BR112014011770B1

BR112014011770B1 - Suspensões da forma 2 de ciclosporina a

Info

Publication number: BR112014011770B1
Application number: BR112014011770-5A
Authority: BR
Inventors: Anuradha V. Gore; Prem Swaroop Mohanty; E. Quinn Farnes
Original assignee: Allergan, Inc
Priority date: 2011-11-15
Filing date: 2012-11-14
Publication date: 2022-11-08
Also published as: US10206971B2; RU2641963C2; CN104080442B; US9238002B2; EP2779994A1; HK1202066A1; DK2779994T3; ES2791751T3; CA2856057C; BR112014011770A2; EP3701939A1; WO2013074625A1; CA2856057A1; KR20140107254A; AU2012339632A1; AU2020270500B2; JP6363506B2; JP2018162296A; JP2020040968A; EP2779994B1

Abstract

SUSPENSÕES DA FORMA 2 DE CICLOSPORINA A. A presente invenção refere-se a formulações compreendendo a forma 2 de ciclosporina A e um veículo. A presente invenção também se refere a um método de preparação de uma formulação de ciclosporina compreendendo as etapas de misturar a forma 2 de ciclosporina A com um veículo para formar uma suspensão e triturar a suspensão. A invenção refere-se, ainda, ao uso da forma 2 de ciclosporina A na preparação de uma formulação para tratar uma condição selecionada de olho seco, blefarite, doença da glândula meibomiana, sensibilidade da córnea prejudicada, conjuntivite a alérgica, ceratoconjuntivite atópica, ceratoconjuntivite vernal e pterígio.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA AO PEDIDO RELACIONADO

[001] Este pedido de patente reivindica a prioridade do Pedido de Patente Provisório U.S. No. 61/559.866, depositado em 15 de novembro de 2011, cujos conteúdos inteiros aqui incorporados por referência. CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A invenção refere-se aos campos da nanotecnologia e da tecnologia de formulação de medicamentos.

ANTECEDENTES

[003] A ciclosporina A é o ingrediente ativo no Restasis®, um medicamento que é utilizado para o tratamento da doença do olho seco. A ciclosporina A é fracamente solúvel em água, e assim é geralmente formulado através da dissolução do medicamento em óleo para formar uma emulsão, ou mediante a mistura do medicamento com níveis elevados de tensoativos e/ou solubilizantes para formar uma solução aquosa. Os inventores descobriram uma formulação de ciclospori- na A utilizando um novo polimorfo cristalino de ciclosporina A, para criar nanossuspensões compreendendo partículas de ciclosporina A tendo um tamanho médio ao redor de 1 micrômetro ou menos (para colocar esse número em perspectiva, a espessura média de um cabelo humano é ao redor de 100 micrômetros).

[004] Uma nanossuspensão de ciclosporina A, quando liberada topicamente no olho, pode ter uma ou mais vantagens, incluindo o que segue: • uma biodisponibilidade superior em comparação com as suspensões, devido à área de superfície mais elevada disponível para dissolução; • uma retenção mais longa no olho devido às partículas menores, que leva à melhora adicional na biodisponibilidade; • um potencial mais baixo para a sensação de corpo estra-nho ou irritação de partícula, reduzindo assim o lacrimejamento e a drenagem das formulações do olho; • um nível mais baixo de tensoativos ou solubilizantes na formulação, o que melhora a tolerabilidade e biodisponibilidade do medicamento.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[005] A Figura 1 mostra a distribuição de tamanho de partícula das nanossuspensões da Forma 2 de ciclosporina A preparadas utilizando um homogeneizador de alta pressão em comparação com suspensões antes da moagem.

[006] A Figura 2 compara a distribuição de tamanho de partícula das nanossuspensões da Forma 2 de ciclosporina A preparadas utilizando diferentes tensoativos e estabilizantes.

[007] A Figura 3 mostra a distribuição de tamanho de partícula da Formulação diluída em veículo contendo Na CMC.

[008] A Figura 4 mostra o tamanho médio de partícula de uma nanossuspensão utilizando a Forma 3 de ciclosporina A em comparação com uma nanossuspensão utilizando a Forma 2 após a moagem usando um microfluidificador. A Forma 2 forma uma nanossuspensão (tamanho de partícula < 1 mm) enquanto que a Forma 3 não.

[009] As Figuras de 5 a 13 mostram os resultados quando quatro formulações diferentes de acordo com a invenção (resumidas na Tabela 2) e Restasis® são administradas a coelhos fêmeas NZW (dois coelhos no total, uma formulação por olho ) em uma única dose tópica.

[0010] A Figura 5 mostra as concentrações na córnea.

[0011] A Figura 6 resume os dados farmacocinéticos.

[0012] A Figura 7 mostra as concentrações na conjuntiva bulbar.

[0013] A Figura 8 mostra as concentrações na conjuntiva palpebral.

[0014] A Figura 9 resume os dados farmacocinéticos para a conjuntiva bulbar e conjuntiva palpebral.

[0015] A Figura 10 mostra as concentrações na conjuntiva bulbar.

[0016] A Figura 11 mostra as concentrações na conjuntiva palpebral.

[0017] A Figura 12 mostra as concentrações na glândula lacrimal.

[0018] A Figura 13 resume os dados farmacocinéticos para a glândula lacrimal.

[0019] A Figura 14 representa os padrões de difração em pó de raios-X característicos (XRPD) de CsA em uma nova forma cristalina (designada aqui como Forma 2), forma tetragonal (designada aqui como Forma 1), e forma ortorrômbica (designada aqui como Forma 3).

[0020] A Figura 15 representa o difractograma de XRPD da Forma 2 cristalina de CsA.

[0021] A Figura 16 representa o perfil de absorção/dessorção de água da Forma 2 de CsA.

[0022] A Figura 17 representa a análise de MDSC da Forma 2 de CsA recuperada da formulação de 0,04 % com 1% de PS80.

[0023] A Figura 18 mostra o padrão de XRPD simulado das formas de ciclosporina A.

DESCRIÇÃO DETALHADA Ciclosporina A

[0024] A ciclosporina A (CsA) é um peptídeo cíclico tendo a seguinte estrutura química:

[0025] Seu nome químico é ciclo[[(E)-(2S,3R,4R)-3-hidróxi-4-metil- 2-(metilamino)-6-octenoil]-L-2-aminobutiril-N-metilglicil-N-metil-Lleucil- L-valil-N-metil-L-leucil-L-alanil-D-alanil-N-metil-L-leucil-N-metil-L-leucil- Nmetil-L-valil]. Também é conhecido pelos nomes ciclosporina e, ci- closporina A. É o ingrediente ativo do Restasis® (Allergan, Inc., Irvine, California), uma emulsão compreendendo 0,05 % (p/v) de ciclosporina. O Restasis® é aprovado nos Estados Unidos para aumentar a produção de lágrimas nos pacientes cuja produção de lágrimas se presume ser suprimida devido à inflamação ocular associada com a ceratocon- juntivite seca.

Forma 2 de Ciclosporina A

[0026] A ciclosporina A é conhecida de existir em uma forma amorfa, a forma de cristal líquido, forma cristalina tetragonal (forma 1), e uma estrutura ortorrômbica (forma 3). Uma nova forma cristalina, a forma 2 de ciclosporina A, foi recentemente descoberta.

[0027] O padrão de XRPD da Forma 2 de CsA difere significativamente da forma tetragonal e da forma ortorrômbica (Fig. 14). Os principais picos cristalinos da forma 2 de CsA aparecem em (2) quando varridos por um difractômetro de raios-X com fonte de raios-X como radiação Cu Kα, À = 1,54 A, em 30 kV / 15 mA: 7,5, 8,8, 10,2, 11,3, 12,7, 13,8, 14,5, 15,6 e 17,5 (espaçamento d na treliça de cristal ao redor de 11,8, 10,0, 8,7, 7,8, 7,0, 6,4, 6,1, 5,6 e 5,1 , respectivamente, Fig. 15). Estes picos principais são definidos como aqueles que são únicos para a Forma 2 em relação às formas ortorrômbicas ou tetra- gonais; assim como, picos tendo uma intensidade maior do que 5 vezes a formação.

[0028] Em uma modalidade, a nova forma cristalina (Forma 2) de CsA é um hidrato não estequiométrico de Ciclosporina A. Em outra modalidade, a Forma 2 cristalina é representada pela fórmula:

X H2O, em que X é o número de moléculas de água e varia de 0 a 3. Em uma modalidade, X na fórmula acima é 2.

[0029] A Forma 2 parece ser uma forma cineticamente estável de CsA em suspensões aquosas. As suspensões contendo a Forma 2 não apresentam nenhuma conversão em outras formas polimórficas ou pseudomórficas conhecidas após o armazenamento. Observou-se que a Forma 1 e a forma amorfa se transformam na Forma 2 na presença de água.

[0030] A estrutura de cristal única da forma de hidrato da Forma 2 de CsA foi determinada e os parâmetros da estrutura de cristal são listados na Tabela 2. Estes resultados indicam que a Forma 2 é única em relação a outras formas cristalinas conhecidas da ciclosporina A.

[0031] Tabela 1: Dados de cristal e os parâmetros de coleta de dados da solução de estrutura de cristal da Forma 2 de CsA.

[0032] A unidade assimétrica desta Forma 2 de CsA contém uma molécula de ciclosporina A e duas moléculas de água. É possível que qualquer molécula pequena que possa ligar o hidrogênio à água pode desempenhar a função de material de carga de espaçamento, o que daria uma faixa de estruturas potenciais que operam a partir do diidra- to ortorrômbico até o diidrato monoclínico distorcido. O padrão de XRPD calculado a partir da estrutura de cristal única é mostrado na Figura 8 e coincide com o padrão experimental mostrado na Figura 2. Estes padrões correspondentes ainda confirmam que a Forma 2 é uma forma cristalina única e pura da ciclosporina A.

[0033] Sem desejar ser limitado pela teoria, a análise termogravi- métrica combinada com a titulação KF e a análise de dessorção da absorção de vapor (VSA) sugerem que a Forma 2 de CsA é um hidrato não estequiométrico de CsA. A análise de absorção de vapor da Forma 2 de Ciclosporina indica que o teor de água na nova forma de cristal de modo reversível varia com a umidade relativa como mostrado na Fig. 16. Semelhante à forma tetragonal, a nova forma de CsA sofre uma transição de fase para uma forma de cristal líquido ou amorfa a 124,4 oC antes de fusão como indicado pela análise calorimétrica diferencial modulada (MDSC) (Figura 17).

[0034] A Forma 2 de Ciclosporina pode ser obtida através da suspensão amorfa de 0,05 % de ciclosporina A (p/v) em 1 % de Polissor- bato 80, aquecimento da solução para 65 °C, mantend o-a nessa temperatura durante 24 horas, e depois recuperação do precipitado por filtração a vácuo. Pode-se então utilizar a Forma 2 de Ciclosporina A assim obtida para gerar quantidades adicionais, utilizando a Forma 2 de Ciclosporina A como um cristal semente; neste método, coloca-se em suspensão cerca de 30 g de ciclosporina A em uma solução de 900 ml de água contendo 1 % (p/v) de Polissorbato 80, aquece a solução para 65 °C, e depois semeia-se com 0,2 g da For ma 2 de ciclospo- rina A em uma temperatura de 52 °C. A solução é então agitada durante cerca de 22 horas em uma temperatura entre cerca de 61 °C e 65 °C, e depois recupera-se o precipitado resultant e.

[0035] Outros detalhes com respeito à Forma 2 de CsA podem ser observados no Pedido de Patente U.S. No. 13/480.710, cujos conteúdos inteiros são aqui incorporados por referência. Suspensões da forma 2 de ciclosporina A

[0036] As composições da invenção são suspensões oftalmica- mente aceitáveis da forma 2 de Ciclosporina A. Por "oftalmicamente aceitáveis", os inventores querem dizer que as suspensões são formuladas de uma tal maneira como para ser não irritativas quando administradas ao olho de um mamífero, tal como um ser humano. Em uma modalidade, as composições são suspensões; isto é, elas compreendem partículas da forma 2 de ciclosporina A, tendo um tamanho médio de partícula maior do que cerca de 1 m, dispersas através de um veículo líquido. Em outra modalidade, as composições são nanossuspen- sões; isto é, elas compreendem partículas da forma 2 de ciclosporina A, tendo um tamanho médio de partícula de menos do que cerca de 1 m, que são dispersas através de um veículo líquido.

[0037] Em uma modalidade, a suspensão compreende a forma 2 de ciclosporina A em uma concentração de cerca de 0,001 % a cerca de 10 % (p/v). Em uma modalidade, a suspensão compreende a forma 2 de ciclosporina A em uma concentração de cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,01 %, cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,04 % (p/v), cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,03 % (p/v), cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,02 % (p/v), ou cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,01 % (p/v). Em outra modalidade, a suspensão compreende a forma 2 de ciclos- porina A em uma concentração de cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,05 %, cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,04 % (p/v), cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,03 % (p/v), cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,02 % (p/v), ou cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,01 % (p/v). Em outra modalidade, a suspensão compreende a forma 2 de ciclosporina A em uma concentração de cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,1 %, cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 0,5 % (p/v), cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 1% (p/v), ou cerca de 1 % (p/v) a cerca de 10 %.

[0038] Por exemplo, as formulações podem compreender ao redor de 0,001 % (p/v), ao redor de 0,002 % (p/v), ao redor de 0,003 % (p/v), ao redor de 0,004 % (p/v), ao redor de 0,005 % (p/v), ao redor de 0,006 % (p/v), ao redor de 0,007 % (p/v), ao redor de 0,008 % (p/v), ao redor de 0,009 % (p/v), ao redor de 0,01 % (p/v), ao redor de 0,015 % (p/v), ao redor de 0,02 % (p/v), ao redor de 0,025 % (p/v), ao redor de 0,03 % (p/v), ao redor de 0,035 % (p/v), ao redor de 0,04 % (p/v), ao redor de 0,045 % (p/v), ao redor de 0,05 % (p/v), ao redor de 0,055 % (p/v), ao redor de 0,06 % (p/v), ao redor de 0,065 % (p/v), ao redor de 0,07 % (p/v), ao redor de 0,075 % (p/v), ao redor de 0,08 % (p/v), ao redor de 0,085 % (p/v), ao redor de 0,09 % (p/v), ao redor de 0,095 % (p/v), ao redor de 0,1 % (p/v), ao redor de 0,15 % (p/v), ao redor de 0,2 % (p/v), ao redor de 0,25 % (p/v), ao redor de 0,3 % (p/v), ao redor de 0,35 % (p/v), ao redor de 0,4 % (p/v), ao redor de 0,45 % (p/v), ao redor de 0,5 % (p/v), ao redor de 0,55 % (p/v), ao redor de 0,6 % (p/v), ao redor de 0,65 % (p/v), ao redor de 0,7 % (p/v), ao redor de 0,75 % (p/v), ao redor de 0,8 % (p/v), ao redor de 0,85 % (p/v), ao redor de 0,9% (p/v), ao redor de 0,95 % (p/v), ou ao redor de 1,0 % (p/v) da forma 2 de ciclosporina A.

[0039] Em uma modalidade, a suspensão compreende um tensoa- tivo. Em uma modalidade, o tensoativo é selecionado de monooleato de polioxietileno (20) sorbitano (Polissorbato 80), hidroxiestearato de polietileno glicol 660 (Solutol), estearato de polioxietileno (40) Myrj 52 (POE-40-estearato), Pluronic F68 (Polaxâmero 188), monolaurato de polioxietileno sorbitano (Polissorbato 20), e glicolato de sódio (NaGC). O veículo pode conter todos esses tensoativos, ou um, dois, três, quatro ou cinco deles.

[0040] Pode-se utilizar entre cerca de 0,001 % (p/v) e cerca de 5 % (p/v) de tensoativo. Em uma modalidade, as suspensões contêm cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v), cerca de 0,001 % (p/v) a cerca de 0,1 % (p/v), cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,1 % (p/v), ou cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v) do tensoativo. Por exemplo, as suspensões podem conter ao redor de 0,001 % (p/v), ao redor de 0,002 % (p/v), ao redor de 0,003 % (p/v), ao redor de 0,004 % (p/v), ao redor de 0,005 % (p/v), ao redor de 0,006 % (p/v), ao redor de 0,007 % (p/v), ao redor de 0,008 % (p/v), ao redor de 0,009 % (p/v), ao redor de 0,01 % (p/v), ao redor de 0,02 % (p/v), ao redor de 0,03 % (p/v), ao redor de 0,04 % (p/v), ao redor de 0,05 % (p/v), ao redor de 0,06 % (p/v), ao redor de 0,07 % (p/v), ao redor de 0,08 % (p/v), ao redor de 0,09 % (p/v), ao redor de 0,1 % (p/v), ao redor de 0,2 % (p/v), ao redor de 0,3 % (p/v), ao redor de 0,4 % (p/v), ao redor de 0,5 % (p/v), ao redor de 0,6 % (p/v), ao redor de 0,7 % (p/v), ao redor de 0,8 % (p/v), ao redor de 0,9 % (p/v), ao redor de 1 % (p/v), ao redor de 2 % (p/v), ao redor de 3 % (p/v), ao redor de 4 % (p/v), ou ao redor de 5 % (p/v) de tensoativo.

[0041] Quando se usa mais do que um tensoativo, a suspensão pode conter as mesmos ou diferentes quantidades de cada um.

[0042] Além de um tensoativo, as suspensões podem compreender um estabilizante. Em uma modalidade, o estabilizante é selecionado de hidroxi propil celulose, hidroxipropilmetil celulose, hidroxietil celulose, polivinil pirrolidona, carboximetil celulose, Pemulen®, e Pemu- len® TR-2. O Pemulen® é o nome comercial para os copolímeros reticulados de peso molecular elevado de ácido acrílico e acrilato de alquila C10-C30 produzido pela Lubrizol Corp. O Pemulen® TR-2 é um polímero cruzado de acrilato de alquila C10-30 contendo um nível mais elevado de grupos hidrofóbicos do que outros polímeros Pemulen®. O veículo pode conter todos esses estabilizantes, ou nenhuma deles, ou pode conter um, dois, três, quatro ou cinco deles.

[0043] Pode-se utilizar entre cerca de 0,01 % (p/v) e cerca de 10 % (p/v) do estabilizante. Em uma modalidade, as suspensões contêm cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v), ou cerca de 0,01 % (p/v) a cerca de 0,1 % (p/v), ou cerca de 0,1 % (p/v) a cerca de 1 % (p/v) de estabilizante. Por exemplo, as suspensões podem conter ao redor de 0,01 % (p/v), ao redor de 0,02 % (p/v), ao redor de 0,03 % (p/v), ao redor de 0,04 % (p/v), ao redor de 0,05 % (p/v), ao redor de 0,06 % (p/v), ao redor de 0,07 % (p/v), ao redor de 0,08 % (p/v), ao redor de 0,09 % (p/v), ao redor de 0,1 % (p/v), ao redor de 0,2 % (p/v), ao redor de 0,3 % (p/v), ao redor de 0,4 % (p/v), ao redor de 0,5 % (p/v), ao redor de 0,6 % (p/v), ao redor de 0,7 % (p/v), ao redor de 0,8 % (p/v), ao redor de 0,9 % (p/v), ao redor de 1 % (p/v), ao redor de 2 % (p/v), ao redor de 3 % (p/v), ao redor de 4 % (p/v), ao redor de 5 % (p/v), ao redor de 6 % (p/v), ao redor de 7 % (p/v), ao redor de 8 % (p/v), ao redor de 9 % (p/v), ou ao redor de 10 % do estabilizante.

[0044] Quando se utiliza mais do que um tensoativo, a suspensão pode conter os mesmos ou diferentes quantidades de cada um.

[0045] Além de um tensoativo, o veículo também pode compreender um regulador de tonicidade selecionado de glicerina, manitol, citrato diidratado de sódio, cloreto de potássio, ácido bórico e borato de- caidratado de sódio. O regulador de tonicidade é adicionado conforme necessário para alcançar a tonicidade desejada; o veículo pode conter todos estes reguladores de tonicidade, ou nenhuma deles, ou pode conter um, dois, três, quatro ou cinco. Em uma modalidade, os reguladores de tonicidade estão presentes em uma quantidade entre cerca de 0,1 % (p/v) e cerca de 10 % (p/v). Quando se utiliza mais do que um regulador de tonicidade, a suspensão pode conter as mesmas ou diferentes quantidades de cada um.

[0046] A suspensão geralmente contém água, em uma quantidade suficiente para fornecer um pH, tonicidade e outras características de-sejadas que tornariam a suspensão apropriada para administração no olho.

Métodos de preparação da suspensão da forma 2 de ciclosporina A

[0047] As formulações da invenção podem ser produzidas através da mistura da forma 2 de ciclosporina A com os tensoativos, estabili- zantes e reguladores da tonicidade apropriados, como descrito acima, para formar uma suspensão se partículas finas de ciclosporina A forem desejadas, a suspensão é então triturada utilizando um homogeneiza- dor de alta pressão, tal como aquele comercialmente disponível da Microfluidics Int’l Corp. of Newton, Massachusetts. Uma única e surpreendente propriedade da forma 2 da ciclosporina A é que ela pode ser triturada, se desejável, para se obter uma suspensão com um tamanho médio de partícula (d90) de menos do que 1 m. A ciclosporina A em uma tal nanossuspensão possui biodisponibilidade mais elevada em comparação com outras (macro) suspensões de ciclosporina A, devido à área superficial superior disponível para dissolução; a biodisponibili- dade é ainda acentuada porque as partículas menores permitem a ci- closporina A ser retida no olho por mais tempo. As partículas menores das nanossuspensões resultam em uma formulação com um potencial mais baixo de produzir uma sensação de corpo estranho ou outra irritação que um indivíduo percebe quando a formulação é instilada no olho. Da mesma forma, visto que as partículas são menores, elas se associam mais facilmente com os tensoativos e estabilizantes, permitindo-se assim utilizar concentrações mais baixas deles.

[0048] Depois que a forma 2 de ciclosporina é triturada, ela é diluída para se obter o produto final.

Métodos de tratamento

[0049] As composições da invenção podem ser usadas para tratar qualquer condição do olho que seja conhecida de ser receptível ao tra-tamento tópico com a ciclosporina A (por exemplo, com o Restasis®) nas concentrações aqui mencionadas. Por exemplo, as composições da invenção podem ser utilizadas para tratar pacientes que sofrem de olho seco, para tratar a blefarite e a doença da glândula meibomiana, para restaurar a sensibilidade da córnea que foi danificada devido à cirurgia refrativa no olho, para tratar a conjuntivite alérgica e a cerato- conjuntivite atópica e vernal, e para tratar pterígio, inflamação da conjuntiva e córnea, ceratoconjuntivite, doença de enxerto versus hospedeiro, glaucoma pós-transplante, transplantes da córnea, ceratite micó- tica, ceratite pontilhada superficial de Thygeson, uveíte e ceratoconjun- tivite límbica superior de Theodore, entre outras condições.

[0050] A International Dry Eye Workshop (DEWS) define olho seco como "uma doença multifatorial das lágrimas e da superfície ocular que resulta em sintomas de desconforto, distúrbios visuais e instabilidade da película lacrimal com danos potenciais à superfície ocular, acompanhado pelo aumento da osmolaridade da película lacrimal e inflamação da superfície ocular. "Ela inclui aquelas condições, tais como ceratoconjuntivite seca, que são provocadas pela deficiência de lágrimas ou evaporação excessiva das lágrimas.

[0051] A blefarite é um distúrbio crônico que produz inflamação da borda da pálpebra anterior e posterior, com o envolvimento da pele e suas estruturas relacionadas (pêlos e glândulas sebáceas), a junção mucocutânea, e as glândulas meibomianas. Também pode afetar a conjuntiva, a película de lágrimas, e a superfície da córnea em estágios avançados e pode estar associada com o olho seco. A blefarite é comumente classificada em blefarite anterior ou posterior, com a anterior afetando a região que carrega os cílios, e a posterior afetando principalmente os orifícios da glândula meibomiana.

[0052] A doença da glândula meibomiana ocorre mais freqüente- mente como uma das três formas: meibomite primária, meibomite secundário e seborréia meibomiana. A seborréia meibomiana é caracterizada pela secreção excessiva da glândula meibomiana na ausência de inflamação (doença da glândula meibomiana hipersecretora). A meibomite primária, ao contrário, distingue-se pelas secreções mei- bomianas estagnadas e condensadas (doença da glândula meibomia- na hipersecretora obstrutiva). A meibomite secundária representa uma resposta inflamatória localizada em que as glândulas meibomianas são secundariamente inflamadas de modo irregular a partir de uma blefarite da borda da pálpebra anterior.

[0053] A sensibilidade da córnea prejudicada muitas vezes ocorre após cirurgia refrativa, tal como a ceratectomia fotorrefrativa, ceratomi- leuse do sub-epitélio assistida por laser (LASEK), EPI-LASEK, ablação sem contato transepitelial personalizada, ou outros procedimentos em que os nervos da córnea são cortados. A sensibilidade da córnea prejudicada também pode ocorrer após a infecção viral, tal como pelos vírus HSV-1, HSV-2 e VZV. Os pacientes com sensibilidade da córnea prejudicada muitas vezes se queixam de que sentem seus olhos secar, mesmo embora a produção e evaporação de lágrimas possam ser normais, sugerindo que a "secura" em tais pacientes é na verdade uma forma de neuropatia da córnea que resulta quando os nervos da córnea são cortados por cirurgia ou inflamados após a infecção viral.

[0054] A conjuntivite alérgica é uma inflamação da conjuntiva que resulta da hipersensibilidade a um ou mais alérgenos. Pode ser aguda, intermitente ou crônica. Ela ocorre sazonalmente, isto é, em apenas determinados períodos do ano, ou ocorre permanentemente, isto é, cronicamente ao longo do ano. Os sintomas da conjuntivite alérgica sazonal e perene incluem, além da inflamação da conjuntiva, lacrima- ção, dilaceramento, dilatação vascular da conjuntiva, coceira, hiperpla- sia papilar, quemose, edema da pálpebra e secreção do olho. A secreção pode formar uma crosta sobre os olhos depois de uma noite de sono.

[0055] A ceratoconjuntivite atópica é uma forma crônica grave de conjuntivite alérgica, que muitas vezes leva à deficiência visual. Os sintomas incluem coceira, ardor, dor, vermelhidão, sensação de corpo estranho, sensibilidade à luz e visão borrada. Muitas vezes existe uma secreção, especialmente no despertar de uma noite de sono; a secreção pode ser pegajosa, viscosa e mucosa. A conjuntiva inferior é fre-quentemente mais proeminentemente afetada do que a conjuntiva su-perior. A conjuntiva pode variar de pálida, edematosa e sem traços ca-racterísticos para ter as características de doença avançada, incluindo hipertrofia papilar, fibrose subepitelial, escorço formix, triquíase, entró- pio, e madurose. Em alguns pacientes, a doença progride para erosões epiteliais pontilhadas, neovascularização da córnea, e outros aspectos de ceratopatia que pode prejudicar a visão. Existe tipicamente a proliferação de células caliciformes na conjuntiva, formação pseudotubular epitelial, e um aumento do número de eosinófilos e mastócitos degranuladores no epitélio. Os linfócitos CD25+T, macrófagos e células dendríticas (HLA-DR.sup.+, HLA-CD1+) são significativamente elevados na própria substância.

[0056] Como a ceratoconjuntivite atópica, a ceratoconjuntivite vernal é uma forma grave de conjuntivite alérgica, mas tende a afetar a conjuntiva superior de forma mais proeminente do que a inferior. Ela ocorre em duas formas. Na forma palpebral, as papilas quadradas, rígidas, achatadas e rigorosamente comprimidas estão presentes; na forma bulbar (limbo), a conjuntiva da periférica da córnea torna-se hipertrofiada e acinzentada. Ambas as formas são frequentemente acompanhadas por uma descarga de muco. A perda de epitélio da córnea pode ocorrer acompanhada de dor e fotofobia, como pode as placas da córnea central e os pontos de Trantas.

EXEMPLOS

[0057] A invenção é ainda ilustrada pelos seguintes exemplos.

Exemplo 1

[0058] Os inventores prepararam as seguintes composições: Tabela 1 - Formulações de ciclosporina A preparadas no Exemplo 1

[0059] As formulações da Tabela 1 foram preparadas pelo seguinte processo: 1. Preparação de nanossuspensões concentradas de ciclosporina A a. A ciclosporina A foi misturada com um veículo apropriado para formar uma suspensão. A concentração de ciclosporina A nesta suspensão está na faixa de 1 a 10 %. b. A suspensão de ciclosporina A foi triturada utilizando um homogeneizador de alta pressão (um Microfluidizer®, fabricado pela Microfluidics, Newton, MA) ou um moinho de bolas para obter nanos- suspensões tais que d90 < 11Jm. c. Os veículos utilizados para a preparação de concentrado de nanossuspensão são como listados na Tabela 1. Preparação do produto final a. As nanossuspensões concentradas preparadas na Etapa 1 foram diluídas em veículos adequados com relação à dosagem oftálmica para obter o produto final na intensidade de dose requerida de ciclosporina A. Os veículos adequados para diluição podem conter tampões, estabilizantes, agentes de formação de gel e/ou diluição para obter as formulações finais com a concentração desejada de CsA. b. As composições de formulações de nanossuspen- são preparadas após a diluição dos concentrados de nanossuspensão são listadas na Tabela 2.

[0060] A distribuição do tamanho de partícula das diferentes Formulações é mostrada nas Figuras 1, 2 e 3.

[0061] A Figura 1 mostra a distribuição do tamanho de partícula das nanossuspensões da forma 2 de ciclosporina A preparadas usando um homogeneizador de alta pressão em comparação com as suspensões antes da trituração.

[0062] A Figura 2 compara a distribuição do tamanho de partícula das nanossuspensões da forma 2 de ciclosporina A preparadas utilizando diferentes tensoativos e estabilizantes.

[0063] A Figura 3 mostra a distribuição do tamanho de partícula da formulação diluída no veículo contendo Na CMC (tabela 2, veículo A). Observar que nenhuma alteração no tamanho de partícula é vista nas Formulações diluídas durante 2 semanas em comparação com o con-centrado de nanossuspensão.

[0064] O tamanho médio de partícula da Forma 3 de ciclosporina A é mostrado na Figura 4. A forma 2 de ciclosporina A forma uma na- nossuspensão (tamanho de partícula < 1 m) enquanto que a Forma 3 não forma.

[0065] Estas experiências mostram que a Forma 2 consistentemente produziu nanossuspensões com menor tamanho de partícula do que qualquer outra forma cristalina de CsA. O menor tamanho de partícula das nanossuspensões de Forma 2 é uma vantagem sobre as outras formas; entre outras razões, espera-se que apresente biodispo- nibilidade mais elevada devido à maior área superficial para dissolução e retenção mais loga no olho, assim como estabilidade física melhorada. Exemplo 2

[0066] Os inventores prepararam as nanossuspensões de ciclos- porina A listadas na Tabela 2 abaixo. Tabela 2 - Formulações de ciclosporina A preparadas no Exemplo 2

[0067] Os inventores administraram as formulações acima em coelhos fêmeas NZW (dois coelhos totais, uma formulação por olho) em uma dose tópica única. Os resultados são resumidos nas Figuras 5-13. Eles mostram que a formulação B1 libera uma dose 5 vezes mais bai- xa de ciclosporina A (0,01 % versus 0,05 %), mas mantém a exposição da córnea comparável em 0,05 % de Restasis® assim como melhora a liberação na conjuntiva bulbar e palpebral.

Claims

1. Formulação caracterizada pelo fato de que compreende uma forma 2 de ciclosporina A, e um veículo, em que o veículo compreende um, dois, três, quatro, cinco ou seis tensoativos, cada um selecionado do grupo consistindo de monooletato de sorbitano polioxietileno (20) em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), hidroxiestearato de polietileno glicol 660 em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), estearato Myrj 52 de polioxietileno (40) em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), pluronic F68 em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), monolaurato de sorbitano polioxietileno em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v) e glicolato de sódio em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v).

2. Formulação, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o veículo compreende um, dois, três ou quatro estabilizantes, cada um selecionado do grupo que consiste de hidroxipropil celulose em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), hidroxipropilmetil celulose em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), hidroxietilcelulose em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), e polivinil pirrolidona em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v), e carboximetilcelulose em uma concentração de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % (p/v).

3. Formulação, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o veículo ainda compreende um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito ou nove ingredientes selecionados de glicerina na concentração de cerca de 1,0 % a cerca de 2,2 %, manitol na concentração ao redor de 0,5 %, Pemulen TR-2 na concentração de cerca de 0,01 % a cerca de 0,1 %, citrato diidratado de sódio na concentração ao redor de 0,4 %, cloreto de potássio na concentração ao redor de 0,14 %, ácido bórico na concentração ao redor de 0,25 %, borato decaidratado de sódio na concentração ao redor de 0,41 %, e água.

4. Método de preparação de uma formulação de ciclosporina, o método caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de misturar a forma 2 de ciclosporina A com um veículo; e triturar a suspensão formada.

5. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a suspensão é triturada entre 10 minutos e 120 minutos.

6. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que a suspensão é triturada durante 60 minutos.

7. Formulação caracterizada pelo fato de que compreende partículas da forma 2 de ciclosporina A; e um veículo, em que o tamanho médio (d90) das partículas é menor do que 10 μm.

8. Formulação, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o tamanho médio das partículas é menor do que 1 μm.

9. Uso da forma 2 de ciclosporina A, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, o uso caracterizado pelo fato de ser na preparação de uma formulação para tratar uma condição selecionada de olho seco, blefarite, doença da glândula meibomiana, sensibilidade da córnea prejudicada, conjuntivite alérgica, ceratoconjuntivite atópica, ceratoconjuntivite vernal e pterígio.