CN101484138A - 难溶性药用活性成分的纳米乳液和制备该乳液的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供用于制备难溶性活性药用成分的纳米粒子的新的三相法。

Description

难溶性药用活性成分的纳米乳液和制备该乳液的方法

相关申请的交互参考

本申请要求2006年3月7日提交的美国临时申请号60/779,420和2006年8月14日提交的美国临时申请号60/837,294的优先权，其内容通过全文引用结合于本文。

发明领域

本发明涉及制备纳米结构的活性药用成分的方法、由新方法制备的组合物以及使用该组合物的方法。

发明背景

A.药用组合物

使活性药用成分轻松传递是开发治疗产品和试图使治疗产品商业化的制药公司面临的关键问题。例如，将易于溶于水的活性药用成分(API)配制成适宜的剂型并不难。然而，将难溶于水的治疗药物配制成适宜的剂型却构成重要的挑战。这是因为人体是以水为基础的系统；因此，为了产生治疗活性的条件，在给药后药物必须溶解。

某些难溶于水的API永远不会商业化，原因是它们不能被有效溶解，因此不能表现出体内可接受的治疗活性。或者，需要给予的、达到可接受的治疗活性水平的难溶于水的API的量可能太大，结果药物的水溶解度差而导致不可接受的毒性。即使将API配制成液体，其中API被溶解于溶剂中，这样的剂型有时仍然不是最佳的。例如，这样的剂型可具有不可预知的性质或产生不需要的副作用。这样溶剂的实例是

(乳浮)，其用于溶解活性药物诸如紫杉醇。然而，在某些患者中，

(乳浮)引起导致死亡的严重不利的过敏反应。

存在用于提高API的溶解度的在先技术。例如，可降低API的粒度，因此增加API的暴露表面积，导致更大的水溶性。此外，已知小颗粒，如，微米或更小，可比较大的颗粒更易于穿过皮肤边界。一个用于降低粒度的在先方法是湿磨法。该方法需要用在API难溶的介质，诸如水中的硬玻璃、瓷器、陶瓷(包括氧化锆和硅酸锆)、聚合体树脂或其它适宜的物质制造的珠碾磨API。API被用物理方法转化为更小的颗粒，维持悬浮于碾磨媒介中。然后通过诸如过滤或离心方法可从碾磨媒介中分离产生的微米-或纳米-大小的API颗粒，并配制成适当的剂型。参见美国专利号5,145,684的“表面修饰的药物纳米颗粒”；两者均是关于“碾磨药用物质的方法”的美国专利号5,518,187和5,862,999，以及美国专利号5,718,388的“碾磨药用物质的持续方法”。API在其中研磨的介质典型地包含一个或更多个对API起表面稳定剂功能的化合物。所述表面稳定剂吸附在API表面上并且起着使API粒度增长的原子空间排列和/或静电障碍的作用。

因此，常规的湿磨法技术产生“双-相”系统，其中稳定的API纳米颗粒悬浮于液体或水性介质中。然而，API的湿磨法有缺陷，主要是此方法的成本。用于采用湿磨法将难溶于水的API配制成为纳米微粒化组合物而增加的成本是可抑制的。另外，湿磨法技术并不能很好地适于加工非晶质的或半-非晶质的API的颗粒。

制备纳米微粒化的活性药物组合物其它已知的方法，包括沉淀法、匀浆法和超临界流体法。微沉淀法(Microprecipitaion)是制备难溶性API的稳定的分散体的方法。这样的方法包含使API溶解于溶剂中，随后使API从溶液中沉淀析出。匀浆法(Homogenization)是不使用磨细或碾磨介质的技术。液体介质中的API使推进的生产液流组成加工区，在

(微型流化床)(Microfluidics，Inc.)中，其被称为互作用腔(Interaction Chamber)。互作用腔的几何形状产生强劲的、引起粒度降低的剪切力(sheer)、冲击力(impaction)和气穴现象(cavitation)。美国专利号5,510,118涉及使用

(微型流化床)而导致纳米微粒化活性药物颗粒的双-相加工过程。最后，制备纳米微粒化API组合物的超临界流体法包括将API溶解于溶液中。然后将该溶液和超临界流体共同导入颗粒形成容器中。控制温度和压力，这样，通过超临界流体的作用，同时充分产生媒介物的分散体和提取物。制备纳米颗粒的已知的超临界方法的实例包括国际专利申请号WO97/144407和美国专利号6,406,718。

B.有关透皮剂型的背景

对于小的微粒化药物，存在透皮应用的问题。药物的小颗粒典型地仅提供小量的药物，并且因此可限制它们的使用。此外，不是所有药物都可被配制成小的微粒化药物剂型，因为典型地这样的剂型仅适宜于难溶于水的药物。参见如，美国专利号5,145,684。然而，比较大的颗粒在透过皮肤屏障碍扩散时可更麻烦。

透皮药物传递使得药物控制释放进入患者而不直接侵入患者身体。这种无痛临床技术可以被动和持续的方式，在几个小时、几天或几个星期内方便和有效地传递药物剂量进入和通过患者的皮肤。可将透皮贴剂置于基本上是皮肤的任何地方，诸如衣服下，并且因此可为考虑周到的(discreet)和在化妆上是优雅的。它的易于使用也增加患者的给药依从性。例如，个人不必坚持严格的口服给药方案，并且不必进行常规的注射或经过诊所实施这样的治疗。还有，通过直接传递药物进血流，仅需要最小有效量的药物，这可帮助减少潜在的副作用。此外，通过直接传递药物进入皮肤和血流，透皮-传递的药物绕过胃肠道，因而消除了可降低或破坏药物生物活性的首过肝脏代谢作用。

透皮传递还造成血流中的药物的稳定水平并且帮助改善药物功效。依赖于用于配制药物的多种成分，以及贴剂技术现状，诸如其设计和粘附质量，可精确操纵药物的释放速率。从而，通过在皮肤上应用不同类型的粘胶贴剂，在推荐的时程内给予个体或多或少，或者相同量的药物。因为这些优点，透皮配方药物往往被认为是比传统的药物传递系统，诸如注射剂和口服-给药片剂更合意的。确实，药物行业创造了用于芬太尼、硝酸甘油、雌二醇、炔雌醇、乙酸炔诺酮、睾酮、可乐定、尼古丁、利多卡因、丙胺卡因、奥昔布宁和东莨菪碱的贴剂，以及含炔雌醇和诺孕曲明(norelgestromin)的避孕药贴剂。2001年美国透皮贴剂市场接近12亿美元并且预期于2008年前在全球增加到130亿美元(Cleary，GW，2004.透皮和透皮样传递系统机会：今天和未来，药物传递技术(Drug Delivery Technology)，3(5).)。

术语“透皮”和“贴剂”意味着用于传递药物进入患者体内的有限类型的机制。事实上，有关用于透皮传递的透皮装置类型的前景变化多样。例如，存在多种贴剂设计，其包括，例如，基质型压敏胶药物(drug-in-adhesive)贴剂、基质型压敏胶多层药物贴剂、显微结构系统、储库配药器(reservoir dispenser)系统、膜、渗透增强剂技术、水凝胶、凝胶、微乳液和成膜聚合物。

即使透皮剂型在患者依从性和其它因素方面是合意的，本领域存在如何将药物配制成透皮剂型的问题。例如，现在不可能将所有药物、生物化合物和治疗用蛋白质配制成用于透皮传递。药物的溶解度、物理化学特性和生物利用度可极大地影响其被配制成适当的透皮组合物的可能性。

此外，即使可将药物配制成透皮剂型，皮肤自身常常是个屏障，限制可从透皮装置被动扩散和穿过皮肤的药物的数量和类型。此并不意指透皮剂型是不可修饰的。确实，在对抗对被动扩散的依赖时，强力驱使药物穿过皮肤屏障是可能的。例如，帮助增加皮肤渗透的技术包括电离子导入(ionotophoresis)，其采用低压电流使得荷电药物颗粒穿过皮肤，和超声导入，其采用低频率超声能量用于相同的目的。另一个相当新的技术包括使用针的显微结构阵列，如，当应用贴剂时，在皮肤上无痛产生微孔而不流血的微型针。新产生的孔的大小可典型地提供对于更多的传统透皮技术而言不能被适宜制备的药物。

甚至用不同装置的实用性，可将药物再配制，以增强其透皮传递的适应性，不论该装置是否是最有效的。确实，使活性药物容易传递是开发用于透皮以及常规给药的治疗产品和使所述产品商业化的所有制药公司面临的关键问题。例如，易于溶于水的活性药用成分(API)，并不难于配制成适宜的剂型。然而，将难溶于水的API配制成适宜的剂型形成重要的挑战。这是因为人体是以水为基础的系统；因此，为了产生治疗活性的条件，在给药后药物必须溶解。

某些难溶于水的API永远不会被商业化，原因是API不能有效溶解，因此不能表现出体内可接受的治疗活性。或者，需要给予的达到可接受的治疗活性水平的难溶于水的API的量可能太大，结果药物的水溶解度差而导致不可接受的毒性。即使将API配制成液体，其中API溶解于溶剂中，这样的剂型有时表现仍然是欠佳的。例如，这样剂型可具有不可预知的性质或产生不需要的副作用。这样的溶剂的实例是(乳浮)，其用于溶解活性药物诸如紫杉醇。然而，在某些患者中，

(乳浮)引起导致死亡的严重不利的过敏反应。

本领域需要一种经济合算的方法，将难溶于水的和溶于水的API配制成表现最佳体内效应的适宜剂型。本发明满足这些需求。此外，本领域因此需要一种经济合算的方法，将难溶于水的和溶于水的API配制成表现最佳体内效应的透皮传递剂型。本发明满足这些需求。

发明简述

本发明的一个方面涉及独特的活性药用成分纳米结构的制剂，其包含(1)胶束组分，(2)水醇(hydro-alcoholic)组分，如，水和易与水混溶的溶剂的混合物，(3)水包油乳液小滴组分和(4)固体颗粒组分。任何或所有这些组分可包含需要的活性药用成分。因而，所述活性药用成分可呈溶液，如在组分1至3中表示的那样，或可呈有沉淀的悬浮液形式，如同组分4的情况。

本发明的另一个方面涉及药用组合物，其包含：(1)至少一种活性药用成分，(2)至少一种溶剂，(3)至少一种油，(4)至少一种表面活性剂和(5)水。所述活性药用成分可以以(a)固体纳米微粒化状态；(b)固体微米微粒化(microparticulate)状态；(c)溶解的；或(d)其任何组合的形式存在。在本发明的另一个实施方案中，所述组合物适宜于透皮传递。在本发明的还一个实施方案中，适宜于透皮传递的组合物具备储库的作用。

本发明的另一个方面涉及适宜于局部应用，诸如经由眼部、粘膜、耳、皮肤、口颊、吸入等应用的本发明药用组合物。

在一个实施方案中，描述了含巨大分子，如，具有分子量大于约500Da的分子的药用组合物。这样的化合物的实例是环孢菌素。在本发明的还一个实施方案中，这样的药用制剂可经或者局部或者透皮传递至患者。

在本发明的另一个实施方案中，双相和三相药用组合物或乳液适于包括高度溶解于水和油两者的亲水性药物的局部应用。如本文定义的，“可溶解的”药物在水或另一个介质中具有高于约10mg/mL，高于约20mg/mL或高于约30mg/mL的溶解度。

在一个实施方案中，当将组合物施用于皮肤，则溶解形式的药物运行穿过皮肤并进入较深的皮层，诸如进入真皮。其它组分，诸如胶束、油部分和/或微粒化药物本身可典型地定位于皮肤层的角质层。依赖于多种物理和化学性质，某些化合物自身可定位于表皮层和真皮层的不同层，其它的则可直接穿过皮肤。

这种复方制剂(composite formulation)避免了不得不与通过别的方式必须引起活性药用成分的透皮渗透的化学渗透促进剂的掺合。

在本发明的一个实施方案中，本发明药用组合物具有抗微生物性质。

在还一个实施方案中，本发明药用组合物包含抗病毒化合物。这样的抗病毒化合物的实例是阿昔洛韦。

在本发明的一个实施方案中，本发明药用组合物包含用于缓解与下列病症相关的症状的化合物：终年的和季节性的过敏性鼻炎；血管收缩性鼻炎；过敏性结膜炎；温和的、无合并症的荨麻疹和血管性水肿；或改善对血液或血浆的过敏反应；或皮肤划痕症(dermatographism)或作为过敏性反应的辅助疗法。这样的化合物的实例包括，但不限于氯雷他定、地氯雷他定和西替利嗪。

在一个实施方案中，活性药用成分是阿昔洛韦、环孢菌素、纳曲酮、阿仑膦酸、西替利嗪、尼古丁、睾酮、黄体酮或雌二醇。

在另一个实施方案中，包含油珠(globules ofoil)的组合物包括溶解的活性药用成分。所述珠可具有小于约2微米的直径。在本发明的其它实施方案中，所述油珠可具有更小的直径。在另一个实施方案中，所述油是大豆油、角鲨烷、三辛酸甘油酯或矿物油(轻质的)。

在一个实施方案中，所述溶剂是醇或N-甲基吡咯烷酮。

在本发明的另一个实施方案中，提供热稳定的胶束纳米颗粒和/或微米颗粒药物组合物，并且因此经受热灭菌。胶束纳米颗粒具有相当的粘性，并且不能采用无菌过滤装置，诸如使用0.2微米滤器的过滤，轻易地灭菌。然而，终端热灭菌是使这样的药用组合物灭菌的合意的方法。问题是，典型地，胶束纳米颗粒制剂在升高的温度如，在高于50℃的温度下，是不稳定的。并且因此不能轻易使用高压灭菌。令人惊讶地，热灭菌后，本发明组合物维持其化学稳定性、物理稳定性或化学和物理稳定性的组合。

在本发明的另一个方面，提供用于制备活性药用成分颗粒的方法，其包括(a)将活性药用成分加至油、溶剂、稳定剂和水的混合物中，形成乳液基质，其中的活性药用成分难溶于油、溶剂和水，(b)使乳液基质匀浆化和(c)研磨匀浆的混合物，形成活性药用成分颗粒。

本发明另一个方面涉及制备活性药用成分(API)颗粒的方法，其包括：(1)通过将API悬浮于(i)非-溶混的液体，(ii)溶剂和(iii)水或缓冲液的混合物中，形成乳液基质，和(2)匀浆化或剧烈搅拌乳液基质，其中生成的组合物是悬浮于乳液小滴中的API颗粒和于介质中的空间稳定的微晶的或纳米微粒化API的混合物。在一个实施方案中，API的直径小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米或小于约1微米大小。在另一个实施方案中，API是阿昔洛韦、环孢菌素、纳曲酮、阿仑膦酸、西替利嗪、尼古丁、睾酮、黄体酮或雌二醇。

本发明的另一个方面涉及制备活性药用成分(API)颗粒的方法，其包括(1)使API溶解于(i)油，(ii)溶剂和(iii)稳定剂的混合物中，形成乳液预混物，(2)向该乳液预混物中加入水或缓冲液，和(3)匀浆化或剧烈搅拌该混合物，由此将API沉淀为颗粒。在一个实施方案中，API的直径小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米或小于约1微米。在另一个实施方案中，API是阿昔洛韦、环孢菌素、纳曲酮、阿仑膦酸、西替利嗪、尼古丁、睾酮、黄体酮或雌二醇。

在还一个实施方案中，所述活性药用成分选自，但不限于非诺贝特、雌二醇、阿仑膦酸、阿昔洛韦、紫杉醇和环孢菌素。在一个实施方案中，所述油选自，但不限于杏仁油(甜的)、苦杏仁油、琉璃苣油、芥花油、椰子油、玉米油、棉籽油、鱼油、霍霍巴豆油、猪油、亚麻籽油(熟的)、澳大利亚坚果油(Macadamia nut oil)、中链甘油三酯、矿物油、橄榄油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油、角鲨烯、向日葵籽油、三辛酸甘油酯(1，2，3-三辛酰基甘油)和麦芽油。在一个实施方案中，所述溶剂选自，但不限于十四酸异丙酯、乙酸甘油酯、N-甲基吡咯烷酮、脂族醇和芳族醇、聚乙二醇和丙二醇。其它有用溶剂的实例是长链醇类。乙醇仍然是可用于本发明的醇的另一个实例。

在还一个实施方案中，所述稳定剂选自，但不限于脱水山梨醇酯、甘油酯、聚乙二醇酯、嵌段共聚物、丙烯酸聚合物(诸如Pemulen)、乙氧基化脂肪酸酯(诸如聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油)、乙氧基化醇(诸如苄泽(Brij))、乙氧基化脂肪酸(诸如吐温(Tween))、甘油一酸酯、硅基表面活性剂和聚山梨酯。最后，在另一个实施方案中，脱水山梨醇酯稳定剂是司盘和阿拉索(Arlacel)，其中的甘油酯是单硬脂酸甘油酯，其中的聚乙二醇酯是聚乙二醇硬脂酸酯，其中的嵌段共聚物是普流罗尼克，其中的丙烯酸聚合物是Pemulen，其中的乙氧基化脂肪酸酯是聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油，其中的乙氧基化醇是苄泽和其中的乙氧基化脂肪酸是吐温20。

在另一个实施方案中，匀浆步骤是经由在1,000至40,000psi的高压系统下实施的。

在一个实施方案中，所述活性药用成分颗粒、包含API的小滴或其组合具有的平均粒度小于约10微米。在本发明的其它实施方案中，所述活性药用成分颗粒、包含API的小滴或其组合具有小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2900nm，小于约2800nm，小于约2700nm，小于约2600nm，小于约2500nm，小于约2400nm，小于约2300nm，小于约2200nm，小于约2100nm，小于约2000nm，小于约1900nm，小于约1800nm，小于约1700nm，小于约1600nm，小于约1500nm，小于约1400nm，小于约1300nm，小于约1200nm，小于约1100nm，小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约200nm或小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm的平均粒度。在一个实施方案中，所述活性药用成分颗粒、包含API的小滴或其组合具有直径小于约3微米的平均粒度。

本发明的另一个方面涉及制备活性药用成分颗粒的方法，其包括(a)将活性药用成分加至油、溶剂和稳定剂的混合物中，形成乳液基质，其中所述活性药用成分溶于油和溶剂之一或两者，但不溶于水，(b)加水至乳液基质中，(c)使该混合物匀浆化，和(d)研磨匀浆的混合物，形成活性药用成分颗粒。

在本发明另一个方面，提供制备非诺贝特颗粒的方法，其包括(a)使适宜量的非诺贝特溶解于N-甲基-吡咯烷酮中形成溶液，(b)将中链甘油三酯加至该溶液中，(c)将溶解于水的普流罗尼克加至该溶液中，(c)混合该溶液，和(d)使溶液经高压匀浆处理，产生非诺贝特颗粒。

本发明另一个方面涉及给予患者活性药用成分的方法，其包括向患者施用包含下列的组合物：(1)至少一种活性药用成分，(2)至少一种溶剂，(3)至少一种油，(4)至少一种表面活性剂和(5)水，其中所述活性药用成分既呈固体纳米微粒化状态又呈溶解状态。在一个实施方案中，将所述组合物作为局部用霜剂施用患者皮肤上。在另一个实施方案中，透皮贴剂包含所述组合物，并且将该贴剂置于与患者的皮肤接触之处。

之前的一般描述和之后的详细描述均为示范性的和说明性的，并且意欲对所要求保护的本发明提供进一步的解释。其它的目标、优点和新颖的特性将通过以下对本发明的详细阐述易于为本领域技术人员所明白。

图的简述

图1：显示原料非诺贝特的粒度分布，平均粒度为57μm。

图2：显示采用本发明方法降低粒度后的非诺贝特的粒度分布，平均非诺贝特纳米乳液小滴大小为60nm(在乳液小滴内)，并且制备的100％的非诺贝特颗粒尺寸小于3μm。

图3：显示原料阿昔洛韦的粒度分布，平均纳米乳液小滴阿昔洛韦粒度为54μm。

图4：显示采用本发明方法降低粒度后的阿昔洛韦粒度分布，平均纳米乳液小滴阿昔洛韦大小为132nm，并且100％的阿昔洛韦颗粒尺寸小于3μm。

图5：显示与常规的、同一药物，

的非纳米微粒化市售乳膏制剂比较，随时间透皮传递依据本发明制备的两种不同的纳米微粒化阿昔洛韦组合物(组合物IV和VI)而释放的平均累计浓度(μg/sq.cm)。

图6：显示局部和透皮传递阿昔洛韦的结果。括号中的值表示药物经过尸体皮(如，天然或人工膜)的流速。

图7：显示经过尸体皮(如，天然或人工膜)以确定溶剂变化对雌二醇释放的作用的体外释放研究的结果。括号中的值表示药物穿过膜的流速。

图8：显示经过尸体皮(如，天然或人工膜)以确定固体晶体雌二醇的作用的体外释放研究的结果。括号中的值表示药物穿过膜的流速。

图9：显示阿昔洛韦的粒度分布(含N-甲基吡咯烷酮的制剂)。

图10：显示阿昔洛韦的粒度分布(含乙醇的制剂)。

图11：显示环孢菌素的粒度分布。

图12：显示证明油的变化对雌二醇释放的作用的体内数据。

图13：显示关于兔中血液西替利嗪水平随时间变化的体内数据。

图14：显示关于兔中血液尼古丁水平随时间变化的体内数据。

图15：显示兔中盐酸纳曲酮透皮传递的分布图。

发明详述

A.发明概况

本发明涉及包含活性药用成分(API)的药用剂型，诸如但不限于透皮和局部剂型或透皮药物传递系统，和制备及使用所述药物剂型的方法。在本发明的一个实施方案中，可将本发明的API的制剂整合进透皮药物传递系统，诸如霜剂、软膏剂、贴剂等中，并将其施用于患者皮肤以局部和全身传递API。

可将本发明组合物配制成任何适宜的剂型。作为例证的药用剂型包括，但不限于：(1)用于选自下列的给药途径的剂型：口服、经肺部、静脉、直肠、耳、眼、结肠、胃肠外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部、口颊、鼻，和局部给药；(2)选自液体分散剂、凝胶剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、片剂、散剂(sachets)和胶囊剂的剂型；(3)选自冻干制剂、速融型(fast melt)制剂、控制释放制剂、延迟释放制剂、持续释放制剂、脉冲释放制剂以及即释和控释混合制剂的剂型；或(4)以上剂型的任何组合。

本发明的一个方面涉及药用组合物，其包含：(1)至少一种活性药用成分，(2)至少一种溶剂，(3)至少一种油，(4)至少一种表面活性剂和(5)水。所述活性药用成分可以以(a)固体纳米微粒化状态；(b)固体微米微粒化状态；(c)溶解的；或(d)其任何组合的形式存在。在本发明的另一个实施方案中，所述组合物适宜于透皮传递。在本发明的还一个实施方案中，适宜于透皮传递的组合物提供储库作用。

本发明的另一个方面涉及适宜局部应用的本发明的药用组合物，例如经眼、粘膜、耳、皮肤、口颊、吸入等应用。

在本发明的另一个实施方案中，本发明的双相和三相药用组合物或乳液适宜于亲水性药物，包括高度溶解于水和油两者的药物的局部应用。如本文定义的，“可溶解的”药物在水或另一种介质中具有的溶解度高于约10mg/mL，高于约20mg/mL或高于约30mg/mL。

在本发明的一个实施方案中，本发明药用组合物包含化合物，所述化合物用于缓解与下列病症相关的症状：终年的和季节性的过敏性鼻炎；血管收缩性鼻炎；过敏性结膜炎；温和的、无合并症的荨麻疹和血管性水肿；或改善对血液或血浆的过敏反应；或皮肤划痕症或作为过敏性反应的辅助疗法。这样的化合物的实例包括，但不限于氯雷他定、地氯雷他定和西替利嗪。

将要用在药用剂型中的组合物可为包含亲脂相、水或缓冲液和微粒化API的三相组合物。该组合物也可包含具有至少一种油的油相、至少一种溶剂和API的表面稳定剂。

本发明包括制备包含亲脂相、水或缓冲液和微粒化API的三相组合物的方法。本发明也包括包含具有至少一种油的油相、至少一种溶剂和API的表面稳定剂的组合物。在此描述了两个特别的制备本发明组合物的方法。在第一个方法(“路径I”)中，在乳液基质研磨API。该方法需要的是，API在油相/亲脂相和水或缓冲液的所有相中是难溶的或不溶的。在第二个方法(“路径II”)中，观察到在乳液基质中同时研磨和沉淀API。第二个方法需要的是，API溶解或部分溶解于乳液基质的一个或更多个相；如，API溶于油、溶剂，或者水或缓冲液。

与在先技术方法，诸如湿磨法相比，本发明的方法的一个好处是，该方法可适用于水溶性API以及水难溶性API。本发明方法的另一个好处是，其不需要碾磨介质或专门的碾磨工艺或设备。使用这样的碾磨介质可增加成本和使API的粒度降低过程复杂化。另外，不同于湿磨法技术，本发明的方法可适合非晶质的或半-非晶质的API。

对于路径I，首先将API悬浮于不-溶混的液体，诸如油、溶剂、水或缓冲液的混合物中，以形成乳液基质，随后匀浆化或剧烈搅拌乳液基质。使用往复注射仪器、连续流仪器或高速混合设备可产生纳米颗粒。产生高剪切力和气穴现象的高速匀浆或剧烈搅拌是优选的。高速剪切方法是优选的，而低速剪切方法可导致比较大的API粒度。生成的组合物是悬浮于乳液小滴(纳米乳液部分)的API和于介质中的空间稳定的微米-/纳米-结晶的API的复合的混合物。此三相系统包括微粒化药物、油和水或缓冲液。得到的微米/纳米微粒化API具有小于约3微米的平均粒度。如下所述，也可得到比较小的微粒化API。

可通过加入更多的不-溶混的液体，使API从油小滴中沉淀析出。典型地，沉淀的API具有小于约3微米的平均粒度。如果需要，可通过掺入表面活性剂或乳化剂，如，“表面稳定剂”，防止API颗粒聚集或结块。

路径II适用于溶于至少一部分乳液基质，诸如溶剂的API。对于路径II，使API溶于油、溶剂和稳定剂的混合物中，形成乳液预混物。如果不将水或缓冲液加至该混合物中，将API保持溶解的形式。一旦加入水或缓冲液和施用剪切力，则API沉淀为平均粒度小于约3微米的微米/纳米颗粒。使用往复注射仪器、连续流仪器或高速混合设备可产生纳米颗粒。高能量输出，通过高速匀浆或剧烈搅拌是优选的方法。高能量加工降低乳液小滴的尺寸，因此使大的表面积暴露于周围的水环境中。高剪切方法是优选的，而低剪切方法可导致比较大的粒度。此后使之前包纳于乳液基质中的纳米微粒化API沉淀。终产物包含在溶液中的API和微粒化混悬液(两者均分布于溶剂、油和水或缓冲液之中)。纳米微粒化API具有至少一种与其表面缔合(associated)的表面稳定剂。

难溶于水但溶于另一种液体的API的实例，包括溶于乙醇的雌二醇，和游离地溶于1-甲基-2-吡咯烷酮或N-甲基-吡咯烷酮[NMP]、稍微溶于油和稳定剂以及不溶于水的非诺贝特。

如果需要，可使采用路径I或路径II制备的与水溶混的油小滴和API纳米颗粒通过0.2或0.45微米滤器过滤。可通过简单增加水容量、减少油-稳定剂-溶剂含量或减弱形成油小滴中的剪切力的方法，产生比较大的油小滴和/或API颗粒。

对于用于路径I或路径II中的乳液基质，油:稳定剂:溶剂的优选比例分别为基于重量与重量比计算的约23:约5:约4。优选的含油相与水或缓冲液的比例分别为约2:约1。依据本发明，油的比例可为约10至约30份；溶剂的比例可为约0.5至约10份；稳定剂的比例可为约1至约8份，而水可为约20至约80％(w/w)。

B.定义

本文使用如下提出的并且贯穿该申请的几个定义来描述本发明。

如本文使用的“约”应被本领域普通技术人员理解，并且根据其所使用的上下文在一定范围内变化。如果在使用该术语的上下文中给出本领域普通技术人员不甚明了的术语使用时，则“约”应指具体术语的直至增加或减少10％。

如本文使用的词组“难溶于水的药物”指在水中具有小于约30mg/mL，小于约20mg/mL，小于约10mg/mL，小于约1mg/mL，小于约0.1mg/mL，小于约0.01mg/mL或小于约0.001mg/mL的溶解度的药物。

如本文使用的词组“可溶性药物”在水或另一种介质中具有选自高于约10mg/mL，高于约20mg/mL和高于约30mg/mL的溶解度的药物。

如本文使用的词组“有效治疗量”应指在大量的需要这样的治疗的患者中给予药物以提供特定药理学反应的药物剂量。应该强调的是，在具体情况下给予具体患者的药物的有效治疗量，在治疗本文描述的病症/疾病中将不总是有效的，即使这样的剂量被本领域技术人员认为是有效治疗的量。

C.本发明组合物的其它优选的方面

本发明的药用组合物可包含巨大分子，如，具有分子量大于约500Da的化合物。这样的化合物的实例是环孢菌素。在本发明的还一个实施方案中，这样的药用制剂可经或者局部或者透皮传递至患者。

本发明的药用组合物可包含抗病毒化合物。这样的抗病毒化合物的实例是阿昔洛韦。在本发明的另一个方面，本发明的抗病毒组合物可局部或透皮施用。

在本发明的另一个实施方案中，本发明的药用组合物具有抗菌性质。该抗菌性质可与制剂有关而与活性药物无关。作为一个实例，本文描述的制剂，在缺乏活性药物时，可表现抗菌活性。

将抗菌剂或防腐剂加至未消毒的剂型中，以保护它们避免微生物生长或避免在制备过程中或制备后由于疏忽而引进的微生物。在多剂量容器中使用的灭菌物品的情况下，加入抗菌防腐剂以抑制可由于通过重复抽取单次剂量而引进的微生物的生长。

美国食品和药品管理局指南要求，无论是产品内在的(如，对于抗生素)，或无论因为添加抗菌剂产生的抗菌效应，必须证明适于包装在多剂量容器中的所有注射剂或适于其它含抗菌防腐剂的产品。必须证明抗菌效应适于多剂量局部和口服剂型和适于其它剂型，诸如眼、耳、鼻，冲洗液和透析液。参见美国药典第25版第51节(USP 25，Section 51)“抗菌效应检验”。

将抗菌剂加至治疗剂型中可以是不需要的，因为这样的化合物可以是有毒性的，并且它们可与将要被传递的主要的活性药物产生不需要的相互作用。此外，杀微生物剂的使用可促进耐药性细菌、耐药性酵母、耐药性真菌等的产生。此已经见于广泛使用的抗菌洗剂、肥皂、清洁产品等。

近年，细菌中的抗生素抵抗已经增加，并且已经引起关注的是，由于暴露于抗生素或生物杀灭剂，细菌或其它微生物中可能发展为交叉抵抗。Rutala，W.A.，“选择和使用消毒剂的APIC指南”，AmericanJ.，24：313-342(1996)；Russell等“选择防腐剂和消毒剂用于抗生素抵抗？”J.ofMedicinal Microbiology，48：613-615(1999)。更有效的消毒剂可为非常具有刺激性和毒性的，导致健康并发症，诸如在人中的接触性皮炎和粘膜刺激。Hansen，K.S.，“医院清洁女工的职业性皮肤病”接触性皮炎，9：343-351(1983)；Beauchamp等，“戊二醛的毒理学评论”毒理学评论(Critical Reviews in Toxicology)，22：143-174(1992)。因而，随着微生物改变和抵抗菌株的产生，继续需要有效和安全的生物杀灭剂(biocidal agent)用于局部和表面消毒。

本发明涉及令人惊讶地具有抗细菌、抗真菌、抗酵母、和/或抗病毒性质的药用组合物。本发明药用组合物包含至少一种溶剂、至少一种油、至少一种表面稳定剂(也称为表面活性剂)和水性介质。所述组合物还可包含可溶解或分散于油、溶剂或水的任何一种中的一种或更多种活性药物。所述活性药物可用作，例如，药物或化妆品。不需要加入外部的抗细菌剂或防腐剂至本发明组合物中以提供抗细菌、抗酵母、抗真菌和/或抗病毒性质。此外，掺入活性药物不会削弱本发明组合物的抗菌效应。

本发明组合物符合在美国药典(USP—总论第51章)中描述的抗菌效应检验。标准的USP检验要求在以下五种微生物中进行评价：黑曲霉(Aspergillus niger)(ATCC16404)、白色念珠菌(Candida albicans)(ATCC 10231)、大肠杆菌(Escherichia coli)(ATCC 8739)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC 9027)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)(ATCC 6538)。

本发明组合物具体用在用于局部治疗感染、伤口愈合等的产品中，在除这样的组合物的活性药物的药理学性质之外，媒介物自身用作杀微生物剂。这样的组合物可能引起增效作用和降低产生耐药性微生物的可能性。此外，这样的组合物可使得使用较低剂量的活性药物成为可能。

目前，多种类型的化妆品和药用组合物需要添加抗微生物剂以阻碍微生物的生长。由于活性药物和抗微生物剂之间的潜在的相互作用，所以选择正确的抗微生物剂可能是具有挑战性的。此外，抗微生物剂可具有毒性并可引起患者的不良反应。

D.示例性的透皮药物传递系统类型

本发明构思用于本发明的几种类型的透皮药物传递系统。例如，下列任一类型的透皮药物传递系统，可包含适宜的API，包括本文公开的API乳液制剂，并且可被放置在与患者皮肤接触之处。随着时间过去，根据API的释放速率不同，API将从剂型(如局部给药)中沉积在或进入患者的皮肤，和/或溶解的形式将穿过皮肤转运和进入患者的系统，如全身传递。

透皮药物传递系统包括，但不限于(1)粘胶系统中的被动药物，(2)凝胶剂、洗剂或霜剂；(3)用热使皮肤更具渗透性和增加药物分子能量的热系统，(4)使用低压电流驱使荷电药物透过皮肤的电离子导入；(5)使用低频率超声波能量破坏角质层的超声导入；(6)致微孔作用(microporation)，其包括在角质层造成微孔的装置；(7)电穿孔，其使用高压短电脉冲在皮肤上造成暂时性水性小孔或(8)以上的任何组合。

用于本发明组合物的优选的透皮药物传递装置是局部应用的凝胶剂、洗剂、霜剂或类似的组合物。现在已批准的或正在开发的、用于经由凝胶透皮药物传递装置传递药物的实例包括，但不限于前列地尔、双氢睾酮、雌二醇和睾酮。凝胶剂/洗剂/霜剂透皮药物传递系统的一个挑战是传递较大的分子穿过皮肤屏障。

在本发明的另一个实施方案中，可配制或包装本发明的凝胶剂/霜剂/洗剂透皮药物传递系统，以提供需要的单位剂量，如计量的剂量透皮传递。

透皮贴剂包括，但不限于：(1)单层基质型压敏胶药物(drug-in-adhesive)系统，(2)多层基质型压敏胶药物系统，(3)储库系统和(4)基质系统。单层基质型压敏胶药物系统以药物内容物直接包含在与皮肤接触的压敏胶(adhesive)中为特征。在此透皮系统设计中，压敏胶不仅起使系统粘贴至皮肤的作用，而且还起着制剂的基质(foundation)的作用，以便包含药物和在单背衬薄膜下的所有赋形剂。多层基质型压敏胶药物与单层基质型压敏胶药物相似，其中药物被直接掺入压敏胶中。然而，多层包括或者夹在两个截然不同的基质型压敏胶药物层之间的另外的膜，或者在单背衬薄膜下的另外的多重基质型压敏胶药物层。储库透皮系统设计的特征是，包含药物溶液或混悬液的液体内容物腔室，其被半-透膜和压敏胶与释放里衬分离。产品中的负责皮肤粘附的压敏胶组分可或者被整合作为膜和释放里衬之间的连续的层，或呈环绕膜的同心构造。基质系统统设计的特征是，含药物溶液或混悬液的半固体基质内容物直接与释放里衬接触。负责皮肤粘附的组分被掺入覆盖层，并且形成环绕半固体基质的同心构造。

E.本发明组合物

本发明的方法可产生几种不同类型的组合物。第一种组合物包含：(1)具有小于约10微米平均粒度并与其表面缔合的至少一种表面稳定剂的纳米微粒化API；(2)水或缓冲液；和(3)包含至少一种油和任选至少一种溶剂的乳液预混物或油相或亲脂相。该组合物还可包含微晶API。所述微粒化API可以以水或缓冲液、油、溶剂或其组合的形式存在。采用路径I制备这样的组合物。

第二种组合物包含：(1)具有小于约10微米平均粒度且与其表面缔合的至少一种表面稳定剂的纳米微粒化API；(2)水或缓冲液；和(3)包含至少一种油、任选至少一种溶剂，及溶解的API的乳液预混物或油相或亲脂相。该组合物还可包含微晶API。溶解的API可以以水或缓冲液、油、溶剂或其组合的形式存在。此外，纳米微粒化API可呈现为水或缓冲液、油、溶剂或其组合。采用路径II制备这样的组合物。在本发明的又一个实施方案中，溶解的API可从乳液小滴中沉淀析出。沉淀的API的平均粒度小于约10微米。

有几个理由说明，本发明的三相组合物是有益的。第一，由路径II方法产生的制剂同时包含固体和溶解形式的同样的API。此使得所得到的药用制剂能够提供组分API的即释和控释，提供适宜API活性的快速启动并延长活性。此外，当配制适宜以霜剂或洗剂对皮肤局部应用时，例如，固体API纳米颗粒在皮肤表面可提供立即的局部治疗效应，而在乳液基质中的溶解的API穿过皮肤/细胞屏障，使得API进入身体系统。即，溶解的API快速穿过皮肤并渗透进入较深层皮肤，而固体部分不渗透进入较深的皮肤层，但是用作局部储库和作为用于提供药物进入较深皮肤层的储库。因此，包含API纳米颗粒和溶解的API两者的制剂可提供局部和全身性治疗效应。

可将以上描述的两种类型的组合物的不同组分分开和独立使用。

1.API纳米颗粒

例如，如，通过过滤或离心，可将固体API纳米颗粒与水性混悬液介质和/或乳液小滴分开。此提供获得难溶于水的或水不溶性API纳米颗粒的便利的方法。此外，当在粒度降低过程中包括稳定剂时，其阻止API纳米颗粒聚集，因而，API纳米颗粒在纳米粒度下是稳定的。如果需要，可将API纳米颗粒配制成任何适宜的剂型。可使用适宜于人使用的食品级、USP或NF级原料制备API纳米颗粒。

示例性剂型包括，但不限于液体分散剂、口服混悬剂、凝胶剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、片剂、胶囊剂、干粉剂、多颗粒剂(multiparticulates)、喷撒剂、散剂、锭剂和糖浆剂。此外，本发明的剂型包括，但不限于固体剂型、液体剂型、半-液体剂型、即释制剂、缓释制剂(modified release)、控释制剂、速融型(fast melt)制剂、冻干制剂、延迟释放制剂、持续释放制剂、脉冲释放制剂以及即释和控释混合制剂，或以上剂型的任何组合。

在本发明的一个实施方案中，可将API纳米颗粒配制成用于经肺部或鼻给药的气雾剂。该气雾剂可为干粉气雾剂或液体分散体气雾剂。本发明的气雾剂可用于局部、鼻或经肺部应用。

在本发明的另一个实施方案中，可将本发明的治疗性或诊断性纳米颗粒经血管注射入患者体内，以治疗或诊断局部或全身性疾病。也可将API纳米颗粒经血管外注射，以在注射部位提供延长效应的控制释放的纳米微粒化API，其使得多次给药的需求减至最少。

由于API纳米颗粒的平均粒度小于约3微米，与微晶API比较，该颗粒典型地更易于能够穿过吸收屏障，诸如胃肠粘膜屏障、鼻、肺、眼和阴道膜。类似地，小的API粒度能使其通过多种器官的血/组织和血/肿瘤屏障。

在本发明的一个实施方案中，API纳米颗粒是非诺贝特纳米颗粒。

2.包含API纳米颗粒和/或溶解的API的乳液小滴

也可将包含溶解的API、API纳米颗粒或其组合的乳液小滴从周围的水相或缓冲液相中分离出来并用于治疗剂型中。可使用适宜于人使用的食品级、USP或NF级原料制备乳液小滴。包含溶解的API的纳米微粒化油小滴和制备相同物质的方法，在美国专利号5,629,021(“′021号专利”，其通过引用结合于本文)中有描述。本发明的乳液小滴典型地包含(1)溶解的API、微粒化API或其组合；(2)至少一种油；(3)至少一种溶剂；和(4)至少一种表面稳定剂或表面活性剂。可通过，例如，过滤，分离包含溶解的API、微粒化API或其组合的乳液小滴。包含溶解的API的乳液小滴特别适宜为转运API穿过皮肤屏障和进入血液的载体。因此，包含溶解的API的小滴提供将API给予患者的全身给药途径。

通常，包含溶解的API、API纳米颗粒或其组合的乳液小滴包含大量的API并且其直径为约10至约1000nm，平均直径小于约1微米是优选的，最小的小滴可滤过0.2微米滤器，如此其典型地用于微生物净化。小滴中的API浓度范围可从约1％至约50％。可将乳液小滴储存于约-20和约40℃之间。在本发明的一个实施方案中，制剂中至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％或至少约90％的小滴的直径小于约1微米，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约200nm或小于约100nm。

通过改变路径I和路径II的不同参数，可修饰这样的小滴的尺寸和完整性。因此，包含溶解的API的小滴的稳定性可改变，使API能够释放，不论是作为溶液或是沉淀物。这是一个微型储库-溶解-控制系统，此处药物固体起储库作用，随着溶解的部分耗尽，更多药物进入溶液中形成微粒化储库。因而，包含溶解的API的乳液小滴能随着时间变化而控制API的释放。

包含溶解的API、API纳米颗粒或其组合的乳液小滴的小尺寸及其与组织的相容性，使它们可适用于多种用途。例如，由于其能快速渗透皮肤，乳液小滴作为局部药物传递载体是有用的。所述小滴也特别具有多种用途，其中所使用的API可为任何可悬浮或可溶解于任何水或缓冲液、油或溶剂中的API。这些性质允许该系统将与难于配制用于其它传递系统的API一起使用。

此外，可用水溶液稀释包含溶解的API、API纳米颗粒或其组合的乳液小滴而不损失其稳定性。此能使高浓度，如，最高至约30％的API得以应用于需要使用时可稀释的产品中。然而，API的浓度取决于实际药物的溶解度和用于溶解药物的溶剂的量。

在本发明的一个实施方案中，乳液小滴包含作为API的雌二醇、阿昔洛韦或睾酮并且被配制成用于透皮传递的剂型。

3.作为例证的本发明组合物

本发明的方法可制备几种不同类型的组合物以用于本发明的药用剂型中。

a.组合物1

第一个组合物包含：(1)具有直径小于约10微米的微米微粒化和/或纳米微粒化API颗粒，并任选对于纳米微粒化API而言，具有与其表面缔合的至少一种表面稳定剂；(2)水或缓冲液；和(3)包含至少一种油和任选至少一种溶剂的乳液预混物或油相或亲脂相。所述微粒化API可以以水或缓冲液、油、溶剂或其组合的形式存在。使用路径I制备这样的组合物。

b.组合物2

第二个组合物包含：(1)具有直径小于约10微米的微米微粒化和/或纳米微粒化API颗粒，并任选对于纳米微粒化API而言，具有与其表面缔合的至少一种表面稳定剂；(2)水或缓冲液；和(3)包含至少一种油，任选至少一种溶剂和溶解的API的乳液预混物或油相或亲脂相。溶解的API可以以水或缓冲液、油、溶剂或其组合的形式存在。此外，微米微粒化和/或纳米微粒化API可呈现为水或缓冲液、油、溶剂或其组合。使用路径II制备这样的组合物。在本发明的又一个实施方案中，溶解的API可从乳液小滴中沉淀析出。沉淀的API的直径小于约10微米。在本发明的其它实施方案中，沉淀的API的直径小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米，小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的沉淀的API可具有小于以上所列的尺寸，如，小于约10微米，小于约9微米等的直径。

有几个理由说明，本发明的三相组合物是有益的。第一，由路径II方法产生的制剂同时包含固体和溶解形式的同样的API。此使得所得到的药用制剂能够提供组分API的速释和控释，提供API活性的快速启动并延长活性。

此外，当配制适宜以霜剂或洗剂对皮肤局部应用时，例如，固体API微米颗粒和/或纳米颗粒在皮肤表面可提供即时的局部治疗效应，而在乳液基质中的溶解的API穿过皮肤/细胞屏障，使得API进入身体系统。即，溶解的API快速穿过皮肤并渗透进入较深层皮肤，而固体API颗粒不渗透进入较深皮肤层，但是用作局部储库和作为用于提供药物进入较深皮肤层的储库。因此，包含API纳米颗粒和/或微米颗粒和溶解的API两者的制剂可提供局部和全身性治疗效应，此对于透皮剂型是特别有益的。

可将以上描述的两种类型的组合物的不同组分分开，如果需要，可独立使用它们。

根据本发明可将任何适宜的API配制成乳液-基质的组合物依。API的实例包括，但不限于阿昔洛韦、环孢菌素、雌二醇、西替利嗪、尼古丁、纳曲酮和阿仑膦酸，所有这些均可用于包括，但不限于透皮药物传递系统的药用剂型中。

4.作为例证的API纳米颗粒和微米颗粒

例如，通过过滤或离心，可将固体API纳米颗粒和微米颗粒与水性混悬液介质和/或乳液小滴分开。此提供获得难溶于水的或水不溶性API纳米颗粒和/或微米颗粒的便利的方法。此外，当在粒度降低过程中包括稳定剂时，其阻止API纳米颗粒聚集，因而API纳米颗粒在纳米粒度下是稳定的。如果需要，可将API纳米颗粒配制成任何适宜的剂型。可使用适宜于人使用的食品级、USP或NF级原料制备API纳米颗粒。

如本文使用的API微米颗粒优选具有小于约10微米的粒度。在本发明的其它实施方案中，API微米颗粒的直径小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米或约1微米或更大。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API微米颗粒可具有小于以上所列尺寸，如，小于约10微米，小于约9微米等的直径。

如本文所用的，API纳米颗粒的直径小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API纳米颗粒可具有小于以上所列的尺寸，如，小于约1000nm，小于约900nm等的直径。

作为例证的药用剂型，包括，但不限于局部或透皮应用，包括但不限于液体分散剂、口服混悬剂、凝胶剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、胶囊剂、干粉剂、多颗粒剂、喷撒剂、散剂、锭剂和糖浆剂。此外，本发明的剂型可为固体剂型、液体剂型、半-液体剂型、即释制剂、缓释制剂、控释制剂、速融型制剂、冻干制剂、延迟释放制剂、持续释放制剂、脉冲释放制剂以及即释和控释混合制剂，或以上剂型的任何组合。

与较大的API相比，较小的API微米颗粒和纳米颗粒是优选的，诸如那些具有小于约3微米直径的颗粒，这样的颗粒典型地更易于能够移动穿过吸收屏障，诸如皮肤。类似地，小的API粒度能使其通过多种器官的血/组织和血/肿瘤屏障。

5.包含API颗粒和/或溶解的API的乳液小滴

如果需要，也可将包含溶解的API、API纳米颗粒和/或微米颗粒或其组合的乳液小滴从周围的水相或缓冲液相中分离出来并用于治疗剂型中。可使用适宜于人使用的食品级、USP或NF级原料制备乳液小滴。包含溶解的API的纳米微粒化油小滴和制备相同物质的方法，在美国专利号5,629,021(“′021号专利”，其通过引用结合于本文)中有描述。

本发明的乳液小滴典型地包含：(1)溶解的API、微粒化API或其组合；(2)至少一种油；(3)至少一种溶剂；和(4)至少一种表面稳定剂或表面活性剂。如果需要，可通过例如过滤，分离包含溶解的API、微粒化API或其组合的乳液小滴。包含溶解的API的乳液小滴特别适宜为转运API穿过皮肤屏障和进入血液的载体。因此，包含溶解的API的小滴提供将API给予患者的全身给药途径。

通常，包含溶解的API、API颗粒或其组合的乳液小滴的直径小于约10微米。在本发明的其它实施方案中，所述油小滴可具有小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米，小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm的直径。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API微米颗粒可具有小于以上所列尺寸，如，小于约10微米，小于约9微米等的直径。

在优选的实施方案中，所述油小滴可具有小于约2微米的直径，其平均直径为约1微米是优选的。在本发明的另一个实施方案中，所述油小滴可滤过0.2微米滤器，如此其典型地用于微生物净化。

小滴中的API浓度范围可从约1％至约50％。可将乳液小滴储存于约-20和约40℃之间。

通过改变路径I和路径II的不同参数，可使这样的小滴的尺寸和完整性有所修改。因此，包含溶解的API的小滴的稳定性可改变，使API能够释放，不论是作为溶液或是沉淀物。这是一个微型储库-溶解-控制系统，此处药物固体起储库作用，随着溶解的部分耗尽，更多药物进入溶液中形成微粒化储库。因而，包含溶解的API的乳液小滴能随着时间变化而控制API的释放。

包含溶解的API、API纳米颗粒和/或微米颗粒或其组合的乳液小滴的小尺寸及其与组织的相容性，使它们可适用于多种用途。例如，由于其能快速渗透皮肤，乳液小滴作为局部药物传递载体是有用的。所述小滴也具有异乎寻常的多种用途，其中所使用的API可为任何可悬浮或可溶解于任何水或缓冲液、油或溶剂中的API。这些性质允许该系统将与难于配制用于其它传递系统的API一起使用。

此外，可用水溶液稀释包含溶解的API、API纳米颗粒和/或微米颗粒或其组合的乳液小滴而不损失其稳定性。此能使高浓度，如，最高至约30％的API得以应用于需要用时可稀释的产品中。然而，API的浓度取决于实际药物的溶解度和用于溶解药物的溶剂的量。

在本发明的一个实施方案中，乳液小滴包含作为API的雌二醇、阿昔洛韦或睾酮，并且被配制成用于包括，但不限于透皮传递的药物传递的剂型。

F.制备本发明组合物的方法

本文描述了用于制备本发明组合物的三种方法。与在先技术的方法，诸如湿磨法相比，这些制备在本发明药用剂型中利用的组合物的方法的一个好处是，所述方法适用于水溶性API以及难溶于水的API。本发明方法的另一个好处是，它们不需要碾磨介质或专门的碾磨工艺或设备。这样的碾磨介质的使用可增加成本并使API的粒度降低过程复杂化。此外，不同于湿磨法技术，本发明的方法可适应非晶质的或半-非晶质的API。概要地说，此三种方法如下：路径I：API是不溶性的或稍微溶于制剂的任何组分(如，阿昔洛韦)；路径II：API溶于或部分溶于制剂中的至少一种组分(如，雌二醇)；和路径III：API完全溶于制剂的所有组分(如，尼古丁)。

1.路径I

路径I的方法主要包括在乳液基质中研磨API。该方法要求API难溶或不溶于油相/亲脂相和水或缓冲液的所有相。因此，首先将API悬浮于可包含至少一种油，至少一种溶剂和至少一种缓冲液或水的不-溶混的液体的混合物中，以形成乳液基质，随后匀浆化或剧烈搅拌乳液基质。使用往复注射仪器、连续流仪器或高速混合设备可产生API纳米颗粒。产生高速剪切力和气穴现象的高速匀浆或剧烈搅拌是优选的。高速剪切方法是优选的，而低速剪切方法可导致比较大的API粒度。

生成的组合物是悬浮于乳液小滴(纳米乳液API部分)的API和于介质中的空间稳定的微晶的或微米微粒化的API的复合的混合物。此三相系统包含微粒化药物、油和水或缓冲液。

在本发明的一个实施方案中，得到的微米微粒化API的直径小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米，高于约1微米和小于约2，约3，约4或约5微米，或约1微米。

在本发明的另一个实施方案中，纳米微粒化API可具有小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm的直径。

在本发明的其它实施方案中，组合物中至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的微晶或微米微粒化API可具有小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米，约1微米或高于约1微米和小于约2，约3，约4，约5，约6，约7，约8，约9或约10微米的直径。

还在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的纳米微粒化API的尺寸可具有小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm大小的直径。

可通过加入更多的不-溶混的液体，使API从油小滴中沉淀析出。典型地，沉淀的API颗粒的直径小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米或小于约1微米。如果需要，通过掺入表面活性剂或乳化剂，如“表面稳定剂”，可防止API颗粒聚集或结块。

2.路径II和路径III

路径II和III要求API溶于或部分溶于乳液基质中的至少一种(路径II)或所有相(路径III)；如，所述API溶于至少一种油，至少一种溶剂或水或缓冲液。在某些实施方案中，路径II或III可包括同时研磨和沉淀乳液基质中的API。

路径II用于溶于至少一部分乳液基质，诸如溶剂的API，而路径III用于溶于乳液基质的所有组分，诸如水、油和溶剂中的API。对于路径II和III而言，API溶解于油、溶剂和稳定剂的混合物中，形成乳液预混物。如果不将水或缓冲液加至混合物中，则API保持溶解的形式。一旦加入水或缓冲液和应用剪切力，API被沉淀为具有小于约10微米直径的微米颗粒和具有小于约1微米直径的纳米颗粒(如在以上路径I中描述；同样的粒度应用于路径II和III)。使用往复注射仪器、连续流仪器或高速混合设备可产生纳米颗粒。通过高速匀浆或剧烈搅拌的高能量输出是优选的方法。高能量方法降低乳液小滴的粒度大小，从而使大的表面积暴露于周围水性环境。高速剪切方法是优选的，而低速剪切方法可导致比较大的粒度。

随后，可使之前包埋在乳液基质中的纳米微粒化API沉淀。终产品包含呈溶液和微粒化混悬液的API，此两者均分散于溶剂、油和水或缓冲液中。在一个实施方案中，纳米微粒化API具有至少一种与其表面缔合的表面稳定剂。

难溶于水但溶于另一种液体的API的实例包括雌二醇(其溶于乙醇)和非诺贝特(其游离地溶于1-甲基-2-吡咯烷酮或N-甲基-吡咯烷酮[NMP]，稍微溶于油和稳定剂和不溶性于水)。

可溶于乳液基质的组合物所有组分的API实例包括例如尼古丁。

如果需要，采用路径I、路径II或路径III制备的易与水溶混的油小滴和API纳米颗粒可经或者0.2微米或者0.45微米滤器过滤。可通过单纯增加水容量、减少油-稳定剂-溶剂含量或减弱形成油小滴中的剪切力的方法，产生较大的油小滴和/或API颗粒。

对于用于路径I、路径II或路径III中的乳液基质，优选的油:稳定剂:溶剂比例，以重量-重量计，分别为约23:约5:约4。优选的含油相与水或缓冲液的比例分别为约2:约1。依据本发明，油比例可为约10至约30份；溶剂比例可为约0.5至约10份；稳定剂比例可为约1至约8份，而水可为约20至约80％ w/w。

G.本发明方法和组合物的组成部分

1.活性药用成分

a.性质

任何适宜的API可用于本发明组合物和方法中。对于将要在路径I方法中使用的API而言，该API必须难溶或不溶于粒度降低系统的所有相，包括水和将要用于本方法的溶剂和油。对于将要在路径II中使用的API而言，该API必须是水溶性差或不溶于水，但溶于乳液基质中的至少一个相，诸如油或溶剂和稳定剂或稳定剂溶液。而“难溶于水”或“不溶于水”，意为所述API在室温和环境压力和约pH 7下，在水中的溶解度小于约20mg/mL，小于约10mg/mL，小于约1mg/mL，小于约0.1mg/mL，小于约0.01mg/mL或小于约0.001mg/mL。

将要用于本发明的方法和在本发明组合物中存在的API，可为非晶质的、半-非晶质的、结晶的、半-结晶的或其混合物。

b.API粒度

如本文使用的，如采用本领域技术人员熟悉的常规技术所检测的API粒度，以重量平均粒度为基础确定，所述常规技术有诸如沉降场流分离、激光衍射、光子相关光谱(也已知为动态光散射)、电声光谱或盘式离心。

如本文使用的，“微米微粒化API”指具有小于约1微米直径的API。“微晶API”指具有大于约1微米直径的API。在本发明的其它实施方案中，微米微粒化API的直径小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米或约1微米或更大。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API微米颗粒可具有小于以上所列的尺寸，如小于约10微米，小于约9微米等的直径。

在本发明的另外的其它实施方案中，纳米微粒化API的直径小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm。在本发明的其它实施方案中，至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API纳米颗粒可具有小于以上所列尺寸，如，小于约900nm，小于约800nm等的直径。

在本发明的其它实施方案中，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％或至少约99％的API颗粒或小滴(包含溶解的API)具有小于平均粒度的尺寸，小于约3微米，小于约2900nm，小于约2800nm等。

c.作为例证的API

任何适宜的API可用于本发明的方法和组合物中。几类有用的API的实例包括，但不限于治疗和诊断剂、色素、颜料、墨水、染料、感光材料、化妆品配料等。

在本发明的一个实施方案中，API是雌二醇、非诺贝特、阿昔洛韦、阿仑膦酸或睾酮。可用于本发明的方法中的API的具体实例包括，但不限于胰岛素、降钙素、降钙素基因调节蛋白、心房促尿钠排泄蛋白、重组干扰素β-1b(betaserori)、促红细胞生成素、α干扰素、β干扰素、γ干扰素、促生长激素、生长激素、生长激素释放抑制因子(somastostatin)、胰岛素-样生长因子、促黄体激素释放激素、因子VIII、白介素、白介素类似物、血液科药物、抗凝血剂、补血药、止血剂、血栓溶解剂、内分泌药物、抗糖尿病药物、抗甲状腺药物、β-肾上腺素受体阻断剂、生长激素、生长激素释放激素、性激素、甲状腺药物、甲状旁腺降钙素、双膦酸盐类药物、子宫-活性药物、心血管药物、抗心律失常药物、抗心绞痛药物、抗高血压药物、血管扩张药、用于治疗心脏紊乱的药物、心肌收缩药物、肾脏药物、泌尿生殖器药物、抗利尿剂、呼吸道药物、抗组胺剂、咳嗽抑制剂、拟副交感神经剂、拟交感神经剂、黄嘌呤类、中枢神经系统药物、止痛剂、麻醉剂、止吐剂、食欲减退剂、抗抑郁剂、抗偏头痛剂、抗癫痫药、多巴胺能药、抗胆碱药、抗帕金森病药、肌肉松弛剂、麻醉拮抗剂(narcoticantagonists)、镇静剂、刺激药、注意力缺陷障碍治疗剂、哌甲酯、氟伏沙明(Fluoxamine)、比索洛尔(bisolperol)、他克莫司、西罗莫司(sacrolimus)、环孢菌素、胃肠药物、全身性抗感染药、用于AIDS治疗的药物、驱虫剂、抗分支杆菌药、免疫药物、疫苗、激素；皮肤病药，包括抗炎药、弹性蛋白酶抑制剂、抗毒蕈碱药、脂质调节剂、血液制品、血液替代品、抗肿瘤剂，包括乙酸亮丙立德、化疗药、肿瘤治疗、营养物质、营养剂、螯合剂、白介素-2、IL-Ira、肝素、水蛭素、集落刺激因子、组织型血浆酶原激活因子、雌二醇、催产素(oxytocin)、硝酸甘油、地尔硫

、可乐定、硝苯地平、维拉帕米、异山梨醇-5-单硝酸盐、有机硝酸盐(organic nitrates)、利尿药、去氨加压素、加压素、祛痰剂、粘液溶解剂、芬太尼、舒芬太尼、布托啡诺、丁丙诺啡、左啡诺、吗啡、氢吗啡酮、氢可酮、羟吗啡酮、美沙酮、利多卡因、布比卡因、双氯芬酸、萘普生、罂粟碱、东莨菪碱、昂丹司琼、多潘立酮、甲氧氯普胺、舒马普坦、麦角生物碱、苯并二氮杂

类、酚噻嗪类(phenothiozines)、前列腺素类、抗生素、抗病毒药、抗真菌剂、免疫抑制剂、抗过敏剂，如，氯雷他定和地氯雷他定、收敛剂、皮质甾类、氟尿嘧啶、博来霉素、长春新碱或去铁胺。

API可为激素，诸如睾酮、黄体酮和雌激素。其它激素包括：(1)胺衍生的激素，诸如儿茶酚胺类，肾上腺素(adrenalin)(或肾上腺素(epinephrine))、多巴胺、去甲肾上腺素(或去甲基肾上腺素)，色氨酸衍生物，褪黑激素(N-乙酰-5-甲氧基色胺)、5-羟色胺(5-HT)，酪氨酸衍生物，甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)；(2)肽激素，诸如抗缪勒氏管(antimullerian)激素(AMH，也为缪勒管抑制因子或激素)、脂联素(adiponectin)(也为Acrp30)、促肾上腺皮质激素(ACTH，也为亲皮质素(corticotropin))、血管紧张素原和血管紧张素、抗利尿激素(ADH，也为后叶加压素(vasopressin)、精氨酸抗利尿素，AVP)、心房促尿钠排泄肽(ANP，也为心钠素)、降钙素、胆囊收缩素(CCK)、促肾上腺皮质激素-释放激素(CRH)、促红细胞生成素(EPO)、卵泡刺激激素(FSH)、胃泌素、胰高血糖素、促性腺激素-释放激素(GnRH)、生长激素-释放激素(GHRH)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、生长激素(GH或hGH)、胰岛素、胰岛素样生长因子(IGF，也为生长调节素)、瘦素(leptin)、黄体生成激素(LH)、黑色细胞刺激激素(MSH或α-MSH)、神经肽Y、催产素、甲状旁腺激素(PTH)、泌乳刺激素(PRL)、松弛肽、肾素、分泌素、生长激素抑制素、血小板生成素、甲状腺-刺激激素(TSH)、促甲状腺素-释放激素(TRH)；(3)甾体激素，诸如糖皮质激素，可的松、盐皮质激素，醛固酮，性类固醇类(sex steroids)，雄激素类、睾酮、脱氢表雄甾酮(DHEA)、硫酸脱氢表雄甾酮(DHEAS)、雄甾烯二酮、二氢睾酮(DHT)，雌激素类，雌二醇，促孕激素类(Progestagens)，黄体酮，孕酮类(Progestins)，(4)甾醇激素，诸如维生素D衍生物和钙三醇(calcitriol)，(5)脂质和磷脂激素(类花生酸类物质(eicosanoids))，诸如前列腺素类、白三烯类、前列环素和血栓素。

自从1981年第一个透皮贴剂被批准用于预防与运动病相关的恶心和呕吐至今，美国食品和药品管理局(FDA)在过去的22年时间内已经批准超过35个透皮贴剂产品，涵盖众多分子，诸如芬太尼、硝酸甘油、雌二醇、炔雌醇、乙酸炔诺酮、睾酮、可乐定、尼古丁、利多卡因、丙胺卡因、东莨菪碱、诺孕曲明和奥昔布宁。参见Gordon等，“透皮药物传递的4个神话传说(4Myths About Transdermal DrugDelivery)”透皮传递(Transdermal Delivery)(www.drugdeliverytech.com)。下表1提供正在开发的用于透皮传递的化合物的实例。以下描述的药物可用于本发明的组合物和方法中。

可将两性分子型API加入本发明的制剂中。即，可离子化和溶于极性或非极性溶剂中的药物或治疗化合物，可被结合到本发明的制剂中。因此，这样的化合物溶于油和水性两者环境中(两性的)。这样的化合物的实例包括尼古丁和西替利嗪。

亲水性API也可被结合到本发明制剂中。这样的化合物包括，但不限于盐酸纳曲酮、阿仑膦酸和西替利嗪二盐酸盐。

2.油类

对于路径I和路径II的两个方法以及本发明组合物，可使用任何适宜的油。可使用的、作为例证的油包括，例如，植物油、坚果油、鱼油、猪油、矿物油、角鲨烷、三辛酸甘油酯及其混合物。可使用的、油的特别的实例包括，但不限于杏仁油(甜的)、苦杏仁油、琉璃苣油、芥花油、椰子油、玉米油、棉籽油、鱼油、霍霍巴豆油、猪油、亚麻籽油(熟的)、澳大利亚坚果油、中链甘油三酯、矿物油、橄榄油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油、角鲨烯、向日葵籽油、三辛酸甘油酯(1，2，3-三辛酰基甘油)、麦芽油及其混合物。

3.稳定剂或表面活性剂

用于本发明方法和组合物的稳定剂与纳米微粒化API的表面缔合(associates)或吸附至其表面，但不与API共价结合。此外，可优选各稳定剂分子不是交联的。可优选稳定剂溶于水。一个或更多个稳定剂可用于本发明的组合物和方法。如本文使用的术语，“稳定剂”、“表面稳定剂”和“表面活性剂”可交互使用。

任何适宜的非离子性或离子性表面活性剂可用于本发明组合物中，它们包括阴离子、阳离子和两性离子表面活性剂。可用于路径I和II两者的、作为例证的稳定剂或表面活性剂，包括，但不限于非-磷脂表面活性剂，诸如吐温(脱水山梨醇脂肪酸酯的聚氧乙烯衍生物)家族的表面活性剂(如，吐温20、吐温60和吐温80)、非苯酚聚乙二醇醚、脱水山梨醇酯(诸如司盘和阿拉索)、甘油酯(诸如单硬脂酸甘油酯)、聚乙二醇酯(诸如聚乙二醇硬脂酸酯)、嵌段共聚物(诸如普流罗尼克类)、丙烯酸聚合物(诸如Pemulen)、乙氧基化脂肪酸酯(诸如聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油)、乙氧基化醇(诸如苄泽)、乙氧基化脂肪酸、甘油一酸酯、硅基表面活性剂、聚山梨酯、Tergitol NP-40(聚(氧基-1，2-乙二基(ethanediyl))、α-(4-壬基苯酚)-ω-羟基、支链的[分子重均1980])和Tergitol NP-70(混合的表面活性剂--AQ＝70％)。

4.溶剂

任何适宜的溶剂可用于本发明方法和组合物中。作为例证的溶剂包括，但不限于十四酸异丙酯、乙酸甘油酯、N-甲基吡咯烷酮。脂族或芳族醇、聚乙二醇、丙二醇。在本发明中有用的醇的实例包括，但不限于乙醇。可使用其它的短链醇和/或酰胺。其它溶剂包括二甲亚砜、二甲基乙酰胺和乙氧基二甘醇(ethoxydiglycol)。溶剂的混合物也可用于本发明的组合物和方法中。

5.水或缓冲液

如果本发明方法和/或组合物使用或包含水或缓冲液，则水溶液优选是生理学上可相容的溶液，诸如水或磷酸缓冲盐水。

6.其它成分

许多其它原料可加至本发明组合物中。挥发性油类，诸如挥发性芳香油，可用于替代某些油或除了主要的油外，还可添加挥发性油。可用于本发明的示例性挥发性油或香料包括，但不限于香脂草油、月桂叶油、香柠檬油、柏木油、樱桃油、肉桂油、丁香油、牛至油和薄荷油。也可使用着色剂，诸如食品着色剂。可用于本发明组合物的示例性食品色料包括，但不限于绿色、黄色、红色和蓝色。有用的食品色料为食品级原料(McCormick)，尽管可用其它来源的原料替代。此外，调味精(flavoring extract)可用于本发明方法和组合物中。作为例证的调味香精包括，但不限于纯的茴芹香精(73％乙醇)、仿香蕉香精(40％乙醇)、仿樱桃香精(24％乙醇)、巧克力香精(23％乙醇)、纯柠檬香精(84％乙醇)、纯橙香精(80％乙醇)、纯薄荷香精(89％乙醇)、仿菠萝香精(42％乙醇)、仿浪姆酒香精(35％乙醇)、仿草莓香精(30％乙醇)和纯的或仿香草精(35％乙醇)。典型地，使用的香精为食品级原料(McCormick)，尽管可用其它来源的原料替代。

H.使用本发明组合物的方法

可经由以下任何常规的方式给予患者本发明组合物，包括，但不限于口服、直肠、眼、眼部，如，经由眼、胃肠外(如，静脉、肌肉或皮下)、鼻内、结肠、脑池内、肺部、阴道、腹膜内、透皮、局部(如，粉剂、霜剂、软膏剂或滴剂)、局部或作为口颊或鼻喷雾剂。如本文使用的术语“患者”用于指动物，优选哺乳动物，包括人或非人哺乳动物。术语患者(patient)和患者(subject)可交互使用。此外，可将本发明组合物配制成任何适宜的剂型，诸如液体分散剂、口服混悬剂、凝胶剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、片剂、胶囊剂、干粉剂、多颗粒剂、喷撒剂、散剂、锭剂和糖浆剂。此外，本发明的剂型可为固体剂型、液体剂型、半-液体剂型、即释制剂、缓释制剂、控释制剂、速融型制剂、冻干制剂、延迟释放制剂、持续释放制剂、脉冲释放制剂以及即释和控释混合制剂，或以上剂型的任何组合。

特别重要的是局部或透皮传递药物的能力。多年来已知，小颗粒，诸如那些小于1微米直径的小颗粒，可比较大的颗粒更容易地穿过皮肤边界。然而，在小颗粒中传递的小量药物常常限制其应用。此外，大多数颗粒仅具它们可传递的有限的类别的物质。

适宜于胃肠外注射的组合物可包含生理学上可接受的灭菌水性或非水性溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂和用于重新配制灭菌可注射溶液剂或分散剂的灭菌粉剂。适宜的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或溶媒的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、丙三醇等)、它们的适宜的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯，如油酸乙酯。例如，可通过使用包衣料，诸如卵磷脂，通过维持其在分散剂状况下所需的粒度，以及通过使用表面活性剂，维持其适当的流动性。

本发明组合物也可包含辅助剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。通过多种抗菌剂和抗真菌剂，诸如尼泊金酯类(parabens)、氯丁醇、苯酚、山梨酸等可确保防止微生物生长。包含等渗剂(tonicityagent)，诸如糖、氯化钠等，也可以是需要的。通过使用延迟吸收剂，诸如单硬脂酸铝和明胶，可使可注射的药物形式产生延长的吸收。

适于口服给药的固体剂型包括，但不限于胶囊剂、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在这样的固体剂型中，可将本发明组合物与下列至少一种物质混合：(a)一种或多种惰性赋形剂(或载体)，诸如柠檬酸钠或磷酸二钙；(b)填充剂或扩充剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(c)粘合剂，诸如羧基甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶；(d)湿润剂，诸如丙三醇；(e)崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠的复合物；(f)溶液迟延剂(retarders)，诸如石蜡；(g)吸收加速剂，诸如季铵化合物；(h)湿化剂，诸如十六烷醇和丙三醇单硬脂酸酯；(i)吸附剂，诸如高岭土和膨润土；和(j)滑润剂，诸如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷醇硫酸钠或其混合物。对于胶囊剂、片剂和丸剂而言，剂型中也可包含缓冲剂。

适于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了API，液体剂型还可包含本领域常用的惰性稀释剂，诸如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂。作为例证的乳化剂和溶剂包括，但不限于乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类，诸如棉籽油、落花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油、丙三醇、四氢糠醇、聚乙二醇、脱水山梨醇的脂肪酸酯或这些物质的混合物等。除了这样的惰性稀释剂，组合物还可包括辅助剂，诸如湿化剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。

如本文使用的，关于API剂量的“有效治疗量”应意指在很多需要这样的治疗的患者中给予API而提供特定的药理效应的剂量。应该强调的是，在具体情况下给予具体患者的“有效治疗量”可能不一定对治疗特定疾病的100％患者都有效，并且在治疗本文描述的疾病中将不会总是有效的，即使这样的剂量被本领域技术人员认为是“有效治疗量”。

普通技术人员将认识到，可凭经验确定API的有效量，并且可以以纯的形式，或药学上可接受的盐、酯或前药形式(当这样的形式存在时)使用。本发明纳米微粒化组合物中的API的实际的剂量水平可变化，以获得有效获得对于具体给予的组合物和方法所需要的治疗效应的API的量。因此，经选择的剂量水平取决于需要的治疗效应、给药途径、给予的API的效力、需要的疗程和其它因素。

剂量单位组合物可包含可被用于构成日剂量的这样的量或其约数。然而，应该理解，对于任何具体患者的特定的剂量水平，将依赖于以下多种因素：所要达到的细胞或生理反应的类型和程度；所用到的特定药物或组合物的活性；所用到的特定药物或组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药次数、给药途径以及药物的排泄速率；治疗期限；与特定药物联合或巧合使用的药物；和医学领域熟知的类似因素。

I.活性药用成分释放的调节

可能通过改变本文描述的组合物的组分，以调节具体API从制剂中释放的速率。因而，可能制备具有不同API通量速率的组合物。此使得能制备透皮装置或组合物，例如，或适合特别需要的透皮递药速率的局部用半固体霜剂。

因素，诸如所用油的类型、所用溶剂的类型和制剂中API固体结晶的存在可改变API从透皮装置、霜剂或半固体流进皮肤的速率。其它因素包括乳液小滴大小、pH、盐形成和固体API颗粒与溶解的API的比率。参见，例如，实施例2和图1，其阐述乙醇对比N-甲基吡咯烷酮对于雌二醇释放速率的体外研究的结果。

图2同样地描述制剂中固体雌二醇结晶的存在对雌二醇释放速率的影响。在不包结晶的雌二醇的组合物中，雌二醇释放速率较低并且每毫克的平方厘米尸体皮肤释放的激素较少。

同样地，图3描述油对于多种雌二醇制剂的影响。从而，可能使用不同类型的这样的制剂组分，以不同的量或在不同的相中(如，溶解的对比固体)，以改变任何需要的活性药用成分从制剂中释放和沉积在或穿过皮肤的速率和量。

J.热稳定的胶束纳米颗粒组合物

在本发明的一个方面，本发明组合物在暴露于升高的温度后是稳定的(如，“热稳定的”组合物)。这样的组合物可用于任何需要的药用剂型中。示例性药用剂型包括，但不限于：(1)用于选自下列的给药途径的剂型：口服、经肺部、静脉、直肠、耳、眼、结肠、胃肠外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部、口颊、鼻和局部给药；(2)剂型，选自液体分散剂、凝胶剂、气雾剂、软膏剂、霜剂、片剂、散剂(sachets)和胶囊剂；(3)剂型，选自冻干制剂、速融型(fast melt)制剂、控制释放制剂、延迟释放制剂、持续释放制剂、脉冲释放制剂以及即释和控释混合制剂；或(4)以上剂型的任何组合。在一个实施方案中，所述剂型是透皮剂型。

“热稳定的”组合物可对化学不稳定性、物理不稳定性或其组合是稳定的。“物理”不稳定性指在暴露于升高的温度后的相分离和/或颗粒聚集。“化学”稳定性指在暴露于升高的温度后的化合物的化学稳定性；如，组合物不氧化或发生别的化学变化。因而，在本发明的一个实施方案中，热稳定的组合物在暴露于升高的温度后保留它们的结构完整性。在另一个实施方案中，热稳定的组合物在暴露于升高的温度后保持它们的化学完整性，并且在第三的实施方案中，热稳定的组合物在暴露于升高的温度后保持它们的结构和化学完整性。

在本发明的一个实施方案中，升高的温度是足够高的温度和在对组合物灭菌消毒期间的温度，如，常规的于121℃下的高压灭菌。两个可接受的用于药物灭菌的方法(还有其它的方法，如，γ照射)是热灭菌和灭菌过滤。灭菌过滤是适于对小于0.2微米(200nm)粒度的溶液灭菌的有效方法，因为0.2微米目大小的滤器足以除去大多数细菌。然而，许多合意的组合物可具有高于200nm的有效平均粒度和/或由于它们的形状，不能通过常规的滤器有效地灭菌。

灭菌过滤比于121℃下的常规高压灭菌(蒸汽热)较为不合意。这是因为用热灭菌方法，可将药用组合物放置在最终贮藏容器中并灭菌(一步法)。然后可将在经热灭菌容器中的产品上市。相反，灭菌过滤的滤器-灭菌步骤后，再进行包装步骤(两步法)。与常规高压灭菌比较，灭菌过滤的第二步的包装步骤大大地增加了污染的风险。由于这些理由，食品药品管理局一般要求呈递资料，以证明在批准灭菌过滤作为用于灭菌产品的灭菌方法之前，制剂不能高压灭菌。

胶束纳米颗粒是具相当的粘性并且不能轻易使用无菌过滤装置，诸如使用0.2微米滤器过滤灭菌。然而，对于这样的药用组合物的灭菌而言，终端热灭菌是合意的方法。问题是，典型地，胶束纳米颗粒制剂在升高的温度，如，在高于50℃温度下是不稳定的，因此不能轻易地被高压灭菌。然而，本发明提供热稳定的胶束纳米颗粒药物组合物，并因此经得起热灭菌。

当暴露于升高的温度下，本发明组合物可以是稳定的，所述温度选自高于约50℃，高于约55℃，高于约60℃，高于约65℃，高于约70℃，高于约75℃，高于约80℃，高于约85℃，高于约90℃，高于约95℃，高于约100℃，高于约105℃，高于约110℃，高于约115℃，高于约120℃，高于约125℃，高于约130℃，高于约135℃，高于约140℃，高于约145℃或高于约150℃。

此外，当暴露于升高的温度下一段时间，本发明组合物可以是稳定的，所述时间段选自约1分钟或更少，约2分钟或更少，约3分钟或更少，约4分钟或更少，约5分钟或更少，约6分钟或更少，约7分钟或更少，约8分钟或更少，约9分钟或更少，约10分钟或更少，约11分钟或更少，约12分钟或更少，约13分钟或更少，约14分钟或更少，约15分钟或更少，约16分钟或更少，约17分钟或更少，约18分钟或更少，约19分钟或更少，约20分钟或更少，约25分钟或更少，约30分钟或更少，约35分钟或更少，约40分钟或更少，约45分钟或更少，约50分钟或更少，约55分钟或更少，约60分钟或更少。

作为例证的热稳定的表面活性剂和/或稳定剂包括，但不限于(1)脱水山梨醇酯，诸如司盘类和阿拉索，(2)嵌段共聚物，诸如普流罗尼克类，(3)丙烯酸聚合物，诸如Pemulen和(4)乙氧基化脂肪酸酯，诸如聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油。

给出以下实施例以阐述本发明。然而，应该理解，本发明并不受限于在这些实施例中描述的具体条件或细节。贯穿整个说明书，任何以及所有参考的可公开获得的文献，包括美国专利，均通过引用而专门结合于本文中。

实施例1

本实施例的目的是，采用本发明的路径II方法制备纳米微粒化非诺贝特组合物。非诺贝特在水中是不溶性的。该化合物在治疗的患者中引起总胆固醇、LDL胆固醇、载脂蛋白B、总甘油三酯和富含甘油三酯的脂蛋白(VLDL)的降低。此外，用非诺贝特治疗导致高密度脂蛋白(HDL)和载脂蛋白apoAI和apoAII增加。参见《内科医师案头参考书》(The Physicians′Desk Reference)，第56版，第513-516页(2002)。

如图1中给出的原料非诺贝特粒度分布图所示，原料非诺贝特颗粒的平均粒度为57μm。使用粒度计数器LS230(Coulter particle sizerLS230)检测粒度。

将4.8g的非诺贝特溶解于7.0g的N-甲基-吡咯烷酮(NMP)中。然后将41.8g的中链甘油三酯(Crodamol GTCC，Croda)加至该非诺贝特溶液中。将9.5g的表面活性剂普流罗尼F-68溶解于37.0g的水中，然后将该表面活性剂溶液加至非诺贝特溶液中。然后使用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力升至10,000psi。使该混合物通过匀浆器中匀浆三次。

如图2所示，得到的包含非诺贝特的纳米乳液小滴的平均粒度为60nm，100％的非诺贝特颗粒尺寸小于3微米。

实施例2

本实施例的目的是，采用本发明的路径II方法制备纳米微粒化雌二醇组合物。雌二醇(17b-雌二醇)是白色、结晶状固体，化学上被描述为雌-1，3，5(10)-三烯-3，17b-二醇。该化合物难溶于水。雌二醇被指定用于激素替代疗法和用于治疗换性者。

将0.25g的雌二醇溶解于8.8g乙醇中。原料雌二醇的平均粒度为约542微米。然后将50.2g大豆油和9.4g表面活性剂聚山梨酯80加至雌二醇溶液中。然后用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力设置在10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆二次。

得到的乳液组合物显示包含雌二醇的小滴的平均尺寸为约93nm。

实施例3

本实施例的目的是，采用本发明的路径I方法制备纳米微粒化阿仑膦酸组合物。阿仑膦酸是用于治疗骨质疏松症的二膦酸盐。其为不溶于水的白色结晶状粉末。原料阿仑膦酸的平均粒度为约190-210μm。

将1.0g的阿仑膦酸与8.8g的乙醇、9.4g的聚山梨酯80和50.2g的大豆油混合。然后将30.6g的水加至阿仑膦酸混合物中。阿仑膦酸不溶于乙醇。然后使用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆二次。

得到的研磨的阿仑膦酸的平均粒度为约0.2μm。

实施例4

本实施例的目的是，采用本发明的路径II方法制备纳米微粒化阿昔洛韦组合物。阿昔洛韦是用于治疗皮肤、嘴唇和生殖器疱疹感染；带状疱疹(带状疱疹(shingles))；和水痘的抗病毒药。将该药物配制成口服和局部剂型。阿昔洛韦适度地溶于水。

如图3中给出的原料阿昔洛韦粒度分布图所示，原料阿昔洛韦颗粒的平均粒度为54μm。

将5.0g阿昔洛韦部分溶于10.0g N-甲基-吡咯烷酮(NMP)中。然后将47.5g矿物油(轻质的)和9.4g聚山梨酯80加至阿昔洛韦混合物中。然后加入27.9g水，用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆二次。

如图4所示，得到的乳液小滴中的阿昔洛韦的平均粒度为132nm，100％的阿昔洛韦颗粒的平均尺寸小于3微米。

实施例5

本实施例的目的是，采用本发明的路径II方法制备纳米微粒化非诺贝特组合物。如上所注释的，原料非诺贝特颗粒的平均粒度为54μm。参见图1。

将4.8g的非诺贝特部分溶解于8.8g的乙醇中。然后将50.2g的大豆油和9.4g的聚山梨酯80加至该非诺贝特溶液中。随后，加入26.8g的水并使用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆三次。经研磨的非诺贝特的平均粒度为约2微米。

实施例6

本实施例的目的是，采用本发明的路径I方法制备纳米微粒化阿昔洛韦组合物。如上所注释的，原料阿昔洛韦颗粒的平均粒度为54μm。参见图3。

将5.0g的阿昔洛韦与8.8g的乙醇、47.7g的大豆油和9.4g的聚山梨酯80混合。然后将29.2g的水加至阿昔洛韦混合物中。使用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆二次。

生成的经研磨的阿昔洛韦的平均粒度为约2微米。

实施例7

本实施例的目的是，采用本发明的路径II方法制备纳米微粒化雷洛昔芬组合物。雷洛昔芬是属于苯并噻吩类化合物的选择性雌激素受体调节剂(SERM)。该药物用于治疗和预防绝经后的骨质疏松症。雷洛昔芬很轻微地溶于水。原料雷洛昔芬的平均粒度为约15-30μm。

将1.0g的雷洛昔芬部分溶解于20.0g的乙醇中。将40.0g的矿物油和9.4g的聚山梨酯80加至该雷洛昔芬混合物中。然后将29.6g的水加至该雷洛昔芬混合物中。使用机械搅拌器将得到的混合物充分混合约15分钟。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆二次。经研磨的雷洛昔芬的平均粒度100％(以体积计)小于10微米和平均值(以体积计)为2.79微米。

实施例8

本实施例的目的是评价如以上实施例4和6中制备的阿昔洛韦组合物与市售的、非-纳米微粒化形式的阿昔洛韦，

的透皮传递的比较。

是局部用霜剂制剂。

将50mg的三个不同的制剂(组合物4、组合物6和

)施用于Franz扩散池上的尸体皮肤上。其暴露的表面面积为1.77sq.cm，并采用HPLC检测相对于各时间点受体室(receptor compartment)中的药物(浓度)。

以随时间释放的阿昔洛韦平均累计浓度绘成图示于图5中。组合物4、6和

释放速率的斜率分别为0.017、0.006和0.004。结果显示，与

比较，组合物4和6在皮肤的表层具有比较高的药物储留，也具有比较高的药物流穿过皮肤屏障和进入体内。因而，对于阿昔洛韦而言，与非-纳米微粒化常规的阿昔洛韦制剂相比，本发明组合物表现出优越的体外药物分布特性。

实施例9

本实施例的目的是评价，与市售的纳米微粒化非诺贝特制剂，(Abbott Laboratories)比较，依据本发明制备的非诺贝特制剂的口服递药的有效性。

测试两个依据本发明的非诺贝特制剂：于实施例#4(组合物II)和实施例#1(组合物I)中制备的制剂。

至于对照制剂，口服液体制剂包含悬浮于0.5％(w/w)的羟基丙基甲基纤维素(HPMC)溶液中的非诺贝特。以0.5％(w/w)HPMC E4M溶液用作给予非诺贝特的载体。粒度与原料非诺贝特相同。

对每组五只大鼠的四组大鼠进行实验。组1接受组合物I、组2接受组合物II、组3接受标准品

制剂和组4接受对照制剂。对照组饲喂含非诺贝特的HPMC凝胶。在禁食条件下，每只大鼠给予单剂量的90mg/kg的非诺贝特。如示于下表的，对四组的每组大鼠检测24小时的AUC(与药物吸收的量或生物利用度相关)、C_max(血液最大药物浓度)、T_max(到达C_msx的时间)、T_1/2(口服)和CL/F(表达为生物利用度函数的药物清除)。T_1/2指的是消除半衰期。

表2

依据本发明的组合物I的效能得非常好。组合物I的AUC为1,333,194.6hrng/mL，相比之下，

的AUC为1,480,971.8hrng/mL-仅差9.9％。组合物I的C_max为174,800.0ng/mL，相比之下，

的C_max为180,600.0ng/mL-仅差3.2％。最惊奇的是，组合物I表现出的T_max小于

的：2.8hr比3.6hr。

然后将剂量和平均AUC用于计算每组的相对接触度(Relativeexposure)(％)。“相对接触度”表示总的生物利用度的范围，相对接触度的表示反映试验制剂和对照制剂相对于标准品(设定为100％)的功效表现。

表3

再者，此结果证明与

比较，组合物1具有极好的生物利用度。

实施例10

本实施例的目的是，制备依据本发明的含阿昔洛韦的组合物，然后检测该制剂在透皮传递系统中的药物释放。

阿昔洛韦是有效对抗病毒疱疹的合成的核苷类似物。该药物以商品名

市售。阿昔洛韦是白色、结晶状的粉末，分子式为C₈H₁₁N₅O₃和分子量为225。于37℃水中的最大溶解度是2.5mg/mL。阿昔洛韦的pk_a是2.27和9.25。阿昔洛韦的化学名是2-氨基-1，9-二氢-9-[(2-羟基乙氧基)甲基]-6H-嘌呤-6-酮；具有下列结构式：

阿昔洛韦是合成的嘌呤核苷类似物，具有体外和体内抑制1型(HSV-1)、2型(HSV-2)单纯疱疹病毒和水痘-带状疱疹病毒(VZV)的活性。阿昔洛韦的抑制活性具高度选择性，由于其对酶，由HSV和VZV编码的胸苷激酶(TK)具亲和力。该病毒酶使阿昔洛韦转化为阿昔洛韦一磷酸盐，一种核苷类似物。通过细胞鸟苷酸激酶的作用，此一磷酸盐进一步转化为二磷酸盐并通过许多细胞酶转化为三磷酸盐。

A.N-甲基-吡咯烷酮中的阿昔洛韦

将阿昔洛韦溶于N-甲基-吡咯烷酮中。然后加入油、聚山梨酯80和水(参见表3)并用桨式搅拌机充分混合。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，于10,000psi匀浆二次。生成的组合物(于下表4中描述)包含溶解于溶剂N-甲基-吡咯烷酮中的阿昔洛韦和存在于乳液的水部分中的与表面稳定剂，聚山梨酯80缔合的纳米微粒化阿昔洛韦颗粒。检测得到的阿昔洛韦的粒度，如图9中所示。粒度分布显示双峰曲线，一大部分的阿昔洛韦颗粒的尺寸小于约0.4微米，而次多部分的颗粒尺寸大于约1微米但小于约10微米。

B.乙醇中的阿昔洛韦

将阿昔洛韦分散于乙醇中。然后加入油、聚山梨酯80和水(表5)并用桨式搅拌机充分混合。然后将该混合物填入高压匀浆器(APVInvensys，型号APV-1000)中，于10,000psi匀浆二次。生成的组合物(于下表5中描述)包含溶解于溶剂乙醇中的阿昔洛韦和存在于乳液的水部分中的与表面稳定剂聚山梨酯80缔合的纳米微粒化阿昔洛韦颗粒。检测得到的阿昔洛韦的粒度，如图10中所示。粒度分布显示绝大部分的阿昔洛韦颗粒直径小于约0.1微米。

C.包含阿昔洛韦配方的透皮剂型

是商业上可获得的阿昔洛韦局部用霜剂，其含常规的、非-纳米微粒化颗粒的阿昔洛韦。将阿昔洛韦从

中释放的速率与阿昔洛韦从示于表4(＂MNP I＂)和表5(＂MNP II＂)的组合物中释放的速率进行比较。将

和以上制备的两种制剂施用于已知面积(1.78sq.cm)的、固定在Franz扩散池集合(assembly)上的尸体皮肤上。在所有的制剂中阿昔洛韦的量相同(5％w/w)和将50mg的制剂施用于每个皮肤样品。储留在皮肤上的量表示用于局部作用的可利用的部分药物，而穿过皮肤的API的量指明注入全身循环的部分。对比的结果(示于图6中)证明，与在先技术，常规的阿昔洛韦制剂比较，本发明制剂的药物释放显著增加。

实施例11

本实施例的目的是制备包括环孢菌素的依据本发明的组合物。

环孢菌素是以商品名

和

在商业上可获得的。它是由11个氨基酸组成的环多肽免疫抑制剂。它是由真菌菌种雪白白僵菌(Beauveria nlyea)产生的代谢产物。化学上，环孢菌素被命名为[R-[R^*，R^*-(E)]]-环(L-丙氨酰基-D-丙氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-3-羟基-N，4-二甲基-L-2-氨基-6-辛烯酰基(octenoyl)-L-α-氨基-丁酰基-N-甲基甘氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-亮氨酰基)。环孢菌素(也已知为环孢菌素A)的化学结构是：

C₆₂H₁₁₁N₁₁O₁₂    分子量1202.63

将环孢菌素溶解于乙醇中。然后加入油、聚山梨酯80和水(表5)并用桨式搅拌机充分混合。然后将该混合物填入高压匀浆器(APVInvensys，型号APV-1000)中，于10,000psi匀浆二次。生成的组合物(于下表6中描述)包含溶解于溶剂乙醇中的环孢菌素和存在于乳液的水部分中的与表面稳定剂聚山梨酯80缔合的纳米微粒化环孢菌素颗粒。检测得到的环孢菌素的粒度，如图11中所示。粒度分布显示双峰曲线，绝大部分的环孢菌素颗粒尺寸小于约1微米，而次多部分的颗粒尺寸大于约2微米但小于约8微米。

实施例12

本实施例的目的是，制备依据本发明的含雌二醇的组合物，然后检测该制剂在透皮传递系统中的药物释放。

雌二醇是白色结晶状的粉末，化学上描述为雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇。其化学经验式是C₁₈H₂₄O₂和分子量为272.39。雌二醇在化学上被描述为雌-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇并具有下列结构式：

用于每一实验的典型方法如下：将雌二醇溶解于乙醇，加入油(如，大豆油、三辛酸甘油酯或角鲨烷)和聚山梨酯80。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，加水至得到的混合物中。运行约3分钟得到乳液。使用该方法，制备以下雌二醇制剂。

A.雌二醇制剂#1：乙醇中的雌二醇和大豆油(图7中的“组合物 I”)

B.雌二醇制剂#2：N-甲基吡咯烷酮中的雌二醇和大豆油(图6中 的“组合物IV”)

C.雌二醇制剂#3：雌二醇和三辛酸甘油酯

D.雌二醇制剂#4：雌二醇和角鲨烷

图1阐述了乙醇(雌二醇制剂#1)对比N-甲基吡咯烷酮(雌二醇制剂#2)对雌二醇穿过人工膜释放速率的影响的体外研究的结果。图7中括号中的值表明雌二醇穿过人工膜的流速：雌二醇制剂#1为12.33，而雌二醇制剂#2为9.89。

雌二醇药物的一部分以固体结晶存在于雌二醇制剂#1中。固体部分通过离心分离以评价其在制剂中的存在对雌二醇的释放动力学的贡献和影响。比较包含固体雌二醇颗粒和缺乏这样的固体雌二醇颗粒的雌二醇制剂#1的雌二醇释放分布特性。结果示于图8，括号中的值表明药物穿过皮肤的流速：雌二醇制剂#1(0.037)和缺乏药物颗粒的雌二醇制剂#1(0.007)。因而，缺乏结晶的雌二醇颗粒的组合物表现出显著较低的雌二醇释放速率和每微克每平方厘米尸体皮肤较少的激素释放。

图12描述与用作对照的雌二醇的乙醇溶液比较的雌二醇制剂编号2、3和4的体内释放分布。将含1mg的17β雌二醇的单剂量的各制剂(0.42mL)局部施用于切除卵巢的恒河猴，每组四只(4)猴子。给药后，于0时和给药后的以下时间间隔点从猴子采集血液样本：0(给药前)、给药后0.5、1、2、4、6、8、12、24、48、72、96、120、144和168hr。然后检测每份血液样本中的雌二醇的血清水平(使用放射免疫分析法测定血清雌二醇)。

结果显示，包含三辛酸甘油酯的雌二醇制剂#3，表现出最高的药物释放速率，而包含大豆油的雌二醇制剂#2，具有仅次最高的速率。包含角鲨烷的雌二醇制剂#4，表现出最低的药物释放水平。

实施例13

本实施例的目的是，制备依据本发明的含两性分子的药物，诸如西替利嗪和尼古丁的组合物，然后检测该组合物透皮释放的分布。

A.西替利嗪

西替利嗪HCl是口服起作用的和选择性的H₁-受体拮抗剂。其化学名是(±)-[2-[4-[(4-氯代苯基)苯基甲基]-1-哌嗪]乙氧基]乙酸，二盐酸盐。西替利嗪HCl是外消旋的化合物，其化学经验式是C₂₁H₂₅ClN₂O₃·2HCl。其分子量是461.82和化学结构显示如下：

西替利嗪HCl是白色、结晶粉末并具水溶性。该化合物以商品名可从商业上获得。

将西替利嗪溶解于乙醇中和然后将大豆油和聚山梨酯80加至该溶液中(表11)。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，加水至得到的混合物中。匀浆器运行约3分钟得到乳液。

图13描述来自示于表10的制剂的西替利嗪随时间在兔体内释放的分布图。将制剂(每克制剂含4mg的西替利嗪的2mL制剂)局部施用于三只雄性兔。给药后，于0时和给药后的定期间隔从兔采集血液样本：0(给药前)、给药后0.5、1、2、4、6、8、12、18、24、36、48小时。然后用液相色谱-质谱法(LC-MS)检测每份血液样本中的西替利嗪的血清水平。

B.尼古丁

尼古丁是由吡啶和吡咯烷环组成的叔胺。其为从烟草植物获得的无色至浅黄色，易溶于水，强碱性、油性、挥发性、吸湿性液体。尼古丁具有特殊的辛辣气味且在暴露于空气或光时转为棕色。尼古丁的化学名为S-3-(1-甲基-2-吡咯烷基)吡啶，其分子式为C₁₀H₁₄N₂，分子量为162.23和具有以下的结构式：

结构式

将尼古丁溶解于乙醇中，随后加入角鲨烷、聚山梨酯80和水(表12)。用桨式搅拌机充分混合该组合物。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆2次。

图14描述来自示于表12的制剂的尼古丁随时间在兔体内释放的图形。将制剂(每克制剂含30mg的尼古丁的2mL制剂)局部施用于三只雄性兔。给药后，于0时和给药后的定期间隔从兔采集血液样本：0(给药前)、给药后0.5、1、2、4、6、8、12、18、24、36、48小时。然后用液相色谱-质谱法(LC-MS)检测每份血液样本中的尼古丁的血清水平。

实施例14

本实施例的目的是，制备依据本发明的含亲水药物，诸如纳曲酮、阿仑膦酸和西替利嗪二盐酸盐的组合物，然后检测该组合物透皮释放的分布特性。

A.纳曲酮

将乙醇、大豆油和聚山梨酯80一起混合(表12)。然后将纳曲酮HCl溶于水中，并在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，将其加至溶剂/油/稳定剂的混合物中。匀浆器运行约3分钟得到乳液。然后用柠檬酸将生成的组合物的pH调节至pH 6.76。

图15描述来自示于表13的制剂的盐酸纳曲酮随时间在兔体内释放分布图。将制剂(每克制剂含10mg的纳曲酮HCl的2mL制剂)局部施用于三只雄性兔。给药后，于0时和给药后的定期间隔从兔采集血液样本：0(给药前)、给药后0.5、1、2、4、6、8、12、18、24、36、48小时。然后用液相色谱-质谱法(LC-MS)检测每份血液样本中的盐酸纳曲酮的血清水平。

B.阿仑膦酸

将阿仑膦酸分散于乙醇中。然后，将聚山梨酯80、油和水加至该组合物(表13)中。使用机械搅拌器将生成的组合物充分混合。然后将该混合物填入高压匀浆器(APV Invensys，型号APV-1000)中，并将压力调至10,000psi。该混合物通过匀浆器匀浆2次。

实施例15：热稳定的胶束纳米颗粒组合物

胶束纳米颗粒具有相当的粘性，并且不能采用无菌过滤装置，诸如使用0.2微米滤器过滤而轻易地灭菌。然而，终端热灭菌是使这样的药用组合物灭菌的合意的方法。问题是，典型地，胶束纳米颗粒制剂在升高的温度如，在高于50℃的温度下是不稳定的，并且因此不能轻易使用高压灭菌。

然而本发明提供的胶束纳米颗粒药物组合物是热稳定的，并且因此经得起热灭菌。

A.热稳定的组合物的制备

典型地通过以下方法制备下列组合物：将乙醇与油合并，并且将该混合物加入热稳定的表面活性剂，诸如溶于水的普流罗尼克中，在高速剪切混合，如经由Silverson高速混合器，于9000rpm下混合约3分钟，得到乳液。

组合物A

将乙醇和大豆油一起混合(表15)。随后，将普流罗尼F-68溶于水。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，将乙醇混合物和普流罗尼

F-68溶液加在一起。使匀浆器运行约3分钟，得到乳液。

组合物B

表16

 

成分	量
		乙醇	8.8gm
Pemulen TR-2	0.25gm
		大豆油	50.2gm
水	41.1gm

将乙醇和大豆油一起混合(表16)。将Pemulen TR-2分散于水中。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，将乙醇混合物和Pemulen TR-2分散液合并。使匀浆器运行约3分钟，得到乳液。

组合物C

将乙醇、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油和大豆油一起混合(表17)。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，加入水。使匀浆器运行约3分钟，得到乳液。

组合物D

将N-甲基-吡咯烷酮和矿物油一起混合(表18)。将普流罗尼

F-68溶于水。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，将矿物油混合物和普流罗尼

F-68溶液合并。使匀浆器运行约3分钟，得到乳液。

组合物E

将乙醇、司盘80和大豆油一起混合(表19)。在9000rpm的高速剪切混合(Silverson高速混合器)下，加入水。使匀浆器运行约3分钟，得到乳液。

如以上对于组合物A-E所描述的制备下列制剂。

B.热挑战

将样品量的组合物A-L的制备的乳液倒入玻璃小瓶中，然后于120℃、15psi压力下高压灭菌25分钟。高压灭菌前和后检测小滴尺寸。以百分变化作为指示，连同肉眼观察一起，了解乳液在灭菌后是否稳定。因此，“无变化”表示通过热灭菌对乳液没有有害的影响。

示于表27的结果证明本发明组合物具引人注目的、意外的热稳定性。

本领域技术人员显然应该明白，对本发明方法和组合物，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可进行多种修改和变化。因而，意欲使本发明覆盖所述本发明的修改和变化，前提它们在所附的权利要求书和它们的等价物的范围之内。

Claims (20)

1.一种制备药用剂型的方法，其包括：

(a)形成乳液基质，即通过将活性药用成分(API)悬浮于油、溶剂、稳定剂和水或缓冲液的混合物中，形成乳液基质，其中：

(i)所述活性药用成分难溶于油、溶剂和水，或者

(ii)所述活性药用成分溶于油和溶剂之一或两者中，但不溶或难溶于水，

(b)使所述乳液基质匀化，形成活性药用成分的颗粒、包含溶解的API的小滴，或其组合。

2.权利要求1的方法，其中生成的组合物是悬浮于乳液小滴中的API颗粒和在水或缓冲液中空间稳定的微粒化API的混合物。

3.权利要求1或权利要求2的方法，其中所述活性药用成分选自非诺贝特、雌二醇、阿仑膦酸、阿昔洛韦、紫杉醇和环孢菌素。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述油选自杏仁油(甜的)、苦杏仁油、琉璃苣油、芥花油、椰子油、玉米油、棉籽油、鱼油、霍霍巴豆油、猪油、亚麻籽油(熟的)、澳大利亚坚果油、中链甘油三酯、矿物油、橄榄油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油、角鲨烯、向日葵籽油、三辛酸甘油酯(1，2，3-三辛酰基甘油)和麦芽油。

5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述溶剂选自十四酸异丙酯、乙酸甘油酯、N-甲基吡咯烷酮、脂族醇和芳族醇、乙醇、二甲亚砜、二甲基乙酰胺、乙氧基二甘醇、聚乙二醇和丙二醇。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述稳定剂选自脱水山梨醇酯、甘油酯、聚乙二醇酯、嵌段共聚物、丙烯酸聚合物(诸如Pemulen)、乙氧基化脂肪酸酯(诸如聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油)、乙氧基化醇(诸如苄泽)、乙氧基化脂肪酸(诸如吐温)、甘油一酸酯、硅基表面活性剂和聚山梨酯。

7.权利要求6的方法，其中所述脱水山梨醇酯稳定剂是司盘和阿拉索，其中的甘油酯是单硬脂酸甘油酯，其中的聚乙二醇酯是硬脂酸聚乙二醇酯，其中的嵌段共聚物是普流罗尼克，其中的丙烯酸聚合物是Pemulen，其中的乙氧基化脂肪酸酯是聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油，其中的乙氧基化醇是苄泽，以及其中的乙氧基化脂肪酸是吐温20。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述匀浆步骤在1,000-40,000psi的高压系统下进行。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中得到的活性药用成分颗粒(API)，包含溶解的API的小滴，或其组合，具有选自小于约10微米，小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米以及约1微米或更大的平均粒度或中数粒度。

10.权利要求9的方法，其中得到的活性药用成分颗粒(API)，包含溶解的API的小滴，或其组合，具有选自小于约1微米，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm的平均粒度。

11.一种制备非诺贝特颗粒的方法，其包括

(a)使非诺贝特溶解于N-甲基-吡咯烷酮中形成溶液，

(b)将中链甘油三酯加至非诺贝特溶液中，

(c)将溶解于水的普流罗尼克加至该溶液，和

(d)使溶液经高压匀浆化，产生非诺贝特颗粒。

12.一种制备透皮剂型的方法，其包括：

(a)使活性药用成分(API)溶解于(i)至少一种油、(ii)至少一种溶剂和(iii)至少一种稳定剂的混合物中，形成乳液预混物，

(b)将水或缓冲液加至该乳液预混物中，和

(c)匀化或剧烈搅拌该混合物，由此API沉淀为颗粒。

13.权利要求12的方法，其中API选自阿昔洛韦、环孢菌素、纳曲酮、阿仑膦酸、西替利嗪、尼古丁、睾酮、黄体酮或雌二醇。

14.一种药用剂型，其包含：

(a)至少一种活性药用成分，其中所述活性药用成分呈固体微粒状态和呈溶解状态，

(b)至少一种溶剂，

(c)至少一种油，

(d)至少一种表面活性剂，和

(e)水。

15.权利要求14的药用剂型，其中所述活性药用成分选自非诺贝特、阿仑膦酸、阿昔洛韦、紫杉醇、环孢菌素、纳曲酮、西替利嗪、尼古丁、睾酮、黄体酮和雌二醇。

16.权利要求14或权利要求15的药用剂型，其中所述组合物包含含有溶解的活性药用成分的油珠，其中所述珠的直径小于约10微米。

17.权利要求16的药用剂型，其中所述珠具有选自小于约9微米，小于约8微米，小于约7微米，小于约6微米，小于约5微米，小于约4微米，小于约3微米，小于约2微米，小于约1000nm，小于约900nm，小于约800nm，小于约700nm，小于约600nm，小于约500nm，小于约400nm，小于约300nm，小于约290nm，小于约280nm，小于约270nm，小于约260nm，小于约250nm，小于约240nm，小于约230nm，小于约220nm，小于约210nm，小于约200nm，小于约190nm，小于约180nm，小于约170nm，小于约160nm，小于约150nm，小于约140nm，小于约130nm，小于约120nm，小于约110nm，小于约100nm，小于约90nm，小于约80nm，小于约70nm，小于约60nm，小于约50nm，小于约40nm，小于约30nm，小于约20nm或小于约10nm的直径。

18.权利要求14-17中任一项的药用剂型，其为透皮剂型。

19.一种治疗有需要的患者的方法，该方法包括将权利要求18的透皮剂型应用于所述患者的皮肤上。

20.权利要求19的方法，其中所述透皮剂型作为局部霜剂应用于所述患者的皮肤上。

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