BR112013011424B1

BR112013011424B1 - Método para extração de lipídeos a partir da biomassa

Info

Publication number: BR112013011424B1
Application number: BR112013011424-0A
Authority: BR
Inventors: Annika Malm; Reijo Tanner; Mervi Hujanen
Original assignee: Neste Oyj
Priority date: 2010-11-08
Filing date: 2011-11-07
Publication date: 2021-08-10
Also published as: CN103328620A; CN103270147A; DK2450425T3; IL225981A0; KR20140007065A; HK1189022A1; US8845765B2; WO2012062962A1; PT2450425E; MX2013005142A; CA2817185A1; ES2641494T3; JP5893636B2; BR112013011424A2; AU2011327956A1; CN103328620B; US8648210B2; KR101990877B1; CA2817186A1; EP2450425B1

Abstract

método para extração de lipídeos a partir de biomassa. a presente invenção se refere a um método para a recuperação de lipídeos a partir de biomassa microbiana. o método compreende o fornecimento de biomassa microbiana úmida que contém lipídeos para extração sem romper as paredes celulares de biomassa e, subsequentemente, extrair a referida biomassa úmida com um líquido de extração a uma temperatura elevada de pelo menos 170º c e pressão elevada. a combinação da temperatura e da pressão é, tal que os referidos lipídeos nas referidas células são colocados em contato com o referido extratante. subsequentemente, os lipídeos extraídos são recuperados a partir de ou com o referido extratante.

Description

Campo da Invenção

A presente invenção se refere a um método para a extração de lipidios a partir da biomassa microbiana. Mais especificamente, o método se refere a melhoria do rendimento de extração e / ou a pureza dos lipidios provenientes da biomassa microbiana úmida.

Antecedentes da Invenção

Microrganismos, tais como algas, arqueobactérias, bactérias e fungos, incluindo os fungos filamentosos, bolores e leveduras podem conter triglicerideos até 80% do seu conteúdo total de matéria seca. No entanto, o óleo a partir da biomassa microbiana, o qual é adequado como precursor para a produção de combustível é escasso no mercado. Isto é, principalmente, devido à falta de métodos econômicos e eficientes para fornecer óleo de boa qualidade a partir da biomassa microbiana.

Os métodos disponíveis para a extração de hidrocarbonetos ou lipidios a partir de biomassa microbiana normalmente requerem a biomassa seca e/ou células microbianas para ser rompidas. A secagem da biomassa consome muita energia e é, por exemplo, realizada após a centrifugação por secagem por contato, secagem por pulverização ou ainda por liof ilização. O teor de água tipico ou o teor de matéria seca da biomassa é dependente do material microbiano utilizado. Teores de matéria seca, normalmente, a partir de 15 até 40% em peso podem ser alcançados por meio de técnicas de colheita de células tradicionais, como a centrifugação ou filtração. Essencialmente, ele é tradicionalmente destinado a tão baixo conteúdo de água livre quanto possivel a fim de maximizar os rendimentos de extração.

Um método alternativo para a aquisição de óleo a partir da biomassa é para aplicar extratantes não seletivos que tipicamente produzem óleo contendo quantidades elevadas de impurezas. As impurezas, tais como metais, fósforo e aminoácidos causam problemas, por exemplo, na produção de combustivel sob a forma de venenos catalíticos e / ou materiais corrosivos. Portanto, muitas vezes é necessário usar o pós-processamento para a remoção desses componentes indesejáveis a partir do produto de óleo extraido.

Especialmente, a elevada quantidade de fosfolipidios na biomassa microbiana, ou seja, a quantidade de lipidios da membrana a partir do conteúdo total de lipidios é problemática. Esses fosfolipidios estão, tipicamente, na forma de sais de metais fornecendo alto teor de metais no óleo. Tradicionalmente, estes fosfolipidios têm sido removidos a partir da fração de bio-óleo bruto antes do processamento adicional, tais como refinamento com processos catalíticos.

Em geral, os métodos disponíveis sofrem tanto com a falta de seletividade para a produção de óleo de boa qualidade quanto ao rendimento pobres que são compensados por medidas adicionais de processamento ou seleção de condições de processamento economicamente inviáveis.

O documento US 2007218175 descreve um método para a extração de uma planta oleaginosa, com os ésteres de alquil de ácidos graxos a temperaturas de 15 Ca 180 C. Os inventores relataram que geralmente melhores rendimentos são obtidos com temperaturas mais elevadas, mas, por outro lado, temperaturas mais elevadas resultam em produtos de óleo com maiores quantidades de fósforo. A utilização de temperaturas mais elevadas de extração, assim, não é considerada vantajosa e extração da biomassa microbiana úmida não é divulgada.

O documento US 4,857,329 descreve um método de extração onde fungos é extraído usando um solvente num estado supercritico, ou uma mistura de um solvente no estado supercritico e um cosolvente selecionado entre butano, pentano, hexano, heptano e ciclohexano. As pressões aplicadas, a fim de fornecer o estado supercritico são na faixa de 200-600 kg / cm2. As células de fungos são desidratadas até um teor de umidade de 50 - 70%, aquecida a temperaturas de 150 - 200 C e extraidas com, pelo menos, o solvente em estado supercritico a temperaturas abaixo de 90 C. Não há análise de dado sobre as impurezas presentes no produto de óleo obtido.

O documento WO 2008034109 revela um método para a recuperação de ácidos graxos sob a forma de ésteres de alquil a partir de biomassa microbiana, tais como microalgas, bactérias e fungos. A biomassa tratada a temperaturas elevadas até 450 C e uma pressão elevada, tal como até 40 Mpa (cerca de 400 bar). Este tratamento de alta temperatura tem por objetivo e resulta em ruptura das células e à formação de uma fase oleosa. Um álcool, tal como metanol ou etanol, é adicionado à fase oleosa e ésteres de alquil (FAME ou FAEE) são formados. Co- solventes, tais como alcanos, e catalisador, tal como ácidos orgânicos, podem ser utilizados. Reações de esterificação exigem ambiente essencialmente livre de água e uma elevada quantidade de álcool presente.

O objeto da presente invenção é proporcionar um método para a remoção eficiente de lipidios, especialmente, triglicerideos, a partir de biomassa úmida.

Um outro objetivo da presente invenção é fornecer um método eficiente para a produção de lipidios a partir de biomassa úmida, o qual o produto de lipidios tem um teor muito baixo de impurezas, tais como fósforo e / ou de metais prejudiciais.

Ainda outro objetivo da presente invenção é proporcionar um método para a produção de lipidios adequada para o uso em processos de refinação catalítica para a produção de vários componentes de hidrocarbonetos, biocombustiveis e diesel renovável.

Sumário da Invenção

Os inventores descobriram que o óleo de lipidios é obtido com bom rendimento quando a biomassa microbiana úmida é extraida sob condições de temperatura e pressão elevadas. Além disso, a qualidade do óleo recuperado é muito melhor em comparação com a extração a temperaturas e condições de extração convencionais. O óleo recuperado foi encontrado para ter um baixo teor de fósforo e metais. Usando extração convencional, como a extração de hexano e evaporação do hexano, a 100° C como temperatura máxima tipica, o conteúdo de metal, do óleo extraído é claramente mais elevado.

A presente invenção fornece um método para melhorar a pureza e / ou o rendimento do óleo proveniente da biomassa microbiana úmida, como descrito na reivindicação 1.

Por exemplo, fosfolipidios, normalmente, tendem a acumular-se na fase de óleo, juntamente com os lipídios neutros quando se extrai a biomassa microbiana. O produto extraído obtido da presente invenção contém, principalmente, gorduras e óleos na forma de triglicerídeos.

Uma importante vantagem da presente invenção é que nenhuma energia consumida na secagem é necessária antes de realizar a extração da biomassa úmida. Também não é necessário romper mecanicamente as células microbianas, a fim de melhorar o rendimento do óleo.

Além disso, o teor de impureza e, especialmente, o conteúdo em fósforo do óleo é reduzida drasticamente, o que aumenta o ciclo de vida dos catalisadores nos subsequentes processos de refinamento de óleo e reduz a necessidade de pré-tratamentos adicionais. Além disso, o rendimento total de óleo pode ser aumentado.

No método da presente invenção, a necessidade de pré ou pós-tratamento para remoção de fosfolipidios antes das etapas de refinamento é, assim, evitada.

Breve Descrição dos Desenhos

A Figura 1 mostra a produção de óleo como a percentagem da quantidade total de lipídios e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração de microalgas Nannochloropsisextraída com heptano, de acordo com o exemplo 1.

A Figura 2 mostra a produção de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração de microalgas Nannochloropsis extraída com heptano de acordo com o exemplo 2.

A Figura 3 mostra a produção de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração para as bactérias Rhodococcus extraídos com heptano, de acordo com o exemplo 3.

A Figura 4 mostra a produção de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração para microalgas Chlorella extraída com heptano, de acordo com o exemplo 4.

A Figura 5 mostra o rendimento de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração para fungos Mortierella extraídos com heptano, de acordo com o exemplo 5.

A Figura 6 mostra o rendimento de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração para microalga Dunaliella seca extraída com heptano, de acordo com o exemplo comparativo 1.

A Figura 7 mostra a produção de óleo e os níveis de impurezas, como uma função da temperatura de extração para bactérias Rhodococcus secas extraídas com heptano, de acordo com o exemplo comparativo 2.

Descrição Detalhada da Invenção

O termo "lipídeo" se refere a uma substância oleosa, cuja molécula contém, geralmente, como uma parte, de uma cadeia de hidrocarboneto alifático, que se dissolve em solventes orgânicos não polares, mas é fracamente solúvel em água. Os lipídios são um grupo essencial de moléculas grandes em células vivas. Os lipídios compreendem, por exemplo, gorduras, óleos, ceras, ésteres de cera, esteróis, terpenos, isoprenóides, carotenóides, polihidroxialcanoatos, ácidos graxos, álcoois graxos, ésteres de ácidos graxos, fosfolipídios, glicolipídios, esfingolipídios e acil-gliceróis, tais como monoglicerídeos (monoacilglicerol) , diglicerídeos (diacilglicerol) ou triglicerídeos (triacilglicerol, TAG).

Na presente invenção, os lipídios desejados a serem recuperados no produto incluem gorduras, óleos, ceras e ácidos graxos e seus derivados.

Pelo termo "biomassa microbiana" significa biomassa derivada de ou contendo micro-organismos, incluindo bactérias, cianobactérias, fungos, tais como leveduras, fungos filamentosos e bolores, arqueobactérias, protistas, plantas microscópicas, tais como algas ou microalgas, plâncton e planaria. A maioria dos microorganismos é unicelular, ou seja, única-célula, no entanto, alguns organismos multicelulares também são microscópicos. Os microrganismos facilmente acumulam lipidios ou que tenham sido geneticamente modificados para acumular lipidios ou para melhorar o acúmulo de lipidios.

Em uma modalidade preferida da presente invenção, lipideo contendo biomassa microbiana é selecionado de entre o grupo de bactérias, cianobactérias, fungos, tais como leveduras, fungos filamentosos e bolores, arqueobactéria, protistas, plantas microscópicas, tais como algas, microalgas, plâncton e planária, mais preferencialmente, de microalgas, bactérias, fungos, fungos filamentosos, bolores e leveduras.

Em uma concretização preferida da biomassa microbiana compreende gêneros microalgae composto por Dunaliella, Chlorella, Botryococcus, Brachiomonas, Chlorococcum, Crypthecodinium, Euglena, Haematococcus, Chlamydomas, Isochrysis, pleura, Chrysa, Pavlova, Prototheca, Phaeodactyluin, Pseudochlorella, Parachlorella , Bracteococcus, Scenedesmus, Skeletoneina, Chaetoceros, Nitzschia, Nannochloropsis, Navicula, Nannochloris, Scihizochytrium, Sceletonema, Thraustochytrium, Ulkenia, Tetraselmis e Synechocystis. O método mostrou ser, particularmente, eficaz com microalgas selecionada de entre o grupo consistindo de Nannochloropsis sp., Dunaliella sp. Tal como Dunaliella tertiolecta, Phaeodactylum sp. Tal como Phaeodactylum tricornutum, e Chlorella sp. Tal como Chlorella pyrenoidosa capaz de incorporar um alto teor de lipidios.

Em uma outra concretização preferida, a biomassa microbiana compreende espécies fúngicas, especialmente as espécies de fungos filamentosos pertencentes aos seguintes gêneros Aspergillus, Mortierella, Chaetomium, Claviceps, Cladosporidium, Cunninghamella, Emeri-Cella, Fusarium, Glomus, Mucor, Paecilomyces, Penicillium, Pythium, Rhizopus, Trichoderma, Zygorhynchus, Humicola, Cladosporium, Malbranchea, Ustilago, especialmente, aquelas espécies que têm grandes quantidades de lipidios e ácidos graxos essenciais. De preferência, a biomassa microbiana compreende Mortierella isabellina, Mucor, Rhizopus ou Aspergillus.

Ainda numa outra concretização preferida, a biomassa microbiana compreende levedura oleaginosa pertencente aos seguintes gêneros clavispora, Deparyomyces, Pachysolen, Kluyveromyces, Galactomyces, Hansenula , Saccharomyces, Waltomyces, Endomycopsis, Cryptococcus, tais como Cryptococcus curvatus, Rhodosporidium,como Rohodosporidium toruloides, Rhodotorula, tai como Rhodotorula glut inis, Yarrowia, tais como a Yarrowia lipolytica, Pichia, tais como a Pichia stipitis, Candida, tais como Candida curvata, tais como a Lipomyces Lipomyces starkeyi, Trichosporon tai como Trichosporon cutaneum ou Trichosporon pullulans, os quais prontamente acumulam lipidios ou foram geneticamente modificados para produzir lipidios. Mais preferivelmente, leveduras compreendem Lipomyces, Rhodosporidium,e Cryptococcus.

Ainda em uma outra concretização preferida, a biomassa microbiana compreende bactérias que pertencem aos seguintes gêneros Acinetobacter, Actinobacter, Alcanivorax, Aero- genes, Anabaena, Arthrobacter, Bacillus, Clostridium, Dietzia, Gordonia, Escherichia, Flexibacterium, Micrococcus, Mycobacterium, Nocardia, Nostoc, Oscillatoria, Pseudomonas, Rhodococcus, Rhodomicrobium, Rhodopseudomonas, She-wanella, Shigella, Streptomyces e Vibrio. Mais preferencialmente, as bactérias compreendem Rhodococcus opacus, Acinetobacter, Nocardia ou Streptomyces.

Na presente invenção, um método para a recuperação de lipidios a partir da biomassa microbiana é fornecido. O processo compreende pelo menos as seguintes etapas: (i) fornecer biomassa microbiana úmida, a qual contém lipideos, sem romper as paredes celulares de biomassa para a extração. Não existe etapa de ruptura mecânica externa necessária antes de submeter à extração da biomassa para auxiliar a penetração do agente de extração em contato com os lipidios. (ii) extrair a referida biomassa microbiana úmida com um extratante liquido à temperatura elevada de pelo menos 170 Cea pressão elevada, de preferência, mais de 2 bar, mas, normalmente, determinado pela temperatura escolhida no sistema de extração fechado, em que a combinação de temperatura e pressão é tal que os referidos lipidios nas referidas células são postos em contato com o referido extratante. (iii) subsequentemente, os lipidios extraídos são recuperados a partir do ou com o referido extratante.

A biomassa a ser processada pode ser obtida diretamente a partir de cultura ou crescimento do sistema como um reator. Biomassa adequada compreende biomassa congelada. A biomassa a ser processada é tratada por métodos geralmente conhecidos, tais como centrifugação, filtração, decantação, flotação ou sedimentação possível assistida por floculação para remover o excesso de água ou de solução aquosa de crescimento. Biomassa de Microalgas, bactérias, arqueobactérias, fungos filamentosos, bolores ou leveduras é, de preferência, filtrada ou centrifugada antes do processamento. Por outro lado, a biomassa de cultivo em estado sólido, a cultura imobilizada ou semelhantes podem ser usadas por amostragem em meios aquosos, se necessário.

Pelo termo "úmida"significa biomassa microbiana que se origina a partir da solução aquosa de cultivo e a partir do qual o excesso de água é removido por processo de remoção de água de consumo de baixa energia, como a filtração ou semelhante, o qual não está, especificamente, seca. Alternativamente, a biomassa microbiana sólida seca pode ser misturada numa forma aquosa.

Em uma concretização preferida, o teor de biomassa microbiana úmido é, adequadamente, elevado para permitir a transferência de massa por meio de bombeamento regular.

Biomassa microbiana "seca" ou secada tem tipicamente um teor de cerca de 10%, ou menos de água, em que a água é água de ligação, isto, e, água no interior da estrutura da célula. 0 requisito tipico para a preservação é um teor de menos do que cerca de 13% de água. Quando a biomassa não é especificamente seca há, além de água acoplada a água livre que não está ligado na estrutura microbiana. Este conteúdo de água livre depende do tipo de biomassa microbiana e o método de remoção de água utilizada. Na presente invenção, a biomassa microbiana úmida tem água livre e o teor de água é, de preferência, pelo menos 60% em peso, mais preferencialmente, pelo menos 65%, mais preferencialmente, pelo menos 70%, tal como pelo menos 75% ou, no caso de algas 80%. Especialmente, quando a biomassa de algas é centrifugada o teor de água é de cerca de 65 - 80%.

O método da presente invenção é adequado para o tratamento de biomassa seca. Teor de matéria seca das biomassas secas testadas foi de preferência 95 - 98% em peso. No entanto, como a biomassa colhida é geralmente úmida, isto é, colhidas a partir de culturas aquosas uma grande vantagem é perdida se a biomassa é primeiro submetida a uma secagem de consumo de energia desnecessária antes de extração.

Além disso, a água é benéfica para a formação da segunda fase, em adição ao solvente de extração para acomodar os residues indesejáveis, tais como metais, compostos de fósforo, açúcares e semelhantes. Em certa medida, estes podem aderir à superfície de residues da biomassa, mas, principalmente, residirão na fase aquosa.

Após a remoção do excesso de água a partir da biomassa a ser tratada no processo da presente invenção, o teor de matéria seca da biomassa é inferior a 70%, em peso, de preferência, inferior a 45%, mais preferencialmente, inferior a 40%. Dependendo da biomassa microbiana aquosa a ser tratado o teor de matéria seca pode ser tão baixo como 4% em peso. No entanto, de preferência, o teor de matéria seca é de pelo menos 5%, em peso, mais preferencialmente, pelo menos 10%, ainda mais preferencialmente, de pelo menos 11%, tal como 19 - 38%.

De acordo com a presente invenção, a biomassa microbiana úmida é fornecida a uma unidade de extração, a qual é opcionalmente purgado com gás inerte, de preferência, nitrogênio, a fim de evitar ou minimizar as possíveis reações com gás ambiente, e, opcionalmente, para definir uma sobrepressão de 1 - 5 bar medido a partir do reator fechado antes de iniciar o processo de extração e aquecimento. Subsequentemente, a biomassa é submetida a uma temperatura e pressão elevadas.

A temperatura de extração é elevada a uma temperatura de pelo menos 170° C e, de preferência, 300° C ou menos, em que a pirólise tipicamente ocorre a temperaturas mais elevadas, de preferência, de 175° C a 270° C, mais preferivelmente, desde 185° C a 260° C, mais preferivelmente, de 190° C a 250° C, tal como de 200° a 245° C. A faixa de temperatura preferida depende em certa medida do tipo de biomassa microbiana utilizada. A seleção da temperatura ideal depende não só do rendimento máximo ou pureza possível de obter, mas também a continuação do uso do óleo e resíduos visados. Por exemplo, se uma maior utilização está em processo de refino de biocombustiveis catalítico que define critérios para o catalisador venenoso, ou seja, teor de fósforo e metal. Não é necessário otimizar ainda mais o processo depois de atingir valores baixos o suficiente. Além disso, a qualidade do lipideo recuperado, tais como o conteúdo de TAG, por exemplo, varia dependendo dos parâmetros de processamento utilizados. A qualidade do residuo depende da temperatura de extração utilizada. O residuo pode ser direcionado para a combustão para a criação de energia quando as temperaturas mais elevadas são usadas. Utilização de forragens ou alimentação do residuo é ativada através da aplicação de temperaturas mais baixas de extração.

A pressão de extração é elevada devido a temperatura aumentada, conforme tipicamente os vasos de pressão fechados ou reatores são utilizados. A pressão de extração depende da temperatura escolhida, solvente selecionado, isto é, o ponto de ebulição e a pressão de vapor destes e o reator de volume morto. Um técnico versado no assunto é capaz de determinar o valor da pressão com base em cálculos teóricos utilizando esses parâmetros. Num modo de operação em bateladas tipicamente de cerca de 65% de volume é eficaz enquanto que cerca de 35% é o volume morto. Preferivelmente, os solventes são escolhidos com o fornecimento de pelo menos 95%, preferencialmente 98%, mais preferivelmente 99%, da mesma estando em fase liquida. Uma faixa de pressão preferida é de 5 bar a 100 bar, mais preferivelmente, de 10 a 80 bar, mais preferencialmente, de 20 a 70 bar, por exemplo, a partir de 25 até 60 bar. Temperatura alvo estabelece limite para o máximo de água e, opcionalmente, álcool, índice durante a extração do óleo. Estes componentes têm tipicamente elevadas pressões de vapor e, portanto, em casos adequados, de preferência, uma parte da água ou de álcool é removido por destilação durante a fase de aquecimento. Isto permite atingir a temperatura alvo com o extrator escolhido. Ou, alternativamente, a quantidade de álcool tem que ser limitada ou baixa em comparação com extratante primário, tais como hexano ou heptano.

O objetivo em aumentar a temperatura e a pressão de extração é para permitir um melhor contato do extratante com os lipídios. Sem estar ligado a qualquer teoria particular prevê-se que as interações fracas no material são reduzidas devido à alta temperatura permitindo que o solvente interaja com os componentes lipídicos. O conteúdo das células de biomassa microbianas da água pode ser responsável pelos lipídios da estrutura da célula para se tornar disponível para o contato com o extrator, enquanto submetido a alta temperatura e pressão, liberando, assim, os lipidios dos mesmo. A extração foi encontrada para ser facilitada representada pelo aumento na produção de lipídeo extraído e pureza melhorada dos lipídios extraídos.

Extratantes adequados para utilização na presente invenção são solventes orgânicos não polares que são, essencialmente, ou totalmente, de preferência, não miscível com água. A miscibilidade da fase aquosa com os resultados na perda de rendimento e as possíveis dificuldades na separação de fases. É possível utilizar qualquer tipo de solvente de dissolução de lipídeo, mas os solventes preferidos são os hidrocarbonetos alifáticos de cadeia longa ou alcanos cíclicos C3-C16, mais preferencialmente, alcanos C5-C12. Alcanos mais preferidos incluem hexano, heptano ou octano ou suas misturas.

De acordo com uma concretização de mistura de alcanos adequados para o refinamento de petróleo, tais como as diferentes frações de destilação de gasolina podem ser utilizadas. De preferência, estas frações contêm heptano e / ou octano. Um exemplo de solvente adequado é frações de destilação de petróleo de refinaria como misturas de solventes de hidrocarbonetos de compostos livre de aromáticos ou pouco aromáticos, tais como livres NESSOL LIAV 110 (bp 85 -110 0 C, disponível a partir Neste Oil), LIAV 230 (bp 175 - 225° C) e análogos.

A extração é realizada usando extratantes líquidos. Isto significa que a pressão do recipiente de extração deve ser tal que o agente de extração utilizado permaneça na forma líquida. Uma vez que a extração é realizada com um agente de extração na forma líquida a temperatura e pressão não podem ser tal que o extratante estaria no estado supercrítico.

A extração é realizada de uma maneira convencional. 0 rendimento é destinado a um rendimento eficiente determinado pela economia do processo total.

De acordo com uma concretização, em operação em bateladas da biomassa microbiana é conduzido para um reator de pressão fechado, juntamente com o solvente de extração. 0 recipiente é opcionalmente purgado com um gás inerte e é depois fechado e aquecido para a temperatura desejada. O rendimento de recuperação de lipídios é aumentado através do aumento da quantidade de solvente extratante. De preferência, a quantidade de matéria seca de biomassa para a quantidade total de extrator, é de 1:1 a 1:20, mais preferencialmente, entre 1:2 a 1:15, mais preferencialmente, entre 1:2,5 a 1:6. A extração é realizada sob agitação vigorosa e eficiente para assegurar um contato uniforme e eficaz entre o solvente e a biomassa.

O tempo de atraso é tipicamente de algumas dezenas de minutos a algumas horas, dependendo da temperatura, tipo de biomassa, solvente e tamanho da batelada.

Em uma concretização, a quantidade de biomassa de matéria seca quando se utiliza a biomassa seca para a quantidade total de solvente é de cerca de 1:5.

A extração pode ser executada em escala industrial em modo continuo contado currentemente ou co-correntemente, pela modificação dos aparelhos e processo por um técnico versado no assunto.

Após extração, os lipidios recuperados desejados, gorduras e óleos residem na fase extratante orgânica. Eles podem ser separados a partir do solvente orgânico por meios convencionais, tais como a destilação ou evaporação, ou utilizado como tal para tratamento posterior.

Em uma concretização, os lipidios recuperados em mistura com o agente de extração, tal como são utilizados para processos de refinamento de biocombustiveis de óleo catalítico.

Em uma outra concretização o extratante é separado e reciclado de volta ao processo de extração, para reutilização. Tipicamente, o rendimento é de pelo menos cerca de 70% em percentagem do conteúdo total de lipidios, de preferência, mais do que cerca de 80%, ou de preferência mais do que 85% ou mesmo mais do que 90%, dependendo dos parâmetros de processamento selecionados, da biomassa e dos valores de pureza desejada e visado. Para algas Nannochloropsis rendimentos mais de 90% são obtidos, enquanto que para Chlorella ou Dunaliella o rendimento é ligeiramente menos de cerca de 80 a 85%. Os rendimentos para as bactérias, tais como Rhodococcus é geralmente elevada, cerca de 80%, de preferência, acima de 90%, dependendo da temperatura selecionada.

Ainda em uma outra concretização da presente invenção, em adição ao extrator orgânico não polar primário, pelo menos um extrator liquido secundário capaz de penetrar as paredes celulares das espécies microbianas contidas na referida biomassa é adicionado. Na etapa de extração são formadas duas fases, a saber, uma fase aquosa compreendendo o agente de extração secundário e uma fase orgânica que compreende o agente de extração primário. A água é o preferido para a formação da segunda fase, além de solvente de extração para acomodar os residues indesejáveis, tais como metais, compostos de fósforo, açúcares e semelhantes. Até certo ponto, estes residues podem aderir à superfície de residuo da biomassa, mas, principalmente, eles irão residir na fase aquosa. De preferência, o agente de extração secundário compreende um solvente orgânico solúvel em água. Mais preferencialmente, este solvente orgânico é solúvel em água de álcool, ácido, tal como ácido acético ou ácido fórmico, ou uma cetona, tal como a acetona. Mais preferivelmente, o solvente orgânico é um álcool selecionado de entre metanol, etanol, isopropanol e propanol. Estes dois componentes extratantes são essencialmente imisciveis uns com os outros, depois da extração ter ocorrido. O extrator pode dissolver-se um no outro antes da extração. Os extratantes podem formar um sistema de duas fases, antes e / ou depois da extração, mas, pelo menos, depois de. A água e a baixa quantidade de álcool presente na extração suprimem a transesterificação indesejada, de preferência, a quantidade de ésteres formados é inferior a 3% em peso.

Numa concretização ainda preferida da extração da duas fase, pares de extrantes primário e secundário preferidos são metanol e / ou etanol com heptano e / ou octano, respectivamente. Um outro exemplo para um extratante primário adequado é uma mistura de solventes HC livre de aromático ou pouco aromático, tal como NESSOL LIAV 110 e semelhantes. A proporção de extratantes utilizados, tais como heptano e etanol para a célula tratada de biomassa deve estar dentro de limites razoáveis, embora o aumento da quantidade de agente de extração vai aumentar o rendimento. A quantidade de matéria seca de biomassa para a quantidade total de agente de extração é de 1:1 a 1:20, mais preferencialmente, entre 1:2 a 1:15, mais preferencialmente, entre 1:2,5 a 1:6. A razão entre o agente de extração secundário ao extratante primário é de 1:10 a 2:1. A quantidade mais elevada de agente de extração secundária é, especialmente, útil para certas bactérias baseada em biomassas e para inibir a formação de emulsões de água irreversíveis.

Uma grande vantagem do método da presente invenção é que a elevada quantidade de fosfolipidios não está essencialmente presente na fase de óleo. A extração a alta temperatura melhora claramente a seletividade dos lipídios em relação à fase de óleo, enquanto o fósforo e os metais permanecem na fase aquosa.

O teor de fósforo e, possivelmente, o produto de lipídeo separado no método da presente invenção é drasticamente diminuído em comparação com o teor em lipídios extraídos a temperaturas mais baixas. Extraindo abaixo de 170° C produz o teor de fósforolipídeo de mais de 500 ppm ou mesmo 2.000 ppm, por exemplo, espécies heterotróficas incluindo certas algas e fungos filamentosos, ou mesmo 2000 - 5000 ppm como para as algas autotrófica e, por exemplo, para a Rhodococcus. No método da presente invenção, o teor de fósforo é reduzido em menos de 20 ppm, de preferência, em menos de 15 ppm, ou mesmo em menos de 10 ppm.

Utilizando o método da presente invenção, o teor de metal dos lipidios extraidos ou a mistura de lipidios no extratante é reduzido em cerca de um vigésimo ou mesmo uma centésima parte do teor em lipidios extraidos a baixas temperaturas. O produto de lipideo obtido da presente invenção apenas contém uma clara diminuição da quantidade de metais ou sais de metais. Impurezas nocivas tipicas compreendem de Al, Cr, Cu, Fe, Mg, Ni, Pb, Zn e Mn, que são prejudiciais para o refinamento de petróleo, por exemplo catalítico. De acordo com a presente invenção, de preferência, o teor total de metal é reduzido de vários milhares de ppms em intervalos razoáveis, tais como algumas centenas ppms para algas de água salgada cultivadas autotroficamente, ou inferior a 20 ppm, de preferência, inferior a 10 ppm, mais preferivelmente, menos do que 5 ppm, para as espécies cultivadas heterotroficamente, dependendo da combinação da temperatura e do solvente utilizado.

Nas condições de alta temperatura e de pressão de extração da presente invenção, compostos do tipo emulsionante ou detergente que residem na biomassa microbiana tanto decompõe ou permanecem na fase aquosa, e, portanto, não irão interferir com os subsequentes processos de refinamento do petróleo.

Em um outro aspecto da presente invenção, os lipideos produzidos recuperados através dos métodos descritos acima são utilizados na produção de biodiesel, diesel renovável, querosene, gasolina ou componentes de óleo de base.

Numa concretização preferida, os lipidios extraídos da biomassa microbiana úmida com o método de acordo com a invenção é utilizada como matéria-prima para a produção de biodiesel, diesel renovável, combustível de jatos, gasolina ou componentes de óleo de base e similares. Pelo termo "biodiesel"significa diesel que consiste em ésteres de alquil de ácidos graxos, e é tipicamente produzido por transesterificação. Na transesterificação, os acilgliceróis são convertidos em ésteres de alquil de ácidos graxos de cadeia longa, tais como ésteres de metil, etil ou de propil. Pelo termo "diesel renovável" entende-se que o combustível é produzido por tratamento de hidrogênio de lipídios, tais como a desoxigenação de hidrogênio, hidrogenação ou hidroprocessamento. No tratamento de hidrogênio, acilgliceróis são convertidos aos alcanos ou seja, parafinas correspondentes. As parafinas podem ainda ser modificadas por isomerização ou por outros processos alternativos. Processo de diesel renovável é, opcionalmente, utilizado para produzir combustível e/ou gasolina. Além disso, a quebra de lipidios pode ser realizada para a produção de biocombustiveis. Além disso, os lipidios são de, preferência, usados como biocombustiveis diretamente, sem qualquer tratamento adicional em certas aplicações.

A invenção é ainda ilustrada pelos exemplos, mas não se restringem aos mesmos.

Exemplos

O reator de pressão utilizado para os experimentos foi da Parr Instruments, modelo 4843. Heptano foi de n-heptano de 99% pura (da JT Baker).

Cromatógrafo Gasoso (GC) utilizado na análise foi um 6890N da Agilent Technologies, e o analisador de Plasma Ferra Acoplado (ICP) foi um Optima 7300 DV da Perkin Elmer. Exemplo 1

Biomassa de algas usada continha uma grande quantidade de metais e fósforo devido ao cultivo autotrófico em água salgada e tinha um elevado teor de fosfolipideo de células. O peso seco da biomassa centrifugada foi de 33%, em peso, e o extrato seco continha 21% em peso de lipidios.

O teor de matéria seca da biomassa não tratada inicial foi determinado por secagem da biomassa, a 105° C no forno, e o teor de lipidios da biomassa não tratada inicial foi determinada por GC após saponificação de lipideo e metilação. 150 g de células centrifugadas de biomassa úmida, obtida a partir do cultivo de microalgas Nannochloropsis, e 150 g de heptano foram pesados para um reator de pressão agitada de 1000 ml. O recipiente fechado foi aquecido até à extração programada de temperatura, 160° C, 180° C, 200° C e 225° C, e mantida ali durante 60 minutos e depois colocado para resfriar por cerca de 30° C. A mistura de células-solvente foi agitado continuamente no interior do reator de pressão a 500 rpm durante a extração. O reator foi aberto e a fase de heptano-óleo foi separada da fase de água e biomassa por centrifugação (10 min, 4430 rpm) e colocado em um funil de separação. A fase heptano-óleo foi evaporada num evaporador rotativo. 0 óleo foi pesado. O conteúdo total de ácido graxo foi analisado por GC após saponificação lipideo e metilação. Teores de metais e fósforo foram determinados por análise- TCP.

O rendimento, ou seja, ácidos graxos totais extraidos em relação aos lipideos totais na biomassa antes da extração e o teor total de metal, incluindo Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, Pb e V e o teor de fósforo no óleo como uma função da temperatura de extração é mostrado na Figura 1.

A Tabela 1 mostra a quantidade de cada uma das impurezas metálicas, impureza de fósforo e rendimento de 5 óleo em óleos extraidos a temperaturas diferentes.

O Rendimento de óleo aumentou com o aumento da temperatura de extração. Um grande diminuição no teor de fósforo pode ser visto quando a temperatura de extração é aumentada a partir de 160° C a 200° C (2810 ppm e 225 ppm).

O teor de fósforo é o mais baixo, 7,3 ppm, em óleo extraido a 225° C. O teor de metais diminuiu de mãos dadas com o teor de fósforo, teor de metais totais sendo o mais baixo, de 135 ppm, em óleo extraido a 225° C. Tabela 1.

Este exemplo indica que o óleo de algas contendo menos de 10 ppm de fósforo é obtido com rendimento de 95% de óleo utilizando o método da presente invenção. A qualidade do produto de óleo notavelmente aperfeiçoado, ou seja, o 5 fósforo e os teores de metais diminuíram quando a temperatura de extração da biomassa úmida é aumentada para 200° C ou mais, mesmo quando aumentada para 225° C.

Exemplo 2

Similarmente ao Exemplo 1, a biomassa de algas 10 utilizada continha uma grande quantidade de metais e fósforo devido ao cultivo autotrófico em água salgada e que tinha um elevado teor de fosfolipidio de células. Neste exemplo, o peso seco da biomassa centrifugado foi de 19% e a matéria seca continha 13% de lipídios. 300 g de células centrifugadas de biomassa úmida, obtida a partir do cultivo de microalgas Nannochloropsis, e 300 g de heptano foram pesados num reator de pressão agitado de 1000 ml. A extração foi realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

O rendimento, ou seja, ácidos graxos totais extraidos em relação ao total de lipidios da biomassa antes de extração, e o total de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) e teor de fósforo em óleo como em função da temperatura de extração é mostrado na Figura 2.

A Tabela 2 mostra a quantidade de cada metal, fósforo e rendimento de óleo em óleos extraidos a temperaturas diferentes. Tabela 2

A biomassa com o menor teor de lipidios e mais agua necessitou de uma temperatura de extragao superior em comparagao com o exemplo 1, a fim de obter mais de 80% em peso dos lipidios extraidos. Em 235° C, o rendimento do oleo foi elevada a 95% e o baixo teor de fosforo de 5,6 ppm. O nivel de metais totais foi de 439 ppm.

Este exemplo indica que a qualidade do oleo melhorou, ou seja, o fosforo e o teor de metal diminuem quando a temperatura de extragao da biomassa umida e aumentada para acima de 200° C, ou ainda melhor acima de 235° C.

Este exemplo indica que a qualidade do óleo melhorou, ou seja, o fósforo e o teor de metal diminuem quando a temperatura de extração da biomassa úmida é aumentada para 10 acima de 200° C, ou ainda melhor acima de 235° C.

Exemplo 3

300 q de células úmidas centrifugadas, obtidas a partir da cultura de Rhodococcus, uma bactéria gram- positiva, e 300 g de heptano foram pesados num reator de 15 pressão agitada de 1000 ml. A extração foi realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

A biomassa bacteriana neste experimento tinha um teor de matéria seca de 31% e de matéria seca tinha um teor de lipídeo de 37% e continha uma certa quantidade de sais.

O rendimento de óleo, isto é, ácidos graxos totais extraídos em relação ao total de lipídios da biomassa antes de extração, e o conteúdo de fósforo e o conteúdo total de 5 metal (Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) em óleo como uma função da temperatura de extração é mostrada na Figura 3.

A Tabela 3 mostra a quantidade de metal e de teor de fósforo no óleo extraído, bem como o rendimento de óleo a 10 diferentes temperaturas.

Este exemplo indica que a produção de óleo a partir de biomassa bacteriana aumenta com o aumento da temperatura de extração. O teor de fósforo e de metal diminui com o aumento da temperatura de extração. A 200° C, 92,6% do 15 total de lipídios é extraído com um teor de fósforo de 12,7 ppm e a quantidade total de metais de 32 ppm. Tabela 3.

Exemplo 4

300 g de células filtradas úmidas obtidas a partir do cultivo de microalgas heterotróficas Chlorella e 300 g de heptano foram pesados num reator de pressão de agitação de 5 1000 ml. A extração foi realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

Neste experimento, a biomassa de algas tinha um teor de matéria seca de 12% e a matéria seca tinha um teor de lipideo de 43% e continha uma certa quantidade de sais.

O rendimento do óleo, isto é, ácidos graxos totais extraidos em relação ao total de lipidios da biomassa antes de extração e o total de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) e o teor de fósforo no óleo como uma função da temperatura de extração é mostrado na Figura 4.

A Tabela 4 mostra a quantidade de cada metal, fósforo e rendimento de óleo em óleos extraidos a diferentes temperaturas. Tabela 4.

A 200° C, óleo de algas foi extraído com um rendimento de 81%, e óleo tem apenas 30 ppm de fósforo e 11 ppm de metais totais. A 225 ° C, o rendimento de óleo é de 81% e o teor de fósforo é reduzida a 3,5 ppm e teor de metal é de 13 ppm.

Este exemplo indica que a produção de óleo e da qualidade do óleo a partir de microalgas Chlorella melhora quando a temperatura de extração é aumentada para 200° C. Exemplo 5 60 g de células filtradas úmidas obtidas a partir do cultivo heterotrófico de fungos filamentosos Mortierella, e 260 g de heptano foram pesados num reator de pressão agitado de 1000 ml. A extração foi realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

Neste experimento, a biomassa fúngica tinha um teor de matéria seca de 38% e a matéria seca tinha um teor de lipídeo de 58% e continha uma certa quantidade de sais.

O rendimento de óleo, isto é, ácidos graxos totais extraídos em relação ao total de lipídios da biomassa antes de extração e o total de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) e o teor de fósforo em óleo como uma função da temperatura de extração é mostrada na Figura 5.

A Tabela 5 mostra a quantidade de cada metal, fósforo e rendimento de óleo em óleos extraídos a diferentes temperaturas. Tabela 5.

Este exemplo indica que o rendimento de óleo a partir da biomassa de fungos filamentosos foi aumentado com o aumento da temperatura de extração. 0 teor em metal e fósforo diminuiu notavelmente quando a temperatura de extração subiu para 200° C. A 200° C, o óleo extraido tinha 2 ppm de fósforo e menos de 1 ppm de todos os metais medidos.

Exemplo 6

200 g de células úmidas obtida a partir do cultivo de 5 levedura Lipomyces e 200 g de heptano foram pesados num reator de pressão de agitação de 1000 ml. A extração foi realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

A biomassa fúngica tinha um teor de matéria seca de 11% e a matéria seca tinha um teor de lipideo de 40% e que 10 contém uma certa quantidade de sais.

O rendimento de óleo, isto é, ácidos graxos totais extraidos em relação ao total de lipidios da biomassa antes de extração, e o total de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Zn, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) e o teor de fósforo em óleo extraido a 15 150° C e 200° C são mostrados na Tabela 6. Tabela 6.

Experimento a 100° C mostrou o rendimento de óleo é muito baixo, apenas 4,2%, em peso. 0 rendimento de óleo é ainda bastante baixo, cerca de 38%, em peso, de extração a 150 ° C. A 200° C, o rendimento aumenta até cerca de 86%, 5 em peso, indicando a necessidade de uma temperatura mais elevada para a extração de lipidios a partir de soluções possuindo este baixo teor de matéria seca. 0 nivel de impureza é muito baixo em ambas as extrações a 150 e 200° C.

Este exemplo indica que o rendimento de óleo a partir da biomassa de levedura aumenta consideravelmente a temperatura elevada. Óleo de alta pureza a partir de biomassa de levedura pode já ser obtido na extração, a 150° C, mas o rendimento de óleo permanece muito inferior do que 15 a 200° C.

Exemplo Comparativo 1

60 g de células liofilizadas obtidas a partir do cultivo de algas Dunaliella e 300 g de heptano foram pesados para um reator de pressão de agitação de 1000 ml. O recipiente é então aquecido até à temperatura de extração de pré-ajuste, 100° C, 160° C, 200° C e 225° C, e mantida nesta durante 60 minutos, e depois colocado para resfriar a cerca de 30° C. A mistura de células-solvente foi agitada continuamente no reator de pressão a 500 rpm durante a extração. O reator foi aberto e o solvente foi separado a partir da biomassa por centrifugação (10 min, 4.430 rpm) . O solvente contendo o óleo foi evaporado num evaporador rotativo. O óleo foi pesado. Os ácidos graxos totais são analisados por GC após saponificação de lipideo e metilação. Metal e teor de fósforo são determinados pela anãlise-ICP.

A biomassa de algas secas continha uma grande quantidade de sais, conforme é cultivada autotroficamente com elevado sal na água do mar, bem como porque o fósforo de um grande nivel de fosfolipidios dos lipidios totais. A biomassa de algas seca liofilizadas, peso seco de cerca de 98%, continha 10% de lipidios.

O rendimento de óleo, isto é, ácidos graxos totais extraidos em relação ao total de lipidios da biomassa antes da extração e o total de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Al, Cr, Zn, Ni, Ba, Mn, V, Pb) e o teor de fósforo em óleo como uma função da temperatura de extração é mostrado na Figura 6.

A Tabela 7 mostra a quantidade de cada metal, fósforo e rendimento de óleo em óleos extraídos a diferentes temperaturas.

O rendimento de óleo é mais elevado no óleo extraido a 200° C em relação a 100° C e 160° C (88% em comparação com 64 e 60%), no entanto, o nivel de impurezas (metais e fósforo) diminuiu à temperatura mais elevada. 0 nivel de fósforo diminuiu de 1,470 ppm a 100 0 C e de 15 ppm a 200° C e de 6,8 ppm a 225° C. 0 teor em metais diminuiu para 121 10 ppm a 200 ° C em comparação com 2.182 ppm a 100° C e 1.154 ppm a 160° C. Tabela 7.

Este exemplo indica que os resultados comparáveis são obtidos quando se utiliza a biomassa de algas úmida em comparação com o uso da biomassa, que é pré-tratada ou seja especificamente, seca antes da extração.

Exemplo Comparativo 2

60 g de células liofilizadas secas obtidas a partir da cultura de bactérias de Rhodococcus e 300 g de heptano são pesados num reator de pressão de agitação de 1000 ml. A extração é realizada da mesma maneira como no exemplo 1.

A biomassa liofilizada tem um teor de lipideo de 43% e que contém uma certa quantidade de sais provenientes do caldo de cultura, bem como fósforo a partir de lipidios da membrana.

O rendimento de óleo (ácidos graxos totais extraídos 15 em relação ao total de lipidios da biomassa antes de extração) e de metal (Mg, Na, Ca, Cu, Al, Cr, Mn, Ni, V, Pb) e conteúdo de fósforo no óleo como uma função de temperatura de extração é mostrado na Figura 7.

A Tabela 8 mostra a quantidade de cada metal, fósforo e rendimento de óleo em óleos extraídos a diferentes temperaturas. Tabela 8

Este exemplo indica que o rendimento de óleo aumentou com o aumento da temperatura, conforme o teor de fósforo e de metal diminui.

Exemplo 7

Outros experimentos (exemplos 7-9) foram feitos usando o equipamento em escala de planta piloto.

O reator de pressão utilizado no exemplo 7 é construído pela DeDietrich, o volume é de 540 litros, e a pressão máxima de circulação é de 16 bar (a) e a temperatura máxima é 250° C.

O reator de pressão utilizado nos exemplos 8 e 9 é construído pela Finnish Company Japro-tek, o volume é de 500 litros, e a pressão máxima de circulação é de 80 bar (a) e a temperatura máxima é 250° C. 152 kg de células úmidas filtradas obtias a partir do cultivo de fungos Martierella são extraida em um reator de pressão com agitação de 540 L com 235 kg de NESSOL Liav 230 (alcanos com área de ponto de ebulição de 175 - 230Q C, da Neste Oil). A extração é realizada a 190° C durante 3 horas no máximo de pressão de 12,5 bar (a). A biomassa é separada por filtração e a fase solvente foi lavada com água. A fase de heptano-óleo é evaporada e o óleo foi analisado como no Exemplo 1.

A biomassa fúngica tem um teor de matéria seca de 38% e a matéria seca tem um teor de lipídeo de 58% e que contém uma certa quantidade de sais provenientes do caldo de cultura, bem como de fósforo a partir de lipidios da membrana.

O rendimento do óleo e do nível de impurezas (fósforo e metais) no óleo extraído é mostrado na Tabela 9. Tabela 9

O rendimento de óleo é alto em 80% e o óleo extraído, de acordo com a invenção é muito baixo em impurezas. 0 nível de fósforo é de 5,6 ppm e todos os metais medidos estão muito abaixo de 1 ppm, apenas o sódio é de 3,1 ppm. Exemplo 8 150 Kg de células imidas filtradas obtidas a partir do cultivo de bactérias Rhodococcus são extraídas num reator de pressão de agitação de 500 L com 125 kg de heptano e 32 kg de etanol. A extração é realizada a 200° C durante 3 horas, a pressão máxima foi de 48 bar (a) . A biomassa é separada por filtração e a fase solvente foi lavada com 5 água. A fase de heptano-óleo é evaporada e o óleo analisado como no Exemplo 1.

A biomassa bacteriana, que tem um teor de matéria seca de 25% e a matéria seca tem um teor de lipideo de 30% e que contém uma certa quantidade de sais provenientes do caldo 10 de cultura, bem como fósforo a partir de lipidios da membrana.

O rendimento do óleo e do nivel de impurezas (fósforo e metais) no óleo extraido é mostrado na Tabela 10. Tabela 10

O rendimento de óleo é alto a 75% e o óleo extraido, de acordo com a invenção é muito baixo em impurezas. O nivel de fósforo é de 6,7 ppm e todos os metais totais medidos são inferiores a 30 ppm.

Exemplo 9

150 Kg de células úmidas filtradas obtida a partir do cultivo de fungos Mortierella são extraidas num reator de pressão de agitação de 500 L com 145 kg de NESSOL Liav 110 (alcanos com a área de ponto de ebulição de 85 - 110Q C, Neste Oil) e 64 kg de etanol absoluto. A extração é realizada a 190 ° C durante 0,5 horas, à pressão máxima de 32 bar (a) . A biomassa é separada por filtração e a fase solvente é lavada com água. A fase de óleo NESSOL LIAV 110 é evaporada e o produto óleo obtido é analisado como no Exemplo 1.

A biomassa fúngica tinha um teor de matéria seca de 38% dos quais 58% era de lipidios. A biomassa também continha sais e fósforo.

O rendimento de óleo e os niveis de fósforo e de impurezas de metais no óleo extraido estão apresentados na Tabela 11. Tabela 11

Claims

1. Método para a recuperação de lipídeos a partir de biomassa microbiana caracterizado pelo fato de que compreendendo as etapas de (i) fornecer biomassa microbiana úmida, a qual contém lipídios para extração sem romper as paredes celulares de biomassa, e (ii) extrair a referida biomassa microbiana úmida com um líquido de extração a uma temperatura elevada de 170°C a 300°C e uma pressão elevada de 500.000 a 10.000.000 Pa (5 a 100 bar), preferencialmente na faixa de 1.000.000 a 8.000.000 Pa (10 a 80 bar), em que a combinação da temperatura e da pressão é tal que os referidos lipídios nas referidas células são contatados com o referido extratante, e (iii) subsequentemente, recuperar os lipídios extraídos a partir de ou com o referido extratante.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o teor de matéria seca da biomassa úmida é inferior a 45% em peso, de preferência, inferior a 40%, mas, pelo menos 5%, de preferência, pelo menos 10%, mais preferencialmente, de pelo menos 11%, tal como de 19% a 38%.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a referida biomassa microbiana úmida é selecionada a partir do grupo de bactérias, cianobactérias, fungos, tais como leveduras, fungos filamentosos e bolores, arqueobactérias, protistas, plantas microscópicas, tais como algas, microalgas, plâncton e planária, mais preferencialmente, de microalgas, bactérias, fungos, bolores, fungos filamentosos e leveduras.

4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a referida temperatura é entre 175° C a 270° C, de preferência, entre 185° C a 260° C, mais preferivelmente, de 190° a 250°.

5. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o referido extratante compreende solvente orgânico apolar, preferencialmente, alcano C3-C16 alifático ou cíclico, mais preferencialmente, hexano, heptano, octano ou suas misturas.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o referido extratante ainda compreende solvente polar miscível em água, de preferência, um álcool ou um ácido orgânico.

7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que a proporção de matéria seca da referida biomassa microbiana para a quantidade total de extratante é de 1:1 a 1:20, mais preferivelmente, de 1:2 a 1:15, mais preferencialmente, de 1:2,5 a 1:6.