WO2024034159A1 - 化粧料及び美容方法 - Google Patents

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WO2024034159A1
WO2024034159A1 PCT/JP2023/005463 JP2023005463W WO2024034159A1 WO 2024034159 A1 WO2024034159 A1 WO 2024034159A1 JP 2023005463 W JP2023005463 W JP 2023005463W WO 2024034159 A1 WO2024034159 A1 WO 2024034159A1
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WO
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hyaluronic acid
skin
cosmetic
mass
magnesium salt
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Application number
PCT/JP2023/005463
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English (en)
French (fr)
Inventor
美佳 吉村
Original Assignee
株式会社 資生堂
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Publication date
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
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    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair

Definitions

  • the present disclosure relates to cosmetics and beauty methods.
  • hyaluronic acid which has a moisturizing function, is used in fields such as cosmetics to moisturize the skin.
  • Patent Document 1 includes hyaluronic acid-supported nanoparticles in which hyaluronic acid is supported on at least one of the inside or the surface of nanoparticles formed of polylactic acid, polyglycolic acid, or a lactic acid/glycolic acid copolymer. , cosmetics are disclosed.
  • Patent Document 2 discloses an external skin preparation containing composite nanoparticles containing (A) hyaluronic acid and (B) an amphoteric compound and having a particle size of 100 nm or less.
  • Patent Document 3 discloses a cosmetic that contains an aqueous medium and hyaluronic acid particles dispersed in the aqueous medium, and the average particle diameter of the hyaluronic acid particles is 200 nm or less.
  • Hyaluronic acid has a negative charge due to the presence of carboxyl groups. Due to electrostatic repulsion based on this negative charge, hyaluronic acid generally spreads out in the form of threads.
  • Compacted hyaluronic acid as described in Patent Documents 1 and 2 tends to stay in the grooves or pores of the skin, for example, compared to hyaluronic acid that has spread into threads.
  • the content of hyaluronic acid in the particles described in Patent Document 1 is as low as about 3% by mass, and the content of hyaluronic acid in the particles described in Patent Document 2 also remains at 50% by mass or less. There were cases where moisture retention could not be ensured.
  • hyaluronic acid is essentially compacted using sodium chloride, but a technology for compacting hyaluronic acid that can exhibit even better moisturizing properties than hyaluronic acid prepared in this way has been desired.
  • the subject matter of the present disclosure is to provide a cosmetic that can exhibit superior skin permeability and moisturizing properties using compacted hyaluronic acid, and a beauty method using the cosmetic.
  • ⁇ Aspect 1> Contains hyaluronic acid and magnesium salt, The magnesium salt is contained in a concentration with an ionic strength of 0.01 or more, and the mass ratio of the magnesium salt to the hyaluronic acid is 1.0 or more.
  • ⁇ Aspect 3> The cosmetic according to aspect 1 or 2, wherein the magnesium salt is magnesium chloride.
  • (a) is a photograph of a cross-section of human skin observed under a fluorescence microscope after applying a hyaluronic acid aqueous solution containing no magnesium salt to human skin
  • (b) is a photograph of hyaluronic acid compacted using magnesium salt. This is a photograph of a cross-section of human skin observed under a fluorescence microscope after applying an aqueous solution containing the same to human skin.
  • the cosmetic of the present disclosure contains hyaluronic acid and a magnesium salt, the magnesium salt is contained in a concentration with an ionic strength of 0.01 or more, and the mass ratio of the magnesium salt to hyaluronic acid is 1.0 or more. be.
  • hyaluronic acid becomes compact, and it also becomes more compact than when using other salts such as sodium salt. It is believed that the principle of action that can provide excellent skin permeability and moisturizing properties is as follows.
  • "compact” refers to a structure that is contracted compared to a structure in which one molecule of hyaluronic acid or a plurality of hyaluronic acid molecules are entangled without adding magnesium salt. do.
  • a structure in which one molecule of hyaluronic acid or a plurality of hyaluronic acid molecules are entangled can be said to be contracted.
  • Hyaluronic acid generally has a negative charge due to the presence of carboxyl groups. Due to electrostatic repulsion based on this negative charge, molecules of hyaluronic acid, for example, tend to spread into threads and are difficult to compact. Therefore, in order to shrink and compact the structure of hyaluronic acid molecules, a support material on the nanometer order that can support hyaluronic acid molecules is required, as in Patent Documents 1 and 2. As a result, restrictions have been imposed on the content ratio of hyaluronic acid in compacted structures.
  • the electrostatic shielding effect of sodium chloride is used to apparently neutralize the negative charge of hyaluronic acid and make hydrogen bonds dominant, thereby preventing the spread of hyaluronic acid molecules. can be suppressed and compacted even when the hyaluronic acid molecule is alone. Since the compacted hyaluronic acid structure prepared by the technique of Patent Document 3 can be prepared without using the above-mentioned supporting material, the content ratio of hyaluronic acid in such a structure can be theoretically determined by It can be 100% by mass.
  • Compacted hyaluronic acid prepared by the technology of Patent Document 3 has an average particle diameter of 200 nm or less, so it can penetrate the skin more easily than uncompacted hyaluronic acid, resulting in improved skin permeability and Moisturizing properties are improved.
  • the present inventor found that using a magnesium salt among various salts as a salt to be used when compacting hyaluronic acid, compared to the case of sodium chloride used in Patent Document 3, resulted in better results. It has been found that it can exhibit skin permeability and moisturizing properties.
  • sodium salt is a salt that is relatively easy to crystallize among salts
  • magnesium salt is a salt that is less likely to crystallize than sodium salt because it has deliquescent properties. Therefore, in the case of cosmetics containing hyaluronic acid, sodium salts, and water, when such cosmetics are applied to the skin, as the water in the applied cosmetics dries, the sodium salts form a crystallized film on the skin surface. It is thought that it is formed. As a result, it is thought that at least a portion of the compacted hyaluronic acid is fixed in this crystallized film and cannot penetrate into the skin.
  • the cosmetic of the present disclosure contains hyaluronic acid and a magnesium salt, the magnesium salt is contained in a concentration with an ionic strength of 0.01 or more, and the mass ratio of the magnesium salt to hyaluronic acid is 1.0 or more. be.
  • the cosmetic of the present disclosure can provide excellent skin permeability and moisturizing properties, and can contribute to improving skin problems such as wrinkles.
  • hyaluronic acid of the present disclosure is not particularly limited.
  • hyaluronic acid refers to a linear polymer in which N-acetyl-D-glucosamine residues and D-glucuronic acid residues are bonded alternately; It can be obtained by isolation and extraction from tissues, or by fermentation using microorganisms such as Streptococcus.
  • Hyaluronic acid may be a derivative thereof.
  • hyaluronic acid salts specifically hyaluronic acid metal salts such as hyaluronate sodium salt, hyaluronate potassium salt, hyaluronate magnesium salt, hyaluronate calcium salt, hyaluronate aluminum salt, etc. are used.
  • derivatives of hyaluronic acid or hyaluronate obtained by etherifying, esterifying, amidating, acetylating, acetalizing, or ketalizing the hydroxyl group, carboxyl group, etc. of hyaluronic acid. can be used.
  • "hyaluronic acid” in the present disclosure may include the concept of hyaluronic acid and its derivatives.
  • the weight average molecular weight of hyaluronic acid is not particularly limited and can be, for example, 10,000,000 or less. It is generally believed that low molecular weight drugs, including hyaluronic acid, are more likely to penetrate the skin. Low-molecular-weight hyaluronic acid does not easily stay inside the skin, and its water retention performance is inferior to that of high-molecular-weight hyaluronic acid, so it may be difficult to maintain the moisturizing effect inside the skin over a long period of time. Therefore, in order to maintain the moisturizing effect inside the skin for a long period of time, it is advantageous to use high molecular weight hyaluronic acid.
  • the weight average molecular weight of hyaluronic acid is, for example, 500 or more, 1,000 or more, 5,000 or more, 10,000 or more, 50,000 or more. 100,000 or more, 300,000 or more, 500,000 or more, 800,000 or more, or 1,000,000 or more, and 10,000,000 or less, 8,000,000 or less , 5,000,000 or less, 3,000,000 or less, 2,000,000 or less, or 1,500,000 or less.
  • the weight average molecular weight refers to the weight average molecular weight in terms of polystyrene in gel permeation chromatography measurement.
  • hyaluronic acid and its derivatives can be used alone or in combination of two or more kinds. Furthermore, the molecular weights of the hyaluronic acid and its derivatives used may be the same or different.
  • hyaluronic acid A commercially available hyaluronic acid may be used.
  • Commercially available hyaluronic acids include, for example, hyaluronic acid HA-LQ (manufactured by Kewpie Corporation), hyaluronic acid FCH (manufactured by Kikkoman Biochemifa Corporation), hyaluronic acid IW120 (manufactured by Iwaki Corporation), and biosodium hyaluronate HA12N (manufactured by Iwaki Corporation). (manufactured by Shiseido Co., Ltd.).
  • the hyaluronic acid of the present disclosure contracts due to the electrostatic shielding effect based on the magnesium salt and the action of hydrogen bonds, and forms a form in which a single hyaluronic acid molecule or a plurality of hyaluronic acid molecules are entangled and aggregated (this form is referred to as "hyaluronic acid").
  • hyaluronic acid a form in which a single hyaluronic acid molecule or a plurality of hyaluronic acid molecules are entangled and aggregated
  • agglomerated shrinkage products. Since such a form of hyaluronic acid can be prepared without using a supporting material as described in Patent Documents 1 and 2, the content ratio of hyaluronic acid in the hyaluronic acid agglomerated and contracted product can be theoretically determined by It can be 100% by mass. That is, the hyaluronic acid agglomerated and contracted product of the present disclosure can be composed of hyaluronic
  • the hyaluronic acid agglomerated and contracted product of the present disclosure may contain other polymer components other than hyaluronic acid as long as they do not cause problems in skin permeability, moisturizing performance, etc.
  • the content ratio of other polymer components is, for example, 20% by mass or less, 10% by mass or less, 5% by mass or less, 3% by mass or less, 1% by mass, based on the total amount of polymer contained in the hyaluronic acid aggregated contracted material. Below, it can be 0.5 mass% or less, 0.1 mass% or less, 0.05 mass% or less, or 0.01 mass% or less.
  • hyaluronic acid agglomerated and contracted material can be intended to mean a product containing a hyaluronic acid component at a high concentration as described above. Particles with a proportion of less than 50% by mass are not included.
  • the content ratio of hyaluronic acid in the hyaluronic acid agglomerated and contracted material can be measured using, for example, an ELISA method.
  • the hyaluronic acid agglomerated and contracted material can be formed into a thread-like particle form that can be measured by dynamic light scattering (this form can be further referred to as "hyaluronic acid”) by adjusting, for example, the amount of magnesium salt added. (sometimes referred to as "acid particles").
  • hyaluronic acid particles Penetration of hyaluronic acid particles into the skin or body hair varies from person to person and can vary depending on the condition of the stratum corneum, the condition of the hair, the number or size of pores, etc., but if the particles have an average particle size of 200 nm or less, , the particles can penetrate most skin or body hair.
  • the average particle diameter of the hyaluronic acid particles is, for example, 150 nm or less, 120 nm or less, or 100 nm or less, from the viewpoint of permeability into the skin or body hair, ease of particle preparation, etc.
  • the thickness can be 10 nm or more, 30 nm or more, or 50 nm or more.
  • the average particle diameter is intended to be the Z-average particle diameter of hyaluronic acid particles optically measured by a dynamic light scattering method, assuming that the particle shape of the hyaluronic acid particles is spherical.
  • Such an average particle diameter can be measured using, for example, a Zetasizer (manufactured by Malvern Panalytical) or a dynamic light scattering photometer DLS-8000 (manufactured by Otsuka Electronics). These measuring devices can be appropriately selected based on the overlap concentration of each hyaluronic acid. For example, if it is less than overlap concentration, a dynamic light scattering photometer DLS-8000 can be used, and if it is more than overlap concentration, Zetasizer can be used. Overlapping concentration can be calculated, for example, by confocal fluorescence recovery after photobleaching (Confocal-FRAP).
  • Hyaluronic acid particles with an average particle size of 200 nm or less are easy to penetrate into the skin or body hair, but on the other hand, because the particle size is small, it is thought that it is difficult to stay inside the skin or body hair.
  • the average particle diameter of hyaluronic acid particles can be made to exceed 200 nm by adjusting the blending amounts of hyaluronic acid and magnesium salt.
  • Hyaluronic acid particles with an average particle size of more than 200 nm would normally be expected to have difficulty penetrating into the skin or body hair, but in the case of hyaluronic acid particles of this size prepared using magnesium salts, unexpected Surprisingly, the hyaluronic acid particles can be penetrated into the skin or body hair, and as shown in Figure 2, the penetrating hyaluronic acid particles tend to remain inside the skin or body hair, so that they can penetrate into the skin or body hair. The moisturizing effect can be maintained for a long period of time.
  • the average particle diameter of such hyaluronic acid particles is more than 200 nm, 210 nm or more, 230 nm or more, 250 nm or more, 270 nm or more, or 280 nm from the viewpoint of permeability into the skin or body hair, ease of retention within the skin or body hair, etc. or more, and can also be 500 nm or less, 450 nm or less, 400 nm or less, 350 nm or less, or 300 nm or less.
  • the hyaluronic acid of the present disclosure can take the form of thread-like particles.
  • Such a form of hyaluronic acid prepared using a magnesium salt easily penetrates into the skin or body hair, for example, non-invasively into the inside of the skin through the stratum corneum or pores of the skin.
  • hyaluronic acid having a relatively low molecular weight of less than 500 is considered to easily penetrate the skin or body hair without being made into fine particles.
  • the hyaluronic acid particles of the present disclosure can be prepared using hyaluronic acid having a weight average molecular weight of 500 or more, and such hyaluronic acid can be contained in the particles at a high concentration. As a result, the obtained hyaluronic acid particles tend to remain inside the skin or body hair, and can maintain the moisturizing effect inside the skin or body hair for a long period of time.
  • the content of hyaluronic acid in cosmetics is, for example, 0.005% by mass or more, 0.01% by mass or more, 0.05% by mass based on the total amount of cosmetics, from the viewpoints of compactness, moisturizing properties, cost, etc.
  • Mass% or more 0.10 mass% or more, 0.15 mass% or more, 0.20 mass% or more, 0.25 mass% or more, 0.30 mass% or more, 0.35 mass% or more, 0.40 mass% % or more, or 0.45% by mass or more, and 5.0% or less, 4.0% or less, 3.0% or less, 2.0% or less, 1.0% by mass or less, 0 It can be .90 mass% or less, 0.80 mass% or less, 0.70 mass% or less, 0.60 mass% or less, 0.50 mass% or less, or 0.45 mass% or less.
  • the hyaluronic acid contained in the cosmetics of the present disclosure is, for example, a high-molecular-weight hyaluronic acid that has a high content of hyaluronic acid in the hyaluronic acid aggregate and has excellent moisturizing properties. Therefore, even if the content of hyaluronic acid in the cosmetic is relatively low, it can exhibit a sufficient moisturizing effect.
  • the cosmetic of the present disclosure contains a magnesium salt.
  • the magnesium salt include magnesium salts composed of at least one selected from inorganic salts and organic acid salts.
  • inorganic salt means a salt composed only of inorganic components, and can also be translated as a salt composed of ions generated from an inorganic acid and an inorganic base.
  • organic acid salt means a salt formed by combining an organic acid and a metal ion. Note that salts generally exist in the form of salt-derived ions in cosmetics. Therefore, in the present disclosure, for example, "a cosmetic containing a magnesium salt” is intended to include a magnesium salt in the form of such an ion.
  • magnesium salts in the form of inorganic salts include magnesium nitrate, magnesium sulfate, and magnesium chloride. These salts can be used alone or in combination of two or more.
  • organic acid salts include citrate, acetate, lactate, tartrate, succinate, malate, glycolate, salicylate, and pyrrolidone carboxylate.
  • magnesium salts in the form of organic acid salts include magnesium ions combined with organic acids such as citric acid, acetic acid, lactic acid, tartaric acid, succinic acid, malic acid, glycolic acid, salicylic acid, and pyrrolidone carboxylic acid. Salt can be mentioned. These salts can be used alone or in combination of two or more.
  • magnesium salt in the form of an inorganic salt is preferable, and magnesium chloride is more preferable.
  • the amount of magnesium salt added in cosmetics should be determined by considering, for example, the degree of compaction of hyaluronic acid, the balance between penetration into the body surface or body hair, and/or sustainability of the moisturizing effect, etc. 0.01% by mass or more, 0.05% by mass or more, 0.10% by mass or more, 0.15% by mass or more, 0.20% by mass or more, 0.25% by mass or more, 0.30% by mass or more , 0.35% by mass or more, 0.40% by mass or more, 0.45% by mass or more, 0.50% by mass or more, 0.55% by mass or more, 0.60% by mass or more, 0.65% by mass or more, or 0.70 mass% or more, and 5.0 mass% or less, 4.0 mass% or less, 3.0 mass% or less, 2.0 mass% or less, 1.9 mass% or less , 1.8% by mass or less, 1.7% by mass or less, 1.6% by mass or less, or 1.5% by mass or less.
  • the magnesium salt is in the form of a
  • the amount of magnesium salt blended in cosmetics can also be defined as the ionic strength of the magnesium salt.
  • the ionic strength of the magnesium salt is, for example, 0.01 or more, 0.03, taking into account the degree of compaction of hyaluronic acid, the balance of permeability to the body surface or body hair, and/or the sustainability of the moisturizing effect. or more, 0.05 or more, 0.07 or more, 0.10 or more, more than 0.10, 0.12 or more, 0.15 or more, 0.17 or more, 0.20 or more, 0.22 or more, or 0. It is preferable that it is 25 or more.
  • the upper limit of the ionic strength may be, for example, 5.0 or less, 4.0 or less, 3.0 or less, 2.0 or less, 1.0 or less, 0.70 or less, or 0.50 or less. can.
  • the amount or ionic strength of the magnesium salt will depend on the composition of the magnesium salt contained in the buffer solution itself and the content of the magnesium salt in the buffer solution. Calculated based on all magnesium salt components including separately added magnesium salt components.
  • the cosmetic of the present disclosure contains a magnesium salt at a concentration of the above ionic strength, and further contains a mass ratio of magnesium salt to hyaluronic acid of 1.0 or more.
  • the cosmetic of the present disclosure does not contain other salts such as sodium chloride, as described in Patent Document 3.
  • it is less likely to crystallize on the surface of the skin, etc., and can provide better skin permeability and moisturizing properties.
  • the mass ratio of magnesium salt to hyaluronic acid is, for example, 1.0 or more, taking into account the degree of compaction of hyaluronic acid, the balance of permeability to the body surface or body hair, and/or the sustainability of the moisturizing effect, etc. 1.1 or more, 1.2 or more, 1.3 or more, 1.4 or more, 1.5 or more, 1.6 or more, 1.7 or more, 1.8 or more, 1.9 or more, or 2.0 or more It is preferable that The upper limit of this mass ratio is, for example, 10 or less, 9.0 or less, 8.0 or less, 7.0 or less, 6.0 or less, 5.0 or less, 4.0 or less, or 3.0 or less. can do.
  • Cosmetics of the present disclosure may typically include an aqueous medium.
  • the aqueous medium is not particularly limited, and any aqueous medium used in cosmetics, quasi-drugs, etc. can be used.
  • ion exchange water, distilled water, ultrapure water, tap water, buffer solution, etc. can be used.
  • the aqueous medium can be used alone or in combination of two or more.
  • buffer examples include citrate buffer, lactic acid buffer, phosphate buffer, acetate buffer, tartrate buffer, borate buffer, and Tris buffer. From the viewpoint of high buffering capacity, citrate buffer, lactic acid buffer, and phosphate buffer are preferred, and citrate buffer is more preferred.
  • the pH of the buffer solution can be 7.0 or less, 6.8 or less, or 6.5 or less.
  • the lower limit of the pH of the buffer solution is not particularly limited, but is preferably 4.5 or more, 5.5 or more, or 6.0 or more, for example, from the viewpoint of skin irritation.
  • the cosmetic composition of the present disclosure can contain various components as appropriate within a range that does not adversely affect the effects of the present invention.
  • Such ingredients include, for example, salts other than magnesium salts, humectants, skin or hair nutrients, vitamins, pharmaceuticals, quasi-drugs, water-soluble drugs applicable to cosmetics, ultraviolet absorbers, and oxidants.
  • surfactants e.g. anionic surfactants, cationic surfactants, nonionic surfactants, amphoteric surfactants
  • pigments dyes, pigments , and fragrances.
  • the optional components can be used alone or in combination of two or more.
  • the cosmetic composition of the present disclosure may contain salts other than magnesium salts.
  • the amount of other salts in the cosmetics is, for example, less than 0.50% by mass, 0.40% by mass or less, 0.30% by mass or less, 0.20% by mass or less, 0.10% by mass or less, 0. It can be less than .10% by weight, 0.05% by weight or less, or 0.01% by weight or less.
  • salts other than magnesium salts are not included in the cosmetic.
  • “other salts other than magnesium salt” in the present disclosure does not include ionic surfactants and hyaluronates.
  • the cosmetic composition of the present disclosure may contain an amphoteric surfactant.
  • the amount of the amphoteric surfactant in the cosmetic can be, for example, less than 0.01% by mass, 0.005% by mass or less, or 0.001% by mass or less. Amphoteric surfactants do not need to be incorporated into cosmetics.
  • the dosage form of the cosmetic of the present disclosure is not particularly limited, and examples thereof include liquid, emulsion, cream, gel, mist, spray, aerosol, and mousse. These may be in the form of a single phase system, or may be in the form of a non-emulsifying or emulsifying, oil-in-water or water-in-oil two-phase system.
  • the term "spray" can include mist-type sprays, aerosol-type sprays, and the like.
  • the product form of the cosmetics of the present disclosure is not particularly limited, and examples include skin care cosmetics such as emulsions, creams, face oils, body oils, and serums; foundations, makeup bases, lipsticks, blushers, eye shadows, mascara, and mascara bases.
  • Make-up cosmetics such as; sunscreen cosmetics; body cosmetics; aromatic cosmetics; skin cleansing products such as makeup removers, face washes, body shampoos; hair cosmetics such as hair sprays, hair creams, hair lotions, hair rinses, shampoos, etc. This includes fees.
  • cosmetics it is advantageous to use it as a leave-on cosmetic that is used without rinsing off and focuses on the penetration of hyaluronic acid into the skin.
  • the cosmetic of the present disclosure can be a solubilized or microemulsion cosmetic (eg, a beauty serum). Such cosmetics may exhibit a translucent to transparent appearance. Such appearance can be evaluated, for example, by the L value calculated from a color difference meter such as COLOR-EYE 7000A (manufactured by Gretag Macbeth). The closer the L value is to 100, the higher the transparency, and in some embodiments, the cosmetic of the present disclosure has an L value of 70 or more, 75 or more, 80 or more, 85 or more, 90 or more, 92 or more, or 95 or more. , 100 or less, or less than 100.
  • a solubilized or microemulsion cosmetic eg, a beauty serum
  • Such cosmetics may exhibit a translucent to transparent appearance. Such appearance can be evaluated, for example, by the L value calculated from a color difference meter such as COLOR-EYE 7000A (manufactured by Gretag Macbeth). The closer the L value is to 100, the higher the transparency
  • the cosmetic composition of the present disclosure does not include a second agent containing a chelating agent, which is used to swell the hyaluronic acid described above after it is applied to the skin.
  • the cosmetics of the present disclosure can be prepared, for example, using the following method. Note that the various materials described above can be used as the various materials such as hyaluronic acid, magnesium salt, water, and optional ingredients that can be used in the cosmetic preparation method.
  • Cosmetics can be prepared by blending a magnesium salt with water or a buffer solution to prepare a solution, blending hyaluronic acid into this solution, and dissolving the hyaluronic acid while stirring and mixing.
  • a cosmetic can be prepared by blending hyaluronic acid with water or a buffer solution, stirring and mixing to dissolve the hyaluronic acid, and then further blending a magnesium salt.
  • the buffer solution itself exhibits the above-mentioned concentration or ionic strength of the magnesium salt due to the action of the magnesium salt contained in the buffer solution, the addition of the magnesium salt can be omitted.
  • optional ingredients When the above-mentioned optional ingredients are blended, such optional ingredients may be blended before hyaluronic acid is compacted with magnesium salt. It is preferable to blend the hyaluronic acid after preparing it.
  • the cosmetic of the present disclosure can be applied to any part of the body, for example, to any part of the skin surface (body surface) or body hair (hair).
  • body surface skin surface
  • hair hair
  • the skin of the face lips, eyes, eyelids, cheeks, forehead, between the eyebrows, nose, etc.
  • head head
  • ears ears
  • hands arms, neck, legs, feet, chest, abdomen, back, etc.
  • body hair hair
  • the skin includes nails and the like that have hardened due to changes in the keratin of the epidermis of the skin.
  • body hair is synonymous with "hair” and includes any hair on the body.
  • examples of body hair include hair, eyelashes, eyebrows, and beards.
  • the cosmetic of the present disclosure can be suitably used as a cosmetic for body surface or body hair. Furthermore, since the cosmetic of the present disclosure can penetrate hyaluronic acid into the body surface or body hair, it can be suitably used as a cosmetic for hyaluronic acid penetration into the body surface or body hair.
  • a beauty method using the cosmetic of the present disclosure includes applying the above-described cosmetic to the body surface or body hair.
  • the term "beauty method” refers to a method of applying the cosmetics of the present disclosure to the body surface or body hair to beautifully condition and beautify the body surface or body hair. Or it is different from the method of diagnosis.
  • the cosmetic of the present disclosure can suitably penetrate the compacted hyaluronic acid into the skin or body hair, and therefore can satisfactorily moisturize the skin or body hair.
  • the production function of the skin's own moisturizing ingredients is improved, and poor turnover in the stratum corneum is also improved, or hair moisture is improved, resulting in rough skin or split ends.
  • problems such as hair breakage are less likely to occur, and the beauty effect can be enhanced.
  • the means for applying the cosmetic to the body surface or body hair can be applied by applying the cosmetic to the body surface or body hair.
  • the cosmetic may be applied to the body surface or body hair using a spray container filled with the cosmetic, or a container without a spray function may be used.
  • the cosmetic may be put into the container, and an appropriate amount of the cosmetic may be collected from the container onto the fingers or palm of the hand, and spread over the body surface or body hair.
  • Cosmetics should be applied to the body surface or body hair for at least 2 days, at least 5 days, at least 7 days, at least 10 days, at least 15 days, at least 20 days, or at least 30 days in order to enhance the beauty effect. is preferred. From the perspective of further enhancing the beauty effect, cosmetics should be applied to the body surface or body hair for 2 or more days, 5 or more days, 7 or more days, 10 or more days, 15 or more days, 20 or more days, or 30 or more consecutive days. It is more preferable to carry out the test.
  • continuous use may be referred to as "continuous use”.
  • Permeability test 1 Evaluation of the amount of hyaluronic acid permeated into human skin
  • the permeability of hyaluronic acid was evaluated from the amount of hyaluronic acid recovered from the stratum corneum peeled off with the tape of the D-squame (trademark) disc: (1) After setting human skin (60s) in the Diffusion Cell Array System (manufactured by Introtech Co., Ltd.), fill the receiver with degassed phosphate buffered saline (PBS) and hydrate the skin for 1 hour. I let it happen.
  • PBS degassed phosphate buffered saline
  • Hyaluronic acid that penetrated into the skin was directly observed according to the following steps (1) to (5): (1) After human skin (60s) was set in a diffusion cell array system (manufactured by Introtech Co., Ltd.), degassed PBS was filled into the receiver and the skin was hydrated for 1 hour. (2) After confirming that the surface temperature of the skin was 32° C., a test sample of the cosmetic was applied to the skin at 10 ⁇ L/cm 2 .
  • fluoresceinamine (FA)-labeled hyaluronic acid (HA) to which the fluorescent group fluoresceinamine (FA) was applied was prepared as follows: After uniformly dispersing 10 g of Biohyalo 12 (manufactured by Shiseido Co., Ltd.) in 500 mL of methanol (manufactured by Nacalai Tesque Co., Ltd.), 500 mL of water was added to completely dissolve it.
  • Permeability test 3 Evaluation of the amount of hyaluronic acid permeated into human skin
  • the permeability of hyaluronic acid was evaluated from the amount of hyaluronic acid recovered from the stratum corneum peeled off with the tape of the D-squame (trademark) disc: (1) After human skin (47 years old, male) was set in the Diffusion Cell Array System (manufactured by Introtech Co., Ltd.), the receiver was filled with degassed PBS and the skin was hydrated for 1 hour. (2) After confirming that the surface temperature of the skin was 32° C., a test sample of the cosmetic was applied to the skin at 10 ⁇ L/cm 2 .
  • Permeability test 4 Evaluation of the amount of hyaluronic acid permeated into human skin
  • the permeability of hyaluronic acid was evaluated from the amount of hyaluronic acid that permeated from the simulated skin to the medium according to the steps (1) and (2) below: (1) A pseudo skin membrane (Melano Derm MEL-300 kit, Asian donor (MEL-300-A) , manufactured by MATTEK), and 25 ⁇ L of the test sample was applied to the upper surface of the simulated skin membrane, followed by culturing in a CO 2 incubator (37° C., 5% CO 2 , humidified) for 1 day. (2) 1 mL of the cultured medium was sampled and analyzed by ELISA to quantify the amount of hyaluronic acid in the medium.
  • Permeability test 5 Evaluation of the amount of hyaluronic acid permeated into human skin after continuous use for 1 month
  • the permeability of hyaluronic acid after one month of continuous use was evaluated from the amount of hyaluronic acid recovered from the stratum corneum peeled off with the tape of the D-squame (trademark) disc: (1) After washing the inner forearms of a panel of 12 healthy men in their 20s to 30s with soap, 1 mL of each cosmetic sample was applied to the washed skin. (2) After carrying out the operation in (1) once a day for one month, the stratum corneum of the skin to which the sample was applied was applied five times with D-square (trademark) disk tape.
  • the third to fifth tapes were immersed in MilliQ (trademark) water containing 5% methanol, and then subjected to ultrasonication for 20 minutes to extract hyaluronic acid.
  • MilliQ trademark
  • the extract was analyzed by ELISA method to quantify the amount of hyaluronic acid in the extract.
  • the average particle size of compacted hyaluronic acid in the test sample was evaluated according to the following procedures (1) and (2): (1) The test sample was filtered with a 1 ⁇ m membrane filter. (2) The Z-average particle diameter of the filtered sample was determined by dynamic light scattering using a Zetasizer (manufactured by Malvern Panalytical).
  • Test Example 1 Effects of various salts>
  • Test Example 1 based on the above-mentioned Penetration Test 1, the influence of various salts mixed with hyaluronic acid was investigated. The results are shown in Table 1 and FIG.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • sodium chloride weight average molecular weight (Mw): 58.4, manufactured by Junsei Kagaku Co., Ltd.
  • concentration 0.14Eq
  • Comparative Examples 2 to 4 and Example 1 Test samples of Comparative Examples 2 to 4 and Example 1 were prepared in the same manner as Comparative Example 1, except that the salts in Table 1 were used.
  • Reference example 1 As a test sample (control sample) of Reference Example 1, Composition A of Comparative Example 1, which does not contain salt, was used.
  • Test Example 2 Direct observation of hyaluronic acid penetrating into the skin>
  • Test Example 2 based on the above-mentioned Permeability Test 2, the degree of penetration of hyaluronic acid into the skin when using a magnesium salt was investigated. The results are shown in FIG.
  • Test sample The test samples of Reference Example 1 and Example 1 in Test Example 1 were used.
  • ⁇ Test Example 3 Influence of the blending ratio of magnesium salt 1>
  • Test Example 3 the influence of the blending ratio of magnesium salt was investigated based on the above-mentioned Permeability Test 3. The results are shown in Tables 2-4.
  • Tables 2 to 4 “1 to 5", “6 to 10", and “11 to 15” refer to the 1st to 5th tapes, the 6th to 10th tapes, and the 11th to 15th tapes. It refers to the amount of hyaluronic acid collected with eye tape.
  • MgCl 2 equivalent amount means the equivalent amount of magnesium chloride hexahydrate (MgCl 2 6H 2 0) excluding the water content of the hydrate
  • MgCl 2 equivalent amount when “MgCl 2 equivalent amount” is described in the table, the total amount of the blended composition is the total amount of each component excluding the MgCl 2 equivalent amount.
  • Reference Example 3 and Comparative Example 8 shown in Table 3 “human skin (47 years old, male)" in (1) of the above permeability test 3 and "6 hours” in (3) were replaced with “human skin” in (1) and "6 hours” in (3).
  • Comparative Examples 6-7 and Examples 2-3 Test samples of Comparative Examples 6 and 7 and Examples 2 and 3 were prepared in the same manner as Comparative Example 5, except that the amount of MgCl 2 .6H 2 0 added was changed to the value shown in Table 2.
  • Reference example 2 As a test sample (control sample) of Reference Example 2, Composition B of Comparative Example 5, which does not contain salt, was used.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid was added to ion-exchanged water at a content of 0.10% by mass, and mixed by stirring with a vortex mixer to prepare composition B. did.
  • 0.17% by mass of MgCl 2 .6H 2 0 was added to Composition B, and the mixture was stirred and mixed using a vortex mixer to prepare a test sample.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • ion-exchanged water a content of 0.10% by mass
  • a vortex mixer a vortex mixer
  • 1.00% by mass of MgCl 2 .6H 2 0 was added to Composition B, and the mixture was stirred and mixed using a vortex mixer to prepare a test sample.
  • test sample (control sample) of Reference Example 4 As the test sample (control sample) of Reference Example 4, the test sample of Reference Example 3 was used.
  • hyaluronic acid prepared using magnesium salt tends to remain near the stratum corneum after penetrating into the skin, and has the ability to enhance the moisturizing effect inside the skin. This result is also consistent with the result of Test Example 2.
  • ⁇ Test Example 4 Effect of blending ratio of magnesium salt 2>
  • Test Example 4 the influence of the blending ratio of magnesium salt was investigated based on the above-mentioned Permeability Test 4.
  • the results are shown in Table 5.
  • the numerical value of the amount of hyaluronic acid in Table 5 is the average value of data for 4 wells of a 12-well plate.
  • the amount of hyaluronic acid blended in the test sample is low (for example, about 0.10% by mass), there is a possibility that the above-mentioned permeability test 3 cannot be evaluated. Therefore, when the amount of hyaluronic acid blended is low, it is preferable to evaluate by permeability test 4.
  • MilliQTM water (ultra pure water) was used as the test sample.
  • test sample was prepared by adding 0.34% by mass of MgCl 2 .6H 2 0 to ion-exchanged water and stirring and mixing with a vortex mixer to dissolve MgCl 2 .6H 2 0.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • ion-exchanged water at a content of 0.10% by mass
  • a vortex mixer to dissolve the hyaluronic acid.
  • a test sample was prepared.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid was added to ion-exchanged water to a content of 0.10% by mass, and mixed with stirring using a vortex mixer to prepare composition C. did.
  • 0.34% by mass of MgCl 2 .6H 2 0 was added to Composition C, and the mixture was stirred and mixed using a vortex mixer to prepare a test sample.
  • Test Example 5 Skin penetration effect of hyaluronic acid when used continuously for one month>
  • Test Example 5 based on the above-mentioned permeability test 5, the effect of hyaluronic acid permeation into the skin when used continuously for one month was investigated.
  • the results are shown in Table 6 and FIG. 3. Note that the numerical value of the amount of hyaluronic acid is the average value of the results obtained by 12 panelists.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • a vortex mixer to prepare composition D.
  • 0.50% by mass of phenoxyethanol and 1.00% by mass of ethanol were added to Composition D, and the mixture was stirred and mixed using a vortex mixer to prepare a test sample.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid was added to ion-exchanged water to a content of 0.50% by mass, and mixed with stirring using a vortex mixer to prepare composition D.
  • hyaluronic acid 1.42% by mass of MgCl2.6H20 , 0.50% by mass of phenoxyethanol , and 1.00% by mass of ethanol were added to composition D, and the mixture was stirred and mixed with a vortex mixer.
  • a test sample was prepared.
  • Table 6 and Figure 3 show that when a composition containing hyaluronic acid prepared using a predetermined amount of magnesium salt is continuously applied to the skin for a long period of time, hyaluronic acid can be properly penetrated into the skin. Ta.
  • Hyaluronic acid manufactured by Shiseido Co., Ltd., Biohyalo 12: weight average molecular weight 1.2 million
  • Hyaluronic acid was added to ion-exchanged water to a content of 0.50% by mass, and mixed with a vortex mixer to prepare composition E. did.
  • sodium chloride was added to composition E so that the ionic strength was 0.20, and the mixture was stirred and mixed using a vortex mixer to prepare a test sample.
  • Reference Example 9 A test sample of Reference Example 9 was prepared in the same manner as Reference Example 8 except that sodium chloride was replaced with MgCl 2 .6H 2 O.
  • Example 11 The test sample of Example 5 (hyaluronic acid: 0.10% by mass, MgCl 2 .6H 2 0: 0.34% by mass) was used as the test sample of Reference Example 11.
  • Reference Example 9 has the same configuration as Example 2 in Table 2. Conventionally, it has been said that when the average particle size of hyaluronic acid exceeds 200 nm, its permeability into the skin decreases, but from the results of Reference Example 9 and Example 2, it was determined that hyaluronic acid was prepared using a predetermined amount of magnesium salt. In the case of hyaluronic acid, it was found that even if the average particle diameter exceeds 200 nm, hyaluronic acid can be suitably penetrated into the skin.

Abstract

コンパクト化したヒアルロン酸を用いて、より優れた皮膚浸透性及び保湿性を呈し得る化粧料及び該化粧料を用いる美容方法を提供する。　本開示の化粧料は、ヒアルロン酸、及びマグネシウム塩を含み、マグネシウム塩が、０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が、１．０以上であり、また、本開示の美容方法は、該化粧料を体表又は体毛に適用することを含む。

Description

化粧料及び美容方法
　本開示は、化粧料及び美容方法に関する。
　例えば皮膚を保湿するために、保湿機能を有するヒアルロン酸が、化粧料等の分野において利用されている。
　特許文献１には、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、及び乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかで形成されたナノ粒子の内部または表面の少なくとも一方にヒアルロン酸を担持したヒアルロン酸担持ナノ粒子を含む、化粧料が開示されている。
　特許文献２には、（Ａ）ヒアルロン酸と、（Ｂ）両イオン性化合物と、を含み、粒径が１００ｎｍ以下である、複合ナノ粒子を含む、皮膚外用剤が開示されている。
　特許文献３には、水性媒体、及び水性媒体中に分散しているヒアルロン酸粒子を含有し、かつ、ヒアルロン酸粒子の平均粒子径が、２００ｎｍ以下である、化粧料が開示されている。
特開２０１０－１５０１５１号公報 国際公開第２０１８／１８２００３号 国際公開第２０２１／０３３７２５号
　ヒアルロン酸は、カルボキシル基の存在により、マイナスの電荷を有している。このマイナス電荷に基づく静電反発のため、ヒアルロン酸は一般に糸状に広がっている。
　特許文献１及び２に記載されるような、コンパクト化したヒアルロン酸は、糸状に広がったヒアルロン酸に比べ、例えば、肌の皮溝部又は毛穴などにとどまりやすい。しかしながら、特許文献１記載の粒子中のヒアルロン酸の含有割合は約３質量％程度と低く、また、特許文献２記載の粒子中のヒアルロン酸の含有割合も５０質量％以下にとどまるため、十分な保湿性を確保できない場合があった。
　本出願人の研究者は、特許文献３に記載されるように、塩化ナトリウムによる静電遮蔽効果を利用して、ヒアルロン酸のカルボキシル基に基づくマイナス電荷を見掛け上中和させ、誘引作用を奏するヒアルロン酸中の水酸基等に基づく水素結合を優位にすることで、ヒアルロン酸の広がりを抑制し、ヒアルロン酸をコンパクト化し得ることを見出した。
　特許文献３では、実質、塩化ナトリウムを用いてヒアルロン酸をコンパクト化しているが、このように調製したヒアルロン酸よりもさらに優れた保湿性を呈し得るヒアルロン酸のコンパクト化技術が望まれていた。
　したがって、本開示の主題は、コンパクト化したヒアルロン酸を用いて、より優れた皮膚浸透性及び保湿性を呈し得る化粧料、及び該化粧料を用いる美容方法を提供することである。
〈態様１〉
　ヒアルロン酸、及びマグネシウム塩を含み、
　前記マグネシウム塩が、０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、前記ヒアルロン酸に対する前記マグネシウム塩の質量比が、１．０以上である、
化粧料。
〈態様２〉
　前記ヒアルロン酸が、前記化粧料の全量に対し、０．００５質量％以上含まれている、態様１に記載の化粧料。
〈態様３〉
　前記マグネシウム塩が、塩化マグネシウムである、態様１又は２に記載の化粧料。
〈態様４〉
　前記ヒアルロン酸の重量平均分子量が、１０，０００，０００以下である、態様１～３のいずれかに記載の化粧料。
〈態様５〉
　前記化粧料が、リーブオン型の化粧料である、態様１～４のいずれかに記載の化粧料。
〈態様６〉
　前記化粧料が、９０以上のＬ値を呈する、態様１～５のいずれかに記載の化粧料。
〈態様７〉
　ヒアルロン酸の体表又は体毛浸透用である、態様１～６のいずれかに記載の化粧料。
〈態様８〉
　態様１～７のいずれかに記載の化粧料を体表又は体毛に適用することを含む、美容方法。
〈態様９〉
　前記化粧料の体表又は体毛への適用が、２日以上実施される、態様８に記載の美容方法。
〈態様１０〉
　前記化粧料の体表又は体毛への適用が、２日以上連続して実施される、態様８に記載の美容方法。
　本開示によれば、コンパクト化したヒアルロン酸を用いて、より優れた皮膚浸透性及び保湿性を呈し得る化粧料及び該化粧料を用いる美容方法を提供することができる。
各種の塩を用いて調製したヒアルロン酸水溶液をヒト皮膚に適用したときのヒト皮膚におけるヒアルロン酸量に関するグラフである。 （ａ）は、マグネシウム塩を含まないヒアルロン酸水溶液をヒト皮膚に適用し、かかる皮膚断面を蛍光顕微鏡で観察したときの写真であり、（ｂ）は、マグネシウム塩を用いてコンパクト化したヒアルロン酸を含む水溶液をヒト皮膚に適用し、かかる皮膚断面を蛍光顕微鏡で観察したときの写真である。 ヒアルロン酸無塗布のヒト皮膚におけるヒアルロン酸量、及びヒアルロン酸水溶液、又はヒアルロン酸及びマグネシウム塩を含む水溶液をヒト皮膚に１か月連用して塗布したときのヒト皮膚におけるヒアルロン酸量に関するグラフである。
　以下、本開示の実施の形態について詳述する。本開示は、以下の実施の形態に限定されるものではなく、発明の本旨の範囲内で種々変形して実施できる。
　本開示の化粧料は、ヒアルロン酸とマグネシウム塩とを含み、マグネシウム塩が、０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が、１．０以上である。
　原理によって限定されるものではないが、ヒアルロン酸とともにマグネシウム塩を所定の割合で配合することで、ヒアルロン酸がコンパクト化することに加え、さらにナトリウム塩等の他の塩を使用した場合に比べて優れた皮膚浸透性及び保湿性を呈し得る作用原理は以下のとおりであると考える。ここで、本開示において「コンパクト化」とは、マグネシウム塩を入れていない状態での、ヒアルロン酸の１分子又はヒアルロン酸分子が複数絡み合った状態の構造物に比べ、収縮していることを意図する。典型的には、ヒアルロン酸と同時にマグネシウム塩が所定量含まれていれば、ヒアルロン酸の１分子又はヒアルロン酸分子が複数絡み合った状態の構造物は収縮していると言える。
　ヒアルロン酸は、一般に、カルボキシル基の存在により、マイナスの電荷を有している。このマイナス電荷に基づく静電反発のため、例えば、ヒアルロン酸の分子は糸状に広がりやすく、コンパクト化しづらい傾向にあった。このため、ヒアルロン酸分子の構造を収縮させてコンパクト化するには、特許文献１及び２のように、ヒアルロン酸分子を担持し得るナノメーターオーダーの支持材料が必要であった。その結果、コンパクト化した構造物中のヒアルロン酸の含有割合には制限が課せられていた。
　一方、特許文献３の技術によれば、塩化ナトリウムによる静電遮蔽効果を利用して、ヒアルロン酸のマイナス電荷を見掛け上中和させ、水素結合を優位にすることで、ヒアルロン酸分子の広がりを抑制し、ヒアルロン酸分子単独であってもコンパクト化することができる。特許文献３の技術によって調製したコンパクト化したヒアルロン酸の構造物は、上述したような支持材料を用いることなく調製することができるため、かかる構造物中のヒアルロン酸の含有割合を、理論上、１００質量％にすることができる。
　特許文献３の技術によって調製したコンパクト化したヒアルロン酸は、２００ｎｍ以下の平均粒子径を有しているため、コンパクト化させていないヒアルロン酸に比べれば、皮膚に浸透しやすくなるため皮膚浸透性及び保湿性は向上する。しかしながら、本発明者は、ヒアルロン酸をコンパクト化させるときに使用する塩として、種々ある塩の中からマグネシウム塩を使用すると、特許文献３で使用されていた塩化ナトリウムの場合に比べ、より優れた皮膚浸透性及び保湿性を呈し得ることを見出した。
　この理由は定かではないが、一要因として、使用する塩の結晶性の差が影響していると考えている。つまり、ナトリウム塩は、塩の中でも比較的に結晶化しやすい塩であるのに対し、マグネシウム塩は、潮解性を有するため、ナトリウム塩よりも結晶化しにくい塩である。したがって、ヒアルロン酸、ナトリウム塩及び水を含む化粧料の場合には、かかる化粧料を皮膚に適用すると、適用した化粧料中の水分が乾燥するに従い、ナトリウム塩によって皮膚表面上に結晶化膜が形成されると考えられる。その結果、コンパクト化したヒアルロン酸のうちの少なくとも一部は、この結晶化膜中に固定化され、皮膚内部へ浸透できなくなると考えられる。一方、ヒアルロン酸、マグネシウム塩及び水を含む化粧料の場合には、かかる化粧料を皮膚に適用し、適用した化粧料中の水分が蒸発したとしても、マグネシウム塩が、空気中の水分を吸収し、その水分に溶解して液体化するため、結晶化膜ではなく水和膜のような状態になると考えられる。その結果、コンパクト化したヒアルロン酸の大部分又は全てが、膜中には固定化されずに皮膚内部へ効率よく浸透するため、ナトリウム塩などを使用した場合に比べ、より優れた保湿性を呈し得ると考えられる。
《化粧料》
　本開示の化粧料は、ヒアルロン酸とマグネシウム塩とを含み、マグネシウム塩が、０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が、１．０以上である。このような構成である結果、本開示の化粧料は、優れた皮膚浸透性及び保湿性を提供することができ、シワ等の皮膚トラブルの改善に貢献することができる。
〈ヒアルロン酸〉
　本開示のヒアルロン酸としては特に制限はない。一般には、ヒアルロン酸は、Ｎ－アセチル－Ｄ－グルコサミン残基と、Ｄ－グルクロン酸残基が交互に結合した直鎖状高分子を意味し、かかるヒアルロン酸は、例えば、鶏冠若しくは他の動物組織からの単離抽出、又はストレプト・コッカス属などの微生物を用いた発酵法により得ることができる。
　ヒアルロン酸は、その誘導体であってもよい。ヒアルロン酸の誘導体としては、例えば、ヒアルロン酸塩、具体的には、ヒアルロン酸ナトリウム塩、ヒアルロン酸カリウム塩、ヒアルロン酸マグネシウム塩、ヒアルロン酸カルシウム塩、ヒアルロン酸アルミニウム塩等のヒアルロン酸金属塩を使用することができ、また、例えば、ヒアルロン酸のヒドロキシル基、カルボキシル基等をエーテル化、エステル化、アミド化、アセチル化、アセタール化、ケタール化させて得られる、ヒアルロン酸又はヒアルロン酸塩の誘導体などを使用することができる。ここで、本開示における「ヒアルロン酸」には、ヒアルロン酸及びその誘導体の概念が包含され得る。
　ヒアルロン酸の重量平均分子量としては特に制限はなく、例えば、１０，０００，０００以下にすることができる。ヒアルロン酸に限らず、一般に低分子量の薬剤は、皮膚に浸透しやすいと考えられている。低分子量のヒアルロン酸は、皮膚の内部に留まりにくく、水分の保持性能が高分子量のヒアルロン酸に比べて劣るため、皮膚の内部における保湿効果を長期にわたって持続させることが難しい場合がある。したがって、皮膚の内部における保湿効果を長期にわたって持続させる場合には、高分子量のヒアルロン酸を用いることが有利である。ヒアルロン酸の水分の保持性能、及びヒアルロン酸のコンパクト化の観点から、ヒアルロン酸の重量平均分子量としては、例えば、５００以上、１，０００以上、５，０００以上、１０，０００以上、５０，０００以上、１００，０００以上、３００，０００以上、５００，０００以上、８００，０００以上、又は１，０００，０００以上とすることができ、また、１０，０００，０００以下、８，０００，０００以下、５，０００，０００以下、３，０００，０００以下、２，０００，０００以下、又は１，５００，０００以下とすることができる。ここで、重量平均分子量とは、ゲルパーミエーションクロマトグラフ測定における、ポリスチレン換算の重量平均分子量を意図する。
　ヒアルロン酸は、ヒアルロン酸及びその誘導体を、単独で又は二種以上組み合わせて使用することができる。また、使用するヒアルロン酸及びその誘導体の分子量は、同一であってもよく又は異なっていてもよい。
　ヒアルロン酸は市販品を用いてもよい。市販のヒアルロン酸としては、例えば、ヒアルロン酸ＨＡ－ＬＱ（キューピー株式会社製）、ヒアルロン酸ＦＣＨ（キッコーマンバイオケミファ株式会社製）、ヒアルロン酸ＩＷ１２０（イワキ株式会社製）、及びバイオヒアルロン酸ナトリウムＨＡ１２Ｎ（株式会社資生堂製）が挙げられる。
　本開示のヒアルロン酸は、マグネシウム塩に基づく静電遮蔽効果と水素結合の作用とにより収縮し、ヒアルロン酸の分子が単独で又は複数が絡まり合って凝集したような形態（この形態を「ヒアルロン酸凝集収縮物」と称する場合がある。）を呈していると考えている。このような形態のヒアルロン酸は、特許文献１及び２に記載されるような支持材料を用いることなく調製することができるため、ヒアルロン酸凝集収縮物中のヒアルロン酸の含有割合を、理論上、１００質量％にすることができる。すなわち、本開示のヒアルロン酸凝集収縮物は、ポリマー成分として、ヒアルロン酸分子単独で構成することができる。
　ただし、本開示のヒアルロン酸凝集収縮物は、皮膚浸透性及び保湿性能などに不具合を生じさせない範囲で、ヒアルロン酸以外の他のポリマー成分が含まれていてもよい。他のポリマー成分の含有割合としては、ヒアルロン酸凝集収縮物に含有される全ポリマー量に対し、例えば、２０質量％以下、１０質量％以下、５質量％以下、３質量％以下、１質量％以下、０．５質量％以下、０．１質量％以下、０．０５質量％以下、又は０．０１質量％以下とすることができる。すなわち、本開示において「ヒアルロン酸凝集収縮物」とは、このようにヒアルロン酸成分を高濃度に含むものを意図することができ、特許文献１及び２に記載されるような、ヒアルロン酸成分の割合が５０質量％以下の粒子は包含されない。ここで、ヒアルロン酸凝集収縮物中のヒアルロン酸の含有割合については、例えば、ＥＬＩＳＡ法を用いて測定することができる。
　いくつかの実施態様において、ヒアルロン酸凝集収縮物は、例えば、マグネシウム塩の添加量などを調整することによって、動的光散乱法で測定可能な糸まり状の粒子形態（この形態をさらに「ヒアルロン酸粒子」と称する場合がある。）にすることができる。ヒアルロン酸粒子の皮膚又は体毛への浸透は、個人差があり、角層の状態、毛の状態、毛穴の数若しくは大きさなどによって変化し得るが、平均粒子径で２００ｎｍ以下の粒子であれば、大部分の皮膚又は体毛に対して粒子を浸透させることができる。いくつかの実施態様において、皮膚又は体毛への浸透性、粒子の調製のしやすさ等の観点から、ヒアルロン酸粒子の平均粒子径としては、例えば、１５０ｎｍ以下、１２０ｎｍ以下、又は１００ｎｍ以下にすることができ、また、１０ｎｍ以上、３０ｎｍ以上、又は５０ｎｍ以上にすることができる。ここで、平均粒子径とは、ヒアルロン酸粒子の粒子形状を球状と仮定したときに動的光散乱法により光学的に測定されたヒアルロン酸粒子のＺ平均粒子径を意図する。かかる平均粒子径は、例えば、ゼータサイザー（マルバーン・パナリティカル社製）、又はダイナミック光散乱光度計ＤＬＳ－８０００（大塚電子社製）を用いて測定することができる。これらの測定装置は、各ヒアルロン酸のオーバーラップコンセントレーションに基づいて適宜選定することができる。例えば、オーバーラップコンセントレーション未満であれば、ダイナミック光散乱光度計ＤＬＳ－８０００を使用することができ、オーバーラップコンセントレーション以上であれば、ゼータサイザーを使用することができる。オーバーラップコンセントレーションは、例えば、共焦点褪色後蛍光回復法（Ｃｏｎｆｏｃａｌ－ＦＲＡＰ）により算出することができる。
　平均粒子径が２００ｎｍ以下のヒアルロン酸粒子は、皮膚又は体毛の内部に浸透させやすいが、その一方で、粒子径が小さいため、皮膚又は体毛の内部に留まりにくいと考えられる。本開示では、いくつかの実施態様において、ヒアルロン酸及びマグネシウム塩の配合量などを調整することによって、ヒアルロン酸粒子の平均粒子径を、２００ｎｍ超にすることができる。平均粒子径が２００ｎｍ超のヒアルロン酸粒子は、通常、皮膚又は体毛の内部に浸透しにくくなると予測され得るが、マグネシウム塩を用いて調製したこのようなサイズのヒアルロン酸粒子の場合には、意外にも驚くべきことに、皮膚又は体毛の内部に浸透させることができ、また、図２に示されるように、浸透したヒアルロン酸粒子は、皮膚又は体毛の内部に留まりやすくなるため、皮膚内部における保湿効果を長期にわたって持続させることができる。
　かかるヒアルロン酸粒子の平均粒子径としては、皮膚又は体毛への浸透性、皮膚又は体毛内部での留まりやすさ等の観点から、２００ｎｍ超、２１０ｎｍ以上、２３０ｎｍ以上、２５０ｎｍ以上、２７０ｎｍ以上、又は２８０ｎｍ以上とすることができ、また、５００ｎｍ以下、４５０ｎｍ以下、４００ｎｍ以下、３５０ｎｍ以下、又は３００ｎｍ以下とすることができる。
　上述したように、本開示のヒアルロン酸は、糸まり状の粒子形態を呈することができる。マグネシウム塩を用いて調製したかかる形態のヒアルロン酸は、皮膚又は体毛内に浸透しやすくなり、例えば、皮膚の角層又は毛穴などを通じて皮膚の内部に非侵襲的に浸透しやすくなる。一般に、重量平均分子量５００未満の比較的低分子量のヒアルロン酸は、微粒子化しなくても、皮膚又は体毛に浸透しやすいと考えられている。しかしながら、このような低分子量のヒアルロン酸は、皮膚又は体毛の内部に留まりにくく、水分の保持性能が高分子量のヒアルロン酸に比べて劣るため、皮膚又は体毛の内部における保湿効果を長期にわたって持続させることが難しい場合がある。一方、本開示のヒアルロン酸粒子は、重量平均分子量が５００以上のヒアルロン酸を用いて調製することができ、また、かかるヒアルロン酸を高濃度に粒子中に含有させることができる。その結果、得られるヒアルロン酸粒子は、皮膚又は体毛の内部に留まりやすく、皮膚又は体毛の内部における保湿効果を長期にわたって持続させることができる。
　化粧料中のヒアルロン酸の含有量としては、例えば、コンパクト化、保湿性、コスト等の観点から、化粧料の全量に対し、０．００５質量％以上、０．０１質量％以上、０．０５質量％以上、０．１０質量％以上、０．１５質量％以上、０．２０質量％以上、０．２５質量％以上、０．３０質量％以上、０．３５質量％以上、０．４０質量％以上、又は０．４５質量％以上にすることができ、また、５．０％以下、４．０％以下、３．０％以下、２．０％以下、１．０質量％以下、０．９０質量％以下、０．８０質量％以下、０．７０質量％以下、０．６０質量％以下、０．５０質量％以下、又は０．４５質量％以下にすることができる。本開示の化粧料中に含まれるヒアルロン酸は、上述したように、例えば、ヒアルロン酸凝集収縮物中のヒアルロン酸の含有割合が高く、また、保湿性に優れる高分子量のヒアルロン酸を使用することができるため、化粧料中のヒアルロン酸の含有量が比較的低量であっても十分な保湿効果を呈することができる。
〈マグネシウム塩〉
　本開示の化粧料は、マグネシウム塩を含む。マグネシウム塩としては、無機塩及び有機酸塩から選択される少なくとも一種から構成されるマグネシウム塩を挙げることができる。化粧料としての使用を考慮した場合、無機塩及び有機酸塩の中でも、皮膚又は体毛に対して悪影響を及ぼしにくい塩であることが好ましい。ここで、「無機塩」とは、無機成分のみから構成される塩を意味し、無機酸と無機塩基より生じるイオンから構成される塩と言い換えることもできる。また、「有機酸塩」とは、有機酸と金属イオンが結合してできた塩を意味する。なお、塩は、化粧料中では、一般に、塩由来のイオンの形態で存在している。したがって、本開示において、例えば「マグネシウム塩を含む化粧料」とは、このようなイオンの形態でマグネシウム塩が含まれていることを意図する。
　無機塩の形態のマグネシウム塩としては、例えば、硝酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、及び塩化マグネシウムを挙げることができる。これらの塩は単独で又は二種以上組み合わせて使用することができる。
　有機酸塩としては、例えば、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、グリコール酸塩、サリチル酸塩、及びピロリドンカルボン酸塩を挙げることができる。有機酸塩の形態のマグネシウム塩として、具体的には、クエン酸、酢酸、乳酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピロリドンカルボン酸などの有機酸と、マグネシウムイオンとが結合した塩を挙げることができる。これらの塩は単独で又は二種以上組み合わせて使用することができる。
　体表又は体毛への浸透性、保湿効果の持続性等の観点から、マグネシウム塩としては、無機塩の形態のマグネシウム塩が好ましく、塩化マグネシウムがより好ましい。
　化粧料中のマグネシウム塩の配合量は、例えば、ヒアルロン酸のコンパクト化の程度、並びに体表又は体毛への浸透性及び／又は保湿効果の持続性のバランス等を考慮し、化粧料の全量に対し、０．０１質量％以上、０．０５質量％以上、０．１０質量％以上、０．１５質量％以上、０．２０質量％以上、０．２５質量％以上、０．３０質量％以上、０．３５質量％以上、０．４０質量％以上、０．４５質量％以上、０．５０質量％以上、０．５５質量％以上、０．６０質量％以上、０．６５質量％以上、又は０．７０質量％以上、とすることができ、また、５．０質量％以下、４．０質量％以下、３．０質量％以下、２．０質量％以下、１．９質量％以下、１．８質量％以下、１．７質量％以下、１．６質量％以下、又は１．５質量％以下とすることができる。ここで、マグネシウム塩が水和物の形態である場合には、この配合量は水和物の水の分を除いた量である。
　化粧料中のマグネシウム塩の配合量は、マグネシウム塩のイオン強度として定義することもできる。マグネシウム塩のイオン強度としては、例えば、ヒアルロン酸のコンパクト化の程度、並びに体表又は体毛への浸透性及び／又は保湿効果の持続性のバランス等を考慮し、０．０１以上、０．０３以上、０．０５以上、０．０７以上、０．１０以上、０．１０超、０．１２以上、０．１５以上、０．１７以上、０．２０以上、０．２２以上、又は０．２５以上であることが好ましい。かかるイオン強度の上限値としては、例えば、５．０以下、４．０以下、３．０以下、２．０以下、１．０以下、０．７０以下、又は０．５０以下とすることができる。
　ここで、例えば、緩衝液にマグネシウム塩を添加して化粧料を調製する場合には、マグネシウム塩の配合量又はイオン強度は、緩衝液自体に含まれているマグネシウム塩の成分と、緩衝液に別途添加したマグネシウム塩の成分とを含む全てのマグネシウム塩成分に基づいて算出する。
　本開示の化粧料は、マグネシウム塩が、上記イオン強度の濃度で含まれるとともに、さらに、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が１．０以上の割合で含まれている。このように、潮解性を呈し得るマグネシウム塩が所定の割合でバランスよく含まれている結果、本開示の化粧料は、特許文献３に記載されるような、塩化ナトリウム等の他の塩を用いてコンパクト化したヒアルロン酸を含む化粧料に比べ、皮膚等の表面上で結晶化しにくく、より優れた皮膚浸透性及び保湿性を提供することができる。
　ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比としては、例えば、ヒアルロン酸のコンパクト化の程度、並びに体表又は体毛への浸透性及び／又は保湿効果の持続性のバランス等を考慮し、１．０以上、１．１以上、１．２以上、１．３以上、１．４以上、１．５以上、１．６以上、１．７以上、１．８以上、１．９以上、又は２．０以上であることが好ましい。かかる質量比の上限値としては、例えば、１０以下、９．０以下、８．０以下、７．０以下、６．０以下、５．０以下、４．０以下、又は３．０以下とすることができる。
〈水性媒体〉
　本開示の化粧料は、典型的には水性媒体を含み得る。かかる水性媒体としては特に制限はなく、化粧料、医薬部外品等に使用される水性媒体を使用することができる。例えば、イオン交換水、蒸留水、超純水、水道水、緩衝液等を使用することができる。水性媒体は単独で又は二種以上組み合わせて使用することができる。
　緩衝液としては、例えば、クエン酸緩衝液、乳酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、酒石酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、及びトリス緩衝液が挙げられる。緩衝能が高いという観点で、クエン酸緩衝液、乳酸緩衝液、及びリン酸緩衝液が好ましく、クエン酸緩衝液がより好ましい。
　緩衝液のｐＨとしては、７．０以下、６．８以下、又は６．５以下にすることができる。緩衝液のｐＨの下限値は特に制限されないが、例えば、皮膚への刺激性の観点等から、４．５以上、５．５以上、又は６．０以上であることが好ましい。
〈任意成分〉
　本開示の化粧料は、本発明の効果に悪影響を及ぼさない範囲で、各種成分を適宜配合することができる。このような成分としては、例えば、マグネシウム塩以外の他の塩、保湿剤、皮膚又は毛髪栄養剤、ビタミン、医薬品、医薬部外品、化粧品等に適用可能な水溶性薬剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、防腐剤、酸化防止助剤、増粘剤、界面活性剤（例えばアニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、両性界面活性剤）、顔料、染料、色素、及び香料を挙げることができる。任意成分は単独で又は二種以上組み合わせて使用することができる。
（マグネシウム塩以外の他の塩）
　本開示の化粧料は、マグネシウム塩以外の他の塩が含まれていてもよい。化粧料中の他の塩の配合量は、例えば、０．５０質量％未満、０．４０質量％以下、０．３０質量％以下、０．２０質量％以下、０．１０質量％以下、０．１０質量％未満、０．０５質量％以下、又は０．０１質量％以下とすることができる。体表又は体毛への浸透性、保湿効果の持続性等の観点から、マグネシウム塩以外の他の塩は、化粧料中に含まれないことが好ましい。ここで、本開示における「マグネシウム塩以外の他の塩」には、イオン性界面活性剤及びヒアルロン酸塩は包含されない。
（両性界面活性剤）
　本開示の化粧料は、両性界面活性剤が含まれていてもよい。化粧料中の両性界面活性剤の配合量は、例えば、０．０１質量％未満、０．００５質量％以下、又は０．００１質量％以下とすることができる。両性界面活性剤は化粧料中に配合しなくてもよい。
《化粧料の剤型及び製品形態》
　本開示の化粧料の剤型は特に限定されず、例えば、液状、乳液状、クリーム状、ジェル状、ミスト、スプレー、エアゾール、ムース等が挙げられる。これらは、単相系の形態であってもよく、或いは、非乳化型若しくは乳化型で水中油型又は油中水型の二相系の形態であってもよい。ここで、本開示において「スプレー」とは、ミストタイプのスプレー、エアゾールタイプのスプレーなどを包含することができる。
　本開示の化粧料の製品形態も特に限定されず、例えば、乳液、クリーム、フェイスオイル、ボディーオイル、美容液などのスキンケア化粧料；ファンデーション、化粧下地、口紅、頬紅、アイシャドウ、マスカラ、マスカラ下地などのメーキャップ化粧料；日焼け止め化粧料；ボディー化粧料；芳香化粧料；メーク落とし、洗顔料、ボディーシャンプー等の皮膚洗浄料；ヘアースプレー、ヘアークリーム、ヘアーローション、ヘアーリンス、シャンプー等の毛髪化粧料が挙げられる。化粧料の中でも、ヒアルロン酸を皮膚等に浸透させることに焦点を置いた、洗い流さずに使用するリーブオン型の化粧料としての使用が有利である。
　いくつかの実施態様において、本開示の化粧料は、可溶化系又はマイクロエマルション系の化粧料（例えば美容液）とすることができる。かかる化粧料は、半透明から透明の外観を呈し得る。このような外観については、例えば、ＣＯＬＯＲ－ＥＹＥ　７０００Ａ（Ｇｒｅｔａｇ　Ｍａｃｂｅｔｈ社製）等の色差計から算出されるＬ値によって評価することができる。Ｌ値は、１００に近いほど透明度が高いことを意図し、いくつかの実施態様における本開示の化粧料は、７０以上、７５以上、８０以上、８５以上、９０以上、９２以上、又は９５以上、１００以下又は１００未満のＬ値を呈することができる。
　いくつかの実施態様において、本開示の化粧料は、上述したヒアルロン酸を皮膚に適用した後にかかるヒアルロン酸を膨潤させるために使用される、キレート剤を含む第２剤を含まない。
《化粧料の調製方法》
　本開示の化粧料は、例えば以下の方法を用いて調製することができる。なお、化粧料の調製方法で使用し得る、ヒアルロン酸、マグネシウム塩、水、任意成分等の各種材料については、上述した各種材料を使用することができる。
　水又は緩衝液にマグネシウム塩を配合して溶液を調製し、この溶液にヒアルロン酸を配合し、攪拌混合しながらヒアルロン酸を溶解させて化粧料を調製することができる。
　または、ヒアルロン酸を水又は緩衝液に配合し、攪拌混合してヒアルロン酸を溶解させた後に、マグネシウム塩をさらに配合して化粧料を調製することができる。
　なお、緩衝液自体が、緩衝液中に含まれているマグネシウム塩の作用によって上述したマグネシウム塩の濃度又はイオン強度を呈する場合には、マグネシウム塩の添加を省略することができる。
　上述した任意成分を配合する場合には、かかる任意成分は、ヒアルロン酸をマグネシウム塩でコンパクト化する前に配合してもよいが、コンパクト化したヒアルロン酸に影響を及ぼさないように、コンパクト化したヒアルロン酸を調製した後に配合することが好ましい。
《化粧料の適用部位》
　本開示の化粧料は、体のあらゆる部分に適用することができ、例えば、皮膚の表面（体表）上又は体毛（毛髪）上のいかなる箇所に適用することができる。具体的には、例えば、顔（唇、目元、瞼、頬、額、眉間、鼻など）、頭（頭皮）、耳、手、腕、首、脚、足、胸、腹、背中等の皮膚表面、又は髪の毛、まつ毛、眉毛、髭等の体毛に対して適宜適用することができる。ここで、皮膚には、皮膚の表皮の角質が変化して硬化した爪なども含まれる。また、本開示において「体毛」は「毛髪」と同義であり、体中のいかなる毛を包含する。具体的には、体毛（毛髪）として、例えば、髪の毛、まつ毛、眉毛、及び髭などを挙げることができる。
　このように、本開示の化粧料は、体表又は体毛用化粧料として好適に使用することができる。さらには、本開示の化粧料は、ヒアルロン酸を体表又は体毛に浸透させることができるため、ヒアルロン酸の体表又は体毛浸透用化粧料として好適に使用することができる。
《化粧料を用いた美容方法》
　本開示の化粧料を用いた美容方法は、上述した化粧料を体表又は体毛に適用することを含む。なお、本開示において「美容方法」とは、本開示の化粧料を体表又は体毛に対して適用して体表又は体毛の状態を美しく整えて美化する方法を意味し、人間を手術、治療又は診断する方法とは相違する。
　一般に、乾燥にさらされた皮膚又は体毛は、知らず知らずのうちに水分が奪われ、肌又は体毛の表面の水分量が保てない状態になる。例えば、肌表面の水分が足りなくなると、肌自らがつくりだす保湿成分（天然保湿因子：Natural Moisturizing Factor (NMF)）がうまくつくりだせなくなる。その結果、肌表面におけるバリア機能と保湿機能が低下し、肌はダメージを受けやすくなるため、うるおいを失ってしわ、肌あれ等を引き起こすと考えられている。また、例えば、髪の潤いがなくなり乾燥してくると、枝毛又は切れ毛が生じたり、静電気によって髪が広がりやすくなったりすると考えられている。
　本開示の化粧料は、コンパクト化したヒアルロン酸を皮膚又は体毛に対して好適に浸透させることができるため、皮膚又は体毛を良好に保湿することができる。その結果、例えば、肌自らがつくりだす保湿成分の生成機能が改善されるとともに、角層におけるターンオーバーの不調も改善されるため、或いは、髪の潤いが改善されるため、肌あれ、又は枝毛若しくは切れ毛等のトラブルが生じがたくなり、美容効果を高めることができる。
　化粧料の体表又は体毛への適用手段は特に制限はなく、例えば、化粧料を体表又は体毛に塗布することによって実施することができる。化粧料の体表又は体毛への塗布手段としては、例えば、化粧料を投入したスプレー容器を用いて体表又は体毛に散布して実施してもよく、或いは、スプレー機能を有さない容器に化粧料を投入し、かかる容器から適量の化粧料を指又は手のひらなどに採取し、それを体表又は体毛へ塗り広げるようにして実施してもよい。
　化粧料の体表又は体毛への適用は、美容効果を高める観点から、２日以上、５日以上、７日以上、１０日以上、１５日以上、２０日以上、又は３０日以上実施することが好ましい。美容効果をより高める観点から、化粧料の体表又は体毛への適用は、２日以上、５日以上、７日以上、１０日以上、１５日以上、２０日以上、又は３０日以上連続して実施することがより好ましい。ここで、連続して実施することを「連用」と称する場合がある。
　以下に試験例及び実施例を挙げて、本発明についてさらに詳しく説明を行うが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、以下、特に断りのない限り、配合量は質量％で示す。
《試験例１～５及び参考試験例１》
〈化粧料の評価〉
　下記の製造方法により得た各化粧料の試験サンプルを用いて以下に示す各種評価を実施し、その結果を、表１～４及び図１～３にまとめる。なお、図中の「ＨＡ」は、ヒアルロン酸を意味する。
（浸透性試験１：ヒト皮膚に対するヒアルロン酸の浸透量の評価）
　下記の（１）～（５）の手順に従い、Ｄ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで剥離した角層からのヒアルロン酸回収量から、ヒアルロン酸の浸透性を評価した：
（１）ディフュージョンセルアレイシステム（株式会社イントロテック製）にヒト皮膚（６０代）をセットした後、脱気したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）をレシーバーに充填して、皮膚を１時間水和させた。
（２）皮膚の表面温度が３２℃であることを確認した後、化粧料の試験サンプルを１０μＬ／ｃｍ２で皮膚に塗布した。
（３）６時間後、皮膚の表面（角層）を、せっけん液を含ませた綿棒で５回、ＭｉｌｌｉＱ（商標）水（超純水）を含ませた綿棒で５回ふき取り、角層を洗浄した。
（４）洗浄した角層をＤ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで２０回ずつ剥離し、６～１０枚目のテープを、メタノールを５％配合したＭｉｌｌｉＱ（商標）水２．５ｍＬに浸した後、超音波処理を２０分行い、ヒアルロン酸を抽出した。
（５）Ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ　Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ（コスモ・バイオ株式会社製）を用い、抽出液をＥＬＩＳＡ法で分析し、抽出液中のヒアルロン酸量を定量した。
（浸透性試験２：蛍光顕微鏡によるヒト皮膚に浸透したヒアルロン酸の浸透性評価）
　下記の（１）～（５）の手順に従い、皮膚内に浸透したヒアルロン酸を直接的に観察した：
（１）ディフュージョンセルアレイシステム（株式会社イントロテック製）にヒト皮膚（６０代）をセットした後、脱気したＰＢＳをレシーバーに充填して、皮膚を１時間水和させた。
（２）皮膚の表面温度が３２℃であることを確認した後、化粧料の試験サンプルを１０μＬ／ｃｍ２で皮膚に塗布した。
（３）６時間後、皮膚の表面（角層）を、ＭｉｌｌｉＱ（商標）水（超純水）を含ませた綿棒でふき取った。
（４）皮膚を切り取り、Ｏ．Ｃ．Ｔ(Optimal Cutting Temperature)コンパウンドに切り取った皮膚を包埋し、クライオスタット（ＣＭ３０５０Ｓ、ライカ マイクロシステムズ株式会社製）で切片を作製した。
（５）作製した切片を蛍光顕微鏡（ＢＸ５１、オリンパス株式会社製）で観察した。
　なお、蛍光基であるフルオレセインアミン（ＦＡ）を適用したフルオレセインアミン（ＦＡ）標識ヒアルロン酸（ＨＡ）は、下記のとおりに調製した：
　１０ｇのバイオヒアロ１２（株式会社資生堂製）を、５００ｍＬのメタノール（ナカライテスク株式会社製）中に均一分散させた後、水を５００ｍＬ添加して完全に溶解させた。そこに、５－アミノフルオレセイン（東京化成工業株式会社製）を１００ｍｇ溶解させたメタノール溶液と、脱水縮合剤であるＤＭＴ－ＭＭ（国産化学株式会社製）を１０４ｍｇ溶解させたメタノール溶液を攪拌しながら添加し、ＦＡ標識ＨＡを得た。得られたＦＡ標識ＨＡをさらに１週間精製水で透析した後、凍結乾燥を行い、精製したＦＡ標識ＨＡ約６ｇを得た。分光蛍光光度計（日本分光株式会社製）を用いて測定したＦＡ標識ＨＡの極大吸収波長は４９４ｎｍであり、極大蛍光波長は５２１ｎｍであった。
（浸透性試験３：ヒト皮膚に対するヒアルロン酸の浸透量の評価）
　下記の（１）～（５）の手順に従い、Ｄ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで剥離した角層からのヒアルロン酸回収量から、ヒアルロン酸の浸透性を評価した：
（１）ディフュージョンセルアレイシステム（株式会社イントロテック製）にヒト皮膚（４７歳、男性）をセットした後、脱気したＰＢＳをレシーバーに充填して、皮膚を１時間水和させた。
（２）皮膚の表面温度が３２℃であることを確認した後、化粧料の試験サンプルを１０μＬ／ｃｍ２で皮膚に塗布した。
（３）６時間後、皮膚の表面（角層）を、せっけん液を含ませた綿棒で５回、ＭｉｌｌｉＱ（商標）水（超純水）を含ませた綿棒で５回ふき取り、角層を洗浄した。
（４）洗浄した角層をＤ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで２０回ずつ剥離し、１～５枚目のテープ、６～１０枚目のテープ、１１～１５枚目のテープをそれぞれ、メタノールを５％配合したＭｉｌｌｉＱ（商標）水２．５ｍＬに浸した後、超音波処理を２０分行い、ヒアルロン酸を抽出した。
（５）ＱｎＥ　Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ　Ａｃｉｄ（ＨＡ）　ＥＬＩＳＡ　Ａｓｓａｙ　Ｋｉｔ（フナコシ株式会社製）を用い、抽出液をＥＬＩＳＡ法で分析し、抽出液中のヒアルロン酸量を定量した。
（浸透性試験４：ヒト皮膚に対するヒアルロン酸の浸透量の評価）
　下記の（１）～（２）の手順に従い、疑似皮膚から培地まで浸透したヒアルロン酸量から、ヒアルロン酸の浸透性を評価した：
（１）３７℃に温めた培地（ＥＰＩ－１００－ＬＬＭＭ、ＭＡＴＴＥＫ社製）を５ｍＬ分注した１２ウェルプレートに、疑似皮膚膜（Ｍｅｌａｎｏ Ｄｅｒｍ　ＭＥＬ－３００キット、Ａｓｉａｎ　ｄｏｎｏｒ（ＭＥＬ－３００－Ａ）、ＭＡＴＴＥＫ社製）を移し、試験サンプルを疑似皮膚膜の上面に２５μＬ適用した後、ＣＯ２インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２、湿潤）で１日培養した。
（２）培養した培地を１ｍＬサンプリングし、ＥＬＩＳＡ法で分析し、培地中のヒアルロン酸量を定量した。
（浸透性試験５：１か月連用後のヒト皮膚に対するヒアルロン酸の浸透量の評価）
　下記の（１）～（３）の手順に従い、Ｄ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで剥離した角層からのヒアルロン酸回収量から、１か月連用後のヒアルロン酸の浸透性を評価した：
（１）２０～３０代の健常な男性パネル１２名の前腕内側を、石けんで洗浄した後、化粧料の各サンプルを洗浄した皮膚に１ｍＬ塗布した。
（２）（１）の操作を、１日に１回、１か月にわたって連続して実施した後、サンプルを適用した皮膚の角層を、Ｄ－ｓｑｕａｍｅ（商標）ディスクのテープで５回ずつ剥離し、３～５枚目のテープを、メタノールを５％配合したＭｉｌｌｉＱ（商標）水中に浸した後、超音波処理を２０分行い、ヒアルロン酸を抽出した。
（３）Ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ　Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ（コスモ・バイオ株式会社製）を用い、抽出液をＥＬＩＳＡ法で分析し、抽出液中のヒアルロン酸量を定量した。
（コンパクト化したヒアルロン酸の平均粒子径の評価）
　下記の（１）～（２）の手順に従い、試験サンプル中のコンパクト化したヒアルロン酸の平均粒子径を評価した：
（１）試験サンプルを１μｍのメンブレンフィルターでろ過した。
（２）濾過したサンプルを、ゼータサイザー（マルバーン・パナリティカル社製）を用い、動的光散乱法により、Ｚ平均粒子径を求めた。
〈試験例１：各種の塩の影響〉
　試験例１では、上記の浸透性試験１に基づき、ヒアルロン酸とともに配合する各種の塩の影響について検討した。その結果を表１及び図１に示す。
（比較例１）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．５０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ａを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、塩化ナトリウム（重量平均分子量（Ｍｗ）：５８．４、純正化学株式会社製）を、金属イオン当量が０．１４Ｅｑとなる濃度（０．８２質量％）で組成物Ａに添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（比較例２～４及び実施例１）
　表１の塩に変更したこと以外は、比較例１と同様にして比較例２～４及び実施例１の試験サンプルを各々調製した。
（参考例１）
　参考例１の試験サンプル（対照サンプル）として、塩を含まない比較例１の組成物Ａを使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
（結果）
　表１及び図１から明らかなように、マグネシウム塩以外の他の塩を使用した場合であっても、塩を含まない参考例１に比べれば、ヒアルロン酸量が増加しているため、ヒアルロン酸の皮膚への浸透性は向上しているが、マグネシウム塩を使用した場合には、ヒアルロン酸の皮膚への浸透性は、他の塩を使用した場合に比べ、大幅に向上することが確認できた。
〈試験例２：皮膚内に浸透したヒアルロン酸の直接観察〉
　試験例２では、上記の浸透性試験２に基づき、マグネシウム塩を用いたときのヒアルロン酸の皮膚内部への浸透具合について検討した。その結果を図２に示す。
（試験サンプル）
　試験例１における参考例１及び実施例１の試験サンプルを使用した。
（結果）
　図２から分かるように、マグネシウム塩を使用しなかったヒアルロン酸含有水溶液を皮膚に適用したときよりも（図２（ａ））、マグネシウム塩を用いて調製したヒアルロン酸含有水溶液を皮膚に適用したときの方（図２（ｂ））が、角層部（矢印部）に多くのヒアルロン酸が蓄積されていることが確認できた。この結果から、所定量のマグネシウム塩を用いて調製したヒアルロン酸は、皮膚の内部に浸透して角層付近にとどまりやすいため、皮膚内部における保湿効果を高め得ることが分かった。
〈試験例３：マグネシウム塩の配合割合の影響１〉
　試験例３では、上記の浸透性試験３に基づき、マグネシウム塩の配合割合の影響について検討した。その結果を表２～４に示す。ここで、表２～４における、「１～５」、「６～１０」、及び「１１～１５」は、１～５枚目のテープ、６～１０枚目のテープ、及び１１～１５枚目のテープで採取されたヒアルロン酸量を意味する。また、本開示において、「ＭｇＣｌ２換算量」とは、塩化マグネシウム・六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２０）の配合量から、水和物の水分量を除いた換算量を意味し、また、「ＭｇＣｌ２換算量」が表中に記載されているときの配合組成の合計量は、ＭｇＣｌ２換算量を除く、各成分の合計量である。なお、表３に示す参考例３及び比較例８においては、上記の浸透性試験３の（１）における「ヒト皮膚（４７歳、男性）」及び（３）における「６時間」を、「ヒト皮膚（３８歳、女性）」及び「４時間」に変更し、また、表４に示す参考例４及び実施例４においては、上記の浸透性試験３の（１）における「ヒト皮膚（４７歳、男性）」及び（３）における「６時間」を、「ヒト皮膚（３４歳、女性）」及び「４時間」に変更した。
（比較例５）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．５０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｂを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物ＢにＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を０．１７質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（比較例６～７及び実施例２～３）
　ＭｇＣｌ２・６Ｈ２０の添加量を、表２に示す値に変更したこと以外は、比較例５と同様にして比較例６～７及び実施例２～３の試験サンプルを各々調製した。
（参考例２）
　参考例２の試験サンプル（対照サンプル）として、塩を含まない比較例５の組成物Ｂを使用した。
（比較例８）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．１０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｂを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物ＢにＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を０．１７質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（参考例３）
　参考例３の試験サンプル（対照サンプル）として、塩を含まない比較例８の組成物Ｂを使用した。
（実施例４）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．１０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｂを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物ＢにＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を１．００質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（参考例４）
　参考例４の試験サンプル（対照サンプル）として、参考例３の試験サンプルを使用した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
（結果）
　表２から明らかなように、参考例２及び比較例５～７に比べ、実施例２～３におけるヒアルロン酸量（合計量）が増加していることから、マグネシウム塩が所定の割合で含まれていると（すなわち、マグネシウム塩が０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が１．０以上であると）、ヒアルロン酸の皮膚への浸透性が大幅に向上することが分かった。また、表３及び表４の結果より、この傾向は、ヒアルロン酸の配合量が低量であっても同様の傾向を示すことが確認できた。
　また、ヒアルロン酸量は、６～１０枚目及び１１～１５枚目に比べ、１～５枚目での数値が高くなっている。この結果から、マグネシウム塩を用いて調製したヒアルロン酸は、皮膚の内部に浸透した後、角層付近にとどまりやすく、皮膚内部における保湿効果を高める性能を有していると言える。この結果は、試験例２の結果とも整合している。
〈試験例４：マグネシウム塩の配合割合の影響２〉
　試験例４では、上記の浸透性試験４に基づき、マグネシウム塩の配合割合の影響について検討した。その結果を表５に示す。なお、表５におけるヒアルロン酸量の数値は、１２ウェルプレートによる４ウェル分のデータの平均値である。また、試験サンプル中のヒアルロン酸の配合量が低量（例えば０．１０質量％程度）である場合、上記の浸透性試験３では評価できないおそれがある。したがって、ヒアルロン酸の配合量が低量の場合には、浸透性試験４で評価することが好ましい。
（参考例５）
　試験サンプルとして、ＭｉｌｌｉＱ（商標）水（超純水）を使用した。
（参考例６）
　イオン交換水中にＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を０．３４質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合し、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を溶解させて試験サンプルを調製した。
（比較例９）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．１０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合し、ヒアルロン酸を溶解させて試験サンプルを調製した。
（実施例５）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．１０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｃを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物ＣにＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を０．３４質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
（結果）
　表５から分かるように、サンプル中のヒアルロン酸の配合量が低量であっても、マグネシウム塩が所定の割合で含まれていると（すなわち、マグネシウム塩が０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、ヒアルロン酸に対するマグネシウム塩の質量比が１．０以上であると）、ヒアルロン酸の皮膚への浸透性が向上することが分かった。
〈試験例５：１か月連用したときのヒアルロン酸の皮膚への浸透効果〉
　試験例５では、上記の浸透性試験５に基づき、１か月連用したときのヒアルロン酸の皮膚への浸透効果について検討した。その結果を表６及び図３に示す。なお、ヒアルロン酸量の数値は、パネル１２名による結果の平均値である。
（参考例７）
　皮膚になにも適用しなかった部位におけるヒアルロン酸量を測定した。
（比較例１０）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．５０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｄを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物Ｄに、フェノキシエタノールを０．５０質量％、エタノールを１．００質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（実施例６）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．５０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｄを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物Ｄに、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２０を１．４２質量％、フェノキシエタノールを０．５０質量％、エタノールを１．００質量％添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
（結果）
　表６及び図３より、所定量のマグネシウム塩を用いて調製したヒアルロン酸を含む組成物を、皮膚に対して長期間連続して適用すると、ヒアルロン酸を好適に皮膚へ浸透させ得ることが分かった。
〈参考試験例１：コンパクト化したヒアルロン酸の粒子径に及ぼす塩の種類及びヒアルロン酸濃度の影響〉
　参考試験例１では、コンパクト化したヒアルロン酸の粒子径に及ぼす塩の種類及びヒアルロン酸濃度の影響について検討した。
（参考例８）
　ヒアルロン酸（株式会社資生堂製、バイオヒアロ１２：重量平均分子量１２０万）を、イオン交換水中に０．５０質量％の含有量となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して組成物Ｅを調製した。ヒアルロン酸を溶解させた後、組成物Ｅに塩化ナトリウムをイオン強度が０．２０となるように添加し、ボルテックスミキサーで攪拌混合して試験サンプルを調製した。
（参考例９）
　塩化ナトリウムをＭｇＣｌ２・６Ｈ２０に代えたこと以外は、参考例８と同様にして参考例９の試験サンプルを調製した。
（参考例１０）
　比較例９の試験サンプル（ヒアルロン酸：０．１０質量％）を、参考例１０の試験サンプルとして使用した。
（参考例１１）
　実施例５の試験サンプル（ヒアルロン酸：０．１０質量％、ＭｇＣｌ２・６Ｈ２０：０．３４質量％）を、参考例１１の試験サンプルとして使用した。
（結果）
　参考例８及び９の結果より、０．５０質量％のヒアルロン酸とナトリウム塩を用いて調製した場合、コンパクト化したヒアルロン酸の平均粒子径は、６８．９ｎｍであった。一方、０．５０質量％のヒアルロン酸とマグネシウム塩を用いて調製した場合、コンパクト化したヒアルロン酸の平均粒子径は、２９５．９ｎｍであった。
　なお、参考例９は、表２の実施例２と同一の構成である。従来より、ヒアルロン酸の平均粒子径が２００ｎｍを越えると、皮膚への浸透性が低下すると言われていたが、参考例９及び実施例２の結果より、所定量のマグネシウム塩を用いて調製したヒアルロン酸の場合には、平均粒子径が２００ｎｍを越えても、ヒアルロン酸を皮膚内部へ好適に浸透させ得ることが分かった。
　参考例１０の結果より、マグネシウム塩を配合しないと、ヒアルロン酸はコンパクト化せず、そのサイズは１，７１１ｎｍと粗大化していることが確認できた。参考例１１のように、マグネシウム塩を配合し、かつ、ヒアルロン酸の配合量を参考例９よりも低量にすると、ヒアルロン酸は６５．０ｎｍ程度までさらにコンパクト化することが分かった。

Claims (10)

  1. 　ヒアルロン酸、及びマグネシウム塩を含み、
    　前記マグネシウム塩が、０．０１以上のイオン強度の濃度で含まれ、かつ、前記ヒアルロン酸に対する前記マグネシウム塩の質量比が、１．０以上である、
    化粧料。
  2. 　前記ヒアルロン酸が、前記化粧料の全量に対し、０．００５質量％以上含まれている、請求項１に記載の化粧料。
  3. 　前記マグネシウム塩が、塩化マグネシウムである、請求項１又は２に記載の化粧料。
  4. 　前記ヒアルロン酸の重量平均分子量が、１０，０００，０００以下である、請求項１又は２に記載の化粧料。
  5. 　前記化粧料が、リーブオン型の化粧料である、請求項１又は２に記載の化粧料。
  6. 　前記化粧料が、９０以上のＬ値を呈する、請求項１又は２に記載の化粧料。
  7. 　ヒアルロン酸の体表又は体毛浸透用である、請求項１又は２に記載の化粧料。
  8. 　請求項１又は２に記載の化粧料を体表又は体毛に適用することを含む、美容方法。
  9. 　前記化粧料の体表又は体毛への適用が、２日以上実施される、請求項８に記載の美容方法。
  10. 　前記化粧料の体表又は体毛への適用が、２日以上連続して実施される、請求項８に記載の美容方法。
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