WO2023190083A1

WO2023190083A1 - 凝固時間延長要因の推定方法

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Publication number: WO2023190083A1
Application number: PCT/JP2023/011644
Authority: WO
Inventors: 俊樹川辺; 由紀夫小田
Original assignee: 積水メディカル株式会社
Priority date: 2022-04-01
Filing date: 2023-03-23
Publication date: 2023-10-05

Abstract

凝固時間延長要因の推定方法であって、１）Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を取得すること、２）Ｔｍ（Ｘ）に基づいて、該被検血液検体の凝固時間延長要因を推定すること、を含み、ここで、Ｔｍ（Ｘ）は、検体Ｍの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｔｎ（Ｘ）は、検体Ｎの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｎのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｅｍは、検体Ｍの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、Ｅｎは、検体Ｎの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、該検体Ｓは、凝固時間が延長している被検血液検体であり、該検体Ｎは、正常血液検体であり、該検体Ｍは、該検体Ｓと該検体Ｎとの混合検体であり、Ｘは０より大きく１００以下である、方法。

Description

凝固時間延長要因の推定方法

　本発明は、凝固時間延長要因の推定方法に関する。

　血液凝固検査は、患者の血液検体に所定の試薬を添加して血液凝固時間等を測定することにより、患者の血液凝固能を診断するための検査である。血液凝固時間の典型的な例としては、プロトロンビン時間（ＰＴ）、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）、トロンビン時間などがある。血液凝固能の異常は、凝固時間の延長を引き起こす。凝固時間の延長が生じる原因としては、凝固阻害薬剤の影響、凝固関与成分の減少、先天的な血液凝固因子の欠乏、凝固反応を阻害する自己抗体の後天的な出現などが挙げられる。

　従来、血液凝固検査で凝固時間の延長が見られた場合、一般的には、検体がヘパリンを含有する疑いがない場合には、クロスミキシング試験が行われ、凝固時間延長要因が判定される。クロスミキシング試験では、血液検体と正常検体との混合直後のＡＰＴＴ（即時反応）と３７℃で２時間インキュベーションした後のＡＰＴＴ（遅延反応）が測定され、該即時反応及び遅延反応のパターンに基づいて、ＡＰＴＴの延長要因が凝固因子インヒビター（抗凝固因子）、ループスアンチコアグラント（ＬＡ）、又は血友病等の凝固因子欠乏のうちの何れに起因するかが判定される。しかし、従来のクロスミキシング試験は、上記のとおり非常に手間と時間がかかる。

　特許文献１には、被検血液検体、正常血液検体、及びそれらを混合した混合検体についての第１、第２及び第３凝固時間を取得する工程と、該被検血液検体、正常血液検体、及び混合検体を所定の温度で４５分～４時間インキュベートしたものについての第４、第５及び第６凝固時間を取得する工程と、該第１、第２及び第３凝固時間に基づいて第１定量化指標を取得する工程と、該第４、第５及び第６凝固時間に基づいて第２定量化指標を取得する工程と、該第１定量化指標の値と該第２定量化指標の値との比もしくは差の値、又は該比の値と差の値とを組み合わせた値を取得する工程とを含み、当該値が、被検血液検体が凝固因子インヒビターを含む疑いがあるか否かを示唆する情報である、凝固時間の延長原因に関する情報を取得する方法が記載されている。しかしこの方法は、血液検体を長時間インキュベートすることを必要とする。
　特許文献２には、被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する工程と、該混合血漿の凝固波形の微分に関するパラメータを取得する工程と、該取得したパラメータの値に基づいて、該被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるか、又はループスアンチコアグラント(ＬＡ)もしくは凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあるかを判定する工程と、を含む、血液検体の判定方法が記載されている。

特許第６６９６９６３号公報特許第６８７１６７３号公報

　本発明は、血液検体の凝固時間延長要因を推定するためのより迅速かつ簡便な方法を提供する。

　すなわち、本発明は、以下を提供する。
〔１〕凝固時間延長要因の推定方法であって、
１）Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を取得すること、
２）Ｔｍ（Ｘ）に基づいて、検体Ｓの凝固時間延長要因を推定すること、
を含み、
　ここで、
　Ｔｍ（Ｘ）は、検体Ｍの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、
　Ｔｎ（Ｘ）は、検体Ｎの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｎのＸ％に達する計測点又は時間を表し、
　Ｅｍは、検体Ｍの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、
　Ｅｎは、検体Ｎの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、
　該検体Ｓは、凝固時間が延長している被検血液検体であり、
　該検体Ｎは、正常血液検体であり、
　該検体Ｍは、該検体Ｓと該検体Ｎとの混合検体であり、
　Ｘは０より大きく１００以下である、
方法。
〔２〕前記１）が、前記検体Ｓの凝固反応曲線における凝固反応終了点Ｅｓを検出し、Ｅｓに基づいてＴｓ（Ｘ）を取得することをさらに含み、
　Ｔｓ（Ｘ）は、該検体Ｓの凝固反応曲線がＥｓのＸ％に達する計測点又は時間を表す、
〔１〕記載の方法。
を含む、方法。
〔３〕前記２）が下記の工程：
（i）１つ以上の指標Ｒｊを算出する工程
（ここで、ｊ≧１であり、
　該指標Ｒｊの各々は、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）からなる群より選択される少なくとも１つに基づいて算出され、
　該指標Ｒｊのうち少なくとも１つは、少なくともＴｍ（Ｘ）に基づいて算出される）；
（ii）該指標Ｒｊを閾値Ｔｊと比較する工程；
（iii）該比較の結果に基づいて前記検体Ｓの凝固時間延長要因を推定する工程、
を含み、
　該凝固時間延長要因は、ループスアンチコアグラント陽性、凝固因子欠乏、又は凝固因子インヒビター陽性である、
〔１〕又は〔２〕記載の方法。
〔４〕前記２）が、
　以下のＲ１～Ｒ８：
　Ｒ１：特定のＸにおける、Ｔｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差と、Ｔｓ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差との間の比を反映する指標、
　Ｒ２：特定のＸの範囲におけるＲ１（Ｘ）の変化量を表す指標、
　Ｒ３：特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量と、Ｔｎ（Ｘ）の変化量との比を反映する指標、
　Ｒ４：前記検体Ｓ又は前記検体Ｍについての、特定のＸの範囲におけるＴ（Ｘ）の相対変化率を反映する指標、
　Ｒ５：特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量を反映する指標、
　Ｒ６：前記検体Ｓと前記検体Ｎとの混合比率の異なる前記検体Ｍの間での、Ｔｍ（Ｘ）の差を反映する指標、
　Ｒ７：特定のＸにおけるＴｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の比を反映する指標、
　Ｒ８：特定のＸの範囲におけるＲ７（Ｘ）の変化量を表す指標、
からなる群より選択される少なくとも１つの指標を算出すること、
　該算出した指標を用いて前記検体Ｓの凝固時間延長要因を推定すること、
を含む、〔１〕又は〔２〕記載の方法。
〔５〕前記２）が、以下の指標：
　Ｒ１（Ｘａ）＝［（Ｔｍ（Ｘａ）－Ｔｎ（Ｘａ））／（Ｔｓ（Ｘａ）－Ｔｎ（Ｘａ））］
（ここで、Ｘａ＝５～１００）
を算出すること、
　Ｒ１（Ｘａ）が閾値Ｔ１より高い場合に、前記検体Ｓをループスアンチコアグラント陽性と推定し、それ以外の場合、前記検体Ｓを凝固因子欠乏又は凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、
〔２〕記載の方法。
〔６〕前記２）が、以下の指標：
　Ｒ４ｓ（Ｘｘ，Ｘｙ，Ｘｚ）＝［（Ｔｓ（Ｘｘ）－Ｔｓ（Ｘｙ））／Ｔｓ（Ｘｚ）］
　Ｒ４ｍ（Ｘｘ，Ｘｙ，Ｘｚ）＝［（Ｔｍ（Ｘｘ）－Ｔｍ（Ｘｙ））／Ｔｍ（Ｘｚ）］
（ここで、Ｘｘ＝５～３０、Ｘｙ＝１０～９５、かつＸｚ＝５～９５であるか、又は、Ｘｘ＝４５～７０、Ｘｙ＝１０～４５、かつＸｚ＝５～９５であり、かつ、Ｘｘ≠Ｘｙである）
を算出すること、
　Ｒ４ｓの閾値Ｔ４ｓと、Ｒ４ｍの閾値Ｔ４ｍを設定し、前記検体ＳのＲ４ｓが閾値Ｔ４ｓより低く、かつＲ４ｍが閾値Ｔ４ｍより高いとき、該検体Ｓをループスアンチコアグラント陽性と推定すること、
を含む、
〔２〕記載の方法。
〔７〕ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、
以下の指標：
　Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）＝［Ｒ１（Ｘｂ）－Ｒ１（Ｘｃ）］、
（ここで、Ｘｂ＝５～５５、Ｘｃ＝１０～９５、Ｘｂ≠Ｘｃ）
を算出すること、
　Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より高ければ、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定し、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より低ければ、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定すること、
を含む、〔５〕又は〔６〕記載の方法。
〔８〕前記凝固因子欠乏と推定された検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）＝［Ｔｍ（Ｘｄ）－Ｔｍ（Ｘｅ）］／［Ｔｎ（Ｘｄ）－Ｔｎ（Ｘｅ）］
（ここで、Ｘｄ＝５～９０、Ｘｅ＝１０～９５、Ｘｅ－Ｘｄ≧５）
を算出すること、
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３より低ければ、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、〔７〕記載の方法。
〔９〕前記凝固因子欠乏と推定された検体Ｓが、指標Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｌより低いとき、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、及び
　該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｈより高いとき、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体と推定し、該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３ＬとＴ３Ｈの間にあるとき、該検体Ｓを中間的なインヒビター力価を有する凝固因子インヒビター陽性検体と推定すること、
を含み、
　ここで
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）＝［Ｔｍ（Ｘｄ）－Ｔｍ（Ｘｅ）］／［Ｔｎ（Ｘｄ）－Ｔｎ（Ｘｅ）］（ここで、Ｘｄ＝５～９０、Ｘｅ＝１０～９５、Ｘｅ－Ｘｄ≧５）
　Ｔ３Ｌ＜Ｔ３Ｈ
である、
〔７〕記載の方法。
〔１０〕前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ１（Ｘａ'）＝［（Ｔｍ（Ｘａ'）－Ｔｎ（Ｘａ'））／（Ｔｓ（Ｘａ'）－Ｔｎ（Ｘａ'））］（ここで、Ｘａ'＝５～８０）
を算出すること、
　Ｒ１（Ｘａ'）が閾値Ｔ１'より高い場合、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定すること、
を含む、〔７〕記載の方法。
〔１１〕ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）＝［Ｔｍ（Ｘｃ）－Ｔｍ（Ｘｂ）］
（ここで、Ｘｂ＝５～３５、Ｘｃ＝２０～９５、Ｘｂ＜Ｘｃ）
を算出すること、
　Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｌより高く、かつ閾値Ｔ５Ｈより低い場合（ここでＴ５Ｌ＜Ｔ５Ｈ）、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、それ以外の場合、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、〔５〕又は〔６〕記載の方法。
〔１２〕前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｌより低いとき、該検体Ｓをインヒビター力価の低い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定するか、又は、該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｈより高いとき、該検体Ｓを比較的高いインヒビター力価の凝固因子インヒビター陽性検体であると推定することを含む、〔１１〕記載の方法。
〔１３〕ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、以下の指標：
　　Ｒ７（Ｘｂ）＝［Ｔｍ（Ｘｂ）／Ｔｎ（Ｘｂ）］
　　Ｒ７（Ｘｂ'）＝［Ｔｍ（Ｘｂ'）／Ｔｎ（Ｘｂ'）］
　　Ｒ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）＝［Ｒ７（Ｘｂ）－Ｒ７（Ｘｂ'）］
（ここで、Ｘｂ＝５～９５、Ｘｂ'＝５～９５、Ｘｂ≠Ｘｂ'）
を算出すること、
　Ｒ７（Ｘｂ）が閾値Ｔ７より低く、かつＲ７（Ｘｂ'）が閾値Ｔ７'より低い場合、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、Ｒ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）が閾値Ｔ８よりも高い場合、検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、〔５〕又は〔６〕記載の方法。
〔１４〕さらに以下：
　ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、Ｔｍ_A（Ｘ）及びＴｍ_B（Ｘ）を取得すること
（ここで、Ｔｍ_A（Ｘ）は、混合検体Ａの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｔｍ_B（Ｘ）は、混合検体Ｂの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、混合検体Ａは、前記検体Ｓと前記検体Ｎの容量比が９：１の混合検体であり、混合検体Ｂは、前記検体Ｓと前記検体Ｎの容量比が１：９の混合検体であり、Ｘは０より大きく１００以下である）；
　以下の指標：
　Ｒ６（Ｘｂ）＝［Ｔｍ_A（Ｘｂ）－Ｔｍ_B（Ｘｂ）］
（ここでＸｂ＝３５～９５）
を算出すること；
　Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６よりも低い場合、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６より高ければ該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、〔５〕又は〔６〕記載の方法。
〔１５〕前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓについて、Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６'よりも高い場合、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定することを含む、〔１４〕記載の方法。
〔１６〕〔１〕又は〔２〕記載の方法を実施するためのプログラム。
〔１７〕〔１〕又は〔２〕記載の方法を実施するための装置。

　本発明の方法によれば、従来のクロスミキシング試験のように血液検体の長時間のインキュベーションをすることなく、かつ凝固反応曲線の微分に関するパラメータを算出せずに、血液検体の凝固時間の延長要因を推定することができる。本発明の方法は、より迅速かつ簡便な血液検体の凝固時間延長要因の推定を可能にする。

凝固反応曲線の一例。Ｔ（Ｘ）の説明。凝固反応曲線上の凝固反応終了点Ｅの１０％、５０％及び９０％に達する時点がそれぞれＴ（１０）、Ｔ（５０）及びＴ（９０）として示されている。異なる検体種の被検検体の凝固反応曲線及びＴ（Ｘ）。Ａ：LA、Ｂ：Def、Ｃ：Inh。上の図は凝固反応曲線（縦軸：散乱光量）、下の図はＴ（Ｘ）を表す。各図には正常検体のデータ（点線）がともに示されている。混合検体の凝固反応曲線及びＴ（Ｘ）。Ａ、Ｂ及びＣは、それぞれLA、Def及びInhと正常検体との１：１混合検体を示す。上の図は凝固反応曲線（縦軸：散乱光量）、下の図はＴ（Ｘ）を表す。各図には正常検体のデータ（点線）がともに示されている。異なる検体種の被検検体についての、Ａ：ＡＰＴＴ、Ｂ：正常検体との１：１混合検体の、加温前後のＡＰＴＴ差、Ｃ：Inh由来混合検体の加温前後でのＡＰＴＴ差のインヒビター力価に対するプロット。図５Ａには正常検体（NP）のデータがともに示されている。被検検体と混合検体の凝固反応曲線。Ａ：ＡＰＴＴが同程度(１００秒付近)である３つの被検検体（LA、Def及びInh）、Ｂ：該被検検体と正常検体との１：１混合検体（LA-M11、Def-M11及びInh-M11）。各図には正常検体（NP）のデータがともに示されている。図６に示した検体のＴｓ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）。Ａ：LA及びLA-M11、Ｂ：Def及びDef-M11、Ｃ：Inh及びInh-M11。各図には正常検体（NP）のデータＴｎ（Ｘ）がともに示されている。混合検体について算出したＦＴ１（Ｘ）。Ａ、Ｂ及びＣは、それぞれ（被検検体：正常検体）１：９、１：１、及び９：１の混合検体のデータを示す。各図中、１点鎖線はLA由来混合検体、２点鎖線はDef由来混合検体、実線はInh由来混合検体を表す。混合検体について算出した[ＦＴ１（Ｘ）－ＦＴ１（９５）]。図の説明は図８と同じ。１：１混合検体について算出した、Ａ：[ＦＴ１（Ｘ）－ＦＴ１（９５）]、Ｂ：ＦＴ２（Ｘ）、及びＣ：ＦＴ３（Ｘ，９５）。各図中、２点鎖線はDef由来混合検体、実線及び破線は、それぞれインヒビター力価１８及び５のInh由来の混合検体を表す。実施例４．１）で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；ＦＴ１（９５）、Ｂ：指標２；ＦＴ１（１０）、及びＣ：指標３；[ＦＴ１（１０）－ＦＴ１（９５）]、ならびに、Ｄ：Inhについての指標３のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：１混合検体を用いた。実施例４．２）で算出した、Ａ：Def及びInhについての指標３；ＦＴ３（１０，９５）、及びＢ：Inhについての指標３のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：１混合検体を用いた。実施例４．４）で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；ＦＴ１（１０）、Ｂ：指標２；ＦＴ３（１０，８５）、ならびに、Ｃ：Inhについての指標２のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には９：１混合検体を用いた。実施例４．５）で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；ＦＴ１（９５）、Ｂ：指標２；ＦＴ１（１０）、Ｃ：指標３；[ＦＴ１（１０）－ＦＴ１（９５）]、Ｄ：指標４；ＦＴ３（１０，９５）、及び、Ｅ：Inhについての指標４のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：９混合検体を用いた。実施例５．１）で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；ＦＴ４ｓ（５、３５，５０）、Ｂ：指標２；ＦＴ４ｍ（５、３５，５０）、Ｃ：指標３；ＦＴ５（５，３５）、及びＤ：Inhについての指標３のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：１混合検体を用いた。実施例５．２）で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；混合検体のＦＴ１（５）、Ｂ：指標２；ＦＴ６（９５）、及びＣ：Inhについての指標２のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には、指標１では９：１混合検体を、指標２では９：１及び１：９の混合検体を用いた。実施例６で算出した、被検検体についての、Ａ：指標１；ＦＴ１（４５）、Ｂ：指標２；ＦＴ２（４５）、Ｃ：指標３；ＦＴ２（５）、Ｄ：指標４；ＦＴ２（４５）－ＦＴ２（５）、及び、Ｅ：Inhについての指標４のインヒビター力価に対するプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：１混合検体を用いた。比較例１）で算出した、被検検体についての、Ａ：Percent Correction（PC）、及びＢ：Rosner Index（RI）、ならびにInhについてのインヒビター力価に対する、Ｃ：PC、及びＤ：RIのプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：１混合検体を用いた。比較例２）で算出した、被検検体についての、Ａ：Percent Correction（PC）、及びＢ：Rosner Index（RI）、ならびにInhについてのインヒビター力価に対する、Ｃ：PC、及びＤ：RIのプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には９：１混合検体を用いた。比較例３）で算出した、被検検体についての、Ａ：Percent Correction（PC）、及びＢ：Rosner Index（RI）、ならびにInhについてのインヒビター力価に対する、Ｃ：PC、及びＤ：RIのプロット。Ｔｍ（Ｘ）の算出には１：９混合検体を用いた。本発明の方法による凝固時間延長要因の推定のための例示的フロー。本発明の凝固時間延長要因の推定方法を行うための自動分析装置の構成を示す概念図。

　血液凝固検査では、血液検体に所定の試薬を添加してその後の血液凝固反応を計測し、該凝固反応から血液凝固時間を測定する。以下の本明細書において、血液検体を単に検体と称する場合がある。血液凝固反応の計測には、一般的な手段、例えば、散乱光量、透過度、吸光度等を計測する光学的な手段、又は血漿の粘度を計測する力学的な手段などが用いられる。血液凝固反応は、一般的に、凝固反応量の経時的変化を示す凝固反応曲線で表される。凝固異常要因のない正常検体の散乱光量に基づく凝固反応曲線は、通常、試薬添加からある程度の時間が経過した時点で凝固の進行により急激に上昇し、その後、凝固反応が終了に近づくとともにプラトーに達する（図１参照）。一方で、凝固異常要因を有する異常検体の凝固反応曲線は、曲線の立ち上がり時間の遅れ、緩やかな上昇など、異常要因に依存して様々な形状を示す。結果、異常検体では、多くの場合、正常検体と比べて凝固時間が延長する。凝固時間の延長は、凝固異常要因の有無の指標である。一方で、異常検体の凝固異常要因のタイプ（凝固時間延長要因）をその凝固時間から推定することはできない。

　血液凝固検査で凝固時間、例えばＡＰＴＴの延長が見られた場合、一般的には、血液検体にヘパリン含有の疑いがなければ、クロスミキシング試験が行われ、凝固時間延長要因（以下、単に「延長要因」ともいう）が判定される。詳細には、ＡＰＴＴの延長が凝固因子インヒビター（抗凝固因子）、ループスアンチコアグラント、又は血友病等の凝固因子欠乏のうちの何れに起因するかが判定される。クロスミキシング試験では正常検体、被検検体、及び被検検体と正常検体との混合検体の、混合直後のＡＰＴＴ（即時反応）と３７℃で２時間インキュベーションした後のＡＰＴＴ（遅延反応）が測定される。これら即時反応及び遅延反応のパターンに基づいて、ＡＰＴＴ延長要因が判定される。上記の従来の一般的な手法では、凝固時間測定とは別途にクロスミキシング試験を行わなければ、延長要因を判定することはできない。しかし、クロスミキシング試験は、被検検体と正常検体との混合検体についての即時反応、及び２時間インキュベーション後の遅延反応の測定を要するため、時間と手間がかかる。具体的には、従来のクロスミキシング試験では、即時反応で混合検体のＡＰＴＴが補正（正常化）された場合は、被検検体は凝固因子欠乏（Def）又は低力価の凝固因子インヒビター陽性（Inh）と判定される。一方、混合検体のＡＰＴＴが補正されなかった場合は、被検検体はループスアンチコアグラント（LA）又はInhのどちらであるかは判定できない。これらに遅延反応の結果を合わせることで、被検検体の延長要因を判定する。つまり、混合検体のＡＰＴＴが即時反応で補正されなかった場合、遅延反応の結果を即時反応の結果と比較することにより、被検検体がLAであるかInhであるかを判定する。一方、混合検体のＡＰＴＴが即時反応で補正されたが遅延反応では補正されなければ、被検検体をDefではなく低力価Inhであると判定することができる。このように従来のクロスミキシング試験では、即時反応と遅延反応を両方行わなければ、ＡＰＴＴの延長要因を判定することができない。そのため、クロスミキシング試験は、現状の臨床ニーズ、例えば、緊急時に採血からなるべく短時間に延長要因を判定したいというニーズには応えられていない。

　前述の特許文献１には、被検者の血液検体が凝固因子インヒビターを含むか否かに関する情報を取得する方法が記載されている。しかし、特許文献１の方法は、クロスミキシング試験の原理に基づいて、正常検体、被検検体及び混合検体の即時反応、及び長時間インキュベーション後の遅延反応の測定を必要とするため、なお時間と手間がかかる。

　前述の特許文献２には、検体の長時間インキュベーションを行うことなく延長要因に関するデータを取得する方法が提案されている。しかし、特許文献２の方法では、凝固反応曲線の微分曲線、つまり凝固速度（１次微分）や凝固加速度（２次微分）からパラメータを延長要因の判定に使用する。一方、凝固反応曲線は、微分曲線のようなピーク形状を有さないため、最大凝固速度や最大凝固速度時間のようなピーク頂点を基にしたパラメータを得ることができない。凝固時間以外には、凝固反応曲線から凝固反応に関する情報を抽出する試みはこれまでほとんどなされていない。

　本発明では、上記の従来技術で用いられていたような、検体の長時間インキュベーション（例えばクロスミキシング試験の遅延反応）を行うことなく、かつ凝固反応曲線の微分曲線（１次微分又は２次微分）を用いることなく、凝固反応曲線そのものの波形を解析することで、検体の凝固時間延長要因を推定することができる。

〔凝固時間延長要因の推定方法〕
　本発明は、凝固時間延長要因の推定方法を提供する。本発明の凝固時間延長要因の推定方法（以下、本発明の方法ともいう）では、凝固時間が延長している血液検体を被検血液検体（以下、被検検体ともいう）として、該被検検体の延長要因を推定する。

　通常の血液凝固検査では、検体の血液凝固反応の時系列データが取得され、該データに基づいて検体の凝固反応曲線や、凝固時間が取得される。正常値（例えば、正常検体群の凝固時間に基づき決定された標準値）よりも長い凝固時間を有する検体を、凝固時間が延長している検体として選択し、本発明の方法の被検検体として用いることができる。

　本発明の方法で用いる血液検体としては、血漿が好ましく用いられる。該検体には、凝固検査に通常用いられる抗凝固剤が添加され得る。例えば、クエン酸ナトリウム入り採血管を用いて採血した後、遠心分離することで血漿が得られる。

　本発明の方法においては、前記被検検体、凝固時間延長を示さない正常血液検体（又は単に正常検体ともいう）、及び、該被検検体と正常検体とを混合した混合検体が使用される。正常検体としては、１つ以上の正常検体群をプールしたプール検体、市販の正常血漿などを使用することができる。混合検体の調製では、被検検体と正常検体とが所定の比率で混合される。被検検体と正常検体との混合比は、合計を１０容量とした容量比で、被検検体：正常検体＝１：９～９：１の範囲であればよく、好ましくは４：６～６：４の範囲、例えば５：５である。

　本発明の方法においては、被検検体、正常検体、及び混合検体の血液凝固反応が計測され、凝固反応曲線が取得される。以下において、被検検体を検体Ｓ、正常検体を検体Ｎ、混合検体を検体Ｍとも呼ぶことがある。また、被検検体、正常検体、及び混合検体を、まとめて単に「検体」と呼ぶことがある。

　本発明において測定される凝固時間の例としては、プロトロンビン時間（ＰＴ）、及び活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）が挙げられる。以下の本明細書においては、主に、凝固時間として活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）を例に挙げて本発明の方法を説明する。その他の凝固時間（例えばプロトロンビン時間（ＰＴ））への本発明の方法の変更は、当業者であれば実施可能である。

　以下、本発明の方法について説明する。

１．凝固反応曲線の取得
１．１．血液凝固反応の計測
　血液凝固反応の計測においては、検体に凝固時間測定試薬が添加され、血液凝固反応が開始される。該試薬と検体を含む反応液の凝固反応が計測され得る。使用される凝固時間測定試薬は、測定目的に合わせて任意に選択することができる。各種凝固時間測定のための試薬は市販されている（例えば、ＡＰＴＴ試薬コアグピア　ＡＰＴＴ－Ｎ；積水メディカル株式会社製）。凝固反応の計測には、一般的な手段、例えば、散乱光量、透過度、吸光度等を計測する光学的な手段、又は血漿の粘度を計測する力学的な手段などを用いればよい。以下の本明細書では、散乱光量に基づく凝固反応計測を例として本発明の方法を説明する。

　凝固反応の反応開始時点は、典型的には、検体に試薬を混合して凝固反応を開始させた時点として定義され得るが、他のタイミングが反応開始時点として定義されてもよい。凝固反応の計測を継続する時間は、例えば、検体と試薬との混合の時点から数十秒～７分程度であり得る。この計測時間は、任意に定めた固定の時間でもよいが、各検体の凝固反応の終了を検出した時点までとしてもよい。該計測時間の間、所定の間隔で凝固反応の進行状況の計測（光学的に検出する場合は測光）が繰り返し行われ得る。例えば、０．１秒間隔で計測が行われればよい。該計測中の反応液の温度は、通常の条件、例えば３０℃以上４０℃以下、好ましくは３５℃以上３９℃以下である。また、計測の各種条件は、検体や試薬、計測手段等に応じて適宜設定され得る。

　従来のクロスミキシング試験又は特許文献１に記載の方法とは異なり、本発明の方法では、所定温度での長時間のインキュベーション処理を施した検体をさらに用意する必要はない。例えば、本発明では、凝固反応計測の際に、凝固時間測定試薬（例えばＡＰＴＴ測定の第１試薬）の添加前に、従来のクロスミキシング試験の遅延反応のように検体の長時間のインキュベーション処理を行うことを必要としない。本明細書において、検体の「長時間のインキュベーション処理」とは、好ましくは１５℃以上４０℃以下、より好ましくは３０℃以上４０℃以下で、５分以上、好ましくは２分以上のインキュベーション処理をいう。また本明細書において、検体の「インキュベーション処理」とは、ヒーターやクーラー、恒温機などによる能動的な温度制御に処すことをいい、室温下に放置するなどによる受動的な温度の変化や維持を含まない。
　一方で、本発明において、凝固反応計測に供される検体は、凝固時間測定試薬の添加前に、通常の凝固反応計測のための検体の予備的加温処理、例えば、３０℃以上４０℃以下で１分以下の加温処理を受けていてもよい。したがって、本発明において凝固反応計測に供される検体は、凝固時間測定試薬の添加前において、１５℃以上４０℃以下でのインキュベーション処理を５分以上は施されていないものであり、好ましくは、１５℃以上４０℃以下でのインキュベーション処理を２分以上は施されていないものであり、より好ましくは、１５℃以上４０℃以下でのインキュベーション処理を受けた時間が１分以下のものである。本発明において凝固反応計測に供される検体は、凝固時間測定試薬を添加された（反応液へと調製された）後は、通常の凝固反応計測における加温工程、すなわち反応液を３０℃以上４０℃以下に維持するような加温処理を受けてもよい。

　前述の凝固反応計測における一連の操作は、自動分析装置を用いて行うことができる。自動分析装置の一例として、血液凝固自動分析装置ＣＰ３０００（積水メディカル株式会社製）が挙げられる。あるいは、一部の操作が手作業で行われてもよい。例えば、検体の調製を人間が行い、それ以降の操作は自動分析装置で行うことができる。

　前述した凝固反応計測から、凝固反応曲線Ｐ（ｉ）が取得される。ここで「ｉ」は、計測点数、又は凝固反応開始からの時間（単に時間ともいう）を表す。例えば、計測（測光）間隔が０．１秒であれば、時間＝０．１×計測点数で表される。すなわち、Ｐ（ｉ）は、計測点数の関数であっても、時間の関数であってもよい。以下の本明細書において、Ｐ（ｉ）を単にＰと略記する場合がある。一般的には、凝固反応曲線Ｐは、凝固反応計測の計測値に、公知の手段でノイズ除去もしくは平滑化処理、又は必要に応じて、反応初期値を調整するためのゼロ点調整もしくは曲線の相対値化が成されたものである。凝固反応曲線の一例を図１に示す。図１の横軸は時間を示し、縦軸は散乱光量を示す。時間経過とともに、反応液の凝固反応が進むため、散乱光量は増加していき、凝固反応が終了に近づくとともにプラトーに達する。

　必要に応じて、凝固時間の算出などのために、求めた凝固反応曲線Ｐから、その微分曲線、例えば反応速度曲線（１次微分）又は反応加速度曲線（２次微分）を取得してもよい。凝固反応曲線の微分処理は任意の手法にて実施することができ、例えば、区間内平均傾き値の算出により行われ得る。本明細書において、反応速度曲線の１次微分曲線、及び反応加速度曲線等の２次微分曲線を、それぞれ「１次曲線」及び「２次曲線」ともいう。

１．２．凝固時間の算出
　凝固反応曲線Ｐに基づいて、検体の血液凝固時間を算出することができる。凝固時間の算出は任意の方法に従って行うことができる。凝固時間の算出方法の例としては、Ｐ（ｉ）が凝固反応終了点Ｅ（後述）のＮ％に達した時点を、凝固時間として算出する方法；Ｐの１次曲線がその最大値のＮ％に達した時点を凝固時間として算出する方法；微小時間帯でのＰ（ｉ）の積算値の比が所定値に達したときを算出起点Ｔｅとし、Ｐ（ｉ）がＰ（Ｔｅ）のＮ％に達した時点を凝固時間として算出する方法（特開平６－２４９８５５号公報）；微小時間帯でのＰ（ｉ）の積算値の経時的変化に基づいて凝固時間を算出する方法（特願２０１９－２３７４２７参照）；Ｐの１次曲線の加重平均時間に基づいて凝固時間を算出する方法（特願２０２０－０３９３４４参照）；Ｐの１次曲線が最大値に達した後に所定値に達したときを算出起点Ｔｅとして、Ｐ（ｉ）がＰ（Ｔｅ）のＮ％に達した時点を凝固時間として算出する方法（特願２０２０－０６８８７７参照）、などが挙げられる。

　被検者由来の検体について算出された凝固時間が正常値（例えば、正常検体群の凝固時間に基づき決定された標準値）よりも長い場合、該検体の凝固時間は延長していると判断される。該凝固時間が延長している検体を、本発明の方法の被検検体として用いることができる。本発明の方法においては、凝固時間が延長している被検検体の凝固時間延長要因を推定する必要がある場合に、該被検検体から混合検体を調製し、該混合検体と正常検体の凝固反応曲線を取得することができる。

２．凝固反応終了点の検出
　本発明の方法においては、検体の凝固反応曲線Ｐにおける凝固反応終了点Ｅを検出する。凝固反応終了点Ｅは、Ｐがプラトーに達した時点、Ｐの１次曲線がピークに達した後に０又は一定値まで減少した時点（特願２０２０－０６８８７７参照）、微小時間帯でのＰ（ｉ）の積算値の比が閾値（例えば1.001）未満となる最も早い点（国際出願番号ＰＣＴ／ＪＰ２０２０／０４８６７６、又は後述の実施例を参照）などの任意の基準に従って検出することができる。凝固反応終了点Ｅの検出は、所定の測定時間までのＰを取得した後で行ってもよく、又はＰの取得と並行してＥの検出を行い、Ｅが検出された時点でＰの取得を終了してもよい。例えば、特願２０２０－０６８８７７又は国際出願番号ＰＣＴ／ＪＰ２０２０／０４８６７６に記載される手順は、Ｐの取得と並行して凝固反応終了点Ｅの検出を行うこと（いわゆるリアルタイムでのＥの検出）を可能にする。

　本発明の方法の一実施形態として、国際出願番号ＰＣＴ／ＪＰ２０２０／０４８６７６に記載の方法に基づく凝固反応終了点Ｅの検出手順の例について詳述する。微小時間帯でのＰ（ｉ）の積算値の比は、積算比Ｚ（ｉ）と規定され、下記式にて算出される：
　Ｚ（ｉ）＝｛Ｐ（ｉ＋１）＋Ｐ（ｉ＋２）＋．．．＋Ｐ（ｉ＋ｍ）｝／｛Ｐ（ｉ－ｍ）＋Ｐ（ｉ－ｍ＋１）＋．．．＋Ｐ（ｉ－１）｝
　上式において、ｉは計測点番号を表し、ｍは、凝固反応の計測条件や分析項目等によって適宜設定することができ、例えば、計測間隔が０．１秒の場合は、ｍ＝１０～３０である。Ｚ（ｉ）が閾値Ｚｓ未満となる最も早い計測点又は時点でのＰ（ｉ）を、凝固反応終了点Ｅとして検出する。Ｚｓは、分析項目に応じて適宜設定され得るが、１より大きく、かつ１．１００以下であり、例えばＡＰＴＴ測定の場合、好ましくは１．０５０以下であり、より好ましくは、Ｚｓは１．０１０から１．００１の範囲である。初期反応異常などによるＥの誤検出を防ぐためには、Ｚ（ｉ）の算出は、ｉが所定の算出開始点に達した以降であってＰ（ｉ）が所定値以上となってから行われることが好ましい。本手順においては、凝固反応を計測しながら、並行してＰ（ｉ）を取得及びＺ（ｉ）を算出し、Ｅを検出することができる。

　本発明の方法においては、被検検体Ｓ、正常検体Ｎ、及び混合検体Ｍのそれぞれについて、凝固反応曲線における凝固反応終了点Ｅを取得することができる。以下において、検体Ｓの凝固反応曲線における凝固反応終了点をＥｓ、検体Ｎの凝固反応曲線における凝固反応終了点をＥｎ、検体Ｍの凝固反応曲線における凝固反応終了点をＥｍという。本発明の方法においては、好ましくは、少なくともＥｍ及びＥｎを取得する。より好ましくは、Ｅｓ、Ｅｍ及びＥｎを取得する。なおＥｎについては、検体Ｎの凝固反応を計測し、得られた凝固反応曲線からＥｎを検出してもよく、既存の検体Ｎの凝固反応曲線からＥｎを検出してもよく、あるいは既存のＥｎを使用することもできる。

３．Ｔ（Ｘ）の取得
　検体Ｓ、検体Ｎ、及び検体Ｍのそれぞれについて、検体の凝固反応曲線Ｐ（ｉ）がＥのＸ％に達する計測点又は時間を表すＴ（Ｘ）を算出することができる。本明細書において、検体ＳについてのＰ（ｉ）及びＴ（Ｘ）を、それぞれＰｓ（ｉ）（又は単にＰｓ）及びＴｓ（Ｘ）といい、検体ＮについてのＰ（ｉ）及びＴ（Ｘ）を、それぞれＰｎ（ｉ）（又は単にＰｎ）及びＴｎ（Ｘ）といい、検体ＭについてのＰ（ｉ）及びＴ（Ｘ）を、それぞれＰｍ（ｉ）（又は単にＰｍ）及びＴｍ（Ｘ）という。より詳細には、Ｔｓ（Ｘ）は、検体Ｓの凝固反応曲線ＰｓがＥｓのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｔｎ（Ｘ）は、検体Ｎの凝固反応曲線ＰｎがＥｎのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｔｍ（Ｘ）は、検体Ｍの凝固反応曲線ＰｍがＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表す。一方、本明細書におけるＴ（Ｘ）は、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）を包含する総称として使用され、Ｔ（Ｘ）に関する説明は、特段の記載がない限り、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）にも適用される。本明細書及び図面において、Ｔ（Ｘ）、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）は、Ｘの括弧表記を無くしてそれぞれ"ＴＸ"、"ＴｓＸ"、"ＴｎＸ"及び"ＴｍＸ"と表記される場合がある。本発明の方法においては、好ましくは、少なくともＴｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を取得する。より好ましくは、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を取得する。なおＴｎ（Ｘ）については、検体Ｎの凝固反応を計測し、得られた凝固反応曲線からＥｎ及びＴｎ（Ｘ）を検出してもよく、既存の検体Ｎの凝固反応曲線からＴｎ（Ｘ）を検出してもよく、あるいは既存のＴｎ（Ｘ）を使用することもできる。

　より詳細には、Ｔ（Ｘ）は、凝固反応開始点（時間０）からＰがＥのＸ％に達するまでの計測点数又は時間である。すなわち、Ｔ（Ｘ）について下記式が成り立つ。
　　Ｐ（Ｔ（Ｘ））＝Ｅ × Ｘ％
　したがって、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）については、それぞれ下記式が成り立つ。
　　Ｐｓ（Ｔｓ（Ｘ））＝Ｅｓ × Ｘ％
　　Ｐｎ（Ｔｎ（Ｘ））＝Ｅｎ × Ｘ％
　　Ｐｍ（Ｔｍ（Ｘ））＝Ｅｍ × Ｘ％
　ここで、Ｘは０より大きく１００以下である。よって、Ｔ（Ｘ）は変数Ｘの関数として表すことができる。本発明の方法においては、Ｘは、好ましくは１～１００、より好ましくは５～９５である。例えば、各々のＸは１以上離れた値（すなわち、Ｘの増分≧１）であってもよく、又は５以上離れた値（すなわち、Ｘの増分≧５）であってもよい。一例において、Ｘは、１～１００の範囲で、増分１で変化する変数（すなわち、Ｘ＝｛１，２，３，・・・，９７，９８，９９，１００｝）である。別の一例において、Ｘは、５～９５の範囲で、増分５で変化する変数（すなわち、Ｘ＝｛５，１０，１５，・・・，９０，９５｝）である。

　あるいは、Ｔ（Ｘ）は、Ｔ（Ｘ－Ｋ）からＴ（Ｘ＋Ｋ）までの平均値として表されてもよい。この場合、Ｋは、前述したＸの増分よりも小さいことが好ましい。例えば、Ｋ＝２であれば、Ｔ（Ｘ）は、Ｘ＝１０のときは、Ｔ（８）からＴ（１２）までの平均値として表すことができ、又はＸ＝１５のときは、Ｔ（１３）からＴ（１７）までの平均値として表すことができる。またあるいは、Ｔ（Ｘ）は、Ｔ（Ｘ－Ｋ＋１）からＴ（Ｘ）までの平均値として表されてもよい。例えば、Ｋ＝５であれば、Ｔ（Ｘ）は、Ｘ＝１０のときは、Ｔ（６）からＴ（１０）までの平均値として表すことができ、又はＸ＝９５のときは、Ｔ（９１）からＴ（９５）までの平均値として表すことができる。

　図２は、Ｔ（Ｘ）を説明する図である。図中、Ｅの１０～９０％に達する点を示した凝固反応曲線が示され、Ｅの１０％、５０％及び９０％に達する時点がそれぞれＴ（１０）、Ｔ（５０）及びＴ（９０）として示されている。Ｅの時点ｔＥは、Ｔ（１００）に相当する。Ｔ（Ｘ）をＸに対してプロットして得られるＴ（Ｘ）曲線は、一般に、図３、４に示すように、Ｘが１から５付近の間で急激に上昇することがあるが、Ｘが約８０までは緩やかに上昇し、その後Ｘが９０付近以降で大きく上昇する。

４．Ｔ（Ｘ）を用いた凝固時間延長要因の推定
　本発明の方法においては、凝固反応曲線から算出されるＴ（Ｘ）に基づいて被検検体の凝固時間延長要因を推定する。後述の実施例に示すとおり、本発明の方法では、Ｔ（Ｘ）を用いることで、凝固時間の延長を示す被検検体の中から、クロスミキシング試験の遅延反応のように長時間インキュベーションした検体を必要とせずに、ループスアンチコアグラント陽性検体（LA）、凝固因子欠乏検体（Def）、及び凝固因子インヒビター陽性検体（Inh）を判別することが可能になる。従来一般的な凝固反応計測では、凝固反応曲線から算出される凝固反応の評価に関わるパラメータは凝固時間のみである。しかし、凝固時間のみから凝固時間延長要因を推定することは困難である。図５に示すように、延長要因が異なる検体で凝固時間は重複しており、かつ混合検体のインキュベーション前後で凝固時間を比較しても延長要因の推定はなお困難である。これに対し、本発明では、凝固反応曲線の形状そのものに着目し、それを反映する指標としてＴ（Ｘ）を算出し、延長要因を推定する。

　後述の図６Ａに示すように、検体の凝固反応は、凝固時間延長要因のタイプ（検体種）ごとに異なる特徴を示し得る。図６Ａは、検体種ごとの凝固反応曲線Ｐ（縦軸：散乱光量）を表し、図中の被検検体（LA、Def、及びInh）の凝固時間は、いずれも１００秒付近であり、正常検体（NP）と比べて延長している。凝固反応曲線Ｐの形状は、検体種によって異なる傾向を示す。正常検体（NP）では曲線の上昇は急峻である。凝固因子欠乏検体（Def）と凝固因子インヒビター陽性検体（Inh）は、Ｐの形状が似た傾向があり、またいずれも曲線の上昇は比較的緩やかである。ループスアンチコアグラント陽性検体（LA）では、凝固時間は延長していても曲線の上昇は比較的急峻である。このように、ＡＰＴＴが同程度に延長した被検検体同士であっても、検体種によってＰの形状は異なる。

　一方、凝固時間延長を有する検体から調製した混合検体の凝固反応は、元の検体とは異なる反応曲線を示す場合がある。例えば、後述の図６Ｂは、図６Ａに示す検体の混合検体（混合比；被検検体：NP＝１：１）についての凝固反応曲線Ｐ（縦軸：散乱光量）を表した図である。凝固因子インヒビター陽性検体（Inh）及び凝固因子欠乏検体（Def）由来の混合検体（図中、Def-M11及びInh-M11）では、正常検体に含まれている凝固因子が補充されたことにより、凝固反応曲線Ｐの形状は正常検体（NP）に近づき、凝固時間が正常範囲になる。一方、ループスアンチコアグラント陽性検体（LA）由来の混合検体（LA-M11）では、凝固時間は延長したままであり、凝固反応曲線Ｐの形状は元の検体(図６ＡのLA)と似ている。

　Ｔ（Ｘ）もまた、検体種ごとに異なる特徴を示し得る。後述の図７Ａ～Ｃは、図６Ａ及びＢにそれぞれ示す被検検体及びその混合検体についてのＴｓ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ）を検体種ごとに表した図である。図７Ａは、ループスアンチコアグラント陽性検体（LA）及びその混合検体（LA-M11）を示し、図７Ｂは、凝固因子欠乏検体（Def）及びその混合検体（Def-M11）を示し、図７Ｃは、凝固因子インヒビター陽性検体（Inh）及びその混合検体（Inh-M11）を示す。各図には、正常検体（NP）についてのＴｎ（Ｘ）が共に示されている。各図とも、横軸がＸ＝５０のときの縦軸の値（時間）がＡＰＴＴ（＝Ｔ（５０））になる。

　図７より、主にＴｍ（Ｘ）の下方（Ｔｎ（Ｘ）に近づく方）へのシフトに起因して、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）を表す曲線の相互の相対的な配置が、検体種により異なることが分かる。すなわち、Ｔｍ（Ｘ）の下方シフトは、LAでは少なく、Def及びInhで大きい。結果、任意のＸにおけるＴｓ（Ｘ）とＴｍ（Ｘ）との差［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］は、LAでは比較的小さく、DefとInhでは比較的大きい。したがって、DefとInhの［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］は、LAの当該値と比べて大きく、一方、Defの［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］と、Inhの［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］の間での差は小さい。

　したがって、本発明においては、少なくともＴｍ（Ｘ）に基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定することができる。一実施形態において、本発明の方法では、Ｔｎ（Ｘ）とＴｍ（Ｘ）との違いに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。一実施形態において、本発明の方法では、Ｔｍ（Ｘ）と、Ｔｓ（Ｘ）と、Ｔｎ（Ｘ）との間の違いに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。

４．１．指標Ｒの算出
　好ましい実施形態において、本発明の方法では、少なくともＴｍ（Ｘ）を用いて凝固時間延長要因の推定のための指標Ｒを算出し、該指標Ｒに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。指標Ｒは、少なくともＴｍ（Ｘ）を用いて算出される、被検検体の凝固反応情報（凝固特性）と結びつく指標である。一実施形態において、指標Ｒは、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を用いて算出される。別の一実施形態において、指標Ｒは、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を用いて算出される。指標Ｒの例としては、下記に説明するＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、及びそれらの組み合わせが挙げられる。したがって本明細書において「指標Ｒ」とは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８などのいずれか１つを指す場合と、それらの２つ以上の組み合わせを指す場合とを包含する。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸにおける、Ｔｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差と、Ｔｓ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差との間の比を反映する指標であるＲ１を算出する。一例において、Ｒ１は、下記式で表され得る。
　　Ｒ１（Ｘ）＝［（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））］
　このとき、Ｘは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５である。Ｒ１（Ｘ）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸの範囲におけるＲ１の変化量を表す指標であるＲ２を算出する。好ましくは、Ｒ２は、Ｘ₁，Ｘ₂を用いて下記式で表され得る。
　　Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）＝［Ｒ１（Ｘ₁）－Ｒ１（Ｘ₂）］
　このとき、Ｘ₁は、好ましくは５～５５、より好ましくは５～４５、さらに好ましくは５～４０であり、Ｘ₂は、好ましくは１０～９５、より好ましくは１５～９５であり、さらに好ましくは２０～９５であり、Ｘ₁≠Ｘ₂である。Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量と、Ｔｎ（Ｘ）の変化量との比を反映する指標であるＲ３を算出する。好ましくは、Ｒ３は、Ｘ₁，Ｘ₂を用いて下記式で表され得る。
　　Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）＝［Ｔｍ（Ｘ₁）－Ｔｍ（Ｘ₂）］／［Ｔｎ（Ｘ₁）－Ｔｎ（Ｘ₂）］
　このとき、Ｘ₁は、好ましくは５～９０、より好ましくは５０～８０であり、Ｘ₂は、好ましくは１０～９５、より好ましくは５５～８５である。ただしＸ₂－Ｘ₁≧５である。Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、検体Ｓ又は検体Ｍについての、特定のＸの範囲におけるＴ（Ｘ）の相対変化率を反映する指標である、Ｒ４を算出する。好ましくは、Ｒ４は、Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃を用いて下記式で表され得る。
　　Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）＝［（Ｔ（Ｘ₂）－Ｔ（Ｘ₁））／Ｔ（Ｘ₃）］
　より具体的には、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）は、検体Ｓ及び検体Ｍについてそれぞれ算出することができ、それぞれ下記式で表され得る。
　　Ｒ４ｓ（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）＝［（Ｔｓ（Ｘ₂）－Ｔｓ（Ｘ₁））／Ｔｓ（Ｘ₃）］
　　Ｒ４ｍ（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）＝［（Ｔｍ（Ｘ₂）－Ｔｍ（Ｘ₁））／Ｔｍ（Ｘ₃）］
　各式において、Ｘ₁は、好ましくは５～３０、より好ましくは５～２５、さらに好ましくは５～２０であり、Ｘ₂は、好ましくは１０～９５、より好ましくは２５～９５、さらに好ましくは２５～７５であり、Ｘ₃は、好ましくは５～９５であるか、もしくは、Ｘ₁は、好ましくは４５～７０、より好ましくは５０～６５であり、Ｘ₂は、好ましくは１０～４５、より好ましくは１０～３５であり、Ｘ₃は、好ましくは５～９５である。Ｘ₁≠Ｘ₂であり、好ましくはＸ₁＜Ｘ₂である。Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量を反映する指標であるＲ５を算出する。好ましくは、Ｒ５は、Ｘ₁，Ｘ₂を用いて下記式で表され得る。
　　Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）＝［Ｔｍ（Ｘ₂）－Ｔｍ（Ｘ₁）］
　各式において、Ｘ₁は、好ましくは５～３５、より好ましくは５～１０であり、Ｘ₂は、好ましくは２０～９５、より好ましくは３５～６５である。好ましくはＸ₁＜Ｘ₂である。Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、検体Ｓと検体Ｎとの混合比率の異なる検体Ｍの間でのＴｍ（Ｘ）の差を反映する指標であるＲ６を算出する。好ましくは、Ｒ６は、下記式で表され得る。
　　Ｒ６（Ｘ）＝［Ｔｍ_A（Ｘ）－Ｔｍ_B（Ｘ）］
　ここで、Ｔｍ_A（Ｘ）は、混合検体ＡについてのＴｍ（Ｘ）を表し、Ｔｍ_B（Ｘ）は、混合検体ＢについてのＴｍ（Ｘ）を表す。混合検体Ａ、Ｂは、被検検体：正常検体の混合比率が異なる。混合検体Ａ、Ｂにおける被検検体：正常検体の混合比率は特に限定されない。好ましい実施形態において、混合検体Ａは、被検検体：正常検体の混合比率が９：１であり、混合検体Ｂは、被検検体：正常検体の混合比率が１：９である。Ｘは、好ましくは３５～９５、より好ましくは６０～９５、さらに好ましくは９０～９５である。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸにおけるＴｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の比を反映する指標であるＲ７を算出する。好ましくは、Ｒ７は、下記式で表され得る。
　　Ｒ７（Ｘ）＝［Ｔｍ（Ｘ）／Ｔｎ（Ｘ）］
　このとき、Ｘは、好ましくは５～９５、より好ましくは７０～９５である。Ｒ７（Ｘ）は百分率（％）で表されてもよい。

　好ましい一実施形態において、本発明の方法では、特定のＸの範囲におけるＲ７（Ｘ）の変化量を表す指標であるＲ８を算出する。一例において、Ｒ８は、Ｘ₁，Ｘ₂を用いて下記式で表され得る。
　　Ｒ８（Ｘ₁，Ｘ₂）＝［Ｒ７（Ｘ₁）－Ｒ７（Ｘ₂）］
　このとき、Ｘ₁は、好ましくは１０～９５、より好ましくは１５～９５、さらに好ましくは７０～９５であり、Ｘ₂は、好ましくは５～９０である。ただし、Ｘ₁－５≧Ｘ₂である。Ｒ８（Ｘ）は百分率（％）で表されてもよい。

　前述のＲ１（Ｘ）、Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、及びＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）は、各々、特定の１つのＸ、又は１組のＸ₁～Ｘ₂もしくはＸ₁～Ｘ₃を用いて算出することができる。あるいは、異なる２つ以上のＸ又は２組以上のＸ₁～Ｘ₂もしくはＸ₁～Ｘ₃を用いて、複数のＲ１（Ｘ）、Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、又はＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）を算出してもよい。その際、前記Ｒ１（Ｘ）、Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、及びＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）のうちのいずれか１つ、２つ又は３つについては複数の値を算出し、残りについては、特定の１つの値を算出してもよい。上記したＲ１（Ｘ）、Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、及びＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）の算出式に用いられるＸ、Ｘ₁～Ｘ₂、及びＸ₁～Ｘ₃は、各式の間で互いに独立である。例えば、Ｒ１（Ｘ）の算出に用いられるＸとＲ６（Ｘ）の算出に用いられるＸは同じ値でも異なる値でもよく、またＲ２（Ｘ₁，Ｘ₂）の算出に用いられるＸ₁～Ｘ₂とＲ３（Ｘ₁，Ｘ₂）の算出に用いられるＸ₁～Ｘ₂は同じ値でも異なる値でもよい。

　一例において、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｃ（ここで、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｃは互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｃである）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）及びＲ２（Ｘｂ, Ｘｃ）を算出することができる。
　別の一例において、Ｘａ、Ｘｄ及びＸｅ（ここで、Ｘａ、Ｘｄ及びＸｅは互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｄ≠Ｘｅである）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）を算出することができる。

　別の一例において、Ｘａ、Ｘａ'、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄ及びＸｅ（ここで、Ｘａ、Ｘａ'、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄ及びＸｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸａ≠Ｘａ'、Ｘｂ≠Ｘｃ、かつＸｄ≠Ｘｅである）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）、ならびにＲ１（Ｘａ'）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）からなる群より選択される少なくとも１つを算出することができる。一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が算出される。別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が算出される。別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が算出される。このとき、Ｘａ≠Ｘａ'であって、Ｘａは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５であり、Ｘａ'は、好ましくは５～１００、より好ましくは５～８０である。ＸｂとＸｃ、及びＸｄとＸｅはそれぞれ前述のＲ２（Ｘ₁，Ｘ₂）に関するＸ₁及びＸ₂の範囲と、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）に関するＸ₁及びＸ₂の範囲から選択することができる。

　別の一例において、Ｘａ、Ｘａ'（ここでＸａ＜Ｘａ'である）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）を算出し、かつこれらの差としてＲ２（Ｘａ，Ｘａ'）を算出することができる。このとき、ＸａとＸａ'は、好ましくはそれぞれ５～５５と１０～９５、より好ましくはそれぞれ５～４５と１５～９５、さらに好ましくはそれぞれ５～４０と２０～９５である。

　別の一例において、Ｘｘ、Ｘｙ、及びＸｚ（ここで、Ｘｘ、Ｘｙ、及びＸｚは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｘ≠Ｘｙである）を用いて、Ｒ４ｓ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）、Ｒ４ｍ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）を算出し、さらに、Ｒ５（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここでＸｄ≠Ｘｅである）を算出することができる。このとき、Ｘｘ～Ｘｚはそれぞれ前述のＲ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）に関するＸ₁～Ｘ₃の前述の範囲から選択することができ、またＸｄ～Ｘｅはそれぞれ前述のＲ５（Ｘ₁，Ｘ₂）に関するＸ₁及びＸ₂の範囲から選択することができる。

　別の一例において、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｂ'（ここで、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｂ'は、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｂ'である）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ６（Ｘｂ）及びＲ６（Ｘｂ'）を算出することができる。このとき、Ｘａは、前述のＲ１（Ｘ）に関するＸの範囲から選択することができ、Ｘｂ及びＸｂ'はそれぞれ前述のＲ６（Ｘ）に関するＸの範囲から選択することができる。

　別の一例において、Ｘａ、Ｘｂ、及びＸｂ'（ここで、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｂ'は、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｂ'である）を用いて、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ７（Ｘｂ）、Ｒ７（Ｘｂ'）、及びＲ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）を算出することができる。Ｘａは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５であり、Ｘｂは、好ましくは１０～９５、より好ましくは１５～９５、さらに好ましくは７０～９５であり、Ｘｂ'≦Ｘｂ－５である。

　前記の例においては、Ｒ１（Ｘａ）を算出する代わりにＲ４ｓ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）及びＲ４ｍ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）を算出してもよい。あるいは、Ｒ４ｓ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）及びＲ４ｍ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）を算出する代わりに、Ｒ１（Ｘａ）を算出してもよい。

４．２．凝固時間延長要因の推定
　算出された指標Ｒは、凝固時間延長要因のタイプ（検体種）ごとに異なる分布を示し得る（図８～１０参照）。例えば、後述の実施例に示すとおり、ループスアンチコアグラント陽性（LA）のＲ１（Ｘ）は、凝固因子欠乏（Def）及び凝固因子インヒビター陽性（Inh）よりも大きい傾向にあり、また、インヒビター力価１８ＢＵ／ｍＬ以上のInhのＲ２（Ｘ₁，Ｘ₂）及びＲ３（Ｘ₁，Ｘ₂）は、Defより大きい傾向にある（図１１～１４参照）。また、Ｔｍ（Ｘ）のついてのＲ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、及びＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）は、LAと低力価以外のInhではDefよりも大きい傾向にあり、Ｔｓ（Ｘ）のＲ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）は、DefとInhではＡＰＴＴと比例関係にある（図１５～１７参照）。したがって、指標Ｒを、被検検体の凝固時間延長要因を推定するために使用することができる。

　好ましい実施形態においては、前述したＲ１（Ｘ）、Ｒ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、Ｒ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、Ｒ６（Ｘ）、Ｒ７（Ｘ）、Ｒ８（Ｘ₁，Ｘ₂）、又はそれらの２つ以上の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定することができる。より詳細には、１つ以上のＸ、又は１組以上のＸ₁及びＸ₂もしくはＸ₁～Ｘ₃を用いて、１つ以上のＲ１（Ｘ）、１つ以上のＲ２（Ｘ₁，Ｘ₂）、１つ以上のＲ３（Ｘ₁，Ｘ₂）、１つ以上のＲ４（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）、１つ以上のＲ５（Ｘ₁，Ｘ₂）、１つ以上のＲ６（Ｘ）、１つ以上のＲ７（Ｘ）、もしくは１つ以上のＲ８（Ｘ₁，Ｘ₂）、又はこれらを組み合わせて算出し、それらのいずれか１つ、好ましくはいずれか２つ以上の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定することができる。

　本発明の方法で推定され得る凝固時間延長要因（検体種）としては、ループスアンチコアグラント陽性（LA）、凝固因子欠乏（Def）、及び凝固因子インヒビター陽性（Inh）が挙げられる。凝固因子欠乏（Def）の例としては、凝固第V因子（FV）欠乏、凝固第VIII因子（FVIII）欠乏、凝固第IX因子（FIX）欠乏、凝固第X因子（FX）欠乏、凝固第XI因子（FXI）欠乏、凝固第XII因子（FXII）欠乏が挙げられ、好ましくはFVIII欠乏である。好ましくは、該FVIII欠乏とは、FVIII活性値が約５％以内の状態をいう。凝固因子インヒビターとしては、FVIIIインヒビター、FVインヒビターなどが挙げられる。好ましくは、該FVIIIインヒビター陽性とは、インヒビター力価が３ＢＵ／ｍＬ以上、好ましくは５ＢＵ／ｍＬ以上の状態をいう。なお本明細書においては、インヒビター力価を単に「力価」と呼ぶことがあり、また本明細書におけるインヒビター力価は、Ｂｅｔｈｅｓｄａ単位（ＢＵ／ｍＬ）で表されている。

　一例においては、Ｒ１（Ｘａ）に基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）又はＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここでＸａ、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄ及びＸｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｃ、Ｘｄ≠Ｘｅ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ２（Ｘｂ, Ｘｃ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここでＸａ、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄ及びＸｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｃ、Ｘｄ≠Ｘｅ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、及びＲ２（Ｘｂ，Ｘｃ）（ここでＸａ、Ｘａ'、Ｘｂ、Ｘｃは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸａ≠Ｘａ'、Ｘｂ≠Ｘｃ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、及びＲ２（Ｘａ'，Ｘａ）（Ｘａ≠Ｘａ'）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここでＸａ、Ｘａ'、Ｘｂ、Ｘｃ、Ｘｄ及びＸｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸａ≠Ｘａ'、Ｘｂ≠Ｘｃ、Ｘｄ≠Ｘｅ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、Ｒ２（Ｘａ'，Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここでＸａ、Ｘａ'、Ｘｄ及びＸｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸａ≠Ｘａ'、Ｘｄ≠Ｘｅ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ４ｓ（Ｘａ，Ｘｂ，Ｘｃ）、Ｒ４ｍ（Ｘａ，Ｘｂ，Ｘｃ）、及びＲ５（Ｘｄ，Ｘｅ）（ここで、Ｘａ～Ｘｅは、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸａ≠Ｘｂ、Ｘｄ≠Ｘｅである。好ましくはＸａ＝Ｘｄ、Ｘｂ＝Ｘｅ）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ６（Ｘｂ）及びＲ６（Ｘｂ'）（ここで、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｂ'は、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｂ'である）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。
　別の一例においては、Ｒ１（Ｘａ）、Ｒ７（Ｘｂ）、Ｒ７（Ｘｂ'）及びＲ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）（ここで、Ｘａ、Ｘｂ及びＸｂ'は、互いに同じ又は異なる値であり、ただしＸｂ≠Ｘｂ'である）の組み合わせに基づいて、被検検体の凝固時間延長要因を推定する。

　あるいは、本発明の方法においては、前記指標Ｒ（例えばＲ１～Ｒ８のいずれか、又はそれらの組み合わせ）に、凝固時間延長要因の推定に用いられる公知の指標、例えば後述するPercent Correction（PC）又はRosner Index（RI）、あるいは、PCやRIの算出式でＡＰＴＴの代わりにＴ（Ｘ）を用いた指標、などを組み合わせて、被検検体の凝固時間延長要因を推定することができる。

　一実施形態においては、被検検体から算出した指標Ｒを推定閾値（以下、単に閾値ともいう）Ｔと比較することで、該被検検体の凝固時間延長要因を推定する。閾値Ｔは、本発明の方法の実施に先立って決定しておくことができる。閾値Ｔは、凝固時間延長要因が既知の検体集団から算出した当該指標Ｒに基づいて決定することができる。閾値Ｔは、凝固時間延長要因の推定に用いる指標の各々について設定され得る；例えば、前述した、Ｒ１～Ｒ８についてそれぞれ閾値Ｔ１～Ｔ８が設定され得る。あるいは、１つの指標について２つ以上の閾値Ｔを設定してもよい。

　一例においては、検体種が既知（例えばLA、Def、又はInh）の検体集団から各検体の指標Ｒを算出し、それらの統計値（例えば、平均値±[ｋ×標準偏差]、最小値÷ｋ、最大値×ｋなど、ｋ≧１）に基づいて閾値Ｔを設定する。被検検体の当該指標Ｒが該閾値Ｔを超えているか否かに基づいて、該被検検体の検体種を推定する。推定手順の例を下記に詳述する。

　手順１）LAのＲ１（Ｘａ）は、他の検体種（Def及びInh）より大きい傾向にある。よって、LAのＲ１（Ｘａ）とDef及びInhのＲ１（Ｘａ）とを区別できる閾値Ｔ１を設定し、これと被検検体のＲ１（Ｘａ）とを比較することで、被検検体の検体種がLAであるか、又はDefもしくはInhであるかを推定することができる。Ｘａは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５である。例えば、被検検体のＲ１（Ｘａ）が閾値Ｔ１より高ければ、該被検検体はLAと推定され、被検検体のＲ１（Ｘａ）が閾値Ｔ１より低ければ、該被検検体はDefもしくはInhと推定される。このときの閾値Ｔ１の好ましい例としては、Defの検体集団から得られたＲ１（Ｘａ）の統計値、LAの検体集団から得られたＲ１（Ｘａ）の統計値、などが挙げられる。

　手順２）さらに、前記手順１）でＲ１（Ｘａ）に基づいてDefもしくはInhと推定された被検検体について、さらに別の指標を用いてDefかInhかを推定することができる。
　一例においては、Defの検体集団から得られたＲ２（Ｘｂ，Ｘｃ）の統計値を閾値Ｔ２とすることができる。Ｘｂは、好ましくは５～５５、より好ましくは５～４５、さらに好ましくは５～４０であり、Ｘｃは、好ましくは１０～９５、より好ましくは１５～９５であり、さらに好ましくは２０～９５であり、Ｘｂ＜Ｘｃである。被検検体のＲ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より高ければ、該被検検体はInhと推定され、被検検体のＲ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より低ければ、該被検検体はDefと推定される。

　前記の閾値Ｔ２にさらに別の閾値を組み合わせて、検体種をより詳細に推定することができる。例えば、Inh検体をインヒビター力価に応じてさらに分類することができる。

　手順２Ａ）インヒビター力価の低いInh検体は、閾値Ｔ２ではDefと区別することが難しい。本手順では、Defの検体集団から得られたＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）の統計値を閾値Ｔ３として、これを前記の閾値Ｔ２と組み合わせて用いる。Ｘｄは、好ましくは５～９０、より好ましくは５０～８０であり、Ｘｅは、好ましくは１０～９５、より好ましくは５５～８５であり、ただしＸｅ－Ｘｄ≧５である。手順２）で閾値Ｔ２に基づいてDefと推定された検体のうち、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３より低い検体はInhと再推定される。このような再推定されたInh検体は、インヒビター力価の低いInh（Inh-L）である。本手順は、インヒビター力価が５以下の低力価Inhを推定することを可能にするため、臨床的に有意義である。

　手順２Ｂ）本手順では、Inhをインヒビター力価に応じて段階的に分類する。Defの検体集団から得られたＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）の統計値に基づいて、２つの閾値Ｔ３ＬとＴ３Ｈ（Ｔ３Ｌ＜Ｔ３Ｈ）を設定し、これらを前記の閾値Ｔ２と組み合わせて用いる。このときＸｄは、好ましくは５～９０、より好ましくは５０～８０であり、Ｘｅは、好ましくは１０～９５、より好ましくは５５～８５であり、ただしＸｅ－Ｘｄ≧５である。
　本手順では、手順２Ａ）と同じく、手順２）で閾値Ｔ２に基づいてDefと推定された検体のうち、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｌより低い検体はInhと再推定される。このようなInh検体はインヒビター力価の低いInh（Inh-L）である。一方、手順２）で閾値Ｔ２に基づいてInhと推定された検体のうち、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｈより高い検体は、インヒビター力価の高いInh（Inh-H）と推定される。残りのＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３ＬとＴ３Ｈの間にあるInhは、中間的なインヒビター力価を有するInh（Inh-M）と推定される。さらに、Inh-Hを後述の手順２Ｃ）にかけ、インヒビター力価のより高いInh（Inh-VH）を推定することができる。

　手順２Ｃ）インヒビター力価がより高いInhを分類することもできる。本手順では、Ｒ１（Ｘａ）に関する第２の閾値Ｔ１'を設定する。閾値Ｔ１'としては、前記手順１）で用いたＲ１（Ｘａ）についてのDefの検体集団からの統計値であって、閾値Ｔ１より低値である値、又は、Ｒ１（Ｘａ'）についてのDefの検体集団からの統計値、などが挙げられる。このとき、Ｘａ＞Ｘａ'であって、Ｘａは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５であり、Ｘａ'は、好ましくは５～８０、より好ましくは５～５０である。
　例えば、手順１）でＲ１（Ｘａ）を用いていた場合、Ｒ１（Ｘａ'）を用いて閾値Ｔ１'を設定する。手順２）でInhと推定された被検検体のうち、Ｒ１（Ｘａ'）が閾値Ｔ１'より高い検体は、インヒビター力価のより高い（例えば力価が７０以上、好ましくは８０以上、より好ましくは９０以上の）Inh（Inh-VH）であると推定することができる。

　手順３）Ｒ４ｓ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）（ここで、Ｘｘは好ましくは５～３０、より好ましくは５～２５、さらに好ましくは５～２０、Ｘｙは好ましくは１０～９５、より好ましくは２５～９５、さらに好ましくは２５～７５、かつＸｚは好ましくは５～９５であるか、又は、Ｘｘは好ましくは４５～７０、より好ましくは５０～６５、Ｘｙは好ましくは１０～４５、より好ましくは１０～３５、かつＸｚは好ましくは５～９５であり、Ｘｘ≠Ｘｙ、好ましくはＸｘ＜Ｘｙ）（以下、簡略化のため単にＲ４ｓという）はＡＰＴＴに応じてばらつくが、LAのＲ４ｓはＡＰＴＴが延長した場合にも比較的大きい値にならない傾向がある。一方、LAのＲ４ｍ（Ｘｘ、Ｘｙ，Ｘｚ）（Ｘｘ、Ｘｙ、Ｘｚは上記のとおり）（以下、簡略化のため単にＲ４ｍという）は他の検体種（Def及びInh）より大きい傾向にある。よって、Ｒ４ｓの閾値Ｔ４ｓと、Ｒ４ｍの閾値Ｔ４ｍを設定し、被検検体のＲ４ｓがＴ４ｓより低く、かつＲ４ｍがＴ４ｍより高いとき、該被検検体をLAと推定することができる。本手順は、前述した手順１）の代わりにLAの推定、好ましくはLAと、DefもしくはInhとの判別に用いることができる。

　手順３Ａ）前記手順１）又は手順３）でLAと推定されなかった被検検体について、Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）（Ｘｂは好ましくは５～３５、より好ましくは５～１０、Ｘｃは好ましくは２０～９５、より好ましくは３５～６５、好ましくはＸｂ＜Ｘｃ）（以下、簡略化のため単にＲ５という）に２つの閾値Ｔ５ＬとＴ５Ｈ（Ｔ５Ｌ＜Ｔ５Ｈ）を設定し、Ｒ５がＴ５Ｌより高くＴ５Ｈより低い被検検体をDefと推定し、それ以外をInhと推定することができる。さらに、Inhと推定された被検検体のうち、Ｒ５が前述のＴ５Ｌより低い検体は、インヒビター力価の低いInh（Inh-L）と推定される。一方、残りのＲ５がＴ５Ｈより高い検体は、比較的高いインヒビター力価のInhと推定され、なかでも、Ｒ４ｍが前述のＴ４ｍより高い検体はインヒビター力価の高いInh（Inh-H）と推定され、低い検体は中間的なインヒビター力価を有するInh（Inh-M）と推定される。

　手順４）あるいは、前記手順１）又は手順３）でLAと推定されなかった被検検体について、Ｒ６（Ｘｂ）を求める。ここで、Ｘｂは、好ましくは３５～９５、より好ましくは６０～９５、さらに好ましくは９０～９５である。Defの検体集団から得られたＲ６（Ｘｂ）の統計値をそれぞれ閾値Ｔ６及びＴ６'とすることができる。被検検体のＲ６（Ｘｂ）がＴ６よりも低ければ、該被検検体はDefと推定され、Ｔ６より高ければ該被検検体はInhと推定される。そして、Inhと推定された被検検体のＲ６（Ｘｂ）がＴ６'よりも高ければ、該被検検体はインヒビター力価の高いInh（Inh-H）と再推定される。

　手順５）あるいは、前記手順１）又は手順３）でLAと推定されなかった被検検体について、Ｒ７（Ｘｂ）、Ｒ７（Ｘｂ'）、及びＲ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）を求める。ここで、Ｘｂ及びＸｂ'はそれぞれ、好ましくは５～９５、より好ましくは７０～９５、ただしＸｂ≠Ｘｂ'である。より好適には、Ｘｂが好ましくは１０～９５、より好ましくは１５～９５、さらに好ましくは７０～９５、Ｘｂ'が好ましくは５～９０、Ｘｂ－５≧Ｘｂ'である。Defの検体集団から得られたＲ７（Ｘｂ）、Ｒ７（Ｘｂ'）、及びＲ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）の統計値をそれぞれ閾値Ｔ７、Ｔ７'及びＴ８とすることができる。被検検体のＲ７（Ｘｂ）及びＲ７（Ｘｂ'）がそれぞれＴ７及びＴ７'よりも低ければ、該被検検体はDefと推定される。被検検体のＲ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）がＴ８よりも高ければ、該被検検体はInhと推定される。

　手順６）Ｒ１（Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）を求めることでLAとそれ以外を区別することができる。Ｘａは、好ましくは５～１００、より好ましくは５～９５、さらに好ましくは５５～９５である。Ｘｄは、好ましくは５～９０、より好ましくは５０～８０であり、Ｘｅは、好ましくは１０～９５、より好ましくは５５～８５であり、ただしＸｅ－Ｘｄ≧５である。被検検体のＲ１（Ｘａ）が閾値Ｔ１より高く、かつＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３より高ければ、該被検検体をLAと推定することができる。このときの閾値Ｔ１及びＴ３の好ましい例としては、Defの検体集団から得られたＲ１（Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）の統計値、LAの検体集団から得られたＲ１（Ｘａ）及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ）の統計値、などが挙げられる。
　本手順を前述した手順１）又は手順３）に置き換えて、LAの推定、好ましくはLAと、DefもしくはInhとの判別に用いることができる。したがって、本手順でLAと推定されなかった被検検体について、続けて前述の手順２）、手順２Ａ～Ｃ）、手順３Ａ）、手順４）、及び手順５）を行うことができることを理解できる。

　前記の手順１）、手順２）、手順２Ａ～Ｃ）、手順３）、３Ａ）、手順４）、手順５）及び手順６）においては、異なる検体種を区別して推定できる限り、「閾値Ｔ１より高い」の代わりに「閾値Ｔ１以上」を使用してもよく、又は「閾値Ｔ１より低い」の代わりに「閾値Ｔ１以下」を使用してもよいことは、当業者であれば理解できるであろう。閾値Ｔ１'、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ３Ｌ、Ｔ３Ｈ、Ｔ４ｓ、Ｔ４ｍ、Ｔ５Ｌ、Ｔ５Ｈ、Ｔ６、Ｔ６'、Ｔ７、Ｔ７'、Ｔ８についても同様である。

　一実施形態においては、上述のＲ１（Ｘ）を用いた手順１、又はＲ４ｓ及びＲ４ｍを用いた手順３の代わりに、Percent Correction（PC）又はRosner Index（RI）を用いて、被検検体の検体種がLAであるか、又はDefもしくはInhであるかを推定することができる。PCとRIは、以下の式にて算出することができる。
　Percent Correction（PC）（％）＝［（Ｓ－Ｍ）／（Ｓ－Ｎ）］×100
　Rosner Index（RI）（％）＝［（Ｍ－Ｎ）／Ｓ］×100
（Ｎ：検体ＮのＡＰＴＴ、Ｍ：検体ＭのＡＰＴＴ、Ｓ：検体ＳのＡＰＴＴ)
　PCは、LAではDef及びInhより小さくなり、RIは、LAではDef及びInhより大きくなる（図１８～２０参照）。好ましくは、LA又はDefの検体集団からPC又はRIについての統計値を算出し、PC又はRIの閾値とする。被検検体のPCが閾値以下（又はより低い）であれば、該被検検体はLAと推定される。あるいは、被検検体のRIが閾値以上（又はより高い）であれば、該被検検体はLAと推定される。あるいは、上記のPC又はRIの式において、検体Ｓ、Ｍ、ＮのＡＰＴＴの代わりに任意のＴｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）をそれぞれ用いて同様の推定を行うことができる。

　被検検体の延長要因（検体種）の推定結果は、任意の形式で出力することができる。必要に応じて、被検検体の検体種の推定結果とともに、被検検体の凝固時間や、凝固反応曲線、凝固反応終了点、Ｔ（Ｘ）曲線などの情報をともに出力することができる。さらに、混合検体についての同様の情報を出力してもよい。好ましくは、被検検体の検体種の推定結果と凝固時間がともに出力される。

５．推定フロー
　一実施形態として、本発明の方法による被検検体の凝固時間延長要因の推定のための例示的フローを図２１に示す。図２１のフローの詳細な手順を下記に示す。
　ｓ１：被検検体の凝固反応を計測する。
　ｓ２：被検検体の反応曲線Ｐｓ（ｉ）を取得する。
　ｓ３：Ｐｓ（ｉ）から測定した凝固時間が延長している場合に、被検検体のＴｓ（Ｘ）を算出する。
　ｓ４：混合検体の凝固反応を計測する。
　ｓ５：混合検体の反応曲線Ｐｍ（ｉ）を取得する。
　ｓ６：Ｐｍ（ｉ）から混合検体のＴｍ（Ｘ）を算出する。
　ｓ７：Ｔｓ（Ｘ）とＴｍ（Ｘ）、及びＴｎ（Ｘ）から指標Ｒｊを算出する。
（指標Ｒｊは、好ましくは上述したＲ１～Ｒ８からなる群より選択される少なくとも１つである）
　ｓ８：指標Ｒｊを閾値Ｔｊと比較する。
　ｓ９：比較結果から被検検体の延長要因を推定する。
　ｓ１０：凝固時間と延長要因を出力する。

　前記の推定フローに従う本発明の凝固時間延長要因の推定方法の一実施形態は、以下の工程を含む：
１－i）被検検体の反応曲線Ｐｓ（ｉ）を取得する工程；
１－ii）該被検検体の凝固時間が延長していた場合に、該被検検体と正常検体との混合検体の凝固反応曲線Ｐｍ（ｉ）、及び該正常検体の凝固反応曲線Ｐｎ（ｉ）を取得する工程；
１－iii）Ｐｓ（ｉ）からＴｓ（Ｘ）を取得し、Ｐｍ（ｉ）からＴｍ（Ｘ）を取得し、かつＰｎ（ｉ）からＴｎ（Ｘ）を取得する工程；
２－i）１つ以上の指標Ｒｊを算出する工程
（ここで、ｊ≧１であり、
　該指標Ｒｊの各々は、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）からなる群より選択される少なくとも１つに基づいて算出され、
　該指標Ｒｊのうち少なくとも１つは、少なくともＴｍ（Ｘ）に基づいて算出される）；
２－ii）該指標Ｒｊを閾値Ｔｊと比較する工程；
２－iii）該比較の結果に基づいて該被検検体の凝固時間延長要因を推定する工程。
　好ましくは、該凝固時間延長要因は、ループスアンチコアグラント陽性、凝固因子欠乏、又は凝固因子インヒビター陽性である。

６．機械学習モデルによる凝固時間延長要因の推定
　本発明の方法の別の一実施形態においては、機械学習で構築された凝固時間延長要因の推定モデル（機械学習モデル）に従って、被検検体の凝固時間延長要因を推定することができる。機械学習のための教師データには、教師検体集団からのＴｍ（Ｘ）に関するデータと、凝固時間延長要因のタイプ（検体種）についてのデータとを用いる。例えば、教師検体集団の各検体についてのＴｍ（Ｘ）の特徴を表す特徴量、例えば前述した指標Ｒを説明変数とし、該教師検体集団の各検体の検体種についてのデータを目的変数とした機械学習により、被検検体の凝固時間延長要因を推定するための機械学習モデルを構築する。

　教師検体集団には、検体種が既知である血液検体集団を用いることができる。好ましい実施形態において、教師検体集団は、凝固時間の延長を示す検体種としてLA、Def、及びInhを含む。好ましくは、検体種Defを、因子活性の相対的な高低に応じて、低活性のDef-1、その他のDef-2の２種に分けてもよい。また好ましくは、検体種Inhを、インヒビター力価の相対的な高低に応じて、高力価のInh-H、低力価のInh-L、中力価のInh-Mの３種に分けてもよく、又は高力価のInh-Hと低中力価のInh-LMの２種に分けてもよい。説明変数に用いる特徴量としては、Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ）、前述した指標Ｒ、例えば、前述したＲ１～Ｒ８（好ましくは、前述したＲ１（Ｘａ）、Ｒ１（Ｘａ'）、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）、及びＲ３（Ｘｄ，Ｘｅ））が挙げられる。これらの指標は、いずれか１つを使用してもよいが、いずれか２つ以上、又はいずれか３つ以上を組み合わせて使用してもよい。さらに、該指標Ｒと、前述したPC、RIなどの従来公知の指標を組み合わせて特徴量として使用してもよい。

　機械学習モデルの構築に用いる機械学習アルゴリズムとしては、サポートベクターマシン（SVM）、ニューラルネットワーク（NN）、決定木、ランダムフォレスト、k近傍法などの公知の機械学習アルゴリズムが挙げられる。構築したモデルに検証用のデータを入力して凝固時間延長要因の推定結果を算出する。該推定結果が実際の結果と最も適合するモデル、例えば、該推定結果の実際の結果に対する正解率が最も大きいモデル、又は該推定結果と実際の結果の誤差が最も小さいモデルを、最適モデルとして選択することができる。

　構築した機械学習モデルは、被検検体についてのＴｍ（Ｘ）の特徴を表す特徴量（すなわち上述した説明変数に対応するデータ）から、該被検検体の凝固時間延長要因の推定結果（LA、Def、又はInh）を出力する。

７．他の凝固反応計測法への応用
　以上、散乱光量に基づく凝固反応計測の場合を例として、本発明の凝固時間延長要因の推定方法を説明した。しかしながら、当業者であれば、上記の散乱光量に基づく方法を他の凝固反応計測法（例えば透過度、吸光度、粘度などに基づく血液凝固反応計測法）を用いた方法に応用することが可能であり、よって当該応用は本発明の範囲に包含される。

８．プログラム及び装置
　上述の本発明の凝固時間延長要因の推定方法は、コンピュータプログラムを用いて自動的に行われ得る。したがって、本発明の一態様は、上述の本発明の凝固時間延長要因の推定方法を行うためのプログラムである。好ましい実施形態において、本発明のプログラムは、前述の図２１のフローを実施するためのプログラムである。また、上述した本発明の方法の一連の工程は、自動分析装置によって自動的に行われ得る。したがって、本発明の一態様は、前述の本発明の凝固時間延長要因の推定方法を行うための装置である。

　本発明の装置の一実施形態について、以下に説明する。本発明の装置の一実施形態は、図２２に示すような自動分析装置１である。自動分析装置１は、制御ユニット１０と、操作ユニット２０と、測定ユニット３０と、出力ユニット４０とを備える。

　制御ユニット１０は、自動分析装置１の全体の動作を制御する。制御ユニット１０は、例えば計算機（パーソナルコンピュータなど）によって構成され得る。制御ユニット１０は、ＣＰＵ、メモリ、ストレージ、通信インターフェース（Ｉ／Ｆ）などを備え、操作ユニット２０からのコマンドの処理、測定ユニット３０の動作の制御、測定ユニット３０から受けた測定データの保存やデータ解析、解析結果の保存、出力ユニット４０による測定データや解析結果の出力の制御、などを行う。さらに制御ユニット１０は、外部メディア、ホストコンピュータなどの他の機器と接続されてもよい。なお、制御ユニット１０において、測定ユニット３０の動作を制御する計算機と、計測データの解析を行う計算機とは、同一であっても、異なっていてもよい。

　操作ユニット２０は、操作者からの入力を取得し、得られた入力情報を制御ユニット１０へと伝達する。例えば、操作ユニット２０は、キーボード、タッチパネル等のユーザーインターフェース（ＵＩ）を備える。出力ユニット４０は、制御ユニット１０の制御下で、測定ユニット３０の計測データや、それに基づく凝固反応曲線Ｐ、凝固反応終了点Ｅ、凝固時間、Ｔ（Ｘ）、指標Ｒ、検体の凝固時間延長要因の推定結果（例えば、LA、Def、Inh、又はそれ以外）などの解析結果を出力する。例えば、出力ユニット４０は、ディスプレイ等の表示装置を備える。

　測定ユニット３０は、血液凝固検査のための一連の操作を実行し、血液検体を含む試料の凝固反応の計測データを取得する。測定ユニット３０は、血液凝固検査に必要な各種の器材や解析モジュール、例えば、血液検体を収める検体容器、検査用試薬を収める試薬容器、検体と試薬との反応のための反応容器、検体、希釈液、試薬などを反応容器に分注するためのプローブ、光源、反応容器内の試料からの散乱光又は透過光を検出するための検出器、検出器からのデータを制御ユニット１０に送るデータ処理回路、制御ユニット１０の指令を受けて測定ユニット３０の操作を制御する制御回路、などを備える。

　制御ユニット１０は、測定ユニット３０が計測したデータに基づいて、検体の凝固時間延長要因の推定を行う。本解析には、上述した凝固反応曲線Ｐ及び凝固時間の取得、ならびに、凝固反応終了点Ｅ及びＴ（Ｘ）の取得、指標Ｒの算出、などが含まれ得る。さらに制御ユニット１０は、算出した指標Ｒを用いた検体の凝固時間延長要因の推定を行ってもよい。あるいは、凝固反応曲線Ｐ及びＥは、測定ユニット３０からの計測データに基づいて制御ユニット１０で取得されてもよく、又は、別の機器、例えば測定ユニット３０で取得され、制御ユニット１０に送られてもよい。制御ユニット１０には、検体の凝固時間、Ｅ、Ｔ（Ｘ）、Ｒの算出に用いるための各種パラメータ（例えば、Ｘ、Ｒの算出のための計算式など）が保存されていてもよい。また制御ユニット１０には、検体の凝固時間延長要因の推定に用いるためのパラメータ（例えば、前述した閾値Ｔなど）や機械学習モデルなどが保存されていてもよい。あるいは、制御ユニット１０は、外部機器又はネットワーク上に保存された該パラメータや基準値を解析の際に取り込んでもよい。

　以上の本解析は、本発明の方法を行うためのプログラムによって実施され得る。したがって、制御ユニット１０は、本発明の凝固時間延長要因の推定方法を行うためのプログラムを備え得る。

　制御ユニット１０での解析結果は、出力ユニット４０に送られ、出力される。出力は、画面への表示、ホストコンピュータへの送信、印刷など、任意の形態をとり得る。出力ユニットからの出力情報は、凝固反応曲線のデータ、凝固反応終了点Ｅ、凝固時間、Ｔ（Ｘ）、指標Ｒ、検体の凝固時間延長要因の推定結果、などを含むことができる。出力ユニットからの出力情報の種類は、本発明のプログラムによって制御され得る。

　以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

方法
１）検体
・正常検体（NP）には、Precision BioLogic IncorporatedのCRYOcheck Pooled Normal Plasma（Ｎ＝１）を用いた（計Ｎ＝１）.
・ＬＡ陽性検体（LA）には、George King Bio-Medical, Inc.のPositive Lupus Anticoagulant Plasma（６つのロットで各Ｎ＝１）と、このうち１ロットを正常血漿で１０倍に希釈した血漿（Ｎ＝１）を用いた（計Ｎ＝７；L-1～L-7）。
・FVIII欠乏血漿（Def）には、FVIII活性値が１％未満であることを確認されているGeorge King Bio-Medical, Inc.のFactor VIII Deficient（４つのロットで各Ｎ＝１）と、このうち２ロットそれぞれに正常血漿を１％と５％添加した計４種の血漿（各Ｎ＝１）を用いた（計Ｎ＝８；D-1～D-8）。
・FVIIIインヒビター陽性検体（Inh）には、George King Bio-Medical, Inc.のFactor VIII Deficient with Inhibitor（３つのロットで各Ｎ＝１）と、この３ロットを正常血漿で２倍から２４倍に希釈した計７種の血漿（各Ｎ＝１）を用いた（計Ｎ＝１０；I-1～I-10）。検体のインヒビター力価（単位はＢＵ／ｍＬ、以下、単に力価ともいう）は、製品の仕様書に従って決定した。正常血漿で希釈した検体の力価は、希釈前の力価と希釈率を基に算出した。
・各検体の混合検体の調製には正常検体（NP）を用いた。

２）凝固反応計測
　測定用試薬は、第１試薬として、ＡＰＴＴ測定用試薬であるコアグピアＡＰＴＴ－Ｎ　ＡＰＴＴ試薬（積水メディカル株式会社製）を、第２試薬として、コアグピアＡＰＴＴ－Ｎ　塩化カルシウム液（２５ｍＭ塩化カルシウム液、積水メディカル株式会社製）を用いた。検体を含む試料の凝固反応計測は、血液凝固自動分析装置ＣＰ３０００（積水メディカル株式会社製）を用いて行った。検体５０μＬをキュベット内にて３７℃で４５秒間加温した後、約３７℃の第１試薬５０μＬを添加し、さらに１７１秒経過後に第２試薬５０μＬを添加して凝固反応を開始させた。反応は３７℃で行った。凝固反応の計測は、キュベットにＬＥＤを光源とする波長６６０ｎｍの光を照射し、０．１秒間隔で９０度側方散乱光の散乱光量を測光した。計測時間は３６０秒間とした。検体を加温して測定する場合は、分析装置の試料加温機能を利用して、測定試薬添加前の検体を３７℃で１２分間加温した。

３）凝固反応曲線の取得
　各検体からの測光データに対してノイズ除去を含む平滑化処理を行った後、測光開始時点の散乱光量が０となるようにゼロ点調整処理して凝固反応曲線Ｐ（ｉ）を作成した。

４）凝固反応終了点Ｅの検出及びＡＰＴＴの決定
　凝固反応曲線Ｐ（ｉ）の積算比Ｚ（ｉ）（ＰＣＴ／ＪＰ２０２０／０４８６７６参照）が積算比閾値Ｚｓ未満となる最も早い時点でのＰ（ｉ）を、凝固反応終了点Ｅとして検出した。積算比閾値Ｚｓは１．００１を用いた。Ｐ（ｉ）がＥの５０％に到達した時点Ｔ（５０）を算出し、ＡＰＴＴとして決定した。時点ｉでの積算比Ｚ（ｉ）は、以下のとおり算出した：
　積算比Ｚ（ｉ）＝Ｐｂ（ｉ）／Ｐａ（ｉ）
　　Ｐａ（ｉ）＝Ｐ（ｉ－２０）からＰ（ｉ－１）までの和
　　Ｐｂ（ｉ）＝Ｐ（ｉ＋１）からＰ（ｉ＋２０）までの和

５）Ｔ（Ｘ）の算出
　各検体について、下記式に基づいて、Ｐ（ｉ）が３）で検出したＥのＸ％に達する時間Ｔ（Ｘ）を算出した。Ｘは１から１００まで１刻みで１００個を設定し、Ｔ（１）～Ｔ（１００）を算出した。なおＸ＝５０のときのＴ（５０）はＡＰＴＴに相当する。
　　Ｐ（Ｔ（Ｘ））＝Ｅ × Ｘ％

検体の凝固反応
　図３に、LA、Def、Inhの各被検検体のＰ（ｉ）（縦軸：散乱光量）（上段図）及びＴ（Ｘ）（下段図）を示す。図３ＡにLA、図３ＢにDef、図３ＣにInhのデータを表す。各図には正常検体（NP）のデータ（点線）がともに示されている。
　図４に、LA、Def、Inhの各被検検体から調製した混合検体（混合比；被検検体：NP＝１：１）のＰ（ｉ）（縦軸：散乱光量）（上段図）及びＴ（Ｘ）（下段図）を示す。図４ＡにLA、図４ＢにDef、図４ＣにInhのデータを表す。各図には正常検体（NP）のデータ（点線）がともに示されている。

　表１には、被検検体（LA、Def、Inh）のインヒビター力価及びＡＰＴＴ、ならびに、各被検検体から調製した混合検体（混合比；被検検体：NP＝１：１）のＡＰＴＴ（加温前ＡＰＴＴ，a）、該混合検体を加温処理（３７℃、１２分間）した検体のＡＰＴＴ（加温後ＡＰＴＴ，b）、及び加温前後の混合検体のＡＰＴＴ差（b－a）が示されている。

　図５Ａには、被検検体のＡＰＴＴを示す。LA、Def、InhのＡＰＴＴ分布範囲は重複しており、ＡＰＴＴでは検体種を判別できないことが確認された。
　加温前後の混合検体のＡＰＴＴ差（b－a）について、検体種ごとの分布を図５Ｂに、Inh検体の力価に対するプロットを図５Ｃに示す。Inhでは混合検体の加温処理によってＡＰＴＴ差（b－a）が生じた検体があったが、LAとDefでは混合検体の加温処理でＡＰＴＴはほとんど変化しなかった。InhのＡＰＴＴ差（b－a）は、力価に応じて増加したが直線関係ではなかった。また、力価５以下のInhは、ＡＰＴＴ差（b－a）ではDefと区別できなかった。

実施例１
　図６Ａには、検体種が異なるがＡＰＴＴが同程度(１００秒付近)である３種の被検検体のＰ（ｉ）を、NPのデータとともに示す。Ｐ（ｉ）の形状はＡＰＴＴが同程度であっても検体種ごとに異なっていた。DefとInhは、Ｐ（ｉ）の形状が似た傾向があり、またいずれも曲線の上昇は比較的緩やかであった。LAでは、ＡＰＴＴが延長していても曲線の上昇は比較的急峻であった。
　一方、混合検体の凝固反応は、被検検体とは異なる挙動を示した。図６Ｂに、図６Ａに示す３種の被検検体からそれぞれ調製した混合検体（混合比；被検検体：NP＝１：１）のＰ（ｉ）を示す。Def及びInh由来の混合検体（Def-M11及びInh-M11）では、Ｐ（ｉ）の形状がNPに近づき、ＡＰＴＴは正常範囲（２４～３９秒）内であった。一方、LA由来の混合検体（LA-M11）では、Ｐ（ｉ）の形状は元の検体(図６ＡのLA)と似ており、ＡＰＴＴも、短縮がみられるものの延長したままであった。

　図７Ａ～Ｃは、図６Ａ及びＢに示した被検検体及び混合検体のＴ（Ｘ）（Ｔｓ（Ｘ）及びＴｍ（Ｘ））を表した図である。図７Ａは、LA及びその混合検体LA-M11のデータを、図７Ｂは、Def及びその混合検体Def-M11のデータを、図７Ｃは、Inh及びその混合検体Inh-M11のデータを示す。各図には、NPについてのＴｎ（Ｘ）がともに示されている。主にＴｓ（Ｘ）と比べたＴｍ（Ｘ）の下方（Ｔｎ（Ｘ）に近づく方）へのシフトに起因して、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）を表す曲線の相対的な配置が、検体種により異なっていた。Ｔｍ（Ｘ）の下方シフトは、LA（図７Ａ）では少なく、Def及びInh（図７Ｂ及びＣ）で大きかった。この結果は、任意のＸにおけるＴｓ（Ｘ）とＴｍ（Ｘ）との差［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］、及びＴｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）との差［Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ）］は、検体種によって異なることを示唆している。すなわち、DefとInhの［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］は、LAの当該値と比べて大きく、一方、DefとInhの［Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ）］は、LAの当該値と比べて小さい。またDefとInhの間では［Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｍ（Ｘ）］又は［Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ）］の差は小さい。

実施例２
　図６Ａに示した被検検体（LA、Def、及びInh）について、混合比（被検検体：NP）１：９、１：１、９：１の混合検体を調製した。各混合検体のＴｍ（Ｘ）を算出した。Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）は実施例１と同じ値を用いた。これらのＴｍ（Ｘ）、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）を用いて、各混合検体について、下記の指標を算出した。
　ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100

　図８Ａ～Ｃに、図６Ａに示した各被検検体由来の混合検体について算出したＦＴ１（Ｘ）をプロットした。図８Ａは、混合比（被検検体：NP）が１：９の混合検体（１：９混合検体）のデータ、図８Ｂは、混合比（被検検体：NP）が１：１の混合検体（１：１混合検体）のデータ、図８Ｃは、混合比（被検検体：NP）が９：１の混合検体（９：１混合検体）のデータをそれぞれ示す。各図とも、１点鎖線はLA由来検体、２点鎖線はDef由来検体、実線はInh由来検体を表す。図８Ａ～Ｃにおいて、LAのＦＴ１（Ｘ）は、DefとInhより大きく、またＸが０から６０辺りまでの範囲では変化が小さく水平状態に近かった。一方、DefとInhのＦＴ１（Ｘ）は、どちらもＸが大きくなるにつれて低下し、Ｘ＝９５付近で最小であった。InhのＦＴ１（Ｘ）はDefよりやや大きく、また両者のＦＴ１（Ｘ）の差は、Ｘが小さいほど広がる傾向があった。これらの結果から、ＦＴ１（Ｘ）に基づいてLAをDefとInhから判別できること、またDefとInhを互いに判別できる可能性があることが示唆された。

　図８のとおりDefとInhのＦＴ１（Ｘ）は、Ｘ＝９５付近で最小となったため、各混合検体について、下記の指標を算出した。
　ΔＦＴ１_X-95＝［ＦＴ１（Ｘ）－ＦＴ１（９５）］
　図８Ａ～Ｃの混合検体についてのΔＦＴ１_X-95のプロットを、それぞれ図９Ａ～Ｃに示す。特にＸが４０以下のとき、DefとInhでΔＦＴ１_X-95の値が異なり、さらに混合検体における被検検体の比率がより高いと、DefとInhのΔＦＴ１_X-95の差はより大きくなった。この結果から、ΔＦＴ１_X-95に基づいてDefとInhを判別できることが示唆された。

実施例３
　Defの１検体（ＡＰＴＴは１０８秒）、及び力価の異なるInhの２検体（力価１８及び力価５、ＡＰＴＴはそれぞれ１０５秒と５７秒）の計３検体について、混合比（被検検体：NP）１：１の混合検体を調製した。各混合検体のＴｍ（Ｘ）を算出した。Ｔｎ（Ｘ）は実施例１と同じ値を用いた。これらのＴｍ（Ｘ）、Ｔｎ（Ｘ）を用いて、各混合検体について、下記の指標を算出した。
　ＦＴ２（Ｘ）＝Ｔｍ（Ｘ）／Ｔｎ（Ｘ）×100
　ＦＴ３（Ｘ，９５）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｍ（９５））／（Ｔｎ（Ｘ）－Ｔｎ（９５））×100

　図１０Ａ～Ｃは、３検体についてのΔＦＴ１_X-95（図１０Ａ）、ＦＴ２（Ｘ）（図１０Ｂ）及びＦＴ３（Ｘ，９５）（図１０Ｃ）のプロットを示す。各図とも、２点鎖線はDef由来混合検体、実線及び破線は、それぞれ力価１８及び力価５のInh由来の混合検体を表す。
　ΔＦＴ１_X-95では、力価５のInhは、Defと力価１８のInhの間に位置していたが、Defとの判別が困難であった。ＦＴ２（Ｘ）は、DefとInhで値に違いがあったが、Ｘが小さくなるとDefと力価１８のInhの値が近づいた。ＦＴ３（Ｘ，９５）は、DefとInhで値に違いがあり、かつＸが小さくなると（特にＸが約４０以下の範囲で）Defと力価１８のInhの値がより大きくなった。これらの結果から、ＦＴ３（Ｘ）がDefとInhをより詳細に判別する指標として好適であることが示唆された。

実施例４
　実施例２及び３で述べた指標ＦＴ１（Ｘ）、ΔＦＴ１_X-95、及びＦＴ３（Ｘ，９５）を用いてLA、Def、Inhの判別を試みた。Ｔｍ（Ｘ）の算出には、混合比（被検検体：NP）１：１の混合検体を用いた。

１）ＦＴ１（Ｘ）、ΔＦＴ１
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～３を算出した。
　指標１；ＦＴ１（９５）
　指標２；ＦＴ１（１０）
　指標３；ΔＦＴ１_10-95＝［ＦＴ１（１０）－ＦＴ１（９５）］
〔ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100〕
　指標１～３のそれぞれについて、Def（D-1～D-8）の平均値及び標準偏差（SD）を求め、該平均値＋4SDを各指標についての閾値に設定した。
　算出した各被検検体の指標１と２を図１１ＡとＢに、DefとInhの指標３を図１１Ｃに、またInhの指標３の力価に対するプロットを図１１Ｄに示す。各図中の点線は、閾値を示す。
　指標１は、LAがDefやInhより高値を示した（図１１Ａ）。Inhの指標２と指標３はDefより高い傾向があったが、一部のInhではDefと区別できなかった（図１１Ｂ、Ｃ）。力価５以下のInhは、指標３が閾値よりも低くDefと区別できなかったが、力価が５より高いInhでは、指標３が力価とともに増加しかつ閾値を超えており、Defと異なる分布を示した（図１１Ｄ）。

　各被検検体の指標１～３を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値、かつ指標３＜閾値の場合：「Def」
　（iii）指標２＜閾値、かつ指標３≧閾値の場合：「Inh (In2)」
　（iv）指標２≧閾値、かつ指標３≧閾値の場合：「Inh (In1)」
　各被検検体の指標１～３、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表２に示す。本推定基準に従って、LAを他の検体種（Def及びInh）と判別することができ、かつ力価５を超えるInh（In2；I-4～I-7、I-10）を正しく判別することができた。また指標２により、力価９２以上の高力価Inh（In1；I-8～I-9）を判別することができた。一方、力価５以下の低力価Inh（I-1～I-3）はDefと判別された。

２）ＦＴ１（Ｘ）、ΔＦＴ１、ＦＴ３（Ｘ₁，Ｘ₂）
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～３を算出した。
　指標１；ＦＴ１（９５）
　指標２；ΔＦＴ１_10-95＝［ＦＴ１（１０）－ＦＴ１（９５）］
　指標３；ＦＴ３（１０，９５）
〔ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100
　ＦＴ３（Ｘ₁，Ｘ₂）＝（Ｔｍ（Ｘ₁）－Ｔｍ（Ｘ₂））／（Ｔｎ（Ｘ₁）－Ｔｎ（Ｘ₂））×100〕
　指標１～２のそれぞれについて、Def（D-1～D-8）の平均値＋4SDを閾値に設定した。指標３については、Def（D-1～D-8）の平均値－2SDを閾値に設定した。
　Def及びInhの指標３を図１２Ａに、Inhの指標３の力価に対するプロットを図１２Ｂに示す。各図中の点線は、閾値を示す。Defの指標３は検体間であまり変わらなかった。Inhは、指標３がDefより低い検体、Defより高い検体、Defと同程度の検体に分かれた（図１２Ａ）。Inhの指標３は、力価に比例しており、力価５以下の３検体で閾値より小さくなった（図１２Ｂ）。

　各被検検体の指標１～３を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値、かつ指標３≧閾値の場合：「Def」
　（iii）指標２≧閾値、かつ指標３≧閾値の場合：「Inh (In1)」
　（iv）指標２＜閾値、かつ指標３＜閾値の場合：「Inh (In2)」
　各被検検体の指標１～３、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表３に示す。本推定基準に従って、LA、Def及びInhを互いに判別することができ、また力価５以下の低力価Inh（In2；I-1～I-3）と、それ以外のInh検体（In1；I-4～I-10）とを判別することができた。

３）ＦＴ１（Ｘ）、ΔＦＴ１、ＦＴ３（Ｘ₁，Ｘ₂）
　上記２）で算出した指標１～３を用いた。閾値には、指標１～２については上記２）と同じ閾値を用い、指標３については、閾値Ｌ：Def（D-1～D-8）の平均値－2SD、及び閾値Ｈ：Def（D-1～D-8）の平均値＋4SDの２つの閾値を用いた。指標１～３を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値、かつ指標３≧閾値Ｌの場合：「Def」
　（iii）指標３＞閾値Ｈの場合：「Inh (In1)」
　（iv）指標３≧閾値Ｌ、かつ指標３≦閾値Ｈの場合：「Inh (In2)」
　（v）指標３＜閾値Ｌの場合：「Inh (In3)」
　各被検検体の指標１～３、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表４に示す。本推定基準に従って、LA、Def及びInhを互いに判別することができ、またInhを力価に応じて、低力価（≦５）（In3）、中力価（In2）及び高力価（≧２６）（In1）の３段階に分類することができた。

４）９：１混合検体
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１、２を算出した。Ｔｍ（Ｘ）の算出に混合比（被検検体：NP）９：１の混合検体を用いた。
　指標１；ＦＴ１（１０）
　指標２；ＦＴ３（１０，８５）
〔ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100
　ＦＴ３（Ｘ₁，Ｘ₂）＝（Ｔｍ（Ｘ₁）－Ｔｍ（Ｘ₂））／（Ｔｎ（Ｘ₁）－Ｔｎ（Ｘ₂））×100〕
　指標１については、Def（D-1～D-8）の平均値＋4SDを閾値に設定した。指標２については、閾値Ｌ：Def（D-1～D-8）の平均値－2.5SD、及び閾値Ｈ：Def（D-1～D-8）の平均値＋2.5SDの２つの閾値を設定した。
　算出した各被検検体の指標１～２を図１３Ａ～Ｂに、Inhの指標２の力価に対するプロットを図１３Ｃに示す。図１３Ａ中の点線は指標１の閾値を示す。図１３Ｂ、Ｃ中の点線は指標２の閾値Ｌを、破線は指標２の閾値Ｈを示す。LAの指標１はDefやInhより高値を示した（図１３Ａ）。LAとInhの指標２はDefより高い傾向があったが。一部のInhの指標２はDefと区別できなかった（図１３Ｂ）。Inhの指標２は、力価に比例して増加したが、低力価の場合には閾値Ｌ又は閾値Ｈを超えず、Defと区別できなかった（図１３Ｃ）。

　各被検検体の指標１、２を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２≧閾値Ｌの場合、かつ指標２≦閾値Ｈの場合：「Def」
　（iii）指標２＞閾値Ｈの場合：「Inh (In1)」
　（iv）指標２＜閾値Ｌの場合：「Inh (In2)」
　各被検検体の指標１、２、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表５に示す。本推定基準に従って、LA、Def及びInhを互いに判別することができ、また低力価（≦５）のInh（In2；I-1～I-3）を判別することができた。
　本推定基準では、指標２が閾値Ｌ以上閾値Ｈ以下となるInhが存在した場合、それをDefと判別することができない可能性がある。しかしクロスミキシング試験の遅延反応のように検体の長時間のインキュベーションを必要とせずにLAや一部Inhの判別が可能になるという点で、従来法に対する利点を有する。

５）１：９混合検体
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～４を算出した。Ｔｍ（Ｘ）の算出に混合比（被検検体：NP）１：９の混合検体を用いた。
　指標１；ＦＴ１（９５）
　指標２；ＦＴ１（１０）
　指標３；ΔＦＴ１_10-95＝［ＦＴ１（１０）－ＦＴ１（９５）］
　指標４；ＦＴ３（１０，９５）
〔ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100
　ＦＴ３（Ｘ₁，Ｘ₂）＝（Ｔｍ（Ｘ₁）－Ｔｍ（Ｘ₂））／（Ｔｎ（Ｘ₁）－Ｔｎ（Ｘ₂））×100〕
　指標１と４については、Def（D-1～D-8）の平均値＋3SDを閾値に設定した。指標２と３については、Def（D-1～D-8）の平均値＋2SDを閾値に設定した。
　算出した各被検検体、又はDefとInhの指標１～４を図１４Ａ～Ｄに、Inhの指標４の力価に対するプロットを図１４Ｅに示す。各図中の点線は閾値を示す。
　指標１、２、４は、LAがDefやInhより高い傾向があったが、DefとInhを判別できなかった（図１４Ａ、Ｂ、Ｄ）。Inhの指標３はDefより高い傾向があったが。一部のInhではDefと区別できなかった（図１４Ｃ）。Inhの指標４は、力価に比例して増加する傾向があった（図１４Ｅ）。

　各被検検体の指標１～４を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値、かつ指標４＞閾値の場合：「LA」
さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値、指標３＜閾値：「Def」
　（iii）指標３＜閾値、かつ指標４≦閾値の場合：「Inh (In3)」
　（iv）指標３≧閾値、かつ指標４≦閾値の場合：「Inh (In2)」
　（v）指標３≧閾値、かつ指標４＞閾値の場合：「Inh (In1)」
　各被検検体の指標１～４、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表６に示す。本推定基準に従って、Inhの１検体（I-3）以外は、LA、Def及びInhを正しく判別することができた。さらに本基準は、被検検体の比率が低い混合検体を使用することができるので、少量の被検検体で検体種の推定を可能にする。これは、被検者からの採血量の低減を可能にするという利点をもたらし得る。例えば、被検検体に凝固時間の延長が見られたときに、被検者から新たに採血する必要なく、残りの検体で検体種の推定を行うことを可能にし得る。

実施例５
１）１：１混合検体
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～３を算出した。Ｔｍ（Ｘ）の算出には、混合比（被検検体：NP）１：１の混合検体を用いた。
　指標１＝ＦＴ４ｓ（５，３５，５０）
　指標２＝ＦＴ４ｍ（５，３５，５０）
　指標３＝ＦＴ５（５，３５）
〔ＦＴ４ｓ（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）＝［（Ｔｓ（Ｘ₂）－Ｔｓ（Ｘ₁））／Ｔｓ（Ｘ₃）］×100
　ＦＴ４ｍ（Ｘ₁，Ｘ₂，Ｘ₃）＝［（Ｔｍ（Ｘ₂）－Ｔｍ（Ｘ₁）］／Ｔｍ（Ｘ₃）］×100
　ＦＴ５（Ｘ₁，Ｘ₂）＝［（Ｔｍ（Ｘ₂）－Ｔｍ（Ｘ₁））×100〕
　指標１～３のそれぞれについて、Def（D-1～D-8）の平均値及び標準偏差（SD）を求めた。閾値には、指標１については該平均値＋2SD、指標２については該平均値－2SDを用い、指標３については、閾値Ｌ：該平均値－1.5SD、及び閾値Ｈ：該平均値＋2SDの２つの閾値を用いた。算出した各被検検体の指標１～３を図１５Ａ、Ｂ及びＣに、またInhの指標３の力価に対するプロットを図１５Ｄに示す。各図中の点線及び破線は、閾値を示す。

　指標１～３を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＜閾値、かつ指標２＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標３≧閾値Ｌ、かつ指標３＜閾値Ｈの場合：「Def」
　（iii）指標３＜閾値Ｌの場合：「Inh (In3)」
　（iv）指標２≦閾値、かつ指標３≧閾値Ｈの場合：「Inh (In2)」
　（v）指標２＞閾値、かつ指標３≧閾値Ｈの場合：「Inh (In1)」
　各被検検体の指標１～３、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表７に示す。本推定基準に従って、LA、Def及びInhを互いに判別することができ、またInhを力価に応じて判別することができた。

２）９：１混合検体及び１：９混合検体の組み合わせ
　混合比（被検検体：NP）が９：１及び１：９の混合検体（それぞれ、９：１混合検体及び１：９混合検体）をそれぞれ調製し、それぞれのＴｍ（Ｘ）を算出した。被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～２を算出した。
　指標１；９：１混合検体のＦＴ１（５）
　指標２；ＦＴ６（９５）
〔ＦＴ１（Ｘ）＝［（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））］×100
　ＦＴ６（Ｘ）＝［９：１混合検体のＴｍ（Ｘ）－１：９混合検体のＴｍ（Ｘ）］〕
　指標１～２のそれぞれについて、Def（D-1～D-8）の平均値及び標準偏差（SD）を求めた。指標１は、閾値：平均値＋4SDを用いた。指標２については、閾値Ｌ：平均値＋2SD、及び閾値Ｈ：平均値＋6SDを用いた。算出した各被検検体の指標１～２を図１６Ａ、及びＢに、またInhの指標２の力価に対するプロットを図１６Ｃに示す。図１６Ａ中の点線は閾値を示し、図１６Ｂ及びＣの点線は閾値Ｌを、破線は、閾値Ｈを示す。

　指標１～２を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値Ｌ：「Def」
　（iii）指標２＞閾値Ｈの場合：「Inh (In1)」
　（iv）指標２≦閾値Ｈの場合：「Inh (In2)」
　各被検検体の指標１～２、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表８に示す。本推定基準に従って、LAを他の検体種（Def及びInh）と判別することができ、かつDefも正しく判別することができた。Inhについては、力価４６以上の高力価Inh（In1；I-6～I-9）、力価１８以上で４６未満の中力価Inh（In2；I-4、I-5）を判別することができた。一方、力価５以下の低力価Inh（I-1～I-3）はDefと判別された。

実施例６
　被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１～４を算出した。Ｔｍ（Ｘ）の算出には、混合比（被検検体：NP）１：１の混合検体を用いた。
　指標１＝ＦＴ１（４５）
　指標２＝ＦＴ２（５）
　指標３＝ＦＴ２（４５）
　指標４＝ＦＴ２（４５）－ＦＴ２（５）
〔ＦＴ１（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））／（Ｔｓ（Ｘ）－Ｔｎ（Ｘ））×100
　ＦＴ２（Ｘ）＝（Ｔｍ（Ｘ）／Ｔｎ（Ｘ））×100〕
　指標１～４のそれぞれについて、Def（D-1～D-8）の平均値及び標準偏差（SD）を求めた。閾値には、指標１については該平均値＋4SD、指標２～４については該平均値＋1SDを用いた。算出した各被検検体の指標１～４を図１７Ａ～Ｄに、またInhの指標４の力価に対するプロットを図１７Ｅに示す。各図中の点線は閾値を示す。

　指標１～４を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＞閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２＜閾値、かつ指標３＜閾値の場合：「Def」
　（iii）指標４＞閾値の場合：「Inh」
　各被検検体の指標１～４、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表９に示す。本推定基準に従って、LAを他の検体種（Def及びInh）と判別することができ、かつ力価５を超えるInhを正しく判別することができた。一方、力価５以下のInh（I-1～I-3）はDefと判別された。

比較例
　従来のＡＰＴＴに基づく指標であるPercent Correction（PC）及びRosner Index（RI）を用いてLA、Def、Inhの判別を試みた。

１）１：１混合検体
　ＡＰＴＴをＴ（５０）として、被検検体（LA、Def、Inh）について下記指標１、２を算出した。Ｔｍ（Ｘ）の算出には、混合比（被検検体：NP）１：１の混合検体を用いた。
　指標１；PC（％）＝（Ts(50)-Tm(50)）／（Ts(50)-Tn(50)）×100
　指標２；RI（％）＝（Tm(50)-Tn(50)）／Ts(50)×100
　指標１については、Def（D-1～D-8）の平均値－4SDを閾値に設定した。指標２については、Def（D-1～D-8）の平均値＋2SDを閾値に設定した。
　被検検体の指標１、２を図１８Ａ、Ｂに、Inhの指標１，２の力価に対するプロットを図１８Ｃ、Ｄに示す。各図中の点線は、閾値を示す。指標１、２とも、LAはDefやInhと異なる分布を示したが、DefやInhの分布は重なっていた（図１８Ａ、Ｂ）。Inhでは、指標１は、力価１８を頂点とした山形の形状に分布し、指標２は、力価１８を最下点としたＪ字状に分布した（図１８Ｃ、Ｄ）。
　各被検検体の指標１、２を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、下記の基準で被検検体の検体種を推定した。
＜推定基準＞
　（i）指標１＜閾値の場合：「LA」
　さらに残りの検体を以下の順に分けた。
　（ii）指標２≦閾値の場合：「Def」
　（iii）指標２＞閾値の場合：「Inh」
　各被検検体の指標１、２、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表１０に示す。本推定基準では、LAを他の検体種（Def及びInh）と判別することができた。しかしInhについては、力価４６以上の高力価検体を判別することができたが、力価４６未満のInhはDefと区別することができなかった。

２）９：１混合検体
　混合比（被検検体：NP）９：１の混合検体を用いて、上記１）で算出した指標１、２を算出した。指標１については、Def（D-1～D-8）の平均値－3.5SDを閾値に設定した。指標２については、Def（D-1～D-8）の平均値＋1.5SDを閾値に設定した。
　被検検体の指標１、２を図１９Ａ、Ｂに、Inhの指標１，２の力価に対するプロットを図１９Ｃ、Ｄに示す。各図中の点線は、閾値を示す。指標１は、LAがDefやInhより下側に分布したが、DefとInhの分布は重なっていた（図１９Ａ）。指標２は、LAとInh、DefとInhの分布が重なっていた。（図１９Ｂ）。Inhでは、指標１は、力価１８を頂点とした山形の形状に分布し、指標２は、力価１８を最下点としたＪ字状に分布した（図１９Ｃ、Ｄ）。
　各被検検体の指標１、２を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、上記１）の推定基準で被検検体の検体種を推定した。各被検検体の指標１、２、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表１１に示す。本推定基準では、LAを他の検体種（Def及びInh）と判別することができたが、Inhについては１：１混合検体（表１０）の場合と同様に、力価４６以上の高力価検体を判別することができたが、力価４６未満のInhは、Defと区別することができなかった。

３）１：９混合検体
　混合比（被検検体：NP）１：９の混合検体を用いて、上記１）で算出した指標１、２を算出した。指標１については、Def（D-1～D-8）の平均値－4SDを閾値に設定した。指標２については、Def（D-1～D-8）の平均値＋2.5SDを閾値に設定した。
　被検検体の指標１、２を図２０Ａ、Ｂに、Inhの指標１，２の力価に対するプロットを図２０Ｃ、Ｄに示す。各図中の点線は、閾値を示す。指標１、２とも、LAはDefやInhと異なる分布を示したが、DefやInhの分布は重なっていた（図２０Ａ、Ｂ）。Inhでは、指標１は、力価２６を頂点とした山形の形状に分布し、指標２は、力価１８を最下点としたＪ字状に分布した（図２０Ｃ、Ｄ）。
　各被検検体の指標１、２を閾値と比較し、その比較結果に基づいて、上記１）の推定基準で被検検体の検体種を推定した。
　各被検検体の指標１、２、これらの指標と閾値との比較結果、及び推定された検体種を表１２に示す。本推定基準では、LAは、１検体（L-2）のみDefと推定されたが、その他はDef及びInhと判別することができた。Inhについては力価９２以上の高力価検体しか判別することができず、力価９２未満のInhは、Defと区別することができなかった。

Claims

　凝固時間延長要因の推定方法であって、
１）Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）を取得すること、
２）Ｔｍ（Ｘ）に基づいて、検体Ｓの凝固時間延長要因を推定すること、
を含み、
　ここで、
　Ｔｍ（Ｘ）は、検体Ｍの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、
　Ｔｎ（Ｘ）は、検体Ｎの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｎのＸ％に達する計測点又は時間を表し、
　Ｅｍは、検体Ｍの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、
　Ｅｎは、検体Ｎの凝固反応曲線における凝固反応終了点であり、
　該検体Ｓは、凝固時間が延長している被検血液検体であり、
　該検体Ｎは、正常血液検体であり、
　該検体Ｍは、該検体Ｓと該検体Ｎとの混合検体であり、
　Ｘは０より大きく１００以下である、
方法。
　前記１）が、前記検体Ｓの凝固反応曲線における凝固反応終了点Ｅｓを検出し、Ｅｓに基づいてＴｓ（Ｘ）を取得することをさらに含み、
　Ｔｓ（Ｘ）は、該検体Ｓの凝固反応曲線がＥｓのＸ％に達する計測点又は時間を表す、
請求項１記載の方法。
を含む、方法。
　前記２）が下記の工程：
（i）１つ以上の指標Ｒｊを算出する工程
（ここで、ｊ≧１であり、
　該指標Ｒｊの各々は、Ｔｓ（Ｘ）、Ｔｍ（Ｘ）及びＴｎ（Ｘ）からなる群より選択される少なくとも１つに基づいて算出され、
　該指標Ｒｊのうち少なくとも１つは、少なくともＴｍ（Ｘ）に基づいて算出される）；
（ii）該指標Ｒｊを閾値Ｔｊと比較する工程；
（iii）該比較の結果に基づいて前記検体Ｓの凝固時間延長要因を推定する工程、
を含み、
　該凝固時間延長要因は、ループスアンチコアグラント陽性、凝固因子欠乏、又は凝固因子インヒビター陽性である、
請求項２記載の方法。
　前記２）が、
　以下のＲ１～Ｒ８：
　Ｒ１：特定のＸにおける、Ｔｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差と、Ｔｓ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の差との間の比を反映する指標、
　Ｒ２：特定のＸの範囲におけるＲ１（Ｘ）の変化量を表す指標、
　Ｒ３：特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量と、Ｔｎ（Ｘ）の変化量との比を反映する指標、
　Ｒ４：前記検体Ｓ又は前記検体Ｍについての、特定のＸの範囲におけるＴ（Ｘ）の相対変化率を反映する指標、
　Ｒ５：特定のＸの範囲におけるＴｍ（Ｘ）の変化量を反映する指標、
　Ｒ６：前記検体Ｓと前記検体Ｎとの混合比率の異なる前記検体Ｍの間での、Ｔｍ（Ｘ）の差を反映する指標、
　Ｒ７：特定のＸにおけるＴｍ（Ｘ）とＴｎ（Ｘ）の比を反映する指標、
　Ｒ８：特定のＸの範囲におけるＲ７（Ｘ）の変化量を表す指標、
からなる群より選択される少なくとも１つの指標を算出すること、
　該算出した指標を用いて前記検体Ｓの凝固時間延長要因を推定すること、
を含む、請求項２記載の方法。
　前記２）が、以下の指標：
　Ｒ１（Ｘａ）＝［（Ｔｍ（Ｘａ）－Ｔｎ（Ｘａ））／（Ｔｓ（Ｘａ）－Ｔｎ（Ｘａ））］
（ここで、Ｘａ＝５～１００）
を算出すること、
　Ｒ１（Ｘａ）が閾値Ｔ１より高い場合に、前記検体Ｓをループスアンチコアグラント陽性と推定し、それ以外の場合、前記検体Ｓを凝固因子欠乏又は凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、
請求項２記載の方法。
　前記２）が、以下の指標：
　Ｒ４ｓ（Ｘｘ，Ｘｙ，Ｘｚ）＝［（Ｔｓ（Ｘｘ）－Ｔｓ（Ｘｙ））／Ｔｓ（Ｘｚ）］
　Ｒ４ｍ（Ｘｘ，Ｘｙ，Ｘｚ）＝［（Ｔｍ（Ｘｘ）－Ｔｍ（Ｘｙ））／Ｔｍ（Ｘｚ）］
（ここで、Ｘｘ＝５～３０、Ｘｙ＝１０～９５、かつＸｚ＝５～９５であるか、又は、Ｘｘ＝４５～７０、Ｘｙ＝１０～４５、かつＸｚ＝５～９５であり、かつ、Ｘｘ≠Ｘｙである）
を算出すること、
　Ｒ４ｓの閾値Ｔ４ｓと、Ｒ４ｍの閾値Ｔ４ｍを設定し、前記検体ＳのＲ４ｓが閾値Ｔ４ｓより低く、かつＲ４ｍが閾値Ｔ４ｍより高いとき、該検体Ｓをループスアンチコアグラント陽性と推定すること、
を含む、
請求項２記載の方法。
　ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）＝［Ｒ１（Ｘｂ）－Ｒ１（Ｘｃ）］、
（ここで、Ｘｂ＝５～５５、Ｘｃ＝１０～９５、Ｘｂ≠Ｘｃ）
を算出すること、
　Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より高ければ、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定し、Ｒ２（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ２より低ければ、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定すること、
を含む、請求項５又は６記載の方法。
　前記凝固因子欠乏と推定された検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）＝［Ｔｍ（Ｘｄ）－Ｔｍ（Ｘｅ）］／［Ｔｎ（Ｘｄ）－Ｔｎ（Ｘｅ）］
（ここで、Ｘｄ＝５～９０、Ｘｅ＝１０～９５、Ｘｅ－Ｘｄ≧５）
を算出すること、
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３より低ければ、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、請求項７記載の方法。
　前記凝固因子欠乏と推定された検体Ｓが、指標Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｌより低いとき、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、及び
　該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３Ｈより高いとき、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体と推定し、該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）が閾値Ｔ３ＬとＴ３Ｈの間にあるとき、該検体Ｓを中間的なインヒビター力価を有する凝固因子インヒビター陽性検体と推定すること、
を含み、
　ここで
　Ｒ３（Ｘｄ，Ｘｅ）＝［Ｔｍ（Ｘｄ）－Ｔｍ（Ｘｅ）］／［Ｔｎ（Ｘｄ）－Ｔｎ（Ｘｅ）］（ここで、Ｘｄ＝５～９０、Ｘｅ＝１０～９５、Ｘｅ－Ｘｄ≧５）
　Ｔ３Ｌ＜Ｔ３Ｈ
である、
請求項７記載の方法。
　前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ１（Ｘａ'）＝［（Ｔｍ（Ｘａ'）－Ｔｎ（Ｘａ'））／（Ｔｓ（Ｘａ'）－Ｔｎ（Ｘａ'））］（ここで、Ｘａ'＝５～８０）
を算出すること、
　Ｒ１（Ｘａ'）が閾値Ｔ１'より高い場合、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定すること、
を含む、請求項７記載の方法。
　ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、以下の指標：
　Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）＝［Ｔｍ（Ｘｃ）－Ｔｍ（Ｘｂ）］
（ここで、Ｘｂ＝５～３５、Ｘｃ＝２０～９５、Ｘｂ＜Ｘｃ）
を算出すること、
　Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｌより高く、かつ閾値Ｔ５Ｈより低い場合（ここでＴ５Ｌ＜Ｔ５Ｈ）、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、それ以外の場合、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、請求項５又は６記載の方法。
　前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｌより低いとき、該検体Ｓをインヒビター力価の低い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定するか、又は、該凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓが、Ｒ５（Ｘｂ，Ｘｃ）が閾値Ｔ５Ｈより高いとき、該検体Ｓを比較的高いインヒビター力価の凝固因子インヒビター陽性検体であると推定することを含む、請求項１１記載の方法。
　ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、以下の指標：
　　Ｒ７（Ｘｂ）＝［Ｔｍ（Ｘｂ）／Ｔｎ（Ｘｂ）］
　　Ｒ７（Ｘｂ'）＝［Ｔｍ（Ｘｂ'）／Ｔｎ（Ｘｂ'）］
　　Ｒ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）＝［Ｒ７（Ｘｂ）－Ｒ７（Ｘｂ'）］
（ここで、Ｘｂ＝５～９５、Ｘｂ'＝５～９５、Ｘｂ≠Ｘｂ'）
を算出すること、
　Ｒ７（Ｘｂ）が閾値Ｔ７より低く、かつＲ７（Ｘｂ'）が閾値Ｔ７'より低い場合、該検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、Ｒ８（Ｘｂ，Ｘｂ'）が閾値Ｔ８よりも高い場合、該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、請求項５又は６記載の方法。
　さらに以下：
　ループスアンチコアグラント陽性と推定されなかった前記検体Ｓについて、Ｔｍ_A（Ｘ）及びＴｍ_B（Ｘ）を取得すること
（ここで、Ｔｍ_A（Ｘ）は、混合検体Ａの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、Ｔｍ_B（Ｘ）は、混合検体Ｂの凝固反応曲線が凝固反応終了点ＥｍのＸ％に達する計測点又は時間を表し、混合検体Ａは、前記検体Ｓと前記検体Ｎの容量比が９：１の混合検体であり、混合検体Ｂは、前記検体Ｓと前記検体Ｎの容量比が１：９の混合検体であり、Ｘは０より大きく１００以下である）；
　以下の指標：
　Ｒ６（Ｘｂ）＝［Ｔｍ_A（Ｘｂ）－Ｔｍ_B（Ｘｂ）］
（ここでＸｂ＝３５～９５）
を算出すること；
　Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６よりも低い場合、該被検体Ｓを凝固因子欠乏と推定し、Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６より高ければ該検体Ｓを凝固因子インヒビター陽性と推定すること、
を含む、請求項５又は６記載の方法。
　前記凝固因子インヒビター陽性と推定された検体Ｓについて、Ｒ６（Ｘｂ）が閾値Ｔ６'よりも高い場合、該検体Ｓをインヒビター力価の高い凝固因子インヒビター陽性検体であると推定することを含む、請求項１４記載の方法。
　請求項１又は２記載の方法を実施するためのプログラム。
　請求項１又は２記載の方法を実施するための装置。