CN106334185B - 一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂及其制备方法 - Google Patents

一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂及其制备方法。本发明通过将多肽类药物加到助表面活性剂中，搅拌至多肽类药物湿润，得到溶液A；将溶液A加入到油相溶液中溶解，混匀，得到溶液B；往溶液B中加入表面活性剂，混匀，得到含多肽类药物自纳米乳剂；将含多肽类药物自纳米乳剂灌封于肠溶软胶囊中，得到含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂。本发明提供的制备方法简单，得到的纳米微乳粒径小，99.3％的乳滴粒径＜44nm，粒径小，易于吸收，生物利用度高；Zeta电位为‑6.4mv，纳米乳具有更好稳定性。

Description

一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种口服制剂，特别涉及一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂及其制备方法。
背景技术
随着生物技术和基因工程的发展，越来越多的多肽类药物用于临床治疗，而多肽类药物大多具有生物活性，对热与酶等多种因素均不稳定，故常采用注射给药。但长期注射给药不仅给患者带来极大的痛苦和不便，还可引起脂肪萎缩等多种不良反应，而且需要专门的注射技术及器材，成本高，医疗费用大。因此，国内外药学工作者一直致力于多肽类药物非注射途径的研究，如鼻腔、直肠、口服、肺、眼、透皮吸收等给药途径。在上述给药途径中，口服给药因其使用方便、安全可靠、吸收稳定、患者的依从性好，可接受程度高，而尤为引人关注。但该类药物若不经特殊包埋技术处理，直接口服，由于：①.胃液酸性环境和消化道的消化酶作用而失活；②.通常分子量较大，且分子间有较强的聚合趋势，故难于通过扩散透过肠壁吸收；③.肝脏的首过作用，如INS直接口服的生物利用度一般小于0.5％，无临床使用价值。对于多肽类药物如胰岛素(INS)的口服给药研究很多，较早的有脂质体、乳剂、肠溶制剂等，但生物利用度仍低于5％；近年的有微球、微乳、纳米粒等.但结果仍不理想。虽然目前也有INS自乳化口服制剂的研究，但由于未能研发出适合于INS的油相、表面活性剂、助表面活性剂的品种及其比例的最佳组合，结果仍然不能适合临床使用，故至今仍没有口服的INS自乳化制剂上市。因此，我们在此研究油相、表面活性剂、助表面活性剂最佳组合的INS自纳米乳化口服制剂，提高胰岛素的口服生物利用度。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂的制备方法。
本发明的另一目的在于提供通过上述制备方法得到的含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂。
本发明所提供的技术方案如下：一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂的制备方法，包含如下步骤：
(1)将多肽类药物加到助表面活性剂中，搅拌至多肽类药物湿润，得到溶液A；
(2)将溶液A加入到油相溶液中溶解，混匀，得到溶液B；
(3)往溶液B中加入表面活性剂，混匀，得到含多肽类药物自纳米乳剂；
(4)将含多肽类药物自纳米乳剂灌封于肠溶软胶囊中，得到含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂；
其中，油相、助表面活性剂和表面活性剂按体积比(20～30):(20～30):(40～60)配比；优选为按体积比(22～28):(23～27):(45～55)配比；更优选为按体积比22：23：55配比。
步骤(1)中所述的多肽类药物优选为胰岛素。
所述的胰岛素可为猪胰岛素、牛胰岛素、人胰岛素或基因重组人胰岛素；优选为人胰岛素。
步骤(1)中所述的助表面活性剂优选为二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇、乙醇和甘油中的一种或至少两种；优选为丙二醇。
步骤(2)中所述的油相溶液优选为中链甘油三酯、油酸聚乙二醇甘油酯、油酸、油酸乙酯和大豆油中的一种或至少两种；优选为中链甘油三酯。
步骤(3)中所述的表面活性剂优选为聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-8甘油辛酸/葵酸酯中的一种或至少两种；优选为聚氧乙烯氢化蓖麻油。
步骤(3)中所述的含多肽类药物自纳米乳剂中多肽类药物的终浓度优选为0.9mg/ml。
一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂，通过上述制备方法得到。
所述的含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂可形成带蓝色乳光透明、澄清的纳米乳，其中99.3％的乳滴的粒径＜44nm，Zeta电位值≥︱-6.4︱mv。
本发明的技术构思如下：
发明人将多肽类药物(如INS)加入经筛选出具有最佳组合的助表面活性剂、油相、表面活性剂复合物中，溶解，灌封于肠溶软胶囊，进入肠道后。含药复合物与肠液自发形成纳米乳(＜60nm)，脂溶性增加，易于跨膜运转，含有药物的脂质乳粒通过以下2条途径吸收进入血液循环：①经小肠上皮细胞胞饮吸收(50nm以下的粒子易被胞饮，见“陆彬.药物新剂型与新技术[M].人民卫生出版社2005(1)：345”)；②经小肠黏膜内的集合淋巴结(Peyer’spaches)中M细胞转运后透过上皮屏障进入淋巴和血液循环。本制剂所形成的乳粒粒径小(＜60nm),易于吸收；Zeta电位绝对值较高(-6.4mv)，使纳米乳具有较好的稳定性；乳化时间短(≤40s)，INS受破坏少，从而增加了药物的吸收，提高了生物利用度。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明提供的制备方法及处方组成简单：所用原料只由油相、表面活性剂、助表面活性剂及药物组成，制备不需要复杂的生产设备。制备方法越简单、处方组成越简单，制剂的质量越易于控制，制剂系统性质越稳定。
(2)本发明得到的制剂形成的纳米乳粒径小，99.3％的乳滴的粒径＜44nm，粒径小，易于吸收，生物利用度高；Zeta电位为-6.4mv，纳米乳具有更好稳定性。本纳米乳与环孢素A纳米乳的粒径、粒子分布、Zeta电位比较如表1所示。
表1本制剂与环孢素A纳米乳浓溶液比较
Figure BDA0001091786700000031
(3)本发明得到的制剂乳化速度快，形成纳米乳的时间短((乳化时间≤40S)。药物体系在体内能迅速形成纳米乳，可缩短多肽类药物与蛋白酶的接触时间，减少多肽类药物的破坏，提高多肽类药物的生物利用度。
(4)本发明得到的制剂降低糖尿病大鼠血糖的疗效明显。以模型组的AUC值为100％，药物组的降糖百分率为30％(药物组AUC值-模型组AUC值/模型组AUC值)；降糖峰值为20％。
附图说明
图1是胰岛素微乳粒子的粒径及分布图。
图2是胰岛素微乳Zeta电位的检测结果图。
图3是本制剂各剂量组给药后大鼠血糖浓度-时间曲线图。
图4是给药后各组大鼠血糖浓度-时间曲线下面积的统计结果图；其中，*P﹤0.05；**P﹤0.01。
图5是对比例1-4形成的溶液外观与本制剂形成纳米乳的外观相片图；其中，A为对比例4形成的微乳，B为本制剂形成的纳米乳，C为对比例1形成的乳剂，D为对比例3形成的微乳，E为对比例2形成的溶液。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1确定胰岛素(INS)自微乳系统最佳处方
(1)INS溶解度的试验
①不同测试样的制备：称取INS原料药(通化东宝药业股份有限公司)50mg/份，置5mL具塞刻度离心管中。分别加入不同油相、助表面活性剂、表面活性剂各5mL，密封后，涡旋混匀。于4±1℃放置，旋涡，溶解60h。以4000r/min离心10min。取上清液，用0.45μm微孔滤膜过滤，精密量取滤液0.2mL，加1.8mL浓度为0.01mol/L的HCl溶液，旋涡(前面是旋涡，请一致化)10min，4000r/min离心10min，取下层液，用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液0.1mL，加0.9mL0.01mol/L HCl溶液，混匀，得供试品。每组实验设置3个重复，检测结果取平均值。
油相为10种，具体为：中链甘油三酯、油酸聚乙二醇甘油酯、橄榄油、油酸、油酸乙酯、大豆油、玉米油、椰子油、向日葵油、聚乙二醇植物油。
助表面活性剂为8种，具体为：二乙二醇单乙基醚、油酸聚乙二醇甘油酯、无水乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、聚甘油脂肪酸酯、正辛醇。
表面活性剂为10种，具体为聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇–8甘油辛酸/葵酸酯、吐温–80、泊洛沙姆188、15-羟基硬脂酸酯聚乙二醇酯、月桂酸聚乙二醇甘油酯、平平加、Brij、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯。
②检测方法：
A、色谱条件：
色谱柱：大连依利特Sino Chrom300AODS-AP(4.6mm×250mm,i.d.5μm,
分析仪器有限公司)；
保护柱：Security Guard Cartridges Widepore C18(4.0mm×3.0mm，i.d.5μm，广州菲罗门科学仪器)；
流动相：0.1mol/L磷酸二氢钠水溶液(A)-乙腈(含0.1mmol/L的四丁基硫酸氢铵，磷酸调pH至2.3)(B)(73:27,v/v)；
流速：1.0mL/min；
柱温：25℃；
检测波长：214nm；
进样体积：10μL。
B、标准曲线制备：取INS对照标准品(中国食品药品检定研究院)适量，精密称定，用浓度为0.01mol/L的盐酸溶液制成浓度为1.0mg/mL的INS贮备液，置4℃避光保存；取INS贮备液适量，精密量取，用浓度为0.01mol/L的HCl溶液稀释得到浓度10、20、50、100、200μg/mL的标准系列溶液。分别进样10μl，按②A项下色谱条件测定INS峰面积。以对照品溶液的浓度(μg/mL)为横坐标(X)，其峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归，得回归方程，绘制标准曲线。
C、样品测定：
分别取①中的供试品10μl，进样，测定INS的吸收峰面积，按外标法计算INS的量。
③结果：
能较大程度溶解INS的油相为5种，具体为：中链甘油三酯386±48.1μg/mL、油酸聚乙二醇甘油酯537.8±48.8μg/mL、油酸2655.3±188.1μg/mL、油酸乙酯325.5±51.11μg/mL、大豆油178.7±70.5μg/mL。
能较大程度溶解INS的助表面活性剂为5种，具体为：二乙二醇单乙基醚301±54.2μg/mL、油酸聚乙二醇甘油酯537.8±48.8μg/mL、无水乙醇128.5±33.01μg/mL、丙二醇4295.8±234.11μg/mL、聚乙二醇440.5±44.11μg/mL。
能较大程度溶解INS的表面活性剂为2种，具体为：聚氧乙烯氢化蓖麻油420.2±47.48μg/mL、聚乙二醇–8甘油辛酸/葵酸酯459.2±49.51μg/mL。
(2)最佳油相、表面活性剂、助表面活性剂的确定
①根据步骤(1)的实验结果，在油相、表面活性剂、助表面活性剂3种组分中先固定其中2种成分的用量，改变另一种成分的用量，混匀后，分别吸取各混合液0.10mL，分别向混合液迅速加入10mL超纯水，振摇，观察乳化情况，根据乳化结果绘制伪三元相图。
②结果：得到的伪三元相图中，当油相为中链甘油三酯、表面活性剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油、助表面活性剂为丙二醇时，微乳区域最大。
(3)正交试验优化处方比例
根据步骤(2)确定的处方组合，以油相、表面活性剂、助表面活性剂的比例为考察因素，各设3个水平(见表2)，选用L9(34)进行正交试验(见表3)，采用拉丁方将各组份按表3混匀，分别吸取各混合液0.10mL，向混合液迅速加入10mL超纯水，振摇，以形成均一、透明、外观不再变化为乳化完全，记录外观变化情况、乳化时间。以滴加水过程的变化情况与微乳的外观、粒径为考察指标进行评分(评分标准见表4)，结果如表3所示，选择评分最高的配伍组合，为A1B1C1。
表2正交试验考察的因素与水平
Figure BDA0001091786700000061
表3L9(34)正交试验设计表与处方筛选结果
Figure BDA0001091786700000062
表4评分标准：
Figure BDA0001091786700000063
Figure BDA0001091786700000071
实施例2
(1)根据实施例1确定的最佳组合，将INS加到丙二醇中，搅拌，待INS湿润，得到溶液A；将溶液A加到中链甘油三酯中，搅拌溶解，得到溶液B；往溶液B中加入聚氧乙烯氢化蓖麻油，混匀，得含INS、中链甘油三酯、丙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油的胰岛素自纳米乳液(下简称：INS自纳米乳剂)，装于密封的小瓶中，密封，于2-8℃储存。
配方组成：中链甘油三酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油和丙二醇按体积比0.22：0.55：0.23配比，INS是每mL中链甘油三酯-聚氧乙烯氢化蓖麻油-丙二醇中按0.9mg添加。同时设置空白对照自纳米乳剂，即不加入INS。
(2)包封率的测定：
①供试品制备：
取步骤(1)制备得到的INS自纳米乳剂2份，每份0.15mL。其中1份，迅速加入4.5mL浓度为0.01mol/L的HCl溶液，振摇，放置10min，旋涡10min，于2-8℃放置12h，旋涡10min，在4000r/min条件下离心10min，取下层液，过滤，得滤液(供试品1)备用；另1份，迅速加入4.5mL超纯水形成纳米乳，在2000r/min条件下离心10min，得滤液(供试品2)，备用。
②加样回收率的测定：
精密量取空白对照自纳米乳剂9份，每份0.15mL，分3组，每组3份；另分别精密量取浓度为20.20、101.00、202.00的胰岛素标准对照品溶液各3份，每份1mL，分别加入3.5mL0.01mol/L的HCl溶液，混匀，然后迅速加到空白对照自纳米乳剂中，振摇，放置10min，旋涡10min，于2-8℃放置12h，旋涡10min，在4000r/min条件下离心10min，取下层液，过滤，取滤液10μL，按实施例1步骤(1)②A进样分析，记录峰面积，结果：加样回收率R为98.51％，相对标准偏差RSD为0.18％(见表5)
表5加样回收率试验结果
Figure BDA0001091786700000072
Figure BDA0001091786700000081
②包封率的测定：分别取供试品1和供试品2各10μL进样，按实施例1(1)②A色谱条件测定INS的吸收峰面积。按外标法分别计算供试品1(C总)和供试品2(C水)中的INS的浓度。胰岛素纳米乳的包封率按下式计算：
Figure BDA0001091786700000082
C水为水相中药物质量浓度，C总为纳米乳中总的药物质量浓度。98.51％为上一步骤测得的回收率，测得包封率结果如下表6所示。
表6纳米乳中胰岛素包封率的测定结果
Figure BDA0001091786700000083
实施例3
INS自纳米乳剂的外观及乳化速率的考察
吸取施例2步骤(1)制备的INS自纳米乳剂3份，每份0.1mL，分别迅速加入10mL超纯水。以形成稳定的澄清透明带蓝色乳光的纳米乳为乳化完全，观察乳化过程外观变化及所形成的纳米乳的外观，记录乳化时间(从加水开始计时)。结果：乳化过程溶液外观变化顺序为：澄清，浑浊，澄清同时溶液呈蓝色，所形成纳米乳的外观为：澄清、透明、呈蓝色乳光，待乳化完全后，计时，乳化时间为40±0.1s。
实施例4
微乳粒径考察
分别取空白纳米乳(实施例2步骤(1)制备的空白对照自纳米乳剂0.15mL，迅速加入4.5mL超纯水后得到的纳米乳)与载药纳米乳(实施例2步骤(1)制备的INS自纳米乳剂0.15mL，迅速加入4.5mL超纯水后得到的纳米乳)适量，用动态粒度仪(Nano-2s90激光动态粒度仪)测定其粒径的大小及分布。记录测定结果。
粒径测定结果如图1所示：空白纳米乳粒径的范围：15≤d≤68nm，平均粒径29.2nm，分布在18-51nm的粒子占总粒子数的96.1％；载药纳米乳粒径的范围：15≤d≤51nm，平均粒径29.24nm，分布在15-44nm的粒子占总粒子数的99.3％。
实施例5
Zeta电位的测定
完成粒径测定后，另取纳米乳适量，用动态粒度仪(Nano-2s90激光动态粒度仪)分别测定空白纳米乳(同实施例4)与载药纳米乳(同实施例4)的Zeta电位。记录测定结果。
Zeta电位测定结果如图2所示：空白纳米乳的Zeta电位为：-0.73mv；载药纳米乳的Zeta电位为：-6.4mv。
实施例6
药效学考察
为了消除内源性INS的干扰，本研究选用Ⅰ型糖尿病模型大鼠为实验动物，以大鼠血糖变化值为本制剂药效的考察指标，分别将实施例2步骤(1)制备得到的INS自纳米乳剂、生理盐水进行十二指肠给药，用血糖试纸测定各时间点的血糖值，以腹腔注射INS注射液为阳性对照，计算血糖浓度-时间曲线下面积(AUC)，比较模型组与给药组的AUC值的差异，考察INS自纳米乳剂的药效。
①实验方法：
A、实验用溶液配制
链脲佐菌素溶液配制：精密称取链脲佐菌素(STZ，Sigma公司)适量，用0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH4.2-4.4)溶解，过滤，制成100mg/mL，于4℃保存。
B、Ⅰ型糖尿病大鼠模型建立
选用SPF级SD大鼠(广东省医学实验动物中心)，100只，雄性，编号，体重200±20g。分正常对照组(10只)和造模组(90只)，造模组腹腔注射(i.p.)50mg/kg STZ，正常对照组给予等量生理盐水，第8天剪尾取血，用血糖试纸测定随机血糖值，第9天测定空腹血糖值，随机血糖值≥16mmol/L，空腹血糖值≥11mmol/L，即确定为造模成功。
C、分组与给药
取造模成功的Ⅰ型糖尿病大鼠90只，禁食12h，不禁水。随机分成9组，分别为模型组、阳性组(阳性对照)、给药组(本制剂B、C、D组；不同处方组，分别为下面对比例1-4制成的药剂)7组，每组10只，称体重。腹膜腔内注射(i.p.)2％的戊巴比妥钠溶液0.2mL/100g进行麻醉，麻醉后，在上腹部中线切口，分离十二指肠。给药组，用注射器直接将药物注射进十二指肠，接着注射4mL 37℃的水，模型组给等量生理盐水，阳性组i.p.胰岛素注射液，缝合腹部切口。另取正常大鼠10只为空白组(空白对照)，不进行手术，不给药。分别于给药前，给药后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4、6、8、10h时间点从尾静脉取血，用血糖试纸测定各时间点的血糖值。各组大鼠给药剂量及方法见(表7)
表7各组动物给药剂量及途径
Figure BDA0001091786700000101
D、数据处理
结果以
Figure BDA0001091786700000102
表示，采用SPSS 13.0统计分析软件对数据进行统计分析，组内比较采用t检验法，各组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)，P<0.05有统计学差异，P<0.01有显著的统计学差异。
②实验结果
实验结果如图3和图4所示，各组大鼠的AUC值见表8。AUC值越大，说明血糖降低越少，降血糖效果越差。从结果看，本制剂各剂量组的降血糖效果均显著优于对比例1-4的降血糖效果。阳性组、本制剂B、C、D组(下称B、C、D组)与模型组AUC比较均有统计学差异，其中阳性对照组、D组有显著性统计学差异(P﹤0.01)，B、C组差异具有统计学意义(P﹤0.05)，且B、C、D组AUC呈现出剂量相关性；而对比例1-4的AUC值虽然略小于模型组，但差异没有统计学意义(P＞0.05)。
表8各组大鼠的血糖曲线下面积(AUC)
Figure BDA0001091786700000111
注：*P﹤0.05；**P﹤0.01
对比例1
(1)将0.9mg INS加到0.20ml助表面活性剂丙二醇中，搅拌至INS湿润，得到溶液A；将溶液A加入到0.35ml油相大豆油中溶解，混匀，得到溶液B；往溶液B中加入0.45ml表面活性剂聚氧乙烯氢化蓖麻油，得到胰岛素乳液。该胰岛素乳液外观不透明、乳白色，在黑色背景下无蓝色(见图5-C)。
(2)检测其乳化时间(步骤同实施例3)、微乳粒径(步骤同实施例4)和Zeta电位(步骤同实施例5)，结果如表9所示。
对比例2
(1)将0.9mg INS加到0.1ml助表面活性剂聚乙二醇中，搅拌至INS湿润，得到溶液A；将溶液A加到0.1ml油相中链甘油三酯中溶解，混匀，得到溶液B；往溶液B中再加入0.8ml表面活性剂聚乙二醇-8甘油辛酸/葵酸酯，得到胰岛素溶液。该胰岛素溶液外观透明、无色，在黑色背景下无蓝色乳光(见图5-E)。
(2)检测其乳化时间(步骤同实施例3)、微乳粒径(步骤同实施例4)和Zeta电位(步骤同实施例5)，结果如表9所示。
对比例3
(1)将0.9mg INS加到0.23ml助表面活性剂聚乙二醇中，搅拌至INS湿润，得到溶液A；将溶液A加到0.22ml油相中链甘油三酯中溶解，混匀，得到溶液B；往溶液B中再加入0.55ml表面活性剂聚乙二醇-8甘油辛酸/葵酸酯，得到胰岛素自微乳液。该胰岛素乳液外观半透明、乳白色，在黑色背景下略带蓝色(见图5-D)。
(2)检测其乳化时间(步骤同实施例3)、微乳粒径(步骤同实施例4)和Zeta电位(步骤同实施例5)，结果如表9所示。
对比例4
(1)将0.9mg INS加到0.25ml助表面活性剂丙二醇中，搅拌至INS湿润，得到溶液A；将溶液A加到0.25ml油相中链甘油三酯中溶解，混匀，得到溶液B；往溶液B中再加入0.50ml表面活性剂聚氧乙烯氢化蓖麻油，得到胰岛素自微乳液。该胰岛素乳液外观半透明、乳白色，在黑色背景下呈蓝色(见图5-A)。
(2)检测其乳化时间(步骤同实施例3)、微乳粒径(步骤同实施例4)和Zeta电位(步骤同实施例5)，结果如表9所示。
表9对比例3-4形成的微乳与本制剂形成的微乳粒径和Zeta电位的比较
Figure BDA0001091786700000121
注：NT表示未检测，这是由于根据实验的经验判断及本研究的目的要求，对比例1的乳滴粒径＞1μm，且远远达不到本研究目的的要求，因此没有检测其粒径及Zeta电位的必要。
以上结果说明，纳米乳的粒径是提高药物生物利用度的关键。而油相、表面活性剂、助表面活性剂的种类及其组成比例决定着能否形成透明稳定的纳米乳，以及纳米乳的粒径、Zeta电位和乳化时间。纳米乳的粒径越小，Zeta电位绝对值越高，乳化时间越短，制剂的稳定性越好，越易吸收，胰岛素在胃肠道被破坏也越少。实验证明，本制剂中油相、表面活性剂、助表面活性剂的种类及其组成比例所形成纳米乳的粒径、Zeta电位和乳化时间及降血糖效果显著优于目前公开发表的同类制剂，是目前最佳的配方组成。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)将多肽类药物加到助表面活性剂中，搅拌至多肽类药物湿润，得到溶液A；
(2)将溶液A加入到油相溶液中溶解，混匀，得到溶液B；
(3)往溶液B中加入表面活性剂，混匀，得到含多肽类药物自纳米乳剂；
(4)将含多肽类药物自纳米乳剂灌封于肠溶软胶囊中，得到含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂；
其中，油相、助表面活性剂和表面活性剂按体积比20～30:20～30:40～60配比；
步骤(1)中所述的多肽类药物为胰岛素；
步骤(1)中所述的助表面活性剂为二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇、丙二醇、乙醇和甘油中的一种或至少两种；
步骤(2)中所述的油相溶液为中链甘油三酯、油酸聚乙二醇甘油酯、油酸、油酸乙酯和大豆油中的一种或至少两种；
步骤(3)中所述的表面活性剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-8甘油辛酸/葵酸酯中的一种或至少两种。
2.根据权利要求1所述含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂的制备方法，其特征在于：所述的胰岛素为猪胰岛素、牛胰岛素、人胰岛素或基因重组人胰岛素。
3.根据权利要求1所述含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂的制备方法，其特征在于：步骤(3)中所述的含多肽类药物自纳米乳剂中多肽类药物的终浓度为0.9mg/ml。
4.一种含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂，其特征在于：通过权利要求1～3任一项所述的制备方法得到。
5.根据权利要求4所述的含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂，其特征在于：所述的含多肽类药物自纳米乳剂的口服制剂是能形成带蓝色乳光透明、澄清的纳米乳，其中99.3％的乳滴的粒径＜44nm，Zeta电位值≥︱-6.4︱mv。
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