BR112019015252A2

BR112019015252A2 - compostos

Info

Publication number: BR112019015252A2
Application number: BR112019015252A
Authority: BR
Inventors: Zhao Baowei; Ren Feng; Xing Weiqiang; Zhan Yang; Sang Yingxia
Original assignee: Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Priority date: 2017-01-25
Filing date: 2018-01-23
Publication date: 2020-04-14
Also published as: EP3573980A1; JP2020505459A; EP3573980A4; CN110248936A; CA3050023A1; US20190389850A1; WO2018137619A1

Abstract

a presente invenção refere-se a compostos novos que inibem a atividade da lrrk2 quinase, processos para sua preparação, para composições contendo os mesmos e seus usos no tratamento de ou prevenção de doenças associadas com ou caracterizadas pela atividade lrrk2 quinase, por exemplo, doença de parkinson, doença de alzheimer e esclerose lateral amiotrófica (als).

Description

COMPOSTOS

CAMPO DA INVENÇÃO [001 ]A presente invenção relaciona-se a novos compostos que inibem a atividade da LRRK2 quinase, processo para sua preparação, composições contendo a mesma e seus usos no tratamento de doenças associadas com ou caracterizadas pela atividade de LRRK2 quinase, por exemplo, doença de Parkinson, doença de Alzheimer e esclerose lateral amiotrófica (ALS).

ANTECEDENTE DA INVENÇÃO [002]Doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurodegenerativo caracterizado pela degeneração seletiva e morte celular de neurônios dopaminérgicos na região nigra substancial do cérebro. A doença de Parkinson foi geralmente considerada como esporádica e de etiologia desconhecida, mas, nos últimos 15 anos, tem havido um importante desenvolvimento da compreensão da base genética desta doença e mecanismos patogênicos associados. Uma área do desenvolvimento é a compreensão da proteína quinase rica em repetição de leucina 2 (LRRK2). Um número de mutações não-senso no gene LRRK2 foram fortemente ligados com doença de Parkinson dominante autossômica em estudos familiares (ver W02006068492 e W02006045392; Trinh e FarreR2013, Nature Reviews in Neurology 9: 445-454; Paisan-Ruiz et al., 2013, J. Parkinson’s Disease 3: 85-103). A mutação G2019S em LRRK2 é a mutação missense mais frequente e é associada com um fenótipo clínico que se assemelha intimamente a doença de Parkinson esporádica. A mutação de LRRK2 G2019S está também presente em aproximadamente 1,5% de casos de doença de Parkinson esporádica (ver Gilks et al., 2005, Lancet, 365: 415-416). Em adição às mutações de codificação patogênicas conhecidas em LRRK2, variantes adicionais de codificação de aminoácidos de LRRK2 foram identificadas e também estão associadas ao risco de desenvolver doença de Parkinson (ver Ross et al., 2011 Lancet Neurology 10: 898-908). Além

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2/154 disso, estudos de associação de amplo-genoma (GWAS) identificaram LRRK2 como um locus de susceptibilidade da doença de Parkinson, que indica que o LRRK2 também pode ser relevante para os casos de doença de Parkinson esporádica sem mutações que causam substituições de aminoácidos na proteína de LRRK2. (Ver Satake et al., 2009 Nature Genetics 41:1303-1307; Simon-Sanchez et al 2009 Nature Genetics 41: 1308-1312).

[003]LRRK2 é um membro da família de proteína ROCO e todos os membros desta família compartilham cinco domínios conservados. A mutação patogênica mais comum G2019S ocorre no domínio da quinase altamente conservada de LRRK2. Esta mutação confere um aumento na atividade de LRRK2 quinase em ensaios de enzima in vitro de proteínas LRRK2 recombinantes (ver Jaleel et al, 2007, Biochem J, 405: 307-317) e em proteínas LRRK2 purificadas a partir de células derivadas de pacientes G2019S PD (ver Dzamko et al, 2010 Biochem. J. 430: 405-413). Mutação patogênica de LRRK2 menos frequente que confere substituição de aminoácidos em um resíduo diferente, R1441, foi também mostrada elevar a atividade de LRRK2 quinase diminuindo a taxa de hidrólise de GTP pelo domínio de GTPase de LRRK2 (ver Guo et al., 2007 Exp Cell Res. 313: 3658-3670; West et al., 2007 Hum. Mol Gen. 16: 223-232). Além disso, a fosforilação de substratos fisiológicos de proteína Rab de LRRK2 mostrou ser aumentada por uma faixa de mutações patogênicas da doença de Parkinson de LRRK2 (ver Steger et al, 2016 eLife 5 e12813). Portanto, a evidência indica que as atividades quinase e GTPase de LRRK2 são importantes para a patogênese, e que o domínio de LRRK2 quinase pode regular a função LRRK2 global (veja Cookson, 2010 Nat. Rev. Neurosci. 11: 791-797).

[004]Há evidência para mostrar que a atividade aumentada de LRRK2 quinase está associada com a toxicidade neuronal em modelos de cultura celular (ver Smith et al, 2006 Nature Neuroscience 9: 1231-1233) e compostos inibidores de

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3/154 quinase protegem contra a morte celular mediada por LRRK2 (veja Lee et al, 2010 Nat. Med. 16: 998-1000). LRRK2 também foi reportado agir como um regulador negativo de depuração mediada por microglia de alfa-sinucleína (ver Maekawa et al, 2016 BMC Neuroscience 17:77), sugerindo uma utilidade possível de inibidores de LRRK2 na promoção da depuração de formas neurotóxicas de alfa-sinucleína no tratamento da doença de Parkinson.

[005]Células tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) derivadas de pacientes com doença de Parkinson de LRRK2 G2019S exibiram defeitos no aparecimento de neurito e suscetibilidade aumentada a rotenona, que pode ser melhorada pela correção genética da mutação G2019S ou tratamento de células com inibidores de molécula pequena de atividade de LRRK2 quinase (ver Reinhardt et al., 2013 Cell Stem Cell 12: 354-367). O dano de DNA mitocondrial foi reportado como um marcador molecular de neurônios de dopamina vulneráveis na substância nigra de espécimes de doença de Parkinson pós morte (ver Sanders et al. 2014 Neurobiol. Dis. 70: 214-223). Níveis aumentados de tais danos de DNA mitocondrial associados com mutação de G2019S de LRRK2 em iSPCs são bloqueados por correção genética da mutação G2019S (ver Sanders et al, 2014 Neurobiol. Dis. 62: 381 -386).

[006]Evidência adicional liga a função de LRRK2 e disfunção com vias autofagia-lisossomal (ver Manzoni e Lewis, 2013 Faseb J. 27:3234-3429). Proteínas LRRK2 conferem defeitos na autofagia mediada por chaperona que impactam negativamente a capacidade de células degradar alfa-sinucleína (Orenstein et al, 2013 Nature Neurosci. 16 394-406). Em outros modelos de células, os inibidores seletivos de LRRK2 foram mostrados estimular a macroautofagia (ver Manzoni et al, 2013 BBA Mol. Celi Res 1833: 2900-2910). Estes dados sugerem que inibidores de molécula pequena de atividade de LRRK2 quinase podem ter utilidade no tratamento de doenças caracterizadas por defeitos na proteostase celular que resultam de vias de degradação de autofagia/lisossomal aberrante incluindo formas de doença de

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Parkinson associada com mutações GBA (ver Swan and Saunders-Pullman 2013 Curr. Neurol. Neurosci Rep. 13: 368), outras alfa-sinucleinopatias, tauopatias, doença de Alzheimer (ver Li et al. 2010 Neurodegen. Dis. 7:265-271) e outras doenças neurodegenerativas (ver Nixon 2013 Nat. Med. 19: 983-997) e doença de Gaucher (ver Westbroek et al., 2011 Trends. Mol. Med. 17: 485-493). Como promotores de autofagia, inibidores de molécula pequena de LRRK2 quinase também podem ter utilidade no tratamento de outras doenças incluindo diabetes, obesidade, doença de neurônios motores, epilepsia e alguns cânceres (Ver Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730), doenças pulmonares tais como doença pulmonar obstrutiva crônica e fibrose pulmonar idiopática (ver Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303) e doenças autoimunes tais como lúpus eritematoso sistêmico (Ver Martinez et al., 2016 Nature 533: 115-119). Como promotores de processos autofágicos e fagocíticos, inibidores de molécula pequena de LRRK2 quinase podem também ter utilidade no aumento de respostas hospedeiras no tratamento de uma faixa de infecções bacterianas intracelulares, infecções parasíticas e infecções virais, incluindo doenças tais como tuberculose (Ver Rubinsztein et al., 2012 Nat.Rev. Drug Discovery 11: 709-730; Araya et al., 2013 Intern. Med. 52: 2295-2303; Gutierrez, Biochemical Society Conference; Leucine rich repeat kinase 2: ten years along the road to therapeutic intervention, Henley Business School, UK 12 July 2016), HIV, virus West Nile e virus chikungunya (ver Shoji-Kawata et al., 2013 Nature 494: 201-206). Os inibidores de LRRK2 podem ter utilidade no tratamento de tais doenças isoladamente, ou em combinação com fármacos que direcionam diretamente o agente infeccioso. Além disso, níveis significativamente elevados de mRNA de LRRK2 também foram observados em fibroblastos de pacientes com doença Niemann-Pick Tipo C (NPC) em comparação com fibroblastos de indivíduos normais, que indicam que a função LRRK2 aberrante pode desempenhar um papel em distúrbios lisossômicos (Ver Reddy et al., 2006

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PLOS One 1 (1):e19 doi: 10.1371/journal.pone.0000019 - Informações de Suporte Base de Dados S1). Esta observação sugere que os inibidores de LRRK2 podem ter utilidade para o tratamento de NPC.

[007]A forma mutante G2019S associada a DP de LRRK2 foi também relatada aumentar a fosforilação da Tau associada à tubulina (ver Kawakami et al., 2012 PLoS ONE 7: e30834, doi 10.1371), e modelos de doença foram propostos nos quais o LRRK2 atua a montante dos efeitos patogênicos de Tau e alfa-sinucleína (ver Taymans & Cookson, 2010, BioEssays 32: 227-235). Em suporte desta, a expressão de LRRK2 tem sido associada com agregação aumentada de Tau insolúvel, e fosforilação de Tau aumentada, em um modelo de camundongo transgênico (ver Bailey et al., 2013 Acta Neuropath. 126:809-827). A superexpressão da proteína mutante patogênica de DP LRRK2 R1441G é registrada para causar sintomas da doença de Parkinson e hiperfosforilação de Tau em modelos de camundongos transgênicos (ver Li, Y. et al 2009, Nature Neuroscience 12: 826-828). Portanto, estes dados sugerem que os inibidores de LRRK2 de atividade catalítica de quinase podem ser úteis para o tratamento de doenças de tauopatia caracterizadas por hiperfosforilação de Tau tal como doença por grão argirofílico, doença de Picks, degeneração corticobasal, paralisia supranuclear progressiva e demência frontotemporal hereditária e parkinsonismo ligados ao cromossoma 17 (FTDP-17) (ver Goedert, M e Jakes, R (2005) Biochemica et Biophysica Acta 1739, 240-250). Além disso, inibidores de LRRK2 podem ter utilidade no tratamento de outras doenças caracterizadas níveis diminuídos de dopamina tais como sintomas de retirada/relapso associados com vício de fármacos (ver Rothman et al. 2008, Prog. Brain Res, 172: 385).

[008]0utros estudos também demonstraram que a superexpressão da forma mutante G2019S de LRRK2 confere defeitos na proliferação e migração na de células neuroprogenitoras da zona subventricular (SVZ) em modelos de

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6/154 camundongos transgênicos (ver Winner et al, 2011 Neurobiol. Dis. 41: 706-716) e reduz o comprimento e ramificação de neuritos em modelos de cultura de células (ver Dachsel et al., 2010 Parkinsonism & Related Disorders 16: 650-655). Além disso, relatou-se que os agentes que promovem a proliferação e a migração de células neuroprogenitoras SVZ também melhoram os resultados neurológicos após a lesão isquêmica em modelos de roedores de acidente vascular cerebral (ver Zhang et al., 2010 J. Neurosci. Res. 88: 3275-3281). Estas descobertas sugerem que os compostos que inibem a atividade aberrante de LRRK2 podem ter utilidade para os tratamentos projetados para estimular a restauração das funções do SNC após a lesão neuronal, tal como acidente vascular isquêmico, lesão traumática cerebral, lesão de medula espinhal.

[009]Mutações em LRRK2 também foram identificadas que são clinicamente associadas com a transição de deterioração cognitiva branda (MCI) para a doença de Alzheimer (Ver W02007149798). Estes dados sugerem que os inibidores da atividade de LRRK2 quinase podem ser úteis para o tratamento de doenças tais como doença de Alzheimer, outras demências e distúrbios neurodegenerativos relacionados.

[010]Regulação aberrante de proteínas LRRK2 normais também é observada em alguns tecidos de doença e modelos de doença. Mecanismos normais de controle de translação de LRRK2 por miR-205 são perturbados em alguns casos de DP esporádicos, onde diminuições significativas em níveis de miR 205 em amostras de cérebro de DP concorrem com níveis elevados de proteína LRRK2 nestas amostras (Ver Cho et al., (2013) Hum. Mol. Gen. 22: 608-620). Portanto, inibidores de LRRK2 podem ser usados no tratamento de pacientes de DP esporádicos que têm níveis elevados de proteínas LRRK2 normais.

[011]Em um modelo experimental da doença de Parkinson em micos, uma elevação de mRNA de LRRK2 é observada de uma maneira que se correlaciona

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7/154 com o nível de discinesia Induzida por L-Dopa (Ver Hurley, M.J et al., 2007 Eur. J. Neurosci. 26: 171-177). Isto sugere que os inibidores de LRRK2 podem ter uma utilidade na melhora de tais discinesias.

[012]Níveis significativamente elevados de mRNA de LRRK2 foram reportados em amostras de biópsia muscular do paciente ALS (ver Shtilbans et al., 2011 Amyotrophic Lateral Sclerosis 12: 250-256). Sugere-se que elevados níveis de atividade de LRRK2 quinase podem ser uma característica de ALS. Portanto, esta observação indicou que o inibidor de LRRK2 pode ter utilidade para o tratamento de ALS.

[013]Há também evidência indicando que a atividade de LRRK2 quinase pode desempenhar um papel na mediação de respostas pró-inflamatórias microgliais (Ver Moehle et al., 2012, J. Neuroscience 32: 1602-1611). Esta observação sugere uma utilidade possível de inibidores de LRRK2 para o tratamento de mecanismos neuroinflamatórios aberrantes que contribuem para uma faixa de doenças neurodegenerativas, incluindo doença de Parkinson, doença de Alzheimer, esclerose múltipla, demência induzida por HIV, esclerose lateral amiotrófica, acidente vascular isquêmico, lesão traumática cerebral e lesão da medula espinhal. Alguma evidência também indica que o LRRK2 desempenha um papel na regulação da diferenciação progenitora neuronal in vitro (ver Milosevic, J. et al., 2009 Mol. Neurodegen. 4: 25). Esta evidência sugere que os inibidores de LRRK2 podem ter utilidade na produção de células progenitoras neuronais in vitro para a consequente aplicação terapêutica no tratamento baseado em células de distúrbios do SNC.

[014]Foi relatado que os pacientes de doença de Parkinson portando a mutação G2019S de LRRK2 exibem uma frequência aumentada de cânceres não de pele, incluindo câncer renal, mama, pulmão, próstata bem como leucemia mielógena aguda (AML). Uma vez que há evidência para mostrar que a mutação G2019S em LRRK2 aumenta a atividade catalítica do domínio de LRRK2 quinase, inibidores de

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8/154 molécula pequena de LRRK2 podem ter utilidade no tratamento de cânceres, por exemplo, câncer de rim, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de próstata (por exemplo, tumores sólidos) e câncer sanguíneo (ver. AML; Saunders-Pullman et al., 2010, Movement Disorders, 25:2536-2541; Inzelberg et al., 2012 Neurology 78: 781-786). A amplificação e superexpressão de LRRK2 também foram relatadas em carcinomas renais e da tireoide papilar, onde a co-operatividade entre o LRRK2 e o oncogene MET pode promover o crescimento e a sobrevivência da célula tumoral (ver Looyenga et al., 2011 PNAS 108: 1439-1444.) [015]Alguns estudos sugeriram que a associação genética de variantes comuns de LRRK2 com suscetibilidade a espondilite anquilosante (ver Danoy P, et al., 2010. PLoS Genet.; 6(12):e1001195; and leprosy infection. (See Zhang FR, et al. 2009, N Engl J Med. 361:2609-18.) Estas descobertas sugerem que os inibidores de LRRK2 podem ter utilidade no tratamento de espondilite anquilosante e infecção de lepra.

[016]Meta-análise de varreduras associadas com três genomas amplos para doença de Crohn identificada por um número de loci associados com a doença, incluindo o locus contendo o gene LRRK2 (ver Barrett et al., 2008, Nature Genetics, 40: 955-962). Também surgiu a evidência de que o LRRK2 é um gene alvo IFN-Y que pode estar envolvido nas vias de sinalização relevantes para a patogênese da doença de Crohn (ver Gardet et al., 2010, J. Immunology, 185: 5577-5585). Estas descobertas sugerem que inibidores de LRRK2 podem ter utilidade no tratamento de doença de Crohn.

[017]Como um gene alvo de IFN-Y, o LRRK2 pode também desempenhar um papel em mecanismos de células T que limitam outras doenças do sistema imunológico, tais como esclerose múltipla e artrite reumatóide. A utilidade potencial adicional dos inibidores de LRRK2 vem da descoberta relatada de que os linfócitos B constituem uma grande população de células de expressão de LRRK2 (ver

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Maekawa et al 2010, BBRC 392: 431-435). Isto sugere que os inibidores de LRRK2 podem ser eficazes no tratamento de doenças do sistema imunológico para o qual o esgotamento das células B é, ou pode ser, eficaz em doenças tais como linfomas, leucemias, esclerose múltipla (ver Ray et al, 2011 J. Immunol. 230:109), artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico, anemia hemolítica autoimune, aplasia pura de células vermelhas, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), síndrome de Evans, vasculite, distúrbios cutâneos bolhosos, diabetes melito tipo 1, síndrome de Sjogren, doença de Devic e miopatias inflamatórias (ver Engel et al, 2011 Pharmacol. Rev. 63: 127-156; Homam et al. 2010 J. Clin. Neuromuscular Disease 12: 91-102).

[018]WO2016036586 e WO2017012576 descrevem uma série de compostos descritos como inibidores de LRRK2 quinase e sua utilização no tratamento de doenças, incluindo, entre outras coisas, doença de Parkinson. Existem necessidades não satisfeitas para novos tratamentos que interrompem ou retardam a progressão da doença tanto em termos de motor (por exemplo, controle de disfunção de movimento, congelamento e desequilíbrio postural) e sintomas nãomotores (por exemplo, demência associada com DP), reduzindo a necessidade de utilização escalada de medicamentos sintomáticos e efeitos adversos de longo prazo associados de tratamento correntemente disponível (por exemplo, discinesia e flutuações de ligar/desligar) manutenção da independência por mais tempo.

RESUMO DA INVENÇÃO [019]A presente invenção proporciona, em um primeiro aspecto, compostos de Fórmula (I) e seus sais:

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R¹

Fórmula (I) em que

R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila C1-3 e cicloalquila C3;

R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo, CN, alquila Ci se haloalquila C1-3;

R³ é selecionado a partir do grupo que consiste de:

a) um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído com um, dois, três ou quatro substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, alquila C1-6, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de: halo, hidroxila, alcóxi Ci se ciclopropila, e alcoxila C1-6, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila e alcoxila C1-3, em que, quando 0 anel heterociclila de 4 a 6 membros ligado a N contém um átomo de nitrogênio substituível, 0 grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído por um, dois ou três

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11/154 substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, e alcoxila C1-3, e é ligado ao referido átomo de nitrogênio substituível;

b) NHR⁷; e

OR⁷;

R⁴ e R⁵são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, hidroxila e halo;

Xi é CR⁶ em que R⁶ é alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em hidroxila, halo e alcoxila C1-3;

R⁷ é selecionado independentemente a partir do grupo que consiste de:

cicloalquila C4-6, a qual cicloalquila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila Ci-3e alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila, e uma heterociclila de 4-6 membros contendo nitrogênio ou oxigênio opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila Ci se alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila; e

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3.

[020]Em um aspecto adicional da invenção, a invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[021 ]Um aspecto adicional da invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento ou prevenção da doença de Parkinson, doença de Alzheimer, ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

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12/154 [022]Os aspectos acima e outros da presente invenção serão agora descritos em maiores detalhes com relação à descrição e às metodologias aqui fornecidas. Deve-se apreciar que a invenção pode ser concretizada em formas diferentes e não deve ser interpretada como limitada às modalidades aqui apresentadas. Ao invés disso, estas modalidades são providas de modo que esta descrição seja detalhada e completa, e transmitirá plenamente o escopo da invenção para aqueles versados na técnica.

[023]A terminologia usada na descrição da invenção aqui é para o propósito de descrever modalidades particulares apenas e não se destina a ser limitativa da invenção. Conforme usado na descrição das modalidades da invenção e das reivindicações anexas, as formas singulares um, uma e o/a destinam-se a incluir as formas plurais igualmente, a menos que o contexto indique claramente indique de outra forma. Também, como usado aqui, e/ou refere-se a e abrange qualquer e todas as combinações possíveis de um ou mais dos itens listados associados. Será adicionalmente entendido que os termos compreende e/ou compreendendo, quando usados neste relatório descritivo, especifica a presença de características declaradas, números inteiros, etapas, operações, elementos e/ou componentes, mas não impede a presença ou adição de uma ou mais outras características, números inteiros, etapas, operações, elementos, componentes e/ou grupos dos mesmos.

[024]Geralmente, a nomenclatura usada aqui e os procedimentos de laboratório em química orgânica, química medicinal, biologia aqui descrita são aquelas bem conhecidas e comumente empregadas na técnica. A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos aqui usados têm, em geral, o mesmo significado como comumente entendido por um versado na técnica à qual esta descrição pertence. No caso de haver uma pluralidade de definições para

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13/154 um termo aqui usado, aqueles nesta seção prevalecem a menos que especificado de outra forma.

A. Definições [025]Conforme aqui utilizado, o termo alquila refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto saturado monovalente que tem um número especificado de átomos de carbono. Por exemplo, alquila C1-3 refere-se a um grupo alquila tendo de 1 a 3 átomos de carbono. Os grupos alquila podem ser simples ou ramificados. Em algumas modalidades, grupos alquila ramificados podem ter uma, duas ou três ramificações. Grupos alquila exemplares incluem, mas sem limitação, metila, etila, e propil (n-propila e isopropila).

[026]Para uso na presente invenção, alcóxi refere-se ao grupo -O-alquila. Por exemplo, grupos alcóxi C1-6 contêm de 1 a 6 átomos de carbono. Grupos alcóxi C1-3 contêm de 1 a 3 átomos de carbono. Grupos alcóxi exemplares incluem, mas não são limitados a, metóxi, etóxi, propóxi, butoxila, pentilóxi e hexilóxi.

[027]Conforme aqui utilizado, 0 termo cicloalquila refere-se a um anel hidrocarboneto monocíclico saturado que tem um número especificado de átomos de carbono. Por exemplo, cicloalquila C3-6 contém 3 a 6 átomos de carbono como átomos membros no anel. Exemplos de cicloalquila C3-6 incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e cicloexila.

[028]Como usado aqui, halogênio refere-se a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br), ou iodo (I). Halo refere-se aos radicais halogênio: flúor (-F), cloro (-CI), bromo (-Br) ou iodo (-I).

[029]Como usado aqui, haloalquila refere-se a um grupo alquila, como definido acima, tendo um ou mais átomos de halogênio selecionados de F, Cl, Br ou I, que são substituídos em qualquer ou todos os átomos de carbono do grupo alquila substituindo átomos de hidrogênio ligados aos átomos de carbono e que podem ser iguais ou diferentes. Por exemplo, haloalquila C1-3 refere-se a um grupo alquila C1-3

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14/154 substituído com um ou mais átomos de halogênio. Em algumas modalidades, haloalquila se refere a um grupo alquila substituído com um ou mais átomos de halogênio selecionados independentemente a partir F ou Cl. Grupos haloalquila exemplares incluem, mas não são limitados a, clorometila, bromoetila, trifluormetila, e diclorometila.

[030]Como usado aqui, o heterociclila ou anel heterociclila é um radical monovalente derivado pela remoção de um átomo de hidrogênio a partir de um anel monocíclico saturado, cujo anel consiste de átomos de carbono de anel e 1 ou mais heteroátomos de anel independentemente selecionados dentre nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em uma modalidade, o anel consiste em átomos de carbono de anel e 1 a 3 heteroátomos de anel selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Em uma modalidade, os heteroátomos de anel são selecionados independentemente a partir de nitrogênio ou oxigênio. O número de átomos de anel pode ser especificado. Por exemplo, uma heterociclila de 4-6 membros uma heterociclila como definido acima consistindo em 4-6 átomos de anel. O termo anel heterociclila de 4-6 membros ligados a N refere-se a um anel heterociclila de 4-6 membros como definido acima que contém pelo menos um átomo de anel de nitrogênio através do qual ele é ligado ao núcleo. Outros heteroátomos de anel (nitrogênio, oxigênio ou enxofre) podem adicionalmente estar presentes. O termo heterociclila contendo nitrogênio refere-se a um anel de heterociclila como definido acima que contém pelo menos um átomo de anel de nitrogênio. Outros heteroátomos de anel (nitrogênio, oxigênio ou enxofre) podem adicionalmente estar presentes. O termo heterociclila contendo oxigênio pode ser construído de maneira análoga. Exemplos de anéis heterocíclicos incluem, mas não estão limitados a, azetidinila, tetraidrofuranila (incluindo, por exemplo, tetraidrofurano-2-il e tetraidrofurano-3-il), pirrolidinila (incluindo, por exemplo,

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15/154 pirrolidin-1-il e pirrolidin-3-il), piperidinila (incluindo, por exemplo, piperidin-3-il e piperidin-4-il), morfolinila (incluindo, por exemplo, morfolin-2-il e morfolin-4-il).

[031]Como usado aqui, substituído em referência a um grupo indica que um ou mais átomos de hidrogênio ligados a um átomo de membros (por exemplo, átomo de carbono) dentro do grupo é substituído por um substituinteselecionado a partir do grupo de substituintes definidos. Deve ser entendido que o termo substituído inclui a provisão implícita de que tal substituição é de acordo com a valência permitida do átomo substituído e do substituinte e que a substituição resulta em um composto estável (isto é, um que não sofre espontaneamente transformação, tal como por rearranjo, ciclização, ou eliminação e que é suficientemente robusta para sobreviver ao isolamento de uma mistura de reação). Quando é estabelecido que um grupo pode conter um ou mais substituintes, um ou mais (conforme apropriado) átomo de membro dentro do grupo pode ser substituído. Além disso, um único átomo de elemento dentro do grupo pode ser substituído com mais do que um substituinte contanto que tal substituição seja de acordo com a valência permitida do átomo. Exemplos de anéis heterocíclicos substituídos incluem, mas não estão limitados a,

[032]Como usado aqui, opcionalmente substituído indica que um grupo particular pode ser não substituído, ou pode ser substituído como definido adicionalmente.

[033]Como aqui usado, o termo doença refere-se a qualquer alteração no estado do corpo ou de alguns dos órgãos, interrompendo ou perturbando o desempenho das funções e/ou causar sintomas tais como desconforto, disfunção,

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16/154 sofrimento, ou mesmo morte para a pessoa afligida ou aquelas em contato com uma pessoa. Uma doença também pode incluir uma indisposição, enfermidade, padecimento, doença, distúrbio, mal-estar, moléstia, queixa, interdisposição, e/ou afetação.

[034]Como usado aqui, tratar, tratando ou tratamento em referência a um meio de doença: (1) para melhorar a doença ou uma ou mais das manifestações biológicas da doença, (2) para interferir com (a) um ou mais pontos na cascata biológica que leva a ou é responsável pela doença ou (b) uma ou mais das manifestações biológicas da doença, (3) para aliviar um ou mais dos sintomas ou efeitos associados com a doença, (4) para retardar a progressão da doença ou uma ou mais das manifestações biológicas da doença, e/ou (5) para diminuir a probabilidade de severidade de uma doença ou manifestações biológicas da doença. Tratamento sintomático refere-se ao tratamento como referido no ponto (1), (3) e (5). O tratamento modificador de doenças refere-se ao tratamento definido no ponto (2) e (4).

[035]Como usado aqui, prevenir, prevenindo ou prevenção significa a administração profilática de um fármaco para diminuir a probabilidade do início de ou retardar o início de uma doença ou sua manifestação biológica.

[036]Como usado aqui, paciente significa um paciente mamífero (por exemplo, cachorro, gato, cavalo, vaca, ovelha, cabra, macaco etc), e pacientes humanos incluindo ambos, pacientes masculinos e femininos, e incluindo pacientes neonatal, criança, juvenil, adolescente, adulto e geriátrico, e ainda incluindo várias raças e etnicidades incluindo, mas não limitado a branco, preto, Asiático, índio Americano e Hispânico.

[037]Como usado aqui, sal(is) farmaceuticamente(s) aceitável(is) refere-se a sal(is) que retêm a atividade biológica desejada do composto em questão e apresentam efeitos toxicológicos mínimos indesejáveis. Estes sais

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17/154 farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação finais do composto, ou por reação separada do composto purificado em sua forma de ácido livre ou base livre com base ou ácido adequado, respectivamente.

[038]Como usado aqui, quantidade terapeuticamente efetiva em referência a um composto da invenção ou outro agente farmaceuticamente ativo significa uma quantidade do composto suficiente para tratar ou prevenir a doença do paciente, mas baixa o suficiente para evitar efeitos colaterais graves (em uma proporção razoável de benefício/risco) dentro do escopo do julgamento médico. Uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto variará com o composto particular escolhido (por exemplo, considerar a potência, eficácia e meia-vida do composto); a via de administração escolhida; a doença que está sendo tratada; a severidade da doença sendo tratada; a idade, o tamanho, o peso e a doença física do paciente que está sendo tratado; a história médica do paciente a ser tratado; a duração do tratamento; a natureza da terapia simultânea; o efeito terapêutico desejado; e fatores semelhantes, mas pode, no entanto, ser rotineiramente determinado pelo versado na técnica.

B. Compostos [039]Esta invenção proporciona, em um primeiro aspecto, um composto de Fórmula (I) e seus sais:

N ?N

N

Fórmula (I)

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18/154 em que

R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste em CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila C1-3 e cicloalquila C3;

R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo, CN, alquila Ci se haloalquila C1-3;

R³ é selecionado a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, alquila C1-6, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de: halo, hidroxila, alcóxi Ci se ciclopropila, e alcoxila C1-6, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila e alcoxila C1-3, em que, quando 0 anel heterociclila de 4 a 6 membros ligado a N contém um átomo de nitrogênio substituível, 0 grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, e alcoxila C1-3, e é ligado ao referido átomo de nitrogênio substituível;

NHR⁷;e

OR⁷;

R⁴ e R⁵ são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, hidroxila e halo;

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19/154

Xi é CR⁶ em que R⁶ é alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de hidroxila, halo e alcoxila C1-3;

R⁷ é selecionado independentemente a partir do grupo que consiste de:

cicloalquila C4-6, cuja cicloalquila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila Ci-3e alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou três grupos halo ou hidroxila, e uma heterociclila de 4-6 membros contendo nitrogênio ou oxigênio opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila Ci se alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila; e

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3.

[040]Em um aspecto adicional da invenção, a invenção provê uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[041 ]Em outro aspecto, a presente invenção provê compostos de Fórmula (ΙΑ) e seus sais:

Formula (l-A)

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20/154

Figura 1: Formula / Fórmula em que

R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste de CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila C1-3 e cicloalquila C3;

R³ é selecionado a partir do grupo que consiste de:

a) um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, [042]Alquila C1-6, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila, alcóxi Ci se ciclopropila, e alcoxila C1-6, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila e alcoxila C1-3, em que, quando 0 anel heterociclila de 4 a 6 membros ligado a N contém um átomo de nitrogênio substituível, 0 grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, e alcoxila C1-3, e é ligado ao referido átomo de nitrogênio substituível;

b) NHR⁷; e

c) OR⁷;

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21/154

Xi é CR⁶ em que R⁶ é alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de hidroxila, halo e alcoxila C1-3; e

R⁷ é selecionado independentemente a partir do grupo que consiste de:

Cicloalquila C4-6, a qual cicloalquila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila C1-3 e alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila, e uma heterociclila de 4-6 membros contendo nitrogênio ou oxigênio opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila C1-3 e alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila.

[043]Em outro aspecto da invenção, a invenção provê uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (l-A) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[044]Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo em alquila Ci se alcoxila C1-3. Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste em metila e metóxi. Em uma modalidade, R¹ é metila.

[045]Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo e alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, flúor, cloro e metil. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, cloro e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo que consiste em cloro e metil. Em uma modalidade, R² é metila.

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22/154 [046]Em uma modalidade R³ é um anel de heterociclila de 4-6 membros Nligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, alquila C1-6, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de: halo, hidroxila, alcóxi Ci-3e ciclopropila, e alcoxila C1-6, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3, em que, quando 0 anel heterociclila de 4 a 6 membros ligado a N contém um átomo de nitrogênio substituível, 0 grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila e alcoxila C1-3, com a condição de que 0 anel heterociclila de 4-6 membros é anexado ao referido átomo de nitrogênio substituível.

[047]Em uma modalidade R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros Nligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcóxi C1-3, e

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23/154 alcoxila C1-3, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3.

[048]Em uma modalidade R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros ligado a N selecionado a partir do grupo que consiste em morfolinila, azetidinila, pirrolidinila e piperazinila, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em:

halo, hidroxila, alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcóxi C1-3, e alcoxila C1-3, cujo grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3.

[049]Em uma modalidade R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros ligado a N selecionado a partir do grupo que consiste em morfolinila, azetidinila, pirrolidinila e piperazinila, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

hidroxila, alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcóxi C1-3, e alcoxila C1-3, cujo grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3.

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24/154 [050]Em uma modalidade R³ é um anel morfolinila N-ligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em:

hidroxila, alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcóxi C1-3, e alcoxila C1-3, cujo grupo alcóxi é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3.

[051 ]Em uma modalidade R³ é um anel morfolinila N-ligado opcionalmente substituído com um substituinte alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcóxi C1-3.

[052]Em uma modalidade, R³ é (2-hidroximetil)-morfolin-4-il.

[053]Em uma modalidade R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros ligado a N contendo um átomo de nitrogênio substituível, substituído com um anel heterociclila de 4-6 membros adicional que é opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3, e com a condição de que 0 anel heterociclila de 4-6 membros ainda é anexado ao referido átomo de nitrogênio substituível.

[054]Em uma modalidade R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros ligado a N contendo um átomo de nitrogênio substituível, substituído com um grupo oxetanila no referido átomo de nitrogênio substituível.

[055]Em uma modalidade, R⁴ e R⁵ são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de H e halo. Em uma modalidade, R⁴ e R⁵ são

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25/154 independentemente selecionados do grupo consistindo em H e flúor. Em uma modalidade, R⁴ e R⁵ são ambos hidrogênio.

[056]Em uma modalidade, R⁶ é alquila C1-3 não substituída. Em uma modalidade, R⁶ é metila.

[057]Em uma modalidade, a invenção provê um composto de Fórmula (I) ou um seu sal em que R¹, R², R⁴, R⁵, X1 e R⁶ são como definidos acima, e R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído por um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila , alquila C1-3 (cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: halo, hidroxila e alcoxila C1-3) e alcoxila C1-3 (cujo grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila e alcoxila C1-3). Nesta modalidade, R¹, R², R⁴, R⁵, Xi e R⁶ podem ser adicionalmente definidos como em qualquer uma das modalidades precedentes. Por exemplo, R¹ pode ser selecionado a partir do grupo consistindo em alquila Ci se alcoxila C1-3 e R² pode ser selecionado do grupo que consiste em H, halo e alquila C1-3.

[058]Em uma modalidade, 0 composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é um composto de qualquer um dos Exemplos 1 a 4, ou um sal do mesmo.

[059]Em uma modalidade, 0 composto de fórmula (I) ou um sal do mesmo é (4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-

4-il) morfolin-2-il) metanol ou )-(4-(2-metóxi-6-(5-metil)-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1-il)pirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol ou um sal de qualquer um destes compostos. Em uma modalidade, 0 composto de fórmula (I) (4(2-metil-6-(5-metil-6-(1 -(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-iI)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4

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26/154 il) morfolin-2-il) metanol ou (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin4-11)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol.

[060]Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é (R)-(4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol ou um sal do mesmo. Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) é (R)-(4-(2-metil-6-(5-metil-

6-(1 - (3-metiloxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol.

[061 ]Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é (S)-(4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol ou um sal do mesmo. Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) é (S)-(4-(2-metóxi-6-(5metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2il) metanol.

[062]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (ΙΑ) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo que é composto de qualquer um dos Exemplos A-1 a A-4 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (l-A) que é um composto de qualquer um dos Exemplos A-1 a A-4.

[063]A presente invenção fornece, em um aspecto adicional, compostos de Fórmula (l-B) e seus sais:

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Formula (I-B)

Figura 2: Formula / Fórmula em que

R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste em CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila Ci se cicloalquila C1-3;

RR¹, RR² e RR³ são independentemente hidrogênio ou alquila C1-3;

R8 é hidrogênio ou alquila C1-3; e n é 1 ou 2;

com a condição de que quando n é 1 e R⁸ é hidrogênio, RR², RR¹ e RR³ não são todos hidrogênio.

[064]Em outro aspecto da invenção, a invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (l-B) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[065]Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo em alquila C1-3 e alcóxi C1-3. Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste em metila ou metóxi. Em uma modalidade, R¹ é metila.

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28/154 [066]Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo e alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, flúor, cloro e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, cloro e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo que consiste em cloro e metila. Em uma modalidade, R² é metila.

[067]Em uma modalidade, n é 1 é hidrogênio. Em uma modalidade, n é hidrogênio.

[068]Em uma modalidade, n é 1 é hidrogênio. Em uma modalidade, n é hidrogênio.

[069]Em uma modalidade, n é 1 RR³ é metila. Em uma modalidade, n é 1 é metila.

ou 2, RR¹ é metila, RR² é hidrogênio, e RR³

1, RR¹ é metila, RR² é hidrogênio, e RR³ é ou 2, RR¹ é hidrogênio, RR² é metila, e RR³

1, RR¹ é hidrogênio, RR² é metila, e RR³ é ou 2, RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, e , RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, e RR³ [070]Em uma modalidade, n é 2 e RR¹, RR² e RR³ são hidrogênio.

[071 ]Em uma modalidade, R⁸ é hidrogênio ou metila. Em uma modalidade, R⁸ é hidrogênio.

[072]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (IB) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em que n é 1. Nesta modalidade, R¹, R², RR², RR¹, RR³ e R⁸ podem ser adicionalmente definidos como em qualquer uma das modalidades precedentes. Por exemplo, R² pode ser metila.

[073]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (IB) selecionado de:

(6-Metil-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol;

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29/154 (5-Meti l-4-(2-meti l-6-(5-meti 1-6-( 1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol;

2-(4-(2-Metil-6-(5-metil-6-(1 - (oxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin -2-il) etanol;

(4-(2-Metóxi-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il) metanol;

(4-(2-Metóxi-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)) pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)-3-metilmorfolin-2-il) metanol;

(4-(2-Metil-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol;

(4-(2-Metóxi-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il)piperidi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol;

ou urn sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[074]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (IB) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo que é composto de qualquer um dos Exemplos B-1 a B-28 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (l-B) que é um composto de qualquer um dos Exemplos B-1 a B-28.

[075]A presente invenção fornece ainda compostos de Fórmula (l-C) e seus sais:

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Formula (l-C)

Figura 3: Formula / Fórmula em que

R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo, CN, alquila C1-3 e haloalquila C1-3;

R³ é hidrogênio ou hidroxila;

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3;

RR¹, RR² e RR³ são independentemente hidrogênio ou alquila C1-3;

RR⁴ é hidrogênio ou hidroxila; e n é 1 ou 2.

[076]Em outro aspecto da invenção, a invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (l-C) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

[077]Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo em alquila Ci se alcoxila C1-3. Em uma modalidade, R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste em metila ou metóxi. Em uma modalidade, R¹ é metila.

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31/154 [078]Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo e alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em alquila C1-3. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, halo e metila. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, flúor, cloro e metil. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo consistindo em H, cloro e metil. Em uma modalidade, R² é selecionado a partir do grupo que consiste em cloro e metil. Em uma modalidade, R²é metila.

[079]Em uma modalidade, RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, RR³ é hidrogênio, e R⁸ é hidrogênio [080]Em uma modalidade, RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, RR³ é alquila C1-3, e R⁸ é hidrogênio.

[081 ]Em uma modalidade, RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, RR³ é metila, e R⁸ é hidrogênio.

[082]Em uma modalidade, n é 1.

[083]Em uma modalidade, RR⁴ é hidrogênio.

[084]Em uma modalidade, RR⁴ é hidroxila.

[085]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (ΙΟ) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo onde n é 1. Nesta modalidade, R¹, R², RR¹, RR², RR³, RR⁴ e R⁸ podem ser adicionalmente definidos como em qualquer uma das modalidades precedentes. Por exemplo, RR¹, RR², RR³ e R⁸podem ser hidrogênio.

[086]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (ΙΟ) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo que é composto de qualquer um dos Exemplos C-1 a 6 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (l-C) que é um composto de qualquer um dos Exemplos C-1 a C-6.

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32/154 [087]Adição à forma de base livre dos compostos aqui descritos, a forma de sal dos compostos está também dentro do escopo da presente invenção. Os sais ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos aqui descritos podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação finais do composto, ou por reação separada do composto purificado em sua forma de base livre com base ou ácido adequado, respectivamente. Para revisões em sais farmacêuticos adequados, ver Berge et al, J. Pharm, Sei., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217; e Bighley et al, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, Nova Iorque 1996, Volume 13, página 453-497.

[088]Certos compostos de fórmula (I) contêm um grupo básico e, portanto, são capazes de formar sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis por tratamento com um ácido adequado. Os ácidos adequados incluem ácidos inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis e ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis exemplares incluem cloridrato, bromidrato, nitrato, metilnitrato, sulfato, bissulfato, sulfamato, fosfato, acetato, hidroxiacetato, fenilacetato, propionato, butirato, isobutirato, valerato, maleato, hidroximaleato, acrilato, fumarato, malato, tartarato, citrato, salicilato, p-aminosalicilato, glicolato, lactato, heptanoato, ftalato, oxalato, succinato, benzoato, o-acetoxibenzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, mandelato, tanato, formato, estearato, ascorbato, palmitato, oleato, piruvato, pamoato, malonato, laurato, glutarato, glutamato, estolato, metanossulfonato (mesilato), etanossulfonato (esilato), 2hidroxietanossulfonato, benzenossulfonato (besilato), p-aminobenzenossulfonato, ptoluenossulfonato (tosilato) e naftaleno-2-sulfonato. Em algumas modalidades, os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem o L-tartarato, etanodisulfonato (edisilato), sulfato, fosfato, p-toluenossulfonato (tosilato), sal cloridrato, metanossulfonato, citrato, fumarato, benzenossulfonato, maleato, bromidrato, L-lactato, malonato e S

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33/154 cânfora-10-sulfonato. Em certas modalidades, alguns destes sais formam solvatos. Em certas modalidades, alguns destes sais são cristalinos.

[089]Certos compostos de Fórmula (I) ou seus sais podem existir em formas estereoisoméricas (por exemplo, eles podem conter um ou mais átomos de carbono assimétricos). Os estereoisômeros individuais (enantiômeros e diastereômeros) e misturas destes estão incluídos no escopo da presente invenção. As diferentes formas isoméricas podem ser separadas ou resolvidas uma da outra por métodos convencionais, ou qualquer dado isômero pode ser obtido por métodos sintéticos convencionais ou por sínteses estereoespecíficas ou assimétricas.

[090]A invenção também inclui compostos e sais isotopicamente marcados, que são idênticos aos compostos de Fórmula (I) ou seus sais, mas para o fato de que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa mais comumente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos de Fórmula (I) ou seus sais isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, flúor, tal como ³H, ¹¹C, ¹⁴C e ¹⁸F. Tal composto isotopicamente marcado de Fórmula (I) ou seus sais úteis em ensaios de distribuição tecidual de fármaco e/ou de substrato. Por exemplo, os isótopos ¹¹C e ¹⁸F são úteis em PET (tomografia de emissão de positron). PET é útil na formação de imagem do cérebro. Compostos isotopicamente marcados de Fórmula (I) e seus sais podem geralmente ser preparados pela realização dos procedimentos descritos abaixo, pela substituição de um reagente isotopicamente marcado prontamente disponível para um reagente não isotopicamente marcado. Em uma modalidade, os compostos de Fórmula (I) ou seus sais não são isotopicamente marcados.

[091]Certos compostos de Fórmula (I) ou seus sais podem existir em forma sólida ou líquida. No estado sólido, compostos de Fórmula (I) ou sais podem existir na forma cristalina ou não cristalina, ou como uma mistura dos mesmos. Para

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34/154 compostos de Fórmula (I) ou sais que estão na forma cristalina, o versado na técnica apreciará que os solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados em que as moléculas de solvente são incorporadas à treliça cristalina durante a cristalização. Solvatos podem envolver solventes não aquosos como etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina, e acetato de etila, ou eles podem envolver água como solvente que é incorporado na treliça cristalina. Solvatos em que água é o solvente que é incorporado na treliça cristalina são referidos tipicamente como hidratos. Hidratos incluem hidratos estequiométricos bem como composições contendo quantidades variáveis de água.

[092]O versado na técnica apreciará ainda que certos compostos de Fórmula (I), sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos mesmos que existem na forma cristalina, incluindo os vários solvatos, podem apresentar polimorfismo (isto é, a capacidade de ocorrer em estruturas cristalinas diferentes). Estas diferentes formas cristalinas são tipicamente conhecidas como polimorfos. Polimorfos têm a mesma composição química, mas diferem em embalagem, disposição geométrica e outras propriedades descritivas do estado sólido cristalino. Os polimorfos, portanto, podem ter diferentes propriedades físicas, tais como a forma, a densidade, a dureza, a deformabilidade, a estabilidade e as propriedades de dissolução. Os polimorfos apresentam tipicamente pontos de fusão diferentes, espectros de IR e padrões de difração de pó de raios-X, que podem ser usados para identificação. O versado na técnica apreciará que diferentes polimorfos podem ser produzidos, por exemplo, através da mudança ou ajuste das condições de reação ou reagentes, usados na produção do composto. Por exemplo, mudanças em temperatura, pressão ou solvente podem resultar em polimorfos. Além disso, um polimorfo pode se converter espontaneamente em um outro polimorfo sob certas condições.

[093]O versado na técnica também aprecia que esta invenção pode conter várias formas deuteradas de compostos de Fórmula (I), ou seus sais

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35/154 farmaceuticamente aceitáveis. Cada átomo de hidrogênio disponível ligado a um átomo de carbono pode ser independentemente substituído por um átomo de deutério. Um versado na técnica saberá como sintetizar formas deuteradas de compostos de Fórmula (I), ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Materiais de partida deuterados comercialmente disponíveis podem ser empregados na preparação de formas deuteradas de compostos de Fórmula (I) ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, ou podem ser sintetizados usando-se técnicas convencionais que empregam reagentes deuterados (por exemplo, deuterídeo de lítio alumínio).

C. Métodos de Uso [094]Compostos de Fórmula (I) ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis são inibidores da atividade de LRRK2 quinase e acredita-se, assim, ser de uso potencial no tratamento ou prevenção das doenças neurológicas a seguir: doença de Parkinson, doença de Alzheimer, demência (incluindo demência de corpos de Lewy e demência vascular, demência induzida por HIV), esclerose lateral amiotrófica (ALS), disfunção de memória relacionada à idade, deterioração cognitiva branda, doença por grãos angirofílicos, doença de Pick , degeneração corticobasal, paralisia supranuclear progressiva, demência frontotemporal hereditária e parkinsonismo ligados ao cromossoma 17 (FTDP-17), sintomas de retirada/relapso associados com vício de drogas, discinesia Induzida por L-Dopa, acidente vascular cerebral, lesão traumática cerebral, lesão de medula espinhal e esclerose múltipla. Outras doenças potencialmente tratáveis pela inibição de LRRK2 incluem, mas não estão limitadas a, distúrbios lisossomal (por exemplo, doença de Niemann-Pick Tipo C, doença de Gaucher), doença de Crohn, cânceres (incluindo tireoide, renal (incluindo renal papilar), câncer de mama, pulmão e próstata, leucemias (incluindo leucemia mielógena aguda (AML)) e linfomas), artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico, anemia hemolítica autoimune, aplasia de células vermelhas puras, púrpura

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36/154 trombocitopênica idiopática (ITP), síndrome de Evans, vasculite, distúrbios cutâneos bolhosos, diabetes melito tipo 1, obesidade, epilepsia, doenças pulmonares tais como doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose pulmonar idiopática, síndrome de Sjogren, doença de Devic, miopatias inflamatórias, espondilite anquilosante, infecções bacterianas (incluindo lepra), infecções virais (incluindo tuberculose, HIV, vírus do Oeste do Nilo e vírus chikungunya) e infecções parasitárias.

[095]Um aspecto da invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para uso em terapia. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o uso no tratamento ou prevenção dos distúrbios acima (isto é, as doenças neurológicas e outras doenças listadas acima). Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de ou prevenção da doença de Parkinson. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento da doença de Parkinson. Em outra modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento ou prevenção da doença de Alzheimer. Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento da doença de Alzheimer. Em outra modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento da esclerose lateral amiotrófica (ALS).

[096]Em uma modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B), ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento ou prevenção da doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).

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37/154 [097]Em outra modalidade, a invenção fornece um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B), ou Fórmula (l-C), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para uso no tratamento da doença de Parkinson.

[098]Um aspecto adicional da invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção dos distúrbios acima (isto é, as doenças neurológicas e outras doenças listadas acima). Um aspecto adicional da invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da doença de Parkinson. Um aspecto adicional da invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento da doença de Parkinson. Em outra modalidade, a invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da doença de Alzheimer. Em uma modalidade, a invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento da doença de Alzheimer. Em outra modalidade, a invenção proporciona o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento da esclerose lateral amiotrófica (ALS).

[099]Em uma modalidade, a invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B), ou Fórmula (l-C), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).

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38/154 [0100]Em outra modalidade, a invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B), ou Fórmula (l-C), um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da doença de Parkinson.

[0101]Em ainda outra modalidade, a invenção fornece o uso de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B), ou Fórmula (l-C), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o tratamento da doença de Parkinson.

[0102]Um aspecto adicional da invenção fornece um método de tratamento ou prevenção de um distúrbio listado acima (isto é, selecionado a partir das doenças neurológicas e outras doenças listadas acima), que compreende administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Um aspecto adicional da invenção fornece um método de tratamento ou prevenção da doença de Parkinson, que compreende administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Um aspecto adicional da invenção fornece um método de tratamento da doença de Parkinson, que compreende administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Um aspecto adicional da invenção fornece um método de tratamento ou prevenção da doença de Alzheimer, que compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Um aspecto adicional da invenção fornece um método de tratamento da doença de Alzheimer, que compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva

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39/154 de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Um aspecto adicional da invenção proporciona um método de tratamento de tuberculose, que compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, o paciente é humano.

[0103]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento de doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS), que compreende administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0104]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento de doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS), que compreende administrar a um ser humano em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0105]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento da doença de Parkinson, que compreende administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0106]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento da doença de Parkinson, que compreende administrar a um ser humano em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0107]No contexto da presente invenção, tratamento da doença de Parkinson refere-se ao tratamento de doença de Parkinson esporádica e/ou doença de Parkinson familiar. Em uma modalidade, o tratamento da doença de Parkinson refere-se ao tratamento da doença de Parkinson familiar. Os pacientes de doença de

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Parkinson familiar são aqueles que expressam uma ou mais das mutações de LRRK2 quinase a seguir: mutação G2019S, mutação N1437H, mutação R1441G, mutação R1441C, mutação R1441H, mutação Y1699C, mutação S176R, ou mutação I2020T. Em outra modalidade, os pacientes de doença de Parkinson familiar expressam outras mutações de codificação (tais como G2385R) ou polimorfismos de nucleotídeos simples não-codificantes no locus LRRK2 que estão associados com a doença de Parkinson. Em uma modalidade mais particular, a doença de Parkinson familiar inclui pacientes que expressam a mutação G2019S ou a mutação R1441G em LRRK2 quinase. Em uma modalidade, o tratamento da doença de Parkinson refere-se ao tratamento de doença de Parkinson familiar inclui pacientes que expressam a mutação de LRRK2 quinase contendo a mutação G2019S. Em outra modalidade, os pacientes de doença de Parkinson familiar expressam níveis aberrantemente altos de LRRK2 quinase normal.

[0108]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento da doença de Parkinson, que compreende a administração a um humano que expressa a mutação G2019S em LRRK2 quinase em necessidade de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0109]Em uma modalidade, a invenção fornece um método de tratamento da doença de Parkinson, que compreende teste em um ser humano para a mutação G2019S em LRRK2 quinase e administração ao humano que expressa a mutação G2019S em LRRK2 quinase em necessidade de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0110]Tratamento da doença de Parkinson pode ser sintomática ou pode ser modificação de doenças. Em uma modalidade, o tratamento da doença de Parkinson

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41/154 refere-se ao tratamento sintomático. Em uma modalidade, o tratamento da doença de Parkinson refere-se a tratamento de modificação de doenças.

[0111]Compostos da presente invenção também podem ser úteis no tratamento de pacientes identificados como suscetíveis à progressão de Parkinsonismo severo por meio de uma ou mais características sutis associadas à progressão da doença tal como história familiar, déficits de olfação, constipação, defeitos cognitivos, indicadores da marcha ou biológicos da progressão da doença obtida a partir de tecnologias moleculares, bioquímicas, imunológicas ou de formação de imagem. Neste contexto, o tratamento pode ser sintomático ou modificação da doença.

[0112]No contexto da presente invenção, tratamento da doença de Alzheimer refere-se ao tratamento de doença de Alzheimer esporádica e/ou doença de Alzheimer familiar. O tratamento da doença de Alzheimer pode ser sintomático ou pode ser modificação de doenças. Em uma modalidade, o tratamento da doença de Alzheimer refere-se ao tratamento sintomático.

[0113]No contexto da presente invenção, o tratamento de demência (incluindo demência de corpos de Lewy e demência vascular, demência induzida por HIV), esclerose lateral amiotrófica (ALS), disfunção de memória relacionada à idade, deterioração cognitiva leve, doença de grão argirofílica, doença de Pick, degeneração corticobasal, paralisia supranuclear progressiva, demência frontotemporal hereditária e parkinsonismo ligados ao cromossoma 17 (FTDP -17), esclerose múltipla, distúrbios lisossomais (por exemplo, doença do Tipo C de Niemann-Pick, doença de Gaucher), doença de Crohn, cânceres (incluindo câncer de tireoide, renal (incluindo renal papilar), câncer de mama, pulmão e próstata, leucemias (incluindo leucemia mielógena aguda (AML)) e linfomas), artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico, anemia hemolítica autoimune, aplasia de células vermelhas puras, púrpura trombocitopênica idiopática (ITP), síndrome de

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Evans, vasculite, distúrbios cutâneos bolhosos, diabetes melito tipo 1, obesidade, epilepsia, doenças pulmonares tais como doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose pulmonar idiopática, Síndrome de Sjogren, doença de Devic, miopatias inflamatórias, espondilite anquilosante, pode ser sintomático ou modificação da doença. Em certas modalidades, o tratamento destes distúrbios refere-se ao tratamento sintomático.

[0114]A invenção também proporciona o uso de inibidores de LRRK2 na produção de células progenitoras neuronais in vitro para a consequente aplicação terapêutica em tratamento com base em células de distúrbios do SNC.

[0115]Quando um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é destinado ao uso no tratamento da doença de Parkinson, ele pode ser usado em combinação com medicamentos que são úteis como tratamentos sintomáticos da doença de Parkinson. Exemplos adequados de tais outros agentes terapêuticos incluem L-dopa, e agonistas de dopamina (por exemplo, pramipexol, ropinirol).

[0116]Quando um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é destinado ao uso no tratamento da doença de Alzheimer, pode ser usado em combinação com medicamentos reivindicados como sendo úteis como tratamento de doença modificante ou sintomáticas da doença de Alzheimer. Exemplos adequados de tais outros agentes terapêuticos podem ser agentes sintomáticos, por exemplo, aqueles conhecidos para modificar a transmissão colinérgica, como agonistas do receptor muscarínico M1 ou moduladores alostéricos, antagonistas M2-muscarínicos, inibidores de acetilcolinesterase (tais como tetraidroaminoacridina, cloridrato de donepezil rivastigmina e galantamina), agonistas do receptor nicotínico ou moduladores alostéricos (tais como agonistas a7 ou moduladores alostéricos ou agonistas α4β2 ou moduladores alostéricos), agonistas de PPAR (tais como agonistas de PPARy), agonistas parciais de receptor

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43/154 de 5-ΗΪ4, antagonistas do receptor 5-HTe, por exemplo, antagonistas do receptor de SB-742457 ou 5HT1A e antagonistas ou moduladores do receptor de NMDA, ou agentes de modificação de doenças tais como inibidores de β ou γ - secretase, por exemplo, semagacestat, estabilizadores mitocondriais, estabilizadores de microtúbulos ou moduladores de patologia Tau tais como inibidores de agregação de Tau (por exemplo, azul de metileno e REMBER™), NSAIDS, por exemplo tarenflurbil, tramiprosil; ou anticorpos, por exemplo, bapineuzumab ou solanezumab; proteoglicanos, por exemplo, tramiprosato.

[0117]Quando um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é destinado ao uso no tratamento de infecções bacterianas, infecções parasitárias ou infecções virais, pode ser usado em combinação com medicamentos que supostamente são úteis como tratamentos sintomáticos que diretamente tem como alvo 0 agente infeccioso.

[0118]Quando um composto de Fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é usado em combinação com outros agentes terapêuticos, 0 composto pode ser administrado sequencialmente ou simultaneamente por qualquer via conveniente.

[0119]A invenção também fornece, em um aspecto adicional, uma combinação compreendendo um composto de Fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável junto com um ou mais agentes ou agentes terapêuticos adicionais.

[0120]As combinações referidas acima podem convenientemente ser apresentadas para uso na forma de uma formulação farmacêutica e assim formulações farmacêuticas compreendendo uma combinação como definida acima junto com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável compreendem um aspecto adicional da invenção. Os componentes individuais de tais combinações

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44/154 podem ser administrados sequencialmente ou simultaneamente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas.

[0121]Quando um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é usado em combinação com um segundo agente terapêutico ativo contra o mesmo estado de doença a dose de cada composto pode diferir daquela quando o composto é usado sozinho. Doses apropriadas serão prontamente apreciadas por aqueles versados na técnica.

D. Composição [0122]Compostos de Fórmula (I) ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser formulados em composições farmacêuticas antes da administração a um paciente. De acordo com um aspecto, a invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um excipiente farmaceuticamente aceitável. De acordo com outro aspecto, a invenção proporciona um processo para a preparação de uma composição farmacêutica que compreende a mistura de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0123]Composições farmacêuticas podem ser apresentadas em formas de dose unitária contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo por dose unitária. Tal unidade pode conter, por exemplo, 0,1 mg, 0,5 mg, ou 1 mg a 50 mg, 100 mg, 200 mg, 250 mg, 500 mg, 750 mg ou 1 g de um composto da presente invenção, dependendo da doença que está sendo tratada, a via de administração e a idade, peso e condição do paciente , ou composições farmacêuticas podem ser apresentadas em formas de dose unitária contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo por dose unitária. Em outras modalidades, as composições de dosagem unitária são aquelas contendo uma dose diária ou subdose como aqui descrito, ou uma fração apropriada da mesma, de um ingrediente ativo. Além disso,

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45/154 tais composições farmacêuticas podem ser preparadas por qualquer um dos métodos bem conhecidos por aqueles versados na técnica.

[0124]Uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) dependerá de um número de fatores incluindo, por exemplo, a idade e o peso do recipiente pretendido, a condição precisa que requer tratamento e sua severidade, a natureza da formulação, e a via de administração, e, por fim, estará na discrição do médico prescrevendo a medicação. Entretanto, uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I) para o tratamento de doenças descritas na presente invenção estará geralmente na faixa de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal do recipiente por dia e, mais usualmente, na faixa de 1 a 10 mg/kg de peso corporal por dia. Assim, para um mamífero adulto de 70 kg, a quantidade real por dia usualmente seria de 70 a 700 mg e esta quantidade pode ser dada em uma dose única por dia ou em um número de sub-doses por dia, tal como dois, três, quatro, cinco ou seis doses por dia. Ou a dosagem pode ser feita intermitentemente, tal como uma vez a cada outro dia, uma vez por semana ou uma vez por mês. Uma quantidade terapeuticamente efetiva de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável etc, pode ser determinado como uma proporção da quantidade terapeuticamente efetiva do composto de Fórmula (I) per se. Considerase que dosagens similares seriam apropriadas para o tratamento das outras doenças referidas acima.

[0125]As composições farmacêuticas da invenção podem conter um ou mais compostos de Fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas podem conter mais de um composto da invenção. Por exemplo, em algumas modalidades, as composições farmacêuticas podem conter dois ou mais compostos de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Além disso, as composições farmacêuticas podem

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46/154 opcionalmente compreender ainda um ou mais ingredientes farmacêuticos ativos adicionais (APIs).

[0126]Como usado aqui, excipiente farmaceuticamente aceitável significa um material farmaceuticamente aceitável, composição ou veículo envolvido em dar forma ou consistência à composição farmacêutica. Cada excipiente pode ser compatível com os outros ingredientes da composição farmacêutica quando misturado de modo que as interações que reduziríam substancialmente a eficácia do composto da invenção quando administradas a um paciente e às interações que resultem em composições farmacêuticas que não são farmaceuticamente aceitáveis são evitadas.

[0127]Os compostos da invenção e o excipiente ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser formulados em uma forma de dosagem adaptada para administração ao paciente pela via de administração desejada. Por exemplo, formas de dosagem incluem aquelas adaptadas para (1) administração oral (incluindo bucal ou sublingual), tais como comprimidos, cápsulas, drágeas, pílulas, pastilhas, pós, xaropes, elixires, suspensões, soluções, emulsões, sachês e saquinhos; (2) administração parenteral (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa ou intradérmica) tal como soluções estéreis, suspensões, e pós para reconstituição; (3) administração transdérmica tal como emplastros transdérmicos; (4) administração retal tal como supositórios; (5) inalação nasal tal como pós secos, aerossóis, suspensões e soluções; e (6) administração tópica (incluindo bucal, sublingual ou transdérmica), tais como cremes, unguentos, loções, soluções, pastas, sprays espumas e géis. Tais composições podem ser preparadas por quaisquer métodos conhecidos na técnica de farmácia, por exemplo, levando em associação um composto de Fórmula (I) com o veículo (s) ou excipiente (s).

[0128]Composições farmacêuticas adaptadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas tais como cápsulas ou

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47/154 comprimidos; pós ou grânulos; soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; espumas comestíveis ou whips; ou emulsões líquidas óleo em água ou emulsões líquidas água em óleo.

[0129]Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados podem variar dependendo da forma de dosagem particular escolhida. Além disso, excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados podem ser escolhidos para uma função particular que podem servir na composição. Por exemplo, certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos para sua capacidade de facilitar a produção de formas de dosagem uniformes. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos para sua capacidade de facilitar a produção de formas de dosagem estáveis. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos por sua capacidade de facilitar a condução ou transporte do composto ou compostos da invenção uma vez administrados ao indivíduo a partir de um órgão, ou uma porção do corpo, a um outro órgão, ou uma porção do corpo. Certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem ser escolhidos para sua capacidade de melhorar a aceitação do paciente.

[0130]Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem os seguintes tipos de excipientes: diluentes, cargas, aglutinantes, desintegrantes, lubrificantes, agentes de deslizamento, agentes de granulação, agentes de revestimento, agentes umectantes, solventes, co-solventes, agentes de suspensão, emulsificantes, adoçantes, agentes aromatizantes, agentes mascaradores de sabor, agentes corantes, agentes antiaglomerante, hemectantes, agentes quelantes, plastificantes, agentes de aumento de viscosidade, antioxidantes, conservantes, estabilizantes, tensoativos e agentes de tamponamento. O versado na técnica apreciará que certos excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem servir a mais de uma função e pode servir como funções alternativas dependendo de quanto o

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48/154 excipiente está presente na formulação e quais outros ingredientes estão presentes na formulação.

[0131]Os versados na técnica possuem o conhecimento e habilidade na técnica para permitir que sejam selecionados excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados em quantidades apropriadas para utilização na invenção. Além disso, existe um número de recursos disponíveis para o versado na técnica que descrevem excipientes farmaceuticamente aceitáveis e pode ser útil na seleção de excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados. Exemplos incluem Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), e The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press).

[0132]As composições farmacêuticas da invenção são preparadas utilizando-se técnicas e métodos conhecidos por aqueles versados na técnica. Alguns dos métodos comumente usados na técnica são descritos em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).

[0133]Em um aspecto, a invenção refere-se a uma forma de dosagem oral sólida, tal como um comprimido ou cápsula compreendendo uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da invenção e urn diluente ou carga. Diluentes e cargas adequados incluem lactose, sacarose, dextrose, manitol, sorbitol, amido (por exemplo, amido de milho, amido de batata e amido pré-gelatinizado), celulose e seus derivados (por exemplo, celulose microcristalina), sulfato de cálcio e fosfato de cálcio dibásico. A forma de dosagem sólida oral pode ainda compreender um aglutinante. Os aglutinantes adequados incluem amido (por exemplo, amido de milho, amido de batata e amido pré-gelatinizado), gelatina, acácia, alginato de sódio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, povidona e celulose e seus derivados (por exemplo, celulose microcristalina). A forma de dosagem sólida oral pode ainda

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49/154 compreender um desintegrante. Desintegrantes adequados incluem crospovidona, glicolato de amido de sódio, croscarmelose, ácido algínico, e carboximetil celulose de sódio. A forma de dosagem sólida oral pode ainda compreender um lubrificante. Os lubrificantes adequados incluem o ácido esteárico, o estearato de magnésio, o estearato de cálcio e o talco.

[0134]Em certas modalidades, a presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo 0,01 a 1000 mg de um ou mais de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e 0,01 a 5 g de um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[0135]Em outra modalidade, a presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica para o tratamento de uma doença de neurodegeneração compreendendo um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um excipiente farmaceuticamente aceitável. Em outra modalidade, a presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica para o tratamento da doença de Parkinson compreendendo um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

E. Processo de preparação de compostos [0136]O processo a ser utilizado na preparação de compostos de Fórmula (I) ou seus sais aqui descritos depende dos compostos desejados. Tais fatores como a seleção do substituinte específico e vários locais possíveis do substituinte específico desempenham um papel no caminho a ser seguido na preparação dos compostos específicos desta invenção. Esses fatores são facilmente reconhecidos por alguém versado na técnica.

[0137]Em geral, os compostos da presente invenção podem ser preparados por técnicas padrão conhecidas na técnica e por processos conhecidos análogos ao mesmo. Métodos gerais para a preparação de compostos de Fórmula (I) são

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50/154 apresentados a seguir. Todos os materiais de partida e reagentes descritos nos esquemas experimentais gerais abaixo são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos conhecidos por aqueles versados na técnica.

[0138]O versado na técnica apreciará que se um substituinte aqui descrito não for compatível com os métodos sintéticos aqui descritos, o substituinte pode ser protegido com um grupo protetor adequado que é estável às condições de reação. O grupo protetor pode ser removido em um ponto adequado na sequência de reação para fornecer um composto intermediário ou alvo desejado. Grupos de proteção adequados e os métodos de proteção e desproteção de substituintes diferentes utilizando tais grupos de proteção adequados são bem conhecidos por aqueles versados na técnica; exemplos dos quais podem ser encontrados em T. Greene e P. Wuts, Protecting Groups in Chemical Synthesis (3a ed.), John Wiley & Sons, NI (1999). Em alguns casos, um substituinte pode ser selecionado especificamente para ser reativo sob as condições de reação usadas. Sob estas circunstâncias, as condições de reação convertem o substituinte selecionado em um outro substituinte que é tanto útil como um composto intermediário ou é um substituinte desejado em um composto alvo.

[0139]Esquema geral A-1 fornece processos exemplares de síntese para a preparação de compostos da presente invenção.

Esquema Geral A -1

Figura 4: A = Cl or I / A = Cl ou A

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51/154 [0140]Esquema Geral A-1 fornece uma síntese exemplar para preparação do composto 3 que representa compostos de Fórmula (l-A). No Esquema A-1, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ e Xi são como definidos na Fórmula (l-A).

[0141]A etapa (i) pode ser uma reação de substituição por reação do composto 1 com o composto 2, usando-se o procedimento base apropriado tal como CS2CO3 em um solvente apropriado tal como Ν,Ν-dimetilformamida (DMF) sob temperatura adequada tal como cerca de 100° C para fornecer 0 composto 3.

[0142]A etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Cul e N,N'-dimetil-cicloexano-1,2diamina na presença de uma base adequada tal como K3PO4 em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada tal como condição de refluxo para fornecer 0 composto 3.

[0143]Etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Pd2dba3 e (2',4',6'- triisopropil-[1,1 bifenil]-2-il)fosfina di-terc-butila na presença de base adequada tal como tercbutóxido de sódio em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada tal como 100° C para fornecer 0 composto 3.

Esquema Geral A-2

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Figura 5: represents R^2a containing a double bond / representa R^2a contendo uma ligação dupla [0144]Esquema geral A-2 fornece uma sintese exemplar para preparação de intermediário 1. O grupo de proteção, Pi, pode ser qualquer grupo de proteção adequado, por exemplo, tetraidro-2H-piran-2-il (THP), (trimetilsilil)etóxi)metil (SEM) ou Acetil (Ac).

[0145]lntermediário 5 pode ser obtido na etapa (i) reagindo-se o material de partida 4 com reagentes adequados tais como DHP em presença de ácidos adequados, tais como TsOH em solventes apropriados, tais como DCM, sob temperaturas adequadas, tais como 20° C a 40° C.

[0146]Etapa (ii) é uma reação de acoplamento cruzado entre o intermediário 5 e o ácido borônico ou ésteres utilizando catalisadores de paládio apropriados, tais como Pd(dppf)Cl2 na presença de bases adequadas tais como Na2COa em solventes apropriados tal como 1,4-dioxano em temperaturas adequadas, tais como 60⁰ C a 100 °C.

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53/154 [0147]Etapa (iii) envolve a reação com reagentes de oxidação adequados, tais como H2O2 em um solvente adequado tal como THF, sob temperaturas adequadas, tais como de -60⁰ C a -10⁰ C, para a provisão de um intermediário 7.

[0148]Etapa (iv) é uma reação com um reagente redutor adequado, tal como hidrogênio, na presença de catalisadores adequados, tal como Pd/C em solventes polares, tais como MeOH em temperaturas apropriadas, tais como 25° C a 80° C.

[0149]Etapa (v) pode ser uma reação de oxidação com oxidantes tal como DMP em solventes adequados tal como DCM, sob temperaturas adequadas, tais como 0⁰ C a 25⁰ C, para dar 0 intermediário 8.

[0150]Etapas (vi) e (vii) envolvem reação com um fluidizador tal como DAST em solventes adequados tal como DCM, sob temperaturas adequadas, tais como a 78° Ca 0^o C.

[0151]Etapas (viii), (ix) e (x) são reações de desproteção. Tipicamente, 0 intermediário é reagido com ácidos adequados tal como HCI em solventes adequados tal como 1,4-dioxano sob temperaturas adequadas, tais como 25⁰ C a 40⁰ C para produzir 0 intermediário 1.

[0152]Etapa (xi) envolve a reação com oxetan-3-ona substituída sob agente redutor adequado tal como NaBHaCN em um solvente adequado tal como MeOH e CH2CI2 em temperatura adequada tal como temperatura ambiente.

Esquema geral A-3

R¹

A = Cl or I ²

Figura 6: A = Cl or I / A = Cl ou I [0153]Esquema Geral A-3 fornece uma síntese exemplar para preparação de intermediários 2.

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54/154 [0154]Quando R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros ligado a N ou NHR⁷; etapa (i) pode ser uma reação com diferentes aminas utilizando-se bases apropriadas tais como TEA em solventes apropriados, tais como EtOH, sob temperaturas adequadas, tais como 25° C a 100° C, para fornecer intermediário 2.

[0155]Quando R3 é OR⁷, etapa (i) é uma reação de acoplamento. O álcool (R⁷OH) é desprotonado por uma base adequada tal como hidreto de sódio em solvente adequado tal como THF em temperatura adequada tal como 0^o C para dar 0 intermediário de transição. Então 0 intermediário 13 é reagido com 0 intermediário de transição em solvente adequado tal como THF em temperatura adequada tal como temperatura ambiente.

[0156]Esquema Geral B-1 fornece processos exemplares de síntese para a preparação de compostos de Fórmula (l-B)

Esquema Geral B -1

Figura 7: A = Cl or I / A = Cl ou I [0157]Esquema Geral B-1 fornece uma síntese exemplar para a preparação de compostos de Fórmula (l-B). No Esquema 1, R¹, R², RR¹, RR², RR³ e R⁸ e n são como definidos na Fórmula (l-B).

[0158]A etapa (i) pode ser uma reação de substituição por reação do composto 1 com 0 composto 2, usando-se a base apropriada tal como CS2CO3 em um solvente apropriado tal como N, N-dimetilformamida (DMF) sob temperatura adequada, tal como cerca de 100° C, para fornecer um composto de Fórmula (l-B).

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55/154 [0159]A etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Cul e N,N'-dimetil-cicloexano-1,2diamina na presença de uma base adequada tal como K3PO4 em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada tal como condição de refluxo para fornecer um composto de Fórmula (l-B).

[0160]Etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados tais como Pdzdbas e (2',4',6'- triisopropil-[1,1'bifenil]-2-il)fosfina di-terc-butila na presença de uma base adequada tal como tercbutóxido de sódio em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada, tal como 100° C, para fornecer um composto de Fórmula (l-B).

Esquema Geral B-2

Figura 8: represents R^1a containing a double bond / representa R^1a contendo uma ligação dupla [0161]Esquema Geral B-2 fornece uma síntese exemplar para a preparação de intermediário 1. O grupo de proteção P1 pode ser hidrogênio ou qualquer grupo

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56/154 de proteção adequado, por exemplo, tetraidro-2H-piran-2-il (THP), (trimetilsilil)etóxi) metil (SEM) ou Acetil (Ac).

[0162]lntermediários 4 podem ser obtidos na etapa (i) reagindo-se o material de partida 3 com reagentes adequados tais como DHP na presença de ácidos adequados, tais como TsOH em solventes apropriados, tais como DCM, sob temperaturas adequadas, tais como 20° C a 40° C.

[0163]Etapa (ii) pode ser uma reação de acoplamento cruzado entre o intermediário 4 com reagentes apropriados tal como ácido borônico ou ésteres utilizando catalisadores de paládio apropriados, tais como Pd(dppf)Cl2 na presença de bases adequadas tais como Na2COa em solventes apropriados tal como 1,4dioxano sob temperaturas adequadas, tais como 60⁰ C a 100⁰ C.

[0164]Etapa (iii) é uma reação com reagentes de oxidação adequados tais como H2O2 em um solvente adequado tal como THF a uma temperatura adequada tal como de -60⁰ C a -10⁰ C.

[0165]Etapa (iv) pode ser uma reação de oxidação envolvendo reagir 0 intermediário 6 com oxidantes tal como DMP em solventes adequados tal sistema como DCM sob temperaturas adequadas, tais como 0^o C a 25° C, para produzir intermediário 7.

[0166]Etapas (v) e (vi) envolvem uma reação com um fluridificador tal como DAST em um solvente adequado tal como DCM a uma temperatura adequada, tal como a -78° C a 0^o C.

[0167]A etapa (viii) é uma reação com um reagente redutor adequado, tal como hidrogênio, na presença de um catalisador adequado, tal como Pd/C em solventes polares, tais como MeOH a uma temperatura apropriada, tal como 25° C a 80° C.

[0168]Etapas (vii), (ix) e (x) são reações de desproteção envolvendo, tipicamente, uma reação com um ácido adequado, tal como HCI, em um solvente

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57/154 adequado, tal como 1,4-dioxano a uma temperatura adequada, tal como 25° C a 40° C.

[0169]Etapa (xi) é uma reação de acoplamento com oxetan-3-ona utilizando reagentes apropriados em presença de base adequada, tal como NaBHsCN, na presença de um catalisador, por exemplo, AcOH, em um solvente adequado tal como DCM ou DCE em temperatura adequada tal como temperatura ambiente.

Esquema Geral B-3

R¹

Figura 9: A = Cl or I / A = Cl ou I [0170]Esquema geral B-3 fornece uma síntese exemplar para a preparação de intermediário 2, em que R1, RR1, RR2, RR3 e n são como mostrados em compostos de Fórmula (IB) [0171]Etapa (i) pode ser uma reação entre o intermediário 12 com diferentes aminas tais como morfolina utilizando-se bases apropriadas tais como TEA em solventes apropriados, tais como EtOH, sob temperaturas adequadas, tais como 25° C a 100° C para fornecer intermediário 2.

[0172]lntermediário 2 também pode ser obtido por uma reação de acoplamento entre o intermediário 12 com reagentes adequados tais como ácido brônico na presença de catalisadores tais como Pd(PPh3)2Cl2 em solventes adequados tais como 1,4-dioxano sob 25° C a 130° C na etapa (xx).

Esquema Geral B-4

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(l-B)

Figura 10: A = Cl or I / A = Cl ou I [0173]Esquema Geral B-4 fornece uma síntese exemplar alternativa para a preparação de compostos de Fórmula (l-B). No Esquema 4, R¹, R², RR¹, RR², RR³ e R⁸ e n são como definidos na Fórmula (l-B).

[0174]Etapa (i) pode ser uma reação de substituição utilizando uma base apropriada tal como CS2CO3 em um solvente apropriado tal como N,Ndimetilformamida (DMF) sob temperatura adequada, tal como cerca de 100° C.

[0175]A etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Cul e N,N'-dimetil-cicloexano-1,2diamina na presença de uma base adequada tal como K3PO4 em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada tal como condição de refluxo.

[0176]Etapa (ii) pode ser uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados na presença de uma base adequada tal como NaBHsCN na presença de um catalisador, por exemplo, AcOH, em um solvente adequado tal como DCM ou

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DCE em temperatura adequada tal como temperatura ambiente para fornecer um composto de fórmula (l-B).

[0177]Esquema Geral C-1 fornece processos exemplares de síntese para a preparação de compostos de Fórmula (l-C).

Figura 11: A = Cl or I / A = Cl ou I [0178]Esquema Geral C-1 fornece uma síntese exemplar para a preparação de compostos de Fórmula (l-C). No Esquema C-1, R¹, R², RR¹, RR², RR³, RR⁴, R⁸ e n são como definidos na Fórmula (l-C). A etapa (i) pode ser uma reação de substituição por reação do composto 1 com o composto 2, usando-se a base apropriada tal como CS2CO3 em um solvente apropriado tal como N,Ndimetilformamida (DMF) sob temperatura adequada tal como cerca de 100° C para fornecer um composto de Fórmula (l-C).

[0179]A etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Cul e N,N'-dimetil-cicloexano-1,2diamina na presença de uma base adequada tal como K3PO4 em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada tal como condição de refluxo para fornecer um composto de Fórmula (l-C).

[0180]Etapa (i) pode ser alternativamente uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados, tais como Pdzdbas e (2',4',6'- triisopropil-[1,1'Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 69/179

60/154 bifenil]-2-il)fosfina di-terc-butila na presença de uma base adequada tal como tercbutóxido de sódio em um solvente adequado tal como tolueno em temperatura adequada, tal como 100° C, para fornecer um composto de Fórmula (l-C).

[0181]Esquema Geral C-2 fornece uma síntese exemplar alternativa para a preparação de compostos de Fórmula (l-C). No Esquema C-2, R¹, R², RR¹, RR², RR³, RR⁴, R⁸ e n são como definidos na Fórmula (l-C).

[0182]Etapa (i) pode ser uma reação de acoplamento utilizando reagentes apropriados na presença de uma base adequada tal como NaBFhCN na presença de um catalisador, por exemplo, AcOH, em um solvente adequado tal como DCM ou DCE em temperatura adequada tal como temperatura ambiente para fornecer um composto de Fórmula (l-C).

Esquema Geral C-3

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Figura 12: represents a ring containin a double bond / representa um anel contendo uma ligação dupla [0183]Esquema Geral C-3 fornece uma síntese exemplar para a preparação de intermediário 1 ou 3, em que B é ou H (para intermediário 3) ou oxetanila (para intermediário 1). O grupo protetor PGi pode ser qualquer grupo protetor adequado, por exemplo, tetraidro-2H-piran-2-il (THP), (trimetilsilil)etóxi)metil (SEM) ou Acetil (Ac).

[0184]Etapa (i) é uma reação com um reagente adequado tal como DHP na presença de um ácido adequado tal como TsOH em solventes apropriados tal como DCM a uma temperatura adequada tal como 20° C a 40° C.

[0185]A etapa (ii) é uma reação de acoplamento cruzado com um reagente adequado tal como ácido borônico ou ésteres utilizando catalisadores de paládio apropriados, tais como Pd(dppf)Cl2 em presença de bases adequadas tais como

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NazCOa em solventes apropriados tal como 1,4-dioxano sob temperaturas adequadas, tais como 60° C a 100° C.

[0186]A etapa (iii) é uma reação com um reagente de oxidação adequado tal como H2O2 em um solvente adequado, tal como THF, sob temperaturas adequadas, tais como de -60⁰ C a -10⁰ C, para fornecer 0 intermediário 1 d.

[0187]A etapa (iv) é uma reação de oxidação que compreende a reação com um oxidante tal como DMP em um solvente adequado tal como DCM a uma temperatura adequada tal como 0^o C a 25° C.

[0188]Etapas (v) e (vii) envolvem reação com um fluridificador tal como DAST em solventes adequados tal como DCM, sob temperaturas adequadas, tais como -78° C a 0^o C.

[0189]Etapa (ix) é uma reação com um reagente redutor adequado, tal como hidrogênio, na presença de catalisadores adequados, tal como Pd/C em solventes polares, tais como MeOH em temperaturas apropriadas, tais como 25° C a 80° C.

[0190]Etapas (vi), (viii) e (x) são reações de desproteção. Tipicamente, 0 intermediário é reagido com ácidos adequados tal como HCI em solventes adequados tal como 1,4-dioxano sob temperaturas adequadas, tais como 25° C a 40° C para produzir 0 intermediário 1.

Esquema Geral C-4

R¹n^n —!

JL JL A = Cl or I 12

Figura 13: A = Cl or I / A = Cl ou I [0191]Esquema Geral C-4 fornece uma síntese exemplar para a preparação de intermediário 2, em que R¹, RR¹, RR², RR³ e RR⁴ são como definidos na Fórmula (l-C).

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63/154 [0192]Etapa (i) é uma reação entre o intermediário 12 com a amina apropriada utilizando bases apropriadas tal como TEA em solventes apropriados, tal como EtOH a uma temperatura adequada, tal como 25° C a 100° C.

[0193]A etapa (i) pode, alternativamente, ser uma reação de acoplamento com reagentes adequados, como ácido borônico, na presença de catalisadores, tais como Pd(PPh3)2Cl2 em solventes adequados, tais como 1,4-dioxano, sob 25° C a 130°C.

EXEMPLOS

Procedimentos Experimentais Gerais [0194]As seguintes descrições e exemplos ilustram a invenção. Estes exemplos não se destinam a limitar o escopo da presente invenção, mas ao invés, fornecer orientação para o químico habilitado preparar e usar os compostos, composições e métodos da presente invenção. Embora modalidades específicas da presente invenção sejam descritas, o químico versado apreciará que várias alterações e modificações podem ser feitas sem que se desvie do caráter e objetivo da invenção.

[0195]Os nomes químicos de compostos descritos no presente pedido de patente foram criados, em geral, de ChemDraw Ultra (ChambridgeSoft) e/ou, em geral, o princípio da nomenclatura IUPAC.

[0196]Aquecimento de misturas de reação com irradiações de microondas foi realizado em um Smith Creator (comprado da Personal Chemistry, Forboro/MA, agora pertencendo a Biotage), um Emrys Optimizer (comprado da Personal Chemistry) ou um microondas Explorer (fornecido por CEM Discover, Mathews/NC).

[0197]Técnicas convencionais podem ser usadas aqui para o trabalho de reações e purificação dos produtos dos Exemplos.

[0198]Referências nos Exemplos abaixo relacionados à secagem de camadas ou fases orgânicas podem se referir à secagem da solução sobre sulfato

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64/154 de magnésio ou sulfato de sódio e filtragem do agente de secagem de acordo com técnicas convencionais. Produtos podem geralmente ser obtidos removendo-se o solvente por evaporação sob pressão reduzida.

[0199]A purificação dos compostos nos exemplos pode ser realizada por métodos convencionais tais como cromatografia e/ou recristalização utilizando solventes adequados. Métodos cromatográficos são conhecidos por aqueles versados na técnica e incluem, por exemplo, cromatografia de coluna, cromatografia flash, HPLC (cromatografia líquida de alto desempenho) e MDAP (autopreparação dirigida à massa, também referida como purificação de LCMS dirigida em massa). O MDAP é descrito, por exemplo, por W. Goetzinger et al, Int. Mass Spectrom., 2004, 238, 153-162.

[0200]Placa de camada fina Analtech Silica Gel GF e E. Merck Silica Gel 60 F-254 foram usadas para cromatografia de camada fina. Ambas, a cromatografia flash e por gravidade foram realizadas em E. Merck Kieselgel 60 (malha 230-400) silica gel. HPLC preparativa foi realizada utilizando-se um Sistema Preparativo Gilson utilizando coluna de fase reversa Luna 5u C18(2) 100A eluindo com um gradiente de 10-80 (0,1% de FA em acetonitrila/0,1 % de FA aquoso) ou um gradiente de 10-80 (acetonitrila/água). O sistema CombiFlash usado para a purificação neste pedido foi comprado de Isco, Inc. Purificação CombiFlash foi realizada utilizando-se uma coluna S1O2 pré-embalada, detector com comprimento de onda UV a 254 nm e solventes mistos.

[0201 ]Os termos CombiFlash, Biotage®, “Biotage 75” e “Biotage SP4®” quando usado aqui refere-se a sistemas de purificação automatizado comercialmente disponíveis utilizando cartuchos de sílica-gel pré-acondicionados.

[0202]Compostos finais foram caracterizados com LCMS (condições listadas abaixo) ou RMN. Os espectros ¹H RMN ou ¹⁹ FRMN foram registrados utilizando-se um espectrômetro Bruker Avance 400 MHz. CDCh é deuteroclorofórmio, DMSO-de é

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65/154 hexaduterodimetilsulfóxido, e CD3OD é tetradeuteriometanol. As mudanças químicas são relatadas em partes por milhão (ppm) campo baixo a partir do padrão interno tetrametilsilano (TMS) ou 0 solvente RMN. Abreviações para os dados de RMN são como segue: s = singleto, d = dupleto, t = tripleto, q = quarteto, m = multipleto, dd = dupleto de dupletos, dt = dupleto de tripletos, app = aparente, br = amplo. J indica a constante de acoplamento de RMN medida em Hertz.

[0203]Todas as temperaturas são relatadas em graus Celsius. Todas as outras abreviações são descritas no Guia Estilo ACS (American Chemical Society, Washington, DC, 1986).

[0204]Estereoquímica absoluta pode ser determinada por métodos conhecidos por aqueles versados na técnica, por exemplo, Raio X ou Dicroismo Circular Vibracional (VCD).

[0205]Quando um enantiômero ou um diasteroisômero é descrito e a estereoquímica absoluta de um centro quiral não é conhecida, 0 uso de * no centro quiral significa que a estereoquímica absoluta do centro quiral não é conhecida, isto é, 0 composto como extraído pode ser ou um único enantiômero R ou um único enantiômero S. Onde a estereoquímica absoluta em um centro quiral de um enantiômero ou um diasteroisômero é conhecida, um símbolo de cunha em negrito ( -^) ou um símbolo em cunha hasheado (...........) é usado como apropriado, sem 0 uso de * no centro quiral.

[0206]Quando um isômero geométrico ou cis-trans é descrito e a configuração absoluta do isômero não é conhecida, 0 uso de * em um dos átomos relevantes para 0 isomerismo geométrico ou cis-trans denota que a configuração absoluta em ou em torno daquele átomo não é conhecida, isto é, 0 composto como extraído pode ser ou um único isômero cis ou um único enantiômero trans.

[0207]Nos procedimentos que se seguem, após cada material de partida, uma referência a um intermediário é tipicamente provida. Isto é fornecido meramente

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66/154 para assistência ao químico versado. O material de partida não pode ser necessariamente preparado a partir do lote referido.

Condições de LCMS:

1) Método Acídico:

a. Instrumentos: HPLC: Waters UPC2 e MS: Qda [0208]Fase móvel: água contendo 0,1% de FA/0,1% de MeCN [0209]Coluna: ACQUITY UPLC BEH Cw 1,7 pm 2,1 x 50 mm e 1,7 pm 2,1 X100 mm [0210]Detecção: MS e detector de arranjo de fotodiodos (PDA)

b. Instrumentos: HPLC: Shimadzu e MS: 2020 [0211]Fase móvel: água contendo 0,1% de FA/0,1% de MeCN [0212]Coluna: Sunfire Cie 5 pm 50 x 4,6 mm e Sunfire Cie 5 pm150 x 4,6 mm [0213]Detecção: MS e detector de arranjo de fotodiodos (PDA)

2) Condições Básicas:

[0214]lnstrumentos: HPLC: Agilent 1260 e MS: 6120 [0215]Fase móvel: 0,1% NH4OH em Η2θ/0,1% NH4OH em ACN [0216]Coluna: Xbridge Cie 5 pm 50 x 4,6 mm e Xbridge C18 5 pm150 x 4,6 mm [0217]Detecção: MS e detector de arranjo de fotodiodos (DAD)

Condições de Prep-HPLC [0218]lnstrumento: Instrumento Waters [0219]Coluna: Xbridge Prep Cie coluna OBD (10 pm, 19 x 250 mm), Xbrige prep C18 10 pm OBD TM 19 X 150 mm, Sunfire Prep C18 10 x 25 0 mm 5 pm, XBRIDGE Prep C18 10 X 150 mm 5 pm etc.

Método Acídico:

[0220]Fase móvel: água contendo 0,1% de TFA/acetonitrila.

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Método básico:

[0221]Fase móvel: água contendo 0,1% de NH 4 OH/acetonitrila

Quiral prep-HPLC:

[0222]Thar SFC Prep 80 (TharSFC ABPR1, Bomba TharSFC SFC Prep 80 CO2, Bomba Co-solvente TharSFC, Permutador de Calor de refrigeração TharSFC e Banho Circulante, Metro de Fluxo de Massa TharSFC, Misturador Estático TharSFC, Módulo de Injeção TharSFC, Detector UV Gilson, Módulo de Coleta de Fração TharSFC.

Análise Quiral-HPLC:

[0223]lnstrumento: Thar SFC Prep 80 (TharSFC ABPR1, Bomba TharSFC SFC Prep 80 CO2, Bomba Co-Solvente TharSFC, Permutador de Calor de refrigeração TharSFC e Banho Circulante, Medidor De Fluxo de massa TharSFC, Misturador Estático TharSFC, Módulo de Injeção TharSFC, Detector UV Gilson, Módulo De coleta De Fração TharSFC.

[0224]Coluna e fase móvel: são descritas em exemplos abaixo.

Abreviações e Fontes de Recursos [0225]As seguintes abreviaturas e recursos são usados aqui abaixo:

Ac - acetil

MeCN - acetonitrila

Atm - atmosfera

Aq. - aquosa

BINAP - 2,2'-bis(difenilfosfino)-1 ,T- binaftil

Boc - terc-butiloxicarbonila

Boc20 - dicarbonato de di-terc-butila

Bn - benzila t-Bu - terc-butila conc. - concentrado

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DAST - Trifluoreto de N,N-dietilaminoenxofre

DCE - 1,2-dicloroetano

DCM - diclorometano

DEA - dietanolamina

DMEDA - N,N'-Dimetiletilenodiamina

Dess-Martin - 1,1,1 -Tris(acetilóxi)-1,1 -diidro-1,2-benziodoxol-3-(1 H)-ona

DHP - 3,4-diidro-2H-pirano

DIBAL-H - Hidreto de diisobutilaluminio

DIEA - N,N-diisopropiletilamina

DIPEA - N,N-diisopropiletilamina

DMA - N,N-dimetilacetamida

DMAP - 4-dimetilaminopiridina

DMEDA - N,N'-dimetiletilenodiamina

DMF - N,N-dimetilformamida

DMP - Dess-Martin Periodinano

DMSO - Dimetil sulfóxido

DPPF - 1,1'- bis (difenilfosfino) ferrocene

EA - Acetato de Etileno

EDC - Cloridrato de 1 -etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida

EDCI - 3-(etiniliminometilenoamino)-N,N-dimetilpropan-1-amina

EtOH/EtOH - etanol

EtzO - Éter dietilico

EtOAc - acetato de etila

EtaN - trietilamina

FA - ácido fórmico

HEP - heptano

Hex - hexano

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HOAc - ácido acético

HATU - hexafluorfosfato de 2-(1 H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urânio

HOBT - hidroxibenzotriazol

IPA - álcool isopropopílico 'PrOH/iPrOH - álcool isopropopílico m-CPBA - ácido meta-cloroperoxibenzoico

MOMCI - éter monoclorodimetila

Me - metila

MeOH - metanol

MsCI - cloreto de metanossulfonila

NaHMDS - bis(trimetilsilil)amida de sódio

NIS - N-iodosuccinimida

NMP -1 -metil-2-pirrolidona

NMO - 4-óxido de 4-metilmorfolina

PE - éter de petróleo

PMB - p-metoxibenzila

Pd2(dba)3 - Tris(dibenzilidenoacetona) dipaládio

Pd(dppf)Cl2 - complexo diclorometano dicloreto de 1,1'- Bis(difenilfosfino) ferrocepaládio (II)

PhsP - trifenilfosfina

PhNTÍ2 - N,N-bis-(Trifluormetanossulfonil) anilina

PPTS - p-toluenossulfonato de piridínio

PTSA - ácido p-toluenossulfônico rt/RT - temperatura ambiente

Rt - tempo de retenção sat. - saturado

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SEM-CI - cloreto de 2-(trimetilsilil)etoximetila

SFC - Cromatografia de Fluido Supercritica

TBAI - lodeto de Tetrabutilamônio

TBDPSCI - terc-Butil(cloro) difenilsilano

TEA - trietilamina

TFA - ácido trifluoracético

TFAA - anidrido trifluoracético

THF - tetraidrofurano

TLC - cromatografia de camada fina

TsCI - cloreto de 4-toluenossulfonila

TsOH - ácido p-toluenossulfônico

Descrição A -1

Cloridrato de (S)-morfolin-2-ilmetanol (D A -1) [0226]A uma solução 2-(hidroximetil)morfolina-4-carboxilato de (S)-terc-butila (500 mg, 2,30 mmol) em dioxano (4 mL) foi adicionado HCI/dioxano (4 M, 5 mL) e agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A TLC mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi concentrada para dar o composto título (bruto, 430 mg, rendimento >100%) como um sólido branco.

Descrição A -2

4,6-Diiodo-2-metilpirimidina (D A -2) [0227]A uma solução de Nal (11,9 g, 79,7 mmol) em HI (55%, 50 mL) foi adicionada 4,6-dicloro-2-metilpirimidina (10,0 g, 61,3 mmol) em partes. A suspensão resultante foi aquecida a 40° C e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada e filtrada. O sólido foi lavado com água e em seguida lavado com metanol (50 mL). A mistura foi filtrada para dar o composto título (9,0 g, rendimento 42%) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CDCb): δ 8,07 (s, 1H), 2,67 (s, 3H).

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LCMS (fase móvel: 5-95% acetonitrila em 2.5 min): Rt = 1.59 min, MS Calcd: 346; MS Encontrado: 347 [M + H]⁺.

Descrição A -3 (S)-(4-(6-lodo-2-metilpirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (D A -3) [0228]A uma solução de cloridrato de (S)-morfolin-2-ilmetanol (430 mg bruto, 2,80 mmol) em CH3OH (5 mL) foi adicionado 4, 6-diiodo-2-metilpirimidina (1,10 g, 3,10 mmol) e TEA (850 mg, 8,40 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 60° C por 2 horas. A TLC mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e EtOAc extraído (20 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de silica gel (PE-EA = 5:1) para dar 0 composto título (760 mg, rendimento 81%) como um sólido branco.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 6,79 (s, 1H), 4,18-4,01 (m, 3H), 3,79-3,58 (m, 4H), 3,08-2,99 (m, 1H), 2,92-2,84 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 1,97-1,90 (m, 1H).

Descrição A-4

6-Bromo-5-metil-1 H-indazol (D A-4) [0229]A uma solução de 5-bromo-2,4-dimetilanilina (15,0 g, 75,0 mmol) em clorofórmio (150 mL) foram adicionados AC2O (15,0, 150 mmol), KOAc (8,00 g, 82,5 mmol), 18-coroa-6 (10,0 g, 37,5 mmol) e nitrito de isoamila (26,3 g, 225 mmol) sob banho de gelo. A mistura de reação foi deixada em refluxo por 36 horas, em seguida concentrada para remover 0 solvente. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (500 mL), lavado com água (100 mL), secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em THF (100 mL) e NaOH (4 M, 40,0 mL, 160 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente foi removido sob vácuo e 0 resíduo foi dividido entre EtOAc (400 mL) e água (200 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina, secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc

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72/154 de 10:1 a 5:1) para produzir o composto título (5,1 g, rendimento de 32%) como um sólido laranja.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 10,20 (br s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 2,50 (s, 3H).

Descrição A-5

6-Bromo -5-metil -1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol (D A-5) [0230]A uma solução de 6-bromo-5-metil-1 H-indazol (5,10 g, 24,2 mmol) em DCM seco (120 mL) foi adicionado DHP (4,10 g, 48,4 mmol), TsOH (0,800 g, 4,80 mmol) e Mg2SCU (5,0 g) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida a 35 minutos e agitada por uma hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi lavado com uma solução de Na2COa (10%, 100 mL), secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 50/1 a 20/1) para dar o composto título (6,0 g, rendimento 84%) como um sólido laranja.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 7,90 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 5,63 (dd, J = 9,6, 3,0 Hz, 1H), 4,05-4,00 (m, 1H), 3,78-3,70 (m, 1H), 2,58-2,44 (m, 4H), 2,20-2,02 (m, 2H), 1,78-1,65 (m, 3H).

LCMS (fase móvel: 5-95% CH3CN): Rt = 2.19 min in 3 min; MS Calcd: 294; MS Encontrado: 295 [M + H]⁺.

Descrição A-6

4-(5-metil-1 -(tetraidro-2 H-pi ran-2-il)-1 H-indazol-6-il)-5,6-di idropi ridi na-1 (2H)carboxilato terc-butila (D A-6) [0231 ]A uma suspensão de 6-bromo-5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 Hindazol (5,50 g, 18,6 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5, 6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (6,90 g, 22,3 mmol) e Na2CCh (4,90 g, 46,5 mmol) em dioxano (150 mL) e água (130 mL) foi adicionado Pd(dppf)Ch (658 mg, 0,900 mmol). A mistura foi desgaseificada com N2 por 3 vezes e em seguida

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73/154 agitada a 80° C durante a noite. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi dividido entre EtOAc (300 mL) e água (200 mL). A camada orgânica separada foi lavada com solução salina, secada sobre NazSCU, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 10:1) para dar o composto título (7,3 g, rendimento 99%) como um sólido castanho claro.

¹H RMN (400 MHz, CDCb): δ 7,92 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 5,67 (dd, J = 9,6, 2,8 Hz, 1H), 5,63 (br s, 1H), 4,07-4,01 (m, 3H), 3,78-3,70 (m, 1H), 3,673,64 (m, 2H), 2,62-2,53 (m, 1H), 2,45-2,39 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,18-2,12 (m, 1H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,81 -1,73 (m, 2H), 1,69-1,61 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).

Descrição A-7

4- (5-metil-1 -(tetraidro-2 H-pi ran-2-il)-1 H-indazol-6-il)pi peridi na-1 -carboxilato de terc-butila (D A-7) [0232]A uma solução de 4-(5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6-il)-

5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (80 g, bruto) em MeOH (2 L) sob H2 foi adicionado Pd/C (10 g, 12%/peso). A mistura de reação foi desgaseificada por 3 vezes, agitada em t.a. por 2 d, filtrado e concentrado para dar 0 produto bruto como um sólido branco. (65,8 g) [0233]LC-MS [fase móvel: fase móvel: de 30% de água (0,1% de FA) e 70% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 2,0 min]: Rt = 0,63 minutos; MS Calculado: 399,2, MS Encontrado: 400,05 [M + H] +.

Descrição A -8

5- metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (D A-8) [0234]A uma solução 4-(5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6il)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila (55,4 g, 139 mmol) em MeOH (150 mL) foi adicionado HCI/MeOH (5 M, 200 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada, tratada com

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Na2C0a aq. e basificada com NaOH aq. a urn pH > 12. A mistura foi filtrada para dar o produto desejado como um sólido branco. (29,3 g, rendimento = 98%)

LC-MS [fase móvel: fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH₃CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH₃CN (0,1% FA) em 2,0 min]: Rt = 0,85 min; MS Calculado.: 215, MS Encontrado: 216 [M + H]+.

Descrição A-9

-((Fenilsulfonil)metileno)oxetano (D A-9) [0235]A uma solução de (metilsulfonil)benzeno (2,2 g, 13,9 mmol) em THF (38 mL) a 0^o C foi adicionado n-BuLi (2,5 M em hexanos, 12,2 mL, 30,6 mmol) em gotas durante 10 minutos. Após a mistura ser agitada por 30 minutos, clorodietilfosfonato (2,4 mL, 16,7 mmol) foi adicionado em gotas à reação. Após 30 minutos, uma solução de oxetan-3-ona (1,0 g, 13,9 mmol) em THF (2 mL) foi adicionada gota a gota à mistura de reação a -78° C. A mistura de reação foi agitada a -78° C por 2 horas, em seguida diluída com NH4CI aquoso (100 mL) e extraída com EtOAc (100 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas e 0 resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de silica (éter de petróleo/EtOAc = 3/1) para dar 0 composto título (2,4 g, 82%) como um óleo incolor.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7.90-7.88 (m, 2H), 7.68-7.64 (m, 1H), 7.57 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 6.13-6.11 (m, 1H), 5.66-5.64 (m, 2H), 5.30-5.27 (m, 2H).

Descrição A-10

Metil-6-(1-(3-((fenilsulfonil)metil)-oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-indazol (D A10) [0236]A uma solução agitada de 3-((fenilsulfonil)metileno)oxetano (630 mg, 2,99 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado 5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (500 mg, 2,32 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50° C de um dia para 0 outro, em seguida concentrada. A purificação através de cromatografia de coluna proporcionou 0 produto desejado como um sólido branco (816 mg, rendimento: 82%).

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LC-MS [fase móvel: de 90% água (0.1% FA) e 10% CH3CN (0.1% FA) to 5% água (0.1% FA) e 95% CH3CN (0.1% FA) em 2.0 min]: Rt = 1.31 min; MS Calcd: 425, MS Encontrado: 426 [M + H]⁺.

Descrição A-11

5-Metil-6-(1 -(3-metiloxetan-3-il)piperidin-4-iI)-1 H-indazol (D A-11) [0237]A uma solução agitada de 5-metil-6-(1-(3-((fenilsulfonil)metil)oxetan-3il)piperidin-4-il)-1 H-indazol (400 mg, 0,940 mmol) em MeOH/THF (12 mL/2,4 mL) foi adicionado Mg (114 mg, 4,70 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Uma outra porção de Mg (152 mg, 6,27 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada a 40° C de um dia para 0 outro, então resfriada à temperatura ambiente, diluída com Et20, tratado com Na2SO4.10H2O, agitado por uma hora e filtrado. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna (eluente: PE:EtOAc =1:1, seguido por CH2Cl2-MeOH = 30:1 a 15:1) forneceu 0 produto desejado como um sólido branco (114 mg, rendimento: 42%).

LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0,92 minutos; MS Calculado: 285, MS Encontrado: 286 [M + H]+

Descrição A-12

Cloridrato de (R)-morfolin-2-ilmetanol (D A-12) [0238]A uma solução de 2-(hidroximetil)morfolina-4-carboxilato de (R)-tercbutila (500 mg, 2,30 mmol) foi adicionado HCI/dioxano (4 M, 10 mL) e agitada por 1 h em temperatura ambiente. A TLC mostrou que a reação foi completada. A reação foi concentrada para dar 0 composto título (420 mg, rendimento > 100%) como um sólido branco.

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1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 9,67 (s, 1H), 9,38 (s, 1H), 3,94-3,88 (m, 1H), 3,77-

3.67 (m, 2H), 3,45-3,33 (m, 2H), 3,13 (t, J = 12,6 Hz, 2H), 2,95-2,87 (m, 1H), 2,78-

2.67 (m, 1H).

Descrição A-13 (R)-(4-(6-lodo-2-metilpirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D A-13) [0239]A uma solução de cloridrato de (R)-morfolin-2-ilmetanol (423 mg bruto, 2,30 mmol) em CH3OH (10 mL) foi adicionado 4,6-diiodo-2-metilpirimidina (954 mg, 2,75 mmol) e TEA (835 mg, 8,25 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 70° C e agitada por 2 horas. LCMS mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi concentrada para remover 0 solvente, vertida em água (40 mL) e extraída com EtOAc (40 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina, secadas em NazSCU e concentradas. O resíduo foi purificado por coluna (PE:EA = 2:1) para dar 0 composto título (639 mg, rendimento 83%) como um sólido branco.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 6,79 (s, 1H), 4,22-4,01 (m, 3H), 3,79-3,56 (m, 4H), 3,08-2,98 (m, 1H), 2,88-2,84 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,09-2,04 (m, 1H).

Descrição A-14

4,6-Diiodo-2-metoxipirimidina (D A-14) [0240]A uma solução de Nal (1,10 g, 7,34 mmol) em HI (55%, 7,5 mL) foi adicionado 4,6-dicloro-2-metoxipirimidina (1,00 g, 5,59 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 40° C e agitada por 10 horas, em seguida derramada em água gelada (50 mL) e filtrada para dar 0 sólido bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 10:1) para dar 0 produto título (640 mg, rendimento de 31,7%) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,85 (s, 1H), 4,00 (s, 3H).

Descrição A -15 (R)-(4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D A-15):

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77/154 [0241 ]0 composto título foi preparado por um procedimento similar àqueles descritos para o D A-3 partindo de uma solução cloridrato de 4,6-diiodo-2metoxipirimidina e cloridrato de (R)-morfolin-2-ilmetanol em 'PrOH e DIPEA.

LC-MS [fase móvel: de 50% de água (0,1% de FA) e 50% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,6 minutos]: Rt = 0,92 minutos; MS Calculado: 351,1, MS Encontrado: 352,0 [M + H]+

Descrição A-16 (S)-(4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D A-16):

[0242]O composto título foi preparado por um procedimento similar àqueles descritos para 0 D A-3 partindo de uma solução de cloridrato de 4,6-diiodo-2metoxipirimidina e cloridrato de (S)-morfolin-2-ilmetanol em iPrOH e DIPEA.

LC-MS [fase móvel: de 50% de água (0,1% de FA) e 50% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,6 minutos]: Rt = 0,91 minutos; MS Calculado: 351,1, MS Encontrado: 352,0 [M + H]+

Descrição B-1

6-Bromo-5-metil-1 H-indazol (D B-1)

[0243]A uma solução de 5-bromo-2,4-dimetilanilina (15,0 g, 75,0 mmol) em clorofórmio (150 mL) foi adicionado AC2O (15,0, 150 mmol) sob banho de gelo. KOAc (8,00 g, 82,5 mmol), 18-coroa-6 (10,0 g, 37,5 mmol) e nitrito de isoamila (26,3 g, 225 mmol) foram adicionados. A mistura foi deixada em refluxo por 36 horas. A mistura de reação foi concentrada e 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc (500 mL). A solução orgânica foi lavada com água (100 mL), seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi dissolvido em THF (100 mL) e NaOH (4 M, 40,0 mL, 160 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 1 h. O solvente foi removido sob vácuo e 0 resíduo foi dividido entre EtOAc (400 mL) e água (200 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina, seca sobre Na2SO4 e

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78/154 concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc de 10:1 a 5:1) para produzir o composto título (5,1 g, rendimento de 32%) como um sólido laranja.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 10,20 (br, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 2,50 (s, 3H).

Descrição B-2

6-Bromo-5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol (D B-2)

THP /

N [0244]A uma solução de 6-bromo-5-metil-1 H-indazol (5,10 g, 24,2 mmol) em DCM seco (120 mL) foi adicionado DHP (4,10 g, 48,4 mmol), TsOH (0,800 g, 4,80 mmol) e Mg2SCU (5,0 g) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida a 35° C e agitada por uma hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi lavado com uma solução de Na2COa (10%, 100 mL), seca sobre Na2SCU e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc de 50:1 a 20:1) para dar o composto título (6,0 g, rendimento 84%) como um sólido laranja.

LCMS (fase móvel: 5-95% de CH3CN): Rt = 2,19 minutos em 3 minutos; MS Calculado: 294; MS Encontrado: 295 [M + H]+

Descrição B-3

4-(5-Metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6-il)-5,6-diidropiridina- piridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (D B-3)

THP / N %

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79/154 [0245]A uma suspensão de 6-bromo-5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 Hindazol (5,50 g, 18,6 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (6,90 g, 22,3 mmol) e Na2C0a (4,90 g, 46,5 mmol) em dioxano (150 mL) e água (130 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (658 mg, 0,900 mmol). A mistura foi desgaseificada com N2 por 3 vezes e em seguida agitada a 80 minutos durante a noite. O solvente foi removido sob vácuo e 0 resíduo foi dividido entre EtOAc (300 mL) e água (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina, secadas sobre Na2SCU e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 10:1) para dar 0 composto título (7,3 g, rendimento 99%) como um sólido castanho claro.

[0246]¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 7,92 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,28 (s, 1H),

5,67 (dd, J = 9,6, 2,8 Hz, 1H), 5,63 (br s, 1H), 4,07-4,01 (m, 3H), 3,78-3,70 (m, 1H), 3,67-3,64 (m, 2H), 2,62-2,53 (m, 1H), 2,45-2,39 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,18-2,12 (m, 1H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,81-1,73 (m, 2H), 1,69-1,61 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).

Descrição B-4

4-(5-Metil-1 - (tetraidro-2H-piran-2-i I)-1 H-indazol-6-il)pi peridi na-1 -carboxilato de terc-butila (D B-4)

[0247]A uma solução de 4-(5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6-il)-

5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (80 g, bruto) em MeOH (2L) sob H2 foi adicionado Pd/C (10 g, 12%/peso). A mistura de reação foi desgaseificada por 3 vezes e agitada em temperatura ambiente por 2 dias. A mistura foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado para dar 0 produto bruto como um sólido branco (65,8 g).

LC-MS [fase móvel: de 30% de água (0,1% de FA) e 70% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 2,0 min]: Rt = 0,63 minutos; MS Calculado: 399,2, MS Encontrado: 400,5 [M + H]+.

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Descrição B-5

5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (D B-5):

ΗΓ

[0248]HCI/MeOH (5M, 200 mL) foi adicionado a uma solução de 4-(5-metil-1(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6-il)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (55,4 g, 139 mmol) em MeOH (150 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada, tratada com Na2CO₃ aq. e basificada com NaOH aq. para pH > 12. A mistura foi filtrada para dar o produto desejado como um sólido branco. (29,3 g, rendimento = 98%).

[0249]LC-MS [fase móvel: fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH₃CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH₃CN (0,1% FA) em 2,0 min]: Rt = 0,85 min; MS Calculado. MS Encontrado: 216 [M + H]+.

Descrição B-6

5-Metil-6-(1 -(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol (D B-6):

H

N ?N [0250]NaBH₃CN (9,40 g, 149 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-metil-

6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (16,0 g, 74,3 mmol)), oxetan-3-ona (13,4 g, 223 mmol), zeólito (13,4 g) e AcOH (1,56 g, 1,63 mmol) em CH2Cl2/MeOH (320 mL / 80 mL) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, filtrada e a massa filtrada foi lavada com CH2CI2. O filtrado foi lavado com NaHCO₃ aquoso e solução salina. A parte orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna (PE:EtOAc = 1:1 para CH2Cl2:MeOH = 50:1) para dar 0 produto desejado como um sólido branco (11,9 g, rendimento = 59%)

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81/154 [0251]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0, 87min; MS calculado: 271, MS Encontrado: 272 [M + H] +.

Descrições B-7 e B-8 (4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)-6-metilmorfolin-2-il)metanol (isômero 1, D B-7) e (4(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)-6-metilmorfolin-2-il)metanol (isômero 2, D B -8):

isomer 1 isomer 2 cis (or trans) trans (or cis)

Figura 14: isomer 1 / isômero 1 isomer 2 / isômero 2 cis (or trans) I cis (ou trans) [0252]DIPEA (886 mg, 6,90 mmol) foi adicionado a uma solução de 4,6diiodo-2-metilpirimidina (792 mg, 2,29 mmol) e (6-metilmorfolin-2-il)metanol (300 mg, 2,29 mmol) em THF/EtOH (7 mL / 7 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada para dar o resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (eluente: PE:EtOAc = 5:1) forneceu o isômero 1 como um sólido branco (207 mg, rendimento: 25%) e isômero 2 como sólido branco (172 mg, rendimento: 21%).

Isômero 1:

[0253]LC-MS [fase móvel: de 80% de água (0,1% de FA) e 20% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 1,51 minutos; MS Calculado: 349, MS Encontrado: 350 [M + H]+.

Isômero 2:

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82/154 [0254]LC-MS [fase móvel: de 80% de água (0,1% de FA) e 20% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 1,23 minutos; MS Calculado: 349, MS Encontrado: 350 [M + H] +

Descrições B-9 e B-10 (4-(6-lodo-2-metilpirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il) metanol (isômero desconhecido único 1, D B-9; isômero desconhecido único 2, D B-10)

isomer 1 isomer 2 cis (or trans) trans (or cis)

Figura 15: isomer 1 / isômero 1 isomer 2 / isômero 2 cis (or trans) I cis (ou trans) trans (or cis) I trans ( ou cis) [0255]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metilpirimidina (792 mg, 2,29 mmol) e (6-metil-morfolin-3-il)metanol (300 mg, 2,3 mmol) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIPEA (886 mg, 6,9 mmol). A mistura de reação foi agitada a 90° C durante a noite, em seguida concentrada para dar o resíduo. A purificação através de cromatografia de sílica-gel (eluente: PE:EtOAc = 5:1) forneceu o isômero 1 como um sólido amarelo (371 mg, rendimento: 46%) e isômero 2 como um óleo brilhante (80 mg, rendimento: 21%).

Isômero 1:

LC-MS [fase móvel: de 95% de água (0,1% de FA) e 5% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 3,76 minutos; MS Calculado: 349, MS Encontrado: 350 [M + H] +

Isômero 2:

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LC-MS [fase móvel: de 95% de água (0,1% de FA) e 5% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 3,66 minutos; MS Calculado: 34, MS Encontrado: 350 [M + H] +.

Descrição B-11

-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il) morfolin-2-il) etanol (D B-11)

O OH [0256]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metilpirimidina (500 mg, 1,4 mmol) e 3oxa-1,8-diazaspiro[4.5]decan-2-ona (220 mg, 1,3 mmol) em EtOH/THF (7 mL / 7 mL) foi adicionado DIPEA (508 mg, 3,9 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (PE:EtOAc = 5:1) para dar 0 produto desejado como um sólido branco (371 mg, rendimento: 81%).

[0257]LC-MS [fase móvel: de 70% de água (0,1% de FA) e 30% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0,29 minutos; MS Calculado: 349,0, MS Encontrado: 350,2 [M + H] +.

Descrição B-12 (4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il) metanol (D B-12) [0258]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidino (300 mg, 0,8 mmol) e (5-metilmorfolin-2-il)metanol (109 mg, 0,8 mmol) em THF/EtOH = 1/1 (30 mL) foi adicionado DIEA (320 mg, 2,5 mmol) em temperatura ambiente. A reação foi agitada a 60° C por 48 h. A mistura de reação foi concentrada e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel eluída com PE:EtOAc = 1:2 para fornecer 0 produto como um sólido branco (253 mg).

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84/154 [0259]LC-MS [fase móvel: de 50% de água (0,1% de FA) e 50% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,6 minutos]: Rt = 1,01 minutos; MS Calculado: 365, MS Encontrado: 366 [M + H] + Descrição B-13

4-(1 -(6-(2-(Hidroximetil)-5-metilmorfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil -1 H-indazol-

6-il)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila (D B-13) [0260]A uma solução de 4-(5-metil-1 H-indazol-6-il) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (500 mg, 1, 58 mmol) e (4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)-5metilmorfolin-2-il) metanol (637 mg, 1,75 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (224 mg, 1,58 mmol), Cui (150 mg, 0,79 mmol) e K3PO4 (670 mg, 3,16 mmol) em tolueno (10 mL) foi agitada a 100° C por 6 horas. A mistura foi concentrada. Ο resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc =1/1) para dar 0 composto título (507 mg, rendimento dado) como um sólido branco.

[0261]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B%) em 4 minutos. 05-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,236 minutos; MS Calculado. 552, MS Encontrado: 553 [M + H] +.

Descrição B-14

3-(Benzilamino)-2-hidroxibutanoato de metila (D B-14)

N v O ^H OH [0262]A uma solução de cloridrato de metil 3-amino-2-hidroxibutanoato (25,0 g, 147 mmol) em MeOH (500 mL) foi adicionado TEA (37,1 mL, 368 mmol) a 0^o C

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Após 10 minutos de agitação, benzaldeído (18,7 g, 176 mmol) foi adicionado à reação. A mistura foi agitada a 0^o C por 10 minutos, então NaBHL (8,4 g, 221 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada a 0^o C à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com 200 mL de NHkCI sat. A mistura foi extraída com EtOAc (500 mL x 2). A camada orgânica foi concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc =10:1 a 2:1 para dar o composto título (10 g, 31%) como um óleo amarelo.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 7.39-7.31 (m, 5H), 4.70 (s, 2H), 3.87-3.66 (m, 5H), 1.19 (d, J = 4.5 Hz, 3H)

Descrição B-15

3-(N-benzil-2-cloroacetamido)-2-hidroxibutanoato de metila (D B-15)

Cl [0263]Uma mistura de 3-(benzilamino)-2-hidroxibutanoato de metila (10 g, 44,8 mmol) em DCM (200 mL) foi adicionado DIPEA (11,6 g, 89,6 mmol) seguido por cloreto de 2-cloroacetila (6,07 g, 54 mmol). A mistura foi agitada a 0^o C por 1 hora. A mistura foi lavada com água (200 mL), extraído com DCM (200 mL). A camada orgânica foi concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 4:1 a 1:1 para dar composto (5,1 g, 38%) como óleo marrom.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 7,45-7,28 (m, 5H), 4,75 (s, 1H), 4,41-4,12 (m, 2H), 4,17-4,12 (m, 2H), 3,76-3,62 (m, 4H), 1,29-1,18 (m, 3H).

Descrição B-16

4-Benzil-3-metil-5-oxomorfolina-2-carboxilato de metila (D B-16)

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O N

[0264]Uma mistura de 3-(N-benzil-2-cloroacetamido)-2-hidroxibutanoato de metila (5,1 g, 17,0 mmol) em THF (60 mL) a 0° C adicionou-se NaH (1,36 g, 34 mmol, 60% em óleo mineral). A mistura foi agitada a 0^o C à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com 20 mL de NFkCI sat. A mistura foi extraída com EtOAc (200 mL). A camada orgânica foi lavada com água (100 mL) e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 4:1 a 1:1 para dar o composto título (3,4 g, 77%) como um óleo amarelo.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 7,37-7,25 (m, 5H), 5,50 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 4,34-4,19 (m, 3H), 3,82-3,71 (m, 5H), 1,25-1,19 (m, 3H).

Descrição B-17 (4-Benzil-3-metilmorfolin-2-il) metanol (D B-17)

N [0265]A uma mistura de 4-benzil-3-metil-5-oxomorfolina-2-carboxilato de metila (3,4 g, 12,9 mmol) em THF (50 mL) foi adicionado L1AIH4 (980 mg, 25,8 mmol) a 0^o C. A mistura foi agitada a 0^o C por 30 minutos, então a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi extinta com 10 mL de MeOH seguido por tartarato de sódio de potássio sat. (20 mL). A mistura foi diluída com 20 mL de EtOAc e agitada em temperatura ambiente por 1 hora. Na2ÔO4 foi adicionado à mistura. A mistura foi filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por

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87/154 cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 2:1 a 1:1 para dar composto (1,6 g, 82%) como óleo amarelo.

[0266]¹H RMN (300 MHz, CDCb): δ 7,38-7,29 (m, 5H), 4,20 (d, J= 13,2 Hz, 1H), 4,07 (dd, J= 12,3, 3,3 Hz, 1H), 3,80-3,71 (m, 2H), 3,61-3,53 (m, 2H), 3,15 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,82 (br s, 1H), 2,70 (dd, J = 11,7, 0,3 Hz, 1H), 2,37 (dt, J = 11,7, 3,3 Hz, 1H), 2,15 (dd, J= 9,6, 2,7 Hz, 1H), 1,29 (d, J=6.3 Hz, 3H).

Descrição B-18

Cloridrato de (3-metilmorfolin-2-il)metanol (D B-18)

HCI H [0267]Uma mistura de (4-benzil-3-metilmorfolin-2-il)metanol (1,6 g, 7,2 mmol), Pd/C (320 mg, 20% em peso) em MeOH (10 mL) foi adicionado HCI conc. (3 gotas). A mistura foi agitada a 50° C sob H2 (50 psi) de um dia para 0 outro. A mistura foi filtrada e concentrada para dar 0 composto título (1,0 g, 86%) como óleo amarelo.

[0268]¹H RMN (400 MHz, CDCb): δ 3.87 (dd, J = 4.0, 1.6 Hz, 1H), 3.84-3.69 (m, 1H), 3.62 (dt, J= 10.4, 3.6 Hz, 1H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.48 (s, 1 H), 3.46-3.39 (m, 1H), 3.03-2.94 (m, 2H), 2.62-2.57 (m, 1H), 1.17 (d, J= 6.4 Hz, 3H).

Descrição B-19 (4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)-3-metilmorfolin-2-il) metanol (D B-19)

[0269]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidino (978 mg, 3 mmol), cloridrato de (3-metilmorfolin-2-il) metanol (500 mg, 3 mmol) e TEA (909 mg, 9 mmol) em i-PrOH (10 mL) foi agitada a 30° C durante a noite. A mistura foi diluída com H2O (50 mL), extraído com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de

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88/154 sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 1/1) para dar o composto título (605 mg, 55%) como um óleo incolor.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,68 (s, 1H), 4,18-4,08 (m, 2H), 3,99-3,90 (m, 7H), 3,71-3,67 (m, 1H), 3,35-3,30 (m, 1H), 2,05-2,02 (m, 1H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 3H).

Descrição B-20

4-(1 -(6-(2-(hidroximetil)-3-metilmorfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil -1 H-indazol-

6-il) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (D B-20)

[0270]A uma solução de 4-(5-metil-l1 H-indazol-6-il)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (476 mg, 1, 51 mmol) e (4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)-3metilmorfolin-2-il) metanol (605 mg, 1,66 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (214 mg, 1,51 mmol), Cul (143 mg, 0,75 mmol) e K3PO4 (640 mg, 3,02 mmol) em tolueno (3 mL) foi agitada a 100° C por 5 horas. A mistura foi diluída com 50 mL de EtOAc e lavada com NH3H2O (30 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SCU4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílicagel (éter de petróleo/EtOAc = 1/1) para dar 0 composto título (540 mg, 65%) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,70 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 4,40-4,35 (m, 3H), 4,29 (s, 3H), 4,10-3,93 (m, 4H), 3,42 (t, J= 12,8 Hz, 1H), 2,98 (t, J= 12,4 Hz, 1H), 2,85-2,80 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 1,88-1,85 (m, 2H), 1,751,65 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,38 (d, J= 6,8 Hz, 3H).

Descrição B-21 (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il)pirimidin-4-il)-3metilmorfolin-2-il) metanol (D B-21)

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[0271 ]A uma solução de 4-(1-(6-(2-(hidroximetil)-3-metilmorfolino)-2metoxipi ri m idi n-4-i l)-5-meti 1-1 H-i ndazol-6-i I) pi peridi na-1 -carboxilato de terc-butila (540 mg, 0,98 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. NaHCOa sat. foi adicionado à mistura para ajustar pH > 7. A Mistura foi diluída com H2O (50 mL), extraído com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2ÔO4, filtrado e concentrado para dar 0 composto título (442 mg, 99%) como um sólido branco.

[0272]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NFkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,679 minutos; MS Calculado. 452, MS Encontrado: 453 [M + H] +.

Descrição B-22 (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il)pirimidin-4-il)-5-metilmorfolin2-il) metanol (D B-22)

N ^N, /

(D V-N [0273]A uma solução de 4-(1-(6-(2-(hidroximetil)-5-metilmorfolino)-2metoxipi ri m idi n-4-i l)-5-meti 1-1 H-i ndazol-6-i I) pi peridi na-1 -carboxilato de terc-butila (507 mg, 0,92 mmol) em DCM (4 mL) e TFA (4 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (DCM/MeOH = 10/1) para dar 0 composto título (400 mg, 96%) como um sólido amarelo.

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90/154 [0274]LCMS [coluna: C18; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 05-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,756 minutos; MS calculado. 452, MS Encontrado: 353 [M + H-100]⁺.

Descrição B-23 [0275]Mistura de 6-metil-4-(((trifluormetil)sulfonil)óxi)-5,6-diidropiridina-1 (2H)carboxilato de terc-butila e 2-metil-4-(((trifluormetil)sulfonil)óxi)-5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (D B-23)

OTf OTf

I I

Boc Boc [0276]A uma solução de 2-metil-4-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (12,5 g, 58,7 mmol) em THF (200 mL) a -70° C foi adicionado LiHMDS (65 mL, 64,5 mmol, 1,0 mol/L em THF). A mistura foi agitada a -70° C por 1 hora. Então, N,N-Bis (trifluormetilsulfonil)anilina (23 g, 64,5 mmol) em THF (40 mL) foi adicionado à reação. A mistura foi agitada a -70° C em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com 200 mL de NH4CI sat. (200 mL). A mistura foi extraída com EtOAc (500 mL). A camada orgânica foi lavada com H2O (200 mL), solução salina (100 mL) e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 100:1 a 10:1 para dar composto (20,3 g, 100%) como óleo amarelo.

[0277]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,161 minutos; MS Calculado. 345, MS Encontrado: 290 [M - 56 + H] +.

Descrição B-24

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91/154 [0278]Mistura de 6-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila e 2-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (D B-24)

ο. ,o o_x„,o

[0279]Uma mistura de mistura de 6-metil-4-(trifluormetil)sulfonil)óxi)-5,6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila e 2-metil-4-(((trifluormetil)sulfonil)óxi)5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (20,3 g, 58,8 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (14,4 g, 58,8 mmol), Pd(dppf)Cl2 (4,8 g, 5,88 mol) e KOAc (11,5 g, 117,7 mmol) em 1,4-dioxano (300 mL) sob l\Í2 foi agitado a 100° C por 4 horas. A mistura foi concentrada com sílica-gel e purificada por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 20:1 a 10:1 para dar o composto título (19 g, 100%) como óleo amarelo.

[0280]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 40-95-POS; taxa de fluxo: 1, 5 mL/min]: Rt = 2,279 minutos; MS Calculado. 323, MS Encontrado: 268 [M -56 + H]+.

Descrição B-25 [0281]Mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)carboxilato de terc-butila e 6-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (D B-25)

[0282]Uma mistura de mistura de 6-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila e 2-metil-4-(4,4,5,

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5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (9,5 g, 29,2 mmol), 6-bromo-5-metil-1 H-indazol (4,1 g, 19,5 mmol), Pd(dppf)Cl2 (1,59 g, 1,95 mmol) e K2CO3 (8,07 g, 58,5 mmol) em 120 mL de 1,4-dioxano/água (v/v = 5/1) sob N2 foi agitada a 100° C por 4 horas. A mistura foi concentrada com silica gel e purificada por cromatografia utilizando éter de petróleo/EtOAc = 10/1 a 4/1 para produzir 0 composto título (5,0 g, 52%) como óleo amarelo.

[0283]LCMS [coluna: C18; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,311 minutos; MS Calculado. 327, MS Encontrado: 328 [M + H] +.

Descrição B-26

2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-piperidina-1-carboxilato de terc-butila (D B-26)

[0284]Uma mistura de mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5,6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila e 6-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)-5,6diidropiridina -1 (2H)-carboxilato de terc-butila (5,0 g, 15,3 mmol) e Pd/C (1,0 g, 20% em peso) em MeOH (100 mL) sob H2 (50 psi) foi agitada a 50° C por 7 dias. A mistura foi concentrada com sílica-gel e purificada por cromatografia utilizando-se éter de petróleo/EtOAc = 2:1 a 1:1 para dar 0 composto título (2,65 g, 53%) como óleo amarelo.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 10,12 (br s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,52 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,67-4,20 (m, 1H), 4,02-3,81 (m, 1H), 3,32-3,01 (m, 2H), 2,44 (d, J= 9,2 Hz, 3H), 1,75-1,66 (m, 4H), 1,51 (s, 9H), 1,27-1,26 (m, 3H )

Descrição B-27 [0285]4-(1 -(6-((S)-2-(hidroximetil)morfolino)-2-metilpirimidin-4-il)-5-metil-1 Hindazol-6-il)-2-metilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila

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[0286]Uma mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1carboxilato de terc-butila (500 mg, 1,52 mmol), (S)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il) morfolin-2-il)metanol (559 mg, 1,67 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (216 mg, 1,52 mmol), Cui (144 mg, 0,76 mmol) e K3PO4 (644 mg, 3,04 mmol) em tolueno (5 mL) foi agitada a 100° C por 3 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (60 mL), lavada com NH3H2O (30 mL) e solução salina (30 mL), secada sobre NazSCU, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc =1:1) para dar 0 composto título (285 mg, 35%) como óleo amarelo.

¹H-NMR (CDCh, 400 MHz): δ 8.78 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.37-4.30 (m, 2H), 4.12-4.09 (m, 2H), 3.84-3.69 (m, 5H), 3.53 (s, 1H), 3.18-3.11 (m, 1H), 3.01 -2.95 (m, 3H), 2.66 (s, 3H), 2.53-2.42 (m, 3H), 1.81 -1.56 (m, 4H), 1.52 (s, 9H), 1.35-1.32 (m, 3H).

Descrição B-28 (R)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D B-28)

N

N [0287]A uma solução de (R)-morfolin-2-ilmetanol (300 mg, 2,56 mmol) e DIEA (992 mg, 7,68 mmol) em EtOH (10 mL) foi adicionado 4,6-diiodo-2metilpirimidina (885 mg, 2,56 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido em vácuo e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (eluída com PE/EtOAc = 4:1) para produzir 0 produto (470 mg, rendimento 54,8%) como um sólido amarelo claro.

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94/154 ¹H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 6,79 (s, 1H), 4,16-4,06 (m, 2H), 4,06-4,02 (m, 1H), 3,79-3,73 (m, 1H), 3,70-3,57 (m, 3H), 3,04 (td, J = 13,2, 3,6 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 12,8, 10,4 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 1,94 (t, J = 6,0 Hz, 1H).

Descrição B-29 (S)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (D B-29)

I [0288]A uma solução de (S)-morfolin-2-ilmetanol (300 mg, 2,56 mmol) e DIEA (992 mg, 7,68 mmol)) em EtOH (10 mL) e THF (20 mL) foi adicionado 4,6diiodo-2-metilpirimidina (885 mg, 2,56 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido em vácuo e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (eluída com ΡΕ/EtOAc = 4:1) para produzir 0 produto (420 mg, rendimento 48,8%) como um sólido amarelo claro.

[0289]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 2,0 min]: Rt = 0,25 min; MS Calculado.: 335,1 MS Encontrado: 336,0 [M + H] +.

Descrição B-30 ((2S)-4-(2-meti l-6-(5-meti l-6-(2-meti Ipi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pi rimidin-4il)morfolin-2-il)metanol (D B-30)

[0290]A uma solução de 4-(1-(6-((S)-2-(hidroximetil)morfolino)-2metilpirimidin-4-i l)-5-meti 1-1 H-i ndazol-6-il)-2-metilpiperidina-1 -carboxilato de tercbutila (285 mg, 0,53 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. NaHCOs sat. foi adicionado à mistura

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95/154 para ajustar pH = 9-10. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com DCM (30 mL x 2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SCU, filtrado e concentrado para dar composto (220 mg, 95%) como óleo amarelo.

[0291]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,758 minutos; MS calculado. 436, MS Encontrado: 437 [M + H] +.

Descrição B-31 (R)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D B-31) —o OH \-N /—(

N^J^N^O

I [0292]4,6-Diiodo-2-metoxipirimidino (724 mg, 2,0 mmol) foi adicionado à solução de (R)-morfolin-2-ilmetanol (235 mg, 2,0 mmol) e EtaN (0,4 mL em MeOH (15 mL) em temperatura ambiente e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora até que todo sólido fosse dissolvido. A solução de reação foi concentrada e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (eluída com PE/EtOAc = 2/1 - 1/1) para produzir 0 produto (680 mg, rendimento 97%) como um sólido branco.

1H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6.65 (s, 1H), 4.15-4.01 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.69-3.57 (m, 3H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 1.96-1.92 (m, 1H).

Descrição B-32 4-(1-(6-((R)-2-(hidroximetil)morfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil-1 H-indazol-6-il)2-metilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila (D B-32)

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96/154 [0293]Uma mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1carboxilato de terc-butila (500 mg, 1,52 mmol), (R)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il) morfolin-2-il)metanol (586 mg, 1,67 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (216 mg, 1,52 mmol), Cui (144 mg, 0,76 mmol)) e K3PO4 (644 mg, 3,04 mmol) em tolueno (5 mL) foi agitada a 100° C por 3 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (60 mL), lavada com NH3.H2O (30 mL) e solução salina (30 mL), secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 1:2) para produzir composto (315 mg, 37%) como um óleo amarelo.

¹H-RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,70 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,30-4,27 (m, 3H), 4,05-4,01 (m, 7H), 3,81-3,63 (m, 7H), 3,26-2,88 (m, 5H), 2,482,45 (m, 3H), 1,97-1,92 (m, 2H), 1,50 (s, 9H).

Descrição B-33 ((2R)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (D B-33)

[0294]A uma solução de 4-(1-(6-((R)-2-(hidroximetil)morfolino)-2metoxipirimidin-4-il)-5-meti 1-1 H-indazol-6-il)-2-metiIpiperidina-1 -carboxilato de tercbutila (315 mg, 0,57 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.. NaHCOs sat. foi adicionado à mistura para ajustar pH = 9~10. A mistura foi diluída com H2O (30 mL) e extraída com DCM (30 mL x 2). A camada orgânica foi seca sobre Na2SCU, filtrada e concentrada para dar composto (221 mg, 86%) como óleo amarelo.

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 106/179

97/154 ¹H-RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8.78 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.32-4.23 (m, 2H), 4.12 (s, 3H), 4.07-4.03 (m, 2H), 3.793.55 (m, 5H), 3.39-3.30 (m, 2H), 3.17-3.11 (m, 2H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.12-2.04 (m, 2H), 1.94-1.91 (m, 1 H),1.60-1.42 (m, 4H).

Descrição B-34 (S)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol (D B-34)

I /—\

Γ \VN (S)/ ^N\^=/ %-OH

I

4,6-Diiodo-2-metoxipirimidino (680 mg, 1,9 mmol) foi adicionado à solução de (S)-morfolin-2-ilmetanol (235 mg, 2,0 mmol) e EtsN (0,4 mL) em MeOH (15 mL) em TA e a reação foi agitada em TA por 1 hora até que todo sólido fosse dissolvido. Então a solução de reação foi concentrada e 0 resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel (eluída com PE/EtOAc = 2/1 - 2/1) para produzir 0 produto (680 mg, rendimento 97%) como um óleo incolor.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6.65 (s, 1H), 4.15-4.01 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.69-3.57 (m, 3H), 3.10-3.06 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 1.96-1.92 (m, 1H).

Descrição B-35 4-(1-(6-((S)-2-(hidroximetil)morfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil-1 Hindazol-6-il)-2-metilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila (D B-35)

[0295]Uma mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1carboxilato de terc-butila (500 mg, 1,52 mmol), (S)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)

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98/154 morfolin-2-il)metanol (587 mg, 1,67 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (216 mg, 1,52 mmol), Cui (144 mg, 0,76 mmol) e K3PO4 (644 mg, 3,04 mmol) em tolueno (3 mL) foi agitada a 100° C por 5 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL), lavada com NH3H2O (30 mL x 3), secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. Ο resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 1:1) para dar composto (400 mg, 48%) como um sólido branco.

1H-RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8.72 (d, J= 16 Hz,1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.30-4.25 (m, 4H), 4.21-4.03 (m, 7H), 3.92-3.64 (m, 6H), 3.28-2.94 (m, 5H), 2.48-2.45 (m, 3H), 1.98 (s, 2H), 1.50 (s, 9H).

Descrição B-36 ((2S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin4-il)morfolin-2-il) metanol (D B-36)

[0296]A uma solução de 4-(1-(6-((S)-2-(hidroximetil)morfolino)-2metoxipirimidin-4-il)-5-meti 1-1 H-indazol-6-il)-2-metiIpiperidina-1 -carboxilato de tercbutila (400 mg, 0,72 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. NaHCCh sat. foi adicionado à mistura para ajustar pH > 7. A mistura foi diluída com H2O (50 mL) e extraída com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2ÔO4, filtrado e concentrado para dar composto (327 mg, 100%) como um sólido branco.

¹H-RMN (CDCI3, 400 MHz): δ 8.78 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.46-4.28 (m, 3H), 4.15 (s, 1H), 4.12 (s, 1H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.81-3.71 (m, 4H), 3.66-3.58 (m, 1H), 3.49-2.27 (m, 2H), 3.17-3.09 (m, 2H),

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99/154

2.99-2.95 (m, 1H), 2.47 (s, 2H),2.42 (s, 1H), 2.11 (s, 1H), 1.94-1.86 (m, 2H), 1.591.57 (m, 1H), 1.43-1.41 (m, 1H), 1.28-1.24 (m, 1H).

Descrição B-37

4-(1 -(6-((R)-2-(hidroximetil)morfolino)-2-metilpirimidin-4-il)-5-metil-1 H-indazol-6-il)-2metilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila (D B-37) --OH

[0297]A uma mistura de 2-metil-4-(5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1carboxilato de terc-butila (500 mg, 1,52 mmol), (R)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il) morfolin-2-il)metanol (560 mg, 1,67 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (216 mg, 1,52 mmol), Cui (144 mg, 0,76 mmol) e K3PO4 (644 mg, 3,04 mmol) em tolueno (3 mL) foi agitada a 100° C por 5 horas. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL), lavada com NH3H2O (30 mL x 3) e solução salina (30 mL), secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílicagel (éter de petróleo/EtOAc = 1:1) para dar composto (562 mg, 69%) como um sólido branco.

¹H-RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8.80 (d, J= 16.8 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.67-4.29 (m, 5H), 4.19-4.05 (m, 4H), 3.92-3.69 (m, 7H), 3.19-2.96 (m, 5H), 2.66 (s, 3H), 2.53-2.42 (m, 2H), 1.65 (s, 9H). Descrição B-38 ((2R)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metiIpiperidin-4-iI)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4il) morfolin-2-il) metanol (D B-38)

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100/154

OH

[0298]A uma solução de 4-(1-(6-((R)-2-(hidroximetil)morfolino)-2metilpirimidin-4-i l)-5-meti 1-1 H-i ndazol-6-il)-2-metilpiperidina-1 -carboxilato de tercbutila (562 mg, 1,05 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. NaHCOa sat. foi adicionado à mistura para ajustar pH > 7. A mistura foi diluída com H2O (50 mL) e extraída com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2ÔO4, filtrado e concentrado para dar composto (457 mg, 100%) como um sólido branco.

¹H-RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8.56 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.38-4.31 (m, 4H), 4.12-4.09 (m, 2H), 3.83-3.72 (m, 7H), 3.52 (s, 1H), 3.42-3.39 (m, 2H), 3.19-2.98 (m, 6H), 2.68-2.65 (m, 3H),2.51 (s, 2H).

Descrição C-1

6-Bromo-5-metil-1 H-indazol (D C-1) [0299]A uma solução de 5-bromo-2,4-dimetilanilina (15,0 g, 75,0 mmol) em clorofórmio (150 mL) foi adicionado AC2O (15,0, 150 mmol) sob banho de gelo. KOAc (8,00 g, 82,5 mmol), 18-coroa-6 (10,0 g, 37,5 mmol) e nitrito de isoamila (26,3 g, 225 mmol) foram adicionados. A mistura foi deixada em refluxo por 36 horas. A mistura de reação foi concentrada e 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc (500 mL). A solução orgânica foi lavada com água (100 mL), seca sobre Na2ÔO4 e concentrada. O resíduo foi dissolvido em THF (100 mL) e NaOH (4 M, 40,0 mL, 160 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 1 h. O solvente foi removido sob vácuo e 0 resíduo foi dividido entre EtOAc (400 mL) e água (200 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina, seca sobre Na2ÔO4 e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc

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101/154 de 10:1 a 5:1) para produzir o composto título (5,1 g, rendimento de 32%) como um sólido laranja.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 10.20 (br s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.75 (s, 1H),

7.61 (s, 1H), 2.50 (s, 3H)

Descrição C-2

6-Bromo-5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol (D C-2) [0300]A uma solução de 6-bromo-5-metil-1 H-indazol (5,10 g, 24,2 mmol) em DCM seco (120 mL) foi adicionado DHP (4,10 g, 48,4 mmol), TsOH (0,800 g, 4,80 mmol) e Mg2SCU (5,0 g) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida a 35° C e agitada por uma hora. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi lavado com uma solução de Na2CCh (10%, 100 mL), seca sobre Na2SCU e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc de 50:1 a 20:1) para dar o composto título (6,0 g, rendimento 84%) como um sólido laranja.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.63 (dd, J = 9.6, 3.0 Hz, 1H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.78-3.70 (m, 1H), 2.58-2.44 (m, 4H), 2.20-2.02 (m, 2H), 1.78-1.65 (m, 3H).

LCMS (fase móvel: 5-95% de ACN): Rt = 2,19 minutos em 3 minutos; MS Calculado: 294; MS Encontrado: 295 [M + H]+

Descrição C-3

4-(5-Metil-1 -(tetraidro-2 H-pi ran-2-i I)-1 H-i ndazol-6-i l)-5,6-di idropi ridi na-1 (2H)carboxilato de terc-butila (D C-3) [0301 ]A uma suspensão de 6-bromo-5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 Hindazol (5,50 g, 18,6 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5,6diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (6,90 g, 22,3 mmol) e Na2CCh (4,90 g, 46,5 mmol) em dioxano (150 mL) e água (130 mL) foi adicionado Pd(dppf)Ch (658 mg, 0,900 mmol). A mistura foi desgaseificada com N2 por 3 vezes e em seguida agitada a 80° C durante a noite. O solvente foi removido sob vácuo e 0 resíduo foi

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102/154 dividido entre EtOAc (300 mL) e água (200 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução salina, secadas sobre NazSCk e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc = 10:1) para dar o composto título (7,3 g, rendimento 99%) como um sólido castanho claro.

¹H RMN (400 MHz, CDCb): δ 7,92 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 5,67 (dd, J = 9,6, 2,8 Hz, 1H), 5,63 (br s, 1H), 4,07-4,01 (m, 3H), 3,78-3,70 (m, 1H), 3,67-3,64 (m, 2H), 2,62-2,53 (m, 1H), 2,45-2,39 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,18-2,12 (m, 1H), 2,07-2,02 (m, 1H), 1,81-1,73 (m, 2H), 1,69-1,61 (m, 1H), 1,52 (s, 9H).

Descrição C-4

4-(5-metil-1 -(tetraidro-2H-piran-2-iI)-1 H-indazol-6-il)piperidina-1 -carboxilato de tercbutila (D C-4) [0302]A uma solução de 4-(5-metil-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1 H-indazol-6-il)-

5,6-diidropiridina-1 (2H)-carboxilato de terc-butila (80 g, bruto) em MeOH (2 L) sob H2 foi adicionado Pd/C (10 g, 12%/peso). A mistura de reação foi desgaseificada por 3 vezes e agitada em t.a. por 2 d. A mistura foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado para dar 0 produto bruto como um sólido branco (65,8 g).

[0303]LC-MS [fase móvel: de 30% de água (0,1% de FA) e 70% de ACN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de ACN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0,63 minutos; MS Calculado. 399,2, MS Encontrado: 400,5 [M + H]+.

Descrição C-5

5-Metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (D C-5)

HCI/MeOH (5M, 200 mL) foi adicionada a uma solução de 4-(5-metil-1(tetraidro-2H-piran-2-il)1 H-indazol-6-il)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila (55,4 g, 139 mmol) em MeOH (150 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, em seguida concentrada, tratada com Na2COa aq. e basificada com NaOH aq. para pH > 12. A mistura foi filtrada

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103/154 para dar o produto desejado como um sólido branco. (23,3 g, rendimento = 98%)

LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de ACN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de ACN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0,85 minutos; MS Calculado. 215, MS Encontrado: 216 [M + H]+.

Descrição C-6

5-Metil-6-(1 -(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-indazol (D C-6) [0304]NaBH3CN (9,40 g, 149 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-metil-

6-(piperidin-4-il))-1 H-indazol (16,0 g, 74,3 mmol), oxetan-3-ona (13,4 g, 223 mmol), zeólito (13,4 g) e AcOH (1,56 g, 1,63 mmol) em CH2Cl2/MeOH (320 mL / 80 mL) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, filtrada e a massa filtrada foi lavada com CH2CI2. O filtrado foi lavado com NaHCCb aquoso e solução salina. A parte orgânica foi seca sobre Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por coluna (PE:EtOAc = 1:1 para CH2Cl2:MeOH = 50:1) para dar 0 produto desejado como um sólido branco (11,9 g, rendimento = 59%) [0305]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de ACN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de ACN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0, 87min; MS calculado. 271, MS Encontrado: 272 [M + H] +.

Descrição C-7

4,6-Diiodo-2-metilpirimidina (D C-7) [0306]A uma solução de Nal (11,9 g, 79,7 mmol) em HI (55%, 50 mL) foi adicionado 4,6-dicloro-2-metilpirimidina (10,0 g, 61,3 mmol) em partes. A suspensão resultante foi aquecida a 40° C e agitada por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada e filtrada. O sólido foi lavado com água e então triturado com metanol (50 mL). A mistura foi filtrada para dar 0 composto título (9,0 g, rendimento 42%) como sólido branco.

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104/154 ¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,07 (s, 1H), 2,67 (s, 3H).

[0307]LCMS (fase móvel: 5-95% de acetonitrila em 2,5 minutos): Rt = 1,59 minutos, MS Calculado: 346; MS Encontradoa: 347 [M + H] +.

Descrição C-8 (S)-4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)-3-metilmorfolina (D C-8) [0308]A uma solução de cloridrato de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidina (1,49 g, 4,12 mmol), (S)-3-metilmorfolina (500 mg, 3,63 mmol) e TEA (1,25 g, 12,36 mmol) em i-PrOH (10 mL) e DMSO (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. A mistura foi diluída com H2O (20 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). A fase orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 5/1) para dar 0 composto título (1,16 g, 95%) como óleo amarelo.

[0309]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 2,173 minutos, MS Calculado. 335, MS Encontrado: 336 [M + H] +

Descrição C-9

4-(1-(2-Metóxi-6-(3-metilmorfolino)pirimidin-4-il)-5-metil-1 H-indazol-6-il) piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila (D C-9) [0310]Uma mistura de 5-metil-6-(1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-indazol (200 mg, 0,64 mmol), (S)-4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)-3-metilmorfolina (319 mg, 0,95 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (180 mg, 1,27 mmol), Cul (60 mg, 0,32 mmol) e K3PO4 (269 mg, 1,27 mmol) em tolueno (2 mL) foi agitada a 100° C por 2 horas. A mistura foi diluída com 5 mL de H2O e extraída com EtOAc (5 mL x 2). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por pré-TLC (éter de petróleo/EtOAc = 1/3) para dar 0 composto título (140 mg, 42%) como um sólido amarelo.

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105/154 [0311]LC-MS [coluna: Cw; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NHkOAc); gradiente (B%)]: Rt = 3,056 minutos, MS Calculado.: 522, MS Encontrado: 523 [M + H] +

Descrição C-10 (S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il)pirimidin-4-il)-3metilmorfolina (D C-10) [0312]A uma mistura de (4-(1-fenil)(2-metóxi-6-(3-metilmorfolino)pirimidin-4il)-5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila (140 mg, 0,268 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (2 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi diluída com NaHCOa sat. para ajustar o pH = 8-9 e extraída com DCM (20 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina, seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (DCM/MeOH = 20/1) para dar o composto título (115 mg, 100%) como sólido amarelo.

[0313]LC-MS [coluna: Cw; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NFhOAc); gradiente (B %)]: Rt = 2,145 minutos, MS Calculado. 422, MS Encontrado: 423 [M + H] +.

Descrição C-11

4,6-diiodo-2-metoxipirimidina (D C-11) [0314]A uma solução de Nal (5,5 g, 36,3 mmol) em HI (55% em água, 30 mL) foi adicionada 4,6-dicloro-2-metoxipirimidina (5 g, 27,9 mmol). A mistura foi aquecida a 40° C e agitada por 14 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e vertida em água gelada (50 mL).

[0315]O filtrado foi lavado com água gelada três vezes para dar o produto como um sólido branco (3,2 g, rendimento de 32%) [0316]LC-MS [fase móvel: de 80% de água (0,1% de TFA) e 20% de ACN (0,1% de TFA) a 20% de água (0,1% de TFA) e 80% de ACN (0,1% de TFA) em 10

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106/154 minutos, pureza de 100%]: Rt = 4,72 minutos; MS Calculado. 362, MS Encontrado: 363 [M + H] +.

Descrição C-12 (S)-(4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il) morfolin-3-il) metanol (D C-12) [0317]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidino (1,51 g, 4,17 mmol) cloridrato de (S)-morfolin-3-ilmetanol (584 mg, 3,79 mmol) em i-PrOH e DMF (20 mL, V/V =1/1) foi adicionado TEA (1,15 g, 11,37 mmol). A mistura foi agitada a 35° C durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada com solução salina (30 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SCU, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia e coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 6:1) para dar o composto título (580 mg, 44%) como um óleo incolor.

¹H RMN (CDCb, 300 MHz): δ 6,68 (s, 1H), 4,28 (br s, 1H), 4,10 (d, J= 16,4 Hz, 2H), 3,92-3,80 (m, 6H), 3,64-3,16 (m, 2H), 3,30-3,28 (m, 1H), 2,57 (br s, 1H),

Descrição C-13 (R)-(4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il) morfolin-3-il) metanol (D C-13) [0318]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidino (1,18 g, 3,27 mmol), cloridrato de (R)-morfolin-3-ilmetanol (500 mg, 3,27 mmol), TEA (991 mg, 9,81 mmol) em i-PrOH (10 mL) e DMSO (4 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com H2O (50 mL), extraída com EtOAc (50 mL x

3). A camada orgânica foi lavada com solução salina (50 mL x 2), seca sobre Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílicagel (éter de petróleo/EtOAc = 1:1) para dar 0 composto título (500 mg, 42%) como sólido branco.

¹H RMN (CDCb, 300 MHz): δ 6,68 (s, 1H), 4,14-4,06 (m, 2H), 4,02-3,89 (m, 7H) , 3,67-3,53 (m, 2H), 3,34-3,26 (m, 1H),

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Descrição C-14

Cloridrato de 5-Metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (D C-14)

4-(5-Metil-1 - (tetraidro-2H-piran-2-i I)-1 H-indazol-6-il)pi peridi na-1 -carboxilato de terc-butila (1,0 g, 2,5 mmol) foi dissolvido em HCI/MeOH (5 mol/L, 10 mL). Então, a mistura foi agitada por 6 horas. A mistura foi concentrada sob baixa pressão para produzir o composto título (820 mg, rendimento > 100%) como um sólido amarelo claro usado para a etapa seguinte sem purificação.

LC-MS: 5-95% de ACN, Rt = 1,13 minutos, MS Calculado. 215, MS Encontrado: 216 [M + H] +.

Descrição C-15

4-(5-Metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila (D C-15)

[0319]A uma solução de cloridrato de 5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol (600 mg, 2,39 mmol) em CH3OH (10 mL) e H2O (2 mL) foi adicionado KOH (268 mg, 4,78 mmol) e (ΒοφΟ (781 mg, 3,58 mmol) sob banho de gelo. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (PE:EtOAc a partir de 10:1 a 4:1) para dar 0 composto título (353 mg, rendimento 47%) como um óleo amarelo.

¹H RMN (300 MHz, CDCh): δ 10,15 (br s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 4,34 (br s, 2H), 2,95-2,81 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,86-1,81 (m, 2H), 1,691,61 (m, 2H), 1,51 (s, 9H), Descrição C-16

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4-(1 -(6-(3-(hidroximetil)morfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil-1 H-indazol-6il)piperidina-1 -carboxilato de terc-butila (D C-16) [0320]0 composto título foi preparado por um procedimento similar àqueles descritos para a Descrição 19 partindo de N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina, (R)-(4(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-3-il)metanol, 4-(5-metil-1 H-indazol-6-il) piperidina-1-carboxilato de terc-butila, Cui e K3PO4.

[0321]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 min-05-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,675 minutos; MS Calculado.538, MS Encontrado: 539 [M + H] +.

Descrição C-17 (R)-(4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il))-1 H-indazol-1 -il)pirimidin-4il)morfolin-3-il) metanol (D C-17) [0322]A uma mistura de 4-(1-(6-(3-(hidroximetil)morfolino)-2-metoxipirimidin4-il)-5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1 -carboxilato de (R)-terc-butila (100 mg, 0,19 mmol) em DCM (2 mL) foi adicionado TFA (2 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi basificada com NaHCCh sat. (15 mL) para ajustar 0 pH = 9, extraído com DCM (20 mL x 3), seca sobre Na2SCU e concentrada. O resíduo foi purificado por pré-TLC (DCM/MeOH = 10/1) para dar 0 composto título (40 mg, 48%) como um sólido branco.

[0323]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 mins-05-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,834 minutos; MS calculado. 438, MS Encontrado: 439 [M + H] +.

Descrição C-18 (4-(6-lodo-2-metoxipirimidin-4-il)-2-metilmorfolin-3-il) metanol (D C-18)

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109/154 [0324]A uma solução de 4,6-diiodo-2-metoxipirimidina (1,56 g, 4,78 mmol), (2-metilmorfolin-3-il)metanol (1,6 g, 9,55 mmol) e TEA (2,89 g, 28,6 mmol) em DMSO (20 mL) foi agitada a 60° C durante a noite. A mistura foi diluída com H2O (30 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 2/1) para dar 0 composto título (640 mg, 37%) como óleo amarelo.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 6,61 (s, 1H), 4,07-4,03 (m, 1H), 3,91 (m, 3H), 3,73-3,56 (m, 4H), 3,31 -3,30 (m, 1H), 1,93-1,90 (m, 1H), 1,58-1,56 (m, 1H), 1,12 (d, J = 6,0 Hz, 3H),

Descrição C-19

4-(1 -(6-(3-(Hidroximetil)-2-metilmorfolino)-2-metoxipirimidin-4-il)-5-metil -1Hindazol-6-il) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (D C-19) [0325]A uma solução de 4-(5-metil-1 H-indazol-6-il) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (550 mg, 1,75 mmol) e (4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)-2metilmorfolin-3-il) metanol (640 mg, 1, 75 mmol), N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina (249 mg, 1,75mmol), Cul (166 mg, 0,88 mmol)) e K3PO4 (742 mg, 3,50 mmol) em tolueno (10 mL) foi agitada a 100° C por 4 horas. A mistura foi diluída com 30 mL de H2O e 10 mL de NH3H2O e extraída com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre Na2ÔO4, filtrada e concentrada para dar 0 composto título (1,0 g, 100%) como um sólido amarelo.

[0326]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 5-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,740 minutos; MS Calculado. 552, MS Encontrado: 553 [M + H] +.

Descrição C-20

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110/154 (4-(2-Metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il))-1 H-indazol-1 -il)pirimidin-4-il)-2metilmorfolin-3-il) metanol (D C-20) [0327]A uma solução de 4-(1-(6-(3-(hidroximetil)-2-metilmorfolino)-2metoxipirimidin-4-il)-5-metil-1 H-indazol-6-il)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (1,0 g, 1,85 mmol) em DCM (10 mL) e TFA (10 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura foi diluída com NaHCOa sat. para ajustar o pH = 7-8. A mistura foi extraída com DCM (40 mL x 3). A camada orgânica foi seca sobre NazSCU, filtrado e concentrado para dar o composto título (920 mg, 100%) como um sólido branco.

[0328]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NFkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 mins. 5-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,850 minutos; MS calculado. 452, MS Encontrado: 453 [M + H] +.

Exemplo A-1 (R)-(4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1 -(3-meti loxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol

N ,N

V-N

ΪΓ ' N [0329]A uma mistura de 5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 Hindazol (65 mg, 0,228 mmol), (R)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)morfolin-2-il) metanol (77 mg, 0,230 mmol), Cul (44 mg, 0,23 mmol) e K3PO4 (98 mg, 0,46 mmol) em tolueno seco (2 mL) foi adicionado N,N'-dimetiletilenodiamina (41 mg, 0,46 mmol). A suspensão foi desgaseificada com Ar e agitada a 100° C por 3 horas. A TLC mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação resfriada foi filtrada e a massa de filtro foi lavada com CH2CI2. O filtrado combinado foi concentrado e 0 resíduo foi

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111/154 purificado por cromatografia de coluna (eluente: CFhCb-MeOH = 15:1) para dar o produto desejado como sólido amarelo (62 mg, rendimento: 55%).

[0330]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 5,49 minutos; MS Calculado: 492,28, MS Encontrado: 493,6 [M + H] +.

¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,69 (d, J= 4,8 Hz, 2H), 4,32-4,27 (m, 4H), 4,07 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 3,78-3,68 (m, 4H), 3,18-2,70 (m, 6H), 2,66 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,32 (br s, 2H), 1,93 (br s, 4H),

1,44 (s, 3H),

Exemplo A-2 (S)-(4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1 - (3-metiloxetan-3-i I) pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 il)pirimidin-4-il)morfolin-2-il) metanol (S)

N ?N \^N ΖΓ < N [0331 ]A uma mistura de 5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 Hindazol (65 mg, 0,228 mmol), (S)-(4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)morfolin-2-il) metanol (77 mg, 0,230 mmol), Cul (44 mg, 0,23 mmol) e K3PO4 (98 mg, 0,46 mmol) em tolueno seco (2 mL) foi adicionado N,N'-dimetiletilenodiamina (41 mg, 0,46 mmol). A suspensão foi desgaseificada com Ar e agitada a 100° C por 3 horas. A mistura de reação resfriada foi filtrada e a massa filtrada foi lavada com CH2CI2. O filtrado combinado foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna (eluente: CH2Cl2-MeOH = 15:1) para produzir 0 produto desejado como um sólido amarelo (65 mg, rendimento: 57%).

[0332]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 5,49 minutos; MS Calculado: 492,28, MS Encontrado: 493,6 [M + H]+.

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112/154 ¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,68 (br s, 2H), 4,32-4,27 (m, 4H), 4,07 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,78-3,68 (m, 4H), 3,182,72 (m, 6H), 2,66 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,32 (br s, 2H), 1,93 (br s, 4H), 1,44 (s, 3H),

Exemplo A-3 (S)-(4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-indazol1 -il)pirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol

N

N ,N [0333]O composto título foi preparado por um procedimento similar àqueles descritos para E1 iniciando formar uma mistura de 5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol, (S)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il)metanol, N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina, Cui e K3PO4 em tolueno a 100° C.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,78 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,63 (d, J= 5,2 Hz, 2H), 4,26-4,24 (m, 4H), 4,17 (s, 3H), 4,06 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 3,77-3,66 (m, 4H), 3,14 (t, J= 14,0 Hz, 1H), 2,97 (t, J= 12,0 Hz, 1H), 2,84-2,78 (m, 1H), 2,67 (d, J= 10,0 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,29 (t, J= 10,0 Hz, 2H), 2,09 (br s, 1H), 1,93-1,82 (m, 4H), 1,69 (s, 3H), [0334]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN): A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %) em 6 minutos]: Rt = 4,565 minutos; MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Exemplo A-4 (R)-(4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-indazol1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol

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113/154

[0335]O composto título foi preparado por um procedimento similar àqueles descritos para a Ε A-1 iniciando formar uma mistura de 5-metil-6-(1-(3-metiloxetan-3il)piperidin-4-il)-1 H-indazol, (R)-(4-(6-iodo-2-metoxipirimidin-4-il)morfolin-2-il) metanol, N,N'-dimetilcicloexano-1,2-diamina, Cui e K3PO4 em tolueno a 100° C.

¹H RMN (400 MHz, CDCb): δ 8,78 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,63 (d, J= 5,6 Hz, 2H), 4,31-4,24 (m, 4H), 4,17 (s, 3H), 4,06 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 3,78-3,66 (m, 4H), 3,14 (t, J= 10,0 Hz, 1H), 2,97 (t, J= 12,8 Hz, 1H), 2,84-2,78 (m, 1H), 2,67 (d, J= 11,2 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H), 2,29 (t, J= 10,0 Hz, 2H), 2,07-2,04 (m, 1H), 1,93-1,81 (m, 4H), 1,67 (s, 3H), [0336]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN): A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %) em 6 min]: Rt = 4,030 minutos; MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Exemplos B-1 e B-2 [0337](6-Metil-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 Hindazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (E B-1, isômero desconhecido único 1; Ε B-2, isômero desconhecido único 2)

Single unkown enantiomer 1 Single unkown enantiomer 2 cis (or trans) cis (or trans)

Figura 16:Single unknown enantiomer 1 / Enantiômero desconhecido único 1 cis (or trans) I cis (ou trans)

Single unkown enantiomer 2 / Enantiômero desconhecido único 2 cis ( or trans) / cis (ou trans)

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114/154 [0338]A uma mistura de (4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)-6-metilmorfolin-2-il) metanol, isômero 1) (207 mg, 0,6 mmol), 5-metil-6-(1-(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 Hindazol (161 mg, 0,6 mmol), Cul (113 mg, 0,6 mmol) e K3PO4 (251 mg, 1,2 mmol) em tolueno (8 mL) foi adicionado N,N'-dimetiletilenodiamina (104 mg, 1,2 mmol) sob Ar. A reação foi agitada a 100° C por 4 horas. A mistura de reação resfriada foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (eluente: PE:EtOAc =1:1, seguido por CHLCUMeOH = 50:1) forneceu 0 produto desejado como um sólido amarelo (168 mg, rendimento: 57%).

[0339]LC-MS [fase móvel: de 80% de água (0,1% de FA) e 20% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 2,0 min]: Rt = 0,99 minutos; MS Calculado: 492,28, MS Encontrado: 493,5 [M + H]+.

[0340]0 produto desejado foi separado por prep-HPLC quiral (Método: Coluna: AD-H; tamanho de Coluna: 0,46 cm I.D. X 15 cm L; fase Móvel: CO2:EtOH (0,1% NH3.H2O);= 60:40, taxa de Fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 25° C; solução de amostra em EtOH) forneceu (6-metil-4-(2-metil6-(5-metil)-6-(1-(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (isômero desconhecido único 1) como sólido branco (80 mg, rendimento 47%) e (6-metil-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1-(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (isômero desconhecido único 2) como um sólido amarelo (83 mg, rendimento: 49%).

Exemplo B-1:

[0341]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,55 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 4,71 (d, J = 6,4 Hz, 4H), 4,34 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,80-3,69 (m, 4H), 3,59-3,53

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115/154 (m, 1 Η), 2,97 (d, J= 10,0 Hz, 2H), 2,90-2,75 (m, 2H), 2,69-2,63 (m, 1 H), 2,65 (s, 3H),

2,45 (s, 3H), 2,07-1,94 (m, 7H), 1,30 (d, J= 6,0 Hz, 3H),

Exemplo B-2:

[0342]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,54 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+ ¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,94 (s, 1H),

4,71 (d, J= 6,8 Hz, 4H), 4,34 (d, J= 12,0 Hz, 2H), 3,80-3,69 (m, 4H), 3,59-3,53 (m, 1H), 2,97 (d, J = 10,4 Hz, 2H), 2,84-2,78 (m, 2H), 2,68-2,63 (m, 1H), 2,65 (s, 3H),

2,45 (s, 3H), 2,07-1,94 (m, 7H), 1,30 (d, J= 6,0 Hz, 3H),

Exemplos B-3 e B-4 (6-Metil-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il)metanol (E B-3, enantiômero desconhecido único 3; E B-4, enantiômero desconhecido único 4):

N ?N

Single unkown enantiomer 4 trans (or cis)

Single unkown enantiomer 3 trans (or cis)

Figura 17: Single unknown enantiomer 3 / Enantiômero desconhecido único 3 cis (or trans) I cis (ou trans)

Single unkown enantiomer 4 / Enantiômero desconhecido único 4 cis ( or trans) I cis (ou trans) [0343]Os compostos do título foram preparados por um procedimento similar àqueles descritos para 0 exemplo 1 e exemplo 2 partindo de N,N'dimetiletilenodiamina, (4-(6-iodo-2-metilpirimidin-4-il)-6-metilmorfolin-2-il) metanol (isômero 2), 5-metil-6-(1-(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol, Cui e K3PO4.

Separação quiral:

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116/154 [0344]Método: Coluna: AD-H; tamanho de coluna: 0,46 cm I.D. X 15 cm; fase móvel: CCh-EtOH (0,1% NH3.H2O) = 60:40; taxa de Fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de Onda: UV 254 nm; Temperatura: 25° C; solução de amostra em EtOH.

Exemplo B-3:

[0345]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 5,42 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 4,71 (d, J= 6,4 Hz, 4H), 4,07-4,02 (m, 2H), 3,99-3,87 (m, 2H), 3,75-3,66 (m, 3H), 3,59-3,53 (m, 1H), 3,33 (dd, J= 13,2, 8,0 Hz, 1H), 2,97 (d, J= 10,0 Hz, 2H), 2,86-2,80 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,07-1,93 (m, 7H), 1,26 (d, J = 6,0 Hz, 3H),

Exemplo B-4:

[0346]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% CH3CN (0,1% FA) em 10,0 min]: Rt = 5,41 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,93 (s, 1H),

4,71 (d, J= 6,8 Hz, 4H), 4,05 (d, J= 3,6 Hz, 2H), 4,04-3,87 (m, 2H), 3,74-3,66 (m, 3H), 3,59-3,53 (m, 1H), 3,32 (dd, J= 13,0, 7,5 Hz, 1H), 2,97 (d, J= 10,0 Hz, 2H), 2,84 (t, J= 10,8 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,07-1,87 (m, 7H), 1,26 (d, J =

6,4 Hz, 3H),

Exemplos B-5 e B-6 (5-Metil-4-(2-metil-6-(5-metil)-6-(1 - (oxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (E B-5, enantiômero único único 1; E B-6, enantiômero desconhecido único 2)

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117/154

Figura 18: Single unknown enantiomer 1 / Enantiômero desconhecido único 1 cis (or trans) I cis (ou trans)

Single unkown enantiomer 2 / Enantiômero desconhecido único 2 cis ( or trans) I cis (ou trans) [0347]Os compostos do título foram preparados por um procedimento similar àqueles descritos para E B-1 e E B-2 partindo de Ν,Ν'-dimetiletilenodiamina, (4-(6iodo-2-metilpirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il)metanol (isômero 1), 5-metil-6-(1(oxetan-3-il) piperidin-4-il)-1 H-indazol, Cui e K3PO4.

Separação quiral:

[0348]Método: Coluna: AD-H; tamanho de coluna: 0,46 cm I.D. X 15 cm L; fase móvel: CO2:EtOH (0,1% NH3.H2O) = 60:40; taxa de fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 25° C; solução de amostra em EtOH.

Exemplo B-5 ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,94 (s, 1H),

4,73-4,70 (m, 4H), 3,90-3,79 (m, 3H), 3,80-3,54 (m, 4H), 3,08-2,95 (m, 3H), 2,86-2,82 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,07-1,93 (m, 8H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), [0349]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,55 minutos; MS Calculado: 492,28, MS Encontrado: 493,5 [M + H]+.

HPLC quiral: Rt: 1,892 min

Exemplo B-6

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 127/179

118/154 [0350]¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 8.80 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 4.73-4.70 (m, 4H), 3.90-3.54 (m, 7H), 3.05-2.95 (m, 3H), 2.84-2.82 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.10-1.67 (m, 8H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H).

[0351]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,54 minutos; MS Calculado: 492,28, MS Encontrado: 493,6 [M + H]+.

HPLC quiral: Rt: 4,966 minutos

Exemplos B-7 e B-8

2-(4-(2-metil-6-(5-metil)-6-(1 -(oxetan-3-i l)pi perid in-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)morfolin-2-il)etanol (E B-7, enatiômero desconhecido único 1; E B-8, enatiômero desconhecido único 2)

N \^N N [0352]Os compostos do título foram preparados por um procedimento similar àqueles descritos para E B-1 e E B-2 partindo de DMEDA, 2-(4-(6-iodo-2metilpirimidin-4-i I) morfoli n-2-i l)etanol, 5-metil-6-(1 - (oxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1Hindazol, Cui e K3PO4.

Separação quiral:

[0353]Método: Coluna: AD-H, tamanho de coluna: 0,46 cm ID X15 cm, fase móvel: CO2:EtOH (0,05% NH3 H2O) = 60:40, taxa de fluxo: 0,5 mL/min, comprimento de onda: UV 205 nm, Temperatura = 25° C, solução de amostra em EtOH.

Exemplo B-7 [0354]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,655 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 128/179

119/154 ¹H RMN (400 MHz, CDCb) δ 8,77 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,94 (d, J= 9,2 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 6,5 Hz, 4H), 4,33 (d, J = 12,5 Hz, 2H), 4,04 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,71 (dd, J = 24,6, 10,4 Hz, 2H), 3,60-3,52 (m, 1H), 3,09 (t, J= 10,9 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 10,2 Hz, 2H), 2,85 (t, J= 11,6 Hz, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,09-1,99 (m, 2H), 1,94 (s, 4H), 1,85 (dd, J= 12,3, 6,8 Hz, 2H),

Exemplo B-8 [0355]LC-MS [fase móvel: de 90% de água (0,1% de FA) e 10% de CH3CN (0,1% de FA) a 5% de água (0,1% de FA) e 95% de CH3CN (0,1% de FA) em 10,0 min]: Rt = 5,655 minutos; MS Calculado: 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

¹H RMN (400 MHz, CDCb) δ 8,77 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,93 (s, 1H),

4,71 (d, J = 6,5 Hz, 4H), 4,33 (d, J = 11,3 Hz, 2H), 4,04 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,86 (s, 2H), 3,81-3,63 (m, 2H), 3,57 (dd, J= 12,9, 6,4 Hz, 1H), 3,09 (t, J= 11,0 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 10,0 Hz, 2H), 2,84 (t, J= 11,7 Hz, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,08-1,98 (m, 2H), 1,94 (s, 4H), 1,85 (dd, J= 12,3, 6,9 Hz, 2H),

Exemplos B-9 - B-12 (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il) metanol (isômeros 1 a 4)

[0356]A uma solução de (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H-indazol1 -il)pirimidin-4-il)-5-metilmorfolin-2-il)metanol (400 mg, 0,88 mmol), oxetan-3-ona (318 mg, 4,42 mmol) e 1 gota de AcOH em DCM (20 mL) foi adicionado NaBHsCN (110 mg, 1,76 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por prep-TLC (DCM/MeOH = 20/1) para dar 0 composto título (230 mg, 51%) como um óleo amarelo.

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 129/179

120/154 ¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,76 (s, 0,5H), 8,74 (s, 0,5H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,81 (s, 0,5H), 6,79 (s, 0,5H), 5,30 (s, 1H), 5,28-5,33 (m, 1H), 4,90 (t, J= 5,2 Hz, 2H), 4,69 (d, J= 6,8 Hz, 2H), 4,58 (t, J= 5,2 Hz, 2H), 4,38-4,36 (m, 0,5H), 4,22-4,19 (m, 0,5H), 4,22 (s, 1,5H), 4,19 (s, 1,5H), 4,07-4,00 (m, 1H), 3,88-3,78 (m, 2H), 3,623,52 (m, 2H), 2,92 (d, J= 10,8 Hz, 2H), 2,83-2,81 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,26-2,25 (m, 2H), 2,01 (d, J= 10,8 Hz, 2H), 1,90-1,86 (m, 2H), 1,38 (d, J= 6,4 Hz, 1,5H), 1,32 (d, J =6,4 Hz, 1,5H), [0357] Separação quiral: coluna: IDS; 0,46 cm X 15 cm; Fase: EtOH = 100; taxa de Fluxo: 0,5 mL/min;

[0358]lsômero 1 [HPLC Quiral: coluna: IDS; 0,46 cm X 15 cm; fase: EtOH = 100; taxa de fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 8,382 minutos.

[0359]lsômero 2 [HPLC Quiral: coluna: IDS; 0,46 cm X 15 cm; fase: EtOH = 100; taxa de fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 8,938 minutos.

[0360]lsômero 3 [HPLC Quiral: coluna: IDS; 0,46 cm X 15 cm; fase: EtOH = 100; taxa de fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 9,740 minutos.

[0361]lsômero 4 [HPLC Quiral: coluna: IDS; 0,46 cm X 15 cm; fase: EtOH = 100; taxa de fluxo: 0,5 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 11.231 minutos.

Exemplos B-13 e B-14 (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1 -(oxetan-3-il)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) 3-metilmorfolin-2-il) metanol (Isômeros 1 e 2)

N

HO

N

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 130/179

121/154 [0362]A uma solução de (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il))-1 H-indazol1 -il)pirimidin-4-il)-3-metilmorfolin-2-il)metanol (442 mg, 0,98 mmol), oxetan-3-ona (352 mg, 4,9 mmol)) e NaBHsCN (123 mg, 1,96 mmol) em DCM (6 mL) foi adicionado catalisador AcOH. A mistura foi agitada a 30° C durante a noite. A reação foi extinta com 4 gotas de NaHCOa sat. e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (DCM/MeOH = 20/1) para dar o composto título (180 mg, 36%) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,74 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,70 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 4,36 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,15 (s, 3H), 3,90-3,98 (m, 3H),

3.74- 3,70 (m, 1H), 3,58 (t, J= 6,4 Hz, 1H), 3,49 (s, 2H), 3,45-3,40 (m, 1H), 2,95 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 2,85-2,81 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,09-2,03 (m, 2H), 1,95-1,86 (m, 4H), 1,39 (d, J=6,8 Hz, 3H), [0363]Exemplo B-13 (isômero 1) e Exemplo B-14 (isômero2) foram separados por HPLC quiral: coluna: Superquiral S-AD, 2 cm I.D. x 25 cm, 5 pm; Fase: CCte/MeOH/NHa.FLO = 60/40/0,05; taxa de Fluxo: 30 mL/min; comprimento de onda: 254 nm

Isômero 1:

[0364]HPLC quiral [coluna: Superquiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; Fase: CO2/EtOH/NH3.H2O = 55/45/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 2,791 minutos.

¹H RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,75 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,72-4,67 (m, 4H), 4,36 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 4,15-4,06 (m, 5H), 4,02-3,95 (m, 3H),

3.74- 3,71 (m, 1H), 3,55 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,46-3,39 (m, 1H), 2,93 (d, J= 10,8 Hz, 2H), 2,86-2,81 (m, 1H), 2,46-2,44 (m, 4H), 2,05-1,98 (m, 2H), 1,94-1,85 (m, 4H), 1,39 (d, J=6,8 Hz, 3H),

Petição 870190070582, de 24/07/2019, pág. 131/179

122/154 [0365]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NHUOAc); gradiente (B %)]: Rt = 3,857 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Isômero 2:

[0366]HPLC quiral [coluna: Superquiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; Fase: CCte/EtOH/ NH3H2O = 55/45/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 6,830 minutos.

¹H RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,74 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,70-4,69 (m, 4H), 4,33 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 4,17-4,07 (m, 5H), 4,01 -3,94 (m, 3H), 3,73-3,70 (m, 1H), 3,55 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 3,44-3,37 (m, 1H), 2,93 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 2,86-2,79 (m, 1H), 2,70 (s, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,05-1,97 (m, 2H), 1,93-1,85 (m, 4H), 1,38 (d, J =6,8 Hz, 3H), [0367]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,844 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Exemplos B-15 e B-16 [0368]((2S)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metil-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 Hindazol-1 -il)pirimidin-4-il)morfolin-2-il) metanol (Isômeros 1 e 2)

[0369]A uma solução de ((2S)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4-il)1 H-indazol-1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (220 mg, 0,50 mmol), oxetan-3ona (180 mg, 2,5 mmol) e catalisador AcOH (2 gotas, 1 gota de AcOH em 1 mL de DCE) em DCE (10 mL) foi adicionado NaBHsCN (63 mg, 1,0 mmol). Outro catalisador AcOH (8 gotas, 1 gota de AcOH em 1 mL de DCE) foi adicionado à

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123/154 reação, e a reação foi agitada a 45° C durante a noite. Após o resfriamento, a reação foi extinta com NaHCCb sat. (4 gotas) e concentrado. O resíduo foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (éter de petróleo/EtOAc = 1:4) para dar composto (180 mg, 73%) como óleo amarelo.

[0370]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,200 minutos; MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

((2S)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il) piperidin-4-iI)-1 H-indazol1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (150 mg) foi separado por HPLC quiral para fornecer o isômero 1 e isômero 2.

HPLC prep. Quiral:

[0371]Coluna: Superquiral S-AD, 2 cm I.D. x 25 cm, 5 pm; fase: CO2/IPA/NH3 H2O = 70/30/0,05; taxa de fluxo: 30 mL/min; comprimento de onda: 254 nm.

Isômero 1:

[0372]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,2% de TFA); gradiente (B %)]: Rt = 3,543 minutos, MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Isômero 2:

[0373]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,2% de TFA); gradiente (B %)]: Rt = 3,638 minutos, MS Calculado.492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Exemplos B-17 - B-20 ((2R)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il) pi peridi n-4-i I)-1Hindazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (Isômero 1 a 4)

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124/154

[0374]A uma solução de ((2R)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4il)-1 H-indazol-1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (221 mg, 0,49 mmol), oxetan3-ona (176 mg, 2,45 mmol) e catalisador AcOH (2 gotas, 1 gota AcOH em 1 mL de DCE) em DCE (10 mL) foi adicionado NaBHsCN (62 mg, 0,98 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Outro catalisador AcOH (7 gotas, 1 gota de AcOH em 1 mL de DCE) foi adicionado à reação. E a reação foi agitada a 45° C de um dia para o outro. Após o resfriamento, a reação foi extinta com NaHCOa sat. (4 gotas) e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (DCM/MeOH = 40:1) para dar composto de mistura (150 mg, 60%) como óleo amarelo.

[0375]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,158 minutos; MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Isômeros foram obtidos a partir da separação quiral:

Isômero 1:

[0376]Pré-HPLC quiral: coluna: Chiralpak AD; 5,0 cm I.D. x 25 cm L; Fase: EtOH:NH3 H2O = 100: 0,1; taxa de fluxo: 60 mL/min, comprimento de onda: 254 nm.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,76 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,79-4,57 (m, 4H), 4,31-4,27 (m, 2H), 4,16 (s, 3H), 4,08-4,04 (m, 1H), 3,78-3,66 (m, 5H), 3,18-3,11 (m, 1H), 3,00-2,83 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,27-2,21 (m, 1H), 2,04-1,79 (m, 5H), 0,96 (d, J= 6,0 Hz, 3H),

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125/154 [0377]HPLC quiral [coluna: quiral pak IG, 0,46 cm I.D. X 25 cm L; fase móvel: MeOH:ACN:DEA = 85:15:0,1; taxa de fluxo: 1 mL/min; comprimento de onda: 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 10,518 minutos.

[0378]LC-MS [coluna: Cw; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NHhOAc); gradiente (B %)]: Rt = 3,708 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Isômero 2:

[0379]Pré-HPLC quiral: coluna: Chiralpak AD; 5,0 cm I.D. x 25 cm L; Fase: EtOH:NH3 H2O = 100:0,1; taxa de fluxo: 60 mL/min, comprimento de onda: 254 nm.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,76 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,73-4,65 (m, 4H), 4,31-4,25 (m, 2H), 4,15 (s, 3H), 4,08-3,97 (m, 2H), 3,78-3,68 (m, 4H), 3,24-3,11 (m, 3H), 3,00-2,94 (m, 1H), 2,74-2,64 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,03-1,89 (m, 4H), 1,06 (d, J= 6,8 Hz, 3H), [0380]HPLC quiral [coluna: chiral pak IG, 0,46 cm I.D. X 25 cm L; fase móvel: MeOH:ACN:DEA = 85:15:0,1; taxa de fluxo: 1 mL/min; comprimento de onda: 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 12,886 minutos.

[0381]LC-MS [coluna: Cw; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,709 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

Isômero 3:

[0382]Pré-HPLC quiral: coluna: Chiralpak AD; 5,0 cm I.D. x 25 cm L; Fase: EtOH:NH3 H2O = 100:0,1; taxa de fluxo: 60 mL/min, comprimento de onda: 254 nm.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,76 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,79-4,57 (m, 4H), 4,36-4,27 (m, 2H), 4,16 (s, 3H), 4,07-4,04 (m, 1H), 3,78-3,65 (m, 5H), 3,16-3,12 (m, 1H), 3,00-2,84 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,26-2,21 (m, 1H), 2,04-1,79 (m, 5H), 0,96 (d, J= 6,0 Hz, 3H),

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126/154 [0383]HPLC quiral [coluna: chiral pak IG, 0,46 cm I.D. X 25 cm L; fase móvel: MeOH:ACN:DEA = 85:15:0,1; taxa de fluxo: 1 mL/min; comprimento de onda: 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 11.795 minutos.

[0384]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NHhOAc); gradiente (B %)]: Rt = 3,709 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H] +.

Isômero 4:

[0385]Pré-HPLC quiral: coluna: Chiralpak AD; 5,0 cm I.D. x 25 cm L; Fase: EtOH:NH3 H2O = 100:0,1; taxa de Fluxo: 60 mL/min, comprimento de onda: 254 nm.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,76 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,30 (s, 1H), 4,73-4,65 (m, 4H), 4,31-4,25 (m, 2H), 4,15 (s, 3H), 4,08-3,97 (m, 2H), 3,78-3,66 (m, 4H), 3,23-3,15 (m, 2H), 3,00-2,94 (m, 1H), 2,74-2,64 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,04-1,90 (m, 4H), 1,77-1,73 (m, 1H), 1,06 (d, J= 7,2 Hz, 3H), [0386]HPLC quiral [coluna: chiral pak IG, 0,46 cm I.D. X 25 cm L; fase móvel: MeOH:ACN:DEA = 85:15:0,1; taxa de fluxo: 1 mL/min; comprimento de onda: 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rf = 21.047 minutos [0387]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,712 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H] +.

Exemplos B-21 - B-24 ((2S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il) pi peridi n-4-i I)-1Hindazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (Isômeros 1 a 4)

4-il) morfolin-2-il) metanol (Isôrr /

C)

I N / 0

H V-N / x Á N /

N ,N

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127/154 [0388]A uma solução de ((2S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4-il)1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (327 mg, 0,72 mmol), oxetan-3ona (259 mg, 3,6 mmol), NaBHaCN (91 mg, 1,4 mmol) e catalisador AcOH em DCM (6 mL) e MeOH (1 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. Outro catalisador AcOH (10 gotas, 1 gota de AcOH em 1 mL de DCM) foi adicionada à reação, e a reação foi agitada a 45° C durante a noite. Após o resfriamento, a reação foi extinta com NaHCOa sat. (4 gotas) e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia de sílica-gel (DCM/MeOH = 40:1) para dar composto (300 mg, 82%) como um óleo amarelo.

[0389]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,199 minutos; MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H] +.

Isômeros foram obtidos a partir da separação quiral: HPLC quiral: coluna: IGS; 0,46 cm X 15 cm; Fase: Hexano/IPA = 30/70; taxa de fluxo: 1,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm;

Temperatura: 35° C [0390]lsômero 1: HPLC quiral: HPLC quiral: coluna: IGS; 0,46 cm X 15 cm; Fase: MeOH/CAN = 95/5; taxa de fluxo: 1,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 Nm; temperatura: 35° C; Rt = 8,670 minutos [0391]lsômero 2: HPLC quiral: HPLC quiral: coluna: IGS; 0,46 cm X 15 cm; Fase: MeOH/CAN = 95/5; taxa de fluxo: 1,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; temperatura: 35° C; Rt = 12,114 minutos [0392]lsômero 3: HPLC quiral: HPLC quiral: coluna: IGS; 0,46 cm X 15 cm; Fase: MeOH/CAN = 95/5; taxa de fluxo: 1,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; temperatura: 35° C; Rt = 13,387 minutos

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128/154 [0393]lsômero 4: HPLC quiral: HPLC quiral: coluna: IGS; 0,46 cm X 15 cm;

Fase: MeOH/CAN = 95/5; taxa de fluxo: 1,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; temperatura: 35° C; Rt = 17,380 minutos.

Exemplos B-25 - B-28 ((2R)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metil1 -(oxetan-3-il) piperidin-4-iI)-1 H-indazol1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol

--OH

[0394]Uma solução de ((2R)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metilpiperidin-4-il)-1 Hindazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (457 mg, 1 mmol), oxetan-3-ona (360 mg, 5 mmol), NaBHaCN (126 mg, 2,0 mmol) e o catalisador AcOH em DCM (6 mL) e MeOH (1 mL) foi agitado em temperatura ambiente durante a noite. A reação foi extinta com NaHCOa (4 gotas) e concentrada. O resíduo foi concentrado e purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH = 40:1) para dar composto (160 mg, 31%) como um sólido branco.

[0395]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NH4OAC + 5% ACN); gradiente (B %) em 4 minutos. 10-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 2,184 minutos; MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

((2R)-4-(2-metil-6-(5-metil-6-(2-metil-1 -(oxetan-3-il) piperidin-4-iI)-1 H-indazol1-il) pirimidin-4-il) morfolin-2-il) metanol (160 mg) foi separado por HPLC quiral para fornecer isômero 1 (10 mg, 6%), isômero 2 (20 mg, 13%), isômero 3 (15 mg, 9%) e isômero 4 (20 mg, 13%).

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129/154 prep-HPLC quiral: coluna: Superchiral S-AD, 2 cm I.D. x 25 cm, 5 pm; fase: CCh/MeOH/NHa H2O = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 30 mL/min; comprimento de onda: 254 nm.

Isômero 1:

[0396]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CO2/MeOH/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min. comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 2,191 minutos.

¹H RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,79 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,83-4,77 (m, 2H), 4,69-4,60 (m, 2H), 4,33-4,30 (m, 2H), 4,09-4,05 (m, 1H), 3,81-3,66 (m, 5H), 3,15-3,08 (m, 1H), 2,98-2,90 (m, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,26 (s, 1H), 2,06 (s, 1H), 1,93 (s, 2H), 1,82 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 1,75-1,64 (m, 1H), 1,00 (d, J =6,4 Hz, 3H), [0397]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,701 minutos, MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Isômero 2:

[0398]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CCh/MeOH/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min. comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 2,655 minutos.

¹H RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,81 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,78 (t, J= 5,6 Hz, 2H), 4,76-4,72 (m, 2H), 4,32-4,30 (m, 2H), 4,09-3,99 (m, 2H), 3,79-3,66 (m, 4H), 3,29 (s, 1H), 3,17-3,08 (m, 2H), 2,97-2,91 (m, 1H), 2,81-2,78 (m, 1H), 2,70-2,61 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,13-2,07 (m, 1H), 1,95-1,92 (m, 2H), 1,77 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 1,07 (d, J = 6,4 Hz, 3H), [0399]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CCh/MeOH/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min; comprimento de onda: UV

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130/154

254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 3,703 minutos, MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [Μ + H]+.

Isômero 3:

[0400]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: COz/MeOH/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min. comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 3,594 minutos.

¹H RMN (CDCb, 400 MHz): δ 8,80 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,83-4,77 (m, 2H), 4,69-4,60 (m, 2H), 4,33-4,30 (m, 2H), 4,08-4,05 (m, 1H), 3,80-3,66 (m, 5H), 3,14-3,08 (m, 1H), 2,98-2,90 (m, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,26 (s, 1H), 2,06 (s, 1H), 1,93 (s, 2H), 1,82 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 1,73-1,64 (m, 1H), 1,00 (d, J =6,4 Hz, 3H), [0401]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,703 minutos, MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Isômero 4:

[0402]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CCh/MeOH/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min. comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 5,014 minutos.

¹H RMN (CDCb, 400 MHz): δ 8,81 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 4,77 (t, J= 6,0 Hz, 2H), 4,72-4,67 (m, 2H), 4,36-4,25 (m, 2H), 4,09-3,99 (m, 2H), 3,79-3,66 (m, 4H), 3,29 (s, 1H), 3,17-3,14 (m, 2H), 2,97-2,91 (m, 1H), 2,81-2,78 (m, 1H), 2,67-2,64 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,09-1,95 (m, 4H), 1,78 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 1,09 (d, J =6,4 Hz, 3H), [0403]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %)]: Rt = 3,704 minutos, MS Calculado. 492, MS Encontrado: 493 [M + H]+.

Exemplo C-1

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131/154 (S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1-(oxetan-3-il) pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)-3-metilmorfolina

[0404]A uma solução de (S)-4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il))-1 Hindazol-1-il) pirimidin-4-il)-3-metilmorfolina (115 mg, 0,27 mmol), oxetan-3-ona (98 mg, 1,36 mmol) e NaBHsCN (34 mg, 0,54 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado AcOH (1 gota). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (Xbridge C18 SN. 24813505811206 waters, gilson-1 X-bridge Cie 5 pm 19 X150 mm 40-80% B, A: H2O (0,1 % NH4HCO3), B: ACN, UV: 254 nm, Taxa de Fluxo: 15 mL/min, GT: 12 minutos) para dar 0 composto título (20 mg, 15%) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,72 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 4,73-4,64 (m, 4H), 4,48-4,42 (m, 1H), 4,10-3,98 (m, 5H), 3,82-3,71 (m, 2H), 3,61-3,55 (m, 2H), 3,36 (s, 1H) 2,97-2,90 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,09-2,03 (m, 2H), 1,90-1,85 (m, 4H), 1,32 (d, J = 6,8 Hz, 3H), [0405]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna, 50 x 4,6 mm; fase móvel: B (ACN): A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %) em 6 min]: Rt = 4,006 minutos; MS Calculado. 478, MS Encontrado: 479 [M + H]+.

Exemplos C-2 e C-3 [0406]Exemplos C-2 e C-3 foram preparados por refluxo do indazol, composto de iodo e amina sob N2, na presença de Cui e K3PO4.

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E C-2 E C-3

Indazol	Composto Iodo	Amina	Produto	¹HRMN (400 MHz, CDCh):	LC-MS*
5- metil- 6- (1- (oxetan- 3- il)piperid in-4-il)- 1H- indazol	(5)-(4-(6- iodo-2- metoxipiri midin-4- il)morfolin- 3- il)metanol	N,Ndimetileti lenodia mina	4-(1-(6-(3(hidroximetil) morfolino)-2metoxipirimi din-4-il)-5metil-1 Hindazol-6il)piperidina1-carboxilato de (S)-tercbutila (E C2)	δ 8,74 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,69 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 4,61- 4.51 (m, 1H), 4,14 (s, 3H), 4,10-3,97 (m, 4H), 3,71-3,53 (m, 3H), 3,443,36 (m, 1H), 2,95-2,92 (m, 2H), 2,87-2,80 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,25-2,20 (m, 1H), 2,041,99 (m, 2H), 1,94-1,85 (m, 4H),	Rt = 4.005 min; MS Calcd. :494, MS Encontrado: 495 [M + H]⁺
5- metil- 6- (1- (oxetan-	(R)-4-(6- iodo-2- metoxipiri	N,Ndimetilci cloexan	4-(1-(2metóxi-6-(3metilmorfolin	δ 8,77 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,51 (s, 1H),	Rt = 4.300 min; MS Calcd. :478,

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Indazol	Composto Iodo	Amina	Produto	¹HRMN (400 MHz, CDCh):	LC-MS*
3il)piperid in-4-il)1Hindazol	midin-4-il)- 3- metilmorfo lina	0-1,2- diamina	o)pirimidin-4il)-5-metil- 1 H-indazol6il)piperidina1-carboxilato c(R)-tercButila (E C- 3)	6,80 (s, 1H), 4,69 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 4,494,43 (m, 2H), 4,14 (s, 3H), 4,02 (d, J = 12 Hz, 1H), 3,713,62 (m, 2H), 3,59-3,52 (m, 2H), 2,94-2,87 (m, 1H), 2,93 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 2,86-2,79 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,01 (t, J = 15,6 Hz, 2H), 1,84-1,83 (m, 4H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 3H),	MS Encontrado: 479 [M + H]⁺.

* Phenomenex Kinetex 5 pm EVO C18, 50*4.6mm; fase móvel: B (ACN): A (0.02% NHkOAc); gradiente (B%) em 6 min.

Exemplo C-4 (R)-(4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1 - (oxetan-3-i l)pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-3-il) metanol

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Ο

[0407]Α uma mistura de (R)-(4-(2-metóxi)-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il)-1 H indazol-1 -il) pirimidin-4-il) morfolin-3-il) metanol (40 mg, 0,091 mmol) e oxetan-3-ona (26 mg, 0,37 mmol) em DCM (2 mL)/MeOH (2 mL) foi adicionado solução de

AcOH/DCM (1 gota, de 1 gota em HOAc em 1 mL de DCM) e NaBHaCN (12 mg,

0,18 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por pré-TLC (DCM/MeOH = 20/1) para dar o composto título (17 mg) como um sólido branco.

¹H RMN (400 MHz, CDCh): δ 8,74 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,87 (s,

1H), 4,69 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 4,61-4,51 (m, 1H), 4,14 (s, 3H), 4,10-3,97 (m, 4H),

3,71-3,53 (m, 3H), 3,44-3,36 (m, 1H), 2,95-2,92 (m, 2H), 2,87-2,80 (m, 1H), 2,46 (s,

3H), 2,25-2,20 (m, 1H), 2,04-1,99 (m, 2H), 1,94-1,85 (m, 4H), [0408]LC-MS [Phenomenex Kinetex 5 pm EVO Cie, 50 x 4,6 mm; fase móvel: B (ACN): A (0,02% NH4OAC); gradiente (B %) em 6 minutos]: Rt = 4,106 minutos; MS Calculado. 494, MS Encontrado: 495 [M + H]+.

Exemplos C-5 e C-6 (4-(2-Metóxi-6-(5-metil-6-(1-(oxetan-3-il)) pi peridi n-4-i I)-1 H-indazol-1 -il) pirimidin-4-il)-2-metilmorfolin-3-il)metanol

[0409]A uma solução de (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(piperidin-4-il))-1 H-indazol

1-il) pirimidin-4-il)-2-metilmorfolin-3-il) metanol (920 mg, 2,04 mmol), oxetan-3-ona (734 mg, 10,2 mmol) e NaBHaCN (257 mg, 4,08 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado 3 gotas de AcOH. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 14

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135/154 horas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (DCM/MeOH = 50/1) para dar o composto título (417 mg, 40%) como um sólido amarelo.

[0410]LCMS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 30 mm 5 pm; Dikwa Diamonsil plus; fase móvel: B (ACN): A1 (0,02% NHkOAc + 5% ACN); gradiente (B %) em 2,5 minutos. 5-95-POS; taxa de fluxo: 1,5 mL/min]: Rt = 1,59 minutos; MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

[0411 ]A mistura (4-(2-metóxi-6-(5-metil-6-(1 - (oxetan-3-i I) pi peridi n-4-i I)-1Hindazol-1-il) pirimidin-4-il)-2-metilmorfolin-3-il) metanol (389 mg) foi separada por HPLC quiral para fornecer o isômero 1 (110 mg, 28%) e isômero 2 (130 mg, 33%).

HPLC prep. Quiral:

Coluna: Superchiral S-AD, 2 cm I.D. x 25 cm, 5 pm; fase: CO2/IPE/NH3 H2O = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min; comprimento de onda: 254 nm.

Exemplo C-5 (Isômero 1):

[0412]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CO2/IPA/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min. comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 4,625 minutos.

[0413]LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,2% de TFA); gradiente (B %)]: Rt = 3,586 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

¹H RMN (CDCb, 400 MHz): δ 8.76 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.69 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.15 (s, 3H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.78-3.54 (m, 5H), 3.49 (s, 1H), 3.29 (br s, 1H), 2.95-2.92 (m, 2H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.05-1.82 (m, 7H), 1.16 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Exemplo C-6

Isômero 2:

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136/154 [0414]HPLC quiral [coluna: Superchiral S-AD ID; 0,46 cm X 15 cm; fase: CO2/IPA/DEA = 60/40/0,05; taxa de fluxo: 3,0 mL/min; comprimento de onda: UV 254 nm; Temperatura: 35° C]: Rt = 5.

177 min.

[0415] LC-MS [coluna: Cis; tamanho de coluna: 4,6 x 50 mm; fase móvel: B (ACN) A (0,2% de TFA); gradiente (B %)]: Rt = 3,587 minutos, MS Calculado. 508, MS Encontrado: 509 [M + H]+.

¹H RMN (CDCh, 400 MHz): δ 8,76 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,81 (s, 1H), 4,69 (t, J= 6,8 Hz, 4H), 4,15 (s, 3H), 4,10-4,05 (m, 1H), 3,80-3,54 (m, 5H), 3,49 (s, 1H), 3,30 (brs, 1H), 2,95-2,92 (m, 2H), 2,86-2,81 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,04-1,80 (m, 7H), 1,16 (d, J =6,8 Hz, 3H),

F. Ensaios e Dados [0416]Como mencionado acima, os compostos da presente invenção são inibidores de LRRK2 quinase, e podem ser úteis no tratamento de doenças mediadas por LRRK2. As atividades biológicas e/ou propriedades dos compostos da presente invenção podem ser determinadas usando qualquer ensaio adequado, incluindo ensaios para determinar a atividade de um composto candidato como um inibidor de LRRK2 quinase, bem como modelos de tecido e in vivo.

1. Ensaios

a. Ensaio de Espectrometria de Massa de Inibição LRRK2 Humana de Comprimento Total G2019 [0417]Este ensaio para a inibição da Repetição Rica em Leucina Quinase 2 (LRRK2) é baseada na medição direta do peptídeo peptide ‘LRRKtide’ (LRRKtide: RLGRDKYKT*LRQIRQ e * refere-se ao local de fosforilação) e ‘LRRKtide’ fosforilado usando um ensaio de espectrometria de massa de RapidFire de alto rendimento. Inibidores são compostos que reduzem a conversão de LRRKtide a fosfo-LRRKtide.

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Preparação de Plasmídeo G2019 LRRK2 Humana [0418]lniciadores usados para a clonagem por PCR:

pHTBV-F:SEQ ID No: 1

LRRK2 wt-F1:SEQ ID No: 2

LRRK2 wt-R1: SEQ ID No: 3

LRRK2 wt-F2: SEQ ID No: 4

LRRK2 wt-R2: SEQ ID No: 5

LRRK2 wt-F3:SEQ ID No: 6 pHTBV-R: SEQ ID No: 7 [0419]pHTBV1-N-Flag-hu LRRK2 foi gerada pela amplificação por PCR da sequência LRRK2 com Flag tag N terminal de pcDNA3.1 (+)_Human_LRRK2 (sequência de referência NCBI: NP_940980,3) com os iniciadores descritos acima, e clonados no vetor pHTBV1mcs3 entre sítios BamHI e Kpnl.

[0420]Sequência de Codificação Flag-LRRK2 de Comprimento Total G2019 éSEQ ID No: 8.

[0421]Sequência de aminoácidos traduzida para a Proteína LRRK2 marcada com flag N terminal de comprimento total G2019 é SEQ ID No: 9.

Culturas de Células de Insetos [0422]Células de insetos Sf9 (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA) foram mantidas a 27° C em SF 900 II SFM em frascos de agitação de 500 mL (Erlenmeyer, Corning). As células foram mantidas em fase de crescimento exponencial e subcultivadas duas vezes por semana. Para volumes maiores, as células foram crescidas em frascos de agitação de 2 litros (Erlenmeyer, Corning) enquanto são agitadas com 120 rpm a 27° C em incubadora de agitação.

Geração do Vírus BacMam [0423]Para gerar o vírus BacMam recombinante, células competentes DH10Bac (10361-012, Invitrogen) foram transformadas pelo plasmídeo LRRK2

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BacMam humano genotipicamente normal para gerar o DNA recombinante de Baculovirus. As células de insetos Sf9 foram co-transfectadas com a mistura de DNA recombinante de Baculovirus e cellfectina (10362-100, Invitrogen). Após 4 horas de incubação a 27° C, o meio de transfecção foi substituído com meio Sf-900 III SFM contendo 5% de SFB HI (10100147, Invitrogen). As células foram incubadas ainda por 4 dias. O meio de cultura de células infectadas contendo o Baculovirus (estoque de vírus P0) foi coletado e amplificado por infecção adicional das células Sf9 de 200 mL através de 200-300 pL de P0.

Quantificação de Título Viral de BacMam por Titulação BacPAKRapid [0424]O título viral, medido como unidade formadora de placa (pfu)/mL foi determinado utilizando Kit de Titulação BacPAK Papid (631406, Clontech) de acordo com o protocolo do fabricante. As células Sf9 plaqueadas em placa de 96 poços com 3 X10⁵ células por poço foram incubadas com diluição seriada dos estoques virais por 1 h a 27° C, 50 pL de sobrecamada de metil celulose foram adicionados a cada poço seguido por 43-47 horas de incubação. As células foram então fixadas em paraformaldeído a 4% (PFA). Após o bloqueio das células com soro de cabra normal diluído, anticorpo anti-gp64 de camundongo foi adicionado às células. Após 30 minutos de incubação, as células foram lavadas com solução salina tamponada com fosfato contendo 0,2% Triton-X100 (PBST) e incubadas por outros 30 minutos com conjugado anticorpo anti-camundongo de cabra/HRP. Isto foi seguido por um substrato de peroxidase azul que detecta as células infectadas isoladas e focos de células infectadas por sua cor azul escura.

Expressão & Purificação de Proteína

a) Expressão de Flag de Comprimento Total Marcado G2019 Humano LRRK2 [0425]Células HEK293 6E foram incubadas em uma incubadora de 37° C com uma atmosfera umedecida de 5% de CO2 em um agitador orbital girando a 110

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139/154 rpm. No dia de transdução, a viabilidade celular foi maior do que 98% e a densidade da célula estava na faixa de 1 x10⁶~1,5 x10⁶ células/mL.

[0426]Células HEK293 6E foram centrifugadas a 1.000 rpm por 10 minutos, e em seguida as células foram ressuspensas em meio de expressão Freestyle 293 fresco (lnvitrogen:12338) com 0,1% de F-68 (Invitrogen: 24040-032) mas sem antibióticos (G418) a uma densidade de 1x10⁶ células/mL. Vírus BacMam com gene Flag-hu LRRK2 (genotipicamente normal) foi centrifugado a 40.000 g por 2 horas, então ressuspenso em meio de expressão Freestyle 293 fresco. O vírus ressuspenso foi adicionado nas células em MOI de 10. As células foram incubadas em uma incubadora a 37° C com uma atmosfera umedecida de 5% de CO2 em ar em um agitador orbital girando a 110 rpm. As culturas foram coletadas em aproximadamente 48 horas após a transdução por centrifugação a 4.000 rpm durante 20 minutos e os concentrados foram congelados para purificação.

b) Purificação de Flag de Comprimento Total Marcado G2019 LRRK2 Humano [0427]O concentrado de células foi ressuspenso em (20 mL/litro de cultura celular) tampão de lise (50 mM de TrisHCI pH 7.5 a 4^o C, 500 mM de NaCl, EDTA 0,5 mM, TritonX -100 a 0,1%, Glicerol a 10%, 2 mM DTT recém adicionado), com inibidores de protease (Roche:04693132001) e benzonase (Merck Millipore: 70746-3 CN) em concentração recomendada sugerida por fornecedores. As células suspensas foram lisadas por sonicação em gelo durante 30 minutos (2 segundos ligado/4 segundos desligado, 20% de amplitude), e centrifugadas a 10.000 rpm por 30 minutos a 4^o C. O sobrenadante foi incubado com 1 mL por litro de cultura celular de esferas magnéticas anti-Flag (Sigma-Aldrich: M8823) a 4^o C por 3 horas, então as esferas foram lavadas por 5 mL (5 volumes de colunas) de tampão de ligação (50 mM Tris pH 7.5 @ 4C, 500 mM NaCl, 0,5 mM EDTA, 0,1% de TritonX-100, 10% de glicerol, 2 mM de DTT recentemente adicionado) por três vezes. As proteínas

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LRRK2 marcadas com Flag foram eluídas por tampão de eluição (50 mM Tris pH 7.5 @ 4C, 500 mM de NaCI, 0,5 mM de EDTA, 0,1 % de Triton X-100, 10% de glicerol, 2 mM de DTT recém adicionado, peptídeo Flag de 250 ug/mL (Sigma-Aldrich: F3290)) a 4^o C por 2 horas. O peptídeo Flag foi removido por Zeba Spin Desalting Colums, 7K MWCO (Thermo-Fisher:89893) e o tampão de proteínas LRRK2 eluídas foi trocado em Tampão de Armazenamento (50 mM Tris pH 7.5 @ 4C, NaCI a 150 mM, EDTA a 0,5 mM, Triton X-100 a 0,02%, DTT a 2 mM e glicerol a 50%) utilizando Amicon Ultra Centrifugal Filter Units (100 kD) (Merck: UFC910096). Frações contendo proteínas de LRRK2 foram reunidas, aliquotadas e armazenadas a -80° C. A concentração de proteína foi determinada por ensaio de proteína Bradford, e a pureza da proteína foi analisada por NuPAG Novex 4-12% Bis-Tris Protens Gels (Invitrogen: NP0322BOX).

Protocolo de Ensaio

1) Um composto de teste 0 mM foi dissolvido em DMSO a 100% e diluído em série 1 em 4. 100 nL desta série de diluição foram então adicionados a uma placa de polipropileno de fundo v de 384 poços, excluindo as colunas 6 e 18. 100 nL de DMSO foram adicionados às colunas 6 e 18 como poços controles. Ensaio de diluição deu uma concentração de ensaio final máxima do composto de teste de 100 pM.

2) 50 pL de ácido fórmico a 1% em água de grau de laboratório foram adicionados à coluna 18 utilizando um distribuidor multi-drop combi para agir como um ensaio controle pré-parado.

3) 5 pL de solução de enzima contendo 50 nM de Flag-LRRK2 de comprimento completo recombinante purificado em tampão de ensaio (Hepes 50 mM (pH 7,2), 10 mM de MgCL, 150 mM de NaCI, 5% de glicerol, 0,0025% de triton X-100 e 1 mM de DTT) foram adicionados a todos os poços utilizando um dispensador multi-drop combi, dando uma concentração final de ensaio de 25 nM de

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141/154 enzima LRRK2. Isto resultou na coluna 6 (enzima mais DMSO) dando 0% de inibição e coluna 18 dando 100% de inibição (controle pré-parado). As placas de teste foram então incubadas durante 30 minutos à temperatura ambiente.

4) 5 pL Solução de substrato contendo 50 uM de substrato de peptídeo de LRRKtide e 4 mM de ATP foram adicionados a todos os poços da placa utilizando um dispensador multidrop combi dando uma concentração de ensaio final de 25 uM de LRRKtide e ATP 2 mM. As placas de teste foram então incubadas durante 1 hora em temperatura ambiente. (Incubação pode variar dependendo da taxa e da linearidade da reação com diferentes lotes de enzima).

5) 50 pL de ácido fórmico a 1% em água de grau de laboratório foram adicionados a todos os poços (menos colunai 8) para extinguir a reação, as placas foram centrifugadas a 3000 rpm por 10 minutos. As placas de teste foram então analisadas em um sistema de extração de fase sólida Agilent RapidFire High Throughput acoplado a um espectrômetro de massa quadropólo AB Sciex API 4000 triplo com o seguinte ajuste:

[0428]Ajustes de RapidFire:

• Altura de Sip = 2 mm, Aspirar = 500 ms, Tempo de Carga = 3000 ms, Tempo de Eluição = 3000 ms, Re-equilíbrio = 500 ms.

•Taxas de Fluxo: bomba 1 = 1,5 mL/min. bomba 2, 1,25 mL/min de bomba 3 = 0,8 mL/min

Ajustes de Espectrômetro de Massa:

• Ajustes de detecção de LRRKtide: massa Q1 644.8Da, massa Q3 638,8, potencial de desagregação 76 volts, energia de colisão 37 Volts, CXP 34 volts.

• Ajustes de detecção de Fosfo-LRRKtide: massa de Q1 671,4 Da, massa de Q3 638,8, potencial de desagregação 76 volts, energia de colisão 37 volts, CXP 34 volts.

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142/154 • Cartucho C4 foi usado e tampões de corrida foram: A (aquoso) 0,1% de ácido fórmico em água B (orgânico) 0,1% de ácido fórmico, 80% de acetonitrila, 20% de água.

• Gás de Colisão: 12, gás de Cortina: 25, gás Fonte de íon (1): 60, gás de Fonte de íon (2): 60, Voltagem de Pulverização de íon: 5500, Temperatura: 600, aquecedor Interfaec: ON.

• Resolução Q1: baixa, Resolução Q3: baixa.

6) Dados foram analisados utilizando o programa ActivityBase (IDBS). Um percentual conversão de LRRKtide para Fosfo-LRRKtide foi calculado usando a seguinte fórmula: % de conversão = (Fosfo-LRRKtide-área de pico de produto/(área de pico de Produto de Fosfo-LRRKtide + área de pico de substrato de LRRKtide))*100

b. Ensaio de AlphaScreen de LRRK2 Celular Recombinante [0429]Determinação da atividade de compostos contra a atividade de LRRK2 quinase em células, a modulação dependente de LRRK2 observada da fosforilação de LRRK2 Ser 935 (Dzamko et al, 2010, Biochem. J. 430: 405-413) foi utilizada para desenvolver um imunoensaio com base em placa de 384 poços quantitativo de fosforilação de LRRK2 Ser935 na linhagem celular de neuroblastoma humana SH-SY5Y, construído para superexpressão de proteína LRRK2 de comprimento total recombinante.

[0430]Um vírus BacMam que expressa LRRK2 recombinante de comprimento total foi comprado da Invitrogen e amplificado pela inoculação de células SF-9 em MOI 0,3 durante 4-5 dias em meio Sf-900 III SFM suplementado com 3% de soro bovino fetal. As culturas de células infectadas foram então centrifugadas a 2000 g durante 20 minutos, título de sobrenadante viral determinado por ensaio de placa anti-gp64 e armazenado a 4^o C.

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143/154 [0431]Anticorpos policlonais de ovelha anti-fosfo LRRK2 Ser935 purificados por afinidade (Dzamko et al, 2010, Biochem. J. 430: 405-413) foram biotinilados por métodos padrão (PerkinElmer). Anticorpo policlonal de coelho anti-LRRK2 foi comprado da Novus Biologicals. Kit Proteína AlphaScreen A IgG (incluindo esferas aceptoras e doadoras) foi adquirido da Perkin Elmer.

[0432]Células SH-SY5Y foram cultivadas em meio DMEM/F12 com 10% de soro bovino fetal dialisado 10% e coletadas por tratamento com 0,5% de tripsinaEDTA por 5 minutos a 37° C seguido por centrifugação a 1000 rpm por 4 minutos. O concentrado de células foi ressuspenso em meio de soro reduzido Opti-MEM (Invitrogen) a 200.000 células/mL e misturado com o vírus BacMam LRRK2 em MOI = 50. 50 pL das soluções de células foram então dispensados a cada poço de uma placa de 384 poços e incubados a 37° C, 5% de CO2 por 24 horas.

[0433]Diluições em série de compostos de teste foram preparadas em meio de soro reduzido Opti-MEM (Invitrogen) e 5,6 μΙ_ transferidos a partir da placa do composto para a placa de ensaio de células para atingir uma concentração final de ensaio máxima de 10 μΜ. DMSO foi usado em certos poços como controles. As células foram incubadas a 37° C, 5% de CO2 por 60 minutos. O meio foi então removido e as células lisadas pela adição de 20 pl_ de tampão de lise celular (Cell Signaling Technology) e incubação a 4^Q C por 20 minutos. 10 pL de mistura de anticorpo / esfera de aceitador [(1/1000 de anticorpo LRRK2 biotinilado-pS935, 1/1000 de anticorpo LRRK2 total, 1/100 de esferas aceptoras em tampão de detecção AlphaScreen (Hepes 25 mM (pH 7.4), 0,5% de Triton X-100, 1 mg/mL de Dextran 500 e 0,1% de BSA)] foi então adicionada a cada poço e as placas incubadas durante 2 horas à temperatura ambiente no escuro. 10 pL de solução de esferas doadoras (1/33,3 esferas doadoras em tampão de detecção AlphaScreen) foram então adicionados a cada poço. Incubação a seguir por mais 2 horas à temperatura ambiente no escuro, as placas foram lidas em um leitor de placas

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EmVision® na emissão de 520-620 nm com excitação de 680 nm. Dados de curva dose-resposta foram baseados em modelo dose-resposta sigmoidal.

c. Ensaio de Solubilidade FASSIF [0434]A solubilidade do composto pode ser avaliada em meios intestinais simulando estado de jejum (FaSSIF) em pH 6.5. Determinada quantidade de composto de teste foi misturada com determinado volume de FaSSIF para preparar uma suspensão de cerca de 1 mg/mL. A suspensão foi incubada a 37^Q C no agitador de banho de água por 24 horas. Na 4^â e 24^â hora, a suspensão foi centrifugada a 14K rpm por 15 minutos. 100 pL do sobrenadante foi retirado e diluído com o mesmo volume de solução aquosa de acetonitrila a 50% e analisado com UPLC (Cromatografia Líquida de Alto Desempenho). A solubilidade FaSSIF foi calculada com base na área de pico do composto de teste.

[0435]A preparação de FaSSIF (170 mL). 100 mg de lecitina e 274 mg (anid. equivalente) de NaTaurocolato foram dissolvidos em cerca de 150 mL de tampão pH 6.5. A solução foi feita até o volume de 170 mL com tampão pH 6.5.

[0436]A solução tampão de pH 6.5 (1L). Preparação de 4,083 g de KH2PO4 e 7,456 g de KCI foram dissolvidos em 800 mL de água, com 100 mL de NaOH 0,1 M subsequentemente adicionados. A solução foi feita até 0 volume de 1 L com água. O valor de pH da solução tampão foi medido e ajustado para ser 6,50 ± 0,1.

[0437]Soluções padrão para calibração de UPLC e cálculo de solubilidade. Soluções 2 μΜ, 20 μΜ e 200 μΜ de DMSO (50% de ACN água).

Método e Parâmetro de UPLC [0438]lnstrumento: Waters ACQUALY UPLC System [0439]Coluna: Waters ACQUITY UPLC BEH C18 (1,7 pm, 2,1 x 50 mm) [0440]Fase móvel: A: 0,1% de TFA em água / B: 0,1% de TFA em CAN [0441] Gradiente: 0 min (A 95%/B 5%), 2 min (A 5%/B 95%), 2,5 min (A 5%/B 95%), 2,6 min (A 95%/B 5%), 3 min (A 95%/B 5%)

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145/154 [0442]Taxa de fluxo: 0,8 mL/min; temperatura da coluna: 4^Q C; volume de injeção: 1,0 pL; detecção de UV: 280 nm

d. Ensaio de Solubilidade CLND [0443]A solubilidade cinética de um composto pode ser avaliada pelo ensaio de solubilidade CLND (Detecção de Nitrogênio Quimiluminescente), com base em protocolos conhecidos (Bhattachar S. N.; Wesley J. A.; Seadeek C., Evaluation of the Chemiluminescent Nitrogen Detector for Solubility Determinations to Support Drug Discovery, J. Pharm. Biomed. Anal. 2006 (41 ):152-157; Kestranek A, Chervenek A, Logenberger J, Placko S. Chemiluminescent Nitrogen Detection (CLND) to Measure Kinetic Aqueous Solubility, Curr Protoc Chem Biol., 2013, 5(4):269-80). Tipicamente, 5 pL de solução de estoque DMSO a 10 mM do composto de teste foram diluídos a 100 pL com solução salina tamponada com fosfato pH 7.4, equilibrado por 1 hora em temperatura ambiente, placas de filtro Millipore Multiscreen-PCF (MSSL BPC). O filtrado é quantificado por Detecção de Nitrogênio Quimi-Luminescente de injeção de fluxo adequadamente calibrado.

2. Dados do Ensaio [0444]Compostos dos Exemplos E A-1 - A-4 foram testados no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante e exibiram um plC50 de > 6,5. O composto do Exemplo A-1 apresentou um plC50 de 6,7 no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante.

[0445]Compostos dos Exemplos E A-3 e E A-4 foram testados no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante e exibiram um PIC50 de > 7,5. O composto do Exemplo A-3 exibiu um plC50 de 7,9 no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante.

[0446] Compostos dos Exemplos E A-1 e E A-2 foram testados no ensaio de Espectrometria de Massa de Inibição de LRRK2 Humano de comprimento total G2019 e exibiram um plC50 de > 7,0.

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146/154 [0447]Compostos dos Exemplos E B-1 - E B-4 e E B-6-e B-8 foram testados no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante e exibiram urn plC50 de > 6,5 como segue:

Exemplo	plC50
B-1	7,3
B-2	7,1
B-3	7,3
B-4	6,5
B-6	7,2
B-7	7,1
B-8	7

[0448]Compostos dos Exemplos E B -7 e E B -8 foram testados no ensaio de Espectrometria de Massa de Inibição de LRRK2 Humano de comprimento total G2019 e exibiram urn plC50 de > 7,0.

[0449]Compostos dos Exemplos E C-2 e E C-3 foram testados no ensaio de AlphaScreen de LRRK2 celular recombinante e exibiram urn plC50 de > 7,0.

3. Listagem de Sequências

SEQ ID NO: Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: pHTBV-F 5’-GATCTCGACGGGCGCGGATCCACCATGGATTACAAGGATGACGACGAT-3’

SEQ ID NO: 2 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: LRRK2 wt-F1 5’-CATGGATTACAAGGATGACGACGATAAGATGGCTAGTGGCAGCTGTCAG-3’

SEQ ID NO: 3 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: LRRK2 wt-R1 5’-GTTCACGAGATCCACTATTCAGTAAGAGTTCCACCAATTTGGGACTG-3’

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SEQ ID NO: 4 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: LRRK2 wt-F2

5’- GAATAGTGGATCTCGTGAACAAG -3’

SEQ ID NO: 5 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos humanos G2019 LRRK2: LRRK2 wt-R2

5’- GTCAGACAAACTGCTTGGAACCAGC-3’

SEQ ID NO: 6 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: LRRK2 wt-F3 5’-CTGGTTCCAAGCAGTTTGTCTGACCACAGGCCTGTGATAG-3’

SEQ ID NO: 7 Iniciadores usados para a clonagem por PCR da preparação de plasmídeos G2019 LRRK2 humano: pHTBV-R

5’- GTTCTAGCCAAGCTTGGTACCCTATTACTCAACAGATGTTCGTCTC-3’

SEQ ID NO: 8 Sequência de codificação Flag-LRRK2 de comprimento total G2019 atggattacaaggatgacgacgataagATGGCTAGTGGCAGCTGTCAGGGGTGCGAAGAG

GACGAGGAAACTCTGAAGAAGTTGATAGTCAGGCTGAACAATGTCCAGGAAGG

AAAACAGATAGAAACGCTGGTCCAAATCCTGGAGGATCTGCTGGTGTTCACGTA

CTCCGAGCACGCCTCCAAGTTATTTCAAGGCAAAAATATCCATGTGCCTCTGTT

GATCGTCTTGGACTCCTATATGAGAGTCGCGAGTGTGCAGCAGGTGGGTTGGT

CACTTCTGTGCAAATTAATAGAAGTCTGTCCAGGTACAATGCAAAGCTTAATGGG

ACCCCAGGATGTTGGAAATGATTGGGAAGTCCTTGGTGTTCACCAATTGATTCT

TAAAATGCTAACAGTTCATAATGCCAGTGTAAACTTGTCAGTGATTGGACTGAAG

ACCTTAGATCTCCTCCTAACTTCAGGTAAAATCACCTTGCTGATACTGGATGAAG

AAAGTGATATTTTCATGTTAATTTTTGATGCCATGCACTCATTTCCAGCCAATGAT

GAAGTCCAGAAACTTGGATGCAAAGCTTTACATGTGCTGTTTGAGAGAGTCTCA

GAGGAGCAACTGACTGAATTTGTTGAGAACAAAGATTATATGATATTGTTAAGTG

CGTTAACAAATTTTAAAGATGAAGAGGAAATTGTGCTTCATGTGCTGCATTGTTT

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ACATTCCCTAGCGATTCCTTGCAATAATGTGGAAGTCCTCATGAGTGGCAATGT

CAGGTGTTATAATATTGTGGTGGAAGCTATGAAAGCATTCCCTATGAGTGAAAG

AATTCAAGAAGTGAGTTGCTGTTTGCTCCATAGGCTTACATTAGGTAATTTTTTC

AATATCCTGGTATTAAACGAAGTCCATGAGTTTGTGGTGAAAGCTGTGCAGCAG

TACCCAGAGAATGCAGCATTGCAGATCTCAGCGCTCAGCTGTTTGGCCCTCCTC

ACTGAGACTATTTTCTTAAATCAAGATTTAGAGGAAAAGAATGAGAATCAAGAGA

ATGATGATGAGGGGGAAGAAGATAAATTGTTTTGGCTGGAAGCCTGTTACAAAG

CATTAACGTGGCATAGAAAGAACAAGCACGTGCAGGAGGCCGCATGCTGGGCA

CTAAATAATCTCCTTATGTACCAAAACAGTTTACATGAGAAGATTGGAGATGAAG

ATGGCCATTTCCCAGCTCATAGGGAAGTGATGCTCTCCATGCTGATGCATTCTT

CATCAAAGGAAGTTTTCCAGGCATCTGCGAATGCATTGTCAACTCTCTTAGAACA

AAATGTTAATTTCAGAAAAATACTGTTATCAAAAGGAATACACCTGAATGTTTTGG

AGTTAATGCAGAAGCATATACATTCTCCTGAAGTGGCTGAAAGTGGCTGTAAAAT

GCTAAATCATCTTTTTGAAGGAAGCAACACTTCCCTGGATATAATGGCAGCAGT

GGTCCCCAAAATACTAACAGTTATGAAACGTCATGAGACATCATTACCAGTGCA

GCTGGAGGCGCTTCGAGCTATTTTACATTTTATAGTGCCTGGCATGCCAGAAGA

ATCCAGGGAGGATACAGAATTTCATCATAAGCTAAATATGGTTAAAAAACAGTGT

TTCAAGAATGATATTCACAAACTGGTCCTAGCAGCTTTGAACAGGTTCATTGGAA

ATCCTGGGATTCAGAAATGTGGATTAAAAGTAATTTCTTCTATTGTACATTTTCCT

GATGCATTAGAGATGTTATCCCTGGAAGGTGCTATGGATTCAGTGCTTCACACA

CTGCAGATGTATCCAGATGACCAAGAAATTCAGTGTCTGGGTTTAAGTCTTATAG

GATACTTGATTACAAAGAAGAATGTGTTCATAGGAACTGGACATCTGCTGGCAA

AAATTCTGGTTTCCAGCTTATACCGATTTAAGGATGTTGCTGAAATACAGACTAA

AGGATTTCAGACAATCTTAGCAATCCTCAAATTGTCAGCATCTTTTTCTAAGCTG

CTGGTGCATCATTCATTTGACTTAGTAATATTCCATCAAATGTCTTCCAATATCAT

GGAACAAAAGGATCAACAGTTTCTAAACCTCTGTTGCAAGTGTTTTGCAAAAGTA

GCTATGGATGATTACTTAAAAAATGTGATGCTAGAGAGAGCGTGTGATCAGAAT

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AACAGCATCATGGTTGAATGCTTGCTTCTATTGGGAGCAGATGCCAATCAAGCA

AAGGAGGGATCTTCTTTAATTTGTCAGGTATGTGAGAAAGAGAGCAGTCCCAAA

TTGGTGGAACTCTTACTGAATAGTGGATCTCGTGAACAAGATGTACGAAAAGCG

TTGACGATAAGCATTGGGAAAGGTGACAGCCAGATCATCAGCTTGCTCTTAAGG

AGGCTGGCCCTGGATGTGGCCAACAATAGCATTTGCCTTGGAGGATTTTGTATA

GGAAAAGTTGAACCTTCTTGGCTTGGTCCTTTATTTCCAGATAAGACTTCTAATT

TAAGGAAACAAACAAATATAGCATCTACACTAGCAAGAATGGTGATCAGATATCA

GATGAAAAGTGCTGTGGAAGAAGGAACAGCCTCAGGCAGCGATGGAAATTTTTC

TGAAGATGTGCTGTCTAAATTTGATGAATGGACCTTTATTCCTGACTCTTCTATG

GACAGTGTGTTTGCTCAAAGTGATGACCTGGATAGTGAAGGAAGTGAAGGCTCA

TTTCTTGTGAAAAAGAAATCTAATTCAATTAGTGTAGGAGAATTTTACCGAGATG

CCGTATTACAGCGTTGCTCACCAAATTTGCAAAGACATTCCAATTCCTTGGGGC

CCATTTTTGATCATGAAGATTTACTGAAGCGAAAAAGAAAAATATTATCTTCAGAT

GATTCACTCAGGTCATCAAAACTTCAATCCCATATGAGGCATTCAGACAGCATTT

CTTCTCTGGCTTCTGAGAGAGAATATATTACATCACTAGACCTTTCAGCAAATGA

ACTAAGAGATATTGATGCCCTAAGCCAGAAATGCTGTATAAGTGTTCATTTGGAG

CATCTTGAAAAGCTGGAGCTTCACCAGAATGCACTCACGAGCTTTCCACAACAG

CTATGTGAAACTCTGAAGAGTTTGACACATTTGGACTTGCACAGTAATAAATTTA

CATCATTTCCTTCTTATTTGTTGAAAATGAGTTGTATTGCTAATCTTGATGTCTCT

CGAAATGACATTGGACCCTCAGTGGTTTTAGATCCTACAGTGAAATGTCCAACT

CTGAAACAGTTTAACCTGTCATATAACCAGCTGTCTTTTGTACCTGAGAACCTCA

CTGATGTGGTAGAGAAACTGGAGCAGCTCATTTTAGAAGGAAATAAAATATCAG

GGATATGCTCCCCCTTGAGACTGAAGGAACTGAAGATTTTAAACCTTAGTAAGA

ACCACATTTCATCCCTATCAGAGAACTTTCTTGAGGCTTGTCCTAAAGTGGAGAG

TTTCAGTGCCAGAATGAATTTTCTTGCTGCTATGCCTTTCTTGCCTCCTTCTATG

ACAATCCTAAAATTATCTCAGAACAAATTTTCCTGTATTCCAGAAGCAATTTTAAA

TCTTCCACACTTGCGGTCTTTAGATATGAGCAGCAATGATATTCAGTACCTACCA

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GGTCCCGCACACTGGAAATCTTTGAACTTAAGGGAACTCTTATTTAGCCATAATC

AGATCAGCATCTTGGACTTGAGTGAAAAAGCATATTTATGGTCTAGAGTAGAGAA

ACTGCATCTTTCTCACAATAAACTGAAAGAGATTCCTCCTGAGATTGGCTGTCTT

GAAAATCTGACATCTCTGGATGTCAGTTACAACTTGGAACTAAGATCCTTTCCCA

ATGAAATGGGGAAATTAAGCAAAATATGGGATCTTCCTTTGGATGAACTGCATCT

TAACTTTGATTTTAAACATATAGGATGTAAAGCCAAAGACATCATAAGGTTTCTTC

AACAGCGATTAAAAAAGGCTGTGCCTTATAACCGAATGAAACTTATGATTGTGG

GAAATACTGGGAGTGGTAAAACCACCTTATTGCAGCAATTAATGAAAACCAAGA

AATCAGATCTTGGAATGCAAAGTGCCACAGTTGGCATAGATGTGAAAGACTGGC

CTATCCAAATAAGAGACAAAAGAAAGAGAGATCTCGTCCTAAATGTGTGGGATTT

TGCAGGTCGTGAGGAATTCTATAGTACTCATCCCCATTTTATGACGCAGCGAGC

ATTGTACCTTGCTGTCTATGACCTCAGCAAGGGACAGGCTGAAGTTGATGCCAT

GAAGCCTTGGCTCTTCAATATAAAGGCTCGCGCTTCTTCTTCCCCTGTGATTCTC

GTTGGCACACATTTGGATGTTTCTGATGAGAAGCAACGCAAAGCCTGCATGAGT

AAAATCACCAAGGAACTCCTGAATAAGCGAGGGTTCCCTGCCATACGAGATTAC

CACTTTGTGAATGCCACCGAGGAATCTGATGCTTTGGCAAAACTTCGGAAAACC

ATCATAAACGAGAGCCTTAATTTCAAGATCCGAGATCAGCTTGTTGTTGGACAG

CTGATTCCAGACTGCTATGTAGAACTTGAAAAAATCATTTTATCGGAGCGTAAAA

ATGTGCCAATTGAATTTCCCGTAATTGACCGGAAACGATTATTACAACTAGTGAG

AGAAAATCAGCTGCAGTTAGATGAAAATGAGCTTCCTCACGCAGTTCACTTTCTA

AATGAATCAGGAGTCCTTCTTCATTTTCAAGACCCAGCACTGCAGTTAAGTGACT

TGTACTTTGTGGAACCCAAGTGGCTTTGTAAAATCATGGCACAGATTTTGACAGT

GAAAGTGGAAGGTTGTCCAAAACACCCTAAGGGAATTATTTCGCGTAGAGATGT

GGAAAAATTTCTTTCAAAGAAAAGGAAATTTCCAAAGAACTACATGTCACAGTAT

TTTAAGCTCCTAGAAAAATTCCAGATTGCTTTGCCAATAGGAGAAGAATATTTGC

TGGTTCCAAGCAGTTTGTCTGACCACAGGCCTGTGATAGAGCTTCCCCATTGTG

AGAACTCTGAAATTATCATCCGACTATATGAAATGCCTTATTTTCCAATGGGATTT

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TGGTCAAGATTAATCAATCGATTACTTGAGATTTCACCTTACATGCTTTCAGGGA

GAGAACGAGCACTTCGCCCAAACAGAATGTATTGGCGACAAGGCATTTACTTAA

ATTGGTCTCCTGAAGCTTATTGTCTGGTAGGATCTGAAGTCTTAGACAATCATCC

AGAGAGTTTCTTAAAAATTACAGTTCCTTCTTGTAGAAAAGGCTGTATTCTTTTGG

GCCAAGTTGTGGACCACATTGATTCTCTCATGGAAGAATGGTTTCCTGGGTTGC

TGGAGATTGATATTTGTGGTGAAGGAGAAACTCTGTTGAAGAAATGGGCATTAT

ATAGTTTTAATGATGGTGAAGAACATCAAAAAATCTTACTTGATGACTTGATGAA

GAAAGCAGAGGAAGGAGATCTCTTAGTAAATCCAGATCAACCAAGGCTCACCAT

TCCAATATCTCAGATTGCCCCTGACTTGATTTTGGCTGACCTGCCTAGAAATATT

ATGTTGAATAATGATGAGTTGGAATTTGAACAAGCTCCAGAGTTTCTCCTAGGTG

ATGGCAGTTTTGGATCAGTTTACCGAGCAGCCTATGAAGGAGAAGAAGTGGCTG

TGAAGATTTTTAATAAACATACATCACTCAGGCTGTTAAGACAAGAGCTTGTGGT

GCTTTGCCACCTCCACCACCCCAGTTTGATATCTTTGCTGGCAGCTGGGATTCG

TCCCCGGATGTTGGTGATGGAGTTAGCCTCCAAGGGTTCCTTGGATCGCCTGC

TTCAGCAGGACAAAGCCAGCCTCACTAGAACCCTACAGCACAGGATTGCACTCC

ACGTAGCTGATGGTTTGAGATACCTCCACTCAGCCATGATTATATACCGAGACC

TGAAACCCCACAATGTGCTGCTTTTCACACTGTATCCCAATGCTGCCATCATTGC

AAAGATTGCTGACTACGGCATTGCTCAGTACTGCTGTAGAATGGGGATAAAAAC

ATCAGAGGGCACACCAGGGTTTCGTGCACCTGAAGTTGCCAGAGGAAATGTCA

TTTATAACCAACAGGCTGATGTTTATTCATTTGGTTTACTACTCTATGACATTTTG

ACAACTGGAGGTAGAATAGTAGAGGGTTTGAAGTTTCCAAATGAGTTTGATGAA

TTAGAAATACAAGGAAAATTACCTGATCCAGTTAAAGAATATGGTTGTGCCCCAT

GGCCTATGGTTGAGAAATTAATTAAACAGTGTTTGAAAGAAAATCCTCAAGAAAG

GCCTACTTCTGCCCAGGTCTTTGACATTTTGAATTCAGCTGAATTAGTCTGTCTG

ACGAGACGCATTTT ATT ACCT AAAAACGTAATTGTTGAATGCATGGTTGCTACAC

ATCACAACAGCAGGAATGCAAGCATTTGGCTGGGCTGTGGGCACACCGACAGA

GGACAGCTCTCATTTCTTGACTTAAATACTGAAGGATACACTTCTGAGGAAGTTG

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CTGATAGTAGAATATTGTGCTTAGCCTTGGTGCATCTTCCTGTTGAAAAGGAAAG

CTGGATTGTGTCTGGGACACAGTCTGGTACTCTCCTGGTCATCAATACCGAAGA

TGGGAAAAAGAGACATACCCTAGAAAAGATGACTGATTCTGTCACTTGTTTGTAT

TGCAATTCCTTTTCCAAGCAAAGCAAACAAAAAAATTTTCTTTTGGTTGGAACCG

CTGATGGCAAGTTAGCAATTTTTGAAGATAAGACTGTTAAGCTTAAAGGAGCTGC

TCCTTTGAAGATACTAAATATAGGAAATGTCAGTACTCCATTGATGTGTTTGAGT

GAATCCACAAATTCAACGGAAAGAAATGTAATGTGGGGAGGATGTGGCACAAAG

ATTTTCTCCTTTTCTAATGATTTCACCATTCAGAAACTCATTGAGACAAGAACAAG

CCAACTGTTTTCTTATGCAGCTTTCAGTGATTCCAACATCATAACAGTGGTGGTA

GACACTGCTCTCTATATTGCTAAGCAAAATAGCCCTGTTGTGGAAGTGTGGGAT

AAGAAAACTGAAAAACTCTGTGGACTAATAGACTGCGTGCACTTTTTAAGGGAG

GTAATGGTAAAAGAAAACAAGGAATCAAAACACAAAATGTCTTATTCTGGGAGAG

TGAAAACCCTCTGCCTTCAGAAGAACACTGCTCTTTGGATAGGAACTGGAGGAG

GCCATATTTTACTCCTGGATCTTTCAACTCGTCGACTTATACGTGTAATTTACAAC

TTTTGTAATTCGGTCAGAGTCATGATGACAGCACAGCTAGGAAGCCTTAAAAAT

GTCATGCTGGTATTGGGCTACAACCGGAAAAATACTGAAGGTACACAAAAGCAG

AAAGAGATACAATCTTGCTTGACCGTTTGGGACATCAATCTTCCACATGAAGTGC

AAAATTTAGAAAAACACATTGAAGTGAGAAAAGAATTAGCTGAAAAAATGAGACG

AACATCTGTTGAGTAA

SEQ ID NO: 9 Sequência de proteína traduzida para proteína marcada flag LRRK2 de comprimento total G2019

MDYKDDDDKMASGSCQGCEEDEETLKKLIVRLNNVQEGKQIETLVQILEDLLVFTYS

EHASKLFQGKNIHVPLLIVLDSYMRVASVQQVGWSLLCKLIEVCPGTMQSLMGPQD

VGNDWEVLGVHQLILKMLTVHNASVNLSVIGLKTLDLLLTSGKITLLILDEESDIFMLIF

DAMHSFPANDEVQKLGCKALHVLFERVSEEQLTEFVENKDYMILLSALTNFKDEEEI

VLHVLHCLHSLAIPCNNVEVLMSGNVRCYNIVVEAMKAFPMSERIQEVSCCLLHRLT

LGNFFNILVLNEVHEFVVKAVQQYPENAALQISALSCLALLTETIFLNQDLEEKNENQ

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ENDDEGEEDKLFWLEACYKALTWHRKNKHVQEAACWALNNLLMYQNSLHEKIGDE

DGHFPAHREVMLSMLMHSSSKEVFQASANALSTLLEQNVNFRKILLSKGIHLNVLEL

MQKHIHSPEVAESGCKMLNHLFEGSNTSLDIMAAVVPKILTVMKRHETSLPVQLEAL

RAILHFIVPGMPEESREDTEFHHKLNMVKKQCFKNDIHKLVLAALNRFIGNPGIQKCG

LKVISSIVHFPDALEMLSLEGAMDSVLHTLQMYPDDQEIQCLGLSLIGYLITKKNVFIG

TGHLLAKILVSSLYRFKDVAEIQTKGFQTILAILKLSASFSKLLVHHSFDLVIFHQMSSN

IMEQKDQQFLNLCCKCFAKVAMDDYLKNVMLERACDQNNSIMVECLLLLGADANQ

AKEGSSLICQVCEKESSPKLVELLLNSGSREQDVRKALTISIGKGDSQIISLLLRRLAL

DVANNSICLGGFCIGKVEPSWLGPLFPDKTSNLRKQTNIASTLARMVIRYQMKSAVE

EGTASGSDGNFSEDVLSKFDEWTFIPDSSMDSVFAQSDDLDSEGSEGSFLVKKKS

NSISVGEFYRDAVLQRCSPNLQRHSNSLGPIFDHEDLLKRKRKILSSDDSLRSSKLQ

SHMRHSDSISSLASEREYITSLDLSANELRDIDALSQKCCISVHLEHLEKLELHQNAL

TSFPQQLCETLKSLTHLDLHSNKFTSFPSYLLKMSCIANLDVSRNDIGPSVVLDPTVK

CPTLKQFNLSYNQLSFVPENLTDVVEKLEQLILEGNKISGICSPLRLKELKILNLSKNHI

SSLSENFLEACPKVESFSARMNFLAAMPFLPPSMTILKLSQNKFSCIPEAILNLPHLR

SLDMSSNDIQYLPGPAHWKSLNLRELLFSHNQISILDLSEKAYLWSRVEKLHLSHNK

LKEIPPEIGCLENLTSLDVSYNLELRSFPNEMGKLSKIWDLPLDELHLNFDFKHIGCK

AKDIIRFLQQRLKKAVPYNRMKLMIVGNTGSGKTTLLQQLMKTKKSDLGMQSATVGI

DVKDWPIQIRDKRKRDLVLNVWDFAGREEFYSTHPHFMTQRALYLAVYDLSKGQA

EVDAMKPWLFNIKARASSSPVILVGTHLDVSDEKQRKACMSKITKELLNKRGFPAIR

DYHFVNATEESDALAKLRKTIINESLNFKIRDQLVVGQLIPDCYVELEKIILSERKNVPI

EFPVIDRKRLLQLVRENQLQLDENELPHAVHFLNESGVLLHFQDPALQLSDLYFVEP

KWLCKIMAQILTVKVEGCPKHPKGIISRRDVEKFLSKKRKFPKNYMSQYFKLLEKFQI

ALPIGEEYLLVPSSLSDHRPVIELPHCENSEIIIRLYEMPYFPMGFWSRLINRLLEISPY

MLSGRERALRPNRMYWRQGIYLNWSPEAYCLVGSEVLDNHPESFLKITVPSCRKG

CILLGQVVDHIDSLMEEWFPGLLEIDICGEGETLLKKWALYSFNDGEEHQKILLDDLM

KKAEEGDLLVNPDQPRLTIPISQIAPDLILADLPRNIMLNNDELEFEQAPEFLLGDGSF

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154/154

GSVYRAAYEGEEVAVKIFNKHTSLRLLRQELVVLCHLHHPSLISLLAAGIRPRMLVME

LASKGSLDRLLQQDKASLTRTLQHRIALHVADGLRYLHSAMIIYRDLKPHNVLLFTLY

PNAAIIAKIADYGIAQYCCRMGIKTSEGTPGFRAPEVARGNVIYNQQADVYSFGLLLY

DILTTGGRIVEGLKFPNEFDELEIQGKLPDPVKEYGCAPWPMVEKLIKQCLKENPQE

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NVSTPLMCLSESTNSTERNVMWGGCGTKIFSFSNDFTIQKLIETRTSQLFSYAAFSD

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SYSGRVKTLCLQKNTALWIGTGGGHILLLDLSTRRLIRVIYNFCNSVRVMMTAQLGS

LKNVMLVLGYNRKNTEGTQKQKEIQSCLTVWDINLPHEVQNLEKHIEVRKELAEKM

RRTSVE

SEQ ID NO:10: peptídeo ‘LRRKtide’

H-RLGRDKYKTLRQIRQ-OH

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto de Fórmula (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

R¹

Fórmula (I)

CARACTERIZADO pelo fato de que

R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste de CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila C1-3 e cicloalquila C3;

R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo, CN, alquila C1-3 e haloalquila C1-3;

R³ é selecionado a partir do grupo consistindo de:

a) um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído com um, dois, três ou quatro substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de:

halo, hidroxila, alquila C1-6, opcionalmente substituída com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de: halo, hidroxila, alcóxi Ci se ciclopropila, e alcoxila C1-6, em que 0 grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em halo, hidroxila e alcoxila C1-3,

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2/10 em que quando o anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado contém um átomo de nitrogênio substituível, o grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, e alcoxila C1-3, e é ligado ao referido átomo de nitrogênio substituível;

b) NHR⁷; e

c) OR⁷;

R⁴ e R⁵ são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo de H, hidroxila e halo;

Xi é CR⁶, em que R⁶ é alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de hidroxila, halo e alcoxila C1-3;

R⁷ é independentemente selecionado a partir do grupo que consiste de:

cicloalquila C4-6, cuja cicloalquila é opcionalmente substituída por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila C1-3 e alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila, e uma heterociclila de 4-6 membros contendo nitrogênio ou oxigênio opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila Ci se alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila; e

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3.

2. Composto de Fórmula (l-A) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

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R¹

Fórmula (I-A)

CARACTERIZADO pelo fato de que

R¹ é selecionado a partir do grupo que consiste de CN, alquila C1-3, alcóxi C1-3, haloalquila C1-3 e cicloalquila C3;

R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo, CN, alquila C1-3 e haloalquila C1-3;

R³ é selecionado a partir do grupo consistindo de:

a) um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo de:

halo, hidroxila, alquila C1-6, opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo de: halo, hidroxila, alcóxi Ci se ciclopropila, e alcoxila C1-6, em que 0 grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo de halo, hidroxila e alcoxila C1-3,

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4/10 em que quando o anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado contém um átomo de nitrogênio substituível, o grupo de substituintes também inclui um anel heterociclila de 4-6 membros que é opcionalmente substituído por um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, e alcoxila C1-3, e é ligado ao referido átomo de nitrogênio substituível;

b) NHR⁷; e

c) OR⁷;

R⁴ e R⁵ são independentemente selecionados a partir do grupo consistindo de H, hidroxila e halo;

X¹ é CR⁶ em que R⁶ é alquila C1-3, cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo que consiste de hidroxila, halo e alcoxila C1-3; e

R⁷ é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo de:

cicloalquila C4-6, cuja cicloalquila é opcionalmente substituída com um, dois ou três substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila C1-3 e alquila C1-3 , cujo grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila, e uma heterociclila de 4-6 membros contendo nitrogênio ou oxigênio opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila, alcoxila C1-3 e alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um, dois ou três grupos halo ou hidroxila.

3. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

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Fórmula (l-B)

CARACTERIZADO pelo fato de que

R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo de CN, alquila C1-3, alcóxi C13, haloalquila C1-3 e cicloalquila C1-3;

R² é selecionado a partir do consistindo de H, halo, CN, alquila C1-3 e haloalquila C1-3;

RR¹, RR² e RR³ são independentemente hidrogênio ou alquila C1-3;

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3; e n é 1 ou 2;

com a condição de que quando n é 1 e R⁸ é hidrogênio, RR², RR¹ e RR³ não são todos hidrogênio.

4. Composto de Fórmula (l-C) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

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6/10

Fórmula (l-C)

CARACTERIZADO pelo fato de que

R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo de CN, alquila C1-3, alcóxi C13, haloalquila C1-3, e cicloalquila C1-3;

R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo, CN, alquila Ci se haloalquila C1-3;

R³ é hidrogênio ou hidroxila;

R⁸ é hidrogênio ou alquila C1-3;

RR¹, RR², e RR³ são independentemente hidrogênio ou alquila C1-3;

RR⁴ é hidrogênio ou hidroxila; e n é 1 ou 2.

5. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de que R¹ é selecionado a partir do grupo consistindo de alquila C1-3 e alcoxila 1-3.

6. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de que R² é selecionado a partir do grupo consistindo de H, halo e alquila C1-3.

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7. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com quaisquer das reivindicações 1,2, 5 ou 6, CARACTERIZADO pelo fato de que R⁴ e R⁵ são independentemente selecionados do grupo consistindo de H e flúor.
8. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com quaisquer das reivindicações 1,2, 5, 6 ou 7, CARACTERIZADO pelo fato de que R⁴e R⁵ são ambos H.
9. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com quaisquer das reivindicações 1,2,5,6,7 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de que R³ é um anel heterociclila de 4-6 membros N-ligado opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo de:

halo, hidroxila, alquila C1-3, em que 0 grupo alquila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir do grupo consistindo de: halo, hidroxila e alcóxi C1-3, e alcoxila C1-3, cujo grupo alcoxila é opcionalmente substituído com um ou dois substituintes selecionados independentemente a partir de halo, hidroxila e alcoxila C1-3.
10. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-A), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com quaisquer das reivindicações 1,2,5, 6, 7, 8 ou 9, CARACTERIZADO pelo fato de que R⁶ é H ou alquila C1-3 não substituída.
11. Composto de Fórmula (I) ou fórmula (l-B), ou um sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3, 5, 6, 7 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de que n é 1, RR¹ é metila, RR² é hidrogênio e RR³ é hidrogênio.

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12. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-B), ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3, 5, 6, 7 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de que n é 1, RR¹ é hidrogênio, RR² é hidrogênio, e RR³ é metila.
13. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-B), ou um sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3, 5, 6, 7 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de que n é 2, RR¹, RR² e RR³ são hidrogênio.
14. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 3, 5, 6, 7, 8, 11, 12 ou 13, CARACTERIZADO pelo fato de que R⁸ é selecionado a partir do grupo que consiste em hidrogênio e metila.
15. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5, 6, 7 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de que n é 1.
16. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5, 6, 7, 8 ou 15, CARACTERIZADO pelo fato de que RR² é hidrogênio.
17. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1,4, 5, 6, 7, 8, 15 ou 16, CARACTERIZADO pelo fato de que RR¹ é hidrogênio.
18. Composto de Fórmula (I) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1,4, 5, 6, 7, 8, 15, 16 ou 17, CARACTERIZADO pelo fato de que R⁸ é hidrogênio.
19. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5, 6, 7, 8, 15, 16, 17 ou 18, CARACTERIZADO pelo fato de que RR³ é hidrogênio ou metila.

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20. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5, 6, 7, 8, 15, 16, 17, 18 ou 19, CARACTERIZADO pelo fato de que RR⁴ é hidrogênio.
21. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5, 6, 7, 8, 15, 16, 17, 18 ou 19, CARACTERIZADO pelo fato de que RR⁴ é hidroxila.
22. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de compreender um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme descrito em qualquer reivindicação precedente e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
23. Composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de ser para uso em terapia.
24. Composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de ser para uso no tratamento da doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).
25. Composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de ser para uso no tratamento da doença de Parkinson.
26. Método de tratamento de uma doença neurodegenerativa CARACTERIZADO pelo fato de compreender a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C), ou um sal

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10/10 farmaceuticamente aceitável conforme descrito em qualquer reivindicação precedente.
27. Método, de acordo com a reivindicação 26, CARACTERIZADO pelo fato de que a doença neurodegenerativa é doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).
28. Método, de acordo com a reivindicação 26 ou 27, CARACTERIZADO pelo fato de que a doença neurodegenerativa é doença de Parkinson.
29. Método, de acordo com a reivindicação 26, 27 ou 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o paciente é um humano.
30. Método, de acordo com a reivindicação 26, 27, 28 ou 29, CARACTERIZADO pelo fato de que o paciente é um humano que expressa a mutação G2019S na LRRK2 quinase.
31. Uso de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de para a fabricação de um medicamento para o tratamento da doença de Parkinson, doença de Alzheimer ou esclerose lateral amiotrófica (ALS).
32. Uso de um composto de Fórmula (I), Fórmula (l-A), Fórmula (l-B) ou Fórmula (l-C) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer reivindicação precedente, CARACTERIZADO pelo fato de ser para fabricação de um medicamento para o tratamento da doença de Parkinson.