CN104511012B - 一种环孢素口服溶液 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种环孢素微乳口服溶液，含有环孢素、枸橼酸钠、枸橼酸、油相、表面活性剂、溶剂、助表面活性剂、水及矫味剂。采用以下方法进行制备：(1)将环孢素溶于溶剂中，加入助表面活性剂、表面活性剂、油相搅拌至澄清；(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入矫味剂使溶解；(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH值至合适范围。与现有技术相比，本发明制备的环孢素微乳口服液服用方便、口感好、质量稳定。

Description

一种环孢素口服溶液

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种环孢素微乳口服溶液。

背景技术

免疫抑制剂是20世纪末在器官移植、肿瘤化疗、免疫病理学和临床免疫学等多学科研究基础上发展起来的一种新的药剂类别，主要包括了多种化学合成药物和生物制剂，其特点就是在临床治疗的剂量下，能保证至少降低或抑制一种免疫反应。其中环孢素A是目前应用最为广泛的免疫抑制剂之一。目前，环孢素A已广泛应用于临床器官移植中，如肾脏、肝脏、心脏等同种异体移植和骨髓移植中，起到了预防和治疗多种移植排斥反应的作用，这极大地提高了移植物的存活率，也明显改善了各种移植手术的预后。除此之外，环孢素A还可以应用于治疗活动性和难治性类风湿性关节炎，能够改善关节炎患者的临床症状。

环孢素为11个氨基酸组成的环状多肽，是一种新型的T淋巴细胞调节剂，能特异性的抑制辅助T淋巴细胞的活性，但并不抑制T淋巴细胞，反而促进其增殖。在明显抑制宿主细胞免疫的同时，对体液免疫亦有抑制作用。能抑制体内抗移植物抗体的产生，因而具有抗排斥的作用。环孢素不影响吞噬细胞的功能，不产生明显的骨髓抑制作用。动物实验表明环孢素可延长同种异体器官(肝脏、心脏、肾脏、胰脏、骨髓、小肠和肺)移植的存活时间，抑制细胞介导免疫反应。

环孢素具有显著的疏水性，口服生物利用度差，个体差异大，为提高其生物利用度科研人员进行了不懈的努力，研制了许多经改良的药物制剂，包括微乳制剂、纳米粒、脂质体等。其中，“山德士”制药公司开发出微乳化、预浓缩的环孢素液体组合物并制成口服液和软胶囊。目前，国内上市的口服环孢素制剂包括软胶囊和口服液，均为油溶液或微乳浓缩液。

国内上市的环孢素微乳浓缩液口服液，为多剂量制剂，配有专用的取样管，一般每次服用剂量为1ml，使用前用水或牛奶、果汁等稀释后使用。因取样剂量较小，微乳浓缩液较粘稠，管壁粘附较多，病人使用时实际很难准确定量，从而造成疗效上的差异。此外，环孢素不可用西柚汁等具有肝药酶抑制作用的果汁稀释，因环孢素经肝细胞P450酶代谢，西柚汁会抑制肝药酶的活性，影响药物的代谢，增加药物毒副作用。微乳浓缩液直接用水稀释口感较差，若用果汁稀释，可能会因为果汁成分的差异而存在潜在的安全隐患。同时，环孢素为多肽类化合物，在溶液状态酰胺键容易水解，导致有关物质增加。

中国专利CN1463746A公开了含环孢素A的微乳化预浓缩口服液。该口服液配方包括作为活性成分的的环孢素A、作为溶剂的无水乙醇、作为表面活性剂的聚氧乙烯氢化蓖麻油、作为助表面活性剂的油酸、作为稀释剂的丙二醇。

中国专利CN1167462C公布了一种含环孢素的药物组合物，其特点是选择中长链的饱和或不饱和脂肪酸、取代羧酸等可药用有机酸或其中一个或多个酸的混合物或鱼油作为亲油性组分，根据各剂型的不同要求，可不加入水或加入适当的水制成亲水基质，该组合物配方可适用于软胶囊剂、软膏剂、滴眼剂、口服液及注射剂等剂型的制备。

中国专利CN103933546公开了雷帕霉素与环孢素A纳米口服微乳液制备方法，具体步骤如下：步骤1，将表面活性剂与助表面活性剂按照质量比1-3:1-2混合均匀，混合均匀后与生物相容性的油、去离子水按照质量百分比为：29-35：24-29：35-39混合，轻轻摇晃即可制备得到直径为30纳米的水包油微乳液体系；步骤2，将克雷帕霉素或环孢素A或雷帕霉素+环孢素A固体溶解在步骤1制备得到的水包油微乳液体系中，在室温或37度温度下，以200-800转/分的转速下匀速混合2-24小时。本发明采用微乳液方法制备免疫抑制剂雷帕霉素、环孢A及雷帕霉素与环孢A组合纳米口服溶液，是新型纳米药物体系，具有高增溶能力、热力学稳定的优点。

中国专利CN103656617A涉及一种环孢素眼用溶液，利用微乳技术，解决了环孢素在水中的溶解性问题。该发明适用于眼用制剂，具有眼刺激性小、稳定性好的特点。

中国专利CN101502641B公开了一种注射给药的环孢素药物组合物，包括作为活性成份的环孢素、作为增溶剂的聚乙二15-羟基硬脂酸酯(Solutol HS 15)、作为助溶剂的醇类或酯类和作为溶剂的注射用水。该药物组合物可制备成注射液或冻干制剂。

中国专利CN101406452 B公开了一种含有环孢素A的注射用微乳制剂，及该注射用微乳制剂的制备方法。该制剂由以下成分组成：主药1-5％、油相1-30％、表面活性剂2-40％、助表面活性剂2-40％、注射用水余量。将处方量的油相和表面活性剂在40℃的水浴下使之溶解成液体，在常温下加入助表面活性剂，混合均匀后，将药物加入上述混合溶液中，轻微搅拌使药物溶解，再滴加水，调节pH值5.0-7.0，即得。

以上发明专利均未对环孢素微乳制剂存储过程中微乳粒径及环孢素有关物质进行考察。

王晓黎等报道了《环孢素A微乳口服液的制备及稳定性研究》，以聚氧乙烯氢化蓖麻油作为表面活性剂、乙醇作为助表面活性剂、十四酸异丙酯为油相、蒸馏水为水相制备O/W型微乳，考察了微乳放置1个月的粒径，制备的微乳粒径较大，部分处方大于100。考察了微乳40℃放置3个月的含量，未对环孢素有关物质进行考察。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种服用方便、口感好、质量稳定的环孢素微乳口服溶液，本发明的另一目的在于提供了一种环孢素口服溶液的制备方法。

具体而言，本发明是通过如下技术实现的：

本发明所述的一种环孢素微乳口服液，含有环孢素、枸橼酸钠、枸橼酸、油相、表面活性剂、溶剂、助表面活性剂、水及矫味剂。

所述的环孢素微乳口服液，枸橼酸钠在口服液中的用量为5mmol/L-15mmol/L，优选为10mmol/L。

所述的环孢素微乳口服液，用2mol/L枸橼酸溶液调节口服液pH值至4.5-5.5，优选为pH5.0。

所述的环孢素微乳口服液，其中油相为司盘80、表面活性剂为Triton X-100、助表面活性剂为聚乙二醇200，溶剂为二乙二醇单乙基醚。

所述的环孢素微乳口服液，其中的矫味剂为阿司巴甜、甜菊素、苹果香精、橘子香精及草莓香精中的一种或几种。

优选地，所述环孢素微乳口服液，含有如下组分配比：

所述的环孢素微乳口服液，采用以下方法进行制备：

(1)将环孢素溶于溶剂中，加入助表面活性剂、表面活性剂、油相搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入矫味剂使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH值至合适范围。

与现有技术相比，本发明制备的环孢素微乳口服液口感好、服用方便、稳定性好。

具体实施方式

以下实施例仅用于进一步说明本发明，但不限制本发明。

实施例1

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入阿司巴甜、苹果香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH4.5。

实施例2

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.0。

实施例3

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、草莓香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.5。

实施例4

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.0。

实施例5

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.0。

实施例6

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH3.5。

实施例7

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.0。

实施例8

制备工艺：

(1)将环孢素溶于无水乙醇中，加入丙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、中脂肪酸甘油酯搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于水中，加入甜菊素、橘子香精使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH5.0。

对比实施例1

制备工艺：

(1)将环孢素溶于二乙二醇单乙基醚中，加入聚乙二醇200、Triton X-100、司盘80搅拌至澄清；

(2)将甜菊素、橘子香精加入水中，搅拌使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L醋酸溶液调节pH5.0。

对比实施例2环孢素微乳浓缩液

制备工艺：

将环孢素溶于无水乙醇中，加入聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40、油酸、丙二醇搅拌至澄清。

对比实施例3环孢素口服液

制备工艺：

将环孢素溶于乙醇和丙二醇混合液中，加入聚氧乙烯蓖麻油、油酸、维生素E、蒸馏水搅拌至澄清。

对比实施例4环孢素A注射用微乳

将10g中碳链三甘油酯(GTCC)和15g的HS15及5g卵磷脂在40℃的水浴下加热使之混合均匀，冷却至室温后加入5g的PEG-400和10g的乙醇，然后将2.5g环孢素A溶解在上述油和表面活性剂的混合物中，加入注射用水至100g，并调节pH值5.0-7.0，搅拌均匀即得微乳浓缩液，制得的产品用0.45μm的微孔滤膜过滤，灌封、灭菌即得。

对比实施例5环孢素眼用溶液

制备工艺：

将环孢素加入中链甘油三酸酯中，使之溶解；在水相中加入苯扎氯铵，使之溶解；在水相中加入甘露醇，使之溶解；将聚氧乙烯氢化蓖麻油40及正丁醇、甘油加入水相中，使之溶解；搅拌下，将油相加入水相中，混合均匀；用水补充至全量，即得。

对比实施例6雷帕霉素与环孢素A纳米口服微乳液

将聚山梨醇酯20与二氧二醇单乙烯醚按照质量比2:1混合均匀，混合均匀后与丙二醇单辛酸酯、去离子水按照质量百分比为：35：30：35混合，轻轻摇晃即可制备得到直径为30纳米的水包油微乳液体系；将10毫克免疫抑制剂剂环孢素A固体或10毫克雷帕霉素固体粉末溶解在1毫升微乳液纳米溶液中，在37度温度下，以200转/分的转速下匀速混合24小时，得到直径为30纳米口服溶液体系免疫抑制剂纳米口服溶液体系，通过生物体外释放实验和细胞存活实验，证明所制备的微乳液体系具有生物相容性，得到疏水性免疫抑制剂环孢素A纳米口服溶液体系。

结果验证例

(1)口感：对比例4-6为非口服制剂，不作评价。实施例1-8及对比例1为稀释后的微乳液，且进行矫味，口感好。对比例2为微乳浓缩液，不利于直接服用，用水稀释后口感也较差。对比例3未进行矫味，口感差。

(2)微乳粒径：取本品，采用激光散射粒度分布仪测定，平均粒径不得过100nm。

(3)含量的测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以四氢呋喃-0.05mol/L磷酸(45:55)为流动相，柱温为50℃，检测波长为220nm。理论板数按环孢素峰计算，不得低于2000。精密量取取本品适量，以四氢呋喃-水(4：1)为溶剂，稀释制成每1ml中含环孢素2mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取环孢素对照品适量，以同溶剂溶解并稀释制成同浓度的溶液，摇匀，作为对照品溶液。精密量取上述两种溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法计算供试品中C₆₂H₁₁₁N₁₁O₁₂的含量。

(4)有关物质测定：取环孢素、杂质005-95、环孢素H、异环孢素A和异环孢素H对照品各适量，分别以四氢呋喃-水(4:1)为溶剂溶解并稀释制成每1ml中各含约0.2mg的溶液，摇匀，将上述各溶液等量混合后吸取10μl，照含量测定项下的色谱条件，注入液相色谱仪，调节色谱系统，使各峰之间的分离度均符合要求；另精密量取含量测定项下的供试品溶液1ml，置200ml量瓶中，用同溶剂稀释至刻度，摇匀，作为限度对照液(0.5％)。精密吸取该溶液10μl，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使限度对照液主峰的面积能达到满足正确积分的要求。再精密量取含量测定项下的供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰出现，扣除辅料峰，各杂质峰面积之和不得大于限度对照液的峰面积(0.5％)。

表各实施例测定结果

从表中可知，本发明实施例1-5，加速6个月微乳平均粒径、含量、有关物质均无明显变化。

实施例6降低微乳pH值，加速后有关物质变化较大，但由于含处方量的枸橼酸钠，经加速试验粒径无明显变化。实施例7显著增加枸橼酸钠的用量，有关物质及平均粒径均有较大增加，但较对比例2-6变化小。

实施例8更换实施例中的油相、表面活性剂等，因其与环孢素的相容性较实施例中辅料差，故有关物质稳定性比实施例差，但由于pH值选择合适，稳定性较对比例2-6好。虽然由于油相、表面活性剂等选择的原因导致初始粒径较大，但由于含枸橼酸钠，加速试验后粒度变化仍较对比例2-6好。

对比例1去掉枸橼酸钠，采用2mol/L醋酸调节pH值，加速后粒径变化明显。对比例2-6采用现有技术。对比例2为微乳浓缩液，试验时取1ml加水稀释至50ml后进行检测，加速后有关物质及粒径均有明显增加，粒度已不符合微乳的要求。对比例3-6经加速试验有关物质及粒径均有明显增加。

Claims (5)

1. 一种环孢素微乳口服液，其特征在于，由环孢素、枸橼酸钠、枸橼酸、油相、表面活性剂、溶剂、助表面活性剂、纯化水及矫味剂组成；所述的油相为司盘80、表面活性剂为TritonX-100、助表面活性剂为聚乙二醇200，溶剂为二乙二醇单乙基醚；所述的枸橼酸钠在口服液中的用量为5mmol/L-15mmol/L；所述的口服液用2mol/L枸橼酸溶液调节口服液pH值至4.5-5.5；所述环孢素微乳口服液中各组分配比为：

环孢素 5-15g/L

二乙二醇单乙基醚 5-18g/L

聚乙二醇200 2-9g/L

TritonX-100 30-50g/L

司盘80 25-35g/L

枸橼酸钠 5-15mmol/L

2mol/L枸橼酸 适量

矫味剂 适量

纯化水 至1000ml。

2.根据权利要求1所述的环孢素微乳口服液，其特征在于，枸橼酸钠在口服液中的用量为10mmol/L。

3.根据权利要求1所述的环孢素微乳口服液，其特征在于，用2mol/L枸橼酸溶液调节口服液pH值至pH5.0。

4.根据权利要求1所述的环孢素微乳口服液，其特征在于，所述的矫味剂为阿司巴甜、甜菊素、苹果香精、橘子香精及草莓香精中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的环孢素微乳口服液，其特征在于，采用以下方法进行制备：

(1)将环孢素溶于溶剂中，加入助表面活性剂、表面活性剂、油相搅拌至澄清；

(2)将枸橼酸钠溶于纯化水中，加入矫味剂使溶解；

(3)在搅拌条件下将(1)加入(2)中，至形成澄清透明溶液，用2mol/L枸橼酸溶液调节pH值至合适范围。