WO2023228994A1 - Ｓｉｒｔ３遺伝子発現増強用組成物 - Google Patents

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WO2023228994A1
WO2023228994A1 PCT/JP2023/019433 JP2023019433W WO2023228994A1 WO 2023228994 A1 WO2023228994 A1 WO 2023228994A1 JP 2023019433 W JP2023019433 W JP 2023019433W WO 2023228994 A1 WO2023228994 A1 WO 2023228994A1
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urolithin
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sirt3
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PCT/JP2023/019433
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健一 大江
裕一 卯川
賢則 中島
喜範 片倉
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株式会社ダイセル
国立大学法人九州大学
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    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6897—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids involving reporter genes operably linked to promoters

Definitions

  • the present disclosure relates to a composition for enhancing SIRT3 gene expression.
  • Non-patent Documents 1 and 2 Urolithin A is known as a component that exhibits the effect of suppressing photoaging (Patent Document 1). Furthermore, urolithin A is known to exhibit an effect of suppressing melanin production and a whitening effect (Patent Document 2).
  • mitochondrial dysfunction and oxidative stress are known to have a causal relationship with neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, and amyotrophic lateral sclerosis (ALS).
  • ALS amyotrophic lateral sclerosis
  • urolithins have the effect of improving mitochondrial function, it is known that they can be used to treat or prevent neurodegenerative diseases, and can also be used to treat or prevent cognitive disorders associated with neurodegenerative diseases (patent patent). Reference 3).
  • NIHL noise-induced hearing loss
  • oxidative stress is known to be involved in many of the declines in cognitive function, decline in nerve function, and loss of nerve cells associated with aging and dementia.
  • the intake of preparations containing antioxidants such as S-adenosylmethionine, acetyl-L-carnitine, and N-acetylcysteine can reduce oxidative stress in the human brain and improve cognitive performance in mild cognitive impairment and the early stages of Alzheimer's disease. It is known that it can delay or improve the decline of
  • oxidative stress is suppressed or reduced by enhancing SIRT3 gene expression, and by suppressing or reducing oxidative stress, it is possible to prevent or improve skin aging, skin whitening, hearing loss, and improve cognitive function. It is known that various effects such as However, it is not known that urolithin M3 enhances the expression of the SIRT3 gene.
  • An object of the present disclosure is at least to provide a technique for enhancing the expression of the SIRT3 gene.
  • a composition for enhancing SIRT3 gene expression containing urolithin M3 as an active ingredient [2] The composition according to [1] for increasing SIRT3. [3] The composition according to [1] or [2] for antioxidation. [4] The composition according to any one of [1] to [3] for preventing or improving skin aging or whitening skin. [5] The composition according to any one of [1] to [3] for preventing or ameliorating hearing loss or improving cognitive function. [6] The composition according to any one of [1] to [5], which is a food or drink. [7] The composition according to any one of [1] to [5], which is a pharmaceutical. [8] The composition according to any one of [1] to [4], which is a cosmetic product.
  • the present disclosure can at least have the effect of providing a technique for enhancing the expression of the SIRT3 gene.
  • Example 3 is a graph showing the results of Example 1 according to one aspect of the present disclosure.
  • One embodiment of the present disclosure is a composition for enhancing SIRT3 gene expression, which contains urolithin M3 represented by the following structural formula as an active ingredient.
  • the method for obtaining urolithin M3 is not particularly limited, and a commercially available one may be used, it may be obtained by chemical synthesis, or it may be obtained by being produced by a microorganism.
  • Examples of commercially available urolithin M3 include those manufactured by Toronto Research Chemicals.
  • methyl 2-bromovanillic acid (2-bromo-5- It can be synthesized from hydroxy-4-methoxybenzoic acid (also called hydroxy-4-methoxybenzoic acid) and resorcinol.
  • composition according to this embodiment may contain urolithin M3 alone, or may contain urolithin M3 alone.
  • Other components may be included as long as they can enhance gene expression.
  • the composition according to this embodiment may be a mixture of urolithin M3 and the other component, and these components may be uniform or non-uniform. .
  • the SIRT3 gene in this embodiment is the sirtuin 3 gene.
  • the SIRT3 gene in this embodiment produces SIRT3 protein.
  • composition according to this embodiment may be ingested or administered, or may be for external use.
  • Subjects that ingest the composition according to this aspect, to which the composition according to this aspect is administered, or to which the composition according to this aspect is applied externally include mammals.
  • Mammals include humans and non-human mammals. Examples of mammals other than humans include cows, goats, sheep, pigs, monkeys, dogs, cats, rats, mice, hamsters, and guinea pigs.
  • the form of the composition according to this embodiment is not particularly limited.
  • the form of the composition according to this aspect is, for example, powder, granule, paste, pellet, capsule (hard capsule, soft capsule). , tablets, etc.
  • the form of the composition according to this aspect may be, for example, a paste form.
  • the composition according to this embodiment may be a solution or dispersion using water, an organic solvent such as DMSO, or an emulsion composition.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of the composition according to this aspect may be, for example, 0.0001% by weight or more, 0.001% by weight or more, or 0.01% by weight or more, and 20% by weight or less, 10% by weight or more. It may be less than or equal to 1% by weight, or may be a consistent combination thereof.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of the composition according to this aspect is, for example, 0.0001% by weight or more and 20% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 10% by weight or less, 0.0001% by weight or more 1% by weight or less, 0.001% to 20% by weight, 0.001% to 10% by weight, 0.001% to 1% by weight, 0.01% to 20% by weight, 0
  • the content may be .01% by weight or more and 10% by weight or less, or 0.01% by weight or more and 1% by weight or less.
  • the effective intake amount or effective dosage of the composition according to this embodiment is determined based on the subject's age, body weight, disease, disorder, symptoms, and symptoms (herein, "diseases, disorders, symptoms, and symptoms" are collectively referred to as “diseases, etc.”). ), the route of ingestion or administration, the schedule of ingestion or administration, the formulation form, etc. may be set as appropriate, but by ingesting or administering it to a subject, the expression of the SIRT3 gene in the subject. There is no particular restriction as long as it increases.
  • the total amount of urolithin M3 per day may be, for example, 1 mg or more, 2 mg or more, or 5 mg or more, or 500 mg or less, 100 mg or less, or 10 mg or less, or a consistent combination thereof. good.
  • As the total amount of urolithin M3, per day specifically, for example, 1 mg to 500 mg, 1 mg to 100 mg, 1 mg to 10 mg, 2 mg to 500 mg, 2 mg to 100 mg, 2 mg to 10 mg, 5 mg to 500 mg. , 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less.
  • the composition according to this embodiment may be taken or administered once per day, or may be taken or administered in multiple doses per day. Alternatively, it may be taken or administered once every few days or weeks.
  • the effective amount to be applied is determined as appropriate depending on the subject's age, body weight, degree of skin aging, degree of need for skin whitening, application route, application schedule, formulation form, etc.
  • the total amount of urolithin M3 is per 1 cm 2 of the application site and per application, e.g. , 1 mg or more, 2 mg or more, or 5 mg or more, 500 mg or less, 100 mg or less, or 10 mg or less, or a consistent combination thereof.
  • the total amount of Urolithin M3 is, for example, 1 mg or more and 500 mg or less, 1 mg or more and 100 mg or less, 1 mg or more and 10 mg or less, 2 mg or more and 500 mg or less, and 2 mg or more per 1 cm 2 of one application site and per application.
  • the amount may be 100 mg or less, 2 mg or more and 10 mg or less, 5 mg or more and 500 mg or less, 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less.
  • the composition may be applied once per day or multiple times per day. It may also be applied once every few days or weeks.
  • composition according to this embodiment contains urolithin M3, and the expression of the SIRT3 gene is enhanced in a subject who ingests or is administered the composition. Therefore, the composition according to this embodiment also causes secondary and subsequent events due to enhanced expression of the SIRT3 gene in the subject.
  • the composition according to this embodiment can also be used for secondary and subsequent events caused by enhanced expression of the SIRT3 gene in a subject.
  • SIRT3 protein By enhancing the expression of the SIRT3 gene, SIRT3 protein (herein sometimes referred to as "SIRT3”) increases.
  • the composition according to this embodiment can also be used to increase SIRT3, and the present disclosure can also provide a composition for increasing SIRT3, which contains urolithin M3 as an active ingredient.
  • the composition according to this embodiment can also be used for deacetylation of active oxygen degrading enzyme SOD2, and the present disclosure also provides a method for deacetylating active oxygen degrading enzyme SOD2 using urolithin M3 as an active ingredient. It is also possible to provide a composition for. Furthermore, the composition according to this embodiment can be used for activating active oxygen degrading enzyme SOD2, and the present disclosure provides a method for activating active oxygen degrading enzyme SOD2 that uses urolithin M3 as an active ingredient. It is also possible to provide a composition of.
  • composition according to this aspect can also be used to promote the decomposition of active oxygen, and the present disclosure also provides a composition for promoting the decomposition of active oxygen, which contains urolithin M3 as an active ingredient. It can also be provided. Furthermore, the composition according to this aspect can also be used for antioxidation, and the present disclosure can also provide a composition for antioxidant containing urolithin M3 as an active ingredient.
  • Antioxidation refers to increasing oxidative stress by suppressing the generation of active oxygen (ROS) in the body or cells, or eliminating excessively generated active oxygen (ROS) in the body or cells. or to suppress, reduce, or alleviate its occurrence. Antioxidation can effectively prevent damage caused by active oxygen to proteins, lipids, nucleic acids, etc. in living bodies or cells.
  • ROS active oxygen
  • composition according to this embodiment can be used for preventing or improving skin aging or whitening, and the present disclosure also provides a method for preventing or improving skin aging or whitening using urolithin M3 as an active ingredient. It is also possible to provide a composition for.
  • skin aging includes both physiological aging that progresses with age and photoaging that occurs due to ultraviolet (sunlight, etc.) irradiation.
  • the composition according to this aspect can be used, for example, to prevent or improve the formation of wrinkles, sagging or dullness, or to improve the firmness or elasticity of the skin.
  • whitening refers to the lightening of the skin, equalizing the tone of skin that has darkened due to sunburn, etc., giving the skin a sense of transparency, and reducing the appearance of spots and freckles. This includes becoming less noticeable or becoming less noticeable, or suppressing the appearance of spots and freckles.
  • the composition according to this embodiment can also be used to prevent or ameliorate diseases that can be prevented or ameliorated by enhancing the expression of the SIRT3 gene. It is also possible to provide a composition for preventing or ameliorating diseases that can be prevented or ameliorated by enhancing expression. "Improvement” includes "treatment.” Examples of such diseases include hearing loss and diseases related to hearing loss. That is, the present disclosure can also provide a composition for preventing or improving hearing loss, which contains urolithin M3 as an active ingredient.
  • hearing loss is a pathological condition in which hearing is impaired, and includes noise-induced hearing loss, hearing loss due to cerebral infarction, hearing loss due to infection, presbycusis, hearing loss due to side effects of drugs, sudden hearing loss, and the like.
  • the hearing loss is noise-induced hearing loss.
  • Hearing loss can be appropriately measured by testing methods commonly used in the art, such as standard pure tone audiometry.
  • composition according to this aspect can also be used for improving cognitive function, and the present disclosure also provides a composition for improving cognitive function that contains urolithin M3 as an active ingredient. can. Furthermore, the composition according to this aspect can also provide a composition for preventing or improving diseases related to cognitive function.
  • cognitive functions refer to higher brain functions including understanding, judgment, memory, attention, calculation, thinking, learning, language, etc., such as cognitive flexibility, executive function, attention, etc. Examples include control function, processing speed, reaction time, and cognitive function speed.
  • cognitive function By improving cognitive function, for example, functions such as attention, information processing, and working memory can be maintained or improved, and work or learning efficiency can be improved.
  • Cognitive function can be appropriately measured by a test method commonly used in the art, such as the Advanced Trail Making Test (ATMT) (see Mizuno K and Watanabe Y (2008), Fatigue Science for Human Health, (See pp.47-54).
  • ATMT Advanced Trail Making Test
  • Diseases related to cognitive function include, for example, dementia such as Alzheimer's disease, mild cognitive impairment, mental illnesses such as depression, Parkinson's disease, Huntington's disease, amyotrophic lateral sclerosis (ALS), Examples include cognitive dysfunction due to hypothyroidism, etc.
  • dementia such as Alzheimer's disease, mild cognitive impairment
  • mental illnesses such as depression, Parkinson's disease, Huntington's disease, amyotrophic lateral sclerosis (ALS)
  • ALS amyotrophic lateral sclerosis
  • Examples include cognitive dysfunction due to hypothyroidism, etc.
  • Preferred embodiments of the composition according to this embodiment include foods and drinks (including supplements), pharmaceuticals, feed, and cosmetics. That is, preferred embodiments that can be provided by the present disclosure include foods and drinks containing urolithin M3 as an active ingredient, pharmaceuticals containing urolithin M3 as an active ingredient, feeds containing urolithin M3 as an active ingredient, and foods containing urolithin M3 as an active ingredient. Cosmetics are an example.
  • Urolithin M3 When Urolithin M3 is used as a material for foods and drinks, it can be used as food for specified health uses, nutritional supplements, functional foods, foods for the sick, food additives, etc. (these also include beverages) in addition to general foods and drinks.
  • Can be used as The food and drink may be in the form of a plant or animal containing urolithin M3.
  • it can be prepared into an edible form, such as granules, using a conventional method. It may be formed into edible shapes, granules, tablets, capsules, pastes, etc., and may be used for various foods, such as processed meat foods such as ham and sausages, processed seafood foods such as kamaboko and chikuwa, bread, confectionery, etc. It may be used by adding it to butter, powdered milk, fermented milk products, or it may be added to drinks such as water, fruit juice, milk, and soft drinks.
  • the main ingredients of the food or drink may be water, protein, carbohydrates, lipids, vitamins, minerals, organic acids, organic bases, fruit juice, flavors, etc.
  • proteins include whole milk powder, skim milk powder, partially skim milk powder, casein, soybean protein, egg protein, meat protein, and other animal and vegetable proteins, their hydrolysates, butter, and the like.
  • carbohydrates include saccharides, modified starches (in addition to dextrin, soluble starch, British starch, oxidized starch, starch ester, starch ether, etc.), dietary fiber, and the like.
  • lipids include vegetable oils and fats such as lard, safflower oil, corn oil, rapeseed oil, coconut oil, fractionated oils thereof, hydrogenated oils, and transesterified oils.
  • vitamins include vitamin A, carotenes, vitamin B group, vitamin C, vitamin D group, vitamin E, vitamin K group, vitamin P, vitamin Q, niacin, nicotinic acid, pantothenic acid, biotin, inositol, and choline.
  • folic acid, etc. and minerals include, for example, calcium, potassium, magnesium, sodium, copper, iron, manganese, zinc, selenium, and whey minerals.
  • organic acids include malic acid, citric acid, lactic acid, and tartaric acid. Two or more of these components may be used in combination, and synthetic products and/or food and drink products containing a large amount of these components may be used.
  • the food/beverage products mentioned above can be manufactured according to conventional methods. Further, the amount, method, and timing of blending into urolithin M3 can be selected as appropriate. Furthermore, if necessary, it can be sealed in an appropriate container such as a bottle, bag, can, box, or pack.
  • the content of urolithin M3 relative to the total amount of the food/beverage product may be, for example, 0.0001% by weight or more, 0.001% by weight or more, or 0.01% by weight or more, and 20% by weight or less, 10% by weight or less. , or 1% by weight or less, or a consistent combination thereof.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of the food and beverage according to this aspect is, for example, 0.0001% by weight or more and 20% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 10% by weight or less, 0.0001% by weight or more 1% by weight or less, 0.001% to 20% by weight, 0.001% to 10% by weight, 0.001% to 1% by weight, 0.01% to 20% by weight, 0
  • the content may be .01% by weight or more and 10% by weight or less, or 0.01% by weight or more and 1% by weight or less.
  • the effective intake amount of the food/drink is appropriately set depending on the subject's age, body weight, disease level, intake route, intake schedule, formulation form, etc., but when the subject ingests it, the SIRT3 There is no particular restriction as long as gene expression is enhanced, and the total amount of urolithin M3 may be, for example, 1 mg or more, 2 mg or more, or 5 mg or more, and 500 mg or less, 100 mg or less, or 10 mg or less per day. or a non-contradictory combination thereof.
  • the total amount of urolithin M3, per day specifically, for example, 1 mg to 500 mg, 1 mg to 100 mg, 1 mg to 10 mg, 2 mg to 500 mg, 2 mg to 100 mg, 2 mg to 10 mg, 5 mg to 500 mg. , 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less.
  • the food/beverage products may be taken once a day or divided into multiple times a day. It may also be taken once every few days or weeks.
  • urolithin M3 When urolithin M3 is used as a material for a pharmaceutical, either oral administration or parenteral administration can be adopted as a method of application as a pharmaceutical.
  • the active ingredient can be mixed with a solid or liquid non-toxic pharmaceutical carrier suitable for oral administration, rectal administration, injection, etc., and administered in the form of a conventional pharmaceutical preparation.
  • preparations include solid preparations such as tablets, granules, powders, and capsules, liquid preparations such as solutions, suspensions, and emulsions, and lyophilized preparations. It can be prepared by conventional means.
  • non-toxic pharmaceutical carrier examples include glucose, lactose, sucrose, starch, mannitol, dextrin, fatty acid glyceride, polyethylene glycol, hydroxyethyl starch, ethylene glycol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, amino acids, gelatin, Examples include albumin, water, and physiological saline. Further, if necessary, conventional additives such as stabilizers, wetting agents, emulsifiers, binders, and isotonic agents can also be appropriately added.
  • the content of urolithin M3 relative to the total amount of the drug may be, for example, 0.0001% by weight or more, 0.001% by weight or more, or 0.01% by weight or more, and 20% by weight or less, 10% by weight or less, Alternatively, it may be 1% by weight or less, or a consistent combination thereof may be used.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of the drug according to this embodiment is, for example, 0.0001% by weight or more and 20% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 10% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 1% by weight or less.
  • Weight% or less 0.001% to 20% by weight, 0.001% to 10% by weight, 0.001% to 1% by weight, 0.01% to 20% by weight, 0.
  • the content may be 0.01% by weight or more and 10% by weight or less, or 0.01% by weight or more and 1% by weight or less.
  • the effective dosage of the above-mentioned drug is appropriately determined depending on the subject's age, weight, disease level, etc., administration route, administration schedule, formulation form, etc.; There is no particular restriction as long as the expression of It may also be a non-contradictory combination thereof.
  • As the total amount of urolithin M3, per day specifically, for example, 1 mg to 500 mg, 1 mg to 100 mg, 1 mg to 10 mg, 2 mg to 500 mg, 2 mg to 100 mg, 2 mg to 10 mg, 5 mg to 500 mg. , 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less.
  • the pharmaceutical agent may be administered once per day, or may be administered in multiple doses per day. Alternatively, the administration may be done once every few days or weeks.
  • urolithin M3 can be used as a feed material.
  • the feed raw material and urolithin M3 may be mixed as appropriate depending on the breeding environment such as the type, growth stage, region, etc. of the mammal.
  • Feed materials include, for example, grains or processed grains (corn, milo, barley, etc.), brans (bran, rice bran, corn gluten feed, etc.), vegetable oil cakes (soybean oil cake, sesame oil cake, cottonseed oil cake, etc.) , animal raw materials (skimmed milk powder, fish meal, meat and bone meal, etc.), minerals (calcium carbonate, calcium phosphate, salt, silicic anhydride, etc.), vitamins, amino acids, yeast such as brewer's yeast, fine powder of inorganic substances ( crystalline cellulose, talc, silica, etc.).
  • the feed contains feed additives such as excipients, fillers, binders, thickeners, emulsifiers, colorants, fragrances, food additives, and seasonings that are usually used in compound feeds in addition to the feed ingredients.
  • feed additives such as excipients, fillers, binders, thickeners, emulsifiers, colorants, fragrances, food additives, and seasonings that are usually used in compound feeds in addition to the feed ingredients.
  • other ingredients antioxidants, bactericides, anthelmintics, preservatives, etc.
  • the form of the feed is not particularly limited, and examples thereof include powder, granules, paste, pellets, capsules (hard capsules, soft capsules), tablets, etc., and pet food for pet animals and experiments. It may also be used as animal feed.
  • the total amount of urolithin M3 relative to the total amount of the feed may be, for example, 0.0001% by weight or more, 0.001% by weight or more, or 0.01% by weight or more, and 20% by weight or less, 10% by weight or less, or
  • the content may be 1% by weight or less, or a consistent combination thereof may be used.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of feed according to this embodiment is, for example, 0.0001% by weight or more and 20% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 10% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 1% by weight or less.
  • Weight% or less 0.001% to 20% by weight, 0.001% to 10% by weight, 0.001% to 1% by weight, 0.01% to 20% by weight, 0.
  • the content may be 0.01% by weight or more and 10% by weight or less, or 0.1% by weight or more and 1% by weight or less.
  • the effective dosage of the feed is appropriately determined depending on the subject's age, body weight, disease level, severity of the disease, administration route, administration schedule, formulation form, etc.; There is no particular restriction as long as the expression of urolithin M3 is enhanced, and the total amount of urolithin M3 may be, for example, 1 mg or more, 2 mg or more, or 5 mg or more, and 500 mg or less, 100 mg or less, or 10 mg or less per day. or a non-contradictory combination thereof. As the total amount of urolithin M3, per day, specifically, for example, 1 mg to 500 mg, 1 mg to 100 mg, 1 mg to 10 mg, 2 mg to 500 mg, 2 mg to 100 mg, 2 mg to 10 mg, 5 mg to 500 mg. , 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less. Further, the feed may be administered once per day, or may be administered in multiple doses per day. Alternatively, the administration may be done once every few days or weeks.
  • the composition for preventing or improving skin aging or whitening which contains urolithin M3 as an active ingredient, is preferably a cosmetic product.
  • the cosmetics may be in liquid form such as aqueous solutions, lotions, sprays, suspensions, and emulsions; solid forms such as powders, granules, and blocks; and semi-forms such as creams and pastes.
  • liquid form such as aqueous solutions, lotions, sprays, suspensions, and emulsions
  • solid forms such as powders, granules, and blocks
  • semi-forms such as creams and pastes.
  • Various desired forms such as solid form and gel form may be mentioned.
  • cosmetics examples include face-washing cosmetics, skin cosmetics (e.g., lotion, emulsion, cream, etc.), sunscreen cosmetics, makeup cosmetics (e.g., foundation, lipstick, etc.), cleaning cosmetics (e.g., facial cleansing foam, bar soap, etc.). , body shampoo, shampoo, conditioner, conditioner, etc.), scalp cosmetics (for example, hair tonic, hair liquid, hair restorer, hair restorer, etc.).
  • the cosmetics can be manufactured by adding ingredients used in ordinary cosmetics or ingredients necessary for formulation as appropriate.
  • ingredients include, for example, water-soluble polymers, plant ingredients, humectants, waxes, hydrocarbons, essential oils, oil and fat ingredients (emollient ingredients), inorganic salts, pigments, fragrances, fine powders, and sterilizers. agents, preservatives, etc.
  • the cosmetics can be manufactured according to conventional methods. Furthermore, the amount, method, and timing of the emulsified composition according to the above embodiment to be added to the cosmetic product can be selected as appropriate. That is, after obtaining an emulsified composition by the manufacturing method according to the above aspect, the cosmetic may be manufactured through a step of blending the emulsified composition with cosmetic raw materials to form a cosmetic.
  • the cosmetics can be packaged in an appropriate container such as a bottle, bag, can, box, pack, etc., if necessary.
  • the content of urolithin M3 relative to the total amount of the cosmetic may be, for example, 0.0001% by weight or more, 0.001% by weight or more, or 0.01% by weight or more, and 20% by weight or less, 10% by weight or less, Alternatively, it may be 1% by weight or less, or a consistent combination thereof may be used.
  • the content of urolithin M3 with respect to the total amount of the cosmetics according to this aspect is, for example, 0.0001% by weight or more and 20% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 10% by weight or less, 0.0001% by weight or more and 1% by weight or less.
  • Weight% or less 0.001% to 20% by weight, 0.001% to 10% by weight, 0.001% to 1% by weight, 0.01% to 20% by weight, 0.
  • the content may be 0.01% by weight or more and 10% by weight or less, or 0.01% by weight or more and 1% by weight or less.
  • the effective amount of the cosmetics to be applied is appropriately determined depending on the subject's age, body weight, degree of skin aging, degree of need for skin whitening, etc., application route, application schedule, formulation form, etc.; There is no particular restriction as long as the expression of the SIRT3 gene is enhanced in the subject, and the total amount of urolithin M3 per 1 cm 2 of the application site and per application, for example, 1 mg or more, 2 mg or more, or 5 mg or more The amount may be 500 mg or less, 100 mg or less, or 10 mg or less, or a consistent combination thereof.
  • the total amount of Urolithin M3 is, for example, 1 mg or more and 500 mg or less, 1 mg or more and 100 mg or less, 1 mg or more and 10 mg or less, 2 mg or more and 500 mg or less, and 2 mg or more per 1 cm 2 of one application site and per application.
  • the amount may be 100 mg or less, 2 mg or more and 10 mg or less, 5 mg or more and 500 mg or less, 5 mg or more and 100 mg or less, or 5 mg or more and 10 mg or less.
  • the cosmetic product may be applied once a day or multiple times a day. It may also be applied once every few days or weeks.
  • Example 1 Increase in SIRT3 in HaCaT cells (preparation of cells into which the SIRT3 gene promoter has been introduced)
  • genomic DNA derived from human epidermal keratinocytes HaCaT cells
  • the sequences of the primers used are shown in Table 1.
  • Primer sequences are 5' to 3' oriented from left to right.
  • SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3 have recognition sequences for restriction enzymes AseI and NheI added to their ends, respectively, based on the reported nucleotide sequence information of the hSIRT3 promoter.
  • the DNA polymerase used was KOD FX (Toyobo Co., Ltd.), and the PCR reaction conditions were 40 cycles of 94°C for 2 minutes, 98°C for 10 seconds, and 68°C for 1 minute.
  • the SIRT3 promoter fragment obtained by PCR was TA cloned into pGEM-T Easy Vector (Promega). Subsequently, it was confirmed by sequencing that the base sequence of the SIRT3 promoter fragment had been incorporated into the pGEM-T Easy Vector. Thereafter, the SIRT3 promoter fragment incorporated into pGEM-T Easy vector was excised by digestion with restriction enzymes AseI and NheI to obtain a fragment. The obtained fragment was inserted into the EGFP-C3 (manufactured by Takara Bio Inc.) vector at a site where the CMV promoter was removed by digestion with restriction enzymes AseI and NheI to obtain vector pSIRT3p-EGFP.
  • HaCaT cells human epidermal keratinocytes; obtained from RIKEN BioResource Center, cell number RCB1872
  • the cells were seeded in DMEM medium supplemented with %FBS and cultured at 37°C in the presence of 5% CO2 .
  • dilute pSIRT3p-EGFP 15 ⁇ g
  • Hilymax Hilymax (Dojindo Laboratories, Inc.)
  • the entire amount was added to HaCaT cells and cultured for 48 hours to perform transfection.
  • Drug selection was performed based on pSIRT3p-EGFP having resistance to drug G418. That is, drug G418 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added to the transfected HaCaT cells at a final concentration of 800 ⁇ g/mL, and cultured at 37° C. in the presence of 5% CO 2 . Every 3 days, the medium was replaced with fresh DMEM containing 10% FBS, and the drug G418 was added to a final concentration of 800 ⁇ g/mL. As a result, HaCaT (SIRT3p-EGFP) cells in which pSIRT3p-EGFP was introduced into HaCaT cells were obtained.
  • drug G418 Wired Chemical Industries, Ltd.
  • Urolithin M3 was synthesized by the method described in Asian Journal of Chemistry, Vol. 29, No. 8, 1803-1805 (2017).
  • HaCaT (SIRT3p-EGFP) cells were seeded in DMEM medium supplemented with 10% FBS at a cell concentration of 0.6 x 10 5 cells/well in a 96-well plate at 37°C in the presence of 5% CO 2 . It was cultured in The next day, add kaempferol (Fuji Film Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), the obtained urolithin M3, or ellagic acid (Fuji Film Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) dissolved in DMSO to each well at a final concentration of 10 ⁇ M.
  • test results are shown in Figure 1.
  • urolithin M3 was shown to enhance the SIRT3 promoter and increase SIRT3.

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Abstract

本開示の課題は、少なくとも、SIRT3遺伝子の発現を増強する技術の提供であり、該課題を、ウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3遺伝子発現増強用組成物で解決する。

Description

ＳＩＲＴ３遺伝子発現増強用組成物
　本開示は、SIRT3遺伝子発現増強用組成物に関する。
　皮膚老化の原因として、加齢による生理的な老化や紫外線照射による光老化が知られている。また、加齢や紫外線照射によって、活性酸素が発生し、DNAやタンパク質、細胞が損傷し、細胞死が引き起こされ、シミ等の色素沈着や、シワの形成、たるみの発生等の皮膚老化が生じることが知られている（非特許文献１、２）。光老化を抑制する効果を示す成分として、ウロリチンＡが知られている（特許文献１）。さらに、ウロリチンＡは、メラニンの産生抑制効果を示し、美白効果を示すことが知られている（特許文献２）。
　また、ミトコンドリア機能不全及び酸化ストレスは、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ALS）等の神経変性疾患と因果関係があることが知られており、ウロリチンＡ等のウロリチン類は、ミトコンドリアの機能を向上させる効果を有することから、神経変性疾患の治療又は予防に用いられ、神経変性疾患に伴う認知障害の治療又は予防に用いられ得ることが知られている（特許文献３）。
　また、騒音性難聴（NIHL）の病因の一つとして、ミトコンドリアにおける活性酸素の蓄積により引き起こされる有毛細胞傷害が知られている。さらに、マウスにおいて、サーチュイン遺伝子の一つであるSIRT3遺伝子発現を阻害すると、活性酸素分解酵素SOD2の脱アセチル化が抑制されることでSOD2の酵素活性が低下し、ミトコンドリアの酸化ストレスを引き起こし、ひいては有毛細胞において酸化的損傷を引き起こすことが示されている。したがって、SIRT3タンパク質は、活性酸素の発生を抑制する効果を有し、NIHLによる有毛細胞傷害の改善し得るため、騒音性難聴の治療や改善に有用であることが知られている（非特許文献３）。
　また、加齢や認知症に伴う認知機能の低下、神経機能の低下、神経細胞の消失の多くには、酸化ストレスが関与していることが知られており、葉酸、ビタミンB12、ビタミンE、S-アデノシルメチオニン、アセチル-L-カルニチン、N-アセチルシステイン等の抗酸化物質を含む製剤の摂取により、ヒトの脳における酸化ストレスが軽減し、軽度認知障害やアルツハイマー病の初期段階において認知能力の低下を遅らせたり、改善したりすることが知られている（非特許文献４）。
　このように、SIRT3遺伝子発現の増強により酸化ストレスが抑制、軽減等されることが知られており、酸化ストレスの抑制、軽減等により、皮膚老化、美白、難聴の予防や改善、認知機能の改善等の種々の効果が得られることが知られている。しかし、ウロリチンＭ３がSIRT3遺伝子の発現を増強することは知られていない。
特開２０１７－００７９５１号公報 特開２０１７－０１９７２５号公報 特開２０１８－０４３９９４号公報
Aging Research Reviews, 31, 36-54 (2016) Biomedicine & Pharmacotherapy, 134, 111161 (2021) Frontiers in Cell and Developmental Biology, 9, Article 766512 (2021) Free Radical Biology and Medicine, 174, 281-304 (2021)
　本開示の課題は、少なくとも、SIRT3遺伝子の発現を増強する技術の提供である。
〔１〕ウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3遺伝子発現増強用組成物。
〔２〕SIRT3の増加のための、〔１〕に記載の組成物。
〔３〕抗酸化のための、〔１〕又は〔２〕に記載の組成物。
〔４〕皮膚老化の予防若しくは改善、又は美白のための、〔１〕～〔３〕のいずれかに記載の組成物。
〔５〕難聴の予防若しくは改善、又は認知機能の改善のための、〔１〕～〔３〕のいずれかに記載の組成物。
〔６〕飲食品である、〔１〕～〔５〕のいずれかに記載の組成物。
〔７〕医薬品である、〔１〕～〔５〕のいずれかに記載の組成物。
〔８〕化粧品である、〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の組成物。
　本開示は、少なくとも、SIRT3遺伝子の発現を増強する技術を提供できるという効果を奏しうる。
本開示における一態様に係る実施例１の結果を示すグラフ。
　各実施形態における各構成及びそれらの組み合わせ等は、一例であって、本開示の主旨から逸脱しない範囲内で、適宜、構成の付加、省略、置換、及びその他の変更が可能である。本開示は、実施形態によって限定されることはなく、特許請求の範囲によってのみ限定される。また、本明細書に開示された各々の態様は、本明細書に開示された他のいかなる特徴とも組み合わせることができる。
　本開示の一態様は、下記の構造式で示されるウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3遺伝子発現増強用組成物である。
　ウロリチンＭ３を得る方法は特段限定されず、市販されているものを用いてもよく、化学合成により合成して取得してもよく、微生物に生成させて取得してもよい。
　市販されているウロリチンＭ３としては、Toronto Research Chemicals社製のもの等が挙げられる。化学合成により合成する場合は、例えば、Asian Journal of Chemistry, Vol.29, No.8, 1803-1805 (2017)に記載の方法を用いて、メチル2-ブロモバニリン酸（2-ブロモ-5-ヒドロキシ-4-メトキシ安息香酸ともいう）とレゾルシノールにより合成することができる。
　本態様に係るSIRT3遺伝子発現増強用組成物（本明細書では、「本態様に係る組成物」と記載することがある。）は、ウロリチンＭ３を単独で含むものであってもよいし、SIRT3遺伝子の発現を増強できる限り、他の成分を含んでもよい。本態様に係る組成物が当該他の成分を含む場合には、本態様に係る組成物は、ウロリチンＭ３と他の成分との混合物であってもよく、それらの成分が均一でも不均一でもよい。
　本態様におけるSIRT3遺伝子は、サーチュイン３遺伝子である。本態様におけるSIRT3遺伝子は、SIRT3タンパク質を生産する。
　本態様に係る組成物は、摂取又は投与するものであってもよく、外用であってもよい。
　本態様に係る組成物を摂取する、本態様に係る組成物が投与される対象、又は本態様に係る組成物を外用として適用する対象としては、哺乳動物が挙げられる。哺乳動物としては、ヒト、ヒト以外の哺乳動物が挙げられる。ヒト以外の哺乳動物としては、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、サル、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター、モルモット等が例示される。
　本態様に係る組成物の形態は特に限定されるものではない。本態様に係る組成物が摂取又は投与するためのものである場合は、本態様に係る組成物の形態は、例えば、粉末状、顆粒状、ペースト状、ペレット状、カプセル剤（ハードカプセル、ソフトカプセル）、錠剤等が挙げられる。本態様に係る組成物が外用のものである場合は、本態様に係る組成物の形態は、例えば、ペースト状等が挙げられる。本態様に係る組成物は、水、DMSO等の有機溶媒を溶媒とする溶液や分散液等であってもよく、乳化組成物であってもよい。
　本態様に係る組成物全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、例えば、０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、または０．０１重量％以上であってもよく、２０重量％以下、１０重量％以下、または１重量％以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　本態様に係る組成物全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、具体的には、例えば、０．０００１重量％以上２０重量％以下、０．０００１重量％以上１０重量％以下、０．０００１重量％以上１重量％以下、０．００１重量％以上２０重量％以下、０．００１重量％以上１０重量％以下、０．００１重量％以上１重量％以下、０．０１重量％以上２０重量％以下、０．０１重量％以上１０重量％以下、または０．０１重量％以上１重量％以下であってもよい。
　本態様に係る組成物の有効摂取量又は有効投与量は、対象の齢、体重、疾患、障害、症状、症候（本明細書では、「疾患、障害、症状、症候」をまとめて「疾患等」と記載することがある。）、摂取又は投与の経路、摂取又は投与スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを対象に摂取させる又は投与することにより、該対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する限り特に制限されない。
　ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、具体的には、例えば、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、本態様に係る組成物は、１日あたり１回の摂取又は投与でもよいし、１日に複数回に分けた摂取又は投与でもよい。また、数日又は数週間に１回の摂取又は投与であってもよい。
　本態様に係る組成物が例えば外用である場合の有効適用量は、対象の齢、体重、皮膚老化の程度、美白の必要性の程度等、適用経路、適用スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを対象に外用として適用することにより、該対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する限り特に制限されず、ウロリチンＭ３の総量として、適用部位の１ｃｍ２あたり、かつ、１回当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、具体的には、例えば、適用部位一箇所の１ｃｍ２あたり、かつ、１回当たり、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、前記組成物は、１日あたり１回の適用でもよいし、１日に複数回の適用でもよい。また、数日又は数週間に１回の適用であってもよい。
　本態様に係る組成物はウロリチンＭ３を含み、当該組成物を摂取した、又は当該組成物が投与された対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する。そのため、本態様に係る組成物は、対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強することに起因する二次的及びそれに続く事象も生じさせる。本態様に係る組成物は、対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強することにより生じる二次的及びそれに続く事象のために用いることもできる。
　SIRT3遺伝子の発現が増強することにより、SIRT3タンパク質（本明細書では、「SIRT3」と記載することがある。）が増加する。本態様に係る組成物は、SIRT3の増加のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3の増加のための組成物を提供することもできる。
　また、SIRT3が増加することにより、活性酸素分解酵素SOD2が脱アセチル化して活性化し、活性酸素の分解が促進することが知られている。
　すなわち、本態様に係る組成物は、活性酸素分解酵素SOD2の脱アセチル化のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、活性酸素分解酵素SOD2の脱アセチル化のための組成物を提供することもできる。
　また、本態様に係る組成物は、活性酸素分解酵素SOD2の活性化のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、活性酸素分解酵素SOD2の活性化のための組成物を提供することもできる。
　さらに、本態様に係る組成物は、活性酸素の分解の促進のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、活性酸素の分解の促進のための組成物を提供することもできる。
　さらにまた、本態様に係る組成物は、抗酸化のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、抗酸化のための組成物を提供することもできる。
　抗酸化とは、生体内又は細胞内における活性酸素（ROS）の発生を抑制したり、生体内又は細胞内において過剰に発生した活性酸素（ROS）を消去したりすることにより、酸化ストレスの増加若しくは発生を抑制、軽減又は緩和することをいう。抗酸化により、生体内又は細胞内のタンパク質、脂質、核酸等の活性酸素による傷害を有効に防止することができる。
　また、本態様に係る組成物は、皮膚老化の予防若しくは改善、又は美白のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、皮膚老化の予防若しくは改善、又は美白のための組成物を提供することもできる。
　紫外線照射による皮膚老化では、光による皮膚の酸化ストレスの増加によって、シワの形成が促進され、皮膚の弾力が失われ、たるみを生じたりハリがなくなったりすることが知られている。また、加齢による生理的な老化も、酸化ストレスによって促進されることが知られている。そのため、本態様に係る組成物が抗酸化作用を有することで、これらの皮膚老化の諸症状を改善又は予防することができる。
　さらに、紫外線照射によって、活性酸素が発生し、DNAやタンパク質、細胞が損傷し、細胞死が引き起こされ、シミ、ソバカス等の色素沈着が生じることが知られている。そのため、本態様に係る組成物が抗酸化作用を有することで、美白効果を得ることができる。
　本態様において、「皮膚老化」とは、加齢に伴って進行する生理的な老化と、紫外線（日光等）照射に伴う光老化の両方を包含する。本態様に係る組成物は、例えば、シワの形成、たるみ若しくはくすみの発生の予防若しくは改善、又は皮膚のハリ若しくは弾力性の改善のために使用することができる。
　本態様において、「美白」とは、皮膚が明色化することを表し、日焼けなどで色味が濃くなった皮膚のトーンを均一化し、肌の透明感が得られること、シミやソバカスが薄くなる、若しくは目立たなくなること、又はシミやソバカスの発生が抑えられることを包含する。
　また、酸化ストレスの増加によって、難聴が引き起こされることや、SIRT3は有毛細胞傷害を改善することが知られている。すなわち、本態様に係る組成物は、SIRT3遺伝子の発現増強によって予防又は改善され得る疾患等の予防又は改善に用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3遺伝子の発現増強によって予防又は改善され得る疾患等の予防又は改善のための組成物を提供することもできる。「改善」は、「治療」を含む。当該疾患等としては、難聴及び難聴に関連する疾患等が例示できる。すなわち、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、難聴の予防若しくは改善のための組成物を提供することもできる。
　本態様において、「難聴」とは、聴覚が低下した病態であり、騒音性難聴、脳梗塞による難聴、感染による難聴、老人性難聴、薬の副作用による難聴、突発性難聴等を含む。難聴は、騒音性難聴であることが好ましい。
　難聴は、当技術分野で通常用いられる検査方法、例えば標準純音聴力検査などによって適宜測定することができる。
　また、酸化ストレスの増加によって、認知機能が低下することが知られている。すなわち、本態様に係る組成物は、認知機能の改善のために用いることもでき、また、本開示は、ウロリチンＭ３を有効成分とする、認知機能の改善のための組成物を提供することもできる。また、本態様に係る組成物は、認知機能に関連する疾患等の予防又は改善のための組成物を提供することもできる。
　本態様において、「認知機能」とは、理解、判断、記憶、注意、計算、思考、学習、及び言語などを含む脳の高次機能のことをいい、例えば、認知柔軟性、実行機能、注意制御機能、処理速度、反応時間、認知機能速度等が例示できる。認知機能を改善することで、例えば、注意・情報処理・作業記憶などの機能が維持され又は向上し、作業又は学習の効率を向上させることができる。
　認知機能は、当技術分野で通常用いられる検査方法、例えばAdvanced Trail Making Test(ATMT)などによって適宜測定することができる（要すれば、Mizuno K及びWatanabe Y（2008）、Fatigue Science for Human Health、pp.47～54を参照）。
　認知機能に関連する疾患等としては、例えば、アルツハイマー型認知症等の認知症、軽度認知機能障害、うつ病などの精神疾患、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ALS）、又は甲状腺機能低下症等における認知機能障害等が例示できる。
　本態様に係る組成物の好ましい態様としては、飲食品（サプリメントを含む。）、医薬品、飼料、化粧品が例示できる。すなわち、本開示により提供することができる好ましい態様として、ウロリチンＭ３を有効成分とする飲食品、ウロリチンＭ３を有効成分とする医薬品、ウロリチンＭ３を有効成分とする飼料、及びウロリチンＭ３を有効成分とする化粧品が例示できる。
　ウロリチンＭ３を飲食品の素材として用いる場合、一般の飲食品の他、特定保健用食品、栄養補助食品、機能性食品、病者用食品、食品添加物等（これらには飲料も含まれる。）として使用できる。飲食品の形態としては、ウロリチンＭ３を含有する植物自体や動物自体ではない形態でもよく、例えば、適当な助剤を添加した後、慣用の手段を用いて、食用に適した形態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル、ペーストなどに成形して食用に供してもよく、また種々の食品、例えば、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品、かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品、パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品に添加して使用したり、水、果汁、牛乳、清涼飲料などの飲料に添加して使用してもよい。
　前記飲食品は、水、タンパク質、糖質、脂質、ビタミン類、ミネラル類、有機酸、有機塩基、果汁、フレーバー類等を主成分とすることができる。タンパク質としては、例えば、全脂粉乳、脱脂粉乳、部分脱脂粉乳、カゼイン、大豆タンパク質、鶏卵タンパク質、肉タンパク質等の動植物性タンパク質、及びこれらの加水分解物、バターなどが挙げられる。糖質としては、糖類、加工澱粉（デキストリンのほか、可溶性澱粉、ブリティッシュスターチ、酸化澱粉、澱粉エステル、澱粉エーテル等）、食物繊維などが挙げられる。脂質としては、例えば、ラード、サフラワー油、コーン油、ナタネ油、ヤシ油、これらの分別油、水素添加油、エステル交換油等の植物性油脂などが挙げられる。ビタミン類としては、例えば、ビタミンＡ、カロチン類、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ群、ビタミンＥ、ビタミンＫ群、ビタミンＰ、ビタミンＱ、ナイアシン、ニコチン酸、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、コリン、葉酸などが挙げられ、ミネラル類としては、例えば、カルシウム、カリウム、マグネシウム、ナトリウム、銅、鉄、マンガン、亜鉛、セレン、乳清ミネラルなどが挙げられる。有機酸としては、例えば、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、酒石酸などが挙げられる。これらの成分は、２種以上を組み合わせて使用してもよく、合成品及び／又はこれらを多く含む飲食品を用いてもよい。
　前記飲食品は、常法に従って製造することができる。また、ウロリチンＭ３への配合量、配合方法、配合時期は適宜選択することができる。さらに、必要に応じて、瓶、袋、缶、箱、パック等の適宜の容器に封入することができる。
　前記飲食品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、例えば、０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、または０．０１重量％以上であってもよく、２０重量％以下、１０重量％以下、または１重量％以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　本態様に係る飲食品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、具体的には、例えば、０．０００１重量％以上２０重量％以下、０．０００１重量％以上１０重量％以下、０．０００１重量％以上１重量％以下、０．００１重量％以上２０重量％以下、０．００１重量％以上１０重量％以下、０．００１重量％以上１重量％以下、０．０１重量％以上２０重量％以下、０．０１重量％以上１０重量％以下、または０．０１重量％以上１重量％以下であってもよい。
　前記飲食品の有効摂取量は、対象の齢、体重、疾患等、その程度、摂取経路、摂取スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを対象が摂取することにより、該対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する限り特に制限されず、ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、具体的には、例えば、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、前記飲食品は、１日あたり１回の摂取でもよいし、１日に複数回に分けた摂取でもよい。また、数日又は数週間に１回の摂取であってもよい。
　ウロリチンＭ３を医薬品の素材として用いる場合、医薬品としての適用方法は、経口投与又は非経口投与のいずれも採用することができる。投与に際しては、有効成分を経口投与、直腸内投与、注射などの投与方法に適した固体又は液体の医薬用無毒性担体と混合して、慣用の医薬製剤の形態で投与することができる。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などの固形剤、溶液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤、凍結乾燥製剤などが挙げられ、これらの製剤は製剤上の常套手段により調製することができる。前記の医薬用無毒性担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングルコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水などが挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤などの慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
　前記医薬品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、例えば、０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、または０．０１重量％以上であってもよく、２０重量％以下、１０重量％以下、または１重量％以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　本態様に係る医薬品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、具体的には、例えば、０．０００１重量％以上２０重量％以下、０．０００１重量％以上１０重量％以下、０．０００１重量％以上１重量％以下、０．００１重量％以上２０重量％以下、０．００１重量％以上１０重量％以下、０．００１重量％以上１重量％以下、０．０１重量％以上２０重量％以下、０．０１重量％以上１０重量％以下、または０．０１重量％以上１重量％以下であってもよい。
　前記医薬品の有効投与量は、対象の齢、体重、疾患等、その程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを対象に投与することにより、該対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する限り特に制限されず、ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、具体的には、例えば、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、前記医薬品は、１日あたり１回の投与でもよいし、１日に複数回に分けた投与でもよい。また、数日又は数週間に１回の投与であってもよい。
　対象がヒト以外の哺乳動物である場合、ウロリチンＭ３を飼料の素材として用いることができる。このとき、飼料原料とウロリチンＭ３とを、哺乳動物の種類、発育ステージ、地域などの飼育環境に応じて適宜配合してもよい。
　飼料原料としては、例えば、穀物類または加工穀物類（とうもろこし、マイロ、大麦等）、糟糠類（ふすま、米糠、コーングルテンフィード等）、植物性油粕類（大豆油粕、ごま油粕、綿実油粕等）、動物性原料（脱脂粉乳、魚粉、肉骨粉等）、ミネラル類（炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、食塩、無水ケイ酸等）、ビタミン類、アミノ酸類、ビール酵母などの酵母類、無機物質の微粉末（結晶性セルロース、タルク、シリカ等）などが挙げられる。
　前記飼料は、前記の飼料原料に、配合飼料に通常使用される賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料等の飼料用添加剤のほか、所望によりその他の成分（抗生物質や殺菌剤、駆虫剤、防腐剤等）を配合してもよい。
　前記飼料の形態は特に限定されるものではなく、例えば、粉末状、顆粒状、ペースト状、ペレット状、カプセル剤（ハードカプセル、ソフトカプセル）、錠剤等が挙げられ、愛玩動物用のペットフードや、実験動物用の飼料として用いられてもよい。
　前記飼料全量に対するウロリチンＭ３の総量として、例えば、０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、または０．０１重量％以上であってもよく、２０重量％以下、１０重量％以下、または１重量％以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　本態様に係る飼料全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、具体的には、例えば、０．０００１重量％以上２０重量％以下、０．０００１重量％以上１０重量％以下、０．０００１重量％以上１重量％以下、０．００１重量％以上２０重量％以下、０．００１重量％以上１０重量％以下、０．００１重量％以上１重量％以下、０．０１重量％以上２０重量％以下、０．０１重量％以上１０重量％以下、または０．１重量％以上１重量％以下であってもよい。
　前記飼料の有効投与量は、対象の齢、体重、疾患等、その程度、投与経路、投与スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを哺乳動物に投与することにより、該哺乳動物においてウロリチンＭ３の発現が増強する限り特に制限されず、ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、１日当たり、具体的には、例えば、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、前記飼料は、１日あたり１回の投与でもよいし、１日に複数回に分けた投与でもよい。また、数日又は数週間に１回の投与であってもよい。
　ウロリチンＭ３を有効成分とする、皮膚老化の予防若しくは改善、又は美白のための組成物は、化粧品であることが好ましい。
　ウロリチンＭ３を化粧品の素材として用いる場合、化粧品の形態としては、水溶液、ローション、スプレー液、懸濁液および乳化液などの液状；粉末、顆粒およびブロック状などの固体状；クリームおよびペーストなどの半固体状；ゲル状等の各種所望の形態が挙げられる。
　前記化粧品としては、例えば、洗顔化粧品、スキン化粧品（例えば、化粧水、乳液、クリーム等）、日焼け止め化粧品、メイクアップ化粧品（例えば、ファンデーション、口紅等）、洗浄化粧品（例えば、洗顔フォーム、固形石鹸、ボディシャンプー、シャンプー、コンディショナー、リンス等）、頭皮用化粧品（例えば、ヘアトニック、へアリキッド、育毛剤、養毛剤等）等が挙げられる。
　また、前記化粧品は、通常の化粧品に用いられる成分や製剤上必要な成分を適宜加えて製造することができる。このような成分としては、例えば、水溶性高分子、植物成分、保湿剤、ロウ類、炭化水素類、精油類、油脂成分（エモリエント成分）、無機塩類、色素類、香料類、微粉体、殺菌剤、防腐剤等が挙げられる。
　前記化粧品は、常法に従って製造することができる。また、前記態様に係る乳化組成物の化粧品への配合量、配合方法、配合時期は適宜選択することができる。すなわち、前記態様に係る製造方法によって乳化組成物を取得した後、該乳化組成物と化粧品の原料とを配合して化粧品とする工程を経て、前記化粧品を製造してよい。前記化粧品は、必要に応じて、瓶、袋、缶、箱、パック等の適宜の容器に封入することができる。
　前記化粧品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、例えば、０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、または０．０１重量％以上であってもよく、２０重量％以下、１０重量％以下、または１重量％以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　本態様に係る化粧品全量に対するウロリチンＭ３の含有量は、具体的には、例えば、０．０００１重量％以上２０重量％以下、０．０００１重量％以上１０重量％以下、０．０００１重量％以上１重量％以下、０．００１重量％以上２０重量％以下、０．００１重量％以上１０重量％以下、０．００１重量％以上１重量％以下、０．０１重量％以上２０重量％以下、０．０１重量％以上１０重量％以下、または０．０１重量％以上１重量％以下であってもよい。
　前記化粧品の有効適用量は、対象の齢、体重、皮膚老化の程度、美白の必要性の程度等、適用経路、適用スケジュール、製剤形態などにより適宜設定されるが、それを対象に外用として適用することにより、該対象においてSIRT3遺伝子の発現が増強する限り特に制限されず、ウロリチンＭ３の総量として、適用部位の１ｃｍ２あたり、かつ、１回当たり、例えば、１ｍｇ以上、２ｍｇ以上、または５ｍｇ以上であってもよく、５００ｍｇ以下、１００ｍｇ以下、または１０ｍｇ以下であってもよく、それらの矛盾しない組み合わせであってもよい。
　ウロリチンＭ３の総量として、具体的には、例えば、適用部位一箇所の１ｃｍ２あたり、かつ、１回当たり、１ｍｇ以上５００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１００ｍｇ以下、１ｍｇ以上１０ｍｇ以下、２ｍｇ以上５００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１００ｍｇ以下、２ｍｇ以上１０ｍｇ以下、５ｍｇ以上５００ｍｇ以下、５ｍｇ以上１００ｍｇ以下、または５ｍｇ以上１０ｍｇ以下であってもよい。
　また、前記化粧品は、１日あたり１回の適用でもよいし、１日に複数回の適用でもよい。また、数日又は数週間に１回の適用であってもよい。
　以下に実施例を記載するが、いずれの実施例も、限定的な意味として解釈される実施例ではない。
〔実施例１〕HaCaT細胞のSIRT3の増加
（SIRT3遺伝子のプロモーターを導入した細胞の調製）
　ヒト表皮角化細胞HaCaT細胞由来のゲノムDNAを鋳型として、配列番号１に示されるヒトSIRT3プロモーター領域の塩基配列をPCRで増幅した。なお、使用したプライマーの配列は表１に記した。プライマー配列は、左から右へ5’から3’の向きである。配列番号２及び配列番号３はそれぞれ、報告されているhSIRT3プロモーターの塩基配列情報をもとにして、末端に制限酵素AseI及びNheIの認識配列を付加したものである。使用したDNAポリメラーゼは、KOD FX（東洋紡株式会社）であり、PCRの反応条件は、94℃2分間、98℃10秒間、及び68℃1分間を1サイクルとする40サイクルの反応条件である。
　PCRによって得られたSIRT3プロモーター断片をpGEM-T Easy Vector（プロメガ社）へTAクローニングした。その後、シーケンシングにより、pGEM-T Easy VectorにSIRT3プロモーター断片の塩基配列が組み込まれていることを確認した。その後、pGEM-T Easy vectorに組み込まれたSIRT3プロモーター断片を制限酵素AseI及びNheI消化によって切り出し、断片を得た。得られた断片を、EGFP-C3（タカラバイオ株式会社製）ベクターのCMVプロモーターを制限酵素AseI及びNheI消化で除いた部位に挿入することで、ベクターpSIRT3p-EGFPを得た。
　トランスフェクションを行うために、5mLディッシュに、HaCaT細胞（ヒト表皮角化細胞；理化学研究所バイオリソースセンターより入手、細胞番号RCB1872）を６．０×１０５cells/dishの細胞濃度になるように10%FBS添加DMEM培地に播種し、37℃、5%ＣＯ２存在下で培養した。翌日、1.5mLチューブ中で、pSIRT3p-EGFP（15μg）を容量が300μLになるように10%FBS含有DMEM培地で希釈した後、そこに70μLのHilymax（株式会社　同仁化学研究所）を加えて室温で20分間インキュベートした。その後、全量をHaCaT細胞に添加し、48時間培養することで、トランスフェクションを行った。
　pSIRT3p-EGFPが薬剤G418耐性を有することに基づき、薬剤選択を行った。すなわち、トランスフェクションしたHaCaT細胞に、薬剤G418（和光純薬工業株式会社）を最終濃度が800μg/mLとなるように添加し、37℃、5%ＣＯ２存在下で培養した。３日毎に、新しい10%FBS含有DMEM培地に置換し、薬剤G418を最終濃度が800μg/mLとなるように添加した。これにより、HaCaT細胞にpSIRT3p-EGFPが導入されたHaCaT（SIRT3p-EGFP）細胞が得られた。
（HaCaT細胞のSIRT3の増加）
　HaCaT（SIRT3p-EGFP）細胞を用いて、各被験物質について、SIRT3遺伝子のプロモーターの増強効果を調べた。
　Asian Journal of Chemistry, Vol.29, No.8, 1803-1805 (2017)に記載の方法により、ウロリチンＭ３を合成した。
　また、96ウェルプレートに、HaCaT（SIRT3p-EGFP）細胞を０．６×１０５cells/wellの細胞濃度になるように10%FBS添加DMEM培地に播種し、37℃、5%ＣＯ２存在下で培養した。翌日、各ウェルに、それぞれDMSOに溶解した、ケンペロール（富士フイルム和光純薬株式会社）、得られたウロリチンＭ３、又はエラグ酸（富士フイルム和光純薬株式会社）を、最終濃度10μMとなるようにそれぞれ添加した（n=3）。また、ネガティブコントロールとして同量のDMSOを添加した。なお、ケンペロールは、ポジティブコントロールとして用いた。各被験物質を添加してから２日間、37℃、5%ＣＯ２存在下で培養した後、培養液に、細胞固定液（4%パラホルムアルデヒド、富士フイルム和光純薬株式会社）100μLを各ウェルに添加し、室温で15分間静置した。その後、各ウェルをアスピレートし、PBSで2回洗浄後、核染色溶液（Hoechst 33342、富士フイルム和光純薬株式会社）100μLを各ウェルに添加し、20分間、室温で静置した。その後、再び各ウェルをアスピレートし、PBSで2回洗浄し、さらにPBS 100μLを添加した。その後、IN Cell Analyzer 2200（GE Healthcare, Cytiva, Tokyo, Japan）を用いて各ウェルの蛍光強度を測定した。各被験物質及びポジティブコントロールのSIRT3量は、蛍光強度の値をネガティブコントロール（DMSO）におけるEGFPの蛍光強度の値で除することにより算出し、n=3におけるSIRT3量の平均値を算出した。
　試験の結果を図１に示す。図１の通り、ウロリチンM3は、SIRT3プロモーターを増強し、SIRT3を増加させることが示された。

Claims (8)

  1. 　ウロリチンＭ３を有効成分とする、SIRT3遺伝子発現増強用組成物。
  2. 　SIRT3の増加のための、請求項１に記載の組成物。
  3. 　抗酸化のための、請求項１又は２に記載の組成物。
  4. 　皮膚老化の予防若しくは改善、又は美白のための、請求項１又は２に記載の組成物。
  5. 　難聴の予防若しくは改善、又は認知機能の改善のための、請求項１又は２に記載の組成物。
  6. 　飲食品である、請求項１又は２に記載の組成物。
  7. 　医薬品である、請求項１又は２に記載の組成物。
  8. 　化粧品である、請求項１又は２に記載の組成物。
     

     
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014501764A (ja) * 2010-12-23 2014-01-23 アマゼンティス エスアー ミトコンドリア機能向上と、神経変性疾患および認知障害治療とのための組成物および方法
JP2017007951A (ja) * 2015-06-17 2017-01-12 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチンを含有する光老化抑制剤
JP2017019725A (ja) * 2015-07-07 2017-01-26 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチン類を含有するメラニン産生抑制剤
JP2017031108A (ja) * 2015-08-04 2017-02-09 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチン類を含有する、抗しわ剤、コラーゲン産生促進剤、ｍｍｐ−１産生抑制剤、及びエラスターゼ活性阻害剤
WO2022114152A1 (ja) * 2020-11-26 2022-06-02 株式会社ダイセル サーチュイン６活性化剤
WO2022162471A1 (en) * 2021-01-27 2022-08-04 Vandria Sa Urolithin derivatives and methods of use thereof

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014501764A (ja) * 2010-12-23 2014-01-23 アマゼンティス エスアー ミトコンドリア機能向上と、神経変性疾患および認知障害治療とのための組成物および方法
JP2017007951A (ja) * 2015-06-17 2017-01-12 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチンを含有する光老化抑制剤
JP2017019725A (ja) * 2015-07-07 2017-01-26 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチン類を含有するメラニン産生抑制剤
JP2017031108A (ja) * 2015-08-04 2017-02-09 公立大学法人岡山県立大学 ウロリチン類を含有する、抗しわ剤、コラーゲン産生促進剤、ｍｍｐ−１産生抑制剤、及びエラスターゼ活性阻害剤
WO2022114152A1 (ja) * 2020-11-26 2022-06-02 株式会社ダイセル サーチュイン６活性化剤
WO2022162471A1 (en) * 2021-01-27 2022-08-04 Vandria Sa Urolithin derivatives and methods of use thereof

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ISHIMOTO HIDEKAZU, TAI AKIHIRO, YOSHIMURA MORIO, AMAKURA YOSHIAKI, YOSHIDA TAKASHI, HATANO TSUTOMU, ITO HIDEYUKI: "Antioxidative Properties of Functional Polyphenols and Their Metabolites Assessed by an ORAC Assay", BIOSCIENCE, BIOTECHNOLOGY, AND BIOCHEMISTRY, JAPAN SOCIETY FOR BIOSCIENCE, BIOTECHNOLOGY, AND AGROCHEMISTRY, JP, vol. 76, no. 2, 23 February 2012 (2012-02-23), JP , pages 395 - 399, XP093111705, ISSN: 0916-8451, DOI: 10.1271/bbb.110717 *
LIU WENJIE, YAN FANG, XU ZHONGYI, CHEN QINYI, REN JIE, WANG QIANQIAN, CHEN LI, YING JIAYI, LIU ZIQI, ZHAO JUEMIN, QIU JU, ZHANG CH: "Urolithin A protects human dermal fibroblasts from UVA-induced photoaging through NRF2 activation and mitophagy", JOURNAL OF PHOTOCHEMISTRY AND PHOTOBIOLOGY B: BIOLOGY, ELSEVIER SCIENCE S.A., BASEL., CH, vol. 232, 1 July 2022 (2022-07-01), CH , pages 112462, XP093111707, ISSN: 1011-1344, DOI: 10.1016/j.jphotobiol.2022.112462 *
WU DAN, JI HAIZHE, DU WENJUAN, REN LINA, QIAN GENG: "Mitophagy alleviates ischemia/reperfusion-induced microvascular damage through improving mitochondrial quality control", BIOENGINEERED, LANDES BIOSCIENCE, US, vol. 13, no. 2, 1 February 2022 (2022-02-01), US , pages 3596 - 3607, XP093111710, ISSN: 2165-5979, DOI: 10.1080/21655979.2022.2027065 *

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