BG99604A - Дитиокарбамати за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания - Google Patents

Дитиокарбамати за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания Download PDF

Info

Publication number
BG99604A
BG99604A BG99604A BG9960495A BG99604A BG 99604 A BG99604 A BG 99604A BG 99604 A BG99604 A BG 99604A BG 9960495 A BG9960495 A BG 9960495A BG 99604 A BG99604 A BG 99604A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
sodium
alkyl
dithiocarbamate
vcam
pdtc
Prior art date
Application number
BG99604A
Other languages
English (en)
Other versions
BG62682B1 (bg
Inventor
Russel MEDFORD
Margaret OFFERMANN
R. Alexander
Original Assignee
Emory University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Emory University filed Critical Emory University
Publication of BG99604A publication Critical patent/BG99604A/bg
Publication of BG62682B1 publication Critical patent/BG62682B1/bg

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/325—Carbamic acids; Thiocarbamic acids; Anhydrides or salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/7056—Selectin superfamily, e.g. LAM-1, GlyCAM, ELAM-1, PADGEM
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Дитиокарбоксилатите, по-специално дитиокарбаматите, блокират предизвиканото отделяне на ендотелиалната клетъчна повърхностно-адхезионна молекула VCAM-1 и намират приложение за лечение на сърдечносъдови заболявания, например атеросклероза, следангиопластична рестеноза, коронарно-артериални заболявания и ангина, както и несърдечносъдови възпалителнизаболявания, чиито посредник е VCAM-1.

Description

Ниво на изобретението
В обхвата на това описание са методи и състави за лечение на атеросклероза и други кардиоваскуларни и възпалителни заболявания.
Адхезията на левкоцитите към ендотелиума представлява основен, ранен симптом при широк кръг от възпалителни процеси, включително атеросклероза, автоимунни заболявания, както и при бактериални и вирусни инфекции. Този процес се опосредства, отчасти, от появата па ендотелиални, клетъчно-повърхностни, адхезионни молекули, такива като ICAM-1 (вътрешно-клетъчна адхезионна молекула-1), VCAM-1 (съдова адхезионна молекула-
1) и ELAM-1 (ендотелиална левкоцитна адхезионна молекула1). Тези адхезионни молекули се свързват към имунните клетки, които са в основата па противодействието на възпалението. Една от адхезионните молекули, VCAM-1, играе особено важна роля при свъзването на моноцитите. Съставни сигнали предизвикват появата на клетъчните, повърхностноадхезионни молекули.
Атеросклерозата е хронично, възпалително заболяване на артериалната интима, характеризиращо се с фокусно акумулиране на левкоцити, гладки мускулни клетки, липиди и извънклетъчна матрица. Основна характеристика и един от най-рано забелязаните признаци в патогеиезата на атсросклерозната плака е прилепването на мононуклеарпи левкоцити към отделни сегменти на артериалния ендотслиум.
посрсдстВом VCAM-l протеини от повърхността на съдовите, ендотелиални клетки. След прилепването към сндотслиалнитс клетки, моноядрените левкоцити сс превръщат В липидно-натоВарени макрофаги или пенни клетки. Атеросклерозата започва като силно фокусирана повреда на съдовата стена, обикновено В области, където нормалния, ламипарен поток от кръВ е нарушен, така както при разклоненията на съдовия поток. Тези области с писък напречен натиск се характеризират с ненормално местно натрупВане на окислително-модифициран липопротеин е ниска гъстота (ox-LDL).
Предполага се, че ранните признаци В патогенезата на атеросклерозата се опосредстВат от липопротеин с ниска гъстота, който е превърнат в ox-LDL от реактиВоспособни кислородни видове. Steinberg и др., Beyond cholesterol: Modifications of low-density lipoprotein that increase its athcrogenicity, N. Engl. J. Med. 320: 915-924 (1989);
Parthasarathy и др., Probucol inhibits oxidative modification of low density lipoprotein, J. Clin. Invest. 77(2): 641-4 (1986). He e чено no какъв механизъм LDL се окислява, дали вътреишоклетъчно или извънклетъчно.
Настоящите терапии на сърдечносъдово заболяване и В частност на атеросклерозата не лекуВат причината на зоболяВането, а Вместо това лекуВат симптомите на заболяването или нискорисковитс фактори, свързани със заболяването, фармацевтичните средства предписвани за тези случаи Включват намаляващи липидите агенти, такива като пробукол и никотинова киселина; аспирин (които предотвратява захващането на натрупванията), противотромбови средства, такива като коумадин; калциеви канални блокиращи агенти, такива като варапамил, дилтиазен и нифсдипин; ангиотензинии превръщащи ензимни (АСЕ) инхибитори, такива като каптоприл и аналоприл и β-блокери, такиВа като пропаналол, тербуталол и лабеталол. Тъй като терапевтичните средства не са селективни, те влияят на множество различни органи и имат значителни странични ефекти. Понастоящем няма лекарства, които да са предназначени за предотвратяване на свързването на моноцити, към клетъчните повърхностно-адхезионни молекули, такива като VCAM-1.
Тъй като сърдечносъдовите заболявания са понастоящем основен смъртен фактор в САЩ и деветдесет процента от сърдечносъдовите заболявания се диагностицират като атеросклероза, има голяма необходимост да се открият нови методи и фармацевтични средства за тяхното лечение.
Дитиокарбаматите са органични вещества привличащи йоните на преминаващи метали, клинично използвани при тежки метални интоксикации. Baselt, R.C., и др., Comparisons of antidotal efficacy of sodium diethyldithiocarbamatc, Dpenicillamine and triethylenetetramine upon acute toxicity of nickel carbonyl in rats, Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 18(4): 677-88 (1977); Menno, T. и K. Kaabcr, Treatment of pompholyx due to nickel allergy with chelating agents, Contact Dermatitis 4(5): 289-90 (1978); Sunderman, F. W., Clinical response to therapeutic agents in poisoning from mercury vapor, Ann. Clin. Lab. Sei. 8 (4): 259-69 (1978); Sunderman, F. W., Efficacy of sodium diethyldithiocarbamatc (dithiocarb) in acute nickel carbonyl poisoning, Ann. Clin. Lab. Sei. 9(1): 1-10 (1979); Gale, G.R., u др., Diethyldithiocarbamatc in treatment of acute cadmium poisoning, Ann. Clin, Lab. Sei. 11(6): 476-83 (1981); Jones, M.M., and M.G. Cherian, The search for chelate antagonists for chronic cadmium intoxication, Toxicology 62(1): 1-25 (1990); Jones, S.G., u gp., A comparisson of diethyldithiocarbamate and EDTA as antidotes for acute cadmium intoxication, Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 38(2): 271-8 (1982); Pages, A., u gp.,
Diethyldithiocarbamates in heavy metal poisoning: complexes of N,N-di(l-hydroxyethyl)dithiocarbamale with Zn(II), Cd(II), Hg(II), CH3Hg(II) and C6H5Hg(II), J. Inorg. Biochem. 25(1):35-42 (1985); Tandon, S.K., u gp., The lead-chelating effects of substituted dithiocarbamates, Biomed. Environ. Sci. 3(3): 299-305 (1990).
Също така, дитиокарбаматите се използват, като добавка, при цис-платиновата химиотерапия, за да предотвратят бъбречна токсичност. Hacker, М.Р., и др., Effect of disulfiram (tetraethylliuram disulfide) and dicthyldithiocarbamate on the bladder toxicity and antitumor activity of cyclophosphamide in mice, Cancer Res. 42(11): 44904499 (1982). Bodenner, Selected protection against cisdiammincdichloroplatinum (II) - induced toxicity in kidney, gut, and bone marrow by diethyldithiocarbamate, Cane. Res. 46: 27512755 (1986). Привличането на преминаващи метали води до блокиране образуването на хидроксилен радикал, вътрешноклетъчно, посредством реакцията на Habcr-WcissFcnton. Sarah, М., и др., Radical reactions in vivo-an overview, Radial. Environ. Biophys. 29(4): 249-62 (1990).
Един дитиокарбамат използван при лечение иа алкохолизъм е дисулфирам, димер па дистилдитиокарбамат. Дисулфурама подтиска чернодробната алдехидна дсхидроасназа. Inoue, К., и др., Effect of disulfiram and its reduced metabolite, dicthyldithiocarbamatc on aldehyde dehydrogenase of human erythrocytes, Life Sei. 30(5) 619-24 (1982).
Споменато c, че дитиокарбаматите подтискат размножаването на HIV вируса и, също така, подобряват узряването на специфични Т клетъчни субпопулации. Това е довело до клинични изпитания на дистилдитиокарбамат спрямо популации при пациенти със AIDs (СПИН). Reisinger, Е., и др., Inhibition of HIV progression by dithiocarb, Lancet 335: 679 (1990).
Следователно, предмет на настоящето изобретение е да осигури метод за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания.
Друг предмет на настоящето изобретение е да осигури фармацевтични състави за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания.
Още една цел на настоящето изобретение е да осигури методи и състави, които да блокират способността на клетките да извличат гении продукти, за които с известно, чс спомагат за прилепването на левкоцити към тези клетки, както и за активирането на клетките.
Същност на изобретението
Открито е, чс дитиокарбоксилати и по-специално дитиокарбамати блокират предизвиканото отделяне на сндотслиалната, клетъчна, повърхностно-адхезионна молекула VCAM-1 и по-този начин са полезни за лечение на атеросклероза, слсд-ангиопластична рсстеноза, коронарноартериални заболявания, ангина и други сърдечносъдови заболявания, както и несърдсчпосъдови, възпалителни заболявания, чиито посредник е VCAM-1.
Важно с, чс определени дишиокарбамати, такива като натриеВ пиролидин N-дитиокарбамат (PDTC), не блокират, достатъчно, предизвиканото отделяне на други ендотелиални, клетъчни, повърхностно-адхезионни молекули, такива като ICAM-1 или ELAM-1 и следователно, не влияят на Възпалителната реакция, на която VCAM-1 не е посредник. Открито е, също така, чс PDTC прояВява избирателна токсичност към размножаващи се чрез пролиферация или ненормално делящи се Васкуларни, гладки, мускулни клетки. Друг дитиокарбамат, натриеВ N-MemuA-N-kap6okcuMemuA-Nкарбодитиоат, също подтиска отделянето на VCAM-1, без да има значителен ефект върху ICAM-1, но не проявява избирателна токсичност към ненормално делящите се васкуларни, гладки, мускулни клетки. Способността на други активни дишиокарбамати да подтискат, избирателно, отделянето на VCAM-1 (без да подтискат отделянето на ELAM-1 или ICAM-1) и да прояВяВат избирателна токсичност към ненормално делящите се Васкуларни, гладки, мускулни клетки се оценяВа в съответствие с описани тук методи.
Дитиокарбамати, които са полезни за лечение на атеросклероза и на други сърдечносъдови и възпалителни заболявания, включват, без да са ограничаващи, тези е формулите :
R1SC(S)NR2r3 или r2r3n(S)CS-SC(S)NR2r3 където е водород или фармацевтично приемлив катион, Включително, но не ограничаващо, натриеВ, калиев или NR4r5r6r7? където R^, R-\ R6 u r7 ca независимо един от друг водород; С]_(} линеен, разклонен или цикличен алкил,
Ί
хидрокси(С]_б)алкил (където една или повече хидроксилни
групи са разположени при който и 9а е от въглеродните
атоми) или арил; и
и са независимо един от друг С1_ю линеен,
разклонен или цикличен алкил; -(СНОН)п(СН2)пОН, където η е ο, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; -(CH2)nCO2Rl; -(CH2)nCO2R4;
хидрокси(С]_б)алкил-, или R^ и R3 заедно образуват мост, такъв като -(СН2)т-, където т е 3-6 и където е алкил, арил, алкарил или аралкил, включително ацетил, пропионил и бутирил.
Активните дитиокарбоксилати и по-специално дитиокарбамати, описани тук, могат да бъдат използвани за лечение на остри и хронични възпалителни заболявания, чиито посредник с VCAM-1, включително, без да са ограничаващи, ревматоид и остеоартрит, астма и дерматит и могат да бъдат полезни при лечение на множествена склероза.
Съединенията са полезни както при основното, така и при допълнителното медицинско лечение на сърдечносъдово заболяване. Съединенията могат да се използват при допълнителна терапия, в комбинация със средства, прилагани за понижаване на риска от заболяване, намалявайки LDL и серумния холсстерол. Методът предстаВлява значителен напредък при лечението на сърдечносъдово заболяване, превъзхождайки сегашните лечения, предназначени само да подтискат развитието на болеста и, когато се използва по подходящ начин, осигурява излекуване'’ предотвратяване па възможност за посредством поражения и причинява не регрес да се прилагат за медицинската атеросклерозата, развитието на нови на съществуващите. Съединенията могат лечение на заболяване на малки съдове, koumo не са подходящи за лечение, посредством хирургична намеса или ангиопластия или на заболяване на други съдове при които хирургичната намеса не е възможна. Съединенията, също така, могат да се използват за стабилизиране на пациенти преди реваскуларизационна терапия.
Активното съединение или смес от съединенията се прилага по всякакъв подходящ начин, включително, но без да е ограничаващо, орално и венозно. Обхватът, най-общо, на дозата е от 0.5 до 500 мг/кг телесно тегло, като предписанието варира от един път през ден до два пъти на ден. Продължителността на лечение е в граници от една доза дадена веднъж до два пъти дневно до дози давани в продължение на два до шест месеца.
Съединенията могат, също, да бъдат прилагани директно към васкуларната стена, като се използват Впръскващи, балонни катетри, следвайки или вместо коронарна или друга артериална ангиопластия. Например, 2-5 мл физиологично приемлив разтвор, който съдържа приблизително 1-500 μΜ от съединението или смес от съединения, се прилага при налягане 1-5 атмосфери. След това, в продължение на следващите шест месеца и по време на периода на максимален риск от рсстеноза, активните съединения се прилагат по други подходящи пътища и предписания на дозите.
Използват се сравнително краткотрайни лечения е активните съединения, за да се предизвика свиване на болестните поражения на коронарната артерия , които не могат да бъдат лекувани, чрез ангиопластия или хирургична намеса. Неограничаващ пример на краткотрайно лечение е прилагане в продължение на два до шест месеца на дози в граници om 0.5 go 500 мг/кг телесно тегло, давани периодично в граници от един път през ден до три пъти дневно.
Могат да сс прилагат по-дълготрайни лечения, за да сс предотврати развитието на поражения в напреднала фаза, при високо-рискови пациенти. Дълготрайното лечение може да продължи години при дози в граници от 0.5 до 500 мг/кг телесно тегло, прилагани на интервали от един път през ден до три пъти дневно.
Активните съединения могат, също така, да бъдат прилагани в периода веднага преди и след коронарната ангиопластия, като средства за намаляване или елиминиране на ненормална пролиферативна и възпалителна реакция, която понастоящем води до клинично значима рестеноза.
Активните съединения могат да бъдат прилагани заедно е други медикаменти, използвани за лечение на сърдечносъдово заболяВане, включително понижаВащи липидите агенти, такива като пробукол и никотинова киселина; инхибитори, под формата на таблетки, такива като аспирин; противотромбови агенти, такива като коумадин; калциеви, канални блокери, такива като варапамил, дилтиазем и нифсдипин; ангиотензинни, превръщащи, ензимни (АСЕ) инхибитори, такива като каптоприл и еналоприл; и β-блокери, такива като пропаналол, тербуталол и лабеталол. Съединенията могат, също, да бъдат прилагани в комбинация е нсстероидни, противовъзпалителни средства, такива като ибупрофен, иидомстацин, фенопрофен, мсфеиамсна киселина, флуфенамена киселина или сулипдак; или е кортикостероиди.
Кратко описание на фигурите фигура 1 е илюстрация на авторадиограма 11а mRNA, получена, както е описано по-долу, хибридизирана до 32р_ означена, човешка VCAM-1 специфична cDNA (Панел А), Еселсктин (ELAM-1) специфична cDNA (Панел В) или ICAM-1 специфична cDNA (Панел С). След предварително третиране, в продължение на 30 мин, е 50 μΜ натриев пиролидин дитиокарбамат (PDTC), HUVE (човешка пъпна вена) клетки се подлагат на IL-lb (10 U/мл) при продължителното присъствие на 50 μΜ PDTC. Успоредни контроли се обработват идентично, е изключение на това, че отсъства PDTC. В определените моменти, цялата RNA се изолира и 20 ргр от материала степенио-фракциониран, чрез денатуриране с 1.0% агарозен, формалдехиден гел, електрофорезно се пренася върху нитроцелулоза, хибридизирана, както е описано по-горе и се визуализира, чрез авторадиография. Колона 1 - 0 часа; Колони 2, 4, 6, 8 - OL-1 само за 2, 4, 8 и 24 часа, съответно; Колони 3, 5, 7, 9 - IL-1 е PDTC за 2, 4, 8 и 24 часа, съответно.
Фигура 2 е илюстрация на авторадиограма на mRNA, получена, както е описано по-долу, хибридизирана до 32р_ означена, човешка VCAM-1 специфична (Панел А), Е-селектин (ЕЕЛМ-1) специфична cDNA (Панел В) или ICAM-1 специфична cDNA (Панел С). HUVE клетки се обработват, предварително с означените концентрации PDTC и след това сс подлагат на IL-lb в присъствието на PDTC за 4 часа и се анализират за VCAM-1 mRNA натрупване, посредством хибридизациопен анализ е Northern филтър. Колона 1 - контрола; Колона 2 - IL-1 (10 П/мл); Колона 3 - IL-lb + PDTC (0.05 μΜ); Колона 4 - IL-1 LB + PDTC (0.5 μΜ); Колона 5 - IL-lb + PDTC (5.0 μΜ);
Колона 6 - IL-lb + PDTC (50.0 μΜ); Колона 7 - IL-lb + PDTC (100 μΜ).
фигура 3 е илюстрация на авторадиограма на mRNA, получена, както е описано по-долу, хибридизирана до 32р_ означена, човешка VCAM-1 специфична (Панел А), Е-селектин (ELAM-1) специфична cDNA (Панел В) или ICAM-1 специфична cDNA (Панел С). HUVE клетки се обработВат, предварително, както е описано на фигура 1 е 50 μΜ PDTC, подлагат се за 4 часа на въздействието на агентите отбелязани по-долу и се анализират за VCAM-1 (Панел А) и ICAM-1 (Панел В) mRNA натрупване. Колона 1 - TNFa (100 U/мл); Колона 2 - TNFa + PDTC; Колона 3 - липополизахариди (LPS) (100 нгр/мл); Колона 4 - LPS + PDTC; Колона 5 поли(Е.С) (100 мгр/мл); Колона 6 - поли(1:С) + PDTC.
Фигура 4 е диаграма на относителното, клетъчноповърхностно отделяне на VCAM-1 и ICAM-1 в присъствието (тъмни ивици) или отсъствието (светли ивици) на PDTC и в присъствието на множество индуциращи стимулатори. Сливащи се HUVE клетки се обработват или не се обработват предварително (само със CTL) за 30 минути е 50 μΜ PDTC и след това се подлагат на въздействие на означените агенти, за означените времена, в присъствието или отсъствието (само на CTL) на PDTC. Клетъчноповърхностното изражение се определя от първичното свързване е VCAM-1 специфични (4В9) и ICAM-1 специфични (84Н10) миши моноклонални антитела последвано от вторично свързване е псроксидаза от конска репичка, белязана като козя, противомиша (IgG). Определянето на количеството се осъществява посредством калоримстрично превръщане, при 450 нм, иа ТМВ. фигура 4 показва, че множество регулаторни сигнали индуцират VCAM-1, но не и ICAM-1 по тиокарбаматно-чувствителен път в човешки, Васкуларни, ендотелиални клетки.
Фигура 5 е диаграма на относително VCAM-1 клетъчноповърхностно отделяне (O.D. 595 нМ) В човешки, пъпни, ендотелиални клетки, активирани с TNFa, при определена концентрация на различни антиокислители. (PDTC е натриев N-пиролидин дитиокарбамат; DETC е натриев N,N-guemuA-Nкарбодитиолат, също познат като натриеВ диетилдитиокарбамат; NAC е N-ацетил цистеин; и DF е дсфероксимин).
фигура 6 е диаграма на относително VCAM-1 клетъчноповърхностно отделяне (O.D. 595 нМ) В чоВешки, пъпни, ендотелиални клетки, активирани с TNFa, В присъствието на определеното количество антиокислител. (PDTC е натриеВ Nпиролидин дитиокарбамат; DIDTC е натриев N,N-guemuA-Nкарбодитиоат; SarDTC е натриев N-MemuA-N-kap6okcuMemuAN-карбодитиоат; IDADTC е тринатриев Ν,Νgu(kap6okcuMemuA)-N-kap6ogumuoam; MGDTC е натриев NMcmuA-D-HAykaMuii-N-kap6ogumuoam; MeOBGDTC е натриев N(4-Mcmokcu6aH3UA)-D-2AykaMun-N-kap6ogumuoam; DEDTC е натриев N,N-guemuA-N-kap6ogumuoam; Di-PDTC е натриеВ N,N-guu3onponuA-N-kap6ogumuoam; NAC е N-ацетил цистеин).
фигура 7 е диаграма, в проценти, на Мок-4 клетки свързващи сс с HUVE клетки, нсстимулирани или стимулирани с TNFa (100 U/мл), за 6 часа, В присъстВисто или отсъствието па PDTC.
Фигура 8 е илюстрация на химическите структури на следните активни дитиокарбамати; натриев пиролидин-Nкарбодитиоат, натриев N-MemuA-N-kapookcuMcmuA-Nкарбодитиоат, карбодитиоат, карбодитиоат, mpunampueB N,N-gu(kap6okcu метил)-NuampucB N-MemuA-D-2AykaMun-Nнатриев N,N-guemuA-N-kap6ogumuoam (uampucB диетилдитиокарбамат), и натриев Ν,Ν-диизопропилN-карбодитиоат.
Подробно описание на изобретението
Терминът алкил, както е използван тук и освен ако не е определен по друг начин, означава наситен въглеводород е права, разклонена или циклична верига, с брой на въглеродните атоми от Cj до С}() и по-специално метилов, етилов, пропилов, изопропилов, бутилов, изобутилов, 1-бутилов, пснтилов, циклопентилов, изопентилов, неопентилов, хексилов, изохексилов, циклохексилов, 3-метилпентилов, 2,2диметилбутилов и 2,3-диметилбутилов.
Терминът алкенил, както е използван тук и освен ако не е определен по друг начин, означава наситен въглеводород е права, разклонена или циклична верига, е брой на въглеродните атоми от С2 до С]() и с най-малко една двойна връзка.
Терминът алкинил, както е използван тук и освен ако не е определен по друг начин, означава наситен въглеводород е права или разклонена верига, с брой на въглеродните атоми от С2 доС]()ис най-малко една тройна връзка.
Терминът аралкил означава арилова група с най-малко един алкилов заместител.
Терминът алкарил означава алкилова група, която има най-малко един арилов заместител.
Терминът хало (алкил, алкенил или алкинил) означава алкилова, алкенилови или алкинилови група в която най-малко един Водороден атом от групата е заместен е халогснен атом.
Терминът арил, както е използван тук и освен ако не е определен по друг начин, означаВа фенилова или заместена фенилова група, в която фениловия пръстен има един или повече от следните заместители: хидрокси, СО2Н или нейна фармацевтично приемлива сол, СО2(алкил), алкокси, алкил или глукамин.
Терминът алкинил, както е използван тук и освен ако не е определен по друг начин, означава част от структурата -Оалкил.
Терминът алкил, както е използван тук, включВа флуор, хлор, бром и йод.
Терминът хидроксиалкил, както е използван тук, означава Cj до Сб алкилова група, в която най-малко един от водородните атоми прикрепени към който и да е от въглеродните атоми е заменен с хидрокси група.
Терминът тиолов антиокислител означава сяра съдържащо съединение, което възпрепятствува окисляването.
Терминът фармацевтично приемливо производно, означава производно на активното съединение, което, при прилагане спрямо реципиента, е способно да осигури получаването директно или индиректно на основното съединение, или което проявява актиВност само по себе си.
I. Активни съединения
Открито е, че дитиокарбоксилатите са полезни при лечение на атеросклероза и други еърдечносъдови и възпалителни заболявалия. Дитиокарбоксилатите, включително дитиокарбаматите, могат да бъдат използвани да блокират способността на клетки, включително ендотелиални клетки, да отделят VCAM-1, който е генен продукт известен е това, че способства за прилепването на левкоцити към клетки, фактът, че дитиокарбоксилати, включително дитиокарбамати, подтискат отделянето на гена VCAM-1 е силна подкрепа на важността на окисляването, като първоначален сигнал за изменени васкуларновъзпалителни клетъчни взаимодействия. Специфичните молекулни механизми по които дитиокарбоксилатите функционират при подтискане отделянето на гена VCAM-1 не са известни.
Най-малко едно от съединенията, натриев пиролидин дитиокарбамат (PDTC), подтиска отделянето на гена VCAM1, при концентрация най-малко 1.0 микромоларна. Това съединение, също така, проявява избирателна токсичност към размножаващи се чрез пролиферация или ненормално делящи се васкуларни, гладки, мускулни клетки. Открито е, че натриев пиролидин дитиокарбамат не блокира, достатъчно, отделянето на ELAM-1 или ICAM-1 и следователно лечението е това съединение не влияе на възпалителната реакция опосредствана от ELAM-1 и 1СЛМ-1. Така се избягва цялостно имуноподтискаие. Така може да се избегнат системни усложнения, предизвикани от' цялостно подтискане на адхезионни молекули, за които е известно, че се отделят при множество клетъчни видове.
Дитиокарбоксилати са съединения със структура A-SC(S)-B и са членове па общия клас съединения, известни капто антиокислители и освен това са известни като карбодитиоли или карбодитиолати. Оказва се, че SC(S) частта е важна за терапевтичната активност и че А и В могат да бъдат Всяка група, която нс Влияе на ефикасността или токсичността на съединението. А и В могат да бъдат подбрани от средния специалист В областта, така че да придадат желаните характеристики на съединението, Включително размер, заряд, токсичност и степен на стабилност (Включително стабилност В кисела среда, такаВа като стомаха или основна среда, такава като чревния тракт). Изборът на А и В има, също така, важно влияние върху тъканното разпространение и фармацевтичната кинстика на съединението. Най-общо, за лечение на сърдечносъдово заболяване с желателно съединението да се акумулира или да сс локализира в артериалния вътрешен слой, съдържащ васкуларни, ендотелиални клетки. За предпочитане, съединенията се премахват чрез бъбречно отделяне.
Например, без това да е ограничение, А и В могат да бъдат незаВисимо един от друг алкил, алкенил, алкинил, алкарил, аралкил, халоалкил, халоалкенил, халоалкинил, арил, алкарил, водород, алкокси-С]_ю алкил, С]_б алкилтио-С]_
Ю алкил, С]_ю заместен алкил (където заместителят е независимо един от друг хидрокси група, карбонилна група или карбоксилна киселина, намиращ се при който и да е въглероден атом С]_]о), NR2r3, -(СНОН)пСН2ОН, където π е 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, -(CH2)nCO2Rl, включително ацетил, пропионил и бутирил. хидрокси(С} _б)алкил- (където една или повече хидроксилни групи сс намират при който и да е въглероден атом); а А може да бъде фармацевтично приемлив катиои, включително, без тоВа да е ограничение, натриев, калиев или NR4R5R6R7. Също така, може да бъде приложен димер, такъв като B-C(S)S-SC(S)-B.
Дитиокарбоксилашише трябва да бъдат подбирани за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания по това дали имат нужната липофилицитност, за да се локализират на заболялото място. Съединенията не трябва да се локализират в места с ниска обмяна, такива като мастни натрупвания. В предпочитан случай за лечение на сърдечносъдово заболяване, фармацевтичната кинетика на съединенията не трябва да се влияе значително от конжестивен сърдечен пристъп или бъбречна недостатъчност.
Дитиокарбаматитс трябва да са физиологично приемливи. Най-общо, приемливи са съединения е терапевтичен индекс най-малко 2, за предпочитане най-малко 5 или 10. Терапевтичният индекс е определен като EC5Q/IC5Q, където ЕС50 е концентрацията на съединението, което подтиска отделянето на VCAM-1 е 50%, а IC50 е концентрацията на съединение което има токсичност до 50% от тази на атакуваните клетки.Клетъчната токсичност може да бъде измерена, чрез директни изброявания на клетки, трипаново синьо изключване или различни метаболичната активност, такива като включВанс, както е известно от нивото изследвания на ЗН -тимидиново па техниката.
Терапевтичният индекс 11а PDTC в тъкаина култура е над 100, измерена посредством клетъчната токсичност разделена на способността да се подтиска отделянето 11а VCAM-1, което е активирано от TNFa, в HUVE (човешка пъпна вена) клетки. Първоначалните изследвания на бързо делящата се, от клетъчен тип НТ-18, човешка глиома не показват токсичност при концентрации 100 пъти по-големи от терапевтичните концентрации. Дисулфирам, орално приложима форма иа диетилдитиокарбамаша, използвана при лечение на алкохолно отравяне, най-общо не проявява голяма клинична токсичност, когато се прилага по подходящ начин.
Има няколко дитиокарбамати, за които е известно, че са генотоксични. Тези съединения не са в обхвата на настоящето изобретение, който се ограничава до прилагането на физиологичнопоносими вещества. Например генотоксичен дитиокарбамат е фунгицидът цинков диметилдитиокарбамат. Освен това, антихолинестсразните свойства на определени дитиокарбамати могат да доведат до невротоксични ефекти. Miller, D., Neurotoxicity of the pesticidal carbamates, Ncurobehav. Toxicol. Teratol. 4(6): 779-87 (1982).
Терминът дитиокарбоксилат, както е използван тук, включва по-специално, без това да е ограничение, дитиокарбамати с формули:
R1SC(S)NR2r3 и r2r3n(S)CS-SC(S)NR2R3 където R1 е водород или фармацевтично приемлив катион, включително, без това да е ограничение, натриев, калиев или NR4r5r6r7? к ьдето R4, r55 r6, r7 са независимо един от друг водород; С]_б линеен, разклонен или цикличен алкил, хидрокси(С] _б)алкил (където една или повече хидроксилни групи се намират при който и да е въглероден атом), или арил; и
R2 и R3 са независимо един от друг Cj.jq линеен, разклонен или цикличен алкил; -(CHOH)n(CH2)nGH, където п е 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6; -(CH2)nCO2R1; -(CH2)nCO2R4;
хидрокси(С]_б)алкил-; или R2 и R-’ заедно образубат мост, такъв като -(СН2)т-, където т е 3-6 и където R4 е алкил, арил, алкарил, или аралкил, включително ацетил, пропионил и бутирил.
Конкретни примери на
илюстрирани на фигура 8,
карбодитиоат, натриев
карбодитиоат, тринатриев
карбодитиоат, натриев
карбодитиоат, натриев
полезни дитиокарбамати, са натриев пиролидин-NN-MemuA-N-kap6okcuMemuA-NN,N-gu(kap6okcuMemuA)-NN-MemuA-D-aAykaMun-NN,N-guemuA-N-kap6ogumuoam (натриев дистилдитиокарбамат), и натриев Ν,Ν-диизопропилN-карбодитиоат.
Активните дитиокарбоксилати и по-специално дитиокарбамати са търговско достъпни или могат да бъдат получени като се използват известни методи.
Установено е, че на молекулно ниво PDTC подтиска активността на транскрипционния, регулаторен фактор NfкВ, в отговор на определени цитокининови и нецитокининови стимулатори (Schreck, R., и др., Reactive oxygen intermedites as apparently widely used messengers in the activation of the NFkappa B transcription factor and HIV-1, EMBO J. 10(8): 2247-58 (1991); Schreck, R., и gp., Dithiocarbamates as potent inhibitors of nuclear factor B activation in intact cells, J, Exp. Med. 175:1181-1194 (1992). Все пак, чрез анализ c гелно, променящо се изместване на ядрени екстракти от HUVE клетки с различни кВ-подобни подобрени формации, е открито, че ендотелиалните клетки активират отделянето на гена VCAM-1, посредством явно нов траискрипционсн, регулаторен фактор, които ис е Nf-kB. Това предполага, чс PDTC може да регулира отделянето па еидотслиалпия клетъчен ген, посредством влиянието си върху нов траискрипционсн регулаторен протеин. Също така, показано е, чс отделянето на VCAM-1 в културирани саркомни клетки на Kaposi е предизвикано от множество фактори, което може да е важно за неговата патогенеза. PDTC блокира отделянето на VCAM1 в саркомните клетки 11а Kaposi, което е предизвикано от TNF, IL-1 и поли(1:С).
Открито е, също така, че гладки мускулни клетки произвеждат, В разтВорима форма VCAM-1, който може да бъде отделян от клетките и който може да играе ролята естестВен антихистамин.
Биологична активност
Способността на дитиокарбоксилатите да подтискат отделянето на VCAM-1, може да бъде измерена по различни начини, Включително по методите описани по-долу, в примери 1 до 7. За удобство, примери 1-3 и 6-7 дават оценката на биологичната активност на натриев пиролидин-Nкарбодитиоат (също споменаван като PDTC). Тези примери нямат за цел да ограничат обхвата на изобретението и, поспециално, включват използването на което и да е от гореописаните съединения за лечение на атеросклероза и други видове възпаления и сърдечносъдови заболявания, опосредствани от VCAM-1. PDTC може лесно да бъде заместен е всяко от гореописаните съединения и оценен по подобен начин.
Пример 4 и 5 дават сравнителни данни за способността на определен брой дитиокарбамати да подтискат отделянето на гена VCAM-1. Примерите, по-долу, показват, че дитиокарбаматите, за които се претендира, блокират, поспециално, способността на VCAM-1 да бъде отделян от васкуларните ендотслиални клетки, под въздействие на множество сигнали, за които е известно, че са активни срещу атеросклерозата и възпаленията.
Експериментални процедури
Клетъчни култури HUVE клетки се изолират от чоВешки пъпни вени, които се капулират, заливат с разтвор на Hanks, за да се отдели кръвта и след това се постаВят в инкубатор е 1% колагеназа, за 15 мин., при 37°С. След отделяне на колагеназата, клетките се култивират в М199 среда, обогатена е 20% ембрионален, волски серум (HyClone), 16 ргр/мл хепарин (ESI Pharmaceuticals, Cherry Hill, NJ), 50 цгр/мл сндотслиално-клетъчна, растежна добаВка (Collaborative Research Incorporated, Bedford, МА), 25 mM Hcpcs-oB буфер, 2 mM L-глутамин, 100 gg/ml пеницилин и 100 pg/ml стрептомицин и израстВат при 37°С, Върху плата е тъканна култура, покрити с 0.1% желатин. Клетките се подлагат на слиВане, чрез разделяне 1:4. Използват се клетки от първите 8 сливания.
Инкубация с цитокини и други реагенти
Слети HUVE клетки се промиват е фосфатно-буфериран физиологичен разтВор и след тоВа се прибавя сВежа среда. Отбелязаните концентрации на PDTC се добавят, като предВарителна обработка, 30 минути преди добавянето на цитокини. Цитокини и други индуциращи средства се прибавят директно към средата, за Времената и концентрациите указани Във Всеки експеримент. Човешкият рскомбинант IL-lb беше щедро подарен от Upjohn Company (Kalamazoo, MI). TNFa беше получен от Bohringer Engclhcim. Бактериален липополизахарид (EPS), полииносиникова киселина: полицитидиликова киселина (Поли 1 :С) и пиролидин дитиокарбамат (PDTC) са получени от Sigma Chemical (St. Louis. МО). Всички други реагенти са от реагептен клас.
RNA изолиране: Цялото количество RNA се изолира, чрез еднократно скстрахиране, като се използва смес от тиоцианат на гуанидиновата киселина, фенол и хлороформ. Клетките се промиват е фосфатно буфериран физиологичен разтвор и след това се разтварят е 2 ml гуанидинов изотиоцианат. Разтворът се подкислява е 0.2 ml натриев ацетат (pH 4.0) и след това се екстрахира е 2 ml фенол и 4 ml хлороформ: изоамилов алкохол (24:1). RNA се подлага на двукратно утаяване е етанол преди да се използва за анализ на Northern.
Анализ на Northern: Цялото количество RNA (20 pg) степенно се фракционира, като се използват 1% агарозни формалдехидни гелове, в присъствието на 1 pg/ml етидиенов бромид. RNA се пренася върху нитроцелулозен филтър и се свързва ковалентно, чрез ултравиолетово облъчване, като се използва апарат за структуриране Stratlinker UV (Stratagene, La Jolla, СА). Провеждат се хибридизации, при 42°С, за 18 часа, в 5Х SSC (1Х=150 тМ NaCl, 15 тМ Na цитрат), 1% натриев додецилеулфат, 5Х Dcnhardt-ов разтвор, 50% формамид, 10% декстранов сулфат и 100 pg/ml обработена, денатурирана, съомгова сперма, съдържаща DNA. Приблизително 1-2 х 10^ cpm/ml белязана проба (специфична активност > 10« cpm/pg DNA) се използва за хибридизация. След хибридизацията, филтрите се промиват накрая точно е 0.2 X SSC, при 55°С. Нитроцелулозата се почиства, като се използва вряла вода, преди да се рехибридизира е други проби. Провежда се авторадиография е усилващо сс пресяване, при 7(РС.
Проби: Правят се 32р означени DNA проби, като се използва произволен метод с първи слой от олигонуклетид.
1СЛМ-1 пробата е Eco-Rl фрагмент от човешки cDNA. ELAM1 пробата с 1.85 kb Hind III фрагмент от човешки cDNA. VCAM-1 пробата е Hind Ill-Xho I фрагмент от човешки cDNA, съдържащ нуклеотид 132 до 1814.
Ензимно свързан имуносорбентен анализ (ELISA) : HUVE клетки сс поставят върху плата, с 96 отвора, с тъканна култура, 48 до 72 часа преди анализа. Към всеки отвор се прибавят първични антитела в Ml99 с 5% FBS и се поставят в инкубатор за един час, при 37°С. След това клетките се промиВат и поставят В инкубатор за един час с пероксидазасвързана козя, протиВомиша IgG (BioRad), разредена 1/500 В Ml99 с 5% FBS. След това отворите се промиВат и се забелязва свързване на антитела, чрез добавяне на 100 μΐ от 10 mg/ml 3,3,5,5'-тетраметил-бензидин (Sigma) е 0.003% Н2О2. Реакцията спира при добавяне на 25 μΐ 8Ν сярна киселина. Платата се изследват с EL1SA анализатор (BioRad) при OD 450 пт, след като се получи просветляване на редоВе, наслоени с антитела от Втория етап. Данните показват начините за утрояВане.
Антитела: Моноклоналпо антитяло (MAb) 4В9, разпознаващо Васкуларната, клетъчна, адхезионна молекула (VCAM-1) беше щедро подарено от д-р Jonh Harlan (University of Washington). MAb E9A1F1 разпознаващо ендотслиална, клетъчна, адхезионна молекула (ELAM-1) беше щедро подарено от д-р Swcrlick (Emory University). Хибридоми произвеждащи MAb 84Н10, разпознаващо вътрешноклетъчна, адхезионна молекула I (1СЛМ-1) се отглеждат в нашата лаборатория и антитялото се използва като тъканна, културална супернатанта.
Пример 1 : PDTC блокира индуцирането, оносредстваио от IL-lb, на HUVE клетъчно VCAM-1, но не и ICAM-1 или ELAM-1, mRNA натрупване
За да сс определи дали окислителното състояние на ендотслиалната клетка може да промени основното или индуцирано отделяне на клетъчните, адхезионни, молекулни гени, култивирани, човешки, васкуларни, ендотелиални клетки сс подлагат на индуциращия цитокин IL-lb (10 U/ml) в присъствието или отсъствието на меркаптидирания, метален, хелатообразуваш, антиокислител пиролидинов дитиокарбамат (PDTC 50 μΜ), за около 24 часа. Както е показано на фигура 1, IL-lb самостоятелно (колони 2, 4, 6, 8) предизвиква очакваното бързо и преходно индуциране на VCAM-1 (Панел А), Е-селектин (ELAM-1, Панел В), и ICAM-1 (Панел С) mRNA натрупване, всяко от които има връх на четвъртия час. Все пак, в присъствието на PDTC, IL-lb индуцирането на VCAM-1 mRNA натрупване се подтиска драматично е повече от 90% (Панел А, колони 3, 5, 7, 9). Обратно, въпреки че IL-lb опосредстваната индукция на ELAM-1 сс подтиска слабо на 2-рия и 24-ия час (сравнете колони 2 и 3, 8 и 9, Панел В), PDTC не подтиска индуцирането на 4-ия и 8-ия час (колони 5 и 7, Панел В). IL-lb опосрсдстваното индуциране на ICAM-1 mRNA натрупване не е засегнато (Панел В, колони 3, 5, 7, 9). Наистина, наблюдава се леко усилване на IL-lb индуцирането на ICAM-1 mRNA натрупване (-30%) (сравнете колони 4 и 5, панел В). Еквивалентните количества нитроцелулозно прехвърлена RNA, за всяка колона сс потвърждават от нанасянето на етидиенов бромид и Визуализацията.
Анализ, зависещ от дозата, сс осъществява за да сс определи, дали PDTC подтиска предизвикването на отделянето на гена VCAM-1, чрез IL-lb, по начин зависещ от дозата. Както е показано на фигура 2, PDTC подтиска IL-lb опосрсдстваното индуциране на отделянето на гена VCAM-1 по стръмна крива, зависеща от дозата (фигура 2, панел А), като EC5Q е изчислена приблизително 10 μΜ, докато PDTC не подтиска IL-lb опосрсдстваното индуциране на отделянето на ELAM-1 при тези концентрации (фигура 2, панел В). IL-lb опосрсдстваното индуциране на 1САМ-1 mRNA натрупване се повишава, посредством PDTC, при концентрации по-високи от 0.5 μΜ (фигура 2, сравнете колона 2 и колони 4-7, панел С).
Тези данни показват, че IL-lb има дитиокарбоксилатно и в частност дитиокарбаматно чувствителен етап, като част от неговия сигнален механизъм за индуциране отделянето на гена VCAM-1. Също така, данните показват, че този дитиокарбаматно чувствителен етап не играе съществена роля за IL-lb опосредстваното индуциране на отделянето на ген ELAM-1 или ICAM-1.
Пример 2 : PDTC блокира индуцирането на HUVE клетъчното VCAM-1 mRNA натрупване, чрез множество стимулатори
За да сс определи дали други добре-описани активатори на отделянето на гена VCAM-1 също имат PDTC чувствителен етап се изследват три различни класа активатори: друг класически, рсцспторно-опосредстван, индуциращ агент (туморсп пекрозен фактор, TNFa), не рсцспторно-опосредстван индуциращ агент (липополизахарид, LPS) и наскоро описан нов индуциращ агент (двойно-разклонена RNA, поли(1:С)). И в трите случая, PDTC силно подтиска индуцирането на VCAM-1 mRNA акумулирането в HUVE клетки, след четири часа (фигура 3, панел А). Въпреки, че TNFa опосредстваното отделяне на гена ELAM-1 се подтиска до известна степен(фигура 3, колона 1 и 2, панел В), LPS и поли(ЕС) опосредстваното ELAM-1 mRNA натрупване не е повлияно (фигура 3, колона 3-6, панел В). Индуцирането на ICAM-1 mRNA натрупване не е повлияно (фигура 3, панел С). Тези данни показват, че структурно различни индуциращи агенти, действащи по различни пътища, имат общ регулиращ етап, специфичен за индуцирането на отделянето на гена VCAM-E
Пример 3 : PDTC блокира HUVE клетъчно-повърхностното отделяне на VCAM-1 индуцирано от множество стимулатори
За да се определи дали, подобно на неговата mRNA, индуцирането на ендотелиалното, клетъчно-повърхностно, протеиново отделяне на VCAM-1, може също да бъде подтискано от PDTC, се използват моноклонални антитела в ELISA анализ, за да се определи степента на индуциране на клетъчно-повърхностна VCAM-1 и ICAM-1 В култивирани HUVE клетки. Както е показано на фигура 4, множество видове активиращи агенти, в отсъствието на PDTC (-PDTC), предизвикват бързото и преходно натрупване па VCAM-1 (горен, ляв панел) в клетъчната повърхност, е върхови стойности па шестия час. В присъствието на PDTC ( + PDTC, горен десен панел) индуцирането на клетъчно-повърхностното отделяне на VCAM-1 от всички изследвани агенти се подтиска значително (80-90%). Обратно, индуцирането отделяне на клетъчно-поВърхностсн ICAM-1 не е повлияно при идентични условия (долен ляв и десен панели).
Тези данни показват, че подобно на неговото mRNA натрупване, клетъчно-повърхностното отделяне на VCAM-1 се подтиска селективно от дитиокарбамати и че множество видове активиращи агенти имат подобен, дитиокарбаматночувствитслсн механизъм, за предизвикване отделянето на гена VCAM-1.
При мер 4 : Сравнителна ефективност на антиокислители при блокиране TNFa индуцирането на VCAM-1
За да се определи дали структурно подобни или различни антиокислители могат също да подтискат отделянето на гена VCAM-1, и е каква сила, HUVE клетки се подлагат на TNFa за шест часа, В присъствието или отсъстВието на различни концентрации от четири различни антиокислители. Както е показано на фигура 5, и двата диетилдитиокарбамат (DETC) и N-ацетил цистеин (NAC) подтискат отделянето на VCAM-1 при концентрации от 5 μΜ и 30 μΜ, съответно. Обратно, PDTC (PDTC) е ефективен между 5 и 50 μΜ. Железния, метален хелатор, дефероксимин, не е показал ефект при изследваните концентрации.
ί л
Пример 5 : PDTC подтиска TNF индуцирането на VCAM1/VLA-4 опосредстваната адхезия
Способността на множество антиокислители да подтискат TNFa индуцирането па VCAM-1 в HUVE клетки се оценява по метода описан в пример 4. фигура 6 с графика на относителното VCAM-1 клетъчно-повърхностно отделяне O.D. 595 пМ) в TNFa активирани HUVE клетки ким концентрации на PDTC (натриев N-пиролидин дитиокарбамат), D1DTC (натриев N,N-guemuA-Nкарбодитиоат), SarDTC (натриев N-MemuA-N-карбоксиметилN-карбодитиоат), IDADTC (тринатриев Ν,Νgu(kap6okcuMemuA)-N-kap6ogumuoam), MGDTC (натриев NMcmuA-D-2AykaMUH-N-kap6ogumuoam), MeOBGDTC (натриев N(4-Mcmokcu6eH3UA)-D-2AykaMUH-N-kap6ogumuoam), DEDTC (натриев N,N-guemuA-N-kap6ogumuoam), Di-PDTC (натриев N,N-guu3onponuA-N-kap6ogumuoam) u NAC e (N-ацетил цистсин). Най-малко ефективните съединения са MeOBGDTC и NAC.
Пример 6 : PDTC подтиска TNF индуцирането на VCAM1/VLA-4 опосредстбаната адхезия
За да се определи дали PDTC подтискането на регулирането на VCAM-1 води до функционални последствия, се изследва свързването на Molt-4 клетки към HUVE клетки, нсстимулирано или стимулирано с TNFa (100 U/ml), за шест часа, в присъствието или отсъствието на PDTC. За Molt-4 клетките е показано, че се свързват към активирани HOVE клетки посредством механизъм, зависещ от VCAM-1. Както е показано на фигура 6, процента Molt-4 свързани към HUVE клетки намалява, когато PDTC присъства в средата.
Пример 7 : PDTC подтиска свързването на моноцити към аортата на гръдния кош на зайци, подхранвани с холестерол
Провежда се експеримент, за да се определи дали тиоловия антиокислител PDTC би бил ефикасен за блокиране на първия, характеризиращ се със свързване на моноцити, стадий на атеросклерозата, при експериментално, моделно животно. НоВозеландски бял заек, В зряла Възраст (3.5 кг), получаВа чрез венозно инжектиране PDTC (20 mg/kg, като концентрация от 20 mg/ml В PBS), един път днеВно, В продължение на 5 дни. Инжекциите се осъщестВяВат посрсдстВом вкарана канула в маргиналната ушна вена, която сс поддържа неподвижно, чрез налиВане на хепариниран, физиологичен разтвор. PDTC разтВорът, за да е свеж, се размссва един път днеВно или периодично през определени дни (съхранява се, защитен от сВетлина, при 4°С), и се филтруВа (0.45 тт порест филтър) непосредствено преди използВанс. След първото инжектиране, когато канулата е поставена, лекарстВото се прилага, като заекът е В съзнание и без Видим дискомфорт за него. На Втория ден от инжектирането, на заекът се даВа храна съдържаща 1% холестерол, теглоВен, което продължава до края на експеримента. На петия ден животното се умъртВяВа безболезнено и аортата на гръдния кош сс отрязва и се фиксира. След подходяща подготовка, пробата сс разглежда на долната поставка на ISI DS-130 сканиращ електронен микроскоп, снабден е LaB емитер. Като се използва двойно-екранен образ и прозрачна мрежа Върху CRT екрана, се появяват и оценяват 64 съседни площи, при увеличение 620х, които покриват област о'т приблизително 1.3 тт^. β5β Всяко поле се преброяват и се записва броя на прилепналите левкоцити (WBC) и еритроцити (RBC).
Данните от главната проба са както следва: 5 WBC и -25 RBC на площ от 1.3 тт-. Това ниво на WBC адхезия е подобно на това при контролните животни, които са хранени редовно (забелязани са около 7 броя на площ В главната проба и пробата от гръдния кош при 2 експеримента е отрицателни контроли). Зайци-положитслни контроли хранени е 1% холестсрол В продължение на 4 дни, но без да получават антиокислител, показват около 5-кратно увеличаване на адхезията до 38 WBC/1.3 mm2. при всяка главна проба се забелязват значително количество прилепнали остатъци с големина от порядъка на клетка. Не е ясно дали този материал е предмет на получаване или присъства in vivo, и ако е така дали той е свързан е прилагането на PDTC. Тези изследвания показват, че инфузията на PDTC може ефективно да блокира първоначалната адхезия на моноцити към аортния сндотслиум.
III. фармацевтични състави
Хора и други животни, по-специално бозайници, страдащи от сърдечносъдови заболявания и други възпаления опосредствани от VCAM-1, могат да бъдат лекувани, чрез прилагане спрямо тях на ефективно количество от едно или повече от гореописаните съединения или техни фармацевтично приемливи производни или соли, заедно е фармацевтично приемлив носител или разредител. Активните вещества могат да бъдат прилагани по всеки подходящ начин, например орално, парентерално, венозно, мускулно или подкожно.
Както е използван тук, терминът фармацевтично приемливи соли или комплекси се отнася до соли или комплекси, които запазват желаната биологична активност на гореописаните съединения и проявяват минимални нежелани токсични ефекти. Неограничаващи примери за такива соли са (а) присъединителни с киселина соли получени с неорганични киселини (например солна киселина, бромна киселина, сярна киселина, фосфорна киселина, азотна киселина и др. подобни) и соли получени с органични киселини, такива като оцетна киселина, оксалова киселина, Винена киселина, сукциноВа киселина, ябълчна киселина, аскорбинова киселина, бензоена киселина, танин, памоена киселина, алгиноВа киселина, полиглутаминова киселина, нафталенсулфоноВа киселина, нафталсндисулфоноВа киселина и полигалактуроноВа киселина; (В) присъединителни е основа соли, получени е поливалентни метални катиони, такива като цинк, калций, бисмут, барий, магнезий, алуминий, мед, кобалт, никелт, кадмий, натрий, калий и други подобни или с органичен катион, получен от Ν,Ν-дибснзилетилен-диамин, D-глюкозамин, амоний, тетрастиламоний или етилендиамип; или (с) комбинации от (а) и (В), напр. цинковотанатна сол и др. подобни.
Активното съединение се Включва В фармацевтично приемливия носител или разредител, В достатъчно количество, за да се осигури на лекуВания пациент терапевтично ефективно количестВо, без да му се причиняват сериозни токсични ефекти. Предпочитаната доза, при всички гореспоменати услоВия, е В границата от около 0.5 до 500 mg/kg, за предпочитане е 1 до 100 mg/kg на ден. Ефективната доза от фармацевтично приемливи производни може да бъде изчислена на базата на теглото на основното съединение, което трябва да се приложи. Ако производното, само по себе си, проявява активност, ефективната доза може да се определи, като по-горе, използвайки теглото на производното, или по други начини известни на специалистите В областта.
Съединението може да се прилага във Всякакви подходящи дозировъчии форми, Включително, без това да се счита за ограничение, такава съдържаща 1 до 3000 mg, за предпочитане 5 до 500 mg активен компонент на единична дозировъчна форма. Обикновено е подходяща орална доза от 25-250 mg.
Активният компонент трябва да се прилага, за да се достигнат върхови, плазмени концентрации па активното съединение от около 0.1 до 100 μΜ, за предпочитане около 1-10 μΜ. ТоВа може да се постигне, например посредством венозно инжектиране на разтвор или форма на активния компонент, по желание във физиологичен разтвор или водна среда или посредством прилагане на активния компонент като болус.
Концентрацията на активното съединение в лекарствения еъстаВ зависи от абсорбцията, разпределението, инактивирансто и скоростта на отделяне на лекарството, както и от други фактори известни на специалистите в областта. Трябва да се отбележи, че големините на дозите варират в зависимост от остротата на условията, които трябва да се преодоляват. Освен това, трябва да се разбира, че за всеки отделен случай специфични дозировъчни режими се определят по всяко време в зависимост от конкретната нужда и професионалното решение на човека прилагащ или контролиращ прилагането на съставите и, че указаните по-горе граници на концентрацията са само примерни и нямат за цел да ограничат обхвата или прилагането на композицията за която ее претендира. Активният компонент може да бъде прилаган наведнъж или може да бъде разделен на множество по-малки дози, които да бъдат прилагани през различни интервали от време.
Оралните състави най-общо включват инертен разредител или ядивсп носител. Тс могат да бъдат затворени в желатинови капсули или пресовани в таблетки. За целите на оралното терапевтично приложение, активното съединение може да бъде свързано е инертен пълнител и използвано под формата на таблетки или капсули. Като част от състава могат да бъдат включени фармацевтично съвместими свързващи агенти и/или добавъчни материали.
Таблетките, хапчетата, капсулите и други подобни могат да съдържат всеки от следните компоненти или съединения с подобно естество: свързващо вещество, такова като микрокристална целулоза, смола-трагаканта или желатин; пълнител, такъв като нишесте или лактоза; разпадащ агент, такъв като алгинова киселина, Primogel или царевично нишесте; смазващо вещество, такова като магнезиев стеарат или Sterotcs; плъзгащо вещество, такова като колоиден силициев двуокис; подслаждащ агент, такъв като захароза или захарин; или ароматизиращ агент, такива като мента, метилов салицилат или портокалов ароматизатор. Когато дозировъчната форма е капсула тя може да съдържа, в допълнение към описания по-горе материал, течен носител, такъв като животинско масло. В добавка, дозировъчните форми могат да съдържат различни други материали, които да подобряват физическите им качества, като например обвивка от захар, шеллак или други чревни агенти.
Активното съединение или негова фармацевтичноприемлива сол или производно могат да бъдат прилагани като част от еликсир, суспензия, сироп, вафла, дъвка или други подобни. Сиропът може да съдържа, в допълнение към активните съединения, захароза, като подслаждащ агент и определени консерванти, багрила и оцветители и а ром а ти за тори.
Активното съединение или негови фармацевтично приемливи производни или соли може също да се прилага е други активни вещества, които да не намаляват желаното действие или с вещества, които да допълват желаното действие, такива като антибиотици, фунгициди, противовъзпалителни или противовирусни вещества. Активните съединения могат да бъдат прилагани е понижаващи липидите агенти, такива като пробукол и никотинова киселина; инхибитори, под формата на таблетки, такива като аспирин; противотромбови агенти, такива като коумадин; калциеви, канални блокери, такива като варапамил, дилтиазсм и нифедипин; ангиотензиини, превръщащи, ензимни (АСЕ) инхибитори, такива като каптоприл и еналоприл; и βблокери, такива като пропаналол, тербуталол и лабеталол. Съединенията могат, също, да бъдат прилагани в комбинация с нсстероидни, противовъзпалителни средства, такива като ибупрофен, индометацин, аспирин, фенопрофен, мефенамена киселина, флуфенамена киселина, сулиндак. Съединението може, също така, да бъде прилагано с кортикостероиди.
Разтвори или суспензии използвани за парентерално, мускулно, подкожно или локално приложение могат да включват следните компоненти: стерилен разредител, такъв като вода за инжектиране, физиологичен разтвор, определени масла, полиетилен гликоли, глицерин, пропилен гликол или други синтетични разтворители; противобактериални агенти, такива като бензилов алкохол или метилови парааминобензоени киселини; антиоксиданти, такива като аскорбинова киселина или натриев биеулфит; разтворими органични вещества, които могат да привличат метални йони в структурата си, такива като стилсндиаминтстраоцстна киселина; буфери такива като ацетати, цитрати, или фосфати и Вещества за регулиране на тонуса, такива като натриеВ хлорид или декстроза. При първоначалното получаване средството може да бъде затворено в ампули, налични спринцовки или многодозови флакони направени от стъкло или пластмаса.
Ако прилагането е венозно, предпочитани носители са физиологичен разтвор или фосфатно-буфериран физиологичен разтвор (PBS).
Активното съединение може, също така, да бъде прилагано на определено място през кожата. Методите за определяне на тези места са известни на специалистите в областта. Например, виж Brown, L., и R., Langer, Transdermal Delivery of Drugs, Ann. Rev. Med., 39:221-229 (1988).
В друг случай, активните съединения се приготвят е носители, които да защитават съединението от бързото му освобождаване от тялото, такива като формулировки е контролирано освобождаване, включително имплантанти и микрокапсуловани лекарствени системи. Могат да бъдат използвани биоразграждащи, биосъвместими полимери, такива като стиленвинилов ацетат, полианхидриди, полигликолоВа киселина, колаген, полиортоестери и полилактонова киселина. Методите за приготвяне на такива’ състави са ясни на специалистите в областта. Материалите могат, също така, да бъдат получени от Alza Corporation и Nova Pharmaceuticals, 1 пс.
Аипозомнитс суспензии могат, също, да бъдат фармацевтично приемливи носители. Те могат да бъдат получени по методи известни на специалистите в областта. Например виж US No. 4 522 811. Например, липозомнитс състави могат да бъдат получени, посредством разтваряне на подходящ(и) липид(и) (такива като стеароилов фосфатидилов етаноламин, стеароилов фосфатидилов холин, арахадоилов фосфатидилов холин и холестерол) в неорганичен разтворител, който впоследствие се изпарява, оставяйки тънък филм от сух липид върху повърхността на контейнера. След това в контейнера се вкарват воден разтвор на активното съединение или негови монофосфатни, дифосфатни и/или трифосфатни производни. След това контейнера се завърта на ръка, за да се отдели липидния материал от стените на контейнера и да диспергират липидните частици, като така се образува липозомната суспензия.
Модификациите и вариантите на настоящето изобретение са ясни на специалистите в областта от горното подробно описание на изобретението. Тези модификации и варианти са включени в обхвата на приложените претенции.

Claims (17)

  1. ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ
    1. Метод за лечение на сърдечносъдово заболяване при хора, характеризиращ се с това, че включва прилагане на ефективно количество нетоксичен дитиокарбамат, избран от групата съдържаща:
    R1SC(S)NR2r3 и r2r3N(S)CS-SC(S)NR2r3 където R1 е водород, натрий, калий или NR4r5r6r7; където R^, R$, r6 и R? са независимо един от друг водород; Cj_6 линеен, разклонен или цикличен алкил,хидрокси(С]_б)алкил или арил;и
    R2 и R3 са независимо един от друг Cj.iq линеен, разклонен или цикличен алкил; -(CHOH)n(CH2)nGH, където п е 0-6; -(CH2)nCO2Rl; -(CH2)nCO2R4; хидрокси(С1_б)алкил-, или R2 и R3 заедно образуват мост, такъв като -(СН2)т_> където т е 3-6 и където R4 е алкил, арил, алкиларил или аралкил, включително ацетил, пропионил и бутирил.
  2. 2. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че дитиокарбаматът е избран от групата, съдържаща натриев пиролидин-М-карбодитиоат, натриев N-MemuA-Nkap6okcuMemuA-N-kap6ogumuoam, тринатриев Ν,Νди(карбоксиметил)-Т4-карбодитиоат, натриев N-MemuA-Dглукамин-М-карбодитиоат, натриев ' N,N-guemuA-Nкарбодитиоат (натриев диетилдитиокарбамат), и натриев N,N-guu3onponuA-N-kap6ogumuoam.
  3. 3. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се е това. че дитиокарбаматът е натриев пиролидин-Nкарбодитиоат.
  4. 4. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се е това, че сърдечносъдовото заболяване е атеросклероза.
  5. 5. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се е тоВа. че сърдечносъдовото заболяване е след-ангиопластичпа рестеноза.
  6. 6. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се с тоВа. чс сърдечносъдовото заболяване е коронарно артериално заболяване.
  7. 7. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ сс с това, че сърдечносъдовото заболяване е ангина.
  8. 8. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че сърдечносъдовото заболяване е заболяване на малки съдове.
  9. 9. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че дитиокарбаматът сс прилага в доза между 0.5 и 500 mg/kg телесно тегло.
  10. 10. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се е това. че дитиокарбаматът се прилага посредством Впръскващ, балонен катетър.
  11. 11. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се е това, че дитиокарбаматът се прилага в комбинация с фармацевтичен агент избран от групата, съдържаща понижаващ липидите агент, инхибитор, под формата на таблетка, противотромбов агент, калциев, канален блокер, ангиотснзинен, превръщащ, ензимен (АСЕ) инхибитор, βблокер, нсстероидно, противовъзпалително средство и кортикостероид.
  12. 12. Метод за подтискане отделянето на VCAM-1 в човешки клетки, характеризиращ сс е това, чс включва прилагане на ефективно количество нетоксичен дитиокарбамат, избран от групата съдържаща:
    R1SC(S)NR2r3 и r2r3N(S)CS-SC(S)NR2r3 където Ri е водород, натрий, калий или NR4r3r6r75 където r4? r5? r6 u r7 ca независимо един от друг водород; С1_б линеен, разклонен или цикличен алкил,хидрокси(С1_б)алкил или арил; и
    R2 и R3 са независимо един от друг Cj-iO линеен, разклонен или цикличен алкил; -(CHOH)n(CH2)nGH> където η е 0-6; -(CH2)nCO2Rl; -(CH2)nCO2R4; хидрокси(С1_б)алкил-, или R2 и R3 заедно образуват мост, такъв като -(СН2)щ-, където т е 3-6 и където R4 е алкил, арил, алкиларил или аралкил, включително ацетил, пропионил и бутирил.
  13. 13. Метод, съгласно претенция 12, характеризиращ се е това, че дитиокарбаматът е избран от групата, съдържаща натриев пиролидин-1Ч-карбодитиоат, натриев N-MemuA-Nkap6okcuMemuA-N-kap6ogumuoam, тринатриев Ν,Νgu(kap6okcuMemuA)-N-kap6ogumuoam, натриев N-MemuA-D2AykaMUH-N-kap6ogumuoam, натриев N,N-guemuA-Nкарбодитиоат (натриев диетилдитиокарбамат), и натриев N,N-guu3onponuA-N-kap6ogumuoam.
  14. 14. Метод, съгласно претенция 12, характеризиращ се е това. че дитиокарбаматът е натриев пиролидин-Nкарбодитиоат.
  15. 15. фармацевтичен състав, за лечение на сърдечносъдово заболяване, характеризиращ се с това, че' включва ефективно количество от нетоксичен дитиокарбамат, избран от групата съдържаща:
    R1SC(S)NR2r3 и r2r3N(S)CS-SC(S)NR2r3 където R1 е водород, натрий, калий или NR4r5r6r7? където R4, r5? r6 u r7 са независимо един от друг водород;
    C]_fj линеен, разклонен или цикличен алкил,хидрокси(С] _в)алкил или арил; и
    R2 u R3 са независимо един om друг C]_iq линеен, разклонен или цикличен алкил; -(СНОН)п(СН2)пОН> където η е 0-6; -(CH2)nCO2Rl; -(CH2)nCO2R4; хидрокси(С|_б)алкил-, или R2 и R3 заедно образуват мост, такъв като -(СН2)т_> където т с 3-6 и където R4 е алкил, арил, алкиларил или аралкил, включително ацетил, пропионил и бутирил;
    във фармацевтично приемлив носител или разредител.
  16. 16. Състав, съгласно претенция 15, характеризиращ се е това, че дитиокарбаматът е избран от групата, съдържаща натриев пиролидин-ТЧ-карбодитиоат, натриев N-Memux-Nkap6okcuMcmuA-N-kap6ogumuoam, тринатрисВ Ν,Νgu(kap6okcuMemuA)-N-kap6ogumuoam, натриев N-MemuA-Dглукамин-1Ч-карбодитиоат, натриев N,N-guemuA-Nкарбодитиоат (натриев диетилдитиокарбамат), и натриев N,N-guu3onponuA-N-kap6ogumuoam.
  17. 17. Метод, съгласно претенция 15, характеризиращ се е това. че дитиокарбаматът е натриев пиролидин-Nкарбодитиоат.
BG99604A 1992-10-30 1995-04-28 Дитиокарбамати за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания BG62682B1 (bg)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/969,934 US5380747A (en) 1992-10-30 1992-10-30 Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
PCT/US1993/010496 WO1994009772A1 (en) 1992-10-30 1993-11-01 Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG99604A true BG99604A (bg) 1996-02-28
BG62682B1 BG62682B1 (bg) 2000-05-31

Family

ID=25516198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG99604A BG62682B1 (bg) 1992-10-30 1995-04-28 Дитиокарбамати за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания

Country Status (19)

Country Link
US (2) US5380747A (bg)
EP (1) EP0666741B1 (bg)
JP (1) JP3254486B2 (bg)
AT (1) ATE183089T1 (bg)
AU (1) AU692426B2 (bg)
BG (1) BG62682B1 (bg)
BR (1) BR9307337A (bg)
CA (1) CA2147881C (bg)
CZ (1) CZ111595A3 (bg)
DE (1) DE69326014T2 (bg)
DK (1) DK0666741T3 (bg)
ES (1) ES2136186T3 (bg)
GR (1) GR3031368T3 (bg)
HU (1) HUT73440A (bg)
NO (1) NO951616L (bg)
NZ (1) NZ258683A (bg)
PL (1) PL179113B1 (bg)
SK (1) SK56095A3 (bg)
WO (1) WO1994009772A1 (bg)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5821260A (en) * 1992-10-30 1998-10-13 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5739115A (en) * 1993-10-07 1998-04-14 Glycomed Incorporated Sulfated maltooligosaccharides with heparin-like properties
US5677291A (en) * 1993-12-10 1997-10-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Method of lowering serum cholesterol levels with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols
WO1996017058A1 (fr) * 1994-11-30 1996-06-06 Nippon Chemiphar Co., Ltd. Recepteur de lipoproteine basse densite denature
US20020040008A1 (en) * 1995-01-24 2002-04-04 Wagner Denisa D. Method for treating and preventing atherosclerosis
US5741815A (en) * 1995-06-02 1998-04-21 Lai; Ching-San Methods for in vivo reduction of nitric oxide levels and compositions useful therefor
US6469057B1 (en) * 1995-06-02 2002-10-22 Mcw Research Foundation, Inc. Methods for in vivo reduction of free radical levels and compositions useful therefor
US5792787A (en) * 1995-06-07 1998-08-11 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5747528A (en) * 1996-02-21 1998-05-05 Warner-Lambert Company Chroman derivatives as anti-oxidants
EP0910384A1 (en) * 1996-04-30 1999-04-28 Hoechst Marion Roussel, Inc. Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols
US5608095A (en) * 1996-04-30 1997-03-04 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silyl-phenols and esters thereof as antiatherosclerotic agents
US5795876A (en) * 1996-04-30 1998-08-18 Hoechst Marion Rousssel, Inc. Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2, 6-di-alkyl-4-silyl-phenols
US5782740A (en) * 1996-08-29 1998-07-21 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation dose delivery catheter with reinforcing mandrel
US5922761A (en) * 1996-09-06 1999-07-13 Medinox, Inc. Methods for in vivo reduction of iron levels and compositions useful therefor
JP2000500879A (ja) * 1996-09-20 2000-01-25 アセロジエニクス・インコーポレイテツド 炎症性疾患の診断及びメディエータ
US6114572A (en) * 1996-11-20 2000-09-05 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
IL132797A0 (en) 1997-05-14 2001-03-19 Atherogenics Inc Compounds and methods for the inhibition of the expression of vcam-1
US6670398B2 (en) * 1997-05-14 2003-12-30 Atherogenics, Inc. Compounds and methods for treating transplant rejection
US6210312B1 (en) 1997-05-20 2001-04-03 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Catheter and guide wire assembly for delivery of a radiation source
US6121463A (en) * 1997-06-24 2000-09-19 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silylheterocyclic phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6133467A (en) * 1997-06-25 2000-10-17 Hoechst Marion Roussel, Inc. 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-4-methoxyphenylsilyl)-methyl-oxy]phenol and 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-2-methoxy-phenylsilyl)methyloxy]phenol
KR20010020611A (ko) * 1997-07-01 2001-03-15 아테로제닉스, 인코포레이티드 항산화제에 의한 과증식질병 치료의 향상
WO1999040907A1 (en) * 1998-02-13 1999-08-19 Medinox, Inc. Methods for the controlled delivery of carbon disulfide for the treatment of inflammatory conditions
US6224535B1 (en) 1998-02-17 2001-05-01 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation centering catheters
US6596770B2 (en) 2000-05-05 2003-07-22 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US20030181495A1 (en) * 1998-06-23 2003-09-25 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US6093743A (en) 1998-06-23 2000-07-25 Medinox Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
AU4722099A (en) * 1998-06-26 2000-01-17 University Of Washington Inhibition of NF-kappaB mediated tissue injury using dithiocarbamate derivatives
WO2000009118A1 (en) * 1998-08-13 2000-02-24 The Wistar Institute Methods for reducing atherosclerotic plaques
US6589987B2 (en) 1998-09-08 2003-07-08 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using tetraethyl thiuram disulfide
US7816403B2 (en) * 1998-09-08 2010-10-19 University Of Utah Research Foundation Method of inhibiting ATF/CREB and cancer cell growth and pharmaceutical compositions for same
US6548540B2 (en) 1998-09-08 2003-04-15 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6706759B1 (en) * 1998-09-08 2004-03-16 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6887712B1 (en) 1998-11-09 2005-05-03 Atherogenics, Inc. Methods and compositions to lower plasma cholesterol levels
US6372187B1 (en) 1998-12-07 2002-04-16 Mcdermott Technology, Inc. Alkaline sorbent injection for mercury control
US6855859B2 (en) * 1999-03-31 2005-02-15 The Babcock & Wilcox Company Method for controlling elemental mercury emissions
US6284199B1 (en) * 1999-03-31 2001-09-04 Mcdermott Technology, Inc. Apparatus for control of mercury
US6734192B1 (en) * 1999-08-23 2004-05-11 Mp-1 Inc. Treatment of viral infections
US6582417B1 (en) 1999-09-22 2003-06-24 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Methods and apparatuses for radiation treatment
US6605031B1 (en) 1999-09-22 2003-08-12 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Stepped centering balloon for optimal radiation delivery
KR20100075503A (ko) 1999-10-01 2010-07-02 디엠아이 바이오사이언시스, 인크 금속 결합 화합물 및 그의 용도
US7592304B2 (en) 1999-10-01 2009-09-22 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US20030130185A1 (en) * 2000-09-29 2003-07-10 David Bar-Or Metal-binding compounds and uses therefor
US20030158111A1 (en) * 1999-10-01 2003-08-21 David Bar-Or Methods and products for oral care
US7632803B2 (en) * 1999-10-01 2009-12-15 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US6274627B1 (en) 1999-10-12 2001-08-14 Medinox, Inc. Conjugates of dithiocarbamate disulfides with pharmacologically active agents and uses therefor
AU2001232787A1 (en) * 2000-01-14 2001-07-24 University Of Virginia Patent Foundation Airway alkalinization as therapy for airway diseases
US7994449B2 (en) 2000-02-16 2011-08-09 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Square-wave laser bonding
US7163504B1 (en) 2000-02-16 2007-01-16 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Multi-lumen fluted balloon radiation centering catheter
US6710086B1 (en) 2000-02-25 2004-03-23 Medinox, Inc. Protected forms of pharmacologically active agents and uses therefor
EP1282445A2 (en) 2000-03-21 2003-02-12 Atherogenics, Inc. N-substituted dithiocarbamates for the treatment of biological disorders
WO2002040021A2 (en) 2000-11-17 2002-05-23 Idenix (Cayman) Limited Methods for inhibiting the transmission of hiv using topically applied substituted 6-benzyl-4-oxopyrimidines
US7481790B2 (en) * 2000-12-27 2009-01-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Vessel enlargement by arteriogenic factor delivery
US20020168396A1 (en) * 2001-02-22 2002-11-14 Ramanan Ramaswami Vasodilator impregnated devices and methods
EP1471931A4 (en) * 2001-08-24 2006-06-14 Maine Medical Ct Res Inst NON-TRADITIONAL EXPORT OF COPPER-DEPENDENT PRO-INFLAMMATORY CYTOKINES AND METHODS, COMPOSITIONS, AND KITS THEREOF
AU2002352726A1 (en) 2001-11-15 2003-06-10 Galileo Laboratories, Inc. Formulations and methods for treatment or amelioration of inflammatory conditions
IL162533A0 (en) * 2001-12-19 2005-11-20 Atherogenics Inc Chalcone derivatives and their use to treat diseases
ES2572145T3 (es) * 2002-07-22 2016-05-30 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Inhibición de la angiogénesis mediante alcaloides de cefalotoxina, derivados, composiciones y usos de los mismos
DE10252772A1 (de) * 2002-11-13 2004-05-27 Beiersdorf Ag Verwendung von einem oder mehreren Diethyldithiocarbamaten zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Zubereitungen zur Prophylaxe und Behandlung von entzündlichen Hautzuständen und/oder zum Hautschutz bei empfindlich determinierter und trockener Haut
US20040181075A1 (en) * 2002-12-19 2004-09-16 Weingarten M. David Process of making chalcone derivatives
AU2004204824B2 (en) * 2003-01-13 2010-12-23 Salutria Pharmaceuticals Llc Process of preparing esters and ethers of probucol and derivatives thereof
US7173129B2 (en) * 2003-06-06 2007-02-06 Athero Genics, Inc. Sulfonamide-substituted chalcone derivatives and their use to treat diseases
US20060025481A1 (en) * 2004-02-09 2006-02-02 Strange Matthew L Process for preparation of probucol derivatives and polymorphic forms thereof
US7294736B2 (en) * 2004-04-09 2007-11-13 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
WO2006004903A2 (en) * 2004-06-28 2006-01-12 Atherogenics, Inc. 1,2-bis-(substituted-phenyl)-2-propen-1-ones and pharmaceutical compositions thereof
US7345191B2 (en) * 2005-02-26 2008-03-18 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
BRPI0809423A2 (pt) * 2007-03-26 2014-09-09 Salutria Pharmaceuticals Llc Usos e composições de derivados de probucol para o tratamento de diabetes
WO2008118946A1 (en) * 2007-03-27 2008-10-02 Atherogenics, Inc. Methods and compositions using certain phenolic derivatives for the treatment of diabetes
CA2684219C (en) * 2007-04-13 2017-05-23 Chemgenex Pharmaceuticals, Inc. Oral cephalotaxine dosage forms
US8455552B2 (en) * 2007-05-03 2013-06-04 Ramot et Tel Aviv University Ltd. Composition comprising S-allylmercapto-N-acetylcysteine (ASSNAC) for up-regulation of cellular glutathione level
CA2692457A1 (en) * 2007-07-03 2009-01-08 Joslin Diabetes Center, Inc. Treatment of cardiovascular disease with salicylates

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3875170A (en) * 1971-05-25 1975-04-01 Banyu Pharma Co Ltd Pyridine bis (dithiocarbamate) derivatives
US4025527A (en) * 1973-07-13 1977-05-24 Smith Kline & French Laboratories Limited Certain thiazoles and oxazoles
GB1542840A (en) * 1975-02-03 1979-03-28 Smith Kline French Lab Heterocyclic dithiocarbamates and isothioureas
US4670471A (en) * 1981-11-03 1987-06-02 Clark Lealand L Treatment for inflammatory skin disease
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
GB8421039D0 (en) * 1984-08-17 1984-09-19 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
US4980286A (en) * 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
ATE68013T1 (de) * 1985-07-05 1991-10-15 Whitehead Biomedical Inst Expression von fremdem genetischem material in epithelzellen.
EP0284879A3 (en) * 1987-03-17 1990-10-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US4870101A (en) * 1987-03-17 1989-09-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US5035878A (en) * 1988-09-12 1991-07-30 University Of Rochester Use of dithiocarbamates to counteract myelosuppression
US5166133A (en) * 1991-04-17 1992-11-24 Cetus Corporation Method for inhibing adhesion of white blood cells to endothelial cells
WO1993001286A2 (en) * 1991-06-28 1993-01-21 Massachusetts Institute Of Technology Localized oligonucleotide therapy
FR2679452B1 (fr) * 1991-07-22 1993-11-12 Cis Bio International Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation.
US5206264A (en) * 1991-11-04 1993-04-27 Cypros Pharmaceutical Corporation Use of disulfiram to prevent cardiovascular damage
US5306724A (en) * 1992-08-17 1994-04-26 Clintec Nutrition Company Method for preventing and treating atherosclerosis
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Also Published As

Publication number Publication date
NZ258683A (en) 1999-08-30
BR9307337A (pt) 1999-05-25
EP0666741B1 (en) 1999-08-11
NO951616D0 (no) 1995-04-27
CA2147881A1 (en) 1994-05-11
ES2136186T3 (es) 1999-11-16
ATE183089T1 (de) 1999-08-15
JP3254486B2 (ja) 2002-02-04
NO951616L (no) 1995-04-27
SK56095A3 (en) 1996-06-05
DE69326014D1 (de) 1999-09-16
JPH08506798A (ja) 1996-07-23
WO1994009772A1 (en) 1994-05-11
CA2147881C (en) 1999-09-07
US5877203A (en) 1999-03-02
EP0666741A1 (en) 1995-08-16
AU5665394A (en) 1994-05-24
PL179113B1 (pl) 2000-07-31
GR3031368T3 (en) 2000-01-31
PL308673A1 (en) 1995-08-21
HUT73440A (en) 1996-07-29
HU9501229D0 (en) 1995-06-28
AU692426B2 (en) 1998-06-11
DE69326014T2 (de) 1999-12-23
CZ111595A3 (cs) 1998-07-15
US5380747A (en) 1995-01-10
DK0666741T3 (da) 1999-12-06
BG62682B1 (bg) 2000-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG99604A (bg) Дитиокарбамати за лечение на атеросклероза и други сърдечносъдови и възпалителни заболявания
US5807884A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5792787A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5783596A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
CZ301313B6 (cs) Lécivo pro lécení zánetlivého onemocnení
MXPA01004683A (es) Metodos y composiciones para disminuir los niveles de colesterol en el plasma.
US20120121554A1 (en) Hmg-coa secondary metabolites and uses thereof
AU2586095A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
AU3795199A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
CN115429804A (zh) Ikzf1、ikzf3和btk多靶点调节剂的应用
MXPA99010404A (en) Monoesters of probucol for the treatment of cardiovascular and inflammatory disease