MX2012005246A - Inhibidores del virus de hepatitis c. - Google Patents

Inhibidores del virus de hepatitis c.

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Abstract

La presente invención se refiere a procesos para elaborar compuestos útiles en el tratamiento de infección por virus de hepatitis C (VHC).

Description

INHIBIDORES DEL VIRUS DE HEPATITIS C Descripción de la Invención La presente descripción se refiere a procesos para fabricar compuestos útiles en el tratamiento de infección por virus de hepatitis C (VHC) .
El VHC es un importante patógeno humano que. infecta a unos 170 millones de personas en todo el mundo (aproximadamente cinco veces el número de infectados por virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1) . Una fracción sustancial de estos individuos infectados por el VHC desarrolla una enfermedad hepática progresiva grave, incluyendo cirrosis y carcinoma hepatocelular.
El actual tratamiento de referencia para el VHC, que usa una combinación de interferón pegilado y ribavirina, presenta una tasa de éxito no óptima para conseguir una respuesta vírica mantenida y provoca numerosos efectos secundarios. Por lo tanto, existe una clara y percibida necesidad desde hace mucho tiempo, de desarrollar terapias eficaces para cubrir esta necesidad médica no satisfecha.
El VHC es un virus de ARN de polaridad positiva.
Basándose en una comparación de la secuencia de aminoácidos deducida y la gran similitud en la región 5' no traducida, el VHC ha sido clasificado como un género diferente de la familia Flaviviridae . Todos los miembros de la familia REF.: 230135 Flaviviridae presentan viriones encapsulados que contienen un genoma de ARN de polaridad positiva que codifica todas las proteínas específicas del virus conocidas mediante traducción de un marco de lectura abierto, ininterrumpido y único.
Se encuentra una heterogeneidad considerable en la secuencia de nucleótidos y de aminoácidos codificados en todo el genoma del VHC debido a la alta tasa de errores de la ARN polimerasa dependiente de ARN que carece de capacidad correctora. Se han caracterizado al menos seis genotipos principales, y se han descrito más de 50 subtipos distribuidos por todo el mundo. La significación clínica de la heterogeneidad genética del VHC ha demostrado una propensión a la aparición de mutaciones durante el tratamiento con monoterapia, por lo tanto es deseable el uso de otras opciones de tratamiento. El posible efecto modulador de los genotipos sobre la patogénesis y terapia sigue sin comprenderse .
El genoma de ARN cadena simple de VHC tiene una longitud de aproximadamente 9500 nucleótidos y tiene un único marco de lectura abierto (ORF, por sus siglas en inglés) que codifica una única poliproteína grande de aproximadamente 3000 aminoácidos. En las células infectadas, esta poliproteína es escindida en múltiples sitios por proteasas celulares y víricas para producir las proteínas estructurales y no estructurales (NS, por sus siglas en inglés) . En el caso del VHC, la generación de proteínas no estructurales maduras (NS2 , NS3, NS4A, NS4B, NS5A y NS5B) es llevada a cabo por dos proteasas víricas. Se cree que la primera es una metaloproteasa y escinde la unión entre NS2 y NS3 ; la segunda es una serina proteasa contenida en la región del extremo N de NS3 (también denominada en el presente documento proteasa NS3) y actúa de mediadora de todas las posteriores escisiones cadena abajo de NS3 , tanto en cis, en el sitio de escisión de NS3 y NS4A, como en trans, para el resto de los sitios' NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B. La proteína NS4A parece desempeñar varias funciones, ya sea actuando de cofactor para la proteasa NS3 como ayudando en la localización en la membrana de NS3 y otros componentes de las replicasas víricas. Para la adecuada actividad de proteasa es necesaria la formación de un complejo NS3-NS4A, lo que supone una eficacia proteolítica mayor de los eventos de escisión. La proteína NS3 también muestra actividades de nucleósido trifosfatasa y ARN helicasa. NS5B (también denominada VHC polimerasa) es una ARN polimerasa dependiente de ARN que está implicada en la replicación de VHC con otras proteínas de VHC, entre otras NS5A., en un complejo de replicasa.
Se desean compuestos útiles para tratar pacientes infectados por VHC que inhiban de forma selectiva la replicación viral del VHC. En particular, son deseables compuestos que sean eficaces para inhibir la función de la proteína NS5A. La proteína NS5A de VHC se describe, por ejemplo, en las siguientes referencias: S. L. Tan, y col., Virology, 284:1-12 (2001); K.-J. Park, y col., J. Biol . Chem., 30711-30718 (2003); T. L. Tellinghuisen, y col., Nature, 435, 374 (2005); R. A. Love, y col., J. Virol, 83, 4395 (2009); N. Appel, y col., J. Biol. .Chem., 281, 9833 (2006); L. Huang, J". Biol. Chem., 280, 36417 (2005); C. Rice, y col. , WO2006093867.
En su primer aspecto, la presente descripción proporciona un compuesto de fórmula (I) (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde X y X' se seleccionan independientemente cada uno de CH, CR1 y N; Y y Y' se seleccionan independientemente cada uno de CH, CR2 y N; con la condición de que no más de dos de X, X' , Y e Y' sean N; R1 y R2 se seleccionan independientemente de cada uno de R3 se selecciona independientemente de hidrógeno, ciano y halo; cada uno de R4 se selecciona independientemente de entre hidrógeno y alquilo, pudiendo formar el alquilo opcionalmente un anillo fusionado de tres a cinco miembros con un átomo de carbono adyacente, en el que este anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos metilo; o R4 y el carbono al que está unido forma un grupo eleleno; cada R5 se selecciona independientemente de hidrógeno y -C(0)R6; cada R6 se selecciona independientemente de alcoxi, alquilo, arilalcoxi, arilalquilo, cicloalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, (NRcRd) alquenilo y (NRcRd) alquilo; y cada uno de R7 y R8 se selecciona independientemente de hidrógeno y alquilo.
En una primera modalidad del primer aspecto, la presente descripción proporciona un compuesto de Fórmula (I) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: X y X' se seleccionan independientemente de CH y CR1; y Y e Y' se seleccionan independientemente de CH y CR2' En una segunda modalidad del primer aspecto, la presente descripción proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde X y X' se seleccionan independientemente de CH y CR1; y Y e Y' son cada uno N.
En una tercera modalidad del primer aspecto, la presente descripción proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde Y y X' son cada uno N; X se selecciona de CH y CR1; y Y' se selecciona de CH y CR2, En una cuarta modalidad del primer aspecto, la presente descripción proporciona un compuesto de Fórmula (I) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: X' es N; y X se selecciona de CH y CR1; y Y .e Y' se seleccionan independientemente de CH y CR2.
En un segundo aspecto, la presente descripción proporciona " una composición que comprende un compuesto de Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y un portador farmacéuticamente aceptable. En una primera modalidad del segundo aspecto, la composición comprende además al menos un compuesto adicional que tenga actividad contra el VHC. En una segunda modalidad del segundo aspecto, al menos uno de los compuestos adicionales es un interferón o una ribavirina. En una tercera modalidad del segundo aspecto, el interferón se selecciona de interferón alfa-2B, interferón alfa pegilado, interferón de consenso, interferón alfa-2A e interferón tau linfoblastoide .
En una cuarta modalidad del segundo aspecto, la presente descripción proporciona una composición que comprende un compuesto de la Fórmula (I) , o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, un portador farmacéuticamente aceptable, y al menos un compuesto adicional que presenta actividad anti-VHC, en donde al menos uno de los compuestos adicionales se selecciona a partir de interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, un compuesto que potencia el desarrollo de una respuesta de linfocitos T cooperadores de tipo 1, ARN de interferencia, ARN antisentido, Imiqimod, ribavirina, un inhibidor de inosina 5 ' -monofosfato deshidrogenasa, amantadina y rimantadina .
En una quinta modalidad del segundo aspecto, la presente descripción proporciona una composición que comprende un compuesto de Fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, un portador farmacéuticamente aceptable y al menos un compuesto adicional que tenga actividad contra el VHC, en donde al menos uno de los compuestos adicionales es eficaz para inhibir la función de un objetivo seleccionada de metaloproteasa del VHC, serina proteasa del VHC, polimerasa del VHC, helicasa del VHC, proteína NS4B del VHC, entrada del VHC, ensamblaje del VHC, salida del VHC, proteína NS5A del VHC e IMPDH para el tratamiento de una infección por VHC.
En un tercer aspecto la presente descripción proporciona un proceso de tratamiento de una infección por VHC en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En una primera modalidad del tercer aspecto, el proceso comprende además administrar al menos un compuesto adicional que tenga actividad contra el VHC antes, después o simultáneamente al compuesto de la Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En una segunda modalidad del tercer aspecto, al menos uno de los compuestos adicionales es un interferón o una ribavirina. En una tercera modalidad del tercer aspecto, el interferón se selecciona de interferón alfa-2B, interferón alfa pegilado, interferón de consenso, interferón alfa-2A e interferón tau linfoblastoide .
En una cuarta modalidad del tercer aspecto, la presente descripción proporciona un proceso para tratar una infección por VHC en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y al menos un compuesto adicional que tenga actividad anti-VHC antes, después o simultáneamente al compuesto de la Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde al menos uno de los compuestos adicionales se selecciona de interleucina 2, interleucina 6, interleucina 12, un compuesto que potencia el desarrollo de una respuesta de linfocitos T auxiliares de tipo 1, ARN de interferencia, AR antisentido, Imiqimod, ribavirina, un inhibidor de inosina 5 ' -monofosfato deshidrogenasa, amantadina y rimantadina.
En una quinta modalidad del tercer aspecto, la presente descripción proporciona un proceso para tratar una infección por VHC en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y al menos un compuesto adicional que tenga actividad anti-VHC antes, después o simultáneamente al compuesto de la Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en donde al menos uno de los compuestos adicionales es eficaz para inhibir la función de un objetivo que se selecciona a partir de metaloproteasa de VHC, serina proteasa de VHC, polimerasa de VHC, helicasa de VHC, proteína NS4B de VHC, entrada de VHC, ensamblaje de VHC, salida de VHC, proteína NS5A de VHC e IMPDH para el tratamiento de una infección por VHC.
En un cuarto aspecto de la presente descripción se proporciona un proceso para preparar un compuesto de Fórmula (X) (i); en donde 1 se selecciona de hidrógeno y un grupo protector de nitrógeno; que comprende el proceso: i) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II) , (ii); o una sal armacéuticamente aceptable del mismo; en donde R1 se selecciona de hidrógeno y un grupo protector de nitrógeno; y R2 se selecciona de amino, alcoxi y ari lacoxi ; y con una base, y (b) tratar el producto de la etapa (a) con agua .
En una primera modalidad del cuarto aspecto, R1 es hidrógeno.
En una segunda modalidad del cuarto aspecto, R1 es un grupo protector de nitrógeno. En una tercera modalidad del cuarto aspecto, el grupo protector de nitrógeno es un grupo terc-butoxicarbonilo .
En una quinta modalidad del cuarto aspecto, la base se selecciona de un alcóxido metálico y un hidróxido metálico. En una sexta modalidad del cuarto aspecto, la base se selecciona de etóxido de sodio, isopropóxido de sodio, terc-butóxido de sodio, hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de potasio, isopropóxido de potasi.o, terc-butóxido de potasio, terc-butóxido de litio e isopropóxido de litio.
En una séptima modalidad del cuarto aspecto, el proceso comprende, además, tratar un producto de Fórmula (I) (I), en donde R1 es hidrógeno; con un reactivo protector de nitrógeno, proporcionando un compuesto de Fórmula (I) (I), en donde R1 es un grupo protector de nitrógeno .
En una octava modalidad del cuarto aspecto, el grupo protector de nitrógeno es tere -butoxicarboni lo .
En un quinto aspecto de la presente descripción se proporciona un proceso para preparar un compuesto de fórmula (Z) (??), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde R4 y R5 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo ; el proceso comprende: tratar un compuesto de Fórmula (IV), con una base en presencia de acetato amonio En una primera modalidad del quintó aspecto, la base se selecciona de una amina terciaria, una amina aromática, una anilina y un imidazol sustituido. En una segunda modalidad del quinto aspecto, la base se selecciona de 1 , 4-dimetilpiperazina, 3 -quinucl idinol , 3 -met ilpiridina , 1 -met i 1 imidazol , dimetilbutilamina , N , N - dimet i lani 1 ina , dimerpranol, quinoxazol ina , creatinina, 2 -met i 1 imidazol , 4 -meti 1 imidazol , imidazol, morfolina, N-met i lmorfol ina , 1 , 8 - diazabic icloundec - 7 -eno, 1 , 4 -diazabic i cío [ 2.2.2 ] octano , colidina, 4-cloroimidazol , 2 - cloroimidazol , 4 -cianoimidazol , bencimidazol , diisopropiletilamina y 2 , 6 - lut idina . En una tercera modalidad, la base es imidazol.
En un sexto aspecto, la presente descripción proporciona un proceso para la preparación del Ejemplo Ejemplo 145, el proceso comprende: (a) tratar el Ejemplo 143 Ej on el Ejemplo 14 Ejemplo 144 en presencia de una base para produc compuesto de Fórmula (V) (V); (b) tratar un compuesto de Fórmula (V) con acetato de amonio en presencia de una base; y (c) tratar el producto de la etapa (b) con metanol .
En una primera modalidad del séptimo aspecto, el proceso es un proceso continuo.
Otros aspectos de la presente modalidad pueden incluir combinaciones adecuadas de modalidades reveladas en el presente documento.
Se pueden encontrar aún otros aspectos y modalidades en la descripción proporcionada en el presente documento .
La descripción de la presente modalidad en el presente documento se interpretaría de forma congruente con las leyes y principios de la formación de enlaces químicos.
En algunos casos puede ser necesario retirar un átomo de hidrógeno con el fin de acomodar un sustituyente en cualquier localización dada.
Se entenderá que los compuestos comprendidos por la presente modalidad son aquellos que son adecuadamente estables para usar como un agente farmacéutico.
Se desea que la definición de cualquier sustituyente o variable en una localización particular en una molécula sea independiente de sus definiciones en otro lugar en esa molécula. .Por ejemplo, cuando R1 y R2 contienen ambos un grupo R4 , los dos grupos R4 pueden ser iguales o diferentes .
Todas las patentes, solicitudes de patentes y referencias bibliográficas citadas en la memoria descriptiva se incorporan en el presente documento mediante referencia en su totalidad. En el caso de inconsistencias, la presente descripción, incluyendo definiciones, prevalecerá.
Tal como se usa en el presente documento descriptivo, los siguientes términos tienen los significados indicados : Como se usa en el presente documento, las formas del singular "un", "uno" y "el/la" incluyen referencia al plural a menos que el contexto indique claramente lo contrario .
A no ser que se indique de otro modo, todos los grupos arilo, cicloalquilo y heterociclilo de la presente descripción pueden estar sustituidos como se describe en cada una de sus respectivas definiciones. Por ejemplo, la parte arilo de un grupo arilalquilo puede estar sustituida como se describe en la definición del término "arilo" .
El término "alquenilo" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo de cadena lineal o ramificada de dos a seis átomos de carbono que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono .
El término "alqueniloxi" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquenilo unido a la porción molecular principal mediante un átomo de oxígeno.
El término "alqueniloxicarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alqueniloxi unido a la porción molecular principal mediante un grupo carbonilo .
El término "alcoxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a la porción molecular parental a través de un átomo de oxígeno.
El término "alcoxialquilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos o tres grupos alcoxi.
El término "alcoxialquilcarbonilo" , como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alcoxialquilo unido a la porción molecular parental , a través de un grupo carbonilo .
El término "alcoxicarbonilo" , como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alcoxi unido a la porción molecular parental a través de un grupo carbonilo.
El término "alquilcarboniloxi" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilcarbonilo unido a la porción molecular principal mediante un átomo de oxígeno .
El término "alquilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo derivado de un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que contiene de uno a seis átomos de carbono. En los compuestos de la presente descripción, cuando R4 es alquilo, cada alquilo puede formar opcionalmente un anillo de tres miembros condensado con un átomo de carbono adyacente proporcionando la estructura mostrada a continuación: en donde n se selecciona de 1 y 2, El término "alquilcarbonilo", como se usa en presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a porción molecular parental a través de un grupo carbonilo.
El término "alquilsulfañilo" , tal como se usa en presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a porción molecular principal mediante un átomo de azufre.
El término "alquilsulfonilo, " tal como se usa en presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a porción molecular principal mediante un grupo sulfonilo.
El término "amino" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a -NRqRs, en donde Rq y Rs se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo y arilalquilo .
El término "arilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo fenilo o un sistema de anillo bicíclico condensado en el que uno o ambos de los anillos es un grupo fenilo. Los sistemas de anillo bicíclico condensado están constituidos por un grupo fenilo condensado con un anillo carbocíclico aromático o no aromático de cuatro a seis miembros. Los grupos arilo de la presente descripción pueden estar unidos a la porción molecular principal a través de cualquier átomo de carbono sustituible en el grupo. Ejemplos representativos de grupos arilo incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos, indanilo, indenilo, naftilo, fenilo y tetrahidronaftilo . Los grupos arilo de la presente descripción están opcionalmente sustituidos con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes seleccionados independientemente de alquenilo, alcoxi, alcoxialquilo , alcoxicarbonilo, alquilo, alquilcarbonilo, un segundo grupo arilo, arilalcoxi, arilalquilo, arilcarbonilo, ciano,. halo, haloalcoxi, haloalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo, heterociclilcarbonilo, hidroxi, hidroxialquilo, nitro, -NRxRy, (NRxRy) alquilo, oxo y -P(0)OR2, donde cada R se selecciona independientemente de hidrógeno y alquilo; y donde la parte alquilo del arilalquilo y el heterociclilalquilo está no sustituida y donde el segundo grupo arilo, la parte arilo del arilalquilo, la parte arilo del arilcarbonilo, el heterociclilo y la parte heterociclilo del heterociclilalquilo y el heterociclilcarbonilo están además opcionalmente sustituidas con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo y nitro.
El término "arilalcoxi" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo arilo unido a la porción molecular parental a través de un grupo alcoxi .
El término "arilalcoxicarbonilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo arilalcoxi unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo .
El término "arilalquilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos o tres grupos arilo. La parte alquilo del arilalquilo está además opcionalmente sustituida con uno o dos grupos adicionales seleccionados independientemente de alcoxi, alquilcarboniloxi , halo, haloalcoxi, haloalquilo, heterociclilo, hidroxi y -NR°Rd, estando el heterociclilo además opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, arilo no sustituido, arilalcoxi no sustituido, arilalcoxicarbonilo no sustituido, halo, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxi, -NRxRy, y oxo .
El término "arilcarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo arilo unido a la porción molecular principal mediante un grupo carbonilo.
El término "base", tal como se usa en el presente, documento, se refiere a un compuesto que acepta protones.
El término "proceso continuo", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un proceso de múltiples' etapas en el que no se aislan los intermediarios formados.
El término "ciano" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a -CN.
El término "cicloalquilo", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un sistema anular de hidrocarburo saturado monocíclico o bicíclico que tiene de tres a catorce átomos de carbono y cero heteroátomos . Ejemplos representativos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no están limitados a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, biciclo [3.1.1] heptilo y adamantilo. Los grupos cicloalquilo de la presente descripción están opcionalmente sustituidos con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, arilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo, heterociclilo, hidroxilo, hidroxialquilo, nitro y -NRxRy, estando el arilo y el heterociclilo además opcionalmente sustituidos con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxilo, nitro y oxo .
El término "cicloalquiloxi", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo unido a la porción molecular principal a través de un átomo de oxígeno .
El término "cicloalquiloxicarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquiloxi unido a la porción molecular . principal a través de un grupo carbonilo.
El término "cicloalquilsulfonilo" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo unido a la porción molecular parental a través de un grupo sulfonilo.
El término "etileno" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a =CH2, El término "formilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a -CHO.
Los términos "halo" y "halógeno," tal como se usan en el presente documento, se refieren a Cl , Br, F o I.
El término "haloalcoxi" , como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo haloalquilo unido a la porción molecular parental a través de un átomo de oxígeno.
El término "haloalcoxicarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo haloalcoxi unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo .
El término "haloalquilo" , como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos, tres o cuatro átomos de halógeno.
El término "heterociclilo", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un anillo de cuatro, cinco, seis o siete miembros que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno y azufre. El anillo de cuatro miembros no tiene ningún doble enlace, el anillo de cinco miembros tiene de ninguno a dos dobles enlaces y los anillos de seis y siete miembros tienen de ninguno a tres dobles enlaces . El término "heterociclilo" también incluye grupos bicíclicos en ^los que el anillo heterocíclico está condensado con otro grupo heterociclilo monocíclico o un grupo carbocíclico, aromático o no aromático, de tres a siete miembros; grupos bicíclicos en los que el anillo heterociclilo está sustituido con un anillo espirocíclico de tres a siete miembros; así como grupos bicíclicos puenteados tales como 7-azabiciclo [2.2.1] hept-7-ilo, 2-azabiciclo [2.2.2] oct-2-ilo y 2-azabiciclo [2.2.2] oct-3-ilo. Los grupos heterociclilo de la presente descripción pueden estar unidos a la porción molecular principal a través de cualquier átomo de carbono o átomo de nitrógeno del grupo. Ejemplos de grupos heterociclilo incluyen, pero no están limitados a, benzotienilo, furilo, imidazolilo, indolinilo, indolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxazolilo, piperazinilo, . piperidinilo, pirazolilo, piridinilo, pirrolidinilo, pirrolopiridinilo, pirrolilo, quinolinilo, tetrahidropiranilo, tiazolilo, tienilo y tiomorfolinilo . Los grupos " heterociclilo de la presente descripción están opcionalmente sustituidos con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes seleccionados independientemente de alquenilo, alcoxi, alcoxialquilo, alcoxicarbonilo, alquilo, alquilcarbonilo, arilo, arilalcoxicarbonilo, arilalquilo, arilcarbonilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo, un segundo grupo heterociclilo, heterociclilalquilo, heterociclilcarbonilo, hidroxilo, hidroxialquilo, nitro, -NRxRy, (NRxRy) alquilo y oxo, en los que la parte alquilo del arilalquilo y el heterociclilalquilo está no sustituida y en los que el arilo, la parte arilo del arilalquilo, la parte arilo del arilcarbonilo, el segundo grupo heterociclilo y la parte heterociclilo del heterociclilalquilo y el heterociclilcarbonilo están además opcionalmente sustituidas con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo y nitro.
El término "heterociclilalcoxi", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heterociclilo unido a la porción molecular principal a través de un grupo alcoxi .
El término "heterociclilalcoxicarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heterociclilalcoxi unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término "heterociclilalquilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos o tres grupos heterociclilo. La parte alquilo del heterociclilalquilo está además opcionalmente sustituida con uno o dos grupos adicionales seleccionados independientemente de alcoxi, alquilcarboniloxi , arilo, halo, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxi y -NRcRd, estando el arilo además opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, arilo no sustituido, arilalcoxi no sustituido, arilalcoxicarbonilo no sustituido, halo, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxi y -NRxRy.
El término "heterociclilalquilcarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heterociclilalquilo unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término "heterociclilcarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heterociclilo unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo .
El término "heterocicliloxi , " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heterociclilo unido a la porción molecular principal mediante un átomo de oxígeno..
El término "heterocicliloxicarbonilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo heteroclcliloxi unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término "hidroxilo" , como se usa en el presente documento, se refiere a -OH.
El término "hidroxialquilo" , como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos, o tres grupos hidroxilo.
El término "hidroxialquilcarbonilo," tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo hidroxialquilo unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término "alcóxico metálico", tal como se usa en el presente documento, se refiere a M-OR, en el que M es un metal seleccionado de sodio, litio y potasio y R es un grupo alquilo .
El término "hidróxido metálico", tal como se usa en el presente documento, se refiere a M-OH, en donde M es un metal seleccionado de sodio, litio y potasio.
El término "nitro" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a -N02, El término "grupo protector de nitrógeno" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a grupos que pretender proteger un grupo amino frente a reacciones no deseadas durante el proceso de síntesis. Grupos protectores de N incluyen, pero no están limitados a, grupos acilo tales como acetilo, benzoilo, 2-bromoacetilo, 4-bromobenzoilo, terc-butilacetilo, carboxaldehído, 2-cloroacetilo, 4- , clorobenzoilo, oc-clorobutirilo, · 4 -nitrobenzoilo o- nitrofenoxiacetilo, ftalilo, pivaloilo, propionilo, tricloroacetilo y trifluoroacetilo; grupos sulfonilo tales como bencenosulfonilo y p-toluenosulfonilo; grupos formadores de carbamato tales como benciloxicarbonilo, benciloxicarbonilo (Cbz) , terc-butiloxicarbonilo (Boc) , p- clorobenciloxicarbonilo y p-metoxibenciloxicarbonilo .
El término "reactivo protector de nitrógeno", tal como se usa en el presente documento, se refiere a un compuestos que en las condiciones de reacción añade un grupo protector de nitrógeno a un átomo de nitrógeno que hay que proteger.
El término "-NRcRd," tal como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Rc y Rd, que están unidos a la porción molecular principal a través de un átomo de nitrógeno. Rc y Rd se seleccionan independientemente de hidrógeno, alqueniloxicarbonilo, alcoxialquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilo, alquilcarbonilo, cicloalquiloxi , alquilsulfonilo, arilo, arilalcoxicarbonilo, arilalquilo, arilalquilcarbonilo, arilcarbonilo, ariloxicarbonilo, arilsulfonilo, cicloalquilo, cicloalquiloxicarbonilo, cicloalquilsulfonilo, formilo, haloalcoxicarbonilo, heterociclilo, heterociclilalcoxicarbonilo, heterociclilalquilo , heterociclilalquilcarbonilo, heterociclilcarbonilo, heterocicliloxicarbonilo, hidroxialquilcarbonilo, (NReRf) alquilo, (NReRf) alquilcarbonilo, (NReRf) carbonilo, (NReRf) sulfonilo, C(NCN)0R' y -C (NCN) NRxRy, donde R' se selecciona de alquilo y fenilo no sustituido y donde la parte alquilo del arilalquilo, el arilalquilcarbonilo, el heterociclilalquilo y el heterociclilalquilcarbonilo están además opcionalmente sustituidos con un grupo -NReRf; y donde el arilo, la parte arilo del arilalcoxicarbonilo, el arilalquilo, el arilalquilcarbonilo, el arilcarbonilo, el ariloxicarbonilo y el arilsulfonilo, el heterociclilo y la parte heterociclilo del heterociclilalcoxicarbonilo, el heterociclilalquilo, el heterociclilalquilcarbonilo, el heterociclilcarbonilo y el heterocicliloxicarbonilo están además opcionalmente sustituidas con uno, dos o tres sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo y nitro.
El término " (NRcRd) alqueni presente documento, se refiere a en donde Rc y Rd son como se definen en el presente documento y cada uno de Rq es independientemente hidrógeno o alquilo Ci-3.
El término " (NRcRd) alquilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos o tres grupos -NRcRd. La parte alquilo de (NRcRd) alquilo, está además opcionalmente sustituida con uno o dos grupos adicionales seleccionados de alcoxi, alcoxialquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilsulfañilo, alquinilo C2, arilalcoxicarbonilo, carboxi , ciano, cicloalquilo, halo, heterociclilo, heterociclilcarbonilo, hidroxilo y (NReRf) carbonilo; estando, además, el heterociclilo opcionalmente sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco sustituyentes seleccionados independientemente de alcoxi, alquilo, ciano, halo, haloalcoxi, haloalquilo y nitro . término u-NReRf," tal como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Re y Rf, que están unidos a la porción molecular principal a través de un átomo de nitrógeno. Re y Rf se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo, arilo no sustituido, arilalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, (cicloalquil) alquilo no sustituido, heterociclilo no sustituido, heterociclilalquilo no sustituido, (NRxRy) alquilo y. (NRxRy) carbonilo.
El término " (NReRf) alquilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno, dos o tres grupos -NReRf.
El término " (NReRf) alquilcarbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo (NReRf) alquilo unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término " (NReRf) carbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo -NReRf unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término " (NReRf) sulfonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo -NReRf unido a la porción molecular principal a través de un grupo sulfonilo.
El término "-NRxRy," tal como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Rx y Ry, que están unidos a la porción molecular principal a través de un átomo de nitrógeno. Rx y Ry se seleccionan independientemente de hidrógeno, alcoxicarbonilo, alquilo, alquilcarbonilo, arilo no sustituido, arilalcoxicarbonilo no sustituido, arilalquilo no sustituido, cicloalquilo no sustituido, heterociclilo no sustituido y (NRx Ry' ) carbonilo, seleccionándose Rx' y Ry' independientemente de hidrógeno y alquilo.
El término " (NRxRy) alquilo , " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo, sustituido con uno, dos o tres grupos -NRxRy.
El término " (NRxRy) carbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo -NRXRY unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo.
El término "-NRxRy," tal como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Rx y Ry, que están unidos a la porción molecular principal a través de un átomo de nitrógeno. R y RY se seleccionan independientemente de hidrógeno y alquilo.
El término " (NRx Ry' ) carbonilo, " tal como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo -NRxRy' unido a la porción molecular principal a través de un grupo carbonilo .
El término "oxo" , como se usa en el presente documento, se refiere a =0.
El término "sulfonilo" , tal como se usa en el presente documento, se refiere a -S02-- Existen centros asimétricos en los compuestos de la presente descripción. Estos centros se designan con los símbolos "R" o "S" , dependiendo de la configuración de los sustituyentes alrededor del átomo de carbono quiral . Debe entenderse que la descripción engloba todas las formas isoméricas estereoquímicas, o sus mezclas, que poseen la capacidad de inhibir NS5A. Se pueden preparar estereoisómeros individuales de los compuestos sintéticamente a partir de materiales iniciales comercialmente disponibles que contienen centros quirales o por preparación de mezclas de productos enantioméricos seguido de separación como por ejemplo conversión a una mezcla de diastereómeros seguido de separación o recristalización, técnicas cromatográficas o separación directa de enantiómeros en columnas cromatográficas quirales. Los compuestos de partida de estereoquímica particular, bien están comercialmente disponibles o bien se pueden preparar y resolver mediante técnicas conocidas en la técnica.
Ciertos compuestos de la presente discusión pueden existir también en formas conformacionales estables diferentes que pueden ser separables. La asimetría torsional debida a rotación restringida sobre un enlace individual asimétrico, por ejemplo debido a su impedimento estérico o tensión de anillo, puede permitir la separación de conformadores diferentes. La presente revelación incluye cada isómero conformacional de estos compuestos y mezclas de los mismos .
Los compuestos de la presente descripción también existen como tautómeros; por tanto la presente descripción también incluye formas tautoméricas .
La expresión "compuestos de la presente descripción" y expresiones equivalentes, pretenden incluir compuestos de Fórmula . (I) , y sus enantiómeros , diastereoisómeros y sales farmacéuticamente aceptables. De forma similar, las referencias a los intermediarios se pretende que engloben sus sales cuando el contexto lo permita .
Se pretende que la presente descripción incluya todos los isótopos de los átomos que aparecen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen los átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos . Como ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos marcados con isótopos de la invención generalmente se pueden preparar por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado con isótopo apropiado en lugar del reactivo no marcado que se usa en otros casos. Tales compuestos pueden tener una diversidad de usos potenciales, por ejemplo como estándares y reactivos en determinación de actividad biológica. En el caso de los isótopos estables, dichos compuestos pueden tener el potencial de modificar favorablemente propiedades biológicas, farmacológicas o farmacocinéticas .
Los compuestos de la presente discusión pueden existir como sales farmacéuticamente aceptables. El término "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en el presente documento, representa sales o formas híbridas de los compuestos de la presente descripción que son solubles en agua o solubles eñ aceite o dispersables, que son, dentro del alcance del juicio médico bien fundamentado, adecuadas para usar en contacto con los tejidos de pacientes sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación es proporcional con una relación beneficio/riesgo razonable, y son efectivos para su uso deseado. Las sales se pueden preparar durante el aislamiento y purificación finales de los compuestos o por separado haciendo reaccionar un átomo de nitrógeno adecuado con un ácido adecuado. Las sales de adición representativas incluyen acetato, adipato, . alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, camforato, camforsulfonato; digluconato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, formiato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2 -hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, mesitilenosulfonato, metanosulfonato, naftilenosulfonato, nicotinato, 2 -naftalenosulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilproprionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tricloroacetato, trifluoroacetato, fosfato, glutamato, bicarbonato, para-toluenosulfonato y undecanoato . Ejemplos de ácidos que' se pueden usar para formar sales de adición farmacéuticamente aceptables incluyen ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico y fosfórico, y ácidos orgánicos tales como ácido oxálico, maleico, succínico y cítrico.
Las sales de adición básica se pueden preparar durante el aislamiento y la purificación finales de los compuestos haciendo reaccionar un grupo carboxilo con una base adecuada tal como el hidróxido, carbonato, o bicarbonato de un catión metálico o con amoniaco o una amina primaria, secundaria, o terciaria. Los cationes de sales farmacéuticamente aceptables incluyen litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio, así como cationes de amina cuaternario no tóxicos tales como amonio, tetrametilamonio , tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, dietilamina, etilamina, tributilamina, piridina, ?,?-dimetilanilina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina, diciclohexilamina, procaína, dibencilamina , N, -dibencilfenetilamina y N, N' -dibenciletilendiamina . Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición básicas incluyen etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina y piperazina.
Cuando es posible que, para ' uso en terapia, se puedan administrar cantidades terapéuticamente eficaces de un compuesto de Fórmula (I) , así como sus sales farmacéuticamente aceptables, en forma de compuestos químicos en bruto, es posible presentar el ingrediente activo como una composición farmacéutica. Por consiguiente, la descripción proporciona además composiciones farmacéuticas que incluyen cantidades terapéuticamente eficaces de compuestos de Fórmula (I) o sus sales farmacéuticamente aceptables, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz," tal como se usa en el presente documento, se refiere a la cantidad total de cada ingrediente activo que es suficiente para mostrar un beneficio significativo al paciente, por ejemplo, una reducción mantenida de la carga vírica. Cuando se aplica a un principio activo individual, administrado solo, el término se refiere a ese ingrediente solo. Cuando se aplica a una combinación, el término se refiere a cantidades combinadas de los principios activos que provoca el efecto terapéutico, ya se administren combinados, en serie o de forma simultánea. Los compuestos de la Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, son tal como se describen anteriormente. El/los portador (es) , diluyente (s) , o excipiente (s) deben ser aceptables en el sentido de que sean compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no deletéreos para el receptor de los mismos. De conformidad con otro aspecto de la presente descripción se proporciona también un proceso para la preparación de una formulación farmacéutica que incluye mezclar un compuesto de Fórmula (I) , o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, con uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. El término "farmacéuticamente aceptable", tal como se usa en el presente documento, se refiere a los compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que son, dentro del alcance del criterio médico habitual, adecuados para usar en contacto con los tejidos de pacientes sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación acorde con una relación benef icio/riesgo razonable, y son eficaces para su uso deseado.
Las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en formas monodosis que contienen una cantidad predeterminada de principio activo por monodosis. En una monoterapia para la prevención y tratamiento de enfermedad mediada por VHC son típicos niveles de dosis que varían de aproximadamente .0 , 01 a aproximadamente 250 miligramos por kilogramo ("mg/kg") de peso corporal por día, con preferencia de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día de los compuestos de la presente descripción. Habitualmente , las composiciones farmacéuticas de la presente descripción se administrarán desde aproximadamente 1 a aproximadamente 5 veces al día o de forma alternativa, en forma de infusión continua. Dicha administración puede usarse como terapia crónica o aguda. La cantidad de principio activo que puede combinarse con los materiales portador para producir una única forma farmacéutica variará dependiendo de la afección que se esté tratando, de la gravedad de la afección, del tiempo de administración, la vía de administración, la velocidad de excreción del compuesto usado, la duración del tratamiento y la edad, sexo, peso y afección del paciente. Las formulaciones monodosis son las que contienen una dosis o subdosis diaria, tal como se indica anteriormente en el presente documento, o una fracción apropiada de las mismas de un principio activo. Generalmente, el tratamiento se inicia con dosis pequeñas sustancialmente por debajo de la dosis óptima del compuesto. Después, la dosis se aumenta en pequeños incrementos hasta que se alcanza el efecto óptimo en las circunstancias dadas. En general, el compuesto se administra, de la forma más deseable a un nivel de concentración que generalmente conseguirá resultados antiviralmente eficaces sin provocar efectos secundarios dañinos ni perjudiciales.
Cuando las composiciones de esta descripción comprenden una combinación de un compuesto de la presente descripción y uno o más agentes terapéuticos o profilácticos adicionales, tanto el compuesto como el agente adicional habitualmente están presentes a niveles de dosis de aproximadamente 10 a 150%, y más preferentemente entre aproximadamente 10 y 80% de la dosis que normalmente se administra en una pauta de monoterapia.
Las formulaciones farmacéuticas se pueden adaptar para administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo por la vía oral (incluyendo la bucal o la sublingual) , rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual, o transdérmica) , vaginal, o parenteral (incluyendo inyecciones o infusiones subcutáneas, intracutáneas , intramusculares, intra-articulares , intrasinoviales , intraesternales , intratecales , intralesionales , intravenosas, o intradérmicas) . Tales formulaciones se pueden preparar por cualquier proceso conocido en la técnica de farmacia, por ejemplo por unión en asociación el ingrediente activo con el/los portador(es) o excipiente (s) . Son preferentes la administración oral o la administración mediante inyección.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles; o emulsiones de aceite-en-agua o emulsiones de agua-en-aceite .
Por ejemplo, para administración oral en la forma de un comprimido o una cápsula, el componente de fármaco activo se puede combinar con un portador inerte farmacéuticamente aceptable no tóxico, oral tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos se prepararon moliendo el compuesto a un tamaño fino adecuado y mezclando con un portador farmacéutico molido de forma similar tal como un carbohidrato comestible, como, por ejemplo, almidón o manitol . También puede estar presente agente aromatizante, conservánte, dispersante y colorante.
Las cápsulas se hacen preparando una mezcla en polvo, como se describe anteriormente y cubiertas de gelatina formadas cargadas. Se pueden añadir agentes deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, o polietilenoglicol sólido a la mezcla en polvo antes de la operación de- carga. Un agente disgregante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio, o carbonato de sodio puede también añadirse para incrementar la disponibilidad del medicamento cuando la cápsula es ingerida.
Además, cuando se desee o sea necesario, también pueden incorporarse aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes adecuados a la mezcla. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como goma arábiga, gomo de tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenoglicol , ceras, y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los disgregadores incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, .bentonita, goma xantana, y similares. Los comprimidos se formularon, por ejemplo, preparando un mezcla en polvo, granulando o soldando con fusión incompleta, añadiendo un lubricante y disgregante, y prensando en comprimidos. Se preparó una mezcla en polvo mezclando el compuesto, molido adecuadamente, con un diluyente o base como se describe anteriormente, y opcionalmente , con un ligando tal como carboximetilcelulosa, un alginato, galatina, o polivinilpirrolidina, un retardante de solución tal como parafina, un acelerados de resorción tal como una sal cuaternaria y/o agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo se puede granular por humectación con un aglutinante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de goma arábiga, o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y forzándola .á pasar a través de un tamiz. Como una alternativa para granular, la mezcla en polvo puede hacerse pasar por la máquina compresora y el resultado son postas formadas imperfectamente rotas en gránulos . Los gránulos se pueden lubricar para evitar que se adhieran al comprimido formando moldes por medio de la adición de ácido esteárico, una sal de estearato, talco, o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime después en comprimidos . Los compuestos de la presente revelación se pueden combinar también con un portador inerte que fluye libre y se pueden comprimir en comprimidos directamente sin ir a través de las formas de granulación o formación de postas. Se pueden proporcionar un revestimiento protector transparente u opaco constituido por un revestimiento sellante de goma laca, un revestimiento de azúcar o de material polimérico, y un revestimiento pulido de cera. Se pueden añadir tintes a estos recubrimientos para distinguir dosificaciones unitarias diferentes.
Los fluidos orales tales como una solución, jarabes y elixires se pueden preparar en forma de dosificación unitaria tal que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa adecuadamente aromatizada, mientras que se prepararon elixires por el uso de un portador no tóxico. Se pueden añadir también solubilizadores y emulsionantes tales como alcoholes .isoestearílicos etoxilados y éteres de polioxietileno sorbitol, conservantes, aditivo aromático tal como aceite de menta o edulcorantes naturales, o sacarina u otros edulcorantes artificiales y similares.
Donde sea apropiado, se pueden encapsular las formulaciones de dosificación unitaria para administración. La formulación se pueden preparar también para prolongar o mantener la liberación como por ejemplo revistiendo o incrustando material particulado en polímeros, ceras, o similares .
Los compuestos de la Fórmula (I) , y sus sales farmacéuticamente aceptables, también pueden administrarse en forma de sistemas de administración de liposomas, tales como vesículas unilaminares , vesículas unilaminares grandes y vesículas multilaminares . Los liposomas se pueden formas a partir de una diversidad de fosfolípidos , tales como colesterol, estearilamina, o fosfatidilcolinas .
Los compuestos de la Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables también pueden administrarse usando anticuerpos monoclonales como portadores individuales a los que se acoplan las moléculas de compuesto. Los compuestos pueden estar acoplados también con polímeros solubles como transportadores de fármacos marcables como objetivos. Tales polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamidafenol , polihidroxietilaspartamidafenol , o polietilenóxidopolilisina sustituida con residuos de palitoilo. Además, los compuestos pueden acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles en lograr liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, caprolactona poliépsilon, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres , poliacetales , polidihidropiranos , policianoacrilatos , y copolímeros de bloque de hidrogeles reticulados o antipáticos.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración transdérmica pueden presentarse como parches discretos que se desea que permanezcan en contacto íntimo con la epidermis de un receptor durante un periodo de tiempo prolongado. " Por ejemplo, el ingrediente activo puede liberarse del parche por iontoforesis como se describe de forma general en Pharmaceutical Research 1986, 3(6), 318.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica se pueden formular como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizaciones, aerosoles o aceites.
Para tratamientos del ojo o de otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las formulaciones se aplican preferentemente como una pomada o crema tópica. Cuando se formula en una pomada, el ingrediente activo se puede usar bien con una base parafínica o bien con una base de pomada mezclable en agua. Alternativamente, el ingrediente activo se puede formular en una crema con una base de aceite-en-agua o con una base de agua-en-aceite .
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administraciones tópicas para el ojo incluyen gotas oculares en las que el ingrediente activo se disuelve o suspende en un portador adecuado, especialmente un solvente acuoso.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica en la boca incluyen tabletas, pastillas y enjuagues bucales.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal pueden presentarse como supositorios o como enemas .
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en las que el portador es un sólido incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partículas de por ejemplo en el intervalo de 20 a 500 micrómetros que se administra en la forma en que se toma rape, es decir, por inhalación rápida a través de la vía nasal desde un recipiente de polvo mantenido próximo a la nariz. Las formulaciones adecuadas en las que el transportador es un líquido, para administración como una pulverización nasal o como gotas nasales, incluyen soluciones acuosas o soluciones aceitosas del ingrediente activo.
Las formulaciones adaptadas para administración por inhalación incluyen espolvoreados o neblinas de partículas finas, que se pueden generar por medio de diversos tipos de aerosoles, nebulizadores , o insufladores presurizados en dosis medidas.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones de pulverización .
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones de inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener anti-oxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que vuelven a la formulación isotónica con la sangre del receptor deseado; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes en suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en recipientes de dosis unitaria o de multidosis, por ejemplo ampollas y viales sellados, y pueden almacenarse en una condición secada por congelación ( liofilizada) que requiere sólo la adición del transportador líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de usar. Se pueden preparar soluciones y suspensiones de inyección extemporáneas a partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos .
Debería entenderse que además de los ingredientes mencionados en particular anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica que se han considerado para el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo aquellos adecuados para administración oral pueden incluir agentes saborizantes .
El término "paciente" incluye seres humanos y otros mamíferos .
El término "tratamiento" se refiere a: (i) prevenir la aparición de una enfermedad, trastorno o estado patológico en un paciente que puede estar predispuesto a la enfermedad, trastorno y/o estado patológico pero al que todavía no se le ha diagnosticado que lo tiene; (ii) inhibir la enfermedad, trastorno o estado patológico, es decir, detener su desarrollo; y (iii) aliviar la enfermedad, trastorno o estado patológico, es decir, causando la regresión de la enfermedad, trastorno y/o estado patológico.
Los compuestos de la presente descripción también se pueden administrar con una ciclosporina, por ejemplo, ciclosporina A. La ciclosporina A ha demostrado que es activa contra el VHC en ensayos clínicos (Hepatology 2003, 38:1282; Biochem. Biophys . Res. Commun. 2004, 313:42; J. Gastroenterol . 2003, 38:567).
La Tabla 1 a continuación enumera algunos ejemplos ilustrativos de compuestos que se pueden administrar con los compuestos de la presente descripción. Los compuestos de la descripción se pueden administrar con otros compuestos con actividad contra el VHC en terapia de combinación, bien de forma ' conjunta o por separado o combinando los compuestos para formar una composición.
Tabla 1 Los compuestos de la presente descripción también se pueden usar como reactivos de laboratorio. Los compuestos pueden ser una contribución decisiva para proporcionar herramientas de investigación para diseñar ensayos de replicación del virus, validación de sistemas de ensayo en animales y estudios de biología estructural para potenciar más el conocimiento de los mecanismos de la enfermedad por VHC. Además, los compuestos de la presente descripción son útiles para establecer o determinar el sitio de unión de otros compuestos antivirales, por ejemplo, por inhibición competitiva .
Los compuestos de esta descripción también pueden ser útiles para tratar o prevenir contaminación viral de materiales y por tanto reducir el riesgo de infección viral de laboratorio o personal médico o pacientes que entren en contacto con tales materiales, por ejemplo, sangre, tejidos, instrumental y prendas quirúrgicas, instrumental y prendas de laboratorio, y aparatos y materiales para la extracción o transfusión de sangre.
Esta descripción pretende incluir compuestos que tienen la Fórmula (I) cuando se preparan por procesos de síntesis o por procesos metabólicos que incluyen los que se producen en el cuerpo humano o animal (en vivo) o procesos que se producen in vi tro.
Las abreviaturas usadas en la presente solicitud, incluyendo en particular en los ejemplos ilustrativos siguientes, son bien conocidas por los expertos en la técnica. Algunas de las abreviaturas usadas son las siguientes: Ph para fenilo; DME para 1 , 2 -dimetoxietano ; TFA para ácido trifluoroacético; DCM para diclorometano; HATU para hexafluorofosfato de 0- (7-azabenzotriazol-l-il) -N, , N' , ' -tetrametiluronio; DMF para N, -dimetilformamida ; iPr2EtN, DIEA o DIPEA para diisopropiletilamina ; h, hr o hrs para horas; MeOD para CD3OD; MeOH para metanol; min o mins para minutos; EtOH para etanol; Et para etilo; DMSO para dimetilsulfóxido; ta o TA para temperatura ambiente, tr o TR para tiempo de retención; EDCI para clorhidrato de 1- (3-dimetilaminopropilo) -3-etilcarbodiimida; Boc, boc o BOC para terc-butoxicarbonilo; EtOAc o EtOAc para acetato de etilo; THF para tetrahidrofurano; TBDPS para t-butildimetilsililo; DMAP para 4 -dimetilaminopiridina ; TBAF para fluoruro de tetrabutilamonio; OAc para acetato; AcOH para ácido acético; SEMCl para cloruro de 2- (trimetilsilil) etoximetilo; d para días; TEA o Et3N para trietilamina ; ACN o MeCN para acetonitrilo; NCS para N-clorosuccinimida ; NBS para N-bromosuccinimida; Et20 para dietil éter; DCE para 1,2-dicloroetano; d para días; y DEA para dietilamina.
La presente descripción se describirá ahora en relación con determinadas modalidades que no se pretende que limiten su alcance. Por el contrario, la presente descripción abarca todas las alternativas, modificaciones y equivalentes y puede incluirse dentro del alcance de las reivindicaciones. Así, los siguientes ejemplos, que incluyen modalidades específicas, ilustrarán una práctica de la presente descripción, entendiéndose que los ejemplos son para fines de ilustración de determinadas modalidades y se presentan para proporcionar lo que se cree que es la descripción más útil y fácilmente entendible de sus procesos y aspectos conceptuales .
Los materiales de partida pueden obtenerse de fuentes comerciales o prepararse mediante procesos ya establecidos en la bibliografía conocidos por las personas expertas en la técnica.
Síntesis de Caps comunes Condiciones de ensayo de los compuestos La valoración de la pureza y el análisis de masas de baja resolución se llevaron a cabo en un sistema de CL Shimadzu CL acoplado con un sistema de EM Waters MICROMASS® ZQ. Se apreciará que los tiempos de retención pueden variar ligeramente entre máquinas. Condiciones adicionales de CL aplicables a la presente sección, a no ser que se indique de otro modo.
Condiciones de EM-N1 Columna = XTERRA® 3.0 X 50 mm S7 % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 2 min Tiempo de detención = 3 min Velocidad de flujo = 5 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condiciones de EM-W2 Columna = XTERRA® 3.0 X 50 mm S7 % Inicial de B = O % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 3 min Tiempo de detención = 4 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condiciones de EM-W5 Columna = XTERRA® 3.0 X 50 mm S7 % Inicial de B = 0 % Final de B = 30 Tiempo de gradiente = 2 min Tiempo de detención = 3 min Velocidad de flujo = 5 ml/min Longitud.de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condiciones-DI Columna = XTERRA® C18 3.0 X 50 mm S7 % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 3 min Tiempo de detención = 4 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0,1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condiciones-D2 Columna = PHENOMENEX® Luna 4.6 X 50 mm S10 % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 3 min Tiempo de detención = 4 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condiciones-M3 Columna = XTERRA® C18 3.0 X 50 mm S7 % Inicial de B = 0 % Final de B = 40 Tiempo de gradiente = 2 min Tiempo de detención = 3 min Velocidad de flujo = 5 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condición I Columna = PHENOMENEX® Luna 3.0X 50 mm S10 % Inicial de B = O % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 2 min Tiempo de detención = 3 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condición II Columna = PHENOMENEX® Luna 4.6X50 mm S10 % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 2 min Tiempo de detención = 3 min Velocidad de flujo = 5 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Condición III Columna = HPLC XTERRA® C18 3.0 x 50mm S7 % Inicial .de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 3 min Tiempo de detención = 4 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 nm solvente A = TFA al 0.1% en metanol al 10%/H2O al 90% solvente B = TFA al 0.1% en metanol al 90%/H2O al 10% Cap-1 Ácido (R) -2- (dimetilamino) -2-fenilacético Se añadió una suspensión de Pd al 10%/C (2.0 g) en metanol (10 mi) a una mezcla de (R)-2-fenilglicina (10 g, 66.2 mmol), formaldehído (33 mi de 37% en peso en agua) , HCl 1N (30 mi) y metanol (30 mi) y se expuso a H2 (413.57 kPa) durante 3 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas ( CELITE® ) y el filtrado se concentró a vacío. El material bruto resultante se recristalizó en isopropanol proporcionando la sal HCl de Cap-1 como agujas blancas (4.0 g) . Rotación óptica: -117.1° [c = 9.95 mg/ml en H20; ? = 589 nm] . RMN de XH (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : d 7.43-7.34 (m, 5H) , 4.14 (s, 1H) , 2.43 (s, 6H) ; CL ( Cond . I) : TR = 0.25; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci0H14N02 180.10; encontrado 180.17; EMAR : Anal. Calculado para [M+H] + Ci0Hi4NO2 180.1025; encontrado 180.1017.
Cap-2 Ácido (R) -2- (dietilamino) -2-fenilacético Se añadió NaBH3CN . (6.22 g, 94 mmol) en porciones durante unos pocos minutos a una mezcla enfriada (hielo/agua) de (R) -2-fenilglicina (6.02 g, 39.8 mmol) y MeOH (100 mi), y se agitó durante 5 min. Se añadió acetaldehído (10 mi) gota a gota durante 10 minutos y se continuó agitando a la misma temperatura fría durante 45 minutos y a temperatura ambiente durante -6.5 horas. La mezcla de reacción se volvió a enfriar con baño de hielo-agua, se trató con agua (3 mi) y luego se inactivo con una adición gota a gota de HCl concentrado durante ~ 45 min hasta que el pH de la mezcla fue ~ 1.5 -2.0. El baño de enfriamiento se retiró y se continuó agitando mientras se añadía HCl concentrado con el fin de mantener el pH de la mezcla aproximadamente a 1,5-2.0. La mezcla de reacción se agitó durante una noche, se filtró para separar la suspensión blanca y el filtrado se concentró a vacío. El material bruto se recristalizó en etanol proporcionando la sal HCl de Cap-2 como un sólido blanco brillante en dos tandas (tanda- 1: 4.16 g; tanda-2: 2.19 g) . RMN de ? (DMS0-d6. d = 2.5 ppm, 400 MHz) : 10.44 (1.00, s ancho, 1H) , 7.66 (m, 2H) , 7.51 (m, 3H) , 5.30 (s, 1H) , 3.15 (m ancho, 2H) , 2.98 (m ancho, 2H) , 1.20 (s ancho aparente, 6H) . Tanda-1: [a] -102.21° (c = 0.357, H20) ; canda- 2 : [a] 25 -99.7° (c = 0.357, H20) . CL (Cond. I): TR = 0.43 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H]+ C12H18N02: 208.13; encontrado 208.26 Cap-3 Se añadió secuencialmente acetaldehído (5.0 mi, 89.1 mmol) y una suspensión de Pd al 10%/C (720 mg) en metanol/H20 (4 ml/1 mi) a una mezcla enfriada (~ 15 °C) de (R) -2-fenilglicina (3.096g, 20.48 mmol), HC1 1N (30 mi) y metanol (40 mi). Se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó bajo un balón de H2 durante 17 horas. Se añadió más acetaldehído (10 mi, 178.2 mmol) y se continuó agitando en atmósfera de H2 durante 24 horas [Nota: el suministro de H2 se reponía cuando fue necesario a través de la reacción] . La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se concentró a vacío. El material bruto resultante se recristalizó en isopropanol proporcionando la sal HCl de ácido (R) -2- (etilamino) -2-fenilacético como un sólido blanco brillante (2.846 g) . RMN de XH (D SO-dg. d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 14.15 (s ancho, 1H) , 9.55 (s ancho, 2H) , 7.55-7.48 (m, 5H) , 2.88 (m ancho, 1H) , 2.73 (m ancho, 1H) , 1.20 (t aparente, J = 7.2, 3H) . CL (Cond. I): TR = 0.39 min; índice de homogeneidad >95%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H]+ C10HiNO2: 180.10; encontrado 180.18.
Se añadió una suspensión de Pd al 10%/C (536 mg) en metanol/H20 (3 ml/1 mi) a una mezcla de ácido (R) -2-(etilamino) -2-fenilacético/HCl (1.492 g, 6.918 mmol) , formaldehído (20 mi de 37% en peso en agua) , HCl 1N (20 mi) y metanol (23 mi) . La mezcla de reacción se agitó bajo un balón de H2 durante -72 horas, en el que se el suministro de H2 se reanudaba según se necesitaba. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se concentró a vacío. El material bruto resultante se recristalizó en isopropanol (50 mi) proporcionando la sal HCl de Ca -3 como un sólido blanco (985 mg) . RMN de 1H (DMSO-d6. d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 10.48 (s ancho, 1H) , 7.59-7.51 (m, 5H) , 5.26 (s, 1H) , 3.08 (s ancho aparente, 2H) , 2.65 (s ancho, 3H) , 1.24 (m ancho, 3H) . CL (Cond. I): TR = 0.39 min; índice de homogeneidad >95%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H]+ CnHi6N02: 194.12; encontrado 194.18; EMAR: Anal. Calculado para [M+H] + C Hi6N02 : 194.1180; encontrado 194.1181.
Cap-4 Ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -2-fenilacético Se añadió ClC02Me (3.2 mi, 41.4 mmol) gota a gota a una semisolución en THF enfriada (hielo/agua) (410 mi) de 2-amino-2-fenilacetato de (R) - erc-butilo/HCl (9.877 g, 40.52 mmol) y diisopropiletilamina (14.2 mi, 81.52 mmol) durante 6 min, y se agitó a una temperatura similar durante 5.5 horas. El componente volátil se eliminó a vacío, y el residuo se repartió entre agua (100 mi) y acetato de etilo (200 mi) . La fase orgánica se lavó con HCl 1N (25 mi) y solución saturada de NaHC03 (30 mi) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío. El aceite resultante incoloro se trituró en hexanos, se filtró y se lavó con hexanos (100 mi) proporcionando 2- (metoxicarbonilamino) -2 -fenilacetato de (R) - tere-butilo como un sólido blanco (7.7 g) . RMN de ?? (DMS0-d6. d = 2.5 ppm, 400 MHz) : 7.98 (d, J = 8.0, 1H) , 7.37-7.29 (m, 5H) , 5.09 (d, J = 8. 1H) , 3.56 (s, 3H) , 1.33 (s, 9H) . CL (Cond. I): TR = 1.53 min; índice de homogeneidad -90 % ; CL/EM: Anal. Calculado para [M+Na] + Ci4H19NNa0 : 288.12; encontrado 288.15.
Se añadió TFA (16 mi) gota a gota a una solución enfriada (hielo/agua) en CH2C12 (160 mi) del producto anterior durante 7 minutos y se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó durante 20 horas. Puesto que la desprotección todavía no fue completa, se añadió más TFA (1.0 mi) y se continuó agitando durante otras 2 horas más. El componente volátil se eliminó a vacío, y el residuo oleoso resultante se trató con éter dietílico (15 mi) y hexanos (12 mi) proporcionando un precipitado. El precipitado se filtró y se lavó con éter diet ílico/hexanos (relación -1:3; 30 mi) y se secó a vacío proporcionando Cap- como un sólido blanco apelusado (5.57 g) . Rotación óptica: -176.9° [c = 3.7 mg/ml en H20; ? = 589 nm] . RMN de XH (DMSO-d6. d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 12.84 (s ancho, 1H) , 7.96 (d, J = 8.3, 1H) , 7.41-7.29 (m, 5H) , 5.14 (d, J = 8.3, 1H) , 3.55 (s, 3H) . CL (Cond. I) : TR = 1.01 min; índice de homogeneidad >95%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci0Hi2 O4 210.08; encontrado 210.17; EMAR: Anal. Calculado para [M+H] + C10H12NO4 210.0766; encontrado 210.0756.
Cap-5 Se calentó a 100 °C durante 21 horas una mezcla de (R) -2-fenilglicina (1.0 g, 6.62 mmol) , 1 , 4 -dibromobutano (1.57 g, 7.27 mmol) y Na2C03 (2.10 g, 19.8 mmol) en etanol (40 mi) . La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró, y el filtrado se concentró a vacío. El residuo se disolvió en etanol y se acidificó con HCl 1N hasta pH 3-4, y el componente volátil se eliminó a vacío. El material bruto resultante se purificó por una HPLC de fase inversa (agua/metanol/TFA) proporcionando la sal TFA de Cap-5 como una espuma blanca semiviscosa (1.0 g) . RMN de 1H (DMSO-d6. d = 2.5. 500 MHz) d 10.68 (s ancho, 1H) , 7.51 (m, 5H) , 5.23 (s, 1H) , 3.34 (s ancho aparente, 2H) , 3.05 (s ancho aparente, 2H) , 1.95 (s ancho aparente, 4H) ; TR = 0.30 min (Cond. I); índice de homogeneidad >98%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C12H16N02 : 206.12; encontrado 206.25.
Cap-6 La sal TFA de Cap-6 se sintetizó a partir de (R)-2-fenilglicina y l-bromo-2- (2 -bromoetoxi) etano usando e proceso de preparación de Cap-5. RMN de 1H (DMS0-d6. d = 2.5 500 Hz) d 12.20 (s ancho, 1H) , 7.50 (m, 5H) , 4.92 (s, 1H) 3.78 (s ancho aparente, 4H) , 3.08 (s ancho aparente, 2H) 2.81 (s ancho aparente, 2H) ; TR = 0.32 min (Cond. I); >98% CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C12H16N03 : 222.11 encontrado 222.20; EMAR: Anal. Calculado para [M+H] + C12H16N03 222.1130; encontrado 222.1121.
Cap- 7 Cap-7a:enantiómero- 1 Cap-7b:enantiómero-2 Se añadió gota a gota una solución en CH2C12 (200 mi) de cloruro de p-toluenosulfonilo (8.65 g, 45.4 mmol) a una solución (-5 °C) en CH2C12 (200 mi) de 2-hidroxi-2-fenilacetato de (S) -bencilo (10.0 g, 41.3 mmol), trietilamina (5.75 mi, 41.3 mmol) y 4 -dimetilaminopiridina (0.504 g, 4.13 mmol) , mientras se mantenía la temperatura de -5 °C a 0 °C. La reacción se agitó a 0 °C durante 9 horas, y luego se almacenó en un congelador (-25 °C) durante 14 horas. Se dejó descongelar hasta temperatura ambiente y se lavó con agua (200 mi), HC1 1N (100 mi) y salmuera (100 mi), se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío proporcionando 2-fenil-2- (tosiloxi) acetato de bencilo como un aceite viscoso que solidificó en reposo (16.5 g) . La integridad quiral del producto no se verificó y dicho producto se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN de 1H (DMS0-d6. d = 2.5, 500 MHz) d 7.78 (d, J = 8.6, 2H) , 7.43-7.29 (m, 10H) , 7.20 (m, 2H) , 6.12 (s, 1H) , 5.16 (d, J = 12.5, 1H) , 5.10 (d, J = 12.5, 1H) , 2.39 (s, 3H) . TR = 3.00 (Cond. III); índice de homogeneidad >90%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C22H20NaO5S: 419.09; encontrado 419.04.
Se calentó a 65 °C durante 7 horas una solución en THF (75 mi) de 2-fenil-2- (tosiloxi) acetato de bencilo (6.0 g, 15.1 mmol), 1-metilpiperazina (.3.36 mi, 30.3 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (13.2 mi, 75.8 mmol) . Se dejó enfriar la reacción hasta temperatura ambiente y el componente volátil se eliminó a vacío. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua, y la fase orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío. El material bruto resultante se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, etilo acetato) proporcionando 2-(4-metilpiperazin-l-il) -2-fenilacetato de bencilo como un aceite viscoso anaranjado-pardo (4.56 g) . El análisis HPLC quiral (CHIRALCEL®OD-H) indicó que la muestra es una mezcla de estereoisómeros en una relación 38.2 a 58.7, La separación de los estereoisómeros se realizó como sigue: se disolvió el producto en 120 mi de etanol/heptano (1:1) y se inyectó (5 ml/inyección) en una columna HPLC quiral (Chiracel OJ, 5 cm ID x 50 cm L, 20 µ??) eluyendo con 85:15 Heptano/etanol a 75 ml/min, y se controló a 220 nm. El estereoisómero-1 (1.474 g) y el estereoisómero-2 (2.2149 g) se recuperaron como aceite viscoso. RMN de ¾ (CDC13, d = 7.26, 500 MHz) 7.44-7.40 (m, 2H) , 7.33-7.24 (m, 6H) , 7.21-7.16 (m, 2H) , 5.13 (d, J = 12.5, 1H) , 5.08 (d, J = 12.5, 1H) , 4.02 (s, 1H) , 2.65-2.38 (s ancho aparente, 8H) , 2.25 (s, 3H) . TR = 2.10 (Cond. III); índice de homogeneidad >98%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C20H25 2O2 : 325.19; encontrado 325.20, Se añadió una solución en metanol (10 mi) de cualquiera de los estereoisómeros de 2- (4-metilpiperazin-l-il) -2-fenilacetato de bencilo (1.0 g, 3.1 mmol) a una suspensión de Pd al 10%/C (120 mg) en metanol (5.0 mi). La mezcla de reacción se expuso a un balón de hidrógeno con un control cuidadoso durante <50 min. Inmediatamente después de completarse la reacción, se filtró el catalizador a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se concentró a vacío proporcionando Cap-? , contaminado con ácido fenilacético como una espuma color castaño (867.6 mg; la masa es superior al rendimiento teórico) . El producto se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN de K (DMSO-d6, d = 2.5, 500 MHz) 6 7.44-7.37 (m, 2H) , 7.37-7.24 (m, 3H) , 3.92 (s, 1H) , 2.63-2.48 (s ancho ap . , 2H) , 2.48-2.32 (m, 6H) , 2.19 (s, 3H) ; TR = 0.31 (Cond. II); índice dé homogeneidad >90%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C13H19N202 : 235.14 ; encontrado 235.15; EMAR: Anal. Calculado para [M+H] + C13H19 2O2 : 235.1447; encontrado 235.1440, La síntesis de Cap-8 y Cap-9 se llevó a cabo de conformidad con la síntesis de Cap-1 usando aminas apropiadas para la etapa de desplazamiento de SN2 (es decir, 4-hidroxipiperidina para Cap-8 y (S) -3-fluoropirrolidina para Cap-9) y condiciones modificadas para la separación de los intermediarios estereoisoméricos respectivos, como se describe más adelante.
Cap-8 8a: enantiómero-1 8b: nantiómero-2 La separación estereoisomérica del intermediario 2 (4-hidroxipiperidin-l-il) -2-fenil acetato de bencilo se efectuó usando las siguientes condiciones: se disolvió el compuesto (500 mg) en etanol/heptano (5 ml/45 mi) . La solución resultante se inyectó (5 ml/inyección) en una columna HPLC quiral (Chiracel OJ, 2 era ID x 25 cm de longitud, 10 ym) eluyendo con 80; 20 de heptano/etanol a 10 ml/min, controlada a 220 nm, proporcionando 186.3 mg de estereoisómero-1 y 209.1 mg de estereoisómero-2 como aceites viscosos amarillo claro. Estos ásteres bencílicos se sometieron a hidrogenación de conformidad con la preparación de Cap-? proporcionando Cap-8: . RMN de 1H (DMS0-d6( d = 2.5, 500 MHz) 7.40 (d, J = 7 , 2H) , 7.28-7.20 (m, 3H) , 3.78 (s 1H) , 3.46 (m, 1H) , 2.93 (m, 1H) , 2.62 (m, 1H) , 2.20 (m, 2H) , 1.70 (m, 2H) , 1.42 (m, 2H) . TR = 0.28 (Cond. II); índice de homogeneidad >98%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci3Hi8N03: 236.13; encontrado 236.07; EMAR: Calculado para [M+H] + Ci3H18N03: 236.1287; encontrado 236.1283.
Cap-9 9a: diastereómero-1 9b: diastereómero -2 La separación diastereomérica del intermediario 2- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -2 -fenilacetato de bencilo se efectuó usando las siguientes condiciones: se separó el éster (220 mg) en una columna HPLC quiral (Chiracel OJ-H, 0.46 cm ID x 25 cm L, 5 µp?) eluyendo con 95% de C02/5% de metanol con 0.1% de TFA, a una presión de lOxlO5 Pa, 70 ml/rain de Velocidad de flujo, y una temperatura de 35 °C. Se concentró el eluato de HPLC para los estereoisómeros respectivos y el residuo se disolvió en CH2C12 (20 mi) y se lavó con un medio acuoso (10 mi agua + 1 mi de solución saturada de NaHC03) . La fase orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío proporcionando 92.5 ' mg de fracción-1 y 59.6 mg de fracción-2, Estos ásteres bencílicos se sometieron a hidrogenac ión de conformidad con la preparación de Cap-7 para preparar Caps 9a y 9b. Cap-9a ( diastereómero- 1 ; la muestra es una sal TFA como resultado de la purificación en una HPLC de fase inversa usando H20/metanol/TFA como solvente) : RMN de H (DMS0-d6, d = 2.5, 400 MHz) 7.55-7.48 (m, 5H) , 5.38 (d de m, J = 53.7, 1H) , 5.09 (s ancho, 1H) , 3.84-2.82 (m ancho, 4H) , 2.31-2.09 (m, 2H) . TR = 0.42 (Cond. I); índice de homogeneidad >95%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci2H15FN02: 224.11; encontrado · 224.14; Cap-9b (diastereómero-2) : RMN de H (DMSO-d6, d = 2.5, 400 MHz) 7.43-7.21 (m, 5H) , 5.19 ( d de m, J = 55.9. 1H) , 3.97 (s, 1H) , 2.95-2.43 (m, 4H) , 2.19-1.78 (m, 2H) . TR = 0.44 (Cond. I); CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci2Hi5FN02 : 224.11; encontrado 224.14.
Cap- 10 A una solución de D-prolina (2.0 g, 17 mmol) y formaldehído (2.0 mi de 37% en peso en H20) en raetanol (15 mi) se añadió una suspensión de Pd al 10%/C (500 mg) en metanol (5 mi) . La mezcla se agitó bajo un balón de hidrógeno durante 23 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío proporcionando Cap-10 como un sólido blanquecino (2.15 g) . RMN de XH (DMS0-d6, d = 2.5, 500 MHz) 3.42 (m, 1H) , 3.37 (dd, J- = 9.4, 6.1, 1H) , 2.85-2.78 (m, 1H) , 2.66 (s, 3H) , 2.21-2.13 (m, 1H) , 1.93-1.84 (m, 2H) , 1.75-1.66 (m, 1H) . TR = 0.28 (Cond. II); índice de homogeneidad >98%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + CsH12N02 : 130.09; encontrado 129.96.
Cap-11 Una mezcla de ácido (2S, 4R) -4-fluoropirrolidin-2 -carboxílico (0.50 g, 3.8 mmol), formaldehído (0.5 mi de 37% en peso en H20) , HCl 12 N (0.25 mi) y Pd al 10%/C (50 mg) en metanol (20 mi) se agitó bajo un balón de hidrógeno durante 19 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se concentró a vacío. El residuo se recristalizó en isopropanol proporcionando la sal HC1 de Cap-11 como un sólido blanco (337.7 mg) . RMN de 1H (DMS0-d6, d = 2.5, 500 MHz) 5.39 (d m, J = 53.7, 1H) , 4.30 (m, 1H) , 3..90 (ddd, J = 31.5, 13.5, 4.5, 1H) , 3.33 (dd, J = 25.6, 13.4, 1H) , 2.85 (s, 3H) , 2.60-2.51 (m, 1H) , 2.39-2.26 (m, 1H) . TR = 0.28 (Cond. II); índice de homogeneidad >98%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C6HnFN02 : 148.08; encontrado 148.06.
Cap-12 (igual que Cap 52) Ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino)propanoico Se disolvió L-alanina (2.0 g, 22.5 mmol) en solución acuosa al 10% de carbonato sódico (50 mi), y se añadió a la misma una solución en THF (50 mi) de cloroformiato de metilo (4.0 mi) . La mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 4.5 horas y se concentró a vacío. El sólido blanco resultante se disolvió en agua y se acidificó con HC1 1N hasta un pH ~ 2-3, Las soluciones resultantes se extrajeron con acetato de etilo (3 x 100 mi) , y la fase orgánica combinada se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró a vacío proporcionando un aceite incoloro (2.58 g) . Se purificaron 500 mg de este material por una HPLC de fase inversa (H20/metanol/TFA) proporcionando 150 mg de Cap-12 como un aceite incoloro. RMN de XH (DMSO-d6, d = 2.5, 500 MHz) 7.44 (d, J = 7.3, 0.8H) , 7.10 (s ancho, 0.2H) , 3.97 (m, 1H) , 3.53 (s, 3H) , 1.25 (d, J = 7.3, 3H) .
Cap-13 Se agitó una mezcla de L-alanina (2.5 g, 28 mmol), formaldehído (8.4 g, 37% en peso), HC1 1N (30 mi) y Pd al 10%/C (500 mg) en metanol (30 mi) en una atmósfera de hidrógeno (344.64 kPa) durante 5 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se concentró a vacío proporcionando la sal HCl de Cap-13 como un aceite que solidificó en reposo a vacío (4.4 g; la masa es superior al rendimiento teórico) . El producto se usó sin purificación adicional. RMN de 1H (DMS0-d6, d = 2.5, 500 MHz) d 12.1 (s ancho, 1H) , 4.06 (q, J = 7.4, 1H) , 2.76 (s, 6H) , 1.46 (d, J = 7.3, 3H) .
Cap-14 Ácido (R) -2-fenil-2- (piperidin-1-il) acético Etapa 1: Una mezcla éster terc-butílico de (R)-(-)-D-fenilglicina (3.00 g, 12.3 mmol), NaBH3CN (0.773 g, 12.3 mmol), KOH (0.690 g, 12.3 mmol) y ácido acético (0.352 mi, 6.15 mmol) se agitó en metanol a 0 °C. A esta mezcla se añadió dialdehído glutárico (2.23 mi, 12.3 mmol) gota a gota durante 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó calentando hasta temperatura ambiente y se continuó agitando a la misma temperatura durante 16 horas. El solvente se eliminó seguidamente y el residuo se repartió con NaOH acuoso al 10% y acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta sequedad proporcionando un aceite transparente. Este material se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 30 x lOOmm; CH3CN-H20-TFA al 0.1%) dando el éster intermediario (2.70 g, 56%) como un aceite transparente. RMN de XH (400 MHz, CDC13) d 7.53-7.44 (m, 3H) , 7.40-7.37 (m, 2H) , 3.87 (d, J = 10.9 Hz, 1H) , 3.59 (d, J" = 10.9 Hz, 1H) , 2.99 (t, J = 11.2 Hz, 1H) , 2.59 (t, J" = 11.4 Hz, 1H) , 2.07-2.02 (m, 2H) , 1.82 (d, J = 1.82 Hz, 3H) , 1.40 (s, 9H) . CL/EM: Anal. Calculado para C17H25NO2 : 275; encontrado: 276 (M+H) + .
Etapa 2 : A una solución agitada del éster intermediario (1.12 g, 2.88 mmol) en diclorometano (10 mi) se añadió TFA (3 mi) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas y luego se concentró hasta sequedad dando un aceite amarillo claro. El aceite se purificó usando HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 30 x lOOmm; CH3CN-H20-TFA al 0.1%). Las fracciones apropiadas se reunieron y se concentraron hasta sequedad a vacío. El residuo se disolvió entonces en una cantidad mínima de metanol y se aplicó en cartuchos de extracción MCX LP (2 x 6 g) . Los cartuchos se aclararon con metanol (40 mi) y luego eluyó el compuesto deseado usando amoníaco 2M en metanol (50 mi) . Las fracciones que contenían producto se reunieron y concentraron y el residuo se suspendió en agua. La liofilización de esta solución proporcionó el compuesto del título (0.492 g, 78%) como un sólido amarillo claro. RM de XH (DMSO-dg) d 7.50 (s, 5H) , 5.13 (s, 1H) , 3.09 (s ancho, 2H) , 2.92-2.89 (m, 2H) , 1.74 (m, 4H) , 1.48 (s ancho, 2H) . CL/EM: Anal. Calculado para Ci3Hi7 02 : 219; encontrado: 220 (M+H) + .
Cap-15 Etapa 1: 2-Bromo-2-fenilacetato de (S) -1-feniletilo: A una mezcla de ácido a-bromofenilacético (10.75 g, 0.050 mol), (S) - ( - ) - 1-feniletanol (7.94 g, 0.065 mol) y DMAP (0.61 g, 5.0 mmol) en diclorometano seco (100 mi) se añadió EDCI sólido (12.46 g, 0.065 mol) todo de una vez. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente en Ar durante 18 horas y luego se diluyó con acetato de etilo, se lavó (H20 x 2, salmuera), se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró dando un aceite amarillo pálido. La cromatografía instantánea (Si02/ hexano-etilo acetato, 4:1) de este aceite proporcionó el compuesto del título (11.64 g, 73%) como un sólido blanco. RMN de H (400 MHz , CDC13) d 7.53-7.17 (m, 10H) , 5.95 (q, J = 6.6 Hz, 0.5H), 5.94 (q, J = 6.6 Hz, 0.5H), 5.41 (s, 0.5H), 5.39 (s, 0.5H), 1.58 (d, J = 6.6 Hz, 1.5H), 1.51 (d, J = 6.6 Hz, 1.5H) .
Etapa 2: (R) -2- ( 4 -hidroxi -4 -me ilpiperidin-1 - il ) -2-fenilacetato de (S) -1-feniletilo : A una solución de 2-bromo-2-fenilacetato de (S) -1-feniletilo (0.464 g, 1.45 mmól) en THF (8 mi) se añadió trietilamina (0.61 mi, 4.35 mmol) , seguido por yoduro de tetrabutilamonio (0.215 g, 0.58 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos y luego se añadió una solución de 4-metil-4-hidroxipiperidina (0.251 g, 2.18 mmol) en THF (2 mi) . La mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente y luego se calentó a 55-60 °C (temperatura de baño de aceite) durante 4 horas. La mezcla de reacción enfriada se diluyó entonces con acetato de etilo (30 mi) , se lavó (¾0 x2 , salmuera) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (0-60% de etilo acetato-hexano) , proporcionando primero el isómero (S,R) del compuesto del título (0.306 g, 60%) como un sólido blanco y luego el correspondiente isómero (S,S) (0.120 g, 23%), también como un sólido blanco. Isómero (S,R) : RMN de ? (CD3OD) d 7.51-7.45 (m, 2H) , 7.41-7.25 (m, 8H) , 5.85 (q, J = 6.6 Hz, 1H) , 4.05 (s, 1H) , 2.56-2.45 (m, 2H) , 2.41-2.29 (m, 2H) , 1.71-1.49 (m, 4H) , 1.38 (d, J = 6.6 Hz, 3H) , 1.18 (s, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C22H27N03 : 353; encontrado: 354 (M+H) + . Isómero (S,S): RMN de XH (CD3OD) d 7.41-7.30 (m, 5H) , 7.20-7.14 (m, 3H) , 7.06-7.00 (m, 2H) , 5.85 (q, J = 6.6 Hz, 1H) , 4.06 (s, 1H) , 2.70-2.60 (m, 1H) , 2.51 (dt, J" = 6.6 , 3.3 Hz, 1H) , 2.44-2.31 (m, 2H) , 1.75-1.65 (m, 1H) , 1.65-1.54 (m, 3H) , 1.50 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 1.20 (s, 3H) . CLEM : Anal. Calculado para C22H27 O3 : 353; encontrado: 354 (M+H) + .
Etapa 3: ácido (R) -2- (4-hidroxi-4-metilpiperidin-l-il) -2-fenilacético: A una solución de (R) -2- (4-hidroxi-4-metilpiperidin-l-il) -2-fenilacetato de (S) -1-feniletilo (0.185 g, 0.52 mmol) en diclorometano (3 mi) se añadió ácido trifluoracético (1 mi) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron seguidamente a vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 20 x 100mm; CH3C -H2O-TFA al 0.1%) dando el compuesto del título (como sal TFA) como un sólido azulado pálido (0.128 g, 98%) . CLEM: Anal. Calculado para Ci4H1903 : 249; encontrado: 250 (M+H) +.
Cap-16 Etapa 1: 2- (2-fluorofenil) acetato feniletilo: Una mezcla de ácido 2 - fluorofenilacético (5.45 g, 35.4 mmol) , (S) -1-feniletanol (5.62 g, 46.0 mmol) , EDCI (8.82 g, 46.0 mmol) y DMAP (0.561 g, 4.60 mmol) en CH2C12 (100 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. El solvente se concentró a continuación y el residuo se repartió con H20-acetato de etilo. Se separaron las fases y la fase acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo (2x) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron (H20, salmuera) , se secaron (Na2S0 ) , se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (BIOTAGE®/ 0-20% de acetato de etilo-hexano) proporcionando el compuesto del título como un aceite incoloro (8.38 g, 92%) . RMN de 1H (400 MHz , CD3OD) d 7.32 - 7.23 (m, 7H) , 7.10-7.04 (m, 2), 5.85 (q, J = 6.5 Hz, 1H) , 3.71 (s, 2H) , 1.48 (d, J = 6.5 Hz, 3H) .
Etapa 2: 2- (2-Fluorofenil) -2- (piperidin-1-il)acetato de (R) - ( (S) -1-feniletilo) : A una solución de 2- (2-fluorofenil) acetato de (S) -1-feniletilo (5.00 g, 19.4 mmol) en THF (1200 mi) a 0°C se añadió DBU (6.19 g, 40.7 mmol) y la solución se dejó calentar hasta temperatura ambiente mientras se agitaba durante 30 minutos. La solución se enfrió entonces hasta -78 °C y se añadió una solución de CBr4 (13.5 g, 40.7 mmol) en THF (100 mi) y la mezcla se dejó calentar hasta -10 °C y se agitó a esta temperatura durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivo con NH4C1 acuoso saturado y se separaron las fases. La fase acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo (2x) y las fases orgánicas combinadas se lavaron (H20, salmuera) , se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron a vacío. Al residuo se añadió piperidina (5.73 mi, 58.1 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Los volátiles se concentraron entonces a vacío y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (B IOTAGE® / 0-30% de éter di e t í 1 i co - hexano ) proporcionando una mezcla pura de diastereoisómeros (relación 2:1 por RMN de 1H) como un aceite amarillo (2.07 g, 31%) , junto con material de partida sin reaccionar (2.53 g, 51%) . Otra cromatografía de la mezcla diast ereomérica ( B IOTAGE® / 0-10% éter die t í 1 i co - tolueno ) proporcionó el compuesto del título como un aceite incoloro (0.737 g, 11%) . RMN de 1K (400 MHz , CD3OD) d 7.52 (ddd, J = 9.4, 7.6, 1.8 Hz, 1H) , 7.33 - 7.40 (m, 1) , 7.23 -7.23 (m, 4H) , 7.02 - 7.23 (m, 4H) , 5.86 (q, J = 6.6 Hz, 1H) , 4.45 (s, 1H) , 2.39 - 2.45 (m, 4H) , 1.52 -1.58 (m, 4H) , 1.40 - 1.42 (m, 1H) , 1.38 (d, J = 6.6 Hz, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C2iH24FN02: 341; encontrado: 342 (M+H)+.
Etapa 3: ácido (R) -2- (2-f luorof enil) -2- (piper idin- 1 - i 1 ) acé t ico : Una mezcla de 2- (2-f luorof eni 1 ) - 2 - (piperidin- 1 - i 1 ) acet ato de (R)-((S)-1-feniletilo) (0.737 g, 2.16 mmol) y Pd(OH)2 al 20%/C (0.070 g) en etanol (30 mi) se sometió a hidrogenac ión a temperatura ambiente y presión atmosférica (balón de H2) durante 2 horas. La solución se purgó .entonces con Ar , se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío. Esto proporcionó el compuesto del título como un sólido incoloro (0.503 g, 98%). RMN de 1H (400 MHz , CD30D) d 7.65 (ddd, J = 9.1, 7.6, 1.5 Hz, 1H) , 7.47-7.53 (m, 1H) , 7.21-7.30 (m, 2H) , 3.07-3.13 (m, 4H) , 1.84 (s ancho, 4H), 1.62 (s ancho, 2H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci3H16FN02 : 237; encontrado: 238 (M+H) + .
Cap -17 Etapa 1: ( R) - 2 - ( 4 - hidroxi - 4 - feni lpiperidin - 1 -i 1 ) - 2 - f eni lacetato de ( S ) - 1 - feni let i lo : A una solución de 2 -bromo - 2 - feni 1 acetato de (S)-l-feniletilo (1.50 g, 4.70 mmol) en THF (25 mi) se añadió trietilamina (1.31 mi, 9.42 mmol) , seguido por yoduro de t et rabut i 1 amonio (0.347 g, 0.94 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos y luego se añadió una solución de 4 - f eni 1 - 4 - hidroxi iper idina (1.00 g, 5.64 mmol) en THF (5 mi) . La mezcla se agitó durante 16 horas y luego se diluyó con acetato de etilo (100 mi) , se lavó (H20 x2 , salmuera) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. El residuo se purificó en una columna de gel de sílice (acetato de etilo 0 - 60 % - hexano ) proporcionando una mezcla aproximadamente 2:1 de diastereoisómeros , como se juzgó por RMN de 1H. La separación de esos isómeros se llevó a cabo usando cromatografía de fluido supercrítico (CHIRALCEL® OJ-H, 30 x 250mm; 20% etanol en C02 a 35 °C) , dando primero el isómero (R) del compuesto del título (0.534 g, 27%) como un aceite amarillo y luego el isómero (S) correspondiente (0.271 g, 14%) , también como un aceite amarillo. Isómero (S,R) : RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) d 7.55-7.47 (m, 4H) , 7.44-7.25 (m, 10H), 7.25-7.17 (m, 1H) , 5.88 (q, J = 6.6 Hz, 1H) , 4.12 (s, 1H) , 2.82-2.72 (m, 1H) , 2.64 (dt, J = 11.1, 2.5 Hz, 1H) , 2.58-2.52 (m, 1H) , 2.40 (dt, J = 11.1, 2.5 Hz, 1H) , 2.20 (dt, J = 12.1, 4.6 Hz, 1H) , 2.10 (dt, J = 12.1, 4.6 Hz, 1H) , 1.72-1.57 (m, 2H) , 1.53 (d, J = 6.5 Hz , 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C27H29NO3: 415; encontrado: 416 (M+H)+; Isómero (S,S) : RMN de 1K (400 MHz, CD3OD) d 7.55-7.48 (m, 2H) , 7.45-7.39 (m, 2H) , 7.38-7.30 (ra, 5H) , 7.25-7.13 (m, 4H) , 7.08-7.00 (m, 2H) , 5.88 (q, J = 6.6 Hz , 1H) , 4.12 (s, 1H) , 2.95-2.85 (m, 1H) , 2.68 (dt, J = 11.1, 2.5 Hz , 1H) , 2.57-2.52 (m, 1H) , 2.42 (dt, J" = 11.1, 2.5 Hz , 1H) , 2.25 (dt, J = 12.1, 4.6 Hz, 1H) , 2.12 (dt, J = 12.1, 4.6 Hz , 1H) , 1.73 (dd, J = 13.6, 3.0 Hz , 1H) , 1.64 (dd, J = 13.6., 3.0 Hz, 1H) , 1.40 (d, J" = 6.6 Hz , 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C27H29NO3: 415; encontrado: 416 (M+H)+.
Los ésteres siguientes se prepararon de una forma similar: Diastereómero 1 : RMN de XH (500 Hz, DMSO-d6) d ppm 1.36 (d, J"=6.41 Hz, 3H) 2.23 - 2.51 (m, 4H) 3.35 (s, 4H) 4.25 (s, 1H) 5.05 (s, 2H) 5.82 (d, J=6.71 Hz, 1H) 7.15 - 7.52 (m, 15H) . CLEM: Análisis calculado para: C28H30N2O4 458.22; Encontrado: 459.44 (M+H)+.
Diastereómero 2 : RMN de XH (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.45 (d, J=6.71 Hz, 3H) 2.27 - 2.44 (m, 4H) 3.39 (s, 4H) 4.23 (s, 1H) 5.06 (s, 2H) 5.83 (d, J=6.71 Hz, 1H) 7.12 (dd, J=6.41, 3.05 Hz, 2H) 7.19 - 7.27 (m, 3H) 7.27 - 7.44 (m, 10H) . CLEM: Análisis calculado para: C28H30N2O4 458.22; Encontrado: 459.44 (M+H) +.
Condiciones de SFC quiral para determinar el tiempo retención : Condición I Columna: Columna CHIRALPAK® AD-H, 4.62X50 mm, 5µpa solventes: 90% de C02 - metanol al 10% con DEA al 0.1% Temp: 35 °C Presión: 15 MPa Velocidad de flujo: 2.0 ml/min.
UV monitoreado a 220 nm Inyección: 1.0 mg/3 ml de metanol Condición II Columna: Columna CHIRALCEL® OD-H, 4.62X50 mm, 5µp? solventes: 90% de C02 - metanol al 10% con DEA al 0.1% Temp: 35 °C Presión: 15 MPa Velocidad de flujo: 2.0 ml/min.
UV monitoreado a 220 nm Inyección: 1.0 mg/ml de metanol Cap-17, Etapa 2: ácido (R) -2 - (4 -hidroxi -4 -fenilpiperidin-l-il) -2-fenilacético : A una solución de (R)-2-(4-hidroxi-4-fenilpiperidin-l-il) -2-fenilacetato de (S) -1-feniletilo (0.350 g, 0.84 mmol) en diclorometano (5 ml) se añadió ácido trifluoracético (1 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron seguidamente a vacío y el residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 20 x 100mm; CH3CN-H20-TFA al 0.1%) dando el compuesto del título (como sal TFA) como un sólido blanco (0.230 g, 88%). CLEM: Anal. Calculado para Ci9H21N03 : 311.15; encontrado: 312 (M+H) + .
Los siguientes ácidos carboxílicos se prepararon en forma ópticamente pura de una forma similar: Condiciones de CLEM para determinar el tiempo de retención Condición I Columna: PHENOMENEX® Luna 4.6 X 50 mm S10 % Inicial de B = 0 % Final de .B = 100 Tiempo de gradiente = 4 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud d onda = 220' solvente A = metanol al 10% - H20 al 90% - TFA al 0.1% solvente. B = metanol al 90% - H20 al 10% - TFA al 0.1% Condición II Columna: Waters-Sunfiré 4.6 X 50 mm S5 % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 2 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 solvente A = metanol al 10% - H20 al 90% - TFA al 0.1% solvente B = metanol al 90% - H20 al 10% - TFA al 0.1% Condición III Columna: PHENOMENEX® 10µ 3.0 X 50 mm % Inicial de B = 0 % Final de B = 100 Tiempo de gradiente = 2 min Velocidad de flujo = 4 ml/min Longitud de onda = 220 solvente A = metanol al 10% - H20 al 90' TFA al 0.1Í solvente B = metanol al 90% - H20 al 10' TFA al O.lí Cap-18 Etapa 1: 2- (4-piridil) -2-bromoacetato de (R,S)-etilo: A una solución de 4 -piridilacetato de etilo (1.00 g, 6.05 mmol) en THF seco (150 mi) a 0 °C en argón se añadió DBU (0.99 mi, 6.66 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se enfrió hasta -78 °C. A esta mezcla se añadió CBr4 (2.21 g, 6.66 mmol) y se continuó agitando a -78 °C durante 2 horas. Seguidamente la mezcla de reacción se inactivo con NH4C1 acuoso saturado y se separaron las fases. La fase orgánica se lavó (salmuera) , se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró a vacío. El aceite amarillo resultante se purificó inmediatamente por cromatografía instantánea (Si02/ hexano-acetato de etilo, 1:1) proporcionando el compuesto del título (1.40 g, 95%) como un aceite amarillo algo inestable. R de XH (400 MHz, CDC13) d 8.62 (dd, J" = 4.6, 1.8 Hz, 2H) , 7.45 (dd, J = 4.6, 1.8 Hz, 2H) , 5.24 (s, 1H) , 4.21-4.29 (m, 2H) , 1.28 (t, J" = 7.1 Hz, 3H) . CLEM : Anal. Calculado para C9Hi0BrNO2: 242, 244; encontrado: 243, 245 (M+H) + .
Etapa 2: 2- (4-piridil) -2- (?,?-dimetilamino) acetato de (R,S) -etilo: A una solución de 2- (4-piridil) -2-bromoacetato de (R,S) -etilo (1.40 g, 8.48 mmol) en DMF (10 mi) a temperatura ambiente se añadió dimetilamina (2 en THF, 8.5 mi, 17.0 mmol) . Después de completarse la reacción (que se juzgó por cromatografía en capa fina) los volátiles se eliminaron a vacío y el residuo se purificó por cromatografía instantánea (columna BIOTAGE®, 40+M Si02; 50%-100% de acetato de etilo-hexano) proporcionando el compuesto del título (0.539 g, 31%) como un aceite amarillo claro. RMN de 1H (400 MHz, CDC13) d 8.58 (d, J = 6.0 Hz, 2H) , 7.36 (d, J = 6.0 Hz, 2H) , 4.17 (m, 2H) , 3.92 (s, 1H) , 2.27 (s, 6H) , 1.22 (t, J = 7.0 Hz) . CLEM: Anal. Calculado para CnHi6N202 : 208; encontrado: 209 (M+H) + .
Etapa 3: ácido (R, S) -2- (4-piridil) -2- (N,N-dimetilamino) acético: A una solución de 2- (4-piridil) -2- (N,N-dimetilamino) acetato de (R,S) -etilo (0.200 g, 0.960 mmol) en una mezcla de THF-metanol-H20 (1:1:1, 6 mi) se añadió LiOH en polvo (0.120 g, 4.99 mmol) a temperatura ambiente. La solución se agitó durante 3 horas y luego se acidificó hasta pH 6 usando HCl 1N. La fase acuosa se lavó con acetato de etilo y luego se liofilizó dando el diclorhidrato del compuesto del título como un sólido amarillo (que contenía LiCl) . El producto se usó como tal en las posteriores etapas. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-de) d 8.49 (d, J = 5.7 Hz, 2H) , 7.34 (d, J = 5.7 Hz, 2H) , 3.56 (s, 1H) , 2.21 (s, 6H) .
Los siguientes ejemplos se prepararon de una forma similar usando el proceso descrito antes; Cap-37 Etapa 1; 2- (quinolin-3-il) -2- (N, N-dimetilamino) - acetato de (R,S) -etilo: Una mezcla de N, -dimetilaminoacetato de etilo (0.462 g, 3.54 mmol) , K3P04 (1.90 g, 8.95 mmol), Pd(t-Bu3P) 2 (0.090 g, 0.176 mmol) y tolueno (10 mi) se desgasificó con una corriente de burbujas de Ar durante 15 minutos. La mezcla de reacción se calentó entonces a 100 °C durante 12 horas, después de lo cual se enfrió hasta temperatura ambiente y se vertió en H20. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2x) y las fases orgánicas combinadas se lavaron (H20, salmuera) , se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo se purificó primero por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH3CN-H20-5 mM NH4OAc) y luego por cromatografía instantánea (Si02/ hexano-acetato de etilo, 1:1) proporcionando el compuesto del título (0.128 g, 17%) como un aceite naranja. RMN de XH (400 MHz, CDC13) d 8.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 8.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 8.03-8.01 (m, 2H) , 7.77 (ddd, J = 8.3, 6.8, 1.5 Hz, 1H) , 7.62 (ddd, J = 8.3 , 6.8, 1.5 Hz, 1H) , 4.35 (s, 1H) , 4.13 (m, 2H) , 2.22 (s, 6H) , 1.15 (t, J = 7.0 Hz, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C15H18N202 : 258; encontrado: 259 (M+H)+.
Etapa 2: Ácido (R,S) 2- (quinolin-3-il) -2- (N,N- dimetilamino) acético : Se calentó una mezcla de 2- (quinolin-3- il) -2- (?,?-dimetilamino) acetato de (R,S) -etilo (0.122 g, 0.472 mmol) y HCl 6M (3 mi) a 100 °C durante 12 horas. El solvente se eliminó a vacío proporcionando el diclorhidrato del compuesto del título (0.169 g, >100%) como una espuma amarillo claro. El material sin purificar se usó en las etapas siguientes sin purificación adicional. CLEM: Anal. Calculado para C13H1 N2O2 : 230; encontrado: 231 (M+H) + .
Cap-38 Cap-38 Etapa 1: 2- (dimetilamino) -2- (2-fluorofenil) acetato de (R) - ( (S) -1-feniletilo) y 2- (dimetilamino) -2- (2- fluorofenil) acetato de (S) - ( (S) -1-feniletil) : A una mezcla de ácido (RS) -2- (dimetilamino) -2- (2-fluorofenil) acético (2.60 g, 13.19 mmol), DMAP (0.209 g, 1.71 mmol) y (S) -1-feniletanol (2.09 g, 17.15 mmol) en CH2Cl2 (40 mi) se añadió EDCI (3.29 g, 17.15 mraol) y la mezcla se dejó agitando a temperatura ambiente durante 12 horas. El solvente se eliminó entonces a vacío y el residuo se repartió con acetato de etilo-H20. Se separaron las fases, la fase acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo (2x) y las fases orgánicas combinadas se lavaron (H20, salmuera) , se secaron (Na2S04), se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (BIOTAGE®/ 0-50% de éter dietílico-hexáno) . La mezcla diastereomérica pura resultante se separó entonces por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 30 x lOOmm; CH3CN-H2O-TFA al 0.1%) dando primero (R)-2-(dimetilamino) - 2 -( 2 - fluorofenil ) acetato de ( S ) - 1 - feneti lo (0.501 g, 13%) y luego ( S ) - 2 - (dimet ilamino) - 2 - ( 2 -fluorofenil ) -acetato de (S ) - 1 - feneti lo (0.727 g. 18%), ambas como sus sales TFA. isómero (S,R) : RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) d 7.65 - 7.70 (m, 1H) , 7.55-7.60 (ddd, J = 9.4, 8.1, 1.5 Hz, 1H) , 7.36-7.41 (m, 2H) , 7.28-7.34 (m, 5H) , 6.04 (q, J = 6.5 Hz, 1H) , 5.60 (s, 1H) , 2.84 (s, 6H) , 1.43 (d, J = 6.5 Hz , 3H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci8H2oFN02:, 301; encontrado: 302 (M+H)+; isómero (S,S): RMN de XH (400 MHz, CD3OD) d 7.58-7.63 (m, 1H) , 7.18-7.31 (m, 6H) , 7.00 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 2H) , 6.02 (q, J = 6.5 Hz, 1H) , 5.60 (s, 1H) , 2.88 (s, 6H) , 1.54 (d, J = 6.5 Hz , 3H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci8H20FNO2: 301; encontrado: 302 (M+H)+.
Etapa 2: ácido ( ) -2- (dimetilamino) -2- (2-fluorofenil) acético: Una mezcla de 2- (dimetilamino) -2- (2-fluorofenil) acetato de (R) - ( (S) -1-feniletilo) , sal TFA (1.25 g, 3.01 mmol) y 20% de Pd(0H)2/C (0.125 g) en etanol (30 mi) se sometió a hidrogenación a temperatura ambiente y presión atmosférica (balón de H2) durante 4 horas. La solución se purgó entonces con Ar, se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío. Esto dio el compuesto del título como un sólido incoloro (0.503 g, 98%). RMN de XH (400 MHz , CD3OD) d 7.53-7.63 (m, 2H) , 7.33-7.38 (m, 2H) , 5.36 (s, 1H) , 2.86 (s, 6H) . CLEM : Anal. Calculado para Ci0Hi2FNO2: 197; encontrado: 198 (M+H) + .
El isómero S se podía obtener a partir de 2- (dimetilamino) -2- (2-fluorofenil) acetato de (S) - ( (S) -1-feniletilo) , sal TFA de una forma similar.
Cap-39 cap-39 Una mezcla de (R) - (2 -clorofenil ) glicina (0.300 g, 1.62 mmol), formaldehído (solución acuosa al 35%, 0.80 mi, 3.23 mmol) y 20% de Pd(OH)2/C (0.050 g) se sometió a hidrogenación a temperatura ambiente y presión atmosférica (balón de H2) durante 4 horas. La solución se purgó entonces con Ar, se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Primesphere C-18, 30 x 100mm; CH3CN-H20-TFA al 0.1%) dando la sal TFA del compuesto del título ácido (R) -2- (dimetilamino) -2 - (2 -clorofenil) acético como un aceite incoloro (0.290 g, 55%) . RM de 1H (400 MHz , CD3OD) d 7.59-7.65 (m, 2H) , 7.45-7.53 (m, 2H) , 5.40 (s, 1H) , 2.87 (s, 6H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci0Hi2ClNO2 : 213; encontrado: 214 ( +H)+.
Cap-40 A una solución enfriada en hielo de (R)-(2- clorofenil) glicina (1.00 g, 5.38 mmol) y NaOH (0.862 g, 21.6 mmol) en H20 (5.5 mi) se añadió cloroformiato de metilo (1.00 mi, 13.5 mmol) gota a gota. La mezcla se dejó agitando a 0 °C durante 1 hora y luego se acidificó mediante la adición de HCl concentrado (2.5 mi) . La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2x) y la fase orgánica combinada se lavó (H20, salmuera) , se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró a vacío dando el compuesto del título ácido (R)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (2-clorofenil) acético como una espuma amarillo-naranja (1.31 g, 96%). RMN de XH (400 MHz, CD3OD) d 7.39 - 7.43 (m, 2H) , 7.29 - 7.31 (ra, 2H) , 5.69 (s, 1H) , 3.65 (s, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C10Hi0ClNO4 : 243 ; encontrado: 244 (M+H)+.
Cap-41 A una suspensión de ácido 2- (2- (clorometil) fenil) acético (2.00 g, 10.8 mmol) en THF (20 mi) se añadió morfolina (1.89 g, 21.7 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó entonces con acetato de etilo y se extrajo con H20 (2x) . La fase acuosa se liofilizó y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (BIOTAGE®/ 0-10% de metanol-CH2Cl2) dando el compuesto del título ácido 2- (2- (morfolinometil ) fenil) acético como un sólido incoloro (2.22 g, 87%). RMN de ¾ (400 MHz, CD30D) d 7.37-7.44 (m, 3H) , 7.29-7.33 (m, 1H) , 4.24 (s, 2H) , 3.83 (s ancho, 4H) , 3.68 (s, 2H) , 3.14 (s ancho, 4H) . CLEM: Anal. Calculado para C13H17N03 : 235; encontrado: 236 (M+H)+.
Los siguientes ejemplos se prepararon de igual modo usando el proceso descrito para Cap-41: Cap-45a Cap-45a Se añadió HMDS (1.85 mi, 8.77 mmol) a una suspensión de p-toluenosulfonato del ácido (R) -2-amino-2-fenilacético (2.83 g, 8.77 mmol) en CH2C12 (10 mi) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añadió isocianato de metilo (0.5 g, 8.77 mmol) en una porción continuando la agitación durante 30 minutos. La reacción se inactivo mediante adición de H20 (5 mi) y se filtró el precipitado resultante, se lavó con H20 y n-hexanos, y se secó a vacio. Se recuperó ácido (R) -2- ( 3 -metilureido) -2-fenilacético (1.5 g; 82 %) como un sólido blanco y se usó sin purificación adicional. RMN de 1H (500 MHz, DMS0-d5) d ppm 2.54 (d, J=4.88 Hz, 3H) 5.17 (d, J=l .93 Hz, 1H) 5.95 (q, .7=4.48 Hz, 1H) 6.66 (d, ,7=7.93 Hz , 1H) 7.26 - 7.38 (m, 5H) 12.67 (s, 1H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci0Hi2N2O3 208.08 encontrado 209.121 (M+H)+; HPLC PHENOMENEX® C-18 3.0 X 46 mm, 0 a 100% de B durante 2 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.1% de TFA, B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.1% de TFA, TR = 1.38 min, índice de homogeneidad 90 %.
Cap-46 cap-46 El producto deseado se preparó de conformidad con el proceso descrito para Cap-45a. RMN de H (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 0.96 (t, .7=7.17 Hz, 3H) 2.94 - 3.05 (m, 2H) 5.17 (d, J"=7.93 Hz, 1H) 6.05 (t, J"=5.19 Hz, 1H) 6.60 (d, .7=7.63 Hz , 1H) 7.26 - 7.38 (m, 5H) 12.68 (s, 1H) . CLEM: Anal. Calculado para CnH^C-s 222.10 encontrado 223.15 (M+H) + .
HPLC XTERRA® C-18 3.0 X 506 mm, 0 a 100% de B durante 2 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.2% H3P04/ B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.2% H3P04, TR = 0.87 min, índice de homogeneidad 90 %.
Cap-47 B Cap-47 Etapa 1: 2- (3 , 3-dimetilureido) -2-fenilacetato de (R) - tere-butilo : A una solución agitada de (R) -terc-butil-2-amino-2-fenilacetato (1.0 g, 4.10 mmol) y base de Hunig (1.79 mi, 10.25 mmol) en DMF (40 mi) se añadió cloruro de dimetilcarbamoilo (0.38 mi, 4.18 mmol) gota a gota durante 10 minutos. Después de agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, la reacción se concentró a presión reducida y el residuo resultante se disolvió en acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con H20, HCl ac . 1N y salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a presión .reducida. Se obtuvo 2- (3, 3-dimetilureido) -2-fenilacetato de (R) -tere-butilo como un sólido blanco (0.86 g; 75%) y se usó sin purificación posterior. RMN de 1H (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 1.33 (s, 9H) 2.82 (s, 6H) 5.17 (d, J=7.63 Hz, 1H) 6.55 (d, J=7.32 Hz, 1H) 7.24 - 7.41 (m, 5H) . CLEM: Anal. Calculado para C15H22 2O3 278.16 encontrado 279.23 (M+H) + ; HPLC PHENOMENEX® LUNA C-18 4.6 x 50 mm, 0 a 100% de B durante 4 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.1% de TFA, B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.1% de TFA, TR = 2.26 min, índice de homogeneidad 97%.
Etapa 2: ácido (R) - 2 - ( 3 , 3 -dimetilureido) - 2 -fenilacético : A una solución agitada de 2- (3,3-dimetilureido) - 2 -fenilacetato de ( (R) - tere-butilo (0.86 g, 3.10 mmol) en CH2C12 (250 mi) se añadió TFA (15 mi) gota a gota y la solución resultante se agitó a ta durante 3 horas. El compuesto deseado precipitó entonces en solución con una mezcla de EtOAC : Hexanos (5:20), se separó por filtración y se secó a presión reducida. Se aisló ácido (R) - 2 -( 3 , 3 -dimetilureido) - 2 - fenilacético como un sólido blanco (0.59g, 86%) y se usó sin purificación posterior. RMN de XH (500 MHz, DMS0-d6) d ppm 2.82 (s, 6H) 5.22 (d, J=7.32 Hz, 1H) 6.58 (d, J=7.32 Hz , 1H) 7.28 (t, J=l .17 Hz , 1H) 7.33 (t, J=7.32 Hz, 2H) 7.38 - 7.43 (m, 2H) 12.65 (s, 1H) . CLE : Anal. Calculado para C11H14N2O3 : 222.24; encontrado: 223.21 (M+H)+. HPLC XTERRA® C-18 3.0 X 50 mm, 0 a 100% de B durante 2 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.2% H3P04, B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.2% H3P0 , TR = 0.75 min, índice de homogeneidad 93%.
Cap-48 Etapa 1: 2- (3 -ciclopentilureido) -2-fenilacetato de (R) - tere-butilo : A una solución agitada de clorhidrato del ácido (R) -2-amino-2-fenilacético (1.0 g, 4.10 mmol) y base de Hunig (1.0 mi, 6.15 mmol) en DMF (15 mi) se añadió isocianato de ciclopentilo (0.46 mi, 4.10 mmol) gota a gota y durante 10 minutos . Después de agitar a temperatura ambiente durante 3 horas, la reacción se concentró a presión reducida y el residuo resultante se suspendió en acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con H20 y salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a presión reducida. Se obtuvo 2- (3- ciclopentilureido) -2-fenilacetato de (R) - tere-butilo como un aceite opaco (1.32 g; 100 %) y se usó sin purificación posterior. RMN de XH (500 MHz, CD3C1-D) d ppm 1.50 - 1.57 (m, 2H) 1.58 - 1.66 (m, .2H) 1.87 - 1.97 (m, 2H) 3.89 - 3.98 (m, 1H) 5.37 (s, 1H) 7.26 - 7.38 (m, 5H) . CLEM : Anal. Calculado para C^e^Os 318.19 encontrado 319.21 (M+H) + ; HPLC XTERRA® C-18 3.0 x 50 mm, 0 a 100% de B durante 4 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.1% de TFA, B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.1% de TFA, TR = 2.82 min, índice de homogeneidad 96%.
Etapa 2: Ácido ( R) - 2 - ( 3 - c iclopenti lureido ) -2 - f enilacético : A una solución agitada de 2- (3-ciclopentilureido) - 2 - fenilacetato de ( R ) - tere -but i lo (1.31 g, 4.10 mmol) en CH2C12 (25 mi) se añadió TFA (4 mi) y trietilsilano (1.64 ral; 10.3 mmol) gota a gota, y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Los componentes volátiles se eliminaron a presión reducida y el producto bruto se recristalizó en acetato de etilo/pentanos proporcionando ácido ( R) - 2 - ( 3 - c ic lopent i lure ido ) - 2 -fenilacético como un sólido blanco (0.69 g, 64%) . RMN de XH (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.17 - 1.35 (m, 2H) 1.42 - 1.52 (m, 2H) 1.53 - 1.64 (m, 2H) 1.67 - 1.80 (m, 2H) 3.75 - 3.89 (m, 1H) 5.17 (d, J"=7.93 Hz, 1H) 6.12 (d, J"=7.32 Hz, 1H) 6.48 (d, J"=7.93 Hz , 1H) 7.24 - 7.40 (m, 5H) 12.73 (s, 1H) . CLEM : Anal. Calculado para C14Hi8N203 : 262.31 ; encontrado: 263.15 (M+H)+. HPLC XTERRA® C-18 3.0 x 50 mm, 0 a 100% de B durante 2 minutos, tiempo de mantenimiento 1 minuto, A = 90% de agua, 10% de metanol, 0.2% H3P04, B = 10% de agua, 90% de metanol, 0.2% H3P04, TR = 1.24 min, índice de homogeneidad 100%.
Cap-49 cap-49 A una solución agitada de ácido 2- (bencilamino) acético (2.0 g, 12.1 mmol) en ácido fórmico (91 mi) se añadió formaldehído (6.94 mi, 93.2 mmol) . Después de cinco horas a 70 °C, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida hasta 20 mi y precipitó un sólido blanco. Después de filtrar, las aguas madres se recogieron y se concentró además a presión reducida proporcionando el producto bruto. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa (XTERRA® 30 X 100 mm , detección a 220 nm , Velocidad de flujo 35 ml/min, 0 a 35% de B durante 8 rain; A = 90% de agua, 10 % de metanol, 0.1% de TFA , B = 10% de agua, 90 % de metanol, 0.1% de TFA) proporcionó el compuesto del título ácido 2 - (bencil (metil ) -amino) acético como su sal TFA (723 mg , 33%) como una cera incolora. RMN de 1K (300 MHz, DMSO-d6) d ppm 2.75 (s, 3H) 4.04 (s, 2H) 4.34 (s, 2H) 7.29 - 7.68 (m, 5H) . CLEM : Análisis calculado para: Ci0Hi3NO2 179.09; Encontrado: 180.20 (M+H) + .
Cap-50 Cap-50 A una solución agitada de ácido 3-metil-2-(metilamino) utanoico (0.50 g, 3.81 mmol) en agua (30 mi) se añadió K2C03 (2.63 g, 19.1 mmol) y cloruro de bencilo (1.32 g, 11.4 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo (30 mi x 2) y la fase acuosa se concentró a presión reducida proporcionando el producto bruto que se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (XTERRA® 30 x 100mm, detección a 220 nm, Velocidad de flujo 40 ml/min, 20 a 80% de B durante 6 min; A = 90% de agua, 10 % de metanol, 0.1% de TFA, B = 10% de agua, 90 % de metanol, 0.1% de TFA) proporcionando ácido 2 - ( benc i 1 (met i 1 ) amino ) - 3 - met i lbutanoi co , sal TFA (126 mg, 19%) como una cera incolora. RMN de 1H (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 0.98 (d, 3H) 1.07 (d, 3H) 2.33 - 2.48 (m, 1H) 2.54 - 2.78 (m, 3H) 3.69 (s, 1H) 4.24 (s, 2H) 7.29 - 7.65 (m, 5H) . CLEM : Análisis calculado para: Ci3Hi9 02 221.14; Encontrado: 222.28 (M+H)+.
Cap-51 Ácido (S) - 2 - (metoxicarboni lamino) - 3 - met i lbutanoico Se añadió Na2C03 (1.83g, 17.2 mmol) a una solución de NaOH (33 mi de 1M/H20, 33 mmol) de L-valina (3.9 g, 33.29 mmol) y la solución resultante se enfrió con baño de hielo-agua. Se añadió gota a gota durante 15 minutos cloroformiato de metilo (2,8 mi, 36.1 mmol) , se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3.25 horas. La mezcla de reacción se lavó con éter (50 mi, 3x) , y la fase acuosa se enfrió con un baño de hielo-agua y se acidificó con HC1 concentrado hasta un pH de 1-2, y se extrajo con CH2C12 (50 mi, 3x) . La fase orgánica se secó (MgS04) y se evaporó a vacío proporcionando Cap-51 como un sólido blanco (6 g) . RMN de 1H para el rotámero dominante (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : 12.54 (s, 1H), 7.33 (d, J = 8.6, 1H) , 3.84 (dd, J = 8.4, 6.0, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.03 (m, 1H) , 0.87 (m, 6H) . E AR : Anal. Calculado para [M+H]+ C7H14 O4 : 176.0923; encontrado 176.0922.
Cap 51 (ruta alternativa) Ácido (S) -metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico Se añadió DIEA (137.5 mi, 0.766 mol) a una suspensión de clorhidrato de 2-amino-3-metilbutanoato de (S) -tere-butilo (75.0 g, 0.357 mol) en THF (900 mi), y la mezcla se enfrió hasta 0 °C (baño de hielo/agua) . Se añadió gota a gota durante 45 minutos cloroformiato de metilo (29.0 mi, 0.375 mol), se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla heterogénea se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se repartió entre EtOAc y agua (1 litro de cada uno) . La fase orgánica se lavó con H20 (1 1) y salmuera (1 1) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a presión reducida. El material bruto se hizo pasar a través de una almohadilla corto de gel de sílice (1 kg) , eluyendo con hexanos (4 1) y EtOAc : hexanos 15:85 (4 1) proporcionando 2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoato de (S) - tere-butilo como un aceite transparente (82.0 g, 99% de rendimiento) . RMN de XH (500 MHz, DMS0-d6, d = 2.5 ppm) 7.34 (d, J = 8.6, 1 H) , 3.77 (dd, J = 8.6, 6.1, 1 H) , 3.53 (s, 3 H) , 1.94 - 2.05 (m, 1 H) , 1.39 (s, 9 H) , 0.83 - 0.92 (m, 6 H) . RMN de 13C (126 MHz , DMSO-d6, d = 39.2 ppm) 170.92, 156.84, 80.38, 60.00, 51.34, 29.76, 27.62, 18.92, 17.95, CL/EM: [M+Na] + 254.17.
Se añadieron ácido trif luoroacét ico (343 mi, 4.62 mol) y Et3SiH (142 mi, 0.887 mol) secuenc ialment e a una solución de 2 - (metoxi carboni lamino ) - 3 -rae i lbutanoato de ( S ) - t ere -but i 1o (82.0 g, 0.355 mol) en CH2C12 ( 675 mi) , y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h . El componente volátil se eliminó a presión reducida y el aceite resultante se trituró con éter d'e petróleo (600 mi) proporcionando un sólido blanco, que se filtró y se lavó con hexanos ( 500 mi) y éter de petróleo (500 mi) . La recristalización en EtOAc/éter de petróleo proporcionó Cap-51 como cristales a modo de escamas blancos (54.8 g, 88 % de rendimiento) . PF = 108.5-109.5 °C. RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6, d = 2.5 ppm) 12.52 (s, 1 H) , 7.31 (d, J = 8.6, 1 H), 3.83 (dd, «7 = 8.6, 6.1, 1 H) , 3.53 (s, 3 H), 1.94 - 2.07 (m, 1 H), 0.86 (dd, J = 8.9. 7.0, 6 H) . RMN de 13C (.126 MHz, DMSO-d6, d = 39.2 ppm) 173.30, 156.94, 59.48, 51.37, 29.52, 19.15, 17.98, CL/EM: [M+H] + = 176.11, Análisis calculado para C7H13N04 : C, 47.99 ; H, 7. 8; N, 7.99. Encontrado: C, 48.17 H, 7.55; N, 7.99. Rotación óptica: [oc]D = -4.16 (12.02 mg/ml ; MeOH) . Pureza óptica: >99.5 % ee . Nota: la valoración de la pureza óptica se realizó en el derivado éster metílico de Cap-51, que se preparó según un protocolo de esteri f icación normalizado en TMSCHN2 ( benceno/MeOH ) . Condiciones del análisis de HPLC : columna, CHIRALPAK® AD-H (4.6 x 250mm, 5µp?) ; solvente, heptano al 95%/IPA al 5% (isocrático) ; velocidad de flujo, 1 ml/min; temperatura, 35 ° C ; UV monitoreado a 205 nm .
[Nota: Cap 51 también se podía adquirir de Flamm.] Cap-52 (Igual que Cap-12) Ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino)propanoico Cap-52 se sintetizó a partir de L-alanina de conformidad con el proceso descrito para la síntesis de Cap-51, Con fines caracterizadores , se purificó una porción del material bruto por una HPLC de fase inversa (H20/metanol/TFA) proporcionando Cap-52 como un aceite incoloro viscoso. RMN de ? (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 Hz) : 12.49 (s ancho, 1H) , 7.43 (d, J = 7.3, 0.88H), 7.09 (s ancho aparente, 0.12H) , 3.97 (m, 1H) , 3.53 (s, 3H) , 1.25 (d, J = 7.3, 3H) .
Cap-53 a Cap- 64 Cap-53 a Cap-64 se prepararon a partir de materiales partida apropiados de conformidad con el proceso descrito para la síntesis de Cap-51, con las modificaciones indicadas si las hubiera.
Cap- 65 Se añadió cloroformiato de metilo (0.65 mi, 8.39 mmol) gota a gota durante 5 minutos a una mezcla enfriada (hielo-agua) de Na2C03 (0.449 g, 4.23 mmol), NaOH (8.2 mi de 1M/H20, 8.2 mmol) y ácido (3) -2-amino-3-hidroxi-3-metilbutanoico (1.04 g, 7.81 mmol) . La mezcla de reacción se agitó durante 45 min, y luego se retiró el baño de enfriamiento y se continuó agitando durante otras 3.75 horas. La mezcla de reacción se lavó con CH2C12, y la fase acuosa se enfrió con baño de hielo-agua y se acidificó con HCl concentrado hasta una región de pH de 1-2, El componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se suspendió en una mezcla 2:1 de MeOH/CH2Cl2 (15 mi) y se filtró, y el filtrado se sometió a evaporación rotativa proporcionando Cap-65 como una espuma semiviscosa blanca (1.236 g) . RMN de 1H (DMSO-d6; d = 2.5 ppm, 400 MHz) : 6 6.94 (d, J = 8.5, 0.9 H) , 6.53 (s ancho, 0.1H) , 3.89 (d, J = 8.8, 1H) , 2.94 (s, 3H) , 1.15 (s, 3H) , 1.13 (s, 3H) .
Cap-66. y -67 se prepararon a partir de materiales de partida disponibles comercialmente usando el proceso descrito para la síntesis de Cap-65.
Cap-66 RMN de XH (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 12.58 (s ancho, 1H) , 7.07 (d, J = 8.3, 0.13H), 6.81 (d, J = 8.8, 0.67H), 4.10-4.02 (m, 1.15H), 3.91 (dd, J = 9.1, 3.5, 0.85H), 3.56 (s, 3H) , 1.09 (d, J" = 6.2, 3H) . [Nota: solo se indican las señales dominantes de NH] Cap- 67 RMN de XH (DMS0-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz): 12.51 (s ancho, 1H) , 7.25 (d, J = 8.4, 0.75H), 7.12 (d ancho, J = 0.4, 0.05H), 6.86 (s ancho, 0.08H), 3.95-3.85 (m, 2H) , 3.54 (s, 3H) , 1.08 (d, J" = 6.3, 3H) . [Nota: solo se indican las señales dominantes de NH] Cap- 68 Se añadió cloroformiato de metilo (0.38 mi, 4.9 mmol) gota a gota a una mezcla de NaOH 1N (ac) (9.0 mi, 9.0 mmol) NaHC03 1M (ac) (9.0 mi, 9.0 mol) , éster ß-bencílico del ácido L-aspártico (1.0 g, 4.5 mmol) y dioxano (9 mi) . La mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 3 horas, y luego se lavó con acetato de etilo (50 mi, 3x) . La fase acuosa se acidificó con HCl 12N hasta un pH ~ 1-2, y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mi) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron a vacío proporcionando Cap-68 como un aceite amarillo claro (1.37g,-la masa es superior al rendimiento teórico, y el producto se usó sin purificación adicional) . RMN de XK (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : d 12.88 (s ancho, 1H) , 7.55 (d, J = 8.5, 1H) , 7.40-7.32 (m, 5H) , 5.13 (d, J = 12.8, 1H) , 5.10 (d, J = 12.9, 1H) , 4.42-4.38 (m, 1H) , 3.55 (s, 3H) , 2.87 (dd, J = 16.2, 5.5, 1H) , 2.71 (dd, J =16.2, 8.3, 1H) . CL (Cond. II) : TR = 1.90 min; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + Ci3Hi6N06 : 282.10; encontrado 282.12.
Cap- 69a y Cap-69b Cap-69a: (R)-enantiómero Cap-69b: (S)-enantiómero añadió NaCNBH3 (2.416 g, 36.5 mmol) en lot una solución acuosa enfriada (~15°C) (17 ml)/MeOH (10 mi) de alanina (1.338 g, 15.0 mmol) . Unos pocos minutos después se añadió gota a gota durante 4 minutos acetaldehído (4.0 mi, 71.3 mmol), se retiró entonces el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 6 horas. Se añadió más acetaldehído (4.0 mi) y la reacción se agitó durante 2 horas . Se añadió HCl concentrado lentamente a la mezcla de reacción hasta que el pH alcanzó ~ 1.5, y la mezcla resultante se calentó durante 1 hora a 40°C. La mayoría del componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se purificó con una resina de intercambio iónico DOWEX® 50 X8-100 (la columna se lavó con agua y el compuesto se eluyó con NH4OH diluido, preparado mezclando 18 mi de NH4OH y 282 mi de agua) proporcionando Cap-69 (2.0 g) como un sólido higroscópico blando blanquecino. RMN de XH (DMSO-d6) d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 3.44 (q, J = 7.1, 1H) , 2.99-2.90 2H) , 2.89-2.80 (m, 2H) , 1.23 (d, J = 7.1, 3H) , 1.13 (t, 7.3, 6H) .
Cap-70 y Cap-74x Cap-70 a Cap-74x se prepararon de conformidad con el proceso descrito para la síntesis de Cap-69 usando materiales de partida apropiados.
Cap- 75 apa a Se añadió NaBH3CN (1.6 g, 25.5 mmol) a una solución enfriada (baño de hielo/agua) en agua (25 ml)/metanol (15 mi) de H-D-Ser-OBzl HCl (2.0 g, 8.6 mmol). Se añadió acetaldehído (1.5 mi, 12.5 mmol) gota a gota durante 5 min, se retiró el baño de enfriamiento, y la mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. La reacción se inactivo cuidadosamente con HCl 12N y se concentró a vacío. El residuo se disolvió en agua y se purificó con una HPLC de fase inversa (MeOH/H20/TFA) proporcionando la sal TFA de 2- (dietilamino) -3 -hidroxipropanoato de (R) -bencilo como un aceite incoloro viscoso (1.9 g) . RMN de K (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 Hz) : d 9.73 (s ancho, 1H) , 7.52-7.36 (m, 5H) , 5.32 (d, J = 12.2, 1H) , 5.27 (d, J" = 12.5, 1H) , 4.54-4.32 (m, 1H) , 4.05-3.97 (m, 2H) , 3.43-3.21 (m, 4H) , 1.23 (t, J = 7.2, 6H) . CL/EM (Cond. II): TR = 1.38 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C14H22NO3 : 252.16; encontrado 252.19.
Cap- 75 Se añadió NaH (0.0727 g, 1.82 mmol , 60%) a una solución enfriada (hielo-agua) en THF (3.0 mi) de la sal TFA de 2- (dietilamino) -3-hidroxipropanoato de (R) -bencilo (0.3019 g, 0.8264 mmol) preparada antes, y la mezcla se agitó durante 15 min. Se añadió yoduro de metilo (56 µ?, 0.90 mmol) y se continuó agitando durante 18 horas dejando que el baño se descongelara hasta condiciones ambiente. La reacción se inactivo con agua y se cargó en un cartucho MCX preacondicionado con MeOH (6 g) y se lavó con metanol seguido por elución del compuesto con NH3 2N/Metanol . La eliminación del componente volátil a vacío proporcionó Cap-75, contaminado con ácido (R) -2- (dietilamino) -3-hidroxipropanoico, como un semisólido amarillo (100 mg) . El producto se usó como tal sin purificación adicional .
Cap- 76 Se añadió NaCNBH3 (1.-60 g, 24.2 mmol) en cargas a una solución enfriada (-15 °C) en agua/MeOH (12 mi cada uno) de ácido (S) -4-amino-2- ( terc-butoxicarbonilamino) butanoico (2.17 g, 9.94 mmol) . Unos pocos minutos después se añadió acetaldehido (2.7 mi, 48.1 mmol) gota a gota durante 2 min, se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 3.5 horas. Se añadió más acetaldehído (2.7 mi, 48.1 mmol) y la reacción se agitó durante 20.5 horas. Se eliminó a vacío la mayoría del componente eOH, y la mezcla restante se trató con HC1 concentrado hasta que su pH llegó a ~ 1.0 y luego se .calentó durante 2 horas a 40 °C. El componente volátil se eliminó a vacío, y el residuo se trató con HCl 4 M/dioxano (20 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 7.5 horas. El componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se purificó con resina de intercambio iónico DOWEX® .50WX8-100 (la columna se lavó con agua y el compuesto se eluyó con NH4OH diluido, preparado a partir de 18 mi de NH40H y 282 mi de agua) proporcionando el intermediario ácido (S) -2 -amino-4 - (dietilamino) butanoico como un sólido blanquecino (1.73 g) .
Se añadió cloroformiato de metilo (0.36 mi, 4.65 mmol) gota a gota durante 11 min a una mezcla enfriada (hielo-agua) de Na2C03 (0.243 g, 2.29 mmol), NaOH (4.6 mi de 1M/H20, 4.6 mmol) y el producto anterior (802.4 mg) . La mezcla de reacción se agitó durante 55 min, y luego se retiró el baño de enfriamiento y se continuó agitando durante otras 5.25 horas. La mezcla de reacción se diluyó con un volumen igual de agua y se lavó con CH2C12 (30 mi, 2x) , y la fase acuosa se enfrió con baño de hielo-agua y se acidificó con HCl concentrado hasta un pH en torno a 2, El componente volátil se eliminó a vacío y el material bruto se desbasificó con resina MCX (6.0g; la columna se lavó con agua, y la muestra se eluyó con NH3 2.0 M/MeOH) proporcionando Cap-16 impuro como un sólido blanquecino (704 mg) . RMN de ""? (MeOH-d4, d = 3.29 ppm, 400 MHz) : d 3.99 (dd, J = 7.5, 4.7, 1H) , 3.62 (s, 3H) , 3.25-3.06 (m, 6H) , 2.18-2.09 (m, 1H) , 2.04-1.96 (m, 1H) , 1.28 (t, J" = 7.3, 6H) . CL/EM : Anal. Calculado para [M+H]+ CioH2iN204: 233.15; encontrado 233.24.
Cap-77a y -77b Cap-77a: enantiómero-1 Cap-77b: enantiómero-2 La síntesis de Cap-?? se llevó a cabo de conformidad con el proceso descrito para Cap-? usando 7-azabiciclo [2.2.1] heptano para la etapa de desplazamiento SN2, y efectuando la separación estereoisomérica del intermediario 2- (7-azabiciclo [2.2.1] heptan-7-il) -2-fenilacetato de bencilo usando las siguientes condiciones: el intermediario (303.7 mg) se disolvió en etanol, y la solución resultante se inyectó en una columna HPLC quiral (columna Chiracel AD-H, 30 x 250 mm, 5 um) eluyendo con 90% de CO2-10% de EtOH a 70 ml/min, y una temperatura de 35 °C proporcionando 124.5 mg de estereoisómero-1 y 133.8 mg de estereoisómero-2. Estos ésteres bencílicos se sometieron a hidrogenación de conformidad con la preparación de Cap-? proporcionando Cap 77: RM de K (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 7.55 (m, 2H) 7.38-7.30 (m, 3H) , 4.16 (s, 1H) , 3.54 (s ancho aparente, 2H) 2.08-1.88 (m, 4 H) , 1.57-1.46 (m, 4H) . CL (Cond. I) : TR 0.67 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci4Hi8 02 : 232.13 encontrado 232.18, EMAR : Anal. Calculado para [M+H] + C14Hi8N02 232.1338; encontrado 232.1340, Se añadió NaCNBH3 (0.5828 g, 9.27 mmol) a una mezcla de la sal HC1 de ácido {R) -2- (etilamino) -2-fenilacético (un intermediario en la síntesis de Cap-3; 0.9923 mg, 4.60 mmol) y ( 1 -etoxiciclopropoxi ) trimetilsilano (1.640 g, 9.40 mmol) en MeOH (10 mi), y se calentó la mezcla semiheterogénea a 50 °C con un baño de aceite durante 20 horas. Se añadieron más (1-etoxiciclopropoxi) trimetilsilano (150 mg, 0.86 mmol) y NaCNBH3 (52 mg, 0.827 mmol) y la mezcla de reacción se calentó otras 3.5 horas. Se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y se acidificó ~ pH entorno a 2 con HCl concentrado, y la mezcla se filtró y el filtrado se evaporó en un evaporador rotatorio. El material bruto resultante se suspendió en i-PrOH (6 mi) y se calentó para efectuar la disolución y la parte no disuelta se separó por filtración y el filtrado se concentró a vacío. Se purificó aproximadamente 1/3 del material bruto resultante con una HPLC de fase inversa (H20/MeOH/TFA) proporcionando la sal TFA de Cap-18 como un aceite incoloro viscoso (353 mg) . RMN de XH (DMSO-d6, 6 = 2.5 ppm, 400 MHz; después de intercambio de D20) : d 7.56-7.49 (m, 5H) , 5.35 -(S, 1H) , 3.35 (m, 1H) , 3.06 (s ancho aparente, 1H) , 2.66 (m, 1H) , 1.26 (t, J = 7.3, 3H) , 0.92 (m, 1H) , 0.83-0.44 (m, 3H) . CL (Cond. I) : TR = 0.64 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci3Hi8 02 : 220.13; encontrado 220.21, EMAR: Anal. Calculado para [M+H] + C13H18N02 : 220.1338; encontrado 220.1343.
Cap- 79 Se burbujeó ozono a través de una solución enfriada (-78 °C) en CH2Cl2 (5.0 mi) de Cap-55 (369 mg, 2.13 mmol) durante aproximadamente 50 min hasta que la mezcla de reacción alcanzó un tinte de color azul. Se añadió Me2S (10 gotas de pipeta) y la mezcla de reacción se agitó durante 35 min. Se reemplazó el baño de -78 °C con un baño a -10 °C y se continuó agitando durante otros 30 min, y luego se eliminó el componente volátil a vacío proporcionando un aceite viscoso incoloro.
Se añadió NaBH3CN (149 mg , 2.25 mmol) a una solución en MeOH (5.0 mi) del material bruto anterior y morfolina (500 µ?, 5.72 mmol) y la mezcla se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas. Se enfrió hasta temperatura de hielo-agua y se trató con HCl .concentrado para llevar el pH a -2.0, y luego se agitó durante 2.5 horas. El componente volátil se eliminó a vacío, y el residuo se purificó con una combinación de resina MCX (lavado con MeOH; elución con NH3 2.0 N/MeOH) y una HPLC de fase inversa. (H20/MeOH/TFA) proporcionando Cap-19 que contenía una cantidad desconocida de morfolina.
Con el fin de consumir la morfolina contaminante, se disolvió el material anterior en CH2C12 (1.5 mi) y se trató con Et3N (0.27 mi, 1.94 mmol) seguido por anhídrido acético (0.10 mi, 1.06 mmol) y se agitó en condiciones ambientales durante 18 horas. Se añadieron THF (1.0 mi) y H20 (0.5 mi) y se continuó agitando durante 1.5 horas. El componente volátil se eliminó a vacío, y el residuo resultante se hizo pasar a través de resina MCX (lavado con MeOH; elución con NH3 2.0 N/MeOH) proporcionando Cap - 79 impuro como un aceite viscoso marrón, que se usó para la etapa siguiente sin purificación adicional.
Cap-80a y Cap- Cap-80a: S/S- diastereómero Cap-80b: S/R- diastereómero añadió SOCl2 (6.60 mi, 90.5 mmol) gota a got durante 15 min a una mezcla enfriada (hielo-agua) de ácido (S) -3-amino-4- (benciloxi) -4 -oxobutanoico (10.04g, 44.98 mmol) y MeOH (300 mi) , se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó en condiciones ambientales durante 29 horas. Se eliminó la mayor parte del componente volátil a vacío y el residuo se repartió cuidadosamente entre EtOAc (150 mi) y solución saturada de NaHC03; La fase acuosa se extrajo con EtOAc (150 mi, 2x) , y la fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío proporcionando 4-metil-2-aminosuccinato de (S) -1-bencilo como un aceite incoloro (9.706g). RMN de ¾ (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) : 5 7.40-7.32 (m, 5H) , 5.11 (s, 2H) , 3.72 (t aparente, J = 6.6, 1H) , 3.55 (s, 3H) , 2.68 (dd, J = 15.9, 6.3, 1H) , 2.58 (dd, J = 15.9, 6.8, 1H) , 1.96 (s, 2H) . CL (Cond. I) : TR = 0.90 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + Ci2H16N04: 238.11; encontrado 238.22. añadió Pb(N03)2 (6.06 g, 18.3 mmol) durante minuto a una solución en CH2C12 (80 mi) de 4-metil-2 aminosuccinato de (S) -1-bencilo (4.50 g, 19.0 mmol), 9-bromo 9-fenil-9H-fluoreno (6.44 g, 20.0 mmol) y Et3N (3.0 ml , 21.5 mmol) y la mezcla heterogénea se agitó en condiciones ambientales durante 48 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se trató con MgS04 y se filtró de nuevo y el filtrado final se concentró. El material bruto resultante se sometió a una purificación en BIOTAGE® (350 g gel de sílice, elución con CH2C12) proporcionando 4-metil 2 - ( 9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) succinato de (S) -1-bencilo como aceite incoloro muy viscoso (7.93 g) . RMN de 1H (DMSO-d6, 5 = 2.5 ppm, 400 MHz) : d 7.82 (m, 2H) , 7.39-7.13 (m, 16H) , 4.71 (d, J = 12.4, 1H) , 4.51 (d, J = 12.6, 1H) , 3.78 (d, J = 9.1, H) , 3.50 (s, 3H) , 2.99 (m, 1H) , 2.50-2.41 (m, 2H, parcialmente traslapado con solvente). CL (Cond. I): TR = 2.16 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C31H28 O4 : 478.20; encontrado 478.19.
Se añadió LiHMDS (9.2 ml de 1.0 M/THF, 9.2 mmol) gota a gota durante 10 min a una solución enfriada (-78 °C) THF (50 ml) de 4-metil 2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) succinato de (S) -1-bencilo (3.907 g, 8.18 mmol) y se agitó durante -1 horas. Se añadió Mel (0.57 ml , 9.2 mmol) gota a gota durante 8 min a la mezcla y se continuó. agitando durante 16.5 horas dejando que el baño de enfriamiento se descongelara hasta temperatura ambiente. Después de inactivar con solución saturada de NH4C1 (5 ml) , se eliminó a vacío la mayor parte del componente orgánico y el residuo se repartió entre CH2C12 (100 mi) y agua (40 mi) . La fase orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío, y el material bruto resultante se purificó con un BIOTAGE® (350 g gel de sílice; 25% de EtOAc/hexanos) proporcionando 3.65 g de una mezcla de diastereoisómeros 2S/3S y 2S/3R de 4-metil 3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) succinato de 1-bencilo en una relación -1.0:0.65 (RMN de 1H) . La estereoquímica del isómero dominante no se determinó en este paso y la mezcla se sometió a la etapa siguiente sin separación. Datos parciales de RMN de XK (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) : Diastereómero mayoritario, d 4.39 (d, J = 12.3, 1H de CH2) , 3.33 (s, 3H, traslapado con señal de H20) , 3.50 (d, J = 10.9, H) , 1.13 (d, J = 7.1, 3H) ; Diastereómero minoritario, 6 4.27 (d, J =12.3, 1H de CH2) , 3.76 (d, J = 10.9, NH) , 3.64 (s, 3H) , 0.77 (d, J = 7.0, 3H) . CL (Cond. I) : TR = 2.19 min; CL/EM : Anal. Calculado para [M+H] + C32H30NO4: 492.22; encontrado 492.15.
Se añadió hidruro de diisobutilaluminio (20.57 mi de 1.0 M en hexanos, 20.57 mmol) gota a gota durante 10 min a una solución enfriada (-78 °C) en THF (120 mi) de 4-metil-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) succinato de (2S) -1-bencilo (3.37 g, 6.86 mmol) preparado antes y se agitó a -78 °C durante 20 horas. La mezcla de reacción se separó del baño de enfriamiento y se vertió rápidamente en H3PO4 ~1M/H20 (250 mi) con agitación y la mezcla se extrajo con éter (100 mi, 2x) . La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío. Se preparó una malla de gel de sílice del material bruto y se sometió a cromatografía (25% de EtOAc/hexanos ; elución por gravedad) proporcionando 1.1 g de 4-hidroxi-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino)butanoato de ( 2S , 3S) -bencilo, contaminado con alcohol bencílico, como un aceite incoloro viscoso y 4-hidroxi-3-metil-2- ( 9 - fenil - 9H- fluoren- 9 - ilamino) butanoato de (2S, 3R) -bencilo que contenía el estereoisómero (2S,3R) como una impureza. La muestra anterior se volvió a someter a las mismas condiciones de purificación de cromatografía en columna proporcionando 750 mg de material purificado como una espuma blanca. [Nota: el isómero (2S, 3S) eluye antes que el isómero (2S,3R) en las condiciones anteriores] . Isómero (2S, 3S) : R N de H (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) : 7.81 (m, 2H) , 7.39-7.08 (m, 16H) , 4.67 (d, J = 12.3, 1H) , 4.43 (d, J = 12.4, 1H) , 4.21 (t aparente, J" = 5.2, OH), 3.22 (d, J = 10.1, NH) , 3.17 (m, 1H) , 3.08 (m, 1H) , -2.5 (m, 1H, traslapado con la señal del solvente), 1.58 (m, 1H) , 0.88 (d, J = 6.8, 3H) . CL (Cond. I): TR = 2.00 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H]+ C31H3oN03: 464.45; encontrado 464.22, Isómero (2S, 3R) : RMN de XH (DMS0-d6, 6 = 2.5 ppm, 400 MHz) : 7.81 (d, J = 7.5, 2H) , 7.39-7.10 (m, 16H) , 4.63 (d, J= 12.1, 1H) , 4.50 (t aparente, J" = 4.9, 1H) , 4.32 (d, J = 12.1, 1H) , 3.59-3.53 (m, 2H) , 3.23 (m, 1H) , 2.44 (dd, J = 9.0, 8.3, 1H) , 1.70 (m, 1H) , 0.57 (d, J" = 6.8, 3H) . CL (Cond. I) : TR = 1.92 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C31H30 O3 : 464.45; encontrado 464.52.
Las asignaciones estereoquímicas relativas de los productos de reducción con DIBAL se hicieron basándose en estudios NOE llevados a cabo en derivados lactona preparados a partir de cada isómero usando el siguiente protocolo: Se añadió LiHMDS (50 µ? de 1.0 M/THF, 0.05 mmol) a una solución enfriada (hielo-agua) en THF (2.0 mi) de 4-hidroxi-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S , 3S) -bencilo (62.7 mg, 0.135 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura similar durante ~2 horas. El componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se repartió entre CH2C12 (30 mi) , agua (20 mi) y solución acuosa saturada de NHC1 (1 mi) . La fase orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío, y el material bruto resultante se sometió a una purificación BIOTAGE® (40 g gel de sílice; 10-15% de EtOAc/hexanos) proporcionando (3S, 4S) -4-metil-3- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) dihidrofuran-2 (3H) -ona como una película incolora de sólido (28.1 mg) . Se elaboró 4-hidroxi-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S , 3R) -bencilo de forma similar a . (3S, 4R) -4-metil-3- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) dihidrofuran-2 (3H) -on . Isómero (3S, 4S) -lactona : RMN de XH (DMSO-de, d = 2.5 ppm, 400 MHz) , 7.83 (d, J = 7.5, 2H) , 7.46-7.17 (m, 11H) , 4.14 (t aparente, J = 8.3, 1H) , 3.60 (d, J = 5.8, NH) , 3.45 (t aparente, J = 9.2, 1H) , -2.47 (m, 1H, parcialmente traslapado con la señal del solvente), 2.16 (m, 1H) , 0.27 (d, J = 6.6, 3H) . CL (Cond. I): TR = 1.98 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+Na] + C24H2i a02 : 378.15; encontrado 378.42, Isómero (3S, 4R) -lactona: RMN de ?? (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) , 7.89 (d, J = 7.6, 1H) , 7.85 (d, J = 7.3, 1H) , 7.46-7.20 (m, 11H) , 3.95 (dd, J = 9.1, 4.8, 1H) , 3.76 (d, J = 8.8, 1H) , 2.96 (d, J = 3.0, H) , 2.92 (dd, J" = 6.8, 3, NCH) , 1.55 (m, 1H) , 0.97 (d, J = 7.0, 3H) . CL (Cond. I): TR = 2.03 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+Na] + C24H2i a02: 378.15; encontrado 378.49.
Se añadieron TBDEM-Cl (48 mg, 0.312 mmol) seguido por imidazol (28.8 mg, 0.423 mmol) a una solución en CH2C12 (3 mi) de 4-hidroxi-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S, 3S) -bencilo (119.5 mg, 0.258 mmol), y la mezcla se agitó en condiciones ambientales durante 14.25 horas. La mezcla de reacción se diluyó entonces con CH2C12 (30 mi) y se lavó con agua (15 mi) , y la fase orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío. El material bruto resultante se purificó con una BIOTAGE® (40 g gel de sílice; 5% de EtOAc/hexanos) proporcionando 4-(terc-butildimetilsililoxi) -3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S , 3S) -bencilo, contaminado con impurezas con base de TBDMS, como un aceite incoloro viscoso (124.4 mg) . Se elaboró 4-hidroxi-3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren- 9-ilamino) butanoato de (2S, 3R) -bencilo de forma similar a 4- ( terc-butildimetilsililoxi) -3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S , 3R) -bencilo . Isómero (2S,3S) -silil éter: RMN de H (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz) , 7.82 (d, J = 4.1, 1H) , 7.80 (d, J = 4.0, 1H) , 7.38-7.07 (m, 16 H) , 4.70 (d, J = 12.4, 1H) , 4.42 (d, J = 12.3, 1H) , 3.28-3.19 (m, 3H) , 2.56 (dd, J = 10.1, 5.5, 1H) , 1.61 (m, 1H) , 0.90 (d, J = 6.8, 3H) , 0.70 (s, 9H) , -0.13 (s, 3H) , -0.16 (s, 3H) . CL (Cond. 1, donde el tiempo de ejecución de prolongó hasta 4 min) : TR = 3.26 min; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H]+ C37H44N03Si : 578.31; encontrado 578.40, Isómero (2S,3R)-silil éter: RMN de XH (DMS0-d6, d = 2.5 ppm, 400 MHz), 7.82 (d, J = 3.0, 1H) , 7.80 (d, J = 3.1, 1H) , 7.39-7.10 (m, 16H) , 4.66 (d, J = 12.4, 1H) , 4.39 (d, J = 12.4, 1H) , 3.61 (dd, J" = 9.9, 5.6, 1H) , 3.45 (d, J = 9.5, 1H) , 3.41 (dd, J = 10, 6.2, 1H) , 2.55 (dd, J" = 9.5, 7.3, 1H) , 1.74 (m, 1H) , 0.77 (s, 9H) , 0.61 (d, J = 7.1, 3H) , -0.06 (s, 3H) , -0.08 (s, 3H) .
Se unió un balón de hidrógeno a una mezcla de 4-( erc-butildimetilsililoxi) -3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren-9-ilamino) butanoato de (2S, 3S) -bencilo (836 mg, 1.447 mmol) y Pd al 10%/C (213 mg) en EtOAc (16 mi) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante ~ 21 horas, recargándose el balón con H2 cuando fue necesario. La mezcla de reacción se diluyó con CH2CI2 y se filtró a través de una almohadilla de tierra de diatomeas (CELITE-545 ) , y se lavó la almohadilla con EtOAc (200 mi), EtOAc/MeOH (mezcla 1:1, 200 mi) y MeOH (750 mi) . La fase orgánica combinada se concentró y se preparó una malla de gel de sílice a partir del material bruto resultante y se sometió a una cromatografía instantánea (mezcla 8:2:1 de EtOAc/i-PrOH/H20) proporcionando ácido (2S, 3S) -2-amino-4- (terc-butildimetilsililoxi) -3-metilbutanoico como un sólido apelusado blanco (325 mg) . Se elaboró 4- ( erc-butildimetilsililoxi) -3-metil-2- (9-fenil-9H-fluoren- 9-ilamino) butanoato de (2S, 3R) -bencilo de forma similar a ácido (2S, 3R) -2-amino-4- ( ercbutildimetilsililoxi) -3-metilbutanoico. (Isómero 2S,3S)-amino ácido: RMN de XH (Metanol-d4, d = 3.29 ppm, 400 MHz) , 3.76 (dd, J = 10.5, 5.2, 1H) , 3.73 (d, J = 3.0, 1H) , 3.67 (dd, J = 10.5, 7.0, 1H) , 2.37 (m, 1H) , 0.97 (d, J = 7.0 , 3H) , 0.92 (s, 9H) , 0.10 (s, 6H) . CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C11H26 O3S Í : 248.17; encontrado 248.44, Isómero (2S , 3R) -amino ácido: RMN de ?? (Metanol-d4, d = 3.29 ppm, 400 MHz), 3.76-3.75 (m, 2H) , 3.60 (d, J" = 4.1, 1H) , 2.16 (m, 1H) , 1.06 (d, J = 7.3, 3H) , 0.91 (s, 9H) , 0.09 (s, 6H) . Anal. Calculado para [M+H]+ CnHaeNOsSi: 248.17; encontrado 248.44.
Se añadieron agua (1 mi) y NaOH (0.18 mi de 1.0 M/H20, 0.18 mmol) a una mezcla de ácido (2S, 3S) -2-amino-4- ( erc-butildimetilsililoxi) -3-metilbutanoico (41.9 mg, 0.169 mmol) y Na2C03 (11.9 mg, 0.112 mmol), y se sometió a ultrasonidos durante aproximadamente 1 minuto para efectuar la disolución de los reactivos. La mezcla se enfrió entonces con un baño de hielo-agua, se añadió cloroformiato de metilo (0.02 mi, 0.259 mmol) se durante 30 s y se continuó con agitación vigorosa a temperatura similar durante 40 minutos y luego a temperatura ambiente durante 2.7 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (5 mi) , se enfrió con baño de hielo-agua, y se trató gota a gota con solución acuosa de HC1 1.0 N HCl (-0.23 mi) . La mezcla se diluyó adicionalmente con agua (10 mi) y se extrajo con CH2C12 (15 mi, 2x) . La fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a vacío proporcionando Cap-80a como un sólido blanquecino. Se elaboró ácido ( 2S , 3R) -2 -amino-4 - ( terc-butildimet ilsililoxi ) -3 -metilbutanoico de forma similar a Cap-80b. Cap-80a: RMN de ?? (DMS0-d6, d = 2.5 ppm, 400 Hz) , 12.57 (s ancho, 1H) , 7.64 (d, J = 8.3, 0.3H) , 7.19 (d, J = 8.8, 0.7H), 4.44 (dd, J = 8.1, 4.6, 0.3H) , 4.23 (dd, J" = 8.7, 4.4, 0.7H) , 3.56/3.53 (dos singletes, 3H) , 3.48-3.40 (m, 2H) , 2.22-2.10 (m, 1H) , 0.85 (s, 9H) , -0.84 (d, 0.9H, traslapado con la señal de t-Bu) , 0.79 (d, J = ?, 2.1H), 0.02/0.01/0.00 (tres singletes traslapados, 6H) . CL/EM: Anal. Calculado para [M+Na] + Ci3H27NNa05Si : 328.16; encontrado 328.46, Cap-80b: RMN de XH (CDC13, d = 7.24 ppm, 400 MHz) , 6.00 (d ancho, J" = 6.8, 1H) , 4.36 (dd, J" = 7.1, 3.1, 1H) , 3.87 (dd, J = 10.5, 3.0, 1H) , 3.67 (s, 3H) , 3.58 (dd, J = 10.6, 4.8, 1H) , 2.35 (m, 1H) , 1.03 (d, J = 7.1, 3H) , 0.90 (s, 9H) , 0.08 (s, 6H) . CL/EM: Anal. Calculado para [M+Na] + Ci3H27NNa05Si : 328.16; encontrado 328.53, Los productos brutos se usaron sin purificación adicional .
Cap- 81 Se preparó de conformidad con el protocolo descrito por Falb et al. Synthetic Communications 1993, 23, 2839.
Cap- 82 a Cap- 85 Se sintetizaron Cap-82 a Cap-85 a partir de los materiales de partida apropiados de conformidad con el proceso descrito para Cap-51 o Cap- 13, Las muestras presentaron perfiles espectrales similares a los de sus estereoisómeros (es decir, Cap-4, Cap-13 , Cap-51 y Cap-52, respectivamente) . Ácido (2S,3R) -3-metoxi-2- (metoxicarbonilamino) butanoico A una mezcla de O -met i 1 - L - treonina (3.0 g, 22.55 mmol) , NaOH (0.902 g, 22.55 mraol) en H20 (15 ml) se añadió ClC02Me (1.74 ml , 22.55 mmol) gota a gota a 0°C. La mezcla se dejó agitando durante 12 h y se acidificó hasta pH 1 usando HC1 1 . La fase acuosa se extrajo con EtOAc y (2x250 ml) y eOH al 10% en CH2C12 (250 ml) y las fases orgánicas combinadas se concentraron a vacío proporcionando un aceite incoloro (4.18 g, 97%) que fue de pureza suficiente para usar en las etapas siguientes. RMN de 1H (400 MHz , CDC13 ) d 4.19 (s, 1H) , 3.92-3.97 (m, 1H) , 3.66 (s, 3H) , 1.17 (d, J = 7.7 Hz, 3H) . CLEM : Anal. Calculado para C7Hi3N05 : 191; encontrado: 190 (M-H)~.
Cap- 87 A una mezcla de L-homoserina (2.0 g, 9.79 mmol) , Na2C03 (2.08 g, 19.59 mmol) en H20 (15 ml) se añadió ClC02Me (0.76 ml , 9.79 mmol) gota a gota a 0°C. La mezcla se dejó agitando durante 48 h y se acidificó hasta pH 1 usando HC1 1 . La fase acuosa se extrajo con EtOAc y (2X250 ml ) y las fases orgánicas combinadas se concentraron a vacio proporcionando un sólido incoloro (0.719 g, 28%) que fue de pureza suficiente para usar en las etapas siguientes. RMN de ?? (400 MHz, CDC13) d 4.23 (dd, J" = 4.5, 9.1 Hz , 1H) , 3.66 (s, 3H) , 3.43-3.49 (m, 2H), 2.08 - 2.14 (m, 1H), 1.82 - 1.89 (m, 1H) . CLEM : Anal. Calculado para C7H13NO5: 191; encontrado: 192 (M+H)+.
Cap- 88 Se calentó una mezcla de L-val ina (1.0 g , 8.54 mmol), 3 -broraopiridina (1.8 mi, 18.7 mmol), K2C03 (2.45 g, 17.7 mmol) y Cul (169 mg , 0.887 mmol) en DMSO (10 mi) a 100°C durante 12h. La mezcla de reacción se enfrió hasta ta, se vertió en H20 (aproximadamente 150 mi) y se lavó con EtOAc (x2) . Las fases orgánicas se extrajeron con una pequeña cantidad de H20 y las fases acuosas reunidas se acidificaron hasta aproximadamente pH 2 con HCl 6N. El volumen se redujo hasta aproximadamente la tercera parte y se añadieron 20 g de resina de intercambio iónico (Strata) . La suspensión se dejó reposar durante 20 min y se cargó en una almohadilla de resina de intercambio catiónico. (Strata) (aproximadamente 25 g) . Se lavó la almohadilla con H20 (200 mi), MeOH (200 mi) y luego NH3 (3M en MeOH, 2X200 mi) . Se concentraron las fracciones apropiadas a vacío y el residuo (aproximadamente 1.1 g) se disolvió en H20, se congeló y liofilizó. El compuesto del título se obtuvo como una espuma (1.02 g, 62%) . RMN de 1K (400 MHz , DMSO-d6) d 8.00 (s ancho, 1H) , 7.68 - 7.71 (m, 1H) , 7.01 (s ancho, 1H) , 6.88 (d, J = 7.5 Hz, 1H) , 5.75 (s ancho, 1H) , 3.54 (s, 1H) , 2.04 -2.06 (m, 1H) , 0.95 (d, J = 6.0 Hz, 3H) , 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C10H14 2O2 : 194; encontrado: 195 (M+H)+.
Cap -89 Se calentó a 100 °C durante 12 horas una mezcla de L-valina (1.0 g, 8.54 mmol) , 5-bromopirimidina (4.03 g, 17.0 mmol) , K2C03 (2.40 g, 17.4 mmol) y Cul (179 mg , 0.94 mmol) en DMSO (10 mi) . La mezcla de reacción se enfrió hasta TA, se vertió en H20 (aproximadamente 150 mi) y se lavó con EtOAc (x2) . Las fases orgánicas se extrajeron con una pequeña cantidad de H20 y las fases acuosas reunidas se acidificaron hasta aproximadamente pH 2 con HCl 6N. El volumen se redujo hasta aproximadamente la tercera parte y se añadieron 20 g de resina de intercambio catiónico (Strata) . La suspensión se dejó reposar durante 20 minutos y se cargó en una almohadilla de resina de intercambio catiónico (Strata) (aproximadamente 25g) . La almohadilla se lavó con H20 (200 mi) , MeOH (200 mi) y luego NH3 (3M en MeOH, 2x200 mi) . Se concentraron las fracciones apropiadas a vacío y se disolvió el residuo (aproximadamente 1.1 g) en H20, se congeló .y liofilizó. El compuesto del título se obtuvo como una espuma (1.02 g, 62%) . La RMN de 1H (400 MHz , CD30D) mostró que la mezcla contenía valina y no se pudo estimar la pureza. El material se usó como tal en las posteriores reacciones. CLEM : Anal. Calculado para C9H13N302 : 195; encontrado: 196 (M+H)+.
Cap- 90 ÑMe2 Se preparó Cap-90 de conformidad con el proceso descrito para la preparación de Cap-1, El material bruto se usó como tal en las etapas posteriores. CLEM: Anal. Calculado para ???15?02: 193; encontrado: 192 (M-H) " .
Cap.- 91 a Cap-116 Los siguientes Caps se prepararon de conformidad con el proceso del usado para la preparación del Cap 51, a menos que se indique de otro modo: Cap-lll a Cap-123 Para la preparación de Cap-117 a Cap-123 los Boc aminoácidos se obtuvieron de suministradores comerciales y se desprotegieron por tratamiento con TFA al 25% en CH2C12, Después de completarse la reacción que se juzgó por CLEM se eliminaron los solventes a vacío y se carbamoiló la sal TFA correspondiente del aminoácido con cloroformiato de metilo de conformidad con el proceso descrito para el Cap-51.
Cap-124 Se llevó a cabo la carbamoilación de la sal clorhidrato de éster terc-butílico de L-treonina de conformidad con el proceso para Cap-51, La mezcla de reacción bruta se acidificó con HC1 1N hasta pH~l y la mezcla se extrajo con EtOAc (2X50 mi) . Las fases orgánicas combinadas se concentraron a vacío dando un aceite incoloro que solidificó en reposo. La capa acuosa se concentró a vacío y la mezcla resultante de producto y sales inorgánicas del producto y sales inorgánicas se trituró con EtOAc-CH2Cl2-MeOH (1:1:0.1) y luego se concentró la fase orgánica a vacío dando un aceite incoloro que por CLEM se mostró que fue el producto deseado. Ambas tandas se reunieron dando 0.52 g de un sólido. RMN de XH (400 MHz , CD3OD) d 4.60 (m, 1H) , 4.04 (d, J" = 5.0 Hz, 1H) , 1.49 (d, J = 6.3 Hz , 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C5H7NO4: 145; encontrado: 146 (M+H)+.
Cap-125 A una suspensión de Pd(OH)2 (20%, 100 mg) , formaldehído acuoso (37% en peso, 4 mi), ácido acético (0.5 mi) en metanol (15 mi) se añadió ácido (S) -4 -amino-2 - ( terc-butoxicarbonilamino) butanoico (1 g, 4.48 mmol) . La reacción se purgó varias veces con hidrógeno y se agitó durante la noche bajo un balón de hidrógeno a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de tierra de diatomeas (CELITE®) y se eliminó el compuesto volátil a vacío. El material resultante bruto se usó como tal para la etapa siguiente. CLEM: Anal. Calculado para CHH22 2O4 : 246; encontrado: 247 (M+H)+.
Cap-126 cj-25 cap-126 Este proceso es una modificación del que se usó para preparar Cap-51, A una suspensión de 3 -metil-L-histidina (0.80 g, 4.70 mmol) en THF (lOmL) y H20 (10 mi) a 0°C se añadió MaHC03 (0.88 g, 10.5 mmol). La mezcla resultante se trató con ClC02Me (0.40 mi, 5.20 mmol) y se dejó agitar la mezcla a 0°C. Después de agitar durante aproximadamente. 2h la CLEM no mostró material de partida. La reacción se acidificó hasta pH 2 con HC1 6 N.
Los solventes se eliminaron a vacío y el residuo suspendió en 20 mi de MeOH al 20% en CH2C12, La mezcla se filtró y se concentró dando una espuma amarillo claro (1.21 g, ) . La CLEM y RMN de 1H mostraron que el material fue una mezcla 9:1 del éster metílico y el producto deseado. Este material se suspendió en THF (10 mi) y H20 (10 mi) , se enfrió hasta 0°C y se añadió LiOH (249.1 mg, 10.4 mmol) . Después de agitar aproximadamente lh la CLEM mostró que no quedaba éster. Seguidamente la mezcla se acidificó con HCl 6N y los solventes se eliminaron a vacío. La CLEM y RMN de 1H confirmaron la ausencia del éster. El compuesto del título se obtuvo como su sal HCl contaminada con sales inorgánicas (1.91 g, >100%) . El compuesto se usó como tal en posteriores etapas sin purificación adicional. RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) d 8.84, (s, 1H) , 7.35 (s, 1H) , 4.52 (dd, J = 5.0, 9.1 Hz, 1H) , 3.89 (s, 3H) , 3.62 (s, 3H) , 3.35 (dd, J = 4.5, 15.6 Hz, 1H, parcialmente oscurecido por solvente) , 3.12 (dd, J = 9.0, 15.6 Hz, 1H) . CLEM: Análisis calculado para C9H13N304 : 227.09; encontrado: 228.09 (M+H)+.
Cap-127 cj-26 cap-127 Se preparó Cap-127 de conformidad con el proceso para Cap-126 anterior partiendo de ácido (S) -2-amino-3- (1-metil-lH-imidazol-4-il) ropanoico (1.11 g, 6.56 mmol) , NaHC03 (1.21 g, 14.4 mmol) y ClC02Me (0.56 mi, 7.28 mmol) . El compuesto del título se obtuvo como su sal HCl (1.79 g, >100%) contaminado con sales inorgánicas. La CLEM y RMN de 1H mostraron la presencia de aproximadamente 5% del éster metílico. La mezcla bruta se usó como tal sin purificación adicional. RMN de XH (400 MHz , CD3OD) d 8.90 (s, 1H) , 7.35 (s, 1H) , 4.48 (dd, J = 5.0, 8.6 Hz , 1H) , 3.89 (s, 3H) , 3-62 (s, 3H) , 3.35 (m, 1H) , 3.08 (m, 1H) .
CLEM: Anal. Calculado para C9Hi3 304 : 227.09; encontrado: 228 (M+H)+.
Preparación de Cap-128 cj-29 cap-128 Etapa 1, Preparación de 2- (tere butoxicarbonilamino) pent-4 -inoato de (S) -bencilo (cj-27b).
BocH C02Bn cj-27b A una solución de cj-27a (1.01 g, 4.74 mmol) , DMAP (58 mg, 0.475 mmol) y iPr2NEt (1.7 mi, 9.8 mmol) en CH2C12 (100 mi) a 0°C se añadió Cbz-Cl (0.68 mi, 4.83 mmol) . La solución se dejó agitando durante 4 h a 0°C, se lavó (KHS04 1N, salmuera) , se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna instantánea (TLC 6:1 hex:EtOAc) dando el compuesto del título (1.30 g, 91%) como un aceite incoloro. RMN de H (400 MHz, CDC13) d 7.35 (s, 5H) , 5.35 (d ancho, J = 8.1 Hz , 1H) , 5.23 (d, J = 12.2 Hz, 1H) , 5.17 (d, J = 12.2 Hz, 1H) , 4.48 - 4.53 (m, 1H) , 2.68 - 2.81 (m, 2H) , 2.00 (t, J = 2.5 Hz , 1H) , 1.44 (s, 9H) . CLEM: Anal. Calculado para Ci7H2iN04 : 303 ; encontrado: 304 (M+H)+.
Etapa 2, Preparación de 3 - ( 1-bencil- 1H- 1 , 2 , 3 -triazol-4-il) -2- ( terc-butoxicarbonilamino) propanoato de (S) -bencilo (cj -28) .
A una mezcla de 2- ( terc-butoxicarbonilamino) pent-4-inoato de (S) -bencilo (0.50 g, 1.65 mmol), ascorbato sódico (0.036 g,. 0.18 mmol) , CuS04-5H20 (0.022 g, 0.09 mmol) y NaN3 (0.13 g, 2.1 mmol) en DMF-H20 (5 mi, 4:1) a ta se añadió BnBr (0.24 mi, 2.02 mmol) y la mezcla se calentó hasta 65°C. Después de 5 horas, la CLEM indicó baja conversión. Se añadió una porción adicional de NaN3 (100 mg) y se continuó calentando durante 12 horas. La reacción se vertió en EtOAc y H20 y se agitó. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo tres veces con EtOAc y las fases orgánicas combinadas se lavaron (H20 x3 , salmuera), se secaron (Na2S04) , se filtraron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía instantánea (BIOTAGE®, 40+M 0-5% de MeOH en CH2C12; TLC 3% de MeOH en CH2Cl2) proporcionando un aceite amarillo claro que solidificó en reposo (748.3 mg, 104%) . La RMN fue consistente con el producto deseado pero sugirió la presencia de DMF . El material se usó como tal sin purificación adicional. RMN de 1H (400 MHz , DMS0-d6) d 7.84 (s, 1H) , 7.27 - 7.32 (m, 10H) , 5.54 (s, 2H) , 5.07 (s, 2H) , 4.25 (m, 1H) , 3.16 (dd, J = 1.0, 5.3 Hz, 1H) , 3.06 (dd, J = 5.3, 14.7 Hz), 2.96 (dd, J = 9.1 , 14.7 Hz, 1H) , 1.31 (s, 9H) .
CLEM: Anal. Calculado para C24H28 4O4 : 436; encontrado: 437 (M+H)+.
Etapa 3, Preparación de 3 - ( 1-bencil- 1H-1 , 2 , 3 -triazol-4-il) -2- (metoxicarbonilamino) propanoato de (S) -bencilo (cj -29) . cj-29 Se añadió TFA (4 mi) a una solución de 3- (l-bencil - lH-l,2,3-triazol-4-il) - 2- (tere- butoxi carboni lamino ) ropanoato de (S)-bencilo (0.52 g, 1.15 mmol) en CH2C12, La mezcla se dejó agitando a temperatura ambiente durante 2h. La mezcla se concentró a vacío dando un aceite incoloro que solidificó en reposo. Este material se disolvió en THF -H20 y se ¦enfrió hasta Q°C. Se añadió NaHC03 sólido (0.25 g, 3.00 mmol) seguido por ClC02Me (0.25 mi, 3.25 mmol) . Después de agitar durante 1.5h la mezcla se acidificó hasta pH~2 con HC1 ' 6N y luego se vertió en H20-EtOAc. Las capas orgánicas se separaron y se extrajo la capa acuosa 2x con EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se lavaron (H20, salmuera) , se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron a vacío dando un aceite incoloro (505.8 mg , 111%, la RMN sugirió la presencia de una impureza no identificada) que solidificó en reposo en la bomba. El material se usó como tal sin purificación posterior. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) d 7.87 (s, 1H) , 7.70 (d, J = 8.1 Hz , 1H), 7.27 - 7.32 (m, 10H) , 5.54 (s, 2H) , 5.10 (d, J = 12.7 Hz, 1H) , 5.06 (d, J = 12.7 Hz, 1H) , 4.32 - 4.37 (m, 1H), 3.49 (s, 3H) , 3.09 (dd, J = 5.6, 14.7 Hz , 1H), 2.98 (dd, J = 9.6, 14.7 Hz, 1H) . CLEM: Anal. Calculado para C2iH22 404 : 394; encontrado: 395 (M+H)+.
Etapa 4, Preparación de ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3- ( 1H- 1 , 2 , 3 - 1riazol - 4 -i 1 ) ropanoico (Cap-128) Cap-128 Se sometió 3- (1-bencil-lH-l, 2 , 3 -triazol -4 - il ) -2-(metoxicarbonilamino) propanoato de (S) -bencilo (502 rag, 1.11 mmol) a hidrogenación en presencia de Pd-C (82 mg) en MeOH (5 mi) a presión atmosférica durante 12h. La mezcla se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío. Se obtuvo ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- (1H-1, 2, 3-triazol-4-il) propanoico como una goma incolora (266 mg, 111%) que estaba contaminada con aproximadamente 10% del éster metílico. El material se usó sin purificación adicional.
RMN de H (400 MHz , DMSO-d6) d 12.78 (s ancho, 1H) , 7.59 9s, 1H) , 7.50 (d, J = 8.0 Hz , 1H) , 4.19 - 4.24 (m, 1H) , 3.49 (s, 3H) , 3.12 (dd, J" = 4.8 Hz, 14.9 Hz , 1H) , 2.96 (dd, J" = 9.9, 15.0 Hz, 1H) . CLEM: Anal. Calculado para C7H10 4O4 : 214; encontrado: 215 (M+H)+.
Preparación de Cap-129 Etapa 1, Preparación de ácido (S)-2- (benciloxicarbonilamino) -3- (??-pirazol-l-il) ropanoico (cj -31) .
CbzHN C02H cj-31 Se calentó una suspensión de 2 -oxooxetan-3 -ilcarbamato de (S) -bencilo (0.67 g, 3.03 mmol) y pirazol (0.22 g, 3.29 mmol) en CH3CN (12 mi) a 50 °C durante 24h. La mezcla se enfrió hasta TA durante la noche y el sólido se filtró proporcionando ácido (S) -2- (benciloxicarbonilamino) -3-(lH-pirazol-l-il) propanoico (330.1 mg) . El filtrado se concentró a vacío y luego se trituró con una pequeña cantidad de CH3CN (aproximadamente 4 mi) proporcionando una segunda tanda (43.5 mg) . Rendimiento total 370.4 mg (44%). P.f. 165.5 - 168°C. p.f. lit 168.5 - 169.5 [Vederas et al. J. Am. Chem. Soc. 1985, 107, 7105]. RMN de ¾ (400 Hz, CD3OD) d 7.51 (d, J = 2.0, 1H) , 7.48 (s, J" = 1.5 Hz, 1H) , 7.24 - 7.34 (m, 5H) , 6.23 m, 1H) , 5.05 (d, 12.7 H, 1H) , 5.03 (d, J" = 12.7 Hz, 1H) , 4.59 - 4.66 (m, 2H) , 4.42 - 4.49 (ra, 1H) . CLEM: Anal. Calculado para C14H15N3O4: 289; encontrado: 290 (M+H)+.
Etapa 2, Preparación de ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- (lH-pirazol-l-il) ropanoico (Cap-129) . cap-129 Se sometió ácido (S) -2- (benciloxicarbonilamino) -3- (lH-pirazol-1-il) ropanoico (0.20 g, 0.70 mmol) a hidrogenación en presencia de Pd-C (45 mg) en MeOH (5 mi) a presión atmosférica durante 2h. El producto parecía ser insoluble en MeOH, por tanto se diluyó la mezcla de reacción con 5 mi de H20 y unas pocas gotas de HC1 6N. La solución homogénea se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) , y el MeOH se eliminó a vacío. La solución restante se congeló y se liofilizó dando una espuma amarilla (188.9 mg) . Este material se suspendió en THF-H20 (1:1, 10 mi) y luego se enfrió hasta 0°C. A la mezcla fría se añadió NaHC03 (146.0 mg, 1.74 mmol) cuidadosamente (generación de C02) . Después de cesar la generación de gas (aproximadamente 15 min) se añadió ClC02Me (0.06 mi, 0.78 mmol) gota a gota. La mezcla se dejó agitando durante 2 horas y se acidificó hasta pH~2 con HC1 6N y se vertió en EtOAc . Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAC (x5) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron (salmuera), se secaron (Na2S04) , se filtraron y concentraron dando el compuesto del título como un sólido incoloro (117.8 mg, 79%) . RMN de ?. (400 MHz , DMS0-d6) d 13.04 (s, 1H) , 7.63 (d, J = 2.6 Hz, 1H) , 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H) , 7.44 (d, J - 1.5 Hz , 1H) , 6.19 (t aparente, J = 2.0 Hz, 1H) , 4.47 (dd, J = 3.0, 12.9 Hz, 1H) , 4.29 - 4.41 (m, 2H) , 3.48 (s, 3H) . CLEM: Anal. Calculado para C8Hn 304 : 213 ; encontrado: 214 (M+H)+.
Cap-13O Se preparó Cap-130 por acilación de (R) -fenilglicina disponible comercialraente de forma análoga al proceso dado en: Calmes, M.; Daunis, J.; Jacquier, R.; Verducci, J. Tetrahedron, 1987, 43(10), 2285, Cap-131 Etapa a: Se añadió cloruro de dimetilcarbamoilo (0.92 mi, 10 mmol) lentamente a una solución de clorhidrato de 2-amino-3-metilbutanoato de (S) -bencilo (2.44 g; 10 mmol) y base de Hunig (3.67 mi, 21 mmol) en THF (50 mi). La suspensión blanca resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche (16 horas) y se concentró a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a presión reducida. El aceite amarillo resultante se purificó por cromatografía instantánea, eluyendo con acetato de etilo :hexanos (1:1) . Las fracciones recogidas se concentraron a vacío proporcionando 2.35 g (85%) de aceite transparente. RMN de. 1H (300 MHz , DMSO-d6) d ppm 0.84 (d, J=6.95 Hz, 3H) , 0.89 (d, J-=6.59 Hz , 3H) , 1.98-2.15 (m, 1H) , 2.80 (s, 6H) , 5.01-5.09 (m, J=12.44 Hz, 1H) , 5.13 (d, J"=12.44 Hz , 1H) , 6.22 (d, J=8.05 Hz, 1H) , 7.26-7.42 (m, 5H) . CL (Cond. 1) : TR = 1.76 min; E : Análisis calculado para [M+H] + Ci6H22 203 : 279.17; encontrado 279.03.
Etapa b : una solución en MeOH (50 mi) del intermediario preparado antes (2.35 g; 8.45 mmol) se añadió Pd/C (10%; 200 mg) y la suspensión negra resultante se llenó con N2 (3x) y se colocó en 10.13 kPa de H2, La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche y se filtró a través de un filtro de microfibra para separar el catalizador. La solución transparente resultante se concentró entonces a presión reducida obteniendo 1.43 g (89%) de Cap-131 como espuma blanca, que se usó sin purificación posterior. RMN de XH (500 MHz, DMSO-dg) d ppm 0.87 (d, J=4.27 Hz, 3H) , 0.88 (d, J=3.97 Hz, 3H) , 1.93-2.11 (m, 1H) , 2.80 (s, 6H) , 3.90 (dd, J=8.39, 6.87 Hz, 1H) , 5.93 (d, J=Q .54 Hz, 1H) , 12.36 (s, 1H) . CL (Cond. 1) : TR = 0.33 min; EM: Análisis calculado para [M+H]+ C8H17N203: 189.12; encontrado 189.04.
Cap-132 Cap-132 se preparó a partir de clorhidrato de 2-aminopropanoato de (S) -bencilo de conformidad con el proceso descrito para Cap-131, RMN de LH (500 MHz, DMS0-d6) d ppm 1.27 (d, J=7.32 Hz, 3H) , 2.80 (s, 6H) , 4.06 (ct, 1H) , 6.36 (d, J=7.32 Hz, 1H) , 12.27 (s, 1H) . CL (Cond. 1) : TR = 0.15 min; E : Análisis calculado para [M+H] + C6H13 203 : 161.09; encontrado 161.00.
Cap-133 Cap-133 se preparó a partir de clorhidrato de 2-amino-3 -metilbutanoato de (S) - tere-butilo y cloroformiato de 2 -fluoroetilo de conformidad con el proceso descrito para Cap-??, RMN de H (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 0.87 (t, J = 6.71 Hz, 6H) , 1.97-2.10 (m, 1H) , 3.83 (dd, J=8.39, 5.95 Hz , 1H) , 4.14-4.18 (m, 1H) , 4.20-4.25 (m, 1H) , 4.50-4.54 (m, 1H) , 4.59-4.65 (m, 1H) , 7.51 (d, J = 8.54 Hz, 1H) , 12.54 (s, 1H) .
Cap-134 Cap-134 se preparó a partir de (S) -dietil alanina y cloroformiato de metilo de conformidad con el proceso descrito para Cap-51, RMN de H (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 0.72-0.89 (m, 6H) , 1.15-1.38 (m, 4H) , 1.54-1.66 (m, 1H) , 3.46-3.63 (m, 3H) , 4.09 (dd, J = 8.85, 5.19 Hz, 1H) , 7.24 (d, J = 8.85 Hz, 1H) , 12.55 (s, 1H) . CL (Cond. 2) : TR = 0.66 min; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C9Hi8N04 : 204.12; encontrado 204.02.
Cap-135 Una solución de ácido D-2 -amino- (4 -fluorofenil) acético (338 mg, 2.00 mmol) , HC1 1N en éter dietílico (2.0 ral, 2.0 mmol) y formalina (37%, 1 mi) en metanol (5 mi) se sometió a hidrogenación bajo un balón en paladio al 10% sobre carbón (60 mg) durante 16 h a 25 °C. La mezcla se filtró a través de CELITE® proporcionando la sal HCl de Cap-135 como una espuma blanca (316 mg, 80%) . RM de XK (300 Hz, MeOH-d4) d 7.59 (dd, J = 8.80, 5.10 Hz, 2H) , 7.29 (t, J" = 8.6 Hz, 2H) , 5.17 (s, 1H) , 3.05 (s muy ancho, 3H) , 2.63 (s muy ancho, 3H) ; TR = 0.19 min (Condiciones de EM-W5) ; índice de homogeneidad del 95%; EMBR: Análisis calculado para [M+H]+ Ci0H13FNO2: 198.09; encontrado: 198.10.
Cap-136 A una suspensión enfriada (-50 °C) de 1-bencil-lJí-imidazol (1.58 g, 10.0 mmol) en éter dietílico anhidro (50 mi) en nitrógeno se añadió n-butil litio (2.5 M en hexanos, 4.0 mi, 10.0 mmol) gota a gota. Después de agitar durante 20 minutos a -50 °C, se hizo burbujear dióxido de carbono (pasado a través de Drierite) en la mezcla de reacción durante 10 minutos antes de dejar calentar hasta 25 °C. El precipitado pesado que se formó al añadir dióxido de carbono a la mezcla de reacción se filtró proporcionando un sólido blanco higroscópico que se recogió en agua (7 mi) , se acidificó hasta pH = 3 , se enfrió y se indujo a cristalizar con raspado. La filtración de este precipitado dio un sólido blanco que se suspendió en metanol, se trató con HC1 lN/éter dietílico (4 mi) y se concentró a vacío. La liofilización del residuo en agua (5 mi) proporcionó la sal HC1 de Cap- 136, como un sólido blanco (817 mg, 40%) . RMN de 1H (300 MHz, D SO-d6) d 7.94 (d, J = 1.5 Hz, 1H) , 7.71 (d, J" = 1.5 Hz, 1H) , 7.50-7.31 (m, 5H) , 5.77 (s, 2H) ; TR = 0.51 min (Condiciones de EM-W5) ; índice de homogeneidad del 95%; EMBR: Análisis calculado para [M+H] + ?????2?202 : 203.08; encontrado: 203.11.
Cap- 137 Cap-137, etapa a Una suspensión de l-cloro-3-cianoisoquinol ina (188 mg , 1.00 mmol; preparada de conformidad con el proceso del documento WO 2003/ 099274) (188 mg , 1.00 mmol) , fluoruro de cesio (303.8 mg , 2.00 mmol ) , dicloruro de bis (tri- terc-but i 1 fos f ina ) pal adi o (10 mg , 0.02 mmol) y 2-( t ribut i le stanni 1 ) furano (378 µ? , 1.20 mmol) en dioxano anhidro (10 mi) en nitrógeno se calentó a 80 °C durante 16 horas de enfriar hasta 25°C y se trató con solución acuosa saturada de fluoruro potásico con agitación vigorosa durante 1 h. La mezcla se repartió entre acetato de etilo y la fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró. La purificación del residuo sobre gel de sílice (elución con acetato de etilo de 0% a 30%/hexanos) proporcionó Cap-137, etapa a como un sólido blanco que se usó como tal (230 mg , 105%) . TR 1.95 min (Condiciones de EM- 2); índice de homogeneidad del 90%; EMBR: Análisis calculado para [M+H]+ Ci4HaN20: 221.07; encontrado: 221.12.
Cap-137 A una suspensión de Cap- 137 , etapa a, (110 mg, 0.50 .mmol) y peryodato sódico (438 mg , 2.05 mmol) en tetracloruro de carbono (1 mi) , acetonitrilo (1 mi) y agua (1.5 mi) se añadió tricloruro de rutenio hidratado (2 mg , 0.011 mmol) . La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 h y luego se repartió entre diclorometano y agua. La fase acuosa se separó, se extrajo dos veces más con diclorometano y se secaron los extractos reunidos sobre Na2S04, se filtraron y concentraron. La trituración del residuo con hexanos proporcionó Cap-137 (55 mg , 55%) como un sólido de color grisáceo. TR = 1.10 min (Condiciones de EM-W2) ; índice de homogeneidad del 90%; CLE -. Análisis calculado para [M+H] + CnH8 202 : 200.08 ; encontrado: 200.08.
Caps 138 a 158 Estrategia de síntesis. Proceso A.
Cap-138 A una suspensión agitada de 5- " hidroxiisoquinolina (preparada de conformidad con el proceso del documento WO 2003/ 099274) (2.0 g, 13.8 mmol) y trif enilfosf ina (4.3 g, 16.5 mmol) en tetrahidrofurano seco (20 mi) se añadió metanol seco (0.8 mi) y azodicarboxilato de dietilo (3.0 mi, 16.5 mmol) en varias porciones. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h antes de diluir con acetato de etilo y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04; se filtró y se concentró. El residuo se preabsorbió sobre gel de sílice y se purificó (elución con acetato de etilo al 40%/hexanos) proporcionando Cap- 138, etapa a como un sólido amarillo claro (1.00 g, 45%) . RMN de XH (CDC13, 500 MHz) 6 9.19 (s, 1H) , 8.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 7.99 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 7.52-7.50 (m, 2H) , 7.00-6.99 (m, 1H) , 4.01 (s, 3H) ; TR = 0.66 min (Cond. D2 ) ; índice de homogeneidad del 95%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0Hi0NO : 160.08; encontrado 160.1.
Cap-138, etapa b A una solución agitada de Cap-138, etapa a (2.34 g, 14.7 mmol) en diclorometano anhidro (50 mi) a temperatura ambiente se añadió ácido meta-cloroperbenzoico (77%, 3.42 g, 19.8 mmol) en una porción. Después de agitar durante 20 horas, se añadió carbonato potásico en polvo (2.0 g) y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente antes de que se filtrara y concentrara proporcionando Cap-138, etapa b como un sólido amarillo pálido que fue suficientemente puro para usarse posteriormente (2.15 g, 83%). RMN de XH (CDC13, 400 MHz) d 8.73 (d, J = 1.5 Hz, 1H) , 8.11 (dd, J" = 7.3, 1.7 Hz, 1H) , 8.04 (d, J=7.1 Hz, 1H) , 7.52 (t, J" = 8.1 Hz, 1H) , 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 6.91 (d, J" = 7.8 Hz, 1H) , 4.00 (s, 3H) ; TR = 0.92 min, (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0Hi0NO2: 176.07; encontrado: 176.0.
Cap-138, etapa c A una solución agitada de Cap-138, etapa b (0.70 g, 4.00 mmol) y trietilamina (1.1 mi, 8.00 mmol) en acetonitrilo seco (20 mi) a temperatura ambiente en nitrógeno se añadió cianuro de trimetilsililo (1.60 mi, 12.00 mmol) . La mezcla se calentó a 75 °C durante 20 h antes de enfriar hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución saturada de bicarbonato sódico y salmuera antes de secar sobre Na2S04 y concentrar el solvente. El residuo se sometió a cromatografía instantánea sobre gel de sílice (elución con acetato de etilo al 5%/hexanos) hasta acetato de etilo al 25%/en hexanos proporcionando Cap-138, etapa c (498.7 mg) como un sólido blanco cristalino junto con 223 mg de más Cap-138, etapa c recuperado del filtrado. RMN de H (CDC13, 500 MHz) d 8.63 (d, J = 5.5 Hz , 1H) , 8.26 (d, J = 5.5 Hz, 1H) , 7.88 (d, J = 8.5 Hz , 1H) , 7.69 (t, J = 8.0 Hz , 1H) , 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1H) , 4.04 (s, 3H) ; TR = 1.75 rain, (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + CnH9N20: 185.07; encontrado: 185.10.
Cap-138 Se trató Cap-138, etapa c (0.45 g, 2.44 mmol) con solución de hidróxido sódico 5N (10 mi) y la suspensión resultante se calentó a 85 °C durante 4 h, se enfrió hasta 25°C, se diluyó con diclorometano y se acidificó con ácido clorhídrico 1N. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, se concentró hasta ¾ del volumen y se filtró proporcionando Cap-138 como un sólido amarillo (0.44 g, 88.9%) . RMN de ¾ (DMSO-ds, 400 MHz) d 13.6 (s ancho, 1H) , 8.56 (d, J= 6.0 Hz, 1H) , 8.16 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 8.06 (d, J- = 8.8 Hz, 1H) , 7.71-7.67 (m, 1H) , 7.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 4.02 (s, 3H) ; TR = 0.70 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 95%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + CnHio 03: 204.07; encontrado: 204.05.
Estrategia de síntesis. Proceso B (derivado Tetrahedron Letters, 2001, 42, 6707) .
Cap-139, etapa a A un vial a rosca de pared gruesa que contenía una suspensión desgasificada en argón de l-cloro-6-metoxiisoquinolina (1.2 g, 6.2 mmol preparado de conformidad con el proceso del documento WO 2003/ 099274) , cianuro potásico (0.40 g, 6.2 mmol), 1 , 5 -bis (difenilfosfino) entano (0.27 g, 0.62 mmol) y acetato de paladio (II) (70 mg, 0.31 mmol) en tolueno anhidro (6 mi) se añadió ?,?,?' ,?' -tetrametiletilendiamina (0.29 mi, 2.48 mmol) . El vial se selló, se calentó hasta 150 °C durante 22 h y luego se dejó enfriar hasta 25 °C. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró. El residuo se purificó sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 5%/hexanos hasta acetato de etilo al 25%/hexanos proporcionando Cap-139, etapa a como un sólido blanco (669.7 mg) . RMN de Hí (CDC13, 500 MHz) d 8.54 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 8.22 (d, J" = 9.0 Hz, 1H) , 7.76 (d, J = 5.5 Hz, 1H) , 7.41-7.39 (m, 1H) , 7.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H) , 3.98 (s, 3H) ; TR = 1.66 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H]+ CnH9 20: 185.07; encontrado: 185.20, Cap-139 Cap-139 se preparó a partir de la hidrólisis básica de Cap-139, etapa a con NaOH 5N de conformidad con el proceso descrito para Cap-138, RMN de XH (400 MHz, DMS0-d6) d 13.63 s muy ancho, 1H) , 8.60 (d, J = 9.3 Hz , 1H) , 8.45 (d, J" = 5.6 Hz( 1H) , 7.95 (d, J = 5.9 Hz, 1H) , 7.49 (d, J = 2.2 Hz , 1H) , 7.44 (dd, J = 9.3, 2.5 Hz, 1H) , 3.95 (s, 3H) ; TR = 0.64 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + CnHi0 03 : 204.07; encontrado: 204.05.
Cap-140 Cap-140, etapa a A una mezcla agitada vigorosamente de 1,3-dicloro-5-etoxiisoquinolina (482 mg, 2.00 mmol; preparada de conformidad con el proceso del documento WO 2005/051410), acetato de paladio (II) (9 mg, 0.04 mmol), carbonato sódico (223 mg, 2.10 mmol) y 1,5-bis (difenilfosf ino) pentano (35 mg, 0.08 mmol) en dimet ilacetamida seca (2 mi) a 25 °C en nitrógeno se añadió ?,?,?' ,?' - tetrameti let i lendiamina (60 mi, 0.40 mmol). Después de 10 min, la mezcla se calentó hasta 150 °C, y luego se añadió una solución patrón de acetona cianohidrina (preparada a partir de 457 µ? de acetona cianohidrina en 4.34 mi de DMA) en porciones de 1 mi durante 18 h usando una bomba de jeringa. La mezcla se repartió entonces entre acetato de etilo y agua y se separó la fase orgánica, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró. El residuo se purificó sobre gel de sílice eluyéndo con acetato de etilo al 10%/hexanos hasta acetato de etilo al 40%/hexanos proporcionando Cap-140 , etapa a como un sólido amarillo (160 mg, 34%). TR = 2.46 min (Condiciones de EM-W2); índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci2H9ClN20 : 233.05; encontrado: 233.08.
Cap-140 Cap-140 se preparó por la hidrólisis ácida de Cap- 140, etapa a con HCl 12N como se describe en el proceso para la preparación de Cap 141, descrito más adelante. TR = 2.24 min (Condiciones de EM-W2); índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + C12HU.CINO3 : 252.04; encontrado: 252.02.
Cap-141 Cap-141, etapa a se preparó a partir de l-bromo-3- fluoroisoquinolina (preparada a partir de 3-amino-l- bromoisoquinolina usando el proceso esbozado en J". Med. Chem. 1970, 13, 613) como se describe en el proceso para la preparación de Cap-140, etapa a (vide supra) . RMN de ?. (500 Hz, CDC13) d 8.35 (d, J = 8.5 Hz , 1H) , 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.83 (t, J = 7.63 Hz , 1H) , 7.77-7.73 (ra, 1H) , 7.55 (s, 1H) ; TR = 1.60 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0H6FN2 : 173.05; encontrado: 172.99.
Cap-141 Se trató Cap-141, etapa a (83 mg, 0.48 mmol) con HCl 12N ('3 mi) y la suspensión resultante se calentó a 80 °C durante 16 h antes de enfriar hasta temperatura ambiente y se diluyó con agua (3 mi) . La mezcla se agitó durante 10 min y luego se filtró proporcionando Cap-141 como un sólido blanquecino (44.1 mg, 48%) . El filtrado se diluyó con dielorómetario y se lavó con salmuera, se secó sobre Na2S04 y se concentró proporcionando más Cap-141 que fue suficientemente puro para usarlo posteriormente (29.30 mg, 32%) . RMN de K (DMS0-d6, 500 MHz) d 14.0 (s ancho, 1H) , 8.59-8.57 (m, 1H) , 8.10 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.88-7.85 (m, 2H) , 7.74-7.71 (m, 1H) ; TR = 1.33 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0H7FNO2: 192.05; encontrado: 191.97.
Cap- 142 Cap a a Cap-142 , etapa a se preparó a partir de N-óxido de 4 -bromoisoquinolina como se describe en el proceso en dos etapas para la preparación de Cap-138, etapas b y c. TR = 1.45 min (Condiciones de EM-W1) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0H6BrN2 : 232.97; encontrado: 233.00.
Cap-142, etapa b A una suspensión desgasificada en argón de Cap-142, etapa a (116 mg, 0.50 mmol) , fosfato potásico tribásico (170 mg, 0.80 mmol), acetato de paladio (II) (3.4 mg, 0.015 mmol) y 2- (diciclohexilfosfino) ifenilo (11 mg, 0.03 mmol) en tolueno anhidro (1 mi) se añadió morfolina (61 µ? , 0170 mmol) . La mezcla se calentó a 100 °C durante 16 h, se enfrió hasta 25 °C y se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) . La purificación del residuo sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo del 10% a 70%/hexanos proporcionó Cap-142, etapa b (38 mg, 32%) como un sólido amarillo, que se llevó a etapas posteriores directamente. TR = 1.26 min (Condiciones de EM-W1) índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H]+ C14H14 30: 240.11; encontrado: 2 0.13.
Cap-142 Cap-142 se preparó a partir de Cap-142, etapa b con hidróxido sódico 5N como se describe en el proceso para Cap- 138, TR = 0.72 min (Condiciones de EM- 1) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + C14H15N2O3 : 259.11; encontrado: 259.08.
Cap-143 3 - amino - 1 - bromoi soquinol ina (444 mg , 2.00 mmol) en dimet i 1 formamida anhidra (10 mi) se añadió hidruro sódico (60%, sin lavar, 96 mg , 2.4 mmol) en una porción. La mezcla se agitó a 25 °C durante 5 min antes de añadir éter 2 -bromoet ílico (90%, 250 µ? , 2.00 mmol) . La mezcla se agitó otra vez a 25 °C durante 5h y a 75 °C durante 72 h antes de enfriar hasta 25 °C, se inactivo con solución saturada de cloruro amónico y se diluyó con acetato de etilo. La fase orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró. La I purificación del residuo sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 0% a 70%/hexanos proporcionó Cap- 143 , etapa a como un sólido amarillo (180 mg , 31%) . TR = 1.75 rain (Condiciones de EM-W1) ; índice de homogeneidad del 90%; CLEM : Análisis calculado para [M+H]+ C13Hi4BrN20: 293.03; encontrado: 293.04.
Cap -143 A una solución fría (-60 °C) de Cap- 143 , etapa a (154 mg, 0.527 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (5 mi) se añadió una solución de n-butil litio en hexanos (2.5 M, 0.25 mi, 0.633 mmol) . Después de 10 min, se burbujeó dióxido de carbono en la mezcla de reacción durante 10 minutos antes que se inactivara con HC1 1N y se dejó calentar hasta 25°C. La mezcla se extrajo entonces con diclorometano (3 x 30 mi) y los extractos orgánicos reunidos se concentraron a vacío. La purificación del .residuo por una HPLC de fase inversa (MeOH/agua/TFA) proporcionó Cap-143 (16 mg , 12%) . TR = 1.10 min (Condiciones de EM-W1); índice de homogeneidad del 90%; CLEM: Análisis 'calculado para [M+H] + C14H15 203 : 259.11; encontrado: 259.08, Cap-144 Cap a Se añadió 1, 3-dicloroisoquinolina (2.75 g, 13.89 mmol) en pequeñas porciones a una solución fría (0 °C) de ácido nítrico fumante (10 mi) y ácido sulfúrico concentrado (10 mi) . La mezcla se agitó a 0°C durante 0.5 horas antes de que se calentara gradualmente hasta 25°C a la que se agitó durante 16 horas. La mezcla se vertió entonces en un vaso de precipitados que contenía hielo triturado y agua y la suspensión resultante se agitó durante 1 hora a 0°C antes de que se filtrara proporcionando Cap-144, etapa a (2.73 g, 81%) como un sólido amarillo que se usó directamente. TR = 2.01 min. (Condiciones-DI) ; índice de homogeneidad del 95%; CLEM: Análisis calculado para [M+H] + C9H5CI2 2Q2: 242.97; encontrado: 242.92.
Cap-144, etapa b suspendió Cap-144, etapa a (0.30 g, 1.23 mmol) en metanol (60 mi) y se trató con óxido de platino (30 mg) y la suspensión se sometió a hidrogenación de Parr a 48.26 kPa de ¾ durante 1.5 h. A continuación, se añadieron formalina (5 mi) y más óxido de platino (30 mg) y la suspensión se volvió a someter a hidrogenación de Parr a 310.26 kPa de H2 durante 13 h. A continuación se sometió a filtración por succión a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró hasta ½ de su volumen. La filtración por succión del precipitado proporcionó el compuesto del título como un sólido amarillo que se sometió a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 5% en hexanos hasta acetato de etilo al 25%/hexanos proporcionando Cap-144, etapa b (231 mg, 78%) como un sólido amarillo pálido. TR = 2.36 min (Condiciones-Dl) ; índice de homogeneidad del 95%; RM de ¾ (400 MHz, CDCI3) d 8.02 (s, 1H) , 7.95 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.57-7.53 (m, 1H) , 7.30 (d, J = 7.3 Hz, 1H) , 2.88 (s, 6H) ; CLEM: Análisis calculado para [M+H]+ CiiHiiCl2N2: 241.03; encontrado: 241.02, EMAR: Análisis calculado para [M+H]+ CiiHnCl2N2 : 241.0299; encontrado: 241.0296.
Cap-144, etapa c Cap-144, etapa c se preparó a partir de Cap-144, etapa b de conformidad con el proceso descrito para la preparación de Cap-139, etapa a . TR = 2.19 min (Condiciones-Dl); índice de homogeneidad del 95%; CLEM: Análisis calculado para [M+H]+ Ci2HiiCl 3: 232.06; encontrado: 232.03, EMAR: Análisis calculado para [M+H]+ C^HnClNs: 232.0642; encontrado: 232.0631.
Cap-144 Cap-144 se preparó de conformidad con el proceso descrito para Cap-141, TR = 2.36 min (Condiciones-Dl) ; 90%; CLEM: Análisis calculado para [M+H]+ C12H12CI 2O2 : 238.01; encontrado: 238.09.
Caps-145 a 162 Se prepararon Caps-145 a 162 a partir de las 1-cloroisoquinolinas apropiadas de conformidad con el proceso descrito para la preparación de Cap-138 (Proceso A) o Cap-139 (Proceso B) a no ser que se describa de otro modo más adelante.
Cap- 163 A una solución de ácido 2 -cetobutírico (1.0 g, 9.8 mmol) en éter dietílico (25 mi) se añadió gota a gota bromuro de fenilmagriesio (22 mi, 1M en THF) . La reacción se agitó a -25 °C en nitrógeno durante 17.5h. La reacción se acidificó con HCl 1N y el producto se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mi) . La fase orgánica combinada se lavó con agua seguido por salmuera y se secó sobre MgS0, Después de concentrar a vacío se obtuvo un sólido blanco. El sólido se recristalizó en hexanos/acetato de etilo proporcionando Cap-163 como agujas blancas (883.5 mg) . RM de H (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : 12.71 (s ancho, 1 H) , 7.54-7.52 (m, 2H) , 7.34-7.31 (m, 2H) , 7.26-7.23 (m, 1H) , 5.52-5.39 (s ancho, 1H), 2.11 (m, 1H) , 1.88 (m, 1H) , 0.79 (t ap, J = 7.4 Hz, 3H) .
Cap-164 Se expuso a H2 a 344.74 kPa en un frasco de Parr durante 42 horas una mezcla de ácido 2-amino-2-fenilbutírico (1.5 g, 8.4 mmol) , formaldehído (14 mi, 37% en agua), HCl 1N (10 mi) y Pd al 10%/C (0.5 mg) en MeOH (40 mi). La reacción se filtró sobre CELITE® y se concentró a vacío, el residuo se suspendió en MeOH (36 mi) y el producto se purificó con una HPLC de fase .inversa (MeOH/H20/TFA) proporcionando la sal TFA de Cap-164 como un sólido blanco (1.7 g) . RMN de XH (DMSO-ds, d = 2.5 ppm, 500 MHz) 7.54-7.47 (m, 5H) , 2.63 (m, 1H) , 2.55 (s, 6H) , 2.31 (m, 1H) , 0.95 (t a , J = 7.3 Hz, 3H) .
Cap- 165 A una mezcla de ácido 2-amino-2-indanocarboxílico (258.6 mg, 1.46 mmol) y ácido fórmico (0.6 mi, 15.9 mmol) en 1 , 2 -dicloroetano (7 mi) se añadió formaldehído (0.6 mi, 37% en agua) . La mezcla se agitó a -25 °C durante 15 min luego se calentó a 70 °C durante 8h. El componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se disolvió en DMF (14 mi) y se purificó por una HPLC de fase inversa (MeOH/H20/TFA) proporcionando la sal TFA de Cap-165 como un aceite viscoso (120.2 mg) . RM de XH (DMS0-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : 7.29-7.21 (m, 4 H) , 3.61 (d, J = 17.4 Hz, 2H) , 3.50 (d, J = 17.4 Hz, 2H) , 2.75 (s, 6H) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + Ci2Hi6N02 : 206.12; encontrado: 206.07.
Cap-166a y -166b Cap-166a: Diastereómero-1 Cap-166b: Diastereómero-2 Caps-166a y -166b se prepararon a partir de (1S, 4S) - ( + ) -2-metil-2.5-diazabiciclo [2.2.1] heptano (2HBr) de conformidad con el proceso descrito para la síntesis de Cap-7a y Cap-lb, con la salvedad de que se separó el éster bencílico intermediario usando una columna semipreparativa CHIRALCEL®OJ, 20 x 250 mm, 10 µ?? eluyendo con una mezcla 85:15 de heptano/etanol a 10 ml/min de velocidad de flujo de elución durante 25 min. Cap-166b: RMN de 1H (DMSO-d6, d = 2.5 ppm, 500 MHz) : 7.45 (d, J = 7.3 Hz , 2H) , 7.27-7.19 (m, 3H) , 4.09 (s, 1H) , 3.34 (s ancho ap, 1H) , 3.16 (s ancho ap, 1H) , 2.83 (d, J=10.1 Hz, 1H) , 2.71 (m, 2H) , 2.46 (m, 1H) , 2.27 (s, 3H) , 1.77 (d, J = 9.8 Hz , 1H) , 1.63 (d, J = 9.8 Hz , 1H) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C14H19N2O2 : 247.14; encontrado: 247.11.
Cap-167 Se agitó una solución de ácido Boc- 1 , 3 -dihidro-2H-isoindol carboxílico racémico (l.Og, 3.8 mmol) en TFA al 20%/CH2Cl2 a -25 °C durante 4h. Se eliminó todo el componente volátil a vacío. Se expuso una mezcla del material bruto resultante, formaldehído (15 mi, 37% en agua), HCl 1N (10 mi) y Pd al 10%/C (10 mg) en MeOH a H2 (275.71 kPa) en un frasco de Parr durante 23 h. La mezcla de reacción se filtró sobre CELITE® y se concentró a vacío proporcionando Cap-167 como una espuma amarilla (873.5 mg) . RMN de ?? (DMSO-d6> d = 2.5 ppm, 500 MHz) 7.59-7.38 (m, 4H) , 5.59 (s, 1H) , 4.84 (d, J = 14 Hz, 1H) , 4.50 (d, J = 14.1 Hz, 1H) , 3.07 (s, 3H) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0Hi2 O2 : 178.09; encontrado: 178.65.
Cap-168 Se preparó Cap-168 racémico a partir de ácido Boc-aminoindano-l-carboxílico racémico de conformidad con el proceso descrito para la preparación de Cap-161, El producto bruto se usó como tal .
Cap-169 Se colocó una mezcla de clorhidrato de ácido 2-amino-2-fenilpropanoico (5.0 g, 2.5 mmol) , formaldehído (15 mi, 37% en agua), HCl 1N (15 mi) y Pd al 10%/C (1.32 g) en MeOH (60 mi) en un frasco de Parr y se agitó en hidrógeno (379.11 kPa) durante 4 días. La mezcla de reacción se filtró sobre Celite y se concentró a vacío. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (MeOH/agua/TFA) proporcionando la sal TFA de Cap-169 como un semisólido viscoso (2.1 g) . RMN de H (CDC13; d = 7.26 ppm, 500 MHz) : 7.58-7.52 (m, 2 H) , 7.39-7.33 (m, 3H) , 2.86 (s ancho, 3H) , 2.47 (s ancho, 3H) , 1.93 (s, 3H) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + CnH16N02 : 194.12; encontrado: 194.12.
Cap-170 Ácido (Sj -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acético A ácido (S) -2-amino-2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (505 mg; 3.18 mmol ; obtenido de Astatech) en agua (15ml) se añadió carbonato sódico (673 mg; 6.35 mmol) y la mezcla resultante se enfrió hasta 0°C momento en el que se añadió cloroformiato de metilo (0.26ml; 3.33mmol) gota a gota durante 5 minutos. Se dejó agitando la reacción durante 18 horas llegando lentamente a temperatura ambiente a medida que se fundía el baño de hielo. La mezcla de reacción se repartió entonces entre HC1 1N y acetato de etilo. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo de nuevo con dos porciones más de acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a vacío proporcionando Cap-170 un residuo incoloro. RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 12.65 (1 H, s ancho) , 7.44 (1 H, d, J=8.24 Hz) , 3.77 - 3.95 (3 H, m) , 3.54 (3 H, s) , 3.11 - 3.26 (2 H, m) , 1.82 - 1.95 (1 H, m) , 1.41 - 1.55 (2 H, m) , 1.21 - 1.39 (2 H, m) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C9Hi6N05 : 218.1; encontrado 218.1, Cap-171 Una solución de 2 - (benciloxicarbonilamino) -2 -(oxetan-3-iliden) acetato de metilo (200 mg, 0.721 mmol ; II Fármaco (2001), 56, 609-613) en acetato de etilo (7 mi) y CH2C12 (4.00 mi) se desgasificó burbujeando nitrógeno durante lOmin. Se añadieron entonces dicarbonato de dimetilo (0.116 mi, 1.082 mmol) y Pd/C (20 mg, 0.019 mmol), la mezcla de reacción se ajustó bajo un balón de hidrógeno y se dejó agitando a temperatura ambiente durante la noche momento en el que la TLC (95:5 CH2Cl2/MeOH: visualizada con tinción realizada en lg de Ce (NH) 2S04, 6g de molibdato amónico, 6 mi de ácido sulfúrico y 100 mi de agua) indicó la conversión completa. La reacción se filtró a través de CELITE® y se concentró. El residuo se purificó por BIOTAGE® (cada con diclorometano en 25 de muestra; elución en columna 25S con diclorometano para 3CV luego 0 a 5% de MeOH/diclorometano sobre 250ml luego mantenido a 5% de MeOH/diclorometano para 250 mi; fracciones de 9 mi) . Las fracciones obtenidas que contenían material deseado y se concentraron hasta 120 mg (81%) de 2- (metoxicarbonilamino) -2- (oxetan-3-il) acetato de metilo como un aceite incoloro. RMN de H (500 MHz, CL0ROF0RM0-D) d ppm 3.29 - 3.40 (m, «7=6.71 Hz, 1 H) 3.70 (s, 3 H) 3.74 (s, 3 H) 4.55 (t, J=6.41 Hz , 1 H) 4.58 - 4.68 (ra, 2 H) 4.67 - 4.78 (m, 2 H) 5.31 (s ancho, 1 H) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C8Hi4NOs : 204.2; encontrado 204.0.
Se añadió a 2 - (metoxicarbonilamino) - 2 - (oxetan- 3 -il) acetato de metilo (50 mg, 0.246 mmol) en THF (2 mi) y agua (0.5 mi) hidróxido de litio monohidratado (10.33 mg, 0.246 mmol) . La solución resultante se dejó agitando durante la noche a temperatura ambiente. La TLC (1:1 EA/Hex; tinción de Hanessian [lg de Ce(NH4)2S04( 6 g de molibdato amónico, 6 mi de ácido sulfúrico y 100 mi de agua]) indicó que quedaba -10% de material de partida. Se añadieron otros 3 mg de LiOH y se dejó agitando durante la noche momento en el que la TLC mostró que no quedaba material de partida. Se concentró a vacío y se colocó en alto vacío durante la noche proporcionando 55 mg de 2- (metoxicarbonilamino) - 2 - (oxetan- 3 - il ) acetato de litio como un sólido incoloro. RMN de 1U (500 MHz, MeOD) d ppm 3.39 -3.47 (m, 1 H) 3.67 (s, 3 H) '4.28 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 4.64 (t, J=6.26 Hz, 1 H) 4.68 (t, J=7.02 Hz, 1 H) 4.73 (d, J=7.63 Hz, 2 H) .
Cap-172 Cap-172, etapa a La siguiente etapa de diazotación se adaptó de Barton, A.; Breukelman, S. P.; Kaye, P. T. ; Meakins, G. D.; Morgan, D. J. J. C. S. Perkin Trans I 1982, 159-164: Se añadió una solución de NaN02 (166 mg, 2.4 mmol) en agua (0.6 mi) a una solución agitada, fría (0 °C) de 2-amino-5-etil-1, 3-tiazol-4-carboxilato de metilo (186 mg, 1.0 mmol), CuS04«5H20 (330 mg, 1.32 mmol), NaCl (260 mg, 4.45 mmol) y H2S04 (5.5 mi) en agua (7.5 mi) . La mezcla se agitó a 0 °C durante 45 min y se dejó calentar hasta temperatura ambiente donde se agitó durante otra 1 h antes de añadir CuCl (118 mg) . Esta mezcla se agitó de nuevo a temperatura ambiente durante 16 h antes de diluirse con salmuera y extraerse con éter dos veces. Las fases orgánicas se reunieron, se secaron sobre MgS04 y se concentraron dando 2-cloro-5-etiltiazol-4-carboxilato de metilo (es decir, Cap-172, etapa a) (175 mg, 85%) como un aceite naranja (80% de pureza) que se usó directamente en la siguiente reacción. TR = 1.99 min (Condición-MDl); CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C7H9CINO2S: 206.01; encontrado: 206.05.
Cap-172 A una solución de 2-cloro-5-etiltiazol-4-carboxilato de metilo (175 mg) en THF/H20/MeOH (20 mi/ 3 mi/ 12 mi) se añadió LiOH (305 mg, 12.76 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche antes de concentrar y neutralizar con HC1 1N en éter (25 mi) . El residuo se extrajo dos veces con acetato de etilo y las fases orgánicas se reunieron, se secaron sobre MgS04 y se evaporaron proporcionando Cap-172 (60 mg, 74%) como un sólido rojo que se usó sin purificación posterior. R N de "?? (300 MHz, DMSO-d6) d ppm 13.03-13.42 (1 H, m) , 3.16 (2 H, q, J = 7.4 Hz) , 1.23 (3 H, t, J = 7.5 Hz) . TR = 1.78 min (Condición-MD1) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C6H7C1N02S : 191.99; encontrado: 191.99.
Cap-173 Cap- pa a La siguiente etapa de diazotación se adaptó de Barton, A.; Breukelman, S. P.; Kaye, P. T. ; Meakins, G. D . ; Morgan, D. J. J. C. S. Perkin Trans I 1982, 159-164: Se añadió una solución de NaN02 (150 mg, 2.17 mmol) en agua (1.0 mi) gota a gota a una solución agitada, fría (0 °C) de 2-amino-5-etil-l, 3-tiazol-4-carboxilato de metilo (186 mg, 1.0 mmol) en H3P02 al 50% (3.2 mi) . La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 h y se dejó calentar hasta temperatura ambiente donde se agitó durante otras 2h. Después de volver a enfriar hasta 0 °C, la mezcla se trató lentamente con una solución de NaOH (85 mg) en agua (10 mi) . La mezcla se diluyó entonces con solución saturada de NaHC03 y se extrajo dos veces con éter. Las fases orgánicas se reunieron, se secaron sobre MgS04 y se concentraron dando 5-etiltiazol- -carboxilato de metilo (es decir, Cap-173, etapa a) (134 mg, 78%) como un aceite naranja (85% de pureza) que se usó directamente en la siguiente reacción. TR = 1.58 min (Condición-MDl) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C7H10NO2S : 172.05; encontrado: 172.05.
Cap-173 A una solución de 5-etiltiazol-4-carboxilato de metilo (134 mg) en THF/H20/MeOH (18 mi/ 2.7 mi/ 11 mi) se añadió LiOH (281 mg, 11.74 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche antes de concentrar y neutralizar con HCl 1N en éter (25 mi) . El residuo se extrajo dos veces con acetato de etilo y las fases orgánicas se reunieron, se secaron sobre MgS04 y se evaporaron proporcionando Cap-173 (90 mg, 73%) como un sólido naranja que se usó sin purificación posterior. RMN de """H (300 Hz, DMSO-de) d ppm 12.74-13.04 (1 H, m) , 3.20 (2 H, q, J = 7.3 Hz) , 1.25 (3 H, t, J = 7.5 Hz) . TR = 1.27 min (Condición- MD1) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C6H8N02S : 158.03; encontrado: 158.04.
Cap-174 Se añadió anhídrido tríflico (5.0 g, 18.0 mmol) gota a gota a una solución fría (0 °C) de 3 -hidroxipicolinato de metilo (2.5 g, 16.3 mmol) y TEA (2.5 mi, 18.0 mmol) en CH2C12 (80 mi) . La mezcla se agitó a 0 °C durante lh antes de dejar calentar hasta temperatura ambiente, momento en el que se agitó durante una hora más. La mezcla se inactivo entonces con solución saturada de NaHC03 (40 mi) y la fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre MgS0 y se concentró dando 3 - (trifluorometilsulfoniloxi ) picolinato de metilo (es decir, Cap-174, etapa a) (3.38 g, 73%) como un aceite marrón oscuro (>95% de pureza) que se usó directamente sin purificación posterior. RMN de H (300 MHz, CDC13) d ppm 8.72-8.79 (1 H, m) , 7.71 (1 H, d, J = 1.5 Hz), 7.58-7.65 (1 H, m) , 4.04 (3 H, s) . TR = 1.93 min (Condición-MDl) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C8H7F3NO5S : 286.00; encontrado: 286.08.
Cap-174 A una solución de 3-(trifluorometilsulfoniloxi ) picolinato de metilo (570 mg, 2.0 mmol) en DMF (20 mi) se añadió LiCl (254 mg, 6.0 mmol) , tributil (vinil ) estanano (761 mg, 2.4 mmol) y dicloruro de bis (trifenilfosfina) paladio (42 mg, 0.06 mmol). La mezcla se calentó a 100 °C durante la noche antes d añadir una solución saturada de KF (20 mi) a la mezcla de reacción a temperatura ambiente. Esta mezcla se agitó durante 4 h antes de filtrar a través de CELITE® y la almohadilla de CELITE® se lavó con acetato de etilo. La fase acuosa del filtrado se separó entonces y se concentró a vacío. El residuo se trató con HC1 4N en dioxanos (5 mi) y la mezcla resultante se extrajo con metanol, se filtró y se evaporó proporcionando Cap-174 (260 mg) como un sólido verde que estaba ligeramente contaminado con sales inorgánicas pero que se usó sin purificación posterior. RMN de 1H (300 MHz, DMSO-de) d ppm 8.21 (1 H, d, J = 3.7 Hz), 7.81-7.90 (1 H, m) , 7.09 (1 H, dd, J = 7.7, 4.8 Hz) , 6.98 (1 H, dd, J = 17.9, 11.3 Hz) , 5.74 (1 H, dd, J" = 17.9, 1.5 Hz), 5.20 (1 H, d, J = 11.0 Hz) . TR = 0.39 min (Condición-MDl) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C8H8N02 : 150.06; encontrado: 150.07.
Cap-175 A una solución de 3- (trifluorometilsulfoniloxi) icolinato de metilo (es decir, Cap-174, etapa a) (570 .mg, 2.0 mmol) , un intermediario en la preparación de Cap-174, en DMF (20 mi) se añadió LiCl (254 mg, 6.0 mmol), tributil (vinil ) estanano (761 mg, 2.4 mmol) y dicloruro de bis (trifenilfosfina) paladio (42 mg, 0.06 mmol). La mezcla se calentó a 100 °C durante 4 h antes de eliminar el solvente a vacío. El residuo se suspendió en acetonitrilo (50 mi) y hexanos (50 mi) y la mezcla resultante se lavó dos veces con hexanos . Se separó entonces la fase de acetonitrilo, se filtró a través de CELITE® y se evaporó. La purificación del residuo por cromatografía instantánea en un aparato Horizon (elución con gradiente de acetato de etilo al 25% en hexanos hasta acetato de etilo al 65% en hexanos) proporcionó 3-vinilpicolinato de metilo (es decir, Cap-175, etapa a) (130 mg, 40%) como un aceite amarillo. RMN de ""? (300 MHz, CDC13) d ppm 8.60 (1 H, dd, J = 4.6, 1.7 Hz), 7.94 (1 H, d, J = 7.7 Hz) , 7.33-7.51 (2 H, m) , 5.72 (1 H, d, 17.2 Hz) , 5.47 (1 H, d, J = 11.0 Hz), 3.99 (3 H, s). 1.29 rain (Condición-MDl) ; CL/EM: Análisis calculado [M+H]+ C9H10NO2: 164.07; encontrado: 164.06.
Cap-175, etapa b Se añadió paladio sobre carbón (10%, 25 mg) a una solución de 3 -vinilpicolinato de metilo (120 mg, 0.74 mmol) en etanol (10 mi) . La suspensión se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de hidrógeno durante 1 h antes de filtrar a través de CELITE® y se lavó la almohadilla de CELITE® con metanol . El filtrado se concentró hasta sequedad proporcionando 3 -etilpicolinato de metilo (es decir, Cap-175, etapa b) que se llevó directamente a la siguiente reacción. TR = 1.15 min (Condición-MDl); CL/EM: Análisis calculado para [M+H]+ C9H12N02: 166.09; encontrado: 166.09.
Cap-175 A una solución de 3 -etilpicolinato de metilo en THF/H20/MeOH (5 mi/ 0.75 mi/ 3 mi) se añadió LiOH (35 mg, 1.47 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días antes de añadir más LiOH (80 mg) . Después de otras 24 horas más a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el solvente se eliminó a vacío. El residuo se trató entonces con HC1 4N en dioxanos (5 mi) y la suspensión resultante se concentró hasta sequedad proporcionando Cap-175 como un sólido amarillo que se usó sin purificación posterior. RMN de H (300 MHz , DMSO-d6) d ppm 8.47 (1 H, dd, J = 4.8, 1.5 Hz) , 7.82-7.89 (1 H, m) , 7.53 (1 H, dd, J = 7.7, 4.8 Hz), 2.82 (2 H, q, J- = 7.3 Hz) , 1.17 (3 H, t, J = 7.5 Hz) . TR = 0.36 min (Condición-MDl) ; CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C8Hi0NO2: 152.07; encontrado: 152.10.
Cap-176 Ácido (S) -2 (4, 4-difluorociclohexil) -2- (metoxicarbonilamino) acético Cap-176, etapa a Se añadió una solución de 1 , 4 -dioxaspiro [4.5] decan-8-ona (15 g, 96 mmol) en EtOAc (150 mi) a una solución de 2-(benciloxicarbonilamino) -2- (dimetoxifosforil ) acetato de metilo (21.21 g, 64.0 mmol) en 1 , 1 , 3 , 3 -tetrametilguanidina (10.45 mi, 83 mmol) y EtOAc (150 mi). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 72 h y luego se diluyó con EtOAc (25 mi) . La fase orgánica se lavó con HCl 1N (75 mi), H20 (100 mi) y salmuera (100 mi), se secó (MgS0 ) , se filtró y se concentró. El residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 5% hasta 25 %/Hexanos; 300g columna) . Las fracciones reunidas que contenían el producto se concentraron entonces a vacío y el residuo se volvió a cristalizar en hexanos/EtOAc dando cristales blancos que corresponden a 2-(benciloxicarbonilamino) -2 - ( 1 , 4-dioxas iro [4.5] decan-8-iliden) acetato de metilo (6.2 g) RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) d ppm 7.30 - 7.44 (5 H, m) , 6.02 (1 H, s ancho), 5.15 (2 H, s) , 3.97 (4 H, s) , 3.76 (3 H, s ancho), 2.84 - 2.92 (2 H, m) , 2.47 (2 H, t, J=6.40 Hz) , 1.74 - 1.83 (4 H, m) . CL (Cond. OLI): TR = 2.89 min. CL/EM: Análisis calculado para [M+Na]+ Ci9H23 Na06: 745.21; encontrado: 745.47 Cap-176, etapa b Se preparó el éster Cap-176, etapa b a partir del alqueno Cap-176, etapa a de conformidad con el proceso de Burk, M. J. ; Gross, M. F, y Martínez J. P. (J. Am. Chem. Soc, 1995, 117, 9375-9376 y referencias en el mismo): Se cargó una botella a alta presión de 500 mi con el alqueno Cap 176, etapa a (3.5 g, 9.68 mmol) en MeOH desgasificado (200 mi) en una capa de N2, La solución se cargó entonces con tetrafluoroborato de ( - ) - 1 , 2 -bis ( (2S , 5S) -2 , 5-dimetilfosfolano) etano (ciclooctadieno) rodio (I) (0.108 g, 0.194 mmol) y la mezcla resultante se cubrió con N2 (3x) y se cargó con H2 (3x) . La solución se agitó vigorosamente a 482 kPa de H2 a temperatura ambiente durante 72 h. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo que quedó se suspendió en EtOAc . La solución pardusca se filtró entonces a través de una almohadilla de gel de sílice y se eluyó con EtOAc . El solvente se concentró a vacío proporcionando un aceite transparente que correspondía al éster Cap-176, etapa b (3.4 g) , RM de XH (500 MHz , CDCl3-d) d ppm 7.28 - 7.43 (5 H, m) , 5.32 (1 H, d, J=9.16 Hz) , 5.06 - 5.16 (2 H, m) , 4.37 (1 H, dd, J=9.00, 5.04 Hz) , 3.92 (4 H, t, J=3.05 Hz) , 3.75 (3 H, s) , 1.64 - 1.92 (4 H, m) , 1.37 - 1.60 (5 H, m) . CL (Cond. OLI): TR = 1.95 min. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + Ci9H26N06: 364.18; encontrado: 364.27.
Cap-176, etapa c Se disolvió el éster Cap 176, etapa b (4.78 g, 13.15 mmol) en THF (15 mi) seguido por la adición secuencial de agua (10 mi), ácido acético glacial (26.4 mi, 460 mmol) y ácido dicloroacético (5.44 mi, 65.8 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 72 h a temperatura ambiente, y la reacción se inactivo mediante la adición lente de Na2C03 sólido con agitación vigorosa hasta que no fue visible la generación de gas. El producto bruto se extrajo en acetato de etilo al 10%-diclorometano y las fases orgánicas se reunieron, se secaron (MgS04) , se filtraron y concentraron. El residuo resultante se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 0 hasta 30%/Hex; 25 g de columna) proporcionando la cetona Cap 176, etapa, c (3.86g) como un aceite transparente. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) d ppm 7.28 - 7.41 (5 H, m) , 5.55 (1 H, d, J=8.28 Hz) , 5.09 (2 H, s) , 4.46 (1 H, dd, J=8.16, 5.14 Hz), 3.74 (3 H, s) , 2.18 - 2.46 (5 H, m) , 1.96 - 2.06 (1 H, m) , 1.90 (1 H, ddd, J=12.99, 5.96, 2.89 Hz) , 1.44 - 1.68 (2 H, m, J=12.36, 12.36, 12.36, 12.36, 4.77 Hz) . CL (Cond. OLI): TR = 1.66 min. CL/EM: Análisis calculado para [M+Na] + Ci7H2iNNa05 : 342.13; encontrado: 342.10.
Cap-176, etapa d Se añadió Deoxo-Fluor® (3.13 mi, 16.97 mmol) a una solución de la cetona Cap-176, etapa c (2.71 g, 8.49 mmol) en CH2C12 (50 mi) seguido por la adición de una cantidad catalítica de EtOH (0.149 mi, 2.55 mmol). La solución amarillenta resultante se agitó a ta durante la noche. La reacción se inactivo mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (25 mi) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3X75 mi) ) .
Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se secaron dando un aceite amarillento. El residuo se purificó por cromatografía en BIOTAGE® (EtOAc al 2% hasta 15%/Hex; 90g de columna) y se recuperó un sólido blanco correspondiente al difluoruro de difluoro aminoácido Cap 176, etapa d (1.5 g) . RMN de XH (400 MHz, CDCl3-d) d ppm 7.29 - 7.46 (5 H, m) , 5.34 (1 H, d, J"=8.28 Hz) , 5.12 (2 H, s) , 4.41 (1 H, dd, J=8.66, 4.89 Hz) , 3.77 (3 H, s) , 2.06 -2.20 (2 H, m) , 1.83 - 1.98 (1 H, m) , 1.60 - 1.81 (4 H, m) , 1.38 - 1.55 (2 H, m) . RMN de 19F (376 MHz , CDCl3-d) d ppm -92.15 (1 F, d, J=237.55 Hz) , -102.44 (1 F, d, J=235.82 Hz). CL (Cond. OLI): TR = 1.66 min. CL/EM : Análisis calculado para [2M+Na] + C34H42F4 2 a08 : 705.28; encontrado: 705.18.
Cap-176, etapa e Se disolvió el difluoruro Cap 176, etapa d (4 g, 11.72 mmol) en MeOH (120 mi) y se cargó con Pd/C (1.247 g, 1.172 mmol) . Se inyectó en la suspensión N2 (3x) y la mezcla de reacción se colocó bajo una presión de 101 kPa de H2 (balón) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 48 h. La suspensión se filtró entonces a través de una almohadilla de CELITE® y se concentró a vacío dando un aceite que corresponde al aminoácido Cap-176, etapa e (2.04 g) y que se usó sin purificación posterior. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 3.62 (3 H, s) , 3.20 (1 H, d, J=5.77 Hz) , 1.91 -2.09 (2 H, m) , 1.50 - 1.88 (7 H, m) , 1.20 - 1.45 (2 H, m) . RMN de 19F (376 MHz, DMS0-d6) d ppm -89.39 (1 F, d, J=232.35 Hz) , -100.07 (1 F, d, J=232.35 Hz) . RMN de 13C (101 MHz , DMSO-d6) d ppm 175.51 (1 C, s) , 124.10 (1 C, t, J=241.21, 238.90 Hz) , 57.74 (1 C, s) , 51.39 (1 C, s) , 39.23 (1 C, s ancho), 32.02 - 33.83 (2 C, m) , 25.36 (1 C, d, J=10.02 Hz) , 23.74 (1 C, d, J=9.25 Hz) . CL (Cond. OL2) : TR = 0.95 min. CL/EM: Análisis calculado para [2M+H] + C18H31F4 2O2 : 415.22; encontrado: 415.40.
Cap-176, etapa f Se añadió cloroformiato de metilo (1.495 mi, 19.30 mmol) a una solución de aminoácido Cap 176, etapa e (2 g, 9.65 mmol) y DIEA (6.74 mi, 38.6 mmol) en CH2C12 (100 mi). La solución resultante se agitó a ta durante 3 h y se eliminaron los volátiles a presión reducida. El residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 0% hasta 20%/Hex; 90 g de columna) . Se recuperó un aceite transparente que solidificó en reposo a vacío y que correspondía al carbamato Cap-176, etapa f (2.22 g) . RMN de XH (500 MHz, CDCl3-d) d ppm 5.27 (1 H, d, J=8.55 Hz), 4.39 (1 H, dd, J=8.85, 4.88 Hz) , 3.77 (3 H, s) , 3.70 (3 H, s), 2.07 - 2.20 (2 H, m) , 1.84 - 1.96 (1 H, m) , 1.64 - I.82 (4 H, m) , 1.39 - 1.51 (2 H, m) . RMN de 19F (471 MHz , CDCl3-d) d ppm -92.55 (1 F, d, J=237.13 Hz) , -102.93 (1 F, d, J=237.12 Hz) . RMN de 13C (126 Hz , CDCl3-d) d ppm 171.97 (1 C, s) , 156.69 (1 C, s) , 119.77 - 125.59 (1 C, m) , 57.24' (1 C, s ancho), 52.48 (1 C, s ancho), 52.43 (1 C, s) , 39.15 (1 C, s) , 32.50 - 33.48 (2 C, m) , 25.30 (1 C, d, J=9.60 Hz) , 24.03 (1 C, d, J=9.60 Hz) . CL (Cond. 0L1) : TR = 1.49 min. CL/EM: Análisis calculado para [M+Na] + C11Hi7F2NNa04 : 288.10; encontrado: 288.03.
Cap-176 Ácido (S) -2 (4, 4 -difluorociclohexil) -2- (metoxicarbonilamino) acético Se añadió una solución de LiOH (0.379 g, 15.83 mmol) en agua (25 mi) a una solución de carbamato Cap-176, etapa f (2.1 g, 7.92 mmol) en THF (75 mi) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se eliminó el THF a vacío y la fase acuosa restante se acidificó con solución de HC1 1N (2 mi) y luego se extrajo con EtOAc (2 X 50 mi) . Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron dando una espuma que correspondía al Cap-176 (1.92 g) . RMN de *H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 12.73 (1 H, s) , 7.50 (1 H, d, J=8.78 Hz), 3.97 (1 H, dd, J=8.53, 6.02 Hz) , 3.54 (3 H, s) , 1.92 - 2.08 (2 H, m) , 1.57 - 1.90 (5 H, m) , 1.34 - 1.48 (1 H, m) , 1.27 (1 H, qd, J=12.72, 3.26 Hz) . RMN de 19F (376 MHz , DMSO-d6) d ppm -89.62 (1 F, d, J=232.35 Hz) , -99.93 (1 F, d, J=232.35 Hz) . CL (Cond. OL2): TR = 0.76 min. CL/EM: Análisis calculado para [M-H] + C10H14F2 O4 : 250.09; encontrado: 250.10.
Cap-177a y 177b Cap-177a y 177b, etapa a Se añadió 1 , 1 , 3 , 3 -tetrametilguanidina (0.985 mi, 7.85 mmol) a una solución agitada de 2-(benciloxicarbonilamino) -2- (dimetoxifosforil) acetato de metilo (2.0 g, 6.0 mmol) en EtOAc (40 mi) y la mezcla se agitó a ta bajo N2 durante 10 min. A continuación se añadió dihidro-2H-piran-3 (4H) -ona [23462-75-1] (0.604 g, 6.04 mmol) y la mezcla se agitó a ta durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió entonces en el frigorífico 10 minutos y se neutralizó con ácido cítrico acuoso (1.5 g en 20 mi de agua) . Las dos fases se repartieron y la fase orgánica se lavó con HCl acuoso 0.25 N y salmuera, y luego se secó (MgS04) y se concentró hasta un aceite incoloro. El material bruto se purificó por cromatografía sobre sílice instantánea (solvente de carga: DCM,. eluido con EtOAc/Hexanos , gradiente desde 20% hasta 30% de EtOAc) proporcionando dos productos isoméricos: El primer producto que eluyó fue (Z)-2- (benciloxicarbonilamino) -2- (2H-piran-3 (4H, 5H, 6H) -iliden) acetato de metilo (490 mg) (sólido blanco), y el segundo fue (E) -2- (benciloxicarbonilamino) -2- (2H-piran-3 (4H, 5H, 6H) -iliden) acetato de metilo (433 mg) (sólido blanco). Tiempo de retención de CL-EM 1.398 min (para el isómero Z) y 1.378 min (para el isómero E) ; m/z 304.08 (para el isómero Z) y 304.16 (para el isómero E) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío. RMN de 1H (400 MHz , CLOROFORMO-d) (para el isómero Z) d ppm 7.30 - 7.44 (m, 5 H) , 6.18 (s ancho, 1 H) , 5.10 - 5.17 (m, 2 H) , 4.22 (s, 2 H) , 3.78 (s ancho, 3 H) , 2.93 - 3.02 (m, 2 H) , 1.80 (dt, J=11.7, 5.8 Hz, 2 H) , 1.62 (s, 2 H) . RMN de H (400 MHz, CLOROFORMO-d) (para el isómero E) d ppm 7.31 - 7.44 (m, 5 H) , 6.12 (s ancho, 1 H) , 5.13 -5.17 (m, 2 H) , 4.64 (s ancho, 2 H) , 3.70 - 3.82 (m, 5 H) , 2.49 (t, J=6.5 Hz, 2 H) , 1.80 (s ancho, 2 H) . (Nota: la regioquímica absoluta se determinó por los desplazamientos de la RMN de ""? y las constantes de acoplamiento) .
Cap-177a y 177b, etapa b Se añadió ( - ) - 1 , 2 -bis ( (2S , 5S) -2 , 5 -dimetilfosfolano) etano (ciclooctadieno) -rodio (I) tetrafluoroborato (28.2 mg, 0.051 mmol) a una solución agitada de (Z) -2- (benciloxicarbonilamino) -2- (2H-piran-3 (4H, 5H, 6H) -iliden) acetato de metilo (310 mg, 1.015 mmol) en MeOH (10 mi) y la mezcla se aspiró por succión con N2, seguido por H2, y a continuación se agitó la reacción bajo H2 (4.136 x 105 Pa) a ta durante 2d. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre sílice instantánea (solvente de carga: DCM, eluido con EtOAc al 20% en hexanos) proporcionando (S)-2-(benciloxicarbonilamino) -2- ( (S) -tetrahidro-2H-piran-3 -il) acetato de metilo (204 mg) como un aceite incoloro. Tiempo de retención de CL-EM 1.437 min; m/z 307.89 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 n . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , CLOROFORMO- d) d ppm 7.30 - 7.46 (m, 5 H) , 5.32 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 5.12 (s, 2 H) , 4.36 (dd, J=8.9, 5.6 Hz , 1 H) , 3.84 - 3.98 (m, 2 H) , 3.77 (s, 3 H) , 3.28 - 3.37 (m, 1 H) , 3.23 (dd, J=11.3, 10.5 Hz, 1 H) , 2.04 - 2.16 (m, 1 H) , 1.61 - 1.75 (ra, 3 H) , 1.31 - 1.43 (m, 1 H) .
El otro estereoisómero ((E) -2- (benciloxicarbonilamino) -2- (2H-piran-3 (4H( 5Hf 6H) -iliden) acetato de metilo) (360 mg, 1.18 mmol) se redujo de una forma similar proporcionando (S)-2- (benciloxicarbonilamino) -2- ( (R) -tetrahidro-2H-piran-3 -il) acetato de metilo (214 mg) como un aceite incoloro. Tiempo de retención de CL-EM 1.437 min; m/z 308.03 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B( un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, CLOROFORMO- d) d ppm 7.30 - 7.44 (m, 5 H) , 5.31 (d, J=9.0 Hz, 1 H) , 5.12 (s, 2 H) , 4.31 (dd, J=8.7, 6.9 Hz, 1 H) , 3.80 - 3.90 (m, 2 H) , 3.77 (s, 3 H) , 3.37 (td, J=10.8, 3.5 Hz, 1 H) , 3.28 (dd, J"=11.3, 9.8 Hz, 1 H) , 1.97 - 2.10 (m, 1 H) , 1.81 (d, J=11.5 Hz, 1 H) , 1.61 - 1.72 (m, 2 H) , 1.33 - 1.46 (m, 1 H) .
Cap-Illa y 111b, etapa c Se añadió Pd al 10%/C (69.3 mg, 0.065 mmol) a una solución de (S) -2- (benciloxicarbonilamino) -2- ( (S) -tetrahidro-2H-piran-3-il) acetato de metilo (200 mg, 0.651 mmol) y dicarbonato de dimetilo [4525-33-1] (0.104 mi, 0.976 mmol) en MeOH (10 mi) . La mezcla de reacción se evacuó por succión con N2, seguido por H2, y luego se agitó la reacción bajo H2 (3.79 x 105 Pa) a ta durante 5 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de CELITE®/sílice y el filtrado se concentró hasta un aceite incoloro. El aceite bruto se purificó por cromatografía sobre sílice instantánea (solvente de carga: DCM, eluido con EtOAc al 30% en hexanos) proporcionando el producto (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (S) -tetrahidro-2H-piran-3-il) acetato de metilo (132 mg) como aceite incoloro. Tiempo de retención de CL-EM 0.92 min; m/z 231.97 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío. RMN de XH (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 5.24 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 4.34 (dd, J=8.9, 5.6 Hz, 1 H) , 3.84 -3.97 (m, 2 H) , 3.77 (s, 3 H) , 3.70 (s, 3 H) , 3.29 - 3.38 (m, 1 H) , 3.23 (dd, .7=11.2, 10.4 Hz, 1 H) , 2.03 - 2.14 (m, 1 H) , . 1.56 - 1.75 (m, 3 H) , 1.32 - 1.43 (m, 1 H) .
Se transformó otro diastereómero ( (S) -2- (benciloxicarbonilamino) -2- ( (R) -tetrahidro-2H-piran-3 -il) acetato de metilo) de una forma similar proporcionando (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (R) -tetrahidro-2H-piran-3 -il) acetato de metilo como un aceite incoloro. Tiempo de retención de CL-EM 0.99 min; m/z 231.90 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío. RMN de XH (400 MHz , CLOROFORMO-d) d .ppm 5.25 (d, J 8.0 Hz, 1 H) , 4.29 (dd, J=8.4, 7.2 Hz , 1 H) , 3.82 -3.90 (m* 2 H) , 3.77 (s, 3 H) , 3.70 (s, 3 H) , 3.37 (td, .7=10.8, 3.3 Hz, 1 H) , 3.28 (t, .7=10.5 Hz , 1 H) , 1.96 - 2.08 (m, 1 H) , 1.81 (dd, J=12.9, 1.6 Hz, 1 H) , 1.56 - 1.72 (m, 2 H) , 1.33 - 1.46 (m, 1 H) .
Cap-177a y 177b, etapa d A una solución de (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (S) -tetrahidro-2H-piran-3-il) acetato de metilo (126 mg, 0.545 mmol) en THF (4 mi) agitando a ta se añadió una solución de LiOH 1M (1.090 mi, 1.090 mmol) en agua. La reacción se agitó a ta durante 3h, se neutralizó con HC1 1M (1.1 mi) y se extrajo con EtOAc (3x 10 mi). Los orgánicos se secaron, se filtraron y se concentraron proporcionando ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (S) -tetrahidro-2H-piran-3-il) acético {Cap-177a) (125 mg) como un aceite incoloro transparente. Tiempo de retención de CL-EM 0.44 min; m/z 218.00 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un .gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, CLOROFORMO- d) d ppm 5.28 (d, J"=8.8 Hz , 1 H) , 4.38 (dd, .7=8.7, 5.6 Hz, 1 H) , 3.96 - 4.04 (m, 1 H) , 3.91 (d, J=11.0 Hz, 1 H) , 3.71 (s, 3 H) , 3.33 - 3.41 (m, 1 H) , 3.24 - 3.32 (m, 1 H) , 2.10 - 2.24 (m, 1 H) , 1.74 -1.83 (m, 1 H) , 1.63 - 1.71 (m, 2 H) , 1.35 - 1.49 (m, 1 H) .
Se transformó otro diastereómero ((S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- ( (R) -tetrahidro-2H-piran-3 -il) acetato de metilo) de una forma similar proporcionando ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (R) -tetrahidro- 2H-piran- 3 - il ) acético (Cap-177b) como un aceite incoloro. Tiempo de retención de CL-EM 0.41 min; m/z 217.93 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 de 3.0x50mm usando un detector de UV-Vis SPD-10AV a una longitud de onda de detección de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de 100% de solvente A/0% de solvente B hasta 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 minutos, un tiempo de mantenimiento de 1 minuto, y un tiempo de análisis de 4 minutos donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato amónico 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato amónico 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío . RMN de ? (400 MHz, CLOROFORMO- d) d ppm 6.18 (s ancho, 1 H) , 5.39 (d, J"=8.5 Hz, 1 H) , 4.27 - 4.37 (m, 1 H) , 3.82 - 3.96 (m, 2 H) , 3.72 (s, 3 H) , 3.42 (td, ,7=10.8, 3.3 Hz, 1 H) , 3.35 (t, J"=10.4 Hz, 1 H) , 2.01 - 2.18 (m, 1 H) , 1.90 (d, J=11.8 Hz, 1 H) , 1.59 - 1.76 (m, 2 H) , 1.40 - 1.54 (m, 1 H) .
Cap-178 Ácido 2- (metoxicarbonilamino) -2- ( (2R, 4S) -2-metiltetrahidro 2H-piran-4-il) acético Cap-178, etapa a A una solución de diacetato de (2S, 3S, 4S) -2-metil- 3 , 4-dihidro-2H-piran73 , 4-diilo (5 g, 23.34 mmol) en 20 mi de MeOH en un depósito de hidrogenación se añadió Pd/C (150 mg, 0.141 mmol) . La mezcla resultante se sometió a hidrogenación a 2.757 x 105 Pa en" un agitador de Parr durante 1 hora. La mezcla se filtró a continuación y el filtrado se concentró dando Cap-178, etapa a (5.0 g) como un aceite transparente, que solidificó en reposo. RMN de 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 4.85 - 4.94 (1 H, m) , 4.69 (1 H, t, J=9.46 Hz) , 3.88 -3.94 (1 H, m) , 3.44 (1 H, td, J=12.21, 1.83 Hz) , 3.36 (1 H, dq, J=9.42, 6.12 Hz) , 2.03 - 2.08 (1 H, m) , 2.02 (3 H, s) , 2.00 (3 H, s) , 1.70 - 1.80 (1 H, m) , 1.16 (3 H, d, J=6.10 Cap-178, etapa b A una solución de Cap-178, etapa a (5.0 g, 23 mmol) en 50 mi de MeOH se añadieron varias gotas de metóxido sódico. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 min, se añadió metóxido sódico (0.1 mi, 23.12 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante la noche . El solvente se eliminó entonces a vacío. El residuo se diluyó con benceno y se concentró dando el diol correspondiente como un sólido amarillo. El sólido se disolvió en 50 mi de piridina y a esta solución a -35CC se añadió cloruro de benzoilo (2.95 mi, 25.4 mmol) gota a gota. La mezcla resultante se agitó a -35 °C durante 1 hora y luego a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con Et20 y se lavó con agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X) . Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgS04 y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc al 5%-15%/Hex) dando Cap-178, etapa b (4.5 g) como aceite transparente que cristalizó lentamente tras reposo prolongado. CL/EM: Análisis calculado para [M+Na] + Ci3Hi6Na04 259.09; encontrado 259.0; RM de 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.02 - 8.07 (2 H, m) , 7.55 -7.61 (1 H, m) , 7.45 (2 H, t, 7=7.78 Hz) , 5.01 (1 H, ddd, «7=11.44, 8.70, 5.49 Hz) , 3.98 (1 H, ddd, .7=11.90, 4.88, 1.53 Hz), 3.54 (1 H, td, 7=12.36, 2.14 Hz) , 3.41 (1 H, t, J=9.00 Hz) , 3.31 - 3.38 (1 H, m) , 2.13 - 2.19 (1 H, m) , 1.83 - 1.94 (1 H, m), 1.36 (3 H, d, 7=5.80 Hz) .
Cap-178, etapa c A una mezcla de NaH (1.143 g, 28.6 mmol) (60% en aceite mineral) en 6 mi de CS2 se añadió Cap-178, etapa b (4.5 g, 19 mmol) en 40 mi de CS2 gota a gota durante 15)min. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla viró a color naranja claro con algo de sólido. Se añadió gota a gota entonces Mel (14.29 mi, 229 mmol) durante 20 min. La mezcla se agitó entonces a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se inactivo cuidadosamente con solución saturada de NH4C1. La mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgS04 y se concentraron. El producto bruto se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc al 6%/Hex) dando Cap-178, etapa c (3.13 g) como aceite transparente. CL/EM: Análisis calculado para [M+Na]+ Ci5H18Na04S2 349.05; encontrado 349.11; RMN de 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.94 - 8.00 (2 H, m) , 7.50 - 7.58 (1 H, m) , 7.41 (2 H, t, J=7.78 Hz) , 5.96 (1 H, t, J=9.46 Hz) , 5.28 (1 H, ddd, J=11.37, 9.38, 5.49 Hz) , 4.02 (1 H, ddd, .7=11.98, 4.96, 1.68 Hz) , 3.54 - 3.68 (2 H, m) , 2.48 (3 H, s) , 2.31 (1 H, dd) , 1.88 - 1.99 (1 H, m) , 1.28 (3 H, d) .
Cap-178, etapa d A una mezcla de Cap-178, etapa c (3.13 g, 9.59 mmol) y AIBN (120 mg, 0.731 mmol) en 40 mi de benceno a 80 °C se añadió hidruro de tri-n-butilestaño (10.24 mi, 38.4 mmol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura de reflujo durante 20 min y luego se enfrió hasta temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con éter dietílico y se añadieron 100 mi de solución acuosa de KF (10 g) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 30 min. Se separaron entonces las dos fases y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2X) . La fase orgánica se secó con MgS04 y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, desactivada con Et3N al 3% en Hexanos y se inyectó Et3N al 3% en Hexanos para eliminar el derivado de tributilestaño y luego se eluyó con EtOAc al 15%/Hex) dando Cap-178, etapa d (1.9 g) como aceite transparente. RMN de 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.98 - 8.07 (2 H, m) , 7.52 - 7.58 (1 H, m) , 7.43 (2 H, t, J=7.63 Hz) , 5.08 - 5.17 (1 H, m) , 4.06 (1 H, ddd, ,7=11.90, 4.88, 1.53 Hz) , 3.50 - 3.59 (2 H, m) , 2.08 -2.14 (1 H, m) , 1.99 - 2.06 (1 H, m) , 1.69 - 1.80 (1 H, m) , I.41 - 1.49 (1 H, m) , 1.24 (3 H, d, J=6.10 Hz) .
Cap-178, etapa e A una mezcla de Cap-178, etapa d (1.9 g, 8.63 mmol) en 10 mi de MeOH se añadió metóxido sódico (2 mi, 4.00 mmol) (2 M en metanol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. El solvente se eliminó a vacío. La mezcla se neutralizó con solución saturada de NH4C1 y se extrajo con EtOAc (3X) . Las fases orgánicas se secaron con MgS0 y se concentraron dando Cap-178, etapa e (0.8 g) como aceite transparente. El producto se usó en la etapa siguiente sin purificación posterior. RMN de 1H (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 4.01 (1 H, ddd, J=11.80, 5.02, 1.76 Hz) , 3.73 - 3.83 (1 H, m) , 3.36 - 3.46 (2 H, m) , 1.92 - 2.00 (1 H, m) , 1.88 (1 H, m) , 1.43 - 1.56 (1 H, m) , 1.23 (3 H, d) , 1.15 - 1.29 (1 H, m) .
Cap-178, etapa f Se añadió cloruro de tosilo (2.63 g, 13.77 mmol) a una solución de Cap-178, etapa e (0.8 g, 6.89 mmol) y piridina (2.23 mi, 27.5 mmol) en 100 mi de CH2C12, La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 días . Se añadieron entonces 10 mi de agua a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora. Se separaron las dos fases y la fase orgánica se lavó con agua y solución acuosa 1 N de HCl . La fase orgánica se secó con MgS04 y se concentró dando Cap-178, etapa f (1.75 g) como un sólido amarillo claro. El producto se usó en la etapa siguiente sin purificación posterior. Análisis calculado para [M+H]+ C13H1904S 271.10; encontrado 270.90; RMN de XH (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.79 (2 H, d, J=8.24 Hz) , 7.34 (2 H, d, J=7.93 Hz) , 4.53 - 4.62 (1 H, m) , 3.94 (1 H, ddd, J=12.13, 4.96, 1.83 Hz) , 3.29 - 3.41 (2 H, m) , 2.45 (3 H, s) , 1.90 -1.97 (1 H, m) , 1.79 - 1.85 (1 H, m) , 1.64 - 1.75 (1 H, m) , 1.38 - 1.48 (1 H, m) , 1.17 (3 H, d, J=6.10 Hz).
Cap-178, etapa g En un tubo de microondas se colocó 2-(difenilmetilenaraino) acetato de etilo (1.6 g, 5.92 mmol) y Cap-178, etapa f (1.6 g, 5.92 mmol) . Se añadieron 10 mi de tolueno. El tubo se selló y se añadió gota a gota bajo N2 LiH D'S (7.1 mi, 7.10 mmol) (1 N en tolueno) . La solución marrón oscura resultante se calentó a 100 °C bajo radiación de microondas durante 6 horas. A la mezcla se añadió entonces agua y la mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con gS04 y se concentraron dando una mezcla diastereomérica de Cap-3, etapa g (3.1 g) como un aceite naranja. La mezcla bruta se sometió a la etapa siguiente sin separación. CL/EM: Análisis calculado para [ +H] + C23H28NO3 366.21; encontrado 366.3.
Cap-178, etapa h una solución de la mezcla diastereomérica de Cap 178 de etilo, etapa g en 20 mi de THF se añadió HCl (30 mi, 60.0 mmol) (2 N acuoso) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se extrajo con EtOAc y la fase acuosa se concentró dando una sal HCl de Cap-178, etapa h (1.9 g) como un aceite naranja. La sal se usó en la etapa siguiente sin purificación posterior. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + Ci0H2o 03 202.14; encontrado 202.1.
Cap-178, etapa i agitó una solución de 1.9 g Cap-178, etapa (sal HCl), DiPEA (4.19 mi, 24.0 mmol) y cloroformiato de metilo (1.24 ral, 16.0 mmol) en 20 ral de CH2C12 a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con CH2C12 y se lavó con agua. La fase orgánica se secó con Na2S04 y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc al 0-20%/Hex) dando Cap-178, etapa i (1.1 g) como un aceite amarillo. Análisis calculado para [M+Na] + C12H2i a05 282.13; encontrado 282.14; RMN de XH (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 5.16 (1 H, s ancho), 4.43 - 4.58 (1 H, m) , 4.17 - 4.28 (2 H, m) , 3.89 - 4.03 (1 H, m) , 3.72 - 3.78 (2 H, m) , 3.67 - 3.72 (3 H, m)., 2.07 - 2.19 (1 H, m) , 1.35 - 1.77 (4 H, m) , 1.30 (3 H, td, J=7.09, 2.89 Hz) , 1.19 (3 H, d, J=6.53 Hz) .
Cap-178, etapa j A una mezcla de Cap-178, etapa i (1.1 g, 4.2 mmol) en 5 mi de THF y 2 mi de agua se añadió LiOH (6.36 ral, 12.7 mmol) (2 N ac . ) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se neutralizó entonces con HCl acuoso 1 N y se extrajo con EtOAc (3X) . Las fases orgánicas combinadas se secaron con gS04 y se concentraron dando Cap-178, etapa j (0.8 g) como un aceite transparente. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + CioHig Os 232.12 ; encontrado 232.1; RMN de ??. (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 5.20 (1 H, d, J=8.28 Hz), 4.54 (1 H, t, .7=8.16 Hz) , 3.95 - 4.10 (1 H, m) , 3.66 - 3.85 (5 H, m) , 2.15 - 2.29 (1 H, ra) , 1.41 - 1.85 (4 H, m) , 1.23 (3 H, dd, J=6.53 , 1.76 Hz) .
Cap-178, etapa k A una solución de Cap-178, etapa j (240 mg, 1.04 mmol), (S) -1-feniletanol (0.141 mi, 1.142 mmol) y EDC (219 mg, 1.14 mmol) en 10 mi de CH2C12 se añadió DMAP (13.95 mg, 0.114 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche y el solvente se eliminó a vacío. El residuo se recogió en EtOAc, se lavó con agua, se secó con MgS04 y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía (gel de sílice, EtOAc al 0-15%/Hexanos) dando Cap-178, etapa k como una mezcla de dos diastereómeros . La mezcla se separó por HPLC quiral (columna CHIRALPAK® AS, 21 x 250 mm, 10 um) eluyendo con dietilamina al 90%/heptano al 0.1% /EtOH al 10% a 15 ml/min dando Cap-178, estereoisómero 1 de la etapa k (eluye primero) y Cap-178, estereoisómero 2 de la etapa k (eluye segundo) como sólido blancos. La estereoquímica de los dos isómeros no se determinó.
Cap-178, estereoisómero 1 de la etapa k (130 mg) : CL/EM: Análisis calculado para [M+Na]+ C18H25NNa05 358.16; encontrado 358.16; RM de ? (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.28 - 7.38 (5 H, m) , 5.94 (1 H, q, .7=6.71 Hz) , 5.12 (1 H, d, J=9.16 Hz) , 4.55 (1 H, t, J=9.00 Hz) , 3.72 - 3.81 (1 H, m) , 3.67 (3 H , s) , 3.60 - 3.70 (2 H , m), 1.98 - 2.08 (1 H , m) , 1.59 (3 H , d, ¿7=6.71 Hz), 1.38 - 1.47 (2 H, m), 1.30 (2 H , t, J=5.34 Hz) , 0.93 (3 H, .d, J=6.41 Hz) .
Cap-178, estereoisómero 1 Ácido 2 - (met oxi carboni lamino) -2 - ( (~2R , 4S) -2 - metil tetrahidro - 2H-piran- 4 -il) acético A una solución de Cap-178, estereoisómero 1 de la etapa k (ácido ( S ) - 2 - ( metoxi carboni 1 amino ) - 2 - ( ( 2 S , 4R) -2-me tiltetrahidro-2H-piran-4-il) acético) (150 mg, 0.447 mmol) en 10 mi de EtOH se añadió Pd/C (20 mg, 0.188 mmol) y la mezcla se sometió a hidrogenac ion en un agitador de Parr a 2.757 x 105 Pa durante la noche. La mezcla se filtró a continuación y el filtrado se concentró dando Cap-178, estereoisómero 1 (100 mg) como un sólido blanco pegajoso. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + CioH13N05 232.12 ; encontrado 232.1; RMN de K (500 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 5.14 - 5.27 (1 H, m) , 4.51 (1 H, t, J=8.39 Hz) , 3.90 - 4.07 (1 H, m) , 3.60 -3.83 (5 H, m) , 2.06 - 2.27 (1 H, m) , 1.45 - 1.77 (4 H, m) , 1.21 (3 H, d, J=6.41 Hz) .
Cap-179 tereoisómero 1 tereoisómero 2 pa Se disolvió 2 , 6-dimetil-4H-piran-4-ona (10 g, 81 mmol) en etanol (125 mi) y se añadió Pd/C (1 g, 0.94 mmol) . La mezcla se sometió a hidrogenación en un agitador de Parr bajo H2 (0.325 g, 161 mmol) (4.825 x 105 Pa) a temperatura ambiente durante 12 horas. El catalizador se filtró a través de una almohadilla de CELITE® y se lavó con etanol. El filtrado se concentró a vacío y le residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc 2% a 25 %/Hex; columna de 160 g) . Se aislaron dos fracciones de aceites transparentes. La primera que eluye corresponde a (2R, 6S) -2 , 6-dimetildihidro-2H-piran-4 (3H) -ona (1.8 g, 14.04 mmol, 17.43 % de rendimiento) mientras que la segunda corresponde a Cap-179, etapa a (1.8 g) .
Datos de (2R, 6S) -2 , 6-dimetildihidro-2H-piran-4 (3H) -ona: RMN de XH (500 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 3.69 (2 H, ddd, J"=11.29( 5.95, 2.29 Hz), 2.24 - 2.36 (2 H, m) , 2.08 - 2.23 (2 H, m) , 1.18 - 1.34 (6 H, m) ; 13C NMR (126 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 206.96 (1 C, s ancho), 72.69 (2 C, s), 48.70 (2 C, s), 21.72 (2 C, s) .
Datos de Cap-179, etapa a: RMN de H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 3.69 - 3.78 (1 H, m) , 3.36 - 3.47 (2 H, m) , 2.10 (1 H, s ancho), 1.88 (2 H, dd, ,7=12.05, 4.73 Hz) , 1.19 (6 H, d, J=6.10 Hz) , 1.10 (2 H, q, J=10.70 Hz) ; 13C NMR (126 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 71.44 (2 C, s) , 67.92 (1 C, s) , 42.59 (2 C, s) , 21.71 (2 C, s) .
Cap-179, etapa b Se añadió gota a gota DEAD (2.311 mi, 14.59 mmol) a una solución de Cap-179, etapa a (0.38 g, 2.92 mmol), ácido 4-nitrobenzoico (2.195 g, 13.14 mmol) y Ph3P (3.83 g, 14.59 mmol) en benceno (25 mi) . Se detectó generación de calor y la solución ámbar resultante se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se purificó mediante BIOTAGE® (EtOAc al 0 a 15%/Hex; columna de 80 g) . Se aisló un sólido blanco que corresponde a Cap-179, etapa b (0.77 g) . CL/EM: Análisis calculado para [M] + CiHi7N05 : 279.11; encontrado 279.12, RMN de XH (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.27 - 8.32 (2 H, m) , 8.20 - 8.24 (2 H, m) , 5.45 (1 H, quin, J=2.82 Hz) , 3.92 (2 H, dqd, .7=11.90, 6.10, 6.10, 6.10, 1.53 Hz) , 1.91 (2 H, dd, «7=14.80, 2.29 Hz), 1.57 (3 H, dt , «7=14.65, 3.05 Hz) , 1.22 (6 H, d, «7=6.10 Hz) Cap-179, etapa Se . añadió una solución de LiOH (0.330 g, 13.8 mmol) en agua (8 mi) a una solución de Cap-179, etapa b (0.77 g, 2.76 mmol) en THF (30 mi) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Se eliminó el THF a presión reducida y la fase acuosa se diluyó con más agua (20 mi) y se extrajo con EtOAc (3 X 15 mi) . Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron a vacío. Se recuperó un residuo oleoso con un sólido blanco. La mezcla se trituró con hexanos y el sólido se separó por filtración proporcionando un aceite transparente que corresponde a Cap-179, etapa c (0.34 g, 2.61 mmol, 95 % de rendimiento). RMN de XH (500 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 4.21 (1 H, quin, «7=2.82 Hz) , 3.87 - 3.95 (2 H, m) , 1.72 (1 H, s ancho), 1.63 (2 H, dd, «7=14.34, 2.14 Hz) , 1.39 - 1.47 (2 H, m) , 1.17 (6 H, d, «7=6.41 Hz) .
Cap-179, etapa d Se añadió cloruro de tosilo (3.98 g, 20.89 mmol) a una solución de Cap-179, etapa c (1.36 g, 10.5 mmol) y piridina (3.38 mi, 41.8 mmol) en CH2C12 (150 mi) a temperatura ambiente y se agitó durante 24 horas y luego se concentró hasta un aceite amarillo. El residuo que queda se añadió a piridina (20 mi) y agua (30 mi) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 1/2 h. La mezcla se extrajo con Et20 (75 mi) y la fase orgánica separada se lavó concienzudamente con HCl acuoso 1 N (4 X 50 mi) . La fase orgánica se secó a continuación (MgS04) , se filtró y se concentró. Se aisló un sólido blanco que corresponde a Cap-179, etapa d (2.2 g) . CL/EM : Análisis calculado para [2M+H] + C28H4i08S2 : 569.22; encontrado 569.3, RMN de XH (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.80 (2 H, d, J=8.28 Hz) , 7.35 (2 H, d, J=8.03 Hz) , 4.89 (1 H, quin, J=2.82 Hz), 3.77 - 3.88 (2 H, m) , 2.46 (3 H, s), 1.77 (2 H, dd, J=14.93, 2.89 Hz) , 1.36 (2 H, ddd, J=14.31, 11.54, 2.76 Hz) , 1.13 (6 H, d, J=6.27 Hz) .
Cap-179, etapa e Se añadió LiHMDS (4.30 mi, 4.30 mmol) a una solución de Cap-179, etapa d (1.02 g, 3.59 mmol) y 2- (difenilmetilenamino) acetato de bencilo (1.181 g, 3.59 mmol) en tolueno (25 mi) a temperatura ambiente en un vial de microondas sellado y la mezcla resultante se agitó entonces durante 5 h a 100 °C bajo radiación de microondas. La reacción se inactivo con agua (10 mi), se extrajo con EtOAc, se lavó con agua, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró a vacío. El residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 0% a 6%/Hex; columna de 80 g) y se aisló un aceite amarillo que correspondía a Cap-179, etapa e (1.2 g) . Análisis calculado para [2M+Na] + C58H62N2Na06 : 905.45; encontrado 905.42, RM de XH (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.64 - 7.70 (4 H, m) , 7.29 - 7.44 (29 H, m) , 7.06 (4 H, dd, J"=7.65, 1.63 Hz) , 5.18 (2 H, d, J=2.01 Hz) , 3.89 (2 H, d, ,7=6.53 Hz) , 3.79 - 3.87 (1 H, m) , 3.46 (5 H, dquind, J=ll.26, 5.87, 5.87, 5.87, 5.87, 1.88 Hz) , 2.47 (2 H, s) , 2.35 - 2.46 (2 H, m) , 1.78 (1 H, dd, J=14.81, 3.01 Hz) , 1.62 - 1.65 (1 H, m) , 1.61 (2 H, s) , 1.36 - 1.43 (3 H, m) , 1.19 (7 H, d, J=6.27 Hz) , 1.14 (11 H, dd, J=6.15, 2.89 Hz) , 0.86 - 0.96 (3 H, m) .
Cap-179, etapa f (estereoisómero 1 y estereoisómero 2) Se disolvió Cap-179, etapa d (2.08 g, 4.71 mmol) en THF (100 mi) y se trató con HC1 2 N (9.42 mi, 18.84 mmol). La solución transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 h y luego se eliminó el THF a presión reducida. La fase acuosa que quedó se extrajo con hexanos (3 X 20 mi) y, después de diluir con H20 (20 mi) , se basificó la fase acuosa con NaOH 1 N hasta pH = 10 y se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi) . Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo resultante se recogió en CH2C12 (100 mi) y se cargó con DIEA (2.468 mi, 14.13 mmol) y cloroformiato de metilo (0.401 mi, 5.18 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se inactivo con agua (10 mi) y la fase orgánica se eliminó a presión reducida. La fase acuosa se extrajo entonces con EtOAc (3 x 10 mi) y las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 10%/Hex; columna de 25 g) . Se recuperó un aceite incoloro transparente que correspondía a Cap-179, etapa f (1.05 g) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C18H26N05 : 336.18; encontrado 336.3, RMN de H (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.32 - 7.40 (5 H, m) , 5.26 (1 H, d, J-=8.24 Hz), 5.13 - 5.24 (2 H, m) , 4.36 (1 H, dd, ^=8.85, 4.88 Hz) , 3.68 (3 H, s) , 3.32 - 3.46 (2 H, m) , 2.02 - 2.14 (1 H, m) , 1.52 (1 H, d, J=12.82 Hz) , 1.32 (1 H, d, ^=12.51 Hz) , 1.11 - 1.18 (6 H, m) , 0.89 - 1.07 (2 H, m) .
Se desarrolló un proceso de SFC quiral para separar la mezcla de estereoisómeros usando metanol al 12% como modificador en una columna CHIRALPAK® AD-H (30 x 250mm, 5µp?) (Temp = 35 °C, Presión = 150 x 105 Pa, Longitud de onda = 210 nm, Velocidad de flujo = 70 ml/min durante 8 min, solvente A = C02, solvente B = MeOH) . Los dos isómeros separados, Cap-179 etapa f (estereoisómero 1) (eluye primero) y Cap-179 etapa f (estereoisómero 2) (eluye segundo) mostraron los mismos datos analíticos que la mezcla correspondiente (véase más arriba) .
Cap-119 179 estereoisómero-1 179 estereoisómero-2 ácido 2- ( (2R, 4r, 6S) -2, 6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- (metoxicarbonilamino) acético Se disolvió Cap-179 etapa f (estereoisómero 1) (0.35 g, 1.044 mmol) en MeOH (50 mi) en un aparato de Parr y se cargó con Pd/C (0.111 g, 1.044 mmol) . La suspensión se colocó entonces en un agitador de Parr y se inyectó N2 (3X) a la mezcla, se colocó bajo 2.757 x 105 Pa de H2 (2.104 mg, 1.044 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El catalizador se separó por filtración a través de una almohadilla de CELITE® y el solvente se eliminó a presión reducida, proporcionando un sólido ámbar que corresponde a Cap-179 estereoisómero 1 (0.25 g, 1.019 mmol, 98 % de rendimiento). RMN de XH (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 12.74 (4 H, s ancho), 7.35 (4 H, d, J=6.10 Hz) , 3.85 (4 H, s ancho), 3.53 (3 H, s) , 3.35 (2 H, ddd, J=15.95, 9.99, 6.10 Hz) , 1.97 (1 H, s ancho), 1.48 (2 H, t, J=13.28 Hz) , 1.06 (6 H, d, ,7=6.10 Hz) , 0.82 - 1.00 (2 H, m) Se obtuvo Cap-179 estereoisómero 2 de conformidad con el proceso usado para preparar Cap-179 estereoisómero 1 usando Cap-179 etapa f (estereoisómero 1) como material de partida. Cap-179 estereoisómero 2: RM de XH (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 12.50 (1 H, s ancho), 7.31 (1 H, s ancho), 3.84 (1 H, t, J=7.32 Hz) , 3.53 (3 H, s) , 3.29 - 3.41 (2 H, m) , 1.99 (1 H, s) , 1.48 (2 H, t, J=14.34 Hz) , 1.06 (6 H, d, J=6.10. Hz) , 0.95 (1 H, q, .7=12.21 Hz), 0.87 (1 H, q, J=11.80 Hz).
Cap-180 Mezcla de reacción Ca a a Se añadió cloruro de tosilo (4.39 g, 23.0 mmol) a una solución de Cap-179, etapa a (1.50 g, 11.5 mmol) y piridina (3.73 mi, 46.1 mmol) en CH2Cl2 (50 mi) a temperatura ambiente y se agitó durante 2 días. La reacción se diluyó con CH2C12, se lavó con agua y luego con HCl 1 N. La fase orgánica se secó (MgS04) y se concentró hasta un aceite amarillo que se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 5% a 20%/Hex; columna de 40 g) . Se aisló un aceite transparente que solidificó a vacío y que corresponde a Cap-180-2a (2.89 g) . CL/EM: Análisis calculado para [2M+Na] + C28H40NaO8S2 : 591.21; encontrado 591.3, RMN de XH (500 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.80 (2 H, d, J=8.24 Hz) , 7.35 (2 H, d, J=7.93 Hz) , 4.59 (1 H, tt, J=11.37, 4.96 Hz), 3.36 - 3.46 (2 H, m) , 2.46 (3 H, s) , 1.91 (2 H, dd, .7=12.05, 5.04 Hz) , 1.37 (2 H, dt , J=12.67, 11.52 Hz) , 1.19 (6 H, d, J=6.10 Hz) .
Cap-180, etapa b Se añadió LiHMDS 1 N (7.09 ml, 7.09 mmol) a una solución de Cap 180, etapa a (1.68 g, 5.91 mmol) y 2- (difenilmetilenamino) acetato de etilo (1.579 g, 5.91 mmol) en tolueno (30 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó entonces durante 16 h a 85 °C. La reacción se inactivo con agua (50 ml) , se extrajo con EtOAc, se lavó con agua, se secó sobre MgS04j se filtró y se concentró en vacuo. El residuo se purificó por BIOTAGE® (EtOAc al 0% a 15%/Hex; columna de 40 g) . Se aisló un aceite amarillento transparente que corresponde a Cap-180, etapa b (mezcla de estereoisómeros) (0.64 g) . CL/EM: Análisis calculado para [M+H]+ C24H30NO3: 380.22; encontrado 380.03, RMN de *H (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.64 - 7.70 (2 H, m) , 7.45 - 7.51 (3 H, m) , 7.38 - 7.44 (1 H, m) , 7.31 - 7.37 (2 H, m) , 7.13 -7.19 (2 H, m) , 4.39 (1 H, d, J=10.54 Hz) , 4.16 - 4.26 (2 H, m) , 3.29 - 3.39 (1 H, m) , 2.93 - 3.03 (1 H, m) , 2.70 (1 H, m, J=9.41, 4.14 Hz) , 1.42 - 1.49 (2 H, m) , 1.31 - 1.37 (1 H, m) , 1.29 (4 H, t, J=7.15 Hz) , 1.04 (6 H, dd, J=7.78, 6.27 Hz) .
Cap-180, etapa c disolvió Cap 180, etapa b (0.36 g, 0.949 mmol) en THF (10 mi) y se trató con HC1 2 N (1.897 mi, 3.79 mmol) . La solución transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 h y se eliminó el THF a presión reducida. La fase acuosa que quedó se extrajo con hexanos (3 X 20 mi) y, después de diluir con H20 (20 mi) , se basificó la fase acuosa con NaOH 1 N hasta pH = 10 y se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi) . Las fases orgánicas combinadas se secaron ( gS04) , se filtraron y se concentraron a vacío. El residuo resultante se recogió en CH2C12 (10.00 mi) y se cargó con DIEA (0.497 mi, 2.85 mmol) y cloroformiato de metilo (0.081 mi, 1.044 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h y la mezcla de reacción se inactivo con agua (10 mi) y la fase orgánica se eliminó a presión reducida. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi) y las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. Se recuperó un sólido ámbar que corresponde a Cap-180, etapa c (0.21 g) y se usó sin purificación posterior. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + C13H24NO5 : 273.17; encontrado 274.06, R N de H (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppra 5.20 (1 H, d, J=8.03 Hz) , 4.59 (1 H, t, J=10.16 Hz) , 4.11 - 4.27 (3 H, m) , 3.69 - 3.82 (2 H, m) , 3.64 (3 H, s) , 1.95 - 2.07 (1 H, m) , 1.63 (1 H, d, J=13.80 Hz) , 1.41 (2 H, dd, J=8.03, 4.02 Hz) , 1.31 - 1.37 (1 H, m) , 1.26 (3 H, t, .7=7.15 Hz) , 1.16 (1 H, d, J=6.27 Hz), 1.12 (6 H, dd, J=6.15, 3.89 Hz) .
Cap-180 Mezcla racémica Se disolvió Cap-180, etapa c (0.32 g, 1.2 mmol) en THF (10 mi) y se cargó con LiOH (0.056 g, 2.342 mmol) en agua (3.33 mi) a 0 °C. La solución resultante se agitó a ta durante 2 h. Se eliminó el THF a presión reducida y el residuo que quedó se diluyó con agua (15 mi) y se lavó con Et20 (2 x 10 mi) . La fase acuosa se acidificó seguidamente con HCl 1 N hasta pH ~ 2 y se extrajo con EtOAc (3 x 15 mi) . Las fases orgánicas combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron a vacío proporcionando Cap-180 (mezcla de estereoisómeros) (0.2 g) como una espuma blanca. CL/EM: Análisis calculado para [M+H] + CnH2o 05 : 246.13; encontrado 246.00, RMN de *H (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 5.14 (1 H, d, J=9.03 Hz) , 4.65 (1 H, t, J=9.91 Hz), 3.63 -3.89 (5 H, m) , 1.99 - 2.13 (1 H, m) , 1.56 - 1.73 (2 H, m) , 1.48 - 1.55 (1 H, m) , 1.35 - 1.48 (1 H, m) , 1.27 (1 H, s ancho), 1.17 (6 H, d, J=6.02 Hz) .
INTERMEDIARIOS Esquema de reacción 1 Literature ChemComm; 2005, páginas 2172-2174 Mezcla de Intermediario 1 2, 6-bis (4, 4, 5, 5- tetrametil -1 , 3 , 2-dioxahorolan-2-il) naftaleno e Intermediario 2 2.7-bis (4,4,5, 5- tetrametil -1 , 3 , 2-dioxahorolan-2-il) naftaleno A una solución desgasificada de naftaleno (19.34 g, 151 mmol) y bis (pinacolato) diboro (84 g, 330 mmol) en ciclohexano (500 mi) se añadió 4 , 4 ' -di- terc-butil-2 , 2 ' -dipiridilo (4.05 g, 15.1 mmol) y di-µ-metoxibis ( 1 , 5 -ciclooctadieno) diiridio (I) (5.0 g, 7.5 mmol) . El matraz se selló y se calentó a 80 °C durante 16 horas después se dejó enfriar a temperatura ambiente. El color de la reacción se volvió rojo oscuro tras calentamiento. El componente volátil se retiró en el vacío y el material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó seca en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 0-100%/tolueno) proporcionando una mezcla de 2 , 6-bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil-1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno y 2,7-bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil -1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (54.57 g, rendimiento del 95%, proporción 1.5:1) en forma de sólido blanco.
Intermediario 1: RMN de 2H (500 MHz, benzeno-d6) d ppm 8.70 (s, 2H) , 8.16 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 7.75 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 1.15 (s, 24H) .
Intermediario 2: RMN de 1H (500 MHz, benzeno-d6) d ppm 8.77 (s, 2H) , 8.22 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 7.66 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 1.15 (s, 24H) .
Mezcla de Intermediario 3 2,2'- (6,6' - (naftaleno-2, 6-diil)bis (IH-benzo [d] imidazol - 6, 2 - diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S, 2 ' S) -tere-butilo e Intermediario 4 2,2 ' - (5,5'- (naftaleno-2, 7-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol -5, 2- diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S, 2 ' S) -tere-butilo A una mezcla de 2 , 6 -bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftaleno y 2 , 7-bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil -1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (1.5:1) (1.25 g, 3.29 mmol) y 2 - ( 6 -bromo- IH-benzo [d] imidazol-2 - il) pirrolidina-1-carboxilato de (S) - tere-butilo (3.01 g, 8.22 mmol) en 1,2-dimetoxietano (50 mi) y agua (12.5 mi) se añadió NaHC03 (1.38 g, 16.4 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P)4 (190 mg, 0.164 mmol) y el matraz a presión se tapó y se calentó con un baño de aceite a 85°C durante 16 horas. El componente volátil se retiró en el vacío. Se fraccionó el residuo entre acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se filtraron a través de una almohadilla corto de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró en el vacío. El material resultante se purificó por cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 10-100%/CH2C12) después se cargó con (metanol al 10%/CH2C12) proporcionando una mezcla de 2 , 2 ' - (6 , 6 ' - (naftaleno-2 , 6-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de ( 2S , 21 S) - tere-butilo y 2 , 2 ' - (5 , 5 ' - (naftaleno-2 , 7-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol-5 , 2-iil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S , 21 S) - tere-butilo (622 mg, rendimiento del 27.1%) en forma de sólido naranja que se usa sin purificación adicional. Se purificó una alícuota por una HPLC de fase reversa (agua/acetonitrilo/TFA) proporcionando una muestra analítica de cada intermediario en forma de una sal de TFA.
Datos analíticos para el Intermediario 3 : Tiempo de retención de CL-EM 1.46 min; calculado para C2H6 604 : 698.36 encontrado m/z 699.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatográfo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 rara usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de 1H (sal de TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s ancho, 2H) , 8.13 (t, J=8.7 Hz, 4H) , 8.05 (t, J=8.4 Hz , 2H) , 7.92 (dd, J=14.8, 8.7 Hz, 3H) , 5.20 - 5.36 (m, 2H) , 3.70 - 3.84 (m, 2H) , 3.57 -3.70 (m, 2H) , 2.54 - 2.70 (m, 2H) , 2.18 - 2.28 (m, 2H) , 2.14 (quintete, J=6.9 Hz , 4H) , 1.50 (s, 9H) , 1.23 (s, 9H) .
Datos analíticos para el Intermediario 4: Tiempo de retención de CL-EM 1.52 min; calculado para C42H46 604 : 698.36 encontrado m/z 699.24 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de 1H (sal de TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.33 (s ancho, 2H) , 7.98 -8.17 (m, 6H) , 7.83 - 7.98 (m, 4H) , 5.18 - 5.3.5 (m, 2H) , 3.71 - 3.83 (m, 2H) , 3.57 - 3.70 (m, 2H) , 2.63 (s ancho, 2H) , 2.19 - 2.28 (m, 2H) , 2.07 - 2.18 (m, 4H) , 1.50 (s, 9H) , 1.22 (s, 9H) .
Mezcla de Intermediario 5 2- (6- (6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l , 3, 2-dioxaborolan-2-il) naftalen- 2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato trifluoroacetato de (S) -tere-butilo e Intermediario 6 2- (6- (7- (4,4, 5, 5-tetrametil-l , 3, 2-dioxaborolan-2-il) naftalen- 2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato trifluoroacetato de (S) -tere-butilo Después de purificación por cromatografía instantánea, la reacción anterior proporcionó también una mezcla de 2 - ( 6 - (6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2 -il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2 - il ) pirrolidina-l-carboxilato trifluoroacetato de (S) - tere-butilo y 2-(6-(7-(4,4,5, 5-tetrametil-l , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il) naftalen-2 - il ) -??-benzo [d] imidazol -2 - il ) irrolidina- 1-carboxilato de (S) -tere-butilo (658 mg) . Durante la separación de HPLC (amortiguador de TFA) los ésteres bóricos parcialmente hidrolizados proporcionaron la misma mezcla que los intermediarios de ácido bórico.
Tiempo de retención de CL-EM 1.34 min (ácidos bóricos) y de 2.05 min (ésteres bóricos); calculado para (ácidos bóricos) C 26 H 28 BN3 O 4 : 457.22 encontrado m/ z 458.14 [M+H]+. Para (ésteres bóricos) [M+H] + C32 H 38B 304 : 539.3 encontrado m/z 490.16 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100 %/ solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Intermediario 7 Intermediario 8 Intermediario 7 2, 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-6- il) naftaleno e Intermediario 8 2, 7-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-6- il) naftaleno Una mezcla de 2 , 2 ' - (6 , 6 ' - (naftaleno-2 , 6-diil)bis (IH-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) dipirrolidina-1-carboxilato de (2S , 2 ' S) - tere-butilo y 2 , 2 ' - (5 , 5 ' - (naftaleno-2 , 7-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol-5 , 2-diil) ) dipirrolidina-1-carboxilato de (2S, 2 ' S) - tere-butilo (594 mg, 0.162 mmol) y TFA (2 mi) en CH2C12 (10 mi) se agitó en condiciones ambientales durante 3 horas. El componente volátil se retiró en el vacío y la materia prima se purificó por una HPLC en fase reversa (agua/acetonitrilo/TFA) proporcionando una sal de TFA de 2 , 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (434 mg) en forma de sólido amarillo y una sal de TFA de 2 , 7-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (204.8 mg) en forma de sólido amarillo.
Datos analíticos para el Intermediario 7: Tiempo de retención de CL-EM 1.05 min; calculado para C32H3oN6 498.25 encontrado m/z 499.21 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shiraadzu LC-IOAS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de 1H (500 MHz, eOD) d ppm 8.18 (s, 1H) , 8.06 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.00 (s, 1H) , 7.84 - 7.92 (m, 1H) , 7.73 - 7.81 (m, 2H) , 5.08 (t, J=7.6 Hz, 1H) , 3.56 - 3.66 (m, 1H) , 3.48 - 3.56 (m, 1H) , 2.62 - 2.71 (m, 1H) , 2.36 - 2.47 (m, 1H) , 2.19 - 2.36 (m, 2H) .
Datos analíticos para el Intermediario 8: Tiempo de retención de CL-EM 1.11 min; calculado para C32H3o 6 498.25 encontrado m/z 499.20 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de K (500 MHz, MeOD) d ppm 8.23 (s, 2H) , 8.01 (m, 4H) , 7.82 - 7.89 (m, 2H) , 7.69 - 7.82 (m, 4H) , 5.08 (t, J=7.6 Hz, 2H) , 3.57 -3.66 (m, 2H) , 3.48 - 3.57 (m, 2H) , 2.60 - 2.73 (m, 2H) , 2.37 - 2.48 (m, 2H) , 2.19 - 2.36 (m, 4H) .
Esquema de reacción 2 Intermediario 9 2- (lH-imidazol-2-il) pirrolidina- 1-carboxilato de (S) -tere- butilo Se añadió gota a gota glioxal (2.0 mi del 40% en agua) durante 11 minutos a una solución de metanol de NH40H (32 mi) y (S) -Boc-prolinal (8.56 g, 43.0 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 19 horas. El componente volátil se retiró en el vacío y el residuo se purificó por una cromatografía instantánea (gel de sílice, acetato de etilo) seguido por una recristalización (acetato de etilo, temperatura ambiente) proporcionando 2-(lH-imidazol-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo en forma de un sólido mullido blanco (4.43 g, 18.6 mmol, rendimiento del 43%) .
RMN de XH (DMSO-d6, 400 MHz) d ppm 11.68/11.59 (sa, 1H) , 6.94 (s, 1H) , 6.76 (s, 1H) , 4.76 (m, 1H) , 3.48 (m, 1H) , 3.35 - 3.29 (m, 1H) , 2.23-1.73 (m, 4H) , 1.39/1.15 (s, 9H) , CLEM. TR = 0.87 min; índice de homogeneidad >95%; CL/EM: Anal. Calculado para [M+H] + C12H20 3O2 238.16; encontrado 238.22, El compuesto mostró tener un ee del 98.9% cuando se analizó en las condiciones de HPLC quiral destacadas a continuación.
Columna: CHIRALPAK® AD, 10 µp?, 4.6 x 50 mm solvente: 1.7% de etanol/heptano (isocrático) Velocidad de flujo: 1 ml/min Longitud de onda: bien 220 ó 256 nm Tiempo de retención relativo: 3.25 min minutos (S) Intermediario 10 2- (4 , 5-diyodo-1H-imidazol -2 -il) irrolidina-1-carboxilato de (S) -tere-butilo Se añadió yodo (16.17 g, 63.7 mmol) a una solución de 2 -( 1H- imidazol -2 -il ) pirrolidina- 1-carboxilato de (S)-terc-butilo (6.87 g, 29.0 mmol) y carbonato de sodio (9.21 g, 87 mmol) en dioxano (72 mi) y agua (72 mi) a temperatura ambiente. El matraz se recubrió con papel de aluminio y se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y una solución acuosa saturada de tiosulfato de sodio. La mezcla se agitó durante 15 minutos y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2S0 ) , se filtraron y se concentraron en el vacío proporcionando 2- (4 , 5-diyodo-lH-imidazol-2-il) pirrolidina-1-carboxilato de (S) - tere-butilo (12.5 g al 88%) en forma de un sólido canela.
Tiempo de retención de CL-EM 1.40 min; calculado para C12H17l2N302488.94 encontrado m/z 489.96 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 4.72 - 4.84 (m, 1H) , 3.58 - 3.70 (m, 1H) , 3.43 - 3.54 (m, 1H) , 2.36 (s ancho, 1H) , 1.88 - 2.08 (m, 3H) , 1.47 (s ancho, 3H) , 1.27 (s ancho, 6H) .
Intermediario 11 2- (5-yodo-lH-imidazol-2-il)pirrolidina-1-carboxilato de (S) - tere-butilo Se añadió sulfito de sodio (10.31 g, 82 mmol) a una solución de 2- (4 , 5-diyodo-lH-imidazol-2-il) pirrolidina-1-carboxilato de (S) - tere-butilo (4.0 g, 8.2 mmol) en etanol (75 mi) y agua (75 mi) . La suspensión se calentó con un baño de aceite a 100°C durante 4 horas y a 90°C durante 16 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa varias veces con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron (salmuera, Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El residuo se purificó por una cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con, acetato de etilo al 0 a 40%/CH2Cl2) proporcionando 2- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) pirrolidina-1-carboxilato de (S) - tere-butilo (2.17 g, al 73.1%) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención de CL-EM 0.930 min; calculado para Ci2H18I 302 363.04 encontrado m/z 364.06 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% .a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 7.52-7.64 (m, 1H) , 4.95 - 5.10 (m, 1H) , 3.57 - 3.70 (m, 1H) , 3.47 -3.57 (m, 1H) , 2.37 - 2.55 (m, 1H) , 1.94 - 2.10 (m, 3H) , 1.46 (s, 4H) , 1.27 (s, 5H) .
Mezcla de Intermediario 12 2- (5- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2-il) -1H-imidazol-2- il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -terc-butilo e Intermediario 13 2- (5- (7- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2-il) -1H-imidazol-2- il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -terc-butilo A una mezcla de 2 - (6 t (6 - (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -1H-benzo [d] imidazol -2-il) pirrolidina-l-carboxilato trifluoroacetato de (S) -terc-butilo y de 2 - (6 - (7- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2 -il) naftalen-2-il) -lH-benzo [d] imidazol-2-il) pirrolidina-1- carboxilato trifluoroacetato de (S) - erc-butilo (560 mg, 0.980 mmol) y de 2- (5-iodo-lH-imidazol-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - terc-butilo (463 mg, 1.27 mmol) en 1,2-dimetoxietano (11.2 mi) y agua (2.8 mi) se añadió NaHC03 (412 mg, 4.90 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío durante 5 minutos y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P)4 (57 mg, 0.049 mmol) y el matraz a presión se tapó y se calentó con un baño de aceite a 100°C durante 16 horas. El componente volátil se retiró en el vacío. El residuo se fraccionó entre acetato de etilo y agua y la fase acuosa se extrajo varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (salmuera, Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 50-100%/hexanos) proporcionando una mezcla parcialmente purificada de productos que se purificaron adicionalmente por una HPLC de fase reversa (agua/acetonitrilo/TFA) proporcionando una mezcla de una sal de TFA de 2 -( 5- ( 6 - (2 -( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2-il) - 1H- imidazol -2 -il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - terc-butilo y una sal de TFA de 2- (5- (7- (2- ( (S) -1- ( erc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6- il ) naftalen-2 - il ) - 1H- imidazol-2 -il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - terc-butilo (74 mg) .
Tiempo de retención de CL-EM 1.32 min; caled, para [M+H]+ C38H44 604 648.34 encontrado m/z 649.20 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Esta mezcla se usó sin purificación adicional .
Intermediario 15 Intermediario 14 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2 -il) -1H- imidazol-5-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol y Intermediario 15 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H- imidazol -4-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol Una mezcla de 2- (5- (6- (2- ( (S) -1- ( terc- butoxicarbonil ) pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6- il) naftalen-2 - il ) -1H- imidazol -2 -il) irrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo y 2 - (5 - (7 - (2 - ( (S) -1- ( erc- butoxicarbonil ) pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-• il ) naftalen-2 - il ) - 1H- imidazol -2 - il ) irrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo como sales de TFA (74 mg) y TFA (2 mi) en CH2C12 (10 mi) se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas. El componente volátil se retiró en el vacío. La materia prima se purificó por una HPLC de fase reversa (agua al 0 a 50%/acetonitrilo/TFA) proporcionando una sal de TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H- imidazol-5-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (32 mg, al 31%) en forma de aceite amarillo y una sal de TFA de 2- ( (S) - pirrolidin-2-il) -6- (7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4- il ) naftalen-2 - il )- ??-benzo [d] imidazol (16 mg) en forma de aceite amarillo.
Datos analíticos para el Intermediario 14: Tiempo de retención de CL-E 0.081 min; calculado para C38H28 6448.24 encontrado m/z 449.20 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ? (500 MHz, MeOD) d ppm 8.33 (s, 1H) , 8.17 (s, 1H) , 8.03 (d, J=3.7 Hz, 1H) , 8.01 (s, 2H) , 7.92 - 7.97 (m, 1H) , 7.87 7.92 (m, 1H) , 7.75 - 7.80 (m, 3H) , 5.11 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 4.99 (t, J=7.9 Hz, 1H) , 3.49 - 3.69 (m, 4H) , 2.56 - 2.76 (m, 2H) , 2.41 - 2.52 (m, 2H) , 2.21 - 2.41 (m, 4H) .
Datos analíticos para el Intermediario 15: Tiempo de retención de CL-EM 0.87 min; calculado para C38H28N6 448.24 encontrado m/z 449.21 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8.39 (s, 1H) , 8.19 (s, 1H) , 7.97 - 8.04 (m, 3H) , 7.91 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.87 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.85 (s, 1H) , 7.78 (s, 2H) , 5.12 (t, J=7.6 Hz , 1H) , 5.04 (t, J=8.1 Hz, 1H) , 3.50 - 3.68 (m, 4H) , 2.60 - 2.74 (m, 2H) , 2.41 - 2.55 (m, 2H) , 2.21 - 2.41 (m, 4H) .
Esquema de reacción 3 Intermediario 16 (6-bromo-IH-benzo [d] imidazol -2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo Se añadió EDCI-HC1 (16.9 g, 88.0 mmol) a una mezcla de 4 -bromobenceno- 1 , 2 -diamina (15.0 g, 80.0 mmol), N-Boc-L- prolina (18.13 g, 84.0 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (12.28 g, 80.0 mmol) en CH2C12 (500 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 16 horas. La mezcla se diluyó después con agua. El precipitado blanco se filtró aparte y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua, se secó (salmuera; Na2S0 ) , se filtró y se concentró en el vacío proporcionando una espuma marrón. Se añadió ácido acético (300 mi) a la espuma y la mezcla se calentó a 85°C (temperatura del baño) durante 5 horas. El componente volátil se retiró en el vacío y el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con agua y la fase orgánica se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró en el vacío. La materia prima resultante se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice; EtOAc al 0-37%/CH2Cl2) . El material parcialmente puro se volvió a someter a cromatografía instantánea (gel de sílice; EtOAc al 20-35%/CH2Cl2) proporcionando 2- (6-bromo-lH-benzo [d] imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (17.98 g, rendimiento del 61.2%) en forma de espuma amarilla.
Tiempo de retención de CL-EM 1.23 min; calculado para Ci6H2oBrN302 : 365.07 encontrado m/z 368.07 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ? (500 MHz , MeOD) d ppm 7.59 - 7.75 (m, 1H) , 7.38 - 7.53 (m, 1H) , 7.31 - 7.38 (m, 1H) , 5.04-5.09 (m, 0.3H) , 4.94 -5.00 (m, 0.7H), 3.68 - 3.76 (m, 1H) , 3.50 - 3.59 (m, 1H) , 2.34 - 2.51 (m, , 1H) , 1.95 - 2.12 (m, 3H) , 1.47 (sa, 3H) , 1.15 (s, 6H) .
Intermediario 17 2- (6- (4 , 4 , 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) -1H- benzo [d] imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere- butilo A un matraz conteniendo una mezcla de 2-(6-bromo-lH-benzo [d] imidazol -2 - il) irrolidina- 1-carboxilato de (S) -tere-butilo (4.5 g, 12 mmol) y bis (pinacolato) diboro (6.55 g, 25.8 mmol) en 1,4-dioxano (50 mi) se añadió acetato de potasio (3.01 g, 30.7 mmol). El matraz de reacción se desgasificó en el vacío durante 5 minutos y se purgó después con nitrógeno. Se añadió el catalizador Pd(Ph3P)4 (710 mg, 0.614 mmol) y el matraz se tapó y se calentó con un baño de aceite a 85°C (temperatura del baño) durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró en el vacío. La materia prima se fraccionó entre CH2C12 y una solución de NaHC03 saturada y la fase acuosa se extrajo con CH2C12, La fase orgánica combinada se secó (salmuera, Na2S04) , se filtró y se concentró en el vacío. El material resultante se. purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 10-50%/CH2Cl2) proporcionando 2-(6-(4,4,5, 5 -tetrametil - 1,3, 2 -dioxaborolan-2 -il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (2.80 g, rendimiento del 55%) en forma de sólido blanco.
Tiempo de retención de CL-EM 1.493 min; calculado para C22H32BN304 : 413.25 encontrado m/z 414.23 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. R N de ¾ (400 MHz , MeOD) d ppm 7.81 - 8.08 (m, 1H) , 7.40 - 7.68 (m, 2H) , 4.95 - 5.13 (ra, 1H) , 3.68 - 3.79 (s ancho, 1H) , 3.48 - 3.60 (s ancho, 1H) , 2.35 - 2.52 (s ancho, 1H) , 1.95-2.15 (m, 3H) , 1.46 (s, 3H) , 1.37 (s, 12H) , 1.13 (s, 6H) .
Intermediario 3 2- (5- (6- (2- (1- (terc-butoxicarbonil) -2-pirrolidinil) -1H- benzimidazol-6-il) -2-naftil) -lH-benzimidazol-2-il) -1- pirrolidinacarboxilato de terc-butilo A una mezcla de 2 - ( 6 - (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) pirrolidina-1-carboxilato de (S) - erc-butilo (1.29 g, 33.1 mmol) y 2,6-dibromonaftaleno (446 mg, 1.56 mmol) en 1 , 2 -dimetoxietano (20 mi) y agua (6 mi) se añadió NaHC03 (787 mg, 9.36 mmol) . La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío durante 10 minutos y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió el catalizador Pd(Ph3P)4 (90 mg, 0.078 mmol) y el matraz se tapó y se calentó con un baño de aceite a 100°C durante 16 horas. El componente volátil se retiró en el vacío. El residuo se fraccionó entre CH2C12 y agua y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo varias veces con CH2C12 y las fases orgánicas combinadas se secaron (salmuera, Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía en matraz (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 0-70%/CH2Cl2) proporcionando 2- (5- (6- (2-(1- (terc-butoxicarbonil) -2-pirrolidinil) -lH-benzimidazol-6-il) -2-naftil) -lH-benzimidazol-2-il) -1-pirrolidinacarboxilato de tere-butilo (605 mg) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención de CL-EM 1.46 min; calculado para C42H 6 6O4: 698.36 encontrado m/z 699.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 minuto y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de 2H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s ancho, 2H) , 8.13 (t, J=8.7 Hz, 4H) , 8.05 (t, J=8.4 Hz, 2H) , 7.92 (dd, J=14.8, 8.7 Hz, 4H) , 5.20 - 5.36 (m, 2H) , 3.70 -3.84 (m, 2H) , 3.57 - 3.70 (m, 2H) , 2.54 - 2.70 (m, 2H) , 2.18 - 2.28 (m, 2H) , 2.14 (quíntete, J=6.9 Hz, 4H) , 1.50 (s, 9H) , 1.23 (s, 9H) .
Intermediario 18 (2S) -2- (5- (6-bromo-2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidinacarboxilato de tere-butilo La reacción anterior también proporcionó (2S) -2- (5-(6 -bromo- 2 -naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinacarboxilato de tere-butilo (519 mg) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención de CL-EM 1.88 min; calculado para C26H26Br 302 : 491.12 encontrado m/z 494.04 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 8.21 (d, J"=8.6 Hz, 1H) , 8.05 - 8.14 (m, 2H) , 7.93 - 8.05 (ra, 2H) , 7.82 - 7.93 (m, 3H) , 7.57 - 7.67 (m, 1H) , 5.28 (s ancho, 1H) , 3.98 (s, 1H) , 3.70 - 3.80 (m, 1H) , 3.57 - 3.70 (m, 1H) , 2.54 -2.71 (m, 1H) , 2.17 - 2.29 (m, 1H) , 2.09 - 2.17 (m, 2H) , 1.49 (s, 4H) , 1.22 (s, 5H) .
Intermediario 7 5,5' - (2, 6-naftalenodiil) bis (2- (2-pirrolidinil) -IH- benzimidazol ) Una mezcla de 2- (5- (6- (2- (1- (fcerc-butoxicarbonil) -2-pirrolidinil) -lH-benzimidazol-6-il) -2-naftil) -1H-bencimidazol-2-il) - 1-pirrolidinacarboxilato de terc-butilo (591 mg, 0.844 mmol) y TFA (2 ml) en CH2C12 (10 mi) se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. El componente volátil se retiró en el vacío y el material resultante se cargó en una columna de MCX, se purgó con flujo de metanol, se liberó con elución de NH3 2.0 M/metanol) y se concentró proporcionando 5 , 5 ' - (2 , 6-naftalenodiil) bis (2- (2-pirrolidinil) -lH-benzimidazol) (419 mg) en forma de un sólido canela .
Tiempo de retención de CL-EM 1.02 min; calculado para C33H3iN5: 498.25 encontrado m/z 499.25 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.18 (s, 1H) , 8.06 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 8.00 (s, 1H) , 7.84 - 7.92 (m, 1H) , 7.73 - 7.81 (ra, 2H) , 5.08 (t, J=7.6 Hz, 1H) , 3.56 - 3.66 (m, 1H) , 3.48 - 3.56 (m, 1H) , 2.62 - 2.71 (m, 1H) , 2.36 -2.47 (m, 1H) , 2.19 - 2.36 (m, 2H) .
Esquema de reacción 4 Intermediario 1 2 , 6-bis (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3 , 2 -dioxaborolan-2 -il) naftaleno Un matraz a presión conteniendo una mezcla de 2,6-dibromonaftaleno (8.0 g, 28 mmol) , bis (pinacolato) diboro (21.3 g, 84.0 mmol), acetato de potasio (3.01 g, 30.7 mmol) y 1,4-dioxano (50 mi) se desgasificó en el vacío durante 5 minutos y se purgó con nitrógeno. Se añadió el catalizador Pd(Ph3P)4 (710 mg, 0.614 mmol). El matraz se tapó y se calentó con un baño de aceite a 85 °C (temperatura del baño) durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró en el vacío y la materia prima se fraccionó entre CH2C12 y una solución de NaHC03 saturada. La fase acuosa se extrajo con CH2C12 y las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice se eluyó con CH2C12 al 50-100%/Hexanos) proporcionando 2 , 6-bis (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2- il) naftaleno contaminado con bis (pinacolato) diboro . El sólido se disolvió en CH2C12 y se añadió metanol hasta que se observó precipitación. El precipitado se recogió por filtración proporcionando 2,6- bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2- il ) naftaleño (5.1 g, rendimiento al 48%) en forma de sólido blanco.
RMN de XH (500 MHz , BENCENO-dg) d ppm 8.70 (s, 2H) , 8.16 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 7.75 (d, J=8.2 Hz , 2H) , 1.15 (s, 24H) .
Intermediario 3 2 , 2 ' - (6, 6' - (naftaleno-2 , 6-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol - 6, 2 - diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S, 2 ' S) -tere-butilo A una mezcla de 2 , 6-bis (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftaleno (2.0 g, 5.3 mmol) y 2,6-dibromonaftaleno de (S) - tere-butilo (2.89 g, 7.89 mmol) en 1 , 2-dimetoxietano (42.1 1) y agua (10.5 mi) se añadió NaHC03 (2.21 g, 26.3 mmol) . La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió el catalizador Pd(Ph3P)4 (90 mg, 0.078 mmol). El matraz se tapó y se calentó con un baño de aceite a 100 °C durante 16 horas. El componente volátil se eliminó en el vacío y el residuo se fraccionó entre acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se filtraron a través de una almohadilla corto de tierra de diatomeas (CELITE®) y el filtrado se secó (Na2S04) , se filtró y se concentró en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 0-100%/hexanos) proporcionando 2 , 2- (6 , 6 '- (naftaleno-2 , 6-diil) bis (1H-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S , 2 ' S) - tere-butilo (761 mg, rendimiento del 21%) en forma de sólido naranja.
Tiempo de retención de CL-EM 1.46 min; calculado para C42H46 60 : 698.36 encontrado m/z 699.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 minuto y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ? (500 MHz , MeOD) ? ppm 8.28 (s ancho, 2H) , 8.13 (t, -7=8.7 Hz, 4H) , 8.05 (t, ,7=8.4 Hz, 2H) , 7.92 (dd, .7=14.8, 8.7 Hz, 4H) , 5.20 - 5.36 (m, 2H) , 3.70 - 3.84 (m, 2H) , 3.57 - 3.70 (m, 2H) , 2.54 - 2.70 (m, 2H) , 2.18 - 2.28 (m, 2H) , 2.09 - 2.19 (m, 4H) , 1.50 (s, 9H) , 1.23 (s, 9H) .
Intermediario 5 2- (6- (6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il)naftalen- 2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo La reacción anterior también proporcionó 2- (6- (6-(4,4,5 , 5-tetrametil-l, 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il) naftalen-2 - il ) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) irrolidina-l-carboxilato trifluoroacetato de (S) - tere-butilo (1.58 g, rendimiento del 56%) en forma de sólido canela.
Tiempo de retención de CL-EM 1.46 min; calculado para C32H38BN304 : 539.3 encontrado m/z 540.24 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Esquema de reacción 5 Intermediario 20 Intermediario Intermediario 24 Intermediario 22 Intermediario 19 (S) -5- ( (terc-butildifenilsililoxi) metil)pirrolidin-2-ona A una solución de (S) -5 - (hidroximetil ) irrolidin-2 -ona (10 g, 87 mmol) en CH2C12 (50 mi) se añadió fcerc-butilclorodifenilsilano (25.6 g, 93 mmol), Et3N (12.1 mi, 87 mmol) y DMAP (1.06 g, 8.7 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta que la pirrolidinona inicial se consumió completamente y después se diluyó con CH2C12 (50 mi) y se lavó con agua (50 mi) . La materia prima se secó (Na2S04) , se filtró, se evaporó en el vacío y la materia prima se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice; al 30 a 100% de EtOAc/hexanos) proporcionando (S) -5- (( erc-butildifenilsililoxi) metil ) pirrolidin-2 -ona (22.7 g, rendimiento del 74%) en forma de un aceite incoloro.
EM/CL (M+H)+ = 354.58, RM de XH (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 7.69 (s ancho, 1H) , 7.64-7.61 (m, 4H) , 7.50-7.42 (m, 6H) , 3.67-3.62 (m, 1H) , 3.58-3.51 (m, 2H) , 2.24-2.04 (m, 3H) , 1.87-1.81 (m, 1H) , 1.00 (s, 9H) .
Intermediario 20 2- ( (terc-butildifenilsililoxi)'metil) -5-oxopirrolidina-1 - carboxilato de (S) -terc-butilo Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (38.5 g, 177 mmol) por partes en forma de un sólido durante 10 minutos a una solución de (S) -5- ( (terc-butildifenilsililoxi) metil) pirrolidin-2-ona (31.2 g, 88.3 mmol), Et3N (8.93 g, 88 mmol) y DMAP (1.08 g, 8.83 mmol) en <¾<¾ (200 mi) y la mezcla de reacción se agitó durante 18 horas a 24°C. La mayoría del material volátil se eliminó en el vacío y la materia prima se purificó por cromatografía en gel de sílice (EtOAc al 20%/hexanos a EtOAc al 50%/hexanos) proporcionando 2- ( ( erc-butildifenilsililoxi)metil) -5-oxopirrolidina-l-carboxilato de (S) - terc-butilo (32.65 g, rendimiento del 82%) en forma de un sólido blanco.
EM/CL (M-Boc+H)+ = 354.58, RMN de H (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 7.61-7.59 (m, 2H) , 7.56-7.54 (m, 2H) , 7.50-7.38 (m, 6H) , 4.18 (m, 1H) , 3.90 (dd, J = 10.4, 3.6, 1H) , 3.68 (dd, J = 10.4, 2.1, 1H) , 2.68-2.58 (m, 1H) , 2.40-2.33 (m, 1H) , 2.22- 2.12 (m, 1H) , 2.01-1.96 (m, 1H) , 1.35 (s, 9H) , 0.97 (s, 9H) .
Intermediario 21 2 - ( (terc-butildifenilsililoxi) metil) -2, 3 -dihidro-IH-pirrol -1 - carboxilato de (S) -terc-butilo Un matraz de tres cuellos equipado con un termómetro y una entrada de nitrógeno se cargó con 2- ((tercbutildifenilsililoxi ) metil ) -5-oxopirrolidina-l-carboxilato de (S) - erc-butilo (10.05 g, 22.16 mmol) y tolueno (36 mi) y se disminuyó en un baño de enfriamiento de -55°C. Cuando la temperatura interna de la mezcla alcanzó -50 °C, se añadió gota a gota trietilborohidruro de litio (23 mi de 1.0 M/THF, 23 mmol) durante 30 min y la mezcla se agitó durante 35 min manteniendo mientras la temperatura interna entre -50 °C y -45 °C. La base de Hunig (16.5 mi, 94 mmol) se añadió gota a gota durante 10 min. Después, se añadió DMAP (34 mg, 0.278 mmol) en un lote, seguido por la adición de anhídrido trifluoroacético (3.6 mi, 25.5 mmol) durante 15 min, manteniendo mientras la temperatura entre -50°C y -45°C. El baño se eliminó 10 min más tarde y la mezcla de reacción se agitó durante 14 h permitiéndola mientras subir a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con tolueno (15 mi) , se enfrió con un baño de agua helada y se trató lentamente con agua (55 mi) durante 5 min. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con agua (50 mi, 2x) y se concentró en el vacío. La materia prima se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice; EtOAc al 5%/hexanos) proporcionando 2- ( ( erc-butildifenilsililoxi) metil) -2 , 3 -dihidro-lH-pirrol-1-carboxilato de (S) - tere-butilo (7.947 g, rendimiento del 82%) en forma de un aceite viscoso incoloro.
CL-EM [M+Na] + = 460.19, Tr = 2.41 min según las siguientes condiciones de HPLC: gradiente de solvente a partir de A al 100%: B al 0% a A al 0% : B al 100% (A = TFA al 0.1% en MeOH/agua 1:9; B = TFA al 0.1% en MeOH/agua 9:1) durante 2 min y se mantuvo durante 1 min; detección @ 220 nm; columna PHENOMENEX® Luna 3.0 X 50 mm S10, RMN de ¾ (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 7.62-7.58 (m, 4H) , 7.49-7.40 (m, 6H) , 6.47 (s ancho, 1H) , 5.07/5.01 (d ancho traslapado, 1H) , 4.18 (s ancho, 1H) , 3.89 (s ancho, 0.5H), 3.69 (s ancho, 1.5H), 2.90-2.58 (m ancho, 2H) , 1.40/1.26 (s ancho traslapado, 9H) , 0.98 (s, 9H) .
Intermediario 22 3- ( (terc-butildifenilsililoxi) metil) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano-2-carboxilato de (3S) -tere-butilo Se añadió gota a gota dietilzinc (19 mi de -1.1 M en tolueno, 21 mmol) durante 15 min a una solución de tolueno (27 mi) enfriada (-30 °C) de 2- ((terc-butildifenilsililoxi) metil) -2 , 3-dihidro-lH-pirrol-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (3.94 g, 9.0 mmol) . Se añadió gota a gota cloroyodometano (estabilizado sobre cobre; 3.0 mi, 41 mmol) durante 10 y se agitó manteniendo mientras la temperatura del baño a -25°C durante 1 hora y entre -25 °C y -21°C durante 18.5 h. La mezcla de reacción se abrió al aire y se desactivó por la adición lenta de solución de NaHC03 saturada al 50% (40 mi) y después se retiró del baño de enfriamiento y se agitó a temperatura ambiente durante 20 min. La mezcla de reacción se filtró a través de un papel de filtro y la torta blanca se lavó con 50 mi de tolueno. La fase orgánica del filtrado se separó y se lavó con agua (40 mi, 2x) , se secó (MgS04) y se concentró en el vacío. La materia prima se purificó usando cromatografía en gel de sílice (350 g de gel de sílice; la muestra se cargó con EtOAc al 7%/hexanos; eluyó con EtOAc al 7-20%//hexanos) proporcionando 3- ( ( erc-butildifenilsililoxi) metil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato de (3S) - tere-butilo (3.69 g, al 90.7%) en forma de una mezcla de isómeros cis/trans . [Nota: en esta fase no se determinó la proporción exacta entre isómeros cis/trans] .
CL-EM [M+Na]+ = 474.14, Tr = 2.39 min según las siguientes condiciones de HPLC: gradiente de solvente a partir de A al 100%: B al 0% a A al 0% : B al 100% (A = TFA al 0.1% en MeOH/agua 1:9; B = TFA al 0.1% en MeOH/agua 9:1) durante 2 min y se mantuvo durante 1 min; detección @ 220 nm; columna PHENOMENEX® Luna 3.0 X 50 mm S10, RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 7.62-7.60 (m, 4H) , 7.49-7.40 (m, 6H) , 3.77/3.67 (s ancho traslapado, 3H) , 3.11-3.07 (m, 1H) , 2.23 (s ancho aparente, 1H) , 2.05-2.00 (m, 1H) , 1.56-1.50 (m, 1H) , 1.33 (s muy ancho, 9H) , 1.00 (s, 9H) , 0.80 (m, 1H) , 0.30 (m, 1H) .
Intermediario 23 3- (hidroximetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato de (3S) -tere-butilo Se añadió gota a gota TBAF (7.27 mi de 1.0 M en THF, 7.27 mmol) durante 5 min a una solución de THF (30 mi) de 3 - ( ( terc-butildifenilsililoxi ) metil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato de (3S) - tere-butilo (mezcla de isómeros cis/trans) (3.13 g, 6.93 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4.75 horas. Después de la adición de solución de NH4C1 saturada (5 mi) , la mayoría del material volátil se retiró en el vacío y el residuo se fraccionó entre CH2C12 (70 mi) y solución de NH4C1 saturada al 50% (30 mi) . La fase acuosa se extrajo con CH2C12 (30 mi) y la fase orgánica combinada se secó (MgS04) , se filtró, se concentró en el vacío y después se expuso a alto vacío durante toda una noche. La materia prima se purificó usando una cromatografía instantánea (gel de sílice; EtOAc al 40-50%/hexanos) proporcionando 3- (hidroximetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato de (3S) - tere-butilo (1.39 g, rendimiento al 94%) en forma de una mezcla de isómeros cis/trans y un aceite incoloro. [Nota: en esta fase no se determinó la proporción exacta entre isómeros cis/trans] .
CL/EM (M+H)+ = 236.20, RMN de ¾ (400 MHz, DMSO-d6, d = 2.5 ppm) d ppm 4.70 (t, J = 5.7, 1H) , 3.62-3.56 (m, 1H) , 3.49-3.44 (m, 1H) , 3.33-3.27 (m, 1H) , 3.08-3.04 (m, 1H) , 2.07 (m ancho, 1H) , 1.93-1.87 (m, 1H) , 1.51-1.44 (m, 1H) , 1.40 (s, 9H) , 0.76-0.71 (m, 1H) , 0.26 (m, 1H) .
Intermediario 24 Ácido (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano-3 -carboxílico Una semi-solución de NaI04 (6.46 g, 30.2 mmol) en agua (31 mi) se añadió a una solución de 3- (hidroximetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato de (3S) - tere-butilo (mezcla de isómeros cis/trans) (2.15 g, 10.08 mmol) en CH3CN (20 mi) y CC14 (20 mi). Se añadió RuCl3 (0.044 g, 0.212 mmol) inmediatamente y la mezcla de reacción heterogénea se agitó vigorosamente durante 75 min. La mezcla de reacción se diluyó con agua (60 mi) y se extrajo con CH2C12 (50 mi, 3x) . Las fases orgánicas ' combinadas se trataron con 1 mi de MeOH, se dejaron reposar durante aproximadamente 5 min y después se filtraron a través de una almohadilla corto de tierra de diatomeas (CELITE®) . La almohadilla corto se lavó con CH2C12 (50 mi) y el filtrado se concentró en el vacío proporcionando un sólido de color gris marengo claro. La materia prima se disolvió en EtOAc (-10 mi) con calor y se dejó reposar a temperatura ambiente con siembra. Aproximadamente 15 min después de empezar la fase de enfriamiento, se observó una rápida formación de cristales. Aproximadamente 1 h después, se añadieron hexanos (~6 mi) y la mezcla se refrigeró toda la noche (no pareció que precipitara material adicional) . La mezcla se filtró y se lavó con hexanos refrigerados con agua helada/EtOAc (proporción 2:1; 20 mi) y se secó en vacío elevado proporcionando la primera cosecha del ácido ( IR, 3S , 5R) -2 - ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo[3.1.0] hexano-3 -carboxílico (cristales blanquecinos, 1.222 g) . Las aguas madres se concentraron en el vacío y el residuo se disolvió en ~3 mi de EtOAc con calentamiento, se dejó permanecer a temperatura ambiente durante 1 h y después se añadieron 3 mi de hexanos y se almacenaron en un refrigerador durante -15 h.
Una segunda cosecha de ácido (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxílico se recuperó de forma similar (cristales grises, 0.133 g) , para un rendimiento combinado del 59%.
CL/EM (M+H)+ = 250.22, Tr = 1.48 min según las siguientes condiciones de HPLC: gradiente de solvente a partir de A al 100%: B al 0% a A al 0%: B al 100% (A = TFA al 0.1% en metanol/agua 1:9; B = TFA al 0.1% en MeOH/agua 9:1) durante 3 min; detección @ 220 nm; columna PHEOMEIEX® Luna 3.0 X 50 mm S10, Punto de fusión (en grados Celsius) a partir de la primera cosecha = 147.5-149.5°C. RM de ¾ (400 MHz, DMSO-dg) d ppm 12.46 (s, 1H) , 3.88 (s ancho aparente, 1H) , 3.27 (s ancho aparente, 1H; traslapado con señal de agua), 2.28 (s ancho, 1H) , 2.07 (s ancho aparente, 1H) , 1.56 (s aparente, 1H) , 1.40/1.34 (dos s aparentes, 9H) , 0.71 (ra, 1H) , 0.45 (m, 1H) . RMN de 13C (100.6 MHz, DMSO-dg) 172.96, 172.60, 154.45, 153.68, 78.74, 59.88, 59.58, 36.91, 31.97, 31.17, 27.77, 27.52, 14.86, 14.53, 13.69, Análisis calculado para CnHi7N04: C, 58.13; H, 7.54; N, 6.16, Encontrado (para primera cosecha): C, 58.24; H, 7.84; N, 6.07, Rotación óptica (10 mg/ml en CHC13) : [a] D = -216 y -212 para la primera y segunda cosecha, respectivamente.
Una síntesis alternativa para el Intermediario 24 : MSA Se preparó (IR, 3R, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxamida (.CH3SO3H) según el proceso descrito para la síntesis de su estereoisómero en la patente WO2004052850.
Intermediario 24 Ácido (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano-3 -carbox.ilico Un matraz de fondo redondo de 1 1 equipado con una entrada de nitrógeno, un agitador en la parte alta, termopar y manto calefactor se cargó con 50 g (225 mmol) (IR, 3R, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxamida (.CH3S03H) y 250 mi de isopropanol . La suspensión resultante se cargó después con 252 mi de NaOEl al 23% en peso en EtOH (2.68 M, 675 mmol, 3.0 equiv. ) y se agitó a 50°C durante alrededor de 1 hora. La mezcla se cargó con 12.2 mi (675 mmol, 3 equiv.) de agua y se calentó a 60°C. La suspensión resultante se dejó agitar a 60°C durante alrededor de 18 horas . La suspensión se enfrió a ta y se cargó con 250 mi de agua y con 98.2 g (450 mmol, 2.0 equiv.) de di-t-butildicarbonato. Se eliminaron etanol e isopropanol por medio de destilación en el vacío y la mezcla acuosa se enfrió a 0°C. La mezcla se neutralizó con 76 mi (456 mmol) de HCl acuoso 6M manteniendo mientras una temperatura interna < 5°C. El producto v se extrajo con MTBE 500 mi y la fase orgánica rica se lavó con 100 mi de agua. La solución transparente se concentró hasta 150 mi por medio de destilación en el vacío y la suspensión resultante se cargó con 600 mi de heptano manteniendo mientras una temperatura interna > 45°C. La suspensión se enfrió a ta durante alrededor de 30 min y se dejó agitar a ta durante alrededor de 2 horas. El producto se filtró, se lavó con 250 mi de heptano :MTBE 4:1 y se secó en agitación a 70°C dando 40.5 g (178 mmol, rendimiento del 79%,- 99.8 AP @ 205 nm) de ácido (1R,3S,5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxílico: RMN de ?? (400 MHz, DMS0-d6) d 12.48 (s, 1H) , 4.02-3.80 (m, 1H) , 3.45-3.15 (m, 1H) , 2.40-2.19 (m, 1H) , 2.19-2.0 (m, 1H), 1.70-1.50 (m, 1H) , 1.50-1.20 (m, 9H) , 0.83-0.60 (m, 1H) , 0.33-0.55 (m, 1H) ; RMN de 13C (100 MHz , DMSO-d6) d 173.7, 173.2, 155.0, 154.3, 79.4, 60.5, 60.2, 37.6, 32.6, 31.8, 28.4, 28.2, 15.6, 15.2, 14.4; HRMS calculado para CnH18N04 (M + H; IEP+) : 228.1236, Encontrada: 228.1234.
Esquema de reacción 6 Intermediario 25 3- (6-bromo-lH-benzo [d] imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo Se añadió EDCI-HCl (2.65 g, 13.8 mmol) a una mezcla de 4 -bromobenceno-1 , 2 -diamina (2.35 g, 12.6 mmol), (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxílico (3.00 g, 13.2 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (1.93 g, 12.6 mmol) en CH2C12 (80 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 16 horas. La mezcla se diluyó después con CH2C12, se lavó con agua, se secó (salmuera; MgS04) , se filtró y se concentró en el vacío proporcionando una espuma marrón. Se añadió ácido acético (80 mi) a la espuma y la mezcla se calentó a 75°C (temperatura del baño) durante 5 horas. El componente volátil se eliminó en el vacío y el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHC03 saturado y la fase orgánica se secó (salmuera, MgS0 ) , se filtró y se concentró en el vacío. La materia prima resultante se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc al 50-100%/hexanos) proporcionando 3-(6-bromo-lH-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (3.01 g, 7.96 mmol, rendimiento del 63.3%) en forma de una espuma naranja claro, que se usó sin purificación adicional. La reacción también proporcionó 847 mg del mismo producto con pureza más baja. Una alícuota del material recogido se purificó adicionalmente por HPLC preparativa (C-18/CH3CN-agua al 30-100% + NH40Ac al 0.1%) logrando una muestra analítica.
Tiempo de retención de CL-EM 1.248 min; calculado para Ci7H2iBrN302 : 378.08 encontrado m/z 380.05 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . R N de ¾ (500 MHz*, MeOD) d ppm 7.67 (s ancho, 1H) , 7.43 (s ancho, 1H) , 7.34 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 4.75 (s ancho, 1H) , 3.62 (s ancho, 1H) , 2.50 - 2.57 - 2.31 (m, 1H) , 2.31 (dt, J=13.2, 6.7 Hz, 1H) , 1.66 - 1.85 (m, 1H) , 1.45 (s ancho, 3H) , 1.11 (s ancho, 6H) , 0.87 (dt, J=8.6, 5.8 Hz, 1H) , 0.66 (s ancho, 1H) .
Intermediario 26 3- (6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) -1H- benzo [d] imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexano-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) - tere-butilo A un matraz que contiene una mezcla de 3- (6-bromo-¦ ??-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (2.0 g, 5.3 mmol) y bis (pinacolato) diboro (2.69 g, 10.6 mmol) en 1,4-dioxano (50 mi) se añadió acetato de potasio (0.78 g, 7.9 mmol) . El matraz de reacción se desgasificó en el vacío durante 10 min y se purgó con nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P) 4 (305 mg, 0.264 mmol) a la mezcla de reacción y el matraz a presión se tapó y se calentó con un baño de aceite a 85°C (temperatura del baño) durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró en el vacío y la materia prima se fraccionó entre CH2C12 (150 mi) y un medio acuoso (50 mi de agua + 10 mi de solución de NaHC03 saturada) . La fase acuosa se extrajo con CH2C1 y la fase orgánica combinada se secó (Na2S0 ) , se filtró y se concentró en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 20- 100%/hexanos) proporcionando 3 - (6- (4,4,5, 5-tetrametil-l , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (1.74 g, rendimiento del 77%) en forma de espuma blanca. Una alícuota del material recogido se purificó adicionalmente por HPLC preparativa (C-18/CH3CN-agua al 30-100% + NH4OAc al 0.1%).
Tiempo de retención de CL-EM 1.78 min; calculado para C23H32BN32 425.25 encontrado m/z 426.21 [ +H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX®-Luna 10 u C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio a 10 mmol y el solvente B fue acetonitrilo al 95%/agua al 5%/acetato de amonio a 10 mmol. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 7.94 (s, 1H) , 7.61 (d, J=7.9 Hz, 1H) , 7.41 -7.56 (m, 1H) , 4.83 (s ancho, 1H) , 3.64 (d, J=1.2 Hz, 1H) , 2.51 - 2.70 (m, 1H) , 2.33 (dt, J=13.4, 6.6 Hz, 1H) , 1.67 -1.84 (m, J=8.5, 6.10, 5.8, 5.8 Hz , 1H) , 1.39 - 1.59 (s ancho, 3H) , 1.37 (s, 12H) , 1.10 (s ancho, 6H) , 0.88 (dt, .7=8.2, 5.8 Hz, 1H) , 0.66 (s ancho, 1H) .
Intermediario 27 3 , 3 ' - (6, 6 ' - (naftaleno-2, 6-diil) bis (IH-benzo [d] imidazol -6, 2- diil) )bis (2-azabiciclo [3.1.0]hexano-2-carboxilato) de (IR, 1 'R, 3S, 3 'S, 5R, 5 'R) -tere-butilo A una mezcla de 3- (6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2 - il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (1.50 g, 3.53 mmol) y 2 , 6-dibromonaftaleno (403 mg, 1.41 mmol) en 1 , 2 -dimetoxietano (21.7 mi) y agua (6.50 mi) se añadió NaHC03 (356 mg, 4.23 mmol) . La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío durante 10 minutos y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P)4 (82 mg, 0.071 mmol) y la mezcla de reacción se calentó con un baño de aceite a 100°C durante 16 horas y después el componente volátil se eliminó en el vacío. El residuo se fraccionó entre CH2C12 y agua (30 mi) y la fase acuosa se extrajo varias veces con CH2C12, Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con acetato de etilo al 0-70%/CH2Cl2) proporcionando 3,3- (6,6'- (naftaleño-2 ,6-diil)bis(lH-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexano-2 -carboxilato) de ( IR, 1 ' R, 3S , 3 ' S , 5R, 5 ' R) - tere-butilo (377 mg) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención de CL-EM 1.49 min; calculado para C44H46N604 : 722.36 encontrado m/z 723.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.26 (s, 2H) , 8.12 (d, J=8.5 Hz, 2H) , 8.09 (s, 2H) , 8.00 (m, .7=8.6 Hz, 2H) , 7.93 (m, J=8.6 Hz, 2H) , 7.86 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 5.01 (s ancho, 2H) , 3.68 (s ancho, 2H) , 2.76 (dd, J=13.3, 9.3 Hz, 2H) , 2.42 - 2.54 (m, 2H) , 1.87 (s ancho, 2H) , 1.49 (s ancho, 9H) , 1.19 (s ancho, 9H) , 0.94 (dt, J=8.3, 6.1 Hz, 2H) , 0.79 (s ancho, 2H) .
Intermediario 28 3- (6- (6-bromonaftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo La reacción anterior también proporcionó 3- (6- (6-bromonaftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (418 mg) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención de CL-EM 1.90 min; calculado para C27H26BrN302 : 503.12 encontrado m/z 506.05 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocí o . RMN de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.12 (s, 1H) , 8.05 (s, 1H) , 7.93 - 8.00 (m, 2H) , 7.86 - 7.93 (m, 2H) , 7.84 (d, J= 8.6 Hz, 1H) , 7.63 (dd, J"=8.6, 1.8 Hz, 1H) , 5.00 (s ancho, 1H) , 3.68 (s ancho, 1H) , 2.75 (dd, J=13.4, .9.2 Hz , 1H) , 2.41 - 2.54 (m, 1H) , 1.87 (s ancho, 1H) , 1.49 (s ancho, 5H) , 1.17 (s ancho, 4H) , 0.87 - 0.98 (m, 1H) , 0.79 (s ancho, 1H) .
Intermediario 29 2/6-bis(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo[3.1.0 jhexan- 3 - il) - 1H-benzo [d] imidazol - 6 - il ) na ft aleño Una mezcla de 3 , 3 ' - ( 6 , 6 ' - (naf taleno- 2 , 6 -diil) bis (??-benzo [d] imidazol-6 , 2 - di i 1 ) ) bis ( 2 -azabíciclo[3.1.0] hexano-2 -carboxilato) de ( IR, 1 ' R, 3S , 3 ' S , 5R, 51 R) - ere-butilo (360 mg , 0.498 mmol) y TFA. (2 mi) en CH2C12 (10 mi) se agitó en condiciones ambientales durante 3 horas. El componente volátil se eliminó en el vacío y el material resultante se cargó sobre una columna MCX, se purgó con flujo de metanol, se eluyó con NH3 2.0 M/metanol y se concentró proporcionando 2,6-bis(2-( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol - 6 - il ) naftaleno en forma de sólido amarillo (253 mg) .
Tiempo de retención de CL-EM 1.07 min; calculado para C34H3oN6 : 522.25 encontrado m/ z 523.19 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100 % / solvent e B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de ele.ct rorrocío . RMN de H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.17 (s, 2H) , 8.06 (d, «7=8.2 Hz, 2H), 8.00 (s, 2H) , 7.88 (d, «7=8.6 Hz, 2H), 7.71 - 7.81 (m, 4H), 4.84 (dd, «7=10.8, 7.5 Hz, 2H) , 3.47 - 3.53 (m, 2H), 2.80 ( dd , «7=12.8, 7.6 Hz , 2H), 2.54 - 2.63 (m, 2H), 2.04 - 2.11 (m, 2H) , 1.20 - 1.27 (m, 2H), 1.02 (c, J= 7.7 Hz, 2H) Esquema de reacción 7 Mezcla de Intermediario 30 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) - ??-benzo [d] imidazol -6-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol -2 il)pirrolidina-l-carboxilato bistrifluoroacetato de (S) - bencilo e Intermediario 31 2- (5- (4- (7- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) - ??-benzo [d] imidazol -6-il ) naftalen-2 - il ) fenil) -1H- imidazol -2- il) pirrolidina-l-carboxilato bistrifluoroacetato de (S) - bencilo A una mezcla de una sal de TFA de 2- (6- (6- (4,4,5,5-tetrametil-1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-2-il) irrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo y una sal de TFA de 2 - (6 - ( 7- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol -2-il ) pirrolidina- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (190 mg) , 2-(5- (4-bromofenil) -lH-imidazol-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo (Solicitudes de Patente: O 2008021928, WO 2008021936 y WO 2008021927) (213 mg, 0.499 mmol) , en 1,2-dimetoxietano (10.0 mi) y agua (2.0 mi) se añadió NaHC03 (140 mg, 1.663 mmol) . La mezcla de reacción se desgasificó en el vacío durante 5 minutos y se purgó con flujo de nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P)4 (19 mg, 0.017 mmol) y el matraz a presión se tapó y se calentó con un baño de aceite a 85°C durante 16 horas. El componente volátil se eliminó en el vacío y el residuo se fraccionó entre acetato de etilo y agua. Se separaron las fases y se extrajo la fase acuosa varias veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron en el vacío. El material resultante se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y se eluyó con metanol al 0-5%/CH2Cl2) proporcionando productos parcialmente purificados. El residuo se purificó adicionalraente por una HPLC en fase reversa (agua/acetonitrilo/TFA) proporcionando una mezcla de sal TFA de 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) pirrolidin-2 -il) -lH-benzo [d] imidazol-6 - il) naftalen-2 - il ) fenil) -1H-imidazol-2-il) irrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo y una sal de TFA de 2- (5- (4- (7- (2- ( (S) -1- ( erc-butoxicarbonil ) pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il ) naftalen-2 - il ) fenil ) -1H- imidazol -2 -il ) pirrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo (381 mg) que se usó sin purificación adicional.
Tiempo de retención de CL-EM 1.54 min; calculado para C47H46 604 758.36 encontrado m/z 759.37 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Mezcla de Intermediario 32 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol- 6- il) naftalen-2-il) fenil) -1H-imidazol -2-il)pirrolidina-1 - carboxilato de (S) -bencilo e Intermediario 33 2- (5- (4- (7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol- 6- il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol -2-il)pirrolidina-1- carboxilato de (S) -bencilo Una mezcla de una sal TFA de 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1-( erc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2-il) fenil) -1H- imidazol -2 -il ) irrolidina- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo y una sal de TFA de 2-(5-(4-(7- (2- ( (S) -1- ( erc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) -1H-benzo [d] imidazol -6 -il) naftalen-2-il) fenil) - 1H- imidazol -2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (381 mg) y TFA (2 mi) en CH2C12 (10 mi) se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas. El componente volátil se eliminó en el vacío y la materia prima se purificó por una HPLC en fase reversa (agua al 0 a 50%/acetonitrilo/NH4OAc) proporcionando una mezcla de 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol -6 -il) naftalen-2-il) fenil) -1H- imidazol-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo y 2-(5-(4-(7-(2-((S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il ) naftalen-2 - il ) fenil) -lH-imidazol-2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo (70 mg, rendimiento del 21%) en forma de aceite amarillo.
Tiempo de retención de CL-EM 2.87 min; calculado para C42H38 602 658.31 encontrado m/z 659.47 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 80%/solvente B al 20% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/NH4OAc a 10 mmol y el solvente B fue acetonitrilo al 95%/agua al 5%/NH40Ac a 10 mmol. RMN de ? (Mezcla de compuestos, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.07 - 8.24 (m, 4H) , 7.91 - 8.03 (m, 6H) , 7.73 - 7.89 (m, 12H) , 7.66 - 7.73 (m, 4H) , 7.27 - 7.46 (m, 6H) , 7.09 - 7.18 (m, 4H) , 6.97 - .7.04 (m, 2H) , 5.01 - 5.21 (m, 5H) , 4.83 - 5.01 (m, 2H) , 3.72 - 3.82 (m, 2H) , 3.53 - 3.65 (m, 2H) , 3.42 - 3.52 (m, 2H) , 3.35 -3.42 (m, 4H) , 2.48 - 2.62 (m, 2H) , 2.28 - 2.47 (m, 4H) , 2.04 - 2.24 (m, 8H) .
Intermediario 34 Tetratrifluoroacetato de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (6- (4- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il ) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) - ??-benzo [d] imidazol e Intermediario 35 Tetratrifluoroacetato de 2- ( (S) -pirrolidin-2 -il ) -6- (7- (4- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) - ??-benzo [d] imidazol A una solución de una mezcla de 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol- 6- il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) irrolidina-l-carboxilato de (S) -bencilo y 2- (5- (4- (7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2 -il) fenil) -1H- imidazol -2-il ) pirrolidina- 1-carboxilato de (S) -bencilo (70 mg, 0.057 mmol) y carbonato de potasio (K2C03) en metanol (5 mi) se añadió una suspensión de paladio en carbono (al 10%, 11 mg) en metanol (2 mi) a temperatura ambiente. El reactor se purgó en el vacío y se volvió a llenar con hidrógeno. La reacción se agitó durante 16 horas bajo un balón de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de una almohadilla corto de tierra de diatomeas (CELITE®) en el vacío y el filtrado se evaporó en el vacío. La materia prima se purificó por una HPLC de fase reversa (agua al 0 a 50%/acetonitrilo/TFA) proporcionando una sal de TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2 - il ) -6-(6- (4- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (50 mg) en forma de aceite amarillo y una sal de TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2 -il) -6- (7- (4- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (24 mg) en forma de sólido blanco.
Datos analíticos, para el Intermediario 34: tiempo de retención de CL-EM 1.06 rain; calculado para C34H32N6 524.27 encontrado m/z 525.26 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 80%/solvente B al 20% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ? (sal de TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.19 (d, J=10.4 Hz, 2H) , 8.02 - 8.10 (m, 3H) , 7.84 - 7.96 (m, 7H) , 7.77 - 7.83 (m, 2H) , 5.14 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 5.06 - 5.11 (m, 1H) , 3.52 - 3.67 (m, 4H) , 2.61 - 2.74 (m, 2H), 2.43 - 2.56 (m, 2H) , 2.30 -2.42 (m, 2H) , 2.18 - 2.30 (m, 2H) .
Datos analíticos para el Intermediario 35: Tiempo de retención de CL-EM 1.13 min; calculado para C34H32N6 524.27 encontrado m/z 525.24 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire 5u C18 de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A al 80%/solvente B al 20% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (sal de TFA , 500 MHz, MeOD) d ppm 8.27 (d, J"=7.0 Hz , 2H) , 7.99 - 8.06 (m, 3H) , 7.90 - 7.96 (m, 4H) , 7.87 (td, J=8.2, 1.7 Hz , 2H) , 7.76 - 7.85 (m, 3H), 5.13 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 5.03 -5.08 (m, 1H) , 3.51 - 3.67 (m, 4H) , 2.61 - 2.74 (m, 2H) , 2.42 - 2.54 (m, 2H) , 2.20 - 2.40 (m, 4H) .
Esquema de reacción Intermediario 36 2 - (6-bromo-1H-imidazo [4,5-b]piridin-2-il)pirrolidina-1- carboxilato de (S) -tere-butilo Se añadió HATU (3.64 g, 9.57 mmol) a una solución agitada de 5-bromopiridina-2 , 3-diamina (1.64 g, 8.70 mmol) y ácido (S) - 1 -( terc-butoxicarbonil) irrolidina-2 -carboxílico (1.87 g, 8.70 mmol) en DMF (50 mi) y DIPEA (3.19 mi, 18.3 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días, se diluyó con agua (400 mi) y se extrajo con EtOAc (150 mi) . La fase orgánica se lavó con salmuera (50 mi), se seco (MgS04) , se filtró y se concentró. La materia prima se purificó parcialmente por cromatografía instantánea (110 g de Si02, MeOH al 1-4%/DCM) proporcionando 3.36 g de espuma solidificada. El material se disolvió en AcOH (35.0 mi) y se calentó a 100 °C durante 8 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se concentró y se purificó por cromatografía instantánea (se cargó con DCM, 80 g de Si02, EtOAc al 20-40%/Hexanos) proporcionando 2- (6-bromo-lH-imidazo [4 , 5-b] piridin-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (1.73 g) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.33 min; m/z 365, 367 (1:1) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron una velocidad de flujo de 5 ml/minuto, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min, y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de U (400 MHz, MeOD) d ppm 8.40 (s ancho, 1H) , 8.09 (s ancho, 1H) , 5.12 - 4.96 (m, 1H) , 3.77 - 3.67 (m, 1H) , 3.62 -3.51 (m, 1H) , 2.56 - 2.38 (m, 1H) , 2.15 - 1.90 (m, 3H) , 1.46 (s, 3.5H) , 1.16 (s, 5.5H) .
Intermediario 37 Intermediario 38 Mezcla de Intermediario 37 2- (6-bromo-3- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -3H-imidazo [4,5- b]piridin-2-il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo e Intermediario 38 2- (6-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -lH-imidazo [4, 5- b]piridin-2 - i 1 )pirrol idina- 1 - carboxi lato de (S) -tere- butilo Una dispersión del 60% de NaH (0.120. g, 3.00 mmol) se añadió a una solución agitada de 2- (6-bromo-lH-imidazo [4 , 5-b] piridin-2-il)pirrolidina-l - carboxi lato de ( S )- tere-butilo (1.0 g, 2.7 mmol) en DMF (25 mi) y la reacción se agitó durante 1.5 horas a temperatura ambiente. Después se añadió SEM-Cl (0.483 mi, 2.72 mmol) y la reacción se agitó 16 horas. La reacción se diluyó con agua (~ 30 mi) y EtOAc (-35 mi) , las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera (30 mi), se secó (MgS04), se filtró y se concentró. El aceite amarillo en bruto residual se purificó por cromatografía instantánea (80 g Si02, EtOAc al 20-30%/hexanos) proporcionando una mezcla de 2 - ( 6 -bromo- 3 -( ( 2 - ( trimetilsilil ) etoxi ) metil) -3H-imidazo [4 , 5 -b] piridin- 2 - il ) pirrol idina- 1 - carboxilato de (S) -tere-butilo y 2 - ( 6 -bromo- 1 - ( ( 2 - ( trimet ilsil i 1 ) etoxi ) met il ) -1H- imidazo [4 , 5-b] piridin-2-il)pirrolidina-l - carboxi lato de (S) - tere-butilo (838 mg) en forma de un aceite amarillo. La mezcla se usó sin purificación adicional.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.54 min; m/z 497.499 (1:1) (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron una velocidad de flujo de 5 ml/minuto, un gradiente de solvente A al 100 %/ solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min, y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 39 2,2' - (6,6' - (naftaleno-2, 6-diil)bis (3- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -3H-imidazo [4 , 5-b]piridina-2, 6- diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S, 2 ' S) -tere-butilo e Intermediario 40 2- (6- (6- (4,4,5, 5- tetrameti2 -1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen- 2-il) -3- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -3H-imidazo [4 , 5- b]piridin-2 -il)pirrolidina-l-carboxilato de (S) -tere-butilo En un vial de microondas, 2 , 6 -bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil-1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) naftaleno (57 mg, 0.150 mmol) , una mezcla de 2- (6-bromo-3- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -3H-imidazo [4 , 5-b] piridin-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo y 2-(6-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -lH-imidazo [4 , 5-b] piridin-2-il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (112 mg) , carbonato de cesio (147 mg, 0.450 mmol) y diciclohexil (21 , 6 ' -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (12.3 mg, 0.030 mmol) se disolvieron en THF (3 mi) y agua (0.3 mi) . Se añadieron 1.5 mi adicionales de THF y la reacción se roció con nitrógeno burbujeante hasta que se hubieron evaporado aparte ~2 mi. A la solución transparente se añadió acetato de paladio (II) (3.37 mg, 0.015 mmol) . El vial se purgó con flujo de nitrógeno, se selló y después se calentó con irradiación de microondas a 120 °C durante 30 min. La reacción se diluyó con EtOAc (~ 3 mi) y se lavó con agua (2 mi) y salmuera (2 mi) . La reacción se secó (MgS04) , se filtró y se concentró a un sólido amarillo que se purificó por cromatografía instantánea (12 g de Si02, EtOAc al 25-75%/hexanos) proporcionando 2,2'- (6,6'- (naftaleno-2 , 6-diil) bis (3- ( (2- (trimetilsilil ) etoxi) metil) -3H-imidazo [4 , 5-b] iridina-6 , 2-diil) ) dipirrolidina-l-carboxilato de (2S , 2 ' S) - tere-butilo (74 mg) en forma de un aceite incoloro transparente (mezcla de regioisómeros de SEM) y 2- (6- (6- (4 , 4 , 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -3- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil ) -3H- imidazo [4 , 5-b] iridin-2 -il) pirrolidina-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (32 mg) en forma de un sólido incoloro (mezcla de regioisómeros de SEM) . Se usó cada uno sin purificación adicional.
Datos analíticos para el Intermediario 39: Tiempo de retención en la CL-EM 3.42 minutos; m/z 961.9 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron una velocidad de flujo de 5 ml/minuto, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min, y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) (mezcla de regioisómeros de SEM) d ppm 8.84 - 8.75 (m, 2H) , 8.39 -8.31 (m, 2H), 8.26 - 8.18 (m, 2H) , 8.11 (s ancho, 2H) , 7.92 - 7.84 (m, 2H) , 5.94. - 5.83 (m, 3H) , 5.79 (d, J = 11.0. Hz, 1H) , 5.34 - 5.25 (m, 2H) , 3.86 - 3.57 (m, 8H) , 2.61 - 2.39 (m, 2H) , 2.34 - 1.99 (m, 6H) , 1.45 (s, 8H) , 1.17 (s, 10H) , 1.10 - 0.87 (m, 4H) , -0.02 (s, 18H) .
Datos analíticos para el Intermediario 40: Tiempo de retención en la CL-EM 3.15 minutos; m/ z 671.5 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo líquido Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna lOu C18 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Visible a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron una velocidad de flujo de 5 ml/minuto, un gradiente de solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de retención de 1 min, y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una Plataforma MICROMASS® para CL en modo de elect orrocío . (Mezcla de regioisómeros de SEM) d ppm 8.82 - 8.75 (m, 1H) , 8.39 - 8.29 (m, 2H), 8.21 - 8.15 (m, 1H) , 8.07 - 8.01 (m, 1H) , 8.11 (s ancho, 2H), 7.98 - 7.93 (m, 1H), 7.89- 7.80 (m, 2H), 5.94 - 5.85 (m, 1.5H) , 5.79 (d, J = 11.3 Hz, 0.5H) , 5.33 - 5.24 (m, 1H), 3.85 - 3.56 (m, 4H) , 2.62 - 2.39 (m, 1H), 2.33 - 1.99 (m, 1H), 1.49 - 0.87 (m, 23H), -0.02 (s, 9H) .
Intermediario 41 2 , 6 -bis (2 - ( (S) -pirrolidin-2-il) - 3H- imidazo [4 , 5 - b] piridin- 6 - il ) naftaleno A una solución agitada de 2,2'-(6,6'- (naftalen-2,6-diil)bis(3- ( (2- (trimetilsilil)etoxi)metil) -3H-imidazo[4,5-b]piridin-6 , 2 - di i 1 ) ) dipi rrol idin- 1 - carboxi lato de (2S,2'S)-terc-butilo (74 mg , 0.077 mmol) (mezcla de regioisómeros SEM) en metanol (1 mi) se añade cloruro de hidrógeno 4M (2.0 mi, 8.0 mmol) en dioxano. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas y, después, se concentró hasta sequedad para dar una sal clorhidrato de 2 , 6 - b i s ( 2 - ( ( S ) - p i rrol idin -2-il) -3H-imidazo[4,5-b]piridin-6-il)naftaleno (51.1 mg) en forma de un sólido amarillo que se usó sin más purificación.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.83 min; m/z 501.13 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de acetonit ri lo/ 90 % de agua/0.1% de ácido trif luoroacético y el solvente B fue 10% de agua/90% de acetoni t ri lo/ 0.1 % de ácido trif luoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma Micromass® para CL en modo de elect rorrocío . RMN de 1H (400 MHz, D20) d ppm 8.76 (s, 2H) , 8.54 (s, 2H) , 8.07 - 7.97 (m, 4H), 7.86- 7.78 (m, 2H) , 5.26 - 5.16 (m, 2H), 3.98 - 3.65 (m, 8H), 2.79 - 2.63 (m, 2H), 2.46 - 2.25 (m, 6H) .
Esquema de reacción Intermediario 42 2- (6-bromo-1H-imidazo [4, 5-b]pirazin-2-il)pirrolidin-1- carboxilato de (S) -tere-butilo A una solución agitada de 5-bromopirazin-2 , 3-diamina (2.28 g, 12.1 mmol) y ácido ( S)-l-(terc-butoxicarbonil) pirrolidina-2-carboxílico (2.60 g, 12.0 mmol) en DMF (50 mi) y DIPEA (4.42 mi, 25.3 mmol) se añadió HATU (5.05 g, 13.3 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días y después a90°C durante 1 día. La mezcla de reacción se diluyó con agua (350 mi) y se extrajo con EtOAc (200 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera (100 mi) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. El material bruto se purificó parcialmente mediante cromatográfica instantánea (110 g de Si02, 1-4% MeOH/DCM) para dar 1.9 g de espuma solidificada. El material s disolvió en AcOH (35.0 mi) y se calentó a 95 °C durante 8 horas. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se concentró y se purificó mediante cromatográfica instantánea (se cargó con DCM, 80 g de Si02, 20-30% EtOAc/Hexanos) para dar 2- (6-bromo-lH-imidazo [4 , 5-b] pirazin-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (760 mg, 2.06 mmol, rendimiento del 17%) en forma de una espuma solidificada amarilla.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.28 min; m/z 366, 368 (1:1) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Phenomenex-Luna de lOu C18, de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma Micromass® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH NMR (400 MHz , MeOD) d ppm 8.50 - 8.43 (m, 1H) , 5.11 -4.99 (m, 1H) , 3.77 - 3.68 (m, 1H) , 3.62 - 3.51 (m, 1H) , 2.57 - 2.40 (m, 1H) , 2.19 - 1.95 (m, 3H) , 1.46 (s, 3.5H), 1.17 (s, 5.5H) .
Intermediario 43 Intermediario 44 Intermediario 43 2- (5-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -IH-imidazo [4,5- b]pirazin-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo e Intermediario 44 2- (6-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -IH-imidazo [4,5- b]pirazin-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo Una dispersión al 60% de NaH (75 mg, 1.9 mmol) se añadió una solución agitada de 2 - ( 6 -bromo-1H- imidazo [4 , 5 -b] irazin-2-il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (627 mg, 1.70 mmol) en DMF (15 mi) y la reacción se agitó durante 1.5 horas a temperatura ambiente. Después se añadió SEM-Cl (0.30 mi, 1.7 mmol) y la reacción se agitó durante la noche. La reacción se diluyó con agua (~ 30 mi) y EtOAc (-35 mi) , se separaron las capas y la capa orgánica se lavó con salmuera (30 mi), se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. El aceite Amarillo bruto se purificó mediante cromatográfica instantánea (40 g de Si02, 20-30% EtOAc/hexanos) para dar 2-( 5-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil ) etoxi)metil) -lH-imidazo [4,5-b] pirazin-2-il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (421 mg) en forma de un aceite incoloro transparente y 2- (6-bromo-1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -lH-imidazo [4,5-b] pirazin-2-il) irrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (345 mg) " forma de un aceite incoloro transparente. La regioquímica absoluta del grupo SEM no se estableció de forma no ambigua, los nombres (y estructuras) se pueden intercambiar en estos intermediarios.
Datos analíticos del Intermediario 43 : Tiempo de retención en la CL-EM 2.43 min; m/z 496, 498 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de NMR (400 MHz, MeOD) d ppm 8.52 (s, 0.5H), 8.49 (s, 0.5H), 5.90 - 5.72 (m, 2H) , 5.32 - 5.25 (m, 1H) , 3.82 - 3.54 (m 4H) , 2.59 - 2.41 (m, 1H) , 2.32 - 1.98 (m, 3H) , 1.43 (s, 4.5H), 1.15 (s, 4.5H), 1.07 - 0.85 (m, - 2H) , -0.02 (s, 9H) .
Datos analíticos del Intermediario 4 : Tiempo de retención en la CL-EM 2.41 min; m/z 496, 498 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENO ENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H NMR (400 MHz, MeOD) d ppm 8.61 (s, 0.5H), 8.58 (s, 0.5H), 5.88 - 5.71 (m, 2H) , 5.28 (dd, J= 8.5, 4.5 Hz, 1H) , 3.82 - 3.54 (m 4H) , 2.59 - 2.41 (m, 1H) , 2.32 - 1.98 (m, 3H) , 1.43 (s, 4.5H) , 1.15 (s, 4.5H) , 1.09 - 0.85 (m, 2H) , -0.02 (s, 9H) .
Intermediario 45 2,2' - (5,5' - (naftalen-2, 6-diil)bis (1- ( (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -lH-imidazo [4, 5-b]pirazin-5, 2- diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S, 2 'S) -tere-butilo e Intermediario 46 2- (5- (6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l , 3, 2-dioxaborolan-2-il) naftalen- 2-il) -1- C (2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -1H-imidazo [4 , 5- b]pirazin-2-il)pirrolidín-l-carboxilato de (S) -tere-butilo En un vial de microondas, 2 , 6 -bis (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil- 1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (149 mg, 0.393 mmol) , 2 - (5 -bromo- 1- (( 2 - (trimetilsilil) etoxi) metil ) -1H-imidazo [4 , 5 -b] irazin-2 - il ) pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (294 mg, 0.590 mmol) (o un regioisómero SEM) , carbonato de cesio (384 mg, 1.18 mmol) y diciclohexil (21 , 61 -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (32.3 mg, 0.079 mmol) se disolvieron en THF (4 mi) y agua (0.4 mi). Se añadió 1.5 mi adicionales de THF y la reacción se roció con nitrógeno en burbujas hasta que el 1.5 se hubo evaporado. A la solución transparente se añadió acetato de paladio (II) (8.83 mg, 0.039 mmol) . El vial se aclaró con nitrógeno, se selló y después se calentó con irradiación de microondas a 120 °C durante 30 min. La reacción se diluyó con EtOAc (~ 3 mi) y se lavó con agua (2 mi) y salmuera (2 mi) . La reacción se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta un aceite Amarillo que se purificó mediante cromatográfica instantánea ( 12 g de Si02, 25-75% EtOAc/hexanos) para dar 2 , 2 ' - (5 , 5 ' - (naftalen-2 , 6-diil) bis (1- ( (2- (trimetilsilil ) etoxi) metil ) -lH-imidazo [4,5-b] irazin-5 , 2-diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S,2'S)-terc-butilo (o un regioisómero SEM) (210 mg) en forma de una espuma solidificada amarilla y 2- (5- (6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l,3,2-dioxaborolan-2-il)naftalen-2-il) -1- ( (2- (trimetilsilil ) etoxi) metil) -lH-imidazo [4,5-b]pirazin-2-il) irrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (o un regioisómero SEM) (53.5 mg) en forma de un aceite incoloro.
Datos analíticos del Intermediario 45: Tiempo de retención en la CL-EM 3.27 min; m/z 963.89 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . R N de XH (400 MHz, MeOD) (mezcla de regioisómeros SEM) d ppm 9.29 - 9.15 (m 2H) , 8.79 - 8.66 (m, 2H) , 8.43 - 8.29 (m, 2H) , 8.20 - 7.98 (m, 2H) , 6.03 -5.84 (m, 4H) , 5.34 (dd, J = 8.3, 4.3 Hz, 2H) , 3.87 - 3.70 (m, 6H) , 3.68 - 3.58 (m, 2H) , 2.63 - 2.43 (m, 2H) , 2.36 - 1.14 (m, 4H) , 2.14 - 1.99 (m, 2H) , 1.46 (s, 8H) , 1.17 (s, 10H) , 1.35- 0.85 (m, 4H) , -0.02 (s, 18H) .
Datos analíticos del Intermediario 46: Tiempo de retención en la CL-EM 3.07 min; m/z 672.52 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. 2, 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2 - il ) -IH-imidazo [4, 5-b]pirazin-5- il ) naftaleno A una solución agitada de 2 , 2 ' - (5 , 5 ' - (naftalen-2 , 6-diil)bis(l- ( (2 - (trimetilsilil) etoxi ) metil ) -IH-imidazo [4,5-b] pirazin-5 , 2-diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S,2'S)-tere-butilo (210 mg, 0.218 mmol) (no se estableció la regioquímica absoluta del SEM) en metanol (3 mi) se añadió cloruro de hidrógeno 4M (6.0 mi, 24 mmol) en dioxano. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas y, después, se concentró hasta sequedad para dar una sal clorhidrato de 2 , 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-imidazo [4 , 5-b] pirazin-5-il) naftaleno (143 mg) en forma de un sólido naranja que se usó sin purificación adicional.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.90 min; m/z 503.21 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de acetonitrilo/90% de agua/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de agua/90% de acetonitrilo/O .1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 Hz, D20) d ppm 8.59 (s, 2H) , 7.94 (s, 2H) , 7.85 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 5.23 - 5.16 (m, 2H) , 3.98 - 3.66 (m 8H) , 2.78 -2.64 (m, 2H) , 2.47- 2.28 (m, 6H) .
Esquema de reacción 2-naftil) -lH-bencimidazol -2 -il ) -1-pirrolidincarboxilato de terc-butilo A una solución de 2 , 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (885 mg, 1.78 ramol) , DMAP (10.8 mg, 0.089 mmol) y trietilamina (1.2 mi, 8.9 mmol) en DMF (30 mi) a temperatura ambiente se. añadió, en una porción, dicarbonato de di- ere-butilo (387 mg, 1.78 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y se purificó en un BIOTAGE® (cargado en seco a un cartucho de gel de sílice de 80 g y eluido con un gradiente de 0 a 50 % de DCM en MeOH) , para dar. (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -1H-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (500 mg, 0.835 mmol, rendimiento de 47.1 %) en forma de un sólido naranja.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.207 min; m/z 599.25 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.27 (d, J=3.1 Hz , 1H) , 8.23 (s, 1H) , 8.04 -8.17 (m, 4H) , 8.03 (s, 1H) ., 7.88 - 7.97 (m, 3H) , 7.75 - 7.83 (m, 2H) , 5.28 - 5.35 (m, 1H) , 5.11 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 3.75 -3.83 (ra, 1H) , 3.60 - 3.72 (m, 2H) , 3.51 - 3.59 (m, 1H) , 2.60 - 2.74 (m, 2H) , 2.40 - 2.50 (m, 1H) , 2.21 - 2.38 (m, 3H) , 2.10 - 2.20 (m, 2H) , 1.52 (s, 4H) , 1.25 (s, 4H) .
Intermediario 49 (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -L-valil) -2- pirrolidinil) -IH-bencimidazol -5 - il ) -2-naftil) -1H- bencimidazol-2-il) -1-pirrolidincarboxilato de terc-butilo A una solución de ( 2 S ) - 2 - ( 5 - ( 6 - ( 2 - ( ( 2 S ) - 2 -pirrol idinil ) - 1H -benc imi dazol - 5 - i 1 ) -2-naftil) -1H-benc imi dazol - 2 - i 1 ) - 1 - pi rrol i dincarboxi 1 ato de terc-butilo (400 mg, 0.668 mmol), ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (176 mg , 1.00 mmol) y DIEA (0.583 mi, 3.34 mmol) en DMF (10 mi) se añadió HATU (381 mg , 1.00 mmol) . La mezcla de reacción se agitó 2 h a temperatura ambiente y después se purificó mediante HPLC prep (usando una columna aters Sunfire de C18 de 30 X 150 mm de 5u, eluida con un gradiente de 0 a 50 % de ACN -Water + 0.1 % en TFA) para dar una sal en TFA de (2S)-2-(5-(6- (2- ( (2S) -1-.(N- (metoxicarbonil ) -L-valil) -2-pirrol idinil ) - 1H-benc imi da zo1 - 5 - i 1 ) -2-naf til) -1H-benc imidazol - 2 - i 1 ) - 1 - pi rrol idincarboxi lato de tere-butilo (445 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.317 min; m/ z 756.28 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 101/ agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 50 ( (1S) -2-metil-l- ( ( (2S) -2 - (5 - (6- (2 - ( (2S) -2- pirrol idini 1 ) - lH-bencimidazol - 5 - il ) -2 -naftil ) -1H- bencimidazol - 2 -il ) -1- pirrol idini 1 ) carbonil) ropil) carhamato de metilo A una solución de sal en TFA de (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -L-valil) -2-pirrol idini 1 ) - lH-bencimidazol -5 - il ) -2-naftil) -1H-benc imidazol - 2 - i 1 )- 1 -pirrol idincarboxi lato de tere-butilo (445 mg) en DCM (10 mi) a temperatura ambiente se añadió TFA (1 mi, 13 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas, se concentró y el residuo se diluyó en MeOH, se cargó en un cartucho Strata XC MCX y se lavó con metanol . El compuesto se liberó del cartucho eluyendo con una solución de amoniaco 2M en metanol y después se evaporó a presión reducida para dar ( ( 1S ) - 2 -met i 1 - 1 - ( ( ( 2S ) - 2 - ( 5 - ( 6 - ( 2 -( (2S) -2-pirrolidinil) - 1H-benc imidazol - 5 - i 1 ) -2-naftil) -lH-bencimidazol - 2 - i 1 ) -1-pirrolidinil ) carbonil ) propil ) carbamato de metilo (275 mg) en forma de un sólido naranja.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.120 min; m/z 656.27 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1K (500 MHz , MeOD) d ppm 8.26 (s ancho, 1H) , 8.22 (s ancho, 1H) , 8.08 - 8.16 (m, 3H) , 8.04 - 8.08 (m, 1H) , 8.03 (s, 1H) , 7.86 - 7.96 (m, 3H) , 7.73 - 7.82 (m, 2H) , 5.88 - 5.93 (m, 0.1H) , 5.37 - 5.44 (m, 0.9H), 5.07 - 5.15 (m, 1H) , 4.28 - 4.33 (m, 1H) , 4.12 - 4.19 (m, 0.8H), 4.06 - 4.10 (m, 0.2H), 3.94 - 4.02 (m, 1H), 3.59 - 3.75 (m, 4H) , 3.50 - 3.59 (m, 1H) , 2.63 - 2.74 (m, 2H) , 2.41 - 2.47 (m, 1H) , 2.23 - 2.40 (m, 5H) , 2.06 - 2.16 (m, 1H) , 1.00 - 1.04 (m, 0.4H), 0.94 - 1.00 (m, 3H) , 0.88 - 0.93 (m, 2.6H) .
Esquema de reacción Intermediario 53 nterme ar o Intermediarlo 55 Intermediario 51 - (4- (6- (4,4,5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere- butilo e Intermediario 52 2,2' - (4,4' - (naftalen-2, 6-diil)bis- (lH-imidazol-4, 2- diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S, 2 ' S) -tere-butilo Un recipiente de presión de 100 mi equipado con una barra de agitación magnética con 2 , 6-bis ( , 4 , 5 , 5-tetrametil-1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (2.00 g, 5.26 mmol) , 2- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) irrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (2.10 g, 5.79 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0.058 g, 0.05 mmol) en DME (47.8 mi) y agua (4.8 mi) . La solución se desgasificó a vacío durante 5 minutos y el reactor se cargó de Nuevo con nitrógeno. El vaso se selló y la mezcla de reacción se calentó durante la noche a 120° C. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron al vacío El residuo se repartió entre agua- y EtOAc y la capa de agua se extrajo con EtOAc adicional. Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó con un BIOTAGE® (cargado en seco sobre un cartucho de gel de sílice de 90 g y eluyó con un gradiente de 0 a 30 % de EtOAc en DCM) y se volvió a purificar con un BIOTAGE® (cargado en seco sobre un cartucho de gel de sílice de 80 g y eluyó con un gradiente de 0 a 50 % de EtOAc en DCM) para dar 2- (4 -(6- (4, 4, 5, 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2- il) -1H-imidazol-2-il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (949 mg) en forma de un sólido amarillo. El material (contaminado con 2 , 2 ' - (4 , 4 ' - (naftalen-2 , 6 -diil ) bis- ( 1H-imidazol-4, 2-diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S,2'S)- tere-butilo) se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.760 min; m/z 490.21 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
La HPLC preparativa de la reacción siguiente dio 2 , 2 ' - (4 , 4' - (naftalen-2, 6 -diil) bis- ( lH-imidazol- , 2 -diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S , 2 ' S) - tere-butilo (92 mg, 0.111 mmol, rendimiento del 11%) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.113 min; m/z 599.24 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/rain, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde .el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.35 (s ancho, 2H) , 8.13 (s ancho, 2H) , 8.08 (s ancho, 1H) , 8.00 (s ancho, 1H) , 7.95 (m, 2H) , 5.18 (s ancho, 2H) , 3.68 - 3.78 (m, 2H) , 3.62 (s ancho, 2H) , 2.51 -2.68 (m, 2H) , 2.21 (s ancho, 2H) , 2.06 - 2.15 (m, 4H) , 1.50 (s ancho, 9H) , 1.31 s ancho, 9H) .
Intermediario 53 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) - IH-imidazol -4 -il ) naftalen-2 - il ) fenil) -lH-imidazol -2- il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo Un recipiente de presión de 100 mi equipado con una barra de agitación magnética se cargó con 2- (4- (6- (4,4, 5,5-tetrametil-1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il) naftalen- 2 - il) - 1H-imidazol-2-il) irrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (500 mg, 1.02 mmol) , 2- (5- (4 -bromofenil) -lH-imidazol-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) - erc-butilo (601 mg, 1.53 mmol) y Pd(Ph3P)4 (58 mg, 0.05 mmol) en DME (10 mi) y agua (1.0 mi) . La solución se desgasificó a vacío durante 5 minutos y el reactor se cargó de Nuevo con nitrógeno. La mezcla se calentó durante 8 horas a 120 °C, se añadió Pd(Ph3P)4 adicional (57.8 mg, 0.05 mmol) y la mezcla se desgasificó y agitó durante la noche¦ a 130°C. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre agua y EtOAc y la capa de agua se extrajo con EtOAc adicional. Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2S0 ) , se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó en un BIOTAGE® (cargado en seco en un cartucho de gel de sílice de 90 g y eluido con un gradiente de 5 a 100 % de EtOAc en DCM) y, después, se volvió a purificar mediante HPLC prep (usando una columna Waters Sunfire de C18 de 30 X 100 mm de 5u eluyó con MeOH -Aguar + 0.1 % TFA) para dar una sal TFA de 2-(5-(4-(6- (2- ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) - 1H- imidazol-2 - il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (S) - terc-butilo (50 mg) .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.278 min; m/z 675.70 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (d, .7=15.9 Hz, 2H) , 8.14 - 8.18 (m, 1H) , 8.10 (d, J=8.85 Hz, 1H) , 8.05 (s, 0.6H), 7.96 - 8.03 (m, 4H) , 7.85 - 7.94 (m, 3.4H), 5.11 - 5.23 (m, 2H) , 3.69 - 3.77 (m, 2H) , 3.62 (s ancho, 2H) , 2.51 - 2.67 (m, 2H) , 2.16 - 2.26 (m, 2H) , 2.05 - 2.16 (m, 4H) , 1.51 (s, 9H) , 1.32 (s, 9H) .
Intermediario 54 2- ( (2S) -2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S) -2 -pirrolidinil ) -1H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-i idazol A una solución de sal en TFA de 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) - 1H-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2- i 1 ) pi rrol idin- 1 - carboxi lato de ( S ) - t ere -but i lo en DCM (10 mi) se anadió TFA (2.0 mi, 26 mmol) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se concentró al vacío para dar una sal en TFA de 2 - ( ( S ) -pi rrol idin- 2 - i 1 ) - 5 - ( 4 -(6- (2 - ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-i 1 ) naf talen- 2 - i 1 ) feni 1 ) - 1H - imidazo1 (51.5 mg) en forma de un sólido naranja, que se usó sin purificación adicional.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.978 min; m/ z 475.19 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0 % de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La HPLC-EM (TFA) 78457-087 usando una columna aters Sunfire de C18 de 4.6 X 50 mm de 5u mostró que la reacción estaba completa, pico encontrado a temperatura ambiente = 0.978 min. MH+ = 475.19, RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.34 (s, 1H), 8.20 (s, 1H) , 8.03 (dd, J"=14.2, 8.7 Hz, 2H), 7.84 -7.96- (m, 7H) , 7.79 - 7.84 (m, 1 H,) 4.99 - 5.11 (m, 2H) , 3.48 - 3.63 (m, 4H), 2.57 - 2.70 (m, 2H), 2.41 -2.55 (m, 2H) , 2.29 - 2.41 (m, 2H), 2.15 - 2.29 (m, 2H) . " Intermediario 55 4,4'- (2 , 6 -naftalendiil ) bis (2- ( (2S) - 2 -pirrolidinil ) - 1H- imidazol ) A una solución de sal en TFA de 2,2' -(4,4'-(naftalen-2, 6-diil)bis (lH-imidazol-4, 2 -diil ) ) dipirrolidin- 1 - carboxi lato de (2S , 2 ' S) - tere-butilo (82 mg) en DCM (2 mi) a temperatura ambiente se añadió TFA (2.0 mi, 26 mmol) en una porción. La mezcla se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente, se purificó mediante HPLC prep (columna Waters Sunfire de C18 de 30 X 100 mm de 5u eluyó con un gradiente de 5 a 90 % MeOH -Agua + 0.1 % de TFA) y se volvió a purificar mediante HPLC prep (columna PHENO ENEX® Luna C18 de 30 X 100 mm de lOu eluida con un gradiente de 10 a 90 % de metanol -Agua + 0.1 % de TFA) para dar una sal TFA de 4,4' -(2,6-na f t a l endi i D b i s (2 - ( ( 2S ) - 2-pirrolidinil) - lH- imidaz o l ) (68 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.978 min; m/z 399.18 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90% /agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ""? ( 500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 2H) , 7.95 - 8.00 (m, 2H), 7.91 - 7.95 (m, 2H) , 7.85 (s, 2H), 5.03 (t, J= 8.2 Hz , 2H), 3.49 -3.62 (m, 4H) , 2.59 - 2.67 (m, 2H), 2.42 - 2.52 (m, 2H), 2.31 - 2.40 (m, 2H), 2.17 - 2.28 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediario 11 Intermediario 56 Intermediario 57 Intermediario 56 2- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il)pirrolidin-1- carboxilato de (S) -tere-butilo 2- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) irrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (750 mg, 2.07 mmol) y yoduro de cobre (I) (79 mg, 0.41 mmol) se disolvieron en DMF (20 mi) y trietilamina (1.439 mi, 10.33 mmol). La solución de. reacción se aclaró al vacío durante 10 minutos (aspirador de vacío, se aclaró con nitrógeno) y después se añadieron etiniltrimetilsilano (1.2 mi, 8.3 mmol) y, por último, Pd(PPh3)4 (119 mg, 0.103 mmol). El matraz se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 50 °C durante la noche. La reacción se concentró hasta un alquitrán negro bruto, se disolvió en DCM y se purificó mediante BIOTAGE® Horizon (80 g de Si02, 20-40% de EtOAc/hexanos) para dar 2- (5-( (trimetilsilil) etinil) -1H- imidazol -2 -il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (546 mg, 1.64 mmol, rendimiento del 79 %) en forma de un sólido amarillo. Este material se usó sin purificación adicional.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.393 min; m/z 332.33 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de XH NMR (400 MHz, CDC13) d ppm 7.19 - 7.13 (m, 1H) , 4.92 - 4.85 (m, 1H) , 3.43 - 3.31 (m, 2H) , 3.04 - 2.83 (m, 1H) , 2.20 - 1.88 (m, 3H) , 1.51 (s, 3H) , 1.49 (s, 6H) , 0.25 (s, 3H) , 0.23 (s, 6H) .
Intermediario 57 2- (5-etinil-lH-imidazol-2-il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo El 2- (5- ( (trimetilsilil) etinil) - 1H- imidazol-2 -il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (537 mg( 1.61 mmol) se disolvió en MeOH (20 mi) y después se añadió carbonato potásico (22 mg, 0.16 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se concentró, se disolvió en diclorometano, se cargó en una columna de Si02 y se purificó mediante BIOTAGE® Horizon (30-40% de EtOAc/hexanos) para dar 2- (5-etinil-lH-imidazol-2-il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (s) - fcerc-butilo (346 mg, 1.32 mmol, rendimiento del 82 %) en forma de un sólido blancuzco.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.878 min; m/z 260.35 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XK NMR (400 MHz , CDC13) d ppm 7.21 - 7.17 (m, 1H) ,. 4.92 -4.87 (m, 1H) , 3.43 - 3.30 (m, 2H) , 3.05 (s, 1H) , 3.03 - 2.85 (m, 1H) , 2.20 - 1.88 (m, 3H) , 1.60 -1.45 (m, 9H) .
Intermediario 58 (2S) -2- (4 - ( (6- ( (2- ( (2S) -1- (terc-butoxicarbonil) -2- pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) etinil) -2-naftil) etinil) -1H- imidazol-2-il) -1-pirrolidincarboxilato de tere-butilo Los compuestos 2- ( 5 -etinil - 1H-imidazol-2 -il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (S) - erc-butilo (340 mg, 1.30 mmol) , 2 , 6-dibromonaftaleno (744 mg, 2.60 mmol) y yoduro de cobre (I) (12.39 mg, 0.065 mmol) se suspendieron en DMF (10 mi) y trietilamina (0.54 mi, 3.9 mmol) . La solución se aclaró al vacío con nitrógeno (5X) , se trató con Pd(PPh3)4 (75 mg, 0.065 mmol)y después se aclaró al vacío con nitrógeno (2X) . La solución amarillo turbia se agitó en nitrógeno a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se concentró hasta un semisólido de color Amarillo-naranja, se suspendió en DMF/MeOH (-1:1), se filtró y se purificó en cinco inyecciones mediante HPLC prep (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM, 15-100%) . Las fracciones que contienen el producto deseado se combinaron y se concentraron para dar (2S) -2- (4- ( (6- ( (2- ( (2S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -2-pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) etinil) -2-naftil) etinil) -1H-imidazol-2-il) - 1-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (70 mg, 0.11 mraol, rendimiento del 18%) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.448 min; m/ z 647.45 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, CDC13) d ppm 10.70 (s ancho, 2H) , 7.98 (s, 2H) , 7.74 (d, J = 8.3 Hz , 2H) , 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.30 - 7.25 (m, 2H, bajo el pico del solvente), 4.95 (dd, J = 7.3, 3.3 Hz , 2H) , 3.46 - 3.37 (m, 4H) , 3.08 - 2.91 (m, 2H) , 2.24 - 2.08 (m, 4H) , 2.03 - 1.92 (ra, 2H) , 1.51 (s, 18H) .
Intermediario 59 4,4'-(2,6-naftalendiildiil-2,l-etindiil)bis(2-((2S)-2- pirrolidinil ) - 1H- imidazol ) El 2,2'-(5,5'-(naftalen-2,6-diilbis(etin-2,l-diil))bis(lH- imidazol - 5,2-diil) ) dipirrolidin-1-carboxilato de ( 2S , 21 S )- tere-butilo (32 mg, 0.049 mmol) se disolvió en diclorometano (2 mi) y, después, se añadió TFA (1 mi, 13 mmol) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La reacción se concentró hasta sequedad para dar una sal en TFA de 4, 4' - (2, 6 -naftalendi ildi - 2 , 1- etindiil ) bis (2- ( (2S) -2-pirrol idini 1 )- 1H- imidazol ) (41.6 mg) en forma de un sólido pardo.
RMN de XH (500 MHz, CD30D) d ppm 8.05 (s, 2H) , 7.89 (d, J" = 8.3 Hz, 2H) , 7.59 (d, J = 8.6 Hz , 2H) , 7.52 (s, 2H) , 4.89 - 4.84 (m, 2H) , 3.56 - 3.44 (m, 4H) , 2.59 - 2.50 (m, 2H) , 2.42 - 2.24 (m, 4H) , 2.26 - 2.14 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediario 60 3- (5- (4-bromofenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 5R) -tere-butilo A una solución agitada de ácido 2-bromo-l- (4- bromofenil) etanona (12.23 g, 44.0 mmol) y (IR, 3S, 5R) -2- ( terc- butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxílico (10 g, 44 mmol) en MeCN seco (400 mi) se añadió Base de Hunig (7.69 mi, 44.0 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera, se secó (sulfato sódico) , se filtró y se concentró. En un recipiente de presión, el residuo' se suspendió en xileno (400 mi) y se añadió acetato amónico (33.9 g, 440 mmol) . El vaso se selló y se calentó a 1401c durante 2 horas El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada (pH= 9) , salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró. El producto bruto, en forma de una espuma naranja rojiza, se disolvió en cloruro de metileno y se introdujo en un cartucho de gel de sílice Thompson de 300 g (eluido con 20% de B a 100% de B para 4000 mi, donde el solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar 3- (5- (4-bromofenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (16.67 g, 39.1 mmol, rendimiento del 88.8 %) en forma de una espuma de color marrón dorado .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.762 min; m/z 403.94 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna S10 de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ^ (500 MHz, MeOD) d ppm 7.62 (d ancho, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.50 (d ancho, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.37 (s, 1H) , 4.66 (s ancho, 1H) , 3.58 (s ancho, 1H) , 2.56 - 2.47 (m, 1H) , 2.36 - 2.27 (m, 1H) , 1.75 - 1.67 (ra, 1H) , 0.97 (s ancho, 9H) , 0.88 - 0.81 (m, 1H) , 0.64 - 0.57 (m, 1H) .
Esquema de reacción 14 Intermediario 24 Intermediario 61 Intermediario 62 Intermediario 63 Intermediario 64 Intermediario 65 Intermediario 61 3 - (hidroximetil) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo A una solución de ácido ( IR, 3S , 5R) -2 - ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboxílico (9.85 g, 43.3 mmol) en THF (200 mi) a 0 °C se añadió, gota a gota, el complejo borano-sulfuro de metilo (282 mi, 563 mmol) durante 30 min. Se eliminó el baño de hielo, la mezcla se agitó durante 1 hora y después se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se enfrió hasta 0°C, lentamente se inactivo con metanol (-200 mi) y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en DCM y se lavó con agua (emulsión) , HCl 1N, NaHC03 ac . sat, y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró para dar 3- (hidroximetil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (8.43 g, 39.5 mmol, rendimiento del 91 %) para dar un aceite incoloro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.398 min; m/ z 236.20 [M+Na]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM s"e determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . R N de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 3.72 -3.79 (m, 1H) , 3.52 - 3.64 (m, 3H) , 3.15 - 3.24 (m, 1H) , 2.00 - 2.08 (m, 1H) , 1.62 - 1.72 (m, 1H) , 1.54 - 1.62 (m, 1H) , 1.45 - 1.51 (m, 9H) , 0.84 (s ancho, 1H) , 0.36 (td, J=5.0 , 2.4 Hz , 1H) .
Intermediario 62 3 -formil -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (1R, 3S, 5R) -terc-butilo A una solución de 3- (hidroximetil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -terc-butilo (4.85 g, 22.74 mmol) en DCM (125 mi) a 0 °C se añadió periodinano de Dess-Martin (11.57 g, 27.3 mmol) . La reacción se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. La reacción se vertió en una solución acuosa saturada de NaHC03j después se añadieron aproximadamente ~20g de Na2S203 y se agitó durante 1 hora. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 40% de EtOAc/hexanos , para dar 3-formil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (4.47 g, 21.2 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un aceite incoloro.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.813 min; m/z sin ionización (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 9.48 (s ancho, 1H) , 3.67 - 3.97 (m, 1H) , 3.33 - 3.59 (m, 1H) , 2.10 - 2.31 (m, 2H) , 1.56 - 1.67 (m, 1H) , 1.47 (s ancho, 9H) , 0.80 (s ancho, 1H) , 0.55 (s ancho, 1H) .
Intermediario 63 3- (lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo A una solución agitada de 3-formil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (4.4 g) en metanol (15 mi) se añadió gota a gota hidróxido amónico (16.40 mi, 421 mmol ) a 0°C. La reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 45 minutos. Después, gota a gota se añadió oxalaldehído H20 al 40% (5.32 mi, 46.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche. Con el tiempo, el color de la reacción pasó a marrón. La reacción se diluyó con salmuera y se concentró para eliminar el solvente volátil. La capa acuosa restante se extrajo varias veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04; se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 70% de EtOAc/hexanos, para dar 3-(lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (3.71 g, 14.9 mmol, rendimiento del 71 %) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.772 min; m/z 250.20 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ^ (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 10.43 (s ancho, 1H) , 6.99 (s, 2H) , 4.86 (dd, J=9.0, 5.0 Hz, 1H) , 3.35 (s ancho, 1H) , 3.20 (s ancho, 1H) , 2.28 - 2.38 (m, 1H) , 1.71 - 1.80 (m, 1H) , 1.49 (s, 9H) , 0.83 - 0.90 (m, 1H) , 0.45 (s ancho, 1H) .
Intermediario 64 3- (4, 5-diyodo-lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo A una solución de 3- (lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato (5.55 g, 22.3 mmol) y carbonato sódico (7.08 g, 66.8 mmol) en dioxano (56 mi) y agua (56 mi) se añadió yodo (I2, 12.43 g, 49.0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó en oscuridad durante 16 horas a temperatura ambiente La mezcla de reacción se diluyó cón EtOAc y se lavó con solución acuosa saturada de tiosulfato sódico. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 100% de EtOAc/hexanos , para dar 3 - (4 , 5 -diyodo- 1H- imidazol -2 - il ) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (8.3 g, 16 mmol , rendimiento del 71 %) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.455 min; m/z 502.07 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/ eOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 4.51 (s ancho, 1H) , 3.56 (s ancho, 1H) , 2.40 - 2.54 (m, 1H) , 2.18 - 2.27 (m, 1H) , 1.65 - 1.73 (m, 1H) , 1.20 - 1.40 (s ancho, 9H) , 0.82 (dt, J=8.6, 5.8 Hz , 1H) , 0.58 (s ancho, 1H) .
Intermediario 65 3- (4 -yodo-1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo Un matraz de presión de 250 mi equipado con una barra de agitación se cargó con una solución de 3- (4, 5-diyodo-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (8.3 g, 17 mmol) en EtOH (83 mi) y agua (83. mi) . Después, se añadió sulfito sódico (20.88 g, 166 mmol) y la mezcla se calentó a 90°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 15% de EtOAc/DCM, para dar 3- (4-yodo-lH-imidazol -2 - il ) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (3.84 g, 10.2 mmol, rendimiento del 62 %) en forma de un sólido amarillo junto con el producto completamente reducido 3- (lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (550 mg, 2.21 mmol, rendimiento del 13%) .
Tiempo de retención en la CL-EM 0.932 min; m/z 376.22 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 M,. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de ¾ (500 MHz, MeOD) d ppm 7.12 (s ancho, 1H) , 4.59 (s ancho, 1H) , 3.44 - 3.64 (s ancho, 1H) , 2.40 - 2.52 (m, 1H) , 2.17 - 2.30 (m, 1H) , 1.65 - 1.73 (m, ??) , 1.27 (s ancho, 9H) , 0.84 (dt, J=8.5, 5.7 Hz, 1H) , 0.58 (s ancho, 1H) .
Esquema de reacción 15 Intermediario 66 (IR, 3S, 5R) -terc-butil 3- (5- (4- (6- (4,4, 5, 5-tetrametil- 1,3, 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) f nil) -lH-imidazol -2- il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (1R,3S,5R)- terc-butilo e Intermediario 67 3,3' - (5,5' - (4,4' - (naftalen-2,6-diil) bis (4.1- fenilen) ) bis (1H-imidazol -5, 2-diil) ) bis (2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato) de (IR, 1 'R, 3S, 3 'S, 5R, 5 'R) -tere-butilo Una solución de 2 , 6 -bis (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftaleno (1.0 g, 2.6 mmol) , 3-(5-(4-bromofenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (1.06 g, 2.63 mmol), Na2C03 (0.837 g, 7.89 mmol) en DME (20 mi) y agua (2 mi) se desgasificó al vacío durante 10 minutos. La mezcla se calentó a 80°C y, después, se añadió Pd(Ph3P)4 (0.152 g, 0.132 mmol) bajo una corriente de de nitrógeno. Se selló el reactor y se prosiguió el calentamiento adicionalmente 1 20 °C durante 16 horas. El DME se eliminó al vacío y el material bruto se repartió entre EtOAc/H20. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con EtOAc . Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatográfica instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 5% de MeOH/DCM para dar el producto diana parcialmente puro contaminado con productos secundarios de la reacción. El producto impuro se purificó de nuevo mediante cromatográfica instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 50 a 100% de EtOAc/hexanos , después, la columna se aclaró con 10% de MeOH/DCM para dar 3- ( 5- (4 - (6 - (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) fenil) - 1H- imidazol -2 - il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S , 5R) - terc-butilo (606 mg) en forma de una espuma amarilla.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.608 min; m/z 578.4 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ? (500 MHz, CLOROFORMO- d, RMN parcial) d ppm 4.89 (s ancho, 1H) , 3.20 - 3.66 (m, 1H) , 2.33 - 2.50 (m, 1H) , 1.76 - 1.86 (m, 1H) , 1.52 (s ancho, 9H) , 1.24 - 1.32 (m, 12H) , 0.87 - 0.93 (m, 1H) , 0.51 (s ancho, 1H) .
Intermediario 68 3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3 -il) -lH-imidazol -4-il) naftalen-2- il) fenil) -??-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo Una solución de 3- (5- (4- (6- (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil - 1,3, 2 -dioxaborolan-2 -il ) naftalen-2 -il ) fenil) - 1H- imidazol-2 -il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (568 mg) , 3- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato (369 mg, 0.983 mmol) de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (369 mg, 0.983 mmol), Na2C03 (313 mg, 2.95 mmol) en DME (10 mi) y agua (2 mi) se desgasificó al vacío durante 10 minutos. La mezcla se calentó a 80°C y, después, se añadió Pd(Ph3P)4 (114 mg, 0.098 mmol) bajo una corriente de de nitrógeno. Se selló el reactor y se prosiguió el calentamiento adicionalmente 130 °C durante la noche. El DME se eliminó al vacío y el material bruto se repartió entre EtOAc/H20. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con EtOAc . Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SÜ4 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea ( (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 20 a 100% de EtOAc/hexanos , después 5% de MeOG/DCM, para dar el compuesto3- (5-(4-(6-(2-((lR,3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) - 1H- imidazol-4 -il ) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (277 mg) parcialmente puro .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.578 min; m/z 699.56 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 7.62 -7.69 (m, 6H) , 7.53 - 7.59 (m, 4H) , 6.95 (s, 2H) , 4.67 (s ancho, 2H) , 3.46 - 3.56 (m, 2H) , 2.50 - 2.59 (m, 0.5H), 2.32 -2.49 (m, 2H) , 2.27 (s ancho, 1.5H), 1.65 - 1.78 (m, 2H) , 1.28 (s ancho, 18H) , 0.80 - 0.88 (m, 2H) , 0.53 - 0.66 (m, 2H) .
Intermediario 69 (1R,3S,5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de 3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-imidazol-5-il) naftalen-2 - il ) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (275 mg) en DCM (10 mi) se añadió TFA (2 mi, 26.0 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo bruto se purificó mediante HPL de fase inversa (agua/MeOH/TFA) para dar una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (106 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.153 min; m/z 499.36 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.33 (s, 1H) , 8.19 (s, 1H) , 7.99 - 8.05 (m, 2H) , 7.85 - 7.95 (m, 6H) , 7.83 (s, 1H) , 7.76 (s, 1H) , 4.78 (c, .7=9.4 Hz, 2H) , 3.47 - 3.54 (m, 2H) , 2.65 - 2.74 (m, 4H) , 2.02 - 2.12 (m, 2H) , 1.18 - 1.25 (m, 2H) , 0.97 - 1.05 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediario 70 (IR, 3S, 5R) -3- (5- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (tere butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -IH-bencimidazol- 6-il) -6-quinolinil) -lH-benci idazol -2 -il ) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de terc-butilo A una solución desgasificada de 6-bromo-2-cloroquinolina (30 mg, 0.12 mmol) , Na2C03 (39.3 mg, 0.371 mmol) y 3 - ( 6 - (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2- il ) - 1H-benzo [d] imidazol -2 - il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -terc-butilo (116 mg, 0.272 mmol) en dioxano (1 mi) y H20 (0.2 mi) se añadió Pd(Ph3Í?)4" (14.3 mg, 0.012 mmol) y la mezcla se agitó a 110 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de TFA 0.1%) para dar una sal TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) -6-quinolinil) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de terc-butilo (60.6 mg, 0.057 mmol, rendimiento 46.3%) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.05 min; m/z 724 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.68 (1H, d, ^=8.5 Hz), 8.60 (1H, s) , 8.44 (1H, dd, <J=8.5, 1.5 Hz) , 8.39 (1H, d, .7=1.3 Hz) , 8.33 (1H, d, J=8.8 Hz) , 8.23 - 8.29 (1H, m) , 8.25 (1H, d, J=8.5 Hz ), 8.19 (1H, s) , 8.08 (1H, d, J=9.0 Hz) , 7.96 (1H, d, J=9.0 Hz) , 7.93 (1H, d, J=9.5 Hz) , 5.02 - 5.12 (2H, m) , 3.70 (2H, s ancho), 2.74 - 2.85 (2H, m) , 2.45 - 2.57 (2H, m), 1.84 - 1.96 (2H, m) , 1.05 - 1.68 (18H, m) , 0.89 -1.01 (2H, m) , 0.77 - 0.86 (2H, m) .
Intermediario 71 2, 6-bis (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol -6-il) quinolina Una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (2- (2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-benzimidazol-6-il) -6-quinolinil) -lH-benzimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de te:rc-butilo (51 mg, 0.054 mmol) se mezcló con una solución en dioxano de HCl (0.5 mi, 2.00 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron para dar una sal HCl de 2,6-bis(2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3- il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) quinolina (53 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.20 min; m/ z 524 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Esquema de reacción 17 Intermediario 72 (IR, 3S, 5R) -3- (5- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- ? azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) -6-quinoxalinil) -lH-bencimidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan- 2-carboxilato de tere-butilo A una solución desgasificada de 6-bromo-2-cloroquinoxalina (30 mg, 0.123 mmol), NaHC03 (31.1 mg, 0.370 mmol) y 3 - ( 6 - ( 4 , 4 , 5 , 5 - tetramet i 1 - 1 , 3 , 2 --dioxabo olan- 2 -il) -IH-benzo [d] imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 - carboxi lato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (131 mg, 0.308 mmol) en dioxano (1.0 ml ) y H20 (0.2 ml) se añadió Pd(Ph3P)4 (14.24 mg, 0.012 mmol) y la mezcla se agitó a 100 °C durante 2 h, después a 110°C durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y el filtrado se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( IR , 3 S , 5R) - 3 - ( 5 - ( 2 - ( 2 - ( ( IR , 3 S , 5R) - 2 -( ere -butoxi carbóni 1 ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex- 3 - il ) - 1H-benc imidazol - 6 - i 1 ) - 6 -quinoxal ini 1 ) - lH-bencimidazol -2 -i 1.) - 2 - azabiciclo [3.1.0 ] hexan- 2 - carboxi lato de tere-butilo (67.6 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.13 min; m/z 725 [M+H]+. (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 9.60 (1H, s) , 8.71 (1H, s) , 8.56 (1H, dd, J"=8.8, 1.5 Hz) , 8.45 (1H, d, J=1.5 Hz) , 8.26 - 8.35 (2H, m) , 8.21 (1H, s) , 8.06 - 8.11 (1H, m) , 7.91 - 7.99 (2H, m) , 5.02 - 5.13 (2H, m) , 3.70 (2H, s ancho), 2.79 (2H, dd, J=13.4, 9.2 Hz) , 2.43 - 2.57 (2H, m) , 1.83 - 1.96 (2H, m) , 1.07 -1.65 (18H, m) , 0.95 (2H, m) , 0.77 - 0.85 (2H, m) .
Intermediario 73 2, 6-bis(2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalina A una solución de sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (2-(2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) -6-quinoxalinil) -lH-bencimidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (65 mg) en DCM (0.5 mL) se añadió TFA (0.25 mi, 3.24 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Los volátiles se eliminaron y el residuo se trituró con Et20. El sólido resultante se recogió mediante embudo de filtración y se aclaró con Et20 para dar una sal en TFA de 2,6-bis(2-( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalina (60 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.51 min; m/z 525 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 9.52 (1H, s) , 8.58 (1H, s), 8.36 (1H, s) , 8.22 - 8.33 (2H, m) , 8.30 (1H, d, J=9.5 Hz) , 8.08 (1H, s) , 7.76 - 7.94 (2H, m) , 7.83 (1H, d, J=9.5 Hz) , 4.80 - 5.05 (2H, m) , 3.45 - 3.61 (2H, m) , 2.70 -2.92 (2H, m) , 2.50 - 2.67 (2H, m) , 2.00 - 2.18 (2H, m) , 1.26 (2H, s ancho), 1.04 (2H, s ancho).
Esquema de reacción 18 Intermediario 74 2- (5- (4-bromofenil) -4-cloro-lH-imidazol-2-il)pirrolidin-1- carboxilato de (S) -tere-butilo A una solución de 2- (5- (4-bromofenil) -lH-imidazol-2 - il ) pirrolidin- 1-carboxilato de tere-butilo (1.0 g, 2.55 mmol) en DMF (25 ML) se añadió NCS (0.51 g, 3.82 ramol) y la mezcla se calentó a 50 °C durante la noche. Los filtrados se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 10 % de EtOAc/DCM, para dar el compuesto 2 - ( 5 - ( 4 -bromofeni 1 ) - 4 - cloro- 1H-imidazol - 2 - i 1 ) pirrol idin- 1 - carboxilato de (S)-terc-butilo (1.04 g) parcialmente puro en forma de una espuma amarilla.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.99 rain; m/z 427.12 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 7.63 (s, 4H) , 4.74 - 4.81 (m, 1H), 3.64 - 3.72 (m, 1H) , 3.45 - 3.55 (m, 1H) , 2.27 - 2.42 (m, 1H) , 2.00 -2.15 (m, 2H) , 1.90 - 2.00 (m, 1H) , 1.48 (m, 3H) , 1.27 (m, 6H) .
Intermediario 75 2- (4-cloro-5- (4 - (6- (4 , 4 , 5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2- il) naftalen-2-il) fenil -1H-imidazol -2-il)pirrolidin-1- carboxilato de (S) -tere-butilo Una solución de 2- (5- (4 -bromofenil ) -4-cloro-lH-imidazol-2-il) irrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (1.0 g, 2.44 mmol) y 2, 6-bis (4,4 , 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (0.926 g, 2.44 mmol) en DME (10 mi) y agua (2 mi) se desgasificó al vacío durante 10 minutos. La mezcla se calentó a aproximadamente ~80°C, se añadió Pd(Ph3P)4 (0.282 g, 0.244 mmol) bajo una corriente de de nitrógeno y se selló el reactor. El calentamiento prosiguió adicionalmente hasta 130°C durante 8 h. Se añadió Pd(PPh3)4 adicional (100 mg) y el calentamiento prosiguió durante la noche. El DME se eliminó al vacío y el material bruto se repartió entre EtOAc/H20. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con EtOAc . Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc/hexanos , para dar el compuesto 2- (4-cloro-5- (4 - (6 - (4,4,5, 5-tetrametil -1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) naftalen-2-11) fenil) -lH-imidazol-2-il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (292 mg) parcialmente puro contaminado con trifenilfosfina (292 mg) . Una alícuota pequeña se purificó de forma adicional mediante HPLC en fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para dar el material del título puro. El material restante se usó en la etapa posterior sin purificación adicional.
Tiempo de retención de CL-EM 2.227 min; m/z 598.46 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz, MeOD, sal en TFA, RMN parcial) d ppm 3.71 (s ancho, 2H) , 3.55 (s ancho, 2H) , 2.45 (s ancho, 1H) , 2.07 - 2.17 (m, 2H) , 1.97 - 2.06 (m, 1H) , 1.50 (s, 3H) , 1.43 (m, 6H) , 1.31 (s ancho, 6H) .
Intermediario 76 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2-il) - 1H-imidazol -5-il) naftalen-2-il) fenil) -4 -cloro-1H-imidazol -2- · il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo Una solución de 2- (5-yodo-lH-imidazol-2- il ) pirrolidin- 1-carboxilato (163 mg( 0.450 mmol) de (S) -tere- butilo, 2- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) irrolidin-l-carboxilato (S) - tere-butilo (163 mg, 0.450 mmol) de (S) - tere-butilo, bicarbonato sódico (113 mg, 1.350 mmol) en una mezcla de solvente de D E (10 mi) y agua (2 mi) se desgasificó al vacío durante 10 min. La mezcla se calentó a 80°C, después se añadió Pd(Ph3P)4 (52.0 mg, 0.045 mmol) y el reactor se aclaró con nitrógeno y se selló. El calentamiento se prosiguió adicionalmente hasta 120°C durante 16 horas. El matraz se enfrió hasta la temperatura ambiente, el DME se eliminó al vacío y el material bruto se repartió entre DCM/H20. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre a2S04 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc/hexanos , para dar el compuesto 2 - ( 5 - (4 - (6 - ( 2 - ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il)fenil) -4-cloro-lH-imidazol-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo parcialmente puro contaminado con trifenilfosfina (77 mg) .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.830 min; m/z 709.43 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d RMN Parcial) d ppm 5.00 (d, J"=4.5 Hz, 2H) , 3.38 - 3.52 (m, 4H) , 3.10 (s ancho, 1H) , 2.91 (s ancho, 1H) , 2.09 - 2.33 (m, 4H) , 1.93 - 2.05 (m, 2H) , 1.54 (s, 18H) .
Intermediario 77 4-cloro-2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2 - il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -IH-imidazol Se añadió TFA (2 mi) a una solución de 2- (5- (4- (6-(2- ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) -lH-imidazol- 5- il) naftalen-2-il) fenil) -4-cloro-lH-imidazol-2-il) irrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo en DCM (10 mi) y la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Los solventes se eliminaron al vacío y el residuo se suspendió en una mezcla de solventes de 1:1 de metanol/CH2Cl2 y se filtraron a través de un cartucho de CX (Strata XC) . El cartucho se lavó con metanol y el compuesto se eluyó con una solución de NH3 en metanol (2M) . Las fracciones se concentraron al vacío para dar 4-cloro-2- ( (S) -pirrolidin-2 -il) -5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -IH-imidazol (40 mg, 0.079 mmol) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.353 min; m/z 509.32 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD, sólo parcialmente soluble) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.09 (s, 1H) , 7.88 - 7.96 (m, 2H) , 7.76 - 7.88 (m, 6H) , 7.51 (s, 1H) , 4.50 (t, J=7.28 Hz, 1H) , 4.35 (t, J=7.15 Hz, 1H) , 3.03 - 3.31 (parcialmente enmascarado por metanol, m, 4H) , 2.24 - 2.42 (m, 2H) , 1.88 -2.21 (m, 6H) .
Esquema de reacción 19 Intermediarlo 80 Intermediarlo 81 Intermediario 79 2- (7- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-but xicarbonil)pirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -4, 5-dihidro-lH-naftol [1,2-d] - imidazol-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo Una solución de 2 - (5 =- ( 6 - (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) naftalen-2-il) -1H- imidazol-2 - il ) irrolidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo (402 mg, 0.821 mmol) , 2- (7-bromo-4 , 5 -dihidro-??-nafto [1,2-d] imidazol -2- il) pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (344 mg, 0.821 mmol) y bicarbonato sódico (207 mg, 2.46 mmol) en DME (14 mi) y agua (1.8 mi) se desgasificó al vacío durante 10 minutos. La mezcla se calentó a 80°C, momento en el cual el matraz se abrió y se añadió Pd(Ph3P)4 (76 mg, 0.066 mmol) . El matraz se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 120°C durante 16 horas. El matraz se enfrió hasta la temperatura ambiente, el DME se eliminó al vacío y el material bruto se repartió entre DCM y H20. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo varias veces con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SC>4 y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 20 a 100% de EtOAc/hexanos y después de 0 a 10% de metanol/DCM, para dar el compuesto 2- (7- (4- (6- (2- ( (S) -1- ( fcerc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -4, 5-dihidro-lH-naftol [1,2-d] imidazol-2-il)pirrolidin-l-carboxilato de (S) - tere-butilo (183 mg) .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.543 min; m/z 701.47 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 80 2- (7- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)pirrolidin-2- il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -IH-naftol [1,2-d] - imidazol-2 -il) pirrolidin-l- carboxilato de (S) -tere-butilo A una solución de 2 - (7 - (6 - ( 2 - ( (S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) irrolidin-2 -il) -1H- imidazol-5 -il) naftalen-2-il) -4, 5-dihidro-lH-nafto [1,2-d] - imidazol -2 -il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (183 mg, 0.196 mraol) en DCM (5 mi) se añadió óxido de manganeso (IV) (1.53 g, 17.6 mmol) y la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de una lámina de tierra de diatomeas (CELITE®) y se lavó con una solución de metanol/DC a 1:1, Los volátiles se eliminaron al vacío usando un rotavap para dar el compuesto 2 - ( 7 - (4 - ( 6 - ( 2 - ( (S) -· 1- ( terc-butoxicarbonil ) irrolidin-2 - il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2 -il) -??-nafto [1,2-d] imidazol-2- il ) pirrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (163 mg) en forma de un sólido pardo .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.523 rain; m/z 699.53 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 81 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -7- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H- imidazol - 5 - il ) naftalen-2-il) - lH-nafto [1 , 2 -d] imidazol A una solución agitada de 2 - ( 7 - ( 6 - ( 2 - ( ( S ) - 1 - ( erc-butoxicarboni 1 )pirrolidin-2-il)-lH-imidazol-5-il)naftalen-2-il) -lH-nafto[l,2-d] -imidazol-2-il ) pirrolidin-l-carboxilato de ( S ) - terc-but i lo (137 mg) en CH2C12 (10 mi) se añadió en una porción TFA (2 mi, 26.0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente y, después, los solventes se eliminaron al vacío. El residuo se suspendió en 50% de metanol/CH2Cl2 y se filtró a través de un cartucho de MCX (Strata XC) . El cartucho se lavó con metanol y el compuesto se eluyó con una solución de NH3 en metanol (2M) . Las fracciones adecuadas se concentraron al vacío para dar 2 - ( (S ) -pirrol idin- 2 - il ) -7-(6-(2-((S) -pirrolidin-2-il) - 1H- imidazol - 5 - il ) naftalen-2 - il ) - ??-nafto [1 , 2 -d] imidazol (98 mg, 0.20 mmol) en forma de un sólido naranja.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.245 min; m/z 499.30 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de elect rorrocío . RMN d ^"H (sal en TFA , 500 MHz, MeOD) d ppm 8.59 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.43 (d, <J=1.5 Hz, 1H) , 8.36 (s, 1H) , 8.31 (s, 1H) , 8.13 (dd, J=8.6, 1.8 Hz, 1H) , 8.01 - 8.10 (m, 3H) , 7.90 - 7.98 (m, 2H) , 7.87 (s, 1H) , 7.80 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 5.18 (t, J=l .9 Hz , 1H) , 5.05 (t, J=8.1 Hz, 1H) , 3.63 - 3.72 (m, 1H) , 3.52 - 3.63 (m, 3H) , 2.61 - 2.77 (m, 2H) , 2.45 - 2.58 (m, 2H) , 2.33 - 2.43 (m, 2H) , 2.20 - 2.33 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediario 82 2,2'- (6, 6' - (quinolin-2, 6-diil) bis- (IH-benzo [d] imidazol-6, 2- diil) ) dipirrolidin-l-carboxilato de (2S, 2 'S) -tere-butilo A una solución agitada y desgasificada de 6-bromo- 2-cloroquinolina (40 mg, 0.165 mmol) , 2- (6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il ) irrolidin- 1-carboxilato de (S) - tere-butilo (150 mg, 0.363 mmol) y NaHC03 (41.6 mg, 0.495 mmol) en dioxano (1 mi) y H20 (0.2 mi) se añadió Pd(Ph3P)4 (19.06 mg, 0.016 mmol). Después, la mezcla de reacción se calentó a 110 °C durante 2 horas, se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de 2 , 2 ' - (6 , 6 ' - (quinolin-2 , 6 -diil) bis (IH-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) dipirrolidin- 1- carboxilato de ( 2S , 21 S) - tere-butilo (73 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.02 min; m/z 700 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de 2H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.63 - 8.74 (1H, m) , 8.60 (1H, s) , 8.44 (1H, dd, J=8.7, 1.6 Hz), 8.38 (1H, s ancho), 8.32 (1H, d, J=8.8 Hz) , 8.25 (2H, d, J=8.8 Hz) , 8.14 - 8.21 (1H, m) , 8.04 - 8.12 (1H, m) , 7.90 - 8.00 (2H, m) , 5.24 - 5.36 (2H, m) , 3.73 - 3.83 (2H, m), 3.59 - 3.72 (2H, m) , 2.57 - 2.74 (2H, m) , 2.20 - 2.33 (2H, m) , 2.09 - 2.20 (4H, m) , 1.50 (9H, s ancho), 1.23 (9H, s ancho).
Intermediario 83 2, 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-benzo- [d] imidazo-6- il) quinolina A una solución de sal en TFA de 2,2'-(6,6'- ( quinol in-2, 6-diil)bis (??-benzo [d] imidazol-6, 2 -di il )) dipi rrol idin- 1 - carboxi lato de ( 2 S , 21 S ) - t ere¦ butilo (65 mg) en DCM (0.5 mi) se añadió TFA (0.25 mi, 3.24 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se trituró con Et20. El sólido resultante se recogió mediante embudo de filtración y se aclaró con Et20 para dar una sal en TFA de 2,6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)quinolina (61 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.12 min; m/ z 500 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de XH (400 MHz , MeOD) d ppm 8.89 (1H, d, J=8.8 Hz) , 8.48 (1H, d, J= 1.3 Hz) , 8.45 (1H, s) , 8.34 - 8.41 (2H, m) , 8.31 (1H, d, J"=8.8 Hz) , 8.12 (1H, dd , J"=8.5, 1.8 Hz) , 8.09 (1H, s) , 7.89 (1H, d, J"=8.5 Hz) , 7.77 - 7.85 (2H, m) , 5.05 - 5.19 (2H, m) , 3.44 - 3.72 (4H, m) , 2.61 - 2.75 (.2H, m) , 2.19 - 2.49 (6H, m) .
Esquema de reacción 21 Intermediarlo 87 Intermediarlo 88 Intermediario 84 3- (6- (6- (6- (4,4, 5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2- il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo A una solución desgasificada de 2 , 6 -bis (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1 , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftaleno (2.51 g, 6.61 mmol) , 3- (5-bromo-lH-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (2.5 g, 6.6 mmol) y carbonato sódico (2.78 g, 33.0 mmol) en DME (52.9 mi) y agua (13.2 mL) a 80°C se añadió Pd(Ph3P)4 (0.382 g, 0.330 mmol) . La reacción se llenó con nitrógeno, se selló y se calentó a 100°C durante la noche. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se suspendió en EtOAc, se lavó con agua y la capa de agua se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se filtraron a través de una lámina de tierra de diatomeas (CELITE®) y se secaron sobre Na2S04, se concentraron y se purificaron en una BIOTAGE® (cargada en seco en gel de sílice, se cargó un cartucho de gel de sílice de 90 g y eluyó con un gradiente 0 a 70 % de acetato de etilo en hexanos, después se aclaró con 10% de MeOH/ DCM) , para dar 3-(6-(6-(4,4,5, 5-tetrametil-1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (1.8 g, 3.3 mmol, rendimiento del 49 %) en forma de un sólido amarillento.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.905 min; m/z 552.47 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 85 (1R,3S,5R) -3- (4- (6-(2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH- imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de tere-butilo Un matraz de presión de fondo redondo de 200 mi equipado con una barra de agitación magnética se cargó con 3-(5-(6-(4,4,5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (795 mg, 1.44 mmol) , 3-(5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (538 mg, 1.43 mmol) y bicarbonato sódico (502 mg, 5.97 mmol) en DME (9.5 mi) y agua (2.4 mi). La solución se desgasificó a vacío durante 5 minutos y el reactor se cargó de nuevo con N2, Después se añadió Pd(Ph3P)4 (110 mg, 0.096 mmol) en una corriente de N2 y el reactor se selló y se calentó durante la noche a 120°C. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se repartió entre agua y EtOAc y la capa acuoso se extrajo con EtOAc . Las fases orgánicas combinadas se filtraron a través de un lámina de tierra de diatomeas (CELITE®) , se secaron Na2S04 y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatográfica instantánea (BIOTAGE®) , eluyendo con un gradiente de 50 a 100% de EtOAc/Hexanos y después 10% de metanol/DCM para dar el producto diana parcialmente puro contaminado con el material de partida, material de partida reducida y otros productos secundarios de la reacción. El residuo se purificó adicionalmente mediante HPLC prep (ACN/agua, TFA al 0.1%), para dar la sal en CFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - lH-bencimidazol -5 - il ) -2-naftil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (200.5 mg) . A partir del mismo mezcla de reacción también se recogió un producto secundario, que se identificó como una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6¦ - (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3 - il ) - 1H-bencimidazol-6-il) -2,2' -binaftalen- 6 - il ) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato (108 mg) Tiempo de retención en la CL-EM 1.497 min; m/z 673.52 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/rain, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN ^ (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) 6 ppm 8.33 (s, 1H) , 8.31 (s, 1H) , 8.09 - 8.20 (m, 3H) , 7.96 - 8.08 (m, 2H) , 7.87 - 7.94 (m, 2H) , 5.07 (t, J=8.2 Hz, 1H) , 4.91 (m, 1H) , 3.69 (s ancho, 2H) , 2.70 - 2.84 (m, 2H) , 2.48 (s ancho, 2H) , 1.81 - 1.94 (m, 2H) , 1.51 (s ancho, 1H) , 1.51 (s ancho, 9H) , 1.31 (s ancho, 5H) , 1.21 (s ancho, 4H) , 0.89 -0.99 (m, 2H) , 0.82 (s ancho, 1H) , 0.77 (s ancho, 1H) .
Intermediario 86 (IR, 3S, 5R) -3- (5- (ß' - (2- ( (1R,3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol - 6-il) -2,2' - binai'talen- 6 -il) -lH-bencimidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato El producto secundario se obtuvo en forma de sal en TFA (108 mg) después de la purificación de la mezcla de reacción de la síntesis del intermediario 85.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.882 min; m/z 849.84 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ¾ (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.36 (s, 2H) , 8.28 (s, 2H) , 8.11 - 8.19 (m, 6H) , 8.03 - 8.09 (m, 4H) , 7.87 - 7.96 (m, 4H) , 5.07 (t, J=8.2 Hz, 2H) , 3.71 (s ancho, 2H) , 2.75 - 2.85 (m, 2H) , 2.51 (s ancho, 2H) , 1.86 - 1.94 (m, 2H) , 1.52 (m, 10H) , 1.22 (s ancho, 8H) , 0.97 (ddd, <J=8.4, 6.0, 5.8 Hz, 2H) , 0.83 (s ancho, 2H) .
Intermediario 87 6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -1H- imidazol-4-il) naftalen-2-il) -2- ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -IH-benzo [d] imidazol A una solución agitada de una sal en TFA de 3- (5-(4 - (6- (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] sean-3-il) -IH-benzo- [d] imidazol- 5-il) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (151 mg) en DCM (3 mi) se añadió HC1 4M en dioxano (10 mi, 40.0 mmol) . Inmediatamente se formó un precipitado. La suspensión se agitó durante 30 minutos. Los componentes volátiles se evaporaron al vacío. El residuo bruto se suspendió en DCM (3 mi) y se añadió TFA (2 mi) . La solución se agitó durante 1 hora. Los componentes volátiles se evaporaron a presión reducida. El residuo se suspendió en MeOH y se filtró a través de un cartucho Strata XC MCX. El cartucho se lavó con metanol y el compuesto se liberó del cartucho eluyendo con una solución de 2M de amoniaco/metanol . El filtrado de amoniaco/metanol se evaporó a presión reducida para dar 6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol-4-il)naftalen-2-il) -2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il )- IH-benzo [d] imidazol (79 mg, 0.17 mmol) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.130 min; m/z 473.35 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.19 (s, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.92 (dd, J=8.6, 5.8 Hz , 2H) , 7.88 (s, 1H) , 7.82 (dd, J=5.8, 1.5 Hz, 2H) , 7.61 - 7.66 (m, 2H) , 7.51 (s, 1H) , 4.24 - 4.35 (m, 2H) , 3.11 (td, J=6.1, 2.4 Hz, 1H) , 3.06 (td, .7=6.0, 2.6 Hz, 1H) , 2.40 - 2.53 (m, 2H) , 2.18 -2.33 (m, 2H) , 1.69 - 1.76 (m, 1H) , 1.62 - 1.69 (m, 1H) , 0.88 (ddd, -7=6.6, 4.3, 2.6 Hz, 1H) , 0.79 - 0.84 (m, 1H) , 0.61 -0.68 (m, 1H) , 0.55 - 0.60 (m, 1H) .
Intermediario 88 ' -bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il ??-benzo [d] imidazol-5-il) -2,2' -binaftilo A una solución de una sal en TFA de (1R,3S,5R) (5- (6· - (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) -2,2'-binaftalen-6-il) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato (108 mg) en DCM (5 ml) se añadió TFA (2.0 ml , 26 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Después, la mezcla de reacción se concentró para dar una sal en TFA de 6,6' -bis (2- ( (1R,3S,5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-5-il) -2 , 2 ' -binaftilo (22 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.722 min; m/z 649.54 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.33 (s ancho, 2H) , 8.22 (s ancho, 2H) , 8.09 - 8.15 (m, 4?) , 8.01 - 8.07 (m, 4?) , 7.89 - 7.95 (m, 2?) , 7.77 - 7.87 (m, 4?) , 4.85 - 4.98 (m, 2?) , 3.51 - 3.57 (m, 2?) , 2.79 - 2.87 (m, 2?) , 2.59 - 2.68 (m, 2?) , 2.07 - 2.14 (m, 2?) , 1.23 - 1.30 (m, 2?) , 1.01 -1.09 (m, 2?) .
Esquema de reacción 22 Intermediario 89 (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3 -il ) -lH-bencimidazol-6-il) -1,5- naftiridin-2 -il) -IH-bencimidazol -2 -il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo A una solución de 2 , 6-dicloro-l, 5-naftiridina (30 mg, 0.151 mmol) , bicarbonato sódico (38.0 mg, 0.452 mmol) y 3-(6-(4,4,5, 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S( 5R) -tere-butilo (141 mg, 0.332 mmol) en dioxano (1.0 mi) y H20 (0.2 mi) se añadió tetrakis (trifenilfosfina) aladio (0) (17.4 mg, 0.015 mmol) y la mezcla se calentó y se agitó a 110 °C durante 2 h. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se concentró y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de NH40Ac 10 mM) para dar (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-bencimidazol-6-il) -1, 5-naftiridin-2-il) - lH-bencimidazol -2 -il ) - 2 -azabiciclo [3.1.0 ] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (22.3 mg, 0.030 mmol) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.11 min; m/z 725 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 90 2, 6-bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) -1 , 5-naftiridina A una solución de ( IR , 3 S , 5R) - 3 - ( 0.5 - ( 6 ' - ( 2 - ( ( IR , 3S , 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) - 1,5' -binaftalen-6-il) -lH-bencimidazol-2-il) -2-a zab i c i c lo [ 3.1. O ] hexan- 2 - carboxi la t o de tere-butilo (20 mg, 0.028 mmol) en DCM (0.5 mi) se añadió TFA (0.25 mi, 3.2 mmol) y la mezcla se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se trituró con Et20. El sólido resultante se recogió mediante embudo de filtración y se aclaró con Et20 para dar una sal en TFA de 2,6-bis (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il ) - 1 , 5 -naf t iridina (26 mg , 0.022 mmol, rendimiento del 78%) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.41 rain; m/z 525 [M+ H] + ; (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de *H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.61 (2H, d, J"=8.8 Hz) , 8.51 (2H, s ) , 8.40 (2H, d, J= 9.0 Hz) , 8.23 (2H, dd, J"=8.5, 1.5 Hz) , 7.81 (2H, d, J= 8.5 Hz) , 4.74 - 4.97 (2H, m) , 3.47 - 3.57 (2H, m) , 2.78 - 2.88 (2H, m) , 2.52 - 2.65 (2H, m) , 2.04 - 2.15 (2H, m) , 1.22 -1.33 (2H, m) , 0.99 - 1.11 (2H( m) .
Esquema de reacción Intermediario 85 Intermediario 91 Intermediarlo 92 Intermediario 91 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil - 5 - cloro-1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2 - carboxilato de tere-butilo A una solución en agitación de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (61 -(2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (183 mg, 0.272 mmol) en DMF (5 mi) se añadió en porciones NCS (20 mg, 0.15 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 3 horas. La reacción se enfrió hasta 0o C, se añadió NCS (15 mg, 0.112 mmol) adicional y la mezcla se agitó durante 2 horas a 50 °C. La reacción se diluyó con agua (2 mi) y metanol (2 mi) , los volátiles se eliminaron y el producto bruto se purificó mediante HPLC prep (TFA) para dar una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-benzimidazol-5-il) -2-naftil) -5-cloro-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo (140.4 mg) en forma de un sólido naranj a .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.822 min m/z 707.54 (1:1) (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 µ??, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.27 (d, J=2.8 Hz, 2H) , 8.03 - 8.18 (m, 4H) , 7.87 - 7.98 (m, 3H) , 5.04 - 5.10 (m, 1H) , 4.63 (d, J=7.6 Hz , 1H) , 3.71 (s ancho, 1H) , 3.63 (s ancho, 1H) , 2.74 - 2.87 (m, 1H) , 2.59 (dd, J=13.3, 8.7 Hz, 1H) , 2.51 (s ancho, 1H) , 2.41 (ddd, ,7=13.6, 6.7, 6.6 Hz, 1H) , 1.86 - 1.95 (m, 1H) , 1.78 (s ancho, 1H) , 1.12 - 1.63 (m, 18H) , 0.97 (ddd, J=8.7, 6.0, 5.8 Hz , 1H) , 0.79 - 0.91 (m, 2H) , 0.66 (s ancho, 1H) .
Intermediario 92 2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -5- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -4-cloro-lH-imidazol- 5-il) -2 -naftil ) -lH-bencimidazol A una solución de sal en TFA DE ( IR, 3S , 5R) - 3 - ( 10 - (6 ' - (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -5 ' - binaftalen-6-il) -lH-bencimidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (131 mg, 0.140 mmol) en DCM (10 mi) se añadió TFA (2 mi, 26.0 mmol) y la mezcla se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se suspendió en MeOH y se filtró a través de un cartucho Strata XC MCX. El cartucho se lavó con metanol y el compuesto se liberó del cartucho eluyendo con una solución de 2M de amoniaco/metanol. El filtrado de amoniaco/metanol se evaporó a presión reducida para dar 2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2 - azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -5-(6-(2-((lR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -4-cloro-lH-imidazol-5-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol (55 mg, 0.11 mmol) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.375 min; m/z 507.33 (1:1) (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 µp?, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 8.26 (s, 1H) , 8.19 (s, 1H) , 8.00 - 8.09 (m, 3H) , 7.92 (ddd, J"=12.1, 8.6, 1.8 Hz, 2H) , 7.85 (dd, .7=8.6, 1.5 Hz, 1H) , 7.81 (d, J"=8.6 Hz, 1H) , 4.96 (dd, <J=11.0, 7.6 Hz , 1H) , 4.6.4 (app t, J=9.3 Hz, 1H) , 3.53 - 3.59 (m, 1H) , 3.44 - 3.50 (m, 1H) , 2.82 (dd, J=13.0, 7.5 Hz, 1H) , 2.61 - 2.74 (m, 3H) , 2.03 -2.15 (m, 2H) , 1.24 - 1.30 (m, 1H) , 1.18 - 1.24 (m, 1H) , 0.96 - 1.09 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediarlo 93 Intermediarlo 94 Intermediario 93 (IR, 3S, 5R) -3- (2- (3-bromofenil) -2-oxoetil) 2-terc-butil 2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2, 3 -dicarboxilato A una suspensión espesa en agitación de ácido (IR, 3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico (2.00 g, 8.80 mraol) y 2-bromo-l- (3-bromofenil) etanona (2.22 g, 8.00 mmol) en acetonitrilo (25 mi) se añadió DIPEA (2.79 mi, 16.0 mmol) (la solución se convirtió en transparente y de color ámbar) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche. La reacción se concentró y se purificó en BIOTAGE® (80 g de Si02, 10-25% de EtOAc/hexanos) para dar 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- ( 3 -bromofenil ) -2-oxoetil) 2-tere-butilo (3.37 g, 7.94 ramol) en forma de un aceite amarillo claro viscoso.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.853 min; m/z 423 y 425.98 (1:1) (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna waters XTERRA® M de 7u, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue eOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (400 MHz, CDC13) d ppm 8.04 (d, J = 1.8 Hz , 1H) , 7.83 (d, J = 7.8 Hz, 1H) , 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.38 (dd, J = 8.0, 7.8 Hz, 1H) , 5.58 - 5.10 (m, 2H) , 4.23 (s ancho, 1H) , 3.62 - 3.39 (m, 1H) , 2.58 (dt, J = 13.3, 6.5 Hz , 1H) , 2.46 (dd, J" = 13.3, 9.5 Hz, 1H) , 1.73 - 1.51 (m, 1H) , 1.47 (s, 9H) , 0.85 (s ancho, 1H) , 0.51 (s, 1H) .
Intermediario 94 3- (4- (3-bromofenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo En un recipiente de presión alta de 350 mi se añadió acetato amónico (5.94 g, 77 mmol) a una solución de 2 - azabiciclo [ 3.1.0 ] hexan- 2 , 3 - dicarboxi lato de (lR,3S,5R)-3-(2-( 3-bromofenil ) - 2 -oxoet il ) 2 - tere -butilo (3.33 g, 7.85 mmol) en xileno (75 mi) y se agitó en nitrógeno durante 5 minutos. El vaso se selló y después se introdujo en un baño de aceite, que se había calentado hasta 140 °C (la reacción pasó a ser marrón oscura) y la reacción se mantuvo a 140°C durante 11 horas. Se añadió acetato amónico adicional (3.0 g) y la reacción se agitó a 145°C durante 8 horas, se enfrió hasta la temperatura ambiente y se agitó (conversión >90% mediante CLEM) . La reacción se concentró en alto vacío hasta un aceite marrón que se repartió entre DCM (~ 200 mi) y 1/2 de bicarbonato sódico sat . (-200 mi) . La capa orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. La espuma bruta solidificada naranja se purificó en un BIOTAGE® Horizon (20-50% de EtOAc/hexanos , 160 g de Si02) para dar 3- (4- (3-bromofenil ) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - ere-butilo (2.03 g, 5.02 mmol) en forma de una espuma solidificada amarilla.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.450 min; m/z 404 y 406.06 (1:1) (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de H (400 MHz, CDCl3) d ppm 7.89 (s, 1H) , 7.65 (d, J" = 6.5 Hz, 1H), 7.42 - 7.32 (m 2H) , 7.26 (t, J = 7.8 Hz, 1H) , 4.72 - 4.61 (m, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 1H) , 2.51 (dd, J = 13.0, 7.8 Hz, 1H) , 2.36 - 2.26 (m, 1H) , 1.75 - 1.66 (m, 1H) , 1.29 (s ancho, 9H) , 0.84 (dt, J = 8.0, 5.7 Hz, 1H), 0.63 - 0.57 (m, 1H) .
Intermediario 95 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (3- (6- (2- ( (1S, 3R, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) -lH-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato de terc-butilo Una solución de 3 - (5 - (6 - (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil- 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) naftalen-2-il ) -??-benzo [d] imidazol -2 - il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (220 mg, 0.395 ramol) (preparada del mismo modo que el intermediario 51 a partir del intermediario 55), 3- (4-bromofenil-lH- imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (192 mg, 0.474 mmol) y carbonato de cesio (386 mg, 1.185 mmol) en THF (4 mi) en un matraz de presión de 100 mi se desgasificó a vacío durante 5 minutos y, después, se llenó con nitrógeno. Se añadió acetato de paladio (II) (8.9 mg, 0.039 mmol) y la mezcla se calentó durante 4 horas a 120 °C. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAC y DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concentraron. El residuo bruto se purificó en un sistema BIOTAGE® (cartucho de 90 g de gel de sílice, eluido con un gradiente de 0 a 100 % de EtOAc en hexanos) , para dar (IR, 3S, 5R) -3- (4- (3- (6- (2- ( (1S, 3R, 5S) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo (142 mg, 0.203 mmol) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.585 min; m/z 699.57 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfi e, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 n . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al' 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ?? (500 MHz, eOD) d ppm 8.33 (d, J=1.2 Hz, 1H) , 8.31 (s, 1H) , 8.20 - 8.24 (m, 1H) , 8.14 -8.20 (m, 1H) , 8.10 - 8.14 (m, 1H) , 7.97 - 8.07 (m, 3H) , 7.94 (d, J=7.9 Hz, 1H) , 7.87 - 7.92 (m, 1H) , 7.77 - 7.82 (m, 1H) , 7.67 - 7.74 (m, 1H) , 4.84 - 4.96 (m, 2H) , 3.67 (s ancho, 2H) , 2.69 - 2.80 (m, 2H) , 2.47 (s ancho, 2H) , 1.82 - 1.91 (m, 2H) , 1.19 - 1.63 (m, 18H) , 0.89 - 0.97 (m, 2H) , 0.77 (s ancho, 2H) .
Intermediario 96 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (3- (6- (2- ( (1S, 3R, 5S) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex- 3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (3- (6- (2-( (1S, 3R, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (130 mg, 0.20.mmol) en DCM (2 mi) se añadió TFA (2 mi, 26.0 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron al vacío y el producto bruto se purificó mediante HPLC prep (metanol/agua/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (3- (6- (2- ( (1S, 3R, 5S) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol-4 - il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (103 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.303 min; m/z 499.13 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 um, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0¾ de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de ¾ (500 MHz, MeOD) d ppm 8.33 (s, 1H) , 8.22 (d, J=12.5 Hz, 2H) , 8.02 (dd, J=8.6, 5.8 Hz, 2H) , 7.90 - 7.97 (m, 2H) , 7.75 · - 7. 82 (m, 4H) , 7.58 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 4.74 - 4.78 (m, 2H) , 3.46 - 3 .53 (m, 2H) , 2.64 - 2.74 (m, 4H) , 2.04 - 2.12 (m, 2H) , 1.19 - 1. .26 (m, 2H) , (ddd, J=14.2, 7.3, 7.2 Hz, 2H) Esquema de reacción Intermediarlo 26 Intermediarlo 99 Intermediarlo 100 Intermediario 97 3- (6- (6-bromoquinoxalin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo A una solución desgasificada de 6-bromo-2-cloroquinoxalina (60 mg, 0.246 mmol), 3 - ( 6 - (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil-1 , 3, 2-dioxaborolan-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (115 mg, 0.271 mmol) y bicarbonato sódico (62.1 mg, 0.739 mmol) en dioxano (1 mi) y H20 (0.2 mi) se añadió Pd(Ph3P)4 (28.5 mg, 0.025 mmol) y la mezcla se agitó a 110 °C durante 2 h, después a 120 °C durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de NH4OAc 10 mM) para dar 3- (6- (6-bromoquinoxalin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo o de tere-butilo (102.2 mg, 0.202 mmol, rendimiento del 82%) en forma de un sólido amarillo brillante.
Tiempo de retención en la CL-E 2.31 min; m/z 506 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. = 100, Tiempo de gradiente = Intermediario 98 Ácido 2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (tere-butoxicarboni1) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol -6- il) quinoxalin-6-ilborónico A una solución desgasificada de 3- (6- (6-bromoquinoxalin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (102 mg, 0.201 mmol) , KOAc (49.4 mg, 0.504 mmol) y bis (pinacolato) diboro (113 mg, 0.443 mmol) en dioxano (2 mi) se añadió Pd(Ph3P)4 (23.28 mg, 0.020 mmol) y la reacción se agitó a 83 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (20 mi) y NH4C1 (ac.) sat . (5 mi). La capa orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta obtener un aceite naranja, que se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador del TFA al 0.1%) para dar ácido 2-(2-((lR,3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalin-6-ilborónico (57 mg, 0.121 mmol, rendimiento del 60.0 %) en forma de un sólido naranja.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.94 min; m/z 472 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 99 (1R,3S,5R) -3- (4- (2- (2- ( (1R,3S,5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -IH-bencimidazol -5-il) -6- quinoxalinil) -lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2 - carboxilato de tere-butilo A una solución desgasificada de ácido 2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalin-6-ilborónico (56 mg, 0.119 mmol) , 3- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (66.9 mg, 0.178 mmol), diciclohexil (21 , 61 -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (9.76 mg, 0.024 mmol) y K2C03 (49.3 mg, 0.356 mmol) en THF (1 mi) y agua (0.25 mi) se añadió Pd(0Ác)2 (2.67 mg, 0.012 mmol) y la mezcla se agitó a 120 °C durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador de NH40Ac lOmM) , para dar 3- (5- (2- (2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalin-6-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (32 mg, 0.047 mmol) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.89 min; m/z 675 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 95%/metanol al 5%/acetato amónico 10 mM. solvente B = agua al 5%/metanol al 95%/acetato amónico- 10 mM. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 2 min. Longitud de onda = 220) . RM de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 9.44 (s, 1H) , 8.45 (s ancho, 1H) , 8.39 (s, 1H) , 8.23 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.18 (d, J"=8.5 Hz, 1H) , 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 7.69 - 7.76 (m, 1H) , 7.64 (s, 1H) , 4.69 - 4.78 (m, 1H) , 4.49 - 4.57 (m, 1H) , 3.56 - 3.70 (m, 2H) , 2.50 -2.73 (m, 2H) , 2.31 - 2.47 (m, 2H) , 1.67 - 1.86 (m, 2H) , 1.31 (s ancho, 18H) , 0.82 - 0.95 (m, 2H) , 0.54 - 0.75 (m, 2H) .
Intermediario 100 2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-bencimidazol-5-il) -6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3- il) -IH-imidazol -4-il) quinoxalina A una solución de 3- (5- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( tere-butoxicarbonil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalin-6-il) - 1H- imidazol -2 - il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (30 mg, 0.044 mmol) en DCM (0.5 mi) se añadió TFA (0.25 ml , 3.24 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se trituró con Et20, para dar una sal en TFA de 2- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol- 6 -il) -6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] exan-3-il) -lH-imidazol-5-il) quinoxalina (32.7 mg) en forma de sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.33 min; m/z 475 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de 1R (400 MHz , MeOD) d ppm 9.47 (s, 1H) , 8.54 (s, 1H) , 8.50 (s, 1H) , 8.31 (dd, J"=8.8, 1.8 Hz , 1H) , 8.26 (dd, J"=8.5, 1.3 Hz, 1H) , 8.15 (d, J=8.8 Hz , 1H) , 7,83 (s, 1H) , 7.82 (d, J=8.8 Hz , 1H) , 4.85 - 4.97 (m, 1H) , 4.67 (dd, J=10.8, 7.5 Hz, 1H) , 3.45 - 3.57 (m, 2H) , 2.77 - 2.86 (m, 1H) , 2.65 - 2.74 (m, 1H) , 2.52 -2.65 (m, 2H) , 2.02 - 2.15 (m, 2H) , 1.18 - 1.30 (m, 2H) , 0.95 - 1.09 (m, 2H) .
Esquema de reacción Intermediario 101 (IR, 3S, 5R) -3- (4-yodo-lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano A una solución 3- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) - tere- butilo (450 mg, 1.20 mmol) en DCM (5 ml) se añadió, gota a gota, TFA (1 ml , 12.98 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, después se eliminaron los volátiles y el residuo se suspendió en MeOH (5 ml) y se filtró a través de un cartucho de Strata XC MCX. El cartucho se lavó con metanol (30 ml) y el compuesto se liberó del cartucho eluyendo con una solución 2M de amoniaco/metanol (40 ml) y se concentró para dar (IR, 3S, 5R) -3- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano (283 mg, 1.03 mmol, rendimiento del 86 %) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.448 min; m/z 275.94 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (500 MHz , MeOD) d ppm 7.17 (s, 1H) , 4.20 (dd, J=10.4, 7.3 Hz, 1H) , 3.08 (td, J"=6.2, 2.6 Hz, 1H) , 2.38 (dd, .7=12.5, 7.3 Hz, 1H) , 2.19 (ddd, J=12.7, 10.5, 4.9 Hz, 1H) , 1.68 - 1.74 (m, 1H) , 0.85 (ddd, J=6.6, 4.4, 2.8 Hz, 1H) , 0.61 - 0.67 (m, 1H) .
Intermediario 102 (S) -1- ( (1R,3S, 5R) -3- (4-yodo-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil -l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo A una solución de (IR, 3S, 5R) -3- ( 5 -yodo- 1H- imidazol -2 - il ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (280 mg, 1.02 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (214 mg, 1.22 mmol) y DIEA (1.8 mi, 10 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (464 mg, 1.22 mmol) . La mezcla de reacción se agitó 2 horas a temperatura ambiente y después se diluyó con MeOH (5 mi) y agua (5 mi) . Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco sobre gel de sílice y se eluyó con 0-100 de acetato de etilo/ hexanos) , para dar (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5-yodo-??- imidazol-2 -il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (500 mg, 0.925 mmol, rendimiento del 91 %) en forma de un aceite amarillento.
Tiempo de retención en la CL-EM 0.850 min; m/z 432.97 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 7.09 (s, 1H) , 5.09 (dd, J=8.9, 4.6 Hz , 1H) , 4.47 - 4.60 (m, 1H) , 3.67 (s, 3H) , 3.59 -3.62 (m, 1H) , 2.39 - 2.49 (m, 1H) , 2.29 -2.39 (m, 1H) , 2.12 (de, J=13.6, 6.8 Hz, 1H) , 1.95 - 2.06 (m, 1H) , 1.11 (dt, J=8.6, 5.5 Hz, 1H) , 0.94 - 1.02 (m, 3H) , 0.91 (d, J"=6.7 Hz, 3H) , 0.76 (s ancho, 1H) .
Intermediario 103 3- (6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-imidazol -4- il)naftalen-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo Una solución de 3 - (6- (6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) naftalen- 2-il) -IH-benzo [d] imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (573 mg, 1.04 mmol), ( S ) - 1- ( ( IR, 3S , 5R) - 3 - ( 5 - iodo- 1H-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (374 mg, 0.87 mmol), diciclohexil (21 , 61 -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (SPHOS, 71.0 mg, 0.173 mmol) y carbonato de cesio (846 mg, 2.60 mmol) en THF (7.9 mi) y agua (0.8 mi) se desgasificó a 0°C al vacío durante 5 minutos y, después, el reactor se llenó con nitrógeno. Se añadió acetato de paladio(II) (19.4 mg, 0.087 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 3 horas. A la solución enfriada se añadió agua y la reacción se diluyó adicionalmente con EtOAc (15 mi) . Las fases se separaron, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (15 mi) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04( se filtraron a través de un lámina de tierra de diatomeas (CELITE®) y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco sobre gel de sílice y eluyó con 20-100% de acetato de etilo/hexanos , después con 5% de MeOH/DCM) , para dar 3- (6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (246 mg, 0.337 mmol, rendimiento del 39.0%) .
Tiempo de retención de CL-EM 1.448 min; m/z 730.21 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire de C18 de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de t? (500 MHz, MeOD) d ppm 8.32 (s ancho, 1H) , 8.30 (s, 1H) , 8.03 - 8.19 (m, 4H) , 7.96 - 8.03 (m, 1H) , 8.01 (s, 1H) , 7.85 - 7.96 (m, 2H) , 5.18 (dd, <J=9.0, 7.0 Hz, 1H) , 5.09 (dd, J=8.9, 7.6 Hz, 1H) , 4.58 (d, J=6.5 Hz, 1H) , 3.81 - 3.89 (m, 1H) , 3.65 - 3.75 (m, 1H) , 3.69 (s, 3H) , 2.68 - 2.86 (m, 2H) , 2.52 (dt, J=13.6, 6.8 Hz, 2H) , 2.15 - 2.29 (m, 1H) , 2.06 - 2.15 (m, 1H) , 1.85 - 1.95 (m, 1H) , 1.51 (s ancho, 4H) , 1.41 (d, J"=16.3 Hz, 1H) , 1.27 (s, 1H) , 1.20 (s ancho, 3H) , 1.12 (ddd, J=8.7, 6.0, 5.9 Hz, 1H) , 1.04 (d, J=6.8 Hz, 3H) , 0.87 - 1.00 (m, 5H) , 0.83 (s ancho, 1H) .
Intermediario 104 (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S., 5R) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6- il) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan- 2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo A una solución de 3- (6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) -naftalen-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (226 mg; 0.310 mmol) en DCM (5 ml) se añadió TFA (2 ml) y la reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La solución se concentró al vacío y el residuo se suspendió en MeOH (10 ml) y se filtró a través de un cartucho de Strata XC MCX y se lavó con metanol (25 ml) . El compuesto se liberó del cartucho lavando la columna con una solución 2M de amoniaco/metanol (10 ml) y se concentró a presión reducida para dar (S) -1-( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -IH-benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2 - il ) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3 -metil-1-oxobutan-2 -ilcarbamato de metilo (131 mg, 0.208 mmol) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención de CL-EM 1.235 min; m/z 630.17 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire de C18 de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.16 (s, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.92 (dd, J=8.3, 6.3 Hz , 2H) , 7.87 (s, 1H) , 7.78 - 7.85 . (ra, 2H) , 7.60 - 7.69 (m, 2H) , 7.44 (s, 1H) , 5.20 (dd, J=8.8, 4.8 Hz, 1H) , 4.62 (d, J=6.8 Hz, 1H) , 4.28 (dd, .7=9.8, 7.8 Hz , 1H) , 3.66 - 3.76 (m, 4H) , 3.35 - 3.41 (m, 2H) , 3.03 ('td, J=6.0, 2.5 Hz, 1H) , 2.40 - 2.59 (m, 3H) , 2.12 - 2.25 (m, 2H) , 1.99 - 2.09 (m, 1H) , 1.59 - 1.68 (m, 1H) , 1.10 - 1.18 (ra, 1H) , 1.00 - 1.08 (m, 3H) , 1.04 (d, J = 6.8 Hz, 3H) , 0.91 -1.04 (ra, 1H) , 0.95 (d, J = 6.8 Hz , 3H) , 0.76 - 0.84 (m, 2H) , 0.50 - 0.59 (m, 1H) .
Esquema de reacción 27 Intermediario 105 (S) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (4 -yodo-1H-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) etilcarbamato de metilo A una solución de ( IR, 3S , 5R) -2 -( 5-yodo- 1H- imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (510 mg, 1.85 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acético (483 mg, 2.23 mmol) y DIEA (3.24 mi, 18.5 mmol) en DMF (5 mi) se añadió HATU (846 mg, 2.23 mmol) y la reacción se agitó 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 mi) y agua (5 mi) . Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se purificó con cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco sobre gel de sílice y se eluyó con 0-100% de acetato de etilo/ hexanos, después 10% de MeOH/DC ) , para dar (S)-2-( (IR, 3S, 5R) -3- (5 -yodo-1H- imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -2-0X0-1- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) etilcarbamato de metilo (370 mg, 0.780 mmol, rendimiento del 42.1 %) en forma de una espuma blanca. El material impuro se purificó adicionalmente sobre HPLC de fase inversa (agua/metanol , TFA al 0.1%), para dar la sal en TFA de (S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5 -yodo- 1H- imidazol-2 -il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo, (387 mg) en forma de un aceite incoloro .
Tiempo de retención en la CL-EM 0.690 min; m/z 474.95 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una- longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de *H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 7.58 (s, 1H) , 5.04 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H) , 4.56 (d, J=7.8 Hz, 1H) , 3.96 (td, .7=11.7, 3.1 Hz, 2H) , 3.74 - 3.81 (m, 1H) , 3.65 - 3.73 (m, 3H) , 3.35 - 3.44 (m, 2H) , 2.61 (dd, J=13.6, 9.3 Hz , 1H) , 2.37 (ddd, J=13.6, 6.7, 6.5 Hz , 1H) , 1.96 - 2.09 (m, 2H) , 1.37 - 1.62 (m, 4H) , 1.06 (dt, J=8.8, 5.9 Hz, 1H) , 0.84 (td, J"=5.6, 2.4 Hz , 1H) .
Intermediario 106 3- (6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 - il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2 - il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2 -carboxilato de (1R,3S,5R)- tere-butilo Una suspensión espesa de 3- (6- (6- (4,4, 5,5-tetrametil-1, 3 , 2 -dioxaborolan-2 - il ) naftalen-2-il) -1H-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (407 mg, 0.738 mmol), una sal en TFA de (S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5-yodo-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etilcarbamato de metilo (350 mg) , diciclohexil ( 21 , 6 ' -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (60.6 mg, 0.148 mmol) y carbonato de cesio (721 mg, 2.21 mmol) en THF (6.7 mi) y agua (0.7 mi) se desgasificó a 0 °C al vacío durante 5 minutos y, después, el reactor se llenó con nitrógeno. Se añadió acetato de paladio (II) (16.6 mg, 0.074 mmol) y la mezcla se calentó a 100°C durante 3 horas. Los volátiles se eliminaron al vacío y la mezcla se diluyó con agua (20 mi) y EtOAc (20 mi) . Las fases se separaron, y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (20 mi) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 y se filtraron y se evaporaron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (la muestra se cargó en seco en gel de sílice y eluyó con 20-100% de acetato de etilo/ hexanos, después con 10% de MeOH/DCM) . El residuo se purificó de nuevo mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol , TFA al 0.1%), para dar la sal en TFA de 3- (6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- ( e rahidro-2H-piran-4 - il ) acetil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2 - il ) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (231 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.395 min; m/z 772.31 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 mi/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de K (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 2H) , 8.09 - 8.18 (m, 3H) , 8.05 (dd, J=8.7, 1.7 Hz, 1H) , 7.97 - 8.02 (m, 2H) , 7.91 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 7.88 (dd, J=8.7, 1.7 Hz, 1H) , 5.16 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 5.01 -5.09 (m, 1H) , 4.62 (d, <J=7.6 Hz, 1H) , 3.91 - 4.02 (m, 3H) , 3.83 - 3.89 (m, 1H) , 3.70 (s ancho, 4H) , 3.35 - 3.45 (m, 2H) , 2.68 - 2.83 (m, 2H) , 2.45 - 2.57 (m, 2H) , 2.04 - 2.16 (m, 2H) , 1.90 (s ancho, 1H) , 1.43 - 1.61 (m, 8H) , 1.14 - 1.31 (m, 4H) ; 1.07 - 1.13 (m, 1H) , 0.97 (dt, J=8.8, 5.8 Hz , 1H) , 0.91 (s ancho, 1H) , 0.82 (s ancho, 1H) .
Intermediario 107 (S) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3-il) -IH-benzo [d] imidazol -6-il)naftalen-2-il) -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan- 2-il) -2-oxo-l - (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 3-(6-(6-(2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -1H-imidazol-5-il) naftalen-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) - terc-butilo (150 mg) en DCM se añadió TFA (2 mi, 26.0 mmol) y la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se suspendió en MeOH (15 mi) y se filtró a través de un cartucho de Strata XC MCX (1 g) y se lavó con metanol. El compuesto se liberó del cartucho lavando la columna con una solución 2M de amoniaco/metanol (20 mi) y se concentró para dar (S)-2-( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftalen-2 - il ) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo (100 mg, 0.149 mmol) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.772 min; m/z 670.36 (M-H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 10%/metanol al 90%/acetato de amonio 10 mM y solvente. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 1H) , 8.24 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.05 - 8.10 (ra, 1H) , 8.03 (s, 1H) , 7.96 - 8.00 (m, 2H) , 7.84 (dd, J-8.7, 1.7 Hz, 1H) , 7.75 - 7.82 (m, 2H) , 5.16 (dd, J=9.2, 7.3 Hz, 1H) , 4.84 - 4.88 (parcialmente matizado por MeOD, m, 1H) , 4.62 (d, J=1.6 Hz, 1H) , 3.91 - 4.01 (m, 2H) , 3.84 - 3.89 (m, 1H) , 3.66 - 3.76 (m, 3H) , 3.51 - 3.56 (m, 1H) , 3.35 - 3.46 (m, 2H) , 2.82 (dd, J=12.8, 7.3 Hz, 1H) , 2.73 (dd, J=13.7, 9.2 Hz , 1H) , 2.61 (td, J"=12.0, 4.7 Hz, 1H) , 2.53 (ddd, J=13.8, 6.8, 6.6 Hz , 1H) , 2.06 - 2.16 (m, 3H) , 1.58 - 1.64 (m, 1H) , 1.44 - 1.57 (m, 3H) , 1.23 - 1.30 (m, 1H) , 1.08 - 1.16 (m, 1H) , 1.05 (c, J"=7.8 Hz, 1H) , 0.88 - 0.93 (m, 1H) .
Esquema de reacción 28 Intermediarlo 112 Intermediarlo 113 Intermediario 108 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinoxalina A una solución de 6-bromo-2-cloroquinoxalina (60 mg, 0.246 mmol) y tributil ( 1-etoxivinil ) estanano (107 mg, 0.296 mmol) en dioxano (1.5 mi) se añadió diclorobis (trifenilfosfina) -paladio (II) (17.30 mg, 0.025 mmol) y la mezcla se agitó a 110 °C durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador lOmM de NH4OAc) , para dar 6-bromo-2- (1-etóxivinil) quinoxalina (36 mg, 0.129 mmol, rendimiento del 52.3 %) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.76 min; m/z 279 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90% : metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 109 2-bromo-l - (6-bromoquinoxalin-2-il) etanona A una solución de 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinoxalina (72 mg, 0.26 mmol) en THF (2 mi) y agua (0.500 mi) se añadió NBS (55.1 mg, 0.310 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador lOmM de NH4OAc) , para dar 2-bromo-1- (6-bromoquinoxalin-2-il) etanona (50 mg, 0.15 mmol, rendimiento del 59 %) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.40 min; m/z 329 [M+H]+. (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente' A = 90% water: 10% metanol : TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 110 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2, 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3 - (2- (6-bromoquinoxalin-2-il) -2 -oxoetil ) 2-tere-butilo A una solución de 2-bromo-l- (6 -bromoquinoxalin- 2-il) etanona (50 mg, 0.152 mmol) y ácido ( IR, 3S , 5R) -2 - ( terc-butoxicarbonil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico (37.9 mg, 0.167 mmol) en acetonitrilo (1.5 mi) se añadió DIPEA (0.040 mi, 0.227 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas . El solvente se evaporó y el residuo se repartió entre EtOAc (20 ral)/ NaHC03 ac . sat . (5 mi) . La capa orgánica se secó (MgS04) , se filtró y se concentró, para dar 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- ( 6 -bromoquinoxalin-2 - il ) -2-oxoetil) 2- tere-butilo (63 mg) bruto en forma de un sólido naranj a .
Tiempo de retención en la CL-EM 2.74 min m/z 476 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 111 3- (4- (6-bromoquinoxalin-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 35, 5R) -tere- butilo A una solución dé 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (6-bromoquinoxalin-2-il) -2-oxoetil) 2 - tere-butilo (63 mg, 0.13 mmol) en tolueno (3 mi) se añadió NH4OAc (102 mg, 1.323 mmol) y la mezcla se agitó a 120 °C durante 4 horas. Se añadió NH0Ac adicional (102 mg, 1.323 mmol) y la reacción se calentó adicionalmente a 120 °C durante 4 horas. La reacción se diluyó con EtOAc (20 mi) y NaHC03 ac . sat . (5 ml) . La capa orgánica se secó (MgS04) , se filtró, se concentró y se purificó mediante cromatografía instantánea (eluido con 1:2 de EtOAc/hexano) , para dar 3- (4-(6-bromoquinoxalin-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (25 mg, 0.055 mmol) en forma de un sólido naranja roj izo .
Tiempo de retención en la CL-E 2.07 min; m/z 456 [M+H]+. (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 112 (IR, 33, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -??-bencimidazol -5-il) -2- quinoxalinil -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato A una suspensión desgasificada de 3- (4- (6-bromoquinoxalin-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (25 mg, 0.055 mmol), K2C03 (22.71 mg, 0.164 mmol), diciclohexil (2 ' , 61 -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (4.50 mg, 10.96 µ?t???) y 3 - ( 6 - (4 , 4 , 5 , 5 - etrametil - 1 , 3 , 2 -dioxaborolan-2 -il) -??-benzo [d] imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) - terc-butilo (30.3 mg, 0.071 mmol) en THF (1 mi) y agua (0.250 mi) se añadió Pd(OAc)2 (1.230 mg, 5.48 µt???) y la mezcla se agitó a 110 °C durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC prep (H20-MeOH con amortiguador lOmM de NH0Ac) , para dar 3-(5-(6-(2-((lR,3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalin-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (12 mg, 0.018 mmol, rendimiento del 33 %) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.90 min; m/z 675 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 95%/metanol al 5%/acetato amónico 10 mM. solvente B = agua al 5%/metanol al 95%/acetato amónico 10 mM. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 2 min. Longitud de onda = 220) .
RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 9.38 (s, 1H) , 8.28 (d, J=2.0 Hz, 1H) , 8.16 - 8.22 (m, 1H) , 8.10 - 8.15 (m, 1H) , 7.95 (s, 2H) , 7.66 - 7.76 (m, 2H) , 3.54 - 3.73 (m, 2H) , 2.52 - 2.69 (m, 2H) , 2.33 - 2.47 (m, 2H) , 1.71 - 1.84 (m, 2H) , 1.08 - 1.57 (m, 20H) , 0.83 - 0.95 (ra, 2H) , 0.60 - 0.74 (m, 2H) .
Intermediario 113 6- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) -2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3 - il) -IH-imidazol -4-il) guinoxalina A una solución de 3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (tercbutoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) -quinoxalin-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (10 mg, 0.015 mmol) en DCM (0.5 ml) se añadió TFA (0.25 ml, 3.24 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Los volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se trituró con Et20. El sólido resultante se aclaró con Et20 para dar la sal en TFA de 6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol - 6 - il ) -2-(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) quinoxalina (10.5 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.32 min; m/z 475 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = O, % B Final = 100, Tiempo gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) .
Intermediario 114 (2S) -2- (6- (6- (2- ( (2S) -1- ( (benciloxi) carbonil ) -2- pirrolidinil ) -lH-imidazo [4, 5-b]piridin- 6-il ) -2 -naftil ) -3H- imidazo [4 , 5-b]piridin-2 -il) -1-pirrolidincarboxilato de bencilo Se preparó de forma similar al Intermediario 39 usando ácido (S) -1- (benciloxicarbonil) pirrolidin-2-carboxílico como material de partida en lugar de ácido (S) -1-( terc-butoxicarbonil) pirrolidin-2-carboxílico y los intermediarios no se protegieron con SEM. Se preparó (2S) -2-(6- (6- (2- ( (2S) -1- ( (benciloxi) carbonil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazo [4 , 5-b] iridin- 6 - il ) -2-naftil) -3H-imidazo [4 , 5-b] iridin-2 - il ) -1-pirrolidincarboxilato de bencilo (20.8 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.742 min; m/z 769.41 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MIC OMASS® para CL en modo de electrorrocío .
EJEMPLOS Ejemplo 1 ( (1S) -1-(((2S) -2- (5- (7- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 2 , 7-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (37 mg) , diisopropiletilamina (68 µ? , 0.40 mmol) . y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (27 mg, 0.15 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (59 mg, 0.15 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) y se agitó durante 15 min. El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó dos veces mediante HPLC de fase inversa- (agua/acetonitrilo/TFA) y HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/NH4OAc) para proporcionar el producto deseado, que se suspendió en metanol y TFA. Los volátiles se eliminaron al vacío para dar una sal en TFA de ((lS)-l-(((2S)-2-(5-(7-(2-((2S)-l-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (11.3 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.34 min; Análisis calculado para C46H52N806 812.4 Encontrado m/z 813.42 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 2H) , 8.03 - 8.10 (m, 4H) , 7.96 -8.02 (m, Hz, 2H) , 7.89 (dd, J=8.6, 1.5 Hz, 2H) , 7.85 (m, 2H) , 5.36 (t, J=7.0 Hz, 2H) , 4.22 - 4.32 (m, 2H) , 4.09 - 4.19 (m, 2H) , 3.89 - 4.00 (m, 2H) , 3.63 - 3.74 (m, 6H) , 2.56 - 2.70 (m, 2H) , 2.31 - 2.40 (m, 2H) , 2.19 - 2.31 (m, 4H) , 2.08 (dd, J=13.6, 6.9 Hz, 2H) , 0.95 (d, J=7.0 Hz, 6H) , 0.89 (d, J=6.7 Hz, 6H) .
Ejemplo 2 fis -1- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (23) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una sal en TFA de 2 , 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2 -il) -lH-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (69 mg) , diisopropiletilamina (126 µ? , 0.723 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (.51 mg, 0.29 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (82 mg, 0.217 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- I bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (47 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.30 min; Calculado para C4SH52 80S : 812.40 Encontrado m/z 813.42 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 8.25 (s, 2H) , 8.07 - 8..16 (m, 4H) , 8.02 (m, J=8.6 Hz, 2H) , 7.91 (m, J=8.6 Hz , 2H) , 7.87 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 5.37 (t, J=7.2 Hz, 2H) , 4.28 (d, J=7.0 Hz , 2H) , 4.09 - 4.18 (m, 2H) , 3.90 - 4.01 (m, 2H) , 3.63 - 3.73 (m, 6H) , 2.57 - 2.70 (m, 2H) , 2.32 - 2.45 (m, 2H) , 2.19 - 2.32 (m, 4H) , 2.09 (de, J=13.6, 6.9 Hz, 2H) , 0.95 (d, J=6.7 Hz , 6H) , 0.89 (d, J=6.7 Hz, 6H) .
Ejemplo 3 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- (1 - ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol -5-il) -2 -naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 2- ( (S) -pirro lidin-2-il) -6- (6- (4- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) - 1H -benzo [d] imidazol (50 mg) di i sopropi 1 e t i 1 amina (89 µ? , 0.51 mmol) y ácido ( S ) - 2 - ( me toxi carboni lamino ) - 3 -metilbutanoico (27 mg, 0.15 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (39 mg , 0.10 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ( ( 1 S ) - 1 - ( ( ( 2 S ) - 2 - ( 4 - (4 - (6 - ( 2 - (1- ( ( 2S ) -2- ( (metoxicarbonil) amino) - 3 -metilbutanoil) - 2 - pi rrol i dini 1 ) - lH-bencimidazol - 5 - il ) -2-naftil)fenil) -lH-imidazol-2-il) - 1 -piyrrolidinil) carbonil) - 2 -me t i lpropi 1 ) carbamato de metilo (31.4 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-E 1.37 min; Análisis calculado para C48H5 806 838.42 Encontrado m/z 839.36 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.23 - 8.28 (m, 2H), 8.08 - 8.15 (m, 3H), 8.02 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.95 - 8.00 (m, 2H), 7.85 -7.95 (m, 6H) , 5.40 (t, J= 7.2 Hz , 1H), 5.29 (t, .7=7.5 Hz, 1H) , 4.29 (dd, J=19.4, 7.2 Hz , 2H), 4.10 - 4.19 (m, 2H) , 3.96 - 4.03 (m, 1H), 3.87 - 3.96 (m, 1H), 3.69 (m, 6H) , 2.55 - 2.73 (m, 2H) , 2.04 - 2.42 8H) , 0.89 - 1.05 (m, 12H) .
Ejemplo 4 ( (1S) -1- ( ( (23) -2- (4-'(4- (7- (2- ( (23) -1- ( (23) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2 -pirrolidinil) -IH- bencimidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil ) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 2- ( (S) -pirro lidin-2-il) -6- (7- (4- (2- ( (S) -pirrol idin- 2 - il ) -1H-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (25 mg) , diisopropiletilamina (45 µ? , 0.26 mmol) y ácido ( S ) - 2 - (metoxicarboni lamino ) - 3 -met i lbutanoico (13 mg, 0.76 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (29 mg, 0.076 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ( ( 1S) - 1 - ( ( ( 2S) -2 - (4 - (4 - ( 7 - ( 2 - ( ( 2S) - 1 - ( ( 2S ) -2 - ( (metoxicarbonil) amino) - 3 -met ilbutanoi 1 ) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) fenil) - 1H-imidazol - 2 - i 1 ) - 1 -pi rrol idini 1 ) carboni 1 ) -2-met i lpropi 1 ) carbamato de metilo (14.2 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.40 rain; Análisis calculado para C48H54 8O6 838.42 Encontrado m/z 839.36 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de lH (sal en TFA , 500 MHz , MeOD) d ppm 8.33 (s ancho, 2H) , 8.13 (s, 1H) , 8.03 - 8.10 (m, 3H), 8.00 (d, J=8.2 Hz, 2H) , 7.86 - 7.94 (ra, 6H), 5.40 (t, J=7.2 Hz, 1H) , 5.29 (t, J=7.6 Hz, 1H) , 4.31 (d, J=7.3 Hz , 1H) , 4.27 (d, J=7.3 Hz, 1H) , 4.10 - 4.20 (ra, 2H) , 3.85 - 4.10 (m, 2H) , 3.69 (s, 6H) , 2.55 - 2.74 (m, 2H) , 2.03 - 2.37 (m, 8H) , 0.85 - 1.05 (m, 12H) .
Ejemplo 5 C (1S) -2- ( (23) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil ) -L- alanil) -2-pirrolidinil) - lH-bencimidazol - 5 -il ) -2-naftil) -1H- bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -l-metil-2- oxoetil) carbamato de metilo A una solución en agitación de una sal en TFA de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol- 6-il)naftaleno (40 mg) , ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) propanoico (28.8 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol) . La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) , para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N-(metoxicarbonil) -L-alanil) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-nafil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -l-metil-2-oxoetil ) carbamato de metilo (35.9 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.12 min; Calculado para C42H44 806 756.34 Encontrado m/z 757.20 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.22 - 8.30 (m, 2H) , 8.08 - 8.18 (m, 4H) , 7.99 - 8.07 (m, 2H) , 7.83 - 7.96 (m, 4H) , 5.44 (dd, J=8.6, 5.2 Hz, 2H) , 4.56 (c, J=6.9 Hz, 2H) , 4.0 - 4.09 (m, 2H) , 3.94 - 4.02 (m, 2H) , 3.61 - 3.75 (m, 6H) , 2.58 - 2.72 (m, 2H) , 2.21 - 2.38 (m, 6H) , 1.32 - 1.45 (m, 6H) . (2, 6-naftalendiilbis (lH-bencimidazol-5, 2-diil (2S) -2, 1- rrolidindiil ( (IR) -2-oxo-l-fenil etanodiil) )) biscarbamato de dimetilo A una solución en agitación de una sal en TFA de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (40 mg) , ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -2-fenilacético (41.0 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol) . La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar ( 2 , 6-naftalendiilbis ( lH-bencimidazol - 5 , 2 -diil (2S) -2, 1-pirrolidindiil ( (IR) -2 -oxo- 1- fenil-2 , 1-etanodiil ))) biscarbamato de dimetilo (32.3 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.43 min; Análisis calculado para C52H48N806 880.37 Encontrado m/z 881.23 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RM de XH (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) 5 ppm 8.25 - 8.35 (m, 2H) , 8.12 - 8.21 (m, 4H) , 8.05 - 8.12 (m, 2H) , 7.90 - 8.00 (m, 4H) , 7.38 - 7.54 (m, 10H) , 5.62 (s, 2H) , 5.38 - 5.53 (m, 2H) , 4.04 - 4.18 (m, 2H) , 3.67 (s, 6H) , 2.34 - 2.41 (m, 2H) , 2.46 - 2.58 (m, 2H) , 2.15 - 2.35 (m, 4H) , 2.02 - 2.13 (m, 2H) .
Ejemplo 7 5,5' - (2, 6-naftalendiil)bis (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2-fenil-2- (1- piperidinil) cetil) -2 -pirrolidinil ) -lH-benzimidazol) A una solución en agitación de una sal en TFA de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -IH-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (40 mg) , ácido (R) -2-fenil-2- (piperidin-1-il) acético (43.0 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, .0.196 mmol). La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar 5 , 5 ' - ( 2 , 6 -naftalendiil ) bis (2- ( (2S) - 1- ( (2R) -2- fenil- 2- (1-piperidinil) acetil) -2-pirrolidinil) -lH-benzimidazol) (44.3 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.18 min; Calculado para [M+H] + C58H5oN802 900.48 Encontrado m/z 451.33 [¾ M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al '10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Ejemplo 8 (IR) -2- ( (2S) -2- (5- (6- (4- (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2- (dimetilamino) -2- fenilacetil) -2-pirrolidinil ) -lH-bencimidazol-6-il) -2 -naftil ) - lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -N,N-dimetil-2-oxo-l- feni1etanamina; A una solución en agitación de una sal en TFA de 2,6-bis(2-((S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (40 mg, 0.065 mmol) , ácido (R) -2- (dimetilamino) -2-fenilacético (35.1 mg) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol) . La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar (IR) -2- ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2- (dimetilamino) -2-fenilacetil) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-6-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -N,N-dimetil-2-oxo-l-feniletanamina (44.3 mg) en forma de un sólido blancuzco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.07 min; Análisis calculado para C^I^NsOs 820.42 Encontrado m/z 821.29 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN DE ?? (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d pm 8.31 (s, 2H) , 8.20 - 8.24 (m, 2H) , 8.13 -8.20 (m, 2H) , 8.07 - 8.13 (m, 2H) , 7.89 - 8.05 (m, 4H) , 7.60 - 7.70 (m, 10H) , 5.55 - 5.59 (m, 2H) , 5.52 (dd, .7=8.7, 3.8 Hz, 2H) , 4.11 - 4.19 (m, 2H) , 2.42 - 3.18 (m, 13H) , 2.17 -2.36 (m, Ejemplo 9 ( (1S, 2R) -2-metoxi-l- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil ) -O-metil -L-treonil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol -5- il ) -2 -naftil ) -lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidin.il) carbonil) propil) carbamato de metilo A una solución en agitación de una sal en TFA de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno . (40 mg) , ácido (2S, 3R) -3-metoxi-2- (metoxicarbonilamino) butanoico (37.4 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol) . La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar ( (1S, 2R) -2-metoxi-l- ( ( (2S) -2-(5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -O-metil-L-treonil) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -1H-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) propil) carbamato de metilo (9.3 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.22 min; Calculado para [M+H] + C46H52 808 844.39 Encontrado m/z 845.25 [½ M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 8.10 - 8.21 (m, 2H) , 7.99 - 8.08 (m, 2H) , 7.83 - 7.96 (m, 4H) , 7.58 - 7.77 (m, 4H) , 5.70 - 5.75 (m, 0.4H), 5.35 (dd, J=7.9, 4.9 Hz, 1.6H), 4.58 - 4.61 (m, 0.2H) , 4.51 (d, J=4.9 Hz, 1.5H), 4.37 - 4.43 (m, 0.3H), 3.89 - 4.08 (m, 3H) , 3.61 -3.78 (m, 7H) , 3.38 - 3.45 (m, 2H) , 3.23 - 3.31 (m, 5H) , 1.93 - 2.57 (m, 9H) , 1.10 - 1.28 (m, 6H) .
Ejemplo 10 ( (13) -3-metoxi-l- ( ( (23) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -O-metil-L-homoseril) -2-pirrolidinil) -1H- benci idazol -5 -il ) -2 -naftil ) -lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) propil) carbamato de metilo A una solución en agitación de una sal en TFA de 2,6-bis(2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-benzo[d] imidazol-6-il) naftaleno (40 rag) , ácido (S) -4-metoxi-2- (metoxicarbonilaraino)butanoico (37.4 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol) . La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con eOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%), para dar una sal en TFA de ( (1S) -3-metoxi-l- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -O-metil-L-homoseril) -2-pirrolidinil) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) ropil) carbamato de metilo (28.6 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.18 min; Calculado para [M+H]+ C46H52N808 844.39 Encontrado m/z 845.22 [½ M+H] +. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ¾ (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.23 -8.30 (m, 2H) , 8.09 - 8.18 (m, 4H) , 8.00 - 8.09 (m, 2H) , 7.84 - 7.97 (m, 4H) , 5.84 -5.90 (m, 0.2H), 5.44 (dd, J"=8.2, 4.9 Hz, 1.8H), 4.65 (dd, J"=9.2, 4.0 Hz, 1.8H), 4.38 - 4.45 (m, 0.2H), 3.91 - 4.11 (m, 4H), 3.66 - 3.78 (m, 6H) , 3.39 - 3.55 (m, 4H) , 3.27 - 3.38 (m, 7H) , 2.59 - 2.75 (m, 2H) , 2.25 - 2.40 (m, 5H) , 2.16 (dddd, J=14.3, 7.0, 6.8, 4.3 Hz, 2H) , 1.74 - 1.93 (m, 2H) .
Ejemplo 11 (2, 6-naftalendiilbis (IH-bencimidazol -5, 2-diil (2S) -2,1- pirrolidindiil ( (1S) -l-ciclopropil -2-oxo-2, 1 - etanodiil) ) ) biscarbamato de dimetilo A una solución en agitación de una sal en TFA de 2,6-bis(2-((S) -pirrolidin-2 -il) -IH-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (40 mg, 0.065 mmol) , ácido (S) -2-ciclopropil-2-(metoxicarbonilamino) acético (33.9 mg, 0.196 mmol) y DIEA (0.114 mi, 0.653 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (74.5 mg, 0.196 mmol). La reacción se agitó 9 horas a temperatura ambiente, se diluyó con eOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( 1S , 1 ' S) -2 , 2 ' - ( (2S , 2 ' S) -2 , 2 ' - ( 5 , 5 ' -(naftalen-2 ,6-diil)bis (IH-benzo [d] imidazol-5 , 2 -diil ) ) bis (pirrolidin-2 ,1-diil) )bis ( l-cyclopropil-2 -oxoetaño-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (34.9 mg, 0.038 mmol, rendimiento del 58 %) en forma de sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.23 min Calculado para C46H48N806 808.37 Encontrado m/z 809.22 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ? (sal en TFA, 500 Hz, MeOD) d ppm 8.20 - 8.29 (m, 2H) , 8.07 - 8.16 (m, 4H) , 7.98 - 8.07 (m, 2H) , 7.84 - 7.95 (m, 4H) , 5.37 - 5.48 (m, 2H) , 4.03 - 4.13 (m, 2H) , 3.87 - 4.03 (m, 4H) , 3.64 - 3.74 (m, 6H) , 2.65 - 2.74 (m, 2H) , 2.20 - 2.40 (m, 6H) , 1.09 -1.22 (m, 2H) , 0.47 - 0.67 (m, 6H) , 0.30 - 0.46 (m, 2H) .
Ejemplo 12 (2, 7-naftalendiilbis (lH-bencimidazol-5, 2-diil (2S) -2, 1- pirrolidindiil ( (IR) -2-oxo-l-fenil-2, 1- etanodiil))) biscarbamato de dimetilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-benzo[d] imidazol-5-il) -7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (47 mg) , ácido (R) -2 - (metoxicarbonilaraino) -2 - fenilacético (30.9 mg, 0.148 mmol) y DIEA (0.086 mi, 0.49 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (56.2 mg, 0.148 mmol). La reacción se agitó 4 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( IR, 1 ' R) -2 , 2 ' - ( (2S , 2 ' S) -2 , 2 ' - (5, 5 ' - (naftalen-2 , 7 -diil) bis (??-benzo [d] imidazol-5 , 2-diil) ) bis (pirrolidin-2 ,1-diil) )bis (2-oxo-l-feniletano-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (38 mg) en forma de sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.45 rain; Análisis calculado para C52H48 806 880.37 Encontrado m/ z 881.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 8.31 - 8.39 (m, 2H) , 8.03 - 8.17 (m, 6H) , 7.84 - 8.00 (m, 4H) , 7.33 - 7.53 (m, 10H), 5.55 - 5.63 (m, 2H) , 5.40 - 5.54 (m, 2H) , 4.01 - 4.17 (m, 2H) , 3.67 (s, 6H) , 3.27 - 4.41 (m, 2H) , 2.44 - 2.75 (m, 2H) , 2.01 - 2.33 (m, 6H) .
Ejemplo 13 ( (1S) -2- ( (23) -2- (5- (7- (2- ( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -L- alanil) -2-pirrolidin.il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -1H- bencimidazol-2 -il) -1-pirrolidinil) -l-metil-2- oxoetil ) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-5-il) -7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (47 mg) , ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) propanoico (21.7mg, 0.148 mmol) y DIEA (0.086 mi, 0.49 mmol) en D F (2 mi) se añadió HATU (56.2 mg, 0.148 mmol) . La reacción se agitó 5 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar ( (1S) -2- ( (2S) -2- (5- (7- (2-( (2S) -1- (N- (metoxicarbonil) -L-alanil) -2 -pirrolidinil ) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil) 1lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -l-metil-2-oxoetil) carbamato de metilo (20.9 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.16 min; Calculado para C42H44 806 756.34 Encontrado m/z 757.27 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-IOAS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u( C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de 1H (500 Hz, MeOD) 6 ppm 8.16 - 8.24 (m, 2H) , 7.87 - 8.02 (m, 4H) , 7.80 - 7.87 (m, 2H) , 7.60 - 7.75 (m, 4H) , 5.42 - 5.46 (m, 0.3H) , 5.34 (dd, J=7.9, 4.0 Hz, 1.7H), 4.55 (c, J=7.0 Hz, 1.7H), 4.31 - 4.37 (m, 0.3H), 3.80 - 3.98 (m, 4H) , 3.67 (s, 5H) , 3.47 (s, 1H) , 2.39 - 2.55 (m, 2H) , 2.04 - 2.36 (m, 4H) , 1.92 - 2.01 (m, 2H) , 1.31 - 1.42 (m, 6H) .
Ejemplo 14 ( (IR) -l-(( (2S) -2- (5- (7- (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2 -pirrolidinil ) -1H- bencimidazol-5-il) -2 -naftil-lH-bencimidazol -2 -i1 ) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2-(2-( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-5-il) -7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (47 mg) ( ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (25.9 mg, 0.148 mmol) y DIEA (0.086 mi, 0.49 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (56.2 mg, 0.148 mmol). La reacción se agitó 5 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) , se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar una sal en TFA d ( ( IR) -1- ( ( (2S) -2- (5- (7- (2 - ( (2S) -1- ( (2R) -2 -(metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (25 mg) en forma de un sólido beige.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.36 min; Análisis calculado para C46H52 8Os 812.40 Encontrado m/z 813.36 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.33 (s, 2H) , 8.07 - 8.13 (m, 4H) , 8.05 (dd, J=8.5, 1.2 Hz, 2H) , 7.84 - 7.96 (m, 4H) , 5.49 (dd, J=8.6, 3.7 Hz", 2H) , 4.36 (d, J=7.3 Hz , 2H) , 4.15 - 4.23 (m, 2H) , 3.83 -3.97 (m, 2H) , 3.72 (s, 6H) , 2.58 - 2.71 (m, 2H) , 2.21 - 2.38 (m, 6H) , 2.05 - 2.18 (m, 2H) , 1.07 (d, J=6.7 Hz, 6H) , 1.04 (d, J=6.7 Hz, 6H) .
Ejemplo 15 5,5' - (2, 7-naftalendiil)bis (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2-fenil-2- (1- piperidinil) acetil) -2 -pirrolidinil) -??-benzimidazol) A una solución agitada de una sal en TFA de 2- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-5-il) -7- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (47 mg) , ácido (R) -2-fenil-2- (piperidin-l-il) acético (32.4 mg, 0.148 mmol) y DIEA (0.086 mi, 0.49 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (56.2 mg, 0.148 mmol) . La reacción se agitó 5 horas a temperatura ambiente, se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi), se concentró para eliminar los volátiles y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con TFA al 0.1%) y, después, mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua con acetato amónico 10 mM) para dar 5 , 5 ' - (2 , 7 -naftalendiil) bis ( 2 -( (2S) -1- ( (2R) -2-fenil-2- ( 1-piperidinil) acetil) -2-pirrolidinil ) - lH-benzimidazol ) (16.4 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.21 min; Calculado para [M+H] + C58H6oN806 900.48 Encontrado m/z 451.43 ½ [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de XH (400 MHz , MeOD) d ppm 8.18 - 8.28 (m, 2H) , 7.96 - 8.05 (m, 2.2H), 7.92 (d, J=1.0 Hz, 1.5H), 7.80 - 7.90 (m, 2.2H), 7.65 - 7.76 (m, 3.8H), 7.55 - 7.64 (m, 3.2H), 7.46 - 7.55 (m, 4.5H), 6.85 -6.97 (m, 1.6H), 6.76-6.83 (m, 1H) , 5.65 - 5.70 (m, 0.5H) , 5.28 (dd, J=7.5, 3.3 Hz, 1.5H), 4.48 (s ancho, 0.5H) , 4.02 4.12 (m, 1.5H), 3.90 - 3.98 (m, 0.5H), 3.74 - 3.84 (m, 0.5H) 3.25 - 3.40 (m, 3H) , 2.51 - 2.93 (m, 8H) , 1.89 - 2.33 (m 8H) , 1.62 - 1.75 (m, 8H) , 1.47 - 1.59 (m 4H) .
Ejemplo 16 C (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) a ino) -3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -IH- bencimidazol -5-il) -2-naftil-lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 2 - ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (32 mg) , diisopropiletilamina (62 µ? , 0.35 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (19 mg, 0.106 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (40 mg, 0.11 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales, durante 9 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (una vez con agua/acetonitrilo/acetato amónico 10 Mm y dos veces con agua/acetonitrilo/TFA al 0.1%) para proporcionar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (21 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.17 min; Calculado para C42H5oN806 762.39 Encontrado m/z 763.34 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. RMN de ? (500 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1H) , 8.27 (s, 1H) , 8.15 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.10 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.94 r 8.01 (m, 3H) , 7.82 -7.89 (m, 2H) , 5.38 (t, J=l .2 Hz , 1H) , 5.31 (t, J=7.6 Hz, 1H) , 4.28 (dd, J=14.5, 7.2 Hz, 2H) , 4.15 (s ancho, 2H) , 3.86 -4.01 (m, 2H) , 3.69 (s, 6H) , 2.55 - 2.69 (m, 2H) , 2.19 - 2.39 (m, 6H) , 2.04 - 2.15 (m, 2H) , 0.86 - 1.05 (m, 12H) .
Ejemplo 17 ( (1S) -1- ( ( {23) -2- (4- (7- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) a ino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol -5-il) -2-naftil-lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (7- (2- ( (S) -pirrolidin-2 -il ) - 1H- imidazol -4 -il) fenil) naftalen-2-il) -lH-benzo [d] imidazol (16 mg) , diisopropiletilamina (31 µ?, 0.18 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (9.3 mg, 0.053 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (20 mg, 0.053 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 9 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA al 0 1%) para proporcionar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (7- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (7.9 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.20 min; Calculado para C42H5o 806 762.39 Encontrado m/z 763.35 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo . de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. R N de ¾ (500 MHz, MeOD) d ppm 8.35 (s, 1H) , 8.25 (s, 1H) , 8.09 (dd, J=8.4, 3.2 Hz, 2H) , 8.04 (s, 1H) , 7.89 - 8.00 (m, 3H) , 7.77 - 7.87 (m, 2H) , 5.37 (t, J=7.0 Hz, 1H) , 5.30 (t, J= 7.3 Hz, 1H) , 4.28 (dd, J=15.4, 7.2 Hz, 2H) , 4.08 - 4.20 (m, 2H) , 3.86 - 4.01 (m, 2H) , 3.69 (s, 6H) , 2.56-2.68 (m, 3H) , 2.39 - 2.02 (m, 7H) , 0.87 - 1.04 (m, 12H) . ( (1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (5- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3 -il) -IH-bencimidazol -5-il) -2-naftil -1H- bencimidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de 2 , 6-bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (100 mg) , diisopropiletilamina (334 µ? , 1.91 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (101 mg, 0.574 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (218 mg, 0.574 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA al 0.1%) para proporcionar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2 - ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - lH-bencimidazol -5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2 - il ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (85 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.33 min; Calculado para C48H52 806 : 836.4 Encontrado m/z 837.32 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ¾ (500 MHz, MeOD) d ppm 8.22 (s, 2H) , 8.05 - 8.13 (m, 4H) , 7.96 - 8.02 (m, 2H) , 7.82 - 7.92 (m, 4H) , 5.22 - 5.32 (m, 2H) , 4.59 (d, J=6.4 Hz, 2H) , 3.86 (t, J=6.0 Hz, 2H) , 3.60 - 3.75 (m, 6H) , 2.66 - 2.79 (m, 2H) , 2.54 (m, 2H) , 2.16 - 2.26 (m, 2H) , 2.02 - 2.16 (m, 2H) , 1.10 - 1.16 (m, 2H) , 0.98 - 1.05 (m, 6H) , 0.94 - 0.97 (m, 2H) , 0.91 (d, J=6.7 Hz, 6H) .
Ejemplo 19 (IR) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2R) -2- (dimetilamino) -2-fenilacetil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) - lH-bencimidazol-6-il) -2 -naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -N, N-dietil-2-oxo-l-feniletanamina A una mezcla de 2 , 6-bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (50 mg) , diisopropiletilamina (0.167 ml , 0.957 mmol) y ácido (R) -2- (dietilamino) -2-fenilacético, HC1 (70.0 mg, 0.287 mmol) en DMF (2 ml) se añadió HATU (109 mg, 0.287 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 ml) y agua (2 ml) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA al 0.1%), después mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo acetato amónico 10 mM) y, por último, mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo, TFA al 0.1%) para proporcionar una sal en TFA de (IR) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2R) -2- (dietilamino) -2-fenilacetil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-6-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -N,N-dietil-2-oxo-l-feniletanamina (25.2 mg) en forma de un polvo blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.15 min; Calculado para M+H] + C58H6oN802 : 900.48 Encontrado m/z 451.46 [½M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. R de ¾ (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.27 (s, 2H) , 8.08 - 8.17 (m, 4H) , 7.96 (td, J=8.7, 1.5 Hz, 4H) , 7.87 (d, J=8.'6 Hz, 2H) , 7.68 - 7.72 (m, 4H) , 7.57 - 7.68 (m, 6H) , 5.79 (s, 2H) , 5.23 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 2H) , 3.95 - 4.05 (m, 2H) , 3.25 - 3.48 (m, 4H) , 3.06 (s ancho, 4H) , 2.43 - 2.61 (m, 4H) , 2.01 - 2.11 (m, 2H) , 1.31 (t, J=6.9 Hz, 12H) , 0.62 (ddd, J=8.7, 6.0, 5.8 Hz, 2H) , -0.21 (td, J=5.1 , 2.4 Hz, 2H) .
Ejemplo 20 (IR) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (5- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) (metoxicarbonil) amino) -2 -fenilacetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 3-il) -lH-bencimidazol -5-il) -2-naftil ) -lH-bencimidazol -2-il) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l-feniletil) carba ato de metilo y Ejemplo 21 (2, 6-naftalendiilbis (lH-bencimidazol -5, 2 -diil (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil ( (IR) -2-oxo-l-fenil-2,l- etanodiil ) ) ) biscarbamato de dimetilo A una mezcla de 2 , 6-bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (50 mg) , diisopropiletilamina (0.167 mi, 0.957 mmol) y ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -2-fenilacético (60 mg, 0.287 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (109 mg, 0.287 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 5 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA al 0.1%), después mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo acetato amónico 10 mM) y, por último, mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo, TFA al 0.1%) para proporcionar una sal en TFA de (IR) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- (metoxicarbonil) amino) -2-fenilacetil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) - lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l-feniletil ) carbamato de metilo (6.9 mg) en forma de un sólido blanco y una sal en TFA de (2 , 6-naftalendiilbis (1H-bencimidazol-5 ,2-diil (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2 -diil ( ( IR) -2 -oxo- 1-fenil-2 , 1-etanodiil ) ) ) biscarbamato de dimetilo (12.5 mg) en forma de un sólido blanco.
Datos analíticos del Ejemplo 20: Tiempo de retención en la CL-EM 1.46 min; Calculado para C46H52 806 : 904.37 Encontrado m/z 453.35 [½M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 ram usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (d, J=4.6 Hz , 2H) , 8.15 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 8.12 (s, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 8.03 (t, J=8.9 Hz , 2H) , 7.92 - 7.98 (m, 2H) , 7.90 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.85 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.48 - 7.54 (m, 2H) , 7.37 - 7.48 (m, 8H) , 5.85 (s, 1H) , 5.78 (s, 1H) , 5.39 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1H) , 5.29 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H) , 3.91 - 3.97 (m, 1H) , 3.68 (s, 3H) , 3.66 (s, 3H) , 3.52 - 3.61 (m, 1H) , 2.73 (dd, J=13.7, 9.2 Hz, 1H) , 2.46 - 2.65 (m, 3H) , 2.06 - 2.14 (m, 1H) , 1.98 - 2.06 (m, 1H) , 1.23 - 1.30 (ra, 1H) , 1.10 (s ancho, 1H) , 0.66 - 0.72 (m, 1H) , 0.01 - 0.10 (ra, 1H) .
Datos analíticos del Ejemplo 21: Tiempo de retención en la CL-EM 1.48 min; Calculado para [M+H] + C54H48 806 : 904.37 Encontrado m/z 453.35 [½M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvénte B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (s, 2H) , 8.16 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 8.11 (s, 2H) , 8.01 -8.06 (m, 2H) , 7.95 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 7.90 (m, J=8.6 Hz , 2H) , 7.48 - 7.55 (m, 4H) , 7.36. - 7.48 (m, 6H) , 5.85 (s, 2H) , .29 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 2H) , 3.92 - 3.97 (m, 2H) , 3.66 (s, H) , 2.55 - 2.66 (ra, 2H) , 2.51 (ddd, J=13.3, 6.6, 6.4 Hz , H) , 1.97 - 2.07 (m, 2H) , 0.63 - 0.74 (m, 2H) , -0.02 - 0.10 (m, 2H) .
Ejemplo 22 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (6- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) a ino) -3 - etilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -IH- imidazo [4 , 5-b]piridin-6-il) -2-naftil-lH-imidazo [4,5- b]piridin-2-il) -1 -pirrolidinil ) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo Y Ejemplo 23 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (6- (6- (2- ( (2R) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -1H- imidazo [4, 5-b]piridin-6-il) -2 -naftil-1H-imidazo [4, 5- b]piridin-2-il) -1 -pirrolidin.il) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una suspensión espesa agitada de una sal clorhidrato de 2 , 6 -bis ( 2 - ( ( S ) -pirrol idin- 2 - i 1 ) - 3H-imidazo [4 , 5 -b] piridin- 6 - il ) naf taleno (45 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-raetilbutanoico (29.3 mg, 0.167 mmol) en DMF (1 mi) y DI PEA (0.122 mi, 0.696 mmol) se añadió HATU (63.5 mg , 0.167 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa ( ace t oni t r i lo/ agua cono acetato amónico 10 mM) para proporcionar ((1S)-l-(((2S)-2-(6-(6-(2-((2S)-l-((2S)-2-( (me toxi carbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -lH-imidazo [4,5-b]piridin-6-il) -2-naftil) -lH-imidazo[4,5-b]piridin-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-met i l ro i 1 ) carbamato de metilo (19.2 mg) en forma de un sólido blanco y ( (1S) -1- ( ( (2R) -2 - (6-(6 - (2 - ( (2S)-1- ( (2S) - 2- ( (me toxi carboni 1) amino) -3-metilbutanoil) - 2 -pirrolidinil) -lH-imidazo [4,5-b]piridin-6-il) - 2 -naftil) -lH-imidazo[4,5-b]piridin-2-il) - 1 -pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (16.5 mg) en forma de un sólido blanco (incierto si el estereocent ro de la pirrolidina se racemizó durante esta etapa o en una etapa previa) . La resolución de 2 , 6 - b i s ( 2 - ( ( S ) - p i rrol i din- 2 - i 1 ) - 3 H -imidazo [4 , 5 -b] piridin- 6 - il ) naftaleno mediante HPLC quiral mostró un pico ancho, pero los diaestereómeros individuales no se pudieron resolver en las condiciones en las que se intentó.
Datos analíticos del Ejemplo 22: Tiempo de retención en la CL-EM 1.407 min; m/z 815.60 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100 %/ solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.82 - 8.71 (m, 2H) , 8.32 - 8.18 (m, 4H) , 8.14 -8.07 (m, 2H) , 7.92 - 7.84 (m, 2H), 5.37 - 5.29 (m, 2H) , 4.30 (d, J" = 7.3 Hz, 2H) , 4.13 - 4.04 (m, 2H) , 4.02 - 3.92 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.54 - 1.98 (m, 10H) , 1.03 - 0.89 (m, 12H) .
Datos analíticos del Ejemplo 23: Tiempo de retención en la CL-EM 1.442 min; m/z 815.59 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100 %/ sol vente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5 % / ace t oni t r i 1 o al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocí o . RMN de 1H (500 MHz, MeOD ) d ppm 8.89 - 8.66 (m, 2H) , 8.36 - 8.20 (m, 4H) , 8.15 -8.10 (m, 2H) , 7.94 - 7.86 (m, 2H) , 5.44 - 5.29 (m, 2H) , 4.34 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 4.30 (d, J = 7.6 Hz , 1H) , 4.21 - 3.80 (m, 4H) , 3.74 (s, 3H) , 3.68 (s, 3H) , 2.69 - 1.95 (m, 10H) , 1.09 - 0.41 (m, 12H) .
Ejemplo 24 ( (1S) -l-( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2 -pirrolidinil) -1H- imidazo [4 , 5-b]piracin-5-il) -2-naftil-1 -imidazo [4, 5- b]piracin-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo Y Ejemplo 25A ( (1S) -1-(((2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2R) -2-( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2 -pirrolidinil) -1H- imidazo [4 , 5-b]piracin-5-il) -2-naftil-lH-imidazo [4 , 5- b]piracin-2-il) -1 -pirrolidinil ) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo y Ejemplo 25B ( (1S) -1- ( ( (2R) -2- (5- (6- (2- ( (2R) -1- ( (23) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2 -pirrolidinil) -1H- imidazo [4, 5-b]piracin-5-il) -2 -naftil-1H-imidazo [4,5- b]piracin-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una suspensión espesa agitada de una sal HCl de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H- imidazo [4 , 5-b] piracin-5-il)naftaleno (45 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (29 mg, 0.17 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.12 mi, 0.69 mmol) se añadió HATU (63 mg, 0.17 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (acetonitrilo/agua cono acetato amónico 10 mM) para dar ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazo [4 , 5-b] piracin- 5 -il) -2-naftil) -1H- imidazo [4,5-b] iracin-2 - il ) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (11.2 mg) en forma de un sólido amarillo y ( (1S) -1- ( ( (2R) -2- (5- (6- (2- ( (2R) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazo [4 , 5-b] piracin- 5 -il) -2-naftil) -1H- imidazo [4,5- b] iracin-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (17.3 mg) y ( (1S) -1- ( ( (2R) -2-(5- (6- (2- ( (2R) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -lH-imidazo [4, 5-b] piracin-5-il) -2-naftil) - 1H- imidazo [4 , 5-b] piracin-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (6.7 mg) en forma de un sólido amarillo (se desconoce su el estereocentro de la pirrolidina racemizó durante esta etapa o en- una etapa previa). La resolución de 2 , 6-bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H- imidazo [4 , 5-b] piracin-5-il) naftaleño mediante HPLC quiral mostró un pico ancho, pero los diaestereómeros individuales no se pudieron resolver en las condiciones en las que se intentó.
Datos analíticos del Ejemplo 24: Tiempo de retención en la CL-EM 1.420 min; m/z 817.59 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ¾ (500 MHz , MeOD) 5 ppm 9.14 - 9.06 (m, 2H) , 8.71 - 8.64 (m, 2H) , 8.37 - 8.29 (m, 2H) , 8.18 - 8.11 (m, 2H) , 5.59 - 5.30 (m, 2H) , 4.30 (d, J = 7.3 Hz, 2H) , 4.13 - 3.96 (m, 4H) , 3.78 - 3.64 (m, 6H) , 2.57 - 2.01 (m, 10H) , 1.07 - 0.92 (m, 12H) .
Datos analíticos del Ejemplo 25A: Tiempo de retención en la CL-EM 1.507 min; m/z 817.56 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL. en modo de electrorrocío. RMN de ?. (500 MHz, MeOD) d ppm 9.14 - 9.02 (m, 2H) , 8.69 - 8.60 (ra, 2H) , 8.36 - 8.27 (m, 2H) , 8.15 - 8.08 (m, 2H) , 5.41 - 5.36 (m, 1H) , 5.34 - 5.29 (m, 1H) , 4.35 (d, J = 7.9 Hz , 1H) , 4.31 (d, J = 7.3 Hz , 1H) , 4.24 - 3.81 (m, 4H) , 3.78 (s, 3H) , 3.68 (s, 3H) , 2.62 - 1.97 (m, 10H) , 1.09 - 0.46 (m, 12H) .
Datos analíticos del Ejemplo 25B: Tiempo de retención en la CL-EM 1.562 min; m/z 817.58 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/agua al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. (2, 6-naftalendiilbis (IH-bencimidazol -5, 2-diil (2S) -2,1- pirrolidindiil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) -2, 1- etanodiil ) ) ) biscarbamato de dimetilo A una solución agitada de 2 , 6 -bis (2 - ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) naftaleno (50 mg) , diisopropiletilamina (175 µ? , 1.0 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (65 mg, 0.30 mmol) en DMF (5 mi) se añadió HATU (114 mg, 0.301 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de (2 , 6-naftalendiilbis (1H-bencimidazol-5 , 2-diil(2S)-2, 1-pirrolidindiil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) -2, 1-etanodiil) ) ) biscarbamato de dimetilo (51.5 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.117 min; m/z 897.31 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente .A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA 500 MHz , MeOD) d ppm 8.27 (s ancho, 2H) , 8.10 , 8.18 (m, 4H) , 8.01 , 8.07 (m, 2H) , 7.86 , 7.96 (m, 4H) , 5.88 , 5.93 (m, 0.2H), 5.39 (t, J=7.0 Hz, 1.8H) , 4.33 , 4.38 (m, 2H) , 4.12 , 4.22 (m, 2H) , 3.89 , 4.05 (m, 7H) , 3.70 (s, 6H) , 3.35 , 3.45 (m, 2H) , 2.60 , 2.75 (m, 2H) , 2.14 , 2.47 (m, 6.5H), 1.94 , 2.12 (m, 2.5H), 1.32 , 1.69 (m, 8H) . ( (1S) -2- ( ( (2S) -2- (5- (6- (2- ( (23) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H- bencimidazol -5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1- pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de ( (1S) -2-metil-l- ( ( (2S) -2-(5- (6- (2- ( (2S) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) propil) carbamato de metilo (50 mg) , diisopropiletilamina (133 µ? , 0.76 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (50 mg, 0.23 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (87 mg, 0.23 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ((lS)-2-((2S)-2-(5-(6-(2-( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) etil ) carbamato de metilo (36 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.177 min; m/z 855.30 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.22 - 8.30 (m, 1.8H) , 8.20 (s ancho, 0.2H) , 8.07 - 8.17 (m, 4H) , 8.00 - 8.06 (m, 1.8H) , 7.98 (s ancho, 0.2H), 7.85 - 7.95 (m, 4H) , 5.86 (m, 0.1H) , 5.35 - 5.44 (m, 1.8H) , 5.25 - 5.31 (m, 0.1H) , 4.36 (d, J=7.6 Hz, 0.5H) , 4.31 (d, J=6.7 Hz, 1H) , 4.15 (s ancho, 1.5H) , 3.87 - 4.05 (m, 4H) , 3.69 (s ancho, 6H) ,. 3.34 - 3.47 (m, 1H) , 2.96 - 3.23 (m, 2H) , 2.61 - 2.77 (m, 2.5H) , 2.21 - 2.47 (m, 6H) , 1.95 - 2.16 (m, 2H) , 1.33 - 1.69 (m, 3.5H) , 1.00 - 1.05 (m, 0.3H) , 0.94 - 0.99 (m, 3H) , 0.91 (d, J=6.7 Hz , 2.7H) .
Ejemplo 28 ( (1S) -2- ( ( (2S) -2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (23) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) acetil) - 2 -pirrolidinil—lH-benclmidazol -5-il ) -2-naftil) -lH-imidazo-2- il) -1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran- 4 - il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -6- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) -??-benzo [d] imidazol (29 mg) , diisopropiletilamina (56 µ? , 0.32 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran—4-il) acético (21 mg, 0.10 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (36.6 mg, 0.096 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . Después, el componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ( ( 1S) -2 - ( ( 2S) -2 - (4 - ( 6 - (2 -( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -pirrolidinil) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) 1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (16.3 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.023 min; m/z 847.31 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B , un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (d, .7=12.5 Hz, 2H) , 8.15 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.10 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.92 - 8.01 (m, 3H) , 7.81 - 7.90 (m, 2H) , 5.37 (dd, J=7.9, 6.1 Hz, 1H) , 5.30 (t, J=7.5 Hz, 1H) , 4.28 - 4.39 (ra, 2H) , 4.12 - 4.22 (m, 2H) , 3.88 - 4.04 (m, 7H) , 3.65 - 3.77 (m, 6H) , 3.38 -3.45 (m, 1H) , 2.56 - 2.69 (m, 2H) , 2.20 - 2.40 (m, 6.5H) , 2.01 (s ancho, 2.5H), 1.57 - 1.69 (m, 2.5H), 1.35 - 1.53 (m, 6.5H) .
Ejemplo 29 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -2 -pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) -2 -naftil ) fenil ) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) aftalen-2-il) fenil-lH-imidazol (47 mg) , diisopropiletilamina (88 µ? , 0.51 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (26.5 mg, 0.152 mmol) en D F (4 mi) se añadió HATU (57.6 mg, 0.152 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol/TFA) , se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/acetato amónico) y, por último, se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol/TFA) para proporcionar una sal en TFA de ((1S)-l-( ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (33.3 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.237 min; m/z 789.29 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%.
Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (sal en TFA, 500 Hz, MeOD) d ppm 8.29 (d, J=8.9 Hz, 2H) , 8.15 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.10 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 7.95 - 8.03 (m, 4H) , 7.93 (s, 1H) , 7.84 - 7.91 (m, 3H) , 5.69 - 5.72 (m, 0.2H), 5.24 - 5.35 (m, 1.8H), 4.27 (dd, J=l .2 , 2.6 Hz, 2H) , 4.09 - 4.19 (m, 2H) , 3.85 - 3.97 (m, 2H) , 3.67 - 3.76 (m, 6H) , 2.55 - 2.68 (m, 2H) , 2.27 - 2.38 (m, 2H) , 2.14 - 2.27 (m, 4H) , 2.02 - 2.14 (m, 2H) , 0.86 - 1.06 (m, 12H) . (2, 6-naftalendiilbis (lH-bencimidazol -5, 2-diil (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3 , 2-diil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4 -il) -2, 1-etanodiil))) biscarbamato de dimetilo A una solución agitada de 2 , 6-bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il)naftaleno (25 mg) , diisopropiletilamina (84 µ?, 0.48 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (31.2 mg, 0.144 mmol) en DMF (5 mi) se añadió HATU (54.6 mg, 0.144 mmol) y la mezcla resultante se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) . El componente volátil se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol/TFA) , se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo/acetato amónico) y, por último, se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol/TFA) para proporcionar una sal en TFA de (2 , 6-naftalendiilbis (1H-bencimidazol -5 , 2 -diyl ( IR, 3S , 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2 -diil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) -2, 1-etanodiil ) ) ) biscarbamato de dimetilo (8.2 mg) en forma de un sólido blancuzco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.220 min; m/z 461.3 [1/2M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue acetonitrilo al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s ancho, 2H) , 8.07 - 8.18 (m, 4H) , 8.00 - 8.07 (m, 2H) , 7.84 - 7.96 (ra, 4H) , 5.23 -5.31 (m, 2H) , 4.59 - 4.67 (m, 2H) , 3.85 - 4.01 (m, 6H) , 3.70 (s, 6H) , 3.28 - 3.44 (m, 4H) , 2.71 - 2.80 (m, 2H) , 2.58 (ddd, J=13.2, 6.5, 6.3 Hz, 2H) , 2.03 - 2.20 (m, 4H) , 1.41 - 1.65 (m, 8H) , 1.13 (s ancho, 2H) , 0.97 (s ancho, 2H) .
Ejemplo 31 ( (1S) -l-(( (2S) -2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2 -pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) etinil- -2-naftil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una sal en TFA de 2 , 6-bis ( (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) etinil) naftaleno (38 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (22 mg, 0.13 mmol) en DMF (0.7 mi) y TEA (0.047 mi, 0.33 mmol) se añadió HATU (47.6 mg, 0.125 mmol) y la solución amarilla transparente a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con MeOH (1 mi), se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa 15-100% de MeOH/agua/amortiguador TFA, para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- ( (6- ( (2 - ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (37.1 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.530 min; m/z 759.61 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENO ENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 32 ( (1S) -!-(( (23) -2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) etinil - -2 -naftil) etinil) -1H- imidazol -2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo Una sal en TFA de 4 , 4 ' - ( 2 , 6 -naftalendiil ) bis (2 -( (2S) -2-pirrolidinil) -lH-imidazol) (21 mg, 0.025 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (12.9 mg) se disolvieron en DMF (3 mi) y DIEA (0.043 ral, 0.246 mmol). Después se añadió HATU (28.0 mg, 0.074 mmol) y la_ mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Los volátiles se eliminaron al vacío y el producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire de C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 0 a 90 % de MeOH -Aguar + TFA al 0.1 % TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- ( (6- ( (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol -4 - il ) etinil) -2-naftil) etinil) - 1H- imidazol -2 - il ) -1-pirrolidinil ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (10.4 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.158 rain; m/z 713.60 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 rain donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 2H) , 8.11 (d, J=8.6 Hz, 2H) , .7.94 - 8.03 (m, 2H) , 7.84 - 7.94 (m, 2H) , 5.29 (t, J=7.3 Hz , 2H) , 4.26 (d, J=7.02 Hz, 2H) , 4.14 (t, J=10.2 Hz, 2H) , 3.85 - 3.96 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.53 - 2.67 (m, 2H) , 2.31 (d, J=10.4 Hz, 2H) , 2.16 -2.28 (m, 4H) , 2.03 - 2.15 (m, 2H) , 0.88 - 1.08 (m, 12H) .
Ejemplo 33 ( (1S) -2- ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran- 4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2-( (2S) -2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (50 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (68.7 mg, 0.316 mmol) en DMF (5 mi) y DIEA (0.18 mi, 1.1 mmol) se añadió HATU (120 mg, 0.316 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 mi) y agua (2 mi) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC prep (columna aters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 90 % de MeOH -Aguar + TFA al 0.1 %) y después se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de hasta % de ACN -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S) -2-(4-(4-(6-(2-((2S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol -4 - il ) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol-2 - il) -1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (96 mg) en forma de un sólido amarillo .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.207 min; m/z 873.63 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 5 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (d, .7=7.9 ??,. 2H) , 8.14 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.06 - 8.11 (m, 1H) , 7.94 - 8.03 (m, 4H) , 7.90 - 7.94 (m, 1H) , 7.80 -7.90 (m, 3H) , 5.74 (s ancho, 0.2H), 5.23 - 5.35 (m, 1.8H), 4.32 (dd, J=8.1, 4.7 Hz , 2H) , 4.16 (d, J=2.8 Hz , 2H) , 3.94 (dd, J=9.5, 7.3 Hz, 6H) , 3.69 (s, 6H) , 3.31 - 3.48 (m, 4H) , 2.55 - 2.68 (m, 2H) , 2.16 - 2.35 (m, 6H) , 1.92 - 2.10 (m, 2H) , 1.63 (d, J=12.8 Hz, 2H) , 1.34 - 1.54 (m, 6H) .
Ejemplo 34 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) acetil ) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -4-il) -2- naftil)fenil) -??-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il - 2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol-5-il) naftalen- 2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano (25 mg, 0.050 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 - il ) acético (33 mg) en DMF (3 mi) y DIEA (0.078 ml , 0.50 mmol) se añadió HATU (57 mg, 0.150 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 ml) y agua (2 ml) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna aters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il-2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) etil) carbamato de metilo (27 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.280 min; m/z 897.65 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.28 - 8.32 (m, 2H) , 8.14 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.07 - 8.11 (m, 1H) , 7.95 - 8.02 (m, 4H) , 7.84 - 7.93 (m, 4H) , 5.12 -5.23 (m, 2H) , 4.62 (dd, .7=7.6, 4.0 Hz, 2H) , 3.92 - 4.00 (m, 4H) , 3.83 - 3.89 (m, 2H) , 3.72 - 3.78 (m, 2H) , 3.70 (s, 6H) , 3.35 - 3.46 (enmascarado con metanol, m, 4H) , 2.68 - 2.77 (m, 2H) , 2.47 - 2.57 (m, 2H) , 2.00 - 2.15 (m, 4H) , 1.42 - 1.65 (m, 6H) , 1.06 - 1.17 (m, 2H) , 0.84 - 0.93 (m, 2H) .
E emplo 35 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (23) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil (fenil) - -1H-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil ) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (4- (6- (2-( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen- 2-il) fenil) -1H- imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano (25 mg, 0.050 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3metilbutanoico (26 mg, 0.15 mmol) en DMF (3 mi) y DIEA (0.070 ml , 0.40 mmol) se añadió HATU (57 mg, 0.150 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 ml) y agua (2 ml) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5 ) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) Carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (34.8 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.402 min; m/z 813.69 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.29 (d, J=7.9 Hz, 2H) , 8.14 (d, J=8.9 Hz , 1H) , 8.09 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 7.95 - 8.01 (m, 4H) , 7.92 (s, 1H) , 7.84 - 7.90 (m, 3H) , 5.16 (ddd, J=11.6, 9.2, 7.0 Hz, 2H) , 4.58 (dd, J=6.4, 2.1 Hz, 2H) , 3.81 - 3.88 (m, 2H) , 3.66 - 3.75 (m, 6H) , 2.67 - 2.77 (m, 2H) , 2.46 - 2.57 (m, 2H) , 2.21 (de, J=12.9, 6.5 Hz, 2H) , 2.06 - 2.14 (m, 2H) , 1.08 - 1.18 (m, 2H) , 1.04 (d, J=6.7 Hz, 6H) , 0.95 (d, J=6.7 Hz , 6H) , 0.91 (s ancho, 2H) .
Ejemplo 36 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol -5-il) -2- quinolinil-lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal clorhidrato de 2,6-bis(2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol - 6 - il ) quinol ina (25 mg) y ácido (S)-2 - (metoxicarbonilamino) - 3 -met ilbutanoico (15 mg , 0.086 mmol) en DMF (1 mi) y D I PEA (0.059 ml , 0.34 mmol) se añadió HATU (32.7 mg , 0.086 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (2S,2'S)-1.1' - ( (ÍR^'R^S^'S^R^'R) - 3,3' - (6,6' - ( quino lin-2,6-diil)bis(lH-benzo[d] imidazol-6,2-diil) ) bis ( 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil) ) bis (3 -me t i 1 - 1 -oxobut an - 2 , 1 - di i 1 ) dicarbamat o de dimetilo (8.3 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.88 min; m/z 838 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.64 - 8.80 (1H, m) , 8.49. - 8.62 (1H, m) , 7.45 -8.48 (9H, m) , 5.21 - 5.52 (2H, m) , 4.50 - 4.68 (2H, m) , 3.82 - 4.13 (2H, m) , 3.70 - 3.79 (2H, m) , 3.68, 3.66 (6H, s, s) , 2.48 - 2.83 (3H, m) , 2.02 - 2.28 (3H, m) , 1.09 - 1.30 (2H, m) , 0.83 - 1.08 (14H, m) .
Ejemplo 37 ( (13) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -IH-bencimidazol -5 -il ) -2- ¦ quinoxalinil-lH-bencimidazol-2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 2, 6 -bis (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) quinoxalina (28 mg) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (11.5 mg, 0.066 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.045 mi, 0.26 mmol) se añadió HATU (25 mg, 0.066 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con eOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (2S, 2 ' S) -1.1 ' -( (IR, 1 'R, 3S, 3 'S, 5R, 5 'R) -3, 3' - (6, 6' - (quinoxalin-2 , 6-diil) bis ( ??-benzo [d] imidazol-6 , 2-diyl) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil) ) bis (3-metil-l-oxobutan-2 , 1-diil ) dicarbamato de dimetilo (27 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.94 min; m/z 839 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de 1H (sal en TFA, 400 MHz , MeOD) d ppm 9.56 (s, 1H) , 8.67 (s, 1H) , 8.52 (d, .7=8.8 Hz , 1H) , 8.40 (s, 1H) , 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.24 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.17 (s, 1H) , 8.05 (d,' J=8.5 Hz, 1H) , 7.93 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 7.90 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 5.30 (app dd, J=9.0, 6.8 Hz, 2H) , 4.60 (app d, J=6.0 Hz, 2H) , 3.93 - 3.84 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.80 - 2.70 (m, 2H) , 2.63 - 2.51 (m, 2H) , 2.29 - 2.09 (m, 4H) , 1.21 - 1.11 (m, 2H) , 1.03 (d, J=6.8 Hz, 6H) , 1.00 - 0.90 (m, 2H) , 0.93 (d, J=6.5 Hz, 6H) . (2, 6-quinoxalindiilbis (lH-bencimidazol-5, 2-diil (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4-il) -2, 1-etanodiil) )) biscarbamato de dimetilo A una solución de una sal en TFA de 2, 6-bis (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol - 6 - il ) quinoxalina (29 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (14.8 rag, 0.068 mmol) en DMF (0.5 ral) y DIPEA (0.046 mi, 0.27 mmol) se añadió HATU (25.9 mg, 0.068 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( 1S , 1 ' S) -2 , 2 ' - ( ( IR, 11 R, 3S , 3 ' S , 5R, 5 ' R) - 3 , 3 ' - ( 6 , 6 ' -(quinoxalin-2 , 6-diil) bis (??-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil) )bis (2-oxo-l- ( tetrahidro-2H-piyran-4-il) etan-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (32.5 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.74 min; m/z 462 [1/2M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de XH (sal en TFA, 400 MHz, MeOD) d ppm 9.53 (s, 1H) , 8.70 (s, 1H) , 8.55 (dd, J=8.8, 1.5 Hz, 1H) , 8.44 (d, .7=1.8 Hz, 1H) , 8.31 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.27 (dd, J=8.8, 1.8 Hz , 1H) , 8.19 (s ancho, 1H) , 8.08 (dd, J=8.8, 1.5 Hz, 1H) , 7.96 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 7.92 (d, J=8.8 Hz , 1H) , 5.28 (app dd, ,7=8.8, 6.8 Hz, 2H) , 4.63 (app d, J=7.3 Hz , 2H) , 3.99 - 3.86 (m, 6H) , 3.69 (s, 6H) , 3.44 - 3.29 (m, 4H) , 2.81 - 2.71 (m, 2H) , 2.63 - 2.52 (m, 2H) , 2.20 - 2.03 (m, 4H) , 1.68 - 1.37 (m, 8H) , 1.17 - 1.08 (m, 2H) , 0.99 - 0.92 (m, 2H) .
Ejemplo 39 (2, 6-quinolindiilbis (lH-bencimidazol -5, 2-diil (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3 , 2-diil ( (1S) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4-il) -2, 1-etanodiil) ) ) biscarbamato de dimetilo A una solución de una sal clorhidrato de 2, 6 -bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) quinolina (26 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (19.4 mg, 0.089 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.061 mi, 0.350 mmol) se añadió HATU (34.0 mg, 0.089 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (1S, l'S) -2,2' - ( (IR, l'R,3S,3 ' S , 5 , 5' ) -3,3' - (6,6' - (quinolin-2, 6-diil)bis (??-benzo [d] imidazol-6, 2-diil) )bis (2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil) )bis (2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piyran-4-il) etan-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (6.0 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.65 min; m/z 462 [1/2M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de ¾ (400 MHz , MeOD) d ppm 8.70 (1H, d, J=8.5 Hz) , 8.57 (1H, s) , 8.23. - 8.45 (5H, m) , 8.17 (1H, s) , 8.01 - 8.12 (1H, m) , 7.88 - 7.97 (2H, m) , 5.27 (2H, t, J=7.8 Hz) , 4.33 - 4.68 (2H, m) , 3.84 - 4.02 (6H, m) , 3.69 (6H, s) , 3.35 - 3.47 (4H, m) , 2.67 - 2.81 (2H, m) , 2.49 - 2.64 (2H, m) , 1.91 - 2.21 (4H, m) , 1.35 - 1.71 (8H, m) , 1.07 - 1.17 (2H, m) , 0.85 -1.00 (2H, m) .
Ejemplo 40 ( (1S) -2- ( (2S) -2- (4cloro-5- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) - 2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran- 4 -il) etil) carbamato de metilo A una solución de 4-cloro-2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -1H-imidazol -5 - il ) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol (20 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (25.6 mg, 0.118 mmol) en DMF (3 mi) y DIEA (0.070 ml , 0.40 mmol) se añadió HATU (45 mg, 0.118 mraol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 ml) y agua (2 ml) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC prep (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 100 tran de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1 %) y después se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de ACN -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S) -2- (4-cloro-5- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1-pirrolidinil ) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran- -il ) etil ) carbamato de metilo (12.9 mg) en forma de un sólido amarillo .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.595 min; m/z 907.39 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ? (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.20 - 8.28 (m, 2H) , 8.09 - 8.12 (m, 1H) , 8.02 - 8.08 (m, 1H) , 7.91 - 8.00 (m, 3H) , 7.87 - 7.91 (m, 2H) , 7.80 - 7.87 (m, 2H) , 5.28 (t, J=7.5 Hz , 1H) , 5.06 - 5.14 (m, 1H) , 4.25 -4.35 (m, 2H) , 4.11 - 4.19 (m, 1H) , 4.00 - 4.07 (m, 1H) , 3.85 - 4.00 (m, 6H) , 3.63 - 3.69 (m, 6H) , 3.32 - 3.43 (m, 4H) , 2.57- 2.64 (m, 1H) , 2.34 - 2.40 (m, 1H) , 2.26 - 2.32 (m, 2H) , 2.12 - 2.25 (m, 4H) , 1.95 - 2.09 (m, 2H) , 1.34 - 1.64( m, 8H) .
Ejemplo 41 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (4- (4-cloro-2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-pirrolidinil) -1H- . imidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1- pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución de 4-cloro-2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol (20 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (20.7 mg, 0.118 mmol) en DMF (3 mi) y DIEA (0.070 ml, 0.40 mmol) se añadió HATU (45 mg, 0.118 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 ml) y agua (2 ml) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC prep (columna aters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1 %) y después se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de ACN -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (4- (4 -cloro-2- ((2S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (3.6 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.715 min; m/z 823.49 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.24 - 8.29 (m, 1H) , 8.22 (s, 1H) , 8.08 - 8.15 (m, 1H) , 8.03 - 8.08 (m, 1H) , 7.81 - 8.01 (m, 7H) , 5.31 (t, J-=7.5 Hz , 1H) , 5.12 (app t, J=7.5 Hz, 1H) , 4.21 - 4.32 (m, 2H) , 4.08 - 4.19 (m, 1H), 3.99 - 4.08 (m, 1H) , 3.85 - 3.96 (m, 2H) , 3.57 -3.74 (m, 6H) , 2.56 - 2.67 (m( 1H) , 2.35 - 2.46 (m, 1H) , 2.28 - 2.35 (m, 2H) , 2.20 - 2.26 (m, 2H) , 2.05 - 2.19 (m, 4H) , 0.90 - 1.09 (m, 12H) .
Ejemplo 42 ( (1S) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (7- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 - il ) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) -1H- nafto [1, 2-d] imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2- oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de 2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -7- (6- (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -??-nafto [1, 2-d] imidazol (45 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (58.8 mg, 0.271 raraol) en DMF (3 ral) y DIEA (0.16 ml , 0.90 mmol) se añadió HATU (103 mg, 0.271 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas . La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (5 ml) y agua (2 ml) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 100 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1%) t, después, se volvió a purificar mediante HPLC (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 0 a 90 % de ACN -Agua + TFA al 0.1 %) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (7- (6- (2- ( (IR, 3S, 5 ) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol-4 -il) -2 -naftil) -??-nafto [1, 2-d] imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (8.7 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.307 min; m/z 897.67 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.51 - 8.57 (m, 2H) , 8.40 (s, 1H) , 8.30 (s, 'lH), 8.23 (d, J=10.1 Hz, 1H) , 8.18 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.05 - 8.15 (m, 3H) , 8.00 (s, 1H) , 7.87 (dd, J=8.6, 1.8 Hz, 1H) , 7.79 - 7.85 (m, 1H) , 5.43 (t, J=7.3 Hz, 1H) , 5.30 (t, J=7.3 Hz, 1H) , 4.28 - 4.40 (m, 2H) , 4.19 (s ancho, 2H) , 3.88 - 4.07 (m, 6H) , 3.70 (d, i7=1.5 Hz, 6H) , 3.26 - 3.45 (traslapado con metanol, m, 4H) , 2.57 - 2.71 (m, 2H) , 2.30 - 2.42 (m, 3H) , 2.20 - 2.29 (m, 3H) , 1.93 - 2.10 (m, 2H) , 1.58 - 1.68 (m, , 2H) , 1.34 -1.58 (m, 6H) .
Ejemplo 43 ( (1S) -2- ( (IR, 3S,5R) -3- (7- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) -1H- nafto [1,2-d] imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -2- oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 2 , 6 -bis (2- ( (S) -pirrolidin-2-il) -??-benzo [d] imidazol-6-il) quinolina (30 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) - 3 -metilbutanoico (11.3 mg, 0.065 ramol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.044 mi, 0.252 mmol) se añadió HATU (24.5 mg, 0.065 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (2S,2,S)-l.l,-((2S,2'S)-2,2'-(6,6'- (quinolin-2 , 6-diil ) bis ( 1H-benzo [d] imidazol-6 , 2-diil) ) bis (pirrolidin-2, 1-diil) )bis(3-metil-l-oxobutan-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (34 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.82 min; m/z 814 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.71 (1H, d, J=8.8 Hz) , 8.57 (1H, s) , 8.21 -8.43 (5H, m) , 8.18 (1H, s) , 8.04 (1H, dd, .7=8.5, 1.5 Hz) , 7.88 - 7.96 (2H, m) , 5.40 (2H, t, J=7.03 Hz) , 4.31 (2H, d, J=6.8 Hz) , 4.09 - 4.21 (2H, m) , 3.91 - 4.06 (2H, m) , 3.68 (6H, s) , 2.58 - 2.73 (2H, m) , 2.20 - 2.49 (6H, m) , 2.02 -2.19 (2H, m) , 0.96 (6H, dd, J=6.8, 1.8 Hz) , 0.90 (6H, dd, J=6.7, 1.6 Hz) .
Ejemplo 44 ( (15) -1- ( ( (IR, 3S, 5R)-3- (5- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil-lH- bencimidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil ) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de 6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -il) -1H- imidazol -4 - il ) naftalen- 2- il ) -2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -il) -1H-benzo [d] imidazol (34 mg) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3metilbutanoico (37.8 mg, 0.216 mmol) y DIEA (0.13 mi, 0.72 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (82 mg, 0.22 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) . Los volátiles se retiraron a vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna aters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 80 % de ACN -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (49.8 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.357 min; m/z 787.65 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con urta columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B , un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) ? ppm 8.29 (d, J=10.7 Hz, 2H) , 8.07 - 8.19 (m, 3H) , 7.94 - 8.05 (m, 3H) , 7.84 - 7.92 (m, 2H) , 5.29 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H) , 5.18 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 4.59 (dd, J=12.4, 6.6 Hz , 2H) , 3.81 - 3.91 (m, 2H) , 3.69 (s, 6H) , 2.67 - 2.80 (m, 2H) , 2.48 -2.61 (m, 2H) , 2.07 - 2.27 (m, 4H) , 1.09 - 1.19 (m, 2H) , 0.99 - 1.06 (m, 6H) , 0.88 - 1.00 (m, 8H) .
Ejemplo 45 C (1S) -2- ( (IR, 3S,5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R, 33, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 ^azabiciclo [3.1.0] hex-3 -il) - lH-bencimidazol -5-il) -2 -naftil ) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de 6- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3 - il ) -1H- imidazol-4 -il ) naftalen-2-il) -2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 - il) -1H-benzo [d] imidazol (34 mg) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (46.9 mg, 0.216 mmol) y DIEA (0.13 mi, 0.72 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (82 mg, 0.216 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) . Los volátiles se retiraron a vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna aters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 80 % de ACN -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il-2-oxo-l-(tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (38 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.240 min; m/z 871.66 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H NMR (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.30 (d, J=6.1 Hz, 2H) , 8.08 - 8.18 (m, 3H) , 8.04 (dd, J=8.6, 1.5 Hz, 1H) , 7.95 - 8.01 (m, 2H) , 7.85 - 7.92 (m, 2H) , 5.27 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H) , 5.16 (dd, J=9.2, 7.0 Hz , 1H) ., 4.59 - 4.66 (m, 2H) , 3.84 - 4.01 (m, 6H) , 3.70 (s, 6H) , 3.35 - 3.45 (m, 4H) , 2.69 - 2.80 (m, 2H) , 2.48 - 2.61 (m, 2H) , 2.03 - 2.20 (m, 4H) , 1.57 - 1.65 (m, 2H) , 1.40 - 1.56 (m, 6H), 1.07 - 1.17 (m, 2H) , 0.97 (s ancho, 1H) , 0.91 (s ancho, 1H) .
Ejemplo 46 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2,2'- binaftalen-6-il) -lH-bencimidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 6, 6' -bis (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-5-il) -2 , 2 ' -binaftilo (22 mg) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (10.5 mg, 0.060 mmol) y DIEA (0.035 mi, 0.20 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (22.7 mg, 0.060 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) y los volátiles se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (columna Waters Sunfire C18 de 30 X 100 mm de 5u eluida con un gradiente de 10 a 80 % de MeOH -Agua + TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6 ' - (2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3- metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2 , 2 ' -binaftalen-6-il) -lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (15.6 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.765 min; m/z 482.68 [1/2M+H+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICRO ASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.36 (s, 2H) , 8.27 (s, 2H) , 8.12 - 8.18 (m, 4H) , 8.11 (s, 2H) , 8.05 (app t, J-=8.6 Hz, 4H) , 7.91 - 7.96 (m, 2H) , 7.86 -7.91 (m, 2H) , 5.29 (dd, J=9.2, 6.7 Hz , 2H) , 4.61 (d, .7=6.4 Hz, 2H) , 3.85 - 3.91 (m, 2H) , 3.70 (s, 6H) , 2.72 - 2.80 (m, 2H) , 2.53 - 2.62 (m, 2H) , 2.12 - 2.26 (m, 4H) , 1.13 - 1.21 (m, 2H) , 1.04 (d, J=6.7 Hz, 6H) , 0.99 (s ancho, 2H) , 0.95 (d, J=6.7 Hz, 6H) .
Ejemplo 47 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -IH-bencimidazol -5 -il ) -1,5- naftiridin-2 -il- IH-bencimidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex- 2 - il ) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 2,6-bis(2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6 -il) 1, 5 -naftiridina (12 mg, 9.93 µp???) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (4.2 mg) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.017 mi, 0.099 mmol) se añadió HATU (8.7 mg, 0.023 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (2S, 2 (S) -1.11 - ( (IR, l'R, 3S, 3 ' S, 5R, 5 'R) -3, 3' - (6, 6' - (1, 5- naftiridin-2 , 6-diil) bis (??-benzo [d] imidazol-6 , 2-diyl) ) bis (2 - azabiciclo [3.1.0] hexan-3 ,2-diil) )bis (3-metil-l-oxobutan-2 , 1- diil ) dicarbamato de dimetilo (5.6 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.91 min; m/z 420 [1/2M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.59 - 8.67 (4H, m) , 8.48 (2H, dd, J=8.8, 1.3 Hz), 8.44 (2H, d, J=8.8 Hz) , 7.92 (2H, d, J=8.5 Hz) , 5.29 (2H, dd, J=9.2 , 6.7 Hz) , 4.60 (2H, d, J"=6.5 Hz) , 3.84 - 3.92 (2H, m) , 3.68 (6H, s) , 2.69 - 2.80 (2H, m) , 2.51 - 2.62 (2H, m) , 2.07 - 2.27 (4H, m) , 1.10 - 1.21 (2H, m) , 1.02 (6H, d, J=6.8 Hz) , 0.95 - 1.00 (2H, m) , 0.93 (6H, d( J=6.8 Hz) . (1, 5-na.ftiridin.-2, 6-diilbis (lH-bencimidazol-5, 2- diil (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-3 , 2-diil ( (1S) -2-oxo- 1- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) -2, 1-etanodiil) ) ) biscarbamato de dimetilo A una solución de una sal en TFA de 2,6-bis(2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3- il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) -1, 5-naftiridina (12 mg) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran- - il ) acético (5.0 mg, 0.023 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.016 mi, 0.089 mmol) se añadió HATU (8.68 mg, 0.023 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( 1S , 1 ' S ) - 2 , 2 ' - ( ( IR, 1 ' R, 3S , 3 ' S , 5R, 5 ' R) - 3 , 3 ' - ( 6 , 6 ' -(1, 5-naftiridin-2 , 6-diil) bis (??-benzo [d] imidazol-6, 2-diil) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 , 2-diil) ) bis (2-oxo-l-(tetrahidro-2H-piyran-4-il) etan-2 , 1-diil) dicarbamato de dimetilo (11 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.73 min; m/ z 462 [1/2M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.61 -8.68 (4H, m) , 8.50 (2H, dd , J=8.8, 1.51 Hz), 8.45 (2H, d, J=8.8 Hz) , 7.93 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.28 (2H, dd, J=9.3, 6.8 Hz) , 4.64 (2H, d, J=7.5 Hz), 3.84 - 4.02 (6H, m) , 3.69 (6H, s), 3.35 - 3.46 (4H, m) , 2.75 (2H, dd, J=13.7, 9.2 Hz), 2.58 (2H, d, J=6.8 Hz) , 1.99 -2.22 (4H, m) , 1.36 - 1.69 (8H, m) , 1.07 - 1.19 (2H, m) , 0.96 (2H, m) .
C (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-chloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) - 2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -5-il) -2-naftíl) -1H- bencimidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil ) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución de 2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -4 -cloro- lH-imidazol -5-il) -2-naftil ) - lH-bencimidazol (34 mg) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3metilbutanoico (35.2 mg, 0.201 mmol) y DIEA (0.12 mi, 0.67 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (76 mg, 0.20 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) y el componente volátil se retiró a vacío. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (agua/metanol/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo (41.3 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.717 min; m/z 821.58 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 rara usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.24 (d, J=1.8 Hz, 2H) , 8.01 - 8.13 (m, 4H) , 7.84 - 7.98 (m, 3H) , 5.29 (dd, J"=9.2, 6.7 Hz , 1H) , 5.09 (t, J=l .2 Hz ,. 1H) , 4.60 (t, J=7.2 Hz, 2H) , 3.86 - 3.91 (m, 1H) , 3.71 - 3.76 (m, 1H) , 3.69 (s, 3H) , 3.68 (m, 3H) , 2.77 (dd, .7=13.6, 9.3 Hz, 1H) , 2.57 (ddd, .7=13.6, 6.7, 6.6 Hz, 1H) , 2.44 -2.53 (m, 2H) , 2.11 - 2.26 (m, 3H) , 1.99 - 2.10 (m, 1H) , 1.10 - 1.22 (m, 2H) , 0.89 - 1.09 (m, 13H) , 0.80 - 0.84 (m, 1H) .
Ejemplo 50 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- (2- ((IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol -5-il ) -2-naftil ) - 1H-imidazol -2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de 2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -5-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -4-cloro-lH-imidazol-5-il) -2-naftil ) - lH-bencimidazol (20 rag, 0.039 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (25.7 mg) y DIEA (0.069 mi, 0.39 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (45.0 mg, 0.118 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) y el componente volátil se retiró a vacío. El residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol , TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5-(6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2-naftil) - 1H- imidazol -2 - il ) -2- azabiciclo[3.1.0] hex-2 - il-2 -oxo- 1 - ( tetrahidro-2H-piran-4 -il) etil) carbamato de metilo (28.1 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 1.597 min; m/z 905.67 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.24 (s, 2H) , 8.02 - 8.13 (m, 4H) , 7.86 - 7.97 (m, 3H) , 5.27 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 5.08 (t, J=7.2 Hz , 1H) , 4.65 (t, .7=7.3 Hz, 2H) , 3.88 - 4.02 (m, 5H) , 3.75 - 3.83 (m, 1H) , 3.70 (s, 3H) , 3.68 (s, 3H) , 3.36 - 3.49 (m, 4H) , 2.77 (dd, 47=13.7, 9.5 Hz, 1H) , 2.57 (ddd, J=13.7, 6.7, 6.4 Hz, 1H) , 2.46 - 2.53 (m, 2H) , 2.00 - 2.20 (m, 4H) , 1.55 - 1.69 (m, 4H) , 1.40 - 1.70 (m, 4H) , 1.08 - 1.20 (m, 2H) , 0.94 -1.00 (m, 1H) , 0.80 - 0.84 (m, 1H) .
Ejemplo 51 ( (1S) -1- ( ( (1S, 3R, 5S) -3- (4- (6- (3- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-i idazol-4-il) fenil) -2-naftil) - lH-ímidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de ( IR, 3S , 5R) -3 - (4 -(3- (6- (2- ( (1S, 3R, 5S) -2 -azabiciclo [3.1.0 ] hex- 3 - il ) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (40 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (22 mg, 0.13 mmol) y DIEA (0.073 mi, 0.42 mmol) en DMF (3 mi) se añadió HATU (47.8 mg, 0.126 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con metanol (2 mi) y agua (2 mi) y el componente volátil se retiró a vacío. El residuo se purificó parcialmente mediante HPLC de fase inversa (agua/metanol , TFA al 0.1%) y después se volvió a purificar mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo, TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (1S, 3R, 5S) -3- (4- (6- (3- (2- ( (IR, 3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (45 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 1.458 min; m/z 813.30 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue agua al 10%/metanol al 90%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (d, J=4.6 Hz, 2H) , 8.18 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.9 Hz , 1H) , 8.10 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 7.98 - 8.02 (m, 2H) , 7.98 (s, 1H) , 7.93 (d, J=8.2 Hz, 1H) , 7.88 (dd, J=8.7, 1.7 Hz , 1H) , 7.77 (d, J=8.2 Hz, 1H) , 7.69 (t, J=7.8 Hz, 1H) , 5.13 - 5.20 (m, 2H) , 4.57 (t, J=6.1 Hz, 2H) , 3.80 - 3.88 (m, 2H) , 3.69 (d, J=6.1 Hz, 6H) , 2.67 - 2.77 (m, 2H) , 2.51 (de, J=13.7, 6.8 Hz , 2H) , 2.15 - 2.25 (m, 2H) , 2.10 (de, J=13.8, 6.8 Hz, 2H) , 1.08 - 1.18 (m, 2H) , 1.03 (dd, J=6.7, 4.6 Hz , 6H) , 0.95 (dd, J=6.7, 3.4 Hz, 6H) , 0.92 (dd, J=5.3, 2.0 Hz, 2H) .
Ejemplo 52 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-bencimidazol -5-il) -2- quinoxalinil -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -6-metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 2- (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol -6 -il) -6- (2- ( (IR, 3S( 5R) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3 - il ) - 1H- imidazol - 5 - il ) quinoxalina ( 14 mg, 0.015 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (6.1 mg) en D F (0.5 mi) y DIPEA (0.024 mi, 0.135 mmol) se añadió HATU (13.16 mg, 0.035 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-benzimidazol-5-il) -6-quinoxalinil ) - 1H- imidazol - 2 - il ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (11.8 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.77 min; m/z 789 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . MN de XH (400 MHz , MeOD) d ppm 9.59 (s, 1H) , 8.67 (s, 1H) , 8.51 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.46 (d, J=1.8 Hz, 1H) , 8.27 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.19 (dd, J=8.8, 2.0 Hz, 1H) , 8.11 (s, 1H) , 7.92 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 5.29 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H) , 5.17 (dd, .7=9.2, 7.2 Hz, 1H) , 4.58 (dd, J=13.2, 6.7 Hz, 2H) , 3.78 - 3.92 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.67 - 2.79 (m, 2H) , 2.45 - 2.62 (m, 2H) , 2.03 - 2.27 (m, 4H) , 1.07 - 1.21 (m, 2H) , 1.03 (d, J=6.8 Hz, 6H) , 0.93 - 1.00 (m, 2H) , 0.93 (dd, J=6.3, 5.8 Hz, 6H) .
Ejemplo 53 ( (1S) -2- ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) ( (metoxicarbon.il) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -6-quinoxalinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) - 6-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 2- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) -6 - (2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) quinoxalina (16 mg) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -2 -tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (8.6 mg, 0.040 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.027 mi, 0.16 mmol) se añadió HATU (15.0 mg, 0.040 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de NH40Ac 100 Mm) para dar ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-benzimidazol-5-il) -6-quinoxalinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (14.5 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.58 min; m/z 873 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220) . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 9.34 (s, 1H), 8.36 (s, 1H) , 8.28 (d, .7=1.0 Hz, 1H) , 8.08 - 8.19 (m, 2H) , 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 7.66 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 7.54 (s, 1H) , 5.27 (t, J=6.9 Hz, 1H) , 5.18 (dd, J=8.9, 4.9 Hz, 1H) , 4.69 (d, J=5.5 Hz , 2H) , 3.87 - 4.03 (m, 4H) , 3.73 - 3.85 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.32 -.3.47 (m, 4H) , 2.50 - 2.61 (m, 3H) , 2.40 - 2.49 (m, 1H) , 1.99 - 2.16 (m, 4H) , 1.51 - 1.72 (m, 6H) , 1.38 - 1.51 (m, 2H) , 1.09 - 1.22 (m, 2H) , 0.76 - 0.92 (m, 2H) .
Ejemplo 54 ((1S) -2- ( ( (IR, 3S,5R) -3- (5- (6- (2-chloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) -1H- bencimidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo A una solución de (S) -1- ( (IR, 3?, 5R) -3- (5- (6- (2- (. (IR, 3S, 5R) -2-azabicyclo [3.1.0] hexan-3 -i1) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) naphthalen-2 - il ) -lH-imidazol-2-il) -2- azabicyclo [3.1.0] hexan-2-il) -3 -methyl-l-oxobutan-2- ilcarbamate de metilo (130 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (90 mg, 0.41 mmol) y DIEA (0.36 ml, 2.1 mmol) en DMF (4 ml)se añadió HATU (157 mg, 0.413 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 ml) y agua (2 ml) . Los volátiles se retiraron a vacío. El material se purificó mediante HPLC en fase inversa (agua/metanol/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (194 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.307 min; m/z 829.27 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , eOD) d ppm 8.31 (s, 1H) , 8.29 (s, 1H) , 8.16 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.11 (d, J = 0.9 Hz, 1H) , 8.11 (d, J" = 8.9 Hz, 1H) , 8.02 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H) , 8.00 (s, 1H) , 7.98 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H) , 7.89 (d, J" = 8.5 Hz, 1H) , 7.88 (dd, J = 8.5, 1.8 Hz, 1H) , 5.27 (dd, J=9.2, 6.7 Hz, 1H) , 5.18 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 4.62 - 4.67 (m, 1H) , 4.58 (d, J=6.4 Hz, 1H) , 3.87 - 4.01 (m, 3H) , 3.82 - 3.87 (m, 1H) , 3.70 (m, 6H) , 3.36 - 3.44 (m, 2H) , 2.74 (td, J=13.3, 9.5 Hz , 2H) , 2.48 - 2.62 (m, 2H) , 2.04 - 2.24 (m, 4H) , 1.40 - 1.60 (m, 4H) , 1.09 - 1.19 (m, 2H) , 1.04 (d, J=6.7 Hz , 3H) , 0.89 - 0.99 (m, 5H) .
Ejemplo 55 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (5- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil ) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) -1H- bencimidazol -2 -i1 ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una solución de (S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-6-il) naf alen-2 -il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 - il ) etilcarbamato de metilo (118 mg) , ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (46.2 mg, 0.263 mmol) y DIEA (0.31 ral, 1.8 mmol) en DMF (4 mi) se añadió HATU (100 mg, 0.263 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 mi) y agua (2 mi) . Los volátiles se retiraron a vacío usando un rotavap y el residuo se purificó en HPLC de fase inversa (agua/metanol, TFA al 01.%) para dar una sal en TFA de ((1S)- 1- (((lR,3S,5R)-3-(5-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) -1H-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (55.3 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 1.320 min; m/z 829.42 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.31 (s, 1H) 8.29 (s, 1H) , 8.08 - 8.18 (m, 3H) , 8.04 (dd, J=8.9, 1.5 Hz, 1H) , 7.95 - 8.00 (m, 2H) , 7.90 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.87 (dd, J"=8.6, 1.8 Hz, 1H) , 5.29 (dd, J=9.3, 6.9 Hz, 1H) , 5.17 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 4.62 (dd, J=9.2, 7.3 Hz, 2H) , 3.96 (td, ^=10.8, 2.9 Hz, 2H) , 3.83 - 3.92 (m, 2H) , 3.64 - 3.77 (m, 6H) , 3.35 -3.46 (m, 2H) , 2.74 (ddd, J=19.3, 13.5, 9.3 Hz, 2H) , 2.48 -2.62 (m, 2H) , 2.06 - 2.26 (m, 4H) , 1.45 - 1.63 (m, 4H) , 1.06 - 1.22 (m, 2H) , 1.03 (d, J=6.7 Hz, 3H) , 0.96 - 1.01 (m, 1H) , 0.93 (d, J=6.7 Hz, 3H) , 0.88 - 0.91 (m, 1H) .
Ejemplo 56 ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-cloro-2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) - 2- ( (metoxicarbonil ) amino) - 3 -metilbutanoil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -5-il) -2-naftil) -1H- bencimidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo A una solución de ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2-chloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4- il) -2-naftil) -lH-bencimidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo (93 mg) en DMF se añadió NCS (14.98 mg, 0.112 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C (temperatura del baño de aceite) durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se purificó mediante HPLC en fase inversa (agua/metanol/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( ( 1S) -2 - ( ( ( IR, 3S , 5R) -3 - ( 5-(6- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) -2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 - il ) etil) carbamato de metilo (102.8 mg) .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.648 min; m/z 863.32 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . R N de ?? (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.22 (s ancho, 2H) , 8.10 (s, 1H) , 8.00 - 8.06 (m, 3H) , 7.85 - 7.94 (m, 3H) , 5.28 (dd, J=9.2, 7.0 Hz , 1H) , 5.09 (t, J=7.2 Hz, 1H) , 4.65 (d, J=l .3 Hz , 1H) , 4.59 (d, J=7.0 Hz, 1H) , 3.89 - 3.99 (m, 3H) , 3.66 - 3.77 (m, 7H) , 3.35 - 3.44 (m, 2H) , 2.77 (dd, J=13.6, 9.3 Hz, 1H) , 2.57 (ddd, J"=13.8, 6.8, 6.6 Hz, 1H) , 2.47 - 2.52 (m, 2H) , 2.02 - 2.22 (m, 4H) , 1.44 - 1.63 (m, 4H) , 1.13 (dt, J=8.6, 5.8 Hz, 2H) , 1.05 (d, J=7.0 Hz, 3H) , 0.92 - 1.02 (m, 4H) , 0.83 (d, .7=1.8 Hz, 1H) .
Ejemplo 57 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (5- (6- (4-cloro-2- ((1R,3S,5R) -2- ( (2S) - 2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) -2- naftil) -lH-bencimidazol -2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) - lH-benzimidazol -2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (64 mg) en DMF (2 mi) se añadió NCS (10.31 mg, 0.077 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50°C durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se purificó en HPLC de fase inversa (agua/metanol , TFA al 01.%) y se volvió a purificar en HPLC de fase inversa (agua/ACN/TFA al 0.1%) para dar la sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-cloro-2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-imidazol-5-il) -2-naftil) -lH-benzimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (44.7 mg) en forma de un sólido pardo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.63 min; m/z 863.39 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue agua al 10%/ metanol al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.24 (s ancho, 2H) , 8.02 - 8.12 (m, 4H) , 7.86 - 7.95 (m, 3H) , 5.28 (dd, J=9.2, 6.7 Hz , 1H) , 5.08 (t aparente, .7=7.0 Hz, 1H) , 4.65 (d, J=7.6 Hz, 1H) , 4.60 (d, J=6.7 Hz , 1H) , 3.93 - 4.01 (m, 2H) , 3.86 - 3.91 (m, 1H) , 3.75 - 3.81 (m, 1H) , 3.65 - 3.74 (m, 6H) , 3.36 - 3.46 (m, 2H) , 2.77 (dd, J=13.7, 9.2 Hz, 1H) , 2.57 (ddd, J=13.7, 6.7, 6.4 Hz, 1H) , 2.49 (dd, -7=7.8, 3.2 Hz, 2H) , 2.12 - 2.25 .(m, 2H) , 2.00 - 2.12 (m, 2H) , 1.54 - 1.67 (m, 3H) , 1.41 - 1.51 (m, 1H) , 1.09 - 1.19 (m, 2H) , 0.97 - 1.06 (ra, 4H) , 0.94 (d, J=6.7 Hz, 3H) , 0.82 (s ancho, 1H) .
Ejemplo 58 ( (1S) -2- ( (1R, 3S,5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R, 3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -6- quinoxalinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) - 6-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 6 - (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- benzo [d] imidazol-6-il) -6-(2-((lR,3S,5R)-2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) quinoxalina (6.0 mg) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2 -tetrahidro-2H- piran-4-il) acético (3.2 mg) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (10.13 µ?, 0.058 mmol) se añadió HATU (5.64 mg, 0.015 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se retiró y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarboni1) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-bencimidazol-5-il) -2-quinoxalinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) etil ) carbamato de metilo (5.5 mg) en forma de un sólido amarillo .
Tiempo de retención en la CL-EM 1.60 min; m/z 873 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 95%/metanol al 5%/acetato amónico 10 mM. solvente B = agua al 5%/metanol al 95%/acetato amónico 10 mM. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final 100, Tiempo de gradiente = 2 min. Longitud de onda = 220) . RMN de XH (400 MHz , MeOD) d ppm 9.42 (s, 1H) , 8.41-8.50 (m, 2H) , 8.30 (d, J=1.3 Hz, 2H) , 8.19 (d, J=1.0 Hz , 1H) , 8.07 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1H) , 7.92 (d, J"=8.5 Hz , 1H) , 5.13-5.33 (m, 3H) , 4.57-4.70 (m, 1H) , 3.81-4.04 (m, 6H) , 3.62-3.77 (m, 6H) , 3.34-3.46 (m, 4H) , 2.65-2.82 (m, 2H) , 2.45-2.61 (m, 2H) , 2.01-2.22 (m, 4H) , 1.40 - 1.65 (m, 8H) , 1.03-1.17 (m, 2H) , 0.83-0.98 (m, 2H) .
Ejemplo 59 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ((1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-bencimidazol-5-il) -2- quinoxalin.il) -lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de 6- (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0 ] hexan- 3 - il ) -1H-benzo [d] imidazol - 6 - il ) -2-(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo[3.1.0] hexan- 3 -il) -lH-imidazol-5-il) quinoxalina (6.0 mg) y ácido (S ) - 2 - (metoxicarbonilamino) - 3 -metilbutanoico (2.60 mg, 0.015 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (10.13 µ? , 0.058 mmol) se añadió HATU (5.64 mg, 0.015 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se retiró y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4 - (6 - (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarboni 1 ) amino) - 3 -met i lbutanoil ) - 2 -azabiciclo[3.1.0] hex- 3 - il ) - ??-benc imidazol -5-il) -2-quinoxal inil ) - 1H- imidazol - 2 - il ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (3.6 mg) en forma de un sólido amarillo.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.75 rain; m/z 789 [M+H] + . (Columna PHENOMENEX® Luna de 3.0 x 50mm S10, solvente A = agua al 90%: metanol al 10%: TFA al 0.1%. solvente B = agua al 10% : metanol al 90%: TFA al 0.1%. Velocidad de flujo = 4 ml/min. % B Inicial = 0, % B Final = 100, Tiempo de gradiente = 3 min. Longitud de onda = 220). RMN de XH (400 MHz , MeOD) d ppm 9.42 (s, 1H) , 8.41 - 8.48 (m, 2H) , 8.30 (d, J=1.3 Hz, 2H) , 8.18 (d, J=1.0 Hz, 1H) , 8.06 (dd, J=8.7, 1.6 Hz , 1H) , 7.92 (d, J"=8.5 Hz, 1H) , 5.24 - 5.33 (m, 1H) , 5.16 - 5.24 (m, 1H) , 4.52 - 4.63 (m, 2H) , 3.78 - 3.91 (m, 2H) , 3.68 (d, J=1.0 Hz, 6H) , 2.65 - 2.79 (m, 2H) , 2.46 - 2.61 (m, 2H) , 2.05 -2.26 (m, 4H) , 1.07 - 1.20 (m, 2H) , 0.99 - 1.06 (m, 6H) , 0.94 - 1.01 (m, 2H) , 0.92 (dd, J"=6.8, 3.3 Hz , 6H) .
Ejemplo 60 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (4- ( (4- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3- metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3 -il) - 1H- imidazol - 5-il) fenil) etinil) fenil) -1H- imidazol -2 -il) -2- az [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo ; ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) 2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2 -il ) carbonil ) 2- metilpropil ) carbamato de metilo Ejemplo 63 ((1S) -1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (4-cloro-2- ((1R,3S,5R) - 2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-naftil) - lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2 -il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6-(2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3 - il ) - 1H- imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol -2 -il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (79 mg) en DMF (2 mi) a temperatura ambiente se añadió NCS (13.0 mg, 0.097 mmol) y la mezcla se calentó a 50°C durante 16 horas. El producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa (TFA) usando una columna aters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 30 a 90 % de MeOH -agua +TFA al 0.1% para dar una sal en TFA de ( ( 1S) - 1 - ( ( ( IR, 3S , 5R) - 3 - (4 -cloro-5- (6- (4- (4 -cloro- 2- ( ( IR, 3S , 5R) -2 - ( ( 2S) -2 -( (metoxícarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (20.2 mg) en forma de un sólido amarilla y una mezcla de dos productos monocloruro que se separaron mediante SFC en una columna CHIRALPAK® IB y después se volvió a purificar individualmente mediante HPLC preparativa (TFA) usando una columna Waters Sunfire C18 de 30 X 150 mm de 5u eluida con un gradiente de 25 a 100 % MeOH -Agua + TFA al 0.1% para dar un TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) - 3- (4 -cloro- 5- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (11.1 mg) en forma de un sólido amarillo y una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4 -cloro- 5- (6-(4-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (11.4 mg) en forma de un sólido amarillo.
Para el Ejemplo 60: Tiempo de retención en la CL-EM 2.133 min; m/z 883.35 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, €18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.22 (s, 2H) , 8.07 (d, J=8.5 Hz , 1H) , 8.03 (d, J=8.9 Hz , 1H) , 7.83 - 7.95 (m, .6H) , 5.08 (td, J=9.1, 6.0 Hz, 2H) , 4.59 (dd, J=6.7, 1.8 Hz, 2H) , 3.71 - 3.79 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.44 -2.57 (m, 4H) , 2.13 - 2.25 (m, 2H) , 2.00 - 2.10 (m, 2H) , 1.09 - 1.16 (m, 2H) , 1.05 (dd, ,7=6.7, 1.5 Hz, 6H) , 0.91 - 1.02 (m, 6H) , 0.79 - 0.87 (m, 2H) .
Para el Ejemplo 62: Tiempo de retención en la CL-EM 1.745 min; m/z 847.33 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H20 al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.23 (s, 2H) , 8.02 - 8.09 (m, 2H) , 7.98 (d, J=8.2 Hz , 2H) , 7.89 - 7.94 (m, 3H) , 7.86 (d, J=8.6 Hz, 2H) , 5.15 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1H) , 5.09 (t, J=7.0 Hz, 1H) , 4.58 (t, J=6.7 Hz, 2H) , 3.84 (t, «7=4.7 Hz, 1H) , 3.71 - 3.77 (m, 1H) , 3.69 (d, J=3.1 Hz, 6H) , 2.72 (dd, J=13.7, 9.5 Hz, 1H) , 2.45 - 2.54 (m, 3H) , 2.14 - 2.24 (m, 2H) , 2.00 - 2.14 (m, 2H) , 1.09 - 1.18 (m, 2H) , .1.00 - 1.08 (m, 6H) , 0.96 (t, J=7.6 Hz , 6H) , 0.92 (s ancho, 1H) , 0.83 (s ancho, 1H) .
Para el Ejemplo 63: Tiempo de retención en la CL-EM 1.753 min; m/z 847.32 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna Waters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.26 (d, J=7.0 Hz, 2H) , 8.13 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.04 - 8.10 (m, 1H) , 7.95 - 8.01 (m, 2H) , 7.89 - 7.95 (m, 2H) , 7.82 -7.89 (m, 3H) , 5.17 (dd, <J=9.2, 7.0 Hz , 1H) , 5.07 (t, J=7.2 Hz, 1H) , 4.58 (d, .7=6.4 Hz, 2H) , 3.81 - 3.88 (m, 1H) , 3.71 -3.76 (m, 1H) , 3.69 (d, J=4.6 Hz , 6H) , 2.73 (dd, J=13.4, 9.5 Hz, 1H) , 2.44 - 2.56 (m, 3H) , 2.14 - 2.25 (m, 2H) , 2.08 -2.14 (m, 1H) , 1.09 - 1.18 (m, 2H, ) 1.00 - 1.08 (m, 6H) , 0.96 (t, J=6.4 Hz, 6H) , 0.92 (s ancho, 1H) 0.78 - 0.85 (m, 1H) .
Ejemplo 61 ( (1S) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) 2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo La reacción del intermediario 105 y el adecuado ácido borónico (preparado de forma similar al intermediario 66 usando los materiales de partida adecuados) mediante una reacción de acoplamiento similar a la preparación del intermediario 106 dio una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (91 mg) en forma de un sólido amarillo claro.
Tiempo de retención en la CL-EM 1.362 min; m/z 855.31 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna aters Sunfire, de 5 u, C18, de 4.6 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis con una longitud de onda del detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 10%/H2O al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue H20 al 10%/MeOH al 90%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.29 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.09 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.01 - 7.94 (m, 4H) , 7.93 - 7.91 (m, 1H) , 7.90 - 7.83 (m, 3H.) , 5.19 - 5.12 (m, 2H) , 4.62 (d, J= 7.6 Hz, 1H) , 4.58 (d, J= 6.4 Hz, 1H) , 3.99 - 3.91 (m, 2H) , 3.89 - 3.80 (m, 2H) , 3.70 (s, 3H) , 3.69 (s, 3H) , 3.46 - 3.35 (m, 2H) , 2.76 - 2.67 (m, 2H) , 2 57 - 2.46 (m, 2H) , 2.25 - 2.16 (m, 1H) , 2.15 - 2.05 (m, 3H) , 1.65 - 1.40 (m, 4H) , 1.16 - 1.07 (m, 2H) , 1.04 (d, J= 6.7 Hz, 3H) , 0.95 (d, <J= 6.7 Hz, 3H) , 0.93 - 0.87 (m, 2H) .
Esquema de reacción 29 Intermediarlo 116 Intermediario 117 Ejemplos Intermediario 114a 1- (4- (6-ace ilnaftalen-2-il) fenil) etanona Una solución de carbonato sódico (5.43 g, 51.3 mmol) en agua (35 mi) se añadió a una solución agitada de 1-(6-bromonaftalen-2-il) etanona (2.554 g, 10.25 mmol) y ácido 4-acetilfenilborónico (2.017 g, 12.30 mmol) en tolueno (35.0 mi) y etanol (35.0 mi) y se burbujeó nitrógeno a través de la mezcla de reacción durante 15 minutos. Después, se añadió Pd(PPh3) 4 (0.237 g, 0.205 mmol) y la reacción se aclaró con nitrógeno y se calentó a 95 °C en nitrógeno durante 8 horas y después se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró hasta sequedad en alto vacío y después se repartió entre DCM (~ 200 mi) y agua (-150 mi) . La capa orgánica se lavó después con salmuera (~ 100 mi) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró. El residuo se trituró con MeOH (~ 120 mi) y los sólidos restantes se redisolvieron en DCM y se concentraron hasta sequedad (-2.7 g de sólido naranja) . Este material se disolvió en EtOAc caliente (80 mi) y se dejó enfriar. Los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración y se aclararon con Et20 para dar l-(4-(6-acetilnaftalen-2-il) fenil) etanona (1.84 g) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.443 min; m/z 288.98 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XH (400 MHz, CLOROFORMO- d) d ppm 8.51 (s, 1 H) , 8.05 - 8.16 (m, 5 H) , 7.98 (d, J-=8.8 Hz, 1 H) , 7.81 - 7.88 (m, 3 H) , 2.76 (s, 3 H) , 2.68 (s, 3 H) .
Intermediario 114b 2 -bromo-1 - (4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona Una solución de bromo (0.669 mi, 13.0 mmol) en DCM (10 mi) se añadió a una solución agitada de l-(4-(6-acetilnaftalen-2-il) fenil) etanona (1.827 g, 6.34 mmol) en DCM (30 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (-20 mi) y se concentró hasta sequedad para dar 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil ) naftalen-2 - il ) fenil ) etanona (2.83 g) que .se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.708 min; m/z 446.71 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz , CLOROFORMO- d) d ppm 8.57 (s, 1 H) , 8.07 -8.17 (m, 5 H) , 8.02 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.88 (d, J=8.8 Hz, 3 H) , 4.60 (s, 2 H) , 4.51 (s, 2 H) .
Intermediario 115 5-metilpirrolidin-l , 2-dicarbox.ilato de (2S, 5S) -2- (2- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1 - (terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin- - carboniloxi) acetil) naftalen-2-il) fenil) -2-oxoetil) 1-terc- butilo A una suspensión espesa agitada de 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona (1.42 g, 3.17 mmol) y ácido (2S, 5S) -1- ( terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2-carboxílico (1.45 g, 6.34 mmol) en acetonitrilo (60 mi) se añadió Base de Hunig (1.662 mi, 9.52 mmol) . La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 día (lentamente se convirtió en transparente) y la solución naranja transparente se concentró y se purificó en una columna BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, 30 - 40% de EtOAc/hexanos) para dar 5-metilpirrolidin-l, 2 -dicarboxilato de (2S,5S)-2-(2-(4-(6-(2-((2S,5S)-l- ( terc-butoxicarbonil ) -5-met i lpirrolidin- 2 -carboniloxi) acetil) naftalen-2-il) fenil) -2-oxoetil) 1- ere-butilo (1.81 g) en forma de una espuma solidificada blancuzca. Tiempo de retención en la CL-EM 3.126 min; m/z 765.87 (M+Na) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ?? NMR (400 MHz , CLOROFORMO- d) d ppm 8.48 (s, 1 H) , 8.13 (s, 1 H) , 7.99 - 8.11 (m, 5 H) , 7.86 (d, J=8.3 Hz, 3 H) , 5.24 - 5.76 (m, 4 H) , 4.41 - 4.59 (m, 2 H) , 3.93 - 4.11 (m, 2 H) , 2.28 - 2.42 (m, 4 H) , 2.11 (br, s, 2 H) , 1.77 (s ancho, 2 H) , 1.49 (s ancho, 9 H) , 1.48 (s ancho, 9 H) , 1.35 (br, s, 6 H) .
Intermediario 116 (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- (terc-butoxicarbonil) -5- metil -2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidincarboxilato de terc-butilo A una solución agitada de 5-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2 -carboniloxi ) acetil) naftalen-2 - il ) fenil) -2 -oxoetil) 1- terc-butilo (1.81 g, 2.437 mmol) en tolueno (40 mi) se añadió acetato amónico (3.76 g, 48.7 mmol) y la suspensión espesa se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos antes de calentar a 100°C durante 12 horas. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se concentró hasta sequedad y el residuo se repartió entre (-150 mi) y 1/2 NaHC03 sat . (ac) (-150 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera (-100 mi), se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta una espuma marrón solidificada que se purificó en BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, 1,5-3% de MeOH/DCM) para dar (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- (tert-butoxicarbonil) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidincarboxilato de terc-butilo (1.46 g) en forma de una espuma solidificada amarillo-naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 2.92 min; m/z 703.32 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 117 2- ( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,5S) -5- metil -2 -pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2 -naftil ) fenil ) -1H- imidazol A una solución agitada de (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2 ( (2S,5S) -1- ( tere-butoxicarbonil ) -5 -metil -2 -pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidincarboxilato de terc-butilo (228 mg, 0.324 mmol) en DCE (6 mi) se añadió, gota a gota, TFA (0.500 mi, 6.49 mmol). Durante la adición se formó un precipitado que dificultó la agitación. Se añadió DCM (~ 10 mi) y la suspensión espesa se agitó mientras se añadía el TFA restante. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, se añadió TFA adicional (-0.5 mi) y la reacción se agitó 3 horas La reacción se concentró para dar una sal en TFA de 2-((2S,5S)-5-metil-2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,5S) -5-metil-2-pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (103 mg, 113 mg, 114 mg) en forma de un sólido naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 2.756 min; m/z 503.14 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 m y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 2H (400 Hz , MeOD) d ppm 8.32 (s, 1 H) , 8.17 (s, 1 H) , 8.01 (app t, J=8.2 Hz, 2 H) , 7.85 - 7.95 (m, 6 H) , 7.80 (s, 1 H) , 7.73 (s, 1 H) , 5.02 (app q, J=8.0 Hz, 2 H) , 3.92 (dddd, J=8.7, 7.0, 6.9, 4.8 Hz, 2 H) , 2.52 - 2.67 (m, 4 H) , 2.38 - 2.49 (m, 2 H) , 1.95 - 2.07 (m, 2 H) , 1.55 (app dd, J=6.7, 4.4 Hz,. 6 H) .
Esquema de reacción 30 Intermediario 118 2-bromo-l- (6-bromonaftalen-2-il) etanona Una solución de bromo (0.682 mi, 13.3 mmol) en DCM (20 mi) se añadió a una solución agitada de l-(6-bromonaftalen-2-il) fenil) etanona (3.30 g, 13.3 mmol) (>90% pureza) en DCM (60 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró para dar 2-bromo-l- (6 -bromonaftalen-2-il) etanona (4.35 g) en forma de un sólido blancuzco que se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.177 min; m/z 342.92 (MNa+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente- B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.49 (s, 1 H) , 8.03 -8.10 (m, 2 H) , 7.86 (d, J=8.5 Hz , 1 H) , 7.85 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.67 (dd, J=8.8, 2.0 Hz , 1 H) , 4.56 (s, 2 H) .
Intermediario 119 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2, 3-dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (6-bromonaftalen-2-il) -2-oxoetil) 2 -tere-butilo A una suspensión agitada de 2 -bromo- 1 - ( 6 -2 -il)etanona (4.35 g, 13.3 mmol) y ácido ( IR, 3S , 5R) -2 - ( terc-butoxicarbon-bromonaftalenil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico bruto (3.01 g, 13.25 mmol) en acetonitrilo (80 mi) se añadió DIPEA (3.47 mi, 19.88 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró hasta sequedad y se purificó mediante BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, 10-20% de EtOAc/hexanos ) . Las fracciones que contenían el producto deseado se dejaron reposar durante 3 días. Algunas fracciones tenían cristales grandes (recogieron 240 mg, producto puro deseado mediante RM de 1H. Todas las fracciones que contenían el producto deseado se recogieron y se concentraron hasta una espuma solidificada amarilla, que se suspendió con Et20 (~ 40 mi) . El sólido blanco que se formó se recogió mediante filtración y se aclaró con Et20 para dar 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- ( 6 -bromonaftalen-2 - il) -2-oxoetil) 2- fcerc-butilo (3.24 g) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.760 min; m/z 472, 474.02 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MIC OMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 mHz, MeOD) d ppm 8.61 (s ancho, 1H) , 8.17 (s, 1H) , 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 8.00 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 7.94 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 7.71 (dd, J = 8.6, 1.8 Hz, 1H) , 5.75 - 5.66 (m, 1H) , 5.61 - 5.46 (m, 1H) , 4.34 - 4.26 (m, 1H) , 3.46 (s ancho, 1H) , 2.69 - 2.59 (m, 1H) , 2.55 - 2.44 (m, 1H) , 1.73 (s ancho, 1H) , 1.54 - 1.43 (m, 9H) , 0.88 (s ancho, 1H) , 0.59 - 0.53 (m, 1H) .
Intermediario 120 3- (5- (6-bromonaftalen-2-il) - 1H-imidazol -2 -il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- ( 2 - ( 6 -bromonaftalen-2 - il ) -2-oxoetil) 2-terc-butilo (3.46 g, 7.28 mmol) y acetato amónico (11.2 g, 146 mmol) se disolvieron en tolueno (100 ml) y se agitaron. Después, la reacción se introdujo en un baño de aceite que se había precalentado hasta 100 °C y se agitó a esa temperatura durante 12 horas. La reacción se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente, se concentró y se repartió entre (-200 ml) y 1/2 NaHC03 sat . (ac) (-150 ml) . La capa orgánica se lavó con salmuera (~ 100 ml) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta una espuma parda solidificada. Este material se purificó en una BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, cargada con DCM, 30-50% de EtOAc/hexanos) para dar (3- (5- (6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de IR, 3S , 5R) - tere-butilo (3.05 g) en forma de una espuma amarilla solidificada. Tiempo de retención en la CL-EM 2.238 min; m/z 452.07, 454.02 (1:1) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, CL0R0F0RM0-d) d ppm 8.14 (s ancho, 1 H) , 7.96 (d, J=1.8 Hz , 1 H) , 7.79 (d, J=9.0 Hz, 1 H) , 7.72 (d, J=9.8 Hz, 2 H) , 7.53 (dd, .7=8.8, 2.0 Hz, 1 H) , 7.38 (s, 1 H) , 4.91 (dd, J=9.0, 5.3 Hz , 1 H) , 3.25 - 3.56 (m, 2 H) , 2.40 - 2.51 (m, 1 H) , 1.75 - 1.85 (m, 1 H) , 1.38 (s ancho, 1 H) , 0.86 - 0.93 (m, 1 H) , 0.47 - 0.55 Esquema de reacción Intermediario 121 3- (4- ( (trimetilsilil) etinil ) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo Se burbujeó nitrógeno a través de una solución de (3- (5-iodo-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de IR, 3S , 5R) - tere-butilo (1.65 g, 4.40 mmol) y Cu(I)I (168 mg, 0.880 mmol) en trietilamina (3.07 mL, 22.0 mmol) y DMF (40 mi) durante 20 min. Después se añadieron etiniltrimetilsilano (2.16 g, 22.0 mmol) y Pd(PPh3) 4 (254 mg, 0.220 mmol), la reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La reacción se concentró hasta un aceite marrón y se purificó en una BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, 20-40% de EtOAc/hexanos) para dar (3- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) - 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de IR, 3S , 5R) - tere-butilo (980 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.230 min; m/z 346.17 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, CLOROFORMO- d) d ppm 7.18 (s, 1 H) , 4.77 (dd, .7=9.2, 5.1 Hz, 1 H) , 3.20 (br, s, 1 H) , 3.14 - 3.39 (m, 1H) , 2.33 (dd, J=13.2, 9.4 Hz , 1 H) , 1.69 - 1.78 (m, 1 H) , 1.34 - 1.56 (m, 1 H) , 1.49 (s, 9 H) , 0.85 (dt, J=8.5, 5.7 Hz, 1 H) , 0.41 - 0.47 (m, 1 H) , 0.22 -0.24 (m, 9 H) .
Intermediario 122 3- (4-etinil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo A una solución de 3- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -1H-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (1R, 3S, 5R) - terc-butilo (970 mg, 2.81 mmol) en MeOH (30 ml) se añadió carbonato potásico (194 mg, 1.40 mmol) y la reacción se agitó en nitrógeno y después se calentó a 50 °C (temp. del baño) durante 4 horas. La reacción se concentró hasta ~5 ml de volumen, se diluyó con DCM (~ 40 ml) y se lavó con salmuera 1/2 sat . (-20 ml) . Los orgánicos se secaron (MgS0 ) , se filtraron y se concentraron en forma de un sólido pardo. Este material se purificó mediante BIOTAGE®- Horizon (40 g de Si02, cargada con DCM, 35-45% de EtOAc/hexanos ) para dar (3-(5-etinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (747 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.866 min; m/z 272.12 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 7.18 (s ancho, 1 H) , 4.59 (s ancho, 1 H) , 3.36 - 3.64 (m, 2 H) , 2.46 (dd, .7=13.2, 8.9 Hz, 1 H) , 2.18 -2.31 (m, 1 H) , 1.64 - 1.74 (m, 1 H) , 1.18 - 1.45 (m, 9 H) , 0.83 (dt, J=8.5, 5.8 Hz, 1 H) , 0.56 (s ancho, 1 H) .
Esquema de reacción 32 Intermediario 123 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol -4-il) etinil) -2- naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de tere-butilo Se burbujeó nitrógeno a través de una solución de 3 - ( 5 - ( 6 - bromonaftalen - 2 - i 1 ) - 1H - imida zol -2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - ere-butilo (400 mg , 0.880 mmol) , 3-(5- etinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( 1R , 3 S , 5R) - t ere -but i lo (313 mg , 1.14 mmol) y Cu ( I ) I (8.4 mg , 0.044 mmol) en t ríe t i lamina (0.37 mi, 2.6 mmol) y DMF (8 mi) durante 10 min. Después se añadió Pd(PPh3)4 (50.9 mg , 0.044 mmol) , se burbujeó nitrógeno a través de la mezcla de reacción durante 1 min y, después, el matraz se selló y se calentó a 50 °C durante 16 horas. La reacción se concentró a alto vacío y los sólidos residuales se trituraron con EtOAc (~5 mi) y se recogieron mediante filtración (aclarando con EtOAc y hexanos) para dar (1R,3S,5R) -3- (4- (3- (6- ( (2- ( (1R,3S,5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H -imidazol-4-il) etinil-2-naf til) -lH-imidazol-2-il) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (595 mg) en forma de un sólido amarillo claro. El material se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 3.140 min; m/z 647.35 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacét ico . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío.
Intermediario 124 (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- ( (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan - 3 - i 1 ) - 1H- imidazol - 4 - il ) et inil - na ftalen- 2 - il ) - 1H- imidazol - 2 - il ) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de ( IR , 3 S , 5R ) - 3 - ( 4 - ( 6 - ( ( 2 - ( (1R,3S,5R) -2- (tere-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 - carboxilato de tere-butilo (200 mg , 0.309 mmol) en dioxano (3 mi) se añadió HCl 4M (1.546 mi, 6.18 mmol) en dioxano y la reacción se agitó enérgicamente durante 4 horas. La suspensión espesa de la reacción se concentró para dar una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- ( (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -1H-imidazol - 4 - i 1 ) et ini 1 ) naf ta len- 2 - i 1 ) - 1H- imidazol - 2 -i 1 ) - 2 - azabic ic lo [ 3.1.0 ] hexano (177 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.403 min; m/z 893.29 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.42 (s, 1 H), 8.16 (s, 2 H) , 8.05 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.97 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1 H) , 7.74 (s, 1 H), 7.66 (dd, J= 8.5 , 1.5 Hz, 1 H) , 5.01 (dd, .7=10.8, 7.8 Hz, 1 H) , 4.78 (dd, J=10.8, 8.3 Hz, 1 H) , 3.57 - 3.77 (m, 2 H), 3.50 - 3.56 (m, 1 H), 2.61 - 2.92 (m, 4 H) , 2.13 - 2.21 (m, 1 H) , 2.06 - 2.13 (m, 1 H ) , 1.25 (ddd, «7=7.8, 5.0, 2.5 Hz, 1 H) , 0.99 - 1.14 (m, 2 H) .
Esquema de reacción 33 Intermediario 125 3 - (5- (4 - (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0] hexn-3-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2- il) fenil) -IH-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -bencilo Se burbujeó nitrógeno a través de una solución bifásica de 3- (5- (4- (4.4.5.5-tetrametil-l .3.2-dioxaborolan-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) -bencilo (preparada de una forma análoga a la del Intermediario 26) (2.0 g, 4.12 mmol) , 3- (5-(6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (1.872 g, 4.12 mmol) y Na2C03 (2.184 g, 20.60 mmol) en una mezcla de EtOH (16.0 mi), tolueno (16.0 mi) y agua (16.0 mi) durante 15 min. Después se añadió Pd(PPh3)4 (0.143 g, 0.124 mmol), la reacción se aclaró con nitrógeno, se selló, después se calentó a 95 °C durante 10 horas. La suspensión espesa bruta se diluyó con agua (~ 20 mi) y se extrajo con EtOAc (~ 100 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta una espuma amarilla. Este material se disolvió en una cantidad mínima de DCM y se purificó en BIOTAGE® Horizon (110 g de Si02, 70-85% de EtOAc/hexanos) para dar 3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( fcerc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexn-3-il) - 1H- imidazol - 5-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) -bencilo (2.257 g) en forma de una espuma solidificada amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 4.158 min; m/z 733.17 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XK (400 MHz, MeOD) d ppm 8.17 (s ancho, 1 H) , 8.07 (s, 1 H) , 7.86 - 7.94 (m, 2 H) , 7.71 - 7.86 (m, 6 H) , 7.44 (s, 1 H) , 7.32 (s, 1 H) , 7.20 (s ancho, 5 H) , 5.14 (d, J=12.3 Hz, 1 H) , 4.91 - 5.05 (m, 1 H) , 4.63 - 4.77 (m, 1 H) , 3.55 - 3.69 (m, 2 H) , 3.29 - 3.34 (m, 1 H) , 2.46 - 2.59 (m, 2 H) , 2.29 - 2.44 (m, 2 H) , 1.66 - 1.80 (m, 2 H) , 1.30 (s ancho, 9 H) , 0.80 - 0.93 (m, 2 H) , 0.61 (s ancho, 2 H) .
Intermediario 126 3- (5- (6- (4- (2- ( (1R,3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexn-3 -il) -1H- imidazol -4-il) fenil)naftalen-2-il) -lH-imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo Una mezcla de reacción de 3- (5- (4- (6- (2-( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexn-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 5R) - tere-butilo (0.305 g, 0.416 mmol) y NaHC02 (0.070 g, 0.832 mmol) en MeOH (15 mi) se cargó con 10% de Pd/C (0.022 g, 0.021 mmol) .. La suspensión resultante se aclaró al vacío con N2 (3X) y se introdujo en 1 atm de H2 (balón) durante 3 h a temperatura ambiente. Después, la mezcla se filtró a través de una lámina de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró a vacío. Se recuperó un sólido blancuzco correspondiente a 3- (5- (6- (4- (2- ( (IR, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexn-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil ) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (0.235 g) y se usó sin purificación adicional. CL/EM [M+H] += 599; Tr = 1.96 min es el producto. Columna Luna de 3u C18 de 2x50mm; inicio %B : 0, final %B: 100 solvente A: Acetonitrilo al 10%/H2O al 90% + TFA al 1%; solvente B: Acetonitrilo al 90%/ H20 al 10%+ TFA al 1%; velocidad de flujo 4 ml/min. Tiempo de recorrido: 5 min. Pureza = 94 % . RMN de 2H (500 MHz, DMS0-d6) d ppm 12.00 (2 H, s ancho,), 8.11 - 8.32 (3 H, m) , 7.88 - 8.02 (5 H, m) , 7.72 - 7.88 (9 H, m) , 7.63 (4 H, s ancho,), 4.64 (2 H, s ancho,), 4.42 (1 H, t, J=7.93 Hz) , 3.97 - 4.18 (1 H, m) , 3.45 (1 H, s ancho,), 3.17 (3 H, s) , 2.96 (1 H, dd, .7=13.43, 6.71 Hz) , 2.08 - 2.43 (6 H, ra), 1.66 (2 H, s ancho,), 1.07 - 1.50 (20 H, m) , 0.81 - 0.89 (3 H, m) , 0.77 (1 H, s ancho,), 0.45 - 0.61 (3 H, m) , 0.30 (1 H, s ancho.).
Intermediario 127 3- (5- (6- (4- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil ) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 - il ) - 1H- imidazol -4- ilfenil) ) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo A una solución de 3- (5- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol-5-i1) fenil ) naftalen- 2-il) -1H- imidazol -2 -il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 - carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (0.235 g, 0.392 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (0.069 g, 0.39 mmol) y DIEA (0.137 mi, 0.785 mmol) en DMF (10 mi) se añadió HATU (0.164 g, 0.432 mmol) y la solución amarilla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se retiró a presión reducida y el residuo se disolvió en metanol, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (solvente A: MeOH al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% ; solvente B: MeOH al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1% ; Columna: Sunfire Prep MS C18 de 30 x 100 mm de 5u; Longitud de onda: 220 nM; Velocidad de flujo: 30 ml/min; gradiente: 0% de B a 100% de B durante 30 min. con un tiempo de conservación de 2 min) para dar una sal en TFA de 3-(5-(6-(4-(2- ( (lR,3S,5R)-2- ( (S)-2-(metoxicarbonilamino) - 3 -met i lbutanoi 1 ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan- 3-il) -lH-imidazol-5-ilfenil) ) naftalen-2-il) - 1H- imidazol - 2 - i 1 ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan- 2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (0.10 g) en forma de un sólido blanco. CL/EM [M+H] += 756; Tr = 2.14 min es el producto. Columna Luna de 3u C18 de 2x50mm; inicio %B : 0, final %B : 100 solvente A: Acetonitrilo al 10%/H2O al 90% + TFA al 1%; solvente B: Acetonitrilo al 90%/ H20 al 10%+ TFA al 1%; velocidad de flujo 4 ml/min. Tiempo de recorrido: 5 min. Pureza = 96 %. RMN *H (500 MHz , DMSO-d6) d ppm 14.60 (1 H, br, s,) , 8.39 (3 H, d, J=4.88 Hz) , 8.09 - 8.24 (4 H, m) , 7.99 -8.08 (6 H, m) , 7.89 - 7.98 (5 H, m) , 7.27 (1 H, d, J"= 8.55 Hz) , 4.98 - 5.07 (1 H, m) , 4.84 (1 H, br, s,) , 4.42 (1 H, t, J"=7.32 Hz) , 3.74 (1 H, br, s,) , 3.55 (4 H, s) , 2.55 (2 H, d, J=9.77 Hz) , 2.32 - 2.44 (3 H, m) , 2.13 (1 H, dq, J"=13.43, 6.71 Hz) , 1.94 (1 H, dt, J"=13.28, 6.79 Hz) , 1.75 (1 H, dt, J"=12.89, 6.22 Hz) , 1.40 (4 H, d, J"=10.07 Hz) , 1.11 - 1.30 (10 H, m) , 0.90 - 1.00 (5 H, m) , 0.73 - 0.88 (10 H, m) .
Intermediario 128 (S) -1- ( (IR, 3Sr 5R) -3- (44- (4- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol -5-il) naftalen-2- il) fenil -lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -il ) -3- metil -l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 3 - (5-(6- (4- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen- 2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (0.10 g, 0.12 mmol) en CH2C12 (20 mi) se añadió HCl 4N en dioxano (2 mi, 8.00 mmol) y la suspensión amarilla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se concentró a vacío y el residuo resultante se trituró con Et20 para dar una sal HCl de (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3-(5- (4- (6 - (2- ( (IR, 3S, 5R) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan- 3 - il ) -1H-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamate de metilo HCl (47 mg) en forma de un sólido amarillo. CL/EM [M+H] += 656; Tr = 1.73 min es el producto. Columna Luna de 3u C18 de 2x50mm; inicio %B : 0, final %B : 100 solvente A: Acetonitrilo al 10%/H2O al 90% + TFA al 1%; solvente B: Acetonitrilo al 90%/ H20 al 10%+ TFA al 1%; velocidad de flujo 4 ml/min. Tiempo de recorrido: 5 min. Pureza = 95 % . RMN de ?? (500 MHz, DMS0-d6) d ppm 14.47 - 15.18 (2 H, m) , 9.77 - 10.61 (2 H, m) , 8.30 - 8.42 (2 H, m) , 8.17 (1 H, s) , 7.93 - 8.10 (10 H, m) , 7.27 (1 H, d, J=8.55 Hz) , 5.08 (1 H, t, J=7.93 Hz) , 4.71 (1 H, t, J=8.39 Hz) , 4.40 - 4.46 (1 H, m) , 3.77 (1 H, bir, s,), 3.52 - 3.58 (3 H, m) , 3.38 - 3.44 (1 H, m) , 2.52 - 2.61 (3 H, m) , 2.39 (1 H, dt, J=13.58, 6.64 Hz) , 2.14 - 2.21 (1 H, m) , 1.94 (2 H, dd, J=8.24, 4.88 Hz), 1.15 (1 H, d, J=5.80 Hz) , 0.93 (4 H, d, J=6.71 Hz) , 0.75 -0.89 (6 H, m) .
Intermediario 129 3- (5- (4- (6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hexn-3-il) -1H- imidazol-4-il) fenil)naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -bencilo A una solución de 3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo[3.1.0] hexn-3 -il ) -1H-imidazol-5-il) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) -bencilo (228 mg, 0.311 mmol) en dioxano (3 mi) se añadió una solución de HCl 4. OM (1.167 mi, 4.67 mmol) en dioxano y la reacción se agitó enérgicamente a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se concentró para dar una sal HCl de 3- (5- (4- (6-(2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexn-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2-il) -fenil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) -bencilo (233 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.988 min; m/z 633.18 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XK (400 MHz , MeOD) d ppm 8.44 (s, 1 H) , 8.28 (s, 1 H) , 8.08 - 8.18 (m, 3 H) , 7.92 - 8.02 (m, 4 H) , 7.84 (br, s, 3 H) , 7.31 (br, s, 5 H) , 5.21 (d, J=12.1, 1 H) , 4.95 - 5.05 (m, 2 H) , 4.80 - 4.91 (m, 1 H) , 3.70 - 3.77 (m, 1 H) , 3.59 - 3.67 (m, 1 H) , 2.77 - 2.93 (m, 2 H) , 2.74 (dd, J=13.4, 9.2 Hz, 1 H) , 2.46 (dt, J=13.5, 6.7 Hz, 1 H) , 2.12 - 2.22 (m, 1 H) , 1.83 - 1.96 (m, 1 H) , 1.27 - 1.35 (m, 1 H) , 1.09 (q, J=l .9 Hz, 1 H) , 0.95 (ddd, J=8.7, 5.9, 5.8 Hz, 1 H) , 0.75 - 0.83 (m, 1 H) .
Intermediario 130 3- (5- (4- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4- il) ) naftalen-2-il) fenil-lH-imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -bencilo A una solución agitada de (3- (5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) - 1H- imidazol -5 -il ) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 5R) -bencilo (225 mg) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (93 mg, 0.53 mmol) en DMF (3 mi) y DIPEA (0.37 mi, 2.1 mmol) se añadió HATU (203 mg, 0.533 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción bruta se concentró bajo corriente de nitrógeno y el residuo se disolvió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de acetato amónico) para dar 3- (5-(4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((S)-2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 5R) -bencilo (200 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.053 min; m/z 790.25 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ? (400 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 2 H) , 8.13 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 8.08 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 7.94 - 8.02 (m, 4 H) , 7.76 -7.92 (m, 3 H) , 7.85 (dd, J"=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.29 (br, s, 5 H) , 5.21 (d, J=12.1 Hz 1 H) , 5.16 (dd, J"=9.2, 6.9 Hz , 1 H) , 4.97 (t, J=8.2 Hz, 1 H) , 4.57 (d, J=6.5 Hz , 1 H) , 3.78 - 3.87 (m, 1 H) , 3.68 (s, 3 H) , 3.64 - 3.77 (m, 2 H) , 2.66 - 2.77 (m, 2 H) , 2.40 - 2.56 (m, 2 H) , 2.14 - 2.25 (m, 1 H) , 2.05 -2.14 (m, 1 H) , 1.87 (d, J=6.5 Hz, 1 H) , 1.06 - 1.16 (m, 1 H) , 02 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.94 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.87 - 0.99 , 2 H) , 0.74 - 0.82 (m, 1 H) .
Intermediario 131 (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-imidazol-5-il) fenil) naftalen- 2-il) -1H-imidazol -2 -il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3- metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo A una solución de 3-(5-(4-(6-(2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) - 2 - (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) fenil) -1H- imidazol -2 -il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 5R) -bencilo (190 mg, 0.241 mmol) y Na2C03 (50 mg, 0.472 mmol) en THF (10 mi) se añadió 10% de paladio sobre carbono (100 mg, 0.094 mmol) y la mezcla de reacción se aclaró al vacío con nitrógeno (3X) y después con hidrógeno (5X) . La mezcla de reacción se dejó agitar en un balón de hidrógeno durante 2 horas, se filtró a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró. El residuo se volvió a someter a las condiciones de reacción (50 mg de 10% Pd/C usado) durante la noche a temperatura ambiente antes de filtrar a través de tierra de diatomeas (CELITE®) y se concentró. El residuo se disolvió en DMSO/MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa ( eOH/H20 p/ TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (2S) -1- ( (R, 3S, 5R) -3- (5- (6-(4- (2- ( (IR, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) naftalen-2 -il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (55 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.147 min; m/z 656.21 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 1 H) , 8.24 (s, 1 H) , 8.12 (d, J=8.9 Hz, 1 H) , 8.07 (d, J=8.9 Hz, 1 H) , 7.91 - 8.01 (m, 4 H) , 7.83 - 7.90 (m, 3 H) , 7.66 (s, 1 H) , 5.17 (dd, J=9.2, 7.0 Hz, 1 H) , 4.67 (dd, J=10.7, 7.6 Hz, 1 H) , 4.58 (d, J=6.7 Hz , 1 H) , 3.82 - 3.87 (m, 1 H) , 3.69 (s, 3 H) , 3.44 - 3.49 (m, 1 H) , 2.59 - 2.77 (m, 3 H) , 2.48 - 2.56 (m, 1 H) , 2.16 - 2.25 (m, 1 2.03 - 2.15 (m, 2 H) , 1.21 (ddd, J=7.5, 4.9, 2.6 Hz, 1.09 - 1.15 (m, 1 H) , 1.04 (d, J=6.7 Hz, 3 H) , 0.98 (m, 1 H) , 0.95 (d, «J=6.7 Hz, 3 H) , 0.89 - 0.95 (m, 1 H) Esquema de reacción Intermediario 132 3.3 ' - (4.4 ' - (2.2 ' -binaftil-6.6 ' -diiljbis (lH-imidazol-4.2- diil) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato) de (IR, 1 'R, 3S, 3 'S, 5R, 5 'R) -tere-butilo Se burbujeó nitrógeno en una solución de 3-(4-(6- bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere- butilo (250 mg, 0.550 mmol) , 4.4.4 ' , 4 ' , 5.5.5 ' , 5 ' -octametil - 2.2 ' -bi (1.3.2-dioxaborolano) (69.9 mg, 0.275 mmol), l.l'-bis- (difenilfosfino) -ferroceno (15.42 mg, 0.028 mmol) y K2C03 (228 mg, 1.651 mmol) en DIVISO (12 mi) durante 10 min. Después se añadió dicloruro de 1.11 -bis- (difenilfosfino) -ferroceno) paladio (22.63 mg, 0.028 mmol) a la mezcla de reacción y el burbujeo de nitrógeno continuó durante 10 minutos antes de sellar la reacción y después se calentó a 110 °C durante 20 horas. La reacción se repartió entre agua (60 mi) y DCM (60 mi) y los orgánicos se separaron, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. El residuo bruto se purificó mediante BIOTAGE® Horizon (40 g de Si02, 70-100% de EtOAc/hexanos) para dar 3.3 ' - (4.4 ' - (2.2 ' -binaftil-6.6 ' -diil) bis (1H- imidazol-4.2 -diil) ) bis ( 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato) de ( IR, 1 ' R, 3S, 3 ' S , 5R, 5 ' R) - tere-butilo (67 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.348 min; m/z 749.29 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XK (400 MHz, MeOD) d ppm 8.22 (s, 4 H) , 7.91 - 8.02 (m, 6 H) , 7.87 (d, J=8.5 Hz , 2 H) , 7.48 (s ancho, 2 H) , 4.68 - 4.77 (m, 2 H) , 3.61 (s ancho, 2 H) , 2.56 (dd, J=13.1, 8.8 Hz, 2 H) , 2.33 - 2.43 (m, 2 H) , 1.70 - 1.79 (m, 2 H) , 1.31 (s ancho, 18 H) , 0.87 (dt, .7=8.5, 5.8 Hz , 2 H) , 0.63 (s ancho, 2 H) .
Intermediario 133 6, 6-bis (2- ( (1R,3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol -4 -il ) -2, 2 -binaftilo A una solución agitada de 3.31 - (4.4 ' - (2.21 -binaftil-6.61 -diil) bis (lH-imidazol-4.2-diil) ) bis (2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, l'R, 3S, 3 'S, 5R, 5 'R) -tere-butilo) (62mg, 0.083 mmol) en dioxano (2 mi) se añadió HCl 4.0M (1.0 mi, 4.00 mmol) en dioxano y la suspensión espesa de la reacción se agitó enérgicamente durante 3 horas. La suspensión espesa se diluyó con MEOH y se concentró hasta sequedad para dar una sal HCl de 6.6' -bis (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H-benzo [d] imidazol-4-il) -2 , 2 ' -binaftilo (56 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.971 min; m/z 547.25 (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.44 (s, 2 H) , 8.38 (s, 2 H) , 8.12 - 8.19 (ra, 6 H) , 8.09 (dd, 2 H) , 7.97 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 2 H) , 4.97 (dd, J=10.5, 8.1 Hz, 2 H) , 3.62 - 3.66 (m, 2 H) , 2.79 - 2.89 (m, 4 H) , 2.15 - 2.22 (m, 2 H) , 1.29 - 1.34 (m, 2 H) , 1.11 (c, J=7.9 Hz, 2 H) .
Esquema de reacción 35 Intermediarlo 138 Intermediarlo 139 Intermediario 134 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinolina A una solución de 6-bromo-2-cloroquinolina (1.0 g, 4.1 mmol) y tributil (1-etoxivinil) estanano (1.79 g, 4.95 mmol) en dioxano (8 mi) se añadió diclorobis (trifenilfosfina) -paladio (II) (0.289 g, 0.412 mmol) y la" mezcla se agitó a 100 °C durante 5 h, el producto deseado se identificó mediante CLEM. La mezcla de reacción bruta se concentró y se purificó mediante cromatografía instantánea en gel de sílice (eluyó con 1:1 de hexanos/DCM) para dar el producto 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinolina (720 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 4.091 min; m/z 279.84 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 135 2-bromo-l - (6 -bromoquinol in-2 -il ) etanona una solución de 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinolina (530 mg, 1.91 mmol) en THF (10 mi) y agua (2.5 mi) se añadió NBS (407 mg, 2.287 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y salmuera y la capa orgánica se concentró. El material bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en gel de sílice (eluyó con Et20/hexanos , gradiente de 0 a 5% Et20) para dar el 2-bromo-l- (6-bromoquinolin-2-il) etanona (380 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.988 min; m/z 329.84 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 136 2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2, 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (6-bromoquinolin-2-il) -2-oxoetil) 2-tere-butilo 2-bromo-l- (6-bromoquinolin-2-il) etanona A una solución de 2-bromo-l- (6 -bromoquinolin-2-il)etanona (268 mg, 0.815 mmol) y ácido (IR, 3S , 5R) -2 -( fcerc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboxílico (204 mg, 0.896 mmol) en acetonitrilo (8 mi) se añadió DIPEA (0.21 mi, 1.2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con NaHC03 ac . sat . (5 mi) y se extrajo con EtOAc (2 x 20 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en gel de sílice (usó DCM como solvente de carga, eluyó con Et20/hexanos , gradiente de 10% a 30% de Et20) para dar 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (6 -bromoquinolin-2 -il) -2 -oxoetil ) 2- terc-butilo (332 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 4.283 min; m/z 476.88 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 137 (1R,3S, 5R) -3- (4- (6-bromo-2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de terc-butilo A una solución de 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 icarboxilato de ( IR, 3S,5R)-3-(2-(6 -bromoquinolin-2 - il ) -2 oxoetil) 2 - tere-butilo (407 mg, 0.856 mmol) en tolueno (10 mi) se añadió acetato amónico (990 mg, 12.8 mmol) y la mezcla se agitó a 120 °C durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó con NaHC03 ac, sat . (10 mi) y se extrajo con EtOAc (50 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS0 ) , se filtró y se concentró. El material bruto se purificó mediante cromatografía instantánea en gel de sílice (eluyó con 1: 1 EtOAc/hexanos) para dar (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6 -bromo- 2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo (272 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.306 min; m/ z 456.99 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ¾ (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 8.08 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.95 (d, J=2.2 Hz , 1 H) , 7.78 (dd, J=8.9, 2.2 Hz, 1 H) , 7.73 - 8.14 (m, 3 H) , 4.86 - 4.98 (m, 1 H) , 3.70 - 3.82 (m, 0.5 H) , 3.26 - 3.39 (m, 1 H) , 2.46 (dd, J=13.3, 9.3 Hz, 1 H) , 1.84 - 1.91 (m, 0.5 H) , 1.74 - 1.84 (m, 1 H) , 1.52 (s, 9 H) , 0.87 - 0.97 (m, 1 H) , 0.48 - 0.61 (m, 1 H) .
Intermediario 138 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-i idazol-4-il) fenil) -2- quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de terc-butilo A una solución de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6-bromo-2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexane-2-carboxilato de terc-butilo (150 mg, 0.329 mmol), 3- (5- (4- (4.4.5.5-tetrametil-l .3.2 -dioxaborolan-2-il) fenil) -1H-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -terc-butilo (149 mg, 0.329 mmol), diciclohexil (21 , 61 -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (27.0 mg, 0.066 mmol) y K2C03 (137 mg, 0.988 mmol) en THF (2 mi) y agua (0.50 mi) se añadió Pd(OAc)2 (7.40 mg, 0.033 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 110 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador NH4OAc lOmM) para dar ( IR, 3S , 5R) -3- (4- (6- (4 - ( 2 - ( ( IR, 3S , 5R) - 2 -(tert-butoxicarbonil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-4-il) fenil) -2 -quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (140 mg) en forma de un sólido amarillo brillante. Tiempo de retención en la CL-EM 3.150 min; m/z 700.36 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x, 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 139 2- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4- il) -6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H- imidazol -4-il) fenil) quinolina A una suspensión de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2-( (IR, 3S( 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-quinolinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (130 mg, 0.186 mmol) en dioxano (3 mi), MeOH (0.5 mi) y DCM (3 mi) se añadió una solución de HCl 4M (1 mi, 400 mmol) en dioxano y la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La reacción se concentró para dar una sal HCl de 2- (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-4-il) -6-(4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-4 -il ) fenil ) quinolina (140 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.063 min; m/z 500.37 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/O.l% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ?? (400 MHz, MeOD) d ppm 9.09 (d, J=9.0 Hz, 1 H) , 8.66 (s, 1 H) , 8.56 - 8.62 (m, 2 H) , 8.47 - 8.53 (m, 2 H) , 8.07 (s, 1 H) , 8.02 - 8.06 (m, 4 H) , 4.97 (dd, J=10.8, 8.0 Hz, 1 H) , 3.65 - 3.71 (m, 1 H) , 3.55 -3.65 (m, 2 H) , 2.73 - 2.86 (m, 3 H) , 2.61 - 2.72 (m, 1 H) , 2.07 - 2.20 (m, 2 H),.1.25 - 1.35 (m, 2 H) , 1.07 (t, 2 H) .
Esquema de reacción 36 Intermediario 140 Intermediario 141 Intermediario 140 1- (4- (5-acetilnaftalen-l-il) fenil) etanona A una solución de 1- (5-bromonaftalen-l-il) etanona (1.2 g, 4.8 mmol) y ácido 4 -acetilfenilborónico (1.03 g, 6.26 mmol) en tolueno (20 mi) y etanol (20 mi) se añadió una solución de carbonato sódico (2.55 g, 24.09 mmol) en agua (20 mi) y la solución heterogénea se agitó enérgicamente con burbujeo de nitrógeno durante 15 min. Después, se añadió Pd(PPh3)4 (0.111 g, 0.096 mmol) y el vaso de reacción se selló y se calentó a reflujo durante 6 horas. La reacción se enfrió y se concentró hasta sequedad. El residuo bruto se suspendió en EtOAc (~ 150 mi) y agua (~ 100 mi) . Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04), se filtró y se concentró hasta un sólido naranja. El sólido naranja se purificó en BIOTAGE® Horizon (40 g de Si02, DCM) para dar l-(4-(5-acet i lnaftalen- 1 - i 1 ) feni 1 ) etanona (1.31 g) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.736 min; m/z 289.19 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido t ri f 1uoroacét i co y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacét ico .
Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocí o . RMN de 1H (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 8.75 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.11 (d, J"=8.5 Hz, 2 H), 7.99 (d, J= 8.5 Hz, 1 H) , 7.94 (dd, J=7.2, 1.1 Hz, 1 H), 7.67 (dd, J=8.5, 7.0 Hz, 1 H) , 7.58 (d, J= 8.3 Hz , 2 H), 7.45 - 7.51 (m, 2 H) , 2.79 (s, 3 H) , 2.70 (s, 3 H) .
Intermediario 141 2 -bromo- 1 - (4- (5- (2 -bromoacetil ) naftalen- 1- il ) fenil ) etanona Una solución de bromo (0.47 mi, 9.1 mmol) en DCM (10 mi) se añadió a una solución de l-(4-(5-acet i lnaftalen- 1 - i 1 ) f eni 1 ) etanona (1.285 g, 4.46 mmol) en DCM (20 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. La reacción se concentró hasta un aceite naranja claro viscoso (-1.92 g) . Mediante RMN de 1H, el producto principal parece ser el producto deseado con picos correspondientes a los dos regioi someros monobromados (-10%) . El material se usó sin purificación. RMN de 1K (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.64 (d, J= 8.5 Hz , 1 H), 8.13 -8.17 (m, 2 H) , 8.05 (d, J= 8.5 Hz, 1 H) , 7.94 (dd, J=7.2, 1.1 Hz, 1 H) , 7.71 ( dd , J= 8.8 , 7.0 Hz , 1 H ) , 7.60 - 7.64 (m, 2 H ) , 7.48 - 7.55 (m, 2 H) , 4.60 (s, 2 H) , 4.53 ( s , 2 H) .
Intermediario 142 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2, 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3 - (2- (4- (5- (2- ( (1R,3S,5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboniloxi) acetil) naftalen-1- il) fenil) -2-oxoetil) 2 -tere-butilo A una solución de 2 -bromo- - (4 - (5 - ( 2 -bromoacetil) naftalen-l-il) fenil) etanona bruta (1.99 g, 4.46 mmol) y ácido (IR, 3S, 5R) -2- (tert-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboxílico (2.337 ml , 13.38 mmol) en acetonitrilo (50 ml) se añadió DIPEA (2.337 ml , 13.38 mmol) y la solución amarillo transparente se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró hasta una espuma solidificada amarilla que se purificó en BIOTAGE® Horizon (Si02, EtOAc/hexanos) para dar 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3-(2- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboniloxi) acetil) naftalen-1-il ) fenil ) -2 -oxoetil ) 2 - tere-butilo (2.95 g) en forma de un sólido suave blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 4.363 min; m/z 737.38 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOME EX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de ¾ (400 Hz, MeOD) d ppm 8.57 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.14 (d, J"=8.0 Hz, 2 H) , 7.99 - 8. 06 (m, 2 H), 7.68 (dd, J--=8. 7. 0 Hz, 1 H) , 7.64 (d, J"=8.3 Hz, 2 H) , 7.52 ¦ - 7 .60 (m, 2 H), 5. 60 5. 70 (m, 1 H) , 5.32 - 5.56 (m, 3 H) , 4.24 - 4. .34 (m, 2 H) , 3. 38 3. 49 (m, 2 H) , 2.59 - 2.69 (m, 1 H) , 2.38 - 2. ,55 (m, 3 H), 1. 61 1. 77 (m, 2 H) , 1.47 (s ancho, 18 H) , 0.81 - 0. 94 (m, 2 H) , 0. 50 0. 58 (m, 2 H) .
Intermediario 143 3- (5- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -2- azabiciclo [3.1.0]hexn-3-il) -lH-i idazol-5-il) naftalen-1 - il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo Una solución de 2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 , 3-dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboniloxi) acetil) naftalen-l-il) fenil) -2-oxoetil) 2- terc-butilo (2.01 g, 2.72 mmol) y acetato amónico (4.19 g, 54.4 mmol) en tolueno (40 mi) se agitó y se calentó a 100°C durante la noche. La reacción se concentró hasta sequedad y los sólidos marrones se repartieron entre DCM (150 mi) y 1/2 NaHC03 sat. (ac) (100 mi) . Las capas orgánicas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. El material bruto no se purificó fácilmente mediante cromatografía en columna instantánea de modo que se recogieron todas las fracciones que contenían el producto deseado o el material de partida, se concentraron y se volvieron a someter a las condiciones de reacción (ahora 100°C durante la noche). La reacción se concentró y los sólidos marrones se repartieron entre DCM (150 mi) y 1/2 NaHC03 sat. (100 mi). Las capas orgánicas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron. Aproximadamente ~ 30-35% del material se purificó en HPLC preparativa (disuelta en MeOH, filtrada, 80-100% MeOH/agua, amortiguador de acetato amónico) para dar 3- (5- (4- (5- (2- ( ( IR, 3S , 5R) -2 - ( erc-butoxicarbonil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-l-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (148 mg) en forma de un sólido amarillo. El material restante se purificó en HPLC preparativa (disuelta en MeOH, filtrada, 60-100% MeOH/agua, amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA DE 3- (5- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) - 1H- imidazol - 5 -il) naftalen-l-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (299 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 3.100 min; m/z 699.56 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un- velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.90 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.83 (d, J=8.3 Hz, 2 H) , 7.59 (dd, J=7.0, 1.0 Hz, 1 H) , 7.53 (dd, J=8.5, 7.0 Hz, 1 H) , 7.43 - 7.50 (m, 4 H) , 7.42 (s, 1 H) , 7.23 (s, 1 H) , 4.66 - 4.80 (ra, 2 H) , 3.60 (br, s, 2 H) , 2.56 (dt, J=13.1, 8.9 Hz , 2 H) , 2.32 - 2.46 (m, 2 H) , 1.70 - 1.78 (m, 2 H) , 1.38 (s ancho, 18 H) , 0.82 - 0.90 (m, 2 H) , 0.63 (s ancho, 2 H) .
Intermediario 144 (1R,3S,5R) -3- (5- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-3-11) -1H-imidazol -5-il) etinil - naftalen-1-il) fenil-??-imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de 3 - ( 5- (4 - (5 - (2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2 - ( tere -butoxicarboni 1 ) - 2 - azabiciclo [3.1.0] hexan- 3 - i 1 ) -1H- imidazol-5-il) naftalen-l-il) fenil) -lH-imidazol-2-i 1 ) - 2 - azabic icio [3.1.0] hexan- 2 - carboxi lato de (lR,3S,5R)-fc ere -but i lo (141 mg , 0.202 mmol) en dioxano (3.0 mi) se añadió HC1 4M (0.757 mi, 3.03 mmol) en dioxano y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Los sólidos se lavaron por los lados del vial con MeOH y la reacción se concentró en corriente de nitrógeno para dar una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan- 3 -il) -lH-imidazol-4-il)naftalen-1-il) fenil) -1H- imidazol - 2 - i 1 ) - 2 - azabic icio [3.1.0] hexano (119 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.333 min; m/z 499.57 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacét ico . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.15 (d, J"=8.3 Hz, 1 H) , 8.03 - 8.08 (m, 2 H) , 8.01 (d, J"=8.0 Hz, .2 H) , 7.95 (s, 1 H) , 7.77 (d, .7=6.5 Hz , 1 H) , 7.68 - 7.74 (m, 1 H) , 7.65 (d, J=8.0 Hz , 2 H) , 7.57 - 7.64 (m, 2 H) , 5.03 (t, .7=9.4 Hz, 1 H) , 4.97 (dd, J=10.8, 8.0 Hz, 1 H) , 3.57 - 3.66 (m, 2 H) , 2.76 - 2.89 (m, 4 H) , 2.11 - 2.21 (m, 2 H), 1.27 - 1.34 (m, J=l .1 , 5.1, 5.1, 2.6 Hz, 2 H) , 1.05 - 1.14 (m, 2 H) Esquema de reacción 37 xilenos, 140°C , n erme ar o Intermediario 145 Hexahidrociclopenta [b]pirrol-1 , 2 (2H) -dicarboxilato de (2S,3aS, 6aS) -2- (2- (4- (6- (2- ( {2S,3aS, 6aS) -1- (terc- butoxicarbonil) - octahidrociclopenta [b]pirrol -2- carboniloxi) acetil) naftalen-2-il) fenil) -2-oxoetil) 1-terc- butilo A una suspensión agitada de 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona (79 mg, 0.176 mmol) y ácido (2S, 3aS, 6aS) -1- (fcerc-butoxicarbonil ) octahidrociclopenta [b] pirrol-2 -carboxílico (90 mg, 0.353 mmol) en acetonitrilo (1.5 mi) y cloroformo (1.5 mi) se añadió DIPEA neta (0.068 mi, 0.388 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y después se purificó mediante gel de sílice FCC (3% de MeOH en DCM) para dar el intermediario 145 en forma de un sólido pardo. Tiempo de retención en la CL-EM: 2.480 min; m/z 793.7 (M-H) Intermediario 146 2-(4-(4-(6-(2-((2S,3aS, 6aS) -1- (tere-butoxicarbonil ) - octahidrociclopenta [b]pirrol -2-il) - 1H- imidazol -4 - il) naf'talen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2- il) hexahidrociclopenta [b]pirrol -1 (2H) -carboxilato de (2S, 3aS, 6aS) -tere-butilo Una suspensión agitada de hexahidrociclopenta [b] pirrol -1 ,2 (2H) -dicarboxi lato de (2S,3aS,6aS) -2- (2 - (4 - (6 - (2 - ( (2S,3aS,6aS) -1- ( terc-butoxicarbonil) octahidrociclopenta [b] pirrol -2 -carboniloxi) acetil)naftalen-2-il) fenil) -2-oxoetil) -1-terc-butilo (140 mg, 0.176 mmol) y acetato amónico (272 mg, 3.52 mmol) en xileno (4 mi) se calentó a 140 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (20 mi) y se lavó con. NaHC03, agua, salmuera y se secó (Na2S04) para dar un sólido marrón que se purificó mediante FCC en gel de sílice (3-5% de MeOH en DCM) para dar el intermediario 146, Tiempo de retención en la CL-EM: 2.77 min; m/z 755, (M+H)+.
Intermediario 147 (2S, 3aS, 6aS) -2- (4 - (4 - (6- (2- ( (2S, 3aS, 6aS) - octahirocyclopenta [b]pirol -2-i) -lH-imidazol-4-i) naftalen-2- il) fenil) -lH-imidazol -2-il) octahidrociclopenta [b]pirrol A una solución del intermediario 146 en DCM se añadió HCl 4N en dioxano (20 equiv) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2-3 horas. Se añadió tolueno anhidro a la suspensión amarilla resultante y después se evaporó hasta sequedad para dar el intermediario 147 en forma de un sólido beige y se aisló en forma de una sal de 4HC1. Tiempo de retención en la CL-EM: 2.43 min; m/z 555 (M+H)+.
Esquema de reacción 38 Intermediario 148 (IR, 3S, 5R) 3- (4- (6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano A una solución de 3- (4- (6-bromonaftalen-2-il) -1H-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) - tere-butilo (Intermediario 120) (606 mg, 1.334 mmol) en DCE (20 mi) se añadió TFA (1.028 mi, 13.34 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después se añadió TFA adicional (1 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La reacción se concentró hasta sequedad y el aceite marrón bruto se disolvió en éter dietílico y se concentró al vacío (2X) para dar una sal en TFA de (IR, 3S,5R)-3-(4-(6 -bromonaftalen-2- il) -1H-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (786 mg) en forma de un sólido amarillo. El material se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.558 min; m/z 352.03, 354.05 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 10.55 (br, s, 1 H) , 8.02 (s, 1 H) , 7.93 (d, J=1.5 Hz, 1 H) , 7.72 (d, J=8.5 Hz , 1 H) , 7.65 (d ,J=8.8 Hz, 1 H) , 7.59 (dd, J=8.8, 2.0 Hz , 1 H) , 7.52 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.44 (s, 1 H) , 5.10 (dd, J=11.8, 7.3 Hz, 1 H) , 3.49 - 3.54 (m, 1 H) , 2.94 (td, J=12.7, 4.6 Hz , 1 H) , 2.68 (dd, J=13.2, 7.2 Hz, 1 H) , 2.06 - 2.14 (m, 1 H) , 1.20 - 1.26 (m, 1 H) , 1.00 - 1.09 (m, 1 H) .
Intermediario 149 (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6-bromonaftalen-2 -il) -lH-imidazol-2- il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3 -me il -1 -oxobutan-2 - ilcarbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (525 mg, 0.902 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (190 mg, 1.08 mmol) en DMF (10 mi) y DIPEA (0.79 mi, 4.5 mmol) se añadió HATU (411 mg, 1.082 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La reacción se diluyó con EtOAc (-80 mi) y se lavó con NaHC03 ac . sat . , agua (30 mi) y salmuera (30 mi). Los orgánicos se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron hasta un aceite marrón (625 mg) . Este material se purificó en BIOTAGE® Horizon (40 g de Si02| 40-80% de EtOAc/hexanos) para dar (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (412 mg) en forma de un cristal amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.843 min; m/z 511.24, 513.12 (1:1) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV -UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1.0 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MIC OMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 150 3- (4- ( (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol -4- il) ) naftalen-2-il) etinill-??- imidazol-2- il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere- butilo Se burbujeó nitrógeno a través de una mezcla de 3-(5-etinil-lH-imidazol-2-il)-2-azab i c i c lo [ 3.1.0 ] hexan- 2 - carboxi lato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (Intermediario 122) (118 mg , 0.432 mmol) , (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6-bromonaf talen-2-il) -1H-imidazol-2-il) - 2 - a zab i c i c 1 o [ 3.1.0 ] hexan - 2 - i 1 ) - 3 -met i 1 - 1 - oxobutan - 2 - il carbamato de metilo (170 mg , 0.332 mmol) y Cul (3.17 mg , 0.017 mmol) en DMF (4 mi) y TEA (0.14 mi, 0.10 mmol) durante 15 min. Después se añadió Pd ( PPh3 ) 4 ( 19.2 mg, 0.017 mmol) y el vaso de reacción se selló y se calentó a 60 °C durante la noche. La reacción se enfrió y se añadieron Cul (5 mg) y TEA (100 ul) adicionales y se burbujeó nitrógeno a través de la reacción durante 15 min. Después se añadió Pd(PPh3)4 adicional (12 mg) y la reacción se selló y se agitó a 70 °C durante 24 h. La reacción se concentró en alto vacío y el residuo se repartió entre DCM (25 mi) y agua (25 mi) . La capa acuosa se extrajo con DCM (2 X 10 mi y las orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (~20 mi) , se secaron (MgS04), se filtraron y se concentraron hasta un aceite oscuro viscoso. El material se disolvió en MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua, amortiguador de acetato amónico) para dar 3 - ( 4 - ( ( 6 - ( 2 - ( ( IR , 3 S , 5R ) - 2 - ( ( S ) - 2 -( metoxi carboni lamino ) - 3 -met i lbutano i 1 ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) ) na£talen-2-il) etinill-lH-imidazol-2-il) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (1R,3S,5R)-terc-butilo (187.4 mg ) en forma de un sólido amarillo. El material se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 1.720 min; m/ z 704.59 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0 % de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1.0 min y - un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido t ri f luoroacét i co y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido tri f luoroacét i co . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 39 Intermediario 151 5-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2- (6- bromonaftalen-2-il) -2-oxoetil) 1-tere-butilo A una suspensión agitada de 2-bromo-l- (6-2-il)etanona (Intermediario 118) (1.03 g, 3.14 mmol) y ácido (2S , 5S) - 1- ( erc-butoxicarbonil ) metilpirrolidin-2-carboxílico (0.720 g, 3.14 mmol) en acetonitrilo (50 mi) se añadió DIPEA (0.823 mi, 4.71 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró hasta sequedad y se purificó mediante BIOTAGE® Horizon (40 g de Si02, 10-20% de EtOAc/hexanos) para dar 5 -metilpirrolidin-1, 2 -dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2- (6-bromonaftalen-2-il) -2-oxoetil) 1- ere-butilo (1.09 g) en forma de una espuma solidificada amarilla. Tiempo de retención en la CL-EM 4.413 min; m/z 476, 478.20 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un croraatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un- tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.57 (s ancho, 1 H) , 8.14 (d, J=1.5 Hz, 1 H) , 8.01 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.96 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 7.91 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.68 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1 H) , 5.62 - 5.70 (m, 1 H) , 5.47 - 5.60 (m, 1 H) , 4.46 (t, J=7.3 Hz , 1 H) , 3.92 - 4.06 (m, 1 H) , 2.26 - 2.37 (m, 2 H) , 2.05 - 2.19 (m, 1 H) , 1.67 - 1.82 (m, 1 H) , 1.46 (d, J=6.8 Hz, 9 H) , 1.30 (d, J=6.5 Hz, 3 H) .
Intermediario 152 2- (5- (6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -5- metilpirrolidin-l-carboxilato de (2S, 5S) -tere-butilo A una solución de 5-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2- (6-bromonaftalen-2-il) -2-oxoetil) 1- ere-butilo (1.17 g, 2.47 mmol) en tolueno (30 mi) se añadió acetato amónico (3.79 g, 49.1 mmol) y la reacción se introdujo en un baño de aceite que se había precalentado a 100 °C y se agitó a esa temperatura durante la noche. La reacción se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente, se concentró y se - repartió entre (100 mi) y 1/2 NaHC03 sat . (ac.) (75 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera (~ 50 mi) , se secó (MgS04) , se filtró y se concentró hasta una espuma parda solidificada. Este material se purificó en una BIOTAGE® Horizon (160 g de Si02, cargada con DCM, 20-35% de EtOAc/hexanos) para dar (2- (5- (6-bromonaftalen-2-il) -1H-imidazol-2-il) -5-metilpirrolidin-l-carboxilato de (2S,5S)-fcerc-butilo (893 mg) en forma de una espuma parda solidificada. Tiempo de retención en la CL-E 3.410 min; m/z 456, 458.22 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 mi/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de eOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de K. (400 MHz , MeOD) d ppm 8.19 (s ancho, 1 H) , 8.01 (s, 1 H) , 7.83 - 7.93 (m, 1 H) , 7.76 - 7.83 (m, 2 H) , 7.55 (dd, J"=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.47 (s ancho, 1 H) , 4.94 (s ancho, 1 H) , 3.99 - 4.09 (m, 1 H) , 2.22 - 2.36 (m, 2 H) , 2.09 - 2.21 (m, 1 H) , 1.72 (s ancho, 1 H) , 1.42 (d, J"=6.0 Hz, 3 H) , 1.34 (s ancho, 9 H) .
Intermediario 153 3 - (4-( (6- (2- ( (2S, 5S) -1- (terc-butoxicarbonil ) -5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) etinil) - 1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo Se burbujeó nitrógeno a través de una solución de 2- (5- (6-bromonaftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -5-metilpirrolidin-carboxilato de (2S , 5S) - tere-butilo (127 mg, 0.277 mmol) , 3- (5-etinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (91 mg, 0.33 mmol) y Cul (2.6 mg, 0.014 mmol) en DMF (3 mi) y TEA (0.12 mi, 0.83 raraol) durante 15 min. Después se añadió Pd(PPh3)4 (16 mg, 0.014 mmol) y el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 50 °C durante la noche. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se burbujeó nitrógeno a través de la mezcla de reacción durante 20 minutos y después, se añadieron Cul (~4 mg) y Pd(PPh3) (15 mg) adicionales. La reacción se lavó con nitrógeno durante 5 min, se selló y se calentó a 60 °C durante 1 día. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con metanol y se purificó en HPLC preparativa ( eOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de 3 -(5 -(( 6 -(2-((2S, 5S)-1-( erc-butoxicarbonil )- 5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) - tere-butilo (56.7 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.161 min; m/z 649.62 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz , MeOD) 6 ppm 8.31 (s, 1 H) , 8.21 (s, 1 H) , 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 - 8.04 (m, 2 H) , 7.91 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1 H) , 7.77 - 7.87 (m, 1 H) , 7.69 (dd, .7=8.7, 1.4 Hz, 1 H) , 5.13 (t, J=7.5 Hz , 1 H) , 4.12 (s ancho, 1 H) , 3.61 (s ancho, 1 H) , 2.66 (s ancho, 1 H) , 2.45 -2.54 (m, 1 H) , 2.33 - 2.42 (m, 1 H) , 2.22 - 2.32 (m, 2 H) , 1.75 - 1.86 (m, 2 H) , 1.25 - 1.59 (m, 21 H) , 1.06 (ninguno, 1 H) , 0.90 (dt, J=8.5, 5.8 Hz, 1 H) , 0.71 (s ancho, 1 H) .
Intermediario 154 (1R,3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 5S) -5-metilpirrolidin-2-il) -1H- imidazol-4-il) naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano A una mezcla de una sal en TFA de 3- (5- ( (6- (2- ( (2S, 5S) -1-( erc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il)naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -terc-butilo (53.6 mg, 0.061 mmol) en dioxano (1.5 mi) se añadió HCl 4M (0.611 mi, 2.445 mmol) en dioxano y la reacción se agitó enérgicamente durante 2 horas. La reacción se concentró bajo vapor de nitrógeno durante la noche para dar una sal HC1 de (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 5S) -5-metilpirrolidin-2-il) -1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il)etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0]hexano (37 mg) , que se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.302 min; m/z 449.40 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHEOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético. Los datos de E se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío.
Esquema de reacción Intermediario 155 (1R,3S,5R) -3- (4- ( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de 3- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -1H-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S , 5R) - tere-butilo (299 mg, 0.865 mmol) en DCE (5 mi) se añadió TFA (500 µ? , 6.49 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La reacción se concentró hasta sequedad y después se volvió a someter a las condiciones de reacción durante 5 horas. La reacción se concentró para dar una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -3- (4-( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano en forma de un aceite marrón viscoso que se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.755 min; m/z 246.25 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H20/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 156 (S) -3-metil-l-oxo-l- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (trimetilsilil ) etinil ) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il)butan-2- ilcarbamato de metilo A una solución agitada de (IR, 3S, 5R) -3- (5-trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (212 mg, 0.865 mmol) y ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (197 mg, 1.125 mmol) en DMF (3 mi) y DIPEA (1.2 mi, 6.9 mmol) se añadió HATU (428 mg, 1.125 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró hasta sequedad y después se purificó en una BIOTAGE® Horizon (25g de Si02, 40-60% de EtOAc/hexanos) para dar (S) -3-metil-l-oxo-l- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il)butan-2-ilcarbamato de metilo (203 mg) en forma de un cristal amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.095 min; m/z 403.29 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de ¾ (400 MHz, MeOD) d ppm 7.17 (s ancho, 1 H) , 5.04 - 5.11 (m, 1 H) , 4.54 (d, J=6.8 Hz, 1 H) , 3.65 (s, 3 H) , 3.54 - 3.61 (m, 1 H) , 2.82 (s, 1 H) , 2.39 - 2.50 (m, 1 H) , 2.27 - 2.36 (m, 1 H) , 2.04 - 2.15 (m, 1 H) , 1.94 - 2.04 (m, 1 H) , 1.11 (dt, J=8.7, 5.6 Hz, 1 H) , 0.95 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.90 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.73 - 0.79 (m, 1 H) , 0.21 (s, 9 H) .
Intermediario 157 (S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-etinil-1H-imidazol-2 -il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo A una solución de (S) -3-metil-l-oxo-l- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- ( (trimetilsilil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il)butan-2-ilcarbamato de metilo (200 rag, 0.497 ramol) en metanol (5 ral) se añadió carbonato potásico (34.3 mg, 0.248 mmol) y la reacción se lavó con nitrógeno, se selló y después se calentó a 50 °C durante 4h y después se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró hasta sequedad y después se purificó en una BIOTAGE® Horizon (12g de Si02, 70-90% de EtOAc/hexanos) para dar (S) - 1 - ( ( IR, 3S , 5R) -3- ( 5-etinil- 1H- imidazol -2 - il ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (151 mg) en forma de un cristal amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.788 min; m/z 331.32 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 158 3- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol -4- il) ) naftalen-2-il) etinil-lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) - tere- butilo Una mezcla de 3- (5- (6-bromonaftalen-2-il) -1H-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo (208 mg, 0.457 mmol) , (S) -1-( (IR, 3S, 5R) -3- (5-etinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (151 mg, 0.457 mmol) y Cul (8.70 mg, 0.046 mmol) en DMF (4 mi) y TEA (0.19 mi, 1.4 mmol) se lavó al vacío con nitrógeno (6X) en 10 minutos. Después se añadió Pd(PPh3)4 (53 mg, 0.046 mmol) y la mezcla de reacción se lavó la vacío con nitrógeno (3X) , se selló y se calentó a 60 °C durante 20h. La reacción bruta se concentró en vapor de nitrógeno durante la noche y después se purificó mediante HPLC preparativa (40-80% de MeOH/agua con amortiguador TFA) para dar una sal en TFA de 3-(5-(6-((2-((lR,3S,5R)-2-((S)-2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) etinil) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (270 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.995 min; m/z 704.70 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 1 H) , 8.18 (s, 1 H) , 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.98 -8.03 (m, 2 H) , 7.89 (dd, J=8.5, 1.8 Hz, 1 H) , 7.69 - 7.85 (m, 1 H) , 7.67 (dd, J=8.7, 1.4 Hz, 1 H) , 5.11 (s ancho, 1 H) , 4.84 - 4.91 (m, 2 H) , 4.55 (d, J=5.8 Hz, 1 H) , 3.70 - 3.77 (m, 1 H) , 3.67 (s, 3 H) , 2.72 (dd, J=13.6, 9.0 Hz , 1 H) , 2.55 - 2.63 (m, 1 H) , 2.39 - 2.50 (m, 2 H) , 2.11 - 2.20 (m, 1 H) , 2.02 - 2.11 (m, 1 H) , 1.81 - 1.89 (m, 1 H) , 1.45 (s ancho, 9 H) , 1.07 - 1.14 (m, 1 H) , 1.00 (d, J=6.8 Hz , 3 H) , 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.84 - 0.93 (m, 2 H) , 0.74 (s ancho, 1 H) .
Esquema de reacción Intermediario 159 1 - (6-bromoquinolin-2-il) etanona Se añadió HCl 3M(ac.) (10 mi, 30.0 mmol) a una suspensión de 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinolina (780 mg, 2.80 mmol) en acetona (20 mi) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla de reacción se concentró, se disolvió en THF (20 mi) y se trató con HCl 3N (ac.) (5 mi) la solución de reacción transparente se agitó a 60 °C durante 5 horas. La reacción se enfrió, se neutralizó con NaOH ac, y NaHC03 y se extrajo con EtOAc . La capa orgánica se secó y se concentró para dar 1- ( 6 -bromoquinolin-2-il)etanona bruta (710 mg) en forma de sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.703 min; m/z 250, 251.99 (1:1) (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 160 1 - (6- (4 -acetilfenil) quinolin-2-il) etanona A una solución de ácido 4 -acetilfenilborónico (689 mg, 4.20 mmol) , 1- (6-bromoquinolin-2-il) etanona (700 mg, 2.8 mmol) , diciclohexil (2 ' , 6 ' -dimetoxibifenil-2-il) fosfina (230 mg, 0.560 mmol) y K2C03 (1.16 g, 8.40 mmol) en dioxano (10 mi) y agua (2.500 mi) se añadió Pd(OAc)2 (62.9 mg, 0.280 mmol) y la mezcla de reacción se sometió a reflujo a 110 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se repartió entre NH4C1 ac . sat, y EtOAc . La capa orgánica se lavó con NaHC03 y salmuera y después se secó (MgS04) , se filtró, se concentró y se purificó mediante cromatográfica instantánea en gel de sílice (solvente de carga: DCM, eluida con 0 ~ 20 % EtOAc/ hexanos) para dar 1-(6- (4-acetilfenil) quinolin-2-il) etanona (781 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.776 min; m/z 290.29 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de R (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.35 (d, J=8.3 Hz, 1 H) , 8.34 (d, J=8.3 Hz, 1 H) , 8.19 (d, J"=8.5 Hz, 1 H) , 8.12 (d, J=8.3 Hz, 1 H) , 8.08 - 8.16 (m, 3 H) , 7.85 (d, J"=8.3 Hz, 1 H) , 7.82 - 7.89 (m, 1 H) , 2.91 (s, 3 H) , 2.69 (s, 3 H) .
Intermediario 161 2-bromo-1- (6- (4- (2 -bromoacetil) fenil) quinolin-2-il) etanona A una suspensión de 1- (6- (4-acetilfenil) quinolin-2-il) etanona (100 mg, 0.346 mmol) y HBr (0.061 mi, 0.35 mmol) en ácido acético (3 mL) se añadió tribromuro de piridinio (221 mg, 0.691 mmol), la mezcla de reacción se agitó a 70° C) durante 6 h. La reacción se concentró al vacío y el residuo se repartió entre NaHC03 ac . (15 mi) y EtOAc (30 mi +10 mi + 10 mi) . Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron, se filtraron y se concentraron, para dar 2-bromo-l- (6- (4- (2-bromoacetil) fenil) quinolin-2-il) etanona bruta (120 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 4.138 min; m/z 448.01 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 162 4 -metilpirrolidin-1 , 2 -dicarboxilato de (2S, 4S) -2- (2 - (6- (4- (2 - ( (2S, 4S) -1 - (tere-butoxicarbon.il) -4 -metilpirrolidin-2- carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 2 -tere- butilo A una solución de 2-bromo-l- (6- (4- (2-bromoacetil) fenil) quinolin-2-il) etanona (60 mg, 0.134 mmol) y ácido ( (2S,4S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -4 -metilpirrolidin- 2 -carboxílico (64.6 mg, 0.282 mmol) en acetonitrilo (2 mi) se añadió DIPEA (0.094 mi, 0.537 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (20 mi + 20 mi)/ NaHC03 (5 mi) ac . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHC03 ac . , salmuera, se secaron, se filtraron y se concentraron para dar 4-metilpirrolidin-l, 2 -dicarboxilato de (2S, 4S) -2- (2 - (6- (4 - (2 - ( (2S,4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2- carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 1- tere-butilo (100 mg) en forma de un sólido naranja. Este material se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 4.558 min; m/z 742.36 (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 163 2- (5- (4- (2- (2- ( (2S,4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4- metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol -4-il) quinolin-6-il) fenil ) -lH-imidazol-2-il) -4-metilpirrolidin-l-carboxilato de (2S,4S)- terc-butilo una solución de (2S,4S) -2- (2- (6- (4- (2- ( (2S, S) ( terc-butoxicarbonil ) -4 -met ilpirrolidin-2 -carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 1- fcerc-butilo 4-metilpirrolidin-l, 2 -dicarboxilato (100 mg, 0.134 mmol) en tolueno (3 mi) se añadió acetato amónico (207 mg, 2.69 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 120 °C (reactor de microondas) durante 3 horas. La reacción se repartió entre EtOAc (20 mi + 10 mi + 10 mi) y NaHC03 ac . (10 mi) y las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron y se concentraron. Este producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa (H20-CH3CN con amortiguador de NH4OAc lOmM) para dar el producto 2- (5- (6- (4- (2- ( (2S, 4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) quinolin-2 - il ) -lH-imidazol-2-il) -4-metilpirrolidin-1-carboxilato de (2S, 4S) -tere-butilo (16.6 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.270 min; m/ z 704.72 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 164 2- (2- ( (2S, 4S) -4-metilpirrolidin-2-il) -1H-imidazol -4 -il) -6- (4- (2- ( (2S, 4S) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5- il) fenil) quinolina A una solución de 2 - (5- ( 6 - (4- (2 - ( ( 2S , 4S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il ) fenil ) quinolin- 2 - il ) - 1H- imidazol -2 - il ) -4 -metilpirrolidin-1-carboxilato de (2S, 4S) - tere-butilo (16.6 mg, 0.024 truno1) en dioxano (1 mi) se añadió HC1 4 (0.2 mi, 0.800 mmol) en dioxano y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. La mezcla de reacción se concentró para dar una sal HCL bruta de 2 - (2- ( (2S, 4S) -4-metilpirrolidin-2-il) -1H- imidazol- 5 -il) -6-(4-(2-((2S,4S)-4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) quinolina (19.1 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.765 min; m/z 504.47 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
.Esquema de reacción Intermediario 165 4-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2- (6- (5- (2- ( (2S,4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2- carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 1-terc-butilo A una solución de 2-bromo-l- (6- (4- (2-bromoacetil) fenil) quinolin-2-il) etanona (50 mg, 0.11 mmol) y ácido (2S, 5S) -1- ( terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2-carboxílico (54 mg, 0.24 mmol) en acetonitrilo (2 mi) se añadió DIPEA (0.059 mi, 0.335 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se repartió entre EtOAc (20 mi + 20 mi)/ NaHC03 (5 mi) ac . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCC>3 ac . sat . , salmuera, se secaron, se filtraron y se concentraron para dar 4-metilpirrolidin-l, 2 -dicarboxilato de (2S, 5S) -2- (2-(6-(5-(2-((2S,4S)-l-( terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2 -carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 1- ere-butilo (69 mg) en forma de un sólido naranja. Este material se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 4.483 min; m/z 744.61 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mra usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se erminaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo electrorrocío .
Intermediario 166 2- (5- (4- (2- (2- ( (2S, 5S) -1- (terc-butoxicarbonil) -5- metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) quinolin-6-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metilpirrolidin-l-carboxilato de (2S,5S)- tere-butilo añadió acetato amónico (107 mg, 1.39 mmol) A una suspensión de 4-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S,5S)-2-(2-(6-(5-(2-((2S,4S)-l- (terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2-carboniloxi) acetil) fenil) quinolin-2-il) -2-oxoetil) 1- tere-butilo (69 mg, 0.093 mmol) en tolueno (volumen: 2 mi) y la mezcla de reacción se agitó a 120 °C (reactor de microondas) durante 3 horas. La reacción se repartió entre EtOAc (10 mi + 5 mi + 5 mi) y NaHC03 ac . (5 mi) . Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron y se concentraron y el producto bruto se purificó mediante HPLC preparativa (H20-CH3CN con amortiguador de NH40Ac lOmM) para dar el producto 2- (5- (6- (4- (2- ( (2S , 5S) -1- ( terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol -4 -il ) fenil ) quinolin-2 - il ) - 1H- imidazol - 2 - il ) - 5 -metilpirrolidin-1-carboxilato de (2S , 5S) - tere-butilo (13.4 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.350 min; m/z 702.29 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.37 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.16 (S, 1 H) , 8.07 - 8.10 (m, 2 H) , 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.79 - 7.88 (m, 5 H) , 7.40 (s, 1 H) , 4.90 - 5.07 (m, 2 H) , 3.99 - 4.13 (m, 2 H) , 2.10 - 2.39 (m, 6 H) , 1.68 - 1.82 (m, 2 H) , 1.43 (d, J=6.0 Hz, 6 H) , 1.24 - 1.59 (m, 22 H) .
Intermediario 167 2- (2- ( (2S, 5S) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) -6- (4- (2- ( (2S, 5S) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5- il) fenil) quinolina A una solución de 2- (5- (6- (4- (2- ( (2S, 5S) -1- ( ere-butoxicarbonil ) -5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il ) fenil ) quinol in- 2 - il ) - 1H- imidazol -2 - il ) - 5 -metil ir ol idin-1-carboxilato de (2S, 5S) - terc-butilo (12.7 mg, 0.018 mmol) en dioxano (1 mi) se añadió HC1 4M (0.2 ml , 0.8 mmol) en dioxano y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. La mezcla de reacción se concentró para dar una sal HCL bruta de 2- (2- ( (2S, 5S) -5-metilpirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) -6-(4-(2-((2S,5S) -4-metilpirrolidin-2-il) -1H-imidazol-5-il) fenil) quinolina (18.1 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.597 min; m/z 504.46 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de (400 MHz , MeOD) d ppm 9.09 (d, .7=9.0 Hz, 1 H) , 8.66 (s, 1 H) , 8.54 - 8.61 (m, 2 H) , 8.51 (d, J=9.0 Hz, 1 H) , 8.50 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.00 - 8.08 (m, 4 H) , 7.99 (s, 1 H) , 5.14 (t, J=8.5 Hz, 1 H) , 5.07 (t, J=8.0 Hz, 1 H) , 3.90 - 4.04 (m, 2 H) , 2.52 - 2.75 (m, 4 H) , 2.39 -2.53 (m, 2 H) , 1.98 - 2.14 (m, 2 H) , 1.59 (dd, J=9.7, 6.7 Hz, 6 H) .
Esquema de reacción 43 El intermediario 173 se preparó de forma análoga a intermediario 139 del esquema de reacción 35 usando 6 -bromo 2 -cloroquinoxalina como material de partida en lugar de 6 bromo-2-cloroquinolina. Los datos analíticos se muestran continuación : Intermediario 168 6-bromo-2- (1-etoxivinil) quinoxalina La reacción dio el producto deseado (380 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 4.178 min; m/z 278.9, 280.98 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 169 2-jbromo-l - (6-bromoquinoxalin-2-il) etanona La reacción dio el producto deseado (390 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.743 min; m/z 331.12 (1:2:1) (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electro rocío .
Intermediario 170 2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2 , 3 -dicarboxilato de (IR, 3S, 5R) -3- (2- (6-bromoquinoxalin-2-il) -2-oxoetil) 2-terc-butilo La reacción dio el producto deseado (270 mg) en forma de un sólido rosa/naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 4.115 min; m/z 473, 475.81 (1:1) (MH- ) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocio .
Intermediario 171 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6-bromo-2-quinoxalinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de tere-butilo La reacción dio el producto deseado (125 mg) en forma de un sólido rojo/naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 3.958 min; m/z 453.90, 455.87 (1:1) (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 9.40 (s ancho, 1 H) , 8.22 (d, J=2.0 Hz, 1 H) , 7.96 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 7.93 - 7.99 (m, 1 H) , 7.90 (dd, J=8.8, 2.0 Hz , 1 H) , 4.71 - 4.81 (m, 1 H) , 3.59 (s ancho, 1 H) , 2.49 - 2.63 (m, 1 H) , 2.31 - 2.45 (m, 1 H) , 1.68 - 1.82 (m, 1 H) , 1.16 - 1.53 (m, 5 H) , 0.81 - 0.94 (m, 1 H) , 0.64 (s ancho, 1 H) .
(IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2- quinoxalini1) -IH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2- carboxilato de tere-butilo La reacción dio el producto deseado (64.4 mg) en forma de un sólido amarillo brillante. Tiempo de retención en la CL-EM 3.696 min; m/z 699.3 (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de LH (400 MHz , DMS0-d6) d ppm 9.45 (s, 1 H) , 8.31 (s, 1 H) , 8.19 (d, J=8.3 Hz, 1 H) , 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.97 (s, 1 H) , 7.81 - 7.95 (m, 4 H) , 7.60 (s, 1 H) , 4.57 - 4.80 (m, 2 H) , 3.23 - 3.60 (m, 2 H) , 2.23 - 2.48 (m, 4 H) , 1.61 - 1.75 (m, 2 H) , 1.28 (s ancho, 18 H) , 0.73 - 0.87 (m, 2 H) , 0.59 (s ancho, 2 H) .
Intermediario 173 C (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -4 -metil-2 - pirrolidinil ) -1H-imidazol -4 -il) fenil) -2-quinolinil -1H- imidazol -2-il) -4 -metil-l-pirrolidinil) carbonil ) -2- metilpropil) carbamato de metilo La reacción dio una sal HC1 del producto deseado (80 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.915 rain; m/z 501.42 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de eOH/0.1% de ácido t r i f luoroacé t i co . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 9.54 (s, 1 H) , 8.40 - 8.43 (m, 1 H) , 8.34 (s, 1 H) , 8.23 - 8.30 (m, 2 H) , 8.13 (s, 1 H), 8.00 - 8.08 (m, 4 H) , 4.88 - 5.08 (m, 2 H) , 3.53 - 3.77 (m, 2 H) , 2.64 - 2.90 (m, 4 H) , 2.08 - 2.22 (m, 2 H) , 1.23 -1.36 (m, 2 H) , 1.02 - 1.14 (m, 2 H) .
Esquema de reacción de conformidad con el procedimiento descrito para la síntesis del Intermediarlo 120 Intermediario 174 3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) etinil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de (IR, 3S, 5R) -tere-butilo El compuesto se preparó de un modo análogo al del intermediario 153 con los materiales de partida adecuados para dar una sal en TFA del compuesto del título (121 mg) en forma de un cristal amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.100 min; m/z 647.37 (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 175 (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 4S) -4 -metilpirrolidin-2 -il ) -1H- imidazol-4-il) naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano A una solución de una sal en TFA de 3- (5- ((6- (2-( (2S,4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4 -metilpirrolidin- 2 - il ) -1H-imidazol-4-il) naftalen-2 - il ) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - terc-butilo (115 mg, 0.131 mmol) en dioxano (1.5 mi) se añadió HCl 2M (0.33 mi, 0.66 mmol) en dioxano (2 mi) y la reacción se agitó enérgicamente durante la noche. La reacción se concentró para dar una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2-( (2S,4S) -5-metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol -4 - il ) naftalen- 2 -il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (87 mg) , que se usó sin purificación adicional. Tiempo de retención en la CL-EM 2.793 min; m/z 449.41 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 rara usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 45 Intermediarlo 114b b Intermediarlo 178 Intermediario 177 Intermediarlo 178 El Intermediario 178 se preparó de forma análoga a la preparación del intermediario 117 en el Esquema de reacción 29 usando ácido (S) -2 - ( erc-butoxicarbonilamino) -3 - metilbutanoico como material de partida en lugar de ácido ( 2S , 5S) - 1- ( erc-butoxicarbonil ) -5-metilpirrolidin- 2 - carboxílico. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 176 (S) -2- (4- (6- (2- ( (S) -2- (terc-butoxicarbonilamino) -3- metilbutanoiloxi) acetil) naftalen-2-il) fenil) -2-oxoetil 2- (tere-butoxicarbonilamino) -3 -metiIbutanoato La reacción dio el producto deseado (700 mg) en forma de un sólido pardo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.243 min; m/z 717.5 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1.0 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 177 ( (1S) -1- (4 - (4 - (6- (2- ( (1S) -1- ( (terc-butoxicarbonil) amino-2-metilpropil) -lH-imidazol -4-il) -2 -naftil ) fenil) -IH-imidazol -2- il) -2-metilpropil) carbamato de terc-butilo La reacción dio el producto deseado (453 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.407 min; m/z 677.6 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100 %/ solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1.0 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío.
Intermediario 178 (S) -1- (5- (4- (6- (2- ( (S) -l-amino-2-metilpropil) -lH-imidazol-4- il) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -metilpropan-1 - amina La reacción dio una sal HCl del producto deseado (390 mg) en forma- de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.080 min; m/z 477.4 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1.0 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de e 1 e c t rorroc í o .
Esquema de reacción Intermediarlo 180 Intermediarlo 181 El Intermediario 181 se preparó de forma análoga a la preparación del intermediario 117 en el Esquema de reacción 29 usando ácido (S) -4 - ( fcerc-butoxicarbonil)morfolino-3-carboxílico como material de partida en lugar de ácido (2S, 5S) -1- ( terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2-carboxílico. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 179 morfolina-3.4-dicarboxilato de (S) -3- (2- (4- (6- (2- ( (S) -4- (terc-butoxicarbonil) morfolina-3 -carboniloxi) acetil) naftalen- 2-il) fenil) -2-oxoetil) 4-terc-butilo La reacción dio una sal HCl del producto deseado (1.60 g) en forma de una espuma solidificada blancuzca. Tiempo de retención en la CL-EM 4.413 min; m/z 770.29 (MNa+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-IOAS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/O.l% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H NMR (400 Hz , CLOROFORMO-d) d ppm 8.47 (s, 1 H) , 8.13 (s, 1 H) , 7.98 - 8.11 (m, 5 H) , 7.86 (d, J=8.3 Hz, 3 H) , 5.39 - 5.70 (m, 4 H) , 4.66 - 4.83 (m, 2 H) , 4.46 - 4.63 (m, 2 H) , 3.91 - 4.03 (ra, 2 H) , 3.68 - 3.85 (m, 4 H) , 3.49 - 3.59 (m, 3 H) , 3.27 - 3.40 (m, 1 H) , 1.51 (s, 18 H) .
Intermediario 180 3- (5- (4- (6- (2- ( (R) -4- (terc-butoxicarbonil) morfolin-3-il) -1H-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol -3-il) morfolin- 1-carboxilato de (R) -tere-butilo La reacción dio el producto deseado (1.12 g) en forma de un sólido naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 3.608 min; m/z 707.94 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B( un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.22 (s, ancho, 1 H) , 8.09 (s, 1 H) , 7.90 - 7.97 (m, 2 H) , 7.75 - 7.89 (m, 6 H) , 7.49 (s ancho, 1 H) , 7.41 (s ancho, 1 H) , 5.17 -5.24 (m, 2 H) , 4.42 (t, J=11.2 Hz, 2 H) , 3.82 - 3.95 (m, 6 H) , 3.59 (tt, J=11.6, 3.0 Hz , 2 H) , 3.39 - 3.51 (m, 2 H) , 1.50 (d, J=2.8 Hz, 18 H) .
Intermediario 181 (R) -3- (5- (4- (6- (2- ( (R) -morfolin-3 -il ) -lH-i idazol-4-il) - naftalen-2-il) fenil -1H-imidazol -2-il) orfolina reacción dio una sal HCl del producto deseado (312 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.988 min; m/z 507.72 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 ram usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esguema de reacción Intermediarlo 114b Intermediario 182 Intermediarlo 183 Intermediarlo 184 Intermediario 184 se preparó de forma análoga la preparación del intermediario 117 en el Esquema de reacción 29 usando ácido (S)-l-(terc-butoxicarbonil) piperidin-2-carboxílico como material de partida en lugar de ácido (2S, 5S) -1- ( erc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2 -carboxílico . Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 182 Piperidin-1, 2-dicarboxilato de (S) -2- (2- (4- (6- (2- ( (2S) -1- (terc-butoxicarbonil)piperidin-2-carboniloxi) acetil) naftalen- 2-il) fenil) -2-oxoetil) 1- tere-butilo La reacción dio el producto deseado (1.67 g) en forma de una espuma amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 4.850 min; m/z 766.37 (MNa+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de H NMR (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 8.47 (s, 1 H) , 8.13 (s, 1 H) , 7.99 - 8.10 (m, 5 H) , 7.83 -7.89 (m, 3 H) , 5.32 - 5.67 (m, 4 H) , 4.92 - 5.13 (m, 2 H) , 3.93 - 4.11 (m, 2 H) , 3.00 - 3.28 (m, 2 H) , 2.40 (s ancho, 2 H) , 1.68 - 1.84 (m, 6 H) , 1.49 (s, 18 H) , 1.39 - 1.67 (m, 4 H) .
Intermediario 183 2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -1- (terc-butoxicarbonil)piperidin-2-il) -1H- imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2- il)piperidin-l-carboxilato de (S) -tere-butilo La reacción dio el producto deseado (1.18 g) en forma de un sólido amarillo brillante.
Tiempo de retención en la CL-EM 3.778 min; m/z 703.97 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/O.l% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.22 (s ancho, 1 H) , 8.09 (s, 1 H) , 7.93 (t, J=l .7 Hz, 2 H) , 7.73 -7.88 (m, 6 H) , 7.46 (s ancho, 1 H) , 7.38 (s ancho, 1 H) , 5.47 (s ancho, 2 H) , 4.03 - 4.15 (m, 2 H) , 2.99 - 3.12 (m, 2. H) , 2.46 (S ancho, 2 H) , 1.80 - 1.94 (m, 2 H) , 1.50 (d, J=2.3 Hz, 18 H) , 1.44 - 1.76 (m, 8 H) .
Intermediario 184 (S) -3- (5- (4- (6- (2- ( (S) -piperidin-2 -il) -lH-imidazol-4-il) - naftalen-2-il) fenil-lH-imidazol -2 -il)piperidina La reacción dio una sal HCl del producto deseado (280 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.015 min; m/z 503.69 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector- de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XH (400 MHz, DMSO-ds.) d ppm 10.06 (s ancho, 2 H) , 9.85 (s ancho, 2 H) , 8.48 (s, 1 H) , 8.36 (s, 1 H) , 8.09 - 8.19 (m, 3 H) , 7.96 - 8.09 (m, 7 H) , 4.70 (s ancho, 2 H) , 3.42 - 3.53 (m, 2 H) , 3.14 (s ancho, 2 H) , 2.10 - 2.37 (m, 4 H) , 1.60 - 2.00 (m, 8 H) .
Esquema de reacción 48 El Intermediario 187 se preparó de forma análoga la preparación del intermediario 117 en el Esquema d reacción 29 usando ácido (2S , 5R) -1- ( terc-butoxicarbonil) -5 metilpirrolidin-2-carboxílico (preparado según JOC 1995, p 5011) como material de partida en lugar de ácido (2S,5S)-1- ( erc-butoxicarbonil ) -5-metilpirrolidin-2-carbox£lico. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación : Intermediario 185 5-metilpirrolidin-l, 2-dicarboxilato de (2S, 5R) -2- (2- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -1- (terc-butoxicarbonil) -5-metilpirrolidin-2- carboniloxi) acetil) aftalen-2 -il) fenil) -2-oxoetil) 1-terc- butilo La reacción dio el producto deseado (979 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 4.796 min; m/z 766.19 (MNa+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% dé ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 8.47 (s ancho, 1 H) , 8.13 (d, J=2.5 Hz, 1 H) , 7.99 -8.11 (m, 5 H) , 7.86 (dd, J=7.8, 2.3 Hz, 3 H) , 5.21 - 5.77 (m, 4 H) , 4.51 - 4.58 (m, 1 H) , 4.47 (dd, J=7.8, 4.5 Hz, 1 H) , 4.17 - 4.26 (m, 1 H) , 4.07 - 4.14 (m, 1 H) , 2.23 - 2.48 (m, 6 H) , 1.60 - 1.68 (m, 2 H) , 1.44 - 1.52 (m, 18 H) , 1.25 (d, J=6.3 Hz, 3 H) , 1.21 (d, J=6.3 Hz, 3 H) .
Intermediario 186 2- (5- (4- (6- (2- ( (2S, 5r) -1- (terc-butoxicarbonil) -5- metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-ímidazol-2-il) -5-metilpirrolidin-l-carboxilato de (2S,5R) terc-jbutilo La reacción dio el producto deseado (561 mg) en forma de una espuma solidificada naranja. Tiempo de retención en la CL-EM 3.673 min; m/z 703.95 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Intermediario 187 2- (-5- ( (2S, 5R) -5-metilpirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -5- metilpirrolidin-2-il) -1H- imidazol -4-il) naftalen-2-il) fenil ) - lH-imidazol La reacción dio una sal HCl del producto deseado (157 mg) en forma de un sólido naranja claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.975 min; m/z 503.71 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H20/90% de eOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 9.84 - 10.25 (m, 4 H) , 8.54 (s, 1 H) , 8.36 (s, 1 H) , 7.95 - 8.22 (m, 10 H) , 5.15 (s ancho, 2 H) , 4.00 (s ancho, 2 H) , 2.53 - 2.63 (m, 4 H) , 2.30 - 2.41 (m, 2 H) , 1.67 - 1.82 (m, 2 H) , 1.43 (d, J=4.3 Hz, 6 H) .
Esquema de reacción Intermediario 188 Intermediario 189 El Intermediario 189 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 49 usando ácido (S)-l-(terc-butoxicarbonil ) -4 -metilenpirrolidin-2 -carboxílico como material de partida. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 188 (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metilen-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naft.il) fenil) -1H- imidazol-2-il) -5-metilen-l-pirrolidincarboxilato de tere- butilo A una suspensión espesa agitada de S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4 -metilenpirrolidin-2 -carboxílico (509 mg, 2.241 mmol) y 2 -bromo-1-4 - ( 6 - (2 -bromoacetil ) naftalen-2 -il) fenil) etanona (500 mg, 1.121 mmol) en MeCN (25 mi) se añadió Base de Hunig (0.43 mi, 2.47 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con agua, solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrado, el residuo se suspendió en xileno (25 mi) y se añadió acetato amónico (1.3 g, 16.85 mmol) . El recipiente de presión se selló y se calentó a 140 °C durante 2.5 horas La mezcla de reacción se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 80 g (eluido con 15% B a 100% B en 1 1 , donde el solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (2S)-2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -4 -metilen-2 -pirrolidinil) - 1H- imidazol - 4 - il ) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol - 2 - il ) - 4 -met ilen- 1 -pirrolidincarboxilato de tere-butilo (380 mg, rendimiento del 45 %) . Tiempo de retención en la CL-EM 3.32 min; Calculado para C42H47N604 : 699.36 m/z Encontrado 699.41 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.21 (s, 1H) , 8.14 (s, 1H) , 7.98 (s, 1H) , 7.97 (s, 1H) , 7.87-7.83 (m, 6H) , 7.54 (s, 1H) , 7.46 (s, 1H) , 5.14 (s, 2H) , 5.19 (s, 2H) , 4.30 (s ancho, 2H) , 4.15 (s ancho, 2H) , 3.22-3.16 (m, 2H) , 2.81 - 2.76 (m, 2H) , 1.51/1.31 (s, 18H) .
Intermediario 189 2 ( (S) -4-metilenpirrolidin-2-il) - 4 - (4 - ( 6 - (2 - ( (S) - 5 -metilENpirrolidin-2- il) - 1H- imidazol -4 - il ) naftalen- 2 -il) fenil) - 1H- imidazol Una solución de HCl 4N en dioxano (10 mi) se añadió a ( 2S ) - 2 - (4 - ( 4 - ( 6 - ( 2 - ( ( 2S ) - 1 - ( erc-butoxicarbonil ) -4 -met len- 2 -pirrol idini 1 ) - 1H- imidazol - 4 - il ) -2-naftil ) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4 -met i len- 1 -pirrolidincarboxilato de tere-butilo (380 mg, 0.544 mmol) en MeOH (10 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 4 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 350 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.68 min; Calculado para C32H31N6: 499.26 m/z Encontrado 499.21 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 50 El Intermediario 191 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 50 usando ácido (S)-2 -( terc-butoxicarbonilamino) propanoico como material de partida. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 190 ( (13) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( (terc-butoxicarbonil) amino-2- etil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) - etil) carbamato de tere-butilo A una suspensión espesa agitada de ácido (S)-2- ( erc-butoxicarbonil) propanoico (424 mg, 2.24 mmol) y 2-bromo-1- (4- (6 - (2-bromoacetil ) naftalen-2 -il ) fenil) etanona (500 mg, 1.121 mmol) en MeCN (50 mi) se añadió Base de Hunig (0.39 mi, 2.24 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con agua, solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrado, el residuo se suspendió en xileno (25 mi) y se añadió acetato amónico (1.5 g, 20.18 mmol) . El recipiente de presión se selló y se calentó a 140°C durante 3.5 horas La mezcla de reacción se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 90g (eluido con 15% B a 100% B en 1 1 , donde el solvente B = acetato de etilo y el solvente A hexanos) para dar ( 1S ) - 1 - ( 4 - ( 4 - ( 6 - ( 2 - ( ( 1S ) - 1 - ( t ere -butoxicarbonil) amino) etil-l.Fí-imidazol-4-il) - 2 -naft i 1 ) f eni 1 ) - 1H- imidazol - 2 - i 1 ) et i 1 ) carbamato de terc-butilo (368 mg , rendimiento del 47 %) . NOTA: La muestra fue sólo parcialmente soluble en cloruro de metileno. Tiempo de retención en la CL-EM 3.24 min; Calculado para C36H43 604 : 623.33 m/z Encontrado 623.37 [M+H] + . Los datos de CL se " registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 rara usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de E se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de elect rorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.11 (s, 1H) , 7.95 (t, J = 8.24 Hz , 2H) , 7.86-7.79 (m, 6H) , 7.46 (s, 1H), 7.37 (s, 1H) , 4.93-4.89 (m, 2H) , 1.57-1.48 (m, 24H) .
Intermediario 191 (S) -1- (4- (4- (6- (2- ((S) -1-aminoetil) -lH-imidazol-4-il) - naftalen-2 -il) fenil-lH-imidazol -2-il) etanamina Una solución de HC1 4N en dioxano (10 mi) se añadió a (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- (tercbutoxicarbonil ) amino) etil) -lJí-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -etil) carbamato de tere-butilo (368 mg. 0.59 mmol) en MeOH (10 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 5 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 334 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 1.33 min; Calculado para C26H27 6: 423.23 m/z Encontrado 423.17 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENO ENEX® Luna de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 51 El Intermediario 193 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 51 usando ácido (S)-2-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) propanoico como material de partida. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 192 ( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( (tere- butoxicarbonil) (metil) amino-2 -etil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1K-imidazol -2 -il) -etil) metilcarbamato de tere-butilo A una suspensión espesa agitada de ácido (S)-2-( terc-butoxicarbonil (metil) amino) propanoico (456 mg, 2.241 mmol) y 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona (500 mg, 1.121 mmol) en MeCN (50 mi) se añadió Base de Hunig (0.78 mi, 4.48 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con agua, solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrado, el residuo se suspendió en xileno (25 mi) y se añadió acetato amónico (859 mg, 11.15 mmol) . El recipiente de presión se selló y se calentó a 140 °C durante 3 horas La mezcla de reacción se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 90g (eluido con 15% B a 100% B en 1 1 , donde el solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) (metil ) amino) etil - 1H- imidazol -4 - il) -2-naftil) fenil) -lfí- imidazol -2 -il) etil) metilcarbamato de tere-butilo (460 mg, rendimiento del 58%) . Tiempo de retención en la CL-EM 3.28 min Calculado para C38H4 N604 : 651.37 m/z Encontrado 651.34 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-IOAS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ?. (500 MHz , MeOD) d ppm 8.24-8.12 (m, 2H) , 7.98-7.82 (m, 8H) , 7.52-7.42 (m, 2H) , 5.47 (s ancho, 2H) , 2.77 (s, 3H) , 2.76 (s, 3H),1.64 (m, 6H) , 1.52 (s, 18H) .
Intermediario 193 (S) -N-metil-1- (4- (4- (6- (2- ( (S) -1- (metilamino) etil) -1H-imidazol-4-il) -naítalen-2-il) fenil -1H-imidazol -2-il) etanamina Una solución de HC1 4N en dioxano (10 mi) se añadí ó a (lS)-l-(4-(4-(6-(2-( (lS)-l- (tere- butoxicarbonil) (metil) amino) etil) -lfí-imidazol-4-il) -2-naftil)fenil) -lH-imidazol-2-il) -etil) meti 1 carbama o de tere-butilo (434 mg. 0.667 mmol) en MeOH (10 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 3 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HC1 (teoría supuesta: a 396 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 1.44 rain; Calculado para C28H3iN6 : 451.26 m/z Encontrado 451.17 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENO ENEX® Luna de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 52 El Intermediario 196 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 52 usando ácido (2S, 4S) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -4-metilenpirrolidin-2-carboxílico como material de partida. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 194 Ácido (2S, 4S) -1 - (terc-butoxicarbonil) -4-metilpirrolidin-2- carboxílico Una solución de ácido (S) - 1- ( erc-butoxicarbonil ) 4-metilenpirrolidin-2-carboxílico (4 g, 17.60 mmol) en 2-propanol (10 mi) se añadió a una suspensión purgada con nitrógeno de 10% de paladio sobre carbono (936 mg) en 2-propanol (240 ral) y el matraz se cargó con gas hidrógeno (1 atra) . Después de agitar 18, se retiró el catalizador mediante filtración sobre CELITE® y el filtrado se concentró. El análisis CL mostró que la muestra contenía -14% del isómero trans y la recristalización del tolueno enriqueció el isómero cis a 96% (16:1) . Tiempo de retención en la CL-EM 3.26 min; Calculado para CiiH2oN60 : : 230.14 m/z Encontrado 252.14 [M+Na] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® de 2 x5 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
RMN de XH (500 MHz , MeOD) d ppm 4.21 - 4.17 (m, 1H) , 3.76 -3.67 (m, 1H) , 2.96 - 2.92 (m, 1H) , 2.49 - 2.46 (m, 1H) , 2.30 - 2.29 (m, 1H) , 1.59 - 1.51 (m, 1H) , 1.47/1.43 (m, 9H) , 1.10 -1.06 (m, 3H) .
Intermediario 195 (2S, 4S) -2- (4 - (4 - (6- (2- ( (2S, 4S) -1- (terc-butoxicarbonil) -4- metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidincarboxilato de terc-butilo A una suspensión espesa agitada de ácido (2S,4S)-1-( erc-butoxicarbonil) -4 -metilpirrolidin-2 -carboxílico (500 mg, 2.18 mmol) y 2-bromo-l-4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il ) fenil ) etanona (486 mg, 1.09 mmol) en acetonitrilo (11 mi) se añadió Base de Hunig (0.381 mi, 2.181 mmol) . La mezcla heterogénea se agitó durante 18 horas a TA y se añadió base de Hunig adicional (1 equiv.) y la mezcla se agitó durante 24 h. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en cloruro de metileno y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada, salmuera y se secó sobre sulfato sódico. El lavado se repitió 2 veces. El producto bruto, asilado en forma de una espuma parda, se suspendió en xileno (15 mi) y se añadió acetato amónico (1.261 g, 16.36 mmol). El recipiente de presión se selló y se introdujo en un baño de aceite precalentado (140 °C) y se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 80 g (eluido con 25% B a 100% B en 1.5 1, y se conservó 0.5 1 B. solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) - 1 - ( terc-butoxicarbonil ) -4-metil-2-pirrolidinil) -lfí-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (214.2 mg, 27.9 %) en forma de una espuma amarilla. Tiempo de retención en la CL-EM 3.32 min; Calculado para C42H51N604 : 703.40 m/z Encontrado 703.28 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ^ (500 MHz, MeOD) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.12 (s, 1H) , 7.96-7.94 (m, 2H) , 7.87-7.82 (m, 6H) , 7.50 (s, 1H) , 7.42 (s, 1H) , 4.87 (s ancho, 2H) , 3.81 (s ancho, 2H) , 3.24-3.18 (m, 2H) , 2.53-2.50 (m, 2H) , 2.36 (s ancho, 2H) , 1.82-1.74 (m, 2H) , 1.46/1.23 (s, 18H) , 1.17-1.16 (m, 6H) .
Intermediario 196 2- ( (2S, 4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -5- metil -2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol Una solución de HCl 4N en dioxano (15 mi) se añadió a (2S,4S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-l- ( erc-butoxicarbonil ) -4- metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol-2-il) -4 -metil-l-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (200 mg. 0.285 mmol) en MeOH (5 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 185 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.64 min; Calculado para C32H35N6: 503.29 m/z Encontrado 503.20 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0¾ de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 53 intermediarlo 197 Intermediarlo 198 El Intermediario 201 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 53 usando ácido (2S , 4R) -1- ( terc-butoxicarbonil ) -4-metilenpirrolidin-2-carboxílico como material de partida. Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 197 El isómero trans se aisló de una mezcla de cis, trans, y el análogo de dimetil que podría obtenerse a partir de la alquilación con yoduro de metilo de 2-metil-5-oxopirrolidin- 1 , 2 -dicarboxilato de (S) -1- tere-butilo de conformidad con el proceso descrito en Tetrahedron Letters, 2003, 3203-3205, RMN de XH (500 MHz, MeOD) d ppm 4.66-4.64 (m, 1H) , 3.80 (s, 3H) , 2.34-2.29 (m, 1H) , 2.04-1.99 (m, 1H) , 1.49 (s, 9H) , 1.21-1.19 (m, 3H) .
Intermediario 198 A una solución del Intermediario 197 (6.06 g, 23.55 mmol) en THF (180 mi) se añadió complejo de sulfuro de borano-metilo (17.67 mi, 35.3 mmol) y la mezcla de reacción se c calentó a 40 °C durante 16 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua (250 mi de cada uno) . La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 X 60 mi) y la fase orgánica combinada se secó con Na2S04( y se concentró al vacío. El aceite incoloro resultante se purificó con una cromatografía instantánea (10-65% de EtOAc/hexano) para dar el Intermediario 198 en forma de un aceite incoloro (3.65 g) . RMN de K NMR (CDC13, d = 7.24 ppm, 400 MHz) : 4.36-4.33 (dd, J=2.4, 10, 0.4H) , 4.26-4.23 (dd( J=3, 8.9, 0.6 H) , 3.73-3.63 (xs' superpuesta con (m' , 4H) , - 2.97-2.85 (m, 1H) , 2.37 (m, 1H) , 2.04 (m, 1H) , 1.81 (m, 1H) , 1.44-1.39 (dos xs', 9H) , 1.03-1.00 (dos s', 3H) .
Intermediario 199 Ácido (2S, 4R) -1- (terc-butoxicarbonil) -4 -metilpirrolidin-2- carboxílico A una solución del éster Intermediario 198 (3.63 g, 14.92 mmol) en etanol (36 mi) se añadió solución de LiOH (0.393 g, 10.42 mmol) en agua (18.00 mi), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 22 h. El solvente orgánico se evaporó a vacío y el residuo se diluyó con agua (30 mi) y se lavó con acetato de etilo (50 mi) . Se enfrió en un baño de agua y hielo, y se acidificó a un intervalo de pH de ~2 con HCl 1 N. Después se extrajo con EtOAc (50 mi, 2x) . La capa orgánica se secó con Na2S0 y se concentró a vacío para dar el Intermediario 199 en forma de un aceite incoloro, que se convirtió en un sólido blanco tras la-« exposreió extendida-'a"'~ alto' vacío (3.3 g) . RMN de 1H NMR (CDC13, d = 7.24 ppm, 400 MHz ) : 4.37-4.27 ( 'm' superpuesta 1H) , 3.72-3.50 (m, 1H) , 3.01-2.83 ( 'm' superpuesta, 1H) , 2.50-2.11 (m, 2H) , 1.89-1.57 (m, 1H) , 1.47-1.39 (dos »s', 9H) , 1.04-1.03 (dos (s' , 3H) .
Intermediario 200 (2S, 4R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4R) -1- (terc-butoxicarbonil) -4- metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidincarboxilato de terc-butilo A una suspensión espesa agitada de ácido (2S,4R)-1-( erc-butoxicarbonil) -4 -metilpirrolidin-2 -carboxílico (500 mg, 2.18 mmol) y 2-bromo-l-4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il ) fenil ) etanona (486 mg, 1.09 mmol) en acetonitrilo (11 mi) se añadió Base de Hunig (0.381 mi, 2.181 mmol). La mezcla heterogénea se agitó durante 18 h a TA y se añadió base de Hunig adicional (1 equiv. ) y la mezcla se agitó durante 24 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo, se suspendió en cloruro de metileno y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada, salmuera y se secó sobre sulfato sódico. El lavado se repitió 2 veces. El producto bruto, aislado en forma de una espuma parda, se suspendió en xileno (15 mi) y se añadió acetato amónico (1.261 g, 16.36 mmol) . El recipiente de presión se selló y se introdujo en un baño de aceite precalentado (140 °C) y se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 80 g (eluido con 25% B a 100% B en 1.5 1, y se conservó 0.5 1 B. solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (2S,4R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4R) -1- ( terc-butoxicarbonil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (214.2 mg, 27.9 %) en forma de una espuma amarilla. Tiempo de retención en la CL-EM 3.32 min; Calculado para C42H51 604 : 703.40 m/z Encontrado 703.28 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 2H (500 MHz , MeOD) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.12 (s, 1H) , 7.96-7.94 (m, 2H) , 7.87-7.82 (m, 6H) , 7.50 (s, 1H) , 7.42 (s, 1H) , 4.87 (s ancho, 2H) , 3.81 (s ancho, 2H) , 3.24-3.18 (m, 2H) , 2.53-2.50 (m, 2H) , 2.36 (s ancho, 2H) , 1.82-1.74 (m, 2H) , 1.46/1.23 (s, 18H) , 1.17-1.16 (m, 6H) .
Intermediario 201 2- ( (23, R) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,4R) -5- metil -2 -pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol Una solución de HCl 4N en dioxano (15 mi) se añadió a (2S,4R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S,4R) -1- (terc-butoxicarbonil) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol-4 - il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidincarboxilato de tere-butilo (200 mg, 0.285 mmol) en MeOH (5 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 185 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.64 min; Calculado para C32H35N6 : 503.29 m/z Encontrado 503.20 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción 54 El intermediario 203 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 54 usando como material de partida ácido (1S, 3S, 5S) -2- ( erc-butoxicarbonil ) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -carboxilico (que podría prepararse de conformidad con el documento O2004/052850) . Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 202 (1S, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato de tere-butilo A una solución agitada de 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona (0.491 g, 1.100 mmol) y ácido (1S, 3S, 5S) -2- ( terc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3 -carboxilico (500 mg, 1.1 mmol) en acetonitrilo (11 mi) se añadió Base de Hunig (0.384 mi, 2.2 mmol) . La mezcla heterogénea se agitó durante 20 horas a temperatura ambiente, el solvente se retiró a vacío. El residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado, salmuera y se secó sobre sulfato sódico. El lavado se repitió 2 veces. El producto bruto se suspendió en xileno (11 mi) y se añadió acetato amónico (1.27 g, 16.5 mmol) . El recipiente de presión se selló y se introdujo en un baño de aceite precalentado (140 °C) y se agitó durante 2 horas. El solvente se eliminó al vacio y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno)¦ en un cartucho de gel de sílice Thompson de 80 g (eluido con 25% B a 100% B en 1.5 1, y se conservó 0.5 1 B. solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (1S,3S,5S)-3- (4- (4 - (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- ( erc-butoxicarbonil) -2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) - 2 -naftil)fenil)-lH-imidazol-2-il)-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (418.9 mg , 43%) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.46 min; Calculado para C42H47 604 : 699.37 m/z Encontrado 699.33 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.18 ("s , 1H) , 8.11 (s, 1H) , 7.96-7.93 (m, 2H) , 7.85- 7.80 (m, 6H) , 7.45 (s ancho, 1H) , 7.37 (s ancho, 1H) , 5.36 (s ancho, 2H) , 3.72 (s ancho, 1H) , 3.64 (s ancho, 1H) , 2.82 (s ancho, 1H) , 2.72 (s ancho, 1H) , 2.43 (s ancho, 1H) , 2.15 (s ancho, 1H) , 1.70 (s ancho, 2H) , 1.55/1.33 (s, 18H) , 1.10 (s ancho, 1H) , 0.94 (s ancho, 1H) , 0.88 (s ancho, 1H) , 0.81 ( s ancho , 1H) .
Intermediario 203 (IR, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( ( IR, 3S , 5S) -2- azabiciclo [3.1.0] hex- 3 - i 1 ) - 1H- imidazol -4 - i 1 ) -2- naftil) fenil ) - 1H- imidazol - 2 - il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexano Una solución de HCl 4N en dioxano (10 mi) se añadió a ( 1S , 3S , 5S ) - 3 - ( 4 - ( 4 - ( 6 - ( 2 - ( ( 1S , 3 S , 5S ) - 2 - ( tere -butoxicarboni 1 ) -2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-Il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lfí-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (375 rag . 0.537 mmol) en MeOH (3 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 346 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.75 min; Calculado para C32H31N6 : 499.26 m/z Encontrado 499.22 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0 % de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción Intermediarlo 197 Intermediarlo 204 Intermediarlo 205 Intermediarlo 206 2] NH4OAc, xi le os El intermediario 209 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 55 usando como material de partida ácido (1S, 3S, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico (que podría prepararse de conformidad con el documento WO2004/052850) . Los datos analíticos para los intermediarios se muestran a continuación: Intermediario 204 A una solución de la mezcla diastereomérica (en el carbono que porta el grupo metilo) del Intermediario 197 (4.75g, 18.46 mmol) se añadió superhidruro (19.20 mi, 19.20 mmol) gota a gota a -50 °C en un baño de hielo seco/acetona en 10 min. Se añadió base de Hunig (13.58 mi, 78 mmol), se agitó durante 10 min, se añadió DMAP (0.122 g, 0.997 mmol) en forma de un sólido, se agitó durante 15 min y se añadió, gota a gota, anhídrido trifluoroacético (2.98 mi, 21.08 mmol) en 15 min. El baño en hielo seco/acetona se retiró y la mezcla de reacción se agitó durante 4 h dejando calentarse a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con agua (50 mL) , NaCl sat . (30 mi) y se concentró a vacío. El material bruto resultante se purificó con una cromatografía instantánea (8-60% de EtOAc/hexano) para dar el éster Intermediario 204 en forma de un aceite amarillo (2.85 g) . RMN de (CD3, 400 MHz) : 6.36 (s, 0.5H), 6.25 (s, 0.5H), 4.70-4.57 (m, 1H) , 3.78 (s, 3H) , 2.96 (m, 1H) , 2.54 (m, 1H) , 1.70 (s, 3H) , 1.50 (s, 4.5H), 1.44 (s, 4.5H) .
Intermediarios 205 y 206 Gota a gota se añadió dietilzinc (1.1 M en tolueno, 59.1 mi, 65.0 mmol) durante 20 min la una solución de tolueno enfriado (-23 °C) (60 mi) del Intermediario 203 (5.23 g, 21.68 mmol) y se agitó- durante 10 min. Gota a gota se añadió cloroyodometano (9.44 mi, 130 mmol) en 10 min y la mezcla de reacción se agitó a -21 °C durante 16 horas. A la mezcla de reacción se añadió NaHC03 sat . (60 mi), se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla se agitó durante 10 min. Después se filtró y la torta del filtro se lavó con tolueno (50 mi) . El filtrado se repartió y la capa orgánica se secó con Na2S04, y se concentró al vacío. El material bruto resultante se purificó con cromatográfica instantánea (2-10% EtOAc/Hexano) para dar el Intermediario 205 (primer eluato; aceite incoloro; 2.88 g) e Intermediario 206 (Segundo eluato aceite incoloro; l.Olg). La asignación de las estereoquímicas relativas se realizó basándose en estudios NOE . Intermediario 205: RMN de ¾- (CD3, 400 MHz) : 4.65-4.52 (m, 1H) , 3.72 (s, 3H) , 3.28-3.17 (m, 1H) , 2.44-2.32 (m, 1H) , 2.16-2.10 (m, 1H) , 1.51-1.42 (dos s, 9H) , 1.24 (s, 3H) , 1.07 (m, 1H) , 0.69-0.60 (m, 1H) .
Intermediario 207 Ácido (1S, 3S, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3 -carboxílico A una solución del éster Intermediario 205 (2.88 g, 11.28 mmol) en etanol (36 mi) se añadió solución de LiOH (0.324 g, 13.54 mmol) en agua (10.00 mi), y la mezcla se. agitó a temperatura ambiente durante 6 h. La mayor parte del componente volátil se eliminó a vacío y el residuo se fraccionó entre agua (20 mi) y éter (20 mi) . La fase acuosa se enfrió en un baño de agua y hielo, se acidificó con HCl 1 a una región de pH de 2 , y se extrajo con EtOAc (30 mi, 4x) . La fase orgánica combinada se secó con Na2S04, se evaporó al vacío para dar el Intermediario 207 en forma de un sólido pegajoso (2.55g). RMN de =- (CD3, 400 MHz) : 4.64 (m, 1H) , 3.25 (appt s, 1H) , 2.70-2.40 (m, 1H) , 2.14 (m, 1H) , 1.54-1.44 (m, 9H) , 1.27 (s, 3H) , 1.10-0.80 (m, 1H) , 0.67 (m, 1H) .
Intermediario 208 (1S,3S,5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S,3S,5S) -2- (terc-butoxicarbonil ) - S-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) - 1H- imidazol -2 -il ) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo A una solución agitada de 2-bromo-l- (4- (6- (2-bromoacetil)naftalen-2-il) fenil) etanona (0.607 g, 1.36 mmol) y ácido (1S, 3S, 5S) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3 -carboxílico (729.0 mg, 2.72 mmol) en acetonitrilo seco (12 mi) se añadió Base de Hunig (0.475 mi, 2.72 mmol) . La mezcla heterogénea se agitó durante 20 horas a temperatura ambiente, el solvente se retiró a vacío. El residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado, salmuera y se secó sobre sulfato sódico. El lavado se repitió 2 veces. .El producto bruto se suspendió en xileno (12 mi) y se añadió acetato amónico (1.57 g, 20.39 mmol). El recipiente de presión se selló y se introdujo en un baño de aceite precalentado (140 °C) y se agitó durante 2 horas. El solvente se eliminó al vacio y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 80 g (eluido con 25% B a 100% B en 1.5 1, y se conservó 0.5 1 B. solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- ( erc-butoxicarbonil) -5-metil-2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (279 mg, 27%) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EN 3.56 min; Calculado para C44H51N6O : 727.40 m/z Encontrado 727.41 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.18 (s, 1H) , 8.11 (s, 1H) , 7 .96-7.93 (m, 2H) , 7.83-7.80 (m, 6H) , 7. .43 (s ancho, 1H) , 7 .35 (s ancho, 1H) , 5.35 (s ancho, 2H) , 3 , .42 (s ancho, 1H) , 3 .36 (s ancho, 1H) , 2.61 (s ancho, 1H) , 2. .53 (s ancho, 2H) , 2, .72 (s ancho, 1H) , 1.55/1.33 (s, 25H) , 1. .06 (s ancho, 1H) , o. 85 1 [s ancho, 1H) , 0 .72 (s ancho, 1H) .
Intermediario 209 (1S, 3S, 5S) -5-metil-3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1. Ojhexano Una solución de HC1 4N en dioxano (15 mi) se añadió a ( 1S , 3 S , 5S ) - 3 - ( 4 - ( 4 - ( 6 - ( 2 - ( ( 1S , 3 S , 5S ) - 2 - ( t ere -butoxi carbóni 1 ) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex -3-11) -lff-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2 - i 1 ) - 5 -met i 12-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo (250 mg , 0.344 mmol) en MeOH (5 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 231 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 3.09 min; Calculado para C34H35 6 : 527.29 m/z Encontrado 527.35 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de E se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Esquema de reacción El intermediario 212 se preparó como se muestra en el Esquema de reacción 56 usando como material de partida ácido (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico (que podría prepararse de conformidad con el documento WO2004/052850) . Los datos analíticos para El intermediario 212 se preparó tal como se muestra en el esquema de reacción 56 usando como material de partida ácido (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-carboxílico (que podría prepararse conforme al documento WO2004/052850 ) . Los datos para los intermediarios se muestran a continuación Ácido (1R,3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0]hexan-3 -carboxílico Intermediario 210 El intermediario 210 se preparó a partir del Intermediario 206 como se ha descrito con anterioridad para el Intermediario 207, RMN de ?? (CDC13, 400 MHz) : 4.13 (app s ancho, 1H) , 3.06 (app s ancho, 1H) , 2.55/2.41 (app s ancho solapante, 2H) , 1.51 (s, 9H) , 1.27 (s, 3H) , 0.76 (app t, J = 5.6, 1H) , 0.60 (app s ancho, 1H) .
Intermediario 211 (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) - 5- etil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0]hexan-2-carboxilato de tere-butilo A una solución agitada de 2 -bromo- 1- (4- (6- (2- bromoacetil) naftalen-2-il) fenil) etanona (0.37 g, 0.83 mmol) y ácido (IR, 3R, 5S) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carboxílico (0.40 g, 1.66 mmol) en acetonitrilo seco (9 mi) se añadió Base de Hunig (0.29 mi, 1.66 mmol) . La mezcla heterogénea se agitó durante 20 horas a temperatura ambiente, el solvente se retiró a vacío. El residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado, salmuera y se secó sobre sulfato sódico. El lavado se repitió 2 veces. El producto bruto se suspendió en xileno (9 mi) y se añadió acetato amónico (1.3 g, 16.6 mmol). El recipiente de presión se selló y se introdujo en un baño de aceite precalentado (140 °C) y se agitó durante 2 horas. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de bicarbonato sódico saturada y salmuera. Después de concentrar, el producto bruto se cargo (cloruro de metileno) en un cartucho de gel de sílice Thompson de 90 g (eluido con 25% B a 100% B en 1.5 1, y se conservó 0.5 1 B. solvente B = acetato de etilo y el solvente A = hexanos) para dar (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (terc-butoxicarbonil) -5 -metil-2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de tere-butilo (80 mg, 10%). Tiempo de retención en la CL-EM 3.37 min; Calculado para C44H51 604 : 727.40 m/z Encontrado 727.38 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un croraatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RM de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.19 (s, 1H) , 8.08 (s, 1H) , 7.92-7.91 (m, 2H) , 7.85-7.77 (m, 6H) , 7.47 (s, 1H) , 7.38 (s, 1H) , 4.67 (s ancho, 2H) , 3.93-3.90 (m, 2H) , 2.63- 2.57 (m, 2H) , 2.20-2.14 (m, 2H) , 1.31-1,23 (m, 24H) , 0.92 (app, d, J=6.7 Hz, 1H) , 0.82 (s ancho, 1H) , 0.77-0.75 (m, 2H) .
Intermediario 212 (IR, 3S, 5R) -5-metil-3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano Una solución de HCl 4N en dioxano (5 mi) se añadió a (IR, 3S, 5 ) -3- (4- (4- (6- ( 2 - ( ( 1 R , 3 S , 5 R ) - 2 - (terc-butoxicarbonil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex -3-Il)-lH-imidazol-4-il)-2-naftil)fenil) - 1H- imidazol -2 - i 1 ) - 5 -me t i 12-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de tere-butilo (48 mg , 0.066 mmol) en MeOH (1 mi) y se agitó en condiciones ambientales durante 2 horas, se concentró y se secó a vacío. Sal tetra de HCl (teoría supuesta: a 44 mg) . Tiempo de retención en la CL-EM 2.82 min; Calculado para C34H35N6 : 527.29 m/z Encontrado 527.26 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0 % de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue metanol al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% ' y el solvente B fue metanol al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de E se determinaron usando una plataforma I CROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplos Ejemplo 64 ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3 -4 - cloro- 5 - (6- (4- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3- metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il)fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex- 2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) etilcarbamato de metilo A una solución agitada de ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3-(54- (6- (4- (2- ( ( IR, 3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etilcarbamato de metilo (Ejemplo 61) (60 mg, 0.071 mmol) en D F (1.5 mi) se añadió N-clorosuccinimida (10.4 mg, 0.078 mmol) y el vaso de reacción se selló y se calentó a 50°C durante 16 horas. La reacción se enfrió, se concentró parcialmente y después se diluyó con MeOH. La solución se filtró y purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/H20, w TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3-(5- (6- (4 -cloro- 5- (6- (4- (4-cloro-2- ((2-lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil-2-naftil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l-(tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (21.4 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.798 min; m/z 462.34 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue T?? al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H NMR (400 MHz, MeOD) d ppm 8.18 (s, 2 H) , 8.03 (d, .7=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.80 - 7.92 (m, 6 H) , 5.06 (ddd, J=9.0, 5.8, 3.5 Hz, 2 H) , 4.63 (d, J=7.5 Hz , 1 H) , 4.57 (d, J=6.5 Hz, 1 H) , 3.92 - 3.98 (m, 2 H) , 3.71 - 3.81 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.35 - 3.44 (m, 2 H) , 2.42 - 2.57 (m, 4 H) , 1.99 - 2.24 (m, 4 H) , 1.40 - 1.66 (m, 4 H) , 1.06 - 1.14 (m, 2 H) , 1.03 (d, J=6.8 Hz , 3 H) , 0.95 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.82 (d, J=2.8 Hz, 2 H) .
Ejemplo 65 ( (1S) -1- (4, 4-difluorociclohexil) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- (4 , 4-difluorociclohexil) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) acetil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il ) - lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxoetil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HC1 de (lR,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo [3.1.0] hexan- 3 -il) -lH-imidazol-5-il) naftalen- 2 -il)fenil)-lH-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0] hexano (Intermediario 69) (38.0 mg, 0.059 mmol) y ácido (S)-2-(4,4 -diflurociclohexi 1 ) - 2 - (metoxicarbónilamino ) acético (44.5 mg, 0.177 mmol) en DMF (0.7 mi) y DI PEA (0.103 mi, 0.590 mmol) se añadió HATU (67.3 mg, 0.177 mmol). La reacción se diluyó con MeOH, se filtró, se purificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH p/TFA al 0.1%) y se repurificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH p/acetato amónico) para dar ( (1S) -1- (4 , 4-difluorociclohexil) -2-( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- (4, 4-difluorociclohexil ) -2- ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -2- azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol - 4 - il ) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol - 2 - i 1 ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il )- 2 -oxoetil ) carbamato de metilo (22.1 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.713 min; m/z 483.13 (1/2MH+]. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.16 (s, 1 H) , 8.11 (s, 1 H) , 7.94 (d, J=8.5 Hz, 2 H) , 7.77 - 7.85 (m, 5 H) , 7.47 (s, 1 H) , 7.39 (s, 1 H) , 7.08 (d, J"=8.5 Hz, 1 H) , 5.15 (ddd, J=8.2, 6.3, 6.1 Hz, 2 H) , 4.68 (s ancho, 2 H) , 3.69 - 3.76 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 2.41 - 2.57 (m, 4 H) , 1.65 - 2.12 (m, 16 H) , 1.33 - 1.59 (m, 4 H) , 1.06 - 1.17 (m, 2 H) , 0.78 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 66 ( (1S) -!-{{ (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -butanoil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3 - il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil (fenil) - -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -propil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de (lR,3S,5R)-3-(5-(4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-azabiciclo[3.1.0] hexan- 3 -il) -lH-imidazol-5-il)naftalen-2-il) fenil) -1H- imidazol - 2 - i 1 ) - 2 - azabic ic lo [3.1.0] hexano (Intermediario 69) (80 mg , 0.084 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) butanoico (37.8 mg , 0.235 mmol) en DMF (0.8 mi) y DI PEA (0.15 mi, 0.84 mmol) se añadió HATU (89 mg, 0.24 mmol) . La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH P/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ((lS)-l-(((lR,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2 - ( (me oxicarboni 1 ) amino) -butañoi 1 ) - 2 -azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil (fenil) --lH-imidazol-2-il) -2-azabi c ic lo [ 3.1.0 ] hex- 2 - i 1 ) carboni 1 ) -propi 1 ) carbamato de metilo (70.1 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 1.688 min; m/ z 785.55 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de eOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacético y el solvente B fue 10% de H20/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.28 (s, 1 H) , 8.26 (s, 1 H) , 8.12 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.07 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.93 - 8.00 (m, 4 H), 7.82 - 7.90 (m, 4 H) , 5.12 - 5.21 (m, 2 H) , 4.58 - 4.65 (m, 2 H), 3.74 - 3.81 (m, 2 H), 3.67 (s, 6 H), 2.70 (ddd, J=13.7, 9.0, 4.9 Hz, 2 H) , 2.49 (de, J=14.2, 7.1 Hz, 2 H) , 2.09 (s ancho, 2 H) , 1.86 - 1.99 (m, 2 H) , 1.64 -1.77 (m, 2 H) , 1.09 - 1.17 (m, 2 H) , 1.02 (t, J"=7.4 Hz, 6 H), 0.92 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 67 ( (1S) -1- ( ((2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil ) -5-metil-2- pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol - 2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil ) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2-( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,5S) -5-metil-2 -pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (intermediario 117) (102 mg, 0.106 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (46.6 mg( 0.266 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.18 mi, 1.1 mmol) se añadió HATU (101 mg, 0.266 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/H20 p/ TFA al 0.1%) y después se volvió a purificar mediante HPLC preparativa (agua/acetonitrilo/TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S, 5S) -1-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil ) - 1H- imidazol -4 -il ) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol -2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo (63.8 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 1.900 min; m/z 817.59 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de.3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min en el que el solvente A fue 10% de eOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de 1H se presenta como una mezcla -4:1 de regioisómeros . RMN de ""? (para el regioisómero mayoritario) (400 MHz , MeOD) d ppm 8.31 (s, 1 H) , 8.27 (s, 1 H) , 8.13 (d, J=8.5 Hz , 1 H) , 8.09 (d, .7=8.5 Hz, 1 H) , 7.94 - 8.02 (m, 5 H) , 7.84 - 7.92 (m, 3 H) , 5.15 - 5.24 (m, 2 H) , 4.13 (dd, J=8.7, 1.4 Hz , 2 H) , 3.74 (d, J=2.8 Hz, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 2.50 - 2.60 (m, 2 H) , 2.26 - 2.45 (m, 4 H) , 1.95 - 2.10 (m, 4 H) , 1.57 (dd, «7=6.5, 3.0 Hz, 6 H) , 1.32 (t, J"=6.4 Hz, 2 H) , 0.99 (d, .7=6.8 Hz, 6 H) , 0.89 (d, J=6.8 Hz, 6 H) .
Ejemplo 68 ( (1S) -1- (((1R,3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-imidazol-5-il) -2 naftil) feni1 -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo y Ejemplo 69 ( (13) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S)-2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-imidazol-5-il) -2 naftil) fenil-??-imidazol -4-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo Una mezcla de dos regioisómeros de cloromidazol forma de sales en TFA (Ejemplos 68 y 69) (21.4 mg) se ais del mismo reacción que preparó una sal en TFA de ( (1S) -( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- (4- (4 -cloro- 2- ( ( IR, 3S , 5R) - 2 -( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil-2-naftil-lH-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l-(tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (Ejemplo 64) . Los dos compuestos regioisómeros se separaron en múltiples inyecciones usando cromatografía SCF (columna SCF de 2 -et ilpiridina (4.6 x 250mm, 5µ??) y 80% de C02 - 20% EtOH/0.1%DEA) . La regioquímica absoluta de los materiales separados se determine mediante correlación HMBC. La reacción dio ( ( ÍS) - 1 - ( ( ( IR, 3S , 5R) -3-(4-(4-(6- (4 -cloro- 2- ((lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro- 2H-piran-4 -il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 3-il) -lH-imidazol-5-il) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol - 2 - i 1 ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 2 - i 1 ) carbonil ) - 2 -metilpropil ) carbamato de metilo (7.4 mg) y ((1S)-1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4 -cloro- 5- (4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- ( tetrahidro- 2H-piran- 4 -il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 3-il) -1H- imidazol - 4 -il) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol - 2 - il ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2 - il ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (4.5 mg) , cada uno un sólido blancuzco. Para el Ejemplo 68: Tiempo de retención en la CL-EM 2.683 min; m/z 889.17 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 10u, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . Para el Ejemplo 69: Tiempo de retención en la CL-EM 2.695 min; m/z 889.22 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 70 ( (1S) -2- ( (2S,5S) -2- (4 - (4 - (6- (2- ((2S,5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil ) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4 -il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol -2-il) 5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2-( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 117) (73.9 mg, 0.077 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (41.9 mg, 0.193 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.14 mi, 0.77 mmol) se añadió HATU (73.3 mg, 0.93 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/H20 p/ TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2-((2S,5S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil) amino) -2- ( tetrahidro- 2H-piran-4-il) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) - 2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (51.2 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.897 min; m/z 901.39 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 71 ( (1S) -1- (4, 4-difluorociclohexil) -2- ( (2S,5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S,5S) -2- ((2S) -2- (4, 4-difluorociclohexil) -2- ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil-H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol -2 -il) -5-metil-l- pirrolidinil-2-oxoetil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2-( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (intermediario 117) (70.8 mg, 0.074 mmol) y ácido (S)-2-(4,4-difluorociclohexil ) -2 - (metoxicarbonilamino) acético (46.8 mg, 0.186 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.13 mi, 0.75 mmol) se añadió HATU (71.4 mg, 0.186 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas . La mezcla de reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/H20 p/ TFA al 0.1%) para dar el producto deseado en forma de una sal en TFA de ( ( 1S) -1- (4 , 4 -difluorociclohexil) -2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-l-( (2S) -2- (4, 4 -difluorociclohexil) -2-( (metoxicarbonil) amino) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxoetil) carbamato de metilo (43.3 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.828 min; m/z 485.22 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 72 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (4- (6- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro- 2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-5-il) -2 -naftil ) fenil ) -lH-imidazol -2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 2-il -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (Ejemplo 34) (22.7 mg, 0.025 mmol) en DMF (0.5 mi) se añadió N-clorosuccinimida (71, mg, 0.053 mmol) y el vaso de reacción se selló y la reacción se calentó a 50 °C durante 12 horas. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se añadió N-clorosuccinimida adicional (~3mg) y el vaso de reacción se selló y se agitó a 50 °C durante 2h. La reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (Metano1/agua p/TFA al 0.1%) para dar ( (1S) -2 - ( (IR, 3S, 5R) -3- (4 -cloro-5- (4- (6- (4 -cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) etil ) carbamato de metilo (12 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.708 min; m/z 483.25 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.18 (s, 2 H) , 8.04 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.80 - 7.92 (m, 6 H) , 5.02 - 5.09 (m, 2 H) , 4.63 (d, .7=6.0 Hz , 2 H) , 3.91 - 3.99 (m, 4 H) , 3.73 -3.80 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.34 - 3.45 (m, 4 H) , 2.43 -2.54 (m, 4 H) , 1.98 - 2.13 (m, 4 H) , 1.38 - 1.67 (m, 8 H) , 1.06 - 1.15 (m, 2 H) , 0.81 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 73 ( (1S,2R) -2-metoxi-l- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (1R,3S,5R) -2- (N- (metoxicarbonil) -O-metil-L-treonil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- 11) carbonil)propil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de 2- ( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -5-metil-2 -pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (intermediario 133) (66 mg, 0.069. mmol) y ácido (2S,3R)-3-metoxi -2- (metoxicarbonilamino) butanoico (33.0 mg, 0.173 mmol) en D F (0.8 mi) y DIPEA (0.121 mi, 0.691 mmol) se añadió HATU (65.7 mg, 0.173 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (Metano1/agua p/acetato amónico 10 m ) para dar una sal en TFA de ( (1S, 2R) -2-metoxi-l- ( ( (IR, 3S, 5R) -3 - (4 - (6 - (4- ( 2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2 -(N- (metoxicarbonil) -O-metil-L-treonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il ) carbonil ) ropil) carbamato de metilo (51.9 mg, 0.048 mmol, rendimiento del 98%) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 2.383 min; m/z 845.42 (MH+) . "Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de lOu, C18 de 3.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XH (MeOD, 400 MHz) d 8.29 (s ancho, 1H) , 8.26 (s, 1H) , 8.12 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 8.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 8.00 - 7.93 (m, 4H) , 7.91 - 7.82 (m, 4H) , 5.18 (td, J = 9.0, 7.0 Hz, 2H) , 4.78 (dd, J = 3.9, 1.7 Hz, 2H) , 3.92 - 3.79 (m, 4H) , 3.68 (s, 6H) , 3.35 (s, 3H) , 3.35 (m, 3H) , 2.76 - 2.65 (m, 2H) , 2.59 - 2.47 (m, 2H) , 2.15 - 2.05 (m, 2H) , 1.19 (d, J = 6.3 Hz, 6H) , 1.16 - 1.07 (m, 2H) , 0.94 - 0.84 (m, 2H) .
Ejemplo 74 ( (1S) -1- ( ( (1R, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -etinil -2-naftil- lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) carbon.il) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 124) (100 mg, 0.169 mmol) y ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (89 mg, 0.51 mmol) en DMF (1.5 mi) y DIPEA (0.24, 1.4 mmol) se añadió HATU (193 mg, 0.506 mmol) y la solución naranja transparente se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se diluyó con metanol, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH con amortiguador acetato amónico) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil-2-naftil (fenil) -lH-iraidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (71 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.706 min; m/z 761.22 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 4 min donde el solvente A fue eOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ? NMR (400 MHz , MeOD) d ppm 8.15 (s, 1 H) , 7.96 (s, 1 H) , 7.80 - 7.88 (m, 3 H) , 7.51 (dd, J=8.4, 1.6 Hz , 1 H) , 7.46 (s, 1 .H) , 7.27 (s, 1 H) , 5.18 (dd, J=9.0, 4.8 Hz , 1 H) , 5.13 (dd, J=8.8, 4.3 Hz, 1 H) , 4.59 (dd, J=11.8, 6.8 Hz , 2 H) , 3.68 -3.72 (m, 1 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.59 - 3.64 (m, 1 H) , 2.31 - 2.60 (m, 4 H) , 2.08 - 2.22 (m, 2 H) , 1.99 - 2.08 (m, 2 H) , 1.13 (ddd, J=8.6, 5.8, 5.5 Hz, 2 H) , 1.00 (dd, J=12.9, 6.9 Hz, 6 H) , 0.93 (dd, J=6.7, 2.9 Hz, 6 H) , 0.79 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 75 (mezcla de diastereómeros) (2- ( (IR, 33, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 33, 5R) -2- ( ( (metoxicarbonil) amino) (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol -4-il) tinil) -2-naftil) -1H-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo- 1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (1R,3S,5R) -4- (5- (6- ( (2- ( (1R,3S,5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol -4-il) etinil) naftalen- 2-il) - 1H- imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 124) (57 mg, 0.096 mmol) y ácido (R) -2- (metoxicarbonilamino) -2 - tetrahidro-2H-piran-4-il) acético racémico (62.7 mg, 0.289 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.134, 0.770 mmol) se añadió HATU (110 mg, 0.289 mmol) y la solución naranja transparente se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se diluyó con metanol, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH con amortiguador acetato amónico) para dar 2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( ( (metoxicarbonil) amino) (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (37.3 mg) en forma de un sólido amarillo y una mezcla de diaestereómeros . Tiempo de retención en la CL-EM 1.522 min; m/z 845.36 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . Mezcla de diastereómeros . RMN de XH NMR (400 MHz, MeOD) d ppm 8.15 (d, J=12.8 Hz, 1 H) , 7.96 (s, 1 H) , 7.80 - 7.90 (m, 3 H) , 7.51 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 7.46 (d, J=5.5 Hz, 1 H) , 7.27 (d, J=5.3 Hz, 1 H) , 5.08 - 5.24 (m, 2 H) , 4.61 - 4.69 (m, 1 H) , 4.57 (dd, «J=8.3, 4.5 Hz, 1 H) , 3.85 - 4.03 (m, 5 H) , 3.63 - 3.79 (m, 8 H) , 3.34 - 3.49 (m, 5 H) , 2.30 - 2.63 (m, 4 H) , 1.99 - 2.16 (m, 3 H) , 1.70 - 1.80 (m, 1 H) , 1.35 -1.66 (m, 6 H) , 1.16 - 1.26 (m, 1 H) , 1.07 - 1.16 (m, 1 H) , 0.70 - 0.83 (m, 2 H) .
Ejemplo 76 ( (1S) -1- ( ( (1R, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- ( (4- (4-cloro-2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3- metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-5- il) etinil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-az [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo; A una solución agitada de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3-(4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -etinil- 2 -naftil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (38 mg, 0.050 mmol) en DMF (1 mi) se añadió N-clorosuccinimida (13.3 mg, 0.100 mmol) y, después, el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 50°C durante 16 horas. La reacción se enfrió hasta la TA y se añadió N-clorosuccinimida (7.4 mg) adicional. La reacción se recalentó a 50°C durante 3 horas, se enfrió hasta la TA, se diluyó con MeOH (~ 0.5 mi), se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua/amortiguador TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-cloro-5- (6- (4-cloro-2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) -etinil-2-naftil-lH-bencimidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (5.0 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.153 min; m/z 831.02 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ?? (400 MHz, MeOD) d ppm 8.19 (s, 1 H) , 8.07 (s, 1 H) , 7.87 - 7.99 (m, 3 H) , 7.58 (dd, J=8.5, 1.3 Hz, 1 H) , 5.07 (t, J=7.2 Hz, 1 H) , 4.98 - 5.03 (m, 1 H) , 4.54 - 4.59 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.62 - 3.75 (m, 2 H) , 2.45 - 2.50 (m, 2 H) , 2.41 (dd, J"=7.3, 3.5 Hz , 2 H) , 2.09 - 2.21 (m, 2 H) , 1.96 - 2.08 (m, 2 H) , 1.08 - 1.16 (m, 2 H) , 02 (t, J=6.1 Hz, 6 H) , 0.92 - 0.97 (m, 6 H) , 0.75 - 0.85 2 H) .
Ejemplo 77 ((1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4 - il) ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3- il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HC1 de (S)-l-( (1R,3S,5R) -3- (5 - (4 - (6 - (2 - ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen- 2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (Intermediario 128) (42 mg, 0.061 mmol) , ácido 2- ( (2R, 4R, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- (metoxicarbonilamino) acético (Cap-179 estereoisómero 2) (14.9 mg, 0.061 mmol) y DIEA (0.053 mi, 0.30 mmol) en DMF (2 mi) se añadió HATU (25.4 mg, 0.067 mmol) y la solución amarillenta resultante se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se concentró a presión reducida y el residuo se redisolvió en metanol y se purificó mediante HPLC preparativa, solvente A: MeCN al 0.5%/ agua al 95%/ NH4Ac 10 mM ; solvente B: MeCN al 95%/ agua al 5%/ NH4Ac 10 mM ; Columna: Sunfire Prep MS C18 de 30 x 100 mm S10; Longitud de onda: 220 nM; Velocidad de flujo: 40 ml/min; gradiente: 0% de B a 80% de B durante 30 minutos con un tiempo de conservación de 5 min) para dar ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4 - (6- (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2- ( ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) ( (metoxicarbonil ) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (26 mg) en forma de un sólido blanco. CL/EM [M+H] += 883; Tr = 2.99 min es el producto. Columna Luna de 3u C18 de 2x50mm; inicio %B: 0, final %B : 100 solvente A: ACN al 5%/ H20 al 95% + Acetato amónico 10 mM; solvente B: ACN al 95%/ H20 al 5%+ acetato amónico 10 mM; velocidad de flujo 4 ml/min. Tiempo de recorrido: 5 min. Pureza = 97 %. RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) d ppm 11.85 (1 H, s ancho,), 11.73 (1 H, s ancho,), 8.14 - 8.27 (2 H, m) , 7.90 - 7.98 (3 H, m) , 7.82 -7.89 (3 H, m) , 7.79 (2 H, d, J"=8.24 Hz) , 7.64 (1 H, s) , 7.57 (1 H, s) , 7.19 (2 H, t, J=9.31 Hz) , 5..03 - 5.13 (2 H, m) , 4.51 (1 H, t, J=7.93 Hz) , 4.44 (1 H, t, J=7.78 Hz) , 3.65 (1 H, s ancho,), 3.51 - 3.60 (7 H, m) , 3.29 - 3.42 (7 H, m) , 2.35 - 2.47 (2 H, m) , 2.20 - 2.33 (2 H, m) , 2.01 - 2.11 (2 H, m) , 1.83 - 1.92 (3 H, m) , 1.63 (1 H, d, J=12.21 Hz) , 1.57 (1 H, d, .7=11.60 Hz) , 0.96 - 1.09 (12 H, m) , 0.89 (4 H, d, J=6.71 Hz) , 0.72 (2 H, s ancho).
Ejemplo 78 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2,2' -binaftalen- 6-il) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de 6 , 6 -bis (2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) - 1H- imidazol - 4 - il ) -2,2' -binaftilo (Intermediario 133) (43.9 mg, 0.080 mmol) y ácido ( S ) - 2 - (metoxicarbonilamino) - 3 -met i lbutanoico (42.0 mg, 0.240 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.14 mi, 0.80 mmol) se añadió HATU (91 mg, 0.240 mmol) y la solución marrón transparente se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (agua/MeOH con TAF al 0.15) para dar una sal en TFA de ( ( 1S ) - 1 - ( ( ( IR, 3 S , 5R) - 3 - ( 4 - ( 4 - ( 6 - ( 2 - ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-met i 1butanoi 1 ) - 2 -azabic icio [3.1.0] hex- 3 - i 1 ) - 1H- imidazol -4-il) -2, 2' -binaftalen- 6 -il) 1H- imidazol - 2 - il ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (28.9 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.788 min; m/z 863.46 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacét ico . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, eOD) d ppm 8.37 (s, 2 H) , 8.29 (d, J=l .0 Hz, 2 H) , 8.15 (d, J"=8.8 Hz, 2 H) , 8.06 - 8.13 (m, 4 H) , 7.97 (s, 2 H) , 7.86 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 2 H) , 5.17 (dd, J=9.3, 7.0 Hz, 2 H) , 4.5.7 (d, .7=6.8 Hz , 2 H) , 3.80 - 3.86 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 2.71 (dd, J=13.7, 9.4 Hz, 2 H) , 2.46 -2.56 (m, 2 H) , 2.15 - 2.25 (m, 2 H) , 2.09 (d, J=8.0 Hz, 2 H) , 1.08 - 1.16 (m, 2 H) , 1.03 (d, J=6.8 Hz, 6 H) , 0.92 -0.96 (m, 6 H) , 0.88 - 0.96 (m, 2 H) .
Ejemplo 79 C (1S) -1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2-( (IR, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (2R, 4r, 63) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il ) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il ) - 1H- i idazol -4 -il ) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metílpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de (2S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5 - (6 - (4 - (2 - ( (IR, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol -5 -il) fenil) naftalen-2-il) -1H- imidazol -2 -il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (47 mg, 0.072 mmol) y ácido (S) -2- ( (2R, 4r, 6S) -2.6 -dimetiltetrahidro-2H-piran-4 -il) -2- (metoxicarbonilamino) acético (23 mg, 0.093 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.050 mi, 0.29 mmol) se añadió HATU (35.4 mg, 0.093 mmol) y la reacción se agitó durante 3 horas. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con CFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 5R) -2- ( (2S) -2-( (2R,4r,6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2-( (metoxicarbonil) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (31.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.670 min; m/z 883.43 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente. B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (d, J"=1.0 Hz, 1 H) , 8.26 (s, 1 H) , 8.12 (d, J"=8.8 Hz , 1 H) , 8.07 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.93 - 7.99 (m, 4 H) , 7.82 - 7.92 (m, 4 H) , 5.15 (td, J=9.6, 6.9 Hz, 2 H) , 4.58 (t, J"=7.4 Hz, 2 H) , 3.79 - 3.86 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 3.43 - 3.53 (m, 2 H) , 2.65 - 2.75 (m, 2 H) , 2.50 (ddd, «7=13.6, 6.7, 6.5 Hz, 2 H) , 2.04 - 2.24 (m, 4 H) , 1.54 - 1.62 (m, 1 H) , 1.45 - 1.53 (m, 1 H) , 0.84 - 1.21 (m, 18 H) .
Ejemplo 80 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3. i .0] hex-3 -il) -lH-imidazol -4-il) fenil) -2- quinolinil) -IH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución de una sal HC1 de 2 - ( 2 - ( ( IR, 3S , 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -6- (4- (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) quinolina (Intermediario 139) (50 mg, 0.073 mmol) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (29.5 mg, 0.169 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.115, 0.660 mmol) se añadió HATU (64.1 mg, 0.169 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20/MeOH con TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-ilfenil) -2-quinolinil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (55.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.883 min; m/z 814.65 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 81 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2 ( (metoxicarbon.il) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) aceti 2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-4- il) fenil -2- quinolinil) -1H-imidazol -2 -il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal de HCl de 2- (2-( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3 - il ) - 1H- imidazol -4 - il ) -6-(4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H-imidazol -4 -il) fenil) quinolinA (Intermediario 139) (50 mg, 0.073 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acético (36.6 mg, 0.169 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.12 mi, 0.66 mmol) se añadió HATU (64.1 mg, 0.169 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2-( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3 -il) -1H-imidazol-4-il) fenil) -2 -quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (64.8 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.553 min; m/z 898.70 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 82 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -IH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo- 1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -4- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) naftalen-2-il) - 1H- imidazol -2 -il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (60 mg, 0.134 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2 -tetrahidro-2H-piran-4,-il) acético (58.4 mg, 0.269 mmol) en DMF (1.2 mi) y DIPEA (0.134, 0.19 mi, 1.1 mmol) se añadió HATU (102 mg, 0.269 mmol) y la reacción se agitó durante 2 horas. La reacción se diluyó con metanol y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de acetato amónico) para dar ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (48.9 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.572 min; m/z 845.65 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de K (400 MHz , MeOD) ? ppm 8.14 (s, 1 H) , 7.96 (s, 1 H) , 7.80 - 7.87 (m, 3 H) , 7.51 (dd, i7=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 7.45 (s, 1 H) , 7.27 (s, 1 H) , 5.16 (dd, J=8.8, 5.0 Hz, 1 H) , 5.11 (dd, J=8.8, 4.5 Hz , 1 H) , 4.66 (d, J=l .5 Hz, 1 H) , 4.63 (d, J=7.8 Hz , 1 H) , 3.90 - 3.98 (m, 4 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.63 - 3.76 (m, 2 H) , 3.33 - 3.44 (m, 4 H) , 2.32 - 2.56 (m, 4 H) , 1.98 - 2.10 (m, 4 H) , 1.35 - 1.67 (m, 8 H) , 1.08 -1.16 (m, 2 H) , 0.78 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 83 ( (1S) -2- ( (1R,5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) a ino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3 -il) -lH-imidazol -4-il) fenil) -2- naftil) fenil- 1H- imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il ) - 2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de (2S) -1- ( (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- (4-(2- ( (IR, 5R) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol -5-il) fenil) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2-il) -3-metil-l-oxobutan-2-ilcarbamato de metilo (Intermediario 131) (40 mg, 0.061 mmol) y ácido (S) -2 (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acético (15.90 mg, 0.073 mmol) se añadió HATU (27.8 mg, 0.073 mmol) y se disolvieron, en D F (0.5 mi) y DIPEA (0.053 mi, 0.31 mmol) y la reacción se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se diluyó con metanol y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador acetato amónico) para dar ( (1S) -2- ( ( (IR, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l-(tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (3.5 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 2.785 min; m/z 855.74 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de K (400 MHz, MeOD) d ppm 8.17 (s, 1 H) , 8.10 (s, 1 H) , 7.93 (dd, J=8.5, 3.0 Hz , 2 H) , 7.77 - 7.86 (m, 6 H) , 7.44 (s,. 1 H) , 7.35 (s, 1 H) , 5.20 (dd, J=8.9, 4.6 Hz, 1 H) , 5.15 (dd, J=8.8, 5.0 Hz , 1 H) , 4.66 (d, J=7.8 Hz, 1 H) , 4.61 (d, J=6.8 Hz, 1 H) , 3.90 - 3.99 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 3.64 - 3.76 (m, 3 H) , 3.34 - 3.43 (m, 3 H) , 2.39 - 2.61 (m, 4 H) , 2.12 - 2.23 (m, 1 H) , 1.99 - 2.10 (m, 2 H) , 1.52 - .67 (m, 2 H) , 1.41 - 1.51 (m, 1 H) , 1.08 - 1.18 (m, 2 H) , 1.02 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.94 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.76 - 0.84 (m, 2 H) .
Ejemplo 84 ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (4-¦( (4- (4-cloro-2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3- metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -5- il) fenil) -2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-az [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo; y Ejemplo 85 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- (4- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) a ino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -??-imidazol -5-il) fenil) -2- quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de ( (1S) - 1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-ilfenil) -2-quinolinil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (Ejemplo 80) (26 mg, 0.022 mmol) en DMF (0.5 mi) se añadió N-clorosuccinimida (6.01 mg, 0.045 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador TFA al 0.1%) para dar dos productos: 1) Una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3-(4 -cloro-5- (6- (4- (4 -cloro-2- ((lR,3S,5R)-2-((2S)-2-( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (12.4 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.871 min; m/z 882.55 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.53 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.26 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 8.23 (s, 1 H) , 8.17 (s, 2 H) , 7.82 - 7.93 (m, 4 H) , 5.16 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 1 H) , 5.06 (t, J=7.2 Hz, 1 H) , 4.53 - 4.63 (m, 2 H) , 3.68 -3.76 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 2.44 - 2.60 (m, 4 H) , 2.11 -2.24 (m, 2 H) , 1.97 - 2.09 (m, 2 H) , 1.09 - 1.18 (m, 2 H) , 1.03 (dd, J=6.8, 3.3 Hz, 6 H) , 0.95 (dd, J=6.8, 2.4 Hz, 6 H) , 0.75 - 0.87 (m, 2 H) . 2) Una sal en TFA de ((1S)-1- (((lR,3S,5R)-3-(4-(6-(4- (4-cloro-2- ( ( IR, 3S , 5R) -2 - ( ( 2S) -2 - ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (4.8 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.98 min; m/z 848.60 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.64 (d, .7=8.8 Hz, 1 H) , 8.34 (s, 1 H) , 8.32 (s, 1 H) , 8.25 - 8.29 (m, 2 H) , 8.09 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 7.86 - 7.96 (m, 4 H) , 5.18 -5.25 (m, 1 H) , 5.03 - 5.09 (m, 1 H) , 4.53 - 4.62 (m, 2 H) , 3.64 - 3.83 (m, 2 H) , 3.64 - 3.69 (m, 6 H) , 2.42 - 2.70 (m, 4 H) , 1.97 - 2.24 (m, 4 H) , 1.08 - 1.17 (m, 2 H) , 1.02 (dd, J=6.8, 2.4 Hz, 6 H) , 0.94 (t, J=6.8 Hz , 6 H) , 0.76 - 0.91 (m, 2 H) .
Ejemplo 86 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- (4- (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro 2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-5-il) fenil -3-quinolinil-lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-2-íl) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal en TFA de ( (1S) -2-( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2 - ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-quinolinil) - 1H- imidazol -2 - il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (Ejemplo 81) (31 mg, 0.025 mmol) en DMF (0.5 mi) se añadió N-clorosuccinimida (6.68 mg, 0.050 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 h. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H2O-Me0H con amortiguador de CFA al 0.1%) para dar ((lS)-2-( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- (4- (4 -cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H-imidazol -5-il) fenil) -2 -quinolinil ) - 1H- imidazol -2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etil ) carbamato de metilo (12.1 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.511 min; m/z 484.17 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de eOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . MN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.60 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.27 - 8.33 (m, 2 H) , 8.21 (s, 2 H) , 7.89 -7.95 (m, 2 H) , 7.83 - 7.88 (m, 2 H) , 5.15 (dd, J=8.7, 5.6 Hz, 1 H) , 5.05 (dd, J=8.3, 6.3 Hz, 1 H) , 4.64 (dd, J=11.3, 7.8 Hz, 2 H) , 3.87 - 4.00 (m, 4 H) , 3.73 - 3.81 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 3.33 - 3.48 (m, 4 H) , 2.41 - 2.61 (m, 4 H) , 1.95 -2.16 (m, 4 H) , 1.39 - 1.70 (m, 8 H) , 1.06 - 1.18 (ra, 2 H) , 0.81 (m, 2 H) .
Ejemplo 87 C (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4-cloro-5- (4- (6- (4-cloro-2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -5-metil -2-pirrolidinil) -1H-imidazol -5-il ) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol-2 -il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal en TFA de ( (1S) - 1- ( ( (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol- 2- il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (105 mg, 0.129 mmol) en DMF (3.0 mi) se añadió N-clorosuccinimida (18.88 mg, 0.141 mmol) y, después, el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 50 °C durante la noche. Mediante CLEM una proporción 1.3:1.6:1 del material de partida : mono-Cl (presumiblemente ambos regioisomeros : dicloro) . La reacción se concentró, se disolvió en MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar un material de partida recuperado (36.2 mg) , una mezcla de los dos regioisomeros mono-cloroimidazol (56.6 mg) (Ejemplo 94 y Ejemplo 95) y una sal en TFA de ((1S)-1-(((2S,5S)-2- (4 -cloro- 5- (4- (6- (4-cloro-2- ((2S,5S)-l-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (20.4 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.482 min; m/z 885.84 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 88 ( (1S) -!-({ {IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -1-naftil (fenil) - -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3 -il) - 1H- imidazol -4 -il ) naftalen- 1-il) fenil) -1H- imidazol -2 -il) -2-azabiciclo[3.1.0] hexano (Intermediario 144) (42.6 mg, 0.066 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) metilbutanoico (28.9 mg, 0.165 mmol) en DMF (0.8 mi) y DIPEA (0.092 mi, 0.53 mmol) se añadió HATU (62.8 mg, 0.165 mmol) y la reacción se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua .con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ((1S)-1-( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-ilfenil) -2-quinolinil-lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -1-metilpropil) carbamato de metilo (53.7 mg) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 2.821 min; m/z 813.88 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.06 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.98 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.95 (s, 1 H) , 7.91 (d, J=8.5 Hz, 2 H) , 7.78 (s, 1 H) , 7.65 - 7.73 (m, 4 H) , 7.59 - 7.64 (m, 2 H) , 5.18 (ddd, J=12.5, 9.2, 7.0 Hz, 2 H) , 4.59 (dd, J=6.4, 3.4 Hz, 2 H) , 3.80 - 3.87 (m, 2 H) , 3.69 (s, 6 H) , 2.73 (dt, i7=13.4, 9.2 Hz , 2 H) , 2.48 - 2.59 (m, 2 H) , 2.18 - 2.28 (m, 2 H) , 2.10 (s ancho, 2 H) , 1.08 - 1.15 (m, 2 H) , 1.06 (d, J=7.0 Hz, 3 H) , 1.04 (d, J=7.0 Hz, 3 H) , 0.99 (d, J=6.7 Hz, 3 H) , 0.95 (d, J=6.7 Hz , 3 H) , 0.89 - 0.94 (m, 2 H) .
Ejemplo 89 ( (1S) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (4- (4- (5- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) 2- ( (metoKicarbon.il) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il ) -1 naftil)fenil) -lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il 2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo una solución agitada de una sal HCl de (1R,3S,5R) -3- (5- (4- (5- (2- ( (1R,3S,5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol-4 -il ) naf alen- 1 il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 144) (42.6 mg, 0.066 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) 2-tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (35.9 mg, 0.165 mmol) en DMF (0.8 mi) y DIPEA (0.092 mi, 0.53 mmol) se añadió HATU (62.8 mg, 0.165 mmol) y la reacción se agitó a TA durante 4 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa ( eOH/agua con amortiguador de acetato amónico) para dar ((lS)-2-( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (5- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) fenil-lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (42.6 mg, 0.066 mmol) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 1.965 min; m/z 897.59 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 1 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/MeOH al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (500 MHz, MeOD) d ppm 8.23 (d, J=8.2 Hz, 1 H) , 7.91 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.82 (d, J=8.2 Hz , 2 H) , 7.52 - 7.59 (m, 2 H) , 7.44 - 7.51 (m, 4 H) , 7.41 (s, 1 H) , 7.21 (s, 1 H) , 5.23 (dd, J=8.9, 4.6 Hz, 1 H) , 5.18 (dd, J=8.9, 4.9 Hz, 1 H) , 4.68 (dd, J=7.5, 2.6 Hz , 2 H) , 3.89 -4.01 (m, 4 H) , 3.70 - 3.77 (m, 2 H) , 3.69 (s, 6 H) , 3.35 -3.45 (m, 4 H) , 2.43 - 2.63 (m, 4 H) , 2.00 - 2.14 (m, 4 H) , 1.52 - 1.71 (m, 6 H) , 1.41 - 1.52 (m, 2 H) , 1.10 - 1.18 (m, 2 H) , 0.79 - 0.86 (m, 2 H) .
Ejemplo 90 ( (1S) -1- ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- ((6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (2R,4r, 63) - 2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il ) - lH-imidazol-4-il) -2-naftil) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxoetil) carbamato de metilo Una sal HCl de (IR, 3S, 5R) -4- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) naftalen- 2- il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 124) (50 mg, 0.073 mmol) , ácido 2- ( (2R, 4r, 6S) -2.6-diraetiltetrahidro-2H-piran-4-il ) -2 - (metoxicarbonilamino) acético (Cap-179 estereoisómero 2) (36.9 mg, 0.151 mmol) HATU (58.6 mg, 0.154 mmol) y DIEA (0.077 mi, 0.441 mmol) se combinaron en DMF (3 mi) y la solución amarilla resultante se agitó a TA durante 15 horas. Los volátiles se retiraron a presión reducida y el residuo se redisolvió en metanol y se purificó mediante HPLC preparativa (solvente A: MeOH al 10%/agua al 90%/TFA al 0.1% solvente B: MeOH al 90%/agua al 10%/TFA al 0.1% ; Columna: Sunfire Prep MS C18 de 30 x 100 mm de 5u; Longitud de onda: 220 nM; Velocidad de flujo: 40 ml/min; gradiente: 10 % de B a 80% de B durante 30 min, con un tiempo de conservación de 5 min) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (2R, 4r, 6S) -2.6 -dimetiltetrahidro- 2H-piran-4-il) -2- ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol-4 - il) -2-naftil ) etinil ) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) -2-oxoetil) carbamato de metilo (43 mg) en forma de un sólido blanco. CL/EM [M+H] += 902; Tr = 1.93 min es el producto. Columna PHENOMENEX® de lOu C18 de 3.0x50mm; inicio %B: 0, final %B: 100 solvente A: MeOH al 10%/H2O al 90% + TFA al 1%; solvente B: MeOH al 90%/ H20 al 10%+ TFA al 1%; velocidad de flujo 4 ml/min. Tiempo de recorrido: 5 min. Pureza = 98 %. RMN de XH (500 MHz , DMS0-d6) d ppm 8.38 (1 H, s ancho,), 8.14 - 8.22 (1 H, m) , 8.09 (1 H, d, .7=8.85 Hz) , 7.93 - 8.00 (2 H, m) , 7.62 (1 H, d, .7=8.85 Hz) , 7.25 (2 H, t, J=7.48 Hz) , 5.02 (2 H, t, J=6.87 Hz) , 4.51 (1 H, dd, J=7.78, 6.56 Hz) , 4.45 (1 H, t, J=7.93 Hz) , 3.82 (1 H, s ancho,), 3.67 (1 H, d, J=13.73 Hz) , 3.54 (6 H, s) , 3.31 - 3.42 (3 H, m),.2.33 (2 H, s ancho,), 1.85 - 1.97 (2 H, m) , 1.43 - 1.52 (1 H, m) , 1.22 - 1.31 (1 H, m) , 1.03 - 1.12 (10 H, m) , 0.89 -1.01 (9 H, m) , 0.82 (1 H, s ancho,), 0.75 (1 H, s ancho.).
Ejemplo 91 ( (1S) -1- ( ( (23, 3aS, 6aS) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S, 3aS, 6aS) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) octahidrociclopenta [b]pirrol -2-il) -lH-imidazol - 4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2- il) hexahidrociclopenta [b]pirrol-1 (2H) -il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de 2S, 3aS, 6aS) -2-(4-(4-(6-(2-( (2S, 3aS, 6aS) -octahidrociclopenta [b] pirrol-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) octahidrociclopenta [b] pirrol (51 mg, 0.073 mmol), ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (Intermediario 147) (28.1 mg, 0.160 mmol) y DIPEA (0.076 mi, 0.44 mmol) en DCM (1.5 ral) se añadió HATU (60.9 mg, 0.160 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se concentró hasta sequedad y se purificó mediante HPLC preparativa (amortiguador TFA) para dar una sal en TFA de ((1S)-1-( ( (2S, 3aS, 6aS) -2-(4-(6-(4-(2-( (2S, 3aS, 6aS) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil ) octahidrociclopenta [b] pirrol-2-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) hexahidrociclopenta [b] pirrol-1 (2H) -il) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (23.7 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 2.462 min; m/z 867.8 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 92 ( (1S) -2- ( (2S, 3aS, 6aS) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 3aS, 6aS) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) hexahidrociclopenta [b]pirrol-2 (2H) -il) -lH-imidazol - 4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2- il) hexahidrociclopenta [b]pirrol-1 (2H) -il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (2S, 3aS, 6aS) -2-(4-(4-(6-(2-( (2S, 3aS, 6aS) -octahidrociclopenta [b] irrol-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) octahidrociclopenta [b] pirrol (51 mg, 0.073 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (Intermediario 147) (52 mg, 0.074 mmol), ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acético (35.5 mg, 0.163 mmol) y DIPEA (0.078 mi, 0.45 mmol) en DCM (1.5 mi) se añadió HATU (62.1 mg, 0.163 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se concentró hasta sequedad y se purificó mediante HPLC preparativa con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S, 3aS, 6aS) -2- (4- (4- (6- (2-( (2S, 3aS, 6aS) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) hexahidrociclopenta [b] pirrol-2 (2H) -il) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) hexahidrociclopenta [b] pirrol-1 (2H) -il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (25.8 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 2.350 min; m/z 477.5 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 i* y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío.
Ej emplo* 93 3-cloro-l- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 33, 5R) -2- ( (3-cloro-5- metoxi -1 -isoquinol inil ) carbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3- il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil ) - 5-metoxisoquinolina A una solución agitada de una sal HC1 de (IR, 3S, 5R) -5- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) naftalen-2- il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 124) (30 rag, 0.051 mmol) y ácido 3-cloro-5-metoxiisoquinolin-l-carboxílico (30.1 mg, 0.127 mmol) en DMF (0.88 mi) y DIPEA (0.071, 0.45 mmol) se añadió HATU (48.1 mg, 0.127 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa. (MeOH/agua con un amortiguador de NH4OAc) y se volvió a purificar mediante HPLC preparativa MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA DE (3 -cloro- 1-( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (3 -cloro-5 -metoxi- 1 -isoquinolinil) carbonil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -5-metoxiisoquinolina (40.0 mg) en forma de sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.621 min; m/z 887.34 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 94 ( (1S) -l-( ( (2S, 5S) -2- (4- (4- ( (4-cloro- (2- ( (2S,5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) a ino) -3 -metilbutanoil ) -5-metil-2- pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) fenil) etinil) fenil) -1H- imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo; y Ejemplo 95 ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4-cloro-5 (-4-6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2- pirrolidinil ) -1H-imidazol -4 -il ) fenil) etinil) fenil) -IH- imidazol -2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil ) -2- metilpropil ) carbamato de metilo; Estos dos compuestos se prepararon en la reacción que preparó ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4-cloro-5- (4- (6- (4-cloro-2-( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol - 2 - il ) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (Ejemplo 87) y se aislaron como una mezcla de mono-cloroimidazol regioisómeros. Los dos regioisómeros se separaron mediante SCFC en una columna CHIRALCEL® OJ-H (30 x 250mm, 5µp\) usando solventes: 75% de C02 - 25% de EtOH/0.1% de DEA. La regioquímica absoluta de los dos mono-cloroimidazol regioisómeros no se determinó de modo que cada uno fue asignado de forma arbitraria. Ejemplo 94 : ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4- (4- ( (4 -cloro- ( 2 - ( ( 2S , 5S) - 1 - ( ( 2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil ) -lH-imidazol-5-il) fenil) etinil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (18.6 mg) se aisló en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.756 min; m/z 851.62 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de eOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . Ejemplo 95: ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4-cloro-5- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4- il) fenil) etinil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo (24.1 mg) se aisló en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.770 min; m/z 851.64 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de •'elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . ((13) -2- ( ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- (2-cloro-2- ( (1R,3S,5R) -2 - ((23) - 2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil ) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2 -naftil) etinil - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etilcarbamato de metilo A una solución de 3- (5- ( (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -1H- imidazol-5-il ) naftalen-2- il) etinil) -1H- imidazol -2 -il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2- carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (Intermediario 150) (69 mg, 0.074 mmol) en dioxano (2 mi) se añadió HC1 4M (0.370 mi, 1.48 mmol) en dioxano y la suspensión espesa se agitó durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se concentró después bajo corriente de nitrógeno y el producto intermediario se trató con ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H- piran-4-il) acético (20.9 mg, 0.096 mmol) , DMF (1.5 mi), DIPEA (0.078 mi, 0.44 mmol) y, por último, HATU (36.6 mg, 0.096 mmol) . La mezcla de reacción se agitó durante la noche a TA, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador TFA al 0.1%) para dar una, sal en TFA de ( (1S) -2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil - 1H- imidazol-2 -il ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (35.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.726 min; m/z 803.74 (MH+). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de HO/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RM de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.27 (s, 1 H) , 8.18 (s, 1 H) , 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.98 -8.02 (m, 2 H) , 7.88 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.74 (s, 1 H) , 7.67 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 5.15 (dd, J=9.3, 7.0 Hz, 1 H) , 5.09 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1 H) , 4.59 (d, J=7.8 Hz , 1 H) , 4.56 (d, J=6.5 Hz, 1 H) , 3.91 - 4.00 (m, 2 H) , 3.74 - 3.84 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.34 - 3.45 (m, 2 H) , 2.70 (dd, .7=13.6, 9.5 Hz, 1 H) , 2.61 (dd, ,7=13.8, 8.8 Hz , 1 H) , 2.40 - 2.54 (m, 2 H) , 2.14 - 2.23 (m, 1 H) , 2.01 - 2.13 (m, 3 H) , 1.56 - 1.64 (m, 1 H) , 1.38 - 1.55 (m, 3 H) , 1.05 - 1.14 (m, 2 H) , 1.01 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.92 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.82 - 0.92 (m, 2 H) .
Ejemplo 97 ( (1S) -1- ( ( (1R, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il ) - 1H- imidazol -4-il) etinil) -2-naftil) -1H-imidazol -2 -il) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución de 3- (5- ( (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) naftalen-2- il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (Intermediario 150) (62.7 mg, 0.067 mmol) en dioxano (2 mi) se añadió HC1 4M (0.34 ml , 1.3 mmol) en dioxano y la suspensión espesa se agitó durante 1.5 horas. La reacción se concentró después bajo corriente de nitrógeno hasta sequedad y después se trató con ácido 2- ( (2R, 4r, 6S) -2.6 -dimetiltetrahidro-2H-piran-4 -il) -2- (metoxicarbonilamino) acético (Cap-179 estereoisómero 2) (21.45 mg, 0.087 mmol), DMF (1.5 ml) , DIPEA (0.071 ml , 0.40 mmol) y, por último, HATU (33.3 mg, 0.087 mmol) . La mezcla de reacción se agitó durante la noche a TA con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( 6 - (4 - ( 2 - ( ( IR, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (2R,4r,6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (28 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.898 min; m/z 831.80 (MH+) · Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.27 (s, 1 H) , 8.17 (s, 1 H) , 8.05 (d, .7=8.8 Hz , 1 H) , 7.98 -8.02 (m, 2 H) , 7.88 (dd, J=8.5, 1.8 Hz, 1 H) , 7.74 (s, 1 H) , 7.66 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 5.15 (dd, J=9.2, 6.9 Hz, 1 H) , 5.10 (dd, J=9.0, 6.3 Hz, 1 H) , 4.56 (t, J=6.0 Hz, 2 H) , 3.73 -3.85 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.43 - 3.54 (m, 2 H) , 2.70 (dd, J=13.7, 9.4 Hz, 1 H) , 2.61 (dd, J=13.6, 9.0 Hz, 1. H) , 2.40 -2.54 (m, 2 H) , 2.01 - 2.23 (m, 4 H) , 1.55 - 1.64 (m, 1 H) , 1.46 (d, J=12.0 Hz, 1 H) , 1.17 (dd, J=6.0, 4.3 Hz, 6 H) , 1.04 - 1.13 (m, 3 H) , 1.01 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.96 - 1.03 (m, 1 H) , 0.92 (d, (m, 1 H) .
Ejemplo 98 ( (1S) -2- ( (2S, 5S) -2- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2- naftil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una sal HC1 de ( IR, 3S , 5R) -3 - (4 - ( (6- (2 - ( (2S,5S) -5-metil irrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) na ftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 154) (27 mg , 0.045 mmol) y ácido ( S ) - 2 - (metoxicarboni lamino ) - 2 -tetrahidro-2H-piran- - il ) acético (24.7 mg , 0.114 mmol) en DMF (1 mi) y DI PEA (0.056, 0.32 mi, 0.32 mmol) se añadió HATU (43.2 mg , 0.114 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se concentró en una corriente de nitrógeno, se disolvió en MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( ( 1S ) - 2 - ( ( 2 S , 5S ) - 2 - ( 4 - ( 6 - ( ( 2 -( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2-( t et rahidro- 2H-piran-4-il) acetil) - 2 -azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imi da zol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) - 2 -oxo-1- (tetrahidro- 2H-piran- 4 - i 1 ) etil) carbamato de metilo (31.4 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.658 min; m/z 847.80 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido t ri f luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1%. de ácido trif luoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de ""? se presenta como una mezcla -1:3:5 de rotámeros . L RMN de 1H para el rotámero mayoritarios es: RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.29 (s, 1 H) , 8.18 (s, 1 H) , 8.06 (d, J-=8.5 Hz, 1 H) , 8.01 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 (s, 1 H), 7.89 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.74 (s, 1 H), 7.67 ( dd , J= 8.4 , 1.4 Hz , 1 H), 5.19 (dd, J=10.5, 7.0 Hz, 1 H), 5.09 (dd, J=8.9, 6.4 Hz, 1 H) , 4.59 (d, J=7.5 Hz , 1 H), 4.22 (d, J"= 9.3 Hz, 1 H) , 3.86 - 4.00 (m, 4 H) , 3.72 - 3.82 (m, 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.23 - 3.45 (m, 4 H) , 2.50 - 2.70 (m, 2 H), 2.24 - 2.50 (m, 3 H), 1.90 - 2.13 (m, 4 H) , 1.70 - 1.85 (m, 1 H) , 1.57 (d, J=6.5 Hz, 3 H) , 1.30 - 1.64 (m, 6 H) , 1.23 (d, J=11.5 Hz, 1 H) , 1.04 - 1.12 (m, 1 H) , 0.85 ( s ancho , 1 H) . ( (1S) -1- ( ( (1R, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) etinil) -IH-imidazol- 2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de OIR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S, 5S) -5-metilpirrolidin-2-il) -1H-imidazol-4-il) naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 154) (10.1 mg, 0.017 mmol) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (7.44 mg, 0.042 mmol) en D F (0.5 mi) y DIPEA (0.021, 0.119 mi) se añadió HATU (43.2 mg, 0.114 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La reacción se concentró disuelta en MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) - ( (1S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-pirrolidinil-lH-imidazol-4-i)naftil) etinil-lH-imidazol-2-il) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -1-metilpropil) carbamato de metilo (9.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.930 min; m/z 763.75 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H representa una mezcla de -1:3 de rótamelos, los datos para el rotámero mayoritario son: RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1 H) , 8.19 (s, 1 H) , 8.07 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 7.99 - 8.03 (m, 2 H) , 7.90 (dd, J"=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 7.77 (s, 1 H) , 7.65 - 7.71 (m, 1 H) , 5.19 (dd, J=10.2, 6.9 Hz , 1 H) , 5.10 (dd, J=9.2, 6.4 Hz , 1 H) , 4.55 (d, -7=6.5 Hz, 1 H) , 4.13 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.65 - 3.79 (m, 2 H) , 1.95 - 2.68 (m, 8 H) , 1.57 (d, J=6.5 Hz, 3 H) , 1.31 (d, J=6.3 Hz , 1 H) , 1.01 (d, J=7.0 Hz, 3 H) , 0.98 (d, J=7.0 Hz, 3 H) , 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.88 (d, <J=6.8 Hz, 3 H) , 0.84 - 1.14 (m, 2 H) .
Ejemplo 100 ( (13) -2- ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- ( (2- ( (1R,3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 - etilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -4-il) etinil ) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo- 1- (tetrahidrq-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de l,3-(6-(4-(5-(2-( (IR, 3S, 5R) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil-2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) etinil) naftalen-2 - il ) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (60 mg, 0.064 mmol) en dioxano (0.5 mi) se añadió HC1 4M (0.32 mi, 1.3 mmol) en dioxano y la reacción se agitó enérgicamente durante 4 horas. La reacción se concentró hasta sequedad.. Después, se añadieron ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (18.2 mg, 0.084 mmol), DMF (0.5 mi), DIPEA (0.067 mi, 0.39 mmol) y, por último, HATU (31.8 mg) al material bruto y la reacción se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró parcialmente con una corriente de nitrógeno, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa ((MeOH/agua con un amortiguador de TFA) y después se volvió a purificar mediante HPLC preparativa ( (MeOH/agua con un amortiguador de acetato amónico.) . El material se purificó una tercera vez mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador TFA) para dar una sal en TFA de ((lS)-2- (((lR,3S,5R)-3-(4-(4-(6-(2-((lR,3S,5R)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil-2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo- [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2-H-piran-4-il) carbamato de metilo (27.7 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.291 min; m/z 803.67 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.27 (s, 1 H) , 8.19 (s, 1 H) , 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 - 8.03 (m, 2 H) , 7.88 (dd, J=8.5, 1.8 Hz, 1 H) , 7.78 (s, 1 H) , 7.68 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 5.15 (dd, J=9.0, 7.0 Hz, 1 H) , 5.09 (dd, J=9.3, 6.5 Hz, 1 H) , 4.80 (d, 2 H) , 4.54 (d, J=6.5 Hz , 1 H) , 3.87 - 3.93 (m, 1 H) , 3.70 - 3.79 (m, 3 H) , 3.68 (s, 3 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.54 - 3.63 (m, 1 H) , 3.34 - 3.40 (m, 1 H) , 2.59 - 2.74 (m, 2 H) , 2.40 - 2.55 (m, 2 H) , 2.00 - 2.22 (m, 4 H) , 1.71 - 1.81 (m, 2 H) , 1.51 - 1.63 (m, 2 H) , 1.05 - 1.14 (m, 2 H) , 1.01 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.88 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 101 ( (1S) -2- ( (IR, 3S,5R) -3- (4- (6- ((2- ( (1R, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo- 1- ( (3S) -tetrahidro-2H-piran-3-il) etil) carbamato de metilo A una mezcla de una sal en TFA de 1 , 3 - ( 6 - (4 - ( 5 - (2 -( (IR, 3S, 5R) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoil-2-azabiciclo[3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-5-il) etinil) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0] hexan-2-carboxilato de ( IR, 3S , 5R) - tere-butilo (60 mg, 0.064 mmol) en dioxano (0.5 mi) se añadió HCl 4M (0.3 mi, 1.3 mmol) en dioxano y la reacción se agitó enérgicamente durante 4 horas. La reacción se concentró hasta sequedad. Después, se añadieron ácido (S)-2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-3-il) acético (18.2 mg, 0.084 mmol) (Cap. 177a), DMF (0.5 mi), DIPEA (0.067 mi, 0.39 mmol) y, por último, HATU (32 mg) al material bruto y la reacción se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró parcialmente, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador TFA) y se volvió a purificar en una inyección mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador acetato amónico) para dar una sal en TFA de ((lS)-2- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) - 1H- imidazol-4 - il) etinil-2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo- [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (3S) - (tetrahidro-2-H-piran-3-il) carbamato de metilo (30.5 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.376 min; m/z 803.66 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.14 (s, 1 H) , 7.94 (s, 1 H) , 7.78 - 7.86 (m, 3 H) , 7.49 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 7.45 (s, 1 H) , 7.26 (s, 1 H) , 5.15 (ddd, J=12.9, 8.7, 4.5 Hz, 2 H) , 4.57 (d, J=6.8 Hz, 1 H) , 3.70 - 3.86 (m, 3 H) , 3.67 (s ancho, 3 H) , 3.66 (s ancho, 3 H) , 3.58 - 3.64 (m, 1 H) , 3.53 (t, J=8.3 Hz, 1 H) , 3.45 (dd, J=11.4, 8.2 Hz , 1 H) , 2.31 - 2.57 (m, 4 H) , 1.93 - 2.17 (m, 5 H) , 1.67 - 1.84 (m, 2 H) , 1.50 - 1.63 (m, 2 H) , 1.08 - 1.17 (m, 2 H) , 0.98 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.92 (d, -7=6.8 Hz, 3 H) , 0.78 (s ancho, 2 H) .
Ejemplo 102 ( (1S) -1- (((2S, 4S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S, 4S) -1- ( (2S) ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -4-metil-2- pirrolidin.il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2 -quinolinil -1H- imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución de una sal de HCl de 2- (2- ( (2S, 4S) - 4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) -6- (4- (2- ( (2S,4S) -4-metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol - 5 - il ) fenil) quinolina (Intermediario 164) (16.5 mg, 0.024 mmol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3- (metilbutanoico (9.7 mg, 0.055 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.038 mi, 0.22 mmol) se añadió HATU (20.99 mg, 0.055 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20- eOH con amortiguador TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ((1S)-1-( ( (2S,4S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S,4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 -il ) fenil) -2-quinolinil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (8.3 mg, 6.94 µp???, rendimiento 28.9%) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.555 min; m/z 818.78 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2' x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de eOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.60 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 8.34 (d, J=1.8 Hz, 1 H) , 8.32 (s, 1 H) , 8.26 - 8.31 (m, 1 H) , 8.21 - 8.26 (m, 1 H) , 8.06 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.97 - 8.03 (m, 1 H) , 8.00 (d, J"=8.5 Hz, 1 H) , 7.93 (s, 1 H) , 7.87 - 7.92 (m, 2 H) , 5.19 - 5.36 (m, 2 H) , 4.29 - 4.41 (m, 2 H) , 4.24 (t, J=6.9 Hz , 2 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.44 (c, ,7=11.0 Hz, 2 H) , 2.62 - 2.74 (m, 2 H) , 2.46 -2.61 (m, 2 H) , 1.97 - 2.12 (m, 2 H) , 1.82 - 1.97 (m, 2 H) , 1.26 (dd, J=6.3, 3.3 Hz, 6 H) , 0.91 - 0.96 (m, 6 H) , 0.89 (dd, J=6.7, 5.1 Hz, 6 H) .
Ejemplo 103 ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S, 5S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2- pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-quinolinil-lH- imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una solución de una sal de HCl bruta de 2- (2- ( (2S, 5S) -5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) -6- (4- (2-( (2S,5S) -5-metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol - 5 -il) fenil) quinolina (Intermediario 167) (12.35 mg, 0.018 mraol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3- (metilbutanoico (7.25 mg, 0.041 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.028 mi, 0.16 mmol) se añadió HATU (15.74 mg, 0.041 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 5S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S, 5S) -1-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2 -quinolinil ) -1H-imidazol-2-il) -4 -metil -1-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (3.9 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.616 min; m/z 818.73 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.68 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.39 (d, J=1.3 Hz, 1 H) , 8.30 - 8.35 (m, 2 H) , 8.26 - 8.31 (m, 1 H) , 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.99 -8.06 (m, 3 H) , 7.89 - 7.94 (m, 2 H) , 5.14 - 5.31 (m, 2 H) , 4.14 (dd, J=8.8, 5.0 Hz, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 2.47 - 2.59 (ra, 2 H) , 2.23 - 2.43 (m, 4 H) , 1.95 - 2.10 (m, 4 H) , 1.56 (dd, J-=6.7, 3.6 Hz, 6 H) , 1.01 - 1.07 (m, 2 H) , 0.99 (dd, J=6.7 , 3.4 Hz, 6 H) , 0.89 (dd, J=6.8, 1.8 Hz , 6 H) .
Ejemplo 104 ( (1S) -1- ( ( (1R,3S,5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2 quinoxalinil) -lH-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución de sal HCl de ( (1S) -1- ( ( (2S, S) -2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-l-((2S)-2-( (metoxicarboni1 ) amino) -3-metilbutanoil ) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 -il) fenil) -2-quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil ) carbonil ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (Intermediario 173) (41.7 mg, 0.058 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (23.4 mg, 0.133 mmol) en DMF (1 mi) y DIPEA (0.09 mi, 0.5 mmol) se añadió HATU (50.7 mg, 0.133 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil ) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-4 -il) fenil) -2-quinoxalinil ) -1H- imidazol -2 -il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2 -il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (22.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.451 min; m/z 815.72 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 9.41 (s, 1 H) , 8.43 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 8.41 - 8.47 (m, 1 H) , 8.28 (d, .7=1.3 Hz, 2 H) , 8.03 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 8.00 - 8.07 (m, 1 H) , 7.87 - 7.95 (m, 3 H) , 5.10 - 5.26 (m, 2 H) , 4.57 (t, .7=6.7 Hz, 2 H) , 3.76 - 3.89 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 2.70 (dd, J=13.7, 9.2 Hz, 2 H) , 2.44 - 2.56 (m, 2 H) , 2.14 - 2.26 (m, 2 H) , 2.04 - 2.14 (m, 2 H) , 1.07 - 1.16 (m, 2 H) , 1.02 (dd, J=6.8, 2.0 Hz, 6 H) , 0.93 (dd, J=6.8, 2.0 Hz, 6 H) , 0.83 - 0.99 (m, 2 H) .
Ejemplo 105 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol -4-il) fenil -2- quinoxalinil) -1H-imidazol -2-il) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-2-il - 2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de sal HCl de ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2-(4-(6-(4-(2-((2S,4S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 -il) fenil) -2 -quinolinil ) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil ) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo (Intermediario 173) (10.1 mg, 0.014 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (7-0 mg, 0.032 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.022 mi, 0.13 mmol) se añadió HATU (12.24 mg, 0.032 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas . . La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/H20 con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (6- (4- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H-imidazol -4 - il ) fenil) -2-quinoxalinil) - 1H- imidazol- 2 - il ) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (7.3 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.251 min; m/z 899.79 (MH+) . Los datos de CL · se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 9.41 (s, 1 H) , 8.41 - 8.47 (m, 2 H) , 8.27 - 8.31 (m, 2 H) , 8.03 (d, J-=8.5 Hz, 1 H) , 8.01 - 8.06 (m, 1 H) , 7.87 - 7.95 (m, 3 H) , 5.09 - 5.26 (m, 2 H) , 4.61 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 3.90 - 4.01 (m, 4 H) , 3.80 - 3.90 (m, 2 H) , 3.68 (s, 6 H) , 3.34 - 3.47 (m, 4 H) , 2.70 (dd, .7=13.6, 9.3 Hz , 2 H) , 2.45 - 2.57 (m, 2 H) , 1.99 - 2.19 (m, 4 H) , 1.36 - 1.68 (m, 8 H) , 1.02 - 1.16 (m, 2 H) , 0.79 - 0.96 (m, 2 H) .
Ejemplo 106 ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- ( (4-cloro-2- ( (IR, 3S, 5R) - 2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) acetil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -5-il) etinil -2-naftil) -lH-imidazol -2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex- 2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil-2-naftil) -lH-imidazol-2-il) - 2- azabiciclo [3.1.0] hex-2-il-2 -oxo- 1 - ( tetrahidro- 2H-piran-4 - il ) etil ) carbamato de metilo (Ejemplo 82) (21.0 mg, 0.025 mmol) en DMF se añadió N-clorosuccinimida (6.97 mg, 0.052 mmol) y después el vaso de reacción se aclaró con una corriente de nitrógeno, se selló y se calentó a 50°C durante 3 horas. Se añadió N-clorosuccinimida adicional (5.0 mg) y el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se calentó a 50°C durante 3 horas, después la reacción se enfrió y se concentró en una corriente de nitrógeno. Los restos se disolvieron en MeOH, se filtraron y se purificaron mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (IR, 3S, 5R) -3- (4-cloro-5- (6- ( (4-cloro- (2-( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex- 3- il) - lH-imidazol-5-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- ( tetrahidro- 2H- piran-4-il) etil) carbamato de metilo (8.1 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.276 min; m/z 457.47 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.18 (s, 1 H) , 8.07 (s, 1 H) , 7.98 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.93 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.88 (dd, .7=8.8, 1.8 Hz, 1 H), 7.59 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H), 5.05 (dd, J"=8.5, 6.3 Hz, 1 H) , 4.99 (t, J=6.9 Hz, 1 H) , 4.62 (d, J=7.5 Hz, 2 H) , 3.91 - 3.98 (m, 4.H) , 3.74 - 3.81 (m, 1 H) , 3.68 - 3.72 (m, 1 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.34 - 3.45 (m, 4 H) , 2.45 - 2.56 (m, 2 H) , 2.39 - 2.44 (m, 2 H) , 1.96 - 2.11 (m, 4 H) , 1.37 - 1.66 (m, 8 H) , 1.05 - 1.14 (m, 2 H) , 0.74 - 0.84 (m, 2 H) .
Ejemplo 107 ( (1S) -1- ( ( (1S) -l-(4-(4- (6- (2-((lS) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) amino) -2-metilpropil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2- il) -2 -metilpropil) carbamoil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (S)-l-(5-, (4- (6- (2- ( (S) -l-amino-2-metilpropil) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-metilpropan-l-amina (Intermediario 178) (57.4 mg, 0.092 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2-metilbutanoico (35.4 mg, 0.202 mmol) y DIPEA (0.096 mi, 0.55 mmol) en DMF (1.5 mi) se añadió HATU (77 mg, 0.20 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se concentró hasta sequedad y se purificó mediante HPLC preparativa (amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) amino) -2-metilpropil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -metilpropil) carbamoil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (60.4 mg) en forma de un sólido blanco.
Tiempo de retención en la CL-EM 2.253 min; m/z 759.6 (MH-) . Los datos de CL se registraron en un croraatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 108 3-metil-N- ( (1S) -2-metil-l- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -2-metil-l- ( (3- metilbutanoil) amino) propil) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) -lH-imidazol -2-il) propil) butanamida A una solución agitada de una sal HC1 de (S)-l-(5- (4- (6- (2- ( (S) -l-amino-2-metilpropil) - 1H- imidazol - 4 -il ) naftalen-2 -il) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -met ilpropan-1-amina (Intermediario 178) (89 mg, 0.142 mmol) y ácido 3 -metilbutanoico (32 mg, 0.313 mmol) y DIPEA (0.149 mi, 0.855 mmol) en D F (2 mi) se añadió HATU (119 mg, 0.31 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2 horas. La mezcla de reacción bruta se concentró hasta sequedad y se purificó dos veces mediante HPLC preparativa (amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de 3-metil-N-((lS) -2-metil-l- (4-(4-(6-(2-((lS)-2-metil-l-( ( 3 -meti lbutanoil ) amino) propi 1 ) - 1H- imidazol -4-il) -2 -nafti 1 )fenil) -lH-imidazol-2-il) ro il ) butanamida (54.6 mg) en forma de un sólido blanco. Tiempo de retención en la CL-EM 2.375 min; m/z 645.6 (MH-). Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usaron un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente del solvente A al 100%/solvente B al 0% a solvente A al 0%/solvente B al 100%, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue acetonitrilo al 5%/H20 al 95%/acetato de amonio 10 mM y el solvente B fue H20 al 5%/acetonitrilo al 95%/acetato de amonio 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . ' 2- ( (2S, 5S) -l-acetil-5-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -l-acetil-5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) - 2-naftil) fenil) -1H-imidazol A una solución de 2- ( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2-( (2S, 5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol (intermediario 117) (contaminado con acetato amónico) (38 mg, 0.076 mmol) y ácido (S)-2-((2R,4r,6S)-2.6 -dimetiltetrahidro-2H-piran-4 - il ) -2 - (metoxicarbonilamino) acético (40.8 mg, 0.166 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.053 mi, 0.30 mmol) se añadió HATU (63.2 mg, 0.166 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de 2- ( (2S, 5S) -l-acetil-5-metil-2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2- ( (2S, 5S) -l-acetil-5-metil-2-pirrolidinil) -1H- imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (20 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.123 min; m/z 587.62 ( H+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacé ico . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.30 (s, 1 H) , 8.27 (s, 1 H) , 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.09 (d, J"=8.8 Hz, 1 H) , 7.93 - 8.01 (m, 4 H) , 7.84 - 7.91 (m, 4 H) , 5.25 (c, J=8.4 Hz, 2 H) , 4.31 - 4.40 (m, 2 H) , 2.53 - 2.66 (m, 2 H) , 2.28 - 2.40 (m, 4 H) , 2.25 (s, 3 H) , 2.25 (s, 3 H) , 1.88 - 1.97 (m, 2 H) , 1.47 (dd, J=6.5, 3.5 Hz , 6 H) , 1.14 - 1.19 (m, 1 H) .
Ejemplo 110 (1- ( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- ( (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5S) -1- ( ( (2R, 4r, 6S) -2.6- dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l- pirrolidinil) -2-oxoetil) carbamato de metilo A una solución de una sal HC1 de 2- ( (2S, 5S) -5-metil-2 -pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,5S) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (intermediario 117) (48 mg, 0.074 mmol) y ácido (S) -2-( (2R, 4r, 6S) -2.6-dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2- (metoxicarbonilamino) acético (Cap-179 estereoisomero 2) (39.9 mg, 0.163 mmol) en DMF (0.8 mi) y DIPEA (0.09 mi, 0.52 mmol) se añadió HATU (61.9 mg, 0.163 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó en dos inyecciones mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( 1 - ( ( 2R, 4r , 6S ) -2.6 -dimetiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2-((2S,5S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S,5S)-l-(((2R,4r,6S)-2.6 -dimetiltetrahidro-2H-piran-4 -il) ( (metoxicarbonil) amino) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil ) -2-oxoetil) carbamato de metilo (55.5 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.506 min; m/z 479.54 (1/2MH+] . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de 1H se presenta como una mezcla compleja de rotámeros .
Ejemplo 111 ( (1S) -2- ( (2S, 5S) -2- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil)¦ 2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2- naftil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de sal HC1 de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (.(6- (2- ( (2S,4S) -5-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2 -il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 175) (15 mg, 0.025 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2 -tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (13.70 rag, 0.063 mmol) en DMF (0.4 mi) y DIPEA (0.03, 0.2 mi, 0.2 mmol) se añadió HATU (23.99 mg, 0.063 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 1.5 horas. La reacción se diluyó con MeOH y se purificó en dos inyecciones mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de((lS)-2-( (2S,4S) -2- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol -4 -il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (12.0 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.040 min; m/z 847.76 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H20/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ¾ (400 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 1 H) , 8.18 (s, 1 H) , 8.05 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.97 - 8.02 (m, 2 H) , 7.88 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1 H) , 7.76 (s, 1 H) , 7.67 (dd, J-=8.4, 1.4 Hz, 1 H) , 5.23 (dd, J=10.9, 6.9 Hz, 1 H) , 5.09 (dd, J=9.0, 6.5 Hz, 1 H) , 4.59 (d, J=7.8 Hz, 1 H) , 4.34 - 4.41 (m, 1 H) , 4.28 (d, J=8.0 Hz, 1 H) , 3.86 - 4.00 (m, 4 H) , 3.75 - 3.81 (m, 1 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.32 - 3.50 (m, 5 H) , 2.39 - 2.74 (m, 4 H) , 1.87 - 2.13 (m, 4 H) , 1.27 - 1.65 (m, 8 H) , 1.25 (d, J=6.3 Hz, 3 H) , 1.04 - 1.14 (m, 1 H) , 0.86 (s ancho, 1 H) .
Ejemplo 112 ( (1S) -1- ( ((2S, 4S) -2- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S,5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución de sal HC1 de (IR, 3S, 5R) -3- (4- ( (6- (2- ( (2S,4S) -5-metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol-4 -il) naftalen-2-il) etinil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 175) (38 mg, 0.064 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (28.0 mg, 0.160 mmol) en DMF (0.7 mi) y DIPEA (0.08, ml , 0.4 mmol) se añadió HATU (60.8 mg, 0.160 mmol) y se agitó a TA durante 1.5 horas. La reacción se diluyó con eOH, se filtró y se purificó dos veces mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1-( ( (2S, 4S) -2- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (19.1 mg) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.288 min; m/z 763.74 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H NMR (400 MHz , MeOD) d ppm 8.28 (s, 1 H) , 8.18 (s, 1 H) , 8.05 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.98 - 8.03 (m, 2 H) , 7.88 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1 H) , 7.76 (s, 1. H) , 7.67 (dd, J=8.5, 1.5 Hz, 1 H) , 5.24 (dd, J=10.9, 7.2 Hz , 1 H) , 5.10 (dd, J=9.0, 6.5 Hz, 1 H) , 4.55 (d, J=6.5 Hz , 1 H) , 4.30 - 4.37 (m, 1 H) , 4.23 (d, J=7.3 Hz, 1 H) , 3.72 - 3 : 79 (m, 1 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.66 (s, 3 H) , 3.43 (t, J=10.4 Hz , 1 H) , 2.49 - 2.74 (m, 3 H) , 2.44 (ddd, J=13.6, 6.7, 6.4 Hz , 1 H) , 2.11 - 2.22 (m, 1 H) , 1.98 - 2.11 (m, 2 H) , 1.89 (c, J=12.0 Hz, 1 H) , 1.25 (d, J=6.3 Hz, 3 H) , 1.06 - 1.15 (m, 1 H) , 1.00 (d, J=6.8 Hz, 3 H) , 0.95 - 0.98 (m, 1 H) , 0.94 (d, J=4.0 Hz, 3 H) , 0.92 (d, J=3.8 Hz, 3 H) , 0.88 (d, J=6.8 Hz, 3 H) .
Ejemplo 113 2- ( (2S,4S) -4-metil-l- (3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -4-metil-l- (3 -metilbutanoil) -2-pirrolidinil) - lH-imidazol-4-il) -2 -naftil ) fenil) -IH-imidazol A una solución de sal HCl de 2-((2S,4S)-4 metilpirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -4 -metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il)naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (64.8 mg, 0.1 mmol) , ácido 3-metilbutanoico (22.5 mg, 0.220 mmol) y DIPEA (0.122 mi, 0.700 mmol) en DCM (2 mi) se añadió HATU (76 mg, 0.200 mmol) y la mezcla se agitó a TA durante la noche. La mezcla de reacción se evaporó hasta sequedad y después se purificó mediante HPLC preparativa para dar una sal en TFA de 2 - ( ( 2S , 4S) -4 -metil - 1- (3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4-metil-1- (3-metilbutanoil) -2-pirrolidinil) ^lH-imidazol-4-il) -2 -naftil ) fenil ) - 1H- imidazol (61.7 mg) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 1.853 min; m/z 671.64 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 n . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 114 ( (1S) -2- ( (2S, 4S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (23, 43) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) acetil) - 4- etil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2- quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo- 1- (tetrahidro-2H-piran-4 - il ) etil) carbamato de metilo A una solución de una sal de HCl de 2- (2- ( (2S, 4S) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) -6- (4- (2- ( (2S,4S) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-5-il) fenil) quinolina (Intermediario 164) (10 mg, 0.015 mmol) y ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (7.28 mg, 0.034 mmol) en DMF (0.5 mi) y DIPEA (0.023 mi, 0.13 mmol) se añadió HATU (12.75 mg, 0.034 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 16 horas. La reacción se concentró y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (H20-MeOH con amortiguador TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S,4S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S,4S) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2- quinolinil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (8.6 mg) en forma de un sólido amarillo. Tiempo de retención en la CL-EM 3.243 min; m/z 902.90 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorroclo . RM de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.61 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.35 (d, J=1.8 Hz, 1 H) , 8.22 - 8.33 (m, 3 H) , 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 8.00 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.97 -8.04 (m, 1 H) , 7.89 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.85 - 7.95 (m, 2 H) , 5.17 - 5.33 (m, 2 H) , 4.32 - 4.45 (m, 2 H) , 4.28 (dd, J=8.2, 5.4 Hz, 2 H) , 3.83 - 3.98 (m, 4 H) , 3.67 (s, 6 H) , 3.22 -3.54 (m, 6 H) , 2.63 - 2.75 (m, 2 H) , 2.46 - 2.61 (m, 2 H) , 1.83 - 2.04 (m, 4 H) , 1.52 - 1.64 (m, 2 H) , 1.30 - 1.53 (m, 6 H) , 1.26 (dd, c7=6.3, 4.0 Hz, 6 H) .
Ejemplo 115 (lS)-l-(((3R)-3-(4-(4-(6-(2-((3R)-4-((2S)-2- ( (metoxicarbon.il ) amino) - 3 -met ilbutanoi 1 ) -3- morfolinil) -lH-ímidazol-4-il) -2-naftil)fenil) - 1H- i idazol - 2 - il ) - 4 -morfolinil ) carbonil ) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HC1 de (of (R) -3- (5- (4- (6- (2- ( (R) -morfolin-3-il) -lH-imidazol-4-il)naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) mo fol ina (Intermediario 181) (71.6 mg , 0.110 mmol) y ácido (S)-2 - (metoxicarbonilamino) - 3 -met ilbutanoico (44.2 mg, 0.252 mmol) en DMF (1.0 mi) y D I PEA (0.13 mi, 0.77 mmol) se añadió HATU (96 mg , 0.252 mmol) y la mezcla reacción se lavó con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 3 horas. La reacción se concentró en corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con MeOH (~ 5 mi) , se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( ( 1S ) - 1 - ( ( ( 3R) - 3 - ( 4 - ( 4 - ( 6 -(2-( (3R)-4-((2S)-2-( (metoxicarbonil) amino) -3- met i lbutanoi 1 ) - 3 - morfol ini 1 ) - 1H- imidazol - 4 - i 1 ) -2-naftil)fenil) -lH-imidazol-2-il) -4 -morfol inil ) carbonil )- 2 -metilpropi 1 ) carbamato de metilo (75.5 mg) en forma de un sólido blancuzco . Tiempo de retención el CLEM 3.351 min; m/z 822.07 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trif luoroacét ico y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trif luoroacét ico . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de 1H presenta una mezcla de rotámeros. RMN de 1H (400 MHz , MeOD) d ppm 8.47 (s, 0.5 H) , 8.33 (s, 0.5 H) , 8.27 (s, 1 H), 7.85 - 8.17 (m, 10 H) , 5.95 (d, J=4.5 Hz , 2 H) , 4.71 (dd, J=12.5, 7.8 Hz, 1 H) , 4.35 - 4.58 (m, 4 H), 3.94 - 4.20 (m, 5 H ) , 3.79 (s, 3 H), 3.68 (s, 3 H ) , 3.53 - 3.78 (m, 3 H) , 2.76 - 2.91 (m, 1 H) , 2.12 (s ancho, 2 H) , 1.05 - 1.19 (m, 6 H ) , 0.81 - 1.00 (m, 6 H) .
Ejemplo 116 ( (1S) -2- ( (3R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (3R) -4- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) - 3 -morfolinil) -lH-imidazol-4-il) -2 -naftil) fenil ) -1H-imidazol - 2-il) -4 -morfolinil ) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (of (R) -2- (5- (4- (6- (2- ( (R) -morfolin-3-il) - 1H- imidazol -4 - il ) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) morfolina (Intermediario 181) (65.5mg, 0.100 mmol) y ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -2 - (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (50.2 mg, 0.231 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.12 mi, 0.70 mmol) se añadió HATU (88 mg, -4 mmol) y la mezcla reacción se lavó con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 3 horas. La reacción se concentró en una corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con eOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (3R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (3R) -4- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) -3 -morfolinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4 -morfolinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (75 mg) en forma de un sólido blancuzco. Tiempo de retención en la CL-EM 3.120 min; m/z 906.15 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 117 (IR, 3S, 5R) -2- (3-metilbutanoil) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (3- metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-imidazol -4 - il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2- azabiciclo [3.1.0]hexano A una solución agitada de una sal HC1 de (IR, 3S, 5R) -3- (5- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-azabiciclo [3.1.0] hexan-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) naftalen-2-il) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 124) (64.7 mg, 0.098 mmol) , ácido 3 -metilbutanoico (22.09 mg, 0.216 mmol) y DIPEA (0.103 mi, 0.590 mmol) en DCM (1.5 mi) se añadió HATU (74.8 mg, 0.197 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 2-3 horas. La reacción se concentró hasta sequedad mediante HPLC preparativo (amortiguador TFA) para dar una sal en TFA de (IR, 3S, 5R) -2- (3 -metilbutanoil) -3- (4- (6- ( (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- (3 -metilbutanoil) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) etinil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (51.5 mg) en forma de una espuma beige. Tiempo de retención en la CL-EM 1.775 min; m/z 615.41 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 2 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío .
Ejemplo 118 ( (1S) -1- ( ( {23) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (23) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil) -2-piperidinil) -1H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -IH-imidazol -2-il) -1- piperidinil) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HCl de (of (S) -2- (5- (4- (6- (2- ( (S) -piperidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il)piperidina (Intermediario 184) (69.0 mg, 0.106 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (42.9 mg, 0.245 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.13 mi, 0.75 mmol) se añadió HATU (93 mg, 0.245 mmol) y la mezcla reacción se lavó con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró en corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con MeOH (~ 5 mi), se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ((1S)-1-( ( (2S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -4- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2-piperidinil) -lH-imidazol-l-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1-piperidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (88.9 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.530 min; m/z 818.08 (MH+) . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de 1H presenta una mezcla de rotámeros. RMN de XH (400 MHz, MeOD) d ppm 8.46 (s. 0.65 H) , 8.33 (s ancho. 0.35 H) , 8.27 (s. 1 H) , 7.84 - 8.15 (m, 10 H) , 6.05 (s ancho. 1.3 H) , 5.80 - 5.90 (m, 0.7 H) , 4.67 - 4.78 (m,1.3 H) , 4.42 - 4.50 (m, 2 H) , 3.99 - 4.10 (m, 0.7 H) , 3.78 (s ancho. 3.5 H) , 3.69 (s ancho. 2.5 H) , 3.40 - 3.52 (m, 0.7 H) , 2.61 - 2.73 (m, 1.3 H) , 2.46 - 2.59 (m, 1.3 H) , 2.37 (s ancho. 0.7 H) , 2.03 - 2.24 (m, 4 H) , 1.91 - 2.02 (m, 1.3 H) , 1.63 - 1.88 (m, 5.4 H) , 1.45 - 1.62 (m, 1.4.H), 1.11 (t. .7=6.8 Hz, 7.3 H), 0.93 - 1.03 (m, 4.7H) .
Ejemplo 119 ((1S) -2- ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil ) -2-piperidinil) -lH-imidazol -4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol - 2-il) -l-piperidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il ) etil ) carbamato de metilo A una solución agitada de una sal HC1 de ((S)-2-(5- (4- (6- (2- ( (S) -piperidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) piperidina (Intermediario 184) (62.5 mg, 0.096 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2-tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (48.2 mg, 0.222 mmol) en DMF (1.0 mi) y DIPEA (0.12 mi, 0.68 mmol) se añadió HATU (84 mg, -4 mmol) y la mezcla reacción se lavó con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró en una corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con MeOH, se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -3 -piperidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -1-piperidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etil ) carbamato de metilo (71.2 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.348 min; m/z 902.10 (MH+) , Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de 1H presenta una mezcla de rotámeros. RMN de ?? (400 MHz, MeOD) d ppm 8.45 (s, 0.6 H) , 8.32 (s ancho, 0.4 H) , 8.27 (s, 1 H) , 8.02 - 8.15 (m, 4.4 H) , 7.85 - 8.02 (m, 5.6 H) , 6.08 (s ancho, 1.2 H) , 5.90 (s ancho, 0.8 H) , 4.70 (s ancho, 1.2 H) , 4.45 - 4.59 (m, 2 H) , 3.90 - 4.10 (m, 4 ,8 H) , 3.77 (s, 3.6 H) , 3.69 (s ancho, 2.4 H) , 3.36 - 3.50 (m, 5 H) , 2.35 - 2.73 (m, 3 H) , 1.36 - 2.22 (m, 20 H) .
Ejemplo 120 ( (1S) -1- ( ( (2S, 5R) -2- (4- (4- ( (1S, 2S) -2- (6- (2- ( (2S, 5R) -1- ( (2S) - 2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3 -metilbutanoil) -4-metil-2- pirrolidinil ) -lH-imidazol-5-il) fenil) ciclopropil) fenil) -1H- imidazol-2-il) -4 -metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil ) carbamato de metilo; A una solución de sal HC1 de 2- ( (2S, 5R) -5-metilpirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -4 -metilpirrolidin-2-il) - 1H- imidazol -4 -il ) naftalen-2- il ) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 187) (46 mg, 0.071 mraol) y ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -metilbutanoico (28.6 mg, 0.163 mmol) y DIPEA (0.09 mi, 0.5 mmol) en DMF (0.7 mi) se añadió HATU (62.0 mg, 0.163 mmol) y el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró en corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con eOH (~ 3 mi) , se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con un amortiguador de TFA) para dar una sal en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 5R) -3- (4- (4- (6-(2- ( (2S, 5R) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil ) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-l-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (53.3 mg) en forma de un sólido amarillo claro. Tiempo de retención en la CL-EM 3.255 min; m/z 818.08 (MH+), Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 rara usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H20/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . La RMN de "?? presenta una mezcla compleja de rotámeros . RMN de 1H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 0.5 H) , 8.26 - 8.30 (m, 1.5 H) , 8.13 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 8.08 (d, J=8.5 Hz, 1 H) , 7.93 - 8.00 (m, 4 H) , 7.83 - 7.93 (m, 4 H) , 5.67 (t, J=7.8 Hz , 0.7 H) , 5.38 - 5.45 (m, 1.3 H) , 4.44 - 4.68 (m, 3.3 H) , 3.92 (dd, J"=8.2, 4.4 Hz, 0.7 H) , 3.66 (s, 3.5 H) , 3.41 (s, 1 H) , 3.35 (s, 1.5 H) , 2.53 - 2.92 (ra, 3.3 H) , 1.96 - 2.30 (m, 6 H) , 1.78 - 1.87 (m, 0.7 H) , 1.43 -1.53 (m, 3.5 H) , 1.33 (dd, J=6.3, 2.5 Hz, 2.5 H) , 0.98 - 1.06 (m, 6 H) , 0.96 (d, J=6.8 Hz, 2.4 H) , 0.84 (d, J=6.8 Hz , 3.6 H) .
Ejemplo 121 ( (1S) -2- ( (2S, 5S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -1- ( (2S, 5R) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol -2-il) 5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución de un vial de sal HCl de 2-((2S,5R)-5-metilpirrolidin-2-il) -5- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -4-metilpirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 187) (41.4 mg, 0.064 mmol) y ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2- (tetrahidro) -2H-piran-4-il) acético (31.9 mg, 0.147 mmol) en DMF (0.7 mi) y DIPEA (0.08 mi, 0.4 mmol) ) se añadió HATU (55.8 mg, -4 mmol) y el vaso de reacción se aclaró con nitrógeno, se selló y se agitó a TA durante 1 hora. La reacción se concentró en una corriente de nitrógeno durante la noche, se diluyó con eOH (~ 3 mi), se filtró y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con amortiguador de TFA al 0.1%) para dar una sal en TFA de ( (1S) -2- ( (2S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 5R) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -5-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -5-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (27.6 mg) en forma de un sólido amarillo claro. El tiempo de retención en la CLEM fue 3.135 min; m/z 902.15 (MH+) , Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna de 3u, C18 de 2 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 4 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 0.8 min y un tiempo de análisis de 5 min en el que el solvente A fue 10% de MeOH/90% de H2O/0.1% de ácido trifluoroacético y el solvente B fue 10% de H2O/90% de MeOH/0.1% de ácido trifluoroacético . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . Mezcla de rotámeros mediante RM 1H. RMN de H (400 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 0.5 H) , 8.25 - 8.29 (m, 1.5 H) , 8.13 (d, J=8.8 Hz , 1 H) , 8.08 (dd, J=8.8, 2.5 Hz , 1 H) , 7.93 - 8.00 (m, 4 H) , 7.82 - 7.92 (m, 4 H) , 5.71 (t, J=7.9 Hz, 0.8 H) , 5.37 - 5.45 (m, 1.2 H) , 4.47 - 4.69 (m, 3 H) , 3.89 - 4.07 (m, 5 H) , 3.67 (s, 3 H) , 3.24 - 3.43 (m, 7 H) , 2.57 - 2.92 (m, 3 H) , 1.96 - 2.29 (m, 6 H) , 1.79 - 1.87 (m, 1 H) , 1.35 - 1.67 (m, 11 H) , 1.33 (dd, J=6.5, 2.5 Hz, 3 H) .
Ejemplo 122 ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3 -metilbutanoil ) -4-metilen-2- pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol- 2-il) -4 -metilen-1 -pirrolidinil ) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de 2-( (S) -4-metilenpirrolidin-2-il) -4- (4- (6- (2- ( (S) -4-metilenepirrolidin-2-il) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 189) (86 mg, 0.148 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (47.1 mg, 0.269 mmol) y base de Hunig (0.234 mi, 1134 mmol) en DMF (6 mi) se añadió HATU (102 mg, 0.269 mmol). La reacción se agitó 4 h a temperatura ambiente y se purificó mediante HPLC preparativa (MeOH/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- (4- (6- (4- (2- ( (2S) -1 - ( ( 2 S ) - 2 - ( (metoxicarboni 1 ) amino ) - 3 -met i 1butañoi 1 ) - 4 -met i len- 2 -pirrol idini 1 ) - 1H- imidazol - 4 - il ) fenil) -2-naftil) -lH-imidazol-2-il) -4 -metilen- 1-pirrolidinil ) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo (65 mg, 46%) , Tiempo de retención en la CL-EM 3.22 rain; Calculado para C46H53 806 : 813.40 Encontrado m/z 813.7 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeCN al 5%/agua al 95%/NH40ac 10 mM y el solvente B fue MeCN al 95%/agua al 5%/NH40ac 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H NMR (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.29 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.15 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.09 (d, J=8.9 Hz , 1H) , 8.0-7.85 (m, 8H) , 5.50-5.45 (m, 2H) , 5.32 (s, 2H), 5.28 (s, 2H) , 4.72 (d, J"=11.6 Hz, 2H) , 4.60 (dd, J=11.3, 3.4 Hz , 2H) , 4.21 (dd, J=7.6, 2.8 Hz, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 2.98 - 2.92 (m, 2H) , 2.10 - 2.06 (m, 2H) , 1.06-1.02 (m, 2H) , 0.97 -0.94 (m, 12H) .
Ejemplo 123 ( (1S) -2- ( (2S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (23) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran- 4 - il ) acetil ) - 4-metilen-2-pirrolidinil) -1H- imidazol -4 -il ) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol-2-il) -4-metilen-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de 2- ( (S) -4-metilenepirrolidin-2-il) -4-(4-(6-(2-((S)-4-metilenepirrolidin-2-il) - 1H- imidazol -4 - il ) naftalen- 2 -il) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 189) (86 mg, 0.148 mmol), ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -2 - ( tetrahidro-2H-piran-4 - il ) acético (58.4 mg, 0.269 mmol) y base de Hunig (0.234 mi, 1134 mmol) en DMF (6 mi) se añadió HATU (102 mg, 0.269 mmol) . La reacción se agitó 5 horas a TA y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ((lS)-2- ((2S)-2-(4-(4-(6-(2-((2S)-l-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- ( tetrahidro- 2H-piran- 4 -il) acetil) -4-metilen-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) - 2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metilen-1-pirrol idini 1 ) -2-oxo-l- ( tetrahidro-2H-piran-4 -il ) etil) carbamato de metilo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.81 min; Calculado para C50H57 8O8 : 897.43 Encontrado m/z 897.41 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de "220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ""? (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (s, 2H) , 8.4 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.09 (d, J-=9.0 Hz, 1H) , 8.01-7.85 (m, 8H) , 5.50-5.44 (m, 2H) , 5.32 (s, 2H) , 5.28 (s, 2H) , 4.75 (d, J=14.6 Hz , 2H) , 4.63 (dd, J=13.3, 4.5 Hz, 2H) , 4.27 (dd, «J=8.3, 3.5 Hz, 2H) , 3.99-3.91 (m, 4H) 3.69 (s, 6H) , 3.41-3.37 (m 4H) , 3.0 -2.94 (m, 2H) , 2.02 - 1.98 (m, 2H) , 1.68-1.65 (m, 2H) , 1.59-1.32 (m, 8H) .
Ejemplo 124 ((1S) -1-(((1S) -l-_(4- (4- (6- (2-((lS) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il ) amino) -3-metilbutanoil) amino) etil) -1H- dazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol il) etil) carbamoil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de (S) -l-(4-(4-(6-(2-((S) -1-aminoetil) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) etanamina (Intermediario 191) (111 mg, 0.148 mmol) , ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (47.1 mg, 0.393 mmol) y base de Hunig (0.343 mi, 1.96 mmol) en DMF (8 mi) se añadió HATU (149 mg, 0.393 mmol) . La reacción se agitó 4 h a temperatura ambiente y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (1S)'-1- (4- (4-(6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) amino) etil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) etil) carbamoil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (91 mg, 47%), El tiempo de retención en la CLEM 2.96 min; Calculado para C4oH49N806: 737.38 Encontrado m/z 737.45 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.35 (s, 1H) , 8.27 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.09 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 7.99-7.88 (m, 8H) , 5.30-5.27 (m, 2H) , 3.99-3.97 (m, 2H) , 3.70 (s, 6H) , 2.14 (s ancho, 2H) , 1.78-1.75 (m, 6H) , 0.99 -0.95 (m, 12H) .
Ejemplo 125 ( (1S) -2- ( ( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) amino) etil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H- imidazol -2-il) etil) amino) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (S) - l-(4-(4-(6-(2-((S) -1-aminoetil) -lH-imidazol-4-il) naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-il) etanamina (Intermediario 191) (83 mg, 0.196 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (85 mg, 0.393 mmol) y base de Hunig (0.343 mi, 1.96 mmol) en DMF (8 mi) se añadió HATU (149 mg, 0.393 mmol). La reacción se agitó 5 h a temperatura ambiente y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ((lS)-2- ('( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) amino) etil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) etil) amino) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il ) etil ) carbamato de metilo (89 mg, 42%), Tiempo de retención en la CL-EM 2.64 min; Calculado para C44H53N808. 821.40 Encontrado m/z 821.80 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 4 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue AcCN al 5%/agua al 95%/NH40ac 10 mM y el solvente B fue AcCN al 95%/agua al 5%/NH40ac 10 mM . Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.34 (s, 1H) , 8.2 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.09 (d, J"=8.6 Hz, 1H) , 7.99-7.87 (m, 8H) , 5.29-5.26 (m, 2H) , 4.02-4.00 (m, 2H) , 3.98-3.93 (m, 4H) 3.71 (s, 6H) , 3.41-3.37 (m 4H) , 2.02 (s ancho, 2H) , 1.79-1.76 (m, 6H) , 1.62 (d, J=13.0 Hz, 2H) , 1.49-1.39 (m, 6H) .
Ejemplo 126 ( (1S) -1- (( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3- metilbutanoil ( etil ) ) amino) et i 1 ) -lH-imidazol-4-il) -2- naftil) fenil) -1H- imidazol-2- il) etil) (metil) carbamoil) - 2 -metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de (S) -N-metil-1- (4- (4- (6-(2- ( (S) - 1-met ilaminoetil ) -1H-imidazol-4-il) naf t alen- 2 -il) fenil) -1H- imidazol - 2 -il)etanamina (Intermediario 193) (66 mg, 0.111 mmol) , ácido ( S ) - 2 - (met o i carbón i lamino ) - 3 -met i lbutanoico . (38.9 mg, 0.222 mmol) y base de Hunig (0.194 mi, 1.11 mmol) en DMF (5 mi) se añadió HATU (84 mg, 0.222 mmol) . La reacción se agitó 5 h a temperatura ambiente y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( ( 1S ) - 1 - ( ( ( 1S ) -l-(4-(4-(6-(2-((lS)-l-(((2S)-2-( (metoxicarboni 1 ) amino) -3 -met i lbutanoil ) (met i 1 ) amino ) etil) -1H- imidazol - 4 - i 1 ) -2-na t i 1) fenil) -1H- imid zol - 2 - i 1 ) etil) (met i 1 ) ca bamoi 1 ) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.78 min; Calculado para C42H53 806 : 765.41 Encontrado m/z 765.41 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de (sal en TFA; rotámeros, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.44/8.34 (s, .1H) , 8.27 (s, 1H) , 8.13 (d, .7=8.6 Hz , 1H) , 8.10-7.88 (m, 9H) , 6.17-6.14/5.33-5.30 (m, 2H), 4.64-4.6/4.41-4.39 (m, 2H) , 3.84/3.66 (s, 3H) , 3.83/3.59 (s, 3H) , 3.37 (s, 6H) , 2.10-2.05 (m, 2H) , 1.90-1.87/1.85-1.82 (m, 6H) , 1.15 -0.90 (m, 12H) .
Ejemplo 127 ((1S) -2-(((lS) -1- (4- (4- (6- (2-((lS) -1-(((2S) -2- ( (metoxicarbonil) (metil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4- il) acetil) amino) etil) -1H-imidazol -4-il) -2-naftil) fenil) -1H- i idazol -2-il) etil) (metil) amino) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H- piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (S)-N-metil-l-(4-(4-(6-(2-( (S) - 1 -met ilaminoet i 1 ) -1H-imidazol-4-il)naftalen-2-il) fenil) -lH-imidazol-2-i D e t anamina (Intermediario 193) (66 mg , 0.111 mmol), ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) - 2 - tetrahidro- 2H-pi ran- 4 - i 1 ) acét ico (48 mg , 0.222 mmol) y base de Hunig (0.194 mi, 1.11 mmol) en DMF (5 mi) se añadió HATU (84 mg, 0.222 mmol) . La reacción se agitó 5 h a temperatura ambiente y se purificó mediante, HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -2- ( ( (1S) -1- (4- (4- (6- (2- ( (1S) -1- ( ( (2S) - 2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- ( tetrahidro- 2H-pi ran- 4 -il)acetil) (met i 1 ) amino ) et i 1 ) - 1H- imidazol - 4 - il ) - 2 -naftiDfenil) -lH-imidazol-2-il)etil) (raetil) amino) - 2-oxo -1- (tetrahidro- 2H-piran- 4 - il ) etil) carbamato de metilo. Tiempo de retención en la CL-EM 1.58 min; Calculado para C46H57N808 : 849.43 Encontrado m/z 849.46 [ +H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 30 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 1 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 3 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, rotámeros, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.45/8.34 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.09 (d, .7=8.3 Hz , 1H) , 8.06-7.88 (m, 8H) , 6.21-6.18/5.38-5.34 (m, 2H), 4.73-4.70/4.47-4.45 (m, 2H) , 4.02-3.94 (m, 4H) 3.84/3.63 (s, 3H) , 3.83/3.60 (s, 3H), 3.46-3.38 (m 4H) , 3.37/3.35 (s, 6H) , 2.02 (s ancho, 2H) , 1.91-1.88/1.84-1.81 (m, 6H) , 1.68 (d, J=13.0 Hz, 2H) , 1.53-1.42 (m, 6H) .
Ejemplo 128 ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2- (4- (4 (6- (2- ( (23, 48) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) a ino) -3 -metilbutanoil) -4 -metil-2 - pirrolidinil) -lH-imidazol-4-ilnaftil) fenil) -1H- imidazol -2 - il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de 2-( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -4-metil-2 -pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (25 mg, 0.039 mmol) , ácido (S) -2-(metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (14.9 mg, 0.085 mmol) y base de Hunig (0.054 mi, 0.308 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (32 mg, 0.085 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S , 4S) -2- (4 - (4- (6 - (2-( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 -il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol -2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo (24.5 mg, 57.8%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.05 min; Calculado para C46H57N8Os : 817.44 Encontrado m/z 817.36 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de. detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 mi/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de ¾ (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (s, 1H) , 8.27 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.08 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.99-7.85 (m, 8H) , 5.27-5.22 (m, 2H) , 4.37-4.33 (m, 2H) , 4.25-4.23 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.47-3.41 (m, 2H) , 2.72-2.68 (m 2H) , 2.55 (s ancho, 2H) , 2.07-2.03 (m, 2H) , 1.92-1.87 (m, 2H) , 1.27-1,26 (m, 6H) , 0.95-0.9 (m, 12H) . ( ( (metoxicarbonil) amino) (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4- metil -2 -pirrolidinil ) -lH-imidazol -4-il) -2-naftil ) fenil ) -1H- imidazol-2-il) -4 -metil-1 -pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro- 2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de 2- ( (2S,4S) -4 -metil -2 -pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -4 -metil -2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (50 mg, 0.077 mmol) , ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -22- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (36.8 mg, 0.170 mmol) y base de Hunig (0.11 mi, 0.617 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (64.5 mg, 0.170 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de (2- ( (2S, 4S) -2- (4-(4- (6- (2- ( (2S, 4S) -1- ( ( (metoxicarbonil) amino) (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4 -metil - 1-pirrolidinil ) -2-oxo-1- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo. Tiempo de retención en la CL-EM 2.84 min; Calculado para CsoHeiNsOs: 901.46 Encontrado m/z 901.42 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH.al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=Q.6 Hz , 1H) , 8.09 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.00-7.85 (m, 8H) , 5.25-5.21 (m, 2H) , 4.42-4.39 (m, 2H) , 4.30-4.27 (m, 2H) , 3.96-3.92 (m, 4H) , 3.68 (s, 6H) , 3.49-3.35 (m 6H) , 2.71-2.38 (m, 2H) , 2.58-2.54 (m, 2H) , 1.97 - 1.89 (m, 4H) , 1.60 (d, J=13.0 Hz, 2H) , 1.48-1,26 (m, 12H) .
Ejemplo 130 (l-ciclopropil-2- ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -1- (ciclopropil ( (metoxicarbonil) a ino) acetil) -4-metil-2- pirrolidinil) -lH-imidazol -4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol - 2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxoetil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de 2-( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol (Intermediario 196) (30 mg, 0.085 mmol) , ácido (S) -2-ciclopropil-2- (metoxicarbonilaraino) acético (17.62 mg, 0.085 mmol) y base de Hunig (0.065 mi, 0.37 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (39 mg, 0.102 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y .se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa ( eCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( l-ciclopropil-2 - ( (2S , 4S) -2 - (4 - (4 -(6-(2-((2S,4S)-l- (ciclopropil ( (metoxicarbonil ) amino) acetil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxoetil) carbamato de metilo (24.5 mg, 57.8%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.08 min; Calculado para C46HS3N806 : 813.41 Encontrado m/z 813.45 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ? (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.32 (s, 1H) , 8.27 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.08 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.99-7.87 (m, 8H) , 5.29-5.24 (m, 2H) , 4.30 (s ancho, 2H) , 3.82-3.80 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.43-3.37 (m, 2H) , 2.72-2.68 (m 2H) , 2.55 (s ancho, 2H) , 1.91-1.86 (m, 2H) , 1.25-1,24 (m, 6H) , 1.11 (s ancho, 2H) , 0.60-0.58 (m, 4H) , 0.53-0.51 (m, 2H) , 0.04-0.38 (m, 2H) .
Ejemplo 131 ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) butanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) -1H- imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -1H-imidazol -2-il) -4-metil-l- pirrolidinil ) carbonil)propil ) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de 2- ( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (35 mg, 0.054 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) butanoico (19.14 mg, 0.119 mmol) y base de Hunig (0.075 mi, 0.432 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (45 mg, 0.119 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino)butanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) propil) carbamato de metilo (36.4 mg, 61.7%), Tiempo de retención en la CL-EM 2.91 min; Calculado para C44H53 805: 789.41 Encontrado m/z 789.41 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENO ENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 8.09 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.00-7.86 (m, 8H) , 5.27-5.22 (m, 2H) , 4.37 (s ancho, 2H) , 4.24-4.23 (m, 2H) , 3.67 (s, 6H) , 3.44-3.39 (m, 2H) , 2.72-2.68 (m 2H) , 2.58 (s ancho, 2H) , 1.88-1.84 (m, 2H) , 1.47-1,25 (m, 6H) , 0.98 -0.92 (m, 10H) .
Ejemplo 132 ( (1S) -l-ciclobutil-2- ( (2S, 4S) -2 - (4 - (4 - (6 - (2 - ( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2- ciclobutil -2- ( (metoxicarbonil ) amino) acetil ) -4- metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol - 4 - il ) -2- naft i 1 ) fenil ) - 1H- imidazol - 2 - il) - 4 -mefcil - 1 - pirrol idini 1 ) - 2 -oxoet i 1 ) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de 2- ( (2S, 4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,4S)-4 -met i 1 - 2 -pirrol idinil ) - 1H- imidazol - 4 - i 1 ) -2-naft i 1 ) feni 1 )- 1H- imidazol (Intermediario 196) (35 mg , 0.054 mmol) , ácido ( S ) - 2 -ciclobut i 1 - 2 - (metoxicarbonilamino) acético (22.23 mg, 0.119 mmol) (preparado de un modo similar a lo indicado en Cap-51 usando ácido ( S )- 2 -( erc-butoxicarboni lamino) 2 -ciclobut ilacético disponible comercialmente como material de partida) y base de Hunig (0.075 mi, 0.432 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (45 mg, 0.119 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( ( 1S ) - 1 - c iclobut i 1 - 2 - ( ( 2S , 4S ) - 2 -(4 - (4 - (6 - (2 - ( (2S, 4S) -1- ( (2S) - 2 - c iclobut i 1 - 2 -( ( me toxicarbonil) amino) acetil ) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol - 2 - i 1 ) -4-metil - 1-pirrolidinil ) -2-oxoetil) carbamato de metilo (25.6 mg, 43.6%) , Tiempo de retención en la CL-EM 3.13 min; Calculado para CjsHsvNsOg. 841.44 Encontrado m/ z 841.48 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM . Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1K (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.30 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.9 Hz, 1H) , 8.09 (d, J"=8.6 Hz, 1H) , 8.00-7.86 (m, 8H) , 5.26-5.21 (m, 2H) , 4.41-4.37 (m, 4H) , 3.68 (s, 6H) , 3.48-3.43 (m, 2H) , 2.71-2.66 (m 4H) , 2.56 (s ancho, 2H) , 1.96-1.87 (m, 14H) , 1.27-1,26 (m, 6H) .
Ejemplo 133 ( (1S) -2- ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 43) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- ( (2Rr 4S) -2 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4-metil -2 -pirrolidinil) -1H-imidazol-4 -il ) - 2-naftil ) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -1- ( (2S, 4R) -2-metiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2-oxoetil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de 2-( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 - il ) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (25 mg, 0.039 mmol) , ácido 2-(metoxicarbonilamino) -2 ( (2R,4S) -2-metiltetrahidro-2H-piran-4 -il) acético (Cap-178, estereoisómero 1) (19.61 mg, 0.085 mmol) y base de Hunig (0.054 mi, 0.308 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (32 mg, 0.085 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -2- ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2-((2S,4S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -2-((2R,4S)-2- metiltetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4-metil-2-pirrolidinil ) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -1- ( (2S, 4R) -2 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il) -2-oxoetil) carbamato de metilo (21.3 mg, 45.2%), Tiempo de retención en la CL-EM 2.94 min; Calculado para C52H64N808 : 929.49 Encontrado m/z 929.64 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, µ? gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.32 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.15 - 8.12 (m, 1H) , 8.09-8.06 (m, 1H) , 8.02-7.94 (m, 5H) , 7.90-7.86 (m, 3H) , 5.28-5.23 (m,. 2H) , 4.50-4.48 (m, 2H) , 4.44 (s ancho, 2H) , 3.95-3.91 (m, 2H) , 3.71-3.68 (s, 10H) , 3.46-3.41 (m, 2H) , 2.72-2.67 (m, 2H) , 2.55-2.52 (m, 2H) , 2.19 (s ancho, 2H) , 1.97 - 1.92 (m, 2H) , 1.60 (s ancho, 2H) , 1.48-1.46 (m, 2H) , 1.39 (s ancho, 2H) , 1.30-1,26 (m, 8H) , 1.14-1.10 (m, 6H) . ( (1S) -1- (((2S,4R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (23, 4R) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -4 -metil-2 - pirrolidinil) -lH-imidazol -4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol - 2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil ) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de 2- ( (2S, 4R) -4 -metil-2 -pirrolidinil) -4-(4-(6-(2-((2S,4R) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 201) (50 mg, 0.077 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (30 mg, 0.171 mmol) y base de Hunig (0.108 mi, 0.308 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (65 mg, 0.171 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (2S, 4R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4R) -1- ( (2S) -2-( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (60.7 mg, 71%), Tiempo de retención en la CL-E 3.12 min; Calculado para C46H57N806 : 817.44 Encontrado m/z 817.46. [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100¾/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.30 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.14 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.09 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.00-7.86 (m, 8H) , 5.43-5.38 (m, 2H) , 4.26-4.24 (m, 2H) , 4.09-4.05 (m, 2H) , 3.69 (s, 6H) , 3.64 (s ancho, 2H) , 2.76-2.73 (m 2H) , 235-2.32 (m, 2H) , 2.25-2.22 (m, 2H) , Ejemplo 135 ( (1S) -1- ( ( (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- ( (2S) -2 - ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) - 2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lHrimidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 203) (50 mg, 0.078 mmol) , ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (30 mg, 0.111 mmol) y base de Hunig (0.108 mi, 0.621 mmol) en DMF (8 mi) se añadió HATU (65 mg, 0.171 mmol) . La reacción se agitó .1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (1S, 3S, 5S) -3-(4-(4-(6-(2-((lS,3S,5S)-2-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2 -metilpropil) carbamato de metilo (54 mg, 63%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.15 min; Calculado para C46H53N8Oe : 813.41 Encontrado m/z 813.45 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 Hz , MeOD) d ppm 8.33 (s, 1H) , 8.26 (s, 1H) , 8.12 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.07 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 7.98-7.86 (m, 8H) , 5.80-5.74 (m, 2H) , 4.36-4.34 (m, 2H) , 4.02-3.99 (m, 2H) , 3.73 (s, 6H) , 2.99-2.95 (m, 2H) , 2.28-2.25 (m 2H) , 2.16 (s ancho, 2H) , 2.04 (s ancho, 2H) , 1.24-1,20 (m, 2H) , 1.08 (s ancho, 2H) , 1.02-1.00 (m, 12H) .
Ejemplo 136 ( (1S) -1- ( ( (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol -2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- 11) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (1S, 3S, 5S) -5-metil-3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 209) (50 mg, 0.074 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3-metilbutanoico (28.7 mg, 0.164 mmol) y base de Hunig (0.104 mi, 0.595 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (62 mg, 0.164 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ((lS)-l-(((lS,3S,5S)-3-(4-(4-(6-(2-((lS,3S,5S)-2-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (45 mg, 54%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.15 min; Calculado para C8H57 806: 841.44 Encontrado m/z 841.50 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas , a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.33 (s, 1H) , 8.25 (s, 1H) , 8.11 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.06 (d, J=8.7 Hz, 1H) , 7.97-7.85 (m, 8H) , 5.82-5.75 (m, 2H) , 4.31- 4.28 (m, 2H) , 3.73-3.71 (m, 8H) , 2.75-2.69 (m, 2H) , 2.44- 2.37 (m 2H) , 2.17-2.12 (m, 2H) , 1.40 (s, 6H) , 1.1-1.11 (m, 4H) , 1.01-0.99 (m, 12H) .
Ejemplo 137 ( (1S) -2- ( (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) - 5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -1H-imidazol -4 -il) -2- naftil) fenil) -1H-imidazol-2-il) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0]hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4 - il) etil) carbamato de metilo ¦ A una solución agitada de la sal tetra HC1 de (1S, 3S, 5S) -5-metil-3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -5-metil-2- azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -1H- imidazol-4 -il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hexano (Intermediario 209) (50 mg, 0.074 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2-- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (35.5 mg, 0.164 mmol) y base de Hunig (0.104 mi, 0.595 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (62 mg, 0.164 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -2- ( (1S, 3S, 5S) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1S, 3S, 5S) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4-il) etil) carbamato de metilo (46.3 mg, 51%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.15 min; Calculado para C52H61N8086: 925.46 Encontrado m/z 463.36 [M/2+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.31 (s, 1H) , 8.25 (s, 1H) , 8.10 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 7.97-7.85 (m, 8H) , 5.80-5.74 (m, 2H) , 4.36-4.35 (m, 2H) , 3.99-3.95 (m, 4H) , 3.76-3.74 (m, 8H) , 3.43-3.35 (m, 4 H) , 2.75-2.68 (m, 2H) , 2.44-2.37 (m 2H) , 2.06-2.04- (m, 2H) , 1.74 (app, d, J=13 Hz, 2H) , 1.52-1.35 (m, 12H) , 1.22-1.19 (m, 2H) , 1.14-1.12 (m, 2H) .
Ejemplo 138 C (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - lH-imidazol -2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0]hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( erc-butoxicarbonil ) -5 -metil-2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato (Intermediario 211) (25 mg, 0.037 mmol) , ácido (S) -2 - (metoxicarbonilamino) -3 - metilbutanoico (14 mg, 0.082 ramol) y base de Hunig (0.052 mi, 0.297 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (31 mg, 0.082 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ((1S)-1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3 - (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3-metilbutanoil) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2 -azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (17 mg, 41%), Tiempo de retención en la CL-EM 3.10 min; Calculado para C48H57 806: 841.44 Encontrado m/z 841.542 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío. RMD de 1H (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.27 (s, 1H) , 8.26 (s, 1H) , 8.12 (d, J=8.5 Hz, 1H) , 8.07 (d, J=8.7 Hz, 1H) , 7.98-7.93 (m, 4H) , 7.88-7.85 (m, 4H) , 5.09-5.04 (m, 2H) , 4.55-4.53 (m, 2H) , 3.38 (s, 6H) , 3.57 (s ancho, 2H) , 2.81-2.75 (m, 2H) , 2.33-2.27 (m 2H) , 2.22-2.16 (m, 2H) , 1.44 (s, 3H) , 1.43 (s, 3H) , 1.05-0.93 (m, 16H) .
Ejemplo 139 ((1S) -1- ( ( (1R,3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (1R,3S, 5R) -2- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -5-metil -2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil ) - lH-imidazol -2-il) -5-metil -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2- il) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HCl de (IR, 3S, 5R) -2- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5 ) -2- ( terc-butoxicarbonil ) -5-metil-2 -azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hexan-2 -carboxilato (Intermediario 211) (28 mg, 0.042 mmol) , ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -2-(tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (20 mg, 0.092 mmol) y base de Hunig (0.085 mi, 0.333 mmol) en D F (2 mi) se añadió HATU (34.8 mg, 0.092 mmol) . La reacción se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1- ( ( (IR, 3S, 5R) -3- (4- (4- (6- (2- ( (IR, 3S, 5R) -2-( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -3 -metilbutanoil ) -5-metil-2-azabiciclo [3.1.0] hex-3-il) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -2-azabiciclo [3.1.0] hex-2-il) carbonil) -2-metilpropil ) carbamato de metilo (13 mg, 25%), Tiempo de retención en la CL-EM 2.92 min; Calculado para C52H61N8086: 925.46 Encontrado m/z 92.53 [M+H]+. Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de 1H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.28 (s, 2H) , 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H) , 8.07 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.00-7.96 (m, 4H) , 7.91-7.84 (m, 4H) , 5.08-5.02 (m, 2H) , 4.59-4.56 (m, 2H) , 4.00-3.94 (m, 4H) , 3.69 (s, 6H) , 3.62 (s ancho, 2H) , 3.44-3.38 (m, 4H) , 2.81-2.78 (m, 2H) , 2.31-2.29 (m, 2H) , 2.09 (s ancho, 2H) , 1.60-1.47 (m, 8?) , 1.43 (s, 3?) , 1.44 (s, 3?) , 1.04 (s ancho, 2H) , 0.98-0.97 (m, 2H) .
Ejemplo 140 ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S, 4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbonil) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4 -il) acetil) -4 -metil-2-pirrolidinil) -lH-imidazol -4-il) -2-naftil ) fenil) -1H- imidazol -2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil ) -2- metilpropil ) carbamato de metilo A una solución agitada de la sal tetra HC1 de 2- ( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) -4- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -4-metil-2-pirrolidinil) - 1H- imidazol -4 - il ) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol (Intermediario 196) (150 mg, 0.231 mmol) , ácido (S)-2-(metoxicarbonilamino) -22- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acético (50 mg, 0.231 mmol) y base de Hunig (0.162 mi, 0.925 mmol) en DMF (1 mi) se añadió HATU (97 mg, 0.254 mmol) . La reacción se agitó 1 h a temperatura ambiente antes de la adición de ácido (S) -2- (metoxicarbonilamino) -3 -metilbutanoico (40.5 mg, 0.231 mmol) y la adición de base de Hunig (0.162 mi, 0.925 mmol) y HATU (97 mg, 0.254 mmol), La mezcla se agitó 1 hora a TA y se concentró parcialmente mediante purga del gas nitrógeno. El residuo se suspendió en MeOH y se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%), Se aplicó un segundo proceso de cromatográfica para separar los isómeros: Columna SFC Diol-HL, 20% de metanol con 0.1 % de DEA; de 4.6 x 250 mm,. de 5ym Fase móvil: 80% C02 - 20% de metanol con 0.1% de DEA; Temp: 35 °C; Presión: 150 bares; Velocidad de flujo: 2 ml/min; UV monitorizada a 328 nm. La muestra aislada se suspendió en metanol (3 mi) y se añadió TFA neto (50 mi) a TA. La mezcla se concentró hasta sequedad y se introdujo en alto vacío para dar una sal en TFA bis de ( (1S) -1- ( ( (2S, 4S) -2-(4-(4-(6-(2-((2S,4S)-l-((2S)-2-( (metoxicarbonil ) amino) -2- (tetrahidro-2H-piran-4-il) acetil) -4-metil-2-pirrolidinil) -1H-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) - 1H- imidazol -2 - il ) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2-metilpropil) carbamato de metilo (78.2 mg, rendimiento de 29.5%), Tiempo de retención en la CL-EM 2.95 min; Calculado para C48H59N807: 859.45 Encontrado m/z 859.50 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatografo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MIC OMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de XH (sal en TFA, 500 MHz , MeOD) d ppm 8.30 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.15 (d, J=8.6 Hz, 1H) , 8.09 (d, «7=8.6 Hz, 1H) , 8.01-7.85 (m, 8H) , 5.26-5.22 (m, 2H) , 4.42-4.36 (m, 2H) , 4.30-4.27 (m, 1H) , 4.24-4.23 (m, 1H) , 3.95-3.91 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.47-3.36 (m 2H) , 3.08-3.04 (m, 1H) , 2.70 (s ancho, 2H) , 2.55 (s ancho, 2H) , 2.08-2.03 (m, 1H) , 1.97 - 1.87 (m, 3H) , 1.59 (d, J=13.0 Hz, 1H) , 1.48-1,26 (m, 10H) 0.95-0.90 (m, 6H) . ((1S) -2- ( (2S,4S) -2- (4- (4- (6- (2- ( (2S,4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2- pirrolidinil) -lH-imidazol-4-il) -2-naftil) fenil) -lH-imidazol-2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) -2-oxo-l- (tetrahidro-2H-piran-4- il) etil) carbamato de metilo El otro isómero como se indica en el Ejemplo 140, El tiempo de retención CL-EM 2.98 min; Calculado para C48H59 807: 859.45 Encontrado m/z 859.58 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de ""? (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.29 (s, 1H) , 8.28 (s, 1H) , 8.13 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 8.09 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 7.99-7.86 (m, 4H) , 7.91-7.85 (m, 4H) , 5.26-5.21 (m, 2H) , 4.41-4.36 (m, 4H) , 4.28(d, J=8.24 Hz, 1H) , 4.24 (d, J=7.32 Hz, 1H) , 3.95-3.91 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.47-3.36 (m 2H) , 2.73-2.66 (m, 2H) , 2.59-2.53 (m, 2H) , 2.07-2.03 (m, 1H) , 1.97 - 1.87 (m, 3H) , 1.59 (d, J"=13.0 Hz, 1H) , 1.51-1,25 (m, 11H) 0.95-0.90 (m, 6H) .
Ejemplo 142 ( (1S) -1- ( ( (2S,4S) -2- (4-cloro-5- (6- (4- (4-cloro-2- ( (2S,4S) -1- ( (2S) -2- ( (metoxicarbon.il) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2- pirrolidin.il) -lH-imidazol -5-il) fenil) -2-naftil) -1H-imidazol - 2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2- metilpropil) carbamato de metilo La NCS (17.98 mg, 0.135 mmol) se añadió a la solución purgada del Ejemplo 128 (55 mg, 0.067 mmol) en DMF (1 mi) y la mezcla de reacción se agotó durante 18 horas a 50 °C. El solvente se retiró mediante concentrado y el producto bruto se suspendió en CH2C12 y se cargó en un cartucho Thompson de 4 g de gel de sílice. La elución de gradiente se realiza de 5-100% B en 1 1. A/B (A = CH2C12; B = 10% MeOH/EtOAc) , Una muestra del producto purificado se suspendió en MeOH y se sometió a HPLC preparativa (MeCN/agua con TFA al 0.1%) para dar una sal bis en TFA de ( (1S) -1-(((2S,4S)-2 - (4 -cloro- 5- (6- (4- (4-cloro-2- ((2S,4S)-l-((2S)-2- ( (metoxicarbonil ) amino) -3-metilbutanoil) -4-metil-2-pirrolidinil ) -lH-imidazol-5-il) fenil) -2-naftil) - 1H- imidazol -2-il) -4-metil-l-pirrolidinil) carbonil) -2 -metilpropil ) carbamato de metilo. Tiempo de retención en la CL-EM 4.48 min; Calculado para C6H55C12N806 : 885.36 Encontrado m/z 885.34 [M+H] + . Los datos de CL se registraron en un cromatógrafo de líquidos Shimadzu LC-10AS equipado con una columna PHENOMENEX® Luna C18 de 2.0 x 50 mm usando un detector SPD-10AV UV-Vis a una longitud de onda de detector de 220 nM. Las condiciones de elución usadas a un velocidad de flujo de 0.8 ml/min, un gradiente de solvente A de 100%/0% de solvente B a 0% de solvente A/100% de solvente B, un tiempo de gradiente de 3 min, un tiempo de conservación de 1 min y un tiempo de análisis de 5 min donde el solvente A fue MeOH al 5%/agua al 95%/TFA al 0.1% y el solvente B fue MeOH al 95%/agua al 5%/TFA al 0.1%. Los datos de EM se determinaron usando una plataforma MICROMASS® para CL en modo de electrorrocío . RMN de H (sal en TFA, 500 MHz, MeOD) d ppm 8.20 (s, 1H) , 8.18 (s, 1H) , 8.03 (d, J=8.6 Hz , 1H) , 8.00 (d, J"=8.6 Hz , 1H) , 7.90-7.83 (m, 6H) , 5.09-5.04 (m, 2H) , 4.30-4.7 (m, 2H) , 4.24-4.23 (m, 2H) , 3.68 (s, 6H) , 3.43-3.99 (m, 2H) , 2.58-2.56 (m 2H) , 2.43 (s ancho, 2H) , 2.05-2.04 (m, 2H) , 1.93-1.87 (m, 2H) , 1.24-1,22 (m, 6H) , 0.97-0.91 (m, 12H) .
Ejemplo 145 Una suspensión agitada del Ejemplo 143 (10. Og, 25.3 mmol) y Boc - L - Prol ina (11.4g, 53., mmol, 2.1 equiv.) en 100 mi of acetonitrilo se cargó con di i sopropi lamina (6.75 g, 52.3 mmol, 2.07 equiv.), La mezcla resultante se calentó hasta 35 °C y se dejó agitar durante 3 horas. La mezcla se enfrió hasta 20 °C y la fase orgánica se lavó tres veces con 50 mi de NaCl acuoso al 13% p. La rica corriente orgánica se intercambió con solvente en tolueno puro mediante destilación al vacío para proporcionar el Ejemplo 144 como solución en aprox. 60 mi de tolueno. Un reactor con camisa de 500 mi se cargó con acetato amónico (38.9 g, 504.9 mmol, 20 equiv. ) , imidazol "(6.9 g, 101.0 mmol, 4 equiv.) y 50 mi de tolueno. La suspensión resultante se calentó hasta una temperatura interna de 92-95 °C. La solución en tolueno del Ejemplo 144 se añadió manteniendo la temperatura a 92-95 °C. La mezcla resultante se dejó agitar a 92-95 °C durante 15 horas. La suspensión espesa resultante se enfrió a 55-60 °C y metanol (150 m) se añadió manteniendo la temperatura de 55-60 °C. La suspensión espesa se mantuvo a esta temperatura durante 3 horas, se enfrió hasta 20 °C durante 18 horas adicionales. Los cristales se recogieron mediante filtración y se lavó con metanol. La torta se deslicoró durante 2 horas y después se secó al vacío a 50-55°C durante 18 horas para dar 12.1 g del Ejemplo 145 en forma de un sólido amarillo claro (rendimiento 76.1°% con una HPLC AP de 97.8) .
Ejemplo 149 En un reactor de 500 mi, se disolvió el Ejemplo 146 (comercialmente disponible, 17.5 g, 1.00 equiv.) en THF (87.5 mi) . La solución resultante se enfrió hasta -75 °C y se cargó 1.5M DIBAL-H en tolueno (61.3 mi, 1.5 equiv.) manteniendo la temperatura por debajo de -70 °C. La solución resultante se agitó a -70 °C durante 1 hora. Se cargó ácido trifluoroacético (2.3 mi, 0.5 equiv.) en 10 minutos manteniendo la temperatura interna por debajo de -70 °C. Después, se cargo trietilamina (51.3 mi, 6 equiv.) en 15 minutos manteniendo la temperatura interna por debajo de -70 °C. Se cargo ácido trifluoroacético (11.2 mi, 1.3 equiv.) en 10 minutos manteniendo la temperatura interna por debajo de -70 °C. Después, la reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente en 90 minutos y se inactivo mediante adición inversa a una solución de 20% en peso de ácido cítrico monohidrato acuoso (96.6 g, 1.5 equiv.) manteniendo la temperatura por debajo de 15 °C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, después se descartó la capa acuosa inferior. La capa orgánica rica en producto se lavó dos veces con 70 mi de bicarbonato sódico acuoso saturado. El bicarbonato sódico sólido (1.7 g, 0.1 g/g del Ejemplo 146) se cargo y la solución se intercambió con el solvente en tolueno puro al vacío para proporcionar el Ejemplo 147 en forma de solución en 2 1/kg de tolueno.
Una solución del Ejemplo 147 (16.5g teóricos del Ejemplo 146) en 33 mi de tolueno se filtró en un reactor de 250 mi. Después, se cargaron trifluorotolueno (50 mi) y cloroyodometano (43.2 g, 4.0 equiv.) y la solución resultante se enfrió hasta -20 °C. Se cargó dietilzinc 1.1M en tolueno (111 mi, 2.0 equiv.) manteniendo la temperatura interna < -8 °C. La solución resultante se agitó a -15 a -20 °C durante 14 horas. La mezcla de reacción se calentó hasta 0 °C, después se inactivo mediante la adición inversa a una solución de 20 % en peso de ácido cítrico (135.7 g, 2.3 equiv.), El reactor se lavó con tolueno (82 mi) y el aclarado se añadió a la solución de inactivación. La mezcla bifásica resultante se agitó durante 20 minutos, después se dividió y se descartó la capa acuosa inferior. La capa orgánica rica se lavó dos veces con 60 mi de NaCl acuoso 13% en peso de NaHC03 saturado. La solución resultante se intercambió con el solvente en IP puro al vacío para producir el ejemplo 148 en forma de una solución en 10 1/kg de IPA.
Un reactor de 250ml se cargó con una solución del Ejemplo 148 (147 mi, 14.7 g teóricos del Ejemplo 146) en IPA. La solución se calentó hasta 35 °C y se añadió el hidróxido sódico sólido (6.2 g, 3.0 equiv.), La mezcla resultante se agitó a 35°C durante la noche. Se añadió agua (44 mi) y los solventes orgánicos se retiraron al vacío. Se añadió MTBE (145 mi) y el pH se ajustó a 3.0 con HC1 6N acuoso. La capa acuosa se dividió y se descartó. La capa orgánica rica en producto se lavó con 60 mi de agua, después se secó en azeotropismo al vacío mediante la adición de un volumen constante de MTBE. La solución se concentró hasta 55 mi y se agitó a 50 °C durante 30 minutos. La solución se enfrió hasta la temperatura ambiente en 1 hora durante la cual se formó una suspensión espesa. Se cargó heptano (90 mi) en 90 minutos y la suspensión espesa resultante envejeció durante 1 hora. Los sólidos se recogieron en una frita de vidrio con medio y se lavaron con 22.5 mi de 3:1 de heptano: MTBE seguido por 22.5 mi de heptano. El sólido se secó en un horno de vacío a 50 °C para proporcionar 5.48 g (46%) del Ejemplo 149 con una pureza LCAP de 94.9%.
El Ejemplo 149 bruto se disolvió en 55 mi de MTBE a 50 °C. La solución resultante se concentró hasta 20 mi y se enfrió hasta la temperatura ambiente^ en 1 hora. Después se añadió heptano (33 mi) en 90 minutos. Los sólidos resultantes se recogieron en una frita de vidrio con medio, se lavaron con heptano (15 mi) y se secaron en un horno de vacío a 50 °C para proporcionar 4.45 g (98.8 AP, 98.8% de pureza quiral, 37% del Ejemplo 146) del producto deseado en forma de un polvo pardo .
" Cabe esperar que la secuencia de reacciones anterior (para la formación del Ejemplo 149) sea lo suficientemente general como para toleran también otra funcionalidad. Por ejemplo, el grupo terc-butoxicarbonilo del carbono C2 del Ejemplo 147 podría ser sustituido potencialmente con una amida u otro éster. Asimismo, el grupo protector de terc-butoxicarbonilo en el nitrógeno podría estar sustituido por grupos protectores (tales como carbamatos, amidas, alquilo, arilo) o podrían estar completamente ausentes (sustituidos por hidrógeno) , ACTIVIDAD BIOLÓGICA Se usó un ensayo VHC Replicón en la presente descripción, y se preparó, realizó y validó tal como se describe en la patente de propiedad conjunta PCT/US2006/022197 y en O'Boyle y col. Antimicroi» Agents Chemother. 2005 Abril ; 49 (4 ) : 1346-53 , También se han usado procesos de ensayo que incorporan informadores de luciferasa como se describe (Apath.com), Se usaron células con el replicón VHC-neo y células con replicón que contenían sustituciones de resistencia en la región NS5A para analizar la familia de compuestos descritos en este documento. Se determinó que los compuestos tenían diferentes grados de actividad inhibitoria reducida sobre células que contenían mutaciones en comparación con el potencial inhibitorio correspondiente contra células de tipo silvestre. Así, los compuestos de la presente descripción pueden ser eficaces en la inhibición de la función de la proteína VHC NS5A y se entiende que son tan eficaces en combinaciones como se ha descrito previamente en la solicitud PCT/US2006/022197 y en el documento de patente de propiedad conjunta WO/04014852, Debería entenderse que los compuestos de la presente descripción pueden inhibir múltiples genotipos del VHC. La Tabla 2 muestra los valores de CE50 (Concentración eficaz inhibidora al 50 %) de compuestos representativos de la presente descripción contra el genotipo Ib de VHC. En una modalidad, los compuestos de la presente descripción son inhibidores de los genotipos la, Ib, 2a, 2b, 3a, 4a y 5a. Los valores de CE50 contra Ib de VHC son como sigue: A = 0.4 pM-10 M; B = 10.1 pM - 1.00 nM; y C = 1.01 nM - 1 |1M.
Los compuestos de la presente descripción pueden inhibir VHC mediante mecanismos además de, o distintos a, la inhibición de NS5A. En una modalidad, los compuestos de la presente descripción inhiben el replicón de VHC y en otra modalidad los compuestos de la presente descripción inhiben NS5A.
Tabla 2 Será evidente para un experto en la técnica que la presente descripción no se limita a los anteriores ejemplos ilustrativos, y que puede realizarse en otras formas específicas sin separarse de sus atributos esenciales. Por lo tanto se desea que los ejemplos sean considerados en todos los respectos como ilustrativos y como no restrictivos, haciendo referencia a las reivindicaciones anexas, en lugar de a los ejemplos anteriores, y por lo tanto se pretende que todos los cambios que entren dentro del significado y del alcance de equivalencia de las reivindicaciones estén incluidos en ellas.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (14)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :
1. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula (X) (i); en donde R1 se selecciona de hidrógeno y un grupo protector de nitrógeno; caracterizado porque comprende: i) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II), (ii); o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde R1 se selecciona de hidrógeno y un grupo protector de nitrógeno; y R2 se selecciona de amino, alcoxi y arilalcoxi ; y con una base, y (b) tratar el producto de la etapa (a) con agua.
2. Proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es hidrógeno.
3. Proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es un grupo protector de nitrógeno.
4. Proceso de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el grupo protector de nitrógeno es un grupo terc-butoxicarbonilo .
5. Proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la base se selecciona de un alcóxido metálico y un hidróxido metálico.
6. Proceso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la base se selecciona de etóxido de sodio, isopropóxido de sodio, tere-butóxido de sodio, hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de potasio, isopropóxido de potasio, terc-butóxido de potasio, terc-butóxido de litio e isopropóxido de litio.
7. Proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque además comprende tratar un producto de fórmula (I) (I), en donde R1 es hidrógeno; con un reactivo protector de nitrógeno para proporcionar un compuesto de Fórmula (I) (I), en donde R1 es un grupo protector de nitrógeno.
8. Proceso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el grupo protector de nitrógeno es terc-butoxicarbonilo .
9. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula (Z) (??), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; en donde R4y R5 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, heterociclilo y heterociclilalquilo ; caracterizado porque comprende: tratar un compuesto de Fórmula (Q) (IV), con una base en presencia de acetato de amonio.
10. Proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base se selecciona de una amina terciaria, una amina aromática, una anilina y un imidazol sustituido .
11. Proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base se selecciona de 1,4-dimetilpiperazina , 3 -quinuclidinol , 3 -metilpiridina , 1-metilimidazol , dimetilbutilamina, N, -dimetilanilina , dimerpranol, quinoxazolina , creatinina, 2 -met il imidazol , 4 -metilimidazol , imidazol, morfolina, N-metilmorfolina, 1.8-diazabicicloundec-7-eno, 1,4-diazabiciclo [2.2.2] octano, colidina, 4 -cloroimidazol , 2-cloroimidazol , 4 -cianoimidazol , bencimidazol , diisopropiletilamina y 2 , 6 - lutidina .
12. Proceso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la base es imidazol.
13. Un proceso de preparación del Ejemplo 145 caracterizado porque comprende: (a) tratar el Ejemplo 143 Ej 3. con el Ejemplo 14 Ejemplo 144 en presencia de una base, para producir un compuesto de Fórmula (V) (V); (b) tratar el compuesto de fórmula (V) con acetato de amonio en presencia de una base; y (c) tratar el producto de la etapa (b) con metanol .
14. Proceso de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque es un proceso continuo.
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