AT509501A1 - Pflanzenschutzmittel - Google Patents

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Description

1
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Pflanzenschutzmittel zur Bekämpfung von Erwinia amylovora. in vielen Ländern wird der Kernobstanbau existentiell durch die von dem Bakterium Erwinia amylovora verursachte Feuerbranderkrankung bedroht. Als langfristige Perspektive sind die vielfältigen züchterischen Bemühungen um Feuerbrand-resistentere Sorten von Apfel und Birne zu betrachten. Dagegen wird in kürzerer Perspektive an der Entwicklung neuer Wirkstoffe gegen den bakteriellen Erreger gearbeitet.
Gegenwärtig wird Feuerbrand in erster Linie durch die Anwendung des Antibiotikums Streptomycin bekämpft, bei dem es sich um eine hierfür hochwirksame Substanz handelt. Es wurden jedoch bereits Resistenzen gegen das Antibiotikum beobachtet. Darüber hinaus führten ökologische und toxikologische Betrachtungen zu einer strengen Regulierung der Streptomycin-Anwendung gegen Feuerbrand. Bedenken bestehen auch hinsichtlich der Entwicklung An-tibiotika-resistenter humanpathogener Bakterien durch breiten Antibiotika-Einsatz. Streptomycin wurde z.B. wiederholt in Honig aus Anwendungsgebieten nachgewiesen (und dieser dann kostenintensiv vernichtet).
Kupfer-basierte Präparate sind ebenfalls aktiv, werden aber zunehmend eingeschränkt, um Kupfer-Akkumulation im Boden zu verhindern.
Gemäß der EP 2 012 589 Bl kann zur Bekämpfung von Erwinia amylovora auch nanoskaliges Silber verwendet werden, das potentiell als Element vergleichbar mit Kupfer im Boden akkumuliert werden kann.
In einem anderen Ansatz werden antagonistische Bakterien bei der Obstblüte gegen Feuerbrand verwendet, erreichen aber nicht den Wirkungsgrad von Streptomycin.
Arbutin (Hydrochinon-glukosid) wurde als natürlicher Sekundärmetabolit der Birne (Pyrüs spp.) hinsichtlich seiner möglichen Rolle in der Pathogenabwehr der Birne gegen Erwinia amylovora wissenschaftlich untersucht (Hildebrand and Schroth, Nature 197 (1963):513). Für das hydrolysierte und oxidierte Produkt 1,4-Benzochinon, das aus Arbutin freigesetzt werden kann, wurde eine Aktivität gegen Erwinia amylovora gefunden (Powell and Hildebrand, Phyto-pathology 60 (1970):337-340; Jin and Sato, Phytochemistry 62 (2003):101-107).
Die im Stand der Technik beschriebenen Mittel zur Bekämpfung von Erwinia, insbesondere zur Bekämpfung des Feuerbranderregers Erwinia amylovora, weisen eine Reihe von Nachteilen auf. Viele der verwendeten Substanzen können für Tiere und Menschen gesundheitsschädlich sein. Andere Substanzen weisen hingegen eine zu geringe Wirksamkeit gegenüber Erwinia auf, so dass durch einen erhöhten Wirkstoffeinsatz die Wirtschaftlichkeit nicht mehr gegeben ist und die Umwelt höher belastet wird.
Es ist Aufgabe der vorliegenden Erfindung Mittel und Verfahren zur Verfügung zu stellen mit deren Hilfe Erwinia und insbesondere der Feuerbranderreger Erwinia amylovora effizient bekämpft werden kann.
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Pflanzenschutzmittel umfassend mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel (I) oder Formel (II):
Formel I Formel II wobei RI, R4 und R5 unabhängig voneinander ein Glykosid-Rest, ein addiertes Aldehyd, ein addiertes Keton, ein Rest einer organischen Säure, ein Rest einer anorganischen Säure oder ein ali-pathischer Rest, und R2, R3, R6, R7 und R8 unabhängig voneinander ein Halogen oder Wasserstoff ist, sowie Additionsprodukte von S- und N-haltigen Verbindungen an Verbindungen der allgemeinen Formel II und Polymere beider Formeln und ihrer jeweiligen Derivate in einer Konzentration von 0,1 μΜ bis 5 mM.
Es hat sich überraschender Weise herausgestellt, dass Ver- 3 bindungen mit der allgemeinen Formeln (I) und (II) und insbesondere 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon (Juglon), sowie 1,4,5-Trihydroxynaphthalin und/oder Derivate davon, die solches freisetzen können, geeignet sind, Pflanzenschädlinge wie Erwinia amylovora aktiv im Wachstum zu hemmen und abzutöten. Über die unerwartet hohe und spezifische Wirkung hinaus, war die Verwendung von derartigen Verbindungen als Pflanzenschutzmittel nicht naheliegend, da z.B. 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon (Juglon) in der Literatur vielfältig als phytotoxisch beschrieben ist ("Allelo-pathie") (Weiler, Nover 2008). Jedoch stellte sich überraschend heraus, dass es durch die hohe Aktivität gegen Erwinia amylovora bei entsprechenden Konzentrationen einen Konzentrationsbereich gibt, in dem der phytotoxische Effekt nicht oder kaum zum Tragen kommt und mit dem Erwinia und besonders Erwinia amylovora effizient bekämpft werden kann. Für die praktische Anwendung von 5-Hydroxy-1,4-Naphthochinon (Juglon) gegen Erwinia amylovora ist die höchste Konzentration mit noch akzeptabler Phytotoxizität (hier vor allem als Fruchtberostung) bei ein- oder mehrmaliger Anwendung während der Blüteperiode anzustreben.
Juglon ist eine bezüglich ihrer phytotoxischen ("allelo-pathischen") Wirkung besonders auf Keimlinge vielfach untersuchte Substanz. Der heimische Walnussbaum (Juglans regia) und auch andere Juglandaceae verhindern in einem natürlichen Prozess das Aufkommen von konkurrierendem Pflanzenbewuchs an ihrem Standort. Es wird der Vorläufer 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-glucosid gebildet. Dieser wird über Niederschläge aus dem Laub ausgewaschen sowie über die Wurzeln freigesetzt und im Boden durch mikrobielle Glucosidasen zu 1,4,5-Trihydroxynaphthalin hydrolysiert. Dieses wird dann zur aktiven Substanz Juglon oxidiert (Weiler und Nover 2008). Juglon kann aber sogar benachbarte Holzpflanzen durch kumulative Wirkung schädigen oder zum Absterben bringen. Für Apfelbäume wurde dies als Feldbeobachtung bereits früh beschrieben (Schneiderhan 1927). Nach diesem Kenntnisstand scheint die Verwendung von Juglon trotz des Vorliegens von Publikationen zur allgemeinen oder speziellen antimikrobiellen Wirkung von Chinonen (z.B. Didry et al. 1998 für 1,4-Naphthochinone, Jin and Sato 2003 für Benzochinon / Erwinia. amylovora) von vornherein ausgeschlossen. Angesichts der speziellen Feuerbrand-Obstanbauproblematik, aber, der sehr kurzfristigen Primärinfektion mit ohnehin nur zeitlich sehr beschränktem Applikationszeitraum für »·«· * • Μ
·· »· I » · · * · · • » * · · • > * « · • · · * - 4 - entsprechende Pflanzenschutzmittel, kommt auch die kurzfristige Anwendung von Substanzen mit phytotoxischen Effekten in Frage. Dies gilt im Besonderen, als sich Juglon als aktiv (wirksamer als andere Chinone, auch 1,4-Naphthochinone wie Plumbagin) gegen Erwinia, insbesondere Erwinia amylovora, erweist. Die Kombination niedriger Applikationskonzentrationen mit einem zeitlich engen Applikationszeitraum stellt das Potential von Juglon und seinen Derivaten als erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel gegen Erwinia amylovora dar.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist der Glykosid-Rest ein Glucosyl-, Mannosyl-, Galacto-syl-, Fructosyl-, Ribosyl-, Arabinosyl-, Rhamnosyl- oder Xylo-syl-Rest.
Das addierte Aldehyd oder Keton der erfindungsgemäßen Verbindung enthält vorzugsweise 1 bis 6 Kohlenstoffatome.
Gemäß einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist der Rest der organischen Säure ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus einer Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyryl-, Isobutyryl-, Malonyl-, Pyruvoyl-, Succinyl-, 2-0xo-glutaroyl-, Oxalessigsäure-, Fumarsäure-, Weinsäure- und Citro-nensäure-Gruppe.
Der Rest der anorganischen Säure ist vorzugsweise ein Phosphorsäure- oder Schwefelsäurerest.
Der Rest der Ether ist vorzugsweise ein Methyl- oder Ethylrest.
Das Halogen ist vorzugsweise Iod, Brom, Chlor oder Fluor ist.
Die erfindungsgemäße Verbindung kann auch als 1,2- oder 1,4-Additionsprodukt der Chinonform (Formel II) vorliegen.
Die erfindungsgemäße Verbindung kann ebenfalls als Polymer vorliegen und ein entsprechende antimikrobielle Aktivität entfalten. Das Polymer ist vorzugsweise 3,3' Bijuglon oder Cyc-lotrijuglon.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen, insbesondere 5-Hydroxy-1, 4-Naphthochinon, dessen reduzierte Form 1,4,5-Trihydroxynaphthalin und/oder Glykoside davon, sind Substanzen, die in der Natur, insbesondere in Pflanzen, natürlich Vorkommen. Daher kann das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel die Verbindungen in synthetischer Form aber auch in Form eines Pflanzenextrakts umfassen. Diese Extrakte werden vorzugsweise aus dem Laub oder den Nüssen der Walnuss Juglans regia (oder anderen Juglan- 5 daceen bevorzugt Juglans ailanthifolia {syn. sieboldiana), ca-thayensis (syn. draconis), cinerea, hindsii, microcarpa (syn. rupestris), nigra, stenocarpa; Carya lacinosa, pecan (syn. oli-vaeformis), tomentosa; Pterocarya caucasica, fraxinifolia, hupe-hensis, rhoifolia, stenoptera (siehe R. Hegnauer, 1966, Chemota-xonomie der Pflanzen, Band IV, S. 281, R. Hegnauer, 1989, Chemo-taxonomie der Pflanzen, Band VIII, S. 575) gewonnen. Diese Verbindungen können jedoch auch aus anderen Quellen isoliert werden (z.B. Penicillium diversum; Balsaminaceae (R. Hegnauer, 1989, Chemotaxonomie der Pflanzen, Band VIII, S. 101; Proteaceae; R. Hegnauer, 1990, Chemotaxonomie der Pflanzen, Band IX, S. 297)).
Um die gewünschte Konzentration der erfindungsgemäßen Verbindungen im Extrakt zu erhalten, wird dieser entsprechend verdünnt oder aufkonzentriert. Selbstverständlich ist es auch möglich, synthetisch hergestellte Verbindungen der vorliegenden Erfindung in den Extrakt zu geben, um die gewünschte Konzentration zu erzielen. Juglon oder deren Derivate können über LC-MS (liquid chromatography-mass spectrometry) bestimmt werden, oder über Chinonreaktionen, z.B. Farbreaktion mit Leucomethylenblau (Ab-bul-Hajj 1978, JBC 253, 7, 2356-60).
Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben zusätzlich den Vorteil, dass diese auch für Insekten, wie z.B. Bienen, unschädlich, d.h. nicht fraß- und kontakt-giftig, sind. Viele bisher verwendete Pflanzenschutzmittel, die gegen Erwinia Infektionen eingesetzt werden, weisen diesen Vorteil nicht auf und sind gegenüber nützlichen Insekten schädlich.
Vorzugsweise sind im erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel die erfindungsgemäßen Verbindungen in einer Konzentration von von 0,5 μΜ bis 4 mM, vorzugsweise von 1 μΜ bis 2 mM, noch mehr bevorzugt von 5 μΜ bis 1 mM, umfasst. Diese Mengen an Wirkstoff sind für die gewünschte Wirkung beim Aufbringen des Pflanzenschutzmittels auf Pflanzen, insbesondere auf die Blüten, ausreichend.
Das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel kann besonders gut zur Bekämpfung von Erwinia amylovora bei Kulturpflanzen eingesetzt werden. Beispielhafte Kulturpflanzen, welche häufig von Erwinia amylovora befallen werden, entstammen vorwiegend aus der Familie der Rosengewächse (Rosaceae). Besonders anfällig ist dabei die Unterfamilie der Kernobstgewächse (Maloideae). Im Holz von Kernobstgewächsen ist Erwinia amylovora zudem in der Lage zu 6 überwintern. Daher ist es besonders bevorzugt das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel bei Rosengewächsen, vorzugsweise bei Kernobstgewächsen, insbesondere bei Äpfeln der Sorten Berlepsch, Braeburn, Cox Orange, Granny Smith, Eistar, Fuji, Gala, Gloster, Gravensteiner, Idared, James Grieve, Jonagold-Gruppe, Jonathan, Weißer Klarapfel, Topaz und Vista Bella, und bei Birnen der Sorten Abbate Fetel, Conference, Williams Christ, Vereinsdechants, Gellerts Butterbirne, Harrow Sweet, Clapps Liebling, Comice, Concorde, Frühe von Trevoux, Gute Luise, Bosc's Flaschenbirne (Kaiser Alexander), Pastorenbirne und Passa Crassana zu verwenden. Neben Kulturpflanzen können auch Ziergehölze wie Quitten, Mispeln, Speierling, Elsbeere, Mehlbeeren wie Vogelbee-re/Eberesche und Echte Mehlbeere, Apfelbeeren, Zierquitten, Weißdorne wie Rotdorn und Feuerdorn, Wollmispeln, Zwergmispeln und Glanzmispeln/Stranvaesia mit dem erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel behandelt werden, um Erwinia amylovora auf diesen Pflanzen zu bekämpfen.
Mit dem erfindungsgemäßen Pflanzenschutzmittel kann besonders gut Erwinia amylovora bekämpft werden. Jedoch eignet sich das Pflanzenschutzmittel auch zur Bekämpfung anderer Erwinia-Arten, die als Pflanzenpathogene wirksam sind. Hierbei seien Erwinia carotovora (verursachen die Schwarzbeinigkeit bei Kartoffelpflanzen und die Nassfäule bei Kartoffelknollen), Erwinia billingia und Erwinia cypripedii genannt.
Die Substanzen 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon (Juglon) bzw. 1,4,5-Trihydroxynaphthalin können auf verschiedenste Weise gewonnen werden. Einerseits können beide Substanzen synthetisch nach bekannten chemischen Verfahren hergestellt, andererseits können beide Substanzen aus z.B. Laub oder Nüssen der Walnuss Juglans regia (oder anderen Juglandaceen) extrahiert werden (z.B. mit Ethanol oder einem azeotropen Wasser-Ethanolgemisch in einer Soxhlet-Apparatur). Auch die Synthese der erfindungsgemäßen Derivate kann nach bekannten Verfahren erfolgen (z.B. durch Chromat-Oxidation von 1,5-Dihydroxynaphthalin).
Die „Derivate" von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon und 1,4,5-Trihydroxynaphthalin sind „ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Glykosiden, Halbacetalen, Vollacetalen, Estern, Ethern, Polymeren und 1,2- oder 1,4-Additionsprodukten sowie halogenringsubstituierte Derivaten". Daher umfasst der Begriff „Derivat" im Sinne der vorliegenden Erfindung ausschließlich Substan- 7 zen, die von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon und 1,4,5-Trihydroxynaphthalin abgeleitet sind und deren Hydroxy- bzw. Ke-to-Gruppen glykosidiert, verestert, verethert, acetalisiert, polymerisiert, an andere Moleküle addiert oder deren Ringsysteme halogeniert sind. Ein besonders bevorzugtes Derivat ist das in Blättern und Früchten des Walnussbaums eingelagerte 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-4-glucosid. Nach dem Aufbringen von 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-4-glucosid auf die Pflanzen wird dessen Glucose-Rest enzymatisch oder chemisch abgespalten und es entsteht durch die Spaltung die chemische Verbindung 1,4,5-Trihydroxynaphthalin ("Hydrojuglon"). Aus diesem bildet sich nach einer Oxidationsreaktion der Stoff Juglon (5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon).
Gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfasst das Pflanzenschutzmittel 1,4,5-Trihydroxynaphthalin bzw. 1.4, 5-Trihydroxynaphthalin-4-glucosid. Sowohl 1,4,5-Trihydroxynaphthalin als auch 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-4-glucosid werden nach dem Aufbringen auf die Pflanze über die Zeit in 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon umgewandelt. Dies hat den Vorteil, dass die Wirkung auf der Pflanze gegenüber Erwinia, z.B., länger anhält, da 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon nach und nach freigesetzt wird.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist das Derivat von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon und 1.4, 5-Trihydroxynaphthalin ausgewählt aus der Gruppe 1.4.5- Trihydroxynaphthalin-4-glucosid, diverser 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-glykoside (Zahl der Reste, 1.4.5- Position und Glykosylrest(e) variabel), 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon-5-glucosid (aber Glykosylrest variabel) , 1.4.5- Trihydroxynaphthalin-mono-/-di-/-tri-essigsäureester(aber Acyl-Rest(e) variabel), 1.4.5- Trihydroxynaphthalin-mono-/-di-/-tri-phosphorsäureester, 1.4.5- Trihydroxynaphthalin-mono-/-di-/-tri-schwefelsäureester, 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon-5-essigsäureester (aber Acyl-Rest variabel), 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon-5-phosphorsäureester, 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon-5-schwefelsäureester, 5-Halb- und 5-Vollacetale von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon,
Halb- und Vollacetale von 1,4,5-Trihydroxynaphthalin (Zahl der - 8 - ·· ** * »··· ·« | • *· ···· . · . ; · · · · · · ··· ··· • * · · · ··· · · · * · · · · · · · ·
Reste und Position(en) variabel), 5-Methyl- und 5-Ethyl-ether von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon (aber Alkyl-Rest variabel),
Methyl- und Ethyl-ether von 1,4,5-Trihydroxynaphthalin (Zahl der Reste und Position(en) variabel, aber auch Alkyl-Rest variabel), definierbare oder unspezifische Polymere von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon oder 1,4,5-Trihydroxynaphthalin, diverser reversibler 1,2- oder 1,4-Additionsprodukte von 5-Hydroxy-1,4-Naphthochinon mit S- oder N-haltigen Verbindungen, am Ringsystem halogenierter Derivate aller oben genannten Verbindungen .
In der folgenden Tabelle sind die bevorzugten Substituenten der allgemeinen Verbindung mit der Formel (I) und (II) aufgelistet .
Typ Derivat Substituenten R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 R8 Natürliches Glucosid ß-D-Glucosid + Andere Glykoside bevorzugt -glucosyl, -mannosyl, -galactosyl, -fructosyl, -ribosyl, -arabinosyl, -rhamnosyl, -xylosyl + + Andere Acetale / Halbacetale / Ketale / Halbketale Aldehyde, Ketone (vorzugsweise C1-C6-Körper) + + + Ester bevorzugt -formyl, -acetyl, -propionyl, -butyryi, -isobutyryl, -malonyl, -pymvoyl, -succinyl, -2-oxo-glutaroyl sowie Oxa-lessigsäureester, Fumarsäureester, Weinsäureester und Citronensäu-reester + + + Ester anorganischer Säuren vorzugsweise Phosphor-' säure, Schwefelsäure + + + Ether vorzugsweise Methyl-, Ethyl- + + + 9 1,4-Additionsprodukte S- oder N-haltige Nude-ophlle + + 1,2-Additionsprodukte S- oder N-haltlge Nucle-ophile + + + + Polymere jeweilige Derivate des Juglon oder dessen reduzierter Form + + + + + + + + Halogenide + + + + +
Diese Wirkstoffe können direkt in Wasser gelöst, oder in einem organischen Lösungsmittel {bevorzugt Ethanol) vorgelöst und vor der Anwendung in Wasser verdünnt, oder, in einer besonders bevorzugten Ausführungsform, werden 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-4-glucosid, 1,4,5-Trihydroxynaphthalin, 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon oder Gemische dieser (durch die Art der Isolation beeinflussbar) aus Juglandaceen-Pflanzenmaterial, besonders Laub von Juglans- oder Carya-Arten, isoliert und als verdünnte Pflanzenpräparate zur Anwendung gebracht. Eine andere mögliche Quelle für Juglon ist Penicillium diversum oder verwandte Organismen.
Das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel kann Tenside umfassen, die keine der bakteriziden Wirkung abträglichen chemischen Reaktionen mit Chinonen eingehen (z.B. Tween 20 (0,005-0,1 Vol%), aber auch natürliche Stoffe mit Tensidwirkung). Besonders bevorzugt umfasst das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel Na-und K-Seifen, oder handelsübliche Netzmittel, wie z.B. Agrowax 010, Break thru, Citowett, Exzellent CS 7, Neo-Wett, Agronetz, Ajutol, Silwet top, Zellex CS.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung von 5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon, 1,4,5-Trihydroxynaphthalin und/oder Derivate davon ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Glykosiden, Halbacetalen, Vollacetalen, Estern, Ethern, Polymeren, 1,2- oder 1,4-Additionsprodukten sowie halogen-ringsubstituierte Derivaten als Pflanzenschutzmittel.
Besonders bevorzugt wird das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel zur Bekämpfung von Erwinia, vorzugsweise Erwinia amylovora, verwendet.
Ein noch weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bekämpfung von Erwinia amylovora auf Pflanzen umfassend den Schritt des Aufbringens eines erfindungsgemäßen 10 • ft ·· 9 * · • · • 9 * ft 9 · 9 • · 9 9 • • · m · • ft« ·· *·» Μ ··♦* *· • ft # · • 9 ··* ··· *·· · · « • * 9 ft ·· · » * * ·
Pflanzenschutzmittels auf Blüten- und Blattwerk der Pflanzen.
Erfindungsgemäß kann das hierin geoffenbarte Pflanzenschutzmittel mittels im Stand der Technik bekannten Verfahren auf das Blüten- und Blattwerk der zu behandelnden Pflanzen aufgebracht werden. Üblicherweise erfolgt das Aufbringen von Pflanzenschutzmittel durch Spritzen, Sprühen oder Stäuben.
Da die Primärinfektion bei Kernobst in der Regel über die Blüte durch Bienen, insbesondere wenn feuchtwarme Wetterbedingungen herrschen, stattfindet, ist es besonders bevorzugt zu diesem Zeitpunkt das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel einzusetzen. Durch die nur kurzzeitige Anwendung während der Obstblüte werden bei dieser Ausführungsform kumulative phytotoxische Effekte auf die Obstbäume vermieden. Das erfindungsgemäße Pflanzenschutzmittel 5-Hydroxy-l,4-naphthochinon (Juglon) hat sich bei im Auftrag durchgeführten Untersuchungen als nicht fraß-oder kontakt-giftig für Bienen herausgestellt.
Die vorliegende Erfindung wird weiters anhand der folgenden Figuren und Beispiele eingehender erläutert, ohne jedoch auf diese beschränkt zu sein.
Fig. 1A bis ID zeigt Wachstumshemmungen (Zelldichte gemessen als optische Dichte bei 600 nm) durch Juglon und vergleichend Plumbagin auf Suspensionkulturen von Erwinia amylovora: Oben: das 1,4-Naphthochinon Juglon 0,01 / 0,05 / 0,1 mM, Kontrolle mit gleichem Volumen des Lösungsmittels Ethanol, und Kontrolle mit reinem KB-Medium. Zweite Grafik: Wiederholung mit 0,01 mM Juglon und niedrigeren Konzentrationen (0,005 / 0,001 mM). Dritte Grafik: 0,1 und 1 mM Plumbagin (die initiale Absorptionsänderung bei 1 mM Plumbagin wird durch eine Reaktion mit dem Medium verursacht) . Vierte Grafik: Positiv-Kontrolle mit dem konventionellen gegen Erwinia amylovora eingesetzten Pflanzenschutzmittel Streptomycin (Antibiotikum).
Fig. 2 zeigt den wachstumshemmenden Effekt von 0,05 and 0,1 mM Juglon auf Erwinia carotovora. E: Kontrolle mit gleichem Volumen des Lösungsmittels Ethanol, K: Kontrolle mit reinem KB-Medium.
Fig. 3 zeigt Birnen-Inokulationstests durch Präinkubation mit verschiedenen Konzentrationen von Juglon (und Streptomycin als Kontrolle) und nachfolgender (15 min) Inokulation mit Erwinia amylovora. Bild nach 6 Tagen Inkubation bei 25eC. Kulturplatte als Kontrolle für die Vitalität der eingesetzten Erwinia - 11 - amylovora Zellen.
In den folgenden Beispielen wurde der Effekt von 1,4-Naphthochinonen auf Pflanzen-pathogene Spezies von Erwinia evaluiert um ihr Potential als Pflanzenschutzmittel zu bewerten.
Die 1,4-Naphthochinone Juglon (5-Hydroxy-l,4-Naphthochinon) und Plumbagin (5-Hydroxy-2-methyl~l,4-naphthochinon) wurden auf ihre Wirkung gegen Erwinia amylovora und Erwinia carotovora getestet.
Juglon
Plumbagin
Beispiel 1:
Inhibitorischer Effekt von 1,4-Naphthochinonen auf das Erwinia amylovora Wachstum in in-vitro-Suspensionskulturen
Die 1,4-Naphthochinone Juglon und Plumbagin wurden auf einen wachstumshemmenden Effekt in in-vitro-Suspensionskulturen von Erwinia amylovora getestet. Streptomycin als konventioneller Wirkstoff gegen Erwinia amylovora wurde als Positivkontrolle benutzt (vgl. Fig. 1A bis ID).
Schlussfolgerung
Aus dieser Serie von Experimenten kann geschlossen werden, dass 1,4-Naphthochinone aktiv und besonders Juglon aktiv gegen Erwinia amylovora ist. Letzteres wirkt wie Streptomycin im submillimolaren Konzentrationsbereich.
Bakteriostatischer versus bakterizider Effekt
Die Wachstumskurven der Suspensionskulturen in Gegenwart verschiedener Juglon-Konzentrationen belegen eine Hemmung des Wachstums von Erwinia amylovora. Diese Experimente geben aber keine Information über die Natur des zugrunde liegenden Effektes, der lediglich bakteriostatisch (nur Wachstumshemmung, kein direktes Abtöten von Zellen) oder auch bakterizid {Abtöten von Zellen) sein könnte: Dies kann aber durch Ausplattieren von Ali-quots der $uspensionskulturen mit Wirkstoff auf wirkstofffreie - 12 -
Festmedien festgestellt werden. Auf solchen Festmedien wird der Wirkstoff aus dem kleinvolumigen Aliquot durch Diffusion unter einen Schwellenwert verdünnt, so dass sich, falls Zellen lediglich gehemmt aber nicht abgetötet waren, nach Inkubation Kolonien bilden. Solche Ausplattierungstests wurden mit 0,1 mM Juglon in der Suspensionskultur durch Entnahme von Aliquots in einer Zeitreihe durchgeführt. Als Kontrolle diente eine Kultur die mit einem entsprechenden Volumen des Lösungsmittels für das Juglon (Ethanol) versetzt worden war. Eine Wiederholung des Experiments mit nur 0,01 mM Juglon wurde ebenfalls durchgeführt, mit Verdünnungsreihen für die jeweiligen Aliquots zur genauen Titerbestimmung. Nur für die Zeitpunkte unmittelbar nach Zugabe von Juglon konnte in beiden Testreihen noch Koloniebildung beobachtet werden, nach jeder längeren Inkubation (schon nach 30 min) fand keine Kolonienbildung aus überlebenden Zellen mehr statt.
Schlussfolgerung
Juglon hat einen starken bakteriziden Effekt auf Erwinia amylovora.
Effekt auf andere Spezies von Erwinia
Verschiedene andere Spezies von Erwinia sind ebenfalls bedeutsame Phytopathogene. Das Bakterium Erwinia carotovora wurde als Beispiel für eine andere Erwinia Spezies ausgewählt. Der Effekt des 1,4-Naphthochinons Juglon auf das Wachstum von Erwinia carotovora in Suspensionskultur wurde mit der gleichen Methodik wie im Fall von Erwinia amylovora getestet.
Es stellte sich heraus, dass das Wachstum von Erwinia carotovora in Suspensionskultur durch 0,1 mM Juglon vollständig inhibiert wird, aber, anders als bei Erwinia amylovora, nicht durch niedrigere Konzentrationen (vgl. Fig. 2).
Schlussfolgerung
Juglon besitzt auch für andere Erwinia Spezies einen wachstumshemmenden Effekt in Suspensionskultur, zumindest für Erwinia carotovora ist dieser Effekt aber schwächer als für Erwinia amylovora .
In-vitro Infektionstests mit Blüten des Apfels (M. x dom.)
In in-vitro Infektionstests mit Apfelblüten wurden Juglon sowie vergleichend das 1,4-Naphthochinon Plumbagin und 1,4-Benzochinon getestet. Streptomycin wurde dabei als Positivkontrolle verwendet. 13
Tabelle 1: In-vitro Infektionstests an Apfelblüten (Malus x do-mestica) mit Juglon sowie Plumbagin und 1,4-Benzochinon. Streptomycin als Positivkontrolle. 8IUtent«*t AMWertunfl 17.06.2009 — iiwfeia «attJnv* 23 Stuirrlert «w dem ttrnl awf th flllhan tt*gab*n (kwotkt Pi* VtiHanfc wirr#* «im* Sex mit® BUttstt vm***hM 2 Sprühet vom Mittel auf jede Shit« Varianten Anzahl der Blüten kranke Bluten Befall % WbkUMMirad (%) Phvtotaxisch Strepto 14 3 21 75 nein E.8..+H20 14 12 86 nein Judlort 0,01 mM 14 4 29 67 nein Juglon 0 005 mM 14 5 36 58 nein Benzcchinon 0.05mM 14 7 50 42 ie 8enzochinonO,Q1 mM 14 0 57 33 nein Plumbagin 0.1 mM 14 5 36 58 nein Plumbagin 0.5mM 14 6 43 50 13_
Besonders die Anwendung von 0,01 mM Juglon in den in-vitro Infektionstests zeigt einen hohen Wirkungsgrad von 67%, im direkten Vergleich zu 75% für das konventionelle Pflanzenschutzmittel Streptomycin, Für die Chinone wurde dabei noch keine Formulierung (v.a. Tenside zur Benetzung) verwendet, die eine Erhöhung des Wirkungsgrades bewirken dürften.
Schlussfolgerung
Juglon besitzt ein gutes Potential als Wirkstoff zur Kontrolle von primärem Feuerbrand (Blüteninfektionen).
Inokulationstests mit Birnenfrüchten (Pyrus communis)
Inokulation von unreifen Birnenfrüchten mit Erwinia amylovo-ra (ein Testsystem das auch nach der Obstblüte zur Verfügung steht) wurde benutzt, um die Wirkung von Juglon gegen Erwinia amylovora auszutesten. Anders als im Blütensystem muss hierbei aber mit Verwundungen des Pflanzengewebes gearbeitet werden. Ergebnisse die mit diesem System erzielt werden sind bekanntermaßen schwieriger zu reproduzieren und zu bewerten. Die Ergebnisse 14 sind in Fig. 3 fotografisch dokumentiert. Es wurden zwei verschiedene Birnensorten eingesetzt.
Die Entwicklung von schwarzen nekrotischen Läsionen des Pflanzengewebes und die Bildung von weißem bakteriellem Schleim (Exsudat) wurden als Kriterien zur Beurteilung des Ausmaßes der Infektion benutzt. Nekrotischen Läsionen wurden im Experiment bei beiden Sorten (Williams Christ und Bose1s Flaschenbirne) beobachtet, während Exsudat-Bildung nur bei der Sorte Williams Christ beobachtet werden konnte. Für die eingesetzte niedrige Streptomycin-Konzentration von 0,01 mM in der Positivkontrolle wurden zwar nekrotische Läsionen bei beiden Sorten beobachtet, diese waren aber gegenüber der Inokulation mit Erwinia amylovora ohne das Antibiotikum etwas vermindert, es gab auch keine Exsudat-Bildung. 0,1 mM Juglon zeigte in diesem System einen etwa vergleichbaren Effekt wie 0,01 mM Streptomycin.
Phytotoxizität bei Apfel- und Birnenblüten und für die nach folgende Fruchtentwicklung
Die Phytotoxizität von Juglon und vergleichend von Plumbagin wurde an Blüten von zwei Apfelsorten (Smoothy, einem Golden De-licious Abkömmling, und Idared) als auch einer Birnensorte (Williams Christ) unter Anbaubedingungen in einer Spalierbaumpflanzung zur Obstblüte getestet. Dabei wurden jeweils die Konzentrationen eingesetzt, die sich in den in-vitro-Suspensionskulturen als vollständig wirksam (kein Bakterienwachstum) herausgestellt hatten. Verschiedene Konzentrationen wurden getestet (0,005 -0,05 mM Juglon und 0,1 - 0,5 mM Plumbagin)(Tabelle 2). Kontroll-behandlungen mit Wasser und mit den bei den Wirkstofflösungen eingesetzten Ethanolkonzentration (0,5 and 5%, zum Vorlösen der Wirkstoffe) wurden durchgeführt und zeigten wie zu erwarten keine Effekte.
Tabelle 2: Überblick der bezüglich Phytotoxizität an Blüten rsp. Fruchtentwicklung von Apfel- und Birnensorten getesteten Konzentrationen von Juglon und Plumbagin.
Birne Apfel cv. Williams cv. Smoothy cv. Idared Christ Juglon (mM] 0,005 / 0,01 0,005 / 0,01 / 0,005 / 0,01 / 15 0,025 / 0,05 0,05 Plumbagin [mM] 0,1 / 0,5 0,1 / 0,5 -
Phytotoxizität als Verbräunungsreaktion auf den Petalen Für Juglon wurden leicht braune Flecken auf den Petalen von Apfelblüten (Smoothy und Idared) für 0,025 mM Juglon beobachtet, deutlichere Flecken für 0,05 mM. Kein Effekt konnte auf den Petalen von Birnenblüten (Williams Christ) beobachtet werden.
Im Vergleich wurden für Plumbagin (0,1 und 0,5 mM) braune Flecken sowohl auf den Petalen von Birne (Williams Christ) als auch Apfels (Smoothy und Idared) beobachtet. Diese Verbräunungsreaktionen waren für die höhere Konzentration (0,5 mM) deutlicher als für die niedrigere (0,1 mM).
Phytotoxizität bezüglich Fruchtansatz
Es konnten im beschriebenen Rahmen der Versuche keine Effekte auf den Fruchtansatz festgestellt werden.
Phytotoxizität bezüglich Fruchtberostung
Es konnte weder durch die Juglon- noch durch die Plumbagin-Behandlungen Fruchtberostung festgestellt werden.
Schlussfolgerung
Es konnten im beschriebenen Rahmen der Versuche keine für die Fruchtproduktion relevanten phytotoxischen Effekte festgestellt werden. Die Verbräunungen der kurzlebigen Petalen waren nicht von Veränderungen bezüglich Fruchtquantität oder -qualität begleitet.
Diskussion der Toxizität und Abbaubarkeit von Juglon
Beide 1,4-Naphthochinone, Juglon und Plumbagin, sind natürliche pflanzliche Sekundärmetabolite. Beim Juglon handelt es sich um eine wohl bekannte bioaktive Verbindung aus der Walnuss (Juglans regia) (und anderen Juglandaceae), während Plumbagin aus nordamerikanischen Drosera Spezies (Drosera rotundifolia, Drose-raceae), Plumbago Spezies (Plumbaginaceae) und Diospyros Spezies (Ebenaceae) stammt. Als solche werden beide Verbindungen aus lebenden (Juglans regia, Weiler Nover 2008) oder in jedem Fall aus sich zersetzenden Pflanzengeweben freigesetzt und danach mikrobiell abgebaut. Phytotoxische ("allelopathische") Wirkung von Juglon auf andere Pflanzen durch Freisetzung der Vorläufersubstanz 1,4,5-Trihydroxynaphthalin-glucosid sind für die Walnuss (Juglans regia)(vgl. Zusammenfassung in Weiler and Nover 2008)
I ·· ···· ·· I 4 I * > · ··· ··· • · · · · < • » · < - 16 - und andere Juglandaceae beschrieben. Im Hinblick auf eine Anwendung als erfindungsgemäßes Pflanzenschutzmittel sind solche phy-totoxischen Wirkungen auf die Obstbäume angesichts der submillimolaren Konzentrationen und des extrem kurzen AnwendungsZeitraumes gegen primären Feuerbrand nur während der Obstblüte nicht zu erwarten.
Beide Substanzen, Juglon und Plumbagin sind als Reinsubstanzen als giftig eingestuft (R-Sätze), Juglon weist aber einen hohen LD5Q-Wert (Ratte) auf. Dem steht das Vorkommen von Juglon in der Walnuss als einer Nutzpflanze für die Ernährung gegenüber.
Der Mensch ist speziell beim Entfernen des Exokarps der Nüsse dem Juglon stark über die Haut exponiert (als Schwarzfärbung der Finger erkennbar (Oxidation, Polymerisation)). Es ist auch als Bestandteil von Wollfärbemitteln und zur Behandlung von Venenerkrankungen im Gebrauch. Des Weiteren werden sogar alkoholische Getränke auf der Basis unreifer Walnüsse traditionell und kommerziell erzeugt und konsumiert ("Nuss-Schnaps"). Vorbehaltlich einer erforderlichen genauen Bewertung als erfindungsgemäßes Pflanzenschutzmittel wird Juglon daher zunächst als eher unbedenklich angesehen.
Vergleichend kann über Plumbagin gesagt werden, dass entsprechende Pflanzenextrakte zur Behandlung oraler Infektionen vorgeschlagen wurde (Didry et al. 1990).
Beispiel 2:
Studie zum Vergleich der Wirkung von Vertretern dreier
Klassen von Chinonen gegen Erwinia amylovora
Exemplarische Vertreter von drei Klassen von Chinonen wurden in ihrer Wirkung anhand ihrer Effekte auf das Wachstum von Suspensionskulturen von Erwinia amylovora vergleichend untersucht.
Grundstrukturen von 3 Klassen von Chinonen 0 > 0 o 0 o O 0 o
Anthrachinone 1, 4-Benzochinone · 1,4-Naphthochinone
Im Vordergrund steht dabei die jeweilige Konzentrationsabhängig- 17 keit der Wirkung.
Durchführung
Die speziellen Vertreter der drei Klassen von Chinonen wurden einheitlich als 1 mM Lösung in Ethanol vorgelöst und dann auf die jeweiligen Endkonzentrationen im Kulturmedium verdünnt. Entsprechende Kontrollen mit gleichen Volumina Ethanol ohne Wirkstoff wurden durchgeführt (Fig. 4, "KE"). Es wurde dabei speziell ein niedriger Konzentrationsbereich unter 100 μΜ genau betrachtet, bei dem unspezifische, schwache antibakterielle Effekte nicht mehr zum Tragen kommen.
Verwendete Vertreter der 3 Klassen von Chinonen o
1,4-Benzochinon 1,4-Naphthochinone: Anthrachinone:
Juglon Anthrachinon
Alizarin
Fig. 4 zeigt die Verläufe der Wachstumskurven in Gegenwart der verschiedenen Vertreter der Klassen in Abhängigkeit von der Konzentration {50 / 25 / 12,5 /10/5/2,5 μΜ). Es wird deutlich (hervorzuheben sind die Verläufe für 10 μΜ bis 25 μΜ), dass in diesem Konzentrationsbereich kein Vertreter anderer Chinon-Klassen eine dem Juglon annähernd vergleichbare Wirkung besitzt. Erst bei der niedrigen Konzentration von 5 μΜ Juglon tritt nach langer Inkubationszeit erneut Wachstum auf. 10 μΜ Juglon, entsprechend 1,74 mg/1, wirkten noch vollständig bakterizid. (Die Deutung der Wachstumsverläufe für 50 μΜ wird durch 2 überlagernde Effekte erschwert: zum einen kommt bei dieser höheren Konzentration die Eigenabsorption der gefärbten Wirkstoffe Alizarin und Anthrachinon zum Tragen (vgl. Zeitpunkt 0, Kurven verschoben); zum anderen zeigt bei 5% Ethanol im Medium dieses einen hemmenden Effekt auf die Bakterien, der aber (vermutlich nach Abbau des Ethanols) von der Kultur überwunden werden kann). Unter Berücksichtigung dieser Effekte zeigt auch für 50 μΜ Juglon als einzige Testsubstanz eine deutliche Wirkung.) 18 18 ΦΦ ·· Φ · Φ · Φ Φ Φ Φ Φ Φ Φ · Φ Φ 9 Φ Φ ΦΦ ···· ·· Φ Φ Φ φ Φ Φ ΦΦΦ ΦΦΦ ΦΦΦ Φ φ φ Φ ΦΦΦ
Schlussfolgerung
Juglon besitzt gegen Erwinia amylovora gegenüber anderen Vertretern von Chinonen mit jeweils beschriebener Wirkung gegen diverse Mikroorganismen eine darüber hinausgehende, besondere (bakterizide) Wirkung.
Material und Methoden Erwinia amylovora Stamm Für die Versuche wurde der österreichische Standard-Stamm Erwina amylovora strain 295/93 (AGES) eingesetzt.
In vitro Suspensionskulturen und Plattierungsmedium Erwinia amylovora wurde in 5 ml KB Medium inokuliert und über Nacht bei 28°C und 200 rpm kultiviert. Diese Kultur wurde auf ODßOO = 0/3 mit KB-Medium verdünnt und 2 ml davon wurden direkt in verschlossenen Küvetten in Gegenwart verschiedener Wirk-stoffkonzentrationen weiterkultiviert. Juglon und Plumbagin wurden in Ethanol vorgelöst und dann entsprechend der zu erzielenden Endkonzentration im Medium zugegeben. Zwei Kontrollen wurden durchgeführt: unverändertes Medium, sowie Medium mit jeweils gleicher Ethanol-Konzentration wie in den Testansätzen. Die optischen Dichten der Kulturen ODßoo wurden im Zeitverlauf nach festen Intervallen gemessen. KB Medium: 20 g Pepton 1.5 g K2HPO4 1.5 g MgS04 x 7 H2O 10 ml Glycerol pH: 7,2 auf 1 1 mit Wasser für das Festmedium mit zusätzlich 14 g Agar/1 versetzt
Bakteriostatischer versus bakterizider Effekt Das Experiment wurde für Wachstumshemmkurven mit 0,1 oder 0,01 mM Juglon (20 μΐ 10 mM und 1 mM Juglon in Ethanol zu 2 ml der Suspensionskulturen) durchgeführt. Jeweils 10 μΐ Aliquots der Kulturen wurden unmittelbar nach Zugabe der Juglonlösung und Mischen, sowie nach regelmäßigen Zeitintervallen entnommen und auf Juglon-freies Festmedium KB plattiert. Als Kontrolle wurden Aliquots aus der Suspensionskultur mit einer äquivalenten Konzentration von Ethanol entnommen und ebenfalls ausplattiert. 19
Nach zwei Tagen Inkubation der Platten bei 25°C wurde die jeweilige Koloniebildung dokumentiert.
Phytotoxizität bei Blüten und für die nachfolgende Fruchtentwicklung Für die Anwendungen wurden Juglon und Plumbagin in Ethanol vorgelöst <65°C) und dann auf die jeweiligen Testkonzentrationen in Wasser verdünnt. Maximale Endkonzentration für das Lösungsmittel Ethanol in den Behandlungslösungen waren 5%, entsprechende Kontrollbehandlungen mit 0,5 oder 5% Ethanol in Wasser wurden durchgeführt. Für jede Variante (Wirkstoff, Konzentration, Sorte) wurden zwei größere Zweige behandelt. Die Tests fanden in der Versuchsobstanlage der Universität für Bodenkultur in Jed-lersdorf) statt. Alle Bäume einer Serie waren gleichen Alters, Entwicklungs- und beobachtbaren physiologischen Zustandes. Die Behandlungen wurden morgens von 8:00 bis 9:30 bei einer rel. Luftfeuchtigkeit von 68-75% und Temperaturen von 12-13°C durchgeführt. An allen Behandlungstagen waren die besprühten Blüten danach direktem Sonnenlicht ausgesetzt. An den Tagen nach der Behandlung wurde auf phytotoxische Effekte bonitiert. In den darauf folgenden Monaten wurden Fruchtansatz und -entwicklung beobachtet und mit denen der Kontrollpflanzen verglichen. Besonders wurde auf sichtbare Veränderungen der Fruchtepidermis bonitiert .
In-vitro Infektionstests mit Blüten des Apfels (M. x dom.) Die den natürlichen Infektionsweg widerspiegelnden in-vitro-Infektionstests mit Apfelblüten wurden wie folgt durchgeführt: Abgetrennte aufblühende Apfelblüten wurden in steriler Zuckerlösung stehend in transparenten Plastikboxen weiter kultiviert.
Die Stigmen der Blüten wurden mit 104 cfu Erwinia amylovora Zellen inokuliert und für 2 Stunden bei Raumtemperatur inkubiert. Danach wurden die zu testenden Wirkstofflösungen aufgesprüht.
Nach weiteren 35 Stunden Inkubation wurde durch Aufsprühen von Wasser befeuchtet. Die Infektionsrate wurde nach 8-10 Tagen Inkubation bei 22 °C und 70% relativer Luftfeuchtigkeit bestimmt. Inokulationstests mit Birnen fruchten (Pyrus communis)
Erwinia amylovora wurde in 5 ml KB Medium inokuliert und über Nacht bei 28eC und 200 rpm kultiviert. Nach Erreichen einer Zelldichte entsprechend ODgoo(l:10 verdünnt) = 0,17-0,20 wurde 1 ml der unverdünnten Kultur zentrifugiert und das Bakterienpellet in PBS (phosphate buffered saline) resuspendiert. Unreife Bir- 20 nenfrüchte (Juli) aus dem Versuchsanbau (Jedlersdorf, BOKU) wurden geerntet, mit Wasser gewaschen, getrocknet und zur Inokulation (EPPO protocol 2004) verwendet. Für die Inokulation wurden mit der Spitze einer Pipette in jede Frucht zwei Löcher von jeweils etwa 10 μΐ Volumen gebohrt. In die Hohlräume wurden jeweils 10 μΐ der Testlösung pipettiert und die Früchte dann für 15 Minuten inkubiert. Nach Absorption der Testlösungen in das Gewebe wurde jede Verwundung mit 10 μΐ Erwinia amylovora Suspension in PBS inokuliert. Als Positivkontrolle wurden Früchte ohne vorherige Wirkstoffzugabe direkt inokuliert. Zur Negativkontrolle wurde statt Wirkstofflösung steriles Wasser verwendet. Als Positivkontrolle wurde eine 0,01 mM Streptomycin-Lösung benutzt. Die inokulierten Früchte wurden bei 25eC und 100% Luftfeuchte für 3-7 Tage inkubiert.
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Claims (14)

  1. - 21 - ♦ ·♦· *4 4 Ansprüche: 1. Pflanzenschutzmittel umfassend mindestens eine Verbindung der allgemeinen Formel (I) oder Formel (IX): R1 R8 0 R8 0 R7f R2 R7r rv sR2 R0 R3 I Ru i 1 I ^R3 0 0 0 0 R5 R4 R5 Formel I Formel II wobei RI, R4 und R5 unabhängig voneinander ein Glykosid-Rest, ein addiertes Aldehyd, ein addiertes Keton, ein Rest einer organischen Säure, ein Rest einer anorganischen Säure, oder ein ali-pathischer Rest und R2, R3, R6, R7 und R8 unabhängig voneinander ein Halogen oder Wasserstoff ist, sowie Additionsprodukte von S-und N-haltigen Verbindungen an Verbindungen der allgemeinen Formel II und Polymere beider Formeln und ihrer jeweiligen Derivate in einer Konzentration von 0,1 μΜ bis 5 mM.
  2. 2. Pflanzenschutzmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass der Glykosid-Rest ein Glucosyl-, Mannosyl-, Galactosyl-, Fructosyl-, Ribosyl-, Arabinosyl-, Rhamnosyl- oder Xylosyl-Rest ist.
  3. 3. Pflanzenschutzmittel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das addierte Aldehyd oder addierte Keton 1 bis 6 Kohlenstoffatome enthält.
  4. 4. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass der Rest der organischen Säure ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus einer Formyl-, Acetyl-,
    • · · * - 22 - Propionyl-, Butyryl-, Isobutyryl-, Malonyl-, Pyruvoyl-, Succi-nyl-, 2-0xo-glutaroyl-, Oxalessigsäure-, Fumarsäure-, Weinsäure-und Citronensäure-Gruppe.
  5. 5. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass der Rest der anorganischen Saure ein Phosphorsäure- oder Schwefelsäurerest ist.
  6. 6. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass das Halogen Iod, Brom, Chlor oder Fluor ist.
  7. 7. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das Polymer 3,3' Bijuglon oder Cyc-lotrijuglon ist.
  8. 8. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Verbindung der allgemeinen Formel (I) und (II) und deren Polymere in einer Konzentration von 0,5 μΜ bis 4 mM, vorzugsweise von 1 μΜ bis 2 mM, noch mehr bevorzugt von 5 μΜ bis 1 mM, im Pflanzenschutzmittel vorhanden ist.
  9. 9. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass das Pflanzenschutzmittel 5-Hydroxy-1,4-Naphthochinon, 1,4,5-Trihydroxynaphthalin und/oder Derivate und Polymere davon umfasst.
  10. 10. Pflanzenschutzmittel nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, dass das Pflanzenschutzmittel einen Pflanzenextrakt umfassend eine Verbindung wie in einem der Ansprüche 1 bis 9 definiert umfasst.
  11. 11. Pflanzenschutzmittel nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, dass der Pflanzenextrakt gewonnen ist aus Juglandaceen, vorzugsweise Juglans ailanthifolia (syn. sieboldiana), Juglans cathayensis (syn. draconis), Juglans cinerea, Juglans hindsii, Juglans microcarpa (syn. rupestris), Juglans nigra und/oder Juglans stenocarpa, Carya lacinosa, Carya pecan (syn. olivaefor-mis), Carya tomentosa, Pterocarya caucasica, Pterocarya fraxini-folia, Pterocarya hupehensis, Pterocarya rhoifolia und Pteroca- - 23 - • ft
    rya stenoptera.
  12. 12. Verwendung einer Verbindung wie in einem der Ansprüche 1 bis 9 definiert oder eines Pflanzenextrakts wie in Anspruch 10 oder 11 definiert als Pflanzenschutzmittel.
  13. 13. Verwendung des Pflanzenschutzmittels nach Anspruch 12 zur Bekämpfung von Erwinia, vorzugsweise Erwinia amylovora.
  14. 14. Verfahren zur Bekämpfung von Erwinia amylovora auf Pflanzen umfassend den Schritt des Aufbringens eines Pflanzenschutzmittels nach einem der Ansprüche 1 bis 11 auf Blüten- und Blattwerk der Pflanzen.
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