Campo Técnico
[001] A presente invenção refere-se a combinações e composições que são úteis no tratamento de câncer, por exemplo, no tratamento de câncer de mama ou de cânceres hematológicos tais como mieloma múltiplo, linfoma ou leucemia.
Antecedentes da Invenção
[002] O câncer é uma das doenças que mais ameaçam a vida. O câncer é uma condição na qual as células em uma parte do corpo experimentam um crescimento fora de controle. De acordo com os últimos dados da American Cancer Society, é estimado que haverá 1,67 milhões de novos casos de câncer nos USA em 2014. O câncer é a segunda causa principal de morte nos Estados Unidos (perdendo apenas para as doenças cardíacas) e reivindicará mais do que 585.000 vidas em 2014. De fato, é estimado que 50% de todos os homens e 33% de todas as mulheres que vivem nos Estados Unidos desenvolverá algum tipo de câncer durante seu tempo de vida. Portanto, o câncer constitui um problema de saúde pública principal e representa um custo significativo Nos Estados Unidos. Esses números se refletem em outros lugares através da maioria dos países globalmente, embora os tipos de câncer a as proporções relativas da população que desenvolve os cânceres variem dependendo de vários fatores diferentes tais que incluem a genética e a dieta.
[003] Por décadas, a cirurgia, quimioterapia e a radiação foram tratamentos estabelecidos para vários cânceres. Os pacientes recebem de modo geral uma combinação desses tratamentos que dependem do tipo e da extensão de sua doença. Mas a quimioterapia é a opção mais importante para os pacientes com câncer quando o trata- mento cirúrgico (isto é, a remoção do tecido doente) é impossível. Embora a cirurgia seja eficaz algumas vezes na remoção de tumores localizados em certos locais, por exemplo, na mama, cólon e pele, ela não pode ser usada no tratamento de tumores localizados em outras áreas, tais como o arcabouço, nem no tratamento de cânceres hematológicos disseminados, incluindo cânceres do sangue e tecidos que formam o sangue (tais como a medula óssea). Eles incluem o mieloma múltiplo, linfoma e leucemia. A terapia de radiação envolve a exposição do tecido vivo à radiação ionizante, o que causa a morte ou o dano das células expostas. Os efeitos colaterais da terapia de radiação podem ser agudos ou temporários, enquanto que outros podem ser irreversíveis. A quimioterapia envolve a ruptura da replicação celular ou do metabolismo celular. Ela é usada mais frequentemente no tratamento do câncer de mama, pulmão e testículo. Uma das causas principais de falha nesse tratamento de câncer é o desenvolvimento de resistência ao fármaco pelas células de câncer, um sério problema que pode levar a recorrência da doença ou até a morte. Portanto, tratamentos de câncer mais eficazes são necessários.
[004] O mieloma múltiplo é um problema significativo e crescente. É um câncer que surge das células plasmáticas. As células plasmáti- cas normais produzem imunoglobulinas para combater a infecção. No mieloma, as células plasmáticas se tornam anormais, se multiplicam incontrolavelmente e liberam apenas um tipo de anticorpo - conhecido como paraproteína - que não tem função útil. Ele tende a se acumular na medula óssea e circula no sangue e pode ser detectado na urina também. Ele afeta múltiplos locais no corpo (daí mieloma “múltiplo”) onde a medula óssea é normalmente ativa nos adultos. As formas principais de mieloma múltiplo (ou mieloma como também é referido) são mieloma ativo, plasmacitoma, mieloma de cadeia leve e mieloma não secretório. O número de novos casos de mieloma nos US em 2011 foi de 6,1 por 100.000 homens e mulheres por ano e o percentual da taxa de sobrevida além de cinco anos foi de 45%. É avaliado que o número de novos casos nos US em 2014 será de mais de 24.000 (1,4% de todos os casos de câncer), enquanto que o número de mortes em 2014 será de um pouco mais de 11.000 (1,9% de todos os casos de câncer).
[005] No WO-A-2010/085377, o composto da fórmula I foi mostrado ter excelente atividade in vitro contra linhagens celulares de mi- eloma múltiplo, com atividades na faixa de 35 a 100 vezes maior do que a atividade mostrada pela bendamustina.
[006] A leucemia é um tipo de câncer do sangue ou da medula óssea caracterizado por um aumento anormal de células brancas sanguíneas imaturas chamadas de ”blastos”. Ao invés de produzir células sanguíneas brancas normais, funcionais para combater a infecção, o corpo produz um grande número desses blastos não funcionais. A leucemia é uma expressão ampla que abrange um espectro de doenças. Por sua vez, ela é parte de um grupo ainda maior de doenças que afetam o sangue, medula óssea e sistema linfoide, que são todas conhecidas como neoplasmas hematológicos. As formas mais comuns são a leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide aguda (LMA) e leucemia mieloide crônica (LMC) com formas menos comuns que incluem a leucemia de célula pilosa (HCL), leucemia pró-linfocítica de célula T (T-PLL), leucemia linfocítica granular e leucemia linfoblástica aguda de célula T. Estima-se que o número de novos casos nos Estados Unidos em 2014 será maior do que 52.000 (3,1% de todos os novos casos de câncer nos US) com mais de 24.000 mortes (4,1% de todas as mortes por câncer nos US). O percentual da taxa de sobrevida acima de cinco anos é, atualmente, de 57,2%, um número significativamente menor do que de vários outros cânceres, com a taxa de sobrevida acima de cinco anos para a leucemia mieloide agora sendo particularmente baixa de apenas 20%.
[007] Linfoma é um câncer do sistema linfático. Existem dois tipos principais de linfoma, a saber linfoma de Hodgkin e linfoma não Hodgkin.
[008] O linfoma não Hodgkin é a forma mais comum de linfoma. O sistema linfático percorre todo o corpo e, portanto, é possível encontrar o linfoma não Hodgkin em quase todas as partes do corpo. Em pacientes com linfoma não Hodgkin, algumas de suas células brancas sanguíneas (linfócitos) se dividem anormalmente. Elas não possuem qualquer período de repouso como as células normais e elas começam a se dividir continuamente, já que muitas são produzidas. Elas não morrem naturalmente conforme elas geralmente fazem. Essas células começam a se dividir antes que elas estejam completamente maduras e, portanto, não podem combater a infecção como as células brancas sanguíneas normais fazem. Todos os linfócitos anormais começam a se acumular nos linfonodos ou em outros locais tais como a medula óssea e o baço. Eles podem então crescer em tumores e começar a causar problemas dentro do sistema linfático e o órgão no qual eles estão crescendo. Por exemplo, se um linfoma começa na glândula tireoide, ele pode afetar a produção de hormônios da tireoide. Existem vários tipos de linfoma não Hodgkin. Eles podem ser classificados de várias maneiras diferentes. Uma maneira é pelo tipo de célula afetada. No linfoma não Hodgkin dois tipos de linfócitos podem ser afetados - células B e células T. Isso é classificado como um linfoma de célula B ou um linfoma de célula T. A maioria das pessoas com lin- foma não Hodgkin tem linfomas de célula B. Os linfomas de célula T são mais comuns em adolescentes e adultos jovens.
[009] As células do linfoma de Hodgkin possuem um aspecto particular ao microscópio. Essas células são chamadas de células de Reed Sternberg. Linfomas não Hodgkin não têm células de Reed Stern- berg. É importante para os médicos serem capazes de dizer a diferença entre as células do linfoma de Hodgkin e do linfoma não Hodgkin já que eles são duas doenças diferentes. No linfoma de Hodgkin, as células nos linfonodos é que se tornaram cancerosas.
[0010] O percentual da taxa de sobrevida por mais de 5 anos em 2009 para pacientes com linfoma não Hodgkin foi de 63%, enquanto que a taxa de sobrevida para aqueles com linfoma de Hodgkin durante o mesmo período foi de 83%.
[0011] O câncer de mama é um câncer que se forma nos tecidos da mama. O tipo mais comum de câncer de mama é o carcinoma ductal, que começa no revestimento dos dutos mamários (tubos finos que carregam o leite dos lóbulos da mama até o mamilo). Outro tipo de câncer e mama é o carcinoma lobular, que começa nos lóbulos, glândulas lácteas) da mama. Os cânceres de mama podem ser classificados em subgrupos como tumores claudin-low, tumores do tipo basal, tumores positivos para o receptor 2 do fator de crescimento epidérmico humano (HER-2), tumores luminais A e tumores luminais B. O câncer de mama invasivo é o câncer de mama que se dissemina de onde ele começou nos dutos mamários ou lóbulos para o tecido normal circundante. O câncer de mama ocorre em ambos, homens e mulheres, em-bora o câncer de mama masculino seja raro. Em 2014, foi estimado que haverá aproximadamente 223.000 novos casos em mulheres e 2400 em homens, com 4000 mortes de mulheres e apenas 400 mortes em homens.
[0012] Aproximadamente 15 de cada 100 mulheres com câncer de mama possuem o câncer triplo-negativo, isto é, são negativos para o estrogênio, são negativos para progesterona e são negativos para HER2. O câncer de mama triplo-negativo recorrente é uma condição de alta necessidade médica não atendida, devido a sua biologia agressiva, desenvolvimento rápido de resistência ao fármaco e ausên- cias de alvos moleculares. Até agora, a quimioterapia permanece o padrão de tratamento para o câncer de mama triplo-negativo avançado com uma sobrevida global média pobre.
[0013] No WO-A-2010/085377, o composto de fórmula I abaixo está descrito. Ele é uma molécula de fusão HDACi alquilante duplamente funcional de primeira classe que inibe potencialmente a via de
[0014] Ensaios biológicos mostraram que o composto de fórmula I inibe potencialmente a enzima HDAC (IC50 de HDAC1 de 9 M) e foi mostrado ter excelente atividade in vitro contra linhagens celulares de mieloma múltiplo.
[0015] Existe uma necessidade de tratamentos de câncer mais eficazes, incluindo o tratamento de câncer de mama e de cânceres hematológicos tais como mieloma múltiplo, linfoma e leucemia. Atualmente, essas condições afetam várias pessoas e o prognóstico em médio e longo prazo não é bom para várias dessas condições. Sumário da Invenção
[0016] Em um primeiro aspecto da presente invenção é fornecida uma combinação que compreende um inibidor de proteassoma e um composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável: Cl
[0017] Foi surpreendentemente descoberto que combinações de um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e um inibidor de proteassoma tal como carfilzomib ou bortezomib são particularmente eficazes no tratamento de cânceres incluindo cânceres hematológicos tais como mieloma múltiplo, linfoma e leucemia e câncer de mama, tal que elas são altamente promissoras nos esforços para direcionar o problema de encontrar tratamentos mais eficazes para o câncer. As combinações podem compreender opcionalmente um glicocorticoide tal como a dexametasona. Essas combinações adicionais também são particularmente eficazes no tratamento do câncer.
[0018] Em um segundo aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um diluente farmaceu- ticamente aceitável ou um veículo e uma combinação de acordo com o primeiro aspecto da invenção.
[0019] Em um terceiro aspecto da presente invenção, é fornecido um kit que compreende uma combinação de acordo com o primeiro aspecto da presente invenção e, opcionalmente, instruções para tratar um paciente.
[0020] Em um quarto aspecto da presente invenção, é fornecida uma combinação, composição ou kit de acordo com o primeiro, segundo ou terceiro aspecto da presente invenção para uso no tratamento de câncer.
[0021] Em um quinto aspecto da presente invenção, é fornecido um método de tratamento de câncer em um paciente necessitado, compreendendo administrar ao dito paciente uma combinação, composição ou kit de acordo com o primeiro, segundo ou terceiro aspecto da presente invenção.
[0022] Em um sexto aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável desse para uso no tratamento de mieloma múltiplo recidivante/refratário. Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) ou um sal farmaceutica- mente aceitável desse é para uso no tratamento de mieloma múltiplo recidivante/refratário em combinação com um inibidor de proteassoma e, ainda opcionalmente, em combinação com um glicocorticoide.
[0023] Em um sétimo aspecto da presente invenção, é fornecido um método de tratamento de mieloma múltiplo recidivante/refratário em um paciente necessitado, compreendendo administrar ao dito paciente um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável desse. Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável desse é administrado em combinação com um inibidor de proteassoma e pode ser opcionalmente administrado em combinação com um glicorticoide também.
Descrição das Figuras
[0024] A Figura 1 é um gráfico do % de sobrevida de células MM1S de mieloma múltiplo in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla ou trio);
[0025] a Figura 2 é um gráfico do % de sobrevida de células MM1S de mieloma múltiplo in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 72 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla ou trio);
[0026] a Figura 3 é um gráfico de crescimento do tumor (mm3) contra o número de dias de estudo para os diferentes compostos testados em camundongos CB17-SCID inoculados por via subcutânea no flanco direito com 3 x 106 células MM1S, para compostos isolados e como combinações;
[0027] a Figura 4 é um gráfico do % de sobrevida de células RPMI8226 de mieloma múltiplo in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0028] a Figura 5 é um gráfico do % de sobrevida de células 201310-16 MTS AMO abzb de mieloma múltiplo in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0029] a Figura 6 é um gráfico do % de sobrevida de células 201401-15 MTS Jeko do manto de linfoma in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0030] a Figura 7 é um gráfico do % de sobrevida de células 201401-15 MTS Granta do manto de linfoma in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0031] a Figura 8 é um gráfico do % de sobrevida de células 201402-21 MTS MDA-MB468 de câncer de mama do tipo basal in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0032] a Figura 9 é um gráfico do % de sobrevida de células MTS HL-60 de leucemia promielocítica in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0033] a Figura 10 é um gráfico do % de sobrevida de células MTS U937 de leucemia mieloide aguda in vitro como um % do controle ver sus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0034] a Figura 11 é um gráfico do % de sobrevida de células BJAB (linhagem do centro germinativo) de linfoma de célula B in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0035] a Figura 12 é um gráfico do % de sobrevida de células OciLy3 (tipo ABC) de linfoma de célula B in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0036] a Figura 13 é um gráfico do % de sobrevida de células TMD8 (tipo ABC) de linfoma de célula B in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla);
[0037] a Figura 14 é um gráfico do % de sobrevida de células TMD8 (tipo ABC) de linfoma de célula BBT-549 de câncer de mama triplo-negativo in vitro como um % do controle versus a concentração para os diferentes compostos testados depois de 48 horas de incubação, para compostos isolados e como combinações (em dupla); e
[0038] a Figura 15 é um gráfico do % da fração de sobrevida das linhagens celulares T98G, U251MG e U87MG de glioblastoma in vitro contra uma dose de radioterapia (Gy) em combinação com duas con-centrações diferentes do composto de fórmula I (EDO-S101) contra um controle apenas com radioterapia.
Descrição Detalhada da Invenção
[0039] No presente pedido, várias expressões e frases comuns são usadas, que devem ser interpretadas como a seguir.
[0040] “Animal” inclui humanos, mamíferos não humanos (por exemplo, cães, gatos, coelhos, gado, cavalo, ovelhas, cabras, suínos, veados e semelhantes) e não mamíferos (por exemplo, pássaros e semelhantes).
[0041] “Sais farmaceuticamente aceitáveis” significam sais de compostos da presente invenção que são farmaceuticamente aceitáveis, como definidos acima e que possuem a atividade farmacológica desejada. Tais sais incluem sais de adição ácida formados com ácidos inorgânicos ou com ácidos orgânicos. Sais farmaceuticamente aceitáveis também incluem sais de adição básica que podem ser formados quando prótons ácidos presentes são capazes de reagir com bases inorgânicas ou orgânicas. Geralmente, tais sais são, por exemplo, preparados pela reação de formas de ácido ou base livre desses compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou do ácido apropri-ado em água ou em um solvente orgânico ou uma mistura dos dois. Geralmente, meios não aquosos como o éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila são preferidos. Exemplos de sais de adição ácida incluem sais de adição mineral tais como, por exemplo, cloridra- to, bromidrato, iodidrato, sulfato, bissulfato, sulfamato, nitrato, fosfato e sais de adição ácida orgânicos tais como, por exemplo, acetato, trifluo- roacetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartarato, sali- cilato, tosilato, lactato, naftalenossulfonato, malato, mandelato, meta- nosulfonato e p-toluenosulfonato. Exemplo de sais de adição alcalina incluem sais inorgânicos tais como, por exemplo, sais de sódio, potássio, cálcio e amônia e sais alcalinos orgânicos tais como, por exemplo, sais de etilenodiamina, etanolamina, N,N-dialquiletanolamina, trietano- lamina e de aminoácidos básicos.
[0042] Foi surpreendentemente descoberto que as combinações de um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e um inibidor de proteassoma, tal como carfilzomib ou borte- zomib, são particularmente eficazes no tratamento de cânceres incluindo cânceres hematológicos tais como mieloma múltiplo, leucemia e linfoma e câncer de mama, tal que eles são altamente promissores nos esforços de direcionar o problema para o achado de tratamentos mais eficazes para o câncer. As combinações podem ainda opcionalmente compreender glicocorticoides tais como a dexametasona. Essas combinações adicionais também são particularmente eficazes no tratamento do câncer.
[0043] Na combinação da presente invenção, o sal farmaceutica- mente aceitável do composto de fórmula I pode ser, preferivelmente o cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, bissulfato, sulfamato, nitrato, fosfato, citrato, metanosulfonato, trifluoracetato, glutamato, glicuronato, glutarato, malato, maleato, succinato, fumarato, tartarato, salicilato, tosilato, lactato, naftalenossulfonato ou acetato e, mais preferivelmente, o acetato.
[0044] Na combinação da presente invenção, o inibidor de pro- teassoma pode ser preferivelmente selecionado do grupo que consiste em bortezomib, carfilzomib, marizomib, delanzomib (CEP-18770), oprozomib (ONX 0912), ixazomib (MLN-9708) e LU-102 ou um sal farmaceuticamente aceitável desses. Particularmente preferivelmente, o inibidor de proteassoma pode ser selecionado entre bortezomib, car- filzomib e LU-102.
[0045] As estruturas desses inibidores de proteassoma são as seguintes:
[0046] A combinação da presente invenção pode compreender ainda um glicocorticoide. Nessa modalidade da combinação da presente invenção, o glicocorticoide pode ser selecionado preferivelmente do grupo que consiste em dexametasona, fluocinolona acetonida e prednisona e é mais preferivelmente a dexametasona.
[0047] Em uma combinação adicional preferida da presente invenção que compreende um composto de fórmula I ou um sal farmaceuti- camente aceitável desse, um inibidor de proteassoma e opcionalmente um glicocorticoide, a dita combinação pode compreender ainda um ou mais agentes farmaceuticamente ativos adicionais. Agentes farmaceu- ticamente ativos particularmente adequados são agentes antitumor que possuem um modo de ação diferente do composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse, o inibidor de proteassoma e o glicocorticoide , por exemplo, agentes alquilantes tais como nitro- soureias, etilenoiminas, alquilsulfonatos, hidrazinas e triazinas e agentes baseados em platina; alcaloide de planta, taxanos e alcaloides da vinca; antibióticos antitumor tais como cromomicinas, antraciclinas e uma miscelânea de antibióticas tais como Bleomicina e Mitomicina; antimetabolitos tais como antagonistas de ácido fólico, antagonistas de pirimidina, antagonistas da purina e inibidores de adenosina deaminase; inibidores da topoisomerase tais como inibidores da topoisomerase I, inibidores da topoisomerase II, miscelânea de antineoplásicos tais como inibidores da ribonucleotídeo redutase, inibidor de esteroide adrenocartical, agentes antimicrotúbulo e retinoides; proteína quina- ses, proteínas de choque térmico, poli-ADP (adenosina difosfato)- ribose polimerase (PARP), fatores indutores de hipóxia (HIF), proteas- soma, proteínas de sinalização Wnt/Hedgehog/Notch, TNF-alfa, meta- loproteinase da matriz, farnesil transferase, via da apoptose, histona deacetilases (HDAC), histona acetiltransferases (HAT) e metiltransfe- rase; terapias hormonais, agente de ruptura vascular, terapia de gene, terapia de câncer com RNAi, agentes quimioprotetores, conjugado de anticorpo, imunoterapia do câncer tal como interleucina-2, vacinas para câncer ou anticorpos monoclonais; e preferivelmente agentes que danificam o DNA, antimetabolitos, inibidores da topoisomerase e agentes antimicrotúbulo, inibidores de EGFR, inibidores de HER2, inibidores de VEGFR2, inibidores de BRAF, inibidores de Bcr-Abl, inibidores de PDGFR, inibidores de ALK, inibidores de PLK, inibidores de MET, agentes epigeneticos, inibidores de HSP90, inibidores de PARP, inibi-dores de CHK, inibidor de aromatase, antagonista do receptor de es- trogênio e anticorpos que atingem VEGF, HER2, EGFR, CD50, CD20, CD30, CD33, etc.
[0048] Em uma modalidade preferida da combinação da presente invenção, o inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável e, se presente, o glicocorticoide são adaptados para administração concomitantemente, sequencialmente ou separadamente. Preferivelmente, o inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável e, se presente, o glicocorticoide são adaptados para administração concomi-tantemente.
[0049] Em uma modalidade preferida da combinação da presente invenção, o inibidor de proteassoma é selecionado entre bortezomib, carfilzomib e LU-102 e o composto de fórmula I ou um sal farmaceuti- camente aceitável desse é
ou o sal de acetato desse. Em uma modalidade dessa combinação, a combinação pode compreender ainda um glicocorticoide, em que o dito glicocorticoide é a dexametasona.
[0050] Em uma modalidade preferida da combinação da presente invenção, a proporção molar do inibidor de proteassoma para o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse na dita combinação é de 1:1000 ou 1000:1. Preferivelmente, a proporção molar do inibidor de proteassoma para o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse na dita combinação é de 1:1000 ou 10:1, mais preferivelmente entre 1:800 a 1:200 ou de 1:5 a 1:0,5, e o mais preferivelmente está entre 1:700 a 1:400 ou de1:3 a 1:0,5, por exemplo, 1:1000, 1:900, 1:800, 1:700, 1:600, 1:500, 1:400, 1:10, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1 ou 1:0,5.
[0051] Uma combinação particularmente preferida da presente invenção compreende o composto de fórmula I ou o sal de acetato desse e um inibidor de proteassoma selecionado entre bortezomib e car- filzomib, em que a proporção molar do inibidor de proteassoma selecionado entre bortezomib e carfilzomib para o composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável nas ditas combinações é de 1:700 a 1:400, por exemplo, 1:700, 1:600, 1:500 ou 1:400. Outra combinação particularmente preferida do primeiro aspecto da presente invenção, compreende o composto de fórmula I ou o sal de acetato desse e um inibidor de proteassoma selecionado LU-102, em que a proporção molar do inibidor de proteassoma selecionado entre LU-102 para o composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável nas ditas combinações é de 1:3 a 1:0,5, por exemplo, 1:3, 1:2, 1:1 ou 1:0,5.
[0052] Foi surpreendentemente descoberto que as combinações que compreendem um inibidor de proteassoma e um composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável são combinações sinérgicas. Em outras palavras, a potência das combinações foi medida com o programa Calcusyn (biosoft, Ferguson, MO, USA), que é baseado no método de Chou Talay (Chou et al., Adv. Enzyme Regul., 22, 27-55 (1984)), que calcula um índice de combinação (CI) com a seguinte interpretação: CI 1>1: efeito antagonista, CI = 1: efeito aditivo e CI < 1 efeito sinérgi- co.
[0053] Foi descoberto no presente trabalho que para várias combinações duplas da invenção compreendem um inibidor de proteas- soma e um composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável, CI foi encontrado ser menor do que 1, indicando sinergia.
[0054] Outra modalidade preferida da combinação da presente invenção compreende ainda um glicocorticoide em adição ao inibidor de proteassoma e ao composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse, em que a proporção molar do inibidor de proteassoma para o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse para o glicocorticoide na dita combinação está entre 1:1000:20 a 1000:1:20. Preferivelmente, a proporção molar do inibidor de pro- teassoma para o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse para o glicocorticoide na dita combinação está entre 1:1000:10 a 1:100:2. Preferivelmente, a proporção molar do inibidor de proteassoma para o composto de fórmula I ou um sal farmaceutica- mente aceitável desse para o glicocorticoide na dita combinação está entre 1:1000:5 a 1:200:2, mais preferivelmente 1:700:4 a 1:400:3, por exemplo, 1:1000:5, 1:900:5, 1:800:4, 1:700:4, 1:600:4, 1:500:3 ou 1:400:3.
[0055] Uma combinação particularmente preferida da presente invenção compreende um inibidor de proteassoma selecionado entre bortezomib e carfilzomib, um composto de fórmula I ou seu sal de acetato e dexametasona, em que a proporção molar do inibidor de pro- teassoma selecionado entre bortezomib e carfilzomib para o composto de fórmula I ou seu sal de acetato para a dexametasona na dita combinação está entre 1:700:4 para 1:400:3, por exemplo, 1:700:4, 1:700:3, 1:600:4, 1:600:3, 1:500:3 ou 1:400:3. Outra combinação particularmente preferida do primeiro aspecto da presente invenção compreende o inibidor de proteassoma selecionado LU-102, um composto de fórmula I ou seu sal de acetato e dexametasona, em que a proporção molar de LU-102 para o composto de fórmula I ou seu sal de acetato para a dexametasona na dita combinação está entre 1:3:4 para 1:0,5:3, para.1:3:4, 1:3:3, 1:2:4, 1:2:3, 1:1:4, 1:1:3 ou 1:0,5:3.
[0056] Foi surpreendentemente descoberto que várias das combinações triplas da presente invenção que compreendem um inibidor de proteassoma, um composto de fórmula I ou seu sal farmaceuticamente aceitável e um glicocorticoide também são combinações sinérgicas, isto é, o índice de combinação CI foi encontrado ser menor do que 1.
[0057] A composição farmacêutica de acordo com o segundo aspecto da presente invenção compreende um diluente ou veículo far- maceuticamente aceitável e uma combinação de acordo com o primei- ro aspecto da presente invenção. As composições preferidas do segundo aspecto da invenção incluem aquelas que compreendem as combinações preferidas da presente invenção como descritas e exemplificadas acima. O diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável da composição de acordo com o segundo aspecto da presente invenção pode ser qualquer agente de dispersão, excipiente, adjuvante adequados ou outro material que atue como um veículo para os agentes ativos da combinação da presente invenção e que não interfira com os agentes ativos presentes na dita combinação. Exemplos de veículos e diluentes farmaceuticamente aceitáveis típicos podem ser encontrados em “Remington's Pharmaceutical Sciences" por E. W. Martin e esses incluem a água, salina, solução de dextrose, solução de soro, solução de Ringer, polietileno glicol (por exemplo, PEG400), um tensoativo (por exemplo, Cremophor), um ciclopolissacarídeo (por exemplo, hidroxi- propil-β-ciclodextrina ou β-ciclodextrinas de éter sulfobutílico), um po-límero, um lipossoma, uma micela, uma nanosfera, etc.
[0058] No terceiro aspecto da presente invenção, é fornecido um kit que compreende uma combinação de acordo com o primeiro aspecto da presente invenção e, opcionalmente, instruções para tratar um paciente. Tipicamente, um kit pode compreender um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse, um inibidor de proteassoma e um glicocorticoide junto com instruções para tratar o paciente. Cada agente ativo pode ser fornecido em um recipiente adequado. O kit pode compreender ainda um sistema de liberação, por exemplo, para o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse, o inibidor de proteassoma ou o glicocorticoide ou qualquer combinação desses.
[0059] As instruções podem recomendar a administração do inibidor de proteassoma, do composto de fórmula I ou um sal farmaceuti- camente aceitável desse e, se presente, do glicocorticoide da combi- nação concomitantemente, sequencialmente ou separadamente de acordo com variáveis tais como a condição específica a ser tratada, o estado daquela condição, a atividade dos compostos específicos em-pregados; a combinação específica empregada; a idade, peso corporal, saúde em geral, sexo e dieta do paciente; tempo de administração, via de administração e a taxa de excreção dos compostos específicos empregados; a duração do tratamento; o fármaco usado na combinação ou simultaneamente com os compostos específicos empregados; e fatores semelhantes bem conhecidos na técnicas médicas. Os kits preferidos de acordo com o terceiro aspecto da presente invenção in-cluem aqueles que compreendem as combinações preferidas da pre-sente invenção como descritas e exemplificadas acima.
[0060] No quarto aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição, combinação ou kit de acordo com o primeiro, segundo ou terceiro aspecto da presente invenção para uso no tratamento do câncer.
[0061] No quinto aspecto da presente invenção, é fornecido um método de tratamento do câncer em um paciente necessitado, que compreende administrar ao dito paciente a combinação, composição ou kit de acordo com o primeiro, segundo ou terceiro aspecto da presente invenção.
[0062] Foi descoberto que as combinações, composições ou kits da presente invenção são altamente ativos, in vitro e in vivo, contra uma grande variedade de tipos de células de tumor. A atividade antitumor mostrada por essas combinações duplas e triplas da presente invenção e pelas combinações nas composições e kits da presente invenção é, em muitos casos, mais do que meramente aditiva, mostrando índices de combinação CI de, significativamente, menos do que 1, indicando a sinergia para essas combinações. Esse achado surpreendente é um suporte adicional para a eficácia particular das combina- ções, composições e kits da presente invenção no tratamento do câncer.
[0063] Exemplos de cânceres que são tratáveis pelas combinações, composições e kits da presente invenção incluem cânceres he-matológicos tais como mieloma múltiplo, linfoma e leucemia, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer coloretal, câncer de próstata, câncer de testículo, câncer pancreático, câncer de fígado, câncer de estômago, câncer do trato biliar, câncer de esôfago, tumor do estroma gastrin-testinal, câncer cervical, câncer de ovário, câncer uterino, câncer renal, melanoma, carcinoma de célula basal, carcinoma de célula escamosa, câncer de bexiga, sarcoma, mesotelioma, timoma, síndrome mielodis- plásica, glioblastoma e doença mieloproliferativa. Em particular, as combinações, composições e kits da presente invenção são eficazes contra o câncer hematológico tal como mieloma múltiplo, linfoma e leucemia e câncer de mama.
[0064] Em uma modalidade da combinação, composição ou kit para uso no tratamento de um câncer de acordo com o quarto aspecto da presente invenção ou o método de tratamento de um câncer de acordo com o quinto aspecto da presente invenção, o câncer é selecionado entre câncer hematológico e câncer de mama.
[0065] Onde a combinação, composição ou kit da presente invenção é para uso no tratamento de um câncer hematológico, esse pode ser preferivelmente selecionado entre o mieloma múltiplo (por exemplo, mieloma ativo, plasmacitoma, mieloma de cadeia leve ou mieloma não secretório, com todas as formas sendo tratáveis em todas as formas incluindo as fases recidivantes e refratárias), linfoma (por exemplo, linfoma de Hodgkin ou linfoma não Hodgkin) e leucemia [leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide aguda (LMA, incluindo a leucemia mieloblástica, leucemia promielocítica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia mo- nocítica aguda, eritroleucemia aguda e leucemia megacariocítica aguda, com todas as formas sendo tratáveis em todas as formas incluindo as fases recidivantes e refratárias), leucemia mieloide crônica (LMC), leucemia de célula pilosa (HCL), leucemia pró-linfocítica de célula T (T-PLL), leucemia linfocítica granular ou leucemia linfoblástica aguda de célula T].
[0066] Onde a combinação, composição ou kit da presente invenção é para uso no tratamento de câncer de mama, o câncer de mama pode ser tipicamente selecionado entre tumores claudin-low, tumores do tipo basal, tumores positivos para o receptor 2 do fator de crescimento epidérmico humano (HER-2), tumores luminais A e tumores lu- minais B e é preferivelmente um câncer de mama triplo-negativo.
[0067] Em uma modalidade preferida da combinação, composição ou kit para uso no tratamento do câncer de acordo com a presente invenção e o método de tratamento de câncer de acordo com a presente invenção, o inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e, se presente, o glicocorticoide são administrados concomitantemente, sequencialmente ou separadamente. Mais preferivelmente, o inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e, se presente, o glicocorticoide são administrados concomitantemente.
[0068] Na combinação para uso no tratamento de câncer e o método de tratamento de câncer de acordo com a presente invenção, o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse é tipicamente administrado ao paciente necessitado em uma faixa de dosagem de 10 a 100 mg/kg de peso corporal do paciente e, preferivelmente, em uma faixa de dosagem de 40 a 80 mg/kg de peso corporal do paciente. Tipicamente, o inibidor de proteassoma é administrado ao paciente necessitado em uma faixa de dosagem de 0,01 a 0,3 mg/kg de peso corporal do paciente, mais preferivelmente, em uma faixa de dosagem de 0,05 a 0,15 mg/kg de peso corporal do paciente. Onde um glicocorticoide também é administrado na combinação, o gli- cocorticoide é tipicamente administrado em uma faixa de dosagem de 0,1 a 1 mg/kg de peso corporal do paciente. Preferivelmente, ele é administrado em uma faixa de dosagem de 0,3 a 0,5 mg/kg de peso corporal do paciente.
[0069] A quantidade terapeuticamente eficaz de uma combinação, composição ou kit de acordo com a presente invenção é uma quantidade da combinação, composição ou kit que confere um efeito terapêutico de acordo com o quarto e quinto aspectos da presente invenção no indivíduo tratado, em uma proporção razoável de benefí- cio/risco aplicável a qualquer tratamento médico. O efeito terapêutico pode ser objetivo (isto é, mensurável por algum teste ou marcador) ou subjetivo (isto é, o indivíduo dá uma indicação de ou sente um efeito). Uma quantidade eficaz da combinação, composição ou kit de acordo com a presente invenção é considerada ser aquela em que o composto de fórmula I ou seu sal está incluído na combinação em uma faixa de dosagem entre 10 a 100 mg/kg de peso corporal do paciente (por exemplo, 40 a 80 mg/kg de peso corporal tal como 40, 50, 60, 70 ou 80 mg/kg de peso corporal), o inibidor de proteassoma está incluído na combinação em uma faixa de dosagem entre 0,01 a 0,3 mg/kg de peso corporal do paciente (por exemplo, 0,1 a 1 mg/kg tal como 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ou 0,5 mg/kg de peso corporal) e o glicocorticoide está incluído na combinação em uma faixa de dosagem entre 0,03 a 1 mg/kg de peso corporal do paciente (por exemplo, 0,3 a 0,5 mg/kg de peso corporal do paciente, tal como 0,3, 0,4 ou 0,5 mg/kg de peso corporal do paciente).
[0070] As doses eficazes variarão dependendo da via de administração, assim como a possibilidade de coutilização com outros agentes ativos. Será compreendido, entretanto, que a utilização diária total das combinações, composições e kits da presente invenção serão decididas pelo médico atendente dentro do escopo do julgamento médico. O nível de dose específica terapeuticamente eficaz para qualquer paciente em particular dependerá de uma variedade de fatores que incluem o distúrbio a ser tratado e a severidade do distúrbio; a atividade do composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso corporal, saúde em geral, sexo e dieta do paciente; tempo de administração, via de administração e a taxa de excreção dos compostos específicos empregados; a duração do tratamento; o fár- maco usado na combinação ou simultaneamente com os compostos específicos empregados; e fatores semelhantes bem conhecidos na técnicas médicas.
[0071] A presente invenção também é dirigida ao uso de uma combinação, composição ou kit de acordo com o primeiro, segundo ou terceiro aspecto da presente invenção na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer, por exemplo, para o tratamento de um câncer hematológico ou câncer de mama.
[0072] Exemplos adequados da forma de administração da combinação, composição ou kit da presente invenção incluem sem limitação oral, tópica, parenteral, sublingual, retal, vaginal, ocular e intranasal. A administração parenteral inclui injeções subcutâneas, injeção intrave-nosa, intramuscular, intraesternal ou técnicas de infusão. Preferivel-mente, as combinações, composições e kits são administradas por via parenteral. As combinações e composições da invenção podem ser formuladas de modo a possibilitar que uma combinação ou composição da presente invenção esteja biodisponível depois da administração da combinação ou composição a um animal, preferivelmente um humano. As composições podem ter a forma de uma ou mais unidades de dosagem, onde, por exemplo, um comprimido pode ser uma unidade de dosagem única e um recipiente de uma combinação ou composição da presente invenção em forma de aerossol pode conter uma pluralidade de unidades de dosagem.
[0073] Preferivelmente, as combinações da presente invenção são fornecidas na forma de kits. Tipicamente, um kit inclui um inibidor de proteassoma, um composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e, opcionalmente, um glicocorticoide. Em certas moda-lidades, um kit pode incluir um ou mais sistemas de liberação, por exemplo, o inibidor de proteassoma, o composto de composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e, opcionalmente, um glicocorticoide ou qualquer combinação desses e instruções de uso do kit (por exemplo, instruções para tratar um indivíduo). Essas orientações/instruções podem informar a administração do inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável desse e, se presente, o glicocorticoide da combinação con-comitantemente, sequencialmente ou separadamente de acordo com variáveis tais como a condição específica a ser tratada, o estado daquela condição, a atividade dos compostos específicos empregados; a combinação específica empregada; a idade, peso corporal, saúde em geral, sexo e dieta do paciente; tempo de administração, via de admi-nistração e a taxa de excreção dos compostos específicos empregados; a duração do tratamento; o fármaco usado na combinação ou si-multaneamente com os compostos específicos empregados; e fatores semelhantes bem conhecidos na técnicas médicas.
[0074] O diluente ou veículo farmaceuticamente aceitáveis pode ser um particulado, tal que as composições estão, por exemplo, na forma de um comprimido ou pó. O veículo pode ser líquido, com as combinações, composições ou kits sendo, por exemplo, um xarope oral ou líquido injetável. Em adição, os veículos podem ser gasosos, de modo a fornecer uma composição em aerossol útil, por exemplo, na administração por inalação. Tais veículos farmacêuticos podem ser líquidos, tais como água e óleos, incluindo aqueles de petróleo, de ori-gem animal, vegetal ou sintética, tais como óleo de amendoim, óleo de soja, óleo mineral, óleo de gergelim e semelhantes. Os veículos podem ser salina, goma de acácia, gelatina, pasta de amido, talco, que- ratina, sílica coloidal, ureia e semelhantes. Adicionalmente, podem ser usados agentes auxiliares, estabilizadores, espessantes, lubrificantes e corantes. Em uma modalidade, quando administrada a um animal, a combinação, composição ou kit da presente invenção e os veículos farmaceuticamente aceitáveis são estéreis. A água é o veículo preferido quando a combinação ou composição da presente invenção é ad-ministrada por via intravenosa. Soluções salinas e soluções aquosas de dextrose e glicerol também podem ser empregadas como veículos líquidos, particularmente para soluções injetáveis. Veículos farmacêu-ticos adequados também incluem excipientes tais como amido, glicose, lactose, sucrose, gelatina, malte, arroz, farinha, giz, gel de sílica, estearato de sódio, monoestearato de glicerol, talco, cloreto de sódio, leite em pó, glicerol, propileno glicol, água, etanol e semelhantes. As presentes composições, se desejado, também podem conter pequenas quantidades de agentes umectantes ou emulsificantes ou agentes de tamponamento do pH.
[0075] Quando pretendidas para administração oral, a combinação, composição ou kit podem estar na forma sólida ou líquida, onde formas semissólidas, semilíquidas, em suspensão ou géis estão incluídas dentro das formas consideradas aqui como sólidas ou líquidas.
[0076] Como uma composição sólida para administração oral, a combinação, composição ou kit pode ser formulada em forma de pó, grânulo, comprimido, pílula, cápsula, goma de mascar, wafer ou forma semelhante. Tal composição sólida contém tipicamente um ou mais diluentes inertes, quer como um único comprimido que compreende todos os agentes ativos ou como várias composições sólidas separa- das, cada uma compreendendo um único agente ativo da combinação da presente invenção (no caso do kit). Adicionalmente, um ou mais dos seguintes podem estar presentes: aglutinantes tais como carboxi- metilcelulose, etil celulose, celulose microcristalina ou gelatina; excipi- entes tais como amido, lactose ou dextrinas, agentes de desintegração tais como ácido algínico, alginato de sódio, amido de milho e seme-lhantes; lubrificantes tais como estearato de magnésio; agentes de deslizamento tais como dióxido de silício coloidal; agentes edulcoran- tes tais como sucrose ou sacarina; um agente flavorizante tal como menta, salicilato de metila ou flavorizante de laranja; e um agente corante.
[0077] Quando a combinação ou composição está na forma de uma cápsula (por exemplo, uma cápsula de gelatina), ela pode conter em adição aos materiais do tipo acima, um veículo líquido tal como polietileno glicol, ciclodextrina ou um óleo graxo.
[0078] A combinação, a composição ou o kit pode estar na forma de um líquido, por exemplo, um elixir, xarope, solução, emulsão ou suspensão. O líquido pode ser útil para administração oral ou para liberação por injeção. Quando pretendidas para administração oral, a combinação, composição ou kit podem compreender um ou mais agentes edulcorantes, conservantes, pigmento/corante e um intensifi- cador do sabor. Em uma combinação ou composição para administração por injeção, um ou mais de um tensoativos, conservante, agente umectante, agente de dispersão, agente de suspensão, tampão, esta- bilizante e agente isotônico também pode ser incluído. No kit da presente invenção, os componentes líquidos que compreendem um ou mais dos agentes ativos da composição podem ser combinados antes da administração e administrados concomitantemente ou cada agente ativo pode ser administrado sequencialmente ou separadamente.
[0079] A via de administração preferida é a administração parente ral que inclui, mas mão está limitada a intradérmica, intramuscular, in-traperitoneal, intravenosa, subcutânea, intranasal, epidural, intranasal, intracerebral, intraventricular, intratecal, intravaginal ou transdérmica. O modo de administração preferido é deixado a critério do médico e dependerá em parte do local da condição médica (tal como o sítio do câncer). Em uma modalidade mais preferida, as presentes combinações, composições e kits da presente invenção são administradas por via intravenosa.
[0080] As combinações líquidas, composições e kits da invenção, sejam elas soluções, suspensões ou outra forma semelhante, também podem incluir um ou mais dos seguintes: diluentes estéreis tais como água para injeção, solução salina, preferivelmente salina fisiológica, solução de Ringer, cloreto de sódio isotônico, óleos fixos tais como mono ou diglicerídeos, polietileno glicóis, glicerina ou outros solventes; agentes antibacterianos tais como álcool benzílico ou metil parabeno; e agentes para o ajuste da tonicidade tais como cloreto de sódio ou dextrose. Uma combinação ou composição parenteral pode estar encerrada em uma ampola, seringa descartável ou um frasco com múltiplas doses feito de vidro, plástico ou outro material. A salina fisiológica é um adjuvante preferido.
[0081] Para administração (por exemplo, intravenosa), a combinação, composição ou kit pode compreender tipicamente o composto de fórmula I ou seu sal em uma faixa de dosagem de 10 a 100 mg/kg de peso corporal do paciente, o inibidor de proteassoma em uma faixa de dosagem de 0,01 a 0,3 mg/kg de peso corporal do paciente e o glico- corticoide em uma faixa de dosagem de 0,03 a 1 mg/kg de peso corporal do paciente. Mais preferivelmente, a combinação, composição ou kit pode compreender o composto de fórmula I ou seu sal em uma faixa de dosagem de 40 a 80 mg/kg de peso corporal do paciente, o inibidor de proteassoma em uma faixa de dosagem de 0,05 a 0,15 mg/kg de peso corporal do paciente e o glicocorticoide em uma faixa de do-sagem de 0,3 a 0,5 mg/kg de peso corporal do paciente.
[0082] As combinações da invenção podem ser formuladas tal que o inibidor de proteassoma, o composto de fórmula I ou um sal farma- ceuticamente aceitável desse e, se presente, o glicocorticoide opcional da combinação sejam adaptados para administração concomitantemente, sequencialmente ou separadamente. Preferivelmente, eles são administrados concomitantemente.
[0083] A combinação, a composição ou o kit da presente invenção pode ser administrado por qualquer via conveniente, por exemplo pela infusão ou injeção em bolus, pela absorção através do epitélio ou dos revestimentos muco-cutâneos.
[0084] Em modalidades específicas, pode ser desejável administrar uma ou mais combinações, composições ou kits da presente invenção ou combinações, composições ou kits localmente na área que necessita de tratamento. Em uma modalidade, a administração pode ser pela injeção direta no local (ou local primário) de um câncer, tumor ou tecido neoplásico ou pré-neoplásico.
[0085] A administração pulmonar também pode ser empregada, por exemplo, pelo uso de um inalador ou nebulizador e a formulação com um agente de aerossolização ou através da perfusão em um ten- soativo pulmonar de fluorcarbono ou sintético. Em certas modalidades, a combinação, composição ou kit da presente invenção ou composições podem ser formuladas como um supositório, com aglutinantes e veículos tradicionais tais como triglicerídeos.
[0086] A presente combinação, composição ou kit pode ter a forma de soluções, suspensões, emulsões, comprimidos, pílulas, péletes, cápsulas, cápsulas contendo líquidos, pós, formulações de liberação sustentada, supositórios, emulsões, aerossóis, sprays, suspensões ou qualquer outra forma de uso adequada. Outros exemplos de veículos farmacêuticos adequados estão descritos em "Remington's Pharma-ceutical Sciences" por E. W. Martin.
[0087] As combinações farmacêuticas, composições e kits podem ser preparados usando a metodologia bem conhecida na técnica far-macêutica. Por exemplo, uma composição pretendida para ser admi-nistrada por injeção pode ser preparada pela combinação dos compo-nentes de um kit da presente invenção com água de modo a formar uma solução. Um tensoativos pode ser adicionado para facilitar a formação de uma solução ou suspensão homogênea.
[0088] As combinações, composições e kits da presente invenção são particularmente eficazes no tratamento do câncer.
[0089] As combinações da presente invenção têm mostrado possuir excelente atividade contra uma grande variedade de tipos de células de tumor in vitro e in vivo, tornando-as particularmente interessantes para o desenvolvimento para uso no tratamento de um câncer, por exemplo, câncer hematológico ou câncer de mama.
[0090] Também foi descoberto no presente trabalho que o composto de fórmula I ou seu sal pode ser administrado em combinação com a radioterapia no tratamento do glioblastoma. Estudos in vitro e in vivo mostraram que uma combinação do composto de fórmula I ou seu sal junto com a radioterapia foi muito mais eficaz do que a radioterapia sozinha. Existe uma descrição prévia no WO 2013/113838 de dados para o composto de fórmula I testado nas linhagens celulares SF-268, SF-295, SF-539, SNB-19, SNB-75 e U-251 de câncer do SNC (Glioma). Eles sugerem atividade do composto de fórmula I contra o glioblastoma quando usado sozinho. Exemplos
[0091] Nos exemplos a seguir, o composto que tem a seguinte fórmula I é referido como EDO-S101 (ou EDO nas Figuras):
Exemplo 1: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem Celular MM1S de Mieloma Múltiplo
[0092] EDO-S101 foi combinado in vitro com bortezomib e dexa- metasona na linhagem celular MM1S de mieloma múltiplo gentilmente fornecida por Steven Rosen da Northwestern University, Chicago, IL, USA. A atividade foi mediada pelo ensaio MTT que é baseado na redução do brometo metabólico a partir de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5- difeniltetrazol (MTT), que é produzido pela enzima mitocondrial succi- nato desidrogenase, transformado em composto colorido em azul chamado formazan. A funcionalidade mitocondrial das células tratadas é então determinada. Esse método foi usado extensivamente para medir a proliferação celular e as capacidades de sobrevida. As células vivas remanescentes são proporcionais à quantidade de formazan produzida.
[0093] Em suma, a metodologia foi a seguinte: • 30.000 células MM1S por poço foram plaqueadas em placas de mi- crotitulação de 96 poços. • Diluições de EDO-S101 e PI foram preparadas em DMSO e dexa- metasona em etanol e adicionadas aos poços até as concentrações finais indicadas no experimento. • As placas foram incubadas por 24-48-72 horas em uma incubadora a 37°C em uma atmosfera umidificada na presença de CO2 5%/ar 95%. • Depois da incubação, 10 μL de solução de MTT foram adicionados a cada poço e incubados por 2 horas para permitir a formação de cristal de formazan. • 100 μL de uma mistura de SDS mais HCl (10 μL de HCl para cada 12 mL de SDS) foram adicionados para dissolver os cristais de forma- zan. • A absorbância foi lida em OD 570 nm e usou um comprimento de onda de referência de 650 nm. • A viabilidade celular (percentual) foi obtida como a seguir: % de via-bilidade = OD das células tratadas x 100 /OD das células de controle. • Cada dose foi testada em quadruplicata e cada experimento foi reali-zado pelo menos duas vezes.
[0094] As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos. EDO-S101 em 500 nM, 1 μM, 2,5 μM; dexametasona em 2,5 nM; 5 nM; 10 nM; e borte- zomib em 0,75 nM, 1,5 nM, 3 nM.
[0095] Os resultados são mostrados na Tabela 1 abaixo e na Figura 1.
[0096] A potência da combinação foi quantificada com o programa Calcusyn (biosoft, Ferguson, MO, USA). que é baseado no método de Chou Talay (Chou et al., Adv. Enzyme Regul., 22, 27-55 (1984)), que calcula um índice de combinação (CI) com a seguinte interpretação: CI 1>1: efeito antagonista, CI = 1: efeito aditivo e CI < 1 efeito sinérgi- co.
[0097] Pode ser visto na Figura 1 e a partir do escrito acima que EDO-S101 mostra sinergia com bortezomib e também mostra sinergia em uma combinação tripla com bortezomib e dexametasona.
[0098] Em um experimento adicional, a mesma dose constante desses fármacos foi incubada por 72 horas ao invés de 48 horas. Os resultados são mostrados na Tabela 2 abaixo e na Figura 2.
[0099] Novamente, pode ser visto a partir da Figura 2 e dos resultados acima na Tabela 2 que EDO-S101 mostra sinergia com borte- zomib e também mostra sinergia em uma combinação tripla com bor- tezomib e dexametasona. Exemplo 2: Combinações de EDO-S101 in vivo contra um Xeno- enxerto de Plasmacitoma Subcutâneo
[00100] Camundongos CB17-SCID (obtidos do The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) foram inoculados por via subcutânea no flanco direito com 3 x 106 células MM1S de mieloma múltiplo, gentilmente fornecida por Steven Rosen da Northwestern University, Chicago, IL, USA em 100 μL de meio RPMI 1640 e 100 μL de Matrigel (BD Biosciences). Quando os tumores se tornaram palpáveis, os camundongos foram randomizados em 8 grupos de tratamento com 5 camundongos em cada um.
[00101] Os grupos eram: • Controle (grupo tratado apenas com veículo) • Bortezomib 1 mg/kg duas vezes por semana intraperitoneal por três semanas • Dexametasona 0,5 mg duas vezes por semana por via intravenosa por três semanas • EDO-S101 por via intravenosa em doses de 30 mg/kg uma vez por semana por 3 doses • Bortezomib mais dexametasona • Bortezomib mais EDO-S101 • EDO-S101 mais dexametasona • Combinação tripla de EDO-S101 mais Bortezomib e dexametasona
[00102] Medições calibradas dos diâmetros do tumor foram realizadas a cada dia e o volume do tumor foi avaliado como o volume de uma elipse usando a seguinte fórmula: V = 4/3 π x (a/2) x (b/2)2, onde “a” e “b” correspondem ao maior e ao menor diâmetro, respectivamente.
[00103] Os resultados do crescimento do tumor são como os mostrados na Figura 3 em um gráfico de crescimento do tumor (mm3) contra o número de dias do estudo. Pode ser visto que a combinação de EDO-S101 e bortezomib resulta em volumes de tumor menores do que os vistos com o agente sozinho, enquanto que a tripla combinação de EDO-S101, bortezomib e dexametasona mostra volumes do tumor significativamente muito menores no final do estudo do que com qual-quer um dos agentes ativos individualmente. Exemplo 3: Combinações de EDO-S101 in vitro - Linhagem Celular RPMI 8226 de Mieloma Múltiplo
[00104] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular RPMI 8226 de mieloma múltipla (obtida de DMSZ) ao invés da linhagem celular MM1S, as combinações de EDO-S101 com bortezomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade. As concentrações para os diferentes fármacos foram constantes para todos os experimentos. EDO-S101 em uma concentração de 0, 2, 4, 8 μM; cada um de bortezomib e car- filzomib em uma concentração de 0,5, 10, 20 nM; e LU-102 em uma concentração de 0, 1, 3,3, 10 μM. Controles com bendamustina também foram realizados.
[00105] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 4. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combina- ções com EDO-S101 in vitro contra RPMI 8226 de mieloma múltiplo. O CI com EDO-S101 4 μM e carfilzomib 20 nm foi de 0,019 e o CI com EDO-S101 4 μM e LU-102 3 μM foi de 0,109. Exemplo 4: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular 2013-10-16 MTS AMO abzb de Mieloma Múltiplo
[00106] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular 2013-10-16 MTS AMO abzb de mieloma múltiplo resistente ao bortezomib (gerada no Department of Oncology and Hematology of the Kantonsspital St. Gallen by Prof. Dr. med. C. Driessen) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante e eram de 0, 2, 4, 8 μM para EDO-S101; 0, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 nM cada um de bortezomib e carfilzomib; e 0, 1, 3,3, 10 μM para LU-102.
[00107] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 5. A figura mostra claramente a sinergia para as combinações de carfil- zomib e LU-102 com EDO-S101 in vitro contra 2013-10-16 MTS AMO abzb de mieloma múltiplo resistente ao bortezomib. O CI das combinações de EDO-S101 e carfilzomib contra essa linhagem celular foi de 0,11 e que para EDO-S101 e LU-102 foi de 0,25. Exemplo 5: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular 2014-01-15 MTS Jeko de Linfoma de Célula do Manto
[00108] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular 2014-01-15 MTS Jeko de linfoma de célula do manto (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com borte- zomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade suces- sivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e são iguais como no Exemplo 3.
[00109] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 6. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combinações com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular 2014-01-15 MTS Jeko de linfoma de célula do manto. O CI com EDO-S101 2 μM e bortezomib 20 nm foi de 0,292; o CI com EDO-S101 2 μM e carfilzomib 20 nm foi de 0,206; e o CI com EDO-S101 2 μM e LU-102 10 μM foi de 0,204. Exemplo 6: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular 2014-01-15 MTS Granta de Linfoma de Célula do Manto
[00110] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular 2014-01-15 MTS Granta de linfoma de célula do manto (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com borte- zomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e são iguais como no Exemplo 3.
[00111] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 7. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combinações com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular 2014-01-15 MTS Granta de linfoma de célula do manto. O CI com EDO-S101 0,5 μM e bortezomib 8 nm foi de 0,025; o CI com EDO-S101 0,5 μM e car- filzomib 8 nm foi de 0,089; e o CI com EDO-S101 1 μM e LU-102 3 μM foi de 0,078. Exemplo 7: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular MTS MDA-MB488 de Câncer de Mama do Tipo Basal
[00112] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular MTS MDA-MB488 de câncer de mama do tipo basal (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com borte- zomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e foram de 0,2, 4, 8, 16 μM para EDO-S101; 0, 8, 16 e 32 nM cada um de bortezomib e car- filzomib; e 0, 1,3,3, 10 μM para LU-102.
[00113] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 8. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combinações com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular MTS MDA- MB468 de câncer de mama triplo negativo. Exemplo 8: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular HL-60 de Leucemia Promielocítica
[00114] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular HL-60 de leucemia promi- elocítica (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As con-centrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção cons-tante para todos os experimentos e foram de 0, 1, 2, 4 μM para EDO- S101; 0, 5, 10 e 20 nM cada um de bortezomib e carfilzomib; e 0, 1, 3,3, 10 μM para LU-102.
[00115] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 9. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combina-ções com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular HL-60 de leu-cemia promielocítica. O CI com EDO-S101 1 μM e bortezomib 20 nm foi de 0,051; o CI com EDO-S101 1 μM e carfilzomib 20 nm foi de 0,073; e o CI com EDO-S101 1 μM e LU-102 3 μM foi de 0,387. Exemplo 9: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular U937 de Leucemia Mieloide Aguda
[00116] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular U937 de leucemia mieloide aguda (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e são iguais como no Exemplo 8.
[00117] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 10. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combinações com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular U937 de leucemia mieloide aguda. O CI com EDO-S101 2 μM e bortezomib 10 nm foi de 0,285; o CI com EDO-S101 2 μM e carfilzomib 10 nm foi de 0,272; e o CI com EDO-S101 2 μM e LU-102 3 μM foi de 0,095. Exemplo 10: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular BJAB de Linfoma de Célula B
[00118] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular BJAB (linhagem germinati- va central) de linfoma de célula B (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bor- tezomib, carfilzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade su-cessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e são iguais como no Exemplo 8.
[00119] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 11. A figura mostra claramente uma forte sinergia para a combinação de EDO-S101 e carfilzomib em particular contra a linhagem celular BJAB (linhagem germinativa central) de linfoma de célula B, embora a combinação de EDO-S101 e carfilzomib também tenha mostrado sinergia. O CI para a combinação de EDO-S101 e carfilzomib foi de 0,09; enquanto que o CI da combinação de EDO-S101 e bortezomib foi de 0,62. Exemplo 11: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular OciLy3 de Linfoma de Célula B
[00120] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular OciLy3 (tipo ABC) de lin- foma de célula B (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kas- tler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, car- filzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e foram de 0, 0,5, 1 e 2 μM para EDO-S101; 0, 5, 10 e 20 nM cada um de bortezomib e carfilzomib; e 0, 1, 3,3, 10 μM para LU-102.
[00121] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 12. A figura mostra uma forte sinergia para a combinação de EDO-S101 e bortezomib em particular in vitro contra a linhagem celular Ocily3 (tipo ABC) de linfoma de célula B, embora a combinação de EDO-S101 e carfilzomib também tenha mostrado sinergia. O CI para a combinação de EDO-S101 e carfilzomib foi de 0,59; enquanto que o CI da combinação de EDO-S101 e bortezomib foi de 0,21.
[00122] Exemplo 12: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular TMD8 de Linfoma de Célula B
[00123] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular TMD8 (tipo ABC) de linfo- ma de célula B (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kastler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, carfil- zomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e foram as mesmas como no Exemplo 11.
[00124] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 13. A figura mostra uma forte sinergia para a combinação de EDO-S101 e o inibidor de proteassoma testado. O CI para a combinação de EDO- S101 e carfilzomib foi de 0,17; o CI da combinação de EDO-S101 e bortezomib foi de 0,14 e o CI da combinação de EDO-S101 e LU-102 foi de 0,63. Exemplo 13: Combinações de EDO-S101 In Vitro - Linhagem celular BT-549 de Câncer de Mama Triplo Negativo
[00125] Usando o mesmo procedimento de teste como descrito no Exemplo 1, mas usando a linhagem celular BT-549 de câncer de mama triplo negativo (obtida de LGC Standards S.a.r.l., 6, rue Alfred Kas- tler, BP 83076, F-67123 Molsheim Cedex, França) no lugar da linhagem celular MM1S, combinações de EDO-S101 com bortezomib, car- filzomib e LU-102 foram testadas quanto a atividade sucessivamente. As concentrações para os diferentes fármacos tiveram uma proporção constante para todos os experimentos e foram de 0, 1, 2 e 4 μM para EDO-S101; 0, 5, 10 e 20 nM cada um de bortezomib e carfilzomib; e 0, 1, 3,3, 10 μM para LU-102.
[00126] A viabilidade celular como um percentual do controle não tratado foi medida e os resultados são como mostrados na Figura 14. A figura mostra claramente a sinergia para cada uma das três combinações com EDO-S101 in vitro contra a linhagem celular BT-549 de câncer de mama triplo negativo. O CI para a combinação de EDO- S101 e bortezomib foi de 0,14; o CI para a combinação de EDO-S101 e carfilzomib foi de 0,05; e o CI para a combinação de EDO-S101 e LU-102 foi de 0,38. Exemplo 14: Combinações de Radioterapia e EDO-S101 Contra Linhagens Celulares de Glioblastoma In Vitro
[00127] Para a linhagem celular U251MG de glioblastoma, a IC50 foi medida como sendo 6,60 μM para EDO-S101 (comparada com 30 μM para bendamustina 20 para temozolamida).
[00128] Para a linhagem celular U87G de glioblastoma, a IC50 foi medida como sendo 1,36 μM para EDO-S101 (comparada com 50 μM para bendamustina e 20 para temozolamida).
[00129] Para a linhagem celular T98G de glioblastoma, a IC50 foi medida como sendo 7,70 μM para EDO-S101 (comparada com 52 μM para bendamustina e >100 para temozolamida).
[00130] Como pode ser visto a partir da Figura 15, o % de sobrevi- da para as células de glioblastoma foi consideravelmente reduzido quando a radioterapia foi usada em combinação com uma dose de EDO-S101 (5 μM ou 10 μM) comparada apenas com a radioterapia. Exemplo 15: Combinações de Radioterapia e EDO-S101 Contra Linhagens Celulares de Glioblastoma In Vivo U87MG, U251MG e T98G Xenoenxertos inoculados por via subcutânea Tratamentos e Doses • Veículo (controle) • Radioterapia (2 Gy/5 dias consecutivos) • Temozolamida (16 mg/kg por 5 dias consecutivos, po) • Temozolamida + radioterapia • EDO-S101 (60 mg/kg no dia 1, 8 e 15 a cada 28 dias, iv) • EDO-S101 + radioterapia
[00131] Foi descoberto que o tempo para a progressão dos tumores aumentou de aproximadamente 17 - 18 dias para o controle para o modelo de xenoenxerto de camundongo U251MG, para 42dias com a combinação de radioterapia e temozolamida para mais de 50 dias para EDO-S101 sozinho (significância P=0,924) para significativamente mais de 50 dias para uma combinação de EDO-S101 e radioterapia (significância P=0,0359).
[00132] Foi descoberto que o tempo de progressão dos tumores aumentou de aproximadamente 15 dias para o controle para o modelo de xenoenxerto de camundongo U87MG, para 35 dias com uma combinação de radioterapia e temozolamida, para 40 dias para EDO-S101 sozinho (significância P=2372) para significativamente mais de 50 dias para a combinação de EDO-S101 e radioterapia (significância P=0,0001). Exemplo 16: Atividade de EDO-S101 Contra Modelos de Mieloma Múltiplo Recidivantes /Refratários
[00133] Um rearranjo genético do lócus MYC, que resulta na expressão desregulada de MYC, é a mutação mais comum no mieloma múltiplo humano. O modelo de camundongo Vk*MYC geneticamente manipulado é baseado na desregulação de MYC e tem sido extensivamente validado como um modelo clinicamente e biologicamente fiel do mieloma múltiplo não tratado. Nove fármacos ou classes de fárma- cos (alquilantes do DNA, glicocorticoides, inibidores de proteassoma, IMiDs, nab-paclitaxel, inibidores da histona deacetilase, TACI-Ig, peri- fosina e SNS-032, um inibidor de CDK2, 7,9) foram previamente rela-tados com mais do que 20% de taxa de resposta parcial em Vk*MYC MM. Entre esses, os primeiros cinco também tem mais do que 20% de PR em pacientes com mieloma múltiplo para um valor preditivo de 56%.
[00134] EDO-S101 induziu uma alta taxa de resposta no mieloma mútiplo Vk*MYC que foi mantida por mais do que três meses em camundongos que receberam apenas duas doses, com uma semana de intervalo. Notavelmente, EDO-S101 é o único fármaco que foi identificado com atividade de agente único no modelo de transplante de Vk12653 agressivo, resistente a múltiplos fármacos de mieloma múltiplo recidivante/refratário.
[00135] Em conclusão, pode ser visto que o composto de fórmula I (EDO-S101) mostra excelente atividade em combinação com inibidores de proteassoma atuando in vitro e in vivo contra uma ampla faixa de linhagens celulares de mieloma, linfoma, leucemia e mama. Adicio-nalmente, pode ser visto que a atividade de várias dessas combinações é surpreendentemente sinérgica e, em muitos casos, em um grau muito significativo. É visto nos Exemplos 1 e 2, que as combinações triplas que compreendem o composto de fórmula I, um inibidor de pro- teassoma e um glicocorticoide tal como a dexametasona mostraram, particularmente, uma forte sinergia.
[00136] Como resultado, é esperado que as combinações do composto de fórmula I da presente invenção com um inibidor de proteas- soma, compreendendo opcionalmente um glicocorticoide, será útil no tratamento do câncer, particularmente cânceres hematológicos e câncer de mama.