BG61816B1

BG61816B1 - Нови стероидни естери

Info

Publication number: BG61816B1
Application number: BG98011A
Authority: BG
Inventors: Bengt Axelsson; Ralph Brattsand; Leif Kaellstroem; Arne Thalen
Original assignee: Astra Aktiebolag
Priority date: 1991-02-04
Filing date: 1993-08-02
Publication date: 1998-06-30
Also published as: RU2112775C1; BG98011A; TW287166B; CN1064078A; JPH06505233A; ES2114931T3; MY111502A; RO111272B1; NO304074B1; EE03110B1; WO1992013873A1; DE69224982T2; SK281802B6; AU1235892A; IS1653B; DE69224982D1; NO932762D0; PT100087B; AP9200354A0; CZ149593A3

Description

Област на техниката

Настоящото изобретение се отнася до нови противовъзпалителни и противоалергични активни съединения, до методи за получаването им и до фармацевтични състави, съдържащи тези © съединения.

Предмет на изобретението е да предостави противовъзпалителен, имуносупресивен и противоалергичен глюкокортико-стероид или съдържащ го фармацевтичен състав с висока активност на мястото на прилагането му, например в дихателния тракт, върху кожата, в чревния тракт, в ставите или в очите, като лекарственото средство се насочва към определения обект на действие и по този начин се предизвикват слаби системни глюкокортикоидни ефекти.

Друг предмет на изобретението е получаването на фармацевтичен състав, съдържащ липозоми, които включват фармакологично активен стероиден мастен киселинен естер от изобретението, с цел да се подобри въвеждането на лекарството и да се намалят страничните ефекти от терапията.

Предшестващо състояние на техниката

Глюкокортикостероидите (GCS) са ценни лекарствени средства за облекчаване на астма и ринит. Общоприето е, че глюкокортикостероидите проявяват терапевтичния си ефект посредством противовъзпалително и противоалергично действие върху дихателния тракт и белодробната тъкан. Продължителното орално приемане на глюкокортикостероидите се утежнява силно от извънбелодробни странични ефекти. По тази причина само малка част от пациентите се подлагат понастоящем на орална терапия с глюкокортикостероиди. Поголяма безвредност може да се постигне чрез въвеждането на глюкокортикостероидите посредством инхалиране. Силно действащите инхалирани глюкокортикостероиди, широко прилагани в момента в клиничната практика - беклометазон 17а, 21-дипропионат и будезонид - са безвредни обаче в сравнително тесни граници и съществуват данни за нежелателно действие и на двата препарата върху общото кръвообръщение при прилагането им в най-високите препоръчителни дози.

Липозомите представляват мембраноподобни везикули, съставени от редица концентрични липидни двойни слоеве, редуващи се с хидрофилни участъци. Липозомите могат да бъдат използвани като носители за различни видове фармацевтично активни съединения с цел да подобрят въвеждането на лекарството и да намалят страничните ефекти от терапията.

Обикновено глюкокортикостероидите се вграждат в липозомите само при ниска концентрация и трудно се задържат във везикулите. Естерифицирането на глюкокортикостероидите с мастни киселини в 21 -ва позиция повишава степента на вграждане и задържането на стероида във везикулите. Установено е, че мастната киселинна верига действа като хидрофобна “котва”, която захваща стероидните ядра към хидратираните главни полярни групи на фосфолипидите и по този начин подобрява взаимодействието между глюкокортикостероида и липозома.

Липозомно капсулирани глюкокортикостероиди за терапевтично приложение са описани от М. De Silva et al., Lancet 8130 (1979), 1320, а патент US No. 4 693 999 представя липозомни състави на глюкокортикостероиди за инхалиране.

Патент US No. 4,695,625 описва някои 16а, 17абутилидендиоксипрегненови производни с хлорен и/или хлорен атом в 6- и/или 9-та позиция. A.Thalen et al., Acta Pharm. Suec. 21, 109-124 (1984) описва много несиметрични циклични 16а,17а-ацетали на 16 α-хидрокксихидрокортизон и флуорирани, както и нефлуорирани 16 α-хидроксипреднизолони. ЕР 170, 642 описва много различни стероидни естери, като всички са ненаситени в 1,2-позиция и някои от които имат кондензиран пръстен в 16,17-позиция. Тези естери са описани в комбинация с липозоми. В Pat. Abst. JP, том 9, No. 200, С298 е описан естер на флуоцинолон-16,17-ацетонид-21маслена киселина. Нито една обаче от тези публикации не описва специфичната група съединения от настоящето изобретение.

Техническа същност на изобретението

Един от предметите на изобретението е създаването на нови глюкокортикостероидни съединения. Новите съединения се характеризират с противовъзпалителна, имуносупресивна и антианафилактична ефективност в мястото на прилагането и поспециално имат подчертано подобрено съотношение между тази ефективност и способността им да причиняват глюкокортикостероидни въздействия извън лекуваните участъци. Предпочитаният начин на прилагане на новите съединения е чрез инхалация, когато желаното място на прилагане е в дихателните пътища.

Друг предмет на изобретението е да предостави противовъзпалителен и противоалергичен, съдържащ стероидни естерни липозоми фармацевтичен състав за локално прилагане, например, в дихателния тракт. Такъв състав осигурява подобрение на терапевтичните свойства на стероидния естер посредством удължаване на локалното задържане в дихателните пътища и насочване на лекарственото средство към определени клетки на обекта.

Съединенията съгласно изобретението имат следната формула

или техен стереоизомер, в която формула връзката в 1,2позицията е наситена или ненаситена,

Rt означава водород или линейна, или разклонена въглеводородна верига, съдържаща 1 - 4 въглеродни атома,

R₂ означава линейна или разклонена въглеводородна верига, състояща се от 1-10 въглеродни атома,

R₃ означава ацил, съдържащ линейна или разклонена, наситена или ненаситена въглеводородна верига с 11-20 въглеродни атома,

X! е флуор,

Х2 е флуор, при условие че когато между въглеродните атоми в 1,2-позиция има двойна връзка, R! и R₂ едновременно не са метилови групи.

Ацилът може да бъде получен от

С₁₀Н₂₁СООН:	ундеканова киселина;
С_ПН₂₃СООН:	лауринова киселина;
С₁₂Н₂₅СООН:	тридеканова киселина;
С₁₃Н₂₇СООН: С₁₄Н₂₉СООН:	миристинова киселина; пентадеканова киселина;
С₁₅Н₃₁СООН:	палмитинова киселина;
С₁₆Н₃₃СООН:	хептадеканова киселина;
С₁₇Н₃₅СООН:	стеаринова киселина;
С₁₇Н₃₃СООН:	олеинова киселина;
С₁₇Н₃₁СООН:	линолова киселина;
С₁₇Н₂₉СООН:	линоленова киселина;
С₁₈Н₃₇СООН:	нонадеканова киселина;
С₁₉Н₃₉СООН:	икозанова киселина.

Предпочитаните ацилни групи са получени от

С_ИН₂₃СООН:	лауринова киселина;
С₁₃Н₂₇СООН:	миристинова киселина;
С₁₅Н₃₁СООН: С₁₇Н₃₅СООН:	палмитинова киселина; стеаринова киселина;
С₁₇Н₃₃СООН:	олеинова киселина;
С₁₇Н₃₁СООН:	линолова киселина;
С₁₇Н₂₉СООН:	линоленова киселина;

и особено от палмитиновата киселина.

Линейната или разклонената въглеводородна верига с 1 - 4 въглеродни атома е предимно алкилова група, съдържаща 1 - 4 въглеродни атома, особено метилова група.

Правата или разклонената въглеводородна верига с 1 - 10 въглеродни атома е предимно алкилова група, съдържаща 1-10 въглеродни атома, по-специално 1 - 4 въглеродни атома, особено метилова или пропилова група.

Предпочитаните съединения от изобретението са тези, при които във формула I връзката в 1,2-позиция е наситена.

Особено предпочитани съединения от изобретението са тези, при които във формула I връзката в 1,2-позиция е наситена, Rt е водороден атом, a R₂ е пропилова група. Друго предпочитано съединение от изобретението е това с формула I, в което връзката в 1,2-позиция е двойна, Ri е водороден атом, R₂ е пропилова група, а R3 е палмитоилова група.

Най-предпочитано съединеие съгласно изобретението е с формула С о

СНгОССС^яСНз

Предпочитаното изпълнение на изобретението е състав, съдържащ предпочитаното съединение от изобретението в комбинация с липозоми.

Отделните стереоизомерни компоненти, присъстващи в една смес на стероид с горната формула I, могат да бъдат илюстрирани по следния начин по отношение на хиралността на въглеродния атом в 22-ра позиция и по отношение на заместителя R₂

Предпочитаният стереоизомерен компонент има 22R конфигурация.

Методи за получаване

Стероидните естери,

II

S —OCRj при които St е

и Х_ь Х₂, R_b R₂ имат дадените по-горе означения, R₄ означава линейна или разклонена, наситена или ненаситена алкилова група, съдържаща 10 - 19 въглеродни атома, и връзката в 1,2 позиция е наситена или е двойна, се получават по всеки един от следващите методи.

А. Взаимодействие на съединение с формула

St-OH

където St има даденото по-горе значение, със съединение с формула

О ii r₄coh

В която R₄ има даденото по-горе значение.

Естерификацията на 21-хидрокси съединението може да се извърши по известните начини, например чрез взаимодействие на изходния 21-хидрокси стероид с подходяща карбоксилна киселина, целесъобразно в присъствието на трифлуорооцетен анхидрид и за предпочитане в присъствието на киселинен катализатор, например р-толуенсулфонова киселина.

Реакцията протича благоприятно в органичен разтворител като бензен или метиленхлорид; подходящата реакционна температура е от 20 до 100°С.

В. Взаимодействие на съединение с формула

St-OH в която St има значението, дадено по-горе, със съединение с формула

О

R₄CX в която R₄ има даденото по-горе значение, a X означава халогенен атом, като хлор, бром, йод и флуор или групата

О

II

-0-C-R4 в която R₄ има даденото по-горе значение.

Изходното 21-хидрокси съединение може да бъде обработено с подходящ карбоксилен киселинен халогенид или анхидрид, за предпочитане в среда на разтворител от типа на халогениран въглеводород, например метиленхлорид, или на етер, например диоксан, в присъствието на основа като триетиламин или пиридин, за предпочитане при ниска температура, например от -5° С до +3()°С.

С. Взаимодействие на съединение с формула

St-Y където St има даденото по-горе значение, a Y е избран измежду халоген, например Cl, Br и I, или мезилат, или р-толуенсулфонат, със съединение с формула

О R₄CO°A® в която R₄ има даденото по-горе значение, а А® представлява катион.

Сол на подходяща карбоксилна киселина с алкален метал, например литий, натрий или калий, или триетиламониева или трибутиламониева сол може да взаимодейства с подходящо алкилиращо съединение с формула St-Y. Реакцията се извършва предимно в полярен разтворител като ацетон, метилетилкетон, диметилформамид или диметилсулфоксид, като благоприятният температурен интервал е от 25 до 100°С.

При всеки един от методите от А до С, в случай че е желателно получаването на чист епимер, може да се окаже необходимо провеждането на един последен етап на реакцията с цел разделяне на епимерната смес на отделните и компоненти. фармацевтични състави

Съединенията от изобретението могат да бъдат използвани за различни форми на локално прилагане в зависимост от мястото на възпалението, например перкутанно, парентерално, или за локално подаване в дихателния тракт чрез инхалиране. Важна цел при формулирането на състава е да се постигне оптимална бионаличност на активната стероидна съставка. При съставите за перкутанно прилагане тя е лесно постижима, ако стероидът се разтваря с висока хидродинамична активност в носителя. Това може да се постигне чрез използване на подходяща система от разтворители, включваща подходящи гликоли, като пропиленгликол или 1,3-бутандиол, или самостоятелно, или в комбинация с вода.

Възможно е също така стероидът да бъде разтворен напълно или частично в липофилна фаза с помощта на повърхностно активно вещество в ролята на разтварящ агент. Съставите за кожно прилагане могат да бъдат под формата на мехлем, крем от масло във вода, крем от вода в масло или лосион. В емулсионни носители системата, съдържаща разтворения активен компонент, може да образува дисперсна или непрекъсната фаза. Стероидът в описаните състави може да бъде и под формата на микронизирано твърдо вещество.

Сгъстените под налягане стероидни аерозоли са предназначени за орално или назално инхалиране. Аерозолната система е формулирана по такъв начин, че всяка подавана доза да съдържа 10 - 1000 pg, за предпочитане 20 - 250 pg активен стероид. Най-активните стероиди се назначават в по-ниските дози на цитирания обхват. Микронизираният стероид се състои основно от частици, по-малки от 5 рт, суспендирани в пропелентна смес с помощта на диспергатор от типа на сорбитантриолеат, олеинова киселина, лецитин или натриева сол на диоктилсулфоянтарната киселина.

Стероидът може да бъде подаван също и в сух вид посредством прахов инхалатор.

Една от възможностите е да се смеси микронизиран стероид с носител от типа на лактозата и глюкозата. Праховата смес се дозира в твърди желатинови капсули, всяка от които съдържа желаната доза стероид. След това капсулата се поставя в праховия инхалатор и дозата се впръсква в дихателните пътища на пациента.

Друга възможност е микронизираният прах да се преработи във сферични гранули, които се разпукват по време на процеса на дозиране. Така преработеният прах се поставя в лекарствения резервоар на инхалатор за многократна употреба, например турбоинхалатор. Дозиращо устройство отмерва желаната доза, която впоследствие се впръсква от пациента. С тази система стероидът заедно с или без носител се подава на пациента.

Стероидът може да бъде включен и в състави, предназначени за лечение на чревни възпалителни заболявания по перорален или ректален път. Съставите за орално приложение θ трябва да са формулирани така, че стероидът да бъде доставен до възпаления участък на червото. Това може да се постигне чрез различни комбинации на принципа на чревно и/или бавно или контролирано освобождаване. За ректално прилагане е подходящ състав под формата на клизма.

Получаване на липозомни състави

Използваните в изобретението лецитини съдържат мастни киселинни вериги с различна дължина и следователно имат различна температура на фазовия преход. Примери за използвани лецитини са лецитини, получени от яйца и соя,и синтетични θ лецитини като димиристоилфосфатидилхолин (DMPC), дипалмитоилфосфатидилхолин (DPPC) и дистеароилфосфатидилхолин (DSPC). Чрез променяне на структурата на лецитините могат да бъдат получени стабилни носители с различни биодегенеративни свойства. Това дава възможност за по-продължително освобождаване на включения стероиден естер.

Степента на взаимодействие на стероидния естер с везикулите, например с дипалмитоилфосфатидилхолин (DPPC), зависи от дължината на естерната верига, като при удължаване на веригата се наблюдава усилено взаимодействие.

Включването на холестерол или холестеролни производни в липозомните състави стана обичайно поради свойството им да увеличават липозомната стабилност.

Първоначалните етапи от получаването на липозоми съгласно настоящето изобретение могат удачно да се извършат по описаните в литературата методи, например компонентите се разтварят в разтворител, например етанол или хлороформ, който впоследствие се изпарява. Полученият липиден слой се диспергира в избраната водна среда с помощта на разклащане или на ултразвук. Предпочитаният диаметър на липозомите от изобретението е между 0.1 и 10 цт.

Допълнително към основния образуващ липозоми липид (липиди), който обикновено е фосфолипид, за модифициране на структурата на липозомната мембрана могат да бъдат включени други липиди (например холестерол или холестеролстеарат) в количество 0 - 40% тегловни от общото липидно количество. С цел да се оптимизира усвояването на липозома може да се включи и трети компонент с отрицателен заряд (например дипалмитоилфосфатидилглицерол) или с положителен заряд (например стеариламиноацетат или цетилпиридинхлорид).

В зависимост от липида и от приложените условия може да бъде използван широк интервал от съотношения между стероидния естер и липида. Може да се приложи изсушаване (чрез замразяване или аерозолно) на липозомите в присъствието на лактоза при съдържание на лактозата в интервала от 0 до 95% спрямо крайното количество на състава.

Особено предпочитаният състав съгласно изобретението съдържа липозоми и (22К)-16а,17а-бутилидендиокси-6а,9адифлуоро-11р-хидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион. Начините на прилагане включват прахови аерозоли, инстилиране (разпръскване на капки), пулверизиране и сгъстени под налягане аерозоли.

Примери за изпълнение на изобретението

Работни примери

Изобретението може допълнително да бъде илюстрирано със следващите неограничаващи го примери. При препаративната хроматография в примерите е използвана скорост на потока (подвижната фаза) 2.5 ml/cm²h⁴. Молекулните тегла във всичките примери са определени посредством химическа йонизираща масспектрометрия (газ-реагент - СН₄), а температурите на топене са определени на микроскоп Leitz Wetzlar със загряваща се масичка. Високоефективните течни хроматографски анализи, в случай, че не е зададено друго, са проведени на колона pBondapak Ci₈ (300 х 3.9 тт вътрешен диаметър) със скорост на потока 1.0 ml/min и подвижна фаза етанол/вода в съотношения между 40:60 и 60:40. Пример 1. (22R)-16 а, 17а-Бутил идендиокси-6а,9а-дифлуоро-11β_: хидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Към разтвор на (22R)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-11р,21-дихидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (200 mg) в 25 ml пиридин на капки се прибавя разтвор на палмитоилхлорид (1.2 g) в 10 ml диоксан. Реакционната смес се разбърква 16 часа при стайна температура. Добавя се метиленхлорид (150 ml) и разтворът се измива с 1М хидрохлорна киселина, с 5% воден разтвор на калиев карбонат и с вода и се изсушава. След изпаряване полученото сурово съединение се пречиства чрез хроматографиране върху колона Sephadex LH-20 (87 х 2.5 ст) при използване на хлороформ като подвижна фаза, фракцията 210-255 ml се събира и изпарява, при което остава 203 mg (22R)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-113-хидрокси-21-палми-тоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион. Температура на топене 87-90°С. Молекулно тегло 706 (изчислено

707.0). Чистота: 96% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 2. (22К)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11Ихидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Към разтвор на (22R)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-11р,21-дихидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (50 mg) и палмитоилхлорид (35 mg) в 10 ml метиленхлорид на капки се прибавя разтвор на триетиламин (13 mg) в 2 ml метиленхлорид. Реакционната смес се разбърква 2 часа при стайна температура. Допълнително се прибавят 50 ml метиленхлорид и реакционната смес се обработва , както в пример 1. Полученото сурово съединение се пречиства върху колона Sephadex LH-20 (85 х 2.5 cm) при използване на хлороформ като подвижна фаза, фракцията 210250 ml се събира и изпарява, при което се получава 34 mg (22R)-16 a, 17а-бутилид ендиокси-6а,9а-дифлуоро-11 β -хидрокси-21 палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион. Молекулно тегло 706 (изчислено 707.0). Чистота: 95% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 3. (225)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11Ихидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Към разтвор на (22S)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-11р,21-дихидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (70 mg) в 25 ml пиридин на капки се прибавя разтвор на палмитоилхлорид (0.4 ml) в 10 ml диоксан. Реакционната смес се разбърква 16 часа при стайна температура и се обработва _? както в пример 1. Полученото сурово съединение се пречиства чрез хроматографиране върху колона Sephadex LH-20 (87 х 2.5 cm) при използване на хлороформ като подвижна фаза, фракцията 225-265 ml се събира и изпарява, при което се получава 92 mg (22S)-16a,17 а-бутилидендиокси-6а,9ос-дифлуоро-11р-хидрокси-21палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион под формата на масло.

Молекулно тегло 706 (изчислено 707.0). Чистота: 97% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 4. (22R)-16a, 17а-Бутил идендиокси-6а,9д-дифлуоро-11Дхидрокси-21-миристоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Синтезира се миристоилхлорид чрез загряване на обратен хладник в продължение на 3 часа на миристинова киселина (7.0 g) и тионилхлорид (9 ml) в трихлороетилен (100 ml), след което разтворителят се изпарява.

Към разтвор на (22Я)-16а,17а-бутилидендиокси-6а,9адифлуоро-11р,21-дихидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (51 mg) в 10 ml Q метиленхлорид се прибавя миристоилхлорид (32 mg) със следващо прибавяне на триетиламин (13 mg), разтворен в метиленхлорид (5 ml). Реакционната смес се разбърква 4 часа при стайна температура. Допълнително се прибавя метиленхлорид и сместа се измива последователно с 0.1М хидрохлорна киселина и с вода (3 х 50 ml). След изсушаване и изпаряване остатъкът се пречиства чрез хроматографиране върху Merck Kieselgel 60 при използване на хептан:ацетон (6:4) като подвижна фаза, при което се получава 27 mg (22Я)-16а,17а-бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11рхидрокси-21-миристоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион. Молекулно тегло С 678 (изчислено 678.9). Чистота: 96.8% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 5. (22К)-16д,17д-Бутилидендиокси-6д,9д-дифлуоро-11вхидрокси-21 -л ауроил оксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Към разтвор на (22Я)-16а,17а-бутилидендиокси-6а,9адифлуоро-11р,21-дихидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (51 mg) в 5 ml метиленхлорид на капки се прибавя лауроилхлорид (28 mg) със следващо прибавяне на триетиламин (13 mg), разтворен в 2 ml метиленхлорид. Реакционната смес се разбърква 3 часа при стайна температура. Допълнително се прибавя метиленхлорид и органичната фаза се измива последователно с 0.1М хидрохлорна киселина и с вода (3 х 30 ml). След изсушаване и изпаряване остатъкът се пречиства чрез хроматографиране върху Merck Kieselgel 60 при използване на хексан:ацетон (6:4) като подвижна фаза. Полученото съединение се пречиства допълнително чрез повторно хроматографиране при използване на подвижна фаза от петролев етер:етилацетат (3:2), при което се получава 33 mg (22R)-16α, 17а-бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11 р-хидрокси-21лауроилокси-прегн-4-ен-3,20-дион. Молекулно тегло 650 (изчислено 650.8). Чистота: 96.9% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 6. (22R)- 16а, 17а-Бутил и ден диокси-ба^тдифл уоро-11 βхидрокси-21-палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Към разтвор на (22R)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-11р,21-дихидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион (700 mg) в 30 ml пиридин на капки се прибавя разтвор на палмитоилхлорид (2.3 ml) в 15 ml диоксан. Реакционната смес се бърка една нощ при стайна температура и се обработва както В пример 1. Полученото сурово съединение се пречиства върху колона Sephadex LH-20 (76 х 6.3 cm) при използване на хептан:хлороформ:етанол (20:20:1) като подвижна фаза, фракцията 1020-1350 ml се събира и изпарява, при което се получава 752 mg (22R)-16a,17aбутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11р-хидрокси-21палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион. Температура на топене 141-145°С; [a]_D ²⁵ = +71.6° (с = 0.204; СН₂С1₂). Молекулно тегло 704 (изчислено 704.9). Чистота: 97.7% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 7. (225)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а_:дифлуоро-111Т хидрокси-21-палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Към разтвор на (22S)-16a,17a-6ymuAugeHguokcu-6a,9aдифлуоро-11р,21-дихидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион (150 mg) в 10 ml пиридин на капки се прибавя разтвор на палмитоилхлорид (0.5 ml) в 5 ml диоксан. Реакционната смес се бърка една нощ при стайна температура и се обработва , както в пример 1. Полученото сурово съединение се пречиства върху колона Sephadex LH-20 (89 х 2.5 cm) при използване на хептан:хлороформ:етанол (20:20:1) като подвижна фаза, фракцията 215-315 ml се събира и изпарява, при което се получава 132 mg (22S)-16a,17aбутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-113-хидрокси-21палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион. Температура на топене 176-180°С; [a]_D ²⁵ = +47.5° (с = 0.198; СН₂С1₂). Молекулно тегло 704 (изчислено 704.9). Чистота: 99% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 8. 6а,9а-Дифлуоро-11И,21-дихидрокси-16а,17а[( 1-метилетилиден)бис(окси)]прегн-4-ен-3,20-дион.

Суспензия на 0.9 g трис(трифенилфосфин)родиев хлорид в 250 ml обезвъздушен толуен се хидрогенира в продължение на 45 минути при стайна температура и атмосферно налягане. Прибавя се разтвор на 1.0 g флуороцинолон 16а,17а-ацетонид в 100 ml абсолютен алкохол и хидрогенирането продължава още 40 часа. Реакционният продукт се изпарява и остатъкът се пречиства чрез бърза хроматография върху силикагел с използване на ацетонпетролев етер като подвижна фаза за отстраняване на основната част от катализатора. Елуатът се изпарява и остатъкът се пречиства допълнително чрез хроматографиране върху колона Sephadex LH-20 (72.5 х 6.3 cm) при използване на хлороформ като подвижна фаза, фракцията 3555-4125 ml се събира и изпарява, при което се получава 0.61 g 6а,9а-дифлуоро-11р,21-дихидрокси-16а,17а[(1-метилетилиден)бис(окси)]прегн-4-ен-3,20-дион. Температура на топене 146-15ГС; [ a]_D ²⁵ = +124.5° (с = 0.220; СН₂С1₂). Молекулно тегло 454 (изчислено 454.6). Чистота: 98.5% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 9. 6а,9а-Дифлуоро-11Д-хидрокси-16а,17а[ (1 -метилетил иден)бис(окси)]-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Към разтвор на 6а,9а-дифлуоро-11р,21-дихидрокси-16а,17ос[(1метилетилиден)бис(окси)]прегн-4-ен-3,20-дион (310 mg) в 30 ml пиридин на капки се прибавя разтвор на палмитоилхлорид (2.1 ml) в 15 ml диоксан. Реакционната смес се бърка една нощ при стайна температура и се обработва, както в пример 1. Полученото сурово съединение се пречиства върху колона Sephadex LH-20 (76 х 6.3 cm) при използване на хептан:хлороформ:етанол (20:20:1) като подвижна фаза, фракцията 1035-1260 ml се събира и изпарява, при с което се получава 158 mg 6а,9а-дифлуоро-11р-хидрокси-16а,17а [(1-метилетилиден)бис-(окси)]-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20дион. Температура на топене 82-86°С; [a]_D ²⁵ = +85.3° (с = 0.232; СНзСк). Молекулно тегло 692 (изчислено 692.9). Чистота: 98.6% (високоефективен течен хроматографски анализ).

Пример 10. фармацевтични състави

Следващите неограничаващи изобретението примери илюстрират състави, предназначени за различни форми за повърхностно приложение. Количеството на активния стероид в перкутанните състави обикновено е 0.001 - 0.2% тегловни, за © предпочитане 0.01-0.1% тегловни.

Състав 1. Мехлем

Стероид, микронизиран	0.025 g
Течен парафин	10-0 g
Бял мек парафин до	100.0 g
Състав 2. Мехлем
Стероид	0.025 g
Пропиленгликол	5.0 g
Сорбитансескиолеат	5.0 g
Течен парафин	10.0 g
Бял мек парафин до	100.0 g

Състав 3. Крем от масло във вода

Стероид	0.025 g
Цетанол	5.0 g
Г лицерилмоностеарат	5.0 g
Течен парафин	Ю.О g
Цетомакрогол 1000	2.0 g
Лимонена киселина	от g
Натриев цитрат	0.2 g
Пропиленгликол	35.0 g
Вода до	100.0 g
Състав 4. Крем от масло във вода
Стероид, микронизиран	0.025 g
Бял мек парафин	15.0 g
Течен парафин	5.0 g
Цетанол	5.0 g
Сорбимакроголстеарат	2.0 g
Сорбитанмоностеарат	0.5 g
Сорбинова киселина	0.2 g
Лимонена киселина	o.i g
Натриев цитрат	0.2 g
Вода до	100.0 g
Състав 5. Крем от вода в масло
Стероид	0.025 g
Бял мек парафин	35.0 g
Течен парафин	5.0 g
Сорбитансескиолеат	5.0 g
Сорбинова киселина	0-2 g
Лимонена киселина	o.i g
Натриев цитрат	0.2 g
Вода до	100.0 g
Състав 6. Лосион

Стероид	0.25	mg
Изопропанол	0.5	ml
Карбоксивинилов полимер	3.0	mg
NaOH	q.s.
Вода до	100.0	g
Състав 7. Суспензия за инжектиране
Стероид, микронизиран	0.05-	10.0 mg
Натриева карбоксиметилцелулоза	7.0	mg
NaCl	7.0	mg
Полиоксиетилен (20) сорбитанмоноолеат	0.5	mg
фенилкарбинол	8.0	mg
Вода, стерилна до	1.0	ml

Състав 8. Аерозол за орално и назално инхалиране

Стероид, микронизиран	0.1	% тегл
Сорбитан триолеат	0.7	% тегл.
Трихлорофлуорометан	24.8	% тегл.
Дихлоротетрафлуороетан	24.8	% тегл.
Дихлородифлуорометан	49.6	% тегл.
Състав 9. Разтвор за пулверизиране
Стероид	7.0	mg
Пропиленгликол	5.0	g
Вода до	10.0	g
Състав 10. Прах за инхалиране
Желатинова капсула, напълнена със смес от
Стероид, микронизиран	0.1	mg
Лактоза	20.0	mg

Прахът се Впръсква посредством инхалатор.

Състав 11. Прах за инхалиране

Сферично гранулираният прах се напълва в инхалатор многократна употреба. Всяка доза съдържа за

Cmepoug, микронизиран 0.1 mg

Състав 12. Прах за инхалиране

Сферично гранулираният прах се напълва в инхалатор за

многократна употреба. Всяка доза съдържа

Стероид, микронизиран	0.1	mg
Лактоза, микронизирана	1.0	mg
Състав 13. Капсула за лечение на тънките черва
Стероид	1.0	mg
Захарни сферични гранули	321.0	mg
Aquacoat ECD 30	6.6	mg
Ацетилтрибутилцитрат	0.5	mg
Polysorbat 80	0.1	mg
Eudragit L100-55	17.5	mg
Триетилцитрат	1.8	mg
Талк	8.8	mg

Антипенител MMS 0.01 mg

Състав 14. Капсула за лечение на дебелото черво

Cmepoug	2.0	mg
Захарни сферични гранули	305.0	mg
Aquacoat ECD 30	5.0	mg
Ацетилтрибу тилцитр am	0.4	mg
Polysorbat 80	0.14	mg
Eudragit NE30 D	12.6	mg
Eudragit S100	12.6	mg
Талк	12.6	mg
Състав 15. Клизма
Cmepoug	0.02	mg
Натриева карбоксиметилцелулоза	25.0	mg
Динатриев едетат (динатриев
етилендиаминтетраацетат)	0.5	mg
Метилпарахидроксибензоат	0.8	mg

Пропилпарахидроксибензоат

НатриеВ хлорид

Лимонена киселина, безводна

Polysorbat 80

Вода, пречистена до

0.2 mg

7.0 mg

1.8 mg

0.01 mg

1.0 ml

Състав 16. Състав, съдържащ липозомно свързан стероид

A. Получаване на състав за инстилиране

Синтетичен дипалмитоилфосфатидилхолин (45 mg), димиристоилфосфатидилхолин (7 mg), дипалмитоилфосфатидилглицерол (1 mg) и (22К)-16ос,17а-бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро11р-хидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион (5 mg) се смесват в стъклена епруветка. Всичките компоненти се разтварят в хлороформ. По-голямата част от разтворителя се изпарява чрез използване на N₂ и след това под вакуум, при което по стените на епруветката се образува тънък филм от липидните компоненти. Към липидите се прибавя воден разтвор (0.9% NaCl). Образуването на липозомите става при температура над температурата на фазовия преход на липидите. Липозомите се образуват при енергично разклащане на разтвора или разбъркване с ултразвук чрез ултразвукова сонда. Получената суспензия съдържа липозоми с размери, вариращи от много малки везикули до 2 рт.

B. Получаване на състав за инхалиране

Получаването на липозомите се извършва по описания в Пример А начин, като водният разтвор съдържа 10% лактоза. Съотношението между лактозата и липида е 7:3. Липозомната суспензия се замразява върху сух лед и се лиофилизира. Сухото вещество се микронизира до частички със среден аеродинамичен раз· ' (MMAD) около 2рт.

Фаь. ология

Селективността на локалното противовъзпалително действие може да бъде илюстрирана със следния дихателен модел.

Значителна по обем фракция от инхалирания глюкокортикостероид се поставя във фарингса и впоследствие се поглъща, достигайки накрая до червата. Тази фракция води до нежелани странични ефекти на стероида, като действа извън определената за лечение област (белия дроб). Следователно е препоръчително да се използва глюкокортикостероид с висока локална противовъзпалителна активност в белите дробове, но със слаби ефекти, причинявани от него след орално прилагане. Направени са изследвания с цел да се определят ефектите, предизвикани от глюкокортикостероиди след локалното им прилагане в белите дробове, както и след орално приемане и разликата между действието на глюкокортикостероида в третирания белодробен участък и извън него са изпитани по следния начин.

Опитни модели

А) Опитен модел за желано локално противовъзпалително действие върху слизестата обвивка на дихателните пътища (ляв белодробен лоб)

Плъхове Sprague Dawley (250 g) са леко анестизирани с Ephrane и точно в левия белодробен лоб е инстилиран глюкокортикостероидният опитен препарат (в суспендирани във физиологичен разтвор липозоми) с обем 0.5 ml/kg. Два часа покъсно в трахеята, точно над бифуркацията (раздвояването) и, е инстилирана суспензия от Sephadex (5 mg/kg) е обем 1 ml/kg, така че да достигне и до левия и до десния белодробен лоб. Двадесет часа по-късно плъховете са убити и левите им белодробни лобове са изрязани и претеглени. За да бъде определено теглото на причинения от Sephadex оток, третиран без лекарство, и нормалното тегло на белия дроб, на контролна група е подаден носител вместо глюкокортикостероидния препарат и физиологичен разтвор вместо суспензия от Sephadex.

В) Опитен модел за нежелания системен ефект при орално абсорбиран глюкокортикостероид

Плъхове Sprague Dawley (250 g) са анестизирани слабо с Ephrane и орално им е подаден глюкокортикостероидният опитен препарат с обем 1.0 ml/kg. Два часа по-късно в трахеята, точно над бифуркацията (раздвояването) и, е инстилирана суспензия от Sephadex (5 mg/kg) с обем 1 ml/kg, така че да достигне и до левия и до десния белодробен лоб. Двадесет часа по-късно плъховете са убити и белодробните им лобове са изрязани и претеглени. За да бъде определено теглото на причинения от Sephadex оток, третиран без лекарство, и нормалното тегло на белия дроб, на контролна група е подаден носител вместо глюкокортикостероидния препарат и физиологичен разтвор вместо суспензия от Sephadex.

В таблица 1 са дадени резултатите от сравнителните изследвания, фармакологичният профил на съединенията от изобретението е сравнен с този на будезонид-21-палмитат и на флуметазон-21-палмитат в състава на липозоми. Всичките стероиди от изобретението показват по-силно локално противовъзпалително действие след прилагане върху дроба в сравнение с будезонид-21-палмитата в липозоми. Освен това, резултатите показват и по-голямата белодробна селективност на изпитваните съединения в сравнение с избраните в нивото на техниката съединения, тъй като необходимата за инхибиране на белодробния оток доза (ED₅₀) при перорално прилагане на последните съединения е 158 (Пример 3), 247 (Пример 7) и 559 (Пример 1) пъти по-висока, за будезонид-21-палмитат е 66 пъти по-висока и за флуметазон-21-палмитат - 8 пъти по-висока в сравнение с дозата, необходима за инхибиране на белодробния оток при локално прилагане на лекарствения препарат в белия дроб

И така може да се заключи, че съединенията от изобретението са много подходящи за локално лечение на възпалителни заболявания на кожата и на различни кухини в тялото (например белодробна, носна, чревна и ставна).

5 g	се X
сх	<
о	<υ
44 о	CD Ο
	2
£	X
<	ω
С4)	Ό
ω	се

CX <υ C/D ε	-j X ω CD «3 CD	се χ Ρω CO	44 ω X се Μ
Ο X се (X X	X υ <υ ε	X <υ CD се CD	се < X ex
X >>	X Ε	ω <s	ο •η
CD π*	►Μ	ο c	Q
X	ε	c «

40 40	r-	oo	οχ
ос	ТГ	Ш	UD
	CO	r-4	in

co co

00	’'f	04
40	1 m	m
in	•n	00

CO 00 in in CO v-< cC *—<

		r—( co
t r—<	Pi	1 X
co 1		o
CD X	ε се	co ce f“*
X	c	ε
o	c	ω
co ω CD	X <
	ce c	θ

m —

ED₅₀ = необходимата доза глюкокортикостероид за намаляване на отока с 50%.

Claims

ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ

1. Съединение с обща формула

6181G или негов стереоизомер, в която формула връзката в 1,2-позиция е наситена или двойна,

Ri означава водород или линейна, или разклонена въглеводородна верига, съдържаща 1 - 4 въглеродни атома,

R₂ означава линейна или разклонена въглеводородна верига, съдържаща 1-10 въглеродни атома,

R₃ означава ацил, съдържащ линейна или разклонена, наситена или ненаситена въглеводородна верига с 11-20 въглеродни атома, а Xi и Х2 са флуорни атоми, при условие^че когато между въглеродните атоми в 1,2-позиция има двойна връзка, R₃ и R₂ не са едновременно метилови групи.
2. Съединение съгласно претенция 1, където връзката в

1,2-позиция в общата формула I е наситена.
3. Съединение съгласно претенция 1 или 2, където R₃ е палмитоил.
4. Съединение съгласно претенция 1, 2 или 3, където връзката в 1,2-позиция е наситена, Ri е водороден атом, a R₂ е пропилова група.
5. Съединение съгласно претенция 1, където връзката в

1,2-позиция е двойна, R_t е водороден атом, R₂ е пропилова група, а R3 е палмитоилова група.
6. 16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-1 Ιβ-xugpokcu21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион,
7. (225)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-1^хидрокси-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион, (22R)-16а, 17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-1 Ιβ-xugpokcu21-миристоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион, (22К)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-1^-хидрокси21-лауроилоксипрегн-4-ен-3,20-дион, (22И)-16а,17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-11р-хидрокси21 -палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион, (22S)-16α, 17а-Бутилидендиокси-6а,9а-дифлуоро-1 Ιβ-хидрокси21-палмитоилоксипрегна-1,4-диен-3,20-дион,

6а,9а-Дифлуоро-1^-хидрокси-16а,17а-[(1-метилетилиден)бис(окси)]-21-палмитоилоксипрегн-4-ен-3,20-дион.
8. Съединение съгласно претенция 1 с формула

II

СНзОС^СН^дСНз
9. Метод за получаване на съединение с обща формула I, съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че включва

а) взаимодействие на съединение с формула в която R_b R₂, Xi u X₂ имат значенията, дадени в претенция 1, със съединение с формула

R₄COOH, където R₄ е линеен или разклонен, наситен или ненаситен алкил, съдържащ 10 - 19 въглеродни атома или

б) взаимодействие на съединение с формула в която R_b R₂, Xi и Х₂ имат значенията, дадени в претенция 1, със съединение с формула

R4COX, където R₄ е дефинираното по-горе, a X е халогенен атом или групата -ООС R₄, или

в) взаимодействие на съединение с формула в която R_b R₂, Xi u X₂ имат значенията, дадени в претенция 1, а Y е халоген, мезилат или р-толуенсулфонат, със съединение с формула ί^ΟΟΟθΑ® където R₄ е дефиниран по-горе, а А е катион, и в случаите така полученото съединение е епимерна смес, а се търси чист епимер, епимерната смес се разделя на стереоизомерните и компоненти.
10. Метод съгласно претенция 9, характеризиращ се с това, че се получава съединение съгласно която и да е от претенциите от 2 до 8.
11. фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че като активна съставка включва съединение съгласно която и да е от претенциите от 1 до 8.
12. фармацевтичен състав съгласно претенция 11, характеризиращ се с това, че съдържа липозоми.
13. фармацевтичен състав съгласно която и да е от претенциите 11 или 12, характеризиращ се с това, че е в единична дозирана форма.
14. фармацевтичен състав съгласно която и да е от претенциите от 11 до 13, характеризиращ се с това, че съдържа активна съставка в комбинация с фармацевтично приемлив носител.
15. фармацевтичен състав съгласно която и да е от претенциите от 11 до 14, характеризираш, се с това, че е под формата на аерозолна система, предназначена за подаване на доза от 10 до 1000 pg от активната съставка.
16. фармацевтичен състав съгласно претенция 15, характеризиращ се с това, че е предназначен за подаване на доза от 20 до 250 pg от активната съставка.

с
17. Използване на съединение съгласно която и да е от претенциите от 1 до 8 като терапевтично активно вещество.
18. Използване на съединение съгласно коя да е от претенциите от 1 до 8‘за получаване на лекарствено средство с противовъзпалително и противоалергично действие.