BR112017022722B1 - Produto para limpeza, desinfectaçâo e higienização - Google Patents
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Abstract
PRODUTO PARA LIMPEZA,SANIFICAÇÃO E HIGIENIZAÇÃO. Produto para limpeza, sanificação e higienização, que compreende uma solução básica com ação sanitária e/ou higiênica a que se misturam bactérias probióticas e elementos de bacteriófagos; as bactérias probióticas sendo preferencialmente dos gêneros Bacillus subtilis, Bacillus megaterium e Bacillus pumilus, enquanto os elementos bacteriófagos compreendem como alternativa ou em combinação, bacteriófagos das famílias Caudavirales, Microviridae, Leviviridae, Inoviridae, Tectiviridae, Corticoviridae.
Description
[0001] A presente invenção refere-se ao campo técnico de limpeza, desinfectação e higienização, em particular de superfícies.
[0002] Atualmente, a possibilidade de controlar e eliminar a contaminação química e/ ou microbiana que pode ser perigosa para a saúde das pessoas vem sendo cada vez mais importante.
[0003] Os produtos e métodos tradicionais e atualmente utilizados para limpeza e desinfectação não são mais satisfatórios tanto para a ocorrência de espécies microbianas multirresistentes (chamados de "superbacterias") como para evitar o uso de substâncias químicas desinfetantes antimicrobianas com alto impacto ambiental.
[0004] Isto deve estar relacionado com a incapacidade dos detergentes tradicionais (formulados quimicamente) e meios de higienização para atuar contra a recontaminação das superfícies tratadas.
[0005] Essa recontaminação é, em última instância, a principal responsável por infecções associadas à microrganismos contaminantes (bactérias e fungos) que podem ser transmitidos pelo contato com as superfícies contaminadas.
[0006] Outra desvantagem de detergentes tradicionais/meios de higienização relaciona-se com a incapacidade de controlar a ocorrência de antibióticos de espécies bacterianas multirresistentes. Do contrário, o uso de substâncias determinadas (e a pressão seletiva exercida sobre microorganismos contaminantes) é, por vezes, diretamente correlacionado com a seleção de espécies microbianas resistentes, o que é altamente indesejável, uma vez que potencialmente associado ao desenvolvimento de infecções mais perigosas para a saúde das pessoas, pois é difícil ser erradicada por meio de terapia farmacológica.
[0007] No campo hospitalar, observa-se que as infecções representam uma das complicações mais freqüentes da internação (5% - 15% de todos os pacientes hospitalizados), uma vez que e os limites e as superfícies dos móveis atuam como receptáculos para microrganismos, aumentando assim o risco de contaminação por contato direto e/ou indireto com o paciente.
[0008] Atualmente, existem produtos conhecidos para limpeza e desinfectação de superfícies hoje utilizadas pelo requerente no uso do sistema conhecido com o nome comercial "Probiotic Cleaning Hygien System" (PCHS), em que os esporos de bactérias probióticas, em particular do gênero Bacillus, são introduzidos em uma mistura com ação detergente, desinfetante e de higienização.
[0009] Tais produtos usam uma abordagem de "controle biológico" com base no fato de que os microorganismos probióticos (não patogênicos) podem colonizar as superfícies a serem limpas e higienizadas, competindo assim com a proliferação de outras espécies potencialmente perigosas para a saúde das pessoas.
[00010] ^s bactérias do gênero Bacillus representam um ótimo grupo de bactérias gram-positivas esporogênicas, de natureza ubíqua e que ocorrem também no intestino humano.
[00011] Os esporos formados pela bactéria Bacillus podem permanecer vitais por períodos muito longos, graças à sua resistência à secagem, ao calor e a muitas substâncias químicas e, portanto, são ideais para aplicações probióticas no campo de desinfectação.
[00012] Além disso, é destacado que, do ponto de vista da segurança, o risco patogênico das espécies de Bacillus que ocorrem nos produtos utilizados na aplicação PCHS é considerado baixo/nulo (não patógeno).
[00013] O requerente mostrou que os produtos para limpeza e desinfectação do tipo utilizado na aplicação do sistema PCHS devem sua ação, por um lado, ao meio de detergente / desinfetante / higienização de base, que, de acordo com as normas da CE, contém tensoativos não iônicos (5 -15%), tensoativos catiônicos (<5%), tensoativos anfotéricos (<5%) em concentrações ambientalmente sustentáveis e é responsável pela ação de limpeza imediata.
[00014] Por outro lado, a presença de probióticos previne a re-conolização de superfícies por microorganismos contaminantes e é responsável por manter a condição higiênica das superfícies estáveis, reduzindo de forma forte e estável o número e quantidade de espécies microbianas potencialmente patogênicas nas superfícies de hospitais [ Vandini et al., 2014 - Biocontrole de superfície rígida em hospitais que utilizam produtos de limpeza baseados em microbios. PLoS One 9, e108598].
[00015] Além disso, o PCHS mostrou ser capaz de reduzir fortemente o número de espécies bacterianas resistentes a antibióticos, evitando assim selecionar ou induzir espécies resistentes [Caselli et al., 2016 - Impact of a Probiotic-Based Cleaning Intervention on the Microbiota Ecosystem of the Hospital Surfaces: Focus on the Resistome Remodulation. PLoS One 11, e0148857].
[00016] Uma vez que é um sistema baseado no mecanismo biológico de antagonismo competitivo entre contaminantes probióticos e microbianos, são necessários tratamentos prolongados, por exemplo, pelo menos 30 dias de aplicação, para alcançar uma redução estável da contagem microbiana.
[00017] Após um período tão prolongado, os detergentes à base de probióticos são capazes de inibir a ocorrência de patógenos na superfície de cerca de 90%, em comparação com as superfícies tratadas com produtos químicos tradicionais [ Vandini et al., 2014].
[00018] US2013 / 1841196 A1 e EP1967578 A1 revelam composições de limpeza e desinfecção que são utilizadas ou são úteis para limpar e desinfectar superfícies de sanitas. As referidas composições compreendem esporos tensoativos e bactérias probióticas da família Bacillus. As composições aderem à superfície tratada e os esporos das bactérias probióticas inibem a formação e o crescimento de microrganismos indesejáveis na superfície tratada.
[00019] O documento EP0414304 A2 divulga o uso de bacteriófagos para prevenir ou controlar o crescimento de bactérias higienicamente indesejáveis e o uso de composição de desinfecção compreendendo as referidas bacteriófilas para desinfecção de superfícies duras, tais como superfícies de sanitários.
[00020] O objetivo da presente invenção é solucionar os referidos problemas. De acordo com um aspecto da invenção, isto é feito fornecendo um produto para limpeza, desinfectação e higienização capazes de atuar de forma particularmente rápida e eficiente contra qualquer espécie microbiana, inclusive multi-resistente.
[00021] Outro objetivo da invenção é fornecer um produto para limpeza, desinfectação e higienização com impacto ambiental extremamente limitado.
[00022] Outro objetivo da invenção é fornecer um produto para limpeza, desinfectação e higienização para o tratamento de superfícies.
[00023] Os objetivos acima descritos são obtidos por meio do produto para limpeza, desinfectação e higienização, que compreende uma solução de base com ação detergente, desinfetante e higiênica contendo pelo menos um tensoativo escolhido entre os tensoativos não iônicos, tensoativos catiônicos e tensoativos anfotéricos; esporos de bactérias probióticas misturados a essa solução de base, caracterizado por compreender ainda elementos de bacteriófagos misturados a essa solução de base e tendo ação bactericida em espécies bacterianas não desejadas predeterminadas que ocorrem em superfícies contaminadas, tais elementos de bacteriófagos, em cooperação com os esporos de bactérias probióticas, que podem realizar uma ação combinada e sinérgica contra os microrganismos prejudiciais, em que a concentração de tensoativos não iônicos estar entre 0,001-30%, a concentração de tensoativos catiônicos está entre 0,001-15%, a concentração de tensoativos anfotéricos está entre 0,001-15%, a concentração de esporos de bactérias probióticas misturadas à solução base estar entre 102 - 109 esporos/ml e a concentração de elementos bacteriófagos misturados à solução de base estar entre 103 -109 PFU/ml.
[00024] De acordo com modalidades particulares, o produto para limpeza, desinfectação e higienização objeto da invenção, compreende uma ou mais das seguintes características, consideradas singularmente ou em combinação: - a concentração de tensoativos não iônicos está de preferência entre 5-15%; - a concentração de tensoativos catiônicos está de preferência entre 0,001-5%; - a concentração de tensoativos anfotéricos está de preferência entre 0,001-5%; - a concentração de esporos de bactérias probióticas está de preferência entre 106 -107 esporos/ml; - a concentração de elementos de bacteriófagos está de preferência entre 106 -107 PFU/ml; - as bactérias probióticas são do gênero Bacillus; - as bactérias probióticas são do Bacillus subtilis, Bacillus megaterium e espécies de Bacillus pumilis; - os elementos bacteriófagos compreendem os bacteriófagos da família Caudovirales e/ou família Microviridae e/ou família Leviviridae e/ou família Inoviridae e/ou família Tectiviridae e/ou família Corticoviridae; - o produto para limpeza, desinfectação e higienização é utilizado para o tratamento de superfícies.
[00025] As características da invenção serão destacadas a seguir como uma maneira de exemplificar a descrição de algumas modalidades preferidas, mas não limitativas. O produto proposto e inovador para limpeza, desinfectação e higienização, compreende: - uma solução de base com ação sanitária e/ou higienizante contendo pelo menos um tensoativo escolhido entre os tensoativos não iônicos, tensoativos catiônicos e tensoativos anfotéricos, - esporos de bactérias probióticas misturados a essa solução de base; - elementos de bacteriófagos misturados a essa solução de base e com ação bactericida em espécies bacterianas indesejáveis predeterminadas, tais elementos de bacteriófagos em cooperação com esporos de bactérias probióticas podendo realizar uma ação combinada e sinérgica contra microorganismos prejudiciais.
[00026] Os tensoativos não iônicos podem ocorrer na solução de base com uma concentração de preferência entre 5-15%.
[00027] Os tensoativos catiônicos podem ocorrer na solução de base com uma concentração de preferência entre 0,001-5%;
[00028] Os tensoativos anfotéricos podem ocorrer na solução de base com uma concentração de preferência entre 0,001-5%.
[00029] A solução de base contém um ou mais dos referidos tensoativos não iônicos, catiônicos e anfotéricos nas concentrações indicadas.
[00030] Os esporos de bactérias probióticas podem ocorrer na solução de base com uma concentração de preferência entre 106 - 107 esporos/ml.
[00031] Os elementos de bacteriófagos especificamente dirigidos contra bactérias persistentes nas superfícies contaminadas podem ocorrer na solução de base com uma concentração de preferência entre 106 -107 PFU/ml.
[00032] Quanto às bactérias probióticas, como exemplo de não limitação, podem ser do gênero Bacillus, por exemplo, as espécies Bacillus subtilis, Bacillus megaterium e Bacillus pumilus.
[00033] É claro que qualquer outra bactéria probiótica pode ser usada de acordo com as espécies bacterianas indesejáveis a serem combatidas.
[00034] De forma vantajosa, os elementos de bacteriófagos podem ser escolhidos, como alternativa ou em combinação, de acordo com a espécie bacteriana a ser combatida entre as seguintes famílias: Caudovirales, Microviridae, Leviviridae, Inoviridae, Tectiviridae, Corticoviridae.
[00035] Como já é conhecido, os elementos bacteriófagos da família Caudovirales compreendem também as famílias Myoviridae, Siphoviridae, Podoviridae.
[00036] O produto proposto para limpeza, desinfectação e higienização, nas modalidades preferidas acima descritas, é particularmente indicado para o tratamento de superfícies, compreendendo o tratamento de superfícies internas de tubos para circulação de fluidos para uso alimentar (por exemplo, água).
[00037] A ação dos bacteriófagos é específica, uma vez que tipos específicos de bacteriófagos líticos matam tipos específicos de bactérias, levando a cabo uma ação potencialmente muito eficiente e direcionada na luta direta contra bactérias indesejadas.
[00038] Também deve ser destacado como o uso de bacteriófagos específicos evita o risco de danos aos probióticos de Bacillus, o que pode manter sua atividade intacta e eficiente.
[00039] O uso de bacteriófagos em produtos para limpeza, desinfectação e higienização é particularmente indicado, uma vez que são bastante estáveis em diferentes condições de temperaturas, pH e salinidade ambiental e, portanto, podem ser adicionados a detergentes diluídos sem perda de atividade.
[00040] Foram realizados testes experimentais de laboratório que destacam o efeito sinérgico decorrente do uso combinado de bactérias probióticas e elementos bacteriófagos em comparação com o uso único de bactérias probióticas ou elementos bacteriófagos.
[00041] A atividade dos detergentes para PCHS contendo probióticos foi amplamente avaliada no campo, onde mostrou poder reduzir a contagem microbiana de cerca de 90% em relação aos detergentes tradicionais, por meio do uso diário prolongado por cerca de um mês.
[00042] Após um período de dois meses, a redução da contagem de contaminantes é estável, tanto para o que diz respeito a bactérias quanto para os fungos [Caselli et al., 2016].
[00043] Nas Figuras de 1 a 3, nota-se a ação antimicrobiana (bactérias e fungos) do detergente com base apenas em probióticos.
[00044] O desenvolvimento da contaminação por Staphylococcus aureus (como exemplo de bactérias gram positivas), Enterobacteriaceae spp. (como exemplo de bactérias gram negativas) e Candida albicans (como exemplo de fungos) foi medida no campo, por aplicação de placas de Rodac de meio de cultura específico para as espécies de bactérias e fungos indicadas.
[00045] Nas Figuras 4 a 6, nota-se a ação antibacteriana de bacteriófagos em superfícies contaminadas por bactérias alvo específicas.
[00046] O desenvolvimento de contaminação por Staphylococcus aureus (como exemplo de bactérias gram-positivas), Pseudomonas aeruginosa (como exemplo de bactérias gram-negativas) e Candida albicans (como exemplo de fungos) foi medido in vitro, em modelos experimentais de superfícies não porosas e material estéril (cerâmica a uma só vez 24 cm2).
[00047] As superfícies foram contaminadas com uma quantidade conhecida de microorganismo (102 CFU/24 cm2) e no seguinte tratado por aplicação de concentrações crescentes de bacteriófagos específicos (103, 104, 105 PFU, respectivamente) com proporção de 10:1, 100:1 e 1000:1 para as bactérias alvo em cultura.
[00048] Para os fungos, utilizou-se a combinação de bacteriófagos utilizados contra bactérias gram-positivas e gram-negativas.
[00049] A contaminação residual foi avaliada após 1, 3 e 6 horas por aplicação de placas de Rodac de meio de cultura específico para as espécies de bactérias e fungos indicadas.
[00050] Os resultados são expressos como valores médios ± DP de amostras em duplicata em três experimentos independentes.
[00051] Pode-se notar que já após 1 hora e na menor concentração, os bacteriófagos são capazes de eliminar mais de 90% das células bacterianas contra as quais são direcionadas especificamente.
[00052] Os tratamentos com apenas bacteriófagos têm a desvantagem a ser direcionada contra apenas bactérias especificamente reconhecidas por bacteriófagos e, portanto, em caso de contaminação por espécies bacterianas diferentes daquelas contra as quais os bacteriófagos são direcionados especificamente, pode ocorrer uma recontaminação da superfície tratada o que é devido ao fato de que os bacteriófagos são, por definição, específicos para uma espécie bacteriana e, portanto, não são capazes de atacar outras espécies bacterianas, muito menos para atacar espécies de fungos.
[00053] Essas desvantagens de bacteriófagos são superadas pela adição de probióticos, o que têm, em vez disso, uma ação mais lenta, mas generalizada, independentemente da ocorrência de espécies bacterianas ou de fungos.
[00054] Nas Figuras 7 a 9, nota-se o efeito da ação antimicrobiana combinada e sinérgica obtida pela ocorrência contemporânea de bactérias probióticas e bacteriófagos em superfícies contaminadas pelos micróbios específicos mostrados.
[00055] O desenvolvimento de contaminação por Staphylococcus aureus (como exemplo de bactérias gram-positivas), Pseudomonas aeruginosa (como exemplo de bactérias gram-negativas) e Candida albicans (como exemplo de fungos) foi medido in vitro, em modelos experimentais de superfícies não porosas e material estéril (cerâmica a uma só vez 24 cm2).
[00056] As superfícies foram contaminadas com uma quantidade conhecida de microorganismos (103 CFU/24 cm2) em seguida tratado por aplicação de uma solução contendo bactérias probióticas (103 PFU/ml) e bacteriófagos específicos (104 PFU/ml).
[00057] Para os fungos, utilizou-se a combinação de bacteriófagos utilizados contra bactérias gram-positivas e gram-negativas.
[00058] A contaminação residual foi avaliada após 1, 2, 3 e 4 semanas por aplicação de placas de Rodac de meio de cultura específico para as espécies de bactérias e fungos indicadas. Os resultados são expressos como valores médios ± DP de amostras em duplicata em três experimentos independentes.
[00059] Na Figura 10, mostra-se a comparação direta da ação antimicrobiana dos três tratamentos sobre a contaminação por Staphylococcus aureus, medido in vitro em modelos experimentais de superfícies de material não-poroso e estéril (cerâmica a fogo simples 24 cm2).
[00060] As superfícies foram contaminadas com uma quantidade conhecida de S. aureus (103 CFU/24cm2) e no seguinte tratado por aplicação de uma solução contendo apenas bactérias probióticas (103 PFU/ml), apenas bacteriófagos específicos (104 PFU/ml), ou a combinação de probióticos e bacteriófagos nas concentrações indicadas.
[00061] A contaminação residual foi avaliada após 1, 2, 3 e 7 dias por aplicação de placas de Rodac de meio de cultura específico para Staphylococcus aureus.
[00062] Os resultados são expressos como valores médios ± DP de amostras em duplicata em três experimentos independentes.
[00063] A partir dos testes experimentais realizados, nota-se facilmente como a ocorrência contemporânea de probióticos de Bacillus e bacteriófagos anti-patogênicos aumenta notavelmente a eficácia do produto para limpeza, desinfectação e higienização, graças à ação sinérgica realizada contra os vários microorganismos prejudiciais.
[00064] Por um lado, os bacteriófagos reduzem a contagem de contaminantes com extrema rapidez, mas têm uma ação limitada no tempo e não são capazes de evitar a contaminação.
[00065] Por outro lado, os probióticos reduzem lentamente a contagem de contaminantes, graças aos mecanismos competitivos, impedindo assim a recontaminação.
[00066] A ocorrência contemporânea de probióticos e bacteriófagos, garante a rapidez da ação antimicrobiana e, ao mesmo tempo, a inibição da recontaminação, garantindo assim uma redução rápida e estável dos patógenos.
[00067] A modalidade de um produto para limpeza, desinfectação e higienização que contenha ao mesmo tempo Bacillus probióticos e bacteriófagos anti-patogênicos é claramente vantajoso em relação aos produtos tradicionais, na medida em que garante uma redução extremamente rápida e imediata da contagem de bactérias contaminantes.
[00068] Isto é devido à ação combinada e sinérgica realizada pelos elementos bacteriófagos que são capazes de matar as bactérias alvo em poucas horas e por bactérias probióticas que são capazes de colonizar os objetos tratados persistentemente, levando rapidamente o lugar dos agentes patogênicos.
[00069] Portanto, a ocorrência de bacteriófagos representa um fortalecimento da ação antibacteriana do produto tradicional com base nos probióticos de Bacillus em relação aos agentes patogênicos, facilitando e aumentando a ação dos probióticos, que também resultam em fungos ativos.
[00070] Isso garante um efeito imediato na etapa inicial de limpeza, sanificação e higienização, permitindo que a bactéria probiótica determine, em tempos mais rápidos do que os produtos tradicionais, uma presença baixa, estável e duradoura em tempo de bactérias potencialmente patogênicas nos objetos tratados.
[00071] A adição de elementos de bacteriófagos específicos à solução de base misturada a esporos probióticos de Bacillus permite, vantajosamente, usar o produto de forma direta, respondendo a necessidades específicas e/ou situações de interesse particular, como por exemplo, a redução de uma ou mais ocorrências particulares e/ou espécies bacterianas específicas prejudiciais.
[00072] A ocorrência de elementos de bacteriófagos específicos representa outro meio de segurança quanto ao uso de bactérias probióticas de Bacillus, uma vez que, acima de tudo, nas etapas iniciais de ataque, esses microorganismos são destruídos e são potencialmente capazes de fornecer caracteres Bacillus indesejáveis por meio da troca de genes.
[00073] A presença no produto inventivo de um maior número de famílias de elementos bacteriófagos (Caudovirales, Microviridae, Leviviridae, Inoviridae, Tectiviridae e Corticoviridae) permite que o mesmo produto tenha uma ação bactericida em um grupo maior de espécies bacterianas tratáveis.
[00074] As famílias predeterminadas de elementos de bacteriófagos podem estar presentes no objeto do produto da invenção, tanto de forma singular como combinada, de modo que se contempla a possibilidade de tratamentos diversificados de acordo com a necessidade específica.
[00075] De acordo com o acima descrito é claro como o produto proposto para limpeza, desinfectação e higienização é capaz de atuar contra qualquer espécie microbiana, do tipo multirresistente ("superbactérias"), de maneira particularmente rápida e eficiente em relação aos produtos tradicionais indicados no preâmbulo.
[00076] O produto proposto para limpeza, desinfectação e higienização, que compreende uma solução básica com ação desinfectante e/ou higienizante a que as bactérias probióticas e os elementos do bacteriófago são misturados, tem definitivamente um impacto ambiental extremamente reduzido.
[00077] Esse produto é particularmente adequado para o tratamento de superfícies e/ou ambientes que compreendem o tratamento de superfícies internas de tubos para circulação de fluidos para uso alimentar (por exemplo, água).
Claims (7)
1. Produto para limpeza, desinfectação e higienização, que compreende: uma solução de base com ação detergente, desinfetante e higiênica contendo pelo menos um tensoativo escolhido entre os tensoativos não iônicos, tensoativos catiônicos e tensoativos anfotéricos; esporos de bactérias probióticas misturados a essa solução de base; caracterizado por compreender ainda elementos de bacteriófagos misturados a essa solução de base e tendo ação bactericida em espécies bacterianas não desejadas predeterminadas que ocorrem em superfícies contaminadas, tais elementos de bacteriófagos, em cooperação com os esporos de bactérias probióticas, que podem realizar uma ação combinada e sinérgica contra os microrganismos prejudiciais, em que a concentração de tensoativos não iônicos estar entre 0,001-30%, a concentração de tensoativos catiônicos está entre 0,001-15%, a concentração de tensoativos anfotéricos está entre 0,001-15%, a concentração de esporos de bactérias probióticas misturadas à solução base estar entre 102109 esporos/ml e a concentração de elementos bacteriófagos misturados à solução de base estar entre 103-109 PFU/ml.
2. Produto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de tensoativos não iônicos estar entre 515%, na medida em que a concentração de tensoativos catiônicos estar entre 0,001-5%, em que a concentração de tensoativos anfotéricos estar entre 0,0015%.
3. Produto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por a concentração de esporos de bactérias probióticas misturadas com a solução de base estar entre 106 -107 esporos/ml.
4. Produto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por a concentração de elementos de bacteriófagos misturados na solução de base estar entre 106 -107 PFU/ml.
5. Produto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por as bactérias probióticas serem do gênero Bacillus.
6. Produto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por as bactérias probióticas serem de Bacillus subtilis , Bacillus megaterium e Bacillus espécies de pumilis .
7. Produto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por os elementos bacteriófagos compreenderem os bacteriófagos da família Caudovirales e/ou família Microviridae e/ou Família Leviviridae e/ou família Inoviridae e/ou Família Tectiviridae e/ou Família Corticoviridae .
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