KR20140022229A - 신규한 트리아졸로 피라진 유도체 및 그의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 신규한 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염, 이들을 유효성분으로 포함하는 c-Met 티로신 키나아제 활성 억제용 약제학적 조성물 및 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 c-Met 티로신 키나아제의 활성을 효율적으로 억제함으로써 비정상적인 키나제의 활성으로 인한 과도한 세포 증식 및 성장과 관련된 다양한 이상증식성 질환, 예를 들어 암, 건선, 류마티스 관절염, 당뇨병성 망막증 등의 치료제로 유용하게 이용될 수 있다.

Description

신규한 트리아졸로 피라진 유도체 및 그의 용도{Novel Triazolopyrazine Derivatives and Use Thereof}
본 발명은 티로신 키나아제 억제활성을 가지는 신규한 트리아졸로 피라진 유도체 및 이를 유효성분으로 포함하는 다양한 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 및 치료용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
단백질 키나아제 (PK)는 단백질의 티로신, 세린 및 트레오닌 잔사 상의 히드록시 그룹의 인산화를 촉매하는 효소이다. 상기 단백질 키나아제는 세포 성장, 분화 및 증식을 야기하는 성장 인자 신호 전달에 중요한 역할을 하고, 따라서 단백질 키나아제의 활성은 세포 생명의 거의 모든 양태에 영향을 미친다.
단백질 키나아제의 돌연변이나 과발현에 의한 세포신호전달체계의 이상은 건선과 같이 비교적 생명에 위협적이지 않은 질환에서부터 암과 같은 독성 (병원성) 질환에 걸친 기질 (stroma) 질환에 밀접한 영향을 미친다.
단백질 키나아제는 티로신 키나아제 (TK) 및 세린-트레오닌 키나아제 (STK)로 분류할 수 있다.
티로신 키나아제의 활성의 주요 양태들 중의 하나는 이것이 성장 인자 수용체와 관련이 있다는 것이다. 성장 인자 수용체는 세포 표면 단백질로서, 성장 인자 리간드에 결합된 경우에는 성장 인자 수용체가 활성 형태로 전환되어 세포막의 내부 표면상의 단백질과 상호 작용하여, 상기 수용체와 기타 단백질의 티로신 잔사 상에서 인산화가 유발되고, 세포 내부에 각종 세포질성 시그널링 분자와의 복합체가 형성되어 궁극적으로는 수많은 세포 반응, 예를 들면, 세포 성장, 분화 및 증식, 세포외 미소환경에 대한 대사성 효과 발현 등이 나타난다 (Schleessinger and Ullrich, Neuron . 9: 303-391(1992)).
티로신 키나아제의 활성을 지닌 성장 인자 수용체는 수용체 티로신 키나아제 (Receptor tyrosine kinase, RTK)로서 알려져 있다. 상기 수용체 티로신 키나아제는 다양한 생물학적 활성을 나타내는 큰 계열의 막관통 (transmembrane) 수용체를 포함한다.
종래에 19개 이상의“HER RTK”로 명명되는 것과 같은 아계열의 수용체 티로신 키나아제가 알려져 있고, 상기 HER RTK에는 상피 성장 인자 수용체 (EGFR), HER2, HER3 및 HER4 등이 포함된다. 상기 수용체 티로신 키나아제는 세포외 글리코실화리간드 결제조 도메인, 막관통 도메인 및 단백질 상의 티로신 잔사를 인산화시킬 수 있는 세포내 세포질성 도메인으로 이루어진다.
또한, 수용체 티로신 키나아제 아계열은 인슐린 수용체(IR), 인슐린 유사 성장 I 수용체 (IGF-1R) 및 인슐린 수용체 관련 수용체 (IRR)로 이루어진다. IR 및 IGF-IR은 인슐린, IGF-I 및IGF-II와 상호 작용하여, 세포막을 가로지르고 키나아제 도메인을 함유하는 2개의 β소단위체와 2개의 완전하게 세포외 글리코실화된 α소단위체의 이종사량체 (hetero 테트라mer)를 형성한다.
또한, 수용체 티로신 키나아제 아계열은 혈소판 유도된 성장 인자 수용체 (PDGFR)로서 명명되는 PDGFRα, PDGFRβ, CSFIR, c-Kit 및 c-Fms을 포함한다. 상기 수용체는 가변수의 면역글로블린 유사 루프와 세포내 도메인으로 구성된 글리코실화 세포외 도메인으로 이루어진다. PDGFR 아계열과의 유사성으로 인해 상기 PDGFR 그룹에 포함되는 태아 간 키나아제 (Flk) 수용체 아계열이 알려져 있다. 상기 Flk 아계열은 키나아제 삽입물 도메인-수용체 태아 간 키나아제-1 (KDR/Flk-1), Flk-1R, Flk-1, Fms-유사 티로신 키나아제 1 또는 3(Flt-1 또는 Flt-3) 등으로 이루어진다.
티로신 키나아제 성장 인자 수용체 계열로서 MET은 c-Met으로서 명명되고 사람 간세포 성장 인자 수용체 티로신 키나아제 (hHGFR)로서 1차적 종양 성장 및 전이에 일정 역할을 하는 것으로 여겨지고 있다 (Plowman et al., DN &P, 7 (6):334-339(1994)).
수용체 티로신 키나아제 이외에도, 비수용체 티로신 키나아제 또는 세포성 티로신 키나아제 (CTK)로 불리우는 특정 계열의 완전한 세포내 TK가 존재한다. 상기 비수용체 티로신 키나아제는 세포외 도메인과 막관통 도메인을 함유하지 않고, Src, Frk, Btk, Csk Abl, Zap70, Fes, Fak, Jak 및 Ack 아계열로 이루어진다. 이중 Src 아계열은 Src, Yes, Fyn, Lyn, Lck, Blk, Hck, Fgr, AUR1 (Aurora-B), AUR2 (Aurora-A), AUR3 (Aurora-C), Yrk 등을 포함한다 (Bolen, Oncogene . 8: 2025-2031(1993)).
수용체 티로신 키나아제 및 비수용체 티로신 키나아제와 관련된 병원성 질환은 건선, 간경변, 당뇨병, 혈관형성, 재발 협착증, 안과질환, 류마티스성 관절염, 자가면역 질환, 죽상경화증, 신장 장애 등이 포함된다.
상기에서 살펴본 PK 중에서 Bcr-Abl, EGFR, VEGFR 등의 수용체 티로신 키나아제는 좋은 항암제 타겟으로 많이 연구되어 왔으며, 글리벡, 이레사 등의 항암제가 개발되어 시판되고 있다.
또한, 항암제 타겟으로 연구되고 있는 RTK 중에서도 간세포 성장인자 (Hepatocyte Growth Factor/Scatter Factor, HGF/SF) 수용체인 c-Met (Hepatocyte Growth Factor Receptor: HGFR)을 타겟으로 하는 항암제가 많이 개발되고 있다 (J. G. Christensen, J. Burrows et al., Cancer Letters, 2005, 225, 1-26; WO 2004/076412; WO 2006/021881 A; WO 2006/021886; WO 2007/064797).
c-Met은 종양 형성, 증대된 세포 운동성 및 침입성 하에서의 종양 진행, 및 전이에 수반되는 폐암, 위암, 피부암, 신장암, 직장암, 췌장암 등의 많은 인간 암에서 과발현 또는 활성화되어 있다 (J. G. Christensen et al., Cancer Letters, 225:1-26(2005); W. G. Jiang et al., Critical Reviews in Oncology / Hematology, 53:35-69(2005)). c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 많은 조직에서 발현되지만, 정상적으로는 주로 상피 및 간엽 기원의 세포 각각으로 한정되어 발현된다. c-Met 및 HGF/SF는 정상적인 포유동물의 발육에 필요하며, 세포 전이, 세포 증식 및 생존, 형태 형성성 분화 및 3-차원적 관상 구조물 (신 세뇨관 세포, 선 형성 등)의 조직화에서 중요한 것으로 밝혀졌다. HGF/SF는 신생혈관생성 인자이며, 상피 세포에서의 c-Met 신호전달은 신생혈관생성에 필수적인 세포 반응 (증식, 운동성, 침입성 등)을 유도한다.
또한 c-Met 및 이의 리간드인 HGF는 다양한 인간 암에서 증가된 수준으로 공-발현되는 것으로 밝혀졌다. 그러나, 수용체 및 리간드는 통상적으로 상이한 세포 유형에 의해 발현되기 때문에, c-Met 신호전달은 대부분 보편적으로 종양-기질 (tumor-stroma) 상호작용에 의해 조절된다.
또한, c-Met의 유전자 증폭, 돌연변이 및 재배열이 다양한 인간 암에서 관찰되었다. c-Met 키나아제를 활성화시키는 생식계 돌연변이를 갖는 부류는 다중 신장 종양 및 다른 조직의 종양에 걸리기 쉽다.
c-Met 및/또는 HGF/SF의 발현은 상이한 유형의 암 (폐, 결장, 유방, 전립선, 간, 췌장, 뇌, 신장, 난소, 위, 피부 및 뼈 등의 암)의 질환 진행 상태와 연관되어 있으며, c-Met 또는 HGF/SF의 과발현은 폐, 간, 위 및 유방을 포함한 많은 주요 인간 암에서 나쁜 예후 및 질환 결과와 상관되는 것으로 밝혀졌다. 또한, c-Met은 췌장암, 신경교종 및 간세포암과 같은 성공적인 치료법이 없는 암에 직접 관련되어 있다고 보고되었으며, c-Met이 과발현되면서 ERBB3 신호전달체계 활성화로 야기된 폐암이 게피티니브 (Gefitinib; 이레사 (상품명: Irresa))에 내성을 갖게 된다고 보고되었다 (J. A. Engelman, K. Zejnullahu et. al. Science , 316:1039-1043(2007)).
HGF/SF는 c-Met의 세포외 도메인에 결합하여 c-Met을 활성화시키며, c-Met의 활성화는 각각 Gab1 및 Grb2 매개된 PI3-키나제 및 Ras/MAPK 활성화를 통한 티로신 포스포릴화 및 다운스트림 시그널화를 이끌어, 세포 운동성 및 증식을 유도한다.
c-Met은 수용체 활성화, 형질전환 및 침습을 이끄는 다른 단백질과 상호작용하는 것으로 밝혀졌고, 또한 c-Met은 초점부착 (focal adhesion)을 형성하는 α6β4 인테그린 (Integrin:라미닌과 같은 세포외 기질 (ECM) 성분에 대한 수용체)과 상호작용하여 HGF/SF 의존적 침습적 성장을 촉진하는 것으로 보고되었다.
이에, 본 발명자들은 단백질 키나아제 억제제를 개발하기 위한 연구를 수행하던 중, 특정한 구조의 모르폴리노 피리미딘 화합물이 c-Met, Ron, KDR, Lck, Flt1, Flt3, Tie2, TrkA, TrkB, b-Raf, Aurora-A 등과 같은 단백질 키나아제에 대한 우수한 억제효과를 가진다는 사실을 실험적으로 관찰함으로써, 이들이 이상증식성 질환의 예방 및 치료에 유용하게 이용될 수 있음을 확인하였다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
본 발명자들은 티로신 키나아제에 대한 억제활성을 가지는 화합물을 발굴함으로써 비정상적인 티로신 키나아제의 활성에 의해 유발되는 다양한 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)을 효율적으로 예방 또는 치료용 조성물을 개발하기 위하여 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 지금까지 알려지지 않은 하기 화학식 1의 신규한 트리아졸로 피라진 (triazolopyrazine) 유도체가 간세포 성장인자 (hepatocyte growth factor, HGF)와 결합하여 인산화를 활성화시킴으로써 세포의 증식, 이동, 침윤 및 신생혈관의 형성을 촉발하는 c-Met 키나아제의 활성을 유의하게 억제시킨다는 사실을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 신규한 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 신규한 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 c-Met 티로신 키나아제 활성 억제용 약제학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규한 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 하기의 화학식 1로 표시되는 트리아졸로 피라진 (triazolopyrazine) 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염을 제공한다:
화학식 1
Figure pat00001
상기 화학식에서,
R1 내지 R3는 각각 독립적으로 수소; 할로겐; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알케닐; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C3 알콕시; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C5 알킬, 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C3 알콕시, 할로겐, 아세틸 피페라진 또는 피페라지닐 카르보닐로 치환된 페닐; 또는 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬, 하이드록시 C1-C5 알킬 또는 C1-C5 알킬로 치환된 5각-6각 고리의 헤테로아릴이고; R1 내지 R3 중 적어도 하나는 수소가 아니며;
R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소; 비치환되거나 C1-C5 알킬로 치환된 5각-6각 고리의 헤테로아릴; 또는 시아노, 할로겐 또는 C1-C5 알킬로 치환된 페닐이고; R4 및 R5 중 적어도 하나는 수소가 아니며;
X는 산소 또는 탄소이다.
본 발명자들은 티로신 키나아제에 대한 억제활성을 가지는 화합물을 발굴함으로써 비정상적인 티로신 키나아제의 활성에 의해 유발되는 다양한 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)을 효율적으로 예방 또는 치료하기 위한 조성물을 개발하기 위하여 예의 연구 노력하였다. 그 결과, 지금까지 알려지지 않은 상기 화학식 1의 신규한 트리아졸로 피라진 유도체가 c-Met 키나아제의 활성을 유의하게 억제시킨다는 사실을 발견하였다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 화학식 1의 화합물은 간세포 성장인자 (hepatocyte growth factor, HGF)와 결합하여 인산화를 활성화시킴으로써 세포의 증식, 이동, 신생혈관의 형성을 촉발하는 c-Met 키나아제의 활성을 유의하게 억제한다. 따라서, 본 발명의 화합물은 세포의 이상증식활성화 과도한 혈관신생을 매개로 하는 다양한 이상증식성 질환을 치료 또는 예방하는 데에 유용하게 이용될 수 있다.
본 명세서에서 용어“할로겐”은 할로겐족 원소를 나타내며, 예컨대, 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도를 포함한다.
본 명세서에서 용어“헤테로사이클로알킬”은 헤테로원자로서 고리 내에 산소, 황 또는 질소를 포함하는 포화 탄소고리를 의미한다. 바람직하게는, 헤테로원자는 질소 또는 산소이다. 헤테로원자의 개수는 1-4이며, 바람직하게는 1-2이다. “5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬”은 고리를 이루는 탄소 및 헤테로원자의 숫자의 합이 5-6개임을 의미한다.
본 명세서에서 용어 “알콕시”는 알코올에서 수소가 제거되어 형성된 라디칼을 의미하며, C1-C3 알콕시가 치환된 경우 치환체의 탄소수는 포함되지 않은 것이다.
본 명세서에서 용어 “알킬”은 직쇄 또는 분쇄의 포화 탄화수소기를 의미하며, 예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소부틸, 펜틸 또는 헥실 등을 포함한다. C1-C5 알킬은 탄소수 1 내지 5의 알킬 유니트를 가지는 알킬기를 의미하며, C1-C5 알킬이 치환된 경우 치환체의 탄소수는 포함되지 않은 것이다. 화학식 1에서, C1-C5 알킬은 바람직하게는 C1-C3 알킬, 보다 바람직하게는 C1-C2 알킬이다.
본 명세서에서 용어“헤테로아릴”은 헤테로원자로서 고리 내에 산소, 황 또는 질소를 포함하는 헤테로사이클릭 방향족기를 의미한다. 바람직하게는, 헤테로원자는 질소 또는 산소이며, 보다 바람직하게는 질소이다. 헤테로원자의 개수는 1-4이며, 바람직하게는 1-2이다. 헤테로아릴에서 아릴은 바람직하게는 모노아릴 또는 비아릴이다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 화학식 1의 R1 내지 R3는 각각 독립적으로 수소; 할로겐; 메틸, 하이드록시 에틸, 피페리딘 또는 N-메틸 피페리딘으로 치환된 피라졸; 비치환되거나 메틸 또는 하이드록시 에틸로 치환된 테트라하이드로피리딘; 할로겐, 모르폴리노에톡시, 피페라지닐에톡시, 피페라지닐메틸, 모르폴리노메틸, 아세틸 피페라진 또는 피페라지닐 카르보닐로 치환된 페닐; 모르폴리노에톡시; 피페라지닐에톡시; 비치환되거나 메틸 또는 하이드록시 에틸로 치환된 피페리딘이고; R1 내지 R3 중 두 개는 수소이다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 화학식 1의 R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소; N-메틸 피라졸; 또는 시아노 또는 할로겐으로 치환된 페닐이고; R4 및 R5 중 하나는 수소이다.
본 발명의 보다 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 화학식 1로 표시되는 트리아졸로 피라진 유도체는 하기의 화학식 2 내지 50으로 표시되는 화합물로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염이다:
화학식 2 화학식 3
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화학식 4 화학식 5
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화학식 6 화학식 7
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화학식 8 화학식 9
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화학식 10 화학식 11
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화학식 12 화학식 13
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화학식 14 화학식 15
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화학식 16 화학식 17
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화학식 18 화학식 19
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화학식 20 화학식 21
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화학식 22 화학식 23
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화학식 24 화학식 25
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화학식 26 화학식 27
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화학식 28 화학식 29
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화학식 30 화학식 31
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화학식 32 화학식 33
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화학식 34 화학식 35
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화학식 36 화학식 37
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화학식 38 화학식 39
Figure pat00038
Figure pat00039
화학식 40 화학식 41
Figure pat00040
Figure pat00041
화학식 42 화학식 43
Figure pat00042
Figure pat00043

화학식 44 화학식 45
Figure pat00044
Figure pat00045

화학식 46 화학식 47
Figure pat00046
Figure pat00047

화학식 48 화학식 49
Figure pat00048
Figure pat00049

화학식 50
Figure pat00050
본 발명의 보다 더 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 트리아졸로 피라진 유도체는 상기의 화학식 6 내지 9, 11 내지 13, 17, 23, 24, 26 내지 32 및 38로 표시되는 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명에 따르면, 상기 나열한 18가지 화합물은 c-Met 키나아제 저해활성에 있어서 매우 낮은 IC50 값을 가질 뿐 아니라, 높은 효율로 암세포의 증식을 억제한다. 따라서 이들은 암을 비롯한 다양한 이상증식성 질환의 매우 효과적인 치료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
본 발명의 트리아졸로 피라진 유도체는 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용될 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산 (free 애시드)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있다.
바람직하게는, 본 발명의 트리아졸로 피라진 유도체의 약제학적 허용 가능한 염은 염산염, 브롬산염, 황산염, 인산염, 구연산염, 아세트산염, 트리플루오로아세트산염, 젖산염, 주석산염, 말레인산염, 푸마린산염, 글루콘산염, 메탄설폰산염, 글리콘산염, 숙신산염, 4-톨루엔설폰산염, 글루투론산염, 엠본산염, 글루탐산염, 또는 아스파트산염으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되지 않고 당업계에서 통상적으로 사용되는 다양한 무기산 및 유기산을 이용하여 형성되는 염이 모두 포함된다.
또한, 본 발명의 트리아졸로 피라진 유도체는 용매화물 (예를 들면 수화물)의 형태로도 존재할 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 본 발명의 상술한 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 c-Met 티로신 키나아제 활성 억제용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상술한 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 신규한 트리아졸로 피라진 유도체에 대해서는 이미 상술하였으므로, 과도한 중복을 피하기 위하여 이를 생략한다.
본 명세서에서 용어“이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)”은 정상적으로 성장 중인 동물체 내에서 일반적인 제한수단에 의해 조절되지 않는 과도한 세포의 성장, 분열 및 이동에 기인하여 유발되는 병적 상태를 의미한다. 본 발명의 조성물로 예방 또는 치료되는 이상증식성 질환에는 예를 들어 암, 당뇨병성 망막증, 미숙아 망막증, 각막 이식 거부, 신생혈관성 녹내장, 홍색증, 증식성 망막증, 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 자가면역 질환, 크론씨병, 재발협착증, 아테롬성 동맥경화, 장관 접착, 궤양, 간경병증, 사구체신염, 당뇨병성 신장병증, 악성 신경화증, 혈전성 미소혈관증, 기관 이식 거부 및 신사구체병증이 있으나, 이에 제한되지 않고 세포의 비정상적인 증식 및 신생혈관의 과도한 생성으로 인해 발생하는 모든 이상증식성 질환이 포함된다.
보다 바람직하게는, 본 발명의 조성물로 예방 및 치료할 수 있는 이상증식성 질환의 하나인 암은 폐암, 위암, 췌장암, 대장암, 난소암, 신장 세포암, 전립선암 또는 뇌종양이다.
본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물의 1일 투여량은 예컨대 0.001-100 ㎎/㎏이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 통상적인 제제로 제형화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 화함 화입시켜 제조될 수 있다. 통상적인 제형이라 함은 예를 들면 경구 (정제, 캡슐제, 분말제), 구강 내, 혀 밑, 직장 내, 질 내, 비강 내, 국소 또는 비경구 (정맥 내, 해면제형화, 근육 화, 피하 및 관 내를 포함) 투여 제형을 일컫는다. 예를 들면, 본 발명에 따른 화합물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 단독 또는 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 화거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강 내 또는 혀 밑 투여될 수 있다. 액체 제제는 현탁제(예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔(witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유(apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제조된다. 또한, 비경구적으로 예를 들면, 정맥 내, 해면체 내, 근육 내, 피하 및 관내를 통하여 주사되는 경우 무균의 수용액 형태로서 사용하는 것이 가장 바람직하며, 이때 상기 용액은 혈액과의 등장성을 갖기 위하여 다른 물질들(예를 들면 염(salt) 또는 만니톨, 글루코오스와 같은 단당류)를 함유할 수도 있다.
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:
(a) 본 발명은 신규한 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염, 이들을 유효성분으로 포함하는 c-Met 티로신 키나아제 활성 억제용 약제학적 조성물 및 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
(b) 본 발명은 c-Met 티로신 키나아제의 활성을 효율적으로 억제함으로써 비정상적인 키나제의 활성으로 인한 과도한 세포 증식 및 성장과 관련된 다양한 이상증식성 질환, 예를 들어 암, 건선, 류마티스 관절염, 당뇨병성 망막증 등의 치료제로 유용하게 이용될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예
각 화합물의 제조방법
Figure pat00051
(S)-(4- 벤질모르폴린 -2-일)메탄올
2-(벤질아미노)에탄올 38.3 ml (270.22 mmnol)과 (R)-2-(클로로메틸)옥시란 25 g (270.22 mmnol)을 H2O/IPA (26 ml + 26 ml)에 녹인 후, 상온에서 밤새 교반하였다. 그 후, 물에 녹인 Et3NOH (35 %) 130ml 를 1시간에 걸쳐 천천히 떨어뜨린 후, 상온에서 3시간 교반하였다. 반응 종료 후, 1 N HCl로 pH 9로 맞춘 후, H2O과 EA을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제 하여, (S)-(4-벤질모르폴린-2-일)메탄올 무색 오일 (50 %)를 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 7.36-7.22 (m, 5H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.76-3.42 (m , 6H), 2.68 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.19 (dt, J = 3.1 Hz, 11.2 Hz, 1H), 2.00 (t, J = 10.9 Hz, 1H)
(S)-(4- 벤질모르폴린 -2-일) 메틸 4- 메틸벤젠설포네이트
(S)-(4-벤질모르폴린-2-일)메탄올 36 g (173.68 mmnol)를 CH2Cl2 (400 ml)에 녹인 후, TsCl (49.6 g, 260.52 mmol), DMAP (2.12 g, 17.36 mmol), Et3N (36.31 ml, 260.52 mmol)를 넣고 상온에서 1시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 CH2Cl2 를 이용하여 추출, 건조(Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 4)로 정제 하여, (S)-(4-벤질모르폴린-2-일)메틸 4-메틸벤젠설포네이트를 하얀색 고형 (62.15 g, 99 %)으로 얻을 수 있었다.
(S)- tert -부틸 2-(( 토실옥시 ) 메틸 )모르폴린-4- 카르복실레이트
(S)-(4-벤질모르폴린-2-일)메틸 4-메틸벤젠설포네이트 (62 g, 171.52 mmol)를 MeOH (500 ml)에 녹인 후, BOC2O (44.9g, 205.83 mmol), Pd/C (8 g)를 H2 (gas) 50 psi 하에서 상온에서 12시간 교반하였다. 반응 종료 후, 셀라이트 (celite)로 여과 후 건조 시킨 뒤, 다음 반응을 진행하였다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 7.81 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 8.1Hz, 2H), 4.07-3.99(m, 2H), 3.94-3.75(m, 2H), 3.67-3.57 (m, 1H), 3.53-3.41 (m, 1H), 2.99-2.81(m, 1H), 2.76-2.58(m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.46(s, 9H)
(S)- tert -부틸 2-( 아지도메틸 )모르폴린-4- 카르복실레이트
(S)-tert-부틸 2-((토실옥시)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (63.7g, 171.52 mmol)를 DMF (550 ml)에 녹인 후, NaN3 (44.59 g, 686.08 mmol), NaI (2.5 g, 17.15 mmol)을 넣고 70 oC에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 브라인을 이용하여 추출, 건조(Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 5)로 정제 하여, (S)-tert-부틸 2-(아지도메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 하얀색 고체 (31.1 g, 75 %)로 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 4.00-3.76 (m, 3H), 3.62-3.48 (m, 2H), 3.31 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 3.04-2.86 (m ,1H), 2.82-2.64 (m, 1H), 1.46 (s, 9H)
(R)- tert -부틸 2-( 아미노메틸 )모르폴린-4- 카르복실레이트
(S)-tert-부틸 2-(아지도메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (31 g, 127.95 mmol) 를 MeOH (400 ml)에 녹인 후, Pd/C (5%) (6 g)을 넣고, H2 (gas) 하에서 1시간 교반하였다. 반응 종료 후, 셀라이트로 여과 후 건조시킨 뒤, 다음 반응을 진행하였다.
(R)- tert -부틸 2-(((3-아미노-6- 브로모피라진 -2-일)아미노) 메틸 )모르폴린-4- 카르복실레이트
(R)-tert-부틸 2-(아미노메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (26 g, 124.83 mmol)를 DMSO (300 ml)에 녹인 후, 3,5-디브로모피라진-2-아민(37.8 g, 149.79 mmol), Et3N (20.9 ml, 149.79 mmol)를 넣고, 150 ℃에서 9시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 브라인 (Brine)을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제하여, (R)-tert-부틸 2-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (33.9 g, 70 %) 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 7.46(s, 1H), 4.78-4.68(m, 1H), 4.25(s, 1H), 4.04-3.44(m, 4H), 3.39-3.24(m, 1H), 3.03-2.83(m, 1H), 2.80-2.63(m, 1H), 1.47 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 2-((6- 브로모 -1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린-4- 카르복실레이트
(R)-tert-부틸 2-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (33.9 g, 87.31 mmol)를 DMF (300 ml)에 녹인 후, 0 ℃에서 이소아밀니트릴 (14 ml, 104.77 mmol)를 천천히 떨어뜨려 주었다. 그 후 70 ℃에서 1시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 브라인을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 2)로 정제 하여, (S)-tert-부틸 2-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (24.3 g, 70 %)를 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 4.84 (dd, J = 7.5 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.73 (dd, J = 4.1 Hz, 14.2 Hz, 1H), 4.13-4.02 (m, 2H), 3.87-3.75 (m, 2H), 3.42 (dt, J = 2.6 Hz, J = 11.7 Hz, 1H), 3.05-2.79 (m, 2H), 1.47 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린-4-카르복실레이트
(S)-tert-부틸 2-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (24.3 g, 60.86 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (15.1g, 73.03 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (2.48 g, 3.04 mmol), CS2CO3 (59.4 g, 182.58 mmol)를 DME (300 ml) : H2O (150 ml)에 녹인 후, N2 탈기 후, 80 oC 에서 3시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 브라인을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제하여, (S)-tert-부틸 2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (21.9 g, 90 %) 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 8.93 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 4.8 (dd, J = 7.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.73 (dd, J = 4.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.17 4.11 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.923.72 (m, 2H), 3.48 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 3.02 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.972.85 (m, 1H), 1.47 (s, 9H)
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린
(S)-tert-부틸 2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (21.9 g, 54.69 mmol)를 CH2Cl2 (300 ml)에 녹인 후, TFA (5.3 g, 82.04 mmol)를 넣고, 상온에서 2시간 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축한 후 다음 반응을 진행하였다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δδ 8.93 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 4.87 (dd, J = 7.3 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.68 (dd, J = 5.1 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.31-4.09 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.57 (dt, J = 2.6 Hz, J = 11.2 Hz, 1H), 3.07-3.03 (m, 1H), 2.91 (dt, J = 1.1 Hz, J = 9.0 Hz, 1H), 2.86-2.78 (m, 2H)
(S)-4-(5- 브로모피리미딘 -2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (화학식 2)
Figure pat00052
(S)-tert-부틸 2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린-4-카르복실레이트 (16.4 g, 54.69 mmol)를 EtOH (500 ml)에 녹인 후, 5-브로모-2-클로로피리미딘 (12.7 g, 65.62 mmol), DIPEA (47.6 g, 273.45 mmol)를 넣고, 50 ℃에서 9시간 교반하였다. 반응 종료 후, EtOH로 재결정하여 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (18.7 g, 75 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.93 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.18 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 4.95 (dd, J = 7.4 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.81 (dd, J = 4.7 Hz, j = 14.2 Hz, 1H), 4.694.63 (m ,1H), 4.414.35 (m, 1H), 4.284.21 (m, 1H), 4.07 4.04 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.58 (dt, J = 2.6 Hz, J = 11.4 Hz, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 3.09 (dd, J = 10.1, Hz J = 13.1 Hz, 1H)
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1-(1- 메틸피페리딘 -4-일)-1H- 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 (화학식 7)
Figure pat00053
(S)-tert-부틸 4-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 550 mg (0.88 mmol)을 35% 포름알데하이드 0.5 ml와 포르믹 애시드 2.5 ml에 녹이고 질소 충전 후 90 0C 에서 18시간 교반하였다. 반응 후 얼음조에서 NaOH 용액을 이용해서 pH 10정도로 냉각시킨 뒤, EA와 브라인으로 추출 한 후 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌클로라이드 : 메탄올 =10 : 1) 로 분리하여 161 mg (34 %)을 얻었다
C26H31N13O의 LCMS 계산값 = 541.28, 관찰값= 542.1
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 HCl 염(화학식 4)
Figure pat00054
(S)-tert-부틸 4-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 463 mg (0.74 mmol)을 메틸렌클로라이드 20 ml에 녹인 후 1,4-디옥산 20 ml에 용해된 4M HCl (과량)를 가하고 질소 충전 후 실온에서 18시간 교반하였다. 반응 후 메틸렌클로라이드와 디옥산을 감압 농축 하여 노란색 고체 493 mg (100 %)을 수득하였다.
C25H29N13O의 LCMS 계산값= 527.26, 관찰값= 528.1
(S)-2-(4-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-1H- 피라졸 -1-일)피페리딘-1-일)에탄올(화학식 8)
(S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 HCl 염 20 mg (0.04 mmol)을 디메틸포름아마이드 1 ml에 녹이고 2-브로모에탄올 6.6 mg (0.05 mmol)과 K2CO3 15 mg (0.11 mmol)을 가하고 질소 충전후 60 ℃ 에서 4시간 교반하였다. 반응 후 디메틸포름아마이드 감압 농축 후 EA와 브라인으로 추출 한 후 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌클로라이드 : 메탄올 =10 : 1) 로 분리하여 33 mg (65 %)을 수득하였다.
C27H33N13O2의 LCMS 계산값= 571.29, 관찰값= 572.1
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4-(2- 모르폴리노에톡시 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린(화학식 14)
Figure pat00056
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 15 mg (0.03 mmol)을 디옥산 1 ml에 녹인 후 4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)페녹시)에틸)모르폴린 16.5 mg (0.05 mmol)과 1M Na2CO3 98μl (0.09 mmol), Pd(pph3)4 2 mg (0.001 mmol)을 가하고 질소 충전 후 105 ℃에서 18시간 교반하였다. 반응 후 EA와 브라인으로 추출 한 후 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌클로라이드 : 메탄올 = 20 : 1) 로 분리하여 6 mg (31 %)을 얻었다.
C29H33N11O3의 LCMS 계산값= 583.28, 관찰값= 583.8
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4-(2-(4- 메틸피페라진 -1-일) 에톡시 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린(화학식 15)
Figure pat00057
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 15 mg(0.03 mmol)을 디옥산 1 ml에 녹인 후 1-메틸-4-(2-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)페녹시)에틸)피페라진 17 mg (0.05 mmol)과 1M Na2CO3 98 μl (0.09 mmol), Pd(pph3)4 2 mg (0.001 mmol)을 가하고 질소 충전 후 105 ℃에서 18시간 교반하였다. 반응 후 EA와 브라인으로 추출 한 후 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌클로라이드 : 메탄올 = 20 : 1)로 분리하여 0.7 mg (4 %)을 얻었다.
C30H36N12O2의 LCMS 계산값 = 596.31, 관찰값= 597.2
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4-( 모르폴리노메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린(화학식 18)
Figure pat00058
(S)-4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤즈알데하이드 40 mg (0.08 mmol)을 메틸렌클로라이드 3 ml에 녹인 후 모르폴린 14 μl (0.17 mmol), 아세틱 애시드 5.7 μl (0.09 mmol), NaBH(OAc)3 26.5mg (0.12 mmol)을 가하고 질소 충전 후 실온에서 18시간 교반하였다. 반응 후 K2CO3(aq.)로 pH 8로 냉각시킨 다음 MC와 물로 추출 한 후 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 컬럼 크로마토그래피 (메틸렌클로라이드 : 메탄올 = 20 : 1)로 분리하여 18.7 mg (41 %)을 얻었다.
C28H31N11O2의 LCMS 계산값= 553.27, 관찰값= 554.0
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1- 메틸피페리딘 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린(화학식 20)
Figure pat00059
(S)-4-(5-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 75 mg (0.16 mmol)을 메탄올 3 ml와 메틸렌 클로라이드 2 ml에 녹인 후 플래티늄 옥사이드를 과량 가하고, 탈기한 후, 수소 풍선을 꽂아서 상온에서 하루 동안 반응한다. 반응 후 셀라이트 필터로 플래티넘옥사이드를 제거하고 PLC (메틸렌클로라이드 : 메탄올 = 5 : 1)로 분리하여 노란색 고체 13.3 mg (18 %)을 수득하였다.
C23H29N11O의 LCMS 계산값 = 475.26, 관찰값= 475.82
(S)-2-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)피페리딘-1-일)에탄올(화학식 21)
Figure pat00060
(S)-2-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-일)에탄올 54 mg (0.11 mmol)을 메탄올 3 ml와 메틸렌 클로라이드 2 ml에 녹인 후 플래티넘옥사이드 과량을 가하고, 탈기 후, 수소 풍선을 꽂아서 상온에서 하루 동안 반응시켰다. 반응 후 셀라이트 필터로 플래티넘옥사이드를 제거하고 PLC (메틸렌클로라이드 : 메탄올 = 5 : 1)로 분리하여 노란색 고체 7.7 mg (14 %)을 수득하였다.
C24H31N11O2의 LCMS 계산값 = 505.27, 관찰값= 506.28
Figure pat00061
(S)- tert -부틸 4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2H)- 카르복실레이트
밀폐튜브 하에서 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (70 mg, 0.15 mmol), tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (57 mg, 0.18 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (6.3 mg, 0.0078 mmol), K2CO3 (64 mg, 0.46 mmol)를 디옥산 (2 ml) + H2O (0.5 ml)를 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 브라인을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 2 : 1)로 정제하여, (S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (71 mg, 83 %)를 얻을 수 있었다.
1H-NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 5.92 (brs, 1H), 4.95 (d, J = 7.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.80 (dd, J = 4.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.75-4.66 (m, 1H), 4.47-4.38 (m, 1H), 4.32-4.20 (m ,1H), 4.10-3.93 (m ,3H), 4.03 (s, 3H), 3.69-3.52 (m, 3H), 3.25-3.03 (m ,2H), 2.48-2.38 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 하이드로클로라이드 (화학식 9의 염)
Figure pat00062
(S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (33 mg, 0.06 mmol)를 CH2Cl2 (2 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4N HCl을 넣고 상온에서 밤새 교반하였다. 반응종료 후, 감압 농축하여, (S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 하이드로클로라이드 (29 mg, 99 %)를 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 5.92 (brs, 1H), 4.95 (d, J = 7.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.80 (dd, J = 4.5 Hz, J=14.1 Hz, 1H), 4.75-4.66 (m, 1H), 4.47-4.38 (m, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 4.10-3.93 (m, 3H), 4.03 (s, 3H), 3.69-3.52 (m, 3H), 3.25-3.03 (m, 2H), 2.48-2.38 (m, 2H)
(S)-4-(5-(1- 메틸 -1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린 (화학식 10)
Figure pat00063
(S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (36 mg, 0.06 mmol)을 35% HCHO (0.1 ml)와 아세트산 (0.5 ml)에 녹인 후, 95 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, NaOH (aq.)를 넣어 pH 11-12 맞춘 후, H2O과 EA을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10) 정제하여, (S)-4-(5-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (16.9 mg, 56 %) 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.93 (s, 1H), 8.37 (s, 2H), 8.18 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 5.96 (brs, 1H), 4.97 (d, J = 7.7 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.81 (dd, J = 4.2 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.74-4.68 (m, 1H), 4.46-4.40 (m, 1H), 4.31-4.23 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 4.02-3.97 (m, 1H), 3.59 (dt, J = 2.8 Hz, J = 11.4 Hz, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 3.16-3.07 (m, 3H), 2.71 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.55-2.50 (m, 2H), 2.44 (s, 3H)
(2 S )-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1-(2-( 테트라하이드로 -2 H -피란-2- 일옥시 )에틸)-1 H - 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 300 mg (0.66 mmol)을 디메톡시메탄 12 ml 녹인 후 1-(2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 450 mg (1.39 mmol)을 가하였다. 세슘카보네이트 641 mg (1.97 mmol)을 증류수 3 ml에 녹여 반응용액에 가하였다. PdCl2(dppf)2 27 mg (0.03 mmol)을 가하고 N2 (g) 퍼지 한 후 80 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되어 에틸아세테이트와 소금물로 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 5% MeOH /MC조건에서 Prep LC로 분리하여 290 mg (77 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.43 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 4.99-4.91 (m, 1H), 4.83-4.77 (m, 1H ), 4.70 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.36 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.28-4.24 (m, 1H), 4.12-4.05 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 4.00 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.83-3.75 (m, 1H), 3.69-3.59 (m, 2H), 3.48-3.43 (m, 1H), 3.24-3.07 (m, 2H), 2.01 (s, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.57-1.49 (m, 4H)
( S )-2-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-1 H - 피라졸 -1-일)에탄올 하이드로클로라이드 (화학식 11의 염)
Figure pat00064
(2S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(1-(2-(테트라하이드로-2H-피란-2-일옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 290 mg (0.51 mmol)을 MC 20 ml에 녹인 후 4M HCl in 디옥산 2 ml를 가하였다. 실온에서 밤새 교반 후 반응이 종결되면 감압 농축하여 MC와 4M HCl in 디옥산을 제거한 후 에테르를 가하여 고체로 떨어트린다. Decant하여 236 mg (89 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.20 (s, 1H), 8.65 (s, 2H), 8.63 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 4.93-4.88 (m, 2H), 4.65 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.12 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.75 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.07-3.03 (m, 2H), 2.72 (s, 1H), 2.27 (s, 1H)
( S )- tert -부틸 4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2 H )- 카르복실레이트
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 500 mg (1.09 mmol)을 디메톡시메탄 8 ml 녹인 후 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 406 mg (1.31 mol)을 가하였다. 포타슘 카보네이트 453 mg (3.28 mmol)을 증류수 2 ml에 녹여 반응용액에 가하였다. PdCl2(dppf)2 45 mg(0.0547 mmol)을 가하고 N2 (g) 퍼지 한 후 80 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되어 에틸아세테이트와 소금물로 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 3% MeOH /MC 컬럼크로마토그래피로 분리하여 478 mg (78 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.34 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.98-4.90 (m, 1H), 4.80-4.72 (m, 1H), 4.70 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.31-4.23 (m, 1H), 4.06 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 4.02-3.93 (m, 1H), 3.69-3.53 (m, 3H), 3.23-3.06 (m, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.95 (s, 1H), 1.48 (s, 9H)
( S )-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 HCl 염(화학식 9의 염)
Figure pat00065
(S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 472 mg (0.84 mmol)을 MC 15 ml에 녹인 후 디옥산 2.5 ml에 용해된 4M HCl을 가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 종결되면 감압 농축하여 MC와 디옥산에 용해된 4M HCl을 제거한 후 에테르를 가하여 고체로 떨어뜨려 330 mg (79 %)의 목적 화합물을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.99-4.93 (m, 1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.37-4.29 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 4.02-3.93 (m, 1H), 3.72-3.58 (m, 3H), 3.32-3.15 (m, 2H), 2.45 (s, 2H), 1.99 (s, 1H)
( S )-2-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2 H )-일)에탄올(화학식 12)
Figure pat00066
(S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린 HCl 염 330 mg (0.67 mmol)을 DMF 10 ml에 녹인 후 포타슘카보네이트 276 mg (1.99 mmol)과 브로모 에탄올 71 μl (0.99 mmol), TEA 1 ml를 가하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 종결되어 에틸아세테이트와 소금물로 여러 번 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 7% MeOH /MC 컬럼크로마토그래피로 분리하여 210 mg (62 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.35 (s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.98-4.95 (m, 1H), 4.93-4.76 (m, 1H), 4.70 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.25 (brs, 1H), 3.98-3.93 (m, 1H), 3.70 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 3.56 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.23 (s, 2H), 3.15 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 2.80 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.69 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.49 (s, 2H)
( S )-4-(5-(3- 플루오로 -4-(2- 모르폴리노에톡시 ) 페닐 )피리미딘-2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3]트리아졸로[4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린 (화학식 13)
Figure pat00067
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 15 mg (0.033 mmol)을 디옥산 1 ml에 녹인 후 4-(2-(2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페녹시)에틸)모르폴린 17 mg (0.049 mmol)과 1M 소듐카보네이트 98.4 ul (0.098 mmol)을 가하였다. Pd(PPh3)4 2 mg (0.0016 mmol)을 가하고 N2 (g) 퍼지 한 후 105 ℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되어 에틸아세테이트와 소금물로 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 4% MeOH /MC 조건에서 Prep LC로 분리하여 7.8 mg (40 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.48 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.71-7.64 (m, 1H), 7.57-7.48 (m, 1H), 7.16 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.07-7.01 (m, 1H), 4.99-4.92 (m, 1H), 4.85-4.72 (m, 2H), 4.46 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.22 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.37 (s, 4H), 3.63-3.56 (m, 2H), 3.26-3.09 (m, 3H), 2.86 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.62 (s, 4H)
( S )-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)피리미딘-2-일)모르폴린
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 100 mg (0.22 mmol)을 디옥산 3 ml 녹인 후 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-bi(1,3,2-디옥사보롤란) 83 mg (0.33 mmol)과 포타슘 아세테이트 85 mg (0.87 mmol)을 가하고 N2 (g) 퍼지를 강하게 주입하였다. PdCl2(dppf)2 11 mg (0.013 mmol)과 dppf 7 mg (0.013 mmol)을 가하고 N2 (g) 퍼지 한 후 80 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 종결되어 에틸아세테이트와 소금물로 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하여 미정제 (crude) 화합물 109 mg (100 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 2H), 8.10 (s, 1H), 4.95-4.90 (m, 1H), 4.80-4.75 (m, 1H), 4.56 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.31-4.25 (m, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.94 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.59-3.53 (m, 1H), 3.13-2.99 (m, 2H), 1.28 (s, 12H)
( S )-2-(2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-올
(S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리미딘-2-일)모르폴린 109 mg (0.22 mmol)을 THF 3 ml와 증류수 3 ml에 녹인 후 NaBO3 65 mg (0.651 mmol)을 가하였다. 실온에서 한 시간 동안 교반 후 반응이 종결되면 MC와 물로 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 4% MeOH /MC조건에서 Prep LC로 분리하여 54 mg (63 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.12 (s, 2H), 8.11 (s, 1H), 4.98-4.93 (m, 1H), 4.82-4.77 (m, 1H), 4.56 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.33-4.26 (m, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.96 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.15-3.00 (m, 2H)
( S )-4-(5-(2- 클로로에톡시 )피리미딘-2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린
(S)-2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸) 모르폴리노)피리미딘-5-올 15 mg (0.04 mmol)을 DMF 2 ml에 녹인 후 1-브로모-2-클로로메탄 16 μl (0.19 mmol)과 포타슘카보네이트 16 mg (0.11 mmol)을 가하고 60 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 종결되면 에틸아세테이트와 소금물로 여러 번 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 4% MeOH /MC 조건에서 Prep LC로 분리하여 9.7 mg (53 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.12 (s, 2H), 8.11 (s, 1H), 4.96-4.91 (m, 1H), 4.80-4.76 (m, 1H), 4.57 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.30-4.24 (m, 2H), 4.20 (t, J = 3.3 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.97 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.78 (t, J = 3.3 Hz, 2H), 3.61-3.55 (m, 1H), 3.15-3.01 (m, 2H)
( S )-2-((6-(1- 메틸 -1 H - 피라졸 -4-일)-1 H -[1,2,3] 트리아졸로 [4,5- b ]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(2-(4- 메틸피페라진 -1-일) 에톡시 )피리미딘-2-일)모르폴린 (화합물 16)
Figure pat00068
(S)-4-(5-(2-클로로에톡시)피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 9 mg (0.019 mmol)을 DMF 1 ml에 녹인 후 1-메틸피페라진 4 μl (0.39 mmol)과 KI 4 mg (0.022 mmol)을 가하였다. 75℃에서 밤새 교반 후 반응이 종결되면 에틸아세테이트와 소금물로 여러 번 추출한 후 유기층은 Na2SO4로 건조하였다. 7% MeOH /MC 조건에서 Prep LC로 분리하여 7.8 mg (76 %)을 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.10 (s, 2H), 4.98-4.93 (m, 1H), 4.81-4.74 (m, 1H), 4.56 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 12.1 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.97 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.66-3.54 (m, 2H), 3.06-2.98 (m, 1H), 2.78 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.62 (brs, 4H), 2.52 (brs, 4H), 2.31 (s, 3H)
계산된 C24H32N12O2 LCMS 값= 520.28, 측정값 : 520.97
Figure pat00069
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)피리미딘-2-일)모르폴린
압력 튜브 하에서 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 50 mg (0.11 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-bi(1,3,2-디옥사보롤란) 42 mg (0.16 mmol), 포타슘 아세테이트 43 mg (0.44 mmol), Pd(dppf)2Cl2 5.4 mg (0.007 mmol), dppf 3.7 mg (0.007 mmol)를 디옥산 3 ml에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃ 에서 3 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하여, 다음 반응을 진행하였다.
(S)-2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-올
(S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리미딘-2-일)모르폴린 55 mg (0.11 mmol)을 THF 2 ml, H2O 2 ml에 녹인 후, NaBO3 16 mg (0.16 mmol)을 넣고 상온에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제 하여, (S)-2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-올 29 mg (2 단계: 67 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, DMSO) δ 9.30(brs, 1H), 9.14(s, 1H), 8.58(s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01(s, 2H), 4.88-4.77(m, 2H), 4.46-4.34(m, 1H), 4.19-4.01(m, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.86-3.77(m, 1H), 3.47-3.34(m, 1H), 2.94-2.74(m, 2H)
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(2- 모르폴리노에톡시 )피리미딘-2-일)모르폴린 (화학식 16)
Figure pat00070
(S)-2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-올 26 mg (0.066 mmol)을 DMF 2 ml에 녹인 후, 4-(2-클로로에틸)모르폴린하이드로클로라이드 14.8 mg (0.079 mmol), 포타슘 카보네이트 28 mg (0.19 mmol)를 넣고, 80℃ 에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제 하여, (S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(2-모르폴리노에톡시)피리미딘-2-일)모르폴린 5 mg (15 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.11 (s, 2H), 4.95 (dd, J = 7.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.78 (dd, J = 4.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.61-4.51 (m, 1H), 4.33-4.21 (m, 2H), 4.10 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 4.02 (s, 3H), 4.00-3.93 (m, 1H), 3.76 (t, J = 3.7 Hz, 4H), 3.58 (dt, J = 2.8 Hz, J = 11.4 Hz, 1H), 3.17-3.07 (m, 1H), 3.03 (dd, J = 10.1 Hz, J = 13.1 Hz, 1H), 2.79 (t, J = 4.5 Hz, 2H), 2.64-2.54 (m, 4H)
Figure pat00071
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 )피리미딘-2-일)모르폴린
(S)-2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-카바알데하이드 16 mg (0.033 mmol)를 CH2Cl2 2 ml에 녹인 후, 1-메틸피페라진 7.4 μl (0.066 mmol), AcOH 2.3 μl, NaBH(OAc)3 11 mg (0.05 mmol)을 넣고, 상온에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, aq. K2CO3 (5%)로 pH 8로 맞춘 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, (S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)피리미딘-2-일)모르폴린 14.1 mg, (76 %) 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.46-7.35 (m, 4H), 4.96 (dd, J = 7.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.84 (dd, J = 4.5 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.81-4.74 (m, 1H), 4.52-4.41 (m, 1H), 4.34-4.23 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 4.01-3.95 (m, 1H), 3.63 (dt, J = 2.5 Hz, J = 11.5 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.16 (dd, J = 10.1 Hz, J = 13.1 Hz, 1H), 2.59-2.38 (m, 8H), 2.31 (s, 3H)
3-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-(( 테트라하이드로 -2H-피란-2-일) 옥시 )에틸)-1H- 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴
압력튜브 반응기에 (S)-3-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]-트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 50 mg (0.10 mmol)을 가한 후, 포타슘 카보네이트 43 mg (0.31 mmol)을 가하였다. Pd(dppf)2Cl2 4 mg (0.005 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 2 ml, 1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 40 mg (0.13 mmol)을 가한 뒤, H2O 0.5 ml를 가하였다. 질소기체 하의 상온에서 10 분 교반 한 후, 80 ℃에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거 한 후, 감압 농축하였다. 50 % 에틸아세테이트 /헥산으로 컬럼크로마토그래피하여, 3-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 48 mg (0.08 mmol)을 70 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.23(s, 1H), 8.51(s, 1H), 8.45(s, 2H), 8.38(d, J = 7.9 Hz 1H), 7.83(d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.69(d, J = 7.5 Hz, 3H), 5.09-5.01 (m, 1H), 4.95-4.89(m, 1H), 4.76(d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.56 s, 1H), 4.45-4.26(m, 5H), 4.13-4.05(m, 2H), 4.00-3.96(m, 1H), 3.83-3.74(m, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 3.83-3.74(m, 2H), 3.68-3.55(m, 3H), 3.74-3.43(m, 2H), 3.22-3.08(m, 2H), 2.09-2.04(m, 1H), 1.78-1.42(m, 9H), 1.31-1.23(m, 2H)
(S)-3-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1H- 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [ 4,5-b]피라진 -6-일) 벤조니트릴 (화학식 31)
Figure pat00072
3-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 48 mg (0.08 mmol)을 MeOH 1 ml에 녹인 후, 1.4-디옥산 3 ml에 용해된 4M HCl을 가하고 상온에서 13시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되면 감압농축 하여 용매를 제거 한 후, (S)-3-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 46 mg (0.084 mmol)을 100 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.23 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.38 (d, J = 7.9 Hz 1H), 7.83 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 5.09-5.01 (m, 1H), 4.95-4.89 (m, 1H), 4.76 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.45-4.26 (m, 5H), 4.13-4.05 (m, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 3.83-3.74 (m, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 3.83-3.74 (m, 2H), 3.68-3.55 (m, 3H), 3.74-3.43 (m, 2H), 3.22-3.08 (m, 2H), 2.09-2.04 (m, 1H)
2- 플루오로 -5-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-(( 테트라하이드로 -2H-피란-2-일) 옥시 )에틸)-1H- 피라졸 -4-일)-피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b] 피라진-6-일) 벤조니트릴
압력튜브 반응기에 ((S)-5-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)-2-플루오로벤조니트릴 50 mg (0.10 mmol)을 가한 후, 포타슘 카보네이트 41 mg (0.30 mmol)을 가하였다. Pd(dppf)2Cl2 4 mg (0.005 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 2 ml, 1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 38 mg (0.12 mmol)을 가한 뒤, H2O 0.5 ml를 가하였다. 질소기체 하의 상온에서 10분 교반 한 후, 80 ℃에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거 한 후, 감압 농축하였다. 60% 에틸아세테이트 /헥산으로 컬럼크로마토그래피하여, 2-플루오로-5-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)-메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 49 mg (0.08 mmol)을 80 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.20 (s, 1H), 8.51 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.45-8.39 (m, 3H), 7.69 (d, J = 7.9 Hz 2H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07-5.00 (m, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 4.76 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.56 (brs, 2H), 4.45-4.28 (m, 5H), 4.15-4.06 (m, 2H), 3.97 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.83-3.74 (m, 2H), 3.68-3.55 (m, 2H), 3.47-3.44 (m, 1H), 3.23-3.07 (m, 2H), 2.04 (s, 1H), 1.78-1.49 (m, 9H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 2H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1H- 피라졸 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴 (화학식 32)
Figure pat00073
2-플루오로-5-(1-(((2S)-4-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)-메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 49 mg (0.08 mmol)을 MeOH 1 ml에 녹인 후, 1.4-디옥산 3 ml에 용해된 4 M HCl을 가하고 상온에서 13시간 동안 교반하였다. 반응이 종결되면 감압 농축하여 용매를 제거 한 후, (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 46 mg (0.084 mmol)을 100 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.20(s, 1H), 8.51(d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.45-8.39(m, 3H), 7.69(d, J = 7.9 Hz 2H), 7.57(s, 1H), 7.45(t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.07-5.00(m, 1H), 4.94-4.88(m, 1H), 4.76(d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.56 (brs, 2H), 4.45-4.28(m, 5H), 4.15-4.06(m, 2H), 3.97(d, J=11.5 Hz, 1H), 3.83-3.74(m, 2H), 3.68-3.55(m, 2H), 3.47-3.44(m, 1H), 3.23-3.07(m, 2H)
(S)- tert - 부틸4 -(2-(2-((6-(3- 시아노 -4- 플루오로페닐 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2H)- 카르복실레이트
압력튜브 반응기에 ((S)-5-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)-2-플루오로벤조니트릴 100 mg (0.20 mmol)을 가한 후, 포타슘 카보네이트 83 mg (0.60 mmol)을 가하였다. Pd(dppf)2Cl2 8 mg (0.01 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 3 ml와 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 74 mg (0.24 mmol)을 가한 뒤, H2O 0.5 ml를 가하였다. 질소기체 하의 상온에서 10분 교반 한 후, 80 ℃에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거한 후, 감압 농축하였다. 50% 에틸아세테이트 /헥산으로 컬럼크로마토그래피 하여, (S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(3-시아노-4-플루오로페닐)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 104 mg (0.17 mmol)을 87 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.41-8.36 (m, 3H), 7.44 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06-4.99 (m, 1H), 4.92-4.86 (m, 1H), 4.77 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 4.26 (brs, 2H), 4.15-4.10 (m, 1H), 4.06 (brs, 2H), 3.96 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.65-3.61 (m, 2H), 3.57-3.53 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 2H), 2.43 (brs, 2H), 2.04 (s, 2H), 1.56 (s, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 2H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴 (화학식 30)
Figure pat00074
(S)-tert-부틸 4-(2-(2-((6-(3-시아노-4-플루오로페닐)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 104 mg (0.17 mmol)을 MeOH 1 ml에 녹인 후, 1.4-디옥산 (3 mL)에 용해된 4 M HCl을 가하였다. 상온에서 3시간 동안 교반 후 반응이 종결되면 감압농축 하여 용매를 제거 한 뒤, 디클로로메탄와 NaHCO3로 2회 이상 추출한 후, 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거하였다. 감압농축 한 후, 5% 디클로로메탄/메탄올로 컬럼 크로마토그래피하여, (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5- (1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 44 mg (0.09 mmol)을 51 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.41-8.36 (m, 3H), 7.44 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06-4.99 (m, 1H), 4.92-4.86 (m, 1H), 4.77 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 4.26 (brs, 2H), 4.15-4.10 (m, 1H), 4.06 (brs, 2H), 3.96 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.65-3.61 (m, 2H), 3.57-3.53 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 2H), 2.43 (brs, 2H), 2.04 (s, 2H), 1.56 (s, 1H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 2H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴 (화학식 38)
Figure pat00075
(S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 44 mg (0.09 mmol)을 DMF 1 ml에 녹였다. 포타슘 카보네이트 36 mg (0.26 mmol), 2-브로모에탄올 0.009 ml (0.13 mmol)을 가한 후, Et3N (2 drop)후, 질소기체 하의 상온에서 13시간 교반하였다. 반응이 종결되면 에틸아세테이트와 물로 2회 이상 추출 한 후 감압 농축하였다. 10 % 디클로로메탄 /메탄올으로 PLC 하여 (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(1-(2-하이드록시에틸)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 9 mg (0.0 17 mmol)을 19 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.40 -8.37 (m, 3H), 7.44 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 5.06-4.97 (m, 1H), 4.92-4.86 (m, 1H), 4.76 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.26 (brs, 1H), 3.96 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.74-3.69 (m, 2H), 3.57 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.24 (brs, 2H), 3.17-3.06 (m, 2H), 3.82-3.27 (m, 2H), 2.71-2.68 (m, 2H), 2.50 (brs, 2H)
4- 브로모 -1-( 브로모메틸 )-2- 플루오로벤젠
NBS (1.07 g, 6.05 mmol)과 AIBN (83 mg, 0.50 mmol)을 CCl4 (10 mL)에 녹인 뒤 1-브로모-2-플루오로-4-메틸벤젠 (1 g, 5.04 mmol)을 가하고 100 ℃에서 13시간 가열 환류하였다. 반응이 종결되면 상온에서 냉각한 후, 생성된 고체를 여과하였다. CCl4와 물로 2회 이상 추출한 후, 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거하였다. 이후 감압농축하여 4-브로모-1-(브로모메틸)-2-플루오로벤젠 (1.2 g, 4.47 mmol)을 89 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.41 (m, 1H), 7.09 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H)
4-(4- 브로모 -2- 플루오로벤질 )모르폴린
4-브로모-1-(브로모메틸)-2-플루오로벤젠 (600 mg, 2.24 mmol)을 DMF (8 mL)에 녹인 후, KI (400 mg, 2.46 mmol)을 가한 뒤 모르폴린 (0.78 mL, 8.96 mmol)을 가하고, 60 ℃에서 13시간 교반하였다. 반응이 종결되면 감압 농축하여 DMF를 제거 한 후, 에틸아세테이트와 소금물로 2회 이상 추출하였다. 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거 한 후 감압 농축하여 30 % 에틸아세테이트 /헥산으로 컬럼크로마토그래피 하여 4-(4-브로모-2-플루오로벤질)모르폴린 (278 mg, 1.01 mmol)을 45 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.47(t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15(d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.99(d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.70(brs, 4H), 3.44(s, 2H), 2.43(brs, 4H)
4-(2- 플루오로 -4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)벤질)모르폴린
압력튜브 반응기에 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (2.22 g, 8.75 mmol)을 가한 후, Pd(dppf)2Cl2 (285 mg, 0.35 mmol)을 가한 뒤, KOAC (2.28 g, 23.3 mmol)을 추가로 가하고 DMF (20 mL)를 가하였다. 4-(4-브로모-2-플루오로벤질)모르폴린 (1.6 g, 5.83 mmol)을 추가로 가하고, 질소기체 하의 85 ℃에서 13시간 교반하였다. 반응이 종결되면 에틸아세테이트와 물로 2회 이상 추출한 후, 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거하였다. 감압농축 하여 30 % 에틸아세테이트 /핵산으로 컬럼크로마토그래피하여 4-(2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린 (1.8 g, 5.6 mmol)을 96 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.47 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.70 (brs, 4H), 3.44 (s, 2H), 2.43 (brs, 4H), 1.35 (s, 12H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(3- 플루오로 -4-( 모르폴리노메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴 (화학식 41)
Figure pat00076
압력튜브 반응기에 ((S)-5-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)-2-플루오로벤조니트릴 (40 mg, 0.08 mmol)을 가한 후, K2CO3 (33 mg, 0.24 mmol)을 가하였다. Pd(dppf)2Cl2 (3 mg, 0.004 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 (2 mL)와 물 (0.5 mL)를 가하였다. 4-(2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린 (12g, 0.13 mmol)을 가한 뒤, 질소기체 하의 상온에서 10분 교반 한 후, 85 ℃에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출 한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거 한 후, 감압 농축하였다. 5 % 디클로로메탄 /메탄올 으로 컬럼크로마토그래피 하여 (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(3-플루오로-4-(몰포리노메틸)페닐) -피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (46 mg, 0.075 mmol)을 46 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.53-8.49 (m, 2H), 8.45-8.38 (m, 1H), 7.44 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33-7.26 (m, 2H), 7.19-7.17 (m, 2H), 5.08-5.11 (m, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 4.83 (d, J = 12.9 Hz, 1H),4.50 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.29 (brs, 1H), 4.15-4.08 (m, 1H), 3.98 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.73 (brs, 4H), 3.63-3.55 (m, 1H), 3.52 (s, 2H), 3.26-3.11 (m, 2H), 2.47 (brs, 4H)
(S)-4-(5-(3- 플루오로 -4-( 모르폴리노메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[ 4,5-b]피라진 -1-일) 메틸 )모르폴린 (화학식 42)
Figure pat00077
압력튜브 반응기에 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (40 mg, 0.08 mmol)을 가한 후, K2CO3 (36 mg, 0.26 mmol)을 가하였다. Pd(dppf)2Cl2 (4 mg, 0.004 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 (2 mL)과 물 (0.5 mL)를 가하였다. 4-(2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)모르폴린 (42 mg, 0.13 mmol)을 가한 뒤, 질소기체 하의 상온에서 10 분 교반 한 후, 85 ℃에서 2시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출 한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거 한 후, 감압 농축하였다. 50 % 에틸아세테이트 /헥산으로 컬럼크로마토그래피 하여, 5 % 디클로로메탄 /메탄올으로 컬럼크로마토그래피하여 (S)-4-(5-(3-플루오로-4-(모르폴리노메틸)페닐)피리미딘-2-일)-2-((6- (1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (51 mg, 0.089 mmol)을 46 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32-7.26 (m, 2H), 7.20-7.16 (m, 2H), 5.08-4.92 (m, 1H), 4.84-4.76 (m, 2H), 4.49 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.28 (brs, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.74-3.71 (m, 4H), 3.64-3.56 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.27-3.10 (m, 2H), 2.47 (brs, 4H)
2- 플루오로 -4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일) 벤즈알데하이드
압력튜브 반응기에 4-브로모-2-플루오로벤즈알데하이드 (500 mg, 2.46 mmol)와 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-bi(1,3,2-디옥사보롤란) (938 mg, 3.69 mmol)을 가한 후, Pd(dppf)2Cl2 (120 mg, 0.15 mmol)을 가한 뒤, dppf (78 mg, 0.15 mmol)과 KOAC (965 mg, 9.84 mmol)을 추가로 가하고 1.4-디옥산 (8 mL)을 가하고 질소기체 하의 85 ℃에서 13시간 교반하였다. 반응이 종결되면 에틸아세테이트와 물로 2회 이상 추출 한 후, 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거하였다. 감압농축하고 20 % 에틸아세테이트 /핵산으로 컬럼크로마토그래피하여 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈알데하이드를 96 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.38 (s, 1H),7.85-7.81 (m, 1H), 7.67-7.65 (m, 1H), 7.57 (s, J = 10.4 Hz, 1H), 1.35 (s, 12H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(3- 플루오로 -4- 포르밀페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [ 4,5-b]피라진 -6-일) 벤조니트릴
압력튜브 반응기에 ((S)-5-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)-2-플루오로벤조니트릴 (50 mg, 0.10 mmol)을 가한 후, 1M Na2CO3 (0.31 mL, 0.31 mmol)을 가하였다. Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.005 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 (1 mL)와 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈알데하이드 (38 mg, 0.15 mmol)을 가한 뒤, 질소기체 하의 상온에서 10 분 교반 한 후, 105 ℃에서 3시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출 한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거 한 후, 감압 농축하였다. 에테르와 헥산을 이용하여 고체를 생성한 후 여과하여 (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(3-플루오로-4-포르밀페닐)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (49 mg, 0.091 mmol)을 90 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.36 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.53-8.45 (m, 1H), 8.61 (s, 2H), 7.97-7.92 (m, 1H), 7.49-7.39 (m, 3H), 5.08-5.01 (m, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 4.56 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.27 (brs, 1H), 4.01-3.93 (m, 1H), 3.67-3.56 (m, 1H), 3.27-3.09 (m, 2H)
(S)-2- 플루오로 -5-(1-((4-(5-(3- 플루오로 -4-((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-6-일) 벤조니트릴 (화학식 39)
Figure pat00078
S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(3-플루오로-4-포르밀페닐)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (49 mg, 0.09 mmol)을 디클로로메탄 (3 mL)에 녹인 후, AcOH (0.006 mL, 0.11 mmol)과 1-메틸피페라진 (0.011 mL, 0.10 mmol)을 가하였다. 상온에서 30분 교반 한 후, NaBH(OAC)3 (29 mg, 0.14 mmol)을 가한 뒤, 상온에서 13시간 교반하였다. 반응이 종결되면 5 % K2CO3를 이용하여 pH 8로 조정 한 후, 디클로로메탄와 물로 2회 이상 추출 한다. 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거한 후, 감압 농축하였다. 10 % 디클로로메탄 /메탄올으로 PLC하여 (S)-2-플루오로-5-(1-((4-(5-(3-플루오로-4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (24 mg, 0.038 mmol)을 45 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.19 (s, 1H), 8.54-8.50 (m, 3H), 8.43-8.38 (m, 1H), 7.49-7.41 (m, 1H), 7.22 (d, J = 8.04 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 5.08-5.01 (m, 1H), 4.94-4.81 (m, 2H), 4.50 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.30 (brs, 1H), 3.98 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.63-3.55 (m, 3H), 3.28-3.11 (m, 2H), 2.54 (brs, 8H), 2.30 (s, 3H)
(S)-2- 플루오로 -4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일) 벤즈알데하이드
압력튜브 반응기에 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (50 mg, 0.11 mmol)을 가한 후, 1M Na2CO3 (0.33 mL, 0.33 mmol)을 가하였다. Pd(PPh3)4 (6 mg, 0.005 mmol)을 추가로 가하고, 1.4-디옥산 (1 mL)와 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈알데하이드 (41 mg, 0.16 mmol)를 가한 뒤, 질소기체 하의 상온에서 10 분 교반 한 후, 105 ℃에서 13 시간 교반하였다. 반응이 종결되면 유기층을 에틸아세테이트와 물로 추출한 후, 여분의 물을 무수망초로 제거하고 감압 농축하였다. 에테르와 헥산을 이용하여 고체를 생성한 후 여과하여 (S)-2-플루오로-4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)-메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤즈알데하이드 (41 mg, 0.087 mmol)을 76 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.36 (s, 1H), 8.92 (s, 1H),8.59 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (t, J = 7.56 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.99-4.92 (m, 1H), 4.85-4.79 (m, 1H), 4.54 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.27 (brs, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.64-3.56 (m, 1H), 3.28-3.13 (m, 2H)
(S)-4-(5-(3- 플루오로 -4-((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )모르폴린 (화학식 40)
Figure pat00079
(S)-2-플루오로-4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)-메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤즈알데하이드 (41 mg, 0.09 mmol)를 디클로로메탄 (3 mL)에 녹인 후, AcOH (0.006 mL, 0.10 mmol)과 1-메틸피페라진 (0.02 mL, 0.17 mmol)을 가하였다. 상온에서 30분 교반한 후, NaBH(OAC)3 (28 mg, 0.13 mmol)을 가한 뒤, 상온에서 13 시간 교반하였다. 반응이 종결되면 5 % K2CO3를 이용하여 pH 8로 조정 한 후, 디클로로메탄와 물로 2회 이상 추출하였다. 유기층을 무수망초로 여분의 물을 제거한 후, 감압 농축하였다. 10 % 디클로로메탄/메탄올로 PLC하여 (S)-4-(5-(3-플루오로-4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (20 mg, 0.034 mmol)을 46 % 수율로 얻었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H),8.52 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.21 (t, J = 7.56 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.85-4.75 (m, 2H), 4.49 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.27 (brs, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.64-3.56 (m, 1H), 3.28-3.13 (m, 2H), 2.53 (brs, 8H), 2.30 (s, 3H)
Figure pat00080
tert -부틸 3-( 아지도메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (8.85 g, 24 mmol)를 DMF (100 ml)에 녹인 후, NaN3 (6.24 g, 96 mmol) 및 NaI (0.36 g, 2.40 mmol)를 넣고, 70 ℃ 에서 4 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 10)로 정제하여, tert-부틸 3-(아지도메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(5.38 g, 92 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.09-3.82 (m, 2H), 3.27-3.16 (m ,2H), 2.95-2.54 (m, 2H), 1.88-1.62 (m, 3H), 1.52-1.42 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.30-1.20 (m, 1H)
tert -부틸 3-( 아미노메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
tert-부틸 3-(아지도메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.38 g, 22.40 mmol)를 MeOH (50 ml)에 녹인 후, Pd/C (5% mol) 넣고, H2 (gas) 하에서 상온에서 9 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 셀라이트 필터 후, 여과, 감압 농축하여, 정제없이 다음 반응을 진행하였다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.02-3.73 (m, 2H), 2.94-2.73 (m, 1H), 2.72-2.33 (m, 3H), 1.90-1.02 (m, 5H), 1.44 (s, 9H)
tert -부틸 3-(((3-아미노-6- 브로모피라진 -2-일)아미노) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
tert-부틸 3-(아미노메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.97 g, 22.40 mmol)를 DMSO (80 ml)에 녹인 후, 3,5-디브로모피라진-2-아민 (8.5 g, 33.60 mmol), Et3N (6.3 ml)를 넣고, 130 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제 하여, tert-부틸 3-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, two steps : 26 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.39 (s, 1H), 4.64-4.23 (m, 2H), 3.79-2.92 (m, 5H), 2.25-1.19 (m, 4H), 1.46 (s, 9H)
tert - 부틸3 -((6- 브로모 -1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
tert-부틸 3-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, 5.70 mmol)를 DMF (15 ml)에 녹인 후, 0 ℃에서 이소아밀니트릴 (0.92 ml, 6.84 mmol)를 천천히 떨어 뜨린다. 그 후, 70 ℃ 에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 8)로 정제 하여, tert-부틸 3-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.39 g, 62 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 4.63 (q, J = 7.3 Hz, J = 14.1 Hz, 2H), 3.96-3.67 (m, 2H), 3.05-2.74 (m, 2H), 2.47-2.31 (m, 1H), 1.81-1.67 (m, 2H), 1.56-1.14 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)
tert -부틸 3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
tert-부틸 3-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.5 g, 1.26 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (0.32 g, 1.51 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (82 mg, 0.06 mmol), Cs2CO3 (1.24 g, 3.78 mmol)를 DME (3 ml) + H2O (1 ml) 에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제 하여, tert-부틸 3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.45 g, 89 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.87 (s, 1H), 8.17-8.07 (m, 2H), 4.59 (q, J = 7.3 Hz, J = 14.1 Hz, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.96-3.68 (m, 2H), 3.06-2.69 (m, 2H), 2.45-2.27 (m, 1H), 1.82-1.62 (m, 2H), 1.53-1.17 (m, 2H), 1.36 (s, 9H)
6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1-(피페리딘-3- 일메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진
3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.45 g, 0.89 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, TFA (5 ml)를 넣고 상온에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축하여, 정제없이 다음 반응을 진행하였다.
1-((1-(5- 브로모피리미딘 -2-일)피페리딘-3-일) 메틸 )-6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진 (화학식 3)
Figure pat00081
6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (0.26g, 0.89 mmol)을 EtOH (15 ml)에 녹인 후, 5-브로모-2-클로로피리미딘 (0.33g, 1.33 mmol), DIPEA (0.77 ml, 4.43 mmol)을 넣고, 50 ℃ 에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제하여, 1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (0.28 g, 70 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.78 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.22 (dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.40-3.32 (m, 1H), 3.23 (dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.59-2.50 (m, 1H), 1.91-1.82 (m, 2H), 1.62-1.44 (m, 2H)
tert -부틸 4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2H)- 카르복실레이트
1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (0.2g, 0.44 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 (0.17 g, 0.53 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (18 mg, 0.02 mmol), K2CO3 (0.19 g, 1.32 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제하여, tert-부틸 4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (0.2 g, 82 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 5.89-5.82 (m, 1H), 4.79 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.30 (dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.08-4.04 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.63 (t, J = 4.7 Hz, 2H), 3.40-3.33 (m, 1H), 3.25 (dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.59-2.51 (m, 1H), 2.42-2.35 (m, 2H), 1.92-1.82 (m, 2H), 1.71-1.43 (m, 2H), 1.51 (s, 9H)
Figure pat00082
1-((1-(5-(1- 메틸 -1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일) 메틸 )-6-(1- 메틸 -1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진 (화학식 34)
Figure pat00083
tert-부틸 4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (71 mg, 0.13 mmol)을 35 % HCHO (0.2 ml) + HCO2H (1 ml) 에 녹인 후, 95 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, NaOH (aq.)를 넣어 pH 11-12로 맞춘 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, 1-((1-(5-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (10 mg, 16 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.28 (s, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 5.91-5.88 (m, 1H), 4.79 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.30 (dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.24 (dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.66 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.59-2.50 (m, 1H), 2.49-2.43 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 1.91-1.41 (m, 4H)
6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1-((1-(5-(1,2,3,6- 테트라하이드로피리딘 -4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진 하이드로클로라이드 (화학식 33)
Figure pat00084
1-((1-(5-(1-메틸-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (125 mg, 0.22 mmol)을 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축한 후, 에테르로 정제하여, 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-((1-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 하이드로클로라이드 (90 mg, 82 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.26 (s, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 5.89-5.82 (m, 1H), 4.79 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.44(dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.30(dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.08-4.04(m, 2H), 4.03(s, 3H), 3.63 (t, J = 4.7 Hz, 2H), 3.40-3.33(m, 1H), 3.25(dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.59-2.51(m, 1H), 2.42-2.35(m, 2H), 1.92-1.82(m, 2H), 1.71-1.43(m, 2H)
2-(4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-5,6- 디하이드로피리딘 -1(2H)-일)에탄올 (화학식 35)
Figure pat00085
6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-((1-(5-(1,2,3,6-테트라하이드로피리딘-4-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 하이드로클로라이드 (71 mg, 0.14 mmol)를 DMF (2 ml)에 녹인 후, 2-브로모에탄올 (16 μl, 0.22 mmol), K2CO3 (100 mg, 0.72 mmol), Et3N (100 ul, 0.72 mmol)를 넣고, 상온에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, 2-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-5,6-디하이드로피리딘-1(2H)-일)에탄올 (10 mg, 13 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.27 (s, 2H), 8.14 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 5.92-5.87 (m, 1H), 4.79 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.27 (dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.08-4.04 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.71 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.27 (dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 3.22-3.19 (m, 2H), 2.77 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.60-2.52 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 2H), 1.91-1.82 (m, 2H), 1.63-1.44 (m, 2H)
Figure pat00086
6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1-((1-(5-(1-(2-(( 테트라하이드로 -2H-피란-2-일) 옥시 )에틸)-1H- 피라졸 -3-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진
1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (30 mg, 0.066 mmol), 1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (32 mg, 0.099 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (2.7 mg, 0.003 mmol), K2CO3 (28 mg, 0.20 mmol)을 디옥산 (1.2 ml) + H2O (0.3 ml) 에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 20)로 정제 하여, 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-((1-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (28 mg, 78 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 8.32 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.64-7.61 (m, 2H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 (m, 2H),4.58-4.55 (m, 1H), 4.43-4.38 (m, 1H), 4.36 (= 13.8 (m, 2H),4.584.30-4.23 (m, 1H), 4.13-4.06 (mm, 2H), 49d, s), 2H), 486-3.76 (m, 1H), 3.69-3.63(m, 1H), 3.49-3.35(m, 2H), 3.30-3.23(m, 1H), 2.61-2.52(m, 1H), 1.92-1.43(m, 10H)
2-(3-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-1H- 피라졸 -1-일)에탄올 하이드로클로라이드 (화학식 36)
Figure pat00087
6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-((1-(5-(1-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에틸)-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (28 mg, 0.049 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl에 녹인 후, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축 후, 에테르로 정제하여 2-(3-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-1H-피라졸-1-일)에탄올 하이드로클로라이드 (21.5 mg, 83 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 8.32 (d, J = 3.2 Hz, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.64-7.61 (m, 2H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.43-4.38 (m, 1H), 4.30-4.23 (m, 1H), 4.13-4.06 (m, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.86-3.76 (m, 1H), 3.69-3.63 (m, 1H), 3.49-3.35 (m, 2H), 3.30-3.23 (m, 1H), 2.61- 2.52 (m, 1H), 1.92-1.43 (m, 4H)
tert -부틸 4-(3-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-1H- 피라졸 -1-일)피페리딘-1- 카르복실레이트
1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (20 mg, 0.0434 mmol), tert-부틸 4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (20 mg, 0.053 mmol), Pd(PPh3)4 (2.6 mg, 0.0022 mmol), Na2CO3 (17 mg, 0.13 mmol)를 THF (1 ml) + H2O (0.6 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 20)로 정제하여, tert-부틸 4-(3-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (25 mg, 90 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 4.80 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.33-4.23 (m, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.27 (dt J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.98-2.84 (m, 1H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 1H), 2.01-1.80 (m, 4H), 1.63-1.44 (m, 2H), 1.49 (s, 9H)
6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1-((1-(5-(1-(피페리딘-4-일)-1H- 피라졸 -3-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진 하이드로클로라이드 (화학식 37)
Figure pat00088
4-(3-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)-1H-피라졸-1-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (25 mg, 0.04 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축 한 후, 에테르로 정제하여, 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-((1-(5-(1-(피페리딘-4-일)-1H-피라졸-3-일)피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 하이드로클로라이드 (18 mg, 75 %)을 얻을 수 있다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.51 (s, 1H), 4.80 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.33-4.23 (m, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.27 (dt J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.98-2.84 (m, 1H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 1H), 2.01-1.80 (m, 4H), 1.63-1.44 (m, 2H)
Figure pat00089
(S)-1- tert -부틸 3-에틸 피페리딘-1,3- 디카르복실레이트
(S)-에틸 피페리딘-3-카르복실레이트 (3 g, 19.08 mmol)을 CH2Cl2 (50 ml)에 녹인 후, BOC2O (5 g, 22.90 mmol), Et3N (4 ml, 28.62 mmol)을 넣고, 상온에서 3 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 10)로 정제 하여, (S)-1-tert-부틸 3-에틸 피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (4.27 g, 87 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.14 (q, J = 7.1 Hz, J = 14.3 Hz, 2H), 4.30-4.05 (m, 1H), 3.92 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.11-2.87 (m, 1H), 2.85-2.77 (m, 1H), 2.44 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.09-2.00 (m, 1H), 1.75-1.51 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
(S)- tert -부틸 3-( 하이드록시메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(S)-1-tert-부틸 3-에틸 피페리딘-1,3-디카르복실레이트 (4.27 g, 16.59 mmol)를 THF (100 ml) 에 녹인 후, 0 ℃ 에서 LiAlH4 (1.26 g, 33.19 mmol)를 넣고, 1 시간 교반하고, 다시 상온에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O (1.26 ml)를 천천히 넣고, NaOH (15 %, 1.26 ml) 천천히 넣어주었다. 그 후, H2O (4 ml)를 넣고 상온에서 1 시간 교반하였다. 셀라이트로 여과한 후, MgSO4 로 건조, 여과, 감압 농축하여, (S)-tert-부틸 3-(하이드록시메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 99 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3.91-3.51 (m, 2H), 3.50 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.24-2.75 (m, 2H), 2.62-2.08 (m, 2H), 1.86-1.18 (m, 4H), 1.45 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 3-(( 토실옥시 ) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(S)-tert-부틸 3-(하이드록시메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (3.5 g, 16.59 mmol)를 CH2Cl2 (60 ml)에 녹인 후, TsCl (3.8 g, 19.91 mmol), Et3N (3.47 ml, 24.87 mmol), DMAP (0.21 g, 1.66 mmol)을 넣고, 상온에서 3 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 MC, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 5)로 정제 하여, (S)-tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (6 g, 97 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.88 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.85-3.75 (m, 2H), 2.81 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.74-2.50 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.91-1.15 (m, 5H), 1.43 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 3-( 아지도메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(S)-tert-부틸 3-((토실옥시)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (8.85 g, 24 mmol)를 DMF (100 ml)에 녹인 후, NaN3 (6.24 g, 96 mmol), NaI (0.36 g, 2.40 mmol) 넣고, 70 ℃에서 4 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 10)로 정제하여, (S)-tert-부틸 3-(아지도메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.38 g, 92 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.09-3.82 (m, 2H), 3.27-3.16 (m ,2H), 2.95-2.54 (m, 2H), 1.88-1.62 (m, 3H), 1.52-1.42 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.30-1.20 (m, 1H)
(R)- tert -부틸 3-( 아미노메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(S)-tert-부틸 3-(아지도메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (5.38 g, 22.40 mmol)를 MeOH (50 ml)에 녹인 후, Pd/C (5 % mol) 넣고, H2 (gas) 하에서 상온에서 9 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 셀라이트 필터 후, 여과, 감압 농축하여, 정제없이 다음 반응을 진행하였다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.02-3.73 (m, 2H), 2.94-2.73 (m, 1H), 2.72-2.33 (m, 3H), 1.90-1.02 (m, 5H), 1.44 (s, 9H)
(R)- tert -부틸 3-(((3-아미노-6- 브로모피라진 -2-일)아미노) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(R)-tert-부틸 3-(아미노메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (4.97 g, 22.40 mmol)를 DMSO (80 ml)에 녹인 후, 3,5-디브로모피라진-2-아민 (8.5 g, 33.60 mmol), Et3N (6.3 ml) 를 넣고, 130 ℃ 에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제 하여, (R)-tert-부틸 3-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, two steps : 26 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.39 (s, 1H), 4.64-4.23 (m, 2H), 3.79-2.92 (m, 5H), 2.25-1.19 (m, 4H), 1.46 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 3-((6- 브로모 -1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1- 카르복실레이트
(R)-tert-부틸 3-(((3-아미노-6-브로모피라진-2-일)아미노)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (2.19 g, 5.70 mmol)를 DMF (15 ml)에 녹인 후, 0 ℃에서 이소아밀니트릴 (0.92 ml, 6.84 mmol)을 천천히 떨어 뜨렸다. 그 후, 70 ℃ 에서 1 시간 교반하고, 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 8)로 정제하여, (S)-tert-부틸 3-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (1.39 g, 62 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 4.63 (q, J = 7.3 Hz, J = 14.1 Hz, 2H), 3.96-3.67 (m, 2H), 3.05-2.74 (m, 2H), 2.47-2.31 (m, 1H), 1.81-1.67 (m, 2H), 1.56-1.14 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)
(S)- tert -부틸 3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-카르복실레이트
(S)-tert-부틸 3-((6-브로모-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.5 g, 1.26 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (0.32 g, 1.51 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (82 mg, 0.06 mmol), Cs2CO3 (1.24 g, 3.78 mmol)를 DME (3 ml) + H2O (1 ml) 에 녹인 후, N2 (gas) 탈기한 뒤에, 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA : Hex = 1 : 1)로 정제하여, (S)-tert-부틸 3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.45 g, 89 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.87 (s, 1H), 8.17-8.07 (m, 2H), 4.59 (q, J = 7.3 Hz, J = 14.1 Hz, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.96-3.68 (m, 2H), 3.06-2.69 (m, 2H), 2.45-2.27 (m, 1H), 1.82-1.62 (m, 2H), 1.53-1.17 (m, 2H), 1.36 (s, 9H)
(S)-6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1-(피페리딘-3- 일메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진
(S)-tert-부틸 3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트 (0.45 g, 0.89 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, TFA (5 ml)를 넣고 상온에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축하여, 정제없이 다음 반응을 진행하였다.
(S)-1-((1-(5- 브로모피리미딘 -2-일)피페리딘-3-일) 메틸 )-6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [ 4,5-b]피라진
(S)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (0.26 g, 0.89 mmol)를 EtOH (15 ml) 에 녹인 후, 5-브로모-2-클로로피리미딘 (0.33 g, 1.33 mmol), DIPEA (0.77 ml, 4.43 mmol)을 넣고, 50 ℃ 에서 밤새 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (EA :H ex = 1 : 1)로 정제하여, (S)-1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (0.28 g, 70 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.19 (s, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.78 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 6.9 Hz, J = 13.8 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.22 (dt, J = 3.7 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.40-3.32 (m, 1H), 3.23 (dd, J = 9.0 Hz, J = 13.3 Hz, 1H), 2.59-2.50 (m, 1H), 1.91-1.82 (m, 2H), 1.62-1.44 (m, 2H)
(S)-2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )-4-(5-(4-((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린(화학식 17)
Figure pat00090
(S)-1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (250 mg, 0.55 mmol), 1-메틸-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)피페라진 (210 mg, 0.66 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (23 mg, 0.027 mmol), K2CO3 (228 mg, 1.65 mmol)를 디옥산 (6 ml) + H2O (1.5 ml)에 녹이고 N2 (gas) 탈기 후, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, (S)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)피리미딘-2-일)모르폴린 (210 mg, 71 %)을 얻었다.
(S)-1-(4-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일) 에타논 (화학식 45)
Figure pat00091
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (50 mg, 0.11 mmol), 1-(4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (45 mg, 0.13 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (4.5 mg, 0.005 mmol), K2CO3 (45 mg, 0.33 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 한 후, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여 (S)-1-(4-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (58 mg, 90 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.55-7.28 (m, 2H), 4.96 (dd, J = 7.7 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.86 -4.71 (m, 2H), 4.48 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.34-4.23 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.02-3.97 (m, 1H), 3.68-3.59 (m, 3H), 3.56 (s, 2H), 3.47 (t, J = 4.3 Hz, 2H), 3.29-3.08 (m, 2H), 2.51-2.40 (m, 4H), 2.11 (s, 3H)
(S)-1-(4-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일) 에타논 하이드로클로라이드
(S)-1-(4-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (58 mg, 0.084 mmol)을 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후 , 감압 농축 한 후, 에테르로 정제하여, (S)-1-(4-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드 (47 mg, 90 %)을 얻을 수 있다.
(S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일) 에타논 (화학식 46)
Figure pat00092
(S)-1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (50 mg, 0.11 mmol), 1-(4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (45 mg, 0.13 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (4.5 mg, 0.0054 mmol), K2CO3 (45 mg, 0.33 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기 한 후, 80 ℃ 에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, (S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (48 mg, 74 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.90 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.13 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 4.80 (dd, J = 7.0 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.46 (dd, J = 3.3 Hz, J = 13.1 Hz, 1H), 4.38-4.27 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.63 (t, J = 4.3 Hz, 2H), 3.55 (s, 2H), 3.47 (t, J = 4.3 Hz, 2H), 3.44-3.33 (m, 1H), 3.27 (dd, J = 8.7 Hz, 13.4 Hz, 1H), 2.63-2.50 (m, 1H), 2.50-2.39 (m, 4H), 2.08 (s, 3H), 1.94-1.80 (m, 2H), 1.66-1.44 (m, 2H)
(S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일) 에타논 하이드로클로라이드
Figure pat00093
(S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (48 mg, 0.08 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축하고, 에테르로 정제하여 (S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 하이드로클로라이드 (46 mg, 90 %)을 얻을 수 있다.
(S)-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일) 페닐 )(4- 메틸피페라진 -1-일) 메타논 (화학식 47)
Figure pat00094
(S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (50 mg, 0.11 mmol), (4-메틸피페라진-1-일)(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)메타논 (45 mg, 0.13 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (4.5 mg, 0.0054 mmol), K2CO3 (45 mg, 0.33 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기하고, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O와 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, (S)-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)페닐)(4-메틸피페라진-1-일)메타논 (62 mg, 98 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.92 (s, 1H), 8.56 (s, 2H), 8.17 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.55-7.45 (m, 4H), 4.97 (dd, J = 7.7 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.87-4.73 (m, 2H), 4.50 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.34-4.23 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 4.02-3.97 (m, 1H), 3.90-3.69 (m, 2H), 3.61 (dt, J = 2.4 Hz, J = 11.2 Hz, 1H), 3.30-3.09 (m, 2H), 2.58-2.36 (m, 4H), 2.34 (s, 3H)
(S)-(4-(2-(2-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 ) 모르폴리노 )피리미딘-5-일) 페닐 )(4- 메틸피페라진 -1-일) 메타논 하이드로클로라이드
Figure pat00095
(S)-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)페닐)(4-메틸피페라진-1-일)메타논 (62 mg, 0.11 mmol)을 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 감압 농축하고, 에테르로 정제하여 (S)-(4-(2-(2-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)페닐)(4-메틸피페라진-1-일)메타논 하이드로클로라이드 (59 mg, 90 %)을 얻을 수 있다.
(S)-(4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일) 페닐 )(4- 메틸피페라진 -1-일) 메타논 (화학식 48)
Figure pat00096
(S)-1-((1-(5-브로모피리미딘-2-일)피페리딘-3-일)메틸)-6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진 (50 mg, 0.11 mmol), (4-메틸피페라진-1-일)(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)메타논 (45 mg, 0.13 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (4.5 mg, 0.0054 mmol), K2CO3 (45 mg, 0.33 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기하고, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여 (S)-1-(4-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)벤질)피페라진-1-일)에타논 (48 mg, 74 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.89 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 8.12 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.50-7.40 (m, 4H), 4.80 (dd, J = 7.7 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.64 (dd, J = 7.7 Hz, J = 14.2 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 2.4 Hz, J = 13.2 Hz, 2H), 4.37-4.26 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.90-3.70 (m, 2H), 3.61-3.37 (m, 3H), 3.30 (dd, J = 9.2 Hz, J = 13.1 Hz, 1H), 2.65-2.37 (m, 5H), 2.34 (s, 3H), 1.95-1.78 (m, 2H), 1.67-1.40 (m, 2H)
(S)-(4-(2-(3-((6-(1- 메틸 -1H- 피라졸 -4-일)-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [4,5-b]피라진-1-일) 메틸 )피페리딘-1-일)피리미딘-5-일) 페닐 )(4- 메틸피페라진 -1-일) 메타논 하이드로클로라이드
Figure pat00097
(S)-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)페닐)(4-메틸피페라진-1-일)메타논 (48 mg, 0.083 mmol)를 CH2Cl2 (5 ml)에 녹인 후, 디옥산 (1 ml)에 용해된 4 N HCl을 넣고, 상온에서 1 시간 교반하였다. 반응 종료 후 감압 농축 한 뒤, 에테르로 정제하여 (S)-(4-(2-(3-((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)피리미딘-5-일)페닐)(4-메틸피페라진-1-일)메타논 하이드로클로라이드 (46 mg, 90 %)을 얻을 수 있다.
(S)-3-(1-((4-(5-(4-((4- 메틸피페라진 -1-일) 메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [ 4,5-b]피라진 -6-일) 벤조니트릴 (화학식 49)
Figure pat00098
(S)-3-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (30 mg, 0.063 mmol), 1-메틸-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)피페라진 (24 mg, 0.094 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (2 mg, 0.003 mmol), Cs2CO3 (62 mg, 0.18 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기한 뒤, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여, (S)-3-(1-((4-(5-(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (12.1 mg, 33 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.25 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.54 (s, 1H), 8.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.73 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.48-7.39 (m, 4H), 5.08 (dd, J = 7.9 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.95 (dd, J = 4.3 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.87-4.80 (m, 1H), 4.54-4.48 (m, 1H), 4.37 4.29 (m, 1H), 4.05-3.98 (m, 1H), 3.63 (dt, J = 2.5 Hz, J = 11.4 Hz, 1H), 3.28-3.21 (m, 1H), 3.18 (dt, J = 10.8 Hz, J = 14.4 Hz, 1H), 2.62-2.35 (m, 8H), 2.31 (s, 3H)
(S)-3-(1-((4-(5-(4-((4- acet일피페라진 -1-일) 메틸 ) 페닐 )피리미딘-2-일)모르폴린-2-일) 메틸 )-1H-[1,2,3] 트리아졸로 [ 4,5-b]피라진 -6-일) 벤조니트릴 (화학식 50)
Figure pat00099
(S)-3-(1-((4-(5-브로모피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (30 mg, 0.063 mmol), 1-메틸-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤질)피페라진 (24 mg, 0.094 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (2 mg, 0.003 mmol), Cs2CO3 (62 mg, 0.18 mmol)를 디옥산 (4 ml) + H2O (1 ml)에 녹인 후, N2 (gas) 탈기하고, 80 ℃에서 2 시간 교반하였다. 반응 종료 후, H2O과 EA, 소금물을 이용하여 추출, 건조 (Na2SO4), 여과, 감압 농축하고, 잔여물을 관 크로마토크래피 (MeOH : MC = 1 : 10)로 정제하여 (S)-3-(1-((4-(5-(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)피리미딘-2-일)모르폴린-2-일)메틸)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-6-일)벤조니트릴 (15.1 mg, 41 %)을 얻을 수 있었다.
1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.25(s, 1H), 8.58(s, 2H), 8.54(s, 1H), 8.40(d, J=7.2 Hz, 1H), 7.86(d, J=7.2 Hz, 1H), 7.73(t, J=7.9 Hz, 1H), 7.48- 7.39(m, 4H), 5.08 (dd, J=7.9 Hz, J = 14.1 Hz, 1H), 4.95(dd, J=4.3 Hz, J =14.1 Hz, 1H), 4.87-4.80(m, 1H), 4.54-4.48(m, 1H), 4.37-4.29(m, 1H), 4.05-3.98(m, 1H), 3.69-3.59(m, 3H), 3.58(s, 2H), 3.55-3.48(m, 4H), 3.29-3.20(m, 1H), 3.18(dd, J=10.5 Hz, J=13.3 Hz, 1H), 2.53-2.40(m, 4H), 2.11 (s, 3H)
제제예
제제예 1 : 정제(직접 가압)
활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후, 락토스 14.1 ㎎, 크로스포비돈 USNF 0.8 ㎎ 및 마그네슘 스테아레이트 0.1 ㎎을 혼합하고 가압하여 정제로 만들었다.
제제예 2 : 정제(습식 조립)
활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후, 락토스 16.0 ㎎과 녹말 4.0 ㎎을 섞었다. 폴리솔베이트 80 (0.3 ㎎)을 순수한 물에 녹인 후 이 용액의 적당량을 첨가한 다음, 미립화하였다. 건조 후에 미립을 체질한 후 콜로이달 실리콘 다이옥사이드 2.7 ㎎ 및 마그네슘 스테아레이트 2.0 ㎎과 섞었다. 미립을 가압하여 정제로 만들었다.
제제예 3 : 분말과 캡슐제
활성성분 5.0 ㎎을 체로 친 후에, 락토스 14.8 ㎎, 폴리비닐 피롤리돈 10.0 ㎎, 마그네슘 스테아레이트 0.2 ㎎와 함께 섞었다. 혼합물을 적당한 장치를 사용하여 단단한 No. 5 젤라틴 캡슐에 채웠다.
제제예 4 : 주사제
활성성분으로서 100 mg을 함유시키고, 그 밖에도 만니톨 180 mg, Na2HPO42H2O 26 mg 및 증류수 2974 mg를 함유시켜 주사제를 제조하였다.
실험예
실험예 1. c- Met 키나아제 억제활성 실험
본 발명에 따른 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용가능한 염의 이상세포의 증식억제활성을 세포단계에서 측정하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.
c-Met 키나아제에 대한 저해활성을 시간분해형광도 (Time-resolved fluorescence, TRF)의 일종인 분리 증강된 란탄족플루오로 면역 분석 (Dissociation Enhanced Lanthanide 플루오로 Immuno Assay, DELFIA; Perkin Elmer)을 이용하여 분석하였다. 그레이너 96웰 V형 바닥 플레이트에 시험화합물로서 본 발명에서 제조된 화합물 10 mL을 가하고 c-Met 효소를 섞은 티로신 키나아제 버퍼 (20 mL)를 가한 후, 상기 효소 및 시험화합물을 15분 동안 혼합하여 배양하였다. 여기에 ATP용액 (10 mL)을 가하여 상온에서 30분 동안 키나아제 반응을 시킨후, 50 mM 에틸렌다이아민테트라아세트산 용액 (EDTA, 40 mL)을 가하여 반응을 중지시켰다. 이후 스트렙트아비딘이 코팅된 플레이트에 반응물을 옮기고 진탕하에 배양하고 2시간 후 PBS-T 완충액 (PBS 0.05% 트윈20)으로 3회 세척하였다.
유로퓸이 붙은 항-포스포타이로신 항체를 1:2,500으로 희석시켜 웰 당 100 mL씩 가하고 진탕하에 배양하고 1시간 후, PBS-T 완충액 (PBS 0.05% 트윈20)으로 5회 세척하였다. 개선제 (enhancement solution, 100 mL)을 가하고 5분 동안 진탕배양한 후, 왈락 인비전 2103 (Wallac Envision 2103) 기기로 615/665 nm의 파장 범위에서 판독하였다. 상기 실험을 수행한 시험화합물의 IC50는 2개씩의 데이터 세트로 결정하였고 프리즘 (버전 5.01, 그래프패드) 소프트웨어를 이용하여 구하였다.
c-Met 키나아제 효소활성을 50%로 감소시키는 상기 화합물의 IC50 값을 하기 표 1에 나타내었다.
각 화합물의 c-Met IC50(μM)값
화합물 c-Met IC50(μM) 화합물 c-Met IC50(μM)
화학식 4 0.011 화학식 26 0.005
화학식 5 0.029 화학식 27 0.005
화학식 6 0.002 화학식 28 0.004
화학식 7 0.006 화학식 29 0.002
화학식 8 0.004 화학식 30 0.002
화학식 9 0.003 화학식 31 0.002
화학식 10 0.004 화학식 32 0.001
화학식 11 0.003 화학식 33 0.003
화학식 12 0.004 화학식 34 0.003
화합물 13 0.015 화학식 35 0.003
화학식 14 0.014 화학식 36 0.002
화학식 15 0.006 화학식 37 0.002
화학식 17 0.003 화학식 38 0.003
화학식 18 0.005 화학식 39 0.002
화학식 19 0.007 화학식 40 0.002
화학식 20 0.002 화학식 42 0.004
화학식 21 0.005 화학식 45 0.008
화학식 22 0.004 화학식 46 0.007
화학식 23 0.003 화학식 47 0.013
화학식 24 0.002 화학식 48 0.006
화학식 25 0.005 화학식 49 0.008
대부분의 신규 화합물들의 IC50 값은 모두 0.01 μM 이하로 나타남으로서 c-Met에 대해 매우 우수한 인 비트로 활성을 보이고 있다. 이로부터 본 발명에 따른 신규 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 c-Met 키나아제에 대한 우수한 억제효과가 있음을 알 수 있다.
실험예 2. 암세포 증식억제 실험
본 발명에 따른 신규 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 암세포 증식 억제능을 알아보기 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다.
<2-1> 실험 재료
세포배양액인 RPMI 1640 배지, FBS (fetal bovine serum) 및 트립신은 Gibco 사 (Grand Island, NY)로부터 구입하였으며, 탄산수소나트륨, 암포테리신 B 및　겐타마이신은 시그마케미컬 제품을 사용하였다. 또한, 세포독성 측정 실험에 사용한 시약인 SRB (sulforhodamine) B, 트리스마 염기 (Trisma base), 트리클로로아세트산 (TCA) 등의 시약은 시그마케미컬사로부터 구입하였다. MTS 분석을 위해서는 CellTiter 96R AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay 제품을 프로메가 (Promega)사로부터 구입하였다. 또한, 세포배양을 위해 사용한 T-25 배양용기,　96-웰(well) 플레이트 및 기타 세포배양에 사용한 일회용 초자류는 팔콘사 (Lincoln Park, NJ) 제품을 사용하였다.
세포독성 측정을 위한 엘라이자 리더기 (microplate reader)는 Molecular Devices사 (Sunnyvale, CA)의 E-max나 SpectraMax250 기종을 사용하였다.
<2-2> 실험방법
실험에 사용한 약물은　시험에 원하는 농도까지 실험용 배지로서 희석하여　사용하였고, 최종 다이메틸설폭사이드 농도는 0.5% 이하가 되도록 하였다.
실험에 사용한 암세포주는 모두 인체기원 암세포주들로서, 위암 세포주인 Hs746T, 및 MKN-45를 사용하였다. 배양액으로는 10% FBS (fetal bovine serum)가 첨가된 RPMI 1640 배지를 사용하여 37 ℃ 및 5% 이산화탄소 인큐베이터에서 배양하였고, 3-4일에 한번 씩 계대 유지하였다.　
96 웰 (well) 평평한 바닥 마이크로플레이트 (flat-bottom microplate)의 각 웰 (well)에 Hs746T는 5×103 cells을 분주하고, MKN-45는 1×104 cells를 분주하고, 세포가 바닥면에 부착하도록 24시간 동안 배양한 후, 배양액을 제거하고, 여기에 본 발명의 화합물이 각각 포함된 배양액을 가하고 72시간 동안 배양하였다. 상기 화합물과의 배양이 종료된 후, 세포독성의 측정은 단백질 염색 시약인 SRB를 이용하여 측정하거나 MTS 분석법을 이용하여 측정하였다.
구체적으로, 본 발명의 화합물과의 배양이 종료된 후, 배양액을 제거하고 각 웰(well)에 차가운 TCA 용액을 처리하고 4 ℃에서 1시간 동안 방치하여 세포들을 고정시켰다. 상기 TCA 용액을 제거하고 실온에서 건조시킨 후, 1% 아세트산 용액에 0.4% SRB를 녹인 염색용액을 가하여 실온에서 30분 동안 방치하여 세포를 염색하였다. 세포와 결합하지 않은 여분의 SRB를 1% 아세트산 용액으로 세척하여 제거하고, 염색된 세포들에 pH 10.3~10.5의 10 mM 트리스 완충용액 (Trisma base; unbuffered)을 가하여 SRB를 용출시켰다. 각 웰 (well)의 흡광도는 엘라이자 리더기 (microplate reader)를 이용하여 520 nm의 파장 범위에서 측정하였다.
약물을 가하지 않은 웰 (well)(C)과 약물을 가한 각 웰 (well)(T) 및 약물을 처음 가할 때의 웰 (well)(Tz)의 OD값으로부터,
Tz=T인 경우에는 [(T-Tz)/(C-Tz)]×100의 수식에 의해 또는
Tz＞T인 경우에는 [(T-Tz)/(Tz)×100 의 수식에 의해 약물의 세포독성을 계산하였다.
MTS 분석법을 이용한 암세포 증식억제 측정은 다음과 같이 실험하였다. 구체적으로, 본 발명의 화합물과의 배양이 종료된 후, Promega사의 CellTiter 96R AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay 제품을 구성하고 있는 PMS 용액과 MTS 용액을 섞은 후 웰당 20 μL를 넣어주었다. 4시간 동안 배양기에 놓아둔 후 꺼내어 상온에서 10분간 방치하였다. Molecular Device사의 SpectraMax250 기종을 이용하여 490 nM에서의 흡광도를 측정한 후 IC50 값을 계산하였다.
암세포 (Hs746T) 증식을 50%로 억제하는 상기 화합물의 IC50는 하기 표 2에 나타내었다.
각 화합물의 암세포 (Hs746T) 증식 억제 분석 [IC50(μM)]
화합물 Hs746T의 IC50(μM) 화합물 Hs746T의 IC50(μM)
화학식 4 0.0012 화학식 22 0.0098
화학식 5 0.0013 화학식 23 0.0001
화학식 6 0.00017 화학식 24 0.00008
화학식 7 0.00011 화학식 25 0.0011
화학식 8 0.00014 화학식 26 0.0009
화학식 9 0.00095 화학식 27 0.0007
화학식 10 0.0011 화학식 28 0.0007
화학식 11 0.00093 화학식 29 0.0001
화학식 12 0.00096 화학식 30 0.00011
화합물 13 0.00086 화학식 31 0.00018
화합물 14 0.0041 화학식 32 0.00014
화학식 16 0.0021 화학식 33 0.0095
화학식 17 0.00012 화학식 34 0.015
화학식 18 0.0096 화학식 35 0.002
화학식 19 0.0012 화학식 36 0.0038
화학식 20 0.0020 화학식 37 0.0013
화학식 21 0.0056 화학식 38 0.00014
표 2에 나타난 바와 같이, 암세포인 Hs746T에 대한 모든 화합물의 IC50 값은 모두 0.01 μM 이하로 나타났으며, 특히 화학식 6 내지 9, 11 내지 13, 17, 23, 24, 26 내지 32 및 38의 화합물은 0.001 μM 이하의 매우 낮은 값을 나타내었다. 이로부터 본 발명에 따른 신규 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 암세포 등의 증식을 억제하는 매우 우수한 효과가 있음을 알 수 있다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
<제제예 1> 약학적 제제의 제조
<1-1> 산제의 제조
트리아졸로 피라진 유도체 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합한 후, 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<1-2> 정제의 제조
트리아졸로 피라진 유도체 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<1-3> 캡슐제의 제조
트리아졸로 피라진 유도체 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<1-4> 주사액제의 제조
트리아졸로 피라진 유도체 10 ㎍/㎖
묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지
주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖
적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 본 발명에 따른 트리아졸로 피라진 유도체를 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (9)

  1. 하기의 화학식 1로 표시되는 트리아졸로 피라진(triazolopyrazine) 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염:
    화학식 1
    Figure pat00100

    상기 화학식에서,
    R1 내지 R3는 각각 독립적으로 수소; 할로겐; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알케닐; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C3 알콕시; 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C5 알킬, 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬로 치환된 C1-C3 알콕시, 할로겐, 아세틸 피페라진 또는 피페라지닐 카르보닐로 치환된 페닐; 또는 5각-6각 고리의 헤테로사이클로알킬, 하이드록시 C1-C5 알킬 또는 C1-C5 알킬로 치환된 5각-6각 고리의 헤테로아릴이고; R1 내지 R3 중 적어도 하나는 수소가 아니며;
    R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소; 비치환되거나 C1-C5 알킬로 치환된 5각-6각 고리의 헤테로아릴; 또는 시아노, 할로겐 또는 C1-C5 알킬로 치환된 페닐이고; R4 및 R5 중 적어도 하나는 수소가 아니며;
    X는 산소 또는 탄소이다.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1의 R1 내지 R3는 각각 독립적으로 수소; 할로겐; 메틸, 하이드록시 에틸, 피페리딘 또는 N-메틸 피페리딘으로 치환된 피라졸; 비치환되거나 메틸 또는 하이드록시 에틸로 치환된 테트라하이드로피리딘; 할로겐, 모르폴리노에톡시, 피페라지닐에톡시, 피페라지닐메틸, 모르폴리노메틸, 아세틸 피페라진 또는 피페라지닐 카르보닐로 치환된 페닐; 모르폴리노에톡시; 피페라지닐에톡시; 비치환되거나 메틸 또는 하이드록시 에틸로 치환된 피페리딘이고; R1 내지 R3 중 두 개는 수소인 것을 특징으로 하는 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1의 R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소; N-메틸 피라졸; 또는 시아노 또는 할로겐으로 치환된 페닐이고; R4 및 R5 중 하나는 수소인 것을 특징으로 하는 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 트리아졸로 피라진 유도체는 하기의 화학식 2 내지 50으로 표시되는 화합물로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염:
    화학식 2 화학식 3
    Figure pat00101
    Figure pat00102


    화학식 4 화학식 5
    Figure pat00103
    Figure pat00104


    화학식 6 화학식 7
    Figure pat00105
    Figure pat00106


    화학식 8 화학식 9
    Figure pat00107
    Figure pat00108


    화학식 10 화학식 11
    Figure pat00109
    Figure pat00110


    화학식 12 화학식 13
    Figure pat00111
    Figure pat00112


    화학식 14 화학식 15
    Figure pat00113
    Figure pat00114

    화학식 16 화학식 17
    Figure pat00115
    Figure pat00116

    화학식 18 화학식 19
    Figure pat00117
    Figure pat00118


    화학식 20 화학식 21
    Figure pat00119
    Figure pat00120


    화학식 22 화학식 23
    Figure pat00121
    Figure pat00122


    화학식 24 화학식 25
    Figure pat00123
    Figure pat00124


    화학식 26 화학식 27
    Figure pat00125
    Figure pat00126


    화학식 28 화학식 29
    Figure pat00127
    Figure pat00128


    화학식 30 화학식 31
    Figure pat00129
    Figure pat00130


    화학식 32 화학식 33
    Figure pat00131
    Figure pat00132


    화학식 34 화학식 35
    Figure pat00133
    Figure pat00134


    화학식 36 화학식 37
    Figure pat00135
    Figure pat00136


    화학식 38 화학식 39
    Figure pat00137
    Figure pat00138


    화학식 40 화학식 41
    Figure pat00139
    Figure pat00140

    화학식 42 화학식 43
    Figure pat00141
    Figure pat00142


    화학식 44 화학식 45
    Figure pat00143
    Figure pat00144


    화학식 46 화학식 47
    Figure pat00145
    Figure pat00146


    화학식 48 화학식 49
    Figure pat00147
    Figure pat00148


    화학식 50
    Figure pat00149

  5. 제 4 항에 있어서, 상기 트리아졸로 피라진 유도체는 상기의 화학식 6 내지 9, 11 내지 13, 17, 23, 24, 26 내지 32 및 38로 표시되는 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 트리아졸로 피라진 유도체 또는 이의 약제학적 허용 가능한 염.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항의 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 c-Met 티로신 키나아제 활성 억제용 약제학적 조성물.
  7. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항의 트리아졸로 피라진 유도체, 이의 약제학적 허용 가능한 염 또는 이의 용매화물을 유효성분으로 포함하는 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
  8. 제 7 항에 있어서, 상기 이상증식성 질환 (hyper proliferative disorder)은 암, 당뇨병성 망막증, 미숙아 망막증, 각막 이식 거부, 신생혈관성 녹내장, 홍색증, 증식성 망막증, 건선, 류마티스 관절염, 골관절염, 자가면역 질환, 크론씨병, 재발협착증, 아테롬성 동맥경화, 장관 접착, 궤양, 간경병증, 사구체신염, 당뇨병성 신장병증, 악성 신경화증, 혈전성 미소혈관증, 기관 이식 거부 및 신사구체병증으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 8 항에 있어서, 상기 암은 폐암, 위암, 췌장암, 대장암, 난소암, 신장 세포암, 전립선암 또는 뇌종양인 것을 특징으로 하는 조성물.
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