BR112015009032B1

BR112015009032B1 - Inibidores de agrecanase, seus usos, e composição farmcêutica

Info

Publication number: BR112015009032B1
Application number: BR112015009032-0A
Authority: BR
Inventors: Timothy Barrett Durham; Jothirajah Marimuthu; Michael Robert Wiley
Original assignee: Elanco Us Inc
Priority date: 2012-10-26
Filing date: 2013-10-18
Publication date: 2022-06-28
Also published as: HK1211927A1; US9206139B2; PL2912021T3; TWI620738B; AU2013334989B2; TW201427955A; EP2912021A1; WO2014066151A1; MX364207B; ES2645970T3; US20150218107A1; DK2912021T3; JP6251279B2; NZ706772A; BR112015009032A2; JP2015535248A; KR101689983B1; AR092971A1; MX2015005297A; EA026037B1

Abstract

INIBIDORES DE AGRECANASE. A presente invenção fornece compostos tendo a fórmula: em que R1 é selecionado de metila, etila, propila, ciclopropila, e dimetila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, junto com métodos e intermediários para sua preparação, e usos destes.

Description

[001] O tecido conjuntivo é um componente necessário de todos os mamíferos. Ele fornece rigidez, diferenciação, conexões, e, em alguns casos, elasticidade. Os componentes do tecido conjuntivo incluem, por exemplo, colágeno, elastina, proteoglicanos, fibronectina, e laminina. Estas substâncias bioquímicas compõem (ou são componentes de) estruturas, tais como pele, osso, dentes, tendão, cartilagem, membrana basal, vasos sanguíneos, córnea, e humor vítreo. A artrite é uma forma de transtorno das articulações que envolve inflamação do tecido conjuntivo de uma ou mais articulações. Não obstante do tipo de artrite, os sintomas comuns para todos os transtornos de artrite incluem níveis variados de dor, inchaço, rigidez articular, e algumas vezes uma dor constante em torno da(s) articulação(ões).

[002] Estima-se que metade dos pacientes humanos de 65 e mais velhos, e quase todo paciente de 75 e mais velho, têm osteoartrite. Existem muitos tratamentos para osteoartrite (OA), variando de Tylenol a opiatos (para manejar a dor de OA), e na cirurgia de reposição da articulação total extrema. Correntemente não existe nenhum tratamento aprovado provado afetar a progressão de OA.

[003] A artrite é muito mais comum em cães do que outros animais domésticos. A artrite é uma doença terrível, visto que ela causa a dor do animal e restringe a mobilidade. Qualquer cão pode ser afligido com artrite, embora cães mais velhos e raças maiores possam ser mais suscetíveis. Cães ativos, como cães de trabalho ou de caça, também podem estar em maior risco por causa de seus níveis de atividade aumentados.

[004] A caracterização bioquímica da cartilagem na articulação artrítica mostra perda significante de dois componentes de matriz chaves, colágeno, particularmente colágeno tipo II, e agrecano. A degradação do agrecano é uma das mudanças iniciais observadas na erosão da cartilagem, particularmente em osteoartrite (OA). Estudos indicaram que o agrecano é catabolizado por duas proteases da matriz extracelular identificadas como agrecanases. Duas proteases agrecanase, ADAMTS-4 (uma desintegrina e metaloprotease com motivos de trombospondina, agrecanase 1) e ADAMTS-5 (agrecanase 2), foram identificadas como particularmente eficazes em catabolizar o agrecano. Existe uma necessidade para fornecer um tratamento mais eficaz de artrite, e em particular, tratamento de OA.

[005] A degradação, ou erosão, das articulações ocorre em várias doenças incluindo artrite reumatoide, artrite psoriática, osteoartrose, artrite hipertrópica, e osteoartrite. Além disso, a inflamação aguda das articulações pode ser acompanhada por destruição da cartilagem. Exemplos de doenças envolvendo inflamação aguda da articulação são artrite por Yersinia, artrite por pirofosfato, artrite gotosa, e artrite séptica. Também, um outro fator que pode ser conducente para a destruição ou degeneração da cartilagem é o tratamento com cortisona.

[006] A presente invenção fornece compostos que podem ser úteis para o tratamento de artrite e em particular, osteoartrite, assim como inibindo a erosão da cartilagem. Os compostos da presente invenção exibem potência para ADAMTS 4 e/ou ADAMTS 5.

[007] A presente invenção fornece compostos apresentando a fórmula:

[008] na qual R1 é selecionado de metila, etila, propila, dimetila, e ciclopropila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Como pode ser observado na Fórmula I, os compostos da invenção têm dois centros quirais, ou um centro quiral quando R1 é dimetila:

[009] A presente invenção fornece compostos da fórmula:

[0010] em que R1 é selecionado de metila, etila, propila, e ciclopropila, ou

[0011] quando R1 é dimetila, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

[0012] A presente invenção fornece compostos das fórmulas:

[0013] e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

[0014] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e pelo menos um de um veículo, excipiente, ou diluente farmaceuticamente aceitáveis.

[0015] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um método de inibir a erosão da cartilagem, tal como é observado com osteoartrite, em um paciente em necessidade deste, que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ao dito paciente.

[0016] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratar artrite em um paciente em necessidade deste, que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ao dito paciente.

[0017] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para a fabricação de um medicamento, e particularmente um medicamento para o tratamento de artrite ou inibição da erosão da cartilagem.

[0018] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para o uso em terapia.

[0019] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um composto de acordo com a presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para o uso no tratamento de artrite ou inibição da erosão da cartilagem.

[0020] Em um outro aspecto, a presente invenção fornece um composto, método, uso, ou composição de acordo com a presente invenção, em combinação com um ou mais agentes ativos adicionais.

[0021] Como observado acima, os compostos preferidos da invenção exibem ligação melhorada à agrecanase, em particular ADAMTS4/5 e inibem sua atividade. Consequentemente, estes compostos podem inibir a degradação de agrecano. Inibir a degradação de agrecano na cartilagem pode ser usado no tratamento de artrite, preferivelmente OA, e/ou suas sequelas ou sintomas patológicos.

[0022] "Paciente" se refere a um mamífero, e inclui, seres humanos, outros primatas (por exemplo, macacos, chimpanzés, etc.), animais de companhia (por exemplo, cães, gatos, cavalos, etc.), animais de criação (por exemplo, cabras, ovelha, porcos, gado, etc.), animais laboratoriais (por exemplo, camundongos, ratos, etc.), e animais selvagens e de zoológico (por exemplo, lobos, ursos, cervos, etc.). O termo "paciente" também se refere a mamíferos que estão sofrendo de efeitos patológicos adversos de erosão da cartilagem, artrite, e/ou osteoartrite, particularmente seres humanos e/ou animais de companhia tais como cães e gatos ou animais domesticados tais como cavalos.

[0023] "Quantidade eficaz" se refere à quantidade de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, suficiente para tratar artrite ou osteoartrite, e/ou uma ou mais das sequelas da artrite ou osteoartrite. Para o uso sobre ou em mamíferos, faixas para os métodos incluem de 0,01 a 1000 mg/kg e mais desejavelmente, 0,1 a 100 mg/kg do peso corporal do mamífero. A frequência da administração também será dependente de vários fatores, e pode ser uma dose única administrada uma vez por dia, uma vez por semana, ou uma vez por mês, por uma duração determinada pelo médico ou veterinário atendentes. Agentes ativos adicionais podem ser administrados com os compostos da presente invenção.

[0024] "Farmaceuticamente aceitável" como usado neste pedido, por exemplo com referência aos sais e componentes da formulação tais como veículoes, se refere àqueles sais e componentes que não são deletérios ao paciente e que são compatíveis com outros ingredientes, agentes ativos, sais, ou componentes. Farmaceuticamente aceitável inclui "veterinariamente aceitável", e assim inclui tanto aplicações em ser humano quanto em mamífero não humano independentemente.

[0025] "Inibir" se refere a seu significado geralmente aceito que inclui tratar profilaticamente um paciente sujeito à erosão da cartilagem incidente, e parar e/ou tratar erosão da cartilagem existente em um paciente. Como tal, o presente método inclui tanto tratamento médico terapêutico quanto profilático, conforme apropriado.

[0026] Como usado aqui, o termo "administrar" se refere a administrar uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção a um paciente. A administração pode ocorrer através de vários meios, incluindo administração oral, administração parenteral tal como injeção (intramuscular, subcutânea, intravenosa, intraperitoneal) ou semelhantes; ou aplicação tópica com ou sem penetração transdérmica, por exemplo.

[0027] Os compostos da presente invenção inibem a agrecanase e assim podem ter uso vantajoso em tratar artrite e especialmente preferido para tratar OA. Como usado aqui, o termo "quantidade eficaz" significa uma quantidade de composto da presente invenção, isto é, Fórmula I, que é capaz de, ou eficaz para, tratar ou aliviar os sintomas das várias condições patológicas aqui descritas. Será entendido que a quantidade do composto realmente administrado será determinada por um médico considerando circunstâncias e condições relativas de um paciente, tais como idade, peso, progressão e severidade da doença. Os compostos da presente invenção são preferivelmente formulados como composições farmacêuticas administradas por uma variedade de vias. O mais preferivelmente, tais composições são para administração oral, tal como na forma de tablete, cápsula, solução, ou suspensão.

[0028] Assim, um outro aspecto da presente invenção é uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser encontrados em S. M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," J. Phar. Sci., 66: 1 - 19 (1977) e "A Handbook of Pharmaceutical Salts Proprerties, Selection, and Use", Wermuth, C. G. e Stahl, P. H. (eds.) Verlag Helvtica Chimica Acta, 2002. Por exemplo, os compostos da invenção podem ser formulados com excipientes, diluentes, ou veículoes farmaceuticamente aceitáveis, e formados em tabletes, cápsulas, suspensões, soluções, pós, e semelhantes. Composições farmacêuticas e processos para sua preparação são conhecidos na técnica e exemplos podem ser encontrados em Remington, "The Science and Practice of Pharmacy" (A. Gennaro, et al. eds. 19a ed. Mack Publishing Co. 1995) que é incorporado por referência aqui. Formulações podem ser administradas através de vários meios, incluindo administração oral, administração parenteral tal como injeção (intramuscular, subcutânea, intravenosa, intraperitoneal) ou semelhantes; aplicação tópica com ou sem penetração transdérmica. Agentes ativos adicionais podem ser incluídos na formulação contendo um composto da invenção.

[0029] Além de sais farmaceuticamente aceitáveis, outros sais são incluídos na presente invenção. Eles podem servir como intermediários na purificação de compostos ou na preparação de outros sais farmaceuticamente aceitáveis, ou são úteis para identificação, caracterização ou purificação.

[0030] Os compostos da presente invenção podem encontrar uso vantajoso para tratar artrite e as sequelas concomitantes. Como usado aqui o termo artrite inclui, mas não é limitado a, artrite reumatoide (RA), artrite reumatoide juvenil, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), gota, esclerodermia, artrite psoriática, espondilite anquilosante, osteoartrite (OA), e síndrome de Reiter (artrite reativa). Os compostos da presente invenção podem encontrar uso particularmente vantajoso no tratamento de osteoartrite (OA).

[0031] Quando usado em combinação com um outro ativo agente, por exemplo um agente anti-inflamatório ou um agente para aliviar a dor, que pode ser um agente esteroidal ou não esteroidal. O composto da presente invenção e o outro agente ativo podem ser administrados concorrentemente em uma formulação única ou em formulações separadas. Alternativamente, o composto da presente invenção e o outro agente podem ser administrados sequencialmente ou conforme necessário pelo paciente.

[0032] Como usado aqui, os termos seguintes têm os significados indicados: "n-BuLi" se refere a n-butil lítio; "DCM" se refere a diclorometano; "Dibal-H" se refere a hidreto de diisobutilalumínio; "DMF" se refere a N,N-dimetilformamida; "DMSO" se refere a dimetilsulfóxido; "EDTA" se refere a ácido etilenodiaminetetraacético; "EtOAc" se refere a acetato de etila; "Et2O" se refere a éter dietílico; "EtOH" se refere a etanol; "Ex" Se refere a Exemplo; "IPA" se refere a álcool isopropílico; "LDA" se refere a diisopropilamida de lítio; "MeOH" se refere a metanol; "Prep" se refere a preparação; "t-boc ou boc" se refere a terc-butoxicarbonila; TFA se refere a ácido trifluoroacético; "THF" se refere a tetra-hidrofurano; "X" como usado aqui se refere a haletos, isto é, I, Br, Cl, ou F; "IC50" se refere à concentração de um agente que produz 50 % da resposta inibitória máxima possível para este agente.

[0033] Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser preparados de acordo com reações como descrito nos exemplos seguintes.

Preparação 1

[0034] Cloridrato de (5R)-5-(aminometil)-5-ciclopropil-imidazolidi- na-2,4-diona

Etapa 1: síntese de N-[2-(metóxi(metil)amino)-2-oxo-etil] carbamato de terc-butila

[0035] A uma solução de Boc-Gly-OH (4250 g, 24,26 mol), HCl de N,O-dimetilhidroxilamina (2839 g, 29,10 mol) e DMAP (297 g, 2,43 mol) em diclorometano (36 L), é adicionada trietilamina (5,54 L) a 0 oC durante um período de 90 min seguido pela adição de cloridrato de EDC (5674 g, 29,60 mol). A mistura é agitada a 0 oC por 1 h depois aquecida até a temp. ambiente por 24 h. A mistura de reação é resfriada até 0 oC e extinta com HCl 1,0 M ao pH 3 a 4, agitada na temp. ambiente por 20 min, depois deixada repousar e separar. A fase orgânica é lavada sucessivamente com HCl 1,0 M (15 L), água (15,0 L) e salmoura (8,0 L), seca em Na2SO4 e filtrada. O filtrado é concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (4985 g; 94 % de rendimento) como um sólido branco. Etapa 2: Síntese de N-(2-ciclopropil-2-oxo-etil)carbamato de terc-butila

[0036] A uma solução de N-[2-(metóxi(metil)amino)-2-oxo- etil]carbamato de terc-butila (2.455,3 g, 11,25 mol) em THF (9,0 L) é adicionado cloreto de isopropilmagnésio 2,0 M em THF (5,34 L, 10,69 mol) a -30 oC por intermédio de um funil de adição durante um período de 60 min tal que a temperatura interna não excedeu 0 oC. A mistura depois é aquecida lentamente até 10 oC e brometo de ciclopropilmagnésio 0,5 M em THF (27,0 L, 13,50 mol) é adicionado por intermédio de um funil de adição durante um período de 1 h. A mistura é agitada na temp. ambiente por 24 h. A mistura é resfriada até 0 oC e extinta com HCl 1,0 M ao pH 5 a 6, depois aquecida até a temp. ambiente e extraída com EtOAc (12 L e 10 L). A fase orgânica combinada é lavada sucessivamente com água (10 L) e salmoura (8 L), seca em Na2SO4, e filtrada. O filtrado é evaporado sob pressão reduzida para fornecer 2,24 kg (100 % de rendimento) do composto do título como um óleo amarelo claro que é usado diretamente para a etapa seguinte. Etapa 3: Síntese de N-[(4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il)metil] carbamato de terc-butila

[0037] Uma mistura do composto N-(2-ciclopropil-2-oxo-etil) carbamato de terc-butila (4204 g, ~21,10 mol), KCN (1786 g, 27,43 mol) e (NH4)2CO3 (4866 g, 50,64 mol) em metanol (16,0 L) e água DI (19,5 L) é agitada a 65 oC por 72 h. A mistura é concentrada sob pressão reduzida para remover a maioria do metanol, e depois extraída com EtOAc (5 x 20 L). A fase orgânica é lavada com salmoura (8,0 L), seca (Na2SO4) e filtrada. O filtrado combinado é dividido em duas porções iguais. Cada porção é concentrada a um volume de 15 L e deixada repousar durante a noite na temp. ambiente. Os precipitados são filtrados e lavados com EtOAc (3 x 1,0 L). O sólido branco resultante é combinado e seco sob vácuo a 45 oC por 3 dias para fornecer o composto do título (3605 g, 64,3 % de rendimento). Etapa 4: Isolamento de N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4- il]metil]carbamato de terc-butila

[0038] Os enantiômeros de N-[(4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin- 4-il)metil]carbamato de terc-butila podem ser separados usando uma coluna quiral. Coluna: 11x33 cm Chiralpak AD®, 20 μm; Taxa de fluxo/detecção: 800 mL/min/230 nm; Fase móvel: Metanol. Etapa 5: Síntese de cloridrato de (5R)-5-(aminometil)-5-ciclopropil- imidazolidina-2,4-diona

[0039] N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il]metil] carba- mato de terc-butila (310 g, 1151 mmol) é dissolvido em MeOH (3,1 L) a 6 oC. HCl 4 M em dioxano (310 mL) é adicionado e a mistura aquecida até 25 oC. Depois de agitar por 22h, uma segunda porção de HCl 4 M em dioxano (110 mL) é adicionada e a agitação continuou por um adicional de 16 h. A reação depois é deixada repousar sem nenhuma agitação por 2 dias. A mistura depois é diluída com tolueno (6 L). O composto do título é coletado por filtração da mistura como um sólido branco (180 g).

Exemplo 1

[0040] (2R)-N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il]metil]- 2-metil-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanamida

[0041] A síntese como essencialmente descrita no exemplo 2 pode ser usada para fabricar o composto acima, usando-se cloreto de propanoíla ao invés de cloreto de butanoíla.

Exemplo 2

[0042] (2R)-N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il]metil]- 2-[[4-(trifluorometil)fenil]metil]butanamida

Etapa 1: Síntese de (4S)-4-benzil-3-butanoil-oxazolidin-2-ona

[0043] A um RBF de 3 bocas (frasco de fundo redondo) é adicionado diclorometano (2,4 L), (S)-4-benzil-2-oxazolidinona (200 g, 1,13 mol) e N,N-Dimetil-4-piridinamina, (13,6 g; 111,32 mmol). O frasco é resfriado em um banho de água gelada e trietilamina (472 mL; 3,39 mol) é adicionada às gotas a 0°C. À solução resultante depois é adicionado às gotas cloreto de butanoíla (152,2 mL; 1,46 mol) durante 3 h, enquanto mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A reação depois é filtrada e o filtrado é lavado com HCl 1 M (aq.) (500 mL x 1) e NaHCO3 saturado (500 mL x 1). A fase orgânica é seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada para fornecer o composto do título (275 g, MS: [M+H]+= 248,1 m/z). Etapa 2: Síntese de (4S)-4-benzil-3-[(2R)-2-[[4-(trifluorometil)fenil] metil]butanoil]oxazolidin-2-ona

[0044] A um RBF de 5 L de 3 bocas é adicionado THF (2 L) e (4S)- 4-benzil-3-butanoil-oxazolidin-2-ona (270 g 1,09 mol) sob N2. A solução resultante é resfriada até -68°C em um banho de acetona-gelo seco. À solução fria é adicionado bis(trimetilsilil)amida de sódio (1320 mL de solução de THF 1 M; 1,32 mol) às gotas durante 1,5 h enquanto a temperatura interna é mantida entre -68 e -60°C. Na conclusão da adição, a reação é agitada a -68°C por 30 min. À solução fria depois é adicionado brometo de 4-trifluorometilbenzila (278 g; 1,16 mol) em THF (1 L) durante 30 min a -68°C. Depois de 1,5 h, a reação é vertida em HCl 1 M. A mistura é extraída com acetato de etila (3 L x 1). Os extratos são combinados e lavados com NaHCO3 aq. (2 L x 1) e salmoura (2 L x 1). A fase orgânica é seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada. O sólido é triturado com EtOH (600 mL) a 15°C. A filtração fornece o composto do título como um sólido (270 g, MS: [M+H]+= 406 m/z). Etapa 3: Síntese de ácido (2R)-2-[[4-(trifluorometil)fenil]metil]butanoico

[0045] A um RBF de 3 bocas é adicionado tetra-hidrofurano (4,2 L) e água (0,8 L). (4S)-4-benzil-3-(2-(benzilóxi)-3-(4-(trifluorometil)fenil) propanoil)oxazolidin-2-ona (250 g; 616,65 mmol) é adicionado e a solução resfriada até 0°C. Peróxido de hidrogênio (4,93 mol; 500,30 mL) é adicionado às gotas durante 45 min. LiOH (1,08 mol; 45,28 g) em 1,2 L de água é adicionado às gotas durante 1 h. A mistura resultante depois é agitada a 2°C por 1 h. Sulfito de sódio (2,47 mol; 310,90 g) é dissolvido em 2 L de água, e a solução resultante adicionada à mistura de reação às gotas durante 1 h. Na conclusão da adição, a mistura é lavada com DCM (2 x 2 L; 1 L x 1). A fase aquosa depois é acidificada com HCl concentrado (100 mL) ao pH = 1. A suspensão resultante é extraída com EA (2 L x 2). Os extratos orgânicos são combinados, lavados com solução de Na2SO3 (2 L x 1) e salmoura I (2 L x 1), secos em Na2SO4, e filtrados para fornecer o composto do título (140 g, MS: [M+H]+ = 247 m/z) Etapa 4: Síntese de (2R)-N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin- 4-il]metil]-2-[[4-(trifluorometil)fenil]metil]butanamida (Exemplo 2)

[0046] A um RBF de 3 bocas (2L) é adicionado diclorometano (996 mL), dimetilformamida (200 mL), ácido (2R)-2-[[4-(trifluorometil)fenil] metil]butanoico (53 g, 215 mmol) e hexafluorofosfato de O-(7-aza- benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametilurônio (215 mmol; 81,84 g) na temperatura ambiente sob uma atmosfera de nitrogênio. À mistura é adicionada N,N-dimetil-etanamina (1,08 mol; 116,80 mL) em uma porção. A mistura é agitada por 30 min. À solução resultante é adicionado cloridrato de (5R)-5-(aminometil)-5-ciclopropil- imidazolidina-2,4-diona (237 mmol; 49 g) em uma porção. A solução resultante é agitada por 2,5 h. A agitação depois é interrompida e a mistura é deixada repousar aberta ao ar por 16 h. A mistura de reação depois é diluída com EtOAc (200 mL) e lavada com HCl 2 M (aq.) (200 mL x 2), NaHCO3 5 a % (aq.) (200 mL x 2) e salmoura (500 mL). A fase orgânica é seca em Na2SO4, filtrada, e concentrada a um óleo. O óleo é diluído com CH2Cl2 (250 mL) fazendo com que um sólido branco precipitasse. O sólido é coletado por filtração e lavado com éter de petróleo (100 mL x 2) para fornecer o composto do título (55 g; MS: [M+H]+= 398 m/z).

Exemplo 3

[0047] (2S)-2-ciclopropil-N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazoli- din-4-il]metil]-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanamida

[0048] A síntese como essencialmente descrita no exemplo 2 pode ser usada para fabricar o composto acima, usando-se cloreto de 2- ciclopropilacetila ao invés de cloreto de butanoíla.

Exemplo 4

[0049] (2S)-N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il]metil]- 3-metil-2-[[4-(trifluorometil)fenil]metil]butanamida

[0050] A síntese como essencialmente descrita no exemplo 2 pode ser usada para fabricar o composto acima, usando-se cloreto de 3- metilbutanoíla ao invés de cloreto de butanoíla.

Exemplo 5

[0051] N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxoimidazolidin-4-il]metil]-2,2- dimetil-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanamida

Exemplo Im Etapa 1: Síntese de (E)-2-metil-3-[4-(trifluorometil)fenil]prop-2-enoato

[0052] Dissolver 2-dietoxifosforilpropanoato de etila (5,24 g, 22 mmol) e 4-(trifluorometil)benzaldeído (3,48 g, 20 mmol) em THF seco (50 mL) sob uma atmosfera de nitrogênio. Resfriar a solução resultante até 0°C. Cuidadosamente adicionar NaH a 60 % em peso (960 mg, 24 mmol). Deixar aquecer até a temperatura ambiente e agitar por 12 h. Concentrar a reação. Purificar o resíduo usando cromatografia instantânea (5 % de EtOAc/éter de petróleo) para fornecer o composto do título (4,18 g). Etapa 2: Síntese de 2-metil-3-[4-(trifluorometil)fenil] propanoato de etila

[0053] Dissolver (E)-2-metil-3-[4-(trifluorometil)fenil]prop-2-enoato de etila (2,58 g, 10 mmol) em uma suspensão de Pd-C(258 mg)/MeOH (20 mL) a 10 em peso % em um RBF sob nitrogênio, visto que a exposição de Pd-C ao oxigênio pode levar a fogo. Cuidadosamente purgar o frasco com hidrogênio e agitar a mistura resultante sob hidrogênio (1 Atm) por 16 h. Purgar o frasco com nitrogênio e desgaseificar o solvente para remover todo o hidrogênio antes de expor ao ar. Filtrar a suspensão através de uma almofada de celite. Concentrar o filtrado para fornecer o composto do título (2,39 g). Etapa 3: Síntese de 2,2-dimetil-3-[4-(trifluorometil)fenil] propanoato de etila

[0054] A uma solução de LDA (2,9 mL de 2 M) em THF (30 mL) a - 78°C adicionar 2-metil-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanoato de etila (1 g, 3,85 mmol). Agitar por 10 min, depois adicionar iodeto de metila (1,48 g, 10,4 mmol) e agitar por um adicional de 15 min. Extinguir a reação com 10 mL de HCl 1 N e deixar aquecer até a temperatura ambiente. Extrair com EtOAc (50 mL). Lavar o extrato com salmoura, secar em sulfato de sódio, filtrar, e concentrar. Purificar o resíduo por cromatografia instantânea (EtOAc a 5 % em éter de petróleo) para fornecer o composto do título (475 mg). Etapa 4: Síntese de ácido 2,2-dimetil-3-[4-(trifluorometil) fenil] propanoico

[0055] Dissolver 2,2-dimetil-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanoato de etila (400 mg, 1,46 mmol) em MeOH (2 mL) e adicionar solução de NaOH aquoso (3 mL de 3 N). Aquecer até 80°C e agitar por 3 h. Resfriar até a temperatura ambiente e acidificar com HCl 1 N até o pH ~ 4. Extrair com EtOAc. Combinar os extratos orgânicos, lavar com salmoura, secar em sulfato de sódio, filtrar, e concentrar para fornecer o composto do título (272 mg). Etapa 5: Síntese de N-[[(4R)-4-ciclopropil-2,5-dioxo-imidazolidin-4-il] metil]-2,2-dimetil-3-[4-(trifluorometil)fenil]propanamida

Exemplo Im

[0056] A uma solução de amina (205 mg, 1 mmol) em 15 mL de acetonitrila seca adicionar N,N-diidopropiletil amina (387 mg, 3 mmol). À solução resultante adicionar ácido 2,2-dimetil-3-[4-(trifluorometil)fenil] propanoico (246 mg, 1 mmol), EDCI (229 mg, 1,2 mmol), e HOAT (163 mg, 1,2 mmol). Agitar por 12 h na temperatura ambiente. Usar HPLC preparativa para isolar o composto do título (282 mg).

[0057] Os protocolos e resultados de ensaio seguintes demonstrando ainda a utilidade e eficácia dos compostos e/ou métodos da invenção corrente são fornecidos para o propósito de ilustração e não são significados como limitantes de nenhum modo. Todos os ligandos, radiorrótulos, solventes, e reagentes utilizados nos ensaios seguintes estão facilmente disponíveis de fontes comerciais, ou podem ser facilmente sintetizados por uma pessoa habilitada na técnica.

[0058] Ensaios de ligação de agrecanase são realizados para demostrar que compostos incluídos dentro da presente invenção exibem afinidade por agrecanase. Mais especificamente, os compostos preferidos da presente invenção exibem afinidade melhorada por agrecanase como exemplificado por sua afinidade de ligação nos ensaios AlphaScreen de ADAMTS-4 e ADAMTS-5.

[0059] Metaloproteases de matriz (MMPs) são conhecidas como estando envolvidas em vários processos homeostáticos incluindo remodelagem de tecido, atividade de sheddase e endocitose. Inibidores de MMP de espectro amplo testados na clínica foram associados com fibroplasia e rigidez articular e efeitos colaterais relacionados coletivamente denominados como síndrome musculoesquelética (MSS). Portanto, a seletividade por agrecanase sobre MMPs em geral é desejada. Similarmente, para a família de ADAMTS, vários membros foram associados com funções críticas diferentes da inibição de agrecanase desejada. Os compostos da presente invenção também exibem potência (isto é, inibindo ADAMTS- 4 e ADAMTS-5) no plasma e/ou seletividade aumentada por ADAMTS- 4 e ADAMTS-5 sobre MMP-2 e MMP-14.

[0060] Ensaio AlphaScreen de ADAMTS-4 e ADAMTS-5:

[0061] Os compostos da presente invenção podem ser avaliados usando-se um ensaio AlphaScreen de ADAMTS-4 e ADAMTS-5 de agrecanase (Miller J. A., et al. Anal. Biochem. 2003, 314, 260 - 265), com as modificações seguintes: Tipicamente 3 ou 4 nM de ADAMTS-4 ou 2,1 nM de ADAMTS-5 são incubados com 80 nM de substrato de peptídeo 43-mer +/- inibidores (1 % de concentração de DMSO final) por 3 horas na temperatura ambiente em uma placa de 96 reservatórios de superfície que não de ligação branca (Corning 3990). Inibidores são serialmente diluídos 3 vezes e testados em concentrações de partida finais de até aproximadamente 100 μM. O ensaio depois é extinto com um coquetel contendo EDTA (62,5 mM), 50 mM de Tris (hidroximetil) aminometano (Tris), (pH 7,5), 10 mM de cloreto de cálcio, 100 mM de cloreto de sódio, 0,2 % de Brij® 35 (componente principal de éter laurílico de polioxietileno(23)), 0,1 % de Albumina Sérica Bovina (BSA), sobrenadante de hibridoma de anticorpo monoclonal BC3 (diluição final de 1:2000), pérolas doadoras conjugadas a estreptavidina e pérolas aceitantes conjugadas a anti- IgG de camundongo (concentração final de 15 μg/mL para ambas as pérolas). A placa é coberta com fita de papel alumínio e a ligação é deixada incubar durante a noite. A placa depois é lida em um leitor AlphaScreen Fusion Alpha da Perkin Elmer. Os dados são analisados usando o software ActivityBase™ (IDBS Alameda, CA). Um ensaio similar é usado com enzima ADAMTS-4 de cão purificada. Os dados de compostos representativos da invenção são fornecidos abaixo na Tabela 1. Tabela 1

Ensaio AlphaScreen de Substituição de Plasma de Rato e Cão

[0062] O Ensaio AlphaScreen é modificado para incluir o teste de inibidores contra ADAMTS-5 na presença de 50 % de plasma de rato de Lewis de modo a determinar os efeitos da ligação da proteína plasmática sobre a potência do inibidor. A razão entre a IC50 do inibidor contra ADAMTS-5 em 50 % de plasma de rato de Lewis versus a IC50 do inibidor em tampão é calculada e é descrita como a substituição de plasma do inibidor. O ensaio é concluído da mesma maneira usando 10 nM de ADAMTS-5 ao invés de 2,1 nM. Um ensaio similar é usado com ADAMTS-4 de cão na presença de 25 % de plasma de cão. Dados de compostos representativos da invenção são fornecidos abaixo na Tabela 2. Tabela 2

Ensaio de fluorescência in vitro da Atividade de MMP-2

[0063] Um ensaio contínuo é usado em que o substrato é um peptídeo sintético contendo um grupo fluorescente (7-metoxicumarin, Mca), que é extinto por transferência de energia para um grupo2,4- dinitrofenila. O substrato é o peptídeo Mca-PQGL-(3-[2,4-dinitrofenil]-L- 2,3-diaminopropionil)-AR-OH. Quando o peptídeo é clivado por MMP um aumento grande na fluorescência é observado. A fonte da enzima para este ensaio é pro-MMP-2 humano, recombinante, de tamanho natural expressado em células do Ovário de Hamster Chinês (CHO) que é subsequentemente ativado por um composto organomercurial, acetato de 4-aminofenil mercúrico (APMA). APMA é removido através de uma coluna de dessalinização (MMP-2 Calbiochem® catálogo número PF023). O tampão de ensaio consiste em 100 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 100 mM de NaCl, 10 mM de CaCl2 e 10 μM de albumina sérica humana. Cada reservatório das placas de 96 reservatórios consiste em uma mistura de reação de 100 μL consistindo em tampão de ensaio, MMP (concentração final de 0,2 nM, preparado diluindo-se em tampão de ensaio), e concentrações variadas de inibidor (preparado diluindo-se serialmente um inibidor dado em DMSO em uma placa de polipropileno de 96 reservatórios usando um esquema de diluição de 10 pontos ou 11 pontos). As reações enzimáticas são iniciadas adicionando-se o substrato a uma concentração final de 20 μM. A concentração de DMSO final no ensaio é de 1,0 %. A placa é incubada por 2 a 4 horas na temperatura ambiente e a clivagem do substrato é determinada na temperatura ambiente com um leitor de placa de fluorescência (filtro de excitação 320 e filtro de emissão 436) em um LJL Analyst® ou um Wallac Envision®.

[0064] Os dados são analisados usando-se os programas do software ActivityBase® vs. 5,3 usando uma equação de modelo de ajuste de 4 parâmetros 205 da qual IC50’s relativas são geradas. O sinal máximo é calculado dos reservatórios não tratados por inibidor mas apresentando enzima, substrato e 1,0 % de DMSO. O sinal mínimo é calculado dos reservatórios apresentando tampão apenas (nenhuma enzima), substrato, e 1,0 % de DMSO.

Ensaio de fluorescência in vitro de outra Atividade de MMP

[0065] Essencialmente o mesmo procedimento é usado para os ensaios de MMP remanescentes como o ensaio de MMP-2, acima, ou como conhecido na técnica. Por exemplo, para MMP-14, a fonte de enzima é o domínio catalítico de MMP-14 (MT1-MMP) produzido pela ativação de uma pró-forma solúvel recombinante da enzima purificada a partir do periplasma. Isto consiste em resíduos de aminoácido Tyr89 a Gly265 de MT1-MMP humana madura (Calbiochem® catálogo número 475935). A concentração final de cada reservatório é 0,5 nM ao invés de 0,2 nM como no ensaio de MMP-2. Dados de compostos representativos da invenção são fornecidos abaixo na Tabela 3. Tabela 3

Modelo PD de Injeção de MIA em ratos

[0066] O ensaio como descrito em Swearingen et al., Osteoarthritis and Cartilage 18 (2010) 1159 - 1166, pode ser utilizado. MIA (Sigma, catálogo # I2512, sal de sódio) é preparado fresco no dia de uso em 3 mg em 50 ul de solução salina a 0,9% estéril. Ratos de Lewis machos de 7 a 8 semanas de idade são anestesiados e injetados intra- articularmente com MIA no joelho direito (para induzir a atividade de agrecanase endógena e a liberação de fragmentos de agrecano no fluido sinovial) e solução salina no joelho esquerdo (contralateral) no dia 0. Inibidor de agrecanase (3, 10 ou 30 mg/kg) ou veículo [1 % de hidroxietil celulose (HEC); 0,25% de Tween 80; 0,05% de antiespumante] são dosados oralmente, duas vezes por dia partindo do dia 3. Uma dose única de composto é fornecida no dia 7, os animais são sacrificados 4 h mais tarde, e as articulações do joelho são lavadas com 200 ul de solução salina. A lavagem sinovial é avaliada para fragmentos clivados por agrecanase de agrecano usando o ELISA tipo sanduíche de NITEGE. A quantidade de fragmentos de agrecano presentes na lavagem sinovial é determinada com base em uma curva padrão gerada com agrecano de rato digerido com agrecanase. A análise estatística é realizada usando o teste de Dunnett.

[0067] Ensaio ELISA tipo sanduíche: Para o ELISA de NITEGE, o anticorpo monoclonal a-NITEGE é imobilizado em placas ELISA de ligação alta brancas (Nunc) durante a noite a 4C. A seguir do bloqueio, amostras de lavagem do fluido sinovial do rato são adicionadas à placa e fragmentos com uma sequência de NITEGE C-terminal são capturados. Os fragmentos capturados são detectados usando o anticorpo monoclonal a-HABR conjugado a HRP. O sinal de ELISA é medido usando o substrato de sensibilidade máxima de femto de ELISA Supersignal (Pierce) e lido em um luminômetro de Victor. A quantidade de fragmentos de agrecano presentes na amostra é determinada com base em uma curva padrão gerada com agrecano de condrossarcoma de rato digerido com agrecanase (850 mg/mL de estoque diluído em tampão de diluição de anticorpo). Os dados são apresentados na Tabela 4. Tabela 4

Estudo do Biomarcador Plasmático ARGN em Cães com Osteoartrite

[0068] O objetivo deste estudo é determinar a resposta do biomarcador plasmático ARGN em cães osteoartríticos (OA) a um composto da invenção através de uma faixa de doses a seguir da administração diária por 21 dias. Dezesseis (16) cães Beagle de laboratório adultos > 8 anos de idade com evidência radiográfica de OA na(s) articulação(ões) do quadril e 4 cães Beagle de controle combinados por idade sem OA são registrados no estudo.

[0069] Amostras de sangue para concentrações de ARGN plasmáticas comparativas são coletadas de todos os cães nos dias 30, 28, e 26 até antes de começar a administração da dose. Os 16 cães com OA são randomizados por bloco por suas concentrações de ARGN plasmáticas comparativas médias a 1 dos 4 grupos de tratamento: placebo, 0,1, 1, e 10 mg/kg do composto do Exemplo 2. Os 4 cães de controle combinados por idade sem OA todos são designados ao grupo de tratamento com placebo. Começando no Dia 0, os cães recebem uma vez ao dia administração por gavagem oral do composto do Exemplo 2 em uma solução/suspensão por 3 semanas de acordo com seu grupo de tratamento designado. As amostras de sangue para ARGN plasmático e a determinação da concentração do composto do Exemplo 2 são coletadas antes da primeira administração da dose e 3 vezes por semana por 4 semanas adicionais (Dia 28). Amostras de sangue adicionais para ARGN plasmático e a determinação da concentração do composto do Exemplo 2 são coletadas antes e 1, 2, 6, 12, e 24 horas a seguir da última administração da dose (Dia 20). Concentrações de ARGN plasmáticas são determinadas por imunoensaio usando um protocolo de ELISA tipo sanduíche e a concentração plasmática do composto do Exemplo 2 é determinada usando um método de LC-MS/MS. Estatísticas resumidas do ARGN plasmático e concentrações do composto do Exemplo 2 são calculadas e uma análise de PK não compartimental das concentrações do composto do Exemplo 2 é conduzida.

[0070] Concentrações de ARGN plasmáticas são inibidas em uma maneira responsiva à dosagem com inibições no Dia 21 médias de 33,8 %, 70,7 %, e 80,3 % a seguir da dosagem diária com 0,1, 1, e 10 mg/kg do composto do Exemplo 2, respectivamente. A inibição de ARGN em cães tratados com placebo normais e com OA é comparavelmente baixa, variando de -1,30 % a 13,4 %. Concentrações de ARGN não são substancialmente diferentes entre cães tratados com placebo normais e com OA. As concentrações plasmáticas do composto do Exemplo 2 aumentam com a dosagem em uma maneira subproporcional e concentrações mínimas no estado estacionário são rapidamente obtidas. É evidente que aumentar dosagens e exposição sistêmica do composto do Exemplo 2 resulta em inibição aumentada de concentrações de ARGN plasmáticas. Portanto, o composto do Exemplo 2 inibe sua agrecanase alvo em cães com OA que ocorre naturalmente a seguir da administração oral uma vez ao dia.

[0071] A invenção é descrita pelas cláusulas seguintes.

[0072] Um composto apresentando a fórmula:

[0073] em que R1 é selecionado de metila, etila, propila, dimetila, e ciclopropila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0074] 2. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0075] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0076] 3. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0077] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0078] 4. O composto de acordo com a cláusula 3 apresentando a fórmula:

[0079] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0080] 5. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0081] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0082] 6. O composto de acordo com a cláusula 5 apresentando a fórmula:

[0083] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0084] 7. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0085] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0086] 8. O composto de acordo com a cláusula 7 apresentando a fórmula:

[0087] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0088] 9. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0089] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0090] 10. O composto de acordo com a cláusula 9 apresentando

[0091] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0092] 11. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0093] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0094] 12. O composto de acordo com a cláusula 11 apresentando a fórmula:

[0095] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0096] 13. O composto de acordo com a cláusula 1 apresentando a fórmula:

[0097] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[0098] 14. O composto de acordo com a cláusula 13 apresentando a fórmula:

[0099] ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

[00100] 15. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e pelo menos um de um veículo, excipiente, ou diluente farmaceuticamente aceitáveis.

[00101] 16. A composição farmacêutica da cláusula 15, em que a dita composição inclui pelo menos um agente ativo adicional.

[00102] 17. A composição farmacêutica da cláusula 15 ou 16, em que a dita composição é uma composição farmacêutica humana.

[00103] 18. A composição farmacêutica da cláusula 15 ou 16, onde a dita composição é uma composição veterinária.

[00104] 19. A composição farmacêutica de qualquer uma das cláusulas 15 a 18, em que a dita composição farmacêutica é adaptada para administração oral.

[00105] 20. A composição farmacêutica de qualquer uma das cláusulas 15 a 19, em que a dita composição farmacêutica está na forma de um tablete, cápsula, solução, ou suspensão.

[00106] 21. Um método de tratar artrite em um paciente em necessidade deste, o dito método compreendendo administrar uma quantidade eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ao dito paciente.

[00107] 22. O método da cláusula 21, em que o dito paciente é administrado com pelo menos um agente ativo adicional.

[00108] 23. O método da cláusula 21 ou 22, em que o dito paciente é um ser humano.

[00109] 24. O método da cláusula 21 ou 22, em que o dito paciente é um cão.

[00110] 25. O método de qualquer uma das cláusulas 21 a 24, em que a dita administração é administração oral.

[00111] 26. O método de qualquer uma das cláusulas 21 a 25, em que a dita administração é realizada usando o dito composto em um tablete, cápsula, solução, ou suspensão.

[00112] 27. Um método de inibir a erosão da cartilagem em um paciente em necessidade deste, o dito método compreendendo administrar uma quantidade eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, ao dito paciente.

[00113] 28. O método da cláusula 27, em que o dito paciente é administrado com pelo menos um agente ativo adicional.

[00114] 29. O método da cláusula 27 ou 28, em que o dito paciente é um ser humano.

[00115] 30. O método da cláusula 27 ou 28, em que o dito paciente é um cão.

[00116] 31. O método de qualquer uma das cláusulas 27 a 30, em que a dita administração é administração oral.

[00117] 32. O método de qualquer uma das cláusulas 27 a 31, em que a dita administração é realizada usando o dito composto em um tablete, cápsula, solução, ou suspensão.

[00118] 33. Um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para o uso em terapia.

[00119] 34. Um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para o uso no tratamento de artrite.

[00120] 35. Um composto de acordo com qualquer uma das cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para o uso na inibição da erosão da cartilagem.

[00121] 36. O uso de um composto de acordo com qualquer um de cláusulas 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, para a fabricação de um medicamento.

[00122] 37. O uso da cláusula 36, em que o dito medicamento é para tratar artrite.

[00123] 38. O uso da cláusula 36 ou 37, em que o dito medicamento é para inibir a erosão da cartilagem.

[00124] 39. O uso de qualquer uma das cláusulas 36 a 38, em que o dito medicamento é adaptado para administração oral.

[00125] 40. O uso de qualquer uma das cláusulas 36 a 39, em que o dito medicamento está na forma de um tablete, cápsula, solução, ou suspensão.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

na qual R1 é selecionado de metila, etila, propila, dimetila, e ciclopropila, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, e pelo menos um de um veículo, excipiente, ou diluente farmaceuticamente aceitável.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, caracterizado pelo fato de que é para o uso em terapia.

8. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou de um sal farmaceuticamente aceitável deste, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para tratar artrite em um paciente em necessidade deste e/ou para inibir erosão da cartilagem em um paciente em necessidade deste.