BR112017022757B1 - Derivados do pirazol, seus usos e composição farmacêutica - Google Patents

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Abstract

DERIVADOS DO PIRAZOL, SEUS USOS, E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA. O presente pedido refere-se a novos compostos de fórmula (I) à sua utilidade no tratamento e/ou prevenção de condições clínicas incluindo doenças cardiovasculares (CVD), a métodos para o seu uso terapêutico, a composições farmacêuticas contendo os mesmos e a processos para preparar esses compostos.

Description

Campo
[001] O presente pedido refere-se a novos compostos que inibem a proteína ativadora da 5-lipoxigenase (FLAP) e, por conseguinte, a produção de leucotrienos, à sua utilidade no tratamento e/ou prevenção de condições clínicas incluindo doenças cardiovasculares (CVD) tais como a aterosclerose, doença coronariana arterial (CAD), doença cardíaca coronariana (CHD), insuficiência cardíaca (HF), doença coronariana arterial de alto risco (HRCAD), e aneurismas abdominais aórticos (AAA), a métodos para o seu uso terapêutico, a composições farmacêuticas contendo os mesmos e a processos para preparar esses compostos.
Antecedentes
[002] A FLAP, proteína ativadora da 5-lipoxigenase, desempenha um papel crítico na produção de leucotrienos pela via da 5- lipoxigenase (5-LO). Em particular, a FLAP medeia a transferência do substrato, o ácido araquidônico, liberado de fosfolipídeos membranares para o sítio ativo da 5-LO. Os leucotrienos são mediadores lipídicos liberados pelos leucócitos, em particular neutrófilos, eosinófilos, mastócitos e monócitos/macrófagos. Eles pertencem à classe mais ampla de mediadores lipídicos conhecidos como eicosanoides, formados a partir do ácido araquidônico liberado das membranas celulares. Existem duas classes distintas de leucotrienos, LTB4 e CysLTs (LTC4, LTD4 e LTE4). As funções do LTB4 inclui a quimioatração e a ativação de leucócitos, a inibição da apoptose dos neutrófilos, e a ativação da expressão de moléculas de adesão. Esses efeitos são mediados por meio da ligação a um ou dois receptores distintos acoplados à proteína G (BLT1 e BLT2), que diferem na sua afinidade e especificidade para o LTB4. Os cisteinil- leucotrienos têm propriedades vasoativas e podem afetar o fluxo sanguíneo e a vasopermeabilidade, ações que são mediadas por dois receptores CysLT, o CysLT1 e o CysLT2.
[003] Para iniciar a biossíntese dos leucotrienos, a 5-LO transloca-se para membranas intracelulares tais como a membrana nuclear, onde interage com a FLAP. O ácido araquidônico liberado de fosfolipídeos membranares pela PLA2 (cPLA2) é transferido via FLAP para a 5-LO, a qual depois incorpora estereoespecificamente oxigênio na posição correspondente ao quinto carbono, com a formação de 5(S)-HpETE. Este é posteriormente convertido pela 5-LO em LTA4, o precursor comum do leucotrieno B4 (LTB4) e dos cisteinil-leucotrienos (LTC4, LTD4 e LTE4). A conversão do LTA4 em LTB4 é mediada pela LTA4 Hidrolase (LTA4H), uma epóxido hidrolase dependente do zinco. A formação de cisteinil-leucotrienos envolve a conjugação do LTA4 em glutationa, mediada pela LTC4 sintase em membranas celulares em associação com a FLAP, e o LTC4 resultante pode ainda ser processado em LTD4 e LTE4 via atividades de peptidase.
[004] Os compostos que inibem a função da 5-LO ou da FLAP podem resultar na inibição da produção de leucotrienos. Os inibidores da FLAP se ligam diretamente à FLAP nas membranas celulares e impedem a biossíntese dos leucotrienos ao impedirem a translocação da 5-LO para a membrana e/ou o fornecimento do substrato ácido araquidônico para o seu sítio ativo. Desta forma, a inibição da FLAP impede a produção tanto do LTB4 como de cysLTs ao inibir a produção do precursor comum LTA4. De forma diferente dos inibidores da 5-LO, os inibidores da FLAP não suprimem diretamente a oxidação do ácido araquidônico pela 5-LO e não inibem a produção de leucotrienos em extratos de células lisadas.
[005] Não obstante a disponibilidade de fármacos que lidam com fatores de risco tais como níveis elevados de colesterol e pressão arterial elevada, são necessárias outras opções de tratamento para reduzir a doença cardiovascular aterosclerótica e as suas sequelas. O papel da deposição de lipídeos na formação de placas ateroscleróticas está bem estabelecido. No entanto, um outro fator-chave na aterogênese é a inflamação, incluindo tanto o recrutamento de células inflamatórias para lesões ateroscleróticas como a sua ativação nas placas. Abordagens farmacológicas que visam a inflamação poderiam, por conseguinte, proporcionar uma nova abordagem para tratar pacientes com aterosclerose. A inibição da produção de leucotrienos através da administração de um inibidor da FLAP é uma dessas abordagens.
[006] Um outro fator de risco associado a doenças cardiovasculares é a disfunção microvascular. Ao atenuar a ativação dos leucócitos e a interação com a microvasculatura, para além de reduzir a produção de cisteinil-leucotrienos vasoativos, a inibição farmacológica da FLAP poderia melhorar a função microvascular em pacientes com doenças cardiovasculares.
[007] Uma ligação entre a FLAP, a atividade da via 5-LO, a produção de leucotrienos e as doenças cardiovasculares é apoiada pelas seguintes linhas de evidência: 1) a expressão e a atividade da via da 5-LO aumenta em associação com a progressão das placas ateroscleróticas e os sintomas de instabilidade das placas que podem provocar rutura das placas e trombose, levando a infarto do miocárdio (MI) (Spanbroek et al (2003) PNAS 100, 1238; Cipollone et al (2005) ATVB 25, 1665); 2) os níveis de leucotrienos no sangue e urina são elevados no período após um evento de síndrome coronariana aguda recente (ACS) (Sanchez-Gala et al (2009) Cardiovascular Research 81, 216; Carry et al (1992) Circulation 85, 230); 3) os haplótipos genéticos no gene FLAP (ALOX5AP) estão associados de forma significativa com o risco de infarto do miocárdio (Helgadottir et al (2004) Nature Genetics 36, 233).
[008] Muitas empresas durante as últimas décadas têm explorado a FLAP como alvo, e os depósitos de patentes associados a estes esforços estão resumidos em várias publicações. Ver por exemplo, Pergola & Werz, Expert Opin. Ther. Patents (2010) 20(3); e Hofmann & Steinhilber Expert Opin. Ther. Patents, (2013) 23(7) e Whatling Bioorg. Med Chem. Lett. (2015) 25(2607). Porém, este pedido apresenta uma nova classe de compostos distintos dos destes depósitos de patentes anteriores.
[009] O presente pedido aborda a grande necessidade não satisfeita, ao fornecer compostos, composições e métodos para o tratamento ou prevenção de doenças cardiovasculares e condições patológicas relacionadas.
Breve Descrição
[0010] Em um aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I):
Figure img0001
[0011] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que, R1 é H, alquila C1-C3, halogênio, alcóxi C1-C3, haloalquila C1-C3 ou haloalcóxi C1-C3; cada um de R2 e R3 é independentemente H, alquila C1-C3, alcóxi C1-C3, -CN ou halogênio; R4 é H, -CH3, -CH2F, -CHF2, - CF3 ou halogênio; o Anel A contém 2 ligações duplas; cada um de X1, X2, X3 e X4 do Anel A é independentemente CR5, CH, O, S, NR6ou N; em que pelo menos um de X1, X2, X3 e X4 no Anel A é NR6; cada R5 é opcional e independentemente alquila C1-C6, alcóxi C1-C6, haloalquila C1-C3, haloalcóxi C1-C3, -S(O)pR7, -CN, -CONR'R'', ou cicloalquila C3C6; cada p é independentemente 0, 1 ou 2; ou em que quando X4 é CR5 e X3 é NR6, então R5 e R6podem ser tomados conjuntamente de modo a formar um anel de heterociclila de 5 a 6 membros fundido com o Anel A, heterociclila essa que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional selecionado de N, O e S; a referida heterociclila fundida pode conter adicionalmente uma carbonila ou um -S(O)2 diretamente adjacente a um heteroátomo na mesma; e pode ainda ser substituída com um ou dois substituintes selecionados do grupo que consiste em -CH3 e halogênio; R6 é H, -CH3 ou -CH2CH3; R7 é -CH3 ou -NR'R''; e cada R' e R'' é independentemente -H ou -CH3; desde que o número total de substituintes no Anel A seja 0, 1 ou 2; e ainda desde que quando R5 e R6 não estiverem combinados para formar um anel de heterociclila fundido com o Anel A, o número total de substituintes R5 e R6 que são alquila e/ou haloalquila seja 0 ou 1.
[0012] Em um outro aspecto, são fornecidas composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de fórmula (I), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um diluente, excipiente e/ou veículo inerte farmaceuticamente aceitável.
[0013] Em um outro aspecto ainda, é fornecido o composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso no tratamento ou profilaxia de doenças e condições patológicas nas quais a inibição da FLAP é benéfica. Em uma modalidade, está um composto de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para uso no tratamento de doenças cardiovasculares. Em uma modalidade, a doença cardiovascular é a doença coronariana arterial, particularmente a doença coronariana arterial de alto risco.
[0014] Em um aspecto é fornecido um método para tratar doenças ou condições patológicas nas quais a inibição da FLAP é benéfica, compreendendo a administração a um paciente com necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em uma modalidade, a referida doença ou condição patológica é a doença coronariana arterial. Em uma outra modalidade, a referida doença ou condição patológica é a doença coronariana arterial de alto risco.
[0015] Em um aspecto, está um composto de acordo com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso como medicamento.
[0016] Em um outro aspecto é fornecido um processo para a preparação de compostos de fórmula (I), e dos intermediários utilizados na sua preparação.
[0017] Estes e outros aspectos do presente pedido são descritos mais em detalhe abaixo no presente documento.
Descrição Detalhada
[0018] O objetivo do presente pedido consiste em fornecer compostos que são inibidores da proteína ativadora da 5-lipoxigenase (FLAP), o seu uso como medicamentos, composições farmacêuticas contendo os mesmos e vias sintéticas para a sua produção.
[0019] Em uma modalidade, está um composto de acordo com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, tal como descrito acima.
[0020] Em uma outra modalidade está um composto de acordo com a fórmula (II):
Figure img0002
[0021] ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que cada X1, X2 e X4 do Anel A é independentemente CR5, CH, ou N; em que pelo menos um de X1, X2 e X4 no Anel A é N; e
[0022] X3 é O, S ou NR6; ou em que quando X4 é CR5 e X3 é NR6, então R5 e R6 podem ser tomados conjuntamente para formar um anel de heterociclila de 5 a 6 membros fundido com o Anel A, heterociclila essa que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional selecionado de N, O e S; a referida heterociclila fundida pode conter adicionalmente uma carbonila ou um -S(O)2 diretamente adjacente a um heteroátomo na mesma; e pode ser ainda substituída com um ou dois substituintes selecionados do grupo que consiste em -CH3 e halogênio; R1, R2, R4, R5 e R6 são tais como acima no presente documento.
[0023] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (III):
Figure img0003
[0024] ou em um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que X1 é CH ou CR5; X2 é N; X3 é O, S, ou NR6; X4 é CH ou CR5; R2 é -H ou F; R5 é -S(O)2NR'R",-SO2CH3; -C(O)NR'R'', -CN, alcóxi C1-C2, haloalcóxi C1-C2 ou haloalquila C1-C2; R6 é H, -CH3 ou -CH2CH3; e cada R' e R'' é independentemente -H ou -CH3; ou em que quando X4 é CR5 e X3 é NR6, então R5 e R6 podem ser tomados conjuntamente de modo a formar um anel de heterociclila de 5 a 6 membros fundido com o Anel A, heterociclila essa que pode opcionalmente conter um heteroátomo adicional selecionado de N, O e S; a referida heterociclila fundida pode conter adicionalmente uma carbonila ou um -S(O)2 diretamente adjacente a um heteroátomo na mesma; e pode ser ainda substituída com um ou dois substituintes selecionados do grupo que consiste em -CH3 e halogênio; e R4 é tal como definido acima no presente documento.
[0025] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (III) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que X1 é CH ou CR5; X2 é N; X3 é O, S, ou NR6; X4 é CH ou CR5; R2 é -H ou F; R5 é -S(O)2NR'R'',-SO2CH3; -C(O)NR'R'', -CN, alcóxi C1C2, haloalcóxi C1-C2 ou haloalquila C1-C2; R6 é H, -CH3 ou -CH2CH3; e cada R' e R'' é independentemente -H ou -CH3; e R4 é tal como definido acima no presente documento.
[0026] O composto de acordo com a fórmula (III), tal como definido acima no presente documento, em que um de X1 é CH, X2 é N e X3 é NR6; e R6 é tal como definido acima no presente documento.
[0027] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (III), tal como definido acima no presente documento, em que R5 é -S(O)2CH3, -CHF2 ou -OCHF2.
[0028] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (III), tal como definido acima no presente documento, em que R5 é -S(O)2NH2, -C(O)NH2 ou -CN; e R6 é -H ou -CH3.
[0029] O composto de acordo com a fórmula (III), tal como definido acima no presente documento, em que um de X1 é CH, X2 é N e X3 é NR6; e R6 é tal como definido acima no presente documento.
[0030] Uma modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (IV):
Figure img0004
[0031] ou em um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que X1 é CH ou CR5; R5, se presente, é -CH3; R2 é -H ou -F; R4 é -H ou - CH3; e R8 é -H ou CH3.
[0032] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (V):
Figure img0005
[0033] ou em um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que X1 é CH ou CR5; R2 é -H ou -F; R4 é -H ou -CH3; R5, se presente, é - CH3; e R6 é -H ou -CH3; desde que R5 e R6 não sejam ambos -CH3 ao mesmo tempo.
[0034] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (VI):
Figure img0006
[0035] ou em um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que X1 é CH ou CR5; R2 é -H ou -F; R4 é -H ou -CH3; R5, se presente, é - CH3; e R6 é -H ou -CH3; R7 é -CH3 ou -NR'R''; e cada R' e R'' é independentemente -H ou -CH3; desde que R5 e R6 não sejam ambos -CH3 ao mesmo tempo.
[0036] Uma outra modalidade consiste em um composto de acordo com a fórmula (VII):
Figure img0007
[0037] ou em um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que um de X1 e X4 é CH, e o outro é CR5; R2 é -H ou -F; R4 é -H ou -CH3; R5 é -CH3 ou haloalquila C1; e R6 é -H ou -CH3; desde que o número total de substituintes R5 e R6no anel A que são alquila seja 0 ou 1.
[0038] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R1 é -H.
[0039] Em um aspecto, para um composto de fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R2 e R3 são cada um deles independentemente -F ou -H. Em um outro aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R2 é -H ou -F e R3 é -H. Em um outro aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R2 é -H e R3 é -H.
[0040] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou seu sal farmaceuticamente aceitável, R4 é -H. Em um outro aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R4 é -CH3.
[0041] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R1 é -H; R2 e R3 são ambos -H; e R4 é -H ou -CH3.
[0042] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (II), (III) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, X1 é CH ou CR5. Em um outro aspecto desta modalidade, X4 é CR5.
[0043] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II) ou (III), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, o Anel A é pirazol, triazol, oxazol, tiazol, oxadiazol ou tiadiazol opcional e independentemente substituído.
[0044] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (II) ou (III), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, um de X2 é N e X3 é NR6.
[0045] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (V) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R5 é - S(O)2NH2, -C(O)NH2 ou -CN; e R6 é -H ou -CH3. Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (V) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, R5 é -S(O)2CH3, -CHF2 ou -OCHF2.
[0046] Em um aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II) ou (III), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, X4 é CR5 e X3 é NR6, e conjuntamente os substituintes R5 e R6 formam um anel de heterociclila de 5 a 6 membros fundido com o Anel A, selecionado de:
Figure img0008
[0047] Em um outro aspecto, X1 é CH e X2 é N nos anéis bicíclicos formados a partir do anel A e do anel heterocíclico formado por R5 e R6 acima.
[0048] Em um outro aspecto, para qualquer uma das fórmulas (I), (II) ou (III), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, X4 é CR5 e X3 é NR6, e conjuntamente os substituintes R5 e R6 formam um anel de heterociclila de 5 a 6 membros fundido com o Anel A, selecionado de:
Figure img0009
[0049] Em um outro aspecto, X1 é CH e X2 é N nos anéis bicíclicos formados a partir do anel A e do anel heterocíclico formado por R5 e R6 acima.
[0050] Qualquer modalidade descrita no presente documento pode ser combinada com qualquer outra modalidade adequada descrita no presente documento para proporcionar modalidades adicionais. Por exemplo, quando uma modalidade descreve individual ou coletivamente grupos possíveis para R1 e uma modalidade separada descreve grupos possíveis para R2, se entende que estas modalidades podem ser combinadas para proporcionar uma modalidade adicional, utilizando os grupos possíveis para R1 e os grupos possíveis para R2. De forma análoga, o pedido engloba quaisquer modalidades requeridas individualmente para R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, X1, X2, X3,X4, Anel A, R' e R'' em combinação com quaisquer modalidades específicas requeridas para cada uma das restantes variáveis.
[0051] Os compostos do pedido incluem os seguintes: Exemplo N° Estrutura Nome
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[0052] Em um aspecto, o composto de fórmula (I) é selecionado do grupo de exemplos 1-49 apresentado acima, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável. Deve se notar que qualquer um destes compostos específicos pode ser rejeitado de qualquer das modalidades mencionadas no presente documento.
[0053] Um outro aspecto consiste em um produto que pode ser obtido por qualquer dos processos ou exemplos divulgados no presente documento.
[0054] Abaixo estão listadas definições de vários termos usados no relatório descritivo e reivindicações para descrever alguns termos usados no presente documento.
[0055] Para evitar dúvidas, deve se entender que, quando neste relatório descritivo um grupo é qualificado por "definido acima", o referido grupo engloba a primeira definição que ocorre e a mais ampla, bem como todas e cada uma das outras definições para esse grupo.
[0056] Para evitar dúvidas, deve se entender que neste relatório descritivo "C1-C6" designa um grupo de carbono com 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono, "C1-C4" designa um grupo de carbono com 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono, "C1-C3" designa um grupo de carbono com 1, 2 ou 3 átomos de carbono, e "C1-C2" designa um grupo de carbono com 1 ou 2 átomos de carbono.
[0057] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "alquila" inclui grupos alquila de cadeia tanto linear como ramificada e pode ser, mas não se limita a, metila, etila, n-propila, i- propila, n-butila, i-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, i-pentila, t-pentila, neo-pentila, n-hexila, i-hexila ou t-hexila.
[0058] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "haloalquila" designa um grupo alquila contendo um ou mais átomos de halogênio, e inclui, mas não se limita a, monofluorometila, difluorometila, trifluorometila, 1-fluoroetila, 2-fluoroetila, 2,2- difluoroetila, 2,2,2-trifluoroetila, 3-fluoropropila, 3,3-difluoropropila ou 3,3,3-trifluoroetila.
[0059] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "alcóxi" inclui grupos alquila de cadeia tanto linear como ramificada contendo um átomo de oxigênio, em que o ponto de ligação do referido grupo é através do átomo de oxigênio. Exemplos incluem, mas não se limitam a, metóxi, etóxi, propóxi, i-propóxi, butóxi, i-butóxi, s-butóxi, t-butóxi, e outros semelhantes.
[0060] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "haloalcóxi" designa um grupo alcóxi, tal como descrito acima, em que um ou mais dos átomos de hidrogênio na parte alquílica é/são substituído(s) por um átomo de halogênio. Exemplos deste incluem, mas não se limitam a, monofluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, 2-fluoroetóxi, 2,2-difluoroetóxi, 2,2,2-trifluoroetóxi, 3- monofluoropropóxi, 3,3-difluoropropóxi e 3,3,3-trifluoropropóxi.
[0061] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "halogênio" se refere ao flúor, cloro ou bromo.
[0062] Nesta relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "cicloalquila C3-C6" designa um grupo alquila cíclico saturado de 3-6 átomos de carbono e inclui, mas não se limita a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, e ciclo-hexila.
[0063] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "heterociclila de 5 a 6 membros" se refere a um anel monocíclico saturado ou parcialmente saturado, não aromático contendo 5 a 6 átomos no anel, do qual pelo menos um átomo do anel é selecionado de nitrogênio, enxofre, e oxigênio, e do qual um grupo -CH2- pode ser opcionalmente substituído por um grupo -C(O)-. Os átomos de nitrogênio do anel podem ser opcionalmente oxidados de modo a formar um N-óxido. Os átomos de enxofre do anel podem ser opcionalmente oxidados de modo a formar S-óxidos ou sulfonas. O referido anel de heterociclila pode opcionalmente ser substituído com um ou dois substituintes selecionados do grupo que consiste em metila e halogênio. Exemplos de um anel de heterociclila de 5-6 membros incluem, mas não se limitam a, pirrolidinila, imidazolidinila, oxazolidina, 4-oxooxazolidinila, tiazolidinila, piperidinila, piperazinila, 2- oxopiperazinila, isoxazolidinila, isotiazolidinila, pirazolidinila, hexaidropiridazinila, hexaidropirimidinila, morfolinila, tiomorfolinila, oxazinanila, 2-oxopirrolidinila, 1,3-tiazinanila e oxo-1,3-tiazolidinila. No contexto deste pedido, uma heterociclila de 5-6 membros pode ser fundida com o Anel A quando X3 é NR6 e X4 é CR5 e os substituintes R5 e R6 são tomados conjuntamente de modo a formar a heterociclila. Os sistemas de anéis descritos neste parágrafo descrevem apenas metade do sistema de anéis bicíclicos, e incluem o átomo de nitrogênio e o átomo de carbono do Anel A, com X1 e X2 como definidos para a Fórmula (I).
[0064] Para evitar dúvidas, por "a referida heterociclila fundida pode adicionalmente conter uma carbonila ou um -S(O)2 diretamente adjacente a um heteroátomo na mesma" na definição de R5 e R6, se entende que o átomo do anel adjacente a um heteroátomo do anel no heterociclo fundido pode ser um carbono do anel substituído por um oxo ou um átomo de enxofre do anel oxidado a um S(O)2 respectivamente.
[0065] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "doença coronariana arterial de alto risco", tal como usado no presente documento, se refere à síndrome coronariana aguda recente (ACS) ou por biomarcadores da função microvascular e cardíaca. Tais biomarcadores podem incluir biomarcadores inflamatórios tais como leucotrienos e interleucinas, contagens de leucócitos e/ou marcadores da função cardíaca e vascular tais como CFR, NT-Pro-BNP e/ou TnT.
[0066] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, o termo "farmaceuticamente aceitável", tal como usado no presente documento, se refere aos compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo do bom senso médico, adequados para uso em contato com tecidos de seres humanos e animais, sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, e compatíveis com uma razão benefício/risco razoável.
[0067] Neste relatório descritivo, salvo indicação em contrário, a frase "quantidade eficaz" designa uma quantidade de um composto ou composição que é suficiente para modificar de forma significativa e positiva os sintomas e/ou condições patológicas a serem tratados (por exemplo, proporciona uma resposta clínica positiva). A quantidade eficaz de um princípio ativo para uso em uma composição farmacêutica irá variar com a condição patológica particular a ser tratada, a gravidade da condição patológica, a duração do tratamento, a natureza de terapias concorrentes, o (s) princípio(s) ativo(s) que está/estão a ser empregado(s), o(s) excipiente(s)/veículo(s) farmaceuticamente aceitável/aceitáveis particular(es) utilizado(s), e fatores semelhantes dentro do conhecimento e perícia do médico assistente.
[0068] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) podem formar sais de ácidos ou bases farmaceuticamente aceitáveis estáveis, e nesses casos a administração de um composto na forma de sal pode ser apropriada. Exemplos de sais de adição de ácidos incluem acetato, adipato, ascorbato, benzoato, benzenossulfonato, bicarbonato, bissulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, colina, citrato, ciclo-hexilsulfamato, dietilenodiamina, etanossulfonato, fumarato, glutamato, glicolato, hemissulfato, 2- hidroxietilsulfonato, heptanoato, hexanoato, cloridrato, bromidrato, iodidrato, hidroximaleato, lactato, malato, maleato, metanossulfonato, meglumina, 2-naftalenossulfonato, nitrato, oxalato, pamoato, persulfato, fenilacetato, fosfato, difosfato, picrato, pivalato, propionato, quinato, salicilato, estearato, succinato, sulfamato, sulfanilato, sulfato, tartarato, tosilato (p-toluenossulfonato), trifluoroacetato, e undecanoato. Exemplos de sais de bases incluem sais de amônio; sais de metais alcalinos tais como sais de sódio, lítio e potássio; sais de metais alcalinoterrosos tais como sais de alumínio, cálcio e magnésio; sais com bases orgânicas tais como sais de diciclo-hexilamina e N- metil-D-glucamina; e sais com aminoácidos tais como arginina, lisina, ornitina, e assim por diante. De igual modo, os grupos contendo nitrogênio básico podem ser quaternizados com agentes tais como: haletos de alquila de cadeia curta tais como haletos de metila, etila, propila, e butila; sulfatos de dialquila tais como sulfatos de dimetila, dietila, dibutila, diamila; haletos de cadeia longa tais como haletos de decila, laurila, miristila e estearila; haletos de arilalquila tais como brometo de benzila e outros. São preferidos sais fisiologicamente aceitáveis não tóxicos, embora outros sais possam ser úteis, tais como no isolamento ou purificação do produto.
[0069] Os sais podem ser formados por meios convencionais tais como por reação da forma de base livre do produto com um ou mais equivalentes do ácido apropriado em um solvente ou meio no qual o sal é insolúvel, ou em um solvente tal como água, que é removido sob vácuo ou por liofilização ou por troca dos ânions de um sal existente por um outro ânion em uma resina de permuta iônica adequada.
[0070] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) têm um ou mais centros quirais, e deve se entender que o pedido engloba todos esses estereoisômeros, incluindo enantiômeros e diastereoisômeros. Assim, deve se entender que, na medida em que alguns dos compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) podem existir em formas oticamente ativas ou racêmicas em virtude de um ou mais átomos de carbono assimétricos, o pedido inclui na sua definição qualquer uma dessas formas oticamente ativas ou racêmicas que possua a atividade acima mencionada. O presente pedido engloba todos esses estereoisômeros com atividade tal como definida no presente documento.
[0071] A síntese de formas oticamente ativas pode ser levada a cabo por meio de técnicas-padrão da química orgânica bem conhecidas na técnica, por exemplo por meio de síntese a partir de materiais de partida oticamente ativos ou por resolução de uma forma racêmica. Os racematos podem ser separados em enantiômeros individuais usando procedimentos conhecidos (ver, por exemplo, Advanced Organic Chemistry: 3a Edição: autor J. March, págs. 104107). Um procedimento adequado envolve a formação de derivados diastereoisoméricos por reação do material racêmico com um auxiliar quiral, seguida de separação, por exemplo por cromatografia, dos diastereoisômeros e depois clivagem das espécies auxiliares. De forma similar, a atividade acima mencionada pode ser avaliada usando as técnicas laboratoriais padrão referidas a seguir.
[0072] Assim, ao longo do relatório descritivo, quando se faz referência ao composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), deve se entender que o termo composto inclui isômeros, misturas de isômeros, e estereoisômeros que são inibidores da FLAP.
[0073] Os estereoisômeros podem ser separados usando técnicas convencionais, por exemplo, cromatografia ou cristalização fracionada. Os enantiômeros podem ser isolados por separação de um racemato por exemplo por cristalização fracionada, resolução ou HPLC. Os diastereoisômeros podem ser isolados por separação em virtude das diferentes propriedades físicas dos diastereoisômeros, por exemplo, por cristalização fracionada, HPLC ou cromatografia rápida. Alternativamente, podem ser preparados estereoisômeros particulares por síntese quiral a partir de materiais de partida quirais sob condições que não causarão racemização ou epimerização, ou por derivatização com um reagente quiral.
[0074] Quando é fornecido um estereoisômero específico (fornecido por separação, por síntese quiral, ou por outros métodos), ele é favoravelmente fornecido substancialmente isolado de outros estereoisômeros do mesmo composto. Em um aspecto, uma mistura contendo um estereoisômero particular de um composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), pode conter menos de 30%, particularmente menos de 20%, e mais particularmente menos de 10% em peso de outros estereoisômeros do mesmo composto. Em um outro aspecto, uma mistura contendo um estereoisômero particular de um composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), pode conter menos de 6%, particularmente menos de 3%, e mais particularmente menos de 2% em peso de outros estereoisômeros do composto. Em um outro aspecto, uma mistura contendo um estereoisômero particular de um composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), pode conter menos de 1%, particularmente menos de 0,5%, e mais particularmente menos de 0,3%, e ainda mais particularmente menos de 0,1% em peso de outros estereoisômeros do composto.
[0075] Deve se entender que, na medida em que alguns dos compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), definidos acima, podem existir em formas tautoméricas, o pedido inclui na sua definição qualquer uma dessas formas tautoméricas que possua a atividade acima mencionada. Assim, a divulgação se refere a todas as formas tautoméricas dos compostos de Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), explicitamente detalhadas ou não no relatório descritivo.
[0076] Também se deve entender que certos compostos de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem existir nas formas solvatada e não solvatada, tais como, por exemplo, nas formas hidratada e anidra. Deve se entender que os compostos do presente documento englobam todas essas formas solvatadas. Por uma questão de clareza, isto inclui tanto as formas solvatadas (por exemplo, hidratada) da forma livre do composto, como as formas solvatadas (por exemplo, hidratada) do sal do composto.
[0077] Por uma questão de clareza, deve se entender que os átomos dos compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), e de quaisquer dos exemplos ou modalidades divulgadas no presente documento, se destinam a englobar todos os isótopos dos átomos. Por exemplo, H (ou hidrogênio) inclui qualquer forma isotópica do hidrogênio incluindo 1H, 2H (D), e 3H (T); C inclui qualquer forma isotópica do carbono incluindo 12C, 13C, e 14C; O inclui qualquer forma isotópica do oxigênio incluindo 16O, 17O e 18O; N inclui qualquer forma isotópica do nitrogênio incluindo 13N, 14N e 15N; P inclui qualquer forma isotópica do fósforo incluindo 31P e 32P; S inclui qualquer forma isotópica do enxofre incluindo 32S e 35S; F inclui qualquer forma isotópica do flúor incluindo 19F e 18F; Cl inclui qualquer forma isotópica do cloro incluindo 35Cl, 37Cl e 36Cl; e semelhantes. Em um aspecto, os compostos das Fórmulas (I), (Ia), (II), (III), (IV) ou (V) incluem isótopos dos átomos nelas presentes em quantidades correspondentes à abundância com que eles ocorrem naturalmente. Porém, em certos casos, pode ser desejável enriquecer um ou mais átomos em um isótopo particular que estaria normalmente presente em uma abundância inferior. Por exemplo, 1H estaria normalmente presente em uma abundância superior a 99,98%; no entanto, em um aspecto, um composto de qualquer fórmula apresentada no presente documento pode ser enriquecido em 2H ou 3H em uma ou mais posições em que esteja presente H. Em um aspecto, quando um composto de qualquer fórmula apresentada no presente documento é enriquecido em um isótopo radioativo, por exemplo 3H e 14C, o composto pode ser útil em ensaios de distribuição de fármacos e/ou substratos em tecidos. Deve se entender que o presente pedido engloba todas essas formas isotópicas.
[0078] O presente pedido fornece ainda um processo para a preparação de um composto de fórmula (I) tal como definido acima, que compreende os Esquemas reacionais 1-10.
Método Preparativo
[0079] As reações nos Esquemas 1-10 ilustram vias sintéticas para certas moléculas de fórmula (I), em que R1, R2, R3, R4, e o Anel A são tais como definidos na fórmula (I), R9 é um grupo alquila, por exemplo, metila ou etila, L1, L2, L3, e L4 são grupos de saída, por exemplo, Br, I, OTf, e PG1 é um grupo protetor, por exemplo, 2- metiltetra-hidro-2H-pirila. Esquema 1
Figure img0023
[0080] As reações no Esquema 1 ilustram duas vias sintéticas para certas moléculas de fórmula (I).
[0081] Um composto de fórmula (3) pode reagir com um composto de fórmula (4) para dar um composto de fórmula (2), ou um composto de fórmula (3) pode reagir com um composto de fórmula (5) para dar um composto de fórmula (I). Qualquer das reações pode ser efetuada na presença de uma base, por exemplo, K2CO3 ou Na2CO3, e pode ser efetuada no intervalo de temperaturas entre a ta e o refluxo em um solvente orgânico tal como dioxano ou DMF, que pode ser misturado com H2O. A reação pode ser catalisada por um reagente de paládio tal como Pd(dtbpf)Cl2 ou Pd(dppf)Cl2. Um composto de fórmula (2) pode ser tratado com ácido, por exemplo, HCl, em um solvente orgânico, por exemplo, MeOH ou dioxano opcionalmente na presença de água, em um intervalo de temperaturas de 0 °C - 10 °C, para dar origem a um composto de fórmula (I). Esquema 2
Figure img0024
[0082] As reações no Esquema 2 ilustram duas vias sintéticas para certas moléculas de fórmula (I).
[0083] Um composto de fórmula (6) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (7) com um equivalente sintético de amônia, por exemplo, NH4Cl, e a reação pode ser efetuada no intervalo de temperaturas entre a ta e o refluxo, em um solvente orgânico inerte tal como DMF, EtOAc, dicloroetano ou NMP, e na presença de uma base, por exemplo, Et3N, DIPEA ou DMAP. A reação pode ser facilitada por um reagente de acoplamento tal como HATU, TBTU ou T3P. De seguida, um composto de fórmula (6) pode reagir com um composto de fórmula (8). A reação pode ser efetuada na presença de uma base, por exemplo, Cs2CO3 ou NaOt-Bu, e pode ser efetuada no intervalo de temperaturas entre a ta e o refluxo, em um solvente orgânico tal como dioxano. A reação pode ser catalisada por um reagente de Pd adequado tal como ou Pd(dppf)Cl2 ou Pd(OAc)2 usando um ligando adequado, por exemplo, XantPhos, para dar origem a um composto de fórmula (I).
[0084] Alternativamente, um composto de fórmula (7) pode reagir com um composto de fórmula (9), reação essa que pode ser efetuada no intervalo de temperaturas entre a ta e o refluxo, em um solvente orgânico inerte tal como DMF, EtOAc, dicloroetano ou NMP, e na presença de uma base, por exemplo, Et3N, DIPEA ou DMAP. A reação pode ser facilitada por um reagente de acoplamento tal como HATU, TBTU ou T3P, para dar origem a um composto de fórmula (I).
Figure img0025
[0085] A reação no Esquema 3 ilustra uma via sintética para certas moléculas de fórmula (3).
[0086] Um composto de fórmula (10) pode reagir com um composto de fórmula (11), e a reação pode ser efetuada no intervalo de temperaturas entre a ta e o refluxo, em um solvente orgânico inerte tal como DMF, EtOAc, dicloroetano ou NMP, e na presença de uma base, por exemplo, Et3N, DIPEA ou DMAP. A reação pode ser facilitada por um reagente de acoplamento tal como HATU, TBTU ou T3P, para dar origem a um composto de fórmula (3).
Figure img0026
[0087] As reações no Esquema 4 ilustram duas vias sintéticas para certas moléculas de fórmula (7).
[0088] Um composto de fórmula (10) pode reagir com um composto de fórmula (4) ou fórmula (5). A reação pode ser efetuada sob condições descritas para as reações análogas descritas no Esquema 1.
Figure img0027
[0089] As reações no Esquema 5 ilustram uma via sintética para certas moléculas de fórmula (I).
[0090] Um composto de fórmula (31) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (13) com um composto de fórmula (8), (9) ou (11), descrito nos Esquemas 2 e 3, usando condições iguais ou similares às descritas para as reações dos compostos (7) ou (10) no Esquema 2 e Esquema 3.
[0091] Um composto de fórmula (32) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (31) com um composto de fórmula (4) ou (5), descrito no Esquema 1, usando condições iguais ou similares às descritas para as reações do composto (3) no Esquema 1.
[0092] Um composto de fórmula (I) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (31) ou um composto de fórmula (32) e usando condições iguais ou semelhantes às descritas para as reações que transformam um composto de fórmula (13) em um composto de fórmula (10) no Esquema 5.
Figure img0028
[0093] As reações no Esquema 6 ilustram uma via sintética para certas moléculas de fórmula (12).
[0094] Um composto de fórmula (15) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (16) com um ânion pré-formado de um metal, por exemplo, um ânion de lítio de um composto de fórmula (17). A reação pode ser efetuada em um solvente orgânico tal como por exemplo, THF, e pode ser efetuada a uma temperatura adequada tal como abaixo de -70 °C. Ela também pode ser efetuada usando procedimentos sintéticos descritos na literatura, por exemplo, em Synlett 12 (2004) 2165-2166 ou Tetrahedron 67 (2011) 3881-3886.
[0095] Um composto de fórmula (14) pode ser formado tratando um composto de fórmula (15) com uma base, por exemplo, Et3N, e a reação pode ser efetuada em um solvente orgânico, por exemplo, dioxano. A reação pode ser efetuada a temperaturas elevadas, por exemplo, a 60 °C. Um composto de fórmula (14) pode ser obtido comercialmente ou pode ser formado em analogia com procedimentos sintéticos análogos aos descritos na literatura, por exemplo, em Synlett 12 (2004) 2165-2166 ou J.Org.Chem. 71 (2006) 6254-6257.
[0096] Um composto de fórmula (12) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (14) com um composto de fórmula (18). A reação pode ser efetuada em um solvente orgânico inerte, por exemplo, tolueno, e pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre a ta e 220 °C, podendo opcionalmente ser efetuada na presença de um estabilizador, por exemplo, hidroquinona, ou pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre -30 °C e a ta, opcionalmente na presença de um catalisador, por exemplo, um ácido de Lewis tal como AlCl3.
Figure img0029
[0097] As reações no Esquema 7 ilustram uma via sintética para certas moléculas de fórmula (10).
[0098] Um composto de fórmula (20) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (21) com um agente de cloração, por exemplo, SOCl2, em um solvente orgânico, por exemplo, DCM, e em um intervalo de temperaturas entre -20 °C e o refluxo, e opcionalmente na presença de um catalisador, por exemplo, DMF, ou usando outros métodos descritos na literatura e conhecidos do perito na técnica.
[0099] Um composto de fórmula (19) poderia ser formado reagindo um composto de fórmula (20) com um composto de fórmula (22). A reação pode ser efetuada na presença de um catalisador, por exemplo, um catalisador de ácido de Lewis, por exemplo, AlCl3, e pode opcionalmente ser formada na presença de um solvente orgânico inerte, por exemplo, DCM, podendo ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre 0 °C e 100 °C.
[00100] Um composto de fórmula (10) poderia ser formado por reação de um composto de fórmula (19) com uma base, por exemplo, NaOH ou LiOH, em um solvente orgânico, por exemplo, THF ou MeOH, ou misturas dos mesmos, e opcionalmente na presença de água. A reação pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre 0 °C e o refluxo.
Figure img0030
[00101] A reação no Esquema 8 ilustra uma via sintética para certas moléculas de fórmula (23), em que X1 e X2 são tais como descritos na fórmula (II), X5 é opcional e independentemente selecionado por exemplo, de H, NO2 ou NHPG2; em que PG2 é um grupo protetor, por exemplo, tert-butilcarbamato, X6 é independentemente selecionado de um heteroátomo, por exemplo, N, O ou S, e n é1 ou 2.
[00102] Um composto de fórmula (23) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (24) com um composto de fórmula (25), em que L4 é um grupo de saída, por exemplo, um haleto ou um éster de sulfonila, por exemplo, OTf, na presença de uma base, por exemplo, K2CO3, e na presença de um solvente orgânico, por exemplo, MeCN ou DMF, podendo a reação ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre 0 °C ao refluxo.
Figure img0031
[00103] As reações no Esquema 9 ilustram uma via sintética para certas moléculas de fórmula (26), em que X6 e n são definidos no Esquema 8.
[00104] Um composto de fórmula (28) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (27) com uma fonte de nitrito, por exemplo, um sal de nitrito, por exemplo, NaNO2, em um solvente, por exemplo, água, e na presença de um ácido, por exemplo, HCl ou CH3CO2H. A reação pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre -5 °C e a ta. Um composto de fórmula (29) pode ser efetuado reagindo um composto de fórmula (28) com um anidrido de ácido, por exemplo, anidrido trifluoroacético, em um solvente orgânico, por exemplo, THF, e em um intervalo de temperaturas entre -5 °C e a ta. Um composto de fórmula (26) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (29) com um éster de alcinila, por exemplo, um propionato de etila ou um propionato de metila, em um solvente orgânico, por exemplo, xileno ou o-xileno. A reação pode ser efetuada a temperaturas elevadas, por exemplo, da ta ao refluxo.
Figure img0032
[00105] As reações no Esquema 10 ilustram uma via sintética para certas moléculas de fórmula (30), em que R8 é opcionalmente selecionado de H ou de um grupo alquila, por exemplo, metila, e X5 é independentemente selecionado por exemplo, de H, NO2 ou NHPG2.
[00106] Um composto de fórmula (33), em que L4 é tal como definido no esquema 8, pode ser formado reagindo um composto de fórmula (31) com um composto de fórmula (32) na presença de uma base, por exemplo, K2CO3, e na presença de um solvente orgânico, por exemplo, MeCN ou DMF, e a reação pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre 0 °C e o refluxo.
[00107] Um composto de fórmula (30) pode ser formado reagindo um composto de fórmula (33) com uma amina primária, por exemplo, amônia, ou uma alquilamina, por exemplo, amônia, hidróxido de amônio ou metilamina, em um solvente orgânico, por exemplo, MeCN ou THF, e a reação pode ser efetuada em um intervalo de temperaturas entre 0 °C e o refluxo.
[00108] Podem ser adquiridas ou sintetizadas várias permutações do Anel A usando condições reacionais padrão.
[00109] Entende-se que as reações orgânicas descritas no presente documento são efetuadas de acordo com a prática laboratorial conhecida do perito na técnica. Entende-se que algumas das reações descritas no presente documento podem opcionalmente ser efetuadas em ordens diferentes das definidas no presente documento. Entende- se que os isômeros quirais dos compostos descritos no presente documento podem ser resolvidos em qualquer fase do processo sintético usando agentes de resolução quiral descritos na literatura e conhecidos do perito na técnica, ou usando métodos de cromatografia quiral descritos na literatura e conhecidos do perito na técnica, ou descritos mais à frente nos Exemplos.
[00110] Entende-se que podem opcionalmente ser necessários grupos protetores adicionais em algumas das etapas descritas acima, e se entende ainda que pode por conseguinte ser efetuada uma etapa de desproteção usando métodos descritos na literatura e bem conhecidos do perito na técnica. A proteção e desproteção de grupos funcionais são descritas em "Protective Groups in Organic Synthesis" 2a Ed, E.W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991) e "Protecting Groups", P.J. Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994), cuja publicação é incorporada no presente documento como referência.
Uso médico e farmacêutico
[00111] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento de doenças cardiovasculares em um mamífero, particularmente em um humano. As doenças cardiovasculares incluem, mas não se limitam a, condições patológicas associadas a disfunções cardíacas e/ou disfunção microvascular e/ou patologia macrovascular tais como aterosclerose, arteriosclerose, doença coronariana arterial incluindo a doença coronariana arterial estável e de alto risco (definida como síndrome coronariana aguda recente (ACS) ou por biomarcadores da disfunção microvascular e cardíaca), infarto do miocárdio, reestenose após procedimentos de revascularização, insuficiência cardíaca, aneurisma abdominal aórtico (AAA), doença arterial periférica (PAD) incluindo disfunção erétil devido a doença vascular, acidente vascular cerebral, ataque isquêmico transitório (TIA) e doença neurológica isquêmica reversível (RIND), demência multiinfarto e doença arterial renal.
[00112] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento de pacientes com risco remanescente de um evento cardiovascular, não obstante o tratamento com padrão de cuidados (SoC), tais como, mas não limitados a, estatinas para baixar os lipídeos, antiplaquetários, inibidores da ACS e bloqueadores beta.
[00113] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento da doença renal crônica.
[00114] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento da diabetes mellitus do tipo II e de complicações da diabetes mellitus do tipo II em um mamífero, particularmente em um humano. Isto inclui, e não se restringe a, patologia micro e macrovascular, neuropatia e nefropatia diabética.
[00115] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento de doenças respiratórias inflamatórias e complicações associadas às doenças respiratórias inflamatórias em um mamífero, particularmente em um humano. As doenças respiratórias inflamatórias incluem, mas não se limitam a, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, enfisema e rinite.
[00116] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento de doenças renais inflamatórias e vasculares e de complicações associadas às doenças renais em um mamífero, particularmente em um humano. As doenças renais inflamatórias e vasculares incluem, mas não se limitam a, doença renal crônica, nefrotoxicidade induzida por fármacos e toxinas, glomerulonefrite, síndrome nefrótica, nefrite por IgA, nefropatia de refluxo, glomerulosclerose segmentar focal, púrpura de Henoch- Schonlein, e nefropatia diabética.
[00117] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou tratamento da doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) e esteato-hepatite não alcoólica (NASH).
[00118] O tratamento com os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) pode reduzir a morbidez e a mortalidade das doenças cardiovasculares e/ou vasculares cerebrais e/ou renais e/ou arteriais periféricas associadas a disfunções cardíacas e/ou disfunção microvascular e/ou patologia macrovascular devido às suas propriedades anti-inflamatórias e influência nos mecanismos vasoativos.
[00119] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem servir para prevenir ou reduzir o risco de desenvolvimento de disfunções cardíacas e/ou disfunção microvascular e/ou patologia macrovascular, bem como para parar ou retardar a progressão e/ou promover a regressão da doença cardiovascular aterosclerótica uma vez ela se tendo tornado clinicamente evidente, compreendendo a administração de uma quantidade profilática ou terapeuticamente eficaz, como apropriado, de um composto de fórmula (I) a um mamífero, incluindo um humano, que está em risco de desenvolver aterosclerose ou que já tem a doença cardiovascular aterosclerótica.
[00120] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou redução da incidência ou gravidade de eventos agudos relacionados com a rutura ou erosão de placas ateroscleróticas, incluindo, mas não se limitando a, infarto do miocárdio, angina instável e acidente vascular cerebral.
[00121] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou redução da incidência ou gravidade de eventos agudos ao melhorarem a função microvascular, patologia macrovascular e/ou função cardíaca.
[00122] Os compostos das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser úteis na prevenção ou redução da progressão de aneurismas abdominais aórticos (AAA) e a incidência de rutura.
[00123] Para evitar dúvidas, tal como aqui utilizado, o termo "tratamento" inclui o tratamento terapêutico e/ou profilático. "Tratamento" inclui também a administração de um composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) para aliviar os sintomas de doenças cardiovasculares (incluindo a doença coronariana arterial e a doença coronariana arterial de alto risco) e/ou para reduzir a gravidade ou a progressão das mesmas.
[00124] Os compostos divulgados no presente documento podem assim ser indicados no tratamento terapêutico e/ou profiláctico destas condições patológicas.
[00125] Os compostos divulgados no presente documento podem ter a vantagem de poder ser mais eficazes, menos tóxicos, mais seletivos, mais potentes, produzir menos efeitos secundários, mais facilmente absorvidos e/ou ter um perfil farmacocinético melhor (por exemplo, maior biodisponibilidade oral e/ou menor depuração), do que os compostos conhecidos na técnica anterior.
Terapia de combinação
[00126] Os compostos de qualquer uma das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, podem também ser administrados em conjunto com outros compostos usados para o tratamento das condições patológicas acima.
[00127] Em uma outra modalidade, há uma terapia de combinação em que um composto de qualquer uma das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um segundo princípio ativo são administrados simultaneamente, sequencialmente ou misturados, para o tratamento de uma ou mais das condições patológicas listadas acima. Uma tal combinação pode ser utilizada em combinação com um ou mais princípios ativos adicionais.
[00128] Os compostos descritos no presente documento podem ser úteis no tratamento de doenças cardiovasculares, metabólicas e renais em combinação com agentes que são
[00129] • terapias cardíacas,
[00130] • anti-hipertensivos,
[00131] • diuréticos,
[00132] • vasodilatadores periféricos,
[00133] • agentes modificadores de lipídeos,
[00134] • antidiabéticos,
[00135] • anti-inflamatórios
[00136] • anticoagulantes
[00137] • antiplaquetários
[00138] Exemplos dos anteriores incluem, mas não estão restritos a, glicosídeos digitálicos, antiarrítmicos, antagonistas de canais de cálcio, inibidores da ACE, bloqueadores de receptores da angiotensina (por exemplo, candersatan), bloqueadores de receptores da endotelina, bloqueadores β, diuréticos tiazídicos, diuréticos de alça, inibidores da síntese de colesterol tais como estatinas (por exemplo, Rosuvastatina), inibidores da absorção de colesterol, inibidores da proteína de transferência do colesteriléster (CETP), fármacos antidiabéticos tais como insulina e análogos, análogos de GLP-1, sulfonamidas, inibidores da dipeptidil peptidase 4, tiazolidinodionas, inibidores da SGLT-2, e fármacos anti-inflamatórios tais como NSAID e antagonistas de CCR2, anticoagulantes tais como heparinas, inibidores da trombina e inibidores do fator Xa, inibidores da agregação plaquetária (por exemplo, antagonistas de P2Y12 ou ticagrelor) e inibidores da neprilisina (por exemplo, Sacubitril).
[00139] Quando usados em uma terapia de combinação, é contemplado que os compostos de qualquer uma das Fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e os outros princípios ativos possam ser administrados em uma única composição, em composições completamente separadas, ou em uma sua combinação. Também é contemplado que os princípios ativos possam ser administrados concorrente, simultânea, sequencial, ou separadamente. A(s) composição(ões) e frequência(s) de dosagem particular(es) da terapia de combinação dependerão de uma variedade de fatores, incluindo, por exemplo, a via de administração, a condição patológica a ser tratada, a espécie do paciente, quaisquer interações potenciais entre os princípios ativos quando combinados em uma única composição, quaisquer interações entre os princípios ativos quando são administrados ao paciente animal, e outros fatores variados conhecidos dos médicos e de outros peritos na técnica.
Administração
[00140] É fornecido um método de tratamento de uma condição patológica em que é necessária a inibição da FLAP, método esse que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, a uma pessoa que sofra de, ou seja susceptível a, uma tal condição patológica.
[00141] Os compostos de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, serão normalmente administrados por via oral, parenteral, intravenosa, intramuscular, subcutânea ou outras formas injetáveis, bucal, retal, vaginal, transdérmica e/ou nasal e/ou por inalação, na forma de preparações farmacêuticas compreendendo o princípio ativo ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, ou um solvato de um tal sal, em uma forma de dosagem farmaceuticamente aceitável. Dependendo do transtorno e do paciente a ser tratado e da via de administração, as composições podem ser administradas em doses variáveis.
[00142] Doses diárias adequadas dos compostos de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, no tratamento terapêutico de humanos são de cerca de 0,0001-100 mg/kg de peso corporal, preferencialmente de 0,01-30 mg/kg de peso corporal.
[00143] As formulações orais são preferidas, particularmente comprimidos ou cápsulas que podem ser formuladas por métodos conhecidos dos peritos na técnica para proporcionar doses do composto ativo no intervalo de 0,1 mg a 1000 mg, por exemplo 1 mg, 3 mg, 5 mg, 10 mg, 25 mg, 50 mg, 100 mg, 250 mg e 500 mg.
[00144] De acordo com um aspecto adicional, é assim proporcionada uma composição farmacêutica que inclui qualquer um dos compostos de Fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, à mistura com adjuvantes, diluentes e/ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.
Testes biológicos
[00145] Podem ser empregados os seguintes procedimentos de teste:
Ensaio de ligação da FLAP (Teste A)
[00146] Os compostos foram testados em um ensaio de ligação competitiva usando 3H-MK591 como marcador. (A preparação do MK- 591 é descrita em Bioorg. Med.Chem. Lett. 1999, 9, 2391). Uma pelota de 100000 x g de células COS-7 transfectadas de forma estável com um plasmídeo que expressa ALOX5AP humano foi a fonte de FLAP. Suspendeu-se novamente pelotas de membranas em tampão (Tris- HCl 100 mM, Tween-20 a 0,05%, NaCl 140 mM, EDTA 2 mM, DTT 0,5 mM, Glicerol a 5%, pH 7,5) para dar uma concentração final de proteína de 12 mg/mL (2 μg/poço). Para efetuar os ensaios, se dispensou 1,4 μL dos compostos em placas de 96 poços, em séries em triplicado de diluições de um fator 3. Adicionou-se então 84 μL de radioligando (25000 CPM, concentração final de 2 nM no ensaio) seguidos de 84 μL de suspensão de membranas e incubação à ta durante 60 min. Após filtração, se secou placas de filtração 12h à TA (ou 50 °C durante 1 hora). Adicionou-se então 50 μL de líquido de cintilação, as placas de filtração foram seladas e a radioatividade medida em um contador microbeta. Definiu-se a ligação específica como a ligação total menos a ligação não específica. A ligação total foi definida como o 3H-MK591 ligado às membranas na ausência de competidor; a ligação não específica foi definida como o 3H-MK591 na presença de MK-591 0,1 mM. Os valores de IC50 foram determinados representando a % de inibição em função da concentração logarítmica do composto e usando um modelo de resposta à dose de um sítio. Os dados para cada composto testado são apresentados na Tabela 1.
Figure img0033
Figure img0034
Ensaio de sangue total com a FLAP (Teste B)
[00147] Os compostos foram testados quanto à inibição da produção do LTB4 em sangue total humano fresco obtido por venopunção, usando heparina para impedir a coagulação. Dispensou- se 1,5 μL dos compostos ou de veículo DMSO para dentro dos poços de uma placa de 96 poços profundos, em séries de diluições de um fator 3. Adicionou-se então 500 μL de sangue total heparinizado, se seguindo incubação a 37 °C durante 30 min (método A) ou 4 h (método B). Transferiu-se posteriormente 100 μL de sangue em triplicado para 0,5 μL de ionóforo de cálcio 2 mM (calcimicina; A23187) em uma segunda placa de 96 poços. Após a incubação a 37 °C durante 20 min, os ensaios foram terminados por adição de 10 μL de solução de terminação (EGTA 100 mM, pH 7,4) e a placa transferida para gelo. A placa foi centrifugada a 3000 rpm a 4 °C durante 10 min e se transferiu 10 μL de plasma para uma placa de 96 poços fresca contendo 90 μL de tampão de ensaio EIA pré-dispensado (tampão fosfato 0,1 M + BSA a 0,1%). Mediu-se então o LTB4 usando reagentes de um EIA comercial (Cayman Chemicals). A produção de LTB4 foi definida como o nível de LTB4 na presença de uma dada concentração de composto de teste menos o nível de LTB4 na presença de 5-[[4-[(2S,4R)-4-hidróxi-2-metil-tetra-hidropiran-4-il]-2- tienil]sulfanil]-1-metil-indolin-2-ona 50 nM. A preparação da 5-[[4- [(2S,4R)-4-hidróxi-2-metil-tetra-hidropiran-4-il]-2-tienil]sulfanil]-1-metil- indolin-2-ona foi descrita em Org. Process Res. Dev., 2005, 9, 555-569 ou EP623614 B1). A inibição da produção de LTB4 foi definida como o nível de LTB4 na presença de uma dada concentração de composto de teste, expresso como uma % do nível de LTB4 na presença de DMSO. Os valores de IC50 foram determinados representando a % de inibição em função da concentração logarítmica do composto e usando um modelo de resposta à dose de um sítio. Os dados para cada exemplo testado são apresentados na Tabela 2.
Figure img0035
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ND = não determinado
Exemplos
[00148] Os compostos do pedido irão agora ser adicionalmente explicados por referência aos exemplos não limitativos que se seguem.
[00149] Nos exemplos, os espectros de massa de alta resolução foram registrados em um espectrômetro de massa Micromass LCT equipado com uma interface do tipo electropulverização (LC-HRMS). As medições de RMN de 1H foram realizadas em espectrômetros Varian UNITY plus 400, 500 e 600 ou espectrômetros Varian INOVA 400, 500 e 600 ou espectrômetros Bruker Avance 400, 500 e 600, operando a frequências de 1H de 400, 500 e 600 MHz, respectivamente. Os experimentos foram tipicamente registrados a 25 °C. Os desvios químicos são dados em ppm, com o solvente como padrão interno. A cromatografia rápida foi efetuada usando cromatografia rápida de fase direta em um Sistema de purificação SP1TM da BiotageTM usando sílica de fase normal FLASH+TM (40M, 25M ou 12 M) ou Cartuchos KP-Sil SNAPTM (340, 100, 50 ou 10), salvo indicação em contrário. Em geral, todos os solventes usados estavam comercialmente disponíveis e eram de grau analítico. Foram rotineiramente usados para as reações solventes anidros. Os Separadores de Fases usados nos exemplos são colunas de Separação de Fases ISOLUTE®. Os Intermediários e Exemplos nomeados abaixo foram nomeados usando o programa ACD/Name 12.01 da Advanced Chemistry Development, Inc. (ACD/Labs).
[00150] São usadas as seguintes abreviaturas AcOH ácido acético aq aquoso/aquosa Boc2O dicarbonato de di-tert-butila DCE dicloroetano DCM diclorometano DEA dietilamina DIPEA N,N-diisopropiletilamina DMAP dimetilaminopiridina DME dimetoxietano DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido DPPA fosforazidato de difenila dppf dtbpf EtOAc 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno 1,1'-bis(ditertbutilfosfino)ferroceno acetato de etila EtOH etanol h hora(s) HATU hexafluorofosfato de (dimetilamino)-N,N-dimetil(3- óxido-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridinil)metanimínio MeCN acetonitrilo MeOH metanol min minuto(s) MS espectrômetro de massa NMP N-metil-2-pirrolidona RMN ressonância magnética nuclear Pd(dppf)Cl2*DCM dicloreto de 1,1'-bis(di-tert- butilfosfino)ferrocenopaládio ta temperatura ambiente sat saturado/saturada SFC cromatografia de fluidos supercríticos T3P 2,4,6-trióxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6- trioxatrifosfinano TBTU tetrafluoroborato de 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1- il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio THF tetra-hidrofurano TLC cromatografia de camada fina Xantphos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno Síntese dos Materiais de Partida e dos Intermediários Intermediário 1: ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-[4-(1 H-Pirazol-3-il)benzoil]- ciclo-hexanocarboxílico
Figure img0037
[00151] Uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (200 mg, 0,64 mmol), ácido 1H- pirazol-3-ilborônico (129 mg, 1,16 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (46,5 mg, 0,06 mmol) e K2CO3 (266 mg, 1,93 mmol) em dioxano (4 mL)/água (4 mL) foi aquecida ao refluxo durante 90 min. A mistura foi diluída com EtOAc e água. As fases foram separadas e a fase aquosa lavada com EtOAc. As camadas aquosa combinadas foram acidificadas com HCl (6 M) até um pH de aproximadamente 4-5, e o produto extraído com EtOAc. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e evaporada para dar o composto em epígrafe (240 mg) como um sólido marrom.
[00152] MS m/z 299 (M+H)+ Intermediário 2:4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0038
[00153] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 800 μL, 1,34 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (200 mg, 0,64 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5- carboxamida (180 mg, 1,28 mmol) e Et3N (356 μL, 2,57 mmol) em EtOAc (3 mL) seco, e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 4 h em um reator de micro-ondas. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com NaHCO3 (sat, aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases, e o solvente evaporado. O composto foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 30-85% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) a pH10 como fase móvel. As frações desejadas foram coletadas e o solvente evaporado para dar o composto em epígrafe (130 mg, 47%).
[00154] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,2 - 1,54 (m, 3H), 1,70 (ddd, 1H), 1,81 - 1,98 (m, 2H), 2,02 - 2,17 (m, 2H), 2,78 - 2,94 (m, 1H), 3,56 - 3,73 (m, 1H), 4 - 4,1 (m, 3H), 6,11 (d, 2H), 7,55 - 7,65 (m, 3H), 7,81 (d, 2H), 8,00 (s, 1H)
[00155] MS m/z 433,1 [M+H]+ Intermediário 3: 3-Metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1 H-pirazol
Figure img0039
Etapa 1 - 3-Metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol
[00156] Dissolveu-se 3-metil-1H-pirazol (2 mL, 24,8 mmol) em 3,4- di-hidro-2H-pirano (6,8 mL, 74,5 mmol). Adicionou-se ácido trifluoroacético (0,134 mL, 1,74 mmol) e se aqueceu a solução límpida a 75 °C durante 18 h. A mistura reacional foi diluída com Et2O e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat, aq), água e solução saturada de cloreto de sódio, filtrada usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (10%^20% de EtOAc em heptano) para dar o composto do subtítulo. (2,4 g, 58%, 70% do isômero correto)
[00157] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,44 (d, 1H), 7,40 (s, 0,3H), 6,04 (d, 1H), 6,00 (s, 0,3H), 5,21-5,28 (m), 3,94 - 4,09 (m), 3,57-3,68 (m), 2,47 (s, 0H), 2,31 (s, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,9 - 2,16 (m), 1,59 - 1,75 (m). Etapa 2 - 3-Metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1 H-pirazol
[00158] Adicionou-se n-butil-lítio (6,1 mL, 15,2 mmol, 2,5M em THF) durante 10 min a uma solução de 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)- 1H-pirazol (2,4 g, 14,4 mmol) em THF (20 mL) a -78 °C. Durante um período de 15 min se adicionou borato de tripropan-2-ila (3,7 mL, 15,9 mmol), gota-a-gota a -78 °C, e a mistura reacional foi agitada durante 15 min, após o que se deixou que atingisse a ta. Adicionou-se 2,3- dimetilbutano-2,3-diol (1,88 g, 15,9 mmol) seguido de AcOH (1,65 mL, 28,9 mmol) e se agitou a mistura reacional à ta durante a noite. A mistura reacional foi diluída com heptano e a fase orgânica lavada com NH4Cl (aq), NaHCO3 (aq) e solução saturada de cloreto de sódio, filtrada usando um separador de fases, e concentrada. O resíduo foi diluído com heptano e concentrado para dar o composto em epígrafe (3,86, 91%).
[00159] MS m/z 293,2 [M+H]+ Intermediário 4: 1-Metil-4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2 H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol- 5-carboxamida
Figure img0040
Etapa 1 - 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-1- metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
[00160] Adicionou-se Et3N (5,5 mL, 39,7 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 12 mL, 20,2 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (3 g, 9,6 mmol), 4-amino-1-metil- 1H-pirazol-5-carboxamida (2,7 g, 19,3 mmol) e Et3N (5,5 mL, 39,7 mmol) em EtOAc (45 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 75-80 °C durante 2 h. A mistura foi diluída com EtOAc (100 mL), lavada quatro vezes com NaHCO3 (sat, aq) e duas vezes com NH4Cl (sat, aq) e água. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases, e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc, e a fase orgânica lavada duas vezes com NaHCO3 (sat, aq), duas vezes com NH4Cl (sat, aq), e finalmente com água. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e o solvente removido sob vácuo para dar o composto do subtítulo impuro (3,55 g) como um resíduo de cor creme.
[00161] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,31 - 1,56 (m, 3H), 1,70 (qd, 1H), 1,81-1,97 (m, 3H), 2,07 - 2,15 (m, 1H), 2,81 - 2,93 (m, 1H), 3,61 - 3,71 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 6,29 (s, 2H), 7,51 - 7,69 (m, 3H), 7,81 (d, 2H), 8,08 (s, 1H)
[00162] MS m/z 433 [M+H]+ Etapa 2 - 1-Metil-4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)- 1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol-5- carboxamida
[00163] Adicionou-se 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 4,2 g, 14,37 mmol) e uma solução de K2CO3 (3,19 g, 23,08 mmol) em água (35 mL) a uma solução de 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]- carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 2, 2,5 g, 5,77 mmol) em dioxano (35 mL) sob atmosfera de nitrogênio. Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (0,371 g, 0,58 mmol) e a mistura resultante foi aquecida a 70-80 °C durante 20 min e de seguida a 80 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (200 mL) e lavada com solução saturada de cloreto de sódio (sat). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (50^100% de EtOAc em heptano, de seguida 100% de EtOAc) para dar o composto em epígrafe (2,15 g, 72%).
[00164] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,29 - 1,46 (m, 2H), 1,75 (dq, 3H), 1,85 - 1,98 (m, 2H), 2,02 (s, 1H), 2,04 (s, 3H), 2,14 (d, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,62-2,45 (m, 1H), 2,93 (t, 1H), 3,59 (td, 1H), 3,7 - 3,85 (m, 1H), 4,02 - 4,1 (m, 3H), 5,10 (t, 1H), 6,16 (s, 1H), 6,22-6,45 (s l, 2H), 7,60 (dd, 3H), 8,04 (dd, 2H), 8,13-8,33 (s l, 1H).
[00165] MS m/z 519,4 [M+H]+ Intermediário 5 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxilato de metila
Figure img0041
[00166] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 1,9 mL, 3,2 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (674 mg, 2,17 mmol), cloridrato de 4-amino-1-metil- 1H-pirazol-3-carboxilato de metila (457 mg, 2,38 mmol) e Et3N (0,63 mL, 4,5 mmol) em EtOAc (9 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 2 h e de seguida à ta durante 2 dias. A mistura reacional foi lavada com NaHCO3 (sat, aq), NH4Cl (sat. aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases, e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (50% de EtOAc) para dar o composto em epígrafe (640 mg, 66%).
[00167] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,26 - 1,35 (m, 1H), 1,35 - 1,49 (d, 2H), 1,57 - 1,7 (m, 1H), 1,88 (dd, 2H), 1,98 - 2,04 (m), 2,09 - 2,18 (m, 1H), 2,87 - 2,99 (m, 1H), 3,6 - 3,69 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 7,57 (d, 2H), 7,84 (d, 2H), 8,04 (s, 1H), 9,09 (s, 1H).
[00168] MS m/z 448 [M+H]+ Intermediário 6 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0042
Etapa 1 - ácido 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxílico
[00169] Adicionou-se LiOH (1 M aq) (3 mL, 3,00 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)- 1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metila (Intermediário 5, 640 mg, 1,43 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (3 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada e se adicionou HCl (3,8 M, aq) (1 mL) seguido de água (20 mL). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, as fases orgânicas combinadas filtradas usando um separador de fases e concentradas para dar o composto do subtítulo (640 mg, 103%).
[00170] MS m/z 432 [M-H]- Etapa 2 - 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-1- metil-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00171] Adicionou-se DIPEA (0,68 mL, 3,9 mmol), TBTU (749 mg, 2,33 mmol) e cloreto de amônio (139 mg, 2,59 mmol) a uma solução de ácido 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1- metil-1H-pirazol-3-carboxílico (563 mg, 1,30 mmol) em DMF (5 mL) e se agitou a mistura reacional à ta durante a noite. A mistura reacional foi diluída com DMSO e purificada por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x50 ID mm) usando um gradiente de 5-75% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel. As frações desejadas foram coletadas, concentradas e extraídas com EtOAc. A fase orgânica foi filtrada usando um separador de fases e concentrada para dar o composto em epígrafe (280 mg, 50%).
[00172] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,16 (dd, 1H), 1,33 - 1,55 (m, 3H), 1,67 - 1,85 (m, 2H), 1,90 (d, 1H), 2,02 (d, 1H), 2,81 - 2,92 (m, 1H), 3,63 - 3,71 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 7,46 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,73 (d, 2H), 7,93 (d, 2H), 8,04 (s, 1H), 9,75 (s, 1H). Intermediário 7: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3-ciano-1- metil-1 H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0043
[00173] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 1,6 g, 4,9 mol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (1,3 g, 4,1 mol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3- carbonitrila (0,5 g, 4,1 mol) e DMAP (1,0 g, 8,2 mol) em DCE (10 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 1 h. A mistura foi resfriada até à ta e diluída com DCM. A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca e concentrada, e o resíduo purificado por cromatografia rápida (éter de petróleo: EtOAc, 3:1) para dar o composto em epígrafe (0,4 g, 24%) como um sólido branco.
[00174] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,49-1,39 (m, 3H), 1,76-1,69 (m, 1H), 1,95-1,86 (m, 2H), 2,12-2,03 (m, 2H), 2,91-2,84 (m, 1H), 3,69-3,62 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 7,59 (d, 2H), 7,64 (s, 1H), 7,83 (d, 2H), δ 7,99 (s, 1H) Intermediário 8: Ácido (1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2- il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexanocarboxílico
Figure img0044
[00175] Adicionou-se K2CO3 (4,02 g, 29,05 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (0,28 g, 0,36 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (2,26 g, 7,26 mmol) e 3-metil-1- (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- 1H-pirazol (Intermediário 3, 3,18 g, 10,89 mmol) dissolvidos em 1,4- dioxano (40 mL) e água (20 mL). A mistura foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes, e então aquecida a 80 °C durante 1h. A mistura foi resfriada até à ta e diluída com EtOAc. Adicionou-se NaHCO3 (sat, aq) e se acidificou a mistura com KHSO4 (1 M, aq). As fases foram separadas e a fase aquosa extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases, e o solvente removido sob vácuo. O resíduo impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C8 Kromasil (10 μm 250x50 ID mm) usando um gradiente de 30%-90% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/AcOH (95/5/0,2) como fase móvel. As frações selecionadas foram combinadas e concentradas sob vácuo, e o resíduo aquoso extraído duas vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e o solvente removido sob vácuo para dar o composto em epígrafe (2,79 g, 97%) como um sólido marrom claro.
[00176] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,21 - 1,64 (m, 6H), 1,71 - 1,94 (m, 4H), 2,02 - 2,12 (m, 2H), 2,23 - 2,31 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,52 - 2,64 (m, 1H), 2,93 - 3,02 (m, 1H), 3,53 - 3,66 (m, 2H), 4,11 - 4,19 (m, 1H), 5,13 (dd, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,56 - 7,63 (m, 2H), 8,01 - 8,07 (m, 2H)
[00177] MS m/z 395,3 [M-H]- Intermediário 9: 4-[( tert-Butoxicarbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxilato de metila
Figure img0045
[00178] Adicionou-se dicarbonato de di-tert-butila (159 mL, 0,68 mol) a 4-amino-1H-pirazol-3-carboxilato de metila (87,6 g, 0,62 mol) e piridina (100 mL, 1,24 mol) em MeOH (1 L) a 10 °C durante um período de 15 min. A mistura reacional foi agitada à ta durante 5 h. O solvente foi removido sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cristalização de MeOH (700 mL) para dar o composto em epígrafe (80 g, 53%) como um sólido roxo.
[00179] MS m/z 228 [M+H]+
[00180] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,47 (s, 9H), 3,83 (s, 3H), 7,70 - 8,20 (m, 2H), 13,45 (s, 1H) Intermediário 10: 1 -(2-Bromoetil)-4-[( tert-butoxicarbonil)amino]-1 H- pirazol-5-carboxilato de metila
Figure img0046
[00181] Adicionou-se 1,2-dibromoetano (1,97 mL, 22,8 mmol) a uma solução de 4-[(tert-butoxicarbonil)amino]-1H-pirazol-5-carboxilato de metila (Intermediário 9, 5,0 g, 20,7 mmol) e K2CO3 (4,3 g, 31,1 mmol) em DMF (50 mL) a 0 °C durante um período de 10 min e a mistura reacional foi agitada à ta durante 5 h. Adicionou-se água à mistura reacional e a fase aquosa foi extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca com MgSO4, filtrada e evaporada, e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (5%^20% 2-metilpentano em EtOAc). As frações puras foram evaporadas à secura para dar o composto em epígrafe (2,5 g, 35%) como um óleo incolor.
[00182] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,47 (s, 9H), 3,80 (t, 2H), 3,87 (s, 3H), 4,79 (t, 2H), 7,86 (s, 1H), 8,24 (s, 1H)
[00183] MS m/z 348 [M+H]+ Intermediário 11: (4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3- il)carbamato de tert-butila
Figure img0047
[00184] Adicionou-se hidrato de amônia (10 g, 287,2 mmol) a uma solução de 1-(2-bromoetil)-4-[(tert-butoxicarbonil)amino]-1H-pirazol-5- carboxilato de metila (Intermediário 10, 10,0 g, 28,7 mmol) em MeCN (100 mL) e o recipiente reacional foi selado e aquecido a 90 °C durante 20 h. O solvente foi removido sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida, gradiente de eluição (1%^10% de DCM em MeOH). As frações puras foram evaporadas à secura para dar o composto em epígrafe (6,0 g, 83%) como um sólido branco.
[00185] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,47 (s, 9H), 3,60 (t, 2H), 4,22 (t, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 8,30 (s, 1H)
[00186] MS m/z 253 [M+H]+ Intermediário 12: Cloridrato de 3-amino-6,7-di-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-4(5 H )-ona
Figure img0048
[00187] Adicionou-se HCl (g) a uma solução de (4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)carbamato de tert-butila (Intermediário 11, 9 g, 35,68 mmol) em MeOH (50 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com EtOAc e seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (6,00 g, 89%) como um sólido branco.
[00188] MS m/z 153 [M+H]+ Intermediário 13: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0049
[00189] Adicionou-se uma mistura de cloridrato de 3-amino-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona (Intermediário 12, 1,0 g, 5,30 mmol) e Et3N (2,96 mL, 21,21 mmol) em DMF (10 mL) a uma solução agitada de ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (1,82 g, 5,83 mmol) e HATU (4,03 g, 10,60 mmol) em DMF (10 mL), durante um período de 5 min. A mistura reacional foi agitada a 50 °C durante 15 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, e lavada sequencialmente com NaHCO3 (sat, aq), solução saturada de cloreto de sódio (sat.), e água. A camada orgânica foi seca com MgSO4, filtrada e evaporada, e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (1%^10% de DCM em MeOH). As frações puras foram evaporadas à secura para dar o composto em epígrafe (1,2 g, 51%) como um sólido branco.
[00190] MS m/z 445 [M+H]+ Intermediário 14: (1R ,2 R )-2-{4-[3-Metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H- pirazol-5-il]benzoil}-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3- il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0050
[00191] Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (0,092 g, 0,11 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 13, 1,0 g, 2,25 mmol), 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2- il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 0,984 g, 3,37 mmol) e Na2CO3 (0,952 g, 8,98 mmol) em dioxano (20 mL) e água (5 mL) durante um período de 10 min sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi agitada a 90 °C durante 3 h. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo diluído com EtOAc. A fase orgânica foi lavada sequencialmente com NaHCO3 (sat, aq), uma solução saturada de cloreto de sódio (sat.), e água. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e evaporada. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (10%^50% de 2-metilpentano em EtOAc) para dar o composto em epígrafe (1,0 g, 84%) como um sólido amarelo.
[00192] MS m/z 531 [M+H]+ Intermediário 15: [1-Metil-5-(metilsulfanil)-1 H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila
Figure img0051
[00193] Adicionou-se Et3N (873 mg, 8,63 mmol) e DPPA (1,19 g, 4,32 mmol) a uma solução de ácido 1-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol- 4-carboxílico (400 mg, 2,32 mmol) em tert-butanol (15 mL), sob atmosfera inerte, e a mistura reacional foi agitada a 20 °C durante 2 h e depois aquecida ao refluxo durante mais 13 h. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo e o resíduo dissolvido em EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (9% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (330 mg, 58%) como um sólido branco.
[00194] MS m/z 244 [M+H]+ Intermediário 16: Cloridrato de 1-metil-5-(metilsulfanil)-1 H-pirazol-4- amina
Figure img0052
[00195] Borbulhou-se HCl (g) em uma solução de [1-metil-5- (metilsulfani)-1H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila (Intermediário 15, 1,6 g, 6,58 mmol) em MeOH (30 mL) a 20 °C com agitação durante 1h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (1,56 g, impuro) como um sólido amarelo claro.
[00196] MS m/z 144 [M+H]+ Intermediário 17:(1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1 -metil-5- (metilsulfanil)-l H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0053
[00197] Adicionou-se HATU (3,8 g, 9,99 mmol) a uma solução agitada de ácido (1R,2R)-2-[(4-bromofenil)carbonil]ciclo-hexano-1- carboxílico (2,3 g, 7,39 mmol) em DMF (20 mL) a 0 °C. Adicionou-se gota-a-gota uma solução de cloridrato de 1-metil-5-(metilsulfanil)-1H- pirazol-4-amina (Intermediário 16, 1,5 g, 8,35 mmol) em DMF (10 mL) e DIPEA (3,24 g, 25,07 mmol) à mistura reacional a 0 °C, e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo dissolvido em EtOAc. A fase orgânica foi lavada com NaHCO3 (sat, aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado com uma coluna de sílica-gel (28% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (2,1 g, 65%) como um sólido amarelo.
[00198] 1H RMN (300MHz, DMSO-d6) δ 1,19-1,09 (m, 1H), 1,43- 1,31 (m, 3H), 1,93-1,73 (m, 3H), 2,11-2,08 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 3,042,95 (m, 1H), 3,72-3,64 (t, 1H), 3,81 (s, 3H), 7,57 (s, 1H), 7,75-7,72 (d, 2H), 7,94-7,91 (d, 2H), 9,42 (s, 1H)
[00199] MS m/z 436 [M+H]+ Intermediário 18:(1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1 -metil-5- (metilsulfonil)-l H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0054
[00200] Adicionou-se ácido 3-cloroperoxibenzoico (356 mg, 2,06 mmol) em porções a 0 °C a uma solução de (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-il]ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 17, 600 mg, 1,4 mmol) em DCM (10 mL). A mistura reacional foi agitada a 0 °C durante 40 min. Adicionou-se ácido 3-cloroperoxibenzoico (356 mg, 2,06 mmol) em porções a 0 °C à mistura reacional, após o que a mistura foi agitada à ta durante 60 min. A mistura reacional foi diluída com DCM e a fase orgânica lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel (96% de DCM em MeOH) para dar o composto em epígrafe (630 mg, 98%) como um sólido branco.
[00201] MS m/z 468 [M+H]+ Intermediário 19: [3-(Difluorometóxi)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila
Figure img0055
[00202] Adicionou-se DIPEA (580 mg, 4,49 mmol) em porções a uma solução de ácido 3-(difluorometóxi)-1-metil-1H-pirazol-4- carboxílico (575 mg, 2,99 mmol) em tert-BuOH (20 mL) sob atmosfera de nitrogênio. Adicionou-se gota-a-gota com agitação DPPA (1,0 g, 3,63 mmol) à mistura reacional, após o que ela foi agitada a 80 °C durante 12 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (5%^20% de EtOAc em petróleo) para dar o composto em epígrafe (630 mg, 80%) como um óleo amarelo claro.
[00203] MS m/z 264 [M+H]+ Intermediário 20: Cloridrato de 3-(difluorometóxi)-1-metil-1 H-pirazol-4- amina
Figure img0056
[00204] Borbulhou-se HCl(g) em uma solução de [3- (difluorometóxi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila (Intermediário 19, 500 mg, 1,90 mmol) em EtOAc (20 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo lavado com uma solução de EtOAc/Éter de petróleo (5 mL, 1:1) para dar o composto em epígrafe (320 mg, 84%) como um sólido branco.
[00205] 1H RMN (300MHz, CDCl3) δ 3,77 (s, 3H), 7,32 (t, 1H), 7,95 (s, 1H), 10,37 (s l, 2H) Intermediário 21: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[3-(difluorometóxi)-1- metil-1 H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0057
[00206] Adicionou-se DIPEA (778 mg, 6,02 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 1,92 g, 6,03 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (514 mg, 1,65 mmol) e cloridrato de 3-(difluorometóxi)-1-metil-1H-pirazol-4-amina (Intermediário 20, 300 mg, 1,50 mmol) em EtOAc (10 mL) e a mistura reacional foi agitada a 75 °C durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica- gel (5%^20% de EtOAc em petróleo) para dar o composto em epígrafe (360 mg, 52%) como um sólido amarelo claro.
[00207] MS m/z 456 [M+H]+ Intermediário 22: Cloreto de 1-metil-4-nitro-1 H-pirazol-3-sulfonila
Figure img0058
[00208] Etapa 1: Adicionou-se CuCh* 2H2O (4,1 g, 24 mmol) a uma solução de SO2 (g) em AcOH (32%, aq) (246 g, 3,84 mol) e a mistura reacional foi agitada a -10 °C durante 1 h em um banho de gelo/sal se borbulhando SO2 gasoso na mistura reacional.
[00209] Etapa 2: Adicionou-se gota-a-gota durante 1 h NaNO2 (6,9 g, 100 mmol) em água (50 mL) a uma solução de 1-metil-4-nitro-1H- pirazol-3-amina (13,5 g, 95 mmol) em AcOH/HCO2H (5:1, 180 mL) e HCl (12 M, aq) (16 mL) a -10 °C sob atmosfera de nitrogênio. A solução amarela formada foi adicionada em porções à solução pré- formada da Etapa 1 durante 1h, resultando na imediata liberação de nitrogênio. A mistura reacional foi agitada durante 1h e concentrada sob vácuo. O resíduo foi diluído com EtOAc e a fase orgânica lavada duas vezes com água e duas vezes com solução saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (15 g, 70%) como um semissólido amarelo.
[00210] MS m/z 227 [M+H]+ Intermediário 23: 1-Metil-4-nitro-1 H-pirazol-3-sulfonamida
Figure img0059
[00211] Adicionou-se gota-a-gota durante 1 h uma solução de cloreto de 1-metil-4-nitro-1H-pirazol-3-sulfonila (Intermediário 22, 5,1 g, 22,6 mmol) em THF (50 mL) a uma solução saturada de amônia em THF (200 mL) à ta, e a mistura reacional foi agitada à ta durante 5 h. Os sólidos formados foram coletados por filtração e lavados com DCM (100 mL), água (50 mL) e MeOH (50 mL) para dar o composto em epígrafe (2,4 g, 51%) como um sólido branco.
[00212] MS m/z 207 [M+H]+ Intermediário 24: 4-Amino-1-metil-1 H-pirazol-3-sulfonamida
Figure img0060
[00213] A uma solução de 1-metil-4-nitro-1H-pirazoli-3-sulfonamida (Intermediário 23, 3,1 g, 15,0 mmol) em MeOH (200 mL) se adicionou Pd/C (10%, 400 mg) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 6 h sob atmosfera de H2 (g). Os sólidos foram separados por filtração e a mistura reacional concentrada sob vácuo. Os sólidos resultantes foram lavados com MeOH (50 mL) para dar o composto em epígrafe (2,1 g, 79%) como um sólido rosa claro.
[00214] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,75 (s, 3H), 4,33 (s, 2H), 7,15 (s, 1H), 7,26 (s, 2H)
[00215] MS m/z 177 [M+H]+ Intermediário 25: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1 -metil-3-sulfamoil)- 1H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0061
[00216] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 3,61 g, 5,68 mmol), Et3N (861 mg, 8,51 mmol) e ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (500 mg, 1,61 mmol) a uma solução de 4-amino-1- metil-1H-pirazol-3-sulfonamida (Intermediário 24, 884 mg, 5,02 mmol) em EtOAc (50 mL), e a mistura reacional foi agitada a 80 °C durante 5 h. A mistura reacional foi lavada com NaHCO3 (sat, aq), duas vezes com água, e finalmente duas vezes com solução saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (720 mg, 31%) como um sólido branco.
[00217] MS m/z 469 [M+H]+ Intermediário 26: 2,3-Di-hidropirazolo[5,1- b ][1,3]oxazol
Figure img0062
[00218] Adicionou-se 1,2-dibromoetano (73,7 g, 392,5 mmol) a uma solução de 1H-pirazol-3-ol (11 g, 130,83 mmol) e K2CO3 (48,3 g, 349,3 mmol) em MeCN (200 mL) à ta, e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 6 h. A mistura reacional foi filtrada, o filtrado concentrado sob vácuo e purificado por cromatografia rápida (1%^2,5% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (4,0 g, 28%) como um sólido amarelo.
[00219] 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 4,30 (t, 2H), 5,06 (t, 2H), 5,34 (s, 1H), 7,36 (s, 1H)
[00220] MS m/z 111 [M+H]+ Intermediário 27: 7-Nitro-2,3-Di-hidropirazolo[5,1- b ][1,3]oxazol
Figure img0063
[00221] Adicionou-se HNO3 (36,1 mL, 802,3 mmol) e H2SO4 (36,1 mL, 676,8 mmol) durante um período de 1 h a uma solução de 2,3-di- hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol (Intermediário 26, 15,89 g, 144,3 mmol) em H2SO4 (72 mL) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio, e de seguida a misura reacional foi agitada à ta durante 16 h. A mistura reacional foi agitada a água gelada e a camada aquosa extraída duas vezes com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (0%^100% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (12,5 g, 56%) como um sólido esbranquiçado.
[00222] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,44 (t, 2H), 5,35 (t, 2H), 7,90 (s, 1H)
[00223] MS m/z 156 [M+H]+ Intermediário 28: 2,3-Di-hidropirazolo[5,1 -b][1,3]oxazol-7-ilcarbamato de tert-butila
Figure img0064
[00224] Adicionou-se dicarbonato de di-tert-butila (21,1 g, 96,7 mmol) e Pd-C (2,1 g, 19,7 mmol) a uma solução de 7-nitro-2,3-di- hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol (Intermediário 27, 5 g, 32,23 mmol) em MeOH (100 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta sob atmosfera de H2 (1 atm) durante 35 h. A mistura reacional foi filtrada, o filtrado concentrado sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (0%^90% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (2,55 g, 35%) como um sólido amarelo pálido.
[00225] MS m/z 226 [M+H]+ Intermediário 29: Cloridrato de 2,3-Di-hidropirazolo[5,1- b ][1,3]oxazol-7- amina
Figure img0065
[00226] Borbulhou-se HCl (g) durante 1 h à ta em uma solução de 2,3-di-hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol-7-ilcarbamato de tert-butila (Intermediário 28, 500 mg, 2,22 mmol) em EtOAc (20 mL). A mistura reacional foi concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (350 mg, 98%) como um sólido esbranquiçado.
[00227] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,32 (t, 2H), 5,17 (t, 2H), 7,41 (s, 1H)
[00228] MS m/z 126 [M+H]+ Intermediário 30:(1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2,3-Di- hidropirazolo[5,1- b ][1,3]oxazol-7-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0066
[00229] Adicionou-se ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (402 mg, 1,29 mmol) a uma solução de cloridrato de 2,3-di-hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol-7-amina (Intermediário 29, 209 mg, 1,29 mmol), HATU (738 mg, 1,94 mmol) e DIPEA (0,90 mL, 5,17 mmol) em DMF (6 mL) à ta, e a mistura reacional foi agitada a durante 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada duas vezes com solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e evaporada. O produto impuro foi purificado por TLC preparativa (9% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (200 mg, 37%).
[00230] MS m/z 418 [M+H]+ Intermediário 31: Cloridrato do ácido (5-metil-1 H-pirazol-3-il)borônico
Figure img0067
[00231] Adicionou-se gota-a-gota a 0 °C uma solução de 3-metil-1-( tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- 1H-pirazol (Intermediário 3, 2,95 g, 10,10 mmol) em MeOH (10 mL) a HCl (3M em MeOH, 50 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo lavado com hexano (2x20 mL) para dar o composto em epígrafe (1,3 g) como um sólido marrom claro.
[00232] MS m/z 127 [M+H]+ Intermediário 32: 5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1 H-pirazol-4-carboxilato de etila
Figure img0068
[00233] Adicionou-se dissulfureto de dibenzila (101,9 g, 413,57 mmol) em porções a uma solução de 5-amino-1-metil-1H-pirazol-4- carboxilato de etila (10 g, 59,11 mmol) em MeCN (400 mL) em atmosfera de nitrogênio e à ta. Adicionou-se CuCl (293 mg, 7,14 mmol) em porções à ta à mistura reacional e esta foi agitada à ta durante 30 min. Adicionou-se 3-metil-1-nitrobutano (41,5 g, 354,26 mmol) à mistura reacional e a solução resultante foi agitada à ta durante 30 min e de seguida a 60 °C durante 1 h. Deixou-se a mistura reacional atingir a ta e se separou os sólidos por filtração. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (EtOAc/éter de petróleo, 1:8) para dar o composto em epígrafe (11,6 g, 71%) como um óleo amarelo.
[00234] MS m/z 277 [M+H]+ Intermediário 33: Ácido 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1 H-pirazol-4- carboxílico
Figure img0069
[00235] Adicionou-se hidróxido de sódio (5,04 g, 126,01 mmol) em água (30 mL) gota-a-gota a 0 °C a uma solução de 5-(benzilsulfanil)-1- metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila (Intermediário 32, 11,6 g, 41,98 mmol) em MeOH (150 mL) e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 15 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo, o resíduo dissolvido em água e a fase aquosa lavada com EtOAc. O pH da camada aquosa foi ajustado a 5~6 com HCl (12 M, aq) e os sólidos formados coletados por filtração e secos sob vácuo para dar o composto em epígrafe (8,8 g, 84%) como um sólido amarelo claro.
[00236] MS m/z 249 [M+H]+= 249 Intermediário 34: [5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila
Figure img0070
[00237] Adicionou-se Boc2O (30 g, 137,61 mmol) e Et3N (10,7 g, 105,74 mmol) sob atmosfera de nitrogênio a uma solução de ácido 5- (benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxílico (Intermediário 33, 8,8 g, 35,44 mmol) em tert-butanol (200 mL). Adicionou-se gota-a-gota difenilfosforilazida (19,5 g, 70,86 mmol) à mistura reacional, e esta foi agitada à ta durante 4 h e de seguida a 88 °C durante 15 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat, aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (EtOAc/éter de petróleo, 1:6) para dar o composto em epígrafe (9,8 g, 87%) como um óleo amarelo.
[00238] MS m/z 320 [M+H]+ Intermediário 35: Cloridrato de 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1 H-pirazol-4- amina
Figure img0071
[00239] Borbulhou-se HCl (g) em uma solução de [5-(benzilsulfanil)- 1-metil-1H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila (Intermediário 34, 9,8 g, 30,68 mmol) em MeOH (150 mL) à ta durante 6 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (7,5 g, 96%) como um sólido amarelo claro.
[00240] MS m/z 220 [M+H]+ Intermediário 36: (1R,2R)-N-[5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]- 2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0072
[00241] Adicionou-se HATU (223 mg, 0,59 mmol) e cloridrato de 5- (benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-amina (Intermediário 35, 100 mg, 0,39 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-[(4- bromofenil)carbonil]ciclo-hexano-1-carboxílico (122 mg, 0,39 mmol) em DMF (10 mL). Adicionou-se gota-a-gota DIPEA (152 mg, 1,18 mmol) à mistura reacional e esta foi agitada a 20 °C durante 15 h. Adicionou-se água à mistura reacional e se extraíu a fase aquosa com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 (sat, aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (EtOAc/Éter de Petróleo, 1:5) e o produto impuro purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 Sunfire (150mm) usando um gradiente de 55-100% de MeCN em um sistema-tampão H2O/HCO2H (99,5/0,5) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (111 mg, 55%) como um sólido branco.
[00242] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,23-1,12 (m, 1H), 1,52 1,37 (m, 3H), 1,94-1,74 (m, 3H), 2,11-2,07 (m, 1H), 3,06-2,98 (t, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,74-3,66 (t, 1H), 3,89 (s, 2H), 7,06-7,03 (m, 2H), 7,257,21 (m, 3H), 7,57 (s, 1H), 7,74-7,71 (d, 2H), 7,95-7,92 (d, 2H), 9,36 (s, 1H)
[00243] MS m/z 512 [M+H]+ Intermediário 37: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil)- 1H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0073
Etapa 1 - Cloreto de 4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-sulfonila
[00244] Diluiu-se uma mistura de (1R,2R)-N-[5-(benzilsulfanil)-1- metil-1H-pirazol-4-il]-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 36, 7 g, 13,66 mmol) em AcOH (60 mL) com água e se resfriou a -10 °C. Adicionou-se 1,3-dicloro-5,5-dimetilimidazolidino-2,4- diona (4,05 g, 20,56 mmol) em uma porção a -10 °C e a mistura reacional foi agitada a -5 °C durante 30 min. Adicionou-se 1,3-dicloro- 5,5-dimetilimidazolidino-2,4-diona (1,35 g, 6,85 mmol) a 0 °C e a mistura reacional foi agitada durante 30 min. Adicionou-se 1,3-dicloro- 5,5-dimetitlimidazolidino-2,4-diona (1,35 g, 6,85 mmol) a cerca de -5 °C e a mistura reacional foi agitada durante 30 min. Adicionou-se 1,3- dicloro-5,5-dimetilimidazolidino-2,4-diona (1,35 g, 6,85 mmol) a cerca de -5 °C e a mistura reacional foi agitada abaixo de 5 °C durante 60 min. A mistura reacional foi diluída com água e a fase aquosa extraída com DCM. A camada orgânica foi lavada com NaHCO3 (8%, aq) até que o pH da camada aquosa ser de cerca de 6~7. A fase orgânica foi concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (12 g, impuro).
[00245] MS 488 m/z [M+H]+= /490 Etapa 2 - (1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil)-1 H- pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
[00246] Borbulhou-se NH3 (g) em THF (300 mL) a -5 °C até o solvente estar perto da saturação. Adicionou-se gota-a-gota uma solução de cloreto 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-sulfonila (19 g, 38,87 mmol) em THF (500 mL) com agitação a -5 °C, e a mistura reacional foi agitada à ta durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica- gel (EtOAc/éter de petróleo, 1:1), e depois por cromatografia em coluna sob pressão moderada com sílica-gel usando um gradiente de 20%-45% de MeCN em um sistema-tampão H2O/HCO2H (99,9/0,1) como fase móvel, para dar o composto em epígrafe (12,0 g, 66%) como um sólido esbranquiçado.
[00247] 1H RMN(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,21-1,10 (m, 1H), 1,52 1,32 (m, 3H), 1,83-1,72 (m, 2H), 2,08-1,90 (m, 2H), 2,90-2,83 (t, 1H), 3,71-3,65 (t, 1H), 3,95 (s, 3H), 7,76-7,74 (d, 2H), 7,79 (s, 1H), 7,957,93 (d, 2H), 8,03 (s, 2H), 8,82 (s, 1H)
[00248] MS 469 m/z [M+H]+ Intermediário 38: 3-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H- pirazol-4-amina
Figure img0074
Etapa 1 - 3-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1 H-pirazol-4- carboxilato de etila
[00249] Adicionou-se 3,4-di-hidro-2H-pirano (1,3 g, 15,45 mmol) e ácido 4-metilbenzenossulfônico (400 mg, 2,33 mmol) a uma solução de 3-(difluorometil)-1H-pirazol-4-carboxilato de etila (2,3 g, 12,10 mmol) em THF (50 mL) e a mistura reacional foi agitada durante a noite à ta. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo, o resíduo diluído com NaHCO3 (aq, 50 mL) e de seguida extraído com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (1,5^5% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto do subtítulo (5 g, impuro) como um óleo marrom. Etapa 2 - Ácido 3-(difluorometil)-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol- 4-carboxílico
[00250] Adicionou-se uma solução de hidróxido de sódio (220 mg, 5,50 mmol) em água (2 mL) a uma solução de 3-(difluorometil)-1- (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1 H-pirazol-4-carboxilato de etila ...(300 mg, 1,09 mmol) em EtOH (5 mL), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante 5 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo, o resíduo diluído com água (3 mL), e o valor do pH da solução ajustado a ~3-4 com HCl (2M. aq). O precipitado foi coletado por filtração e o sólido seco em um forno sob vácuo para dar o composto do subtítulo (0,15 g, 56%) como um sólido branco. Etapa 3 - 3-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1 H-pirazol-4- il]carbamato de benzila
[00251] Adicionou-se DPPA (5,4 g, 19,62 mmol) e Et3N (3,2 g, 31,62 mmol) a ácido 3-(difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-4-carboxílico (4 g, 16,25 mmol) dissolvido em uma mistura de álcool benzílico e tolueno (60 mL, 5:1) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi aquecida ao refluxo durante 2 h. A mistura reacional foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com Na2SO4, e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (5^33% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto do subtítulo (6 g, impuro) como um óleo amarelo. Etapa 4 - 3-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1 H-pirazol-4- amina
[00252] Adicionou-se Pd/C (1 g) a uma solução de [3-(difluorometil)- 1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]carbamato de benzila (4,2 g, 11,95 mmol) em EtOH (50 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite sob atmosfera de H2 (g). Os sólidos foram separados por filtração e o filtrado concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (3^50% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (2,4 g, 92%) como um óleo vermelho.
[00253] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,40 - 1,75 (m, 3H), 1,75 - 2,05 (m, 3H), 3,50 - 3. 70 (m, 1H), 4,30 (s l, 2H), 5,25 (d, 1H), 6,90 (t, 1H), 7. 25 (s, 1H).
[00254] MS m/z 218 [M+H]+ Intermediário 39: (1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N -[5-(difluorometil)-1- (tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0075
[00255] Adicionou-se HATU (2 g, 7,9 mmol) e DIPEA (2,2 g, 17 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (2 g, 6,45mmol) em DMF (40 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 20 min. Adicionou-se 3- (difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-amina (Intermediário 38, 1,68 g, 7,74 mmol) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. Adicionou-se água gelada (100 mL) à mistura reacional e o precipitado foi filtrado e lavado com água. O sólido impuro foi dissolvido em DCM (200 mL), seco com Na2SO4 e concentrado sob vácuo para dar o composto em epígrafe (1,5 g, 45%) como um sólido branco.
[00256] MS m/z 532 [M+Na]+ Intermediário 40: (5-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)carbamato de tert-butila
Figure img0076
[00257] Adicionou-se 1-(2-bromoetil)-4-[(tert-butoxicarbonil)amino]- 1H-pirazol-5-carboxilato de metila (Intermediário 10, 5 g, 14,36 mmol) a uma solução de metilamina (30 mL, 60,00 mmol) em THF (30 mL) a 25 °C, e a mistura reacional foi agitada a 70 °C durante 15 h. A mistura reacional foi filtrada através de uma camada de Celite e o filtrado concentrado sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (0%^1% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (3,20 g, 84%) como um sólido branco.
[00258] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,46 (s, 9H), 2,98 (s, 3H), 3,75 (t, 2H), 4,30 (t, 2H), 7,75 (s, 1H), 8,01 (s, 1H)
[00259] MS m/z 267 [M+H]+ Intermediário 41: Cloridrato de 3-amino-5-metil-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-4(5 H)-ona
Figure img0077
[00260] Borbulhou-se HCl gasoso em uma solução de (5-metil-4- oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)carbamato de tert- butila (Intermediário 40, 3,1 g, 11,64 mmol) em EtOAc (100 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com EtOAc (50 mL) e seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (2,2 g, 93%) como um sólido branco.
[00261] MS m/z 167 [M+H]+ Intermediário 42: (1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-metil-4-oxo-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0078
[00262] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 14,58 g, 22,92 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (1,78 g, 5,73 mmol), cloridrato de 3-amino-5-metil- 6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona (Intermediário 41, 1 g, 6,02 mmol) e Et3N (3,20 mL, 22,92 mmol) em acetato de butila (1 mL) a 25 °C, e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante 15 h. O solvente foi removido sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (0%^5% MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (0,69 g, 26%) como um sólido branco.
[00263] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,55-1,10 (m, 4H), 1,83 1,70 (m, 2H), 2,10-1,88 (m, 2H), 2,98 (t, 1H), 3,01 (s, 3H), 3,70 (t, 1H), 3,78 (t, 2H), 4,30 (t, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,81 (s, 1H), 7,92 (d, 2H), 9,20 (s, 1H)
[00264] MS m/z 459 [M+H]+ Intermediário 43: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-ciano-1- metil-1 H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0079
[00265] Adicionou-se ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanicarboxílico (2,0 g, 6,4 mol) a uma mistura de 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-carbonitrila (2,0 g, 6,4 mol), T3P (50% em EtOAc, 2,0 g, 9,4 mol) e DMAP (1,8 g, 1,5 mol) em DCE (10 mL), e a mistura reacional foi agitada em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com DCM e a camada orgânica lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel (17% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (0,4 g, 17%) como um sólido branco.
[00266] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,39 - 1,49 (m, 3H), 1,69 - 1,76 (m, 1H), 1,85 - 1,94 (m, 2H), 2,04 - 2,10 (m, 2H), 2,83 - 2,90 (m, 1H), 3,64 - 3,71 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 7,56 (s, 1H), 7,59 (d, J =8,4 Hz, 2H), 7,83 (d, J =8,4 Hz, 2H), 7,89 (s, 2H)
[00267] MS m/z 415,1 [M+H]+ Intermediário 44: 1-Etil-4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro—2 H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol- 5-carboxamida
Figure img0080
[00268] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 293 μL, 0,98 mmol) e Et3N (422 μL, 3,03 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-{4-[3- metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexanocarboxílico (Intermediário 8, 300 mg, 0,76 mmol) e 4-amino-1- etil-1H-pirazol-5-carboxamida (152 mg, 0,98 mmol) em EtOAc (2,3 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um recipiente selado a 80 °C durante 1,5 h. Adicionou-se 4-amino-1-etil-1H-pirazol-5- carboxamida (152 mg, 0,98 mmol), Et3N (422 μL, 3,03 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 293 μL, 0,98 mmol) à mistura reacional, e esta foi aquecida a 80 °C durante 1 h e de seguida agitada à ta durante a noite. A mistura reacional foi purificada por cromatografia rápida usando EtOAc como fase móvel para dar o composto em epígrafe (150 mg, 37%).
[00269] MS m/z 531,3 [M-H]- Intermediário 45:4-({[(1 R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxilato de metila
Figure img0081
[00270] Adicionou-se Et3N (1,8 mL, 12,99 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 4 mL, 6,72 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (1 g, 3,21 mmol) e 4-amino-1- metil-1H-pirazol-5-carboxilato de metila (1 g, 6,45 mmol) em EtOAc (15 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1h e de seguida aquecida a 73-77 °C durante 2h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (100 mL) e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat, aq), seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (30%^100% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (1,22 g, 85%) como um sólido branco.
[00271] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,25 - 1,40 (m, 1H), 1,43 (dqt, 2H), 1,71 (qd, 1H), 1,84 - 1,95 (m, 2H), 1,99 - 2,08 (m, 1H), 2,11 (dd, 1H), 2,92 (ddd, 1H), 3,67 (ddd, 1H), 4,03 (s, 3H), 4,07 (s, 3H), 7,56 - 7,63 (m, 2H), 7,8 - 7,87 (m, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,88 (s, 1H).
[00272] MS m/z 448 [M+H]+ Intermediário 46: 1-Metil-4-({[(1 R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol- 5-carboxilato de metila
Figure img0082
[00273] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (1,44 g, 10,44 mmol) em água (15 mL) seguida de Pd(dtbpf)Cl2 (168 mg, 0,26 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)- 1-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de metila (Intermediário 45, 1,17 g, 2,61 mmol) e 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 1,91 g, 6,52 mmol) em dioxano (15 mL) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 1h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (200 mL) e a fase orgânica lavada com solução saturada de cloreto de sódio (sat.), seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (20%^100% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (0,85 g, 61%).
[00274] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,23 - 1,6 (m, 6H), 1,69 (tdd, 3H), 1,8 - 1,93 (m, 2H), 2,08 (dd, 2H), 2,39 (d, 1H), 2,52 (tdt, 1H), 2,87 - 3,01 (m, 1H), 3,55 (qd, 1H), 3,72 (ddd, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,99 - 4,04 (m, 3H), 5,06 (dt, 1H), 6,12 (s, 1H), 7,54 (d, 2H), 8,02 (d, 2H), 8,09 (d, 1H), 8,88 (s, 1H).
[00275] MS m/z 534,2 [M+H]+ Intermediário 47: N,1-Dimetil-4-({[(1 R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro- 2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H- pirazol-5-carboxamida
Figure img0083
Etapa 1 - Ácido 1-metil-4-({[(1 R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro—2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol- 5-carboxílico
[00276] Adicionou-se gota-a-gota LiOH (1M em H2O, 3 mL, 3,00 mmol) durante 10 min a uma solução de 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3- metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexil]carbonil}amino)-1H-pirazol-5-carboxilato de metila (Intermediário 46, 0,78 g, 1,46 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (3 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 50 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, agitada à ta durante 5 min e de seguida concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (0,75 g, 99%).
[00277] MS m/z 519,0 [M+H]+ Etapa 2 - N ,1-Dimetil-4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran- 2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol-5- carboxamida
[00278] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 344 μL, 0,58 mmol), cloridrato de metilamina (22 μL, 0,38 mmol) e DIPEA (134 μL, 0,77 mmol) a uma suspensão de ácido 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1- (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]-carbonil}- amino)-1H-pirazol-5-carboxílico (0,1 g, 0,19 mmol) em EtOAc (0,8 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1h e de seguida aquecida em um reator de micro-ondas a 60 °C durante 1 h. Adicionou-se cloridrato de metilamina (22 μL, 0,38 mmol) e DIPEA (134 μL, 0,77 mmol) à mistura reacional e esta foi aquecida em um reator de microondas a 60 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e NaHCO3 (sat., aq), e a fase orgânica seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (100% de EtOAc) para dar o composto em epígrafe (0,067 g, 65%).
[00279] MS m/z 531,4 [M-H]- Intermediário 48: 5-Metil-4-({[(1 R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol- 3-carboxamida
Figure img0084
[00280] Adicionou-se DIPEA (352 μL, 2,02 mmol) e HATU (230 mg, 0,61 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 8, 200 mg, 0,50 mmol) em DMF (4 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 5 min. Adicionou-se 4-amino-5-metil- 1H-pirazol-3-carboxamida (106 mg, 0,76 mmol) à mistura reacional e esta foi agitada à ta durante 15h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat, aq), NH4Cl (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (0%^10% de EtOH em EtOAc), as frações contendo composto coletadas, concentradas sob vácuo, e o resíduo dissolvido em DCM e concentrado sob vácuo para dar o composto em epígrafe (190 mg, 73%) como um sólido bege.
[00281] MS m/z 417,1 [M-H]- Intermediário 49: 1 4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[1-(Tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol-5- carboxamida
Figure img0085
[00282] Adicionou-se uma solução de ácido (1R,2R)-2-{4-[1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 69, 300 mg, 0,78 mmol) em DMF (3,0 mL) a uma solução de cloridrato de 4-amino-1H-pirazol-5-carboxamida (255 mg, 1,57 mmol) e Et3N (381 μL, 2,75 mmol) em EtOAc (3 mL). Adicionou- se T3P (50% em EtOAc, 0,70 mL, 1,18 mmol), a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 1h e de seguida agitada à ta durante a noite. A mistura reacional foi diluída com NaHCO3 (8%, aq) e EtOAc. A camada aquosa foi extraída com EtOAc, as camadas orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 10-80% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2), para dar o composto em epígrafe (97 mg, 25%).
[00283] MS m/z 489,3 [M-H]- Intermediário 50: (1R ,2 R)-N-(4-Oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[ 1,5- a ]pirazin-3-il)-2-{4-[1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5- il]benzoil}ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0086
[00284] Adicionou-se uma solução de 1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (0,511 g, 1,84 mmol) em dioxano (5 mL) a (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-oxo- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 13, 0,545 g, 1,22 mmol). Adicionou-se uma solução de K2CO3 (0,677 g, 4,90 mmol) em água (5 mL) à mistura reacional e esta foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes. A mistura reacional foi aquecida a 50 °C, se adicionou Pd(dtbpf)Cl2 (0,040 g, 0,06 mmol), e a mistura reacional foi aquecida a 50 °C durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (5 mL) e a fase orgânica lavada com água. A fase aquosa foi extraída com EtOAc, de seguida as fases orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (EtOAc) para dar o composto em epígrafe (0,460 g, 72,8%) como um óleo.
[00285] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,31 - 1,53 (m, 3H), 1,63 - 1,99 (m, 6H), 2,06 - 2,25 (m, 3H), 2,47 - 2,71 (m, 1H), 2,93 - 3,08 (m, 1H), 3,63 (q, 1H), 3,80 (d, 3H), 4,13 (q, 2H), 4,31 (t, 2H), 5,21 (d, 1H), 5,91 (s, 1H), 6,33 - 6,46 (m, 1H), 7,62 (dd, 3H), 8,10 (d, 2H), 8,16 (s, 1H), 8,84 (s, 1H).
[00286] MS m/z 515,6 [M-H]- Intermediário 51: 1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-carboxilato de etila
Figure img0087
[00287] Adicionou-se gota-a-gota com agitação a 0-2 °C durante 20 min uma solução de 5-(clorossulfonil)-1-metil-1H-pirazol-4-carboxilato de etila (10,0 g, 39,6 mmol) em THF (20 mL) a uma mistura de metilamina (33% aq, 20,4 g, 217 mmol) e K2CO3 (5,4 g, 38,79 mmol). A mistura reacional foi agitada a 0-2 °C em um banho de água/gelo durante 40 min. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi extraído com éter tert-butilmetílico e a camada orgânica seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (9,5 g, 97%) como um óleo amarelo.
[00288] 1H RMN (300MHz, CDCl3) δ 1,35 (t, 3H), 2,67 (d, 3H), 4,20 (s, 3H), 4,32 (q, 2H), 6,85-6,74 (m, 1H), 7,92 (s, 1H) Intermediário 52: Ácido 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1 H-pirazol-4- carboxílico
Figure img0088
[00289] Adicionou-se uma solução de NaOH (3,9 g, 97,5 mmol) em água (20 mL) a uma solução de 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4- carboxilato de etila (Intermediário 51, 9,5 g, 38,4 mmol) em MeOH (10 mL), e a mistura reacional foi agitada a 40 °C durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e a mistura resultante lavada duas vezes com éter tert-butilmetílico. O valor do pH da solução foi ajustado a 2-3 com HCl (6 M, aq). Os sólidos foram coletados por filtração para dar o composto em epígrafe (5,7 g, 68%) como um sólido esbranquiçado.
[00290] 1H RMN (300MHz, DMSO-d6) δ 2,53 (s, 3H), 4,08 (s, 3H), 7,50 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 13,20 (s, 1H). Intermediário 53: 1,1-Dióxido de 2,7-dimetil-4,7-di-hidropirazolo[4,3- e ][1,2,4]tiadiazin-3(2 H)-ona
Figure img0089
[00291] Adicionou-se DIPEA (3,67 g, 28,40 mmol) a uma solução de ácido 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-carboxílico (Intermediário 52, 4,8 g, 21,90 mmol) em tolueno (25 mL). Adicionou- se gota-a-gota DPPA (7,83 g, 28,45 mmol) à mistura reacional, com agitação a 80-85 °C durante 20 min, e a mistura reacional foi agitada a 85 °C durante 3 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (50% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (3,2 g, 68%) como um sólido esbranquiçado.
[00292] 1H RMN (400MHz, CDCl3,) δ 3,40 (s, 3H), 4,12 (s, 3H), 7,34 (s, 1H), 9,28 (s, 1H). Intermediário 54: Cloridrato de 4-amino-N,1-dimetil-1 H-pirazol-5- sulfonamida
Figure img0090
[00293] Adicionou-se HCl (6M, aq, 43 mL) a uma solução de 1,1- dióxido de 2,7-dimetil-4,7-di-hidropirazolo[4,3-e][1,2,4]tiadiazin-3(2H)- ona (Intermediario 53, 3,5 g, 16,19 mmol) em 1,4-dioxano (2 mL) e a mistura reacional foi agitada a 95 °C durante 3 dias. Deixou-se a mistura reacional alcançar a ta e se ajustou o valor do pH da solução a 9-10 com K2CO3 (sat., aq). A solução resultante foi extraída com EtOAc e a camada orgânica seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia com uma coluna de sílica-gel (50% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (2,8 g, 91%) como um sólido amarelo claro.
[00294] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 2,43 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 4,66 (s, 2H), 7,05 (s, 1H), 7,67 (s, 1H)
[00295] MS m/z 191 [M+H]+ Intermediário 55:(1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1 -metil-5- (metilsulfamoil)-l H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0091
[00296] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 2,73 g, 8,58 mmol) e Et3N (870 mg, 8,60 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-[(4- bromofenil)carbonil]ciclo-hexano-1-carboxílico (533 mg, 1,71 mmol) e cloridrato de 4-amino-N,1-dimetil-1H-pirazol-5-sulfonamida (Intermediário 54, 327 mg, 1,72 mmol) em EtOAc (10 mL), e a mistura reacional foi agitada a 70 °C durante 4 h. A mistura reacional foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas lavadas com hidróxido de sódio (2N, aq), solução saturada de cloreto de sódio, secas com Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (17%^33% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (350 mg, 42%) como um sólido branco.
[00297] MS m/z 483 [M+H]+ Intermediário 56: (1R ,2 R)-N-[1 -Metil-5-(metilsulfamoil)-1 H-pirazol-4-il]- 2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexano-carboxamida
Figure img0092
[00298] Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (33,8 mg, 0,05 mmol) e K2CO3 (171 mg, 1,24 mmol) a uma mistura de (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 55, 200 mg, 0,41 mmol) e 3-metil- 1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioxolan-2-il)-1H- pirazol (Intermediário 3, 218 mg, 1,04 mmol) em dioxano/H2O (1:1, 5 mL), e a mistura reacional foi agitada a 50 °C durante 30 min. A mistura reacional foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, secas com Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (11%^50% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (240 mg, 97%) como um sólido vermelho.
[00299] MS m/z 569 [M+H]+ Intermediário 57: 5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1 H-pirazol-4-carboxilato de etila
Figure img0093
[00300] Adicionou-se 5-(clorossulfonil)-1-metil-1H-pirazol-4- carboxilato de etila (10 g, 39,58 mmol) a uma solução de dimetilamina (2 M em THF, 45 mL, 89,45 mmol) em THF (30 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (100 mL) e a fase orgânica lavada com água, solução saturada de cloreto de sódio, e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (8 g, 77%) como um óleo vermelho.
[00301] MS m/z 262 [M+H]+ Intermediário 58: Ácido 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1 H-pirazol-4- carboxílico
Figure img0094
[00302] Adicionou-se uma solução de NaOH (3,8 g, 95,01 mmol) em água (50 mL) a uma solução de 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H- pirazol-4-carboxilato de etila (Intermediário 57, 5 g, 19,14 mmol) em MeOH (100 mL), e a mistura reacional foi agitada a 40 °C durante 2 h. O solvente foi removido sob vácuo e o valor do pH da solução ajustado a 2-3 com HCl (1M, aq). O sólido foi coletado por filtração e o filtrado extraído com EtOAc (2x20 mL). A camada orgânica foi concentrada e os sólidos combinados e secos sob vácuo para dar o composto em epígrafe (3,8 g, 85%) como um sólido vermelho.
[00303] MS m/z 234 [M+H]+ Intermediário 59: [5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]carbamato de tert-butila
Figure img0095
[00304] Adicionou-se DPPA (6,1 g, 22,3 mmol) e DIPEA (3,8 g, 29,40 mmol) a uma solução de ácido 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H- pirazol-4-carboxílico (Intermediário 58, 3,7 g, 15,86 mmol) em tert- BuOH (50 mL), e a mistura reacional foi agitada a 85 °C durante 15 h. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo dissolvido em EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, concentrada sob vácuo, e o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (33% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (2,5 g, 52%) como um sólido amarelo claro.
[00305] MS m/z 305 [M+H]+ Intermediário 60: Cloridrato de 4-amino-N,N,1-trimetil-1 H-pirazol-5- sulfonamida
Figure img0096
[00306] Tratou-se uma solução de [5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H- pirazol-4-il]carbamato de tert-butila (Intermediário 59, 500 mg, 1,64 mmol) em EtOAc (20 mL) com HCl (g) e se agitou a mistura reacional à ta durante 1 h. O solvente foi removido sob vácuo para dar o composto em epígrafe (390 mg, 99%) como um sólido rosa.
[00307] MS m/z 205 [M+H]+ Intermediário 61: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[5-(dimetilsulfamoil)- 1H-pirazol-4-il]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0097
[00308] Adicionou-se HATU (844 mg, 2,22 mmol) e DIPEA (573 mg, 4,43 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-[(4- bromofenil)carbonil]ciclo-hexano-1-carboxílico (358 mg, 1,15 mmol) e cloridrato de 4-amino-N,N,1-trimetil-1H-pirazol-5-sulfonamida (Intermediário 60, 280 mg, 1,16 mmol) em DMF (8 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 4 h. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo purificado por TLC preparativo (4,7% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (130 mg, 23%) como um sólido amarelo.
[00309] MS m/z 497 [M+H]+ Intermediário 62: 4-Amino-3-metil-1 H-pirazol-5-carboxilato de etila
Figure img0098
[00310] Adicionou-se Pd-C (500 mg, 4,70 mmol) a uma solução de 3-metil-4-nitro-1H-pirazol-5-carboxilato de etila (4,75 g, 23,85 mmol) em MeOH (50 mL) e a mistura reacional foi agitada sob atmosfera de hidrogênio à ta durante 20 h. O sólido foi separado por filtração e o filtrado concentrado sob vácuo para dar o composto em epígrafe (3,8 g, 94%).
[00311] MSm/z 170 [M+H]+ Intermediário 63: 4-[( tert-Butoxicarbonil)amino]-3-metil-1 H-pirazol-5- carboxilato de etila
Figure img0099
[00312] Adicionou-se Boc2O (2,13 mL, 9,16 mmol) a uma solução de 4-amino-3-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de etila (Intermediário 62, 1,5g, 8,87 mmol) e piridina (1,42 mL, 17,57 mmol) em MeOH (40 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 4 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (2,1 g, 88%)
[00313] MS m/z 270 [M+H]+ Intermediário 64: 1 -(2-Bromoetil)-4-[( tert-butoxicarbonil)amino]-3-metil- 1H-pirazol-5-carboxilato de etila
Figure img0100
[00314] Adicionou-se 1,2-dibromoetano (1,6 g, 8,52 mmol) a uma solução de 4-[(tert-butoxicarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5- carboxilato de etila (Intermediário 63, 2,1g, 7,80 mmol) e K2CO3 (2,1 g, 15,19 mmol) em DMF (80 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 3 h. Os sólidos foram separados por filtração e o filtrado concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (20% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (1 g, 34%).
[00315] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,30 (t, 3H), 1,43 (s, 9H), 2,08 (s, 3H), 3,78 (t, 2H), 4,25 (q, 2H), 4,73 (t, 2H)
[00316] MS m/z 376 [M+H]+ Intermediário 65: (2-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)carbamato de tert-butila
Figure img0101
[00317] Suspendeu-se 1-(2-bromoetil)-4-[(tert butoxicarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de etila (Intermediário 64, 1 g, 2,66 mmol) em MeCN (9 mL) e amônia (25%, aq, 3 mL, 77,04 mmol) em um reator de pressão e o reator foi aquecido em um banho de óleo a 60 °C durante 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e a mistura resultante lavada com uma mistura de EtOAc/Éter de petróleo (1:2). Os sólidos foram coletados por filtração e secos sob vácuo para dar o composto em epígrafe (650 mg, 92%) como um sólido esbranquiçado.
[00318] MS m/z 267 [M+H]+ Intermediário 66: Cloridrato de 3-amino-2-metil-6,7-Di- hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-4(5 H)-ona
Figure img0102
[00319] Borbulhou-se HCl (gasoso) em uma solução de (2-metil-4- oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)carbamato de tert- butila (Intermediário 65, 650 mg, 2,44 mmol) em MeOH (15 mL) à ta durante 20 min. A mistura resultante foi concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (460 mg, 93%) como um sólido branco.
[00320] 1H RMN (300 MHz DMSO-d6) δ 2,23 (s, 3H), 3,63-3,58 (m, 2H), 4,23-4,19 (t, 2H), 7,49-7,15 (m, 2H), 8,46 (s, 1H), 9,78-8,78 (l, 1H)
[00321] MS m/z 167 [M+H]+ Intermediário 67: (1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2-metil-4-oxo-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0103
[00322] Adicionou-se cloridrato de 3-amino-2-metil-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-ona (Intermediário 66, 460 mg, 2,27 mmol) e DIPEA (1,18 g, 9,13 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R)-2- (4-bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (708 mg, 2,28 mmol) e HATU (1,73 g, 4,55 mmol) em DMF (20 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 50 °C durante 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo dissolvido em EtOAc. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (4,7% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (630 mg, 60%) como um sólido amarelo claro.
[00323] MS m/z 441 [M+H]+ Intermediário 68: (1R ,2 R)-N-[5-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2- il)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida
Figure img0104
[00324] Adicionou-se ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (169 mg, 1,51 mmol), K2CO3 (568 mg, 4,11 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (112 mg, 0,14 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5- (difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 39, 700 mg, 1,37 mmol) em uma mistura de dioxano e água (4:1, 15 mL) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 50 °C durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com água, solução saturada de cloreto de sódio (sat.), seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (33% de EtOAc em Éter de petróleo) para dar o composto em epígrafe (520 mg, 76%) como um óleo marrom.
[00325] MS m/z 498 [M+H]+ Intermediário 69: Ácido (1R,2R)-2-{4-[1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1 H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexanicarboxílico
Figure img0105
[00326] Adicionou-se K2CO3 (3,94 g, 28,5 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (232 mg, 0,36 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (2,22 g, 7,12 mmol) e 1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H- pirazol (2,97 g, 10,68 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL) e água (20 mL). A mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes, e então aquecida a 80 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com KHSO4 (1M, aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (x2) e as fases orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C8 Kromasil (10 μm 250x50 ID mm), usando um gradiente de 30-90% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/AcOH (95/5/0,2), para dar o composto em epígrafe (2,72 g, 100%) como um sólido marrom.
[00327] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,23 - 1,34 (m, 1H), 1,36 - 1,47 (m, 2H), 1,47 - 1,66 (m, 3H), 1,71 - 1,83 (m, 1H), 1,83 - 1,94 (m, 3H), 2,05 - 2,12 (m, 2H), 2,24 - 2,31 (m, 1H), 2,54 - 2,65 (m, 1H), 2,95 - 3,02 (m, 1H), 3,54 - 3,68 (m, 2H), 4,12 - 4,18 (m, 1H), 5,22 (dd, 1H), 6,38 - 6,41 (m, 1H), 7,61 - 7,67 (m, 3H), 8,03 - 8,09 (m, 2H).MS m/z 381,3 [M-H]- Intermediário 70: 4-(4-Bromo-2-clorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de etila
Figure img0106
[00328] Adicionou-se n-butil-lítio (1,6M em hexano, 44 mL, 70,4 mmol) a uma solução de DIPEA (10 mL, 69,2 mmol) em THF (100 mL) sob atmosfera de nitrogênio a -78 °C durante 30 min. Adicionou-se gota-a-gota prop-2-inoato de etila (6,5 mL, 64,3 mmol) à mistura reacional seguido da adição de uma solução de 4-bromo-2- clorobenzaldeído (14,11 g, 64,3 mmol) em THF (25 mL) e a mistura reacional foi agitada a -78 °C durante a noite. Adicionou-se AcOH (12 mL) em THF (50 mL) à mistura reacional e esta foi de seguida vertida para dentro de água (800 mL). A mistura reacional foi extraída quatro vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (20%^50% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (11,0 g, 54%).
[00329] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,31 (t, 3H), 2,70 (d, 1H), 4,24 (q, 2H), 5,86 (d, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,55 - 7,61 (m, 2H)
[00330] MS m/z 316,9 [M-H]- Intermediário 71: (2E)-4-(4-Bromo-2-clorofenil)-4-oxobut-2-enoato de etila
Figure img0107
[00331] Adicionou-se Et3N (5 mL, 36,07 mmol) a uma solução de 4- (4-bromo-2-clorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de etila (Intermediário 70, 11 g, 34,6 mmol) em 1,4-dioxano (50 mL), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante 4 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo, o resíduo redissolvido em EtOAc, e a fase orgânica lavada com HCl (1M, aq). O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (0%^25% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (7,8 g, 71%).
[00332] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,33 (t, 3H), 4,28 (q, 2H), 6,66 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,46 - 7,54 (m, 2H), 7,64 (d, 1H). Intermediário 72: (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-clorobenzoil)ciclo- hex-3-eno-1-carboxilato de etila
Figure img0108
[00333] Adicionou-se buta-1,3-dieno (14 mL, 165,65 mmol), condensado a -78 °C, a uma mistura de (2E)-4-(4-bromo-2-clorofenil)- 4-oxobut-2-enoato de etila (Intermediário 71, 4,04 g, 12,72 mmol) e hidroquinona (0,011 g, 0,10 mmol) em tolueno (15 mL) a -78 °C, e o recipiente reacional foi selado e agitado à ta durante 1 h e de seguida aquecido a 210 °C durante 15 h. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (5%^25% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (4,47 g, 95%).
[00334] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,24 (t, 3H), 2,08 (dddd, 1H), 2,21 (dddd, 1H), 2,26 - 2,39 (m, 1H), 2,52 (dd, 1H), 3,02 (td, 1H), 3,63 (td, 1H), 4,12 (qd, 2H), 5,63 - 5,77 (m, 2H), 7,47 (dd, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,60 (d, 1H). Intermediário 73: 4-({[(1 R,6R e 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-clorobenzoil)ciclo- hex-3-en-1-il]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0109
Etapa 1 Ácido (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2-clorobenzoil)ciclo-hex-3- eno-1-carboxílico
[00335] Adicionou-se água (20 mL) e LiOH (1,0 g, 41,76 mmol) a uma solução de (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2-clorobenzoil)ciclo-hex- 3-eno-1-carboxilato de etila (Intermediário 72, 4,43 g, 11,92 mmol) em THF (40 mL) e MeOH (40 mL), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo acidificado pela adição de HCl (2M, aq). A fase aquosa foi extraída três vezes com éter dietílico, e as fases orgânicas combinadas secas com MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto do subtítulo (3,69 g, 90%). Etapa 2j 4-({K1R16R e^S16S)-6-(4-Bromo-2-cIorobenzoiI)cicIo-hex-3∑ en-1-il]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
[00336] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 640 mg, 2,01 mmol) e DMAP (300 mg, 2,46 mmol) a uma solução de ácido (1R,6R e 1S,6S)- 6-(4-bromo-2-clorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico (Intermediário 73 Etapa 1, 571 mg, 1,16 mmol) e 4-amino-1-metil-1H- pirazol-5-carboxamida (280 mg, 2,0 mmol) em THF (12 mL) e DCM (1 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 15 h. Adicionou-se água (5 mL) e a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com água e a fase aquosa extraída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DCM, seco usando um separador de fases, e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (20% de acetona em EtOAc) para dar o composto em epígrafe (470 mg, 87%).
[00337] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 2,04 - 2,15 (m, 1H), 2,31 - 2,56 (m, 3H), 2,98 (td, 1H), 3,74 (td, 1H), 4,09 (s, 3H), 5,76 (d, 2H), 6,17 (s, 2H), 7,44 - 7,49 (m, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 8,09 (s, 1H).
[00338] MS m/z 465,1 [M-H]- Intermediário 74: 4-[({(1 R,6R e 1S,6S)-6-[2-CIoro-4-(1 H-pirazoI-5- iI)benzoiI]-cicIo-hex-3-en-1-iI}carboniI)amino]-1-metiI-1 H-pirazoI-5- carboxamida
Figure img0110
[00339] Suspendeu-se 4-({[(1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2- clorobenzoil)ciclo-hex-3-en-1-il]carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 73, 230 mg, 0,49 mmol), ácido 1H- pirazol-5-ilborônico (112 mg, 1 mmol), K2CO3 (140 mg, 1,01 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (20 mg, 0,03 mmol) em uma mistura de dioxano (8 mL) e água (2 mL). O recipiente reacional foi evacuado e purgado com nitrogênio (g), e de seguida aquecido a 90 °C durante 1,5 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o resíduo diluído com EtOH (50 mL). Adicionou-se NaHCO3 (sat., aq) até pH 8 e a mistura reacional foi concentrada até à secura sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (28 mg, 13%).
[00340] MS m/z 451,1 [M-H]- Intermediário 75: 4-[({(1 R,6R e 1S,2S)-6-[2-Cloro-4-(3-metil-1 H-pirazol- 5-il)benzoil]-ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
Figure img0111
Etapa 1: 4-({[(1 R,6R e 1S,6S)-6-{2-Cloro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-en-1-il]carbonil}amino)-1- metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
[00341] Suspendeu-se 4-({[(1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2- clorobenzoil)ciclo-hex-3-en-1-il]carbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 73, 230 mg, 0,49 mmol), 3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H- pirazol (Intermediário 3, 300 mg, 1,03 mmol), K2CO3 (150 mg, 1,09 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (20 mg, 0,03 mmol) em uma mistura de dioxano (8 mL) e água (2 mL). O recipiente reacional foi evacuado, purgado com nitrogênio (g) e aquecido a 90 °C durante 30 min. A mistura reacional foi usada diretamente após resfriamento na etapa seguinte. Etapa 2: 4-[({(1 R ,6 R e 1S ,2 S )-6-[2-Cloro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
[00342] Adicionou-se HCl (4 M em dioxano, 0,5 mL, 2,00 mmol) à mistura reacional do Intermediário 75 Etapa 1 e a mistura reacional foi agitada à ta durante 10 min. A mistura reacional foi concentrada a pressão reduzida, se adicionou NaHCO3 (sat., aq) ao resíduo até pH 8, e a fase aquosa foi extraída duas vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas até à secura a pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (EtOAc) e de seguida por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (100 mg, 59%).
[00343] MS m/z 465,2 [M-H]- Intermediário 76: 4-(4-Bromo-2-fluorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de metila
Figure img0112
[00344] Adicionou-se n-butil-lítio (1,6 M em Hexano, 45 mL, 72,0 mmol) a uma solução de DIPEA (10 mL, 69,2 mmol) em THF (100 mL) sob atmosfera de nitrogênio a -78 °C e a mistura reacional foi agitada a -78 °C durante 30 min. Adicionou-se gota-a-gota prop-2-inoato de metila (5,7 mL, 64,5 mmol), de seguida se adicionou uma solução de 4-bromo-2-fluorobenzaldeído (13,1 g, 64,5 mmol) em THF (20 mL) e a mistura reacional foi agitada a -78 °C durante a noite. Adicionou-se AcOH (10 mL) à mistura reacional e esta foi vertida para dentro de água. A mistura reacional foi extraída com DCM e as fases orgânicas combinadas secas com MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (20%^50% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (12,9 g, 70%).
[00345] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 2,62 (s, 1H), 3,79 (s, 3H), 5,78 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,49 (t, 1H).
[00346] MS m/z 285,0 [M-H]- Intermediário 77: (2 E)-4-(4-Bromo-2-fluorofenil)-4-oxobut-2-enoato de metila
Figure img0113
[00347] Adicionou-se Et3N (12,5 mL, 90,2 mmol) a uma solução de 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de metila (Intermediário 76, 12,9 g, 44,9 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite e de seguida aquecida a 60 °C durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (0%^25% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (9,7 g, 75%).
[00348] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,84 (s, 3H), 6,85 (dd, 1H), 7,31 - 7,49 (m, 2H), 7,65 - 7,8 (m, 2H). Intermediário 78: (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)ciclo- hex-3-eno-1-carboxilato de metila
Figure img0114
[00349] Adicionou-se buta-1,3-dieno (20 mL, 236,6 mmol), condensado a -78 °C, a uma mistura de (2E)-4-(4-bromo-2-fluorofenil)- 4-oxobut-2-enoato de metila (Intermediário 77, 5,5 g, 19,2 mmol) e hidroquinona (0,020 g, 0,18 mmol) em tolueno (15 mL) a -78 °C, e o recipiente reacional foi selado e aquecido a 210 °C durante 14 h. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (5%^30% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (5,69 g, 87%).
[00350] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,95 - 2,14 (m, 1H), 2,14 - 2,27 (m, 1H), 2,49 (ddd, 2H), 3,07 (tdd, 1H), 3,56 - 3,77 (m, 4H), 5,73 (s, 2H), 7,29 - 7,46 (m, 2H), 7,72 (t, 1H). Intermediário 79: Ácido (1R ,6 R e 1S, 6 S )-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico
Figure img0115
[00351] Adicionou-se uma solução de LiOH (0,40 g, 16,7 mmol) em água (50 mL) a uma solução de (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxilato de metila (Intermediário 78, 5,6 g, 16,41 mmol) em THF (50 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite. Adicionou-se LiOH (0,33 g, 13,8 mmol) à mistura reacional e esta foi agitada à ta durante 4 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo impuro foi acidificado usando HCl (2M, aq) e a fase aquosa extraída três vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com MgSO4, filtradas e ligeiramente concentradas sob vácuo. Adicionou-se heptano, e os sólidos formados foram separados por filtração e secos para dar o composto em epígrafe (4,19 g, 78%).
[00352] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,92 - 2,08 (m, 1H), 2,12 - 2,36 (m, 1H), 2,33 - 2,6 (m, 2H), 3,06 (td, 1H), 3,64 (td, 1H), 5,72 (s, 2H), 7,3 - 7,47 (m, 2H), 7,70 (t, 1H). Intermediário 80: Ácido (1R ,6 R ou 1S, 6 S )-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico
Figure img0116
[00353] Os enantiômeros do ácido (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico (Intermediário 79, 8,0 g, 24,5 mmol) foram separados por cromatografia SFC quiral em uma coluna C2 Lux (5μm, 250x30mm). Injetou-se 500 mg (200 mg/mL em MeOH), se eluiu com MeOH a 20% em CO2 (g) (175 bar) a um caudal de 100 mL/min e detectou a 265 nm. O primeiro composto eluído foi coletado e evaporado para dar o composto em epígrafe (3,95 g, 49%, 99,9% de ee).
[00354] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,92 - 2,06 (m, 1H), 2,19 - 2,31 (m, 1H), 2,39 - 2,6 (m, 2H), 2,96 - 3,12 (m, 1H), 3,64 (td, 1H), 5,72 (s, 2H), 7,29 - 7,44 (m, 2H), 7,71 (t, 1H).
[00355] Rotação óptica: -29,9° (1g/100mL em MeCN, 589 nm, 20 °C). Intermediário 81: 4-({[(1 R ,6 R ou 1S ,6 S )-6-(4-Bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-en-1-il]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
Figure img0117
[00356] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 1 mL, 1,68 mmol) a uma solução de ácido (1R,6R ou 1S,6S)-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico (Intermediário 80, 250 mg, 0,76 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (215 mg, 1,53 mmol) e Et3N (411 μL, 2,96 mmol) em EtOAc (3,5 mL), a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 80 °C durante 60 min e de seguida agitada à ta durante a noite. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com NaHCO3 (sat. aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 30-85% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (140 mg, 41%).
[00357] MS m/z 451 [M+2]+ Intermediário 82: 4-[({(1 R,6R ou 1S,6S)-6-[2-Fluoro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
Figure img0118
[00358] Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (20 mg, 0,03 mmol) a uma mistura de 4-({[(1R,6R ou 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hex- 3-en-1-il]carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 81, 140 mg, 0,31 mmol), ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (70 mg, 0,63 mmol), K2CO3 (170 mg, 1,23 mmol) em dioxano (2,5 mL) e água (1,2 mL). A mistura reacional foi purgada com nitrogênio (g) e de seguida aquecida em um reator de micro-ondas a 80 °C durante 45 min. Adicionou-se NaHCO3 (sat., aq) à mistura reacional e a mistura foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases, concentrada sob vácuo, e o produto impuro purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 20-65% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (52 mg, 38%).
[00359] MS m/z 435,2 [M-H]- Intermediário 83: Ácido (1R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexano-carboxílico
Figure img0119
[00360] Adicionou-se catalisador de ródio (Rh/C a 5%, 628 mg, 0,31 mmol) a uma solução de ácido (1R,6R ou 1S,6S)-6-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico (Intermediário 80, 10 g, 30,57 mmol) em THF (100 mL) e a mistura reacional foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (2 bar) à ta durante 16 h. O produto impuro foi filtrado através de uma camada de celite e os sólidos enxaguados com THF. O filtrado foi concentrado sob vácuo para dar origem a um óleo que solidificou ao ficar em repouso. O produto sólido foi dissolvido e precipitado de éter metil-tert-butílico e heptano, e seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (9,16 g, 91%).
[00361] 1H RMN (500 MHz, CDCI3, 23°C) δ 0,98 - 1,09 (m), 1,13 - 1,38 (m, 3H), 1,67 - 1,79 (m, 2H), 1,94 (d, 1H), 2,04 - 2,13 (m, 1H), 2,73 (t, 1H), 3,19 - 3,29 (m, 1H), 7,18 - 7,3 (m, 2H), 7,60 (t, 1H). Intermediário 84: 4-({[(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-(4-Bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-3- carboxamida
Figure img0120
[00362] Adicionou-se 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxamida (358 mg, 2,55 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4- bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 83, 560 mg, 1,70 mmol), HATU (647 mg, 1,70 mmol) e DIPEA (593 μL, 3,40 mmol) em DMF (3 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 3 h. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-80% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (640 mg, 83%).
[00363] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,24 (qd, 1H), 1,41 (q, 2H), 1,59 (qd, 1H), 1,84 - 1,92 (m, 2H), 2,07 - 2,2 (m, 2H), 2,81 - 2,99 (m, 1H), 3,47 - 3,62 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 5,43 (s, 1H), 6,64 (s, 1H), 7,3 - 7,42 (m, 2H), 7,74 (t, 1H), 8,03 (s, 1H), 9,53 (s, 1H). Intermediário 85: 4-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[1-(tetra-hidro- 2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1-metil- 1H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0121
[00364] Adicionou-se K2CO3 (262 mg, 1,90 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (27 mg, 0,04 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-(4- bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-3- carboxamida (Intermediário 84, 214 mg, 0,47 mmol) e 1-(tetra-hidro- 2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (198 mg, 0,71 mmol) em dioxano (1,5 mL) e água (1,5 mL). A mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio (g) três vezes, e de seguida aquecida em um reator de micro-ondas a 80 °C durante 60 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaCl (sat., aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (75%^100% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (273 mg).
[00365] MS m/z 521,4 [M-H]- Intermediário 86: 4-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1- metil-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0122
[00366] Adicionou-se K2CO3 (213 mg, 1,54 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (22 mg, 0,03 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-(4- bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-3- carboxamida (Intermediário 84, 174 mg, 0,39 mmol) e 3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H- pirazol (Intermediário 3, 169 mg, 0,58 mmol) em dioxano (1,5 mL) e água (1,5 mL). A mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio (g) três vezes, e de seguida aquecida em um reator de micro-ondas a 80 °C durante 60 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaCl (sat., aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc e as fases orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (75%^100% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (216 mg, 100%).
[00367] MS m/z 535,5 [M-H]- Intermediário 87: 4-(4-Bromo-2-fluorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de etila
Figure img0123
[00368] Adicionou-se n-butil-lítio (1,6 M em hexano, 44 mL, 70,4 mmol) a uma solução de DIPEA (10 mL, 69,2 mmol) em THF (100 mL) sob atmosfera de nitrogênio e a mistura reacional foi agitada a -78 °C durante 30 min. Adicionou-se gota-a-gota prop-2-inoato de etila (6,5 mL, 64,3 mmol) à mistura reacional seguido da adição de uma solução de 4-bromo-2-fluorobenzaldeído (13,1 g, 64,5 mmol) em THF (20 mL). A mistura reacional foi agitada a -78 °C durante a noite. A mistura reacional foi aquecida a 0 °C, e se adicionou AcOH (15 mL) dissolvido em THF (50 mL) seguido de água (800 mL). A mistura reacional foi extraída três vezes com DCM e as fases orgânicas combinadas secas com MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (20%^50% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (14,7 g, 76%).
[00369] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,31 (t, 3H), 2,57 (s l, 1H), 4,25 (q, 2H), 5,78 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,50 (t, 1H). Intermediário 88: (2 E)-4-(4-Bromo-2-fluorofenil)-4-oxobut-2-enoato de etila
Figure img0124
[00370] Adicionou-se Et3N (14 mL, 101 mmol) a uma solução de 4- (4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroxibut-2-inoato de etila (Intermediário 87, 14,6 g, 48,5 mmol) em 1,4-dioxano (40 mL), e a mistura reacional foi agitada a 60 °C durante 6h e de seguida concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e a fase orgânica lavada com HCl (1M, aq) e concentrada sob vácuo. O composto impuro foi purificado por cromatografia rápida (0%^25% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (10,4 g, 71%).
[00371] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,33 (t, 3H), 4,29 (q, 2H), 6,83 (dd, 1H), 7,35 - 7,45 (m, 2H), 7,67 - 7,74 (m, 2H). Intermediário 89: (1R,6R e 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)ciclo- hex-3-eno-1-carboxilato de etila
Figure img0125
[00372] Adicionou-se buta-1,3-dieno (15 mL, 177,5 mmol), condensado a -78 °C, a uma mistura de (2E)-4-(4-bromo-2-fluorofenil)- 4-oxobut-2-enoato de etila (Intermediário 88, 5,59 g, 18,56 mmol) e hidroquinona (0,035 g, 0,32 mmol) em tolueno (15 mL) a -78 °C, e o recipiente reacional foi selado e agitado à ta durante 1 h e de seguida aquecido a 200 °C durante 20 h. O recipiente reacional foi resfriado a - 78 °C e se adicionou buta-1,3-dieno (12 mL, 142 mmol), condensado a -78 °C, à mistura reacional. O recipiente reacional foi selado e aquecido a 200 °C durante a noite. A mistura reacional foi evaporada sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (0%^25% de EtOAc em heptano) para dar o produto em epígrafe (5,7 g, 86%).
[00373] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,19 (t, 3H), 1,89 - 2,13 (m, 1H), 2,14 - 2,26 (m, 1H), 2,37 - 2,66 (m, 2H), 3,06 (tdd, 1H), 3,68 (td, 1H), 4,08 (q, 2H), 5,73 (s, 2H), 7,3 - 7,46 (m, 2H), 7,72 (t, 1H). Intermediário 90: (1R,6R e 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro- 2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-eno-1-carboxilato de etila
Figure img0126
[00374] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (0,553 g, 4,00 mmol) em água desgaseificada (8 mL) a uma mistura de (1R,6R e 1S,6S)-6- (4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hex-3-eno-1-carboxilato de etila (Intermediário 89, 0,355 g, 1,0 mmol), 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 0,438 g, 1,50 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (0,064 g, 0,10 mmol) em dioxano desgaseificado (8 mL). A mistura reacional foi aquecida a 90 °C durante 1 h e então repartida entre EtOAc e NaCl (sat., aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc e as fases orgânicas combinadas secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida em coluna (15%^60% de EtOAc em heptano) para dar o composto em epígrafe (0,355 g, 81%).
[00375] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,23 (t, 3H), 1,53 - 1,63 (m), 1,64 - 1,67 (m, 2H), 2,02 - 2,15 (m, 2H), 2,20 - 2,29 (m, 1H), (d, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,44 - 2,64 (m, 3H), 3,05 - 3,16 (m, 1H), 3,62 (t, 1H), 3,78 (td, 1H), 4,08 - 4,19 (m, 3H), 5,09 - 5,15 (m, 1H), 5,76 (s, 2H), 6,20 (s, 1H), 7,31 - 7,41 (m, 2H), 7,89 - 7,96 (m, 1H). Intermediário 91: 4-({[(1 R,6R e 1S,6S)-6-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-en-1- il]carbonil}amino)-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0127
Etapa 1: Ácido (1R,6R e 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro- 2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico
[00376] Adicionou-se uma solução de LiOH (0,041 g, 1,70 mmol) em água (2 mL) a uma solução de (1R,6R e 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3- metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3- eno-1-carboxilato de etila (Intermediário 90, 0,374 g, 0,85 mmol), e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite e de seguida a 60 °C durante 6 h. Adicionou-se água à mistura reacional e o pH foi ajustado a ~4 usando KHSO4 (1M, aq). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto do subtítulo (347 mg, 99%).
[00377] MS m/z 411,2 [M-H]- Etapa 2: 4-({[(1 R,6R e 1S,6S)-6-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-en-1-il]carbonil}amino)-1- metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
[00378] Adicionou-se Et3N (464 μL, 3,35 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 598 μL, 1,00 mmol) a uma suspensão de ácido (1R,6R e 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5- il]benzoil}ciclo-hex-3-eno-1-carboxílico (Intermediário 91 Etapa 1, 0,345 g, 0,84 mmol) e 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (234 mg, 1,67 mmol) em EtOAc (8 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite. Adicionou-se DMF (1 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 5,5 h. A mistura reacional foi repartida entre EtOAc e NaHCO3(sat., aq). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc e as fases orgânicas combinadas secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O composto impuro foi purificado por cromatografia rápida (EtOAc) para dar o composto em epígrafe (191 mg, 43%).
[00379] MS m/z 535,1 [M+H]+ Intermediário 92: 4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
Figure img0128
Etapa 1: 4-[({(1 R,6R e 1S,6S)-6-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5- carboxamida
[00380] Adicionou-se HCl (4M em dioxano, 59 μL, 0,23 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,6R e 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hex-3-en-1- il]carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 91, 157 mg, 0,29 mmol) em dioxano (8 mL) e água (2 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 80 min. Adicionou-se NaHCO3 (sat., aq) e EtOAc à mistura reacional e se separou as fases. A fase orgânica foi lavada com NaHCO3 (sat., aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto do subtítulo (132 mg, 100%).
[00381] MS m/z 449,2 [M-H]- Etapa 2: 4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
[00382] Adicionou-se catalisador de paládio (Pd/C a 5%, 62 mg, 0,03 mmol) a uma solução de 4-[({(1R,6R e 1S,6S)-6-[2-fluoro-4-(3- metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil- 1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 92 Etapa 1, 0,131 g, 0,29 mmol) em MeOH (4 mL) e EtOAc (4 mL), e a mistura reacional foi tratada com H2(g) a 1 atm e à ta durante a noite. O catalisador foi separado por filtração e lavado com MeOH. O filtrado foi concentrado sob vácuo e o produto impuro purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (0,046 g, 35,0%).
[00383] 1H RMN (500 MHz, MeOD) δ 1,22 (s, 1H), 1,36 - 1,68 (m, 3H), 1,88 - 1,94 (m, 2H), 2,10 - 2,20 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,87 (s, 1H), 3,61 (d, 1H), 4,01 (s, 3H), 6,54 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,86 (d, 1H). Intermediário 93: Ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1- (tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexanocarboxílico
Figure img0129
[00384] Adicionou-se 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 2,08 g, 7,11 mmol) e uma solução desgaseificada de K2CO3 (1,96 g, 14,22 mmol) em água (5 mL) a uma solução de ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4- bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 83, 1,17 g, 3,55 mmol) em dioxano (5 mL). Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (0,080 g, 0,12 mmol) e a mistura reacional foi aquecida em um reator de microondas a 60 °C durante 50 min. A mistura reacional foi diluída com água e EtOAc. Adicionou-se KHSO4 (1%, aq) à camada aquosa até pH 5 e a camada aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. O pH da camada aquosa foi ajustado a 3-4 e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C8 Kromasil (10 μm 250x50 ID mm), usando um gradiente de 10-85% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/HCO2H (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (1,2 g, 81%).
[00385] MS m/z 413,3 [M-H]- Intermediário 94: 4-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)- 1H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0130
[00386] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 194 μL, 0,33 mmol) a uma suspensão de ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1- (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-ciclo- hexanocarboxílico (Intermediário 93, 90 mg, 0,22 mmol), cloridrato de 4-amino-1H-pirazol-5-carboxamida (71 mg, 0,43 mmol) e Et3N (105 μL, 0,76 mmol) em EtOAc (1 mL). Adicionou-se DMF (1 mL) e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 3 h. A mistura reacional foi diluída com NaHCO3 (8%, aq) e EtOAc. A camada orgânica foi lavada três vezes com NaHCO3 (8%, aq), seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 10-80% de MeCN em um sistema- tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (24 mg, 21%).
[00387] MS m/z 521,3 [M-H]- Intermediário 95: (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)-N-(4- oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[ 1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida
Figure img0131
[00388] Adicionou-se cloridrato de 3-amino-6,7-Di-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-4(5H)-ona (Intermediário 12, 300 mg, 1,97 mmol), HATU (1,16 g, 3,05 mmol) e Et3N (768 mg, 7,59 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (Intermediário 83, 500 mg, 1,52 mmol) em DMF (20 mL), e a mistura reacional foi agitada a 38 °C durante 12 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (3,8% de MeOH em DCM) para dar o composto em epígrafe (300 mg, 43%).
[00389] MS m/z 463 [M+H] + Intermediário 96: 4-({[(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-(4-Bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1,2,5-oxadiazolo-3- carboxamida
Figure img0132
[00390] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 0,75 mL, 1,26 mmol) a uma solução de 4-amino-1,2,5-oxadiazolo-3-carboxamida (0,178 g, 1,39 mmol), ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (Intermediário 83, 0,20 g, 0,61 mmol) e DMAP (0,22 g, 1,80 mmol) em THF (2,5 mL) e DCM (0,5 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com THF e o produto impuro purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 Kromasil, usando MeCN em um sistema-tampão H2O/HOAc (100/0,2) como fase móvel. As frações contendo produto foram reunidas, concentradas sob vácuo e liofilizadas para dar o composto em epígrafe (87 mg, 33%).
[00391] MS m/z 439,1 [M-H]- Intermediário 97: Fluoreto de (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-Bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexanocarbonila
Figure img0133
[00392] Dissolveu-se ácido (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 83, 100 mg, 0,30 mmol) e piridina (0,052 mL, 0,61 mmol) em DCM seco (1 mL) sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi resfriada a -10 °C, se adicionou 2,4,6-trifluoro-1,3,5-triazina (0,051 mL, 0,61 mmol) e a mistura reacional foi agitada a -10 °C durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com DCM, se adicionou água e a mistura reacional foi agitada à ta durante 30 min. Adicionou-se água e DCM, e se separou as fases. As fases orgânicas combinadas foram separadas dos sólidos, lavadas com água fria, secas usando um separador de fases, e evaporadas à ta sob vácuo para dar o composto em epígrafe (107 mg, 106%).
[00393] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,19 (qd, 1H), 1,3 - 1,5 (m, 2H), 1,50 - 1,63 (m), 1,83 - 1,97 (m, 2H), 2,14 (d, 1H), 2,23 - 2,36 (m, 1H), 3,00 (dddd, 1H), 3,43 (td, 1H), 7,33 - 7,45 (m, 2H), 7,75 (t, 1H). Intermediário 98: 4-({[(1 R ,2 R e 1S, 2 S )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}-amino)-1-etil-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0134
[00394] Adicionou-se Et3N (178 μL, 1,29 mmol) e T3P (50% em EtOAc, 230 μL, 0,39 mmol) a uma suspensão de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol) e 4-amino-1-etil-1H-pirazol-3-carboxamida (67 mg, 0,43 mmol) em EtOAc (2 mL), a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 2 h e de seguida agitada à ta durante a noite. A mistura reacional foi repartida entre EtOAc e NaHCO3 (sat., aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe (119 mg, 83%).
[00395] MS m/z 449 [M+2]+ Intermediário 99:5-({[(1 R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1,3,4-oxadiazolo-2-carboxilato de etila
Figure img0135
[00396] Adicionou-se 5-amino-1,3,4-oxadiazolo-2-carboxilato de etila (1,11 g, 7,06 mmol), T3P (50% em EtOAc, 8,18 g, 25,72 mmol) e Et3N (2,6 g, 25,69 mmol) a uma solução de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (2 g, 6,43 mmol) em EtOAc (25 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 12 h. A mistura reacional foi lavada duas vezes com água e as fases aquosas combinadas extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe (2,85 g, 98%).
[00397] MS m/z 450 [M+H]+ Intermediário 100: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2- tiazol-5-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0136
[00398] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 383 μL, 0,64 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol), cloridrato de 3-metil-1,2- tiazol-5-amina (97 mg, 0,64 mmol), e Et3N (134 μL, 0,96 mmol) em EtOAc (3 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica extraída com NaHCO3 (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (25% de EtOAc em tolueno) para dar o composto em epígrafe (24 mg, 18%).
[00399] MS m/z 407,2 [M-H]- Intermediário 101: (1R,2R e 1S,1S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(4-ciano-3- metil-1,2-tiazol-5-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0137
[00400] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 383 μL, 0,64 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,1S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol), 5-amino-3-metil-1,2-tiazolo-4- carbonitrila (89 mg, 0,64 mmol), e Et3N (134 μL, 0,96 mmol) em EtOAc (3 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de microondas a 150 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica extraída com NaHCO3 (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. A trituração do resíduo em DCM deu o composto em epígrafe (51 mg, 37%).
[00401] MS m/z 432,2 [M-H]- Exemplo 1: 1-Metil-4-[({(1R,2R ou 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]- ciclo-hexil}carbonil)amino]-1H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0138
Etapa 1 - 1-Metil-4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]- ciclo-hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxilato de metila
[00402] Agitou-se a 50 °C durante a noite uma solução de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-(1H-pirazol-3-il)benzoil)ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 1, 200 mg, 0,67 mmol), TBTU (387 mg, 1,21 mmol), 4- amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metila (208 mg, 1,34 mmol) e DIPEA (0,351 mL, 2,01 mmol) em NMP (8 mL). A reação foi inativada por adição de NaHCO3 (sat, aq). A mistura foi diluída com EtOAc e as fases separadas. A camada orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, NH4Cl (sat, aq) e finalmente solução saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e evaporada, dando origem ao composto do subtítulo (292 mg) como um sólido amarelo. Etapa 2 - Ácido 1-metil-4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[4-(1 H-pirazol-3- il)benzoil]-ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxílico
[00403] Adicionou-se uma solução de LiOH (1 M aq, 0,80 mL, 0,80 mmol) em água (1,0 mL) a uma solução de produto impuro da etapa 1 (292 mg, 0,67 mmol) em MeOH (2.5 mL) e THF (2,5 mL). A solução resultante foi agitada a 50 °C durante 1 h. A mistura foi diluída com EtOAc e água, as fases separadas e a fase aquosa lavada com EtOAc. As camadas aquosa combinadas foram acidificadas com HCl (6 M) até um pH entre 4-5, e o produto extraído com EtOAc. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e evaporada para dar o composto do subtítulo (155 mg, 55%).como um sólido ligeiramente marrom.
[00404] MS m/z 420 [M-H]- Etapa 3 - (1R ,2 R e 1S ,2S) -1-Metil-4-[({2-[4-(1 H-pirazol-3- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00405] Agitou-se a 50 °C durante 2 h uma solução do produto da etapa 2, (155 mg, 0,37 mmol), TBTU (213 mg, 0,66 mmol), cloreto de amônio (39,3 mg, 0,74 mmol) e DIPEA (0,193 mL, 1,10 mmol) em NMP (4 mL). A reação foi inativada pela adição de NaHCO3 (sat, aq). A mistura foi diluída com EtOAc e as fases separadas. A camada orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, NH4Cl (sat, aq) e finalmente solução saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e evaporada para dar origem a um sólido amarelo que foi purificado por HPLC preparativa de fase reversa em uma coluna C18 XBridge (5μm OBD 19x150 mm), usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) a pH10 como fase móvel para dar o composto em epígrafe (73 mg, 48%).
[00406] 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 1,21 (d, 1H), 1,44 (t, 1H), 1,52 (td, 2H), 1,80 (dd, 2H), 2,01 (dd, 2H), 2,82 - 2,94 (m, 1H), 3,69 - 3,78 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 6,86 (t, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,98 (d, 2H), 8,03 (d, 2H), 8,07 (s, 1H), 9,77 (s, 1H), 13,09 (s, rotâmero maioritário), 13,50 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,25
[00407] MS m/z 421,2 [M+H]+ Etapa 4 - 1-Metil-4-[({(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-[4-(1 H-pirazol-3- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00408] Os enantiômeros da (1R,2R e 1S,2S)-1-metil-4-[({2-[4-(1H- pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1H-pirazol-3- carboxamida (50 mg, 0,12 mmol) foram separados por cromatografia quiral em uma coluna de HPLC IA Chiralpak (5μm, 250x20mm). Injetou-se 50 mg (8 mg/ mL em EtOH:DCM, 4:2), se eluiu com EtOH: DCM (4:2) a um caudal de 15 mL/min e detectou a 245nm. O primeiro composto eluído foi coletado e evaporado para dar o composto em epígrafe (0,019 g, 99,6% de ee).
[00409] HRMS m/z 841,3857 [2M+H]+ Exemplo 2: 1-Metil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0139
[00410] Misturou-se 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 2, 130 mg, 0,30 mmol), ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (70 mg, 0,63 mmol), K2CO3 (170 mg, 1,23 mmol) e Pd(dtbpf)Cl2 (20 mg, 0,03 mmol) em dioxano (2,5 mL) e H20 (1,2 mL), e a mistura reacional foi purgada com nitrogênio. A mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 80 °C durante 45 min. Adicionou-se NaHCO3 (sat., aq) e a mistura foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases, e o solvente evaporado. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 20-65% de acetonitrila em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel. As frações desejadas foram coletadas e o solvente evaporado para dar o composto em epígrafe (36 mg, 28%).
[00411] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,19 - 1,43 (m, 3H), 1,50 (dd, 1H), 1,73 (dt, 1H), 1,8 - 1,97 (m, 2H), 2,10 (d, 2H), 2,84 - 2,96 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 6,66 (dd, 4H), 7,53 (s, 1H), 7,6 - 7,66 (m, 1H), 7,80 (d, 2H), 7,94 (t, 2H), 8,23 (s, 1H).
[00412] MS m/z 421 [M+H]+ Exemplo 3: 1-Metil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0140
[00413] Adicionou-se HCl em MeOH (6,0 mL, 7,20 mmol) a uma solução de 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2- il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 4, 1,39 g, 2,68 mmol) em MeOH (230 mL). A solução resultante foi evaporada sob vácuo a 5 °C. O resíduo foi dissolvido em 230 mL de MeOH, evaporado de novo a 5 °C e o produto impuro imediatamente purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 5-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel. As frações desejadas foram coletadas, liofilizadas e novamente purificadas por SFC preparativa em uma coluna HILIC Luna (5 μm 250x30 ID mm) usando 25% de MeOH/DEA (100/0,5) em CO2(g) (150 bar) como fase móvel. As frações desejadas foram coletadas, evaporadas e liofilizadas de MeCN/H2O (1:1) para dar o composto em epígrafe (0,71 g, 67%).
[00414] 1H RMN (500 MHz, DMSO) δ 1,17 (dd, 1H), 1,29 - 1,39 (m, 1H), 1,42 - 1,57 (m, 2H), 1,72 - 1,88 (m, 2H), 1,97 (d, 1H), 2,07 (d, 1H), 2,78 - 2,91 (m, 1H), 3,29 (s, 3H), 3,65 - 3,74 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 6,56 (s, 1H), 7,89 (d, 2H), 7,99 (d, 2H), 9,49 (s, 1H), 12,74 (s, 1H) Exemplo 4: 1-Metil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0141
Etapa 1 - 1-Metil-4-({[(1 R ,2 R )-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)- 1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1 H-pirazol-3- carboxamida
[00415] Adicionou-se 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 283 mg, 0,97 mmol) e uma solução desgaseificada de K2CO3 (89 mg, 0,65 mmol) em água (1 mL) a uma solução de 4-({[(1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3- carboxamida (Intermediário 6, 70 mg, 0,16 mmol) em dioxano (1 mL). Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (10,40 mg, 0,02 mmol) e a mistura resultante foi aquecida em um reator de micro-ondas a 85 °C durante 60 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada com solução saturada de cloreto de sódio (sat.). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida (100% de EtOAc) para dar o composto do subtítulo (118 mg, 141%).
[00416] MS m/z 517 [M-H]- Etapa 2 - 1-Metil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo- hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00417] Adicionou-se HCl (1,2 M em MeOH) (1 mL, 1,20 mmol) a uma solução do produto da etapa 1 (118 mg, 0,23 mmol) em MeOH (10 mL), e a mistura reacional foi concentrada a 5 °C. O resíduo foi dissolvido em 10 mL de MeOH e concentrado a 5 °C. O composto foi imediatamente purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 5-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (46 mg, 46%).
[00418] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,19 (q, 1H), 1,35 - 1,56 (m, 3H), 1,75 (d, 2H), 1,81 (d, 1H), 1,95 (d, 1H), 2,01 (d, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,8 - 2,93 (m, 1H), 3,68 - 3,77 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 6,56 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,89 (d, 2H), 8,00 (d, 2H), 8,05 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 12,75 (s, rotâmero maioritário), 13,08 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,19.
[00419] MS m/z 435,3 [M+H]+ Exemplo 5a: (1S ,2 S ou 1R, 2 R)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4- (3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida e Exemplo 5b: (1R,2R ou 1S,2S)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4- (3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0142
Etapa 1 - (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-{4-[3- metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexanocarboxamida
[00420] Dissolveu-se ((1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3- ciano-1-metil-1H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 7, 150 mg, 0,36 mmol) e 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 106 mg, 0,36 mmol) em dioxano:DMF (2 mL, 95:5). Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (7,0 mg, 11 μmol) e uma solução de K2CO3 (200 mg, 1,44 mmol) em água (1,5 mL), e a mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes, sendo de seguida aquecida a 80 °C durante 45 min. A mistura reacional foi usada diretamente na Etapa 2. Etapa 2 - (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol—4-il)-2-[4-(3- metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00421] Adicionou-se HCl (2 M em dioxano:água, 1:1, 1 mL) à mistura reacional da Etapa 1 acima, e a mistura reacional foi agitada à ta durante 15 min. A mistura reacional foi concentrada, e o resíduo diluído com EtOAc e lavado com NaHCO3 (sat, aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc e as fases orgânicas combinadas lavadas com NH4Cl (aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca usando um separador de fases, e o solvente removido sob vácuo. O composto foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 20-65% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar os compostos da Etapa 2 do subtítulo (102 mg, 68%) como um sólido branco.
[00422] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,1 - 1,23 (m, 1H), 1,33 (t, 1H), 1,37 - 1,58 (m, 2H), 1,72 - 1,80 (m), 1,83 (d, 1H), 1,97 (d, 1H), 2,07 (d, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,88 - 3,01 (m, 1H), 3,74 (t, 1H), 3,81 (s, 3H), 6,56 (s, 1H), 7,88 (d, 2H), 8,00 (d, 2H), 8,10 (s, 1H), 10,41 (s, 1H), 12,75 (s, 1H)
[00423] MS m/z 417,1 [M+H]+ Etapa 3 - (1R,2R ou 1S,2S)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4-(3- metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida e (1S,2S ou 1R, 2 R)-N-(3-ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexanocarboxamida
[00424] Os enantiômeros da (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-ciano-1-metil- 1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida (77 mg, 0,18 mmol) foram separados por cromatografia quiral em uma coluna AD Chiralpak (5μm, 250x20mm). Injetou-se 52 mg (26 mg/mL em EtOH:DCM, 2:1), se eluiu com Heptano:EtOH (30:70) a um caudal de 18 mL/min e detectou a 260nm. O primeiro composto eluído foi coletado e evaporado para dar o Exemplo 5a (31 mg, 40%, 98,2% de ee).
[00425] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,26 - 1,6 (m, 3H), 1,72 (td, 1H), 1,83 - 1,98 (m, 2H), 2,11 (td, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,92 (ddd, 1H), 3,68 - 3,79 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 5,31 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 7,80 - 7,86 (m, 3H), 7,98 - 8,03 (m, 3H)
[00426] Rotação óptica: -138,9° (1 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C).
[00427] O segundo composto eluído foi coletado e evaporado para dar o Exemplo 5b (30 mg, 39%, 98,6% de ee).
[00428] Rotação óptica: +136,8° (1 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C).
[00429] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,27 - 1,56 (m, 3H), 1,65 - 1,76 (m, 1H), 1,85 - 1,97 (d, 2H), 2,11 (t, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,87 - 2,95 (m, 1H), 3,69 - 3,78 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 5,31 (s, 2H), 6,44 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,98 - 8,04 (m, 3H) Exemplo 6: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N -(1H-pirazol- 4-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0143
Etapa 1 - (1R ,2 R )-2-{4-[3-Metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol- 5-il]benzoil}- N-(1H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
[00430] Adicionou-se ácido (1R,2R)-2-{4-[3-Metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-ciclo-hexanocarboxílico (Intermediário 8, 0,167 g, 0,42 mmol) a uma mistura de 1H-pirazol-4- amina (0,074 g, 0,89 mmol), T3P (50% em EtOAc, 0,37 mL, 0,63 mmol) e Et3N (0,23 mL, 1,68 mmol) em EtOAc (8 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 30 min. Adicionou-se DMF (1 mL) e a mistura reacional foi agitada à ta durante a noite. Adicionou-se 1H- pirazol-4-amina (0,040 g), T3P (50% em EtOAc, 0,150 mL, 0,25 mmol) e DMF (2 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, e a fase orgânica lavada duas vezes com NaHCO3 (sat, aq). A fase orgânica foi seca com MgSO4, filtrada e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (0,194 g, 100%).
[00431] MS m/z 460,3 [M-H]- Etapa 2 - (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1H-pirazol-4- il)ciclo-hexanocarboxamida
[00432] Adicionou-se HCl (HCl 2 M em dioxano/água, 1:1, 2 mL) ao composto da etapa 1 (194 mg, 0,42 mmol) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat, aq). A fase aquosa foi extraída uma vez com EtOAc e as fases orgânicas combinadas secas com MgSO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm OBD 19x150 mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) a pH10 como fase móvel para dar o composto em epígrafe (52 mg, 33%).
[00433] 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 1,08 - 1,2 (m, 1H), 1,27 - 1,37 (m, 1H), 1,40 - 1,54 (m, 2H), 1,71 - 1,79 (m, 1H), 1,79 - 1,86 (m, 1H), 1,92 - 1,98 (m, 1H), 1,99 - 2,07 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,75 - 2,83 (m, 1H), 3,68 - 3,76 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 7,99 (d, 2H), 9,99 (s, 1H), 12,45 (s, 1H), 12,75 (s, rotâmero maioritário), 13,10 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,18.
[00434] MS m/z 378,2 [M+H]+ Exemplo 7: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(4-oxo- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0144
[00435] Adicionou-se HCl (6 M em água, 20 mL) lentamente a uma solução de (1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-5-il]benzoil}-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3- il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 14, 3,5 g, 6,60 mmol) em dioxano (40 mL) e água (10 mL) a 4 °C durante um período de 2 min. A mistura reacional foi agitada 5 min a 4 °C, e se deixou de seguida atingir a ta e agitar durante 1h. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi diluído com uma solução de Na2CO3 (sat, aq) e a camada aquosa extraída três vezes com DCM. O solvente foi removido sob vácuo e o produto impuro purificado por cromatografia rápida de fase reversa em uma coluna C18 usando um gradiente de 25-45% de MeCN em um sistema-tampão H2O/HCO2H (99,9/0,1) como fase móvel. As frações puras foram coletadas e evaporadas à secura para dar origem ao composto em epígrafe (1,8 g, 61%) como um sólido amarelo claro.
[00436] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,10 - 1,55 (m, 4H), 1,74 - 1,82 (m, 2H), 1,95 - 2,08 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,99 (t, 1H), 3,70 (s, 2H), 3,82 (t, 1H), 4,21 (t, 2H), 6,58 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 8,01 (d, 2H), 8,33 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 12,76 (s, 1H)
[00437] MS m/z 469 [M+Na]+ Exemplo 8: (1R ,2 R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfonil)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4- (1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0145
[00438] Adicionou-se ácido (1H-pirazol-3-il)borônico (108 mg, 0,97 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (105 mg, 0,13 mmol) e uma solução de K2CO3 (266 mg, 1,92 mmol) em água (1,5 mL) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfonil)-1H-pirazol-4- il]ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 18, 300 mg, 0,66 mmol) em dioxano (10 mL) sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 1,5 h sob atmosfera de nitrogênio. Adicionou- se uma solução de água/EtOAc (1:10) à mistura reacional e os sólidos foram separados por filtração. A camada orgânica foi lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (95% de DCM em MeOH). O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 Sunfire (19x150 mm) usando um gradiente de 5-40% de MeCN em um sistema-tampão H2O/HCO2H (99,9/0,1) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (120 mg, 41%) como um sólido branco.
[00439] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,11 - 1,23 (m, 1H), 1,53 1,32 (m, 3H), 1,73 - 1,85 (m, 2H), 1,94 (d, 1H), 2,07 - 2,11 (m, 1H), 2,86 - 2,93 (t, 1H), 3,41 (s, 3H), 3,71-3,76 (t, 1H), 3,99 (s, 3H), 6,83 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,83 - 8,13 (m, 5H), 9,19 (s, 1H), 13,07 (s, rotâmero maioritário), 13,51 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,23.
[00440] MS m/z 456 [M+H]+ Exemplo 9: (1R,2R)-N-[3-(Difluorometóxi)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]-2-[4- (1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0146
[00441] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (121 mg, 0,88 mmol) em água (2 mL), ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (74 mg, 0,66 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (72 mg, 0,09 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)-N-[3-(difluorometóxi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 21, 200 mg, 0,44 mmol) em dioxano (10 mL), e a mistura reacional foi agitada a 80 °C durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo, o resíduo purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (10%^50% EtOAc em éter de petróleo) e de seguida por HPLC preparativa em uma coluna T3, usando MeCN em H2O/HCO2H (99,9/0,1) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (125 mg, 64%) como um sólido branco.
[00442] 1H RMN (400MHz, CDCl3,): δ1,26 - 2,10 (m, 8H); 2. 86 (t, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,75 (t, 1H), 6,26 (l, 1H), 6,72 (s, 1H), 6,78 (t,1H), 7,25 (s, 3H), 7,66 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,87 (d, 2H), 8,05 (d, 2H)
[00443] MS m/z 444 [M+H]+ Exemplo 10: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N -(1-metil-3- sulfamoil-1 H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0147
[00444] Adicionou-se cloridrato do ácido (5-metil-1H-pirazol-3- il)borônico (Intermediário 31, 209 mg, 1,29 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (70 mg, 0,09 mmol) e K2CO3 (206 mg, 1,49 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 25, 200 mg, 0,43 mmol) em uma mistura de dioxano/H2O (15 mL) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 50 °C durante 3 h. A mistura reacional foi extraída duas vezes com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas lavadas três vezes com água, secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 XBridge (5 μm 150x19 ID mm) usando um gradiente de 18-90% de MeCN em um sistema- tampão de NH4HCO3 (0,010 M, aq) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (54 mg, 27%) como um sólido branco.
[00445] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,10- 1,26 (m, 1H), 1,37 1,55 (m, 3H), 1,77-1,87 (m, 2H), 1,96-2,05 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,51 (t, 1H), 2,93 (t, 1H), 3,80 (s, 3H), 6,57 (s, 1H), 7,58 (s, 2H), 7,92 (d, 2H), 8,03 (d, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 12,74 (s, rotâmero maioritário), 13,1 (s, rotâmero minoritário). Razão desconhecida entre os rotâmeros..
[00446] MS m/z 471 [M+H]+ Exemplo 11: (1R,2R)-N-(2,3-Di-hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol-7-il)-2- [4-(3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0148
[00447] Adicionou-se K2CO3 (132 mg, 0,96 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (78 mg, 0,10 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4- bromobenzoi)-N-(2,3-di-hidropirazolo[5,1-b][1,3]oxazol-7-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 30, 200 mg, 0,48 mmol) e ácido (5-metil-1H-pirazol-3-il)borônico (60 mg, 0,48 mmol) em 1,4-dioxano (5 mL) e água (1 mL) à ta, e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 5 h sob atmosfera de nitrogênio. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo dissolvido em EtOAc. A camada orgânica foi lavada duas vezes com água, seca com Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (9% de MeOH em DCM), de seguida por cromatografia rápida com C18 (0%^50% de MeCN em água) para dar o composto em epígrafe (60 mg, 30%) como um sólido branco.
[00448] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,20-1,01 (m, 1H). 1,41 - 1,49 (m, 3H), 1,73 - 1,82 (m, 2H), 1,90 - 2,03 (m, 2H), 2,50(s, 3H), 2,78(t, 1H), 3,68(t, 1H), 4,18(t, 2H), 4,99(t, 2H), 6,56(s, 1H), 7,21(s, 1H), 7,89(d, 2H), 7,98(d, 2H), 9,35(s, 1H), 12,75(s, rotâmero maioritário), 13,1 (s, rotâmero minoritário). Razão desconhecida entre os rotâmeros.
[00449] MS m/z 420 [M+H]+ Exemplo 12: (1R,2R ou 1S,2S)-N-(3-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4- (1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0149
Etapa1ií1Ri2R elS12S)zN:(3zÇianoz1-metilz1H-pirazolz4zil)z2z[4z(1H- pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00450] Dissolveu-se (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3- ciano-1-metil-1H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 7, 150 mg, 0,36 mmol) em dioxano (1,5 mL). Adicionou-se ácido 1H- pirazol-3-ilborônico (73 mg, 0,65 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (29 mg, 0,04 mmol) e uma solução de K2CO3 (0,065 mL, 1,1 mmol) em água (1,5 mL), e a mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes, depois aquecida em um reator de micro-ondas a 60 °C durante 30 min e de seguida a 80 °C durante 50 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada duas vezes com uma solução saturada de cloreto de sódio (sat.). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases, concentradas, e o resíduo purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 20-65% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar os compostos do subtítulo (45 mg, 31%).
[00451] 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 1,16 (qd, 1H), 1,27 - 1,38 (m, 1H), 1,39 - 1,55 (m, 2H), 1,72 - 1,79 (m, 1H), 1,82 (d, 1H), 1,95 (d, 1H), 2,02 (d, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,74 - 2,84 (m, 1H), 3,65 - 3,78 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,89 (d, 2H), 7,99 (d, 2H), 9,99 (s, 1H), 12,45 (s, 1H), 12,75 (s, rotâmero), 13,09 (s, rotâmero)
[00452] MS m/z 403,1 [M+H]+ Etapa 2^(1Ri2R ou JS12S)-N-(3zCjano-^metiJ-1H-pirazo!-4zj!)-2-14z (1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00453] Os enantiômeros da etapa 1 (30 mg, 0,07 mmol) foram separados por cromatografia quiral em uma coluna AD Chiralpak (5μm, 250x20mm). Injetou-se 30 mg (30 mg/mL em EtOH:DCM, 91:9), se eluiu com Heptano:EtOH (30:70) a um caudal de 18 mL/min e detectou a 260nm. O segundo composto eluído foi coletado e evaporado para dar o composto em epígrafe (11 mg, 37%, 99,9% de ee).
[00454] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,25 - 1,45 (m, 2H), 1,50 (ddd, 1H), 1,69 (qd, 1H), 1,84 - 1,95 (m, 2H), 2,05 - 2,17 (m, 2H), 2,96 (ddd, 1H), 3,73 - 3,83 (m, 4H), 6,70 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,87 (d, 2H), 7,99 (s, 1H), 8,04 (d, 2H), 8,22 (s, 1H).
[00455] Rotação óptica: -153,8° (1 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C). Exemplo 13: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N -(1-metil-5- sulfamoil-1 H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0150
[00456] Adicionou-se PdCl2(dppf)-DCM (4,87 g, 5,97 mmol) a uma mistura de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H- pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 37, 28 g, 59,7 mmol), ácido (5-metil-1H-pirazol-3-il)borônico (15,02 g, 119,31 mmol) e carbonato de sódio (25,3 g, 238,63 mmol) em dioxano (500 mL) e água (125 mL) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 85 °C durante 4 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e diluída com EtOAc, a fase orgânica lavada com solução saturada de cloreto de sódio (sat., aq), seca com Na2SO4, filtrada e evaporada. O produto impuro foi purificado por Cromatografia rápida em coluna, em uma coluna C18 (32μm, 400g), usando um gradiente de 0^40% de MeCN em água como fase móvel para dar o composto em epígrafe (12,73 g, 45,3%) como um sólido marrom.
[00457] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,13 - 1,22 (m, 1H), 1,36 - 1,52 (m, 3H), 1,74 - 1,84 (m, 2H), 1,96 - 2,08 (m, 2H), 2,22 (d, 3H), 2,84 - 2,90 (m, 1H), 3,35 - 3,75 (m, 1H), 3,92 (d, 3H), 6,57 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,89 - 7,96 (t, 2H), 8,01 - 8,16 (m, 4H), 8,82 (s, 1H), 12,78 (s, 1H).
[00458] MS m/z 471 [M+H]+ Exemplo 14: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Metóxi-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4-
Figure img0151
(1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida Etapa 1 - (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-metóxi-1-metil-1 H- pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
[00459] Suspendeu-se ácido (1R,2R e 1S, 2S)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (59 mg, 0,19 mmol), cloridrato de 3-metóxi-1-metil-1H-pirazol-4-amina (61,3 mg, 0,37 mmol) e Et3N (105 μL, 0,76 mmol) em EtOAc (2,1 mL). Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 135 μL, 0,23 mmol) e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 20 min. A mistura foi repartida entre EtOAc e NaHCO3 (sat., aq), e a fase orgânica lavada com NH4Cl (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (63 mg, 79%).
[00460] MS m/z 420 [M+H]+ Etapa 2 - (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Metóxi-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4- (1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00461] Adicionou-se K2CO3 (83 mg, 0,60 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (12 mg, 0,01 mmol) a uma solução do produto da etapa 1 (63 mg, 0,15 mmol) e ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (25 mg, 0,22 mmol) em dioxano (0,7 mL) e água (0,7 mL). A mistura foi evacuada e purgada com nitrogênio três vezes, e de seguida aquecida em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e água, e a fase aquosa extraída uma vez com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de cloreto de sódio, NH4Cl (sat., aq), solução saturada de cloreto de sódio, secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (11 mg, 18%).
[00462] 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 1,1 - 1,2 (m, 1H), 1,26 - 1,35 (m, 1H), 1,36 - 1,44 (m, 1H), 1,45 - 1,54 (m, 1H), 1,72 - 1,83 (m, 2H), 1,91 - 1,97 (m, 1H), 2 - 2,06 (m, 1H), 2,91 - 2,97 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,69 - 3,75 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 6,85 (d, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,92 - 8,07 (m, 4H), 9,44 (s, 1H), 13,08 (s, 1H).
[00463] MS m/z 408,2 [M+H]+ Exemplo 15: (1R ,2 R)-N-[5-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil- 1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0152
Etapa 1 - (1R ,2 R)-N-[5-(Difluorometil)-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H- pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida
[00464] Adicionou-se ácido (5-metil-1H-pirazol-3-il)borônico (237 mg, 1,88 mmol), K2CO3 (650 mg, 4,70 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (128 mg, 0,16 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5- (difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 39, 800 mg, 1,57 mmol) em uma mistura de dioxano e água (4:1, 15 mL) sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 50 °C durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com água, solução saturada de cloreto de sódio (sat.), seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com sílica-gel (33% de EtOAc em éter de petróleo) para dar o composto do subtítulo (620 mg, 77%) como um sólido amarelo.
[00465] MS m/z 512 [M+H]+ Etapa 2 - (1R ,2 R)-N-[5-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1 H- pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00466] Adicionou-se HCl (3M em MeOH, 5,9 mL) a uma solução do produto da etapa 1 (600 mg, 1,17 mmol) em MeOH (30 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1 h. O valor do pH da mistura reacional foi ajustado a ~8 usando NaHCO3 (aq), e a mistura reacional extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio (sat.), seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm 150x19 ID mm) usando um gradiente de 25-55% de MeCN em água (0,03% de NH4OH) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (69 mg, 14%) como um sólido branco.
[00467] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,34 - 1,38 (m, 1H), 1,41 - 1,53 (m, 3H), 1,73 - 1,84 (m, 2H), 1,94 - 2,07 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,93 - 2,96 (m, 1H), 3,69 - 3,76 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,99 (t, J=54,0 Hz, 1H), 7,89 - 8,07 (m, 5H), 9,67 (s, 1H), 12,74 (s, 1H), 13,04 (s, 1H).
[00468] MS m/z 428 [M+H]+ Exemplo 16: (1R,2R)-N-(5-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)-2-[4-(5-metil-1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida
Figure img0153
[00469] Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (53 mg, 0,07 mmol) a (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 42, 300 mg, 0,65 mmol), ácido (5-metil-1H-pirazol-3- il)borônico (164 mg, 1,31 mmol) e Na2CO3 (138 mg, 1,31 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (1 mL) a 25 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 90 °C durante 15 h. Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (26 mg, 0,035 mmol), ácido (5-metil- 1H-pirazol-3-il)borônico (80 mg, 0,65 mmol) e Na2CO3 (70 mg, 0,65 mmol) à mistura reacional e esta foi agitada a 90 °C durante 6 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (50 mL), filtrada através de uma camada de celite e concentrada sob vácuo. O resíduo impuro foi purificado por TLC preparativa (5% de MeOH em DCM). O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm 19x150 mm ID), usando um gradiente de 30-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/CF3CO2H (99,95/0,05) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (130 mg, 43%) como um sólido amarelo pálido.
[00470] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,10 - 1,55 (m, 4H), 1,70 - 1,85 (m, 2H), 1,95 - 2,10 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,98 (t, 1H), 3,02 (s, 3H), 3,70 (t, 1H), 3,78 (t, 2H), 4,30 (t, 2H), 6,52 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 8,00 (d, 2H), 9,20 (s, 1H), 12,78 (s, 1H)
[00471] MS m/z 461 [M+H]+ Exemplo 17: (1R,2R)-N-(5-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)-2-[4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0154
[00472] Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (53,3 mg, 0,07 mmol) a uma mistura de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 42, 300 mg, 0,65 mmol), ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (146 mg, 1,31 mmol) e Na2CO3 (138 mg, 1,31 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) e água (1 mL) a 25 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a mistura reacional foi agitada a 90 °C durante 15 h. Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (27 mg, 0,035 mmol), ácido (1H-pirazol-3-il)borônico (73 mg, 0,65 mmol) e Na2CO3 (70 mg, 0,65 mmol), e a mistura reacional foi agitada a 90 °C durante 6 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc (50 mL), filtrada através de uma camada de celite, e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (5% de MeOH em DCM). O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm, 19x150 mm ID) usando um gradiente de 30-70% de MeCN em água (0,05% de CF3COOH) como fase móvel, para dar o composto em epígrafe (130 mg, 45%) como um sólido branco.
[00473] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 1,10 - 1,60 (m, 4H), 1,70 - 1,85 (m, 2H), 1,90 - 2,10 (m, 2H), 2,99 (t, 1H), 3,01 (s, 3H), 3,74 (t, 1H), 3,79 (t, 2H), 4,20 (t, 2H), 6,88 (s, 1H), 7,85 (s, 2H), 8,01 (d, 2H), 8,08 (d, 2H), 9,20 (s, 1H), 13,10 (s, 1H).
[00474] MS m/z 447 [M+H]+ Exemplo 18a: (1R,2R ou 1S,2S)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2- [4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida e Exemplo 18b: (1S ,2 S ou 1R, 2 R)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2- [4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0155
Etapa 1 - (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol—4-il)-2-[4-(1 H- pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00475] Adicionou-se ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (73 mg, 0,65 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (8,8 mg, 10,8 μmol) e uma solução de K2CO3 (149 mg, 1,08 mmol) em água (1,5 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-ciano-1-metil-1H-pirazol-4-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 43, 150 mg, 0,36 mmol) em dioxano (1,5 mL), a mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio e de seguida aquecida a 80 °C durante 3,5 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada duas vezes com solução saturada de cloreto de sódio (sat.). A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 Sunfire da Waters (5 μm 19x150 mm ID) usando um gradiente de 5%- 95% de MeCN em um sistema-tampão de HCO2H (0,1M, aq) como fase móvel. As frações contendo produto foram concentradas e dissolvidas em EtOAc. A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (46 mg, 32%).
[00476] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,1 - 1,23 (m, 1H), 1,33 (t, 1H), 1,39 - 1,62 (m, 2H), 1,80 (dd, 2H), 1,94 - 2,02 (m, 1H), 2,06 (d, 1H), 2,83 - 2,98 (m, 1H), 3,69 - 3,79 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 6,84 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,9 - 8,13 (m, 4H), 10,52 (s, 1H), 13,08 (s, 1H)
[00477] MS m/z 403 [M+H]+ Etapa 2^(1R12R ou^S12S)-N-(5zCjano∑1-metil∑1H-pirazol∑4∑il)∑2∑[4z (1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida (18a) e (1S,2S ou 1R, 2 R)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4-(1 H-pirazol-3- il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida (18b)
[00478] Os enantiômeros da etapa 1 (34 mg, 0,08 mmol) foram separados por cromatografia quiral em uma coluna AD Chiralpak (5 μm, 250x20mm). Injetou-se 34 mg (17 mg/mL em EtOH), se eluiu com Heptano:EtOH (30:70) a um caudal de 18 mL/min e detectou a 260nm.
[00479] O primeiro composto eluído foi coletado e evaporado para dar o Exemplo 18a (13 mg, 38%, 98% de ee).
[00480] Rotação óptica: -131° (1 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C).
[00481] 1H RMN (500 MHz, CDCh) δ 1,23 - 1,43 (m, 2H), 1,51 (ddd, 1H), 1,76 (qd, 1H), 1,83 - 1,95 (m, 2H), 2,06 - 2,16 (m, 2H), 2,92 - 3,01 (m, 1H), 3,77 - 3,86 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 6,70 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,83 - 7,91 (m, 3H), 8,04 (d, 2H), 8,37 (s, 1H).
[00482] O segundo composto eluído foi coletado e evaporado para dar o Exemplo 18b (13 mg, 38%, 96,0% de ee).
[00483] Rotação óptica: +127° (1 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C).
[00484] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,22 - 1,44 (m, 2H), 1,51 (ddd, 1H), 1,76 (qd, 1H), 1,92 (d, 2H), 2,02 - 2,22 (m, 2H), 2,96 (td, 1H), 3,73 - 3,87 (m, 1H), 3,92 (s, 3H), 6,70 (d, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,82 - 7,93 (m, 3H), 8,04 (d, 2H), 8,32 (s, 1H) Exemplo 19: 1-Etil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0156
[00485] Adicionou-se HCl em MeOH (1,2M, 0,3 mL, 0,36 mmol) a uma solução de 1-etil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 44, 150 mg, 0,28 mmol) em MeOH (20 mL). A mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 18 °C. O resíduo foi dissolvido em MeOH (25 mL) e de seguida concentrado a 16 °C. O produto impuro foi imediatamente purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) para dar o composto em epígrafe (78 mg, 62%).
[00486] 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 1,12 - 1,22 (m, 1H), 1,25 (t, 3H), 1,35 (t, 1H), 1,42 - 1,57 (m, 2H), 1,76 (d, 2H), 1,83 (d, 1H), 1,97 (d, 1H), 2,08 (d, 1H), 2,75 - 2,96 (m, 1H), 3,69 (t, 1H), 4,28 (q, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,38 (s, 2H), 7,89 (d, 2H), 8,00 (d, 2H), 9,48 (s, 1H), 12,74 (s, rotâmero maioritário), 13,09 (rotâmero minoritário) Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,12.
[00487] MS m/z 449,3 [M+H]+ Exemplo 20: N,1-Dimetil-4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[4-(1 H-pirazol-3- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0157
Etapa 1 - 4-({[(1 R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)- N ,1 -dimetil-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00488] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 268 μL, 0,45 mmol) e Et3N (0,094 mL, 0,67 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (70 mg, 0,22 mmol) e cloridrato de 4-amino-N,1-dimetil-1H-pirazol-3-carboxamida (86 mg, 0,45 mmol) em EtOAc (2 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 40 min. Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 268 μL, 0,45 mmol) e Et3N, e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 20 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada para dar o composto do subtítulo (87 mg, impuro). Etapa 2 - N,1-Dimetil-4-[({(1 R,2R)-2-[4-(1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexil}carbonil)-amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
[00489] Adicionou-se uma solução do produto da etapa 1 (86 mg, 0,19 mmol) em DME (1,5 mL) e etanol (0,5 mL) a Pd(dppf)Cl2*DCM (16 mg, 0,02 mmol) e ácido 1H-pirazol-3-ilborônico (21,64 mg, 0,19 mmol) sob atmosfera de nitrogênio. Adicionou-se fosfato de potássio (aq, 12M, 0,047 mL, 0,58 mmol) em água (0,5 mL) e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 140 °C durante 15 min. Adicionou-se 1H-pirazol-3-carboxamida (16 mg, 0,035 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (10 mg, 0,012 mmol) à mistura reacional e esta foi aquecida em um reator de micro-ondas a 140 °C durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com água, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O resíduo impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 XBridge (5 μm, 19x150 mm ID) usando um gradiente de 595% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) a pH10 como fase móvel para dar o composto em epígrafe (23 mg, 27%).
[00490] 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 1,20 (q, 1H), 1,43 (t, 1H), 1,52 (q, 2H), 1,72 - 1,88 (m, 2H), 1,97 (d, 1H), 2,04 (d, 1H), 2,77 (d, 3H), 2,84 - 2,94 (m, 1H), 3,74 (t, 1H), 3,80 (s, 3H), 6,86 (s, 1H), 7,85 (s, rotâmero maioritário), 7,91 (s, rotâmero minoritários), 7,97 (d, rotâmero maioritário), 8 - 8,1 (m, 3H), 8,28 (d, 1H), 9,80 (s, 1H), 13,09 (s, rotâmero maioritário), 13,53 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,21.
[00491] MS m/z 422,2 [M+H]+ Exemplo 21: N ,1-Dimetil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(5-metil-1 H-pirazol-3- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0158
[00492] Adicionou-se gota-a-gota HCl resfriado em gelo (2M em dioxano/água, 1:1, 2 mL, 4,00 mmol) a uma solução de N,1-dimetil-4- ({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5- il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 47, 0,069 g, 0,13 mmol) em dioxano (3 mL) a 0 °C. Deixou-se a mistura reacional atingir a ta e se agitou de seguida à ta durante 50 min. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 10-15 °C. O resíduo foi coevaporado sob vácuo a 10-15 °C com dioxano (3 x 3 mL). Adicionou-se metilamina (2 M em THF, 1 mL) e se evaporou a mistura reacional. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm), usando um gradiente de 10-60% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2), para dar o composto em epígrafe (0,044 g, 75,0%).
[00493] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 1,26 - 1,46 (m, 2H), 1,52 (q, 1H), 1,68 - 1,79 (m, 1H), 1,91 (dd, 2H), 2,12 (t, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,72 - 2,91 (m, 4H), 3,7 - 3,82 (m, 1H), 4,01 (s, 3H), 6,43 (s, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,88 (s, 1H), 7,98 (d, 2H).
[00494] MS m/z 447,3 [M-H]- Exemplo 22: 5-Metil-4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0159
[00495] Adicionou-se HCl (3,8M em água, 145 μL, 0,55 mmol) a uma solução de 5-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1H- pirazol-3-carboxamida (Intermediário 48, 190 mg, 0,37 mmol) em uma mistura de 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,75 mL). A mistura reacional foi agitada à ta durante 2,5 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e água, e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat. aq), solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por SFC preparativa em uma coluna 2-EP Viridis (5 μm, 30x250 mm ID), usando MeOH/DEA (100:0,5) em CO2(g) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (94 mg, 59,1%)
[00496] 1H RMN(600 MHz, DMSO-d6) δ 1,14 - 1,24 (m, 1H), 1,29 - 1,58 (m, 3H), 1,71 - 2,04 (m, 6H), 2,12 - 2,33 (m, 4H), 2,78 - 2,92 (m, 1H), 3,59 - 3,77 (m, 1H), 6,64 (d, 1H), 7,21 (d, 1H), 7,76 - 8,11 (m, 4H), 9,30 (d, 1H), 12,66 - 13,18 (m, 2H) Exemplo 23: 4-[({(1 R ,2 R )-2-[4-(1 H-Pirazol-5-il)benzoil]ciclo- hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0160
[00497] Adicionou-se HCl (1,25 M em MeOH, 0,2 mL, 0,25 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R)-2-{4-[1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 49, 90 mg, 0,18 mmol) em MeOH (10 mL). A mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 19 °C. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL) e concentrado sob vácuo a 17 °C. O resíduo foi imediatamente purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-80% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) para dar o composto em epígrafe (56 mg, 75%).
[00498] 1H RMN (500 MHz, DMSO) δ 1,11 - 1,27 (m, 1H), 1,34 - 1,59 (m, 3H), 1,69 - 1,84 (m, 2H), 1,99 (dd, 2H), 2,78 - 2,92 (m, 1H), 3,67 - 3,78 (m, 1H), 6,84 (d, 1H), 7,39 - 8,16 (m, 8H), 9,76 (s, 1H), 13,07 (s, 2H), 13,51 (s, 0H).
[00499] MS m/z 405,3 [M-H]- Exemplo 24: (1R ,2 R)-N-(4-Oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)-2-[4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0161
[00500] Adicionou-se HCl (3,8M em água, 5 mL, 19 mmol) gota-a- gota a uma solução de (1R,2R)-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)-2-{4-[1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 50, 0,46 g, 0,89 mmol) em dioxano (5 mL) resfriado em um banho de gelo, e a mistura reacional foi agitada enquanto resfriava durante 1h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e NaHCO3 (sat., aq), e a fase aquosa extraída quatro vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3 (sat., aq), secas usando um separador de fases e evaporadas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm 250x50 ID mm), usando um gradiente de 15-55% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) para dar o composto em epígrafe (0,298 g, 77%).
[00501] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,14 - 1,56 (m), 1,6 (m, 2H), 1,88 (m, 2H), 2,12 (t, 2H), 2,95 (m, 1H), 3,69 (m, 3H), 4,30 (t, 2H), 6,70 (d, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,86 (d, 2H), 8,05 (d, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,82 (s, 1H) Exemplo 25 :(1 R ,2 R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4- (3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0162
[00502] Adicionou-se HCl (1,25N em MeOH, 0,76 mL) a uma solução de (1R,2R)-N-[1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]-2-{4- [3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 56, 180 mg, 0,32 mmol) em MeOH (5 mL) a 0 °C e a mistura reacional foi agitada à ta durante 30 min. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm, 19x150 mm) usando um gradiente de 17-55% de MeCN em água (NH4OH, 0,03%) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (67 mg, 44%) como um sólido branco.
[00503] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 1,05- 1,29 (1H, m), 1,29 1,60 (3H, m),1,69- 1,84 (2H, m),1,94- 2,07 (2H, m),2,25 (3H, s), 2,872,95 (1H, m), 3,67-3,74 (1H, m), 3,93 (3H, s), 6,57 (1H, s), 7,80 (1H, s), 7,87-7,90 (2H, m), 7,98-8,01 (4H, m), 8,08-8,13 (1H, m), 8,84 (1H, s), 12,75 (1H,s l)
[00504] MS m/z 485 [M+H]+ Exemplo 26 :(1 R,2R)-N-[1-Metil-3-sulfamoil-1 H-pirazol-4-il]-2-[4-(1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0163
[00505] Adicionou-se cloridrato do ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (108 mg, 0,73 mmol), K2CO3 (353 mg, 2,56 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (104 mg, 0,13 mmol) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N- (1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 25, 300 mg, 0,64 mmol) em uma mistura de dioxano/H2O (1:1, 15 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 70 °C durante 3 h sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combinadas lavadas com água, secas com Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm 19x150 mm) usando um gradiente de 19-55% de MeCN em água (NH4OH, 0,03%) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (71 mg, 24%) como um sólido branco.
[00506] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ1,10- 1,26 (m, 1H), 1,37- 1,56 (m, 3H), 1,77-1,87 (m, 2H), 1,97-2,09 (m, 2H), 2,89-2,96 (m, 1H), 3,72-3,80 (t, 4H), 6,86 (d, 1H), 7,57 (s, 2H), 7,85-8,12 (m, 6H), 13,07 (s, 1H)
[00507] MS m/z 457 [M+H]+ Exemplo 27: (1R,2R)-N-[5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1 H-pirazol-4-il]-2- [4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0164
[00508] Adicionou-se Pd(dppf)Cl2*DCM (43 mg, 0,06 mmol), K2CO3 (108 mg, 0,78 mmol, 3,00 equiv) e água (1 mL) a uma solução de (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol- 4-il]ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 61, 130 mg, 0,26 mmol) e ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (59 mg, 0,53 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL), e a mistura reacional foi agitada a 85 °C durante 15 h. A mistura foi diluída com EtOAc e a camada orgânica concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (50% de MeOH em DCM), seguida de cromatografia em coluna C18 (20% de MeCN em água) para dar o composto em epígrafe (18,7 mg, 15%) como um sólido branco.
[00509] 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 1,72-1,28 (m, 4H), 1,90 (t, 2H), 2,11 (t, 2H), 2,84 (s, 6H), 2,96 (t, 1H), 3,79 (t, 1H), 4,01 (s, 3H), 6,80 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,99-7,89 (m, 3H), 8,06 (d, 2H)
[00510] MS m/z 485 [M+H]+ Exemplo 28: (1R,2R)-N-(2-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)-2-[4-(5-metil-1 H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida
Figure img0165
[00511] Suspendeu-se (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(2-metil-4- oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 67, 330 mg, 0,72 mmol,), Pd(dppf)Cl2*DCM (117 mg, 0,14 mmol), K2CO3 (298 mg, 2,16 mmol) e ácido (5-metil-1H-pirazol-3-il)borônico (136 mg, 1,08 mmol) em uma mistura de 1,4-dioxano em água (10:1, 11 mL). A mistura reacional foi purgada com nitrogênio e de seguida aquecida a 100 °C durante 1 h sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e água. Os sólidos foram separados por filtração e a camada orgânica lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4, e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por Cromatografia rápida em coluna, em uma coluna C18 (30 μm, 20 g), usando um gradiente de 0%^39% de MeCN em um sistema-tampão água/NH4HCO3 (99,5/0,5) como fase móvel, para dar o composto em epígrafe (181 mg, 55%) como um sólido branco.
[00512] 1H RMN(300 MHz DMSO-d6) δ 1,19 (m, 1H), 1,48-1,38 (m, 3H), 1,82-1,74 (m, 5H), 1,99-1,93 (m,1H), 2,28-2,16 (m, 4H), 2,90 (t, 1H), 3,51 (s, 2H), 3,68 (t, 1H), 4,14-4,10 (t, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,89-7,87 (d, 2H), 8,04-7,97 (m, 3H), 9,27 (s, 1H), 12,74 (s, 1H)
[00513] MS m/z 461 [M+H]+ Exemplo 29: (1R,2R)-N-(2-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a ]pirazin-3-il)-2-[4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0166
[00514] Suspendeu-se (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(2-metil-4- oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 67, 300 mg, 0,65 mmol,), Pd(dtbpf)Cl2 (107 mg, 0,13 mmol), K2CO3 (271 mg, 1,96 mmol) e ácido (1H-pirazol-3-il)borônico (110 mg, 0,98 mmol) em uma mistura de dioxano e água (6,7:1, 11,5 mL). A mistura reacional foi purgada com nitrogênio e de seguida aquecida a 100 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e água, e os sólidos separados por filtração. A camada orgânica foi lavada com água e solução saturada de cloreto de sódio, seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por Cromatografia rápida em coluna, em uma coluna C18 (30 μm, 20 g), usando um gradiente de 0%^37% de MeCN em um sistema-tampão água/NH4HCO3 (99,5/0,5) como fase móvel, para dar o composto em epígrafe (1745 mg, 60%) como um sólido branco.
[00515] 1H RMN (300 MHz DMSO-d6) δ 1,48-1,10 (m, 4H), 1,80 1,70 (m, 2H), 1,80 (s, 3H), 2,00-1,93 (m, 1H), 2,19-2,16 (m, 1H), 2,90 (t, 1H), 3,51 (s, 2H), 3,70 (t, 1H), 4,14-4,10 (m, 2H), 6,83 (s, 1H), 8,047,83 (m, 6H), 9,27 (s, 1H), 13,06 (s, 1H)
[00516] MS m/z 447 [M+H]+ Exemplo 30: (1R ,2 R)-N-[5-(Difluorometil)-1 H-pirazol-4-il]-2-[4-(1 H- pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0167
[00517] Adicionou-se HCl em MeOH (3 M em MeOH, 5 mL) a uma solução de (1R,2R)-N-[5-(difluorometil)-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 68, 520 mg, 1,05 mmol) em MeOH (26 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1 h. O valor do pH da solução foi ajustado a 8 com NaHCO3 (aq) e a mistura reacional diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com água, solução saturada de cloreto de sódio (sat.), seca com Na2SO4 e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm, 19x150 mm) usando um gradiente de 37-46% de MeCN em água (0,03% de NH4OH) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (80,5 mg, 19%) como um sólido branco.
[00518] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,32 - 1,38 (m, 1H), 1,41 - 1,57 (m, 3H), 1,75 - 1,85 (m, 2H), 1,96 - 2,05 (m, 2H), 2,91 - 3,03 (m, 1H), ), 3,72 - 3,78 (m, 1H), 6,85 (s, 1H), 7,02 (t, J=53,6Hz, 1H), 7,84 - 8,04 (m, 6H), 9,71 (s, 1H), 13,09 (s, 1H).
[00519] MS m/z 414 [M+H]+ Exemplo 31: 4-[({(1 R ,2 R e 1S,2S )-2-[2-Cloro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0168
[00520] Adicionou-se paládio (Pd/C a 10% umedecido com 50% de água, 200 mg, 0,09 mmol) e DMSO (40 mg, 0,51 mmol) a uma solução de 4-[({(1R,6R e 1S,6S)-6-[2-cloro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hex- 3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 74, 50 mg, 0,11 mmol) dissolvida em EtOH (20 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta. Adicionou-se gota-a-gota trietilsilano (2 g, 17,20 mmol) durante 5 min e a mistura reacional foi agitada à ta durante 10 min. A mistura reacional foi filtrada através de um filtro de seringa, o filtrado concentrado sob pressão reduzida e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (0%^33% de Acetona em EtOAc). As frações contendo produto foram coletadas e concentradas até à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em tert-butanol e liofilizado para dar o composto em epígrafe (28,0 mg, 56%).
[00521] 1H RMN (600 MHz, MeOD) δ 1,29 - 1,35 (m), 1,42 (t, 2H), 1,5 - 1,64 (m, 1H), 1,88 (d, 2H), 2,01 (d, 1H), 2,15 (d, 1H), 2,8 - 2,88 (m, 1H), 3,51 - 3,6 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 6,78 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,73 (d, 2H), 7,81 (s, 1H), 7,91 (s, 1H).
[00522] MS m/z 453,2 [M-H]- Exemplo 32: 4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[2-Cloro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0169
[00523] Adicionou-se paládio (Pd/C a 10%, umedecido com 50% de água, 200 mg, 0,09 mmol) e DMSO (40 mg, 0,51 mmol) a uma solução de 4-[({(1R,6R e 1S,6S)-6-[2-cloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 75, 40 mg, 0,09 mmol) em EtOH (20 mL). Adicionou-se gota-a-gota trietilsilano (2,5 g, 21,5 mmol) à ta durante 5 min e a mistura reacional foi agitada à ta durante 10 min. A mistura reacional foi filtrada; o filtrado foi concentrado sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (0%^33% de acetona em EtOAc) e o produto liofilizado de tert-butanol para dar o composto em epígrafe (20 mg, 50%).
[00524] 1H RMN (600 MHz, MeOD) δ 1,28 - 1,34 (m), 1,41 (t, 2H), 1,52 - 1,62 (m, 1H), 1,88 (d, 2H), 2,00 (d, 1H), 2,14 (d, 1H), 2,79 - 2,88 (m, 1H), 3,52 - 3,59 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 6,51 (s, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,71 (d, 2H), 7,85 (s, 1H).
[00525] MS m/z 467,3 [M-H]- Exemplo 33: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciclopropil-1-metil-1 H-1,2,3-triazol- 4-il)-2-[4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0170
Etapa 1: (1R,2R e 1S,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-ciclopropil-1-metil- 1H-1,2,3-triazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida
[00526] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 383 μL, 0,64 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol), 5-ciclopropil-1-metil-1H-1,2,3- triazol-4-amina (89 mg, 0,64 mmol), e Et3N (134 μL, 0,96 mmol), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica extraída duas vezes com NaHCO3 (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo impuro (148 mg).
[00527] MS m/z 433,1 [M+2]+ Etapa 2: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciclopropil-1-metil-1 H-1,2,3-triazol-4-il)- 2-[4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00528] Adicionou-se 1H-pirazol-5-ilborônico (35,8 mg, 0,32 mmol), e Pd(dppf)Cl2*DCM (25,9 mg, 0,03 mmol) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-ciclopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4- il)ciclo-hexanocarboxamida (Exemplo 33 Etapa 1, 138 mg, 0,32 mmol) em DME (2,4 mL) e água (0,8 mL). Adicionou-se uma solução de K3PO4 (204 mg, 0,96 mmol) em água (0,90 mL) à mistura reacional, e esta foi aquecida em um reator de micro-ondas a 140 °C durante 15 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica extraída com água, seca usando um separador de fases, e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2, pH10) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (45 mg, 33%).
[00529] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 0,56 (tt, 2H), 0,67 - 0,79 (m, 2H), 1,13 - 1,24 (m, 1H), 1,37 (t, 1H), 1,45 - 1,58 (m, 2H), 1,61 (tt, 1H), 1,78 (d, 1H), 1,87 (d, 1H), 1,96 (d, 1H), 2,17 (d, 1H), 2,88 - 2,96 (m, 1H), 3,74 (t, 1H), 3,92 (s, 3H), 6,84 (d, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,96 (d, rotâmero maioritário),7,97 - 8,97 (m, rotâmero minoritário), 8,03 (d, 2H), 9,70 (s, 1H), 13,08 (s, rotâmero maioritário), 13,5 (s, rotâmero minoritário). Mistura de rotâmeros na razão maior:menor 1:0,19. Exemplo 34: 4-[({(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-[2-Fluoro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0171
[00530] Adicionou-se paládio (Pd/C a 10%, 25 mg, 0,02 mmol) a uma solução de 4-[({(1R,6R ou 1S,6S)-6-[2-fluoro-4-(1H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hex-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5- carboxamida (Intermediário 82, 52 mg, 0,12 mmol) em MeOH (5 mL), e a mistura reacional foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (1 atm) à ta durante 1 h. A mistura reacional foi filtrada através de uma camada de celite e o filtrado concentrado sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm, 250x19 ID mm), usando um gradiente de 20-65% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (13 mg, 25%).
[00531] 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,17 (tt, 1H), 1,24 - 1,39 (m, 1H), 1,39 - 1,56 (m, 1H), 1,68 (tt, 1H), 1,86 (t, 2H), 2,03 - 2,19 (m, 2H), 2,81 (t, 1H), 3,56 - 3,69 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 6,61 (d, 1H), 6,92 (s, 2H), 7,47 (d, 1H), 7,52 - 7,64 (m, 3H), 7,78 (t, 1H), 8,22 (s, 1H).
[00532] MS m/z 437,2 [M-H]- Exemplo 35: 4-[({(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-[2-Fluoro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0172
[00533] Adicionou-se HCl (1,25 M em MeOH, 0,5 mL, 0,63 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]-carbonil}amino)-1-metil- 1H-pirazol-3-carboxamida (Intermediário 85, 270 mg, 0,52 mmol) em MeOH (10 mL), e a mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 16 °C. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL) e concentrado sob vácuo a 16 °C. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-80% de MeCN em um sistema-tampão H2O/ACN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (120 mg, 53%).
[00534] 1H RMN (500 MHz, MeOD) δ 1,18 - 1,33 (m, 1H), 1,37 - 1,52 (m, 2H), 1,52 - 1,64 (m, 1H), 1,88 (d, 2H), 2,04 - 2,17 (m, 2H), 2,8 - 2,94 (m, 1H), 3,53 - 3,65 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 6,78 (d, 1H), 7,5 - 7,79 (m, 3H), 7,84 (t, 1H), 7,98 (s, 1H).
[00535] MS m/z 437,3 [M-H]- Exemplo 36: 4-[({(1 R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0173
[00536] Adicionou-se HCl (1,25 M em MeOH, 0,5 mL, 0,63 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1- metil-1H-pirazol-3-carboxamida (Intermediário 86, 216 mg, 0,40 mmol) em MeOH (10 mL), e a mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 16 °C. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL) e concentrado sob vácuo a 16 °C. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-80% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (126 mg, 69%).
[00537] 1H RMN (500 MHz, MeOD) δ 1,19 - 1,33 (m, 1H), 1,45 (q, 2H), 1,52 - 1,62 (m, 1H), 1,88 (d, 2H), 2,05 - 2,17 (m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,86 (ddd, 1H), 3,54 - 3,65 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 6,52 (s, 1H), 7,58 (dd, 2H), 7,82 (t, 1H), 7,98 (s, 1H). Exemplo 37: 4-[({(1 R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1-metil-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0174
[00538] Os enantiômeros do racemato trans de 4-[({(1R,2R e 1S,2S)-2-[2-fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo- hexil}carbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-carboxamida (intermediário 92, 44 mg, 0,10 mmol) foram separados por cromatografia SFC quiral em uma coluna de HPLC IC Chiralpak (5μm, 250x20 ID mm). Injetou- se 23 mg (16 mg/mL em EtOH), se eluiu com 35% de EtOH/DEA (100/0,5) em CO2 (175 bar) a um caudal de 70 mL/min e detectou a 260nm. O segundo composto eluído foi coletado e liofilizado de uma mistura de MeCN/H2O (1:1). O resíduo foi dissolvido em EtOAC e lavado com KHSO4 (0.01M, aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc, e as fases orgânicas combinadas secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe (0,019 g, 99,7% de ee).
[00539] Rotação óptica: +73° (0,5 g/100 mL em MeCN, 589 nm, 20 °C).
[00540] 1H RMN (500 MHz, MeOD) δ 1,31 - 1,68 (m, 4H), 1,91 (s, 2H), 2,15 (s, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,89 (d, 1H), 3,60 (t, 1H), 4,01 (s, 3H), 6,54 (s, 1H), 7,41 - 7,76 (m, 3H), 7,87 (t, 1H).
[00541] HRMS m/z 453,2079 [M+H]+ Exemplo 38: 4-[({(1 R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-5-carboxamida
Figure img0175
[00542] Adicionou-se HCl (1,2M em MeOH) (0,1 mL, 0,12 mmol) a uma solução de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)- 1H-pirazol-5-carboxamida (Intermediário 94, 24 mg, 0,05 mmol) em MeOH (10 mL), e a mistura reacional foi concentrada sob vácuo a 17 °C. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL) e concentrado sob vácuo a 17 °C. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-70% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (10 mg, 46%).
[00543] 1H RMN (500 MHz, DMSO) δ 1,17 (q, 1H), 1,41 (dd, 3H), 1,79 (d, 2H), 2,01 (d, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,73 - 2,91 (m, 1H), 3,42 - 3,55 (m, 1H), 6,62 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,57 - 7,78 (m, 3H), 7,84 (t, 1H), 8,03 (s, 1H), 9,76 (s, 1H), 12,96 (d, 2H). Exemplo 39: (1R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a ]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida
Figure img0176
[00544] Adicionou-se ácido (3-metil-1H-pirazol-5-il)borônico (164 mg, 1,30 mmol), K2CO3 (180 mg, 1,29 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (106 mg, 0,13 mmol) a uma solução de (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2- fluorobenzoi)-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3- il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 95, 300 mg, 0,65 mmol) em uma mistura de dioxano e água (10:1, 15 mL), e a mistura reacional foi agitada a 100 °C durante 2 h. A mistura reacional foi filtrada e o filtrado concentrado sob vácuo. O resíduo foi diluído com DCM e a camada orgânica lavada três vezes com água. A fase orgânica foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD RP18 XBridge Shield (5 um, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 4595% de MeOH em um sistema-tampão NH4HCO3/H2O (10 mM) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (90 mg, 30%).
[00545] 1H RMN (400MHz, DMSO-d6,): δ 1,27-1,05 (m, 1H), 1,52 1,29 (m, 3H), 1,78 (s, 2H), 2,10-1,98 (t, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,95 (t, 1H), 3,50 (t, 1H), 3,60 (s, 2H), 4,32 (t, 2H), 6,62 (s, 1H), 7,32-6,95 (m, 1H), 7,80-7,68 (m, 2H), 7,98-7,81 (m, 2H), 8,32 (s, 1H), 9,16 (s, 1H).
[00546] MS m/z 465 [M+H] + Exemplo 40: 4-[({(1 R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1,2,5-oxadiazolo-3-carboxamida
Figure img0177
Etapa 1: 4-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-1,2,5- oxadiazolo-3-carboxamida
[00547] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (110 mg, 0,80 mmol) em água (2 mL) a uma solução de 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)- 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 139 mg, 0,48 mmol) e 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-1,2,5-oxadiazolo-3- carboxamida (Intermediário 96, 87 mg, 0,20 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL), e a mistura reacional foi purgada com N2(g). Adicionou-se Pd(dtbpf)Cl2 (15 mg, 0,02 mmol) à mistura reacional e esta foi aquecida em um reator de micro-ondas a 90 °C durante 1 h. Deixou-se a mistura reacional resfriar e se usou diretamente na etapa seguinte. Etapa 2: 4-[({(1 R,2R ou 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}carbonil)amino]-1,2,5-oxadiazolo-3-carboxamida
[00548] Adicionou-se HCl (2M, aq, 2 mL) à mistura reacional impura de 4-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-ciclo-hexil]carbonil}amino)-1,2,5- oxadiazolo-3-carboxamida (Exemplo 40 Etapa 1 acima), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo e a fase aquosa extraída com DCM. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O composto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (1,4 mg, 2%).
[00549] MS m/z 441,17 [M+H]+ Exemplo 41: 3-[({(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-[2-Fluoro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]-ciclo-hexil}carbonil)amino]-5-metil-1,2-oxazolo-4- carboxamida
Figure img0178
Etapa 1: Ácido 3-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo- hexil]carbonil}amino)-5-metil-1,2-oxazolo-4-carboxílico
[00550] Adicionou-se fluoreto de (1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2- fluorobenzoil)ciclo-hexanocarbonila fluoride (Intermediário 97, 107 mg, 0,32 mmol) dissolvido em DCM (1 mL) a uma solução ao refluxo de ácido 3-amino-5-metilisoxazolo-4-carboxílico (50 mg, 0,36 mmol) e quinolina (0,046 mL, 0,39 mmol) em DCM (1 mL), e a mistura reacional foi agitada ao refluxo durante 2 dias. A mistura reacional foi diluída com éter tert-butilmetílico, e se ajustou o pH da mistura reacional a 1214 usando NaOH (1M, aq). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio, NH4Cl (aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. Adicionou-se DCM ao resíduo e a mistura foi concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (107 mg). Etapa 2: 3-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexil]- carbonil}amino)-5-metil-1,2-oxazolo-4-carboxamida
[00551] Adicionou-se DIPEA (124 μL, 0,71 mmol) e TBTU (114 mg, 0,35 mmol) a uma solução de ácido 3-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo- 2-fluorobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-5-metil-1,2-oxazolo-4- carboxílico impuro (Exemplo 41 Etapa 1, 107 mg) em DMF (3 mL), e a mistura reacional foi agitada durante 5 min. Adicionou-se NH4Cl (30 mg, 0,57 mmol) e a mistura reacional foi agitada à ta durante 2 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com NaHCO3 (sat., aq), solução saturada de cloreto de sódio, NH4Cl (sat., aq), e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (96 mg). Etapa 3: 3-({[(1 R,2R ou 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[1-(tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-5-metil-1,2- oxazolo-4-carboxamida
[00552] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (117 mg, 0,85 mmol) em água desgaseificada (1 mL) a uma solução desgaseificada de 3- ({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)ciclo-hexil]- carbonil}amino)-5-metil-1,2-oxazolo-4-carboxamida (Exemplo 41 Etapa 2, 96 mg) e 1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (83 mg, 0,30 mmol) em dioxano (1 mL). A solução foi evacuada e purgada com nitrogênio (g). Adicionou- se Pd(dtbpf)Cl2 (3 mg, 4 μmol) e a mistura reacional foi aquecida a 60 °C durante 2 h. Resfriou-se a mistura reacional até à ta e se usou diretamente na etapa seguinte. Etapa 4: 3-[({(1 R ,2 R ou 1S ,2 S )-2-[2-Fluoro-4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexil}-carbonil)amino]-5-metil-1,2-oxazolo-4- carboxamida
[00553] Adicionou-se gota-a-gota uma solução de HCl (4M em dioxano, 2,5 mL, 10,0 mmol) em água (2,5 mL) à mistura reacional de 3-({[(1R,2R ou 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexil]carbonil}amino)-5-metil-1,2-oxazolo-4- carboxamida (Exemplo 41 Etapa 3 acima), e esta foi agitada à ta durante 10 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada duas vezes com NaHCO3 (sat., aq). As fases aquosas combinadas foram extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10 μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 5-45% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel. As frações contendo composto foram coletadas, evaporadas e repartidas entre EtOAc e água. A fase orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto em epígrafe (1,5 mg, 1%).
[00554] MS m/z 440,2 [M+H]+ Exemplo 42: 1-Etil-4-[({(1 R,2R e 1S,2S)-2-[4-(1 H-pirazol-5-il)benzoil]- ciclo-hexil}carbonil)amino]-1 H-pirazol-3-carboxamida
Figure img0179
[00555] Adicionou-se uma solução de K2CO3 (147 mg, 1,06 mmol) em água desgaseificada (1,5 mL) a uma mistura de 4-({[(1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-1-etil-1H-pirazol- 3-carboxamida (Intermediário 98, 119 mg, 0,27 mmol), ácido 1H- pirazol-5-ilborônico (45 mg, 0,40 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (22 mg, 0.03 mmol) em dioxano desgaseificado (1,5 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 100 °C durante 1 h. A mistura reacional foi repartida entre EtOAc e NaCl (sat., aq), e a fase aquosa extraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (39 mg, 34%).
[00556] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 1,13 - 1,25 (m, 1H), 1,31 (t, 3H), 1,43 (t, 1H), 1,51 (t, 2H), 1,79 (dd, 2H), 2,00 (dd, 2H), 2,82 - 2,91 (m, 1H), 3,73 (t, 1H), 4,08 (q, 2H), 6,85 (d, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,79 - 8,11 (m, 6H), 9,77 (s, 1H), 13,09 (s, 1H).
[00557] MS m/z 433,2 [M-H]- Exemplo 43: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1,3,4- oxadiazol-2-il)ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0180
Etapa 1: (1R ,2 R )-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1,3,4-oxadiazol-2-il)ciclo- hexanocarboxamida
[00558] Adicionou-se LiOH (213 mg, 8,89 mmol) a uma solução de 5-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)ciclo-hexil]carbonil}amino)-1,3,4- oxadiazolo-2-carboxilato de etila (Intermediário 99, 1 g, 2,22 mmol) em MeOH (15 mL) e água (15 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 1 h. A mistura reacional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em água (50 mL) e o pH da solução ajustado a 1-2 usando HCl (1M, aq). A fase aquosa foi extraída três vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo para dar o composto do subtítulo (1 g).
[00559] MS m/z 378 [M+H]+ Etapa 2: (1R ,2 R )-2-[4-(3-Metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1,3,4- oxadiazol-2-il)ciclo-hexanocarboxamida
[00560] Adicionou-se ácido (3-metil-1H-pirazol-5-il)borônico (666 mg, 5,29 mmol), K2CO3 (730 mg, 5,28 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (432 mg, 0,53 mmol) e água (1 mL) a uma solução de (1R,2R)-2-(4- bromobenzoil)-N-(1,3,4-oxadiazol-2-il)ciclo-hexanocarboxamida (Exemplo 43 Etapa 1, 1 g, 2,64 mmol) em dioxano (10 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 80 °C durante 4 h sob atmosfera de nitrogênio. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e lavada duas vezes com água, e as fases aquosas combinadas extraídas com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 XBridge Shield (5 um, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-85% de MeCN em um sistema-tampão H2O/HCO2H (100/0,1) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (84 mg, 8%) como um sólido amarelo claro.
[00561] 1H RMN (300 MHz, DMSO): δ 1,03-1,57 (m, 4H), 1,69-1,87 (m, 2H), 1,90-2,13 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,96 (s, 1H), 3,72 (t, 1H), 6,57 (s, 1H), 7,90 (d, 2H), 8,02 (d, 2H), 8,92 (s, 1H), 11,79 (s, 1H), 12,76 (s, 1H).
[00562] MS m/z 380 [M+H]+ Exemplo 44: (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-oxazol-5-il)-2-[4-(1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0181
Etapa 1: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-oxazol-5- il)ciclo-hexanocarboxamida
[00563] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 383 μL, 0,64 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol), 3-metil-1,2-oxazol-5-amina (63,1 mg, 0,64 mmol), e Et3N (134 μL, 0,96 mmol) em EtOAc (3 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, a fase orgânica lavada duas vezes com NaHCO3 (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (95 mg, 76%).
[00564] MS m/z 391,2 [M-H]- Etapa 2: (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-oxazol-5-il)-2-[4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00565] Adicionou-se uma solução de K3PO4 (155 mg, 0,73 mmol) em água (0,6 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-oxazol-5-il)ciclo-hexanocarboxamida (Exemplo 44 Etapa 1, 95 mg, 0,24 mmol), ácido 1H-pirazol-5- ilborônico (27 mg, 0,24 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (20 mg, 0,02 mmol) em uma mistura de DME (1,8 mL) e EtOH (0,6 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 140 °C durante 15 min. Adicionou-se ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (27 mg, 0,24 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (20 mg, 0,02 mmol) e a mistura reacional foi aquecida a 140 °C durante 15 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a camada orgânica lavada com água, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 XBridge (5μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 10-60% de MeCN em um sistema-tampão H2O/NH3 (100/0,2, pH10) como fase móvel, e de seguida por HPLC preparativa em uma coluna Prep C18 Sunfire (5μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão HCO2H/H2O (0,1M) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (10 mg, 11%).
[00566] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 1,11 - 1,21 (m, 1H), 1,32 (d, 1H), 1,39 - 1,5 (m, 1H), 1,55 (d, 1H), 1,77 (d, 1H), 1,85 (d, 1H), 2,01 (d, 1H), 2,11 (s, 4H), 2,82 - 2,97 (m, 1H), 3,66 - 3,85 (m, 1H), 5,97 (s, 1H), 6,86 (d, 1H), 8,04 (d, 5H), 11,64 (s, 1H), 13,10 (s, 1H).
[00567] MS m/z 379,2 [M+H]+ Exemplo 45: (1R,2R e 1S,2S)-N-(4-Metil-1,3-oxazol-2-il)-2-[4-(1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0182
Etapa 1: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(4-metil-1,3-oxazol-2- il)ciclo-hexanocarboxamida
[00568] Adicionou-se DIPEA (336 μL, 1,93 mmol) e TBTU (371 mg, 1,16 mmol) a uma solução agitada de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)ciclo-hexanocarboxílico (300 mg, 0,96 mmol) e 4-metil- 1,3-oxazol-2-amina (113 mg, 1,16 mmol) em DCM (5 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 3 dias. A mistura reacional foi lavada com Na2CO3 (1M, aq) e as fases separadas. A camada orgânica foi seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (40% de EtOAc em heptano) para dar o composto do subtítulo (85 mg, 23%). Etapa 2: (1R,2R e 1S,2S)-N-(4-Metil-1,3-oxazol-2-il)-2-[4-(1 H-pirazol-5- il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00569] Adicionou-se K2CO3 (113 mg, 0,82 mmol) dissolvido em água (1 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N- (4-metil-1,3-oxazol-2-il)ciclo-hexanocarboxamida (Exemplo 45 Etapa 1, 80 mg, 0,20 mmol), ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (46 mg, 0,41 mmol) e Pd(dppf)Cl2*DCM (13,2 mg, 0,02 mmol) em dioxano (2 mL). A mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio (g), e de seguida aquecida a 80 °C durante 2,5 h. A mistura reacional foi repartida entre EtOAc e NaHCO3 (sat., aq). A fase orgânica foi filtrada usando um separador de fases, concentrada sob vácuo, e o produto impuro purificado por cromatografia rápida (80% de EtOAc em heptano). As frações contendo produto foram coletadas, evaporadas e trituradas com Et2O. O produto impuro foi purificado por cromatografia rápida (80% de EtOAc em heptano), e as frações contendo produto combinadas, evaporadas à secura e finalmente trituradas com Et2O para dar o composto em epígrafe (21 mg, 28%).
[00570] 1H RMN (500 MHz, CDCI3, 28°C) δ 1,15 - 1,38 (m, 2H), 1,38 - 1,57 (m, 1H), 1,77 - 1,94 (m, 3H), 2,07 (d, 5H), 2,92 (d, 1H), 3,69 - 3,87 (m, 1H), 6,69 (d, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,86 (d, 2H), 8,02 (d, 2H).
[00571] MS m/z 377,2 [M-H]- Exemplo 46: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-[4- (3-metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0183
Etapa 1: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol-4-il)-2-{4-[3- metil-1-(tetra-hidro-2 H-piran-2-il)-1 H-pirazol-5-il]benzoil}ciclo- hexanocarboxamida
[00572] Adicionou-se Pd(dtbpf)Ch (6,97 mg, 10,84 μmol) e uma solução de K2CO3 (150 mg, 1,08 mmol) em água (1,5 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-ciano-1-metil-1H- pirazol-4-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 43, 150 mg, 0,36 mmol) e 3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (Intermediário 3, 106 mg, 0,36 mmol) em dioxano (2 mL), e a mistura reacional foi evacuada e purgada com nitrogênio (g) três vezes, e de seguida aquecida a 80 °C durante 1 h. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada duas vezes com NaCl (sat., aq). As fases aquosas combinadas foram extraídas duas vezes com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram secas usando um separador de fases e concentradas sob vácuo para dar o composto do subtítulo (180 mg).
[00573] MS m/z 499,3 [M-H]- Etapa 2: (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-Ciano-1-metil-1 H-pirazol—4-il)-2-[4-(3- metil-1 H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00574] Adicionou-se uma solução de HCl (4M em dioxano, 0,5 mL) em água (0,5 mL) a uma solução de (1R,2R e 1S,2S)-N-(5-ciano-1- metil-1H-pirazol-4-il)-2-{4-[3-metil-1-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-1H- pirazol-5-il]benzoil}ciclo-hexanocarboxamida (Exemplo 45 Etapa 1, 180 mg) em dioxano (2 mL), e a mistura reacional foi agitada à ta durante 15 min. A mistura reacional foi concentrada e o produto impuro purificado por HPLC preparativa em uma coluna OBD C18 Sunfire da Waters (5μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão HCO2H/H2O (0,1M, pH3), e de seguida por HPLC preparativa em uma coluna C18 XBridge (10μm, 250x19 ID mm) usando um gradiente de 20-60% de MeCN em um sistema- tampão H2O/MeCN/NH3 (95/5/0,2) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (28 mg, 19%).
[00575] 1H RMN (500 MHz, DMSO) δ 1,09 - 1,23 (m, 1H), 1,33 (t, 1H), 1,4 - 1,57 (m, 2H), 1,76 (d, 1H), 1,84 (d, 1H), 1,98 (d, 1H), 2,05 (d, 1H), 2,27 (s, 3H), 2,86 - 2,94 (m, 1H), 3,69 - 3,78 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 6,56 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,88 (d, 2H), 8,00 (d, 2H), 10,51 (s, 1H), 12,7 (s, 1H).
[00576] MS m/z 417,1 [M+H]+ Exemplo 47: (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)-2-[4- (1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0184
Etapa 1: (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-ciclopropil-1,2,4- tiadiazol-5-il)ciclo-hexanocarboxamida
[00577] Adicionou-se T3P (50% em EtOAc, 383 μL, 0,64 mmol) a uma mistura de ácido (1R,2R e 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)ciclo- hexanocarboxílico (100 mg, 0,32 mmol), 3-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-5- amina (91 mg, 0,64 mmol), e Et3N (134 μL, 0,96 mmol) em EtOAc (3 mL), e a mistura reacional foi aquecida em um reator de micro-ondas a 150 °C durante 30 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc, a fase orgânica extraída com NaHCO3 (sat., aq) e solução saturada de cloreto de sódio, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo para dar o composto do subtítulo (151 mg).
[00578] MS m/z 434,2 [M+H]+ Etapa 2: (1R,2R e 1S,2S)-N-(3-Ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)-2-[4-(1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
[00579] Adicionou-se uma solução de K3PO4 (204 mg, 0,96 mmol) em água (0,9 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)-N-(3-ciclopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)ciclo- hexanocarboxamida (Exemplo 47 Etapa 1, 139 mg, 0,32 mmol), ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (36 mg, 0,32 mmol), e Pd(dppf)Cl2*DCM (26 mg, 0,03 mmol) em uma mistura de DME (2,4 mL) e EtOH (0,8 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 140 °C durante 15 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com água, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/NH3 (100/0,2, pH10) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (35 mg, 26%).
[00580] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 0,85 - 1,05 (m, 4H), 1,09 - 1,24 (m, 1H), 1,32 (d, 1H), 1,39 - 1,51 (m, 1H), 1,81 (dd, 2H), 1,96 - 2,21 (m, 3H), 2,95 - 3,09 (m, 1H), 3,72 - 3,87 (m, 1H), 6,86 (d, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,89 - 8,14 (m, 4H), 13,10 (s, 2H).
[00581] MS m/z 422,2 [M+H]+ Exemplo 48: (1R ,2 R e 1S, 2 S)-N-(3-Metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4-(1 H- pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0185
[00582] Adicionou-se uma solução de K3PO4 (38 mg, 0,18 mmol) em água (0,2 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,2S)-2-(4- bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-tiazol-5-il)ciclo-hexanocarboxamida (Intermediário 100, 24 mg, 0,06 mmol), ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (7 mg, 0,06 mmol), e Pd(dppf)Ch (5 mg, 5,89 μmol) em uma mistura de DME (0,6 mL) e EtOH (0,2 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 140 °C durante 15 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica extraída com água, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/NH3 (100/0,2, pH10) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (8 mg, 35%).
[00583] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 1,1 - 1,3 (m, 1H), 1,3 - 1,44 (m, 1H), 1,44 - 1,64 (m, 2H), 1,78 (d, 1H), 1,86 (d, 1H), 1,97 - 2,12 (m, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,84 - 3,04 (m, 1H), 3,81 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,86 (d, 1H), 7,73 - 8,15 (m, 5H), 11,96 (s, 1H), 13,10 (s, 1H).
[00584] MS m/z 395,2 [M+H]+ Exemplo 49: (1R,2R e 1S, 1S)-N-(4-Ciano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4- (1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida
Figure img0186
[00585] Adicionou-se uma solução de K3PO4 (74 mg, 0,35 mmol) em água (0,3 mL) a uma mistura de (1R,2R e 1S,1S)-2-(4- bromobenzoil)-N-(4-ciano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)ciclo- hexanocarboxamida (Intermediário 101, 51 mg, 0,12 mmol), ácido 1H-pirazol-5-ilborônico (13 mg, 0,12 mmol), e Pd(dppf)Cl2*DCM (10 mg, 0,01 mmol) em uma mistura de DME (1 mL) e EtOH (0,3 mL), e a mistura reacional foi aquecida a 140 °C durante 15 min. A mistura reacional foi diluída com EtOAc e a fase orgânica lavada com água, seca usando um separador de fases e concentrada sob vácuo. O produto impuro foi purificado por HPLC preparativa em uma coluna Prep OBD C18 XBridge (5 μm, 150x19 ID mm) usando um gradiente de 5-95% de MeCN em um sistema-tampão H2O/NH3 (100/0,2, pH10) como fase móvel para dar o composto em epígrafe (14 mg, 29%).
[00586] 1H RMN (600 MHz, DMSO) δ 1,15 - 1,24 (m, 1H), 1,28 - 1,39 (m, 1H), 1,46 (d, 1H), 1,59 (d, 1H), 1,78 (s, 1H), 1,87 (d, 1H), 2,05 (s, 1H), 2,12 (d, 1H), 2,41 (s, 3H), 3,21 (s, 1H), 3,84 (s, 1H), 6,86 (d, 1H), 7,76 - 8,2 (m, 5H), 12,83 (s, 1H), 13,10 (s, 1H).
[00587] MS m/z 420,1 [M+]+

Claims (11)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (IV):
Figure img0187
ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, na qual X1 é CH ou CCH3; R2 é -H ou -F; R4 é -H ou -CH3; e R8 é -H ou CH3.
2. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que X1 é CH.
3. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é H.
4. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R4 é -CH3.
5. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R8 é H.
6. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste em: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(4-oxo- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo-hexanocarboxamida; (1R,2R)-N-(5-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida; (1R,2R)-N-(5-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida; (1R,2R)-N-(4-Oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin- 3-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida; (1R,2R)-N-(2-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]ciclo- hexanocarboxamida;e (1R,2R)-N-(2-Metil-4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]ciclo-hexanocarboxamida;
7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5- il)benzoil]-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5- il)benzoil]-N-(4-oxo-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)ciclo- hexanocarboxamida.
9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e pelo menos um veículo, diluente, ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
10. Uso de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para preparar um medicamento para o tratamento ou profilaxia de doenças selecionadas de doença cardiovascular, doença renal crônica, diabetes mellitus tipo II e complicações de diabetes mellitus tipo II, doença inflamatória respiratória e complicações associadas a ela, doenças renais inflamatórias e vasculares e complicações associadas à doença renal, doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) e esteato-hepatite não alcoólica (NASH).
11. Uso de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para preparar um medicamento para tratar doença cardiovascular.
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