BR112012011134A2 - Inibidores do vírus da hepatite c - Google Patents

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Bharath P. Patel
Bharat P. Patel
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Abstract

inibidores do vírus da hepatite c. a presente invenção refere-se a métodos para fabricação de compostos no tratamento de infecção pelo vírus da hepatite c (hcv).

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INIBIDORES DO VÍRUS DA HEPATITE C".
REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS O presente pedido reivindica o benefício do Pedido de Patente Provisório U.S. No. 61/260.115 depositado em 11 de novembro de 2009 e Pedido de Patente Provisório U.S. No. 61/378.806 depositado em 31 de a- gosto de 2010, aqui incorporados a título de referência em sua totalidade.
A presente invenção refere-se a métodos para fabricação de compostos úteis no tratamento de infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) (HepatitisC Virus). . O HCV é um patógeno humano importante, infectando uma esti- mativa de 170 milhões de pessoas em todo o mundo — mais ou menos cinco | vezes o número de infectados pelo vírus da imunodeficiência humana tipo 1. Uma fração substancial desses indivíduos infectados por HCV desenvolve do- “ 15 ençahepática progressiva séria, incluindo cirrose e carcinoma hepatocelular. a O padrão atual para cuidado de HCV, que emprega uma combi- Í nação de interferon peguilado e ribavirina, tem uma taxa de sucesso não ótima na obtenção de resposta viral sustentada e causa vários efeitos colate- rais. Desta maneira, há uma necessidade clara e há muito tempo sentida de desenvolver terapias eficazes para se direcionar a esta necessidade médica não satisfeita.
O HCV é um virus de RNA de filamento positivo. Com base em uma comparação da sequência de aminoácido deduzida e da extensiva simi- laridade na região não traduzida 50, HCV foi classificado como um gênero separado na família Flaviviridae. Todos os membros da família Flaviviridae desenvolveram virions que contêm um genoma de RNA de filamento positivo codificando todas as proteínas específicas do vírus conhecidas através da tradução de uma estrutura de leitura aberta, única, sem interrupção.
Heterogeneidade considerável é encontrada dentro do nucleoti- deoesequênciade aminoácido codificada em todo o genoma do HCV devi- do à alta taxa de erro de polimerase de RNA dependente de RNA codificado que não tem uma capacidade de verificação. Pelo menos seis genótipos
: 2/563 principais foram caracterizados, e mais de 50 subtipos foram descritos com distribuição em todo o mundo. A significância clínica da heterogeneidade genética do HCV demonstrou uma propensão a surgirem mutações durante tratamento com monoterapia, então opções de tratamento adicionais para usosão desejadas. O efeito modulador possível de genótipos sobre patogê- nese e terapia permanece evasivo.
O genoma de RNA do HCV de filamento simples é de aproxima- damente 9500 nucleotídeos de comprimento e tem uma estrutura de leitura aberta única (ORF) codificando uma poliproteína grande única de cerca de 3000 aminoácidos. Em células infectadas, esta poliproteína é clivada em - sítios múltiplos por proteases celulares e virais para produzir as proteínas estruturas e não estruturais (Non-structural). No caso de HCV, a geração de : proteínas não estruturais maduras (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NSSA e NS5B) é realizada por duas proteases virais. A primeira é acreditada ser uma meta- * 15 loprotease e clivar na junção NS2-NS3; a segunda é uma serina protease a contida dentro da região N-terminal de NS3 (também referida aqui como ] NS3 protease) e faz a mediação das clivagens subsequentes a jusante de NS3, ambos em cis, no sítio de clivagem NS3-NS4A, e em trans, para os sítios de NS4A-NS4B, NS4B-NSS5A, NSSA-NS5B. A proteína NS4A parece servir funções múltiplas ao agir ambos como um cofator para a protease NS3 e auxiliar na localização de membrana de NS3 e outros componentes de replicase viral, A formação de um complexo NS3-NS4 é necessária para atividade de protease apropriada resultando em eficiência proteolítica au- mentada dos eventos de clivagem. A proteina NS3 também exibe atividades de nucleosídeo trifosfatase e RNA helicase. NSSB (também referida aqui como polimerase de HCV) é uma polimerase de RNA dependente de RNA que está envolvida na replicação de HCV com outras proteínas do HCV, in- cluindo NSSA, em um complexo de replicase.
Compostos úteis para tratamento de pacientes infectados com HCV são desejados, os quais inibam seletivamente replicação viral de HCV. Em particular, os compostos que são eficazes para inibir o funcionamento da proteína NSSA são desejados. A proteina NSSA do HCV é descrita, por e-
xemplo, nas referências que seguem: Tan, S.L. e outros, Virology, 284:1-12 (2001); Park, K.J. e outros, J. Biol. Chem., 30711-30718 (2003); Tellinghui- sen, T.L. e outros, Nature, 435:374 (2005); Love, R.A. e outros, JJ. Virol., 83:4395 (2009); Appel, N. e outros, J. Biol. Chem., 281:9833 (2006); Huang, L,J Biol Chem, 280:36417 (2005); Rice, C. e outros, World Patent Appli- cation WO 2006/093867. Em seu primeiro aspecto a presente invenção provê um compos- to de Fórmula (1)
XX gil x So ga SÊ vê - 10 (O, ou um sai farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X e X' são cada um independentemente selecionados de CH, CR'eN; 7 Y e Y' são cada um independentemente selecionados de CH, + 15 CREeN ' contanto que não mais do que dois de X, X', Y e Y sejam N; R' e Rº são independentemente selecionados de H no R H o, H SN (> no SS ON SS NE D SN 2? ” NS ST SE QRO x» Rê Ré ; Rê Rô ; Rº Rô ; R? Rº ; à & Us Sh NADA"
A LAIO DOGS. RM Ré - Ré : Rê R . A o * à R7 SE 1 1 “tz 4d WZ à" NZ à VU o wWeRo N 5 N 5 N 5 Rn R . Rê R . Rn R : TR N Rt == N DA he 3 X ú é O PATA Ré R . Rê . Ré - SN Sn TRES TG" IM ;e R ;
cada Rº é independentemente selecionado de hidrogênio, ciano e halo; cada R* é independentemente selecionado de hidrogênio e alqui- la, em que a alquila pode opcionalmente formar um anel de três a cinco membros fundido com um átomo de carbono adjacente em que o dito anel é — opcionalmente substituído com um ou dois grupos metila; ou Rº e o carbono ao qual eles estão ligados formam um grupo etileno; cada Rº é independentemente selecionado de hidrogênio e — C(O)R*; cada RÔ é independentemente selecionado de alcóxi, alquila, ari- Jlalcóxi, arilalquila, cicloalquila, heterociclila, heterociclilalquila, (NRºRº al- - quenila e (NRºR$alquila; e cada R' e Rº é independentemente selecionado de hidrogênio e ' alquila.
Em uma primeira modalidade do primeiro aspecto a presente in- * 15 venção provê um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamente í aceitável do mesmo, em que: X e X' são independentemente selecionados de CH e CR'; e Y e Y' são independentemente selecionados de CH e CR?. Em uma segunda modalidade do primeiro aspecto, a presente invenção provê um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X e X' são independentemente selecionados de CH e CR'; e Y e Y' são cada um N.
Em uma terceira modalidade do primeiro aspecto, a presente in- venção provê um composto de Fórmula (|), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Y e X são cada um N; X é selecionado de CH e CR'; e Y' é selecionado de CH e CR?; Em uma quarta modalidade do primeiro aspecto, a presente in- venção provê um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
XéNe X é selecionado de CH e CR'; e Y e Y' são independentemente selecionados de CH e CR?. Em um segundo aspecto, a presente invenção provê uma com- posição compreendendo um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
Em uma primeira modalidade, o segundo aspecto da composição compre- ende ainda pelo menos um composto adicional tendo atividade anti-HCV.
Em uma segunda modalidade do segundo aspecto pelo menos um dos compostos adicionais é um interferon ou uma ribavirina.
Em uma terceira - modalidade do segundo aspecto o interferon é selecionado do interferon al- fazB, interferon alfa peguilado, interferon de consenso, interferon alfa 2a e Ú interferon linfoblastoide tau.
Em uma quarta modalidade do segundo aspecto, a presente in- “ 15 venção provê uma composição compreendendo um composto de Fórmula + (1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um veículo farmaceu- ticamente aceitável, e pelo menos um composto adicional tendo atividade anti-HCV, em que pelo menos um dos compostos adicionais é selecionado de interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, um composto que aumenta odesenvolvimento de resposta de célula T auxiliar tipo 1, RNA de interferên- cia, RNA antissenso, Imigimod, ribavirin, um inibidor de inosina 5-monofos- fato desidrogenase, amantadina e rimantadina.
Em uma quinta modalidade do segundo aspecto, a presente in- venção provê uma composição compreendendo um composto de Fórmula (D,ouum;salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, um veículo farmaceu- ticamente aceitável, e pelo menos um composto adicional tendo atividade anti-HCV, em que pelo menos um dos compostos adicionais é eficaz para inibir o funcionamento de um alvo selecionado de metaloprotease de HCV, serina protease de HCV, polimerase de HCV, helicase de HCV, proteina —NS4BdeHCV, entrada de HCV, montagem de HCV, egresso de HCV, prote- ína NSSA de HCV e IMPDH para o tratamento de uma infecção por HCV.
Em um terceiro aspecto, a presente invenção provê um método de tratamento de uma infecção por HCV em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma primeira modalidade do terceiro aspecto o método compreende a- inda administrar pelo menos um composto adicional tendo atividade anti- HCV antes, após ou simultaneamente ao composto de Fórmula (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma segunda modalidade do terceiro aspecto pelo menos um dos compostos adicionais é um interferon ou ribavirina. Em uma terceira modalidade do terceiro aspecto o interferon é selecionado de interferon alfa 2B, interferon alfa peguitado, interferon de - consenso, interferon alfa 2A e interferon linfoblastoide tau.
Em uma quarta modalidade do terceiro aspecto, a presente in- ' venção provê um método de tratamento de uma infecção por HCV em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuti- * 15 camente eficaz de um composto de Fórmula (|), ou um sal farmaceuticamen- 2 te aceitável do mesmo, e pelo menos um composto adicional tendo atividade anti-HCV antes, após ou simultaneamente ao composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que pelo menos um dos compostos adicionais é selecionado de interleucina 2, interleucina 6, inter- leucina 12, um composto que aumenta o desenvolvimento de uma resposta de célula T auxiliar tipo 1, RNA de interferência, RNA antissenso, Imigimode, ribavirina, um inibidor de inosina 5'-monofosfato desidrogenase, amantadina e rimantadina. Em uma quinta modalidade do terceiro aspecto, a presente in- venção provê um método de tratamento de uma infecção por HCV em um paciente compreendendo administrar ao paciente uma quantidade terapeuti- camente eficaz de um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamen- te aceitável do mesmo, e pelo menos um composto adicional tendo atividade anti-HCV antes, depois ou simultaneamente ao composto de Fórmula (1), ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, em que pelo menos um dos compostos adicionais é eficaz para inibir o funcionamento de um alvo sele- cionado de metaloprotease de HCV, serina protease de HCV, polimerase de
HCV, helicase de HCV, proteína NS4B de HCV, entrada de HCV, montagem de HCV, egresso de HCV, proteina NSSA de HCV e IMPDH para o trata- mento de uma infecção por HCV. Em um quarto aspecto, a presente invenção provê um processo para preparação de um composto de fórmula (X) ro (TA O Rº O); em que R' é selecionado de hidrogênio e um grupo de proteção de nitrogê- : nio; o processo compreendendo: - (a) reação de um composto de fórmula (11) duo
A “o & “Um a ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R' é selecionado de hidrogênio e um grupo de proteção de ni- trogênio; e R? é selecionado de amino, alcóxi e arilalcóxi; e com uma base, e (c) tratamento do produto da etapa (a) com água.
Em uma primeira modalidade do quarto aspecto, R' é hidrogê- nio.
Em uma segunda modalidade do quarto aspecto, Ré um grupo de proteção de nitrogênio. Em uma terceira modalidade do quarto aspecto o grupo de proteção de nitrogênio é grupo terc-butoxicarbonila.
Em uma quinta modalidade do quarto aspecto, a base é selecio- nada de um alcóxido de metal e um hidróxido de metal. Em uma sexta mo- dalidade do quarto aspecto a base é selecionada de etóxido de sódio, iso- propóxido de sódio, ferc-butóxido de sódio, hidróxido de sódio, hidróxido de lítio, hidróxido de potássio, isopropóxido de potássio, terc-butóxido de potás- sio, terce-butóxido de lítio e isopropóxido de lítio.
Em uma sétima modalidade do quarto aspecto, o processo com- preende ainda tratamento de um produto de fórmula (1) Pol v > o Rº O), em que R* é hidrogênio; com um reagente de proteção de nitrogênio para prover um composto de fórmula (1) Po N ?
SR em que Rº é um grupo de proteção de nitrogênio. - Em uma oitava modalidade do quarto aspecto, o grupo de prote- ção de nitrogênio é terc-butoxicarbonila. , Em um quinto aspecto, a presente invenção provê preparação deum composto de fórmula (Z) * H
RN Tor N (1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Rº e Rº são independentemente selecionados de hidrogênio, al- quila, arila, arilalquila, heterociclila e heterociclitalquila; o processo compreendendo: tratamento de um composto de fórmula (Q) o ANO Rº IV), com uma base na presença de acetato de amônio. Em uma primeira modalidade do quinto aspecto, a base é sele- cionada de uma amina terciária, uma amina aromática, uma anilina e imida- zol substituído. Em uma segunda modalidade do quinto aspecto a base é selecionada de 1,4-dimetilpiperazina, 3-quinuclidinol, 3-metilpiridina, 1-
metilimidazol, dimetilbutilamina, N,N-dimetilanilina, dimerprano!, quinoxazoli- na, creatinina, 2-metilimidazol, 4-metilimidazol, imidazol, morfolina, N-metil- morfolina, 1,8-diazabicicloundec-7-eno, 1,4-diazabiciclo(2.2.2Joctano, colidina, 4-cloroimidazol, 2-cloroimidazol, 4-cianoimidazol, benzimidazol, di-isopro- piletilamina e 2,6-lutidina. Em uma terceira modalidade a base é imidazo!l. Em um sexto aspecto, a presente invenção provê um processo para a preparação do Exemplo 145
N Boc! —N
HN 7 7 “NH N= Boc . N Exemplo 145, oprocesso compreendendo: (a) tratamento do Exemplo 143 o Br ! Br o Exemplo 143, com o Exemplo 144 Boc % à Pa Exemplo 144, na presença de uma base para produzir um composto de fórmula (V)
' o Boc e o o o = (V (b) tratamento do composto de fórmula (V) com acetato de amô- nio na presença de uma base; e ' (c) tratamento do produto da etapa (b) com metanol. Em uma primeira modalidade do sétimo aspecto, o processo é um processo contínuo, Outros aspectos da presente invenção podem incluir combina- Í ções adequadas de modalidades reveladas aqui. . Ainda outros aspectos e modalidades podem ser encontrados no relatório provido aqui.
A descrição da presente invenção deve ser considerada em congruidade com as leis e princípios de ligação química. Em alguns casos pode ser necessário remover um átomo de hidrogênio a fim de acomodar um substituinte em qualquer dado local.
Deve ser compreendido que os compostos compreendidos pela presente invenção são aqueles que são adequadamente estáveis para uso como agente farmacêutico.
É pretendido que a definição de qualquer substituinte ou variável em um local particular em uma molécula seja independente de sua definição em qualquer outro local naquela molécula. Por exemplo, quando R' e R? ambos contiverem um grupo R$, os dois grupos Rº podem ser iguais ou dife- rentes.
Todas as patentes, pedidos de patente e referências à literatura citados no relatório são aqui incorporados a título de referência em sua tota- lidade. No caso de inconsistências, a presente invenção, incluindo defini-
ções, vai prevalecer.
Conforme usado no presente relatório, os termos que seguem têm os significados indicados: Conforme aqui usado, as formas singulares "um", "uma", "o" e "a" incluem referências no plural a menos que o contexto dite claramente outro modo.
A menos que de outro modo declarado, todos os grupos arila, ci- cloalquila e heterociclila da presente invenção podem ser substituídos con- forme descrito em cada uma das suas respectivas definições. Por exemplo, a parte arila de um grupo arilalguila pode ser substituída conforme descrito . na definição do termo "arila”", O termo "alquenila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo de cadeia reta ou ramificada de dois a seis átomos de carbono contendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono. “As O termo "alquenilóxi", conforme aqui usado, refere-se a um gru- . po alquenila ligado à porção molecular parental através de um átomo de oxi- gênio.
O termo "alqueniloxicarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquenilóxi ligado à porção molecular parental através de um gru- pocarbonila.
O termo "alcóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo al- quila ligado à porção molecular parental através de um átomo de oxigênio.
O termo "alcoxialquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos alcóxi.
O termo "alcoxialquilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alcoxialquila ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "alcoxicarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alcóxi ligado à porção molecular parental através de um grupo carbo- nia.
O termo "alquilcarbonilóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquilcarbonila ligado à porção molecular parental através de um áto-
mo de oxigênio.
O termo "alquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo derivado de um hidrocarbono saturado de cadeia reta ou ramificada conten- do de a partir de um a seis átomos de carbono. Nos compostos da presente invenção, quando Rº é alquila, a alquila pode opcionalmente formar um anel de três membros fundido com um átomo de carbono adjacente para prover a estrutura mostrada abaixo. LX" Cp 1 R5 O termo "alquilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um ' grupo alquita ligado à porção molecular parental através de um grupo carbo- nila - O termo "alquilsulfanita", conforme aqui usado, refere-se a um : grupo alquila ligado à porção molecular parental através de um átomo de enxofre.
O termo "alquilsulfonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila ligado à porção molecular parental através de um grupo sulfo- nila.
O termo "amino", conforme aqui usado, refere-se a -NRºRº, em que Rº e Rº são independentemente selecionados de hidrogênio, alquila e arilalquila.
O termo "arila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo feni- la, ou um sistema de anel fundido bicíclico, em que um ou ambos os anéis são um grupo fenila. Sistemas de anel fundido bicíclico consistem em um grupo fenila fundido a um anel carbocíclico aromático ou não aromático de quatro a seis membros. Os grupos arila da presente invenção podem ser ligados à porção molecular parental através de qualquer átomo de carbono substituível no grupo. Exemplos representativos de grupos arila incluem, mas não estão limitados a, indanila, indenila, naftila, fenila e tetra-hidro- naftila. Os grupos arila da presente invenção são opcionalmente substituídos com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes independentemente sele- cionados de alquenila, alcóxi, alcoxialquila, alcoxicarbonila, alquila, alguilcar- bonila, um grupo arila secundário, arilalcóxi, arilalquila, arilcarbonila, ciano, halo, haloaicóxi, haloatquila, heterociclila, heterociclilalquila, heterociclilcar- bonila, hidróxi, hidroxialquila, nitro, -NRRY”, (NRRY)alquila, oxo e -P(O)ORs, em que cada R é independentemente selecionado de hidrogênio e alquila; e em que a parte alquila da arilalguila e da heterociclilalquila é não substituída e em que o segundo grupo arila, a parte arila da arilalguila, a parte arila da arilcarbonila, a heterociclila e a parte heterociíclila da heterociclilalquila e da —heterociclicarbonila são ainda opcionalmente substituídas com um, dois ou : três substituintes independentemente selecionados de alcóxi, alquila, ciano, halo, haloalcóxi, haloalquila e nitro.
O termo "arilacóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo arila ligado à porção molecular parental através de um grupo alcóxi.
Ns E O termo "arilalcoxicarbonila", conforme aqui usado, refere-se a . um grupo arilalcóxi ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "arilalquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos arila.
A parte alquila da ari- lalquila é opcionalmente substituída mais com um ou dois grupos adicionais independentemente selecionados de alcóxi, alquilcarbonilóxi, halo, haloalcó- xi, haloalquila, heterociclila, hidróxi e -NRºRº, em que a heterociclila é ainda opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independentemente selecionados de alcóxi, alquila, arila não substituída, arilalcóxi não substituí- do, arilalcoxicarbonila não substituída, halo, haloalcóxi, haloalquila, hidróxi, - NR*R* e oxo.
O termo "arilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo arila ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "base", conforme aqui usado, refere-se a um composto que aceita prótons.
O termo "processo contínuo", conforme aqui usado, refere-se a um processo muitietapa onde os intermediários formados não são isolados.
O termo "ciano", conforme aqui usado, refere-se a -CN.
O termo "cicloalquila", conforme aqui usado, refere-se a um sis- tema de anel hidrocarbono monocíclico ou bicíclico saturado tendo três a quatorze átomos de carbono e zero heteroátomo. Exemplos representativos de grupos cicloalguila incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclo- butila, ciclopentila, ciclo-hexila, biciclo[3.1.1]heptila e adamantila. Os grupos cicloalquila da presente invenção são opcionalmente substituidos com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes independentemente selecionados de alçóxi, alquila, arila, ciano, halo, haloalcóxi, haloaiquila, heterociclila, hidróxi, hidroxialquila, nitro e -NRxRy, em que a arila e a heterociclila são ainda op- . cionalmente substituídas com um, dois ou três substituintes independente- mente selecionados de alcóxi, alquila, ciano, halo, haloalcóxi, haloalquila, Ú hidróxi, nitro e oxo. O termo "cicloalquilóxi", conforme aqui usado, refere-se a um “* 15 grupo cicloalquila ligado à porção molecular parental através de um átomo . de oxigênio.
O termo "cicloalquiloxicarbonila, conforme aqui usado, refere-se a um grupo cicloalquilóxi ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "cicloalquilsulfonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo cicloalquila ligado à porção molecular parental através de um gru- po suilfonila.
O termo "etileno", conforme aqui usado, refere-se a =CH,.
O termo "formila", conforme aqui usado, refere-se a —-CHO.
Os termos "halo" e "halogênio", conforme aqui usado, referem-se aCl, Br, Foul.
O termo "haloalcóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo haloalquila ligado à porção molecular parental através de um átomo de oxi- gênio.
O termo "haloalcoxicarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo haloalcóxi ligado à porção molecular parental através de um grupo carbornila,
O termo "haloalquila", conforme aqui usado, refere-se a um gru-
po aiquila substituído com um, dois, três ou quatro átomos de halogênio.
O termo "heterociclila", conforme aqui usado, refere-se a um a- nel de quatro, cinco, seis ou sete membros contendo um, dois, três ou quatro — heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre.
O anel de quatro membros tem zero ligação dupla, o anel de cinco membros tem zero a duas ligações duplas e os anéis de seis e sete mem- bros têm zero a três ligações duplas.
O termo "heterociclila" também incluí grupos bicíclicos onde o anel heterociclila é fundido a outro grupo heterocicli- la monocíclico ou um anel carbocíclico aromático ou não-aromático de três a - sete membros; grupos bicíclicos onde o anel heterociclila é substituído com um anel espirocíclico de três a sete membros; bem como grupos bicíclicos Ú em ponte tais como 7-azabiciclo[2.2.1]hetp-7-ila, 2-azabiciclo[2.2.2]oct-2-ila e 2-azabicicio[2.2.2]oct-3-ila.
Os grupos heterociclila da presente invenção po- "* 15 dem serligados à porção molecular parental através de qualquer átomo de - carbono ou átomo de nitrogênio no grupo.
Exemplos de grupos heterociíclila incluem, mas não estão limitados a, benzotienila, furila, imidazolila, indolinila, isoquinolinila, isotiazolila, isoxazolila, morfolinila, oxazolila, piperazinila, pipe- ridinila, pirazolila, piridinila, pirrolidinila, pirrolpiridinita, pirrolila, quinolinila, tetra-hidropiranila, tiazolila, tienila e tiomorfolinila.
Os grupos heterociclila da presente invenção são opcionalmente substituídos com um, dois, três, qua- tro ou cinco substituintes independentemente selecionados de alquenila, at- cóxi, alcoxialquila, alcoxicarbonila, alquila, alquilcarbonila, arila, arilalcoxicar- bonila, arilalquila, arilcarbonila, ciano, halo, haloalcóxi, haloalquila, um se- gundo grupo heterociclila, heterocictilalquila, heterociclilcarbonita, hidróxi, hidroxialquila, nitro, -NRxRy, (NRxRyJ)alquila e oxo, em que a parte alquila da arilalquila e a heterociclilalquila são não substituídas e em que a arila, a par- te arila da arilalquila, a parte arila da arilcarbonila, o segundo grupo heteroci- clila e a parte heterociíclila da heterociclilalquila e a heterociclilcarbonila são — opcionalmente ainda substituídos com um, dois ou três substituintes inde- pendentemente selecionados de alcóxi, alquila, ciano, halo, haloalcóxi, halo-
alquila e nitro.
O termo "heterociclilalcóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo heterociclila ligado à porção molecular parental através de um grupo alcóxi.
O termo "heterociclilalcoxicarbonila", conforme aqui usado, refe- re-seaum grupo heterociclilalcóxi ligado à porção molecular parental atra- vês de um grupo carbonila.
O termo "heterociclilalquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos heterociclila. A par- te alquila da heterociclilalquila é ainda opcionalmente substituída com um ou dois grupos adicionais independentemente selecionados de alcóxi, alquilcar- - bonilóxi, arila, halo, haloalcóxi, haloalquila, hidróxi e -NRºRº, em que a arila é ainda opcionalmente substituída com um ou dois substituintes independen- ' temente selecionados de alcóxi, alquila, arila não substituída, arilalcóxi não substituído, arilalcoxicarbonila não substituída, halo, haloalcóxi, haloalquila, “7 15 hidróxie-NRRY BR O termo "heterociclitalguilcarbonila", conforme aqui usado, refe- re-se a um grupo heterociclilalquila ligado à porção molecular parental atra- vês de um grupo carbonila.
O termo "heterociclilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo heterociclila ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "heterociclilóxi", conforme aqui usado, refere-se a um grupo heterociíclila ligado à porção molecular parental através de um átomo de oxigênio.
O termo "heterocicliloxicarbonila", conforme aqui usado, refere- se a um grupo heterociclilóxi ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "hidróxi", conforme aqui usado, refere-se a —OH.
O termo "hidroxialquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos hidróxi.
O termo "hidroxialquilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo hidroxialquila ligado à porção molecular parental através de um i grupo carbonila.
O termo "alcóxido de metal", conforme aqui usado, refere-se a M-OR, em que M é um metal selecionado de sódio, lítio e potássio e R é um grupo alquila.
O termo "hidróxido de metal", conforme aqui usado, refere-se a M-OH, em que M é um metal selecionado de sódio, lítio e potássio.
O termo "nitro", conforme aqui usado, refere-se a -NO,. O termo "grupo de proteção de nitrogênio", conforme aqui usa- do, refere-se a grupos pretendidos proteger um grupo amino contra reações indesejadas durante procedimentos sintéticos.
Grupos de proteção N co- ' muns incluem, mas não estão limitados a, grupos arila tais como acetila, benzoila, 2-bromoacetila, 4-bromobenzoíila, 4-ferc-butilacetila, carboxaldeí- do, 2-cloroacetila, 4-clorobenzoíila, a-clorobutirila, 4-nitrobenzoila, o-nitrofe- noxiacetila, ftalila, pivaloila, propionila, tricloroacetila e trifluoracetila; grupos * 15 sulifonila tais como benzenossulfonila e p-toluenossulfonila; grupos de for- . mação de carbamato tais como benziloxicarbonila, benziloxicarbonila (Cbz), terc-butoxicarbonila (Boc), p-clorobenziloxicarbonila e p-metoxibenziloxicar- bonila.
O termo "reagente de proteção de nitrogênio", conforme aqui usado, refere-se a um composto que sob condições de reação adiciona um grupo de proteção de nitrogênio a um átomo de nitrogênio que pode ser pro- tegido.
O termo "NRºRº", conforme aqui usado, refere-se a dois grupos, Rº e R$, que são ligados à porção molecular parental através de um átomo de nitrogênio.
Rº e Rº são independentemente selecionados de hidrogênio, alqueniloxicarbonila, alcoxialquilcarbonila, alcoxialquilcarbonila, alcoxicarbo- nila, alquita, alquilcarbonila, cicioalquilóxi, alquilsulfonila, arila, arilalcoxicar- bonila, arilaiquila, arilalquilcarbonila, arilcarbonila, ariloxicarbonila, arilsulfoni- la, cicloalquila, cicloalquitoxicarbonila, cicloalquilsulfonila, formila, haloalcoxi- —carbonila, heterociclila, heterociclilalcoxicarbonila, heterociclilalquila, hetero- ciclilalquilcarbonila, heterociclilcarbonila, heterocicliloxicarbonila, hidroxialquil- carbonila, (NRºR$alquila, (NRºRalquilcarbonita, (NRºRÍcarbonila, (NRºRÍ sul-
] fonila, -C(NCN)OR' e -C(NCN)NR'R", em que R' é selecionado de alquila e fenila não substituída, e em que a parte alquila da arilalquila, a arilalquilcar- bonila, a heterociclilalquila e a heterociclilalquilcarbonila são ainda opcional- mente substituídas com um grupo NRcRÍ; e em que a arila, a parte arila da arilalcoxicarbonila, a arilalguila, a arilalquilcarbonila, a arilcarbonita, a ariloxi- carbonila e a arilsulfonila, a heterociíclila, e a parte heterociclila da heterocicli- lalcoxicarbonila, a heterociclitalquila, a heterociclilalquilcarbonila, a heteroci- clilcarbonila e a heterocicliloxicarbonila são ainda opcionalmente substituídas com um, dois ou três substituintes independentemente selecionados de al- cóxi, alquila, ciano, halo, haloalcóxi, haloalquila e nitro. , O termo "(NRºRi)alquenila", conforme aqui usado, refere-se a Rº & Rº Rº Rº em que Rº e Rº são conforme aqui definido e cada Rº é inde- pendentemente hidrogênio ou C,.; alquila.
O termo "(NRºR alquila”, conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos -NRºRº, A parte alqui- la da (NRºR)alquila é ainda opcionalmente substituída com um ou dois gru- pos adicionais selecionados de alcóxi, alcoxialquilcarbonila, alcoxicarbonila, alquilsulfanila, C> alquinila, arilalcoxicarbonila, carbóxi, ciano, cicloalquila, halo, heterociclila, heterociclilcarbonila, hidróxi e (NRºRÍcarbonila; em que a —heterociíclila é ainda opcionalmente substituída com um, dois, três, quatro ou cinco substituintes independentemente selecionados de alcóxi, alquila, cia- no, halo, haloalcóxi, haloalquila e nitro.
O termo "NRºR""', conforme aqui usado, refere-se a dois grupos, Rº e RI, que são ligados à porção molecular parental através de um átomo de nitrogênio.
Rº e Rí são independentemente selecionados de hidrogênio, alquila, arila não substituída, arilalquila não substituída, cicloalquila não substituída, (cicloalquil)alquita não substituída, heterociclila não substituída,
i heterociclilalquila não substituída, (NR“R”)alquila e (NR“R”)carbonila.
O termo "(NRºRalquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquita substituído com um, dois ou três grupos —N RºRÍ O termo "(NRºRjalquilcarbonila", conforme aqui usado, refere-se aumgrupo (NRºR5alquila ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "(NRºRiicarbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo —NRºRÍ ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "(NRºRÍsulfonila”, conforme aqui usado, refere-se a um . grupo -NRºR ligado à porção molecular parental através de um grupo sulfo- nila. S O termo "NR'R"", conforme aqui usado, refere-se a dois grupos, R" e R”, que são ligados à porção molecular parental através de um átomo * 15 de nitrogênio Re R” são independentemente selecionados de hidrogênio, . alcoxicarbonila, alquila, alquilcarbonita, arila não substituída, arilalcoxicarbo- nila não substituída, arilalquila não substituída, cicloalquila não substituída, heterocíclila não substituida e (NR*RÚ)carbonila, em que R* e RY são inde- pendentemente selecionados de hidrogênio e alquila. O termo "(NR“R”)alquila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo alquila substituído com um, dois ou três grupos -NR“R”.
O termo "(NR“R”)carbonita", conforme aqui usado, refere-se a um grupo -NR*R” ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "NRR"", conforme aqui usado, refere-se a dois grupos, R*e R”, que são ligados à porção molecular parental através de um átomo de nitrogênio. R e Rº são independentemente selecionados de hidrogênio e atquila.
O termo "(NR"R”)carbonila", conforme aqui usado, refere-se a um grupo—NR*R"” ligado à porção molecular parental através de um grupo carbonila.
O termo "oxo", conforme aqui usado, refere-se a =O.
] O termo "sulfonila”, conforme aqui usado, refere-se a —SO->.
Centros assimétricos existem nos compostos da presente inven- ção. Esses centros são designados pelo símbolo "R" ou "S", dependendo da configuração dos substituintes em torno do átomo de carbono quiral. Deve ser compreendido que a invenção compreende todas as formas isoméricas estereoquímicas, ou suas misturas, que possuem a habilidade em inibir NSSA. Estereoisômeros individuais de compostos podem ser preparados sinteticamente a partir de materiais de partida comercialmente disponíveis que contêm centros quirais ou através da preparação de misturas de produ- tos estereoisoméricos seguido por separação tal como conversão em uma - mistura de diastereômeros seguido por separação ou recristalização, técni- cas cromatográficas ou separação direta de estereoisômeros em colunas Ú cromatográficas quirais. Compostos de partida de estereoquímica particular ou estão comercialmente disponíveis ou podem ser feitos e separados atra- 7 15 vésdetécnicasconhecidas no campo.
. Certos compostos da presente invenção podem também existir em formas conformacionais estáveis diferentes que podem ser separáveis. Assimetria torsional devido à rotação restrita em torno de uma ligação sim- ples assimétrica, por exemplo, por causa de impedimento estérico ou fila- mento de anel, pode permitir separação de conformadores diferentes. A pre- sente invenção inclui cada isômero conformaciona! desses compostos e mis- turas dos mesmos.
Os compostos da presente invenção também existem como tau- tômeros; desta maneira, a presente invenção também compreende todas as formas tautoméricas.
O termo "compostos da presente invenção" e expressões equi- valentes pretendem compreender compostos de Fórmula (|) e estereoisôme- ros, diastereômeros e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Simi- larmente, referências a intermediários pretendem compreender seus sais em queocontextotambém permitir.
A presente invenção pretende incluir todos os isótopos de áto- mos ocorrendo nos presentes compostos. Isótopos incluem aqueles átomos
' tendo o mesmo número atômico, mas números de massa diferentes.
A título de exemplo geral e sem limitação, isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio.
Isótopos de carbono incluem **C e "*C.
Os compostos isotopicamente marcados da invenção podem ser geralmente preparados através de técni- cas convencionais conhecidas daqueles versados no campo ou através de processos análogos àqueles descritos aqui, usando um reagente isotopica- mente marcado apropriado no lugar do reagente não marcado de outra ma- neira empregado.
Tais compostos podem ter uma variedade de usos poten- ciais, por exemplo, como padrões e reagentes na determinação da atividade biológica.
No caso de isótopos estáveis, tais compostos podem ter o poten- - cial de modificar favoravelmente propriedades biológicas, farmacológicas ou farmacocinéticas.
S Os compostos da presente invenção podem existir como sais farmaceuticamente aceitáveis.
O termo "sal farmaceuticamente aceitável", * 15 conforme aqui usado, representa sais ou formas zwitteriônicas dos compos- . tos da presente invenção que são solúveis ou dispersáveis em água ou óleo, que são, dentro do escopo do julgamento médico importante, adequados para uso em contato com o tecido de pacientes sem toxidez excessiva, irri- tação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação comensurável com uma razão de benefício/frisco razoável e são eficazes para o uso pre- tendido.
Os sais podem ser preparados durante isolamento e purificação finais dos compostos ou separadamente através da reação de um átomo de nitrogênio adequado com um ácido adequado.
Sais de adição ácidos repre- sentativos incluem acetato, adipato, aiginato, citrato, aspartato, benzoato, — benzenossulfonato, bissulfato, butirato, canforato, canforsulfonato, digluconato, glicerofosfato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, formato, fumarato, cloridra- to, bromidrato, iodrato, 2-hidroxietanossulfonato, lactato, maleato, mesitilenos- sulfonato, metanossulfonato, naftilenossulfonato, nicotinato, 2-naftalenossu!- fonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pi- valato, propionato, succinato, tartrato, tricloroacetato, trifluoracetato, fosfato, glutamato, bicarbonato, para-toluenossulfonato e undecanoato.
Exemplos de ácidos que podem ser empregados para formar sais de adição farmaceuti-
: camente aceitáveis incluem ácidos inorgânicos tais como ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico e fosfórico e ácidos orgânicos tais como oxálico, malei- co, succeínico e cítrico.
Sais de adição básicos podem ser preparados durante isolamen- toepurificação finais dos compostos através de reação de um grupo carbóxi com uma base adequada tal como o hidróxido, carbonato ou bicarbonato de um cátion de metal ou com amônia ou uma amina primária, secundária ou terciária orgânica. Os cátions de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem litio, sódio, potássio, cálcio, magnésio e alumínio, bem como cátions de ami- na nãotóxicos tais como amônio, tetrametilamônio, tetraetilamônio, metilami- - na, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, dietilamina, etilamina, tributilami- na, piridina, N,N-dimetilanilina, N-metilpiperidina, N-etilmorfolina, diciclo- S hexilamina, procaina, dibenzilamina, N, N-dibenzilfenetilamina e N N'-dibenzi- letilenodiamina. Outras aminas orgânicas representativas úteis para a for- 7“ 15 maçãode sais de adição de base incluem etilenodiamina, etanolamina, die- ' tanolamina, piperidina e piperazina.
Quando é possível, para uso em terapia, que quantidades tera- peuticamente eficazes de um composto de Fórmula (1), bem como sais far- maceuticamente aceitáveis do mesmo, sejam administradas como o agente químico bruto, é possível apresentar o ingrediente ativo como uma composi- ção farmacêutica. Desta maneira, a presente invenção provê ainda composi- ções farmacêuticas, que incluem quantidades terapeuticamente eficazes de compostos de Fórmula (1) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mes- mos e um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente a- ceitáveis. O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", conforme aqui usa- do, refere-se à quantidade total de cada componente ativo que é suficiente para mostrar um benefício significante para o paciente, por exemplo, uma redução sustentada em carga viral. Quando aplicado a um ingrediente ativo individual, administrado sozinho, o termo refere-se a este ingrediente sozi- nho. Quando aplicado a uma combinação, o termo refere-se a quantidades combinadas dos ingredientes ativos que resultam no efeito terapêutico, seja administrado em combinação, serialmente ou simultaneamente. Os compos-
tos de Fórmula (1) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos são conforme acima descrito.
O(s) veículo(s), diluente(s) ou excipiente(s) de- ve(m) ser aceitável(eis) no sentido de ser compatíveis com os outros ingre- dientes da formulação e não prejudiciais para o seu recipiente.
De acordo com outro aspecto da presente invenção é também provido um processo para a preparação de uma formulação farmacêutica incluindo mistura de um composto de Fórmula (1), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com um ou mais veículos, diluentes ou exciptente farmaceuticamente aceitá- veis.
O termo "farmaceuticamente aceitável", conforme aqui usado, refere-se àqueles compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que - são, dentro do escopo do julgamento médico importante, adequados para uso em contato com os tecidos de pacientes sem toxidez excessiva, irrita- Ú ção, resposta alérgica ou outro problema ou complicação comensurado com uma razão de benefício/risco razoável e são eficazes para seu uso pretendi-
* 15 do
. As formulações farmacêuticas podem ser apresentadas em for- mas de dosagem unitária contendo uma quantidade predeterminada de in- grediente ativo por dose unitária.
Os níveis de dosagem entre cerca de 0,01 e cerca de 250 miligramas por quilograma ("mg/kg") de peso do corpo por dia, preferivelmente entre cerca de 0,05 e cerca de 100 mg/kg de peso do corpo por dia, dos compostos da presente invenção são típicos em uma mo- noterapia para a prevenção e o tratamento de doença mediada por HCV.
Tipicamente, as composições farmacêuticas da presente invenção serão administradas de a partir de cerca de 1 a cerca de 5 vezes por dia ou, alter- —nativamente, como uma infusão contínua.
Tal administração pode ser usada como uma terapia crônica ou aguda.
A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com os materiais veículos para produzir uma forma de dosagem única vai variar dependendo da condição sendo tratada, da severi- dade da condição, do momento de administração, da via de administração, da taxade excreção do composto empregado, da duração do tratamento e da idade, gênero, peso e condição do paciente.
Formulações de dosagem unitária preferidas são aquelas contendo uma dose ou subdose diária, con-
' forme aqui acima mencionado, ou uma fração apropriada da mesma, de um ingrediente ativo.
Em geral, tratamento é iniciado com dosagens pequenas substancialmente menos do que a dose ótima do composto.
Em seguida, a dosagem é aumentada em pequenos aumentos até que o efeito ótimo sob as circunstâncias seja atingido.
Em geral, o composto é mais desejavelmen- te administrado em um nível de concentração que vai geralmente dar resul- tados antiviralmente eficazes sem causar quaisquer efeitos colaterais peri- gosos ou prejudiciais.
Quando as composições da presente invenção compreendem uma combinação de um composto da presente invenção e um ou mais agen- tes terapêuticos ou profiláticos adicionais, ambos o composto e o agente adicional estão geralmente presentes em níveis de dosagem entre cerca de S 10 a 150% e mais preferivelmente entre cerca de 10 e 80% da dosagem normalmente administrada em regime de monoterapia. “115 As formulações farmacêuticas podem ser adaptadas para admi- BR nistração através de qualquer via apropriada, por exemplo, através das via oral (incluindo bucal ou sublingual), retal, nasal, tópica (incluindo bucal, sub- lingual ou transdermal), vaginal ou parenteral (incluindo injeções ou infusões subcutâneas, intracutâneas, intramusculares, intra-articulares, intrassinovi- ais, intrasternais, intratecais, intralesionais, intravenosas ou intradermais). Tais formulações podem ser preparadas através de qualquer método conhe- cido na técnica de Farmácia, por exemplo, trazendo em associação o ingre- diente ativo com o(s) veículo(es) ou excipiente(s). Administração oral ou ad- ministração através de injeção é preferida.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração o- ral podem ser apresentadas como unidades separadas tais como cápsulas ou comprimidos; pós ou grânulos; soluções ou suspensões em líquidos a- quosos ou não aquosos; espumas comestíveis ou lenços; ou emulsões líqui- das óleo-em-água ou emulsões água-em-óleo.
Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimi- do ou cápsula, o componente de fármaco ativo pode ser combinado com um veículo inerte farmaceuticamente aceitável não-tóxico, oral, tal como etanol,
i glicerol, água e similar. Pós são preparados moendo o composto para um tamanho pequeno adequado e misturando com um veículo farmacêutico si- milarmente moído tal como um carboidrato comestível como, por exemplo, amido ou manitol. Agente de saborização, conservante, de dispersão e colo- ração pode também estar presente.
Cápsulas são feitas preparando uma mistura de pó, conforme acima descrito, e enchendo folhas de gelatina formadas. Glidantes e lubrifi- cantes tais como sílica coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio ou polietileno glicol sólido podem ser adicionados à mistura em pó antes da operação de enchimento. Um agente desintegrante ou de solubili- - zação tal como ágar-ágar, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio pode também ser adicionado para melhorar a disponibilidade do medicamento ' quando a cápsula é ingerida. Além disso, quando desejado ou necessário, ligantes, lubrifican- 7“ 15 tes, agentes de desintegração e agentes de coloração podem também ser . incorporados à mistura. Ligantes adequados incluem amido, gelatina, açúca- res naturais tal como glicose ou beta-glicose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas tal como acácia, tragacanto ou alginato de sódio, carbo- ximetilcelulose, polietileno glicol e similar. Lubrificantes usados nas formas de dosagem incluem oleato de sódio, cloreto de sódio e similar. Desintegra- dores incluem, sem limitação, amido, metil celulose, ágar, bentonita, goma xantana e similar. Comprimidos são formulados, por exemplo, através da preparação de uma mistura em pó, granulação ou pré-compressão, adição de um lubrificante e um desintegrante, e pressionamento em comprimidos. Uma mistura em pó é preparada misturando o composto, moído adequado, com um diluente ou base conforme acima descrito e, opcionalmente, com um ligante tal como carboximetilcelulose, um alginato, gelatina ou polivinilpir- rolidona, um retardante de solução tal como parafina, um acelerador de re- absorção tal como sal quaternário e/ou um agente de absorção tal como —bentonita, caulim ou fosfato de dicálcio. A mistura em pó pode ser granulada umedecendo com um ligante tal como xarope, pasta de amido, mucilagem de acácia ou soluções de materiais celulósicos ou poliméricos e forçar atra-
É vés de uma peneira. Como uma alternativa para granulação, a mistura em pó pode ser posta em uma máquina de mesa e o resultado são balas imper- feitamente formadas quebradas em grânulos. Os grânulos podem ser lubrifi- cados para prevenir que grudem aos moldes de formação de comprimido por —meioda adição de ácido esteárico, um sal de estearato, talco ou óleo mine- ral. A mistura lubrificada é então pressionada em comprimidos. Os compos- tos da presente invenção podem também ser combinados com um veículo inerte de fluxo livre e prensados em comprimidos diretamente sem ir para as etapas de granulação ou formação de bala. Um revestimento protetor trans- parente ou opaco consistindo em um revestimento de vedação de verniz, um revestimento de açúcar ou material polimérico e um revestimento de poli- mento de cera pode ser provido. Corantes podem ser adicionados a esses revestimentos para distinguir dosagens unitárias diferentes.
Fluidos orais tais como solução, xaropes e elixires podem ser 7“ 15 preparados em forma de dosagem unitária de maneira que uma dada quan- : tidade contenha uma quantidade predeterminada do composto. Xaropes po- dem ser preparados dissolvendo o composto em uma solução aquosa favo- ravelmente saborizada, enquanto elixires são preparados através do uso de um veículo não tóxico. Solubilizadores e emulsificantes tais como álcoois de isoestearila etoxilados e ésteres de polioxietileno sorbitol, preservativos, adi- tivo saborizante tais como óleo de pimenta e adoçantes naturais, ou sacarina ou outros adoçantes artificiais, e similar podem ser também adicionados. Onde apropriado, formulações unitárias de dosagem para admi- nistração oral podem ser microencapsuladas. A formulação pode ser tam- bém preparada para prolongar ou sustentar a liberação como, por exemplo, através do revestimento ou embutimento de material em partícula em polí- meros, cera ou similar.
Os compostos de Fórmula (1), e sais farmaceuticamente aceitá- veis dos mesmos, podem ser também administrados na forma de sistemas de aplicação de lipossoma, tais como vesículas unilamelares pequenas, ve- sículas unilamelares grandes e vesículas multilamelares. Lipossomas podem ser formados a partir de uma variedade de fosfolipídeos, tal como colesterol,
' estearilamina ou fosfatidilcolinas.
Os compostos de Fórmula (1) e sais farmaceuticamente aceitá- veis dos mesmos podem ser também aplicados através do uso de anticorpos monoclonais como veículos individuais aos quais as moléculas de composto são acopladas. Os compostos podem também ser acoplados com polimeros solúveis como veículos de fármaco alvo. Tais polímeros podem incluir polivi- nilpirrolidona, copolímero de pirano, poli-hidroxipropilmetacrilamidofenol, po- li-hidroxietilaspartamidofeno! ou polietilenooxidopolilisina substituído com resíduos palitoila. Ainda, os compostos podem ser acoplados a uma classe de polímeros biodegradáveis úteis em obter liberação controlada de um fár- - maco, por exemplo, ácido poliláctico, poliepson caprolactona, ácido poli- hidroxi butírico, poliortoésteres, poliacetais, polidiidropiranos, policianoacrila- tos e copolímeros em bloco reticulados ou anfifáticos de hidrogéis.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração “15 transdermal podem ser apresentadas como emplastros separados pretendi- ' dos permanecer em contato íntimo com a epiderme do recipiente por um período de tempo prolongado. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser a- plicado a partir do emplastro através de iontoforese conforme geralmente descrito em Pharmaceutical Research, 3(6):318 (1986).
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração tó- pica podem ser formuladas como unguentos, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, géis, sprays, aerossóis ou óleos.
Para tratamento do olho ou outros tecidos externos, por exem- plo, boca e pele, as formulações são preferivelmente aplicadas como um —unguento ou creme tópico. Quando formulado em um unguento, o ingredien- te ativo pode ser empregado ou com uma base parafínica ou de unguento miscível em água. Alternativamente, o ingrediente ativo pode ser formulado em um creme com uma base de creme óleo-em-água ou uma base água- em-óleo.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administrações tópicas ao olho incluem colírios em que o ingrediente ativo é dissolvido ou suspenso em um veículo adequado, especialmente um solvente aquoso.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração tó- pica na boca incluem pastilhas e enxaguatórios bucais.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração re- tal podem ser apresentadas como supositórios ou como enemas.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração nasal onde o veículo é um sólido incluem um pó grosso tendo um tamanho de partícula, por exemplo, na faixa de 20 a 500 mícrons que é administrado de uma maneira onde aspiração é feita, isto é, através de inalação rápida através da passagem nasal a partir de um recipiente do pó mantido próximo aonariz. Formulações adequadas onde o veículo é um líquido, para adminis- - tração como um spray nasal ou gotas nasais, incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente ativo. As formulações farmacêuticas adaptadas para administração a- través de inalação incluem pós ou névoas de partículas finas, que podem ser 7“ 15 geradas por meio de vários tipos de aerossóis, nebulizadores ou insuflado- . res pressurizados, de dose medida.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações spray.
As formulações farmacêuticas adaptadas para administração pa- renteral incluem soluções de injeção estéril aquosas e não aquosas que po- dem conter antioxidantes, tampões, bacteriostatos e soufes que tornam a formulação isotônica com o sangue do recipiente pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes de espessamento. As formulações podem ser apresentadas em re- cipientes de dose unitária ou multidose, por exemplo, ampolas e frascos ve- dados, e podem ser armazenadas em uma condição seca por congelamento (liofilizada) requerendo apenas a adição do veículo líquido estéril, por exem- plo, água para injeções, imediatamente antes do uso. Soluções e suspen- —sões de injeção extemporânea podem ser preparadas a partir de pós, grânu- los e comprimidos estéreis.
Deve ser compreendido que em adição aos ingredientes particu-
' larmente mencionados acima, a formulação pode incluir outros agentes con- vencionais na técnica tendo relação com o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir a- gentes saborizantes. O termo "paciente" inclui ambos humanos e outros mamíferos. O termo "tratando" refere-se a: (1) prevenção de uma doença, distúrbio ou condição de ocorrer em um paciente que pode ser predisposto à doença, distúrbio e/ou condição, mas que não foi ainda diagnosticado como tendo-a; (ii) inibição da doença, distúrbio ou condição, isto é, parada do seu desenvolvimento; e (iii) alívio da doença, distúrbio ou condição, isto é, cau- - sando a regressão da doença, distúrbio e/ou condição. Os compostos da presente invenção podem ser também admi- nistrados com uma cictosporina, por exemplo, ciclosporina A. A ciclosporina A foi também mostrada ser ativa contra HCV em testes clínicos (Hepatology, “15 38:1282 (2003); Biochem. Biophys. Res. Commun., 313:42 (2004); J. Gas- . troenterol., 38:567 (2003)).
A Tabela 1 abaixo lista alguns exemplos ilustrativos de compos- tos que podem ser administrados com os compostos da presente invenção. Os compostos da invenção podem ser administrados com outros compostos de atividade antiHCV em terapia de combinação, ou em conjunto ou sepa- radamente, ou através da combinação dos compostos em uma composição.
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. 35/563 | Os compostos da presente invenção podem ser também usados como reagentes de laboratório.
Os compostos podem ser instrumentais na provisão de ferramentas de pesquisa para projeto de ensaios de replicação viral, validação de sistemas de ensaio de animal e estudos de biologia estru- turais para aumentar mais o conhecimento dos mecanismos de doença do HCV.
Ainda, os compostos da presente invenção são úteis no estabeleci- mento ou determinação do sítio de ligação de outros compostos virais, por exemplo, através de inibição competitiva.
Os compostos da presente invenção podem ser também usados paratratar ou prevenir contaminação viral de materiais e então reduzir o ris- - co de infecção viral de pessoal de laboratório ou médico ou pacientes que entram em contato com tais materiais, por exemplo, sangue, tecido, instru- mentos cirúrgicos e roupas, instrumentos e roupas de laboratório e apare- lhos e materiais de coleta ou transfusão de sangue. 7 A15 A presente invenção pretende compreender compostos tendo : Fórmula (1) quando preparados através de processos sintéticos ou através de processos metabólicos incluindo aqueles ocorrendo no corpo humano ou animal (in vivo) ou processos ocorrendo in vitro.
As abreviações usadas no presente pedido, incluíndo particular- mente nos exemplos ilustrativos que seguem, são bem conhecidas daqueles versados na técnica.
Algumas das abreviações usadas são como segue: Ph para fenila;, DME para 1,2-dimetoxietano; TFA para ácido trifluoracético; DCM para diclorometano; HATU para hexafluorfosfato de O-(7-azabenzotri- azol-1-iI)-N,N,N' N'-tetrametilurônio; DMF para N, N-dimetilformamida; iPr.EtN, DIEA ou DIPEA para di-isopropiletilamina; h, hr ou hrs para horas; MeEOD para CD;OD; MeOH para metanol; min ou mins para minutos; EtOH para etanol; Et para etila; DMSO para dimetilsuifóxido; rt ou RT ou Rt para tempe- ratura ambiente ou tempo de retenção (o contexto vai ditar); EDCI para clori- drato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida; Boc, boc ou BOC para ferc-butoxicarbonila; FIOAc ou EtOAc para acetato de etila, THF para tetra- hidrofurano; TBDPS para t-butildimetilsilila; DMAP para 4-dimetilaminopiri- dina; TBAF para fluoreto de tetrabutilamônio; OAc para acetato; ACOH para
: 36/563 : ácido acético; SEMCI para cloreto de 2-(trimetilsili)etoximetila; d para dias; TEA ou Et3N para trietilamina; ACN ou MeCN para acetonitrila; NOS para N- clorossuccinimida; NBS para N-bromossuccinimida; Et;O para dietil éter; DCE para 1,2-dicloroetano; d para dias; e DEA para dietilamina.
A presente invenção será agora descrita em conexão com certas modalidades que não pretendem limitar seu escopo. Pelo contrário, a pre- sente invenção compreende todas as alternativas, modificações e equivalen- tes que possam estar incluídos no escopo das reivindicações. Desta manei- ra, os exemplos que seguem, que pretendem incluir modalidades específi- cas, vãoilustrar uma prática da presente invenção, sendo compreendido que - os exemplos são para os propósitos de ilustração de certas modalidades e são apresentados para prover o que é acreditado ser a descrição mais útil e ' prontamente compreensível de seus procedimentos e aspectos conceituais. Os materiais de partida podem ser obtidos de fontes comerciais “ 15 ou preparados através de métodos bem estabelecidos na literatura conheci- : dos daqueles de habilidade comum na técnica.
SÍNTESE DE CAPS COMUNS Condições de Análise de Composto Avaliação de pureza e análise de massa de baixa resolução fo- ram conduzidas em um sistema Shimadzu LC acoplado com Waters MI- CROMASS” z7Q MS system. Deve ser notado que tempos de retenção po- dem variar ligeiramente entre as máquinas. Condições de LC adicionais apli- cáveis à seção atual, a menos que de outro modo indicado. Cond.-MS-W1 Coluna = XTERRAº 3,0 X 50 mm S7 %B Inicial =0o %B Final = 100 Tempo de gradiente — =2 min Tempo de parada =3min Taxade Fluxo = 5 mL/min Comprimento de onda =220 nm Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H2O 90%
: 37/563 Ú Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H20 10% Cond.-MS-W2 Coluna = XTERRAº 3,0 X 50 mm S7 %B Inicial =0O %BFinal = 100 Tempo de Gradiente = = 3 min Tempo de parada =4 min Taxa de fluxo =4 mLmin Comprimento de onda =220 nm SolventeA = TFA 0,1% em metano! 10%/H2zO 90% : Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H2O0 10% Cond.-MS-W5 Coluna = XTERRAº 3,0 X 50 mm S7 %B Inicial =0o “15 “%BrFinal =30 : Tempo de gradiente — =2 min Tempo de parada =3 min Taxa de fluxo = 5 mL/min Comprimento de onda =220nm SolventeA = TFA 0,1% em metanol 10% H2O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H2O0 10% Cond.-D1 Coluna = XTERRAº C18 3,0 X 50 mm S7 %B Inicial =0O %BrFinal = 100 Tempo de Gradiente = 3 min Tempo de parada =4 min Taxa de fluxo =4 mUmin Comprimento de onda =220 nm SolventeA = TFA 0,1% em metanol 10% H2O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol! 90%/H2O 10% Cond.-D2
: 38/563 Ú Coluna =PHENOMENEXº Luna 4,6 X 50mm S10 %B Inicial =0O %B Final = 100 Tempo de gradiente = =3 min S Tempode parada =4 min Taxa de fluxo = 4 mL/min Comprimento de onda =220 nm Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H;O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H2O 10% Cond-M3 . Coluna = XTERRA? C18 3,0 X 50 mm S7 %RB Inicial =O %B Final =40 Tempo de gradiente — =2 min * 15 Tempo de parada =3 min : Taxa de fluxo = 5 mL/min Comprimento de onda =220 nm Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H2O0 290% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H2O 10% Condição! Coluna = PHENOMENEX” Luna 3,0 X 50 mm S10 %RB Inicial =0 %B Final = 100 Tempo de gradiente — =2 min Tempo de parada =3 min Taxa de Fluxo = 4 mlL/min Comprimento de onda =220 nm Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H;O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/HsO 10% Condição! Coluna = PHENOMENEXº Luna 4,6 X 50 mm S10 %B Inicial =O
. 39/563 ] %B Final = 100 Tempo de gradiente — = 2 min Tempo de parada =3min Taxa de Fluxo = 5 mLmin Comprimento de onda = 220 nm Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H2;O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/HzO 10% Condição Ill Coluna =XTERRA? C18 3,0 x 50mm S7 %Blnicial =0 - %B Final = 100 Tempo de gradiente — = 3 min i Tempo de parada = 4 min Taxa de fluxo = 4 mlL/min “ 15 Comprimento de onda = 220 nm : Solvente À = TFA 0,1% em metanol 10%/H;O 90% Solvente B = TFA 0,1% em metanol 90%/H2O 10% Cap-1
CA “OH
AN Ácido (R)-2-(dimetilamino)-2-fenilacético Uma suspensão de Pd/C 10% (2,0 g) em metanol (10 mL) foi a- dicionada a uma mistura de (R)-2-fenilglicina (10 9, 66,2 mmol), formaldeído (33 mL de 37% em peso em água), HCl 1N (30 mL) e metano! (30 mL) e ex- posta a H; 413,69 kPa (60 psi) por 3 horas. A mistura de reação foi filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e o filtrado foi concentrado in vacuo. O ma- terial bruto resultante foi recristalizado a partir de isopropanol para prover o sal de HCl de Cap-1 como uma agulha branca (4,0 g). Rotação óptica: -117,1º [0c=9,95 mgiml. em H2O; A=589 nm]. *H RMN (DMSO-ds, 5=2,5 ppm, 500 MHz): 5 7,43-7,34 (m, 5H), 4,14 (s, 1H), 2,43 (s, 8H); LC (Condição |): Tr= 0,25; LC/MS: Anál. Cal. para [IM+H]* CioHaNO, 180,10; encontrado 180,17;
: 40/563 ] HRMS: Anál.
Cal. para [M+H]" CioH14NO> 180,1025; encontrado 180,1017. Cap-2 o ” Ácido (R)-2-(Dietilamino)-2-fenilacético NaBH;3CN (6,22 g, 94 mmol) foi adicionado em porções durante alguns minutos a uma mistura fria (gelo/água) de (R)-2-fenilglicina (6,02 g, 39,8 mmol) e metanol (100 mL) e agitado por 5 minutos.
Acetaldeído (10 mL) foi adicionado em gotas durante 10 minutos e agitação foi continuada na ] mesma temperatura fria por 45 minutos e em temperatura ambiente por -6,5 . horas.
A mistura de reação foi esfriada de volta com banho de água gelada, tratada com água (3 mL) e então extinta com uma adição em gotas de HCI concentrado durante -45 minutos até que o pH da mistura fosse -1,5-2,0. O banho de esfriamento foi removido e a agitação foi continuada enquanto adi- - cionado HCl concentrado a fim de manter o pH da mistura em torno de 1,5- 2,0. A mistura de reação foi agitada da noite para o dia, filtrada para remover asuspensão branca e o filtrado foi concentrado in vacuo.
O material bruto foi recristalizado a partir de etanol para dar o sal de HCl de Cap-2 como um só- lido branco brilhante em dois grupos (grupo 1: 4,16 g; grupo 2: 2,19 g). *H RMN (DMSO-ds, ô=2,5 ppm, 400 MHz): 10,44 (1,00, s amplo, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,51 (m, 3H), 5,30 (s, 1H), 3,15 (m amplo, 2H), 2,98 (m amplo, 2H), 1,20 (s amplo ap, 6H). Grupo-1: [a]º* -102,21º (c=0,357, HO); grupo-2: [a] - 99,7º (c=0,357, HO). LC (Condição 1): Tr=0,43 min; LC/MS: Anál.
Cal. para IM+H]* Ci2Hi8NO>: 208,13; encontrado 208,26. Cap-3 o —N . Acetaideído (5,0 mL, 89,1 mmol) e uma suspensão de Pd/C 10% (720mg)em metanol/H2O (4 mL/1 mL) foram sequencialmente adicionados
: 41/563 ] a uma mistura fria (-15ºC) de (R)-2-fenilglicina (3,096 g, 20,48 mmol), HC! 1N (30 mL) e metanol (40 mL). O banho de esfriamento foi removido e a mis- tura de reação foi agitada sob um balão de H> por 17 horas. Mais acetaldeí- do (10 mL, 178,2 mL) foi adicionado e agitação continuou sob atmosfera de —H> por 24 horas [Nota: o fornecimento de H, foi reabastecido conforme ne- cessário durante a reação]. A mistura de reação foi filtrada em terra diato- mácea (CELITE?) e o filtrado foi concentrado in vacuo. O material bruto re- sultante foi recristalizado a partir de isopropanol para prover o sal de HCI de ácido (R)-2-(etilamino)-2-fenilacético como um sólido branco brilhante (2,846 190 g)'HRMN (DMSO-ds, 5=2,5 ppm, 400 MHz): 5 14,15 (s amplo, 1H), 9,55 (s - amplo, 2H), 7,55-7,48 (m, 5H), 2,88 (m amplo, 1H), 2,73 (m amplo, 1H), 1,20 (t ap, J/=7,2, 3H). LC (Condição 1): Tr=0,39 min; >95 % índice de homogenei- | dade; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* CioHaNO>: 180,10; encontrado 180,18. Uma suspensão de Pd/C 10% (536 mg) em metano!/HzO (3 mL/ * 15 1mL)foiadicionadaa uma mistura de ácido (R)-2-(etilamino)-2-fenilacético/ ' HCI (1,492 g, 6,918 mmol), formaldeído (20 mL de 37% em peso em água), HCI 1N (20 mL) e metanol (23 mL). A mistura de reação foi agitada sob um balão de H> por —-72 horas, em que o fornecimento de H2O foi reabastecido conforme necessário. A mistura de reação foi filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e o filtrado foi concentrado in vacuo. O materia! bruto resultante foi recristalizado a partir de isopropanol (50 mL) para prover o sal de HCl de Cap-3 como um sólido branco (985 mg). *H RMN (DMSO-ds, 3=2,5 ppm, 400 MHz): 5 10,48 (s amplo, 1H), 7,59-7,51 (m, SH), 5,26 (s, 1H), 3,08 (s amplo ap, 2H), 2,65 (s amplo, 3H), 1,24 (m amplo, 3H). LC (Condição 1): Tr=0,39 min; >95% índice de homogeneidade; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* C11HeNO>2: 194,12; encontrado 194,18; HRMS: Anál. Cal. para [M+H]* Cu H;6NO>z: 194,1180; encontrado 194,1181.
Cap-4
O “oH Hi o
O Ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético
: 42/563 : CICOxMe (3,2 mL, 41,4 mmol) foi adicionado em gotas a um semissólido de THF frio (gelo/água) (410 mL) de (R)-ferc-butil 2-amino-2- fenilacetato/HCI (9,877 gq, 40,52 mmol) e di-isopropiletilamina (14,2 mL, 81,52 mmol) durante 6 minutos e agitado em temperatura similar por 5,5 ho- ras.
O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre água (100 mL) e acetato de etila (200 mL). À camada orgânica foi lavada com HCl 1N (25 mL) e solução de NaHCO; saturada (30 mL), seca (MgSO3;), filtrada e concentrada in vacuo.
O óleo incolor resultante foi triturado a partir de hexanos, filtrado e lavado com hexanos (100 mL) para prover (R)-ferc- —butil 2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetato como um sólido branco (7,7 9). - 1H RMN (DMSO-ds, 5=2,5 ppm, 400 MHz): 7,98 (d, J=8,0, 1H), 7,37-7,29 (m, SH), 5,09 (d, J=8, 1H), 3,56 (s, 3H), 1,33 (s, 9H). LC (Condição |): Tr=1,53 ' min; -90 % índice de homogeneidade; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+Naf" CiaHIoNNaO,: 288,12; encontrado 288,15. 2 15 TFA (16 mL) foi adicionado em gotas a uma solução de CHzCk . fria (gelofágua) (180 mL) do produto acima durante 7 minutos e o banho de esfriamento foi removido e a mistura de reação foi agitada por 20 horas.
Uma vez que a desproteção não estava ainda completa, mais TFA (1,0 mL) foi adicionado e a agitação continuada por mais 2 horas.
O componente vo- látilfoi removido in vacuo, e o resíduo oleoso resultante foi tratado com dieti! éter (15 mL) e hexanos (12 mL) para prover um precipitado.
O precipitado foi filtrado e lavado com dietil éter/hexanos (razão de -1:3; 30 mL) é seco in vacuo para prover Cap-4 como um solido branco fofo (5,57 g). Rotação ópti- ca: -176,9º [0c=3,7 mg/ml. em H2O; A=589 nm]. *H RMN (DMSO-ds, 5=2,5 ppm, 400 MHz): 5 12,84 (s amplo, 1H), 7,96 (d, J=8,3, 1H), 7,41-7,29 (m, 5H), 5,14 (d, J=8,3, 1H), 3,55 (s, 3H). LC (Condição |): Tr=1,01 min; >95 % Índice de homogeneidade; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]* CioHi2NO, 210,08; encontrado 210,17; HRMS: Anál.
Cal. para [M+H]* CioH2NO, 210,07686; en- contrado 210,0756. Cap-5
. 43/563
AU Y oH
O Uma mistura de (R)-2-fenilglicina (1,0 g, 6,682 mmol), 1,4-dibro- mobutano (1,57 9, 7,72 mmol) e Na;CO; (2,10 g, 19,8 mmol) em etanoi (40 mL) foi aquecida a 100ºC por 21 horas. A mistura de reação foi esfriada em temperatura ambiente e filtrada e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resi- S duofoidissolvido em etanol e acidificado com HCI 1N para pH 3-4 e o com- ponente volátil foi removido in vacuo. O material bruto resultante foi purífica- . do através de HPLC de fase reversa (água/metanol/TFA) para prover o sal de TFA de Cap-5 como uma espuma branca semiviscosa (1,0 g). 'H RMN ' (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 5 10,68 (s amplo, 1H), 7,51 (m, 5H), 5,23 (s, 1H), 3,34 (s amplo ap, 2H), 3,05 (s amplo ap, 2H), 1,95 (s amplo ap, 4H); : Tr=0,30 minutos (Condição 1); >98% índice de homogeneidade; LC/MS: A- nál. Cal. para [M+H]" Ci2H,6NO>: 206,12; encontrado 206,25. Cap-6 ã
CC O sal de TFA de Cap-6 foi sintetizado a partir de (R)-2-fenilgli- cina e 1-bromo-2-(2-bromoetóxi)detano usando o método de preparação de Cap-5. 17H RMN (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 3 12,20 (s amplo, 1H), 7,50 (m, 5H), 4,92 (s, 1H), 3,78 (s amplo ap, 4H), 3,08 (s amplo ap, 2H), 2,81 (s am- plo ap, 2H); Tr=0,32 minutos (Condição |); >98%; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* Ci2H;sNOs: 222,11; encontrado 222,20; HRMS: Anál. Cal. para [M+H]" CioHsNO;: 222,1130; encontrado 222,1121. Cap-7
À oH Õ C2B:6: Enanciênera 2 '
: 44/563 ' Uma solução de CH2Cl> (200 mL) de cloreto de p-toluenossuifo- nila (8,65 q, 45,4 mmol) foi adicionada em gotas a uma solução de CH2Cl, (200 mL) fria (-5ºC) de (S)-benzil 2-hidróxi-2-fenilacetato (10,0 9, 41,3 mmol), trietilamina (5,75 mL, 41,3 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (0,504 g, 4,13 mmol), enquanto mantendo a temperatura entre -5ºC e 0ºC . A reação foi agitada a 0ºC por 9 horas e então armazenada em um congelador (-25ºC) por 14 horas.
Ela foi deixada descongelar para temperatura ambiente e la- vada com água (200 mL), HCI 1N (100 mL) e salmoura (100 mL), seca (Mg- SO), filtrada e concentrada in vacuo para dar benzil 2-fenil-2-(tosilóxi) aceta- to como um óleo viscoso que solidificou enquanto descansando (16,5 g). À - integridade quiral do produto não foi checada e o produto foi usado para a etapa seguinte sem purificação adicional. 'H RMN (DMSO-ds, d=2,5, 500 i MHz) 5 7,78 (d, J= 8,6, 2H), 7,43-7,29 (m, 10H), 7,20 (m, 2H), 6,12 (s, 1H), 5,16 (d, J=12,5, 1H), 5,10 (d, /=12,5, 1H), 2,39 (s, 3H). Tr=3,00 (Condição * 15 Il); índice de homogeneidade >90%; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]* ' CooHaoNaOsS: 419,09; encontrado 419,04. Uma solução de THF (75 mL) de benzil 2-fenil-2-(tosilóxi)acetato (6,0 g, 15,1 mmol), 1-metiipiperazina (3,36 mL, 30,3 mmol) e N,N-di-isopro- piletilamina (13,2 mL, 75,8 mmol) foi aquecida a 65ºC por 7 horas.
A reação foideixada esfriar para temperatura ambiente e o componente volátil foi re- movido in vacuo.
O resíduo foi dividido entre acetato de etila e água e a ca- mada orgânica foi lavada com água e salmoura, seca (MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo.
O material bruto resultante foi purificado através de cromatografia rápida (silica-gel, acetato de etila) para prover benzil 2-(4- metilpiperazin-1-1I)-2-fenilacetato como um óleo viscoso marrom alaranjado (4,56 9). Análise de HPLC quiral (CHIRALCEL? OD-H) indicou que a amos- tra é uma mistura de estereoisômeros em uma razão 38,2 para 58,7. A sepa- ração dos estereoisômeros foi realizada como segue: o produto foi dissolvido em 120 ml de etanoi/heptano (1:1) e injetado (5 mL/injeção) em coluna de HPLC quiral (Chiralcel OJ, DI 5 cm x 50 em C, 20 um) eluindo com 85:15 de Heptano/etanol a 75 mL/min e monitorada a 220 nm.
O estereoisômero-1 (1474 9) e o estereoisômero-2 (2,2149 g) foram recuperados como óleo vis-
coso. *H RMN (CDCl3, 5=7,26, 500 MHz) 7,44-7,40 (m, 2H), 7,33-7,24 (m, 6H), 7,21-7,16 (m, 2H), 5,13 (d, J=12,5, 1H), 5,08 (d, J=12,5, 1H), 4,02 (s, 1H), 2,65-2,38 (s amplo ap, 8H), 2,25 (s, 3H). Tr=2,10 (Condição ll); índice de homogeneidade >98%; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]' CooHasN>2O>: 325,19; encontrado 325,20.
Uma solução de metanol (10 mL) de qualquer estereoisômero de benzil 2-(4-metilpiperazin-1-11)-2-fenilacetato (1,0 g, 3,1 mmol) foi adicionada a uma suspensão de Pd/C 10% (120 mg) em metanol (5,0 mL). A mistura de reação foi exposta a um balão de hidrogênio, sob um monitoramento cuida- doso,por< 50 minutos. Imediatamente após o término da reação, o catali- - sador foi filtrado em terra diatomácea (CELITE) e o filtrado foi concentrado in vacuo para prover Cap-7, contaminada com ácido fenilacético como uma espuma castanha (876,6 mg; a massa está acima do rendimento teórico). O produto foi usado para a etapa seguinte sem purificação adicional. 'H RMN "7 15 (DMSO-d; õ=2,5, 500 MHz) 5 7,44-7,37 (m, 2H), 7,37-7,24 (m, 3H), 3,92 (s, : 1H), 2,63-2,48 (s amplo ap, 2H), 2,48-2,32 (m, 6H), 2,19 (s, 3H); Tr=0,31 (Condição 11); índice de homogeneidade >90%; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" CiaHioN2O2: 235,14; encontrado 235,15; HRMS: Anál. Cal. para [M+H]"* CiaH19N2O2: 235,1447; encontrado 235,1440. A síntese de Cap-8 e Cap-9 foi conduzida de acordo com a sín- tese de Cap-7 usando aminas apropriadas para a etapa de deslocamento de SN, (isto é, 4-hidroxipiperidina para Cap-8 e (S)-3-fluorpirrolidina para Cap- 9) e condições modificadas para a separação dos respectivos intermediários estereoisoméricos, conforme descrito abaixo. Cap-8 o A, * E qo) oH A separação estereoisomérica do intermediário benzil 2-(4-hidro- xipiperidin-1-i1)-2-fenil acetato foi realizada empregando as condições que seguem: o composto (500 mg) foi dissolvido em etanol/heptano (5 mU/45
. 46/563 S mL). A solução resultante foi injetada (5 mL/injeção) em uma coluna de H- PLC quiral (Chiralcel OJ, DI 2 cm x 25 em C, 10 um) eluindo com 80:20 de heptano/etanol a 10 mL/min, monitorada a 220 nm, para prover 186,3 mg de estereoisômero-1 e 209,1 mg de estereoisômero-2 como óleos viscosos a- marelo-claro. Esse éster de benzila sofreu hidrogenólise de acordo com à preparação de Cap-7 para prover Cap-8: *H RMN (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 7,40 (d, J=7, 2H), 7,28-7,20 (m, 3H), 3,78 (s 1H), 3,46 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,20 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 1,42 (m, 2H). Tr=0,28 (Condição 11); índice de homogeneidade >98%; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" CiasHsNOz3: 236,13; encontrado 236,07; HRMS: Calc. para [M+H]"* - C13H,aNO;z: 236,1287; encontrado 236,1283. . Cap-9 o : lo E qecanees .
A separação diastereomérica do intermediário benzil 2-((S8)-3- fluorpirrolidin-1-i1)-2-fenilacetato foi realizada empregando as condições que seguem: o éster (220 mg) foi separado em uma coluna de HPLC quiral (Chi- —ralcel OJ-H, 0,48 cm DI x 25 cm C, 5 um) eluindo com CO, 95%/metanol 5% com TFA 0,1%, em pressão de 10 bar, taxa de fluxo de 70 mL/min e uma temperatura de 35ºC. O eluato de HPLC para os respectivos estereoisôme- ros foi concentrado e o resíduo foi dissolvido em CH3Ch (20 mL) e lavado com um meio aquoso (10 mL de água + 1 mL de solução de NaHCO; satu- rada). A fase orgânica foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada /n vacuo para prover 92,5 mg de fração-1 e 59,6 mg de fração-2. Esses ésteres de benzila sofreram hidrogenólise de acordo com a preparação de Cap-7 para preparar Cap-ga e Cap-9b. Cap-9a (diastereômero-1; a amostra é um sal de TFA co- mo um resultado de purificação em uma HPLC de fase reversa usando H;O/metanol/solvente de TFA): 1H RMN (DMSO-ds, d=2,5, 400 MHz) 7,55- 7,48 (m, 5H), 5,38 (d de m, J=53,7, 1H), 5,09 (s amplo, 1H), 3,84-2,82 (m amplo, 4H), 2,31-2,09 (m, 2H). Tr=0,42 (Condição 1); índice de homogenei-
. 47/563 dade >95%; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" CioHisFNO>: 224,11; encontrado 224,14; Cap-9b (diastereômero-2): *H RMN (DMSO-ds, d=2,5, 400 MHz) 7,43-7,21 (m, SH), 5,19 (d de m, J=55,9, 1H), 3,97 (s, 1H), 2,95-2,43 (m, 4H), 2,19-1,78 (m, 2H). Tr=0,44 (Condição 1); LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* CioHisFNO>: 224,11; encontrado 224,14. Cap-10 todo ú 7 A uma solução de D-prolina (2,0 g, 17 mmol) e formaldeído (2,0 - mL de 37% em peso em H,;O) em metanol (15 mL) foi adicionada uma sus- pensão de Pd/C 10% (500 mg) em metanol (5 mL). A mistura foi agitada sob “10 um balãode hidrogênio por 23 horas. A mistura de reação foi filtrada através de terra diatomácea (CELITES) e concentrada in vacuo para prover Cap-10 . como um sólido esbranquiçado (2,15 g). 'H RMN (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 3,42 (m, 1H), 3,37 (dd, J=9,4, 6,1, 1H), 2,85-2,78 (m, 1H), 2,66 (s, 3H), 2,21-2,13 (m, 1H), 1,93-1,84 (m, 2H), 1,75-1,66 (m, 1H). Tr=0,28 (Condição 11); Índice de homogeneidade >98%; LC/MS: Anál. Cal. para [MHH]'* CsHi2NO,: 130,09; encontrado 129,96. Cap-11 re o
E Uma mistura de ácido (28,4R)-4-fluorpirrolidino-2-carboxílico (0,50 g, 3,8 mmol), formaldeído (0,5 mL de3 37% em peso em H2O), HCl 12 N(025mL) e Pd/C10% (50 mg) em metanol (20 mL) foi agitada sob um balão de hidrogênio por 19 horas. A mistura de reação foi filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi cristalizado a partir de isopropanol para prover o sal de HCI de Cap-11 como um sólido branco (337,7 mg). 1H RMN (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 5,39 (d m, J=53,7, 1H), 4,30 (m, 1H), 3,90 (ddd, J=31,5, 13,5, 4,5, 1H), 3,33 (da, J=25,6, 13,4, 1H), 2,85 (s, 3H), 2,60-2,51 (m, 1H), 2,39-2,26 (m, 1H).
' Tr=0,28 (Condição 11); índice de homogeneidade >98%;: LC/MS: Anál.
Cal. para [IM+H]" CsHFNO>: 148,08; encontrado 148,06. Cap-12 (igual a Cap-52) o) sou o : Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)propanoico L-Alanina (2,0 g, 22,5 mmol) foi dissolvida em solução de carbo- nato de sódio aquosa 10% (50 mL) e uma solução de THF (50 mL) de cioro- formiato de metila (4,0 mL) foi adicionada a ela.
A mistura de reação foi agi- tada sob condições ambientes por 4,5 horas e concentrada in vacuo.
O sóli- do branco resultante foi dissolvido em água e acidificado com HCI 1N para - 10 umpH-2-3,As soluções resultantes foram extraídas com acetato de etila (3 x 100 mL) e a fase orgânica combinada foi seca (Na-SO;,), filtrada e concen- ' trada in vacuo para prover um óleo incolor (2,58 g). 500 mg deste material foram purificados através de HPLC de fase reversa (H>O/metanol/TFA) para ' prover 150 mg de Cap-12 como um óleo incolor. *H RMN (DMSO-de, 5=2,5, 500 MHz) 7,44 (d, J=7,3, 0,8H), 7,10 (s amplo, 0,2H), 3,97 (m, 1H), 3,53 (s, 3H), 1,25 (d, J=7,3, 3H). Cap-13 | o É Nou Uma mistura de L-alanina (2,5 9, 28 mmol), formaldeído (8,4 9, 37% em peso), HCl 1N (30 mL) e Pd/C 10% (500 mg) em metano! (30 mL) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio 344,74 kPa (50 psi) por 5 ho- ras.
À mistura de reação foi filtrada em terra diatomácea (CELITEY) e o fil- trado foi concentrado in vacuo para prover o sal de HCl de Cap-13 como um óleo que solidificou quando ficou sob vácuo (4,4 g; a massa está acima do rendimento teórico). O produto foi usado sem purificação adicional. 1H RMN (DMSO-ds, 5=2,5, 500 MHz) 3 12,1 (s amplo, 1H), 4,06 (q, J=7,4, 1H), 2,76 (s, 8H), 1,46 (d, J=7,3, 3H).
. 49/563 Cap-14 NH? Q Q (fes o COt-Bu — (fes Cap-14 Ácido (R)-2-fenil-2-(piperidin-1-il)acético
Etapa 1: Uma mistura de terc-butil éster de (R)-(-)-D-fenilglicina (3,00 g, 12,3 mmol), NaBH;CN (0,773 g, 12,3 mmol), KOH (0,690 g, 12,3 mmol) e ácido acético (0,352 mL, 6,15 mmol) foi agitada em metanol a 0º C.
A esta mistura foi adicionado dialdeído glutárico (2,23 mL, 12,3 mmol) em : gotas durante 5 minutos.
A mistura de reação foi agitada enquanto ela era . deixada aquecer para temperatura ambiente e a agitação foi continuada na mesma temperatura por 16 horas.
O solvente foi subsequentemente removi- — 10 doeoresíduofoidividido com NaOH aquoso 10% e acetato de etila.
A fase orgânica foi separada, seca (MgSO;,y), filtrada e concentrada até secar para - prover um óleo transparente.
Este material foi purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH;CN-H;O- TFAO,1%) para dar o éster intermediário (2,70 g, 56%) como um óleo trans- parente. *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,53-7,44 (m, 3H), 7,40-7,37 (m, 2H), 3,87 (d, J=10,9 Hz, 1H), 3,59 (d, J=10,9 Hz, 1H), 2,99 (t, J=11,2 Hz, 1H), 2,59 (t, J=11,4 Hz, 1H), 2,07-2,02 (m, 2H), 1,82 (d, J=1,82 Hz, 3H), 1,40 (s,
9H). LC/MS: Anál.
Cal. para C17H2sNO>: 275; encontrado: 276 (M+H)*. Etapa 2: A uma solução agitada de éster intermediário (1,12 g, 2,88mmol) em diclorometano (10 mL) foi adicionado TFA (3 mL). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas e então foi con- centrada até secar para dar um óleo amarelo-claro.
O óleo foi purificado u- sando HPLC preparativa de fase reversa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH3;CN-H2O-TFA 0,1%). As frações apropriadas foram combinadas e con- centradas até secar in vacuo.
O resíduo foi então dissolvido em uma quanti- dade mínima de metano! e aplicado a cartuchos de extração de LP MCX (2 x 6 g). Os cartuchos foram enxaguados com metanol (40 mL) e então o com- posto desejado foi eluído usando amônia 2 M em metanol (50 mL). As fra-
. 50/563 S ções contendo produto foram combinadas e concentradas e o resíduo foi absorvido em água.
Liofilização desta solução proveu o composto do título (0,492 g, 78%) como um sólido amarelo-claro. 'H RMN (DMSO-ds) 5 7,50 (s, 5H), 5,13 (s, 1H), 3,09 (s amplo, 2H), 2,92-2,89 (m, 2H), 1,74 (m, 4H), 1,48 (s amplo, 2H). LC/MS: Anál.
Cal. para Ci3H7NO>: 219; encontrado: 220 (M+H)*. Cap-15 Ao — Ah == Ai 2 .s.
Br Br N O A B S Ss HOT Me 7 (R-Cap-15
. Etapa 1: (S)-1-Feniletil 2-bromo-2-fenilacetato.
A uma mistura de ácido a-bromofenilacético (10,75 g, 0,050 mol), (S)-(-)-1-feniletanol (7,94 9, 2— 10 0,065 mol) e DMAP (0,61 g, 5,0 mmol) em diclorometano seco (100 mL) foi adicionado EDCI sólido (12,46 g, 0,065 mol) todo de uma vez.
A solução - resultante foi agitada em temperatura ambiente sob Ar por 18 horas e então foi diluída com acetato de etila, lavada (H2O x salmoura), seca (NasSO;), filtrada e concentrada para dar um óleo amarelo pálido.
Cromatografia rápida (SiO)/hexano-acetato de etila, 4:1) deste óleo proveu o composto do título (11,64 g, 73%) como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,53- 7,17 (m, 10H), 5,95 (q, J=6,6 Hz, 0,5H), 5,94 (q, J=6,6 Hz, 0,5H), 5,41 (s,
0,5H), 5,39 (s, 0,5H), 1,58 (d, J=6,6 Hz, 1,5H), 1,51 (d, J=6,6 Hz, 1,5H). Etapa 2: (S)-1-Feniletil (R)-2-(A-hidróxi-4-metilpiperidin-1-11)-2- fenilacetato.
A uma solução de (S)-1-feniletil 2-bromo-2-fenilacetato (0,464 9, 1,45 mmol) em THF (8 mL) foi adicionada trietilamina (0,61 mL, 4,35 mmol), seguido por iodeto de tetrabutilamônio (0,215 g, 0,58 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 5 minutos e então uma so- lução de 4-metil-4-hidroxipiperidina (0,251 g, 2,18 mmol) em THF (2 mL) foi — adicionada.
A mistura foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente e en- tão ela foi aquecida a 55-60ºC (temperatura de banho de óleo) por 4 horas.
A mistura de reação esfriada foi então diluída com acetato de etila (30 mL), lavada (H;O x 2, salmoura), seca (MgSO;,), filtrada e concentrada.
O resíduo
. 51/563 S foi purificado através de cromatografia de sílica-gel (acetato de etila 0-60%- hexano) para prover primeiro o isômero (S,R) do composto do título (0,306 9, 60%) como um sólido branco e então o isômero (S,S) correspondente (0,120 g, 23%), também como um sólido branco.
Isômero (S,R): *H RMN (CDs.OD) d7,51-7,45 (m, 2H), 7,41-7,25 (m, 8H), 5,85 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,05 (s, 1H), 2,56-2,45 (m, 2H), 2,41-2,29 (m, 2H), 1,71-1,49 (m, 4H), 1,38 (d, J=6,6 Hz, 3H), 1,18 (s, SH). LCMS: Anál.
Cal. para Ca2H27NOs: 353; encontrado: 354 (M+H)*. Isômero (S,S): 1H RMN (CD3OD) 5 7,41-7,30 (m, 5H), 7,20-7,14 (m, 3H), 7,06-7,00 (m, 2H), 5,85 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,06 (s, 1H), 2,70-2,60 (m, 1H) 2,51 (dt, J=6,6, 3,3 Hz, 1H), 2,44-2,31 (m, 2H), 1,75-1,65 (m, 1H), 1,65- . 1,54 (m, 3H), 1,50 (d, J=6,8 Hz, 3H), 1,20 (s, 3H). LCMS: Anál.
Cal. para Cr2H27NO;3: 353; encontrado: 354 (M+H)*. Etapa 3: Ácido (R)-2-(4-hidróxi-4-metilpiperidin-1-il)-2-fenilacéti- co.
A uma solução de (S)-1-feniletil (R)-2-(4-hidróxi-4-metilpiperidin-1-11)-2- “ 15 fenilacetato (0,185 g, 0,52 mmol) em diclorometano (3 mL) foi adicionado : ácido trifluoracético (1 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
Os voláteis foram subsequentemente removidos in vacuo e O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (Primes- phere C-18, 20 x 100mm; CH;CN-H2O0-TFA 0,1%) para dar o composto do título (como sal de TFA) como um sólido azulado pálido (0,128 g, 98%). LCMS: Anál.
Cal. para Ci4HoNO;: 249; encontrado: 250 (M+H)*. Cap-16 o 1 Po: Me CA PA 2 RAE O ' O O (R)-Cap-16 Etapa 1: (S)-1-Feniletil 2-(2-fluorfenil)acetato.
Uma mistura de ácido 2-fluorfenilacético (5,45 g, 35,4 mmol), (S)-1-feniletanol (5,62 9, 46,0 mmol), EDCI (8,82 g, 46,0 mmol) e DMAP (0,561 g, 4,60 mmol) em CHzCl; (100 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas.
O solvente foi então concentrado e o resíduo dividido com H2O-acetato de etila.
As fases foram separadas e a camada aquosa retroextraída com acetato de etila (2x). As fases orgânicas combinadas foram lavadas (H;O, salmoura), secas (Na2SO;), filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de silica-gel (BIOTAGE/acetato de etila 0-20%-hexano) para prover o composto do título como um óleo incolor (8,38 g, 92%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) à 7,32-7,23 (m, 7H), 7,10-7,04 (m, 2), 5,85 (a, J=6,5 Hz, 1H), 3,71 (s, 2H), 1,48 (d, J=6,5 Hz, 3H). Etapa 2: (R)((S)-1-Feniletil) 2-(2-fluorfenil)-2-(piperidin-1-il) acetato. A uma solução de (S)-1-feniletil 2-(2-fluorfenil)acetato (5,00 g, 19,4 mmol) em THF (1200 mL) a 0ºC foi adicionado DBU (6,19 g, 40,7 mmol) e a solu- - ção foi deixada aquecer para temperatura ambiente enquanto agitando por 30 minutos. A solução foi então esfriada para -78ºC e uma solução de CBr, (13,5 g, 40,7 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada e a mistura foi deixada aquecer para -10ºC e agitada nesta temperatura por 2 horas. A mistura de rea- * 15 çãofoiextintacom NH,CI aquoso saturado e as camadas foram separadas. À : camada aquosa foi retroextraída com acetato de etila (2x) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas (H;O, salmoura), secas (Na7SO;,), filtradas e concentradas in vacuo. Ao resíduo foi adicionada piperidina (5,73 mL, 58,1 mmol) e a solução foi agitada em temperatura ambiente por 24 horas. Os voláteis foram então concentrados in vacuo e o resíduo foi purificado através de cromatografia de sílica-gel (BIOTAGE”/ éter de dietila 0-30%-hexano) para prover uma mistura pura de diastereômeros (razão 2:1 por *H RMN) como um óleo amarelo (2,07 g, 31%), junto com material de partida não rea- gido (2,53 g, 51%). Cromatografia adicional da mistura diastereomérica (Bl- OTAGE*/éter de dietila 0-10%-tolueno) proveu o composto do título como um óleo incolor (0,737 g, 11%). '*H RMN (400 MHz, CD3;OD) 5 7,52 (ddd, J=9,4, 7,6, 1,8 Hz, 1H), 7,33 - 7,40 (m, 1), 7,23 - 7,23 (m, 4H), 7,02 - 7,23 (m, 4H), 5,86 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,45 (s, 1H), 2,39 - 2,45 (m, 4H), 1,52 - 1,58 (m, 4H), 1,40 - 1,42 (m, 1H), 1,38 (d, J=6,6 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para —CxH2aFNO>z: 341; encontrado: 342 (M+H)*.
Etapa 3: Ácido (R)-2-(2-fluorfenil)-2-(piperidin-1-iacético. Uma mistura de (R)-((S)-1-feniletil) 2-(2-fluorfenil)-2-(piperidin-1-il)acetato (0,737 g, 2,16 mmol) e Pd(OH)>; 20%/C (0,070 g) em etanol (30 mL) foi hidrogenada em temperatura ambiente e pressão atmosférica (balão de H>) por 2 horas.
A solução foi então purgada com Ar, filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e concentrada in vacuo.
Isto proveu o composto do título como um sólido incolor (0,503 g, 98%). 'H RMN (400 MHz, CDsOD) 5 7,65 (ddd, J=9,1, 7,6, 1,5 Hz, 1H), 7,47-7,53 (m, 1H), 7,21-7,30 (m, 2H), 3,07-3,13 (m, 4H), 1,84 (s amplo, 4H), 1,62 (s amplo, 2H). LCMS: Anál.
Cal. para CaisHisFNO>: 237; encontrado: 238 (M+H)*. Cap-17 : o RR : “O — = o Br “O N O ' A E B HO “Ph
(R)-Cap-17 . Etapa 1: (S)1-Feniletil (R)-2-(4-hidróxi-4-fenilpiperidin-1-11)-2- fenilacetato.
A uma solução de (S)-1-feniletil 2-bromo-2-fenilacetato (1,50 9, ' 4,70 mmol) em THF (25 mL) foi adicionada trietilamina (1,31 mL, 9,42 mmol), seguido por iodeto de tetrabutilamônio (0,347 9, 0,94 mmol). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 5 minutos e então uma solução de 4- fenil-4-hidroxipiperidina (1,00 g, 5,64 mmol) em THF (5 mL) foi adicionada.
À mistura foi agitada por 16 horas e então ela foi diluída com acetato de etila (100 mL), lavada (HO x2, salmoura), seca (MgSO;y), filtrada e concentrada.
O resíduo foi purificado em uma coluna de sílica-gel (acetato de etila 0-60%- hexano) para prover uma mistura de aproximadamente 2:1 de diastereôme- ros, conforme julgado por *H RMN.
Separação desses isômeros foi realizada usando cromatografia de fluido supercrítico (CHIRALCEL? OJ-H, 30 x 250 mm; etanol 20% em CO, a 35ºC), para dar primeiro o isômero (R) do com- posto do título (0,534 g, 27%) como um óleo amarelo e então o isômero (S) correspondente (0,271 g, 14%), também como um óleo amarelo.
Isômero (SR): 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 7,55-7,47 (m, 4H), 7,44-7,25 (m, 10H), 7,25-7,17 (m, 1H), 5,88 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,12 (s, 1H), 2,82-2,72 (m, 1H), 2,64 (dt, J/=11,1, 2,5 Hz, 1H), 2,58-2,52 (m, 1H), 2,40 (dt, J=11,1, 2,5 Hz, 1H), 2,20 (dt, J=12,1, 4,6 Hz, 1H), 2,10 (dt, J=12,1, 4,6 Hz, 1H), 1,72-1,57
(m, 2H), 1,53 (d, J=6,5 Hz, 3H). LCMS: Anál.
Cal. para Ca7;H29NO;3: 415; en- contrado: 416 (M+H)*; Isômero (S,S): H'RMN (400 MHz, CD3;OD) 5 7,55- 7,48 (m, 2H), 7,45-7,39 (m, 2H), 7,38-7,30 (m, 5H), 7,25-7,13 (m, 4H), 7,08- 7,00 (m, 2H), 5,88 (q, J=6,6 Hz, 1H), 4,12 (s, 1H), 2,95-2,85 (m, 1H), 2,68 (dt J=11,1,2,5 Hz, 1H), 2,57-2,52 (m, 1H), 2,42 (dt, J=11,1, 2,5 Hz, 1H), 2,25 (dt, J=12,1, 4,6 Hz, 1H), 2,12 (dt, J=12,1, 4,6 Hz, 1H), 1,73 (dd, J=13,6, 3,0 Hz, 1H), 1,64 (dd, J=13,6, 3,0 Hz, 1H), 1,40 (d, J=6,6 Hz, 3H). LCMS: Anál.
Cal. para Co7H26NO3: 415; encontrado: 416 (M+H)*. Os ésteres que seguem foram preparados de uma maneira simi- lar ' Intermediário-17a oo) Diastereômero 1: *H RMN (500 MHz, DM- - N SO-ds) 5 ppm 1,36 (d, J=6,41 Hz, 3H) 2,23- Co 2,51 (m, 4H) 3,35 (s, 4H) 4,25 (s, 1H) 5,05 : SF (s, 2H) 5,82 (d, J=6,71 Hz, 1H) 7,15-7,52 9 Õ (m, 15H). LCMS: Anál.
Calc. para: CosHao - N20, 458,22; Encontrado: 459,44 (M+H)”. Diastereômero 2: 'H RMN (500 MHz, DM- SO-ds) ô pom 1,45 (d, J=6,71 Hz, 3H) 2,27- 2,44 (m, 4H) 3,39 (s, 4H) 4,23 (s, 1H) 5,06 (s, 2H) 5,83 (d, J=6,71 Hz, 1H) 7,12 (dd, J=6,41, 3,05 Hz, 2H) 7,19-7,27 (m, 3H) 7,27-7,44 (m, 10H). LCMS: Anál.
Cal. para: CasHaoN2O, 458,22; Encontrado: 459,44 M+H)", Intermediário -17b N O Diastereômero 1: Tr=11,76 minutos (Condi- CS ção 11); LOMS: Anál.
Cal. para: CooH2oN2O; ST 338,16; Encontrado: 339,39 (M+H)*. 9 &Õ Diastereômero 2: Tr=10,05 minutos (Condi- ção |). LCMS: Anál.
Cal. para: CooHa2N2O; 338,16; Encontrado: 339,39 (M+H)*.
Intermediário -17c dh Diastereômero 1: Tr-4,55 minutos (Condi- Co ção 1); LCMS: Anál.
Cal. para: Ca Ho6N2O> cr 338,20, Encontrado: 339,45 (M+H)”. 9 S Diastereômero 2: Tr-6,00 minutos (Condi- ção 1). LOCMS: Anál.
Cal. para: Ca H>6N2O, 338,20. Encontrado: 339,45 (M+H)*. Intermediário -17d Diastereômero 1: Tr=7,19 minutos (Condi-| ção 1); LCMS: Anál.
Cal. para: CarH2oNO;,| n 399,22. Encontrado: 400,48 (M+H)'. DO Diastereômero 2: Tr=9,76 minutos (Condi- 7 9 Õ ção 1); LCMS: Anál.
Cal. para: C>;HzeNO, ' 399,22. Encontrado: 400,48 (M+H)”. Condições de SFC quiral para determinação do tempo de reten- ção: i Condição | BR Coluna: Coluna CHIRALPAK? AD-H, 4,62x50 mm, Sum Solventes: CO> 90% -metanol 10% com DEA 0,1% Temp.: 35 ºC Pressão: (150 bar) Taxa de fluxo: 2,0 mLimin.
UV monitorada a 220 nm Injeção: 1,0 mg/3 mL de metano! Condição |! Coluna: Coluna CHIRALCELº OD-H, 4,62x50 mm, 5um Solventes: CO, 90%-metanol 10% com DEA 0,1% Temp.: 35 ºC Pressão: (150 bar) Taxa de fluxo: 2,0 mL/min.
UV monitorada a 220 nm Injeção: 1,0 mg/mL metano! Cap-17. Etapa 2: Ácido (R)-2-(4-hidróxi-4-fenilpiperidin-1-11)-2- fenilacético.
A uma solução de (S)-1-feniletil (R)-2-(4-hidróxi-4-fenilpiperidin-
1-i)-2-fenilacetato (0,350 g, 0,84 mmol) em diclorometano (5 mL) foi adiício- nado ácido trifluoracético (1 mL) e a mistura foi agitada em temperatura am- biente por 2 horas. Os voláteis foram subsequentemente removidos in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (Pri- mesphere C-18, 20 x 100mMm; CH;CN-H2O-TFA 0,1%) para dar o composto do título (como sal de TFA) como um sólido branco (0,230 g, 88%). LCMS: Anál. Cal. para Ci9H2NO;z: 311,15; encontrado: 312 (M+HY*. Os ácidos carboxílicos que seguem foram preparados em forma opticamente pura de uma maneira similar: Cap-17a o LO Tr=2,21 (Condição 11); *H RMN (500 MHz, DMSO- Ú XT ds) 5 ppm 2,20-2,35 (m, 2H) 2,34-2,47 (m, 2H) - C J 3,37 (s, 4H) 3,71 (s, 1H) 5,06 (s, 2H) 7,06-7,53 (m, N 10H). LOCMS: Anál. Cal. para: CaoH22N2O, 354,16; i Cr ot Encontrado: 355,38 (M+H)*. ' Cap-17b Ú o Tr=0,27 (Condição III); LCMS: Anál. Cal. para: O Ci2H,N20;3 234,10; Encontrado: 235,22 (M+H)*. DN 2 OH Ss Cap-17c ú Tr=0,48 (Condição 11); LCMS: Anál. Cal. para: Co CiaH1eN2O> 234,14; Encontrado: 235,31 (M+H)*.
DN OH Ss Cap-17d Tr=2,21 (Condição |); LCMS: Anál. Cal. para: CioHa;:NO, 295,16; Encontrado: 296,33 (M+H)'.
N OH
SS Condições de LCMS para determinação do tempo de retenção: Condição | Coluna: PHENOMENEXº Luna 4,6 X 50 mm S10
% B Inicial = O % B Final = 100 Tempo de Gradiente =4 min Taxa de Fluxo = 4 mL/min Comprimento de onda = 220 Solvente A = metanol 10% - H2O 90% - TFA 0,1% Solvente B = metanol 90% - HO 10% - TFA 0,1% Condição |! Coluna: Waters-Sunfire 4,6 X 50 mm S5 % B Inicial = O ' % B Final = 100 Tempo de Gradiente = 2 min Taxa de Fluxo = 4 mL/min Comprimento de onda = 220 7 15 Solvente A= metano! 10% - H;yO 90% - TFA 0,1% Solvente B= metanol 90% - HO 10% - TFA 0,1% l Condição 1! Coluna: PHENOMENEXº 104 3,0 X 50 mm % B Inicial = O % B Final = 100 Tempo de Gradiente = 2 min Taxa de Fluxo = 4 mL/min Comprimento de onda = 220 Solvente A = metanol 10% - H2O 90% - TFA 0,1% Solvente B = metanol 90% - HO 10% - TFA 0,1% Cap-18 x NO >NO STS 2 DA 8 DA Nz O NA 6 NA o A X=EH c cap-t8 B: X=Br ' ? Etapa 1: (R,S)-Etil 2-(4-piridil)-2-bromoacetato.
A uma solução de etil 4-piridilacetato (1,00 g, 6,05 mmol) em THF seco (150 mL) a 0ºC sob argônio foi adicionado DBU (0,99 mL, 6,86 mmol). A mistura de reação foi deixada aquecer para temperatura ambiente durante 30 minutos e então foi esfriada para -78ºC. A esta mistura foi adicionado CBr, (2,21 g, 6,66 mmol) e agitação foi continuada a -78ºC por 2 horas. A mistura de reação foi extinta com NH,C! aquoso saturado e as fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada (salmoura), seca (NazSO;,), filtrada e concentrada in vacuo. O óleo amarelo resultante foi imediatamente purificado através de cromatografia rápida (SIOX/hexano-acetato de etila, 1:1) para prover o composto do título (1,40 g, 95%) como um óleo amarelo um pouco instável. *H RMN (400 MHz, : CDCIs) 5 8,62 (dd, J=4,6, 1,8 Hz, 2H), 7,45 (dd, J=4,6, 1,8 Hz, 2H), 5,24 (s, 1H), 4,21-4,29 (m, 2H), 1,28 (t, J=7,1 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para CaH1oBrNO;>: 242, 244; encontrado: 243, 245 (M+H)*.
Etapa 2: (R,S)-Etil 2-(4-piridil)-2-(N N-dimetilamino)acetato. A “15 uma solução de (R,S)-etil 2-(4-piridil)-2-bromoacetato (1,40 g, 8,48 mmol) ' em DMF (10 mL) em temperatura ambiente foi adicionada dimetilamina (2M em THF, 8,5 mL, 17,0 mmol). Após o término da reação (conforme julgado através de cromatografia de camada fina), os voláteis foram removidos in vacuo e o resíduo foi purificado através de cromatografia rápida (BIOTAGE?, coluna de SiIOz 40+M; acetato de etila-hexano 50%-100%) para prover o composto do título (0,539 g, 31%) como um óleo amarelo-claro. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 8,58 (d, J=6,0 Hz, 2H), 7,36 (d, J=6,0 Hz, 2H), 4,17 (m, 2H), 3,92 (s, 1H), 2,27 (s, 6H), 1,22 (t, Js7,0 Hz). LCMS: Anál. Cal. para C11H1eN2O>2: 208; encontrado: 209 (M+H)*. Etapa 3: Ácido (R,S)-2-(4-piridil)-2-(N, N-dimetilamino)acético. À uma solução de (R,S)-etil 2-(4-piridil)-2-(N N-dimetilamino)acetato (0,200 g, 0,960 mmol) em uma mistura de THF-metanol-H2O (1:1:1, 6 mL) foi adicio- nado LiOH em pó (0,120 g, 4,99 mmol) em temperatura ambiente. A solução foi agitada por 3 horas e então foi acidificada para pH 6 usando HCI IN. À fase aquosa foi lavada com acetato de etila e foi então liofilizada para dar o bicloridrato do composto do título como um sólido amarelo (contendo LiCI). O produto foi usado como é em etapas subsequentes. *H RMN (400 MHz,
DMSO-ds) 5 8,49 (d, J=5,7 Hz, 2H), 7,34 (d, J=5,7 Hz, 2H), 3,56 (s, 1H), 2,21 (s, 6H). Os exemplos que seguem foram preparados de uma maneira similar usando o método descrito acima: NMez . Cap-19 LCMS: Anál. Cal. para CH. N2O0>,: 180; en- > COH + | contrado: 181 (M+H)*.
N NMe, o 2 Cap-20 LCMS: nenhuma ionização. "H RMN (400
COH Í 2N ? MHz, CD;OD) 5 8,55 (d, J=4,3 Hz, 1H), 7,84 (1 ap, J=5,3 Hz, 1H), 7,61 (d, J=7,8 Hz, 1H), - 7,37 (t ap, J=5,3 Hz, 1H), 4,35 (s, 1H), 2,60 s, 6H . NMe; , Cap-21 LCMS: Anál. Cal. para C.H,,CINSO>: 214, RE COH . ! >” 216; encontrado: 215, 217 (M+H)”. ' CN NMe; , Cap-22 LCMS: Anál. Cal. para CioHIaN5O,: 224; COo.H ' ? encontrado: 225 (M+H)”.
ON NMe, Cap-23 LCMS: Anál. Cal. para C1,H15NO;: 229; en- Cco2H + contrado: 230 (M+H). NMe, , Cap-24 FC LCMS: Anál. Cal. para ChHeF3 NO: 247; Cco,H ? encontrado: 248 (M+H)*. NMe, , Cap-25 LCMS: Anál. Cal. para C/H 2F;NO;: 247; COH . encontrado: 248 (M+H)”. CF; NMe> Cap-26 LCMS: Anál. Cal. para CioHeFNO,: 197; COH . encontrado: 198 (M+H)”.
F NMe, . Cap-27 F. LCMS: Anál. Cal. para CioHFNO»:: 247; Cco.H ? encontrado: 248 (M+H)*.
NM: Cap-28 Cc e LCMS: Anál. Cal. para CiH,yCINO, 213;
CO H ? encontrado: 214 (M+H)”. NMe, Cap-29 LCMS: Anál. Cal. para CioH2CINO,; 213;
CO H CO ? encontrado: 214 (M+H)”. Cc NMe>z , Cap-30 LCMS: Anál. Cal. para CioH;2CINO,: 213; COo,H ? encontrado: 214 (M+H)*, Cc! NMe> , Cap-31 O LCMS: Anál. Cal. para CgH,N20,S: 200; = COH Ss ? encontrado: 201 (M+H)*. Ú NMe, . Cap-32 LCMS: Anál. Cal. para C;dHÃÁNOJS: 185; Pr COLH + NE encontrado: 186 (M+H)”, NM: Cap-33 x LCMS: Anál. Cal. para C;H,NO,S: 185; == , Sã co encontrado: 186 (M+H)*. NM: . Cap-s4 Que LCMS: Anál. Cal. para CuHeNsOs: 220; CcoH Ú ? encontrado: 221 (M+H)*. o-N NMe> , Cap-35 LCMS: Anál. Cal. para CioH,aNO,S: 235; CcOoH s | ? encontrado: 236 (M+H)*. NM: Cap-36 N Se LCMS: Anál. Cal. para CiHy,N;0,S: 250; CcoH A o 2? | encontrado: 251 (M+H)"*. Ss Cap-37
NÓS NOS > 2 > OEt 1 MexN E o TX Men E men o A .Ho o
B cap-37 Etapa 1: (R,S)-Etil 2-(quinolin-3-il)-2-(N N-dimetilamino)-acetato. Uma mistura de N N-dimetilaminoacetato de etila (0,462 g, 3,54 mmol),
K3PO, (1,90 g, 8,95 mmol), Pdí(t-Bus3P)> (0,090 g, 0,176 mmol) e tolueno (10 mL) foi desgaseificada com uma corrente de bolhas de Ar por 15 minutos. À mistura de reação foi então aquecida a 100ºC por 12 horas, após o que ela foi esfriada para temperatura ambiente e despejada em H2O. A mistura foi extraídacom acetato de etila (2x) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas (H2O, salmoura), secas (Na7-SO;), filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado primeiro através de HPLC preparativa de fase rever- sa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH;CN-H;0-5 mM NH,OAc) e então através de cromatografia rápida (SIO/hexano-acetato de etila, 1:1) para pro- vero composto do título (0,128 g, 17%) como um óleo laranja. *H RMN (400 . MHz, CDCI3) à 8,90 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,32 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,03-8,01 (m, 2H), 7,77 (ddd, J=8,3, 6,8, 1,5 Hz, 1H), 7,62 (ddd, J-8,3, 6,8, 1,5 Hz, 1H), 4,35 (s, 1H), 4,13 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,15 (t, J=7,0 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para C1sHi8gN2O,: 258; encontrado: 259 (M+H)*. “OAB Etapa 2: Ácido (R,S) 2-(quinolin-3-i)-2-(N,N-dimetilamino) acéti- : co. Uma mistura de (R,S)-etil 2-(quinolin-3-i1)-2-(N, N-dimetilamino)acetato (0,122 g, 0,472 mmol) e HCl 68M (3 mL) foi aquecida a 100ºC por 12 horas. O solvente foi removido in vacuo para prover o bicloridrato do composto do título (0,169 g, >100%) como uma espuma amarelo-claro. O material não- purificado foi usado em etapas subsequentes sem purificação adicional. LCMS: Anál. Cal. para Ci3H14N202: 230; encontrado: 231 (M+HY*. Cap-38
E O AA to A “O 2 F ON * oH + — + F NRIR? As Me PA o B Cap-38 Etapa 1: (R)-((S)-1-Feniletil) 2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfenil) ace- tato e (S)-((S)-1-Feniletil) 2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfenil)acetato. A uma mis- tura de ácido (RS)-2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfenil)acético (2,60 g, 13,19 mmol), DMAP (0,209 g, 1,71 mmol) e (S)-1-feniletanol (2,09 g, 17,15 mmol) em CH2Cl> (40 mL) foi adicionado EDCI (3,29 g, 17,15 mmol) e a mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente por 12 horas.
O solvente foi então removido in vacuo e o resíduo dividido com acetato de etila-H2O.
As cama- das foram separadas, a camada aquosa foi retroextraída com acetato de etila (2x) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas (H2O, salmoura), secas (Na2zSO,), filtradas e concentradas /n vacuo.
O resíduo foi purificado através de cromatografia de silica-gel (BIOTAGEº/dietil éter 0-50%-hexano). A mistura diastereomérica pura resultante foi então separada através de HPLC preparativa de fase reversa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH;CN- ' H20-0,1% TFA) para dar primeiro (S)-1-fenetil (R)-2-(dimetilamino)-2-(2- : fluorfeni)acetato (0,501 g, 13%) e então (S)-1-fenetil (S)-2-(dimetilamino)-2- (2-fluorfenit)-acetato. (0,727 g, 18%), ambos como seus sais de TFA.
Isômero (S.,R): 'H RMN (400 MHz, CD3;OD) 5 7,65-7,70 (m, 1H), 7,55-7,60 (ddd, “15 J=9,4,81,1,5Hz, 1H), 7,36-7,41 (m, 2H), 7,28-7,34 (m, 5H), 6,04 (q, J=6,5 : Hz, 1H), 5,60 (s, 1H), 2,84 (s, 6H), 1,43 (d, J=6,5 Hz, 3H). LCMS: Anál.
Cal. para Ci8H2oFNO>: 301; encontrado: 302 (M+H)*; Isômero (S,S): 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7,58-7,83 (m, 1H), 7,18-7,31 (m, 6H), 7,00 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 2H), 6,02 (a, J=6,5 Hz, 1H), 5,680 (s, 1H), 2,88 (s, 6H), 1,54 (d, J=6,5 Hz 3H) LCMS: Anál.
Cal. para CigH2oFNO;: 301; encontrado: 302 (M+H)*. Etapa 2: Ácido (R)-2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfenil)acético.
Uma mistura de sal de TFA de (R)-((S)-1-feniletil) 2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfenil) acetato (1,25 9, 3,01 mmol) e PA(OH)2 20%/C (0,125 g) em etanol (30 mL) foi hidrogenada em temperatura ambiente e pressão atmosférica (balão de —H2)por4 horas.
A solução foi então purgada com Ar, filtrada através de terra diatomácea (CELITE?) e concentrada in vacuo.
Isto deu o composto do título como um sólido incolor (0,503 g, 98%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,53- 7,63 (m, 2H), 7,33-7,38 (m, 2H), 5,36 (s, 1H), 2,86 (s, 6H). LCMS: Anál.
Cal. para CioHi2FNO>: 197; encontrado: 198 (M+H)*. O isômero S poderia ser obtido a partir de sal de TFA de (S)- ((S)-1-feniletil) 2-(dimetilamino)-2-(2-fluorfeni)acetato de uma maneira simi- lar.
Cap-39 CI NH crONÓ
OH OH
SST O ; cap-39 Uma mistura de (R)-(2-clorofenil)glicina (0,300 g, 1,62 mmol), formaldeído (solução aquosa 35%, 0,80 mL, 3,23 mmol) e PAd(OH)/C 20% (0,050 g) foi hidrogenada em temperatura ambiente e pressão atmosférica (balão de Hs) por 4 horas. A solução foi então purgada com Ar, filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado " através de HPLC preparativa de fase reversa (Primesphere C-18, 30 x . 100mm; CH;CN-H;O-TFA 0,1%) para dar o sal de TFA do composto do título ácido (R)-2-(dimetilamino)-2-(2-clorofenil)acético como um óleo incolor (0,290 g, 55%). 'H RMN (400 MHz, CDzOD) 5 7,59-7,65 (m, 2H), 7,45-7,53 ' (m, 2H), 5,40 (s, 1H), 2,87 (s, 6H). LCMS: Anál. Cal. para CioH12CINO;: 213; . encontrado: 214 (M+H)*. Cap-40 o CI NH, Cl HNSo
OH OH
O O ' cap-40 A uma solução gelada de (R)-(2-clorofeni)alicina (1,00 g, 5,38 mmol) e NaOH (0,862 g, 21,6 mmol) em HO (5,5 mL) foi adicionado cloro- formiato de metila (1,00 mL, 13,5 mmol) em gotas. A mistura foi deixada agi- tar a 0º C por 1 hora e então ela foi acidificada através da adição de HCI conc. (2,5 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (2x) e a fase or- gânica combinada foi lavada (H;O, salmoura), seca (Na2SO;,), filtrada e con- centrada in vacuo para dar o composto do título ácido (R)-2-(metoxicarbo- nilamino)-2-(2-clorofenil)acético como uma espuma amarelo-laranja (1,31 g, 96%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,39 - 7,43 (m, 2H), 7,29 - 7,31 (m, 2H), 5,69 (s, 1H), 3,65 (s, 3H). LCMS: Anál. Cal. para CioHioCINO,: 243; encon-
trado: 244 (M+H)*. Cap-41
CS fe N o o SE— SÉ cap-41 A uma suspensão de ácido 2-(2-clorometifenil)acético (2,00 g, 10,8 mmol) em THF (20 mL) foi adicionada morfolina (1,89 9, 21,7 mmol) e a solução foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de rea- . ção foi então diluída com acetato de etila e extraída com H2O (2x). A fase aquosa foi liofilizada e o resíduo foi purificado através de cromatografia de ] sílica-gel (BIOTAGE?/metanol-CH>Cl, 0-10%) para dar o composto do título ácido 2-(2-(morfolinometilYfenil)acético como um sólido incolor (2,22 g, 87%). - 10 HRMN (400 MHz, CD3OD) 5 7,37-7,44 (m, 3H), 7,29-7,33 (m, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,83 (s amplo, 4H), 3,68 (s, 2H), 3,14 (s amplo, 4H). LCMS: Anál. Cal. para C13H17NO;s: 235; encontrado: 236 (M+H)*. Os exemplos que seguem foram similarmente preparados usan- do o método descrito para Cap-41: Cap-42 (O LCMS: Anál. Cal. para CiH;NO>: 233; encontrado: SE 234 (M+H)Y*. oH Cap-43 O LCOMS: Anál. Cal. para C13H,,NO;: 219; encontrado: SE 220 (M+H).
OH SE 194 (M+H)*.
OH Cap-45 ços” LOMS: Anál. Cal. para CiaHoN2O>: 248; encontrado: SE 249 (M+H)*. oH
Cap-45a oH oH NHz HN.
O + pTsOH sal Dá
Cap-45a HMDS (1,85 mL, 8,77 mmol) foi adicionado a uma suspensão de p-toluenossulfonato do ácido (R)-2-amino-2-fenilacético (2,83 g, 8,77 mmol) em CH2Chl (10 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos.
Isocianato de metila (0,5 9, 8,77 mmol) foi adicionado em uma por- çãoea agitação continuada por 30 minutos.
A reação foi extinta através da i adição de H2O (5 mL) e o precipitado resultante foi filtrado, lavado com H2O ' € n-hexanos e seco sob vácuo.
Ácido (R)-2-(3-metilureido)-2-fenilacético (1,5 g; 82%) foi recuperado como um sólido branco e ele foi usado sem purifica- ' ção adicional. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 2,54 (d, J=4,88 Hz, 3H) 5,17(d,J=7,93 Hz, 1H) 5,95 (q, J=4,48 Hz, 1H) 6,66 (d, J=7,93 Hz, 1H) 7,26- ' 7,38 (m, 5H) 12,67 (s, 1H). LCMS: Anál.
Cal. para CioHi2N2O;3 208,08; en- contrado 209,121 (M+H)”; HPLC PHENOMENEX? C-18 3,0 x 46 mm, BO a 100% durante 2 minutos, tempo de manutenção de 1 minuto, A = água 90%, metanol 10%, TFA 0,1%, B = água 10%, metano! 90%, TFA 0,1%, Tr= 1,38 min, índice de homogeneidade 90%. Cap-46 OH oH mois É ao
O produto desejado foi preparado de acordo com o método des- crito para Cap-45a. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 0,96 (t, J=7,17 Hz, 3H) 2,94-3,05 (m, 2H) 5,17 (d, J=7,93 Hz, 1H) 6,05 (t, J=5,19 Hz, 1H) 6,60 (d, J=7,63 Hz, 1H) 7,26-7,38 (m, 5H) 12,68 (s, 1H). LCMS: Anál.
Cal. para —CnHAN20; 222,10; encontrado 223,15 (M+H)*. HPLC XTERRAS C-18 3,0 x 506 mm, B O a 100% durante 2 minutos, tempo de manutenção 1 minuto, À
= água 90%, metanol 10%, H;PO, 0,2%, B = água 10%, metanol 90%, H3PO4 0,2%, Tr = 0,87 min, índice de homogeneidade 90%.
Cap-47 QFCOÚX: = or e não WÃo B Cap47 Etapa 1: (R)-terc-Butil 2-(3,3-dimetilureído)-2-fenilacetato. A uma solução agitada de (R)-ferc-butil-2-amino-2-fenilacetato (1,0 g, 4,10 mmol) e “5 basede Hunig(1,79mL, 10,25 mmol) em DMF (40 mL) foi adicionado clore- : to de dimetilcarbamoíla (0,38 mL, 4,18 mmol) em gotas durante 10 minutos. Após agitar em temperatura ambiente por 3 horas, a reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo resultante foi dissolvido em acetato de eti- ' la. A camada orgânica foi lavada com H2O, HCI aquoso 1N e salmoura, seca - 10 (MgSO;), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. (R)-ferc-butil 2-(3,3- dimetilureído)-2-fenilacetato foi obtido como um sólido branco (0,86 9; 75%) e usado sem purificação adicional. 'H RMN (5900 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 1,33 (s, 9H) 2,82 (s, 6H) 5,17 (d, J=7,63 Hz, 1H) 6,55 (d, J=7,32 Hz, 1H) 7,24-7,41 (m, 5H). LCMS: Anál. Cal. para Ci5H22N2O;3 278,16; encontrado 279,23 (M+H)*; HPLC PHENOMENEXº LUNA C-18 4,6 x 50 mm, BO a 100% durante 4 minutos, tempo de manutenção 1 minuto, À = água 90%, metanol 10%, TFA 0,1%, B = água 10%, metanol 90%, TFA 0,1%, Tr= 2,26 min, índice de homogeneidade 97%.
Etapa 2: Ácido (R)-2-(3,3-dimetilureído)-2-fenilacético. A uma so- lução agitada de ((R)-ferc-butil 2-(3,3-dimetilureído)-2-fenilacetato (0,86 9, 3,10 mmol) em CH2Cl> (250 mL) foi adicionado TFA (15 mL) em gotas e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. O com- posto desejado foi então precipitado da solução com uma mistura de EtO- Ac:Hexanos (5:20), filtrado e seco sob pressão reduzida. Ácido (R)-2-(3,3- dimetilureido)-2-fenilacético foi isolado como um sólido branco (0,59 g, 86%) e usado sem purificação adicional. '*H RMN (500 MHz, DMSO-ds) à ppm
2,82 (s, 6H) 5,22 (d, J=7,32 Hz, 1H) 6,58 (d, J=7,32 Hz, 1H) 7,28 (t, J=7,17 Hz, 1H) 7,33 (t, J1=7,32 Hz, 2H) 7,38-7,43 (m, 2H) 12,65 (s, 1H). LCMS: Anál.
Cal. para C1H4N2O3: 222,24; encontrado: 223,21 (M+H)*”. HPLC XTERRAº C-18 3,0 x 50 mm, B O a 100% durante 2 minutos, tempo de manutenção 1 minuto, AÀA=água 90%, metanol 10%, H3;PO, 0,2%, B = água 10%, metanol 290%, H3PO,4 0,2%, Tr=0,75 min, índice de homogeneidade 93%. Cap-48 AX 2 s E SE 7 B Cap48 . Ftapa 1: (R)-ferc-Butil 2-(3-ciclopentilureido)-2-fenilacetato.
A uma solução agitada de cloridrato do ácido (R)-2-amino-2-fenilacético (1,0 g, 4,10 mmol) e base de Hunig (1,0 mL, 86,415 mmol) em DMF (15 mL) foi adi- ' cionado ciclopentil isocianato a (0,46 mL, 4,10 mmoi) em gotas durante 10 ' minutos.
Após agitar em temperatura ambiente por 3 horas, a reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo resultante foi absorvido em acetato de etila.
A camada orgânica foi lavada com H;O e salmoura, seca (MgSO3), filtrada e concentrada sob pressão reduzida. (R)-ferc-butil 2-(3- ciclopentilureído)-2-fenilaceato foi obtido como um óleo opaco (1,32 9, 100%) e usado sem purificação adicional. *"H RMN (500 MHz, CD;CHD) 5 ppm 1,50-1,57 (m, 2H) 1,58-1,66 (m, 2H), 1,87-1,97 (m, 2H), 3,89-3,98 (m, 1H), 5,37 (s, 1H), 7,26-7,38 (m, 5H). LOMS: Anál.
Cal. para CigH>sN2O;3 318,19; encontrado 319,21 (M+H)*; HPLC XTERRA? C-18 3,0 x 50 mm, B O a 100% durante 4 minutos, tempo de manutenção 1 minuto, A = água 90%, metanol 10%, TFA 0,1%, B = água 10%, metanol 90%, TFA 0,1%, Tr=2,82 min, índice de homogeneidade 96%. Etapa 2: Ácido (R)-2-(3-ciclopentilureído)-2-fenilacético.
A uma solução agitada de (R)-ferc-butil 2-(3-ciclopentilureido)-2-fenilacetato (1,31 q, 4,10 mmol) em CH2Cl, (25 mL) foram adicionados TFA (4 mL) e trietilsilano (1,54 mL; 10,3 mmol) em gotas e a solução resultante foi agitada em tempe- ratura ambiente por 6 horas.
Os componentes voláteis foram removidos sob pressão reduzida e o produto bruto foi recristalizado em acetato de eti- la/pentanos para dar ácido (R)-2-(3-ciclopentilureído)-2-fenilacético como um sólido branco (0,69 g, 64%). *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 1,17-1,35 (m, 2H) 1,42-1,52 (m, 2H) 1,53-1,64 (m, 2H) 1,67-1,80 (m, 2H) 3,75-3,89 (m, 1H)5,17(d,J=7,93 Hz, 1H) 6,12 (d, J=7,32 Hz, 1H) 6,48 (d, J=7,93 Hz, 1H) 7,24-7 40 (m, 5H) 12,73 (s, 1H). LCMS: Anál. Cal. para CiaHigN2O3: 262,31; encontrado: 263,15 (M+H)*”. HPLC XTERRAS C-18 3,0 x 50 mm, B O a 100% durante 2 minutos, tempo de manutenção 1 minuto, A = água 90%, metanol 10%, H;PO, 0,2%, B = água 10%, metanol 90%, H3PO,4 0,2%, Tr=1,24 min, índicede homogeneidade 100%. - Cap-49 | COMf— CO cap-49 º A uma solução agitada de ácido 2-(benzilamino)acético (2,0 g, 12,1 mmol) em ácido fórmico (91 mL) foi adicionado formaldeído (6,94 mL, 93,2 mmol). Após cinco horas a 70ºC, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para 20 mL e um sólido branco precipitou. Seguindo filtragem, os líquidos-mãe foram coletados e concentrados mais sob pressão reduzida provendo o produto bruto. Purificação através de HPLC preparativa de fase reversa (XTERRAº 30 X 100 mm, detecção a 220 nm, taxa de fluxo 35 mL/min, B O a 35% B durante 8 min; A = água 90%, metanol 10%, TFA 0,1% B= água 10%, metanol 90%, TFA 0,1%) proveu o composto do título ácido 2-(benzilímetil)-amino)acético como seu sal de TFA (723 mg, 33%) como uma cera incolor. *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 2,75 (s, 3H) 4,04 (s, 2H) 4,34 (s, 2H) 7,29-7,68 (m, 5H). LCMS: Anál. Cal. para: C1oH;3NO;>z 179,09; Encontrado: 180,20 (M+H)*. Cap-50
DA mA o Ao O Cx Cap-so
A uma solução agitada de ácido 3-metil-2-(metilamino)butanoico (0,50 g, 3,81 mmol) em água (30 mL) foi adicionado K2CO;3 (2,63 g, 19,1 mmol) e cloreto de benzila (1,32 g, 11,4 mmol). A mistura de reação foi agi- tada em temperatura ambiente por 18 horas.
A mistura de reação foi extraí- dacom acetato de etila (30 ml x 2) e a camada aquosa foi concentrada sob pressão reduzida provendo o produto bruto que foi purificado através de H- PLC preparativa de fase reversa (<TERRAº 30 x 100mm, defecção a 220 nm, taxa de fluxo 40 mL/min, B 20 a 80% B durante 6 min; À = água 90%, metanol 10%, TFA 0,1%, B = água 10%, metano! 90%, TFA 0,1%) para pro- verácido2-(benzilí(meti)amino)-3-metilbutanoico, sal de TFA (126 mg, 19%) ' como uma cera incolor. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 0,98 (d, 3H) . 1,07 (d, 3H) 2,33-2,48 (m, 1H) 2,54-2,78 (m, 3H) 3,69 (s, 1H) 4,24 (s, 2H) 7,29-7,65 (m, SH). LCMS: Anál.
Cal. para: Ci3H1oNO> 221,14; Encontrado: 222,28 (M+H)*. i Cap-51 - | Êo o
Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico Na2CO; (1,83 g, 17,2 mmol) foi adicionado à solução de NaOH (33 ml. de IM/H;O, 33 mmol) de L-valina (3,9 g, 33,29 mmol) e a solução resultante foi esfriada com banho de água gelada.
Cloroformiato de metila (2,8 mL, 36,1 mmol) foi adicionado em gotas durante 15 minutos, o banho de esfriamento foi removido e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 3,25 horas.
A mistura de reação foi lavada com éter (50 mL, 3x) e a fase aquosa foi esfriada com banho gelado e acidificada com HCI concentrado para uma região de pH de 1-2 e extraída com CH2CI7 (50 mL, 3x). A fase orgânica foi seca (M9SO;,) e evaporada in vacuo para dar Cap-51 como um sólido branco (6 9). *H RMN para o rotâmero dominante (DMSO- ds, 0=2,5 ppm, 500 MHz): 12,54 (s, 1H), 7,33 (d, J=8,6, 1H), 3,84 (dd, J=8,4, 86,0, 1H), 3,54 (s, 3H), 2,03 (m, 1H), 0,87 (m, 6H). HRMS: Anál.
Cal. para
[M+H]" C7Hi4NO4: 176,0923; encontrado 176,0922. Cap-51 (via alternativa) .á É HN o nO, — nO, A be A e A Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico DIEA (137,5 mL, 0,766 mol) foi adicionado a uma suspensão de cloridrato de (S)-ferc-butil 2-amino-3-metilbutanoato (75,0 9, 0,357 mol) em THF (900 mL) e a mistura foi esfriada para 0º C (banho de água gelada). Cloroformiato de metila (29,0 mL, 0,375 mol) foi adicionado em gotas duran- te 45 minutos, o banho de esfriamento foi removido e a mistura heterogênea foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas.
O solvente foi removido . sob pressão menor e o resíduo dividido entre EtOAc e água (1 L cada). À camada orgânica foi lavada com HzO (1 L) e salmoura (1 L), seca (MgSO;,), “10 filitadae concentrada sob pressão baixa.
O material bruto foi passado por um tampão de sílica-gel (1 kg), eluindo com hexanos (4 L) e EtOAc/hexanos 15:85 (4 L) para dar (S)-ferc-butil 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoato como um óleo transparente (82,0 g, 99% de rendimento). 'H RMN (500 MHz, DMSO-d;s, ô = 2,5 ppm) 7,34 (d, J = 8,6, 1 H), 3,77 (dd, J = 8,6,6,1, 1 H), 3,53(s, 3H) 1,94 -2,05 (m, 1 H), 1,39 (s, 9 H), 0,83 - 0,92 (m, 6 H). PC- RMN (126 MHz, DMSO-ds, 5 = 39,2 ppm) 170,92, 156,84, 80,38, 60,00, 51,34, 29,76, 27,62, 18,92, 17,95, LC/MS: [M+Na]* 254,17. Ácido trifuoracético (343 mL, 4,52 mmol) e ELSIH (142 mL, 0,887 mol) foram adicionados sequencialmente a uma solução de (S)-ferc- butil 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoato (82,0 g, 0,355 mol) em CH2Cl72 (675 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 4 ho- ras.
O componente volátil foi removido sob pressão baixa e o óleo resultante triturado com éter de petróleo (600 mL) para dar um sólido branco, que foi filtrado e lavado com hexanos (500 mL) e éter de petróleo (500 mL). Recris- talização a partir de FtOAcféter de petróleo deu Cap-51 como cristais em floco brancos (54,8 g, 88% de rendimento). MP = 108,5-109,5 ºC. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds, ô = 2,5 ppm) 12,52 (s, 1 H), 7,31 (d, J= 8,6, 1 H), 3,83 (dd, J = 8,6, 6,1, 1 H), 3,53 (s, 3 H), 1,94 - 2,07 (m, 1 H), 0,86 (dd, J = 8,9, 7,0, 8 H). *C RMN (126 MHz, DMSO-ds, 5 = 39,2 ppm) 173,30, 156,94, 59,48,51,37,29,52, 19,15, 17,98 LC/MS: [M+H]* = 176,11. Anál.
Cal. para C7H3NO,4: C, 47,99; H, 7,48; N, 7,99. Encontrado: C, 48,17; H, 7,55; N, 7,99. Rotação óptica: [a] 7 = -4,16 (12,02 mg/ml; MeOH). Pureza óptica: >99,5 % ee, A avaliação de pureza óptica foi feita no derivado de éster de metila de Cap-51, que foi preparado sob um protocolo de esterificação de TMSCHN; (benzeno/MeOH). Condições analíticas de HPLC: coluna, CHIRALPAKº AD- ' H (4,6 x 250 mm, 5 um); solvente, heptano 95%/IPA 5% (isocrático); taxa de ' fluxo, 1 mL/min; temperatura, 35ºC; UV monitorada a 205 nm. [Nota: Cap-51 poderia ser também comprado da Flamm]. . Cap-S52 (igual a Cap-12) do, HN,, Õ ou Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)propanoico Cap-S52 foi sintetizado a partir de L-alanina de acordo com o pro- —cedimento descrito para a síntese de Cap-51. Para propósitos de caracteri- zação, uma porção do material bruto foi purificada através de uma HPLC de fase reversa (H>O/metanol/TFA) para dar Cap-52 como um óleo viscoso in- color. *H RMN (DMSO-dg, 5=2,5 ppm, 500 MHz): 12,49 (s amplo, 1H), 7,43 (d, J=7,3, 0,88H), 7,09 (s amplo ap, 0,412H), 3,97 (m, 1H), 3,53 (s, 3H), 1,25 (d,J=7,3,3H) Cap-53 até Cap-64 Cap-53 até Cap-64 foram preparados a partir de materiais de partida apropriados de acordo com o procedimento descrito para a síntese de Cap-51, com modificações registradas se alguma:
Dados Cap-53a: (R) o RN Q 7H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 Cap-53b: (S) ((S- É v O MHz): 5 12,51 (s amplo, 1H), 74 (d J = ácido 2-(metóxi-carbo-;) 7,9, 0,9H), 7,06 (s ap, 0,1H), 3,86-3,82 nil-camino) butanoico) (m, 1H), 3,53 (s, 3H), 1,75-1,67 (m, 1H), 1,62-1,54 (m, 1H), 0,88 (d, JU = 7,3, 3H). Tr= 0,77 minuto (Cond. 2); LC/MS: A- nál. Cal. para [M+Na]" CHA, NNaoO, : 184,06; enconirado 184,07, HRMS Calc. para [M+Na]ll CH, NNaO,: 7 184,0586; encontrado 184,0592.
. Cap-54a: (R) o f T 7H RMN (DMSO-d., 5 = 2,5 ppm, 500 Cap-54b: (S) ácido É 5S e. MHz): 5 12,48 (s, 1H), 7,58 (d J] = 7,6, ((S)-2-ciclopropil-2- 0,9H), 7,25 (s ap, 0,1H), 3,52 (s, 3H), ' (metóxi-carbonil- 3,36-3,33 (m, 1H), 1,10-1,01 (m, 1H), ' amino)acético 0,54-0,49 (m, 1H), 0,46-0,40 (m, 1H), 0,39-0,35 (m, 1H), 0,31-0,21 (m, 1H). HRMS Calc. para [M+H]" C;HANO,: 174,07686; encontrado 174,0771 Cap-55 tida, QoS (DMSO-d,, 5 = 2,5 PPM 500 o 2): 5 12,62 (s, 1H), 7,42 (d, JU = 8,2, 7 0,9H), 7,07 (s ap, 0,1H), 5,80-5,72 (m, 1H), 5,10 (d, J = 17,1, 1H), 5,04 (d, J =| 10,4, 1H), 4,01-3,96 (m, 1H), 3,53 (s, 3H), 2,47-2,42 (m, 1H), 2,35-2,29 (m, 1H. Cap-56 o. RA 17H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 ácido (S)-3-metóxi-2- O Y Ã OH MHz): 5 12,75 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,3, (metóxi-carbonil- ? 0,9H), 6,96 (s ap, 0,1H), 4,20-4,16 (m, amino)propanoico 1H), 3,60-3,55 (m, 2H), 3,54 (s, 3H), 3,24 (s, 3H).
Cap-57 odor 'H RMN (DMSO-d,, ô = 2,5 ppm, 500 ô MHz): 5 12,50 (s, 1H), 8,02 (d, J = 7,7, D 0,08H), 7,40 (d, J =7,9, 0,76H), 7,19 (d, J = 8,2, 0,07H), 7,07 (d, J =6,7, 0,09H), 4,21-4 12 (m, 0,08H), 4,06-3,97 (m, 0,07H), 3,96-3,80 (m, 0,85H), 3,53 (s, 3H), 1,69-1,51 (m, 2H), 1,39-1,26 (m, 2H), 0,85 (t, J =7,4, 3H). LC (Cond. 2): Tr= 1,39. LC/MS: Anál.
Cal. para : [M+H]* C;HuNO,s : 176,09; encontrado . 176,06. [A o SO 4 RMN (DMSO-ds, 3 = 2,5 ppm, 500 A Ca MHz): 5 12,63 (s amplo, 1H), 7,35 « O NH> õ (s,1H), 7,31 (d, J = 8,2, 1H), 6,92 (s, - 1H), 4,33-4,29 (m, 1H), 3,54 (s, 3H), 2,54(dd, J = 15,5, 5,4, 1H), 2,43 (dd, J = 15,6, 8,0, 1H). Tr= 0,16 min (Cond. 2); LC/MS: Anál Cal para [M+H] CsHyuN5Os : 191,07; encontrado 191,14. Cap-58a: (R) o Hg O 1H RMN (DMSO-ds, 3 = 2,5 ppm, 400 Cap-59b: (S) Y NÃo MHz): 5 12,49 (s amplo, 1H), 7,40 (d, Ju = 7,3, 0,89H), 7,04 (s amplo, 0,11H), 4,00-3,95 (m, 3H), 1,24 (d, J = 7,3, 3H), 1,15 (t J = 7,2, 3H). HRMS: Anál.
Cal. para [M+H]" C;HoNO,: 162,0766; en-
contrado 162,0771.
Cap-80 o 4 A O material bruto foi purificado com uma v or HPLC de fase reversa (H2O/MeOH/TFA) para dar um óleo viscoso incolor que cristalizou para um sólido branco quando da exposição a vácuo alto. *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 bpm, 400 MHz): 5 12,38 (s amplo, 1H), 7,74 (s, 0,82H), 748 (s, 0,18H), 3,54/3,51 (dois s, 3H), 1,30 (m, 2H), 7 0,98 (m, 2H). HRMS: Anál. Calc. para . IM+H]* C;H;oNO,4: 160,06810; encontra- do 160,0604. : Cap-61 o 4 A ?H RMN (DMSO-d,, 3 = 2,5 ppm, 400 Y oH MHz): 5 12,27 (s amplo, 1H), 7,40 (s) , amplo, 1H), 3,50 (s, 3H), 1,32 (s, 6H). HRMS: Anál Cal para [M+H]" CeHaoNO;: 162,0766; encontrado 162,0765. Cap-62 o A ?H RMN (DMSO-d,, 5 = 2,5 ppm, 400 MY E OH ln2): 5 12,74 (s amplo, 1H), 4,21 (d,
PAM = 10,3, 0,6H), 4,05 (d, J = 10,0, 0,4H), 3,62/3,60 (dois singletos, 3H), 3,0 (s, 3H), 2,14-2,05 (m, 1H), 0,95 (d, J =6,3, 3H), 0,81 (d, J = 6,6, 3H). LC/MS: Anál. Calc. para [M-H] CH, NO; 188,09; encontrado 188,05.
PA PP PP Cap-63 o K O [Nota: a reação foi deixada acontecer| Y o mais tempo do que foi registrado para o procedimento geral]. *H RMN (DMSO- ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 12,21 (s amplo, 1H), 7,42 (s amplo, 1H), 3,50 (s, 3H), 2,02-1,85 (m, 4H), 1,66-1,58 (m, 4H). LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]" CEHaNO,: 188,09; encontrado 188,19. Cap-64 o NH Q [Nota: a reação foi deixada acontecer| , Y a o mais tempo do que foi registrado para o - procedimento gerall. '-H RMN (DMSO- des, 3 = 2,5 ppm, 400 MHz): 12,35 (s amplo, 1H), 7,77 (s, 0,82H), 7,56/7,52 ' (s amplo de sobreposição, 0,18H), 3,50 - (s, 3H), 2,47-2,40 (m, 2H), 2,14-2,07 m, 2H), 1,93-1,82 (m, 2H). Cap-65 nº sa º OH Cloroformiato de metila (0,685 mL, 8,39 mmol) foi adicionado em gotas durante 5 minutos a uma mistura esfriada (água gelada) de Na2CO;3 (0,449 g, 4,23 mmol), NaOH (8,2 mL de 1M/H/O, 8,2 mmol) e ácido (S)-2- amino-3-hidróxi-3-metilbutanoico (1,04 9, 7,81 mmol). A mistura de reação foi agitada por 45 minutos e então o banho de esfriamento foi removido e agitação foi continuada por mais 3,75 horas.
A mistura de reação foi lavada com CH2Cl; e a fase aquosa foi esfriada com banho de água gelada e acidi- ficada com HCI concentrado para uma região de pH de 1-2. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em uma mistura 2:1 de MeOH/CH2Clz (15 mL) e filtrado, e o filtrado sofreu rotoevaporação para dar
Cap-65 como uma espuma semiviscosa branca (1,236 g). *H RMN (DMSO- des, O = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 6,94 (d, J = 8,5, 0,9 H), 6,53 (s amplo, 0,1H), 3,89 (d, J = 8,8, 1H), 2,94 (s, 3H), 1,15 (s, 3H), 1,13 (s, 3H). Cap-66 e Cap-67 foram preparados a partir de materiais de par- tida comercialmente disponíveis apropriados através do emprego do proce- dimento descrito para a síntese de Cap-65. Cap-66
H O Oo O “on 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 12,58 (s amplo, 1H), 7,07 (d, J = 8,3, 0,13H), 6,81 (d, J = 8,8, 0,67H), 4,10-4,02 (m, 1,15H), 3,91 (dd, J = 9,1, 3,5, 0,85H), 3,56 (s, 3H), 1,09 (d, / = 6,2, 3H). [Nota: ape- . 10 nasossinais dominantes de NH foram registrados]. Cap-67 H o of 9 oH 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 12,51 (s amplo, 1H), 7,25 (d, J = 8,4, 0,75H), 7,12 (d amplo, J = 0,4, 0,05H), 6,86 (s amplo, 0,08H), 3,95-3,85 (m, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,08 (d, J = 6,3, 3H). [Nota: apenas os sinais dominantes de NH foram registrados]. Cap-68 H o Pi on o e [A Cloroformiato de metila (0,38 ml, 4,9 mmol) foi adicionado em gotas a uma mistura de NaOH 1N (aquoso) (9,0 ml, 9,0 mmol), NaHCO; 1M (aquoso) (9,0 ml, 9,0 moles), B-benzil éster do ácido L-aspártico (1,0 g, 4,5 mmol) e Dioxana (9 ml). A mistura de reação foi agitada em condições ambi- entes por 3 horas e então lavada com Acetato de etila (50 ml, 3x). A camada aquosa foi acidificada com HCl 12N para pH —1-2 e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com —salmoura, secas (NazSQ;), filtradas e concentradas in vacuo para dar Cap- 68 como um óleo amarelo-claro. (1,37 g; a massa está acima do rendimento teórico e o produto foi usado sem purificação adicional). 1H RMN (DMSO-d;, ô = 2,5 ppm, 500 MHz): 5 12,88 (s amplo, 1H), 7,55 (d, J = 8,5, 1H), 7,40- 7,32 (m, 5H), 5,13 (d, 1 = 12,8, 1H), 5,10 (d, J = 12,9, 1H), 4,42-4,38 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,87 (dd, J = 16,2, 5,5, 1H), 2,71 (dd, J =16,2, 8,3, 1H). LC : (Cond. 2): Tr= 1,90 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]I* CiaHieNOç: 282,10; : encontrado 282,12, Cap-69a e Cap-69b . q 9 Cap-69a: (R)-enantiomer Non Cap-69b: (S)-enantiomer NaCNBH;3 (2,416 g, 36,5 mmol) foi adicionado em bateladas a uma solução de água fria (-15ºC) (17 mLYMeOH (10 mL) de alanina (1,338 g 15,0 mmol). Alguns minutos depois acetaldeido (4,0 mL, 71,3 mmol) foi adicionado em gotas durante 4 minutos, o banho de esfriamento foi removi- do e a mistura de reação foi agitada em condição ambiente por 6 horas.
Mais acetaldeído (4,0 mL) foi adicionado e a reação foi agitada por 2 horas.
HCI concentrado foi adicionado lentamente à mistura de reação até que o pH atingisse-1,5, ea mistura resultante foi aquecida por 1 hora a 40ºC.
A maior parte do componente volátil foi removida in vacuo e o resíduo foi purificado com uma resina de troca de íon DOWEX? 50WX8-100 (a coluna foi lavada com água e o composto foi eluído com NH,O diluído, preparado misturando 18 ml! de NH,OH e 282 ml de água) para dar Cap-69 (2,0 g) como um sólido —higroscópico macio esbranquiçado. *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 3,44 (q, J = 7,1, 1H), 2,99-2,90 (m, 2H), 2,89-2,80 (m, 2H), 1,23 (d, J =7,1, 3H), 1,13 (t, JU =7,3, 6H). Cap-70 até Cap-74x
Cap-70 até Cap-74x foram preparados de acordo com o proce- dimento descrito para a síntese de Cap-69 empregando materiais de partida apropriados.
Cap-70a: (R) À "7H RMN (DMSO-d,, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 Cap-70b: (S) Ato, 3,42 (q, J = 7,1, 1H), 2,68-2,60 (m, 4H), 1,53- 1,44 (m, 4H), 1,19 (d, J = 7,3, 3H), 0,85 (t, JU = 7,5, 6H). LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]J CaH2oNO,: 174,15; encontrado 174,13. Cap-71a: (R) O 9 'H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz): 5 Cap-71b: (S) No 3,18-3,14 (m, 1H), 2,84-2,77 (m, 2H), 2,76-2,68 (m, 2H), 1,589-1,54 (m, 2H), 1,05 (t, JU = 7,2, 6H), . 0,91 (t, J = 7,3, 3H). LC/MS: Anál.
Cal. para M+H]* C;HNO>: 160,13; encontrado 160,06. : Cap-72 Ns ? 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 O 2,77-2,66 (m, 3H), 2,39-2,31 (m, 2H), 1,94-1,85 ' (m, 1H), 0,98 (t, J = 7,1, 6H), 0,91 (d JU = 6,5, 3H), 0,85 (d, J = 6,5, 3H). LC/MS: Anál.
Cal. para M+H]* CoHxoNO,>: 174,15; encontrado 174,15. Cap-73 ” o 'H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz): 3 NÃo, z 9,5 (s amplo, 1H), 3,77 (dd, J = 10,8, 4,1,1H), O Pé peesgeras 4H), 1,13 (t J =7,2, 6H). Cap-74 d 7 'H RMN (DMSO-d,, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz): 5 C 7,54 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,81 (1, J = 6,6, k1H), Neo 2,82-2,71 (m, 4H), 2,63 (dd, J = 15,6, 7,0, 1H), 2,36 (dd, J = 15,4, 6,3, 1H), 1,09 (t, J =7,2, 6H). Tr= 0,125 minutos (Cond. 2); LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]] CHINO; : 189,12; encontrado 189,13. x" 188,17; encontrado 188,21.
Cap-75 mo Ano 1 Cap-75, etapa a
O doa OoH NaBH3CN (1,6 g, 25,5 mmol) foi adicionado a uma solução de água fria (banho de água gelada) (25 ml)/metanol (15 ml) de H-D-Ser-Obzl ' HCI (2,0 g, 86 mmol). Acetaldeído (1,5 ml, 12,5 mmol) foi adicionado em 1 gotas durante 5 minutos, o banho de esfriamento foi removido e a mistura de ração foi agitada em condição ambiente por 2 horas. A reação foi cuidado- . 10 —samente extinta com HCI 12N e concentrada in vacuo. O resíduo foi dissol- vido em água e purificado com uma HPLC de fase reversa (MeOH/H2O/TFA) - para dar o sal de TFA de (R)-benzil 2-(dietilamino)-3-hidroxipropanoato como um óleo viscoso incolor (1,9 9). "H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz): 3 9,73 (s amplo, 1H), 7,52-7,36 (m, 5H), 5,32 (d, J = 12,2, 1H), 5,27 (, J = 12,5, 1H), 4,54-4,32 (m, 1H), 4,05-3,97 (m, 2H), 3,43-3,21 (m, 4H), 1,23 (t, J = 7,2, 6H). LC/MS (Cond. 2): Tr= 1,38 min; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" CiaH22NO;3: 252,16; encontrado 252,19.
Cap-75 NaH (0,0727 9, 1,82 mmol, 60%) foi adicionado a uma solução deTHF fria (gelo-água) (3,0 mL) do sal de TFA de (R)-benzil 2-(dietilamino)- 3-hidroxipropanoato (0,3019 g, 0,8264 mol) preparada como acima e a mis- tura foi agitada por 15 minutos. lodeto de metila (56 uL, 0,90 mmol) foi adi- cionado e a agitação foi continuada por 18 horas enquanto permitindo que o banho descongelasse para condição ambiente. A reação foi extinta com á- Quae carregada em um cartucho MCX pré-condicionado com MeOH (6 9) e lavada com metanol seguido por eluição do composto com NH3 2N/Metanol. Remoção do componente volátil in vacuo deu Cap-75, contaminado com ácido (R)-2-(dietilamino)-3-hidroxipropanoico, como um semissólido amarelo
(100 mg). O produto foi usado como é, sem purificação adicional. Cap-T6 ortios
ES
O NaCNBH;3 (1,60 g, 24,2 mmol) foi adicionado em bateladas a uma solução de água fria (-15ºCYMeOH (12 mL cada) de ácido (S)-4- amino-2-(terc-butoxicarbonilamino)butanoico (2,17 g, 9,94 mmol). Alguns minutos depois acetaldeído (2,7 mL, 48,1 mmol) foi adicionado em gotas durante 2 minutos, o banho de esfriamento foi removido e a mistura de rea- " ção foi agitada em condição ambiente por 3,5 horas. Mais acetaldeído (2,7 mL, 48,1 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por 20,5 horas. A maior . parte do componente MeOH foi removida in vacuo e a mistura restante foi tratada com HCI concentrado até que seu pH atingisse -1,0 e então aqueci- - da por 2 horas a 40ºC. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíi- duo foi tratado com HCl 4M/dioxana (20 mL) e agitado em condição ambien- tepor7,5 horas. O componente volátil foi removido im vacuo e o resíduo foi purificado com resina de troca de íon DOWEXº 50WX8-100 (coluna foi lava- da com água e o composto foi eluído com NH,OH diluído, preparado a partir de 18 ml de NH,OH e 282 ml de água) para dar intermediário ácido (S)-2- amino-4-(dietilamino)butanoico como um sólido esbranquiçado (1,73 g). Cloroformiato de metila (0,38 mL, 4,65 mmol) foi adicionado em gotas durante 11 minutos a uma mistura fria (gelo-água) de Na2CO; (0,243 g, 2,298 mmol), NaOH (4,6 mL de 1M/H;O, 4,6 mmol) e o produto acima (802,4 mg). A mistura de reação foi agitada por 55 minutos e então banho de esfriamento foi removido e a agitação foi continuada por mais 5,25 horas. À mistura de reação foi diluída com volume igual de água e lavada com CH2Cl (30 mL, 2x) e a fase aquosa foi esfriada com banho de água gelada e acidifi- cada com HCI concentrado para uma região de pH de 2. O componente vo- látil foi então removido in vacuo e o material bruto era de base livre com re- sina MCX (6,0 g; a coluna foi lavada com água e a amostra foi eluída com
NH;3 2,0M/MeOH) para dar Cap-76 impuro como um sólido esbranquiçado (704 mg). 'H RMN (MeOH-d,, õ = 3,29 ppm, 400 MHz): 5 3,99 (dd, J =7,5, 4,7, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,25-3,06 (m, 6H), 2,18-2,09 (m, 1H), 2,04-1,96 (m, 1H), 1,28 (t, J =7,3, 6H). LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* CioH2N204: 233,15; encontrado 233,24. Cap-77a e Cap-77b o .s. n Cap-r7a: enantiômero- 1 Ay Cap-7r7b: enantiômero-2 A síntese de Cap-77 foi conduzida de acordo com o procedimen- to descrito para Cap-7 usando 7-azabiciclo[2.2.1]heptano para a etapa de ' deslocamento de SN, e realizando a separação estereoisomérica do inter- mediário benzil 2-(7-azabiciclo[2.2.1]heptan-7-iI)-2-fenilacetato usando a . condição que segue: o intermediário (303,7 mg) foi dissolvido em etanol e a solução resultante foi injetada em uma coluna de HPLC quiral (coluna Chi- . ralcel AD-H, 30 x 250 mm, 5 um) eluindo com CO,z 90%-EtoOH 10% a 70 mL/min e uma temperatura de 35ºC para prover 124,5 mg de estereoisôme- ro1e133,8g de estereoisômero 2. Os ésteres de benzila sofreram hidroge- nólise de acordo com a preparação para Cap-7 para prover Cap-77: *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 7,55 (m, 2H), 7,38-7,30 (m, 3H), 4,16 (s, 1H), 3,54 (s amplo ap, 2H), 2,08-1,88 (m, 4 H), 1,57-1,46 (m, 4H). LC (Cond. 1): Tr= 0,67 min; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" CiHisNO;>: 232,13; encontrado 232,18. HRMS: Anál. Cal. para [M+H]" CiuHieNO;,: 232,1338; encontrado 232,1340. Cap-78
AA oH
O NaCNBH; (0,5828 g, 9,27 mmol) foi adicionado a uma mistura do salde HCI de ácido (R)-2-(etilamino)-2-fenilacético (um intermediário na síntese de Cap-3; 0,9923 mg, 4,60 mmol) e (1-etoxiciclopropóxi)trimetilsilano
(1,640 g, 9,40 mmol) em MeOH (10 mL) e a mistura semi-heterogênea foi aquecida a 50ºC com um banho de óleo por 20 horas. Mais (1-etoxiciclopro- póxiXtrimetilsilano (150 mg, 0,86 mmol) e NaCNBH;3 (52 mg, 0,827 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida por mais 3,5 horas. Ela foi então deixada esfriar para temperatura ambiente e acidificada para uma re- gião de pH de — 2 com HCi concentrado e a mistura foi filtrada e o filtrado sofre rotoevaporação. O material bruto resultante foi absorvido em i-PrOH (6 mL) e aquecido para realizar dissolução, e a parte não-dissolvida foi filtrada e o filtrado concentrado in vacuo. Cerca de 1/3 do material bruto resultante foi purificado com uma HPLC de fase reversa (H>O/MeOH/TFA) para dar o ' sal de TFA de Cap-78 como um óleo viscoso incolor (353 mg). *H RMN . (DMSO-ds, à = 2,5 ppm, 400 MHz; após troca de D2O): 5 7,56-7,49 (m, SH), 5,35 (S, 1H), 3,385 (m, 1H), 3,06 (s amplo ap, 1H), 2,66 (m, 1H), 1,26 (t, J = 7,3, 3H), 0,92 (m, 1H), 0,83-0,44 (m, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 0,64 min; “15 LC/MS: Anál. Cal. para [IM+H]" CiaHiaNO,2: 220,13; encontrado 220,21.
: HRMS: Anál. Cal. para [M+H]" CiaHgNO>: 220,1338; encontrado 220,1343. Cap-79 o tdo, o
N
CC Ozônio foi borbulhado em uma solução de CH.Cls (5,0 mL) fria (78ºC)de Cap-55 (369 mg, 2,13 mmol) por cerca de 50 minutos até que a mistura de reação atingiu um tom de cor azul. MesS (10 gotas de pipeta) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 35 minutos. O banho de -78ºC foi substituído como um banho de -10ºC e a agitação continuou por mais 30 minutos, e então o componente volátil foi removido in vacuo para darumóleo viscoso incolor.
NaBH3CN (149 mg, 2,25 mmol) foi adicionado a uma solução de MeOH (5,0 mL) do material bruto acima e morfolina (500 uL, 5,72 mmol) e a mistura foi agitada em condição de temperatura ambiente por 4 horas. Ela foi esfriada para temperatura de água gelada e tratada com HCl concentrado para trazer seu pH para -2,0 e então agitada por 2,5 horas. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado com uma combinação de resina MCX (lavagem com MeOH; eluição de NH; 2,0 N/MeOH) e uma HPLC de fase reversa (HYO/MeOH/TFA) para dar Cap-79 contendo quanti- dade desconhecida de morfolina. A fim de consumir a contaminação de morfolina, o material aci- ma foi dissolvido em CH2Cl (1,5 mL) e tratado com EtaN (0,27 mL, 1,94 mmol) seguido por anidrido acético (0,10 mL, 1,06 mmol) e agitado em con- dição ambiente por 18 horas. THE (1,0 mL) e HO (0,5 mL) foram adiciona- 7 dos e agitação continuada por 1,5 hora. O componente volátil foi removido jn - vacuo e o resíduo resultante foi passado por resina MCX (lavagem com Me- OH; eluição com NH3 2,0 NNMeOH) para dar Cap-79 impura como um óleo viscoso marrom, que foi usado para a etapa seguinte sem purificação adi- 7 15 cional. Cap-80a e Cap-80b - o Aço eoH | | À 5 < gados SAdaaedns ds
À SOCI> (6,60 mL, 90,5 mmol) foi adicionado em gotas durante 15 minutos a uma mistura fria (água gelada) de ácido (S)-3-amino-4-(benzilóxi)- 4-oxobutanoico (10,04 g, 44,98 mmol) e MeOH (300 mL), o banho de esfri- amentofoiremovido e a mistura de reação foi agitada em condição ambiente por 29 horas. A maioria do componente volátil foi removida in vacuo e o re- síduo foi cuidadosamente dividido entre EtOAc (150 mL) e solução de NaH- CO; saturada. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (150 mL, 2x) e a fase orgânica combinada foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo para dar(S)1-benzil 4-metil 2-aminossuccinato como um óleo incolor (9,706 g). 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 5 7,40-7,32 (m, 5H), 5,11 (s, 2H), 3,72 (t ap, J = 6,6, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,68 (dd, J = 15,9, 6,3, 1H), 2,58 (dd, J = 15,9, 6,8, 1H), 1,96 (s, 2H). LC (Cond. 1): Tr= 0,90 min; LC/MS: A-
nál.
Cal. para [M+H]" Ci2H,6NO,4: 238,11; encontrado 238,22. Pb(NO3)> (6,06 g, 18,3 mmol) foi adicionado durante 1 minuto a uma solução de CH2Cl; de (S)-1-benzil 4-metil 2-aminossuccinato (4,50 9, 19,0 mmol), 9-bromo-9-fenil-9H-fluoreno (86,44 g, 20,0 mmoi) e Et;N (3,0 mL, 21,5mmol) e a mistura heterogênea foi agitada em condição ambiente por 48 horas.
À mistura foi filtrada e o filtrado foi tratado com MgSO;, e filtrado novamente e o filtrado Final foi concentrado.
O material bruto resultante foi submetido a uma purificação com Biotageº (350 g de sílica-gel, eluição com CH2CI;) para dar (S)-1-benzil 4-metil 2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)succina- to como um óleo incolor altamente viscoso (7,93 g). *'H RMN (DMSO-ds, 5 = ' 2,5 ppm, 400 MHz): à 7,82 (m, 2H), 7,39-7,13 (m, 16H), 4,71 (d, JU = 12,4, - 1H), 4,51 (d, J = 12,6, 1H), 3,78 (d, J = 9,1, NH), 3,50 (s, 3H), 2,99 (m, 1H), 2,50-2,41 (m, 2H, parcialmente sobreposto com solvente). LC (Cond. 1): Tr= 2,16 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]* Ca1H2o8gNO,: 478,20; encontrado
"15 47819
: LiHMDS (9,2 mL de1,0 M/THF, 9,2 mmol) foi adicionado em go- tas durante 10 minutos a uma solução de THF (50 mL) fria (-78ºC) de (S)-1- benzil 4-metil 2-(9-fenil-9H-fiuoren-9-ilamino)succinato (3,907 g, 8,18 mmol) e agitado por -1 hora.
Mel (0,57 mL, 9,2 mmol) foi adicionado em gotas du- rante 8 minutos à mistura e a agitação foi continuada por 16,5 horas enquan- to permitindo que o banho de esfriamento descongelasse para temperatura ambiente.
Após extinguir com solução de NH,CI saturada (5 mL), a maior parte do componente orgânico foi removida in vacuo e o resíduo foi dividido entre CH2Clz (100 mL) e água (40 mL). A camada orgânica foi seca (Mg- SO;), filtrada e concentrada in vacuo e o material bruto resultante foi purifi- cado com uma BIOTAGE? (350 g de sílica-gel; FtOAc 25%/hexanos) para dar 3,65 g de misturas diastereoméricas 28/3S e 28/3R de 1-benzil 4-metil 3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-g-ilamino)succinato em razão de —-1,0:0,65 ('H RMN). A estereoquímica do isômero dominante não foi determinada nesta junçãoea mistura foi submetida à etapa seguinte sem separação.
Dados de 1H RMN parcial (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): diastereômero em quan- tidade maior, 3 4,39 (d, J = 12,3, 1H de CH), 3,33 (s, 3H, sobreposto com sinal de HO), 3,50 (d, J = 10,9, NH), 1,13 (d, J = 7,1, 3H); diastereômero em quantidade menor, 3 4,27 (d, J =12,3, 1H de CH>), 3,76 (d, J = 10,9, NH), 3,64 (s, 3H), 0,77 (d, J =7,0, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 2,19 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]* CaoH3oNO,4: 492,22; encontrado 492,15. Hidreto de di-isobutilalumínio (20,57 ml de 1,0 M em hexanos, 20,57 mmol) foi adicionado em gotas durante 10 minutos a uma solução de THF (120 mL) fria (-78ºC) de (2S)-1-benzil 4-metil 3-metil-2-(9-fenil-9H- fluoren-9-ilamino)succinato (3,37 g, 6,88 mmol) preparada acima e agitado a -78ºC por 20 horas. A mistura de reação foi removida do banho de esfria- mento e rapidamente despejada em H;PO4/H2O -1M (250 mL) com agitação ' e as misturas foram extraídas com éter (100 mL, 2x). A fase orgânica combi- - nada foi lavada com salmoura, seca (MgSO;), filtrada e concentrada in va- cuo. Uma rede de sílica-gel do material bruto foi preparada e submetida à cromatografia (EtOAc 25%/hexanos; eluição de gravidade) para dar 1,1 gq de “15 (28,38)-benzil 4-hidróxi-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato, : contaminado com álcool benzílico, como um óleo viscoso incolor e (28,3R)- benzil 4-hidróxi-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato contendo o estereoisômero (28,3R) como uma impureza. A última amostra foi novamen- te submetida às mesmas condições de purificação de cromatografia de colu- naparadar 750 mg de material purificado como uma espuma branca. [Nota: o isômero (28,38) elui antes do isômero (28,3R) sob a condição acima]. |- sômero (28S,3S): 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 7,81 (m, 2H), 7,39-7,08 (m, 16H), 4,67 (d, J = 12,3, 1H), 4,43 (d, J = 12,4, 1H), 4,21 (tap, J = 5,2, OH), 3,22 (d, J = 10,1, NH), 3,17 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), -2,5 (m, 1H, — sobreposto com o sinal de solvente), 1,58 (m, 1H), 0,88 (d, JU = 6,8, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 2,00 min; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]" Ca H3oNO;: 464,45; encontrado 464,22. Isômero (28,3R): *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz): 7,81 (d, J =7,5, 2H), 7,39-7,10 (m, 16H), 4,63 (d, J= 12,1, 1H), 4,50 (t ap, J = 4,9, 1H), 4,32 (d, J = 12,1, 1H), 3,59-3,53 (m, 2H), 3,23 (m, 1H), 2,44 (dd, J=9,0,8,3, 1H), 1,70 (m, 1H), 0,57 (d, J =6,8, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 1,92 min; LC/MS: Anál. Cal. para [M+H]* CaHaoNO;: 464,45; encontrado 464,52.
As avaliações estereoquímicas relativas dos produtos de redu- ção DIBAL foram feitas com base em estudos NOE conduzidos em deriva- dos lactona preparados a partir de cada isômero através do emprego do pro- tocolo que segue: LiHMDS (50 ul de 1,0 M/THF, 0,05 mmol) foi adicionado S auma soluçãode THF fria (gelo-água) (2,0 mL) de (2S,3S)-benzil 4-hidróxi- 3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato (62,7 mg, 0,135 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura similar por -2 horas.
O com- ponente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre CH2Cl2 (30 mL), água (20 mL) e solução de NH,CI aquoso saturado (1 ML). A camada orgânica foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo e o material bruto " resultante foi submetido a uma purificação BIOTAGES (40 g de sílica-gel; EtOAc 10-15%/hexanos) para dar (3S,4S8)-4-metil-3-(9-fenil-9H-fluoren-9- itamino)diidrofuran-2(3H)-ona como uma película incolor de sólido (28,1 mg). (2S,3R)-benzil 4-hidróxi-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato foi “15 elaborado similamente à (3S,AR)-4-metil-3-(9-fenil-9H-fluoren-9-itamino) . diidrofuran-2(3H)-ona.
Isômero (38 4S)-lactona: *H RMN (DMSO-de, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz), 7,83 (d, J = 7,5, 2H), 7,46-7,17 (m, 11H), 4,14 (tap, J=8,3, 1H), 3,60 (d, J = 5,8, NH), 345 (t ap, JU = 9,2, 1H), -2,47 (m, 1H, parcialmen- te sobreposto com sinal de solvente), 2,16 (m, 1H), 0,27 (d, J = 6,6, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 1,98 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+Na]" CaHaNNaO>: 378,15; encontrado 378,42. Isômero (38 ,4R)-lactona: 1H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz), 7,89 (d, J = 7,6, 1H), 7,85 (d, JU = 7,3, 1H), 7,46-7,20 (m, 11H), 3,95 (dd, J = 9,1, 4,8, 1H), 3,76 (d, J = 8,8, 1H), 2,96 (d, JU = 3,0, NH), 2,92 (dd, J = 6,8, 3, NCH), 1,55 (m, 1H), 0,97 (d, J = 7,0, 3H). LC (Cond. 1): Tr= 2,03 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+Na]* CosHo NNaO>:
378,15; encontrado 378,49. TBDMS-CI (48 mg, 0,312 mmol) seguido por imidazol (28,8 mg, 0,423 mmol) foi adicionado a uma solução de CH2Cl; (3 ml) de (28,3S)- benzil 4-hidróxi-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato (119,5 mg, 0,258 mmol) ea mistura foi agitada em condição ambiente por 14,25 horas.
A mistura de reação foi então diluída com CH2Cb (30 mL) e lavada com á- gua (15 mL) e a camada orgânica foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo.
O material bruto resultante foi purificado com um BIOTAGE? (40 q de sílica-gel; EtOAc 5%/hexanos) para dar (2S,3S)-benzil 4-(terc-butildimetilsili- lóxi)-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato, contaminado com im- purezas baseadas em TBDMS, como um óleo viscoso incolor (124,4 mg). (2S8,3R)-benzil 4-hidróxi-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato foi elaborado similarmente a (28S,3R)-benzil 4-(ferc-butildimetilsililóxi)-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato.
Isômero de (2S,3S)-silil éter: *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz), 7,82 (d, J = 4,1, 1H), 7,80 (d, J = 4,0, 1H), 7,38-7,07 (m, 16 H), 4,70 (d, J = 12,4, 1H), 4,42 (d, J = 12,3, 1H), 3,28-3,19(m, 3H), 2,56 (dd, J=10,1,5,5, 1H), 1,61 (m, 1H), 0,90 (d, J =6,8, ' 3H), 0,70 (s, 9H), -0,13 (s, 3H), -D,16 (s, 3H). LC (Cond. 1, em que o tempo de atividade foi prolongado para 4 minutos): Tr= 3,26 min; LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]" C37H4,NOsSi: 578,31; encontrado 578,40. Isômero de (2S8,3R)- sili! éter: *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz), 7,82 (d, J = 3,0, 1H), “15 7,80(d/J=3/1,1H),7,39-7,10 (m, 16H), 4,66 (d, J = 12,4, 1H), 4,39 (d, J = . 12,4, 1H), 3,61 (dd, J = 9,9, 5,8, 1H), 3,45 (d, J = 9,5, 1H), 3,41 (dd, JU = 10, 6,2, 1H), 2,55 (dd, J = 9,5, 7,3, 1H), 1,74 (m, 1H), 0,77 (s, 9H), 0,61 (d J =
7,1, 3H), -0,06 (s, 3H), -0,08 (s, 3H). Um balão de hidrogênio foi posto em uma mistura de (28,3S)- benzil 4-(ferc-butildimetilsililóxi)-3-metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-g-ilamino) buta- noato (836 mg, 1,447 mmol) e Pd/C 10% (213 mg) em EtOAc (16 mL) e à mistura foi agitada em temperatura ambiente por -21 horas, em que o balão foi recarregado com H> conforme necessário.
À mistura de reação foi diluída com CHzCL; e filtrada através de uma almofada de terra diatomácea (CELI- TEP-545) e a almofada foi lavada com EtOAc (200 mL), EtOCAC/MeOH (mistura 1:1, 200 ml) e MeOH (750 mL). A fase orgânica combinada foi concentrada e a rede de sílica-gel foi preparada a partir do material bruto resultante e subme- tida a uma cromatografia rápida (mistura 8:2:1 de EtOAc/i-PrOH/HyO) para dar ácido (28,38)-2-amino-4-(terc-butildimetilsilitóxi)-3-metilbutanoico como um sólido fofo branco (325 mg). (2S8,3R)-benzil 4-(ferc-butildimetilsililóxi)-3- metil-2-(9-fenil-9H-fluoren-g-ilamino)butanoato foi similarmente elaborado para ácido (28,3R)-2-amino-4-(terc-butildimetilsililóxi)-3-metilbutanoico.
Isô-
mero de (2S,38S)-aminoácido: 1H RMN (metanol-d,, 5 = 3,29 ppm, 400 MHz), 3,76 (dd, JU = 10,5, 5,2, 1H), 3,73 (d, J =3,0, 1H), 3,67 (dd, J = 10,5, 7,0, 1H), 2,37 (m, 1H), 0,97 (d, J = 7,0, 3H), 0,92 (s, 9H), 0,10 (s, 68H). LC/MS: Anál.
Cal. para [M+H]* Ci Ha6NO3Si: 248,17; encontrado 248,44. Isômero de (28,3R)amincácido: *H RMN (metanol-da, 5 = 3,29 ppm, 400 MHz), 3,76- 3,75 (m, 2H), 3,60 (d, J = 4,1, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,06 (d, J = 7,3, 3H), 0,91 (s, 9H), 0,09 (s, 8H). Anál.
Cal. para [M+H]* Cy HagNO;3Si: 248,17; encontra-
do 248,44. Água (1 mL) e NaOH (0,18 mL de 1,0M/H2O, 0,18 mmol) foram adicionados a uma mistura de ácido (28,38)-2-amino-4-(terc-butildimetil- ' sililóxi)-3-metilbutanoico (41,9 mg, 0,169 mmol) e NaCO;z (11,9 ma, 0,112 mmol) e sonificados por cerca de 1 minuto para realizar dissolução de rea- gentes.
A mistura foi então esfriada com um banho de água gelada, cloro- formiato de metila (0,02 mL, 0,259 mmol) foi adicionado durante 30 segun- “ 15 dose agitação vigorosa foi continuada em temperatura similar por 40 minu- : tos e então em temperatura ambiente por 2,7 horas.
A mistura de reação foi diluída com água (5 mL), esfriada com banho de água gelada e tratada em gotas com solução aquosa de HCI 1,0 N (-0,23 mL). A mistura foi diluída mais com água (10 mL) e extraída com CH2Cl; (15 mL, 2x). A fase orgânica combinada foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo para dar Cap- 80a como um sólido esbranquiçado.
Ácido (28,3R)-2-amino-4-(ferc-butildi- metilsililóxi)-3-metilbutanoico foi similarmente elaborado para Cap-80b.
Cap- 80a: *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 400 MHz), 12,57 (s amplo, 1H), 7,64 (d, J = 8,3, 0,3H), 7,19 (d, J = 8,8, 0,7H), 4,44 (dd, J = 8,1, 4,6, 0,3H), 4,23 (dd, J=8,7,4,4,0,7H),3,56/3,53 (dois singletos, 3H), 3,48-3,40 (m, 2H), 2,22-2,10 (m, 1H), 0,85 (s, 9H), -0,84 (d, 0,9H, sobreposto com sinal de t- Bu), 0,79 (d, J = 7, 2,1H), 0,02/0,01/0,00 (três singletos sobrepostos, 6H). LC/MS: Anál.
Cal. para [M+Na]* Ci3H2;NNaOsSi: 328,16; encontrado 328,46. Cap-80b: “H RMN (CDCls, 5 = 7,24 ppm, 400 MHz), 6,00 (d amplo, J = 6,8, 1H), 4,36 (dd, J=7,1,31, 1H), 3,87 (dd, J = 10,5, 3,0, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,58 (dd, J = 10,6, 4,8, 1H), 2,35 (m, 1H), 1,03 (d, J = 7,1, 3H), 0,90 (s, 9H), 0,08 (s, 6H). LC/MS: Anál.
Cal. para [M+Na]* Ci3H2;NNaOsSi: 328,16; en-
contrado 328,53. Os produtos brutos foram utilizados sem purificação adi- cional. Cap-81
O
H ond on o” Preparado de acordo com o protocolo descrito por Falb e outros, Synthetic Communications, 23:2839 (1993). Cap-82 até Cap-85 : Cap-82 até Cap-85 foram sintetizados a partir de materiais de partida apropriados de acordo com os procedimentos descritos para Cap-51 ou Cap-13. As amostras exibiram perfis espectrais similares àqueles dos seus estereoisômeros (isto é, Cap4, Cap-13, Cap-51 e Cap-52, respectiva- .- 10 mente). o K o o) o H o à º - Pá Y ou Anon Z Y oH PN o: o Ph O o Cap-82 Cap-83 Cap-84 Cap-85 Cap-86 MeO,CHN
É ome OH Ácido (28,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoico A uma mistura de O-metil-L-treonina (3,0 g, 22,55 mmol), NAOH (0,902 g, 22,55 mmol) em HO (15 mL) foi adicionado CICO»Me (1,74 mL, 22,55 mmol) em gotas a 0º C. A mistura foi deixada agitar por 12 horas e —acidificada para pH 1 usando HCI IN. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e (2x250 mL) e MeOH 10% em CHzCl,; (250 mL) e as fases orgânicas com- binadas foram concentradas in vacuo para dar um óleo incolor (4,18 g, 97%) que era de pureza suficiente para uso em etapas subsequentes. *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 4,19 (s, 1H), 3,92-3,97 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 1,417 (d, J =
7,7 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para C;H,.3NOs: 191; encontrado: 190 (M-Hy. Cap-87 MeO2CHN o nor A uma mistura de L-homoserina (2,0 g, 9,78 mmol), Na2SO;3 (2,08 g, 19,59 mmol) em HO (15 mL) foi adicionado CICOzMe (0,76 mL, 9,79 mmol) em gotas a 0º C. A mistura foi deixada agitar por 48 horas e aci- dificada para pH 1 usando HCI IN. A fase aquosa foi extraída com FtOAc (2x250 mL) e as fases orgânicas combinadas foram concentradas in vacuo - para dar um sólido incolor (0,719 g, 28%) que era de pureza suficiente para uso em etapas subsequentes. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 4,23 (dd, J = 4,5, 9,1 Hz, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,43-3,49 (m, 2H), 2,08 - 2,14 (m, 1H), 1,82 - 1,89 (m, 1H) LCMS: Anál. Cal. para C;H3NOs: 191; encontrado: 192 (M+H)*. Cap-88 E, NH o
E Uma mistura de L-valina (1,0 g, 8,54 mmol), 3-bromopiridina (1,8 mL, 18,7 mmol), KCO; (2,45 g, 17,7 mmol) e Cul (169 mg, 0,887 mmol) em DMSO (10 mL) foi aquecida a 100ºC por 12 horas. A mistura de reação foi esfriada para temperatura ambiente, derramada em H2O (cerca de 150 mL) elavadacom FtOAc (x2). As camadas orgânicas foram extraídas com uma quantidade pequena de H,O e as fases aquosas combinadas foram acidifi- cadas para cerca de pH 2 com HCI 6N. O volume foi reduzido para cerca de um terço e 20 g de resina de troca de cátion (Strata) foram adicionados. À pasta fluida foi deixada descansar por 20 minutos e carregada em uma al- —mofada de resina de troca de cátion (Strata) (cerca de 25 g). À almofada foi lavada com HzO (200 mL), MeOH (200 mL) e então NH3 (38M em MeOH, 2x200 mL). As frações apropriadas foram concentradas in vacuo e o resíduo (cerca de 1,1 g) foi dissolvido em HO, congelado e liofilizado. O composto do título foi obtido como uma espuma (1,02 g, 62%). 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 8,00 (s amplo, 1H), 7,68 - 7,71 (m, 1H), 7,01 (s, amplo, 1H), 6,88 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,75 (s, amplo, 1H), 3,54 (s, 1H), 2,04 - 2,06 (m, 1H), 0,95 (d, JU =6,0 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,6 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para —CioHaN20>2: 194; encontrado: 195 (M+H)”. Cap-89
O N=/"NH
E Uma mistura de L-valina (1,0 g, 8,54 mmol), S-bromopiridina (4,03 g, 17,0 mmol), K.COs (2,40 g, 17,4 mmol) e Cul (178 mg, 0,94 mmol) em DMSO (10 mL) foi aquecida a 100ºC por 12 horas. A mistura de reação foi esfriada para temperatura ambiente, derramada em H2O (cerca de 150 190 mL) e lavada com EtOAc (x2). As camadas orgânicas foram extraídas com - uma pequena quantidade de HO e as fases aquosas combinadas foram acidificadas para pH de cerca de 2 com HCI 6N. O volume foi reduzido para cerca de um terço e 20 g de resina de troca de cátion (Strata) foram adicio- nados. A pasta fluida foi deixada descansar por 20 minutos e carregada em uma almofada de resina de troca de cátion (Strata) (cerca de 25 g). A almo- fada foi lavada com H;O (200 mL), MeOH (200 mL) e então NH3 (38M em MeOH, 2x200 mL). As frações apropriadas foram concentradas in vacuo e o resíduo (cerca de 1,1 g) foi dissolvido em H2O, congelado e liofilizado. O composto do título foi obtido como uma espuma (1,02 g, 62%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) mostrou que a mistura continha valina e a pureza não poderia ser estimada. O material foi usado como é em reações subsequentes. LCMS: Anál. Cal. para CaH13N302: 195; encontrado: 196 (M+H)”. Cap-290
CO H Cap-90 foi preparado de acordo com o método descrito para a preparação de Cap-1. O material bruto foi usado como é nas etapas subse- quentes. LCMS: Anál. Cal. para Ch H;5NO>z: 193; encontrado: 192 (M-H). Cap-91 até Cap-116 As Caps que seguem foram preparadas de acordo com o méto- do usado para preparação de Cap-51 a menos que de outro modo mencio- nado: Cap-91 NHCO,Me LCMS: Anál. Cal. para ChHNO,: e 223; encontrado: 222 (M-H). - Cap-g2 NHCO,Me LCMS: Anál. Cal. para Cy1H;NO,: gm 1223; encontrado: 222 (M-HY. Cap-93 | LCMS: Anát. Cal. para CioH12N2O,: xo o 1224; encontrado: 225 (M+H)*. . HN, Ao - Fe |
WN Cap-g94 o LCOMS: Anál. Cal. para CsaHyNs3O:: ET on 213; encontrado: 214 (M+H)*. N HN. O.
H PY o Cap-95 o LCMS: Anál. Cal. para CiHy,NO,: Soto o 251; encontrado: 250 (M-H). DAS: Cap-96 o LCMS: Anál. Cal. para CiHIsNO,: St o 237; encontrado: 236 (M-H). E"
Es OE es OO Cap-97 o LCMS: Anál. Cal, para CoH;sNO;: Son ? 201; encontrado: 200 (M-Hy. O. Cap-98 o LCMS: Anál. Cal. para CoHsNO,: So Oo 201; encontrado: 202 (M+H)”. Cf Cap-99 o 7H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 3,88 - seta 3,94 (m, 1H), 3,60, 3,61 (s, 3H), . 2,80 (m, 1H), 2,20 (m 1H), 1,82 - 1,84 (m, 3H), 1,45-1,71 (m, 2H).
COH Cap-99a o *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 3,88 - So ne 3,94 (m, 1H), 3,80, 3,61 (s, 3H), ' z 2,80 (m, 1H), 2,20 (m 1H), 1,82 - O 1,94 (m, 3H), 1,45 - 1,71 (m, 2H). Ú “com Cap-100 o LCOMS: Anál. Cal. para C. HU, NOF: Soa o 255; encontrado: 256 (M+H)*.
OH F. Cap-101 o LCMS: Anál. Cal. para C1,HsNO,: So NH 223; encontrado: 222 (M-H). S “COsH Cap-102 o LCMS: Anál. Cal. para CuHNO:: So NH 223; encontrado: 222 (M-H) ' “coH fo TO Eme TE A Cap-103 o LCMS: Arál. Cal. para CioHiaN2O,: SA 1224: encontrado: 225 (M+H)”. Oo NH
COH
FN A 1 Cap-104 7H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 3,60 HN CoH oa (s, SH), 3,50 - 3,53 (m, 1H), 2,668 - o 2,69 e 2,44 - 2,49 (m, 1H), 1,91 - / 2,01 (m, 2H), 1,62 - 1,74 (m, 4H), 1,51 - 1,62 (m, 2H). Cap-105 Or ?H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 3,60 Hon COH : - o (s, 3H), 3,33 - 3,35 (m, 1H, parcial-| o mente obscurecido por solvente), / 2,37 - 241 e 2,16 - 2,23 (m, 1H), 1,94 - 2,01 (m, 4H), 1,43 - 1,53 (m, 2H), 1,17 - 1,29 (m, 2H). 7 Cap-106 AN con ?H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 3,16 —/ ? (q, J = 7,3 Hz, 4H), 2,38 - 241 (m, - Preparado a partir de ácido cis-4- 1H), 2,28 - 2,31 (m, 2H), 1,79 - 1,89 aminociclo-hexano — carboxílico —e/(7 2H), 1,74 (ap, ddd J = 3,5, 12,5, acetaldeido empregando um proce-| 15.9 Hz, 2H), 1,46 (dt ap, J = 4,0, dimento similar descrito para a sin- 12,9 Hz, 2H), 1,26 (t J =7,3 Hz, 6H) tese de Cap-2. O sal de HCI bruto foi passado por MCX (lavagem com MeOH/H;O/CH2Cl; eluição com NHyMeOH 2 N) para dar um óleo que foi dissolvido em CH;CN/H;O e liofiizado para dar um sólido Cap-107 o LCMS: Anál. Cal. para CgHioN2O,8S: QTO os 230; encontrado: 231 (M+H)*. Ss ASSES o Cap-108 Oo LCMS: Anál. Cal. para CisH17N:O,: . - + FTA or 303; encontrado: 304 (M+H)*.
N ENO Ph o
Cap-109 o LCMS: Anál. Cal. para CioH12N2O;: So NH 224; encontrado: 225 (M+H)”. : CcOoH 7 e PS
SW N Cap-110 o LCMS: Anál. Cal. para CioHi2aN2O,: So NH 224: encontrado: 225 (M+H)*. : COoH o PS “N ' Cap-111 o LCMS: Anál. Cal. para Ci2H,.sNO;gP: So NH 333; encontrado: 334 (M+H)"*. ó COH a ' meo, Cap-112 o LCMS: Anál. Cal. para C;3Hy, NO, So NH 262; encontrado: 263 (M+H)”. : COH ae
NH Cap-113 [e] LCMS: Anál. Cal. para Ci3H,NOs: So No 329; encontrado: 330 (M+H)*.
EE OBn cap-114 CO Me 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 4,82 -
TE EE CO H 3,77 (s, 3H), 2,56 (s, amplo, 2H)
[car | Estrutura — | [ES NS ] Cap-115 Neco 'H RMN (400 MHz, CDCLk) 5 5,13 NHCO,Me (s, amplo, 1H), 4,13 (s, amplo, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,61 (d, J = 5,0 Hz, 2H), 1,28 (d, 1 =9,1 Hz, 3H). Cap-116 'H RMN (400 MHz, CDC) 5 5,10 CO2H (d, y = 8,6 Hz, 1H), 3,74 - 3,83 (m, NHCO,Me 1H), 3,69 (s, 3H), 2,54 - 2,61 (m, 2H), 1,88 (sept, J = 7,0 Hz, 1H), 0,95 (d, JU =7,0 Hz, 6H). Cap-117 até Cap-123 Para preparação de Cap-117 até Cap-123 os Boc aminoácidos ' foram obtidos de fontes comerciais e foram desprotegidos através de trata- mento com TFA 25% em CH2Cb2. Após a reação terminada conforme julgado através de LCMS, os solventes foram removidos in vacuo e o sal de TFA correspondente do aminoácido foi carbamoilado com cloroformiato de metila « de acordo com o procedimento descrito para Cap-51. " Cap-117 & LCMS: Anál. Cal. para CiaH,sNO,: 237; TOM O encontrado: 238 (M+H)*. E í Cap-118 ss LCMS: Anál. Cal. para CioH3NO,S: DON O 243; encontrado: 244 (M+H)”. oH
OS Cap-119 e LCMS: Anál. Cal. para CioHsNO,S: MOUNI OO 243; encontrado: 244 (M+H)*.
OH
OS Cap-120 s LCMS: Anál. Cal. para CioH3NO,S: MONK O 243; encontrado: 244 (M+H)*.
E * Y Ss ear ese EE o Cap-121 o 'H RMN (400 MHz, CDC) 5 4,06 - Sou 14,16 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,43 (s, 1H), Ã 2,82 e 2,66 (s amplo, 1H), 1,86 - 2,10 Cro (m, 3H), 1,64 - 1,76 (m, 2H), 1,44 - 1,53 (m, 1H). Cap-122 o O perfil de *H RMN é similar àquele de Sou seu estereoisômero, Cap-121,
Õ COH Cap-123 oa d LCMS: Anál. Cal. para Cox HosN3Os: E Oi? 1474; encontrado: 475 (M+H)”*. o ou Cap-124 Oo
N do o OH - O sal de cloridrato de ferc-butil éster de L-treonina foi carbamoi- lado de acordo com o procedimento para Cap-51. A mistura de reação bruta foi acidificada com HCI 1N para pH —-1 e a mistura foi extraída com EtOAc (2x50 mL). As fases orgânicas combinadas foram concentradas in vacuo para dar um óleo incolor que solidificou quando sedimentou. A camada a- quosa foi concentrada in vacuo e a mistura resultante de produto e sais inor- gânicos foi triturada com EtOAc-CH2CI2-MeOH (1:1:0,1) e então a fase orgã- nica foi concentrada in vacuo para dar um óleo incolor que foi mostrado atra- vés de LCMS ser o produto desejado. Ambos os grupos foram combinados para dar 0,52 g de um sólido. *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 4,60 (m, 1H), 4,04 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 1,49 (d, J = 6,3 Hz, 3H). LCMS: Anál. Cal. para CsH;NO4: 145; encontrado: 146 (M+H)*. Cap-125 /
DAL BocHN oH
À uma suspensão de Pd(OH),, (20%, 100 mg), formaldeído a- quoso (37% em peso, 4 ml), ácido acético, (0,5 mL) em metanol (15 mL) foi adicionado ácido (S)4-amino-2-(ferc-butoxicarbonilamino)butanoico (1 q, 4,48 mmol). A reação foi purgada várias vezes com hidrogênio e foi agitada danoiteparaodiacom um balão de hidrogênio em temperatura ambiente.
À mistura de reação foi filtrada em uma almofada de terra diatomácea (CELI- TE) e o componente volátil foi removido in vacuo.
O material bruto resultan- te foi usado como é para a etapa seguinte.
LC/MS: Anál.
Cal. para C11H22N2O04: 246; encontrado: 247 (M+H)”. Cap-126 i > CICO Me, NaHCO, DD HANTCOH — THF/H30/0º0 — MeozCHN “COaH cjo5 cap-126 o Este procedimento é uma modificação daquele usado para pre- - parar Cap-51. A uma suspensão de 3-metil-L-histidina (0,80 g, 4,70 mmol) em THF (10 mL) e HO (10 mL) a 0º C foi adicionado NaHCO; (0,88 dg, 10,5 mmol). À mistura resultante foi tratada com CICOMe (0,40 mL, 5,20 mmol) e a mistura deixada agitar a 0º C.
Após agitar por cerca de 2 horas, LCMS não mostrou nenhum material de partida restante.
A reação foi acidificada para pH 2 com HCI 6N.
Os solventes foram removidos in vacuo e o resíduo foi suspenso em 20 mL de MeOH 20% em CH2Ch2. A mistura foi filtrada e concentrada para dar uma espuma amarelo-claro (1,21 g). LCMS e *H RMN mostraram o material ser uma mistura 9:1 do metil éster e o produto desejado.
Este mate- rial foi absorvido em THF (10 mL) e HO (10 mL), esfriado para 0º C e LIOH (249,1 mg, 10,4 mmol) foi adicionado.
Após agitar por cerca de 1 hora LCMS não mostrou nenhum éster restante.
Desta maneira a mistura foi acidificada com HCI 6N e os solventes removidos in vacuo.
LOMS e 'H RMN confirma- rama ausência do éster.
O composto do título foi obtido como seu sal de HCI contaminado com sais inorgânicos (1,91 g, > 100%). O composto foi usado como é em etapas subsequentes sem purificação adicional. 1H RMN i 99/563 (400 MHz, CD;OD) à 8,84, (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,52 (dd, JU = 5,0, 9,1 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,35 (dd, J = 4,5, 15,6 Hz, 1H, parcialmente obscurecido pelo solvente), 3,12 (dd, J = 9,0, 15,8 Hz, 1H). LCMS: Anál. Cal. para CaH13N3O,4: 227,09; encontrado: 228,09 (M+H)*. Cap-127 MeN MeN DS CICO,Me, NaHCO;s Da HAN “COH THF/H,0/0ºC MeO,CHN "COH ci26 cap-127 SS Cap-127 foi preparado de acordo com o método para Cap-126 acima começando com ácido (S)-2-amino-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-propa- noico (1,11 9, 86,56 mmol), NaHCO;z (1,21 g, 14,4 mmol) e CICOxMe (0,56 mL, 7,28 mmol). O composto do título foi obtido como seu sal de HCI (1,79 g, , >100%) contaminado com sais inorgânicos. LCMS e 1H RMN mostraram a presença de cerca de 5% de éster de metila. A mistura bruta foi usada como ' é sem purificação adicional. *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 8,90 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,48 (dd, J = 5,0, 8,8 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,35 (m, 1H), 3,08 (m, 1H); LCMS: Anál. Cal. para CaH,3N304: 227,09; encontrado: 228 (M+H)*. Preparação de Cap-128
PRA W SATAN 4 BnBr/CusOrSH£o o BocHN “CO, H dC BocHN CO7Bn NaNs/ DME, HO — BocHN” “CO,2Bn cj-27a cja7b 65ºC/12h Gj28
PRA 1) TFA/ CH,CL W À a/PAO À 3) ciGo,ve/NaHco, MeOH THF-H5O MeO,;CHN “COBn MeO23CHN “CO,H cj-29 cap-128 Etapa 1. Preparação de (S)-benzil 2-(ferc-butoxicarbonilamino) pent-4-inoato (cj-27b).
BocHN" “CO,Bn cjo7h A uma solução de cj-27a (1,01 g, 4,74 mmol), DMAP (58 mg, 0,475 mmol) e iPrºNET (1,7 mL, 9,8 mmol) em CH3Cl; (100 mL) a 0º C foi adicionado Cbz-Cl (0,68 mL, 4,83 mmol). A solução foi deixada agitar por 4 horas a 0º C, lavada (KHSO, 1N, salmoura), seca (Na2SOy), filtrada e con- centrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de colu- na rápida (TLC 6:1 hexEtOAc) para dar o composto do título (1,30 9, 91%) : como um óleo incolor. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,35 (s, 5H), 5,35 (d, amplo, J = 8,1 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 5,47 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 4,48 - 4,53 (m, 1H), 2,68 - 2,81 (m, 2H), 2,00 (t, J = 2,5 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H). LCMS: Anál. Cal. para Ci7H2 NO,: 303; encontrado: 304 (M+H)*. a Etapa 2. Preparação de (S)-benzil 3-(1-benzil-1H-1,2,3-triazol-4- iN)-2-(terc-butoxicarbonilamino)propanoato (cj-28). - Ph
N
N BocHN' "“CO,Bn cj-28 A uma mistura de (S)-benzil 2-(terc-butoxicarbonilamino)pent-4- inoato (0,50 g, 1,85 mmol), ascorbato de sódio (0,036 g, 0,18 mmol), CuSO,- 5H20 (0,022 g, 0,09 mmol) e NaN; (0,13 g, 2,1 mmol) em DMF-H5O (5 mL; 4:1) em temperatura ambiente foi adicionado BnBr (0,24 mL, 2,02 mmol) e a mistura foi aquecida para 65ºC. Após 5 horas LCMS indicou conversão bai- xa. Uma porção adicional de NaN; (100 mg) foi adicionada e aquecimento foi continuado por 12 horas. A reação foi derramada em EtOAc e H,; e agitada. As camadas foram separadas e a camada aquosa extraída 3x com EtOAc e as fases orgânicas combinadas lavadas (H5O x3, salmoura), secas (Na>SO;), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado através de flash (BIOTAGE?, 40+M 0-5% MeOH em CH;Cb; TLC 3% MeOH em CH>Cl2) para dar um óleo amarelo-claro que solidificou enquanto parado (748,3 mg,
104%). A NRM estava de acordo com o produto desejado, mas sugere a presença de DMF. O material foi usado como é sem purificação adicional. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 7,84 (s, 1H), 7,27 - 7,32 (m, 10H), 5,54 (s, 2H), 5,07 (s, 2H), 4,25 (m, 1H), 3,16 (dd, J = 1,0, 5,3 Hz, 1H), 3,06 (dd, JU = 5,3, 14,7 Hz), 2,96(dd,J=9,1,14,7 Hz, 1H), 1,31 (s, 9H). LCMS: Anál. Cal. para CraH28N4O4: 436; encontrado: 437 (M+H)*. Etapa 3. Preparação de (S)-benzil 3-(1-benzil-1H-1,2,3-triazol-4- i)-2-(metoxicarbonilamino)propanoato (cj-29).
PRA
N e ' N MeO3CHN “COBn cr29 A uma solução de (S)-benzil 3-(1-benzil-1H-1,2,3-triazol-4-11)-2- -» 10 (terc-butoxicarbonilamino)propanoato (0,52 g, 1,15 mmol) em CHz2Cl> foi adi- cionado TFA (4 mL). A mistura foi deixada agitar em temperatura ambiente | por 2 horas. A mistura foi concentrada in vacuo para dar um óleo incolor que solidificou enquanto parado. Este material foi dissolvido em THF-H2O e es- friado para 0º C. NaHCO; sólido (0,25 g, 3,00 mmol) foi adicionado seguido por CICOxMe (0,25 mL, 3,25 mmoi). Após agitar por 1,5 hora a mistura foi acidificada para pH -2 com HCI 6N e então despejada em H2O-EtOAc. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída 2x com EtOAc. As ca- madas orgânicas combinadas foram lavadas (HO, salmoura), secas (Na2SO;), filtradas e concentradas in vacuo para dar um óleo incolor (505,8 mg, 111%, RMN sugeriu a presença de uma impureza não-identificada) que solidificou enquanto ficando na bomba. O material foi usado como é sem purificação adicional. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 7,87 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,27 - 7,32 (m, 10H), 5,54 (s, 2H), 5,10 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 5,06 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 4,32 - 4,37 (m, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,09 (dd, JU = 5,6, 14,7 Hz, 1H), 2,98 (dd, J = 9,6, 14,7 Hz, 1H). LCMS: Anál. Cal. para C21H22N4O,4: 394; encontrado: 395 (M+H)*. Etapa 4. Preparação de ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-
(1H-1,2,3-triazol-4-il)propanoico (Cap-128).
HN NS
N MeOsCHN" “COsH Cap-128 (S)-Benzil — 3-(1-benzil-1H-1,2,3-triazol-4-11)-2-(metoxicarbonila- mino)propanoato (502 mg, 1,11 mmol) foi hidrogenado na presença de Pd-C (82 mg) em MeOH (5 mL) em pressão atmosférica por 12 horas. A mistura foifilirada em terra diatomácea (CELITE?) e concentrada in vacuo. Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-(1H-1,2,3-triazol-4-il)propanoico foi obtido co- mo uma goma incolor (266 mg, 111%) que foi contaminada com cerca de 10% de éster de metila. O material foi usado como é sem purificação adicio- nal. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 12,78 (s, amplo, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,50 (d/J=80Hz, 1H), 4,19- 4,24 (m, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,12 (dd, J = 4,8 Hz, 14,9 Hz, 1H), 2,96 (dd, J = 9,9, 15,0 Hz, 1H). LCMS: Anál. Cal. para C7H1oN4O4: 214; encontrado: 215 (M+H)*. Preparação de Cap-129 N= N= N= RA ro O 1) Hz PA-C/ MeOH É CbzHN O CH;CN/50ºC cen co, 2) CICO,Me MeOsCHN “COH cj-30 cjs1 NaHCO; / THF-H;O cap-129 Etapa 1. Preparação de ácido (S)-2-(benziloxicarbonilamino)-3- (1H-pirazol-1-il)propanoico (cj-31). N=
PP CbzHN “COH cr31 Uma suspensão de (S)-benzil 2-oxooxetan-3-ilcarbamato (0,67 9, 3,03 mmol) e pirazol (0,22 g, 3,29 mmol) em CH;CN (12 mL) foi aquecida a 50ºC por 24 horas. A mistura foi esfriada para temperatura ambiente e o sólido filtrado para dar ácido (S)-2-(benziloxicarbonilamino)-3-(1H-pirazol-1-
' 104/563 4,41 (m, 2H), 3,48 (s, 3H). LCMS: Anál. Cal. para CgaH1N3O,: 213; encontra- do: 214 (M+H)*. Cap-130
ACHNVCOH Cap-130 foi preparado através da acilação de (R)-fenilglicina comercialmente disponível análogo ao procedimento dado em: Calmes, M. e outros, Tetrahedron, 43(10):2285 (1987). ' Cap-131 o a o b AA Ago EA = TO NH; ANO PY A Her ON AN . Etapa a: Cloreto de dimetilcarbamoíla (0,92 mL, 10 mmol) foi a- dicionado lentamente a uma solução de cloridrato de (S)-benzil 2-amino-3- metilbutanoato (2,44 g; 10 mmol) e base de Hunig (3,67 mL, 21 mmol) em THF (50 mL). A suspensão branca resultante foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia (18 horas) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e água. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca (MgSO,), filtrada e concentrada sob pressão re- duzida. O óleo amarelo resultante foi purificado através de cromatografia rápida, eluindo com acetato de etila:hexanos (1:1). As frações coletadas fo- ram concentradas sob vácuo provendo 2,35 g (85%) de óleo transparente. 1H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 0,84 (d, J=6,95 Hz, 3H), 0,89 (d, J=6,59 Hz, 3H), 1,98-2,15 (m, 1H), 2,80 (s, 6H), 5,01-5,09 (m, J=12,44 Hz, 1H), 5,13 (d, J=12,44 Hz, 1H), 6,22 (d, J=8,05 Hz, 1H), 7,26-7,42 (m, 5H). LC (Cond. 1): Tr= 1,76 min; MS: Anál. Calc. para [M+H]* CisHo2N2O3: 279,17; encontrado 279,03. Etapa b: A uma solução de MeOH (50 mL) do intermediário pre- parado acima (2,35 g; 8,45 mmol) foi adicionado Pd/C (10%; 200 mg) e a i 105/563 suspensão preta resultante recebeu fluxo de N; (3x) e posta sob 1 atm de Hz.
A mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia e fil- trada em um filtro de microfibra para remover o catalisador.
A solução trans- parente resultante foi então concentrada sob pressão reduzida para obter 1,43g(89%) de Cap-131 como uma espuma branca, que foi usada sem pu- rificação adicional. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 0,87 (d, J=4,27 Hz, 3H), 0,88 (d, J=3,97 Hz, 3H), 1,93-2,11 (m, 1H), 2,80 (s, 6H), 3,90 (dd, J=8,39, 6,87 Hz, 1H), 5,93 (d, J=8,54 Hz, 1H), 12,36 (s, 1H). LC (Cond. 1): Tr= 0,33 min; MS: Anál.
Calc. para [M+H]" CaH17N2O03: 189,12; encontrado 189,04. S Cap-132 o OH . SO BR ÃO da o HN o He! AN
Cap-132 foi preparado a partir de cloridrato de (S)-benzil 2- aminopropanoato de acordo com o método descrito para Cap-131. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 1,27 (d, J=7,32 Hz, 3H), 2,80 (s, 6H), 4,06 (at, 1H), 6,36 (d, J=7,32 Hz, 1H), 12,27 (s, 1H). LC (Cond. 1): Tr= 0,45 min; MS:
Anál.
Calc. para [IM+H]* CgHi3N2O3: 161,08; encontrado 161,00. Cap-133 o oH AAX — Ao NH) ANO Hc! dr,
Cap-133 foi preparado a partir de cloridrato de (S)-ferc-butil 2- amino-3-metilbutanoato e 2-fluoretil cloroformiato de acordo com o método descrito para Cap-47. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 0,87 (t, J = 6,71 Hz, 6H), 1,987-2,10 (m, 1H), 3,83 (dd, J=8,39, 5,95 Hz, 1H), 4,14-4,18 (m,
1H),4,204,25 (m, 1H), 4,50-4,54 (m, 1H), 4,59-4,65 (m, 1H), 7,51 (d J = 8,54 Hz, 1H), 12,54 (s, 1H).
' 106/563 Cap-134 o OH OH — o NH> ANO
O Cap-134 foi preparado a partir de (S)-dietil alanina e cloroformia- to de metila de acordo com o método descrito para Cap-51. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) ô ppm 0,72-0,89 (m, 6H), 1,15-1,38 (m, 4H), 1,54-1,66 (m, 1H), 3,46-3,63 (m, 3H), 4,09 (dd, J = 8,85, 5,19 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,85 Hr, 1H) 12,55 (s, 1H). LC (Cond. 2): Tr= 0,66 min; LC/MS: Anál. Calc. para : [M+H]* CoHigNO+: 204,12; encontrado 204,02. Cap-135 - o F
AI
ANO Uma solução de ácido D-2-amino-4-(fluorfenil)acético (338 ma, 2,00 mmol), HCI 1N em dietiléter (2,0 mL, 2,0 mmol!) e formalina (37%, 1 mL) em metanol (5 mL) foi submetida à hidrogenação com balão em paládio so- bre carbono 10% (60 mg) por 16 horas a 25ºC. A mistura foi então filtrada em CELITE? para dar o sal de HCI para Cap-135 como uma espuma branca (316 mg, 80%). ?H RMN (300 MHz, MeOH-d,) 5 7,59 (dd, J = 8,80, 5,10 Hz, 2H), 7,29 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,17 (s, 1H), 3,05 (s amplo v, 3H), 2,63 (s amplo v, 3H); Tr = 0,19 min (Cond.-MS-W5); índice de homogeneidade 95%; L- RMS: Anál. Calc. para [M+H]" CioH13FNO»: 198,09; encontrado: 198,10. Cap-136 N o
ES or A uma suspensão fria (-50ºC) de 1-benzil-1TH-imidazol (1,58 9,
10,0 mmol) em éter de dietila anidro (50 mL) sob nitrogênio foi adicionado n- butil lítio (2,5 M em hexanos, 4,0 mL, 10,0 mmol) em gotas. Após ser agitada por 20 minutos a -50ºC, dióxido de carbono seco (passado por Drierita) foi borbulhado na mistura de reação por 10 minutos antes de ser deixado aque- cerpara25SºC, O precipitado pesado que se formou quando da adição de dióxido de carbono à mistura de reação foi filtrado para dar um sólido bran- co, higroscópico, que foi absorvido em água (7 mL), acidificado para pH = 3, esfriado e induzido a cristalizar com raspagem. Filtragem deste precipitado deu um sólido branco que foi suspenso em metanol, tratado com HCI 1N/éter de dietila (4 mL) e concentrado in vacuo. Liofilização do resíduo a partir de água (5 mL) deu o sal de HCl de Cap-136 como um sólido branco (817 mg, ' 40%). *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 7,94 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,71 (d, J= . 1,5 Hz, 1H), 7,50-7,31 (m, 5H), 5,77 (s, 2H); Tr= 0,51 min (Cond.-MS-W5); Índice de homogeneidade 95%; LRMS: Anál. Calc. para [M+H]" Ci H12N2O>: 203,08; encontrado: 203,11. Cap-137 - SS CN so
COH Cap-137, etapa a
EN
N Fo Uma suspensão de 1-cloro-3-cianoisoquinolina (188 mg, 1,00 mmol; preparada de acordo com o procedimento no WO 2003/099274) (188 mg, 1,006 mmol), fluoreto de césio (303,8 mg, 2,00 mmol), bicioreto de bis(tri- terc-butilfosfino)paládio (10 mg, 0,02 mmol) e 2-(tributilestanil)Yfurano (378 ul,1,20 mmol) em dioxana anidra (10 mL) sob nitrogênio foi aquecida a 80ºC por 16 horas antes de ser esfriada para 25ºC e tratada com solução de fluoreto de potássio aquosa, saturada, com agitação vigorosa por 1 hora. À mistura foi dividida entre acetato de etila e água e a fase orgânica foi sepa- rada, lavada com salmoura, seca em NazSO;,, filtrada e concentrada. Purifi- cação do resíduo em sílica-gel (eluição com acetato de etila 0% a 30%/hexanos) deu Cap-137, etapa a como um sólido branco que foi usado comoé (230 mg, 105%). Tr= 1,95 min (Cond.-MS-W32); índice de homoge- neidade 90%; LRMS: Anál. Calc. para [M+H]" CiaHgN2O: 221,07; encontra- do: 221,12. Cap-137
AN Ox - Cco,H . A uma suspensão de Cap-137, etapa a (110 mg, 0,50 mmol) e periodato de sódio (438 mg, 2,05 mmol) em tetracloreto de carbono (1 mL), —acetonitrila (1 mL) e água (1,5 mL) foi adicionado hidrato de tricloreto de ru- tênio (2 mg, 0,011 mmol). A mistura foi agitada a 25ºC por 2 horas e então dividida entre diclorometano e água. A camada aquosa foi separada, extraí- | da mais duas vezes com diclorometano e os extratos de diclorometano com- binados foram secos em NazSO,, filtrados e concentrados. Trituração do resíduo com hexanos deu Cap-137 (55 mg, 55%) como um sólido de cor acinzentada. Tr= 1,10 min (Cond.-MS-W32); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* Cy HgN2O>: 200,08; encontrado: 200,08. Cap-138 até Cap-158 Estratégia Sintética. Método A. H O O TT o ai ' & om Cap-138 >o
A
N 2
' 109/563 Cap-138, etapa a o ..
N A uma suspensão agitada de 5-hidroxiisoquinolina (preparada de acordo com o procedimento no WO 2003/099274) (2,0 g, 13,8 mmol) e trife- nilfosfina (4,3 g, 16,5 mmol) em tetra-hidrofurano seco (20 mL) foram adicio- nados metanol seco (0,8 mL) e dietil azodicarboxilato (3,0 mL, 16,5 mmol) em porções. À mistura foi agitada em temperatura ambiente por 20 horas antes de ser diluída com acetato de etila e lavada com salmoura, seca em Na;sSO,;, filtrada e concentrada. O resíduo foi pré-absorvido em síilica-gel e - purificado (eluição com acetato de etila 40%/hexanos) para dar Cap-138, etapa a como um sólido amarelo-claro (1,00 g, 45%). 'H RMN (CDCl3, 500 “10 MH2)59,19(s,1H),8,51(d,J=6,0 Hz, 1H), 7,99 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,52- 7,50 (m, 2H), 7,00-6,99 (m, 1H), 4,01 (s, 3H); Tr= 0,66 min (Cond. D2); índi- ce de homogeneidade 95%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]" CioHoNO: 160,08; encontrado 160,10. Cap-138, etapa b >o
OO ANÍ - Oo A uma solução agitada de Cap-138, etapa a (2,34 g, 14,7 mmol) em diclorometano anidro (50 mL) em temperatura ambiente foi adicionado ácido meta-cloroperbenzoico (77%, 3,42 9, 19,8 mmol) em uma porção. A- pós ser agitada por 20 horas, carbonato de potássio em pó (2,0 g) foi adicio- nado e a mistura foi agitada por 1 hora em temperatura ambiente antes de ser filtrada e concentrada para dar Cap-138, etapa b como um sólido amare- lo, pálido, que era suficientemente puro para ser levado adiante (2,15 g, 83,3%). *H RMN (CDCl3, 400 MHz) 5 8,73 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 8,11 (dd, JU = 7,3, 1,7 Hz, 1H), 8,04 (d, J=7,1 Hz, 1H), 7,52 (t J = 8,1 Hz, 1H), 7,28 (d J = 8,3 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H); Tr= 0,92 min, (Cond.-D1);
' 110/563 Índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHioNO>: 176,07; encontrado: 176,0. Cap-138, etapa c o
O
CN A uma solução agitada de Cap-138, etapa b (0,70 g, 4,00 mmol) e trietilamina (1,1 mL, 8,00 mmol) em acetonitrila seca (20 mL) em tempera- turaambiente sob nitrogênio foi adicionada trimetilsililcianida (1,60 mL, 12,00 - mmol). A mistura foi aquecida a 75ºC por 20 horas antes de ser esfriada pa- ra temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e lavada com solução : de bicarbonato de sódio saturada e salmoura antes da secagem em NazSO, e concentração de solvente. O resíduo sofreu cromatografia rápida em sílica- gel (eluição com acetato de etila 5%/hexano) para acetato de etila 25%/hexanos para dar Cap-138, etapa c (498,7 mg) como um sólido cristali- ' no, branco, junto com 223 mg de Cap-138 adicional, etapa c recuperado do filtrado. *H RMN (CDCl3, 500 MHz) 5 8,63 (d, J=5,5 Hz, 1H), 8,26 (d J=5,5 Hz, 1H), 7,88 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,69 (t J = 8,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J =7,5 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H); Tr= 1,75 min, (Cond.-D1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]' Ci HaN2O: 185,07; encontrado: 185,10. Cap-138 >o a se CO,H Cap-138, etapa c (0,45 g, 2,44 mmol) foi tratado com solução de hidróxido de sódio SN (10 mL) e a suspensão resultante foi aquecida a 85ºC por 4 horas, esfriada para 25ºC, diluída com diclorometano e acidificada com ácido clorídrico IN. A fase orgânica foi separada, lavada com salmoura, se- ca em NasSOa,, concentrada para %4 de volume e filtrada para dar Cap-138 como um sólido amarelo (0,44 g, 88,9%). *H RMN (DMSO-ds, 400 MHz) 5 13,6 (s amplo, 1H), 8,56 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,16 (d, J =6,0 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,71-7,67 (m, 1H), 7,30 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H); Tr= 0,70 min (Cond.-D1); índice de homogeneidade 95%; LCMS: Anál. Calc. pa- ra[M+H]* CuHoNOs: 204,07; encontrado: 204,05. Estratégia Sintética. Método B (derivado de Tetrahedron Letters, 428107 (2001). o *W, — KCN, dpppe é * — 5VNaoH o = Xe, OO PE OO Cl toluene CN CcoH WO 2003/ 099274 Cap-139 - o SS o CoH : Cap-139, etapa a o RR
O
CN A um frasco de tampa superior, de parede espessa, contendo uma suspensão desgaseificada com argônio de 1-cloro-6-metoxiisoquinolina (1,2 g, 86,2 mmol; preparada de acordo com o procedimento no WO 2003/099274), cianida de potássio (0,40 g, 8,2 mmol), 1,5-bis(difenilfosfino) pentano (0,27 g, 0,62 mmol) e acetato de paládio (11) (70 mg, 0,31 mmol) em tolueno anidro (6 mL) foi adicionado N,N,N',N -tetrametiletilenodiamina (0,29 mL 2,48 mmol). O frasco foi vedado, aquecido a 150ºC por 22 horas e então deixado esfriar para 25ºC. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila, lavada com água e salmoura, seca em NazSO;,, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado em sílica-gel eluindo com acetato de etila S%/hexanos para acetato de etila 25%/hexanos para dar Cap-139, etapa a como um sólido branco (669,7 mg). *H RMN (CDCI3, 500 MHz) 5 8,54 (d, J=
' 112/563 6,0 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,41-7,39 (m, 1H), 7,13 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,98 (s, 3H); Tr= 1,66 min (Cond.-D1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]" Cu HaN2O: 185,07; encontrado: 185,20. Cap-139 o > Pl
COH Cap-139 foi preparado a partir da hidrólise básica de Cap-139, etapa a com NaOH SN de acordo com o procedimento descrito para Cap- - 138. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 13,63 (s amplo v, 1H), 8,60 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 845 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 7,49 (d, J= 2,2 : Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 9,3, 2,5 Hz, 1H), 3,95 (s, 3H); Tr= 0,84 min (Cond.- D1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+HF' C11H1oNO;3: 204,07; encontrado: 204,05. : Cap-140 Po
NC
AN CoH Cap-140, etapa a Ao
NT AN
CN A uma mistura vigorosamente agitada de 1,3-dicloro-5-etoxiiso- quinolina (482 mg, 2,00 mmol; preparada de acordo com o procedimento no WO 2005/051410), acetato de paládio (1!) (9 mg, 0,04 mmol), carbonato de sódio (223 mg, 2,10 mmol) e 1,5-bis(difenilfosfino)pentano (35 mg, 0,08 mmol) em dimetilacetamida seca (2 mL) a 25ºC sob nitrogênio foi adicionada
N,N,N Nitetrametiletilenodiamina (60 mL, 0,40 mmol). Após 10 minutos, a mistura foi aquecida para 150ºC e então uma solução de estoque de aceto- na cianoidrina (preparada a partir de 457 ul. de acetona cianoidrina em 4,34 mL de DMA) foi adicionada em porções de 1 mL durante 18 horas usando uma bomba de seringa. A mistura foi então dividida entre acetato de etila e água e a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca em Na2SO;,, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado em sílica-gel eluindo com acetato de etila 10%/hexanos para acetato de etila 40%/hexanos para dar Cap-140, etapa a como um sólido amarelo (160 mg, 34%). Tr= 2,46 min (Cond-MS-W2); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para IM+H]* CioHaCIN2O: 233,05; encontrado: 233,08. Cap-140 - Po
RC Pl COo,H Cap-140 foi preparado através de hidrólise ácida de Cap-140, etapa a com HC! 12N conforme descrito no procedimento para a preparação de Cap-141, descrito abaixo. Tr= 2,24 min (Cond.-MS-W32); índice de homo-
15. geneidade 90%; LCMS: Anál. Calc, para [M+H]' CHÁ CINO3: 252,04; en- contrado: 252,02. Cap-141
SN
ZN CO2H Cap-141, etapa a
DF N
CN Cap-141, etapa a, foi preparada a partir de 1-bromo-3-fluoriso-
quinolina (preparada a partir de 3-amino-1-bromoisoquinolina usando o pro- cedimento mostrado em J. Med. Chem., 13:513 (1970)) conforme descrito no procedimento para a preparação de Cap-140, etapa a (víde supra). *H RMN (500 MHz, CDCI3) 5 8,35 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,83 (t, J=7,63 Hz, 1H), 7,77-7,73 (m, 1H), 7,55 (s, 1H); Tr= 1,60 min (Cond.-D1); Índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHsFN>: 173,05; encontrado: 172,99. Cap-141
DP o - CO2sH Cap-141, etapa a, (83 mg, 0,48 mmol) foi tratado com HCl 12N (3 mL) e a pasta fluida resultante foi aquecida a 80º C por 16 horas antes de seresfriada para temperatura ambiente e diluída com água (3 mL). A mistura foi agitada por 10 minutos e então filtrada para dar Cap-141 como um sólido esbranquiçado (44,1 mg 47,8%). O filtrado foi diluído com diclorometano e lavado com salmoura, seco em NazSO, e concentrado para dar mais Cap- 141 que era suficientemente puro para ser levado adiante diretamente (29,30 mg, 31,8%). *H RMN (DMSO-ds, 500 MHz) 5 14,0 (s amplo, 1H), 8,59-8,57 (m, 1H), 8,10 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,88-7,85 (m, 2H), 7,74-7,71 (m, 1H); Tr= 1,33 min (Cond.-D1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioH7FNO>: 192,05; encontrado: 191,97. Cap-142 O.
QD É X s
ZN COzH Cap-142, etapa a
: 115/563 Br >
PJ
CN Cap-142, etapa a, foi preparado a partir de N-óxido de 4- bromoisoquinolina conforme descrito no procedimento de duas etapas para a preparação de Cap-138, etapas b e c. Tr= 1,45 min (Cond.-MS-W1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHsBrN>: 232,97; encontrado: 233,00. Cap-142, etapa b
Q : N - À
CN A uma suspensão desgaseificada com argônio de Cap-142, eta- pa a, (116 mg, 0,50 mmol), fosfato de potássio tribásico (170 mg, 0,80 ] mmol), acetato de paládio (Il) (3,4 mg, 0,015 mmol) e 2-(diciclo-hexilfosfino) bifenita (11 mg, 0,03 mmol) em tolueno anidro (1 mL) foi adicionada morfoli- na(61uL, 0,70 mmol). A mistura foi aquecida a 100ºC por 16 horas, esfriada para 25ºC e filtrada em terra diatomácea (CELITE?). Purificação do resíduo em sílica-gel, eluindo com acetato de etila 10% a 70%/hexanos deu Cap- 142, etapa b, (38 mg, 32%) como um sólido amarelo, que foi levada adiante diretamente. Tr= 1,26 min (Cond.-MS-W1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]] Ci4H14N30: 240,11; encontrado: 240,13. Cap-142
Q
N Ds
N CcoH Cap-142 foi preparado a partir de Cap-142, etapa b, com hidró-
xido de sódio 5N conforme descrito no procedimento para cap-138. R, = 0,72 min (Cond.-MS-W1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* Ci4H;i5N2O3: 259,11; encontrado: 259,08, Cap-143 fo
A IS
COH Cap-143, etapa a fo . RAN se: Br A uma solução agitada de 3-amino-1-bromoisoquinolina (444 mg, 2,00 mmol) em dimetilformamida anidra (10 mL) foi adicionado hidreto . de sódio (60%, sem lavagem, 96 mg, 2,4 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada a 25ºC por 5 minutos antes de éter de 2-bromoetita (90%, 250 uL, 2,00 mmol) ser adicionado. A mistura foi agitada mais a 25ºC por 5 horas e a 75ºC por 72 horas antes de ser esfriada para 25ºC, extinta com solução de cloreto de amônio saturada e diluída com acetato de etila. A camada orgâni- ca foi separada, lavada com água e salmoura, seca em NazSO,, filtrada e concentrada. Purificação do resíduo em síilica-gel eluindo com acetato de etila 0% a 70%/hexanos deu Cap-143, etapa a, como um sólido amarelo (180 mg, 31%). Tr= 1,75 min (Cond.-MS-W1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]" CisHuBrNsO: 293,03; encontrado: 293,04. Cap-143 fo
AO
O CcoH
' 117/563 A uma solução fria (-60ºC) de Cap-143, etapa a, (154 mg, 0,527 mmol!) em tetra-hidrofurano anidro (5 mL) foi adicionada uma solução de n- butil lítio em hexanos (2,5 M, 0,25 mL, 0,633 mmol). Após 10 minutos, dióxi- do de carbono seco foi borbulhado na mistura de reação por 10 minutos an- tes de ser extinto com HCI IN e deixado aquecer para 25ºC. A mistura foi então extraída com diclorometano (3 x 30 mL) e os extratos orgânicos com- binados foram concentrados in vacuo. Purificação do resíduo através de uma HPLC de fase reversa (MeOH/água/TFA) deu Cap-143 (16 mg, 12%). Tr= 1,10 min (Cond.-MS-W1); índice de homogeneidade 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CiaHisN2O;3: 259,11; encontrado: 259,08. Cap-144 : SÃO . E!
OS CO2H . Cap-144, etapa a NO; SS Cc!
OS cl 1,3-Dicloroisoquinolina (2,75 g, 13,89 mmol) foi adicionada em porções pequenas a uma solução fria (0º C) de ácido nítrico fumegante (10 mL) e ácido sulfúrico concentrado (10 mL). A mistura foi agitada a 0º C por 0,5 hora antes de ser gradualmente aquecida para 25ºC em que é agitada por16 horas. A mistura foi então derramada em um béquer contendo gelo picado e água e a suspensão resultante foi agitada por 1 hora a 0º C antes de ser filtrada para dar Cap-144, etapa a, (2,73 g, 81%) como um sólido a- marelo que foi usado diretamente. Tr= 2,01 min. (Cond.-D1); índice de ho- mogeneidade 95%; LCMS: Anál. Calc. para [M+tH]" CaHsClaN2O>2: 242,97; encontrado: 242,92.
Cap-144, etapa b
SÃO NTE
OS Cl Cap-144, etapa a, (0,30 g, 1,23 mmol) foi absorvido em metanol (60 mL) e tratada com óxido de platina (30 mg) e a suspensão foi submetida à hidrogenação Parr a 48,26 kPa (7 psi) de H> por 1,5 hora. Então formalina (5 mL) e óxido de platina adicional (30 mg) foram adicionados e a suspensão foinovamente submetida à hidrogenação Parr a 310,26 kPa (45 psi) de H, : por 13 horas. Ela foi então filtrada por sucção em terra diatomácea (CELI- . TE) e concentrada para menos para %4 de volume. Filtragem com sucção do precipitado seguinte deu o composto do título como um sólido amarelo que sofreu cromatografia rápida em silica-gel eluindo com acetato de etila 5% em hexanos para acetato de etila 25% em hexanos para dar Cap-144, R etapa b, (231 mg, 78%) como um sólido amarelo pálido. *H RMN (400 MHz, CDC) 5 8,02 (s, 1H), 7,95 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,57-7,53 (m, 1H), 7,30 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 2,88 (s, 6H); LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* C, Hy,ClaNz: 241,03; encontrado: 241,02, HRMS: Anál. Calc. para [M+H]* Ci Hu ClaNo: 241,0299; encontrado: 241,0296. Cap-144, etapa c
NÓ SS Cl
O
CN Cap-144, etapa c, foi preparado a partir de Cap-144, etapa b, de acordo com o procedimento descrito para a preparação de Cap-139, etapa a. Tr= 2,19 min (Cond.-D1); índice de homogeneidade 95%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]" CioH,CIN3: 232,06; encontrado: 232,03, HRMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHCIN3:232,0642; encontrado: 232,0631.
i 119/563 Cap-144
NO CO! 2N
COH Cap-144 foi preparado de acordo com o procedimento descrito para Cap-141. Tr= 2,36 min (Cond.-D1); 90%; LCMS: Anál. Calc. para [M+H]* CioH2CIN2O>: 238,01; encontrado: 238,09. Cap-145 até Cap-162 - Cap-145 até Cap-162 foram preparados a partir das 1-cloroiso- quinolinas apropriadas de acordo com o procedimento descrito para a prepa- : ração de Cap-138 (Método A) ou Cap-139 (Método B) a menos que de outra maneira mencionado conforme mostrado abaixo.
. 120/563 EN Ss EE | co wo 6 o E o SC |<.. o E o E o E & x o nx É = E = E s ão Fo o. s=.s E 38 3 E: 2 o& o 2 o o “& [CORRA o o. <€ és Ss Ss ss g |XS o 3s 3s x x 2 |ºS 28 =s =s o SE so so so s = 6 o o e o + £ |€É8 | O à O à o o ao = = == == o e x a a E Xe lxrS 7 E 7E 7E 2º o vo vo vo
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, 126/9563 Cap-163
OH OH
SM À uma solução de ácido 2-cetobutírico (1,0 g, 9,8 mmol) em die- tiléter (25 ml) foi adicionado brometo de fenilmagnésio (22 ml, 1M em THF) emgotas.A reação foi agitada a -25ºC sob nitrogênio por 17,5 horas. A rea- ção foi acidificada com HCl 1N e o produto foi extraído comi acetato de etila (3 x 100 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com água seguido por salmoura e seca em MgSO,. Após concentração in vacuo, um sólido branco foi obtido. O sólido foi recristalizado a partir de hexanos/acetato de -— 10 etila para dar Cap-163 como agulhas brancas (883,5 mg). *H RMN (DMSO- ds, 6 = 2,5 ppm, 500 MHz): 12,71 (s amplo, 1 H), 7,54-7,52 (m, 2H), 7,34- : 7,31 (m, 2H), 7,26-7,23 (m, 1H), 5,52-5,39 (s amplo, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 0,79 (tap, J=7,4 Hz, 3H). Cap-164 ' o
N y Uma mistura de ácido 2-amino-2-fenilbutírico (1,5 g, 8,4 mmol), formaldeído (14 mL, 37% em água), HCl 1N (10 mL) e Pd 10%/C (0,5 mg) em MeOH (40 mL) foi exposta a H2> a 344,74 kPa (50 psi) em uma garrafa Parr por 42 horas. A reação foi filtrada em CELITE? e concentrada in vacuo, o resíduo foi absorvido em MeOH (36 mL) e o produto foi purificado com uma HPLC de fase reversa (MeOH/HyYTFA) para dar o sal de TFA de Cap- 164 como um sólido branco (1,7 9). *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz) 7,54-7,47 (m, 5H), 2,63 (m, 1H), 2,55 (s, 6H), 2,31 (m, 1H), 0,95 (t ap, J=7,3 Hz, 3H). Cap-165 o Cx”
E A uma mistura de ácido 2-amino-2-indanocarboxílico (258,6 mg,
i 127/563 1,46 mmol) e ácido fórmico (0,6 ml, 15,9 mmoi) em 1,2-dicloroetano (7 ml) foi adicionado formaldeído (0,6 ml, 37% em água). A mistura foi agitada a —-25ºC por 15 minutos, então aquecida a 70ºC por 8 horas. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dissolvido em DMF (14 mL) e purificado através de HPLC de fase reversa (MeOH/H>O/TFA) para dar o sal de TFA de Cap-165 como um óleo viscoso (120,2 mg). *H RMN (DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm, 500 MHz): 7,29-7,21 (m, 4 H), 3,681 (d, J= 17,4 Hz, 2H), 3,50 (d, J = 17,4 Hz, 2H), 2,75 (s, 6H). LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]" Ci2HieNO>: 206,12; encontrado: 206,07. Cap-166a e Cap-166b o 7 O, Cep-16ãa: Diastereômero-1 [8 Ceap-1665: Diastereômero-2 : A
Í Cap-166a e Cap-166b foram preparados a partir de (18, 4S)-(+)- ] 2-metil-2 5-diazabiciclo[2,2,1]heptano (2HBr) de acordo com o método des- ' crito para a síntese de Cap-7a e Cap-7b, com a exceção que o intermediário de éster de benzila foi separado usando uma coluna Chiralcel OJ semi-prep, 20x250 mm, 10 um eluindo com mistura 85:15 de heptano/etanol em taxa de eluição de 10 mL/min por 25 minutos. Cap-166b: *H RMN (DMSO-ds, à = 2,5 ppm, 500 MHz): 7,45 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,27-7,19 (m, 3H), 4,09 (s, 1H), 3,34 (s amplo ap, 1H), 3,16 (s amplo ap, 1H), 2,83 (d, J=10,1 Hz, 1H), 2,71 (m, 2H), 2,46 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 1,77 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 1,83 (d, J= 9,8 Hz, 1H). LC/MS: Arál. Calc. para [M+H]" CiuaHisN2O>: 247,14; encontrado: 247,11. Cap-167 :
S OH Uma solução de ácido Boc-1,3-di-hidro-2H-isoindo! carboxílico (1,09, 3,8 mmol) em TFA 20%/CH2Cl; foi agitada a -25ºC por 4 horas. Todo
' 128/563 o componente volátil foi removido in vacuo.
Uma mistura do material bruto resultante, formaldeído (15 mL, 37% em água), HCI 1N (10 mL) e Pd 10%/C (10 mg) em MeOH foi exposta a H> (40 psi) em uma garrafa Parr por 23 ho- ras.
A mistura de reação foi filtrada em CELITE? e concentrada in vacuo para darCap-167 como uma espuma amarela (873,5 mg). 'H RMN (DMSO-ds, 5 =2,5 ppm, 500 MHz) 7,59-7,38 (m, 4H), 5,59 (s, 1H), 4,84 (d, J = 14 Hz, 1H), 4,50 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 3H). LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* CioH12NO>: 178,09; encontrado: 178,65. Cap-168 os NMe>; ' Cap-168 racêmico foi preparado a partir de ácido Boc-aminoin- —dano-1-carboxílico racêmico de acordo com o procedimento descrito para a preparação de Cap-167. O material bruto foi empregado desta maneira.
Cap-169 o Ade no Uma mistura de cloridrato do ácido 2-amino-2-fenilpropanoico (5,0 g, 2,5 mmol), formaldeído (15 ml, 37% em água), HCI 1N (15 ml) e Pd 10%/C (1,32 gd) em MeOH (60 mL) foi posta em uma garrafa Parr e agitada sob hidrogênio 379,21 kPa (55 psi) por 4 dias.
A mistura de reação foi filtra- da em CELITE? e concentrada in vacuo.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (MeOH/água/TFA) para dar o sal de TFA de Cap-169 como um semissólido viscoso (2,1 g). "H RMN (CDCI;3, à = 7,26 ppm, 500 MHz): 7,58-7,52 (m, 2 H), 7,39-7,33 (m, 3H), 2,86 (s amplo, 3H), 2,47 (s amplo, 3H), 1,93 (s, 3H). LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* Cu H1sNO>: 194,12; encontrado: 194,12.
i 129/563 Cap-170 o [o] No
ANO o Ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acético A ácido (S)-2-amino-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (505 mg; 3,18 mmol; obtido da Astatech) em água (15 ml) foi adicionado carbonato de sódio (673 mg; 6,35 mmol) e a mistura resultante foi esfriada para 0º C e então cloroformiato de metila (0,26 ml; 3,33 mmol) foi adicionado em gotas “5 durante5 minutos. A reação foi deixada agitar por 18 horas enquanto permi- : tindo que o banho descongelasse para temperatura ambiente. A mistura de reação foi então dividida entre HCI 1N e acetato de etila, A camada orgânica foi removida e a camada aquosa foi extraída mais com 2 porções adicionais de . acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com sal- : 10 moura, secas em sulfato de magnésio, filtradas e concentradas in vacuo para dar Cap-170 como um resíduo incolor. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 12,65 (1 H, s amplo), 7,44 (1 H, d, J=8,24 Hz), 3,77 - 3,95 (3 H, m), 3,54 (3 H, s), 3,11 - 3,26 (2 H, m), 1,82 - 1,95 (1 H, m), 1,41 - 1,55 (2H, m), 1,21 - 1,39 (2 H, m); LC/MS: Anál. Calc. para IM+H]* CaHieNOs: 218,1; encontrado 218,1. Cap-171 o o 2
HNSÇO o Uma solução de metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-(oxetan-3- ilideno)acetato (200 mg, 0,721 mmol; Il Farmaco (2001), 56, 609-613) em acetato de etila (7 mi) e CHZClz (4,00 ml) foi desgaseificada através de bor- bulhamento de nitrogênio por 10 minutos. Dimetil dicarbonato (0,116 ml, 1,082 mmol) e Pd/C (20 mg, 0,019 mmol) foram então adicionados, a mistu- rade reação foi equipada com um balão de hidrogênio e deixada agitar em temperatura ambiente da noite para o dia momento quando TLC (CH2Cl; 95:5/MeOH: visualizado com corante feito de 1 g de Ce(NH1)2SO,, 6 g de molibdato de amônio, 6 ml de ácido sulfúrico e 100 mi de água) indicou con- versão completa. A reação foi filtrada em CELITE? e concentrada. O resíduo foi purificado através de BIOTAGES (carga com diclorometano em 25 amos- tras; eluir em coluna 258 com diclorometano para 3CV, então MeOH 0 a S%/diciorometano acima de 250 ml então manter em MeOH 5%/diclorome- tano para 250 ml; frações de 9 ml). Coletadas as frações contendo o material desejado e concentradas para 120 mg (81%) de 2-(metoxicarbonilamino)-2- (oxetan-3-il)acetato como um óleo incolor. 'H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) ô ppm 3,28 - 3,40 (m, J=6,71 Hz, 1 H) 3,70 (s, 3 H) 3,74 (s, 3 H) 4,55 (t, J=6,41 Hz, 1 H) 4,58 - 4,68 (m, 2 H) 4,67 - 4,78 (m, 2 H) 5,31 (s amplo, 1 H). . LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]* CgH14NOs: 204,2; encontrado 204,0.
A metil 2-(metoxicarbonilamino)-2-(oxetan-3-i)acetato (50 mg, 0,246 mmol) em THF (2 mL) e água (0,5 mL) foi adicionado monoidrato de . hidróxido de lítio (10,33 mg, 0,246 mmol). A solução resultante foi deixada : agitar da noite para o dia em temperatura ambiente. TLC (1:1 EA/Hex; Co- rante Hanessian [1 g de Ce(NH4),SO,, 6 g de molibdato de amônio, 6 m! de ácido sulfúrico e 100 ml! de água]) indicou -10% de material de partida res- tantes. Mais 3 mg de LiOH foram adicionados e deixados agitar da noite pa- ra o dia momento quando TLC não mostrou nenhum material de partida res- tante. Concentrados in vacuo e postos em vácuo alto da noite para o dia provendo 55 mg de 2-(metoxicarbonilamino)-2-(oxetan-3-il)acetato de lítio como um sólido incolor. *H RMN (500 MHz, MeCD) 5 ppm 3,39 - 3,47 (m, 1 H) 3,67 (s,3H) 4,28 (d, J=7,93 Hz, 1 H) 4,64 (t, J=6,26 Hz, 1 H) 4,68 (t, J=7,02 Hz, 1 H) 4,73 (d, J=7,63 Hz, 2 H).
Cap-172 Se
FNAS Cap-172, etapa a de AN o A etapa de diazotização que segue foi adaptada de Barton, A. e outros, J.
C. S.
Perkin Trans 1, 159-164 (1982): Uma solução de NaNO, (166 mg, 2,4 mmol) em água (0,6 mL) foi adicionada lentamente a uma solução fria (0º C), agitada, de metil 2-amino-5-etil-1,3-triazol-4-carboxilato (1868 ma, 1,0mmol), CuSO4-5H;O (330 mg, 1,32 mmol), NaCl (260 mg, 4,45 mmol) e H2SO, (5,5 mL) em água (7,5 mL). A mistura foi agitada a 0º C por 45 minu- tos e deixada aquecer para temperatura ambiente em que ela é agitada mais por 1 hora antes de CuCl (118 mg) ser adicionado.
A mistura foi agitada mais em temperatura ambiente por 16 horas antes dela ser diluída com sal- . 10 mourae extraída com éter duas vezes.
As camadas orgânicas foram combi- nadas, secas em MgSO, e concentradas para dar metil 2-cloro-5-etildiazo|l-4- carboxilato (isto é, Cap-172, etapa a) (175 mg, 85%) como um óleo laranja : (80% puro) que foi usado diretamente na reação seguinte.
Tr= 1,99 min ' (Cond.-MD1); LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* C;HJCINO2S: 206,01; encon- trado: 206,05. Cap-172 A uma solução de metil 2-cloro-5-etiltiazol-4-carboxilato (175 mg) em THF/H2O/MeOH (20 mlL/ 3 mlL/ 12 mL) foi adicionado LiIOH (305 mg, 12,78 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia antes de ser concentrada: para menos e neutralizada com HCl IN em éter (25 mL). O resíduo foi extraído duas vezes com acetato de etila e as camadas orgânicas foram combinadas, secas em MgSO, e evaporadas para dar Cap-172 (60 mg, 74%) como um sólido vermelho que foi usado sem puri- ficação adicional. *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 13,03-13,42 (1 H, m), 3,16 (2 H, q, J= 7,4 Hz), 1,23 (3 H,t, J=7,5 Hz). Tr= 1,78 min (Cond.-MD1); LC/MS:Anál.
Calc. para [M+HJ" CGH;CINO,S: 191,99; encontrado: 191,99.
Cap-173 de
SO Cap-173, etapa a de No A etapa de diazotização que segue foi adaptada de Barton, À. e outros, 1.C.S. Perkin Trans 1, 159-164 (1982): Uma solução de NaNO,z (150 - mg, 2,17 mmol) em água (1,0 mL) foi adicionada em gotas a uma solução fria (0º C), agitada, de metil 2-amino-5-etil-1,3-tiazol-4-carboxilato (1868 mg, “5 10mmol)em H;POz 50% (3,2 mL). A mistura foi agitada a 0º C por 1 hora e deixada aquecer para temperatura ambiente em que ela é agitada mais por 2 horas. Após esfriar para 0ºC, a mistura foi lentamente tratada com uma solução de NaOH (85 mg) em água (10 mL). A mistura foi então diluída com : solução de NaHCO; saturada e extraída duas vezes com éter. As camadas orgânicas foram combinadas, secas em MgSO, e concentradas para dar metil 5-etiltiazol-4-carboxilato (isto é, Cap-173, etapa 1) (134 mg, 78%) como um óleo laranja (85% puro) que foi usado diretamente na reação seguinte. Tr= 1,58 min (Cond.-MD1); LC/MS: Anál. Calc. para [IM+H]* C;H,oNO»S: 172,05; encontrado: 172,05. Cap-173 A uma solução de metil 5-etiltiazol-4-carboxilato (134 mg) em THF/H2O/MeOH (18 mL/ 2,7 mlL/ 11 mL) foi adicionado LiOH (281 ma, 11,74 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia antes de ser concentrada para menos e neutralizada com HCl IN em éter (25 mL). O resíduo foi extraído duas vezes com acetato de etila e as cama- das orgânicas foram combinadas, secas em MgSO, e evaporadas para dar Cap-173 (90 mg, 73%) como um sólido laranja que foi usado sem purificação adicional. *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 12,74-13,04 (1 H, m), 3,20 (2
H, q, J = 7,3 Hz), 1,25 (3 H, t, J = 7,5 Hz). Tr= 1,27 min (Cond.-MD1); LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* C;HgNO,2S: 158,03; encontrado: 158,04. Cap-174 S | o Cap-174, etapa a te 2 OSOsCFz : o Anidrido tríflico (5,0 g, 18,0 mmol) foi adicionado em gotas a uma solução fria (0º C) de metil 3-hidroxipicolinato (2,5 g, 16,3 mmol) e TEA (2,5 mL, 18,0mmol) em CH2Cl; (80 mL). A mistura foi agitada a 0º C por 1 hora antes de ser deixada aquecer para temperatura ambiente em que ela foi agi- tada por mais 1 hora.
A mistura foi então extinta com solução de NaHCO;3 saturada (40 mL) e a camada orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca em MgSO, e concentrada para dar metil 3-(trifluormetilsulfonilóxi) pico- linato(isto é, Cap-174, etapa a) (3,38 g, 73%) como um óleo marrom escuro (>95% puro) que foi usado diretamente sem purificação adicional. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,72-8,78 (1 H, m), 7,71 (1 H, d, J= 1,5 Hz), 7,58- 7,65 (1 H, m), 4,04 (3 H, s). Tr= 1,93 min (Cond.-MD1); LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* CaH;F3NOsS: 288,00; encontrado: 286,08. Cap-174 A uma solução de metil 3-(trifluormetilsulfonilóxi)picolinato (570 mg, 2,0 mmol) em DMF (20 mL) foram adicionados LiCI (254 mg, 6,0 mmol), tributil(viniestanano (781 mg, 2,4 mmol) e bicloreto de bis(trifenilfosfino) paládio (42 mg, 0,06 mmol). A mistura foi aquecida a 100ºC da noite para o diaantesde uma solução saturada de KF (20 mL) ter sido adicionada à mis- tura de reação em temperatura ambiente.
Esta mistura foi agitada por 4 ho- ras antes dela ser filtrada através de CELITES e a almofada de CELITES foi
' 134/563 lavada com acetato de etila. A fase aquosa do filtrado foi então separada e concentrada para menos in vacuo. O resíduo foi tratado com HCI 4N em dio- xanas (5 mL) e a mistura resultante foi extraída com metanol, filtrada e eva- porada para dar Cap-174 (260 mg) como um sólido verde que foi levemente contaminado com sais orgânicos, mas foi usado sem purificação adicional. '!H RMN (300 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8,21 (1 H, d, J=3,7 Hz), 7,81-7,90 (1 H, m), 7,09 (1 H, dd, J=7,7, 4,8 Hz), 6,98 (1 H, dd, J = 17,9, 11,3 Hz), 5,74 (1 H, dd, J = 17,9, 1,5 Hz), 5,20 (1 H, d, J = 11,0 Hz). Tr= 0,39 min (Cond.- MD1); LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]" CgHaNO>: 150,06; encontrado: 150,07.
Cap-175 * o ' Cap-175, etapa a : NS |
O A uma solução de metil 3-(fluormetilsulfonilóxi)picolinato (isto é, Cap-174, etapa a) (570 mg, 2,0 mmol), um intermediário na preparação de Cap-174, em DMF(20 mL) foram adicionados LiCI (254 mg, 6,0 mmol), tribu- til(viniestanano (761 mg, 2,4 mmol) e bicloreto de bis(trifenilfosfino)paládio (42mg, 0,06 mmol). A mistura foi aquecida a 100ºC por 4 horas antes do solvente ter sido removido in vacuo. O resíduo foi absorvido em acetonitrila (50 mL) e hexanos (50 mL) e a mistura resultante foi lavada duas vezes com hexanos. A camada de acetonitrila foi então separada, fitrada em CELITE? e evaporada. Purificação do resíduo através de cromatografia rápida em um instrumento Horizon (eluição de gradiente com acetato de etila 25% em he- xanos para acetato de etila 65% em hexanos) deu metil 3-vinilpicolinato (isto é, Cap-175, etapa a) (130 mg, 40%) como um óleo amarelo. 'H RMN (300 i 135/563 MHz, CDCI;) à ppm 8,680 (1 H, dd, J = 4,6, 1,7 Hz), 7,94 (1 H, d JU =7,7 H2), 7,33-7,51 (2H, m), 5,72 (1 H, d, J= 17,2 Hz), 5,A7 (1 H, d, J = 11,0 Hz), 3,99 (8 H, s). Tr= 1,29 min (Cond.-MD1); LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* CaHIoNO;>: 164,07; encontrado: 164,06. Cap-175, etapa b * o Paládio sobre carbono (10%, 25 mg) foi adicionado a uma solu- ' ção de metil 3-vinilpicolinato (120 mg, 0,74 mmol) em etanol (10 mL). A sus- pensão foi agitada em temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidro- ' gênio por 1 hora antes de ser filtrada em CELITE? e a almofada de CELITE? foi lavada com metanol.
O filtrado foi concentrado para menos até secar para darmetil3-etilpicolinato (isto é, Cap-175, etapa b) que foi levado diretamente : para a reação seguinte.
Tr= 1,15 min (Cond.-MD1); LC/MS: Anál.
Calc. para - [M+H]* CoHi2NO>: 166,09; encontrado: 166,09. Cap-175
A uma solução de 3-etilpicolinato em THF/H2O/MeOH (5 mL/ 0,75 mL/ 3 mL) foi adicionado LIOH (35 mg, 1,47 mmol). A mistura foi agita- daem temperatura ambiente por 2 dias antes de mais LiOH (80 mg) ter sido adicionado.
Após mais 24 horas em temperatura ambiente, a mistura foi fil- trada e o solvente foi removido in vacuo.
O resíduo foi então tratado com HC! 4N em dioxanas (5 mL) e a suspensão resultante foi concentrada para me- nos até secar para dar Cap-175 como um sólido amarelo que foi usado sem purificação adicional. *H RMN (300 MHz, DMSO-ds) ô ppm 8,47 (1 H, dd, J= 4,8, 1,5 Hz), 7,82-7,89 (1 H, m), 7,53 (1 H, dd, J= 7,7, 4,8 Hz), 2,82 (2H, q, J=7,3 Hz), 1,17 (3 H, t J = 7,5 Hz). Tr= 0,36 min (Cond.-MD1); LC/MS: A-
nál.
Calc. para [M+H]* CaHioNO>: 152,07; encontrado: 152,10.
' 136/563 Cap-176
HO O
É Ácido (S)-2-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-(metoxicarbonilamino)acético Cap-176, etapa a Ox : Uma solução de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ona (15 g, 96 mmol) em EtOAc (150 mL) foi adicionada a uma solução de metil 2-(benziloxicarbo- , nilamino)-2-(dimetoxifosforil)acetato (21,21 g, 64,0 mmol) em 1,1,3,3-tetra- metilguanidina (10,45 mL, 83 mmol) e EtOAc (150 mL). A solução resultante foientão agitada em temperatura ambiente por 72 horas e então ela foi diluí- ' da com EtOAc (25 mL). A camada orgânica foi lavada com HCI 1N (75 mL), ' H2O (100 mL) e salmoura (100 mL), seca (MgSO;), filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado através de BIOTAGE? (EtOAc 5% a 25%/Hexanos; coluna de 300 g). As frações combinadas contendo o produto foram então concentradas sob vácuo e o resíduo foi recristalizado a partir de hexa- nos/EtOAc para dar cristais brancos que correspondiam a metil 2-(benzilo- xicarbonilamino)-2-(1 4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ilideno)acetato (6,2 9) 'H RMN (400 MHz, CDCI3-d) 3 ppm 7,30 - 7,44 (5 H, m), 6,02 (1 H, s amplo), 5,15 (2H, s), 3,97 (4 H, s), 3,76 (3 H, br. s.), 2,84 - 2,92 (2H, m), 247 (2H, t J=6,40 Hz), 1,74 - 1,83 (4 H, m). LC (Cond. OL1): Tr= 2,89 min. LC/MS: Anál. Calc. para [M+Na]" CisH2o3NNaOs: 745,21; encontrado: 745,47. Cap-176, etapa b O y ; O Cê Éster Cap-176, etapa b, foi preparado a partir de alceno Cap-
: 137/563 176, etapa a, de acordo com o método de Burk, M.J. e outros (J. Am. Chem. Soc., 117:9375-9376 (1995)) e referências nele): Uma garrafa de alta pres- são de 500 ml! foi carregada com alceno Cap-176, etapa a (3,5 9, 9,68 mmol) em MeOH desgaseíificado (200 mL) sob uma cobertura de N7. A solução foi então carregada com tetrafluorborato de (-)-1,2-Bis((2S,5S)-2,5-dimetilfos- folano)etano(ciclooctadieno) ródio (1) (0,108 g, 0,194 mmol) e a mistura re- sultante recebeu fluxo de N; (3x) e carregada com H>2 (3x). A solução foi agi- tada vigorosamente sob (70 psi) de H> em temperatura ambiente por 72 ho- ras. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo restante foi absorvido em EtOAc. A solução amarronzada foi então filtrada em uma al- mofada de Sílica-gel e eluída com EtOAc. O solvente foi concentrado sob , vácuo para dar um óleo transparente correspondente a Cap-176 de éster, : etapa b (3,4 g). *H RMN (500 MHz, CDCI;-d) 5 ppm 7,28 - 7,43 (5 H, m), 5,32 (1 H, d, J-9,16 Hz), 5,06 - 5,16 (2 H, m), 4,37 (1 H, dd, J=9,00, 5,04 Hz), 3,92(4H,t, J=3,05 Hz), 3,75 (3 H, s), 1,64 - 1,92 (4 H, m), 1,37 - 1,60 . (5 H, m). LC (Cond. OL1): Tr= 1,95 min. LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]" : CioHosNOçg: 364,18; encontrado: 364,27. Cap-176, etapa c OOo OO
SO o Cap-176 de éster, etapa b (4,78 9, 13,15 mmol), foi dissolvido em THF (15 mL) seguido por adição sequencial de água (10 mL), ácido acé- ticoglacial (26,4 mL, 460 mmol) e ácido dicloroacético (5,44 mL, 65,8 mmol). A mistura resultante foi agitada por 72 horas em temperatura ambiente e a reação foi extinta através da adição lenta de Na2CO;z sólido com agitação vigorosa até a liberação de gás não ser mais visível. Produto bruto foi extraí- do em acetato de etila 10%-diclorometano e as camadas orgânicas foram combinadas, secas (MgSO;), fitradas e concentradas. O resíduo resultante foi purificado através de BIOTAGES (EtOAc O a 30%/Hex; coluna de 25 g) para dar Cap-176 de cetona, etapa c (3,86 g) como um óleo transparente. 'H RMN (400 MHz, CDCI;3-d) 5 ppm 7,28 - 7,41 (5 H, m), 5,55 (1 H, d, u=8,28
Hz), 5,09 (2 H, s), 4,46 (1 H, dd, J=8,16, 5,14 Hz), 3,74 (3 H, s), 2,18 - 2,46 (5 H, m), 1,96 - 2,06 (1 H, m), 1,90 (1 H, ddd, J=12,99, 5,96, 2,89 Hz), 1,44 - 1,688 (2 H, m, J=12,36, 12,36, 12,36, 12,36, 4,77 Hz). LC (Cond. OL1): Tr= 1,66 min. LC/MS: Anál. Calc. para [M+Na]" Ci7Ho NNaOs: 342,13; encontra- do: 342,10. Cap-176, etapa d
OO CO | SO
F DEOXO-FLUORº (3,13 mL, 16,97 mmol) foi adicionado a uma ' solução de cetona Cap-176, etapa c (2,71 g, 8,49 mmol) em CH2Cl2 (50 mL) : seguido pela adição de uma quantidade catalítica de EtOH (0,149 mL, 2,55 mmol). A solução amarela resultante foi agitada em temperatura ambiente danoite para odia. A reação foi extinta através da adição de NaHCO;3 aquo- . so saturado (25 mL) e a mistura foi extraída com EtOAc (3 x 75 mL). As ca- : madas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;,), filtradas e secas para dar um óleo amarelado. O resíduo foi purificado através de cromatografia BIOTAGE? (EtOAc 2% a 15%/Hex; coluna de 90 g) e um sólido branco cor- respondendo ao Cap-176 de bifluoreto de difluor aminoácido, etapa d (1,5 q), foi recuperado. *H RMN (400 MHz,, CDCI3-d) 5 ppm 7,29 - 7,46 (5 H, m), 5,34 (1 H, d, J=8,28 Hz), 5,12 (2 H, s), 4,41 (1 H, dd, J=8,66, 4,89 Hz), 3,77 (3 H, s), 2,06 - 2,20 (2 H, m), 1,83 - 1,98 (1 H, m), 1,580 - 1,81 (4 H, m), 1,38 - 1,55 (2 H, m). *F RMN (376 MHz, CDCI3-d) 5 ppm -92,15 (1 F, d, J=237,55 Hz), -102,44 (1F, qd J=235,82 Hz). LO (Cond. OL1): Tr= 1,66 min. LC/MS: Anál. Calc. para [2M+Na]" CaaHa2FaNoNaOs: 705,28; encontrado: 705,18. Cap-176, etapa e
OO ao
F
É Bifluoreto Cap-176, etapa d (4 g, 11,72 mmol), foi dissolvido em
' 139/563 MeOH (120 mL) e carregado com Pd/C (1,247 9, 1,172 mmol). A suspensão recebeu fluxo de N> (3x) e a mistura de reação foi posta sob 1 atm de H, (batão). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 48 horas. A sus- pensão foi então filtrada em uma almofada de CELITE? e concentrada sob vácuo para dar um óleo que correspondia a aminoácido Cap-176, etapa e (2,04 g), e aquele que foi usado sem purificação adicional. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 3 ppm 3,62 (3 H, s), 3,20 (1 H, d, J=5,77 Hz), 1,91 - 2,09 (2 H, m), 1,50 - 1,88 (7 H, m), 1,20 - 1,45 (2 H, m). *F RMIN (376 MHz, DMSO- ds) 5 ppm -89,39 (1 F, d, J=232,35 Hz), -100,07 (1 F, d, J=232,35 Hz). *C RMN(101 MHz, DMSO-ds) ô ppm 175,51 (1 C, s), 124,10 (1 C, t, J=241,21, 238,90 Hz), 57,74 (1 C, s), 51,39 (1 C, s), 39,23 (1 C, s amplo), 32,02 - 33,83 ' (2 C, m), 25,38 (1 C, d, J=10,02 Hz), 23,74 (1 C, d, J=9,25 Hz). LC (Cond. : OL2): Tr= 0,95 min. LC/MS: Anál. Calc. para [2M+H]* CisH31FaN2O>: 415,22; encontrado: 415,40.
Cap-176, etapa f . Ox 9
F Cloroformiato de metila (1,495 mL, 19,30 mmol) foi adicionado a uma solução de aminoácido Cap-176, etapa e (2 g, 9,85 mmol), e DIEA (6,74 mL, 38,6 mmol) em CH2Clyz (100 mL). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas e os voláteis foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de BIOTAGE? (EtOAc 0% a20%/Hex; coluna de 90 9). Um óleo transparente que solidificou quando parado sob vácuo e correspondendo a carbamato Cap-176, etapa f (2,2 9), foi recuperado. *H RMN (500 MHz, CDCI3-d) 5 ppm 5,27 (1 H, d, J=8,55 Hz), 4,39 (1 H, dd, J=8,85, 4,88 Hz), 3,77 (3 H, s), 3,70 (3 H, s), 2,07 - 220 (2H, m), 1,84 - 1,98 (1 H, m), 1,64 - 1,82 (4 H, m), 1,39 - 1,51 (2 H, m). *F RMN (471 MHz, CDCI3-d) 5 ppm -92,55 (1 F, d, J=237,13 Hz), -102,93 (1 F, d, J=237,12 Hz). *C RMN (126 MHz, CDCI3-d) 5 ppm 171,97 (1 C, s), 156,69 (1C,s), 119,77 - 125,59 (1 C, m), 57,24 (1 C, s amplo), 52,48 (1 C, s amplo),
52,43 (1 O, s), 39,15 (1 C, s), 32,50 - 33,48 (2 C, m), 25,380 (1 C, d, J=9,60 Hz), 24,03 (1 C, d, J=9,60 Hz). LC (Cond. OL1): Tr= 1,49 min. LC/MS: Anál. Calc. para [M+Na]* ChuHi;FaNNaO,: 288,10; encontrado: 288,03. Cap-176 HO, O . No”
F H
É Ácido (S)-2-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-(metoxicarbonitamino)acético Uma solução de LiOH (0,379 g, 15,83 mmol) em água (25 mL) foi adicionada a uma solução de carbamato Cap-176, etapa f (2,1 g, 7,92 ' mmol), em THF (75 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura - ambiente por 4 horas. THF foi removido sob vácuo e a fase aquosa restante foi acidificada com solução de HCI 1N (2 mL) e então extraída com EtOAc (2 x 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;y), filtradas * 10 e concentradas para dar uma espuma branca correspondendo a Cap-176 : (1,929). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) à ppm 12,73 (1 H, s), 7,50 (1 H, d, J=8,78 Hz), 3,97 (1 H, dd, J=8,53, 6,02 Hz), 3,54 (3 H, s), 1,92 - 208 (2 H, m), 1,57 - 1,90 (5 H, m), 1,34 - 1,48 (1 H, m), 1,27 (1 H, qd, J=12,72, 3,26 Hz). *F RMN (376 MHz, DMSO-d;s) 5 ppm -89,62 (1 F, d, J-232,35 Hz), - 99,93(1F,qd J=232,35 Hz). LC (Cond. OL2): Tr= 0,76 min. LC/MS: Anál. Calc. para [M-H]* CioHi4F2NO,: 250,09; encontrado: 250,10. Cap-177a e Cap-177b o no X > HO 2º o
O o R O capitr7za Cap 177b Cap-177a e Cap-177b, etapa a o b o o: o
SO SO H o H o
1,1,3,3-Tetrametilguanidina (0,985 mL, 7,85 mmol) foi adiciona- da a uma solução agitada de metil 2-(benziloxicarbonitamino)-2-(dimetoxi- fosforil)>acetato (2,0 9, 6,0 mmol) em EtOAc (40 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente sob N> por 10 minutos.
Então diidro-2H-piran- 3(4H)-ona [23462-75-1] (0,604 g, 6,04 mmol) foi adicionada e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
A mistura de reação foi en- tão esfriada em congelador por 10 minutos e neutralizada com ácido cítrico aquoso (1,5 g em 20 mL de água). As duas fases foram divididas e a fase orgânica foi lavada com HCI aquoso 0,25 N e salmoura e então secas (Mg- SO;,) e concentradas para um óleo incolor.
O material bruto foi purificado através de cromatografia de sílica rápida (solvente de carga: DCM, eluído Ú com EtOAc/Hexanos, gradiente de EtOAc 20% a 30%) para dar dois produ- ' tos isoméricos: O primeiro produto eluído foi (Z)-metil 2-(benziloxicarbo- nilamino)-2-(2H-piran-3(4H,5H,6H)-ilideno)acetato (490 mg) (sólido branco) e o segundo foi (E)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-(2H-piran-3(4H,5H,6H)- - ilideno)acetato (433 mg) (sólido branco). Tempo de retenção LC-MS 1,398 ' min (para isômero Z) e 1,378 min (para isômero E); m/z 304,08 (para isôme- ro Z) e 304,16 (para isômero E) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 10u C18 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min em que o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clo- rofórmio-d) (para isômero Z) ô ppm 7,30 - 7,44 (m, 5 H), 6,18 (br. s., 1 H), 5,10-5,17(m, 2H), 4,22 (s,2H), 3,78 (s amplo, 3 H), 2,93 - 3,02 (m, 2H), 1,80 (dt, J=11,7, 5,8 Hz, 2 H), 1,62 (s, 2 H). *H RMN (400 MHz, clorofórmio- d) (para isômero E) 5 ppm 7,31 - 7,44 (m, 5 H), 6,12 (s amplo, 1 H), 5,13 -
5,17 (m, 2 H), 4,64 (s amplo, 2 H), 3,70 - 3,82 (m, 5 H), 2,49 (t, J=6,5 Hz, 2 H), 1,80 (s amplo, 2 H). (Nota: a regioquímica absoluta foi determinada atra- vés de mudanças de 'H RMN e constantes de acoplamento).
Cap-177a eCap-177b, etapa b o o do SS 6 O SO O
O Tetrafluorborato de (-)-1,2-bis((28,58)-2,5-dimetilfosfolano)etano (ciclooctadieno)-ródio(l) (28,2 mg, 0,051 mmol) foi adicionado a uma solução : agitada de (Z)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-(2H-piran-3(4H,5H,6H)- ilidene)acetato (310 mg, 1,015 mmol) em MeOH (10 mL) e a mistura recebeu fluxo de vácuo com N,, seguido por H7, e então a reação foi agitada sob H, 413,69 kPa (60 psi) em temperatura ambiente por 2 dias. A mistura de rea- ção foi concentrada e o resíduo foi purificado através de cromatografia de Sílica rápida (solvente de carga: DCM, eluído com EtOAc 20% em hexanos) ' para dar (S)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-((S)-tetra-hidro-2H-piran-3- iNacetato (204 mg) como óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 1,437 min; m/z 307,89 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tem- po de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era H;O 5% / MeOH 95% / acetato de a- mônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio- d)ôóppm7,30-7,46(m,5H), 5,32 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 4,36 (dd, J=8,9, 5,6 Hz, 1 H), 3,84 - 3,98 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,28 - 3,37 (m, 1 H), 3,23 (dd, J=11,3, 10,5 Hz, 1 H), 2,04 - 2,16 (m, 1 H), 1,61 - 1,755 (m, 3 H),
' 143/563 1,381 - 1,43 (m, 1 H).
O outro estereoisômero ((E)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2- (2H-piran-3(4H,5H,6H)-ilideno)acetato) (360 ma, 1,18 mmol) foi reduzido de uma maneira similar para dar (S)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-((R)- tetra-hidro-2H-piran-3-il)acetato (214 mg) como um óleo íncolor. Tempo de retenção de LC-MS 1,437 min; m/z 308,03 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXSº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Sol- 1 vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH 5% / H2O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95%/ acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando . um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, ciorofórmio-d) 5 ppm 7,30 - 7,44 (m, 5 H), 5,31 (d, J=9,0 Hz, 1 H), 5,12 (s, 2 H), 4,31 (dd, J=8,7, 6,9 Hz, 1 H), 3,80 - 3,90 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,37 (td, J=10,8, 3,5 Hz, 1 H), 3,28 (dd, J=11,3, 9,8 Hz, 1 H), 1,987 - 2,410 (m, 1H) 1,81(d,J=11,5Hz, 1H), 1,61 - 1,72 (m, 2 H), 1,33 - 1,46 (m, 1 À). Cap-177a e Cap-177b, etapa c
À À Ox o on º o
SOS H o H Oo Pd/C 10% (69,3 mg, 0,085 mmol) foi adicionado a uma solução de (S)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-((S)-tetra-hidro-2H-piran-3- iNacetato (200 mg, 0,651 mmol) e dimetil dicarbonato [4525-33-1] (0,104 mL, 0,976 mmo!) em MeOH (10 mL). A mistura de reação recebeu fluxo a vácuo de N, seguido por H7; e então a reação foi agitada sob H, 379,21 kPa (55 psi) em temperatura ambiente por 5 horas. A mistura de reação foi filtrada
: 144/563 em CELITE?/almofada de sílica e o filtrado foi concentrado para um óleo in- color. O óleo bruto foi purificado através de cromatografia de sílica rápida (solvente de carga: DCM, eluído com EtOAc 30% em hexanos) para dar produto — (S)-metil — 2-(metoxicarbonilamino)-2-((S)-tetra-hidro-2H-piran-3- ilacetato (132 mg) como óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 0,92 min; m/z 231,97 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um ' tempo de gradiente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tem- po de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato i de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de a- —mônio10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº . Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio- d) à ppm 5,24 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 4,34 (dd, J=8,9, 5,6 Hz, 1 H), 3,84 - 3,97 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,29 - 3,38 (m, 1 H), 3,23 (dd, J=11,2, 10,4 Hz, 1 H), 2,03 - 2,14 (m, 1 H), 1,56 - 1,75 (m, 3 H), 1,32 - 1,43 (m, 1H).
Outro diastereômero ((S)-metil 2-(benziloxicarbonilamino)-2-((R)- tetra-hidro-2H-piran-3-il)acetato) foi transformado de uma maneira similar para dar (S)-metil 2-(metoxicarbonilamino)-2-((R)-tetra-hidro-2H-piran-3- iacetato como um óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 0,99 min; m/z 231,90 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líqui- do Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXO Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- entede3min, um tempo de manutenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HSO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
' 145/563 Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 5,25 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 4,29 (dd, J=8,4, 7,2 Hz, 1 H), 3,82 - 3,90 (m, 2 H), 3,77 (s, 3 H), 3,70 (s, 3 H), 3,37 (td, J=10,8, 3,3 Hz, 1 H), 3,28 (t, J/=10,5 Hz, 1H),196-2,08(m, 1H), 1,81 (dd, J=12,9, 1,6 Hz, 1 H), 1,568 - 1,72 (m, 2 H), 1,33 - 1,46 (m, 1 H). Cap-177a e Cap-177b, etapa d HO-º o HO 2º o
STS o ' A uma solução de (S)-metil 2-(metoxicarbonilamino)-2-((S)-tetra- : hidro-2H-piran-3-il)acetato (126 mg, 0,545 mmol) em THF (4 mL) agitando em temperatura ambiente foi adicionada uma solução de LIOH 1M (1,090 19 mL, 1,090 mmol) em água. A reação foi agitada em temperatura ambiente - por 3 horas, neutralizada com HCl 1M (1,1 mL) e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). Os orgânicos foram secos, filtrados e concentrados para dar ácido (S)- 2-(metoxicarbonilamino)-2-((S)-tetra-hidro-2H-piran-3-il)acético — (Cap-177a) (125 mg) como um óleo incolor. Tempo de retenção de LO-MS 0,44 min; m/z 218,00 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líqui- do Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/ Solvente B0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tempo de análise de 4 min onde o Solvente À era MeEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solivente B era H;O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) ô ppm 5,28 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 4,38 (dd, J=8,7, 5,6 Hz, 1 H), 3,96 - 4,04 (m, 1 H), 3,91 (d, J=11,0 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,33 - 3,41 (m, 1 H), 3,24 - 3,32 (m, 1
' 146/563 H), 2,10 - 2,24 (m, 1 H), 1,74 - 1,83 (m, 1 H), 1,63 - 1,71 (m, 2 H), 1,35 - 1,49 (m, 1H). Outro diastereômero ((S)-metil 2-(metoxicarbonilamino)-2-((R)- tetra-hidro-2H-piran-3-il)acetato) foi transformado de uma maneira similar para dar ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-((R)-tetra-hidro-2H-piran-3- iNacético (Cap-177b) como óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 0,41 min; m/z 217,93 (MH+). Os dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- Ú vente A 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um BR tempo de gradiente de 3 min, um tempo de manutenção de 1 min e um tem- po de análise de 4 min em que o Solvente À era MeOH 5% / HO 95% / ace- tatode amônio 10 mM e o Solvente B era HSO 5% / MeOH 95% / acetato de . amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- . MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clo- rofórmio-d) ô ppm 6,18 (br. s., 1 H), 5,39 (d, J/=8,5 Hz, 1 H), 4,27 - 4,37 (m, 1 H), 3,82 - 3,968 (m, 2 H), 3,72 (s, 3 H), 3,42 (td, J=10,8, 3,3 Hz, 1 H), 3,35 (t, J=10,4 Hz, 1H), 2,01 -2,18 (m, 1 H), 1,90 (d, /=11,8 Hz, 1 H), 1,59 - 1,76 (m, 2 H), 1,40 - 1,54 (m, 1H). Cap-178 :
QT Ácido 2-(metoxicarbonilamino)-2-((2R,48)-2-metiltetra-hidro-2H-piran-4- iNacético Cap-178, etapa a OAc à 2OAc
SS
' 147/563 A uma solução de diacetato de (28,3S8,4S)-2-metil-3,4-di-hidro- 2H-piran-3,4-diila (5 9, 23,34 mmol) em 20 mL de MeOH em um tanque de hidrogenação foi adicionado Pd/C (150 mg, 0,141 mmol). A mistura resultan- te foi hidrogenada a 275,79 kPa (40 psi) em Agitador Parr por 1 hora. A mis- turafoi então filtrada e o filtrado foi concentrado para dar Cap-178, etapa a (5,0 g) como um óleo transparente, que solidificou enquanto parado. *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) ô ppm 4,85 - 4,94 (1 H, m), 4,69 (1 H, t, J=9,46 Hz), 3,88 - 3,94 (1 H, m), 3,44 (1 H, td, J=12,21, 1,83 Hz), 3,36 (1 H, da, J=9,42, 6,12 Hz), 2,03 - 2,08 (1 H, m), 2,02 (3 H, s), 2,00 (3 H, s), 1,70 - 1,890(1H,m), 1,16 (3H, d,J=6,10 Hz).
Cap-178, etapa b o Co? ' A OH ÇS.
. A uma solução de Cap-178, etapa a, (5,0 g, 23 mmol) em 50 mL de MeOH foram adicionadas várias gotas de metóxido de sódio. Após agitar i em temperatura ambiente por 30 minutos, metóxido de sódio (0,1 mL, 23,12 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. O solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi diluído com benzeno e concentrado para dar o diol correspondente como um sólido amarelo. O sólido foi dissolvido em 50 mL de piridina e a esta solução a - 35ºC foi adicionado cloreto de benzoíla (2,95 mL, 25,4 mmol) em gotas. À mistura resultante foi agitada a -35ºC por 1 hora, então em temperatura am- bienteda noite para o dia. A mistura foi diluída com EtO e lavada com água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2X). As camadas orgânicas com- binadas foram secas com MgSO, e concentradas. O produto bruto foi purifi- cado através de cromatografia rápida (sílica-gel, EIOAc 5%-15%/Hex) para dar Cap-178, etapa b, (4,5 gd) como óleo incolor que cristalizou lentamente quando parado por muito tempo. LC/MS: Anál. Calc. para [M+Na]* C13H16 NaO, 259,09; encontrado 259,0; *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,02 - 8,07 (2 H, m), 7,55 - 7,61 (1 H, m), 7,45 (2H, t, U=7,78 Hz), 5,01 (1 H,
' 148/563 ddd, J=11,44, 8,70, 5,49 Hz), 3,98 (1 H, ddd, /=11,90, 4,88, 1,53 Hz), 3,54 (1 H, td, J=12,36, 2,14 Hz), 3,41 (1 H, t, /=9,00 Hz), 3,31 - 3,38 (1 H, m), 2,13 - 2,19 (1 H, m), 1,83 - 1,94 (1 H, m), 1,36 (3 H, d, J=5,80 H2).
Cap-178, etapa c OBz
OS A uma mistura de NaH (1,143 g, 28,6 mmol) (60% em óleo mine- ral)em6mL de CS, foi adicionado Cap-178, etapa b, (4,5 g, 19 mmol) em 40 mL de CS; em gotas durante 15 minutos. A mistura resultante foi agitada - em temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura ficou laranja claro com um pouco de sólido. Mel (14,29 mL, 228 mmol) foi então adicionado em go- ' tas durante 20 minutos. A mistura foi então agitada em temperatura ambien- teda noite para o dia. A reação foi cuidadosamente extinta com solução de NH,CI saturada. A mistura foi extraída com EtOAc (3X). As camadas orgâni- cas combinadas foram secas com MgSO, e concentradas. O produto bruto 7] foi purificado através de cromatografia rápida (silica-gel, EtOAc 6%/Hex) pa- ra dar Cap-178, etapa c (3,13 g), como óleo transparente. LC/MS: Anál.
Calc para [M+Na]" CisHisNaO,4S, 349,05; encontrado 349,11; 1H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 pom 7,94 - 8,00 (2 H, m), 7,50 - 7,58 (1 H, m), 7,41 (2 H, t, J=7,78 Hz), 5,96 (1 H, t, J=9,46 Hz), 5,28 (1 H, ddd, J=11,37, 9,38, 5,49 Hz), 4,02 (1 H, ddd, J=11,98, 4,96, 1,68 Hz), 3,54 - 3,68 (2H, m), 2,48 (3 H, s), 2,31 (1 H, dd), 1,88 - 1,99 (1 H, m), 1,28 (3H, d).
Cap-178, etapa d OBz Q, A uma mistura de Cap-178, etapa c, (3,13 g, 9,59 mmol) e AIBN (120 mg, 0,731 mmol) em 40 mL de benzeno a 80ºC foi adicionado hidreto de tri-n-butilestanho (10,24 mL, 38,4 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura de refluxo por 20 minutos, então esfriada para temperatura
' 149/563 ambiente. A mistura foi diluída com éter de dietila e 100 mL. de solução a- quosa de KF (10 9) foram adicionados e a mistura foi agitada vigorosamente por 30 minutos. As duas camadas foram então separadas e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2X). A camada orgânica foi seca com MgSO, e con- centrada. O produto bruto foi purificado através de cromatografia rápida (sili- ca-gel, desativado com EgN 3% em Hexanos e recebeu fluxo com Et;N 3% em Hexanos para remover derivado de tributilestanho e então eluído com EtOAc 15%/Hex) para dar Cap-178, etapa d (1,9 g), como óleo transparente. 1H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 7,98 - 8,07 (2 H, m), 7,52 - 7,58 (1 Hm) 7,43(2H, t J=7,63 Hz), 5,08 - 5,17 (1 H, m), 4,06 (1 H, ddd, J=11,90, 4,88, 1,53 Hz), 3,50 - 3,59 (2H, m), 2,08 - 2,14 (1 H, m), 1,99 - 2,06 (1 H, m), : 1,69 - 1,80 (1 H, m), 1,41 - 149 (1 H, m), 1,24 (3H, d, J=6,10 Hz). ' Cap-178, etapa e
OH ' A uma mistura de Cap-178, etapa d, (1,9 g, 8,63 mmol) em 10 mlk. de MeOH foi adicionado metóxido de sódio (2 mL, 4,00 mmol) (2 M em metanol). À mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 5 horas. O solvente foi removido sob vácuo. A mistura foi neutralizada com solução de NH,CI saturada e extraída com EtOAc (3X). As camadas orgâni- cas foram secas com MgSO, e concentradas para dar Cap-178, etapa e, (0,8 g) como óleo transparente. O produto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 4,01 (1 H, ddd, J=11,80, 5,02, 1,76 Hz), 3,73 - 3,83 (1 H, m), 3,36 - 3,46 (2 H, m), 1,92 - 2,00 (1 H, m), 1,88 (1 H, m), 1,43 - 1,56 (1 H, m), 1,23 (3 H, d), 1,15- 1,29 (1 H,m). Cap-178, etapa f oTs Q.
" 150/563 Tosil-C! (2,63 9, 13,77 mmol) foi adicionado a uma solução de Cap-178, etapa e, (0,8 g, 6,89 mmol) e piridina (2,23 mL, 27,5 mmol) em 100 mL de CH2Cl.
A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 3 dias. 10 mL de água foram então adicionados à mistura de reação e a mis- tura foi agitada em temperatura ambiente por uma hora.
As duas camadas foram separadas e a fase orgânica foi lavada com água e solução de HCI 1 N aquosa.
A fase orgânica foi seca com MgSO, e concentrada para dar Cap- 178, etapa f, (1,75 g) como um sólido amarelo-claro.
O produto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
Anál.
Calc. para [M+H]* CiaH1901S 271,10; encontrado 270,90; 'H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 7,79 (2 H, d, J=8,24 Hz), 7,34 (2 H, d, J=7,93 Hz), 4,53 - 4,62 (1 H, m), 3,94 (1 H, ' ddd, /=12,13, 4,96, 1,83 Hz), 3,29 - 3,41 (2H, m), 2,45 (3 H, s), 1,90 - 1,97 (1 H, m), 1,72 - 1,85 (1 H, m), 1,64 - 1,75 (1 H, m), 1,38 - 1,48 (1 H, m), 1,17 (3 H, d, J=6,10 Hz). Cap-178, etapa g L. ' Ph N Qt
A um tubo de micro-ondas foram postos etil 2-(difenilmetilenoa- mino)acetato (1,6 q, 5,92 mmol) e Cap-178, etapa f (1,6 g, 5,92 mmol). 10 mL de tolueno foram adicionados.
O tubo foi vedado e LIHMDS (7,1 mL, 7,10 mmol) (1N em tolueno) foi adicionado em gotas sob N,. A solução marrom escuro resultante foi aquecida a 100ºC sob radiação de micro-ondas por 6 horas.
À mistura foi então adicionada água e a mistura foi extraída com E- tOAc (3X). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com MgSO, e concentradas para dar uma mistura diastereomérica de Cap-3, etapa g, (3,1 g) como um óleo laranja.
A mistura bruta foi submetida à etapa seguinte sem separação. .C/MS: Anál.
Calc. para [M+H]* CasHosNOsz
366,21; encontrado 366,3.
: 151/563 . Cap-178, etapa h
L HoN o Ss
QT A uma solução da mistura diastereomérica de etila Cap-178, e- tapa 9, em 20 mL de THF foi adicionado HCI (30 ml, 60,0 mmol) (aquoso 2N). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. À mistura foi extraída com EtOAc e a camada aquosa foi concentrada para dar — 5 umsaldeHCIde Cap-178, etapa h (1,9 g), como um óleo laranja. O sal foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LC/MS: Anál. Calc. para ' IM+H]I* CioH2oNO; 202,14; encontrado 202,1. Cap-178, etapa o NA - Y CH o o om Uma solução de 1,9 g de Cap-178, etapa h, (sal de HCI) DIPEA (4,19 mL, 24,0 mmol) e cloroformiato de metila (1,24 mL, 16,0 mmol) em 20 mL de CHCl, foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. A mistura foi diluída com CH2Clz e lavada com água. A camada orgânica foi seca com Na28SO, e concentrada. O produto bruto foi purificado através de cromatogra- fia rápida (sílica-gel, EtOAc 0-20%/Hex) para dar Cap-178, etapa i, (1,1 g) como um óleo amarelo. Anál. Calc. para [M+Na]"* Ci2HNNaO;s 282,13; en- contrado 282,14; 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 8 ppm 5,16 (1 H, s am- plo), 4,43 - 4,58 (1 H, m), 4,17 - 4,28 (2 H, m), 3,89 - 4,03 (1 H, m), 3,72 - 3,78 (2H, m), 3,67 - 3,72 (3 H, m), 2,07 - 2,19 (1 H, m), 1,35- 1,77 (AH, m), 1,30 (3 H, td, /=7,09, 2,89 Hz), 1,19 (3 H, d, J=6,53 Hz).
: 152/563
À Cap-178, etapa j ot
E Oo “
QT A uma mistura de Cap-178, etapa i, (1,1 g, 4,2 mmol) em 5 mL de THF e 2 mL de água foi adicionado LIOH (6,36 mL, 12,7 mmol) (aquoso 2N). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura foi então neutralizada com HCl IN aquoso e extraída com EtOAc (3X). As camadas orgânicas combinadas foram secas com MgSO, e R concentradas para dar Cap-178, etapa j, (0,8 g) como um óleo transparente. LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHiaNOs 232,12; encontrado 232,1; *H ' RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 3 ppm 5,20 (1 H, d, J=8,28 Hz), 4,54 (1 H, t, J=8,16 Hz), 3,95 - 4,10 (1 H, m), 3,66 - 3,85 (5 H, m), 2,15 -2,29 (1 H, m), : 10 1,41-1,85(4AH,m), 1,23 (3H, dd, J=6,53, 1,76 Hz). Cap-178, etapa k 2 O X-NH o cor o
O A uma solução de Cap-178, etapa j, (240 mg, 1,04 mmol) (S)-1- feniletano! (0,141 mL, 1,142 mmol) e EDC (219 mg, 1,14 mmol) em 10 mL de CH2CI, foi adicionado DMAP (13,95 mg, 0,114 mmol). A solução resultan- te foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi absorvido em EtOAc, lavado com água, seco com MgSO, e concentrado. O produto bruto foi purificado através de cromatografia (silica-gel, EtOAc 0-15%/Hexanos) para dar Cap-178, etapa k, como uma mistura de dois diastereômeros. A mistura foi separada através de HPLC quiral (Coluna CHIRALPAKº AS, 21 x 250 mm, 10 um) eluindo com dietilamina/Heptano 90%- 0,1%-EtOH 10% a 15 mL/min para dar cz 153/563 - Cap178, etapa k, estereoisômero 1 (eluído primeiro) e Cap-178, etapa k, estereoisômero 2 (eluído segundo) como sólidos brancos. À estereoquímica dos isômeros não foi determinada. Cap-178, etapa k, estereoisômero 1 (130 mg): LC/MS: Anál. Calc. para [M+Na]" CisHosNNaOs 358,16; encontrado 358,16; 1H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 8 ppm 7,28 - 7,38 (5 H, m), 5,94 (1 H, q, J=6,71 Hz), 5,12 (1 H, d, J=9,16 Hz), 4,55 (1 H, t, J/=9,00 Hz), 3,72 - 3,81 (1 H, m), 3,67 (3 H, s), 3,60 - 3,70 (2H, m), 1,98 - 2,08 (1 H, m), 1,59 (3 H, d, J=6,71 Hz), 1,38 - 1,47 (2H, m), 1,30 (2H, t, J=5,34 Hz), 0,93 (3 H, d, J=6,41 Hz). Cap-178, estereoisômero 1 . o ' OH - o D QT Mm Ácido 2-(metoxicarbonilamino)-2-((2R,48)-2-metiltetra-hidro-2H- piran-4i)acético ' A uma solução de Cap-178, etapa k, estereoisômero 1 ácido ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-((28,4R)-2-metiltetra-hidro-2H-piran4-il) acé- tico) (150 mg, 0,447 mmol) em 10 mL de EtOH foi adicionado Pd/C (20 mg, 0,188 mmol) e a mistura foi hidrogenada em agitador Parr a 275,79 kPa (40 psi) da noite para o dia. A mistura foi então filtrada e o filtrado foi concentra- do para dar Cap-178, estereoisômero 1 (100 mg) como um sólido branco pegajoso. LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]* CioHisNOs 232,12; encontrado 232,1; *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 5,14 - 5,27 (1 H, m), 4,51 (1 H t J=8,39Hz),3,90-4,07(1H,m), 3,60 - 3,83 (5 H, m), 2,08 - 227 (1 H, m), 1,45-1,77 (4H, m), 1,21 (3 H, d, J=6,41 Hz). Cap-179 4 4 IS 172 sessstras!
E OH
Cap-179, etapa a
TS
OH 2,6-Dimetil-4H-piran-4-ona (10 g, 81 mmol) foi dissolvida em e- tanol (125 mL) e Pd/C (1 g, 0,84 mmol) foi adicionado. A mistura foi hidroge- nada em um aparelho Parr sob H7 (0,325 g, 161 mmol) 482,63 kPa (70 psi) em temperatura ambiente por 12 horas. O catalisador foi filtrado em uma almofada de CELITES e lavado com etanol. O filtrado foi concentrado a vá- cuo e o resíduo foi purificado através de BIOTAGE? (EtOAc 2% a 25%/Hex; coluna de 160 g). Duas frações de óleos transparentes foram isoladas. À primeira eluição correspondia à (2R,6S)-2,6-dimetildiidro-2H-piran-4(3H)-ona - (1,8 g, 14,04 mmol, 17,43% de rendimento) enquanto a segunda correspon- diaaCap-179, etapa a, (1,8 g).Dados de (2R,6S)-2,6-dimetilditdro-2H-piran- 4(3H)-ona: *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 3,69 (2 H, ddd, J=11,29, ' 5,95, 2,29 Hz), 2,24 - 2,36 (2H, m), 2,08 - 2,23 (2H, m), 1,18 - 1,34 (6H, m); - GC RMN (126 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 206,96 (1 C, s amplo), 72,69 (2 C, s), 48,70 (2C,s), 21,72(2C,s). Cap-179, dados da etapa a: *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 3,69 - 3,78 (1 H, m), 3,36 - 3,47 (2H, m), 2,10 (1 H, s amplo), 1,88 (2 H, dd, J=12,05, 4,73 Hz), 1,419 (6 H, d, J=6,10 Hz), 1,10 (2 H, q, J/=10,70 H2); **C RMN (126 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 71,44 (2 C, s), 867,92 (1 C, s), 42,59 (2C,s), 21,71 (2C,S). Cap-179, etapa b
XY | ô NO, DEAD (2,311 mL, 14,59 mmol) foi adicionado em gotas a uma solução de Cap-179, etapa a, (0,38 g, 2,92 mmol) ácido 4-nitrobenzoico (2,195 g, 13,14 mmol) e Ph3P (3,83 g, 14,59 mmol) em benzeno (25 mL). Evolução de calor foi detectada e a solução âmbar resultante foi agitada em temperatura ambiente por 6 horas, Solvente foi removido sob pressão redu- zidaeo resíduo foi purificado através de BIOTAGE? (EtOAc 0 a 15%/Hex; coluna de 80 g). Um sólido branco correspondendo a Cap-179, etapa b, (0,77 g) foi isolado. 'H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,27 - 8,32 (2 H, m), 8,20 - 8,24 (2 H, m), 5,45 (1 H, quin, /=2,82 Hz), 3,92 (2 H, dad, J=11,90, 6,10, 6,10, 6,10, 1,53 Hz), 1,91 (2 H, dd, J=14,80, 2,29 Hz), 1,57 (3 H dt,J=14,65,3,05 Hz), 1,22 (6 H,d,J=6,10 Hz). ' Cap-179, etapa c
TS om Uma solução de LiOH (0,330 g, 13,8 mmol) em água (8 mL) foi adicionada a uma solução de Cap-179, etapa b, (0,77 g, 2,78 mmol) em THF ' (30 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. THF foi removido sob pressão reduzida e a camada aquosa foi diluída com mais água (20 mL) e extraída com EtOAc (3 x 15 mL). As camadas or- gânicas combinadas foram secas (MgSO3), filtradas e concentradas sob vá- cuo. Um resíduo oleoso com um sólido branco foi recuperado. A mistura foi triturada com hexanos e o sólido foi filtrado para dar um óleo transparente correspondendo a Cap-179, etapa c (0,34 g, 2,61 mmol, 95% de rendimen- to) 'H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 4,21 (1 H, quin, J=2,82 Hz), 3,87 - 3,95 (2 H, m), 1,72 (1 H, s amplo), 1,63 (2 H, dd, J=14,34, 2,14 H2), 1,39 - 1,47 (2H, m), 1,17 (6 H, d, J=6,41 Hz). Cap-179, etapa d Os às Cloreto de tosila (3,98 9, 20,89 mmol) foi adicionado a uma solu-
ção de Cap-179, etapa c, (1,38 g, 10,5 mmol) e Piridina (3,38 mL, 41,8 mmol) em CH.Ch (150 mL) em temperatura ambiente e agitado por 24 horas e então concentrado para um óleo amarelo. O resíduo restante foi adiciona- do à piridina (20 mL) e água (30 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 1 % hora. A mistura foi extraída com Et7O (75 mL) e a camada orgânica separada foi então lavada completamente com HCI aquoso IN (4 x 50 mL). A camada orgânica foi então seca (MgSO;), filtrada e concentrada. Um sólido branco correspondendo a Cap-179, etapa d, (2,2 g) foi isolado. LC/MS: Anál. Calc. para [2M+H]I* CogH41OgS> : 569,22; encon- trado 569,3, *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) à ppm 7,80 (2 H, d, J=8,28 Hz), 7,35 (2 H, d, J=8,03 Hz), 4,89 (1 H, quin., /=2,82 Hz), 3,77 - 388 (2 H, ' m), 2,46 (3 H, s), 1,77 (2 H, dd, J=14,93, 2,89 Hz), 1,36 (2 H, ddd, J=14,31, 11,54, 2,76 Hz), 1,13 (6 H, d, J=6,27 H2).
Cap-179, etapa e Ph . PRA
N - a O
SS o LiHMDS (4,30 mL, 4,30 mmol) foi adicionado a uma solução de Cap-179,etapad,(1,02g,3,59 mmol) e benzil 2-(difenilmetilencamino) ace- tato (1,81 g, 3,59 mmol) em tolueno (25 mL) em temperatura ambiente em um frasco de micro-ondas vedado e a mistura resultante foi então agitada por 5 horas a 100ºC sob radiação de micro-ondas. A reação foi extinta com água (10 mL), extraída com EtOAc, lavada com água, seca em MgSO,, fil- tradae concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de BIOTAGEº? (EtOAc 0% a 6%/Hex; coluna de 80 g) e um óleo amarelo correspondendo a Cap-179, etapa e, (1,2 g) foi isolado. Anál. Calc. para [2M+Na]* CssHe2aNa NaOs : 905,45; encontrado 905,42, *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 7,64 - 7,70 (4 H, m), 7,29 - 7,44 (29 H, m), 7,06 (4 H, dd, J=7,65, 1,63 Hz), S518(2H,d,J=2,01 Hz), 3,89 (2 H, d, J=6,53 Hz), 3,79 - 3,87 (1 H, m), 3,46 (5 H, dquind, J=11,26, 5,87, 5,87, 5,87, 5,87, 1,88 Hz), 247 (2 H, s), 2,35 - 2,46 (2 H, m), 1,78 (1 H, dd, J=14,81, 3,01 H2), 1,62 - 1,65 (1 H, m), 1,61 (2
H, s), 1,38 - 1,43 (3 H, m), 1,49 (7 H, d, J=6,27 Hz), 1,14 (11 H, dd, J=6,15, 2,89 Hz), 0,86 - 0,98 (3 H, m). Cap-179, etapa f (estereoisômero 1 e estereoisômero 2)
X 4
NH
Õ Cap-179, etapa d, (2,08 9, 4,71 mmol) foi dissolvido em THF (100 mL) e tratado com HCl 2N (9,42 mL, 18,84 mmol). A solução transpa- rente resultante foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas e então : THF foi removido sob pressão reduzida. A camada aquosa resultante foi ex- traída com hexanos (3 x 20 ml) e após diluir com H2O (20 mL), a fase aquo- " sa foi basificada com NaOH 1N para pH = 10 e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;), filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo resultante foi absorvido em CH,Cl> (100 ' mL) e carregado com DIEA (2,468 mL, 14,13 mmo!) e cloroformiato de metila ' (0,401 mL, 5,18 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura am- biente por 2 horas. A mistura de reação foi extinta com água (10 mL) e a camada orgânica foi removida sob pressão reduzida. A camada aquosa foi então extraída com EtOAc (3 x 10 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado atra- vés de BIOTAGE? (EtOAc 10%/Hex; coluna de 25 g). Um óleo incolor cor- respondendo a Cap-179, etapa f, (1,05 g) foi recuperado. LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]* CisH2osNOs : 336,18; encontrado 336,3, *H RMN (500 MHz, clo- rofórmio-d) 5 ppm 7,32 - 7,40 (5 H, m), 5,26 (1 H, d, J=8,24 Hz), 5,13 - 5,24 (2 H, m), 4,36 (1 H, dd, J=8,85, 4,88 Hz), 3,68 (3 H, s), 3,32 - 346 (2 H, m), 2,02 - 2,14 (1 H, m), 1,52 (1 H, d, J=12,82 Hz), 1,32 (1 H, d, 112,51 H2), 1,11-1,18(6 H, m), 0,898 - 1,07 (2H, m). Um método de SFC quiral foi desenvolvido para separar a mistu- rade estereoisômeros usando metanol 12% como o modificador em uma coluna CHIRALPAKº AD-H (30 x 250 mm, 5 um) (Temp = 35ºC, Pressão = 150 bar, Comprimento de onda = 210 nm, Taxa de fluxo = 70 mlL/min por 8 minutos, Solvente A = CO», Solvente B = MeOH). Os dois isômeros separa- dos, Cap-1789 etapa f (estereoisômero 1) (eluindo primeiro) e Cap-179 etapa f (estereoisômero 2) (eluindo segundo), mostraram os mesmos dados analí- ticos que a mistura correspondente (vide acima). Cap-179 Y 4 2 178 Ssseontmes oH o Ácido 2-((2R,4R,6S)-2 ,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-(metoxicarbo- nilamino)acético Cap-178 etapa f (estereoisômero 1) (0,35 g, 1,044 mmol) foi dis- ' solvido em MeOH (50 mL) em uma garrafa Parr e carregado com Pd/C (0,111 g, 1,044 mmol). A suspensão foi então posta em um agitador Parre a mistura recebeu fluxo de N> (3x), posta sob 275,79 kPa (40 psi) de H> (2,104 mg, 1,044 mmol) e agitada em temperatura ambiente por 2 horas. O catali- - 10 sadorfoifilirado em uma almofada de CELITES e o solvente foi removido sob pressão reduzida para dar um sólido âmbar correspondendo ao estere- oisômero 1 Cap-179 (0,25 g, 1,019 mmol, 98% de rendimento). 1H RMN (500 MHz, DMSO-ds) à ppm 12,74 (4 H, s amplo), 7,35 (4 H, d, J=6,10 Hz), 3,85 (4 H, s amplo), 3,53 (3 H, s), 3,35 (2 H, ddd, J=15,95, 9,99, 6,10 H2), 1,87 (1H,s amplo), 1,48 (2 H, t, /=13,28 Hz), 1,06 (6 H, d, J=6,10 Hz), 0,82 - 1,00 2H, m).
O estereoisômero 2 Cap-179 foi obtido de acordo com o proce- dimento usado para preparar o estereoisômero 1 Cap-179 usando Cap-179 etapa f (estereoisômero 1) como o material de partida. Estereoisômero 2 Cap-179:'H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 12,50 (1 H, s amplo), 7,31 (1 H, s amplo), 3,84 (1 H, t, J=7,32 Hz), 3,53 (3 H, s), 3,29 - 3,41 (2 H, m), 1,99 (1H, s), 1,48 (2 H, t, J=14,34 Hz), 1,06 (6 H, d, J=6,10 Hz), 0,95 (1 H, q, J=12,21 Hz), 0,87 (1 H, q, J=11,80 Hz).
Cap-180 Mistura racêmica o
YS A
H NH o oH o Cap-180, etapa a
TV OTs ' Tosil-Cl (4,39 g, 23,0 mmol) foi adicionado a uma solução de . Cap-179, etapa a, (1,50 g, 11,5 mmol) e piridina (3,73 mL, 46,1 mmol) em CH2Ckb (50 mL) em temperatura ambiente e agitado por 2 dias. À reação foi diluída com CH2Cl2, lavada com água, então HCl 1N. A camada orgânica foi . 5 seca (MgSO,) e concentrada para dar um óleo amarelo que foi purificado através de BIOTAGES (EtOAc 5% a 20%/Hex; coluna de 40 g). Um óleo transparente que solidificou sob vácuo e correspondendo a Cap-180-2a (2,89 g) foi isolado. LC/MS: Anál. Calc. para [2M+Na]" CogHNaO;zS, : 591,21; encontrado 591,3, *H RMN (500 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 7,80 (2 Hd, J=8,24 Hz), 7,35 (2 H, d, J=7,93 Hz), 4,59 (1 H, tt, /=11,37, 4,96 Hz), 3,36 - 3,46 (2 H, m), 246 (3 H, s), 1,91 (2 H, dd, J=12,05, 5,04 Hz), 1,37 (2 H, dt, J/=12,67, 11,52 Hz), 1,19 (6 H, d, J=6,10 Hz). Cap-180, etapa b Ph
PRA
N O = H )-O o LiHMDS 1 N (7,09 mL, 7,09 mmol) foi adicionado a uma solução de Cap-180, etapa a, (1,68 g, 5,91 mmol) e etil 2-(difenilmetilenoamino) ace- tato (1,579 g, 5,91 mmol) em tolueno (30 mL) em temperatura ambiente e a mistura resultante foi então agitada por 16 horas a 85ºC. A reação foi extinta com água (50 mL), extraída com EtOAc, lavada com água, seca em MgSO;,, filtrada e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de BIOTA- GEº (EtOAc 0% a 15%/Hexa; coluna de 40 g). Um óleo amarelado transpa- rente correspondendo a Cap-180, etapa b, (mistura de estereoisômeros) (0,649g)foiisolado. LC/MS: Anál. Cale. para [M+H]" CosH3oNO; : 380,22; en- contrado 380,03. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) à ppm 7,64 - 7,70 (2 H, m), 7,45 -7,51 (3 H, m), 7,38 - 7,44 (1 H, m), 7,31 - 7,37 (2H, m), 7,13 -7,19 (2 H, m), 4,39 (1 H, d, J=10,54 Hz), 4,16 - 4,26 (2 H, m), 3,29 - 3,39 (1 H, m), 2,93 - 3,03 (1 H, m), 2,70 (1 H, m, J=9,41, 4,14 Hz), 1,42 - 149 (2 H, m), 1,31-1,387 (1H, m), 1,29 (4H, t, J=7,15 Hz), 1,04 (6 H, dd, J=7,78,6,27 H2). Cap-180, etapa c
X - . > a La H Oo : Ó Cap-180, etapa b, (0,36 g, 0,949 mmol) foi dissolvido em THF (10 mL) e tratado com HCI 2N (1,897 mL, 3,79 mmol). A solução transparen- te resultante foi agitada em temperatura ambiente por 20 horas e THF foi removido sob pressão reduzida. A camada aquosa restante foi extraída com hexanos(3x20mbL) e após diluir com HzO (20 mL), a fase aquosa foi basifi- cada com NaOH 1N para pH = 10 e extraída com EtOAc (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;,), filtradas e concen- tradas sob vácuo. O resíduo resultante foi absorvido em CH2Cl2 (10,00 mL) e carregado com DIEA (0,497 mL, 2,85 mmol) e cloroformiato de metila (0,081 —mL,1,044 mmol). A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas e a mistura de reação foi extinta com água (10 mL) e a camada orgânica foi removida sob pressão reduzida. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 10 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO;), filtradas e concentradas. Um óleo âmbar correspondendo a Cap- 180, etapa c, (0,21 g) foi recuperado e ele foi usado sem purificação adicio- nal. LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]" Ci3H24NOs : 273,17; encontrado 274,06,
7H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 5,20 (1 H, d, J=8,03 Hz), 4,59 (1 H, t, 110,16 Hz), 4,11 - 4,27 (3 H, m), 3,69 - 3,82 (2 H, m), 3,64 (3 H, s), 1,95 - 2,07 (1 H, m), 1,63 (1 H, d, J=13,80 Hz), 1,41 (2 H, dd, J=8,03, 4,02 Hz), 1,31 - 1,367 (1 H, m), 1,26 (3 H, t, /=7,15 Hz), 1,16 (1 H, d, J=6,27 Hz), 1,12
(68H, dad,J=6,15,3,89Hz). Cap-180 Mistura racêmica 4 Q o oH : o Cap-180, etapa c, (0,32 g, 1,2 mmol) foi dissolvido em THF (10 ' mL) e carregado com LiOH (0,056 9, 2,342 mmol) em água (3,33 mL) a 0º C.
A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
THF . foi removido sob pressão reduzida e o resíduo restante foi diluído com água (15mL) e lavado com EtO (2 x 10 mL). A camada aquosa foi então acidifi- : cada com HCl 1N para pH —2 e extraída com EtOAc (3 x 15 mL). As cama- das orgânicas combinadas foram secas (MgSO;,), filtradas e concentradas sob vácuo para dar Cap-180 (mistura de estereoisômeros) (0,2 9) como uma espuma branca.
LC/MS: Anál.
Calc. para [M+H]' Ci HooNOs : 246,13; encon- trado 246,00, 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) à ppm 5,14 (1 H, d, /=9,03 Hz), 4,65 (1 H, t, J=9,91 Hz), 3,63 - 3,89 (5 H, m), 1,99 - 2,13 (1 H, m), 1,56 - 1,73 (2H, m), 1,48 - 1,55 (1 H, m), 1,35 - 1,48 (1 H, m), 1,27 (1 H, s amplo), 1,17 (6 H, d, J=6,02 Hz).
INTERMEDIÁRIOS Esquema 1 co Xe Grato OE Fio | Mistura E DO GAI oasis? E ÇA, Exemplos — emas s À = Exemplos “ox, 2 Intermediario 1 Intermediario 2 Literature ChemComm, 2172-2174 (2005). Misturade intermediário 1 2,6-Bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno e Intermediário 2 2,7-Bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-itnaftaleno A uma solução desgaseificada de naftaleno (19,34 9, 151 mmol) e bis(pinacolato)diboro (84 g, 330 mmol) em ciclo-hexano (500 mL) foram adicionados 4,4'-di-terc-butil-2,2'-dipiíridil (4,05 g, 15,1 mmol) e di-p-metoxibis (1 5-ciclooctadiene)diirídio (1) (5,0 g, 7,5 mmol). O frasco foi vedado e aque- cido a 80ºC por 16 horas, então foi deixado esfriar em temperatura ambien- te.
A cor da reação ficou vermelho escuro quando do aquecimento.
O com- ponente volátil foi removido in vacuo e o material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 0-100%/tolueno) para dar uma mistura de 2,6-bis
(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno e 2,7-bis(4,4,5,5-tetrame- til-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno (54,57 g, 95% de rendimento, razão 1,5:1) como sólido branco.
Intermediário 1: *H RMN (500 MHz, benzeno-ds) ô ppm 8,70 (s, 2H) 8,16 (d,J=8,2Hz,2H),7,75(d, J=8,2 Hz, 2H), 1,15 (s, 24H). Intermediário 2: *H RMN (500 MHz, benzeno-ds) à ppm 8,77 (s, 2H), 8,22 (d, J=8,2 Hz, 2H), 7,66 (d, J=8,2 Hz, 2H), 1,15 (s, 24H). S £ Dot pao Tio Mona CAI O É sol intermediário 3 Intermediário 4 ' Mistura de Intermediário 3 2 10 (28,2'S)-terc-Butil 2,2-(6,6-(naftaleno-2,6-diil)bis(1H-benzo[d] imidazo!-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 4 ' (28,2'S)-terc-Butit / 2,2'-(5,5-(naftaleno-2,7-dii)bis(1H-benzo[d] . imidazol-5,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato A uma mistura de 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il) naftaleno e 2,7-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-i)naftaleno (1,5:1) (1,25 g, 3,29 mmol) e (S)-ferc-butil 2-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazo!- 2-i)pirrolidino-1-carboxilato (3,01 g, 8,22 mmol) em 1,2-dimetoxietano (50 mL) e água (12,5 mL) foi adicionado NaHCO; (1,38 g, 16,4 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada in vacuo e recebeu fluxo de nitrogênio. Pd(Ph3P), (190 mg, 0,164 mmol) foi adicionado e o frasco de pressão foi capeado e aquecido com um banho de óleo a 85ºC por 16 horas. O compo- nente volátil foi removido in vacuo. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e água. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída vá- rias vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram filtra- das em uma almofada de terra diatomácea (CELITE?) e o filtrado foi seco (Na2SO3,), filtrado e concentrado in vacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 10-100%/CH2Cl) então recebeu fluxo com (metanol
10%/CH;Cb) para dar uma mistura de (28,2'S)-ferc-butil 2,2'-(6,6"-(naftaleno- 2,6-dii)bis(1H-benzo[d]imidazo!-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato e (28,2'S)- terc-butil 2,2'-(5,5'-(naftaleno-2,7-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol|-5,2-diil)) dipir- rolidino-1-carboxilato (822 mg, 27,1% de rendimento) como um sólido taranja que foiusado sem purificação adicional. Uma alíquota foi purificada através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover uma amostra analítica de cada intermediário como um sal de TFA. Dados analíticos para o Intermediário 3: Tempo de retenção de LC-MS 1,46 min; Calc. para CaoHaeNsO,4: 698,38. Encontrado m/z 699,26 [M+H]F". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de : 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento - de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente À 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, ' um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos . em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 1H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,28 (s amplo, 2H), 8,13 (t, J=8,7 Hz, 4H), 8,05 (t, J=8,4 Hz, 2H), 7,92 (dd, J=14,8, 8,7 Hz, 3H), 5,20 - 5,36 (m, 2H), 3,70 - 3,84 (m, 2H), 3,57 - 3,70 (m, 2H), 2,54 - 2,70 (m, 2H), 2,18 - 2,28 (m, 2H), 2,14 (quin, J=6,9 Hz, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,23 (s, 9H).
Dados analíticos para Intermediário 4: Tempo de retenção de LC-MS 1,52 minuto; Calc. para CazHaeNgO,: 698,36. Encontrado m/z 699,24 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrita 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente
B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s amplo, 2H), 7,98 - 8,17 (m, 68H), 7,83 - 7,98 (m, 4H), 5,18 - 5,35 (m, 2H), 3,71 - 3,83 (m, 2H), 3,57 - 3,70 (m, 2H), 2,63 (s amplo, 2H), 2,19 - 2,28 (m, 2H), 2,07 - 2,18 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,22 (s, 9H). ga g A, OS remenaros 5 MÁ O Bo H Intermediários 6 Intermediários do ácido borônico - 5 Mistura de Intermediário 5 ] Trifluoracetato de (S)-ferc-butil 2-(6-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dio- xaborolan-2-il)naftaten-2-i1)- 1H-benzo[ad]Jimidazol|-2-il)pirrolidino-1-carboxilato . e Intermediário 6 Trifluoracetato de (S)-terc-butil 2-(6-(7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dio- : xaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato Após purificação com cromatografia rápida, a reação acima tam- bém proveu uma mistura de trifluoracetato de (S)-ferc-butil 2-(8-(6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-iI)- 1H-benzo[d]limidazo|-2-11) pir- rolidino-t-carboxilato e (S)-terc-butil 2-(6-(7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabo- rolan-2-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[dlimidazo]|-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (658 mg). Durante a separação por HPLC (tampão de TFA) os ésteres borônicos hidrolisaram parcialmente para dar a mesma mistura que intermediários do ácido borônico.
Tempos de retenção de LC-MS 1,34 minuto (ácidos borôni- cos)e2,05 (ésteres borônicos); Calc. para (ácidos borônicos) CasH2sBN3O,: 457,22. Encontrado m/z 458,14 [M+H]". Para (ésteres borônicos) [M+H]' C32H38BN3O,4: 539,3. Encontrado m/z 490,16 [M]*. Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPDH10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA0O 1%.
N co
CÃO Intermediário 7
AS TU - Intermediário 8 Intermediário 7 i 2,6-Bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)- 1 H-benzo[d]imidazo|l-6-iD)naftaleno e Intermediário 8 210 2,7-Bis(2-((S)-pirrolidin-2-i1)- 1 H-benzo[d]imidazol-6-il)naftaleno Uma mistura de (2S,2'S)-ferc-butil 2,2(6,6-(naftaleno-2,6-diil)bis ' (1H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato e (28,2'S)-ferc-butil 2,2'-(5,5-(naftaleno-2,7-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol-5,2-diil))dipirrolidino-1- carboxilato (594 mg, 0,162 mmol) e TFA (2 mL) em CHzCl; (10 mL) foi agita- daem condições ambientes por 3 horas. O componente volátil foi removido in vacuo e o material bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa (águafacetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirroli- din-2-i1)-1H-benzo[d]limidazo!-S-il)naftaleno (434 mg) como um sólido amare- lo e um sal de TFA de 2,7-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6- iblnaftaleno (204,8 mg) como um sólido amarelo. Dados analíticos para Intermediário 7: Tempo de retenção de LC-MS 1,05 minuto; Calc. para Ca2H3oN; 498,25. Encontrado m/z 499,21 IM+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6xX50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0%
para Solvente À 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 99%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrita 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm3ô8,18(s, 1H), 8,06 (d, J=-8,6 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,84 - 7,92 (m, 1H), 7,73 - 7,81 (m, 2H), 5,08 (t, J=7,6 Hz, 1H), 3,56 - 3,66 (m, 1H), 3,48 - 3,56 (m, 1H), 2,62 - 2,71 (m, 1H), 2,36 - 2,47 (m, 1H), 2,19 - 2,36 (m, 2H). Dados analíticos para Intermediário 8: Tempo de retenção LC- MS 1,11 minuto; Calc. para Ca2HaoNs 498,25. Encontrado m/z 499,20 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire bu C18 de 4,6x50mm usan- do um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de de- - tector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solven- te A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo ' de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o ' Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 3 ppm 8,23 (s, 2H), 8,01 (m, 4H), 7,82 - 7,88 (m, 2H), 7,69 - 7,82 (m, 4H), 5,08 (t, J=7,6 Hz, 2H), 3,57 - 3,66 (m, 2H), 3,48 - 3,57 (m, 2H), 2,60 - 2,73 (m, 2H), 2,37 - 2,48 (m, 2H), 2,19 - 2,36 (m, 4H). Esquema 2 ão FX 8 No NaSOz e.
Na Intermediário 10 Intermediário 11 o N SM Intermediários — intermediário 11 A, CJ) Intermediário12 — TFA,DCM bos MEIO Bea mo TA, intermediários Intermediário 13 ea)
É A RCOH —R 1 E & A AI E amor 2 SIS Na d ELE Pres Fey Rx Exemplos H H RCOH Fo
O
A sd Boc Intermediário 9 - (S)-terc-Butil 2-(1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato E) Glioxal (2,0 mL de 40% em água) foi adicionado em gotas duran- te 11 minutos a uma solução de metanol de NH,OH (32 mL) e (S)-Boc- prolina (8,56 9, 43,0 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente . por 19 horas. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi puri- ficado através de cromatografia rápida (silica-gel, acetato de etila) seguido “10 porumarecristalização (acetato de etila, temperatura ambiente) para prover (S)-ferc-butil 2-(1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato — como um sólido branco fofo (4,439, 18,6 mmol, 43% de rendimento). 'H RMN (DMSO-ds, 400 MHz) 5 ppm 11,68/11,59 (s amplo, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,76 (s, 1H), 4,76 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,35 - 3,29 (m, 1H), 2,23-1,73 (m, 4H),
15. 1,39/1,15 (s, 9H). LCMS. Tr= 0,87 min; índice de homogeneidade >95%; LC/MS: Anál. Calc. para [M+H]" CioHaoN3O2 238,16; encontrado 238,22. O composto mostrado ter uma ee% de 98,9 quando analisado sob as condi- ções de HPLC quirais mencionadas abaixo. Coluna: CHIRALPAKº AD, 10 um, 4,6 x 50 mm Solvente: etanol 1,7%/heptano (isocrático) Taxa de fluxo: 1 mL/min Comprimento de onda: ou 220 ou 256 nm Tempo de retenção relativo: 3,25 min (R), 5,78 minutos (S)
NON AA) 0 Boc Intermediário 10 (S)-terc-Butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-t-carboxilato lodo (16,17 g, 83,7 mmol) foi adicionado a uma solução de (S)- tfero-butil 2-(1H-imidazol-2-iN)pirrolidino-1-carboxilato (6,87 9, 29,0 mmol) e carbonato de sódio (9,21 g, 87 mmol) em dioxana (72 mL) e água (72 mL) em temperatura ambiente. O frasco foi coberto com folha de alumínio e agi- tado por 16 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e so- lução aquosa saturada de tiossuifato de sódio. A mistura foi agitada por 15 minutose as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída várias vezes com acetato de etila, As fases orgânicas combinadas foram secas (Na2SO;,), filtradas e concentradas in vacuo para dar (S)-terc-butil 2-(4,5-diiodo-1H- imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (12,5 g 88%) como um sólido castanho. . Tempo de retenção de LC-MS 1,40 minuto; Calc. para CiaH17/2N30> 488,94. Encontrado m/z 489,96 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cro- ' matógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 4,72 - 4,84 (m, 1H), 3,58 - 3,70 (m, 1H), 3,43 -3,54 (m, 1H), 2,36 (s amplo, 1H), 1,88 - 2,08 (m, 3H), 1,47 (s amplo, 3H), 1,27 (s amplo, 6H). No
ON Boc Intermediário 11 (S)-fterc-Butil 2-(S-lodo-1H-imidazol-2-i)pirrolidino-1-carboxilato
Sulfito de sódio (10,31 9, 82 mmol) foi adicionado a uma solução de (S)-ferc-butil 2-(4,5-diíodo-1H-imidazol-2-i)pirrolidino-1-carboxitato (4,0 9, 8,2 mmol) em etanol (75 mL) e água (75 mL). A suspensão foi aquecida com um banho de óleo a 100ºC por 4 horas e a 90ºC por 16 horas. A reação foi diluídacom acetato de etila e água. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída várias vezes com acetato de etila. As fases orgânicas com- binadas foram secas (salmoura, NazSO;), filtradas e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila O a 40%/CH2CL) para dar (S)-ferc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (217 &, 73,1%) como um sólido branco. Tempo de retenção de LOC-MS 0,930 min; ] Calc. para Ci2H18lN302 363,04, Encontrado m/z 364,06 [M+H]".
- Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6xX50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento " de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma . taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos emqueo Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,52-7,64 (m, 1H), 4,95 - 5,410 (m, 1H), 3,57 - 3,70 (m, 1H), 3,47 - 3,57 (m, 1H), 2,37 - 2,55 (m, 1H), 1,94 - 2,10 (m, 3H), 1,46 (s, 4H), 1,27 (s, 5H).
FS EF 1 o A O Intermediário 12
NS OA
CAIO A Intermediário 13 Ben)
Mistura de Intermediário 12 (S)-terc-Butil / 2-(5-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[dlimidazol-6-il) naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1- carboxilato e Intermediário 13 (S)-ferc-Butil/ 2-(5-(7-(2-((S)-1-(terc-butoxicarboniDpirrolidin-2-i1)- 1H-benzo[d]Jimidazo|-6-il)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxi- lato A uma mistura de trifluoracetato de (S)-ferc-butil 2-(6-(6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-il)-1 H-benzo[d]Jimidazo|-2-il) pir- rolidino-1-carboxilato e trifluoracetato de (S)-ferc-butil 2-(6-(7-(4,4,5,5-tetra- ' metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazo|-2-il)pirrolidi- . no-1-carboxitato (560 mg, 0,980 mmol) e (S)-ferc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazo|- 2-il)pirrolidino-1-carboxilato (463 mg, 1,27 mmol) em 1,2-dimetoxietano (11,2 ml) eágua(2,8mL) foi adicionado NaHCO; (412 mg, 4,90 mmol). A mistura . de reação foi desgaseificada in vacuo por 5 minutos e recebeu fluxo de ni- trogênio.
PAd(Ph3P), (57 mg, 0,049 mmol) foi adicionado e o frasco de pres- são foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 100ºC por 16 horas.
O componente volátil foi removido in vacuo.
O resíduo foi dividido entre acetato deetilaeáguae a fase aquosa foi extraída várias vezes com acetato de eti- la.
As fases orgânicas combinadas foram secas (Na;SO;), filtradas e con- centradas in vacuo.
O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 50-100%/hexanos) para dar uma mistura parcialmente purificada de produtos que foi purificada mais através de HPLC de fase reversa (á- guafacetonitrila/TFA) para prover uma mistura de um sal de TFA de (S)-terc- butil 2-(5-(6-(2-((S)-1-(ferc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-1I)-1H-benzo[d]imidazo!- 6-iNnaftalen-2-i1)-1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e um sal de TFA de (S)-terc-butil 2-(5-(7-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-i1)-1H-benzo[ad] imidazol-6-il)naftalen-2-iI)-1H-imidazo!l-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (74 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,32 min; Calc. para [M+H]" CasHaaNsO,s 648,34. Encontrado m/z 649,20 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- ters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% /fágua 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. À mistura foi usada sem purificação adicional.
Í MM 4 (O Noé a po N Intermeciário 14
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CAD GQ ' Intermediário 15 ' Intermediário 14 2-((S)-Pirrolidin-2-i1)-6-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1 H-imidazo|-5- iNnaftalen-2-i1)-1H-benzo[dlimidazo! e Intermediário 15 2-((S)-Pirrolidin-2-il)-6-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-imidazo|-4- iDnaftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol Uma mistura de (S)-fterc-butil 2-(5-(6-(2-((S)-1-(ferc-butoxicar- bonil)pirrolidin-2-i)- 1 H-benzo[d]imidazol-6-il)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-il) pirrolidino-1-carboxilato e (S)-ferc-butil 2-(5-(7-(2-((S)-1-(ferc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-iI)-1H-benzo[dJimidazo|-6-iDnaftalen-2-iI)- H-imidazol-2-i1) pirroli- dino-t-carboxilato como sais de TFA (74 mg) e TFA (2 mL) em CH2Cl (10 mL) foi agitada em condições ambientes por 4 horas. O componente volátil foi removido in vacuo. O material bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa (água O a 50%/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de 24(S)-pirrolidin-2-i1)-6-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-ih-1H-imidazol-S-il)naftalen-2-i1)- TH-benzo[d]limidazol (32 mg, 31%) como óleo amarelo e um sal de TFA de
2-((S)-pirrolidin-2-11)-6-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1 H-imidazol-4-i)naftalen-2-l)- 1H-benzo[d]imidazol (16 mg) como óleo amarelo.
Dados analíticos para o Intermediário 14: Tempo de retenção de LC-MS 0,081 min; Calc. para CagHogNgç 448,24. Encontrado m/z 449,20 [M+H]* Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos " onde o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B : era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 8,33 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,03 (d, J=3,7 Hz, 1H), 8,01 (s, 2H), 7,92 - 7,97 (m, 1H), 7,87 7,92 (m, 1H), 7,75 - 7,80 (m, 3H), 5,11 (t, J=7,8 Hz, 1H), 4,99 (t, - Jd=7,9 Hz, 1H), 3,49 - 3,69 (m, 4H), 2,56 - 2,76 (m, 2H), 2,41 - 2,52 (m, 2H), 2,21 -241 (m, 4H). i Dados analíticos para o Intermediário 15: Tempo de retenção de LC-MS 0,87 min; Calc. para CagHogNç 448,24. Encontrado m/z 449,21 [M+HF. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,39 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,97 - 8,04 (m, 3H), 7,91 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,87 (d,J=8,6Hz 1H) 7,85(s, 1H), 7,78 (s, 2H), 5,12 (t, J=7,6 Hz, 1H), 5,04 (t, J=8,1 Hz, 1H), 3,50 - 3,68 (m, 4H), 2,60 - 2,74 (m, 2H), 241 - 2,55 (m, 2H), 2,21 -2,41 (m, 4H).
Esquema 3 Bs Vº mm oo El Ono Em Fa O vtsmediáro “ioxano ricas! “onério : ae NH> " ed OA, Cc imemedíário o i RX O auotemedário ? a bee CA Intermediário 1º R P “ OA Ce, E Exemplos = * - N - 5 pod Intermediário 16 (S)-ferc-Butil — 2-(6-bromo-1H-benzo[ad]imidazol-2-il)pirrolidino-1- i 5 carboxilato 7 EDCIHCI (16,9 g, 88,0 mmol) foi adicionado a uma mistura de 4- bromobenzeno-1,2-diamina (15,0 g, 80,0 mmol), N-Boc-L-prolina (18,13 g, 84,0 mmol) e 1-hidroxibenzotriazol (12,28 g, 80,0 mmol) em CH2Cl> (500 mL) e agitado em condições ambientes por 16 horas.
A mistura foi então diluída com água O precipitado branco resultante foi filtrado e as camadas foram separadas.
A camada orgânica foi lavada com água, seca (salmoura; Na>sSO;), filtrada e concentrada in vacuo para prover uma espuma marrom.
Ácido acético (300 mL) foi adicionado à espuma e a mistura foi aquecida a 85ºC (temperatura do banho) por 5 horas.
O componente volátil foi removido in vacuo eo resíduo foi dissolvido em EtOAc, lavado com água e a fase or- gânica foi seca (Na7SO;), filtrada e concentrada in vacuo.
O material bruto resultante foi submetido à cromatografia rápida (silica-geli EtOAc O- 37%/CH2C|2). O material parcialmente puro foi novamente submetido à cro- matografia rápida (silica-gel; EtOAc 20-35%/CH2Cl>) para prover (S)-terc-butil — 2-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazo|-2-il)pirrolidino-1-
carboxilato (17,98 g, 81,2% de rendimento) como uma espuma amarela. Tempo de retenção de LC-MS 1,23 min; Calc. para CisH2aoBrN30>2: 365,07. Encontrado m/z 368,07 [M+H]"*. Dados de LC foram registrados em um cro- matógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire5uCigde46x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrilta 10% /água 90%TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. : Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC - em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,59 - 7,75 (m., 1H), 7,38 - 7,53 (m, 1H), 7,31 - 7,38 (m, 1H), 5,04-5,09 (m, 0,3H), 4,94 -5,00 (m, 0,7H), 3,68 - 3,76 (m, 1H), 3,50 - 3,59 (m, 1H), 2,34 - 2,51 ' (m., 1H), 1,95 - 2,12 (m., 3H), 1,47 (s amplo, 3H), 1,15 (s, 6H).
N | o ÁTLIAA .. À Boé Intermediário 17 (S)-terc-Butil 2-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iI)-1H- benzo[dlimidazol-2-iDpirrolidino-1-carboxilato A um frasco contendo uma mistura de (S)-ferc-butil 2-(6-bromo- TH-benzo[d]imidazol-2-il) pirrolidino-1-carboxilato (4,5 g, 12 mmol) e bis(pina- colato)diboro (6,55 g, 25,8 mmol) em 1,4-dioxana (50 mL) foi adicionado acetato de potássio (3,01 g, 30,7 mmol). O frasco de reação foi desgaseifi- cadoinvacuo por 5 minutos e então purgado com nitrogênio. O catalisador Pd(PhsP)a (710 mg, 0,614 mmoi) foi adicionado e o frasco foi tampado e a- quecido com um banho de óleo a 85ºC (temperatura do banho) por 16 ho- ras. A mistura de reação foi concentrada in vacuo. O material bruto foi dividi- do entre CH2Cl; e uma solução de NaHCO; saturada e a camada aquosa foi extraída com CH3Clz. A fase orgânica combinada foi seca (salmoura,
Na2SO,), filtrada e concentrada in vacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 10-50%/CHCL) para prover (S)-ferc-butil 2-(6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-1)-1H-benzo[d]imidazo|-2-il)pirrolidino-1-car- — boxilato(2,80 9,55% de rendimento) como um sólido branco. Tempo de re- tenção de LC-MS 1,493 min; Calc. para Co2H32BN30,4: 413,25. Encontrado m/z 414,23 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- —primento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Sol- : vente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente - de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% eo Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (400 MHz, ' MeOD) 5 ppm 7,81 - 8,08 (m, 1H), 7,40 - 7,68 (m., 2H), 4,95 - 5,13 (m, 1H), ' 3,68 - .3,79 (s amplo, 1H), 3,48 - 3,60 (s amplo, 1H), 2,35 - 2,52 (s amplo, 1H), 1,95-2,15 (m, 3H), 1,46 (s, 3H), 1,37 (s, 12H), 1,13 (s, 6H).
CIR ea OR
CÃO
N Intermediário 3 terc-Butil 2-(5-(6-(2-(1-(terc-butoxicarbonil)-2-pirrolidinil)-1H-ben- zimidazol-6-il)-2-naftil)-1 H-benzimidazol-2-i1)-1-pirrolidinocarboxilato A uma mistura de (S)-ferc-butil 2-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dio- xaborolan-2-il)-1H-benzo[d]Jimidazo|-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (1,29 g, 33,1 mmol) e 2,6-dibromonaftaleno (446 mg, 1,56 mmol) em 1,2-dimetoxietano (20ml)e água (8 mL) foi adicionado NaHCO; (787 mg, 9,36 mmol). A mis- tura de reação foi desgaseificada in vacuo por 10 minutos e recebeu fluxo de nitrogênio. O catalisador PA(Ph3P) a (90 mg, 0,078 mmol) foi adicionado e o frasco foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 100ºC por 16 horas.
O componente volátil foi removido in vacuo. O resíduo foi dividido entre CH2Clk e água e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída várias vezes com CH3xChkb e as fases orgânicas combinadas foram secas (salmoura, NazSO;,), filtradas e concentradas in vacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em síli- ca-gel e eluída com acetato de etila 0-70%/CH2CI2) para dar terc-butil 2-(5-(6-(2-(1-(ferc-butoxicarbonil)-2-pirrolidinil)-1H-ben- zimidazol-6-i1)-2-naftil)-1 H-benzimidazol-2-i1)-1-pirrolidinocarboxilato (805 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,46 min; Calc. pa- ra CaoHasN6sO,4: 698,36 Encontrado m/z 699,26 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com ' uma coluna Waters Sunfire 5Su C18 de 4,65x50mm usando um detector de . UWV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradi- ente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente À 0%/Solvente B ' 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 ' minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era aceto- nitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (s amplo, 2H), 8,13 (t J=8,7Hz, 4H), 8,05 (t J=8,4 Hz, 2H), 7,92 (dd, J=14,8, 8,7 Hz, 4H), 5,20 - 5,36 (m, 2H), 3,70 - 3,84 (m, 2H), 3,57 - 3,70 (m, 2H), 2,54 - 2,70 (m, 2H), 2,18 - 2,28 (m, 2H), 2,14 (quin, J=6,9 Hz, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,23 (s, 6H). Br
OO
N Intermediário 18 ferc-Butil (28)-2-(5-(8-bromo-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-1- —pirrolidinocarboxilato A reação acima também proveu ferc-butil (28)-2-(5-(6-bromo-2- naftil)-1H-benzimidazol-2-il)-1-pirrolidinocarboxilato (519 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,88 min; Calc. para IM+HI* CosHos BrN3O,2: 491,42. Encontrado m/z 494,04 [M+H]".
Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxadefluxode4mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm3$8,21(d,J-8,6 Hz, 1H), 8,05 - 8,14 (m, 2H), 7,93 - 8,05 (m, 2H), 7,82 - 7,93 (m, 3H), 7,57 - 7,67 (m, 1H), 5,28 (s amplo, 1H), 3,98 (s, 1H), 3,70 - ' 3,80 (m, 1H), 3,57 - 3,70 (m, 1H), 2,54 - 2,71 (m, 1H), 2,17 - 2,298 (m, 1H), . 2,09 - 2,17 (m, 2H), 1,49 (s, 4H), 1,22 (s, 5H).
CC . Nº N
CAIO Intermediário 7 5,5-(2,6-Naftalenodiil)bis(2-(2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol) Uma mistura de ferc-butil 2-(5-(6-(2-(1-(fero-butoxicarbonil)-2-pirro- lidinil)-1H-benzimidazol-6-il)-2-naftil)-1 H-benzimidazol|-2-il)-1-pirrolidinocarbo- xilato (591 mg, 0,844 mmol) e TFA (2mL) em CH2Cb (10 mL) foi agitada em condições ambientes por 2 horas. O componente volátil foi removido in va- cuoeormaterial resultante foi carregado em uma coluna MCX, recebeu fluxo de metanol, liberado com eluição de NH; 2,0M/metanol) e concentrado para prover 5,9'-(2,6-naftalenodiil)bis(2-(2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazol) (419 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS 1,02 min; Calc.
para C3a3H3Ns: 498,25. Encontrado m/z 499,25 [M+H]".
Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6xX50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos emqueo Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. '*H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,18 (s, 1H), 8,06 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,84 - 7,92 (m, 1H), 7,73 - 7,81 (m, 2H), 5,08 (t, J=7,6 Hz, 1H), 3,56 - 3,688 (m, 1H), 3,48 - 3,56 (m, 1H), 2,62 - 2,71 (m, 1H), 2,36 - 2,47 (m, 1H), 2,19 - 2,36 (m, 2H). Esquemad4
NS - o o o A, À Br XI + É gb Intermediário 1 - LIS PAPPhIIKO AC. o LOS PAPPhA/ NeHCOs Dioxano P METRO Intermediário 1
N - (O 2) TFAMCHIMO à 4 CO OQ 2 Bos 1 He To & Intarmadiário 7
9. ABRE Bos Po IA AI Cr CA O " "xo NO N Intermediário 5 x RW (O 4. = AS vens o
VB 2 Intermediário 1 2,6-Bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno Um frasco de pressão contendo uma mistura de 2,6-dibromo- —naftaleno(8,09g,28 mmol), bis(pinacolato)diboro (21,3 g, 84,0 mmol), aceta- to de potássio (3,01 g, 30,7 mmol) e 1,4-dioxana (50 mL) foi desgaseificado in vacuo por 5 minutos e purgado com nitrogênio. O catalisador PA(Ph3aP), (710 mg, 0,614 mmol) foi adicionado. O frasco foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 85ºC (temperatura do banho) por 16 horas. A mistura de reação foi concentrada in vacuo e o material bruto foi dividido entre CH2Cl; e solução de NaHCO; saturada. A camada aquosa foi extraída com CH3Cb e as fases orgânicas combinadas foram secas (NazSO;,), filtradas e concen- tradasinvacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com CHCl; 50- 100%/Hexanos) para prover 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- iDnaftaleno contaminado com bis(pinacolato)diboro. O sólido foi dissolvido em CH2Chb e metanol foi adicionado até precipitação ser observada. O preci- pitado foi coletado através de filtragem para dar 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno (5,19, 48 % de rendimento) como sólido branco. *H RMN (500 MHz, benzeno-ds) 5 ppm 8,70 (s, 2H), 8,16 (d, J=8,2 - Hz, 2H), 7,75 (d, J=8,2 Hz, 2H), 1,15 (s, 24H).
N
CAT - N Intermediário 3 (28,2'S)-terc-Butil 2,2'46,6"-(naftaleno-2,6-diil)bis(1H-benzo[d] imidazol-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato A uma mistura de 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- iNnaftaleno (2,0 g, 5,8 mmol) e (S)-ferc-butil 2-(6-bromo-1H-benzo[d] imida- zol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (2,89 9, 7,89 mmol) em 1,2-dimetoxietano (421mL)e água (10,5 mL) foi adicionado NaHCO; (2,21 g, 26,3 mmol). À mistura de reação foi desgaseificada in vacuo e recebeu fluxo de nitrogênio. O catalisador PAd(Ph3aP), (90 mg, 0,078 mmol) foi adicionado. O frasco foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 100ºC por 16 horas. O com- ponente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre acetato de etilae água. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída vá- rias vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram filtra- das em uma almofada de terra diatomácea (CELITES) e o filtrado foi seco (Na2SO3,), filtrado e concentrado in vacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel eluída com acetato de etila 0-100%/hexanos) para dar (28,2'S)-terc-butil 2,2'(6,6'-(naftaleno-2 ,6-diil)bis(1H-benzo[d] i- midazol-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (781 mg, 21% de rendimento) co- mo sólido laranja. Tempo de retenção de LC-MS 1,46 min; Calc. para Ca2HasN5O,4: 698,36. Encontrado m/z 699,26 [M+H]*. Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x560mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B ] 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 . minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era aceto- nitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (s amplo, 2H), 8,13 ' (t, J=8,7 Hz, 4H), 8,05 (t, J=8,4 Hz, 2H), 7,92 (dd, J=14,8, 8,7 Hz, 4H), 5,20 - : 5,36 (m, 2H), 3,70 - 3,84 (m, 2H), 3,57 - 3,70 (m, 2H), 2,54 - 2,70 (m, 2H), 2,18 - 2,28 (m, 2H), 2,09 - 2,19 (m, 4H), 1,50 (s, 9H), 1,23 (s, 9H). o & ta ”
CAIO
N Intermediário 5 (S)-ferc-Butil 2-(6-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- iNnaftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato A reação acima também proveu (S)-fterc-butil 2-(6-(6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1 H-benzo[d]imidazo|-2- iDpirrolidino-1-carboxilato (1,58 9, 56% de rendimento) como sólido casta- nho. Tempo de retenção de LC-MS 1,46 min; Calc. para CaH3gBN3O,: 539,3. Encontrado m/z 540,24 [M+H]", Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa-
ters Sunfire Su C18 de 4,86x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. Esquema 5 Pot dão o TBDPSO.
Aiso Lee. asa LA Boc Boc : Intermediário 20 Intermediário 21 | É : F EtZn FT EEE PET — . Intermediário 24 Intermediário 22 raras Ns do Intermediário 19 (S)-5-((terc-Butildifenilsililóxi)metil)pirrolidin-2-ona À uma solução de (S)-5-(hidroximetil)pirrolidin-2-o0na (10 gq, 87 mmol) em CH>Cl2 (50 mL) foram adicionados ferc-butilclorodifenilsilano (25,6 g, 93 mmol), EtN (12,1 mL, 87 mmol) e DMAP (1,06 g, 8,7 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente até que a pirrolidinona de partida fosse completamente consumida e então diluída com CH3Cl;z (50 mL) e lavada com água (50 mL). A camada orgânica foi seca (Na>SO;), filtrada, evapora- da in vacuo e o material bruto foi submetido à cromatografia rápida (sílica- gel; 30 a 100% de EtOAc/hexanos) para dar (S)-S((terc-butildifenilsililóxi) metil)pirrolidin-2-ona (22,7 g, 74 % de rendimento) como um óleo incolor.
LC/MS (M+HY' = 354,58, 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,69 (s am- plo, 4H), 7,64-7,61 (m, 4H), 7,50-7,42 (m, 6H), 3,67-3,82 (m, 1H), 3,58-3,51
(m, 2H), 2,24-2,04 (m, 3H), 1,87-1,81 (m, 1H), 1,00 (s, 9H). Teors- Nel ds, h Boc Intermediário 20 (S)-terc-Butil 2-((fterc-butildifenilsililóxi)Metil)-5-oxopirrolidino-1-carboxilato Di-ferc-butil dicarbonato (38,5 g, 177 mmol) foi adicionado em porções como um sólido durante 10 minutos a uma solução de (S)-5-((terc- — butildifenilsililóxiDmetil)pirrolidin-2-0na(31,2 g, 88,3 mmol), Et;N (8,93 g, 88 mmo!) e DMAP (1,08 g, 8,83 mmol) em CH2Cl, (200 mL) e a mistura de rea- : ção foi agitada por 18 horas a 24ºC.
À maioria do material volátil foi removi- da in vacuo e o material bruto foi purificado através de cromatografia de síli- ' ca-gel (EtOAc 20%/hexanos para EtOAc 50%/hexanos) para dar (S)-ferc- butil 2((ferc-butildifenilsililóxi)9metil)-5-oxopirrolidino-1-carboxilato (32,65 q9, 82 % de rendimento) como um sólido branco.
LC/MS (M-Boc+H)* = 354,58. i *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,61-7,59 (m, 2H), 7,56-7,54 (m, 2H), - 7,50-7,38 (m, 6H), 4,18 (m, 1H), 3,90 (dd, J = 10,4, 3,6, 1H), 3,68 (dd, J = 10,4, 2,1, 1H), 2,68-2,58 (m, 1H), 2,40-2,33 (m, 1H), 2,22-2,12 (m, 1H), 2,01- 1,96(m,1H),1,35(s, 9H), 0,97 (s, SH). TenPs-NN ld v Boc Intermediário 21 (S)-terc-Butil 2-((ferc-butildifenilsililóxi)metil)-2,3-di-hidro-1H-pirro] -1-carboxilato Um frasco de três gargalos equipado com um termômetro e uma entrada de nitrogênio foi carregado com (S)-ferc-butil 2-((ferc-butildifenil- sililóximetil-S-oxopirrolidino-1-carboxilato (10,05 g, 22,16 mmol) e tolueno (36 mL) e abaixado em um banho de esfriamento a 55ºC.
Quando a tempe- ratura interna da mistura atingiu 50ºC, trietilboroidreto de lítio (23 mL de THE 1,0M, 23 mmol) foi adicionado em gotas durante 30 minutos e a mistura foi agitada por 35 minutos enquanto mantendo a temperatura interna entre - 50ºC e 45ºC. Base de Hunig (16,5 ml, 94 mmol) foi adicionada em gotas durante 10 minutos. Então, DMAP (34 mg, 0,278 mmol) foi adicionado em uma batelada, seguido pela adição de anidrido trifluoracético (3,6 mL, 25,5 S mmol) durante 15 minutos, enquanto mantendo a temperatura interna entre - 50ºC e 45ºC. O banho foi removido 10 minutos depois e a mistura de rea- ção foi agitada por 14 horas enquanto permitindo que ele fosse para tempe- ratura ambiente. A mistura de reação foi diluída com tolueno (15 mL), esfria- da com banho de água gelada e tratada lentamente com água (55 mL) du- rante 5 minutos. As fases foram separadas e a camada orgânica lavada com água (50 mL, 2x) e concentrada in vacuo. O material bruto foi purificado a- ] través de cromatografia rápida (sitlica-gel; EtOAc 5%/hexanos) para dar - (S)-terc-butil 2-((terc-butildifenilsilitóxi)metil)-2,3-di-hidro-1H-pirro! -1-carboxitato (7,947 g, 82% de rendimento) como um óleo viscoso incolor. LC/MS: [M+Na]" = 460,19. Tr= 2,41 minutos sob as condições de HPLC que ' seguem: Gradiente de solvente de A 100% : B 0% para A 0% : B 100% (A = : TFA 0,1% em MeOH/água 1:9; B = TFA 0,1% em MeOH/água 9:1) durante 2 minutos e mantido por 1 minuto; detecção a 220 nm; Coluna S10 de 3,0x50 mm PHENOMENEXS Luna. “H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 7,62-7,58 (m, 4H), 7,49-7,40 (m, 8H), 6,47 (s amplo, 1H), 5,07/5,01 (d amplo sobre- pondo, 1H), 4,18 (s amplo, 1H), 3,89 (s amplo, 0,5H), 3,89 (s amplo, 1,5H), 2,90-2,58 (m amplo, 2H), 1,40/1,26 (s amplo sobrepondo, 9H), 0,98 (s, 9H).
o, TBDPS e Boc intermediário 22 (3S)-terc-Butil 3-((ferc-butildifenilsililóxi)metil)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano-2-carboxilato Dietilzinco (19 mL de -1,1M em tolueno, 21 mmol) foi adicionado em gotas durante 15 minutos a uma solução de tolueno (27 mL) fria (-30ºC) de (S)-terc-butil 2-((ferc-butildifenilsililóxi)metil)-2,3-di-hidro-1H-pirrol-1-carbo- xilato (3,94 g, 9,0 mmol). Cloroiodometano (estabilizado em cobre; 3,0 mL,
41 mmol) foi adicionado em gotas durante 10 minutos e agitado enquanto mantendo a temperatura do banho em -25ºC por 1 hora e entre -25º'C e - 21ºC por 18,5 horas. A mistura de reação foi aberta ao ar e extinta através da adição lenta de solução de NaHCO; saturada 50% (40 mL) e então re- —movidado banho de esfriamento e agitada em temperatura ambiente por 20 minutos. A mistura de reação foi filtrada em um filtro de papel e a torta bran- ca foi lavada com 50 mL de tolueno. A fase orgânica do filtrado foi separada e lavada com água (40 mL, 2x), seca (MgSO;,y) e concentrada in vacuo. O material bruto foi purificado usando cromatografia de síilica-gel (350 g de síli- ca-gel;a amostra foi carregada com EtOAc 7%/hexanos; eluída com EtOAc 7-20%/hexanos) para dar (3S)-ferc-butil 3-((terc-butildifenilsililóxi)]Mmetil)-2- Ú azabiciclo(3,1,0]hexano-2-carboxilato (3,69 g, 90,7%) como uma mistura de . isômeros cis/trans. |[Nota: a razão de isômero cis/trans exata não foi deter- minada neste estágio]. LC/MS: [M+Na]* = 474,14. Tr= 2,39 minutos sob as condições de HPLC que seguem: Gradiente de solvente de A 100% : B 0% . para À 0%: B 100% (A = TFA 0,1% em 1:9 de MeOH/água; B = TFA 0,1% BR em 8:1 de MeOH/água) durante 2 minutos e mantido por 1 minuto; detecção a 220 nm; coluna S10 de 3,0X50 mm PHENOMENEX" Luna. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) à ppm 7,62-7,60 (m, 4H), 7,49-7,40 (m, 6H), 3,77/3,67 (s amplo sobrepondo, 3H), 3,11-3,07 (m, 1H), 2,23 (s amplo ap, 1H), 2,05-2,00 (m, 1H), 1,56-1,50 (m, 1H), 1,33 (s muito amplo, 9H), 1,00 (s, 9H), 0,80 (m, 1H), 0,30 (m, 1H).
Boc Intermediário 23 (3S)-ferc-Butil 3-(hidroximetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato TBAF (7,27 ml. de 1,0 M em THF, 7,27 mmol) foi adicionado em gotas durante 5 minutos à solução de THF (30 mL) de (3S)-ferc-butil 3-((ferc- butildifenilsililóxi)netil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (mistura de isômeros cis/trans) (3,13 g, 6,93 mmol) e a mistura foi agitada em temperatu-
ra ambiente por 4,75 horas. Após a adição de solução de NH,CI saturada (5 mL), a maioria do material volátil foi removida in vacuo e o resíduo dividido entre CHCl2z (70 mL) e solução de NH,CI saturada 50% (30 mL). A fase a- quosa foi extraída com CH2Cl> (30 mL) e a fase orgânica combinada foi seca (MgSO;), filtrada, concentrada in vacuo e então exposta a vácuo alto da noi- te para o dia. O material bruto foi purificado usando uma cromatografia rápi- da (sílica-gel; EtOAc 40-50%/hexanos) para dar (3S)-ferc-butil 3-(hidroxi- metil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (1,39 g, 94% de rendimento) como uma mistura de isômeros cis/trans e um óleo incolor. [Nota: a razão de isômero cis/trans exata não foi determinada neste estágio]. LC/MS (M+Na)* = 236,20. 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds, 5 = 2,5 ppm) 5 ppm 4,70 (t, J = 5,7, ' 1H), 3,62-3,56 (m, 1H), 3,49-3,44 (m, 1H), 3,33-3,27 (m, 1H), 3,08-3,04 (m, . 1H), 2,07 (m amplo, 1H), 1,93-1,87 (m, 1H), 1,51-1,44 (m, 1H), 1,40 (s, 9H), 0,76-0,71 (m, 1H), 0,26 (m, 1H).
o ( XZ - N
L Ú Intermediário 24 Ácido (1R,38,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1 0] he- xano-3-carboxílico Uma semi-solução de NalO, (6,46 g, 30,2 mmol) em água (31 mL) foi adicionada a uma solução de (3S)-terc-butil 3-(hidroximetil)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (mistura de isômeros cis/ftrans) (215 9, 10,08 mmol) em CH;CN (20 mL) e CClk, (20 mL). RuCl3 (0,044 9, 0,212 mmol) foi adicionado imediatamente e a mistura de reação heterogênea foi agitada vigorosamente por 75 minutos. A mistura de reação foi diluída com água (60 mL) e extraída com CH2Cl> (50 mL, 3x). As fases orgânicas combi- nadas foram tratadas com MeOH 1 mL, deixadas descansar por cerca de 5 minutos e então filtradas em uma almofada de terra diatomácea (CELITEº). A almofada foi lavada com CH2Cl2 (50 mL) e o filtrado foi concentrado in va- cuo para dar um sólido colorido de carvão claro. O material bruto foi dissolvi- do em EtOAc (-10 mL) com aquecimento e deixado descansar em tempera-
- 187/563 r tura ambiente com semeadura.
Cerca de 15 minutos na fase de esfriamento, uma formação de cristal rápida foi observada.
Cerca de 1 hora depois, hexa- nos (-6 mL) foram adicionados e a mistura refrigerada da noite para o dia (não pareceu que material adicional tinha precipitado). A mistura foi filtrada e lavadacom hexanos esfriado com gelo/água/EtOAc (razão de 2:1; 20 mL) e seca sob vácuo alto para dar a primeira porção de ácido (1R,38,5R)-2-(terc- butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (cristais esbranquiça- dos, 1,222 g). O licor-mãe foi concentrado in vacuo e o resíduo dissolvido em -3 mL de EtOAc com aquecimento, deixado ficar em temperatura ambi- entepor1 horae então 3 mL de hexanos foram adicionados e armazenados em um refrigerador por -15 horas.
Uma segunda porção de ácido (1R,3S, i 5R)-2-(fero-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico foi reto- - mada similarmente (cristais cinzas, 0,133 g), para um rendimento combinado de 59%. LC/MS [M+Na]* = 250,22. Tr= 1,48 min sob as condições de HPLC que seguem: Gradiente de solvente de a partir de A 100%: B 0% para A 0%: 7 B 100% (A = TFA 0,1% em 1:9 metanol/água; B = TFA 0,1% em 9:1 de me- . tanol/água) durante 3 minutos; detecção a 220 nm; coluna S10 de 3,0X50 mm PHENOMENEXº Luna.
MP (dec.) para a primeira porção = 147,5-149,5 -
ºC. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 12,46 (s, 1H), 3,88 (app s amplo, 1H), 3,27 (apps amplo, 1H; sobreposto com o sinal de água), 2,28 (m am- plo, 1H), 2,07 (s amplo ap, 1H), 1,56 (s ap, 1H), 1,40/1,34 (dois s sobrepos- tos, 9H), 0,71 (m, 1H), 0,45 (m, 1H). 13C-RMN (100,6 MHz, DMSO-ds) 172,96, 172,60, 154,45, 153,68, 78,74, 59,88, 59,58, 36,91, 31,97, 31,17, 27,77, 27,52, 14,86, 14,53, 13,69. Anál.
Calc. para CHHy,NO,: C, 58,13;:H, 7,54; N, 6,16. Encontrado (para a primeira porção): C, 58,24:H, 7,84; N, 6,07. Rotação óptica (10 mg/ml em CHCI3): [a] D = -216 e -212 para as pri-
meira e segunda porções, respectivamente,
Uma síntese alternativa para o Intermediário 24: H2N CT *MSA
Le 188/563 + (1R,3R,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0Jhexano-3-carboxamida (.CH3SO3H) foi preparada de acordo com o procedimento descrito pa- ra a síntese de seu estereoisômero na patente WO 2004/052850. o OE
N aaa Intermediário 24 Ácido (1R,38S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano-3-carboxílico Um frasco de fundo redondo de 1 L equipado com uma entrada 7 de nitrogênio, agitador superior, termopar e manta de aquecimento foi carre- . gado com 50 9 (225 mmol) de (1R,3R,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hexano-3-car- boxamida (.CH3SO3H) e 250 mL isopropanol. A pasta fluida resultante foi carregada com 252 mL de NaOEt 23% em EtOH (2,68 M, 675 mmoi, 3,0 e- - quiv.) e agitada a 50ºC por cerca de 1 hora. A mistura foi carregada com 12,2 mL (675 mmol, 3 equivalentes) de água e aquecida para 60ºC. A pasta Ú fluida resultante foi deixada agitar a 60ºC por cerca de 18 horas. A pasta fluida foi esfriada para temperatura ambiente e carregada com 250 mL de águae 98,2 g (450 mmol, 2,0 equivalentes) de di-f-butildicarbonato. Etanol e isopropanol foram removidos através de destilação a vácuo e a mistura a- quosa esfriada para 0º C. A mistura foi neutralizada com 76 ml (456 mmol) de HCI aquoso 6M enquanto mantendo uma temperatura interna de <5ºC. O produto foi extraído com 500 mL de MTBE e a camada orgânica rica foi la- —vadacom 100 mL de água. A solução transparente foi concentrada para 150 mL através de destilação a vácuo e a pasta fluida resultante foi carregada com 600 mL de heptano enquanto mantendo uma temperatura interna de >45ºC. A pasta fluida foi esfriada para temperatura ambiente durante cerca de 30 minutos e deixada agitar por cerca de 2 horas. O produto foi filtrado, —lavadocom 250 mL de heptano:MTBE 4:1 e seco sob vácuo a 70ºC para dar 40,5 g (178 mmol, 79% de rendimento, 99,8 AP a 205 nm) de ácido (1R,3S8,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico:
'*H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 12,48 (s, 1H), 4,02-3,80 (m, 1H), 3,45-3,15 (m, 1H), 2,40-2,19 (m, 1H), 2,19-2,0 (m, 1H), 1,70-1,50 (m, 1H), 1,50-1,20 (m, 9H), 0,83-0,580 (m, 1H), 0,33-0,55 (m, 1H); *C RMN (100 MHz, DMSO- ds) 5 173,7, 173,2, 155,0, 154,3, 79,4, 60,5, 60,2, 37,68, 32,6, 31,8, 28,4, 28,2,15,6,15,2, 14,4; HRMS calc. para Cy H1aNO, (M + H; ESI”): 228,1236. Encontrado: 228,1234. Esquema 6 LO mao EE mao n
ELO E <P o CS eng 7 Intermediário 26 Ro ooo, e É 4 TA, Exemplos '
N LI D> & N Bol Intermediário 25 (1R,38,5R)-ferc-Butil 3-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazo]|-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato EDCI-HCI (2,65 g, 13,8 mmol) foi adicionado a uma mistura de 4- bromobenzeno-1,2-diamina ( 2,35 g, 12,6 mmol), ácido (1R,38,5R)-2-(terc- butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (3,00 g, 13,2 mmol) e 1-hidroxibenzotriazol (1,93 g, 12,6 mmol) em CH2Clz (80 mL) e agitado em condições ambientes por 16 horas. A mistura foi então diluída com CH>Cla, lavada com água, seca (salmoura; MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo para prover uma espuma marrom. Ácido acético (80 mL) foi adicionado à espuma e a mistura foi aquecida a 75ºC (temperatura do banho) por 5 horas. O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dissolvido em E-
tOAc, lavado com solução de NaHCO; saturada e a fase orgânica foi seca (salmoura; MgSO;), filtrada e concentrada in vacuo. O material bruto resul- tante foi submetido à cromatografia rápida (silica-gel; EIOAc 50-100%/ he- xanos) para prover (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6-bromo-1H-benzo[dlimidazo|-2- il-2-azabicicio[3,1,0)hexano-2-carboxilato (3,01 g, 7,96 mmol, 63,3 % de rendimento) como uma espuma laranja claro, que foi usada sem purificação adicional. A reação também rendeu 847 mg do mesmo produto com pureza menor. Uma alíquota do material coletado foi purificada mais através de H- PLC preparativa (C-18/ CH;CN 30-100% -água+ NH.OAc 0,1%) para obter uma amostra analítica. Tempo de retenção de LC-MS 1,248 min; Calc. para Ci7H21 BrN30>2: 378,08. Encontrado m/z 380,05 [M+H]*. Dados de LC foram ' registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com ' uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- : ente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B . 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitri- la 10% fágua 90%IFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Piatform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 7,67 (s amplo, 1H), 7,43 (s amplo, 1H), 7,34 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,75 (s amplo, 1H), 3,62 (s amplo, 1H), 2,50 - 2,57 - 2,31 (m, 1H), 2,31 (dt, J=13,2, 6,7 Hz, 1H), 1,68 - 1,85 (m, 1H), 1,45 (s amplo, 3H), 1,11 (s amplo, 6H), 0,87 (dt,J-8,6,5,8Hz, 1H), 0,66 (s amplo, 1H).
AIR TP 2 n Bo Intermediário 26 (1R,38S,5R)-terc-Butil/ 3-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-iI)-1H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato
A um frasco de pressão contendo uma mistura de (1R,3S,5R)- ferc-butil 3-(6-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (2,0 g, 5,3 mmol) e bis(pinacolato)diboro (2,69 g, 10,6 mmol) em 1,4-dioxana (50 mL) foi adicionado acetato de potássio (0,78 g, 7,9 mmol). O frasco de reação foi desgaseificado in vacuo por 10 minutos e purgado com nitrogênio. PA(Ph3P), (305 mg, 0,264 mmol) foi adicionado à mistura de rea- ção e o frasco foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 85ºC (tem- peratura do banho) por 16 horas. A mistura de reação foi concentrada in va- cuo e o material bruto foi dividido entre CH2Clz (150 mL) e um meio aquoso (50mL de água +10 mL de solução de NaHCO; saturada). A camada aquo- sa foi extraída com CH3Cl7 e a fase orgânica combinada foi seca (NaSO;), filtrada e concentrada in vacuo. O material resultante foi purificado com cro- - matografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 20-100%/hexanos) para prover (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2- ' azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (1,749, 77% de rendimento) como uma : espuma branca. Uma alíquota do material coletado foi purificada mais atra- vêés de HPLC preparativa (C-18/ CH; CN 30-100%-água+ NH, Oac 0,1%). Tempo de retenção de LC-MS 1,78 min; Calc. para Ca3H32BN32 425,25. En- contradom/z426,21[M+H]*.
Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 5u C18 de 4,6X50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 5% /água 95%/acetato de amônio 10 mmo! e o Solvente B era acetoniírita 85%/água 5%Aacetato de amônio 10 mmol. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização.'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,94 (s, 1H), 7,61 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,41 - 7,56 (m,
1H), 4,83 (s amplo, 1H), 3,684 (d, J=1,2 Hz, 1H), 2,51 - 2,70 (m, 1H), 2,33 (dt, J=13,4,6,6 Hz, 1H), 1,67 - 1,84 (m, J=8,5, 6,10, 5,8, 5,8 Hz, 1H), 1,39 - 1,59 (s amplo, 3H), 1,37 (s, 12H), 1,40 (s amplo, 6H), 0,88 (dt, J=8,2, 5,8 Hz, 1H), 0,66 (s amplo, 1H). OQ > Boc e o Bo Nº N <A AIU
N . Intermediário 27 (1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-ferc-Butil 3,3'-(6,6'-(naftaleno-2,6-diil)bis - (1H-benzo[d]imidazol|-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato) . A uma mistura de (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(6-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[d]limidazol-2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano- 2-carboxilato (1,50 9, 3,53 mmol) e 2,6-dibromonaftaleno (403 mg, 1,41 - 10 mmol) em 1,2-dimetoxietano (21,7 mL) e água (6,50 mL) foi adicionado NaHCO; (356 mg, 4,23 mmol). A mistura de reação foi desgaseificada in va- ' cuo por 10 minutos e recebeu fluxo de nitrogênio. PA(Ph3P), (82 mg, 0,071 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida com um banho de Óleo a 100ºC por 16 horas e então o componente volátil foi removido in va- cuo, O resíduo foi dividido entre CHCl, e água (30 mL) e a fase aquosa foi extraída várias vezes com CH2Cl2z. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO;), filtradas e concentradas in vacuo. O material resultante foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi car- regada seca em silica-gel e eluída com acetato de etila 0-70%/CH2CI>) para dar (1R,1'R38,3'S,5R,5'R)-ferc-butil 3,3-(8,6'-(naftaleno-2,6-diil)bis (1H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo(3,1,0]hexano-2-carboxilato) (3877 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,49 min; Calc. para Ca4HasN5O4: 722,36. Encontrado m/z 723,26 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1minutoeumtempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetoni- trila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,26 (s, 2H), 8,12 (d, J=8,5 Hz, 2H),8,09 (s, 2H), 8,00 (m, J=8,6 Hz, 2H), 7,93 (m, J=8,6 Hz, 2H), 7,86 (d, J=8,6 Hz, 2H), 5,01 (s amplo, 2H), 3,68 (s amplo, 2H), 2,76 (dd, J=13,3, Ú 9,3 Hz, 2H), 2,42 - 2,54 (m, 2H), 1,87 (s amplo, 2H), 1,49 (s amplo, 9H), 1,19 . (s amplo, 9H), 0,94 (dt, J=8,3, 6,1 Hz, 2H), 0,79 (s amplo, 2H). Br e O ' <A, O ' Intermediário 28 (1R,38,5R)-ferc-Butil 3-(8-(6-bromonaftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imi- dazol-2-1I)-2-azabicíclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato A reação acima também proveu (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(6-(6- romonatftalen-2-il)-1 H-benzo[d]imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (418 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,90 min; Calc. para Ca7H26BrN3O>2: 503,12. Encontrado m/z 506,05 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usan- do um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de de- tector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solven- te A0%Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era i 194/563 acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,20 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,93 - 8,00 (m, 2H), 7,86 - 7,93 (m, 2H), 7,84 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=8,6, 1,8 Hz, 1H), 5,00(s amplo, 1H), 3,68 (s amplo, 1H), 2,75 (dd, J=13,4, 9,2 Hz, 1H), 241 - 2,54 (m, 1H), 1,87 (s amplo, 1H), 1,49 (s amplo, 5H), 1,17 (s am- plo, 4H), 0,87 - 0,98 (m, 1H), 0,79 (s amplo, 1H).
AA> ia OO
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CU N i Intermediário 29 ' 2,6-Bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-benzo[d] imidazot-6-il)naftaleno ; 10 Uma mistura de (1R,1'R3S8,3'S,5R,5'R)-ferc-butil 3,3-(6,6-(nafta- leno-2,6-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol!-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0] hexano- ] 2-carboxilato) (360 mg, 0,498 mmol) e TFA (2mL) em CHzClz (10 mL) foi agi- tada em condições ambientes por 3 horas. O componente volátil foi removi- do in vacuo e o material resultante foi carregado em uma coluna MCX, rece- beu fluxo de metanol, eluído com NH;3 2,0M/ metanol e concentrado para prover 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciíclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-benzo [d]imidazo]-6-il)naftaleno como sólido amarelo (253 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,07 min; Calc. para CazaH3oNg: 522,25. Encontrado m/z 523,19 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- —madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, umtempode manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. H RMN (500 MHz, MeOD) 5 pom 8,17 (s, 2H), 8,06 (d, J=8,2 Hz, 2H), 8,00 (s, 2H), 7,88 (d, J-8,6 Hz, 2H), 7,71 - 7,81 (m, 4H), 4,84 (dd, J=10,8, 7,5 Hz, 2H), 3,47 - 3,53 (m, 2H), 2,80 (dd, J=12,8, 7,6 Hz, 2H), 2,54 - 2,63 (m, 2H), 2,04-2,11(m,2H),1,20-1,27 (m, 2H), 1,02 (q, J=7,7 Hz, 2H). Esquema 7
N o Vo Bos y CM se, ? [CAR Yimtermediário 5 " NS imemediáro 90 — pira Dom Boc 1 EO ——. Mistura BRPaE” Nº ON e, DMETHIO Boc 7* LL) Ô À - " medido o Tio Pa. Ú Nistura intermediário 34 MN <Q" “So DA K e RCOH R (O Bol Rs "Ee AO h . Cs Intermediário 34 : Sa 9 Exemplos
R : 4 Leon ro SO to a se dio Ma, Intermediário 35 SS Exemplos o Nº Pa
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E SO CAIO O NS N Ex CC O Intermediário 30 Intermediário 31 ENA Chz-N Mistura de Intermediário 30 (S)-Benzil/ 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[dlimidazol-6-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1- carboxilato bistrifluoracetato e Intermediário 31 (S)-Benzil/ 2-(5-(4-(7-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d]imidazo!-6-il)naftalen-2-iN)fenil)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1- — carboxilato bistrifluoracetato
A uma mistura de um sal de (S)-terc-butil 2-(6-(6-(4,4,5,5-tetra- metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1 H-benzo[d]imidazo|-2-1) pirrolidi- no-1-carboxilato e um sal de TFA de (S)-ferc-butil 2-(6-(7-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[dlimidazol-2-il) — pirrolidino-1- carboxilato (190 mg), (S)-benzil 2-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-ibpirroli- dino-1-carboxilato (Pedidos de patente: WO 2008/021928, WO 2008/021936 e WO 2008/021927) (213 mg, 0,499 mmo!), em 1,2-dimetoxietano (10,0 mL) e água (2,0 mL) foi adicionado NaHCO; (140 mg, 1,663 mmol). A mistura de reação foi desgaseíficada in vacuo por 5 minutos e recebeu fluxo de nitrogê- nio.
Pd(PhaP)a (19 mg, 0,017 mmol) foi adicionado e o frasco de pressão foi tampado e aquecido com um banho de óleo a 85ºC por 16 horas.
O compo- : nente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre acetato de - etila e água.
As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída vá- rias vezes com acetato de etila.
As fases orgânicas combinadas foram secas (NasSO;), filtradas e concentradas jn vacuo.
O material resultante foi purifi- ' cado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em silica-gel e . eluída com metano! 0-5%/CH2CL) para dar produtos parcialmente purifica- dos.
O resíduo foi purificado mais através de HPLC de fase reversa (água/ acetonitrila/TFA) para prover uma mistura de um sal de TFA de (S)-benzil 2- (5-(4-(6-(2-((S)-1-(ferc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-11)-1H-benzo[d] imidazol-6-il) naftalen-2-il)fenil)- 1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e um sal de TFA de (S)-benzil 2-(5-(4-(7-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il)- 1H-benzo
[dlimidazol-6-il)naftalen-2-i)fenil)-1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (381 mg) que foi usado sem purificação adicional.
Tempo de retenção de LC-MS 1,54 min; Calc. para Ca7HaeN6O, 758,36. Encontrado m/z 759,37 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxadefluxode4ml/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. d “ SE tora.
A O Da a Intermediário 33 O Cbz-N Mistura de Intermediário 32 (S)-Benzil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)- 1 H-benzo[d]imidazo1|-6- iNnaftalen-2-il)Yfenil)- 1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 33 ' (S)-Benzit 2-(5-(4-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1H-benzofd]limidazo|-6- ' iNnaftalen-2-il)fenil)- 1H-imidazol-2-iN)pirrolidino-t-carboxilato Uma mistura de um sal de TFA de (S)-benzil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol-S-il)naftalen-2-il)fenil)- . 1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e um sal de TFA de (S)-benzil 2-(5- (4-(7-(2-((S)-1-(terc-butoxicarboni)pirrolidin-2-i1)-1H-benzo[d]imidazo|-6-il) naftalen-2-il)fenil)-1 H-imidazol-2-iN) pirrolidino-1-carboxilato (381 mg) e TFA (2 mL) em CHClz (10 mL) foi agitada em condições ambientes por 4 horas.
O componente volátil foi removido in vacuo e o material bruto foi purificado a- través de HPLC de fase reversa (água 0 a 50%/acetonitrila/NH,OAc) para prover uma mistura de (S)-benzil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-il)- 1H-benzo[d] imidazol-6-il)naftalen-2-i)fenil)- 1 H-imidazol-2-i)pirrotidino-1-carboxilato e (S)- benzil 2-5-(4-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)naftalen-2-i1) fenil)-1H-imidazol-2-il)pirrotidino-1-carboxilato (70 mg, 21% de rendimento) como óleo amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,87 min; Calc. para CaoH3gN6O»> 658,31. Encontrado m/z 659,47 [M+H]". Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 80%/Solvente B 20% para Solvente À
0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Sol- vente A era acetonitrila 5% /água 95%/NH.OAc 10 mmol e o Solvente B era acetonitrila 95%/água 5%/NHOAc 10 mmol. *H RMN (Mistura de compos- tos, 500 MHz, MeEOD)ô ppm 8,07 - 8,24 (m, 4H), 7,91 - 8,03 (m, 6H), 7,73 - 7,89 (m, 12H), 7,66 - 7,73 (m, 4H), 7,27 - 7,46 (m, 6H), 7,09 - 7,18 (m, 4H), 6,97 - 7,04 (m, 2H), 5,01 - 5,21 (m, 5H), 4,83 - 5,01 (m, 2H), 3,72 - 3,82 (m, 2H), 3,53 - 3,65 (m, 2H), 3,42 - 3,52 (m, 2H), 3,35 - 3,42 (m, 4H), 2,48 - 2,62 (m, 2H), 2,28 - 2,47 (m, 4H), 2,04 - 2,24 (m, 8H).
N ooo do CO SO : LAÇO ' € A, O Intermediário 34 Intermediário 35 o - HN Intermediário 34 ; 2-((S)-Pirrolidin-2-11)-6-(6-(4-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-il) fenil)naftalen-2-iI)-1H-benzo[d]imidazo! tetratrifluoracetato e Intermediário 35 7 2-((S)-Pirrolidin-2-il)-8-(7-(4-(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1 H-imidazol-5- iDfenidnaftalen-2-11)-1H-benzo[d]limidazo! tetratrifluoracetato A uma solução de uma mistura de (S)-benzil 2-(5-(4-(8-(2-((S)- pirrolidin-2-1)-1 H-benzo[d]imidazol-6-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazo]-2-1]) pirrolidino-1-carboxilato e (S)-benzil 2-(5-(4-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)- 1H-benzo [dlimidazol-6-iNnaftalen-2-i)fenil)-1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (70 mg, 0,057 mmol) e carbonato de potássio (KCO;3) em metanol (5 mL) foi adicionada uma pasta fluida de paládio sobre carbono (10%, 11 mg) em me- tano! (2 mL) em temperatura ambiente. O reator foi purgado a vácuo e retro- abastecido com hidrogênio. A reação foi agitada por 16 horas sob um balão de hidrogênio. A mistura foi fitrada através de uma almofada de terra diato- —mácea (CELITEº) sob vácuo e o filtrado foi evaporado in vacuo. O material bruto foi purificado através de HPLC de fase reversa (água 0 a 50%/ acetoni- trila/TFA) para prover um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-6-(6-(4-(2-((S)- pirrolidin-2-iN)-1H-imidazol-S-ilfenil)naftalen-2-iI)- 1H-benzo[d]imidazo!l (50 mg) como um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-6-(7-(4-(2-((S)-pirrolidin-2-
iN)-1H-imidazol-5-ilfenil)naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]Jimidazol (24 mg) como só- lido branco.
Dados analíticos para o Intermediário 34: Tempo de retenção de LC-MS 1,06 min; Calc. para CasHa2N; 524,27. Encontrado m/z 525,26 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 80%/Solvente B 20% para Solvente À 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos i em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente . B era acetonitrita 90%/água 10%/TFA 0,1%. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,19 (d, J=10,4 Hz, 2H), 8,02 - 8,10 (m, 3H), 7,84 - 7,86 (m,
15. 7H),7,77-7,83 (m, 2H), 5,14 (t, Js7,8 Hz, 1H), 5,06 - 5,411 (m, 1H), 3,52- ] 3,67 (m, 4H), 2,61 - 2,74 (m, 2H), 2,43 - 2,56 (m, 2H), 2,30 - 2,42 (m, 2H), . 2,18 - 2,30 (m, 2H).
Dados analíticos para Intermediário 35: Tempo de retenção de LC-MS 1,13 min; Calc. para CasH32N; 524,27. Encontrado m/z 525,24 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 80%/Solvente B 20% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% /água 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10%/TFA 0,1%. 1H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (d, J=7,0 Hz, 2H), 7,99 - 8,08 (m, 3H), 7,90 - 7,96 (m, 4H) 7,87 (td, J=8,2, 1,7 Hz, 2H), 7,76 - 7,85 (m, 3H), 5,13 (t, J=s7,8 Hz, 1H), 5,03 - 5,08 (m, 1H), 3,51 - 3,67 (m, 4H), 2,61 - 2,74 (m, 2H), 2,42 - 2,54 (m, 2H), 2,20 - 2,40 (m, 4H).
Esquema 8 n SEM
LN e o) ÁLAIGO 2, OS sk 6 to ET Fo mn E Intermediário 82/00 e. Ds À / à. intermediári Po EO ÁL/ PT SEM NÇNH 1009C emscítio Br N APAÇOPO), S-Phos Intermediário a6 9 Mistura né” No (EX IL) poe ÃO píddno à Há Ns Pioxano L | | MÁ SN Intermediário 39 A, SW Intermediário 41 : ex | s eo " Intermediário 40 o E o, CS, nº Exemplos Não N | A ' ÁXZIASI H 1 Boc ' Intermediário 36 (S)-terc-Butil 2-(6-bromo-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)pirrolidino- 1-carboxilato HATU (3,64 g, 9,57 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de 5-bromopiridino-2,3-diamina (1,684 g, 8,70 mmol) e ácido (S)-1-(ferc- butoxicarbonil)pirrolidino-2-carboxílico (1,87 g, 8,70 mmol) em DMF (50 mL) e DIPEA (3,19 mL, 18,3 mmol). A mistura de reação foi agitada em tempera- tura ambiente por 3 dias, diluída com água (400 mL) e extraída com EtOAc (150mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura (50 mL), seca (MgSO;), filtrada e concentrada. O material bruto foi parcialmente purificado através de cromatografia rápida (SiO7 110 g, MEOH/DCM 1-4%) para dar 3,36 g de es- puma solidificada. O material foi dissolvido em ACOH (35,0 mL) e aquecido a 100ºC por 8 horas. A reação foi esfriada para temperatura ambiente, con- centrada e purificada através de cromatografia rápida (carregada com DCM, SiO>, 80 g, EtOAc 20-40%/Hexanos) para dar (S)-ferc-butil 2-(8-bromo-1H-
imidazo[4,5-b]piridin-2-il pirrolidino-1-carboxilato (1,73 g) como sólido amare- lo. Tempo de retenção de 1,33 min; m/z 365, 367 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detectorde UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente À 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Sol- vente A era acetonitrila 5% /água 95%/acetato de amônio 10 MM e o Solven- te B era água 5%/acetonitrila 95%/acetato de amônio 10 mM. Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de - eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,40 (s amplo, 1H), 8,09 (s amplo, 1H), 5,12 - 4,96 (m, 1H), 3,77 - 3,67 (m, 1H), 3,62 - 3,51 (m, 1H)/2,56-2,38 (m, 1H), 2,15- 1,90 (m, 3H), 1,46 (s, 3,5H), 1,16 (s, 5,5H).
SEM SEM - NaN Bra N
AD CIA Bo Bor Intermediário 37 Intermediário 38 Mistura de Intermediário 37 (S)-terc-Butil 2-(6-bromo-3-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)-3H-imidazo [4,5-b]piridin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 38 (S)-ferc-Butil 2-(6-bromo-1-((2-(trimetilsilil)atóxi)metil)-1H-imidazo [4,5-b]piridin-2-iN)pirrolidino-1-carboxilato Uma dispersão a 60% de NaH (0,120 g, 3,00 mmol) foi adiciona- da a uma solução agitada de (S)-ferc-butil 2-(6-bromo-1H-imidazo[4,5-b] piri- din-2-il)pirrolidino-1-carboxitato (1,0 g, 2,7 mmol) em DMF (25 mL) e a rea- ção foi agitada por 1,5 hora em temperatura ambiente. Então SEM-CI (0,483 mL, 2,72 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada 16 horas. A reação foi —diluídacom água (-30 mL) e EtOAc (-35 mL), as camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), seca (MgSO;), filtra- da e concentrada. O óleo amarelo bruto residual foi purificado através de cromatografia rápida (SiO7 80 g, EtOAc 20-30%/hexanos) para dar uma mis- tura de (S)-ferc-butil 2-(8-bromo-3-((2-(trimetilsilil)etóxi)mMetil)-3H-imidazo[4,5- blpiridin-2Z-i)pirrolidino-1I-carboxilato e (S)-terc-butil 2-(6-bromo-1-((2-(trimetil- silietóxi)netil)- 1H-imidazo([A,5-b]piridin-2-iDpirrolidino-1-carboxilato (838 mg) como um óleo amarelo. A mistura foi usada sem purificação adicional. Tem- po de retenção de LC-MS 2,54 min; m/z 497,499 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de ] 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 - mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Sol- : vente A era acetonitrila 5% /água 95%/acetato de amônio 10 mM e o Solven- . te B era acetonitrila 5%/ água 95%/acetato de amônio 10 MM. Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. N Do ok
FTA É CA & ) E 39 Ss " Intermediário 40
SEM Intermediário 39 (28,2'S)-terc-Butil 2,2'-(6,6'-(naftaleno-2,6-diil)bis(3-((2-(trimetil- silietóxi)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridino-6,2-diil)dipirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 40 (S)-terc-Butil — 2-(6-(8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-it)-3-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il) pirro- lidino-1-carboxilato Em um frasco de micro-ondas, 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-
dioxaborolan-2-il)naftaleno (57 mg, 0,450 mmol), uma mistura de (S)-ferc- butil — 2-(6-bromo-3-((2-(trimetilsili)etóxi)Metil)-3H-imidazo([4,5-b]piridin-2-i1) pirrolidino-1-carboxilato e (S)-ferc-butil 2-(6-bromo-1-((2-(trimetilsili)etóxi) metil)-1H-imidazo(4,5-b]piridin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (112 mg), carbo- nato de césio (147 mg, 0450 mmol) e diciclo-hexil(2',6"-dimetoxibifenil-2- iNfosfina (12,3 mg, 0,030 mmol) foram dissolvidos em THF (3 mL) e água (0,3 mL). Mais 1,5 mL de THF foi adicionado e a reação foi aspergida com nitrogênio borbulhante até -2 mL terem evaporado. À solução transparente foi adicionado acetato de paládio (11) (3,37 mg, 0,015 mmol). O frasco rece- beu fluxo de nitrogênio, foi vedado e então aquecido com irradiação de mi- cro-ondas a 120ºC por 30 minutos. À reação foi diluída com EtOAc (-3 mL) ' e lavada com água (2 mL) e salmoura (2 mL). A reação foi seca (MgSO;), . filtrada e concentrada para um óleo amarelo que foi purificado através de cromatografia rápida (12 g de SiOs, FtOAc 25-75%/hexanos) para dar (28,2'S)-terc-butil 2,2'-(6,6'-(naftaleno-2,6-diil)bis(3-((2-(trimetilsilil) etóxi) me- ' til)-3H-imidazo(4,5-b]piridino-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (74 mg) como : um óleo incolor transparente (mistura de regioisômeros SEM) e (S)-terc-butil 2-(6-(6-(4,4,5,5-teirametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-1)-3-((2-(trimetil- sililjetóxi)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (32 mg) como um óleo incolor (mistura de regioisômeros SEM). Cada um foi usado sem purificação adicional.
Dados analíticos para o Intermediário 39: Tempo de retenção de LC-MS 3,42 min; m/z 961,9 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo tíquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eumtempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% fágua 95%/acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era água 5%/aceto- nifrila 95%/acetato de amônio 10 mM. Dados de MS Foram determinados i 204/563 usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) (mistura de regioisômeros SEM) ô ppm 8,84 - 8,75 (m, 2H), 8,39 - 8,31 (m, 2H), 8,26 - 8,18 (m, 2H), 8,11 (s amplo, 2H), 7,92 - 7,84 (m, 2H), 5,94 - 5,83 (m, 3H), 5,79 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 5,34 - 5,25 (m, 2H) 3,86-3,57 (m, 8H), 2,61 - 2,39 (m, 2H), 2,34 - 1,99 (m, 6H), 1,45 (s, 8H), 1,17 (s, 10H), 1,10 - 0,87 (m, 4H), -0,02 (s, 18H). Dados analíticos para Intermediário 40: Tempo de retenção de LC-MS 3,15 min; m/z 671,5 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma : taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% . para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos emque o Solvente A era acetonitrila 5% /água 95%/acetato de amônio 10 . MM e o Solvente B era água 5%/acetonitrila 95%/acetato de amônio 10 mM. Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC ] em modo de eletropulverização. (mistura de regioisômeros SEM) 5 ppm 8,82 - 8,75 (m, 1H), 8,39 - 8,29 (m, 2H), 8,21 - 8,15 (m, 1H), 8,07 - 8,01 (m, 1H), 8,11(s amplo, 2H), 7,98 - 7,93 (m, 1H), 7,89- 7,80 (m, 2H), 5,94 - 5,85 (m, 1,5H), 5,79 (d, J = 11,3 Hz, 0,5H), 5,33 - 5,24 (m, 1H), 3,85 - 3,56 (m, 4H), 2,62 - 2,39 (m, 1H), 2,33 - 1,99 (m, 1H), 1,49 - 0,87 (m, 23H), -0,02 (s, 9H).
ISA) ex
POD
AL Intermediário 41 2,6-Bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-S-il) naftale- no Cloreto de hidrogênio 4M (2,0 mL, 8,0 mmol) em dioxana foi adi-
cionado a uma solução agitada de (2S,2'S)-ferc-butil 2,2'-(6,6"-(naftaleno-2,6- diil)bis(3-((2(trimetilsilil)etóxi)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridino-6,2-diil)) dipir- rolidino-1-carboxilato (74 mg, 0,077 mmol) (mistura de regioisômeros SEM) em metanol (1 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas e então concentrada até secagem para dar um sal de cloridrato de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)naftaleno (51,1 mg) como um sólido amarelo que foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LOC-MS 0,83 min; m/z 501,13 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LO-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- i ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mE/min, um gradiente . de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eum tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila Í 10% /água 90%/ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era água 10%/ace- . tonitrila 90%/ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *'H RMN (400 MHz, D2O) 5 ppm 8,76 (s, 2H), 8,54 (s, 2H), 8,07 - 7,97 (m, 4H), 7,86-7,78(m, 2H), 5,26 -5,16 (m, 2H), 3,98 - 3,65 (m, 8H), 2,79 - 2,63 (m, 2H), 2,46 - 2,25 (m, 6H). Esquema 9
SEM o ALII a ot 2 BONDE ÇÇÃ SS sea O hs PE memos ED ERTZ Intermediário aa PÉ no A No CAT, ) Intermediário 45 OX Iniermeciário 47 SEM + Nos E N NoN & Ny N ao Intermesiário 46 tão un poi
NEN
ÁS Boc . Intermediário 42 . (S)-ferc-Butil 2-(6-bromo-1H-imidazo([4,5-b]pirazin-2-i)pirrolidino- 1-carboxilato HATU (5,05 g, 13,3 mmol) foi adicionado a uma solução agitada . de 5-bromopirazino-2,3-diamina (2,28 g, 12,1 mmol) e ácido (S)-1-(terc-bu- toxicarbonil)pirrolidino-2-carboxílico (2,680 g, 12,0 mmol) em DMF (50 mL) e Ú DIPEA (4,42 mL, 25,3 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatu- raambiente por 3 dias e então a 90ºC por 1 dia, A mistura de reação foi dilu- ída com água (350 mL) e extraída com EtOAc (200 mL). À camada orgânica foi lavada com salmoura (100 mL), seca (MgSO;), filtrada e concentrada. O material bruto foi parcialmente purificado através de cromatografia rápida (SIiO2 110 g, MeOH 1-4%/DCM) para dar 1,9 g de espuma solidificada. O —materialfoi dissolvido em AcOH (35,0 mL) e aquecido a 95ºC por 8 horas. À reação foi esfriada para temperatura ambiente, concentrada e purificada a- través de cromatografia rápida (carregada com DCM, 80 g de SiO>, EtOAc 20-30%/Hexanos) para dar (S)-terc-butil 2-(6-bromo-1H-imidazo[4,5-b] pira- zin-2-iN)pirrolidino-1-carboxilato (760 ma, 2,06 mmol, 17% de rendimento) como espuma amarela solidificada. Tempo de retenção de LC-MS 1,28 min; miz 366, 368 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-
10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Sol- vente À 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e umtempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% fágua 95%/acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era água 5%/aceto- nitrila 95%/acetato de amônio 10 mM. Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 3 ppm 8,50 - 8,43 (m, 1H), 5,11 - 4,99 (m, 1H), 3,77 -3,68(m,1H),3,62-3,51 (m, 1H), 2,57 - 2,40 (m, 1H), 2,19 - 1,95 (m, 3H), 1,46 (s, 3,5H), 1,17 (s, 5,5H). " E So E
AR MESA Boê N Bot . Intermediário 43 Intermediário 44 - Intermediário 43 (S)-terc-Butil 2-(5-bromo-1-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)- 1 H-imidazo [4,5-b]pirazin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 44 (S)-terc-Butil 2-(6-bromo-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1 H-imidazo [4,5-b]pirazin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato Uma dispersão a 60% de NaH (75 mg, 1,9 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de (S)-ferc-butil 2-(6-bromo-1iH-imidazo[4,5-b]pirazin- 2-iNpirrolidino-1-carboxilato (827 mg, 1,70 mmol) em DMF (15 mL) e a rea- çãofoi agitada por 1,5 hora em temperatura ambiente, Então SEM-CI (0,30 mL, 1,7 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada da noite para o dia. À reação foi diluída com água (-30 mL) e EtOAc (-35 mL), as camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), seca (MgSO3,), filtrada e concentrada. O óleo amarelo bruto foi purificado através de cromatografia rápida (40 g de SiO7, EtOAc 20-30%/hexanos) para dar (S)-ferc-butil 2-(5-bromo-1-((2-(trimetilsili)etóxi)mnetil)- 1H-imidazo[4,5-b] pira-
zin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (421 mg) como um óleo incolor transparente e (S)ferc-butil 2-(6-bromo-1-((2-(trimetilsilil)etóxi)metil)-1 H-imidazo[4,5-b] pirazin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (345 mg) como um óleo incolor transpa- rente.
A regioquímica absoluta do grupo SEM não foi estabelecida sem am- — biguidade, os nomes (e estruturas) podem ser mudados nesses intermediá- rios.
Dados analíticos para Intermediário 43: Tempo de retenção de LC-MS 2,43 min; m/z 496, 498 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV- Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As con- , dições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente . de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eumtempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% . fágua 95%/acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5%/aceto- nitrila 95%/acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,52 (s, 0,5H), 8,49 (s, 0,5H), 5,90 - 5,72 (m, 2H), 5,32-5,25 (m, 1H), 3,82 - 3,54 (m 4H), 2,59 - 2,41 (m, 1H), 2,32 - 1,98 (m, 3H), 1,43 (s, 4,5H), 1,15 (s, 4,5H), 1,07 - 0,85 (m, 2H), -0,02 (s, 9H). Dados analíticos para o Intermediário 44: Tempo de retenção de LC-MS 2,41 min; m/z 496, 498 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna —PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV- Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As con- dições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0%/Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eumtempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% fágua 95%/acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5%/aceto- nitrila 95%/acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS Foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,61 (s, 0,5H), 8,58 (s, 0,5H), 5,88 - 5,71(m, 2H), 5,28 (dd, J = 8,5, 4,5 Hz, 1H), 3,82 - 3,54 (m 4H), 2,59 - 241 (m, 1H), 2,32 - 1,98 (m, 3H), 1,43 (s, 4,5H), 1,45 (s, 4,5H), 1,09 - 0,85 (m, 2H), -0,02 (s 9H). N. ão ok ATL, ) ntermediário 39 e > Intermediário 40
SEM Intermediário 45 BR (28,2'S)-terc-Butil 2,2'-(5,5-(naftaleno-2,6-diil)bis(1-((2-(trimetil- sili)etóxi)metil)-1 H-imidazo[4,5-b]pirazino-S5,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato “10 elntermediário 46 (S)-ferc-Butil 2(5-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- : iNnaftalen-2-i1)-1-((2-(trimetilsili)etóxi)Mmetil)- H-imidazo[4,5-blpirazin-2- iDpirrolidino-1-carboxilato - Em um frasco de micro-ondas, 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- —dioxaborolan-2-il)naftaleno (149 ma, 0,393 mmol), (S)-ferc-butil 2-(5-bromo- 1-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)-1 H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)pirrolidino-1- carboxilato (294 mg, 0,590 mmol) (ou um regioisômero SEM), carbonato de césio (384 mg, 1,18 mmol) e diciclo-hexil(2',6-dimetoxibifenil-2-i)fosfina (32,3 mg, 0,079 mmol) foram dissolvidos em THF (4 mL) e água (0,4 mL). Mais1,5mL de THF foi adicionado e a reação foi aspergida com nitrogênio borbuihante até que 1,5 mL tivesse evaporado. À solução transparente foi adicionado acetato de paládio(ll) (8,83 mg, 0,039 mmol). O frasco recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e então aquecido com irradiação de micro- ondas a 120ºC por 30 minutos. A reação foi diluída com FtOAc (-3 mL) e lavada com água (2 mL) e salmoura (2 mL). A reação foi seca (MgSO;), fil- trada e concentrada para um óleo amarelo que foi purificado através de cro- matografia rápida (12 g de SiO2, EtOAc 25-75%/hexanos) para dar (28,2'S)- terc-butil 2,2'-(5,5'-(naftaleno-2,6-diil)bis(1-((2-(trimetilsili)Detóxi)]Metil)- 1 H- imidazo[4,5-b]pirazino-S5,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (ou um regioisôme-
' 210/563 ro SEM) (210 mg) como uma espuma solidificada amarela e (S)-ferc-butil 2- (5-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1-((2- (trimetilsili)etóxi)mMetil)- 1 H-imidazo[A4,5-b]pirazin-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (ou um regioisômero SEM) (53,5 mg) como um óleo incolor.
Dados analíticos para o Intermediário 45: Tempo de retenção de LC-MS 3,27 min; m/z 963,89 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo - de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- . po de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 MM. Dados de MS foram determinados usando - um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) (mistura de regioisômeros SEM) 5 ppm 9,29 - 9,45 (m | 2H), 8,79 - 8,66 (m, 2H), 8,43 - 8,29 (m, 2H), 8,20 - 7,98 (m, 2H), 6,03 - 5,84 (m, 4H), 5,34 (dd, J = 8,3, 4,3 Hz, 2H), 3,87 - 3,70 (m, 6H), 3,68 - 3,58 (m, 2H) 2,63-2,43(m, 2H), 2,36 - 1,14 (m, 4H), 2,14 - 1,99 (m, 2H), 1,46 (s, 8H), 1,17 (s, 10H), 1,35- 0,85 (m, 4H), -0,02 (s, 18H).
Dados analíticos para o Intermediário 45: Tempo de retenção de LCO-MS 3,07 min; m/z 672,52 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- pode análisede4 minutosem que o Solvente À era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização.
No N (E NON CO Ns Cl, | Intermediário 47 2,6-Bis(2-((S)-pirrolidin-2-it)-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-5-l) nafta- leno Cloreto de hidrogênio 4M (6,0 mL, 24 mmol) em dioxana foi adi- cionadoauma solução agitada de (2S,2'S)-ferc-butil 2,2'-(5,5'-(naftaleno-2,6-
' diil)bis(1-((2-(trimetilsilil)etóxi)9metil)- 1H-imidazo[4,5-b]pirazino-S5,2-
- diil)dipirrolidino-1-carboxilato (210 mg, 0,218 mmol) (regioquimica absoluta do SEM não foi estabelecida) em metano! (3 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas e concentrada até secar para dar um sal
* 10 de cloridrato de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-S-il) nafialeno (143 mg) que foi usado sem purificação adicional.
Tempo de re- i tenção de LC-MS 0,80 min; m/z 503,21 (MH+). Dados de LC foram registra- dos em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma co- luna Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era acetonitrila 10%/ água 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era água 10% / acetonitrila 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (400 MHz, D2O) 5 ppm 8,59 (s, 2H), 7,94 (s, 2H), 7,85 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,23 - 5,16 (m, 2H), 3,98 - 3,66 (m, 8H), 2,78-2,64 (m, 2H), 2,47- 2,28 (m, 6H).
Esquema 10 o o N 1560, e o h E o E H oo mão = Intermeciário 48 o N TFA o N A E eh & : x, ET Rh ti, no Rs L L pri A Intermediário 49 CEI ptermediário so : . E oo e N o UA Exemplos R ! (CX, > : NON
HH H HO N N Boc
CAI
N Intermediário 48 ' terc-butil (28)-25-(6-(2-((28)-2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazol|-5-il) -2-naftil)-1H-benzimidazol-2-il)-1-pirrolidinocarboxilato A uma solução de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d] imi- dazol-6-il)naftaleno (885 mg, 1,78 mmol), DMAP (10,8 mg, 0,089 mmol) e trietilamina (1,2 mL, 8,9 mmol) em DMF (30 mL) em temperatura ambiente foi adicionado em uma porção di-tere-butil dicarbonato (387 mg, 1,78 mmol). A mistura de reação foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente e purificada em uma BIOTAGES (carregada seca em um cartucho de sílica- ge! de 80 g e eluída com um gradiente de DCM 0 a 50% em MeOH), para dar ferc-butil (28)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-pirrolidinit)-1 H-benzimidazol-5-iI)-2-naftil) -1H-benzimidazol|-2-iI)-1-pirrolidinocarboxilato (500 mg, 0,835 mmol, 47,1% derendimento) como um sólido laranja. Tempo de retenção de LC-MS 1,207 min; m/z 599,25 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógra- fo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega-
ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradien- te de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de aná- lise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 01%eo Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (d, J=3,1 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,04 - 8,17 (m, 4H), 8,03 (s, 1H), 7,88 - 7,97 (m, 3H), 7,75 - 7,83 (m, 2H), 5,28 - 5,35 (m, 1H), 5,11 (t, J/=7,8 Hz, 1H), 3,75 - 3,83 (m, 1H), 3,60 -3,72(m,2H),3,51-3,59 (m, 1H), 2,60 - 2,74 (m, 2H), 2,40 - 2,50 (m, 1H), 2,21 - 2,38 (m, 3H), 2,10 - 2,20 (m, 2H), 1,52 (s, 4H), 1,25 (s, 4H). Oo : A LT O S— A LDO al N d Boc
VAIO - N : Intermediário 49 terc-butil (28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-(N-(metoxicarbonil)-L-valil)-2- pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol|-5-il)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-1-pirrolidino- carboxilato A uma solução de ferc-butil (28)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazo|-5-i1)-2-naftil)- 1 H-benzimidazo|-2-iI)-1-pirrolidinocarboxilato (400 mg, 0,668 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (176 mg, 1,00 mmol) e DIEA (0,583 mL, 3,34 mmol) em DMF (10 mL) foi a- dicionado HATU (381 mg, 1,00 mmol). A mistura de reação foi agitada 2 ho- rasem temperatura ambiente e então purificada através de HPLC preparati- va (usando uma coluna Waters Sunfire 5Su C18 de 30x50 mm eluída com um gradiente de ACN O a 50%-Água + TFA 0,1%)) para dar um sal de TFA de terc-butil (28)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(metoxicarbonil)-L-valil)-2-pirrolidinit)-1H- benzimidazol-5-il)-2-naftil)-1H-benzimidazol-2-iI)-1-pirrolidinocarboxilato (445 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LOC-MS 1,317 min; m/z 756,28 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido
' 214/563 Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS fo- ram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de ele- tropulverização. Oo | A L CS) Bro [IO RN - N N
CAIO . Intermediário 50 Metil ((18)-2-metil-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((2S)-2-pirrolidinil)-1H-ben- : zimidazol-5-i)-2-naftil)-1H-benzimidazol-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)propil) car- bamato A uma solução de um sal de TFA de ferc-butil (28)-2-(5-(6-(2- ((28) 1-(N-(metoxicarbonil)-L-valil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazol-5-i1)-2- naftil)-1H-benzimidazol-2-iI)-1-pirrolidinocarboxilato (445 mg) em DCM (10 mL) em temperatura ambiente foi adicionado TFA (1 mL, 13 mmol). A mistu- ra foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas, concentrada e o resíduo foi diluído com MeOH, carregado em um cartucho Strata XC MCX e levado com metanol. O composto foi liberado do cartucho através de eluição com uma solução de amônia 2M e metanol e então evaporado sob pressão redu- zida para dar metit ((1S)-2-metil-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((28)-2-pirrolidinil)-1H- benzimidazol-5-it)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)propil) carbamato (275 mg) como um sólido laranja. Tempo de retenção de LC-MS 1,120 min; m/z 656,27 [M+HY". Dados de LC foram registrados em um cro- matógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters
Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo degradientede3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,26 (s amplo, 1H), 8,22 (s amplo, 1H), 8,08 - 8,16 (m, 3H), 8,04 - 8,08 (m, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,868 - 7,98 (m, 3H), 7,73 - 7,82 (m, 2H), 5,88 - 5,93 (m, 0,1H), 5,37 - 5,44 (m, 0,9H), 5,07 - 5,15 (m, 1H), 4,28 - 4,33 (m, 1H), 4,12 - 4,19 (m, ' 0,8H), 4,06 - 4,10 (m, 0,2H), 3,94 - 4,02 (m, 1H), 3,59 - 3,75 (m, 4H), 3,50 - 3,59 (m, 1H), 2,63 - 2,74 (m, 2H), 2,41 - 2,47 (m, 1H), 2,23 - 2,40 (m, 5H), 2,06-2,16(m, 1H), 1,00 - 1,04 (m, 0,4H), 0,94 - 1,00 (m, 3H), 0,88 - 0,93 (m, ] 2,6H). BR Esquema 11 IDE a PRE qa PE) Intermediário 4 DME HO Intermediário s1 Intermediário; s2 PAD NH Boo TF Bos Hà un à CH:O, Intermediário 53 ATE Reco ' o DL Intermediário 4 Exemplos NE BO nº cRa: A
4/4 NH Boc / NH Boc E DAS + Pe DOTO o À Boé HN-Á Intermediário 51 Intermediário 52 Intermediário 51
(S)-terc-butil — 2-(4-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)
naftalen-2-il)-1H-imidazol-2-ilpirrolidino-1-carboxilato e Intermediário 52 (28,2'S)-ferc-butil — 2,2'-(4,4-(naftaleno-2,6-diil)bis(1H-imidazol-
4 2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato
Um recipiente de pressão de 100 mL equipado com uma barra : de agitação magnética foi carregado com 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)naftaleno (2,00 g, 5,26 mmol), (S)-ferc-butil 2-(5-iodo-1H- “10 imidazol-2-ilpirrolidino-1-carboxilato (2,10 g, 5,79 mmol) e PA(Ph3aP), (0,058 9, 0,05 mmol!) em DME (47,8 mL) e água (4,8 mL). A solução foi desgaseifi- cada sob vácuo por 5 minutos e o reator foi retroabastecido com nitrogênio.
O recipiente foi vedado e a mistura de reação foi aquecida da noite para o - dia a 120ºC.
A reação foi esfriada para temperatura ambiente e os voláteis foram removidos sob... O resíduo foi dividido entre água e EtOAc e a cama- da de água foi extraída com mais EtOAc.
As camadas orgânicas combina- das foram secas (Na2SO;,), filtradas e concentradas.
O produto bruto foi puri- ficado com uma BIOTAGES (carregada seca em um cartucho de síilica-gel de 90 g e eluída com um gradiente de EtOAc O a 30% em DCM) e novamente purificado com uma BIOTAGEº (carregada seca em um cartucho de sílica- gel de 80 g e eluída com um gradiente de EFtOAc 0 a 50% em DCM) para dar (S)-terc-butil 2-(4-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-il)- 1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxitato (949 mg) como um sólido amarelo.
O material (contaminado com (28S,2'S)-ferc-butil 2,2'-(4,4'-(naftaleno-2,6- diilbis(IH-imidazol-4,2-diil)dipirrolidino-1-carboxilato) foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
Tempo de retenção de LC-MS 1,760 min; m/z 490,21 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com-
primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradien- te de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de aná- lisede4minutosem que o Solvente À era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS; Platform LC em modo de eletropulverização. A HPLC preparativa da próxima reação deu (2S,2'S)-terc-butil 2,2-(4,4(naftaleno-2,6-diil)bis(1H-imidazol-4,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (92 mg, 0,111 mmol, 11% de rendimento) como sólido amarelo. Tempo de ] retenção de LC-MS 1,113 min; m/z 599,24 [M+H]". Dados de LC foram regis- ' trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condi- ' ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente . de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era aceto- nitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MH>, MeOD) 5 ppm 8,35 (s amplo, 2H), 8,13 (s amplo, 2H), 8,08 (s amplo, 1H), 8,00 (s amplo, 1H), 7,95 (m, 2H), 5,18 (s amplo, 2H), 3,68 - 3,78 (m, 2H), 3,62(s amplo, 2H), 2,51-268 (m, 2H), 2,21 (s amplo, 2H), 2,06 - 2,15 (m, 4H), 1,50 (s amplo, 9H), 1,31 (s amplo, 9H). h NH Boc
E OTA Boc d / Intermediário 53 (S)-terc-butil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-
iI)-1H-imidazol4-i)naftalen-2-il)fenil)-1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato Um recipiente de pressão de 100 mL equipado com uma barra de agitação magnética foi carregado com (S)-ferc-butil 2-(4-(6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilnaftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1- — carboxilato (500 mg, 1,02 mmol), (S)-ferc-butil 2-(5-(4-bromofenil)-1H-imida- zol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (601 mg, 1,53 mmol) e Pd(Ph3P), (58 mg, 0,05 mmol) em DME (10 mL) e água (1,0 mL). A solução foi desgaseificada sob vácuo por 5 minutos e o reator foi retroabastecido com nitrogênio.
À mis- tura foi aquecida por 8 horas a 120ºC, mais Pd(Ph3aP), (57,8 mg, 0,05 mmol) foi adicionado e a mistura foi desgaseificada e agitada da noite para o dia a 130º C.
A reação foi esfriada para temperatura ambiente e os voláteis foram ' removidos sob vácuo.
O resíduo foi dividido entre água e EtOAc e a camada - de água foi extraída com EtOAc adicional.
As camadas orgânicas combina- das foram secas (Na>SO;), filtradas e concentradas.
O produto bruto foi puri- ficado em uma BIOTAGE? (carregada seca em um cartucho de sílica-gel de Í 90 g e eluída com um gradiente de EtOAc de 5 a 100% em DCM) e então : purificado através de HPLC preparativa (usando uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 30 X 100 mm eluída com MeOH -Água + 0,1 % TFA) para dar um sal de TFA de (S)-ferc-butil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil) pirrolidin- 2)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-iNfenil)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxi- lato (50 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,278 min; m/z 675,70 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm u- sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos on- de o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (d, J=15,9 Hz, 2H), 8,14 - 8,18 (m,
1H), 8,10 (d, J=8,85 Hz, 1H), 8,05 (s, 0,6H), 7,96 - 8,03 (m, 4H), 7,85 - 7,94 (m, 3,4H), 5,11 - 5,23 (m, 2H), 3,69 - 3,77 (m, 2H), 3,62 (s amplo, 2H), 2,51 - 2,67 (m, 2H), 2,16 - 2,26 (m, 2H), 2,05 - 2,16 (m, 4H), 1,51 (s, 9H), 1,32 (s, 9H). NH n
N Intermediário 54 2-((28)-2-Pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4- i)-2-naftifenil)-1H-imidazo]! - A uma solução de um sal de TFA de (S)-ferc-butil 2-(5-(4-(6-(2- . ((S)-1-(ferc-butoxicarboniN)pirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-4-i)naftalen-2-il)fenil)- 1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (50 mg) em DCM (10 mL) foi adicio- nado TFA(2,0mL, 26 mmol) em uma porção. A mistura foi agitada em tem- - peratura ambiente por 2 horas. A reação foi concentrada sob vácuo para dar um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1H-imida- , zol-S-il)naftalen-2-iN)fenil)-1H-imidazol (51,5 mg) como um sólido laranja, que foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 0,978
15. min;m/z 475,19 [(M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógra- fo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mLímin, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- venteB 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradien- te de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de aná- lise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. HPLC-MS (TFA) 78457-087 usando uma coluna Waters Sunfire 5 u C18 de 4,6x50 mm mostrou a reação estar completa pico encon- trado em Tr= 0,978 min. MH+ = 475,19, 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,34 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 8,03 (dd, J=14,2, 8,7 Hz, 2H), 7,84 - 7,96 (m, 7H),
' 220/563 7,79 - 7,84 (m, 1 H,) 4,998 - 5,11 (m, 2H), 3,48 - 3,63 (m, 4H), 2,57 - 2,70 (m, 2H), 2,41 - 2,55 (m, 2H), 2,29 - 2,41 (m, 2H), 2,15 - 2,29 (m, 2H).
PO HH an Intermediário 55 4,4'-(2 6-Naftalenodiil)bis(2-((2S)-2-pirrolidinil)-1H-imidazo]) A uma solução de um sal de TFA de (28,2'S)-ferc-butil 2,2'-(4,4"- (naftaleno-2,6-diil)bis(1H-imidazol-4,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (82 mg) ' em DCM (2 mL) em temperatura ambiente foi adicionado TFA (2,0 mL, 26 W mmol) em uma porção. A mistura foi agitada por 3 horas em temperatura ambiente, purificada através de HPLC preparativa (Coluna Waters Sunfire 5u C18de30x100 mm eluída com um gradiente de MeOH 5 a 90%-Água + , TFA 0,1%) e repurificada através de HPLC preparativa (coluna PHENOME- R NEXº Luna 10u C18 de 30 X 100 mm eluída com um gradiente de metanol 10 a 90%-Água + TFA 0,1 %) para dar um sal de TFA de 4,4-(2,6-naftale- nodiil)bis(2-((2S)-2-pirrolidinil)- 1H-imidazol) (688 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS 0,978 min; m/z 399,18 [M+HF". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MI- CROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 2H), 7,95 - 8,00 (m, 2H), 7,91 - 7,95 (m, 2H), 7,85 (s, 2H), 5,03 (t, J=8,2 Hz, 2H), 3,49 - 3,62 (m, 4H), 2,589 - 2,67 (m, 2H),
2,42 - 2,52 (m, 2H), 2,31 - 2,40 (m, 2H), 2,17 - 2,28 (m, 2H). Esquema 12 ! Boc de Boc. Boc.
FA ARA NR O SS NS o ErOo elo Intermeciário 11 , ' Intermediário 56 Intermediário 57 Bot. Tra ns db É Ene Lda ADA
QDO E ADD Boc Intermediário 58 Intermediário 58 nm o co CÊ RÁ, memo 5 O Exemplos . ” Si Boc Ss WO (Sel) - N
H Intermediário 56 (S)-terc-butil 2-(5-((trimetilsili)etinil)- 1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1- carboxilato (S)-terc-butil — 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (750 mg, 2,07 mmol) e iodeto de cobre (79 mg, 0,41 mmol) foram dissolvidos em bDMF (20 mL) e trietilamina (1,439 mL, 10,33 mmol). A solução de reação recebeu fluxo de vácuo por 10 minutos (vácuo de aspirador, fluxo de nitro- gênio) e então etiniltrimetilsilano (1,2 mL, 8,3 mmol) e Finalmente Pd(PPh3), (119 mg, 0,103 mmol) foram adicionados. O frasco recebeu fluxo de nitrogê- nio, foi vedado e aquecido a 50ºC da noite para o dia. A reação foi concen- trada para um piche preto bruto, dissolvido em DCM e purificado através de BIOTAGE? Horizon (SiO; 80g, EtOAc 20-40%/hexanos) para dar (S)-ferc- butil 2-(S-((trimetilsili)etinil)- 1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (546 mg, 1,64 mmol, 79% de rendimento) como um sólido amarelo. Este material foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 1,393 min; m/z332,33(MH-) Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí-
quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 5% / H2O 95% / acetato de amô- nio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Plat- 10 form LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, CDC) 5 ppm 7,19 - 7,13 (m, 1H), 4,92 - 4,85 (m, 1H), 3,43 - 3,31 (m, 2H), 3,04 - 2,83 (m, : 1H), 2,20 - 1,88 (m, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,49 (s, 6H), 0,25 (s, 3H), 0,23 (s, 6H). >. . Bos [Ce )
N Intermediário 57 (S)-terc-butil 2-(5-etinil-1AH-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (S)-terc-butil 2-(S-((trimetilsilil)etinil)- 1H-imidazol-2-iN) pirrolidino-1- carboxilato (537 mg, 1,61 mmol) foi dissolvido em MeOH (20 mL) e então carbonato de potássio (22 mg, 0,16 mmol) foi adicionado e a reação foi agi- tada em temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi concentrada, dis- solvida em diclorometano, carregada em uma coluna de SiO», e purificada através de BIOTAGES Horizon (EtoAc 30-50%/hexanos) para dar (S)-terc- butil 2-(5-etinil-1 H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (346 mg, 1,32 mmol, 82% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradi- entede Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitri- la 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização.
HRMN (400 MHz, CDCI3) ô ppm 7,21 - 7,17 (m, 1H), 4,92 - 4,87 (m, 1H), 3,43 - 3,30 (m, 2H), 3,05 (s, 1H), 3,03 - 2,85 (m, 1H), 2,20 - 1,88 (m, 3H), 1,60 -1,45 (m, 9H). Boc, dd Cd o) POr N.
NH Boc Intermediário 58 terc-butil — (28)-2-(4-((6-((2(28S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-2-pirroli- dinil)-1 H-imidazol-5-il) etinil)-2-naftil)etinil)- 1H-imidazol-2-iN-1-pirrolidinocarbo- - 10 xilato (S)-ferc-butil 2-(5-etinil-1AH-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato : (340 mg, 1,30 mmol), 2,6-dibromonatftaleno (744 mg, 2,680 mmol) e iodeto de cobre (1) (12,39 mg, 0,085 mmo!) foram transformados em pasta em DMF (10 mL) e trietilamina (0,54 mL, 3,9 mmol). A solução recebeu fluxo de vácuo comnitrogênio (5X), tratada com Pd(PPh3)a (75 mg, 0,065 mmol) e então recebeu fluxo de vácuo com nitrogênio (2X). A solução amarela nebulosa foi agitada sob nitrogênio em temperatura ambiente por 3 horas.
A reação foi concentrada para um semi-sólido amarelo-laranja, transformada em pasta em DMF/MeOH (-1:1), filtrada e purificada em cinco injeções através de HPLC preparativa (acetoni- trila/água com acetato de amônio 10 mM, 15-100%). As frações contendo o produto desejado foram combinadas e concentradas para dar ferc-butil (28)-2-(4-((6-((2-((28)-1-(terc-butoxicarbonil)-2-pirrolidi- nil)-1H-imidazol-5-il)etinil)-2-naftil)etinil)- 1 H-imidazol-2-1)-1-pirrolidinocarboxi- lato(70mg,0,11 mmol, 18% de rendimento) como um sólido amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 1,448 min; m/z 647,45 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitri- la 5% / H2O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. HRMN (400 MHz, CDCI3) à ppm 10,70 (s amplo, 2H), 7,98 (s, 2H), 7,74 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,57 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,30 - 7,25 (m, 2H, sob pico de sol- Ú vente), 4,95 (dd, J = 7,3, 3,3 Hz, 2H), 3,46 - 3,37 (m, 4H), 3,08 - 2,91 (m, 2H), 2,24 - 2,08 (m, 4H), 2,03 - 1,92 (m, 2H), 1,51 (s, 18H).
TE CS == Ns - Intermediário 59 4,4'-(2 6-Naftalenodiildi-2, 1-etinOdiil)bis(2-((2S)-2-pirrolidinil)- 1H- imidazol) (28,2'S)-tero-butil 2,2'-(5,5'-(naftaleno-2,6-diilbis(etino-2,1-diil))bis (1H-imidazol-5,2-diil)dipirrolidino-1-carboxilato (32 mg, 0,049 mmol) foi dis- solvido em dicloroetano (2 mL) e então TFA (1 mL, 13 mmol) foi adicionado. A solução foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi con- centrada até secar para dar um sal de TFA de 4,4'-(2,6-naftalenodiildi-2,1- etinodiil)bis(2-((2S)-2-pirrolidinil)-1H-imidazol) (41,6 mg) como sólido casta- nho. “H RMN (500 MHz, CD;OD) 5 ppm 8,05 (s, 2H), 7,89 (d, u = 8,3 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,52 (s, 2H), 4,89 - 4,84 (m, 2H), 3,56 - 3,44 (m, 4H), 2,59 - 2,50 (m, 2H), 2,42 - 2,24 (m, 4H), 2,26 - 2,14 (m, 2H).
Esquema 13 a Re EEE CA Intermediário 24 Intermediário 60 dio
À H Da Boc N 4 : Intermediário 60 (1R,5R)-terc-butil 3-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabi- ciclo(3,1,0]hexano-2-carboxilato Base de Hunig (7,68 mL, 44,0 mmol) foi adicionada a uma solu- ção agitada de 2-bromo-1-(4-bromofenil)etanona (12,23 g, 44,0 mmol) e áci- do (1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (10 g, 44 mmol) em MeCN seco (400 mL). A mistura foi agitada por 16 horas em temperatura ambiente. O solvente foi removido /n vacuo e o resíduo foi - absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura, seco (sulfato de sódio), filtrado e concentrado. Em um recipiente de pressão o resíduo foi absorvido em xileno (400 mL) e acetato de amônio (33,9 g, 440 mmol) foi adicionado. O recipiente foi vedado e a- —quecido a 140ºC por 2 horas. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada (pH = 9), salmoura, seco em sulfato de sódio e concentrado. O produto bruto, uma espuma laranja amarelada, foi dissolvido em cloreto de metileno e posto em um cartucho de sílica-gel Thompson de 300 g (eluído comB 720% paraB 100% por 4000 mL onde o Solvente B = acetato de etila e o Solvente À = hexano) para dar (1R,3S8,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-bromofenil)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (18,867 g, 39,1 mmol, 88,8% de rendimento) como uma espuma dourada-marrom. Tempo de retenção de LC-MS 1,762 min; m/z 403,94 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº? Luna S10 de 3,0x50 mm usando um detector
' 226/563 de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mLímin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção deiminutoeum tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era me- tanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,62 (d amplo, J = 8,6 Hz, 2H), 7,50 (d amplo, J = 8,8 Hz, 2H), 7,37 (s, 1H),4,66(s amplo, 1H), 3,58 (s amplo, 1H), 2,56 - 2,47 (m, 1H), 2,36 - 2,27 (m, 1H), 1,75 - 1,87 (m, 1H), 0,97 (s amplo, 9H), 0,88 - 0,81 (m, 1H), 0,64 - ' 0,57 (m, 1H).
Esquema 14 : só TO no CI, PE MA Te, Intermecitário 24 Intermeciário 64 Intermediário 62 NH "e Esto O nm PS er6i o ny PS Co, Nas Ao, =2— As Intermediário 63 Intermediário 64 Intérmeciário 65 Boc
N Tr Intermediário 61 (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(hidroximetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano- 2-carboxilato A uma solução de ácido (1R,38,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2- —azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (9,85 g, 43,3 mmol) em THF (200 mL) a 0ºC foi adicionado em gotas complexo de borano-sulfeto de metila (282 mL, 563 mmol) durante 30 minutos. O banho gelado foi removido, a mistura foi agitada por 1 hora e então aquecida em refluxo por 2 horas. A mistura foi esfriada para 0º C, lentamente extinta com metanol (-200 mL) e concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em DOM e lavado com água (emulsão), HCI IN, NaHCO; aquoso saturado e salmoura. A camada orgânica foi seca em Na;SO,, filtrada e concentrada para dar (1R,3S8,5R)-ferc-butil 3-(hidroxi- metil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (8,43 9, 39,5 mmol, 91% de rendimento) como óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 1,398 min; m/z 236,20 [M+Na]”. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era metano! 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- : verização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 3,72 - 3,79 (m, 1H), 3,52 - 3,64 : (m, 3H), 3,15 - 3,24 (m, 1H), 2,00 - 2,08 (m, 1H), 1,62 - 1,72 (m, 1H), 1,54 - 1,62 (m, 1H), 1,45 - 1,51 (m, 9H), 0,84 (s amplo, 1H), 0,36 (td, J=5,0, 2,4 Hz, 1H).
Boc
N
PTS Intermediário 62 (1R,38S,5R)-terc-butil 3-formil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato A uma solução de (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(hidroximetil)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (4,85 g, 22,74 mmol) em DCM (125 mL) a O ºC foi adicionada periodinana Dess-Martin (11,57 g, 27,3 mmol). A reação foi aquecida para temperatura ambiente e agitada por 3 horas. A reação foi despejada em uma solução aquosa saturada de NaHCO; então cerca de —-20gde NasS2O;3 foram adicionados e agitados por 1 hora. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída várias vezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na7SO, e evaporados in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGES), eluindo com um gradiente de O a 40% de EtOAc/hexanos para dar (1R3S,5R)-ferc-butil 3-formil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (4,479,21,2mmol, 93% de rendimento) como óleo incolor. Tempo de reten- ção de LC-MS 0,813 min; m/z nenhuma ionização (MH+). Dados de LC fo- ram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30mm usando um detector : de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 200 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto, e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era Me- OH10%/H;O 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / . TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio- Ú d) 5 ppm 9,48 (s amplo, 1H), 3,67 - 3,97 (m, 1H), 3,33 - 3,59 (m, 1H), 2,10 - 2,31 (m, 2H), 1,56 - 1,67 (m, 1H), 1,47 (s amplo, 9H), 0,80 (s amplo, 1H), 0,55(s amplo, 1H). NH Bor
CG N Ko Intermediário 63 (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2- carboxilato Hidróxido de amônio (16,40 mL, 421 mmol) foi adicionado em gotas a uma solução agitada de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-formil-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexano-2-carboxilato (4,4 g) em metanol (15 mL) a O ºC. A reação foi deixada aquecer para temperatura ambiente e agitada por 45 minutos. En- tão, oxalaldeído H2O 40% (5,32 mL, 46,3 mmol) foi adicionado em gotas e a mistura de reação foi agitada da noite para o dia. A cor da reação ficou mar- rom com o tempo. À reação foi diluída com salmoura e concentrada para remover o solvente volátil. A camada aquosa restante foi então extraída vá- rias vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secasem Na SO, e evaporadas sob vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGE9), eluindo com um gradiente de EtOAc O a 70%/hexanos para dar (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(1H-imidazol-2- 11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (3,71 g, 14,9 mmol, 71% de ren- dimento) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 0,772 min; m/z 250,20 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido * Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento ' de onda de detector de 200 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram deter- minados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulveri- zação. 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 3 ppm 10,43 (s amplo, 1H), 6,99 (s, 2H), 4,86 (dd, J=9,0, 5,0 Hz, 1H), 3,35 (s amplo, 1H), 3,20 (s amplo, 1H), 2,28 - 2,38 (m, 1H), 1,71 - 1,80 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 0,83 - 0,90 (m, 1H), 0,45 (s amplo, 1H). m ses
ATA Intermediário 64 (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(4,5-diiodo-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no-2-carboxilato lodo (l2, 12,43 g, 49,0 mmol) foi adicionado a uma solução de 3- (1IH-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (5,559, 22,3 mmol)
e carbonato de sódio (7,08 g, 66,8 mmol) em dioxana (56 mL) e água (56 mL) e a mistura de reação foi agitada no escuro por 16 horas em temperatu- ra ambiente.
A mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada com uma solução saturada aquosa de tiossulfato de sódio.
As camadas foram separa- dasea camada aquosa foi extraída com EtOAc.
As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na-SO, e evaporadas sob vácuo.
O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGE9), eluindo com um gradiente de EtOAc O a 100%/hexanos para dar (1R,3S8,5R)-ferc- butil — 3-(4,5-diiodo-1H-imidazo!-2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (8,3g,16 mmol, 71% de rendimento) como um sólido branco.
Tempo de re- - tenção de LC-MS 1,455 min; m/z 502,07 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma : coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 200 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / H2O 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. "H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 4,51 (s amplo, 1H), 3,56 (s amplo, 1H), 2,40 - 2,54 (m, 1H), 2,18 - 2,27 (m, 1H), 1,65 - 1,73 (m, 1H), 1,20 - 1,40 (s amplo, 9H), 0,82 (dt, J=8,6, 5,8 Hz, 1H), 0,58 (s amplo, 1H). NH Boc A ty. ! N A Intermediário 65 (1R,38,5R)-terc-butil 3-(4-lodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato
Um frasco de pressão de 250 mL equipado com uma barra de agitação foi carregado com uma solução de (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(4,5-
diiodo-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (8,3 g, 17 mmol) em EtoOH (83 mL) e água (83 mL). Então, sulfito de sódio (20,88 9, 166 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 90ºC por 16 horas. À mistura de reação foi extraída com EtOAc e as camadas orgânicas combi- nadas foram secas em Na7zSO, e evaporadas sob vácuo. O resíduo foi puri- ficado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGES), eluindo com um gradiente de EtOAc O a 15%/DCM para dar (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(4- iodo-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (3,84 g, 10,2 mmol, 62% de rendimento) como um sólido amarelo junto com o produto totalmente reduzido (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo - 13,1,0]hexano-2-carboxitato (550 mg, 2,21 mmol, 13% de rendimento). Tem- po de retenção de LC-MS 0,932 min; m/z 376,22 (MH+). Dados de L.C foram ] registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 200 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10%/H2O0 90% /TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,12 (s amplo, 1H), 4,59 (s amplo, 1H), 3,44 - 3,64 (s amplo, 1H), 2,40 - 2,52 (m, 1H), 2,47 - 2,30 (m, 1H), 1,65 - 1,73 (m, 1H), 1,27 (s amplo, 9H), 0,84 (dt, J=8,5,5,7 Hz, 1H), 0,58 (s amplo, 1H).
Esquema 15 47 H O dE SO" % H o Intermediário 1 PERO Intermediário és
AE, so MH Soc FA E. Intermesiário 88 ! H 2 qo FR Intermediário Exemplos
E
PES sé AZAO AO” » 7 Intermediário 66 (1R,38,5R)-terc-butil 3-(5-(4-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabo- rolan2ilnaftalen-2-iDfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2- carboxilato e Intermediário 67 (1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-ferc-butilt 3,3-(5,5-(4,4"-(naftaleno-2,6- diil)bis(4, 1-fenileno))bis(1H-imidazol-5,2-diil))bis(2-azabicíclo[3,1,0)hexano-2- carboxilato) Uma solução de 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- iNnaftaleno (1,0 g, 2,6 mmo!), (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(5-(4-bromofenil)-1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (1,06 g, 2,63 mmol), NasCO; (0,837 g, 7,89 mmol) em DME (20 mL) e água (2 mL) foi desgaseifi- cada sob vácuo por 10 minutos. A mistura foi aquecida a 80ºC e então
15. — Pa(Ph3P)s (0,152 g, 0,432 mmol) foi adicionado sob uma corrente de nitro- gênio. O reator foi vedado e o aquecimento foi continuado a 120ºC por 16 horas. O DME foi removido in vacuo e o material bruto foi dividido entre E- tOAC/H2O. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída várias vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secos em NasSO, e evaporados in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromato- grafia de coluna rápida (BIOTAGES), eluindo com um gradiente de MeOH 5%/DCM para dar o produto alvo parcialmente puro contaminado com sub- produtos de reação. O produto impuro foi purificado novamente através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGEG), eluindo com um gradiente de
EtoOAc 50 a 100%/hexanos, então a coluna recebeu fluxo com MeOH 10%/DCM para dar (1R,38,S5R)-terc-butil 3-(5-(4-(8-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no-2-carboxilato (806 mg) como uma espuma amarela.
Tempo de retenção deLC-MS 1,608 min; m/z 578,4 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- ters Sunfire 5U C18 de 4,6x380 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um . tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MEOH 10% / HO : 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Da- dos de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 17H RMN (500 MHz, clorofórmio-d, RMN Parcial) 5 ppm 4,89 (s amplo, 1H), 3,20 - 3,66 (m, 1H), 2,33 - 2,50 (m, 1H), 1,76 - 1,86 (m, 1H), 1,52 (s amplo, 9H), 1,24 - 1,32 (m, 12H), 0,87 - 0,93 (m, 1H), 0,51 (s amplo, 1H). x IAN Bo Jd / A Intermediário 68 (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(5-(4-(6-(21(1R,38S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-aza- biciclo[3,1,0Jhexan-3-i1)-1H-imidazol-4-il)naftaten-2-i)Yfenil)-1 H-imidazol-2-11)- 2-azabicicto[3,1,0]hexano-2-carboxilato Uma solução de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(6-(4,4,5,5-tetra- metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-il)fenil)- 1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo [3,1,O]hexano-2-carboxilato (568 mg), (1R,3S,S5R)-ferc-butil 3-(S-iodo-1H- imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (369 mg, 0,983 mmol), NasCO; (313 mg, 2,95 mmol) em DME (10 mL) e água (2 mL) foi desgaseifi- cada sob vácuo por 10 minutos.
A mistura foi aquecida a 80ºC e então
Pd(Ph3P), (114 mg, 0,098 mmol) foi adicionado sob uma corrente de nitro- gênio.
O reator foi vedado e o aquecimento foi continuado mais a 130ºC da noite para o dia.
O DME foi removido in vacuo e o material bruto foi dividido entre EtOAc/H;O.
As camadas foram separadas e a camada aquosa foi ex- traída várias vezes com EtOAc.
Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO, e evaporados in vacuo.
O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGEGO), eluindo com um gradiente de EtOAc 20 a 100%/hexanos, então MeOH 5%/DCM para dar um (1R,38,5R)- terc-butil/ 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-3-il)1H-imidazol-4il)naftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo - [3,1 ,0]hexano-2-carboxilato parcialmente puro (277 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,578 min; m/z 699,56 (MH+). Dados de LC foram registrados em ' um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- ters Sunfire SU C18 de 4,6x380 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e : um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90%/TFA01%e o Solvente B era HO 10% / MeEOH 90% / TFA 0,1%. Da- dos de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,62 - 7,69 (m, 6H), 7,53 - 7,59 (m, 4H), 6,95 (s, 2H), 4,67 (s amplo, 2H), 3,46 - 3,56(m, 2H), 2,50 - 2,59 (m, 0,5H), 2,32 - 2,49 (m, 2H), 2,27 (s amplo, 1,5H), 1,65 - 1,78 (m,2H),1,28(br.s, 18H), 0,80 - 0,88 (m, 2H), 0,53 - 0,66 (m, 2H). Dt a DE E OO O.
N / af Intermediário 69 (1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2((1R,3S,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1IH-imidazol-4-i1)-2-naftil)fenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano
A uma solução de (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S, 5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i!)-1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-iNYfenil)-1H-imidazot-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (275 mg) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL, 26,0 mmol). A mistura foiagitada por 2 horas em temperatura ambiente.
Os voláteis foram removi- dos sob vácuo e o resíduo bruto foi purificado através de HPLC de fase re- versa (água/MeOH/TFA) para dar um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4-(4-(6- (2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1H- imidazol-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0Jfhexano (106 mg) como sólido castanho.
Tempo de retenção de LC-MS 1,153 min; m/z 499,36 (MH+). Dados de LC - foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30 mm usando um detector : de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era Me- OH 10% / H7O 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / i TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 7,99 - 8,05 (m, 2H), 7,85 - 7,95 (m, 68H), 7,83 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 4,78 (q, J=9,4 Hz, 2H), 3,47 - 3,54 (m, 2H), 2,65 - 2,74 (m, 4H), 2,02 - 2,12 (m, 2H), 1,18 - 1,25 (m, 2H), 0,97 - 1,05 (m, 2H). Esquema 16 " OR 20 ração ET Das TERES CD ronco QN (CO Aa Ro Ns DD NOS intermediário 71 Exemplos
N <= o PO ny (O À god Nº N Cá A, É Intermediário 70 terc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbo- nil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-benzimidazol-6-il)-S-quinolini!)- 1H-benzi- midazoi-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato A uma solução desgaseificada de 6-bromo-2-cloroquinolina (30 mg, 0,12 mmol), Na2COs (39,3 ma, 0,371 mmol) e (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(6- - (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1 H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2-aza- biciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (116 mg, 0,272 mmol) em dioxana (1 mL) Ú e H2O (0,2 mL) foi adicionado Pd(Ph3P), (14,3 mg, 0,012 mmol) e a mistura foi agitada a 110ºC por 2 horas.
A mistura de reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de terc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-benzimidazo|-6-i1)-6-quinolinil)- 1H- benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (60,6 ma, 0,057 mmol, 46,3% de rendimento) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,05 min; m/z 724 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXS Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = 90% água: 10% metanol: 0,1% TFA.
Solvente B = água 10%:metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B inici- al=0,%deBFinal= 100. Tempo de Gradiente = 3 min.
Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,68 (1H, d, J=8,5 Hz), 8,60 (1H, s), 844 (1H, dd, J=8,5, 1,5 Hz), 8,39 (1H, d, J=1,3 Hz), 8,33 (1H, d, J=8,8 Hz), 8,23 - 8,29 (1H, m), 8,25 (1H, d, J=8,5 Hz), 8,19 (1H, s), 8,08 (1H, d, J=9,0 Hz), 7,96 (1H, d, /=9,0 Hz), 7,93 (1H, d, J=9,5 Hz), 5,02 - 5,12 (2H, m) 3,70(2H,s amplo), 2,74 - 2,85 (2H, m), 2,45 - 2,57 (2H, m), 1,84 - 1,96 (2H, m), 1,05 - 1,68 (18H, m), 0,89 - 1,01 (2H, m), 0,77 - 0,86 (2H, m).
OD do (Ch
N Intermediário 71 2,6-Bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo Idlimidazol-6-il)quinolina Um sal de TFA de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2Á1(1R,3S,5R)-2- (terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo(3,1,0]hex-3-ii)-1H-benzimidazo|-6-i1)-6- quinolini)-1H-benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato (51 mg, 0,054 mmol) foi misturado com uma solução de dioxana de HC! (0,5 mL, ' 2,00 mmol) e agitado em temperatura ambiente por 2 horas. Os voláteis fo- - ram removidos para dar um sal de HCI de 2,6-bis(2-((1R,38,5R)-2-azabici- clo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-S-il)quinolina (53 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,20 min; m/z 524 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Sotvente A = água 90%:metano! 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de fluxo = 4 mLímin. % de B inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de gradiente - = 3 min. Comprimento de onda = 220). Esquema 17 " OR a pa O E cao RP am EA nº AEE * ese <A AI) Intermediário 72 tferce-butil (1R,3S8,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbo- —nil)-?-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-iI)-1H-benzimidazol-6-il)-6-quinoxalinil)-1H-
benzimidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato PdA(Ph3P), (14,24 mg, 0,012 mmol) foi adicionado a uma solução desgaseíificada de 8-bromo-2-cloroquinoxalina (30 mg, 0,123 mmol), NaH- CO;z (31,1 mg, 0,370 mg) e (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(6-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzofd]limidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano- 2-carboxilato (131 mg, 0,308 mmol) em dioxana (1,0 mL) e HO (0,2mL) e a mistura foi agitada a 100ºC por 2 horas, então a 110ºC por 2 horas. A rea- ção foi diluída com MeOH, filtrada e o filtrado foi purificado através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-aza- - biciclo[3,1,0]hex-3-i)-1 H-benzimidazol|-6-il)-6-quinoxalinil)-1H-benzimidazol- 2-iN)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (67,6 mg) como um sólido ama- ] relo. ferc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-benzimidazol-6-il)-S-quinoxalinil)- 1H-benzimida-
15. zol2/)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato (67,5 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,13 min; m/z 725 [M+H]*., (Coluna PHENOMENEXSº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%: metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de ' Fluxo = 4 mL/min. % de B de partida = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 min. Comprimento = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,60 (1H, s), 8,71 (1H, s), 8,56 (1H, dd, J=8,8, 1,5 Hz), 8,45 (1H, d, J=1,5 Hz), 8,26 - 8,35 (2H, m), 8,21 (1H, s), 8,06 - 8,11 (1H, m), 7,91 - 7,99 (2H, m), 5,02 - 5,13 (2H, m), 3,70 (2H, s amplo), 2,79 (2H, dd, /=13,4, 9,2 H2), 2,43 - 2,57 (2H, m), 1,83 - 1,96 (2H, m), 1,07 - 1,65 (18H, m), 0,95 (2H, m), 0,77-0,85(2H,Mm)
N
DEE <ATO Intermediário 73 2,6-Bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclof3,1,0]hexan-3-i!)-1H-benzo[d] imidazol-6-il)quinoxalina
TFA (0,25 mL, 3,24 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de terc-butil (1R,38,5R)-3-(5-(2-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicar- bonit)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-benzimidazo|-6-iI)-6-quinoxalinil)-1 H- benzimidazol|-2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (65 mg) em DCM (05ml)ea mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
Os voláteis foram removidos e o resíduo foi triturado com Et2O.
O sólido resul- tante foi coletado através de funil de filtragem e enxaguado com EtsrO para dar um sal de TFA de 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-benzo[dlimidazo!-6-il)quinoxalina (60 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retençãodeLC-MS 1,51 min; m/z 525 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEX? - Luna 3,0 x SOmm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 ] mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 min.
Comprimento de onda = 220). '*H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,52 (1H, s) 8,58 (1H,s), 8,36 (1H, s), 8,22 - 8,33 (2H, m), 8,30 (1H, d, J=9,5 Hz), 8,08 (1H, s), 7,76 - 7,94 (2H, m), 7,83 (1H, d, J=9,5 Hz), 4,80 - 5,05 (2H, m), 3,45 - 3,61 (2H, m), 2,70 - 2,92 (2H, m), 2,50 - 2,67 (2H, m), 2,00 - 2,18 (2H, m), 1,26 (2H, s amplo), 1,04 (2H, s amplo). Esquema 18 o so o Ao mm CAP se CR Imermediário 74 Intermediário 76 no o nºs ve, “O O Eee ! Intermediário 76 intermediário 7
Boc Br Cl Intermediário 74
(S)-terc-butil 2-(5-(4-bromofenil)-4-cloro-1H-imidazol|-2-iI) pirroli- dino-1-carboxilato NCS (0,51 g, 3,82 mmol) foi adicionado a uma solução de ferc- butil 2-(5-(4-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (1,0 g, 2,55 mmol) em DMF (25 mL) e a mistura foi aquecida a 50ºC da noite para o dia.
Os voláteis foram removidos sob vácuo.
O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida (BIOTAGE?), eluindo com um gradiente de EtOAc 0 à 10%/DCM para dar o (S)-ferc-butil 2-(5-(4-bromofenil)-4-cloro-1H-imidazo|-2- il)pirrolidino-1-carboxilato parcialmente puro (1,04 g) como uma espuma a- marela.
Tempo de retenção de LC-MS 1,99 min; m/z 427,12 (MH+). Dados - de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5SU C18 de 4,6x30 mm usando ' um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mLmin, um gradiente de Solvente A 100% / Soivente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Sol- vente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MI- CROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,63 (s, 4H), 4,74 - 4,81 (m, 1H), 3,64 - 3,72 (m, 1H), 3,45 - 3,55 (m, 1H), 2,27 - 2,42 (m, 1H), 2,00 - 2,15 (m, 2H), 1,90 - 2,00 (m, 1H), 1,48 (m, 3H), 1,27 (m, 6H). e cs" 1 Cl Intermediário 75 (S)-terc-butil 2-(4-cloro-5-(4-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa- — borolan-2-inaftalen-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)birrolidino-1-carboxilato
Uma solução de (S)-ferc-butil 2-(5-(4-bromofenil)-4-cloro-1H-imi- dazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (1,04 g, 2,44 mmol) e 2,6-bis(4,4,5,5-tetra- metil-1,3,2-dioxaborolan-2-ilnaftaleno (0,926 g, 2,44 mmol) em DME (10 mL) e água (2 mL) foi desgaseificada sob vácuo por 10 minutos. A mistura foi aquecida em cerca de -80ºC, Pd(Ph3P) Ca (0,282 9, 0,244 mmol) foi adicionado sob uma corren- te de nitrogênio e o reator foi vedado. O aquecimento foi continuado mais para 130ºC por 8 horas. Mais PA(PPh3) a (100 mg) foi adicionado e o aque- cimento foi continuado da noite para o dia. O DME foi removido in vacuo e o material bruto foi dividido entre EtOAc/H20. As camadas foram separadas e - a camada aquosa foi extraída várias vezes com EtOAc. Os extratos orgâni- cos combinados foram secos em Na2zSO, e evaporados in vacuo. O resíduo ' foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGE), eluin- do com um gradiente de O a 100% de EtoAc/hexanos para dar o (S)-terc-
15. butil 2-(4-cloro-5-(4-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2- iDfenil)-1H-imidazol-2-iDpirrolidino-1-carboxilato parcialmente puro contami- : nado com trifenilfosfina (292 mg). Uma alíquota pequena foi purificada mais através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para dar o material título puro. O material restante foi usado em etapa subsequente sem purifi- cação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 2,227 min; m/z 598,46 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 —mLímin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Sol- vente A era MeOH 10% / HO 90%/ acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS fo- ram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de ele- tropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD, sal de TFA, RMN parcial) 5 ppm 3,71 (s amplo, 2H), 3,55 (s amplo, 2H), 2,45 (s amplo, 1H), 2,07 - 2,17 (m,
2H), 1,87 - 2,06 (m, 1H), 1,50 (s, 3H), 1,43 (m, 6H), 1,31 (s amplo, 6H).
N
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NS Intermediário 76 (S)-ferc-butil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2- iN)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-i)fenil)-4-cloro-1H-imidazol-2-i)pirrolidino-1- carboxilato Uma solução de (S)-ferc-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)pirrolidi- - no-1-carboxilato (163 mg, 0,450 mmol), (S)-ferc-butil 2-(S-iodo-1H-imidazol- 2-ilpirrolidino-1-carboxilato (163 ma, 0,450 mmol), bicarbonato de sódio (113 mg, 1,350 mmol) em mistura de solvente de DME (10 mL) e água (2 mL) foi desgaseificada sob vácuo por 10 minutos. A mistura foi aquecida a 80ºC, então PAd(Ph3aP), (52,0 mg, 0,045 mmol) foi adicionado e o reator recebeu : fluxo de nitrogênio e foi vedado. O aquecimento foi continuado mais para - 120ºC por 16 horas. O frasco foi esfriado para temperatura ambiente, o DME foi removido in vacuo e o material bruto foi dividido entre DCOM/H2O. As ca- madas foram separadas e a camada aquosa foi extraída várias vezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na;SO, e evapo- rados in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTAGES), eluindo com um gradiente de EtOAc O a 100%/hexanos para dar o (S)-ferc-butil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(ferc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-i1)- 1H-imidazol-5-il)naftalen-2-il)fenil)-4-cioro-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-car- boxilato contaminado com trifeniifosfina (77 mg). Tempo de retenção de LC- MS 1,830 min; m/z 709,43 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5U C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de —eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d RMN parcial) 5 ppm 5,00 (d, J=4,5 Hz, 2H), 3,38 - 3,52 (m, 4H), 3,410 (br. s, 1H), 2,91 (s amplo, 1H), 2,09 - 2,33 (m, 4H), 1,93 - 2,05 (m, 2H), 1,54 (s, 18H).
SA (DO) No : no À A, ] - Cl Intermediário 77 4-Cloro-2-((S)-pirrolidin-2-il)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-imi- dazol-5-i)naftalen-2-iNYfenil)-1H-imidazol : 10 TFA (2 mL) foi adicionado a uma solução de (S)-ferc-butil 2-(5- : (4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-i)naftalen-2- iNfenil)-4-cloro-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (75 mg) em DCM (10 mL) e a mistura foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. Os solven- tes foram removidos in vacuo e o resíduo foi absorvido em uma mistura de solvente 1:1 de metanol / CHZCLk e filtrado em um cartucho MCX (Strata XC). O cartucho foi lavado com metanol e o composto foi eluído com uma solução de NH; em metanol (2M). As frações apropriadas foram concentradas in va- cuo para dar 4-cloro-2-((S)-pirrolidin-2-i1)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1H- imidazol-S-i)naftaten-2-iN)Yfenil)-1H-imidazol (40 mg, 0,079 mmol) como sólido amarelo, Tempo de retenção de LC-MS 1,353 min; m/z 509,32 (MH+). Da- dos de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5SU C18 de 4,5x30 mm u- sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de4ml/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol-
vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era H2O0 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usan- doumMICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD, parcialmente solúvel apenas) 5 ppm 8,20 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,88 - 7,96 (m, 2H), 7,76 - 7,88 (m, 6H), 7,51 (s, 1H), 4,50 (t, u=7,28 Hz, 1H), 4,35 (t, J=7,15 Hz, 1H), 3,03 - 3,31 (parcialmente mascarado por meta- nol, m, 4H), 2,24 - 2,42 (m, 2H), 1,88 - 2,21 (nm, 6H). Esquema 19 "uo ARES TS Es OMETHZO Intermediário 78 om TN E hu AA a ES a > —— o EP A, . Intermediário 80 Intermediário 41 . f N 7 CO K Bog Boc E o
S
N Intermediário 79 (S)-ferc-butil 2-(7-(6-(2-((S)-1-(ferc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-!)- 1Himidazot-S-il)naftalen-2-il)-4,5-di-hidro-1H-nafto[1,2-d]imidazol|-2-iI) pirroli- dino-1-carboxilato Uma solução de (S)-ferc-butil 2-(5-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (402 mg, 0,821 mmol), (S)-ferc-butil 2-(7-bromo-4,5-di-hidro-1H-nafto[1,2-dJimi- dazol-2-ipirrolidino-1-carboxilato (344 mg, 0,821 mmol) e bicarbonato de sódio (207 mg, 2,46 mmol) em DME (14 mL) e água (1,8 mL) foi desgaseifi- cada sob vácuo por 10 minutos. A mistura foi aquecida a 80ºC momento quando o frasco foi aberto e Pd(PhaP), (76 mg, 0,066 mmol) foi adicionado. O frasco recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e aquecido a 120ºC por 16 horas. O frasco foi esfriado para temperatura ambiente, o DME foi removido in vacuo e o material bruto foi dividido entre DCM e HO. As camadas foram separadas eacamada aquosa foi extraída várias vezes com DCM. Os extra- tos orgânicos combinados foram secos em NasSO, e evaporados in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (BIOTA- GE), eluindo com um gradiente de EtOAc 10 a 100%/Hexanos e então me- tanol O a 10%/DCM para dar (S)-ferc-butil 2-(7-(6-(2-((8)-1-(terc-butoxicarbo- —nibpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-S-iNnaftalen-2-11)-4,5-0i-hidro-1H-nafto[1,2-d] - imidazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (183 mg). Tempo de retenção de LC- MS 1,543 min; m/z 701,47 (MH+). Dados de LC foram registrados em um , cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5U C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de ' gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo ' de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFAO,1%eo Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. í SA) Boc
DO
N Intermediário 80 (S)-terc-butil/ 2-(7-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-i)- 1H-imidazol-S-iN)naftalen-2-i1)-1H-nafto[1,2-djimidazol-2-il)pirrolidino-1-carbo- xilato
Óxido de manganês(IV) (1,53 g, 17,8 mmol) foi adicionado a uma solução de (S)-ferc-butil 2-(7-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrolidin- 2-i1)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-i1)-4,5-di-hidro-1H-nafto[1,2-d]imidazol-2- iDNpirrolidino-1-carboxilato (183 ma, 0,198 mmol) em DOM (5 mL) e a mistura foi agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A mistura de rea- ção foi filtrada em uma almofada de terra diatomácea (CELITE?) e lavada com uma solução de metano/DCM 1:1. Os voláteis foram removidos sob vácuo usando um rotovap para dar (S)-terc-butil 2-(7-(6-(2-((S)-1-(ferc- butoxicarbonil)pirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-i1)-1H-nafto[1,2- dlimidazol-2-ilpirrolidino-1-carboxilato (163 mg) como sólido castanho. Tem- - po de retenção de LO-MS 1,523 min; m/z 699,53 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com ' uma coluna Waters Sunfire 5U C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220NM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B , 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MEOH 10% / H2O 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. SS) (O NOK£8 A ()
N Intermediário 81 2-((S)-Pirrolidin-2-i1)-7-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-il) naftalen-2-iI)-1H-nafto[1,2-d]imidazo] TFA (2 mL, 26,0 mmol) foi adicionado em uma porção a uma so- lução agitada de (S)-ferc-butil 2-(7-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)pirrotidin-
21)-1H-imidazol-S-il)naftalen-2-i)-1H-nafto[1,2-dJimidazol-2-il)pirrotidino-1- carboxilato (137 mg) em CH.Cl; (10 mL) em temperatura ambiente. A mistu- ra foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente e então os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi absorvido em metanol 50%/CHz2Cl> e filtrado através de um cartucho MCX (Strata XC). O cartucho foi lavado com metanol e o composto foi eluído com uma solução de NH; em metanol (2M). As frações apropriadas foram concentradas in vacuo para dar 2-((S)- pirrolidin-2-11)-7-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-iN)-1H-imidazol-S-iNnaftalen-2-i1)-1H- nafto[1,2-dlimidazo! (98 mo, 0,20 mmo!) como sólido laranja. Tempo de re- tenção de LC-MS 1,245 min; m/z 499,30 (MH+). Dados de LC foram regis- - trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LG-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis | SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/ímin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 . minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platform LC emmodo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,59 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,43 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,13 (dd, J=8,6, 1,8 Hz, 1H), 8,01 - 8,10 (m, 3H), 7,90 - 7,98 (m, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,80 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,18 (t, J/=7,9 Hz, 1H), 5,05 (t, J=8,1 Hz, 1H), 3,63 - 3,72 (m, 1H), 3,52 - 3,63 (m, 3H), 2,61 - 2,77 (m, 2H), 2,45 - 2,58 (m 2H), 2,33-2,43(m, 2H), 2,20-2,33 (m, 2H). Esquema 20 ZE to rama DSI ca Intermeciário 27 7
N OP eo E; oa Intermediário 83 EBiemplos
NX Ns (C Va
CAIO Intermediário 82 (28,2'S)-ferc-butil/ 2,2'-(6,6-(quinolino-2,6-diil)bis(1H-benzo[d] i- midazol-6,2-diil) )dipirrolidino-1-carboxilato Pd(Ph3P)a (19,06 mg, 0,016 mmol) foi adicionado a uma solução agitada e desgaseificada de 6-bromo-2-cloroquinolina (40 mg, 0,165 mmol), (S)-fterc-butil 2-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[fd]imi- - dazol-2-il)pirrolidino-1-carboxilato (150 mg, 0,363 mmol) e NaHCO;3 (41,6 mg, 0,495 mmol) em dioxana (1 mL) e H2O (0,2 mL). A mistura de reação foi : 10 então aquecida a 110ºC por 2 horas, esfriada para temperatura ambiente, diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de (28,2'S)-terc-butil 2,2'-(6,6-(quinolino-2,6-diil)bis(1 H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))dipirrolidino-1- carboxilato (73 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,02 min; m/z 700 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm : S10, Solvente A = água 90%: metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mlLímin. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 min. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,63 - 8,74 (1H, m), 8,60 (1H, s), 8,44 (1H, dad,J=8,7,1,6Hz), 8,38 (1H, s amplo), 8,32 (1H, d, J=8,8 Hz), 8,25 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,14 - 8,21 (1H, m), 8,04 - 8,12 (1H, m), 7,90 - 8,00 (2H, m), 5,24 - 5,36 (2H, m), 3,73 - 3,83 (2H, m), 3,59 - 3,72 (2H, m), 2,57 - 2,74 (2H, m), 2,20 - 2,33 (2H, m), 2,09 - 2,20 (4H, m), 1,50 (9H, s amplo), 1,23 (9H, s amplo).
N NON D
CAIU Intermediário 83
2,6-Bis(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1 H-benzo[d]imidazol-6-il) quinolina TFA (0,25 mL, 3,24 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de (28,2'S)-ferc-butil 2,2'-(6,6-(quinolino-2,6-diil)bis(1H-benzo[d] imidazo!-6,2-diil))dipirrolidino-1-carboxilato (865 mg) em DCM (0,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi triturado com Et7O.
O sólido resultante foi coletado através de filtragem e enxaguado com EtzO para dar um sal de TFA 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)quinolina (61 mo) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,12 min; m/z 500 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = : água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. ' Tempo de Gradiente = 3 min.
Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 8,89 (1H, d, J=8,8 Hz), 8,48 (1H, d, J=1,3 Hz), 8,45 (1H, s) 8,34-8,41 (2H, m), 8,31 (1H, d, J=8,8 Hz), 8,12 (1H, dd, J=8,5, 1,8 H2), 8,09 (1H, s), 7,89 (1H, d, J=8,5 Hz), 7,77 - 7,85 (2H, m), 5,05 - 5,19 (2H, m), 3,44 - 3,72 (4H, m), 2,61 - 2,75 (2H, m), 2,19 - 2,49 (6H, m). | Esquema 21 nu HH “Boo LIA oo n u o E, E eo o 0 Em Intermediário 25 Dioxano (4,0 Voxano 1H Intermeciiário 84 + u NH Bor 27 Iitênasditio és Intermediário sê fit FE Wo 4 ú So Intermediário &7 Intermediário 83
&. H ? Pio PE Boc N GS Intermediário 84 (1R,3S,5R)-ferc-Butil 3-(6-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabo- rotan-2-il)naftalen-2-i1)- 1 H-benzofd]imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato
Pd(Ph3aP), (0,382 g, 0,330 mmol) foi adicionado a uma solução desgaseificada de 2,6-bis(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftaleno (2,51 g, 6,61 mmol), (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-bromo-1H-benzo[dlimidazol- Ú 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (2,5 g, 6,6 mmol) e carbonato de . 10 sódio (2,78 g, 33,0 mmol) em DME (52,9 mL) e água (13,2 mL) a 80ºC.
À reação foi retrocarregada com nitrogênio, vedada e aquecida a 100ºC da noite para o dia.
Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi ab- sorvido em EtOAc, lavado com água e a camada de água foi extraída com EtOAc.
As camadas orgânicas combinadas foram filtradas em uma almofada . 15 de terra diatomácea (CELITE?) e secas em Na;SO,, concentradas e purifi- . cadas em uma BIOTAGES (carregada seca em sílica-gel, carregada em um cartucho de gel de sílica de 90 g e eluída com um gradiente de O a 70% de acetato de etila e hexanos, então recebeu fluxo de MeOH 10%/DCM) para dar (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(8-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)
—naftalen-2-il)-1H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carbo- xilato (1,8 g, 3,3 mmol, 49% de rendimento) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,905 min; m/z 552,47 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,8x30 mm usando um detector de UV-Vis —SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10%/H2O 90%/TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA
0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. A A NH Boc
STA Intermediário 85 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbo- nil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)- 1 H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1 H-imidazo]-2- iN)-2-azabiciclo[(3,1,0]hexano-2-carboxilato - Um frasco de fundo redondo de pressão de 200 mL equipado com uma barra de agitação magnética foi carregado com (1R,3S,5R)-terc- ' butil 3-(5-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-iI)-1H-benzo [d] imidazol-2-i1)-2-azabiciclo(3,1,0]hexano-2-carboxilato (795 mg, 1,44 mmol), (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-iodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano- 2-carboxilato (538 mg, 1,43 mmol) e bicarbonato de sódio (502 mg, 5,97 mmol) em DME (9,5 mL) e água (2,4 mL). A solução foi desgaseificada sob vácuo por 5 minutos e o reator foi retrocarregado com N>2. Então, PA(Ph3aP), Ú (110 mg, 0,096 mmol) foi adicionado sob uma corrente de N, e o reator foi vedado e aquecido da noite para o dia a 120º C. A reação foi esfriada para temperatura ambiente e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi dividido entre EtOAc e água e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram filtrados em uma almofada de terra diato- mácea (CELITE?), secos em Na-SO, e os voláteis foram removidos sob vá- cuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna rápida (Bl- OTAGE9), eluindo com um gradiente de EtOAc 50 a 100% /Hexanos e então metano! 10%/DCM para dar o produto alvo parcialmente puro contaminado com material de partida, material de partida reduzido e outros subprodutos de reação. O resíduo foi purificado mais através de HPLC preparativa (ACN/água, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de ferc-butil (1R,38,5R)-3- (4-(8-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H- benzimidazol-5-i1)-2-naftil)-1H-imidazo]-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-car-
boxilato (200,5 mg). Um subproduto foi também coletado da mesma mistura de reação que foi identificado como um sai de TFA (1R,38,5R)-3-(5-(6"-(2- ((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)- 1H-benzimi- dazol-6-il)-2,2"-binaftalen-6-iI)-1H-benzimidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no2-carboxilato (108 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,497 min; m/z 673,52 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solivente B - 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 : minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / H20 90% / TEA 0,1% e o Solvente B era H7/O 10% / MeEOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,09 - 8,20 (m, 3H), 7,96 - 8,08 (m, 2H), 7,87 - 7,94 (m, 2H), 5,07 (t, J=8,2 Hz, 1H), 4,91 (m, 1H), 3,69 (s amplo, 2H), 2,70 - 2,84 (m, 2H), 2,48 (s Ú amplo, 2H), 1,81 - 1,94 (m, 2H), 1,51 (s amplo, 1H), 1,51 (s amplo, 9H), 1,31 (samplo, 5H), 1,21 (s amplo, 4H), 0,89 - 0,99 (m, 2H), 0,82 (s amplo, 1H), 0,77 (s amplo, 1H). 2 NA < <> N Boc Bo N O SS CD o
ANA Intermediário 86 (1R,38,5R)-3-(5-(6"-(2-((1R,38S,5R)-2-(terc-Butoxicarbonil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-benzimidazol-S-il)-2,2'-binaftalen-6S-il)-1H- benzimidazo!-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Subproduto obtido como sal de TFA (108 mg) após purificação da mistura de reação da síntese do Intermediário 85. Tempo de retenção de LC-MS 1,882 min; miz 849,84 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/ Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,36 (s, ' 2H), 8,28 (s, 2H), 8,11 - 8,19 (m, 6H), 8,03 - 8,09 (m, 4H), 7,87 - 7,96 (m, 4H), 5,07 (t, J=8,2 Hz, 2H), 3,71 (s amplo, 2H), 2,75 - 2,85 (m, 2H), 2,51 (s amplo, 2H), 1,86 - 1,94 (m, 2H), 1,52 (m, 10H), 1,22 (s amplo, 8H), 0,97 (ddd, J=8,4, 6,0, 5,8 Hz, 2H), 0,83 (s amplo, 2H).
“A O J NH . ur - Intermediário 87 6-(6-(2-((1R,38,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4- i)naftalen-2-1)-2((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d] imi- dazol HCI 4M em dioxana (10 mL, 40,0 mmol) foi adicionado a uma so- lução agitada de um sal de TFA de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-(2-((1R,3S, S5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d] imida- zol-S-il)naftalen-2-1)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0])hexano-2-carboxilato (151 mg) em DCM (3 mL). Precipitado se formou imediatamente. À suspen- são foi agitada por 30 minutos. Os componentes voláteis foram evaporados sob vácuo. O resíduo bruto foi absorvido em DCM (3 mL) e TFA (2 mL) foi — adicionado. A solução foi agitada por 1 hora. Os componentes voláteis foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido em MeOH e fil- trado em um cartucho Strata XC MCX. O cartucho foi lavado com metanol e o composto foi liberado do cartucho através de eluição com uma solução de 2M de amônia/metanotl.
O filtrado de amônia/metanol foi evaporado sob pressão reduzida para dar 6-(6-(2-((1R,3S8,5R)-2-azabiciclo[3,1,0)hexan-3-il)- 1IH-imidazol-4-i)naftalen-2-i1)-2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-
1H-benzo[dlimidazol (79 mg, 0,17 mmol) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,130 min; m/z 473,35 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condi-
ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 ml/min, um gradiente . de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 ' minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MEOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1% Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 17H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 8,19 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,92 (dd, J=8,6, 5,8 Hz, 2H), 7,88 (s, 1H), 7,82 (dd, : J=5,8, 1,5 Hz, 2H), 7,61 - 7,66 (m, 2H), 7,51 (s, 1H), 4,24 - 4,35 (m, 2H), " 3,11 (td, J=6,1, 2,4 Hz, 1H), 3,06 (td, J=6,0, 2,6 Hz, 1H), 2,40 - 2,53 (m, 2H), 2,18-233 (m, 2H), 1,69 - 1,76 (m, 1H), 1,62 - 1,69 (m, 1H), 0,88 (ddd, J=6,6, 4,3, 2,6 Hz, 1H), 0,79 - 0,84 (m, 1H), 0,61 - 0,68 (m, 1H), 0,55 - 0,80 (m, 1H). 7” e.
DQ RDI ZIO AS, Tr Intermediário 88 6,6-Bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H- benzofd]imidazol|-5-il)-2,2'-binaftila TFA (2,0 mL, 26 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA (1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabici- clo[3,1,0Jhex-3-iI)-1 H-benzimidazol-6-il)-2,2"-binaftalen-6-11)-1H-benzimidazol-
2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (108 mg) em DCM (5 mL) e a mistura de reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. A mistu- ra de reação foi então concentrada para dar um sal de TFA de 6,6'-bis(2- ((1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol-5-i1)-2,2"- binaftil (22 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LO-MS 1,722 min; m/z 649,54 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- ' vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TEA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeEOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSS” Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s amplo, 2H), 8,22 (s am- . plo, 2H), 8,09 - 8,15 (m, 4H), 8,01 - 8,07 (m, 4H), 7,89 - 7,95 (m, 2H), 7,77 - 7,87 (m, 4H), 4,85 - 4,98 (m, 2H), 3,51 - 3,57 (m, 2H), 2,79 - 2,87 (m, 2H), 2,59 - 2,68 (m, 2H), 2,07 - 2,14 (m, 2H), 1,23 - 1,30 (m, 2H), 1,01 - 1,09 (m, 2H). Esquema 22 O MRS o o ES
DERSLANTITTIESA SÃO S SM <A resciiio so
N Boc DD N SN | NE À god <VAIO Intermediário 89
' 256/563 ferc-butit (1R,38,5R)-3-(5-(6-(2(1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-benzimidazol|-6-i1)-1,5-naftiridin-2-i1)-1H- benzimidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato Tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) (17,4 mg, 0,015 mmol) foi adi- cionadoa uma solução de 2,6-dicloro-1,5-naftiridina (380 mg, 0,151 mmol), bicarbonato de sódio (38,0 ma, 0,452 mmol) e (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(6- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iI)-1 H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2-az2a- biciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato (141 mg, 0,332 mmol) em dioxana (1,0 mL) e H2O (0,2 mL) e a mistura foi aquecida e agitada a 110ºC por 2 horas. Areação foi diluída com MeOH, filtrada, concentrada e purificada através de . HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar terc-butil/ (1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabi- | ciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-benzimidazo|-6-il)-1,5-naftiridin-2-iN-1H-benzimidazol- 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (22,3 mg, 0,030 mmol) como um sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 2,11 min; m/z 725 [M+H]]. (Co- luna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%: : metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 min. Comprimento de onda = 220).
N te Ns O N q R H | > H H «É : & O Intermediário 90 2,6-Bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-benzo[d] imidazol-6-i1)-1,5-naftiridina TFA (0,25 mL, 3,2 mmol) foi adicionado a uma solução de ferc- butil (1R,38,5R)-3-(5-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hex-3-il)- 1 H-benzimidazol-6-il)-1,5-naftiridin-2-11)- 1H-benzimidazo|-2-i1)- —2-azabiciclol3,1,0)hexano-2-carboxilato (20 mg, 0,028 mmol) em DCM (0,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. O volátil foi removido sob vácuo e o resíduo foi triturado com Et2O. O sólido resultan-
te foi coletado através de filtragem e enxaguado com Et7O para dar um sal de TFA de 2,6-bis(2((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-benzo[d] imidazol-6-il)-1,5-naftiridina (26 mg, 0,022 mmol, 78% de rendimento) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,41 min; m/z 525 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%: metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%: metanol 90%: TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 min. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) ôõ ppm 8,61 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,51 (2H, s), 8,40 (2H, d, J=9,0 Hz), 8,23 (2H, dd, J=8,5,1,5H2), 7,81 (2H, d, J=8,5 Hz), 4,74 - 4,97 (2H, m), 347 - 3,57 . (2H, m), 2,78 - 2,88 (2H, m), 2,52 - 2,65 (2H, m), 2,04 - 2,15 (2H, m), 1,22 - 1,33 (2H, m), 0,99 - 1,11 (2H, m). Esquema 23 2 Cc Er H H B nes é RH Q NH Doo . Intermeciário 85 Intermediário 91 TFA A o ' ne Ê N EN Intermediário 92 Cl
A AX E RD-DA OS Boc N =
O Intermediário 91 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbo- nil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-benzimidazol1-5-i1)-2-naftiN)-S-cloro-1H-imi- dazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0Thexano-2-carboxilato NCS (20 mg, 0,15 mmol) foi adicionado em porções a uma solu- ção em agitação de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-buto- xicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-benzimidazol-5-11)-2-naftil)- 1H-imi-
" 258/563 dazol-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (183 mg, 0,272 mmol) em DMF (5 mL) em temperatura ambiente.
A mistura de reação foi então aque- cida a 50ºC por 3 horas.
A reação foi esfriada para 0º C, mais NCS (15 mg, 0,112 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada por 2 horas a 50ºC.
A rea- çãofoidiluída com água (2 mL) e metanol (2 mL), os voláteis foram removi- dos e o produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa (TFA) para dar um sal de TFA de terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc- butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-benzimidazol-5-i)-2-naftil)-5- cloro-1H-imidazol|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (140,4 mo) como sólido laranja.
Tempo de retenção de LC-MS 1,822 min; m/z 707,54 ' (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 5 uM de i 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Soivente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um . tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B i era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização.
H RMN (500 MHz, MeOD) 3 ppm 8,27 (d, J=2,8 Hz, 2H), 8,03 - 8,18 (m, 4H), 7,87 - 7,98 (m, 3H), 5,04 - 5,10 (m, 1H), 4,63 (d, J=7,6 Hz, 1H), 3,71 (s am- plo, 1H), 3,63 (s amplo, 1H), 2,74 - 2,87 (m, 1H), 2,59 (dd, J=13,3, 8,7 Hz, 1H), 2,51 (s amplo, 1H), 241 (ddd, J=13,6, 6,7, 6,6 Hz, 1H), 1,86 - 1,95 (m, 1H) 1,78(s amplo, 1H), 1,12- 1,63 (m, 18H), 0,97 (ddd, J=8,7, 6,0, 5,8 Hz, 1H), 0,79 - 0,91 (m, 2H), 0,86 (s amplo, 1H). Cc! A O NH O) ORDENADO, fr Intermediário 92 2-((1R,3S,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-
- 259/563 azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-4-cloro-1H-imidazol-5-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazol! TFA (2 mL, 26,0 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbo- nil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1 H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)-S-cloro-1H-imi- — dazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (131 mg, 0,140 mmol) em DCM (19 mL) e a mistura foi agitada por 3 horas em temperatura ambiente.
Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi absorvido em MeOH e filtrado em um cartucho Strata CX MCX.
O cartucho foi lavado com meta- nol e o composto foi liberado do cartucho através de eluição com uma solu- ção2M de amônia/metanol.
O filtrado de amônia/metanol foi evaporado sob - pressão reduzida para dar 2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-5-(6-(2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-4-cloro-1H-imidazol|-5-iN)-2-naftil)- 1 H- i benzimidazol (55 mg, 0,11 mmol) como sólido castanho.
Tempo de retenção de LC-MS 1,375 min; m/z 507,33 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registra- dosem um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma co- luna Waters Sunfire C18 5 uM de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis . SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À i 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 8,26 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,00-8,09 (m, 3H), 7,92 (ddd, J=12,1, 8,6, 1,8 Hz, 2H), 7,85 (dd, J=8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,96 (dd, J=11,0, 7,6 Hz, 1H), 4,64 (app t, J=9,3 Hz, 1H), 3,53 - 3,59 (m, 1H), 3,44 - 3,50 (m, 1H), 2,82 (dd, J=13,0, 7,5 Hz, 1H), 2,61 - 2,74 (m, 3H), 2,03 - 2,15 (m, 2H), 1,24 - 1,30 (m, 1H), 1,48 - 1,24 (m, 1H), 0,96 - 1,09 (m, 2H).
. 7 260/563 Esquema 24 : oH Br TS, Bi ts yu Br Bos . o "Re 5 N DIPEA, CH;CH Bor r Intermediário 93 2 Intermediário 94 ” ECN o ' y K NH Bor TFA Boc PÁOAC),, Cs;COs, SPhos ES - H,0, TRF, 120 € Intermediário 95 , H NH s N é R Intermediário 96 . Br Oo
DKIO | QS é Boc Intermediário 93 (1R,38,5R)-3-(2-(3-Bromofenil)-2-oxoetil) 2-terc-butil 2-azabiciclo [3,1 0]hexano-2,3-dicarboxilato DIPEA (2,79 mL, 16,0 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de ácido (1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano-3-carboxílico (2,00 g, 8,80 mmol) e 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (2,22 g,8,00 mmol) e 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (2,22 g, 8,00 mmol) em acetonitrila (25 mL) (a solução se tornou transparente e de cor âmbar) e a mistura de reação foi agitada da noite para o dia. A reação foi concentrada e purificada através de BIOTAGE? (SiO, 80 g, EtOAc 10-25%/hexanos) para dar (1R,38,5R)-3-(2-(3-bromofenil)-2-oxoetil) 2-ferc-butil 2-azabiciclo([3,1,0] hexano2,3-dicarboxilato (3,37 g, 7,584 mmol) como um óleo amarelo-claro viscoso. Tempo de retenção de LC-MS 1,853 min; m/z 423 e 425,98 (1:1)
« í 261/563 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna Waters XTERRAº? MS 7u C18 de 3,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detecior de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxade fluixode4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio MM o solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. 10 Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS; Platform LC . em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,04 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,83 (d, /=7,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,38 (dd, J = ' 8,0, 7,8 Hz, 1H), 5,58 - 5,10 (m, 2H), 4,23 (s amplo, 1H), 3,62 - 3,39 (m, 1H), 2,58 (dt, J=13,3, 6,5 Hz, 1H), 2,46 (dd, J = 13,3, 9,5 Hz, 1H), 1,73 - 1,51 (m, 1H), 1,47 (s, 9H), 0,85 (s amplo, 1H), 0,51 (s, 1H). Boc Br Intermediário 94 (1R,38,5R)-terc-butil 3-(4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Em um recipiente de alta pressão de 350 mL acetato de amônio (5,94 g, 77 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38,5R)-3-(2-(3- — bromofenil)-2-oxoetil) 2-ferc-butil 2-azabicicio[3,1,0Jhexano-2,3-dicarboxilato (3,33 g, 7,85 mmol) em xileno (75 mL) e agitado sob nitrogênio por 5 minu- tos.
O recipiente foi vedado e então posto em um banho de óleo que tinha sido aquecido para 140ºC (a reação ficou marrom escuro) e a reação foi mantida a 140ºC por 11 horas.
Mais acetato de amônio (3,0 g) foi adicionado eareação foi agitada a 145ºC por 8 horas, esfriada para temperatura ambi- ente e agitada (>90% de conversão através de LCMS). A reação foi concen- trada sob vácuo alto para um óleo marrom que foi dividido entre DCM (-200 a + 262/563 mL) e bicarbonato de sódio saturado 4 (-200 mL). A camada orgânica foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada.
A espuma solidificada laranja bruta foi purificada em um BIOTAGEº Horizon (EtOAc 20-50%/hexanos, SiO2 160 g) para dar (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabi- ciclo[(3,1,0)hexano-2-carboxilato (2,03 g, 5,02 mmol) como como uma espu- ma solidificada amarela.
Tempo de retenção de LC-MS 2,450 min; m/z 404 e 406,06 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Lu- na 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma . taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 ] minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era MEOH 5%/ H;O 95%/ acetato de amônio 10mMeo Solvente B era HO 5%/ MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (400 MHz, CDCI;) à ppm 7,89 (s, 1H), 7,65 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,42 - 7,32 (m 2H), 7,26 (t, J = 7,8 Hz, 1H), B 4,72 -4,61 (m, 1H), 3,62 - 3,53 (m, 1H), 2,51 (dd, J = 13,0, 7,8 Hz, 1H), 2,36 -2,26(m,1H),1,75-1,66 (m, 1H), 1,29 (s amplo, 9H), 0,84 (dt, J = 8,0, 5,7 Hz, 1H), 0,83 - 0,57 (m, 1H). " H NH.
Boc "Le TO: Boc N O e; di Intermediário 95 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(3-(6-(2((18,3R,58)-2-(ferc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-i1)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol- 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Uma solução de (1R,38,SR)-ferc-butil 3-(5-(6-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano-2-carboxilato (220 mg, 0,395 mmol) (preparada da mesma maneira que o Intermediário 51 a partir do Intermediário 55), (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(4-(3- bromofenil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (192 mg, 0,474 mmol) e carbonato de césio (386 mg, 1,185 mmol) em THF (4 mL) e água (4 mL) em um frasco de pressão de 100 mL foi desgaseificada sob vácuopor5 minutos e então retroabastecida com nitrogênio.
Acetato de pa- ládio (II) (8,9 mg, 0,039 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida por 4 horas a 120ºC.
A mistura de reação foi esfriada para temperatura ambiente, diluída com água e extraída com EtOAc e DCM.
As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO;y), filtradas e con- centradas.
O resíduo bruto foi purificado em um sistema BIOTAGE? (cartu- cho de sílica-gel de 90 g, eluído com um gradiente de FtOAc O a 100% em hexanos) para dar ferc-butil (1R,3S,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((18,3R,58)-2-(terc- i butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-il)- 1H-imidazol-4-iN)-2-naftil)fenil)-1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (142 mg, 0,203 mmol) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,585 min; m/z 699,57 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido . Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire C18 5 uM de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento | de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização. '*H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (d, J=1,2 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,20 - 8,24 (m, 1H), 8,14 - 8,20 (m, 1H), 8,10 - 8,14 (m, 1H), 7,97 - 8,07 (m, 3H), 7,94 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,87 - 7,92 (m, 1H), 7,77 - 7,82 (m, 1H), 7,67 - 7,74 (m, 1H), 4,84 - 4,96 (m, 2H), 3,67 (s amplo, 2H), 2,69 - 2,80 (m, 2H), 2,47(samplo, 2H), 1,82-1,91 (m, 2H), 1,19 - 1,63 (m, 18H), 0,89 - 0,97 (m,
2H), 0,77 (s amplo, 2H).
EO FX N NOS Õ ns, H N ( Ko Intermediário 96
(1R,38,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((1S,3R,58)-2-Azabiciclo[3,1,0]Jhex-3-il)-
IH-imidazo|-4-i1)-2-naftil)feni))-1H-imidazol-2-i0)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano TFA (2 mL, 26,0 mmol) foi adicionado a uma solução de ferc- butil (1R,38,5R)-3-(4-(3-(8-(2-((1S,3R,5S)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo
[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo . [3,1,0]hexano-2-carboxilato (130 mg, 0,20 mmol) em DCM (2 mL) e a mistura foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente.
Os voláteis foram removi- dos sob vácuo e o produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa (metanol/água, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4-(3-(6- (2((1S8,3R,58)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-nafti)fenil)-1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (103 mg) como um sólido castanho. . Tempo de retenção de LC-MS 1,303 min; m/z 499,13 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 5 uM de 4,6Xx30 mm usando um detec- torde UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metano! 10%/ água 90% /TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s, 1H), 8,22 (d, J=12,5 Hz, 2H), 8,02 (dd, J=8,6, 5,8 Hz, 2H), 7,90 - 7,97 (m, 2H), 7,75 - 7,82 (m, 4H), 7,58 (t, /=7,8 Hz, 1H), 4,74 - 4,78 (m, 2H) 3,46-3,53 (m, 2H), 2,64 - 2,74 (m, 4H), 2,04 - 2,12 (m, 2H), 1,19 - 1,26 (m, 2H), 1,02 (ddd, J=14,2, 7,3, 7,2 Hz, 2H).
Esquema 25 Intermediário se o ol NA H 4 Bo E H IH imermediário 83 intermegasrio 100 - » u | VIADO Br =N Intermediário 97 (1R,38S,S5R)-fterc-butil > 3-(8-(6-bromoquinoxalin-2-il)- 1H-benzo[d] imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato ' PdA(Ph3P), (28,5 mg, 0,025 mmol) foi adicionado a uma solução - desgaseificada de 6-bromo-2-cloroquinoxalina (60 mg, 0,246 mmol), (1R,3S, 5R)-ferc-butil 3-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-benzo[d] imidazol-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (115 mg, 0,271 mmol) e bicarbonato de sódio (62,1 mg, 0,739 mmol) em dioxana (1 mL) e HO (0,2 mL) e a mistura foi agitada a 110ºC por 2 horas e então a 120ºC por 2 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC prepa- rativa (H4O-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar (1R,38S,5R)- tercbutil 3-(6-(6-bromoquinoxalin-2-i)-1H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2-azabici- clo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (102,2 mg, 0,202 mmol, 82% de rendimento) como sólido amarelo brilhante.
Tempo de retenção de LC-MS 2,31 min; m/z 506 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente À = água 90%:metano! 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda = 220).
“QA o soê ABAS o =N Intermediário 98 Ácido 2-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazo!l-6-il)quinoxalin-6-ilborônico Pd(Ph3P)1 (23,28 mg, 0,020 mmol) foi adicionado a uma solução desgaseificada de (1R,3S8,5R)-ferc-butil 3(6-(6-bromoquinoxalin-2-it)-1H- benzo[alimidazol-2-1I)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (102 mg, 0,201 mmol), KOAc (49,4 mg, 0,504 mmol) e bis(pinacolato)diboro (113 mg, 0,443 : mmol) em dioxana (2 mL) e a reação foi agitada a 83ºC por 16 horas.
A mis- . tura de reação foi dividida entre EtOAc (20 mL) e NH,ÁCI saturado (aquoso) (5 mL). A camada orgânica foi seca (MgSO;,), filtrada e concentrada para um óleo laranja, que foi purificado através de HPLC preparativa (HXO-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar ácido 2-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxi- carbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-11)-1H-benzo[d]imidazol-8-il)quinoxalin-S- ' ilborônico (57 mg, 0,421 mmol, 60,0% de rendimento) como sólido laranja. ' Tempo de retenção de LC-MS 1,94 min; m/z 472 [M+H]". (Coluna PHENO- MENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metano! 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mLímin. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100, Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda = 220). QA JF NH Boc e ELIADIAS, =N ar Intermediário 99 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(2-(2((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbo- —nil)-2-azabiciclo(3,1,0])hex-3-i!)-1H-benzimidazol-5-i1)-6-quinoxalinil)-1H-imi- dazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Pd(OAc), (2,67 mg, 0,012 mmol) foi adicionado a uma solução desgaseificada de ácido 2-(2-((1R,3S8,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabi-
ciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-benzo[d]Jimidazol-6-il) quinoxalin-8-ilborônico (56 mg, 0,118 mmol), (1R,38,5R)-terc-butil 3-(5-iodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabi- ciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato (68,9 mg, 0,178 mmol), diciclo-hexil(2',6"- dimetoxibifenil-2-il)fosfina (9,76 mg, 0,024 mmol) e K;CO;3 (49,3 mg, 0,356 mmol) em THF (1mL)e água (0,25 mL) e a mistura foi agitada a 120ºC por 2 horas. A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de H- PLC preparativa (HXO-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-(2-(2-((1R,38S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabi- ciclo[3,1,0)hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazo|-6-il) quinoxalin-6-il)- 1 H-imidazoi- 21)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato (32 mg, 0,047 mmol) como sóli- . do amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,89 min; m/z 675 [M+H]". (Colu- na PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm 810, Solvente A = água 95% / me- tanol 5% / acetato de amônio 10 MM. Solvente B = água 5% / metanol 95% / acetato de amônio 10 mM. Taxa de Fluxo = 4 mLimin. % de B Inicial = 0, % deBrFinal=100. Tempo de Gradiente = 2 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,44 (s, 1H), 8,45 (s amplo, 1H), BR 8,39 (s, 1H), 8,23 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,13 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,69 - 7,76 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 4,69 - 4,78 (m, 1H), 4,49 - 4,57 (m, 1H), 3,58 - 3,70 (m, 2H), 2,50 - 2,73 (m, 2H), 2,31 - 2,47 (m, 2H), 1,67 - 1,86 (m 2H),1,31(samplo, 18H), 0,82 - 0,95 (m, 2H), 0,54 - 0,75 (m, 2H). &/ H NH Qd ODAS,
N É Intermediário 100 2-(2-((1R,38,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-benzimidazol-5- i)-6-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-i1)-1H-imidazol-4-il)quinoxalina TFA (0,25 mL, 3,24 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38,S5R)-ferc-butil / 3-(5-(2-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabi- ciclo(3,1,0]hexan-3-11)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)quinoxalin-6-iI)-1H-imidazol- 2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (30 mg, 0,044 mmol) em DCM (0,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi triturado com EtçO para dar um sal de TFA de 2-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H- benzo[d]imidazo!-6-il)-8-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iN)-1H- imidazol-5-iN)quinoxalina (32,7 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção deLC-MS 1,33 min; m/z 475 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna 3,0 x SOmm S10, Solvente À = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). “H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,47 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,50(s, 1H), 8,31 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1H), 8,26 (dd, J=8,5, 1,3 Hz, 1H), 8,15 - (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,82 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,85 - 4,97 (m, 1H), 4,67 (dd, J1=10,8, 7,5 Hz, 1H), 3,45 - 3,57 (m, 2H), 2,77 - 2,86 (m, 1H), 2,65 - 2,74 (m, 1H), 2,52 - 2,65 (m, 2H), 2,02 - 2,15 (m, 2H), 1,18 - 1,30 (m, 2H), 0,95 - 1,09 (m, 2H). Esquema26 4 o Ra TFA Mm Et o E PR Ê E Mao “ SP Es.co, : Intermediário 17 Intermeçiácio 104 Intermesiário 102 HF, água + 4, Pi Qu E Ir Ns Ss NA SD "LA Intermediário 13 Intermediário 104
NH
W Intermediário 101 (1R,38,5R)-3-(4-lodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexano TFA (1 mL, 12,98 mmol) foi adicionado em gotas a uma solução de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-iodo-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no-2-carboxilato (450 mg, 1,20 mmol) em DCM (5 mL) em temperatura am- biente. A mistura foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente, então os voláteis foram removidos e o resíduo foi absorvido e MeOH (5 mL) e filtrado através de um cartucho Strata XC MCX. O cartucho foi lavado com metanol
(30 mL) e o composto foi liberado do cartucho através de eluição com uma solução de 2M de amônia/metanol (40 mL) e concentrado para dar (1R,38,5R)-3-(5-lodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (283 mg, 1,03 mmol, 86% de rendimento) como sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS0,448min;m/z275,94 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% /Solvente BO0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) àô ppm 7,17 (s, 1H), 4,20 (dd, J=10,4, 7,3 Hz, 1H), 3,08 (td, J=6,2, 2,6 Hz, 1H), 2,38 (dd, J=12,5, 7,3 Hz, - 1H), 2,19 (ddd, J=12,7, 10,5, 4,9 Hz, 1H), 1,68 - 1,74 (m, 1H), 0,85 (ddd, J=6,6, 4,4, 2,8 Hz, 1H), 0,81 - 0,67 (m, 1H). | VT o E Po Es o Intermediário 102
Metil (S)-1-((1R,38,5R)-3-(4-iodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabíciclo
[3,1,0]hexan-2-iI)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato HATU (464 mg, 1,22 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38,5R)-3-(5-iodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano (280 mg, 1,02 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (214 mg, 1,22 mmol) e DIEA (1,8 mL, 10 mmol) em DMF (3 mL). A mistura de reação foi agitada 2 horas em temperatura ambiente e então diluída com MeOH (5 mL) e água (5 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi purificado através de cromatografia rápida (a amostra foi carregada seca em Silica-gel e eluída com acetato de etila 0-100 / hexanos) para dar metil (S)-1- ((1R,3S,5R)-3-(5-lodo-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexan-2-il)-3-metil- 1-oxobutan-2-ilcarbamato (500 mg, 0,925 mmol, 91% de rendimento) como óleo amarelado. Tempo de retenção de LC-MS 0,850 min; m/z 432,97 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- : vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platíorm LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 7,09 (s, 1H), 5,09 (dd, J=8,9, 4,6 Hz, 1H), . 4,47 - 4,60 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,59 -3,62 (m, 1H), 2,39 - 2,49 (m, 1H), 2,29 - 2,39 (m, 1H), 2,12 (da, J=13,6, 6,8 Hz, 1H), 1,95 - 2,06 (m, 1H), 1,11 | (dt, J=8,6, 5,5 Hz, 1H), 0,94 - 1,02 (m, 3H), 0,91 (d, J=6,7 Hz, 3H), 0,76 (s amplo, 1H).
E E % HNZ CD O A H fe Intermediário 103 (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicar- bonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciíclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-4-i1) naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carbo- xilato Uma solução de (1R,38,5R)-terc-butil 3-(6-(6-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-i1)- 1H-benzo[d]imidazo1|-2-11)-2-azabiíciclo [3,1 0]hexano-2-carboxilato (573 mg, 1,04 mmol), metil (S)-1-((1R,38S,5R)-3-
(S-lodo-1H-imidazol|-2-i1)-2-azabicíclo[3,1,0]hexan-2-iI)-3-metil-1-oxobutan-2- ilcarbamato (374 mg, 0,87 mmol), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-iNfosfina (SPHOS, 71,0 mg, 0,173 mmol) e carbonato de césio (846 mg, 2,60 mmol) em THF (7,9 mL) e água (0,8 mL) foi desgaseificada a 0º C sob vácuo por 5 minutoseoreator foi então retroabastecido com nitrogênio.
Acetato de palá- dio(ll) (19,4 mg, 0,087 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aque- cida a 100ºC por 3 horas.
Água foi adicionada à solução fria e a reação foi diluída mais com EtOAc (15 mL). As fases foram separadas e a camada a- quosa foi extraída com EtOAc (15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na-sSO,, filtradas em uma almofada de terra diatomácea - (CELITE?) e os voláteis foram removidos sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em síili- ca-gel e eluída com acetato de etila 20-100% / hexanos, então MEOH 5% / DCM) para dar (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoi!)-2-azabiciclof3,1,0]hexan-3-il)- IH-imidazol-5- iNnaftalen-2-il)-1H-benzo[d]imidazo|-2-i1)-2-azabiciclof3,1,0]Jhexano-2-carbo- . xilato (246 mg, 0,337 mmol, 39,0% de rendimento). Tempo de retenção de LC-MS 1,448 min; m/z 730,21 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análisede3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,32 (s amplo, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,03 - 8,19 (m, 4H), 7,96 - 8,03 (m, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,85 - 7,96 (m, 2H), 5,18 (dd, J=9,0,7,0 Hz, 1H), 5,09 (dd, J=8,9, 7,6 Hz, 1H), 4,58 (d, J=6,5 Hz, 1H), 3,81 - 3,89 (m, 1H), 3,65 - 3,75 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,68 - 2,86 (m, 2H), 2,52 (dt, J=13,6, 6,8 Hz, 2H), 2,15 - 2,29 (m, 1H), 2,06 - 2,15
(m, 1H), 1,85 - 1,95 (m, 1H), 1,51 (s amplo, 4H), 1,41 (d, J=16,3 Hz, 1H), 1,27 (s, 1H), 1,20 (s amplo, 3H), 1,12 (ddd, J=8,7, 6,0, 5,9 Hz, 1H), 1,04 (d, J=6,8 Hz, 3H), 0,87 - 1,00 (m, 5H), 0,83 (s amplo, 1H). do ô HN Pe AO Or 3 Y% AN” O A AN H e Intermediário 104 Metil (S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0] : 5 hexan-3-il)-1IH-benzo[dlimidazol-B-iNnaftalen-2-11)-1H-imidazol-2-11)-2-azabi- cicio[3,1,0)hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato TFA (2 mL) foi adicionado a uma solução de (1R,3S,5R)-ferc- butil 3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)- 2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-S-il)naphtalen-2-11)-1H-benzofd] imidazol-2-11)-2-azabicicio[3,1,0Jhexano-2-carboxilato (226 mg, 0,310 mmol) em DCM (5 mL) e a reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambien- ' te.
A solução foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi absorvido em MeOH : (10 mL) e filtrado em um cartucho Strata XC MCX e lavado com metanol (25 mL). O composto foi liberado do cartucho através de lavagem da coluna com uma solução de 2M de amônia/metanol (10 mL) e concentrada sob pressão reduzida para dar metil (S)-1((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2((1R,38,5R)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexan-3-iI)-1H-benzo[d]limidazol-S-il)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (131 ma, 0,208 mmol) como sólido castanho.
Tempo de retenção de LO-MS 1,235 min; m/z 630,17 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
Às condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era metanol 10% / água 90% / TEA 0,1% e o
Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,16 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,92 (dd, J=8,3, 6,3 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,78 - 7,85 (m, 2H), 7,60 - 7,69 (m, 2H), 744(s,1H), 5,20 (dd, J=8,8, 4,8 Hz, 1H), 4,62 (d, J-6,8 Hz, 1H), 4,28 (dd, J=9,8, 7,8 Hz, 1H), 3,66 - 3,76 (m, 4H), 3,35 - 3,41 (m, 2H), 3,03 (td, J=6,0, 2,5 Hz, 1H), 2,40 - 2,59 (m, 3H), 2,12 - 2,25 (m, 2H), 1,99 - 2,09 (m, 1H), 1,59 - 1,68 (m, 1H), 1,10 - 1,48 (m, 1H), 1,00 - 1,08 (m, 3H), 1,04 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,91 - 1,04 (m, 1H), 0,95 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,76 - 0,84 (m, 2H), 0,50-0,59(m,1H). ' Esquema 27 ' ÕÔ o sm ou ex h u e RR a oo ' nº Nor Intermediário 64 & srta O SPhros. têscos intermediário 101 ' Intermediário 105 TAF. Aguê ] 2 4 ” Intermediário 106 O o Intermediário 07 i á
O o E O AA o (ke Intermediário 105 Metil — (S)-2((1R,38,5R)-3-(4-lodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo [3,1 0]hexan-2-il)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etilcarbamato HATU (846 mg, 2,23 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38,5R)-3-(5-iodo-1H-imidazo]-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (510 mg, 1,85 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) —acético(483 mg,2,23 mmol) e DIEA (3,24 mL, 18,5 mmol) em DMF (5 mL) e água (5 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi purifica- do com cromatografia rápida (amostra foi carregada seca em sílica-gel e elu- ída com acetato de etila 0-100% / hexanos então MeOH 10%/DCM) para dar metil (S)-2-((1R,38S,5R)-3-(5-iodo-1H-imidazol-2-11)-2-azabicicio[3,1,0]hexan- 2)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etilcarbamato (370 ma, 0,780 mmol, 42,1% de rendimento) como espuma branca. Material impuro foi purificado mais em HPLC de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) para dar sal de TFA de metil (S)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-ilodo-1H-imidazo]-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etilcarbamato, (387 mg) como óleo incolor. Tempo de retenção de LC-MS 0,690 min; m/z 474,95 (MH+). - Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando ' um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4
15. mlL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Soivente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de . manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Sol- vente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água ] 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 17H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 3 ppm 7,58 (s, 1H), 5,04 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 1H), 4,56 (d, J=7,8 Hz, 1H), 3,96 (td, J=11,7, 3,1 Hz, 2H), 3,74 - 3,81 (m, 1H), 3,65 - 3,73 (m, 3H), 3,35 - 3,44 (m, 2H), 2,61 (dd, J=13,6, 9,3 Hz, 1H), 2,37 (ddd, J=13,6, 6,7, 6,5 Hz, 1H), 1,96 - 2,09 (m, 2H), 1,37 - 1,62 (m, 4H), 1,06 (dt/J=8,8,5,9Hz, 1H), 0,84 (td, J=5,6, 2,4 Hz, 1H).
/ * mt DO & Oo < o RA O Cs o Intermediário 106 (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((S8)-2-(metoxicar-
bonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i!)- 1IH-imidazol-4-i)naftalen-2-il)- 1H-benzo[d]imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano-2-carboxilato
Uma pasta fluida de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(4,4,5,5-tetra-
metil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)mnaftalen-2-iI)-1H-benzo[d]imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (407 mg, 0,738 mmol), um sal de TFA de metil (S)-2-((1R,38,5R)-3-(5-iodo-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xan-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etilcarbamato (350 mg), diciclo- hexil(2',6"-dimetoxibifenil-2-ilYfosfina (80,6 mg, 0,148 mmol) e carbonato de césio(721mg,2,21mmol) em THF (8,7mL) e água foi desgaseificada a 0º C ' sob vácuo por 5 minutos e então o reator foi retroabastecido com nitrogênio.
Acetato de Paládio(ll) (18,6 mg, 0,074 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 100ºC por 3 horas.
Os voláteis foram removidos sob vácuo e a mistura foi diluída com água (20 mL) e EtOAc (20 mL). As fases foram sepa- radas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (20 mL). As camadas or- gânicas combinadas foram secas em Na>SO;,, filtradas e evaporadas sob . vácuo.
O resíduo foi purificado através de cromatografia rápida (a amostra foi carregada seca em sílica-gel e eluída com acetato de etila 20%-100% / i hexanos, então MeOH 10%/DCM). O resíduo foi purificado novamente atra- vésde HPLC de fase reversa (água/metano!, TFA 0,1%) para dar o sal de TFA de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbo- nitamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H- imidazol-5-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazo|-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no-2-carboxilato (231 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC- MS 1,395 min; m/z 772,31 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% /SolventeB 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA
0,1% e o Solvente B era água 10% / metano! 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 2H), 8,09 - 8,18 (m, 3H), 8,05 (dd, J=8,7, 1,7 Hz, 1H), 7,97 - 8,02 (m, 2H), 7,91(d,J=86Hz, 1H), 7,88 (dd, J=8,7, 1,7 Hz, 1H), 5,16 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 5,01 - 5,09 (m, 1H), 4,62 (d, J=7,6 Hz, 1H), 3,91 - 4,02 (m, 3H), 3,83 - 3,89 (m, 1H), 3,70 (s amplo, 4H), 3,35 - 3,45 (m, 2H), 2,68 - 2,83 (m, 2H), 2,45 - 2,57 (m, 2H), 2,04 - 2,16 (m, 2H), 1,90 (s amplo, 1H), 1,43 - 1,61 (m, 8H), 1,14 - 1,31 (m, 4H), 1,07 - 1,43 (m, 1H), 0,97 (dt, J=8,8, 5,8 Hz, 1H), 0,91(samplo, 1H), 0,82 (s amplo, 1H). O.
NEN SI : Va A, O 4 AU H 2 Õ : o Intermediário 107 . Metil (S)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0] : hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol|-6-i)naftalen-2-11)-1H-imidazol-2-11)-2-azabici- clof3,1,0]hexan-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etilcarbamato TFA (2 mL, 26,0 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(6-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((S)-2-(metoxicar- bonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-imidazol-S-il)naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol|-2-i/)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano-2-carboxitato (150 mg) em DCM e a mistura foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente.
Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resí- duo foi absorvido em MeOH (15 mL), filtrado em um cartucho Strata XC MOCX (1 g) e lavado com metanol.
O composto foi liberado do cartucho atra- vés de lavagem da coluna com uma solução de 2M de amônia/metanol (20 mL) e concentrado para dar metil (S)-2((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)- 2-azabiciclo[3,1,0)hexan-3-i)-1H-benzofd]limidazol-S-il)naftalen-2-iN)-1H- imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDNetilcarbamato (100 mg, 0,149 mmol) como sólido branco.
Tempo de reten-
ção de LC-MS 1,772 min; m/z 670,36 (M-H+). Dados de LC foram registra- dos em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma co- luna Waters Sunfire C18 de 4,6x30 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / á- gua 90% / acetato de amônio 10 mM e solvente e o Solvente B era água 10%/ metanol 90% / acetato de amônio 10 mM e solvente.
Dados de MS : foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. "H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (s, ' 1H), 8,24 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,05 - 8,10 (m, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,96 - 8,00 (m, 2H), 7,84 (dd, J=8,7, 1,7 Hz, 1H), 7,75 - 7,82 (m, 2H), 5,16 (dd, J=9,2,7,3 Hz, 1H), 4,84 - 4,88 (parcialmente ocultado por MeOD, m, 1H), 4,62 (d, J=7,6 Hz, 1H), 3,91 - 4,01 (m, 2H), 3,84 - 3,89 (m, 1H), 3,66 - . 3,76 (m, 3H), 3,51 - 3,56 (m, 1H), 3,35 - 3,46 (m, 2H), 2,82 (dd, J=12,8, 7,3 Hz, 1H), 2,73 (dd, J=13,7, 9,2 Hz, 1H), 2,61 (td, J=12,0, 4,7 Hz, 1H), 2,53 (ddd, /=13,8, 6,8, 6,6 Hz, 1H), 2,06 - 2,18 (m, 3H), 1,58 - 1,64 (m, 1H), 1,44 - 1,57 (m, 3H), 1,23-1,30 (m, 1H), 1,08 - 1,16 (m, 1H), 1,05 (q, J=7,8 Hz, 1H), 0,88 - 0,93 (m, 1H). Esquema 28 A AAA E Bo O "E e Cc Pecape E é E Br N 7 Intermedisrio 24 O aixãno ** O z O eo RE CL a. + ea $ FIRE Crie “O A, Intermediario 112 Intermediário 113
Nº o Bl SRA Intermediário 108 6-Bromo-2-(1-etoxivinil)quinoxalina Diclorobis(trifenilfosfina)-paládio(ll) (17,30 mg, 0,025 mmol) foi adicionado a uma solução de 6-bromo-2-cloroquinoxalina (60 mg, 0,246 mmol) e tributil(1-etoxivini)estanana (107 mg, 0,296 mmol) em dioxana (1,5 mL) e a mistura foi agitada a 110ºC por 2 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar 6-bromo-2-(1-etoxivinil)quinoxalina (36 mo, Ú 10 0,129 mmol, 52,3% de rendimento) como sólido branco. Tempo de retenção : de LC-MS 2,76 min; m/z 279 [M+HY". (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de
15. onda=220). - N= o - as Intermediário 109 2-Bromo-1-(6-bromoquinoxalin-2-il)etanona NBS (55,1 mg, 0,310 mmol) foi adicionado a uma solução de 6- bromo-2-(1-etoxivinil)quinoxalina (72 mg, 0,28 mmol) em THF (2 mL) e água (0,500 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar 2-bromo-14(6- bromoquinoxalin-2-i)etanona (50 mg, 0,15 mmol, 59% de rendimento) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 2,40 min; m/z 329 [M+H]". (Co- luna PHENOMENEXº? Luna de 3,0 x 50mMm SÍO, Solvente A = água 90% metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mLímin. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220).
O ST LL O Boo Br Intermediário 110 (18,3S,58)-3-(2-(6-Bromoquinoxalin-2-11)-2-0x0etil) 2-terc-butil 2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato DIPEA (0,040 mL, 0,227 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-bromo-1-(6-bromoquinoxalin-2-il)etanona (50 mg, 0,152 mmol) e ácido (1R38S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabicicio[3,1,0]hexano-3-carboxílico - (37,9 mg, 0,167 mmol) em acetonitrila (1,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo foi ' dividido entre EtOAc (20 mL) / NAHCO; aquoso saturado (5 mL). A camada aquosa foi seca (MgSO;), filtrada e concentrada para dar (1R,38,5R)-3-(2- (6-bromoquinoxalin-2-i1)-2-oxoetil) 2-terc-butil 2-azabiciclo[3,1,0fhexano-2,3- dicarboxilato (63 mg) como sólido laranja. Tempo de retenção de LC-MS . 2,74 min; m/z 476 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água Ú 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, %deBFinal = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). CTA oo
STS Intermediário 111 (1R,38S,S5R)-terc-butil 3-(4-(8-bromoquinoxalin-2-i1)-1H-imidazol- 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato NH,OAc (102 mg, 1,323 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,3S,5R)-3-(2-(86-bromoquinoxalin-2-i1)-2-0x0etil) 2-ferc-butil 2-azabicíclo [3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (63 mg, 0,13 mmol) em tolueno (3 mL) e a mistura foi agitada a 120ºC por 4 horas. Mais NH.OAc (102 mg, 1,323 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida mais a 120ºC por 4 horas. A reação foi diluída com EtOAc (20 mL) e NaHCO; aquoso saturado (5 mL). A cama- da orgânica foi seca (M9SO;), filtrada, concentrada e então purificada atra- vés de cromatografia de silica-gel (eluída com 1:2 de EtOAc/hexanos) para dar (1R,3S,S5R)-terc-butil 3-(4-(6-bromoquinoxalin-2-iI)-1 H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclol3,1,0]hexano-2-carboxilato (25 mg, 0,055 mmol) como sólido ver- melho laranja.
Tempo de retenção de LC-MS 2,07 min; m/z 456 [M+H]*. (Co- luna PHENOMENEX? Luna de 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mlL/min. % de B inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda = 220). | E H Ne Qg FAX Boo dA Intermediário 112 (1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-Butoxicarbonil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-benzimidazol-5-11)-2-quinoxalinil)-1H-imidazol-2- ] iN)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxitato
- Pd(OAc), (1,230 mg, 5,48 umol) foi adicionado a uma suspensão desgaseificada de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(4-(8-bromoquinoxalin-2-i1)-1H- imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (25 mg, 0,055 mmol), K2CO;3 (22,71 mg, 0,164 mmol), diciclo-hexil(2',6'-dimetoxibifenil-2-iNfosfina (4,50 mg, 10,968 umol) e (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-iI)-1H-benzo[a]limidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-
carboxilato (30,3 mg, 0,071 mmol) em THF (1 ml) e água (0,250 mL) e a mistura foi agitada a 110ºC por 2 horas.
À reação foi diluída com MeOH, fil- trada e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar (1R,38,5R)-terc-butil 3-(5-(6-(2-((1R,3S8,5R)-2- (terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-benzo[d]imidazo|-6-
iNquinoxalin-2-i)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (12 mg, 0,018 mmol, 33% de rendimento) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,90 min; m/z 675 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Lu-
na 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 95% / metanol 5% / acetato de amô- nio 10 mM. Solvente B = água 5% / metanol 95% / acetato de amônio 10 mM. Taxa de Fluxo = 4 mLímin. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 2 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD)5õ ppm 9,38 (s, 1H), 8,28 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,16 - 8,22 (m, 1H), 8,10 - 8,15 (m, 1H), 7,95 (s, 2H), 7,66 - 7,76 (m, 2H), 3,54 - 3,73 (m, 2H), 2,52 - 2,69 (m, 2H), 2,33 - 247 (m, 2H), 1,71 - 1,84 (m, 2H), 1,08 - 1,57 (m, 20H), 0,83 - 0,95 (m, 2H), 0,60 - 0,74 (m, 2H). É H N= NH ' af . Intermediário 113 6-(2-((1R,3S,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]Jhexan-3-iI)-1H-benzo[d] imi- dazol-6-10)-2-(2-((1R,3S8,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4-i) quinoxalina TFA (0,25 mL, 3,24 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-(2-((1R,38S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabi- ' ciclo [3,1,0]hexan-3-il)-1 H-benzo[d]imidazol-6-il)quinoxalin-2-i1)- 1H-imidazo!-
15. 2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (10 mg, 0,015 mmol) em DCM (0,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi triturado com EtO. O sólido resultante foi enxaguado com Et,;O para dar um sal de TFA de 6-(2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol|-6-11)-2-(2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-S-il)quinoxalina (10,5 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,32 min; m/z 475 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna 3,0 x 50mm S10, Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220).
%o Cc > ra GA Na.
H N Intermediário 114 Benzil / (28)-2-(6-(6-(2-((28S)-1-((benzilóxi)carboni!)-2-pirrotidinil)- 1H-imidazo([4,5-b]piridin-6-11)-2-naftil)- 3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)-1-pirroli- dinocarboxilato Preparado de uma maneira similar ao Intermediário 39 usando ' 5 ácido (S)-1-(benziloxicarbonil)pirrolidino-2-carboxílico como um material de ' partida ao invés de ácido (S)-1-(ferc-butoxicarbonil)pirrolidino-2-carboxílico e o intermediário não foi protegido com SEM. Benzil (28)-2-(6-(6-(2-((28)-1- ((benzilóxi)carbonil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-S-i1)-2-naftil)- 3H- imidazo[4,5-b]piridin-2-i)-1-pirrolidinocarboxilato (20,8 mg) como um sólido branco. Tempo de retenção de LO-MS 1,742 min; m/z 769,41 (MH+). Dados . de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS : equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados deMS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização.
EXEMPLOS o No Ae FO AA O a o TE C) “ A Exemplo 1 Metil — ((18)-1-(((28)-2-(5-(7-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazo|-5-11)-2-naftil)- 1H-benzi- midazol-2-11)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (59 mg, 0,15 mmol) foi adicionado a uma mistura de um ' sal de TFA de 2,7-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-B-il)naftaleno (37 mg), di-isopropiletilamina (68 ul, 0,40 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoico (27 mg, 0,15 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 2,5 horas.
A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL) e agitada por 15 minu- ' tos.
O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado - duas vezes através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) e H- PLC de fase reversa (água/acetonitrila/NH,/OAc) para prover o produto dese- jado que foi suspenso em metanol e TFA.
Os voláteis foram removidos in vacuo para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(5-(7-(2-((28)-1-((2S)
-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazo!-5- il)-2-naftil)-1H-benzimidazo|-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil).:- carba- mato (11,3 mg) como sólido castanho.
Tempo de retenção de LC-MS 1,34 min; Calc. para CasHs2NgOs 812,4. Encontrado m/z 813,42 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100%/ Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o
Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 1H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,31 (s, 2H), 8,03 - 8,10 (m, 4H), 7,96 - 8,02 (m, Hz, 2H), 7,89 (dd, J=8,6, 1,5 Hz, 2H), 7,85 (m, 2H), 5,36 (t, J=7,0 Hz, 2H), 4,22 - 4,32 (m, 2H),4,09-4,19 (m, 2H), 3,89 -4,00 (m, 2H), 3,63 - 3,74 (m, 6H), 2,56 - 2,70 (m, 2H), 2,31 - 2,40 (m, 2H), 2,19 - 2,31 (m, 4H), 2,08 (dd, J=13,6, 6,9 Hz, 2H), 0,95 (d, J=7,0 Hz, 6H), 0,89 (d, J=6,7 Hz, 6H). v Oo o O N A Tra OO TA CÃO do s - N Sa
O Exemplo 2 Metil — ((18)-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) . amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H- benzimidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato : HATU (82 mg, 0,217 mmol) foi adicionado a um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol|-6-il)naftaleno (69 mg), di- isopropiletilamina (126 ul, 0,723 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoico (51 mg, 0,298 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 2,5 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). Então o componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase rever- sa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)- 2-(5-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2- pirrolidinil)-1H-benzimidazol-5-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-1- pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (47 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS 1,30 min; Calc. para CasHs2NgOs: 812,40. En- contrado m/z 813,42 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um croma- tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfi-
re 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,25 (s, 2H), 8,07 - 8,16 (m, 4H), 8,02 (m, J=8,6 Hz, 2H), 7,91 (m, J=8,6 Hz, 2H), 7,87 (d, J=8,68 Hz, 2H), 5,37 (t, J=7,2 Hz, 2H), 4,28 (d,J=7,0 Hz, 2H), 4,09 - 4,18 (m, 2H), 3,90 - 4,01 (m, 2H), 3,63 - 3,73 (m, 6H), 2,57 - 2,70 (m, 2H), 2,32 - 2,45 (m, 2H), 2,198 - 2,32 (m, 4H), 2,09 (dq, J=13,6, 6,9 Hz, 2H), 0,95 (d, J=6,7 Hz, 6H), 0,89 (d, J=6,7 Hz, SH). ? N NX ua O | ax N N (O HN | CAIO Ds - Exemplo 3 Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(4-(6-(2-(1-((28)-2-((metoxicarbonil) a- mino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol-S-i1)-2-naftil)fenil)- 1 H- imidazol-2-il)-1-pirrolidinibcarbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (38 mg, 0,10 mmol) foi adicionado a uma mistura de um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-86-(6-(4-(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1H-imidazo]l- S-iDNfeninnaftalen-2-i1)- 1H-benzo[d]imidazol (50 mg), di-isopropiletilamina (89 HL, 0,51 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (27 mg, 0,15mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi diluída com metano! (2 mL) e água (2 mL). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(4-(8-(2-(1-((28)-2-((meto- xicarbonil)>amino)-3-metilbutanoi!)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazol|-5-i1)-2-naftil) fenil)-1iH-imidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato — (31,4 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS 1,37 min; Calc. para CagHsaNgOç 838,42. Encontrado m/z 839,36 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era ace- tonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / : água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,23 - 8,28 (m, 2H), 8,08 - 8,15 (m, 3H), 8,02 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,95 - 8.00 (m, 2H), 7,85 - 7,95 (m, 6H), 5,40 (t, J=7,2 Hz, 1H), 5,29 (t, J=7,5 Hz, 1H), 4,29 (dd, J=19,4, 7,2 Hz, 2H), 4,10 - 4,19 (m, 2H), 3,96 - 4,03 (m, 1H), 3,87 - 3,96 (m, 1H), 3,89(m,6H),2,55-2,73 (m, 2H), 2,04 - 2,42 (m, 8H), 0,89 - 1,05 (m, 12H).
IOLR o NH o O. N i Aí Em S&S d oo
À Exemplo 4 Metil ((18S)-1-(((28)-2-(4-(4-(7-(2-((28)-14((28S)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazo!-5-i)-2-naftifenil)-1 H- imidazol-2-1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) carbamato HATU (29 mg, 0,076 mmol) foi adicionado a uma mistura de um saldeTFA de 2(S)-pirrolidin-2-i1)-6-(7-(4-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)- 1 H-imidazol- 5-ilfenibnaftalen-2-i1)- 1H-benzo[d]imidazol (25 mg), di-isopropiletilamina (45 uL, 0,26 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (13 mg, 0,78 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 2,5 horas. À mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) eágua(2ml). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de metil ((1S)-1-(((28)-2-(4-(4-(7-(2-((28)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazol-5-i1)- 2-naftilfenil)-1H-imidazol-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (14,2 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,40 min; Calc. para CagHsaNgOs 838,42. Encontrado m/z 839,36 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mLímin, um - gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- ] ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90%/água 10% /TFA 0,1%. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s amplo, 2H), 8,13 (s, 1H), 8,03 - 8,10 (m, 3H), 8,00 (d, J=8,2 Hz, 2H), . 7,86 - 7,94 (m, 6H), 5,40 (t, J=7,2 Hz, 1H), 5,29 (t, J=7,6 Hz, 1H), 4,31 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,27 (d, J=7,3 Hz, 1H), 4,10 - 4,20 (m, 2H), 3,85 - 4,10 (m, ] 2H), 3,69 (s, 6H), 2,55 - 2,74 (m, 2H), 2,03 - 2,37 (m, 8H), 0,85 - 1,05 (m, 12H).
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O Exemplo 5 Metil ((18)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-(N-(metoxicarbonil)-L- alanil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1 H-benzimidazol-2-1)-1- pirrolidinil)- 1-metil-2-oxoetil)carbamato HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de ácido 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)- 1H-benzo[d] imidazol-6-il)naftaleno (40 mg), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)propanoico (28,8 mg, 0,196 mmol) e DIEA (0,114 mL, 0,653 mmol!) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) eágua(2mL), concentrada para remover os voláteis e purificada atra- vés de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(metoxicarbonil)-L-alanil)- 2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazo|-5-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-1-pirrolidi- nil)-1-metil-2-oxoetil)carbamato (35,9 mg) como sólido branco. Tempo de retenção de LOC-MS 1,12 min; Calc. para CazHaaNgOs 756,34, Encontrado m/z - 757,20 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 . minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e : o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (sa! de —TFA,500 MHz, MeOD)ô ppm 8,22 - 8,30 (m, 2H), 8,08 - 8,18 (m, 4H), 7,99 - 8,07 (m, 2H), 7,83 - 7,96 (m, 4H), 5,44 (dd, J=8,6, 5,2 Hz, 2H), 4,56 (q, J=6,9 Hz, 2H), 4,0 - 4,09 (m, 2H), 3,94 - 4,02 (m, 2H), 3,61 - 3,75 (m, 6H), 2,58 - 2,72 (m, 2H), 2,21 - 2,38 (m, 6H), 1,32 - 1,45 (m, 6H). x o o O N a o N N % ND
Õ Exemplo 6 Dimetil (2, 6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil(28)-2,1- pirrolidinodiil((1R)-2-0x0-1-fenil-2,1-etanediil)))biscarbamato
HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-benzofd] imi- dazol-6-iN naftaleno (40 mg), ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (41,0 mg, 0,196 mmol) e DIEA (0,114 mL, 0,653 mmol) em DMF (2 mL). À reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purificada atra- vés de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) e então através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil(28)-2,1-pirrolidinodiil ((1R)-2-0x0-1-fenil-2,1-etanediil)))biscarbamato (32,3 mg) como sólido bran- - co. Tempo de retenção de LC-MS 1,43 min; Calc. para Cs2Ha8N8Os 880,37. Encontrado m/z 881,23 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cro- i matógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A . 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- | po de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 10% / água 90%/TFAO,1% eo Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. ?H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,25 - 8,35 (m, 2H), 8,12 - 8,21 (m, 4H), 8,05 - 8,12 (m, 2H), 7,90 - 8,00 (m, 4H), 7,38 - 7,54 (m, 10H), 5,62 (s, 2H), 5,38 - 5,53 (m, 2H), 4,04 - 4,18 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 2,34 - 2,41 (m, 2H), 2,46 - 2,58 (m, 2H), 2,15 - 2,35 (m, 4H), 2,02 - 2,13 (m, 2H).
O O NA
N N Cr CI A LO
CAIO Õ Exemplo 7 5,5-(2 6-Naftalenodiil)bis(2-((28)-1-((2R)-2-fenil-2-(1-piperidinil)
acetil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazo]l) HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) fci adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-benzo[d] imi- dazol-6-il)naftaleno (40 mg), ácido (R)-2-fenil-2-(piperidin-1-il)acético (43,0 mg 0,1968mmol)e DIEA (0,114 mL, 0,853 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) e então através de H- PLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar 5,5-(2,6-naftalenodiil)bis(2-((28)-1-((2R)-2-fenil-2-(1-piperidinil)acetil)-2-pirro- - lidinil)-1H-benzimidazol) (44,3 mg) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,18 min; Calc. para [M+H]* CsgHsoN3O> 900,48. Encontrado m/z 451,33 [1/2 M+H]*, Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo li- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de4,6x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- to de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma . taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Soivente B 100%, um tempo de gradiente de 3 | minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%.
NNW N Nº ON A LO A, O AN Exemplo 8 (1R)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((28S)-1((2R)-2-(Dimetilamino)-2-fenilace- til)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol-6-iI)-2-naftil)- 1 H-benzimidazol-2-i1)-1-pirro- lidinil)-N, N-dimetil-2-0x0-1-feniletanamina HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1H-benzo[d] imi- dazol-6-il)naftaleno (40 mg, 0,065 mmol), ácido (R)-2-(dimetilamino)-2-
fenilacético (35,1 mg) e DIEA (0,114 mL, 0,853 mmol) em DMF (2 mL). À reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purificada atra- vês de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) e então através deHPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar (1R)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-((2R)-2-(dimetilamino)-2-fenilaceti|)-2- pirrolidinil)- 1 H-benzimidazo|-6-i1)-2-naftil)- 1 H-benzimidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)- N N-dimetil-2-0x0-1-feniletanamina (44,3 mg) como sólido esbranquiçado. Tempo de retenção de LC-MS 1,07 min; Calc. para Cs2H52NgO, 820,42. En- contrado m/z 821,29 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um croma- - tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfi- re 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mLímin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo . de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. H ' RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 2H), 8,20 - 8,24 (m, 2H), 8,13-8,20(m,2H),8,07-8,13(m,2H),7,89-8,05 (m, 4H), 7,60 - 7,70 (m, 10H), 5,55 - 5,59 (m, 2H), 5,52 (dd, J=8,7, 3,8 Hz, 2H), 4,11 - 4,19 (m, 2H), 2,42-3,18 (m, 13H), 2,17 - 2,36 (m, 5H), 1,98 - 2,08 (m, 4H). A !
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Ô Exemplo 9 Metil — ((18,2R)-2-metóxi-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N-(metoxi- carbonil)-O-metil-L-treonil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol-S-il)-2-naftil)- 1H- —benzimidazol-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)propil)carbamato
HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-i0)-1H-benzo[d] imi- dazol-6-ilnaftaleno (40 mg), ácido (28,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) butanoico (37,4 mg, 0,196 mmol) e DIEA (0,114 mL, 0,653 mmol) em DMF (2ml).A reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purifi- cada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) e então através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar metil ((1S8,2R)-2-metóxi-1-(((28)-2-(5-(8-(2-((2S)-1-(N-(metoxi- —carbonil)-O-metil-L-treonil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)-1 H- : benzimidazol|-2-i1)-1-pirrolidinilcarbonil)propil)carbamato (9,3 mg) como sóli- do branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,22 min; Calc. para [M+H]" CasHsa NgO; 844,39. Encontrado m/z 845,25 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de - eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, : um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eumtempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,10 - 8,21 (m, 2H), 7,99 - 8,08 (m, 2H), 7,83 - 7,96 (m, 4H), 7,58 - 7,77 (m, 4H), 5,70 - 5,75 (m, 0,4H), 5,35 (dd, J=7,9, 4,9 Hz, 1,6H), 4,58 - 4,61 (m, 0,2H), 4,51 (d, J=4,9 Hz, 1,5H), 4,37 - 443(m, 0,3H),3,89-4,08 (m, 3H), 3,61 - 3,78 (m, 7H), 3,38 - 3,45 (m, 2H), 3,23 - 3,31 (m, 5H), 1,93 - 2,57 (m, 9H), 1,10 - 1,28 (m, 6H).
A N e, CID) NOR CO ' A A, O Hs O, dn Tr N Exemplo 10
Metil ((18)-3-metóxi-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((2S)-1-(N- (metoxicarbonil)-O-metil-L-homoseril)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol-5-11)-2- naftil)-1H-benzimidazot-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)propil)carbamato HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1 H-benzold] imi- dazol-6-ilnaftaleno (40 mg), ácido (S)-4-metóxi-2-(metoxicarbonilamino) bu- tancico (37,4 mg, 0,186 mmol) e DIEA (0,114 mL, 0,653 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 9 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purifi- cada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) para ' dar um sal de TFA de metil ((18)-3-metóxi-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-(N- . (metoxicarboni!)-O-metil-L-homoseril)-2-pirrolídinil)-1H-benzimidazo|-5-i1)-2- naftil)-1 H-benzimidazol-2-i)-1-pirrolidinil)carbonil)propil)carbamato (28,6 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,18 min; Calc. para [M+H]" CasHsoNsOsg 844,39. Encontrado m/z 845,22 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado - com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era acetoníitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Soivente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,23-8,30 (m, 2H), 8,09 -8,18 (m, 4H), 8,00 - 8,09 (m, 2H), 7,84 - 7,97 (m, 4H), 5,84 -5,90 (m, 0,2H), 5,44 (dd, J=8,2, 4,9 Hz, 1,8H), 4,65 (dd, J=9,2, 4,0 Hz, 1,8H), 4,38 - 4,45 (m, 0,2H), 3,91 - 4,11 (m, 4H), 3,66 - 3,78 (m, 6H), 3,39 - 3,55 (m, 4H), 3,27 - 3,38 (m, 7H), 2,59 - 2,75 (m, 2H), 2,25 - 2,40 (m, 5H), 2,16 (dddd, J=14,3, 7,0, 6,8, 4,3 Hz, 2H), 1,74 - 1,93 (m, 2H).
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O Exemplo 11 Dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-dil(28)-2,1- pirrolidinodiil((1S)-1-ciclopropil-2-0x0-2, 1-etanediil)))biscarbamato ' HATU (74,5 mg, 0,196 mmol) foi adicionado a uma solução em agitação de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1 H-benzo[d] imi- ' 5 dazol6ilmaftaleno (40 mg, 0,065 mmol), ácido (S)-2-ciclopropil-2-(metoxi- carbonilamino)acético (33,9 mg, 0,196 mmol) e DIEA (0,114 mL, 0,653 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 9 horas em temperatura ambi- ente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remover os voláteis e purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (18,1'S)-2,2'-((28,2'8)-2,2"- - (5,5"-(naftaleno-2,6-diil)bis(1H-benzo[d]imidazo|-5,2-diil))bis(pirrolidino-2,1- ditD))bis(1-ciclopropil-2-0xo0etano-2, 1-diil)dicarbamato (34,9 mg, 0,038 mmol, 58% de rendimento) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,23 min; Calc. para CasHagN3Os 808,37. Encontrado m/z 809,22 [M+H]”. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,20 - 8,29 (m, 2H), 8,07 - 8,16 (m, 4H), 7,98 - 8,07 (m, 2H),
7,84 - 7,95 (m, 4H), 5,37 - 5,48 (m, 2H), 4,03 - 4,13 (m, 2H), 3,87 - 4,03 (m, 4H), 3,64 - 3,74 (m, 6H), 2,65 - 2,74 (m, 2H), 2,20 - 2,40 (m, 6H), 1,09 - 1,22 (m, 2H), 0,47 - 0,67 (m, 6H), 0,30 - 0,46 (m, 2H).
O Som SI NU)
SE IELO 4 AROS o CA HNSO,
O Exemplo 12 - Dimetil (2,7-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-dil(28)-2,1- pirrolidinodiil((1R)-2-0x0-1-fenil-2,1-etanodiil)))biscarbamato ' HATU (56,2 mg, 0,148 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-(2-((S)-pirrolidin-2-1)-1H-benzo[d]imidazo!-5-i1)- 7-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-benzo[d]imidazo|-6-i)naftaleno (47 mg), ácido (R)- 2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (30,9 mg, 0,148 mmol) e DIEA (0,086 2 10 mL,049mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 4 horas em temperatu- ra ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para re- ' mover os voláteis e purificada através de HPLC preparativa (acetonitri- lafágua com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (1R,1'R)-2,2"- ((28,2'8)-2,2'-(5,5'-(naftaleno-2,7-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol-5,2- diil)bis(pirrolidino-2,1-diil))bis(2-0x0-1-feniletano-2, 1-diil)dicarbamato (38 mg) como sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 1,45 min; Calc. para Cs2aHaeNgOç 880,37. Encontrado m/z 881,26 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente À era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila
90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 - 8,39 (m, 2H), 8,03 - 8,17 (m, 6H), 7,84 - 8,00 (m, 4H), 7,33 - 7,53 (m, 10H), 5,55 - 5,63 (m, 2H), 5,40 - 5,54 (m, 2H), 4,01 - 4,17 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 3,27 - 4,41 (m, 2H), 2,44 - 2,75 (m, 2H), 2,01 - 2,33 (m, 6H). a N SOU SA? CS o Có Pr Oo Exemplo 13 Metil ((18)-2-((28)-25-(7-(2-((28S)-1-(N-(metoxicarbonil)-L- . alani!)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol-5-11)-2-naftil)-1 H-benzimidazo|-2-11)-1- pirrolidinil)-1-metil-2-oxoetil)carbamato HATU (56,2 mg, 0,148 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)- 1 H-benzo[d]imidazo]-5-i1)- 7-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1H-benzo[d]imidazo|-6-iNnaftaleno (47 mg), ácido (S)- " 2-(metoxicarbonilamino)propanoico (21,7mg, 0,148 mmol) e DIEA (0,086 mL, BR 0,49 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL.) e água (2 mL), concentrada para remo- ver os voláteis e purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água comTFA 0,1%) e então através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar ((18)-2-((28)-2-(5-(7-(2-((2S8)-1N- (metoxicarbonil)-L-alanil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazo1!-5-11)-2-naftil)-1 H- benzimidazol|-2-il)-1-pirrolidinil)-1-metil-2-oxoetil)carbamato (20,9 mg) como sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS 1,16 min; Calc. para CrooHUuNgOs 756,34. Encontrado m/z 757,27 [M+H]". Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nNM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- entede Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de
1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetoni- trila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,16 - 8,24 (m, 2H), 7,87 - 8,02 (m, 4H), 7,80 - 7,87 (m, 2H), 7,60 - 7,75 (m, 4H), 5,42 - 5,46 (m, 0,3H), 5,34 (dd, J=7,9, 4,0 Hz, 1,7H), 4,55 (q, J=7,0 Hz, 1,7H), 4,31 - 4,37 (m, 0,3H), 3,80 - 3,98 (m, 4H), 3,67 (s, 5H), 3,47 (s, 1H), 2,39 - 2,55 (m, 2H), 2,04 - 2,36 (m, 4H), 1,92 - 2,01 (m, 2H), 1,31 - 1,42 (m, 6H).
O N A “Te O “AO. Cro de CM o ' Exemplo 14 Metil — ((1R)-1-(((28)-2-(5-(7-(2-((2S8)-1-((2R)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazol|-5-i1)-2-naftil)- 1H- benzimidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato ' HATU (56,2 mg, 0,148 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1 H-benzofd]imidazol|-S-il)- Ú 7-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-benzo[d]imidazol|-6-il)naftaleno (47 mg), ácido (R)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (25,9 mg, 0,148 mmol) e DIEA (0,086 mL, 0,498 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentra- da para remover os voláteis e purificada através de HPLC preparativa (ace- tonitrila/água com TFA 0,1%) e então através de HPLC preparativa (acetoni- trila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar um sal de TFA de metil ((1R)-1-((28)-2-(5-(7-(2-((28)-1-((2R)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3- metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- lH-benzimidazo|-2- iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metiipropil)carbamato (25 mg) como sólido bege. Tempo de retenção de LC-MS 1,36 min; Calc. para CasHs2aNgOs 812,40. En- contrado m/z 813,36 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um croma- tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfi- re Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análisede4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,33 (s, 2H), 8,07 - 8,13 (m, 4H), 8,05 (dd, J=8,5, 1,2 Hz, 2H), 7,84 - 7,96 (m, 4H), 5,49 (dd, J=8,6, 3,7 Hz, 2H), 4,36 (d, J=7,3 Hz, 2H), 4,15 - 4,23 (m, 2H), 3,83 - 3,97 (m, 2H), 3,72 (s, 6H) 2,58-2,71 (m, 2H), 2,21 - 2,38 (m, 6H), 2,05 - 2,18 (m, 2H), 1,07 (d, : Jd=6,7 Hz, 6H), 1,04 (d, J=6,7 Hz, 6H).
SS ELO à Hg CS o Exemplo 15 | 5,5'-(2,7-Naftalenodiil)bis(2-((28)-1-((2R)-2-fenil-2-(1-piperidinil) acetil)-2-pirrolidinil)- 1H-benzimidazo!) HATU (56,2 mg, 0,148 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-(2-((S)-pirrotidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazo|-5-il)- 7-(2-((S)-pirrolidin-2-i1)- 1H-benzo[d]imidazo|-S-il)naftaleno (47 mg), ácido (R)- 2-fenil-2-(piperidin-1-il)acético (32,4 mg, 0,148 mmol) e DIEA (0,086 mL, 0,49 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente, diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL), concentrada para remo- veros voláteis e purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) e então através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para dar 5,5-(2,7-naftalenodiil)bis(2-((28)-1- ((2R)-2-fenil-2-(1-piperidinil)acetil)-2-pirrolidinil)- H-benzimidazol) (16,4 mo) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,21 min; Calc. para [M+H]" CsgHooNgOs 900,48 Encontrado m/z 451,43 1/2[M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradientede Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,18 - 8,28 (m, 2H), 7,968-8,05 (m, 2,2H), 7,92 (d, J=1,0 Hz, 1,5H), 7,80 - 7,90 (m, 2,2H), : 7,65 - 7,76 (m, 3,8H), 7,55 - 7,64 (m, 3,2H), 7,46 - 7,55 (m, 4,5H), 6,85 - 6,97 (m, 1,8H), 6,76-8,83 (m, 1H), 5,85 - 5,70 (m, 0,5H), 5,28 (dd, J=7,5, 3,3 Hz, 1,5H), 4,48 (s amplo, 0,5H), 4,02 - 4,12 (m, 1,5H), 3,90 - 3,98 (m, 0,5H), 3,74 - 3,84 (m, 0,5H), 3,25 - 3,40 (m, 3H), 2,51 - 2,93 (m, 8H), 1,89 - 2,33 (m, 8H), 1,62-1,75(m, 8H), 1,47 - 1,59 (mM 4H). x fo) | o, Ss CAIO vã Vas
O Exemplo 16 Metil — ((18)-1-(((28)-2-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinit)-1 H-benzimidazo|-5-i1)-2-naftil)- 1 H- imidazol-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (40 mg, 0,11 mmol) foi adicionado a uma mistura de um salde TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-11)-6-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-11)-1H-benzo[d]limidazol (32 mg), di-isopropiletilamina (62 uL, 0,35 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (19 mg, 0,106 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 9 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi puri- ficado através de HPLC de fase reversa (uma vez com água/acetonitrila ace- tato de amônio 10 mM e duas vezes com água/acetonitrila TFA 0,1%) para prover um sal de TFA de ((18)-1-(((28)-2-(4-(6-(2-((28)-1(28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazo|-5-il)- 2-naftil)-1H-imidazol-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)lcarbamato — (21 mg) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,17 min; Calc. para Ca2HsoNgOs 762,39. Encontrado m/z 763,34 [M+H]". Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de - UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ] ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era ace- tonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / . água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,10 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,94 - , 8,01 (m, 3H), 7,82 - 7,89 (m, 2H), 5,38 (t, J=7,2 Hz, 1H), 5,31 (t, J=7,6 Hz, 1H),4,28 (dd, J=14,5,7,2 Hz, 2H), 4,15 (s amplo, 2H), 3,86 - 4,01 (m, 2H), 3,69 (s, 8H), 2,55 - 2,69 (m, 2H), 2,19 - 2,39 (m, 6H), 2,04 - 2,15 (m, 2H), 0,86 - 1,05 (m, 12H). o So NH o SE
TEXSD CA mo Êo |! Exemplo 17 Metil — ((18)-1-(((28)-2-(4-(7-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol|-5-i1)-2-naftil)- 1H-imida- —zol-2-il)-i-pirrolidinilcarbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (20 mg, 0,053 mmol) foi adicionado a uma mistura de um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-6-(7-(2-((S)-pirrolidin-2-iI)-1 H-imidazol-4-i]) naftalen-2-i1)-1H-benzo[d]imidazol (16 mg), di-isopropiletilamina (31 ul, 0,18 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (9,3 mg, 0,053 mmol)em DMF (2 mL) ea mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 9 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi puri- ficado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%) para prover um sal de TFA de ((18)-1-(((28)-2-(4-(7-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- . 1H-imidazo|-2-11)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (7,9 mg) co- mo sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,20 min; Calc. para CaoHsoNgO;s 762,39. Encontrado m/z 763,35 [M+H]". Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6xX50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220NM. As . condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 ml/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Soivente , B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minutoeum tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetoni- trila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,35 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,09 (dd, J=8,4, 3,2 Hz, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,89 - 8,00 (m, 3H), 7,77 - 7,87 (m, 2H), 5,37 (t, J=7,0 Hz, 1H), 5,30 (t, Ja 7,3 Hz, 1H), 4,28 (dd, J=15,4, 7,2Hz, 2H), 4,08-4,20 (m, 2H), 3,86 - 4,01 (m, 2H), 3,69 (s, 6H), 2,56-2,68 (m, 3H), 2,39 - 2,02 (m, 7H), 0,87 - 1,04 (m, 12H). e ú Yão n DP TCA PO)
O Exemplo 18
Metil ((18)-1(((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S8,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H- benzimidazol|-5-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- i)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (218 mg, 0,574 mmol) foi adicionado a uma mistura de 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)- 1H-benzo[dlimidazo|-6- iDnaftaleno (100 mg), di-isopropiletilamina (334 ul., 1,91 mmol) e ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (101 mg, 0,574 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). Então, o ' componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de . HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%) para prover um sal de TFA de ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicar- bonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)- 1 H-benzimidazol|-5-
15. il-2-nafti)-1H-benzimidazo]-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (85 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de . LC-MS 1,33 min; Calc. para CasHs2aNgOs: 836,4 Encontrado m/z 837,32 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4/,6xX50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitritla 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização. '*H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,22 (s, 2H), 8,05 - 8,13 (m, 4H), 7,98 - 8,02 (m, 2H), 7,82 - 7,92 (m, 4H), 5,22 - 5,32 (m, 2H), 4,59 (d, J=6,4Hz 2H), 3,86 (t,J=6,0 Hz, 2H), 3,60 - 3,75 (m, 6H), 2,66 - 2,79 (m, 2H), 2,54 (m, 2H), 2,16 - 2,26 (m, 2H), 2,02 - 2,16 (m, 2H), 1,10 - 1,46 (m, 2H), 0,98 - 1,05 (m, 6H), 0,94 - 0,97 (m, 2H), 0,91 (d, J=6,7 Hz, 6H).
” COS D> o Nº à w N N Ff , Exemplo 19 (1R)-2((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((2R)-2-(Dietila-
mino)-2-fenilacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-benzimidazol-6-i1)-2-naftil)-
1H-benzimidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)-N N-dietil-2-0x0-1-fenileta-
: namina
HATU (108 mg, 0,287 mmol) foi adicionado a uma mistura de
1 2,6-bis(2((1R,38,5R)-2-azabicíclo[3,1,0]hexan-3-1)-1H-benzofd]imidazo|-6- iDnaftaleno (50 mg), di-isopropiletilamina (0,167 mL, 0,957 mmol) e ácido (R)-2-(dietilamino)-2-fenilacético, HCI (70,0 mg, 0,287 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 5 horas.
À mistura de reação foi diluída com metano! (2 mL) e água (2 mL). Então, o componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de - HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%) então através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila acetato de amônio 10 mM) e finalmente através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%) para prover um sal de TFA de (1R)-2-((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2(2R)-2- (dietilamino)-2-fenilaceti!)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-benzimidazo|-6-i1)-2-
naftil)-1H-benzimidazol|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)-N, N-dietil-2-0x0-1-
feniletanamina (25,2 mg) como pó branco.
Tempo de retenção de LC-MS 1,15 min; Calc. para [M+H]* CsgHgoNgO>2: 900,48. Encontrado m/z 451,46 [1/2 M+HJY”. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para —Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos,
um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de eletropulveriza- ção 'HRMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (s, 2H), 8,08 - 8,17 (m, 4H), 7,96 (td, J=8,7, 1,5 Hz, 4H), 7,87 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,68 - 7,72 (m, 4H), 7,57 - 7,68 (m, 6H), 5,79 (s, 2H), 5,23 (dd, J=9,0, 6,3 Hz, 2H), 3,95 - 4,05 (m, 2H), 3,25 - 3,48 (m, 4H), 3,06 (s amplo, 4H), 2,43 - 2,61 (m, 4H), 2,01 - 2,11 (m, 2H), 1,31 (t, J=6,9 Hz, 12H), 0,62 (dda, J=8,7, 6,0, 5,8 Hz, 2H),-0,21 (td, J=5,7,2,4 Hz, 2H). - x " o N So, ooo, < ÃO 2 N º Exemplo 20 Ô Á, - - 9 NH N GATO e. ' Exemplo 21 x * Exemplo 20 Metil ((1R)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((me- toxicarbonil)amino)-2-fenilacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)- 1H-benzimida- zol-5-i1)-2-naftil)- 1H-benzimidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-11)-2-0x0-1- fenitetil)carbamato e Exemplo 21 Dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1 H-benzimidazol-5,2-diil[(1R,3S,5R)- 2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil((1R)-2-0x0-1-fenil-2, 1-etanodiil))) biscarba- mato HATU (109 mg, 0,287 mmol) foi adicionado a uma mistura de 2,6-bis(2-((1R,3S8,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazo|-6-
i)naftaleno (50 mg), di-isopropiletilamina (0,167 mL, 0,957 mmol) e ácido (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacético (680,0 mg, 0,287 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 5 ho- ras.
A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). En- tão, o componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado a- través de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%), então através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila acetato de amônio 10 mM) e fi- nalmente através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila TFA 0,1%) pa- ra prover um sal de TFA de metil ((1R)-2-((1R,38S,5R)-3-(5-(6-(21(1R,3S,5R)- 24(28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-fenilacetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)- ' 1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)-1H-benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- : 11)-2-0x0-1-feniletil)carbamato (6,9 mg) como sólido branco e um sal de TFA de dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazo!-5,2-diil(1R,3S,5R)-2-azabi- ciclo(3,1,0]hexano-3,2-diil((1R)-2-0x0-1-fenil-2,1-etanediil)))biscarbamato (12,5Mmg)como sólido branco.
Dados analíticos para o Exemplo 20: Tempo de retenção de LC- - MS 1,46 min; Calc. para CsaHagNgOs: 904,37. Encontrado m/z 453,35 [1/2 M+HT*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos ondeo Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulveriza- ção. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (d, J=4,6 Hz, 2H), 8,15 (d, J=8,6 Hz, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,03 (t, J=8,9 Hz, 2H), 7,92 -7,98(m, 2H),7,90 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,85 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,48 - 7,54 (m, 2H), 7,37 - 7,48 (m, 8H), 5,85 (s, 1H), 5,78 (s, 1H), 5,39 (dd, J=9,0, 6,3 Hz, 1H), 5,29 (dd, J=9,2, 5,8 Hz, 1H), 3,91 - 3,97 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,66 (s,
3H), 3,52 - 3,61 (m, 1H), 2,73 (dd, J=13,7, 9,2 Hz, 1H), 2,46 - 2,65 (m, 3H), 2,06 - 2,14 (m, 1H), 1,98 - 2,06 (m, 1H), 1,23 - 1,380 (m, 1H), 1,10 (s amplo,
1H), 0,66 - 0,72 (m, 1H), 0,01 - 0,10 (m, 1H). Dados analíticos para o Exemplo 21: Tempo de retenção de LC- MS148min; Calc. para [M+H]" Cs Ha8NgOs: 904,37. Encontrado m/z 453,35 [1/2 M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 . minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropul- verização. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,28 (s, 2H), 8,16 . (d, J=8,6 Hz, 2H), 8,11 (s, 2H), 8,01 - 8,06 (m, 2H), 7,95 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,90 (m, J=8,6 Hz, 2H), 7,48 - 7,55 (m, 4H), 7,36 - 7,48 (m, 6H), 5,85 (s, 2H), Ú 5,29 (dd, J=9,2, 5,8 Hz, 2H), 3,92 - 3,97 (m, 2H), 3,66 (s, 6H), 2,55 - 2,66 (m, 2H), 2,51 (ddd, J=13,3, 6,6, 6,4 Hz, 2H), 1,97 - 2,07 (m, 2H), 0,63 - 0,74 (m,
2H), -0,02 - 0,10 (m, 2H). o A No N LAO Pk A Se Exemplo 22 "ho, vt i *. DX) VA e Exemplo 23 “PA Exemplo 22
Metil — ((18)-1-(((28)-2-(6-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinit)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-6-i1)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato e Exemplo 23 Metil — ((18)-1-(((2R)-2-(6-(6-(2-((28)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazo[4, 5-b]piridin-6-il)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (63,5 mg, 0,167 mmol) foi adicionado a uma pasta fluida de um sal de cloridrato de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b] piri- din6iilnaftaleno (45 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- ' noico (29,3 mg, 0,167 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,122 mL, 0,696 : mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 ho- ras, diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com acetato de amônio 10 mM) para prover ((18)-1-(((2S)- 2-(6-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirroli- dinil)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)-2-naftil)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-1/)-1- . pirrolidini)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (19,2 mg) como sólido branco e metil ((18)-1-(((2R)-2-(6-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonilamino)-3- | metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazo[4,5-b]piridin-6-11)-2-naftil)- 1H- imidazo([4,5-b]piridin-2-iI)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (16,5 mg) como sólido branco (sem certeza se o estereocentro de pirrolidina ra- cemizou durante esta etapa ou em uma etapa anterior). Separação de 2,6- bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-i)naftaleno — através — de HPLC quiral mostrou um pico amplo, mas diastereômeros individuais não puderam ser separados sob as condições tentadas.
Dados analíticos para o Exemplo 22: Tempo de retenção de LC- MS 1,407 min; m/z 815,60 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis —SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mlL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,82 - 8,71 (m, 2H), 8,32 - 8,18 (m, 4H), 8,14 - 8,07 (m, 2H), 7,92 - 7,84 (m, 2H), 5,37 - 5,28 (m, 2H), 4,30 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 4,13 - 4,04 (m, 2H), 4,02 - 3,92 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 2,54 - 1,98 (m, 10H), 1,03 - 0,89 (m, 12H).
Dados analíticos para o Exemplo 23: Tempo de retenção de LC- - MS 1,442 min; m/z 815,59 (MH+). Dados de LC foram registrados em um . cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo - de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% / água Ú 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95%/ acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,89 - 8,66 (m, 2H), 8,36 - 8,20 (m, 4H), 8,15 - 8,10 (m, 2H), 7,94 - 7,86 (m, 2H), 5,44 - 5,29 (m, 2H), 4,34 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,21 - 3,80 (m, 4H), 3,74 (s, 3H), 3,68 (s, 3H), 2,69 - 1,95(m,10H),1,09-0,41 (m, 12H).
À, ON No 2 N RA DAS "PA, AS, RL, ) Exemplo 24 no O x X
à O NH "SA
E VA NoONQN Ad CL) e Exemplo 254 É NX Á, ; “E 7 a oo Ho Ad A, x, ! no o Exemplo 25B & > . Exemplo 24 Metil — ((18)-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazo[4,5-b]pirazin-S-il)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-h1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato e Exemplo 25A Metil — ((18)-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) - amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazo[4,5-b]pirazin-S-il)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-11)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato e Exemplo 25B Metil — ((18)-1-(((2R)-2-(5-(6-(2(2R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazo(4,5-b]pirazin-S5-i1)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-11)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (63 mg, 0,17 mmol) foi adicionado a uma pasta fluida agi- tada de um sal de HCI de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)- H-imidazo[4,5-b] pira- zin-S-ilnaftaleno (45 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonitamino)-3-metilbuta- —noico(29mg,0,17 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,12 mL, 0,688 mmol). À mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas, diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (acetonitri- la/água com acetato de amônio 10 mM) para dar metil ((18)-1-(((28)-2-(5-(6- (2-((28S)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-
imidazo[4,5-b]pirazin-S-i1)-2-naftil)- 1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-11)-1-pirrolidinil) carbonil)-2-metilpropil)carbamato (11,2 mg) como sólido amarelo, metil ((18)- 1-(((28)-2-(5-(6-(2-((2R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2- pirrolidinil)-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-5-i1)-2-naftil)- 1 H-imidazo[4,5-b]jpirazin-2- il-1-pirrolidinilicarbonil)-2-metilpropil)carbamato (17,3 mg) como sólido ama- relo e metil ((18)-1-(((2R)-2-(5-(6-(2(2R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)- 3-metilbutanoil)-2-pirrolidinit)-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-S-i1)-2-naftil)- 1 H- imidazo(4,5-b]lpirazin-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (8,7 mg) como sólido amarelo (sem certeza se o estereocentro de pirrolidina ra- cemizou durante esta etapa ou em uma etapa anterior). Separação de 2,6- ] bis(2-((S)-pirrolidin-2-i1)-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-S-il)naftaleno — através — de , HPLC quiral mostrou um pico amplo, mas diastereômeros individuais não puderam ser separados sob as condições tentadas. Dados analíticos para o Exemplo 24: Tempo de retenção de LC- MS1,420 min; m/z 817,59 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHE- - NOMENEX* Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição i empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 9,14 - 9,06 (m, 2H), 8,71 - 8,64 (m, 2H), 8,37 - 8,29 (m, 2H), 8,18 - 8,11 (m, 2H), 5,59 - 5,30 (m, 2H), 4,30 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 4,13 - 3,98 (m, 4H), 3,78 - 3,64 (m, 6H), 2,57 - 2,01 (m, 10H), 1,07 - 0,92 (m, 12H).
Dados analíticos para o Exemplo 25A: Tempo de retenção de LC-MS 1,507 min; m/z 817,56 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHE-
NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo degradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD)õ ppm 9,14 -9,02 (m, 2H), 8,69 - 8,60 (m, 2H), 8,36 - 8,27 . (m, 2H), 8,15 - 8,08 (m, 2H), 5,41 - 5,36 (m, 1H), 5,34 - 5,29 (m, 1H), 4,35 (d, ' J=7,9 Hz, 1H), 4,381 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,24 - 3,81 (m, 4H), 3,78 (s, 3H), 3,68 (s, 3H), 2,62 - 1,97 (m, 10H), 1,09 - 0,46 (m, 12H).
Dados analíticos para o Exemplo 25B: Tempo de retenção de LC-MS 1,562 min; m/z 817,58 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHE- - NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100%/ Solvente B 0% para Soivente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos onde o Solvente À era acetonitrila 5% / água 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização.
nl o NH O N N o o Exemplo 26
Dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil(28)-2,1- pirrolidinodiil((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-11)-2,1-etanodiil)))biscarba- mato HATU (114 mg, 0,301 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-1)-1H-benzo[d]imidazo!-6-iNnaftaleno (50 mg), di-isopropiletilamina (175 ul, 1,0 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (85 mg, 0,30 mmol) em DMF (5 mL) e a mistura de reação foi agitada em condições ambientes por 2 horas.
À mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). Então, o componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de - HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de . dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol|-5,2-diil(28)-2, 1-pirrotidinodiil ((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-1/)-2,1-etanodiil)))biscarbamato — (51,5 mg) como sólido amarelo pálido.
Tempo de retenção de LC-MS 1,117 min; mz897/,31(MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo |li- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 - de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- to de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma ' taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropul- —verização 'H RMN (sal de TFA 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (s amplo, 2H), 8,10 - 8,18 (m, 4H), 8,01 - 8,07 (m, 2H), 7,86 - 7,96 (m, 4H), 5,88 - 5,93 (m, 0,2H), 5,39 (t, J=7,0 Hz, 1,8H), 4,33 - 4,38 (m, 2H), 4,12 - 4,22 (m, 2H), 3,89 - 4,05 (m, 7H), 3,70 (s, 6H), 3,35 - 3,45 (m, 2H), 2,60 - 2,75 (m, 2H), 2,14 - 2,47 (m, 6,5H), 1,94 - 2,12 (m, 2,5H), 1,32 - 1,69 (m, 8H).
nl Oy N Yo Te nº O CO * A [>
A AS o Exemplo 27 Metil — ((18)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((28S)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazo!-5-i1)-2-naftil)- 1H- benzimidazo|-2-i!)-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil) carba- - mato HATU (87 mg, 0,23 mmol) foi adicionado a uma solução agitada i de metil ((18S)-2-metil-1-(((28)-2-(5-(6-(2-((28S)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazo]l- S-iN)-2-naftil)- 1 H-benzimidazol|-2-it)-1-pirrolidini)carboniDpropil)carbamato (50 mg), di-isopropiletilamina (133 ul, 0,76 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran4-il)acético (50 mg, 0,23 mmol) em DMF (3 -— 10 mL)eamistura resultante foi agitada em condições ambientes por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL). Então o , componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(5-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metil- butanoil-2-pirrolidinil))-1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-11)-1- pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (36 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,177 min; m/z 855,30 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm u- sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos on- deo Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (sa! de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,22 - 8,30 (m, 1,8H), 8,20 (s amplo, 0,2H), 8,07 - 8,17 (m, 4H), 8,00 - 8,06 (m, 1,8H), 7,98 (s amplo, 0,2H) 7,85-7,95(m, 4H), 5,86 (m, 0,1H), 5,35 - 5,44 (m, 1,8H), 5,25 - 5,31 (m, 0,1H), 4,36 (d, J=7,6 Hz, 0,5H), 4,31 (d, J=6,7 Hz, 1H), 4,15 (s amplo, 1,5H), 3,87 - 4,05 (m, 4H), 3,69 (s amplo, 6H), 3,34 - 3,47 (m, 1H), 2,96 - 3,23 (m, 2H), 2,61 - 2,77 (m, 2,5H), 2,21 - 2,47 (m, 6H), 1,95 - 2,16 (m, 2H), 1,33 - 1,69 (m, 3,5H), 1,00 - 1,05 (m, 0,3H), 0,94 - 0,99 (m, 3H), 0,91 (d, J=6,7H2,2,7H). vÊ y
NH LI o H CO Ho dE Exemplo 28 Metil — ((18)-2-((28)-2-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) ' amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i) acetil)-2-pirrolidinil)- 1 H-benzimidazo]|-5-il)- 2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil) carbamato HATU (36,6 mg, 0,096 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-6-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i)-1H- imidazol-5-iDnaftalen-2-11)-1H-benzo[d]imidazol (29 mg), di-isopropiletilamina (56 ul, 0,32 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)acético (21 mg, 0,10 mmol) em DMF (2 mL) e a mistura resultante foiagitada em condições ambientes por 2 horas. A mistura de reação foi di- luída com metanol (2 mL) e água (2 mL). Então o componente volátil foi re- movido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/TFA) para prover um sal de TFA de metil ((18)-2((2S8)-2- (4-(8-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacetil)-2-pirrolidinil)-1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-i1)-1-
pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (16,3 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,023 min; m/z 847,31 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,8x50 mm u-
sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Soivente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos on-
deo Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B . era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. | 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (d, J=12,5 Hz, 2H), 8,15 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,10 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,92 - 8,01 (m, 3H), 7,81-7,90 (m, 2H), 5,37 (dd, J=7,9, 6,1 Hz, 1H), 5,30 (t, J=7,5 Hz, 1H), 4,28 - 4,39 (m, 2H), 4,12 - 4,22 (m, 2H), 3,88 - 4,04 (m, 7H), 3,65 - 3,77 (m, 6H), . 3,38 - 3,45 (m, 1H), 2,56 - 2,69 (m, 2H), 2,20 - 2,40 (m, 6,5H), 2,01 (s amplo, 2,5H), 1,57 - 1,69 (m, 2,5H), 1,35 - 1,53 (m, 6,5H). - vo N e CO ! 4 To A, Cn ; O "“ N do Exemplo 29 Metil ((1S)-1-(((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)- 1H- imidazol|-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (57,6 mg, 9,152 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2-((S)-pirrolidin-2-i1)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-S-il)naftalen-2-i)fenil)-1H-imidazol (47 mg), di-isopropiletilamina (88 ul, 0,51 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (26,5 mg, 0,152 mmol) em DMF (4 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 2 horas.
A mistura de reação foi diluída com meta- nol (2 mL) e água (2 mL). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi purificado através de HPLC de fase reversa (água/metanoi/TFA), repurificado através de uma HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/acetato de amônio) e finalmente repurificado através de HPLC de fase reversa (á- gua/metanol/HPLC) para prover um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4- (4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2- pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4-il)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-1/)-1- pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (33,3 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,237 min; m/z 789,29 (MH+). Dados de LC - foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado . com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/imin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Sol- vente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manuten- . ção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era acetonitrila ' 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (d, J=8,9 Hz, 2H), 8,15 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,10 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,95 - 8,03 (m, 4H), 7,93 (s, 1H), 7,84 - 7,91 (m, 3H), 5,69 - 5,72 (m, 0,2H), 5,24 - 5,35 (m, 1,8H), 4,27 (dd, J=7,2, 2,6 Hz, 2H), 4,09 - 4,19 (m, 2H), 3,85 - 3,97 (m, 2H), 3,67 - 3,76 (m, 6H), 2,55 - 2,68 (m, 2H), 2,27 -2,38(m,2H),2,14-2,27 (m, 4H), 2,02 - 2,14 (m, 2H), 0,86 - 1,06 (m, 12H). o Dow O N / Tra OO VS <A O ns N ss Exemplo 30 Dimetil (2,6-naftalenodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil(1R,3S8,5R)-
2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-11)-2,1- etanodiil)))biscarbamato
HATU (54,6 mg, 0,144 mmol) foi adicionado a uma solução agi-
tada de 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-benzo[d] imi-
dazol-6ilmaftaleno (25 mg), di-isopropiletilamina (84 ul, 0,48 mmol) e ácido
(S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)acético (31,2 mo,
0,144 mmol) em DMF (5 mL) e a mistura resultante foi agitada em condições ambientes por 4 horas.
A mistura de reação foi diluída com metano! (2 mL) e água (2 mL). O componente volátil foi removido in vacuo e o resíduo foi puri-
ficado através de HPLC de fase reversa (água/metanol/TFA), repurificado
' através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila/acetato de amônio) e
. finalmente repurificado através de uma HPLC de fase reversa (á-
gua/metanol/TFA) para prover um sal de TFA de dimetil (2,6-naftalenodiilbis (1H-benzimidazol|-5,2-diil(1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil((1S)-
2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i1)-2,1-etanodiil)))biscarbamato (8,2 mg) co-
mo sólido esbranquiçado.
Tempo de retenção de LC-MS 1,220 min; m/z
. 461,3 [1/2 M+H*]. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líqui-
do Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de i 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B
0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 10% / água 90% / TFA 0,1% eo
SolventeB era acetonitrila 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul-
verização. 'H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (s amplo, 2H),
8,07 - 8,18 (m, 4H), 8,00 - 8,07 (m, 2H), 7,84 - 7,96 (m, 4H), 5,23 - 5,31 (m,
2H), 4,59 - 4,67 (m, 2H), 3,85 - 4,01 (m, 6H), 3,70 (s, 6H), 3,28 - 3,44 (m,
4H) 2,71-2,80 (m, 2H), 2,58 (ddd, J=13,2, 6,5, 6,3 Hz, 2H), 2,03 - 2,20 (m,
4H), 1,41 - 1,65 (m, 8H), 1,13 (s amplo, 2H), 0,97 (s amplo, 2H).
NA 1 SA) e.” FAN X o xo, AI MA CA 7X N o Exemplo 31 Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-((6-((2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-iI)etinil)-2-nafti)etinil)- 1H- imidazol-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato : HATU (47,6 mg, 0,125 mmol) foi adicionado a um sal de TFA de 2,6-bis((2((S)-pirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-S-il)etinil)naftaleno (38 mg) e ácido ' (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (22 mg, 0,13 mmol) em DMF (0,7 mL) e TEA (0,047 mL, 0,33 mmol) e a solução amarela transparente estava em temperatura ambiente ON.
A reação foi diluída com MeOH (1 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa tampão de MeOH 15- 100%/água/FFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4-((6-((2-
' ((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-
- imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)etinil)- 1 H-imidazol-2-iI)-1-pirrotidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (37,1 mg) como sólido amarelo-claro.
Tempo de re- tenção de LC-MS 2,530 min; m/z 759,61 (MH-). Dados de LC foram registra-
dosem um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Co- luna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%,
umtempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5%/ H2zO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
4 CX x o NH () "AL
E A
N Exemplo 32 Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-((6-((2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazo]l-4-il)etinil)-2-naftil)etinil)-1H- imidazol-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato . Um sal de TFA de 4,4'-(2 6-naftalenodiil)bis(2-((2S)-2-pirrolidinil)- 1Himidazoi) (21 mg, 0,025 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- : metilbutanoico (12,9 mg) foram dissolvidos em DMF (3 mL) e DIEA (0,043 mL, 0,246 mmol). Então HATU (28,0 mg, 0,074 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. Os volá- teis foram removidos sob vácuo e o produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire 5su C18 de 30 X 100 mm eluída com um gradiente de MeOH O a 90%-Água + TFA 0,1%) - para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4-((6-((2-((28)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazo]-4-i)etinil)- 2-naftil)jetinil)-1H-imidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (104 mg) como sólido esbranquiçado. Tempo de retenção de LC-MS 1,158 min; m/z 713,60 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropul- verização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 2H), 8,11
(d, J=8,6 Hz, 2H), 7,94 - 8,03 (m, 2H), 7,84 - 7,94 (m, 2H), 5,29 (t, Js7,3 Hz, 2H), 4,26 (d, J=7,02 Hz, 2H), 4,14 (t, J=10,2 Hz, 2H), 3,85 - 3,96 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 2,53 - 2,67 (m, 2H), 2,31 (d, J=10,4 Hz, 2H), 2,16 - 2,28 (m, 4H), 2,03 - 2,15 (m, 2H), 0,88 - 1,08 (m, 12H).
NV N a CO We Io ÁL >» * Fº BR Exemplo 33 . 5 Metil ((18)-2-((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2- naftilYfenil)-1H-imidazol-2-il)-1-pirrolidinit)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNeti)carbamato HATU (120 mg, 0,316 mmol) foi adicionado a uma solução agi- - 10 tadadeum;saldeTFA de 2(2S)-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((2S)-2-pirrolidinil)- 1IH-imidazo|-4-11)-2-naftil)Yfeni!)- 1H-imidazol (50 mg) e ácido (S)-2-(metoxicar- Ú bonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)>acético (68,7 ma, 0,316 mmol) em DMF (5 mL) e DIEA (0,18 mL, 1,1 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 x 100 mm eluída com um gradiente de MeOH 10 a 90 %-Água + TFA 0,1%) e então repurificado através de HPLC preparativa (coluna Wa- ters Sunfire Su C18 de 30 X 150 mm eluída com um gradiente de ACN %- Água+TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(4-(4-(6- (2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-iNacetil)- 2-pirrolidinil)-1H-imidazot-4-iI)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazo!-2-i1)-1-pirrolidinil)-2- ox0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4iDetil)carbamato (96 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,207 min; m/z 873,63 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 5 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- teB100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era Me- OH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD)õ ppm 38,29 (d, J=7,9 Hz, 2H), 8,14 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,06 - 8,11 (m, . 1H), 7,94 - 8,03 (m, 4H), 7,90 - 7,94 (m, 1H), 7,80 - 7,90 (m, 3H), 5,74 (s amplo, 0,2H), 5,23 - 5,385 (m, 1,8H), 4,32 (dd, J=8,1, 4,7 Hz, 2H), 4,16 (d, J=2,8 Hz, 2H), 3,94 (dd, J=9,5, 7,3 Hz, 6H), 3,69 (s, 6H), 3,31 - 3,48 (m, 4H), 2,55 - 2,68 (m, 2H), 2,16 - 2,35 (m, 6H), 1,92 - 2,40 (m, 2H), 1,63 (d, J=12,8 Hz,2H),1,34-1,54 (m, 6H).
A ES . o NH VD É ID -o CO Á LX N | 2 Exemplo 34 Metil — ((18)-24(1R,38,5R)-3-(4-(4-(8-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1 H-imidazo|-4-11)-2-nafti)Yfenil)-1 H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-iN)etil)carbamato HATU (57 mg, 0,150 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da de (1R,38,5R)-3(5-(4(6-(2((1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-imidazol-S-il)naftalen-2-iDfenil)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no (25 mg, 0,050 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro- 2H-piran-4-iacético (33 mg) em DMF (3 mL) e DIEA (0,078 mL, 0,50 mmol) eamistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi purificado através de HPLC prepa- rativa (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 X 100 mm Eluída com um gradiente de MeOH 10 a 100%-Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2((1R,3S8,5R)-3-(4-(4-(6-(2- ((1R,38,5R)-2((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilfenil)-1H- imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDetiicarbamato (27 mg) como um sólido amarelo pálido. Tempo de retenção detLC-MS 1,280 min; m/z 897,65 (MH+). Dados de LC foram registrados em ' um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- - ters Sunfire 5u C18 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 200nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%/Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo . de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeEOH 10% / H;O 90 %/TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. 17H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,28 - 8,32 (m, 2H), 8,14 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,07 - 8,11 (m, 1H), 7,95 - 8,02 (m, 4H), 7,84 - 7,93 (m, 4H), 5,12 - 5,23 (m, 2H), 4,62 (dd, J=7,6, 4,0 Hz, 2H), 3,92 - 4,00 (m, 4H), 3,83 - 3,89 (m, 2H), 3,72 - 3,78 (m, 2H), 3,70 (s, 68H), 3,35 - 3,46 (masca- rado com metanol, m, 4H), 2,68 - 2,77 (m, 2H), 2,47 - 2,57 (m, 2H), 2,00 - 2/15(m,4H),1,42-1,65 (m, 6H), 1,06 - 1,17 (m, 2H), 0,84 - 0,93 (m, 2H).
A DD “ OS Teo AL TO "“ N o Exemplo 35 Metit / ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-
((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-11)- 1H- imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0jhex-2- il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (57 mg, 0,150 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(6-(24(1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0)hexan-3-il)- 1H-imidazol-5-il)naftalen-2-il)feni!)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no (25 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanocico (26 mg, 0,15 mmol!) em DMF (3 mL) e DIEA (0,070 mL, 0,40 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A mistura de rea- ção foidiluíida com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removi- R dos sob vácuo.
O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire 5Su C18 de 30 X 100 mm eluída com um gradiente de MeOH i 10 a 100%-Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6- (24(1R,38,5R)-2(2S)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-
azabiciclo[3,1,0Jhex-3-il)-1H-imidazo]-4-11)-2-naftilfenil)- 1 H-imidazol-2-11)-2- ' azabiciclo[3,1,0J)hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (34,8 mg) como um sólido amarelo pálido.
Tempo de retenção de LC-MS 1,402 min; m/z 7 813,69 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram deter- minados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulveri- zação. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (d, J=7,9 Hz, 2H), 8,14 (d,J=8,9Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,95 - 8,01 (m, 4H), 7,92 (s, 1H), 7,84 - 7,920 (m, 3H), 5,16 (ddd, J=11,6, 9,2, 7,0 Hz, 2H), 4,58 (dd, J=6,4, 2,1 Hz, 2H), 3,81 - 3,88 (m, 2H), 3,66 - 3,75 (m, 6H), 2,67 - 2,77 (m, 2H),
2,46 - 2,57 (m, 2H), 2,21 (da, J=12,9, 6,5 Hz, 2H), 2,06 - 2,14 (m, 2H), 1,08 - 1,18 (m, 2H), 1,04 (d, J=6,7 Hz, 6H), 0,95 (d, J=6,7 Hz, 6H), 0,91 (s amplo, 2H). nl
NT N VE COARI, CARAI PAL, TAL | N Sra
O Exemplo 36 Metil ((1S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- i 5 ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H- benzimidazo!-5-i1)-2-quinolinil)-1H-benzimidazo!-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex- 2-ibcarbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (32,7 mg, 0,086 mmol) foi adicionado a uma solução de sai de cloridrato de 2,6-bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H- i 10 benzo[dlimidazol-6-il)quinolina (25 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoico (15 mg, 0,086 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (9,059 mL, 0,34 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. À reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H20-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (28,2'S)-1,1((1R,1'R38,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,8"-(quinolino-2,6-diil)bis(1H- benzo[d]imidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil))bis(3-metil-1- oxobutano-2,1-diil)dicarbamato (8,3 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,88 min; m/z 838 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Lu- na 3,0 x 50Omm S10, Solvente À = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Sol- venteB=água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Com- primento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,64 - 8,80 (1H, m), 8,49 - 8,62 (1H, m), 7,45 - 8,48 (9H, m), 5,21 - 5,52 (2H, m), 4,50 - 4,68 (2H, m), 3,82 - 4,13 (2H, m), 3,70 - 3,79 (2H, m), 3,68, 3,66 (6H, s, s), 248 - 2,83(3H,m),2,02-2,28(3H,m), 1,09 - 1,30 (2H, m), 0,83 - 1,08 (14H, m).
à Oo NH N
N AE o Exemplo 37 Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(5-(8-(2-((1R,38,5R)-2(28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciíclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H- benzimidazo|-5-iI)-2-quinoxalinil)- 1 H-benzimidazol-2-11)-2- ' azabiciclo[3,1,0Jhex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato ' 5 HATU (25 mg, 0,086 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H- benzofdlimidazol-6-i)quinoxalina (28 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-3-metilbutanoico (11,5 mg, 0,066 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,045 mL, 0,28 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por “ 10 2 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC pre- : parativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (28,2'S)-1,1 4((1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-3,3-(6,6"-(quinoxalino-2,6- diil)bis(1H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2- diil))bis(3-metil-1-oxobutano-2, i-diil)dicarbamato (27 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LOC-MS 1,94 min; m/z 839 [M+H]". (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mMm S10. Solvente À = água 90%:metano! 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradi- ente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). 'H RMN (sal de TFA, 400 MHz, MeOD)õ ppm 9,56 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,52 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,26 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,24 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,05 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,380 (dd ap, J=9,0, 6,8 Hz, 2H), 4,60 (d ap, J=6,0 Hz, 2H), 3,93 - 3,84 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 2,80 - 2,70 (m, 2H), 2,63 - 2,51 (m, 2H), 2,29 - 2,098 (m, 4H), 1,21 - 1,11 (m, 2H),1,03(d,J=6,8Hz, 6H), 1,00 - 0,90 (m, 2H), 0,93 (d, J=6,5 Hz, 6H).
ne O NH Su > N o Õ nº AL) N Proa fo) Exemplo 38 Dimetil (2,6-quinoxalinodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil (1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-11)-2, 1-etanodiil)))biscarbamato ' HATU (25,9 mg, 0,068 mmol) foi adicionado a uma solução de - 5 um sal de TFA de 2,6-bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H- benzo[alimidazol-6-il)quinoxalina (29 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran4-il)acético (14,8 mg, 0,068 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,046 mL, 0,27 mmol) e a mistura foi agitada em tempera- tura ambiente por 16 horas.
A reação foi diluída com MeOH e purificada a- * 10 través de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (18,1'8)-2,2((1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-3,3-(6,6"- (quinoxalino-2,6-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0] hexano-3, 2-diil))bis(2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etano-2, 1-diil)dicarba- mato (32,5 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,74 min; m/z 462 [1/2 M+H]”. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda = 220). *H RMN (sal de TFA, 400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,53 (s, 1H), 8,70 (s, 1H),8,55 (dd, J=8,8, 1,5 Hz, 1H), 8,44 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,31 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,27 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1H), 8,19 (s amplo, 1H), 8,08 (dd, J=8,8, 1,5 Hz, 1H), 7,96 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,28 (dd ap, J=8,8, 6,8 Hz, 2H), 4,63 (app d, J=7,3 Hz, 2H), 3,99 - 3,86 (m, 6H), 3,69 (s, 6H), 3,44 - 3,29 (m, 4H), 2,81 - 2,71 (m, 2H), 2,63 - 2,52 (m, 2H), 2,20 - 2,03 (m, 4H), 1,68-1,37 (m, 8H), 1,17 - 1,08 (m, 2H), 0,99 - 0,92 (m, 2H).
A o NH N fee Nº O W N fe H (O H AL > N S Õ E o Y s N Fo o Exemplo 39 Dimetil (2,6-quinolinodiilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil(1R,3S,5R)- 2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diil((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-11)-2,1- etanodiil)))biscarbamato , HATU (34,0 mg, 0,089 mmol) foi adicionado a uma solução de . 5 um sal de cloridrato de 2,6-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-benzo[d]imidazol-6-il)quinolino (26 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (19,4 mg, 0,089 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,061 mL, 0,350 mmol) e a mistura foi agitada em tempe- ratura ambiente por 16 horas. A reação foi dituída com MeOH e purificada * 10 através de HPLC preparativa (H»O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (18,1'S)-2,2-((1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6"- (quinolino-2,6-dii)bis(1H-benzo[dlimidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo(3,1,0] hexano-3,2-diil))bis(2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etano-2,1-d0iil) dicarba- mato (6,0 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,65
15. min; m/z 462 [1/2 M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mMm S10. Solvente À = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metano! 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mLímin. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,70 (1H, d, J=8,5 Hz), 8,57 (1H, s) 8,23-8,45(5H,m), 8,17 (1H, s), 8,01 - 8,12 (1H, m), 7,88 - 7,97 (2H, m), 5,27 (2H, t, J=7,8 Hz), 4,33 - 4,68 (2H, m), 3,84 - 4,02 (6H, m), 3,69 (6H, s), 3,35 - 3,47 (4H, m), 2,67 - 2,81 (2H, m), 2,49 - 2,64 (2H, m), 1,91 - 2,21 (4H, m), 1,35 - 1,71 (8H, m), 1,07 - 1,47 (2H, m), 0,85 - 1,00 (2H, m).
ND N on “o | van Cn ; (> ns o NO dg N Exemplo 40 Metil ((18)-2-((2S)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazo!- 4-11)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-iI)-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- - piran-4-i)etil)carbamato : 5 HATU (45 mg, 0,118 mmol) foi adicionado a uma solução de 4- cloro-2-((S)-pirrolidin-2-11)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-i)-1H-imidazol-5-il) naf- talen-2-il)Yfeni!)- 1H-imidazol (20 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-il) acético (25,6 mg, 0,118 mmol) em DMF (3 mL) e DIEA (0,070 mL, 0,40 mmol) e a mistura de reação foi agitada em tempera- . 10 turaambiente por 2 horas.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removidos sob vácuo.
O resíduo foi purifi- ' cado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 x 100 mm eluída com um gradiente de MeOH 10 a 100% -Água + TFA 0,1%) e então repurificado através de HPLC (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 x 150mm eluída com um gradiente de MeOH 10 a 100% -Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(2-((28)-1- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-pirro- lidinil)-1H-imidazo|-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1 H-imidazol-2-i1)-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato (12,9 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,585 min; m/z 907,39 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven-
te B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. '*H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,20 - 8,28 (m, 2H), 8,09 - 8,12 (m, 1H), 8,02 - 8,08 (m, 1H), 7,91 - 8,00 (m, 3H), 7,87 - 7,91 (m, 2H), 7,80 - 7,87 (m, 2H), 5,28 (t, J=7,5 Hz, 1H), 5,068 - 5,14 (m, 1H), 4,25 - 4,35 (m, 2H), 4,11 - 4,19 (m, 1H), 4,00 - 407 (m, 1H), 3,85 - 4,00 (m, 8H), 3,683 - 3,69 (m, 6H), 3,32 - 3,43 (m, 4H), ' 2,57- 2,64(m, 1H), 2,34 - 240 (m, 1H), 2,26 - 2,32 (m, 2H), 2,12 - 2,25 (m, - 4H), 1,95 - 2,09 (m, 2H), 1,34 - 1,54(m, 8H). “A DD) > O o | Cd O HN o | N cl dg > Exemplo 41 Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(6-(4-(4-cloro-2-((28)-1-((28)-2-((meto- xicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)- tH-imidazol-5-il)fenil)-2- — nafti)-IH-imidazo!-2-i!)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (45 mg, 0,118 mmoi) foi adicionado a uma solução de 4- cloro-2-((S)-pirrolidin-2-11)-5-(4-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-11)-1H-imidazol-5l) naf- talen-2-iDfenil)-1H-imidazol (20 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoico (20,7 mg, 0,118 mmol) em DMF (3 mL) e DIEA (0,070 mL, 0,40mmol)ea mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removidos sob vácuo.
O resíduo foi purificado através de H- PLC preparativa (coluna Waters Sunfire 5u C18 de 30 x 100 mm eluída com um gradiente de MeOH 10 a 100% -Água + TFA 0,1%) e então repurificado através de HPLC (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 x 150 mm eluída com um gradiente de ACN 10 a 100% Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(6-(4-(4-cloro-2-((28)-1-((28)-2-((metoxicar- bonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-5-il)fenil)-2-naftil)- 1 H- imidazo!-2-il)-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (3,6 mg) como sólidoamarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,715 min; m/z 823,49 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30mm usan- do um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de de- tector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo . de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- R vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era H2010%/MeOH 90% /TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº? - Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,24 - 8,29 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,08 - 8,15 (m, 1H), 8,03 - ' 8,08 (m, 1H), 7,81 - 8,01 (m, 7H), 5,31 (t, J=7,5 Hz, 1H), 5,12 (t ap, J=7,5 Hz, 1H),4,21-4,32 (m, 2H), 4,08 - 4,19 (m, 1H), 3,99 - 4,08 (m, 1H), 3,85 - 3,96 (m, 2H), 3,57 - 3,74 (m, 6H), 2,56 - 2,67 (m, 1H), 2,35 - 2,46 (m, 1H), 2,28 - 2,35 (m, 2H), 2,20 - 2,26 (m, 2H), 2,05 - 2,19 (m, 4H), 0,90 - 1,09 (m, 12H). vo? N o, [ DI) ID Yo A Á Oo Cd & EN o N E x Exemplo 42 Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(7-(8-(2((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((me- toxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo [3,1,0]hex- 3)-IH-imidazol-4-i0)-2-naftil)-1H-nafto[1,2-djimidazo!-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]
hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil))carbamato HATU (103 mg, 0,271 mmol) foi adicionado a uma solução de 2- ((S)-pirrolidin-2-1N)-7-(6-(2-((S)-pirrolidin-2-il)- TH-imidazol-5-i)naftalen-2-il)- 1H-nafto[1,2-d]limídazol| (45 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4iacético (58,8 mg, 0,271 mmol) em DMF (3 mL) e DIEA (0,16 mL, 0,90 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura am- biente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL) e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi purificado a- través de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 x 100 eluí- dacom um gradiente de MeOH 10 a 100% -Água + TFA 0,1%) e então repu- ' rificado através de HPLC (coluna Waters Sunfire Su C18 de 30 X 150 mm . eluída com um gradiente de ACN 0 a 90% -Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(7-(6-(2((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabicicio
15. [3,1 ,0]hex-3-il)-1H-imidazo|-4-11)-2-naftil)-1 H-nafto[1,2-d]imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (8,7 - mg) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 1,307 min; míz 897,67 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos em que o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era H;O 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,51 - 8,57 (m, 2H), 8,40 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,23 (d, J=10,1 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,05-8,15(m,3H),8,00(s, 1H), 7,87 (dd, J=8,6, 1,8 Hz, 1H), 7,79 - 7,85 (m, 1H), 5,43 (t, J1=7,3 Hz, 1H), 5,30 (t, J=7,3 Hz, 1H), 4,28 - 4,40 (m, 2H), 4,19 (s amplo, 2H), 3,88 - 4,07 (m, 6H), 3,70 (d, J=1,5 Hz, 6H), 3,26 - 3,45 (so-
breposto com metanol, m, 4H), 2,57 - 2,71 (m, 2H), 2,30 - 2,42 (m, 3H), 2,20 - 2,29 (m, 3H), 1,93 - 2,10 (m, 2H), 1,58 - 1,688 (m., 2H), 1,34 - 1,58 (m, 6H). x o o, H O N A) Yo yu (O As N AN
ADO RT N As” o
O Exemplo 43 Metil ((18)-2-((1R,38S,5R)-3-(7-(6-(2-((1R,38,5R)-2((28)-2- ((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo ' 5 [3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)- 1H-nafto[1,2-d]imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (24,5 mg, 0,065 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((S)-pirrolidin-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)qui- nolina (30 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (11,3 0 mg, 0,085 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,044 mL, 0,252 mmol) e a mis- - tura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H;>O-MeOH com tam- pão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil (28,2'S8)-1,1((28,2'S)- 2,2-(6,6"-(quinolino-2,6-diil)bis(1 H-benzo[d]imidazo!-6,2-dii))bis(pirrolidino- 2,1-d0iil))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-dii)dicarbamato (34 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,82 min; m/z 814 [M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradi- ente=3minutos. Comprimento de onda = 220). '*H RMN (400 MHz, MeOD) 6 ppm 8,71 (1H, d, J=8,8 Hz), 8,57 (1H, s), 8,21 - 8,43 (SH, m), 8,18 (1H, s), 8,04 (1H, dd, J=8,5, 1,5 Hz), 7,88 - 7,96 (2H, m), 5,40 (2H, t, J=7,03 Hz), 4,31 (2H, d, J=6,8 Hz), 4,09 - 4,21 (2H, m), 3,91 - 4,06 (2H, m), 3,68 (8H, s), 2,58 - 2,73 (2H, m), 2,20 - 2,49 (6H, m), 2,02 - 2,19 (2H, m), 0,96 (6H, dd,
J=6,8, 1,8 Hz), 0,90 (SH, dd, J=6,7, 1,6 Hz). o N “o DP Ve A ITA AA nº HN C) HN <A É % Exemplo 44 Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(5-(8-(2-((1R,3S8,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i)- 1H- - imidazol-4-iI)-2-naftil)- 1H-benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2- : 5 ilcarbonil)-2-metiloropil)carbamato HATU (82 mg, 0,22 mmol) foi adicionado a uma solução de 6-(6- (2((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)- 1H-imidazo!-4-il)naftalen-2-i)-2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[d]imidazol (34 mg), áci- do (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (37,8 mg, 0,216 mmol) e .- 10 DIEA(013mL,0,72mmol) em DMF (3 mL) e a reação foi agitada 2 horas em temperatura ambiente.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 ml) ' e água (2 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo.
O resíduo foi purifi- cado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire 5u C18 30 X 150 mm eluída com um gradiente de ACN 10 a 80% -Água + TFA 0,1%) para dar um saldeTFA de metil ((18)-1-(((1R,38S,5R)-3-(5-(6-(2((1R,38,5R)-2((2S)- 2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H- imidazol-4-i1)-2-naftil)- !H-benzimidazol-2-il)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2- iN)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (49,8 mg) como sólido amarelo pálido.
Tempo de retenção de LC-MS 1,357 min; m/z 787,65 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire Su C18 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era H5O 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) õppm38,29(d,J=10,7 Hz, 2H), 8,07 - 8,19 (m, 3H), 7,94 - 8,05 (m, 3H), 7,84 - 7,92 (m, 2H), 5,29 (dd, 4U=9,2, 6,7 Hz, 1H), 5,18 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 4,59 (dd, J=12,4, 6,6 Hz, 2H), 3,81 - 3,91 (m, 2H), 3,69 (s, SH), 2,67 - 2,80 (m, 2H), 2,48 - 2,61 (m, 2H), 2,07 - 2,27 (m, 4H), 1,09 - 1,49 (m, 2H), 0,99 - 1,06 (m, 6H), 0,88 - 1,00 (m, 8H). o N : o QAV | No SS " oÁ LL ST HN O md o <A E D Exemplo 45 Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(6-(2((1R,38,5R)-2-((2S)-2- i ((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piranA-il)acetil)-2-azabiciclo . [3,1 ,0]hex-3-11)- 1 H-benzimidazol-5-il)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabi- ciclo[3,1,0]Jhex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-iI)etil)carbamato HATU (82 mg, 0,216 mmol) foi adicionado a uma solução de 6- (6-(2((1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1 H-imidazol-4-il)naftalen-2- i)-2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo[a]imidazol (34 mg), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (46,9 mg, 0,216 mmol) e DIEA (0,13 mL, 0,72 mmol) em DMF (3 mL) e a reação foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo.
O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (coluna Waters Sunfire 5u C18 de 30 x 150 mm eluída com um gradiente de ACN 10 a 80%- Água + TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3- (4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H- pirandá-ilacetil)-?-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-iI)-1H-benzimidazo|-5-i1)-2-naftil)- TH-imidazol-2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-
iNetilcarbamato (38 mg) como sólido amarelo pálido.
Tempo de retenção de LC-MS 1,240 min; m/z 871,66 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220NM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fiuxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H5O 90% / TFA O1%eo Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS 1 foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de . eletropulverização. *H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (d, J=6,1 Hz, 2H), 8,08 - 8,18 (m, 3H), 8,04 (dd, J=8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,95 - 8,01 (m, 2H), 7,85 - 7,92 (m, 2H), 5,27 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 1H), 5,16 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 4,59 -4,66 (m, 2H), 3,84 - 4,01 (m, 6H), 3,70 (s, 6H), 3,35 - 3,45 (m, 4H), 2,69 - 2,80 (m, 2H), 2,48 - 2,61 (m, 2H), 2,03 - 2,20 (m, 4H), 1,57 - . 1,65 (m, 2H), 1,40 - 1,56 (m, 6H), 1,07 - 1,47 (m, 2H), 0,87 (s amplo, 1H), 0,91 (s amplo, 1H). o N ão ST Te OO mA <AÃO º Exemplo 46 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-11)-1H- benzimidazol|-5-i1)-2,2"-binaftalen-6-il)-1H-benzimidazo|-2-i1)-2-azabiciclo [3,1 0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (22,7 ma, 0,060 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 6,6"-bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H- benzo[dlimidazol-S-il)-2,2-binaftit (22 mg), ácido (S)2-(metoxicarbonila- mino)-3-metilbutanoico (10,5 mg, 0,060 mmol) e DIEA (0,035 mL, 0,20 mmol) em DMF (3 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2ml) e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi purificado através de H- PLC preparativa (Coluna Waters Sunfire 5u C18 de 30 x 100 mm eluída com um gradiente de MeOH 10 a 80%-Água + TFA 0,1%)) para dar um sa! de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(5-(8'-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxi- carbonil>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1 H-benzimidazo!- B-i1)-2,2'-binaftalen-6-il)- 1H-benzimidazol|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)Jhex-2-il) carbonil)-2-metilpropil)carbamato (15,6 mg) como sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS 1,765 min; m/z 482,68 (1/2 M+H+). Dados de LC foram ' registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com . uma coluna Waters Sunfire Su C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- entede Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 - minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA i 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. '*H RMN (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,36 (s, 2H), 8,27 (s, 2H), 8,12 - 8,18 (m, 4H), 8,11 (s, 2H), 8,05 (app t, J=8,6 Hz, 4H), 7,91 - 7,96 (m, 2H), 7,86 - 7,91 (m, 2H), 5,29 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 2H), 4,61 (d, J=6,4 Hz, 2H), 3,85 - 3,91 (m, 2H), 3,70 (s, 68H), 2,72 - 2,80 (m, 2H), 2,53 - 2,62 (m, 2H), 2,12 - 2,26 (m, 4H), 1,43 - 1,21 (m, 2H), 1,04 (d, J=6,7Hz, 6H), 0,99 (s amplo, 2H), 0,95 (d, J=6,7 Hz, 6H). x o À, SD Yo Na NO NON > Nó º A <CDAJIO "O
E N Exemplo 47
Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i)-1H- benzimidazol-5-il)-1,5-naftiridin-2-11)-1H-benzimidazo!-2-11)-2-azabíiciclo [3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (8,7 mg, 0,023 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 2,6-bis(2-((1R,38,5R)-2-azabiciíclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H- benzofd]limidazol-6-il)-1,5-naftiridina (12 mg, 9,93 umol) e ácido (S)-2-(meto- xicarbonilamino)-3-metilbutanoico (4,2 mg) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,017 mL, 0,098 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC pre- - parativa (H>O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de dimetil (28,2'8)-1,1((1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6-(1,5-naftiridino-2,6- diil)bis(1H-benzo[dJimidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2- diil))bis(3-metil-1-oxobutano-2,1-diil)dicarbamato (5,6 mg) como sólido ama- relo. Tempo de retenção de LC-MS 1,91 min; m/z 420 [1/2 M+H]*. (Coluna PHENOMENEXº Luna S10 de 3,0 x 50mm, Solvente A = água 90%:metanol - 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100, Tempo de Gradi- ' ente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5ppm38,59-867 (4H, m), 8,48 (2H, dd, J=8,8, 1,3 Hz), 8,44 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,92 (2H, d, J=8,5 Hz), 5,29 (2H, dd, UJ=9,2, 6,7 Hz), 4,60 (2H, d, J=6,5 Hz), 3,84 - 3,92 (2H, m), 3,68 (6H, s), 2,69 - 2,80 (2H, m), 2,51 - 2,62 (2H, m), 2,07 - 2,27 (AH, m), 1,410 - 1,21 (2H, m), 1,02 (6H, d, J=6,8 Hz), 0,95 - 1,00 (2H, m), 0,93 (6H, d, J=6,8 Hz). . ' NH 7 D QI H | SOS O n É o <A OA ALI N So
O Exemplo 48 Dimetil (1,5-naftiridino-2,6-diilbis(1H-benzimidazol-5,2-diil
(1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3,2-diyl((18)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-11)-2,1-etanediil)))biscarbamato HATU (8,68 mg, 0,023 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 2,6-bis(2((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H- — benzo[djimidazol-6-il)-1,5-naftiridina (12 mo) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (5,0 mg, 0,023 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,016 mL, 0,089 mmol) e a mistura foi agitada em tempe- ratura ambiente por 3 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para darumsaldeTFA de dimetil (18,1'8)-2,2(1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-3,3'-(6,6"- ' (1,5-naftiridino-2,6-diil)bis(1H-benzo[d]imidazol-6,2-diil))bis(2-azabiciclo . [3,1,0]hexano-3,2-diil))bis(2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etano-2,1- dii)dicarbamato (11 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC- MS 1,73 min; m/z 462 [1/2 M+H]". (Coluna PHENOMENEXSº Luna de 3,0 x SOmm S10. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial - = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,61 - 8,68 (4H, m), 8,50 Ú (2H, dd, J=8,8, 1,51 Hz), 8,45 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,93 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,28 (2H,dd,J=9,3,6,8 Hz), 4,64 (2H, d, J=7,5 Hz), 3,84 - 4,02 (6H, m), 3,89 (6H, Ss), 3,35 - 3,46 (4H, m), 2,75 (2H, dd, J=13,7, 9,2 Hz), 2,58 (2H, d, J=6,8 Hz), 1,99 - 2,22 (4H, m), 1,36 - 1,69 (8H, m), 1,07 - 1,19 (2H, m), 0,96 (2H, m).
o Cc! N o, JOE o JS AA nº EN O) HN <A É À Exemplo 49 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)- 2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iN)-1H- imidazol-5-iI)-2-naftil)-1H-benzimidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2-1)) — car-
bonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (76 mg, 0,20 mmol) foi adicionado a uma solução de 2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-1)-5-(6-(2-((1R,38S,5R)-2-azabiciclo [3,1,0]hex-3-il)-4-cloro-1H-imidazo|-5-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazol (34 mo), ácido(S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (35,2 mg, 0,201 mmol) e DIEA (0,12 mL, 0,67 mmol) em DMF (3 mL) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL) e o componente volátil foi removido in vacuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (á- gua/metanol, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,3S, ' S5R)-3-(5-(86-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- . metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H-imidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H- benzimidazo|-2-i1)-2-azabicíclo[3,1,0]Jhex-2-il)carbonil)-2-metilpropil) — carba- mato (41,3 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,717
15. min; m/z 821,58 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 - Smm de 4,6 x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- venteB 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metano! 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropul- —verização 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,24 (d, J=1,8 Hz, 2H), 8,01 - 8,13 (m, 4H), 7,84 - 7,98 (m, 3H), 5,29 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 1H), 5,09 (t, J=7,2 Hz, 1H), 4,60 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,86 - 3,91 (m, 1H), 3,71 - 3,76 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,68 (m, 3H), 2,77 (dd, J=13,6, 9,3 Hz, 1H), 2,57 (ddd, J=13,6, 6,7, 6,6 Hz, 1H), 244 - 2,53 (m, 2H), 2,11 - 2,26 (m, 3H), 1,99 - 2,10 (m, 1H), 1,10-1,22 (m, 2H), 0,89 -1,09 (m, 13H), 0,80 - 0,84 (m, 1H).
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N “ou | DT IE a E? PALO o Nº HAN e Hd <ACÁ E Exemplo 50 Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((2S)- 2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo [3,1,0]hex-3-il)- 1H-benzimidazo|-5-i1)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo . [3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (45,0 mg, 0,118 mmol) foi adicionado a uma solução de 2- ((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-il)-5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabicíclo [3,1 ,0Jhex-3-iI)-4-cloro-1H-imidazol-5-i1)-2-naftil)- H-benzimidazol (20 mg, 0,039 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacético (25,7 mg) e DIEA (0,069 mL, 0,39 mmol) em DMF (3 mL) e a mistu- ra resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com metanol (2 mL) e água (2 mL) e o componente volátil - foi removido in vacuo. O resíduo foi purificado através de HPLC preparativa de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-benzimidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-1/)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (28,1 mg) como sólido amarelo pálido. Tempo de retenção de LC-MS 1,597 min; m/z 905,67 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 Smm de 4,6 x38Omm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de2minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 8,24 (s, 2H), 8,02 - 8,13 (m, 4H), 7,86 - 7,97 (m, 3H), 5,27 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 5,08 (t, J=7,2 Hz, 1H), 4,65(tJ=7,3Hz, 2H), 3,88-4,02 (m, 5H), 3,75 - 3,83 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,68 (s, 3H), 3,36 - 3,49 (m, 4H), 2,77 (dd, J=13,7, 9,5 Hz, 1H), 2,57 (ddd, J=13,7, 6,7, 86,4 Hz, 1H), 2,46 - 2,53 (m, 2H), 2,00 - 2,20 (m, 4H), 1,55 - 1,69 (m, 4H), 1,40 - 1,70 (m, 4H), 1,08 - 1,20 (m, 2H), 0,94 - 1,00 (m, 1H), 0,80 - 0,84 (m, 1H).
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O HAN R 2 : Exemplo 51 “Ao Metil — ((1S)-1-(((1S8,3R,58)-3-(4-(6-(3-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iD-1H- imidazol-4-iN)Yfenil)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-1/)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2-il) — car bonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (47,8 ma, 0,126 mmol) foi adicionado à uma mistura de um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4-(3-(6-(2-((18,3R,58)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano (40 mg), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (22 mg, 0,13 mmol) e DIEA (0,073 mL, 0,42 mmol) em DMF (3 mL) e a mistura resul- tante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À mistura de reação foidiluída com metanol (2 mL) e água (2 mL) e o componente volátil foi re- movido in vacuo. O resíduo foi parcialmente purificado através de uma HPLC de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) e então repurificado através de HPLC de fase reversa (água/acetonitrila, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((18,3R,58)-3-(4-(6-(3-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4- iDfenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carboni!l)-2- metilpropil)carbamato (45 mg) como um sólido branco. Tempo de retenção deLC-MS1,458 min; m/z 813,30 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- ters Sunfire C18 de 4,6Xx30 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo ' de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um — MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (d, J=4,6 Hz, 2H), 8,18 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,9 Hz, - 1H), 8,10 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,98 - 8,02 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,93 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=8,7, 1,7 Hz, 1H), 7,77 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,69 (t, J=7,8 Ú Hz, 1H), 5,13 - 5,20 (m, 2H), 4,57 (t, J=6,1 Hz, 2H), 3,80 - 3,88 (m, 2H), 3,689 (d,J=6,1H7z, 6H), 2,67 -2,77 (m, 2H), 2,51 (da, J=13,7, 6,8 Hz, 2H), 2,15 - 2,25 (m, 2H), 2,10 (da, J=13,8, 6,8 Hz, 2H), 1,08 - 1,18 (m, 2H), 1,03 (dd, J=6,7, 4,6 Hz, 6H), 0,95 (dd, J=6,7, 3,4 Hz, 6H), 0,92 (dd, J=5,3, 2,0 Hz, 2H). H “A
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A NE H “e. N h
JA Exemplo 52 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoi!)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H- — benzimidazol-S-il)-6-quinoxalinil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-2-
il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (13,16 mg, 0,035 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 2-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexan-3-il)- 1H-benzo [d]limidazol-6-iI)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1 H-imidazol- Silquinoxalina(14 mg, 0,015 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoico (6,1 mg) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,024 mL, 0,135 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1- (((1R,38,5R)-3-(4(2-(2((1R,38,5R)-2-((2S)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- ' metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1 H-benzimidazol-5-i1)-6-quino- xalinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil) carbamato (11,8 mg,) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC- MS 1,77 min; m/z 789 [M+H]". (coluna PHENOMENEXº? Luna de 3,0 x 50mMm S1O. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 80%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mUmin. % de B Inicial = O, - % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,59 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,51 (ad, ' J=8,8 Hz, 1H), 8,46 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,27 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,19 (dad, J=8,8,2,0 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,92 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,29 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 1H), 5,17 (dd, J=9,2, 7,2 Hz, 1H), 4,58 (dd, J=13,2, 6,7 Hz, 2H), 3,78 - 3,92 (m, 2H), 3,68 (s, 8H), 2,67 - 2,79 (m, 2H), 2,45 - 2,62 (m, 2H), 2,03 - 2,27 (m, 4H), 1,07 - 1,21 (m, 2H), 1,03 (d, UJ=6,8 Hz, 6H), 0,93 - 1,00 (m, 2H), 0,93 (dd, J=6,3, 5,8 Hz, 6H).
4 H e NH Bo OS
SEDA PCR
A Exemplo 53 Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-
((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-i)-1H-benzimidazo|-5-i1)-6-quinoxalinil)-1H-imidazol-2- iN)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato
HATU (15,0 mg, 0,040 mmol) foi adicionado a uma solução de umsaldeTFA de 2-(2((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo [d]imidazo]-6-i1)-6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexan-3-il)-1H-imidazol- S-iNquinoxalina (16 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro- 2H-piran-4-iN)acético (8,6 mg, 0,040 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,027 mL, 0,16 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 ho- ras.
A reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC preparati- ' va (H2O-MeOH com tampão de NH,OAc 10mM) para dar metil ((18)-2- ((1R,38,5R)-3-(4-(2-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)- 1H-benzimidazol- 5-i1)-6-quinoxalinil)-1H-imidazo!|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-2-11)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (14,5 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,58 min; m/z 873 [M+H]". (coluna PHENO- . MENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = Ú 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,34 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,28 (d, J=1,0 Hz, 1H), 8,08 - 8,19 (m, 2H), 8,03 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,66 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 5,27 (t, J=6,9 Hz, 1H), 5,18 (dd, J=8,9, 4,9 Hz, 1H), 4,69 (d, J=5,5 Hz, 2H), 3,87 - 4,03 (m, 4H), 3,73 - 3,85 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,32 - 3,47 (m, 4H), 2,50 - 2,61 (m, 3H), 2,40 - 2,49(m,1H),1,99-2,16(m, 4H), 1,51 - 1,72 (m, 6H), 1,38 - 1,51 (m, 2H), 1,09 - 1,22 (m, 2H), 0,76 - 0,92 (m, 2H). o E “e R-Qs Aro ADA N O >? “o eo Rn o Exemplo 54
Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(5-(86-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-11)-1H- imidazol-4-il)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- oxo0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (157 mg, 0,413 mmol) foi adicionado a uma solução de metil (S)-1-((1R,38S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- TH-benzo[d]imidazol-B-il)naftalen-2-i1)-1 H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (130 mg), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acético (90 mg, 0,41 mmol) e DIEA (0,36 mL, 2,1 mmol) em DMF (4 mL) e a reação foi agitada 2 - horas em temperatura ambiente.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo.
O material foi purificado em HPLC de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-il)-1H- imidazol-4-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- . oxo-1-(tetra-hidro-2H-piran-4i)etil)carbamato (194 mg) como sólido amare- lo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,307 min; m/z 829,27 (MH+). Dados de ' LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- —padocom uma Coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nNM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Sol- vente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,16 (d, J=8,5Hz,1H),8,11(d,J=0,9Hz, 1H), 8,11 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,98 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1H), 7,89 (d J = 8,5 Hz, 1H), 7,88 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 5,27 (dd, J=9,2, 6,7 Hz, 1H), 5,18 (dd,
À 346/563 J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 4,62 - 4,67 (m, 1H), 4,58 (d, J=6,4 Hz, 1H), 3,87 - 4,01 (m, 3H), 3,82 - 3,87 (m, 1H), 3,70 (m, 6H), 3,36 - 3,44 (m, 2H), 2,74 (td, J=13,3, 9,5 Hz, 2H), 2,48 - 2,62 (m, 2H), 2,04 - 2,24 (m, 4H), 1,40 - 1,60 (m, 4H), 1,09 - 1,19 (m, 2H), 1,04 (d, J=6,7 Hz, 3H), 0,89 - 0,99 (m, 5H). o 4 REO-OTd Suit IA" PA o S * . Exemplo 55 Metil ((18)-1-(((1R,38S,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)- 1 H-benzimidazo|-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (100 mg, 0,263 mmol) foi adicionado a uma solução de 2 10 metil (S)-2-((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-benzo[d]imidazo1l-6-il)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-i1)-2- ' azabiciclo(3,1,0]hexan-2-i!)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)etilcarbamato (118 mg), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (46,2 mg, 0,263 mmol) e DIEA (0,31 mL, 1,8 mmol) em DMF (4 mL) e a reação foi agi- tada 2 horas em temperatura ambiente.
A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 mL) e água (2 mL). Os voláteis foram removidos sob vácuo usando um rotovap e o resíduo foi purificado em HPLC de fase reversa (á- gua/metano|, TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,3S, 5R)-3-(5-(6-(2-((1R,38S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro- 2H-pirand4-ilacetil)-?-azabicicio[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)- 1H- benzimidazo!-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil) — carba- mato (55,3 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,320 min; m/z 829,42 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de
' 347/563 detector de 220nNM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mk/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos on- deoSolvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,31 (s, 1H) 8,29 (s, 1H), 8,08 - 8,18 (m, 3H), 8,04 (dd, J=8,9, 1,5 Hz, 1H), 7,95 - 8,00 (m, 2H), 7,90 (d, J=8,6 Hz,1H), 7,87 (dd, J=8,6, 1,8 Hz, 1H), 5,29 (dd, J=9,3, 6,9 Hz, 1H), 5,17 (dd, - J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 4,62 (dd, J=9,2, 7,3 Hz, 2H), 3,96 (td, J=10,8, 2,9 Hz, 2H), 3,83 - 3,92 (m, 2H), 3,64 - 3,77 (m, 6H), 3,35 - 3,46 (m, 2H), 2,74 (ddd, J=19,3, 13,5, 9,3 Hz, 2H), 2,48 - 2,62 (m, 2H), 2,06 - 2,26 (m, 4H), 1,45 - 1,63 (m, 4H), 1,08 - 1,22 (m, 2H), 1,03 (d, J=6,7 Hz, 3H), 0,96 - 1,01 (m, 1H), 0,93(d,J=6,7 Hz, 3H), 0,88 - 091 (m, 1H). % 4 . n NH Cc! CX CL RS ST o ; S Exemplo 56 Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(5-(6-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((2S)- 2-((metoxicarbonil)amino)-3-metiibutanoil)-2-azabiciclo(3,1,0]hex-3-iN-1H- imidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- ox0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato NCS (14,98 mg, 0,112 mmol) foi adicionado a uma solução de metil / ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(5-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)Jhex-3-i1)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)- 1H-benzimidazol-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)etil)carbamato (93 mg) em DMF e a mistura de reação foi aquecida a50ºC (temperatura do banho de óleo) por 2 horas.
A mistura de reação
' 348/563 bruta foi purificada em HPLC de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) pa- ra dar um sal de TFA de metil ((18)-2((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-cloro-2-((1R,3S, 5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-il)-1H-imidazol-5-i1)-2-naftil)- 1H-benzimidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex2)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (102,8 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,648 min; m/z 863,32 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV- Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As con- dições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente 7 de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, - MeOD) 5 ppm 8,22 (s amplo, 2H), 8,10 (s, 1H), 8,00 - 8,08 (m, 3H), 7,85 - 7,94 (m, 3H), 5,28 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 5,09 (t, J=7,2 Hz, 1H), 4,65 (d, | J=7,3 Hz, 1H), 4,59 (d, J=7,0 Hz, 1H), 3,89 - 3,99 (m, 3H), 3,66 - 3,77 (m, 7H) 3,35-3,44 (m, 2H), 2,77 (dd, J=13,6, 9,3 Hz, 1H), 2,57 (ddd, J=13,8, 6,8, 6,6 Hz, 1H), 2,47 - 2,52 (m, 2H), 2,02 - 2,22 (m, 4H), 1,44 - 1,63 (m, 4H), 1,13 (dt, J/=8,6, 5,8 Hz, 2H), 1,05 (d, J=7,0 Hz, 3H), 0,92 - 1,02 (m, 4H), 0,83 (d, J=1,8 Hz, 1H). % E <oATN Cc HO OX
DO TIO S $ Exemplo 57 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-cloro-2-((1R,38S,5R)-2-((2S)- 2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo
: 349/563 [3,1,0]hex-3-il)- 1 H-imidazol-5-iI)-2-naftil)- 1 H-benzimidazol|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0)hex-2-i)carbonil)-2-metilpropil)carbamato NCS (10,31 mg, 0,077 mmol) foi adicionado a uma solução de metil ((18)-1(((1R,3S,5R)-3-(5-(8-(2-((1R,38S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-i)-1H- imidazol|-4-i1)-2-naftil)- 1 H-benzimidazo|-2-11)-2-azabicíclo[3,1,0)hex-2-il) - car- bonil)-2-metilpropil)carbamato (64 mg) em DMF (2 mL) e a mistura de reação foi aquecida a 50º C por 2 horas.
À mistura de reação bruta foi purificada em HPLC de fase reversa (água/metanol, TFA 0,1%) e repurificada em HPLC de fase reversa (água/ACN, TFA 0,1%) para dar o sal de TFA de metil ((18)-1- 7 (((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) ami- no)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-iI)-1H-imidazo] -5-i1)-2-naftil)- 1H-benzimidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-il)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (44,7 mg) como sólido castanho.
Tempo de retenção deLC-MS 1,63 min; m/z 863,39 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- - ters Sunfire C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição Ú empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era água 10% / metanol 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,24 (s amplo, 2H), 8,02 - 8,12 (m, 4H), 7,86 - 7,95 (m, 3H), 5,28 (dd, J=9,2, 86,7 Hz, 1H), 5,08 (t aparente, J=7,0 Hz, 1H), 4,65 (d, J=7,6 Hz, 1H), 4,60 (d, J=6,7 Hz, 1H), 3,93 - 4,01 (m, 2H), 3,86 - 3,91 (m, 1H), 3,75 - 3,81 (m, 1H), 3,65 - 3,74 (m, 6H), 3,36 - 3,46 (m, 2H), 2,77 (dd, J=13,7, 9,2 Hz, 1H), 2,57 (ddad, J=13,7,6,7,6,4 Hz, 1H), 2,49 (dd, J=7,8, 3,2 Hz, 2H), 2,12 - 2,25 (m, 2H), 2,00 - 2,12 (m, 2H), 1,54 - 1,67 (m, 3H), 1,41 - 1,51 (m, 1H), 1,09 - 1,19 (m, 2H), 0,97 - 1,06 (m, 4H), 0,94 (d, J=8,7 Hz, 3H), 0,82 (s amplo, 1H).
Ú 350/563 d H de NH FA Ne N js o As NO 1 OA CA
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SO | Exemplo 58 Metil ((18)-2-((1R,38S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- : ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabicíclo[3, 1,0] hex-3-iI)-1H-benzimidazol-5-i1)-2-quinoxalinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabicicio [3,1 0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)eti)carbamato HATU (5,64 mg, 0,015 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-benzo Id]imidazo|-6-11)-2-(2((1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol- ] S-ilquinoxalina (6,0 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)acético (3,2 mg) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (10,13 ul, 0,058 mmol)ea mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. O sol- vente foi removido e o resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil). ami- no)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H- benzimidazol-5-iI)-2-quinoxalinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- 11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (5,5 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,60 min; m/z 873 [M+H]". (coluna PHENOMENEXQO Luna de 3,0 x 50mm S10. Solvente A = água 95% / meta- nol 5% / acetato de amônio 10 mM. Solvente B = água 5% / metanol 95% / —acetatode amônio 10 MM. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = 0, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 2 minutos. Comprimento de onda = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,42 (s, 1H), 8,41 - 8,50 (m, 2H), 8,30 (d, J=1,3 Hz, 2H), 8,19 (d, J=1,0 Hz, 1H), 8,07 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1H),
' 351/563 7,92 (d, J=8,5 Hz, 1H), 5,13 - 5,33 (m, 3H), 4,57 - 4,70 (m, 1H), 3,81 - 4,04 (m, 6H), 3,62 - 3,77 (m, 6H), 3,34 - 3,46 (m, 4H), 2,65 - 2,82 (m, 2H), 2,45 - 2,61 (m, 2H), 2,01 - 2,22 (m, 4H), 1,40 - 1,65 (m, 8H), 1,03 - 1,17 (m, 2H), 0,83 - 0,98 (m, 2H). too ; 20 y : Fo o» ae “ Exemplo 59 Metil ((18)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H- benzimidazo|-5-il)-2-quinoxalinil)- 1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)Jhex-2- iNcarbonil)-2-metilpropil)carbamato . HATU (5,64 mg, 0,015 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de 6-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0)hexan-3-il)-1H-benzo : Idlimidazol-6-11)-2-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol- S-iNquinoxalina (6,0 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- noico (2,60 mg, 0,015 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (10,13 ul, 0,058 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
O sol- vente foi removido e o resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-((1R,38,5R)-3-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) ami- no)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-benzimidazol-5-i1)-2- quinoxalinil)-1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metil- — propilcarbamato (3,6 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC- MS 1,75 min; m/z 789 [M+H]*. (coluna PHENOMENEXº Luna de 3,0 x 50mm S10. Solvente A = água 90%:metanol 10%: TFA 0,1%. Solvente B = água 10%:metanol 90%:TFA 0,1%. Taxa de Fluxo = 4 mL/min. % de B Inicial = O, % de B Final = 100. Tempo de Gradiente = 3 minutos.
Comprimento de onda
' 352/563 = 220). *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 9,42 (s, 1H), 8,41 - 8,48 (m, 2H), 8,30 (d, J=1,3 Hz, 2H), 8,18 (d, J=1,0 Hz, 1H), 8,06 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1H), 7,92 (d, J-8,5 Hz, 1H), 5,24 - 5,33 (m, 1H), 5,16 - 5,24 (m, 1H), 4,52 - 4,63 (m, 2H), 3,78 - 3,91 (m, 2H), 3,68 (d, J=1,0 Hz, 6H), 2,65 - 2,79 (m, 2H), 2,46 -261(m 2H), 2,05-2,26 (m, 4H), 1,07 - 1,20 (m, 2H), 0,98 - 1,06 (m, 6H), 0,94 - 1,01 (m, 2H), 0,92 (dd, J=6,8, 3,3 Hz, 6H). o e! x N A Es /
CON Do AL <A 1 O HN a
W - Na S Exempio 60 Metil / ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2((1R,3S, 5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-il)-1H-imidazoL-S-il)fenil)-2-naftil)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-ilcarbonil)-2-metilpropil)carbamato ' o Cl x N A [DS
SS ONO : H eo AL N À dq Exemplo 62 Metil — ((1S8)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(2((1R,3S8,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclof3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-4-il)Yfenil)-2-naftil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato o x N Ss E OOo Deo A TA ; O o o “ No E y Exemplo 63 i 353/563 Metil — ((1S8)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(4-cloro-2-((1R,38,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1IH-imidazol-S-iN)fenil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabicíclo[3,1,0])hex-2- ilcarbonil)-2-metilpropil)carbamato NCS (13,0 mg, 0,097 mmol) foi adicionado a uma solução de metil — ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicar- bonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2- naftilfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpro- pil)carbamato (79 mg) em DMF (2 mL) em temperatura ambiente e a mistura foi aquecida a 50 ºC por 16 h. O produto bruto foi purificado através de H- " PLC preparativa (TFA) usando uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 30 x 150 mm eluída com um gradiente de MeOH 30 a 90%-Água + TFA 0,1% pa- ra dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4- cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-
15. — azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H-imidazol-S-iN)fenil)-2-nafti)- 1H-imidazol-2-)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (20,2 mg) como ' sólido amarelo e uma mistura dos dois produtos monocioridrato que foram separados através de SFC em uma coluna CHIRALPAKº IB e então repurifi- | cados individualmente através de HPLC preparativa (TFA) usando uma co- luna Waters Sunfire Su C18 de 30x150mm eluída com um gradiente de Me- OH 25 a 100%-Água + TFA 0,1% para dar um TFA de metil ((18)-1- (((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1 H-imidazol-4-il)fenil)-2- naftil)-1 H-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-iDcarbonil)-2-metilpropil) car- bamato(11,1mg)como um sólido amarelo e um sal de TFA de metil ((1S)-1- (((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-il)fenil)-2- naftil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-ii)carbonil)-2-metilpropil) car- bamato (11,4 mg) como um sólido amarelo. Para o Exemplo 60: Tempo de retenção de LC-MS 2,133 min; m/z 883,35 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18
: 354/563 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV UV em um compri- mento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era H2O 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm38,22 (s,2H),8,07 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,03 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,83 - 7,95 (m, 6H), 5,08 (td, J=9,1, 6,0 Hz, 2H), 4,59 (dd, J=6,7, 1,8 Hz, 2H), 3,71 - 3,79 (m, 2H), 3,68 (s, 8H), 2,44 - 2,57 (m, 4H), 2,13 - 2,25 (m, 2H), 2,00 - 2,10 (m, 2H), 1,09 - 1,46 (m, 2H), 1,05 (dd, J=6,7, 1,5 Hz, 6H), 0,91 - 1,02 (m, 6H), 0,79 - 0,87 (m, 2H). Para o Exemplo 62: Tempo de retenção de LOC-MS 1,745 min; m/z 847,33 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo li- - quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- to de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 ml/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram deter- —minados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulveri- zação. '*H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,23 (s, 2H), 8,02 - 8,09 (m, 2H), 7,98 (d, J=-8,2 Hz, 2H), 7,89 - 7,94 (m, 3H), 7,86 (d, J=8,8 Hz, 2H), 5,45 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 5,09 (t, J=7,0 Hz, 1H), 4,58 (t, J=6,7 Hz, 2H), 3,84 (t, J=4,7 Hz, 1H), 3,71 - 3,77 (m, 1H), 3,69 (d, J=3,1 Hz, 6H), 2,72 (dd, J=13,7, &95Hz 1H) 2,45 -2,54 (m, 3H), 2,14 - 2,24 (m, 2H), 2,00 - 2,14 (m, 2H), 1,09 - 1,48 (m, 2H), 1,00 - 1,08 (m, 6H), 0,96 (t, J=7,6 Hz, 6H), 0,92 (s am- plo, 1H), 0,83 (s amplo, 1H).
' 355/563 Para o Exemplo 63: Tempo de retenção de LC-MS 1,753 min; m/z 847,32 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Waters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- todeondade detector de 220nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 mi- nutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / TFA 0,1% e o Solvente Bera HO 10% /MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,26 (d, J=7,0 Hz, 2H), 8,13 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,04 - 8,10 (m, 1H), 7,95 - 8,01 (m, 2H), 7,89 - 7,95 (m, 2H), 7,82 - 7,89 (m, 3H), 5,17 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1H), 5,07 (t, J=7,2 Hz, 1H), 4,58 (d, J=6,4 Hz, 2H),3,81-3,88 (m, 1H), 3,71 - 3,76 (m, 1H), 3,69 (d, J=4,6 Hz, 6H), 2,73 (dd, J=13,4, 9,5 Hz, 1H), 2,44 - 2,56 (m, 3H), 2,14 - 2,25 (m, 2H), 2,08 - 2,14 . (m, 1H), 1,09 - 1,18 (m, 2H,) 1,00 - 1,08 (m, 6H), 0,96 (t, J=6,4 Hz, 6H), 0,92 (s amplo, 1H) 0,78 - 0,85 (m, 1H). A. DD "AO Ds AO
N À I Exemplo 61 Metil — ((18)-2((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)- 1H- imidazol|-4-i)fenil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- oxo-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato A reação de Intermediário 105 e do ácido borônico apropriado (preparado de uma maneira similar ao Intermediário 66 usando o material de partida apropriado) através de uma reação de acoplamento similar para a i 356/563 preparação de Intermediário 106 deu um sal de TFA de metil ((18)-2- ((1R,38S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)fenil)-2-naftil)- 1 H- imidazo|-2-iI)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- ileti)dcarbamato (91 mg) como um sólido amarelo pálido. Tempo de retenção de LO-MS 1,362 min; m/z 855,31 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Wa- ters Sunfire 5u C18 de 4,6x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM. As condições de elui- çãoempregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 1H), 8,28 (s, ' 1H), 8,14 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,01 - 7,94 (m, 4H), 7,93 - 7,91 (m, 1H), 7,90 - 7,83 (m, 3H), 5,19 - 5,12 (m, 2H), 4,62 (d, J= 7,6 Hz, | 1H), 4,58 (d, J= 6,4 Hz, 1H), 3,99 - 3,91 (m, 2H), 3,89 - 3,80 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,46 - 3,35 (m, 2H), 2,76 - 2,67 (m, 2H), 2,57 - 2,46 (m, 2H), 2,25 - 2,16 (m, 1H), 2,15 - 2,05 (m, 3H), 1,65 - 1,40 (m, 4H), 1,46 - 1,07 (m, 2H), 1,04 (d, J= 6,7 Hz, 3H), 0,95 (d, J= 6,7 Hz, 3H), 0,93 - 0,87 (m, 2H). Esquema 29 o FO: om 8 o EX Tático oo Intermediário 1145 Intermestário 4166 FR S Fo nºjão NÃo Boo o TRA Intermediário +15 Intermédiário 116
H NH SR intermeciario 117 Exemplos
O o
FOCA Intermediário 114a 1-(4-(6-Acetilnaftalen-2-il)Yfenil)atanona Uma solução de carbonato de sódio (5,43 g, 51,3 mmol) em á- gua(35 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 1-(6-bromonaftalen-2- i)etanona (2,554 9, 10,25 mmol) e ácido 4-acetilfenilborônico (2,017 g, 12,30 mmol) em tolueno (35,0 mL) e etanol (35,0 mL) e nitrogênio foi borbulhado através da mistura de reação por 15 minutos. Então Pa(PPh3) , (0,237 9, 0,205 mmol) foi adicionado e a reação recebeu fluxo de nitrogênio e foi a- —quecida para 95ºC sob nitrogênio por 8 horas e então agitada da noite para o dia em temperatura ambiente. A reação foi concentrada até secar sob vá- cuo alto e então dividida entre DCM (-200 mL) e água (-150 mL). A camada orgânica foi então lavada com salmoura (-100 mL), seca (MsSO,) filtrada e concentrada. O resíduo foi triturado com MeOH (-120 mL) e os sólidos res- tantes foram redissolvidos em DCM e concentrados até secagem (-2,7 g de - sólido laranja). Este material foi dissolvido em EtOAc quente (80 mL) e dei- xado esfriar. Os sólidos resultantes foram coletados através de filtragem e enxaguados com Et,;O para dar 1-(4-(6-acetilnaftalen-2-il)fenil)etanona (1,84 g). Tempo de retenção de LC-MS 2,443 min; m/z 288,98 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usan- do um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / —SolventeB 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manu- tenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H2O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulve- rização. 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,51 (s, 1 H), 8,05 - 8,16 (m, 5 H), 7,98 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,81 - 7,88 (m, 3 H), 2,76 (s, 3 H), 2,68 (s,
] 358/563 3H. Br (> o
OSS Br Intermediário 114b 2-Bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-ilYfenil)aetanona Uma solução de bromo (0,669 mL, 13,0 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 1-(4-(6-acetilnaftalen-2-il)fenil) eta- S nona(1,827g,86,34 mmol) em DCM (30 mL) e a reação foi agitada em tem- peratura ambiente por 1 dia. A mistura de reação foi diluída com DCM (-20 mL) e concentrada até secar para dar 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil) nafta- len-2-ifenil)etanona (2,83 g) que foi usada sem purificação adicional. Tem- po de retenção de LC-MS 2,708 min; m/z 446,71 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- - ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeéOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / Me- OH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASSº* Platform LC em modo de eletropulverização. H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) ô ppm 8,57 (s, 1 H), 8,07 - 8,17 (m, 5 H), 8,02 (d, J/=8,8 Hz, 1 H), 7,88 (d, J=8,8 Hz, 3 H), 4,60 (s, 2H), 4,51 (s, 2H). Boc o O OO N Boc Intermediário 115 (28,58)-2-(2-(4-(8-(2-((28,5S)-1-(terc-Butoxicarbonil)-5- metilpirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)naftalen-2-)fenil)-2-oxoetil) 1-ferc-butil 5-
metilpirrolidino-1,2-dicarboxilato Base de Hunig (1,662 mL, 9,52 mmol) foi adicionada a uma pas- ta fluida de 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-ifenil)etanona (1,42 9, 317 mmol) e ácido (2S8,58)-1-(tferc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2- — carboxílico (1,45 g, 6,34 mmol) em acetonitrila (60 mL). A reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 dia (lentamente ficou transparente) e a solu- ção laranja transparente foi concentrada e purificada em um BIOTAGE* Ho- rizon (160 g de SiO2, EtOAc 30-40%/hexanos) para dar (28,58)-2-(2-(4-(6- (2-((28S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carbonilóxi)acetil) naf- talen-2-iNfenil)-2-oxoetil) 1-ferc-butil S-metilpirrolidino-1,2-dicarboxilato (1,81 g) como uma espuma solidificada esbranquiçada. Tempo de retenção de LC- MS 3,126 min; m/z 765,87 (M+Na). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente ' A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tem- po de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um | tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MEOH 10% / HO 890% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,48 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,99 - 8,11 (m, 5H), 7,86 (d, J=8,3 Hz, 3 H), 5,24 - 5,76 (m, 4 H), 4,41 - 4,59 (m, 2 H), 3,93 - 4,11 (m,2H),2,28-2,42(m, 4H), 2,11 (s amplo, 2H), 1,77 (s amplo, 2 H), 1,49 (s amplo, 9 H), 1,48 (s amplo, 9 H), 1,35 (s amplo, 6 H). h NH Boc
E DA AO Bod N / Intermediário 116 terc-butil (28,58)-2-(4-(4-(6-(2-((28,5S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-5-
' 360/563 metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazo!-4-i1)-2-naftibfenil)-1H-imidazol-2-11)-5-metil-1- pirrolidinocarboxilato Acetato de amônio (3,76 g, 48,7 mmol) foi adicionado a uma so- lução agitada de (28,58) 2-(2-(4(6-(2-((28S,58S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-S- metilpirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)naftalen-2-il)fenil)-2-oxoetil) 1-ferc-butil 5- metilpirrolidino-1,2-dicarboxilato (1,81 g, 2,437 mmol) em tolueno (40mL) e a pasta fluida foi agitada em temperatura ambiente por 10 minutos antes de ser aquecida a 100ºC por 12 horas. A reação foi esfriada para temperatura ambiente, concentrada até secar e o resíduo foi dividido entre DCM (-150 mL) eNaHCO; saturado % (aquoso) (-150 mL). A camada orgânica foi lava- da com salmoura (-100 mL), seca (MgSO3), filtrada e concentrada para uma espuma marrom solidificada que foi purificada através de uma BIOTAGE? Horizon (160 g de SIO,, MeOH 1,5-3%/DCM) para dar ferc-butil (28,58)-2- (4-(4-(8-(2-((2S,58S)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-
15. 4i)-2-naftifenil)-1H-imidazol-2-iI)-5-metil-1-pirrolidinocarboxilato (1,46 go) como uma espuma solidificada amarelo-laranja. Tempo de retenção de LC- : MS 2,92 min; m/z 703,32 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- ' NOMENEXGO Luna 1O0u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tem- po de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era H;O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. NA ) Ad
DN O O
N Intermediário 117
' 361/563 2-((28,5S)-5-Metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((2S,5S)-5-metil-2- pirrolidini)-1H-imidazo|-4-i!)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol TFA (0,500 mL, 6,49 mmol) foi adicionado em gotas a uma solu- ção agitada de terc-butil (2S8,58)-2-(4-(4-(86-(2-((28,58)-1-(ferc-butoxicarbonil) -S-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)-1 H-imidazol-2-i1)-5-metil- 1-pirrolidinocarboxilato (228 mg, 0,324 mmol) em DCE (6 mL). Durante à adição, um precipitado se formou, o qual impediu a agitação. DCM (-10 mL) foi adicionado e a pasta fluida foi agitada enquanto TFA restante era adicio- nado. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos, mais TFA foi adicionado (-0,5 mL) e a reação foi agitada por 3 horas. A reação foi concentrada para dar um sal de TFA de 2-((28,58)-S-metil-2-pirrolidinil)-4-(4- (8-(2-((28,58)-5-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)- 1H- imidazol (102 mg, 113 mg, 114 mg) como um sólido laranja. Tempo de re- tenção de LC-MS 2,756 min; m/z 503,14 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector - de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente Ú de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / Me- OH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H —RMN (400 MHz, MeOD)ôõ ppm 8,32 (s, 1H), 8,17 (s, 1 H), 8,01 (app t, J=8,2 Hz, 2 H), 7,85 - 7,95 (m, 6 H), 7,80 (s, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 5,02 (app q, J=8,0 Hz, 2 H), 3,92 (dddd, J=8,7, 7,0, 6,9, 4,8 Hz, 2 H), 2,52 - 2,67 (m, 4 H), 2,38 - 2,49 (m, 2 H), 1,95 - 2,07 (m, 2 H), 1,55 (app dd, J=6,7, 44 Hz, 6H). Esquema 30 Mo Eu o FI O. Ns isto ; À Bor
SET EFITED
' 362/563 Br.
DA Intermediário 118 2-Bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)etanona Uma solução de bromo (0,682 mL, 13,3 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionada a uma solução de 1-(6-bromonaftalen-2-il)>etanona (3,30 9, 13,3 mmol) (>90% de pureza) em DCM (60 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura de reação foi concen- trada para dar 2-bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)etanona (4,35 g) como um sólido esbranquiçado que foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 2,177 min; m/z 342,92 (MNa+). Dados de LC foram re- gistrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 2,0x80mm usando um detec- tor de UV-VIS SPD-10AV UV-Vis em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 ml/min, um - 15 gradientede Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção : de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era Me- OH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,49 (s, 1 H), 8,03 - 8,10 (m, 2H), 7,86 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,85 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,67 (dd, J=8,8, 2,0 Hz, 1 H), 4,56 (s,2H). Boc o Nº. pu ds Br (> oo Intermediário 119 (1R,38,5R)-3-(2-(6-Bromonaftalen-2-1)-2-0x0etil) 2-fterc-butil 2- — azabicicio(3,1,0)hexano-2,3-dicarboxilato
' 363/563
DIPEA (3,47 mL, 19,88 mmol) foi adicionado a uma pasta fluida agitada de 2-bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)etanona bruta (4,35 g, 13,3 mmol) e ácido (1R,38,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo(3,1,0]hexano- 3-carboxílico (3,01 g, 13,25 mmol) em acetonitrila (80 mL) e a reação foi agi- tadaem temperatura ambiente da noite para o dia.
A reação foi concentrada até secar e purificada através de BIOTAGE? Horizon (180 g de SiO2, EtOAc 10-20%/hexanos). As frações contendo o produto desejado foram deixadas descansar por 3 dias.
Algumas frações tinham estraçalhado em cristais grandes (coletados 240 mg, produto desejado puro através de 14 RMN). To- dasasfrações contendo o produto desejado foram coletadas e concentradas para uma espuma solidificada amarela que foi transformada em pasta fluida com Et2O (-40 mL). O sólido branco que se formou foi coletado através de filtragem e enxaguado com EtsO para dar (1R,38,5R)-3-(2-(6-bromonatftalen- 2-11)-2-0x0etil) 2-ferc-butil 2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (3,24 dg) Tempo de retenção de LC-MS 2,760 min; m/z 472, 474,02 (1:1) (MH). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 7 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solven- te B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 mHz, MeOD) d ppm 8,61 (s amplo, 1H), 8,17 (s, 1H), 8,03 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,71 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H), 5,75 - 5,66 (m, 1H), 5,61 - 5,46 (m, 1H), 4,34 - 4,26 (m, 1H), 3,46 (s amplo, 1H), 2,69 - 2,59 (m, 1H), 2,55 - 244 (Mm, 1H), 1,73(s amplo, 1H), 1,54 - 1,43 (m, 9H), 0,88 (s amplo, 1H),
0,59 - 0,53 (m, 1H).
N Boc
UE Intermediário 120 (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5(S6-bromonaftalen-2-1)-1H-imidazo|-2- i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (1R,38,5R)-3-(2-(6-Bromonaftalen-2-11)-2-0x0etil) 2-ferc-butil 2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (3,46 g, 7,28 mmol) e acetato de amônio (11,2 g,146 mmol) foram dissolvidos em tolueno (100 mL) e agita- dos. Então a reação foi posta em um banho de óleo que tinha sido preaque- cido para 100ºC e agitado nesta temperatura por 12 horas. A reação foi dei- xada esfriar para temperatura ambiente, concentrada e dividida entre DCM (-200 mL) e NaHCO; aquosa saturada 72 (-150 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (-100 mL), seca (MgSO), filtrada e concentrada para uma espuma castanha solidificada. Este material foi purificado em uma BIO- , TAGESº Horizon (160 g de SiO,, carregada com DCM, FtOAc 30-50%/hexanos) para dar BIOTAGES Horizon (1609 SiO>, carregado com DCM, EtoOAc 30- ' 50%/hexanos) para dar (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H- imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (3,05 g) como uma es- puma amarela solidificada. Tempo de retenção de LC-MS 2,238 min; m/z 452,07, 454,02 (1:1) (MH). Dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 3u C18 2,0x30mm usando um detector UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,14 (s amplo, 1 H), 7,96 (d, J=1,8 Hz, 1 H), 7,79
, 365/563 (d, J=9,0 Hz, 1 H), 7,72 (d, J=9,8 Hz, 2 H), 7,53 (dd, J=8,8, 2,0 Hz, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 4,91 (dd, J=9,0, 5,3 Hz, 1 H), 3,25 - 3,56 (m, 2 H), 2,40 - 2,51 (m, 1 H), 1,75 - 1,85 (m, 1 H), 1,38 (s amplo, 1 H), 0,86 - 0,93 (m, 1 H), 0,47 - 0,55 (m, 1 H). Esquema31 x. = Emo sê E PAPER ad NE = Cul, TEÁ HNZ : HN 7 Intermeciario 65 ” Intermeciário 121 Intermediario 122 27 os no Boc N/D so Intermediário 121 (1R,38,5R)-terc-butil 3-(4-((trimetilsili)etinil)-1 H-imidazol-2-i1)-2- —azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Nitrogênio foi borbulhado em uma solução de (1R,38S,5R)-terc- - butil 3-(5-iodo-1H-imidazol|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (1,65 9, 4,40 mmol) e Cu(bl (168 mg, 0,880 mmol) em trietilamina (3,07 mL, 22,0 mmol) e DMF (40 mL) por 20 min. Então, etiniltrimetilsilano (2,16 9, 22,0
15. mmol) e Pad(PPh3)C4 (254 mg, 0,220 mmol) foram adicionados e a reação re- cebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e agitada em temperatura ambiente por 24 horas. A reação foi concentrada para um óleo marrom e purificada atra- vês de BIOTAGE? Horizon (160 g de SIO2, EIOAC 20-40%/hexanos) para dar (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-((trimetilsili)etinil)- 1H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo(3,1,0)hexano-2-carboxilato (980 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,230 min; m/z 346,17 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u C18 2,0x50mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma-
' 366/563 nutenção de 1 mínuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifuoracético 0,1% e o Solvente B era H2O0 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de Eeletropulve- rização *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) d ppm 7,18 (s, 1 H), 4,77 (dd, J=9,2, 51 Hz, 1 H), 3,20 (s amplo, 1 H), 3,14 - 3,39 (m, 1H), 2,33 (dd, J=13,2, 9,4 Hz, 1 H), 1,69 - 1,78 (m, 1 H), 1,34 - 1,56 (m, 1 H), 1,49 (s, 9 H), 0,85 (dt, J=8,5, 5,7 Hz, 1 H), 0,41 - 0,47 (m, 1 H), 0,22 - 0,24 (m, 9 H).
2” No Boê HN JE Intermediário 122 (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(4-etinil-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo [3,1,0]hexano-2-carboxilato Carbonato de potássio (194 mg, 1,40 mmol) foi adicionado a . uma solução de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-((trimetilsili)etinil)- 1H-imidazol-2- iI)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexano-2-carboxilato (970 mg, 2,81 mmol) em MeOH ] (30 mL) e a reação foi agitada sob nitrogênio e então aquecida a 50ºC (tem- —peratura do banho) por 4 horas. A reação foi concentrada para -5 mL de volume, diluída com DCM (-40 mL) e lavada com salmoura saturada 4 (-20 mL). Os orgânicos foram secos (MgSO;y), filtrados e concentrados para um sólido castanho. Este material foi purificado através de BIOTAGE? Horizon (40 g de SiOz, carregada com DCM, EtOAc 3545%/hexanos) para dar (1R3S,5R)-ferc-butil 3-(5-etinil-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclof3,1,0]Jhexano-2- carboxilato (747 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 2,866 min; m/z 272,12 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x60mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 200 nM. As condi ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B
' 367/563 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos em que o Solvente A era MeEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HSO 5% / Me- OH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 7,18 (s amplo, 1 H), 4,59 (s amplo, 1 H), 3,36 - 3,64 (m, 2 H), 2,46 (dd, J=13,2, 8,9 Hz, 1 H), 2,18 - 2,31 (m, 1 H), 1,64 - 1,74 (m, 1 H), 1,48 - 1,45 (m, 9 H), 0,83 (dt, J=8,5, 5,8 Hz, 1 H), 0,56 (s am- plo, 1H). Esquema 32 So LO Meo maneio " a Intermeciário 420 ser Intermediário 123 « à RECO % N%R Intermediário 124 Exemplos - ” Pee DRE Be AND CC A. fr Intermediário 123 terc-butil/ (1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-(ferc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0jhex-3-iI)-1H-imidazol-4-i)etinil)-2-naftil)- 1H-imidazo!- 2-0-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Nitrogênio foi borbulhado em uma solução de (1R,38,5R)-ferc- butil/ 3-(5-(6-bromonaftalen-2-il)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano- 2-carboxilato (400 mg, 0,880 mmol), (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(5-etinil-1AH- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (313 ma, 1,14 mmol) e Cu(ll (8,4 mg, 0,044 mmol) em trietilamina (0,37 mL, 2,6 mmol) e DMF (8 mL) por 10 minutos.
Então Pd(PPh3)4 (50,9 mg, 0,044 mmol) foi adicionado,
' 368/563 nitrogênio foi borbulhado através da mistura de reação por 1 minuto e então o frasco foi vedado e aquecido a 50ºC por 16 horas.
A reação foi concentra- da para vácuo alto e os sólidos residuais foram triturados com EtOAC (-5 mL) e coletados através de filtragem (enxaguando com EtOAc e hexanos) para dar ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)- 2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-1 H-imidazol-2-i1)-2- azabiciíclol3,1,0]hexano-2-carboxilato (595 mg) como um sólido amarelo- claro.
O material foi usado sem purificação adicional.
Tempo de retenção de LC-MS 3,140 min; m/z 647,35 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x560mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos em que o Solvente A era MeOH . 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados ' usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. dr . Rn H = NA, Na Intermediário 124 (1R,3S,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,38S,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hexan-3- iI)-1H-imidazol-4il)etinil)naftalen-2-i1)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano HCI 4M (1,546 mL, 6,18 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicar- —bonil)-2-azabicíclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1H-imidazol- 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (200 mg, 0,309 mmol) em dio- xana (3 mL) e a reação foi vigorosamente agitada por 4 horas.
A pasta fluida
: 369/563 da reação foi concentrada para dar um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(6-((2- ((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)naftalen-2- iN)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (177 mg) como um sólido ama- relo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,403 min; m/z 893,29 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma coluna PHENOMENEXº?
Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Sol-
vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICRO-
MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) d ppm 8,42 (s, 1 H), 8,16 (s, 2 H), 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,03 (d,
- J=8,8 Hz, 1 H), 7,97 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,66 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,01 (dd, 110,8, 7,8 Hz, 1 H), 4,78 (dd, J=10,8, 8,3 Hz, 1 H), ' 3,57 - 3,77 (m, 2 H), 3,50 - 3,56 (m, 1 H), 2,61 - 2,92 (m, 4 H), 2,13 - 2,21 (m, 1H,2,06-2,13(m, 1H), 1,25 (ddd, J=7,8, 5,0, 2,5 Hz, 1 H), 0,99 - 1,14 (m, 2H.
Esquema 33 Se ão so o Ee er 11, 10%PAC Intermediário 425 PF ImooRs Y
: 370/563 nodos | DER OMF ot os | E ore oe Ns N Hoc NA | ; O ANA o js ES SS Í D-ODPR AA qu Oo As > FA %-R NA gun, Nao po POSTS RA POSTAL 4 NA CIÁN eos a VOO AL
E Intermediário 125 (1R,3S8,5R)-Benzil — 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicar- ' 5 —bonil-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-iYfenil)-1H- : imidazoi-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Nitrogênio foi borbulhado em uma solução bifásica de (1R,3S, S5R)-benzil 3-(5-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iN)Yfenil)- 1H-imida- zol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (preparada de uma maneira análoga ao Intermediário 26) (2,0 g, 4,12 mmol), (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(5- (86-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (1,872 g, 4,12 mmol) e Na;CO; (2,184 g, 20,60 mmol) em uma mistura de EtOH (16,0 mL), tolueno (16,0 mL) e água (16,0 mL) por 15 minu- tos. Então, PA(PPh3a)a (0,143 9, 0,124 mmol) foi adicionado, a reação rece- beu fluxo de nitrogênio, foi vedada e então aquecida a 95ºC por 10 horas. À pasta fluida bruta foi diluída com água (-20 mL) e extraída com EtOAc (-100 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca (MgSO4), filtrada e concentrada para uma espuma amarela. Este material foi dissolvido em uma quantidade mínima de DCM e purificada em uma BIOTAGE? Horizon (110 g de SiO,, EtOAc 70-85%/hexanos) para dar (1R,3S,5R)-benzil 3-(5-(4-(6-(2-
' 371/563 ((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i)-1H- imidazol-5-il)naftalen-2-i)fenil)- 1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (2,257 g) como uma espuma solidificada amarelo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 4,158 min; m/z 733,17 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manuten- ção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulveriza- ção *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,17 (s amplo, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,86 - 7,94 (m, 2 H), 7,71 - 7,88 (m, 6 H), 7,44 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,20 (s - amplo, 5 H), 5,14 (d, J=12,3 Hz, 1 H), 4,91 - 5,05 (m, 1 H), 4,63 - 4,77 (m, 1 H), 3,55 - 3,69 (m, 2 H), 3,29 - 3,34 (m, 1 H), 2,46 - 2,59 (m, 2 H), 2,29 - 2,44 Ú (m, 2 H), 1,686 - 1,80 (m, 2 H), 1,30 (s amplo, 9 H), 0,80 - 0,93 (m, 2 H), 0,61 (samplo,2H). 4 NA (> 7 NH Boc
EXDAXAO A Sã Intermediário 126 (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-(8-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1 O]hexan-3-il)-1 H-imidazol-4-il)fenil)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Uma mistura de reação de (1R,5R)-benzil 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S, — 5R)-2-(tferco-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i)-1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-il)Yfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato (0,305 g, 0,416 mmol) e NaHCO, (0,070 g, 0,832 mmol) em MeOH (15 mL)
' 372/563 foi carregada com Pd/C 10% (0,022 g, 0,021 mmol). A suspensão resultante recebeu fluxo de vácuo com Nº (3X) e posta sob 1 atm de H? (balão) por 3 horas em temperatura ambiente. A mistura foi então filtrada através de uma almofada de terra diatomácea (CELITE?) e concentrada sob vácuo. Um sóli- do branco esbranquiçado correspondendo a (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-(6-(4- (2-((1R,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)fenil)naftalen-2-i1)- 1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (0,235 g) foi recu- perado e usado sem purificação adicional. LC/MS [M+H]*= 599; Tr= 1,96 min é produto. Coluna Luna 3u C18 de 2x50mm; % de B inicial: O, % de B Final:
100. Solvente A: Acetonitrila 10% / HO 90% + TFA 1%; Solvente B: Acetoni- trila 90%/ H2O0 10% + TFA 1%; taxa de fluxo 4 ml/min. Tempo de realização: 5 min. Pureza = 94 %. '*H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 12,00 (2H, s amplo), 8,11 - 8,32 (3 H, m), 7,88 - 8,02 (5 H, m), 7,72 - 7,88 (9 H, m), 7,63 (4 H, s amplo), 4,64 (2 H, s amplo), 4,42 (1 H, t, /=7,93 Hz), 3,97 - 4,18 (1 H, m),3A45(1H,s amplo), 3,17 (3H, s), 2,96 (1 H, dd, J=13,43, 6,71 Hz), 2,08 - 2,43 (6 H, m), 1,66 (2 H, s amplo), 1,07 - 1,50 (20 H, m), 0,81 - 0,89 (3H, m), . 0,77 (1 H, s amplo), 0,45 - 0,61 (3 H, m), 0,30 (1H, s amplo). a
ABOODS NS
N N No Y ENZ O CC o. o Intermediário 127 (1R,38S,5R)-fero-butil 3-(5-(6-(4-(2-((1R,38,5R)-2-((S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-4- ilfenidbnaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato HATU (0,164 g, 0,432 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(5-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo(3,1,0]hexan-3-il)- 1H-imidazol-S-iDfenil)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexa- no-2-carboxilato (0,235 g, 0,392 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- —metilbutanoico (0,069 g, 0,39 mmol) e DIEA (0,137 mL, 0,785 mmol) em DMF (10 mL) e a solução amarela resultante foi agitada da noite para o dia
' 373/563 em temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em metanol, filtrado e purificado através de HPLC pre- parativa (Solvente A: MeOH 10% / água 90% / TFA 0,1%; Solvente B; MeOH 90% / água 10% / TFA 0,1%; Coluna: Sunfire Prep MS 5u C18 de 30x100 mm; Comprimento de onda: 200 nM; Taxa de fluxo: 30 mi/min; Gradiente: B 0% para B 100% durante 30 minutos com um tempo de manutenção de 2 minutos) para dar um sal de TFA de (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-(4-(2-((1R, 3S8,5R)-2(S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclof3,1,0] hexan-3-il)-1H-imidazol-5-iN)feniNnaftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo [3,1,0]hexano-2-carboxilato (0,10 gq) como um sólido branco. LC/MS [M+H]'= 756; Tr= 2,14min é produto. Coluna Luna 3u C18 de 2x50mm; % de B inicial: O, % de B Final: 100; Solvente A: Acetonitrila 10% / HO 90% + TFA 1%; Solvente B: Acetonitrila 90%/ HO 10% + TFA 1%; taxa de fluxo 4 ml/min. Tempo de realização: 5 min. Pureza = 96 %. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) ppm 14,60 (1 H, s amplo), 8,39 (3 H, d, J=4,88 Hz), 8,09 - 8,24 (A H, m), 7,99 - 8,08 (6 H, m), 7,89 - 7,98 (5 H, m), 7,27 (1 H, d, J=8,55 Hz), 4,98 - - 5,07 (1 H, m), 4,84 (1 H, s amplo), 4,42 (1 H, t, J=7,32 Hz), 3,74 (1 H, sam- plo), 3,55 (4 H, s), 2,55 (2 H, d, J=9,77 Hz), 2,32 - 244 (3 H, mM), 2,13 (1 H, i dq, J=13,43, 6,71 Hz), 1,94 (1 H, dt, J=13,28, 6,79 Hz), 1,75 (1 H, dt, J=12,89,6,22 Hz), 1,40 (4 H, d, J=10,07 Hz), 1,11 - 1,30 (10 H, m), 0,90 - 1,00 (5 H, m), 0,73 - 0,88 (10 H, m). dio, ATBODR:
OTA o o EN H >. XNH nt -—o Intermediário 128 Metil — (S)-1-((1R,38,5R)-3-(4-(4-(8-(2((1R,38,5R)-2-azabiciclo [3,1 ,O]Jhexan-3-il)-1H-imidazol-5-iNnaftalen-2-il)fenil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-aza- biciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato HCI AN em dioxana (2 mL, 8,00 mmol) foi adicionado a uma so- lução agitada de um sal de TFA de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-(4-(2-
((1R,38,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazoLl-5-ilYfenil)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2- i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (0,10 g, 0,12 mmol) em CHzCI,; (20 mL) e a suspensão amarela resultante foi agitada em temperatura ambiente por2 horas. A reação foi concentrada sob vácuo e o resíduo resultante foi triturado com Et2O para dar um sal de HCl de HCI de metil (S)-1-((1R,3S8,5R)- 3-(9-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexan-3-iI)- 1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-il)fenil)-1H-imidazo!-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-i1)-3-metil-1- —oxobutan-2-ilcarbamato (47 mg) como um sólido amarelo. LC/MS [M+H]"=656; Tr=1,73 min é produto. Coluna Luna 3u C18 de 2x50mm; % de B inicial: O, % de B Final: 100; Solvente A: Acetonitrila 10%/ HO 90% + TFA 1%; Solvente B: Acetonitrila 90%/ 10% HO + TFA 1%; taxa de fluxo 4 ml/min. Tempo de realização: 5 min. Pureza = 95 %. *H RMN (500 MHz, DMSO-ds) ô ppm 14,47 - 15,18 (2 H, m), 9,77 - 10,61 (2 H, m), 8,30 - 8,42 (2 H, m), 8,17 (1 H, s), 7,93 - 8,10 (10 H, m), 7,27 (1 H, d, J=8,55 Hz), 5,08 (1 - H, t, J=7,93 Hz), 4,71 (1 H, t, /=8,39 Hz), 4,40 - 4,46 (1 H, m), 3,77 (1 H, s amplo), 3,52 - 3,58 (3 H, m), 3,38 - 3,44 (1 H, m), 2,52 - 2,61 (3 H, m), 2,39 (1 H, dt, /=13,58, 6,64 Hz), 2,14 - 2,21 (1 H, m), 1,94 (2 H, dd, J=8,24, 4,88 Hz) 1,15(1H,d,J=5,80 Hz), 0,93 (4 H, d, J=6,71 Hz), 0,75 - 0,89 (6 H, m). 2d z NnZ
UF Intermediário 129 (1R,38S,5R)-Benzi —* 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S8,5R)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-3-il)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)fenil)- 1 H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexano-2-carboxilato Uma solução de HCI 4,0M (1,167 mL, 4,67 mmol) em dioxana foi adicionada a uma solução agitada de (1R,3S,5R)-benzil 3-(5-(4(6-(2((1R, 38,5R)-2-(ferc-butoxicarbonit)-2-azabicicto[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-iNfenil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato
' 375/563 (228 mg, 0,311 mmol) em dioxana (3 mL) e a reação foi agitada vigorosa- mente em temperatura ambiente por 3 horas.
A reação foi concentrada para dar um sal de HCI de (1R,38,5R)-benzil 3-(5-(4-(8-(2-((1R,38,5R)-2-azabi- ciclo[3,1,0]Jhexan-3-iI)-1H-imidazol-5-iN)naftalen-2-i)fenil)- 1H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo(3,1,0)hexano-2-carboxilato (233 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,988 min; m/z 633,18 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mLi/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma- nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5%/MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulve- - rização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,44 (s, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 8,08 - 8,18 (m, 3 H), 7,92 - 8,02 (m, 4 H), 7,84 (s amplo, 3 H), 7,31 (s amplo, 5 H), : 5,21 (d, J=12,1, 1 H), 4,95 - 5,05 (m, 2 H), 4,80 - 4,91 (m, 1 H), 3,70 - 3,77 (m,1H) 3,59-3,67 (m, 1H), 2,77 -2,93 (m, 2 H), 2,74 (dd, J=13,4, 9,2 Hz, 1H), 2,46 (dt, J=13,5, 6,7 Hz, 1 H), 2,12 - 2,22 (m, 1 H), 1,83 - 1,96 (m, 1H), 1,27 - 1,35 (m, 1 H), 1,09 (q, J=7,9 Hz, 1 H), 0,95 (ddd, J=8,7, 5,9, 5,8 Hz, 1 H), 0,75 - 0,83 (m, 1 H). o 4 o HNA Ni A COCIE Ta intermediário 130 (1R,3S,5R)-Benzil 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicar- — bonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-imidazol-4- iNnaftalen-2-iDfenil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato
' 376/563
HATU (203 mg, 0,533 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de (1R,5R)-benzil 3-(5-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3- i)-1H-imidazol-S-i)naftalen-2-il)fenil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano-2-carboxilato (225 mg) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbu- tanoico(93mg, 0,53 mmol) em DMF (3 mL) e DIPEA (0,37 mL, 2,1 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas.
À reação bruta foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio e o resíduo foi dissolvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tam- pão de acetato de amônio) para dar (1R,5R)-benzil 3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)
-2-((8)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexan-3- il)-1H-imidazol-S-il)naftalen-2-i)fenil)- 1H-imidazol-2-10)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano-2-carboxilato (200 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LO-MS 4,053 min; m/z 790,25 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- - ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B ' 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nutoeum tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 5% / H2O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 8,28 (s, 2 H), 8,13 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,08 (d, J=8,8Hz,1H),7,94-8,02 (m, 4H), 7,76 - 7,92 (m, 3 H), 7,85 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,28 (s amplo, 5 H), 5,21 (d, /=12,1 Hz 1 H), 5,16 (dd, J=9,2, 6,9 Hz, 1 H), 4,97 (t, u=8,2 Hz, 1 H), 4,57 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 3,78 - 3,87 (m, 1 H), 3,68 (s, 3 H), 3,64 - 3,77 (m, 2 H), 2,66 - 2,77 (m, 2 H), 240 - 2,56 (mM, 2H), 2,14 - 2,25 (m, 1 H), 2,05 - 2,14 (m, 1 H), 1,87 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 1,06 - 1,16 (m,1H) 1,02 (d,J=6,8Hz,3H), 0,94 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,87 - 0,99 (m, 2
H), 0,74 - 0,82 (m, 1 H).
, 377/563 . or 2 y o Ho À, No kt Intermediário 131 Metil — (S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-i)fenil)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-iicarbamato Paládio sobre carbono 10% (100 mg, 0,094 mmol) foi adicionado auma solução de (1R,5R)-benzil 3-(5-(4-(8-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5- iNnaftalen-2-ilYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato (190 mg, 0,241 mmol) e Na2CO; (50 mg, 0,472 mmol) em THF (10 mL)e à mistura de reação recebeu fluxo a vácuo de nitrogênio (3X) e então com hi- drogênio (5X). À mistura de reação foi deixada agitar sob balão de hidrogê- nio por 2 horas, filtrada em terra diatomácea (CELITE?) e concentrada.
O Ú resíduo foi novamente submetido às condições de reação (50 mag de Pd/C - 10% usados) da noite para o dia em temperatura ambiente antes de ser fil- trado em terra diatomácea (CELITES) e concentrado.
O resíduo foi dissolvido em DMSO/MeOH, filtrado e purificado através de HPLC preparativa (Me- OH/H;O com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil (28)-1-((1R,3S, S5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazo|-5-il) fenil)naftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1- oxobutan-2-ilcarbamato (55 mg). Tempo de retenção de LC-MS 2,147 min; mi/z656,21(MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo li- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% /Solvente B0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de a- mônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppmB8B28(s,1H) 8,24(s,1H), 8,12 (d, J=8,9 Hz, 1 H), 8,07 (d, J=8,9 Hz, 1 H), 7,91 - 8,01 (m, 4 H), 7,83 - 7,90 (m, 3 H), 7,66 (s, 1 H), 5,17 (dd, J=9,2, 7,0 Hz, 1 H), 4,67 (dd, J=10,7, 7,6 Hz, 1 H), 4,58 (d, J=6,7 Hz, 1 H), 3,82 - 3,87 (m, 1 H), 3,69 (s, 3 H), 3,44 - 3,49 (m, 1 H), 2,59 - 2,77 (m, 3 H), 2,48 - 2,56 (m, 1 H), 2,16 - 2,25 (m, 1 H), 2,03 - 2,15 (m, 2 H), 1,21 (ddd, J=7,5, 49,2,6Hz,1H),1,09-1,15(m, 1H), 1,04 (d, J=6,7 Hz, 3 H), 0,98 - 1,03 (m, 1H), 0,95 (d, J=6,7 Hz, 3 H), 0,89 - 0,95 (m, 1 H). Esquema 34 1: Paciidppf) " AR, A o ” ne Intermedisito 132 Intermediário 193 Exemplos es <> 7 Nº Bo sé DA) (e Intermediário 132 (1R,1'R,38,3'S,5R,5'R)-ferc-butil — 3,3/-(4,4/-(2,2'-binaftil-6,6'-diil) bis(1H-imidazol-4,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato) Nitrogênio foi borbulhado em uma solução de (1R,38,5R)-terc- butil 3-(4-(6-bromonaftalen-2-iI)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano- 2-carboxilato (250 mg, 0,550 mmol), 4,4,4' 4',5,5,5',5'-octametil-2,2"-bi(1,3,2- dioxaborolano) (69,9 mg, 0,275 mmol), 1,1"-bis-(difeniltfosfino)-ferroceno (15,42 mg, 0,028 mmol) e K2CO; (228 mg, 1,651 mmol) em DMSO (12 mL) por 10 minutos.
Então bicloreto de 1,1'-bis-(difenilfosfino)-ferroceno)paládio (22,63 mg, 0,028 mmol) foi adicionado à mistura de reação e o borbulha- mento de nitrogênio foi continuado por 10 minutos antes da reação ter sido
] 379/563 vedada e então aquecida a 110ºC por 20 horas.
A reação foi dividida entre água (60 ml) e DCM (60 mL) e os orgânicos foram separados, secos (Mg- SO;), filtrados e concentrados.
O resíduo bruto foi purificado através de Bl- OTAGEº? Horizon (40 g de SiO,, EtOAc 70-100%/hexanos) para dar (IR1R38,3'S,5R,5'R)-ferc-butil 3,3'-(4,4'-(2,2'-binaftil-S8,6'-diiDbis(1H- imidazol-4,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato) (67 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 4,348 min; m/z 749,29 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x60mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente À era MEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. - Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,22 (s, 4 : H), 7,91 - 8,02 (m, 6 H), 7,87 (d, J-8,5 Hz, 2 H), 7,48 (s amplo, 2 H), 4,68 - 4,77(m 2H),3,61(s amplo, 2 H), 2,56 (dd, J=13,1, 8,8 Hz, 2 H), 2,33 - 2,43 (m, 2 H), 1,70 - 1,79 (m, 2 H), 1,31 (s amplo, 18 H), 0,87 (dt, J=8,5, 5,8 Hz, 2 H), 0,63 (s amplo, 2 H). 7 NH ” TIA de Intermediário 133 6,6-Bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazo!- 4-11)-2,2"-binaftil HCI 4,0M (1,0 mL, 4,00 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução agitada de (1R,1'R,3S,3'S,S5R,5'R)-ferc-butil 3,3'-(4,4-(2,2'-binaftil- 6,6'-diil)bis(1H-imidazol4,2-diil))bis(2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato)
' 380/563 (62mg, 0,083 mmol) em dioxana (2 mL) e a pasta fluida de reação foi agitada vigorosamente por 3 horas.
A pasta fluida foi diluída com MeOH e concen- trada até secar para dar um sal de HCl de 6,6-bis(2((1R,3S,5R)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2,2"-binaftil (58 mg) como um sólido amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 3,971 min; m/z 547,25 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H2O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,44 (s,2 H), 8,38 (s, 2 H), 8,12 - 8,19 (m, 6 H), 8,09 (dd, 2 H), 7,97 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 2 H), 4,97 (dd, J=10,5, 8,1 Hz, 2 H), 3,62 - 3,66 (m, 2 H), 2,79 - 2,89 (m, 4 S H), 2,15 - 2,22 (m, 2H), 1,29 - 1,34 (m, 2H), 1,11 (qa, J/=7,9 Hz, 2H). Esquema35 Bos.
Sn(nBú); nBS' Br Pd Dá Poa = o o.
AH Intemeiiao FP ex C; PACIAPPIAz al Br DIPEA oxtas Tnemmedisio 134 Intermediário 135 Hen + E ar NAM aro ASR TAT Time SAIR Inienmediário 26. Intermesiário 136 Intermeciário 137 * E a = AH qa % = intermediário 138 * intermediário 139 +
' 381/563 — OEt
ARA Intermediário 134 6-Bromo-2-(1-etoxivinil)quinolina Diclorobis(trifeni!fosfino)-paládio(ll) (0,289 g, 0,412 mmol) foi a- dicionadoa uma solução de 6-bromo-2-cloroquinolina (1,0 g, 4,1 mmol) e tributil(1-etoxivini)estanana (1,79 g, 4,95 mmol) em dioxana (8 mL) e a mis- tura foi agitada a 100ºC por 5 horas, o produto desejado foi identificado atra- vês de LCMS. A mistura de reação bruta foi concentrada e purificada através ' de cromatografia rápida de sílica-gel (eluída com hexanos/DCM 1:1) para | 10 daro produto 6-bromo-2-(1-etoxivinil)quinolina (720 mg) como sólido branco. 7 Tempo de retenção LC-MS 4,091 min; m/z 279,84 (MH+). Dados de LC fo- ram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de > 15 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Soivente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma- nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H205%/MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulve- rização. Br,
OR Br N o Intermediário 135 2-Bromo-1-(6-bromoquinolin-2-il)etanona NBS (407 mg, 2,287 mmol) foi adicionado a uma solução de 6- bromo-2-(1-etoxivinil)quinolina (530 mg, 1,51 mmol) em THF e água (2,5 mL) eamistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de
' 382/563 reação foi dividida entre EtOAc e salmoura e a camada orgânica foi concen- trada. O material bruto foi purificado através de cromatografia rápida de síli- ca-gel (eluída com Et,O/hexanos, gradiente de a partir de 0 a 5% de Et,O) para dar 2-bromo-1-(6-bromoquinolin-2-il)etanona (380 mg) como sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 3,988 min; m/z 329,84 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 de 2,0x50mm u- sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de08ml/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo . de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Sol ' vente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS » 15 foram determinados usando um MICROMASS?” Platform LC em modo de eletropulverização. ] Boc = O N.,
ASR PAX Br N oo Intermediário 136 (1R,3S,5R)-3-(2-(6-Bromoquinolin-2-iN)-2-0x0etil) 2-ferc-butil/ 2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato DIPEA (0,21 mL, 1,2 mmol) foi adicionado a uma solução de 2- bromo-1-(8-bromoquinolin-2-il)etanona (268 mg, 0,815 mmol)) e ácido (1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (204 mg, 0,896 mmol) em acetonitrila (8 mL) e a mistura de reação foi agita- da em temperatura ambiente por 16 horas. À mistura de reação foi diluída com NaHCO; aquoso saturado (5 mL) e extraída com EtOAc (2 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Mg- SO), filtradas e concentradas. O produto bruto foi purificado através de cromatografia rápida de sílica-gel (usou DCM como solvente de carga, eluí-
' 383/563 da com Et;O/hexanos, gradiente de a partir de 10% a 30% de Et5O) para dar (1R,3S,5R)-3-(2-(6-bromoquinolin-2-i1)-2-0x0etil) 2-ferc-butil 2-azabíciclo [3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (332 mg) como sólido branco. Tempo de re- tenção de LC-MS 4,283 min; m/z 476,88 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- teB100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 Ú minuto e uma análise de tempo de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH - 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização.
: Br N q fe Intermediário 137 terc-butil / (1R,38,5R)-3-(4-(6-bromo-2-quinolinil)- 1H-imidazol-2- i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato Acetato de amônio (990 mg, 12,8 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R,38,5R)-3-(2-(6-bromoquinolin-2-i1)-2-0x0etil) 2-ferc-butil 2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (407 mg, 0,856 mmol) em tolueno (10MmL)ea mistura foi agitada a 120ºC por 3 horas. À mistura de reação foi diluída com NaHCO;z aquoso saturado (10 mL) e extraída com EtOAc (50 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca (MgSO;), filtrada e concentrada. O material bruto foi purificado através de cromatografia rápida de sílica-gel (eluída com EtOAc/hexanos 1:1) para dar ferc-butil (1R,38,5R)- — 3-(4-(6-bromo-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (272 mg) como sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LC- MS 3,306 min; m/z 456,99 (MH+). Dados de LC foram registrados em um
' 384/0563 cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- ' NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeEOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B foi HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN i (400 MHz, clorofórmio-d) à ppm 8,08 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,95 (d, J=2,2 Hz, 1 - H), 7,78 (dd, J=8,9, 2,2 Hz, 1 H), 7,73 - 8,14 (m, 3 H), 4,86 - 4,98 (m, 1 H), 3,70 - 3,82 (m, 0,5 H), 3,26 - 3,39 (m, 1 H), 2,46 (dd, /=13,3, 9,3 Hz, 1 H), 1,84 - 1,91 (m, 0,5 H), 1,74 - 1,84 (m, 1 H), 1,52 (s, 9 H), 0,87 - 0,97 (m, 1 " 15 H)048-0,61(m 1H). 7 - SA NAN so see DOS AL uf Intermediário 138 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,38,5R)-2-(terc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-4-i)Yfenil)-2-quinolinil)-1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Pd(OAc)> (7,40 mg, 0,033 mmol) foi adicionado a uma solução de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-bromo-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (150 mg, 0,329 mmol), (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iDfenil)-1H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (149 mg, 0,329 mmol), diciclo-hexil (2',6-dimetoxibifenil-2-i)fosfina (27,0 mg, 0,066 mmol) e K.CO;3 (137 mg, 0,988 mmol) em THF (2 mL) e água (0,50 mL) e a mistura de reação foi agi- tada a 110ºC por 2 horas.
A mistura de reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H;XO-MeOH com tampão de
NH.OAc 10mM) para dar ferc-butil (1R,3S8,5R)-3-(4-(68-(4-(2-((1R,3S,5R)-2- (terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i)fenil)-2- quinolinil)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciíclo[3,1,0)hexano-2-carboxilato (140 mg) como sólido amarelo brilhante.
Tempo de retenção de LOC-MS 3,150 min; m/z 700,36 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / —Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- Ú ente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise - de 5 minutos em que o Solvente À era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Plat- * 15 form LC em modo de eletropulverização. ” (O OO A nf Intermediário 139 2-(2((1R,38,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-6- (4-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iN)-1H-imidazol-4-iNfenil)quinolina Uma solução de HCl 4M (1 mL, 4,00 mmol) em dioxana foi adi- cionada a uma suspensão de ferc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(8-(4-(2-((1R,3S,5R)- 2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo|3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-4-iNfenil)-2- quinolinil)-1H-imidazo|-2-i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (130 mg, 0,186 mmol) em dioxana (3 mL), MeOH (0,5 mL) e DCM (3 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A reação foi concentrada para dar um sal de HCI de 2-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iN)-1H- imidazol-41)-6-(4-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciíclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazo1-4- iNfenil)quinolina (140 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC- MS 2,063 min; m/z 500,37 (MH+). Dados de LC foram registrados em um
' 386/563 cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos em que o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H i RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 9,09 (d, J=9,0 Hz, 1 H), 8,66 (s, 1 H), 8,56 - - 8,62 (m, 2 H), 8,47 - 8,53 (m, 2 H), 8,07 (s, 1 H), 8,02 - 8,06 (m, 4 H), 4,97 (dd, J=10,8, 8,0 Hz, 1 H), 3,65 - 3,71 (m, 1 H), 3,55 - 3,65 (m, 2 H), 2,73 - 2,86 (m, 3 H), 2,61 - 2,72 (m, 1 H), 2,07 - 2,20 (m, 2 H), 1,25- 1,35 (m, 2H), ' 15 107(t 2H).
: Esquema 36 PatPPhA), er A8132005 O iz 9 e : Intermediário 10 : Intermedianio 141 oe do N o ao E Intermenana asa CM Belos no
CID Intermediário 140 1-(4-(5-Acetilnaftalen-1-ifenil)etanona Uma solução de carbonato de sódio (2,55 9, 24,09 mmol) em
, 387/5683 água (20 mL) foi adicionada a uma solução de 1-(5-bromonaftalen-1-il)>eta- nona (1,2 g, 4,8 mmol) e ácido 4-acetilfenilborônico (1,03 g, 6,26 mmol) em tolueno (20 mL) e etanol (20 mL) e então solução heterogênea foi vigorosa- mente agitada com nitrogênio borbulhante por 15 minutos. Então PAd(PPh3), (0,1119g,0,096mmol) foi adicionado e o recipiente de reação foi vedado e aquecido em refluxo por 6 horas. A reação foi esfriada e concentrada até secar. O resíduo bruto foi absorvido em EtOAc (-150 mL) e água (-100 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmou- ra, seca (M9gSO;,), filtrada e concentrada para um sólido laranja. O sólido la- ranja foi purificado em uma BIOTAGE? Horizon (40 g de SiO2s, DMC) para i dar 1-(4-(5-acetilnaftalen-1-iNfeni)etanona (1,31 9) como um sólido esbran- - quiçado. Tempo de retenção de LC-MS 3,736 min; m/z 289,19 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm u- ' 15 sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de : detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 80% / ácido trifluoracético 0,1% e o Sol- vente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,75 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,11 (d, J=8,5 Hz, 2 H), 7,99 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,94 (dd, J=7,2, 1,1 Hz,1H), 7,67 (dd, J=8,5, 7,0 Hz, 1 H), 7,58 (d, J-8,3 Hz, 2 H), 7,45 - 7,51 (m, 2 H), 2,79 (s, 3H), 2,70 (s, 3H). Br or
DIOS Intermediário 141 2-Bromo-1-(4-(5-(2-bromoacetil)naftalen-1-iNfenil)etanona
" 388/563 Uma solução de bromo (0,47 mL, 9,1 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionada a uma solução de 1-(4-(5-acetilnaftalen-1-ilfeniletanona (1,285 9, 4,46 mmol) em DCM (20 mL) e a reação foi agitada em temperatura am- biente por 1 dia. A reação foi concentrada para um óleo taranja claro viscoso (1,929) Através de 'H RMN o produto principal parecia ser o produto de- sejado com picos correspondendo aos dois regioisômeros mono brominados (10%). O material foi usado sem purificação. . 1H RMN (400 MHz, clorofór- mio-d) 5 ppm 8,64 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 8,13 - 8,17 (m, 2 H), 8,05 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,94 (dd, J=7,2, 1,1 Hz, 1 H), 7,71 (dd, J=8,8, 7,0 Hz, 1 H), 7,60 - 7,64 (m,2H),7,48-7,55 (m, 2H), 4,60 (s, 2 H),4,53(s, 2H). i Boc : OQ 5, O Oo
IO - Boc Intermediário 142 (1R,38,5R)-3-(2-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-Butoxicarbonil)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carbonilóxi)acetiNnaftalen-1-i)fenit)-2-0xoetil) — 2- terc-butil 2-azabiciíclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxitato DIPEA (2,337 mL, 13,38 mmol) foi adicionado a uma solução de
15. 2-bromo-1-(4-(5-(2-bromoacetil)naftalen-1-i)feni)etanona bruta (1,99 g, 4,46 mmol) e ácido (1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo(3,1,0]hexano- 3-carboxílico (2,03 g, 8,92 mmol) em acetonitrila (S0mL) e a solução amare- lo-claro foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A reação foi concentrada para uma espuma solidificada amarela que foi purificada em uma BIOTAGES Horizon (SiO», EtOAc/hexanos) para dar (1R,38,5R)-3-(2- (4-(5-(2-((1R,38,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3- carbonilóxi)acetil)naftalen-1-iDfenil)-2-0xoetil) 2-ferc-butil 2-azabicíclo[3,1,0] hexano-2,3-dicarboxilato (2,95 g) como um sólido fofo branco. Tempo de retenção de LC-MS 4,363 min; m/z 737,38 (MH-). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de
] 389/563 UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minutoeumtempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era acetonitri- la 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,57 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,14 (d, J=8,0 Hz, 2H) 7,99-8,06(m,2H),7,68 (dd, J=8,8, 7,0 Hz, 1 H), 7,64 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,52 - 7,60 (m, 2 H), 5,60 - 5,70 (m, 1 H), 5,32 - 5,58 (m, 3 H), 4,24 - 4,34 - (m, 2 H), 3,38 - 3,49 (m, 2 H), 2,59 - 2,69 (m, 1 H), 2,38 - 2,55 (m, 3 H), 1,61 - 1,77 (m, 2 H), 1,47 (s amplo, 18 H), 0,81 - 0,94 (m, 2 H), 0,50 - 0,58 (m, 2 H). 7 dos Dn q av : ATA
OS MT ÇA) N Boc Intermediário 143 (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxi- carbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazo|-5-il)naftalen-1-i)fenil)-1 H- imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Uma solução de (1R,38,5R)-3-(2-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc- butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carbonilóxi)acetil)naftalen-1-il) fenil)-2-oxoetil) 2-ferc-butil 2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato (2,01 g, 2,72 mmol) e acetato de amônio (4,19 g, 54,4 mmol) em tolueno (40 mL) foi agitada e aquecida a 100ºC da noite para o dia. À reação foi concentrada até secar e os sólidos marrons foram divididos entre DCM (150 mL) e NaH- CO; aquoso saturado % (100 mL). Os orgânicos foram secos (MgSO4), fil- trados e concentrados. O material bruto não foi facilmente purificado através de cromatografia de coluna rápida de maneira que todas as frações conten-
] 390/563 do o produto desejado ou material de partida foram coletadas, concentradas e novamente submetidas às condições de reação (agora 110ºC da noite pa- ra o dia). A reação foi concentrada e os sólidos marrons foram divididos en- tre DOM (150 mL) e NaHCO; saturado % (100 mL). Os orgânicos foram se- cos (MgSO;), filtrados e concentrados.
Aproximadamente -30-35% do mate- rial foram purificados através de HPLC preparativa (dissolvidos em MeOH, filtrados, MeOH 80-100%/água, tampão de acetato de amônio) para dar (1R,38S,5R)-fero-butil 3-(5(4-(5-(2((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-5-il)naftalen-1-il)fenil)- H-imidazol-2- iN-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (148 mg) como um sólido amarelo.
Ú O material restante foi purificado através de HPLC preparativa (dissolvido - em MeOH, filtrado, MeOH 60-100%/água, tampão de TFA) para dar um sal de TFA (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicarbonil) -2-azabíiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-5-il)naftalen-1-iN)fenil)-1H-imida- . 15 Zz0l-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (299 mg). Tempo de reten- ção de LC-MS 3,100 min; m/z 699,56 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX?º Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- çõesde eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeêOH 10% 1 HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 8,29 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,90 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,83 (d, J=8,3 Hz, 2 H), 7,59 (dd, J=7,0, 1,0 Hz, 1 H), 7,53 (dd, J=8,5, 7,0 Hz, 1H), 7,43 - 7,50 (m, 4 H), 7,42 (s, 1 H), 7,23 (s, 1 H), 4,86 - 4,80 (m, 2 H), 3,60(samplo, 2H) 2,56 (dt,J=13,1,8,9 Hz, 2 H), 2,32 - 2,46 (m, 2 H), 1,70 - 1,78 (m, 2 H), 1,38 (s amplo, 18 H), 0,82 - 0,90 (m, 2 H), 0,63 (s amplo, 2 H).
, 391/563 H à
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AO LLT ZON
NH Intermediário 144 (1R,38,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-Azabiciclo[3,1,0]hexan-3- iN)-1H-imidazol-S-il)naftalen-1-il)fenil)- 1 H-imidazotl-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xano HCI 4M (0,757 mL, 3,03 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-(4-(5-(2((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicar- - bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-S-il) naftalen-1-ifeniN)-1H- imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (141 mg, 0,202 mmol) em dioxana (3,0 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 6 í horas. Os sólidos foram lavados dos lados do frasco com MeOH e a reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio para dar um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H- imidazol-4-il)naftalen-1-ilfenil)- 1H-imidazol|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (118 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,333 min; miz 499,57 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. Às condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm815(d,J=8,3Hz, 1H), 8,03-8,08 (m, 2 H), 8,01 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 7,95 (s, 1 H), 7,77 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 7,68 - 7,74 (m, 1 H), 7,65 (d, J=8,0 Hz,
2H),7,57 -7,64 (m, 2 H), 5,03 (t, J=9,4 Hz, 1 H), 4,97 (dd, J=10,8, 8,0 Hz, 1 H), 3,57 - 3,68 (m, 2 H), 2,76 - 2,89 (m, 4 H), 2,11 - 2,21 (m, 2 H), 1,27 - 1,34 (m, J=7,7, 5,1, 5,1, 2,6 Hz, 2H), 1,05 - 1,14 (m, 2H). Esquema 37 Fo o P oo Boc Fm MO OQeo E Imermeciano 1148 BM pipes ACN Intermediário 145 L: intermediário 146 e intermediário 147 i TO o O oo Bos
N CIO PEIO ' Boc Intermediário 145 ] (28,3aS,6aS)-2-(2-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-1-(terc-Butoxicarbonil) —-octaidrociclopenta[b]pirrol-2-carbonilóxi)acetil)naftalen-2-il)fenil)-2-0xoetil) 1- terc-butil hexaidrociclopentafb]pirrol-1,2(2H)-dicarboxilato DIPEA puro (0,068 mL, 0,388 mmol) foi adicionado a uma sus- pensão agitada de 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-iDfeniletanona (79 mg, 0,176 mmol) e ácido (28S,3aS,6aS)-1-(terc-butoxicarbonil) octaidroci- — clopenta[b]pirrol-2-carboxílico (90 mg, 0,353 mmol) em acetonitrila (1,5 mL) e clorofórmio (1,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente da noi- te para o dia. A mistura de reação foi evaporada até secar e então purificada através de silica-gel FCC (MeOH 3% em DCM) para dar o Intermediário 145 como um sólido castanho. Tempo de retenção de LC-MS: 2,480 min; m/z 793,7 (MH). A NH Boc Boc N Á Intermediário 146
' 393/563 (28,3aS,6aS)-ferc-butil 2-(4-(4-(6-(2((28,3aS,6aS)-1-(ferc-buto- xicarbonil)- octaidrociclopenta[b]pirrol-2-i1)-1H-imidazol-4-i)naftalen-2-i)fenil)- 1H-imidazol-2-il)hexaidrociclopenta[b]pirrol-1(2H)-carboxilato Uma suspensão agitada de (28,3aS,6aS)-2-(2-(4-(6-(2-((28,3aS, 6aS)-1-(terc-butoxicarbonil)octaidrociclopenta[b]pirrol-2-carbonilóxi)acetil) naftalen-2-il)fenil)-2-oxoetil) 1-ferc-butil hexaidrociclopenta[b]pirro|l-1,2(2H)- dicarboxilato (140 mg, 0,176 mmol) e acetato de amônio (272 mg, 3,52 mmol) em xileno (4 mL) foi aquecida a 140 ºC por 2 horas. À mistura de rea- ção foi esfriada para temperatura ambiente e diluída com EtOAc (20 mL) e lavada com NaHCO; saturado, água, salmoura e seca (Na-SO,) para dar um Ú sólido marrom que foi purificado através de sílica-gel FCC (MeOH 3-5% em - DCM) para dar o Intermediário 146. Tempo de retenção de LC-MS: 2,577 min; m/z 755,7 (M+H)*.
JF NH H . N Intermediário 147 (28,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-Octaidrociclopenta[b] pirrol-2il)-1H-imidazol-4-i)naftalen-2-iDfenil)-1H-imidazol-2-il)octaidrociíclo- penta[b]pirrol HCI AN em dioxana (20 equivalentes) foi adicionado a uma solu- ção de Intermediário 146 em um DCM e a mistura foi agitada em temperatu- ra ambiente por 2-3 horas. Tolueno anidro foi adicionado à suspensão ama- rela resultante e então evaporado até secar para dar o Intermediário 147 como um sólido bege e isolado como sal de 4HCI : Tempo de retenção de LC-MS: 2,343 min; m/z 555 (M+H)*. Esquema 38 PA Ro oa SE ato Br N a m— B N N AAA s
' 394/5683 “O, mo AN Eme QE PRI Is E Si a DR intemediaie tas Intermediario 122 Intermeciario 160 *
OI NE a O? A
E Intermediário 148 (1R,3S,5R)-3-(4-(6-Bromonaftalen-2-il)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabi- ciclo(3,1,0)hexano TFA (1,028 mL, 13,34 mmol) foi adicionado a uma solução de : (1R,3S,5R)-terc-butil — 3-(4-(S-bromonaftalen-2-i1)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabi- . ciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (Intermediário 120) (606 mg, 1,334 mmol) em DCE (20 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 ho- ras. Então mais TFA (1 mL) foi adicionado e a reação foi agitada em tempe- - ratura ambiente por 4 horas. A reação foi concentrada até secar e o óleo marrom bruto foi dissolvido em éter de dietila e concentrado sob vácuo (2X) para dar um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4-(6-bromonaftalen-2-i)-1H- imidazol|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (786 ma) como um sólido amarelo. O material foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 2,558 min; m/z 352,03, 354,05 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV- Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Sol- vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 MM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 10,55 (s amplo, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 7,93 (d, J=1,5 Hz, 1 H), 7,72 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,65 (d, J=8,8 Hz. 1 H), 7,59 (dd, J=8,8, 2,0
' 395/563 Hz, 1 H), 7,52 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 5,10 (dd, J=11,8, 7,3 Hz, 1 H), 3,49 - 3,54 (m, 1 H), 2,94 (td, J=12,7, 4,6 Hz, 1 H), 2,68 (dd, J=13,2, 7,2 Hz, 1 H), 2,08 - 2,14 (m, 1 H), 1,20 - 1,26 (m, 1 H), 1,00 - 1,09 (m, 1H). o O mo EN, ASI AN> fa Intermediário 149 ' 5 Metil (S)-1-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol- . 2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-iI)-3-metil-1 -oxobutan-2-ilcarbamato HATU (411 mg, 1,082 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4-(6-bromonaftalen-2-il)- 1H-imidazol-2-i1)-2- ' azabicíclo[3,1,0)hexano (525 mg, 0,502 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoico (190 mg, 1,08 mmol) em DMF (10 mL) e DIPEA ] (0,79 mL, 4,5 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas.
A reação foi diluída com EtOAc (-80 mL) e lavada com NaHCO; a- quoso saturado, água (30 mL) e salmoura (30 mL). Os orgânicos foram en- tão secos (MgSO;), filtrados e concentrados para um óleo marrom (625 mg). Este material foi purificado em uma BIOTAGE* Horizon (40 g de SiO,, EtO- Ac 40-80%/hexanos) para dar metil (S)-1-((1R,38,5R)-3-(4-(6-bromonaftalen- 2-1)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0])hexan-2-i1)-3-metil- 1-oxobutan-2- ilcarbamato (412 mg) como um vidro amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,843 min; m/z 511,24, 513,12 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1,0 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH
- 396/563 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização.
; LR di Be unZz — O A
E Intermediário 150 (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(4-((6-(2-((1R,3S8,5R)-2-((S)-2-(metoxi- - 5 —carbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabicicio[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4- iNnaftalen-2-il)etinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato ' Nitrogênio foi borbulhado em uma mistura de (1R,3S,5R)-terc- butil 3-(5-etinil-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclof3,1,0]hexano-2-carboxilato (In- : termediário 122) (118 mg, 0,432 mmol), metil (S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6- bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-ii)-3-metil-1- 7 oxobutan-2-ilcarbamato (170 mg, 0,332 mmol) e Cul (3,17 mg, 0,017 mmol) em DMF (4 mL) e TEA (0,14 mL, 0,10 mmol) por 15 minutos. Então PA(PPh3)4(19,2 mg, 0,017 mmol) foi adicionado e o recipiente de reação foi vedado e aquecido a 60ºC da noite para o dia. A reação foi esfriada e então mais Cul(5mg)e TEA (100 ul) foram adicionados à reação e nitrogênio foi borbulhado na reação por 15 minutos. Então mais Pd(PPhz3) 4 (12 mg) foi adi- cionado e a reação foi vedada e agitada a 70ºC por 24 horas. A reação foi concentrada sob vácuo alto e o resíduo foi dividido entre DCM (25 mL) e á- gua (25 mL). A parte aquosa foi extraída com DCM (2 x 10 mL) e os orgâni- cos combinados foram lavados com salmoura (-20 mL), secos (MgSO;), filtrados e concentrados para um óleo escuro viscoso. O material foi dissolvi- do em MeOH, filtrado e purificado através de HPLC preparativa (Me- OH/água, tampão de acetato de amônio) para dar (1R,38S,5R)-ferc-butil 3-(4- ((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabi- ciclo[l3,1,0]hexan-3-i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)-1H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (187,4 mg) como um sólido amarelo. O
' 397/563 material foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 1,720 min; m/z 704,59 (MH+). Dados de LC foram registrados em um croma- tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV S emum comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 1,0 mL/min, um gradiente de Solven- te A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tem- po de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / H2O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- - MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. Esquema 39 Bo 2 Intermediário 118 Intermediário 451 Intermediário 162 AN " ue Dus eos = (99 A E 4 pa A * s A Intermediario 153 o ” Intermediário 154 O Boc
AS a ID O Intermediário 151 (28,58)-2-(2-(6-Bromonatftalen-2-i1)-2-0x0etil) 1-terc-butil 5-metil- pirrolidino-1,2-dicarboxilato ' DIPEA (0,823 mL, 4,71 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tadade 2-bromo-1-(6-bromonaftalen-2-il)etanona (Intermediário 118) (1,03 9, 3,14 mmol) e ácido (28,58)-1-(ferc-butoxicarboni!)-S-metilpirrolidino-2-car- boxílico (0,720 g, 3,14 mmol) em acetonitrila (50 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A reação foi concentrada até secar e purificada através de BIOTAGES? Horizon (40 g de SiO2, EtOAc 10- 20%/hexanos) para dar (28,58)-2-(26-bromonaftalen-2-1I)-2-0x0etil) 1-ferc-
' 398/563 butil 5-metilpirrolidino-1,2-dicarboxilato (1,09 g) como uma espuma amarela solidificada.
Tempo de retenção de LC-MS 4,413 min; m/z 476, 478,20 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10A8S equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético i 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. . Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,57 (s amplo, 1 H), 8,14 (d, J=1,5 Hz, 1 H), 8,01 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,96 (d, Je8,8 " 15 Hz,1H) 7,91 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,68 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1 H), 5,62 - 5,70 : (m, 1 H), 5,47 - 5,60 (m, 1 H), 4,46 (t, J=7,3 Hz, 1 H), 3,92 - 4,06 (m, 1 H), 2,26 - 2,37 (m, 2 H), 2,05 - 2,19 (m, 1 H), 1,67 - 1,82 (m, 1 H), 1,46 (d, J=6,8 Hz, 9 H), 1,30 (d, J=6,5 Hz, 3H). À Boc Br ( AS Intermediário 152 (28,5S)-terc-butil 2-(5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-i1)-5- —metilpirrolidino-1-carboxilato Acetato de amônio (3,79 g, 49,1 mmol) foi adicionado a uma so- lução de (28,58)-2-(2-(6-bromonaftalen-2-i1)-2-0x0etil) 1-ferc-butil S-metil- pirrolidino-1,2-dicarboxilato (1,17 g, 2,47 mmol) em tolueno (30 mL) e a rea- ção foi posta em um banho de óleo que tinha sido preaquecido para 100ºC e agitado neste temperatura da noite para o dia.
A reação foi deixada esfriar da noite para o dia, concentrada e dividida entre DCM (100 mL) e NaHCO; aquoso saturado % (75 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (-50 mL), seca (MgSO;), filtrada e concentrada para uma espuma castanha
' 399/563 solidificada.
Este material foi purificado em uma BIOTAGE? Horizon (160 g de SiO>, carregada com DCM, EtOAc 20-35%/hexanos) para dar (2S8,5S)- terc-butil 2-(5-(6-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol|-2-iN)-S-metilpirrolidino-1- carboxilato (893 mg) como uma espuma castanha solidifcada.
Tempo de retenção de LC-MS 3,410 min; m/z 456, 458,22 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À ' 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo - de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Sol- vente B era HO 10% / MeOH 90%/ ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS ] 15 foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de : eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,19 (s amplo, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,83 - 7,93 (m, 1 H), 7,76 - 7,83 (m, 2 H), 7,55 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,47 (s amplo, 1 H), 4,94 (s amplo, 1 H), 3,99 - 4,098 (m, 1 H), 2,22 - 2,36 (m, 2 H), 2,09 - 2,21 (m, 1 H), 1,72 (s amplo, 1 H), 1,42 (d, J=6,0 Hz, 3 H 1,34(samplo, 9H). 41 Nua O JF NH Boc Boc = ARE Intermediário 153 (1R,38S,5R)-terc-butil 3-(4-((6-(2-((28,58)-1-(terc-butoxicarbonil)- S-metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)- 1 H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Nitrogênio foi borbulhado em uma solução de (28,5S)-ferc-butil 2-(5-(6&-bromonaftalen-2-il)-1H-imidazol-2-i1)-S-metitpirrolidino-1-carboxilato (127 mg, 0,277 mmol), (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-etinil-AH-imidazo|-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (91 mg, 0,33 mmol) e Cul (2,6 mg,
. 400/563 0,014 mmol) em DMF (3 mL) e TEA (0,12 mL, 0,83 mmol) por 15 minutos. Então Pd(PPh3)a(16 mg, 0,014 mmol) foi adicionado e o recipiente de reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e aquecido a 50ºC da noite para o dia. A reação foi esfriada para temperatura ambiente, nitrogênio foi borbu- lhado na mistura de reação por 20 minutos e então mais Cul (-4 mg) e Pd(PPh3)a (15 mg) foram adicionados. A reação recebeu fluxo de nitrogênio por 5 minutos, foi vedada e aquecida a 60ºC por 1 dia. A reação foi esfriada para temperatura ambiente, diluída com metanol, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA) para dar um sal de TFA de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-((6-(2-((2S,58)-1-(ferc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-S-iNnaftalen-2-i)etinil)- 1 H-imidazol-2-11)-2- , azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (56,7 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,161 min; m/z 649,62 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado ' 15 com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma- —nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulve- rização. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 8,07 (d,J=8,8Hz,1H) 7,99-8,04 (m, 2 H), 7,91 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,77 - 7,87 (m, 1 H), 7,69 (dd, J=8,7, 1,4 Hz, 1 H), 5,13 (t, J=7,5 Hz, 1 H), 4,12 (s amplo, 1 H), 3,81 (s amplo, 1 H), 2,66 (s amplo, 1 H), 245 - 2,54 (m, 1 H), 2,33 - 242 (m, 1 H), 2,22 - 2,32 (m, 2 H), 1,75 - 1,86 (m, 2 H), 1,25 - 1,59 (m, 21 H), 1,06 (nenhum, 1 H), 0,90 (dt, J=8,5, 5,8 Hz, 1 H), 0,71 (s amplo, 1 H).
4 HNZ TS Ab
: 401/563 Intermediário 154 (1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,58)-5-Metilpirrolidin-2-iI)- 1H-imidazol A-il)naftalen-2-i)etinil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hexano HCt 4M (0,611 mL, 2,445 mmol) em dioxana foi adicionado a uma mistura de um sal de TFA de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-((6-(2-((28,5S)- 1-(ferc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-11) eti- nil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexano-2-carboxilato (53,8 mg, 0,061 mmol) em dioxana (1,5 mL) e a reação foi vigorosamente agitada por 2 ho- ras.
A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o ' dia para dar um sal de HC! de (1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((2S,5S)-5-metilpirro- lidin-2-il)-1H-imidazol-4-i)naftalen-2-il)etinil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo : [3,1,0]hexano (37 mg) que foi usado sem purificação adicional.
Tempo de retenção de LC-MS 2,302 min; m/z 449,40 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de - 15 UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10%/H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 40 % + 2 Lon * Intermediário 124 Intermediário 155 DIÊA, OMF.
O pitemediário 156 %no IS ENSZOE amermedate aro 5 A =D AS
" 402/563 4, HnZ TS Intermediário 155 (1R,38,5R)-3-(4-((Trimetilsilil)Jetinil)- 1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexano TFA (500 ul, 6,498 mmol) foi adicionado a uma solução de (1R, 38S,5R)-ferc-butil 3-(5-((trimetilsili)Detinil)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano-2-carboxilato (299 mg, 0,885 mmol) em DCE (SmL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. A reação foi concentrada " até secar e então novamente submetida às condições de reação por 5 ho- : 10 ras. À reação foi concentrada para dar um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(4- ((trimetilsili)etinil)- 1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexano como um óleo marrom viscoso que foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção - de LOC-MS 2,755 min; m/z 246,25 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna ' 15 PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nutoeumtempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização, 41, A / O. o HZ Sis
XNH — O Intermediário 156 Metil (S)-3-metil-1-0x0-1-((1R,3S,5R)-3-(4-((trimetilsili)etinil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)butan-2-ilcarbamato
' 403/563 HATU (428 mg, 1,125 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de (1R,3S,5R)-3-(5-((trimetilsili)etinil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo 13,1,0]hexano (212 mg, 0,865 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonitamino)-3- metilbutanoico (197 mg, 1,125 mmol) em DMF (3 mL) e DIPEA (1,2 mL, 6,9 mmol)eareaçãofoiagitadaem temperatura ambiente da noite para o dia. À reação foi concentrada até secar e então purificada com uma BIOTAGE? Horizon (25 g de SIO>, EtOAc 40-60%/hexanos) para dar metil (S)-3-metil-1- 0x0-1-((1R,38S,5R)-3-(5-((trimetilsilil)etinil)- 1H-imidazo|-2-iI)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexan-2-il)butan-2-ilcarbamato (203 mg) como um vidro amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,095 min; m/z 403,29 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado - com uma coluna PHENOMENEX” Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 ' 15 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A : 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma- nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos em que o Solven- te A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?” Platform LC em modo de eletropul- verização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 7,17 (s amplo, 1 H), 5,04 - 5,11 (m, 1 H), 4,54 (d, J=6,8 Hz, 1 H), 3,65 (s, 3 H), 3,54 - 3,61 (m, 1 H), 2,82 (s, 1H), 2,39 - 2,50 (m, 1 H), 2,27 - 2,36 (m, 1 H), 2,04 - 2,15 (m, 1 H), 1,94 - 2,04 (m, 1 H), 1,11 (dt, J=8,7, 5,6 Hz, 1 H), 0,95 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,90 (d, J=6,8Hz,3H) 0,73-0,79(m,1H),0,21(s,9H). do, o o PN
NH Oo Intermediário 157 Metil / (S)-1-((1R,3S8,5R)-3-(4-etinil-1AH-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo
' 404/563 [3,1,0]hexan-2-iI)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato Carbonato de potássio (34,3 mg, 0,248 mmol) foi adicionado a uma solução de metil (S)-3-metil-1-0x0-1-((1R,3S,5R)-3-(S-((trimetilsilil) eti- nil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-i))butan-2-ilcarbamato — (200 mg,0,497 mmol) em metanol (5 mL) e a reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada, então aquecida a 50ºC por 4 horas e então agitada em tempera- tura ambiente da noite para o dia. A reação foi concentrada até secar e en- tão purificada em uma BIOTAGE& Horizon (12 g de SIO2, EtOAc 70-90%/ hexanos) para dar metil (S)-14((1R,38,5R)-3-(5-etinil-1H-imidazol-2-1/)-2- —azabiciclo[3,1,0]hexan-2-1)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (151 mg) como vidro amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 1,788 min; m/z 331,32 (MH+). . Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento ' 15 de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma : taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos em que o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético O01%eoSolvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. do
N O. o > NH fr
O Intermediário 158 (1R,38,5R)-terc-butil — 3-(5(6-((2(1R,38,5R)-2-((S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4- ibetininaftalen-2-i1)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Uma mistura de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5(6-bromonaftalen-2-i1)-
' 405/563 1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (208 mg, 0,457 mmol), meti! (S)-1-((1R,38,5R)-3-(5-etinil-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-2-i1)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (151 mg, 0,457 mmol) e Cul (8,70 mg, 0,046 mmol) em DMF (4 mL) e TEA (0,19 mL, 1,4 mmol) recebeu fluxoa vácuo de com nitrogênio (6X) durante 10 minutos. Então Pd(PPh3), (53 mg, 0,046 mmol) foi adicionado e a mistura de reação recebeu fluxo a vácuo de nitrogênio (3X), foi vedada e aquecida a 60ºC por 20 horas. A rea- ção foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia e então purificada através de HPLC preparativa (MeOH 40-80%/água com um tampãodeTFA) para dar um sal de TFA de (1R,3S,5R)-terc-butil 3-(5-(6-((2- ' ((1R,38,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo . [3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-S-i)etinil)naftalen-2-i1)-1H-imidazo|-2-1/)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (270 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,995 min; m/z 704,70 (MH+). Dados de LC ' 15 foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0%/ Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma- nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulve- rização '*H RMN (400 MHz, MeOD) 5 pom 8,28 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,06 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,98 - 8,03 (m, 2 H), 7,89 (dd, J=8,5, 1,8 Hz, 1 H), 7,69 - 7,85 (m, 1 H), 7,67 (dd, J=8,7, 1,4 Hz, 1 H), 5,11 (s amplo, 1 H), 4,84 - 4,91 (m, 2 H), 4,55 (d, J=5,8 Hz, 1 H), 3,70 - 3,77 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 2,72 (dd, J=13,6, 9,0 Hz, 1 H), 2,55 - 2,683 (m, 1 H), 2,39 - 2,50 (m, 2 H), 2,11 - 2,20 (m, 1H) 2,02-2,11(m, 1H), 1,81-1,89(m, 1H), 1,45 (s amplo, 9 H), 1,07 - 1,14 (m, 1 H), 1,00 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,93 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,84 - 0,93 (m, 2H), 0,74 (s amplo, 1 H).
: 406/563 Esquema 41 = ne =. FO Po Rene Intermediário 134 Intermediário 159 THFARO Intermediário 160 Bi Ho s E " Na o = oo à 0a Intermediário 161 Cneu Intermediário 162 BOX N Tm A AZ Intermegiario 163 Intermediário 164 ' = O ”Z aa ] 5 Intermediário 159 . 1-(6-Bromoquinolin-2-il)etanona HCI 3M (aquoso) (10 mL, 30,0 mmol) foi adicionado a uma sus- pensão de 6-bromo-2-(1-etoxivinil)quinolina (780 mg, 2,80 mmol) em aceto- na (20 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 5 horas.
À mistura de reação foi concentrada, dissolvida em THF (20 mL) e tratada com HCI 3N (aquoso) (5 mL) era solução de reação transparente foi agitada a 60ºC por 5 horas.
A reação foi esfriada, neutralizada com NaOH aquoso e NaHCO; e extraída com EtOAc.
A camada orgânica foi seca e concentrada para dar 1-(6-bromoquinolin-2-il)-etanona bruta (710 mg) como sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS 3,703 min; m/z 250, 251,99 (1:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise
: 407/563 de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluora- cético 0,1% e o Solvente B era H7O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform
LC em modo de eletropulverização. = o o Intermediário 160 1-(6-(4-Acetilfenil)quinolin-2-il)etanona
: Pd(OAc), (62,9 mg, 0,280 mmol) foi adicionado a uma solução de ácido 4-acetilfenilborônico (689 mg, 4,20 mmol), 1-(8-bromoquinolin-2- ' iNetanona (700 mg, 2,8 mmol), diciclo-hexil(2,6'- dimetoxibifenil-2-i)fosfina (230 mg, 0,560 mmol) e K;CO;3 (1,16 g, 8,40 mmol) em dioxana (10 mL) e água (2.500 mL) ea mistura de reação foi refluxada a 110ºC por 5 horas.
A mistura de reação foi esfriada para temperatura ambiente e dividida entre - NH,CI aquoso saturado e EtOAc.
A camada orgânica foi lavada com NaH- CO; e salmoura e então seca (MgSO;,), filtrada e concentrada e purificada através de cromatografia de sílica-gel (solvente de carga: DCM, eluído com 0-20% de EtOAc/hexanos) para dar 1-(6-(4-acetilfenil)quinolin-2-il)etanona (781 mg) como sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS 3,776 min; m/z 290,29 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluora- cético0,1%e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 ppm 8,35 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 8,34 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 8,19 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 8,12
' 408/563 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 8,08 - 8,16 (m, 3 H), 7,85 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 7,82 - 7,89 (m, 1 H), 2,91 (s, 3H), 2,69 (s, 3 H). Br = O O Br Intermediário 161 2-Bromo-1-(6-(4-(2-bromoacetil)Yfenil)quinolin-2-il)etanona Tribrometo de piridínio (221 mg, 0,691 mmol!) foi adicionado a uma suspensão de 1-(6-(4-acetilfenil)quinolin-2-il)etanona (100 mg, 0,346 . mmol) e HBr (0,061 mL, 0,35 mmol) em ácido acético (3 mL) e a mistura de reação foi agitada a 70ºC) por 6 horas. À reação foi concentrada sob vácuo ' e o resíduo foi dividido entre NAHCO;z aquoso (15 mL) e EtOAc (30 mL + 10 mL + 10 mL). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com sal- moura, secas, filtradas e concentradas para dar 2-bromo-1-(8-(4-(2-bromo- acetilYfenil)quinolin-2-il)etanona (120 mg) como sólido branco. Tempo de re- - tenção de LC-MS 4,138 min; m/z 448,01 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10%/ HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
VA TEXL é
N IOCP Boc Intermediário 162 (28,48)-2-(2-(6-(4-(2-((2S,4S)-1-(ferc-Butoxicarbonil)-4-metil-
: 409/5963 pirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)fenil)quinolin-2-11)-2-0x0etil) 1-ferc-butil 4-metil- pirrolidino-1,2-dicarboxilato DIPEA (0,094 mL, 0,537 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-bromo-1-(6-(4-(2-bromoacetiNfenil)quinolin-2-i)etanona (60 mg, 0,134 mmol) e ácido (2S8A4S)-1-(tere-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2-carboxílico (64,6 mg, 0,282 mmol) em acetonitrila (2 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (20 mL + 20 mL) / NaHCO; aquoso (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO; aquoso, salmoura, secas, filtradas e concentradas para dar (28,48)-2-(2-(6-(4-(2-((28,4S)-1-(terc-butoxicar- i bonil)-4-metilpirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)fenil)quinolin-2-11)-2-0x0etil) 1-terc . -butil 4-metilpirrolidino-1,2-dicarboxilato bruto (100 mg) como sólido laranja. Este material foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC- MS 4,558 min; m/z 742,36 (MH-). Dados de LC foram registrados em um , 15 — cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- : NOMENEXSº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solven- te A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos em que o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropuiverização.
=N /NH Boo Boc N h Intermediário 163 (28,4S)-terc-butil 2-(5-(4-(2-(2((28 4S)-1-(ferc-butoxicarboni!)-4- metilpirrolidin-2-i1)-1 H-imidazol-4-il)quinolin-S-iNfenil)-1 H-imidazol-2-i1)-4- metilpirrolidino-1-carboxilato
Ú 410/563 Acetato de amônio (207 mg, 2,689 mmol) foi adicionado a uma solução de (28,48)-2-(2-(6-(4-(2-((2S ,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metilpirro- lidino-2-carbonilóxi)acetilYfenil)quinolin-2-11)-2-0x0etil) 1-ferc-butil 4-metilpirro- lidino-1,2-dicarboxilato (100 mg, 0,134 mmol) em tolueno (3 mL) e a mistura dereação foi agitada a 120ºC (reator de micro-ondas) por 3 horas. A reação foi dividida entre EtOAc (20 mL + 10 mL + 10 mL) e NaHCO; aquoso (10 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram secas, filtradas e concentradas. Este produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa (H20-CH;CN com tampão de NH,OAc 10 mM) para dar o produto (2S,4S)-ferc-butil 2-(5- (6-(4-(2-((28,4S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-il)-1 H-imidazol-5- iDfeniNquinolin-2-iI)-1H-imidazol-2-iI)-4-metilpirrolidino-1-carboxilato (16,6 . mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,270 min; m/z 704,72 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u ' 15 C18de2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- : primento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de5S5minutosem que o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluo- racético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracéti- co 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Plat- form LC em modo de eletropulverização. == NH H
NZ Intermediário 164 2-(2-((28,4S)-4-Metilpirrolidin-2-iI)- 1H-imidazol-4-11)-6-(4-(2- ((28,4S)4-metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-iNfenil)quinolina HCI 4M (0,2 mL, 0,800 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução de (2S,4S)-terc-butil 2-(5-(8-(4-(2-((2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-
B 411/563 metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-iNfenil)quinolin-2-iD)-1H-imidazol-2-11)-4- metilpirrolidino-1-carboxilato (16,6 mg, 0,024 mmol) em dioxana (1 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 3 dias. A mistura de reação foi concentrada para dar um sal de HCI bruto de 2-(2-((28,48)-4- metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-11)-6-(4-(2-((2S ,4S) -4-metilpirrolidin-2-i1)-1H- imidazol-5-iN)Yfenil)quinolina (19,1 mg) como sólido amarelo. Tempo de reten- ção de LC-MS 2,765 min; m/z 504,47 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente . de Solvente A 100% / Soivente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% , 15 /H/O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH . 80% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 42 . Br = o e o = oo Pr NH0AC Imtermeciario 161 CH3ON Intermediário 165 NA qo o na NAN Intermediário 166 Intermedtário 167 O =" 00 Bos
CIO DIS Boc Intermediário 165 (28,58)-2-(2-(6-(4-(2-((28,4S)-1-(terc-Butoxicarbonil)-4-metil- pirrolidino-2-carbonilóxi)acetiNfenil)quinolin-2-i1)-2-0x0etil) 1-terc-butil 5-metil- pirrolidino-1,2-dicarboxilato DIPEA (0,059 mL, 0,335 mmol) foi adicionado a uma solução de
. 412/563 2-bromo-1-(6-(4-(2-bromoacetil)fenil)quinolin-2-iDetanona (50 mg, 0,11 mmol) e ácido (28,58)-1-(ferc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carboxílico (54 ma, 0,24 mmol) em acetonitrila (2 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi dividida entre EtOAc (20+20mL)/NaHCO; aquoso (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO; aquoso saturado, salmoura, secas, filtradas e concentradas para dar (28,58)-2-(2-(6-(4-(2-((28,58)-1-(terc-butoxicarbonil)- S-metilpirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)fenil)quinolin-2-i1)-2-0x0etil) — 1-ferc-butil S-metilpirrolidino-1,2-dicarboxitato bruto (69 mg) como sólido laranja. Este bruto foi usado sem purificação adicional. Tempo de retenção de LC-MS 4,483 min; m/z 744,61 (MH+). Dados de LC foram registrados em um croma- - tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de elui- : 15 ção empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solven- . te A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tem- po de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de Eeletropulverização.
= q NH Boc Boc N é Intermediário 166 (28,5S)-terc-butil 2-(5-(4-(2-(2-((28,58)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidin-2-i1)-1 H-imidazol|-4-iD)quinolin-8-il)fenil)-1H-imidazol-2-11)-5- metilpirrolidino-1-carboxilato Acetato de amônio (107 mg, 1,39 mmol) foi adicionado a uma suspensão de (2S,58)-2-(2-(6-(4-(2-((2S,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-S-metil- pirrolidino-2-carbonilóxi)acetil)fenihquinolin-2-i1)-2-0x0etil) 1-ferc-butil S-metil- pirrolidino-1,2-dicarboxilato (69 mg, 0,093 mmol) em tolueno (Volume: 2 mL)
: 413/5863 e a mistura de reação foi agitada a 120ºC (reator de micro-ondas) por 3 ho- ras.
A reação foi dividida entre EtOAc (10 mL + 5 ml + 5 mL) e NaHCO; a- quoso (5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas, filtradas e concentradas e o produto bruto foi purificado através de HPLC preparativa (H2O-CH;CN com tampão de NH40Ac 10 mM) para dar produto (2S,5S)- terc-butil 2-(4-(6-(4-(2-((28,58)-1-(terc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidin-2-i)- 1H-imidazol-4-iNfenil)quinolin-2-iN)-1H-imidazol-2-i1)-5-metilpirrolidino-1- carboxitato (13,4 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC- MS 4,350min; m/z 702,29 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- : NOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis - SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de elui- ção empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solven- te A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um ' 15 tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e : um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeEOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H2O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 MM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD)õ ppm 8,37 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,07 - 810 (m, 2 H), 8,03 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,79 - 7,88 (m, 5 H), 7,40 (s, 1 H), 4,90 - 5,07 (m, 2H), 3,99 - 4,13 (m, 2 H), 2,10 - 2,39 (m, 6 H), 1,68 - 1,82 (m, 2 H), 1,43 (d, J=6,0 Hz, 6 H), 1,24 - 1,59 (m, 22 H). = NH H NnZ Intermediário 167 2-(2-((28,58S)-5-Metilpirrolidin-2-il)- 1H-imidazol-4-11)-6-(4-(2- ((2S,5S)S-metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-il)fenil)quinolina HCI 4M (09,2 mL, 0,8 mmol) em dioxana foi adicionado a uma so- lução de (28,5S)-ferc-butil 2-(5-(6-(4-(2-((2S,58)-1-(terc-butoxicarbonil)-5- metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-ilYfenil)quinolin-2-i1)- 1H-imidazol-2-11)-5-
. 414/5683 metilpirrolidino-1-carboxilato (12,7 mg, 0,018 mmol) em dioxana (1 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 3 dias.
A mistura de reação foi concentrada para dar um sal de HC! bruto de 2-(2-((28,58)-5-metilpirro- lidin-2-iI)-1H-imidazol-5-11)-6-(4-(2-((28,58)-5-metilpirrolidin-2-i1)- 1H-imidazo]|- Silfenilquinolina (18,1 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,597 min; m/z 504,46 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B - 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% 1 H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH . 15 90%/ ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando : um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 9,09 (d, J=9,0 Hz, 1 H), 8,66 (s, 1 H), 8,54 - 8,61 (m, 2 H), 8,51 (d, J=9,0 Hz, 1 H), 8,50 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,00 - 8,08 (m, 4 H), 7,99 (s, 1 H), 5,14 (t, J=8,5 Hz, 1 H), 5,07 (t J=8,0 Hz, 1 H), 3,90 - 4,04 (m,2H) 2,52-2,75 (m, 4H) 2,39 -2,53 (m, 2 H), 1,98 - 2,14 (m, 2 H), 1,59 (dd, J=9,7, 86,7 Hz, 6 H). Esquema 43 Ho is Ns Aos Nx Om e "o : FO Esc NH,0AC Ns Nh () Pu A Em ut At ! é = A 2 H Boc VOO ao N NM Foo & “o
. 415/5683 O Intermediário 173 foi preparado de uma maneira análoga ao Intermediário 139 no Esquema 35 utilizando 6-bromo-2-cloroquinoxalina co- mo o material de partida ao invés de 6-bromo-2-cloroquinolina. Os dados analíticos são mostrados abaixo.
O Br N Intermediário 168 6-Bromo-2-(1-etoxivinil)quinoxalina A reação deu o produto desejado (380 mg) como um sólido ' branco. Tempo de retenção de LC-MS 4,178 min; m/z 278,9, 280,98 (1:1) ' (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXSº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento - de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B ' 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MEOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. Br, 2?
AN Intermediário 169 2-Bromo-1-(6-bromoquinoxalin-2-il)atanona A reação deu o produto desejado (390 mg) como um sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 3,743 min; m/z 331,12 (1:2:1) (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de
. 416/563 detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Soivente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o —Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Sol- vente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
N o aos = N 7 a ATA “ Ú Intermediário 170 (1R,38,5R)-3-(2-(6-Bromoquinoxalin-2-il)-2-oxoetil) 2-ferc-butil 2- - 10 azabiciclo[3,1,0]hexano-2,3-dicarboxilato A reação deu o produto desejado (270 mg) como um sólido ro- , sa/laranja.
Tempo de retenção de LC-MS 4,115 min; m/z 473, 475,81 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 10u C18 de 195 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos on- deoSolvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
NAN Boc Br A )-N q (é Intermediário 171 terce-butil / (1R,38,5R)-3-(4-(6-bromo-2-quinoxalinil)-1H-imidazol- 2-iN)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato A reação deu o produto desejado (125 mg) como um sólido ver- melho/laranja.
Tempo de retenção de LC-MS 3,958 min; m/z 453,90, 455,87 (1:1) (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 - minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC ' 15 em modo de eletropulverização. '*H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 9,40 (s . amplo, 1 H), 8,22 (d, J=2,0 Hz, 1 H), 7,96 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,93 - 7,99 (m, 1H), 7,90 (dd, J=8,8, 2,0 Hz, 1 H), 4,71 - 4,81 (m, 1 H), 3,59 (s amplo, 1 H), 2,49 - 2,63 (m, 1 H), 2,31 - 2,45 (m, 1 H), 1,68 - 1,82 (m, 1 H), 1,46 - 1,53 (m, 5 H), 0,81 - 0,94 (m, 1 H), 0,64 (s amplo, 1 H). 4, .. NAN Boo Be DADAS N q Uf Intermediário 172 terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i!)-1H-imidazol-4-il)fenil)-2-quinoxalinil)- 1 H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato A reação deu o produto desejado (64,4 mg) como um sólido a- marelo brilhante.
Tempo de retenção de LC-MS 3,696 min; m/z 699,3 (MH-). — Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mLi/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o — Solvente À eraMeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solven- te B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. '*H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,45 (s, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 8,07 (d, J=8B,8 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,81 - 7,95(m, 4H), 7,60 (s, 1H), 4,57 -4,80(m,2H),3,23-3,60 (m, 2H), 2,23- 2,48 (m, 4 H), 1,61 - 1,75 (m, 2 H), 1,28 (s amplo, 18 H), 0,73 - 0,87 (m, 2 H), - 0,59 (s amplo, 2 H). do
DO N A "Fr Intermediário 173 Metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(6-(4-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazo|-4-i)fenil)-2- — quinolini)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carba- mato A reação deu um sal de HCI do produto desejado (80 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,915 min; m/z 501,42 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zuLC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H?O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,54 (s, 1 H), 8,40 - 8,43 (m, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,23 - 8,30 (m, 2 H), 8,13 (s, 1 H), 8,00 - 8,08 (m, 4 H), 4,88 - 5,08 (m, 2 H), 3,53 - 3,77 (m, 2 H), 2,64 - 2,90 (m, 4 H) 2,08-2,22(m,2H),1,23-1,36(m,2H), 1,02-1,14(m,/2H). Esquema 44 ao Erne MÉIDS “% Intermestianio ATA . " Intermediario 175 - ” | soé p= as Intermediário 174
(1R,38S,5R)-terc-butil 3-(4-((6-(2-((28,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)- 4-metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)- 1H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato
O composto foi preparado de uma maneira análoga ao Interme-
diário 153 com os materiais de partida apropriados para dar um sal de TFA do composto do título (121 mg) como um vidro amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 4,100 min; m/z 647,37 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi-
ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi-
nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / H2O 95% / acetato de amônio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. dio HNZ % Intermediário 175 - 5 (1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((28,48S)-4-Metilpirrolidin-2-i1)-1H- imidazol|-4-il)naftalen-2-il)etínil)- 1 H-imidazo!-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano HCI 2M (0,33 mL, 0,56 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução de um sal de TFA de (1R,38,S5R)-ferc-butil 3-(5-((6-(2-((28,48)-1- . (ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidin-2-i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)- 1Himidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (115 mg, 0,131 ' mmol) em dioxana (2 mL) e a reação foi agitada vigorosamente da noite para O dia.
A reação foi concentrada para dar um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(4- ((6-(2-((28,4S)-4-metilpirrolidin-2-i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)- 1 H- imidazol-2-i1)-2-azabiciíclo[3,1,0]hexano (87 mg) que foi usado sem purífica- ção adicional.
Tempo de retenção de LC-MS 2,793 min; m/z 449,41 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxade fluxode 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 45 Boc. à o NM "
OA NNE o ” Emo mo IODDH" aee Intermediário 114b Intermediario 176 y CNH dioxanmo ' EX VEDA Za o PA Intermediário 177 Intermediário 178 ' O Intermediário 178 foi preparado de uma maneira análoga à : preparação do Intermediário 117 no Esquema 29 utilizando ácido (S)-2-(tero- butoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico como um material de partida ao invés de ácido (28,58)-1-(ferc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carboxílico. Da- - dos analíticos para os intermediários mostrados abaixo. . no. O oo De e DOI dA" Boc Intermediário 176 (S8)-2-(4-(68-(2-((S)-2-(ferc-Butoxicarbonilamino)-3-metilbutanoitó- xi)aceti)naftalen-2-il)fenil)-2-oxoetil — 2(ferc-butoxicarbonilamino)-3-metilbu- tanoato A reação deu o produto desejado (700 mg) como um sólido cas- tanho. Tempo de retenção de LO-MS 2,243 min; m/z 717,5 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u C18 de 2,0x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1,0 ml/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Sol- venteAeraMeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização.
ANA À ml SI Ao H N / Intermediário 177 terc-butil ((18)-1-(4-(4-(6-(2((18S)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)- 2-metilpropil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftifenil)-1 H-imidazol-2-i1)-2-metilpropil) : carbamato A reação deu o produto desejado (453 mg) como um sólido ama- relo. Tempo de retenção de LC-MS 2,407 min; m/z 677,6 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- ' 10 —pado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector 7 de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1,0 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- verização.
J NH
A ASIA NnZ Intermediário 178 (S)-1-(5-(4-(8-(2-((S)-1-Amino-2-metilpropil)- 1 H-imidazol-4-)) naf- talen-2-i)Yfenil)-1H-imidazol|-2-i)-2-metilpropan-1-amina A reação deu um sal de HCl do produto dessjado (390 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,080 min; m/z 477,4
(MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxadefluxode1,0mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente À era MeOH 5% / HzO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H;O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. - Esquema 46 Bor O hd FP o or) Px o oo” no | PODSAS Tao ADO DIO x Intermediário 114 intermediario 179 7 O. FNE Bo nO o Nº DATAS Em Qu a PR, Imermediário 180 intermediário 181 : O Intermediário 181 foi preparado de uma maneira análoga à preparação do Intermediário 117 no Esquema 29 utilizando ácido (S)-4-(terc- butoxicarbonil)»morfolino-3-carboxílico como um material de partida ao invés de ácido (2S,5S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carboxílico. Da- dos analíticos para os intermediários mostrados abaixo.
NL O oo BS QQ$IQOSI O) Boc Intermediário 179 (8)-3-(2-(4-(8-(2((S)-4-(terc-Butoxicarbonil)morfolino-3- carbonilóxi)acetil)naftalen-2-i)fenil)-2-oxoetil) — 4-ferc-butil — morfolino-3,4- dicarboxilato A reação deu um sal de HCI do produto desejado (1,60 9) como uma espuma sólida esbranquiçada.
Tempo de retenção de LC-MS 4,413 min; m/z 770,29 (MNa+). Dados de LC foram registrados em um cromatógra- fo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº
Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À
100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluo-
l racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº . Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio- d) 5 ppm 8,47 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,98 - 8,11 (m, 5 H), 7,86 (d, J=8,3 Hz,
3 H), 5,39 - 5,70 (m, 4 H), 4,56 - 4,83 (m, 2 H), 4,46 - 4,63 (m, 2 H), 3,91 -
Ú 15 4,03(m, 2H) ,3,68-3,85 (m, 4 H), 3,49 - 3,59 (m, 3 H), 3,27 - 3,40 (m, 1 H),
: 1,51 (s, 18H). Ns o AS TO SS o Intermediário 180
(R)-ferc-butil 3-(5-(4-(6-(2-((R)-4-(terc-butoxicarbonil)morfolin-3- i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)Yfenil)- 1 H-imidazol-2-il)]norfolino-4-carboxilato
A reação deu o produto desejado (1,12 g) como um sólido laran-
ja.
Tempo de retenção de LC-MS 3,608 min; m/z 707,94 (MH+). Dados de
LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi-
pado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8
—mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À
0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de ma-
nutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente
A era MeOH 10% / H2O0 80% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era
H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 3 ppm 8,22 (s amplo, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,90 - 7,87 (m, 2 H), 7,75 - 7,89 (m, 6 H), 7,49 (s amplo, 1 H), 7,41 (s amplo, 1H), 5,17-5,24 (m, 2H), 4,42 (1, J=11,2 Hz, 2 H), 3,82 - 3,95 (m, 6 H), 3,59 (tt, /=11,6, 3,0 Hz, 2H), 3,39 - 3,51 (m, 2 H), 1,50 (d, J=2,8 Hz, 18 H). O. nu TN H
PIAS Intermediário 181 (R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-Morfolin-3-i1)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2- ' iNfenil)-1H-imidazol-2-il)]Mmorfolina A reação deu um sal de HCI do produto desejado (312 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LO-MS 2,988 min; m/z 507,72 Í (MH+), Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- . zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 de i 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MEOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. Esquema 47 . Intermediário 1146 Intermediasio 182 GNH Bor TEA nº Intermediario 183 Intersediario 184
O Intermediário 184 foi preparado de uma maneira análoga à preparação do Intermediário 117 no Esquema 29 utilizando ácido (S)-1-(ferc- butoxicarbonil)piperidino-2-carboxílico como um material de partida ao invés de ácido (28S,5S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carboxílico. Da- dos analíticos para o intermediário mostrado abaixo.
A DAL Sos CIDOCITFO Intermediário 182 : (8)-2-(2-(4-(6-(2-((S)-1-(ferc-Butoxicarbonil)piperidino-2-carbo- nilóxi)acetil)naftalen-2-iN)fenil)-2-oxoetil) 1-ferc-butil piperidino-1,2-dicarbo- ' xilato A reação deu o produto desejado (1,57 g) como uma espuma amarelo-claro solidificada. Tempo de retenção de LC-MS 4,850 min; m/z ' 766,37 (MNa+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido - Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u | C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / ' Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluora- cético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, clorofórmio-d) 5 pom 8,47 (s, 1H), 8,13 (s, 1 H), 7,99 - 8,10 (m, 5 H), 7,83 - 7,89 (m, 3 H), 5,32 - 5,67 (m, 4 H), 4,92 - 5,13 (m, 2 H), 3,93 - 4,11 (m, 2 H), 3,00 - 3,28 (m, 2H), 2,40 (s amplo, 2 H), 1,68 - 1,84 (m, 6 H), 1,498 (s, 18 H), 1,39 - 1,67 (m, 4 H)
OST Intermediário 183
(S)-ferc-butil 2-(5-(4-(6-(2-((S)-1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-2- i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-iN)fenil)- 1 H-imidazol-2-il)piperidino-1-carboxilato A reação deu o produto desejado (1,18 9) como um sólido ama- relo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 3,778 min; m/z 703,97 (MH+). Da- dos deLC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- ' nutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC , 15 em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,22 (s . amplo, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,93 (t, J=7,7 Hz, 2 H), 7,73 - 7,88 (m, 6 H), 7,46 ' (s amplo, 1 H), 7,38 (s amplo, 1 H), 5,47 (s amplo, 2 H), 4,03 - 4,15 (m, 2H), 2,99 - 3,42 (m, 2 H), 2,46 (s amplo, 2 H), 1,80 - 1,94 (m, 2 H), 1,50 (d, J=2,3 Hz, 18 H), 1,44 - 1,76 (m, 8 H). f NH H
N Intermediário 184 (S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-Piperidin-2-il)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2- iDfenil)-1H-imidazol-2-il)piperidina A reação deu um sal de HCI do produto desejado (280 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,015 min; m/z 503,69 (MH+), Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zuLC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B
0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. —Dadosde MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 10,06 (s amplo, 2 H), 9,85 (s amplo, 2 H), 8,48 (s, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 8,09 - 8,19 (m, 3 H), 7,968 - 8,09 (m, 7 H), 4,70 (s amplo, 2 H), 3,42 - 3,53 (m, 2H), 3,14 (s amplo, 2 H), 2,10 - 2,37 (m, 4 H), 1,680 - 2,00 (m, 8 H). Esquema48 Br 2 ? . o no o Boc s MH,0AC Intermediário 114 Intermediário 185 . nó h NA ano q - Intermediarto 186 Intermediário 4187 O Intermediário 187 foi preparado de uma maneira análoga à preparação do Intermediário 117 no Esquema 28 utilizando ácido (28,5R)-1- - (terc-butoxicarbonil)-5-metilpirrolidino-2-carboxílico (preparado de acordo com JOC 1995, p. 5011) como um material de partida ao invés de ácido (28,5S)-1-(terc-butoxicarbonil)-S-metilpirrolidino-2-carboxílico. Dados analíti- cos para os intermediários mostrados abaixo. Ox O 00 Bos Ss
ON IDAS DAI Boc Intermediário 185 (28,5R)-2-(2-(4-(8-(2((28,5R)-1-(ferc-Butoxicarbonil)-S-metilpir- rolidino-2-carbonilóxi)acetil)naftalen-2-iI)fenil)-2-0x0etil) 1-ferc-butil 5-metilpir- rolidino-1,2-dicarboxilato A reação deu o produto desejado (979 mg). Tempo de retenção de LC-MS 4,796 min; m/z 766,19 (MNa+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 min, um tempo de manutenção de 1 mi- nuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% 1 H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. "H RMN i (400 MHz, clorofórmio-d) ô ppm 8,47 (s amplo, 1 H), 8,13 (d, J=2,5 Hz, 1 H), - 7,99 - 8,11 (m, 5 H), 7,86 (dd, J=7,8, 2,3 Hz, 3 H), 5,21 - 5,77 (m, 4 H), 4,51 - 4,58 (m, 1 H), 4,47 (dd, J=7,8, 4,5 Hz, 1 H), 4,17 - 4,26 (m, 1 H), 4,07 - 4,14 (m, 1 H), 2,23 - 248 (m, 6 H), 1,680 - 1,68 (m, 2 H), 1,44 - 1,52 (m, 18 H), ' 15 1,25(d,J=6,3 Hz, 3 H), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H). - /J NH Boc Boé NA Intermediário 186
(28,5R)-terc-butil 2(5-(4-(6-(2-((28,5R)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-
metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-4-i)naftalen-2-iI)fenil)- 1H-imidazo1-2-i1)-5-
metilpirrolidino-1-carboxilato
A reação deu o produto desejado (581 mg) como uma espuma sólida laranja.
Tempo de retenção de LO-MS 3,673 min; m/z 703,95 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxadeflixode 0,8 mL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético
0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização.
NH "ER OA a H N / Intermediário 187 2-((28,5R)-5-Metilpirrolidin-2-11)-5-(4-(6-(2-((2S,5R)-5-metilpirro]i- din2i)1Himidazol-4il)naftalen-2-iNfenil)-1H-imidazol ' A reação deu um sal de HCI do produto desejado(157 mg) como , um sólido laranja claro. Tempo de retenção de LC-MS 2,975 min; m/z 503,71 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº? Luna 3u C18 de : 10 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma . taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 : 15 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. '*H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 9,84 - 10,25 (m, 4 H), 8,54 (s, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 7,95 - 8,22 (m, 10 H), 5,15 (s am- plo 2H),4,00(s amplo, 2 H), 2,53 -2,63 (m, 4 H), 2,30 - 2,41 (m, 2H), 1,67 - 1,82 (m, 2 H), 1,43 (d, J=4,3 Hz, 6 H). Esquema 49 FF HO' " N : Aa *Z 7 Intermediário 1486 Ben Ti ) amos lenos ” Imermediario 188
| HCHDioxano
OX WA DA PAX SS SS
KH N So fi RS não iPRNEt Exemplos Intermediario 189 O Intermediário 189 foi preparado conforme mostrado no Es- quema 49 utilizando ácido (S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilenopirrolidino-2- . 5 — carboxílico como material de partida. Dados analíticos para os intermediários mostrados abaixo. Boc - N N
RA
N Ot 1 O
N DS
N N Boc Intermediário 188 terc-butil — (28)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-(ferc-butoxicarboni!)-4-meti- leno-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftifenil)- 1 H-imidazol-2-11)-4-metileno- 1-pirrolidinocarboxilato Base de Hunig (0,43 mL, 2,47 mmol) foi adicionada a uma solu- ção agitada de ácido (S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilenopirrolidino-2- carboxílico (509 mg, 2,241 mmol) e 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoaceti)naftalen- 2-i)fenietanona (500 mg, 1,121 mmol) em MeCN (25 mL). A mistura foi agi- tada por 18 horas em temperatura ambiente. O solvente foi removido in va- cuoeo resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com água, solu- ção de bicarbonato de sódio saturada e salmoura. Após ser concentrado, o resíduo foi absorvido em xileno (25 mL) e acetato de amônio (1,3 g, 16,85 mmol) foi adicionado. O recipiente de pressão foi vedado e aquecido a 140ºC por 2,5 horas. A mistura de reação foi absorvida em acetato de etila e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura. Após ser concentrado, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) à um cartu- chodesíilica-gel Thompson de 80 g (eluído com B 15% para B 100% em 1 L onde o Solvente B = acetato de etila e o Solvente A = hexanos) para dar terc-butil (28)-2-(4-(4-(8-(2-((28)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-metileno-2- pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metileno-1- pirrolidinocarboxilato (380 mg, 45% de rendimento). Tempo de retenção de LC-MS 3,32 min; Calc. para CaoHa7NsO,4: 699,36 m/z. Encontrado 699,41 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- . madzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa " 15 de fluxode0,8mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% : para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minu- ' tos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- nutos onde o Solvente À era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solven- te B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- - 20 —nados usando um MICROMASS?” Platform LC em modo de eletropulveriza- ção. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,21 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,87-7,83 (m, 6H), 7,54 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 5,14 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,30 (s amplo, 2H), 4,15 (s amplo, 2H), 3,22-3,16 (m, 2H), 2,81 - 2,76 (m, 2H), 1,51/1,31 (s, 18H). | Au som a nO
H Intermediário 189 2-((S)-4-Metilenopirrolidin-2-11)-4-(4-(6-(2-((S)-4-metilenopirrolidin
-2-iI)- 1H-imidazol-4-iDNnaftalen-2-iNfenil)-1H-imidazo!
Uma solução de HCl 4N em dioxana (10 mL) foi adicionado a terc-butil — (28)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metileno-2-pirro- lidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftiDfenil)-1 H-imidazol-2-il)-4-metileno-1-pirroli-
dinocarboxilato (380 mg. 0,544 mmol) em MeOH (10 mL) e agitada em con- dições ambientes por 4 horas, concentrada e seca sob vácuo.
Sal de tetra HCI (suposição teórica: 350 mg). Tempo de retenção de LC-MS 2,68 min; Calc. para C32H3:Ns: 499,26 m/z.
Encontrado 499,21 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector | de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. . As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção ' 15 de1minutoe um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era me- : tanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% ' / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropuiverização.
Esquema 50 | 8 ss” ne o no À + CO Br Alanina ' ' SA S$<7 Br Y O Intermediário 114b Be oe N 2 NH.OAc, xlenos eee O | HClDio xane N o í N NH2 oo sen O he 0 NOR ? BN não Exemplos TO Intermediário 191
O Intermediário 191 foi preparado conforme mostrado no Es-
quema 50 utilizando ácido (S)-2-(ferc-butoxicarbonilamino)propanoico como material de partida. Dados analíticos para os intermediários mostrados abai- xo.
Boc
N NH oo
E mn SA Boc ' Intermediário 190 ' terc-butil/ ((18)-1-(4-(4-(6-(2Á1(18)-1-((terc-butoxicarbonil)amino) eti)-IH-imidazol-4-11)-2-naftilVfenil)-1H-imidazol-2-i)etil)carbamato Base de Hunig (0,39 mL, 2,24 mmol) foi adicionada a uma solu- ' ção agitada de ácido (S)-2-(fere-butoxicarbonilamino)propanoico (424 mg, : 2,24 mmol) e 2-bromo-1-(4-(86-(2-bromoacetil)naftalen-2-ilYfenil)etanona (500 : mg, 1,421 mmol) em MeCN (50 mL). A mistura foi agitada por 18 horas em temperatura ambiente. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi ab- sorvido em acetato de etila e lavado com água, solução de bicarbonato de . sódio saturada e salmoura. Após ser concentrado, o resíduo foi absorvido em xileno (25 mL) e acetato de amônio (1,5 9, 20,18 mmol) foi adicionado. O recipiente de pressão foi vedado e aquecido a 40ºC por 3,5 horas. A mistura de reação foi absorvida em acetato de etila e lavada com solução de bicar- bonato de sódio saturada e salmoura. Após ser concentrado, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) em um cartucho de silica-gel Thompson de 90 g (eluído com B 15% para B 100% em 1 L onde o Solvente B = aceta- to de etila e o Solvente A = hexanos) para prover terc-butil ((18)-1-(4-(4-(6- (2(18)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)etil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)fenil)- 1H- imidazol-2-i)etil)carbamato (368 mg, 47% de rendimento). NOTE: A amostra era parcialmente solúvel em cloreto de metileno. Tempo de retenção de LC- MS 3,24 min; Calc. para CasHasNãOa4: 623,33 m/z. Encontrado 623,37 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi-
madzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para —Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,20 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,95 (t, JU = 8,24 i Hz, 2H), 7,86-7,79 (m, 6H), 7,46 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 4,93-4,89 (m, 2H), ' 1,57-1,48 (m, 24H). N NH> O Í va | AE i KEN N Intermediário191 : (8)-1-(4-(4-(8-(2-((S)-1-Aminoetil)-1 H-imidazol-4-iN naftalen-2- iNfenil)-1H-imidazol-2-i)etanamina Uma solução de HCI 4N em dioxana (10 mL) foi adicionada a ferc-butil ((18)-1-(4-(4-(6-(2((18)-1-((terc-butoxicarbonilamino)etil)-1 H- imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-il)etil)carbamato (368 mo, 0,59 mmol) em MeOH (10 mL) e agitada em condições ambientes por 5 horas, concentrada e seca sob vácuo.
Sal de tetra HCl (suposição teórica: 334 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,33 min; Calc. para CogHo7N;s: 423,23 m/z.
Encontrado 423,17 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromató- grafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna de 2,0x380mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição em- —pregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100%
/ Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradi- ente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. Esquema 51 Boc Boc, o n x í PO da OS CO meti! alanina n () Ç =. Br Intermeciario 1125 NiP6NE no Intermediário 192 o CHJ,CH Boc Í 2) NH/0 Ac, Xilenos o R : DA am IA * O * HA (So RCOH K O : << MES ST ' NO h À Exemplos - TN ON Intermediário 183 o: O Intermediário 193 foi preparado conforme mostrado no Es- - 10 quema 51 utilizando ácido (S)-2-(ferc-butoxicarbonil(metil)amino)propanoico como material de partida. Dados analíticos para os intermediários mostrados abaixo. Boc N N. Y < CT "
H 1 O So « & |
N N Boc Intermediário 192 terc-butil ((18)-1-(4-(4-(8-(2-((18S)-1-((ferc-butoxicarbonil) (me- til)>amino)etil)-1 H-imidazol-4-1)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazol-2-i)etit) metilcarba-
mato Base de Hunig (0,78 mL, 4,48 mmol) foi adicionada a uma solu- ção agitada de ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonil(metil)amino)propanoico (456 mg, 2,241 mmol) e 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-il)fenil)etanona (500mg,1,121mmol) em MeCN (50 mL). A mistura foi agitada por 18 horas em temperatura ambiente.
O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com água, solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura.
Após ser concentrado, o resíduo foi absorvido em xileno (25 mL) e acetato de amônio (859 mg, 11,15 mmol) foi adicionado. —Orecipiente de reação foi vedado e aquecido a 140ºC por 3 horas.
À mistura de reação foi absorvida em acetato de etila e lavada com solução de bicar- . bonato de sódio saturada e salmoura.
Após ser concentrado, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) em um cartucho de sílica-gel Thompson de 90 g (eluído com B 15% para B 100% em 1 L onde o Solvente B = aceta- ' 15 todeetilaeo Solvente A = hexanos) para dar terc-butil ((18)-1-(4-(4-(6-(2- : ((18)-1-((ferc-butoxicarbonil)(metil)amino)etil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftilfenil)- ' 1H-imidazol-2-il)etil)metilcarbamato (460 mg, 58% de rendimento). Tempo de retenção de LC-MS 3,28 min; Calc. para CagHa7N5O,: 651,37 m/z.
Encon- trado 651,34 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo - 20 líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Lu- na de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um compri- mento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Soivente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente ded4minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,24-8,12 (m, 2H), 7,98-7,82 (m, 8H),7,52-7,42 (m, 2H), 5,47 (s amplo, 2H), 2,77 (s, 3H), 2,76 (s, 3H),1,64 (m, 6H), 1,52 (s, 18H).
no oco nO <
H Intermediário 193 (S)-N-Metil-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(metilamino)etil)- 1 H-imidazol-4- iNnaftalen-2-ilYfenil)- 1 H-imidazol-2-i)etanamina Uma solução de HCl 4N em dioxana (10 mL) foi adicionada a . tfere-butil — ((18)-1-(4-(4-(6-(2((18)-1-((terc-butoxicarbonil)(metil)amino)etil)- 1Himidazol4-il)-2-nafti)fenil)-1H-imidazol-2-iN)etil)]netilcarbamato (434 mo, 9,667 mmol) em MeOH (10 mL) e agitada em condições ambientes por 3 horas, concentrada e seca sob vácuo. Sal de tetra HCI (suposição teórica: : 396 mg). Tempo de retenção de LC-MS 1,44 min; Calc. para CogH3 Ne: 451,26 m/z. Encontrado 451,17 [M+H]". Dados de LC foram registrados em 7 10 um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna de 2,0x380mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Sol- i vente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. Esquema 52 o 4 Pac, H, o e as TA BO Intermediário 194
Boc o À Boc dd N. de TA DA, meses & E
H 2) NH,0Ac, xilenos Boc | HElVdisxana OX n FS *% So Po S O PA RCO,H KH a Ser N qN H N Intermediário 196 . ão Bxempios A - O Intermediário 196 foi preparado conforme mostrado no Es- quema 52 utilizando (28,48) 1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2- carboxílico como material de partida. Dados analíticos para os intermediários - 5 mostrados abaixo. ; o Ss am taA Intermediário 194 Ácido (28,4S)-1-(fere-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2-carbo- xílico Uma solução de (S)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilenopirrolidino- 2-carboxílico (4 g, 17,680 mmol) em 2-propanol (10 mL) foi adicionada a uma suspensão purgada de nitrogênio de paládio sobre carbono 10% (936 mg) em 2-propanol (240 mL) e o frasco foi carregado com gás hidrogênio (1 atm). Após ser agitado 18 horas, o catalisador foi removido através de filtragem em CELITES e o filtrado concentrado. Análise de LC mostrou que a amostra continha -14% do isômero trans, e recristalização a partir de tolueno enri- —queceu o isômero cis para 98% (186:1). Tempo de retenção de LC-MS 3,26 min; Calc. para Cy HaoN8O4: 230,14 m/z. Encontrado 252,14 [M+Na]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº de 2x5mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- teB100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era me- tanol 10% / água 90% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 90% / água 10% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD)õ ppm 4,21 -4,17 (m, 1H), 3,76 - 3,67 (m, 1H), 2,96 - 2,92 (m, 1H), | 2,49 - 2,46 (m, 1H), 2,30 - 2,29 (m, 1H), 1,59 - 1,51 (m, 1H), 1,47 / 1,43 (m, . 9H), 1,10 -1,06 (m, 3H). N a con : a - NON Boc Intermediário 195 terc-butil (28,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- i metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1 H-imidazol-2-11)-4-metil-1-
—pirrolidinocarboxilato Base de Hunig (0,381 mL, 2,181 mmot) foi adicionada a uma so- lução agitada de ácido (28,48)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2- carboxílico (500 mg, 2,18 mmol) e 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen- 2-ilfenietanona (486 mg, 1,09 mmol) em acetonitrila (11 mL). A mistura heterogênea foi agitada por 18 horas em temperatura ambiente e mais base de Hunig (1 equivalente) foi adicionada e a mistura foi agitada por 24 horas.
O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em cloreto de me- tileno e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura e seca em sulfato de sódio.
A lavagem foi repetida 2X.
O produto bruto, isola- docomo uma espuma castanha, foi absorvido em xileno (15 mL) e acetato de amônio (1,2619g, 16,36 mmol) foi adicionado.
O recipiente de reação foi vedado e posto em um banho de óleo preaquecido (140ºC) e agitado por 2 horas. A mistura de reação foi absorvida em acetato de etila e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura. Após ser concentra- do, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) em um cartucho de síilica-gel Thompson de 80 g (eluído com B 25% para B 100% em 1,5 L e mantido em B 0,5 L. Solvente B = acetato de etila e Solvente A = hexanos) para dar ferc-butil (28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28 4S)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1- pirrolidinocarboxilato (214,2 mg 27,9 %) como uma espuma amarela. Tempo deretenção de LC-MS 3,32 min; Calc. para Ca2Hs1N6O24: 703,40 m/z. Encon- trado 703,28 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo ] líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Lu- na de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um compri- mento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram ' 15 uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- . vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente " de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o . Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- - 20 terminados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropuíve- rização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,20 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,96- 7,94 (m, 2H), 7,87-7,82 (m, 6H), 7,50 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 4,87 (s amplo, 2H), 3,81 (s amplo, 2H), 3,24-3,18 (m, 2H), 2,53-2,50 (m, 2H), 2,36 (s amplo, 2H), 1,82-1,74 (m, 2H), 1,46/1,23 (s, 18H), 1,17-1,16 (m, 6H). f o
N a ne
H Intermediário 196 2-((28,4S)-4-Metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(8-(2-((28,48)-4-metil-2- pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-il)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazo]l
Uma solução de HCI 4N em dioxana (15 mL) foi adicionada a terc-butil (28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(tero-butoxicarbonil)-4-metil-2- pirrolidinil)-1H-imidazo!-4-i1)-2-naftiYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-4-metil-1- pirrolidinocarboxilato (200 mg, 0,285 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada em condições ambientes por 2 horas, concentrada e seca sob vácuo. Sal de tetra HCl (suposição teórica: 185 mg). Tempo de retenção de LOC-MS 2,64 min; Calc. para Ca2H35Ng: 503,29 m/z. Encontrado 503,20 [M+H]*. Dados de LG foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um de- teclor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 ' mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- ' 15 vente À era metano! 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol . 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um : MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. Esquema 53 . o Bos sa o Boc No RS N AE o AO Intermediário 197 Intermeciário 198 Am ! Eoc o à Boc. 8 e O (34) Br > N +
Í EX K 2)NH0Ac xlenos Bec | Húá/dloxano x H í (<), a REOM &, À O. be) ” N Exempios H Intermediário 201
R
O Intermediário 201 foi preparado conforme mostrado no Es- quema 53 utilizando ácido (2S,4R)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino- 2-carboxílico como material de partida, Dados analíticos para os intermediá- rios mostrados abaixo. Boc o N o
OS Intermediário 197 O isômero frans foi isolado de uma mistura de cis, trans e o aná- ' logo de dimetila que poderia ser obtido a partir da alqguilação de iodeto de ' metila de (S)-1-terc-butil 2-metil-S-oxopirrolidino-1,2-dicarboxilato de acordo com o procedimento descrito em Tetrahedron Leffers, 2003, 3203-3205. *'H RMN (500 MHz, MeOD) à ppm 4,66-4,64 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 2,34-2,29 (m, . 10 1H),2,04-1,99 (m, 1H), 1,49 (s, 9H), 1,21-1,19 (m, 3H). ' Boc . SN . XI) ' Intermediário 198 Complexo de borano-sulfito de metila (17,567 mL, 35,3 mmol) foi adicionado a uma solução de Intermediário 197 (6,06 g, 23,55 mmol) em THF (180 mL) e a mistura de reação foi aquecida a 40ºC por 16 horas. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi dividido entre EtOAc e água (250 mL cada). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 80 mL) e a fase orgânica combinada foi seca com Na>SO, e concentrada in vacuo. O óleo incolor resultante foi purificado com uma cromatografia rápida (EtOAc 10-65%/Hexano) para dar o Intermediário 198 como um óleo incolor (3,65 g). ?H RMN (CDCi3, 5 = 7,24 ppm, 400 MHz): 4,36-4,33 (dd, J=2,4, 10, 0,4H), 4,26-4,23 (dd, J=3, 8,9, 0,6 H), 3,73-3,63 ('s' sobreposto com m', 4H), 2,97- 2,85 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,04 (m, 1H), 1,81 (m, 1H), 1,44-1,39 (dois 'S', 9H), 1,03-1,00 (dois 's', 3H).
Boc
X N
F Intermediário 199 Ácido (28,4R)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2-carbo- xílico A uma solução de éster Intermediário 198 (3,63 g, 14,92 mmol) em etanol (36 ml) foi adicionada solução de LiOH (0,393 g, 10,42 mmol) em água(1800mL)ea mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 22 horas. O solvente orgânico foi evaporado in vacuo e o resíduo foi dilu- . ido com água (30 mL) e lavado com acetato de etila (50 mL). Ele foi esfriado em um banho gelado e acidificado para uma faixa de pH de -2 com HCI IN. Ele foi então extraído com EtOAc (50 mL, 2x). A camada orgânica foi seca . 10 com NazSO, e concentrada in vacuo para dar o Intermediário 199 como um NR óleo incolor, que se tornou um sólido branco quando da exposição prolonga- . da a vácuo alto (3,3 9). "H RMN (CDCls, 5 = 7,24 ppm, 400 MHz): 4,37-4,27 (m' sobreposto 1H), 3,72-3,50 (m, 1H), 3,01-2,83 (m' sobreposto, 1H), 2,50- 2,11 (m, 2H), 1,89-1,57 (m, 1H), 1,47-1,39 (dois 's', 9H), 1,04-1,03 (dois 's”, 3H. | Boc [SO It a j Boc Intermediário 200 terc-butil (28,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((28 ,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4- metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol|-4-i1)-2-naftiYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-4-metil-1- pirrolidinocarboxilato Base de Hunig (0,381 mL, 2,181 mmol) foi adicionada a uma so-
lução agitada de ácido (28,4R)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpirrolidino-2- carboxílico (500 mg, 2,18 mmol) e 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen- 2-iNfenil)etanona (486 mg, 1,09 mmol) em acetonitrila (11 mL). A mistura heterogênea foi agitada por 18 horas em temperatura ambiente e mais base de Hunigfoiadicionada (1 equivalente) e a mistura foi agitada por 24 horas.
O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em cloreto de me- tileno e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura e seco em sulfato de sódio.
A lavagem foi repetida 2x.
O produto bruto, isolado como uma espuma castanha, foi absorvido em xileno (15 mL) e acetato de amônia (1,261 g, 16,36 mmol) foi adicionado.
O recipiente de pressão foi vedado e posto em um banho de óleo preaquecido (140ºC) e agitado por 2 ' horas.
A mistura de reação foi absorvida em acetato de etila e lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura.
Após ser concentra- do, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) para um cartucho de ' 15 sílica-gel Thompson de 80 g (eluído com B 25% para B100% em 1,5L e - mantido em B 0,5 L.
Solvente B = acetato de etila e Solvente A = hexanos) ' para dar ferc-butil (28,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((28 AR)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-
metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftiNfenil)-1 H-imidazol-2-i)-4-metil-1- . pirrolidinocarboxilato (214,2 mg 27,9 %) como uma espuma amarela.
Tempo - 20 deretençãodeLC-MS 3,32 min; Calc. para CaoH5NãO4: 703,40 m/z.
Encon- trado 703,28 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Lu- na de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um compri- mento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulve- rização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,20 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,96- 7,94 (m, 2H), 7,87-7,82 (m, 6H), 7,50 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 4,87 (s amplo,
2H), 3,81 (s amplo, 2H), 3,24-3,18 (m, 2H), 2,53-2,50 (m, 2H), 2,36 (s amplo, 2H), 1,82-1,74 (m, 2H), 1,46/1,23 (s, 18H), 1,17-1,16 (m, 6H).
nº [3X Or Fr, H GO vu O
N N Intermediário 201 : 2-((2S AR)-4-Metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28 AR)-4-metil-2- : pirrolidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazo] Uma solução de HCl 4N em dioxana (15 mL) foi adicionada a terc-butil (28,AR)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4R)-1-(ferc-butoxicarbonil)-4-metil-2- : pirrolidinil)-1 H-imidazo]-4-11)-2-nafti)Yfenil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirro- lidinocarboxilato (200 mg. 0,285 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada em con- " dições ambientes por 2 horas, concentrada e seca sob vácuo. Sal de tetra HCl (teórico suposto: 185 mg). Tempo de retenção de LC-MS 2,64 min; Calc. : para C32H35Ns: 503,28 m/z. Encontrado 503,20 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com | uma coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector de UV- Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As con- dições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradi- ente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 54 Boc sec H o im N N 2 fs gundo eoft Br À H n GG 6 O WON 052850 IX & J Intermediario 1136 De v Ae ' Intermeciario 292 F)UHÕES, xitenos | HCWDioxano ox H A N pn e [ % < D> o í 8 : Ot : DD . 1 é PES é ' NON RC a FP o Exemplos nulos H Intermediário 203 O Intermediário 203 foi preparado conforme mostrado no Es- ' quema 54 utilizando como material de partida ácido (18,3S8,58)-2-(terc- : 5 —butoxicarbonil)-2-azabicíclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (que poderia ser pre- ' parado de acordo com WO 2004/052850). Dados analíticos para os interme- diários mostrados abaixo. ! Bor ny
N NO . FS | 3 N >
CON
LO 7 N II] Ns N H Boc Intermediário 202 terc-butil / (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2X(18,3S,58)-2-(ferc-butoxicar- bonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yenil)-1 H-imidazol- 20)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexano-2-carboxilato Base de Hunig (0,384 mL, 2,2 mmol) foi adicionada a uma solu- ção agitada de 2-bromo-1-(4-(86-(2-bromoacetil)naftalen-2-il)Yfenil)etanona (0,491 g, 1,100 mmol) e ácido (18,38,58)-2-(ferc-butoxicarbonil)-2-azabici-
clo[3,1,0]Jhexano-3-carboxílico (500 mg, 1,1 mmol) em acetonitrila (11 mL). À mistura heterogênea foi agitada por 20 horas em temperatura ambiente e o solvente foi removido in vacuo.
O resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura e seco em —sulfatode sódio.
A lavagem foi repetida 2x.
O produto bruto foi absorvido em xileno (11 mL) e acetato de amônia (1,27 g, 16,5 mmol) foi adicionado.
O recipiente de pressão foi vedado e posto em um banho de óleo preaquecido (140ºC) e agitado por 20 horas.
O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura.
Após ser concentrado, o produto bruto foi carre- i gado (cloreto de metileno) em um cartucho de sílica-gel Thompson de 80 g ' (eluído com B 25% para B 100% em 1,5 L e mantido em B 0,5 L.
Solvente B = acetato de etila e Solvente A = hexanos) para dar ferc-butil (1$8,38,58)-3- (4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-
' 15 imidazol-4-il)-2-naftil)fenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- : carboxilato (418,9 mg, 43%) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção ' de LC-MS 3,46 min; Calc. para CaoHa7N6O4: 699,37 m/z.
Encontrado 699,33 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- W madzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minu- tos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 mi- —nutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solven- te B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulveriza- ção. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,18 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,96-7,93 (m, 2H), 7,85-7,80 (m, 6H), 7,45 (s amplo, 1H), 7,37 (s amplo, 1H), 5,36 (s amplo, 2H), 3,72 (s amplo, 1H), 3,64 (s amplo, 1H), 2,82 (s amplo, 1H), 2,72 (s amplo, 1H), 2,43 (s amplo, 1H), 2,15 (s amplo, 1H), 1,70 (s amplo, 2H), 1,55/1,33 (s, 18H), 1,10 (s amplo, 1H), 0,94 (s amplo, 1H), 0,88 (s amplo,
1H), 0,81 (s amplo, 1H).
NONE
DAD sã : n H () 7 N Id, |
H H Intermediário 203 (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-Azabiciclo[3,1,0Jhex-3-il)- ] 1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano ' Uma solução de HCl 4N em dioxana (10 mL) foi adicionada a fercbutil (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-(terc-butoxicarbonil)-2- azabiciíclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)- 1 H-imidazo|-2-11)-2- - azabiciclo(3,1,0]hexano-2-carboxilato (375 mg. 0,537 mmol) em MeOH (3 . mL) e agitada em condições ambientes por 2 horas, concentrada e seca sob " vácuo. Sal de tetra HCI (teórico suposto: 346 mg). Tempo de retenção de LCMS 2,75 min; Calc. para Ca2H3N5: 499,26 m/z. Encontrado 499,22 . [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- : madzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna de 20x50 cm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de flixode 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente À era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados u- —sandoum MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 55 o Ps o ss o u o Bor " o > N. . TA 1 TO, x Intermediário 197 Intermediário 204 Intermedisrio 205 Intermediario 206 Bor PA 9 AE n Poe E . “e Cet 6 CO meme am e a O) o ca, K Boc Intermediário 208 Í 2)HIH 0 Ac, xilenos N os H nº RE DD SS > O OS H He O N es - ve Me KH II — do . geN ON RCOH gu o . ão Exemplos BEAN Intermediario 209 O Intermediário 209 foi preparado conforme mostrado no Es- quema 55 utilizando como material de partida ácido (18,38,58)-2-(terc- — butoxicarbonil)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (que poderia ser preparado de acordo com o WO 2004/052850). Dados analíticos para intermediários mostrados abaixo. Boc
SS N
A Intermediário 204 A uma solução da mistura diastereomérica (no carbono carre- gando o grupo metila) de Intermediário 197 (4,75 g, 18,46 mmol) foi adicio- nado superidreto (19,20 mL, 19,20 mmol) em gotas a -50ºC em um banho de gelo seco/acetona durante 10 minutos. Base de Hunig (13,58 mL, 78 mmol) foi adicionada, agitada por 10 minutos, DMAP (0,122 g, 0,987 mmol) foi adi- cionado como um sólido, agitado por 15 minutos e anidrido trifluoracético
(2,98 mL, 21,08 mmol) foi adicionado em gotas durante 15 minutos. O banho de gelo seco/acetona foi removido e a mistura de reação foi agitada por 4 horas enquanto sendo deixada aquecer para temperatura ambiente. A mistu- ra de reação foi lavada com água (50 mL), NaCl saturado (30 mL) e concen- tradain vacuo. O material bruto resultante foi purificado através de cromato- grafia rápida (EFtOAc 8-80%/Hexano) para dar éster Intermediário 204 como um óleo amarelo (2,85 9). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz): 6,36 (s, 0,5H), 6,25 (s, 0,5H), 4,70-4,57 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,98 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,50 (s, 4,5H), 1,44 (s, 4,5H). Boc Boc - o N 3 . o N H
TD CP Me Me Intermediário 205 e Intermediário 206 - 10 Dietilzinco (1,1 M em tolueno, 59,1 mL, 65,0 mmol) foi adiciona- : do em gotas durante 20 minutos a uma solução de tolueno fria (-23ºC) (60 ' mL) de Intermediário 203 (5,23 g, 21,68 mmol) e agitado por 10 minutos. Cloroiodometano (9,44 mL, 130 mmol) foi adicionado em gotas durante 10 . minutos e a mistura de reação foi agitada a -21ºC por 16 horas. NaHCO; - 15 saturado (60 mL) foi adicionado à mistura de reação, o banho de esfriamento foi removido e a mistura foi agitada por 10 minutos. Ela foi então filtrada e a torta de filtro foi lavada com tolueno (50 mL). O filtrado foi dividido e a cama- da orgânica foi seca com NazSO, e concentrada in vacuo. O material bruto resultante foi purificado com cromatografia rápida (EtOAc 2-10%/Hexano) paradar Intermediário 205 (primeiro eluto; óleo incolor; 2,88 9) e Intermediá- rio 206 (segundo eluto; óleo incolor; 1,01 g). Determinação estereoquímica relativa foi feita com base em estudos NOE. Intermediário 205: *H RMN (CDCl3, 400 MHz): 4,85-4,52 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,28-3,17 (m, 1H), 2,44- 2,32 (m, 1H), 2,16-2,10 (m, 1H), 1,51-1,42 (dois, 9H), 1,24 (s, 3H), 1,07 (m, 1H) 0,69-0,60 (m, 1H).
Boc ºC NH Me Intermediário 207 Ácido (18,38,58)-2-(terc-butoxicarbonil)-S-metil-2-azabiciclo [3,1 O0]hexano-3-carboxílico A uma solução de Intermediário 205 (2,88 g, 11,28 mmol) em e- tanol (20 mL) foi adicionada uma solução de LiOH (0,324 g, 13,54 mmol) em água(10,00mL)e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 6 ho- ' ras.
A maioria do componente volátil foi removida in vacuo e o resíduo foi - divídido entre água (20 mL) e éter (20 mL). A camada aquosa foi esfriada em um banho de água gelada, acidificada com HCI 1N para uma região de pH de 2 e extraída com EtOAc (30 mL, 4x). A fase orgânica combinada foi seca - 10 com NazSO,, evaporada in vacuo para dar o Intermediário 207 como um só- . lido pegajoso (2,55 g). '*H RMN (CDCl3, 400 MHz): 4,64 (m, 1H), 3,25 (s ap, & 1H), 2,70-2,40 (m, 1H), 2,14 (m, 1H), 1,54-1,44 (m, 9H), 1,27 (s, 3H), 1,10- 0,80 (m, 1H), 0,87 (m, 1H). . N sos, H - ES OS E.
Me H (O ID, ] À Boo Intermediário 208 ferc-butil/ (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-(terc-butoxicar- — bonil)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1 H- imidazo|-2-i1)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato Base de Hunig (0,475 mL, 2,72 mmol) foi adicionada a uma so- lução agitada de 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-i)fenil)etanona (0,607 g, 1,356 mmol) e ácido (18,3S,5S)-2-(ferc-butoxicarbonil)-5-metil-2- —azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (729,0 mg, 2,72 mmol) em acetonitrila seca (12 mL). A mistura heterogênea foi agitada por 20 horas em temperatu- ra ambiente e o solvente foi removido in vacuo.
O resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura e seco em sulfato de sódio.
A lavagem foi repetida 2x.
O produto bruto foi absorvido em xileno (12 mL) e acetato de amônia (1,57 g, 20,39 mmol) foi adicionado.
O recipiente de pressão foi vedado e posto em um ba- nho de óleo preaquecido (140ºC) e agitado por 2 horas.
O solvente foi remo- vido in vacuo e o resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com so- lução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura.
Após ser concentrado, o — produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) em um cartucho de sílica- gel Thompson de 80 g (eluído com B 25% para B 100% em 1,5 L e mantido ' em B 0,5 L.
Solvente B = acetato de etila e Solvente A = hexanos) para dar terc-butil (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-(ferc-butoxicarbonil)-5-metil- 2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazol-2-i1)-5- ' 15 metil-2-azabiciclo([3,1,0]hexano-2-carboxilato (279 mg, 27%) como um sólido : amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 3,565 min; Calc. para 7 Ca4Hs1NSO4: 727,40 m/z.
Encontrado 727,41 [M+HF'. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com . uma coluna PHENOMENEXº de 2,0x50mm usando um detector de SPD- - 20 10AV UV-Vis em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de elu- ição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mLímin, um gradiente de Solven- te A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tem- po de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95%/TFAO01%e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,18 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,96-7,93 (m, 2H), 7,83-7,80 (m, 6H), 7,43 (s amplo, 1H), 7,35 (s amplo, 1H), 5,35 (s amplo, 2H), 3,42 (s amplo, 1H), 3,36 (s amplo, 1H),2,61(s amplo, 1H), 2,53 (s amplo, 2H), 2,72 (s amplo, 1H), 1,55/1,33 (s, 25H), 1,06 (s amplo, 1H), 0,85 (s amplo, 1H), 0,72 (s amplo, 1H).
NAL | N St E. Me H ()
II
EN OS Intermediário 209 (18,3S,58S)-5-Metil-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58S)-5-metil-2-azabiciclo [3,1,0]hex-3-i)- 1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo ' [3,1 ,0]hexano Uma solução de HCI 4N em dioxana (15 mL) foi adicionada a ] 5 ferc-butil (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2((18,38,58)-2-(terc-butoxicarbonil)-5-metil- 2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)- 1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-5- metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (250 mg. 0,344 mmol) em Me- Ú OH (5 mL) e agitada em condições ambientes por 2 horas, concentrada e ' seca sob vácuo. Sal de tetra HCl (suposto teórico: 231 mg). Tempo de re- ' 10 tenção de LC-MS 3,09 min; Calc. para Ca4H3s5Ns: 527,28 m/z. Encontrado 527,35 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido ' Shimadzu LC-104S equipado com uma coluna PHENOMENEX? de " 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de0,8mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados u- —sando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
Esquema 58 Bor o q ao. Me Intermediário 206 Boc A o À Be q o CP | SAP Br Me OO E Me 6 OO imensa to e (O) . O Intermegtario 1141 Die DI Intermediário 241 2) NH,0 Ac, Xilenos | HCfdioxano o KR H
H
NON N ' DAP (<P O N Me CO K Me “A "IO ' do | O ' À N REOM dh ON do e R Exemplos Ta Intermediário 212 ' O Intermediário 212 foi preparado conforme mostrado no Es- ' quema 56 utilizando como material de partida ácido (1R,3S8,5R)-2-(terc- — butoxicarboni!l)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-3-carboxílico (que poderia ser preparado de acordo com o WO 2004/052850). Dados analíticos para os intermediários mostrados abaixo. Boc o No
CÊ Me Intermediário 210 Ácido (1R,38,5R)-2-(terc-butoxicarbonil)-S-metil-2-azabiciclo [3,1,0]hexano-3-carboxílico O Intermediário 210 foi preparado a partir do Intermediário 206 conforme descrito acima para o Intermediário 207. 'H RMN (CDCl3, 400
MHz): 4,13 (s amplo ap, 1H), 3,06 (s amplo ap, 1H), 2,55/2,41 (s amplo ap sobrepondo, 2H), 1,51 (s, 9H), 1,27 (s, 3H), 0,76 (t ap, J = 5,6, 1H), 0,60 (s amplo ap, 1H). N Bos H
Í AP Me H (o
N DD ; Boc " Intermediário 211 ' terc-butil (1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-butoxicar- — bonil)-o-metil-2-azabiciclo(3,1,0])hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)fenil)-1 H- imidazol-2-il)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato ] Base de Hunig (0,29 mL, 1,66 mmol) foi adicionada a uma solu- . ção agitada de 2-bromo-1-(4-(6-(2-bromoacetil)naftalen-2-ifenil)etanona ' (0,37 g, 0,83 mmol) e ácido (1R,3R,58)-2-(terc-butoxicarbonil)-S-metil-2- —azabiciclo[3,1,0]Jhexano-3-carboxílico (0,40 g, 1,88 mmol) em acetonitrila se- ' ca (9 mL). A mistura heterogênea foi agitada por 20 horas em temperatura : ambiente e o solvente foi removido in vacuo. O resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada, salmoura e seco em sulfato de sódio. A lavagem foi repetida 2x. O produto bruto foi absorvido em xileno (9 mL) e acetato de amônia (1,3 9, 16,6 mmol) foi adicionado. O recipiente de pressão foi vedado e posto em um banho de óleo preaquecido (140ºC) e agitado por 2 horas. O solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi absorvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada e salmoura. Após ser concentrado, o produto bruto foi carregado (cloreto de metileno) em um cartucho de sílica-gel Thompson de 90 g (eluído com B 25% para B 100% em 1,5 L e mantido em B 0,5 L. Solvente B = acetato de etila e Solvente A = hexanos) para dar ferc- butil / (1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-5-metil-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazo|-2-1)-5-
metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (80 mg, 10%). Tempo de reten- ção de LC-MS 3,37 min; Calc. para CaaHs:iNsO,4: 727,40 m/z. Encontrado 727,38 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- deo Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era metanol 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados u- ' sando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,19 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,92-7,91 (m, 2H), 7,85-7,77 (m, 6H), 7,47 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,57 (s amplo, 2H), 3,93-3,90 ' 15 (m 2H),2,63-2,57 (m, 2H), 2,20-2,14 (m, 2H), 1,31-1,23 (m, 24H), 0,92 (app. . d, J=6,7 Hz, 1H), 0,82 (s amplo, 1H), 0,77-0,75 (m, 2H). | NONE <P À Me H (O)
N ID) i
H H Intermediário 212 (1R,3S,5R)-S-Metil-3-(4-(4-(8-(2-((1R,3S,5R)-5-metil-2-azabiciclo [3,1,0]hex-3-il)- 1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo [3,1 ,0]hexano Uma solução de HCI 4N em dioxana (5 mL) foi adicionada a terc- butil (1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(ferc-butoxicarbonil)-5-metil-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-i1)-5- metil-2-azabicício[3,1,0] hexano-2-carboxilato (48 mg, 0,066 mmol) em Me- OH (1 mL) e agitada em condições ambientes por 2 horas, concentrada e seca sob vácuo. O sal de tetra HCI (suposto teórico: 44 mg). Tempo de re-
tenção de LC-MS 2,82 min; Calc. para CaaHasNs: 527,29 m/z. Encontrado 527,26 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV de comprimento de ondade220nM, As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solven- te A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era metanol 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era me- tanol 95% /água 5% /TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando í um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. , EXEMPLOS eu P! TJ 9 = Te H . fo H É ias , "é o Exemplo 64 . Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2-((1R,3S, : 5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabicicio[3,1,0]
15. hex3il)-1H-imidazol-S-iNfenil)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato N-Clorossuccinimida (10,4 mg, 0,078 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)- 2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-3- il)-1H-imidazol-4-i)fenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-it)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)- 2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (Exempio 61) (60 mg, 0,071 mmol) em DMF (1,5 mL) e o recipiente de reação foi vedado e aquecido a 50ºC por 16 horas. A reação foi esfriada, parcialmente concentrada e então diluída com MeOH. A solução foi filtrada e purificada através de HPLC pre- — parativa (MeOH/H2O, com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((1S)- 2-((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxi-
carbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-5- iDfenil)-2-naftil)- lH-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-2-11)-2-0x0-1-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (21,4 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,798 min; m/z 462,34 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH : 5%! HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5%/ Me- OH 95%/ acetato de amônio 10. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN 7 15 (400 MHz, MeOD) ô ppm 8,18 (s, 2 H), 8,03 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,99 (d, : J=8,8 Hz, 1 H), 7,80 - 7,92 (m, 6 H), 5,068 (ddd, J=9,0, 5,8, 3,5 Hz, 2 H), 4,63 ] (d, J=7,5 Hz, 1 H), 4,57 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 3,92 - 3,98 (m, 2 H), 3,771 - 3,81 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H), 3,35 - 3,44 (m, 2 H), 2,42 - 2,57 (m, 4 H), 1,99 - 2,24 : (m, 4 H), 1,40 - 1,66 (m, 4 H), 1,06 - 1,14 (m, 2 H), 1,03 (d, J=6,8 Hz, 3 H), . 20 0,95(d,J=6,8Hz 3H), 0,82(d,J=2,8Hz,2H). Y ; N
DOE OE F o o F Nº Kd CO o ÁnX <<) UK NH F N q Exemplo 65 Metil ((18)-1-(4 4-difluorcicto-hexil)-2-((1R,38S,5R)-3-(4-(4-(6-(2- ((1R,38,5R)-2-((28)-2-(4 A-difluorciclo-hexil)-2-((metoxicarbonil)amino)acetil)- 2-azabiciíclo[3,1,0]hex-3-iI)- H-imidazol-4-it)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazo!-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-iI)-2-oxoetil)carbamato HATU (67,3 mg, 09,177 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCl de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo
[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-imidazol-S-ilnaftalen-2-iDfenil)-1H-imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 69) (38,0 mg, 0,059 mmol) e ácido (S)-2-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-(metoxicarbonilamino)acético (44,5 mg, 0,177 mmol) em DMF (0,7 mL) e DIPEA (0,103 mL, 0,590 mmol). A reação foi diluída comMeOH, filtrada, purificada através de HPLC preparativa (água/MeOH com TFA 0,1%) e novamente purificada através de HPLC preparativa (água/ Me- OH com acetato de amônio 10 mM) para dar metil ((1S)-1-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-((1R,38,5R)-3-(4- (4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-(4 A-difluorciclo-hexil)-2-((metoxicarbonil) a- —mino)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-2-11)-2-oxoetil)carbamato (22,1 mg) como : um sólido amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 2,713 min; m/z 483,13 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna , 15 10Uu C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um : comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma : taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 ' minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era 5% MeOH / 95% H2O / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. 17H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 8,16 (s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,94 (d, J=8,5 Hz, 2 H), 7,77 - 7,85 (m, 5H), 7,47 (s 1H), 7,39(s 1H) 7,08 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 5,15 (ddd, J=8,2, 6,3, 6,1 Hz, 2H), 4,68 (s amplo, 2 H), 3,69 - 3,76 (m, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 2,41 - 2,57 (mn, 4 H), 1,65 - 2,12 (m, 16 H), 1,33 - 1,59 (m, 4 H), 1,06 - 1,17 (m, 2 H), 0,78 (s am- plo, 2H).
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H AOS eo N x Exemplo 66 Metil — ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)butanoil)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-il)-1H-imidazo|-4- iN)-2-naftifenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- ' i)carbonilpropil)carbamato . 5 HATU (89 mg, 0,24 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de um sal de TFA de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-azabíciclo 13,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-S-il)naftalen-2-iNfenil)-1H-imidazol-2-11)-2- - azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 69) (80 mg, 0,084 mmol) e ácido (S)- ' 2-(metoxicarbonilamino)butanoico (37,8 mg, 0,235 mmol) em DMF (0,8 mL) 4 10 e DIPEA (0,15 mL, 0,84 mmol). A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (água/MeOH com TFA 0,1%) para . dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2- : ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)butanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H- imidazo|-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il) — car- bonilpropilicarbamato (70,1 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 1,688 min; m/z 785,55 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90%/ ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 8,28 (s, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 8,12 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,93 - 8,00 (m, 4 H), 7,82 - 7,90 (m, 4 H), 5,12- 5,21 (m, 2 H), 4,58 - 4,65 (m, 2 H), 3,74 - 3,81 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H), 2,70 (ddd,J=13,7,9,0,4,9Hz,2H),2,49 (dq, J=14,2,7,1 Hz, 2 H), 2,09 (s amplo, 2H), 1,868 - 1,99 (m, 2 H), 1,64 - 1,77 (m, 2 H), 1,09 - 1,17 (m, 2 H), 1,02 (t, J=7,4 Hz, 6 H), 0,92 (s amplo, 2 H). So v A ! Qd Yo SAL e LATA ' " O" “E Exemplo 67 ' Metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(4-(6-(2-((28,5S)-1-((28)-2-((metoxi- . carbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazo|-4-i/)-2- : 10 naftilfenil)>-1H-imidazol-2-11)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carba- mato ' HATU (101 mg, 0,266 mmol) foi adicionado a uma solução agi- ' tada de um sal de TFA de 2-((28,58S)-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,58) -5-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-nafti)Yfenil)- 1H-imidazol (Intermediá-
15. rio 117) (102 mo, 0,108 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanoico (46,6 mg, 0,266 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,189 mL, 1,1 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À mistura de reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC pre- parativa (MeOH/H7O0 com TFA 0,1%) e então novamente purificada através de HPLC preparativa (acetonitrila/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(4-(6-(2-((28,58)-1-((2S8)-2-((metoxicar- bonil)>amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil) fenil)-1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (63,8 mg) como um sólido amarelo pálido. Tempo de retenção de LC-MS 1,900 min; m/z817,59 (MH+). Dados de LC foram registrados em um croma-
tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD- 10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente À 100%/Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tem- po de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90 % / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN se apresenta i como uma mistura 4:1 de regioisômeros. 'H RMN (para regioisômero maior) i (400 MHz, MeOH) 5 ppm 8,31 (s, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 8,13 (d, J=8,5Hz, 1 H), 8,09 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,94 - 8,02 (m, 5 H), 7,84 - 7,92 (m, 3 H), 5,15- 5,24 (m, 2 H), 4,13 (dd, J=8,7, 1,4 Hz, 2 H), 3,74 (d, J=2,8 Hz, 2 H), 3,67 (s 6 H), ' 15 2,50-2,60(m, 2H), 2,26-2,45(m, 4H), 1,95 - 2,10 (m, 4 H), 1,57 (dd, : J=6,5, 3,0 Hz, 6 H), 1,32 (t, J=6,4 Hz, 2 H), 0,99 (d, J=6,8 Hz, 6 H), 0,89 (d, ] J=6,8 Hz, 6 H). o . " QN o 4 PO L à ( Exemplo 68 Metil — ((18)-1(((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(4-cloro-2-((1R,38S,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- —azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-5-i1)-2-naftiVfenil)-1 H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0)hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato e o — QN ? x Ç ' TS o x Exemplo 69
Metil — ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-aza- biciclo/3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftiNfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato Uma mistura de dois regioisômeros de cloroimidazol como sais de TFA (Exemplos 68 e 69) (21,4 mg) foi isolada da mesma reação que a- quela que preparou um sal de TFA de meti! ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5- (6-(4-(4-cloro-2((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbuta- noil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-5-il)Yfenil)-2-naftil)-1 H-imidazol-2- il) 2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (Exemplo 64). Os dois compostos regioisoméricos foram separados em inje- ' ções múltiplas usando cromatografia SFC (coluna SCF de 2-etilpiridina (4,6 x 250mm, 5um) e CO, 80% - EtoH 20%/0,1%DEA). A regioquímica absoluta dos materiais separados foi ' 15 determinada através de correlação de HMBC.
A reação deu metil ((18)-1- : (((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) ' amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H- imidazol-5-il)-2-naftiNfenil)- 1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il) — car ' bonil)-2-metilpropil)carbamato (7,4 mg) e metil ((1S)-1-(((1R,3S8,5R)-3-(4-clo- ' 20 ro 5-(4-(6-(2((1R,3S8,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil) -1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil) carbama- to (4,5 mg), cada um como um sólido esbranquiçado.
Para o Exemplo 68: Tempo de retenção de LC-MS 2,683 min; m/z 889,17 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeEOH 5% / H7O 95%/ acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / Me-
OH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização.
Para o Exemplo 69: Tempo de retenção de LC-MS 2,695 min; m/z 889,22 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- —10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solven- : te B era HO 5% / MeOH 95%/ acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS fo- ram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de ele- tropulverização. - “% v : o | Qu o Or eo AS Exemplo 70 Metil / ((18)-2-((28,58)-2-(4-(4-(6-(2((28,58)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-5-metil-2-pirrotidinil)-1H- imidazo|-4-i)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-iI)-S5-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etilcarbamato HATU (73,3 mg, 0,193 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tadadeumsaldeTFA de 2-((28,58)-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28S,5S) -o-metil-2-pirrolidiniN)-1H-imidazol-4-11)-2-naftiYfenil)- 1H-imidazol (Intermediá- rio 117) (73,9 mg, 0,077 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acético (41,9 mg, 0,193 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,14 mL, 0,77 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos.
À mistura de reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada a-
través de HPLC preparativa (MeOH/Hz7O com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28,58)-2-(4-(4-(6-(2-((2S8,58)-1-((28)-2-((metoxicarbo- nil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imida- zol-4-iI)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-1D-5-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-
— hidro-2H-pirand4iletil)carbamato (51,2 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 1,897 min; m/z 901,39 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B ' 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de tempo de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / H;O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO ' 15 5%/MeOH 95% / acetato de amônio.
Dados de MS foram determinados : usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. - SS . Ar | DO “o E : e Ok OT ALI | PDDO F qu Da 7 Dé Exemplo 71 Metil ((18)-1-(4,A-difluorciclo-hexil)-2-((28,58)-2-(4-(4-(6-(2- ((28,58)-1-((28)-2-(4,4-difluorcício-hexil)-2-((metoxicarbonil)amino)acetil)-5- metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1- pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato HATU (70,8 mg, 0,186 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2(28,5S)-S-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,58S) -S-metil-2-pirrolidinit)-1 H-imidazol-4-1)-2-naftiNfenil)- 1H-imidazol (Intermediá- rio 117) (71,4 mg, 0,074 mmol) e ácido (S)-2-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-(meto- xicarbonilamino)acético (46,8 mg, 0,186 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA
(0,13 mL, 0,75 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/H7O com TFAO,1%) para dar o produto desejado um sal de TFA de metil ((18)-1-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-((28,58)-2-(4-(4-(6- (24(28,58)-1-((28)-2-(4,4-difluorciclo-hexil)-2-((metoxicarbonil)>amino)acetil)- S5-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)- 1 H-imidazol-2-1)-5-metil- 1-pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato (43,3 mg) como um sólido amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 2,828 min; m/z 485,22 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de 220 nM.
As : condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mL/min, um gradi- ente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de ' 15 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH : 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / Me- ' OH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados u- sando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. : “o Ny - ni G DT o ao” H . Cs QE" <O( Y NA . Exemplo 72 Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(4-(6-(4-cloro-2-((1R,3S, 5R)-2-((2S)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1H-imidazol-5-i1)-2-naftifenil)-1 H-imidazo|-2-1)-2- azabiciclo[3,1,0Jhex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran4-il)etil)carbamato N-Clorossuccinimida (7,1 mg, 0,053 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabici- clo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol|-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-11)-2-azabi-
ciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato — (Exem- plo 34) (22,7 mg, 0,025 mmol) em DMF (0,5 mL) e o recipiente de reação foi vedado e a reação foi aquecida a 50ºC por 12 horas. A reação foi esfriada para temperatura ambiente, mais N-clorossuccinimida (-3 mg) foi adicionada eorecipiente de reação foi vedado e agitado a 50ºC por 2 horas. À reação foi esfriada para temperatura ambiente, diluída com MeOH, filtrada e purifi- cada através de HPLC preparativa (Metanol/Água com TFA 0,1%) para dar metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(4-(6-(4-cloro-2-((1R,3S8,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-2-azabiciíclo[3,1,0] hex3l) 'iH-imidazol-5-il)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (12 mg) como um ' sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,708 min; m/z 483,25 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX?º Luna 10u C18 de : 15 3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento : de onda de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo : de 4 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos on- ' 20 deoSolvente A era MeOH 5% / H;O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeQOH 95%/ acetato de amônio 10 mM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,18 (s, 2 H), 8,04 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,99 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,80 - 7,92 (m, 6 H), 5,02 - 5,09 (m, 2 H) 4,63(d,J=6,0Hz,2H),3,91-3,99 (m, 4H), 3,73 -3,80 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H), 3,34 - 3,45 (m, 4 H), 2,43 - 2,54 (m, 4 H), 1,98 - 2,13 (m, 4 H), 1,38 - 1,67 (m, 8 H), 1,06 - 1,45 (m, 2 H), 0,81 (s amplo, 2 H).
N od, Â Se CT — No O á AA O nn CO HNo o Exemplo 73
Metil ((18,2R)-2-metóxi-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(8-(4-(2-((1R,3S,5R)
-2-(N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imi- dazol-4-i)fenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il) — carbo-
nilpropil)carbamato
HATU (65,7 mg, 0,173 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de 2((28,5S)-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(8-(2-((28S,5S) -5-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)'fenil)- 1 H-imídazol (Intermediá- rio 133) (66 mg, 0,069 mmol) e ácido (28,3R)-3-metóxi-2-(metoxicarbonila- mino)butanoico (33,0 mg, 0,173 mmol) em DMF (0,8 mL) e DIPEA (0,121 mL,0,691 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de : HPLC preparativa (Metanol/água com acetato de amônio 10 mM) para dar um sal de TFA de metil ((18,2R)-2-metóxi-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2- ((1R,38,5R)-2-(N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-
S 15. il-1H-imidazol-4-il)fenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-1))-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2- R iNcarbonil)propil)carbamato (51,9 mg, 0,048 mmol, 98% de rendimento) co- ' mo um sólido esbranquiçado.
Tempo de retenção de LC-MS 2,383 min; m/z 845,42 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido ' Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna 10u ' 20 C18de3,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 4 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 100% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 3 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 —minutosem que o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era H;O 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (MeOH, 400 MHz) 5 8,29 (s amplo, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,12 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,00 - 7,93(m 4H) 7,91-7,82 (m, 4H), 5,18 (td, J = 9,0, 7,0 Hz, 2H), 4,78 (dd, J = 3,9, 1,7 Hz, 2H), 3,92 - 3,79 (m, 4H), 3,68 (s, 6H), 3,35 (s, 3H), 3,35 (m, 3H), 2,76 - 2,65 (m, 2H), 2,59 - 2,47 (m, 2H), 2,15 - 2,05 (m, 2H), 1,19 (d, J = 6,3
Hz, SH), 1,16 - 1,07 (m, 2H), 0,94 - 0,84 (m, 2H). do -
IDA A FA AD NO Rn»
FAN E Exemplo 74 Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(8-((2((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i!)-1H- imidazo|-4-il)>etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-ilcar- 7 5 bonil)-2-metiloropil)carbamato . HATU (193 mg, 0,506 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-11)-2- . azabicíclo[3,1,0]hexano (Intermediário 124) (100 ma, 0,169 mmol) e ácido ' 10 (R)>2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (89 mg, 0,51 mmol) em DMF ' (1,5 mL) e DIPEA (0,24 mL, 1,4 mmol) e a solução laranja transparente foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi diluída com me- - tanol, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um : tampão de acetato de amônio) para dar metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6- ((2A(1R,38,5R)-2-((28S)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazot-4-i)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (71 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LC-MS 3,706 min; m/z 761,22 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50 mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era MeOH 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM. Dados de
MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,15 (s, 1 H), 7,96 (s, 1H), 7,80 - 7,88 (m, 3 H), 7,51 (dd, J=8,4, 1,6 Hz, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 5,18 (dd, J=9,0, 4,8 Hz, 1 H), 5,13 (dd, J=8,8, 4,3 Hz, 1 H), 4,59 (dd, J=11,8,6,8Hz,2H), 3,68-3,72(m,1H),3,67(s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,59- 3,64 (m, 1 H), 2,31 - 2,60 (m, 4 H), 2,08 - 2,22 (m, 2 H), 1,99 - 2,08 (m, 2H), 1,13 (ddd, J=8,6, 5,8, 5,5 Hz, 2 H), 1,00 (dd, J=12,9, 8,9 Hz, 6 H), 0,93 (dd, J=6,7, 2,9 Hz, 8 H), 0,79 (s amplo, 2 H). o, 1 a : “ o AB. " RA ; 4º N H À ; cr o . Exemplo 75 : (mistura de diastereômeros) : Metil (2-((1R,3S,5R)-3-(4-(8-((2-((1R,3S,5R)-2-(((metoxicarbonil) amino)(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-il)-1H- imidazo|-4-iN)etinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- ' ox0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (110 mg, 0,289 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(8-((2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1 0]hexan-3-il)-IH-imidazol-4-il)etinil)naftalen-2-11)-1H-imidazo]-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 124) (57 ma, 0,096 mmol) e ácido 2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético racêmico (62,7 mg, 0,289 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,134 mL, 0,770 mmol) e a solução laranja transparente foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas.
A re- ação foi diluída com metanol, filtrada e purificada através de HPLC prepara- tiva (MeOH/água com um tampão de acetato de amônio) para dar metil (2- ((1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-(((metoxicarbonil)amino)(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2- naftil)-1H-imidazo|-2-il)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-
piran-4-iDetil)carbamato (37,3 mg) como um sólido amarelo e como uma mis- tura de diastereômeros. Tempo de retenção de LC-MS 1,522 min; m/z 845,36 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS Luna 3u S C18de2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluora- cético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético : 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de eletropulverização. Mistura de diastereômeros. *H RMN (400 MHz, MeOH) 5 ppm 8,15 (d, J=12,8 Hz, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,80 - 7,90 1 15. (m,3H), 7,51 (dd, J=8,5,1,5Hz, 1 H), 7,46 (d, J=5,5 Hz, 1 H), 7,27 (d, J=5,3 - Hz, 1 H), 5,08 - 5,24 (m, 2 H), 4,61 - 4,689 (m, 1 H), 4,57 (dd, J=8,3, 4,5 Hz, 1 ' H), 3,85 - 4,03 (m, 5 H), 3,63 - 3,79 (m, 8 H), 3,34 - 3,49 (m, 5 H), 2,30 - 2,63 (m, 4 H), 1,99 - 2,16 (m, 3 H), 1,70 - 1,80 (m, 1 H), 1,35 - 1,68 (m, 6 H), 1,146 : - 1,26 (m, 1 H), 1,07 - 1,16 (m, 1 H), 0,70 - 0,83 (m, 2H). - ; ceu Ci o r o o H H — 4) S
BD FAIA AN e 6 Exemplo 76 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-((4-cloro-2-((1R,3S,5R) -2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3- il)-1H-imidazol-5-il)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2- iNcarbonil)-2-metilpropil)carbamato N-Clorossuccinimida (13,3 mg, 0,100 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S8,5R)-2-((2S) -2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H- imidazol-4-i)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-iI) - car-
bonil)-2-metilpropil)carbamato (38 mg, 0,050 mmol) em DMF (1 mL) e então o recipiente de reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e aquecido a 80ºC por 16 horas. A reação foi esfriada para temperatura ambiente e mais N-clorossuccinimida (7,4 mg) foi adicionada. A reação foi novamente aque- cidaa50ºC por 3 horas, esfriada para temperatura ambiente, diluída com MeOH (-0,5 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (Me- OHfágua, TFA buffer) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)- 3-(4-cloro-5-(6-((4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H-imidazol-5-il)etinil)-2-naftil)-1H- imidazol-2-l1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (5,0 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 4,153 min; Ú m/z 831,02 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um : 15 comprimento de onda de detector de 220 nM. Às condições de eluição em- - pregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de solvente A 100% ' / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gra- diente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de ' análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeEOH 10% / HO 90% ácido 7 20 trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 80% / ácido trifluo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,19 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,87 - 7,99 (m, 3 H), 7,58 (dd, J=8,5, 1,3 Hz, 1H), 5,07 (t, J=7,2 Hz, 1 H), 4,98 - 5,03 (m, 1 H), 4,54 - 4,59 (m, 2 H), 3,67 (s 6H) 3,62-3,75 (m, 2H), 2,45 -2,50 (m, 2 H), 2,41 (dd, J=7,3, 3,5 Hz, 2 H), 2,09 - 2,21 (m, 2 H), 1,96 - 2,08 (m, 2 H), 1,08 - 1,16 (m, 2 H), 1,02 (t, J=6,1 Hz, 6 H), 0,92 - 0,97 (m, 6 H), 0,75 - 0,85 (m, 2H). o à H R o. ah o NZ o“
Ô Exemplo 77
Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(((2R Ar, 86S)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)((metoxicarbonil)amino)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (25,4 mg, 0,067 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de metil (S)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2((1R,3S,5R)- 2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-5-i)naftalen-2-iI)fenil)- 1H-imidazol- 2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-i1)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato — (Inter mediário 128) (42 mg, 0,061 mmol), ácido 2-((2R,4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro -2H-piran-4-i)-2-(metoxicarbonilamino)acético (estereoisômero Cap-179 2) (14,9 mg, 0,061 mmol) e DIEA (0,053 mL, 0,30 mmol) em DMF (2 mL) e a i solução amarelada resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi redis- solvido em metano! e preparado através de HPLC preparativa. (Solvente A: ' 15. MeCN 0,5% / água 95% / NHAc 10 mM; Solvente B;: MeCN 95% / água 5% . 1 NH,Ac 10 MM; Coluna: Sunfire Prep MS C18 30 X 100mm S10; Compri- ' mento de onda 220nM; Taxa de fluxo: 40 mi/min; Gradiente: B 0% para B 80% durante 30 minutos com um tempo de manutenção de 5 minutos) para dar metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4(6-(2((1R,38,5R)-2-(((2R,4r,68)-2,6- - 20 dimetiltetra-hidro-2H-piran-4il)((metoxicarbonil)amino)acetil)-2-azabicíclo 13,1,0)hex-3-iI)- 1 H-imidazol-4-11)-2-nafti)fenil)-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo [3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (26 mg) como um sólido branco.
LO/MS [M+H]"=883; Tr= 2,99min é produto.
Coluna Luna 3u C18 de 2x50mm; % de B inicial: 0, % de B Final: 100 Solvente A: ACN 5%/ HzO 95%+ Acetato de Amônio 10 mM; Solvente B: ACN 95%/ HO 5% + Acetato de Amônio 10 MM; taxa de fluxo 4 miímin.
Tempo de atividade: 5 minutos.
Pureza = 97 %. 'H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 11,85 (1 H, s amplo), 11,73 (1 H, s amplo), 8,14 - 8,27 (2 H, m), 7,90 - 7,98 (3 H, m), 7,82 - 7,89 (3 H, m), 7,79 (2 H, d, J=8,24 Hz), 7,64 (1 H, s), 7,57 (TH, s), 7,19 (2H, t, J=9,31Hz),5,03-5,13(2H,m), 4,51 (1H, t J=7,93 Hz), 4,44 (1 H, t, J=7,78 Hz), 3,65 (1 H, s amplo), 3,51 - 3,60 (7 H, m), 3,29 - 342 (7 H, m), 2,35 - 2,47 (2H, m), 2,20 - 2,33 (2 H, m), 2,01 - 2,11 (2H, m), 1,83 - 1,902 (SH, m),
1,63 (1 H, d, J=12,21 Hz), 1,57 (1 H, d, J=11,60 Hz), 0,96 - 1,09 (12 H, m), 0,89 (4 H, d, J=6,71 Hz), 0,72 (2 H, s amplo). XY í NS Da ANA, NO o CO
EO O <DD> o i 2"
HN XY Exemplo 78 Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6"-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ' ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)- 1H- ' 5 imidazol-4-11)-2,2-binaftalen-6-1I)- 1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2- iDcarbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (91 mg, 0,240 mmol) foi adicionado a uma solução agita- , da de 6,6"-bis(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1 H-imidazol-4-i1)- : 2,2'-binaftil (Intermediário 133) (43,9 mg, 0,080 mmol) e ácido (S)-2-(metoxi- . 10 —carbonilamino)-3-metilbutanoico (42,0 mg, 0,240 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,14 mL, 0,80 mmol) e a solução marrom-claro foi agitada por 2 ho- ' ras. À mistura de reação foi diluída com MeOH e purificada através de HPLC - preparativa (MeOHfágua com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil (18) 1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(2((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) ami- no)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2,2"- binaftalen-6-il)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (28,9 mg) como um sólido amarelo. Tempo de reten- ção de LC-MS 1,788 min; m/z 863,46 (MH+). Dados de LC foram registrados emum cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 4 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H —RMN (400 MHz, MeOD)5ôõ ppm 38,37 (s, 2 H), 8,29 (d, J=1,0 Hz, 2 H), 8,15 (d, J=8,8 Hz, 2 H), 8,06 - 8,13 (m, 4 H), 7,97 (s, 2 H), 7,86 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 2 H), 5,17 (dd, J=9,3, 7,0 Hz, 2 H), 4,57 (d, J=6,8 Hz, 2 H), 3,80 - 3,86 (m, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 2,71 (dd, J=13,7, 9,4 Hz, 2 H), 2,46 - 2,56 (m, 2H), 2,15 - 2,25 (m, 2 H), 2,09 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 1,08 - 1,16 (m, 2 H), 1,03 (d, J=6,8 Hz, : 10 6H), 0,92-0,968(m,6H),0,88-0,96(m,2H). o o” . R Jo Fo o mn, o DOI > N N H > : o Ts 4 UF : Exemplo 79 Metil (18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-((28)-2- ((2R 4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-1)-2-((metoxicarbonil)amino) ' acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)fenil)-2-naftil)-1 H-imidazol- 2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (35,4 mg, 0,093 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de TFA de metil (28)-1-((1R,3S,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2- azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazol-S-iN)fenil)naftalen-2-i1)-1 H-imidazo]-2- i)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (47 mg, 0,072 mmol) e ácido (S)-2-((2R,4r,6S)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2- (metoxicarbonilamino)acético (23 mg, 0,093 mmol) em DMF (1mL) e DIPEA (0,050 mL, 0,29 mmol) e a reação foi agitada por 3 horas.
A mistura de rea- ção foi diluída com MeOH e HPLC preparativa purificada (MeOH/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-
(2-((1R,5R)-2-((28)-2-((2R 4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)-2-
((metoxicarbonilamino)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-4-
iNfenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (31,3 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de reten- ção de LC-MS 1,670 min; m/z 883,43 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna
— PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSS Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (d, J=1,0 Hz, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 8,12 (d, R 15 J=88Hz,1H),8,07 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,93 - 7,99 (m, 4 H), 7,82 - 7,92 (m, 4 . H), 5,15 (td, J=9,6, 6,9 Hz, 2 H), 4,58 (t, J=7,4 Hz, 2 H), 3,79 - 3,86 (m, 2H), ' 3,68 (s, 6 H), 3,43 - 3,53 (m, 2 H), 2,65 - 2,75 (m, 2 H), 2,50 (ddd, J=13,6, 6,7, 6,5 Hz, 2 H), 2,04 - 2,24 (m, 4 H), 1,54 - 1,62 (m, 1 H), 1,45 - 1,53 (m, 1 H), 0,84 - 1,21 (m, 18 H). - --o din, Va DS 4 NºS OCDE "Nr ú Exemplo 80
Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-
((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclof3,1,0]hex-3-il)-1H-
imidazot-4-i)fenit)-2-quinolinil)-1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-
il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (64,1 mg, 0,169 mmol) foi adicionado a uma solução de umsaldeHClde2-(2X4(1R,38,5R)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-11)-1H-imidazol-4-
1)-6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)- 1 H-imidazol-4-il)fenil) qui- nolina (Intermediário 139) (50 mg, 0,073 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoico (29,5 mg, 0,169 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,115 mL, 0,660 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
À reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((1S)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S8,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)- 1H-imidazol-4-iN)fenil)-2-quinolinit)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-
ibDcarbonil)-?2-metilpropil)carbamato (55,3 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,883 min; m/z 814,65 (MH+). Dados de LC ] foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de : 15 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 . mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À ' 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente ' 20 BeraHO 10%/MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS fo- ram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de ele- tropulverização. o 4, Vo e ENC, o NH 2 NO ú Exemplo 81
Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(8-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-
((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-2-azabiciclo
[3,1,0]hex-3l)1H-imidazol4il)fenil)-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-1)-2-
azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil)carbamato HATU (64,1 mg, 0,169 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de 2-(2((1R,38S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-3-il)- 1H-imidazo|-4- i)-6-(4-(2-((1R,38,5R)-2-azabiciclo(3,1,0)hex-3-iI)-1H-imidazol-4-iN)fenil) qui- nolina (Intermediário 139) (50 mg, 0,073 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4il)acético (36,8 ma, 0,169 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,12 mL, 0,66 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(2- ((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i)Yfenil)-2-quinolinil)-1H- imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNetil)carbamato (64,8 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de : 15 LO-MS 2,553 min; m/z 898,70 (MH+). Dados de LC foram registrados em um - cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- : NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ' ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente " 20 de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados —usandoum MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
o o &7 u o mn, Senha o o. o —o Exemplo 82 Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-
((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-iI)-1H-imidazol-4-iN)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato
HATU (102 mg, 0,269 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de (1R,3S8,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1,0]hexan-3-il)- 1H-imidazol-4-ietinil)naftalen-2-iI)-1H-imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (60 mg, 0,134 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (58,4 mg, 0,269 mmol) em DMF (1,2 mL) e DIPEA (0,19 mL, 1,1 mmol) e a reação foi agitada em temperatu- ra ambiente por 2 horas.
A reação foi diluída com metanol e purificada atra- vêés de HPLC preparativa (MeOH/água, com um tampão de acetato de amô- nio) para dar metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(8-((2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-i1)-1H-imidazol-4-iNetinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0] ; 15 hex-21)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato (48,9 mg) como um . sólido amarelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 2,572 min; m/z 845,65 ] (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de Í 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento r 20 de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético O %eo Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,14 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,80 - 7,87 (m, 3 H), 7,51 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 7,45 (s,1 H), 7,27 (s, 1 H), 5,16 (dd, J=8,8, 5,0 Hz, 1 H), 5,11 (dd, J=8,8, 4,5 Hz, 1 H), 4,66(d,J=7,5Hz, 1H), 4,63 (d,J=7,8 Hz, 1 H), 3,90 - 3,98 (m, 4 H), 3,67 (s, 6 H), 3,683 - 3,76 (m, 2 H), 3,33 - 3,44 (m, 4 H), 2,32 - 2,58 (m, 4 H), 1,08 - 2,10 (m, 4 H), 1,35 - 1,67 (m, 8 H), 1,08 - 1,46 (m, 2 H), 0,78 (s amplo, 2H).
. o 3 o mA,
GENOA
FSLIOS NE o £) 8 Exemplo 83 Metil ((18)-2-((1R,5R)-3-(4A(4-(8-(2((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabicíclo[3,1,0)hex-3-i1)-1H- imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2- ' o0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-iNetil)carbamato . 5 HATU (27,8 mg, 0,073 mmol) foi adicionado a uma solução de metil (28)-1-((1R,38,5R)-3-(5-(6-(4-(2-((1R,5R)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)- 1H-imidazol-S-i)fenil)naftalen-2-iN)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan- 2-1I)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamato (Intermediário 131) (40 mg, 0,061 : mmos) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acéti- ' 10 co(15,90 mg, 0,073 mmol) foi dissolvido em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,053 mL, 0,31 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. . A reação foi diluída com metano! e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de acetato de amônio) para dar metil ((18)-2- ' ((1R,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-
15. —metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H- imidazol|-2-11)-2-azabicíclo[3,1,0]Jhex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDetil)carbamato (3,5 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LO-MS 2,785 min; m/z 855,74 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x60mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu- toeumtempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH
90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,17 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,93 (dd, J=8,5, 3,0 Hz, 2H),7,77 -7,868 (m, 6 H), 7,44 (s, 1 H), 7,35 (s, 1 H), 5,20 (dd, J=8,9, 4,6 Hz, 8 1H) 5,15(dd,J=8,8,5,0 Hz, 1 H), 4,66 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 4,681 (d, J-6,8 Hz, 1 H), 3,90 - 3,99 (m, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 3,64 - 3,76 (m, 3 H), 3,34 - 3,43 (m, 3 H), 2,39 - 2,61 (m, 4 H), 2,12 - 2,23 (m, 1 H), 1,99 - 2,10 (m, 2 H), 1,52 - 1,67 (m, 2 H), 1,41 - 1,51 (m, 1 H), 1,08 - 1,18 (m, 2 H), 1,02 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,94 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,76 - 0,84 (m, 2H). - din, so
HN . N . Cc Ú Exemplo 84 Metil / ((18)-1(((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2-((1R,3S, ' 5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabicíclo[3,1,0] ' hex-3-il)-1H-imidazol-S-iN)feni!)-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-i)-2-azabiciclo [3,1 ,0jhex-2-il)carbonil)-2-metiipropil)carbamato e — oo. à» Co º Pas d o NH o Neo $i > TOC O À c Cx NE
N Exemplo 85 Metil — ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2- ((28)2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-S-iN)fenil)-2-quinolinit)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- iNcarbonil)-2-metilpropil)carbamato
N-Clorossuccinimida (6,01 mg, 0,045 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6- (4-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-iN)-1H-imidazol-4-iNfenil)-2-quinolinil)- 1H-imidazo|-2-i)- S 2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato — (Exemplo 80) (26 mg, 0,022 mmol) em DMF (0,5 mL) e a mistura de reação foi agitada a 50ºC por 16 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada atra- vés de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar dois produtos: 1) Um sal! de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5- (6-(4-(4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- l metilbutanoil)-2-azabiciclo(3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-5-il)fenil)-2-quinolinil)- ] 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (12,4 mg) como sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,871 min; m/z 882,55 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo |í- , 15 — quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna . 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um ' comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de ' 20 gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / áci- do trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido tri fluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICRO- MASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD)õ ppm 38,53 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,26 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 823 (s, 1 H), 8,17 (s, 2 H), 7,82 - 7,93 (m, 4 H), 5,16 (dd, J=8,8, 5,3 Hz, 1 H), 5,06 (t, d=7,2 Hz, 1 H), 4,53 - 4,63 (m, 2 H), 3,68 - 3,76 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 2,44 - 2,60 (m, 4 H), 2,11 - 2,24 (m, 2 H), 1,97 - 2,09 (m, 2 H), 1,09 - 1,18 (m, 2H), 1,03 (dd, J=6,8, 3,3 Hz, 6 H), 0,95 (dd, J=6,8, 2,4 Hz, 6 H), 0,75 - 0,87 (m, 2 H) 2) Um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-(4-(4-cloro-2- ((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2- azabiciclo[3,1,0Jhex-3-iI)-1H-imidazol-S-iDfenil)-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-i1)-
2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (4,8 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,98 min; m/z 848,80 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético i 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,64 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,32 (s, 1 H), 8,25 - 8,29 (m, 2 H), 8,09 (d, : 15 J=8,8Hz,1H),7,86-7,98 (m, 4 H), 5,418 - 5,25 (m, 1 H), 5,03 - 5,09 (m, 1 ' H), 4,53 - 4,62 (m, 2 H), 3,64 - 3,83 (m, 2 H), 3,64 - 3,69 (m, 6 H), 242 - 2,70 Ú (m, 4 H), 1,97 - 2,24 (m, 4 H), 1,08 - 1,17 (m, 2 H), 1,02 (dd, J=6,8, 2,4 Hz, 6 H), 0,94 (t, J=6,8 Hz, 6 H), 0,76 - 0,91 (m, 2 H). o do Yo ' HN st : O dg” COLS NA
Í CLS
N Cc Exemplo 86 Metil ((18)-2((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2((1R,3S, 5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabicicio[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazoL-5-iN)'fenil)-2-quinolinil)-1 H-imidazol-2-])- 2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato N-Clorossuccinimida (6,688 mg, 0,050 mmol) foi adicionada a uma solução de um sal de TFA de metil ((18)-2((1R,3S8,5R)-3-(4-(6-(4-(2- ((1R38S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-
i)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-iI)fenil)-2-quinolinil)-1H- imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNeticarbamato (Exempio 81) (31 mg, 0,025 mmol) em DMF (0,5 mL) e a mistura de reação foi agitada a 50ºC por 16 horas. A reação foi diluída com MeOH, fitrada e purificada através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-cloro-5-(6-(4- (4-cloro-2-((1R,38S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H- piran-4-iNacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-S-i)fenil)-2-quino- linil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclof3,1,0)Jhex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- pirandibeti)carbamato (12,1 mg) como sólido amarelo. Tempo de retenção de LOC-MS 3,511 min; m/z 484,17 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ' 15 çõesde eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% : / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu- to e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / ' H2O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH ' 20 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. "H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 8,60 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,27 - 8,33 (m, 2 H), 8,21 (s, 2 H), 7,89 - 7,95 (m, 2 H), 7,83 - 7,88 (m, 2 H), 5,45 (dd, J=8,7, 5,6 Hz, 1H), 5,05 (dd, J=8,3, 6,3 Hz, 1 H), 4,64 (dd, J=11,3, 7,8 Hz, 2 H), 3,87 - 4,00 (m, 4 H373-3,81(m, 2H),3,68(s,6H),3,33-3,48(m,4H),2,41-2,61 (mM, 4H), 1,95 - 2,16 (m, 4 H), 1,39 - 1,70 (m, 8 H), 1,06 - 1,18 (m, 2 H), 0,81 (m, 2H).
o CN XY A i Dm Da O No No, AN (O — De | VT À cl Exemplo 87
Metil — ((18)-1-(((28,58)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(4-cloro-2-((2S,58)-1- ((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H- imidazol-95-i1)-2-naftilfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- metilpropilcarbamato N-Clorossuccinimida (18,88 ma, 0,141 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(4-(6- (2-((28,58)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2- pirrolidinil)- 1H-imidazo|-4-i1)-2-naftiNYfenil)-1H-imidazol-2-1N)-5-metil-1- pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (105 mg, 0,129 mmol) em DMF (30mL)e então a reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e aquecida a 50ºC da noite para o dia.
Através de LCMS, 1,3:1,6:1 de material de parti- da : mono-Cl (presumivelmente ambos os regioisômeros : bicloro). A reação foi concentrada, dissolvida em MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar material de par- ' 15 tida recuperado (36,2 mg), uma mistura dos dois regioisômeros cloroimidazo! - (56,6 mg) (Exemplo 94 e Exemplo 95) e um sal de TFA de meti! ((18)-1- ' (((28,58)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(4-cloro-2-((28,58)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-5-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato — (20,4 " 20 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,482 min; m/z 885,84 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Sol- vente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluora- cético 0,1% e o Solvente B era H2O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados deMS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização.
o Es NO2 mn <>? TF CC <> Y*N S o £ AN O— Exemplo 88 Metil — ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(4(5-(21(1R,38,5R)-24(28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H- imidazol-4-il)-1-naftifenil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2- iNcarbonil)-2-metilpropil)carbamato Ú 5 HATU (62,8 mg, 0,165 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo [3,1,0]hexan-3-il)-1 H-imidazol-4-il)naftalen-1-iN)fenil)- 1H-imidazol-2-1/)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 144) (42,6 mg, 0,066 mmol) e ácido - (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (28,9 mg, 0,165 mmol) em : 10 DMF (0,8 mL) e DIPEA (0,082 mL, 0,53 mmol) e a reação foi agitada em . temperatura ambiente por 2 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA) ' para dar te um sal de TFA de metil ((1S)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4-(5-(2((1R, . 38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex3l)-1H-imidazol-4-i)-1-naftilfenil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (53,7 mg) como um sólido esbran- quiçado.
Tempo de retenção de LC-MS 2,821 min; m/z 813,88 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm u- —sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para So!l- vente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- deo Solvente À era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H5O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de
MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,06 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,98 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,91 (d, J=8,5 Hz, 2 H), 7,78 (s, 1 H), 7,65 - 7,73 (m, 4 H), 7,59 - 7,64 (m, 2 H), 5,18 (ddd, J=12,5, 9,2, 7,0 Hz, 2H) 4,59 (dd, J=6,4, 3,4 Hz, 2H), 3,80 - 3,87 (m, 2 H), 3,69 (s, 6 H), 2,73 (dt, J=13,4, 9,2 Hz, 2 H), 2,48 - 2,59 (m, 2 H), 2,18 - 2,28 (m, 2 H), 2,10 (s amplo, 2 H), 1,08 - 1,45 (m, 2 H), 1,08 (d, J=7,0 Hz, 3 H), 1,04 (d, J=7,0 Hz, 3 H), 0,99 (d, J=6,7 Hz, 3 H), 0,95 (d, J=6,7 Hz, 3 H), 0,89 - 0,94 (m, 2 H). =o QN O un R TF o : 1 NS S/A) DUDA o— : Exemplo 89 :í Metil ((18)-2-((1R,3S8,5R)-3-(4-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- . 10 ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol|-4-i1)-1-naftil)Yfenil)- 1 H-imidazol-2-i1)-2- ' azabiciício[3,1,0)hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato : HATU (62,8 mg, 0,165 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCi de (1R,38,5R)-3-(5-(4-(5-(2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo
15. [3,1,0]hexan-3-iI)-1H-imidazol-4-il)naftalen-1-iN)fenil)-1H-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 144) (42,6 mg, 0,066 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (35,9 ma, 0,165 mmol) em DMF (0,8 mL) e DIPEA (9,092 mL, 0,53 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas. A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de acetato de amônio) para dar metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(4-(5- (2((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacetil)-2-azabiciíclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-4-11)-1-naftil)Yfenil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-iI)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iletiicarbamato (42,6 mg, 0,086 mmol) como um sólido esbranquiçado.
Tempo de retenção de LC-MS 1,965 min; m/z 897,59 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 5% / H;O 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B eraHO5%/MeOH 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropul- i verização. *H RMN (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,23 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 7,91 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,82 (d, J=8,2 Hz, 2 H), 7,52 - 7,59 (m, 2 H), 7,44 - 7,51 (m, 4 H), 7,41 (s, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 5,23 (dd, J=8,9, 4,6 Hz, 1 H), 5,18 (dd, J=8,9, : 15 4,9Hz, 1H), 4,68 (dd, J=7,5, 2,6 Hz, 2 H), 3,89 - 4,01 (m, 4 H), 3,70 - 3,77 . (m, 2 H), 3,69 (s, 6 H), 3,35 - 3,45 (m, 4 H), 2,43 - 2,63 (m, 4 H), 2,00 - 2,14 ] (m, 4 H), 1,52 - 1,71 (m, 6 H), 1,41 - 1,52 (m, 2 H), 1,10 - 1,18 (m, 2 H), 0,79 - 0,86 (m, 2 H). o.
Z, ma EIA Z as 1 N Rr CD? º or 4) jr Exemplo 90 Metil — ((18)-1((2R,4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2- ((1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((2R ,4r1,68)-2,6-dimetiltetra- hidro-2H-piran-4-1)-2-((metoxicarbonil)amino)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3- i)-1H-imidazol-4-11)-2-nafti)etinil)-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-2- i)-2-oxoetil)carbamato Um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(8-((2-((1R,3S8,5R)-2-azabici- clo[3,1,0]hexan-3-il)-iH-imidazol-4-il)etinil)naftalen-2-11)-1H-imidazo|-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 124) (50 mg, 0,073 mmol), ácido 2-
((2R ,4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-(metoxicarbonilamino) acé- tico (estereoisômero 2 Cap-179) (36,9 mg, 0,151 mmoi), HATU (58,6 mg, 0,154 mmol) e DIEA (0,077 mL, 0,441 mmol) foram combinados em DMF (3 mL) e a solução amarela resultante foi agitada em temperatura ambiente por 15horas.
Os voláteis foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi redissolvido em metanol e purificado através de HPLC preparativa (Solvente A: MeOH 10% / água 90% / TFA 0,1%; Solvente B;: MeOH 90% / água 10% / TFA 0,1%; Coluna: Sunfire Prep MS Su C18 30x100 mm; Comprimento de onda: 220 nM; Taxa de fluxo: 40 mi/ímin; Gradiente: B 10% para B 80% du- rante 30 minutos com um tempo de manutenção de 5 minutos) para dar um . sal de TFA de metil ((18)-1((2R 41,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2- ((1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((2R,4r,6S)-2,6-dimetiltetra- hidro-2H-piran-4-1N)-2-((metoxicarbonil)amino)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3- iN)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)etinil)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclof3,1,0Jhex-2- 1 15. iN-2-oxoetil)carbamato (43 mg) como um sólido branco.
LC/MS [M+H]'= 902; . Tr= 1,98 minuto é produto.
Coluna PHENOMENEXº Luna 10u C18 de ' 3,0x50mm; % de B inicial: 0, % de B Final: 100 Solvente À: MEOH 10% / H2O 90% + TFA 1%; Solvente B;: MeOH 90% / HO 10% + TFA 1%; taxa de fluxo 4 mL/min.
Tempo de atividade: 5 minutos.
Pureza = 98%. 'H RMN (500 : 20 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8,38 (1 H, s amplo), 8,14 - 8,22 (1 H, m), 8,09 (1 H, d, J=8,85 Hz), 7,93 - 8,00 (2 H, m), 7,62 (1 H, d, J=8,85 Hz), 71,25 (2H, t, J=7,48 Hz), 5,02 (2 H, t, J=6,87 Hz), 4,51 (1 H, dd, J=7,78, 6,56 Hz), 4,45 (1 H, t, J=7,93 Hz), 3,82 (1 H, s amplo), 3,67 (1 H, d, J=13,73 Hz), 3,54 (6H, s), 3,31 - 3,42 (3 H, m), 2,33 (2 H, s amplo), 1,85 - 1,97 (2 H, m), 1,43 - 1,52 (1 Hm) 1,22-1,31(1H,m), 1,038 - 1,12 (10 H, m), 0,89 - 1,01 (9 H, m), 0,82 (1 H, s amplo), 0,75 (1 H, s amplo). -—o " a.
PENA o e IA H o Exempio 91 Metil ((18)-1-(((28,3aS,6aS)-2-(4-(6-(4-(2-((28,3aS,6aS)-1-((2S)-
2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)octaidrociclopenta[b]pirrol-2-iI)-1H- imidazol-4-iDfenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-il)hexaidrociclopenta[b]pirrol-1(2H)- iD)carbonil)-2-metilpropil)carbamato
HATU (60,9 mg, 0,160 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tadadeumsalde HCl de (28,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS,6aS)-octaidro- ciclopenta[b]pirrol-2-il)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-iNfenil)-1H-imidazol-2-i1) octaidrociclopentafb]pirrol (51 mg, 0,073 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoico (Intermediário 147) (28,1 mg, 0,160 mmol) e DI- PEA (0,076 mL, 0,44 mmol) em DCM (1,5 mL) e a mistura de reação foi agi- tada em temperatura ambiente por 2 horas.
À mistura de reação bruta foi . concentrada até secar e purificada através de HPLC preparativa (tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,3aS,6aS)-2-(4-(6-(4-(2- ((28,3aS,6aS)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutancil) octaidroci- clopenta[b]pirrol-2-il)-1H-imidazol-4-il)fenil)-2-naftit))- H-imidazol-2-11) — hexai- í 15 — drociclopenta[b]pirrol-1(2H)-iI)carbonil)-2-metilpropil)carbamato — (23,7 mg) . como um sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS 2,462 min; m/z 867,8 ' (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento ' 20 de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitrita 5% / HO 95% / acetato de amô- nio10mMMeo Solvente B era H?O 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 MM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Plat- form LC em modo de eletropulverização. o " a a o CP o b O Nº " a H o Exemplo 92
Metil ((18)-2((28,3aS,6aS)-2-(4-(4-(8-(2-((28,3aS,6aS)-1((28)- 2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDacetil)hexaidrociclopenta[b]pirroi-2(2H)-il)-1H-imidazo|-4-11)-2-nafti)Yfenil)- iH-imidazol-2-il)hexaidrociclopenta[b]pirrol-1(2H)-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- pirandljeti)carbamato HATU (62,1 mg, 0,163 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sai de HCI de (28,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6-(2-((28,3aS,6aS)-octaidro- ciclopenta[b]pirrol-2-i1)-1 H-imidazol-4-iI)naftalen-2-iI)fenil)- 1H-imidazol-2- iN)octaidrociclopenta[b]pirrol (51 mg, 0,073 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoico (Intermediário 147) (52 mg, 0,074 mmol), ácido : (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran4-il)acético (35,5 mg, 0,163 mmol!) e DIPEA (0,078 mL, 0,45 mmol) em DCM (1,5 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A mistura de reação bruta foi concentrada até secar e purificada através de HPLC preparativa (tampão À 15 deTFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28,3aS,6aS)-2-(4-(4-(6- . (2-((28,3aS 6aS)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-41- ' iNacetil)hexaidrociclopenta[b]pirrol-2(2H)-i1)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)feni!)- 1H-imidazol-2-il)hexaidrociclopenta[b]pirrol-1(2H)-iN)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)etil)carbamato (25,8 mg) como um sólido branco.
Tempo de reten- ' 20 çãodeLC-MS2,350 min; m/z 477,5 (1/2 MH+). Dados de LC foram registra- dos em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma co- luna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradi- entede Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitri- la 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM.
Dados de MS foram determina- dos usando um MICROMASS?” Platform LC em modo de eletropulverização.
J Cl N O <Z o O | o o No RÁ Ná <DDç = ? N ci Exemplo 93 3-Cloro-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-((3-cloro-S- metóxi-1-isoquinolinil)carbonil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4- iDetinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-5- ' metoxiisoquinolina : 5 HATU (48,1 mg, 0,127 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de (1R,38,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0] he- xan-3-il)-1H-imidazol-4-i!)etinil)naftalen-2-i1)- 1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo . EB,1,0lhexano (Intermediário 124) (30 mg, 0,051 mmol) e ácido 3-cloro-5- : metoxiiscquinolino-1-carboxílico (30,1 mg, 0,127 mmol) em DMF (0,8 mL) e - 10 DIPEA (9,071 mL, 0,45 mmol) e agitado em temperatura ambiente da noite para o dia.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de ] HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de NH,OAc) e purificada ' novamente através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de 3-cloro-1-(((1R,38,5R)-3-(4(6-((2-((1R,3S, 5R)-2(3-cloro-5-metóxi-1-isoquinolinil)carbonil)-2-azabicicio[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- iNcarbonil)-5-metoxiisoquinolina (40,9 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,621 min; m/z 887,34 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de ma- —nutençãode 1 minutoe um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era
HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulve- rização.
FS Oo S nm
A O NON HN 7 o o NH No o (7 do N Cl Exemplo 94 . Metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(4-(6-(4-cloro-2-((28,58)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-5- iI)-2-naftifenil)- 1 H-imidazol2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) carbamato e : Ny o . S A | dm - HN O NO NE Oo 7 o, H o "e N N NH ' O " ) IA N o Exemplo 95 Metit ((18)-1-(((28,58)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(2-((28,58)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazol-4- iN-2-naftifenil)-1H-imidazol-2-i0)-S-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) carbamato Esses dois compostos foram preparados na reação que prepa- rou metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(4-cloro-2-((28,58)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-5-metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazol-5-
15. iN-2-naftifenil)-1H-imidazol-2-i1)-S5-metil-1-pirrolidinilcarbonil)-2-metilpro- pil)carbamato (Exemplo 87) e eles foram isolados como uma mistura de re- gioisômeros de monocloroimidazol. Os dois regioisômeros foram separados através de SCFC em uma coluna CHIRALCEL? OJ-H (30 x 250mm, 5um)
usando Solventes: CO> 75% - EtOH 25% /DEA 0,1%. A regioquímica absolu- ta dos dois regioisômeros monocloroimidazol não foi determinada, então ca- da um foi arbitrariamente designado.
Exemplo 94: Metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(4-(6-(4-cloro-2-((2S, 58) 14(28)-2-((metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazol-S-i1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)- 2-metilpropil)carbamato (18,6 mg) foi isolado como um sólido amarelo. Tem- po de retenção de LC-MS 3,756 min; m/z 851,62 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detec- : tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de ma- , 15 nutençãode 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente 7 A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era ' H20 10% / MeOH 90% 7 ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de- terminados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulve- rização. Exemplo 95: Metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-cloro-5-(4-(6-(2-((28,58)-1- ' 20 ((28)2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1H- imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (24,1 mg) foi isolado como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,770 min; m/z 851,64 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detec- tor de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 NM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de ma- —nutenção de 1 minutoe um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H2O0 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram de-
terminados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulve- rização.
X N FE | SD
NH O N N do x RA Yº <[DDi | o
N Exemplo 96 . Metil ((18)-2-((1R,3S8,5R)-3-(4-((68-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- - ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-3-iI)-1H- imidazol-4-il)-2-naftiletinil)-1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclof3,1,0]hex-2-i1)-2- 0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HCI 4M (0,370 mL, 1,48 mmol) em dioxana foi adicionado a uma : solução de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-((6-(2-((1R,38,5R)-2-((S8)-2-(metoxicar- ' bonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i1)-1H-imidazol-5- ibnaftalen-2-i)etinil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (Intermediário 150) (69 mg, 0,074 mmol) em dioxana (2 mL) e a pasta fluida foi agitada por 1,5 hora. A mistura de reação foi então concentrada sob uma ' corrente de nitrogênio e o produto intermediário foi tratado com ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (20,9 mg, 0,096 mmol), DMF (1,5 mL), DIPEA (0,078 mL, 0,44 mmol) e Finalmente HATU (36,6 mg, 0,096 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura am- biente da noite para o dia, diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-((86-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2- nafti)etinil)- 1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-iletil)carbamato (35,3 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 2,726 min; m/z 803,74 (MH+). Dados de LC foram regis- trados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de
UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de1minutoeum tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era Me- OH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,06 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,98-8,02 (m, 2 H), 7,88 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,67 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,15 (dd, J=9,3, 7,0 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J=9,0, 6,3 Hz, 1 H), 4,59 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 4,56 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 3,91 - 4,00 (m, 2 H), 3,74 - 3,84 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H), 3,34 - 3,45 (m, 2 H), 2,70 (dd, J=13,6, 9,5 Hz, 1 H), 2,61 (dd, J=13,8, 8,8 Hz, 1 H), 2,40 - 2,54 (m, 2 H), 2,14 - 2,23 : 15 (m, 1H) 2,01-2,13(m,3H),1,56- 1,684 (m, 1 H), 1,38 - 1,55 (m, 3 H), 1,05 . - 1,14 (m, 2 H), 1,01 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,92 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,82 - 0,92 7 (m, 2H).
X N Se | À. Mr à o CO DP. D+ AÊ A <DDegT º
N Exemplo 97 Metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(8-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((2R 4r1,6S)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-i1)-2-((metoxicarbonil)amino) acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HCl 4M (0,34 mL, 1,3 mmol) em dioxana foi adicionado a uma solução de (1R,3S,5R)-ferc-butil 3-(5-((6-(2-((1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicar- bonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabicicio[3,1,0]hexan-3-il)-1H-imidazo!-5- ilnaftalen-2ietinil)-1IH-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato
(Intermediário 150) (62,7 mg, 0,087 mmol) em dioxana (2 mL) a pasta fluida foi agitada por 1,5 hora.
A reação foi então concentrada sob uma corrente de nitrogênio até secar e então tratada com ácido 2-((2R 4r,68)-2,6-dimetiltetra- hidro-2H-piran-4-11)-2-(metoxicarbonilamino)acético (estereoisômero 2 Cap- 179) (21,45 mg, 0,087 mmol), DMF (1,5 mL), DIPEA (0,071 mL, 0,40 mmol) e Finalmente HATU (33,3 mg, 0,087 mmol). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2((1R,3S,5R)-2-
((28)2((2R4r1,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-((metoxicarbonil)
amino)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-1 H-
imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (28 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,898 min; m/z 831,80 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido 1 15 Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u ó C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- ' primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradi- ' 20 entede4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H;O 10% / MeOH 90% / ácido trifluo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm8,27(s,1H), 8,17 (s,1H),8,05(d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,98 - 8,02 (m, 2H), 7,88 (dd, J=8,5, 1,8 Hz, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,86 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,15 (dd, J=9,2, 6,9 Hz, 1 H), 5,10 (dd, J=9,0, 6,3 Hz, 1 H), 4,56 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,73 - 3,85 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H), 3,43 - 3,54 (m, 2 H), 2,70 (dd, J=13,7, 9,4 Hz, 1 H), 2,61 (dd, J=13,6, 9,0 Hz, 1 H), 2,40 - 2,54 (m, 2H), 2,01-2,23(m,4H),1,55-1,64 (m, 1 H), 1,46 (d, J=12,0 Hz, 1 HD), 1,17 (dd, J=6,0, 4,3 Hz, 6 H), 1,04 - 1,43 (m, 3 H), 1,01 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,96 - 1,03
(m, 1 H), 0,92 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,88 - 0,93 (m, 1 H), 0,82 - 0,87 (m, 1 H).
o , Og Ox O Nº NO NH NO o o WO FO HN o o Exemplo 98 Metil ((18)-2-((28,58)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- - 1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil))carbamato HATU (43,2 ma, 0,114 mmol) foi adicionado a um sal de HCl de (1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((28S,5S)-5-metilpirrolidin-2-1!)-1H-imidazol-4-1) - nafta- .: len-2-iNetinil)- 1TH-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 154) : (27 mg, 0,045 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H- : piran-4il)acético (24,7 mg, 0,114 mmol) em DMF (1 mL) e DIPEA (0,056 mL, 0,32mmol)e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 . horas.
A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio, dissolvida : em MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2- ((28,58)-2-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1H-imidazol-4-il)etinil)- 2-naftil)-1H-imidazol-2-il)-5-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran- 4il)etil)carbamato (31,4 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,658 min; m/z 847,80 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna —PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu- toeumitempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% /
H;O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. A *'H RMN se apresenta como uma mistura -1:3,5 de rotâmeros. À 1H RMN para o ro- tâmero principal é: 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,06 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 8,01 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,89 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,67 (dd, J=8,4, 1,4 Hz, 1 H), 5,19 (dd, J=10,5, 7,0 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J=8,9, 6,4 Hz, 1 H), 4,59 (d, J=7,5 Hz, 1 H), 4,22 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,86 - 4,00 (m, 4 H), 3,72 - 3,82 (m, 2 H), 3,67 (s, 6 H) 3,23-3,45(m, 4H) 2,50 -2,70 (m, 2H), 2,24 - 2,50 (m, 3 H), 1,90 -2,13 i (m, 4 H), 1,70 - 1,85 (m, 1 H), 1,57 (d, J=6,5 Hz, 3 H), 1,30 - 1,684 (m, 6 H), 1,23 (d, J=11,5 Hz, 1 H), 1,04 - 1,12 (m, 1 H), 0,85 (s amplo, 1 H). oo E - * H 08 . SANA O HN —o e o
À Exemplo 99 Metil ((18)-1-(((1R,3S,5R)-3-(4-((6-(2-((28,58)-1-((28)-2-((meto- xicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2- — naftiDetinil)-1H-imidazo|-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2-il)carbonil)-2-metil- propil)carbamato HATU (43,2 mg, 0,114 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(4-((6-(2-((28,5S)-S-metilpirrolidin-2- i)-1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil)- H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano' (Intermediário 154) (10,1 ma, 0,017 mmol) e ácido (S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3S-metilbutanoico (7,44 mg, 0,042 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,021 mL, 0,119 mmol) e a mistura de reação foi agitada em tempe- ratura ambiente por 2 horas. A reação foi concentrada, dissolvida em MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão deTFA0O,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-((6-
(2-((28,58)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2- pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)etinil)- 1H-imidazo]l-2-i!)-2-azabiciclo 13,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (9,3 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 2,930 min; m/z 763,75 (MH+). Da-
dos de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B
0% para Solvente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 i minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 80% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC 1 15 emmodo de eletropulverização.
A 'H RMN se apresenta como uma mistura ' —1:3 de rotâmeros, os dados para o rotâmero principal são: 'H RMN (400 ' MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1 H), 8,19 (s, 1 H), 8,07 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,99 - 8,03 (m, 2 H), 7,90 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,65 - 7,71 (m, 1 H), 5,19 (dd, J=10,2, 6,9 Hz, 1 H), 5,10 (dd, J=9,2, 6,4 Hz, 1 H), 4,55 (d, : 20 J=6,5 Hz, 1H),4,13(d, J=8,8 Hz, 1 H), 3,67 (s, 6 H), 3,65 - 3,79 (m, 2 H), 1,95 - 2,68 (m, 8 H), 1,57 (d, J=6,5 Hz, 3 H), 1,31 (d, J=6,3 Hz, 1 H), 1,01 (d, J=7,0 Hz, 3 H), 0,98 (d, J=7,0 Hz, 3 H), 0,93 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,88 (d, J=6,8 Hz, 3 Hs), 0,84 - 1,14 (m, 2H). 27 e nu TF o Nono o" O AN Id —Oo O Exemplo 100 Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(8-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabicíclo[3,1,0Jhex-3-il)-1H- imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-i1)-2-
oxo-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato HCi 4M (0,32 mL, 1,3 mmol) em dioxana foi adicionado a uma mistura de um sal de TFA de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-((2-((1R,38,5R)-2- ((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-il)-
1iH-imidazol-S-il)etinil)naftalen-2-i1)-1H-imidazo|-2-i1)-2- azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (Intermediário 158) (60 mg, 0,064 mmol) em dioxana (0,5 mL) e a reação foi agitada vigorosamente por 4 ho- ras.
A reação foi concentrada até secar Então ácido (S)2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acético (18,2 mg, 0,084 mg), DMF (0,5 mL), DIPEA (0,067 mL, 0,39 mmol) e Finalmente HATU (31,8 mg) foram adicionados ao material bruto e a reação foi agitada em tempera-
tura ambiente por 1 hora.
A reação foi parcialmente concentrada com uma corrente de nitrogênio, diluída com MeOH, filtrada e purificada através de
HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) e então HPLC pre-
1 15 parativa novamente purificada (MeOH/água com um tampão de acetato de
' amônio). O material foi purificado uma terceira vez através de HPLC prepa-
' rativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de metil ((1S)- 2((1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-1H-
: 20 imidazol-2-11)-2-azabíiciclo[3,1,0]hex-2-1))-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-
iNDeticarbamato (27,7 mg) como um sólido branco.
Tempo de retenção de
LC-MS 3,291 min; m/z 803,67 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE-
NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mMm usando um detector de UV-Vis
—SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi-
ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%
/ um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu-
to e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% /
HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H;O 10% / MeOH
90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN
(400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (s, 1 H), 8,19 (s, 1 H), 8,06 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,99 - 8,03 (m, 2 H), 7,88 (dd, J=8,5, 1,8 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,68 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,15 (dd, J=9,0, 7,0 Hz, 1 H), 5,09 (dd, J=9,3, 6,5 Hz, 1 H), 4,80 (d, 2 H), 4,54 (d, J=6,5 Hz, 1 H), 3,87 - 3,93 (m, 1 H), 3,70 - 3,79 (m, 3H) 3,68(s 3H) 3,687 (s, 3H) 3,54 -3,63 (m, 1 H), 3,34 - 3,40 (m, 1 H), 2,59 - 2,74 (m, 2 H), 2,40 - 2,55 (m, 2 H), 2,00 - 2,22 (m, 4 H), 1,71 - 1,81 (m, 2H),1,51 - 1,63 (m, 2 H), 1,05 - 1,14 (m, 2 H), 1,01 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,93 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,88 (s amplo, 2 H).
ES í H l A = A N SS o Nona o DR 2 “ —Oo HN <. - Exempio 101 . Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(8-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- 7 10 ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1H- imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo(3,1,0)hex-2-il)-2- i ox0-1(3S)-tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil)carbamato - HCI 4M (0,3 mL, 1,3 mmol) em dioxana foi adicionado à mistura de um sal de TFA de (1R,38,5R)-ferc-butil 3-(5-(6-((2-((1R,38,5R)-2-((8)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoi!)-2-azabiciclo[3,1,0]hexan-3-i)-1H- imidazol-5-il)etinil)naftalen-2-iI)-1H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2- carboxilato (Intermediário 158) (680 mg, 0,064 mmol) em dioxana (0,5 mL) e a reação foi agitada vigorosamente por 4 horas. A reação foi concentrada até secar. Então ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-((S)-tetra-hidro-2H-piran-3- ilacético Cap-177a) (18,2 mg, 0,084 mmol), DMF (0,5 mL), DIPEA (0,067 mL, 0,39 mmol) e finalmente HATU (32 mg, 0,084 mmol) foram adicionados ao material bruto e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi parcialmente concentrada, diluída com MeOH, filtrada e purifi- cada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) e novamente purificada em uma injeção através de HPLC preparativa (Me-
OHfágua com um tampão de acetato de amônio) para dar metil ((18)-2- ((1R,38,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo(3,1,0Jhex-2-i1)-2-0x0-1-((3S)-tetra-hidro-2H-piran-3- ibetilicarbamato (30,5 mg) como um sólido branco. Tempo de retenção de LC-MS 3,376 min; m/z 803,66 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHE- NOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- çõesde eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% 1 um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu- to e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / H2O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH í 15 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando . um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropuiverização. '*H RMN ' (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,14 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,78 - 7,86 (m, 3 H), 7,49 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,26 (s, 1 H), 5,15 (ddd, J=12,9, i 8,7, 4,5 Hz, 2 H), 4,57 (d, J=6,8 Hz, 1 H), 3,70 - 3,86 (m, 3 H), 3,67 (s amplo, - 20 3H), 3,66(s amplo, 3H), 3,58 - 3,64 (m, 1 H), 3,53 (t, J=8,3 Hz, 1 H), 3,45 (dd, J=11,4, 8,2 Hz, 1 H), 2,31 - 2,57 (m, 4 H), 1,93 - 2,17 (m, 5 H), 1,67 - 1,84 (m, 2 H), 1,50 - 1,63 (m, 2 H), 1,08 - 1,47 (m, 2 H), 0,698 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,92 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,78 (s amplo, 2H). Oo N RS o P ; WO
N o AO AA
SEO vw “S / E Ni Exemplo 102 Metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(6-(4-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxi- —carbonillamino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-iDfenil)-2-
quinolinil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil): — car- bamato HATU (20,99 mg, 0,055 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl 2-(2-((28,4S)-4-metilpirrolidin-2-i1)-1H-imidazol-5-11)-6-(4-(2- ((2SAS)4-metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-S-ilfenil)quinolina — (Intermediário 164) (16,5 mg, 0,024 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- metilbutanocico (9,7 mg, 0,055 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,038 mL, 0,22 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18) 1-(((28,48S)-2-(4-(6-(4-(2-((28,48)-1-((2S8)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4- iDNfenil)-2-quinolinil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (8,3 mg, 6,94 umol, 28,9% de rendimento) como um í 15 sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,555 min; m/z 818,78 (MH+).
' Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- ' 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento i de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma 7 20 taxade flixode0,8mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,60 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 8,34 (d, J=1,8 Hz, 1 H), 8,32 (s, 1 H), 8,26 - 8,31 (m, 1 H), 8,21 - 8,26 (m, 1 H), 8,06 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,97 - 8,03 (m, 1 H), 8,00 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,87 - 7,92 (m, 2 H), 5,19 - 5,36 (m, 2 H), 4,29 - 441(m 2H) 4,24 (t/J=6,9Hz,2H), 3,67 (s, 8H), 3,44 (q, J=11,0H2z, 2H), 2,62 - 2,74 (m, 2 H), 2,46 - 2,61 (m, 2 H), 1,97 - 2,12 (m, 2 H), 1,82 - 1,97 (m, 2 H), 1,26 (dd, J=6,3, 3,3 Hz, 6 H), 0,91 - 0,96 (m, 6 H), 0,89 (dd, J=6,7, 5,1
Hz, 6H). Oo N A = d Du “ NH ú N Ne, yo O An "O. ú O HN o ! S 1 Z NX Exemplo 103 Metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(6-(4-(2-((2S,58S)-1-((28)-2-((metoxi- . carbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-5-metil-2-pirrolidinit)- 1H-imidazol-4-i)fenil)-2- quinotinil)-1H-imidazol-2-iI)-5-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) car- bamato HATU (15,74 mg, 0,041 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HC! bruto de 2-(2-((28,58S)-S5-metilpirrolidin-2-11)-1 H-imidazol-5-il)- : 6-(4-(2-((28,5S)-S-metilpirrolidin-2-i1)-1 H-imidazol-5-iDYfenil)quinolina — (Inter- mediário 167) (12,35 mg, 0,018 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoico (7,25 mg, 0,041 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,028 - mL, 0,16 mmol) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H2O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,58)-2-(4-(8-(4-(2(2S,58)-1-((2S)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4- iNfenil)-2-quinolini!)-1 H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinit)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (3,8 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,616 min; m/z 818,73 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna —"PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fiuxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% 1 um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minu- toeumtempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MEOH 10% /
H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,68 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,39 (d, J=1,3 Hz, 1 H), 830-8,35(m 2H),8,26-8,31(m,1H), 8,16 (d, J-8,8 Hz, 1 H), 7,99 - 8,06 (m, 3 H), 7,89 - 7,94 (m, 2 H), 5,14 - 5,31 (m, 2 H), 4,14 (dd, J=8,8, 5,0 Hz, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 2,47 - 2,59 (m, 2 H), 2,23 - 2,43 (m, 4 H), 1,95-2,10 (m, 4 H), 1,56 (dd, J=6,7, 3,8 Hz, 6 H), 1,01 - 1,07 (m, 2 H), 0,99 (dd, J=6,7, 3,4 Hz, 6 H), 0,89 (dd, J=6,8, 1,8 Hz, 6 H). . do, o O, r NH o FM O NZ (O N ? h N e ' ED ir Oo . N : Exemplo 104 ' 10 Metil / ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2((1R,38,5R)-2-((28)-2- : ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-i1)-1H- imidazol-4-iDfenil)-2-quinoxalinil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-2- ' iNcarbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (50,7 mg, 0,133 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCI de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(6-(4-(2-((28,A4S)-1-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinit)- 1 H-imidazol-4- iDfenil)-2-quinolinil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (Intermediário 173) (41,7 mg, 0,058 mmol) e ácido (S)- 2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (23,4 mg, 0,133 mmol) em DMF (1 mL)e DiIiPEA (0,09 mL, 0,5 mmol) e a mistura de reação foi agitada em tem- peratura ambiente por 16 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H;O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2- ((1R,38,5R)-2-((2S)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2- —azabiciclo(3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-iNfenil)-2-quinoxalinil)-1H-imidazol-2-
iN)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (22,3 mg) co- mo um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,451 min; m/z 815,72 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H»O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 9,41 (s, 1 H), 8,43 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 841 - 8,47 (m, 1 H), 8,28 (d, J=1,3 Hz, 2 H), 8,03 í 15 (d,J=8,5Hz,1H),8,00-8,07 (m, 1 H), 7,87 - 7,95 (m, 3 H), 5,10 - 5,26 (m, 2 ' H), 4,57 (t, J=6,7 Hz, 2 H), 3,76 - 3,89 (m, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 2,70 (dad, ' J=13,7, 9,2 Hz, 2 H), 2,44 - 2,56 (m, 2 H), 2,14 - 2,26 (m, 2 H), 2,04 - 2,14 . (m, 2 H), 1,07 - 1,16 (m, 2 H), 1,02 (dd, J-6,8, 2,0 Hz, 6 H), 0,93 (dd, J=6,8, 2,0 Hz, 6 H), 0,83 - 0,99 (m, 2H). Ú o PU x / E, Yo A 2 —o r NH o 2 o SOCO N d ú Exemplo 105 Metil ((18)-2-((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-2-azabicicto[3,1,0] hex-3-il)-1H-imidazot-4-i)Yfenil)-2-quinoxalinil)- 1H-imidazo|-2-i1)-2-azabiciclo [3,1,0)hex-2-il)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil)carbamato HATU (12,24 mg, 0,032 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCI de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(6-(4-(2-((28,48)-1-((28)-2-
((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazo|-4- iNfenil)-2-quinolinil)-1H-imidazo|-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metil- propil)carbamato (Intermediário 173) (10,1 mg, 0,014 mmol) e ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)acético (7,0 mg, 0,032 mmol) em DMF (0,5mL)e DIPEA (0,022 mL, 0,13 mmol) e a mistura de rea- ção foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (H>O-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2- ((1R,38,5R)-3-(4-(6-(4-(2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-
(tetra-hidro-2H-piran-4-iN)acetil)-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-iI)-1H-imidazol-4- i iDfenil)-2-quinoxalinil)-1 H-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (7,3 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,251 min; m/z 899,79 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado : 15 com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um ' detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de ' 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 : mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de ' 20 manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- vente A era MeEOH 10% / H2O0 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropul- verização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 3 ppm 9,41 (s, 1 H), 8,41 - 847 (m, 2 H) 8,27-8,31(m,2H),8,03(d, J=8,5 Hz, 1 H), 8,01 - 8,068 (m, 1 H), 7,87 - 7,95 (m, 3 H), 5,09 - 5,26 (m, 2 H), 4,61 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 3,90 - 4,01 (m, 4 H), 3,80 - 3,90 (m, 2 H), 3,68 (s, 6 H), 3,34 - 3,47 (m, 4 H), 2,70 (dd, J=13,6, 9,3 Hz, 2 H), 2,45 - 2,57 (m, 2 H), 1,99 - 2,19 (m, 4 H), 1,36 - 1,68 (m, 8 H), 1,02 - 1,16 (m, 2 H), 0,79 - 0,96 (m, 2H).
o Oo 7 e o ANA
ATBADANIS que FO O "o o Exemplo 106 Metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-cloro-5-(6-((4-cloro-2-((1R,3S,5R)- 2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-aza- biciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-5-il)etinil)-2-naftil)- AH-imidazol-2-11)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-iI)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato N-Clorossuccinimida (6,97 mg, 0,052 mmol) foi adicionada a uma solução agitada de metil ((18)-2-((1R,3S,5R)-3-(4-(6-((2-((1R,3S,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-azabi- ciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-aza- 7 biciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (E- . 10 xemplo 82) (21,0 mg, 0,025 mmol) em DMF e então o recipiente recebeu ' fluxo com uma corrente de nitrogênio, foi vedado e aquecido a 50ºC por 3 horas. Mais N-clorossuccinimida (5,0 mg) foi adicionada e o recipiente de ] reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e aquecido a 50ºC por 3 ho- - ras, então a reação foi esfriada e concentrada sob uma corrente de nitrogê- nio. Os restos foram dissolvidos em MeOH, filtrados e purificados através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-24(1R,3S8,5R)-3-(4-cloro-5-(6-((4-cloro-2-((1R,3S,5R)-2- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i1)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-5-il)etinil)-2-naftil)- 1H-imidazo|-2-1)-2- azabicicio[3,1,0]Jhex-2-il)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato (8,1 mg) como um sólido amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 4,276 min; m/z 457,47 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo li- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x80mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de solvente A
100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente À era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido triftuo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 8,18 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,98 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,93 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,88 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,59 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,05 (dd, J=8,5, 6,3 Hz, 1 H), 4,99 (t, J=6,9 Hz, 1 H), 4,62 (d, J=7,5 Hz, 2 H), 3,91 - 3,98(m,4H) 3,74-3,81(m,1H),3,68-3,72(m,1H),3,67(s,6H), 3,34 - l 3,45 (m, 4 H), 2,45 - 2,56 (m, 2 H), 2,39 - 2,44 (m, 2 H), 1,96 - 2,11 (m, 4 H), 1,37 - 1,68 (m, 8 H), 1,05 - 1,14 (m, 2 H), 0,74 - 0,84 (m, 2H). o SJ : A e. -N O No Hi <C 6 . Exemplo 107 . Metil / ((18)-1-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicarbo- nil)amino)-3-metilbutanoil)>amino)-2-metilpropil)- 1H-imidazo|-4-i1)-2-naftil) fe-
15. nil)-1Himidazol-2-i1)-2-metilpropil)carbamoil)-2-metilpropil)carbamato HATU (77 mg, 0,20 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de sal de HCI de (S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-amino-2-metilpropil)- 1H-imidazol-4- iDnaftalen-2-iN)fenil)-1H-imidazol-2-11)-2-metilpropan-1-amine — (Intermediário 178) (57,4 mg, 0,092 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- —noico(35,4 mg, 0,202 mmol) e DIPEA (0,096 mL, 0,55 mmol) em DCM (1,5 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A mistura de reação bruta foi concentrada até secar e purificada através de HPLC preparativa (tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1- (((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil) amino)-2-metilpropil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1H-imidazo|-2-11)-2- metilpropil)carbamoil)-2-metilpropil)carbamato (60,4 mg) como um sólido branco.
Tempo de retenção de LC-MS 2,253 min; m/z 759,6 (MH-). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXSº Luna 3u C18 de 2,0x30mmM u- sando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detectorde220nM.As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos on- de o Solvente A era acetonitrila 5% / HO 95% / acetato de amônio 10 mM e : 10 o SolventeB eraHO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio 10 mM.
Da- dos de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização.
Sí OQ et O os ' Exemplo 108 - 3-Metil-N-((18S)-2-metil-1-(4-(4-(6-(2-((1S)-2-metil-1-((3-metilbuta- noil)amino)propil)-1H-imidazol-4-4)-2-naftilfenil)-1H-imidazol-2-il)propil) bu- tanamida
HATU (118 mg, 0,313 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de um sal de HCl de (S)-1-(5-(4-(6-(2-((S)-1-amino-2-metilpropil)-1 H- imidazol-4-i)naftalen-2-i)fenil)-1H-imidazol-2-i)-2-metilpropan-1-amina/— (In- termediário 178) (89 mg, 0,142 mmol), ácido 3-metilbutanoico (32 mg, 0,31 mmol) e DIPEA (0,149 mL, 0,855 mmol) em DCM (2 mL) e a mistura de rea- ção foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas.
A mistura de reação bruta foi concentrada até secar e purificada duas vezes através de HPLC preparativa (tampão de TFA) para dar um sal de TFA de 3-metil-N-((18)-2-
metil-1-(4-(4-(6-(2-((18)-2-metil-1 ((3-metilbutanoil)amino)propil)-1H-imida- —zol-d4-il-2-naftifenil)-1H-imidazol-2-il)propil)butanamida (54,6 mg) como um sólido bege.
Tempo de retenção de LC-MS 2,375 min; m/z 645,6 (MH-). Da- dos de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-
10AS equipado com uma Coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fiuxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era acetonitrila 5%/ HO 95% / acetato de amô- nio 10 MM e o Solvente B era HO 5% / acetonitrila 95% / acetato de amônio MM. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Plat- 10 form LC em modo de eletropulverização. D-OQIA)
N NÃ “ Ss : Exemplo 109 ' 2((28,58)-1-Acetil-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,58S)-1- acetil-5-metil-2-pirrolidínil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol HATU (63,2 mg, 0,166 mmol) foi adicionado a uma solução de 2- ((28,58S)-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,5S)-5-metil-2-pirrolidinil)- 1H- imidazol-4-il)-2-naftilfenil)-1H-imidazol (Intermediário 117) (contaminado com acetato de amônio) (38 mg, 0,076 mmol) e ácido (S)-2-((2R 4r,68)-2,6- dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-(metoxicarbonilamino)acético (40,8 mg, 0,166 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,053 mL, 0,30 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura de rea- ção foidiluída com MeOH, filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sai de TFA de 2- ((28,58)-1-acetil-5-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,58)-1-acetil-5-metil-2- Pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol (20 mg) como um sóli- do amarelo. Tempo de retenção de LC-MS 3,123 min; m/z 587,62 (MH+).
Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de
| 514/563 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1 H,827(s,1H) 8,13(d,J=8,8Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,93 - 8,01 (m, 4 H), 7,84 - 7,91 (m, 4 H), 5,25 (q, J/=8,4 Hz, 2 H), 4,31 - 4,40 (m, 2H), 2,53 - 2,66 (m, 2 H), 2,28 - 2,40 (m, 4 H), 2,25 (s, 3 H), 2,25 (s, 3 H), 1,88 - 1,97 (m, 2 H), 1,47 (dd, J=6,5, 3,5 Hz, 6 H), 1,14 - 1,19 (m, 1 H). : D-O QI) ' N nº Ar,
HN NH Ses Ss Exemplo 110 Metil — (1-((2R,4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-((2S, 58)-2-(4-(4-(6-(21(28,58)-1-(((2R 4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4- iN((metoxicarbonil)amino)acetil)-5-metil-2-pirrolidinil)- 1H-imidazol-4-11)-2- naftifenil)-1H-imidazol-2-i1)-S5-metil-1-pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato HATU (61,9 mg, 0,163 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de 2-((2S,5S)-S-metil-2-pirrolidini!)-4-(4-(6-(2-((28,58)-S-metil- 2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazol (Intermediário 117) (48 mg, 0,074 mmol) e ácido 2-((2R,4r7,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4- i1)-2-(metoxicarbonilamino)acético (estereoisômero 2 Cap-179) (39,9 mg, 0,163 mmol) em DMF (0,8 mL) e DIPEA (0,09 mL, 0,52 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi diluída com Me-
OH, filtrada e purificada em duas injeções através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil (1- ((2R 4r,6S)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-((28,58)-2-(4-(4-(6-(2- ((28,58)-1-(((2R 4r,68)-2,6-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il) ((metoxicarbonil) amino)acetil)-5-metil-2-pirrolidinit)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazo!- 2-iI)-5-metil-1-pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato (55,5 mg) como um sólido a- marelo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 3,506 min; m/z 479,54 (1/2 MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimad- zu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de : 10 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 : 15 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era H7O 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Ú Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC . em modo de eletropulverização.
À 7H RMN se apresentava como uma mistu- ra complexa de rotâmeros.
N N o Rn /7O CO SE % SNS / [ < J« o N Exemplo 111 Metil ((18)-2-((28,48)-2-(4-(8-((2-((1R,3S,5R)-2-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-iacetil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol|-4-il)etinil)-2-naftil)-1H-imidazo|-2-11)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (23,99 mg, 0,063 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(4-((6-(2(2S,4S)-4-metilpirrolidin-2-11)-1H-
imidazol-4-il)naftalen-2-ietinil)- 1H-imidazo]-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano (Intermediário 175) (15 mg, 0,025 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)acético (13,70 mg, 0,063 mmol) em DMF (0,4 mL) e DIPEA (0,03 mL, 0,2 mmol) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 1,5 hora.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada em duas injeções através de HPLC preparativa (MeOH/água com tampão de TFA) para um sal de TFA de metil ((18)-2-((28,48S)-2-(4-(6-((2((1R,38S,5R)- 2-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2- azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-4- metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil)carbamato (12,0 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de retenção de LC-MS 3,040 min; m/z 847,76 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um com- : 15 primento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição emprega- ram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Ú Soivente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradi- . ente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solivente A era MeOH 10% / H2O 90% ácido ' 20 trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) õ ppm 8,28 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,97 - 8,02 (m, 2 H), 7,88 (dd, J=8,8, 1,8 Hz, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 7,67 (dd, J=8,4, 1,4 Hz, 1 H), 5,23 (dd, J=10,9,6,9 Hz, 1H), 5,09 (dd, J=9,0, 6,5 Hz, 1 H), 4,59 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 4,34 - 4,41 (m, 1 H), 4,28 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 3,868 - 4,00 (1, 4 H), 3,75 - 3,81 (m, 1 H), 3,67 (s, 3 H), 3,67 (s, 3 H), 3,32 - 3,50 (m, 5 H), 2,39 - 2,74 (m, 4 H), 1,87 - 2,13 (m, 4 H), 1,27 - 1,65 (m, 8 H), 1,25 (d, J=6,3 Hz, 3 H), 1,04 - 1,14 (m, 1 H), 0,86 (s amplo, 1 H).
HN o VA4S CO Fai eo X K o N O 7, ã | AX Exemplo 112 Metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(8-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((meto- xicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4- iDetinil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-iN)-4-metil-1-pirrolidinibcarbonil)-2-metilpropil) - carbamato HATU (60,8 mg, 0,160 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de (1R,38,5R)-3-(4-((8-(2-((28,4S)-4-metilpirrolidin-2-i)-1H- imidazol-4-iNnaftalen-2-il)etinil)- 1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0]hexano : (Intermediário 175) (38 mg, 0,064 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) ' -3-metilbutanoico (28,0 mg, 0,160 mmol) em DMF (0,7 mL) e DIPEA (0,08 : 10 mL, 0,4 mmol) e agitado em temperatura ambiente por 1,5 hora.
A reação foi diluída com MeOH, filtrada e purificada duas vezes através de HPLC prepa- . rativa (MeOH/água com tampão de TFA) para dar um sal de TFA de meti! ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)- i 3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]Jhex-3-il)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)-
1Himidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (19,1 mg) como um sólido esbranquiçado.
Tempo retenção LC-MS 3,288 minutos; miz 763,74 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo lí- quido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 de 2,0x560mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100% / um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluo- racético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº
Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (400 MHz, MeOD) 3 ppm 8,28 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,05 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,98 - 8,03 (m, 2H), 7,88 (dd, J=8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 7,67 (dd, J=8,5, 1,5 Hz, 1 H), 5,24 (dd, J=10,9, 7,2 Hz, 1 H), 5,40 (dd, J=9,0, 86,5 Hz, 1 H), 4,55 (d, JE6,5 Hz,1H),/4,30-4,37 (m, 1H), 4,23 (d, J=7,3 Hz, 1 H), 3,72-3,/79 (mM, 1 H), 3,67 (s, 3H), 3,66 (s, 3 H), 3,43 (t, J=10,4 Hz, 1 H), 2,49 - 2,74 (m, 3 H), 2,44 (ddd, J=13,6, 6,7, 6,4 Hz, 1 H), 2,11 - 2,22 (m, 1 H), 1,98 - 2,11 (m, 2H), 1,89 (q, J=12,0 Hz, 1 H), 1,25 (d, J=6,3 Hz, 3 H), 1,06 - 1,15 (m, 1 H), 1,00 (d, J=6,8 Hz, 3 H), 0,95 - 0,98 (m, 1 H), 0,94 (d, J=4,0 Hz, 3 H), 0,92 (d, 2 10 J=38Hz,3H) 0,88(d,J=6,8Hz 3H).
IR O A “E Doo. 2 1 Exemplo 113 2-((28,48)-4-Metil-1-(3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2- . ((28,4S)-4-metil-1-(3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil) fenil)-1H-imidazol HATU (76 mg, 0,200 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de 24((28,48)-4-metilpirrolidin-2-i1)-5-(4-(6-(2-((28,4S)-4-metil- pirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-il)naftalen-2-i)Yfenil)- IH-imidazol — (Intermediário 196) (64,8 mg, 0,1 mmol), ácido 3-metilbutanoico (22,5 mg, 0,220 mmol) e DIPEA (0,122 mL, 0,700 mmol) em DCM (2 mL) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente da noite para o dia. A mistura de reação foi evaporada atésecare então purificada através de HPLC preparativa para dar um sal de TFA de 2-((28,4S)-A4-metil-1-(3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((2S, 48)-4-metil-1-(3-metilbutanoil)-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazol (81,7 mg) como um sólido esbranquiçado. Tempo de retenção de LC-MS 1,853 min; m/z 671,64 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis
SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minutoeum tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MEOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS* Platform LC em modo de eletropulverização.
A É | Dr NH ' No CI O Ál » DN (5 HN Dk 1 À N o : Exemplo 114 Metil ((18)-2-((28,48)-2-(4-(6-(4-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxi- —carboniljamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1H- . imidazol-4-il)Yfenil)-2-quinolinil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato | HATU (12,75 mg, 0,034 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-(2((28 ,AS)-4-metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazo|-4-11)-6-(4-(2-((28,48)-4- metilpirrolidin-2-iI)-1H-imidazol-5-iN)Yfenil)quinolina (Intermediário 164) (10 ma, 0,015 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacético (7,28 mg, 0,034 mmol) em DMF (0,5 mL) e DIPEA (0,023 mL, 0,13 mmol) e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 16 horas.
A rea- ção foi concentrada e o resíduo foi purificado através de HPLC preparativa (HO-MeOH com tampão de TFA 0,1%) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28,4S)-2-(4-(6-(4-(2-((28 4S)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4-iN)fenil)-2- quinolinil)-1H-imidazo!-2-1)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-i)etil)carbamato (8,6 mg) como um sólido amarelo.
Tempo de reten- çãodelLC-MS 3,243 min; m/z 902,90 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-190AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 5 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% 7 ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H i RMN (400 MHz, MeOD) ô ppm 8,61 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,35 (d, /=1,8 Hz, 1 H), 8,22 - 8,33 (m, 3 H), 8,07 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,00 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,97 - 8,04 (m, 1 H), 7,89 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,85 - 7,95 (m, 2 H), 5,17 - 5,383 (m, 2 H), 4,32 - 4,45 (m, 2 H), 4,28 (dd, J=8,2, 5,4 Hz, 2 H), 3,83 - 3,98 (m, 4 H), 7 15 367(s,6H),3,22-3,54 (m, 6 H), 2,63 - 2,75 (m, 2 H), 2,46 - 2,61 (m, 2 H), 1,83 - 2,04 (m, 4 H), 1,52 - 1,64 (m, 2 H), 1,30 - 1,53 (m, 6 H), 1,26 (dd, ' J=6,3, 4,0 Hz, 6H).
H . NX N o . D Co) E o A x N A JS eo ço “ À
H Exemplo 115 Metil ((18)-1-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((28)-2-((metoxicarbo- nilamino)-3-metilbutanoil)-3-morfolinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1H- imidazol-2-11)-4-morfolinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (96 mg, 0,252 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCI de (R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-morfolin-3-ii)-1H-imidazol-4-iD)naftalen-2- iNfenil)-1H-imidazol-2-il)morfolina (Intermediário 181) (71,8 mg, 0,110 mmo!) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (44,2 mg, 0,252 mmol)
em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,13 mL, 0,77 mmol) e a mistura de reação re- cebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e agitada em temperatura ambiente por 3 horas. À reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-5 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)- 3-metilbutanoil)-3-morfolinil)- 1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazo1l-2-i1)- 4-motfolinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (75,5 mg) como um sólido es- branquiçado. Tempo de retenção de LC-MS 3,351 min; m/z 822,07 (MH+). : 10 Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- : 15 vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- : de o Solvente A era MeOH 10% / H;7O 90% / ácido trifluoracético 01,% e o : Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de ' 20 eletropulverização. *H RMN se apresenta como uma mistura de rotâmeros. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,47 (s, 0,5 H), 8,33 (s, 0,5 H), 8,27 (s, 1 H), 7,85 - 8,17 (m, 10 H), 5,95 (d, J=4,5 Hz, 2 H), 4,71 (dd, J=12,5, 7,8 Hz, 1 H), 4,35 - 4,58 (m, 4 H), 3,94 - 4,20 (m, 5 H), 3,79 (s, 3 H), 3,68 (s, 3 H), 3,53 - 3,78 (m, 3 H), 2,76 - 2,91 (m, 1 H), 2,12 (s amplo, 2 H), 1,05- 1,19 (m, SH), 0,81-1,00(m,/6H).
H + SO
NH
O CO O CDé do Exemplo 116 Metil ((18)-2((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((28)-2-((metoxicarboni!)
amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-iBacetil)-3-morfolinil)-1H-imidazol-4-11)-2- naftil)fenil)-1H-imidazol-2-i1)-4-morfolinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-11) etil)carbamato
HATU (88 mg, 0,231 mmol) foi adicionado a uma solução de um salde HCl de (R)-3-(5-(4-(6-(2-((R)-morfolin-3-11)-1H-imidazol-4-i) naftalen-2- iDfenil)-1H-imidazol-2-iNMmorfolina (Intermediário 181) (65,5mg, 0,100 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4il)acético (50,2 mg, 0,231 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,12 mL, 0,70 mmol) e a mistu- ra de reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e agitada em tempera- tura ambiente por 3 horas.
A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-5 mL), filtrada e purifica- da através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((3R)-3-(4-(4-(8-(2-((38R)-4-((28)-2-((me-
toxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-3-morfolinil)- 1 H-imi-
í 15 dazol4-il)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-11)-4-morfolinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4il)etil)carbamato (75 ma) como um sólido esbranquiçado.
Tempo Ú de retenção de LO-MS 3,120 min; m/z 906,15 (MH+). Dados de LC foram . registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector ' 20 de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era Me- OH10%/H7O 90% / ácido trifluoracético 01,% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. » Ç H — AN o v Exemplo 117
(1R,38S,5R)-2-(3-Metilbutanoil)-3-(4-(6-((2-((1R,38,5R)-2-(3- metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-ietinil)-2-naftil)- 1H- imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0Jhexano HATU (74,8 ma, 0,197 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tadade salde HCI de (1R,38,5R)-3-(5-(6-((2-((1R,3S,5R)-2-azabiciclo[3,1,0] hexan-3-i1)-1H-imidazol-4-il)etinil)naftalen-2-11)-1H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo 13,1,0]hexano (Intermediário 124) (64,7 mg, 0,098 mmol), ácido 3-metilbuta- noico (22,09 mg, 0,216 mmol) e DIPEA (0,103 mL, 0,599 mmol) em DCM (1,5 mL) e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2-3 horas. A reação foi concentrada até secar e purificada através de HPLC pre- parativa (tampão de TFA) para dar um sal de TFA de (1R,38,5R)-2-(3- metilbutanoil)-3-(4-(6-((2-((1R,3S8,5R)-2-(3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0] hex-3-iI)-1H-imidazol-4-il)etinil)-2-naftil)- 1 H-imidazol-2-1)-2-azabiciclo[3,1,0] hexano (51,5 mg) como uma espuma solidificada bege. Tempo de retenção . 15 deLC-MS1,775 min; m/2 615,41 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna Ú PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis . SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente ' 20 de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 0,1% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados —usandoum MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização.
H
E AÇO o CS HAN Cod do
N XY Exemplo 118
Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-2-piperidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-nafti)fenil)- 1H- imidazol-2-i1)-1-piperidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (93 mg, 0,245 mmol) foi adicionado a uma solução de um salde HCI de (S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-piperidin-2-i!)-1 H-imidazol-4-ibnaftalen-2- iNfenil)-1H-imidazol-2-il)piperidina (Intermediário 184) (69,0 mg, 0,108 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (42,9 mg, 0,245 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,13 mL, 0,75 mmol) e a reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e agitada em temperatura ambiente por 1 hora.
À reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-5 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-2-piperidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1 H-imidazol-2-11)-1- í 15 piperidinil)carbonii)-2-metilpropil)carbamato (88,9 mg) como um sólido ama- relo-claro.
Tempo de retenção de LC-MS 3,530 min; m/z 818,08 (MH+). Da- ' dos de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- . 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de ' 20 detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era MeOH 10% / HO 90% / ácido trifluoracético 01,96 e o —SolventeB era H2O 10% /MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN se apresenta como uma mistura de rotâmeros. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,46 (s, 0,65 H), 8,33 (s amplo, 0,35 H), 8,27 (s, 1 H), 7,84 - 8,15 (m, 10 H), 6,05 (s amplo, 1,3 H), 5,80 - 5,90 (m, 0,7 H), 4,67-4,78(m,1,3H),4,42-4,50 (m, 2 H), 3,99 - 4,10 (m, 0,7 H), 3,78 (s amplo, 3,5 H), 3,69 (s amplo, 2,5 H), 3,40 - 3,52 (m, 0,7 H), 2,681 - 2,73 (m, 1,3 H), 2,46 - 2,59 (m, 1,3 H), 2,37 (s amplo, 0,7 H), 2,03 - 224 (m, 4 H),
1,91 - 2,02 (m, 1,3 H), 1,63 - 1,88 (m, 5,4 H), 1,45 - 1,62 (m, 1,4,H), 1,11 (t, J=6,8 Hz, 7,3 H), 0,93 - 1,03 (m, 4,7H).
N N 2 dO NH O o OF por” nO Co -. N x Exemplo 119 Metil ((18)-2-((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-piperidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2- naftilfenil)-IH-imidazol-2-i1)-1-piperidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDeticarbamato : HATU (84 mg, 0,222 mmol) foi adicionado a uma solução de um ' sal de HC! de (S)-2-(5-(4-(6-(2-((S)-piperidin-2-il)-1H-imidazol-4-iI) naftalen-2- BR iNfenil)- 1H-imidazol-2-ilpiperidina (Intermediário 184) (62,5 ma, 0,096 mmol) e ácido (S)2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (48,2 . mg, 0,222 mmol) em DMF (1,0 mL) e DIPEA (0,12 mL, 0,688 mmol) e a rea- ção recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedada e agitada em temperatura ambi- i ente por 1 hora. A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-5 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbonil) a- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-2-piperidinil)- 1H-imidazo|-4-11)-2- naftilfenil)-1H-imidazol-2-i1)-1-piperidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iDetilcarbamato (71,2 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de reten- çãodeLC-MS 3,348 min; m/z 902,10 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. Às condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%,
um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MEOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 01,% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN se apresenta como uma mistura de rotâmeros. “H RMN (400 MHz, MeOD) à ppm 8,45 (s, 0,6 H), 8,32 (s amplo, 0,4 H), 8,27 (s, 1 H), 8,02 - 8,15 (m, 4,4 H), 7,85 - 8,02 (m, 5,6 H), 6,08 (s amplo, 1,2 H), 5,90 (s amplo, 0,8 H), 4,70 (s amplo, 1,2 H), 4,45 - 4,59 (m, 2 H), 3,90 - 4,10 (m, 4.8 H), 3,77 (s, 3,6 H), 3,69(s amplo, 2,4 H), 3,36 -3,50 (m, 5H), 2,35 - 2,73 (m, 3 H), 1,36 - 2,22 (m, 20 H).
N Y | dC oa N N N 00 Ao : MT D»1 <
KH i Exemplo 120 Metil ((18)-1-(((2S,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((28,5R)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-pirrolidinit)- 1H-imidazol-4-11)-2- naftiYfenil)-1H-imidazol|-2-i1)-S5-metil-1 -pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) car- —bamato HATU (62,0 mg, 0,163 mmol) foi adicionado a uma solução de um sal de HCl de 24(2S8,5R)S-metilpirrolidin-2-11)-5-(4-(6-(2-((2S,5R)-5- metilpirrolidin-2-i1)-1 H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)fenil)- 1H-imidazol (Intermedi- ário 187) (46 ma, 0,071 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metil- butanoico (28,8 mg, 0,163 mmol) DMF (0,7 mL) e DIPEA (0,09 mL, 0,5 mmol) e o recipiente de reação recebeu fluxo de nitrogênio, foi vedado e agi- tado em temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-3 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tam-
pão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,5R)-2-(4-(4-(6-(2- ((28,5R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-5b-metil-2-pirro- lidinil)-1H-imidazo!-4-i1)-2-naftil)Yfeni!)- 1 H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil) carbonil)-2-metilpropil)carbamato (53,3 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de retenção de LOC-MS 3,255 min; m/z 818,08 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. Às condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 01,% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS fo- : 15 ram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de ele- tropulverização. *H RMN se apresenta como uma mistura complexa de ro- ' tâmeros. *H RMN (400 MHz, MeOD) 5 ppm 8,31 (s, 0,5 H), 8,26 - 8,30 (m, . 1,5 H), 8,13 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 8,08 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,93 - 8,00 (m, 4H), 7,83 - 7,93 (m, 4 H), 5,67 (t, J=7,8 Hz, 0,7 H), 5,38 - 5,45 (m, 1,3 H), 4,44 - ' 20 468(m 3,3H),3,92 (dd, J=8,2, 4,4 Hz, 0,7 H), 3,66 (s, 3,5 H), 3,41 (s, 1H), 3,35 (s, 1,5 H), 2,53 - 2,92 (m, 3,3 H), 1,968 - 2,30 (m, 6 H), 1,78 - 1,87 (m, 0,7 H), 1,43 - 1,53 (m, 3,5 H), 1,33 (dd, J=6,3, 2,5 Hz, 2,5 H), 0,98 - 1,06 (m, 6 H), 0,96 (d, J=6,8 Hz, 2,4 H), 0,84 (d, J=6,8 Hz, 3,6 H).
N XY | Ph fo N N NH O) o OL por” WO N 00 Deo TD] Nú Exemplo 121 Metil / ((18)-2-((28,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((28,5R)-1-((28)-2-((metoxi-
carboniljamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1H- imidazol-4-1I)-2-nafti)Yfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-5-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- (tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato HATU (55,8 mg, 0,147 mmol) foi adicionado a uma solução de frasco de um sal de HCl de 2-((28,5R)-S-metilpirrolidin-2-i1)-5-(4-(6-(2- ((28,5R)-5-metilpirrolidin-2-il)-1 H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)Yfeni!)- 1H-imidazol (Intermediário 187) (41,4 mg, 0,064 mmol) e ácido (S)-2-(metoxicarbonila- mino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilacético (31,9 ma, 0,147 mmol) em DMF (0,7 mL) e DIPEA (0,08 mL, 0,4 mmol) e o recipiente de reação recebeu flu- xode nitrogênio, foi vedado e agitado em temperatura ambiente por 1 hora.
A reação foi concentrada sob uma corrente de nitrogênio da noite para o dia, diluída com MeOH (-3 mL), filtrada e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com um tampão de TFA) para dar um sal de TFA de metil ((18)-2(28,5R)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5R)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2- : 15 (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-S-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil) fenil)-1H-imidazol-2-11)-S5-metil- 1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- ' iDNetil)carbamato (27,6 mg) como um sólido amarelo-claro. Tempo de reten- . ção de LC-MS 3,135 min; m/z 902,15 (MH+). Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna " 20 PHENOMENEXº Luna 3u C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto eum tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 10% / H2O 90% / ácido trifluoracético 01,% e o Solvente B era HO 10% / MeOH 90% / ácido trifluoracético 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platiorm LC em modo de eletropulverização. Mistura de rotâmeros através de *H RMN. 'H RMN (400 MHz, MeOD) 5 pm 8,31 (s, 0,5 H) 8,25-8,29(m 1,5H),8,13(d,J=8,8Hz,1H),8,08 (dd, J=8,8,2,5 Hz, 1 H), 7,93 - 8,00 (m, 4 H), 7,82 - 7,92 (m, 4 H), 5,71 (t, J=7,9 Hz, 0,8 H), 5,37 - 5,45 (m, 1,2 H), 4,47 - 4,69 (m, 3 H), 3,89 - 4,07 (m, 5 H), 3,67 (s, 3 H), 3,24
- 3,43 (m, 7 H), 2,57 - 2,92 (m, 3 H), 1,96 - 2,298 (m, 6 H), 1,79 - 1,87 (m, 1 H), 1,35 - 1,67 (m, 11 H), 1,33 (dd, J=6,5, 2,5 Hz, 3 H). " as o X PA, DOOR! o”
AA H Exemplo 122 Metil ((18)-1-(((28)-2-(4-(6-(4-(2-((28)-1-((28)-2-((metoxicarbo- nil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metileno-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-iNfenil)-2- naftil)-1H-imidazo|-2-i1)-4-metileno-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) — car- bamato HATU (102 mg, 0,269 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de tetra sal de HCl de 2-((S)-4-metilenopirrolidin-2-i1)-4-(4-(6-(2-((S8)-4- metilenopirrolidin-2-il)-1H-imidazol-4-ilnaftalen-2-i)fenil)- 1 H-imidazol — (Inter i mediário 189) (88 mg, 0,148 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3- - metilbutanoico (47,1 mg, 0,269 mmol) e base de Hunig (0,234 mL, 1,34 mmol) em DMF (6 mL). A reação foi agitada em 4 horas em temperatura ' 15 ambiente e purificada através de HPLC preparativa (MeOH/água com TFA . 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18S)-1-(((28)-2-(4-(6-(4-(2-((2S)- 1-((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-4-metileno-2-pirrolidinil)- TH-imidazol-4-iDfenil)-2-naftil)-1 H-imidazol-2-il)-4-metileno-1-pirrolidinil) car- bonil)-2-metilpropil)carbamato (65 mg, 46%). Tempo de retenção de LC-MS 3,22min; Calc. para CasHs3aNgOsg: 813,40. Encontrado m/z 813,7 [M+H]*". Da- dos de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC- 10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de08ml/min, um gradiente de solvente A 100% / Solvente B 0% para Sol- vente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era MeCN 5% / água 95% / NH.OAc 10mM e o Solvente B era 95% MeCN/ água 5% / NH,OAc 10mM. Dados de MS foram determina-
dos usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (Sa! de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,0-7,85 (m, 8H), 5,50-5,45 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,72 (d, J=11,6 Hz, 2H), 4,60 (dd, J=11,3, 34 Hz 2H) 4,21 (dd, J=7,6,2,8 Hz, 2H), 3,68 (s, 6H), 2,98 - 2,92 (m, 2H), 2,10 - 2,06 (m, 2H), 1,06-1,02 (m, 2H), 0,97 -0,94 (m, 12H). O. o K a O.
O Oo TA, DADA Yodo q N NH O o o Exemplo 123 Metil ((18)-2-((28)-2-(4-(4-(6-(2-((28)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil) ' amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metileno-2-pirrolidinil)- 1 H-imi- dazol4-il)-2-naftilfenil)-1H-imidazol-2-il)-4-metileno-1-pirrolidinil)-2-0x0-1- " (tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato HATU (102 mg, 0,269 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de tetra sal de HCI de 2-((S)-4-metilenopirrolidin-2-i1)-4-(4-(6-(2-((8)-4- - metilenopirrolidin-2-i!)-1H-imidazol-4-i naftalen-2-iI)fenil)- lH-imidazol (Inter- —mediário 189) (86 mg, 0,148 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- (tetra-hidro-2H-piran4-il)acético (58,4 mg, 0,269 mmo!) e base de Hunig (0,234 mL, 1,34 mmol) em DMF (6 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente e purificada através de HPLC preparativa (MeCN/ á- gua com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-2-((28)-2-(4- (4-(6-(2-((28)-1-((28S)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i!) acetil)-4-metileno-2-pirrofidinil)-1H-imidazo|-4-11)-2-naftil)Yfenil)- 1 H-imidazol-2- iN)-4-metileno-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato.
Tempo de retenção de LC-MS 2,81 min; Calc. para CsoHs7;NgOsg: 897,43 En- contrado m/z 897,41 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um croma- tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- NEXº Luna C18 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
Às condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análisedeS minutos onde o Solvente À era MeEOH 5% / água 95% / TFA 0,1,%6 e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 2H), 8,4 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,09 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,01-7,85 (m, 8H), 5,50- 5,44 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,75 (d, J=14,6 Hz, 2H), 4,63 (dd, J=13,3, 4,5 Hz, 2H), 4,27 (dd, J=8,3, 3,5 Hz, 2H), 3,99-3,91 (m, 4H) 3,69 (s, 6H), 3,41-3,37 (m 4H), 3,0 -2,94 (m, 2H), 2,02 - 1,98 (m, 2H), 1,68-1,65 (m, 2H), 1,59-1,32 (m, 8H). O. o = o ' ANARP-O QI XI O so x - o Exemplo 124 Metil — ((18)-1-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicar- ' bonil)amino)-3-metilbutanoil)aminojetil)- 1H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)- 1 H- imidazol-2-il)etil)carbamoil)-2-metilpropil)carbamato HATU (149 mg, 0,393 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de tetra sal de HCl de (S)-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-aminoetil)- 1 H-imidazol-4- ilnaftalen-2ilfenil)-1H-imidazol-2-il)etanamina (Intermediário 191) (111 ma, 0,148 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (47,1 mg, 0,196 mmol) e base de Hunig (0,343 mL, 1,96 mmol) em DMF (8 mL). A rea- ção foi agitada 4 horas em temperatura ambiente e purificada através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicarbonil)amino)- 3-metilbutanoil)>amino)etil)-1H-imidazol-4-11)-2-naftiDfenil)-1H-imidazo|-2- iNetilcarbamoil)-2-metilpropil)carbamato (91 mg, 47%). Tempo de retenção de LC-MS 2,96 min; Calc. para CaoHasNgOçg: 737,38 Encontrado m/z 737,45
[M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxadeflixode0,8ml/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeEOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sa! de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,35 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,13 (d, J-8,9 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,99-7,88 (m, 8H), 5,30-5,27 (m, 2H), 3,99-3,97 (m, 2H), 3,70 (s, 8H), 2,14 (s amplo, 2H), 1,78-1,75 (m, 8H), 0,99 -0,95 (m, 12H).
- O O, w en OD o * o
E DOADA . Õ N Oo Exemplo 125 Metil ((18)-2-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicar- bonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)amino)etil)-1H-imidazo|-4-11)-2- naftiDfenil)-1H-imidazol-2-i)etil)amino)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran4-il) e- til)carbamato HATU (148 mg, 0,393 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada de tetra sal de HCl de (S)-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-aminoetil)-1H-imidazo|-4- iNnaftalen-2-ilfenil)- 1H-imidazol-2-il)etanamina (Intermediário 191) (83 mg, 0,496 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNacético (85 mg, 0,393 mmol) e base de Hunig (0,343 mL, 1,98 mmol) em DMF (8 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente e purifi- cada através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-2-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxi-
carbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)amino)etil) -1H-imidazol-4- i)-2-naftiYfenil)- 1H-imidazol-2-il)etil)>amino)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4- iNeticarbamato (89 mg, 42%). Tempo de retenção de LC-MS 2,64 min; Calc. para 14H53N8Os: 821,40. Encontrado m/z 821,80 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXS” Luna C18 de 2,0x50mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À
0%/ Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minutos e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- vente A era ACCN 5% / água 95% / NH,OAc 10 mM e o Solvente B era AcCN 95% / água 5% / NH,OAc 10 MM.
Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSSº Platíorm LC em modo de eletropulverização. *'H . 15 RMN(Salde TFA, 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,34 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,99-7,87 (m, 8H), 5,29-5,26 (m, 2H), ' 4,02-4,00 (m, 2H), 3,98-3,93 (m, 4H) 3,71 (s, 8H), 3,41-3,37 (m 4H), 2,02 (s : amplo, 2H), 1,79-1,76 (m, 6H), 1,62 (d, J=13,0 Hz, 2H), 1,49-1,39 (m, 6H). > 1 4 o.
Y 9 AMI DIANA o Oo A, Oo x x Exemplo 126
Metil ((18)-1-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28)-2-((metoxicar- bonilamino)-3-metilbutanoil)(metil)amino)etil)- 1 H-imidazol-4-iI)-2-naftil)Yfenil)-
1H-imidazol-2-iN)etil)(metil)carbamoil)-2-metilpropil)carbamato HATU (84 mg, 0,222 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da de tetra sal de HC! de (S)-N-metil-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(metilamino)etil)-1 H- imidazol-4-i)naftalen-2-ilYfenil)- 1H-imidazol-2-i)etanamina (Intermediário 193) (66 mg, 0,111 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- noico (38,9 mg, 0,222 mmol) e base de Hunig (0,194 mL, 1,11 mmol) em DMF (5 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambiente e purifi-
cada através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18S)-1-(((28)-2-((metoxicar- bonilamino)-3-metilbutanoil)(metil)amino)etil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazot-2-i)etil)(metil)carbamoil)-2-metilpropil)carbamato.
Tempo — de retenção de LC-MS 1,78 min; Calc. para Ca2Hs3NgOs: 765,41. Encontrado m/z 765,41 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x80mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- to de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mlL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol- - 15 venteBeraMeOH 95% / água 5% /TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASSSº Platform LC em modo de eletropulveriza- ' ção. *H RMN (Sa! de TFA; rotâmeros, 500 MHz, MeOD) 3 ppm 8,44/8,34 (s, . 1H), 8,27 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,10-7,88 (m, 9H), 6,17-6,14/5,33- 5,30 (m, 2H), 4,64-4,6/4,41-4,389 (m, 2H), 3,84/3,66 (s, 3H), 3,83/3,59 (s, 3H), ' 20 3,37 (s, 6H) 2,10-2,05 (m, 2H), 1,90-1,87/1,85-1,82 (m, 6H), 1,15 -0,90 (m, 12H). N H o —-O H 'N N O VA q O 5 O So MOO o H Exemplo 127 Metil / ((18)-2-(((18)-1-(4-(4-(6-(2-((18)-1-(((28S)-2-((metoxicarbo- ni)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)acetil)(metil)amino)etil)- 1H-imidazol-4- i)-2-naftil)fenil)-1H-imidazol-2-iN)etil)(metil)amino)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- pirand4i)etiicarbamato HATU (84 mg, 0,222 mmol) foi adicionado a uma solução agita-
da de tetra sal de HCI de (S)-N-Metil-1-(4-(4-(6-(2-((S)-1-(metilamino)etil)- 1H- imidazol-4-iD)naftalen-2-il)Yfenil)-1H-imidazol-2-il)etanamina (Intermediário 193) (66 mg, 0,111 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)acético (48 mg, 0,222 mmol) e base de Hunig (0,194 mL, 1,11 mmol) em DMF (5 mL). A reação foi agitada 5 horas em temperatura ambi- ente e purificada através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-2-(((18)-1-(4-(4-(6-(2((18)-1- (((28)-2-((metoxicarbonil)>amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)(metil)/ a- mino)etil)-1H-imidazol-4-iI)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazo|-2-il)etil)(metil)amino)-2- oxo-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil)carbamato.
Tempo de retenção de LC-MS
1,58 min; Calc. para CasHs;NgOzg: 849,43. Encontrado m/z 849,46 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna C18 de 2,0x30mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimen- - 15 to de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 1 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente ' B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 2 . minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 3 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol- ' 20 venteBeraMeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulveriza- ção. '*H RMN (Sal de TFA, rotâmeros 500 MHz, MeOD) ô ppm 8,45/8,34 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,08-7,88 (m, 8H), 6,21-6,18/5,38-5,34 (m, 2H), 4,73-4,70/4,47-4,45 (m, 2H), 4,02-3,94 (m, 4H)3,84/3,63 (s, 3H), 3,83/3,60 (s, 3H), 3,46-3,38 (m 4H), 3,37/3,35 (s, 6H), 2,02 (s amplo, 2H), 1,91-1,88/1,84-1,81 (m, 6H), 1,68 (d, J=13,0 Hz,
2H), 1,53-1,42 (m, 6H). AMA OOQDQILAA No o Pr Re) Exemplo128
Metil — ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((2S 4S)-1-((28)-2-((meto- xicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2- naftifenil)-1H-imidazol|-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropi!) car- bamato HATU (32 mg, 0,085 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da de tetra sal de HCl de 2-((28,48S)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(8-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftilfenil)-1H-imidazol (Intermediá- rio 196) (25 mg, 0,039 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- noico (14,9 mg, 0,085 mmoi) e base de Hunig (0,054 mL, 0,308 mmol) em DMF (1mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parci- almente concentrada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi ab- sorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 01,%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4- (4-(6-(2-((28,48S)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil- - 15 2-pirrotidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-nafti)Yfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1- pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil)carbamato (24,5 mg, 57,8%). Tempo de ' retenção de LC-MS 3,05 min; Calc. para CasHs;N8Os: 817,44. Encontrado . m/z 817,36 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Lu- ' 20 na C18 de 20x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mlL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análisede5S minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,08 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,99-7,85 (m, 8H), 5,27-5,22 (m, 2H), 4,37-4,33 (m, 2H), 4,25-4,23 (m, 2H), 3,688 (s, 6H), 3,47-3,41 (m, 2H), 2,72-2,68 (m 2H), 2,55 (s amplo, 2H), 2,07-2,03 (m, 2H), 1,92-1,87 (m, 2H), 1,27-1,26 (m, 6H), 0,95-0,9 (m, 12H).
a Õ
H AAA DOQxa NR o SN Cd A Cv NÃo
GO N o Exemplo 129 Metil (2-((28,48S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-1-(((metoxicarbonil) ami- nol(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)- TH-imidazol-4-11)-2- naftifenil)-1H-imidazol-2-iI)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-iletil)carbamato HATU (64,5 mg, 0,170 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada do tetra sal de HCl de 2-((28,4S)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2- ((28 4S)-4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilfenil)- 1H-imidazol (In- BR termediário 196) (50 mg, 0,077 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (36,8 mg, 0,170 mmo!) e base de Hunig ' 10 (0,11mL,0,6817 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em tem- peratura ambiente e parcialmente concentrada através de purga de gás ni- trogênio. O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC - preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de me- til (2-((2S8,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,4S)-1-(((metoxicarbonil)amino)(tetra-hidro-
15. 2H-pirand-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4-11)-2-naftilYfenil)-1H- imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil) car- bamato. Tempo de retenção de LOC-MS 2,84 min; Calc. para CsoHs NgOg: 901,46. Encontrado m/z 901,42 [M+H]*, Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna —PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeO0OH
5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 3 ppm 8,29 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H),8,00-7,85 (m, 8H), 5,25-5,21 (m, 2H), 4,42-4,39 (m, 2H), 4,30-4,27 (m, 2H), 3,96-3,92 (m, 4H), 3,68 (s, 6H), 3,49-3,35 (m 6H), 2,71-2,38 (m, 2H), 2,58-2,54 (m, 2H), 1,97 - 1,89 (m, 4H), 1,60 (d, J=13,0 Hz, 2H), 1,48-1,26 (m, 12H). —oO, N ss (D <> o Y o VA, DO Q3 Aa TÁ 4 ““% : Exemplo 130 Metil (t-ciclopropil-2-((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,4S)-1-(ciclopro- Ú 10 — pil((metoxicarbonil)>amino)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2- . naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-1)-4-metil-1 -pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato HATU (39 mg, 0,102 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da do tetra sal de HCI de 2-((28 4S)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazo|-4-11)-2-naftil)fenil)- H-imidazol (Intermediá- rio 196) (30 mg, 0,085 mmol), ácido (S)-2-ciclopropil-2-(metoxicarbonilamino) acético (17,62 mg, 0,102 mmol) e base de Hunig (0,065 mL, 0,37 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parci- almente concentrada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi ab- sorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água comTFA0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil (1-ciclopropil-2-((2S,4S) -2-(4-(4-(6-(2-((28 4S)-1-(ciclopropil((metoxicarbonil)amino)acetil)-4-metil-2- pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirroli- dinil)-2-oxoetil)carbamato (24,5 mg, 57,8%). Tempo de retenção de LC-MS 3,08 min; Calc. para CasHs3NgOs: 813,41. Encontrado m/z 813,45 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-
10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Soivente B 0% para Sol- vente A 0%/ Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos on- de o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usan- do um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Salde TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,32 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,08 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,99-7,87 (m, 8H), 5,29-5,24 (m, 2H), 4,30 (s amplo, 2H), 3,82-3,80 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,43-3,37 (m, 2H), 2,72- 2,68 (m 2H), 2,55 (s amplo, 2H), 1,91-1,86 (m, 2H), 1,25-1,24 (m, 6H), 1,11 (s amplo, 2H), 0,60-0,58 (m, 4H), 0,53-0,51 (m, 2H), 0,04-0,38 (m, 2H). - —o H Do o V o a, DO Qua Td . / "o Exemplo 131 Metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)>amino)butanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazo|-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)propil)carbamato HATU (45 mg, 0,119 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da do tetra sal de HCI de 2-((28,4S)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazo|-4-11)-2-nafti)fenil)- H-imidazol (Intermediá- rio 196) (35 mg, 0,054 mmol), ácido (S)-2(metoxicarbonilamino)butanoico (19,14 mg, 0,119 mmol) e base de Hunig (0,075 mL, 0,432 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concentrada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA
0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(4-(6-(2- ((28,48)-1-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)butanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H- imidazol-4-iI)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil) propil)carbamato (36,4 mg, 81,7%). Tempo de retenção de LC-MS 2,91 min; Calc para CuHlsaNgOs: 789,41. Encontrado m/z 789,41 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo liquido Shimadzu LC-10AS equi- pado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 5% / água 85% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. . 15 Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. 'H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, ] MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, . J=8,6 Hz, 1H), 8,00-7,88 (m, 8H), 5,27-5,22 (m, 2H), 4,37 (s amplo, 2H), 4,24-4,23 (m, 2H), 3,67 (s, 6H), 3,44-3,39 (m, 2H), 2,72-2,68 (m 2H), 2,58 (s ' 20 amplo, 2H), 1,88-1,84 (m, 2H), 1,47-1,25 (m, 6H), 0,98-0,92 (m, 10H). a o FAO QD Yo Ô "o Exemplo 132 Metit ((1S)-1-ciclobutil-2-((28,48S)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48S)-1((2S)- 2-ciclobutil-2-((metoxicarbonil)amino)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol- 41)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato HATU (45 mg, 0,119 mmol) foi adicionado a uma solução agita- dadetetrasalde HCI de 2-((28,48)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol (Intermediá-
rio 196) (35 mg, 0,054 mmol), ácido (S)-2-ciclobutil-2-(metoxicarbonilamino) acético (22,23 mg, 0,119 mmol) (preparado de uma maneira similar a Cap- 51 usando ácido (S)-2-(ferc-butoxicarbonilamino)-2-ciciobutilacético comer- cialmente disponível como um material de partida) e base de Hunig (0,075 mL 0,4382mmol)em DMF (1 m). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concentrada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-
ciclobutil-2-((2S,48)-2-(4-(4-(8-(2-((28,48S)-1-((28)-2-ciclobutil-2-((metoxicar-
—bonilamino)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-1))-2-naftil)Yfenil)-1H- imidazo|-2-iI)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-oxoetil)carbamato (25,6 mg, 43,6%). Tempo de retenção de LC-MS 3,13 min; Calc. para CasHs7N3Os: 841,44. En- contrado m/z 841,48 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um croma- tógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOME- . 15 NEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição ' empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A . 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo ' 20 de análisede5 minutos onde o Solvente À era MEOH 5% / água 95% / TEA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS?* Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,9 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,00-7,86 (m, 8H), 5,26-5,21 (m, 2H), 4,414,37 (m, 4H), 3,68 (s, 6H), 3,48-3,43 (m, 2H), 2,71- 2,668 (m 4H), 2,56 (s amplo, 2H), 1,96-1,87 (m, 14H), 1,27-1,26 (m, 6H). o, o, H Duo O O a o E.
D-OQ3 YonÃo- Exemplo 133
Metil ((18)-2-((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxi- carbonil)amino)-2-((2R,48)-2-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2- Pirrolidinil)-1H-imidazol-4-iI)-2-naftil)Yfenil)- 1H-imidazol-2-iN)-4-metil-1-pirro- lidini)-1-((28,4R)-2-metiltetra-hidro-2H-piran-4-i1)-2-oxoetil)carbamato HATU (32 mg, 0,085 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da do tetra sal de HCI de 2-((28,4S)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazol-4-11)-2-nafiil)fenil)- 1/H-imidazol (Intermediá- rio 196) (25 mg, 0,039 mmol), ácido 2-(metoxicarbonilamino)-2-((2R,4S)-2- metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (Cap-178, estereoisômero 1) (19,61 mg, 0,085 mmol) e base de Hunig (0,054 mL, 0,308 mmol) em DMF (1 ML). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concen- trada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil . 15 ((18)-2-((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48)-1-((28)-2-((metoxicarbo- ni)amino)-2-((2R,4S)-2-metiltetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirro- ] lidinil)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazo|-2-i1)-A4-metil-1 -pirrolidinil)-1- . ((28,AR)-2-metiltetra-hidro-2H-piran-4-11)-2-oxoetil)carbamato — (21,3 mo, 45,2%). Tempo de retenção de LC-MS 2,94 min; Calc. para Cs2HeaNgOs: ' 20 929,49, Encontrado m/z 929,64 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condi- ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mLímin, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS” Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sa! de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,32 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,15 - 8,12 (m, 1H), 8,09-8,06 (m, 1H), 8,02- 7,94 (m, 5H), 7,90-7,868 (m, 3H), 5,28-5,23 (m, 2H), 4,50-4,48 (m, 2H), 4,44
(s amplo, 2H), 3,95-3,91 (m, 2H), 3,71-3,68 (s, 10H), 3,46-3,41 (m, 2H), 2,72- 2,67 (m, 2H), 2,55-2,52 (m, 2H), 2,19 (s amplo, 2H), 1,97 - 1,92 (m, 2H), 1,60 (s amplo, 2H), 1,48-1,46 (m, 2H), 1,39 (s amplo, 2H), 1,30-1,26 (m, 8H), 1,14-1,10 (m, 6H).
GA A A o $$ O O Exemplo 134 Metil ((18)-1-(((28,4R)-2-(4-(4-(6-(2-((28,4R)-1-((28)-2-((metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H-imidazol-4-11)-2- naftifenil)-1H-imidazo|-2-i1)-4-metil- 1-pirrolidinil)carbonil)-2-metilpropil) car bamato ' HATU (65 mg, 0,171 mmoi) foi adicionado a uma solução agita- dade tetra sal de HCI de 2-((28,4R)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4R)- 4-metil-2-pirrolidinil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- 1 H-imidazol (Intermediá- - rio 201) (50 mg, 0,077 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metil- butanoico (30 mg, 0,170 mmol) e base de Hunig (0,108 mL, 0,308 mmol) em ' DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parci- almente concentrada através de purga de gás nitrogênio. O resíduo foi ab- sorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((1S)-1-(((28,4R)-2-(4- (4-(6-(2-((28,4R)-1-((2S)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil- 2-pirrolidinil)- 1H-imidazol-4-i1)-2-nafti)Yfenil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirro- lidinicarbonil)-2-metilpropil)carbamato (80,7 mg, 71%). Tempo de retenção de LC-MS 3,12 min; Calc. para CagHs7NgOs: 817,44. Encontrado m/z 817,46 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B
0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol vente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- —nados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulveriza- ção. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,30 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,14 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,00-7,86 (m, 8H), 5,43- 5,38 (m, 2H), 4,26-4,24 (m, 2H), 4,09-4,05 (m, 2H), 3,69 (s, 68H), 3,64 (s am- plo, 2H), 2,76-2,73 (m 2H), 235-2,32 (m, 2H), 2,25-2,22 (m, 2H), 2,11-2,09 (m, 2H), 1,22-1,20 (m, 6H), 0,98-0,93 (m, 12H).
H o NA O CG o. Da o YA, DO QI Yi l . Ow â Exemplo 135 , Metil — ((18)-1-(((18,3S,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-((28)-2- : ((metoxicarbonil)>amino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)- 1H-imi- dazol-4-iI)-2-naftil)Yfenil)-1 H-imidazol-2-11)-2-azabiciclo[3,1,0])hex-2-il)carbonil)- 2-metilpropil)carbamato HATU (65 mg, 0,171 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da de tetra sal de HCl de (18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-azabiciclo 13,1,0]hex-3-iI)- 1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1 H-imidazo!-2-11)-2-azabiciclo [3,1,0]hexano (Intermediário 203) (50 mg, 0,078 mmol), ácido (S)-2-(metoxi- carbonilamino)-3-metilbutanoico (30 mg, 0,111 mmol) e base de Hunig (0,108 mL, 0,621 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concentrada através de purga de gás nitrogênio. O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de me- til ((18)-1-(((18,38,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,38,58)-2-((2S)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutancil)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil)
B545/563 fenil)-IH-imidazol-2-i1)-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-iN)carbonil)-2-metilpropil) car- bamato (54 mg, 63%). Tempo de retenção de LC-MS 3,15 min; Calc. para CasHs3NgOs: 813,41. Encontrado m/z 813,45 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de1minutoe um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era Me- OH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. '*H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,12 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,07 (d, - 15 J=8,6Hz, 1H), 7,98-7,86 (m, 8H), 5,80-5,74 (m, 2H), 4,36-4,34 (m, 2H), 4,02- 3,99 (m, 2H), 3,73 (s, 6H), 2,99-2,95 (m, 2H), 2,28-2,25 (m 2H), 2,16 (s am- ' plo, 2H), 2,04 (s amplo, 2H), 1,24-1,20 (m, 2H), 1,08 (s amplo, 2H), 1,02-1,00 (m, 12H). . ve a A Cd <> nO Es o ó o DO Q3e LES H VvH mê Exemplo 136 Metil — ((18)-1-(((1S8,3S,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazo|-4-i1)-2-naftil)Yfenil)-1H-imidazol-2-1)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-il)carbonil)-2-metilpropilcarbamato HATU (62 mg, 0,164 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da do tetra sal de HCl de (18,38,58)-5-metil-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-5- —metil2-azabicicio[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftiNYfenil)-1 H-imidazol-
' 546/563
2-1)-2-azabiciclo [3,1,0]hexano (Intermediário 209) (50 mg, 0,074 mmol), áci- do (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoico (28,7 mg, 0,164 mmol) e base de Hunig (0,104 mL, 0,595 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concentrada através de purgade gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado atra- vês de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((18,3S,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-((2S)-2-
((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-
1H-imidazol-4-11)-2-naftil)Yfenil)- 1 H-imidazol-2-i1)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2lcarbonil)-2-metilpropil)carbamato (45 mg, 54%). Tempo de retenção de LC-MS 3,15 min; Calc. para CagHs;N8Oçs: 841,44 Encontrado m/z 841,50 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento - 15 de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B : 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 mi- ' nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol- 7] 20 venteBeraMeOH 95% / água 5% /TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. ?H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,33 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,11 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,97-7,85 (m, 8H), 5,82-5,75 (m, 2H), 4,31-4,28 (m, 2H), 3,73-3,71 (m, 8H), 2,75-2,69 (m, 2H), 2,44-2,37 (m 2H), 217-2,12(m,2H), 1,40 (s, 6H), 1,1-1,11 (m, 4H), 1,01-0,99 (m, 12H). Ne o FA DO QIA to ó Ow o 2 Me Exemplo 137
Metil ((18)-2-((18,3S,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,58)-2-((28)-2- ((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetil)-5-metil-2-azabi- ciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfeni!)- 1H-imidazol-2-i1)-5-metil-2- azabiciclo[3,1,0]hex-2-i1)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4il)etil)carbamato HATU (62 mg, 0,164 mmol) foi adicionado a uma solução agita- da do tetra sal de HCI de (18,38S,5S)-5-metil-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,5S)-5-metil -2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-11)-2-nafti)Yfenil)- 1 H-imidazol-2-il)- 2-azabiciclo [3,1 ,0]hexano (Intermediário 209) (50 mg, 0,074 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acético (35,5 ma, 0,164 mmo!) e base de Hunig (0,104 mL, 0,595 mmol) em DMF (1 mL). À reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concen- trada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-2-((18,3S,58)-3-(4-(4-(6-(2-((18,3S,5S)- - 15 24(28)-2-((metoxicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-5-metil- 2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazo|-4-i1)-2-naftil)fenil)- 1H-imidazol-2-i1)-5- : metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-2-11)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-i)etil) — car- bamato (46,3 mg, 51%). Tempo de retenção de LC-MS 3,15 min; Calc. para Cs2aHe8:NgOs: 925,46. Encontrado m/z 463,36 [M/2+H]*. Dados de LC foram : 20 registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- teB100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era Me- OH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº? Platform LC em modo de eletropulverização. 1H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,31 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,06 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,97-7,85 (m, 8H), 5,80-5,74 (m, 2H), 4,36-4,35 (m, 2H), 3,99-
3,95 (m, 4H), 3,76-3,74 (m, 8H), 3,43-3,35 (m, 4 H), 2,75-2,68 (m, 2H), 2,44- 2,37 (m 2H), 2,06-2,04 (m, 2H), 1,74 (app. d, J=13 Hz, 2H), 1,52-1,35 (m, 12H), 1,22-1,19 (m, 2H), 1,14-1,12 (m, 2H). Me
H H —o, NX 4 ED o Ds o E Pa VOTO
H H Me Exemplo 138 Metil — ((18)-1-(((1R,3S8,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- ((metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-S5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazo|-4-11)-2-naftil)Yfenil)-1 H-imidazol-2-iI)-S5-metil-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (31 mg, 0,082 mmol) foi adicionado a uma solução agita- - da do tetra sal de HCI de (1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,S5R)-2-(ferc-buto- xicarbonil)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-iI)-1H-imidazol-4-i1)-2-naftil)Yfenil)- , 1H-imidazol-2-iI)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hexano-2-carboxilato (Intermediá- rio 211) (25 mg, 0,037 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbuta- noico (14 mg, 0,082 mmol) e base de Hunig (0,052 mL, 0,297 mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parci- almente concentrada através de purga de gás nitrogênio. O resíduo foi ab- sorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((1S8)-1-(((1R,3S,5R)-3- (4-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-5- metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1 H-imidazol-4-11)-2-naftiNYfenil)-1H-imidazol- 2/))-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-2-il)carbonil)-2-metilpropil)carbamato — (17 mg, 41%). Tempo de retenção de LC-MS 3,10 min; Calc. para CasHs57NgOs: 841,44. Encontrado m/z 841,542 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condi-
ções de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5%/água95%/TFA0,1%e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%.Dados de MS foram determinados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,27 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 8,12 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,07 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,98-7,93 (m, 4H), 7,88-7,85 (m, 4H), 5,09-5,04 (m, 2H), 4,595-4,53 (m, 2H) 3,38 (s, 6H), 3,57 (s amplo, 2H), 2,81-2,75 (m, 2H), 2,33-2,27 (m 2H), 2,22-2,16 (m, 2H), 1,44 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,05-0,93 (m, 16H). Me O.
H H O o H Ss <>? o 2 O | TA, DOQXA Tudo Õ os - O Me BR Exemplo 139 Metil — ((18)-1-(((1R,38,5R)-3-(4-(4(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2- Ú ((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-S5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)- 1H-imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)-1 H-imidazol-2-il)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0] hex-2l)carbonil)-2-metilpropil)carbamato HATU (34,8 mg, 0,092 mmol) foi adicionado a uma solução agi- tada do tetra sal de HCl de (1R,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,3S,5R)-2-(terc-bu- toxicarbonil)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0]hex-3-il)-1H-imidazo|-4-i1)-2-naftil)fenil) -1H-imidazol-2-il)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0]Jhexano-2-carboxilato (Intermedi- ário 211) (28 mg, 0,042 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acético (20 mg, 0,092 mmol) e base de Hunig (0,085 mL, 0,333 mmol) em DMF (2 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente e parcialmente concentrada através de purga de gás nitrogênio. O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar o bis sal de TFA de metil ((1S)-1-
((1R,38,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((1R,38,5R)-2-((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3- metilbutanoil)-S-metil-2-azabiciclo[3,1,0)hex-3-il)-1H-imidazol-4-11)-2-naftil) fenil)-1H-imidazol-2-1)-5-metil-2-azabiciclo[3,1,0Jhex-2-il)carbonil)-2-metil- propil)carbamato (13 mg, 25%). Tempo de retenção de LC-MS 2,92 min; Calc para Cs2H5:NgOs: 925,46. Encontrado m/z 92,53 [M+H]*. Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um de- tector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 —mL/min, um gradiente de Solvente À 100% / Solvente B 0% para Solvente À 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Sol- vente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um - 15 MICROMASS?º Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,28 (s, 2H), 8,14 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,07 (d, ' J=8,6 Hz, 1H), 8,00-7,96 (m, 4H), 7,91-7,84 (m, 4H), 5,08-5,02 (m, 2H), 4,59- ' 4,56 (m, 2H), 4,00-3,94 (m, 4H), 3,69 (s, 6H), 3,62 (s amplo, 2H), 3,44-3,38 (m, 4H), 2,81-2,78 (m, 2H), 2,31-2,29 (m, 2H), 2,09 (s amplo, 2H), 1,60-1,47 : 20 (m, 8H), 1,43(s, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,04 (s amplo, 2H), 0,98-0,97 (m, 2H). O. NA í ú Ed <> o 2 9 de Vo
H Exemplo 140 Metil — ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48)-1-((28)-2-((meto- xicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidini)-1H- imidazol-4-i1)-2-naftilYfenil)- 1H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato HATU (97 mg, 0,254 mmol) foi adicionado a uma solução agita-
da do tetra sal de HCI de 2-((28,48)-4-metil-2-pirrolidinil)-4-(4-(6-(2-((28,4S)- 4-metil-2-pirrolidínil)-1 H-imidazol-4-i1)-2-naftiN)fenil)-1H-imidazol (Intermediá- rio 196) (150 mg, 0,231 mmol), ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acético (50 mg, 0,231 mmol) e base de Hunig (0,162 mL, 0,925mmol) em DMF (1 mL). A reação foi agitada 1 hora em temperatura ambiente antes da adição de ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbu- tanoico (40,5 mg, 0,231 mmol) e base de Hunig adicional (0,162 mL, 0,925 mmol) e HATU (97 mg, 0,254 mmol). A mistura foi agitada mais em tempera- tura ambiente por 1 hora e parcialmente concentrada através de purga de gás nitrogênio.
O resíduo foi absorvido em MeOH e purificado através de HPLC preparativa (MeCNf/água com TFA 0,1%). Um segundo método de cromatografia foi aplicado para separar os isômeros: coluna SFC Diol-HL, metanol 20% com DEA 0,1%; 4,6 x 250 mm, Fase Móvel 5um: CO, 80% - metanol 20% com DEA 0,1%; Temp.: 35 “*C; Pressão: 150 bar; Taxa de flu- - 15 xo: 2mlmin; UV monitorada a 328 nm.
A amostra isolada foi absorvida em metanol (3 mL) e TFA puro (50 mL) foi adicionado em temperatura ambiente. ' A mistura foi concentrada até secar e posta em vácuo alto para dar um bis : sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((28,48)-1-((28)-2-((meto-
xicarbonil)amino)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1H-
: 20 imidazol-4-1)-2-naftilYfenil)-1H-imidazol-2-il)-4-metil-1-pirrotidinil)carbonil)-2- metilpropil)carbamato (78,2 mg, 29,5% de rendimento). Tempo de retenção de LC-MS 2,95 min; Calc. para CasHsaNgO;: 859,45. Encontrado m/z 859,50 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shi- madzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 mi- nutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Sol- vente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determi- nados usando um MICROMASS? Platform LC em modo de eletropulveriza-
ção. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) à ppm 8,30 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,15 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,01-7,85 (m, 8H), 5,26- 5,22 (m, 2H), 4,42-4,36 (m, 2H), 4,30-4,27 (m, 1H), 4,24-4,23 (m, 1H), 3,95- 3,91 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,47-3,36 (m 2H), 3,08-3,04 (m, 1H), 2,70 (s am- plo, 2H),2,55(s amplo, 2H), 2,08-2,03 (m, 1H), 1,97 - 1,87 (m, 3H), 1,59 (d, J=13,0 Hz, 1H), 1,48-1,26 (m, 10H) 0,95-0,90 (m, 6H).
—-o H as No TRA IDQIL e E o O SO O Fa ONA, º Rosa
H Oo Exemplo 141 Metil ((18)-2-((28,48)-2-(4-(4-(6-(2-((2S ,48)-1-((28)-2-((metoxi- ' carboniljamino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1H-imidazo|-4-11)-2- ' naftilYfenil)-1H-imidazo|-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)-2-0x0-1-(tetra-hidro-2H- piran-4ileti)carbamato . O outro isômero conforme relatado no Exemplo 140. Tempo de retenção de LC-MS 2,98 min; Calc. para CagHseNgO;: 859,45. Encontrado m/z 859,58 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEX? Lu- na C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM. As condições de eluição em- pregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solvente B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de5S5 minutos onde o Solvente À era MeOH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 0,1%. Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,29 (s, 17H), 8,28 (s, 1H), 8,13 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,99-7,86 (m, 4H), 7,91-7,85 (m, 4H), 5,26-5,21 (m, 2H), 4,41-4,36 (m, 4H), 4,28(d,
J=8,24 Hz, 1H), 4,24 (d, J=7,32 Hz, 1H), 3,985-3,91 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,47-3,36 (m 2H), 2,73-2,66 (m, 2H), 2,59-2,53 (m, 2H), 2,07-2,03 (m, 1H), 1,97 - 1,87 (m, SH), 1,589 (d, J=13,0 Hz, 1H), 1,51-1,25 (m, 11H) 0,95-0,90 (m, 6H). o ss OBX-Or? o Fo NA, | TIQIM AA A Cc o n Exemplo 142 Metil ((1S)-1-(((28,48)-2-(4-cloro-5-(6-(4-(4-cloro-2-((28,48)-1- ((28)-2-((metoxicarbonil)amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)- 1 H- imidazol-5-iNfenil)-2-naftil)-1 H-imidazol-2-i1)-4-metil-1-pirrolidinil)carbonil)-2- - metilpropil)carbamato O NCS (17,98 mg, 0,135 mmol) foi adicionado a uma solução : 10 —purgada com nitrogênio do Exemplo 128 (55 mg, 0,067 mmol) em DMF (1 . mL) e a mistura de reação foi agitada por 18 horas a 50ºC.
O solvente foi removido através de concentrado e o produto bruto foi absorvido em CH2Cl> : e carregado em um cartucho de sílica-gel Thompson de 4 g.
Eluição de gra- diente foi realizada a partir de B 5-100% para 1 L.
A/B (A = CHxCb; B = 10% MeOH/EtOAc). Uma amostra do produto purificado foi absorvida em MeOH e submetida à HPLC preparativa (MeCN/água com TFA 0,1%) para dar um bis sal de TFA de metil ((18)-1-(((28,48)-2-(4-cloro-5-(6-(4-(4-Cloro-2-((28,4S)-1- ((28)-2-((metoxicarbonil) amino)-3-metilbutanoil)-4-metil-2-pirrolidinil)-1 H- imidazol-5-iNYfenil)-2-naftil)-1H-imidazol-2-i1)-4-metil- 1 -pirrolidinil)carbonil)-2- —metilpropil) carbamato.
Tempo de retenção de LC-MS 4,48 min; Calc. para CasHssCloNgOç: 885,36, Encontrado m/z 885,34 [M+H]". Dados de LC foram registrados em um cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado com uma coluna PHENOMENEXº Luna C18 de 2,0x50mm usando um detector de UV-Vis SPD-10AV em um comprimento de onda de detector de 220 nM.
As condições de eluição empregaram uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min, um gradiente de Solvente A 100% / Solvente B 0% para Solvente A 0% / Solven- te B 100%, um tempo de gradiente de 4 minutos, um tempo de manutenção de 1 minuto e um tempo de análise de 5 minutos onde o Solvente A era Me- OH 5% / água 95% / TFA 0,1% e o Solvente B era MeOH 95% / água 5% / TFA 01% Dados de MS foram determinados usando um MICROMASSº? Platform LC em modo de eletropulverização. *H RMN (Sal de TFA, 500 MHz, MeOD) 3 ppm 8,20 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,03 (d, J=8,68 Hz, 1H), 8,00 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,90-7,83 (m, 6H), 5,09-5,04 (m, 2H), 4,30-4,7 (m, 2H), 4,24- 4,23 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,43-3,99 (m, 2H), 2,58-2,56 (m 2H), 2,43 (s am- plo, 2H), 2,05-2,04 (m, 2H), 1,93-1,87 (m, 2H), 1,24-1,22 (m, 6H), 0,97-0,91 (m, 12H). Exemplo 145 a o Boc mz - o É C, ' " Bor (O no mn ” Tom o [o ' Exemplo 143 Exemplo 144 Exempl 145 Uma suspensão agitada do Exemplo 143 (10,0 g, 25,3 mmol) e Boc-L-Prolina (11,4 g, 53,0 mmol, 2,1 equivalente) em 100 mL de acetonitrila foi carregada com di-isopropiletitamina (6,75 g, 52,3 mmol, 2,07 equivalen- tes). A mistura resultante foi aquecida para 35ºC e deixada agitar por 3 ho- ras.
A mistura foi esfriada para 20ºC e a fase orgânica foi lavada três vezes com 50 mL de NaCl aquoso 13%. A corrente orgânica rica teve fon trocado com tolueno puro através de destilação a vácuo para prover o Exemplo 144 como uma solução em cerca de 60 mL de tolueno.
Um reator revestido de 500 mL foi carregado com acetato de amônio (38,9 g, 504,9 mmol, 20 equi- valentes), imidazol (6,9 g, 101,0 mmol, 4 equivalentes) e 50 mL de tolueno.
A suspensão resultante foi aquecida para uma temperatura interna de 92- 95ºC.
A solução de tolueno do Exemplo 144 foi adicionada enquanto man-
tendo uma temperatura de 92-95ºC.
A mistura resultante foi deixada agitar a 92-95ºC por 15 horas.
A pasta fluida resultante foi esfriada para 55-60ºC e metanol (150 mL) foi adicionado enquanto mantendo uma temperatura de 55-60ºC.
A pasta fluida foi mantida nesta temperatura por 3 horas, esfriada para20ºC durante uma hora e mantida a 20ºC por mais 18 horas.
Os cristais foram coletados através de filtragem e lavados com metanol.
A torta teve liquido retirado por 2 horas e então seca sob vácuo a 50-55ºC por 18 horas para dar 12,1 g do Exemplo 145 com um sólido amarelo-claro (76,1% de rendimento com uma AP de HPLC de 97,8). Exemplo 149 S + o o 1) DIBAL-H, tolueno, -70 C OL O DANE 2) TFAA, DIPEA, DMAP Se À YT " Exemplo 146 º CC Exemplo 147 : Y Et37n o f 1) NaOH, IPA 9 De CHAICI SL o.
T 2),ÃgMe — oo, o CJ 3) MTBE/Hept ' Exemplo 149 Exemplo 148 Em um reator de 500 mL o Exemplo 146 (comercialmente dispo- nível, 17,5 g, 1,00 equivalente) foi dissolvido em THF (87,5 mL). À solução resultante foi esfriada para -75ºC e DIBAL-H 1,5M em tolueno (61,3 mL, 1,5 equivalente) foi carregado enquanto mantendo a temperatura abaixo de - 70ºC.
A solução resultante foi agitada a -70ºC por 1 hora.
Ácido trifluoracéti- co (2,3 mL, 0,5 equivalente) foi carregado durante 10 minutos mantendo a temperatura interna abaixo de -70ºC.
Trietilamina (51,3 mL, 6 equivalentes) foi então carregada durante 15 minutos, mantendo a temperatura interna —abaixode-70ºC.
Anidrido trifluoracético (11,2 mL, 1,3 equivalente) foi carre-
gado durante 10 minutos mantendo a temperatura interna abaixo de -70ºC, A reação foi então deixada aquecer para temperatura ambiente durante 90 minutos e extinta através da adição inversa a uma solução de monoidrato de ácido cítrico aquoso 10% em peso (986,6 g, 1,5 equivalente) enquanto man- tendo uma temperatura abaixo de 15ºC. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas, então a camada aquosa inferior foi des- cartada. A camada orgânica rica em produto foi lavada duas vezes com 70 mL de bicarbonato de sódio aquoso saturado. Bicarbonato de sódio sólido (1,7 q, 0,1 g/g Exemplo 146) foi carregado e a solução teve solvente trocado por tolueno puro sob vácuo para prover o Exemplo 147 como uma solução em tolueno 21./kg.
Uma solução do Exemplo 147 (16,5 g teórico do Exemplo 146) em 33 mL de tolueno foi filtrada com polimento em um reator de 250 mt. Trifluortolueno (50 mL) e cloroiodometano (43,2 g, 4,0 equivalentes) foram . 15 então carregados e a solução resultante esfriada para -20ºC. Dietilzinco
1.1M em tolueno (111 mL, 2,0 equivalentes) foi carregado enquanto man- Ú tendo a temperatura interna < -8ºC. A solução resultante foi agitada a -15ºC : até -20ºC por 14 horas. A mistura de reação foi aquecida para 0ºC, então extinta através da adição inversão a uma solução de ácido cítrico aquoso ' 20 20% (135,7 g,2,3 equivalentes). O reator foi enxaguado com tolueno (82 mL) e o enxágue adicionado à solução extinta. A mistura bifásica resultante foi agitada por 20 minutos, então a camada aquosa foi separada e descarta- da. O orgânico rico foi lavado duas vezes com 60 mL de NaCl aquoso 13% em peso seguido por 60 mL de NaHCO; saturado. A solução resultante teve — solvente trocado por IPA puro sob vácuo para prover o Exemplo 148 como uma solução em 10 L/kg de IPA.
Um reator de 250 mL foi carregado com uma solução do Exem- plo 148 (147 mL, 14,7 g teórico do Exemplo 146) em IPA. A solução foi a- quecida para 35ºC e hidróxido de sódio sólido (6,2 g, 3,0 equivalentes) foi — adicionado. A mistura resultante foi agitada a 35ºC da noite para o dia. Água (44 mL) foi adicionada e os solventes orgânicos removidos sob vácuo. MTBE (145 mL) foi adicionado e o pH ajustado para 3,0 com HCl aquoso 6N. À camada aquosa foi separada e descartada. O orgânico rico em produto foi lavado com 60 mL de água, então azeotropicamente seco sob vácuo através de adição de volume constante de MTBE. A solução foi concentrada para 55 mL e agitada a 50ºC por 30 minutos. A solução foi esfriada para temperatura ambiente durante 1 hora, tempo durante o qual uma pasta fluida se formou. Heptano (90 mL) foi carregado durante 90 minutos e a pasta fluida resultante envelhecida por 1 hora. Os sólidos foram coletados em uma frita de vidro média e lavados com 22,5 mL de heptano 3:1:MTBE seguido por 22,5 mL de heptano. Então sólido castanho foi seco em um forno a vácuo a 50ºC para prover 5,48 g (46%) de Exemplo 149 com pureza de LCAP de 94,9. O Exemplo 149 bruto foi dissolvido em 55 mL de MTBE a 50ºC. A solução resultante foi concentrada para 20 mL e esfriada para temperatura ambiente durante 1 hora. Heptano (33 mL) foi então adicionado durante 90 minutos. Os sólidos resultantes foram coletados em uma frita de vidro média, - 15 lavados com heptano (15 mL) e secos em um forno a vácuo a 50ºC para prover 4,45 gq (AP 98,8, pureza quiral 98,8%, 37% do Exemplo 146) do pro- ' duto desejado como um pó castanho. ' É esperado que a sequência de reação acima (para a formação do Exemplo 149) seja geral suficiente para tolerar outra funcionalidade tam- ] 20 bém. Por exemplo, o grupo terc-butoxicarbonila no carbono C2 do Exemplo 147 poderia ser potencialmente substituído com uma amida ou outro éster. Da mesma maneira, o grupo de proteção de terc-butiloxicarbonila no nitro- gênio poderia ser substituído por outros grupos de proteção (tais como ou- tros carbamatos, amidas, alquita, arila) ou poderia estar ausente totalmente (substituído com um hidrogênio).
ATIVIDADE BIOLÓGICA Um ensaio Replicon HCV foi utilizado na presente invenção e foi preparado, conduzido e validado conforme descrito no PCT/US2006/022197 de propriedade comum e em O'Boyle e outros, Antimiícrob. Agents Chemo- fer, 49(4):1346-1353 (Abril, 2005). Métodos de ensaio incorporando repórte- res da luciferase foram também usados conforme descrito (Apath.com). Células de replicon HCV-neo e células de replicon contendo substituições de resistência na região NS5A foram usadas para testar a fa- mília aqui descrita de compostos. Os compostos foram determinados ter graus diferentes de atividade inibidora reduzida em células contendo muta- ções vs. a potência inibidora correspondente contra células do tipo selva- gem. Desta maneira, os compostos da presente invenção podem ser efica- zes na inibição da função da proteina NSSA HCV e são compreendidos ser tão eficazes em combinação quanto anteriormente descrito no pedido PCT/US2006/022197 e no WO 04/014852 de propriedade comum. Deve ser compreendido que os compostos da presente invenção podem inibir genóti- pos múltiplos de HCV. A Tabela 2 mostra os valores de ECso (concentração inibidora 50% eficaz) de compostos representativos da presente invenção contra o genótipo 1b de HCV. Em uma modalidade, Os compostos da pre- sente invenção são inibidores versus genótipos 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 4a e Sa.Valores de ECs5o contra 1h HCV são como segue: À = 0,4 pM-10 pM; B = . 15 101 pM-1,00NM;eC=1,01 nM-14UM.
Os compostos da presente invenção podem inibir HCV através ' de mecanismos em adição a ou não inibição de NSSA. Em uma modalidade, BR os compostos da presente invenção inibem replicon de HCV e em outra mo- dalidade os compostos da presente invenção inibem NS5A.
Tabela2 | a menos que de outro modo mencionado o Í Lintermediáro sa pp
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RR RE e A
EEE [1] (a menos que de outro modo mencionado) | [a A
FERRO Ps er = 8 go ag [ro [or A e da os | es A : ras or : [rg [o las e | | ro A aaa AR ae ag ara ag [ass
EO RE PA az BBB araeos de = e A | [roda Mar a | sra E a menos que de outro modo mencionado: . — Bo f [BB A | Bag [res asse dB = Bo lgsamos | 8 = | go | la [res TA ee ago A aaa [1a A [asa | aa A : ass ass ' Bl | : [rag A se ao TA Ba TR [gg A | Será evidente a um versado comum na técnica que a presente invenção não é limitada aos exemplos ilustrativos acima, e que ela pode ser concretizada em outras formas específicas sem se afastar dos seus atributos essenciais.
É então desejado que os exemplos sejam considerados em to- dosos aspectos como ilustrativos e não restritivos, referência sendo feita às reivindicações apensas, ao invés dos exemplos acima, e todas as mudanças que estiverem dentro do significado e faixa de equivalência das reivindica-
ções pretendem então ser compreendidas aqui.

Claims (14)

REIVINDICAÇÕES
1. Processo para preparação de um composto de fórmula (X) mol TX Yo)
DR em que R' é selecionado de hidrogênio e um grupo de proteção de nitrogê- nio o processo compreendendo: (a) reação de um composto de fórmula (II) o R
O “q; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R' é selecionado de hidrogênio e um grupo de proteção de ni- . trogênio; e R? é selecionado de amino, alcóxi e arilalcóxi; e com uma base, 7 e (b) tratamento do produto da etapa (a) com água. i 15
2. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que R' é hi- - drogênio.
3. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que R' é um grupo de proteção de nitrogênio.
4. Processo de acordo com a reivindicação 3, em que o grupo de proteção de nitrogênio é um grupo terc-butoxicarbonila.
5. Processo de acordo com a reivindicação 1, em que a base é Selecionada de um alcóxido de metal e um hidróxido de metal.
6. Processo de acordo com a reivindicação 5, em que a base é selecionada de etóxido de sódio, isopropóxido de sódio, terc-butóxido de sódio, hidróxido de sódio, hidróxido de lítio, hidróxido de potássio, isopropó- xido de potássio, ferc-butóxido de potássio, terc-butóxido de lítio e isopropó- xido de lítio.
7. Processo de acordo com a reivindicação 1, compreendendo ainda tratamento de um produto de fórmula (1) o UT
YO
DR em que R' é hidrogênio; com um reagente de proteção de nitrogênio para prover um composto de fórmula (1) o LT YO) SR, em que R' é um grupo de proteção de nitrogênio.
8. Processo de acordo com a reivindicação 7, em que o grupo de proteção de nitrogênio é terc-butoxicarbonila.
9. Processo para preparação de um composto de fórmula (Z)
RO A : É DR 5 : N 01), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: - Rº e Rº são independentemente selecionados de hidrogênio, al- quila, arila, arilalquila, heterociclila e heterociclilalquila; : 15 O processo compreendendo: tratamento de um composto de fórmula (Q) o ” À o Rô MV), com uma base na presença de acetato de amônio.
10. Processo de acordo com a reivindicação 9, em que a base é — selecionada de uma amina terciária, uma amina aromática, uma anilina e um imidazol substituído.
11. Processo de acordo com a reivindicação 9, em que a base é selecionada de 1,4-dimetilpiperazina, 3-quinuclidinol, 3-metilpiridina, 1-metili- midazol, dimetilbutilamina, N N-dimetilanilina, dimerpranol, quinoxazolina, creatinina, 2-metilimidazol, 4-metilimidazo|, imidazol, morfolina, N-metil-
morfolina, 1,8-diazabicicloundec-7-eno, 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano, colidi- na, 4-cloroimidazol, 2-cloroimidazol, 4-cianoimidazo|, benzimidazol, di-iso- propiletilamina e 2,6-lutidina.
12. Processo de acordo com a reivindicação 9, em que a base é imidazol.
13. Processo para a preparação do Exemplo 145
N Boc! —N HN, > : 7 “NH N—= Bos
N Exemplo 145, o processo compreendendo: (a) tratamento do Exemplo 143 - o. | Br Br o Exemplo 143, com o Exemplo 144 Boc & à aa Exemplo 144, na presença de uma base para produzir um composto de fórmula (V)
o Boc o Ao $ ep o sv) (b) tratamento do composto de fórmula (V) com acetato de a- mônio na presença de uma base; e (c) tratamento do produto da etapa (b) com metanol.
14. Processo de acordo com a reivindicação 13, o qual é um processo contínuo.
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