WO2022181273A1 - ペプチド測定における品質管理用標準溶液、及びペプチド測定の品質管理 - Google Patents

ペプチド測定における品質管理用標準溶液、及びペプチド測定の品質管理 Download PDF

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Abstract

ペプチド（タンパク質を含む）測定における品質管理用標準溶液、及びペプチド（タンパク質を含む）測定の品質管理を提供する。対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料であって、ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含む、ＱＣ標準試料。測定対象の前記ペプチドが、例えば、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む。前記安定同位体標識されたペプチドが、例えば、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む。

Description

ペプチド測定における品質管理用標準溶液、及びペプチド測定の品質管理
　本発明は、生体由来試料分析、及びペプチド（タンパク質を含む）定量分析の分野に属し、ペプチド測定における品質管理用標準溶液、及びペプチド測定の品質管理に関する。
　種々の生体由来試料分析、及びペプチド（タンパク質を含む）定量分析は、免疫沈降法（Immunoprecipitation; IP）－質量分析（ＩＰ－ＭＳ）、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）、及びガスクロマトグラフィー－質量分析（ＧＣ－ＭＳ）などにより行われている。
　これらの分析機器を用いて多検体のペプチドを測定するに際しては、得られた分析データの品質管理は重要である。すなわち、多検体のペプチド測定において、検体の測定の時期に係わらず、いずれの検体についても、ある一定の基準に基づいて精度の良い分析データを得る必要がある。
　例えば、非特許文献１には、質量分析と連結したガスクロマトグラフィー及び液体クロマトグラフィーを用いた血清及び血漿の大規模代謝プロファイリングの手順が開示され、ＧＣ－ＴＯＦ－ＭＳ分析において、１０７３頁，第１９項に、各分析バッチの開始時にＱＣサンプルが注入されることが開示されている。また、ＵＰＬＣ－ＴＯＦ－ＭＳ分析において、１０７４頁，ＢＯＸ１に、各分析バッチの開始時にＱＣサンプルが注入されることが開示されている。
　得られた分析データが品質的に採用されるべきか否かを判断するために、通常の測定において、連続する複数検体の測定の前後に品質管理用標準溶液の測定を行うことが考えられる。
　一方、近年では、バイオマーカーとして有用な種々のペプチド（タンパク質を含む）が見つけられ、それらの正確な定量分析が求められる。
　例えば、国際公開ＷＯ２０１５／１７８３９８（そのファミリー米国公開ＵＳ２０１７／０１８４５７３）、国際公開ＷＯ２０１７／０４７５２９（そのファミリー米国公開ＵＳ２０１８／０２３８９０９）には、脳内のアミロイド・βペプチド（Ａβ）蓄積状態を評価するサロゲート・バイオマーカー及びその分析方法が開示されている。
国際公開ＷＯ２０１５／１７８３９８ 米国公開ＵＳ２０１７／０１８４５７３ 国際公開ＷＯ２０１７／０４７５２９ 米国公開ＵＳ２０１８／０２３８９０９
　多検体のバイオマーカーペプチド測定において、検体の測定の時期に係わらず、いずれの検体についても、ある一定の基準に基づいて精度の良い分析データを得る必要がある。しかしながら、上記各特許文献には、多検体のペプチドを測定するに際して、得られた分析データの品質管理については、何ら言及されていない。
　そこで、本発明の目的は、ペプチド（タンパク質を含む）測定における品質管理用標準溶液（Quality Control Standard for Peptide Measurement）、及びペプチド（タンパク質を含む）測定の品質管理（Quality Control for Peptide Measurement）を提供することにある。
　本明細書において、品質管理用標準溶液（Quality Control Standard for Peptide Measurement）を「ＱＣ標準試料」、「ＱＣ標準溶液」、「ＱＣ試料」、あるいは単に「標準試料」、「標準溶液」なとど表記することがある。
　多検体のペプチド測定において、検体の測定の時期に係わらず、いずれの検体についても、ある一定の基準に基づいて精度の良い分析データを得る必要がある。そのために、実試料（検体）の測定に先立って、及び／又は実試料（検体）の測定の後に、品質管理用標準溶液を測定して、品質管理用標準溶液の測定結果の変動が実質的にないか又は少ないことを確かめる。品質管理用標準溶液の測定結果の変動が実質的にないか又は少なければ、それら品質管理用標準溶液の測定の間に行われた実試料（検体）の測定結果は品質管理において適正であったと考えられる。
　品質管理用標準溶液は、なるべく実試料（検体）とその組成条件が同一又は近いことが望ましい。この観点から、多検体の分析において、各検体の一部を少しずつ集めてプールしたものを品質管理用標準溶液とすることが望ましい。しかしながら、多検体分析プロジェクト開始前に全ての検体が採取されていない場合や、各検体の量が少量しかない場合などでは、各検体の一部を集めて品質管理用標準溶液を調製することは困難である。
　これらの事情から、品質管理用標準溶液として、市販の（ヒト）血液サンプル（血清サンプル、血漿サンプル）が用いられている。
　しかしながら、市販の（ヒト）血液サンプル（血清サンプル、血漿サンプル）を品質管理用標準溶液として用いる場合、市販（ヒト）血液サンプル中に含まれる測定対象となるペプチドの含有量は不明であり、実試料（検体）中の測定対象ペプチドの含有量とかなり乖離している可能性がある。
　例えば、測定対象のバイオマーカーペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである場合、市販の（ヒト）血液サンプル（血清サンプル、血漿サンプル）には、どの程度の量のアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドが含まれているのかは不明であり、実試料（検体）中のアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドの含有量とかなり乖離している可能性がある。従って、市販の（ヒト）血液サンプルに、測定対象のバイオマーカーペプチドをスパイク（添加）するとしても、該バイオマーカーペプチドの適切なスパイク量も決定することができない。
　もともと、市販の（ヒト）血液サンプルは、特定のバイオマーカーペプチドの測定を目的とするものでもない。
　本発明者は、鋭意検討し、品質管理用標準溶液として、血液試料中に安定同位体標識されたペプチドをスパイクすることにより、安定同位体標識されたペプチドの量（あるいは、安定同位体標識されたペプチドが複数種の場合には、それらの量の比）を基準として、分析データの品質管理を行うことができることを見出した。前記安定同位体標識されたペプチドは、元来、生体由来の血液試料中にも、疑似血液試料中にも存在していないものであるが、測定対象のペプチドと基本構造が同じ又は類似であれば、同じ物理化学的挙動で分析され得る。
　本発明は、以下の発明を含む。
　対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料であって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含む、ＱＣ標準試料。
　多検体血液試料中の対象ペプチドを測定する方法であって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含むＱＣ標準試料の測定を行う開始ＱＣ工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う中間ＱＣ工程と、
　前記検体測定工程と、前記中間ＱＣ工程とを所定回数繰り返す工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う最終ＱＣ工程と、
を含む、ペプチド測定方法。
　前記各検体測定工程において、１つ以上９つ以下の血液試料の連続測定を行う、上記のペプチド測定方法。
　さらに、
　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において測定された各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルが、所定の基準値に対して、－２０％以上＋２０％以下の正常範囲内であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は合格とし、一方、前記正常範囲の外であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は不合格とする判定工程と、
　各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方が合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用し、一方、各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方又は一方が不合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用しないと決定する採否決定工程と、
を含む、上記のペプチド測定方法。
　対象ペプチド測定用のＱＣ標準試料キットであって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、
　該血液試料にスパイクされるべき安定同位体標識されたペプチドと、
を含む、ＱＣ標準試料キット。
　本発明において、ペプチドには、タンパク質も含まれる。ペプチドのレベルとは、基本的には濃度を意味するが、当業者が濃度に準じて用いる他の単位、例えば、質量分析における検出イオン強度であってもよい。
　測定対象となる検体は、ヒト、及びヒト以外の哺乳動物（例えば、ラット、イヌ、ネコなど）などからの生体由来試料（例えば、血液、脳脊髄液（ＣＳＦ）、尿、体分泌液、唾液、痰などの体液；　及び糞便）であり得る。生体由来試料は、由来元の被験対象（例えば、被験者）に戻すことなくは破棄される。
　本発明によれば、対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料は、ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含んでいる。前記安定同位体標識されたペプチドは、元来、生体由来の血液試料中にも、疑似血液試料中にも存在していないものである。従って、ＱＣ標準試料として、血液試料中に安定同位体標識されたペプチドをスパイクすることにより、種々の変動要因に左右されることなく、安定同位体標識されたペプチドの量を基準として、分析データの品質管理を行うことができる。
　本発明によれば、対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料は、ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含んでいる。前記安定同位体標識されたペプチドは、元来、生体由来の血液試料中にも、疑似血液試料中にも存在していないものであるが、測定対象のペプチドと化学構造が同じ又は類似であれば、同じ物理化学的挙動で分析され得る。従って、ＱＣ標準試料として、血液試料中に、測定対象のペプチドと化学構造が同じ又は類似であり且つ安定同位体標識されたペプチドをスパイクすることにより、種々の変動要因に左右されることなく、安定同位体標識されたペプチドの量を基準として、分析データの品質管理を行うことができる。
　前記安定同位体標識されたペプチドが複数種の場合には、それらの量の比を基準として、分析データのより信頼性のある品質管理を行うことができる。
　本発明によれば、対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料を用いて、多検体血液試料中の対象ペプチドを測定するに際して、分析データの品質管理を行うことができる。
　さらに、本発明によれば、前記対象ペプチド測定用のＱＣ標準試料を作製するためのキットが提供される。
多検体を測定する際の概略フロー図である。 Ｎ＝２７データからのＱＣ試料（標準血漿）のＳＩＬ－アミロイドペプチド比基準値決定のフロー図である。 多検体（検体数：４２）を質量分析する際の９６ウェルプレート上でのサンプル配置例を示す図である。
　本発明の一実施形態において、対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料は、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含んでいる。
［分析対象物質］
　まず、分析対象物質について詳しく説明する。
　分析対象物質は、特に限定されないが、例えば、ペプチド、糖ペプチド、糖鎖、タンパク質、脂質、糖脂質等が含まれ得る。ペプチド、糖ペプチド、糖鎖、タンパク質、脂質や糖脂質には種々のものが含まれ得る。より具体的には、Ａβ及びＡβ関連ペプチドであってもよい。「Ａβ及びＡβ関連ペプチド」は単に「Ａβ関連ペプチド」と総称することもある。「Ａβ及びＡβ関連ペプチド」には、アミロイド前駆タンパク質（Amyloid precursor protein；ＡＰＰ）が切断されることにより生じるＡβ及びＡβの配列を一部でも含むペプチドが含まれる。
　例えば、Ａβ関連ペプチドには、以下のようなものが含まれる。
ＡＰＰ６７７－７０９（Ａβ６－３８）（配列番号１）：
HDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGG

ＡＰＰ６７２－７０４（Ａβ１－３３）（配列番号２）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIG

ＡＰＰ６７７－７１１（Ａβ６－４０）（配列番号３）：
HDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV

ＡＰＰ６７２－７０６（Ａβ１－３５）（配列番号４）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLM

ＡＰＰ６７２－７０８（Ａβ１－３７）（配列番号５）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVG

ＡＰＰ６７４－７１１（Ａβ３－４０）（配列番号６）：
EFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV

ＡＰＰ６７２－７１１（Ａβ１－４０）（配列番号７）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV

ＯｘＡＰＰ６７２－７１１（ＯｘＡβ１－４０）（配列番号８）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV （Met ７０６が酸化されている）

ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）（配列番号９）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

ＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）：
VKMDAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV

ＡＰＰ６７２－７０９（Ａβ１－３８）（配列番号１１）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGG

ＡＰＰ６７２－７１０（Ａβ１－３９）（配列番号１２）：
DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGV
　アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）は、膜一回貫通タンパク質で７７０残基のアミノ酸から成る。アミロイド前駆タンパク質（ＡＰＰ）は、βセクレターゼとγセクレターゼによってタンパク質分解を受け、タンパク質分解によってアミロイド・ベータペプチド（Ａβ）が産生される。ＡＰＰ６７２－７１３とＡβ１－４２とは同じペプチドを表す（配列番号９）。また、ＡＰＰ６７２－７１１とＡβ１－４０とは同じペプチドを表す（配列番号７）。
　上述のようなＡβ関連ペプチドのうち、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－４０（配列番号７）、ＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）、Ａβ１－３９（配列番号１２）は、アルツハイマー病に関して、有効なバイオマーカーである。また、
　ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）レベルに対するＡＰＰ６６９－７１１レベルの比：
ＡＰＰ６６９－７１１／ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）、

　ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）レベルに対するＡＰＰ６７２－７１１（Ａβ１－４０）レベルの比：
ＡＰＰ６７２－７１１（Ａβ１－４０）／ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）、

　ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）レベルに対するＡＰＰ６７４－７１１（Ａβ３－４０）レベルの比：
ＡＰＰ６７４－７１１（Ａβ３－４０）／ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）、及び

　ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）レベルに対するＡＰＰ６７２－７１０（Ａβ１－３９）レベルの比：
ＡＰＰ６７２－７１０（Ａβ１－３９）／ＡＰＰ６７２－７１３（Ａβ１－４２）

などもアルツハイマー病に関して、有効なバイオマーカーである。
　また、ペプチドは、免疫沈降法（ＩＰ）により得られたペプチドであってもよい。あるいは、ペプチダーゼなどの酵素によるタンパク質の消化によって生成されたペプチドや、クロマトグラフィーにより分画されたペプチドであってもよい。
　分析対象物質には、内部標準物質を含んでいてもよい。内部標準物質は、当業者が適宜選択することができる。例えば、安定同位体標識された物質を用いてもよい。分析対象物質のうちの１つの物質に安定同位体標識したものを用いてもよい。実施例においては、内部標準物質として安定同位体で標識されたＡβ１－３８（ＳＩＬ－Ａβ１－３８）を用いた例が示されている。本明細書において、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する。
　分析対象物質を含む試料が質量分析に供される。質量分析に供される前記試料は、特に限定されないが、例えば、生体由来試料であってもよい。生体由来試料には、血液、脳脊髄液（ＣＳＦ）、尿、体分泌液、唾液、及び痰などの体液；及び糞便が含まれる。血液試料には、全血、血漿及び血清などが含まれる。血液試料は、個体から採取された全血を、適宜処理することによって調製することができる。採取された全血から血液試料の調製を行う場合に行われる処理としては特に限定されず、臨床学的に許容されるいかなる処理が行われてよい。例えば遠心分離などが行われうる。また、質量分析に供される血液試料は、その調製工程の中途段階又は調製工程の後段階において、適宜冷凍など低温下での保存が行われたものであってよい。なお、本発明において血液試料などの生体由来試料が質量分析に供される場合は、その生体由来試料は由来元の被験者に戻すことなく破棄される。
　質量分析に供される前記試料は、種々の前処理が行われた後の試料であってもよい。例えば、免疫沈降法（ＩＰ）を行った後であってもよい。ペプチダーゼなどの酵素によるタンパク質の消化後であってもよい。クロマトグラフィーを行った後であってもよい。質量分析に供される前記試料は、一定量の内部標準物質を添加したものを用いてもよい。
　質量分析に供される前記試料は、予め、免疫沈降法を行った後に、免疫沈降法で得られた溶出液を質量分析に供してもよい（免疫沈降－質量分析Immunoprecipitation-mass spectrometry；ＩＰ－ＭＳ）。免疫沈降法は、分析対象物質を認識可能な抗原結合部位を持つ免疫グロブリン、または分析対象物質を認識可能な抗原結合部位を含む免疫グロブリン断片を用いて作製された抗体固定化担体を用いて行ってもよい。
　また、質量分析に供される前記試料は、連続的に免疫沈降（Consecutive Immunoprecipitation；ｃＩＰ）を行い、その後、質量分析装置での試料中ペプチドの検出を行ってもよい（ｃＩＰ－ＭＳ）。２回連続でアフィニティ精製を行うことにより、１回のアフィニティ精製だけでは排除しきれなかった夾雑物質を、２回目のアフィニティ精製によりさらに減少させることができる。このため、夾雑物質によるポリペプチドのイオン化抑制を防ぐことができ、生体試料中の微量なポリペプチドでも質量分析で高感度に計測することが可能となる。
［ＱＣ標準試料］
　対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料は、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含んでいる。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料が、生体由来試料の場合には、通常、種々のペプチドが含まれている。血液試料に含まれているペプチドには、測定対象のペプチドも含まれ得るが、測定対象ではないペプチドも含まれ得る。前記血液試料は、全血液、血漿、及び血清からなる群から選ばれ得る。通常の前処理が行われていてもよい。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料が、生体由来試料以外の場合としては、疑似血液、疑似血漿、及び疑似血清からなる群から選ばれ得る。これら疑似試料の場合には、測定対象に応じて、所望のペプチドをスパイク（添加）しておくとよい。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記ペプチドと化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識されたペプチドを含んでいるとよい。前記ＱＣ標準試料が、測定対象のペプチドに対応する化学的に同じ又は類似の構造の安定同位体標識されたペプチドを含んでいることにより、前記ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましいであろう。
　ここで、測定対象の前記ペプチドと化学的に「類似の」構造を有するペプチドについて、例えば、測定対象ペプチドがアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドから選ばれるペプチドである場合には、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドに含まれるペプチドは、測定対象の前記ペプチドと化学的に「類似の」構造を有するペプチドに該当するであろう。このような場合、前記ＱＣ標準試料が、測定対象のペプチドに対応する化学的に「類似の」構造の安定同位体標識されたペプチドを含んでいることにより、前記ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましいであろう。
　測定対象の前記ペプチドと化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識されたペプチドは、元来生体由来の血液試料中にも、疑似血液試料中にも存在していないものであるが、測定対象のペプチドと化学構造が同じ又は類似であれば、同じ物理化学的挙動で質量分析され得る。従って、前記ＱＣ標準試料として、血液試料中に、測定対象のペプチドと化学構造が同じ又は類似であり且つ安定同位体標識されたペプチドをスパイクすることにより、種々の変動要因に左右されることなく、安定同位体標識されたペプチドの量を基準として、分析データの品質管理を行うことができる。
　前記ＱＣ標準試料が、測定対象のペプチドに対応する化学的に「同じ」構造の安定同位体標識されたペプチドを含んでいることにより、「類似の」構造の安定同位体標識されたペプチドを含んでいるよりも、前記ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件により近くなり好ましいであろう。
　また、測定対象の前記ペプチドが、複数種のペプチドであってもよい。この場合、前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記複数種のペプチドとそれぞれ化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識された複数種のペプチドを含んでいるとよい。測定対象のペプチドに対応する安定同位体標識されたペプチドを含んでいることにより、ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましいであろう。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、実際の測定対象試料（検体）の組成条件の近い値を考慮して、所定の基準範囲内の量で含まれているとよい。実際に含まれている量が「基準値」となり得る。
　詳細には、測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである場合には、前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドであることが好ましい。ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましい。
　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む場合には、
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含んでもよい。
　例えば、安定同位体標識されたＳＩＬ－Ａβ１－３８は、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。
　安定同位体標識されたＳＩＬ－Ａβ１－４２は、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。
　安定同位体標識されたＳＩＬ－Ａβ１－４０は、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。
　安定同位体標識されたＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１は、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。
　このように、前記安定同位体標識されたペプチドは、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。これらは、化学合成により得ても良いし、あるいは、市販品として入手してもよい。
　具体的には、測定対象の前記ペプチドが、
　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　測定されたペプチドレベルの比：
Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
がバイオマーカーとして用いられる場合には、
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
が所定の基準範囲内とされているとよい。ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましい。
　より具体的には、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量としての質量分析ピーク強度の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
の基準範囲内とされているとよい。ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましい。
　ピーク強度の比が、上記範囲の値になるように前記安定同位体標識されたペプチドの添加量を調整すればよい。
　ピーク強度の比は、例えば、各ピーク強度を内部標準ペプチド（ＳＩＬ－Ａβ１－３８）で標準化して、それらの比を算出するとよい。さらに、用いる各質量分析装置で補正した値を得て、それらの比を算出するとよい。
　このように、前記安定同位体標識されたペプチドは、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであってもよく、あるいは、全ての窒素原子14Ｎが15Ｎに置換されたものであってもよい。これらは、化学合成により得ても良いし、あるいは、市販品として入手してもよい。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドの存在量としての質量分析ピーク強度の比について、実際にＱＣ標準試料に含まれている量が「基準値」となり得る。
　これら、前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドの存在量については、例えば、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くすることを考慮すれば、前記ＱＣ標準試料中における濃度で表して、それぞれ、
ＳＩＬ－Ａβ１－４０の濃度：４５～１２１ｐＭ
ＳＩＬ－Ａβ１－４２の濃度：４～１３ｐＭ
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１の濃度：４～１１ｐＭ
のようにすればよい。ただし、このような範囲に限定されることはない。また、実際の存在量（ｐＭ）の比と質量分析のピーク強度の比とは必ずしも一致しないため、上記質量分析ピーク強度比としての基準を用いることが有用である。ペプチドによって免疫沈降（ＩＰ）収率やＭＳのイオン化効率が異なるため、実際のペプチド濃度比と質量分析ピーク強度の比とは異なり得る。
［ペプチド測定方法］
　本発明の一実施形態において、図１を参照して、多検体血液試料中の対象ペプチドを測定する方法は、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含むＱＣ標準試料の測定を行う開始ＱＣ工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う中間ＱＣ工程と、
　前記検体測定工程と、前記中間ＱＣ工程とを所定回数繰り返す工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う最終ＱＣ工程と、
を含む。
　前記各検体測定工程において、血液試料の連続測定を行う。例えば、１つ以上９つ以下の血液試料の連続測定を行ってもよい。
　本発明の一実施形態において、多検体血液試料中の対象ペプチドを測定する方法は、さらに、
　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において測定された各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルが、所定の基準値に対して、－２０％以上＋２０％以下の正常範囲内であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は合格とし、一方、前記正常範囲の外であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は不合格とする判定工程と、
　各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方が合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用し、一方、各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方又は一方が不合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用しないと決定する採否決定工程と、
を含んでいてもよい。
　測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドであってもよい。
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドであってもよい。
　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む場合には、
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含んでもよい。
　具体的には、測定対象の前記ペプチドが、
　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　測定されたペプチドレベルの比：
Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
がバイオマーカーとして用いられ、
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
が所定の基準範囲内とされているとよい。ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましい。
　より具体的には、前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量としての質量分析ピーク強度の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
の基準範囲内とされているとよい。ＱＣ標準試料の組成が、実際の測定対象試料（検体）の組成条件に近くなり好ましい。
　前記安定同位体標識されたＳＩＬ－ペプチドの質量分析ピーク強度の各比は、上記の範囲に限定されることはない。これら各比の値については、ペプチドによって免疫沈降（ＩＰ）収率やＭＳのイオン化効率が異なるため、実際のペプチド濃度比と質量分析ピーク強度の比とは異なり得るため、質量分析装置の手法（ＭＡＬＤＩ、又はＥＳＩなど）や、質量分析装置の種類（メーカー、モデル型式、レーザーの種類など）で最適範囲値は異なり得る。上記の各比の範囲は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ製のＡＸＩＭＡ－ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅTMで測定した場合の例である。
　前記ＱＣ標準試料の血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドの存在量としての質量分析ピーク強度の比について、実際にＱＣ標準血漿を質量分析測定して得られたペプチドピーク強度の比が「基準値」となり得る。
　ペプチド測定は、免疫沈降法（Immunoprecipitation; IP）－質量分析（ＩＰ－ＭＳ）、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）、又はガスクロマトグラフィー－質量分析（ＧＣ－ＭＳ）により測定を行うことができる。
［質量分析］
　質量分析法は、特に限定されないが、マトリックス支援レーザー脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ）質量分析法、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析法などによる質量分析法が含まれる。例えば、ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ（マトリックス支援レーザー脱離イオン化－飛行時間）型質量分析装置、ＭＡＬＤＩ－ＩＴ（マトリックス支援レーザー脱離イオン化－イオントラップ）型質量分析装置、ＭＡＬＤＩ－ＩＴ－ＴＯＦ（マトリックス支援レーザー脱離イオン化－イオントラップ－飛行時間）型質量分析装置、ＭＡＬＤＩ－ＦＴＩＣＲ（マトリックス支援レーザー脱離イオン化－フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴）型質量分析装置、ＥＳＩ－ＱｑＱ（エレクトロスプレーイオン化－三連四重極）型質量分析装置、ＥＳＩ－Ｑｑ－ＴＯＦ（エレクトロスプレーイオン化－タンデム四重極－飛行時間）型質量分析装置、ＥＳＩ－ＦＴＩＣＲ（エレクトロスプレーイオン化－フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴）型質量分析装置等を用いることができる。
　マトリックス及びマトリックス溶媒は、分析対象物質に応じて当業者が適宜決定することができる。
　マトリックスとしては、例えば、α－シアノ－４－ヒドロキシ桂皮酸（ＣＨＣＡ）、２，５-ジヒドロキシ安息香酸（２，５－ＤＨＢ）、シナピン酸、３－アミノキノリン（３－ＡＱ）等を用いることができる。
　マトリックス溶媒としては、例えば、アセトニトリル（ＡＣＮ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、メタノール、エタノール及び水からなる群から選択して用いることができる。より具体的には、ＡＣＮ－ＴＦＡ水溶液、ＡＣＮ水溶液、メタノール－ＴＦＡ水溶液、メタノール水溶液、エタノール－ＴＦＡ水溶液、エタノール溶液などを用いることができる。ＡＣＮ－ＴＦＡ水溶液におけるＡＣＮの濃度は例えば１０～９０体積％であり、ＴＦＡの濃度は例えば０．０５～１体積％、好ましくは０．０５～０．１体積％でありうる。
　マトリックス濃度は、例えば０．１～５０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは０．１～２０ｍｇ／ｍＬ、あるいは０．３～２０ｍｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．５～１０ｍｇ／ｍＬでありうる。
　ＭＡＬＤＩ質量分析による検出系を用いる場合、マトリックス添加剤（コマトリックス）が併用されることが好ましい。マトリックス添加剤は、分析対象（ポリペプチド）及び／又はマトリックスに応じて当業者が適宜選択することができる。例えば、マトリックス添加剤として、ホスホン酸基含有化合物を用いることができる。具体的には、ホスホン酸基を１個含む化合物として、ホスホン酸（Phosphonic acid）、メチルホスホン酸（Methylphosphonic acid）、フェニルホスホン酸（Phenylphosphonic acid）、及び1-ナフチルメチルホスホン酸（1-Naphthylmethylphosphonic acid）等が挙げられる。また、ホスホン酸基を２個以上含む化合物として、メチレンジホスホン酸（Methylenediphosphonic acid；ＭＤＰＮＡ）、エチレンジホスホン酸（Ethylenediphosphonic acid）、エタン-1-ヒドロキシ-1,1-ジホスホン酸（Ethane-1-hydroxy-1,1-diphosphonic acid）、ニトリロトリホスホン酸（Nitrilotriphosphonic acid）、及びエチレンジアミノテトラホスホン酸（Ethylenediaminetetraphosphonic acid）等が挙げられる。上記のホスホン酸基含有化合物の中でも、１分子中に２以上、好ましくは２～４個のホスホン酸基を有する化合物が好ましい。
　ホスホン酸基含有化合物の使用は、例えば抗体固定化担体表面に残存した洗浄溶液の金属イオンが解離工程後の溶出液に混入した場合に有用である。この金属イオンは質量分析においてバックグラウンドへ悪影響を与える。ホスホン酸基含有化合物の使用には、このような悪影響を抑制する効果がある。
　なお、上記マトリックス添加剤以外にも、より一般的な添加剤、例えばアンモニウム塩及び有機塩基からなる群から選ばれる物質が使用されても良い。
　マトリックス添加剤は、水中又はマトリックス溶媒中０．１～１０ｗ／ｖ％、好ましくは０．２～４ｗ／ｖ％の溶液に調製することができる。マトリックス添加剤溶液及びマトリックス溶液は、例えば、１：１００～１００：１、好ましくは１：１０～１０：１の体積比で混合することができる。
［ＱＣ標準試料キット］
　本発明の一実施形態において、対象ペプチド測定用のＱＣ標準試料キットは、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、
　該血液試料にスパイクされるべき安定同位体標識されたペプチドと、
を含む。
　前記ＱＣ標準試料キットにおいて、前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）と、
を含んでもよい。前記ＱＣ標準試料キットには、その他の必要な成分を含むことができる。その他の必要な成分としては、例えば、内部標準として用いられるＳＩＬ－Ａβ１－３８、各種緩衝溶液などが挙げられる。
　以下に実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に制限されるものではない。以下において％で示される物の量は、特に断りがない場合は、液体である場合は体積基準で示されている。
［実験例１：標準血漿の調製］
　ＱＣ試料（標準血漿）の準備方法のプロトコル例を示す。
　ＳＩＬ－Ａβ１－３８は、AnaSpec（San Jose, CA, USA）を使用した。ＳＩＬ－Ａβ１－３８は、Ａβ１－３８のＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものである。

　ＳＩＬ－Ａβ１－４０は、rPeptide（Watkinsville, GA, USA）を使用した。ＳＩＬ－Ａβ１－４０は、Ａβ１－４０の全ての窒素原子が15Ｎで置換されているものである。

　ＳＩＬ－Ａβ１－４２は、rPeptide（Watkinsville, GA, USA）を使用した。ＳＩＬ－Ａβ１－４２は、Ａβ１－４２の全ての窒素原子が15Ｎで置換されているものである。

　ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１は、rPeptide（Watkinsville, GA, USA）を使用した。ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１は、ＡＰＰ６６９－７１１の全ての窒素原子が15Ｎで置換されているものである。
［実験例１－１：血漿へのＳＩＬ－ペプチドのスパイク］
[1]  １ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、０．１％（ｗ／ｖ）ＤＤＭ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ-ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ９．０）で希釈した５０ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４０、５ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び５ｎＭのＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１の各１００μＬずつを、１００ｍＬのヒト血漿に添加した。これを「ＳＩＬスパイク血漿－１」と称する。
[2]  ＳＩＬスパイク血漿－１を転倒混和により十分に混合した。
[3]  ＳＩＬスパイク血漿－１の９００μＬを２本の１．５ｍＬ容マイクロチューブへ分取し、分取した２本と残りのＳＩＬスパイク血漿－１とを、それぞれ、－６０℃以下で凍結した。
[4]  ９００μＬ分取・凍結した内の１本を融解し、連続免疫沈降法（Consecutive Immunoprecipitation; ｃＩＰ）－質量分析（ｃＩＰ－ＭＳ）を実施した（ＩＰ繰り返し回数３回）。ＩＰ－ＭＳ操作の詳細は、以下のとおりであった。
［連続免疫沈降法(Consecutive Immunoprecipitation;ｃＩＰ)］
（抗体固定化ビーズの用意）
　アミロイドβタンパク質（Ａβ）の３－８残基をエピトープとする抗Ａβ抗体（IgG）のクローン６Ｅ１０（Covance社）を用意した。
　抗Ａβ抗体（ＩｇＧ）１００μｇに対して、磁性ビーズ（Dynabeads（登録商標）M-270 Epoxy）約３．３×１０8 個を、固定化緩衝液（１．３Ｍ 硫酸アンモニウムを含有する０．１Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７．４））中で３７℃、１６～２４時間反応させることにより、抗Ａβ ＩｇＧ固定化ビーズを作製した。
（第１反応工程）
　上記ＳＩＬスパイク血漿－１の２５０μＬに、安定同位体標識されたＡβ１－３８(ＳＩＬ－Ａβ１－３８）を１１ｐＭで含んでいる第一ＩＰ反応緩衝液（０．２％（ｗ／ｖ） ＤＤＭ, ０．２％（ｗ／ｖ）ＮＴＭ, ８００ｍＭ ＧｌｃＮＡｃ, １００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）, ３００ｍＭ ＮａＣｌ） ２５０μＬを混合させた後、氷上で５～６０分間静置させた。ＳＩＬ－Ａβ１－３８は、ＰｈｅとＩｌｅの炭素原子が13Ｃで置換されているものであり、マススペクトルのシグナル強度を標準化するための内部標準として用いた。その血漿を抗Ａβ ＩｇＧ固定化ビーズと混ぜて、４℃のペルチェチラーで１時間振盪およびピペッティング攪拌させた。
（第１洗浄工程、第１溶出工程）
　その後、前記抗体ビーズを第一ＩＰ洗浄緩衝液（０．１％ ＤＤＭ, ０．１％ ＮＴＭ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ）１００μＬで１回洗浄、５０ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液５０μＬで１回洗浄した後、第一ＩＰ溶出液（０．１％ ＤＤＭ含有する５０ｍＭ Ｇｌｙｃｉｎｅ ｂｕｆｆｅｒ （ｐＨ２．８））により抗体ビーズに結合しているＡβ及びＡβ様ペプチド（すなわち、ＡＰＰ派生型ペプチド）を溶出させた。
（中性化工程）
　得られた溶出液を第二ＩＰ反応緩衝液（０．２％（ｗ／ｖ）ＤＤＭ, ８００ｍＭ ＧｌｃＮＡｃ, ３００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）, ３００ｍＭ ＮａＣｌ）と混合させて、第一精製溶液を得た。
（第２反応工程）
　得られた第一精製溶液を、別途の抗Ａβ抗体固定化ビーズと混ぜて、４℃のペルチェチラーで１時間振盪およびピペッティング攪拌させた。
（第２洗浄工程、第２溶出工程）
　その後、抗Ａβ抗体固定化ビーズを第二洗浄緩衝液（０．１％ ＤＤＭ, １５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ）５０μＬで２回洗浄、５０ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液５０μＬで１回洗浄、さらにＨ2Ｏ ３０μＬで１回洗浄した後、第二ＩＰ溶出液（５ｍＭ塩酸を含有する７０％（ｖ／ｖ） アセトニトリル）８μＬ（又は、実験室の湿度により９μＬ）により抗体ビーズに結合しているＡβ及びＡβ様ペプチド（ＡＰＰ派生型ペプチド）を溶出させた。このようにして、第二精製溶液を得た。第二精製溶液を質量分析に供した。
　ｎ－Dodecyl－β－Ｄ－maltoside （ＤＤＭ） [臨界ミセル濃度ｃｍｃ:０．００９％]
　ｎ－Nonyl－β－Ｄ－thiomaltoside （ＮＴＭ） [ｃｍｃ:０．１１６％]
［ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳによる検出］
　Ｌｉｎｅａｒ　ＴＯＦ用のマトリックスとして、α-cyano-4-hydroxycinnamic acid（ＣＨＣＡ）を用いた。マトリックス溶液はＣＨＣＡ １ｍｇを７０％（ｖ／ｖ）アセトニトリル１ｍＬで溶解することによって調製した。マトリックス添加剤として、０．４％（ｗ／ｖ） methanediphosphonic acid（ＭＤＰＮＡ）を用いた。１ｍｇ／ｍＬのＣＨＣＡ溶液と０．４％（ｗ／ｖ）ＭＤＰＮＡを等量混合した後、その０．５μＬをμFocus MALDI plateTM ９００μｍ（Hudson Surface Technology, Inc., Fort Lee, NJ)上へ滴下し、乾固させた。
　上記の免疫沈降で得られた第二精製溶液を１μＬ取り、μFocus MALDI plateTM ９００μｍ上のマトリックスへ滴下した。
　マススペクトルデータはＡＸＩＭＡ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ (Shimadzu/KRATOS, Manchester, UK)を用いて、ポジティブイオンモードのＬｉｎｅａｒ　ＴＯＦで取得した。１ｗｅｌｌに対して４００スポット、１６，０００ショットずつ積算した。ピークの検出限界の基準はＳ／Ｎ比３以上とした。Ｌｉｎｅａｒ　ＴＯＦのｍ／ｚ値はピークのアベレージマスで表示した。ｍ／ｚ値は外部標準としてhuman angiotensin IIとhuman ACTH fragment 18-39、bovine insulin oxidized beta-chain、bovine insulinを用いてキャリブレーションした。
[5]  ＳＩＬアミロイドペプチド比（ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、Ｎ＝３の平均値）を算出した。ここで、装置性能不良や予期せぬトラブル等によりデータが取得できなかった場合は、９００μＬ分取・凍結した内の別の１本を用いて、ｃＩＰ－ＭＳを再度実施することができる。
[6]  算出した値が、基準範囲内：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３
の場合は、［実験例２：ＳＩＬアミロイドペプチド比基準値決定］へと進んだ。基準範囲外の場合は次項［実験例１－２：ＳＩＬアミロイドペプチド比調整］へと進んだ。
［実験例１－２：ＳＩＬ－アミロイドペプチド比調整］
[1]  前項実験例１－１の[3]で凍結保存した残りのＳＩＬスパイク血漿－１を室温にて静置して解凍した。
[2]  前項実験例１－１の[3]で９００μＬ分取・凍結した内の別の１本が残っていれば、これを解凍して上記[1]の解凍液に混合した。
[3]  ＳＩＬアミロイドペプチド比の目標値として、
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比を２８．０、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比を１．０
と定め、前項実験例１－１の[5]における測定値と、前記目標値の中間点（中間目標値）を目指し、５０ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４０、５ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び５ｎＭのＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１の必要量を上記[1]の解凍液に添加した。（最終目標値を目指して添加すると添加しすぎる場合が多いので、あえて中間目標値を目指して添加した。）
[4]  上記[3]の液を転倒混和により十分に混合した。これを「ＳＩＬスパイク血漿－２」と称する。
[5]  ＳＩＬスパイク血漿－２の９００μＬを２本の１．５ｍＬ容マイクロチューブへ分取し、分取した２本と残りのＳＩＬスパイク血漿－２とを、それぞれ、－６０℃以下で凍結した。
[6]  ９００μＬ分取・凍結した内の１本を融解し、連続免疫沈降法（Consecutive Immunoprecipitation; cIP）－質量分析（ｃＩＰ－ＭＳ）を実施した（ＩＰ繰り返し回数３回）。ＩＰ－ＭＳ操作の詳細は、前項実験例１－１のとおりであった。
[7]  ＳＩＬ－アミロイドペプチド比（ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、Ｎ＝３の平均値）を算出した。ここで、装置性能不良や予期せぬトラブル等によりデータが取得できなかった場合は、９００μＬ分取・凍結した内の別の１本を用いて、ｃＩＰ－ＭＳを再度実施することができる。
[8]  算出した値が、基準範囲内：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３
の場合は、［実験例２：ＳＩＬアミロイドペプチド比基準値決定］へと進んだ。基準範囲外の場合は次項[9]以降へと進み、３度目のスパイクを行った。
[9]  上記[5]で凍結保存した残りのＳＩＬスパイク血漿－２を室温にて静置して解凍した。
[10]　上記[5]で９００μＬ分取・凍結した内の別の１本が残っていれば、これを解凍して上記[9]の解凍液に混合した。
[11]　３度目のスパイクとして、ＳＩＬ－アミロイドペプチド比の目標値として、
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比を２８．０、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比を１．０
と定め、これを目指し、５０ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４０、５ｎＭのＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び５ｎＭのＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１の必要量を上記[9]の解凍液に添加した。
[12]　上記[11]の液を転倒混和により十分に混合した。これを「ＳＩＬスパイク血漿－３」と称する。
[13]　ＳＩＬスパイク血漿－３の９００μＬを２本の１．５ｍＬ容マイクロチューブへ分取し、分取した２本と残りのＳＩＬスパイク血漿－３とを、それぞれ、－６０℃以下で凍結した。
[14]　９００μＬ分取・凍結した内の１本を融解し、連続免疫沈降法（Consecutive Immunoprecipitation; cIP）－質量分析（ｃＩＰ－ＭＳ）を実施した（ＩＰ繰り返し回数３回）。ＩＰ－ＭＳ操作の詳細は、前項実験例１－１のとおりであった。
[15]　ＳＩＬ－アミロイドペプチド比（ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、Ｎ＝３の平均値）を算出した。ここで、装置性能不良や予期せぬトラブル等によりデータが取得できなかった場合は、９００μＬ分取・凍結した内の別の１本を用いて、ｃＩＰ－ＭＳを再度実施することができる。
[16]　算出した値が、基準範囲内：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３
の場合は、［実験例２：ＳＩＬアミロイドペプチド比基準値決定］へと進んだ。基準範囲外の場合は上記[9]に戻り、上記[9]～[16]の手順に従い、さらなるスパイクとＩＰ－ＭＳ操作を、算出した値が前記基準範囲内となるまで繰り返した。
［実験例２：標準血漿のＳＩＬ－アミロイドペプチド比基準値決定］
[1]  前記ＳＩＬ－アミロイドペプチド比が前記基準範囲内：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３
に入ったＳＩＬスパイク血漿を標準血漿とした。
[2]  凍結保存したＳＩＬスパイク血漿を室温にて静置して解凍した。
[3]  ９００μＬ分取・凍結した内の別の１本が残っていれば、これを解凍して上記[2]の解凍液に混合した。
[4]  解凍液の全量を９００μＬずつ１．５ｍＬ容マイクロチューブへ分注した。
[5]  全ての分注品を－６０℃以下で一旦凍結した。
[6]  上記[5]の凍結品の内の３本を融解し、抗体ビーズの３ロットを用いて各Ｎ＝３でＩＰ－ＭＳを実施した（合計Ｎ＝９）。ＩＰ－ＭＳ操作の詳細は、前項実験例１－１のとおりであった。
[7]  ＩＰ－ＭＳ操作を３バッチ繰り返した（合計Ｎ＝２７）。
[8]  Ｎ＝２７のＩＰ－ＭＳ結果から、アミロイドペプチド比を算出した。算出されたアミロイドペプチド比の両方が基準範囲内：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５、及び
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３
に入っていれば、その値が基準値として決定された。算出されたアミロイドペプチド比のいずれか一方又は両方が上記基準範囲外の場合は、標準血漿の調製から再度実施した。
　上記プロトコル例により、ＱＣ試料（標準血漿）を準備した。
　Ｎ＝２７データからのＱＣ試料（標準血漿）のＳＩＬ－アミロイドペプチド比基準値決定のフローを図２に示す。
　図２において、
<1>  Ｓ／Ｎ閾値について、
　ＳＩＬ－Ａβ１－３８のＳ／Ｎ閾値：１５
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０のＳ／Ｎ閾値：３
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２のＳ／Ｎ閾値：３
　ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１のＳ／Ｎ閾値：３
<2>  基準値について、
　基準値１：
　　ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比、及び
　基準値２：
　　ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比
<3>  取り除き方について、
　・基準値との相対誤差が２０％を超えるデータは大きいものから取り除いて再計算する。
　・基準値毎に独立とする。すなわち、基準値１で２０％超えるので取り除いても、基準値２で２０％以下であれば採用する。
　より詳細には、以下のとおりである。
　基準値を決定する段階では、測定誤差を考慮して異常値を取り除いていき、最終的にＮ＝２７のデータのうち、その８０％以上として２２データ以上が残ればその残ったデータで平均値を求め基準値として定める。例えば、あるスペクトルでＳＩＬ－Ａβ１－４０のピーク位置に夾雑物ピークが重なってＳＩＬ－Ａβ１－４０のピーク強度が異常だった場合には基準値１（ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比）のデータは除かれるが、一方、ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１とＳＩＬ－Ａβ１－４２のピークは正しく検出されるため基準値２（ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比）は採用される。
　Ｎ＝２７の測定データから基準値１及び２の決定は、ソフトウェアが自動計算することにより行い得る。
<4>  合格とする基準値範囲について、
　基準値１：２５．０～３２．５
　基準値２：０．７～１．３
［実験例３：ＱＣ試料（標準血漿）を用いたアミロイドペプチド検体測定］
　ここでは、上記プロトコル例により準備したＱＣ試料（標準血漿）を用いて、測定対象の血中アミロイドペプチド検体（検体数：４２）をＩＰ－ＭＳ測定した。
（ＩＰ－ＭＳ測定の基本操作）
　測定対象の各検体は、内部標準として、ＳＩＬ－Ａβ１－３８（AnaSpec，San Jose, CA, USA）が添加され、前項実験例１－１のとおりの連続免疫沈降法に準じてＩＰ操作されたものであった。
　ＭＳ測定は、ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ　ＭＳ分析により行った。
　より具体的には、マススペクトルデータはＡＸＩＭＡ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ (Shimadzu/KRATOS, Manchester, UK)を用いて、ポジティブイオンモードのＬｉｎｅａｒ ＴＯＦで取得した。
　Ｌｉｎｅａｒ ＴＯＦ用のマトリックスとして、α-cyano-4-hydroxycinnamic acid（ＣＨＣＡ）を用いた。マトリックス溶液はＣＨＣＡ １ｍｇを７０％（ｖ／ｖ）アセトニトリル１ｍＬで溶解することによって調製した。マトリックス添加剤として、０．４％（ｗ／ｖ） methanediphosphonic acid（ＭＤＰＮＡ）を用いた。１ｍｇ／ｍＬのＣＨＣＡ溶液と０．４％（ｗ／ｖ）ＭＤＰＮＡを等量混合した後、その０．５μＬをμFocus MALDI plateTM ９００μｍ（Hudson Surface Technology, Inc., Fort Lee, NJ)上へ滴下し、乾固させた。
　上記ＩＰ操作された検体の精製溶液を１μＬ取り、μFocus MALDI plateTM ９００μｍ上のマトリックスへ滴下した。
　１ｗｅｌｌに対して４００スポット、１６，０００ショットずつ積算した。ピークの検出限界の基準はＳ／Ｎ比３以上とした。Ｌｉｎｅａｒ　ＴＯＦのｍ／ｚ値はピークのアベレージマスで表示した。ｍ／ｚ値は外部標準としてhuman angiotensin IIとhuman ACTH fragment 18-39、bovine insulin oxidized beta-chain、bovine insulinを用いてキャリブレーションした。
　図１を参照して、最大検体の４２検体を処理した場合の処理例として、
まず、前記ＱＣ標準試料のＭＳ測定を行った（開始ＱＣ工程）。
次に、ＩＰ後の測定対象の各検体（検体数：９）のＭＳ測定を行った（検体測定工程）。
続いて、前記ＱＣ標準試料のＭＳ測定を行った（中間ＱＣ工程）。
次に、前記検体測定工程と、前記中間ＱＣ工程とを所定回数（３回）繰り返した（繰り返し工程）。
次に、ＩＰ後の測定対象の各検体（検体数：６）のＭＳ測定を行った（検体測定工程）。
続いて、前記ＱＣ標準試料のＭＳ測定を行った（最終ＱＣ工程）。
　図３には、多検体（検体数：４２）を質量分析する際の９６ウェルプレート上でのサンプル配置例が示されている。測定順序は矢印（→）で示されている。
　図３によると、まず、ＱＣ標準試料１がプレートウェル１Ａ上に載せられ（開始ＱＣ工程）、次に、
検体１～９がウェル１Ｂ～２Ｇ上に載せられ（検体測定工程）、ＱＣ標準試料２がウェル２Ｆ上に載せられ（中間ＱＣ工程）、
検体１１～１９がウェル２Ｅ～３Ｆ上に載せられ（検体測定工程）、ＱＣ標準試料３がウェル３Ｅ上に載せられ（中間ＱＣ工程）、
検体１８～２７がウェル３Ｄ～４Ｃ上に載せられ（検体測定工程）、ＱＣ標準試料４がウェル４Ｂ上に載せられ（中間ＱＣ工程）、
検体２８～２９がウェル４Ａ～５Ａ上に載せられ（検体測定工程）、ＱＣ標準試料５がウェル６Ｈ上に載せられ（中間ＱＣ工程）、
検体３７～４２がウェル６Ｇ～６Ｂ上に載せられ（検体測定工程）、最後に、
ＱＣ標準試料６がプレートウェル６Ａ上に載せられている（最終ＱＣ工程）。
（ＱＣ試料を用いたアミロイドペプチド検体測定の品質管理）
　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において用いられた各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルの比は、
　基準値１：
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が２５．０～３２．５の範囲内、及び
　基準値２：
　ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２の比が０．７～１．３の範囲内
を満たしている。
　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において実際に測定された各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルの比が、
上記実際の基準値１、及び基準値２に対して、－２０％以上＋２０％以下の正常範囲内であれば、当該ＱＣ標準試料は合格と判定し、一方、前記正常範囲の外であれば、当該ＱＣ標準試料は不合格とした（判定工程）。
　各検体測定工程の直前ＱＣ工程で用いられたＱＣ標準試料及び直後ＱＣ工程で用いられたＱＣ標準試料の両方が合格とされた当該検体測定工程における前記検体測定工程で得られた測定結果は採用した。一方、各検体測定工程の直前ＱＣ工程で用いられたＱＣ標準試料及び直後ＱＣ工程で用いられたＱＣ標準試料の両方又は一方が不合格とされた当該検体測定工程における前記検体測定工程で得られた測定結果は採用しなかった（採否決定工程）。
　品質管理については、ソフトウェアで自動判定され、全検体の測定が適正に行われたことが示された。
　この例では、１バッチでの最大の測定サンプル数４８として、検体数４２の測定及び品質管理の例を示した。本発明は、通常、複数検体数の場合に適用されるが、検体数が１つの場合についても、開始ＱＣ工程→検体測定工程→最終ＱＣ工程を行うことにより実施できる。全検体数に応じて、各回の検体測定工程における検体の測定数を調整して、本発明のＱＣ標準試料を用いて測定及び品質管理を実施することができる。
　以上述べたように、本発明において、市販ヒト血漿又は疑似血漿に、それらには存在しない安定同位体標識されたアミロイドβペプチド（ＳＩＬ－アミロイドβペプチド）をスパイクしたＱＣ試料を調製する。ＳＩＬ－アミロイドβペプチドのスパイク量は、実試料（検体）中に含まれる対応するアミロイドβペプチドの量に近い量とし、ＳＩＬ－アミロイドβペプチドの上記比が一定範囲内になるよう比を調整する。
　調製したＱＣ試料を、複数ロットの抗体ビーズを使用し、複数バッチ測定し平均を算出することで、そのロットのＱＣ試料におけるＳＩＬ－アミロイドβペプチド比の「基準値」を設定する。
　実試料測定時に同バッチ内で測定したＱＣ試料は、１ＱＣ試料ごとに２種ＳＩＬ－アミロイドβペプチドの比がそれぞれ「基準値」から±２０％以内であるか否か判定を行う。
　合格基準を満たしたＱＣ試料に挟まれた実試料の測定値のみを採用する。
　ＱＣ試料中のＳＩＬ－アミロイドβペプチド量をコントロールすることで、実試料に近いＱＣ試料を用意することができる。ＱＣ試料のＳＩＬ－アミロイドβペプチド比の基準値を予め設定しておくことで、徐々に分析系の不具合（装置状態の不具合）が生じたときの見過ごしリスクを低減することができる。また、一定間隔で測定するＱＣ試料につて、基準に合格したＱＣ試料に挟まれた実試料の測定値のみを採用することで、バッチ内での局所的な感度低下等を見過ごさずにデータ採用可否を判断することができる。
　本発明に含まれる形態として、例えば、以下のものが挙げられる。
（１）
　対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料であって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含む、ＱＣ標準試料。
（２）
　前記血液試料が、全血液、血漿、及び血清からなる群から選ばれる、上記（１）に記載のＱＣ標準試料。
（３）
　前記血液試料が、ペプチドがスパイクされた疑似血液、疑似血漿、及び疑似血清からなる群から選ばれる、上記（１）に記載のＱＣ標準試料。
（４）
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記ペプチドと化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識されたペプチドを含んでいる、上記（１）～（３）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（５）
　測定対象の前記ペプチドは、複数種のペプチドを含み、
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記複数種のペプチドとそれぞれ化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識された複数種のペプチドを含んでいる、上記（１）～（４）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（６）
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、所定の基準範囲内の量で含まれている、上記（１）～（５）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（７）
　測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、上記（１）～（６）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（８）
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、上記（１）～（７）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（９）
　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む、上記（１）～（８）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（１０）
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含む、上記（１）～（９）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（１１）
　測定対象の前記ペプチドが、
　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　測定されたペプチドレベルの比：
Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
がバイオマーカーとして用いられ、
　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
が所定の基準範囲内とされている、上記（１）～（１０）のうちのいずれかに記載のＱＣ標準試料。
（１２）
　前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
の基準範囲内とされている、上記（１１）に記載のＱＣ標準試料。
（１３）
　多検体血液試料中の対象ペプチドを測定する方法であって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含むＱＣ標準試料の測定を行う開始ＱＣ工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う中間ＱＣ工程と、
　前記検体測定工程と、前記中間ＱＣ工程とを所定回数繰り返す工程と、
　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
　前記ＱＣ標準試料の測定を行う最終ＱＣ工程と、
を含む、ペプチド測定方法。
（１４）
　前記各検体測定工程において、１つ以上９つ以下の血液試料の連続測定を行う、上記（１３）に記載のペプチド測定方法。
（１５）
　さらに、
　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において測定された各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルが、所定の基準値に対して、－２０％以上＋２０％以下の正常範囲内であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は合格とし、一方、前記正常範囲の外であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は不合格とする判定工程と、
　各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方が合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用し、一方、各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方又は一方が不合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用しないと決定する採否決定工程と、
を含む、上記（１３）又は（１４）に記載のペプチド測定方法。
（１６）
　測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、上記（１３）～（１５）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（１７）
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、上記（１３）～（１６）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（１８）
　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む、上記（１３）～（１７）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（１９）
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含む、上記（１３）～（１８）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（２０）
　測定対象の前記ペプチドが、
　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　測定されたペプチドレベルの比：
Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
がバイオマーカーとして用いられ、
　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
を含み、
　前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
が所定の基準範囲内とされている、上記（１３）～（１９）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（２１）
　前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
の基準範囲内とされている、上記（２０）に記載のペプチド測定方法。
（２２）
　免疫沈降法（Immunoprecipitation; IP）－質量分析（ＩＰ－ＭＳ）、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）、又はガスクロマトグラフィー－質量分析（ＧＣ－ＭＳ）により測定を行う、上記（１３）～（２１）のうちのいずれかに記載のペプチド測定方法。
（２３）
　対象ペプチド測定用のＱＣ標準試料キットであって、
　ペプチドを含んでいる血液試料と、
　該血液試料にスパイクされるべき安定同位体標識されたペプチドと、
を含む、ＱＣ標準試料キット。
（２４）
　前記安定同位体標識されたペプチドが、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）と、
を含む、上記（２３）に記載のＱＣ標準試料キット。

Claims (24)

  1. 　対象ペプチド測定用ＱＣ標準試料であって、
    　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含む、ＱＣ標準試料。
  2. 　前記血液試料が、全血液、血漿、及び血清からなる群から選ばれる、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  3. 　前記血液試料が、ペプチドがスパイクされた疑似血液、疑似血漿、及び疑似血清からなる群から選ばれる、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  4. 　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記ペプチドと化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識されたペプチドを含んでいる、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  5. 　測定対象の前記ペプチドは、複数種のペプチドを含み、
    　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、測定対象の前記複数種のペプチドとそれぞれ化学的に同じ又は類似の構造であり且つ安定同位体標識された複数種のペプチドを含んでいる、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  6. 　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドは、所定の基準範囲内の量で含まれている、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  7. 　測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  8. 　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  9. 　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  10. 　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含む、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  11. 　測定対象の前記ペプチドが、
    　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
    　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
    を含み、
    　測定されたペプチドレベルの比：
    Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
    ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
    がバイオマーカーとして用いられ、
    　前記血液試料にスパイクされた前記安定同位体標識されたペプチドが、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
    を含み、
    　前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
    ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
    ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
    が所定の基準範囲内とされている、請求項１に記載のＱＣ標準試料。
  12. 　前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
    ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
    ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
    の基準範囲内とされている、請求項１１に記載のＱＣ標準試料。
  13. 　多検体血液試料中の対象ペプチドを測定する方法であって、
    　ペプチドを含んでいる血液試料と、該血液試料にスパイクされた安定同位体標識されたペプチドとを含むＱＣ標準試料の測定を行う開始ＱＣ工程と、
    　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
    　前記ＱＣ標準試料の測定を行う中間ＱＣ工程と、
    　前記検体測定工程と、前記中間ＱＣ工程とを所定回数繰り返す工程と、
    　１つ又は複数の血液試料の測定を行う検体測定工程と、
    　前記ＱＣ標準試料の測定を行う最終ＱＣ工程と、
    を含む、ペプチド測定方法。
  14. 　前記各検体測定工程において、１つ以上９つ以下の血液試料の連続測定を行う、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  15. 　さらに、
    　前記開始ＱＣ工程、前記中間ＱＣ工程、及び前記最終ＱＣ工程において測定された各ＱＣ標準試料中の前記安定同位体標識されたペプチドのレベルが、所定の基準値に対して、－２０％以上＋２０％以下の正常範囲内であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は合格とし、一方、前記正常範囲の外であれば、当該ＱＣ標準試料の測定は不合格とする判定工程と、
    　各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方が合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用し、一方、各検体測定工程の直前ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定及び直後ＱＣ工程で行われたＱＣ標準試料の測定の両方又は一方が不合格とされた当該検体測定工程における前記１つ又は複数の血液試料の測定結果は採用しないと決定する採否決定工程と、
    を含む、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  16. 　測定対象の前記ペプチドが、アミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  17. 　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、安定同位体標識されたアミロイドベータ（Ａβ）関連ペプチドである、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  18. 　測定対象の前記ペプチドが、Ａβ１－４２（配列番号９）、Ａβ１－３８（配列番号１１）、Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つを含む、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  19. 　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、ＳＩＬ－Ａβ１－４２、ＳＩＬ－Ａβ１－３８、ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）を含む、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  20. 　測定対象の前記ペプチドが、
    　Ａβ１－４２（配列番号９）と、
    　Ａβ１－４０（配列番号７）、及びＡＰＰ６６９－７１１（配列番号１０）からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
    を含み、
    　測定されたペプチドレベルの比：
    Ａβ１－４０／Ａβ１－４２、及び／又は
    ＡＰＰ６６９－７１１／Ａβ１－４２
    がバイオマーカーとして用いられ、
    　前記ＱＣ標準試料に含まれる前記安定同位体標識されたペプチドが、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つと、
    を含み、
    　前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
    ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２、及び／又は
    ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２
    が所定の基準範囲内とされている、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  21. 　前記ＱＣ標準試料中において、前記安定同位体標識されたペプチドの存在量の比：
    ＳＩＬ－Ａβ１－４０／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、２５．０～３２．５、及び／又は
    ＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１／ＳＩＬ－Ａβ１－４２が、０．７～１．３
    の基準範囲内とされている、請求項２０に記載のペプチド測定方法。
  22. 　免疫沈降法（Immunoprecipitation; IP）－質量分析（ＩＰ－ＭＳ）、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）、又はガスクロマトグラフィー－質量分析（ＧＣ－ＭＳ）により測定を行う、請求項１３に記載のペプチド測定方法。
  23. 　対象ペプチド測定用のＱＣ標準試料キットであって、
    　ペプチドを含んでいる血液試料と、
    　該血液試料にスパイクされるべき安定同位体標識されたペプチドと、
    を含む、ＱＣ標準試料キット。
  24. 　前記安定同位体標識されたペプチドが、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４２と、
    　ＳＩＬ－Ａβ１－４０、及びＳＩＬ－ＡＰＰ６６９－７１１からなる群から選ばれる少なくとも１つ（ここで、“ＳＩＬ－”とは安定同位体標識された（Stable isotope labeled）ことを意味する）と、
    を含む、請求項２３に記載のＱＣ標準試料キット。
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