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La. présente lnvnfc@n a pour objet la préparât ion de composes en 14 de la séwie du pré saturés? ou non atUll@9 orygên0 @n position 18 ou en position 3.1 e 18, ainsi qu@ dG la 2 s dérives fcnationnais. Ses nouveaux composés en lu If} 1; leurs ëéll":1 vés" par enemplo la 14-hyd1"oJQralQ!o!}tél-;;on, 0 ont %,ne act;1o:. plus :rorte tlue les core, poses non hydroylëë es position 14.
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On obtient ces nouveaux composes fâ?3.xQ%$16s n 14 de la série du prégnane on soumettant (Ses 14-.îl-prégnance Saturés ou non saturés, oxygénés on position z,$ ou en positif il et 18, à l'action aérobie d'ensymes clo des genres Mucor, Helicontylum, Pleospopa. ou CMrMlas'ia.
Les 14-H-prégnanes oxygénés en position 3.8 ou en position 11 et 18, utilisés cmys: xab t,ss 30 départ, présentent de préférence en position 3 et 20e des hydrosylea ou des groupes oxo libres ou oretionn:âl:m.;z t tnedifia. Ils
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peuvent être saturés ou renfermer des doublez liaisons, par
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exemple en position 1 et/ou 4, ainsi qu'en position 5 6, 7> 8, 9sll, Ils 12 ou 16, ou comporter der3 sub±ti$u&rrf;8 complé- mentaires, tels que des hydroxyles ou dec groupes oxo libres ou modifiés, ainsi que des groupes épomi ou des atomes d'halogène, par exemple en position 2P ee 53 z, 7 8, 9p 12, 15, 16, 17 ou 21, ou des groupes sethyliques, par exemple
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en position 17a.
Les substances de départ indiquées ci-dessus
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sont de n'importe quelle cosiflguratlon stérique et peuvent. aussi être z, l'état de recensâtes. co-..orr;nnent également les composés des séries dites noe et/ou o:o, notamment lea 19-nor- et D-homocomposés. Dca substances de départ parti- owlierement importantes sont par exemple la 1$bdrow et la oRaprogestérone, la 3.7a,1$-dih;dror- et la 17-iârot- -o=progestérone, la 18-hydroxy- et la 18-oxo-cortexone, la 17a,18-dihydroxy- et la Lcc-hdrox-18-oxa-oorteaone,
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, do'â oi2 la 8 t f32:
<i'û:,d'fi9"'c t la .8 i'3iD 11-dadx--cooo oo, la l1-épi-18-hydro- et la ll-ép1 18-oo aor3.eoo, la 17a-hYdroXY-aldostérone la 18- atd^o3-&doc2, la 18-hydoxy- et la l8-axe-cortisone, les 1-ddlledro- et 21cxo-cooa corrospcadants et/ou les 9a-fluopo-, 9s-chlopo- ou .2s-Ramo- et -aRsamo-dà,cr9 par sxempl@ la 9e-flopo-aMostGna et la 9a-flpoF-o-l¯ ddhydro-aldostérone, la 9o-flw3?o-l8-hydroxy-co2*ticosfcéî?on et la '( .C.o .Cd'mBSid3 S S .- ."ro-cor, f/.ostérone. Dans les substances de dé>art, .e.'E,'gPi''4TâF'.''' fonetionn@ll@ment modifié est 35 ' fia F39 un hydroxyle '''.'9., par Sfifi5tw' pas un acide cnrboQrl1que al1phat1ueo aromatiquo ou hétéroesllqw, par exemple par les acides acét1G 9 . ca.oiao, ben2oue ou furae-c?boJ11u; ou un hydyosyle éthé1f1é, par exemple le groupe csL 6adx o$r,'RS.,9 be-nsylossy OM PN::,a8''R' méthoxy.
Il groupe oo tonctinn011emcnt modifié est &vantag- eusement Ma groupe oxo eétallsë ou acétaliaé, ddloluant notamment d'un alcool divalent, par eKSsple 2c groupe éyRnna d1o=yo par groupe crboyl1uc ronctionncl1mcnt modifié, on entend en premier lieu un grcute cabozyl1que atérlf1é ou lactonlsé.
Conformément au poedé les substances de départ
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indiquées sont amenées à réagir sur des ensymes de' champignons
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des genres Mucor, H11cogtylum, Pleospora ou Curvularia, notamment de l'espsee Pleospora. gaeumanni, ainsi que des
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espèces Mueor griseocyamus, Mucor parasiticus, Helicostylum piriforme -et Curvularia pallescens.
Pour leur obtention sont . appropries des milieux en eux-mêmes connus,par exemple ceux renfermant des sucres comme le glucose ou le lactose, des peptones, de l'eau de gonflement du maïs., des produits- du soja et analogues, ainsi que des sels minéraux, ou alors des solutions nutritives synthétiques. On travaille notamment dans des conditions aérobies, par exemple en culture d'agi- tation, ou par croissance immergée avec agitation et amenée d'air. Les champignons indiqués se différencient d'autres microorganismes, par exemple de bactéries, par leur bonne croissance dans des conditions de culture relativement simples.
La réaction conforme au présent procédé a lieu dans la culture de champignons décrite ci-dessus ou à l'aide des enzymes qu'elle renferme,le cas échéant après enrichissement ou séparation, ainsi donc dans le cas le plus simple, dans une suspension du mycélium du champignon séparé, du mycélium du champignon homogénéisé ou dans des filtrats ou des extraits aqueux du mycélium.
On peut isoler les produits du procédé par des méthodes connues . Leur séparation peut avoir lieu par exemple en extrayant le mélange réactionnel avec un solvant organique, par exemple avec du chlorure de méthylène ou de l'acétate d'éthyle.Pour purifier davantage l'extrait ainsi obtenu on opérera notamment par chromatographie, par exemple sur
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de l'oxyde d'aluminium ou sur du gel de siliceau moyen des méthodes de répartition par exemple par le procède à contre-courant ou par séparation à l'aide de réactifs de
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Girard, tels que le chlorure de trlméthyl-acéthyâraside- ammonium ou le chlorure daeëthydrazide-pyrMinima.
Apres la purification ou à sa place, on effectue finalement une recristallisation, de préférence dans des solvants organiques ou dans des solvants organiques aqueux.
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Par introduction de l'hydrosyle en 14, on par- vient à de précie l4-hydrocy'.prgnaneSj, ogënës en position 18 ou en position 11 et 18, et à leurs dérivés, qui, comparés aux composés thérapeutiquement actifs qui ne sont pas hydroxylés en position 14, se caractérisent par une efficacité accrue.
Par composés oxygénés on entend alors ceux qui renferment des hydroxyles, des groupes oxo ou des groupes acides libres
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ou fonetîonnellemp-rlt modifiés, tels que les esters éthera, lactones thioesterSj, thîodthers, thiol- et thlan-esters, acétals, rnercaptalsj) cétals, les dérives énoliques tels que les esters énol1quesD les éthers énoliques ou les énaaiînesj, les hydrasones, les semi-carbazones et analogues.
Parmi les produits du présent procédé, il y a lieu de citer notamment la 14a,18-dlhydrox-y- et la 14a-hYdroxY-18oxo-progestéronej) la 14a,17aJ>18-trihydroJ- et la 14a.,17a-dîhydro,-y-18-or.o- progestérone, la 14a;18-dhyàroff- et la l4a-hy<3roxy-â8-oxo- cortexone, la I4a,17a,l8-trihydroxy- et la 14a;17a-dihydroxy-
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.8-oxo-cor'ceone la 14a-hyd:r'oz.y .,8 Idos tél"on9 , la lia;) 18- âihydroxy-cort.cotérone et la âa:8-dhyex aâ,-.'-dhdro- cortloostérone, la il-drî-14ael8-dibydroxj- et la l1-épi- 14a-.hydroxy-18-oxo-corticostérone, la Ia,.7a-dihyeroë:y-a.-. dostérone, la la, .8-d.hydroxy-hyirocor;
isane, la .a.,18- dihydroxy- et la 14a-hydroxy-18-oxo-cortisone, les 1-déhydro- et les 21-oxo-composés correspondants, ainsi que les dérivés fonctionnels correspondants,tels que les esters, les éthers,
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les dérivés halogénés, par exemple les 9a- ou 12<x-halogéno- en particulier les fluoro- ou chloro-composés, par exemple la l4a-hydroxy-9a-fluoro-aldostérone et la l4ct-hy<Sroxy-9#- fluora-1-déhdro-a.doetrone9 la l4a,l8-dlhydrosy-9a-fluoro- corticostérone et la la,:l.8-dihrdroxy-9a-fluaro--1-déhydro- corticostérone. Pour autant que les produits du procédé ne présentent pas la configuration et les substituants de stéroïdes thérapeutiquement utilisables, ils peuvent être utilisés comme produits intermédiaires pour leur préparation, par exemple pour la préparation des composés indiqués ci-dessus.
Les produits réactionncls obtenus conformément au présent procédé peuvent être transformés, d'une manière en elle-même connue, en leurs dérivés fonctionnels tels que les dérivés oxygénés,soufrés ou azotés, par exemple en esters,
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éthers, esters -énoliques, éthers énoliques, cétals, thloethers et thïoeétalzt ainsi qu'en hydrazines, en oximes et en énamines; de plus, les hydroxyles peuvent être deshydrogénéa
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en groupes 0,"0. Bans ces composés . toutes les fonctions hydroxyles et/ou oxo ou les unes seulement être modifiées fônctionnellement.
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Dans les esters et les esters énoliques, les restes d'acide sont ceux de n'importe quels acides organiques
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ou inorganiques, par exemple les restes d'acides cal00,culîques, thioncarboxyliquesp thîolëc,,4rbo2fyliques ou suif niques aliphatiques, allcyclîques, aral1phatiquesp aromatiques ou htérocycl1quesJl de préférence les restes des acides fornique, acétique, des acides chloracétiques, des acides trifluor- acétique, propîonîque, des acides butyriques,, des acides valérianiques, des acides triméthylacétique d1éthylaoétlque des acides caproigrao, des acides oenanthiques , des acides capryliques, des acides palmitiques, dos acides crotoiilque, unâécaniquà, unaécYléniquep oxalique, succinique, pim61ique, maléïque, lactique, des acides carbamlquesg des acides al- coxycarboxyliquesy des acides p-cyclopeïitylpropioniquej, hexa- hydrobenzoïquej,
benzoïque, p7àiénylacétique, cyclohazylacétîque, des acides phénylpropioniqueSg des acides triméthylgaln4que, phtalique, furanne-2-carboxylique, isonicotinique., méthane- sulfoniquep toluène-sulfonique, des acides sun.furîques, des
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hydracides halogènes ou des acides phosphoriques.
Si on le désire, on peut, dans les composés ob- tenus, transformer en groupes libres les hydroxyles ou les groupes oxo fonctionnellement modifiés. De cette manière, on
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peut mettre en liberté les groupes fonctionnellement modifiés, aussi partiellement, notamment dans les dérivés polysubstitués.
Cela a lieu; par exemple, par hydrolyse chimique ou enzyma- tique, par exemple en utilisant des agents acides ou basiques, par alcoolyse ou par acétalisation couplée. A partir des dérivés obtenus de cette manière ou aussi directement, qui ne sont que partiellement modifiés, par exemple estérifiés ou éthérifiés, on peut, par modification subséquente des diverses fonctions présentes, par exemple par estérification ou éthérification, préparer des dérivés polysubstitués, notam- ment aussi des esters ou des éthers mixtes ou des ester-éthers.
Si, lors de l'hydrolyse, effectuée notamment avec des agents alcalins, les 9,11- ou les 12,11-halogène-hydrines ont été transformées en les 9,11- ou 11,12-époxy-composés correspondants, ces derniers peuvent être de nouveau transformées en 9,11- ou 12,11-halogène-hydrines désirées, par l'action d'hydracides halogénés, notamment d'acide fluorhydrique ou d'acide chlor- . hydrique.
Les produits du procédé peuvent être utilises- comme produits intermédiaires pour la préparation d'autres produits précieux ou, certains d'entre eux,comme médicaments.
L'invention concerne également, à titre de produits industriels nouveaux, les composés définis ci-dessus,
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L'invention est décrite plus en détail dans les exemples non limitatifs qui suivent, dans lesquels les températures sont indiquées en degrés centigrades.
Exemple 1
A une culture de Pleospora gaeumanni, bien dé- . veloppée par agitation à 28 , âgée de quatre jours,dans 500 cm3 d'une solution aqueuse à 70% de moût de bière, avec 0,5 cm3 d'huile de baleine, on ajouté, dans des conditions stériles, une solution de 125 mg d'aldostérone, dans 10 car d'acétone.
On continue d'agiter la suspension pendant quatre jours à la même température. On sépare alors le mycélium et le lave bien à l'eau et à l'acétate d'éthyle.. Après avoir réuni les solution claires, on les extrait à l'acétate d'éthyle. On lave a l'eau les solutions d'acétate d'éthyle, les sèche et les évapore sous vide. On dissout le résidu dans du méthanol à 80% et extrait à plusieurs reprises/avec de l'éther de pétrole. On évapore ensuite complètement sous vide les so- lutions méthanoliques.
Un chromatogramme sur papier du résidu (propylène-glycol-toluène) montre à côté de peu d'aldostérone* la 14[alpha]-hydroxy-aldostérone qui migre un peu plus lentement.
On sépare la totalité du résidu à l'aide d'un chromatogramme préparatoire sur papier (propylène-glycol-toluène). Les,-zones correspondant à la 14a-hydroxy-aldostérone sont découpées et extraites à plusieurs reprises avec du méthanol à 50%. On
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élimine ensuite le méthanol soue vide, extrait la solution aqueuse qui reste à plusieurs reprises avec de l'acétate d'éthyle, lave à l'eau les solutions d'acétate d'éthyle après les avoir réunies, les sèche et les évapore sous vide; on
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obtient comme résidu de la l4a-hydroxy-aldostérone pure.
On peut aussi effectuer l'incubation de l'aldo- stérone dans 500 cm3 d'une culture aqueuse, bien développés, de Curvularia pallescens qui renferme les adjuvants suivants: 5 g; de sucr de canne, 5 g de triptone Difco, 1 g de nitrate de sodium, 0,5 g d'orthophosphate secondaire de potassium, 0,25 g de sulfate de magnésium, 0,25 g de chlorure de potassium, 5 mg de sulfate de fer heptahydrate, 1,25 g de carbonate de calcium et 0,5 cm3 d'huile de baleine. Le traitement a lieu comme indiqué ci-dessus.
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la l4a-hydroxy-aldostrone ainsi obtenue peut être estérifiée comme suit;On recouvre 100 mg de ce produit avec 0,2 cm3 de pyridine et 0,4 cm3 d'anhydride acétique.
On laisse la solution reposer pendant 15 heures à 20 et l'évaporé ensuite, après y avoir ajouté de l'eau, sous un vide habituellement utilisé et finalement sous un vide poussé,
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à 35 . On obtient comme résidu du 3$, 2i-r,a cébate de-la l4a- hydroxy-aldostérone.
Exemple 2
A une culture de Pleospora gaeumanni
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veloppée par agitation à 28 , âgée de quatre Jours;,dans 500 cm d'une solution aqueuse à 78% de moût de bière, avec 0,5 cm d'huile-de baleine, on ajouté., dans des conditions stériles une solution de 125 mg de 1-déhydro-aldostérone (préparée de manière comme, par exemple suivant les indications de la demande de brevet déposée par la demanderesse le 6 février 1956 et ayant pour titre ; "Procédé de préparation de déhydro- composés de la série des stéroïdes") dans 10 car d'acétone* On continue d'agiter la suspension pendant quatre jours à la mime température.
On traite alors le mélange réactionnel comme indiqué à l'exemple 1 et isole, également comme indiquée la 1-déhydro-14[alpha]-hydroxy-aldostérone, à l'aide d'un chromato- gramme préparatoire sur papier (propylèneglycol-toluène), elle migre un peu plus lentement que la 1-déhydro-aldostérone.
Pour l'estérification on recouvre la 1-déhydro- 14[alpha]-hydroxy-aldostérone ainsi obtenue avec 0,2 cm3 de pyridine et 0,4 en,3 d'anhydride acétique* laisse reposer la solution pendant 15 heures à 20 , et l'évaporé alors sous un vide habi- tuellement utilisé, puis finalement sous un vide poussé, à 35 . On obtient comme résidu le 18,21-diacétate de la 1-déhydro,, 14a-hydroxy-aldostérone.
Exemple 3
On fait réagir 125 mg de (18# 11ss)-lactone du #4-3,20-dioxo-11ss-hydroxy-prégnène-18-oïque (qu'on obtient
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de manière connue;, par exemple comme Indiqua dans la demande de brevet de perfectionnement déposée le 17 mai 1956 par Monsieur REICHSTEIN, Tadéus et ayant pour titre :
"Procédé de préparation de stéroïdes oxygénés et nouveaux composés ainsi obtenus"), comme il a été indique dans les exemples 1 et 2 ci-dessus, dans une culture de Pleospora gaeumanni. On traite également le produit réactionnel comme indiqué dans
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ces exemples et isole comme indiqué la (18 ----}11)-lactone formée, du A ¯j5,20-dioxo¯ll±, l4a-dihydroxy-prëgnène<-l8- orque.
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The present invention relates to the preparation of 14 compounds of the pre-saturated sewie. or not atUll @ 9 orygên0 @n position 18 or in position 3.1 e 18, as well as @ dG la 2 s fcnationnais drifts. Its new compounds read If} 1; their ëéll ": 1 vés" by enemplo la 14-hyd1 "oJQralQ! o!} tel - ;; on, 0 ont%, ne act; 1o :. plus: rorte tlue cores, poses not hydroylëë es position 14.
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We obtain these new compounds fâ? 3.xQ% $ 16sn 14 of the Pregnane series by subjecting (Its 14-.îl-pregnance Saturated or unsaturated, oxygenated in position z, $ or in positive il and 18, to the aerobic action of clo ensymes of the genera Mucor, Helicontylum, Pleospopa, or CMrMlas'ia.
The 14-H-pregnans oxygenated in position 3.8 or in position 11 and 18, used cmys: xab t, ss 30 starting, preferably have in position 3 and 20e hydrosylea or free oxo groups or oretionn: αl: m .; zt tnedifia. They
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may be saturated or contain double bonds, for example
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example in position 1 and / or 4, as well as in position 5 6, 7> 8, 9sll, Ils 12 or 16, or contain der3 sub ± ti $ u &rrf; 8 complementary, such as hydroxyls or oxo groups free or modified, as well as epomi groups or halogen atoms, for example in position 2P ee 53 z, 7 8, 9p 12, 15, 16, 17 or 21, or ethyl groups, for example
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in position 17a.
The starting substances indicated above
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are of any steric cosiflguratlon and can. also be z, the state of censuses. co - .. orr; nnent also the compounds of the series known as noe and / or o: o, in particular lea 19-nor- and D-homocomposés. Particularly important starting substances are for example 1 $ bdrow and oRaprogesterone, 3.7a, 1 $ -dih; dror- and 17-iârot- -o = progesterone, 18-hydroxy- and 18- oxo-cortexone, 17a, 18-dihydroxy- and Lcc-hdrox-18-oxa-oorteaone,
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, do'â oi2 the 8 t f32:
<i'û :, d'fi9 "'ct the .8 i'3iD 11-dadx - cooo oo, the l1-épi-18-hydro- and the ll-épi 18-oo aor3.eoo, the 17a- hYdroXY-aldosterone 18- atd ^ o3- & doc2, 18-hydoxy- and 18-axis-cortisone, corrosive 1-ddlledro- and 21cxo-cooa and / or 9a-fluopo-, 9s-chlopo- or. 2s-Ramo- and -aRsamo-dà, created by sxempl @ the 9th-flopo-aMostGna and the 9a-flpoF-ol¯ ddhydro-aldosterone, the 9o-flw3? O-l8-hydroxy-co2 * ticosfceî? On and the '(.Co .Cd'mBSid3 SS .-. "Ro-cor, f / .osterone. In de> art substances, .e.'E,' gPi''4TâF '.' '' Fonetionn @ ll @ modified is 35 'fia F39 a hydroxyl' '.' 9., by Sfifi5tw 'not a cnrboQrl1que acid al1phat1ueo aromatiquo or heteroesllqw, for example by the acids acet1G 9. ca.oiao, ben2oue or furae-c? boJ11u; or an ethereal hydyosyl, for example the csL 6adx group o $ r, 'RS., 9 be-nsylossy OM PN ::, a8''R' methoxy.
He group oo tonctinn011emcnt modified is & vantag- ously My group oxo etallsë or acetalia, ddloluant in particular of a divalent alcohol, by eKSsple 2c group éyRnna d1o = yo by group crboyl1uc ronctionncl1mcnt modified, one understands first of all a lacteronlozeal or atherlozylic grcute.
In accordance with the procedure, the starting substances
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indicated are caused to react on ensymes of 'fungi
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of the genera Mucor, H11cogtylum, Pleospora or Curvularia, in particular of the species Pleospora. gaeumanni, as well as
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species Mueor griseocyamus, Mucor parasiticus, Helicostylum piriforme -and Curvularia pallescens.
For their obtaining are. suitable for media known per se, for example those containing sugars such as glucose or lactose, peptones, corn swelling water, soy products and the like, as well as mineral salts, or then synthetic nutrient solutions. Work is carried out in particular under aerobic conditions, for example in an agitation culture, or by submerged growth with agitation and supply of air. The indicated fungi differ from other microorganisms, for example bacteria, by their good growth under relatively simple culture conditions.
The reaction according to the present process takes place in the mushroom culture described above or with the aid of the enzymes which it contains, optionally after enrichment or separation, thus therefore in the simplest case, in a suspension of mycelium of the fungus separated, from the mycelium of the fungus homogenized or in filtrates or aqueous extracts of the mycelium.
The products of the process can be isolated by known methods. Their separation can take place for example by extracting the reaction mixture with an organic solvent, for example with methylene chloride or ethyl acetate. To further purify the extract thus obtained, the operation will be carried out in particular by chromatography, for example on
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aluminum oxide or on silica gel by means of distribution methods, for example by the countercurrent process or by separation using reagents of
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Girard, such as trlmethyl-acéthyâraside-ammonium chloride or daeëthydrazide-pyrMinima chloride.
After the purification or in its place, finally recrystallization is carried out, preferably in organic solvents or in aqueous organic solvents.
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By introduction of the hydrosyl at 14, one arrives at a precise l4-hydrocy'.prgnaneSj, genes in position 18 or in position 11 and 18, and their derivatives, which, compared to therapeutically active compounds which are not hydroxylated in position 14, are characterized by increased efficiency.
By oxygenated compounds is meant then those which contain hydroxyls, oxo groups or free acid groups
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or functional modified, such as ethera esters, thioesterSj lactones, thiodthers, thiol- and thlan-esters, acetals, mercaptalsj) ketals, enolic derivatives such as enolic esters, enolic ethers or enoleins, semi-hydrasones -carbazones and the like.
Among the products of the present process, mention should be made in particular of 14a, 18-dlhydrox-y- and 14a-hydroxY-18oxo-progesteronej) 14a, 17aJ> 18-trihydroJ- and 14a., 17a-dîhydro , -y-18-or.o- progesterone, 14a; 18-dhyàroff- and 14a-hy <3roxy-â8-oxo-cortexone, I4a, 17a, 18-trihydroxy- and 14a; 17a-dihydroxy-
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.8-oxo-cor'ceone 14a-hyd: r'oz.y., 8 Idos tel "on9, la lia;) 18- âihydroxy-cort.coterone and âa: 8-dhyex aâ, -.'- dhdro-cortloosterone, il-drî-14ael8-dibydroxj- and l1-epi- 14a-.hydroxy-18-oxo-corticosterone, Ia, .7a-dihyeroë: y-a.-. dosterone, la la,. 8-d.hydroxy-hyirocor;
isane, la .a., 18-dihydroxy- and 14a-hydroxy-18-oxo-cortisone, the corresponding 1-dehydro- and 21-oxo-compounds, as well as the corresponding functional derivatives, such as esters, ethers,
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halogenated derivatives, for example 9a- or 12 <x-halogeno- in particular fluoro- or chloro-compounds, for example 14a-hydroxy-9a-fluoro-aldosterone and 14ct-hy <Sroxy-9 # - fluora -1-dehdro-a.doetrone9 l4a, l8-dlhydrosy-9a-fluorocorticosterone and la,: l.8-dihrdroxy-9a-fluaro - 1-dehydro-corticosterone. As long as the products of the process do not have the configuration and the substituents of therapeutically useful steroids, they can be used as intermediates for their preparation, for example for the preparation of the compounds indicated above.
The reaction products obtained in accordance with the present process can be converted, in a manner known per se, into their functional derivatives such as oxygenated, sulfur or nitrogenous derivatives, for example into esters,
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ethers, enol esters, enolic ethers, ketals, thloethers and thioetalzt as well as hydrazines, oximes and enamines; in addition, hydroxyls can be dehydrogenated
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in groups 0, 0. In these compounds, all the hydroxyl and / or oxo functions or only some may be functionally modified.
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In esters and enolic esters, the acid residues are those of any organic acids
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or inorganic, for example the residues of cal00, culic, thioncarboxyliquesp thiolëc ,, 4rbo2fylic or tallow aliphatic, allcyclic, aral1phatiquesp aromatic or heterocyclic acids, preferably the residues of fornic acids, acetic, trifluoroacetic acids, acetic acids. propionic, butyric acids, valerian acids, trimethylacetic acids, ethylacetic acids, caproigrao acids, enanthic acids, caprylic acids, palmitic acids, crotolic acids, unaecanic, unaecylenic, oxalic, succinic, pim61ic, lactic, maleic acids carbamlquesg al- coxycarboxyliquesy acids p-cyclopoiitylpropionicj, hexahydrobenzoicj,
benzoic, p7aienylacetic, cyclohazylacetic, phenylpropionic acidsSg trimethylgalic acids, phthalic, furan-2-carboxylic, isonicotin., methanesulphonic, toluenesulphonic, sunfuric acids,
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halogenated hydracids or phosphoric acids.
If desired, the functionally modified hydroxyls or oxo groups can be converted into free groups in the compounds obtained. In this way, we
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can set free the functionally modified groups, also partially, in particular in polysubstituted derivatives.
It takes place; for example, by chemical or enzymatic hydrolysis, for example using acidic or basic agents, by alcoholysis or by coupled acetalization. From the derivatives obtained in this way or also directly, which are only partially modified, for example esterified or etherified, it is possible, by subsequent modification of the various functions present, for example by esterification or etherification, to prepare polysubstituted derivatives, in particular. There are also esters or mixed ethers or ester-ethers.
If, during the hydrolysis, carried out in particular with alkaline agents, the 9,11- or 12,11-halogen-hydrines have been converted into the corresponding 9,11- or 11,12-epoxy-compounds, the latter can be again converted into the desired 9,11- or 12,11-halogen-hydrins, by the action of halogenated hydracids, in particular hydrofluoric acid or chlor- acid. hydric.
The products of the process can be used as intermediates for the preparation of other valuable products or, some of them, as medicaments.
The invention also relates, as new industrial products, to the compounds defined above,
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The invention is described in more detail in the non-limiting examples which follow, in which the temperatures are indicated in degrees centigrade.
Example 1
Has a culture of Pleospora gaeumanni, well de-. veloppé by agitation at 28, four days old, in 500 cm3 of a 70% aqueous solution of beer wort, with 0.5 cm3 of whale oil, a solution of 125 is added under sterile conditions mg of aldosterone, in 10 because of acetone.
Stirring of the suspension is continued for four days at the same temperature. The mycelium is then separated and washed well with water and with ethyl acetate. After having combined the clear solutions, they are extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate solutions are washed with water, dried and evaporated in vacuo. The residue is dissolved in 80% methanol and extracted several times with petroleum ether. The methanolic solutions are then completely evaporated in vacuo.
A chromatogram on paper of the residue (propylene-glycol-toluene) shows alongside little aldosterone * 14 [alpha] -hydroxy-aldosterone which migrates a little more slowly.
The entire residue is separated using a preparatory chromatogram on paper (propylene-glycol-toluene). The, -zones corresponding to 14α-hydroxy-aldosterone are cut out and extracted several times with 50% methanol. We
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then eliminates the methanol under vacuum, extracts the aqueous solution which remains several times with ethyl acetate, wash the ethyl acetate solutions with water after having combined them, dry them and evaporate them in vacuo ; we
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obtains pure 14α-hydroxy-aldosterone as a residue.
The aldosterone can also be incubated in 500 cm3 of a well-developed aqueous culture of Curvularia pallescens which contains the following adjuvants: 5 g; of cane sugar, 5 g of Difco triptone, 1 g of sodium nitrate, 0.5 g of secondary potassium orthophosphate, 0.25 g of magnesium sulfate, 0.25 g of potassium chloride, 5 mg of iron sulfate heptahydrate, 1.25 g of calcium carbonate and 0.5 cm3 of whale oil. Processing takes place as indicated above.
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the 14α-hydroxy-aldostrone thus obtained can be esterified as follows: 100 mg of this product are covered with 0.2 cm3 of pyridine and 0.4 cm3 of acetic anhydride.
The solution is left to stand for 15 to 20 hours and then evaporated, after adding water, under a vacuum usually used and finally under a high vacuum,
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to 35. A residue of 3, 2-r, α-1,4-hydroxy-aldosterone cebate is obtained.
Example 2
Has a culture of Pleospora gaeumanni
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stirred at 28, four days old;, in 500 cm 3 of a 78% aqueous solution of beer wort, with 0.5 cm of whale oil, a solution is added under sterile conditions. of 125 mg of 1-dehydro-aldosterone (prepared in a manner as, for example, according to the indications of the patent application filed by the applicant on February 6, 1956 and entitled: "Process for the preparation of dehydro-compounds of the series of steroids ") in 10 carbs of acetone * The suspension was stirred for four days at the same temperature.
The reaction mixture is then treated as indicated in Example 1 and 1-dehydro-14 [alpha] -hydroxy-aldosterone is isolated, also as indicated, using a preparatory chromatogram on paper (propylene glycol-toluene ), it migrates a little more slowly than 1-dehydro-aldosterone.
For esterification, the 1-dehydro-14 [alpha] -hydroxy-aldosterone thus obtained is covered with 0.2 cm3 of pyridine and 0.4 in. 3 of acetic anhydride * the solution is left to stand for 15 hours at 20, and then evaporated under a vacuum usually used, then finally under a high vacuum, at 35. As residue is obtained 1-dehydro, 18,21-diacetate, 14α-hydroxy-aldosterone.
Example 3
125 mg of (18 # 11ss) -lactone are reacted from # 4-3,20-dioxo-11ss-hydroxy-pregnene-18-oic (which is obtained
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in a known manner ;, for example as indicated in the improvement patent application filed on May 17, 1956 by Mr. REICHSTEIN, Tadéus and having for title:
“Process for the preparation of oxygenated steroids and novel compounds thus obtained”), as indicated in Examples 1 and 2 above, in a culture of Pleospora gaeumanni. The reaction product is also treated as indicated in
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these examples and isolates as indicated the (18 ----} 11) -lactone formed, A ¯j5,20-dioxōll ±, 14a-dihydroxy-prenegene <-18- orca.