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La présente invention a trait à un nouveau procédé
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....1101" pour la préparation synthétique de 1-(2' -d'IOXl- '-Irlborurano,,1)-'-tluorO-o7to'lne, qui est souvent désignée gaz, 2 t -cS'.oX7-,-tluorO-c1Udln., ainsi que de son c-an08a..., à t'avoir la 1- (2' -d'lox,--'D-rlbotur&nOI71) -,.tluoro-o1toI1nl.
Le procédé ci-de&4u& permet d'obtenir aoa deux &Db8trel .
"par'..nt.
Une particularité du pylooddt en question oontinte en oe que la 21-dé oxy-5-fluoro-oytidlne obtenue est en grande partie libre de son CI.anl'8. D'autre part, on peut obtenir la 1-(21-d4coxy-a-D-riboturar-%%11)-5-tluoro-cytosine pratiquement exempt* de ton 0-ancmère.
La 2'-désoxy-5-fluoro-oytldin est un OCUP044 connu, qui est utile pour la lutte contre les tuaeure. En outre, oe oofflposé a une action inhibitrice sur la oroissance des bactéries et champignons aloroloop1qu...
Le procédé oi-desaur est oaractérlaé par le fait qu'on .OU8*t la 5-fluoro-oytoaino à acylation, met la 4-M-*on$- aoyl-5-fluoro-oytoaine obtenue en réaction avec un sel merou- rique afin d'obtenir son sol sonomrourique, fait réagir ce dernier ael avec un halogénure de 3,5-diaroyl-2-dé oxy- D-riboturanosyle, de aorte qu'en obtient un Mélange consis- tant en l'a-anomre et le 8 -anre de la '-Jl-.ono-ao71- 1-(3'.5-di-D-at'oyl-2'-diaoar-D-riboturanoaylj-5-tluoro- 7to.ln., .'pare le 0-anwa4re de l'u-aaore et soumet le 13-anomr: et/ou l'a-anoatère, Individuellement, à hydrolyse
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L prooidi mentocur ol-d iau. tit rtpr a nt ' par 1..obe..
#UiVAfttl ' .suivant. &HHI N:?' 1 l , 1 \"k'11btl"'1. ven Il 11t NH*A yl z IV A fY CSl A yl-OOK, i/ 1 t##C Aayl-OCM< #S# fl -Àd,1 . Ttt KM, !!0<, &yY V A jrY ¯-0 ' A OH Ha
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Au premier stade du procédé susdit, la -tluoro-oltoI1nt(%) est soumise à acylation, afin de préparer la ¯-...ono.aO;l-'- flucro-cytotine (II) correspondante.
Ce dernier groupe de oom- posée n'était pas oonnu jusqu'à présent Certains composés appartenant à et groupe, tels que la 5-fluoro-*-N-toluojrlorto81ne et la ¯-W-benzOJl-5-tluorO-oltoI1n. peuvent étre
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hydrolysée facilement avec un aoide, de sorte qu'on obtient
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le 5-tiuorouraalls, qui est un composé connu) il est #il. comme agent anti-tumoral et "r.1oidl, Ainsi/ outre leur utilité tfoome intermédiaires dans le procédé en question, dortains composés de -fimona-sayi--liuoro-ertsin peuvent agir comme précurseurs du tluoto.urla11. dans les oyettate
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biologiques.
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tors de f.Ol1.t10 dans le cadre du "oo'd4 tuodito on peut té servir de tdui les dgerits 4'adti"idft Ulve!'1 t4-X7 4u. l'anhydride 40'fqu., 1,9 âi6tip'i dt 14 chlorure dé p-tôlubylf, l'anhydride dl Jt..1t4u'l ttdi Dili.
un 1 aise' I Ó,uvrtYuo'&t, IfCfi.ijft If fais t i lid.! cS.' chlot4utfï di p:-tOlù6Yl.'. 6J .ff'6uf $téjilfl6 en dl'3engefil 'i'dIsl'elll'!Í f" t1üÓI"6.6t6fttif Hf6 i'ipfil 4'ityit* 13id1ïL Ce$6 r'.ÓÍÓ 8' f41t , un* t.mp'&6üf' pmafit dititildu la tèmp"l'.ù. de rftiuit, et en présent d'un' ï81'Vtii& 6fîmi4uf frittlte, tel qlre' là pyridine, là d'laittîßf6'il.dèr fa: LI quantité d'agent d.t'ao7la.L6n ut!!!8'. lit 'irl.tii4 6iSBdifiE; 1.rop6rt1on devraÍt être deatï 661tit ü66 161ê 4i'i'fi diiê1ii tiaif pa IDole' de 5-(lUoO""" 1to8ini p'ff8'.iiti 4a61 il ri4itiigè dd r'kbtr.. Le' cas loh6ant 6t± peu toùtft1 tf#iïi #f i' g nt d'aoy.l'at'1'on' e1f léger' .XOI8..
INAL Le' 8.àon4 atade du, procédé oi-deoouff 6tàsì jl6tr Iii
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r4aotlon la 4-M-mono-m'byï-5 fïuWtf-dy±<>riW lit)
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4verb, U6, compos.' meràurique (1'e rbréren4 Y't 0iiêfièi 4#tt6'
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solvant), de sorte qu'on obtient le ael 8On088rourtque de la 11mono-aori5tiuoro-ottoairve(II.Tout.aei merourique approprie peut étre utilisé; on proféra, oependant, le ohlorure mercurique ou l'ao'tat4 marourique.
Comme solvant, on peut utiliser tout
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solvant organique Inerte dans lequel aussi bien la 4-9-mono-
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aoyl-5-tluoro-oytoaine que son sel rerourique sont solubles, Dana une tOI"1l8 d'exécution préférés dd procédé, on se sert toutotois de dlafthyltor8&8lde. ln général on prépare la composé de caroura désiré sous torse d'un pr4oipit4wn 84lanalant lob partenaires de réaction à température ubiante. Le sel monomerourique précipité peut ensuite ttre séparé du mélange de réaction, par exemple par tiltration ou par contritugation.
Au troisième stade du procédé, le sol .lrour1que de 4-N- ono-aoyl-5-fluoro-oytoBin est ait en réaction avec une quantité équimolaire d'un halogénure de 3,5-di-0-arcyl-2dénoxy-D-riboturanosyle, tel que le chlorure de 2-deoxy-3.5di-0-p-toluoyl-D-riboturanoisyle, le chlorure de 3,5-di--pchloro-bontoyl-2-désoxy-D-riboturanceyle @ta. Le produit ainsi obtenu contient un mélange de *-Ny3',5' 'trlacyl'-désoxy- 5-tluoro-cytidine (IV A) et de son a-anomire (IV B). Il contient plus particulièrement un mélange de 'A-N-mon0aorl-5r,5di-0-aroyl-2'-désoxy-5-fluoro-oytidine et de son a-&nombre, Dans le troisième stade du procédé, le sol aarourique de 4-N-mono-acYl-5-tlucro-cytosine est vis en suspension dans un solvant approprié organique inerte, non-miscible à
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l'eau, 'Il que le toluène, le tétrachlorure de carbone, le
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xylène, le bensine, etc.
Afin de mettre en oeuvre la réaotion désirée, on ajoute simplement l'halogénure de 3,5-da-0- aroyl-2-disoxy-D-riboruranosyle à la suspension de sol aerou-
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que, tout en remuant le mélange obtenu à température ambiante. (
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ai
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Ensuite, on sépare la ,-.,,' ,,'-trll.orl-2'-d4Io.zr-,-tluoro- ortidine (IV A) de son #.&ftre (zy 8). Lorsque le produit de réaction contient par exemple un mélange de l'a-anwdtre .. du 0-anombre de '-.-.O't11-l-(2'.d'loxr-,',,'-d1-0-p- toluoyl-D-ribofuranoayl)-3-fluoro oytoaina oc da 1-(2'-d'IOJJ- 3.5'-d1-G-p-toluotl-D-riboturanosyl)5-tluoro-!f-pivalorl eltottabo ce* an08tr.. peuvent ttre séparés par la nlthode diorite ci-après.
La allant* de réaction (obtenu au troisième
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stade du procédé) eat d'abord traité avec une solution aqueuse
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aaturfe de chlore de sodium. Ensuite, la coucha aqueuse est a4par4 de la couche organique, cette dernière eat conoentrde par évaporation jusqu'à l'obtention d'un sirop, après-quoi on dilue avec de l'acétate d'4th11. et de l'éther, puis
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Inocule et laisse* cristalliser. On triture les cristaux
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dans un mélange de pyridine et d'ac4tont, puis filtra. L4 anom6r. reste sur le filtre, tandis qu'on peut récupérer l'o-Mioatrw du filtrat.
Lorsque 1toutefois, le produit de réaction obtenu au
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troisième stade du procédé contient, par exemple, la 2'-
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disor-5-fluoro-t-N,3',5'-trip-toluoyl-ortidine, offet-à- dir,t la 0-nombre, et la 1-(2d6aoxy-3',5'-di-0-toluoTl- CL-D-riboturanosyl)-5-tlucro-4-N-tcb ll-oytoilne, c'est-à- dire l' GL-anmbre, ung autre méthode est utilisé* poil épartr, deux An08ar.8. Elit consiste à laver plusieurs foie le pro-
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duit de réaction avec de grandes quantités do solution
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aqueuse d'iodura de potassium, de sorte que le 0-anombre oe oristaliise partiellement. Lea orbitaux peuvent 4tre . séparés, par exoaaple, par filtration. Le filtrat est ensuite oonolntr4 par fvqporation jusqu'à l'obtention d'un ,trop.
In diluant ce sirop avec du méthanol bcutlltnt, on obtient
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IRI&nt1t' 8upp14..ntaire du 0-anoure crlotalli84.
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Apres avoir isole le ss-anomère sous forme de cristaux
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en suivant lajeéthode décrite ci-dessus, on obtient, par évaporation des eaux-mères et dissolution consécutive du résidu dans du tétrachlorure de barbone des (cristaux cireux,
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qui sont d1ttiolle. , filtrer; après avoir été trituré avec de l'éther. ces cristaux peuvent toutefois être filtrés facile' ment. On peut purifier lea cristaux obtenus par filtration, en
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les chauffant, d'abord à ébullition aveo de l'éther, en les séparant, après refroidissement, du solvant, puis en les
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chauffants 4bullition aveo du méthanol, et en les séparant, après refroidissement, de nouveau du solvant.
On obtient ainsi 1 b -anomare, 1 savoir la -(2'-déaox,y-3',5'-di-0-toluoyl- *-D-rlbofuranoayl)-5-fluoro-4-N-toluoyl-eytl8ine, -.%us forme de cristaux.
Au quatrième stade du procédé, la N,3',5'-triaoyl- 2'-dé80xy-5-fl\ioro-oytidine, alnsi que son a-anomre, sont désacylés individuellemt par hydrolyse alcaline. La
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décaoylation complète de la 2l-dé oxy-5-fluoro-4-N,îl ,5'- tr1-p-toluoyl-oytidine et de la 1-(2'-déeoxy-3',5'-di-0-toljoyl- o-D-rlboturanpsyl)-5-tluoro-'-N-toluoyl-oyto8Ine peut ae faire, par exemple, par les méthodes usuelles. De préférence,
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la décaoylation complète ne fait par ;hauttage des composés L température de reflux avec un aloo.,latl) alcalin' ou aveo de l'ammoniao alcoolique.
La dinacyltzion oomplète des 0- et p-anomerea de la i-N-aoétyL-1-(2'-déaoxy-3',5'-di-0- p-toluoyl-D-ribofuranosyl)-5-fluoro-cytosine et de la 1-(2'- désoxy-3'5l-di-0-p-toluoyl-D-ribofuranosyl)-5-fluoro-4-N- plvaloyl-oytosine se fait de préférence par le mélange de ces composés aveo un alooola'te alcalin ou aveo de l'ammoniac
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alcoolique à température ambiante. On peut également désacyler
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les a- et 0-anomères du composé de -N,3',5'-tri-p-Loluoyle
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à tempdratw-e ambiante, en utilisant de l'aloali en grand
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excès et/ou en prolongeant la durée de la rebâti on.
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En outre, on a trouvé que, lors d'une ddsaoylation de la 2'-d6soxy-5-fluoro-tl-N,3',5t-tri-p-toluoyl-oytidine sous conditions douces, seuls lois groupe:aen- acyles attachés
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à la - ribose sont éliminée. Ainsi, lorsqu'on mélange,
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à température ambiante ou à une température au-dessous de-celloi la 2'-déaoxr-5-fluoro--N,3',5'-tr!-p-toluayloytidine avec un alooolate alcalin ou avec de l'ammonlao alcoolique, on ob- tient la 2'-désoxy-5-.fluoro-l -N-p-toluoyl- cytidjne. En traitant ' l'a-anombre de la 2'-d'8oxY-S-tluoro-¯-N" ,5'-tr'l-p-toluoyl- oytidine de manière correspondante, on obtient l'a-ancabre de la 2>-désoxy-5-fluoro-4-N-p-toluoyl-oytidlne. De tels dérivés n'étaient pas connus Juaqu'à présent.
On peut faoilement les transformer par hydrolyse acide en la 2'-déaoxy-5-fluoro-uridine ou en son a-anomère, qui oonatituent des agents antifongiques et antibactér4ens connus. Ces Composés constituent donc des sub-
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stances intermédiaires, & partir desquelles on peut préparer
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la 2'-désoxy-5-fluoro-uridine, ainsi que son a-anoméref de plus, ils peuvent Otre considérés,, dans les systèmes biologiques, comme étant leo précurseurs de la 21-désoXY-5-fluoro-uridine et de son a-anombre.
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Exemple 1
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Préparation de 5-fluoro-4-H-p-toluoyl-oytoslne Il2ig g (Ojl mole) de 5-flucro-OYtosine sont mis en suspension dans 100 ml de pyridine, Puis on ajoute 17,0 g
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(14 ml, 0,11- ole) de chlorure de p-toluoyle. Lorsqu'on remue le mélange, la température monte apon
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tan4ment , environ 45 Le mélange est chauffé a reflux pendant environ 5 heures, puis on laisse reposer jusqu'au
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lendemain là température ambiante pour permettre la crizzalli- aatlon de la 5-fluoro-4-N-p-toluoyl-cyto8ina.
On détruit tout excès deahlorure de p-toluoyle, se trouvant encore dans le mélange de réaction, en y ajoutant 50 ml d'éthanol, puis en remuant le tout pendant environ 20 minutes.
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La 5 flucro-4-9-p-tolucyl-cytosine cristallisée est séparée par filtration du mélange de réaction, lavée avec de l'éthanolet ensuite avec de l'éther, puis séchée à en-
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viron 6o sous vide. On obtient ainsi lfl,J5 g de 5-fluoro- 4-N-p-toluoyl-cytoalne fondant à 250-251 (d4o.).
J En évaporant les eaux-mtrea a alocit4, triturant le résidu avec de l'éthanol, éliminant l'éthanol: par évaporation, et mettant le résidu en suspension dans 20 ml d'éther et 20 ml
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d'eau, on obtient une quantité aupplenta1r. de 1.56 g de produit de réaction.
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Le rendement total en 5-fluoro-t-N-p-toluoyl-cytoslne .et de 19.01 g (n0,5 de la théorie). Après recristallinatlon de l'éthanol à 90% (environ 300 01), ce produit s'analyse/
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coma suit:, point de, fuaion: 257-258 [>4ic. ) ,} E*2H 265 et
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325 mp (E-12,700, i7.ooo) 235 et 290 op (E- 8,000t 9oo).
Analyse do ?l9Hlo?)is0t : calculé C-58,30) B 4 08; N-17.00; F:7:68; \ trouvé: iirr5, 3 i H 1 N-17.loi Pu.51 Préparation du sel monoraerourlque- de 5-fluoro-1-N-p- toluoii-cytoslne Une solution de 8,97 g (0,0281 mole) d*aoétate mercu- risque et do 75 ml d'èthanol bouillanuliaist &Joutéei-à -une solution obtenue en ohauftant 6,95 g 4e''5-!'P- toluoyl-cytoainê et 75 ml de dlnéthylformanlde à environ 100 , Le milange des déuxaolut,ons provoque une préclpi- tation; afin que celle-ci soit complète, le mélange "est
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additionne de 800 ml d'éther. On soumet à centrifugation,
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lave avec de l'éther et esche'l environ 35 nous vide. On obtient ainsi 11,80 g (94,1 de la théorie) de ael )Bono<cerourique de 5-fluoro-4-M-p-toluoyl-cytbMn<H p.
Analyse de C,aHoNàOaffgt c&loule< F-*, 26; N-.9. trouvés P-*,07; N-9,13 Préparation de 2'-désoXY-5-tluorc>r#-N 3',51-tri-P-toluoil- ¯¯¯¯¯¯¯¯¯ ¯¯¯¯ cytidine On déshydraté une suspension de 11,75 g (0,0264 mole) du sel monoaerourlque de 5-flUoro-*-H-p-toluoyl-oytosine dans 350 MI de toluène, en élir-inant par diatillation environ 40 ml-de IGINA4$ne. La suspension est refroidie à teopérmture ambiante, puis,.
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on ajoute, en remuant, 22,j g (0,052e noie) de chlorure de 2-
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â4aQxy-3 5-41-0-p-toluo7l-I>-rlbofuranos7l*. La température du mélange de réaction augmente légèrement et une solution claire se foro au coure d'environ 5 minutée.
Environ 35 minutes plue
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tard, la cristallisation eomaencct e. ce moment, on ajoute 100 ml d'une solution aqueuse à 15% d'iodure de potassium et on remue le mélange pendant environ 20 minutes. On sépare de la solution les cristaux compacts formée et les lave avec de l'eau et de l'éther, puia les sèche à environ 60 nous vide.
Les cristaux sont ensuite triturée avec 75 ml d'éthanol
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bouillant. On obtient 5,36 g de 2'-désoxy-5-fluoro-4-N,3t,5l- tri-p-toluoyl-cytidine fondant à 217 . Après reoriatallisation dans 400 ml d'acétate de butyle, on obtient 4,25 g de cristaux touffus fondant à 234-235 . C1z.243 et 232 mu (E 37#500 AULX et 26,500); CHaCla m 290 mu (f- 8,490); ta) 25.+ 5.5 . (o. 1,0 dans de la diméthylformamide).
Par 1' évaporât ion des eaux-mères de toluène, d'éthanol et d'aoétate de butyle, on obtient une quantité supplémentaire de cristaux. En tout, on obtient 5,90 g ( 40% de la théorie) de
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21-dénoxY-5-fluoro-4-N,3',51-tri-p-toluoyl-cytidine. Analyse de Cs.HsoPN,07 calcule! C-66,10= H-5,04; P-3,17;
N-7,01; trouvé, c-66,16; H-5.03: P-3,01;
N-6,73, 6,90.
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Préparation de 2'-déaoxy-5-fluoro-oytidine On met 2,24 g de 21-dénoXY-5-flucro-4-N,3',5'-tri-Ptoluoyl-cytidine en suspension dans 25 ml de méthanol contenant une petite quantité de phénolphtaldine. On chauffe la suspension AL à reflux et ajoute simultanément, zum jours do 1 minutée et
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goutte à goutte, 2,7 el d'hydroxyde de 8od1ua 0,85M. On continue'
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de chauffer à reflux pendant aviron 1 heure.
Ensuite, la solution est neutralisée avec 2,7 ml d'acide chlorhydrique alcoolique 0,85 N et évaporée sous vide, de sorte qu'on obtient un sirop. Ce sirop est repris dans de l'alcool butylique, puis le solvant est de nouveau éliminé par évapora-
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tion. Le résidu est séché à environ 600 sous vide. Ensuite, il est repris dans 80 ml de butanol bouillant, et la solu- tion trouble ainsi obtenue est filtrée à travers de la terre de toulon et du charbon animal. Lorsqu'on refroidit, des cristaux se précipitent, qui sont séparés des eaux-mères par
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filtration. On obtient ainsi 0,424 g de 2'-désoXY-5-fluorooytidine fondant à 194-1960.
En évaporant les eaux-mères, déshydratant avec du toluène et recristallioant le produit dans du butanol, on obtient encore 0,226 g de 2'-dénoxY-5-tluoro-cytidine cristallisée fondant à 196-1970.
Exemple 2
Dans cet exemple, on trouvera l'explication d'une méthode
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pour la séparation et la récupération de 2'-disoxY-5-tluoro-4- N,3',5'-trl-p-toluoyl-oytldlne et de l'a-anomère de ce composé, à savoir la 1-(2'-décoxy-31,5'-di-0-toluoyl-a-D-riboturanoayl)- 5-flucro-4-N-toluoyl-cytosine, d'un mélange contenant cou deux composée.
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36,3 g du ael monomèreurique de 5-fluoro-H-N-p-toluoyl- cytosine (préparés selon la méthode décrite dans l'exemple 1), en suspension dans 750 ml de toluène, sont mis or réaction
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aveo le chlorure de 2-déeo,xy-3,5-di-0-p-tolyoyl-D-ribofuranoiyle,
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Cette opération est effectuée Ion la Méthode décrite dans l'exemple 1.
Le produit ainsi obtenu est lavé plusieurs fois avec
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800 al d'une solution à 30 % d'iodure de potassium et 4000-el d'eau. La 2-désoxy-5-fluoro-#-N,31,5'-tri-p-toluoyl-cytidine se Sépare de la solution de toluène tout forme de cristaux* Ces cristaux sont liâmes par filtration et la solution de toluène est concentrée par Evaporation Jusqu'à l'obtention d'un airop. Une quantité supplémentaire de cristaux peut être obtenue par traitement du sirop aveo du méthanol bouillant.
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Au total, on obtient 20,2 g de 2'-dEaoar-5-tluoro-t-N,3',' tri-p-toluoll-cytidine fondant à 2150.
Les eaux-mères de méthanol aont ensuite évaporée , et le résidu est dissous dans 80 ml de tétrachlorure de carbone, de aorte que des cristaux cireux se séparant de la solution.
Après trituration avec 75 ml d'éther, on sépare leu cristaux
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par filtration et purifie le produit en le chauttant à 4bullim tion aveo 225 ml de méthanol, On obtient 7,5 g d'aiguilles
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touffues fondant à 152-153 . Ce produit est recristallied dans de l'éthanol (80 volumes). On obtient ainsi la 1-(21-désoxy- 3'5'-di-o-toluoyl-D-ribofursnaaylj-5-fluoro-t-N-toluoyl oytoaine fondant 152,5-153 lct]D #133 (cm 0,5 dans la diméthyltormmide). J # 242-3 et 330 mp (6-39,200 et 12,960). - 219 et 295 mu (. 19.000 et 7,65q.À J JJj1 - 243 et 334 mu (E- 37,500 et 28,200).
CH2Cl8. 2 g 1 ra p (f. 9.200).
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Exemple 3 Cet exemple décrit une méthode pour la conversion de 1-
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(2'-déBox3r-3l,5f-di-o-telûoyl-a-D-rlbofurâno 3rl)-5-fluoro-4-lltoluoyl-cytosine en 1-(21-dénoxy-a-b-riboruranosyl)-5-tluorooytouine, c'est-à-dire 1'Q-Moaëre de 2'-désoxy-5-fluoro-cytidint.
559 as de 1-(2'ddaoxY-31,5t-di-0-toluoyl-a-D-riboturanosyl)- 5-fluoro-4-N-to\uoyl-oytosine (préparée suivant l'exemple 2) sont ajoutée à 25 ml d'ammoniao méthanclique 6N. On laisse repo- ser ce mélange pendant environ 24 heures à température ambiante, évapore ensuite la solution à siccité (nous vide) et chauffe le résidu pendant environ 5 minutes A reflux dans 30ml de chloroforme. On laisse cristalliser Jusqu'au lendemain à tem- pérature ambiante, puis élimine les oriataux par filtration.
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On obtient ainsi 214 mg (84% de la théorie) de l-(2'-deaoxy- a-D-ribofuranoayl)-5-fluoro-oytoaine fondant à 182-183 0 Après recristalllaation dans 5 ml d'éthanol, puis trituration avec de l'éthanol chaud, le produit fond à 186-1870. [a) 25 la . -g2o (o. 1,0 dans de l'eau). 011N Mim 291 mu (J-12,000);À CI'N HCI max. juin.
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. 241 mut (.1,530).
S Analyse de C.KtaPN.04& calculé, P-7,75 trouvés P-7,57 Exemple 4
Cet exemple déorit d'autres méthode de désaoylation de
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"''é'aoxr-5-fluoro--N,3',5'-tri-p-toluoyloytidiaa. qu< c<ll< déorite dans l'exemple 1.
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A. Une suspension de 3 g de 2'-déaoxy-5-fluore-4-N,3',5'- tri-p-toluoil-cytidint (5,36 mmole) dans 50 el de méthanol cet chauffée à température de reflux. On ajoute, goutte 4 goutte, 6 ml de eéthoxyde de lithium 6,458; pendant l'addition, la température du mélange est maintenue à environ 50-55 .
Après environ 50 minutes à cette température, on obtientune solution Après avoir chauffé pendant environ 5 heures à cette marne température, on peut constater l'absence presque totale d'absorption à 320 m . A la fin de la période de chauffage de 5 heures, on neutralise la solution aveo de l'aoide chlor- hydrique alcoolique, puis on clarifie la solution au moyen de terre d'infusoires et de charbon animal. La solution est ensuite concentrée par évaporation jusqu'à l'obtention d'un sirop, à partir duquel on obtient un produit cristallin en utilisant un mélange de 10 ml d'éthanol, de 10 ml de méthanol et de 25 ml d'éther. On obtient 0,91 g (69, de la
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théorie) de 21-désoxY-5-fluoro-cytidine.
Après recristallisa- tion dans du butanol, puis dans de l'éthanol, on obtient un o produit fondant a 196-197 .
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B. 10,71 g de 2'-désoxy-5-fluoro-4-N,3\5'-tri-p-toluoyl- oytidine sont mis en suspension dans 170 ml d'éthanol, qui contient 15% d'ammoniac. La mélange est remué pendant environ 16 heures à température ambiante, puis on ajoute 330 ml de méthanol. Ou nature le mélange aveo de l'ammoniao, tout en le remuant et en le refroidissant au moyen de glace, puis on laisse reposer pendant encore 20 heures. La solution obtenue est clarifiée par filtration avec de la terre foulon et du oharbon animal; l'analyse du produit révèle que sa valeur
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E2N HIC" aient que de . 1250(ce qui correspond à 0,3% de 2'-ddaoxy-5-fluoro-t-H-toluoyl-oytidine).
La solution est L concentré! par évaporation, de sorte qu'on obtient une poudre
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cristalline sèche, qui est déahydrttoavto 80 ml d'ithanol
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bouillant. Après refroidissement et addition de 80 ml d'éther,
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on obtient 2,33 g de 2l-désoxy 5-fluoro-aytidiM fondant à o 193.3-1.
En ajoutant encore de l'éther aux eaux-mères, concentrant
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la solution à siccité par évaporation et tr1tura'toD du résidu avec 100 ml dtacitate de butyle bouillant, ou obtient une quan- tit4 supplémentaire de 2'-désoxy-5 fluoro-oytldint. Au total, on obtient z,21 g du produit (89,7% de la théorie).
Exemple 5
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Préparation de 2'-désoxy-5-fluoro-lf-N-p-toluoyl-oytldlne 1,12 g (0,002 mole) de 21-décoxy-5-flucro-4-N,3',51-tri- p-toluoyl-cytidine (préparée selon l'exemple 1) sont mis en suspension dans 30 ml de méthanol (oontenant quelques gouttes de phénolyhtaléine), puis on ajoute 2 ml de méthoxyde de sodium 1N., On secoue le mélange pendant environ 20 minutes, puis on ajoute encore 2 ml de méthoxyde de sodium 1n On laisse reposer le mélange pendant approximativement 16 heures à environ 3 Le produit est ensuite neutralisé avec de l'acide chlorhydrique méthanolique (0,0026 mole) et concentré par évaporation. Le sirop obtenu est trituré avec 50 ml d'éther, de sorte qu'on obtient des cristaux.
Ceux-ci sont séparés par centrifugation, lavés avec de l'éther et repris dans 15 ml d'eau. On laisse cristalliser, puis les cristaux sont éliminée par filtration, lavés aveo de l'eau et ensuite aveo de l'éthanol.
On neutralise le filtrat aveo 0,7 ml d'acide chlorhydrique 1n, déporte qu'on obtient une quantité supplémentaire de cristaux.
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IALAu total, on obtient 0,k1 g (56.5 de la théorie) de 0 ris taux.
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Le produit s'amollit à 188-189 , ne solidifie de nouveau et
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fond entre 217-218 .
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On recristallist 0,3 a de ce produit dans 15 ai d'eau et 5 ai d'éthanoi. On obtient Ainsi 0,27 g de 2'-d<<ojqr-5-fluoro- 4-3-p-toluoyl-oytidine sous fora de longues aiguilles toa- dans 1 218-2190.) : . 265 et 329 ap (t-16,800 et 17.900).
1Itou m 236 et 294 mp tf .8.6o0 et 8, 7od ? i IU0H. 245 et '"m* M H JU 320 mr (± 11,440 et 22,380). 0 1 NaOH 235 et 260 8fI (±# 11,160 et 8,410). (a,25. 490#3o# (0.0@# dans la dimlthylforma-
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aide).
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Analyse de Ca8HiOn(s07i calculis Cm66,10, Hj,01 p- 3,n M-7,Olj trouât C-66,16; M-5,031 P. ',01, N-6,73. 6.90.
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Exemple 6
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Préparation de ¯-N-ao4tyl-5-rluqro-OYtoI1nt 12,9 g de 5-fluoro-cytouine, 60 ai d'acide acétique et
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12 ml d'anhydride acétique aont mélangés dans un récipient approprié, puis chauffée à environ 110-115 . Après une période de chauffage de 5 minutes, tous lea partenaires de réaction sont dissous. On laisse refroidir à température ambiante, de sorte que la cristallisation se produit. Les cristaux sont éliminés
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par filtration et séchés à environ 80 , Jusqu'. l'obtention d'un poids constant. On obtient ainsi 17,1 9 de 4-N-acétYl- 5-fluoro-07tonine (100% de lathéorie) fondant à 2}5-2'7 (d'o.)
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Analyse de C,HtM,0,P: calcul*! C-42.1 ; f H3,s trouvé C-'2,2', H-3,80.
Préparation de '-N-ao't,1-1-(2'-d'.Oxr-,'"t-d1-0-P-tolu071- p-rlbofaranosyl)-5-fluoro-oytoBftna En chauffant légèrement au bain de vapeur, on prépare une aolution de 17,1 g de 4-N-acétyl 5-fluoro-oytoelne et 200 el de diaéthylformaalde.Cette soluticn est ajoutée à une solution de 32,0 g d'acétate merourique et de 130 ml de dlm'thJlroa- - aide. Avant l'addition de la solution de *-N-aoétyl-5-fluoro- cytosine' la solution d#acdtatt meraurlqut a été refroidie à environ 0 .
De plus, l'addition se fait progressivement, de manière à ce que la température du mélange ne dépasse pas environ 20 .Après l'addition, on remue le mélange pendant environ 10 minutes à environ 0-10 . Le mélange est ensuite addi-
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tionni de 300 ml d'éther absolu, et le précipité formé est sépa- ré par filtration, puis lavé avec 100 ml d'éther absolu et ensuite avec 100 ml de toluène.
Sans le sécher, on met le produit en suspension, en remuant constamment, dans 500 ml de toluène, puis on ajoute 80,0 g de
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chlorure de 2-désoxy-3*5"'di-0-p-toluoyl-D-ribofuranosyle. Pendant environ 1 heure, on remue le mélange à environ 20-250-
Ensuite, on additionne, tout en remuant fortement pendant environ 15 minutes, un mélange de 200 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium et de 1,0 g le bicarbonate de sodium. On obtient ainsi un système biphasique. La couche toluique est séparée et secouée aveo 100 ml d'une solution saturée de GINAL ohlorure de sodium. La solution de toluène est ensuite évaporée
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.,8oo!t4 nous vide.
Le sirop résiduel obtenu est dilué avec*''
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5 10 15 20 20 ml d'acétate d'éthyle et 200 ml d'éther, puis inoculé et
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laissé cristalliser; après environ 12 heures la cristallisatiorl est complëte Les cristaux formés sont éliminée par filtration
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et lavés avio de l'éther. On obtient ainsi 39#5 9 (75% de la théorie) de 4-N-acétyl-l-(21-dé4oxy-31,51-di-0-p-toluoyl-D- riboturanosyl)-5-fluoro-oytosine fondant à 155-162 . ce] 25 -600 (1%de di*4thyltormamide).
Isolement du 0 -anomère de 4-N-ao4t,1-1-(2, '-d'eOX1-' ,,'- 0 0 - - bo a os o -o a e 30,0 g de -H-aoftyl-1-(2'-dfaou,-3',5'-di-ptoluoyl-D- riboturancisyl)-5-flucro-cytonine (préparée selon la méthode décrit au paragraph précédent) sont repris'par.x5 r de uc pyridine et 45 ml d'acétone. Le mélange est remué pendant environ 30 minutes, puis les substances non!'-dissoutes lavé.. aveo 10 ml d'acétone.
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On obtient 12,5 g de A-N-aoétyl-désoxy-S-fluoroO11- di-0-p-toluoyl-cytidine fondant à 197 . &: ]DS.. 32,0 i 0,5 Après reoristallisatlon dans du butanol le produit s'analyse comme sultt Analyse de Oiytirs0tla81 caleuldt C-61,94j Hm5,01; Bzz trouvés c-61,86; H5, 21= N.8,12.
Réparation de 2t-d48o-5-tluoro-Qt1d1n' On oet 5,24 g de N-aodtrl-2'-dfsox,r-5-tluoro-3',5'-d- 0-p-toluoyl-cytidinè en suspension dans 80 ml de méthanol. La suspension est additionnée de 15 ml d'une solution de aéthoxyde
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de sodium 1N. Le* partenaires de réaction vont rapidement en solution.On laisse reposer la solution pendant 6 heures, puis on y ajoute 15 ml d'acide sulfurique aqueux IN. La solution
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est évaporé* à aiecitd, puis on lave le résidu avec de l'éther$ l'extrait ensuite avec 100 ml de méthanol chauffa a ébullition, le filtre et évapore le filtrat sous vide.
On obtient ainsi
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2,4 g (100% de la théorie) de 2'-désoxy-5-fluoro-oytidine .ou. forme de cristaux fondant à 188-190 Après recristallisation
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dans 120 ml de méthanol, on obtient la 2'-désoxy-5-fluoro- oytidine, fondant à 195-1960. (cL) 25 -4 76,60, 1 0,4 ( 1% dans de l'eau).
Exemple 7
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Préparation de 5-f luoro-4-S-pivaloyl-oytosine
On mélange 13,0 g de 5-fluoro-oytoaine, 26 ml de diméthyl- formamide et 19,0 g d'anhydride plvalique, puis on chauffe le mélange, en remuant, à environ 110-120 . Après avoir chauffé pendant environ 15 minutes, on laisse refroidir le mélange; par refroidissement supplémentaire, on fait cristalliser la
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5-fluoro-4-N-ptvaloyl-cytoaine; les cristaux sont séparés par filtration, Après r,or1.tat..tlQn dana 4y métb4ilul# le pro- 4WIt tonit k 1511,"P"'i0 '4'Q,), Analyse de C.YH.
O2NOF; calcule C-506 ; ; H-5,6;
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trouve: C50, 15 t H-5.81 Préparation de 2'-désoxy-5-fluoro-4-N-pivaloyl-3' ,5'- 4td1-0-P-t01UO1-0Ytld1neJ L Un mélange de 10,52 g de 5-fluoro-4-N-pivaloyl-oytosine,
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de 16 g d'acétate merourlque et de 20 ml <<'< 1Mthv'rM.-'.
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5 10 15 20 25 est traité à environ 0-5 jusqu'à l'obtention d'un sirop homogène, auquel on ajoute, en remuant, 300 ml d'éther absolu.
Un composé mercurique volumineux, amorphe et floconneux se précipitaon le sépare par filtration et le lave avec 50 ml d'éther absolu.
On met ensuite, en remuant, le produit obtenu en suspen- lion dans 500 ml de toluène. On ajoute 0,0 g de ohlorure de
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2 -déioxy-3,5-di-0-p-toluoyl D-rlbofuranosyle, puis remue le mélange pendant environ 1 heure. Le produit obtenu est élaboré selon la méthode décrit* dans l'exemple 6 (préparation de la
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-N-acétyl-1-(2'-dEaoxy3',5'-dl-0-p-toluoyl-D-ribvfuranoayl)- 5-fluoro-oytoslne et l'isolement de son '-anomre), de aorte qu'on obtient 4,0 g de 2'-d'sOXl-5-fluoro-¯-N-plval01l-,'.5'. di-0-p-toluoyl-oytidim sous forme de cristaux tondant à 209 . ici] 25.4-210( ( 1% dans la dlméthylformamlde) .
Préparation de 2'-déeoxy5-luoro-ortdne 3,) g de 2l-dé0oxy-5-fluoro-J -N-plvaloyl-3l.5'-di-O-p- toluoyl-oytidine sont mis en suspension dans 70 ml de méthanol, puis on ajoute quelques gouttes d'une solution alcoolique de
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phénolphtaldint. La suspension est ensuite additionnée, goutte à goutte, d'une solution méthanolique de Mth1la- de bal7UJr 1, 8N, jusqu'à ce que la suspension ait une couleur rouge durable. On laisse reposer le mélange pendant environ 90 minutes à environ 25 , puis on neutralise la solution avec de l'acide sulfurique 1N et la filtre. On élabore le tiltrat de la manière décrite
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dans l'exemple 6 (préparation de la 2'-désoxy-5-fluoro-oytidine), de sorte qu'on obtient 1,5 g de 2'-désoxy-5-f luoro-cytidine ORIGINAL 2r sous forme de cristaux tondant 4 1960.
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