BR112016018099B1 - Compostos funcionalizados de benzopiranos e uso dos mesmos - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS FUNCIONALIZADOS DE BENZOPIRANOS E USO DOS MESMOS. A presente invenção refere-se amplamente a agentes anticâncer. Em particular, a presente invenção refere-se à compostos selecionados de benzopiranos, preparação dos mesmos, e utilização dos mesmos em métodos para o tratamento de câncer e na redução da incidência ou risco de recorrência de câncer.

Description

Campo da invenção

[0001] A presente invenção refere-se amplamente a agentes anticâncer. Em particular, a presente invenção refere-se à compostos selecionados de benzopirano, preparação dos mesmos, e utilização dos mesmos em métodos para o tratamento de câncer e na redução da incidência ou risco de recorrência de câncer.

Antecedentes da Invenção

[0002] O câncer mata milhares de pessoas por ano em todo o mundo. Avanços significativos têm sido alcançados no tratamento e prevenção de uma grande variedade de cânceres. Por exemplo, o câncer de mama tem apresentado programas iniciais de triagem, bem como uma variedade de técnicas cirúrgicas. No entanto, estes muitas vezes revelarem-se física e emocionalmente debilitantes. Além disso, os pacientes que se submeteram à cirurgia e quimioterapia subsequente, muitas vezes experimentam uma recorrência. Nos últimos anos, pesquisas indicaram o potencial tumorigênico heterogêneo de células de câncer, o que levou à hipótese das células-tronco tumorais (“CSC”, na sigla em inglês). Em resumo, esta hipótese estabelece que apenas uma fração das células dentro de um tumor possuem características semelhantes a células-tronco, incluindo potencial proliferativo ilimitado.

[0003] Outras evidências na literatura suportam o conceito de que os tumores são sistemas heterogêneos complexos similares a órgãos com uma organização celular hierárquica, ao invés de coleções simples de células tumorais homogêneas de linhagens individuais. A célula tumoral iniciadora mantém a capacidade de gerar progênie diversificada em vários níveis de diferenciação, a partir de células-tronco pluripotentes não comprometidas, até células progenitoras comprometidas, até células descendentes senescentes totalmente diferenciadas. Deste modo, a população de células tumorais é heterogênea em si, acrescentando arquitetura diversificada fornecida pelas células imunes, estromais e vasculares que também estão presentes em tumores. Algumas das células no interior deste "órgão de câncer" ou tumor possuem potencial para proliferação contínua. A filogenia destas células tumorais, sugere a existência de uma população de células que mantém a capacidade de se auto renovar, enquanto muitas vezes também possuem a capacidade de gerar descendências que se diferenciam. Assim, a célula-tronco tumoral é definida como sendo uma célula dentro de um tumor que possui a capacidade de auto renovação e de provocar as linhagens de células cancerosas heterogêneas que compreendem o tumor. De fato, evidências laboratoriais confirmam que a injeção de células- tronco tumorais semelhantes isoladas de ovário, de cérebro, de cólon, de mama, de próstata ou de pâncreas em camundongos imunocomprometidos resultada na formação de tumores que são fenotipicamente idênticos ao tumor original e contêm ambas as células-tronco semelhantes e células-tronco não semelhantes. Portanto, existem duas populações distintas; um subconjunto relativamente bem diferenciado com capacidade proliferativa limitada formando a massa do tumor que caracteriza fenotipicamente a doença, e um segundo subconjunto menor, menos diferenciado que contém CSCs clonogênicas. Importantemente, as CSCs apresentam resistência a múltiplos fármacos, uma propriedade adicional que contribui para sua longevidade e potencial metastático, permitindo que elas sobrevivam à investidas tóxicas, incluindo muitos dos medicamentos atualmente utilizados para tratar o câncer. Existe, portanto a necessidade de desenvolver terapias que visam especificamente as capacidades de auto renovação da população de células-tronco tumorais, revogando assim a fonte de recorrência do tumor como um resultado de resistência a terapias convencionais.

[0004] Os marcadores putativos de CSC que foram descritos para outras doenças malignas, incluindo a leucemia mieloide aguda (CD34-positivo/CD38-negativo), mama (CD44- positivo/CD24-negativo/-baixo/Linnegativo), próstata (CD44- positivo/_2_1-alto/CD133-positivo) e cérebro (CD133- positivo/nestin positivo), têm refletido aqueles expressos pelo estado original dos seus homólogos de tecido normal. Evidências recentes confirmam que as células de câncer de ovário CD44+ também possuem a capacidade de formar tumores em camundongos imunocomprometidos. Tal como acontece com outros fenótipos de CSC, as células-tronco tumorais de câncer de ovário são de crescimento lento, quimiorresistentes e formam tumores em camundongos imunocomprometidos que são fenotipicamente idênticos ao tumor original em que existem principalmente células CD44-ve que formam a massa do tumor com pequenas bolsas de células CD44+ve.

[0005] Muitos cânceres avançados voltam a aparecer apesar da utilização de modalidades quimioterapêuticas e radioativas que inicialmente acarretam em respostas terapêuticas. Por exemplo, a irradiação de glioblastomas pode acarretar em respostas radiográficas importantes, mas estes tumores invariavelmente retornam e levar à morte do paciente. Frequentemente, os glioblastomas se repetem em um padrão nodular, sugerindo uma origem clonal ou policlonal de células tumorais recorrentes que são capazes de resistir a terapias citotóxicas tradicionais, incluindo terapia de radiação, para provocar a recorrência da doença. Além disso, os tumores recorrentes também demonstram heterogeneidade em relação a população de células tumorais no que tange à presença de ambas as CSCs e não-CSCs, bem como em análise histológica e diferenças citogenéticas. Isto sugere que as CSCs que povoam o tumor original podem ter resistido à intervenção terapêutica para repovoar o tumor recorrente, mesmo após a massa tumoral ter sido removida por ressecção ou radioterapia e quimioterapia, consequentemente, enfatizando o conceito de que as CSCs são a fonte de recorrência pós-terapêutica do tumor. Uma mudança na estratégia terapêutica que acarreta no desenvolvimento de agentes direcionados únicos que atacam as CSCs podem melhorar o tratamento de câncer e prolongar a sobrevivência de muitos pacientes.

[0006] Os presentes inventores surpreendentemente descobriram que uma seleção de compostos de benzopirano é capaz de exercer efeitos biológicos potentes sobre as não- CSCs bem como sobre as CSCs. Tais compostos oferecem estratégias quimioterápicas alternativas para tratar o câncer e reduzir a incidência, ou risco de recorrência, de câncer.

Sumario da Invenção

[0007] Em um primeiro aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula geral (I)

[0008] ou um sal, hidrato, derivado, solvato ou pró- fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[0009] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C6,

[0010] R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH e alcoxi C1-C6,

[0011] R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, halo e alcoxi C1-C6,

[0012] R10 até R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OH, alquil C1-C6, halo e alcoxi C1-C6,

[0013] R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, alcoxi C1-C6, NH2, NHMe, NHEt, N(Me)2 e N(Et)2,

[0014] R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, OH, halo e alquil C1-C6, ou

[0015] R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0016] Em um segundo aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto juntamente com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0017] Em um terceiro aspecto, a presente invenção fornece um método para o tratamento de câncer em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ao indivíduo de acordo com o primeiro aspecto, ou uma composição do segundo aspecto.

[0018] O método pode adicionalmente compreender a administração de outro agente quimioterapêutico.

[0019] O câncer pode ser um câncer que retornou.

[0020] O câncer pode ser resistente a um ou mais agentes quimioterapêuticos.

[0021] O câncer pode ser câncer de pâncreas, câncer colorretal, melanoma, câncer de próstata, câncer de cérebro (incluindo adultos e pediátrica), câncer de ovário, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de útero, neuroblastoma, mesotelioma, ascite maligna ou câncer de peritônio.

[0022] Em um quarto aspecto, a presente invenção fornece a utilização de um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto na fabricação de um medicamento para tratar o câncer.

[0023] O medicamento pode adicionalmente compreender, ou pode ser administrado com outro agente quimioterapêutico.

[0024] Em um quinto aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto para ser utilizado no tratamento de câncer.

[0025] Em um sexto aspecto, a presente invenção fornece um método para reduzir a incidência, ou risco de recorrência, de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer, método que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) ao indivíduo de acordo com o primeiro aspecto, ou uma composição do segundo aspecto.

[0026] O indivíduo pode ser um indivíduo que está em remissão de câncer. O indivíduo pode estar em remissão de câncer de ovário, câncer de cérebro ou algum outro tipo de câncer, tal como um ou mais dos anteriormente referidos.

[0027] Em um sétimo aspecto, a presente invenção fornece a utilização de um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto, na fabricação de um medicamento para reduzir a incidência, ou risco de recorrência, de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer.

[0028] Em um oitavo aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto para utilização na redução da incidência, ou risco de recorrência, de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer.

[0029] Em um nono aspecto, a presente invenção fornece um método para induzir apoptose, ou inibir a proliferação, de uma célula-tronco tumoral, método que compreende o contato das células-tronco tumorais com uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto.

[0030] A célula-tronco tumoral pode ser uma célula- tronco tumoral de câncer de ovário ou uma célula-tronco tumoral de câncer de cérebro.

[0031] Em um décimo aspecto, a presente invenção fornece a utilização de um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto, na fabricação de um medicamento para induzir apoptose, ou inibir a proliferação, de uma célula- tronco tumoral.

[0032] Em um décimo primeiro aspecto, a presente invenção fornece um método para o tratamento de uma doença causada por células-tronco tumorais em um indivíduo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo de acordo com o primeiro aspecto, ou uma composição do segundo aspecto.

[0033] A doença pode ser câncer. O câncer pode ser um câncer metastático. As células-tronco tumorais podem ser células-tronco tumorais de câncer de ovário ou células- tronco tumorais de câncer de cérebro.

[0034] Em um décimo segundo aspecto, a presente invenção fornece a utilização de um composto da fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto, na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença causada por células-tronco tumorais.

[0035] Em um décimo terceiro aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula (I) de acordo com o primeiro aspecto, para ser utilizado no tratamento de uma doença causada por células-tronco tumorais.

[0036] Em um décimo quarto aspecto, a presente invenção fornece um método para a preparação de um composto da fórmula (I) compreendendo as etapas de: (a) redução de um composto de fórmula (II) para produzir um composto de fórmula (III):

[0037] em que no composto de fórmula (II), R1, R3, e de R10 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto, e R2 é OAc ou tal como definido no primeiro aspecto, e, no composto de fórmula (III) de R1 a R3 e de R10 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto, e

[0038] (b) hidrogenação de um composto de fórmula (III) para produzir um composto de fórmula (I),

[0039] em que de R1 a R3, e de R10 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto.

[0040] A etapa (a) pode ser realizada através da reação de um composto de fórmula (II) com um reagente de borano, por exemplo, complexo de borano dimetil sulfeto, decborano, 9-BBN, ou complexo de borano tetrahidrofurano.

[0041] A etapa (b) pode ser realizada através da reação de um composto de fórmula (III) com um catalisador metálico heterogêneo sob uma atmosfera de hidrogênio.

[0042] Em uma modalidade, o método pode adicionalmente compreender:

[0043] (c) reação de um composto de fórmula (IV) com um composto de fórmula (V) para produzir um composto de fórmula (II)

[0044]

[0045] em que no composto de fórmula (II), R1, R3, e de R10 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto, e R2 é OAc ou tal como definido no primeiro aspecto, e no composto de fórmula (IV), de R1 a R3 e de R13 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto, e no composto de fórmula (V), de R10 a R12 sejam tal como definido no primeiro aspecto.

[0046] A etapa (c) pode ser realizada na presença de uma base.

[0047] Em outra modalidade, o método pode adicionalmente compreender:

[0048] (d) reação de um composto de fórmula (VI) com um composto de fórmula (VII) para produzir um composto da fórmula (IV)

[0049] em que de R1 a R3, e de R13 a R15 sejam tal como definido no primeiro aspecto.

[0050] A etapa (d) pode ser realizada através da combinação de compostos (VI) e (VII) na presença de oxicloreto de fósforo e cloreto de zinco. Em uma modalidade alternativa, a etapa (d) pode ser realizada através da reação do composto (VII) com cloreto de tionila, seguido por reação com cloreto de alumínio e composto (VI).

Definições

[0051] A seguir estão algumas definições que podem ser úteis na compreensão da descrição da presente invenção. Estas destinam-se como definições gerais e não devem, de qualquer maneira, limitar o âmbito da presente invenção a esses termos sozinhos, mas são postos importantes para uma melhor compreensão da descrição que se segue.

[0052] Ao longo deste relatório descritivo, a menos que o contexto exija de outra forma, a palavra "compreende", ou variações tais como "compreendem" ou "compreendendo", será entendida como implicando a inclusão de um elemento declarado, inteiro ou etapa, ou grupo de elementos, inteiros ou etapas, mas não a exclusão de qualquer outro elemento, inteiro ou etapa, ou grupo de elementos, inteiros ou etapas.

[0053] Os termos "um" e "uma" são aqui utilizados para se referir a um ou a mais do que um (ou seja, pelo menos um) objetivo gramatical do artigo. A título de exemplo, "um elemento" significa um elemento ou mais de um elemento.

[0054] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "alquil" significa grupos de hidrocarbonetos monovalentes saturados de cadeia ramificada ou de cadeia linear com o número de átomos de carbono recitado. Exemplos de grupos alquil incluem, mas não estão limitados a, metil, etil, 1-propil, isopropil, 1-butil, 2-butil, isobutil, terc- butil, amil, 1,2-dimetilpropil, 1,1-dimetilpropil, pentil, isopentil, hexil, 4-metilpentil, 1-metilpentil, 2- metilpentil, 3-metilpentil, 2,2-dimetilbutil, 3,3- dimetilbutil, 1,2-dimetilbutil, 1,3-dimetilbutil, 1,2, 2- trimetilpropil, 1,1,2-trimetilpropil, 2-etilpentil, 3- etilpentil, heptil, 1-metil-hexil, 2,2-dimetilpentil, 3,3- dimetilpentil, 4,4-dimetilpentil, 1,2-dimetilpentil, 1,3- dimetilpentil, 1,4-dimetilpentil, 1,2,3-trimetilbutil, 1,1,2-trimetilbutil, 1,1,3-trimetilbutil, 5-metil-heptil, 1-metil-heptil, octil, nonil e decil.

[0055] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "alcoxi" é tomado para significar grupos O-alquil em que alquil é como aqui definido. Exemplos de grupos alcoxi incluem, mas não estão limitados a metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, sec-butoxi e terc-butoxi.

[0056] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "pró-fármaco" significa um composto que é capaz de ser convertido in vivo por meios metabólicos (por exemplo, através de hidrólise, redução ou oxidação) de um composto da fórmula (I). Por exemplo, um pró-fármaco de éster de um composto da fórmula (I) contendo um grupo hidroxi pode ser hidrolisado in vivo para a molécula-mãe. Os ésteres adequados são, por exemplo, acetatos, citratos, lactatos, tartaratos, malonatos, oxalatos, salicilatos, propionatos, succinatos, fumaratos e maleatos.

[0057] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "quantidade eficaz" inclui uma quantidade não tóxica, porém suficiente de um composto ativo, para fornecer o efeito indicado. Quando utilizado em referência a recorrência do câncer a "quantidade eficaz" significa uma quantidade de um composto de fórmula (I) que é necessária para reduzir a incidência ou risco do indivíduo experimentar uma recorrência de câncer. Os técnicos na arte apreciarão que a quantidade exata requerida de um composto irá variar de acordo com um número de fatores e, assim, não é possível especificar uma "quantidade eficaz" exata. No entanto, para qualquer caso determinado, uma "quantidade eficaz" adequada pode ser definida por um técnico na arte.

[0058] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" inclui uma quantidade não tóxica, porém suficiente de um composto ativo para fornecer o efeito terapêutico desejado. Os técnicos na arte apreciarão que a quantidade exata requerida de um composto irá variar de acordo com um número de fatores e, assim, não é possível especificar uma "quantidade terapeuticamente eficaz" exata. No entanto, para qualquer caso determinado, uma "quantidade terapeuticamente eficaz" adequada pode ser determinada por um técnico na arte.

[0059] No contexto deste relatório descritivo, os termos "tratar", "tratamento", "prevenir" e "prevenção" referem-se a todas e quaisquer utilizações as quais remediam câncer ou sintomas do mesmo, previnem o estabelecimento do câncer, ou de outro modo impedem, detêm, retardam ou revertem a progressão de câncer ou de outros sintomas indesejáveis em qualquer forma que seja. Assim, os termos "tratar", "tratamento", "prevenir" e "prevenção" e semelhantes deverão ser considerados no seu contexto mais amplo. Por exemplo, o tratamento não implica necessariamente que um indivíduo seja tratado até a recuperação total.

[0060] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "indivíduo" inclui animais humanos e também não humanos. Como tal, além de serem úteis no tratamento de câncer em seres humanos, os compostos da presente invenção também encontram utilização no tratamento de câncer em animais não humanos, por exemplo, mamíferos, tais como animais domésticos e animais de fazenda. Exemplos não limitativos de animais domésticos e animais de fazenda incluem cães, gatos, cavalos, vacas, ovelhas e porcos. Preferivelmente, o indivíduo é um ser humano.

[0061] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "recorrência" no que se refere ao câncer, é entendido para significar o retorno de células cancerosas e/ou um tumor canceroso após as células cancerosas e/ou um tumor canceroso terem sido tratados anteriormente com sucesso.

[0062] No contexto do presente relatório descritivo, o termo “administração” e variações do referido termo, incluindo “administrar” e “administrando”, inclui o contato, aplicação, entrega ou fornecimento de um composto ou composição da invenção a um organismo através de quaisquer meios adequados.

Breve Descrição das Figuras

[0063] Figura 1: Atividade diferencial do composto 2 contra dois diferentes tipos de explantes derivados de pacientes com GBM; GBM14-CHA (losangos) ou ODA14-RAV (quadrados).

[0064] Figura 2: Atividade diferencial do composto 2 e os seus enantiômeros purificados contra o explante derivado do paciente com GBM, GBM14.

[0065] Figura 3: Análise da eficácia do composto 2 contra células OCSC-2 utilizando imagens de confluência (A, B), e danos celulares (C, D). O IC50 foi calculado a partir de gráficos de AUC para confluência e intensidade de fluorescência em função do tempo. Os cálculos do IC50 foram realizados após 72 horas de cultura.

[0066] Figura 4: Análise da eficácia do composto 2 contra células OCSC-2 utilizando confluência. Os cálculos do IC50 foram realizados após 72 horas de cultura. GAD 305 é aqui o composto 9 e GAD 310 é aqui o composto 13.

[0067] Figura 5: Avaliação do racemato do composto 2 (A, C) e eutômero do mesmo (B, D), contra as linhas celulares A172 (Glioma) (A e B) e OVCAR-3 (câncer de ovário) (C e D).

[0068] Figura 6: Capacidade do composto 2 para retardar a proliferação de células-tronco tumorais de câncer de ovário.

[0069] Figura 7: Avaliação microscópica de células OCSC2 tratadas com o composto 2 a 1 μg/ml ao longo de 24 horas (B) e 48 horas (C), em comparação com o controle, 72 horas (A).

[0070] Figura 8: Microscopia fluorescente de células-tronco OCSC-2 marcadas com GFP e co-culturas de OCC2 marcadas com mCherry tratadas com o composto 2 a 1 μg/ml ao longo de 48 horas (B), em comparação com o controle (A).

[0071] Figura 9: Composto 2 destrói esferóides de células-tronco tumorais de câncer de ovário. Os esferóides OCSC-2 foram estabelecidos utilizando metodologia padrão e expostos a concentrações crescentes de composto 2 durante 24 horas. A, Controle; B, 0,1 μg/ml - 24 horas; C, 1 μg/ml, - 24 horas. Uma estrutura esferoidal foi avaliada por microscopia.

[0072] Figura 10: Perfil farmacocinético dos compostos 2, 6, 9 e 13 (que é rotulado como 31) a 1 mg/kg entregues em 30% de formulação de Captisol®.

[0073] Figura 11: Eficácia in vivo do eutômero do composto 9 contra um modelo de flanco de GBM (U87MG). Utilizando o modelo de flanco U87 anteriormente descrito, os camundongos foram divididos em dois grupos, um grupo de tratamento (eutômero do composto 9) formulado em uma base de supositório de manteiga de cacau e doseados diariamente a 100 mg/kg - e um grupo de controle de supositório (n = 10 para o controle e n = 4 para o composto 9). Os camundongos foram observados diariamente, pesados a cada três dias e sacrificados após 12 dias de tratamento. Ao término do tratamento, os tumores foram extirpados e pesados. O composto 9 foi administrado diariamente a 100 mg/kg em uma formulação de supositório, enquanto os animais de controle foram doseados apenas com a formulação de supositório. As curvas de crescimento do tumor para a extensão do tratamento (12 dias) (média ± EP) foram significativamente diferentes (P- valores mostrados). O peso do tumor (mediana e quartis) também foi significativamente reduzido (P-valores mostrados acima do gráfico).

[0074] Figura 12: Eficácia in vivo do eutômero do composto 2 em um modelo de câncer de ovário animal. Os animais foram inoculados com células OCSC1-F2 M-cherry e em seguida doseados no dia 4 após a inoculação com eutômero do composto 2 formulado com Captisol® utilizando dois regimes diferentes (100 mg/kg, i.p., qd, 50 mg/kg, i.p.) e a eficácia foi comparada com o controle. A, intensidade de fluorescência médio do tumor (tumores foram visualizados de três em três dias utilizando um sistema Vivo FX Imaging, ROI) , controle de Captisol®; , eutômero do composto 2 (50 mg/kg i.p. por dia); A, eutômero do composto 2 ( 100 mg/kg i.p. por dia); B, a carga média de tumor terminal foi avaliada através da remoção e pesagem de todos os tumores de animais tratados com o controle e com o eutômero do composto 2 formulado com Captisol®, *, p < 0,02; **, p < 0,0001; contra os respectivos controles.

Descrição Detalhada da Invenção

[0075] A presente invenção refere-se a compostos selecionados de benzopirano de fórmula geral (I), preparação de tais compostos e utilização dos mesmos no tratamento de câncer e na diminuição da incidência da recorrência de câncer. Os compostos aqui descritos representam uma invenção seletiva no que diz respeito aos Documentos US2012/0251630 e WO2012/061409.

[0076] Em um aspecto, a presente invenção fornece um composto de fórmula geral (I)

[0077] ou um sal, hidrato, derivado, solvato ou pró- fármaco farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

[0078] R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C6,

[0079] R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH e alcoxi C1-C6,

[0080] R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, halo e alcoxi C1-C6,

[0081] R10 até R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OH, alquil C1-C6, halo e alcoxi C1-C6,

[0082] R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, alcoxi C1-C6, NH2, NHMe, NHEt, N(Me)2 e N(Et)2,

[0083] R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, OH, halo e alquil C1-C6, ou

[0084] R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0085] Em uma modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3.

[0086] Em outra modalidade, R2 representa OH ou OMe. Em uma modalidade adicional, R2 representa OH.

[0087] Em outra modalidade, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, halo e alquil C1-C3. Em outra modalidade, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl.

[0088] Em uma modalidade adicional, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe e halo. Em outra modalidade, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, F e Cl. Ainda em outra modalidade, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe e F.

[0089] Em outra modalidade, R11 e R12 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, alquil C1-C4 e F. Em outra modalidade adicional, R11 e R12 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, metil, terc-butil e F. Em uma outra modalidade adicional, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OMe, metil, terc-butil e F. Em outra modalidade, R11 e R12 são independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, terc-butiloe F. Em uma outra modalidade adicional, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil e F.

[0090] Em outra modalidade, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, NH2, NHEt e N(Et)2.

[0091] Em outra modalidade, R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil.

[0092] Em outra modalidade adicional, R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0093] Em uma modalidade, os compostos de fórmula (I) possuem a seguinte estrutura

[0094] em que R1, R3 e de R10 a R15 são tal como acima definido.

[0095] Em uma modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C6. Em uma outra modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3.

[0096] Em outra modalidade, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, halo e alquil C1-C6. Em outra modalidade, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl.

[0097] Em outra modalidade, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe e halo. Em outra modalidade adicional, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, F e Cl. Em outra modalidade, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe e F.

[0098] Em outra modalidade adicional, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe, metil e halo. Ainda em outra modalidade, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe, metil, F e Cl. Em outra modalidade, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe, metil e F.

[0099] Em outra modalidade, R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil, metil e halo. Ainda em outra modalidade, R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil, metil, F e Cl. Em outra modalidade adicional, R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, metil, terc-butil e F.

[0100] Em outra modalidade, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe e halo. Ainda em outra modalidade, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe, F e Cl. Em outra modalidade adicional, R11 é selecionado a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe e F.

[0101] Em outra modalidade R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil e halo. Ainda em outra modalidade, R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil, F e Cl. Em outra modalidade adicional, R12 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil e F.

[0102] Em outra modalidade, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, NH2, NHEt e NEt2.

[0103] Em outra modalidade, R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, halo e metil. Em outra modalidade, R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil.

[0104] Em outra modalidade adicional, R13 e um de R14 a R15 formam a seguinte estrutura:

[0105] Em uma modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil.

[0106] Em uma outra modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil, ou R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0107] Em outra modalidade, R1 e R3 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, metil ou etil, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, F e metil. Nesta modalidade, R15 pode ser orto ou meta em relação a R13.

[0108] Em outra modalidade, R1 e R3 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, metil ou etil, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, F e metil, ou R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0109] Em uma modalidade, R1 e R3 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, metil ou etil, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, F e metil. Nesta modalidade, R15 pode ser orto em relação ao R13.

[0110] Em outra modalidade, R1 e R3 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, metil ou etil, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe e OH e R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, F e metil, ou R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0111] Em uma modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH, NH2, NHEt e NEt2 e R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil.

[0112] Em outra modalidade, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3, F e Cl, R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH e F, R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: terc-butil, metil, OMe e F, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OMe, OH, NH2, NHEt e NEt2 e R14 e R15 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil, ou R13 e R15 formam a seguinte estrutura:

[0113] Exemplos de compostos de acordo com a fórmula (I) incluem:

[0114] Em uma modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 41. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 40. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 35. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos de 1 a 4, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 36. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 41. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 40. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 36. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13, 16, de 18 a 22, 24 e de 32 a 35. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir de compostos 33 e 36 a 41. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir de compostos 33, 36, 37 e 39. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 9 e 36. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 9, 20, 33 e 36. Em outra modalidade o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em: compostos 2, 9, 33 e 36. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13 e de 36 a 41. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em: compostos 2, 6, 9, 13 e de 36 a 40. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos 2, 6, 9, 13, 36, 37 e 39. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é o composto 2. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é o composto 9. Em outra modalidade, o composto de fórmula (I) é o composto 36. Em modalidades alternativas, o composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41.

[0115] Os compostos de fórmula (I) incluem, pelo menos, dois centros quirais. A presente invenção inclui todos os enantiômeros e diastereoisômeros, bem como misturas dos mesmos em quaisquer proporções. A invenção também se estende aos enantiômeros isolados ou pares de enantiômeros. Os métodos de separar enantiômeros e diastereômeros são bem conhecidos pelos técnicos na arte. Em algumas modalidades, os compostos de fórmula (I) são misturas racêmicas. Em outras modalidades, os compostos da fórmula (I) estão presentes na forma opticamente pura.

[0116] Também será reconhecido pelos técnicos na técnica que, nos compostos de fórmula (I), os substituintes fenil ligado ao anel heterocíclico podem ser cis ou trans, um em relação ao outro. Preferivelmente, nos compostos de fórmula (I), estes substituintes serão cis, um em relação ao outro. Alternativamente, nos compostos de fórmula (I), estes substituintes podem ser trans, um em relação ao outro.

[0117] Em algumas modalidades, os compostos de fórmula (I), incluindo os compostos de 1 a 41, possuem a seguinte estrutura:

[0118] Em outras modalidades, os compostos de fórmula (I), incluindo os compostos de 1 a 41, possuem a seguinte estrutura:

[0119] Os compostos de fórmula (I) são também entendidos como incluindo hidratos e solvatos. Os solvatos são complexos formados por associação de moléculas de um solvente com um composto da fórmula (I). No caso dos compostos da fórmula (I) que são sólidos, deverá ser entendido pelos técnicos na arte que estes compostos podem existir em diferentes formas cristalinas ou polimórficas, todas as quais destinam-se a estar dentro do âmbito da presente invenção.

[0120] Os compostos de fórmula (I) podem estar na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. Esses sais são bem conhecidos pelos técnicos na arte. S.M. Berge et al. descreve sais farmaceuticamente aceitáveis de forma detalhada em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66:1-19. Os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final dos compostos da fórmula (I), ou em separado, através da reação entre o composto de base livre com um ácido orgânico adequado. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos da presente invenção podem ser preparados a partir de um ácido inorgânico ou de um ácido orgânico. Exemplos de tais ácidos inorgânicos são ácido clorídrico, bromídrico, iodídrico, nítrico, carbônico, sulfúrico e ácido fosfórico. Os ácidos orgânicos apropriados podem ser selecionados a partir de classes alifáticas, cicloalifáticas, aromáticas, heterocíclicas, carboxílicas e sulfônicas de ácidos orgânicos, exemplos dos destes são ácido fórmico, acético, propiônico, succínico, glicólico, glucônico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, glucorônico, fumárico, maleico, pirúvico, alquilsulfônico, arilsulfônico, aspártico, glutâmico, benzóico, antranílico, mesílico, salicílico, p-hidroxibenzóico, fenilacético, mandélico, ambônico, pamóico, pantotênico, sulfanílico, ciclo-hexilaminossulfônico, esteárico, algênico, β- hidroxibutírico, galactárico, e galacturônico. Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis adequados dos compostos da presente invenção incluem sais metálicos feitos a partir de lítio, sódio, potássio, magnésio, cálcio, alumínio e zinco, e sais orgânicos feitos a partir de bases orgânicas, tais como colina, dietanolamina, morfolina. Em alternativa, sais orgânicos feitos a partir de N,N'- dibenziletilenodiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilenodiamina, meglumina (N- metilglucamina), procaína, sais de amônio, sais quaternários, tais como sal de tetrametilamônio, sais de adição de aminoácidos, tais como sais com glicina e arginina.

[0121] Os compostos de fórmula (I) também se estendem a incluir todos os derivados com grupos de saída fisiologicamente cliváveis que podem ser clivados in vivo para fornecer os compostos da fórmula (I). Os grupos de saída adequados incluem acil, fosfato, sulfato, sulfonato, e preferivelmente são compostos mono-, di- e per-acil oxi- substituídos, em que um ou mais dos grupos hidroxi pendente são protegidos por um grupo acil, preferivelmente um grupo acetil. Tipicamente, compostos substituídos com aciloxi são facilmente clivável para os compostos hidroxi-substituídos correspondentes.

[0122] Os compostos representativos da fórmula (I) podem ser sintetizados tal como descrito abaixo.

[0123] Na primeira etapa da síntese, benzofenona intermediária (IV) é preparada adequadamente funcionalizado (VII) de acordo com o Esquema 1.

Esquema 1: Preparação de uma benzofenona intermediária

[0124] A localização relativa dos substituintes de R14 e R 15 no anel fenil do composto (VII) pode ser selecionada com base no padrão de substituição necessário do anel 4- fenil do composto de fórmula (I) a ser preparado. Sempre que apropriado ou necessário, podem ser empregados grupos protetores. Os grupos protetores padrão são conhecidos pelos técnicos na arte e incluem os descritos, por exemplo, em 'Protective Groups in Organic Synthesis' por Theodora Greene e Peter Wuts (Terceira Edição, 1999, John Wiley and Sons).

[0125] Tipicamente, na reação descrita no Esquema 1, o composto fenólico (VI) e o composto de ácido benzóico (VII) são feitos reagir sob condições de acilação. Por exemplo, em um método descrito no Indian Journal of Chemistry, 1971, 619-62, o composto fenólico (VI) e o composto de ácido benzóico (VII) podem ser combinados com oxicloreto de fósforo e cloreto de zinco, e a mistura pode ser aquecida durante um período de tempo suficiente para que a reação prossiga substancialmente até a conclusão. O período de tempo exato dependerá da escala da reação, no entanto, os técnicos na arte serão prontamente capazes de determinar as condições de tempo e temperatura adequadas. Em uma reação típica, os reagentes são aquecidos a uma temperatura de cerca de 70°C durante cerca de 1 a 3 horas. Quando a reação é considerada suficientemente completa, a mistura de reação é arrefecida, por exemplo, vertendo-a sobre gelo, após isto, a benzofenona intermediária (IV) pode ser isolada e purificada utilizando técnicas padrão conhecidas pelos técnicos na arte.

[0126] Em um método alternativo, o composto de ácido benzóico (VII) pode ser agitado em cloreto de tionil em refluxo durante cerca de 2 a 6 horas, seguido pela adição de N,N-dimetilformamida catalítica em um solvente orgânico adequado (por exemplo diclorometano) por cerca de 20 minutos a 1 hora. Após remover o cloreto de tionil residual, a mistura é tipicamente arrefecida (por exemplo, em banho de gelo), em seguida, cloreto de alumínio e o composto fenólico (VI) são adicionados, e a mistura é agitada durante um período de tempo adequado, tipicamente cerca de 18 a 36 horas, enquanto é lentamente aquecida até à temperatura ambiente, em seguida, aquecida em refluxo durante cerca de 2 a 8 horas. A reação pode ser conduzida sob uma atmosfera inerte.

[0127] A benzofenona intermediária (IV) pode ser purificada utilizando-se técnicas padrão conhecidas pelos técnicos na arte. Por exemplo, a benzofenona intermediária (IV) pode ser recolhida por filtração, lavada (por exemplo, com água), em seguida, recristalizada a partir de um sistema solvente adequado. Exemplos de solventes de recristalização incluem metanol, etanol, água e misturas dos mesmos. Alternativamente, a benzofenona intermediária (IV) pode ser purificada por cromatografia em coluna.

[0128] A próxima etapa da síntese envolve a reação da benzofenona intermediária (IV) com um ácido fenilcarboxílico adequadamente funcionalizado (V) para fornecer a benzopiranona funcionalizada (II) (ver Esquema 2). A localização relativa dos substituintes de R11 e R12 no anel fenil do composto (V) pode ser selecionada com base no padrão de substituição necessária do anel 3-fenil do composto de fórmula (I) a ser preparado. Sempre que apropriado ou necessário, podem ser empregues grupos protetores.

Esquema 2: Preparação de uma benzopiranona funcionalizada

[0129] Tipicamente, na reação de condensação descrita no Esquema 2, a benzofenona intermediária (IV) é reagida com ácido fenilacético adequadamente funcionalizado (V) na presença de uma base e de anidrido acético. Tipicamente, a base é uma base não-nucleofílica, tal como N,N-diisopropiletilamina (DIEA), N-metilmorfolina ou trietilamina. Durante esta reação quaisquer substituintes hidroxil presente nos anéis fenil podem ser convertidos em acetato correspondente. A reação é tipicamente realizada com aquecimento e durante um período de tempo até se julgar que a reação esteja substancialmente completa (por exemplo, através de análise CCF ou GC). Os técnicos na arte saberão que os períodos de tempo adequados dependerão da escala da reação e dos reagentes particulares utilizados. Tipicamente, os reagentes podem ser aquecidos a uma temperatura de cerca de 40°C a 60°C (por exemplo, cerca de 50°C) durante cerca de 20 a 30 minutos para garantir que todos os reagentes estejam em solução, em seguida, aquecidos a uma temperatura mais elevada, tal como cerca de 130°C a 150°C (por exemplo, cerca de 135°C), durante cerca de 6 a 48 horas (por exemplo, cerca de 18 horas). A benzopiranona funcionalizada (II) pode ser isolada por meios convencionais, tais como extração com solvente (por exemplo, utilizando um solvente orgânico, tal como acetato de etil, clorofórmio, ou semelhantes), e lavada com uma solução alcalina aquosa (por exemplo, carbonato de sódio, ou uma solução de carbonato de hidrogênio e sódio), seguida por purificação padrão utilizando técnicas conhecidas pelos técnicos na arte, tais como cromatografia em coluna, recristalização a partir de um solvente adequado (por exemplo, etanol ou uma mistura de etanol/água), ou trituração com um solvente adequado (por exemplo, metanol, etanol ou misturas dos mesmos).

[0130] A próxima etapa da síntese envolve a redução da lactona da benzopiranona funcionalizada (II) para fornecer o composto de cromeno funcionalizado (III) (ver Esquema 3).

Esquema 3. Preparação de um cromeno funcionalizado

[0131] Tipicamente, a reação de redução é realizada por tratamento de benzopiranona (II) com um agente redutor adequado capaz de reduzir a porção cetona do anel de piranona. Preferivelmente, o reagente de redução reduz seletivamente a porção cetona do anel de piranona, mas não reduz a ligação dupla 3,4. A redução também pode desproteger quaisquer grupos hidroxil acilados presente nos anéis fenil. Os agentes redutores apropriados serão conhecidos pelos técnicos na arte e incluem reagentes borano, tais como, por exemplo, complexo de borano dimetil sulfeto, decborano, 9- BBN e complexo de borano tetrahidrofurano. Em algumas modalidades o agente redutor é o borano dimetil sulfeto. A redução pode ser facilitada pela utilização de um auxiliar quiral. Por exemplo, borano dimetil sulfeto é passível de redução de cetona assimétrica utilizando um catalisador de oxazaborolidina quiral (Corey, E.J.; Helal, C.J. Angew. Chem Int Ed. 1998, 1986). A reação pode ser realizada em um solvente orgânico, tal como tetrahidrofurano, tolueno ou clorofórmio. A reação pode ser realizada sob uma atmosfera inerte em uma temperatura abaixo da temperatura ambiente, normalmente a uma temperatura de cerca de -10°C a cerca de 10°C, ou a cerca de -5°C a cerca de 0°C, ou a cerca de 0°C, durante cerca de 15 minutos até cerca de 4 horas, tipicamente durante cerca de 30 minutos até cerca de 2 horas. Quando a reação de redução é considerada completa (ou substancialmente completa), o produto pode ser isolado por trabalho acídico utilizando os métodos padrão conhecidos pelos técnicos na arte, em seguida, purificada, utilizando técnicas convencionais, tais como cromatografia em coluna.

[0132] Com o composto de cromeno globalmente desprotegido (III) em mãos, a etapa final da síntese envolve a redução cisoide catalítica da olefina do composto de cromeno (III) para criar compostos da fórmula (I) (ver Esquema 4).

Esquema 4. Redução catalítica para fornecer compostos da fórmula (I)

[0133] A redução da ligação dupla pode ser realizada por hidrogenação utilizando reagentes e condições que são bem conhecidas pelos técnicos na arte. Os reagentes adequados incluem catalisadores metálicos heterogêneos, tais como catalisadores de platina e de paládio, na presença de uma atmosfera de hidrogênio. Os catalisadores preferenciais apresentados incluem, mas não estão limitados a, Pd/C, Pd(OH)2/C, Pt/C, Níquel Raney, catalisadores Rh, incluindo os catalisadores Rh quiral, tal como Rh DiPAMP e catalisadores de Wilkinson. Exemplos de solventes adequados incluem metanol e etanol. A reação pode ser realizada à temperatura ambiente ou a mistura reacional pode ser aquecida (por exemplo, a cerca de 50°C a 60°C). Alternativamente, a reação de hidrogenação pode ser realizada sob pressão. Os técnicos na arte serão prontamente capazes de determinar quando a reação está completa (ou substancialmente completa) utilizando técnicas convencionais (por exemplo, TLC, GC-MS). O produto pode ser purificado utilizando técnicas padrão (por exemplo, cromatografia).

[0134] Depois da purificação, os compostos de fórmula (I) podem estar substancialmente puros. Por exemplo, os compostos de fórmula (I) podem ser isolados em uma forma que é pelo menos cerca de 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99%, 99,5% ou 99,9% pura.

[0135] Os compostos da fórmula (I) podem ser obtidos como misturas racêmicas. Os enantiômeros podem ser isolados utilizando técnicas conhecidas pelos técnicos na arte, incluindo resolução quiral, cromatografia de fluido supercrítico e sínteses enantioseletivas. Os enantiômeros individuais podem ser isolados em uma forma substancialmente pura ou em um excesso enantiomérico (ee). Por exemplo, em modalidades preferenciais, um enantiômero pode ser isolado em um excesso enantiomérico de cerca de 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou superior a 99%.

[0136] Os presentes inventores descobriram que os compostos da fórmula (I) são capazes de exercer efeitos biológicos surpreendentemente potentes sobre células cancerosas diferenciadas, bem como em células cancerosas indiferenciadas, que são, por várias vezes, referidas como "células-tronco tumorais" ou "células progenitoras de câncer". Os efeitos biológicos podem incluir inibição da proliferação celular, indução de morte celular, indução de diferenciação celular e reversão do comportamento anormal.

[0137] Os compostos de fórmula (I), consequentemente, encontram utilização no tratamento de câncer. Em particular, os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados no tratamento de câncer, onde são desejáveis para atingir tanto células cancerosas diferenciadas quanto células cancerosas indiferenciadas, e em que os efeitos em ambos os tipos celulares de câncer podem ser diferentes ou até mesmo opostos. Por exemplo, os compostos da fórmula (I) podem induzir a morte celular em células cancerosas diferenciadas e induzir a diferenciação celular em células cancerosas indiferenciadas. Em outras modalidades os compostos de fórmula (I) podem inibir a proliferação de células-tronco tumorais e de células-tronco diferenciadas, tais como as células cancerosas somáticas.

[0138] Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados em conjunção com, ou em alternativa, na ausência de outros agentes quimioterapêuticos.

[0139] Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados no tratamento de câncer que é resistente a um ou mais agentes quimioterapêuticos.

[0140] Em virtude dos seus efeitos biológicos sobre células cancerosas indiferenciadas, os compostos de fórmula (I) encontram utilização especial no tratamento de câncer que voltou a ocorrer em um indivíduo e na redução da incidência, ou risco de recorrência, de câncer em um indivíduo considerado em risco de recorrência de câncer, por exemplo, um indivíduo que está em remissão de câncer. O indivíduo pode estar em remissão de um tumor sólido, tal como aqui definido. Os compostos de fórmula (I) podem também encontrar utilização na indução de apoptose, ou na inibição da proliferação, de células-tronco tumorais. Os compostos de fórmula (I) podem também encontrar utilização no tratamento de doenças causadas por células-tronco tumorais, tal como o câncer. O câncer pode ser um câncer metastático.

[0141] Além disso, os compostos da fórmula (I) podem possuir excelentes propriedades farmacêuticas, tais como resistência melhorada a conjugação através glucuronil transferases e outras transferases solubilizantes em água, tais como sulfases, a qual pode ser sobre-expressa em células proliferativas, tais como células cancerosas. Isto pode, vantajosamente, conferir excelentes propriedades farmacêuticas, tais como um perfil farmacocinético melhorado através da redução da conjugação e eliminação.

[0142] Em todos os aspectos da invenção, o câncer pode ser um tumor sólido, tal como, por exemplo, câncer de mama, câncer de pulmão (NSCLC e SCLC), câncer de próstata, câncer de ovário, câncer de útero, câncer de peritônio, câncer cerebral (incluindo, por exemplo, gliomas, tais como glioblastoma, glioma intrínseco e difuso de tronco (DIPG, na sigla em inglês) e meduloblastoma), câncer de pele, câncer de cólon, câncer de bexiga, câncer colorretal, câncer gástrico, câncer de fígado, câncer de pâncreas, câncer de cabeça e pescoço, melanoma, ascite maligna, mesotelioma ou neuroblastoma. O câncer de cérebro pode ser adulto ou pediátrico. O glioma pode ser resistente a temozolomida (TMZ) ou susceptível a TMZ.

[0143] Em modalidades particulares, o câncer é câncer de ovário, neuroblastoma, câncer de próstata ou câncer cerebral (incluindo, por exemplo, gliomas, tais como glioblastoma, meduloblastoma e DIPG). Em outras modalidades, o câncer é câncer de ovário, câncer de próstata ou câncer cerebral (incluindo, por exemplo, gliomas, tais como glioblastoma, meduloblastoma e DIPG). Em outras modalidades, o câncer é câncer de ovário, glioma, câncer colorretal, câncer de próstata, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de fígado, melanoma ou ascite maligna. Em outras modalidades, o câncer pode ser câncer de pâncreas, câncer colorretal, melanoma, câncer de próstata, câncer de cérebro (incluindo pediátrico e adulto), câncer de ovário, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de útero, neuroblastoma, mesotelioma, ascite maligna ou câncer de peritônio.

[0144] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização na indução de apoptose, ou inibir a proliferação, de células-tronco de câncer de ovário. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para induzir apoptose, ou inibir a proliferação, de células-tronco de câncer de ovário, método que compreende o contato entre as células-tronco de câncer de ovário com uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I). O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 41, ou em alternativa, o composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, 13 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9 e 13. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+). As células-tronco de câncer de ovário podem ser resistentes à cisplatina e/ou paclitaxel. O composto de fórmula (I) pode ser administrado por via intraperitoneal.

[0145] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização no tratamento de câncer de ovário em um indivíduo. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer de ovário em um indivíduo em necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ao indivíduo. O câncer pode ser um câncer que voltou a ocorrer. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 41, ou em alternativa, o composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, 13 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9 e 13. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+). O câncer de ovário pode ser resistente à cisplatina e/ou paclitaxel. O composto de fórmula (I) pode ser administrado por via intraperitoneal.

[0146] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização na redução da incidência ou risco de recorrência de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para reduzir a incidência risco de recorrência de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer, método que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) ao indivíduo. O indivíduo considerado em risco de recorrência de câncer pode ser um indivíduo em remissão de câncer de ovário ou um indivíduo em remissão de câncer de cérebro, tal como glioma. O método pode envolver a redução da incidência ou risco de recorrência de câncer de ovário, ou recorrência de câncer de cérebro no indivíduo. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9 e 13. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2 ou composto 9. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0147] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização no tratamento de uma doença causada por células- tronco de câncer de ovário em um indivíduo. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de uma doença causada por células-tronco de câncer de ovário em um indivíduo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. A doença pode ser câncer. O câncer pode ser um câncer de ovário ou algum outro câncer, por exemplo, um câncer metastático. O câncer pode ser resistente à cisplatina e/ou paclitaxel. O composto de fórmula (I) pode ser administrado por via intraperitoneal. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 13. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0148] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização na indução de apoptose, ou inibir a proliferação, de células-tronco de câncer de cérebro, tais como célula- tronco de glioma. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para inibir a proliferação de células-tronco de câncer de cérebro, tais como células- tronco de glioma, método que compreende o contato das células-tronco de câncer de cérebro com uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I). O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 41, ou alternativamente, o composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6 e 9, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 13, ou, alternativamente, podem ser selecionados a partir de compostos 2 e 9. O composto de fórmula (I) podem ser o composto 9. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0149] Os compostos de fórmula (I) podem encontrar utilização no tratamento de uma doença causada por células- tronco de câncer de cérebro em um indivíduo, tais como células-tronco de glioma. Consequentemente, em uma modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de uma doença causada por células-tronco de câncer de cérebro em um indivíduo, tais como células-tronco de glioma, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. A doença pode ser câncer. O câncer pode ser um câncer de cérebro ou algum outro tipo de câncer, por exemplo, um câncer metastático. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 41, ou alternativamente, o composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6 e 9, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 13, ou, alternativamente, podem ser selecionados a partir de compostos 2 e 9. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 9. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0150] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O câncer pode ser câncer colorretal, câncer de cérebro (como por exemplo, glioma, DIPG ou meduloblastoma), câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de fígado, melanoma, neuroblastoma ou ascite maligna. O câncer de cérebro pode ser adulto ou pediátrico. O câncer pode ser câncer de ovário, câncer de próstata, câncer de cérebro ou neuroblastoma. O câncer pode ser câncer de ovário, câncer de próstata ou câncer de cérebro. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 ou de 32 a 41, ou alternativamente pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 ou de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 ou de 32 a 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, 16, de 18 a 22, 24 ou de 32 a 35, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9, 13 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9 e 13. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0151] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para tratar o câncer de cérebro em um indivíduo em necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O câncer de cérebro pode ser glioma, por exemplo, glioblastoma, DIPG ou meduloblastoma. O câncer de cérebro pode ser adulto ou pediátrico. O câncer pode ser um câncer que voltou a ocorrer. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 41, ou alternativamente, o composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14 e de 32 a 40, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos de 1 a 14, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 36, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 13, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6 e 9, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9 e 13, ou, alternativamente, pode ser selecionado a partir de compostos 2 e 9. O composto de fórmula (I) pode ser composto 9. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. O glioma pode ser resistente ou suscetível ao TMZ. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0152] Em uma modalidade adicional, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer de próstata em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende o a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 41, ou alternativamente pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 40. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir dos compostos de 33 a 41 ou a partir dos compostos de 33 a 40. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 33 ou 36. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 36. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+). O composto de fórmula (I) pode ser administrado por via retal.

[0153] Em outra modalidade adicional, a invenção fornece um método para o tratamento de neuroblastoma em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 41, ou alternativamente pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 40. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 9 ou 36. O composto de neuroblastoma pode ser neuroblastoma pediátrica. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0154] Em outra modalidade adicional, a invenção fornece um método para o tratamento de melanoma em um indivíduo em necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 41, ou alternativamente pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 40. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 9. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outro quimioterapêutico agentes. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0155] Em outra modalidade adicional, a invenção fornece um método para o tratamento de ascite maligna em um indivíduo em necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ao indivíduo. O composto de fórmula (I) pode ser qualquer combinação de um ou mais dos compostos de 1 a 41. O composto de fórmula (I) pode ser selecionado a partir de compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 41, ou alternativamente pode ser selecionado a partir dos compostos 2, 6, 9, de 19 a 22, 24 e de 32 a 40. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2 ou o composto 9. O composto de fórmula (I) pode ser o composto 2. Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0156] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer de ovário, câncer peritoneal, ascites malignas, câncer de útero, câncer de pâncreas, câncer gástrico, câncer colorretal, câncer de fígado, câncer de mama, câncer de pulmão ou câncer de próstata, em um indivíduo com essa necessidade, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto 2 ao indivíduo. O composto pode ser utilizado na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. O composto pode estar na forma de enantiômero (+).

[0157] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer do cérebro, neuroblastoma, melanoma, câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer colorretal ou câncer de próstata, em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto 9 ao indivíduo. O câncer de cérebro pode ser glioma, por exemplo, DIPG. O composto pode ser utilizado na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. O composto pode estar na forma de enantiômero (+).

[0158] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer de próstata, câncer de cérebro, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de mama, melanoma, câncer de pâncreas, câncer de ovário ou câncer colorretal, em um indivíduo com necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto 36 ao indivíduo. O câncer de cérebro pode ser glioma, por exemplo, DIPG. O composto pode ser utilizado na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. O composto pode estar na forma de enantiômero (+).

[0159] Em outra modalidade, a invenção fornece um método para o tratamento de câncer de fígado em um indivíduo em necessidade do mesmo, método que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto 20 ou composto 33 ao indivíduo. Os compostos podem ser utilizados na ausência de outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos podem estar na forma de enantiômero (+).

[0160] Os técnicos na arte reconhecerão que os compostos e as composições farmacêuticas da presente invenção podem ser administrados através de qualquer via que fornece uma quantidade eficaz dos compostos ao tecido ou local a ser tratado. Em geral, os compostos e as composições podem ser administrados por via parentérica (por exemplo, intravenosa, intra-espinhal, subcutânea ou intramuscular), oral ou tópica. A administração pode ser sistêmica, regional ou local. Em uma modalidade, a administração pode ser por via retal.

[0161] A via de administração particular para ser utilizada em qualquer circunstância dependerá de um número de fatores, incluindo a natureza do câncer a ser tratado, da gravidade, da extensão do câncer, da dosagem requerida do composto particular a ser entregue e de possíveis efeitos colaterais do composto.

[0162] Em geral, as composições adequadas podem ser preparadas de acordo com métodos que são conhecidos pelos técnicos na arte e podem incluir veículos, diluentes e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Os veículos, diluentes e excipientes devem ser "aceitáveis", em termos de serem compatíveis com os outros ingredientes da composição e não deletério em relação ao recipiente do mesmo.

[0163] Exemplos de veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis são água desmineralizada ou destilada; solução salina; óleos de base vegetal, tais como óleo de amendoim, óleo de cártamo, óleo de oliva, óleo de semente de algodão, óleo de milho ou óleo de coco; óleos de silicone, incluindo polisiloxanos, tais como metilpolisiloxano, fenilpolissiloxano e metilfenilpolisiloxano; silicones voláteis; óleos minerais tais como parafina líquida, parafina mole ou esqualano; derivados de celulose tais como metilcelulose, etilcelulose, carboximetilcelulose, carboximetilcelulose de sódio ou hidroxipropilmetilcelulose; Cremaphor; ciclodextrinas; alcanóis inferiores, por exemplo, etanol ou i-propanol; aralcanóis inferiores; polialquilenoglicóis inferiores alquilenoglicóis inferiores, por exemplo, polietilenoglicol, polipropilenoglicol, etilenoglicol, propilenoglicol, 1,3- butileno-glicol ou glicerina; ésteres de ácidos graxos, tais como palmitato de isopropil, miristato de isopropil ou oleato de etil; polivinilpirrolidona; ágar; carragena; goma de tragacanto ou goma acácia e vaselina. Tipicamente, o veículo/veículos irá/irão formar de 10% a 99,9% em peso das composições.

[0164] As composições farmacêuticas da invenção podem estar em uma forma adequada para administração através de injeção, sob a forma de uma formulação adequada para a ingestão oral (tal como cápsulas, comprimidos, pastilhas, elixires, por exemplo), sob a forma de uma pomada, creme ou loção adequada para administração tópica, sob uma forma adequada para administração como gotas para os olhos, na forma de aerossol adequado para administração por inalação, tal como por inalação intranasal ou inalação oral, sob uma forma adequada para administração parentérica, que é, subcutânea, intramuscular ou injeção intravenosa.

[0165] Para a administração como uma solução ou suspensão injetável, diluentes ou veículos não tóxicos parentericamente aceitáveis podem incluir ciclodextrinas (por exemplo, Captisol®) Cremaphor, solução de Ringer, solução salina isotônica, solução salina tamponada com fosfato, etanol e 1,2-propilenoglicol. Para auxiliar a injeção e a administração, os compostos também podem ser adicionados a lipossomas ou micelas PEGuilados e não PEGuilados com tags de alvejamento específicos ligados a porções de PEG, tais como o peptídeo RGD ou glutationa, para auxiliar a passagem através da barreira hematoencefálica.

[0166] Alguns exemplos de veículos adequados, diluentes, excipientes e adjuvantes para utilização oral incluem ciclodextrinas, Cremaphor, óleo de amendoim, parafina líquida, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, alginato de sódio, goma acácia, goma de tragacanto, dextrose, sacarose, sorbitol, manitol, gelatina e lecitina. Além disso, estas formulações orais podem conter agentes aromatizantes e corantes adequados. Quando utilizado na forma de cápsulas, estas podem ser revestidas com compostos, tais como monoestearato de gliceril ou diestearato de gliceril, que atrasam a desintegração.

[0167] Os adjuvantes tipicamente incluem emolientes, emulsionantes, agentes espessantes, conservantes, agentes bactericidas e de tamponamento.

[0168] As formas sólidas para administração oral podem conter ligantes aceitáveis de prática farmacêutica humana e veterinária, adoçantes, agentes desintegrantes, diluentes, aromatizantes, agentes de revestimento, conservantes, lubrificantes e/ou agentes de atraso. Os ligantes adequados incluem goma arábica, gelatina, amido de milho, goma adragante, alginato de sódio, carboximetilcelulose ou polietilenoglicol. Os adoçantes adequados incluem sacarose, lactose, glicose, aspartame ou sacarina. Os agentes desintegrantes adequados incluem amido de milho, metilcelulose, polivinilpirrolidona, goma guar, goma xantana, bentonite, ácido algínico ou ágar. Os diluentes adequados incluem lactose, sorbitol, manitol, dextrose, caulino, celulose, carbonato de cálcio, silicato de cálcio ou fosfato dicálcico. Os agentes aromatizantes adequados incluem óleo de hortelã-pimenta, óleo de gaultéria, aromatizantes de cereja, laranja ou framboesa. Os agentes de revestimento adequados incluem polímeros ou copolímeros de ácido acrílico e/ou ácido metacrílico e/ou os ésteres dos mesmos, ceras, álcoois graxos, zeína, goma-laca ou glúten. Os conservantes adequados incluem benzoato de sódio, vitamina E, alfa-tocoferol, ácido ascórbico, metilparabeno, propilparabeno, ou bissulfito de sódio. Os lubrificantes adequados incluem estearato de magnésio, ácido esteárico, oleato de sódio, cloreto de sódio ou talco. Os agentes de atraso adequados incluem monoestearato de gliceril ou diestearato de gliceril.

[0169] As formas líquidas para administração oral podem conter, além dos agentes anteriores, um veículo líquido. Os veículos líquidos adequados incluem água, óleos tais como óleo de oliva, óleo de amendoim, óleo de sésamo, óleo de girassol, óleo de cártamo, óleo de coco, parafina líquida, etilenoglicol, propilenoglicol, polietilenoglicol, etanol, propanol, isopropanol, glicerol, álcoois graxos, triglicerídeos ou misturas dos mesmos.

[0170] As suspensões para administração oral podem adicionalmente conter agentes dispersivos e/ou agentes de suspensão. Os agentes de suspensão adequados incluem carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, polivinilpirrolidona, alginato de sódio ou álcool acetil. Os agentes dispersantes adequados incluem lecitina, ésteres de polioxietileno de ácidos graxos, tais como ácido esteárico, mono- ou di-oleato, - estearato ou -laurato de polioxietileno sorbitol, mono- ou di-oleato, -estearato ou -laurato de polioxietileno sorbitano e semelhantes.

[0171] As emulsões para administração oral podem adicionalmente conter um ou mais agentes emulsionantes. Os agentes emulsionantes adequados incluem agentes dispersantes, tais como os exemplificados acima ou gomas naturais, tais como goma guar, goma acácia ou goma de tragacanto.

[0172] Os métodos para a preparação de composições administráveis de forma parentérica são evidentes para os técnicos na arte, e são descritos em mais detalhes em, por exemplo, Pharmaceutical Science de Remington, 15a Ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., aqui incorporado por referência.

[0173] As formulações tópicas podem compreender um ingrediente ativo em conjunto com um ou mais veículos aceitáveis e, opcionalmente, quaisquer outros ingredientes terapêuticos. As formulações adequadas para administração tópica incluem preparações líquidas ou semilíquidas adequadas para penetração através da pele até o local onde o tratamento é necessário, tais como linimentos, loções, cremes, unguentos ou pastas, e gotas adequadas para administração ao olho, ouvido ou nariz.

[0174] As gotas, de acordo com a presente invenção, podem compreender soluções ou suspensões aquosas ou oleosas estéreis. Estas podem ser preparadas através da dissolução do ingrediente ativo em uma solução aquosa de um agente bactericida e/ou fungicida e/ou qualquer outro conservante adequado, e incluindo, opcionalmente, um agente ativo de superfície. A solução resultante pode então ser clarificada por filtração, transferida para um recipiente adequado e esterilizada. A esterilização pode ser conseguida através de tratamento em autoclave ou manutenção de 90°C a 100°C durante meia hora, ou por meio de filtração, seguido por transferência para um recipiente através de uma técnica asséptica. Exemplos de agentes bactericidas e fungicidas adequados para inclusão nas gotas são: nitrato ou acetato de fenilmercúrico (0,002%), cloreto de benzalcônio (0,01%) e acetato de clorexidina (0,01%). Os solventes adequados para a preparação de uma solução oleosa incluem glicerol, álcool diluído e propilenoglicol.

[0175] As loções, de acordo com a presente invenção, incluem as que são adequadas para aplicação à pele ou aos olhos. Uma loção para os olhos pode compreender uma solução aquosa estéril contendo opcionalmente um agente bactericida e pode ser preparada através de métodos semelhantes aos descritos acima em relação à preparação de gotas. As loções ou linimentos para aplicação à pele podem também incluir um agente para acelerar a secagem e para arrefecer a pele, tal como um álcool ou acetona, e/ou um hidratante, tal como glicerol, ou um óleo, tal como azeite.

[0176] Os cremes, unguentos ou pastas, de acordo com a presente invenção, são formulações semissólidas do ingrediente ativo para aplicação externa. Eles podem ser produzidos através da mistura do ingrediente ativo finamente dividido ou em forma de pó, sozinho ou em solução ou suspensão, em um fluido aquoso ou não aquoso, com uma base gordurosa ou não gordurosa. A base pode compreender hidrocarbonetos, tais como parafina dura, mole ou líquida, glicerol, cera de abelha, um sabão metálico; uma mucilagem; um óleo de origem natural, tal como óleo de amêndoa, milho, amendoim, rícino ou azeite; gordura de lã ou seus derivados, ou um ácido graxo, tal como ácido esteárico ou oleico juntamente com um álcool, tal como propilenoglicol ou macrogóis.

[0177] A composição pode incorporar qualquer agente tensoativo adequado, tal como um tensoativo aniônico, catiônico ou não iônico, tal como ésteres de sorbitano ou derivados de polioxietileno dos mesmos. Os agentes de suspensão, tais como gomas naturais, derivados de celulose ou materiais inorgânicos, tais como sílicas siliciosas, e outros ingredientes, tais como lanolina, podem também ser incluídos.

[0178] Em algumas modalidades, as composições são administradas na forma de supositórios adequados para administração retal dos compostos de fórmula (I). Estas composições são preparadas através da mistura do composto de fórmula (I) com um excipiente não irritante adequado que é sólido à temperaturas normais, mas é líquido à temperatura retal e irá, portanto, derreter no reto para liberar o composto de fórmula (I). Tais materiais incluem manteiga de cacau, gelatina glicerinada, óleos vegetais hidrogenados, misturas de polietilenoglicóis de vários pesos moleculares e ésteres de ácidos graxos de polietilenoglicol.

[0179] As composições também podem ser administradas ou fornecidas a células alvo na forma de lipossomos. Os lipossomos são geralmente derivados de fosfolipídios ou outras substâncias lipídicas e são formados com cristais líquidos hidratados mono- ou multi-lamelares que são dispersos em um meio aquoso. Exemplos específicos de lipossomos utilizados na administração ou fornecimento de uma composição para alvejar células são colesterol sintético (Sigma), fosfolipídeos 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina (DSPC); Avanti Polar Lipids), lipídeo PEG 3-N- [(-metoxi poli(etilenoglicol)2000)carbamoil]-1,2- dimirestiloxi-propilamina (PEG-CDMA), e o lipídeo catiônico 1,2-di-o-octadecenil-3-(N,N-dimetil)aminopropano (DODMA) ou 1,2-dilinoleiloxi-3-(N,N-dimetil)aminopropano (DLinDMA) em uma proporção molar de 55:20:10:15 ou 48:20:2:30, respectivamente, PEG-cDMA, e DODMA DLinDMA. O lipossomo pode ser construído a partir de 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina-N-[metoxi(polietilenoglicol)-2000] (DSPE PEG2000) e fosfatidilcolina derivada de soja e hidrogenado entre 50% e a 100%, por exemplo soja PC-75 ou soja PC-100. MW divergentes de PEG podem ser utilizadas e ligadas de forma covalente com vários agentes de direcionamento específicos, tais como a glutationa, peptídeos RGD, ou outros agentes de direcionamento de lipossomos reconhecidos. Qualquer lipídeo não tóxico fisiologicamente aceitável e metabolizável capaz de formar lipossomos pode ser utilizado. As composições na forma de lipossomos podem conter estabilizantes, conservantes, excipientes e semelhantes. Os lipídeos preferenciais são os fosfolipídeos e fosfatidilcolinas (lecitinas), tanto naturais quanto sintéticas. Os métodos para formar lipossomos são conhecidos na arte, e em relação a isto, é feita referência específica a: Prescott, Ed, Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, Nova Iorque, Nova Iorque (1976), p. 33 e segs., cujo conteúdo é aqui incorporado por referência.

[0180] As composições também podem ser administradas sob a forma de micropartículas ou nanopartículas. As micropartículas biodegradáveis formadas a partir de ácido poliláctico (PLA), poli (L-ácido láctico-co- ácidoglicólico) (PLGA), e epsilon-caprolactona (é- caprolactona) têm sido amplamente utilizados como suportes de medicamentos para aumentar a meia vida no plasma e assim prolongar a eficácia (R. Kumar, M., 2.000, J. Pharm. Pharmaceut. Sci. 3(2) 234-258). As micropartículas têm sido formuladas para a entrega de uma variedade de candidatos a fármacos, incluindo vacinas, antibióticos e DNA. Além disso, estas formulações têm sido desenvolvidas para várias vias de administração, incluindo injeção subcutânea, parentérica, intravenosa e inalação.

[0181] As composições podem incorporar uma matriz de liberação controlada que é composta por acetato isobutirato de sacarose (SAIB) e um solvente orgânico ou mistura de solventes orgânicos. Aditivos de polímeros podem ser adicionados ao veículo como um modificador de liberação para aumentar ainda mais a viscosidade e retardar a taxa de liberação. O SAIB é um aditivo alimentar conhecido. Ele é um derivado de sacarose inteiramente esterificado, muito hidrofóbico, a uma razão nominal de seis isobutiratos de dois grupos acetato. Como um éster misto, o SAIB não cristaliza, mas existe como um líquido viscoso transparente. A mistura de SAIB com um solvente orgânico farmaceuticamente aceitável, tal como etanol ou álcool benzílico, diminui a viscosidade da mistura suficientemente para permitir a injeção. Um ingrediente farmacêutico ativo pode ser adicionado ao veículo de entrega de SAIB para formar formulações de solução ou suspensão de SAIB. Quando a formulação é injetada por via subcutânea, o solvente difere a partir da matriz que permite as misturas de SAIB-fármaco ou de SAIB-fármaco-polímero para ser configurado como um depósito de formação in situ.

[0182] Para os propósitos da presente invenção, os compostos e composições podem ser administrados terapeuticamente ou preventivamente aos indivíduos. Em uma aplicação terapêutica, as composições são administradas a um paciente que já sofre de câncer em uma quantidade suficiente para curar ou pelo menos parar parcialmente o câncer e as suas complicações. A composição deve fornecer uma quantidade do composto ou agente suficiente para tratar eficazmente o indivíduo.

[0183] A quantidade terapeuticamente eficaz para qualquer paciente em particular dependerá de uma variedade de fatores, incluindo: o câncer a ser tratado e da sua gravidade; a atividade do composto administrado; a composição em que o composto está presente; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do indivíduo; o tempo de administração; a via de administração; a taxa de sequestro do composto; a duração do tratamento; fármacos utilizados em combinação ou coincidentes com o composto, em conjunto com outros fatores relacionados bem conhecidos em medicina.

[0184] Um técnico na arte seria capaz, por experimentação de rotina, de determinar uma quantidade eficaz e não tóxica de um composto que seria necessário para tratar ou prevenir um câncer particular.

[0185] Geralmente, uma dosagem eficaz está prevista para estar no intervalo de cerca de 0,0001 mg por kg a cerca de 1.000 mg por kg de peso corporal por 24 horas; Tipicamente, cerca de 0,001 mg por kg a cerca de 750 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 0,01 mg por kg a cerca de 500 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 0,1 mg por kg a cerca de 500 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 0,1 mg por kg a cerca de 250 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 1,0 mg por kg a cerca de 250 mg por kg de peso corporal por 24 horas. Mais tipicamente, um intervalo de dosagem eficaz é esperado para estar no intervalo de cerca de 1,0 mg por kg a cerca de 200 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 1,0 mg por kg a cerca de 100 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 1,0 mg por kg a cerca de 50 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 1,0 mg por kg a cerca de 25 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 5,0 mg por kg a cerca de 50 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 5,0 mg por kg a cerca de 20 mg por kg de peso corporal por 24 horas; cerca de 5,0 mg por kg a cerca de 15 mg por kg de peso corporal por 24 horas.

[0186] Alternativamente, uma dosagem eficaz pode ser de até cerca de 500 mg/m2. Geralmente, uma dosagem eficaz está prevista para estar no intervalo de cerca de 25 mg/m2 a cerca de 500 mg/m2, preferivelmente cerca de 25 mg/m2 a cerca de 350 mg/m2, mais preferivelmente cerca de 25 mg/m2 a cerca de 300 mg/m2, ainda mais preferivelmente cerca de 25 mg/m2 a cerca de 250 mg/m2, ainda mais preferivelmente cerca de 50 mg/m2 a cerca de 250 mg/m2, e ainda mesmo mais preferivelmente cerca de 75 mg/m2 a cerca de 150 mg/m2.

[0187] Tipicamente, em aplicações terapêuticas, o tratamento seria para o período de duração do estado de doença.

[0188] Além disso, será evidente para um técnico na arte que a quantidade ótima e o espaçamento das dosagens individuais serão determinados pela natureza e extensão do câncer a ser tratado, pela forma, pela via e local de administração, e pela natureza do indivíduo particular a ser tratado. Além disso, tais condições ótimas podem ser determinadas por técnicas convencionais.

[0189] Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados isoladamente no tratamento de câncer, ou, alternativamente, em combinação com radioterapia e/ou cirurgia e/ou outros agentes terapêuticos, por exemplo, agentes quimioterapêuticos e agentes imunoestimulantes, como parte de uma terapia de combinação. Os compostos de fórmula (I) podem sensibilizar células de câncer indiferenciadas para outros agentes quimioterapêuticos e/ou para radioterapia.

[0190] Os termos "terapia de combinação" e "terapia adjunta" destinam-se a englobar a administração de vários agentes terapêuticos de uma maneira sequencial em um regime que fornecerá efeitos benéficos, e destinam-se a englobar a administração destes agentes em uma única formulação ou em formulações separadas.

[0191] A terapia de combinação pode envolver os agentes ativos a ser administrados em conjunto, sequencialmente, ou espaçados, adequados a cada caso. As combinações de agentes ativos, incluindo os compostos da invenção, podem ser sinérgicos.

[0192] A coadministração de compostos de fórmula (I) com outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode ser efetuada por um composto da fórmula (I) na mesma forma de dose unitária como o(s) outro(s) agente(s) terapêutico(s), ou o composto da fórmula (I) e outro(s) agente(s) terapêutico(s) podem estar presentes em formas de dosagem unitárias individuais e discretas que são administradas sequencialmente, ao mesmo tempo, ou em um momento semelhante. A administração sequencial pode estar em qualquer ordem conforme necessário e pode necessitar de um efeito fisiológico em curso do primeiro agente (ou agente inicial) para estar na corrente quando o segundo agente (ou agente posterior) é administrado, especialmente quando é desejado um efeito cumulativo ou sinérgico. Quando administrados separadamente, pode ser preferencial que o composto de fórmula (I) e outro agente sejam administrados pela mesma via de administração, embora não seja necessário que ocorra desta forma.

[0193] De acordo com várias modalidades da presente invenção, um ou mais compostos de fórmula (I) podem ser incluídos na terapia de combinação com cirurgia e/ou radioterapia e/ou um ou mais agentes quimioterapêuticos.

[0194] Existe um grande número de agentes quimioterapêuticos, que estão atualmente em uso na avaliação clínica e em desenvolvimento pré-clínico, que poderiam ser selecionados para o tratamento de cânceres em combinação com os compostos da fórmula (I). Tais agentes encontram-se em várias categorias principais, nomeadamente, agentes antibióticos, agentes de alquilação, agentes antimetabólitos, agentes hormonais, agentes imunológicos, agentes tipo interferon e uma categoria de agentes variados. Alternativamente, podem ser utilizados outros agentes quimioterapêuticos, tais como inibidores de metaloproteinase de matriz (MMP). Os agentes adequados que podem ser utilizados em terapias de combinação incluem aqueles listados, por exemplo, em The Merck Index, An Encyclopaedia of Chemicals, Drugs and Biologicals, 12a Ed., 1996, cujo conteúdo total é aqui incorporado por referência.

[0195] Quando utilizado no tratamento de tumores sólidos, os compostos de fórmula (I) podem ser administrados com um ou mais dos seguintes agentes quimioterapêuticos: adriamicina, taxol, docetaxel, fluorouracil, melfalano, cisplatina, interferon alfa, COMP (ciclofosfamida, vincristina, metotrexato e prednisona), etoposido, mBACOD (metotrexato, bleomicina, doxorrubicina, ciclofosfamida, vincristina e dexametasona), PROMACE/MOPP (prednisona, metotrexato (com recuperação de leucovin), doxorrubicina, ciclofosfamida, taxol, etoposido / mecloretamina, vincristina, prednisona e procarbazina), vincristina, vinblastina, angioinibinas, TNP 470, polissulfato de pentosano, plaquetas de fator 4, angiostatina, LM 609, SU 101, CM 101, Techgalan, talidomida, SP-PG e semelhantes.

[0196] A presente invenção é adicionalmente descrita abaixo com referência aos seguintes exemplos não limitativos.

Exemplos Exemplo 1 - Síntese de compostos de fórmula (I)

[0197] Os compostos representativos da fórmula (I) foram preparados como se segue.

Etapa 1. (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(4- hidroxifenil)metanona (1-1a)

[0198] 2-metilresorcinol (50 g, 1 eq.), ácido 4- hidroxibenzóico (55,5 g, 1 eq.), cloreto de zinco (120 g, 2,2 eq) e POCl3 (550 mL) foram adicionados a um balão sob atmosfera de N2 e agitados. A mistura foi aquecida a 70°C durante 2 horas, arrefecida até à temperatura ambiente e vertida em gelo/água (4L) mantendo a temperatura a <30°C. O sólido foi filtrado, lavado com água (3 x 500 mL). O sólido úmido foi então recristalizado a partir de IMS (250 mL) e seco para se obter o produto como um sólido cor de laranja 85 g (87%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,91 (s, 1H), 10,59 (s, 1H), 10,30 (s, 1H), 7,28 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,46 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,24 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 2,02 (s, 3H).

[0199] Outros análogos preparados através deste método:

[0200] (2,4-dihidroxifenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1b) (47%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 11,90 (bs, 1H), 7.51-7,32 (m, 3H), 7,09 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 6,45-6,33 (m, 2H).

[0201] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1c) (41%). 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) δ 12,72 (s, 1H), 10,76 (s, 1H), 10,65 (s, 1H), 7,43 (dd, J = 1,96, 11,74 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 9,00 Hz, 2H), 7,06 (t, J = 8,41 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 9,00 Hz, 1H), 1,99 (s, 3H).

[0202] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(4-metoxi-3,5- dimetilfenil)metanona (1-1d) (63%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 12,89 (s, 1H), 10,67 (s, 1H), 10,15 (s, 1H), 7,38-7,15 (m, 3H), 6,52-6,43 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 2,28 (s, 6H).

[0203] (3,5-difluoro-4-hidroxifenil)(2,4-dihidroxi- 3-metilfenil)metanona (1-1e). (43%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 12,61 (s, 1H), 10,84 (bs, 1H), 9,70 (bs, 1H), 7,237,10 (m, 2H), 6,98-6,85 (m, 1H), 2,20 (s, 3H).

[0204] (2,4-dihidroxi-3-i-propil-fenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1f). (18%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 12,88 (bs, 1H), 7,62 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 7,31 (d,J = 8,4 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 6,47 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 1,95 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,2 (t, J = 9,1 Hz, 3H).

[0205] (2,4-dihidroxi-5-etilfenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1g) (77%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 7,41 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 1,2, 8,2 Hz), 7,08 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 2,51 (q, J = 9,1 Hz, 2H), 1,22 (t, J = 9,2 Hz, 3H).

[0206] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(3-4- metilenodioxifenil)metanona (1-1h). (22%) 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,65 (br s, 1H), 9,87 (brs, 1H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,06 (s, 2H), 2,02 (s, 3H).

[0207] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(4- nitrofenil)metanona (1-1i) (38%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,96 (brs, 1H), 8,33 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,97 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,09 (d, J = 8,12 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H).

[0208] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(4- acetamidafenil)metanona (1-1j) (38%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 13,21 (brs, 1H), 9,66 (brs, 1H), 7,88 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,50 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,10 (s, 1H), 2,09 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).

[0209] (2,4-dihidroxi-5-etil-3-metilfenil)(4- hidroxifenil)metanona (1-1k) (42%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 13,55 (s, 1H), 11,20 (br, 1H), 10,90 (br, 1H), 7,44 (d, J= 8,2 Hz, 2H), 7,11 (s, 1H), 6,99 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 3,45 (q, J = 7,9 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,34 (t, J = 8,0 Hz, 3H).

[0210] (2,4-dihidroxi-3-etilfenil)(4- hidroxifenil)metanona (1-1l). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,2 (s, 1H), 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,11 (d,J = 8,2 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 2,65 (m, 2H), 1,04 (t, J = 7,8 Hz, 3H).

[0211] (2,4-dihidroxi-5-metilfenil)(4- hidroxifenil)metanona (1-1m). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,90 (s, 1H), 10,90-95 (br, 2H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,33 (s, 1H), 7,11 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,33 (s, 1H), 2,05 (s, 3H).

[0212] (2,4-dihidroxi-5-fluorofenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1n). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,99 (m, 1H), 7,55-7,35 (m, 3H), 7,05 (m, 1H), 6,55 (s, 1H).

[0213] (5-cloro-2,4-dihidroxifenil)(3-fluoro-4- hidroxifenil)metanona (1-1o). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,11 (s, 1H), 7,89 (m, 1H), 7,55-45 (m, 2H), 7,11 (s, 1H), 6,5 (s, 1H).

[0214] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(3-cloro-4- hidroxifenil)metanona (1-1p). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,91 (s, 1H), 11,11 (br, 1H), 10,65 (br, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 8,2 Hz, 1H) 2,05 (s, 3H).

[0215] (2,4-dihidroxi-5-etil-3-metilfenil)(3- fluoro-4-hidroxifenil)metanona (1-1q) (42%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,55 (s, 1H), 11,20 (br, 1H), 10,90 (br, 1H), 7,55-7,45 (m, 2H), 7,11 (s l, 1H), 7,01 (brs, 1H), 3,45 (q, J = 7,9 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,34 (t, J = 8,0 Hz, 3H).

[0216] (2,4-dihidroxi-5-etil-3-metilfenil)(3-metil- 4-hidroxifenil)metanona (1-1r). (41%) 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 9,55 (s, 1H), 8,20 (br, 1H), 7,90 (br, 1H), 6,65 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,60 (dd, J = 7,1, 2,1 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,15 (q, J = 7,9 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,14 (t, J = 8,0 Hz, 3H).

[0217] (2,4-dihidroxi-5-etil-3-metilfenil)(2-metil- 4-hidroxifenil)metanona (1-1s) (32%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ 9,59 (s, 1H), 8,60 (br, 1H), 7,95 (br, 1H), 6,68 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,56 (d, J = 7, Hz, 1H), 6,35 (dd, J = 6,9, 2,1 Hz, 1H), 3,25 (q, J = 7,8 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,24 (t, J = 8,0 Hz, 3H).

[0218] (2,4-dihidroxi-5-etil-3-metilfenil)(2- fluoro-4-hidroxifenil)metanona (1-1t) (38%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,9 (s, 1H), 9,16 (br, 1H), 7,95 (br, 1H), 6,78 (dd J = 6,9, 6,2 Hz, 1H), 6,62 (brd, J = 7,1 Hz, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,45 (brd, J = 6,9 Hz, 1H), 3,28 (q, J = 7,8 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 1,14 (t, J = 8,0 Hz, 3H). Etapa 2. 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2a)

[0219] (2,4-dihidroxi-3-metilfenil)(4- hidroxifenil)metanona (36,8 g, 1 eq.) e ácido 3,5-dimetoxi- 4-hidroxifenilacético (32 g, 1 eq.) foram adicionados a anidrido acético (110 ml) com agitação, diisopropiletilamina (64,4 g, 4,5 eq.) foi então adicionada ao longo de 5 minutos. A reação foi aquecida de 130°C a 140°C durante 18 horas, em seguida arrefecida até à temperatura ambiente e vertida sobre água (750 mL). O aquoso foi extraído com DCM (2 x 750 mL), lavado com água (500 mL), salmoura (300 mL), seco sobre MgSO4, em seguida, concentrado para resultar em um sólido castanho pegajoso escuro. O material bruto foi tratado com EtOAc (200 mL), agitado, aquecido ao refluxo e arrefecido, o sólido filtrado foi lavado com gelo EtOAc frio (50 mL) para originar um sólido amarelo pálido (66 g). O sólido foi tratado 2 x EtOAc (100 mL) com agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos, filtrado para dar origem a um sólido branco (62 g, 76%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,187,07 (m, 5H), 6,93 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,37 (s, 2H), 3,62 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).

[0220] Outros análogos preparados através deste método:

[0221] 4-(7-acetoxi-8-metil-2-oxo-3-(3,4,5- trimetoxifenil)-2H-cromen-4-il)fenil acetato (1-2b) (61%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,17-7,06 (m, 5H), 6,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,34 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,65 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,30 (s, 3H).

[0222] 3-(4-acetoxi-3,5-di-terc-butilfenil)-4-(4- acetoxifenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2c) (21 %). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,20-7,00 (m, 7H), 6,946,86 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,09 (s, 9H).

[0223] 4-(7-acetoxi-8-metil-2-oxo-3-(3,4,5- trifluorofenil)-2H-cromen-4-il)fenil acetato (1-2d) (20%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,18-7,08 (m, 5H), 7,01 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,80-6,71 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,33 (s, 3H).

[0224] 4-(7-acetoxi-2-oxo-3-(3,4,5-trifluorofenil)- 2H-cromen-4-il)-2-fluorofenil acetato (1-2e) (76%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,57-7,29 (m, 4H), 7,21-7,10 (m, 4H), 2,31 (s, 6H).

[0225] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-fluorofenil)-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2f) (68%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,31-7,20 (m, 2H), 7,17-7,10 (m, 1H), 7,07-6,98 (m, 2H), 6,94-6,88 (m, 1H), 6,38 (s, 2H), 3,64 (s, 6H), 2,36 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

[0226] 4-(7-acetoxi-2-oxo-3-(3,4,5-trimetoxifenil)- 2H-cromen-4-il)-2-fluorofenil acetato (1-2g) (50%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,32-7,22 (m, 2H), 7,18-7,05 (m, 1H), 7,08-6,90 (m, 3H), 6,33 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,69 (s, 6H), 2,38 (s, 6H).

[0227] 4-(4-acetoxi-3-fluorofenil)-8-metil-2-oxo-3- (3,4,5-trifluorofenil)-2H-cromen-7-il acetato (1-2h) (49%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,37-7,05 (m, 4H), 7,03-6,88 (m, 2H), 6,81-6,70 (m, 1H), 6,38 (s, 1H), 2,36 (bs, 9H).

[0228] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-fluorofenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2i) (46 %). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,18-6,87 (m, 5H), 6,39 (s, 2H), 3,66 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

[0229] 4-(4-acetoxi-3-fluorofenil)-8-metil-2-oxo-3- (3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-il acetato (1-2j) (49%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,16-6,89 (m, 5H), 6,34 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,68 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,31 (s, 3H).

[0230] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4-metoxi- 3,5-dimetilfenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (12k) (30%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,77 (s, 2H), 6,42 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,61 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,20 (s, 6H).

[0231] 4-(4-metoxi-3,5-dimetilfenil)-8-metil-2-oxo- 3-(3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-il acetato (1-2l) (34%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,15 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,76 (s, 2H), 6,38 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,66 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,20 (s, 6H).

[0232] 4-(4-acetoxi-3,5-difluorofenil)-3-(4- acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2m) (30%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,03-6,90 (m, 3H), 6,84-6,76 (m, 1H), 6,47 (s, 2H), 3,73 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H).

[0233] 4-(4-acetoxi-3,5-difluorofenil)-8-metil-2- oxo-3-(3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-il acetato (1-2n) (22%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,03-6,77 (m, 4H), 6,40 (s, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,71 (s, 6H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,34 (s, 3H).

[0234] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(3-fluoro- 4-acetoxifenil)-8-propil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1- 2o) (34%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,15-09 (m, 2H), 6,87 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,36 (s, 2H), 3,73 (s, 6H), 2,75 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,05 (s, 3H), 1,65 (m, 1H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

[0235] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(3-fluoro- 4-acetoxifenil)-6-etil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2p) (34%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,18 (s, 1H), 7,16 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 7,04 (dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 8,3, 2,5 Hz, 1H), 6,35 (s, 2H), 3,56 (s, 6H), 2,56 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 1,04 (t, J = 7,7 Hz, 3H).

[0236] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(3,4- metilenodioxifenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2q) (75%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,20 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,51 (s, 1H), 6,34 (s, 2H), 5,96 (s, 1H), 5,91 (s, 1H), 3,58 (s, 6H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,65 (s, 3H).

[0237] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- nitrofenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2r) (25%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 8,25 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,96 (m, 2H), 6,34 (s, 2H), 3,67 (s, 6H), 2,25 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,89 (s, 3H).

[0238] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- etilaminofenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2s) (45%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,51 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,43 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,42 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,96 (s, 3H).

[0239] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2t) (25%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,96 (s, 1H), 6,87 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,35 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,32 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0240] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-8-etil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2u) (45%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,21 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,10 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,41 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,81 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,25 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0241] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-6-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2v) (55%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,21 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,18 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,07 (m, 1H), 6,88 (m, 1H), 6,34 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,96 (s, 3H).

[0242] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-fluorofenil)-5-fluoro-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2w) (15%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,07-7,02 (m, 2H), 6,96-86 (m, 1H), 6,58 (s, 1H), 6,50 (s, 1H), 6,36 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,23 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H).

[0243] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-6-cloro-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2x) (45%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,21 (m, 2H), 7,18 (dd, J = 1,4, 1,2 Hz, 1H), 7,02 (dd, J = 1,2, 8,1 Hz, 1H), 6,96 (dd, J = 1,3, 8,6 Hz, 1H), 6,41 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,45 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,21 (s, 3H).

[0244] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-clorofenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2y) (55%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,31 (s, 1H), 7,10 (m, 2H), 7,05-7,01 (m, 2H), 6,45 (s, 2H), 3,66 (s, 6H), 2,35 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H).

[0245] 3-(4-acetoxy-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-fluorofenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-l acetato (1-2z) (35%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 7,07-7,02 (m, 2H), 6,96-88 (m, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,32 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0246] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-3-metilfenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2aa) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 7,1, 2,1 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 5,98 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,38 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0247] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetilfenil)-4-(4-acetoxi- 3-metilfenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2bb) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 7,1, 2,1 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,23 (s, 2H), 2,31 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 6H), 1,98 (s, 3H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0248] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxi-2-metilfenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2cc) (36%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,46 (d, J = 7. Hz, 1H), 6,30 (dd, J = 6,9, 2,1 Hz, 1H), 5,92 (s, 2H), 3,65 (s, 6H), 2,33 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0249] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetilfenil)-4-(4-acetoxi- 2-fluorofenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-2dd) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,88 (dd J = 6,9, 6,5 Hz, 1H), 6,66 (brd, J = 7,0 Hz, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,45 (brd, J = 6,5 Hz, 1H), 2,31 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,12 (s, 6H), 1,95 (s, 3H), 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Etapa 3. 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- hidroxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3a)

[0250] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- acetoxifenil)-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (24 g, 1 eq) e THF (1.500 mL) foram adicionados a um balão sob atmosfera de N2 e arrefecido a 5°C. 2M de complexo de borano dimetil sulfeto em THF (400 ml, 18 eq.) foi adicionado ao longo de 10 minutos. A solução foi agitada durante 2 horas sob esta temperatura, em seguida, aquecida até 40°C. A mistura foi vertida em 2M de HCl (2.000 mL) a < 15°C, em seguida, extraída com EtOAc (2 x 1.000 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 1.000 mL), salmoura, secos (MgSO4), em seguida, evaporados até à secura, obtendo- se (1-3a) bruto como um sólido amarelo pegajoso. O material foi purificado por cromatografia em coluna eluída com heptano para heptano/EtOAc a 3:2. As frações do produto foram retiradas para fornecer o composto do título (9,5 g, 53%) como um sólido laranja. 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,39 (bs, 2H), 7,14 (s, 1H), 6,98 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,82 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,54 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,40 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,35 (s, 2H), 5,07 (s, 2H), 3,61 (s, 6H), 2,12 (s, 3H).

[0251] Outros análogos preparados através deste método:

[0252] 4-(4-hidroxifenil)-8-metil-3-(3,4,5- trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3b) (47%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,38 (bs, 2H), 6,98 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,81 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,53 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,436,35 (m, 3H), 5,08 (s, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,61 (s, 6H), 2,22 (s, 3H).

[0253] 3-(3,5-di-terc-butil-4-hidroxifenil)-4-(4- hidroxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3c) (36%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,36-8,29 (m, 2H), 7,50-7,42 (m, 1H), 6,94-6,77 (m, 5H), 6,52 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,39 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,97 (s, 1H), 5,09 (s, 2H), 2,13 (s, 3H), 1,51 (s, 9H), 1,30 (s, 9H).

[0254] 4-(4-hidroxifenil)-8-metil-3-(3,4,5- trifluorofenil)-2H-cromen-7-ol (1-3d) (41%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,52 (bs, 1H), 8,50 (bs, 1H), 6,98 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,90-6,80 (m, 4H), 6,54 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,47 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,05 (s, 2H), 2,12 (s, 3H).

[0255] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(3,4,5- trifluorofenil)-2H-cromen-7-ol (1-3e) (34%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,80 (bs, 1H), 8,66 (bs, 1H), 7,05-6,77 (m, 5H), 6,74-6,66 (m, 1H), 6,45-6,34 (m, 2H), 5,03 (s, 2H).

[0256] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3f) (44%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,72 (bs, 1H), 8,57 (bs, 1H), 7,20 (bs, 1H), 7,06-6,96 (m, 1H), 6,91-6,80 (m, 2H), 6.81-6.75 (m, 1H), 6,45-6,37 (m, 4H), 5,08 (s, 2H), 3,63 (s, 6H).

[0257] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(3,4,5- trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3g) (48%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,74 (bs, 1H), 8,59 (bs, 1H), 7,04-6,80 (m, 3H), 6,84-6,82 (m, 1H), 6,48-6,37 (m, 4H), 5,08 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,62 (s, 6H).

[0258] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trifluorofenil)-2H-cromen-7-ol (1-3h) (48%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,80 (bs, 1H), 8,57 (bs, 1H), 7,046,75 (m, 5H), 6,54 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,06 (s, 2H), 2,12 (s, 3H).

[0259] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3i) (53%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,66 (bs, 1H), 8,37 (bs, 1H), 7,19 (bs, 1H), 7,06-6,76 (m, 3H), 6,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,45-6,35 (m, 3H), 5,07 (s, 2H), 3,63 (s, 6H), 2,17 (s, 3H).

[0260] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3j) (49%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,68 (bs, 1H), 8,49 (bs, 1H), 7,046,77 (m, 3H), 6,53 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,48-6,36 (m, 3H), 5,07 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,65 (s, 6H), 2,13 (s, 3H).

[0261] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4-metoxi- 3,5-dimetilfenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3k) (22%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,37 (bs, 1H), 7,21 (bs, 1H), 6,32 (s, 2H), 6,49-6,34 (m, 4H), 5,08 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,60 (s, 6H), 2,22 (s, 6H), 2,13 (s, 3H).

[0262] 4-(4-metoxi-3,5-dimetilfenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3l) (15%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,41 (bs, 1H), 6,81 (s, 2H), 6,496,36 (m, 4H), 5,08 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,61 (s, 6H), 2,22 (s, 6H), 2,12 (s, 3H).

[0263] 4-(3,5-difluoro-4-hidroxifenil)-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3m) (47%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,86-6,74 (m, 2H), 6,47-6,36 (m, 4H), 5,10 (s, 2H), 3,66 (s, 6H), 2,13 (s, 3H).

[0264] 4-(3,5-difluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3n) (55%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,86-6,75 (m, 2H), 6,49-6,37 (m, 4H), 5,12 (s, 2H), 3,66 (s, 9H), 2,14 (s, 3H).

[0265] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-8-propil-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3o) (36%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,72 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,01 (m, 1H), 6,95-78 (m, 2H), 6,48 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,45 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,41 (s, 2H), 5,02 (s, 2H), 3,71 (s, 6H), 2,65 (m, 1H), 1,65 (m, 1H), 1,06 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0266] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-6-etil-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3p) (54%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,54 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,05 (m, 1H), 6,78 (m, 1H), 6,66 (s, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,34 (s, 2H), 5,04 (s, 2H), 3,65 (s, 6H), 2,45 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0267] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(3,4- metilenodioxofenyl)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3q) (54%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,23 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,82 (d, J = 8,01 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,50 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,42 (s, 2H), 6,40 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,04 (s, 2H), 5,11 (s, 2H), 3,57 (s, 6H), 1,78 (s, 3H).

[0268] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- nitrofenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3r) (24%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,23 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,45 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,25 (s, 1H), 6,38 (s, 2H), 6,32 (s, 2H), 5,04 (s, 2H), 3,56 (s, 6H), 2,01 (s, 3H).

[0269] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- etilaminofenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3s) (21%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,23 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,66 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,34 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,34 (s, 2H), 5,04 (s, 2H), 3,45 (s, 6H), 3,05 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

[0270] 4-(4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3t) (31%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,67 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,05 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,98 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,45 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 3,56 (s, 6H), 2,55 (m, 2H), 2,05 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0271] 4-(4-hidroxifenil)-8-etil-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3u) (61%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,34 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,01 (m, 2H), 6,76 (m, 2H), 6,56 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,50 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,45 (s, 2H), 5,10 (s, 2H), 3,47 (s, 6H), 2,65 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,5 Hz, 3H).

[0272] 4-(4-hidroxifenil)-6-metil-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3v) (68%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,88 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,33 (d, J = 3 Hz, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,78 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,34 (s, 2H), 5,11 (s, 2H), 3,56 (s, 6H), 2,07 (s, 3H).

[0273] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-5-fluoro-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3w) (21%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,12 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,8876 (m, 3H), 6,50 (s, 1H), 6,45 (s, 2H), 6,05 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 4,89 (s, 2H), 3,56 (s, 6H).

[0274] 6-cloro-4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4- hidroxi-3,5-trimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3x) (21%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 7,32 (m, 1H), 7,16-09 (m, 2H), 6,94 (s, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,39 (s, 2H), 5,10 (s, 2H), 3,65 (s, 6H).

[0275] 4-(3-cloro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (1-3y) (41%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 7,11 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 1,2, 8,2 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,42 (s, 2H), 5,11 (s, 2H), 3,65 (s, 6H), 2,05 (s, 3H).

[0276] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil- 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3z) (41%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,77 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,15 (m, 2H), 6,98 (brs, 1H), 6,65 (s, 1H), 6,45 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 3,56 (s, 6H), 2,55 (m, 2H), 2,05 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0277] 4-(3-metil-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil-3- (4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (1-3aa) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 8,22 (br, 2H), 7,66 (s, 1H), 6,62 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,55 (dd, J = 7,1, 2,3 Hz, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,38 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,95 (s, 2H), 3,51 (s, 6H), 2,32 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,92 (s, 3H), 1,05 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0278] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil- 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxyfenil)-2H-cromen-7-ol (1-3bb) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 7,1, 2,1 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,23 (s, 2H), 2,31 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 6H), 1,98 (s, 3H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0279] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetilfenil)-4-(4-acetoxi- 3-metilfenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-3cc) (36%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,46 (d, J = 7 Hz, 1H), 6,30 (dd, J = 6,9, 2,1 Hz, 1H), 5,92 (s, 2H), 3,65 (s, 6H), 2,33 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,2 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

[0280] 3-(4-acetoxi-3,5-dimetilfenil)-4-(4-acetoxi- 2-fluorofenil)-6-etil-8-metil-2-oxo-2H-cromen-7-il acetato (1-3dd) (38%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 9,08 (br 1H), 8,65 (s, 1H), 8,22 (br 1H), 6,81 (dd J = 6,6, 6,3 Hz, 1H), 6,62 (brd, J = 7,0 Hz, 1H), 6,46 (s, 1H), 6,35 (brd, J = 6,5 Hz, 1H), 2,31 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,12 (s, 6H), 1,95 (s, 3H), 1,17 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Etapa 4. 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- hidroxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 2) (1-4a)

[0281] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4- hidroxifenil)-8-metil-2H-cromen-7-ol (4,8 g, 1 eq), IMS (500 mL) e Pd/C 10% tipo pasta 338 (3,0 g) foram adicionados a um hidrogenador preenchido com H2 2,5 bar. A reação foi mantida a 40°C durante a noite e apresentou conversão completa. O catalisador foi removido por filtração e os filtrados foram evaporados até à secura. Três lotes iguais foram misturados e secos para se obter 12,6 g (88%) do Composto 2 como um sólido esbranquiçado. 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,656,51 (m, 5H), 6,40 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,04 (s, 2H), 4,44-4,35 (m, 1H), 4,25-4,15 (m, 2H), 3,64 (s, 6H), 3,46-3,37 (m, 1H), 2,15 (s, 3H).

[0282] Outros compostos de fórmula (I) preparados através deste método:

[0283] 4-(4-hidroxifenil)-8-metil-3-(3,4,5- trimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 1) (1-4b) (99%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,63-6,49 (m, 5H), 6,36 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,04 (s, 2H), 4,46-4,36 (m, 1H), 4,25-4,17 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,63 (s, 6H), 3,49-3,40 (m, 1H), 2,15 (s, 3H).

[0284] 3-(3,5-di-terc-butil-4-hidroxifenil)-4-(4- hidroxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 3) (1-4c) (33%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,10 (bs 1H), 8,05 (bs, 1H) 7,28-7,20 (m, 1H), 6,63-6,52 (m, 3H), 6,43-6,36 (m, 2H), 6,04 (s, 2H), 4,47-4,35 (m, 1H), 4,24-4,09 (m, 2H), 3,64 (s, 6H), 3,78-3,66 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,32 (s, 9H).

[0285] 4-(4-hidroxifenil)-8-metil-3-(3,4,5- trifluorofenil)croman-7-ol (Composto 4) (1-4d) (95%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,67-6,52 (m, 7H), 6,42 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,48-4,40 (m, 1H), 4,35-4,26 (m, 2H), 3,64-3,55 (m, 1H), 2,15 (s, 3H).

[0286] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(3,4,5- trifluorofenil)croman-7-ol (Composto 5) (1-4e) (50%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,84-6,65 (m, 4H), 6,49-6,30 (m, 4H), 4,48-4,18 (m, 3H), 3,67-3,56 (m, 1H).

[0287] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 6) (1-4f) (39%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,80-6,74 (m, 2H), 6,44-6,32 (m, 4H), 6,08 (s, 2H), 4,41-4,33 (m, 1H), 4,24-4,12 (m, 2H), 3,66 (s, 6H), 3,52-3,38 (m, 1H).

[0288] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(3,4,5- trimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 7) (1-4g) (22%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,80-6,72 (m, 2H), 6,48-6,33 (m, 4H), 6,11 (s, 2H), 4,44-4,35 (m, 1H), 4,25-4,14 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,64 (s, 6H), 3,52-3,45 (m, 1H).

[0289] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trifluorofenil)croman-7-ol (Composto 8) (1-4h) (50%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,81-6,65 (m, 3H), 6,60 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,49-6,40 (m, 2H), 6,39-6,30 (m, 1H), 4,50-4,42 (m, 1H), 4,38-4,30 (m, 2H), 3,66-3,55 (m, 1H), 2,16 (s, 3H).

[0290] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 9) (1-4i) (60%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,78-6,70 (m, 1H), 6,60 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,46-6,32 (m, 3H), 6,07 (s, 2H), 4.454,35 (m, 1H), 4,28-4,17 (m, 2H), 3,65 (s, 6H), 3,49-3,41 (m, 1H), 2,20 (s, 3H).

[0291] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 10) (1-4j) (44%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,80-6,71 (m, 1H), 6,60 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,46-6,32 (m, 4H), 6,10 (s, 2H), 4,484,38 (m, 1H), 4,31-4,22 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,65 (s, 6H), 3,53-3,41 (m, 1H), 2,17 (s, 3H).

[0292] 3-(4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-4-(4-metoxi- 3,5-dimetilfenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 11) (1-4k) (83%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,52 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,33 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,25 (s, 2H), 5,91 (s, 2H), 4,344,24 (m, 1H), 4,18-4,05 (m, 2H), 3,57 (s, 3H), 3,50 (s, 6H), 3,48-3,33 (m, 1H), 2,05 (s, 3H), 2,03 (s, 6H).

[0293] 4-(4-metoxi-3,5-dimetilfenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 12) (1-4i) (99%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,58 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,33 (s, 2H), 6,05 (s, 2H), 4,52-4,37 (m, 1H), 4,25-4,12 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,11 (s, 6H), 3,50-3,39 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,07 (s, 6H).

[0294] 4-(2,3-difluoro-4-hidroxifenil)-3-(4- hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 13) (1-4m) (60%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,73-6,68 (m, 1H), 6,64-6,57 (m, 1H), 6,55-6,49 (m, 1H), 6,42 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,08 (s, 2H), 4,59-4,55 (m, 1H), 4,46-4,36 (m, 1H), 4,25-4,21 (m, 1H), 3,63 (s, 6H), 3,53-3,47 (m, 1H), 2,14 (s, 3H).

[0295] 4-(2,3-difluoro-4-hidroxifenil)-8-metil-3- (3,4,5-trimetoxifenil)croman-7-ol (Composto 14) (1-4n) (66%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,74-6,68 (m, 1H), 6,60 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,55-6,47 (m, 1H), 6,44 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 6,13 (s, 2H), 4,61-4,57 (m, 1H), 4,48-4,36 (m, 1H), 4,29-4,22 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,64 (s, 6H), 3,58-3,48 (m, 1H), 2,14 (s, 3H).

[0296] 4-(4-hidroxifenil-3-fluoro)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-8-propilcromano-7-ol (Composto 16) (1- 4o) (80%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,76 (m, 1H), 6,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,45-33 (m, 3H), 6,05 (s, 2H), 4,44 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,56 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 1,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0297] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-6-etilcroman-7-ol (Composto 18) (1-4p) (80%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,76 (m, 1H), 6,66 (s, 1H), 6,56-38 (m, 3H), 6,05 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 3,55 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 1,05 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0298] 4-(3,4-metilenodioxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 32) (1-4q) (80%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,08 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,71 (m, 2H), 6,55 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,23 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 6,06 (s, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 3,65 (s, 6H), 3,46 (m, 1H), 2,05 (s, 3H).

[0299] 4-(4-aminofenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 21) (1-4r) (70%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,67 (m, 1H), 6,45-33 (m, 5H), 6,09 (s, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,64 (s, 6H), 3,35 (m, 1H), 2,06 (s, 3H).

[0300] 4-(4-etilaminofenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 22) (1-4s) (78%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,65 (m, 1H), 6,51-39 (m, 5H), 6,01 (s, 2H), 4,65 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 3,65 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 3,11 (m, 2H), 2,06 (s, 3H), 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0301] 4-(4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-6-etil-8-metilcromano-7-ol (Composto 33) (1- 4t) (80%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,75 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,45 (m, 3H), 6,01 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,65 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,55 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0302] 4-(4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-etilcroman-7-ol (Composto 34) (1-4u) (86%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,72 (m, 1H), 6,56 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,50-33 (m, 4H), 6,01 (s, 2H), 4,51 (m, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,65 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0303] 4-(4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-6-metilcromano-7-ol (Composto 35) (1-4v) (96%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,67 (m, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,45-32 (m, 4H), 6,01 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,32 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,06 (s, 3H).

[0304] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-5-fluorocroman-7-ol (Composto 19) (1-4w) (66%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,67 (m, 1H), 6,45 (m, 2H), 6,25 (m, 1H), 6,18 (m, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,50 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,67 (s, 6H), 3,45 (m, 1H).

[0305] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-6-clorocroman-7-ol (Composto 20) (1-4x) (56%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,16 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,75 (m, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,45 (m, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,30 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 3,45 (m, 1H).

[0306] 4-(3-cloro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-8-metilcromano-7-ol (Composto 24) (1-4y) (66%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 8,1 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,0 (s, 1H), 6,65-50 (m, 4H), 6,42 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,41 (m, 1H), 4,35 (m, 2H), 3,64 (s, 6H), 3,46 (m, 1H).

[0307] 4-(3-fluoro-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi- 3,5-dimetoxifenil)-6-etil-8-metilcromano-7-ol (Composto 36) (1-4z) (80%). 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 6,75 (m, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,45 (m, 3H), 6,01 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,65 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,55 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0308] 4-(3-metil-4-hidroxifenil)-3-(4-hidroxi-3,5- dimetoxifenil)-6-etil-8-metilcromano-7-ol (Composto 37) (1- 4aa) (88%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 8,22 (br, 2H), 7,66 (s, 1H), 6,62 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,55 (dd, J = 7,1, 2,3 Hz, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,38 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,95 (s, 2H), 4,48 (m, 1H), 4,21 (m, 2H), 3,61 (s, 6H), 3,45 (m, 1H), 2,55 (m, 2H), 2,01 (s, 3H), 1,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0309] 4-(3-metil-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil-3- (4-hidroxi-3,5-dimetilfenil)-2H-cromen-7-ol (Composto 38) (1-4bb) (80%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 7,1, 2,1 Hz, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,23 (s, 2H), 4,45 (m, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,45 (m, 1H), 2,55 (m, 2H), 2,15 (s, 6H), 2,01 (s, 3H), 1,02 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0310] 4-(2-metil-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil-3- (4-hidroxi-3,5-dimetoxifenil)-2H-cromen-7-ol (Composto 39) (1-4cc) (76%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 6,68 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 6,46 (d, J = 7 Hz, 1H), 6,30 (dd, J = 6,9, 2,1 Hz, 1H), 5,92 (s, 2H), 4,42 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 3,65 (s, 6H), 3,41 (m, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,01 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0311] 4-(2-fluoro-4-hidroxifenil)-6-etil-8-metil- 3-(4-hidroxi-3,5-dimetilfenil)-2H-cromen-7-ol (composto 40) (1-4dd) (70%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 9,1 (br, 1H), 8,75 (s, 1H), 7,22 (br, 1H), 6,85 (dd J = 6,6, 6,1 Hz, 1H), 6,58 (brd, J = 7,3 Hz, 1H), 6,42 (s, 1H), 6,25 (brd, J = 6,1 Hz, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,13 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 2,45 (m, 2H), 2,18 (s, 6H), 2,11 (s, 3H), 1,05 (t, J = 7,1 Hz, 3H).

[0312] Os enantiômeros do composto 2 foram preparados por resolução quiral em uma coluna Chiralcel OD- H, 30 x 250 mm, 5 micra de fase normal. As análises do composto com menor tempo de retenção sobre esta coluna indicaram as seguintes propriedades de rotação óptica:

[0313] O enantiômero com um tempo de retenção mais longo nesta coluna possuía as seguintes propriedades de rotação óptica.

[0314] Os enantiômeros do composto 6 foram preparados por resolução quiral em fase normal de uma coluna Chiralcel OD-H, 30 x 250 mm, 5 micra. As análises do composto com menor tempo de retenção (enantiômero 1) nesta coluna indicaram as seguintes propriedades de rotação óptica:

[0315] O enantiômero com um tempo de retenção mais longo (enantiômero 2) nesta coluna possuía as seguintes propriedades de rotação óptica:

[0316] Os enantiômeros do composto 9 foram preparados por resolução quiral em fase normal de uma coluna Chiralcel OD-H, 30 x 250 mm, 5 micra. As análises do composto com menor tempo de retenção (enantiômero 1) nesta coluna indicaram as seguintes propriedades de rotação óptica:

[0317] O enantiômero com um tempo de retenção mais longo (enantiômero 2) nesta coluna possuía as seguintes propriedades de rotação óptica:

Exemplo 2 - Ensaios in vitro

[0318] A atividade anticâncer do composto 2 (a forma racêmica e um eutômero e distômero purificado) foi avaliada por XenTech em dois explantes de glioblastoma multiformes derivados do paciente, estabelecidos a partir de biópsias de tumor seguindo a metodologia detalhada. As culturas de células primárias foram obtidas a partir de xenotransplantes de GBM14-CHA e ODA14-RAV explantados e dissociados. As células foram descongeladas rapidamente em um banho de água a 37°C. Um frasco de células (~10 milhões de células) foi diluído em 10 mL de meio de crescimento completo (F12/DMEM suplementado com soro fetal bovino a 8%, 100 μg/ mL de penicilina g sódica, 100 μg/ml de sulfato de estreptomicina). Após centrifugação a 150xg durante 5 minutos, o pellet celular foi ressuspenso em meio de crescimento completo e plaqueado a uma densidade de pelo menos 140.000 células/cm2 em frascos de cultura de células de 75 cm2. As células foram mantidas a 37°C em uma atmosfera umidificada com 5% de CO2 durante pelo menos uma semana. As células foram então colhidas e semeadas em placas de 96 poços a uma densidade de 2,5x103 células/poço para ensaios de citotoxicidade. As células foram incubadas durante 48 horas a 37°C antes da adição dos compostos de ensaio. Os compostos de ensaio foram adicionados em concentrações finais desejadas e adicionalmente incubados durante 72 horas.

[0319] A viabilidade celular foi avaliada, antes da adição dos compostos de ensaio (T0) e 72 horas após a medição do conteúdo de ATP celular da célula, utilizando CellTiter- Glo® Luminescent Cell Viability Assay (Promega) de acordo com as instruções do fabricante.

[0320] ODA14 foi designado como grau III (determinado por exame histopatológico) suscetível a TMZ, quando avaliado em estudos de xenotransplante, mutante p53, pTEN de tipo selvagem e possuía expressão amplificada de EGFR. O GBM14 foi designado como resistente a TMZ, p53 de tipo selvagem, pTEN mutante, EGFR de tipo selvagem. O grau do GBM não era conhecido. Após exposição de 72 horas ao composto 2, um valor de IC50 de 0,14 μM contra GBM14 e 48 μM contra ODA14 foi observado. Os resultados são apresentados na Figura 1. Após 72 horas de exposição ao eutômero do composto 2, um IC50 de 0,051 μM foi observado, enquanto que em contraste, o distômero do composto 2 possuía um valor de IC50 de 3,43 μM (ver Figura 2) contra a linha celular de GBM14-CHA. Estes dados demonstram que o eutômero do composto 2 (+ enantiômero) é cerca de 2 a 3 vezes mais ativo contra GBM14-CHA em comparação com o racemato do composto 2 e >60 vezes mais ativo do que o distômero do composto 2 (- enantiômero).

[0321] Os enantiômeros dos compostos 6 e 9 também foram avaliados contra a linha celular de glioblastoma GBM14- CHA utilizando a metodologia descrita acima. Os resultados são apresentados na Tabela 1 abaixo. Tabela 1: Dados de IC50 para racemato e formas quirais de compostos 6 e 9 contra a linha celular de glioblastoma GBM14- CHA

[0322] Tal como foi observado para o composto 2, os eutômeros dos compostos 6 e 9 eram drasticamente mais ativos do que os distômeros correspondentes.

[0323] A atividade antiproliferativa do composto 2 também foi avaliada em correspondência a linhas celulares susceptíveis a TMZ (D54-S e U87-S) ou resistentes a TMZ (D54- R e U87-R) (Hong Kong University, Dr. Gilberto Leung). Os dados confirmam que TMZ possuía eficácia reduzida contra subclones resistentes a TMZ tanto para GBM U87 quanto para GMB D54 em comparação com seus respectivos subclones sensíveis a TMZ. Em contraste à TMZ, o composto 2 e seu eutômero demonstraram atividade antiproliferativa equipotente tanto contra linhas celulares de GBM D54 quanto para GBM U87, independentemente do seu status de resistência a TMZ. Duas metodologias (SRB e MTT) foram utilizadas para avaliar a viabilidade e ambos mostraram que o composto 2 foi igualmente eficaz na supressão da viabilidade celular de GBM independentemente do status de resistência TMZ. O SRB tende a superestimar a citotoxicidade em comparação ao MTT. No entanto, os valores de IC50 foram inferiores a 0,36 μM, independentemente do método, da linha de células e do status de TMZ quando tratados com o composto 2. Os valores de IC50 do composto 2, portanto, são visivelmente inferiores em relação a TMZ, mesmo contra subclones sensíveis a TMZ. O eutômero do composto 2 também foi equipotente contra subclones resistentes e sensíveis a TMZ, mas a eficácia anticâncer foi mais potente para o enantiômero ativo em comparação ao racemato. Os valores de IC50 foram inferiores a 0,065 μM, independentemente da linha celular e do status de TMZ (ver Tabela 2). Tabela 2: Viabilidade celular de subclones U87 e D54 sensíveis a TMZ após o tratamento com TMZ, composto 2, ou eutômero do composto 2*

• A viabilidade celular (IC50) 72 horas após tratamento foi medida por SRB ou MTT (como indicado). IC50 em μM.

[0324] A atividade antiproliferativa do eutômero de composto 9 (+ enantiômero) também foi avaliada e verificada para ser equipotente contra subclones resistente e sensíveis a TMZ de ambos U87 e D54, e semelhante ao eutômero do composto 2, os calores de IC50 foram inferiores a 0,065 μM independentemente da linha celular e status de TMZ.

[0325] A eficácia dos eutômeros dos compostos 9 e 36 também foi testada contra as linhas celulares de neuroblastoma pediátrico. Os valores de IC50 variaram entre 0,020 μM e 0,088 μM para o eutômero do composto 9 e de 0,243 μM a 0, 698 μM para o eutômero do composto 36. (ver Tabela 3). Mais dois cânceres neurais pediátricos foram avaliados para a sensibilidade ao eutômero do composto 9. Estudos in vitro também mostraram baixa eficácia, de micromolar a sub-micromolar, contra uma linha celular de DIPG e eficácia nanomolar contra linhas celulares de meduloblastoma (D283L = 0,097 μM; 547L = 0,063 μM; e D425L = 0,101 μM). Em conjunto com os estudos anteriores utilizando linhas celulares de GBM e culturas PDX, estes resultados sugerem que o composto 9 possui uma potência considerável contra uma variedade de cânceres incluindo os principais cânceres neurais infantis. Tabela 3: Citotoxicidade de eutômeros dos compostos 9 e 36 contra neuroblastoma

 A viabilidade celular foi avaliada após 72 horas.

[0326] A capacidade dos compostos de 1 a 14 para inibir a proliferação de células-tronco de câncer de ovário foi estabelecida a partir de explantes derivados do paciente. O laboratório do Dr. Gil Mor (Universidade de Yale) identificou dois tipos de células epiteliais de câncer de ovário: Tipo I são células epiteliais de câncer de ovário (EOC, na sigla em inglês) CD44+ve resistente à quimioterapia e Tipo II são células EOC CD44-ve sensíveis a quimioterapia. As células-tronco de câncer de ovário foram preparadas como descrito anteriormente (Alvero et al., 2009). A proliferação celular foi avaliada utilizando o Incucyte Kinetic Imaging System. O efeito citotóxico dos compostos foi avaliado simultaneamente utilizando o ensaio de citotoxicidade CellPlayer utilizando CellToxTM (Promega, Cat#: G8731). As células em monocamada foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de 96 poços. Após 24 horas, uma vez que as células tenham se unido, o tratamento foi dispensado em meio RPMI com 10% de FBS. As concentrações de fármaco utilizadas foram: 0,001 μg/ml, 0,01 μg/ml, 0,1 μg/ml, 1 μg/ml, e 10 μg/ml. Uma diluição apropriada de reagente CellToxTM (1:1000) foi adicionada a cada poço após a adição do composto de ensaio. As placas de cultura foram imediatamente colocadas no sistema Incucyte e fotografadas a cada 2 horas, utilizando a opção “Fluorescence and Phase contrast” no equipamento Incucyte. As curvas de crescimento foram calculadas como uma medida de confluência de células utilizando um algoritmo integrado de confluência como um substituto para o número de células para determinar a taxa de proliferação. A área sob a curva calculada a partir do gráfico de Contagem de CsttTox/mm2 ao longo do tempo foi então utilizada para calcular o IC50. Em experimentos em duplicado, verificou-se que o composto 2 era mais potente no retardamento da proliferação de células- tronco de câncer de ovário em concentrações entre 0,01 μg/ml a 0,1 μg/ml para OCSC-1 e OCSC-2. Os compostos 6, 9 e 13 também foram potentes na inibição da proliferação de células OCSC-2 em concentrações entre 0,1 μg/ml e 1 μg/ml (Tabela 4). O composto 2 também provocou um efeito semelhante contra as células F2 em concentrações log vezes maiores (de 0,1 μg/ml a 1 μg/ml). Quando avaliados, todos os outros análogos exibiram atividade antiproliferativa de 1 μg/ml a 10 μg/ml (ver Quadro 4). Tabela 4: Efeito anticâncer de uma série de compostos contra células-tronco de câncer de ovário

NT = não testado

[0327] Estudos de confirmação, utilizando estudos de confluência Incucyte que utilizaram um maior número de concentrações demonstraram que o composto 2 possuía um valor de IC50 de 0,052 μg/ml contra OCSC2. Esta observação foi adicionalmente confirmada utilizando Cytotox green, um reagente corante que explora a integridade da membrana comprometida de uma célula morta, com o reagente capaz de atravessar a membrana e se ligar ao DNA e dessa forma liberando um sinal de fluorescência que pode ser quantificado. O IC50 para o composto 2 utilizando CellTox verde era de 0,051 μg/ml. Estes dados demonstram que o composto 2 é um composto anticâncer altamente ativo, tal como avaliado pelas duas metodologias diferentes. Os valores de IC 50 de 0,12 μg/ml também foram gerados para os compostos 9 e 13 (ver Figuras 3 e 4).

[0328] A capacidade dos compostos selecionados para inibir a proliferação de células cancerosas representativas de melanoma, câncer de pulmão de pequenas células, câncer colorretal, câncer de mama (receptor de estrogênio negativo (ER-ve, TNBC - ER -ve, receptor de progesterona negativo e negativo para amplificação de EGFR), câncer de próstata, câncer de fígado, câncer de ovário, câncer de pâncreas e câncer de cérebro, foram estudos. Um número pré-determinado de células determinadas a partir dos ensaios de crescimento de células para cada uma das linhas celulares utilizadas foram semeadas em seus respectivos meios de cultura (utilizando os parâmetros de cultura ATCC - http://www.atcc.org) e cultivadas durante 24 horas a 37°C e 5% de CO2 em placas de cultura de 96 poços. Uma vez ligadas, cada linha celular foi, em seguida, exposta a várias concentrações de cada análogo respectivo (30 μM, 3 μM, 0,3 μM e 0,03 μM), cultivada durante mais 72 horas e exposta ao reagente luminescente de título de células (100 μ/poço) durante mais 30 minutos). A luminescência foi capturada usando um leitor multilabel EnVision e os dados para cada concentração de análogo comparados com o controle. Gráficos de semi-log do percentual de controle versus a concentração foram preparadas e o IC50 determinado utilizando análise de regressão linear. Os dados são apresentados nas Tabelas 5 e 6. Na Tabela 6, os compostos 1, 2 e 3 e são compostos comparativos com as seguintes estruturas:

Tabela 5: Avaliação de uma série de compostos em relação à sua capacidade para retardar a proliferação de uma variedade de células cancerosas somáticas

NT = não testado Tabela 6: Avaliação de uma série de compostos em relação à sua capacidade para retardar a proliferação de uma variedade de células cancerosas somáticas

NT = não testado

[0329] Os dados demonstram que o composto 2 exibiu atividade antiproliferativa potente (IC50 = <1 μM) contra linhas celulares representativas de NSCLC (A549), TNBC (MDA- MB-231) e câncer de próstata (DU-145). O composto 2 foi moderadamente ativo contra células de câncer de fígado (HepG2) (IC50 = 1,9 μM).

[0330] Os compostos 6 e 9 apresentam uma atividade potente (IC50 = <1 μM) contra NSCLC (A549) e ambas as linhas celulares de câncer de próstata (PC3 e DU-145), ao contrário do composto 2 que só foi ativo contra DU-145. Os compostos 6 e 9 também foram moderadamente ativos contra MDA-MB-231 (IC50 <2 μM) e HepG2 (IC50 <4 μM).

[0331] Utilizando o mesmo método, o racemato do composto 2 e os seus enantiômeros foram avaliados contra glioblastoma A172 e linhas celulares de câncer de ovário OVCAR-3. Como foi observado no estudo de explante de GBM acima, o eutômero do composto 2 era pelo menos duas vezes mais ativo contra ambas as linhas celulares quando comparado com o racemato (ver Figura 5). O distômero era > 5 vezes menos ativo em comparação com o racemato (não mostrado).

[0332] De acordo com o conceito de que as células progenitoras cancerosas residuais dentro do tumor pós- tratamento são responsáveis pela reincidência do tumor, uma estratégia terapêutica importante para prolongar a sobrevivência é a de eliminar as células progenitoras do tumor que conduzem a reincidência. Estudos in vitro foram conduzidos para determinar se o composto 2 foi capaz de inibir a proliferação de OCSC, uma vez que a pressão do fármaco foi removida. As células OCSC-2 foram tratadas com 0,1 μg/ml, 1 μg/ml e 10 μg/ml de composto 2 durante 24 horas, lavadas com meio de cultura e deixadas em recuperação durante mais 50 horas sob condições de incubação padrão. As placas de cultura foram imediatamente colocadas no sistema Incucyte e fotografadas a cada 2 horas. As curvas de crescimento foram calculadas como uma medida de confluência de células utilizando um algoritmo integrado de confluência como um substituto para o número de células para determinar a taxa de proliferação.

[0333] Em contraste com células 2-OCSC tratadas com o veículo, as células que foram pré-tratadas com o composto 2 por 24 horas não entraram em crescimento logarítmico após um período adicional de 48 horas de cultura em meio sem fármaco (ver Figura 6). Morfologicamente, essas células pareciam arredondadas e possuíam corpos apoptóticos, sugerindo que as células já não eram viáveis a partir de 24 horas de exposição (ver Figura 7).

Exemplo 3 - Estudos Celulares

[0334] As células OCSC2 marcadas com GFP e as células OCC2 marcadas com mCherry foram estabelecidas por infecção celular com lentivírus que expressa as proteínas fluorescentes (Craveiro et al. 2013). As co-culturas de OCSC2 GFP+ e OCC2 mCherry+ foram tratadas com 1 μg/ml de composto 2 durante 48 horas e deixadas em recuperação durante mais 72 horas. A fluorescência foi determinada por microscopia de fluorescência. O composto 2 visivelmente reduziu o número de células-tronco de OCSC2 marcadas com GFP e fizeram com que as células OCC2 marcadas com mCherry apresentassem arredondamento e elevação na superfície de cultura (ver Figura 8). Estes dados indicam que o composto 2 interrompe a proliferação das células-tronco de câncer de ovário e de células somáticas de câncer de ovário.

[0335] Os esferoides de células-tronco de câncer de ovário foram obtidos a partir de culturas cultivadas sob condições especiais que foram selecionadas para células com potencial de auto renovação (Alvero et al., 2009). Resumidamente, as células CD44+ foram incubadas em um sistema de suspensão que consiste em um tubo de vidro em rotação contínua para evitar a aderência. Estas células formaram aglomerados após 48 horas e esferoides compactos após 4 dias. Os esferoides foram então expostos a 0,1 μg/ml e 1 μg/ml de composto 2 e examinadas ao microscópio após 24 horas. Após 24 horas de exposição à composição 2 a 0,1 μg/ml a infraestrutura esferoide do câncer de ovário tinha começado a se desintegrar. Em 1 μg/ml de composto 2, a estrutura esferoide foi quase totalmente destruída. Estes dados demonstram que o composto 2 é capaz de penetrar no esferoide e destruir a sua infraestrutura (ver Figura 9) e é sugestivo que o composto deve ser capaz de entrar no microambiente do tumor. Referências

[0336] Craveiro, V., Yang-Hartwich, Y., Holmberg, J. C., Sumi, N. J., Pizzonia, J., Grffin, B., Gill., S. K., Sliasi, D-A., Azodi, M., Rutherford, T., Alvero, A, B., Mor, G. (2013). “Phenotypic modifications in ovarian cancer stem cells following Paclitaxel treatment” Cancer Medicine, 2(6), 751-762.

[0337] Alvero A. B., Chen R, Fu H. H, Montagna M., Schwartz P. E., Rutherford T., Silasi D. A., Steffensen K. D., Waldstrom M., Visintin I., Mor G. (2009) “Molecular phenotyping of human ovarian cancer stem cells unravels the mechanisms for repair and chemoresistance” Cell Cycle. 2009 Jan 1;8(1):158-66.

Exemplo 4 - Ensaios de farmacocinética

[0338] Um estudo sobre o comportamento farmacocinético dos compostos 2, 6, 9, 13 foi realizado. Os resultados demonstraram que os compostos podem ser entregues e alcançar concentrações plasmáticas com a janela de eficácia farmacêutica proposta.

[0339] O estudo compreendeu três fases: a Fase 1, um estudo de pré-formulação assegurando que todos os compostos eram solúveis em solução de 30% de Captisol® e que formou uma mistura homogênea adequada para entrega i.v. Um número de métodos de LC-MS foi desenvolvido e parcialmente validado para garantir que cada analito pudesse ser quantificado a partir da matriz de plasma e que não houvesse interferência entre qualquer um dos analitos. A Fase 2 envolve o estudo em vida em que camundongos Sprague-Dawley foram aclimatizados durante três dias antes de serem injetados na veia da cauda com uma dose cassete de quatro compostos, com uma concentração final de 1 mg/kg cada. Três camundongos foram utilizados no estudo com a amostragem de sangue com tubos anticoagulantes em 5 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas e 8 horas. A terceira fase do estudo foi a bioanálise dos analitos. As amostras de sangue foram centrifugadas a 1.200 rpm durante 10 minutos a 4°C. Após os RBCs e o plasma serem separados, o plasma foi armazenado a -80°C até ser processado e injetado em LC-MS. As amostras a partir de camundongos individuais foram tratadas como amostras individuais com o perfil PK gerado a partir da média dos dados dos três camundongos. Os resultados são mostrados na Figura 10.

Exemplo 5 - Eficácia in vivo

[0340] Utilizando o modelo de flanco de U87 anteriormente descrito, a entrega via supositório do eutômero do composto de 9 a 100 mg/kg por dia induziu um forte efeito antitumoral. Os resultados são mostrados na Figura 11. A ANOVA de duas vias com correção de Sidak para comparações múltiplas indicou que o tamanho do tumor foi significativamente menor apenas 7 dias após a iniciação de pós-tratamento e isto continuou até o dia 12 (o último ponto de tempo avaliado). A taxa de crescimento do tumor também foi significativamente reduzida pelo eutômero do composto 9. O peso do tumor no instante final foi significativamente reduzido pelo eutômero do composto 9 em relação ao controle de Captisol® (teste T não emparelhado, P = 0,0036). Os pesos finais dos camundongos nos grupos de tratamento e controle não foram significativamente diferentes, no entanto 3 camundongos no grupo de tratamento, de um número original igual a 7, morreram (todos os animais que morreram estavam dentro do quartil inferior da faixa de peso do animal). Estes camundongos também apresentaram uma redução significativa no crescimento do tumor, embora, para consistência, os dados a partir desses animais foram removidos a partir de todos os dados apresentados e a partir da análise estatística. Tal como o esquema de dosagem anterior, não foram verificados sinais clínicos evidentes de toxicidade (ou seja, piloereção, morbidade, diarreia). A análise histopatológica está em curso para identificar a causa da morte. Os hemogramas foram normais.

Exemplo 6 - Eficácia in vivo

[0341] O modelo de câncer de ovário animal utilizado para avaliar a eficácia in vivo do composto 2 é composto por injeção intraperitoneal de 7x106 células-tronco de câncer de ovário mCherry-CD44+ em camundongos atímicos. Neste modelo, a formação de tumores replica a morfologia de câncer de ovário humano, dando origem a tumores disseminados compreendendo OCC CD44+ e CD44-, confirmando que as células- tronco tumorais injetadas podem formar tumores heterogêneos. Neste modelo de roedor, a progressão do tumor é caracterizada por carcinomatose disseminada em que os tumores são encontrados nos ovários, mesentério, peritônio, diafragma, fígado, pâncreas e baço. O modelo também imita o quadro clínico para o câncer de ovário e é caracterizado por uma resposta parcial inicial a paclitaxel ou a cisplatina, que é então seguido de recorrência e resistência à terapia inicial. A progressão do tumor é monitorada por life imaging utilizando um sistema de imagem por raios-X/fluorescência Bruker Vivo FX System (Bruker Corp., Billerica, MA) (Craveiro et al. 2013).

[0342] Comparado com animais de controle tratados com 20% de Captisol®, o eutômero do composto 2 doseado em um horário diário i.p formulado em ciclodextrina provocou uma redução significativa, dependente da dose, na taxa de proliferação do tumor (Figura 12A) e da carga tumoral terminal (Figura 12B). Observou-se uma resposta dependente da concentração, em que os animais doseados com o composto 2 a 50 mg/kg e 100 mg/kg tinham uma redução de 65% e > 80% em peso do tumor, respectivamente, em comparação com o controle. Referência

[0343] Craveiro, V., Yang-Hartwich, Y., Holmberg, J. C., Sumi, N. J., Pizzonia, J., Grffin, B., Gill., S. K., Sliasi, D-A., Azodi, M., Rutherford, T., Alvero, A, B., Mor, G. (2013). “Phenotypic modifications in ovarian cancer stem cells following Paclitaxel treatment” Cancer Medicine, 2(6), 751-762.

[0344] A citação de qualquer referência não deve ser interpretada como uma admissão de que essa referência está disponível como uma técnica anterior à presente aplicação. Além disso, a referência neste relatório descritivo a qualquer publicação prévia (ou informação derivada dela), ou para qualquer assunto que se sabe, não é, e não deve ser tomada como um reconhecimento ou admissão ou qualquer forma de sugestão de que essa publicação anterior (ou informações obtidas a partir dele) ou matéria conhecida faz parte do conhecimento geral comum no campo das tentativas as quais este relatório descritivo se refere.

[0345] Os técnicos na arte apreciarão que a invenção aqui descrita é susceptível de outras variações e modificações que não aquelas especificamente descritas. Deverá ser entendido que a invenção inclui todas essas variações e modificações. A invenção adicionalmente inclui todas as etapas, características, composições e compostos referidos ou indicados neste relatório descritivo, individualmente ou coletivamente, e todas e quaisquer combinações de quaisquer duas ou mais das referidas etapas, características, composições e compostos.

Claims (16)

1. Composto caracterizado pelo fato de que possui a fórmula geral (I):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C6, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH e alcoxi C1-C6, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, halo e alquil C1-C6, R10 é OH, e R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OH, alquil C1-C4, F e OMe, R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, alcoxi C1-C6, NH2, NHMe, NHEt, N(Me)2 e N(Et)2, R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, OH, halo e alquil C1-C6, ou R13 e um de R14 e R15 formam a seguinte estrutura:

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H e alquil C1-C3.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R2 é OH.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em: H, alquil C1-C3 e halo.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, terc-butil, metil e F.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que R11 e R12 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: OMe, terc-butil, metil e F.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizado pelo fato de que R13 é selecionado a partir do grupo que consiste em: OH, OMe, NH2, NHEt e N(Et)2.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R14 e R15 são selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em: H, F, Cl e metil.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de ser um composto de fórmula (Ia) que possui a seguinte estrutura:

10. Composto, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em:

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir dos compostos 2 e 9

12. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto de fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, juntamente com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

13. Uso de um composto de fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11 caracterizado pelo fato de ser para a produção de um medicamento para o tratamento de câncer em um indivíduo com necessidade do mesmo.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste em: câncer do pâncreas, câncer colorretal, melanoma, câncer de próstata, câncer de cérebro (incluindo pediátrico e adulto), câncer de ovário, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de útero, neuroblastoma, mesotelioma, ascite maligna ou câncer de peritônio.

15. Uso de um composto de fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11 caracterizado pelo fato de ser para a produção de um medicamento para reduzir a incidência ou risco de recorrência de câncer em um indivíduo considerado como estando em risco de recorrência de câncer.

16. Uso de um composto de fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11 caracterizado pelo fato de ser para a produção de um medicamento para o tratamento de uma doença causada para células tronco cancerosas em um indivíduo com necessidade do mesmo.

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