ES2605727T3 - Inhibidores de MAP cinasa p38 - Google Patents

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ES2605727T3 ES07732629.6T ES07732629T ES2605727T3 ES 2605727 T3 ES2605727 T3 ES 2605727T3 ES 07732629 T ES07732629 T ES 07732629T ES 2605727 T3 ES2605727 T3 ES 2605727T3
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Abstract

Un compuesto de fórmula (I): **Fórmula** 5 en la que: G es-CH>= D es un anillo fenilo opcionalmente sustituido; R6 es hidrógeno; P representa hidrógeno y U representa un radical de fórmula (IA); o U representa hidrógeno y P representa un radical de fórmula (IA); -A-(CH2)2-X1-L1-Y-NH-CHR1R2 (IA) en la que A representa un anillo fenilo o ciclohexilo opcionalmente sustituido; z es o 1; Y es un enlace, -C(>=O)-, -S(>=O)2-, -C(>=O)NR3-, -C(>=S)-NR3, -C(>=NH)NR3 o -S(>=O)2NR3- donde R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; L1 es un radical divalente de fórmula -(Alq1)m(Q)n(Alq2)p- en la que m, n y p son independientemente 0 o 1, Q es (i) un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 miembros de anillo, o (ii), en el caso donde m y p son ambos 0, un radical divalente de fórmula -X2-Q1- o -Q1-X2- en la que X2 es -O-, S- o NRA- en la que RA es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido, y Q1 es un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 miembros de anillo, Alq1 y Alq2 representan independientemente radicales C3-C7 cicloalquilo divalentes opcionalmente sustituidos, o radicales alquileno C1-C6, alquenileno C2-C6 o alquinileno C2-C6 opcionalmente sustituidos, lineales o ramificados, que pueden terminar en, o contener opcionalmente, una unión éter (-O-), tioéter (-S-) o amino (-NRA-) donde RA es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido; y X1 representa un enlace; -C(>=O); o -S(>=O)2-; -NR4C(>=O)-, -C(>=O)NR4-,-NR4C(>=O)NR5-, -NR4S(>=O)2- o -S(>=O)2NR4- donde R4 y R5 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; R1 es un grupo éster que es hidrolizable por una o más enzimas de carboxilesterasa intracelulares para dar un grupo de ácido carboxílico; R2 es la cadena lateral de un alfa aminoácido natural o no natural seleccionado entre: (i) grupos alquilo C1-C6, fenilo, 2-, 3- o 4-hidroxifenilo, 2-, 3- o 4-metoxifenilo, 2,-3- o 4-piridilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-, 3- o 4-hidroxibencilo, 2-, 3- o 4-benciloxibencilo, 2-, 3- o 4-alcoxibencilo C1-C6, y benciloxi(alquil C1-C6); (ii) el grupo característico de un α aminoácido natural, en el que cualquier grupo funcional puede estar protegido; (iii) grupos -[Alq]nR6 donde Alq es un grupo alquilo (C1-C6) o alquenilo (C2-C6) opcionalmente interrumpido por uno o más átomos de -O- o -S- o grupos -N(R7)- [donde R7 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6)], n es 0 o 1, y R6 es un grupo cicloalquilo o cicloalquenilo opcionalmente sustituido; (iv) un grupo bencilo sustituido en el anillo de fenilo con un grupo de fórmula -OCH2CORdonde R15 es hidroxilo, amino, alcoxi (C1-C6), fenilalcoxi (C1-C6), alquilamino (C1-C6), di(alquil (C1-C6))amino, fenilalquilamino (C1-C6), el resto de un haluro de ácido o aminoácido, derivado de éster o amida del mismo, estando dicho resto unido mediante un enlace de amida, seleccionándose dicho aminoácido entre glicina, α o β alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico; (v) un grupo heterociclicalquilo (C1-C6), estando sin sustituir o mono o disustituido en el anillo heterocíclico con halo, nitro, carboxi, alcoxi (C1-C6), ciano, alcanoílo (C1-C6), trifluorometilalquilo (C1-C6), hidroxi, formilo, amino, alquilamino (C1-C6), di-alquilamino (C1-C6), mercapto, alquiltio (C1-C6), hidroxialquilo (C1-C6), 5 mercaptoalquilo (C1-C6) o alquilfenilmetilo (C1-C6); y (vi) un grupo -CRaRbRc en el que: cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo(C1-C6), cicloalquilo (C3-C8); o Rc es hidrógeno y Ra y Rb son independientemente fenilo o heteroarilo, tal como piridilo; o Rc es hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6) o cicloalquilo (C3-C8), y Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un cicloalquilo de 3 a 8 miembros o un anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros; o Ra, Rb y Rc junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo tricíclico (por ejemplo adamantilo); o Ra y Rb son cada uno independientemente alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6), o un grupo como se define para Rc más adelante distinto de hidrógeno, o Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un anillo cicloalquilo o heterocíclico, y Rc es hidrógeno, -OH, -SH, halógeno, -CN,-CO2H, perfluoroalquilo (C1-C4), -CH2OH -CO2alquilo (C1-C6), -Oalquilo 20 (C1-C6),-Oalquenilo (C2-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -Salquenilo (C2-C6), -SOalquenilo (C2-C6), -SO2alquenilo (C2-C6) o un grupo -Q2-W en el que Q2 representa un enlace o -O-, -S-, -SO- o -SO2- y W representa un grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo (C3-C8), cicloalquilalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), cicloalquenilalquilo (C4-C8), heteroarilo o heteroarilalquilo, grupo W que puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre, hidroxilo, halógeno, -CN, -CO2H, -CO2alquilo (C1-C2), -CONH2, -CONHalquilo (C1-C6), -CONH(alquilo C1-C6)2, -CHO, -CH2OH perfluoroalquilo (C1-C4), -Oalquilo (C1-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -NO2, -NH2,-NHalquilo (C1-C6), -N(alquilo (C1-C6))2, -NHCOalquilo (C1-C6), alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), cicloalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), fenilo o bencilo; y a menos que se indique otra cosa en el contexto en el que aparezca, el término "sustituido" según se aplica a cualquier resto en el presente documento significa sustituido con hasta cuatro sustituyentes compatibles, cada uno de los cuales se selecciona independientemente entre alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), hidroxi, hidroxialquilo (C1-C6), mercapto, mercaptoalquilo (C1-C6), alquiltio (C1-C6), fenilo, halo incluyendo flúor, bromo y cloro, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORA, -CORA, -SO2RA, -CONH2, 35 -SO2NH2,-CONHRA, -SO2NHRA, -CONRARB, -SO2NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, -OCONHRA, -OCONRARB, -NHCORA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHSO2ORA, -NRBSO2OH, -NRBSO2ORA, -NHCONH2, -NRACONH2, -NHCONHRB, -NRACONHRB, -NHCONRARB o -NRACONRARB en los que RA y RB son independientemente un alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), fenilo o heteroarilo monocíclico que tiene 5 o 6 átomos en el anillo.

Description

DESCRIPCIÓN
Inhibidores de MAP cinasa p38
La presente invención se refiere a una serie de compuestos de aminoácidos y de ésteres de aminoácidos, a 5 composiciones que los contienen, a procesos para su preparación y a su uso en medicina como inhibidores de MAP cinasa p38 para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias e inflamatorias, incluyendo artritis reumatoide, psoriasis, enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, esclerosis múltiple, diabetes, dermatitis atópica, enfermedad de injerto contra hospedador, lupus eritematoso sistémico y otras. 10
Antecedentes de la invención
La activación inadecuada de leucocitos, incluyendo monocitos, macrófagos y neutrófilos que da lugar a la producción de niveles elevados de citocinas, tales como TNF-α, IL1-β e IL-8, es una característica de la patogénesis de varias 15 enfermedades inflamatorias, incluyendo la artritis reumatoide, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), asma y psoriasis. La producción de citocinas por parte de las células inflamatorias es el resultado de la respuesta a una diversidad de estímulos externos, que dan lugar a la activación de una serie de mecanismos de señalización intracelular. Entre estas destaca la superfamilia de proteínas cinasas activadas por mitógeno (MAPK) que consisten en cinasas de señalización altamente conservadas que regulan el 20 crecimiento celular, la diferenciación y las respuestas al estrés. Las células de mamífero contienen al menos tres familias de MAPK: las MAPK cinasa reguladas por señales extracelulares (ERK) p42/44, las cinasas de NH2-terminal c-Jun (JNK) y MAPK p38 (también denominada p38a/Mpk2/RK/SAPK2a/CSBP1/2). La MAPK p38 se clonó por primera vez después de su identificación como cinasa que se fosforila en las tirosinas después de la estimulación de monocitos con lipopolisacárido (LPS) [Han et al., Science 1994,265,808]. Se han descrito homólogos adicionales de 25 p38 de mamífero e incluyen p38β [Jiang et al, J.Biol.Chem, 1996, 271, 17920], p38γ [Li et al, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1996, 228, 334] y p38δ [Jiang et al, J.Biol.Chem. 1997, 272, 30122]. Mientras que p38α y p38β se expresan de manera ubicua, p38γ está restringida principalmente al músculo esquelético y p38δ se expresa predominantemente en el pulmón y el riñón.
30
La liberación de citocinas por células defensivas del hospedador y la respuesta de los leucocitos a las citocinas y a otros estreses proinflamatorios están reguladas en diversa medida por MAPK p38 [Cuenda et al., FEBS Lett, 1995, 364, 229-233]. En otros tipos celulares, la MAPK p38 controla las respuestas al estrés, tales como la producción de IL-8 por células epiteliales bronquiales estimulada por TNF-α, y la regulación positiva de la molécula de adhesión celular ICAM-1 en células endoteliales estimuladas por LPS. Tras la activación, mediante la fosforilación dual de un 35 motivo de TGY por parte de las cinasas con especificidad dual MKK3 y MKK6, MAPK p38 ejerce sus efectos mediante la fosforilación de factores de transcripción y otras cinasas. Las proteína cinasa-2 activada por MAP cinasa (MAP-KAPK-2) se ha identificado como una diana para la fosforilación de p38. Se ha demostrado que los ratones [Kotlyarov et al., Nat. Cell Biol. 1999, 1, 94-97] que carecen de MAPKAP-K2 liberan niveles reducidos de TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-10 e IFN-γ en respuesta al choque endotóxico mediado por LPS/galactosamina. La regulación de los niveles de 40 estas citocinas así como de COX-2 es a nivel de ARNm. Los niveles de TNF-α se regulan mediante control traduccional mediante elementos ricos en AU del 3’- UTR el ARNm de TNF-α, siendo la señalización de MAPKAP-K2 la que aumenta la traducción del ARNm de TNF-α. La señalización de MAPKAP-K2 da lugar a una estabilidad aumentada del ARNm de COX-2, IL-6 y la proteína inflamatoria de macrófagos. MAPKAP K2 determina la ubicación celular de MAPK p38 así como la transducción de la señalización de MAPK p38, que posee una señal de localización 45 nuclear en su extremo carboxilo y una señal de exportación nuclear como parte de su dominio autoinhibidor [Engel et al., EMBO J. 1998, 17, 3363-3371]. En células estresadas, MAPKAP-K2 y MAPK p38 migran al citoplasma desde el núcleo, produciéndose esta migración únicamente cuando MAPK p38 está catalíticamente activa. Se cree que este acontecimiento está dirigido por la exposición de la señal de exportación nuclear de MAPKAP-K2, como resultado de la fosforilación por MAPK p38 [Meng et al., J. Biol. Chem. 2002, 277, 37401-37405]. Además, MAPK p38 da lugar directa 50 o indirectamente a la fosforilación de varios factores de transcripción que se considera que median la inflamación, incluyendo ATF1/2 (factores de transcripción activantes 1/2), CHOP-10/GADD-153 (gen 153 inducible por daño en el ADN y detención del crecimiento), SAP-1 (proteína accesoria-1 de factor de respuesta sérica) y MEF2C (factor-2 potenciador de monocitos) [Foster et al., Drug News Perspect. 2000, 13, 488-497].
55
En varios casos, se ha demostrado que la inhibición de la actividad de MAPK p38 mediante moléculas pequeñas es útil para el tratamiento de varias patologías mediadas por la producción inadecuada de citocinas, incluyendo artritis reumatoide, EPOC, asma e isquemia cerebral. Esta modalidad ha sido objeto de varias revisiones [Salituro et al., Current Medicinal Chemistry, 1999, 6, 807-823 y Kumar et al, Nature Reviews Drug Discovery 2003, 2, 717-726].
60
Se ha demostrado que los inhibidores de MAPK p38 son eficaces en modelos animales de artritis reumatoide, tales como la artritis inducida por colágeno en ratas [Revesz et al., Biorg. Med. Chem. Lett., 2000, 10, 1261-1364] y la artritis inducida por adyuvante en ratas [Wadsworth et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 1999, 291,1685-1691. En modelos murinos de lesión pulmonar inducida por pancreatitis, el pretratamiento con un inhibidor de MAPK p38 redujo la liberación de TNF-α en las vías respiratorias y el edema pulmonar [Denham et al, Crit. Care Med., 2000, 29, 628 y Yang 65 et al, Surgery, 1999, 126, 216]. La inhibición de MAPK p38 antes de la exposición a ovoalbúmina (OVA) en ratones sensibilizados con OVA redujo la acumulación de citocinas y de células inflamatorias en las vías respiratorias en un modelo de inflamación alérgica de las vías respiratorias, [Underwood et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 2000,293, 281]. Se ha observado un aumento de la actividad de MAP cinasa p38 en pacientes que padecen enfermedad inflamatoria del intestino [Waetzig et al., J. Immunol, 2002,168, 5432-5351]. Se ha demostrado que los inhibidores de MAPK p38 5 son eficaces en modelos de rata de hipertrofia cardíaca [Behr et al., Circulation, 2001, 104, 1292-1298] y de isquemia cerebral focal [Barone et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 2001,296, 312-321].
Los presentes inventores han descubierto un grupo de compuestos que son inhibidores selectivos y potentes de MAPK p38 (p38α, β, γ y δ) y las isoformas y variantes de corte y empalme de la misma, especialmente p38α, p38β y p38β2. 10 Los compuestos son, por lo tanto, útiles en medicina, por ejemplo, en el tratamiento y profilaxis de trastornos inmunitarios e inflamatorios descritos en el presente documento. Los compuestos se caracterizan por la presencia en la molécula de un motivo de aminoácidos o un motivo de éster de aminoácidos que puede hidrolizarse por una carboxilesterasa intracelular. Los compuestos de la invención que tienen el motivo de éster de aminoácidos lipófilo atraviesan la membrana celular, y se hidrolizan en el ácido por parte de las carboxilesterasas intracelulares. El 15 producto de hidrólisis polar se acumula en la célula ya que no atraviesa fácilmente la membrana celular. Por lo tanto, se prolonga y potencia la actividad de MAP cinasa p38 del compuesto dentro de la célula. Los compuestos de la invención están relacionados con los inhibidores de MAP cinasa p38 abarcados por la divulgación en la Solicitud Internacional de Patente WO03076405, pero difieren de los mismos en tanto que los presentes compuestos tienen el motivo de éster de aminoácido citado anteriormente. 20
El documento WO 2003/076905 trata sobre aroilpiridinas monocíclicas, procesos para su producción y su uso como medicamentos, especialmente en el tratamiento de COPD.
Descripción detallada de la invención 25
De acuerdo con la invención se proporciona un compuesto de fórmula (I):
30
en la que:
G es -CH=
D es un anillo fenilo opcionalmente sustituido;
R6 es hidrógeno; 35
P representa hidrógeno y U representa un radical de fórmula (IA); o U representa hidrógeno y P representa un radical de fórmula (IA);
-A-(CH2)z-X1-L1-Y-NH-CHR1R2 (IA)
40
en la que
A representa un anillo fenilo o ciclohexilo opcionalmente sustituido;
z es 0 o 1;
Y es un enlace, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, -C(=NH)NR3 o -S(=O)2NR3- en el que R3 es 45 hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;
L1 es un radical divalente de fórmula -(Alq1)m(Q)n(Alq2)p- en el que
m, n y p son independientemente 0 o 1, 50
Q es (i) un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 miembros de anillo, o (ii), en el caso donde m y p son ambos 0, un radical divalente de fórmula -X2-Q1- o -Q1-X2- en la que X2 es -O-, S- o NRA- donde RA es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido, y Q1 es un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 miembros de anillo, 55
Alq1 y Alq2 representan independientemente radicales divalentes cicloalquilo C3-C7 opcionalmente sustituido, o radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno Co radicales alquileno C
X1 representa un enlace; -C(=O); o -S(=O)2-; -NR4G(=G)-, -C(=O)NR4-,-NR4C(=O)NR5-, -NR4S(=O)2- o 5 -S(=O)2NR4- donde R4 y R5 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido.
R1 es un grupo éster que es hidrolizable por una o más enzimas de carboxilesterasa intracelulares para dar un grupo de ácido carboxílico; y
R2 se selecciona entre:
10
(i) grupos alquilo C1-C6, fenilo, 2-, 3- o 4-hidroxifenilo, 2-, 3- o 4-metoxifenilo, 2,-3- o 4-piridilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-, 3- o 4-hidroxibencilo, 2-, 3- o 4-benciloxibencilo, 2-, 3- o 4-alcoxibencilo C1-C6, y benciloxi(alquilo C1-C6);
(ii) el grupo característico de un α aminoácido natural, en el que cualquier grupo funcional puede estar 15 protegido;
(iii) grupos -[Alq]nR6 donde Alq es un grupo alquilo (C1-C6) o alquenilo (C2-C6) opcionalmente interrumpido por uno o más átomos de -O- o -S- o -N(R7)- [donde R7 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6)], n es 0 o 1, y R6 es un grupo cicloalquilo o cicloalquenilo opcionalmente sustituido; 20
(iv) un grupo bencilo sustituido en el anillo de fenilo con un grupo de fórmula -OCH2COR15 donde R15 es hidroxilo, amino, alcoxi (C1-C6), fenilalcoxi (C1-C6), alquilamino (C1-C6), di(alquil (C1-C6))amino, fenilalquilamino (C1-C6), el resto de un derivado de una amida, éster, haluro de ácido o aminoácido del mismo, estando dicho resto unido mediante un enlace de amida, seleccionándose dicho aminoácido entre glicina, α o β 25 alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico;
(v) un grupo heterociclicalquilo (C1-C6), estando tanto sin sustituir como mono o disustituido en el anillo heterocíclico con halo, nitro, carboxi, alcoxi (C1-C6), ciano, alcanoílo(C1-C6), trifluorometilalquilo (C1-C6), 30 hidroxi, formilo, amino, alquilamino (C1-C6), di-alquilamino (C1-C6), mercapto, alquiltio (C1-C6), hidroxialquilo (C1-C6), mercaptoalquilo (C1-C6) o alquilfenilmetilo (C1-C6); y
(vi) un grupo -CRaRbRc en el que:
35
cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C8); o
Rc es hidrógeno y Ra y Rb son independientemente fenilo o heteroarilo, tal como piridilo; o
40
Rc es hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6) o cicloalquilo (C3-C8), y Ra y Rb junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un cicloalquilo de 3 a 8 miembros o un anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros; o
Ra, Rb y Rc junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo tricíclico (por ejemplo 45 adamantilo); o
Ra y Rb son cada uno independientemente alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6), o un grupo como se define para Rc más adelante distinto de hidrógeno, o Ra y Rb junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un cicloalquilo o anillo heterocíclico, y Rc es hidrógeno, -OH, 50 -SH, halógeno, -CN,-CO2H, perfluoroalquilo (C1-C4), -CH2OH, -CO2alquilo (C1-C6), -Oalquilo (C1-C6), -Oalquenilo (C2-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo(C1-C6), -Salquenilo (C2-C6),-SOalquenilo (C2-C6), -SO2alquenilo (C2-C6) o un grupo -Q2-W en el que Q2 representa un enlace o -O-, -S-, -SO- o -SO2- y W representa un grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo (C3-C8), cicloalquilalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), cicloalquenilalquilo (C4-C8), heteroarilo o heteroarilalquilo, grupo W que 55 puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre, hidroxilo, halógeno, -CN, -CO2H, -CO2alquilo (C1-C6), -CONH2, -CONHalquilo (C1-C6), -CONH(alquilo C1-C6)2, -CHO, -CH2OH, perfluoroalquilo (C1-C4), -Oalquilo (C1-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -NO2, -NH2, -NHalquilo (C1-C6), -N(alquilo (C1-C6))2, -NHCOalquilo (C1-C6), alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), cicloalquilo (C3-C8), 60 cicloalquenilo (C4-C8), fenilo o bencilo;
a menos que se indique otra cosa en el contexto en el que aparezca, el término "sustituido" según se aplica a cualquier resto en el presente documento, significa sustituido con hasta cuatro sustituyentes compatibles, cada uno de los cuales se selecciona independientemente entre alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), hidroxi, hidroxialquilo 65 (C1-C6), mercapto, mercaptoalquilo (C1-C6), alquiltio (C1-C6), fenilo, halo, incluyendo flúor, bromo y cloro, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORtrifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COOR
Los compuestos de fórmula (I) anterior pueden prepararse en forma de sales, especialmente sales farmacéuticamente aceptables, N-óxidos, hidratos y solvatos de los mismos. Cualquier reivindicación para un compuesto en el presente documento, o referencia en el presente documento a "compuestos de la invención", "compuestos a los que hace 10 referencia la invención", "compuestos de fórmula (I)" y similares, incluye sales, N-óxidos, hidratos y solvatos de tales compuestos.
Aunque la definición anterior incluye potencialmente moléculas de alto peso molecular, es preferible, en línea con los principios generales de la práctica de química médica, que los compuestos a los que hace referencia la presente 15 invención tengan pesos moleculares de no más de 600.
La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto definido anteriormente junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
20
Los compuestos a los que se refiere la invención pueden usarse para la inhibición de la actividad enzimática de la MAP cinasa p38 in vitro o in vivo.
En un aspecto de la invención, la invención proporciona un compuesto tal como se ha definido anteriormente para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias o inflamatorias, en particular, aquellas mencionadas anteriormente en 25 las que está implicada la actividad de MAP cinasa p38.
Terminología
La expresión "éster" o "grupo carboxilo esterificado" significa un grupo RXO(C=O)- en el que RX es el grupo 30 característico del éster, que se deriva teóricamente del alcohol RXOH.
Como se usa en el presente documento, la expresión " alquilo (Ca-Cb)", en la que a y b son número enteros, se refiere a un radical alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de a a b átomos de carbono. Así, cuando a es 1 y b es 6, por ejemplo, el término incluye metilo, etilo, n- propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y n-hexilo. 35
Como se usa en el presente documento, la expresión "radical divalente de alquileno (Ca-Cb)", en la que a y b son números enteros, se refiere a una cadena de hidrocarburo saturado que tiene de a a b átomos de carbono y dos valencias no satisfechas.
40
Como se usa en el presente documento, la expresión "alquileno (Ca-Cb)", en la que a y b son números enteros, se refiere a un resto alquenilo de cadena lineal o ramificada que tiene de a a b átomos de carbono, que tiene al menos un doble enlace de esteroquímica E o Z donde sea aplicable. La expresión incluye, por ejemplo, vinilo, alilo, 1- y 2-butenilo y 2-metil-2-propenilo.
45
Como se usa en el presente documento, la expresión "radical divalente de alquenileno (Ca-Cb)" significa una cadena de hidrocarburo que tiene de a a b átomos de carbono, al menos un doble enlace, y dos valencias no satisfechas.
Como se usa en el presente documento, la expresión "alquinilo Ca-Cb ", en la que a y b son números enteros, se refiere a grupos hidrocarburo de cadena lineal o de cadena ramificada que tiene de a a b átomos de carbono y que además 50 tiene un triple enlace. Esta expresión incluiría, por ejemplo, etinilo, 1-propinilo, 1- y 2-butinilo, 2-metil-2-propinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 4-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo, 4-hexinilo y 5-hexinilo.
Como se usa en el presente documento, la expresión "radical divalente de alquinileno (Ca-Cb)", en la que a y b son números enteros, se refiere a una cadena de hidrocarburo divalente que tiene de a a b átomos de carbono, y al menos 55 un triple enlace.
Como se usa en el presente documento, el término "carbocílico" se refiere a un radical mono, bi o tricíclico que tiene hasta 16 átomos en el anillo, todos los cuales son carbono, e incluye arilo y cicloalquilo.
60
Como se usa en el presente documento, el término "cicloalquilo" se refiere a un radical carbocíclico, monocíclico, saturado que tiene de 3-8 átomos de carbono e incluye, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.
Como se usa en el presente documento, el término no calificado "arilo" se refiere a un radical aromático, mono, bi o 65 tricíclico, e incluye radicales que tienen dos arnillos aromáticos carbocíclicos monocíclicos que están unidos directamente mediante un enlace covalente. Son ilustrativos de tales radicales, fenilo, bifenilo y naftilo.
Como se usa en el presente documento, el término no calificado "heteroarilo" se refiere a un radical aromático mono, bi o tricíclico que contiene uno o más heteroátomos seleccionados entre S, N y O, e incluye radicales que tienen dos de tales anillos monocíclicos, o uno de tales anillos monocíclicos y un anillo arilo monocíclico, que están unidos 5 directamente mediante un enlace covalente. Son ilustrativos de tales radicales, tienilo, benzotienilo, furilo, benzfurilo, pirrolilo, imidazolilo, benzoimidazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, isotiazolilo, benzoisotiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, benzoxazolilo, isoxazolilo, benzoisoxazolilo, isotiazolilo, triazolilo, benzotriazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo, indolilo e indazolilo.
10
Como se usa en el presente documento, el término no calificado "heterociclilo" o "heterocíclico" incluye "heteroarilo" como se ha definido anteriormente, y en sus significado no aromático se refiere a un radical no aromático, mono, bi o tricíclico que contiene uno o más heteroátomos seleccionados entre S, N y O, y a grupos que consisten en un radical no aromático monocíclico que contiene uno o más de tales heteroátomos que está unido covalentemente a otro de tales radicales o a un radical carbocíclico monocíclico. Son ilustrativos de tales radicales, grupos pirrolilo, furanilo, 15 tienilo, piperidinilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, piridinilo, pirrolidinilo, pirimidinilo, piperazinilo, indolilo, morfolinilo, benzfuranilo, piranilo, isoxazolilo, benzoimidazolilo, metilenodioxifenilo, etilenodioxifenilo, maleimido y succinimido.
Un "radical divalente de fenileno, piridinileno, pirimidinileno o pirazinileno" es un anillo de benceno, piridina, pirimidina 20 o pirazina, con dos valencias no satisfechas e incluye 1,3-fenileno, 1,4-fenileno, y los siguientes:
25
A menos que se especifique lo contrario en el contexto donde aparezca, el término "sustituido" como se aplica a cualquier resto en el presente documento significa sustituido con hasta cuatro sustituyentes compatibles, cada uno de los cuales puede ser independientemente, por ejemplo, alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), hidroxi, hidroxialquilo (C1-C6), mercapto, mercaptoalquilo (C1-C6), alquiltio (C1-C6), fenilo, halo (incluyendo flúor, bromo y cloro), trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORA, -CORA, -SO2RA, -CONH2, -SO2NH2, -CONHRA, -SO2NHRA, 30 -CONRARB, -SO2NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, -OCONHRA, -OCONRARB, -NHCORA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHSO2ORA, -NRBSO2OH, -NRBSO2ORA, -NHCONH2, -NRACONH2, -NHCONHRB, -NRACONHRB, -NHCONRARB o -NRACONRARB donde RA y RB son independientemente un alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), fenilo o heteroarilo monocíclico que tiene 5 o 6 átomos en el anillo. Un "sustituyente opcional" puede ser uno de los grupos sustituyentes anteriores. 35
La expresión "cadena lateral de un alfa-aminoácido natural o no natural" se refiere al grupo RY en un aminoácido natural o no natural de fórmula NH2-CH(RY)-COOH.
Los ejemplos de cadenas laterales de alfa aminoácidos naturales incluyen aquellas de alanina, arginina, asparagina, 40 ácido aspártico, cisteína, cistina, ácido glutámico, histidina, 5-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina, valina, ácido α-aminoadípico, ácido α-amino-n-butírico, 3,4-dihidroxifenilalanina, homoserina, α-metilserina, ornitina, ácido pipecólico y tiroxina.
Los alfa-aminoácidos naturales que contienen sustituyentes funcionales, por ejemplo grupos amino, carboxilo, hidroxi, 45 mercapto, guanidilo, imidazolilo o indolilo en sus cadenas laterales características incluyen arginina, lisina, ácido glutámico, ácido aspártico, triptófano, histidina, serina, treonina, tirosina y cisteína. Cuando R2 en los compuestos de la invención es una de dichas cadenas laterales, el sustituyente opcional puede estar opcionalmente protegido.
El término "protegido" cuando se usa en relación a un sustituyente funcional en una cadena lateral de un 50 alfa-aminoácido lateral significa un derivado de tal sustituyente que es sustancialmente no funcional. Por ejemplo, los grupos carboxilo pueden esterificarse (por ejemplo como un alquil C1-C6 éster), los grupos amino pueden convertirse en amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil Cen amidas (por ejemplo como una NHCOalquil C
Como se usa en el presente documento, el término "sal" incluye sales de adición de bases, de adición de ácidos y cuaternarias. Los compuestos de la invención que son ácidos pueden formar sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, con bases, tales como hidróxidos metal alcalino, por ejemplo hidróxidos de sodio y 10 potasio; hidróxidos de metal alcalinotérreo, por ejemplo hidróxidos de calcio, bario y magnesio; con bases orgánicas, por ejemplo, N-metil-D-glucamina, colina, tris(hidroximetil)amino-metano, L-arginina, L-lisina, N-etilpiperidina, dibencilamina y similares. Aquellos compuestos (I) que son básicos pueden formar sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, con ácidos inorgánicos, por ejemplo con ácidos hidrácidos, tales como ácidos clorhídrico o bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido fosfórico, y similares, y con ácidos orgánicos, por 15 ejemplo con ácidos acético, tartárico, succínico, fumárico, maleico, málico, salicílico, cítrico, metanosulfónico, p-toluenosulfónico, benzoico, bencenosulfónico, glutámico, láctico y mandélico, y similares. Para una revisión de sales adecuadas, véase Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use de Stahl y Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2002).
20
El término "solvato" se usa en el presente documento para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una cantidad estequiométrica de una o más moléculas de disolvente farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, etanol. El término "hidrato" se emplea cuando dicho disolvente es agua.
Los compuestos de la invención que contienen uno o más centros quirales reales o potenciales, debido a la presencia 25 de átomos de carbono asimétricos, pueden existir en forma de enantiómeros o como una diversidad de diaestereoisómeros con estereoquímica R o S en cada centro quiral. La invención incluye todos estos enantiómeros y diaestereoisómeros y mezclas de los mismos.
Como se ha mencionado, los ésteres de la invención se convierten mediante esterasas intracelulares en los ácidos 30 carboxílicos. Tanto los ésteres como los ácidos carboxílicos pueden tener actividad inhibidora de cinasa de p38 MAP por su propio derecho.
En los compuestos a los que hace referencia la invención:
35
El grupo D
D es un anillo fenilo opcionalmente sustituido.
El sustituyente R6
R6 es hidrógeno.
regioisómeros P/U 40
En la actualidad se prefiere que P sea hidrógeno y U sea un radical de fórmula (IA) como se ha definido anteriormente.
El radical A
En el radical de fórmula (IA), se prefiere actualmente que A sea 1,4 fenileno opcionalmente sustituido. En ese caso, los sustituyentes opcionales preferidos incluyen flúor y cloro. A también puede ser un anillo ciclohexilo, que está 45 opcionalmente sustituido.
Un subgrupo particularmente preferido de compuestos de la invención consiste en aquellos de fórmula (IIA), (IIB) y (IIC):
50
en los que R11 = F, R12 = H, R13 = H y R14 = H; o
R11 = F, R12 = F, R13 = H y R14 = H; o
R11 = F, R12 = H, R13 = F y R14 = F; o 5
R11 = F, R12 = F, R13 = F y R14 = F; o
R11 = F, R12 = F, R13 = F y R14 = H
y los que z, X1, L1, Y, R1 y R2 son como se han definido anteriormente con referencia a la fórmula (I), y como se describe adicionalmente más adelante. 10
El radical -Y-L1-X1-[CH2]z-
Este radical (o enlace) surge de una estrategia química particular seleccionada para unir el motivo de éster de aminoácido R1CH(R2)NH- al sistema de anillo A. Evidentemente, la estrategia química para ese acoplamiento puede 15 variar ampliamente, y por tanto son posibles muchas combinaciones de las variables Y, L1, X1 y z. La combinación precisa de variables que constituyen la química de unión entre el motivo de éster de aminoácido y el sistema de anillo A serán habitualmente irrelevantes para el modo de unión primario del compuesto en su conjunto. Por otro lado, dicha química de unión en algunos casos recogerá interacciones de unión adicionales con la enzima. También debe indicarse que los beneficios del motivo de éster de aminoácido (entrada fácil en la célula, hidrólisis de esterasa dentro 20 de la célula y la acumulación dentro de la célula de producto de hidrólisis de ácido carboxílico activo) se consiguen de la mejor manera cuando la unión entre el motivo de éster de aminoácido y el sistema de anillo A no es un sustrato para la actividad de peptidasa dentro de la célula, que puede resultar en la escisión del aminoácido desde la molécula. Por supuesto, la estabilidad para peptidasas intracelulares se ensaya fácilmente incubando el compuesto con contenidos celulares discontinuos, y analizando para cualquiera de dichas escisiones. 25
Con las observaciones generales anteriores en mente, tomando a su vez las variables que constituyen el radical -Y-L1-X1-[CH2]z-:
z puede ser 0 o 1, de manera que un radical metileno unido al sistema de anillo A es opcional; 30
los ejemplos específicos de Y cuando no se requiere la selectividad de un macrófago incluyen -(C=O)- y -(C=O)NH-; Donde se requiere la selectividad de un macrófago, son adecuadas cualquiera de las otras opciones para Y, incluyendo el caso donde Y es un enlace.
En el radical L1, los ejemplos de radicales Alq1 y Alq2, cuando están presentes, incluyen -CH2-, -CH2CH2-, 35 -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH=CH-, -CH=CHCH2-, -CH2CH=CH-, CH2CH=CHCH2-C≡C-, -C≡CCH2-, CH2C≡C- y CH2C≡CCH2. Los ejemplos adicionales de Alq1 y Alq2 incluyen -CH2W-, -CH2CH2W-, -CH2CH2WCH2-, -CH2CH2WCH(CH3)-, -CH2WCH2CH2-, -CH2WCH2CH2WCH2- y -WCH2CH2-, donde W es -O-, -S-, -NH-, -N(CH3)- o -CH2CH2N(CH2CH2OH)CH2-. Los ejemplos adicionales de Alq1 y Alq2 incluyen radicales divalentes de ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo. 40
En L1, cuando n es 0, el radical es una cadena de hidrocarburo (opcionalmente sustituido y que tal vez tiene una unión de éter, tioéter o amino). Actualmente, se prefiere que no haya sustituyentes opcionales en L1. Cuando m y p son ambos 0, L1 es un radical divalente carbocíclico o heterocíclico, monocíclico o bicíclico con 5 - 13 átomos en el anillo (opcionalmente sustituido). Cuando n es 1 y al menos uno de m y p es 1, L1 es un radical divalente que incluye una cadena o cadenas de hidrocarburo y un radical carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico con 5 - 13 45 átomos en el anillo (opcionalmente sustituido). Cuando está presente, Q puede ser, por ejemplo, un radical divalente de fenilo, naftilo, ciclopropilo, ciclopentilo o ciclohexilo, o un radical heterocíclico, mono o bicíclico que tiene de 5 a13 miembros de anillo, tal como un radical piperidinilo, piperazinilo, indolilo, piridilo, tienilo o pirrolilo, pero actualmente se prefiere 1,4-fenileno.
Específicamente, en algunas realizaciones de la invención, L1, m y p pueden ser 0, siendo n 1. En otras realizaciones, n y p pueden ser 0, siendo m 1. En otras realizaciones, m, n y p pueden ser todos 0. En más realizaciones adicionales m puede ser 0, n puede ser 1, siendo Q un radical heterocíclico monocíclico, y p puede 5 ser 0 o 1. Alq1 y Alq2, cuando están presentes, pueden seleccionarse entre -CH2-, -CH2CH2- y -CH2CH2CH2- y Q puede ser 1,4-fenileno.
Los ejemplos específicos del radical -Y-L1-X1-[CH2]z- incluyen -C(=O)- y -C(=O)NH-, así como -(CH2)v-, -(CH2)vO-, -C(=O)-(CH2)v-, -C(=O)-(CH2)vO-, -C(=O)-MH-(CH2)w-, -C(=O)-NH-(CH2)wO- 10
en los que v es 1, 2, 3 o 4 y w es 1, 2 o 3, tal como -Y-L1-X1-[CH2]z-, es -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, -CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C(=O)-CH2-, -C(=O)-CH2O-, 15 -C(=O)-NH-CH2- o -C(=O)-NH-CH2O-.
El grupo R1
El grupo éster R1 debe ser uno que en el compuesto de la invención sea hidrolizable por una o más enzimas de 20 carboxilesterasa intracelulares para dar un grupo de ácido carboxílico. Las enzimas de carboxilesterasa intracelulares, capaces de hidrolizar el grupo éster de un compuesto de la invención para dar el ácido correspondiente incluyen los tres isótopos de enzima humana conocidos hCE-1, hCE-2 y hCE-3. Aunque se considera que estas son las enzimas principales, otras enzimas, tales como bifenilhidrolasa (BPH) también pueden desempeñar una función en la hidrólisis del éster. En general, si la carboxilesterasa hidroliza el éster de aminoácido libre para dar el ácido precursor, esta 25 también hidrolizará el motivo de éster cuando se conjuga covalentemente con el inhibidor. Por tanto, el ensayo de célula rota y/el ensayo de carboxilesterasa aislada descritos en el presente documento proporcionan un primer cribado directo, rápido y simple para ésteres que tienen el perfil de hidrólisis requerido. Los motivos de éster seleccionados de tal manera, pueden después ensayarse de nuevo en el mismo ensayo de carboxilesterasa cuando se conjugan con el inhibidor mediante la química de conjugación seleccionada, para confirmar que es aún un sustrato de carboxilesterasa 30 en ese nivel de fondo.
Sujetos al requerimiento de que sean hidrolizables por enzimas de carboxilesterasa intracelulares, los ejemplos de grupos éster R1 particulares incluyen aquellos de fórmula -(C=O)OR14 donde R14 es R8R9R10C- en los que
35
(i) R8 es hidrógeno o alquilo (C1-C3)-(Z1)a-[alquil (C1-C3)]b- opcionalmente sustituido o alquenil (C2-C3)-(Z1)a-[alquilo (C1-C3)]b- en los que a y b son independientemente 0 o 1 y Z1 es -O-, -S- o -NR11- donde R11 es hidrógeno o alquilo (C1-C3); y R9 y R10 son independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C3)-;
(ii) R8 es hidrógeno o R12R13N-alquilo (C1-C3)- opcionalmente sustituido donde R12 es hidrógeno o alquilo (C1-C3) 40 y R13 es hidrógeno o alquilo (C1-C3); o R12 y R13 junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico monocíclico opcionalmente sustituido de 5 o 6 átomos en el anillo o un sistema de anillo heterocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos en el anillo, y R9 y R10 son independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C3)-;o
(iii) R8 y R9, tomados junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo carbocíclico monocíclico 45 opcionalmente sustituido de 3 a 7 átomos en el anillo o sistema de anillo carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos en el anillo, y R10 es hidrógeno.
Dentro de estas clases, R10 es habitualmente hidrógeno. Los ejemplos específicos de R14 incluyen metilo, etilo, n- o iso-propilo, n-, sec- o terc-butilo, ciclohexilo, alilo, fenilo, bencilo, 2-, 3- o 4-piridilmetilo, N-metilpiperidin-4-ilo, 50 tetrahidrofurano- 3-ilo o metoxietilo. Se prefiere actualmente donde R14 es ciclopentilo.
Se sabe que los macrófagos desempeñan un papel clave en los trastornos inflamatorios mediante la liberación de citocinas, en particular, de TNF-α e IL-1 (van Roon et al., Arthritis and Rheumatism, 2003, 1229-1238). En la artritis reumatoide, contribuyen de manera principal al mantenimiento de la inflamación articular y a la destrucción de la 55 articulación. Los macrófagos también están implicados en el crecimiento y desarrollo tumoral (Naldini y Carraro, Curr Drug Targets Inflamm Allergy, 2005, 3-8). Por lo tanto, los agentes que se dirigen de manera selectiva a la proliferación celular de los macrófagos podrían ser valiosos para el tratamiento del cáncer y de enfermedades autoinflamatorias. Podría esperarse que el hecho de dirigirse a tipos celulares específicos de lugar a una reducción de los efectos secundarios. Los inventores han descubierto un método para dirigir los inhibidores de la cinasa p38 a macrófagos que 60 se basa en la observación de que el modo en que el motivo de esterasa se une al inhibidor de la cinasa p38 determina si esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa Rsi esta se hidroliza, y por lo tanto si esta se acumula o no en diferentes tipos celulares. Específicamente, se ha descubierto que los macrófagos contienen la carboxiesterasa hCE-1 humana, mientras que otros tipos celulares no. En la fórmula general (I), cuando el nitrógeno del motivo de esterasa R
La cadena lateral de aminoácido R2
10
Sujeta al requerimiento de que el grupo éster R1 sea hidrolizable por enzimas de carboxilesterasa intracelulares, la identidad el grupo de cadena lateral R2 no es crítica.
Son cadenas laterales de aminoácido:
15
grupos alquilo C1-C6, fenilo, 2-, 3- o 4-hidroxifenilo, 2-, 3- o 4-metoxifenilo, 2,-3- o 4-piridilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-, 3- o 4-hidroxibencilo, 2-, 3- o 4-benciloxibencilo, 2-, 3- o 4-alcoxibencilo C1-C6, y benciloxi(alquilo C1-C6)-;
el grupo característico de un α aminoácido natural, en el que cualquier grupo funcional puede estar protegido;
grupos -[Alq]nR6 donde Alq es un grupo alquilo (C1-C6) o alquenilo (C2-C6) opcionalmente interrumpido por uno o 20 más átomos de -O- o -S- o grupos -N(R7)- [donde R7 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6)], n es 0 o 1, y R6 es un grupo cicloalquilo o cicloalquenilo opcionalmente sustituido;
un grupo bencilo sustituido en el anillo fenilo con grupo de fórmula -OCH2COR15 donde R15 es hidroxilo, amino, alcoxi (C1-C6), fenilalcoxi (C1-C6), alquilamino (C1-C6), di(alquil (C1-C6))amino, fenilalquilamino (C1-C6), el resto 25 de un haluro de ácido o aminoácido, derivado de éster o amida del mismo, estando dicho resto unido mediante un enlace de amida, seleccionándose dicho aminoácido entre glicina, α o β alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico;
30
un grupo heterociclicalquilo (C1-C6), estando tanto sin sustituir como mono o disustituido en el anillo heterocíclico con halo, nitro, carboxi, alcoxi (C1-C6), ciano, alcanoílo (C1-C6), trifluorometil alquilo (C1-C6), hidroxi, formilo, amino, alquilamino (C1-C6), di-alquilamino (C1-C6), mercapto, alquiltio (C1-C6), hidroxialquilo (C1-C6), mercaptoalquilo (C1-C6) o alquilfenilmetilo(C1-C6); y
35
un grupo -CRaRbRc en el que:
cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C8); o
40
Rc es hidrógeno y Ra y Rb son independientemente fenilo o heteroarilo tal como piridilo; o
Rc es hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6) o cicloalquilo (C3-C8), y Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un cicloalquilo de 3 a 8 miembros o un anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros; o 45
Ra, Rb y Rc, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un anillo tricíclico (por ejemplo adamantilo); o
Ra y Rb son cada uno independientemente alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), 50 fenilalquilo (C1-C6) o un grupo como se define para Rc más adelante distinto de hidrógeno, o Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un anillo cicloalquilo o heterocíclico, y Rc es hidrógeno, -OH, -SH, halógeno, -CN, - CO2H, perfluoroalquilo (C1-C4), -CH2OH, -CO2alquilo (C1-C6), -Oalquilo (C1-C6), -Oalquenilo (C2-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -Salquenilo (C2-C6), -SOalquenilo (C2-C6), -SO2alquenilo (C2-C6) o un grupo -Q2-W, en el que Q2 representa un enlace o -O-, -S-, 55 -SO- o -SO2- y W representa un grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo (C3-C8), cicloalquilalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), cicloalquenilalquilo (C4-C8), heteroarilo o heteroarilalquilo, grupo W que puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre, hidroxilo, halógeno, -CN, -CO2H, -CO2alquilo (C1-C6), -CONH2, -CONHalquilo (C1-C6), -CONH(alquil C1-C6)2, -CHO, -CH2OH, perfluoroalquilo (C1-C4), -Oalquilo (C1-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo 60 (C1-C6), -NO2, -NH2, -NHalquilo (C1-C6), -N(alquilo (C1-C6))2, -NHCOalquilo (C1-C6), alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), cicloalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), fenilo o bencilo.
Los ejemplos particulares de grupos R2 incluyen hidrógeno (la "cadena lateral" de glicina), bencilo, fenilo, ciclohexilmetilo, ciclohexilo, piridin-3-ilmetilo, terc-butoximetilo, iso-butilo, sec-butilo, terc-butilo, 1-benciltio-1-metiletilo, 65 1-metiltio-1-metiletilo, 1-mercapto-1-metiletilo y feniletilo. Actualmente, los grupos R2 preferidos incluyen fenilo, bencilo, isobutilo, ciclohexilo y t-butoximetilo.
Para los compuestos de la invención que se van a administrar por vía sistémica, se prefieren ésteres con una baja velocidad de escisión por carboxilesterasa, ya que son menos susceptibles al metabolismo pre-sistémico. Por lo tanto, aumenta su capacidad para alcanzar su tejido diana intactos, y el éster puede convertirse en el producto ácido en el 5 interior de las células del tejido diana. Sin embargo, para administración local, en donde el éster se aplica directamente al tejido diana o se dirige a este mediante, por ejemplo, inhalación, a menudo será deseable que el éster tenga una alta velocidad de escisión por esterasas, para minimizar la exposición sistémica y los consiguientes efectos secundarios no deseados. En los compuestos de la presente invención, si el carbono adyacente al carbono alfa del éster de alfa aminoácido está monosustituido, es decir, R2 es CH2Rz (siendo Rz el mono-sustituyente) los ésteres tienden a 10 escindirse más rápidamente que si ese carbono estuviese di o trisustituido, como en el caso donde R2 es, por ejemplo, fenilo o ciclohexilo.
Tal como se ha mencionado anteriormente, los compuestos a los que se refiere la invención son inhibidores de la actividad de MAP cinasa p38, y por lo tanto son útiles en el tratamiento de enfermedades, tales como psoriasis, 15 enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, esclerosis múltiple, diabetes, dermatitis atópica, enfermedad de injerto contra hospedador, o lupus eritematoso sistémico y artritis reumatoide, en las que está implicada la actividad de MAP cinasa p38.
Se entenderá que el nivel de dosificación específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de 20 factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, de la edad, del peso corporal, del estado de salud general, del sexo, de la dieta, del tiempo de administración, de la vía de administración, de la velocidad de excreción, de la combinación de fármacos y de la gravedad de la enfermedad particular que se someta a tratamiento. Los niveles óptimos de dosificación y frecuencia de dosificación se determinarán mediante ensayo clínico.
25
Los compuestos a los que se refiere la invención pueden prepararse para su administración por cualquier ruta consistente con sus propiedades farmacocinéticas. Las composiciones administrables por vía oral pueden estar en forma de comprimidos, cápsulas, polvos, gránulos, pastillas para chupar, preparaciones líquidas o en gel, tales como soluciones o suspensiones orales, tópicas o parenterales estériles. Los comprimidos o cápsulas para administración oral pueden estar en una forma de presentación de dosis unitaria, y pueden contener excipientes convencionales, tales 30 como agentes aglutinantes, por ejemplo, jarabe, goma arábiga, gelatina, sorbitol, tragacanto, o polivinilpirrolidona; cargas, por ejemplo, lactosa, azúcar, almidón de maíz, fosfato de calcio, sorbitol o glicina; lubricante para comprimidos, por ejemplo, estearato de magnesio, talco, polietilenglicol o sílice; disgregantes, por ejemplo, almidón de patata, o agentes humectantes adecuados, tales como laurilsulfato de sodio. Los comprimidos pueden recubrirse de acuerdo con métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal. Las preparaciones líquidas orales pueden estar en 35 forma de, por ejemplo, suspensiones acuosas u oleosas, soluciones, emulsiones, jarabes o elixires, o pueden presentarse como un producto seco para su reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Dichas preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales, tales como agentes suspensores, por ejemplo, sorbitol, jarabe, metilcelulosa, jarabe de glucosa, gelatina, grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes, por ejemplo, lecitina, monooleato de sorbitán, o goma arábiga; vehículos no acuosos (que pueden incluir aceites 40 comestibles), por ejemplo, aceite de almendra, aceite de coco fraccionado, ésteres oleosos, tales como glicerina, propilenglicol, o alcohol etílico; conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de metilo o propilo o ácido sórbico, y si se desea, agentes aromatizantes o colorantes convencionales.
Para aplicación tópica a la piel, el fármaco puede prepararse en una crema, loción o pomada. Las formulaciones en 45 crema o pomada que pueden usarse para el fármaco son formulaciones convencionales conocidas en la técnica, por ejemplo, tal como se describen en libros de texto convencionales de farmacia, tales como la Farmacopea Británica.
Para aplicación tópica por inhalación, el fármaco puede formularse, por ejemplo, para administración de aerosol, mediante atomizadores de chorro dirigido por presión o atomizadores de ultrasonidos, o preferentemente por 50 aerosoles medidos impulsados por propulsor o la administración sin propulsor de polvos micronizados, por ejemplo, cápsulas para inhalación u otros sistemas de administración de "polvo seco". Los excipientes, tales como, por ejemplo, propulsores (por ejemplo, frigeno en el caso de aerosoles medidos), sustancias tensioactivas, emulsionantes, estabilizantes, conservantes, saporíferos, y cargas (por ejemplo, lactosa en el caso de inhaladores de polvo) pueden estar presentes en dichas formulaciones inhaladas. Para los fines de inhalación, hay disponible una gran variedad de 55 aparatos con los que se pueden generar y administrar aerosoles con tamaño de partícula óptimo, usando una técnica de inhalación que sea adecuada para el paciente. Además del uso de adaptadores (espaciadores, expansores) y recipientes en forma de pera (por ejemplo, Nebulator®, Volumatic®), y dispositivos automáticos que emiten un chorro de spray (Autohaler®), para los aerosoles medidos, en particular en el caso de inhaladores de polvo, hay disponible una serie de soluciones técnicas (por ejemplo, Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® o los inhaladores descritos, por 60 ejemplo, en la Solicitud de Patente Europea EP 0 505 321).
Para aplicación tópica en el ojo, el fármaco puede prepararse en una solución o suspensión en un vehículo acuoso o no acuoso estéril adecuado. También pueden incluirse aditivos, por ejemplo, tampones tales como metabisulfito sódico o edeatato disódico; conservantes, incluyendo agentes fungicidas y bactericidas, tales como acetato o nitrato 65 fenil mercúrico, cloruro de benzalconio o clorhexidina y agentes espesantes, tales como hipromelosa.
También puede administrarse el principio activo por vía parenteral en un medio estéril. Dependiendo del vehículo y concentración usados, el fármaco puede suspenderse o disolverse en el vehículo. Ventajosamente, pueden disolverse adyuvantes, tales como un anestésico local, agentes conservantes y tamponadores en el vehículo.
Síntesis 5
Existen múltiples estrategias sintéticas para la síntesis de los compuestos (I) en lo que se refiere a la presente invención, pero todas se apoyan en procedimientos químicos conocidos, conocidos para el especialista en química orgánica sintética. Por lo tanto, los compuestos de acuerdo con la fórmula (I) pueden sintetizarse de acuerdo con procedimientos descritos en la literatura convencional y son bien conocidos para los expertos en la materia. Son 10 fuentes bibliográficas típicas "Advanced organic chemistry", 4ª edición (Wiley), J March, "Comprehensive Organic Transformation", 2ª Edición (Wiley), R.C. Larock, "Handbook of Heterociclic Chemistry", 2ª edición (Pergamon), A.R. Katritzky), artículos de revisión como los que se encuentran en "Synthesis", "Acc. Chem. Res.", "Chem. Rev", o fuentes bibliográficas primarias identificadas por búsquedas en línea de bibliografía convencionales o de fuentes secundarias, tales como "Chemical Abstracts" o "Beilstein". 15
Los compuestos de la invención pueden prepararse por una diversidad de procedimientos que se describen de modo general más adelante y más específicamente en los Ejemplos más adelante en el presente documento. En las reacciones que se describen más adelante, puede ser necesario proteger grupos funcionales reactivos, por ejemplo, grupos hidroxilo, amino y carboxi, donde estos se desean en el producto final, para evitar su participación indeseada 20 en las reacciones [véase por ejemplo Greene, T.W., "Protecting Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1999]. Pueden usarse grupos protectores convencionales junto con la práctica convencional. En algunos casos, la desprotección puede ser la etapa final en la síntesis de un compuesto de la fórmula general (I) y se entiende que los procesos de acuerdo con la invención descritos más adelante en el presente documento se extienden a dicha retirada de grupos protectores. 25
Los ejemplos de tales métodos, que pueden emplearse para la síntesis de compuestos de la fórmula general (I) se exponen, pero sin limitación, en las reacciones mostradas a continuación en el Esquema 1.
Por tanto, pueden prepararse aminoésteres de fórmula general (A) por tratamiento del carbamato terc-butilo de fórmula general (2a) con ácido trifluoroacético en diclorometano. Los intermedios de fórmula general (2) pueden prepararse por métodos descritos en el documento WO 03/076405 y referencias en el mismo. Los aminoésteres de 5 fórmula general (2b) pueden formarse como un subproducto en la síntesis de compuestos de fórmula (2a) y tratarse con ácido trifluoroacético para dar compuestos de fórmula general (B).
Los ésteres intermedios de fórmula general (5) pueden prepararse mediante los procedimientos que se muestran en el Esquema 2. 10
La hidrogenación del intermedio de nitrobencilo (6) sobre catalizador de paladio-carbono en THF proporciona aminas de la fórmula general (5). Los intermedios de fórmula (6) pueden prepararse mediante la reacción la amina correspondiente con di-terc-butoxicarbonato en un disolvente inerte, tal como THF a temperatura ambiente. Los 5 intermedios de la fórmula general (7) pueden producirse mediante la alquilación de aminoésteres de fórmula (8) con bromuro de 4-nitrobencilo. La reacción puede realizarse en un disolvente de dialquilamida, tal como DMF en presencia de una base inorgánica, tal como carbonato de potasio o de cesio. Tales reacciones se exponen en March’s Advanced Organic Chemistry [John Wiley and Sons, 1992].
10
Un método alternativo para la síntesis de ésteres de N-bencilamino ácido de fórmula general (9), donde se requiere purificación adicional en el anillo arilo del sustituyente de bencilo se expone el Esquema 3.
15
En un aspecto más de la invención, los aminoésteres de fórmula general (9) pueden prepararse, pero sin limitación, mediante las reacciones expuestas en el Esquema 3. Así, los benzonitrilos de fórmula general (11), que están disponibles en el mercado o pueden sintetizarse fácilmente por métodos conocidos por los expertos en la materia, pueden convertirse en el benzaldehído correspondiente de fórmula general (10) por reducción con un hidruro de metal adecuado, tal como DIBAL-H e hidrólisis de ácido de la imina intermedia [véase, por ejemplo LeBel J. Am. Chem. Soc., 20 1964, 86, 3759]. El éster de N-bencil aminoácido de fórmula general (9) pueden prepararse por reacción con el benzaldehído mencionado en condiciones de alquilación reductora, empleando reactivos de borohidruro, tales como NaBH3CN o NaBH(OAc)3, en condiciones ácidas, en un disolvente prótico, tal como metanol [véase, por ejemplo, Borsch et al, J.Am. Chem. Soc., 1971,93, 2897].
25
En un aspecto más de la invención, pueden prepararse compuestos de fórmula general (C) por métodos expuestos en el Esquema 4, a partir de la alquilación de intermedios de la fórmula general (8) con mesilatos de la fórmula general (12). La alquilación puede realizarse en un disolvente inerte, tal como THF, en presencia de yoduro de sodio y bases 5 inorgánicas, tales como carbonato potásico. Se reconocerá por los expertos en la materia que los alquilbromuros o alquilcloruros correspondientes serán de utilidad en este proceso. La preparación del mesilato (12) puede realizarse por tratamiento del alcohol primario (13) con cloruro de metanosulfonilo, en un disolvente inerte, tal como diclorometano y en presencia de una base orgánica, tal como trietilamina. Los compuestos de la fórmula general (14) pueden prepararse por métodos descritos en el documento WO 03/076405 y referencias en el mismo. 10
En un aspecto más para la invención, los compuestos de fórmula general (D) pueden prepararse, pero sin limitación, mediante las reacciones en el Esquema 5.
15
Por lo tanto, los alcoholes de fórmula general (14) pueden alquilarse con un derivado de cicloalcanol adecuadamente protegido, tal como 1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ol usando trifenilfosfina y un azadicarboxilato de dialquilo, tal como DEAD en un disolvente etéreo inerte [véase, por ejemplo, Mitsunobu et al, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1967, 40, 2380]. Los cetales de fórmula general (16) pueden protegerse para dar la cetona correspondiente en condiciones acuosas ácidas. La aminación reductora de compuestos de fórmula (16) puede conseguirse por tratamiento con ésteres de aminoácido 5 de la fórmula general (8) en presencia de reactivos de borohidruro, tales como cianoborohidruro sódico y triacetoxiborohidruro sódico en condiciones ácidas para dar compuestos de la fórmula general (D).
En un aspecto más para la invención, los compuestos de fórmula general (E) pueden prepararse, pero sin limitación, mediante las reacciones en el Esquema 6. 10
La aminación reductora de compuestos de fórmula (22) puede conseguirse por tratamiento con dibencilamina en presencia de reactivos de borohidruro, tales como cianoborohidruro sódico y triacetoxiborohidruro sódico en 15 condiciones ácidas para dar compuestos de la fórmula general (21). La hidrogenación de (21) y la reacción posterior con tiofosgeno pueden dar el isocianato de fórmula general (20). Los compuestos de la fórmula general (19) pueden prepararse por reacción de (20) con la acetofenona correspondiente usando terc-butóxido sódico. La alquilación de (19) con yodoetano puede realizarse usando una base inorgánica, tal como carbonato potásico en un disolvente, tal como acetona. Los compuestos de la fórmula general (18) pueden someterse a ciclación, oxidación y después 20 desplazamiento de amonio posterior para dar los cetales de la fórmula general (17). Por tanto, los cetales de fórmula general (17) pueden desprotegerse para dar el intermedio de ciclohexanona correspondiente en condiciones acuosas ácidas, después hacer reaccionar ciclohexanona con ésteres de aminoácido de la fórmula general (8) en condiciones de aminación reductora empleando reactivos de borohidruro, tales como cianoborohidruro sódico y triacetoxiborohidruro sódico. 25
En otro aspecto de la invención, los aminoácidos de fórmula general (F) pueden prepararse mediante, pero sin restringirse a los métodos expuestos en el Esquema 7.
Por lo tanto, por ejemplo, los ésteres de aminoácido de la fórmula general (C) pueden hidrolizarse para dar los aminoácidos correspondientes (F) por tratamiento con hidróxido potásico o sódico acuoso, o cualquier base adecuada, a temperatura ambiente en un codisolvente, tal como metanol o etanol. 5
En otro aspecto de la invención, los aminoácidos de fórmula general (G) pueden prepararse mediante, pero sin restringirse a los métodos expuestos en el Esquema 8.
10
Por lo tanto, los aminoésteres de fórmula general G pueden prepararse mediante la alquilación de los intermedios de fórmula general (8) con mesilatos de fórmula general (23). La alquilación puede realizarse en un disolvente inerte, tal como THF, en presencia de yoduro de sodio y bases inorgánicas, tales como carbonato potásico. La preparación del mesilato (23) puede realizarse por tratamiento del alcohol primario (24) con cloruro de metanosulfonilo en un disolvente inerte, tal como diclorometano y en presencia de una base orgánica, tal como trietilamina. El alcohol (24) puede prepararse mediante la desprotección del grupo acetilo del intermedio (25) en condiciones ácidas, tales como HCl. Los intermedios de fórmula general (4), (25) y (26) pueden prepararse por métodos similares descritos en el documento WO 03/076405 y referencias en el mismo. 5
Los siguientes ejemplos ilustran la invención. Todas las temperaturas están en ºC. Se usan las siguientes abreviaturas:
MeOH
= metanol
EtOH
= etanol
EtOAc
= acetato de etilo
Boc
= terc-butoxicarbonilo
CDI
= 1,1’-carbonildiimidazol
DCM
= diclorometano
DMF
= dimetilformamida
DMSO
= dimetilsulfóxido
TFA
= ácido trifluoroacético
THF
= tetrahidrofurano
Na2CO3
= carbonato sódico
HCl
= ácido clorhídrico
DIPEA
= diisopropiletilamina
NaH
= hidruro sódico
NaOH
= hidróxido sódico
NaHCO3
= hidrogenocarbonato sódico
Pd/C
= paladio sobre carbono
TME
= terc-butil metil éter
N2
= nitrógeno
Na2SO4
= sulfato sódico
Et3N
= trietilamina
NH3
= amoniaco
TMSCl
= trimetilclorosilano
TBME
= butil metil éter terciario
NH4Cl
= cloruro de amonio
LiAlH4
= hidruro de litio y aluminio
MgSO4
= sulfato de magnesio
nBuLi
= n-butillitio
CO2
= dióxido de carbono
EDCl
= clorhidrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodiimida
Et2O
= éter dietílico
LiOH
= hidróxido de litio
HOBt
= 1-hidroxibenzotriazol
ELS
= Disperisión de luz evaporativa
TLC
= cromatografía de capa fina
ml
= mililitro(s)
g
= gramo(s)
mg
= miligramos(s)
mol
= moles
mmol
= milimol(es)
CLEM
= cromatografía líquida de alto rendimiento/espectrometría de masas
RMN
= resonancia magnética nuclear
TA
= temperatura ambiente
Se realizó irradiación de microondas usando un reactor de microondas dirigido CEM Discover. Los disolventes se 10 retiraron usando un GeneVac Series I sin calentamiento o un Genevac Series
II con VacRamp a 30 º°C o un evaporador rotatorio Buchi. La purificación de compuestos por cromatografía en columna ultrarrápida se realizó usando gel de sílice, tamaño de partícula 40-63 μm (malla 230-400) obtenido de Silicicle. La purificación de compuestos por HPLC preparativa se realizó en sistemas Gilson usando columnas de fase 15 inversa ThermoHypersil-Keystone Hyperprep HS C18 (12 μm, 100 x 21,2 mm), gradiente B al 20-100 % (A= agua/TFA al 0,1 %, B = acetonitrilo/TFA al 0,1 %) durante 9,5 min, flujo = 30 ml/min, disolvente de inyección 2:1 de DMSO:acetonitrilo (1,6 ml), detección UV a 215 nm.
Se registraron espectros de RMN 1H en un espectrómetro Bruker 400 MHz AV o un Bruker 300 MHz AV en disolventes 20 deuterados. Los desplazamientos químicos (δ) están en partes por millón. Se realizó análisis de cromatografía de capa fina (TLC) con placas Kieselgel 60 F254 (Merck) y se visualizaron usando luz UV.
Se realizó HPLCMS analítica en sistemas de CL Agilent HP1100, Waters 600 o Waters 1525 usando columnas de fase inversa Hypersil BDS C18 (5 μm, 2,1 x 50 mm), gradiente B al 0-95 % (A= agua/TFA al 0,1 %, B= acetonitrilo/TFA al 0,1 %) durante 2,10 min, flujo = 1,0 ml/min. Se registraron espectros UV a 215 nm usando un detector de matriz de diodos Gilson G1315A, detector UV de longitud de onda individual G1214A, detector de UV de longitud de onda dual Waters 2487, detector UV de longitud de onda dual Waters 2488 detector UV de matriz de diodos Waters 2996. Se 5 obtuvieron espectros de masas en el intervalo m/z de 150 a 850, a una velocidad de toma de muestras de 2 exploraciones por segundo o 1 exploración cada 1,2 segundo usando un Micromass LCT con interfaz Z-spray o Micromass LCT con interfaz Z-spray o MUX. Los datos se integraron y se indicaron usando software OpenLynx y OpenLynx Browser.
10
Intermedios
Intermedio 1A (S)-2-[(4-Aminobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo
15
Se disolvió (S)-2-[terc-butoxicarbonil-(4-nitrobencil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo (3,8 g, 8,74 mmol) en EtOH (100 ml) antes de la adición de catalizador de Pd/C (10 % humedad) (100 mg) y se hidrogenó a una presión de globo a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de celite y se evaporó a sequedad para dar un sólido de color rosa (3,15 g, rendimiento del 89 %). Pureza de CLEM 100 %, m/z 405 [M+H]+. 20
El material de partida de carbamato de bencilo para este procedimiento se preparó de la siguiente manera:
25
Se disolvió (S)-(4-nitrobencil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo (15,8 g; 47,4 mmol) en THF (250 ml) antes de la adición de carbonato potásico (7,58 g, 56,9 mmol) y agua (150 ml). Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (15,5 g, 71,1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50 ºC durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para retirar los volátiles, dando un residuo acuoso que se extrajo con EtOAc (200 ml). La capa de EtOAc se lavó consecutivamente con HCl 0,1 M (150 ml), NaHCO3 ac sat. y agua (150 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4), 30 se filtró y se concentró a sequedad. Después de la purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (EtOAc al 10 %/hexano) el producto se aisló (9,36 g, rendimiento del 46 %). Pureza de CL 94 %, m/z 435 [M+H]+.
El material de partida de nitrobencilamino usado en este procedimiento se preparó como se indica a continuación
35
Se disolvió bromuro de 4-nitrobencilo (11 g, 50 mmol) en DMF (180 ml) y se añadió carbonato potásico (13,6 g, 99 mmol), seguido de ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8) (16 g, 43 mmol). La reacción se agitó durante 18 h a TA. El residuo se diluyó con EtOAc (500 ml) y se lavó con agua (3 x 100 ml), se secó (Na2SO4) se filtró y se concentró 5 a sequedad para dar el producto en bruto (15,8 g) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. Pureza de CLEM 60 %, m/z 335 [M+H]+.
Los siguientes compuestos se prepararon de una manera similar:
10
Intermedio 1B (S)-2-[(4-Aminobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-3-fenilpropionato de ciclopentilo
Pureza de CLEM 75 %, m/z 439 [M+H]+. 15
Intermedio 1C (S)-[(4-Aminobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-fenilacetato de ciclopentilo
20
Pureza de CLEM 100 %, m/z 425 [M+H]+.
Intermedio 1D (S)-2-[(4-Amino-3,5-difluorobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo
Se disolvió 2(S)-(4-amino-3,5-difluorobencil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo (2,54 g en bruto, asumido 5 5,73 mmol) en una mezcla de THF (25 ml) y agua (25 ml). Se añadieron K2CO3 (5,15 g, 37,3 mmol) y Boc2O (8,14 g, 37,2 mmol) y se continuó agitando a TA durante 18 h. Los volátiles se retiraron a presión reducida y la capa acuosa residual se extrajo con EtOAc (50 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 5 %/heptano) dio el producto protegido con N-Boc (1,0 g, 40 %). Pureza de CLEM 89 % m/z 441 [M+H]+. 10
El carbamato de bencilamino usado como material de partida se preparó de la siguiente manera
15
A una solución de 4-amino-3,5-difluorobenzaldehído (0,90 g, 5,73 mmol) en 1/1 de MeOH/ DMF (16 ml), se le añadieron ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8) (3,19 g, 8,59 mmol) y K2CO3 (1,19 g, 8,59 mmol). La mezcla de reacción se ajustó a pH 5-6 usando ácido acético glacial (gota a gota) y se agitó durante 1 h antes de la adición de NaCNBH3 (0,72 g, 11,46 mmol). La agitación se continuó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar el MeOH, se diluyó con EtOAc (20 ml), se lavó con NaHCO3 (5 ml) seguido de agua (10 ml). 20 La capa orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío para dar el producto en bruto (2,54 g) que se hizo reaccionar en la siguiente etapa sin purificación. pureza de CL = 68 %.
El benzaldehído usado como material de partida se preparó de la siguiente manera;
25
A una solución agitada de 4-amino-3,5-difluorobenzonitrilo (2,0 g, 12,98 mmol) en tolueno (16 ml) se le añadió gota a gota DIBAL (1,5 M en tolueno) a 0 ºC. La mezcla de reacción se calentó a TA y la agitación se continuó durante 2 h. La reacción se interrumpió mediante la adición gota a gota a ácido cítrico ac. al 10 % (10 ml). Se añadieron EtOAc (50 ml) 30 y tartrato de sodio y potasio ac. saturado (sal de Rochelle) (30 ml) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 20 min. La capa orgánica se aisló y se lavó con agua (10 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró a sequedad para dar un sólido de color amarillo pálido (1,9 g, 93 %). Pureza de CLEM 92 %, m/z 158 [M+H]+.
Los siguientes compuestos se prepararon de una manera similar: 35
Intermedio 1E (S)-2-[(4-Amino-3,5-difluorobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-3-fenilpropionato de ciclopentilo
Pureza de CLEM 86 %, m/z 475 [M+H]+. 5
Intermedio 1F (S)-2-[(4-Amino-3,5-difluorobencil)-terc-butoxicarbonilamino]-fenilacetato de ciclopentilo
10
Pureza de CLEM 86 %, m/z 461 [M+H]+.
Intermedio 2A (S)-[terc-Butoxicarbonil-(-4{[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]aminobencil)amino- fenilacetato de ciclopentilo
15
Una mezcla de 4-clorofenilo éster del ácido 3-(4-fluorofenil)-3-oxotiopropionimídico [documento WO 03/076405] (300 mg, 0,874 mmol), el Intermedio 1C (0,41 g, 0,961 mmol) y ácido acético glacial (3 ml) se agitó a 80 ºC durante 2 h. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad a presión reducida para dar un residuo espeso que se trituró con 20 éter (3 ml). El sólido resultante se recogió por filtración por succión. El producto se neutralizó repartiéndolo entre EtOAc (20 ml) y NaHCO3 ac. sat. (10 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. Rendimiento = 305 mg (59 %). Pureza de CLEM = 75 %, m/z 588 [M+H]+. El producto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
25
Los siguientes materiales de partida se prepararon de una manera análoga:
Intermedio 2B (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(4-{[3-(4-fluorofenil)-3-oxoproplonimidoil]amino}bencil)amino]-3- fenilpropionato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 1B, Pureza de CLEM 76 %, m/z 602 [M+H]+.
Intermedio 2C (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(4-{[3-(4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)amino]-1-4- metilpentanoato de ciclopentilo
10
A partir del Intermedio 1A, Pureza de CLEM 55 %, m/z 568 [M+H]+.
Intermedio 2D (S)-[terc-Butoxicarbonil-(-4-[3-(2,4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]aminobencil)amino- 15 fenilacetato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 1C, Pureza de CLEM 76 %, m/z 606 [M+H]+. 20
Intermedio 2E (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(4-{[3-(2,4-difluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)aminol-3- fenilpropionato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 1B, Pureza de CLEM 78 %, m/z 620 [M+H]+.
Intermedio 2F (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(4-{[3-(2,4-difluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)amino]-4- metilpentanoato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 1A, Pureza de CLEM 76 %, m/z 586 [M+H]+.
Intermedio 2G (S)-[terc-Butoxicarbonil-(-4-[3-(3-metil-4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]aminobencil)amino- 10 fenilacetato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 1C, Pureza de CLEM 77 %, m/z 602 [M+H]+. 15
Intermedio 2H (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(4-{[H3-(3-metil-4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)- amino]-3-fenilpropionato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 1B, Pureza de CLEM 77 %, m/z 616 [M+H]+.
Intermedio 2I (S)-2-[terc-butoxicarbonil-(4-{[3-(3-metil-4-fluorofenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)amino]- 1-4-metilpentanoato de ciclopentilo 25
A partir del Intermedio 1A, pureza de CLEM 77 %, m/z 582 [M+H]+.
Intermedio 2J (S)-[terc-Butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(4-fluorofenil)-3-oxo-propionimidoil]amino}bencil)- amino]fenilacetato de ciclopentilo 5
A partir del Intermedio 1F, pureza de CLEM %, m/z 624[M+H]+.
10
Intermedio 2K (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxopropionimidoil]amino}bencil)- amino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo
15
A partir del Intermedio 1D, pureza de CLEM %, m/z 604 [M+H]+.
Intermedio 2L (S)2-[terc-Butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-propionimidoil]amino}bencil)- amino]-3-fenilpropionato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 1E, Pureza de CLEM 100 %, m/z 638 [M+H]+.
Intermedio 2M (S)-2-[terc-Butoxicarbonil-(3,5-difluoro-4-{[3-(2,4-difluorofenil)-3-oxopropion- 25 imidoil]amino}bencil)amino]-4-metilpentanoato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 1D, Pureza de CLEM 86 %, m/z 622 [M+H]+.
Intermedio 3A (S)-({4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridinil-1-il]bencil}-terc-butoxi- carbonilamino)fenilacetato de ciclopentilo
5
A una solución del Intermedio 2A (305 mg, 0,52 mmol) en MeOH (5 ml) se le añadió propiolato de metilo (70 μl, 0,78 mmol). La mezcla se calentó a 80 ºC durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna (EtOAc al 30 %/heptano). Rendimiento = 200 mg (60 %). Pureza de CLEM 10 80 %, m/z 640 [M+H]+.
Los siguientes compuestos se produjeron de una manera similar:
Intermedio 3B (S)-({4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridinil-1-il]bencil}-terc-butoxicarbonil- 15 amino)fenilacetato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 2D, Pureza de CLEM 71 %, m/z 658 [M+H]+. 20
Intermedio 3C (S)-({4-[6-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridinil-1-il]bencil}-terc- butoxicarbonilamino)fenilacetato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 2G, Pureza de CLEM 73 %, m/z 654 [M+H]+.
Intermedio 3D (S)-2-({4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencil}-terc-butoxi- carbonilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 2B, Pureza de CLEM 64 %, m/z 654 [M+H]+.
Intermedio 3E (S)-2-({4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-bencil}terc-butoxicarbonil- amino)-3-fenilpropionato de ciclopentilo
10
A partir del Intermedio 2E, Pureza de CLEM 59 %, m/z 672 [M+H]+.
Intermedio 3F (S)-2-({4-[6-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-bencil}-terc-butoxicarbonil- 15 amino)-3-fenilpropionato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 2H, Pureza de CLEM 87 %, m/z 668 [M+H]+. 20
Intermedio 3G (S)-2-({d4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencil}-terc-butoxi- carbonilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 2C, Pureza de CLEM 82 %, m/z 620 [M+H]+.
Intermedio 3I (S)-2-({4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencil}-terc-butoxicarbonilamino)- 4-metilpentanoato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 2F, Pureza de CLEM 84 %, m/z 638 [M+H]+.
Intermedio 3J (S)-2-({4-[-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencil}-terc- butoxicarbonilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentilo
10
A partir del Intermedio 21, Pureza de CLEM 90 %, m/z 634 [M+H]+.
Intermedio 3K (S)-2-({4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorobencil}-terc-butoxi- 15 carbonilamino)-3-fenil propionato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 2L, Pureza de CLEM 92 %, m/z 690 [M+H]+. 20
Intermedio 3L (S)-2-({4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorobencil}-terc-butoxi- carbonilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 2M, Pureza de CLEM 92 %, m/z 674 [M+H]+.
Intermedio 4A 3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propil éster del ácido metanosulfónico
5
A una suspensión de 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-(3-hidroxi-propoxi)-fenil]-1H-piridin-2-ona (100 mg, 0,25 mmol) en DCM anhidro (1 ml) a 0 ºC se le añadió cloruro de metanosulfonilo (21,5 ml, 0,28 mmol), seguido de Et3N (70 μl, 0,50 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 10-20 min para finalización, supervisada por TLC (MeOH al 5 %/DCM). La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml), se lavó con ácido cítrico al 10 % (5 ml), seguido de NaHCO3 ac. sat. (5 ml) y agua (5 ml). La capa de DCM se secó (Na2SO4), se 10 filtró y se concentró al vacío. Rendimiento = 105 mg (88 %). Pureza de CLEM = 79 % m/z= 475 [M+H]+. Este material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
El alcohol usado como material de partida se preparó de la siguiente manera:
15
La 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-(3-hidroxi-propoxi)-fenil]-1H-piridin-2-ona se preparó como se muestra a continuación.
Una mezcla de 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-hidroxi-fenil]-1H-piridin-2-ona [documento WO 03/076405] (0,80 g, 2,37 mmol), 3-bromo-1-propanol (0,23 ml, 2,60 mmol), K2CO3 (1,37 g, 9,46 mmol), Nal (0,73 g, 4,86 mmol) en 20 acetona (20 ml) se calentó a 70 ºC durante 18 h en una atmósfera de N2. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, se suspendió en agua (20 ml) y el sólido resultante se filtró y se lavó con éter (0,5 ml). Rendimiento = 0,8 g (85 %). Pureza de CLEM = 96 %, m/z 397 [M+H]+
Los siguientes intermedios de metanosulfonato se prepararon de una manera similar al Intermedio 4A usando métodos 25 descritos en el documento WO 03/076405 para la síntesis de los intermedios de 4-hidroxifenilo correspondientes.
Intermedio 4B 3{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propiléster del ácido metanosulfónico
30
Pureza de CLEM 66 %, m/z 461 [M+H]+.
Intermedio 4C 3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propil éster del ácido 35 metanosulfónico
Pureza de CLEM 88 %, m/z 479 [M+H]+. 40
Intermedio 4D 3-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propil éster del ácido metanosulfónico
5
Pureza de CLEM 51 %, m/z 511 [M+H]+.
Intermedio 4E 3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}-propil éster del ácido metanosulfónico
10
Pureza de CLEM 72 %, m/z 497 [M+H]+.
Intermedio 4F 3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propil éster del 15 ácido metanosulfónico
Pureza de CLEM 81 %, m/z 515 [M+H]+. 20
Los siguientes intermedios se prepararon mediante alquilación directa de los intermedios de 4-hidroxifenilo (descritos en el documento WO03/076405) con 1-bromo-5-cloropentano.
Intermedio 4G 6-Amino-1-{4-[(5-cloropentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluoro-benzoil)piridin-2(1H)-ona 25
A una solución de 6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-1-(2,6-difluoro-4-hidroxifenil)-piridin-2(1H)-ona (300 mg, 0,79 mmol) en acetona (6 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron 1-bromo-5-cloropentano (0,115 ml, 0,87 mmol, 30 1,1 equiv.), yoduro de sodio (238 mg, 1,59 mmol, 2 equiv.) y carbonato potásico (438 mg, 3,17 mmol, 4 equiv.). La mezcla se calentó a 70 ºC durante 16 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (EtOAc al 30 % en heptano) proporcionó una mezcla 3:2 del compuesto del título y 6-amino-1-{4-[(5-yodopentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1H)-ona (142 mg) que se usó 35 sin purificación adicional.
CL/EM: m/z 483, 575 [M+H]+.
Intermedio 4H 6-Amino-1-{4-[(5-cloropentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(4-fluoro-benzoil)piridin-2(1H)-ona
A una solución de 6-amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-1-(2,6-difluoro-4-hidroxifenil)-piridin-2(1H)-ona (200 mg, 0,56 mmol) 5 en DMF anhidra (6 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron 1-bromo-5-cloropentano (0,088 ml, 0,67 mmol, 1,2 equiv.) y carbonato potásico (115 mg, 0,83 mmol, 1,5 equiv.). La mezcla se calentó a 40 ºC durante 19 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (20 ml). La solución se lavó con agua (3 x 20 ml) y salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (EtOAc al 20-40 % en heptano) proporcionó el compuesto del título en 10 forma de un sólido de color amarillo (104 mg) que se usó sin purificación adicional.
CL/EM: m/z 465 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,60 (2H, m), 7,53 (1 H, d, J = 9,4 Hz), 7,33 (2H, m), 7,05 (2H, m), 5,72 (1H, d, J = 9,8 Hz), 4,11 (2H, t, J = 6,3 Hz), 3,68 (2H, t, J = 6,5 Hz), 1,84-1,77 (4H, m), 1,56 (2H, m).
Intermedio 4J 2-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenil}-etil éster del ácido 15 metanosulfónico
A una suspensión de 6-Amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[4-(2-hidroxi-etil)-fenil]-1H-piridin-2-ona (150 mg, 20 0,43 mmol) en DCM anhidro (3 ml) a 0 ºC se le añadió cloruro de metanosulfonilo (34 μl, 0,47 mmol), seguido de Et3N (120 ml, 0,85 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 24 horas hasta que se completó. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml), se lavó con ácido cítrico al 10 % (5 ml), seguido de NaHCO3 ac. sat. (5 ml) y agua (5 ml). La capa de DCM se secó (MgSO4), se filtró y se concentró al vacío. Rendimiento = 183 mg (en bruto). Pureza de CLEM = 85 % m/z= 431 [M+H]+. Este material se usó en la siguiente etapa sin 25 purificación adicional. El alcohol usado como material de partida se preparó de la siguiente manera:
Se disolvió 2-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenil}-etil éster del ácido acético (300 mg) en agua (5 ml) y HCl conc. (5 ml) y se calentó a 100 ºC durante 1 hora. Después, la reacción se enfrió, se diluyó con 10 ml de agua y se filtró. Después, el sólido resultante se secó a presión reducida para dar 264 mg de producto, 30 m/z= 353 [M+H]+.
El 2-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-benzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenil}-etil éster del ácido acético usado como material de partida se preparó de la siguiente manera:
35
Una solución de ácido propiólico (270 μl, 4,39 mmol) y CDI (712 mg, 4,34 mmol) en THF (13 ml) se calentó de 0 ºC a TA y se agitó durante 1,5 horas. A esta solución se le añadió 2-(4={[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-propionimi- doil]-amino}-fenil)-etil éster del ácido acético (1 g, 2,92 mmol) en THF (6 ml) y la reacción se calentó a 80 ºC durante un periodo de 2 horas máximo. Después de refrigeración y de evaporación a presión reducida, el residuo en bruto se sometió a ultrasonidos con metanol (7 ml) antes de filtración, lavando con una cantidad mínima de 40 metanol. Se recogió un sólido blanquecino (350 mg en bruto).
El 2-(4-{[3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-propionimidoil]-amino}-fenil)-etil éster del ácido acético usado como material de partida se preparó de la siguiente manera:
45
Se disolvieron 4-cloro-fenilo éster del ácido 3-(4-fluoro-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico (1 g, 2,9 mmol) y 4-aminofenetil alcohol (418 mg, 3,08 mmol) en ácido acético (5 ml) y se calentó a 80 ºC durante un periodo de 24 horas. La reacción se enfrió a TA y se evaporó a presión reducida. El residuo en bruto se repartió entre DCM y Na2CO3. La capa de DCM se lavó adicionalmente con salmuera y se secó sobre MgSO4 antes de evaporación a presión reducida. El producto se aisló (1 g en bruto) en forma de una mezcla 3:1 del producto acetilado:alcohol. 50 Este se recogió por completo sin purificar en la reacción de ciclación anterior. Producto m/z= 343 [M+H]+, alcohol m/z= 301 [M+H]+.
Intermedio 5 6-Amino-1-[2,6-difluoro-4-(4-oxo-ciclohexiloxi)fenil]-5-(4-fluorobenzoil)-1H-piridin-2-ona
A una solución de 6-amino-1-[4-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-iloxi)-2,6-difluoro-fenil]-5-(4-fluorobenzoil)-1H- 5 piridin-2-ona (0,55 g, 1,10 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se le añadió HCI ac. 2 M (5 ml) a temperatura ambiente. La agitación se continuó durante 18 h. Una vez completa la reacción, la mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) antes de la evaporación de dioxano a presión reducida. La solución acuosa residual se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron a sequedad a presión reducida para dar la cetona deseada en forma de un sólido de color blanco (0,43 g, 86 %). Pureza de CLEM 98 %, m/z 457 10 [M+H]+,RMN 1H (400 MHz, CDCI3), δ: 2,05-2,15 (2H, m), 2,25-2,45 (4H, m), 2,55-2,70 (2H, m), 4,65-4,75 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,70-6,75 (2H, m), 7,05-7,15 (2H, m), 7,50-7,65 (3H, m).
El cetal usado como material de partida se preparó de la siguiente manera:
15
A una solución agitada de 1,4-dioxa-espiro[4,5]decan-8-ol (0,5 g, 1,45 mmol) en THF (1,5 ml) se le añadieron 6-amino-1-(2,6-difluoro-4-hidroxifenil)-5-(4-fluoro-benzoil)-1H-piridin-2-ona (preparada por métodos descritos en el documento WO 03/076405) (0,5 g, 1,39 mmol) y trifenilfosfina (0,38 g, 1,45 mmol) a TA. Se añadió gota a gota 20 azodicarboxilato de diisopropilo (0,29 ml, 1,45 mmol) y se continuó agitando durante 18 h. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y se purificó por cromatografía en columna para proporcionar el material deseado en forma de un sólido de color blanco (0,55 g, 79 %). Pureza de CLEM 99 %, m/z 501 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CDCI3), δ: 1,55-1,65 (2H, m), 1,75-2,00 (6H, m), 3,85-3,90 (4H, m,), 4,35-4,40 (1 H, m), 5,85 (1H, d), 6,10-6,20 (2H, m), 7,05-7,15 (2H, m), 7,45-7,60 (3H, m). 25
Intermedio 6 6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-1-(4-oxo-ciclohexil)-1H-piridin-2-ona
30
Se añadió HCl 2 M (14 ml) a una solución de color amarillo de 6-amino-1-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-5-(4-fluorobenzoil)-1H-piridin-2-ona (664 mg, 1,78 mmol) en 1,4-dioxano (60 ml) a TA. La solución de color amarillo resultante se agitó a TA durante 24 h y después se diluyó con H2O (30 ml) y se concentró al vacío para retirar el 1,4-dioxano, dando un sólido cristalino de color amarillo. El sólido se aisló por filtración, se lavó con H2O y se secó al aire, dando un sólido cristalino de color amarillo. Rendimiento = 479 mg, 82 %. 35 Pureza de CLEM 92 %, m/z 329 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CDCI3), δ: 1,90-2,30 (8H, m), 5,35 (1H, m), 5,65 (1H, d), 7,05-7,15 (2H, m), 7,30 (1 H, d), 7,35-7,45 (2H, m), 11,45 (1 H, s).
El piridona acetal usado como material de partida en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación 40
Se añadió trietilamina (0,74 ml, 5,31 mmol) a una solución de 1-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-6-etanosulfinil- 5-(4-fluorobenzoil)-1H-piridin-2-ona (1,046 g,2,42 mmol) en NH3 0,5 M en 1,4-dioxano (30 ml) a TA en una atmósfera de N2. La solución de color amarillo resultante se agitó a TA durante una noche y después se concentró al vacío, 5 dando un sólido de color amarillo, que se trituró con TBME, se aisló por filtración y se lavó con TBME dando un sólido de color amarillo pálido. Rendimiento = 802 mg, 89 %. Pureza de CLEM 100 %, m/z 373 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CDCI3), 5:1,90-2,00 (6H, m), 2,60 (2H, m), 4,15 (4H, m), 5,90 (1 H, d), 7,25 (2H, m), 7,55 (1 H, d), 7,65 (2H, m).
El sulfóxido usado en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación 10
Se añadió en una porción ácido m-cloroperbenzoico (583 mg, 2,60 mmol) a una solución de color amarillo de 1-(1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-il)-6-etilsulfanil-5-(4-fluorobenzoil)-1H-piridin-2-ona (986 mg, 2,36 mmol) en CH2Cl2 15 (30 ml) a TA en una atmósfera de N2. La solución de color amarillo resultante se agitó a TA durante una noche y después se diluyó con CH2Cl2 (25 ml) y se lavó con Na2SO3 sat. (2 x 30 ml), NaHCO3 sat. (2 x 30 ml), H2O (30 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío, dando aceite de color amarillo claro. Rendimiento = 1,046 g, 102 %. Pureza de CLEM 96 %, m/z 434 [M+H]+.
20
El sulfuro usado en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación
Se añadió 1-cloro-N,N-2-trimetilpropenilamina (2,03 ml, 15,34 mmol) a una solución incolora de ácido propiólico 25 (0,94 ml, 15,34 mmol) en THF anhidro (50 ml) a 0 ºC en una atmósfera de N2. La solución incolora resultante se agitó a 0 ºC durante 2 h, tiempo después del cual se añadió una solución de color amarillo del ácido N-(1,4-dioxa-espiro[4,5]dec-8-il)-3-(4-fluorofenil)-3-oxo-tiopropionimidoco (4,667 g, 12,79 mmol) en THF anhidro (50 ml) durante 5 min a 0 ºC. Después, la solución de color amarillo resultante se dejó calentar a TA y se agitó durante 24 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío, dando un aceite de color pardo oscuro, que se diluyó con EtOAc 30 (20 ml) y se dejó reposar a TA durante una noche, dando un sólido cristalino que se aisló por filtración y se lavó con heptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CHheptano y TBME. Rendimiento = 216 mg. El filtrado se concentró al vacío, dando un sólido de color pardo que se disolvió en CH
El ácido tiopropionimídico usado en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación:
10
Se añadió K2CO3 (16,1 g, 117 mmol) a una solución de N-(1,4-dioxaspiro[4,5]dec-8-il)-3-(4-fluorofenil)-3-oxo- tiopropionamida (18,8 g, 55,7 mmol) en acetona (200 ml) a TA/N2 seguido del yoduro de etilo (6,68 ml, 83,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA/N2 durante 2 h y después se concentró al vacío, dando una pasta de color pardo que se recogió en EtOAc (300 ml) y se lavó con H2O (250 ml). La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío, 15 dando un aceite de color pardo. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (sílice, EtOAc al 15 %/Heptano) dio un aceite de color amarillo. Rendimiento = 9,94 g, 49 %. Pureza de CLEM 94 %, m/z 366 [M+H]+.
La tiopropionamida usada en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación:
20
Una solución de 4-fluoroacetofenona (6,76 ml, 55,7 mmol) en THF (50 ml) se añadió lentamente durante 5 min a una suspensión agitada de KOtBu (6,56 g, 58,5 mmol) en THF (40 ml) a 0 ºC. Se añadió una solución de 8-isotiocianato-1,4-dioxaespiro[4,5]decano (11,1 g, 55,7 mmol) en THF (30 ml) a 0 ºC durante 5 min y la mezcla 25 resultante se agitó a 0 ºC durante 90 min. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad, dando un sólido de color pardo oscuro que se usó en bruto en la siguiente etapa. Rendimiento = 18,8 g, 100 %. Pureza de CLEM 55 %, m/z 338 [M+H]+.
El isotiocianato usado en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación 30
Se añadió carbonato de calcio (13,75 g, 137,4 mmol) a una solución de 1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-ilamina (13,5 g, 85,9 mmol) en CH2Cl2 (675 ml) y H2O (330 ml) con agitación vigorosa a TA. El tiofosgeno (8,5 ml, 111,6 mmol) se 35 añadió gota a gota durante 5 min y una vez completa la adición, la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con Hmezcla de reacción se diluyó con H
La ciclohexilamina usada en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación: 5
Se añadió Pd al 10 %(OH)2/C (1 g) a una suspensión fina de N,N-dibencil-N-1,4-dioxaespiro[4,5]dec-8-ilamina (21,13 g, 62,7 mmol) en EtOH (400 ml) a TA. La mezcla resultante se evacuó y se purgó tres veces con H2 y después 10 se mantuvo en una atmósfera de H2 (globo) durante una noche. La mezcla de reacción se evacuó y se purgó tres veces con N2 y después el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se concentró al vacío, dando la amina en forma de un aceite incoloro. Rendimiento = 14,34 g, 99 %. Pureza de CL-EM (detección de ELS) 100 %, m/z 158 [M+H]+.
La dibencilamina usada en el procedimiento anterior se preparó como se indica a continuación: 15
Se añadió dibencilamina (27,8 ml, 145m mol) a una solución de 1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona (21,5 g, 138 mmol) en DCE (350 ml) a TA en una atmósfera de N2 y se agitó durante 1 h. Se añadió en porciones triacetoxiborohidruro de 20 sodio (46,7 g, 220 mmol) durante 10 min y una vez completa la adición, la reacción se agitó a TA/N2 durante una noche. Se añadió NaHCO3 saturado (300 ml), seguido de DCM (300 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min. La fase orgánica se separó y se lavó con NaHCO3 (300 ml) y salmuera (300 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío, dando un aceite que tras trituración con heptano dio un sólido de color blanco que se aisló por filtración. Rendimiento = 30,95 g, 67 %. Pureza de CLEM 100 %, m/z 338 [M+H]+. 25
Intermedio 7 (S)-2-(terc-Butoxicarbonil-{3,5-difluoro-4-[3-(4-fluoro-benzoil)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2- ilamino]bencil}amino)-3-fenil propionato de ciclopentilo
30
La piridona se formó como un producto secundario del procedimiento descrito para la síntesis del Intermedio 3K. Pureza de CLEM 80 %, m/z 690 [M+H]+.
35 Preparación de ésteres de aminoácido (Intermedios 8 a 16)
Ruta I. Usada para la preparación de los Intermedios 8, 9, 13, 14 y 15
5
Ruta II. Usada para la preparación del Intermedio 10, 11,12 y 16
10
Intermedios preparados:
15
Síntesis de compuestos indicados en la Figura 1
Ruta I (ilustrada para el Intermedio 9) 5
Etapa 1 – Formación de éster
10
A una solución de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-3-ciclohexil-propiónico (5 g, 19,4 mmol) en DMF (50 ml) a 0 ºC se le añadieron ciclopentanol (8,8 ml, 97,15 mmol), EDCI (4,09 g, 21,37 mmol) y finalmente DMAP (237 mg, 1,94 mmol). La mezcla de reacción se calentó a TA y se agitó durante 18 h. La DMF se retiró al vacío para dar un aceite transparente. Este se separó entre agua y EtOAc. La fase orgánica se secó (MgSO4) y se concentró al vacío. El extracto en bruto se purificó por cromatografía en columna (EtOAC al 25 % en heptano) para producir el producto 15 deseado en forma de un aceite transparente (14,87 g, 55 %). RMN 1H (300 MHz, d6-DMSO) δ; 7,09 (1H, d), 5,08 (1H, t), 3,76 (1H, t), 1,50-1,85 (10H, m a), 1,39 (9H, s), 1,00-1,25 (9H, m a).
Etapa 2- Desprotección de Boc para producir clorhidrato de (2S)-amino(ciclohexil)acetato de ciclopentilo (Intermedio 9) 20
El producto de la Etapa 1 (14,87 g, 45,69 mmol) se disolvió en DCM (100 ml) y se trató con HCl 4 M/dioxano (22,8 ml, 91,38 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 24 h. La mezcla en bruto se concentró a presión reducida 25 para dar un aceite de color naranja. Este se trituró con Et2O para dar un precipitado de color blanco. Este se lavó adicionalmente con Et2O para dar el producto deseado en forma de un polvo de color blanco (7,78 g, 65 %). RMN 1H (300 MHz, d6-DMSO) δ; 8,45 (3H, s a), 5,22 (1 H, t), 3,28 (1 H, d), 1,95-1,50 (10H, m a), 1,30-0,90 (9H, m a).
Ruta II (ilustrada para los Intermedios 10) 30
Etapa 1 -Formación de éster para producir 4-metilbencenosulfonato de (1S)-2-(ciclopentiloxi)-2-oxo-1-feniletanaminio (Intermedio 10)
35
A una suspensión de (S)-fenilglicina (5 g, 33,1 mmol) en ciclohexano (150 ml) se le añadió ciclopentanol (29,84 ml, 331 mmol) y ácido p-tolueno sulfónico (6,92 g, 36,4 mmol). La reacción se ajustó con un receptor Dean-Stark y se calentó a 135 ºC para su disolución completa. Después de 12 h, la reacción se enfrió a TA, conduciendo a la precipitación de un sólido de color blanco. El sólido se filtró y se lavó con EtOAc antes de secar a presión reducida para dar el producto requerido en forma de un polvo de color blanco (11,01 g, 85 %). RMN 1H (300 MHz, k6-DMSO) δ; 8,82 5 (2H, s a), 8,73 (1H, s a), 7,47 (7H, m), 7,11 (2H, d), 5,25 (1 H, s a), 5,18 (1H, m), 2,29 (3H, s), 1,87-1,36 (8H, m).
Los intermedios 11 y 12 se prepararon usando 2-indanol y α-norborneol, respectivamente, en lugar de ciclopentanol (mediante la Ruta II). De una manera similar, los intermedios 13 y 14 se prepararon usando dimetilaminoetanol y 4-(2-hidroxietil)-morfolina, respectivamente (mediante la Ruta I). El intermedio 15 se preparó mediante la Ruta I 10 usando Z-Dab(Boc)-OH (ácido N-α-Z-N-y-Boc-L-2,4-diaminobutírico) disponible en el mercado.
Los ésteres de (R)-aminoácido correspondientes de los intermedios anteriores pueden prepararse de una manera similar a la mostrada anteriormente, partiendo de los (R)-aminoácidos disponibles en el mercado pertinentes. Además, los terc-butil ésteres de Leucina y Fenilglicina correspondientes están disponibles en el mercado y se utilizan 15 directamente donde sea adecuado.
Ejemplos
Ejemplo 1 (S)-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}fenilacetato de ciclopentilo 20
Una mezcla del Intermedio 3A (80 mg, 0,125 mmol) en una solución al 20 % de TFA/DCM (5 ml) se dejó en agitación a TA durante 1 h. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y se purificó por HPLC preparativa para dar el 25 producto deseado, rendimiento = 33 mg (40 %), pureza de CLEM = 100 % m/z 540 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,21-1,82 (8H, m), 4,01-4,14 (2H, m), 5,11-5,21 (2H, m), 5,64 (1 H, d), 7,21-7,54 (13H, m), 7,62 (1 H, d), 10,16 (2H, s a).
Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera similar al Ejemplo 1. 30
Ejemplo 2 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentilo
35
A partir del Intermedio 3D. Pureza de CLEM 100 %, m/z 554 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,22-1,83 (8H, m), 3,10 (1H, m), 4,45 (3H, m), 5,19 (1H, m), 5,85 (1H, d), 7,35-7,74 (14H, m), 7,82 (1H, s a), 9,96 (1H, s a).
Ejemplo 3 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 3G. Pureza de CLEM 100 %, m/z 520 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,10 (6H, m), 1,70-2,11 (11H, m), 4,14-4,53 (3H, m), 5,42 (1H, m, CH), 5,90 (1H, d), 7,49-7,91 (9H, m), 9,83 (2H, s a).
Ejemplo 4 (S)-{4-[6-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}fenilacetato de ciclopentilo 10
A partir del Intermedio 3C, Pureza de CLEM 97 %, m/z 554 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-1,81 (8H, m), 2,25 (3H, s), 3,72 (2H, s), 4,34 (1 H, s), 5,08 (1 H, m), 5,70 (1 H, d), 7,03-7,38 (10H, m), 7,46-7,61 (3H, m). 15
Ejemplo 5 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 3F. Pureza de CLEM 100 %, m/z 568 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,09-1,77 (8H, m), 2,30 (3H, s), 2,95 (1H, m), 3,14 (2H, s), 4,19-4,42 (3H, m), 5,02 (1 H, m), 5,69 (1 H, d), 7,19-7,51 (11 H, m), 7,68 (2H, m), 9,79 (2H, s a).
25
Ejemplo 6 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(3-Metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 3J. Pureza de CLEM 100 %, m/z 534 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,32-1,70 (11 H, m), 2,09 (3H, s), 3,72-4,14 (3H, m), 5,03 (1 H, m), 5,50 (1 H, d), 7,00-7,29 (6H, m), 7,46 (2H, m), 9,40 (2H, s a).
Ejemplo 7 (S)-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}fenilacetato de 10 ciclopentilo
A partir del Intermedio 3B. Pureza de CLEM 100 %, m/z 558 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,33-1,89 (8H, m), 15 3,71 (2H, m), 4,28 (1 H, s), 5,04 (1 H, m), 5,61 (1 H, d), 6,91 (1H, s a), 7,18-7,60 (13H, m), 10,05 (1H, s a).
Ejemplo 8 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 3E. Pureza de CLEM 100 %, m/z 572 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 1,08-1,76 (8H, m), 2,95 (1H, t), 4,11-4,40 (3H, m), 4,98 (1H, m), 5,68 (1H, d), 6,89 (1H, s a), 7,13-7,50 (12H, m), 7,65 (1H, m), 9,64-10,12 (2H, s a). 25
Ejemplo 9 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-4-metilpentanoato de ciclopentilo
30
A partir del Intermedio 3I.Pureza de CLEM 100 %, m/z 538 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 0,79 (6H, m), 1,39-1,78 (11H, m), 3,84-4,22 (3H, m), 5,10 (1H, m), 5,59 (1H, d), 6,79 (1 H, s a), 7,03-7,18 (2H, m), 7,21-7,42 (4H, m), 7,56 (2H, m), 9,54 (1 H, s a), 9,92 (1 H, s a).
Ejemplo 10 (S)-2-{-4-[6-Amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorobencilamino}-3- 5 fenilpropionato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 3K. Pureza de CLEM 94 %, m/z 591 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,20-1,90 (10H, 10 m), 3,10 (1 H, m), 3,50-3,60 (2H, m), 4,40-4,50 (4H, m), 5,20 (1 H, m), 5,90 (1 H, d), 7,35-7,50 (7H, m), 7,65-7,70 (5H, m), 9,50 (1 H, a)
Ejemplo 11 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorobencilamino}- 4-metilpentanoato de ciclopentilo 15
A partir del Intermedio 3L .Pureza de CLEM 96 %, m/z 574 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95-1,15 (6H, m), 1,65-2,05 (11H, m), 4,15-4,25 (1H, m), 4,35-4,45 (2H, m), 5,35-5,45 (1H, m), 5,85 (1H, d), 7,10-7,20 (2H, m), 7,45-7,55 20 (4H, m).
Ejemplo 12 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-3-fenil propionato de ciclopentilo
25
A una mezcla de sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16) (218 mg, 0,54 mmol), K2CO3 (192 mg, 1,39 mmol), Nal (108 mg, 0,72 mmol) se le añadió una solución de mesilato Intermedio 4A (170 mg, 0,35 mmol) en THF (2 ml). La mezcla de reacción se diluyó con DMF (2 ml) y se calentó a 70 ºC durante 18 h con 30 agitación. La mezcla de reacción se enfrió a TA, el THF se retiró mediante concentración a presión reducida. El residuo se diluyó con EtOAc (20 ml) y se lavó con agua (10 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó a sequedad. La purificación por HPLC preparativa proporcionó el producto deseado, rendimiento = 57 mg, 15 %. Pureza de CLEM 97 %, m/z 612 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-2,00 (8H, m), 2,30 (2H, m), 3,10 (1H, m), 3,40 (1H, m), 4,25 (2 H, m), 4,40 (1H, m), 5,20 (1H, m), 5,85 (1H, d), 6,90 (2H, m), 7,10 (2H, d), 7,20-7,45 (7H, m), 7,65 (2H, m), 7,75 35 (1H, m).
Los siguientes compuestos se prepararon de una manera similar
40 Ejemplo 13 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)- fenilacetato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 4E y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 96 %, m/z 620 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,40-1,65 (5H, m), 1,80 (2H, m), 1,95 (1 H, m), 2,30 (2H, m), 3,15 (1 H, m), 3,30 (1 H, m), 4,25 (2H, m), 5,25 (1 H, s), 5,40 (1 H, m), 5,90 (1 H, d), 6,90 (2H, d), 7,30 (2H, t), 7,55 - 7,60 (5H, m), 7,65 (2H, m) 7,75 (1 H, d).
10
Ejemplo 14 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)- fenilacetato de ciclopentilo
15
A partir del Intermedio 4E y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16), Pureza de CLEM 97 %, m/z 634 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-2,00 (8H, m), 2,30 (2H, m), 3,10 (1 H, m), 3,40 (1 H, m), 4,25 (2H, m), 4,40 (1 H, m), 5,20 (1 H, m), 5,85 (1H, d), 6,90 (2H, m), 7,10 (2H, d), 7,20-7,45 (7H, m), 7,65 (2H, m), 7,75 (1H, m).
Ejemplo 15 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxifenoxi}- 20 propilamino)-4-metil pentanoato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4E y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8), Pureza de CLEM 96 %, m/z 600 [M+H]+, 25 RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10 (6H, m), 1,70-2,0 (12H, m), 2,30 (2 H, m), 4,10 (1 H, m), 4,25 (2H, m), 4,40 (1 H, m), 5,40 (1 H, m), 5,85 (1 H, d), 6,90 (2H, m). 7,10 (2H, d), 7,60. (2H, m), 7,65 (2H, m), 7,75 (1H, m).
Ejemplo 16 N-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)-L-leucinato de etilo 30
A partir del Intermedio 4E y etil éster de L-leucina, Pureza de CLEM 98 %, m/z 560 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10-1,20 (6H, m), 1,45-1,55 (3H, t), 1,65-1,85 (2H, m), 1,90-2,00 (1 H, m), 2,15-2,30 (2H, m), 2,85-3,05 35 (2H, m), 3,55 (1 H, m), 4,35-4,50 (4H, m), 6,00 (1H, d), 7,10 (1H, d), 7,45-7,55 (1H, m), 7,80-7,85 (1H, m), 7,95 (1H, d).
Ejemplo 17 (S)-(3-{[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino) fenilacetato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 4D y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 100 %, m/z 634 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,20-1,80 (8H, m), 2,0 (2H, m), 2,20 (3H, m), 2,80-3,00 (2H, m), 4,10 (2H, m), 5,10 (1H, m), 5,30 (1H, s), 5,60 (1H, d), 6,95 (1H, d), 7,20 (1H, m), 7,30 (1H, m), 7,40-7,50 (8H, m), 9,65 (1 H, m).
10
Ejemplo 18 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentilo
15
A partir del Intermedio 4D y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16), Pureza de CLEM 97 %, m/z 648 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,20-1,90 (9H, m), 2,25 (2H, m), 2,35 (3H, s), 3,15 (1H, m), 3,45 (1H, m), 4,25 (2H, m), 4,40 (1H, d), 5,20 (2H, m), 5,82 (1H, d), 6,95 (2H, m), 7,20 (1H, m), 7,30-7,50 (7H, m), 7,75 (1H, d).
20
Ejemplo 19 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoato ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 4D y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedios 8), Pureza de CLEM 100 %, m/z 614 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,90 (6H, m), 1,60-1,70 (10H, m), 1,90 (2H, m), 2,15 (2H, m), 2,30 (3H, s), 3,00-3,20 (2H, m), 4,10 (1 H, s), 4,20 (2H, m), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,05 (1H, d), 7,25 (1H, m), 7,40 (1H, m), 7,50 (1H, m), 7,60 (1 H, d).
30
Ejemplo 20 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)- fenilacetato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 4F y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 91 %, m/z 638 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,50-2,10 (8H, m), 2,30 (2H, m), 3,10-3,25 (2H, m), 4,33 (2H, m), 5,40 (1 H, m), 5,56 (1 H, m), 5,90 (1 H, d), 7,20 (1 H, d) 7,40-7,75 (9H, m), 9,85 (2H, m).
Ejemplo 21 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}-propilamino)- 10 3-fenilpropionato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4F y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16).Pureza de CLEM 100 %, 15 m/z 652 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,10-1,80 (9H, m), 2,15 (2H, m), 2,95-3,20 (2H, m), 4,20 (2H, m), 4,40 (1H, m), 5,10 (1H, m), 5,75 (1 H, d), 7,06 (2H, d), 7,25-7,58 (9H, m), 9,34 (2H, m).
Ejemplo 22 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoato de ciclopentilo 20
A partir del Intermedio 4F y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8), Pureza de CLEM 87 %, m/z 618 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,0 (6H, m), 1,75 (9H, m), 1,95 (2H, m), 2,20 (2H, m), 3,10-3,30 (2H, m), 4,16 (1H, 25 m), 4,26 (2H, m), 5,33 (1H, m), 5,80 (1H, d), 7,15 (2H, d), 7,40-7,65 (4H, m), 9,13- 9,25 (2H, m).
Ejemplo 23 (S)-(3-{-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenoxi}propilamino)-fenulacetato de ciclopentilo
30
A partir del Intermedio 4B y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 95 %, m/z 584 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,25-1,55 (5H, m), 1,60-1,85 (3H, m), 2,15 (2H, m), 3,00 (1 H, m), 3,15 (1 H, m), 4,05 (2H, m), 5,10 (1H, s), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,00 (2H, m), 7,15 (4H, m), 7,40-7,50 (7H, m), 7,55 (1H, 35 d).
Ejemplo 24 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-3-fenilpropionato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 4B y ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16), Pureza de CLEM 93 %, m/z 598 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,50-2,10 (8H, m), 2,50 (2H, m), 3,35-3,40 (1 H, m), 3,55-3,70 (2H, m), 4,40-4,50 (2H, m), 4,60 (1 H, m), 5,40-5,45 (1 H, m), 6,05-6,10 (1 H, d), 7,40-7,65 (11H, m), 7,85 (2H, m). 7,90 (1 H, m).
Ejemplo 25 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)- 10 4-metilpentanoato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4B y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8), Pureza de CLEM 97 %, m/z 564 [M+H]+, 15 RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,90 (6H, m), 1,60-1,75 (10H, m), 1,90 (2H, m), 2,15 (2H, m), 3,10-3,30 (2H, m), 4,10 (1H, m), 4,15 (2H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 (1H, d). 7,15 (2H, d), 7,30 (2H, d), 7,35 (2H, t), 7,50 (1H, d), 7,55 (1H, m) 9,05-30 (2H, m).
Ejemplo 26 (S)-(3-{4[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il-fenoxi}propilamino)fenilacetato 20 de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4A y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 95 %, 25 m/z 598 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,30 2,20 (10H, m), 2,30 (3H, m), 2,90-3,10 (2H, m), 4,15 (2H, m), 5,20 (1H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,10 (2H, d), 7,25-7,40 (5H, m), 7,40-7,50 (3H, m), 7,55 (5H, m), 9,70 (2H, m).
Ejemplo 27 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-4- metilpentanoato de ciclopentilo 30
A partir del Intermedio 4A y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8), Pureza de CLEM 89 %, m/z 578 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,55-2,25 (12H, m), 2,30 (3H, m), 2,75-3,30 (2H, m), 4,15 (3H, m), 5,25 35 (1H, m), 5,70 (1H, d). 7,15 (2H, d), 7,30-7,40 (4H, m), 7,40 - 7,50 (2H, m).
Ejemplo 28 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenoxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentilo
5
A partir del Intermedio 4C y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10), Pureza de CLEM 99 %, m/z 602 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,35-2,15 (10H, m), 2,90-3,10 (2H, m), 4,10 (2H, m), 5,25 (1H, m), 5,40 (1H, m), 5,70 (1H, d), 7,10 (2H, d), 7,25-7,30 (4H, m), 7,40-7,50 (2H, m), 7,55 (5H, m), 9,70 (2H, m).
Ejemplo 29 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-3- 10 fenilpropionato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4C y sal tosilato de ciclopentil éster de L-fenilalanina (Intermedio 16), Pureza de CLEM 99 %, 15 m/z 616 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,10-1,80 (8H, m), 2,20 (2H, m), 2,95 (1H, m), 3,10-3,30 (2H, m), 3,40 (2H, m), 4,20 (2H, m), 4,40 (1H, m), 5,05 (1 H, m), 5,70 (1 H, d), 7,15 (2H, d), 7,20-7,55 (11 H, m), 9,70 (2H, m).
Ejemplo 30 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-4- metilpentanoato de ciclopentilo 20
A partir del Intermedio 4C y ciclopentil éster de L-leucina (Intermedio 8), Pureza de CLEM 99 %, m/z 582 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,65-2,15 (13H, m), 3,10-3,20 (2H, m), 4,15 (3H, m), 5,30 (1H, m), 5,70 25 (1H, d), 7,15 (2H, d), 7,25-7,55 (6H, m), 9,24 (2H, m)
Ejemplo 31 (S)-2-(4-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- ciclohexilamino)-4-metilpentanoato trifluoroacetato de ciclopentilo
30
Una suspensión del Intermedio 5 (120 mg, 0,263 mmol) y sal tosilato de ciclopentil éster de L-Fenilalanina (Intermedio 16) (98 mg, 0,263 mmol) en MeOH (1,2 ml) se dejó en agitación a TA durante 1 h antes de la adición de NaCNBH3 (66 mg, 1,05 mmol). La agitación se continuó a TA durante 18 h. Una vez completa la reacción, la mezcla de 35 reacción se concentró a sequedad y se repartió entre EtOAc (10 ml) y agua (10 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró a sequedad a presión reducida y se purificó por HPLC preparativa. Esto dio el producto deseado en forma de una sal TFA. Rendimiento = 37 mg (18 %).
Pureza de CLEM 97 %, m/z 674 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,10-2,20 (16H, m), 2,35-2,45 (1 H, m), 2,70-3,00 (2H, m), 3,50-3,55 (1 H, m), 4,25-4,35 (1 H, m), 4,95-5,05 (1H, m), 5,70 (1H, d), 6,75 (2H, dd), 7,05-7,25 (7H, m), 7,45-7,55 (2H, m), 7,65 (1H, d)
Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera similar: 5
Ejemplo 32 (2S)-[(4-{4[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}ciclohexil)amino]- (fenil)acetato de ciclopentilo
10
A partir del Intermedio 5 (120 mg, 0,263 mmol) y ciclopentil éster de L-fenilglicina (Intermedio 10). Pureza de CLEM 97 %, m/z 660 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,30-1,80 (14H, m), 1,90-2,05 (2H, m), 2,35-2,50 (1 H, m), 4,35-4,45 (1 H, m), 4,50-4,60 (1H, m), 5,05-5,10 (1H, m), 5,70 (1H, d), 6,75-6,85 (2H, m), 7,10-7,15 (2H, m), 7,20-7,35 (5H, m), 7,45-7,55 (2H, m), 7,55-7,60 (1 H, m). 15
Ejemplo 33 (S)-2-(4-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}ciclohexilamino)- 4-metilpentanoato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 5 (120 mg, 0,263 mmol) y ciclopentil éster de L-Leucina (Intermedio 8). Pureza de CLEM 100 %, m/z 640 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95-1,05 (6H, m), 1,50-2,00 (16H, m), 2,10-2,35 (3H, m), 3,15-3,20 (1 H, m), 4,00-4,15 (1 H, m), 4,40 y 4,75 (cada uno 0,5H, m), 5,25-5,35 (1 H, m), 5,75 (1 H, d), 6,85-6,95 (2H, m), 7,15-7,25 (2H, m), 7,55-7,65 (2H, m), 7,65-7,70 (1H, m). 25
Ejemplos 34 y 35 (S)-2-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]clohexilamino}-3-fenilpropionato de ciclopentilo
30
El Intermedio 6 (50 mg, 0,15 mmol) se añadió a una solución incolora de ciclopentil éster de L-fenilalanina (89 mg, 0,38 mmol) en MeOH (10 ml) a TA/N2 y se agitó a TA durante 1 h. Se añadió gota a gota AcOH glacial para ajustar el pH a 6, seguido del NaCNBH3 (38 mg, 0,61 mmol). La solución incolora resultante se agitó a TA durante una noche y después se inactivó cuidadosamente con NaHCO3 sat. (20 ml) y se extrajo en CH2Cl2 (3 x 15 ml). Las fases orgánicas 35 combinadas se lavaron con HCl 2 M (2 x 20 ml) y salmuera (20 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío, dando un sólido de color crema. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida (sílice, la elusión en gradiente de EtOAc al 40-100 %/heptano) dio el material deseado, separable en forma de dos isómeros, isómero 1 (Ejemplo 34) en forma de un sólido de color blanco (Rendimiento = 39 mg, 47 %) Pureza de CLEM 100 %, m/z 546 [M+H]
Ejemplo 36 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- 10 propilamino)fenilo acetato de terc-butilo
A partir del Intermedio 4F y terc-butil éster de L-fenilglicina, Pureza de CLEM 93 %, m/z 626 [M+H]+, RMN 1H (400 15 MHz, CD3OD), δ: 1,30 (9H, s), 2,15 (2H, m), 3,00-3,15 (2H, m), 4,06 (2H, m), 5,02 (1H, s), 5,70 (1H, d), 6,75 (2H, d), 7,02 (2H, m), 7,30-7,50 (7H, m).
Ejemplo 37 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1il]-3,5-difluorofenoxi}- propilamino)-3-fenilpropionato de terc-butilo 20
A partir del Intermedio 4F y terc-butil éster de L-fenilalanina. Pureza de CLEM 97 %, m/z 640 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,25 (9H, s), 2,16 (2H, m), 3,00 (1H, dd), 3,15-3,25 (2H, m), 3,35 (1H, dd), 4,10 (2H, m), 4,20 (1H, m), 25 5,71 (1H, d), 6,79 (2H, d), 7,02 (2H, t), 7,20-7,30 (5H, m), 2H (2H, m).
Ejemplo 38 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoato de terc-butilo
30
A partir del Intermedio 4F y terc-butil éster de L-leucina, Pureza de CLEM 97 %, m/z 606 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95 (6H, m), 1,41 (9H, s), 1,61 (1H, m), 1,75 (2H, m), 2,15 (2H, m), 3,22-3,25 (2H, m), 3,88 (1H, m), 4,13 (2H, m), 4,20 (1H, m), 5,40 (1H, s), 5,75 (1 H, d), 6,85 (2H, d), 7,00 (2H, t), 7,40 (2H, m). 35
Ejemplo 39 (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}propilamino)-4-metil pentanoato de terc-butilo
5
A partir del Intermedio 4C y terc-butil éster de L-leucina, Pureza de CLEM 91 %, m/z 570 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 0,95 (6H, m), 1,45 (9H, s), 1,65 (1H, m), 2,15 (2H, m), 3,15-3,30 (2H, m), 3,85 (1H, m), 4,15 (2H, m), 5,75 (1H, d), 7,00-7,20 (6H, m), 7,35 (2H, m).
Ejemplo 40 (2S)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-di- 10 fluorofenoxi}propil)amino](fenil)acetato de 2,3-dihidro-1H-inden-2-ilo
A partir del Intermedio 4F e indanil éster de L-fenilglicina (Intermedio 11), Pureza de CLEM 96 %, m/z 686 [M+H]+, 15 RMN 1H (300 MHz, CD3OD), δ: 7,55-7,47 (2H, m), 7,46-7,31 (5H, m), 7,22-7,10 (6H, m), 6,85 (2H, d, J = 9,6 Hz), 5,82 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 5,57-5,51 (1 H, m), 4,37 (1 H, s), 4,13 (1 H, t, J = 6,0 Hz), 3,32-3,21 (2H, m), 3,05-2,98 (1 H, m), 2,80-2,63 (3H, m), 2,05-1,97 (2H, m).
Ejemplo 41 (2R)-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}- 20 propil)amino](fenil)acetato de 2,3-dihidro-1H-inden-2-ilo
A partir del Intermedio 4F e indanil éster de D-fenilglicina, Pureza de CLEM 94 %, m/z 686 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, 25 CD3OD), δ: 7,56-7,47 (2H, m), 7,38-7,31 (5H, m), 7,28-7,14 (6H, m), 6,85 (2H, d, J = 9,6 Hz), 5,82 (1H, d, J = 9,6 Hz), 5,57-5,52 (1H, m), 4,37 (1H, s), 4,13 (1H, t, J = 6,0 Hz), 3,31-3,21 (2H, m), 3,09-2,99 (1H, m), 2,78-2,64 (3H, m), 2,06-1,99 (2H, m).
Ejemplo 42 (2R)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}- 30 propil)amino](fenil)acetato de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4F y ciclopentil éster de D-fenilglicina, Pureza de CLEM 95 %, m/z 638 [M+H]+. 35
Ejemplo 43 (2S)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil}-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)- amino](fenil)acetato de biciclo[2,2,1]hept-2-ilo
5
A partir del Intermedio 4F y norborneil éster de L-fenilglicina (Intermedio 12), Pureza de CLEM 97 %, m/z 664 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, CD3OD), δ: 7,50-7,21 (7H, m), 7,02 (2H, t, J = 8,6 Hz), 6,75 (2H, d, J = 9,6 Hz), 5,70 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,50 (1 H, d, J = 6,6 Hz), 4,32-4,26 (1H, m), 4,05 (2H, t, J = 5,9 Hz), 2,71-2,56 (2H, m), 2,24-1,90 (4H, m), 1,64-1,06 (8H, m).
10
Ejemplo 44 (2R)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)amino]- (fenil)acetato de biciclo[2,2,1]hept-2-ilo
15
A partir del Intermedio 4F y norborneil éster de D-fenilglicina, Pureza de CLEM 98 %, m/z 664 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, CD3OD), δ: 7,42-7,17 (7H, m), 7,00 (2H, t, J = 8,6 Hz), 6,74 (2H, d, J = 9,1 Hz), 5,69 (1H, d, J = 9,8 Hz), 4,49 (1H, d, J = 6,8 Hz), 4,32-4,26 (1H, m), 4,03 (2H, t, J = 6,0 Hz), 2,70-2,52 (2H, m), 2,18-1,86 (4H, m), 1,63-0,92 (8H, m).
Ejemplo 45 (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)- 20 fenilacetato de terc-butilo
A partir del Intermedio 4E y terc-butil éster de L-fenilglicina, Pureza de CLEM 100 %, m/z 608 [M+H]+, RMN 1H (300 25 MHz, CD3OD), δ: 7,55-7,47 (3H, m), 7,30-7,21 (6H, m), 7,09 (1H, t, J = 8,7 Hz), 6,61 (2H, d, J = 9,3 Hz), 5,81 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,18 (1H, s), 4,03 (2H, t, J = 6,0 Hz), 2,75-2,69 (1 H, m), 2,65-2,58 (1 H, m), 1,96-1,88 (1 H, m), 1,96-1,88 (2H, m); 1,32 (9H, s)
Ejemplo 46 N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)-L-leucinato 30 de 2-(dimetilamino)etilo
A partir del Intermedio 4F y el Intermedio 13, Pureza de CLEM 90 %, m/z 621 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 35 10,18 (1H,br s), 9,50 (1H, s a),7,57 (1 H, c, J = 7,8 Hz), 7,39 (2H, m),7,37-7,15 (3H, m), 7,04 (2H, m), 5,73 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,59-4,46 (2H, m), 4,21 (2H, t, J = 9,0 Hz), 4,11 (1H, m), 3,14 (2H, m), 2,86 (6H, s), 2,14 (2H, m), 1,74 (2H, m), 0,92 (8H, m).
Ejemplo 47 N-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)- L-leucinato de 2-morfolin-4-iletilo
5
A partir del Intermedio 4F y el Intermedio 14, Pureza de CLEM 90 %, m/z 621 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 7,57 (1H, c, J = 7,5 Hz), 7,40 (2H, m), 7,26-7,17 (3H, m), 7,06 (2H, d, J = 10,8 Hz), 5,74 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 4,53 (2H, m), 4,21 (4H, m), 3,80 (4H, m), 3,37 (2H, m), 3,17 (4H, m), 2,15 (2H, m), 1,75 (3H, m), 0,94 (6H, s a). 10
Ejemplo 48 (2S)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)- amino](ciclohexil)acetato de ciclopentilo
15
A partir del Intermedio 4F y ciclopentil éster de L-ciclohexilglicina (Intermedio 9), Pureza de CLEM 95 %, m/z 664 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 9,15 (1H, s a), 8,95 (1 H, s a), 7,62-7,52 (1 H, m), 7,46-7,31 (2H, m),7,27-7,20 (1 H, m), 7,05 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,74 (1H, d, J = 9,6 Hz), 5,30-5,25 (1H, m), 4,20 (2H, t, J = 5,7 Hz), 4,10-3,95 (1 H, m), 3,25 -2,95 (2H, m), 2,20-2,07 (2H, m), 2,00-1,50 (15H, m),1,30-1,00 (4H, m), 0,95-0,75 (1 H, m) 20
Ejemplo 49 (2S)-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)amino]- (ciclohexil)acetato de terc-butilo
25
A partir del Intermedio 4F y terc-butil éster de L-ciclohexilglicina, Pureza de CLEM 95 %, m/z 632 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 9,10 (1H, s a), 8,85 (1H, s a), 7,62-7,52 (1H, m), 7,45-7,31 (2H, m), 7,28-7,20 (1H, m), 7,06 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,74 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,20 (2H, t, J = 5,9 Hz), 3,95-3,85 (1 H, m), 3,25-2,95 (2H, m),2,20-2,07 (2H, 30 m), 2,00-1,60 (6H, m), 1,51 (9H, s),1,35-1,07 (4H, m),1,00-0,85 (1H, m).
Ejemplo 50 N-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil}-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)- D-leucinato de ciclopentilo
35
A partir del Intermedio 4F y ciclopentil éster de D-Leucina, Pureza de CLEM 95 %, m/z 618 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 10,10 (1 H, s a), 9,40-9,10 (2H, m), 8,15 (1 H, s a), 7,62-7,52 (1H, m), 7,47-7,31 (2H, m), 7,28-7,12 (1H, m), 7,07 (2H,d, J = 10,5 Hz), 5,73 (1H, d, J = 9,6 Hz), 5,30-5,20 (1H, m), 4,25-4,00 (3H, m), 3,30-3,00 (2H, m), 2,20-2,00 (2H, m), 1,95-1,80 (2H, m), 1,75-1,55 (10H, m), 1,00-0,90 (6H, m).
5
Ejemplo 51 N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)-D-leucinato de terc-butilo
10
A partir del Intermedio 4F y terc-butil éster de D-Leucina, Pureza de CLEM 95 %, m/z 606 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 9,30-9,00 (2H, m), 7,62-7,52 (1H, m), 7,47-7,32 (2H, m), 7,28-7,12 (1 H, m), 7,06 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,73 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,20 (2H, t, J = 5,7 Hz), 3,99 (1 H, s a), 3,25-2,95 (2H, m), 2,20-2,05 (2H, m), 1,80-1,60 (3H, m), 1,49 (9H, s), 0,95 (6H, d, J = 4,8 Hz).
15
Ejemplo 52 (2S)-4-Amino-2-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenoxi}propil)amino]butanoato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 4F y el Intermedio 15, Pureza de CLEM 90 %, m/z 605 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, CD3OD), δ: 7,46 - 7,55 (2H, m), 7,12 (2H, t, J = 8,7 Hz), 6,93 (2H, d, J = 9,6 Hz), 5,81 (1H, d, J = 9,6 Hz), 5,37 - 5,44 (1H, m), 4,20 - 4,31 (4H, m), 3,33 - 3,42 (1 H, m), 2,25 - 2,49 (4H, m), 1,91-2,08 (2H, m), 1,65 - 1,89 (7H, m).
Ejemplo 53 N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato 25 de ciclopentilo
A partir del Intermedio 4G. A una solución de 30 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1H)-ona (138 mg, 0,29 mmol) en DMF anhidra (3 ml) en una atmósfera de nitrógeno, se le añadieron L-leucinato de ciclopentilo (Intermedio 8) (284 mg, 1,43 mmol, 5 equiv.), yoduro de sodio (86 mg, 0,57 mmol, 2 equiv.) y N,N-diisopropiletilamina (0,052 ml, 0,29 mmol, 1 equiv.). La mezcla se calentó a 90 ºC durante 16 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (25 ml). La solución se lavó con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml). La capa orgánica se secó sobre 35 MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (MeOH al 3-4 % en DCM), seguido de HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido de color (96 mg, rendimiento del 52 %).
CL/EM: m/z 646 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,56-7,47 (2H, m), 7,13 (2H, m), 6,88 (2H, m), 5,82 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 5,23 (1 H, t, J = 4,1 Hz), 4,11 (2H, t, J = 6,3 Hz), 3,28 (1 H, m), 2,61-2,51 (2H, m), 1,95-1,41, (17H, m a), 40 0,98-0,93 (6H, m).
Ejemplo 54 N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato terc-butilo
5
A partir del Intermedio 4G. A una solución de 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(2,4-difluorobenzoil)piridin-2(1H)-ona (96 mg, 0,20 mmol) en DMF anhidra (3 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron clorhidrato de L-leucinato de terc-butilo (198 mg, 0,99 mmol, 5 equiv.), yoduro de sodio (60 mg, 0,40 mmol, 2 equiv.) y N,N-diisopropiletilamina (0,072 ml, 0,40 mmol, 2 equiv.). La mezcla se calentó a 90 ºC durante 20 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente y se diluyó 10 con EtOAc (20 ml). La solución se lavó con agua (2 x20 ml) y salmuera (20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (MeOH al 1-3 % en DCM), seguido de HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (23 mg, rendimiento del 18 %).
CL/EM: m/z 634 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,56-7,47 (2H, m), 7,14 (2H, m), 6,89 (2H, m), 5,81 (1 H, d, J = 15 9,6 Hz), 4,11 (2H, t, J = 6,2 Hz), 3,19 (1 H, m), 2,60-2,53 (2H, m), 1,89-1,84 (2H, m), 1,72-1,41 (16H, m), 0,96 (6H, m).
Ejemplo 55 N-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentilo
20
A partir del Intermedio 4H. A una solución de 6-amino-1-{4-[(5-cloropentil)oxi]-2,6-difluorofenil}-5-(4-fluoroben- zoil)piridin-2(1H)-ona (99 mg, 0,21 mmol) en DMF anhidra (3 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron L-leucinato de ciclopentilo (Intermedio 8) (212 mg, 1,06 mmol, 5 equiv.), yoduro de sodio (64 mg, 0,43 mmol, 2 equiv.) 25 y N,N-diisopropiletilamina (0,039 ml, 0,21 mmol, 1 equiv.). La mezcla se calentó a 90 ºC durante 20 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (25 ml). La solución se lavó con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (MeOH al 2 % en DCM), seguido de HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (64 mg, rendimiento del 48 %). 30
CL/EM: m/z 628 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,71 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,62 (2H, m), 7,26 (2H, m), 6,89 (2H, m), 5,81 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 5,23 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 4,11 (2H, t, J = 6,4 Hz), 3,28 (1H, m), 2,55 (2H, m), 1,91-1,48 (17H, m), 0,98-0,93 (6H, m).
Ejemplo 56 N-({4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]fenoxi}acetil)-L-leucinato de ciclopentilo 35
CL/EM: m/z 564 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,47 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,56 (2H, m), 7,45 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 7,38-7,24 (4H, m), 7,15 (2H, m), 5,69 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 5,09 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 4,63 (2H, m), 4,31 (1 H, m), 40 1,84-1,79 (2H, m), 1,66-1,53 (9H, m), 0,92-0,86 (6H, m).
A una solución de 6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-1-(4-hidroxifenil)piridin-2(1H)-ona [documento WO 03/076405] (100 mg, 0,31 mmol) en DMF anhidra (3 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadieron N-(bromoacetil)-L-leucinato de ciclopentilo (109 ml, 0,34 mmol, 1,1 equiv.) y carbonato potásico (51 mg, 0,37 mmol, 1,2 equiv.). La mezcla se calentó a 40 ºC durante 16 horas, antes de dejarse enfriar a temperatura ambiente se añadió a agua (20 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 1 5 ml) y los extractos combinados se lavaron con agua (2 x 40 ml) y salmuera (40 ml). La capa 5 orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La purificación por cromatografía en columna (MeOH al 2-3 % en DCM), seguido de trituración con MeOH mínimo proporcionó el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (91 mg, rendimiento del 52 %).
El N-(bromoacetil)-L-leucinato de ciclopentilo se sintetizó a partir de L-leucinato de ciclopentilo en una etapa, los 10 detalles de la cual se indican a continuación.
A una solución de L-leucinato de ciclopentilo (Intermedio 8) (568 mg, 2,84 mmol) en DCM (6 ml) se le añadió gota a 15 gota trietilamina (0,24 ml, 2,84 mmol, 1 equiv.) y cloruro de bromoacetilo (1,44 ml, 3,13 mmol, 1,1 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas, se diluyó con DCM (50 ml) y se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para proporcionar una mezcla en bruto que contenía el compuesto del título (902 mg) que se usó sin purificación adicional. CL/EM: m/z 320/322 [M+H]+. 20
Ejemplo 57 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 4J y ciclopentil éster de L-Leucina (Intermedio 8). CL/EM: m/z 534 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,47 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,56 (2H, m), 7,45 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 7,38-7,24 (4H, m), 7,15 (2H, m), 5,69 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 5,09 (1 H, t, J = 5,3 Hz), 4,63 (2H, m), 4,31 (1 H, m), 1,84-1,79 (2H, m), 1,66-1,53 (9H, m), 0,92-0,86 (6H, m). 30
Los siguientes ejemplos se sintetizaron de una manera similar:
Ejemplo 58 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de terc-butilo
35
A partir del Intermedio 4J y tbutil éster de L-Leucina . CL/EM: m/z 522 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9,40-9,10 (2H, m), 7,59-7,44 (5H, m), 7,38-7,30 (4H, m), 5,71 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,00 (1 H, s a), 3,40-3,28 (1 H, m), 3,25-3,15 (1 H, m), 3,10-3,00 (2H, m), 1,80-1,70 (3H, m), 0,96 (6H, d, J = 5,1 Hz). 40
Ejemplo 59 N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
5
El Ejemplo 59 se sintetizó mediante una ruta similar a la del Ejemplo 57 usando 4-cloro-fenil éster del ácido 3-(2,4-difluoro-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico. CL/EM: m/z 552 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,07 (1 H, s a), 9,35 (2H, s a), 7,55-6,95 (8H, m), 5,72 (1H, d, J = 9,9 Hz), 5,27 (1H, t, J = 5,7 Hz), 4,15-4,00 (1H, m), 3,41-3,15 (2H, m), 3,10-3,00 (2H, m), 1,96-1,80 (2H, m), 1,78-1,55 (9H, m), 0,95 (6H, d, J = 5,1 Hz).
10
Ejemplo 60 N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de terc-butilo
15
El Ejemplo 60 se sintetizó mediante una ruta similar a la del Ejemplo 57 usando 4-cloro-fenil éster del ácido 3-(2,4-difluorofenil)-3-oxo-tiopropionimídico. CL/EM: m/z 540 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,07 (1 H, s a), 9,30 (2H, s a), 7,55-6,94 (8H, m), 5,72 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,05-3,93 (1 H, m), 3,40-3,10 (2H, m), 3,08-3,00 (2H, m), 1,80-1,65 (3H, m), 1,50 (9H, s), 0,96 (6H, d, J = 5,1 Hz).
20
Ejemplo 61 (2S)-{[2-(4-{6-Amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]amino}(fenil) etanoato de ciclopentilo
25
A partir del Intermedio 4J y ciclopentil éster de L-Fenilglicina (Intermedio 10). CL/EM: m/z 554 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 10,35 (1 H, s a), 7,60-7,13 (14H, m), 5,91 (1H, d, J = 10,2 Hz), 5,22-5,14 (1H, m), 4,36 (1H, s), 3,00-2,85 (4H, m), 2,16 (1H, s a), 1,99-1,43 (8H, m).
Ejemplo 62 (2S)-{[2-(4-{6-Amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]amino}(fenil) etanoato 30 de terc-butilo
A partir del Intermedio 4J y tbutil éster de L-Fenilglicina. CL/EM: m/z 542 [M+H]+ RMN 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 10,30 (1H, 35 s a), 7,51-7,45 (3H, m), 7,38 (2H, d, J = 6,9 Hz), 7,27-7,04 (9H, m), 5,82 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,20 (1 H, s), 2,86-2,75 (4H, m), 2,04 (1 H, s a), 1,31 (9H, s).
Ejemplo 63 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metilfenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L- leucinato de ciclopentilo
5
El Ejemplo 63 se preparó por una metodología similar a la del Ejemplo 59 usando 4-cloro-fenilo éster del ácido 3-(4-metilfenil)-3-oxo-tiopropionimídico, preparado por un método similar al usado para el Intermedio 4J. CL/EM: m/z 530 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 7,65 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 7,47 (4H, m), 7,26 (4H, m), 5,89 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 5,20 (1 H, m), 3,25 (1H, t, J = 7,2 Hz), 2,87 (4H, m), 2,44 (3H, s), 1,99-1,53 (9H, m), 1,42 (2H, t, J = 6,3 Hz), 0,91 (6H, m). 10
Ejemplo 64 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metoxifenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
15
El Ejemplo 64 se preparó por una metodología similar a la Ejemplo 59 usando 4-cloro-fenilo éster del ácido 3-(4-metoxi-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico, preparado por un método similar al usado para Intermedio 4J. CL/EM: m/z 546 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 7,67 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 7,55 (2H, d), 7,46 (2H, d), 7,24 (2H, d, J = 8,4 Hz), 6,98 (2H, d, J = 6,9 Hz), 5,90 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 5,18 (1 H, m), 3,88 (3H, s), 3,24 (1 H, t, J = 7,2 Hz), 2,87 (4H, m), 20 1,97-1,53 (9H, m), 1,43 (2H, t), 0,90 (6H, m).
Ejemplo 65 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-clorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
25
El Ejemplo 65 se preparó por una metodología similar a la Ejemplo 59 usando 4-cloro-fenilo éster del ácido 3-(4-cloro-fenil)-3-oxo-tiopropionimídico, preparado por un método similar al usado para el Intermedio 4J. CL/EM: m/z 551 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 7,40 (7H, m), 7,16 (2H, d, J = 8,4 Hz), 5,82 (1H, d, J = 9,9 Hz), 5,11 (1H, m), 30 3,17 (1H, t, J = 7,5 Hz), 2,78 (4H, m), 1,92-1,43 (9H, m), 1,35 (2H, t), 0,82 (6H, dd).
Ejemplo 66 N-[3-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}-3-fluorofenoxi)propil]-L-leucinato de ciclopentilo
35
El Ejemplo 66 se preparó por una metodología similar a la del Ejemplo 25 usando 6-amino-5-(4-fluoro-3-metil-benzoil)-1-[2-fluoro-4-hidroxi-fenil]-1H-piridin-2-ona [documento WO 03/076405]. Pureza de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]de CLEM 97 %, m/z 582 [M+H]
Ejemplo 67 N-[3-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)propil]-L-leucinato de 5 ciclopentilo
El Ejemplo 61 se sintetizó mediante una ruta similar a la del Ejemplo 57 usando 3-(4-amino-fenil)-propan-1-ol. CL/EM: 10 m/z 548 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9,13 (2H, s a), 7,59-7,52 (2H, m), 7,50-7,42 (3H, m), 7,39-7,25 (4H, m), 5,70 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 5,28-5,24 (1 H, m), 4,04 (1H, s a), 3,35-2,85 (2H, m), 2,80-2,70 (2H, m), 2,10-1,80 (4H, m), 1,75-1,55 (10H, m), 0,93 (6H, d, J = 3,4 Hz).
El 3-(4-Amino-fenil)-propan-1-ol se sintetizó en un procedimiento de una etapa a partir de 4-nitro cinamil alcohol como 15 se muestra a continuación:
A una solución de 4-nitro cinamil alcohol (2 g, 11,1 mmol) en metanol (30 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadió níquel Raney (suspensión de 2 ml en agua). Después, la reacción se expuso a gas de hidrógeno y se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 12 horas para completar la reacción. La mezcla de reacción se filtró a 20 través de Celite, lavando con metanol y acetato de etilo. Después, el filtrado se concentró a presión reducida antes de purificación por cromatografía en columna (8:2 de EtOAc:Hexano) para dar el producto requerido (1,68 g, 95 %) en forma de un sólido de color amarillo.
Ejemplo 68 N2-[3-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}-3,5-difluorofenoxi)propil]- 25 L-lisinato de ciclopentilo
El Ejemplo 68 se sintetizó mediante una ruta similar a la del Ejemplo 52 usando (Z)-ciclopentil éster de L-Lisina. 30 CL/EM: m/z 633 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,45 - 7,54 (2H, m), 7,12 (2H, t, J = 8,6 Hz), 6,93 (2H, d, J = 9,8 Hz), 5,81 (1H, d, J = 9,8 Hz), 5,33-5,40 (1 H, m), 4,25 (2H, t, J = 5,1 Hz), 4,10 - 4,16 (1 H, m), 2,96 (2H, t), 2,27 - 2,35 (2H, m), 1,63 - 2,12 (16H, m).
Ejemplo 69 N2-[3-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}-3,5-difluorofenoxi)propil]- 35 L-lisinato de terc-butilo
El Ejemplo 69 se sintetizó mediante una ruta similar a la del Ejemplo 52 usando (Z)- tbutil éster de L-Lisina. CL/EM: 40 m/z 621 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,48 (2H, dd, J = 9,7, 2,7 Hz), 7,12 (2H, t, J = 8,6 Hz), 6,88 (2H, d, J = 9,2 Hz), 5,81 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,18 (2H, t, J = 6,2 Hz), 3,15 (H, t, J = 6,6 Hz), 2,76 - 2,87 (3H, m), 2,68 (1 H, dt, J = 11,5, 6,9 Hz), 1,97 - 2,05 (4H, m), 1,64 (4H, dt, J = 6,1 Hz), 1,01 (9H, s).
Ejemplo 70 N-[2-(3-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
5
El Ejemplo 70 se sintetizó usando una metodología similar a la del Intermedio 4J (usando en su lugar 3-aminofenetil alcohol) y ciclopentil éster de L-Leucina (Intermedio 8).
CL/EM: m/z 534 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9,40-9,00 (2H, m), 7,65-7,44 (5H, m), 7,38-7,11 (4H, m), 5,72 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 5,30-5,20 (1 H, m), 4,10-4,00 (1H, m), 3,45-3,15 (2H, m), 3,10-3,00 (2H, m), 1,95-1,80 (2H, m), 1,75-1,55 (9H, m), 9,93 (6H, d, J = 4,8 Hz). 10
Ejemplo 71 (S)-2-{3,5-Difluoro-4-[3-(4-fluorobenzoil)-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-ilamino]bencilamino}-3- fenilpropionato de ciclopentilo
15
Una solución del Intermedio 7 (20 mg) en TFA al 20 %/DCM (0,5 ml) se dejó en reposo a TA durante 1 h. Una vez se completó, la mezcla de reacción se evaporó a sequedad mediante soplado en un flujo moderado de N2. Se añadió DCM (0,5 ml) y se sopló en una atmósfera de N2. El secado en una atmósfera de N2 se continuó durante una noche. Rendimiento = 20 mg, 98 %. 20
Pureza de CLEM 96 %, m/z 590 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,75 -1,33 (8H, m), 2,90 (1H, m), 3,50 (2H, m), 4,25 (3H, m), 4,93 (1H, m), 5,70, (1H, m), 5,98 (1H, m), 7,15-7,62 (11 H, m), 9,7 (1H, s a), 10,42 (0,5H, s a)
Ejemplo de Referencia 72 Ácido (S)-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}- fenilacético 25
A una solución del Ejemplo 7 (100 mg, 0,179 mmol) en THF (1 ml) y MeOH (0,5 ml) se le añadió NaOH 2 M (ac, 1 ml). La mezcla se dejó en agitación a TA durante 3h, se evaporó casi a sequedad, se acidificó usando adición gota a gota 30 de HCl 1 M y se extrajo con EtOAc (5 ml). La capa de EtOAc se concentró al vacío para dar el aceite en bruto. La CLEM muestra un 80 % de producto m/z = 490 [M+H]+ y 20 % de impureza m/z 470 [M+H]+. La purificación por HPLC preparativa proporcionó el producto deseado. Rendimiento = 34 mg, 31 %). Pureza de CLEM 100 %, m/z 490 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 3,64 (2H, m, CH2), 4,06 (1H, s, CH), 5,50 (1H, d, Ar), 6,75(1H, s a, NH), 6,96 (13H, m, Ar), 9,84 (1H, s a, NH). 35
Los siguientes compuestos se prepararon de una manera similar:
Ejemplo de Referencia 73 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}- 3-fenilpropiónico
5
A partir del Ejemplo 8. Pureza de CLEM 99 %, m/z 504 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 2,96-3,09 (3H, m), 3,81 (1H, d), 3,98 (1H, d), 5,76 (1H, d), 7,00 (1H, s a), 7,22-7,40 (9H, m), 7,41-7,61 (4H, m), 10,11 (1H, s a).
Ejemplo de Referencia 74 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}- 4-metilpentanoico 10
A partir del Ejemplo 9. Pureza de CLEM 91 %, m/z 470 [M+H]+, 1H NOR (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,40 (2H, m), 1,60 (1 H, m), 3,44 (1 H, m), 3,89 (2H, s), 5,49 (1H, d), 6,70 (1 H, s a), 6,94-7,08 (2H, m), 7,14-7,33 (4H, m), 7,46 15 (2H, m), 9,86 (1 H, s a).
Ejemplo de Referencia 75 Ácido (S)-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}- fenilacético
20
A partir del Ejemplo 1. Pureza de CLEM 100 %, m/z 472 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 4,13 (1H, d), 4,22 (1H, d), 5,18 (1H, s), 5,73 (1H, d), 7,30-7,61 (13H, m), 7,73 (1H, d), 10,09 (2H, s a).
25
Ejemplo de Referencia 76 Ácido (S)-{4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- bencilamino}fenilacético
A partir del Ejemplo 4. Pureza de CLEM 86 %, m/z 486 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 2,20 (3H, s), 3,98 (1H, d), 4,06 (1H, d), 5,07 (1H, s), 5,62 (1H, d), 7,12-7,50 (12H, m), 7,61 (1 H, d), 9,90 (2H, s a).
Ejemplo de Referencia 77 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-4- 5 metilpentanoico
A partir del Ejemplo 9. Pureza de CLEM 91 %, m/z 470 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 0,71 (6H, m), 1,40 (2H, 10 m), 1,60 (1H, m), 3,44 (1H, m), 3,89 (2H, s), 5,49 (1H, d), 6,70 (1H, s a), 6,94-7,08 (2H, m), 7,14-7,33 (4H, m), 7,46 (2H, m), 9,86 (1H, s a).
Ejemplo de Referencia 78 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-3- fenilpropropiónico 15
A partir del Ejemplo 2. Pureza de CLEM 100 %, m/z 486 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 3,00 (2H, m), 3,98 (3H, m), 5,65 (1H, d), 7,15-7,34 (11 H, m), 7,40 (1 H, d), 7,51 (2H, m). 20
Ejemplo de Referencia 79 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]bencilamino}-4- metilpentanoico
25
A partir del Ejemplo 3. Pureza de CLEM 100 %, m/z 452 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 0,81 (6H, m), 1,51 (2H, m), 1,72 (1 H, m), 3,95 (2H, m), 5,61 (1 H, d), 7,21-7,30 (4H, m), 7,39 (1 H, d), 7,48 (2H, m), 7,52 (2H, m).
30 Ejemplo de Referencia 80 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- bencilamino}-3-fenilpropiónico
5
A partir del Ejemplo 5. Pureza de CLEM 100 %, m/z 500 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 2,33 (3H, s), 2,90-3,07 (3H, m), 3,76 (1 H, d), 3,92 (1 H, d), 5,72 (1 H, d), 7,20-7,42 (9H, m), 7,49 (4H, m).
Ejemplo de Referencia 81 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-Piridin-1-il]- bencilamino}-4-metilpentanoico 10
A partir del Ejemplo 6. Pureza de CLEM 98 %, m/z 500 [M+H]+.
15
Ejemplo de Referencia 82 Ácido ciclopentil (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- fenoxi}propilamino)-3-fenilpropiónico
20
A partir del Ejemplo 24. Pureza de CLEM 93 %, m/z 530 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,90 (2H, m), 2,80-2,90 (2H, m), 3,00 (2H, m), 3,40 (1H, m), 4,05 (2H, m), 5,70 (1 H, d), 7,10 (1H, d), 7,20 (2H, d). 7,30 (5H, m), 7,35 (1H, d), 7,45 (1H, d), 7,60 (1H, d).
Ejemplo de Referencia 83 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(3-metil-4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}- 25 propilamino)-3-fenilpropiónico
A partir del Ejemplo 12. Pureza de CLEM 96 %, m/z 544 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,30 (2H, m), 2,40 30 (3H, s), 3,30 (1 H, m), 4,30 (2H, m), 4,45 (1 H, m), 5,85 (1 H, d), 5,40 (1H, m), 5,85 (1 H, d), 7,25 (2H, d), 7,40-7,55 (9H, m), 7,60-7,70 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 84 Ácido (S)-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-fenoxi}- propilamino)fenilacético
5
A partir del Ejemplo 28. Pureza de CLEM 82 %, m/z 534 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 2,25 (2H, m), 3,10 (1H, m), 3,25 (1H, m), 4,20 (1 H, m), 5,83 (1H, d), 7,15 - 7,60 (13H, d).
10
Ejemplo de Referencia 85 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoico
15
A partir del Ejemplo 25. Pureza de CLEM 100 %, m/z 496 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 1,00 (6H, m), 1,75-1,90 (3H, m), 2,30 (2H, m), 3,10-3,30 (2H, m), 4,00 (1H, m), 4,25 (2H, m), 5,85 (1 H, d), 5,40 (1 H, m), 5,85 (1 H, d), 7,20 (2H, d), 7,30 (2H, d), 7,40 (2H, t), 7,55 (1 H, m), 7,65 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 86 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}- 20 propilamino)-3-fenilpropiónico
A partir del Ejemplo 29. Pureza de CLEM 100 %, m/z 548 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,15 (2H, m), 25 3,15-3,30 (3H, m), 3,35 (1 H, m), 4,10 (2H, m), 4,20 (1 H, m), 5,65 (1 H, d), 7,15 (2H, d), 7,20-7,35 (11 H, m).
Ejemplo de Referencia 87 Ácido (S)-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il-fenoxi}- propilamino)fenilacético
30
A partir del Ejemplo 26. Pureza de CLEM 95 %, m/z 530 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,15 (3H, s) -2,35 (2H, m), 2,85 (2H, m), 3,05 (2H, m), 4,10 (2H, m), 5,25 (1H, m), 5,70 (1H, d), 4,25 (2H, m), 5,85 (1 H, d), 5,40 (1H, m), 5,85 (1 H, d), 7,10 (2H, d), 7,25 (2H, d), 7,3 (1 H, d), 7,35 (1 H, m), 7,40-7,55 (5H, m), 7,60 (2H, m). 35
Ejemplo de Referencia 88 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoico
5
A partir del Ejemplo 27. Pureza de CLEM 94 %, m/z 510 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,90 (6H, s a), 1,65-1,80 (3H, m), 2,1-2,30 (3H, s+ 2H, m), 3,0-3,20 (2H, m), 3,90 (1H, m), 4,15 (2H, m), 5,65 (1H, d), 7,15 (2H, d), 7,20-7,30 (3H, m), 7,30 (1H, m), 7,40 (1H, d), 7,45 (2H, s).
Ejemplo de Referencia 89 Ácido S)-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}- 10 propilamino)fenilacético
A partir del Ejemplo 13. Pureza de CLEM 91 %, m/z 552 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,10-2,25 (2H, m a), 15 2,80 (1 H, m), 3,00 (1 H, m), 4,15 (2H, d), 5,20 (1 H, s), 5,70 (1 H, d), 5,65 (1H, d), 6,95 (2H, d), 7,30 (2H, t), 7,30 (1H, m), 7,40 -7,60 (8H, m).
Ejemplo de Referencia 90 Ácido (S)-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- difluorofenoxi}propilamino)fenilacético 20
A partir del Ejemplo 14. Pureza de CLEM 98 %, m/z 566 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,35 (2H, m), 3,1-3,3 (3H, m), 3,50 (1H, m), 4,25-4,40 (3H, m), 5,80 (1H, d), 5,70 (1H, d), 7,10 (2H, d), 7,30-7,45 (7H, m), 7,60-7,70 25 (3H, m).
Ejemplo de Referencia 91 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- difluorofenoxifenoxi}propilamino)-4-metilpentanoico
30
A partir del Ejemplo 15. Pureza de CLEM 92 %, m/z 532 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,8 (3H, m), 2,30 (2H, m), 3,10-3,25 (2H, m), 3,95 (1H, m), 4,25 (2H, m), 5,80 (1 H, d), 7,10 (2H, m), 7,40 (2H, m), 7,60 (1 H, m), 7,65 (2H, m). 35
Ejemplo de Referencia 92 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(2,4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluoro- bencilamino}-3-fenilpropiónico
5
A partir del Ejemplo 10. Pureza de CLEM 95 %, m/z 522 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 3,30 (2H, m), 4,15 (1H, m), 4,25 (2H, m), 5,75 (1H, d), 7,15-7,35 (9H, m), 5,20 (1 H, m), 5,90 (1H, d), 7,35-7,50 (9H, m), 7,55 (2H, m), 7,65 (1H, d).
Ejemplo de Referencia 93 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- 10 difluorofenoxi}propilamino)-3-fenilpropiónico
A partir del Ejemplo 18. Pureza de CLEM 92 %, m/z 580 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,30 (2H, m), 2,40 15 (3H, s), 3,15-3,35 (4H, m), 3,50 (1 H, m), 4,30 (2H, m), 4,35 (1 H, m), 5,80 (1 H, d), 7,10 (2H, m), 7,35-7,50 (7H, m), 7,55 (1 H, m), 7,65 (1 H, m).
Ejemplo de Referencia 94 Ácido (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- fenoxi}propilamino)fenilacético 20
A partir del Ejemplo 23. Pureza de CLEM 87 %, m/z 516 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,25 (2H, m), 2,80 (1H, m), 3,10 (1H, m), 4,15 (2H, m), 5,30 (1H, s), 5,75 (2H, d), 7,15 (2H, d), 7,25 (2H, d), 7,40 (2H, t), 7,50-7,70 (7H, m). 25
Ejemplo de Referencia 95 Ácido (S)-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- difluorofenoxi}propilamino)fenilacético
30
A partir del Ejemplo 20. Pureza de CLEM 84 %, m/z 570 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,30 (2H, m), 2,90 (1H, m), 3,15 (1H, m), 4,23 (2H, m), 5,32 (1 H, s), 5,85 (1 H, d), 7,10 (2H, d), 7,50 (3H, m), 7,60-7,65 (6H, m).
35 Ejemplo de Referencia 96 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]fenoxi}- propilamino)-4-metilpentanoico
5
A partir del Ejemplo 30. Pureza de CLEM 93 %, m/z 514 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95 (6H, m), 1,85 (3H, m), 2,30 (2H, m), 3,15-3,22 (2H, m), 3,99 (1 H, m), 4,21 (2H, m), 5,77 (1H, d), 7,20 (2H, d), 7,30 (4H, m), 7,45 (1H, m), 7,55 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 97 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]- 10 3,5-difluorofenoxi}-propilamino)-4-metilpentanoico
A partir del Ejemplo 22. Pureza de CLEM 88 %, m/z 550 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,80-0,95 (6H, 15 m),1,50-1,85 (3H, m), 1,95-2,10 (2H, m), 2,95-3,05 (2H, m), 3,75-3,85 (1H, m), 4,05-4,15 (2H, m), 5,65 (1H, d), 7,00 (1H, d), 7,10-7,20 (1H, m), 7,25-7,30 (1H, m), 7,30-7,40 (1 H, m), 7,45-7,55 (1 H, m), 7,80-8,25 (1H, s a), 9,90-10,20 (1 H, s a).
Ejemplo de Referencia 98 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)- 20 2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)-4-metilpentanoico
A partir del Ejemplo 19. Pureza de CLEM 93 %, m/z 546 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 0,95-1,05 (6H, m), 25 1,55-1,75 (2H, m), 1,80-1,90 (1H, m), 2,10-2,25 (2H, m), 2,35 (3H, s), 3,00-3,15 (2H, m), 3,70 (1H, m), 4,15-4,30 (2H, m), 5,80 (1H, d), 7,10 (1H, d), 7,25-7,35 (1H, m), 7,40-7,45 (1H, m), 7,50-7,55 (1H, m), 7,55-7,65 (1H, m), 8,90-10,70 (2H, s a).
Ejemplo de Referencia 99 Ácido (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(4-fluoro-3-metilbenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1- 30 il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)fenilacético
A partir del Ejemplo 17. Pureza de CLEM 100 %, m/z 566 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, d6-DMSO), δ: 2,05-2,20 (2H, m), 35 2,30 (3H, s), 2,75-3,05 (2H, m), 4,05-4,20 (2H, m), 4,65-4,85 (1 H, m), 5,70 (1H, d), 7,00 (1H, d), 7,25-7,35 (1H, m), 7,35-7,60 (8H, m).
Ejemplo de Referencia 100 Ácido (S)-2-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- difluorofenoxi}-propilamino)-3-fenilopropiónico
5
A partir del Ejemplo 21. Pureza de CLEM 100 %, m/z 584 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 2,05-2,15 (2H, m) 3,00-3,10 (3H, m), 4,00-4,25 (4H, m), 5,75 (1H, d), 7,05 (1H, d), 7,25-7,50 (8H, m), 7,55-7,65 (1 H, m).
10
Ejemplo de Referencia 101 Ácido (S)-2-{4-[6-mino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluoro- bencilamino}-4-metilpentanoico
15
A partir del Ejemplo 11. Pureza de CLEM 92 %, m/z 506 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, MeOD), δ: 0,85-1,05 (6H, m), 1,65-1,85 (3H, m), 3,95-4,05 (1 H, m), 4,25-4,35 (2H, m), 5,75 (1 H, d), 6,90 (1H, d), 7,00-7,10 (2H, m), 7,35-7,45 (4H, m).
Ejemplo de Referencia 102 Ácido (S)-2-(4-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- 20 difluorofenoxi}-ciclohexilamino)-4-metilpentanoico
A partir del Ejemplo 31. Pureza de CLEM 91 %, m/z 606 [M++H], RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,55-2,55 (8H, m), 25 3,20-3,40 (2H, m), 4,25-4,35 (1 H, m), 4,45-4,55 (1 H, m), 4,85-4,95 (1H, m), 5,95 (1H, d), 6,95-7,10 (2H, m), 7,35-7,55 (6H, m), 7,70-7,80 (2H, m), 7,80-7,85 (1H, d).
Ejemplo de Referencia 103 Ácido (2S)-[(4-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenoxi}ciclohexil)aminol(fenil)acético 30
A partir del Ejemplo 32. Pureza de CLEM 89 %, m/z 592 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,60-1,75 (2H, m), 1,80-1,95 (2H, m), 2,00-2,15 (2H, m), 2,15-2,30 (2H, m), 3,05-3,20 (1H, m), 4,65-4,75 (1H, m), 4,75-4,80 (1H, m), 5,80 35 (1H, d), 6,85-6,95 (2H, m), 7,20-7,30 (2H, m), 7,40-7,50 (3H, m), 7,55-7,65 (4H, m), 7,65-7,70 (1 H, m).
Ejemplo de Referencia 104 N-(4-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenoxi}ciclohexil)-L-leucina
5
A partir del Ejemplo 33. Pureza de CLEM 93 %, m/z 572 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 0,85-1,00 (6H, m), 1,45-2,00 (9H, m), 2,05-2,25 (3H, m), 3,05-3,15 (1H, m), 3,60-3,75 (1H, m), 4,30 y 4,65 (cada uno 0,5H, m), 5,70 (1H, d), 6,75-6,85 (2H, m), 7,10-7,15 (2H, m), 7,45-7,55 (2H, m), 7,55-7,65 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 105 Ácido (S)-2-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]ciclohexil- 10 amino}-3-fenilpropiónico
A partir del Ejemplo 34. Pureza de CLEM 98 %, m/z 478 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, CD3OD), δ: 1,55-1,85 (4H, m), 15 1,95-2,20 (2H, m), 2,30-2,75 (2H, m), 3,15-3,20 (1 H, m), 3,25-3,35 (2H, m), 4,05-4,15 (1 H, m), 5,60 (1 H, d), 7,05-7,15 (2H, m), 7,15-7,35 (5H, m), 7,35-7,45 (3H, m).
Ejemplo de Referencia 106 Ácido (R)-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5- difluorofenoxi}-propilamino)fenilacético 20
A partir del Ejemplo 42. Pureza de CLEM 88 %, m/z 570 [M+H]+, RMN 1H (400 MHz, DMSO), δ: 2,05-2,20 (2H, m), 2,75-2,95 (2H, m), 4,10-4,20 (2H, m), 4,30-4,50 (1H, m), 5,75 (1H, d), 7,00-7,10 (2H, m), 7,20-7,30 (1H, m), 7,35-7,50 25 (7H, m), 7,55-7,65 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 107 Ácido (2S)-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenoxi}propil)amino](ciclohexil)acético
30
A partir del Ejemplo 48, Pureza de CLEM 95 %, m/z 576 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 10,16 (1 H, s a),8,78 (1 H, s a), 8,12 (1 H, s a), 7,62-7,53 (1 H, m), 7,47-7,32 (2H, m), 7,27-7,21 (1H, m), 7,07 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,74 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,19 (2H, t, J = 5,7 Hz), 3,85-3,75 (1H, m),3,15-3,00 (2H, m), 2,20-2,05 (2H, m),1,95-1,60 (6H, m), 1,40-0,90 (5H, m).
5
Ejemplo de Referencia 108 N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]- 3,5-difluorofenoxi}propil)-D-leucina
10
A partir del Ejemplo 50. Pureza de CLEM 90 %, m/z 550 [M+H]+, RMN 1H (300 MHz, DMSO), δ: 7,63-7,52 (1H, m), 7,46-7,32 (2H, m), 7,28-7,10 (1H, m), 7,06 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,73 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 4,25-4,15 (2H, m), 3,90-3,80 (1 H, m), 3,20-3,00 (2H, m), 2,20-2,05 (2H, m), 1,80-1,55 (3H, m), 0,98-0,90 (6H, m).
Ejemplo de Referencia 109 N-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}- 15 pentil)-L-leucina
A partir del Ejemplo 55. A una solución de N-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]- 20 3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentilo (33 mg, 0,05 mmol) en THF (1 ml) y agua (1 ml) se le añadió LiOH (25 mg, 1,05 mmol, 20 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, antes de calentarse a 80 ºC durante 10 horas. La mezcla se concentró a presión reducida y se añadió agua (5 ml). El pH se ajustó a 7 usando HCl 1 M y la capa acuosa se extrajo con 1-butanol (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron a presión reducida. El residuo sólido se trituró con Et2O, se recogió por filtración y se purificó por HPLC preparativa para 25 proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco en forma de la sal de mono-TFA (7 mg, rendimiento del 24 %). CL/EM: m/z 560 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,62-7,51 (3H, m), 7,34 (2H, m), 7,05 (2H, m), 5,72 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 4,09 (2H, t, J = 5,7 Hz), 3,23 (1 H, m), 2,80 (2H, m), 1,79-1,43 (9H, m), 0,89 (6H, t, J = 6,7 Hz).
30
Ejemplo de Referencia 110 N-({4-[6-Amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]fenoxi}-acetil)-L-leucina
A partir del Ejemplo 56. A una solución de 35 N-({4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]fenoxi}acetil)-L-leucinato de ciclopentilo (35 mg, 0,06 mmol) en THF (1 ml) y agua (1 ml) se le añadió LiOH (30 mg, 1,24 mmol, 20 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se concentró a presión reducida y se añadió agua (5 ml). El pH se ajustó a 7 usando HCl 1 M y la capa acuosa se extrajo con 1-butanol (3 x 5 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron a presión reducida. El residuo sólido se trituró con Et2O, se filtró y se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del 40 título en forma de un sólido de color crema (11 mg, rendimiento del 36 %).
CL/EM: m/z 496 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,58-7,53 (3H, m), 7,43 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 7,36-6,98 (6H, m), 5,68 (1 H, d, J = 9,6 Hz), 4,58 (2H, s), 3,90 (1 H, m), 1,67-1,31 (3H, m), 0,86 (6H, m).
Ejemplo de Referencia 111 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucina
A partir del Ejemplo 58. CL/EM: m/z 466 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,21 (1H, s a), 7,60-7,44 (4H, m), 5 7,39-7,30 (4H, m), 5,76-5,69 (1 H, m), 4,00-3,85 (1 H, m), 3,10-2,95 (2H, m), 1,85-1,60 (3H, m), 1,30-1,10 (2H, m), 0,95 (6H, d, J = 6 Hz).
Ejemplo de Referencia 112 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metilfenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucina
10
A partir del Ejemplo 63. CL/EM: m/z 462 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,69 (1H, d, J = 9,6 Hz), 7,53 (2H, d, J = 7,2 Hz), 7,45 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,34 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,25 (2H, d, J = 8,4 Hz), 5,80 (1H, d, J = 9,6 Hz), 3,15 (1H, m), 3,02-2,75 (4H, m), 2,45 (3H, s), 1,73 (1 H, m), 1,56-1,22 (2H, m), 0,96 (6H, dd). 15
Ejemplo de Referencia 113 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metoxifenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}- fenil)etil]-L-leucina
20
A partir del Ejemplo 64. CL/EM: m/z 478 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,28 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,15 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,04 (1H, d, J = 9,3 Hz), 6,89 (4H, m), 4,87 (1H, d, J = 9,3 Hz), 3,78 (1H, m), 3,41 (3H, s), 2,75 (2H, m), 1,78 (1 H, m), 1,24 (2H, m), 0,86 (6H, t).
25
Ejemplo de Referencia 114 N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-clorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucina
A partir del Ejemplo 65. CL/EM: m/z 482 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 7,16 (1H, d), 7,52 (6H, m), 7,23 (2H, 30 d), 6,82 (1 H, d), 3,15 (1 H, t), 1,74 (1 H, m), 1,44 (2H, m), 0,93 (6H, dd).
Ejemplo de Referencia 115 (2S)-4-amino-2-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5- difluorofenoxi}propil)amino]butanoato
5
A partir del Ejemplo 52. CL/EM: m/z 537 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,52-7,75 (2H, m), 7,30 - 7,48 (2H, m), 7,20 - 7,29 (1H, m), 7,09 (2 H, d, J = 9,7 Hz), 4,23 (1H, t, J = 6,1 Hz), 4,07 - 4,17 (2H, m), 2,14 - 2,32 (2H, m), 1,22 - 1,41 (6H, m), 0,88 (4H, t, J = 7,3 Hz)
Ejemplo de Referencia 116 N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}- 10 pentil)-L-leucina
A partir del Ejemplo 54. A una solución de N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]- 15 3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato de terc-butilo (21 mg, 0,04 mmol) en DCM (2,5 ml) se le añadió TFA (2,5 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas, antes de concentrarse a presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH mínimo y se destiló tres veces azeotrópicamente con 1:1 de tolueno/DCM. El compuesto del título se proporcionó en forma de un sólido de color crema en forma de la sal de mono-TFA (21 mg, rendimiento del 92 %). CL/EM: m/z 634 [M+H]+. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,14 (1 H, s a), 8,21 (1 H, s a), 7,57 (1 H, m), 7,46 (1 H, m), 20 7,34 (1 H, dd, J = 9,6, 2,4 Hz), 7,21 (1 H, m), 7,06 (2H, d, J = 10,2 Hz), 5,73 (1 H, d, J = 9,9 Hz), 4,10 (2H, t, J = 5,7 Hz), 3,40 (1 H, m), 2,84 (2H, t, J = 6,6 Hz), 1,79-1,48 (9H, m), 0,90 (6H, t, J = 6,3 Hz).
Los siguientes ejemplos se prepararon de una manera similar:
25
Ejemplo de Referencia 117 N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)- etil]-L-leucina
30
A partir del Ejemplo 60. CL/EM: m/z 484 [M+H]+: RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10,06 (1 H, s a), 9,17 (2H, s a), 7,55-6,94 (8H, m), 5,72 (1H, d, J = 9,6 Hz), 4,05-3,93 (1H, m), 3,40-3,10 (3H, m), 1,85-1,65 (4H, m), 0,95 (6H, d, J = 5,7 Hz).
Ejemplo de Referencia 118 Ácido (2S)-{[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il)fenil)etil]- 35 amino}(fenil)etanoico
40 A partir del A partir del A partir del A partir del A partir del A partir del A partir del A partir del A partir del
Medición de actividades biológicas
5
Actividad de MAP cinasa p38
Se midió la capacidad de los compuestos para inhibir la actividad de MAP cinasa a p38 en un ensayo llevado a cabo por Upstate (Dundee, R.U.). En un volumen final de reacción de 25 μl, se incubó MAP cinasa a p38 (5-10 mU) con Tris 25 mM, pH 7,5, EGTA 0,002 mM, 0,33 mg/ml de proteína básica de mielina, acetato de Mg 10 mM y [g-33p-ATP] 10 (actividad específica de aproximadamente 500 cpm/pmol, concentración según sea necesario). La reacción se inició mediante la adición de la mezcla de MgATP. Tras incubar durante 40 minutos a temperatura ambiente, la reacción se detuvo mediante la adición de 5 μl de una solución de ácido fosfórico al 3%. Entonces se añadió 1 μl de la reacción sobre un Filtermat P30 y se lavó tres veces durante 5 minutos en ácido fosfórico 75 mM y una vez en metanol antes del secado y recuento de centelleo. 15
Se generaron puntos de datos duplicados a partir de una dilución en serie log 1/3 de una solución madre en DMSO. Se efectúan nueve etapas de dilución a partir de una concentración máxima de 10 μM, y se incluye un blanco "sin compuesto". El ensayo radiométrico de unión al filtro se llevó a cabo a una concentración de ATP de o próxima a la Km. Se recogieron los datos de los recuentos de centelleo y se sometieron a análisis de ajuste libre mediante el programa 20 informático Prism. A partir de la curva generada, se determinó y comunicó la concentración que proporcionó una inhibición del 50%.
Estimulación con LPS de células THP-1
25
Se sembraron células THP-1 en 100 μl a una densidad de 4 x 104 células/pocillo en placas tratadas para cultivo tisular de fondo en V de 96 pocillos y se incubaron a 37°C en CO2 al 5% durante 16 h. 2 h después de la adición del inhibidor en 100 μl de medio de cultivo tisular, se estimuló a las células con LPS (cepa de E coli 005:B5, Sigma) a una concentración final de 1 μg/ml y se incubaron a 37°C en CO2 al 5% durante 6 h. Se midieron los niveles de TNF-α a partir de los sobrenadantes sin células mediante ELISA sándwich (R&D Systems n.º QTA00B). 30
Estimulación con LPS de sangre humana completa
Se extrajo sangre completa mediante punción venosa usando vacutainers heparinizados (Becton Dickinson) y se diluyeron en un volumen igual de medio para cultivo tisular RPMI1640 (Sigma). Se emplacaron 100 μl en placas 35 tratadas para cultivo tisular de fondo en V de 96 pocillos. 2 h después de la adición del inhibidor en 100 μl de medio RPMI1640, se estimuló la sangre con LPS (cepa de E. coli 005:B5, Sigma) a una concentración final de 100 ng/ml y se incubaron a 37°C en CO2 al 5% durante 6 h. Se midieron los niveles de TNF-α a partir de los sobrenadantes sin células mediante ELISA sándwich (R&D Systems n.º QTA00B).
40
Los valores de CI50 se asignaron a uno de tres intervalos del modo siguiente:
Intervalo A: CI50 < 100 nM
Intervalo B: 100 nM < CI50 <1000 nM
Intervalo C: CI50 >1000 nM 45
Tabla de resultados
Ejemplo
Actividad del inhibidor frente a MAPKa p38 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα por THP-1 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα en sangre completa humana
1
B C NE
2
B C NE
3
B C C
4
B C NE
5
B C NE
6
B C NE
7
A C NE
8
A B NE
9
A B C
10
A B NE
11
A B C
Ejemplo
Actividad del inhibidor frente a MAPKa p38 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα por THP-1 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα en sangre completa humana
12
A B NE
13
A A NE
14
A A NE
15
A A C
16
A A NE
17
A A NE
18
A A NE
19
A A C
20
A A B
21
A A C
22
A A B
23
A B NE
24
A B NE
25
A B C
26
A B NE
27
B B C
28
A A NE
29
A B NE
30
A A NE
31
A A NE
32
A A NE
33
A A NE
34
B C NE
35
B C NE
36
A A C
37
A B NE
38
A A C
39
A B NE
40
A A NE
41
B A C
42
A A B
43
A A NE
44
B A NE
45
A A NE
46
B A B
47
A A B
48
A A C
49
A B C
50
A A NE
51
A A NE
52
A A B
53
A A B
54
A A NE
55
B A NE
56
B C NE
57
B A B
58
B A B
Ejemplo
Actividad del inhibidor frente a MAPKa p38 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα por THP-1 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα en sangre completa humana
59
B A B
60
B A NE
61
B A NE
62
B B NE
63
C A NE
64
C B NE
65
B A NE
66
B B NE
67
B B C
68
NE NE NE
69
NE NE NE
70
NE NE NE
71
A C NE
72
A NE NE
73
A NE NE
74
A NE NE
75
B NE NE
76
B NE NE
77
A NE NE
78
B NE NE
79
B NE NE
80
A NE NE
81
B NE NE
82
A NE NE
83
A NE NE
84
A NE NE
85
A NE NE
86
C NE NE
87
B NE NE
88
A NE NE
89
A NE NE
90
A NE NE
91
A NE NE
92
A NE NE
93
A NE NE
94
A NE NE
95
A NE NE
96
A NE NE
97
A NE NE
98
A NE NE
99
A NE NE
100
A NE NE
101
A NE NE
102
A NE NE
103
A NE NE
104
A NE NE
105
B NE NE
Ejemplo
Actividad del inhibidor frente a MAPKa p38 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα por THP-1 Actividad del inhibidor frente a la liberación de TNFα en sangre completa humana
106
A NE NE
107
A NE NE
108
A NE NE
109
A NE NE
110
B NE NE
111
B NE NE
112
NE NE NE
113
NE NE NE
114
NE NE NE
115
NE NE NE
116
A NE NE
117
A NE NE
118
A NE NE
Ensayo de carboxilesterasa de células lisadas
Puede probarse cualquier compuesto dado de la presente invención en el que R1 es un grupo éster para determinar si cumple con el requisito de hidrolizarse por las esterasas intracelulares, mediante pruebas con el siguiente ensayo. 5
Preparación del extracto celular
Se lavaron células tumorales U937 o Hut78 (~ 109) en 4 volúmenes de PBS de Dulbecco (~ 1 litro) y se sedimentaron a 525 g durante 10 min a 4°C. Esto se repitió dos veces y el sedimento celular final se resuspendió en 35 ml de tampón 10 de homogeneización frío (Trizma 10 mM, NaCI 130 mM, CaCl2 0,5 mM, pH 7,0 a 25°C). Los homogeneizados se prepararon mediante cavitación en nitrógeno (4826 kPa (700 psi) durante 50 min a 4°C). El homogeneizado se mantuvo sobre hielo y se complementó con un cóctel de inhibidores a concentraciones finales de:
Leupeptina
1 μM
Aprotinina
0,1 μM
E64
8 μM
Pepstatina
1,5 μM
Bestatina
162 μM
Quimostatina
33 μM
15
Después de la clarificación del homogeneizado celular por centrifugación a 525 g durante 10 min, se usó el sobrenadante resultante como fuente de actividad de esterasa y se almacenó a -80°C hasta que se necesitó.
Medición de la escisión del éster
20
Puede medirse la hidrólisis de los ésteres en los correspondientes ácidos carboxílicos usando el extracto celular, preparado como en el caso anterior. Para este efecto, el extracto celular (~30 μg/volumen de ensayo total de 0,5 ml) se incubó a 37°C en un tampón de Tris-HCl 25 mM, NaCl 125 mM, pH 7,5 a 25°C. Después, a tiempo cero, el éster (sustrato) se añadió a una concentración final de 2,5 μM y las muestras se incubaron a 37°C durante un tiempo adecuado (normalmente de 0 u 80 min). Las reacciones se detuvieron mediante la adición de 3 volúmenes de 25 acetonitrilo. Para las muestras a tiempo cero, se añadió el acetonitrilo antes del compuesto de éster. Después de centrifugar a 12000 g durante 5 min, las muestras se analizaron respecto del éster y su correspondiente ácido carboxílico a temperatura ambiente mediante CLEM (Sciex API 3000, bomba binaria HP1100, CTC PAL). La cromatografía se basó en una columna de AceCN (75 x 2,1 mm) y una fase móvil de acetonitrilo en agua al 5-95 %/ácido fórmico al 0,1 %. 30
Las tasas de hidrólisis se expresan en pg/ml/min.
La tabla 1 presenta datos que muestran que varios motivos de éster de aminoácidos, conjugados a varios inhibidores de enzimas intracelulares mediante varias químicas de enlace distintas se hidrolizan todos por las carboxiesterasas 35 intracelulares en el ácido correspondiente.

Claims (13)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de fórmula (I):
    5
    en la que:
    G es-CH=
    D es un anillo fenilo opcionalmente sustituido; 10
    R6 es hidrógeno;
    P representa hidrógeno y U representa un radical de fórmula (IA); o U representa hidrógeno y P representa un radical de fórmula (IA);
    -A-(CH2)2-X1-L1-Y-NH-CHR1R2 (IA) 15
    en la que
    A representa un anillo fenilo o ciclohexilo opcionalmente sustituido;
    z es o 1; 20
    Y es un enlace, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, -C(=NH)NR3 o -S(=O)2NR3- donde R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;
    L1 es un radical divalente de fórmula -(Alq1)m(Q)n(Alq2)p- en la que
    25
    m, n y p son independientemente 0 o 1,
    Q es (i) un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 miembros de anillo, o (ii), en el caso donde m y p son ambos 0, un radical divalente de fórmula -X2-Q1- o -Q1-X2- en la que X2 es -O-, S- o NRA- en la que RA es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido, y Q1 es un radical divalente, carbocíclico o heterocíclico, mono o bicíclico, opcionalmente sustituido que tiene 5 - 13 30 miembros de anillo,
    Alq1 y Alq2 representan independientemente radicales C3-C7 cicloalquilo divalentes opcionalmente sustituidos, o radicales alquileno C1-C6, alquenileno C2-C6 o alquinileno C2-C6 opcionalmente sustituidos, lineales o ramificados, que pueden terminar en, o contener opcionalmente, una unión éter (-O-), tioéter (-S-) o amino (-NRA-) donde RA es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido; y 35
    X1 representa un enlace; -C(=O); o -S(=O)2-; -NR4C(=O)-, -C(=O)NR4-,-NR4C(=O)NR5-, -NR4S(=O)2- o -S(=O)2NR4- donde R4 y R5 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido;
    R1 es un grupo éster que es hidrolizable por una o más enzimas de carboxilesterasa intracelulares para dar un grupo de ácido carboxílico; 40
    R2 es la cadena lateral de un alfa aminoácido natural o no natural seleccionado entre:
    (i) grupos alquilo C1-C6, fenilo, 2-, 3- o 4-hidroxifenilo, 2-, 3- o 4-metoxifenilo, 2,-3- o 4-piridilmetilo, bencilo, feniletilo, 2-, 3- o 4-hidroxibencilo, 2-, 3- o 4-benciloxibencilo, 2-, 3- o 4-alcoxibencilo C1-C6, y benciloxi(alquil C1-C6); 45
    (ii) el grupo característico de un α aminoácido natural, en el que cualquier grupo funcional puede estar protegido;
    (iii) grupos -[Alq]nR6 donde Alq es un grupo alquilo (C1-C6) o alquenilo (C2-C6) opcionalmente interrumpido por uno o más átomos de -O- o -S- o grupos -N(R7)- [donde R7 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo (C1-C6)], n es 0 o 1, y R6 es un grupo cicloalquilo o cicloalquenilo opcionalmente sustituido; 50
    (iv) un grupo bencilo sustituido en el anillo de fenilo con un grupo de fórmula -OCH2COR15 donde R15 es hidroxilo, amino, alcoxi (C1-C6), fenilalcoxi (C1-C6), alquilamino (C1-C6), di(alquil (C1-C6))amino, fenilalquilamino (C1-C6), el resto de un haluro de ácido o aminoácido, derivado de éster o amida del mismo, estando dicho resto unido mediante un enlace de amida, seleccionándose dicho aminoácido entre glicina, α o β alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, 55 asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico;
    (v) un grupo heterociclicalquilo (C1-C6), estando sin sustituir o mono o disustituido en el anillo heterocíclico con halo, nitro, carboxi, alcoxi (C1-C6), ciano, alcanoílo (C1-C6), trifluorometilalquilo (C1-C6), hidroxi, formilo, amino, alquilamino (C1-C6), di-alquilamino (C1-C6), mercapto, alquiltio (C1-C6), hidroxialquilo (C1-C6), 5 mercaptoalquilo (C1-C6) o alquilfenilmetilo (C1-C6); y
    (vi) un grupo -CRaRbRc en el que:
    cada uno de Ra, Rb y Rc es independientemente hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo(C1-C6), cicloalquilo (C3-C8); o 10
    Rc es hidrógeno y Ra y Rb son independientemente fenilo o heteroarilo, tal como piridilo; o
    Rc es hidrógeno, alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6) o cicloalquilo (C3-C8), y Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un cicloalquilo de 3 a 8 miembros o un anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros; o
    Ra, Rb y Rc junto con el átomo de carbono al que están unidos forman un anillo tricíclico (por ejemplo 15 adamantilo); o
    Ra y Rb son cada uno independientemente alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), fenilalquilo (C1-C6), o un grupo como se define para Rc más adelante distinto de hidrógeno, o Ra y Rb, junto con el átomo de carbono al que están unidos, forman un anillo cicloalquilo o heterocíclico, y Rc es hidrógeno, -OH, -SH, halógeno, -CN,-CO2H, perfluoroalquilo (C1-C4), -CH2OH -CO2alquilo (C1-C6), -Oalquilo 20 (C1-C6),-Oalquenilo (C2-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -Salquenilo (C2-C6), -SOalquenilo (C2-C6), -SO2alquenilo (C2-C6) o un grupo -Q2-W en el que Q2 representa un enlace o -O-, -S-, -SO- o -SO2- y W representa un grupo fenilo, fenilalquilo, cicloalquilo (C3-C8), cicloalquilalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), cicloalquenilalquilo (C4-C8), heteroarilo o heteroarilalquilo, grupo W que puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre, hidroxilo, 25 halógeno, -CN, -CO2H, -CO2alquilo (C1-C2), -CONH2, -CONHalquilo (C1-C6), -CONH(alquilo C1-C6)2, -CHO, -CH2OH perfluoroalquilo (C1-C4), -Oalquilo (C1-C6), -Salquilo (C1-C6), -SOalquilo (C1-C6), -SO2alquilo (C1-C6), -NO2, -NH2,-NHalquilo (C1-C6), -N(alquilo (C1-C6))2, -NHCOalquilo (C1-C6), alquilo (C1-C6), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), cicloalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C4-C8), fenilo o bencilo; y
    30
    a menos que se indique otra cosa en el contexto en el que aparezca, el término "sustituido" según se aplica a cualquier resto en el presente documento significa sustituido con hasta cuatro sustituyentes compatibles, cada uno de los cuales se selecciona independientemente entre alquilo (C1-C6), alcoxi (C1-C6), hidroxi, hidroxialquilo (C1-C6), mercapto, mercaptoalquilo (C1-C6), alquiltio (C1-C6), fenilo, halo incluyendo flúor, bromo y cloro, trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (-CN), oxo, -COOH, -COORA, -CORA, -SO2RA, -CONH2, 35 -SO2NH2,-CONHRA, -SO2NHRA, -CONRARB, -SO2NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, -OCONHRA, -OCONRARB, -NHCORA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHSO2ORA, -NRBSO2OH, -NRBSO2ORA, -NHCONH2, -NRACONH2, -NHCONHRB, -NRACONHRB, -NHCONRARB o -NRACONRARB en los que RA y RB son independientemente un alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), fenilo o heteroarilo monocíclico que tiene 5 o 6 átomos en el anillo. 40
  2. 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que P es hidrógeno y U es un radical de fórmula (IA) como se ha definido en la reivindicación 1.
  3. 3. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que A es 1,4-fenileno 45 opcionalmente sustituido.
  4. 4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la fórmula (IIA), (IIB) y (IIC):
    en las que R11 = F, R12 = H, R13 = H y R14 = H; o
    R11 = F, R12 = F, R13 = H y R14 = H; o
    R11 = F, R12 = H, R13 = F y R14 = F; o 5
    R11 = F, R12 = F, R13 = F y R14 = F; o
    R11 = F, R12 2 = F, R13 = F y R14 = H
    y en las que z, X1, L1, Y, R1 y R2 son como se han definido en la reivindicación 1.
  5. 5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el radical -Y-L1-X1-[CH2]z-, es 10 -CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2O-, -CH2CH2O-, -CH2CH2CH2O-, -CH2CH2CH2CH2O-, -C(=O)-CH2-, - C(=O)-CH2O-, -C(=O)-NH-CH2- o -C(=O)-NH-CH2O-.
  6. 6. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R1 es un grupo éster de fórmula -(C=O)OR14, en la que R14 es R8R9R10C- donde 15
    (i) R8 es hidrógeno o alquil (C1-C3)-(Z1), -[alquilo (C1-C3)]b- o alquenil (C2-C3)-(Z1)a-[alquilo (C1-C3)]b- opcionalmente sustituido, en el que a y b son independientemente 0 o 1 y Z1 es -O-, -S- o -NR11- donde R11 es hidrógeno o alquilo (C1-C3); y R9 y R10 son independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C3)-;
    (ii) R8 es hidrógeno o R12R13N-alquilo (C1-C3)- opcionalmente sustituido donde R12 es hidrógeno o alquilo (C1-C3) 20 y R13 es hidrógeno o alquilo (C1-C3); o R12 y R13, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo monocíclico heterocíclico opcionalmente sustituido de 5 o 6 átomos en el anillo o sistema de anillo bicíclico heterocíclico de 8 a 10 átomos en el anillo, y R9 y R10 son independientemente hidrógeno o alquilo (C1-C3)-; o
    (iii) R8 y R9, tomados junto con el carbono al que están unidos, forma un anillo carbocíclico monocíclico opcionalmente sustituido de 3 a 7 átomos en el anillo o sistema de anillo carbocíclico bicíclico de 8 a 10 átomos en 25 el anillo, y R10 es hidrógeno.
  7. 7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que R14 es metilo, etilo, n- o iso-propilo, n-, sec- o terc-butilo, ciclohexilo, alilo, fenilo, bencilo, 2-, 3- o 4-piridilmetilo, N-metilpiperidin-4-ilo, tetrahidrofurano-3-ilo o metoxietilo.
    30
  8. 8. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R2 es fenilo, bencilo, iso-butilo, ciclohexilo o t-butoximetilo.
  9. 9. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R1 es un grupo éster de fórmula -(C=O)OR14, en el que R14 es ciclopentilo, y R2 es fenilo, bencilo, iso-butilo, ciclohexilo o t-butoximetilo. 35
  10. 10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 seleccionado entre el grupo que consiste en
    (S)-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)fenilacetato de ciclopentilo 40
    (S)-2-(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxo-2H-piridin-1-il]-3,5-difluorofenoxi}propilamino)-4- metilpentanoato de ciclopentilo
    Ejemplo 42 (2R)-[(3-{4-[6-Amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)amino]- (fenil)acetato de ciclopentilo
    N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1-(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)-L-leucinato de 45 2-morfolin-4-iletilo
    N-(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1-(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)-L-leucinato de 2-(dimetilamino)etilo
    N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
    N-(5-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentilo
    N-[3-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)propil]-L-leucinato de ciclopentilo
    (2S)-4-Amino-2-[(3-{4-[6-amino-5-(2,4-difluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H-il]-3,5-difluorofenoxi}propil)amino]- 5 butanoato de ciclopentilo
    N-(5-{4-[6-amino-5-(4-fluorobenzoil)-2-oxopiridin-1(2H)-il]-3,5-difluorofenoxi}pentil)-L-leucinato de ciclopentilo
    N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
    N-[2-(4-{6-amino-5-[(2,4-difluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de terc-butilo
    (2S)-{[2-(4-{6-amino-5-[(4-fluorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]amino}(fenil)etanoato de ciclopentilo 10
    N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-metilfenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo
    N-[2-(4-{6-amino-5-[(4-clorofenil)carbonil]-2-oxopiridin-1(2H)-il}fenil)etil]-L-leucinato de ciclopentilo.
  11. 11. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores que está en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. 15
  12. 12. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, junto con un transportador farmacéuticamente aceptable.
  13. 13. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para el tratamiento de una enfermedad 20 autoinmunitaria o inflamatoria.
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