HUT73440A - Use of dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases and pharmaceutical compositions containing said compounds - Google Patents

Use of dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases and pharmaceutical compositions containing said compounds Download PDF

Info

Publication number
HUT73440A
HUT73440A HU9501229A HU9501229A HUT73440A HU T73440 A HUT73440 A HU T73440A HU 9501229 A HU9501229 A HU 9501229A HU 9501229 A HU9501229 A HU 9501229A HU T73440 A HUT73440 A HU T73440A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
sodium
carbodithioate
alkyl
dithiocarbamate
treatment
Prior art date
Application number
HU9501229A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9501229D0 (en
Inventor
R Wayne Alexander
Russel M Medford
Margaret K Offermann
Original Assignee
Univ Emory
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Emory filed Critical Univ Emory
Publication of HU9501229D0 publication Critical patent/HU9501229D0/hu
Publication of HUT73440A publication Critical patent/HUT73440A/hu

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/325—Carbamic acids; Thiocarbamic acids; Anhydrides or salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/7056—Selectin superfamily, e.g. LAM-1, GlyCAM, ELAM-1, PADGEM
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

A találmány ditio-karbamátok alkamazására vonatkozik ateroszklerózis és más kardiovaszkuláris és gyulladásos betegségek kezelésénél, valamint vonatkozik ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítményekre és ezek előállítására is.
A leukociták endotéliumhoz való adhéziója egy alapvető és korai jelenség a különböző gyulladásos betegségek esetén, beleértve az ateroszklerózist, az autoimmun elváltozásokat és bakteriális, valamint vírus fertőzéseket. Ezt a folyamatot részben az endoteliális sejtfelületi adhéziós molekulák, így például az ICAM-1 (intracellular adhesion molecule-1), a VCAM-1 (vascular adhesion molecule-1), és az ELAM-1 (endothelial leukocyte adhesion molecule-1) indukált expressziója közvetíti. Ezek az adhéziós molekulák az immunsejtekhez kötődnek, ami megindítja és tovább viszi a gyulladásos választ. Az egyik ilyen adhéziós molekula a VCAM-1 különösen jelentős szerepet játszik a monociták megkötésénél. Több jel indukálja a sejtfelületi adhéziós molekulák expresszi óját.
Az ateroszklerózis az artériás intima krónikus gyulladásos betegsége, amelyre a leukociták, simaizomsejtek, lipidek és extracelluláris mátrix gócos akkumulációja jellemző. Az ateroszklerótikus vérlemezkék patogenézisénél egy alapvető jellemző és egyike a legkorábban kimutatható jeleknek a mononukleáris leukociták adhéziója az artériás endotélium diszkrét szegmenseihez egy VCAM-proteinen keresztül a vaszkuláris endoteliális sejtek felületén. Az endoteliális sejtek kötődése után a mononukleáris leukociták lipidtartalmú makrofágokká alakulnak vagy “habsejeteket” alkotnak. Az ateroszklerózis az érfalakon belül nagymértékű gócos sérülések
-3formájában alakul ki, általában ott, ahol a véráram normális laminális áramlása meg van zavarva, így például a véredény átfolyás elválasztóknál. Ezeket az “alacsony nyírófeszültségű” területeket az oxidative módosított kis sűrűségű lipoproteinek ox-LDL) abnormális helyi akkumulációja jellemzi.
Említették már, hogy az ateroszklerózis patogenézisének korai jelenségeit egy kis sűrűségű liporpotein közvetíti, amely reakcióképes oxigén révén egy ox-LDL formává alakult át (Steinberg és mtársai, Beyond cholesterol: Modifícations of lowdensity lipoprotein that increase its atherogenicity, N. Engl. J. Med. 320: 915-924 (1989); Parthasarathy és mtársai, Probucol inhibits oxidative modifícation of low density lipoprotein, J. Clin. Invest. 11(2): 641-4 (1986)). Nem teljesen tiszta, hogy az LDL milyen mechanizmus révén oxidálódik akár intracellulárisan, akár extracellulárisan.
A kardiovaszkuláris betegségek és különösen az ateroszklerózis jelenlegi terápiáinál nem a betegség okát kezelik, hanem a betegség szimptómáit vagy a betegséggel kapcsolatos alacsonyabb rizikó faktorokat.Az ilyen tünetek kezelésére előírt gyógyszerek közé tartoznak a lipidcsökkentő szerek, így például a probukol és a nikotinsav, az aszpirin (ez gátolja a vérlemezkék összetapadását), antitrombotikus szerek, így például a coumadin, a kalciumcsatorna blokkolók, így például a varapamil, diltiazem és nifedipin, angiotenzin konvertáló enzim (ACE) inhibitorok, így például a captopril és enalopril, β-blokkolók, így például a propanalol, terbutanol és labetalol. Mivel ezek a terápiás szerek nem szelektívek, ezek számos különböző szervre egyaránt hatnak és szignifikáns mellékhatá-4saik is vannak. Jelenleg nem ismert olyan hatóanyag, amely a monocitáknak a sejtfelületi adhéziós molekulákhoz, így például a VCAM-l-hez való kötődését gátolnák.
Tekintve, hogy a kardiovaszkuláris betegségek jelenleg a vezető okok közé tartoznak a halálozásban az Egyesült Államokban és a kardiovaszkuláris betegségek 90%-át ateroszklerózisként diagnosztizálják, igen nagy szükség van új kezelési módozatokra és gyógyszerekre ezek kezeléséhez.
A ditiokarbamátok átmenetifém-kelátorok, amelyeket klinikailag alkalmaznak a nehézfémek detoxikálásában (Baseli, R.C., és mtársai, Comparisons of antidotal efficacy of sodium diethyldithiocarbamate, D-penicillamine and triethylenetetramine upon acute toxicity of nickel carbonyl in rats, Rés. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 18(4): 677-88 (1977); Menne, T., and K. Kaaber, Treatment of pompholyx due to nickel allergy with chelnting agents, Contact Dermatitis 4(5): 289-90 (1978); Sunderman, F.W., Clinical response to therapeutic agents in poisoning from mercury vapor, Ann. Clin. Láb. Sci. 8(4): 259-69 (1978); Sunderman, F.W., Efficacy of sodium diethyldithiocarbamate (dithiocarb) in acute nickel carbonyl poisoning, Ann. Clin. Láb. Sci. 9(1): 1-10 (1919); Gale, G.R., és mtársai, Diethyldithiocarbamate in treatment of acute cadmium poisoning, Ann. Clin. Láb. Sci. 11(6): 476-83 (1981); Jones, M.M., és M.G. Cherian, The search fór chelate antagonists fór chronic cadmium intoxication, Toxicolgy 62(1): 1-25 (1990); Jones, S.G., és mtársai, A comparison of diethyldithiocarbamate and EDTA as antidotes fór acute cadmium intoxication, Rés. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 38(2): 211-8 (1982); Pages,
-5A. és mtársai, Dithiocarbamates in heavy metál poisoning: complexes of N,N-di(l-hydroxyethyl)dithiocarbamate with Zn(II), Cd(H), Hg(II), C H3 Hg(II), and 35 C6Ii5Ii9 (Π), J. Inorg. Biochem. 25 (1) : 35-4Z (1985); Tandon, S.K., és mtársai, The lead-chelating effects of substituted dithiocarbamates, Biomed. Environ. Sci. 3(3): 299-305 (1990)).
A ditio-karbamátokat ugyancsak használják a cisz-platina kemoterápiás kezelésekkel együttesen a vese toxicitás megakadályozására (Hacker, M.P. és mtársai, “Effect of disulfíram (tetraethylthiuram disulfíde) and diethylditiocarbamate on the bladder toxicity and antitumor activity of cyclophosphamide in mice, Cancer Rés. 42(11): 4490-4499 (1982); Bodenner, “Selected protection against cisdiamminedichloroplatinum (Π) - induced toxicity in kideny, gut, and boné marrow by diethyldithiocarbamate”, Canc. Rés. 46: 2751-2755 (1986)). Az átmeneti fémek kelát formában való megkötésének az lehet a hatása, hogy intracellulárisan blokkolják a hidroxil-gyök képződést a Haber-Weiss-Fenton reakció révén.
(Sárán, M. és mtársai, Radical reactions in vivő - an overview”, Radiat. Environ. Biophys. 29(4) 249-62 (1990)).
Jelenleg egy dito-karbamátot használnak az alkoholfüggőség kezelésére, ez a disulfuram, ami egy dietil-ditio-karbonát dimer. A disulfuram gátolja a máj aldehid-dehidrogenázt (Inoue, K. és mtársai, “Effect of disulfuram and its reduced metabolite, diethyldithiocarbamate on aldehyde dehydrogenase of humán erythrocytes”, Life Sci. 30(5): 419-24 (1982)).
Leírták azt is, hogy a ditio-karbamátok gátolják a HÍV vírus replikációt és ugyancsak fokozzák specifikus T sejt • · · · • ·
-6alpopulációk érlelődését. Ez vezetett oda, hogy a dietil-dito-karbamátot klinikai vizsgálatoknál alkalmazzák AIDS betegeknél (Reisinger, E. és mtársai, “Inhibition of HÍV progression by dithiocarb” Láncét 335: 679 (1990)).
A fentiek alapján a találmányunk ateroszklezózis és más kardiovaszkuláris és gyulladásos begeteségek kezelésére vonatkozik.
Vonatkozik továbbá a találmány az ateroszklerózis és kardiovaszkuláris és gyulladásos betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítményekre is.
Vonatkozik továbbá a találmány készítményekre és eljárásra, amelyek blokkolják a sejtek azon képességét, hogy olyan géntermékeket expreszszáljanak, amelyek felelősek a leukocitáknak a sejtekhez való tapadásához, valamint a sejtek aktiválásáért.
Felismertük, hogy a ditio-karboxilátok és különösen a ditio-karbamátok blokkolják az endoteliális sejtfelületi adhéziós molekula, a VCAM-1 indukált expresszióját és ily módon alkalmazhatók ateroszklerózis, érplasztika utáni resztenózis, koronáriás, ártériás betegségek, angina és más kardiovaszkuláris betegségek, valamint nem-kardiovaszkuláris gyulladásos betegségek kezelésére, amelyket a VCAM-1 közvetít.
Igen fontos, hogy bizonyos ditio-karbamátok, így például a nátrium-pirrolidin-N-ditio-karbamát (PDTC) szignifínkáns mértékben nem blokkolja az egyéb endoteliális sejtfelületi adhéziós molekulák, így például az ICAM-1 vagy ELAM-1 indukált expresszióját és ily módon nem befolyásolja ellentétesen azokat a gyulladásos válaszokat, amelyeket a VCAM-1 nem
-7 közvetít. Felismertük továbbá azt is, hogy a PDTC jelentős mértékben toxikus a vaszkuláris simaizomsejtek szaporodására vagy abnormális osztódására. Egy másik ditio-karbamát a nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát ugyancsak gátolja a VCAM-1 expresszióját anélkül, hogy szignifikáns hatással lenne az ICÁM-1-re, de nem fejt ki kiemelt toxicitást a vaszkuláris simaizomsejtek abnormális osztódására. Egyéb aktív ditio-karbamátok azon képességét, hogy szelektíven gátolják a VCAM-1 expresszióját (anélkül, hogy gátolnák az ELAM-1 vagy ICAM-1 expresszióját), valamint azt, hogy kiemelten toxikusak az abnormálisán osztódó simaizomsejtekre, a következőkben leírt módszerekkel vizsgáltuk.
A találmány szerinti, az ateroszklerózis és más kardiovaszkuláris és gyulladásos betegségek kezelésére alkalmazható ditio-karbamátokat a korlátozás szándéka nélkül a következő képletekkel írjuk le:
R’SCÍSjNR2^ vagy R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 a képletekben
R1 jelentése hidrogénatom vagy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen nátrium vagy kálium, vagy NR4R5R6R7 általános képletű csoport, amely képletben
R4, R5, R6 és R7 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos, lineáris, egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport, ahol egy vagy több hidroxilcsoport kapcsolódhat bármelyik szénatomhoz, vagy arilcsoport, és • ·
-8R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül 1-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport -(CHOH)n(CH2)nOH csoport, ahol n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5 vagy 6, -(CH2)nCO2R1 vagy -(CH2)nCO2R4 általános képletű csoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport vagy R2 és R együttesen egy hidat képeznek, amely lehet egy -(CH2)m általános képletű csoport, ahol m értéke 3-6, és R4 jelentése alkil-, aril-, alkaril- vagy aralkil-csoport, előnyösen acetil-, propionil-, vagy butiril-csoport.
Az említett aktív ditio-karboxilátokat és különösen a ditio-karbamátokat alkalmazhatjuk akut és krónikus, a VCAM-1 által közvetített gyulladásos betegségek kezelésére, ezek a korlátozás szándéka nélkül lehetnek rheumatikus és oszteoartritisz eredetűek, lehet továbbá asztma vagy dermatitisz, továbbá alkalmazhatók sclerosis multiplex kezelésénél is.
A vegyületek egyaránt alkalmazhatók a kardiovaszkuláris betegségek primer vagy kapcsolt kezelésére. Kapcsolt kezelés esetén olyan szerekkel alkalmazhatók kombinációban például, amelyeket a betegségek rizikójának csökkentésével alkalmaznak az LDL és szérum koleszterinszint csökkentésére. A találmány szerinti alkalmazásnak a kardiovaszkuláris betegségek kezelésénél az a különleges előnye, hogy az túlmegy a jelenlegi terápiákon, amelyeket egyszerűen a betegség progressziójának gáltására alkalmaznak és lehetővé teszi a megfelelő alkalmazással, hogy orvosilag kezeljék az ateroszklerózist azáltal, hogy megakadályozza az új sérülések kifejlődését és a már meglévő sérüléseket visszafejleszti. A vegyületek alkalmazhatók a kis véredény betegségek kezelésére is, amelyek nem kezelhetők se • ·· ·
-9- ...........
bészi vagy érplasztikai úton vagy más olyan véredény beteségek esetén, ahol a sebészi beavatkozás nem megoldás. A vegyületek alkalmazhatók továbbá a betegek stabilizálására a revaszkularizációs terápiát megelőzően.
Az aktív vegyületeket vagy azok keverékét bármilyen megfelelő módon adagolhatjuk, így például orálisan vagy intravénásán. A dózis általában 0,5-500 mg/testtömeg kg közötti érték és a dózis adagolását a naponként kétszeri adagolási gyakoriságtól a két naponkénti adagolási gyakoriságig végezzük. Az adagolás hossza is széles határok között változhat és egyetlen dózistól, amelyet naponta egyszer vagy kétszer adagoltak, egészen a 2-6 hónapig történő adagolásig terjedhet.
A vegyületeket adagolhatjuk közvetlen az érfalba is, perfúziós ballon-katéter alkalmazásával a koronáriás vagy más artériás érplasztikát követően vagy ahelyett. Például 2-5 ml fizológiás sóoldatot adagolhatunk 1-5 atmoszférikus nyomáson, amely sóoldat 100 pmól mennyiségű vegyületet vagy vegyület keveréket tartalmaz. Ezután a következő 6 hónapos periódus során, amikor a restenosis rizikója a legnagyobb, az aktív vegyületeket más megfelelő módon és dózisban adagoljuk.
Relatíve rövid ideig tartó kezelést alkalmaznak az aktív vegyületekkel az olyan koronáriás artériás sérülések “zsugorítására”, amelyek érplasztikával vagy sebészi beavatkozással nem kezelhetők. Ilyen rövid idejű kezelésnél például a korlátozás szándéka nélkül 2-6 hónapon át 0,5-500 mg/kg hatóanyagot adagolnak kétnaponkénti egyszeri-tői a napi háromszori adagolásig terjedő gyakorisággal.
• ·
- 10A hosszabb ideig tartó kezelést alkalmazzuk a nagy rizikó faktorú betegeknél a sérülések kialakulásának megakadályozására. A hosszú ideig tartó kezelés évekig tarthat, a dózis 0,5-500 mg/kg és az adagolási intervallum a kétnaponkénti egyszeri adagolástól a napi háromszori adagolásig terjed. A hatóanyagokat adagolhatjuk közvetlenül a koronáriás érplasztikai beavatkozás előtt vagy azt követően, annak érdekében, hogy csökkentsük vagy elimináljuk a proliferatív és gyulladásos válaszok kialakulását, amelyek általában a klinikailag szignifikáns restenosis-hoz vezetnek.
A hatóanyagot adagolhatjuk együtt más szerekkel is, amelyeket a kardiovaszkuláris betegségek kezelésénél alkalmaznak, ilyenek például a következők: lipidcsökkentő szerek, így például nobukol és nikotinsav, vérlemezkeaggregációt gátlók, így például az aszpirin, antitrombotikus szerek, így péládul a coumadin, kalciumcsatorna blokkolók, így például varapamil, diltiazem és nifedipin, angiotenzin konvertáló enzim (ACE) inhibitorok, így például captopril és enalopril, továbbá β-blokkolók, így például propanolol, terbutanol és labetalol. A vegyületeket adagolhatjuk továbbá nem-szteroid gyulladásgátló szerekkel együtt is, ilyenek például az ibuprofen, indometacin, fenoprofen, mefenaminsav, flufenaminsav vagy szulindak, továbbá adagolhatjuk kortikoszteroidokkal együtt is.
Az 1. ábrán az alábbiakban ismertetett módon előállított mRNS autoradiogramját mutatjuk be, az mRNS-t vagy 32P-jelzett humán VCAM-1 specifikus cDNS-hez (A panel) E-szelektin (ELAM-1) specifikus cDNS-hez (panel B) vagy ICÁM-1-specifikus cDNS-hez (panel C) hibridizáltuk. Egy 30 • ·
- 11 ··· · · ♦« »' ‘ · · · · ··· ·· ·· ··..
perces 50 pmól nátrium-pirrolidin-ditiokarbamáttal (PDTC) végzett kezelés után a HUVE (humán köldök véna) sejteket IL-lb hatásnak tettük ki (10 U/ml) 50 pmól PDTC folyamatos jelenlétében. A parallel végzett kontroll kísérletet hasonlóképpen végeztük, kivéve, hogy PDTC-t nem alkalmaztunk. A megjelölt időpontokban az összes RNS-t izoláltuk, és 20 pg 1%-os agaróz-formaldehid gélelektroforézis denaturálással méret-frakcionált anyagot mikrocellulózra vittük, a fentiek szerint hibridizáltuk, majd autoradiográfíával láthatóvá tettük. Sáv 1-0 óra, sáv 2, 4, 6, 8-01-1 önmagában 2, 4, 8 és 24 órán át, sáv 3, 5, 7, 9 -IL-1 PDTC-vel 2, 4, 8, illetve 24 óráig.
A 2. ábrán az alábbiakban ismertetett módon előállított mRNS autoradiogramját mutatjuk be, amelyet 32P-jelzett humán VCAM-1 specifikus DNS-hez (panel A), E-szelektin (ELAM-1) specifikus cDNS-hez (panel B) vagy ICAM-1 specifikus cDNS-hez (panel C) hibridizáltuk. A HUVE sejteket a megadott koncentrációjú PDTC-vel előkezeltük, majd Il-lb hatásának tettük ki PDTC jelenlétében 4 órán át, majd vizsgáltuk a VCAM-1 mRNS akkumulációját Northern szűrő hibridizációs analízissel. Sáv 1 -kontroll, sáv 2 -IL-1 (U/ml), sáv 3 -IL-lb + PDTC (0,05 pmól), sáv 4 -IL-1 LB+PDTC (0,5 pmól), sáv 5 -IL-lb+PDTC (5 pmól), sáv 6 -IL-lb+PDTC (50 pmól), sáv -IL-lb+PDTC (100 pmól).
A 3. ábrán az alábbiakban ismertetett módon előállított mRNS autoradiogramját mutatjuk be, amelyet 32P-humán VCAM-1 specifikus cDNS-hez (panel A), E-szelektin (ELAM-1) specifikus cDNS-hez (panel B) vagy ICAM-1 specifikus cDNS-hez (panel C) hibridizáltunk. A HUVE sej eteket az * · · · • «
1. ábra ismertetésénél leírt módon előkezeltük 50 μιηόΐ PDTC-vel, majd 4 órán át az alábbiakban ismertetett szerek hatásának tettük ki, majd vizisgáltuk a VCAM-1 (panel A) és ICAM-1 (panel B) mRNS akkumulációt. Sáv 1 -TNFa (100 U/ml), sáv 2 -THFa+PDTC, sáv 3 -lipopoliszacharid (LPS) (100 ng/ml), sáv 4 -LPS+PDTC, sáv 5 -poli(I:C) (100 mg/ml), sáv 6 poli(I:C)+PDTC.
A 4. ábrán bemutatjuk a VCAM-1 és ICAM-1 relatív sejtfelületi expresszióját PDTC jelenlétében (sötét oszlopok) vagy anélkül (fehér oszlopok) több különböző típusú indukáló inger jelenlétében. Az összefolyó HUVE sejteket vagy előkezeltük, vagy nem (CTL csak) 30 percig 50 pmól PDTC-vel, majd a megadott ideig a megadott szerek hatásának tettük ki PDTC jelenlétében vagy anélkül (CTL csak). A sejtfelületi expressziót VCAM-1 specifikus (4B9) és ICAM-1 specifikus (80H10) egér monoklón antitestek primer kötésével, majd ezt követően torma-peroxidáz kecske anti-egér (IgG) szekunder kötésével határoztuk meg. A kvantitatív értékelést a TMB kalorimetrikus konverziójának meghatározásával végeztük 450 nm-nél. A 4. ábrából kitűnik, hogy több szabályozó jel indukálja a VCAM-1-et, de nem indukálja az ICAM-l-et a szokásos ditio-karbamát érzékeny út révén a humán vaszkuláris endoteliális sejtekben.
Az 5. ábrán bemutatjuk a relatív VCAM-1 sejtfelületi expressziót (O.D. 595 nmól) humán köldök véna endoteliális sejtekben, TNFa-val aktiválva a különböző antioxidáns koncentrációk függvényében. (A PDTC nátrium-N-pirrolidin-dito-karbamát, a DETC nátrium-N,N-dietil-N-karbo-ditiolát, ezt ··♦· ·«
-13- .......·:· nátrium-dietil-ditio-karbamátként is említik, az NAC
N-acetil-cisztein és a DF dezferoximin).
A 6. ábrán látható a relatív VCAM-1 sejtfelületi expresszió (O.D. 595 nm) humán köldök véna endoteliális sejtekben, TNFa-val aktiválva, a megadott mennyiségű antioxidánsok jelenlétében. A PDTC nátrium-N-pirrolidon-N-ditiokarbamát, a DIDTC nátrium-N,N-dietil-N-karboditioát, az SarDTC nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát, az IDADTC trinátrim-N,N-di(karboxi-metil)-N-karboditioát, az MGDTC nátrium-N-metil-D-glükamin-N-karboditioát, az MeOBGDTC nátrium-N-(4-metoxi-benzil)-D-glükamin-N-karboditioát, a DEDTC nátrium-N,N-dietil-N-karboditioát, a Di-PDTC nátrium-N,N-diizopropil-L-karboditioát, az NAC N-acetil-cisztein.
A 7. ábrán bemutatjuk a HUVE sejtekhez kötődött Molt-4 sejtek százalékos mennyiségét TNFa-val (100 U/ml) stimulálva vagy nem stimulálva 6 órán át, PDTC jelenlétében vagy anélkül.
A 8. ábrán a következő aktív ditio-karbamátok képletét mutatjuk be: (1) nátrium-pirrolidin-N-karboditioát, (2) nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát, (3) trinátrium-N,N-di(karboxi-metil)-N-karboditioát, (4) nátrium-N-metil-D-glükamin-N-karboditioát, (5) nátrium-N-(4-metoxi-benzil)-D-glükamin-N-karboditioát, (6) nátrium-N,N-dietil-N-karboditioát (nátrium-dietil-ditio-karbamát), és (7) nátrium-N,N-diizopropil-N-karboditioát.
A találmány szerinti vegyületekkel kapcsolatban az alkilcsoport, hacsak másképp nem jelöljük, telített, egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos 1-10 szénatomos szénhidrogéncsopor_ 14 - ··· “ ’··’ ···· tokát jelent, különösen metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, terc-butil-, pentil-, ciklopentil-, izopentil-, neopentil-, hexil-, izohexil-, ciklohexil-, 3-metil-pentil-, 2,2-dimetil-butilvagy 2,3-dimetil-butil-csoport.
Az alkenilcsoport, hacsak másképp nem jelöljük egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos 2-10 szénatomos szénhidrogéncsoportot jelent, amely legalább egy kettőskötést tartalmaz.
Az alkinilcsoport, hacsak másképp nem jelöljük, 2-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú szénhidrogéncsoportot jelent, amely legalább egy hármaskötést tartalmaz.
Az aralkilcsoport arilcsoportot jelent, amely legalább egy alkilcsoportot tartalmaz szubsztituensként.
Az alkarilcsoport alkilcsoportot jelent, amely legalább egya rilcsoportot tartalmaz szubsztituensként.
A halogén- (alkil-, alkenil- vagy alkinil-)-csoport olyan alkil-, alkenil- vagy alkinil-csoportot jelent, amelyekben legalább egy hidrogénatom helyén halogénatom van.
Az arilcsoport, hacsak másképp nem jelöljük fenil- vagy szubsztituált fenilcsoportot jelent, ahol a fenilcsoporton lévő egy vagy több szubsztituens valamely következő csoport: hidroxi-, CO2H vagy gyógyászatilag elfogadható sója, CO2(alkil)-, alkoxi-, alkil- vagy glükamincsoport.
Az alkoxicsoport, hacsak másképp nem jelöljük -O-csoportot jelent.
A halogénatom jelentése fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom.
A hidroxi-alkil-csoport 1-6 szénatomos alkilcsoportot jelent, amelyben legalább egy hidrogénatom bármelyik szénatomon hidroxilcsoporttal van helyettesítve.
_ 15 - ··· ··· ·.·
A tiol-antioxidáns kifejezés kéntartalmú vegyületre utal, amely lassítja az oxidációt.
A gyógyászatilag elfogadható származék kifejezés olyan származékra utal, amely adagolás után közvetve vagy közvetlenül az anyavegyületté alakul vagy annak aktivitásával rendelkezik.
I. Aktív vegyületek
Felsimertük, hogy a ditio-karboxilátok alkalmazhatók az ateroszklerózis és más kardiovaszkuláris és gyulladásos betegségek kezelésére. A ditio-karboxilátok, beleértve ditio-karbamátokat is, alkalmazható a sejtek, beleértve az endoteliális sejteket is, azon képességének blokkolására, hogy expresszálják a VCAM-l-et, amely egy gén termék és amely felelős a leukocitáknak a sejtekez való tapadásáért. Az a tény, hogy a ditio-karboxilátok, beleértve a ditio-karbamátokat is, gátolják a VCAM-1 gén expresszióját, erőteljesen aláhúzza az oxidáció fontosságát abban, hogy az egy kezedeti jel a megváltoztatott ér-gyulladásos sejt kölcsönhatásokban. A specifikus molekuláris mechanizmus, amellyel a ditio-karboxilátok hatnak a VCAM-1 gén expresszió gátlásában, nem ismert.
Legalább egy a vegyületek közül, a nátrium-pirrolidin-ditiokarbamát (PDTC) A VCAM-1 gén expressziót kisebb mint 1 pmól mennyiségben gátolja. Ez a vegyület továbbá kifejezett toxicitást mutat a vaszkuláris simaizom sejtek szaporodására vagy abnormális osztódására. Felismertük, hogy a nátrium-pirrolidin-ditio-karbamát szignifikáns mértékben nem blokkolja az ELAM-1 vagy ICAM-1 expressziót és ily módon az ezen vegyülettel végzett kezelés ellentétesen nem befolyásolja az ELAM-1 vagy ICAM-1 által közvetített gyulladásos válaszokat. így az általánosított ··· ·
-16- .......·:· immunoszupresszió elkerülhető. Ez elkerülheti az adhéziós molekulák általános gátlásából eredő szisztémás komplikációkat számos más sejttípus esetén is, amelyekről ismert, hogy azokat expresszálják.
A ditio-karboxilátok az A-SC(S)-B szerkezetnek felelnek meg és azon általános vegyületcsoportnak tagjai, amelyek tiol-antioxidánsként ismertek és ezeket még karboditiolként vagy karboditiolátként is említjük. Úgy tűnik, hogy az SC(S) molekularész a lényeges a terápiás aktivitás szempontjából és az A és B jelentése lehet bármilyen csoport, amely hátrányosan nem befolyásolja a vegyület hatását vagy toxicitását. Az A és B csoportot a szakterületen jártas szakember választhatja meg úgy, hogy a kívánt jellemzőjű vegyületet nyerje, beleértve a vegyület méretét, töltését, toxicitását, valamint a stabilitás mértékét (beleértve a stabilitást savas környezetben, így például a gyomorban, vagy bázikus környezetben, így pédául a béltraktusban). Az A és B megválasztásának továbbá fontos szerepe van a vegyület szövetben való eloszlásában, valamint a farmakokinetikai tulajdonságokban is. Általában a kardiovaszkuláris betegségek kezelésénél kívánatos, hogy a vegyület a vaszkuláris endoteliális sejteket tartalmazó artéris intimális rétegben akkumulálódjon vagy lokalizálódjon. A vegyületek előnyösen vesén keresztül eliminálódnak.
Nem korlátozó példaként az A és B csoport jelentése lehet például egymástól függetlenül valamely következő csoport: alkil-, alkenil-, alkinil-, alkaril-, aralkil-, halogén-alkil-, halogén-alkenil-, halogén-alkinil-, aril-, alkaril-, hidrogén-, 1-6 szénatomos alkoxi-1-10 szénatomos alkil-, 1-6 szénatomos alkil-tio-1-10 szénatomos alkil-, 1-10 szénatomos szubsztituált alkil- (ahol a • ·
- 17.... : : ·..· · .· ··.· ..· ·..· .u.
szubsztituens jelentése lehet egymástól függetlenül hidroxil-, karbonil-, vagy karbonsav-csoport bármelyik szénatomon), NR R , -(CHOH)nCH2OH csoport, ahol n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5 vagy 6, -(CHf^COfR1 csoport, beleértve az acetil-, propionil- vagy butiril-csoportot, hidroxi-1-6 szénatomos alkil- (ahol az egy vagy több hidroxilcsoport bármelyik szénatomhoz kapcsolódhat), továbbá A jelentése lehet egy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen például nátrium vagy kálium vagy NR4R5R6R7 csoport is. Egy másik kiviteli formánál dimert, így például B-C(S)S-SC(S)-B vegyületet is adagolhatunk.
A ditio-karboxilátokat az ateroszklerózis és más kardiovaszkuláris és gyulladásos betegségek kezelésénél úgy kell megválasztani, hogy a megfelelő lipofilicitásúak legyenek, hogy a beteg résznél lokalizálódjanak. A vegyület nem kerülhet be az alacsony átmeneti szakaszokba, így például a zsírlerakódásokba. A kardiovaszkuláris betegségek kezelésének egy előnyös kiviteli formájánál a vegyület farmakokinetikai tulajdonságait nem befolyásolhatja nagyobb mértékben a pangásos szívelégtelenség vagy veseelégtelenség.
A ditio-karboxilát fiziológiailag elfogadható kell, hogy legyen. Általában a vegyület terápiás indexe legalább 2, előnyösen 5 vagy 10. A terápiás index jelentése EC5O/IC5O, ahol EC50 jelentése az a vegyületkoncentráció, amely 50%-os értékben gátolja a VCAM-1 expresszióját és IC50 jelentése az a vegyületkoncentráció, amely 50%-ban toxikus a célsejtre nézve. A celluláris toxicitást meghatározhatjuk közvetlenül a sejtek számának meghatározásával, továbbá trypan kék kizárással, vagy különböző metabolikus aktivitás vizsgálatokkal, így például 3H-timidin • ·
- 18inkorporációval, ezek a szakember számára ismertek. A PDTC terápiás indexe szövet kultúrákban 100 fölötti érték, ezt úgy határoztuk meg, hogy a sejt toxicitást osztottuk a TNFa-val aktivált VCAM-1 expresszió gáltásával HUVE (humán köldök véna) sejtek esetén. A gyorsan osztódó HT-18 humán glioma sejttípusok esetén végzett vizsgálatok nem mutattak ki toxicitást a terápiás koncentrációnál 100-szor nagyobb koncentráció esetén sem. Az orálisan adagolható dietil-ditio-karbamát a disulfíram, amelyet orális adagolással alkalmaznak alkoholfüggőség kezelésére, általában nem fejt ki lényeges klinikai toxicitást ha megfelelően adagolják.
Ismertek ugyanakkor bizonyos ditio-karbamátok, amelyek genotoxikusak. Ezek a vegyületek nem esnek a találmány oltalmi körébe, amely csak a fiziológiailag elfogadható anyagok alkalmazására vonatkozik. Ilyen genotoxikus ditio-karbamát például a fungicid hatású cink-dimetil-ditio-karbamát. Továbbá, bizonyos ditio-karbamátok anti-kolineszteráz tulajdonságai neurotoxikus hatásokat eredményezhetnek (Miller, D., Neurotoxicity of the pesticidal carbamates, Neurobehav. Toxicol. Teratol. 4(6): 779-87 (1982)).
A találmány szerint alkalmazható ditio-karboxilátok közé tartoznak a korlátozás szándéka nélkül például a következő képletű ditio-karbamátok:
R^QSjNR^3 vagy R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 a képletekben
R1 jelentése hidrogénatom vagy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen nátrium vagy kálium, vagy NR4R5R6R7 általános képletű csoport, ahol R4, R5, R6 és R7 jelentése
- 19egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkil-, hidroxi-1-6 szénatomos alkil- (ahol egy vagy több hidroxilcsoport helyezkedik el bármelyik szénatomon) vagy aril-csoport, és R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül 1-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkil-, -(CHOH)n(CH2)nOH, ahol n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5 vagy 6, -(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 általános képletú csoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkil-csoport vagy R és R együttesen egy hidat képeznek, amely lehet -(CH2)m csoport, ahol m értéke 3-6, és R4 jelentése alkil-, aril-, alkaril- vagy aralkil-csoport, így például acetil-, propionil- vagy butiril-csoport.
Közelebbről említjük a 8. ábrán bemutatott ditio-karbamátokat: (1) nátrium-pirrolidin-N-karboditioát, (2) nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát, (3) trinátrium-N,N-di(karboxi-metil)-N-karboditioát, (4) nátrium-N-metil-D-glükamin-N-karboditioát, (5) nátrium-N-(4-metoxi-benzil)-D-glükamin-N-karboditioát, (6) nátrium-N,N-dietil-N-karboditioát (nátrium-dietil-ditio-karbamát), és (7) nátrium-N,N-diizopropil-N-karboditioát.
Az aktív ditio-karboxilátok és különösen a ditio-karbamátok kereskedelmi forgalomban beszerezhetők vagy ismert módszerekkel előállíthatok.
Molekuláris szinten a PDTC-ről kimutattuk, hogy gátolja az Nf-kB transzkripciós szabályozó faktor aktiválását bizonyos citokin és nem-citokin ingerekre válaszképppen (Schreck, R., és mtársai, “Reactive oxygen intermediates as apparently widely used
-20messengers in the activation of the NF-kappa B transcription factor andHIV-1”, EMBO J. 10(8): 2247-58 (1991); Schreck, R., és mátrsai, “Dithiocarbamates as potent inhibitors of nuclear factor B activation in intact cells”, J. Exp. Med. 115:1181-1194 (1992)).
Azonban a HUVE sejtmag extraktumok különböző kB-szerű fokozó motifokkal végzett gél mobilitásos eltolási vizsgálatánál felismertük, hogy az endoteliális sejtek a VCAM-1 expresszióját egy látszólag új, Nf-kB-től eltérő transzkripciós szabályozó faktoron keresztül aktiválják. Ez azt sugallja, hogy a PDTC szabályozhatja az endoteliális sejt gén expresszióját az új transzkripciós szabályozó proteinra kifejtett hatásán keresztül. Kimutattuk azt is, hogy a VCAM-expressziót tenyésztett Kaposi szarkóma sejtekben több faktor indukálja, amelyek fontosak lehetnek a patogenézisében. A PDPC blokkolja VCAM-1 expressziót Kaposi szarkóma sejtekben, amelyeket TNF, IL-1 és poli(I:C) anyagokkal aktiváltunk.
Felismertük azt is, hogy a simaizom sejtek a VCAM-1 oldható formáját termelik, amelyeket a sejtek kiválaszthatnak és amely természetes antihisztaminként hathat.
II. Biológiai aktivitás
A ditio-karboxilátok azon képességét, hogy gátolják a VCAM-1 expresszióját, különböző módon határozhatjuk meg, ilyenek azok a módszerek, amelyeket részletesen az 1-7. példákban ismertetünk. Az 1-3. és 6-7. példákban a nátrium-pirrolidin-N-karboditioát (PDTC) biológiai aktivitását mutatjuk be. Ezekkel a példákkal azonban nem kívánjuk a találmány oltalmi körét korlátozni, ebbe beletartozik bármely fentiekben ismertetett vegyület alkalmazása a VCAM-1 által közvetített ateroszklerózis és más
I··· ·· ·»
:.. ! * * » · .
···, · · ·· , * · · Λ Λ ··· ». ..·
-21 gyulladásos és kardiovaszkuláris betegségek kezelésére. Bármely fentiekben említett vegyülettel a PDTC helyettesíthető és hasonló módon értékelhető.
A 4. és 5. példákban összehasonlító adatokat mutatunk be különböző ditio-karbamátoknak a VCAM-1 gén expressziót gátló hatására vonatkozóan. A példákból kitűnik, hogy a találmány szerinti ditio-karbamátok specifikusan blokkolják a VCAM-1 vaszkuláris sejtek által történő expresszálódását, ami az ateroszklerózis és gyulladásos válasz esetén aktívként ismert számos jelzésre következik be.
Kísérleti eljárások
Sejtkultúrák: a HUVE sejteket humán köldök vénából izoláltuk, kanüleztük, Hanks oldattal átöblítettük a vér eltávolítására, majd 1% kolagenáz jelenlétében 15 percig 37°C hőmérsékleten inkubáltuk. Ezután a kollagenázt eltávolítottuk, és a sejteket a következő összetételű közegben tenyésztettük: Ml99 közeg a következőkkel kiegészítve: 20% szarvasmarha embrió szérium (HyClone), 16 pg/ml heparin (ESI Pharmaceutical, Cherry Hill, NJ), 50 pg/ml endoteliális sejt növekedési kiegészítő (Collaborative Research Incorporated, Bedford MA), 25 mmól Hepes puffer, 2 mmól L-glutamin, 100 pg/ml penicillin és 100 pg/ml sztreptomicin, a tenyésztést 37°C hőmérsékleten szövettenyészeti lemezen végeztük, amelyet 0,1% zselatinnal borítottunk. A sejteket 1:4 osztással összefolyásig passzáltuk. Az első nyolc passzálásnál nyert sejteket alkalmaztuk.
Citokinekkel és más reagensekkel végzett inkubálás: az összefolyt HUVE sejeteket foszfáttal pufferált sóoldattal mostuk, majd új tápközeget adagoltunk. A megadott PDTC koncentrációkat ···· .. .. ., ···. · J ···· * .*
-22- ..... -adagoltuk előkezelésként 30 perccel a cytokinek adagolása előtt. A cytokineket és egyéb kiváltókat közvetlenül a közeghez adagoltuk a megadott időn át és a megadott koncentrációkban. A humán rekombináns IL-lb-t az Upjohn Company (Kalamazoo, MI) nagylelkű ajándékaként kaptuk. A TNFa-t a Bohringer Engelheim cégtől szereztük be, a bakteriális lipopoliszacharidot (LPS), a poliinozinsav:policitidilinsav (Poly I:C) anyagot és a pirrolidin-ditiokarbamátot (PDTC) a Sigma Chemical cégtől (St. Louis, MO) szereztük be. Az összes többi reagens reagens tisztaságú volt.
RNS izolálás: az összes celluláris RNS-t egyetlen extrakcióval választottuk el, ehhez savas guanidium-tiocianát-fenol-klorofom keveréket alkalmaztunk. A sejeteket foszfáttal pufferolt sóoldattal öblítettük, majd 2 ml guanidim-izotiocianáttal lizáltuk. Az oldatot 0,2 ml nátrium-acetáttal megsavanyítottuk (pH=4), majd 2 ml fenollal és 0,4 ml klorofom:izoamil-alkohol eleggyel (24:1) extraháltuk. Az RNS-t kétszer etanolal kicsaptuk, mielőtt a Northem biot analízishez alkalmaztuk.
Northern biot analízis: az összes celluláris RNS-t (20 pg) méret-frakcionáltuk, ehhez 1 % agaróz formaldehid gélt alkalmatunk 0,1 pg/ml etidium-bromid jelenlétében. Az RNS-t nitrocellulóz szűrőre vittük át és kovalensen kötöttük ultraviola besugárzással Stratlinker UV térhálósító alkalmazásával (Tratagene, LA Jolla, CA). A hibridizációt 42°-on 18 órán át végeztük 5X SSC (1X=15O mmól NaCl, 15 mmól Na-citrát), 1% nátrium-dodecil-szulfát, 5X Denhart oldat, 50% formamid, 10% dextrán-szulfát és 100 pg/ml vágott denaturátl lazac sperma DNS jelenlétében. Kb. l-2xl06 cpm/ml jelzett próbát (specifikus aktivi-23 tás > 108 cpm/^g DNS) alkalmaztunk minden hibridizációnál. A hibridizációt követően a szűrőket 0,2XSSC végső mennyiséggel átmostuk 55°C hőmérsékleten. A nitrocellulózt forró víz alkalmazásával tisztítottuk, a többi mintával való rehibridáziót megelőzően. Az autoradiográfiát egy intenzifikáló szűrővel végeztük -70°C hőmérsékleten.
Minták: a 32P jelzett DNS mintákat random primer oligonukleotid módszerrel készítettük. Az ICAM-1 minta humán cDNS Eco RÍ fragmense volt, az ELAM-1 minta humán cDNS 1,85 kb Hind III fragmense, a VCAM-1 minta 132-1814-ig terjedő nukleotidot tartalmazó humán cDNS Hind III-Xho I fragmense volt.
Enzim-kapcsolású immunoszorbens vizsgálat (ELISA): a
HUVE sejeteket 96-lyukú szövettenyésztő lemezre vittük 48-72 órával a vizsgálat előtt. Minden lyukba primer antitesteket adagoltunk Ml99 közegben, amely még 5% FBS-t tartalmazott és 37°C hőmérsékleten 1 órán át inkubáltuk. A sejeteket ezután mostuk és további 1 órán át kecske anti-egér IgG-vel (Bio Rád) konjugált peroxidázzal inkubáltuk, amelyet 1/500 arányban M199+5%FBS tápközeggel hígítottunk. A lyukakat ezután mostuk és az antitestek kötődését detektáltuk 100 μΐ mennyiségű 10 mg/ml 3,3,5,5’-tetrametil-benzidil (Sigma) plusz 0,003% H2O2 adagolásával. A reakciót 25 μΐ 8 n kénsav adagolásával állítottuk le. A lemzeket ELISA leolvasó berendezéssel (Bio Rád) értékeltük OD 450 nm-nél miután kivágtuk a sorokat, amelyeket csak második lépés antitesttel festettünk. Az adatok három párhuzamos mérés átlagát jelentik.
Antitestek: a vaszkuláris sejt adhéziós molekula-1-et (VCAM-1) felismerő monoklón antitest (Mab) 4B9 Dr. John • · • ······ ··· · · · · · .24Harlan nagylelkű ajándéka volt (University of Washington). Az endoteliális sejt adhéziós molekulát (ELAM-1) felsimerő MAb E9A1F1 Dr. Swerlick (Emory University) nagylelkű ajándéka volt. Az intracelluláris adhéziós molekula-1-et (ICAM-1) felismerő MAb 84H10-et termelő hibridomákat rutinszerűen saját laboratóriumunkban tenyésztettük és az antitestet mint szövettenyészet felülúszót alkalmaztuk.
1. példa
PDTC blokkolja az IL-lb közvetített HUVE sejt VCAM-1 mRNS akkumulációt, de nem blokkolja ICAM-1 vagy ELAM-1 esetén
Annak meghatározására, hogy az endoteliális sejt oxidativ állapota képes-e megváltoztatni a sejtadhéziós molekula gének alap vagy indukált expresszióját, tenyésztett humán vaszkuláris endoteliális sejteket indukáló cytokin, EL-lb (10 U/ml) hatásának tettünk ki tiolezett fémkelátor antioxidáns, pirrolidin-ditiokarbamát jelenlétében (PDTC, 50μιηό1) vagy anélkül max. 24 órán át. Mint az az 1. ábrán látható az IL-lb önmagában ( sáv 2,4,6,8,) indukálja a várt gyors és tranziens VCAM-1 (panel 1), E-szelektin (ELAM1, panel 2) és ICAM-1 ( panel 3) mRNS akkumulációt, ennek max. értéke 4 óránál van. Azonban, PDTC jelenlétében az IL-lb - indukált VCAM-1 mRNS akkumuláció erősen gátolva van, több mint 90%-kal (panel A, sáv 3,5,7,9). Ezzel szemben, bár az ELAM-1 IL-lb közvetített indukciója enyhén gátolt 2 és 24 óránál (lásd sáv 2,3,8,9 panel B), a PDTC nem gátol 4 és 8 óránál ( sáv 5 és 7 , panel B). Az IL-lb közvetített ICAM-1 mRNS akkumuláció nincs befolyásolva (panel B, sáv 3,5,7,9). Ténylegesen az IL-lb közvetített ICAM-1 mRNS akkumulációban gyenge növekedés volt meg • · • ·
-25• · • · * figyelhető (~30%) (lásd sáv 4 és 5 a panel B-n). Azonos mennyiségű nitrocellulóz-átvitt RNS volt kimutatható sávonként etidiumbromiddal végzett festéssel és vizualizálással.
Dózis-válasz analízist végeztünk annak megállapítására, hogy a PDTC dózis-fuggően gátolja-e az IL-lb - indukált VCAM-1 gén expressziót. Mint az a 2. ábrából látható, a PDTC egy meredek dózis-válasz görbének megfelelően gátolja az IL-lb által közvetített VCAM-1 gén expressziót ( 2. ábra, panel A) a kalkulált, kb 10 pmól, EC50 értéknél, míg ugyanezen koncentrációnál a PDTC nem gátolja az ELAM-1 expresszió IL-lb által közvetített indukcióját (2. ábra, panel B). Az IL-lb - közvetített ICAM-1 mRNS akkumulációt a PDTC 0,5 pmól-nál nagyobb koncentráció estén növeli (lásd 2. ábra sáv 2 és 4-7. panel C).
Ezek az adatok demonstrálják, hogy az IL-lb hasznosít egy ditiokarboxilát és különösen egy ditiokarbamát érzékeny lépést a jelzőrendszerének részeként a VCAM-1 gén expresszió indukciójában. Az adatok tovább azt is mutatják, hogy ez a ditiokarbamátérzékeny lépés nem játszik jelentős szerepet az ELAM-1 vagy ICAM-1 gén expresszió IL-lb k közvetített indukciójában.
2. példa
A PDTC blokkolja a HUVE sejt VCAM-1 mRNS akkumulációját több inger esetén
Annak meghatározására, hogy más jól ismert VCAM-1 gén expresszió aktivátorok szintén hasznosítják-e a PDTC-szenzitív lépést, három különböző aktivátorcsoportot vizsgáltunk: egy másik klasszikus receptor-közvetített indukálószer (tumor nekrozis faktor, TNFa), nem-receptor közvetített indukálószer (lipopoliszacharid, LPS) és egy nemrégen ismertetett új indukáló
-26anyag (kettős szálú RNS, poli(I:C)). Mindhárom esetben a PDTC igen jelentősen gátolta a VCAM-1 mRNS akkumulációt HUVE sejtekben négy óra után ( 3. ábra, panel A). Bár a TNFa - közvetített ELAM-1 gén expresszió bizonyos mértékig visszanyomott, az LPS és poli(I:C) által közvetített ELAM-1 mRNS akkumuláció nem változott ( 3. ábra, sáv 3-6, panel B). Az ICAM-1 mRNS akkumuláció indukciója szintén nem változott ( 3. ábra, panel C). Ezek az adatok azt mutatják, hogy szerkezetileg eltérő, eltérő utakon ható indukálószerek, a szokásos, a VCAM-1 gén expresszióra specifikus szabályozó lépést fejtik ki.
3. példa
A PDTC blokkolja a több inger által indukált VCAM-1 HUVE sejt felületi expresszióját
Annak meghatározására, hogy - hasonlóan az mRNS-éhez - a VCAM-1 endoteliális sejtfelületi protein expressziójának indukciója szintén gátolható PDTC-vel, monoklón antitesteket alkalmaztunk az ELISA analízisnél a sejtfelületi VCAM-1 és ICAM-1 indukciójának számszerűsítésére tenyésztett HUVE sejtekben. Mint az a 4. ábrán látható a különböző csoportokba tartozó aktiválószerek PDTC nélkül (-PDTC) gyors és tranziens VCAM-1 akkumulációt indukálnak a sejtfelületen ( bal felső panel), ennek maximuma hat óránál van. PDTC jelenlétében ( +PDTC, jobb felső panel), a VCAM-1 sejtfelületi expresszióját minden vizsgált szer jelentős módon gátolja (80-90%). Ezzel szemben a sejtfelületi ICAM-1 expresszió indukciója változatlan maradt ( alsó jobb és bal panelek).
Ezek az adatok mutatják, hogy az mRNS akkumulációhoz hasonlóan a sejtfelületi VCAM-1 expressziót is szelektíve gátolják a
-27ditiokarbamátok és hogy több csoportja az aktiváló szereknek hasonló, ditiokarbamát-szenzitív mechanizmust hasznosít a VCAMgén expresszió indukálásában.
4. példa
Antioxidánsok hatásosságának összehasonlítása a TNFa-indukált VCAM-1 blokkolásban
Annak meghatározására, hogy a szerkezetileg hasonló vagy nem hasonló antioxidánsok gátolják-e a VCAM-1 gén expresszió indukcióját és ha igen milyen hatékonysággal, HUVE sejteket TNFa hatásnak tettük ki hat órán át különböző koncentrációjú, négy különböző antioxidáns jelenlétében vagy azok nélkül. Mint az az 5. ábrából kitűnik, mind a dietil-ditiokarbamát (DETC), mind az N-acetil-cisztein (NAC) gátolja a VCAM-1 expresszió indukcióját 5 pmól ill. 30 pmól koncentrációkban. Ezzel szemben a PDTC 5 és 50 pmól koncentrációknál volt hatásos. A vas-kelátor, a dezferroximin, a vizsgált koncentrációkban nem volt hatásos
5. példa
A PDTC gátolja a VCAM-l/VLA-4 közvetített adhézió TNF indukcióját
A 4. példában leírt módon vizsgáltuk különböző antioxidánsok képességét a a VCAM-1 TNFa indukciójának gátlására HUVE sejtekben. A 6. ábrán bemutajuk a relatív VCAM-1 sejtfelületi expresszió értékét (O.D.595 nmól) TNFa - aktivált HUVE sejtekben a PDTC ( nátrium-N-pirrolidin-ditiokarbamát), DIDTC (nátrium-N,N-metil-dietil-N-karboditioát), SarDTC (nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát), IDADTC (trinátrium-N,N-di(karboxi-metil)- N-karboditioát, MGDTC (nátriumN-metil-D-glükamin-N-karboditioát), MeOBGDTC (nátrium-N-(4 • ·
-28- ...........
metoxi-benzil)-D-glükamin-N-karboditioát), DEDTC (nátriumN,N-dietil-N-karboditioát), Di-PDTC (nátrium-N,N-diizopropil-Nkarboditioát) és NAC (N-acetil-cisztein) koncentrációk függvényében. A legkevésbé aktív vegyület a MeOBGDTC és NAC.
6. példa
A PDTC gátolja a VCAM-l/VLA-4 közvetített adhézió TNF indukcióját
Annak meghatározására, hogy a VCAM-1 szabályozás PDTC gátlása funkcionális konzekvenciákkal is jár-e, vizsgálatuk Molt-4 sejtek HUVE sejtekhez való kötődését TNFa-val stimulálva (100 U/ml) vagy stimulálás nélkül hat órán át PDTC jelenlétében vagy anélkül. A Molt-4 sejtekről korábban kimutattuk, hogy kötődnek az aktivált HUVE sejtekhez egy VCAM-1 függő mechanizmussal. Mint az a 6. ábrából kitűnik, a HUVE sejtekhez kötött Molt-4 sejtek %-os mennyisége csökkent PDTC jelenlétében.
7. példa
A PDTC gátolja a monociták kötődését a mellkasi aortához koleszterines táppal kezelt nyulak esetén
A kísérletet annak meghatározására végeztük, hogy a tiol antioxidáns PDTC hatásos-e az ateroszklerózis első monocita kötő komponensének blokkolásában kísérleti állat modell esetében. Kifejlett ujzélandi fehér nyúlnak (3,5 kg) naponta egyszer, öt napon át intravénásán PDTC-t adagoltunk ( 20 mg/kg, 20 mg/ml PBSben). Az injekciókat egy állandóra behelyezett kanülön keresztül adagoltuk a marginális füli vénába, amelyet nyitott állapotban tartottunk heparinizált sóoldattal végzett öblítéssel. A PDTC oldatot minden nap vagy minden másnap (fénytől védve tároltuk 4°on) frissen készítettük és szűrtük (0,45 mm porusú szűrőn) közvet
-29• · len a felhasználás előtt. Az első injekció után, amikor a kanült behelyeztük, a hatóanyagot a nyálaknak éber állapotukban adagoltuk észrevehető diszkomfort vagy más hatás megjelenése nélkül. A második napon az állatoknak 1 t% koleszterint tartalmazó tápot adtunk és az etetést a kísérlet hátralevő részében folytattuk. Az 5. napon az állatokat végleg elaltattuk és a mellkasi aortát kimetszettük és fixáltuk. A megfelelő preparálás után a mintát LaB emmitterrel felszerelt ISI DS-130 scanning elektronmikroszkóppal leképeztük. Kettős-szűrős leképező és a CRT szűrőn transzparens rács alkalmazásával 620x-os nagyításnál 64 szomszédos mezőt határoztunk meg, ezek kb. 1,3 mm2 területet foglatak el. Mindegyik mezőn belül megszámláltuk és feljegyeztük a feltapadt leukociták ( WBC) és eritrociták (RBC) számát. Az ívből származó minták esetén nyert adatok a következők: 5 WBC és ~25 RBC per 1,3 mm területen. A WBC adhézió ezen szintje hasonló a szokásos táppal táplált kontroll állatok szintjéhez ( mezőnként kb 7 állapítható meg az ív és mellkasi mintákon 2 negatív kontroll kísérletben). A pozitív kontroll állatoknak 1% koleszterint adagoltunk 4 napon át, de nem adagoltunk antioxidánst, ezeknél az állatoknál 5-szörös növekedést állapítottunk meg az adhézióban, 38 WBC/1,3 mm . Minden ívmintához odatapadva, jelentős mennyiségű, túlnyomórészt sejtméretű törmeléket figyeltünk meg. Nem tisztázott, hogy ez egy változás a készítményben vagy in vivő van jelen, és ha igen kapcsolatban van-e a PDTC adagolással. Ez a tanulmányozás azt suggalja, hogy a PDTC infúzió hatásosan blokkolja a kezdeti monocita adhéziót a mellkasi endoteliumhoz.
III. Gyógyszerkészítmények • · · ·
- 30 - ...........
VCAM-1 közvetített kardiovaszkuláris elváltozásokban vagy gyulladásos betegségekben szenvedő humán egyedeket és állatokat és különösen emlősöket kezelhtünk oly módon, hogy betegeknek egy vagy több fentiek szerinti vegyületet vagy annak gyógyszerészetileg elfogadható származékát vagy sóját adagoljuk gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy higítóanyaggal elkeverve. A hatóanyagot megfelelő formában, így például orálisan, parenterálisan, intravénásán, intradermálisan vagy szubkután adagoljuk.
A gyógyszerészetileg elfogdaható só vagy komplex kifejezés olyan sókra vagy komplexekre utal, amelyek megtartják a fentiekben említett vegyületek biológiai aktivitását és minimális nem kívánatos toxikus mellékhatással rendelkeznek. A korlátozás szándéka nélkül ilyen sóként említjük például a következőket: a) savaddiciós sók, amelyeket valamely következő szervetlen illetve szerves sóval állítunk elő: sósav, hidrogén-bromid, kénsav, foszforsav, salétromsav, illetve ecetsav, oxálsav, borkősav, borostyánkősav, almasav, aszkorbinsav, benzoesav, tanninsav, pamoinsav, alginsav, poliglutaminsav, naftalinszulfonsav, naftalindiszulfonsav, vagy poligalakturonsav, b) bázisokkal képzett addíciós sók, például a következők: többértékű fémkationok, így például cink, kalcium, bizmut, bárium, magnézium, alumínium, réz, kobalt, nikkel, kadmium, nátrium, kálium, stb. vagy Ν,Ν-dibenzil-etilén-diamin, D-glükózamin, ammónium, tetraetil-ammónium, vagy etilén-diamin, vagy c) az a) és b) pont kombinációja, így például cink-tannát sók stb.
A hatóanyagot olyan mennyiségű gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy higítóanyaggal együtt adagoljuk a ♦ ·· ♦ • · betegnek, hogy a kívánt terápiás hatást biztosítsuk komoly toxikus mellékhatások nélkül. A hatóanyag előnyös mennyisége az összes fentiekben említett tünetek esetén általában 0,5-500 mg/kg, előnyösen 1-100 mg/kg naponta. A gyógyszerészetileg elfogadható származékok hatásos mennyiségét az adagolni kívánt anyavegyület tömege alapján számítjuk. Ha a származék önmagában is aktív, a hatásos dózist a fentiek alapján állapítjuk meg a származék tömegének alkalmazásával vagy pedig más a szakterületen ismert módon.
A vegyületeket általában bármilyen alkalmas dózis egység formájában adagolhatjuk, amely dózis egység tartalmazhat például 1-3000 mg, előnyösen 5-500 mg hatóanyagot. Az orális dózisokban általában 25-250 mg hatóanyagot alkalmazunk.
A hatóanyagot úgy kell adagolni, hogy a csúcskoncentráció a plazmában 0,1-100 pmól, előnyösen 1-1 pmól legyen. Ezt például intravénás injekcióval érhetjük el, ami a hatóanyag oldata vagy készítménye, a hatóanyagot előnyösen sóoldatban vagy egyéb vizes közegben és bolusként adagoljuk.
A hatóanyag koncentáricója a gyógyszerkészítményben függ a vegyület abszorpciójától, eloszlásától, inaktiválásától, valamint a kiválasztódásától, valamint a szakterületen ismert faktortól. Megjegyezzük, hogy a dózis értéke függ továbbá még a kezelendő tünetek komolyságától. Nyilvánvaló továbbá, hogy minden adott betegnél az adott dózist az egyéni szükséglettől és a kezelőorvos szakmai megítélésétől függően meghatározott ideig kell adagolni, továbbá hogy a fentiekben említett koncentrációhatárok csupán példaképpen szolgálnak és semmiképpen sem korlátozzák a gya-32 korlati alkalmazást. A hatóanyagot adagolhatjuk egyszer vagy több hasonló dózisra osztva különböző időintervallumokban.
Az orális adagolású készítmények általában inért higítóanyagot vagy egy ehető hordozóanyagot tartalmaznak. A készítmények lehetnek zselatinkapszulák vagy sajtolt tabletták. Az orális kezelés céljára a hatóanyagot vivőanyagokkal tablettákká, ostyákká vagy kapszulákká alakítjuk. Gyógyszerészetileg kompatibilis kötőanyagokat és/vagy adjuvánsokat szintén alkalmazhatunk.
A tabletták, pirulák, kapszulák, ostyák és hasonló készítmények esetén például a következő vegyületeket vagy alkotókat alkalmazhatjuk: kötőanyagok, így például mikrokristályos cellulóz, tragantgumi vagy zselatin; vivőanyagok, így például keményítő vagy laktóz; dezintegrálószerek, így például alginsav, Primogel vagy kukoricakeményítő; csúsztatóanyagok, így például magnézium-sztearát vagy Sterotes; glidánsanyag, így például kolloid eloszlású szilicium-dioxid; édesítőszer, így például szachróz vagy szacharin; továbbá ízesítőszerek, így például borsmenta, metil-szalicilát vagy narancsíz. Amennyiben a dózis egység egy kapszula, az tartalmazhat még a fentiekben említett anyagokon kívül folyékony hordozót is, így például egy zsírsav olajat. Továbbá, a dózis egységek tartalmazhatnak még különböző egyéb anyagokat is, amelyek megváltoztatják a fizikai formáját a dózis egységnek, így például tartalmazhatnak még cukor, sellak vagy más enterális bevonószert.
A hatóanyagokat vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóikat vagy származékaikat adagolhatjuk egy elixír, szuszpenzió, szirup, ostya, rágógumi vagy más hasonló komponenseként is. A szirup • · ···· · · ·· • · · · · · •·· · « ··
- 33 - *··’ ··* ’··’ · tartalmazhat a hatóanyag mellett szacharózt mint édesítőszert, bizonyos konzerválószereket, festékeket, színezőanyagokat és ízanyagokat.
A hatóanyagot vagy gyógyászatilag elfogadható származékait vagy sóit adagolhatjuk továbbá más hatóanyagokkal együttesen is, amelyek nem befolyásolják a kívánt hatást, ilyenek lehetnek például a következők: antibiotikumok, gomba-elleni szerek, gyulladásgátlók,vagy vírusellenes vegyületek. A hatóanyagokat adagolhatjuk lipidcsökkentő szerekkel együtt is, ilyenek például a probucol és a nikotinsav, vérlemezkeaggregációt gátló anyagokkal, ilyen például az aszpirin, antitrombotikus szerekkel, ilyen például a coumadin, kalciumcsatoma blokkolókkal, ilyenek például a varapamil, a diltiazem és a nifedipin, angiotenzin konvertáló enzim (ACE) inhibitorokkal, ilyen például a captopril és az enaropril, továbbá β-blokkolókkal, ilyen péládul a propanolol, terbutalol és labetalol. A vegyületeket adagolhatjuk továbbá különböző nem-szteroid gyulladásgátlókkal együtt is, ilyenek például az ibuprofen, indometacin, aszpirin, fenoprofén, mefenaminsav, flufanaminsav, szulindak. A vegyületeket kortikoszteroidokkal együtt is adagolhatjuk.
A parenterális, intradermális, szubkután vagy topikális adagolási! oldatok vagy szuszpenziók például a következő komponensekt tartalmazhatják: steril hígítók, így például injekció céljára alkalmas víz, sóoldat, fixált olajok, polietiléglikolok, glicerin, propilénglikol vagy szintetikus oldószerek; antibakteriális szerek, így például benzil-alkohol vagy metil-parabens; antioxidánsok, így például aszkorbinsav vagy nátrium-biszulfit; kelátképzőszerek, így például etilén-diamin-tetraecetsav; pufferek, • · · · ··
-34így például acetátok, cifrátok vagy foszfátok, továbbá a tonicitás beállítására alkalmas szerek, így például a nátrium-klorid vagy dextróz. A parenterális készítmények lehetnek ampullák, eldobható fecskendők vagy több adagot tartalmazó fiolák üvegből vagy műanyagból.
Intravénás adagolás esetén az előnyös hordozóanyagok közé tartozik a fiziológiai sóoldat vagy a foszfáttal pufferolt sóoldat (PBS).
A találmány szerinti hatóanyagokat adagolhatjuk transzdermális tapaszokkal is. Ezen transzdermális tapaszok előállítása a szakterületen ismert (például Brown, L., és R. Langer, “Transdermal Delivery of Drugs”, Ann. Rév. Med., 39:221-229 (1988)).
Egy további kivitelezési formánál a hatóanyagot olyan hordozókkal keverjük el, amelyek védik a vegyületet a szervezetből való gyors kiürüléssel szemben, ilyenek a szabályozott felszabadulású készítmények, beleértve az inplantátumokat és mikrokapszulázott hordozórendszereket. Erre a célra biológiai úton lebomlani képes biokompatibilis polimereket alkalmazunk, például a következőket: etilén-vinil-acetát, polianhidridek, poliglikolsavak, kollagén, poliortoészterek vagy politejsav. Ezen készítmények előállítása a szakterületen jártas szakember számára ismert. Az anyagokat kereskedelmi forgalomban beszerezhetjük például az Alza Corporation és Nova Pharmaceuticals Inc cégektől.
Liposzóma szuszpenziókat szintén alkalmazhatunk mint gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagokat. Ezeket a szakterületen jártas szakember számára ismert módon állítjuk elő (például USP 4 522 811 számú szabadalmi leírás). Például • · · · _ 35 - ...........
liposzóma készítményeket állíthatunk elő oly módon, hogy a megfelelő lipidet vagy lipideket (például sztearoil-foszfatidil-etanolamin, sztearoil-foszfatidil-kolin, arachadoil-foszfatidil-kolin, és koleszterin) megfelelő szervetlen oldószerben feloldunk, majd elpárologtatjuk, amikoris egy vékony film vagy egy szárított lipidréteg marad vissza a tartály felületén. A hatóanyag vagy monofoszfátja, difoszfátja és/vagy trifoszfátja vizes oldatát ezután beadagoljuk a tartályba. A tartályt ezután kézzel rázzuk, hogy a lipidet a tartály falától elválasszuk, majd a lipid aggregátumokat diszpergáljuk és így képezzük a liposzóma szuszpenziót.
A találmány szerinti megoldás különböző módosításai és változatai, amelyek a szakember számára nyilvánvalóak, szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.

Claims (15)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. A következő képleteknek megfelelő nem-toxikus ditio-karbamátok alkalmazása humán kardiovaszkuláris betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításánál:
    R1SC(S)NR2R3 vagy R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 a képletben
    R1 jelentése hidrogénatom vagy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen nátrium vagy kálium, vagy NR4R5R6R7 általános képletű csoport, amely képletben R4, R5, R6 és R7 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos, lineáris, egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport, ahol egy vagy több hidroxilcsoport kapcsolódhat bármelyik szénatomhoz, vagy arilcsoport, és
    R2 és R3 jelentése egymástól függetlenül 1-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport -(CHOH)n(CH2)nOH csoport, ahol n értéke 0, 1, 2, 3, 4, 5 vagy 6, -(CH2)nCO2R1 vagy -(CH2)nCO2R4 általános képletű csoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport vagy R és R együttesen egy hidat képeznek, amely lehet egy -(CH2)m általános képletű csoport, ahol m értéke 3-6, és R4 jelentése alkil-, aril-, alkaril- vagy aralkil-csöpört, előnyösen acetil-, propionil-, vagy butiril-csoport.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti alkalmazása a következő ditiokarbamátoknak: nátrium-pirrolidin-N-karboditioát, nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát, trinátrium-N,N• · • 4
    -37 -di(karboxi-metil)-N-karboditioát, nátrium-N-metil-D-glükamin-N-karboditioát, nátrium-Ν,Ν-dietil-N-karboditioát (nátrium-dietil-ditio-karbamát), és nátrium-N,N-diizopropil-N-karboditioát.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás ahol a ditiokarbamát nátrium-pirrolidin-N-karboditioát.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás ateroszklerózis kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításához.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás érplasztika utáni restenosis kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításához.
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás koronáriás artériás betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításához.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás angina kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításához.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti alkalmazása kis véredény betegségeinek kezezlésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállításához.
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, amelynél a ditio-karbamátot 0,5-500 mg/kg testtömeg mennyiségben alkalmazzuk.
  10. 10. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a ditio-karbamátot perfúziós ballonkatéteren keresztül történő adagolásra alkalmas gyógyszerkészítményekhez alkalmazzuk.
  11. 11. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, amelynél a ditio-karbamátot valamely következő gyógyhatású szerrel kombináltan alkalmazzuk a gyógyszerkészítmény előállításánál: lipid csökkentő szer, vérlemezkeaggregációt gáltó szer, antitrombotikus «··· ·· _ 38 - ..... ......
    szer, kalciumcsatoma blokkoló, angiotenzin konvertáló enzim (ACE) inhibitor, β-blokkoló, nem szteroid gyulladásgátló vagy kortikoszteroid.
  12. 12. Gyógyszerkészítmény, amely a kardiovaszkuláris betegY ségek kezelésére hatásos mennyiségben valamely következő kép- u letnek megfelelő nem-toxikus ditio-karbamátot tartalmaz:
    R^QSjNR^3 vagy R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 a képletben
    R1 jelentése hidrogénatom vagy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen nátrium vagy kálium, vagy NrVrV általános képletű csoport, amely képletben R4, R5, R6 és R7 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos, lineáris, egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport, ahol egy vagy több hidroxilcsoport kapcsolódhat bármelyik szénatomhoz, vagy arilcsoport, és
    R és R jelentése egymástól függetlenül 1-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport -(CHOH)n(CH2)nOH csoport, ahol n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5 vagy 6, -(CH2)nCO2R1 vagy -(CH2)nCO2R4 általános képletű csoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport vagy R és R együttesen egy hidat képeznek, amely lehet egy -(CH2)m általános képletű csoport, ahol m értéke 3-6, és R4 jelentése alkil-, aril-, alkaril- vagy aralkil-csoport, előnyösen acetil-, propionil-, vagy butiril-csoport gyógyszerészetileg elfogadható higítóanyaggal vagy hordozóanyaggal együtt.
    • *
    -39• ·«·«·· • ·· · 9 ·♦9 • 9 9 99 ··· ·· 999999
  13. 13. A 12. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely ditio-karbamátként valamely következő vegyületet tartalmaz: nátrium-pirrolidin-N-karboditioát, nátrium-N-metil-N-karboxi-metil-N-karboditioát, trinátrium-N,N-di(karboxi-metil)-N-karboditioát, nátrium-N-metil-D-glükamin-N-karboditioát, nátrium-N,N-dietil-N-karboditioát (nátrium-dietil-ditio-karbamát), és nátrium-N,N-diizopropil-N-karboditioát.
  14. 14. A 12. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely ditio-karbamátként nátrium-pirrolidin-N-karboditioátot tartalmaz.
  15. 15. Eljárás kardiovaszkuláris betegségek kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállítására azzal jellemezve, hogy valamely következő képletnek megfelelő nem-toxikus ditio-karbamátot gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy higítóanyaggal elkeverünk:
    R1SC(S)NR2R3 vagy R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 a képletben
    R1 jelentése hidrogénatom vagy gyógyászatilag elfogadható kation, előnyösen nátrium vagy kálium, vagy NR4R5R6R7 általános képletű csoport, amely képletben
    R4, R5, R6 és R7 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos, lineáris, egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport, ahol egy vagy több hidroxilcsoport kapcsolódhat bármelyik szénatomhoz, vagy arilcsoport, és
    R és R jelentése egymástól függetlenül 1-10 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú vagy ciklusos alkilcsoport -(CHOH)n(CH2)nOH csoport, ahol n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5
    V
    V vagy 6, -(CH2)nCO2R1 vagy -(CH2)nCO2R4 általános képletű csoport, hidroxi-1-6 szénatomos alkilcsoport vagy R és R3 együttesen egy hidat képeznek, amely lehet egy -(CH2)m általános képletű csoport, ahol m értéke 3-6, és jelentése alkil-, aril-, alkaril- vagy aralkil-csoport, előnyösen acetil-, propionil-, vagy butiril-csoport.
HU9501229A 1992-10-30 1993-11-01 Use of dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases and pharmaceutical compositions containing said compounds HUT73440A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/969,934 US5380747A (en) 1992-10-30 1992-10-30 Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9501229D0 HU9501229D0 (en) 1995-06-28
HUT73440A true HUT73440A (en) 1996-07-29

Family

ID=25516198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9501229A HUT73440A (en) 1992-10-30 1993-11-01 Use of dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases and pharmaceutical compositions containing said compounds

Country Status (19)

Country Link
US (2) US5380747A (hu)
EP (1) EP0666741B1 (hu)
JP (1) JP3254486B2 (hu)
AT (1) ATE183089T1 (hu)
AU (1) AU692426B2 (hu)
BG (1) BG62682B1 (hu)
BR (1) BR9307337A (hu)
CA (1) CA2147881C (hu)
CZ (1) CZ111595A3 (hu)
DE (1) DE69326014T2 (hu)
DK (1) DK0666741T3 (hu)
ES (1) ES2136186T3 (hu)
GR (1) GR3031368T3 (hu)
HU (1) HUT73440A (hu)
NO (1) NO951616L (hu)
NZ (1) NZ258683A (hu)
PL (1) PL179113B1 (hu)
SK (1) SK56095A3 (hu)
WO (1) WO1994009772A1 (hu)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5821260A (en) * 1992-10-30 1998-10-13 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5739115A (en) * 1993-10-07 1998-04-14 Glycomed Incorporated Sulfated maltooligosaccharides with heparin-like properties
US5677291A (en) * 1993-12-10 1997-10-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Method of lowering serum cholesterol levels with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols
DE69535063T2 (de) * 1994-11-30 2006-12-21 Nippon Chemiphar Co. Ltd. Denaturierter low-density lipoprotein (ldl) rezeptor
US20020040008A1 (en) * 1995-01-24 2002-04-04 Wagner Denisa D. Method for treating and preventing atherosclerosis
US6469057B1 (en) * 1995-06-02 2002-10-22 Mcw Research Foundation, Inc. Methods for in vivo reduction of free radical levels and compositions useful therefor
US5741815A (en) * 1995-06-02 1998-04-21 Lai; Ching-San Methods for in vivo reduction of nitric oxide levels and compositions useful therefor
US5792787A (en) * 1995-06-07 1998-08-11 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5747528A (en) * 1996-02-21 1998-05-05 Warner-Lambert Company Chroman derivatives as anti-oxidants
US5608095A (en) * 1996-04-30 1997-03-04 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silyl-phenols and esters thereof as antiatherosclerotic agents
US5795876A (en) * 1996-04-30 1998-08-18 Hoechst Marion Rousssel, Inc. Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2, 6-di-alkyl-4-silyl-phenols
JP2000509070A (ja) * 1996-04-30 2000-07-18 ヘキスト・マリオン・ルセル・インコーポレイテツド ２，６―ジアルキル―４―シリル―フェノールを使用して血管細胞接着分子―１を阻害する方法および慢性炎症性疾患を治療する方法
US5782740A (en) * 1996-08-29 1998-07-21 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation dose delivery catheter with reinforcing mandrel
US5922761A (en) * 1996-09-06 1999-07-13 Medinox, Inc. Methods for in vivo reduction of iron levels and compositions useful therefor
SK66198A3 (en) * 1996-09-20 1999-09-10 Atherogenics Inc Diagnostics for and mediators of inflammatory disorders
US6114572A (en) * 1996-11-20 2000-09-05 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6670398B2 (en) * 1997-05-14 2003-12-30 Atherogenics, Inc. Compounds and methods for treating transplant rejection
ES2283933T3 (es) * 1997-05-14 2007-11-01 Atherogenics, Inc. Ester del acido succinico de probucol para la inhibicion de la expresion de vcam-1.
US6210312B1 (en) 1997-05-20 2001-04-03 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Catheter and guide wire assembly for delivery of a radiation source
US6121463A (en) * 1997-06-24 2000-09-19 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silylheterocyclic phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6133467A (en) * 1997-06-25 2000-10-17 Hoechst Marion Roussel, Inc. 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-4-methoxyphenylsilyl)-methyl-oxy]phenol and 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-2-methoxy-phenylsilyl)methyloxy]phenol
WO1999001118A2 (en) * 1997-07-01 1999-01-14 Atherogenics, Inc. Antioxidant enhancement of therapy for hyperproliferative conditions
AU2662899A (en) * 1998-02-13 1999-08-30 Medinox, Inc. Methods for the controlled delivery of carbon disulfide for the treatment of inflammatory conditions
US6224535B1 (en) 1998-02-17 2001-05-01 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation centering catheters
US6093743A (en) * 1998-06-23 2000-07-25 Medinox Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US20030181495A1 (en) * 1998-06-23 2003-09-25 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US6596770B2 (en) 2000-05-05 2003-07-22 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
WO2000000192A1 (en) * 1998-06-26 2000-01-06 University Of Washington INHIBITION OF NF-λB MEDIATED TISSUE INJURY USING DITHIOCARBAMATE DERIVATIVES
US6555579B2 (en) 1998-08-13 2003-04-29 The Wistar Institute Methods for reducing atherosclerotic plaques
US6589987B2 (en) 1998-09-08 2003-07-08 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using tetraethyl thiuram disulfide
US7816403B2 (en) * 1998-09-08 2010-10-19 University Of Utah Research Foundation Method of inhibiting ATF/CREB and cancer cell growth and pharmaceutical compositions for same
US6548540B2 (en) 1998-09-08 2003-04-15 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6706759B1 (en) 1998-09-08 2004-03-16 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6887712B1 (en) 1998-11-09 2005-05-03 Atherogenics, Inc. Methods and compositions to lower plasma cholesterol levels
US6372187B1 (en) 1998-12-07 2002-04-16 Mcdermott Technology, Inc. Alkaline sorbent injection for mercury control
US6284199B1 (en) * 1999-03-31 2001-09-04 Mcdermott Technology, Inc. Apparatus for control of mercury
US6855859B2 (en) * 1999-03-31 2005-02-15 The Babcock & Wilcox Company Method for controlling elemental mercury emissions
US6734192B1 (en) 1999-08-23 2004-05-11 Mp-1 Inc. Treatment of viral infections
US6582417B1 (en) 1999-09-22 2003-06-24 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Methods and apparatuses for radiation treatment
US6605031B1 (en) 1999-09-22 2003-08-12 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Stepped centering balloon for optimal radiation delivery
US20030130185A1 (en) * 2000-09-29 2003-07-10 David Bar-Or Metal-binding compounds and uses therefor
KR101312880B1 (ko) 1999-10-01 2013-09-30 디엠아이 바이오사이언시스, 인크 금속 결합 화합물 및 그의 용도
US7632803B2 (en) 1999-10-01 2009-12-15 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US20030158111A1 (en) * 1999-10-01 2003-08-21 David Bar-Or Methods and products for oral care
US7592304B2 (en) * 1999-10-01 2009-09-22 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US6274627B1 (en) 1999-10-12 2001-08-14 Medinox, Inc. Conjugates of dithiocarbamate disulfides with pharmacologically active agents and uses therefor
CA2396165C (en) * 2000-01-14 2011-01-04 John F. Hunt Airway alkalinization as therapy for airway diseases
US6540734B1 (en) 2000-02-16 2003-04-01 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Multi-lumen extrusion tubing
US7994449B2 (en) 2000-02-16 2011-08-09 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Square-wave laser bonding
US6710086B1 (en) 2000-02-25 2004-03-23 Medinox, Inc. Protected forms of pharmacologically active agents and uses therefor
US6747061B2 (en) 2000-03-21 2004-06-08 Atherogenics, Inc. N-substituted dithiocarbamates for the treatment of biological disorders
WO2002040021A2 (en) 2000-11-17 2002-05-23 Idenix (Cayman) Limited Methods for inhibiting the transmission of hiv using topically applied substituted 6-benzyl-4-oxopyrimidines
US7481790B2 (en) * 2000-12-27 2009-01-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Vessel enlargement by arteriogenic factor delivery
US20020168396A1 (en) * 2001-02-22 2002-11-14 Ramanan Ramaswami Vasodilator impregnated devices and methods
CA2458622A1 (en) * 2001-08-24 2003-03-06 Maine Medical Center Research Institute Copper-dependent non-traditional pro-inflammatory cytokine export and methods, compositions and kits relating thereto
EP1450787A4 (en) 2001-11-15 2006-01-25 Galileo Pharmaceuticals Inc FORMULATIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OR AMELIORATION OF INFLAMMATORY CONDITIONS
MXPA04005864A (es) * 2001-12-19 2004-10-29 Atherogenics Inc Derivados de charcona y su uso para tratar enfermedades.
CA2493544A1 (en) * 2002-07-22 2004-01-29 Chemgenex Pharmaceuticals, Inc. Angiogenesis inhibition by cephalotaxine alkaloids, derivatives, compositions and uses thereof
DE10252772A1 (de) * 2002-11-13 2004-05-27 Beiersdorf Ag Verwendung von einem oder mehreren Diethyldithiocarbamaten zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Zubereitungen zur Prophylaxe und Behandlung von entzündlichen Hautzuständen und/oder zum Hautschutz bei empfindlich determinierter und trockener Haut
US20040181075A1 (en) * 2002-12-19 2004-09-16 Weingarten M. David Process of making chalcone derivatives
SG142207A1 (en) * 2003-01-13 2008-05-28 Atherogenics Inc Process of preparing esters and ethers of probucol and derivatives thereof
WO2004108094A2 (en) * 2003-06-06 2004-12-16 Atherogenics, Inc. Sulfonamide-substituted chalcone derivatives and their use to treat diseases
US20060025481A1 (en) * 2004-02-09 2006-02-02 Strange Matthew L Process for preparation of probucol derivatives and polymorphic forms thereof
US7294736B2 (en) * 2004-04-09 2007-11-13 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
US20060063828A1 (en) * 2004-06-28 2006-03-23 Weingarten M D 1,2-Bis-(substituted-phenyl)-2-propen-1-ones and pharmaceutical compositions thereof
US7345191B2 (en) * 2005-02-26 2008-03-18 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
CN101686676A (zh) * 2007-03-26 2010-03-31 沙路特里亚制药有限责任公司 用于治疗糖尿病的方法和普罗布考衍生物的组合物
US20080280985A1 (en) * 2007-03-27 2008-11-13 Scott Robert A D Methods and Compositions Using Certain Phenolic Derivatives for the Treatment of Diabetes
WO2008128191A2 (en) * 2007-04-13 2008-10-23 Chemgenex Pharmaceuticals, Inc. Oral cephalotaxine dosage forms
WO2008135984A1 (en) * 2007-05-03 2008-11-13 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Composition comprising s-allylmercapto-n-acetylcysteine (assnac) for up-regulation of cellular glutathione level
WO2009006583A1 (en) * 2007-07-03 2009-01-08 Joslin Diabetes Center, Inc. Treatment of cardiovascular disease with salicylates

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3875170A (en) * 1971-05-25 1975-04-01 Banyu Pharma Co Ltd Pyridine bis (dithiocarbamate) derivatives
US4025527A (en) * 1973-07-13 1977-05-24 Smith Kline & French Laboratories Limited Certain thiazoles and oxazoles
GB1542840A (en) * 1975-02-03 1979-03-28 Smith Kline French Lab Heterocyclic dithiocarbamates and isothioureas
US4670471A (en) * 1981-11-03 1987-06-02 Clark Lealand L Treatment for inflammatory skin disease
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
GB8421039D0 (en) * 1984-08-17 1984-09-19 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
EP0228458B2 (en) * 1985-07-05 1997-10-22 Whitehead Institute For Biomedical Research Epithelial cells expressing foreign genetic material
US4980286A (en) * 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
EP0284879A3 (en) * 1987-03-17 1990-10-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US4870101A (en) * 1987-03-17 1989-09-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US5035878A (en) * 1988-09-12 1991-07-30 University Of Rochester Use of dithiocarbamates to counteract myelosuppression
US5166133A (en) * 1991-04-17 1992-11-24 Cetus Corporation Method for inhibing adhesion of white blood cells to endothelial cells
AU659482B2 (en) * 1991-06-28 1995-05-18 Massachusetts Institute Of Technology Localized oligonucleotide therapy
FR2679452B1 (fr) * 1991-07-22 1993-11-12 Cis Bio International Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation.
US5206264A (en) * 1991-11-04 1993-04-27 Cypros Pharmaceutical Corporation Use of disulfiram to prevent cardiovascular damage
US5306724A (en) * 1992-08-17 1994-04-26 Clintec Nutrition Company Method for preventing and treating atherosclerosis
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Also Published As

Publication number Publication date
AU692426B2 (en) 1998-06-11
NZ258683A (en) 1999-08-30
PL308673A1 (en) 1995-08-21
NO951616D0 (no) 1995-04-27
JPH08506798A (ja) 1996-07-23
SK56095A3 (en) 1996-06-05
NO951616L (no) 1995-04-27
CA2147881C (en) 1999-09-07
ES2136186T3 (es) 1999-11-16
ATE183089T1 (de) 1999-08-15
HU9501229D0 (en) 1995-06-28
PL179113B1 (pl) 2000-07-31
JP3254486B2 (ja) 2002-02-04
AU5665394A (en) 1994-05-24
WO1994009772A1 (en) 1994-05-11
US5877203A (en) 1999-03-02
DK0666741T3 (da) 1999-12-06
EP0666741B1 (en) 1999-08-11
US5380747A (en) 1995-01-10
CZ111595A3 (cs) 1998-07-15
CA2147881A1 (en) 1994-05-11
DE69326014D1 (de) 1999-09-16
BG99604A (bg) 1996-02-28
BG62682B1 (bg) 2000-05-31
BR9307337A (pt) 1999-05-25
DE69326014T2 (de) 1999-12-23
EP0666741A1 (en) 1995-08-16
GR3031368T3 (en) 2000-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT73440A (en) Use of dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases and pharmaceutical compositions containing said compounds
US5783596A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5792787A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US20110003774A1 (en) Compounds having anti-proliferative properties
JP2006232848A (ja) 心血管性疾患および炎症性疾患を治療するためのプロブコールモノエステル類
AU2016298175B2 (en) Compositions and methods of treating cancer
PT642341E (pt) Utilizacao de inibidores de redutase de 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima a no tratamento de cancro
Sadzuka et al. Effects of methylxanthine derivatives on adriamycin concentration and antitumor activity
IL295737A (en) Cancer treatment methods
BR112020016033A2 (pt) Métodos para prevenir, reduzir ou erradicar a toxicidade e nefrotoxicidade causada pelo acetaminofeno ou seu derivado e para administrar acetaminofeno, uso de um composto, composições para uso na prevenção, redução ou erradicação da toxicidade e da nefrotoxicidade causada pelo acetaminofeno ou seu derivado, e, combinação.
AU709939B2 (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
AU2004200762B2 (en) Compounds having anti-proliferative properties

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee