SK56095A3 - Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflamatory diseases - Google Patents

Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflamatory diseases Download PDF

Info

Publication number
SK56095A3
SK56095A3 SK560-95A SK56095A SK56095A3 SK 56095 A3 SK56095 A3 SK 56095A3 SK 56095 A SK56095 A SK 56095A SK 56095 A3 SK56095 A3 SK 56095A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
sodium
carbodithioate
group
dithiocarbamate
pyrrolidine
Prior art date
Application number
SK560-95A
Other languages
English (en)
Inventor
Russel M Medford
Margaret K Offermann
R Wayne Alexander
Original Assignee
Univ Emory
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Emory filed Critical Univ Emory
Publication of SK56095A3 publication Critical patent/SK56095A3/sk

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/325—Carbamic acids; Thiocarbamic acids; Anhydrides or salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/70503—Immunoglobulin superfamily, e.g. VCAMs, PECAM, LFA-3
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/7056—Selectin superfamily, e.g. LAM-1, GlyCAM, ELAM-1, PADGEM
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/32—Cardiovascular disorders
    • G01N2800/323—Arteriosclerosis, Stenosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Oblasť techniky
Tento vynález spadá do oblasti spôsobov a prostriedkov na liečenie aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení.
Doteraiší stav techniky
Adhézia leukocytov k endotelu (bunkovej výstelke) predstavuje podstatný a včasný príznak pri mnohých rozmanitých zápalových ochoreniach vrátane aterosklerózy, chorôb autoimunity a bakteriálnych a vírusových infekcií. Tento proces je čiastočne sprostredkovaný vyvolanou expresiou povrchových adhéznych molekúl bunkovej výstelky, ako je ICAM-1 (intracelulárna adhézna molekula-1), VCAM-1 (vaskulárna adhézna molekula -1) a ELAM-1 (endotelná leukocytová adhézna molekula-1). Tieto adhézne molekuly sa viažu k bunkám spôsobujúcim imunitu, ktoré vyvolávajú a šíria protizápalovú odozvu. Jedna z adhéznych molekúl, VCAM-1, hrá predovšetkým dôležitú úlohu pri viazaní monocytov. Násobné signály vyvolávajú expresiu povrchových adhéznych molekúl bunky.
Ateroskleróza je chronické zápalové ochorenie arteriálnej intimy, ktorú charakterizujú ohniská akumulácie leukocytov, buniek hladkého svalstva, lipidov a extracelulárnej základnej hmoty. Stredovým znakom a jedným z najskôr pozorovateľných príznakov v patogenéze aterosklerotických plátov je adhézia mononukleáných leukocytov k oddeleným segmentom arteriálnej bunkovej výstelky cez proteíny VCAM-1 na povrchu vaskulárnej bunkovej výstelky. Po pripojení k mononukleárne leukocyty premenia na bunkovej výstelke sa makrofágmi zaťažené lipidy alebo penové bunky. Ateroskleróza začína ako vysoko ohniskové poškodenie vo vaskulárnej stene, zvyčajne v oblasti, kde sa normálny, laminárny tok krvi rozdeľuje, ako sa rozdeľuje pri prietoku ciev. Tieto oblasti nízkeho strihového napätia sú charakterizované abnormálnou miestnou akumuláciou oxidatívne modifikovaného lipoproteínu s nízkou hustotou (ox-LDL).
Bol vyslovený predpoklad, že včasné príznaky v patogenéze aterosklerózy sú sprostredkované lipoproteínmi s nízkou hustotou, ktoré sa konvergujú látkami reaktívnymi s kyslíkom na oxidatívne modifikované lipoproteíný s nízkou hustotou (Steinberg a kol., Beyond cholesterol: Modifications of low density lipoprotein that increase its atherogenecity, N. Eng. J. Med. 320. 915 - 924 (1989), Parthasarathy a kol., Probucol inhibits oxidative modification of low density lipoprotein J. Clin. Invest. 77(2), 641 - 664 (1986). Nie je jasné akým mechanizmom je LDL oxidovaný buď intracelulárne alebo extracelulárne.
Súčasná terapia kardiovaskulárnych ochorení a predovšetkým aterosklerózy neošetruje príčinu ochorenia, ale namiesto toho ošetruje príznaky choroby alebo menej rizikové faktory spojené s chorobou. Farmaceutické prostriedky, ktoré sa predpisujú pre tieto stavy zahrňujú prípravky znižujúce lipidy, ako je probucol a kyselina nikotínová, aspirín (ktorý zabraňuje zlepovaniu krvných doštičiek), antitrombotické prípravky, ako je kumadín, blokátory vápnikových kanálikov, ako je varapamil, diltiazem a i nifedipin, angiotensin konvertujúci enzýmové (ACE) inhibítory, ako je captopril a enalopril, a B-blokátory, ako je propanalol, terbutanol a labetalol. Pretože terapeutické prípravky nie sú selektívne, môžu nepriaznivo ovplyvňovať rad rozdielnych orgánov a majú významné vedľajšie účinky. V súčasnom období nejestvujú žiadne prípravky, ktoré by boli zamerané na inhibíciu viazania monocytov k povrchovým adhéznym molekulám buniek, ako je VCAM-1.
Uvádza sa, že kardiovaskulárne choroby sú v súčasnom období hlavnou príčinou úmrtia v Spojených štátoch amerických a 90 % kardiovaskulárnych chorôb je teraz diagnostikovaných ako ateroskleróza. Preto vzniká silná potreba spoznávať nové spôsoby a získať nové farmaceutické prostriedky na ich ošetrovanie.
Ditiokarbamáty sú tranzitné chelátory kovov, ktoré sa klinicky používajú pri otravách ťažkými kovmi (R. C. Baselt a kol., Comparisons of antidotal efficacy of sodium dietylditiocarbamate, D-penicillamine and trietylenetetramine úpon acute toxicity of nickel carbonyl in rats, Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 18(4), 677 - 688 (1977), T. Menne a K. Kaaber, Treatment of pompholyx due to nickel allergy with chelating agents, Contact Dermatitis 4(5), 289 - 290 (1978),
F. W. Sunderman, Clinical response to therapeutic agents in poisoning from mercury vapor, Ann. Clin. Lab. Sci. 8.(4), 259 269 (1978), F. w. Sunderman, Efficacy of sodium diétyldithiocarbamate (dithiocarb) in acute nickel carbonyl poisoning, Ann. Clin. Lab. Sci. 9(1), 1 - 10, (1979), G. R. Gale a kol.,
Diétyldithiocarbamate in treatment of acute cadmium poisôning, Ann. Clin. Lab. Sci. 11(6), 476 - 483 (1981), M. M. Jones a M. G. Cherian, The search for chelate antagonists for chronic cadmium intoxication, Toxicology 62(1), 1-25 (1990),
S. G. Jones a kol., A comparison of diétyldithiocarbamate and EDTA as antidotes for acute cadmium intoxication Res. Commun. Chem. Pathol. Pharmacol. 38.(2), 271 - 278, (1982), A. Pages a kol., Dithiocarbaraates in heavy metal poisoning: complexes of N,N-di-(1-hydroxyethyl)dithiocarbamate with Zn(II), Cd(II), Hg(II), CH3Hg(II), and C6H5Hg(II), J. Inorg. Biochem. 25(1), 35 - 42 (1985), S. K. Tandon a kol., The lead-chelating effects of substituted dithiocarbamates, Biomed. Environ. Sci. 3(3), 299 - 305 (1990).
Ditiokarbamáty sa taktiež podporne používajú pri chemoterapii cis-platinou, aby sa zabránilo renálnej toxicite (M. P. Hacker a kol., Effect of disulfiram (tetraethylthiuram disulfide) and diethyldithicarbamate in mice, Cancer Res. 42(11), 4490 - 4499 (1982), Bodenner Selected protection against cis-diamminedichloroplatinum (II) - induced toxicity in kidney, gut, and bone marrow by diethyldithiocarbamate , Canc. Res. 46, 2751 - 2755 (1986). Cheláty prechodných kovov by mali mat účinok blokujúci tvorbu hydroxyskupín intracelulárnou cestou, pomocou Haber-Weiss-Fentonovej reakcie (M. Saran a kol., Radical reactions in vivo - an overview, Radiat. Environ. Biophys. 29(4), 249 - 262 (1990).
Dikarbamát, ktorý sa v súčasnosti používa pri liečbe závislosti od alkoholu, je disulfiram, ktorý je dimérom diétylditiokarbamátu. Disulfiram inhibuje aldehyd-dehydrogenázu pečene (K. Inoue a kol., Effect of disulfiram and its reduced metabolite, diethyldithiocarbamate on aldehyde dehydrogenase of human erythrocytes, Life Sci. 30(5), 419 - 424 (1982).
Uvádza sa, že ditiokarbamáty inhibujú replikáciu HIV vírusu a tiež zvyšujú dozrievanie špecifických subpopulácií T buniek. To viedlo ku klinickým skúškam diétylditiokarbamátu u pacientov trpiacich AIDS (E. Reisinger a kol., Inhibition of HIV progression by dithiocarb”, Lancet 335. 679 (1990).
Podstata vynálezu
Predmet tohoto vynálezu sa preto týka spôsobu liečby aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení.
Iný predmet tohto vynálezu sa týka farmaceutických prostriedkov na ošetrovanie aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení.
Ešte iný predmet tohoto vynálezu sa a prostriedkov na blokovanie schopnosti buniek expresii génových produktov, o ktorých je zodpovedné za ulpievanie leukocytov na týchto aktiváciu buniek.
týka spôsobov podieľať sa na známe, že sú bunkách, a na
V dalšom je opísané zhrnutie tohoto vynálezu.
Zistilo sa, že ditiokarboxyláty a predovšetkým ditiokarbamáty blokujú vyvolanú expresiu povrchovo adhéznej molekuly bunkovej výstelky VCAM-1, a tak sú vhodné na liečenie aterosklerózy, postangioplastickej restenózy, koronárnych arte5 riálnych ochorení, angíny a iných kardiovaskulárnych chorôb, rovnako ako nekardiovaskulárnych zápalových ochorení, ktoré sú sprostredkované VCAM-1.
Je dôležité, že určité ditiokarbamáty, ako nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát (ďalej tiež PDTC), signifikantne neblokujú vyvolanú expresiu iných povrchových adhéznych molekúl bunkovej výstelky, ako je ICAM-1 alebo ELAM-1, a preto nemajú nepriaznivý účinok na zápalové odozvy, ktoré nesprostredkuje VCAM-1. Zistilo sa tiež, že nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát neprejavuje preferenčnú toxicitu k proliferujúcim alebo abnormálne deliacim sa bunkám hladkého svalstva. Iný ditiokarbamát, nátrium-N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioát, taktiež inhibuje expresiu VCAM-1, bez toho aby mal významný vplyv na ICAM-1, ale neinhibuje preferenčnú toxicitu pre abnormálne deliace sa vaskulárne bunky hladkého svalstva. Schopnosť iných aktívnych ditiokarbamátov selektívne inhibovať VCAM-1 (bez toho aby nastala inhibícia expresie ELAM-ll alebo icam-1) a prejavovať preferenčnú toxicitu voči abnormálne sa deliacim bunkám hladkého svalstva, sa hodnotí podlá tu v ďalšom uvedených spôsobov.
Ditiokarbamáty, ktoré sú vhodné na ošetrovanie aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení, zahrňujú, bez toho aby boli na ne obmedzené, zlúčeniny všeobecných vzorcov
R1SC(S)NR2R3 alebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 v ktorých
R1 znamená atóm vodíka, farmaceutický prijatelný katión vrátane sodného a draselného, bez toho aby bol na ne obmedzený a skupinu vzorca NR4R5R6R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s l až 6 atómami uhlíka, na ktorej je jedna alebo väčší počet hydroxyskupín umiestnený na lubovoínom atóme uhlíka, alebo arylovú skupinu a í
RÄ a RJ znamenajú nezávisle od seba priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s ľ až 10 atómami uhlíka, skupinu vzorca -(CHOH)n(CH2)nOH, kde n znamená číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6,
-(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 alebo hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo
R2 a R3 tvoria spolu mostík, ako “(CH2)m, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovú, arylovú, alkarylovú alebo aralkylovú skupinu, vrátane acetylovej, propionylovej a butyrylovej skupiny.
Aktívne ditiokarboxyláty a predovšetkým ditiokarbamáty, zahrnuté do rozsahu tohoto vynálezu, sa môžu používať na liečenie akútnych a chronických zápalových ochorení sprostredkovaných VCAM-1, vrátane reumatizmu, osteoartritídy, astmy a dermatitídy, ktorými však výpočet nie je obmedzený, a môžu byt prospešné pri liečbe rozptýlenej sklerózy.
Zlúčeniny sú vhodné ako na primárne, tak aj na podporné lekárske ošetrovanie kardiovaskulárnych ochorení. Zlúčeniny sa môžu používať pri podpornej terapii v kombinácii s prípravkami, ktoré sa podávajú na zníženie rizika ochorenia znížením LDL a sérového cholesterolu. Spôsob predstavuje významnú výhodu pri ošetrovaní kardiovaskulárnych chorôb, pri ktorom sa pokračuje pri súbežnej terapii jednoducho tak, že sa zamedzuje šíreniu choroby, a ak sa zlúčeniny primerane používajú, poskytuje sa týmto možnosť lekársky podrobiť liečeniu aterosklerózu tým, že sa zabraňuje novému poškodeniu z pokračujúcej choroby a už vzniknuté poškodenie sa privádza na ústup. Zlúčeniny sa môžu podávať na ošetrovanie chorôb malých ciev, pri ktorých ošetrenie nie je možné vykonať chirurgicky, alebo angioplasticky alebo iných cievnych ochorení, pri ktorých nie je možné zvoliť na liečenie chirurgický zákrok. Zlúčeniny sa môžu tiež používať pri stabilizácii pacientov ' pred revaskularizačnou terapiou.
Aktívna zlúčenina alebo zmes zlúčenín sa podáva íubovoíným vhodným spôsobom, vrátane orálneho a intravenózneho podania, na ktoré však nie sú obmedzené. Všeobecné rozmedzie dávky sa bude pohybovyt od 0,5 do 500 mg/kg telesnej hmotnosti s rozpisom dávky od jednej každý deň do dvakrát denne. Dĺžka dávkovania bude v rozmedzí od jedinej dávky podanej len jeden až dvakrát za deň až po dávku podávanú počas dvoch až šesť mesiacov.
Zlúčeniny sa môžu podávať priamo do vaskulárnej steny pri použití perfúznych katétrov s balónikom v smere ku koronárnej oblasti alebo k inej arteriálnej angioplastickej oblasti alebo do týchto oblastí. Ako príklad sa uvádza podanie 2 až 5 ml fyziologicky prijateľného roztoku, ktorý obsahuje približne 1 až 500 μπιοί zlúčeniny. Zmes zlúčenín sa podáva pri jednonásobku až päťnásobku atmosférického tlaku. Počas nasledujúcich šiestich mesiacov, počas obdobia maximálneho rizika restenózy, sa aktívne zlúčeniny podávajú inými vhodnými cestami a podía rozpisu dávok.
Relatívne krátke obdobie liečenia aktívnymi zlúčeninami sa používa na to, aby sa spôsobilo zmenšené poškodenie, ktoré je vyvolané koronárnym arteriálnym ochorením, ktoré nemôže byť ošetrené buď angioplasticky alebo chirurgicky. Príkladom krátkeho obdobia ošetrovania je dva až šesť mesiacov, pri dávkovom rozmedzí od 0,5 do 500 mg/kg telesnej hmotnosti, podávané v rozmedzí intervalu od jedenkrát do trikrát denne, pričom tento príklad sa nemá pokladať za obmedzenie možných ošetrení.
Dlhšie obdobie ošetrovania sa môže používať na zabránenie postupujúceho ochorenia u vysoko rizikových pacientov. Dlhé obdobie ošetrovania môže trvať roky, s dávkami v rozmedzí od 0,5 do 500 mg/kg telesnej hmotnosti, pri podávaní v intervale od jedenkrát každý deň do trikrát denne.
Aktívne zlúčeniny sa môžu podávať v období bezprostredne pred a po koronárnej angioplastike, ako opatrenie na zníženie alebo vylúčenie abnormálnej proliferácie a zápalovej odozvy, ktorá súčasne vedie ku klinicky signifikantnej restenóze.
Aktívne zlúčeniny sa môžu podávať súčasne s inými liečivami na ošetrovanie kardiovaskulárnych ochorení, vrátane prípravkov znižujúcich lipidy, ako je probucol a kyselina nikotínová, inhibítorov zhlukovania krvných doštičiek, ako je aspirín, antitrombotických prípravkov, ako je kumadín, blokátorov vápnikových kanálikov, ako varapamil, diltiazem a nifedipin, angiotenzín konvertujúcich enzýmových (ACE) inhibítorov, ako je captopril a enalopril, a β-blokátorov, ako je propanalol, terbutalol a labetalol. Zlúčeniny sa môžu tiež podávať v kombinácii s nesteroidnými protizápalovými prostriedkami, ako je ibuprofén, indometacín, fenoprofén, kyselina mefanamová, kyselina flufenamová alebo sulindac, alebo s kortikosteroidmi.
Prehíad obrázkov na výkresoch
Obr. 1 je ilustráciou autorádiogramu mRNA, získanej ako je opísané ďalej, hybridizovanej buď na 32P-značenej íudskej VCAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik A), E-selektínovej (ELAM-1) špecifickej cDNA (obdĺžnik B) alebo ICAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik C). Po predchádzajúcom spracovaní počas 30 minút s 50 μπιοί nátrium pyrolidínditiokarbamátu (PDTC) sa bunky HUVE (z íudskej pupočnej žily) vystavia pôsobeniu 10 jedn./ml IL-lb pri nepretržitej prítomnosti 50 μπιοί nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu. Súbežné kontrolné stanovenie sa uskutočňuje rovnakým spôsobom s tým rozdielom, že nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát nie je prítomný. V uvedených časových intervaloch sa celá RNA izoluje a materiál rozdelený na veľkosť 20 pg sa denaturuje 1,0 % aragózovým gélom, obsahujúcim formaldehyd, pre elektroforézu a prenesie sa do nitrocelulózy, hybridizuje ako je opísané vyššie a vizualizuje autorádiograficky. Pruh 1-0 hodín, pruhy 2, 4, 6, 8 - OL-1 samotný pre 2, 4, 8 a 24 hodiny, pruhy 3, 5, 7, 9 - IL-1 s PDTC pre 2, 4, 8 a 24 hodín.
Obr. 2 je ilustráciou rádiogramu mRNA, získanej ako je opísané ďalej, hybridizovanej buď na 32P-značenej ľudskej VCAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik A), E-selektínovej (ELAM-1) špecifickej cDNA (obdĺžnik B) alebo ICAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik C). Bunky HUVE sa vopred spracujú uvedenými koncentráciami nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu, potom ša vystavia IL-lb v prítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu počas 4 hodín a skúmajú sa na nahromadenie VCAM-1 na mRNA pomocou Nothern filter hybridizačnej analýzy. Pruh 1 kontrolné stanovenie, pruh 2 - IL-1 (10 jedn./ml), pruh 3 IL-lb + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (0,05 pmol), pruh 4 - IL-1 LB + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (0,5 μοί), pruh
- IL-lb + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (5,0 μοί), pruh
- IL-lb + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (50,0 μοί), pruh
- IL-lb + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (100 μοί)
Obr. 3 je ilustráciou autorádiogramu mRNA, získanej ako je opísané ďalej, hybridizovanej buď na 32P-značenej íudskej VCAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik A), E-selektínovej (ELAM-1) špecifickej cDNA (obdĺžnik B) alebo ICAM-1 špecifickej cDNA (obdĺžnik C). Bunky HUVE sa vopred spracujú ako je opísané v súvislosti s obr. 1 s 50 μιηοΐ nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu, vystavia sa počas 4 hodín prípravkom uvedeným ďalej a skúmajú sa na nahromadenie VCAM-1 (obdĺžnik A) a ICAM-1 (obdĺžnik B) mRDA. Pruh 1 - TNFa (100 jedn./ml), pruh 2 - TNFa + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát, pruh 3 - lipopolysacharid (LPS) (100 ng/ml), pruh 4 - LPS + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát, pruh 5 - poly(I:C) (100 mg/ml), pruh 6 - poly(I:C) + nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát.
Obr. 4 je grafom relatívnej povrchovej expresie buniek VCAM-1 a ICAM-1 v prítomnosti (tmavý pás) alebo neprítomnosti (svetlý pás) nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu a v prítomnosti väčšieho počtu typov indukujúcich stimuláciu. Sútokové (confluent) bunky HUVE sa vopred spracujú alebo vopred nespracujú (iba CTL) počas 30 minút s 50 μπιοί nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu a potom počas uvedeného časového obdobia vystavia expozícii zmienených prípravkov v prítomnosti alebo neprítomnosti (iba CTL) nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu. Expresia povrchových buniek sa stanovuje primárnym viazaním s VCAM-1 špecifickými (84H10) monoklonáInými protilátkami myší, s nasledujúcim sekundárnym viazaním s protimyšacím IgG kozy, značeným peroxidázou z chrenu dedinského. Stanovenie množstva sa uskutočňuje určením kalorimetrickej konverzie TMB pri 450 nm. Obr. 4 ukazuje, že násobné regulátorové signály vyvoláva VCAM-1, avšak nie ICAM-1 všeobecnou cestou senzitivity ditiokarbamátu v ludskej vaskulárnej bunkovej výstelke .
Obr. 5 je grafom relatívnej expresie povrchových VCAM-1 buniek (optická hustota, O.D., 595 nmol) v bunkovej výstelke pupočnej žily človeka, aktivovaných TNFa, proti koncentráciám rôznych antioxidantov. (PDTC je nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát, DETC je nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát, označovaný tiež ako nátrium diétylditiokarbamát, NAC je N-acetylcysteín a DF je desferoximín).
Obr. 6 je grafom relatívnej expresie povrchových VCAM-1 buniek (optická hustota 595 nmol) v bunkovej výstelke pupočnej žily človeka, aktivovaných TNFa, v prítomnosti špecifického množstva antioxidantu. (PDTC je nátrium N-pyrolidínditiokarbamát, DiDTC je nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát, SarDTC je nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioát, IDADTC je trinátrium N,N-di(karboxymetyl)-N-karboditioát, MGDTC je nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioát, MeOBGDTC je nátrium N-(4-metoxybenzyl)-D-glukamín-N-karboditioát, DEDTC je nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát, Di-PDTC je nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioát a NAC je N-acetylcysteín).
Obr. 7 je grafom percentuálneho obsahu buniek Molt-4 viažúcich sa k bunkám HUVE, buď nestimulovaným alebo stimulovaným TNFa v množstve 100 jedn./ml počas 6 hodín v prítomnosti alebo neprítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu.
Obr. 8 ilustruje chemickú štruktúru týchto ditiokarbamátov:
nátrium N-pyrolidín-N-karboditioát, nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioát, trinátrium N,N-di(karboxymetyl)-N-karboditioát, nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioát, nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát (nátrium diétylditiokarbamát), nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioát a nátrium N-(4-metoxybenzyl)-D-glukamín-N-karboditioát,
V ďalšom sa uvádza detailný opis vynálezu.
Výraz alkyl, ak sa tu používa a nie je inak upresnený, týka sa nasýtenej priamej, rozvetvenej alebo cyklickej uhľovodíkovej skupiny s 1 až 10 atómami uhlíka a jednotlivo zahrňuje metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, terc.-butyl, pentyl, cyklopentyl, izopentyl, neopentyl, hexyl, izohexyl, cyklohexyl,
3-metylpentyl, 2,2-dimetylbutyl a 2,3-dimetylbutyl.
Výraz alkenyl, ak sa tu používa a nie je inak upresnený sa týka priamej, rozvetvenej alebo cyklickej uhľovodíkovej skupiny s 2 až 10 atómami uhlíka, ktorá obsahuje najmenej jednu dvojitú väzbu.
Výraz alkinyl, ak sa tu používa a nie je inak upresnený, sa týka priamej alebo rozvetvenej uhľovodíkovej skupiny s 2 až 10 atómami uhlíka, ktorá obsahuje najmenej jednu trojitú väzbu.
Výraz aralkyl sa vzťahuje na arylovú skupinu, s najmenej jedným alkylovým substituentom.
Výraz alkaryl sa vzťahuje na alkylovú skupinu, ktorá má najmenej jeden arylový substituent.
Výraz halogén(alkyl, alkenyl alebo alkinyl) sa týka alkylovej, alkenylovej alebo alkinylovej skupiny, v ktorej najmenej jeden z atómov vodíka v skupine je nahradený atómom halogénu.
Výraz aryl, ak sa tu používa a nie je inak upresnený, sa týka fenylovej skupiny alebo substituovanej fenylovej skupiny, v ktorých fenylový kruh obsahuje najmenej jeden z týchto substituentov: hydroxyskupina, karboxyskupina alebo jej farmaceutický prijatelná sol, C02(alkylová) skupina, alkoxyskupina, alkylová skupina alebo glukamínový zvyšok.
Výraz alkoxyskupina, ak sa tu používa a nie je inak upresnený sa týka časti so štruktúrou -O-alkyl.
Výraz halogén, ktorý sa tu používa, zahrňuje atóm fluóru, chlóru, brómu a jódu.
Výraz hydroxyalkyl, ktorý sa tu používa, sa týka alkylovej skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, v ktorej najmenej jeden z atómov vodíka, pripojený k lubovolnému z atómov uhlíka, je nahradený hydroxyskupinou.
Výraz tiolový antioxidant sa vzťahuje na zlúčeninu obsahujúcu síru, ktorá zabraňuje oxidácii.
Výraz farmaceutický prijatelný derivát sa vzťahuje na derivát aktívnej zlúčeniny, ktorá je po podaní príjemcovi schopná priamo alebo nepriamo poskytnúť základnú zlúčeninu, alebo ktorá samotná vykazuje aktivitu.
I. Aktívne zlúčeniny
Zistilo sa, že ditiokarboxyláty sú vhodné na ošetrovanie aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení. Ditiokarboxyláty vrátane ditiokarbamátov sa môžu používať na blokovanie schopnosti buniek, vrátane bunkovej výstelky, spôsobiť expresiu VCAM-1, ktorým je génový produkt, o ktorom je známe, že je zodpovedný za priľnavosť leukocytov k bunkám. Skutočnosť, že ditiokarboxyláty vrátane ditiokarbamátov inhibujú génovú expresiu VCAM-1, významne podporuje dôležitosť oxidácie ako počiatočného signálu pri zmenených interakciách vaskulárnych-zápalových buniek. Špecifický molekulárny mechanizmus, ktorým karboxyláty pôsobia pri inhibícii génovej expresie VCAM-1, nie je známy.
Najmenej jedna zo zlúčenín, nátrium pyrolidínditiokarbamát (PDTC), inhibuje génovú expresiu VCAM-1 pri koncentrácii nižšej ako 1,0 μιηοΐ. Táto zlúčenina tak prejavuje preferenčnú toxicitu k proliferujúcim alebo abnormálne sa deliacim vaskulárnym bunkám hladkého svalstva. Zistilo sa, že nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát neblokuje významne expresiu ELAM-1 alebo ICAM-1, a preto ošetrovanie touto zlúčeninou nemá nepriaznivo pôsobiace vplyvy na zápalovú odozvu sprostredkovanú ELAM-1 alebo ICAM-1. Takto sa vo všeobecnosti vyhne potlačeniu imunity. Tým sa môže vyhnúť systémovým komplikáciám zo všeobecného potlačenia adhéznych molekúl pri rade iných typov buniek, známych k ich expresii.
Ditiokarboxyláty sú zlúčeniny všeobecného štruktúrneho vzorca
A-SC(S)-B, ktoré sú členmi všeobecnej skupiny zlúčenín známych ako tiolové antioxidanty a ktoré sa inak uvádzajú vo vzťahu s karboditiolmi alebo karboditiolátmi. Javí sa, že časť vzorca SC(S) je podstatná pre terapeutický účinok a že A a B môžu byť ľubovoľné skupiny, ktoré nemajú nepriaznivý účinok na účinnosť alebo toxicitu zlúčeniny. A a B môže zvoliť odborník v odbore na prepožičanie požadovaných charakteristických vlastností zlúčenine, vrátane veľkosti, náboja, toxicity a stupňa stability (vrátane stability v kyslom prostredí, ako v žalúdku, alebo v zásaditom prostredí, ako v intestinálnom trakte). Výber
A a B bude mat tiež dôležitý vplyv na distribúciu v tkanive na farmakokinetické vlastnosti zlúčeniny. Vo všeobecnosti je pre ošetrovanie kardiovaskulárnych chorôb žiadúce, aby sa zlúčenina hromadila a umiestňovala vo vrstve blízkej tepne, ktorá obsahuje vaskulárnu bunkovú výstelku. Zlúčeniny sa s výhodou vylučujú prostredníctvom výlučkov z ľadvín.
Ako ničím neobmedzené príklady A a B sa môžu nezávisle od seba uviesť alkylová, alkenylová, alkinylová, alkarylová, aralkylová, halogénalkylová, halogénalkenylová, halogénalkinylová, arylová a alkarylová skupina, atóm vodíka, alkoxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkyltioalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkyltiočasti a 1 až 10 atómami uhlíka v alkylovej časti, substituovaná alkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka (kde substituentom je nezávisle od seba hydroxyskupina, karbonyl alebo zvyšok karboxylovej kyseliny, ktoré sú umiestnené na ľubovoľnom zo všetkých 10 atómov uhlíka), ďalej skupina vzorca NR2R3, -(CHOH)nCH2OH, kde n znamená číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, skupina vzorca -(CH2)n C02Rl» vrátane acetylu, propionylu a butyrylu, hydroxyalkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka (kde najmenej jedna hydroxylová skupina je umiestnená na ľubovoľnom z atómov uhlíka) a A môže byť farmaceutický prijateľný katión vrátane sodíka, draslíka alebo skupiny vzorca NR4R5R6R7, na ktoré výpočet nie je obmedzený.
Pri inom uskutočnení sa môže podávať dimér všeobecného vzorca
B-C(S)S-SC(S)-B.
Ditiokarboxyláty sa majú voliť pre použitie pri ošetrovaní aterosklerózy a iných kardiovaskulárnych a zápalových ochorení tak, aby mali vlastnú lipofilicitu pre umiestnenie na postihnutom mieste. Zlúčenina sa nedostáva do oblasti s nízkou premennou, ako do miesta ukladania tuku. Pri výhodnom ošetrovaní kardiovaskulárnych chorôb, farmakokinetické vlastnosti zlúčeniny by nemali byť výrazne zhoršované zlyhaním srdca v dôsledku jeho prekrvenia alebo nedostatočnosti ladvín.
Ditiokarboxyláty musia byt fyziologicky prijateľné. Vo všeobecnosti sú prijateľné zlúčeniny s terapeutickým indexom najmenej 2 a s výhodou najmenej 5 alebo 10. Terapeutický index je definovaný ako EC50/IC50, kde symbol EC5Q znamená koncentráciu zlúčeniny, ktorá inhibuje expresiu VCAM-1 o 50 % a symbol IC50 označuje koncentráciu zlúčeniny, ktorá je toxická pre 50 % cielových buniek. Bunková toxicita sa môže merať priamym spočítaním buniek, exklúziou trypanovou modrou alebo štúdiami meniacej sa metabolickej aktivity, tak ako aj zapravením 3H-tymidínu, ako je známe odborníkovi v odbore. Terapeutický index nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu v tkanivovej kultúre je nad 100, ako sa zmeralo na základe bunkovej toxicity delenej schopnosti inhibovať expresiu VCAM-1, pri aktivácii TNFa, pri bunkách HUVE (pupočná žila človeka). Počiatočné štúdie na rýchle sa deliacich bunkách typu HT-18 gliómu človeka dokazujú, že nenastáva toxicita pri koncentráciách stonásobne vyšších ako je terapeutická koncentrácia. Disulfiram, orálne podávaná forma diétylditiokarbamátu, používaný pri liečbe závislosti na alkohole, vo všeobecnosti nevyvoláva velkú klinickú toxicitu, ako sa vhodne podáva.
Jestvuje niekoľko ditiokarbamátov, ktoré sú známe ako látky toxické pre gény. Tieto zlúčeniny nespadajú do rozsahu tohoto vynálezu, ktorý je obmedzený na podávanie fyziologicky prijateľných látok. Ako príklad ditiokarbamátu toxického pre gény sa uvádza dimetylditiokarbamát zinku, známy ako fungicídny prostriedok. Ďalej anticholínesterázové vlastnosti určitých ditiokarbamátov môžu viest k neurotoxickému poškodeniu (D. Miller, Neurotoxicity of the pesticidal carbamates, Neurobehav. Toxicol. Teratol. 4(6), 779 - 787 (1982).
Výraz ditiokarboxylát, ako sa tu používa, zahrňuje predovšetkým, i keď nie je na ne obmedzený, ditiokarbamáty všeobecného vzorca
R1SC(S)NR2R3 alebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 v ktorých znamená atóm tión vrátane ne obmedzený, vodíka alebo farmaceutický prijateíný kasodného a draselného, bez toho aby bol na alebo skupinu vzorca NR4R5R6R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, na ktorej je jedna alebo väčší počet hydroxyskupín umiestnený na lubovoínom atóme uhlíka, alebo arylovú skupinu a n *1
R a RJ znamenajú nezávisle od seba priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu vzorca -(CHOH)n(CH2)nOH, kde n znamená číslo 0, 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, -(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 alebo hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo
R a R tvoria spolu mostík, ako -(CH2) m' kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovú, arylovú, alkarylovú alebo aralkylovú skupinu, vrátane acetylovej, propionylovej a butyrylovej skupiny.
Špecifickými príkladmi vhodných ditiokarbamátov ilustrovaných na obr. 8 sú nátrium pyrolidín-N-karboditioát, nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioát, trinátrium N,N-di(karboxymetyl)-N-karboditioát, nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioát, nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát (nátrium diétylditiokarbamát) a nátrium N,N-diizopropyl-N- -karboditioát.
Aktívne ditiokarboxyláty a predovšetkým ditiokarbamáty sú alebo komerčne dostupné alebo sa môžu vyrobiť použitím známych postupov.
Pri molekulárnej hladine nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu sa tiež ukazuje, že táto zlúčenina inhibuje aktiváciu transkripčného regulátorového faktora· Nf-kB ako odozvu na určitú cytokinónovú a necytokinónovú stimuláciu (R. Schreck a kol., Reakctive oxygen intermediates as apparently widely used messengerts in the activation of the nF-kappa B transcription factor and HIV-1, EMBO J. 10(8), 2247 - 2258 (1991),
R. Schreck a kol., Dithiocarbamates as potent inhibitors of nuclear factor B activation in intact cells, J. Exp. Med. 175. 1181 - 1194 (1992)). Avšak skúškou posunu mobility gélu z jadrových extraktov buniek HUVE s rôznymi zvyšujúcimi sa prejavmi podobnými kB sa zistilo, že bunková výstelka aktivuje génovú expresiu VCAM-1 zrejme novým transkripčným regulátorovým faktorom, ktorým nie je Nf-kB. To naznačuje, že nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát môže regulovať génovú expresiu bunkovej výstelky svojím účinkom na nový transkripčný regulátorový proteín. Dokázalo sa tiež, že expresia VCAM-1 je vyvolávaná väčším počtom faktorov v kultivovaných bunkách Kaposiho sarkómu, čo môže byť dôležité pri ich patogenéze. Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát blokuje expresiu VCAM-1 v bunkách Kaposiho sarkómu, ktoré sú aktivované TNF, IL-1 a poly(I:C).
Zistilo sa tiež, že bunky hladkého svalstva produkujú rozpustnú formu VCAM-1, ktorá sa môže vylučovať bunkami a ktorá môže pôsobiť ako prírodný antihistamín.
II. Biologická aktivita
Schopnosť ditiokarboxylátov inhibovať expresiu VCAM-1 sa môže merať rôznymi spôsobmi, vrátane metód uvedených podrobne ďalej v príkladoch 1 až 7. Pre názornosť, v príkladoch 1 až 3, 6 a 7 sa opisuje zhodnotenie biologického účinku nátrium pyrolidín—N-karboditioátu (tiež označovaného ako PDTC). Tieto príklady nie sú mienené ako obmedzenie rozsahu vynálezu, ktorý špecificky zahrňuje použitie lubovolnej z vyššie opísaných zlúčenín na ošetrovanie aterosklerózy a iných typov zápalov a kardiovaskulárnych ochorení, sprostredkovaných VCAM-1. Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát sa môže lahko nahradiť íubovolnou zo zlúčenín opísaných vyššie a ohodnotiť podobným spôsobom.
Príklady 4 a 5 poskytujú porovnávacie hodnoty týkajúce sa schopnosti radu ditiokarbamátov inhibovat génovú expresiu VCAM-1. Príklady uvedené ďalej podávajú obraz o tom, že nárokované ditiokarbamáty špecificky blokujú schopnosť VCAM-1 podrobiť sa expresii vaskulárnou bunkovou výstelkou ako odozvu na rad signálov, o ktorých je známe, že sú aktívne pri ateroskleróze a odozve na zápal.
Experimentálne postupy
Bunkové kultúry
Bunky HUVE, izolované z pupočnej žily človeka, sa kanylujú, prepláchnu Hankovým roztokom, s cieíom odstránenia krvi a potom inkubujú s 1 % kolagenázou pri teplote 37 C počas minút. Po odstránení kolagenázy sa bunky kultivujú v prostredí M199, doplnenom 20 % fetálnym telacím sérom (HyClone), μg/ml heparínu (ESI Pharmaceuticlas, Cherry Hill, New Jersey, USA), 50 μg/ml rastového doplnku bunkovej výstelky (Collaborative Research Incorporated, Bedford, Massachusetts, USA), 25 mmol Hepes pufru, 2 mmol L-glutamínu, 100 μg/ml penicilínu a 100 μg/ml streptomycínu, a nechajú rásť na doskách tkanivovej kultúry potiahnutých 0,1 % želatíny, pri teplote 37 C. Bunky sa podrobia pasáži pri sútoku štiepením 1:4. Bunky sa použijú v prvých 8 pasážach.
Inkubácia s cytokínmi a inými reakčnými činidlami
Sútokové bunky HUVE sa premyjú fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom a potom sa dodajú do čerstvého prostredia.
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát sa pridáva v uvedených koncentráciách, po tom ako sa uskutoční predchádzajúce spracovanie 30 pred pridaním cytokínov. Cytokíny a iné indukujúce látky sa priamo pridávajú do prostredia v uvedených časoch a koncentráciách, ktoré sú uvedené pri každom experimente. Ľudský rekombinant IL-lb je genetický jed od firmy Upjohn Company (Kalamazoo, MI, USA). TNFa sa získava od formy Bohringer Ingelheim (SRN). Bakterálny lipopolysacharid (LPS), kyselina polyinozínová, kyselina polycitidilová (Poly I:C) a pyrolidínditiokarbamát (nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát) sa zabezpečuje od firmy Sigma Chemicals (St. Louis, Montana, USA). Všetky ďalšie reakčné činidlá majú akosť pre reagencie.
Izolácia RNA
Celková bunková RNA sa izoluje jednoduchou extrakciou použitím kyslej zmesi guanidiumtiokyanátu, fenolu a chloroformu. Bunky sa prepláchnu fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom a potom sa lýzujú s 2 ml guanidiumizotiokyanátu. Roztok sa okysli s 0,2 ml octanu sodného (hodnota pH 4,0) a potom sa extrahuje s 2,0 ml fenolu a 0,4 ml zmesi chloroformu a izoamylalkoholu v pomere 24 : 1. RNA sa podrobí dvom preparáciám etanolom predtým, ako sa použije na analýzu škvŕn Nothern.
Analýza škvŕn Nothern μg celkovej bunkovej RNA sa frakcionuje podľa veľkosti pri použití 1 % agarózového gélu obsahujúceho formaldehyd, v prítomnosti 1 μg/ml etidiumbromidu. RNA sa prenesie na nitrocelulózový filter a kovalentne viaže ultrafialovým žiarením pri použití zariadenia Stratlinker UV Crosslinker (Stratagene, La Jolla, Kalifornia, USA).
Hybridizácia sa uskutočňuje pri teplote 42 ’C počas 18 hodín v 5x SSC (lx = 150 mmol chloridu sodného, 15 mmol citrátu sodného), 1 % dodecylsulfátu sodnom, 5x Denhardtovom roztoku, 50 % formaldehydu, 10 % dextránsulfátu a 100 μg/ml DNA zo spermií lososa, denaturovaného strihom. Približne 1 x 106 až x ΙΟ6 μιη/ml značenej skúšobnej vzorky (so špecifickou aktivitou menšou ako 108 cpm/^g DNA) sa použije na hybridizáciu. Potom sa uskutoční hybridizácia a filtráty sa premyjú s konečnou ostrosťou 0,2 x SSC pri teplote 55 ’C. Nitrocelulóza sa stripuje pri použití vriacej vody pred rehybridizáciou s inou skúšobnou vzorkou. Audiograf sa stanovuje pri zosilňujúcom tienení pri teplote -70 ’C.
Skúšobné vzorky
Vzorky DNA značené 32P sa vyhotovia pri použití primérovej oligonukleotidovej metódy s náhodným usporiadaním. Skúšobnou vzorkou ICAM-1 je fragment Eco R1 z ľudskej cDNA. Skúšobnou vzorkou ELAM-1 je fragment 1,85 kb Hind III z ľudskej cDNA. Skúšobnou vzorkou VCAM-1 je fragment Hind ΙΙΙ-Xho I z ľudskej cDNA pozostávajúci z nukleotidu 132 až 1814.
Skúška enzýmu viazaného na imunosorbent (ELISA)
Bunky HUVE sa umiestnia na dosky tkanivovej kultúry s 96 jamkami 48 až 72 hodín pre skúškou. Do každej jamky sa pridajú primárne protilátky v prostredí M199 s 5 % fetálneho teľacieho séra a všetko sa inkubuje pri teplote 37 ’C počas 1 hodiny. Bunky sa potom premyjú a inkubujú počas 1 hodiny s antimyšacím IgG kozy, konjugovaným peroxidázou (Bio Rad), pri zriedení v pomere 1 : 500 v M199 s 5 % fetálneho teľacieho séra. Bunky sa potom premyjú a viazanie protilátky sa stanoví prídavkom 100 μΐ roztoku, ktorý obsahuje 10 mg/ml 3,3,5,5·-tetrametylbenzidínu (Sigma) s obsahom 0,003 % peroxidu vodíka. Reakcia sa zastaví prídavkom 25 μΐ 8-normálnej kyseliny sírovej. Dosky sa odčítajú na vyhodnocovacom zariadení ELISA (Bio Rad) pri optickej hustote O.D. zodpovedajúcej 420 nmol, po slepom odčítaní na riadky vyfarbené iba s druhým stupňom protilátky. Údaje predstavujú stredné hodnoty z trojnásobných meraní.
Protilátky
Monoklonálna protilátka (MAb) 4B9, vhodná na stanovenie vaskulárnej adhéznej molekuly-1 (VCAM-1) buniek, je veľkorysým darom Dr. Johna Harlana z Univerzity of Washington, USA. MAb E9A1F1, vhodná na stanovenie adhéznej molekuly bunkovej výstelky (ELAM-1), je šľachetný dar Dr. Swerlicka z Emory Univerzity. Hybridómy produkujúce MAb 84H10, ktoré zisťujú intramolekulárne adhézne molekuly-1 (ICAM-1) rastú bežným spôsobom v laboratóriu pôvodcov tohoto vynálezu. Protilátky sa používajú ako superna’ tantová tkanivová kultúra.
• Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát blokuje indukciu VCAM-1 buniek HUVE sprostredkovanú IL-lb, ale nie ICAM-1 alebo ELAM-1, nahromadenie mRNA
Na stanovenie, či oxidačný stav bunkovej výstelky môže urýchliť bazálnu alebo indukovanú expresiu bunkových adhéznych molekulárnych génov, sa ľudská vaskulárna bunková výstelka vystaví indukujúcemu cytokínu, IL-lb (10 jedn./ml) v prítomnosti alebo neprítomnosti tiolového antioxidantu chelatizujúceho kov a pyrolidínditiokarbamátu (nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát, 50 μπιοί) až na obdobie 24 hodín. Ako je znázornené na obr. 1, samotný IL-lb (pruhy 2, 4, 6 a 8) indukuje s očakávanou rýchlosťou a s prechodnou indukciou VCAM-1 (obdĺžnik A), E-selektín (ELAM-1, obdĺžnik B) a ICAM-1 (obdĺžnik C) nahromadenie mRNA, pričom všetky piky sa dosahujú za 4 hodiny. Avšak v prítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu, IL-lb sprostredkovaná indukcia VCAM-1 nahromadenia mRNA sa výrazne inhibuje nad 90 % (obdĺžnik A, pruhy 3, 5, 7 a 9). V protiklade k tomu, aj keď IL-lb sprostredkovaná indukcia ELAM-1 je slabo inhibovaná za 2 a 24 hodín (porovnaj pruhy 2 a 3 a ďalej 8 a 9 na obdĺžniku B), nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát neinhibuje indukciu za 4 a 8 hodín (pruhy 5 a 7 na obdĺžniku B). IL-lb sprostredkovaná indukcia z ICAM-1 nahromadenie mRNA nie je nepriaznivo ovplyvnené (obdĺžnik B, pruhy 3, 5, 7 a 9). V skutočnosti sa pozoruje mierne zväčšenie IL-lb indukcie z ICAM-1 nahromadenie mRNA (približne 30 %) (porovnaj pruhy 4 a 5 na obdĺžniku B). Ekvivalentné množstvo nitrocelulózou prenesenej RNA na pruh sa potvrdí zafarbením etidiumbromidom a vizuálnym sledovaním.
I
Analýzy hodnôt dávka - odozva sa uskutočňujú pri stanovení, či nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát inhibuje « indukciu expresie VCAM-1 génu pomocou IL-lb v dávke závislej od spôsobu. Ako je znázornené na obr. 2, nátrium pyrolidín-N• -ditiokarbamát inhibuje IL-lb sprostredkovanú indukciu expresie VCAM-1 génu so strmou krivkou dávka - odozva (obr. 2, obdĺžnik
A), s vypočítanou hodnotou EC^q približne 10 μπιοί, zatiaí čo nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát neinhibuje indukciu ELAM-1 expresie pri týchto koncentráciách, sprostredkovanú IL-lb (obr. 2, obdĺžnik B). IL-lb sprostredkovaná indukcia ICAM-1 nahromadenia mRNA sa zvýši nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátom pri koncentráciách vyšších ako 0,5 μπιοί (obr. 2, porovnaj pruh 2 a pruhy 4 až 7 na obdĺžniku C).
Tieto údaje dokazujú, že IL-lb používa ditiokarboxylát a predovšetkým senzitívny stupeň s ditiokarbamátom, ako čast « svojho signalizačného mechanizmu pre indukciu expresie VCAM-1 génu. Tieto údaje taktiež ukazujú, že tento senzitívny stupeň * s ditiokarbamátom nehrá významnú úlohu pri indukcii expresie ELAM-1 alebo ICAM-1 génu, ktorá je sprostredkovaná IL-lb.
Príklad 2
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát blokuje indukciu VCAM-1 buniek HUVE nahromadenia mRNA viacnásobným stimulovaním
Na stanovenie, či iné dobre popísané aktivátory expresie VCAM-1 génu tiež používajú senzitívny stupeň s nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátom, sa testujú tri oddelené skupiny aktivátorov: indukujúci prípravok sprostredkovaný iným klasickým receptorom (faktor tumorovej nekrózy, TNFa), indukujúca látka sprostredkovaná nereceptorom (lipopolysacharid, LPS) a nedávno opísaná nová indukujúca látka (dvojitá stočená RNA, poly(I:C)). Vo všetkých troch prípadoch nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát výrazne inhibuje indukciu VCAM-1 nahromadenie mRNA v bunkách HUVE po 4 hodinách (obr. 3, obdĺžnik A). Hoci expresia ELAM-1 génu sprostredkovaná TNFa je v určitom rozsahu potlačená (obr. 3, pruh la 2, obdĺžnik B) z ELAM-1 nahromadenie mRNA sprostredkované LPS a poly(I:C) je bez nepriaznivého ovplyvnenia (obr. 3, pruhy 3 až 6, obdĺžnik B). Indukcia ICAM-1 nahromadenia mRNA je bez nepriaznivého ovplyvnenia (obr. 3, obdĺžnik C). Tieto hodnoty ukazujú, že štruktúrne odlišné indukujúce prostriedky, pôsobiace odlišnými spôsobmi, sa podieíajú na všeobecnom regulačnom stupni špecificky pre indukciu expresie VCAM-1 génu.
Príklad 3
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát blokuje povrchovú expresiu VCAM-1 buniek HUVE indukovanú pri viacnásobnom stimulovaní
Na stanovenie, či podobne ako mRNA, by indukcia povrchovej proteínovej expresie VCAM-1 bunkovej výstelky bola tiež inhibovaná nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátom, sa použijú monoklonálne protilátky pri skúške ELISA, na kvantitatívne stanovenie indukcie bunkového povrchu VCAM-1 a ICAM-1 v kultivovaných bunkách HUVE. Ako je znázornené na obr. 4, väčší počet súborov aktivujúcich prípravkov v neprítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (-PDTC) indukuje rýchle a krátkodobé nahromadenie VCAM-1 (horný íavý obdĺžnik) na povrchu buniek, pri dosiahnutí vrcholu za 6 hodín. V prítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (+PDTC, horný pravý obdĺžnik) sa indukcia povrchovej expresie VCAM-1 buniek všetkými testovanými prípravkami výrazne inhibuje (80 až 90 %). Naopak indukovaná expresia bunkového povrchu ICAM-1 je bez nepriaznivého ovplyvnenia pri identických podmienkach (spodné íavé a pravé obdĺžniky).
Tieto údaje ukazujú, že podobne ako nahromadenie mRNA, expresia VCAM-1 povrchových buniek sa selektívne inhibuje ditiokarbamátmi, a že väčší počet súborov aktivujúcich prípravkov používa podobný senzitívny mechanizmus ditiokarbamátov pre indukciu expresie VCAM-1 génu.
Príklad 4
Pomerná účinnosť antioxidantov pri blokovaní TNFa indukcie VCAM-1
Na stanovenie, či štruktúrne podobné alebo odlišné antioxidanty by mohli inhibovat expresiu VCAM-1 génu a s akou silou, sa bunky HUVE vystavia pôsobeniu TNFa počas 6 hodín v prítomnosti alebo neprítomnosti 5 rozdielnych antioxidantov v odlišných koncentráciách. Ako je uvedené na obr. 5, ako diétylditiokarbamát (DETC), tak N-acetylcysteín (NAC) inhibujú expresiu VCAM-1 pri koncentráciách 5a 30 pmol. Na rozdiel od toho, nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát a 50 μιηοΐ. Chelatizačné činidlo (PDTC) je účinný medzi pre kovové železo, desferroximin, nemá účinok pri testovaných koncentráciách.
Príklad 5
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát inhibuje TNFa indukciu adhézie sprostredkovanú VCAM-l/VLA-4
Schopnosť rôznych antioxidantov inhibovať TNFa indukciu VCAM-l v bunkách HUVE sa hodnotí spôsobom uvedeným v príklade
4. Obr. 6 je grafom relatívnej povrchovej expresie VCAM-1 buniek (optická hustota, O.D., 595 nmol) v TNFa aktivovaných bunkách HUVE oproti daným koncentráciám
PDTC (nátrium N-pyrolidínditiokarbamát),
DiDTC (nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát),
SarDTC (nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioát), IDADTC (trinátrium N,N-di(karboxymetyl)-N-karboditioát), MGDTC (nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioát),
MeOBGDTC (nátrium N-(4-metoxybenzyl)-D-glukamín-N-karboditioát), DEDTC (nátrium N,N-dietyl-N-karboditioát),
Di-PDTC (nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioát) a NAC (N-acetylcysteín).
Najmenej účinné zlúčeniny sú nátrium N-(4-metoxybenzyl)-D-glukamín-N-karboditioát a N-acetylcysteín.
Príklad 6
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát inhibuje TNFa indukciu adhézie sprostredkovanú VCAM-l/VLA-4
Na stanovenie, či nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátom spôsobená inhibícia VCAM-1 regulácie je spojená s funkčnými dôsledkami, stanoví sa viazanie buniek Molt-4 na bunky HUVE bud nestimulované alebo stimulované 100 jedn./ml TNFa počas 6 hodín v prítomnosti alebo neprítomnosti nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu. Pri bunkách Molt-4 sa predtým ukázalo, že sú viazané k aktivovaným bunkám HUVE prostredníctvom mechanizmu závislého na VCAM-1. Ako ukazuje obr. 6, percentuálne množstvo buniek Molt-4 viažúcich sa na bunky HUVE klesá, ako je v prostredí prítomný nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát.
Príklad 7
Nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát inhibuje monocyt viažúci sa k hrudnej aorte králikov kŕmených cholesterolom
Pokus sa uskutočňuje na stanovenie, či by tiolový antioxidant nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamát bol účinný pri blokovaní prvej zložky aterosklerózy viažúcej monocyt na experimentálnom zvieracom modele. Jeden dospelý biely králik kmeňa New Zealand, s hmotnosťou 3,5 kg, dostane intravenóznu injekciu nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu (20 mg/kg, pri koncentrácii 20 mg/ml v PBS) jedenkrát denne počas 5 dní. Injekcie sa podávajú dočasne uloženou kanylou do žily v okrajovej oblasti ucha, ktorá sa udržiava prístupná prúdením heparinizovaného fyziolo26 gického roztoku. Roztok nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu sa mieša čerstvý denne alebo každý druhý deň (skladovaný pri ochrane pred svetlom pri teplote 4 °C) a filtruje (póry filtra 0,45 mm) bezprostredne pred použitím. Po prvej injekcii, kedy sa uskutoční umiestnenie kanyly, sa liečivá látka podáva králikovi pri vedomí, bez zjavných príznakov nepokoja alebo iných príznakov choroby. Pri injekcii na druhý deň dostáva králik potravu obsahujúcu 1 % hmotnostné cholesterolu a v tom sa pokračuje počas zostávajúcej časti experimentu. Na piaty deň sa zviera milosrdne usmrtí a hrudná aorta sa vyrežie a fixuje. Po príslušnej preparácii sa vzorka zobrazí na nižšom stupni skanovacieho elektronického mikroskopu ISI DS-130, ktorý je opatrený emitorom LaB. Použitím zobrazenia s dvojitým tienidlom a transparentnej mriežky sa tienidle CRT, so 64 susednými poliami, sa pri 620-násobnom zväčšení stanoví, že pokrýva oblasť približne 1,3 mm2. V každom poli sa spočítajú a zaznamenávajú leukocyty (WBC) a erytrocyty (RBC), pri ktorých nastala adhézia.
Údaje zo vzorky oblúka sú tieto: 5 WBC a -25 RBC na
1,3 mm2. Táto úroveň WBC adhézie je podobná ako pri kontrolných zvierat kŕmených bežnou potravou (v oblúku sa pozoruje približne 7 prípadov na oblasť a hrudné vzorky z 2 negatívnych kontrolných experimentov). Pozitívne kontrolné králiky, kŕmené 1 % cholesterolu počas 4 dní, avšak bez podávania antioxidantu, vykazujú približne päťnásobne zvýšenú adhéziu, zodpovedajúcu 38 WBC/1,3 mm2. Značné množstvo prevažne mŕtveho tkaniva veľkosti buniek sa pozoruje priľnuté ku každej vzorke oblúka. Nie je jasné, či tento materiál vznikol umele z preparácie alebo či bol prítomný in vivo a ak by to bolo tak, či toto súvisí s podávaním nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu. Táto štúdia svedčí o tom, že infúzia nátrium pyrolidín-N-ditiokarbamátu môže účinne blokovať počiatočnú adhéziu monocytov ku výstelke aorty.
III. Farmaceutické prostriedky
Iaidia a iné živé tvory, predovšetkým cicavce, trpiace kardiovaskulárnymi chorobami a inými zápalovými stavmi sprostredkovanými VCAM-1, sa môžu ošetrovať tak, že sa pacientovi podá účinné množstvo najmenej jednej z vyššie vymedzených zlúčenín alebo ich farmaceutický prijatelných derivátov alebo solí, vo farmaceutický prijateínej nosnej látke alebo riedidle. Aktívne materiály sa môžu podávať lubovolným vhodným spôsobom, napríklad orálne, parenterálne, intravenózne, intradermálne alebo subkutánne.
Keď sa tu používa výraz farmaceutický prijatelné soli alebo komplexy, tento výraz sa týka solí alebo komplexov, ktoré zachovávajú požadovanú biologickú aktivitu vyššie charakterizovaných zlúčenín a majú minimálne nežiadúce toxikologické účinky. Neobmedzujúcimi príkladmi takýchto solí sú
a) adičné soli s kyselinami, vzniknuté z anorganických kyselín (napríklad kyseliny chlorovodíkovej, kyseliny bromovodíkovej, kyseliny sírovej, kyseliny fosforečnej, kyseliny dusičnej a podobne) a soli vzniknuté z organických kyselín (napríklad kyseliny octovej, kyseliny oxálovej, kyseliny vínnej, kyseliny jantárovej, kyseliny jablčnej, kyseliny askorbovej, kyseliny benzoovej, kyseliny trieslovej, kyseliny pamoovej, kyseliny alginovej, kyseliny polyglutámovej, kyseliny naftalénsulfónovej, kyseliny naftaléndisulfónovej, kyseliny polygalakturónovej),
b) adičné soli s bázami, vzniknuté z polyvalentných kovových katiónov, ako je zinok, vápnik, bizmut, báryum, horčík, hliník, meď, kobalt, nikel, kadmium, sodík, draslík a podobne, alebo z organických katiónov, vzniknutých z N,N-dibenzyletyléndiamínu, D-glukozamínu, amónia, tetraetylamónia alebo etyléndiamínu alebo
c) kombinácia (a) a (b), napríklad zinočnatej soli kyseliny trieslovej a podobne.
Aktívna zlúčenina je obsiahnutá v farmacuticky prijateľnej nosnej látke alebo riedidle postačujúcom na dodanie terapeuticky účinného množstva pacientovi, bez toho, aby sa vyvolal rad toxických účinkov u ošetrovaného pacienta. Výhodná dávka účinnej zlúčeniny pre všetky vyššie uvedené stavy je v rozmedzí od približne 0,5 do 500 mg/kg, s výhodou od l do 100 mg/kg za deň. Účinné dávkové rozmedzie farmaceutický prijateľných derivátov sa môže vypočítať na základe hmotnosti základnej zlúčeniny, ktorá má byt uvoľnená. Ak samotný derivát vykazuje aktivitu, účinná látka sa môže stanoviť ako je uvedené vyššie, s použitím hmotnosti derivátu alebo iným spôsobom známym odborníkovi v odbore.
Zlúčenina sa zvyčajne podáva v ľubovoľnej vhodnej forme dávkovej jednotky, vrátane jednotky s obsahom 1 až 3000 mg aktívnej látky, účelne 5 až 500 mg aktívnej látky na formu dávkovej jednotky, na ktoré však možnosti nie sú obmedzené. Zvyčajne je vhodná orálna dávka od 25 do 250 mg.
Aktívna zložka by sa mala podávať po dosiahnutie vrcholných koncentrácií aktívnej látky v plazme od približne 0,1 do 100 μιηοΐ, s výhodou od približne 1 do 10 μπιοί.. Toto sa môže dosiahnuť napríklad intravenóznou injekciou roztoku alebo prostriedku aktívnej zložky, prípadne vo fyziologickom roztoku alebo vodnom prostredí alebo podaním sústa s obsahom aktívnej zložky.
Koncentrácia aktívnej zlúčeniny v liečivom prostriedku bude závisieť od absorpcie, distribúcie, inaktivácie a rýchlosti vylučovania liečivej látky, rovnako ako od iných okolností známych odborníkovi v odbore. Je potrebné poznamenať, že hodnota dávky sa bude meniť tiež v závislosti od závažnosti stavu určeného na zmiernenie. Ďalej je potrebné vziať do úvahy, že pre ľubovoľného individuálneho pacienta sa špecifický režim dávkovania môže upraviť počas doby podľa individuálnych potrieb a profesionálneho úsudku osoby podávajúcej alebo dozerajúcej na podanie prostriedku, a že koncentračné rozmedzie sa uvádza len ako príklad a nie je mienené ako obmedzenie praktického uskutočnenia nárokovaných prostriedkov. Aktívna zložka sa môže podávať naraz alebo rozdelená na rad menších dávok, určených na podanie v pozmenených časových intervaloch.
Orálne prostriedky budú vo všeobecnosti zahŕňať interné riedidlo alebo požívatelnú nosnú látku. Môžu byt zapuzdrené do želatínových kapsúl alebo zlisované do tabliet. Pre účely orálneho terapeutického podania sa aktívna zlúčenina môže uviesť do tesného styku s pomocnými látkami a používať sa vo forme tabliet, trochiet alebo kapsúl. Farmaceutický prijatelné spájadlá a/alebo pomocné látky sa môžu zahrnúť ako časť prostriedku.
Tablety, pilulky, kapsule, trochety a podobné formy môžu obsahovať ľubovoľné z ďalej uvedených zložiek alebo zlúčenín podobnej povahy:
spájadlá ako je mikrobiologická celulóza, guma, tragant alebo želatína, excipienty (pomocné látky) ako je škrob alebo laktóza, dezintegračné prípravky, ako je kyselina alginová, Primogel alebo kukuričný škrob, mazadlá, ako je stearát horečnatý alebo Sterotes, látky umožňujúce kĺzanie, ako je koloidný oxid kremičitý, sladidlá, ako je sacharóza alebo sacharín, alebo aromatizačné prípravky, ako je mentol, metylsalicylát alebo pomarančové ochuťovadlo.
Ak je jednotkovou dávkou kapsula, môže okrem látok vyššie uvedeného typu obsahovať kvapalné nosné látky, ako mastné oleje. Okrem toho dávkové jednotkové formy môžu obsahovať rôzne iné materiály, ktoré modifikujú fyzikálnu formu jednotkovej dávky, napríklad obsahujú poťahy z cukru, šelaku alebo požívateľných prípravkov.
Aktívna zlúčenina alebo jej farmaceutický prijateľná soľ alebo derivát sa môžu podávať ako zložka elixíru, suspenzie, sirup, oblátka, žuvacia guma a podobne. Sirup môže obsahovať, okrem aktívnych zlúčenín, cukor ako sladidlo a niektoré konzervačné prostriedky, farbivá a aromatizačné prípravky.
Aktívna zlúčenina alebo jej farmaceutický prijateľné deriváty alebo soli sa môžu tiež podávať s inými aktívnymi látkami, ktoré nepoškodzujú požadovaný účinok, ako sú antibiotiká, protiplesňové prípravky, protizápalové prostriedky alebo protivírusovo účinné zlúčeniny. Aktívne zlúčeniny sa môžu podávať s prípravkami znižujúcimi lipidy, ako je probucol alebo kyselina nikotínová, inhibítóry zhlukovania krvných doštičiek, ako je aspirín, antitrombotickýrai prípravkami ako je kumadín, blokátormi vápnikových kanálikov, ako je varapamil, diltiazem a nifedipin, angiotenzín konvertujúcimi enzýmovými (ACE) inhibítormi, ako je captopril a analopril, a β-blokátormi, ako je propanalol, terbutalol a labetalol. Zlúčeniny sa môžu tiež podávať v kombinácii s nesteroidnými protizápalovými prostriedkami, ako je ibuprofén, indometacín, aspirín, fenoprofén, kyselina mefanamová, kyselina flufenamová a sulindac. Zlúčenina sa môže taktiež podávať s kortikosteroidmi.
Roztoky alebo suspenzie používané pre parenterálne, intradermálne, subkutánne alebo lokálne podanie môžu zahrňovať tieto zložky:
sterilné riedidlo, ako voda pre injekcie, fyziologický roztok, stužené oleje, polyetylénglykoly, glycerín, propylénglykol alebo iné syntetické rozpúšťadlá, antibakteriálne prípravky, ako je benzylalkohol alebo metylparabény, antioxidanty, ako je kyselina askorbová alebo hydrogénsiričitan sodný, chelatizačné činidlá ako je kyselina etyléndiamíntetraoctová, pufry, ako sú octany, citráty alebo fosfáty a prostriedky na úpravu toxicity, ako je chlorid sodný alebo dextróza.
Parenterálne prostriedky sa môžu vniesť do ampúl, injekčných striekačiek pre okamžité použitie alebo do liekoviek pre väčší počet dávok, vyhotovených zo skla alebo z plastickej hmoty.
Ak sa vykonáva intravenózne podanie, výhodnými nosnými látkami sú fyziologický roztok alebo fyziologický roztok pufrovaný fosfátom (PBS).
Aktívna zlúčenina sa môže tiež podávať prostredníctvom transdermálnej náplaste. Spôsoby výroby transdermálnych náplastí sú známe odborníkovi v odbore, pozri napríklad L. Brown a R. Lanter, Transdermal delivery of drugs, Ann. Rev. Med. 39. 221 - 229 (1988).
Pri inom uskutočnení sa aktívne zlúčeniny budú pripravovať s nosnými látkami, ktoré budú chrániť zlúčeninu proti rýchlemu vylučovaniu z tela, ako prostriedky s riadeným uvolňovaním, vrátane implantátov z mikroenkapsulovaných uvolňovacích systémov. Môžu sa používať biologicky degradovatelné, biologicky znášanlivé polyméry, ako etylénvinylacetát, polyanhydridy, kyselina polyglykolová, kolagén, polyortoestery a kyselina polymliečna. Spôsoby výroby takýchto prostriedkov budú odborníkovi v odbore známe. Tieto materiály sa môžu získať tiež komerčne od firiem Alza Corporation a Nová Pharmaceuticals, Inc.
Lipozomálnymi suspenziami môžu byt taktiež farmaceutický prijatelné nosné látky. Tieto sa môžu pripravovať spôsobmi známymi odborníkovi v odbore, pozri napríklad US patent č. 4 522 811. Tak napríklad lipozómové prostriedky sa môžu pripravovať rozpustením vhodného lipidu alebo vhodných lipidov (ako je stearoylfosfatidyletanolamín, steraroylfosfatidylcholín, arachadoylfosfatidylcholín a cholesterol) v anorganickom rozpúšťadle, ktoré sa potom odparí a zanechá po sebe tenký film vysušeného lipidu na povrchu zásobníka. Do zásobníka sa potom vnesie vodný roztok aktívnej zlúčeniny alebo jej monofosfátového, difosfátového a/alebo trifosfátového derivátu. Obsah zásobníka sa potom rýchle rozvíri rukou a nastane uvolnenie volného lipidového materiálu zo strán zásobníka a dispergovanie lipidových agregátov, čím sa vytvorí lipozomálna suspenzia.
Modifikácie a variácie tohoto vynálezu budú zrejmé odborníkovi v odbore z predchádzajúceho podrobného opisu vynálezu. Takéto modifikácie a variácie sú určené na zahrnutie do rozsahu pripojených patentových nárokov.
- 32 r K 56v-y6

Claims (17)

1. Spôsob ošetrovania kardiovaskulárneho ochorenia u ludí, vyznačujúci sa tým, že sa podáva účinné množstvo netoxického ditiokarbamátu, zvoleného zo súboru zahrňujúceho zlúčeniny všeobecného vzorca
R1SC(S)NR2R3, alebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3' / v ktorých
R1 znamená atóm vodíka, sodíka alebo draslíka alebo skupinu vzorca NR4R5R6R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo arylovú skupinu a
R2 a R3 znamenajú nezávisle od seba priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu vzorca -(CHOH)n(CH2)n0H, kde n znamená číslo 0 až 6,
-(CH2)nCO2Rl, -(CH2)nCO2R4 alebo hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo
R2 a R3 tvoria spolu mostík, ako -(CH2)m, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovú, arylovú, alkarylovú alebo aralkylovú skupinu, vrátane acetylovej, propionylovej a butyrylovej skupiny.
2. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamát je zvolený zo súboru pozostávajúceho z nátrium N-pyrolidín-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioátu, trinátrium N,N-di(karboxymety1)-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboďitioátu, nátrium N,N-dietyl-N-karboditioátu (nátrium diétylditiokarbamátu ) a nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioátu.
3. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamátom je nátrium pyrolidín-N-karboditioát.
4. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárnym ochorením je ateroskleróza.
5. Spôsob podľa nároku l,vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárnym ochorením je postangioplastická restenóza.
6. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárnym ochorením je koronárne arteriálne ochorenie.
7. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárnym ochorením je angína.
8. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že kardiovaskulárnym ochorením sú choroby malých ciev.
9. Spôsob podľa nároku že ditiokarbamát sa telesnej hmotnosti.
1, vyznačujúci sa tým, podáva v dávke od 0,5 do 500 mg/kg
10. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamát sa podáva perfúznou kanylou opatrenou balónikom.
11. Spôsob podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamát sa podáva v kombinácii s farmaceutickým prípravkom zvoleným zo súboru, ktorý zahrňuje prípravok znižujúci lipidy, inhibítor zhlukovania krvných doštičiek, antitrombotický prípravok, blokátor vápnikových kanálikov, angiotenzín konvertujúci enzýmový (ACE) inhibítor, β-blokátor, nesteroidný protizápalový prostriedok a kortikosteroid.
12. Spôsob potláčania exprexie VCAM-1 v ľudských bunkách, vyznačujúci sa tým,, že sa podáva účinné množstvo netoxického ditiokarbamátu, zvoleného zo súboru zahrňujúceho zlúčeniny všeobecného vzorca
R1SC(S)NR2R3 alebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 v ktorých
R1 znamená atóm vodíka, sodíka alebo draslíka alebo skupinu vzorca NR4R5R6R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo arylovú skupinu a
R a R znamenajú nezávisle od seba priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu vzorca -(CHOH)n(CH2)nOH, kde n znamená číslo 0 až 6,
-(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 alebo hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo
R2 a R3 tvoria spolu mostík, ako “(CH2)in, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovú, arylovú, alkarylovú alebo aralkylovú skupinu, vrátane acetylovej, propionylovej a butyrylovej skupiny.
13. Spôsob podľa nároku 12,vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamát je zvolený zo súboru pozostávajúceho z nátrium N-pyrolidín-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioátu, trinátrium N,N-di(karboxymety1)-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioátu, nátrium N,N-dietyl-N-karboditioátu (nátrium diétylditiokarbamátu) a nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioátu.
14. Spôsob podľa nároku 12,vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamátom je nátrium N-pyrolidín-N-karboditioát.
15. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tý že obsahuje účinné množstvo pre ošetrenie kardiovaskulárnej choroby netoxického ditiokarbamátu, zvoleného zo súboru zahrňujúceho zlúčeniny všeobecného vzorca
R1SC(S)NR2R3 alebo R2R3N(S)CS-SC(S)NR2R3 v ktorých
R1 znamená atóm vodíka, sodíka alebo draslíka alebo skupinu vzorca NR4R5R®R7, kde R4, R5, R6 a R7 znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo arylovú skupinu a
R2 a R3 znamenajú nezávisle od seba priamu, rozvetvenú alebo cyklickú alkylovú skupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu vzorca -(CHOH)n(CH2)nOH, kde n znamená číslo 0 až 6, “(CH2)nCO2R1, -(CH2)nCO2R4 ' alebo hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo
R2 a R3 tvoria spolu mostík, ako “(CH2)ln, kde m znamená číslo 3 až 6 a
R4 znamená alkylovú, arylovú, alkarylovú alebo aralkylovú skupinu, vrátane acetylovej, propionylovej a butyrylovej skupiny, vo farmaceutický prijatelnej nosnej látke alebo riedidle.
16. Prostriedok podlá nároku 15, vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamát je zvolený zo súboru pozostávajúceho z nátrium N-pyrolidín-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-N-karboxymetyl-N-karboditioátu, trinátrium N,N-di(karboxymetyl)-N-karboditioátu, nátrium N-metyl-D-glukamín-N-karboditioátu, nátrium N,N-dietyl-N-karboditioátu (nátrium diétylditiokarbamátu) a nátrium N,N-diizopropyl-N-karboditioátu.
17. Prostriedok podlá nároku 15, vyznačujúci sa tým, že ditiokarbamátom je nátrium N-pyrolidín-N-karboditioát.
SK560-95A 1992-10-30 1993-11-01 Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflamatory diseases SK56095A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/969,934 US5380747A (en) 1992-10-30 1992-10-30 Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
PCT/US1993/010496 WO1994009772A1 (en) 1992-10-30 1993-11-01 Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK56095A3 true SK56095A3 (en) 1996-06-05

Family

ID=25516198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK560-95A SK56095A3 (en) 1992-10-30 1993-11-01 Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflamatory diseases

Country Status (19)

Country Link
US (2) US5380747A (sk)
EP (1) EP0666741B1 (sk)
JP (1) JP3254486B2 (sk)
AT (1) ATE183089T1 (sk)
AU (1) AU692426B2 (sk)
BG (1) BG62682B1 (sk)
BR (1) BR9307337A (sk)
CA (1) CA2147881C (sk)
CZ (1) CZ111595A3 (sk)
DE (1) DE69326014T2 (sk)
DK (1) DK0666741T3 (sk)
ES (1) ES2136186T3 (sk)
GR (1) GR3031368T3 (sk)
HU (1) HUT73440A (sk)
NO (1) NO951616D0 (sk)
NZ (1) NZ258683A (sk)
PL (1) PL179113B1 (sk)
SK (1) SK56095A3 (sk)
WO (1) WO1994009772A1 (sk)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5821260A (en) * 1992-10-30 1998-10-13 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5739115A (en) * 1993-10-07 1998-04-14 Glycomed Incorporated Sulfated maltooligosaccharides with heparin-like properties
US5677291A (en) * 1993-12-10 1997-10-14 Hoechst Marion Roussel, Inc. Method of lowering serum cholesterol levels with 2,6-di-alkyl-4-silyl-phenols
PT795605E (pt) * 1994-11-30 2006-10-31 Nippon Chemiphar Co Receptor de lipoproteina de baixa densidade desnaturada
US20020040008A1 (en) * 1995-01-24 2002-04-04 Wagner Denisa D. Method for treating and preventing atherosclerosis
US6469057B1 (en) * 1995-06-02 2002-10-22 Mcw Research Foundation, Inc. Methods for in vivo reduction of free radical levels and compositions useful therefor
US5741815A (en) * 1995-06-02 1998-04-21 Lai; Ching-San Methods for in vivo reduction of nitric oxide levels and compositions useful therefor
US5792787A (en) * 1995-06-07 1998-08-11 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5747528A (en) * 1996-02-21 1998-05-05 Warner-Lambert Company Chroman derivatives as anti-oxidants
US5795876A (en) * 1996-04-30 1998-08-18 Hoechst Marion Rousssel, Inc. Method of inhibiting vascular cell adhesion molecule-1 and treating chronic inflammatory diseases with 2, 6-di-alkyl-4-silyl-phenols
US5608095A (en) * 1996-04-30 1997-03-04 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silyl-phenols and esters thereof as antiatherosclerotic agents
JP2000509070A (ja) * 1996-04-30 2000-07-18 ヘキスト・マリオン・ルセル・インコーポレイテツド ２，６―ジアルキル―４―シリル―フェノールを使用して血管細胞接着分子―１を阻害する方法および慢性炎症性疾患を治療する方法
US5782740A (en) * 1996-08-29 1998-07-21 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation dose delivery catheter with reinforcing mandrel
US5922761A (en) * 1996-09-06 1999-07-13 Medinox, Inc. Methods for in vivo reduction of iron levels and compositions useful therefor
HUP0102907A1 (hu) * 1996-09-20 2004-05-28 Atherogenics Inc. Gyulladásos rendellenességek diagnosztizálása és mediátorai
US6114572A (en) * 1996-11-20 2000-09-05 Hoechst Marion Roussel, Inc. Substituted phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6670398B2 (en) * 1997-05-14 2003-12-30 Atherogenics, Inc. Compounds and methods for treating transplant rejection
ATE294158T1 (de) * 1997-05-14 2005-05-15 Atherogenics Inc Ein monoether von probucol und methoden zur hemmung der vcam-1 expression
US6210312B1 (en) 1997-05-20 2001-04-03 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Catheter and guide wire assembly for delivery of a radiation source
US6121463A (en) * 1997-06-24 2000-09-19 Hoechst Marion Roussel, Inc. Alkyl-4-silylheterocyclic phenols and thiophenols useful as antioxidant agents
US6133467A (en) * 1997-06-25 2000-10-17 Hoechst Marion Roussel, Inc. 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-4-methoxyphenylsilyl)-methyl-oxy]phenol and 2,6-di-t-butyl-4-[(dimethyl-2-methoxy-phenylsilyl)methyloxy]phenol
EP1019034A2 (en) * 1997-07-01 2000-07-19 Atherogenics, Inc. Antioxidant enhancement of therapy for hyperproliferative conditions
WO1999040907A1 (en) * 1998-02-13 1999-08-19 Medinox, Inc. Methods for the controlled delivery of carbon disulfide for the treatment of inflammatory conditions
US6224535B1 (en) 1998-02-17 2001-05-01 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Radiation centering catheters
US6596770B2 (en) 2000-05-05 2003-07-22 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US6093743A (en) * 1998-06-23 2000-07-25 Medinox Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
US20030181495A1 (en) * 1998-06-23 2003-09-25 Medinox, Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
AU4722099A (en) * 1998-06-26 2000-01-17 University Of Washington Inhibition of NF-kappaB mediated tissue injury using dithiocarbamate derivatives
AU5561999A (en) 1998-08-13 2000-03-06 Wistar Institute, The Methods for reducing atherosclerotic plaques
US6589987B2 (en) 1998-09-08 2003-07-08 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using tetraethyl thiuram disulfide
US7816403B2 (en) * 1998-09-08 2010-10-19 University Of Utah Research Foundation Method of inhibiting ATF/CREB and cancer cell growth and pharmaceutical compositions for same
US6706759B1 (en) * 1998-09-08 2004-03-16 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6548540B2 (en) 1998-09-08 2003-04-15 Charlotte-Mecklenburg Hospital Authority Method of treating cancer using dithiocarbamate derivatives
US6887712B1 (en) 1998-11-09 2005-05-03 Atherogenics, Inc. Methods and compositions to lower plasma cholesterol levels
US6372187B1 (en) 1998-12-07 2002-04-16 Mcdermott Technology, Inc. Alkaline sorbent injection for mercury control
US6855859B2 (en) * 1999-03-31 2005-02-15 The Babcock & Wilcox Company Method for controlling elemental mercury emissions
US6284199B1 (en) * 1999-03-31 2001-09-04 Mcdermott Technology, Inc. Apparatus for control of mercury
US6734192B1 (en) 1999-08-23 2004-05-11 Mp-1 Inc. Treatment of viral infections
US6582417B1 (en) 1999-09-22 2003-06-24 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Methods and apparatuses for radiation treatment
US6605031B1 (en) 1999-09-22 2003-08-12 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Stepped centering balloon for optimal radiation delivery
US7632803B2 (en) * 1999-10-01 2009-12-15 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
WO2001025265A1 (en) 1999-10-01 2001-04-12 Dmi Biosciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US7592304B2 (en) * 1999-10-01 2009-09-22 Dmi Life Sciences, Inc. Metal-binding compounds and uses therefor
US20030130185A1 (en) * 2000-09-29 2003-07-10 David Bar-Or Metal-binding compounds and uses therefor
US20030158111A1 (en) * 1999-10-01 2003-08-21 David Bar-Or Methods and products for oral care
US6274627B1 (en) 1999-10-12 2001-08-14 Medinox, Inc. Conjugates of dithiocarbamate disulfides with pharmacologically active agents and uses therefor
WO2001051046A1 (en) * 2000-01-14 2001-07-19 University Of Virginia Patent Foundation Airway alkalinization as therapy for airway diseases
US7994449B2 (en) 2000-02-16 2011-08-09 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Square-wave laser bonding
US7163504B1 (en) 2000-02-16 2007-01-16 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Multi-lumen fluted balloon radiation centering catheter
US6710086B1 (en) 2000-02-25 2004-03-23 Medinox, Inc. Protected forms of pharmacologically active agents and uses therefor
US6747061B2 (en) 2000-03-21 2004-06-08 Atherogenics, Inc. N-substituted dithiocarbamates for the treatment of biological disorders
AU2002248910A1 (en) 2000-11-17 2002-05-27 Idenix (Cayman) Limited Methods for inhibiting the transmission of HIV using topically applied substituted 6-benzyl-4-oxopyrmidines
US7481790B2 (en) * 2000-12-27 2009-01-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Vessel enlargement by arteriogenic factor delivery
US20020168396A1 (en) * 2001-02-22 2002-11-14 Ramanan Ramaswami Vasodilator impregnated devices and methods
WO2003018595A2 (en) * 2001-08-24 2003-03-06 Maine Medical Center Research Institute Copper-dependent non-traditional pro-inflammatory cytokine export and methods, compositions and kits relating thereto
EP1450787A4 (en) 2001-11-15 2006-01-25 Galileo Pharmaceuticals Inc FORMULATIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OR AMELIORATION OF INFLAMMATORY CONDITIONS
BR0215240A (pt) * 2001-12-19 2004-10-26 Atherogenics Inc Derivados de calcona e seu uso no tratamento de doenças
EP1539179B1 (en) * 2002-07-22 2016-03-02 Teva Pharmaceuticals International GmbH Angiogenesis inhibition by cephalotaxine alkaloids, derivatives, compositions and uses thereof
DE10252772A1 (de) * 2002-11-13 2004-05-27 Beiersdorf Ag Verwendung von einem oder mehreren Diethyldithiocarbamaten zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Zubereitungen zur Prophylaxe und Behandlung von entzündlichen Hautzuständen und/oder zum Hautschutz bei empfindlich determinierter und trockener Haut
WO2004056727A2 (en) * 2002-12-19 2004-07-08 Atherogenics, Inc. Process of making chalcone derivatives
EP1594824A4 (en) * 2003-01-13 2007-04-04 Atherogenics Inc PROCESS FOR THE PREPARATION OF ESTERS AND PROBUCOL ETHERS AND DERIVATIVES
US7173129B2 (en) * 2003-06-06 2007-02-06 Athero Genics, Inc. Sulfonamide-substituted chalcone derivatives and their use to treat diseases
US20060025481A1 (en) * 2004-02-09 2006-02-02 Strange Matthew L Process for preparation of probucol derivatives and polymorphic forms thereof
US7294736B2 (en) * 2004-04-09 2007-11-13 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
US20060063828A1 (en) * 2004-06-28 2006-03-23 Weingarten M D 1,2-Bis-(substituted-phenyl)-2-propen-1-ones and pharmaceutical compositions thereof
US7345191B2 (en) * 2005-02-26 2008-03-18 Cambrex Charles City, Inc. Process for preparation of probucol derivatives
AU2008230861A1 (en) * 2007-03-26 2008-10-02 Salutria Pharmaceuticals, Llc Methods and compositions of derivatives of probucol for the treatment of diabetes
WO2008118946A1 (en) * 2007-03-27 2008-10-02 Atherogenics, Inc. Methods and compositions using certain phenolic derivatives for the treatment of diabetes
KR101506607B1 (ko) * 2007-04-13 2015-03-30 켐제닉스 파마슈티칼스 인크. 세팔로탁신 경구 제형
US8455552B2 (en) * 2007-05-03 2013-06-04 Ramot et Tel Aviv University Ltd. Composition comprising S-allylmercapto-N-acetylcysteine (ASSNAC) for up-regulation of cellular glutathione level
CA2692457A1 (en) * 2007-07-03 2009-01-08 Joslin Diabetes Center, Inc. Treatment of cardiovascular disease with salicylates

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3875170A (en) * 1971-05-25 1975-04-01 Banyu Pharma Co Ltd Pyridine bis (dithiocarbamate) derivatives
US4025527A (en) * 1973-07-13 1977-05-24 Smith Kline & French Laboratories Limited Certain thiazoles and oxazoles
GB1542840A (en) * 1975-02-03 1979-03-28 Smith Kline French Lab Heterocyclic dithiocarbamates and isothioureas
US4670471A (en) * 1981-11-03 1987-06-02 Clark Lealand L Treatment for inflammatory skin disease
US4522811A (en) * 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
GB8421039D0 (en) * 1984-08-17 1984-09-19 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
ATE68013T1 (de) * 1985-07-05 1991-10-15 Whitehead Biomedical Inst Expression von fremdem genetischem material in epithelzellen.
US4980286A (en) * 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US4870101A (en) * 1987-03-17 1989-09-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
EP0284879A3 (en) * 1987-03-17 1990-10-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting interleukin-1 release
US5035878A (en) * 1988-09-12 1991-07-30 University Of Rochester Use of dithiocarbamates to counteract myelosuppression
US5166133A (en) * 1991-04-17 1992-11-24 Cetus Corporation Method for inhibing adhesion of white blood cells to endothelial cells
JPH07501204A (ja) * 1991-06-28 1995-02-09 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 局所的オリゴヌクレオチド療法
FR2679452B1 (fr) * 1991-07-22 1993-11-12 Cis Bio International Produit radiopharmaceutique ayant notamment un tropisme cerebral, comportant un complexe nitruro d'un metal de transition, et son procede de preparation.
US5206264A (en) * 1991-11-04 1993-04-27 Cypros Pharmaceutical Corporation Use of disulfiram to prevent cardiovascular damage
US5306724A (en) * 1992-08-17 1994-04-26 Clintec Nutrition Company Method for preventing and treating atherosclerosis
US5380747A (en) * 1992-10-30 1995-01-10 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases

Also Published As

Publication number Publication date
PL179113B1 (pl) 2000-07-31
WO1994009772A1 (en) 1994-05-11
HUT73440A (en) 1996-07-29
EP0666741B1 (en) 1999-08-11
CA2147881C (en) 1999-09-07
AU5665394A (en) 1994-05-24
JP3254486B2 (ja) 2002-02-04
ES2136186T3 (es) 1999-11-16
EP0666741A1 (en) 1995-08-16
DK0666741T3 (da) 1999-12-06
ATE183089T1 (de) 1999-08-15
US5877203A (en) 1999-03-02
BG99604A (bg) 1996-02-28
DE69326014T2 (de) 1999-12-23
NZ258683A (en) 1999-08-30
JPH08506798A (ja) 1996-07-23
CZ111595A3 (cs) 1998-07-15
HU9501229D0 (en) 1995-06-28
DE69326014D1 (de) 1999-09-16
NO951616L (no) 1995-04-27
US5380747A (en) 1995-01-10
PL308673A1 (en) 1995-08-21
GR3031368T3 (en) 2000-01-31
BG62682B1 (bg) 2000-05-31
NO951616D0 (no) 1995-04-27
BR9307337A (pt) 1999-05-25
AU692426B2 (en) 1998-06-11
CA2147881A1 (en) 1994-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK56095A3 (en) Dithiocarbamates for the treatment of atherosclerosis and other cardiovascular and inflamatory diseases
US5807884A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5821260A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
US5792787A (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
KR101823275B1 (ko) 전립선 암종의 치료를 위한 병용 요법
CZ9904024A3 (cs) Monoestery probukolu pro léčbu kardiovaskulárních a zánětlivých onemocnění
UA125744C2 (uk) Фармацевтичні композиції для комбінованої терапії
AU709939B2 (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
AU733198B2 (en) Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases