BRPI0610885B1

BRPI0610885B1 - Mineralização dental

Info

Publication number: BRPI0610885B1
Application number: BRPI0610885-7A
Authority: BR
Inventors: Charles Reynolds Eric
Original assignee: The University Of Melbourne
Priority date: 2005-06-07
Filing date: 2006-06-07
Publication date: 2018-07-10
Also published as: US8673363B2; CA2611077A1; RU2413498C2; PT1888014E; JP5539648B2; DK1888014T3; EP1888014A1; US20140147512A1; NZ563944A; BRPI0610885A2; MX2007015496A; CN104013963A; AR057353A1; ES2399345T3; AU2006255486B2; EP1888014B1; AU2006255486A1; EP1888014A4; US20080193557A1; WO2006130913A1

Abstract

é fornecido um método para mineralizar uma superfície ou sub-superfície dental que incluí contatar a superfície dental com um agente rompedor de proteína e fosfato de cálcio amorfo (acp) estabilizado ou fosfato fluoreto de cálcio amorfo (acfp).

Description

(54) Título: MINERALIZAÇÃO DENTAL (51) Int.CI.: A61K 8/24; A61K 8/20; A61K 8/22; A61K 33/42; A61Q 11/00 (30) Prioridade Unionista: 07/06/2005 AU 2005902961 (73) Titular(es): THE UNIVERSITY OF MELBOURNE (72) Inventor(es): ERIC CHARLES REYNOLDS

MINERALIZAÇÃO DENTAL

A presente invenção está relacionada a um método de mineralizar uma superfície dental, em particular o esmalte dental. Métodos de mineralizar lesões hipomineralizadas ('incluindo lesões de sub-superfície) no esmalte dental provocado por cáries dentais, erosão dental e fluorose são também providos.

Fundamentos

Causas comuns de lesões hipomineralizadas são cá10 ries e fluorose.

A cárie dental é iniciada pela desmineralização do tecido duro dos dentes usualmente por ácidos orgânicos produzidos a partir da fermentação do açúcar da dieta pela bactéria odontopatogênica da placa dental. A cárie dental é a15 inda um principal problema de saúde pública. Além disso, as superfícies dentais restauradas podem ser suscetíveis a mais cáries em torno das margens da restauração. Apesar da prevalência das cáries dentais ter diminuído através do uso de flúor nos países mais desenvolvidos, a doença permanece um principal'problema de saúde pública. A erosão ou a corrosão dental é a perda do mineral dental por meio da dieta ou pelos ácidos regurgitados. A hipersensibilidade é devido aos túbulos dentinais expostos através da perda da camada protetora mineralizada, cemento. 0 cálculo dental é o indesejado crescimento de minerais fosfato de cálcio sobre a superfície dos dentes. Todas essas condições, cáries dentais, erosão dental, hipersensibilidade dental e cálculo dental são portanto, desequilíbrios no nível de fosfatos de cálcio.

A fluorose do esmalte (matizado) tem. sido identificada por quase um século, todavia, o papel etiológico do flúor não foi identificado até 1942 (Black e McFay, 1916) . A aparência característica da fluorose pode ser diferenciada de outras perturbações do esmalte (Fejerskov e outros, 1991). As características clínicas das lesões fluoróticas do esmalte (FLE) representam uma faixa contínua de variação desde finas linhas opacas que seguem a periquimata, até gredoso, esmalte branco (Fejerskov e outros, 1990; Giambro e outros 1995). A presença de uma superfície externa comparativamente altamente mineralizada e uma superfície hipomineralizada na lesão fluorótica simula a incipiente lesão de cárie no esmalte manchas brancas (Fejerskov e outros, 1990). Com crescente gravidade, ambos a profundidade do esmalte envolvido na lesão e o grau de hipomineralização aumentam (Fejerskov e outros, 1990, Giambro e outros, 1995). O desenvolvimento da fluorose é altamente dependente da dose, duração e tempo de exposição ao flúor (Fejerskov e outros, 1990, Fejerskov e outros, 1996; Aoba e Fejerskov, 2002) e é acreditado estar relacionado às elevadas concentrações de flúor no soro. Lesões gredosas manchas brancas podem também formar no desenvolvimento dos dentes de crianças tal como após o tratamento com antibiótico ou febre. Tais lesões indicam áreas de hipomineralização do esmalte dental.

Dependendo da gravidade da lesão, a fluorose tem sido gerenciada clinicamente por meio da substituição restaurativa ou da microabrasão do esmalte externo (Den Besten e Thariani, 1992; Fejerskov e outros, 1996). Esses tratamen25

tos são insatisfatórios porque eles envolvem restaurações ou a remoção do tecido dental. 0 que é desejado é um tratamento que irá mineralizar o esmalte hipomineralizadc para produzir uma aparência e estruturas naturais.

Complexos específicos de fosfopeptídeos de caseína e de fosfato de cálcio amorfo (CPP-ACP, disponíveis como Recaldent™) têm se mostrado remineralizar lesões na subsuperfícíe do esmalte in vitro e in situ (Reynolds, 1998; Shen e outros, 2001; Reynolds e outros, 2003).

WO 98/40406 em nome da Universidade de Melbourne (o conteúdo da qual é aqui incorporado em sua totalidade como referência) descreve complexos de fosfopeptídeo de caseína-fosfato de cálcio amorfo (CPP-ACP) e complexos de CPPfluoreto fosfato de cálcio amorfo estabilizado (CPP-ACFP) que foram produzidos em pH alcalino. Tais complexos têm se mostrado prevenir a desmineralização e promover a remineralização das lesões da sub-superfície do esmalte em modelos de cáries em animais e humanos (Reynolds, 1998).

Os CPP que são ativos na formação de complexos re20 alizam isto fazendo eles parte ou não de uma proteína caseína de comprimento completo. Exemplos do ativo (CPP) que podem ser isolados após a típica digestão da caseína de comprimento completo foram especificadas na Patente U.S. No. 5.015.628 e incluem peptídeos Bos a_si-caseína X-5P (f 5 925 79) [1], Bos β-caseína X-4P (Fl-25) [2] , Bos a_s2 X-4P (f4670) [3] e Bos ct_s2-caseína X-4P (fl-21) [4] como a seguir:

[1] Gln⁵⁹-Met-Glu-Ala-Glu-Ser(P)-lle-Ser(P)-Ser(P)Ser(P)-Glu-Glu-lle-Val-Pro-Asn-Ser(P)-Val-Glu-Gln-Lys⁷⁹ a_sl (59—75) [ 2 1 Arg^-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-GIy-GIulle-Val-Glu-Ser(Ρ)-Leu-Ser(P)-Ser(P)-Ser(Ρ)-Glu-Glu-Ser-iieThr-Arg²⁵ (3(1-2 5) ' [’3J ’ Ãsn^4D-AÍa-Asn-Glu-Glu-Glu-Tyr-Ser-lle-GlySer(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu-Ser(P)-Ala-Glu-Val-Ala-Thr-GluGlu-Val-Lys⁷⁰ a_s2 (46-70) [4] Lys^Asn-Thr-Met-Glu-His-Val-Sen(P)-Ser(P)Ser(P)-Glu-Glu-Ser-lle-lle-Ser(P)-Gln-Glu-Thr-Tyr-Lys²¹ a_s2 (1

-21 )

O acesso de íons mineralizantes ao esmalte dental em muitos casos pode ser limitado pela camada de proteínas salivares que se forma sobre a superfície do esmalte, denominada de película. As proteínas da película pode também se acumular na sub-superfície das lesões do esmalte, inibindo desse modo a mineralização dessas lesões. Tais acúmulos de proteínas pode descolorir durante o tempo, deixando manchas de mau aspecto sobre o dente. Consequentemente, existe uma necessidade de remover essas proteínas para remover a desco20 loração e evitar'limitações do acesso ao esmalte por parte dos íons remineralizantes. Para superar essas e outras limitações dos tratamentos conhecidos, têm sido conduzidas pesquisas para essas finalidades.

Sumário da Invenção

Em um aspecto, a presente invenção proporciona um método de mineralizar uma superfície ou uma sub-superfície dental que inclui contatar a superfície dental com um agente destruidor da proteína, e contatar a superfície dental com

fluofosfato de cálcio amorfo (ACP) estabilizado ou fosfato fluoreto de cálcio amorfo (ACFP) estabilizado. A superfície dental é preferivelmente o esmalte dental. Em uma modalidade a superfície dental é uma lesão no esmalte, tal como uma lesão '5 provocada põr cárie, erosão dental ou f luorose.

A mineralização das superfícies dentais pode ser significativamente melhorada pela ruptura das películas das proteínas situadas na superfície dental antes da aplicação de um material remineralizante, tal como ACP e/ou ACFP esta10 bilizados. Em particular, foi descoberto que a mineralização do esmalte por meio das formas solúveis de ACP (CPP-ACP) e ACFP (CPP-ACFP) estabilizadas é melhorada por meio do prétratamento da superfície do esmalte com um agente de ruptura da proteína tal como um clareador alcalino.

Preferivelmente, o ACP e/ou ACFP é fosfopeptídeo (PP) estabilizado. Preferivelmente, o fosfopeptídeo (como definido adiante) é um fosfopeptídeo caseína.

Em uma modalidade preferida o ACP e/ou ACFP está na forma de um complexo ACP e/ou ACFP estabilizado por fos20 fopeptídeo caseína.

Preferivelmente, a fase do ACP é predominantemente uma fase básica, onde o ACP compreende predominantemente espécies Ca²⁺, PO4³~ e OH“. A fase básica do ACP pode ter a fórmula geral [Ca3 ( P0-0₂] χ [Ca₂ (PO₄) (OH) ] onde x > 1. Preferivel25 mente, x = 1-5. Mais preferivelmente, x = 1. Preferivelmente os dois componentes da fórmula estão presentes em proporções iguais. Consequentemente, em uma modalidade a fase básica de ACP tem a fórmula Ca₃ ( PO₄) ₂Ca₂ (P0₄) (OH) .

Preferivelmente, a fase do ACFP é predominantemente uma fase básica, onde o ACFP compreende predominantemente as espécies Ca²⁺, P0,^J“ e F“. A fase básica do ACFP pode ter a fórmula geral [Ca₃ (P0₄) ₂] χ (Ca₂ (P0₄) F] _y onde χ > 1 quando y = 1 ou onde y > 1 quando χ = 1. Preferivelmente, y = 1 e x = 13. Mais preferivelmente, y = 1 e x = 1. Preferivelmente os dois componentes da fórmula estão presentes em proporções iguais. Consequentemente, em uma modalidade fase básica do ACFP tem a fórmula Ca₃(P0₄)₂Ca₂(P0₄) F.

Em uma modalidade, o complexo ACP consiste essencialmente de fosfopeptídeos, íons cálcio, fosfato e hidróxido e água.

Em uma modalidade, o complexo ACFP consiste essencialmente de fosfopeptídeos, íons cálcio, fosfato, flúor e hidróxido e água.

Descrição Detalhada da Invenção

Qualquer agente rompedor de proteína adequado pode ser usado no método da presente invenção. O agente é requerido reduzir a barreira proteinácea formada sobre a superfí20 cie a ser’’tratada, tal como a película sobre os dentes. Exemplos de agentes adequados incluem clareadores, detergentes, agentes caotrópicos tais com uréia, altas concentrações de fosfato, coquetéis de proteases (por ex., endopeptidases, proteinases e exopeptidases) e qualquer outro agente que so25 lubilize, destrua ou hidrólise proteína.

Exemplos de clareadores adequados incluem hipoclorito de sódio (NaOCl), e clareadores peróxido de carbamida. Em uma modalidade preferida, o clareador é um clareador al7 calino. Em uma modalidade adicionalmente preferida, o clareador alcalino é o NaOCl. 0 agente rompedor da proteína atua para solubilizar e remover parcialmente cu totalmente as proteínas da superfície dental, particularmente as proteínas da pelícuia.

Em um aspecto adicional da presente invenção é provido um método de mineralizar uma superfície dental que compreende prover um agente rompedor da proteína e uma fonte de ACP ou ACFP. Em uma modalidade preferida a superfície dental é o esmalte.

Em um aspecto adicional da presente invenção, é provido um método para tratar fluorose que compreende contatar uma lesão fluorótica no esmalte dental com um agente rompedor de proteína e ACP e/ou ACFP.

Em um aspecto adicional da presente invenção é provido um método para tratar cáries dentais que compreende contatar uma lesão de cárie no esmalte do dente com um agente rompedor de proteína e ACP e/ou ACFP estabilizados.

Em um aspecto adicional da presente invenção é provido um método para tratar a erosão dental que compreende contatar uma lesão no esmalte dental provocada por erosão com um agente rompedor de proteína e ACP e/ou ACFP estabilizados .

Em um aspecto adicional da presente invenção é provido um método para reduzir lesões de manchas brancas sobre o esmalte dental que compreende contatar uma lesão no esmalte dental provocada por erosão com um agente rompedor de proteína e ACP e/ou ACFP estabilizados.

Preferivelmente o ACP e/ou ACFP é estabilizado por um fosfopeptídeo. Em uma modalidade preferida o fosfopeptídeo é um fosfopeptídeo caseína. Preferivelmente, o ACP ou ACFP está na forma de um complexo ACP ou ACFP estabilizado por fosfopeptideo caseína.

Em uma modalidade, o agente rompedor de proteína é o NaOCl. Uma concentração de cerca de 1 a 20% NaOCl pode ser usada. De modo alternativo, a concentração de NaOCl é de 1 a 10%. Em uma modalidade preferida, cerca de 5% NaOCl é utili10 zado.

O agente rompedor de proteína pode ser contatado com a superfície dental por um período de cerca de 1 a 60 minutos, ou por cerca de 1 a 30 minutos. Em uma modalidade, o agente rompedor de proteína é contatado com a superfície dental por cerca de 20 minutos.

Preferivelmente o ACP e/ou ACFP estabilizados é contatado com a superfície dental por um período de cerca de 1 minuto to 2 horas, ou de 5 minutos a 60 minutos ou de cerca de 10 minutos. O ACP e/ou ACFP estabilizado pode ser re20 petidamente aplicado à superfície dental durante um período de 1 dia até vários meses.

Em uma modalidade, o ACP e/ou ACFP estabilizados é contatado com a superfície dental após a superfície dental ter sido contatada com o agente rompedor de proteína.

Em uma modalidade preferida, o agente rompedor de proteína é contatado com a superfície dental 1 a 60 minutos, ou de 1 a 30 minutos, ou de 1 a 5 minutos antes de contatar a superfície dental com o ACP e/ou ACFP estabilizados.

Em um aspecto adicional da presente invenção é provido um método para mineralizar uma superfície dentai que compreende aplicar um complexo de ACP e/ou ACFP á superfície de um dente que foi pré-tratado com um agente rompedor de proteína. Preferivelmente a superfície do dente é esmalte dental. Em uma modalidade preferida, a superfície do dente é esmalte dental contendo uma lesão selecionada a partir do grupo que consiste de um ou mais de uma lesão de mancha branca; a lesão fluorótica; uma lesão por cáries; ou uma le10 são provocada por erosão dental. Em uma modalidade adicionalmente preferida o agente rompedor de proteína é um clareador.

Em uma modalidade, a superfície dental está em necessidade de tal tratamento. A invenção também inclui um mé15 todo de tratar um indivíduo que sofre de fluorose, cáries dentais, hipersensibilidade dentinal ou cálculo dental.

Sem estar limitado por qualquer teoria ou modo de ação é entendido que o pré-condicionamento do esmalte dental com um agente rompedor de proteína resulta na desproteinação completa ou parcialdo esmalte, melhora da difusão de cálcio e de fosfato ao interior do esmalte da sub-superfície.

É adicionalmente entendido que o tratamento do esmalte dental com o esmalte dental com ACFP estabilizado produz fluorapatita, que é mais resistente à provocação ácida que o esmalte dental normal. Isso pode resultar em esmalte dental com superiores propriedades de resistência às cáries. Conseqüentemente, em uma modalidade preferida o método da presente invenção inclui ACFP estabilizado.

Fosfopeptídeo no contexto da descrição dessa invenção significa uma sequência aminoácido na qual pelo menos um aminoácido é fosforilado. Preferivelmente, c fosfopeptídeo inclui uma ou mais da sequência aminoácido -A-B-C-, onde

À é um resíduo fosfoamino, B é qualquer resíduo acílamino incluindo a resíduo fosfoamino e C é selecionado a partir de um resíduo glutamila, aspartila ou fosfoamino. Qualquer dos resíduos fosfoamino resíduos pode ser independentemente um resíduo fosfoserila. B é desejavelmente um resíduo a cadeia lateral do qual não é nem relativamente grande nem hidrofóbica. Ele pode ser Gly, Ala, Vai, Met, Leu, lie, Ser, Thr, Cys, Asp, Glu, Asn, Gin ou Lys.

Em uma outra modalidade, pelo menos dois dos ácidos fosfoamino na sequência são preferivelmente contíguos.

Preferivelmente o fosfopeptídeo inclui a sequência A-B-C-DE, onde A, B, C, D e E são independentemente fosfoserina, fosfotreonina, fosfotirosina, fosfoistidina, ácido glutâmico ou ácido aspártico, e pelo menos dois, preferivelmente três de A, B, C, D e E são um fosfoaminoácido. Em uma modalidade preferida, os’ resídüos fosfoaminoácido são fosfoserina, muito preferivelmente três resíduos fosfoserina contíguos. É também preferido que D e E sejam independentemente ácido glutâmico ou aspártico.

É também entendido que o termo compreende (ou suas variantes gramaticais) como usado aqui nessa especificação é equivalente ao termo inclui e pode ser usado de modo intercambiável e não deverá ser assumido como excluindo a presença de outros elementos ou caracter!sticas.

Em uma modalidade, o ACP ou ACEP é estabilizado por fosfopeptídeo caseína (CPP) , que está na forma de caseira intacta ou fragmento de caseína, e o complexo formado possui preferivelmente a fórmula [CPP(ACP)₈]_n ou [(CPP) (ACFP)₃]~ onde n é igual a ou maior que 1 , por exemplo 6. 0 complexo formado pode ser um complexo coloidal, onde as partículas de núcleo se agregam para formar partículas coloidais maiores (por ex., 100 nm) suspensas em água. Desse modo, o PP pode ser uma proteína caseína ou um polifosfopep10 tídeo.

O PP pode ser proveniente de qualquer fonte; ele pode estar presente no contexto de um polipeptídeo maior, incluindo um polipeptídeo caseína de comprimento completo, ou ele pode ser isolado por meio tríptico ou outro meio en15 zimático ou digestão química da caseína, ou outras proteínas ricas em fosfoaminoácido tais como fosfitina, ou por meio de síntese química ou recombinante, contanto que ela compreenda uma sequência -A-B-C- ou A-B-C-D-E como descrito acima. A sequência que flanqueia essa sequência núcleo pode ser qual20 quèr sequência. Todavia, aquelas sequências flanqueadõras em o_sl(59-79) [1], β(1-25) [2], a_s2(46-70) [3] eo_s2(l-21) [4]são preferidas. As sequências flanqueadõras podem ser opcionalmente modificadas por apagamento, adição ou substituição conservativa de um ou mais resíduos. A composição aminoácido e a sequência da região flanqueadora não são cruciais.

Exemplos de substituições conservativas são mostradas na Tabela 1 adiante.

Tabela 1

Resíduo original	Substância c o n ser v ativa	Substância con-
	representativa	serva o r va prefe-
		rida
Ala	Vai, Leu, lie	Vai
Asn	Gin Lys His Phe	Gin
Gin	Asn	Asn
Gly	Pro	Pro
lie	Leu, Vai, Met, Ala, Phe	Leu
Leu	lie, Vai, Met, Ala, Phe	lie
Lys	Arg, Gin, asn	Arg
Phe	Leu, Vai, lie, Ala	Leu
Pro	Gly	Gly
Ser	Thr	Thr
Vai	lie, Leu, Met, Phe, Ala	Leu
Asp	Glu	Glu
Thr	Ser	Ser
Trp	Tyr	Tyr
Tyr	Trp Phe Thr Ser	Phe

As sequências flanqueadoras podem também incluir resíduos aminoácidos naturalmente ocorrentes. Aminoácidos comumente encontrados os quais não estão codificados pelo 5 código genético incluem:

Ácido 2-amino adípico (Aad) para Glu e Asp;

Ácido 2-aminopimélico (Apm) para Glu e Asp;

Ácido 2-aminobutírico (Abu) para Met, Leu, e outros aminoácidos alifáticos;

Ácido 2-aminoeptanóico (Ahe) para Met, Leu e

outros aminoácidos alitáticos;

Ácido 2-aminoisobutírico (Aib) para Gly; c i c 1 o ti ex i 1 a 1 a n i na (Cha) para Vai, β Leu e lis; homoarginina (Har) para Arg e Lys;

Ácido 2,3-diaminopropiônico (Dpr) para Lys, Arg e

His;

N-etilglicina (EtGly) para Gly, Pro, e Ala;

N-etilasparigina (EtAsn) para Asn, e Gin;
	Hidroxilisina (Hyl) para Lys;
10	allohídroxilisina (AHyl) para Lys;
	3-{e 4) hidroxiprolina (3Hyp, 4Hyp) para Pro, Ser,

e Thr;

alloisoleucina (Alie) para lie, Leu, e Vai; p-amidinofenilalanina para Ala;

N-metilglicina (MeGIy, sarcosine) para Gly, Pro,

Ala.

N-metilisoleucina (Melle) para lie;

Norvalina (Nva) para Met e outros aminoácidos alifáticos;

Norleucina (Nlej para Met e outros aminoácidos alifáticos;

Ornitina (Orn) para Lys, Arg e His;

Citrullina (Cit) e sulfóxido de metionina (MSO) para Thr, Asn e Gin;

N-metilfenilalanina (MePhe), trimetilfenilalanina, halo (F, Cl, Br e I) fenilalanina, triflorilfenilalanina, para Phe.

Em uma modalidade, o PP é um ou mais

fosfopeptídeos selecionados a partir do grupo que consiste de cqi ( 59-79) [1], β(1-25) [2] , a_s2(46-70) [3] e a_s2(l-21} [4],

Em uma outra modalidade da invenção, o complexo ACFP ou ACP estabilizado é incorporado em composições de uso oral tais como pasta dental, lavadores ou formulações de uso bucal para auxiliar na prevenção e/ou tratamento de cáries dentais, decadência dental, erosão dental ou fluorose. 0 complexo ACFP ou ACP pode compreender 0,01-50% em peso da composição, preferivelmente de 1,0-50%. Para composições de uso oral, é preferido que a quantidade de CPP-ACP e/ou CPPACFP administrada seja de 0,01-50% em peso, preferivelmente de l,0%-50% em peso da composição. Em uma modalidade partícula rmente preferida, a composição oral da presente invenção contém cerca de 2% CPP- ACP, CPP-ACFP ou uma mistura de am15 bos. A composição oral dessa invenção que contém os agentes acima mencionados pode ser preparada e utilizada de diversas formas aplicáveis à boca tais como dentifrício, incluindo pastas dentais, pós para uso dental e dentifrícios líquidos, lavadores de uso bucal, pastilhas, gomas de mascar, pastas dentais, cremes de massagem gengival, comprimidos para gargarejo, produtos lácteos e outros gêneros alimentícios. A composição oral de acordo com essa invenção pode adicionalmente incluir ingredientes adicionais bem conhecidos dependendo do tipo e da forma de uma composição oral em partícu25 lar.

Em certas formas preferidas a composição oral pode ter caráter substancialmente líquido, tal como lavador ou enxaguador de uso bucal. Em uma tal preparação, o veículo é tipicamente uma mistura de água-álcool que inclui desejávelmente um umectante como descrito adiante. Geralmente, a quantidade total de água em relação ac álcccl está na faixa de a partir de cerca de 1:1 a cerca de 20:1. A quantidade total da mistura água-álcool nesse tipo de preparação está tipicamente na faixa de a partir de cerca de 70 a cerca de 99.9% em peso da preparação. O álcool é tipicamente etanol ou isopropanol. 0 etanol é preferido.

O pH de tais preparações líquidas da invenção está geralmente na faixa de a partir de cerca de 5 a cerca de 9 e tipicamente de a partir de cerca de 5,0 to 7,0. O pH pode ser controlado com ácido (por ex., ácido fosfórico, ácido cítrico ou ácido benzóico) ou base (por ex., hidróxido de sódio) ou tamponado (como com citrato, benzoato, carbonato, ou bicarbonato de sódio, fosfato ácido dissódico, fosfato diácido de sódio, etc).

Em outras formas desejáveis dessa invenção, a composição de ACP ou ACFP estabilizado pode ter caráter substancialmente sólido ou pastoso, tal como um pó de uso dental, um comprimido dental ou uma pasta dental (creme dental ou dentifrício dental. O veículo de tais preparações sólidas ou pastosa contém geralmente materiais polidores aceitáveis para uso dental. Exemplos de materiais polidores são matafosfato de sódio, metafosfato de potássio insolúveis em água, trifosfato de cálcio, fosfato de cálcio desidratado, difosfato de cálcio anidro, pirofosfato de cálcio, ortofosfato de magnésio, fosfato de trimagnésio, carbonato de cálcio, alumina hidratada, alumina calcinada, silicato de alu-

mínio, silicato de zircônio, sílica, bentonina e misturas desses mencionados. Outros materiais polidores incluem partic alados de resinas ter^of ixas tais como melam ir. a, fe cólica, e uréia-formaldeídos, e poliepóxidos e poliésteres reti5 calados. Materiais polidores preferidos incluem sílica cristalina possuindo tamanhos de partícula de até cerca de 5 micra, um tamanho médio de partícula de até cerca de 1,1 mícron, e uma área de superfície de até cerca de 50.000 cm²/g, sílica gel ou sílica coloidal, e complexos amorfos de alumi10 no-silicato de metal alcalino.

Quando géis visualmente límpidos são empregados, um agente de polimento de sílica coloidal, tal como aqueles comercializados sob a marca comercial SYLOID como Syloid 72 e Syloid 74 ou sob a marca comercial SANTOCEL como Santocel

100, complexos alumino-silicato de metal alcalino são particularmente úteis uma vez que eles possuem índices refrativos próximos aos índices refrativos do sistema agente formador de gel-líquido (incluindo água e/ou umectante) comumente usados em dentifrícios.

’’ Muitos dos assim chamados materiais polidores insolúveis em água são de caráter não-iônico e também incluem pequenas quantidades de material solúvel. Desse modo, o metafosfato de sódio insolúvel pode ser formado em qualquer modo adequado, por exemplo, como ilustrado por Thorpe's Dic25 tionary of Applied Chemistry, Volume 9, 4^a Edição, pp., 510511. As formas de metafosfato insolúvel conhecidas como sal de Mandrell e sal de Kurrol são exemplos adicionais de materiais adequados. Esses sais metafosfato apresentam apenas

3) uma diminuta solubilidade em água, e portanto, são comumente referidos como metafosfatos insolúveis (IMP). Está presente nela uma quantidade menor de material fosfato insolúvel como impureza, usualmente um pequeno percenrual tal como 4% em peso. A quantidade do material fosfato solúvel, que é considerada incluir um trimetafosfato de sódio so91uvel no caso do matafosfato insolúvel, pode sr reduzida ou eliminada por lavagem com água se desejado. 0 metafosfato de metal alcalino insolúvel é tipicamente empregado na forma de pó de m ta10 manho de partícula tal que não mais que 1% do material seja maior que 37 micra.

O material polidor está geralmente presente nas composições sólidas ou pastosas em concentrações em peso de cerca de 10% até cerca de 99%. Preferivelmente, ele está presente em quantidades de a partir de cerca de 10% até cerca de 75% em pasta dental, e de a partir de cerca de 70% até cerca de 99% em pó de uso dental. Em pastas dentais, quando o material polidor é de natureza siliciosa, ele está geralmente presente em uma quantidade de cerca de 10-30% em peso.

Outros materiais polidores estão tipicamente presentes em quantidade de cerca de 30-75% em peso.

Em uma pasta de uso dental, o veículo líquido pode compreender água e umectante tipicamente em uma quantidade que varia de a partir de cerca de 10% até cerca de 80% em peso da preparação. Glicerina, propileno glicol, sorbitol e polipropileno glicol exemplificam umectantes/veículos adequados. Também vantajoso são misturas líquidas de água, glicerina, e sorbitol. Em géis límpidos onde o índice refrativo é uma consideração importante, cerca de 2,5 - 30% p/p de água, de o a cerca de 70% p/p de glicerina e cerca de 20-80% p/p de sorbitol são preferivelmente empregados.

Pastas, cremes e géis de uso dental contêm tipica5 mente um espessante sintético ou agente formador de gel em proporções de cerca de 0,1 até cerca de 10, preferivelmente de cerca de 0,5 até cerca de 5% p/p. Um espessante adequado é a hectorita sintética, uma argila de complexo silicato de metal alcalino magnésio coloidal dispositivo, por exemplo, como Laponita (por ex., CP, SP 2002, D) comercializada por Laporte Industries, Limited. A Laponita D é, aproximadamente 58% em peso de SiO₂, 25,40% em peso MgO, 3,05% em peso Na₂O, 0,98% em peso Li₂O, e alguma água e materiais traço. Seu peso especifico é de 2,53 e ela possui uma densidade mássica aparente de 1,0 g/mL a 8% de umidade.

Outros espessantes adequados incluem musgo irlandês, um pouco de carragena, goma tragacanto, amido, polivinilpirrolidona, hidroxietilpropilcelulose, hidroxibutil metil celulose, hidroxietil celulose, hidroxietil celulose (por ex., dispositivo como Natrosol), carboximetil celulose sódica, e silica coloidal tal como Syloid finamente triturada (por ex., 244). Agentes solubilizantes podem ser também incluídos tais como polióis umectantes tais como propileno glicol, dipropileno glicol, hexileno glicol, celossolves

5 tais como metil celossolve e etil celossolve, óleos e ceras vegetais contendo pelo menos cerca de 12 carbonos em uma cadeia linear tal como óleo de oliva, óleo de mamona, e vaselina e ésteres tais como acetato de amila, acetato de etila, e benzoato de benzila.

Será entendido que, como é convencional, as preparações de uso oral serão usualmente comerciali zadas cn de outro modo distribuídas em embalagens rotuladas de modo ade5 quado. Desse modo, um recipiente de enxágue de uso oral irá possuir um rótulo que a descreve, em substância, como um enxaguado r de uso bucal, ou lavador de uso bucal e possuindo instruções para seu uso; e uma pasta dental, creme ou gel irão estar usualmente em um tubo que possa ser comprimido, tipicamente de alumínio, revestido com chumbo ou plástico, ou outro que se possa comprimir, bomba ou dispensador pressurizado para dosar os conteúdos, possuindo um rótulo que o descreve, em substância, como uma pasta de uso dental, gel ou creme dental.

Agentes orgânicos ativos de superfície podem ser usados nas composições da presente invenção para conseguir aumentada ação profilática, ajudar em conseguir dispersão ampla e completa dc agente ativo ao longo de toda a extensão da cavidade oral, e tornar as presentes composições cosmeti20 camente mais aceitáveis. O material orgânico ativo de superfície é preferivelmente aniônico, não-iònico ou anfótero em sua natureza e preferivelmente não interagem com o ingrediente ativo. É preferido empregar como o agente ativo de superfície um material com poder detergente que confira à com25 posição propriedades detergentes e de formação de espuma. Exemplos adequados de tensoativos aniônicos são sais solúveis em água de monosulfatos de monoglicerídeo de ácidos graxos solúveis em água, tais como o sal sódico de monogli20 cerideo monosulfatado de ácidos graxos de óleo de coco hidrogenado, sul fatos de alquilas superiores tais como lauril sulfate de sódio, alquila^il sulfonatos tais cone dodecil— benzeno sulfonato de sódio, alquilsulfoacetatos superiores, ésteres de ácidos graxos superiores de 1,2-diidroxi propano sulfonato, e acilamidas alifáticas superiores substancialmente saturadas de compostos ácido carboxílico alifáticos inferiores, tais como aqueles possuindo de 12 a 16 carbonos nos ácido graxo, radicais alquila ou acila, e semelhantes.

Exemplos das últimas amidas mencionadas são N-lauroil sarcosina, e sais etanolamina de N-lauroil, N-miristoil, ou Npalmitoil sarcosina que deverão ser substancialmente livres de sabão ou de material ácido graxo superior similar. O uso desses compostos sarconita nas composições orais da presente invenção é particularmente vantajoso uma vez que esses materiais apresentam um efeito notadamente prolongado na inibição da formação de ácido na cavidade oral devido ao colapso dos carboidratos em adição a exercer alguma redução na solubilidade do esmalte dental em soluções acidas. Exemplos de tensoativos não-iônicos solúveis em água para uso são produtos de condensação de óxido de etileno com vários compostos contendo hidrogênio reativo com eles possuindo cadeias hidrofóbicas longas (por ex., cadeias alifáticas de cerca de 12 a 20 átomos de carbono), cujos produtos de condensação (etoxâmeros) contêm frações polioxietileno hidrofílicas, tais como produtos de condensação de poli(óxido de etileno) com ácidos graxos, álcoois graxos, amidas graxas, álcoois poliídricos (por e.x, monoestearato de sorbitan) e óxido de

polipropileno (por ex., materiais Plurônicos).

agente ativo de superfície está presente tipicamente em uma quantidade de cerca de 0,1-51 em peso. É de se notar que o agente ativo de superfície pode ajudar na disso5 íução do agente ativo da invenção e desse modo reduzir a quantidade necessária do umectante solubilizante.

Diversos outros materiais podem ser incorporados nas preparações orais dessa invenção tais como agentes de branqueamento, conservantes, silicones, compostos de cloro10 fila e/ou material amoniacal tal como uréia, fosfato de diamônio, e misturas desses mencionados. Esses auxiliares, onde presentes, são incorporados nas preparações em quantidades que não influenciem de modo adverso as propriedades e características desejadas.

Qualquer material aromatizante ou adoçante adequado pode ser também empregado. Exemplos de constituintes aromatizantes adequados são óleos aromatizantes, por ex., óleo de hortelã, menta, gaultéria, sassafrás, cravo da índia, sálvia, eucalipto, manjerona, canela, limão, e laranja, e “salicilato de metila. Agentes adoçantes adequados incluem sacarose, lactose, maltose, sorbitol, xilitol, ciclamato de sódio, perilartina, AMP (aspartil fenil alanina, éster metílico) , sacarina, e semelhantes. De modo adequado, agentes aromatizantes e adoçantes podem compreender cada um de 0,1% a 5% ou mais da preparação.

A invenção também proporciona uma composição ACP ou ACFP como descrito anteriormente incluindo adicionalmente um agente rompedor de proteína. Em uma modalidade, o agente rompedor de proteína é um clareador. Em uma modalidade preferida o clareador é NaOCl.

As composições dessa invenção podem estar também incorporadas em pastilhas, ou em gomas de mascar ou em ou5 tros produtcs, por ex. , mediante agitação numa base gomosa aquecida ou revestindo a superfície externa de uma base gomosa, ilustrativo dos quais são gelatinas, látex de borracha, resinas vinilita, etc., desejavelmente com plastificantes ou amaciantes convencionais, açúcar ou outros adoçantes ou tais como glicose, sorbitol e semelhantes.

Em um aspecto adicional, a invenção proporcionar composições incluindo composições farmacêuticas compreendendo qualquer dos complexos ADFP e/ou ACP como descritos acima juntamente com um agente rompedor de proteína e um veículo farmaceuticamente aceitável. Tais composições podem ser selecionadas a partir do grupo que consiste de composições dentais, anticariogênicas e composições terapêuticas. Composições dentais ou composições terapêuticas podem estar na forma de um gel, líquido, sólido, pó, creme ou pastilha. As composições terapêuticas podem estar também na forma de comprimidos ou cápsulas. Em uma modalidade, os complexos ACP e/ou ACFP são substância, os únicos componentes remineralizantes ativos de uma tal composição. Por exemplo, uma formulação de creme pode ser empregada contendo: água; glicerol;

CPP-ACP; D-sorbitol; dióxido de silício; carboximetildelulose sódica (CMC-Na); propileno glicol; dióxido de titânio; xilitol; ácido fosfórico; goma guar; óxido de zinco; sacarina sódica; p-hidroxibenzoato de etila; óxido de magnésio; p-

hidroxibenzoato de butila e p-hidroxibenzoato de propila.

A invenção adicionalmente inclui uma formulação descrita acima provida j untamente com instruções para sua utilização para tratar ou prevenir qualquer de uma ou mais caries dentais ou decadência dental, erosão dental e fluorose.

Em uma modalidade, os componentes ativos da composição consistem essencialmente do agente rompedor de proteína e ACP e/ou ACFP estabilizados. É acreditado, sem estar limitado por qualquer teoria ou modo de ação, que o ACP e/ou

ACFP estabilizado e o agente rompedor de proteína são centrais ao efeito terapêutico ou preventivo das modalidades da invenção apresentadas acima, e desse modo modalidades consistindo essencialmente daqueles componentes (com veículos, excipientes e semelhantes como requerido) estão inclusos no escopo da invenção.

A invenção também está relacionada a um kit para o tratamento ou a prevenção de uma ou mais de cáries dentais, fluorose, e erosão dental incluindo (a) um agente rompedor de proteína e (b) um complexo CPP-ACP ou CPP-ACFP em um veí20 culo farmaceuticamente aceitável. De modo desejável, o kit também inclui instruções para a sua utilização para a mineralização de uma superfície dental em um paciente em necessidade de tal tratamento. Em uma modalidade, o agente e o complexo estão presentes em quantidades adequadas para o tratamento de um paciente.

Em um aspecto adicional, é provido um método para tratar ou prevenir um ou mais de cada um de cáries dentais, decadência dental, erosão dental e fluorose, compreendendo

3/ as etapas de administrar um agente rompedor de proteína aos dentes de um indivíduo seguido pela administração de um complexo ou compos i ção ACP ou ACFP. A administração· tópica do complexo é preferida. 0 método inclui preferivelmente a ad5 ministração do complexo em uma formulação como descrito acima.

Em um aspecto adicional é provido o uso de um agente rompedor de proteína na fabricação de uma primeira composição e uso do fosfato de cálcio amorfo estabilizado (ACP) ou fosfato fluoreto de cálcio amorfo (ACFP) em uma fa10 bricação de uma segunda composição, a primeira e segunda composições sendo usadas para o tratamento e/ou prevenção de um ou mais de cáries dentais, decadência dental, erosão dental e fluorose, onde a primeira composição é aplicada a uma superfície dental antes da segunda composição.

Em um aspecto adicional é provido uma primeira composição que inclui um agente rompedor de proteína e uma segunda composição que inclui fosfato de cálcio amorfo (ACP) estabilizado ou fosfato de fluoreto de cá leio amorfo (ACFP) estabilizado para o tratamento e/ou prevenção de um ou mais ' de cáries dentais, decadência dental, erosão dental e fluorose, onde a primeira composição onde a primeira composição é aplicada a uma superfície dental antes da segunda composição.

Será claramente entendido que, embora essa especificação se refira especifícamente a aplicações em humanos, a invenção é também útil para propósitos veterinários. Desse modo, em todos os aspectos a invenção é útil para animais domésticos tais como gado, ovelhas, cavalos, e aves; para animais de companhia tais como gatos e cães; e para animais

de zôo.

A invenção será agora adicionalmente descrita >m xemplos 'vão limitantes apresentados guir.

Um exemplo de uma composição minerali zante é uma composição que compreende os seguintes (apresentados em ordem decrescente de proporção):

Água

Glicerol

CPP-ACP

D-sorbitol

Dióxido de silício

Carboximetilcelulose sódica (CMC-Na)

Propileno glicol

Dióxido de titânio

Xilitol

Ácido fosfórico Goma guar Óxido de zinco

Sacarina sódica p-hidroxibenzoato de etila óxido de magnésio p-hidroxibenzoato de butila p-hidroxibenzoato de propila

Uma tal composição está disponível da GC Corporation sob o nome Tooth Mouse™. Isto é adequado para uso após um agente de ruptura de proteína, e está na forma de uma pasta ou creme para facilitar sua retenção sobre os dentes por um período adequado. De modo alternativo, essa composição mineralizante pode conter um agente rompedor de proteína, tal como hipoclorito de sódio.

A eficácia da invenção pode ser demonstrada como a seguir.

Sete dentes pré-molares com FLE (índice de Thylstrup Fejerskov, TF=3) foram selecionados a partir de dentes extraídos por motivos ortodônticos de pacientes saudáveis com idade de 10-28 anos no Royal Dental Hospital de Melbour10 ne, Austrália. O consentimento informado do paciente foi obtido quanto aos dentes extraídos e o protocolo de estudo foi aprovado pelo Comitê Ético de Pesquisa Humana da Universidade de Melbourne. Todas as amostras foram debridadas do tecido mole aderente e armazenadas em solução 18% p/v de acetato de formalina na temperatura ambiente.

Os dentes foram limpos com um uma copo emborrachado e pedra pôme e enxaguados em água duplamente deionizada (DDW) (Fejerskov e outros, 1988). As coroas anatômicas foram secionadas das raízes utilizando lâmina adiamantada resfria20 da com água. Cada coroa foi secionada para prover um par de blocos de esmalte contendo cada um, um FLE. Uma janela de 4x4 rmn² foi criada sobre cada lesão mediante colocar uma peça retangular de Parafilme© (American National Can, Chicago,

III., USA.) sobre a lesão e cobrindo o esmalte circundante com verniz para unhas (Revlon™, New York, USA) . O parafilme foi em seguida cuidadosamente removido para revelar a janela com lesão no esmalte a qual foi dividida em metades como janelas controle e de teste. A janela controle foi recoberta com verniz para unhas. As duas lesões de cada amostra foram consignadas randomícamente a um dos grupos de remíneralização; Grupo I — tratamento com 5% ρ/ν CPP—ACFP e o Grupo II — tratamento com 5% p/v CPP-ACFP imediatamente em seguida do pré-condicionamento com 5,25% NaOCl.

CPP-ACFP foi obtido da Recaldent Pty Ltd (Melbourne, Australia) e continha 47,6% p/p CPP, 15,7% p/p Ca²⁺, 22, 9% p/p PO₄ ³” e 1, 2% p/p F”. 0 CPP-ACFP foi dissolvido em água destilada deionizada a 5% p/v e ajustado para pH 7,0 com HCl. Para o primeiro grupo, cada amostra foi colocada em 2 mL de solução 5% p/v, CPP-ACFP em um pequeno frasco plástico a 37 °C. A solução CPP-ACFP era trocada diariamente durante 10 dias. Para o segundo grupo, cada amostra foi colocada em solução 5,25% NaOCl por 20 minutos, enxaguada e em seguida colocada em 2 mL de 5% p/v CPP-ACFP em um frasco plástico de 5 mL a 37 °C. A solução CPP-ACFP era trocada diariamente por 10 dias.

Um medidor Chroma (Minolta ChromaMeter CR241, Minolta, Japan) foi usado para registrar a refletância de superfície. A medição da refletancia de superfície foi estabelecida em um espaço colorido L*a*b* pela Commission de L'Eclairage em 1978, e as medições estão relacionadas com a percepção de cores pelos humanos em três dimensões de cor (Commision Internationale de L’Eclaige, 1978). Os valores L* representam gradientes de cor desde o branco até o preto, os valores a* representam gradientes de cores desde o verde até o vermelho, e os valores b* representam gradientes e cor desde o azul até o amarelo (Commision Internationale de L'E28 claige, 1978). Apenas as medições do valor L* foram usadas nesse estudo com outras cores possuindo uma leitura maior, e cores mas escuras uma leitura inferior. Para assegurar uma posição reproduzível das amostras no Chroma MEter, um molde em cera para cada amostra foi preparado e armazenado. Todas as amostras foram secadas ao ar com uma seringa dental triplex por 60s antes de cada medição. As amostras individuais foram reposicionadas dez vezes tanto antes e após o tratamento, e os valores L* da refletância foram registrados.

Cada amostra foi removida da solução mineralizante e enxaguada em DDW por 60s e secada com papel mata-borrão. 0 verniz de unha na janela de controle foi removido suavemente com acetona. As j anelas controle e de teste foram então separadas por corte ao longo da linha de meio entre as janelas. As duas meias placas foram então colocadas com as janelas de lesão paralelas e encaixadas em resina metacrilado de cura a frio (Paladur, Heraus Kulzer, Alemanha). As duas meias partes esmaltadas emparelhadas foram então secionadas, e submetidas a análises de microradiografia e microdensitometria para determinar exatamente o conteúdo mineral como descrito por Shen e outros (2001).

Uma área livre de defeitos próxima da linha intermediária de cada imagem microradiográf ica de cada lesão (controle e teste) foi escolhida e feita a varredura seis vezes (Shen e outros, 2001). Cada varredura compreendeu 200 leituras, tomadas a partir da superfície do esmalte até a região intermediária do esmalte para incluir a lesão fluorótica total. A lesão de teste (tratada por CPP-ACFP) foi var-

rida exatamente na mesma profundidade como a da lesão de controle (não tratada). Os valores cinza obtidos a partir de cada varredura foram convertidos à espessura equivalente do alumínio (tA) usando a imagem da borda de alumínio incluída com cada seção (Shen e outros, 2001). Utilizando a fórmula de Angmar e outros (1963), o volume percentual de mineral foi obtido para cada leitura como a seguir: V=(52,77(tA)~ 4,54)/tS. Onde: V=volume de mineral como uma porcentagem; tA= a espessura relativa do alumínio obtida a partir do va10 lor cinza varrido; e tS= espessura da seção (80 pm).

A partir do perfil densitométrico de [(vol% min versus profundidade da lesão (mm)] para cada lesão os valores DZ foram calculados usando integração trapezoidal (Reynolds, 1997). A diferença entre a área sob o perfil do es15 malte fluorótico não tratado na janela de controle com esmalte normal adjacente foi designado DZf, e a diferença entre a área sob o esmalte fluorótico tratado com DPP-ACFP na janela de teste e esmalte normal adjacente foi designada DZr. Porcentagem de mineralização (%M) da lesão fluorótica foi portanto (1-DZr/(DZf)xlOO (Reynolds, 1997) .

Em seguida da microradiografia as seções contendo ambos FLE controle e mineralizado foram submetidos a análise de Energia Dispersiva por Raio-X (EDAX) como descrito anteriormente (Reynolds, 1997).

Os valores médios de L* foram comparados usando um modo por análise de classificação da variância (ANOVA) com uma comparação múltipla de Scheffe. Os valores do %M médio foram também comparados usando ANOVA de uma via. A média L*

completa e os valores do %M foram analisados usando um teste-t de Student de dados emparelhados.

Os valores de L* das lesões de esmalte fiuorctieo não tratado variarem de 79,1 a 87,8 com um valor médio de 5 83,6 ±3,6 (tabela 1). 0 tratamento com 5% CPP-ACFP reduziu significativamente o valor L* para 74,6 ± 4,1, que não foi significativamente diferente do esmalte normal (Tabela 1). 0 pré-condicionamento com NaOCl seguido por tratamento com 5%

CPP-ACFP reduziu significativamente o valor de L* para 72,6 ± 5,6, gue foi também não significativamente diferente do esmalte normal (Tabela 1). Não houve diferença significativa nos valores L* para os dois grupos de pós-tratamento (CPPACFP e NaOCl/CPP-ACFP). A aparência do esmalte de superfície de ambos os grupos de tratamento melhorou substancialmente com ambos apresentando a aparência de esmalte normal, translúcido.

A diferença entre o conteúdo mineral do esmalte sadio e aquele das lesões de pré-tratamento (DZf) variou de 426 a 12.048 vol% min.mm (Tabela 2). Não foi encontrada cor20 relação entre a refletância de superfície (L*) e DZf do FLE não tratado. O tratamento com 5% CPP-ACFP sozinho aumentou substancialmente o conteúdo mineral das lesões fluoróticas para restaurar 32,7% a 55,5% do mineral perdido, com um valor médio de 44,8 ± 10,6% (Tabela 2). A restauração 100% do mineral perdido poderia converter a lesão completa a esmalte sadio com respeito ao conteúdo mineral. O précondicionamento do esmalte com NaOCl antes do tratamento com

CPP-ACFP aumentou a captura mineral de 73.6% a 92,8% do mi-

neral perdido com um valor médio de SO, 1 ± 7,8'% (Tabela 2) . A análise da energia dispersiva de raios-X da lesão mineralízada das seções transversas confirmou que o mineral formado pelo tratamento com CPP-ACFP era apatita contendo flúor.

Tabela 1

Efeito de 5% CPP-ACFP com e sem précondicionamento dom NaOCl sobre a refletância da cor (L*) de amostras de esmalte fluorótico

Amostras esmalte fluorótico	Valores (L*)	ie refletância de cor
I	II	III	IV	V	VI	VII	Média geral
Pré-	82,9	85,5	84,3	82,5	87,8	79,1	83,0	83,6 ±
tratamento	± 0,9^â	± 1,8	± 0,4	± 1,3	±0,6	± 0,9	± 0,6	3,6
Tratamento	74,1	72,0	78,2	76,1	79,5	69,7	72,3	74,6 ±
pós-CPP-	± 0,7^b	± 0,5	± 0,4	± 0,7	± 0,8	± 1,5	± 1,7	4,l^c
ACFP
Tratamento	69,2	72,3	76,9	72,2	78,5	61,6	77,4	72,6 ±
pós-	+ l,0^b	± 1Λ	± 1,4	± 1,3	± 1,4	± 1,2	± 1,0	5,6^C
NaOCl/CPP-
ACFP

a n = 20 b n = 10 c Valor médio de pós-tratamento é significativamente diferente do valor médio do prétratamento (teste-t Student emparelhado), ρ,Ο,ΟΙ) mas não significativamente diferente do esmalte normal 71,6 ± 3,1.

condi

Tabela 2

Efeito de 5% CPP-ACFP com ;nament

NaOCl :cr e sem préerai de esmalte fluorótico

Tratamento	Amostras
	I	II	III	IV	V	VI	VII	Média geral
Lesão fluo-	ΔΖί	2331	-^c	3869	2468	2706 +	3238	-^c
rótica na-	(vol%m	±		+	±	103^a	+
tural tra-	in. pm)	352^a		, 70^a	323^a		194^a
tada com	ΔΖί	1203	-^c	1723	1618	1270 ±	2178	_c
CPP-ACFP	(vol%m	+		±	+	596^a	+
	in.pm)	241^a		262^a	427^a		216^a
	%M^b	48,4	_c	55,5	34,5	53,1	32,7		44,8
									±
									10,6
Lesão fluo-	ΔΖί	2199	6501	_c	1181	2461 +	_c	12048
rótica na-	(vol%m	+	+		+	213^a		+ 512^a
tural tra-	in. μπι)	266^a	441^a		261^a
tada com	ΔΖί	581	471		211	552 ±	-^c	3087
NaOCl/CPP-	(vol%m	±	+		±	203^a		+ 723^a
ACFP	in.pm)	230^a	285^a		137^a
	%M^b	73,6	92,8		82,1	77,6	_c	74,4	80,1
									± 7,8

A Média ± SD (n=6)

B %M porcentagem de mineralização (1AZr/AZf)xlOO

C Perda de amostra durante o processamento

Em clínica, como um exemplo de um paciente com necessidade de tratamento de remineralização do esmalte dentar, o paciente é tratado usando as etapas de:

1. Pré-tratar a área de esmalte com necessidade de tratamento, isolada usando uma barragem de borracha com uma solução 5% de NaOCl por 5 minutos.

2. Remover a solução de NaOCl da área com um chumaço de algodão úmido.

3. Aplicar Aplicar creme topico contendo CPP-ACP 10 Tooth Mousse™ (GC Corporation) à superfície do esmalte imediatamente após 5 minutos e em seguida o paciente também aplica a Tooth Mouse™ noturnamente sem enxágue por quatro semanas.

Será entendido que a invenção revelada e definida 15 nessa especificação se estende a todas as alternativas e combinações de duas ou mais das caracter!sticas individuais mencionadas ou evidenciadas a partir do texto ou dos desenhos. Todas essas diferentes combinações constituem diversos aspectos alternativos da invenção.

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Uso de um agente rompedor de proteína na fabricação de uma primeira composição e uso do fosfato de cálcio amorfo (ACP) estabilizado ou fosfato fluoreto de cálcio amorfo (ACFP) na fabricação de uma segunda composição, a primeira e segunda composições sendo usadas para mineralizar uma superfície ou sub-superfície dental, CARACTERIZADO pelo fato de que a primeira composição é aplicada à superfície ou sub-superfície dental antes da segunda composição.
2. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que malte dental.
3. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que a são no esmalte dental.
4. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que é dentais, erosão dental ou fluoro
5. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que o deo estabilizado.
6. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que peptídeo caseína.
7. Uso, de acordo CARACTERIZADO pelo fato de que <

se básica.
8. Uso, de acordo com a reivindicação 1, a superfície dental é o escom a reivindicação 1, superfície dental é uma lecom a reivindicação 3, i lesão é causada por cáries se.

com a reivindicação 1, ACP e/ou ACFP é fosfopeptícom a reivindicação 5, o fosfopeptídeo é um fosfocom a reivindicação 1,

ACP ou ACFP está em uma facom a reivindicação 1,

CARACTERIZADO pelo fato de que o agente rompedor de proteína é selecionado a partir de um ou mais do grupo consistindo de um clareador, um detergente, um agente caotrópico, uma protease e uma misturas de proteases.
9. Uso, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que o clareador é hipoclorito de sódio ou um clareador peróxido de carbamida.
10. Uso de um agente rompedor de proteína na fabricação de uma primeira composição e uso de fosfato de cálcio amorfo (ACP) estabilizado ou fosfato fluoreto de cálcio amorfo (ACFP) na fabricação de uma segunda composição, a primeira e segunda composições sendo usadas para o tratamento e/ou prevenção de um ou mais de cáries dentais, decadência dental, erosão dental e fluorose, CARACTERIZADO pelo fato de que a primeira composição é aplicada à superfície dental antes da segunda composição.
11. Kit para o tratamento ou a prevenção de um ou mais de cáries dentais, fluorose e erosão dental, CARACTERIZADO pelo fato de que inclui (a) um agente rompedor de proteína e (b) um complexo CPP-ACP ou CPP-ACFP em um veículo farmaceuticamente aceitável.
12. Kit, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o ACP e/ou ACFP é fosfopeptídeo estabilizado.
13. Kit, de acordo com a reivindicação 12, CARACTERIZADO pelo fato de que o fosfopeptídeo é um fosfopeptídeo de caseína.
14. Kit, de acordo com a reivindicação 11,

CARACTERIZADO pelo fato de que o ACP ou ACFP está em uma fase básica.
15. Kit, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o agente rompedor de proteína

5 é selecionado a partir de um ou mais do grupo que consiste de um clareador, um detergente, um agente caotrópico, uma protease e uma misturas de proteases.
16. Kit, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o clareador é hipoclorito de

10 sódio ou um clareador de peróxido de carbamida.