WO2021075536A1

WO2021075536A1 - 幹細胞遊走剤を使用した糖尿病治療

Info

Publication number: WO2021075536A1
Application number: PCT/JP2020/039045
Authority: WO
Inventors: 秀人小島; 智也寺島; 美和子樫
Original assignee: 国立大学法人滋賀医科大学
Priority date: 2019-10-18
Filing date: 2020-10-16
Publication date: 2021-04-22
Also published as: AU2020367414A1; EP4035680A4; EP4035680A1; US20220403032A1; JPWO2021075536A1; KR20220103718A; CN114828890A; JP2023139101A

Abstract

本開示は、幹細胞の遊走と組み合わせた異常幹細胞を標的とする糖尿病治療を提供する。一つの実施形態では、本開示は、幹細胞の遊走と組み合わせた異常幹細胞を標的とする糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療を提供する。一つの実施形態では、本開示は、異常幹細胞の遊走および／または残留を指標とする糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクの診断を提供する。

Description

幹細胞遊走剤を使用した糖尿病治療

　本開示は、幹細胞の遊走と異常幹細胞の抑制とを組み合わせた糖尿病および／またはその関連疾患の治療、ならびに幹細胞の遊走および／または残留を指標とする糖尿病および／またはその関連疾患の診断に関する。より特定すると、本開示は、異常造血幹細胞を遊走させ抑制することによる糖尿病および／またはその関連疾患の治療、ならびに異常造血幹細胞の特定ニッチからの遊走および／または特定ニッチにおける残留を検出することによる糖尿病および／またはその関連疾患の診断に関する。

　糖尿病は、一般的に１型と２型とに分類される（非特許文献１）。しかし、両者ともに発症の詳細が不明であることから、１型および２型の分類そのものが、病因に基づくものとしての妥当性を欠いているといわざるを得ない。また、現在、糖尿病治療のために種々の薬物が開発されているが、多くは血糖コントロールを目的としたものであり、糖尿病の進行防止には有効であり得るが、糖尿病の治癒には不十分であり得る。さらに、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害などの糖尿病合併症も１型および２型に分類される糖尿病に共通して発症するが、一旦発症すると治癒は困難であり得る。

糖尿病診療ガイドライン2016、日本糖尿病学会、南江堂

　本発明者らは、異常幹細胞の抑制による糖尿病および/またはその関連疾患の治療戦略が、幹細胞の遊走と組み合わせた場合に、より効果的であることを見出した。この新たな知見に基づき、本開示は、糖尿病および/またはその関連疾患の治療および診断のための手段を提供する。

　したがって、本開示は以下を提供する。
（項目１）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該抑制剤は、幹細胞遊走剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
（項目２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの組成物。
（項目９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの組成物。
（項目１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目１２）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と、幹細胞遊走剤との組み合わせを含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための医薬。
（項目１３）
幹細胞遊走剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該幹細胞遊走剤は、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
（項目１４）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための組成物。
（項目１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目１６）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目１７）
被験体において糖尿病または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防する方法であって、該被験体に対して異常造血幹細胞（ＨＳＣ）を低減または消失させる薬剤および幹細胞遊走剤を有効量投与する工程を含む、方法。
（項目１８）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を、被験体において糖尿病または糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の指標とする方法であって、該被験体における異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する工程を含む、方法。
（項目１９）
前記組成物は、薬学的組成物である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目２０）
薬学的に許容可能は賦形剤をさらに含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ａ１）
被験体における糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防する方法であって、有効量の異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤および幹細胞遊走剤を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、項目Ａ２に記載の方法。
（項目Ａ４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ１２）
被験体における糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置を選択する方法であって、有効量の異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ１３）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ１４）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ａ１５）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を、被験体において糖尿病または糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を診断する方法であって、該被験体における異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する工程を含む、方法。
（項目Ｂ１）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための、幹細胞遊走剤と組み合わせて使用するための、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制のための組成物。
（項目Ｂ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ４）
抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの抑制剤。
（項目Ｂ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ６）
抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１３）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と組み合わせて使用するための、幹細胞遊走のための組成物。
（項目Ｂ１４）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出するための組成物。
（項目Ｂ１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１６）
ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１７）
前記組成物は、薬学的組成物である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｂ１８）
薬学的に許容可能は賦形剤をさらに含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｃ１）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための医薬の製造における、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤および幹細胞遊走剤の使用。
（項目Ｃ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ１４）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための医薬の製造における、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤の使用。
（項目Ｃ１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｃ１６）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｄ１）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該抑制剤は、幹細胞遊走剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
（項目Ｄ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体およびＨＤＡＣ阻害剤（例えば、トリコスタチンＡ）からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ１２）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と、幹細胞遊走剤との組み合わせを含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための医薬。
（項目Ｄ１３）
幹細胞遊走剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該幹細胞遊走剤は、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
（項目Ｄ１４）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための組成物。
（項目Ｄ１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ１６）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ１７）
被験体において糖尿病または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防する方法であって、該被験体に対して異常造血幹細胞（ＨＳＣ）を低減または消失させる薬剤および幹細胞遊走剤を有効量投与する工程を含む、方法。
（項目Ｄ１８）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を、被験体において糖尿病または糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の指標とする方法であって、該被験体における異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する工程を含む、方法。
（項目Ｄ１９）
前記組成物は、薬学的組成物である、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｄ２０）
薬学的に許容可能は賦形剤をさらに含む、上記項目のいずれかの組成物。
（項目Ｅ１）
被験体における糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防する方法であって、有効量の異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤および幹細胞遊走剤を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ｅ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体およびＨＤＡＣ阻害剤（例えば、トリコスタチンＡ）からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ１２）
被験体における糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置を選択する方法であって、有効量の異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ｅ１３）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ１４）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの方法。
（項目Ｅ１５）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を、被験体において糖尿病または糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を診断する方法であって、該被験体における異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する工程を含む、方法。
（項目Ｆ１）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための、幹細胞遊走剤と異常造血幹細胞（ＨＳＣ）抑制剤との組み合わせで使用するための、幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ４）
抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの抑制剤。
（項目Ｆ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ６）
抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体およびＨＤＡＣ阻害剤（例えば、トリコスタチンＡ）からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ１３）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と組み合わせて使用するための、幹細胞遊走のための幹細胞遊走剤または異常ＨＳＣ抑制剤。
（項目Ｆ１４）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤。
（項目Ｆ１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの薬剤。
（項目Ｆ１６）
ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの薬剤。
（項目Ｇ１）
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）抑制剤および幹細胞遊走剤の組み合わせで糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための医薬の製造における、異常ＨＳＣ抑制剤または幹細胞遊走剤のうちの少なくとも一方の使用。
（項目Ｇ２）
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ３）
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ４）
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ５）
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ６）
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体およびＨＤＡＣ阻害剤（例えば、トリコスタチンＡ）からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ７）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ８）
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ９）
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ１０）
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ１１）
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ１４）
糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための医薬の製造における、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤の使用。
（項目Ｇ１５）
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、上記項目のいずれかの使用。
（項目Ｇ１６）
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、上記項目のいずれかの使用。

　本開示において、上記の１つまたは複数の特徴は、明示された組み合わせに加え、さらに組み合わせて提供され得ることが意図される。本開示のなおさらなる実施形態および利点は、必要に応じて以下の詳細な説明を読んで理解すれば、当業者に認識される。

　本開示は、糖尿病および/またはその関連疾患の新たな治療および診断を提供する。従来、糖尿病患者においてインスリン分泌を回復させる方法である膵臓移植や膵島移植などで必要とされていたドナーを不要とし、レシピエントの数に対する供給能力の制限を克服し得る。また、レシピエントが受けていた手術などの患者負荷も回避し得る。このように、本開示の治療は、薬剤投与によって達成され得るため、はるかに簡便で低負荷であり得る。また、根本治療が可能であるため、予後も良いと期待される。

非糖尿病（非ＤＭ）およびストレプトゾシン誘導糖尿病（ＳＴＺ－ＤＭ）の単核細胞におけるｃ－ｋｉｔ陽性Ｓｃａ－１陽性系統マーカー陰性細胞（ＫＳＬ）画分中のプロインスリン陽性細胞の蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析である。左上の２つのパネル（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。左下の２つのパネル（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、プロインスリン陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸はＫＳＬ細胞数、横軸はプロインスリンの蛍光強度を示す。右のグラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ細胞中のプロインスリン陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。＊＊：Ｐ＜０．０１。非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭの単核細胞におけるＫＳＬ細胞中の腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。左上の２つのパネル（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。左下の２つのパネル（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＴＮＦ－α陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸はＫＳＬ細胞数、横軸はＴＮＦ－αの蛍光強度を示す。右のグラフは、ＫＳＬ細胞中のＴＮＦ－α陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝５）。データは平均±標準誤差として示す。＊＊：Ｐ＜０．０１。非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭの単核細胞におけるＫＳＬ細胞のＣＤ１０６発現についてのＦＡＣＳ分析である。左の２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。右の２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＣＤ１０６陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸は側方散乱光（ＳＳＣ）の強度、横軸はＣＤ１０６の蛍光強度を示す。右のグラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ細胞中のＣＤ１０６陽性細胞の割合（１目盛りは１％である）を示す（１群あたりｎ＝４）。＊＊：Ｐ＜０．０１。ＩＣＲマウスおよびＮＯＤマウスの単核細胞のＦＡＣＳ分析である。２つのパネル（左：ＩＣＲ、右：ＮＯＤ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。ＩＣＲマウスおよびＮＯＤマウスの単核細胞におけるＫＳＬ細胞中の腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）陽性細胞およびＣＤ１０６陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。上の２つのパネル（左：ＩＣＲ、右：ＮＯＤ）は、ＴＮＦ－α陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸は前方散乱光（ＦＳＣ）の強度、横軸はＴＮＦ－αの蛍光強度を示す。下の２つのパネル（左：ＩＣＲ、右：ＮＯＤ）は、ＣＤ１０６陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸は前方散乱光（ＦＳＣ）の強度、横軸はＣＤ１０６の蛍光強度を示す。非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのＫＳＬ細胞中のサイドポピュレーション（ＳＰ）画分および非ＳＰ画分のＦＡＣＳ分析である。左の２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ細胞のうちのＳＰ画分（左下の丸囲み）および非ＳＰ画分（右上の丸囲み）を示し、縦軸はＨｏｅｃｈｓｔ　Ｂｌｕｅの蛍光強度、横軸はＨｏｅｃｈｓｔ　Ｒｅｄの蛍光強度を示す。右のグラフ（左：ＳＰ、右：非ＳＰ）は、非ＤＭ（左のバー）およびＳＴＺ－ＤＭ（右のバー）のＫＳＬ細胞中のＳＰ画分および非ＳＰ画分の割合を示す（ｎ＝３）。データは平均値±標準誤差として示す。＊＊：Ｐ＜０．０１。ａ）非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのＫＳＬ－非ＳＰ細胞におけるＣＤ１０６陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＣＤ１０６陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸は側方散乱光（ＳＳＣ）の強度、横軸はＣＤ１０６の蛍光強度を示す。グラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ－非ＳＰ細胞中のＣＤ１０６陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。　　ｂ）非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのＫＳＬ－ＳＰ細胞におけるＣＤ１０６陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＣＤ１０６陽性細胞（四角で囲まれる、０％であった）の分布を示し、縦軸は側方散乱光（ＳＳＣ）の強度、横軸はＣＤ１０６の蛍光強度を示す。グラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ－ＳＰ細胞中のＣＤ１０６陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。　　ｃ）非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのＫＳＬ－非ＳＰ細胞におけるＴＮＦ－α陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）はＴＮＦ－α陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸は側方散乱光（ＳＳＣ）の強度、横軸はＴＮＦ－αの蛍光強度を示す。グラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ－非ＳＰ細胞中のＴＮＦ－α陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。　　ｄ）非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのＫＳＬ－ＳＰ細胞におけるＴＮＦ－α陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。２つのパネル（上：非ＤＭ、下：ＳＴＺ－ＤＭ）はＴＮＦ－α陽性細胞（四角で囲まれる、０％であった）の分布を示し、縦軸は側方散乱光（ＳＳＣ）の強度、横軸はＴＮＦ－αの蛍光強度を示す。グラフ（左：非ＤＭ、右：ＳＴＺ－ＤＭ）は、ＫＳＬ－ＳＰ細胞中のＴＮＦ－α陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。　　データは平均値±標準誤差として示す。＊：Ｐ＜０．０５。非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭマウスのＫＳＬ細胞におけるヒストン脱アセチル化酵素遺伝子群（ＨＤＡＣｓ）の遺伝子発現比較を示す。左から、Ｈｄａｃ３、Ｈｄａｃ４、Ｈｄａｃ８、およびＨｄａｃ９の発現量を示し、各棒グラフにおいて、左は、非ＤＭマウスの結果であり、右は、ＳＴＺ－ＤＭマウスの結果である。縦軸は、非ＤＭマウスにおけるｍＲＮＡ発現量を１とした場合の両マウスにおけるｍＲＮＡ発現量の相対量を示す。＊：Ｐ＜０．０５。正常血糖マウスへの非ＤＭまたはＳＴＺ－ＤＭマウス由来ＫＳＬ細胞の移植のための実験の概略を示す。グリーン蛍光タンパク質を遺伝子導入したトランスジェニックマウス（ＧＦＰ－Ｔｇマウス）をＳＴＺで処置して糖尿病を誘発したマウス（ＳＴＺ－ＤＭ　ＧＦＰ）、および静脈内クエン酸緩衝液注射の対照処置を施した非ＤＭマウスを用意した（非ＤＭ　ＧＦＰ）。３ヵ月後、非ＤＭマウスおよびＳＴＺ－ＤＭマウスのそれぞれから得たＫＳＬ細胞を、９Ｇｙの致死量照射正常血糖野生型マウスに移植した（非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）。非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝９）およびＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝１０）における血糖濃度（ｍｇ／ｇＬ）（左）および非ＤＭ由来のＫＳＬ－Ｔにおける測定値を１とした場合の坐骨神経における知覚神経伝達速度（ＳＮＣＶ）の相対比（右）を示す。Ｎ．Ｓは有意差がないことを示し、＊＊はＰ＜０．０１を示す。後根神経節（ＤＲＧ）におけるＭＡＰ２、プロインスリン、およびＴＮＦ－αの免疫蛍光染色像である。左から４列はＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔの結果であり、左から、核（青）、ＧＦＰ（緑）、標的分子（上段：ＭＡＰ２、中段：プロインスリン、下段：ＴＮＦ－α）（赤）、マージの画像である。右列は非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔの結果であり、核（青）、ＧＦＰ（緑）、および標的分子（上段：ＭＡＰ２、中段：プロインスリン、下段：ＴＮＦ－α）（赤）のマージ画像である。矢頭は融合細胞を示す。スケールバー＝１０μｍ。非ＤＭ由来ＫＳＬ－ＴおよびＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔの単核細胞におけるＫＳＬ画分中のプロインスリン陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。左上の２つのパネル（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。左下の２つのパネル（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、プロインスリン陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸はＫＳＬ細胞数、横軸はプロインスリンの蛍光強度を示す。右のグラフ（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、ＫＳＬ細胞中のプロインスリン陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。＊：Ｐ＜０．０５。非ＤＭ由来ＫＳＬ－ＴおよびＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔの単核細胞におけるＫＳＬ画分中のＴＮＦ－α陽性細胞のＦＡＣＳ分析である。左上の２つのパネル（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、系統陰性細胞のうちＫＳＬ細胞（四角で囲まれる）を示し、縦軸はｃ－ｋｉｔの蛍光強度、横軸はＳｃａ－１の蛍光強度を示す。左下の２つのパネル（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、ＴＮＦ－α陽性細胞（四角で囲まれる）の分布を示し、縦軸はＫＳＬ細胞数、横軸はＴＮＦ－αの蛍光強度を示す。右のグラフ（左：非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ、右：ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）は、ＫＳＬ細胞中のＴＮＦ－α陽性細胞の割合を示す（１群あたりｎ＝３）。＊＊：Ｐ＜０．０１。ヒト糖尿病患者（ＤＭ）および健常ヒト被験者（ｎｏｎ－ＤＭ）の血液試料における各遺伝子の発現量の比較。パネルは、それぞれ、インスリン（左上）、ＣＤ３４（右上）、ＴＮＦ－α（左下）、ＣＤ１０６（右下）を示す。各パネルにおいて、左のバーは健常ヒト被験者の結果を、右のバーはヒト糖尿病患者の結果を示す。縦軸は、健常ヒト被験者の平均結果を１とした場合の、相対的なｍＲＮＡ発現量を示す。ストレプトゾトシン誘導糖尿病マウスを幹細胞遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体で処置した場合（２５０μｇ／マウスの用量、一週間ごとの尾静脈投与）の血糖値および体重の変化を示す。上のグラフは、０日目および１８日目の血糖値（縦軸、ｍｇ/ｄL）を示す。下のグラフは、０日目および１８日目の体重（縦軸、ｇ）を示す。青の線は、対照処置の結果を示し、オレンジ色の線は、幹細胞遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体の結果を示し、灰色の線は、抗ＣＤ１０６抗体処置の結果を示す。マウス凍結切片のインスリンおよび核の染色像である。左上は非ＤＭマウス、右上はＳＴＺ－ＤＭマウス、下の２つは幹細胞遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体で処置した２匹のＳＴＺ－ＤＭマウスの結果を示す。各マウスにおいて膵島をランダムに８～１０個程度選び、膵島の大きさに対するインスリン陽性面積の割合をＩｍａｇｅ　Ｊソフトウェアで算出した結果である。左から、非ＤＭマウス、ＳＴＺ－ＤＭマウス、幹細胞遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体で処置した２匹のＳＴＺ－ＤＭマウス（＃１および＃２）の結果を示す。＊＊Ｐ＜０．０１を示す。ＮＯＤマウスを幹細胞遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体で処置した場合（２５０μｇ／マウスの用量、一週間ごとの尾静脈投与）の血糖値および体重の変化を示す。上のグラフは、７日目および１４日目の血糖値（縦軸、ｍｇ／ｄＬ）を示す。下のグラフは、７日目および１４日目の体重（縦軸、ｇ）を示す。青の線（＃６７０）およびオレンジ色の線（＃６７１）は、遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体処置を１週間ごとに２回実施した２個体の結果をそれぞれ示し、灰色の線（＃６７３）は、遊走剤および抗ＣＤ１０６抗体処置を１回のみ実施した個体の結果を示す。マウス凍結切片のインスリンおよび核の染色像である。左から、非ＤＭマウス、糖尿病発症前のＮＯＤマウス、糖尿病発症後のＮＯＤマウスの結果を示す。上段は２０倍拡大像、下段は４０倍拡大像である。矢頭は、膵島を示す。ＤＭなしの患者（ＤＭ（－））とＤＭありの患者（ＤＭ（＋））の骨髄のプロインスリン染色。プロインスリン抗体で染色された骨髄細胞（矢印）は、ＤＭ（＋）例では観察されるが、ＤＭ（－）例では観察されない。スケールバーは５０μｍを示す。

　以下、本開示を最良の形態を示しながら説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本開示の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。

　以下に本明細書において特に使用される用語の定義および／または基本的技術内容を適宜説明する。

　（定義）
　本明細書において、「糖尿病」は当該分野において使用される通常の意味で用いられ、妊娠に伴うものや特異な遺伝子異常によるものを除き、通常は、膵臓のβ細胞の破壊によってインスリンが枯渇して生じる１型糖尿病、および肥満などを原因として、膵臓のランゲルハンス島（膵島）のβ細胞からのインスリン分泌量が減少し、筋肉、脂肪組織へのグルコースの取り込み能が低下して生じる２型糖尿病に分類される。なお、本研究の結果によると、１型糖尿病および２型糖尿病の両者はこれまで成因と考えられていたものとは全く異なる、免疫異常を介した共通の細胞成因によって起こると推察される。糖尿病は、例えば、２回以上の検査で、空腹時血糖≧１２６ｍｇ／ｄＬ、ＨｂＡ１ｃ≧６．５％、経口ブドウ糖負荷試験（７５ｇＯＧＴＴ）で２時間値が２００ｍｇ／ｄＬ以上などによって診断され得る。本明細書における「糖尿病」には若年発症成人型糖尿病、境界型糖尿病も含まれる。

　本明細書において「糖尿病の関連疾患」または「糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状」は、糖尿病に関連する任意の疾患、障害および症状が包含され得、それらの例として、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、続発性糖尿病、糖尿病性昏睡、意識障害、腹痛、こむら返り、神経障害、高浸透圧高血糖症候群、アルブミン尿、浮腫、腎不全、失明、アルツハイマー型認知症、心筋梗塞、閉塞性動脈硬化症、脳梗塞、脂肪肝、皮膚症状（糖尿病性リポイド類壊死など）、創傷治癒能力の低下、易感染性（敗血症など）、がん（肝がん、腎臓がん、膵がん、結腸がん、胃がん、肝がん、卵巣がん、大腸がん、結腸がんなど）、糖尿病性ケトアシドーシス、心臓病、脳血管障害、ステロイド糖尿病、便秘、立ちくらみ（起立性低血圧）、勃起不全、心筋梗塞、胸痛、重症虫垂炎、腹膜刺激症状、低温やけど、妊娠糖尿病、口渇、多飲、多尿などが挙げられる。

　特に断らない限り、本明細書において「非糖尿病被験体」とは、糖尿病もその関連疾患も有しない被験体を意味する。

　本明細書において「治療」とは、ある疾患または障害について、そのような状態になった場合に、そのような疾患または障害の悪化を防止、好ましくは、現状維持、より好ましくは、軽減、さらに好ましくは消退させることをいい、患者の疾患、もしくは疾患に伴う1つ以上の症状の、症状改善効果あるいは予防効果を発揮しうることを含む。事前に診断を行って適切な治療を行うことは「コンパニオン治療」といい、そのための診断薬を「コンパニオン診断薬」ということがある。

　本明細書において「予防」とは、ある疾患または障害について、そのような状態になる前に、そのような状態にならないようにすることをいう。本開示の薬剤を用いて、診断を行い、必要に応じて本開示の薬剤を用いて例えば、糖尿病等の予防をするか、あるいは予防のための対策を講じることができる。

　本明細書において「診断」とは、被験体における状態（例えば、疾患、障害）などに関連する種々のパラメータを同定し、そのような状態の現状または未来を判定することをいう。本開示の方法、組成物、システムを用いることによって、体内の状態を調べることができ、そのような情報を用いて、被験体における状態、投与すべき処置または予防のための処方物または方法などの種々のパラメータを選定することができる。本明細書において、狭義には、「診断」は、現状を診断することをいうが、広義には「早期診断」、「予測診断」、「事前診断」等を含む。本開示の診断方法は、原則として、身体から出たものを利用することができ、医師などの医療従事者の手を離れて実施することができることから、産業上有用である。本明細書において、医師などの医療従事者の手を離れて実施することができることを明確にするために、特に「予測診断、事前診断もしくは診断」を「支援」すると称することがある。本開示の技術は、このような診断技術に応用可能である。

　本明細書において標的細胞の「抑制」は、標的細胞の増殖速度の低下、標的細胞の傷害、標的細胞の減少および／または標的細胞の死滅をもたらすことを意味する。標的細胞の抑制は直接的作用および／または間接的作用によって達成され得る。例えば、標的細胞を抑制する直接的作用は、この細胞が有する任意の特徴（例えば、発現分子）を標的化して、標的細胞の傷害、標的細胞の減少および／または標的細胞の死滅をもたらすことによって達成され、例えば、放射線照射、アポトーシスの誘導、免疫細胞による攻撃の誘導などの機構が挙げられるが、これらに限定されない。標的細胞を抑制する間接的作用は、この標的細胞を認識して抑制するように免疫系に学習させる方法などが挙げられるが、これに限定されない。

　本明細書において標的細胞の「抑制剤」は、任意の手段で標的細胞を抑制する薬剤を意味する。本明細書に記載される抑制剤において、標的細胞を抑制する手段は任意であり得、例えば、標的細胞と標的化分子（例えば、抗体）との結合によって引き起こされる免疫細胞による攻撃、放射線発生分子の使用などが挙げられるが、これに限定されない。

　本明細書において細胞の「遊走」とは、細胞が末梢血液および/または循環血液中に移動することを意味する。典型的には、遊走は、細胞が、骨髄（またはその中の特定の部位）から末梢血液および/または循環血液中に移動することを意味する。このような骨髄中の特定の部位は、ニッチ(niche)または特定ニッチということがあり、特定ニッチとは、生体内で幹細胞がその性質を維持するために必要な微小環境をいう。したがって、本明細書では、特定の実施形態では、ニッチから幹細胞を遊走させることを言うがこれに限定されない。

　本明細書において細胞の「遊走剤」は、任意の手段で標的細胞を遊走させる薬剤を意味する。

　本明細書において「造血幹細胞」または「ＨＳＣ」とは、血球系細胞に分化可能な幹細胞を指す。ヒト成体では主に骨髄に存在し、白血球（好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、単球、マクロファージ）、赤血球、血小板、肥満細胞、樹状細胞を生み出す。ヒト造血幹細胞は、例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性によって特徴付けられ得、また、Ｌｉｎｅａｇｅ陰性ＣＤ３４陽性ＣＤ３８陰性ＣＤ９０陽性ＣＤ４５ＲＡ陰性（すなわち、Ｌｉｎ^－ＣＤ３４^＋ＣＤ３８^－ＣＤ９０^＋ＣＤ４５ＲＡ^－）によっても特徴付けられ得る（例えば、Proc　Natl　Acad　Sci　USA.　2011　Dec　13;108(50):20012-20017参照）。マウス造血幹細胞は、ｃ－ｋｉｔ陽性Ｓｃａ－１陽性系統マーカー陰性（ＫＳＬ）細胞として特徴付けられ得る。また、造血幹細胞は、Ｈｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２色素で染色した骨髄細胞を、紫外光（３５０ｎｍ）で励起し、Ｈｏｅｃｈｓｔ　ｂｌｕｅおよびＨｏｅｃｈｓｔ　ｒｅｄの２種類の光学フィルターで展開した場合に両方とも陰性であることによっても特徴付けられ得る。造血幹細胞は、長期造血幹細胞（ＬＴ－ＨＳＣ）、短期造血幹細胞（ＳＴ－ＨＳＣ）などに細分類され得る。例えば、造血幹細胞の特徴は、Cytometry　Research　19（2）：25-32，2009を参照することができる。

　本明細書において「長期造血幹細胞（ＬＴ－ＨＳＣ）」とは長期骨髄細胞再建能を持つ造血幹細胞をいう。ＬＴ－ＨＳＣは、通常、表面抗原マーカーにより特定され、（例えば、マウスにおいては）ＣＤ３４陰性、ＣＤ１５０陽性、ＣＤ４８陰性、Ｌｉｎ陰性、ｓｃａ１陽性、ｃ－ｋｉｔ陽性（あるいは、Ｌｉｎｅａｇｅ^－ｃ－Ｋｉｔ^＋Ｓｃａ－１^＋ＣＤ３４^{－／ｌｏｗ}ＣＤ１５０^＋細胞）と表現され得る。また、ＬＴ－ＨＳＣは、（例えば、ヒトにおいては）ＣＤ３４陰性、ＣＤ３８陰性（あるいは、ＣＤ３４^－ＣＤ３８^－細胞）と表現され得る（例えば、Nat　Immunol.　2010　Jul;11(7):585-93；Blood　108,　2446－2454,　2006）。

　本明細書において「短期造血幹細胞（ＳＴ－ＨＳＣ）」とは、短期骨髄再建能を持つ造血幹細胞をいう。ＳＴ－ＨＳＣは、通常、表面抗原マーカーにより特定され、（例えば、マウスにおいては）ＣＤ３４陽性、ＣＤ１５０陽性、ＣＤ４８陰性、Ｌｉｎ陰性、ｓｃａ－１陽性、ｃ－ｋｉｔ陽性と表現され得る。また、ＳＴ－ＨＳＣは、（例えば、ヒトにおいては）ＣＤ３４陽性、ＣＤ３８陰性（あるいは、ＣＤ３４^＋ＣＤ３８^－細胞）と表現され得る（例えば、Nat　Immunol.　2010　Jul;11(7):585-93；Blood　108,　2446－2454,　2006）。

　本明細書において「異常造血幹細胞」または「異常ＨＳＣ］とは、異常な機能を発現しているか、および／または正常な機能を少なくとも一部欠いている造血幹細胞をいう。代表的には、異常ＨＳＣは、ＣＤ１０６またはその機能的等価物の遺伝子またはタンパク質が通常レベルで発現していないかおよび／または機能していない細胞をいう。

　本明細書において、遺伝子またはタンパク質が「通常のレベルで発現していない」とは、正常な機能を有する細胞において見られる発現量ではない量やレベルで当該遺伝子またはタンパク質が発現していることをいう。例えば、ＣＤ１０６についていうと、ＣＤ１０６が通常発現している（正常細胞で見られる通常の値）から外れる場合に異常であると判断し得、好ましくは、ＣＤ１０６が通常よりも多く発現している場合に異常と判定し得る。例えば、非糖尿病および糖尿病のマウスからＫＳＬ細胞をＦＡＣＳで分取し、ＲＮＡを抽出した後、ＱＴ－ＰＣＲを用いて遺伝子発現量の比較解析を行うことで遺伝子の通常のレベルでない発現（例えば、過剰発現）を試験することができる。例えば、ＦＡＣＳ解析を実施し、異常な造血幹細胞の表面抗原を検出し、糖尿病被験体と非糖尿病被験体とを比較することでタンパク質の通常のレベルでない発現を試験することができる。

　本明細書において、遺伝子またはタンパク質が「通常のレベルで機能していない」とは、正常な機能を有する細胞において見られるレベルの機能が当該遺伝子またはタンパク質についてみられないことをいう。例えば、ＣＤ１０６についていうと、ＣＤ１０６が通常機能するレベル（正常細胞で見られる通常のレベルまたは値）から外れる場合に異常であると判断し得、好ましくは、ＣＤ１０６が通常よりも多いレベルで機能が観察される場合に異常と判定し得る。例えば、ＦＡＣＳ解析を実施し、異常な造血幹細胞の表面抗原を検出し、糖尿病被験体と非糖尿病被験体とを比較してタンパク質の活性化を観察することで、タンパク質が通常のレベルで機能していないことを試験することができる。

　本明細書において「ＣＸＣＲ４」とは、ＣＤ１８４またはＦｕｓｉｎとしても知られる７回膜貫通型のＧタンパク共役受容体（ＧＰＣＲ）である。ＣＸＣＲ４の生理的リガンドは、ＣＸＣケモカインの一つで、単球およびリンパ球の遊走を強く誘導するstromal　cell-derived　factor-1（ＳＤＦ－１）である。ＣＸＣＲ４の阻害によって造血幹細胞の遊走が生じ得る（Future　Oncol.　2007　Feb;3(1):19-27）。

　本明細書において「ＣＤ１０６」とは、表面抗原の一種であり、接着分子ＶＣＡＭ－１（Vascular　cell　adhesion　molecule-1）またはＩＮＣＡＭ－１００としても知られる、ＩｇスーパーファミリーのメンバーのＩ型膜タンパク質であり、サイトカイン活性化内皮によって発現される細胞表面シアロ糖タンパク質であり、白血球－内皮細胞接着およびシグナル伝達を媒介することが知られる。ヒトでは、ＶＣＡＭ－１アイソフォームaプリカーサー（核酸配列：NM_001078.4、アミノ酸配列：NP_001069.1）、ＶＣＡＭ－１アイソフォームｂプリカーサー（核酸配列：NM_080682.2、アミノ酸配列：NP_542413.1）、ＶＣＡＭ－１アイソフォームｃプリカーサー（核酸配列：NM_001199834.1、アミノ酸配列：NP_001186763.1）が代表的である。

　本明細書において「ＣＤ３４」とは、幹細胞の骨髄細胞外マトリックスまたは間質細胞への付着に関与すると考えられている表面タンパク質であり、高度にグリコシル化され、プロテインキナーゼＣによってリン酸化されることが知られる。ヒトでは、ＣＤ３４転写バリアント１（核酸配列：NM_001025109.2、アミノ酸配列：NP_001020280.1）、ＣＤ３４転写バリアント２（核酸配列：NM_001773.3、アミノ酸配列：NP_001764.1）、が代表的である。

　本明細書において「腫瘍壊死因子アルファ」またはその省略形である「ＴＮＦ－α」とは、ＴＮＦ、ＤＩＦ、ＴＮＦＡ、ＴＮＦＳＦ２、ＴＮＬＧ１Ｆとしても知られる腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーに属する多機能炎症誘発性サイトカインであり、主にマクロファージによって分泌されるタンパク質を指す。ＴＮＦ－αは、受容体ＴＮＦＲＳＦ１Ａ／ＴＮＦＲ１およびＴＮＦＲＳＦ１Ｂ／ＴＮＦＢＲを介して機能することができ、細胞増殖、分化、アポトーシス、脂質代謝、および凝血など広範な生物学的プロセスの調節に関与する。ヒトでは、核酸配列：NM_000594.4、アミノ酸配列：NP_000585.2が代表的である。

　本明細書において「プロインスリン」とは、インスリンの前駆体タンパク質を指す。プロインスリンは、膵β細胞の小胞体においてプロセッシングされ、未成熟の分泌顆粒内でＣペプチド領域が除去されることでＡ鎖およびＢ鎖から構成されるインスリンが生成される。ヒトでは、プロインスリン転写バリアント１（核酸配列：NM_000207.3、アミノ酸配列：NP_000198.1）、プロインスリン転写バリアント２（核酸配列：NM_001185097.2、アミノ酸配列：NP_001172026.1）、プロインスリン転写バリアント３（核酸配列：NM_001185098.1、アミノ酸配列：NP_001172027.1）、プロインスリン転写バリアント４（核酸配列：NM_001291897.2、アミノ酸配列：NP_001278826.1）が代表的である。

　本明細書において「ｃ－Ｋｉｔ」とは、ＰＢＴ、ＳＣＦＲ、ＫＩＴ、ＣＤ１１７またはＭＡＳＴＣとしても知られるＭＧＦ（肥満細胞増殖因子、幹細胞因子としても知られる）の３型膜貫通受容体を指す。ヒトでは、Ｋｉｔアイソフォーム１プリカーサー（核酸配列：NM_000222.2、アミノ酸配列：NP_000213.1）、Ｋｉｔアイソフォーム２プリカーサー（核酸配列：NM_001093772.1、アミノ酸配列：NP_001087241.1）が代表的である。

　本明細書において「ＣＤ２０」とは、ＭＳ４Ａ１、Ｂ１、Ｓ７、Ｂｐ３５、ＣＤ２０、ＣＶＩＤ５、ＭＳ４Ａ２またはＬＥＵ－１６としても知られる膜貫通型４Ａ遺伝子ファミリーのメンバーであり、Ｂ細胞の形質細胞への発達および分化において役割を果たすＢリンパ球表面分子を指す。ヒトでは、ＣＤ２０転写バリアント１（核酸配列：NM_152866.2、アミノ酸配列：NP_690605.1）、ＣＤ２０転写バリアント３（核酸配列：NM_021950.3、アミノ酸配列：NP_068769.2）が代表的である。

　特に断らない限り、本明細書において、各タンパク質に関する言及は、特定のアクセッション番号に記載されるアミノ酸配列を有するタンパク質（あるいはそれをコードする核酸）のみならず、その機能的等価物もまた企図されることが理解される。

　本明細書において、ある分子の「機能的等価物」には、その分子の変異体または改変体（例えば、アミノ酸配列改変体等）であって、本明細書に記載される特徴（例えば、マーカー）としての機能を有するもの、その分子の生物学的機能と同様の機能（同じ程度でなくてもよい）を発揮するもの、ならびに、作用する時点において、その分子自体に変化することができるものが包含されることが理解される。

　本明細書において、ある分子の「機能的改変体」には、その分子の機能を維持した（程度は変更されてもよい）ままその分子を改変した物質が包含される。例えば、抗体などの結合分子の機能的改変体には、標的分子との結合機能を維持するように、他の部分（標識、他の機能性分子（タンパク質など）など）とコンジュゲート化したもの、フラグメント化したものなどが含まれる。このように、本明細書で使用される場合、機能的改変体は、改変前の基本となる機能を維持するものである。

　本開示の機能的等価物としては、アミノ酸配列において、１もしくは複数個のアミノ酸の挿入、置換もしくは欠失、またはその一方もしくは両末端への付加されたものを用いることができる。本明細書において、「アミノ酸配列において、１もしくは複数個のアミノ酸の挿入、置換もしくは欠失、またはその一方もしくは両末端への付加」とは、部位特異的突然変異誘発法等の周知の技術的方法により、あるいは天然の変異により、天然に生じ得る程度の複数個の数のアミノ酸の置換等により改変がなされていることを意味する。

　本明細書において「生物学的機能」とは、ある遺伝子またはそれに関する核酸分子もしくはポリペプチドについて言及するとき、その遺伝子、核酸分子またはポリペプチドが生体内において有し得る特定の機能をいい、これには、例えば、特異的な抗体の生成、酵素活性、抵抗性の付与等を挙げることができるがそれらに限定されない。このような生物学的活性は、上述した表の中で言及されるアクセッション番号、Entrez番号等において引用される文献等を参照することができ、本明細書においてそのような文献等もまた参考として援用する。本明細書において、生物学的機能は、「生物学的活性」によって発揮され得る。本明細書において「生物学的活性」とは、ある因子（例えば、ポリヌクレオチド、タンパク質など）が、生体内において有し得る活性のことをいい、種々の機能（例えば、転写促進活性）を発揮する活性が包含され、例えば、ある分子との相互作用によって別の分子が活性化または不活化される活性も包含される。２つの因子が相互作用する場合、その生物学的活性は、その二分子との間の結合およびそれによって生じる生物学的変化、例えば、一つの分子を抗体を用いて沈降させたときに他の分子も共沈するとき、２分子は結合していると考えられる。従って、そのような共沈を見ることが一つの判断手法として挙げられる。例えば、ある因子が酵素である場合、その生物学的活性は、その酵素活性を包含する。別の例では、ある因子がリガンドである場合、そのリガンドが対応するレセプターへの結合を包含する。そのような生物学的活性は、当該分野において周知の技術によって測定することができる。

　本明細書で使用されるタンパク質または核酸の「誘導体」または「類似体」または「変異体」は、限定を意図するものではないが、タンパク質または核酸に実質的に相同な領域を含む分子を含み、このような分子は、種々の実施形態において、同一サイズのアミノ酸配列または核酸配列にわたり、または当該分野で公知のコンピュータ相同性プログラムによってアラインメントを行ってアラインされる配列と比較した際、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％または９９％同一であるか、あるいはこのような核酸の「誘導体」または「類似体」または「変異体」は、ストリンジェントな条件、中程度にストリンジェントな条件、またはストリンジェントでない条件下で、元の核酸にハイブリダイズ可能である。代表的には、タンパク質の「誘導体」または「類似体」または「変異体」は、天然存在タンパク質にアミノ酸置換、欠失および付加などの修飾が生じた産物であって、なお天然存在タンパク質の生物学的機能を、必ずしも同じ度合いでなくてもよいが示すタンパク質を意味する。例えば、本明細書において記載されあるいは当該分野で公知の適切で利用可能なｉｎ　ｖｉｔｒｏアッセイによって、このようなタンパク質の生物学的機能を調べることも可能である。本開示では、ヒトについて主に論じられるが、他の種例えば霊長類内の他の種あるいはこのほかの属の動物の種のものにも当てはまることが理解され、これらの哺乳動物についても、本開示の範囲内に入ることが理解される。

　本明細書で使用される用語「活性」は、最も広い意味での分子の機能を指す。活性は、限定を意図するものではないが、概して、分子の生物学的機能、生化学的機能、物理的機能または化学的機能を含む。活性は、例えば、酵素活性、他の分子と相互作用する能力、および他の分子の機能を活性化するか、促進するか、安定化するか、阻害するか、抑制するか、または不安定化する能力、安定性、特定の細胞内位置に局在する能力を含む。適用可能な場合、この用語はまた、最も広い意味でのタンパク質複合体の機能にも関する。

　本明細書で使用される「機能的に活性な」タンパク質、ポリペプチド、フラグメントまたは誘導体は、生物学的活性などの、タンパク質の構造的機能、制御機能、または生化学的機能を有する。

　本明細書において「遺伝子」とは、遺伝形質を規定する因子をいう。通常染色体上に一定の順序に配列している。タンパク質の一次構造を規定する遺伝子を構造遺伝子といい、その発現を左右する遺伝子を調節遺伝子という。本明細書では、「遺伝子」は、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」（ここでは、ＤＮＡ、ＲＮＡなどを含む）を指すことがある。「遺伝子産物」とは、遺伝子に基づいて産生された物質でありタンパク質、ｍＲＮＡなどを指す。したがって、ｍＲＮＡは遺伝子の概念にも入り得、遺伝子産物にも該当し得る。また「遺伝子の発現」という場合は、ｍＲＮＡなどの転写レベルを指すことが多い。

　本明細書において「タンパク質」、「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーをいう。このポリマーは、直鎖であっても分岐していてもよく、環状であってもよい。アミノ酸は、天然のものであっても非天然のものであってもよく、改変されたアミノ酸であってもよい。この用語はまた、複数のポリペプチド鎖の複合体へとアセンブルされたものを包含し得る。この用語はまた、天然または人工的に改変されたアミノ酸ポリマーも包含する。そのような改変としては、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化または任意の他の操作もしくは改変（例えば、標識成分との結合体化）が包含される。この定義にはまた、例えば、アミノ酸の１または２以上のアナログを含むポリペプチド（例えば、非天然アミノ酸などを含む）、ペプチド様化合物（例えば、ペプトイド）および当該分野において公知の他の改変が包含される。

　本明細書において「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのヌクレオチドのポリマーをいう。この用語はまた、「オリゴヌクレオチド誘導体」または「ポリヌクレオチド誘導体」を含む。「オリゴヌクレオチド誘導体」または「ポリヌクレオチド誘導体」とは、ヌクレオチドの誘導体を含むか、またはヌクレオチド間の結合が通常とは異なるオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドをいい、互換的に使用される。そのようなオリゴヌクレオチドとして具体的には、例えば、２’－Ｏ－メチル－リボヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がホスホロチオエート結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がＮ３’－Ｐ５’ホスホロアミデート結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のリボースとリン酸ジエステル結合とがペプチド核酸結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ－５プロピニルウラシルで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ－５チアゾールウラシルで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のシトシンがＣ－５プロピニルシトシンで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のシトシンがフェノキサジン修飾シトシン（phenoxazine-modified　cytosine）で置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、ＤＮＡ中のリボースが２’－Ｏ－プロピルリボースで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体およびオリゴヌクレオチド中のリボースが２’－メトキシエトキシリボースで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体などが例示される。他にそうではないと示されなければ、特定の核酸配列はまた、明示的に示された配列と同様に、その保存的に改変された改変体（例えば、縮重コドン置換体）および相補配列を包含することが企図される。具体的には、縮重コドン置換体は、１またはそれ以上の選択された（または、すべての）コドンの３番目の位置が混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換された配列を作成することにより達成され得る（Batzer　et　al.,　Nucleic　Acid　Res.19:5081(1991);Ohtsuka　et　al.,　J.Biol.Chem.260:2605-2608(1985);　Rossolini　et　al.,　Mol.　Cell.　Probes　8:91-98(1994)）。本明細書において「核酸」はまた、遺伝子、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、およびポリヌクレオチドと互換可能に使用される。本明細書において「ヌクレオチド」は、天然のものでも非天然のものでもよい。

　本明細書において遺伝子の「相同性」とは、２以上の遺伝子配列の、互いに対する同一性の程度をいい、一般に「相同性」を有するとは、同一性または類似性の程度が高いことをいう。従って、ある２つの遺伝子の相同性が高いほど、それらの配列の同一性または類似性は高い。２種類の遺伝子が相同性を有するか否かは、配列の直接の比較、または核酸の場合ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション法によって調べられ得る。２つの遺伝子配列を直接比較する場合、その遺伝子配列間でＤＮＡ配列が、代表的には少なくとも５０％同一である場合、好ましくは少なくとも７０％同一である場合、より好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である場合、それらの遺伝子は相同性を有する。従って本明細書において「相同体」または「相同遺伝子産物」は、本明細書にさらに記載する複合体のタンパク質構成要素と同じ生物学的機能を発揮する、別の種、好ましくは哺乳動物におけるタンパク質を意味する。こうような相同体はまた、「オルソログ遺伝子産物」とも称されることもある。

　アミノ酸は、その一般に公知の３文字記号か、またはIUPAC－IUB　Biochemical　Nomenclature　Commissionにより推奨される１文字記号のいずれかにより、本明細書中で言及され得る。ヌクレオチドも同様に、一般に認知された１文字コードにより言及され得る。本明細書では、アミノ酸配列および塩基配列の類似性、同一性および相同性の比較は、配列分析用ツールであるＢＬＡＳＴを用いてデフォルトパラメータを用いて算出される。同一性の検索は例えば、ＮＣＢＩのBLAST　2．2.9（2004．5.12発行）を用いて行うことができる。本明細書における同一性の値は通常は上記BLASTを用い、デフォルトの条件でアラインした際の値をいう。ただし、パラメータの変更により、より高い値が出る場合は、最も高い値を同一性の値とする。複数の領域で同一性が評価される場合はそのうちの最も高い値を同一性の値とする。類似性は、同一性に加え、類似のアミノ酸についても計算に入れた数値である。

　本明細書において「ストリンジェント（な）条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド」とは、当該分野で慣用される周知の条件をいう。本開示のポリヌクレオチド中から選択されたポリヌクレオチドをプローブとして、コロニー・ハイブリダイゼーション法、プラーク・ハイブリダイゼーション法あるいはサザンブロットハイブリダイゼーション法などを用いることにより、そのようなポリヌクレオチドを得ることができる。具体的には、コロニーあるいはプラーク由来のＤＮＡを固定化したフィルターを用いて、０．７～１．０ＭのＮａＣｌ存在下、６５℃でハイブリダイゼーションを行った後、０．１～２倍濃度のＳＳＣ（saline－sodium　citrate）溶液（１倍濃度のＳＳＣ溶液の組成は、１５０ｍＭ　塩化ナトリウム、１５ｍＭ　クエン酸ナトリウムである）を用い、６５℃条件下でフィルターを洗浄することにより同定できるポリヌクレオチドを意味する。ハイブリダイゼーションは、Molecular　Cloning　2nd　ed.,Current　Protocols　in　Molecular　Biology,Supplement　1～38、DNA　Cloning　1:Core　Techniques,　A　Prac1tical　Approach,　Second　Edition,　Oxford　University　Press(1995)などの実験書に記載されている方法に準じて行うことができる。低ストリンジェンシー条件は、３５％ホルムアミド、５ｘＳＳＣ、５０ｍＭ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５ｍＭ　ＥＤＴＡ、０．０２％　ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、０．０２％ＢＳＡ、１００μｇ／ｍｌ変性サケ精子ＤＮＡ、および１０％（重量／体積）デキストラン硫酸を含む緩衝液中、４０℃で１８～２０時間ハイブリダイゼーションし、２ｘＳＳＣ、２５ｍＭ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、５ｍＭ　ＥＤＴＡ、および０．１％ＳＤＳからなる緩衝液中、５５℃で１～５時間洗浄し、そして２ｘＳＳＣ、２５ｍＭ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、５ｍＭ　ＥＤＴＡ、および０．１％ＳＤＳからなる緩衝液中、６０℃で１．５時間洗浄することを含む。

　本明細書において「精製された」物質または生物学的因子（例えば、核酸またはタンパク質など）とは、その生物学的因子に天然に随伴する因子の少なくとも一部が除去されたものをいう。従って、通常、精製された生物学的因子におけるその生物学的因子の純度は、その生物学的因子が通常存在する状態よりも高い（すなわち濃縮されている）。本明細書中で使用される用語「精製された」は、好ましくは少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも８５重量％、よりさらに好ましくは少なくとも９５重量％、そして最も好ましくは少なくとも９８重量％の、同型の生物学的因子が存在することを意味する。本開示で用いられる物質は、好ましくは「精製された」物質である。

　本明細書において「対応する」アミノ酸または核酸とは、あるポリペプチド分子またはポリヌクレオチド分子において、比較の基準となるポリペプチドまたはポリヌクレオチドにおける所定のアミノ酸またはヌクレオチドと同様の作用を有するか、または有することが予測されるアミノ酸またはヌクレオチドをいい、特に酵素分子にあっては、活性部位中の同様の位置に存在し触媒活性に同様の寄与をするアミノ酸をいう。例えば、アンチセンス分子であれば、そのアンチセンス分子の特定の部分に対応するオルソログにおける同様の部分であり得る。対応するアミノ酸は、例えば、システイン化、グルタチオン化、Ｓ－Ｓ結合形成、酸化（例えば、メチオニン側鎖の酸化）、ホルミル化、アセチル化、リン酸化、糖鎖付加、ミリスチル化などがされる特定のアミノ酸であり得る。あるいは、対応するアミノ酸は、二量体化を担うアミノ酸であり得る。このような「対応する」アミノ酸または核酸は、一定範囲にわたる領域またはドメインであってもよい。従って、そのような場合、本明細書において「対応する」領域またはドメインと称される。

　本明細書において「対応する」遺伝子（例えば、ポリヌクレオチド配列または分子）とは、ある種において、比較の基準となる種における所定の遺伝子と同様の作用を有するか、または有することが予測される遺伝子（例えば、ポリヌクレオチド配列または分子）をいい、そのような作用を有する遺伝子が複数存在する場合、進化学的に同じ起源を有するものをいう。従って、ある遺伝子に対応する遺伝子は、その遺伝子のオルソログであり得る。そのような対応する遺伝子は、当該分野において周知の技術を用いて同定することができる。従って、例えば、ある動物（例えば、マウス、ラット）における対応する遺伝子は、対応する遺伝子（例えば、ヒトのもの）の基準となる遺伝子の配列をクエリ配列として用いてその動物の配列データベースを検索することによって見出すことができる。

　　本明細書において「フラグメント（断片）」とは、全長のポリペプチドまたはポリヌクレオチド（長さがｎ）に対して、１～ｎ－１までの配列長さを有するポリペプチドまたはポリヌクレオチドをいう。フラグメントの長さは、その目的に応じて、適宜変更することができ、例えば、その長さの下限としては、ポリペプチドの場合、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０およびそれ以上のアミノ酸が挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。また、ポリヌクレオチドの場合、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、７５、１００およびそれ以上のヌクレオチドが挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。本明細書において、このようなフラグメントは、例えば、全長のものがマーカーとして機能する場合、そのフラグメント自体もまたマーカーとしての機能を有する限り、本開示の範囲内に入ることが理解される。本開示において、分子のフラグメントとは、この分子の任意の領域を含む物質（代表的にはポリペプチド）であり、本開示の目的（例えば、治療、検出、診断等）に用いることができる限り、天然の分子の生物学的機能を有していなくてもよい。

　本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなどの「発現」とは、その遺伝子などがインビボで一定の作用を受けて、別の形態になることをいう。好ましくは、遺伝子、ポリヌクレオチドなどが、転写および翻訳されて、ポリペプチドの形態になることをいうが、転写されてｍＲＮＡが作製されることもまた発現の一態様であり得る。より好ましくは、そのようなポリペプチドの形態は、翻訳後プロセシングを受けたもの（本明細書にいう誘導体）であり得る。例えば、分子の発現レベルは、任意の方法によって決定することができる。具体的には、この分子のｍＲＮＡの量、タンパク質の量、またはタンパク質の生物学的な活性を評価することによって発現レベルを知ることができる。

　本明細書において「発現量」とは、目的の細胞、組織などにおいて、ポリペプチドまたはｍＲＮＡ等が発現される量をいう。そのような発現量としては、本開示の抗体を用いてＥＬＩＳＡ法、ＲＩＡ法、蛍光抗体法、ウェスタンブロット法、免疫組織染色法などの免疫学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本開示ポリペプチドのタンパク質レベルでの発現量、またはノーザンブロット法、ドットブロット法、ＰＣＲ法などの分子生物学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本開示において使用されるポリペプチドのｍＲＮＡレベルでの発現量が挙げられる。「発現量の変化」とは、上記免疫学的測定方法または分子生物学的測定方法を含む任意の適切な方法により評価される本開示において使用されるポリペプチドのタンパク質レベルまたはｍＲＮＡレベルでの発現量が増加あるいは減少することを意味する。あるマーカーの発現量を測定することによって、マーカーに基づく種々の検出または診断を行うことができる。

　本明細書において「マーカー（物質、タンパク質または遺伝子（核酸））」とは、ある状態（例えば、細胞の種類、正常細胞状態、疾患状態、障害状態、あるいは増殖能、分化状態のレベル等）にあるかまたはその危険性があるかどうかを追跡する示標となる物質をいう。このようなマーカーとしては、遺伝子（核酸＝ＤＮＡレベル）、遺伝子産物（ｍＲＮＡ、タンパク質など）、代謝物質、酵素などを挙げることができる。本開示において、ある状態（糖尿病など）についての検出、診断、予備的検出、予測または事前診断は、その状態に関連するマーカーに特異的な薬剤、剤、因子または手段、あるいはそれらを含む組成物、キットまたはシステム等を用いて実現することができる。

　本明細書において「抗体」は、広義にはポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、多重特異性抗体、キメラ抗体、および抗イディオタイプ抗体、ならびにそれらのフラグメント、例えばＦｖフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）_２およびＦａｂフラグメント、ならびにその他の組換えにより生産された結合体または機能的等価物（例えば、キメラ抗体、ヒト化抗体、多機能抗体、二重特異性またはオリゴ特異性（oligospecific）抗体、単鎖抗体、ｓｃＦＶ、ダイアボディー、ｓｃ（Ｆｖ）_２（single　chain　（Fv）₂）、ｓｃＦｖ－Ｆｃ）を含む。さらにこのような抗体を、酵素、例えばアルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、αガラクトシダーゼなど、に共有結合させまたは組換えにより融合させてよい。本開示で用いられる抗体は、その由来、種類、形状などは問われない。具体的には、非ヒト動物の抗体（例えば、マウス抗体、ラット抗体、ラクダ抗体）、ヒト抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体などの公知の抗体が使用できる。本開示においては、モノクローナル、あるいはポリクローナルを抗体として利用することができるが好ましくはモノクローナル抗体である。抗体の標的タンパク質への結合は特異的な結合であることが好ましい。

　本明細書において「手段」とは、ある目的（例えば、検出、診断、治療、予防、遊走）を達成する任意の道具となり得るものをいい、特に、本明細書では、「選択的に認識（検出）する手段」とは、ある対象を他のものとは異なって認識（検出）することができる手段をいう。

　本明細書においてポリヌクレオチドまたはポリペプチド発現の「検出」または「定量」は、例えば、マーカー検出剤への結合または相互作用を含む、ｍＲＮＡの測定および免疫学的測定方法を含む適切な方法を用いて達成され得る。分子生物学的測定方法としては、例えば、ノーザンブロット法、ドットブロット法またはＰＣＲ法などが例示される。免疫学的測定方法としては、例えば、方法としては、マイクロタイタープレートを用いるＥＬＩＳＡ法、ＲＩＡ法、蛍光抗体法、発光イムノアッセイ（ＬＩＡ）、免疫沈降法（ＩＰ）、免疫拡散法（ＳＲＩＤ）、免疫比濁法（ＴＩＡ）、ウェスタンブロット法、免疫組織染色法などが例示される。また、定量方法としては、ＥＬＩＳＡ法またはＲＩＡ法などが例示される。アレイ（例えば、ＤＮＡアレイ、プロテインアレイ）を用いた遺伝子解析方法によっても行われ得る。ＤＮＡアレイについては、（秀潤社編、細胞工学別冊「ＤＮＡマイクロアレイと最新ＰＣＲ法」）に広く概説されている。プロテインアレイについては、Nat　Genet．2002　Dec；32　Suppl：526-32に詳述されている。遺伝子発現の分析法としては、上述に加えて、ＲＴ－ＰＣＲ、ＲＡＣＥ法、ＳＳＣＰ法、免疫沈降法、ｔｗｏ－ｈｙｂｒｉｄシステム、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ翻訳などが挙げられるがそれらに限定されない。そのようなさらなる分析方法は、例えば、ゲノム解析実験法・中村祐輔ラボ・マニュアル、編集・中村祐輔羊土社（２００２）などに記載されており、本明細書においてそれらの記載はすべて参考として援用される。

　本開示の検出剤または検出手段は、検出可能とする部分（例えば、抗体等）に他の物質（例えば、標識等）を結合させた複合体または複合分子であってもよい。本明細書において使用される場合、「複合体」または「複合分子」とは、２以上の部分を含む任意の構成体を意味する。例えば、一方の部分がポリペプチドである場合は、他方の部分は、ポリペプチドであってもよく、それ以外の物質（例えば、基材、糖、脂質、核酸、他の炭化水素等）であってもよい。本明細書において複合体を構成する２以上の部分は、共有結合で結合されていてもよくそれ以外の結合（例えば、水素結合、イオン結合、疎水性相互作用、ファンデルワールス力等）で結合されていてもよい。２以上の部分がポリペプチドの場合は、キメラポリペプチドとも称しうる。従って、本明細書において「複合体」は、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、脂質、糖、低分子などの分子が複数種連結してできた分子を含む。

　本開示の検出剤またはその他医薬は、プローブおよびプライマーの形態を採ることができる。本開示のプローブおよびプライマーは、標的の核酸分子と特異的にハイブリダイズすることができる。本開示のプローブおよびプライマーは、標的核酸分子の発現を検出することができればよく、複数のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）またはリボ核酸（ＲＮＡ）等の塩基または塩基対からなる重合体であり得る。二本鎖ｃＤＮＡも組織ｉｎ　ｓｉｔｕハイブリダイゼーションにおいて利用可能であることが知られており、本開示のプローブおよびプライマーにはそのような二本鎖ｃＤＮＡも含まれる。組織中のＲＮＡの検出において特に好ましいプローブおよびプライマーとしては、ＲＮＡプローブ（リボプローブ）を挙げることができる。

　本開示によるプライマーおよびプライマーセットは、ＰＣＲ法、ＲＴ－ＰＣＲ法、リアルタイムＰＣＲ法、ｉｎ　ｓｉｔｕ　ＰＣＲ法、ＬＡＭＰ法等の核酸増幅法を利用して目的遺伝子を検出する公知の方法において、常法に従ってプライマーおよびプライマーセットとして利用することができる。

　本明細書において「プローブ」とは、インビトロおよび／またはインビボなどのスクリーニングなどの生物学的実験において用いられる、検索の手段となる物質をいい、例えば、特定の塩基配列を含む核酸分子または特定のアミノ酸配列を含むペプチド、特異的抗体またはそのフラグメントなどが挙げられるがそれに限定されない。本明細書においてプローブは、マーカー検出手段としてもちいられる。

　通常プローブとして用いられる核酸分子としては、目的とする遺伝子の核酸配列と相同なまたは相補的な、少なくとも８の連続するヌクレオチド長の核酸配列を有するものが挙げられる。そのような核酸配列は、好ましくは、少なくとも９の連続するヌクレオチド長の、より好ましくは少なくとも１０の連続するヌクレオチド長の、さらに好ましくは少なくとも１１の連続するヌクレオチド長の、少なくとも１２の連続するヌクレオチド長の、少なくとも１３の連続するヌクレオチド長の、少なくとも１４の連続するヌクレオチド長の、少なくとも１５の連続するヌクレオチド長の、少なくとも２０の連続するヌクレオチド長の、少なくとも２５の連続するヌクレオチド長の、少なくとも３０の連続するヌクレオチド長の、少なくとも４０の連続するヌクレオチド長の、少なくとも５０の連続するヌクレオチド長の、少なくとも核酸配列であり得る。プローブとして使用される核酸配列には、上述の配列に対して、少なくとも約７０％相同な、より好ましくは、少なくとも約８０％相同な、さらに好ましくは、少なくとも約９０％相同な、少なくとも約９５％相同な核酸配列が含まれる。

　１つの実施形態において、本開示の検出剤は、標識されたものでありうる。あるいは、本開示の検出剤は、タグを結合させたものであってもよい。

　本明細書において「標識」とは、目的となる分子または物質を他から識別するための存在（例えば、物質、エネルギー、電磁波など）をいう。そのような標識方法としては、ＲＩ（ラジオアイソトープ）法、蛍光法、ビオチン法、化学発光法等を挙げることができる。本開示のマーカーまたはそれを捕捉する因子または手段を複数、蛍光法によって標識する場合には、蛍光発光極大波長が互いに異なる蛍光物質によって標識を行う。蛍光発光極大波長の差は、１０ｎｍ以上であることが好ましい。リガンドを標識する場合、機能に影響を与えないものならば何れも用いることができるが、蛍光物質としては、Ａｌｅｘａ^ＴＭＦｌｕｏｒが望ましい。Ａｌｅｘａ^ＴＭＦｌｕｏｒは、クマリン、ローダミン、フルオレセイン、シアニンなどを修飾して得られた水溶性の蛍光色素であり、広範囲の蛍光波長に対応したシリーズであり、他の該当波長の蛍光色素に比べ、非常に安定で、明るく、またｐＨ感受性が低い。蛍光極大波長が１０ｎｍ以上ある蛍光色素の組み合わせとしては、Ａｌｅｘａ^ＴＭ５５５とＡｌｅｘａ^ＴＭ６３３の組み合わせ、Ａｌｅｘａ^ＴＭ４８８とＡｌｅｘａ^ＴＭ５５５との組み合わせ等を挙げることができる。核酸を標識する場合は、その塩基部分と結合できるものであれば何れも用いることができるが、シアニン色素（例えば、ＣｙＤｙｅ^ＴＭシリーズのＣｙ３、Ｃｙ５等）、ローダミン６Ｇ試薬、Ｎ－アセトキシ－Ｎ2－アセチルアミノフルオレン（ＡＡＦ）、ＡＡＩＦ（ＡＡＦのヨウ素誘導体）等を使用することが好ましい。蛍光発光極大波長の差が１０ｎｍ以上である蛍光物質としては、例えば、Ｃｙ５とローダミン６Ｇ試薬との組み合わせ、Ｃｙ３とフルオレセインとの組み合わせ、ローダミン６Ｇ試薬とフルオレセインとの組み合わせ等を挙げることができる。本開示では、このような標識を利用して、使用される検出手段に検出され得るように目的とする対象を改変することができる。そのような改変は、当該分野において公知であり、当業者は標識におよび目的とする対象に応じて適宜そのような方法を実施することができる。

　本明細書において使用される場合、「タグ」とは、受容体－リガンドのような特異的認識機構により分子を選別するための物質、より具体的には、特定の物質を結合するための結合パートナーの役割を果たす物質（例えば、ビオチン－アビジン、ビオチン－ストレプトアビジンのような関係を有する）をいい、「標識」の範疇に含まれうる。よって、例えば、タグが結合した特定の物質は、タグ配列の結合パートナーを結合させた基材を接触させることで、この特定の物質を選別することができる。このようなタグまたは標識は、当該分野で周知である。代表的なタグ配列としては、ｍｙｃタグ、Ｈｉｓタグ、ＨＡ、Ａｖｉタグなどが挙げられるが、これらに限定されない。本開示のマーカーまたはマーカー検出剤にはこのようなタグを結合させてもよい。

　本明細書において「薬剤」、「剤」または「因子」（いずれも英語ではagentに相当す
る）は、広義には、交換可能に使用され、意図する目的を達成することができる限りどのような物質または他の要素（例えば、光、放射能、熱、電気などのエネルギー）でもあってもよい。そのような物質としては、例えば、細胞（例えば、Ｔ細胞）、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、ペプチド、ポリヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ヌクレオチド、核酸（例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡのようなＤＮＡ、ｍＲＮＡのようなＲＮＡを含む）、ポリサッカリド、オリゴサッカリド、脂質、有機低分子（例えば、ホルモン、リガンド、情報伝達物質、有機低分子、コンビナトリアルケミストリで合成された分子、医薬品として利用され得る低分子（例えば、低分子リガンドなど）など）、これらの複合分子が挙げられるがそれらに限定されない。

　本明細書において「キット」とは、通常２つ以上の区画に分けて、提供されるべき部分（例えば、検査薬、診断薬、治療薬、抗体、標識、説明書など）が提供されるユニットをいう。安定性等のため、混合されて提供されるべきでなく、使用直前に混合して使用することが好ましいような組成物の提供を目的とするときに、このキットの形態は好ましい。そのようなキットは、好ましくは、提供される部分（例えば、検査薬、診断薬、治療薬をどのように使用するか、あるいは、試薬をどのように処理すべきかを記載する指示書または説明書を備えていることが有利である。本明細書においてキットが試薬キットとして使用される場合、キットには、通常、検査薬、診断薬、治療薬、抗体等の使い方などを記載した指示書などが含まれる。

　本明細書において「指示書」は、本開示を使用する方法を医師または他の使用者に対する説明を記載したものである。この指示書は、本開示の検出方法、診断薬の使い方、または医薬などを投与することを指示する文言が記載されている。また、指示書には、投与部位として、経口、食道への投与（例えば、注射などによる）することを指示する文言が記載されていてもよい。この指示書は、本開示が実施される国の監督官庁（例えば、日本であれば厚生労働省、米国であれば食品医薬品局（ＦＤＡ）など）が規定した様式に従って作成され、その監督官庁により承認を受けた旨が明記される。指示書は、いわゆる添付文書（package　insert）であり、通常は紙媒体で提供されるが、それに限定されず、例えば、電子媒体（例えば、インターネットで提供されるホームページ、電子メール）のような形態でも提供され得る。

　本明細書で使用されるとき、試料中の分析物等の「量」は、一般には、試料の体積中で検出し得る分析物の質量を反映する絶対値を指す。しかし、量は、別の分析物量と比較した相対量も企図する。例えば、試料中の分析物の量は、試料中に通常存在する分析物の対照の値または正常の値より大きい量であってもよい。

　本明細書で使用されるとき、試料中の分析物等の「レベル」は、一般には、分析物が酵素などの機能を発揮する対象である場合に、その分析物の活性等の値を反映する絶対値を指す。しかし、レベルは、別の分析物レベルと比較した相対レベルも企図する。例えば、試料中の分析物のレベルは、試料中に通常存在する分析物の対照の値または正常の値より大きいレベルであってもよい。

　用語「約」は、本明細書で使用されるとき、示された値プラスまたはマイナス１０％を指す。なお、「約」と明示的に示されない場合でも「約」があると同義で解釈されうる。

（本開示の概要）
　本発明者らは、ＣＤ１０６などの異常発現によって特徴付けられる異常幹細胞を標的とする糖尿病治療の効果が、幹細胞の遊走と組み合わせることで改善され得るという新たな局面を見出した。本開示は、この新たな糖尿病治療戦略に基づき糖尿病および／またはその関連疾患について新たな治療戦略および診断を提供するものである。

　（好ましい実施形態）
　以下に本開示の好ましい実施形態を説明する。以下に提供される実施形態は、本開示のよりよい理解のために提供されるものであり、本開示の範囲は以下の記載に限定されるべきでないことが理解される。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本開示の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。また、本開示の以下の実施形態は単独でも使用されあるいはそれらを組み合わせて使用することができることが理解される。

（糖尿病および/またはその関連疾患に係る異常幹細胞の特徴）
　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、造血幹細胞であり得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、ＣＤ１０６、ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）のうちの少なくとも１つを通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないことによって特徴付けられ、必要に応じて、本明細書に記載の異常幹細胞の他の特徴（例えば、ｃ－Ｋｉｔ陽性、Ｓｃａ－１陽性、造血幹細胞の系統マーカー陰性、上記短期造血幹細胞の特徴（ＣＤ３８陰性など））を有することによってさらに特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、ＣＤ１０６を通常のレベルで発現していないことによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、（ａ）ＣＤ１０６を通常のレベルで発現しておらず、（ｂ）ＣＤ３４異常発現、ＴＮＦ－α異常発現、プロインスリン異常発現、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）異常発現のうちの少なくとも１つを通常のレベルで発現していないことによって特徴付けられ、必要に応じて、本明細書に記載の異常幹細胞の他の特徴（例えば、ｃ－Ｋｉｔ陽性、Ｓｃａ－１陽性、造血幹細胞の系統マーカー陰性、上記短期造血幹細胞の特徴（ＣＤ３８陰性など））を有することによってさらに特徴付けられ得る。

　一つの代表的な実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞（例えば、造血幹細胞）は、ＣＤ１０６の異常発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団の全骨髄細胞または造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性細胞）におけるＣＤ１０６発現量より高いＣＤ１０６発現量により特徴づけられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、細胞１個あたり１×１０^２以上、２×１０^２以上、５×１０^２以上、１×１０^３以上、２×１０^３以上、５×１０^３以上、１×１０^４以上、２×１０^４以上、５×１０^４以上、１×１０^５以上、２×１０^５以上、５×１０^５以上、１×１０^６以上、２×１０^６以上、５×１０^６以上、または１×１０^７以上のＣＤ１０６分子を細胞表面に発現することによって特徴付けられ得る。具体的な実施形態において、本開示の異常幹細胞は、細胞１個あたり約１×１０^４以上のＣＤ１０６分子を細胞表面に発現することによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、正常な被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞または造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性細胞）をＣＤ１０６に対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞または造血幹細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の１倍以上、２倍以上、５倍以上、１０倍以上、２０倍以上、５０倍以上、１００倍以上、２００倍以上、５００倍以上、または１０００倍以上の蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団由来の造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性細胞）よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上または２００％以上高いＣＤ１０６のｍＲＮＡ発現量によって特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、ＴＮＦ－αの発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、ＴＮＦ－αの発現について陽性であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、ＴＮＦ－αの発現について陽性であることは、正常な被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞または造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性細胞）をＴＮＦ－αに対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞または造血幹細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の１倍以上、２倍以上、５倍以上、１０倍以上、２０倍以上、５０倍以上、１００倍以上、２００倍以上、５００倍以上、または１０００倍以上の蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団由来の造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性細胞）よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上または２００％以上高いＴＮＦ－αのｍＲＮＡ発現量によって特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、プロインスリンの異常な発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、プロインスリンの発現について陽性であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、プロインスリンの発現について陽性であることは、非糖尿病被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞または造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性細胞）をプロインスリンに対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞または造血幹細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の１倍以上、２倍以上、５倍以上、１０倍以上、２０倍以上、５０倍以上、１００倍以上、２００倍以上、５００倍以上、または１０００倍以上の蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団由来の造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性細胞）よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上、２００％以上、３００％以上、４００％以上、５００％以上、７００％以上または１０００％以上高いインスリン（またはプロインスリン）のｍＲＮＡ発現量によって特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、ｃ－Ｋｉｔの発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、ｃ－Ｋｉｔの発現について陽性であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、ｃ－Ｋｉｔの発現について陽性であることは、非糖尿病被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞または造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性細胞）をｃ－Ｋｉｔに対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞または造血幹細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の０．１倍以上、０．２倍以上、０．５倍以上、１倍以上、２倍以上、５倍以上、１０倍以上、２０倍以上、５０倍以上、１００倍以上、２００倍以上、５００倍以上、または１０００倍以上の蛍光強度を呈する、かつ／またはこの蛍光色素由来の蛍光強度の大きい順に細胞を並べた場合に上位７０％以内、６０％以内、５０％以内、４０％以内、３０％以内、２０％以内または１０％以内に属する蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、Ｓｃａ－１の発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、Ｓｃａ－１の発現について陽性であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、Ｓｃａ－１の発現について陽性であることは、非糖尿病被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞をＳｃａ－１に対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の０．１倍以上、０．２倍以上、０．５倍以上、１倍以上、２倍以上、５倍以上、１０倍以上、２０倍以上、５０倍以上、１００倍以上、２００倍以上、５００倍以上、または１０００倍以上の蛍光強度を呈する、かつ/またはこの蛍光色素由来の蛍光強度の大きい順に全骨髄細胞を並べた場合に上位７０％以内、６０％以内、５０％以内、４０％以内、３０％以内、２０％以内または１０％以内に属する蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、造血幹細胞の系統マーカーの発現によって特徴付けられ得る。造血幹細胞の系統マーカーとしては、ＣＤ３（Ｔ細胞）、ＣＤ１９（Ｂ細胞）、ＮＫ１．１（ＮＫ細胞）、ＣＤ１１ｃ（樹状細胞）、ＣＤ１１ｂ（単球）、ＦｃεＲＩ（マスト細胞）、Ｇｒ－１（顆粒球）などが挙げられる。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、ＣＤ３、ＣＤ１９、ＮＫ１．１、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＦｃεＲＩ、およびＧｒ－１のうちの１つまたは複数（例えば、全て）の発現について陰性であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、ＣＤ３、ＣＤ１９、ＮＫ１．１、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＦｃεＲＩ、およびＧｒ－１のそれぞれの発現について陰性であることは、非糖尿病被験体（例えば、ヒト）の全骨髄細胞をＣＤ３、ＣＤ１９、ＮＫ１．１、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１１ｂ、ＦｃεＲＩまたはＧｒ－１に対する蛍光色素コンジュゲート化抗体で標識してＦＡＣＳで分析した場合に、全骨髄細胞について観察されるこの蛍光色素由来の蛍光強度の中央値の１０００％以下、５００％以下、２００％以下、１００％以下、５０％以下、２０％以下、１０％以下、５％以下、２％以下、または１％以下の蛍光強度を呈する、かつ／またはこの蛍光色素由来の蛍光強度の大きい順に全骨髄細胞を並べた場合に下位５０％以内、２０％以内、１０％以内、５％以内、２％以内、または１％以内に属する蛍光強度を呈する発現量によって示され得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団由来の造血幹細胞よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上または２００％以上高いＣＤ３４のｍＲＮＡ発現量によって特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、造血幹細胞であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、ヒト造血幹細胞であることは、ＣＤ３４陽性Ｔｈｙ－１陽性であるか、またはＬｉｎｅａｇｅ陰性ＣＤ３４陽性ＣＤ３８陰性ＣＤ９０陽性ＣＤ４５ＲＡ陰性であることによっても特徴付けられ得る。一つの実施形態において、マウス造血幹細胞は、ｃ－ｋｉｔ陽性Ｓｃａ－１陽性系統マーカー陰性（ＫＳＬ）であることによって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、造血幹細胞であることは、Ｈｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２色素で染色した骨髄細胞を、紫外光（３５０ｎｍ）で励起し、Ｈｏｅｃｈｓｔ　ｂｌｕｅおよびＨｏｅｃｈｓｔ　ｒｅｄの２種類の光学フィルターで展開した場合に両方とも陰性であることによっても特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、造血幹細胞の細胞段階によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、短期造血幹細胞であり得る。

　一つの実施形態において、本開示が対象とする異常幹細胞は、ヒストン脱アセチル化酵素遺伝子群（ＨＤＡＣｓ）の発現によって特徴付けられ得る。一つの実施形態において、本開示の異常幹細胞は、非糖尿病被験体集団由来の造血幹細胞（例えば、ｃ－Ｋｉｔ陽性系統マーカー陰性細胞）よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上、２００％以上、３００％以上、４００％以上または５００％以上高いヒストン脱アセチル化酵素遺伝子群（ＨＤＡＣｓ）（例えば、Ｈｄａｃ３、Ｈｄａｃ４、Ｈｄａｃ８、Ｈｄａｃ９）の１つまたは複数の発現量によって特徴付けられ得る。

　一つの実施形態において、プロインスリンおよび／またはＴＮＦ－αは、本開示が対象とする異常幹細胞が骨髄に局在することを示すマーカーとなり得る。

（幹細胞の遊走と組み合わせた異常幹細胞を標的とした糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防）
　一つの局面において、本開示は、本明細書に記載の特徴を有する異常幹細胞を遊走させ、抑制することによる糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防を提供する。この治療および／または予防は、方法の実施、この目的のための組成物、組合せ物、キット、またはシステムの提供など、任意の手段によって達成され得る。例えば、抗体などの抑制剤を使用する場合、骨髄中に存在する細胞に対する抑制効果は限定的であり得る（例えば、実施例を参照のこと）そのため、本開示のように、異常幹細胞を抑制する前に、異常幹細胞を遊走させることで、異常幹細胞の抑制効果が向上し得る。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防は、本明細書に記載の異常幹細胞の少なくとも１つの特徴を有する全細胞を遊走させ、抑制することで実施され得る。すなわち、この実施形態において、遊走し、抑制される細胞は、本明細書に記載の異常幹細胞に限定されない。本明細書に記載の異常幹細胞のみを遊走・抑制することは技術的に困難であり得、異常幹細胞の遊走・抑制により得られる利益と、その他の細胞の遊走・抑制による影響とを考慮に入れて治療および／または予防が選択され得る。他方、本明細書に記載の異常幹細胞のうちの一部の細胞の遊走・抑制では、糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防が不十分となり得るため、本明細書に記載の異常幹細胞は全て遊走・抑制することが好ましくあり得る。本開示の治療および／または予防において、遊走のために利用する異常幹細胞の特徴と、抑制のために利用する異常幹細胞の特徴とは、同じであってもよいし、異なってもよい。例えば、一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防は、異常幹細胞が造血幹細胞であるという特徴を遊走のために利用し（例えば、ＣＸＣＲ４拮抗薬および／またはＣＸＣＲ２刺激薬を使用して）、異常幹細胞が特定の細胞表面タンパク質（ＣＤ１０６など）を異常に発現するという特徴を抑制のために利用して（例えば、抗ＣＤ１０６抗体を使用して）もよい。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における遊走は、本明細書に記載の任意の特徴を有する異常幹細胞を遊走させることで実施することができる。一つの実施形態において、本明細書に記載の異常幹細胞の遊走は、造血幹細胞を遊走させる処置により実施することができる。一つの実施形態において、造血幹細胞を遊走させる処置には、ＣＸＣＲ４の阻害（Future　Oncol.　2007　Feb;3(1):19-27）、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害（Nature　Medicine　volume　16,　pages　1141-1146　(2010)）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）刺激の惹起（Blood.　1995　Dec　15;86(12):4437-45）、およびＣＸＣＲ２刺激の惹起（Cell.　2018　Jan　11;172(1-2):191-204.e10）などが挙げられるが、これらに限定されない。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における遊走は、本明細書に記載の任意の特徴を有する異常幹細胞の遊走剤を使用して実施され得る。当業者は、本開示の治療および／または予防における遊走において使用することができる遊走剤を適宜選択することができ、例えば、遊走剤の投与前後で、実際に骨髄内および/または血液中における幹細胞（例えば、本明細書に記載の特徴を有する異常幹細胞）の比率を測定し、遊走効果を調べることによって、本開示の治療および／または予防に利用可能な遊走剤を選択することができる。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における遊走は、造血幹細胞の遊走剤を使用して実施され得る。一つの実施形態において、造血幹細胞の遊走剤は、ＣＸＣＲ４の阻害（例えば、プレリキサフォル（ＡＭＤ３１００））、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）の阻害（例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブなど）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）刺激の惹起（例えば、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチムなど）、およびＣＸＣＲ２刺激の惹起（例えば、ＧＲＯβ（ＭＩＰ２））などの機能を有するものであり得るが、これらに限定されない。一つの実施形態において、造血幹細胞の遊走剤は、任意の組み合わせで使用することができ、例えば、ＣＸＣＲ４の阻害剤（例えば、プレリキサフォル（ＡＭＤ３１００））およびＣＸＣＲ２刺激惹起剤（例えば、ＧＲＯβ（ＭＩＰ２））の組み合わせであり得る。

　一つの実施形態において、本明細書に記載の異常幹細胞の抑制は、本明細書に記載の異常幹細胞の任意の特徴を標的とし、標的となった細胞を遊走させて、抑制することで実施することができる。例えば、本明細書に記載の異常幹細胞が細胞表面に発現する分子（ＣＤ１０６、ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、ｃ－Ｋｉｔ、Ｓｃａ－１など）を標的とする場合、細胞表面発現分子に特異的に結合する分子（抗体、Ｔ細胞受容体、低分子化合物など）を使用することができる。また、複数種類の分子を同時発現する細胞を標的とする場合、例えば、多特異的抗体など複数種類の分子に結合する分子を使用して目的の細胞を標的化することができる。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、ＣＤ１０６異常発現、ＣＤ３４異常発現、ＴＮＦ－α異常発現、プロインスリン異常発現、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）異常発現のうちの少なくとも１つを特徴とする異常幹細胞を遊走させて、抑制することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、ＣＤ１０６異常発現を特徴とする異常幹細胞を遊走させて、抑制することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、（ａ）ＣＤ１０６異常発現と、（ｂ）ＣＤ３４異常発現、ＴＮＦ－α異常発現、プロインスリン異常発現、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）異常発現のうちの少なくとも１つとを特徴とする異常幹細胞を遊走させて、抑制することで実施され得る。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、ＣＤ１０６、ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）の少なくとも１つを標的とする１つまたは複数の抑制剤を使用して実施され得る。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、ＣＤ１０６を標的とする抑制剤を使用して実施され得る。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防における抑制は、（ａ）ＣＤ１０６と、（ｂ）ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）のうちの少なくとも１つとを標的とする１つまたは複数の抑制剤を使用して実施され得る。抑制剤は本明細書に記載の任意の抑制剤を使用することができ、例えば、上記分子と結合する抗体である。一つの実施形態において、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）を標的とする抑制剤は、ＨＤＡＣ阻害剤であり得、例えば、ＴＳＡ（トリコスタチンＡ）、ＶＰＡ（バルプロ酸）、酪酸ナトリウム（ＮａＢｕ）、ＳＡＨＡ（スベロイルアニリドヒドロキサム酸またはボリノスタット）、ナトリウムフェニルブチレート、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８、ＦＫ２２８）、トラポキシン（ＴＰＸ）、環式ヒドロキサム酸含有ペプチド１（ＣＨＡＰ１）、ＭＳ－２７５、ＬＢＨ５８９、およびＰＸＤ１０１などが挙げられるが、これらに限定されない。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防は、糖尿病の治療および／または予防であり得る。一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害または皮膚障害の治療および／または予防であり得る。

　本開示の治療および／または予防は、任意の公知の治療および／または予防処置または手段（例えば、糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防処置または手段）と組み合わされてもよい。

（異常幹細胞の遊走および／または残留に基づく糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクの診断）
　一つの局面において、本開示は、本明細書に記載の異常幹細胞の遊走および／または残留に基づく糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクの診断を提供する。この診断は、方法の実施、この目的のための組成物、組合せ物、キット、またはシステムの提供など、任意の手段によって達成され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の少なくとも１つの特徴を有する少なくとも一部の細胞の特定の部位における存在および／または存在量を検出することで実施され得る。本明細書において、特に断らない限り、細胞の「存在量」とは、細胞の数（または細胞の数を示す任意の指標）だけでなく、細胞集団中の特定の細胞の割合（または特定の細胞の割合を示す任意の指標）も意味する。一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の骨髄および／または骨髄のニッチにおける存在および／または存在量を検出することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の循環血における存在および／または存在量を検出することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の遊走剤を投与した被験体における異常幹細胞の特定の部位における存在および／または存在量を検出することで実施することができ、例えば、遊走剤の投与の前後における異常幹細胞の特定の部位（例えば、骨髄）における存在および／または存在量の変化に基づいて実施され得る。この実施形態において、例えば、遊走剤の投与後に被験体の骨髄において異常幹細胞の存在量が低下した場合、被験体が、糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクを有すると診断してもよく、一つの実施形態において、この被験体は、この遊走剤を用いた本開示の治療および／または予防処置に供され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の少なくとも１つの特徴の定量的指標（例えば、細胞表面タンパク質発現量、ｍＲＮＡ発現量）に基づいて実施され得る。一つの実施形態において、被験体由来の試料（例えば、血液試料、骨髄試料）またはそこに含まれる造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性細胞）が、非糖尿病被験体集団の対応する試料またはそこに含まれる造血幹細胞（例えば、ＣＤ３４陽性細胞）よりも１０％以上、２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、１００％以上、１５０％以上または２００％以上高いＣＤ１０６のｍＲＮＡ発現量を示す場合に、被験体は、糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクを有する、あるいは本開示の異常細胞遊走処置に適すると判断され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の少なくとも１つの特徴（定量的指標を含む）を示す細胞の割合に基づいて実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、被験体の造血幹細胞のうちの正常でないレベルのＣＤ１０６発現を示す細胞の割合に基づいて実施することができ、必要に応じて非糖尿病被験体集団または糖尿病被験体集団の造血幹細胞のうちの正常でないレベルのＣＤ１０６発現を示す細胞の割合と比較することで実施され得る。一つの実施形態において、特定の部位（例えば、骨髄）において、被験体の造血幹細胞のうちの正常でないレベルのＣＤ１０６発現を示す細胞の割合が、非糖尿病被験体集団の造血幹細胞のうちの正常でないレベルのＣＤ１０６発現を示す細胞の割合の１．１倍以上、１．２倍以上、１．３倍以上、１．４倍以上、１．５倍以上、１．６倍以上、１．７倍以上、１．８倍以上、１．９倍以上、２倍以上、２．１倍以上、２．２倍以上、２．３倍以上、２．４倍以上、２．５倍以上、２．６倍以上、２．７倍以上、２．８倍以上、２．９倍以上、３倍以上、３．５倍以上、４倍以上、４．５倍以上、または５倍以上である場合に、被験体は、糖尿病および／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクを有する、あるいは本開示の異常細胞遊走処置に適すると判断され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、本明細書に記載の異常幹細胞の任意の特徴を検出することで実施することができる。一つの実施形態において、本開示の診断は、ＣＤ１０６異常発現、ＣＤ３４異常発現、ＴＮＦ－α異常発現、プロインスリン異常発現、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）異常発現のうちの少なくとも１つの特徴を有し、必要に応じて、本明細書に記載の異常幹細胞の他の特徴（例えば、ｃ－Ｋｉｔ陽性、Ｓｃａ－１陽性、造血幹細胞の系統マーカー陰性、上記短期造血幹細胞の特徴（ＣＤ３８陰性など））をさらに有する細胞を検出することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、ＣＤ１０６異常発現を特徴とする細胞を検出することで実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、（ａ）ＣＤ１０６異常発現と、（ｂ）ＣＤ３４異常発現、ＴＮＦ－α異常発現、プロインスリン異常発現、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）異常発現のうちの少なくとも１つとを特徴とし、必要に応じて、本明細書に記載の異常幹細胞の他の特徴（例えば、ｃ－Ｋｉｔ陽性、Ｓｃａ－１陽性、造血幹細胞の系統マーカー陰性、上記短期造血幹細胞の特徴（ＣＤ３８陰性など））をさらに有する細胞を検出することで実施され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、ＣＤ１０６、ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）の少なくとも１つを標的とする１つまたは複数の検出剤を使用して実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、ＣＤ１０６を標的とする検出剤を使用して実施され得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、（ａ）ＣＤ１０６と、（ｂ）ＣＤ３４、ＴＮＦ－α、プロインスリン、およびヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣｓ）のうちの少なくとも１つとを標的とする１つまたは複数の検出剤を使用して実施され得る。検出剤は本明細書に記載の任意の検出剤を使用することができ、例えば、上記分子と結合する抗体を含む。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、被験体に対する検出剤の投与によって実施してもよいし、被験体由来の試料を試験することで実施してもよい。例えば、本開示の診断は、被験体に本開示の検出剤を投与して、骨髄（またはその特定のニッチ）における本開示の異常幹細胞の存在および/または存在量を検出することで実施され得る。例えば、本開示の診断は、被験体の細胞を含む試料（例えば、血液試料、骨髄試料）を取得して、本開示の異常幹細胞の少なくとも１つの特徴および/または骨髄（またはその特定のニッチ）における存在を示すマーカーを有する細胞が存在するかどうかを確認することで実施され得る。

　一つの実施形態において、本開示の診断は、糖尿病の診断であり得る。一つの実施形態において、本開示の診断は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害または皮膚障害、あるいはそのリスクの診断であり得る。

　本開示の診断は、任意の公知の診断（例えば、糖尿病および/または糖尿病に関連する
疾患、障害および／もしくは症状の診断）と組み合わされてもよい。

　一つの実施形態において、本開示の治療および／または予防は、本開示の診断に基づいて（例えば、本開示の診断の結果、異常幹細胞が骨髄に存在することが予測された被験体に対して）実施され得る。

　本開示の治療、予防および／または診断は、任意の被験体において実施することができる。一つの実施形態において、被験体は、哺乳動物、例えば、ヒト、マウス、モルモット、ハムスター、ラット、ネズミ、ウサギ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、マーモセット、サル、またはチンパンジー等である。具体的な実施形態において、被験体は、ヒトである。

（医薬品、剤型等）
　本明細書に記載される異常幹細胞の抑制剤、遊走剤および異常幹細胞の検出剤は、種々の形態の組成物または医薬として提供され得る。

　本明細書に記載される異常幹細胞の抑制剤、遊走剤および異常幹細胞の検出剤の投与経路は、糖尿病および/または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療、予防または検出に際して効果的なものを使用するのが好ましく、例えば、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、または経口投与等であってもよい。投与形態としては、例えば、注射剤、カプセル剤、錠剤、顆粒剤等であってもよい。注射用の水溶液は、例えば、バイアル、またはステンレス容器で保存してもよい。また注射用の水溶液は、例えば生理食塩水、糖（例えばトレハロース）、ＮａＣｌ、またはＮａＯＨ等を配合してもよい。また治療薬は、例えば、緩衝剤（例えばリン酸塩緩衝液)、安定剤等を配合してもよい。

　一般的に、本開示の組成物、医薬、抑制剤、遊走剤、検出剤等は、治療有効量の有効成分または検出可能量の検出手段、および薬学的に許容しうるキャリアもしくは賦形剤を含む。本明細書において「薬学的に許容しうる」は、動物、そしてより詳細にはヒトにおける使用のため、政府の監督官庁に認可されたか、あるいは薬局方または他の一般的に認められる薬局方に列挙されていることを意味する。本明細書において使用される「キャリア」は、治療剤または検出剤を一緒に投与する、希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルを指す。このようなキャリアは、無菌液体、例えば水および油であることも可能であり、石油、動物、植物または合成起源のものが含まれ、限定されるわけではないが、ピーナツ油、ダイズ油、ミネラルオイル、ゴマ油等が含まれる。医薬を経口投与する場合は、水が好ましいキャリアである。医薬組成物を静脈内投与する場合は、生理食塩水および水性デキストロースが好ましいキャリアである。好ましくは、生理食塩水溶液、並びに水性デキストロースおよびグリセロール溶液が、注射可能溶液の液体キャリアとして使用される。適切な賦形剤には、軽質無水ケイ酸、結晶セルロース、マンニトール、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、中鎖脂肪酸トリグリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、白糖、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩等が含まれる。組成物は、望ましい場合、少量の湿潤剤または乳化剤、あるいはｐＨ緩衝剤もまた含有することも可能である。これらの組成物は、溶液、懸濁物、エマルジョン、錠剤、ピル、カプセル、粉末、持続放出配合物等の形を取ることも可能である。伝統的な結合剤およびキャリア、例えばトリグリセリドを用いて、組成物を座薬として配合することも可能である。経口配合物は、医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン・ナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどの標準的キャリアを含むことも可能である。適切なキャリアの例は、E．W．Martin,　Remington’s　Pharmaceutical　Sciences(Mark　Publishing　Company,　Easton,　U.S.A）に記載される。このような組成物は、患者に適切に投与する形を提供するように、適切な量のキャリアと一緒に、治療有効量の療法剤、好ましくは精製型のものを含有する。配合物は、投与様式に適していなければならない。これらのほか、例えば、界面活性剤、賦形剤、着色料、着香料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、等張化剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤等を含んでいてもよい。

　本開示の一実施形態において「塩」は、例えば、任意の酸性（例えばカルボキシル）基で形成されるアニオン塩、または任意の塩基性（例えばアミノ）基で形成されるカチオン塩を含む。塩類には無機塩または有機塩を含み、例えば、Berge　et　al.,　J.　Pharm.　Sci.,　1977,　66,　1-19に記載されている塩が含まれる。また例えば、金属塩、アンモニウム塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩等が挙げられる。本開示の一実施形態において「溶媒和物」は、溶質および溶媒によって形成される化合物である。溶媒和物については例えば、J.　Honig　et　al.,　The　Van　Nostrand　Chemist’s　Dictionary　P650(1953)を参照できる。溶媒が水であれば形成される溶媒和物は水和物である。この溶媒は、溶質の生物活性を妨げないものが好ましい。そのような好ましい溶媒の例として、特に限定するものではないが、水、または各種バッファーが挙げられる。

　本開示において、医薬を投与する場合、種々の送達（デリバリー）系をともに使用することができ、そしてこのような系を用いて、本開示の抑制剤および/または遊走剤を適切な部位に投与することも可能である。このような系には、例えばリポソーム、微小粒子、および微小カプセル中の被包：受容体が仲介するエンドサイトーシスの使用；レトロウイルスベクターまたは他のベクターの一部としての療法核酸の構築などがある。導入法には、限定されるわけではないが、皮内、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻内、硬膜外、および経口経路が含まれる。好適な経路いずれによって、例えば注入によって、ボーラス（bolus）注射によって、上皮または皮膚粘膜裏打ち（例えば口腔、直腸および腸粘膜など）を通じた吸収によって、医薬を投与することも可能であるし、必要に応じてエアロゾル化剤を用いて吸入器または噴霧器を使用しうるし、そして他の生物学的活性剤と一緒に投与することも可能である。投与は全身性または局所であることも可能である。

　好ましい実施形態において、公知の方法に従って、ヒトへの投与に適応させた医薬組成物として、組成物を配合することができる。このような組成物は注射により投与することができる。代表的には、注射投与のための組成物は、無菌等張水性緩衝剤中の溶液である。必要な場合、組成物はまた、可溶化剤および注射部位での疼痛を和らげるリドカインなどの局所麻酔剤も含むことも可能である。一般的に、成分を別個に供給するか、または単位投薬型中で一緒に混合して供給し、例えば活性剤の量を示すアンプルまたはサシェなどの密封容器中、凍結乾燥粉末または水不含濃縮物として供給することができる。組成物を注入によって投与しようとする場合、無菌薬剤等級の水または生理食塩水を含有する注入ビンを用いて、分配することも可能である。組成物を注射によって投与しようとする場合、投与前に、成分を混合可能であるように、注射用の無菌水または生理食塩水のアンプルを提供することも可能である。

　本開示の組成物、医薬、遊走剤、抑制剤を中性型または塩型あるいは他のプロドラッグ（例えば、エステル等）で配合することも可能である。薬学的に許容しうる塩には、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来する遊離型のカルボキシル基とともに形成されるもの、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２－エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来するものなどの遊離型のアミン基とともに形成されるもの、並びにナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、および水酸化第二鉄などに由来するものが含まれる。

　本開示の抑制剤および/または遊走剤の量は、障害または状態の性質によって変動しうるが、当業者は本明細書の記載に基づき標準的臨床技術によって決定可能である。さらに、場合によって、in　vitroアッセイを使用して、最適投薬量範囲を同定するのを補助することも可能である。配合物に使用しようとする正確な用量はまた、投与経路、および疾患または障害の重大性によっても変動しうるため、担当医の判断および各患者の状況に従って、決定すべきである。しかし、投与量は特に限定されないが、例えば、１回あたり０．００１、１、５、１０、１５、１００、または１０００ｍｇ／ｋｇ体重であってもよく、それらいずれか２つの値の範囲内であってもよい。投与間隔は特に限定されないが、例えば、１、７、１４、２１、または２８日あたりに１または２回投与してもよく、それらいずれか２つの値の範囲あたりに１または２回投与してもよい。投与量、投与間隔、投与方法は、患者の年齢や体重、症状、対象臓器等により、適宜選択してもよい。また治療薬は、治療有効量、または所望の作用を発揮する有効量の有効成分を含むことが好ましい。有効用量は、in　vitroまたは動物モデル試験系から得られる用量－反応曲線から推定可能である。

　本開示の医薬組成物または治療剤もしくは予防剤はキットとして提供することができる。

　特定の実施形態では、本開示は、本開示の組成物または医薬の１以上の成分が充填された、１以上の容器を含む、薬剤パックまたはキットを提供する。場合によって、このような容器に付随して、医薬または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府機関によって規定された形で、政府機関による、ヒト投与のための製造、使用または販売の認可を示す情報を示すことも可能である。

　本開示の治療薬、予防薬等の医薬等としての製剤化手順は、当該分野において公知であり、例えば、日本薬局方、米国薬局方、他の国の薬局方などに記載されている。従って、当業者は、本明細書の記載があれば、過度な実験を行うことなく、使用すべき量等の実施形態を決定することができる。

　本明細書において「または」は、文章中に列挙されている事項の「少なくとも1つ以上」を採用できるときに使用される。「もしくは」も同様である。本明細書において「2つの値」の「範囲内」と明記した場合、その範囲には2つの値自体も含む。

　本明細書において引用された、科学文献、特許、特許出願などの参考文献は、その全体が、各々具体的に記載されたのと同じ程度に本明細書において参考として援用される。

　以上、本開示を、理解の容易のために好ましい実施形態を示して説明してきた。以下に、実施例に基づいて本開示を説明するが、上述の説明および以下の実施例は、例示の目的のみに提供され、本開示を限定する目的で提供したのではない。従って、本開示の範囲は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、特許請求の範囲によってのみ限定される。

　必要な場合、以下の実施例で用いる動物の取り扱いは、滋賀医科大学の動物実験ガイドラインに従って実施した。試薬類は具体的には実施例中に記載した製品を使用したが、他メーカー（Sigma－Aldrich、和光純薬、ナカライ、R&D　Systems、USCN　Life　Science　INC等）の同等品でも代用可能である。

　以下の実施例において、それぞれの略語は以下の意味を示す。
ＤＭ　　　　　　糖尿病
ＳＴＺ－ＤＭ　　ストレプトゾトシン誘導性糖尿病
ＫＳＬ細胞　　　ｃ－Ｋｉｔ陽性Ｓｃａ－１陽性Ｌｉｎｅａｇｅ（系統マーカー）陰性細胞
ＳＮＣＶ　　　　知覚神経伝達速度

（実施例１：糖尿病に関与する異常幹細胞の特定）
　糖尿病に関与する異常細胞を特定するために、糖尿病モデルマウスから取得した幹細胞を分析した。

　方法
　マウスおよび骨髄細胞の取得
　試験には、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（野生型、日本クレア、大阪）を使用した。ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）（１５０ｍｇ／ｋｇ）（ナカライテスク、京都）の静脈内注射によって糖尿病を誘導して、２型糖尿病モデル（ＳＴＺマウス）を作成した。８週齢のマウスから骨髄細胞を単離した。

　ＦＡＣＳ
　Ｆｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ　Ｐｌｕｓ（GE　Healthcare　Bio-Sciences　AB、Uppsala
、Sweden）を用いて全骨髄から単核細胞を単離した。

　ＴＮＦ－αおよびＣＤ１０６の発現を評価するために、単核細胞を、ＰＥ－Ｃｙ７コンジュゲート化ストレプトアビジン抗体（BD　Biosciences、San　Jose、CA）、ビオチンマウス系統パネル染色（BD　Biosciences）、ＡＰＣコンジュゲート化抗ｃ－ｋｉｔ抗体（BD　Biosciences）、ＡＰＣ－Ｃｙ７コンジュゲート化抗Ｌｙ６Ａ／Ｅ抗体（Ｓｃａ－１）（BD　Biosciences）、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）コンジュゲート化抗ＣＤ１０６抗体（BD　Biosciences）およびフィコエリトリン（ＰＥ）コンジュゲート化抗ＴＮＦ－α抗体（eBiosciences）と免疫反応させた。

　プロインスリン発現を評価するために、単核細胞を、ＰＥ－Ｃｙ７コンジュゲート化ストレプトアビジン抗体、ＡＰＣコンジュゲート化抗ｃ－ｋｉｔ抗体、ＡＰＣ－Ｃｙ７コンジュゲート化抗Ｌｙ６Ａ／Ｅ抗体（Ｓｃａ－１）、およびビオチンマウス系統パネルと反応させた後、ＢＤ　Ｃｙｔｏｆｉｘ／ＣｙｔｏＰｅｒｍ（BD　Biosciences）で固定した。次に、ウサギ抗インスリンモノクローナル抗体（Cell　signaling　technology）およびＰＥコンジュゲート化抗ウサギＩｇＧ抗体（Cell　signaling　technology）を単核細胞に適用した。この染色の前に、死細胞を枯渇させるために、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ固定可能死細胞ブルー染色キット（ThermoFisher　Scientific　Inc.、米国マサチューセッツ州ウォルサム）を使用した。

　染色の４時間後、ＦＡＣＳ　ＤＩＶＡソフトウェア（BD　Biosciences）でＦＡＣＳ　Ｃａｎｔｏ　ＩＩを使用して細胞を分析した。

　結果
　プロインスリン陽性細胞はＳＴＺ－ＤＭマウス由来の単核細胞のＫＳＬ画分において見出されたが、非ＤＭマウスのＫＳＬ画分では観察されなかった（図１）。同様に、ＴＮＦ－α陽性細胞も、ＳＴＺ－ＤＭマウス由来の単核細胞のＫＳＬ画分において見出されたが、非ＤＭマウスのＫＳＬ画分では観察されなかった（図２）。ＣＤ１０６陽性細胞はＳＴＺ－ＤＭマウスおよび非ＤＭマウス両方の単核細胞のＫＳＬ画分において見出されたが、ＳＴＺ－ＤＭマウスにおいてより多く発現していた（図３）。

　糖尿病マウスでは、ＫＳＬ細胞において、ＴＮＦ－α陽性細胞、およびプロインスリン陽性細胞が存在し、ＣＤ１０６発現細胞が増大しており、これらの特徴を有する造血幹細胞が、糖尿病の慢性疾患としての特徴を出現させる原因となっていると考えられる。

（実施例２：１型糖尿病に関与する異常幹細胞の特定）
　実施例１と同様に、１型糖尿病モデルマウスから取得した幹細胞についても糖尿病に関与する異常細胞を特徴付けた。

　方法
　マウスおよび骨髄細胞の取得
　試験には、ＩＣＲマウス（日本クレア、大阪）およびＮＯＤマウス（日本クレア、大阪）を使用した。実施例１と同様に単核細胞を単離した。

　実施例１と同様に、単核細胞を、ＴＮＦ－α、ＣＤ１０６、ｃ－ｋｉｔ、Ｓｃａ－１、およびマウス系統（Ｌｉｎｅａｇｅ）について染色して、ＦＡＣＳ分析を行った。

　結果
　ＩＣＲマウスと比較して、ＮＯＤマウスでは、ＫＳＬ細胞の割合が約２５％に減少していた（図４）。ＫＳＬ細胞集団に含まれるＴＮＦ－α陽性細胞、およびＣＤ１０６発現細胞の割合は、ＩＣＲマウスと比較してＮＯＤマウスにおいて顕著に増大していた（図５）。

　１型糖尿病マウスのＫＳＬ細胞においても、ＴＮＦ－α陽性細胞、およびＣＤ１０６発現細胞が増大しており、これらの特徴を有する造血幹細胞が、糖尿病の慢性疾患としての特徴を出現させる原因となっていると考えられる。

（実施例３：糖尿病に関与する異常幹細胞の細胞段階）
　異常幹細胞が、造血幹細胞のどの段階の細胞であるかを試験した。

　方法
　ＫＳＬ細胞のサイドポピュレーション（ＳＰ）を、Ｇｏｏｄｅｌｌによって報告された方法に従ってＦＡＣＳによって分析した（J　Exp　Med.　1996　Apr　1;183(4):1797-806；Nat　Med.　1997　Dec;3(12):1337-45を参照のこと）。Ｈｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２色素は細胞透過性がありＤＮＡと結合するが、造血幹細胞ではこの色素が効率的に細胞外に排出され得る。この性質を用いて、この色素で染色した骨髄細胞を、紫外光（３５０ｎｍ）で励起し、Ｈｏｅｃｈｓｔ　ｂｌｕｅおよびＨｏｅｃｈｓｔ　ｒｅｄの２種類の光学フィルターで展開した場合、造血幹細胞分画が、染色されていない細胞集団（ＳＰ細胞）に含まれることが報告されている。全骨髄細胞を、色素としてＨｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２（Sigma-Aldrich　Japan　K.K.、東京、日本）を用いて３７℃で正確に９０分間染色した。ゲート設定のためにＨｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２陽性細胞を塩酸ベラパミル（Tocris　bioscience、Bristol、UK）と共にインキュベートし、単核細胞をＦｉｃｏｌｌ－Ｐａｑｕｅ　Ｐｌｕｓによって分離した。次に、ビオチンマウス系統パネル染色した後、これらの細胞を、ＰＥ－Ｃｙ７コンジュゲート化ストレプトアビジン、ＡＰＣコンジュゲート化抗ｃ－ｋｉｔ、ＡＰＣ－Ｃｙ７コンジュゲート化抗Ｌｙ６Ａ／Ｅ（Ｓｃａ－１）、およびＰＥコンジュゲート化抗ＴＮＦ－αまたはＦＩＴＣコンジュゲート化抗ＣＤ１０６とインキュベートした。死細胞枯渇のために、ヨウ化プロピジウム（Sigma-Aldrich）を試料に添加して死細胞を除去し、ＦＡＣＳ　ＤＩＶＡソフトウェア（BD　Biosciences）を用いたＦＡＣＳ　Ａｒｉａ　Ｆｕｓｉｏｎを用いた分析を行った。Ｈｏｅｃｈｅｓｔ　３３３４２で染色した細胞を３５０ｎｍの紫外光で励起し、４５０ＢＰ２０（４５０／２０ｎｍバンドパスフィルター）（Ｈｏｅｃｈｓｔ　ｂｌｕｅ）および６７５ＥＦＬＰ（６７５ｎｍロングパスエッジフィルター）（Ｈｏｅｃｈｓｔ　ｒｅｄ）の２種類の光学フィルターを使用した。

　結果
　非ＤＭマウスと比較してＳＴＺ－ＤＭマウスにおいてＫＳＬ細胞中のＳＰ細胞の割合が増大し、非ＳＰ細胞の割合が減少していた（図６）。非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭのいずれのマウスのＳＰ細胞においてもＣＤ１０６陽性細胞もＴＮＦ－α陽性細胞も検出されなかった（図７ｂ、ｄ）。他方、非ＳＰ細胞においては、非ＤＭ由来のＴＮＦ－α陽性細胞は検出されなかったが、ＳＴＺ－ＤＭ由来のＴＮＦ－α陽性細胞が検出され、非ＤＭマウスと比較してＳＴＺ－ＤＭマウスにおいてより多くのＣＤ１０６陽性細胞が観察された（図７ａ、ｃ）。そのため、ＣＤ１０６陽性細胞およびＴＮＦ－α陽性細胞は、ＳＴＺ－ＤＭ中のＫＳＬ細胞の非ＳＰ画分に存在する。

　造血幹細胞の異常を特徴付けるＣＤ１０６陽性細胞およびＴＮＦ－α陽性細胞は、ＫＳＬ細胞中の非ＳＰ細胞（短期造血幹細胞：ＳＴ－ＨＳＣ）に含まれていたが、より早期の分化段階にあるＫＳＬ細胞中のＳＰ細胞（長期造血幹細胞：ＬＴ－ＨＳＣ）には含まれていなかった。このことは、糖尿病におけるＨＳＣの異常は幹細胞の中でも前駆細胞の段階でとどまって、いわゆる「幹細胞中の幹細胞」には異常が生じておらず、前駆細胞を除去することで、糖尿病およびその関連疾患の治療が可能であることを示唆し得る。「幹細胞中の幹細胞」が治療対象となると、骨髄移植が必要であり得るが、前駆細胞の除去で治療が可能となると、薬物治療が可能であると考えられる。
　このように、糖尿病において見出される異常幹細胞はＳＴ－ＨＳＣに存在し得ることが明らかとなった。

（実施例３：異常幹細胞のさらなる特徴付け）
　糖尿病に関与する異常幹細胞のさらなる特徴付けを行った。

　方法
　実施例１と同様の非ＤＭおよびＳＴＺ－ＤＭマウスのＦＡＣＳ　ｓｏｒｔによって得られたＫＳＬ細胞からＲＮＡを抽出し、ＱＴ－ＰＣＲ法を用いてヒストン脱アセチル化酵素遺伝子群（Ｈｄａｃｓ）の遺伝子発現を解析した。

　結果
　結果を図８に示す。非ＤＭマウスと比較して、ＳＴＺ－ＤＭマウスでは、Ｈｄａｃ３、Ｈｄａｃ４、Ｈｄａｃ８、およびＨｄａｃ９のｍＲＮＡ発現が有意に増加していることが明らかとなった。

　糖尿病のＫＳＬ細胞では、ヒストン修飾などにより遺伝子発現を調節するのに重要なエピゲノム関連遺伝子（Ｈｄａｃｓ）の発現が増加していたことから、高血糖は幹細胞に対して遺伝子レベルで異常な性質を授けていることが考えられた。一過性の高血糖に暴露された細胞は正常血糖値の環境下に戻しても、高血糖で生じた細胞の異常が維持されることが報告されているが（El-Osta　et.al.　J　Exp　Med.　2008　Sep　29;205(10):2409-17）、このことからも、ＫＳＬ細胞で生じたヒストン脱アセチル化酵素遺伝子の発現増加が、ＣＤ１０６やＴＮＦ－α、プロインスリン陽性細胞の出現に関与し得ると考えられる。これを明らかにするために、Ｈｄａｃ阻害剤（例えば、トリコスタチンＡ）により治療が可能かどうかを検討することが考えられる。

（実施例５：異常幹細胞による糖尿病発症）
　上記で見出された異常幹細胞が、糖尿病を引き起こす原因となるかを試験した。

　方法
　非ＤＭまたはＳＴＺ－ＤＭ　ＫＳＬ細胞を正常血糖マウスに移植する試験の概略を図９に示す。ＧＦＰ－Ｔｇマウス（The　Jackson　Laboratory,　Bar　Harbor,　ME）に対して、実施例１と同様にＳＴＺ処置（ＳＴＺ－ＤＭ　ＧＦＰ）、または静脈内クエン酸緩衝液注射の対照処置（非ＤＭ　ＧＦＰ）を施した。３ヵ月後、非ＤＭマウスまたはＳＴＺ－ＤＭマウスのそれぞれから得られたＫＳＬ細胞を、９Ｇｙの致死量の放射線を照射した正常血糖野生型Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（クレア、大阪）に移植した（それぞれ、非ＤＭ由来ＫＳＬ－ＴまたはＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ）（図１０、左）。移植から３ヶ月後の血糖値を観察した（非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝９）、ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝１０））。移植から３ヶ月後に坐骨神経におけるＳＮＣＶを測定した（（非ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝５）、ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－Ｔ（ｎ＝６））（図１０、右）。移植から３ヶ月後にそれぞれのマウスから後根神経節（ＤＲＧ）を取得し、核、ＧＦＰ、ＭＡＰ２、プロインスリン、およびＴＮＦ－α（ＰＥコンジュゲート化）について免疫蛍光染色を行った（図１１、図１２、図１３）。

　上記のＳＮＣＶ測定は以下の手順で行った。３０℃～３２℃において麻酔下（ペントバルビタールナトリウム、５ｍｇ／ｋｇ　ｉ．ｐ．）でＭｅｄｅｌｅｃ　Ｓａｐｐｈｉｒｅ　ＥＭＧ（Medelec、Woking、UK）を使用して、マウスの感覚神経伝導試験を行った。大腿部の左背面表面から皮膚を切り取り、坐骨神経を露出させた。感覚神経活動電位（ＳＮＡＰ）を記録し、感覚神経伝導速度（ＳＮＣＶ）を、刺激部位から記録部位までの距離をＳＮＡＰの初期潜時で割ることで算出した。

　結果
　ＳＴＺ－ＤＭ由来ＫＳＬ－ＴマウスのＫＳＬ細胞画分中にはＴＮＦ－αやプロインスリンなど異常幹細胞の特徴が見出されたが、非ＤＭ由来ＫＳＬ－ＴマウスのＫＳＬ細胞画分は異常幹細胞の特徴は見出されなかった。

　糖尿病マウスにおいて見出された異常なＫＳＬ細胞を正常マウスに移植した結果、血糖値が正常にもかかわらず糖尿病性神経障害類似症状を呈した。このことから糖尿病マウスの血糖値は正常化された場合であっても、異常幹細胞は消失するわけではないことが明らかとなった。このことは異常細胞が異常なまま骨髄内に定着した、すなわち病的幹細胞として定着したことを示す。また、その異常幹細胞から派生した細胞が神経組織に遊走し、神経障害を発症させたと理解されることから、この幹細胞が残っている限り、糖尿病は血糖コントロールを行っても治らないことが明らかになった。さらに、この糖尿病マウスの異常幹細胞を含む骨髄を正常マウスに移植したところ、耐糖能障害が観察され、骨髄移植により糖尿病の本体である糖代謝異常も再現された。

　このことは、高血糖を改善しても糖尿病および糖尿病合併症が治らないという臨床症状と合致するものであり、糖尿病の究極の治療標的は異常な造血幹細胞であることを示唆する。このように、糖尿病の造血幹細胞を正常マウスに移植することによって、糖代謝異常並びに糖尿病神経障害を正常マウスに再現することができた。

（実施例６：ヒト糖尿病患者における異常幹細胞の特徴）
　滋賀医科大学附属病院　集中治療室に入室した患者を調査した。試料を取得した被験者は、糖尿病であると診断された患者（３名）（男性３／女性０、平均年齢７２．０±１４．２）、および健常な被験者（４名）（男性３／女性１、平均年齢７６．５±８．５）であった。

　これらの被験者から血液試料を取得し、血液試料からＲＮＡを抽出した。具体的には、血液を１．５ｍｌ採取し、ＤＮＡｓｅ（Qiagen,　Hilden,ドイツ）にてＤＮＡを分解した後、ＱＩＡａｍｐ　ＲＮＡ　ｂｌｏｏｄ　ｍｉｎｉ　ｋｉｔ（Qiagen,　Hilden,ドイツ）を用いてＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡからＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＩＩＩ　Ｆｉｒｓｔ－Ｓｔｒａｎｄ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　Ｓｙｓｔｅｍ（Invitrogen/ThermoFisher　scientific,MA,アメリカ）を用いてｃＤＮＡを作製した。Ｐｏｗｅｒ　ＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　ＰＣＲ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘ　ｉｎ　ａ　ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｓｙｓｔｅｍ（Applied　Biosystems/ThermoFisher　scientific,MA,アメリカ）を用いて定量的ＰＣＲを行い、発現しているｍＲＮＡを定量化した。２群間の比較はｔ検定にて行った。結果を図１４に示す。

　マウスの結果と同様に、ヒトにおいても、糖尿病患者においてインスリン、ＴＮＦ－α、およびＣＤ１０６の発現の上昇傾向が確認された。また、糖尿病患者においてＣＤ３４の発現の上昇傾向が確認されたが、ヒトにおいてＣＤ３４は幹細胞の特徴を表すため、マウスの結果と同様に、ヒトにおいても、糖尿病患者において異常幹細胞が存在することが示唆された。

（実施例７：異常幹細胞を標的とする１型糖尿病治療）
　血糖値の上昇を確認したＮＯＤマウスに対して、インスリンペレットを背部皮下に埋め込み、血糖値を正常化させた後、２５０μｇ／マウスの用量の抗ＣＤ１０６抗体を一週間ごとに尾静脈投与した場合に、インスリンペレットに依存せず正常血糖値が持続されるかどうかを検討する。

　インスリンペレットを埋め込んで血糖値をほぼ正常にした糖尿病マウスに対して放射線を照射し、骨髄幹細胞（ＬＴ－ＨＳＣならびにＳＴ－ＨＳＣの両者）を死滅させ、代わりに正常マウスから採取したＬＴ－ＨＳＣだけを骨髄移植する。この操作により、移植されたマウスの骨髄内で、ＬＴ－ＨＳＣからＳＴ－ＨＳＣが新たに作られることになる。ここで、糖尿病マウスに元々存在した異常ＳＴ－ＨＳＣ、そこから分化したＴ細胞系前駆細胞（ＳＴＺマウスおよび糖尿病発症ＮＯＤマウスで異常が観察される）およびＢ細胞系前駆細胞（糖尿病発症前のＮＯＤマウスで異常が観察される）は死滅しているので、これらの細胞により臓器が傷害されることはないと考えられる。また、同様の糖尿病マウスを用意し、インスリンペレットを埋めずに、血糖値を高く維持したまま、同様のＬＴ－ＨＳＣ骨髄移植を行う。このマウスでは、高血糖が存在したままであるため、ＬＴ－ＨＳＣから異常なＳＴ－ＨＳＣが生じ、これが様々な臓器を傷害すると予測されるので、糖尿病およびその合併症が治癒しないと予測される。

　インスリンペレット＋ＬＴ－ＨＳＣの処置による異常ＳＴ－ＨＳＣが除去され、損なわれた膵島が正常化し合併症が消失し得る。

（実施例８：ストレプトゾトシン誘導性糖尿病マウスにおける幹細胞の抑制剤および遊走剤の組み合わせ処置）
　ストレプトゾトシン誘導性糖尿病マウスにおいて、異常幹細胞の抑制剤と遊走剤とを組み合わせることのよる治療効果を試験した。

　方法
　上記と同様に作製したストレプトゾトシン誘導糖尿病マウス（糖尿病発症後３ヶ月）に対して、ＡＭＤ３１００（５ｍｇ／ｋｇ：abcam）＋ＧＲＯβ（０．１ｍｇ／ｋｇ：Peprotech）を生理食塩水とともに皮下注射し、１５分経過後、抗ＣＤ１０６抗体（２５０μｇ／マウス）を尾静脈注射した（ＧＡ－ＣＤ１０６群）。この処置を１週間ごとに行った。同様に、ＡＭＤ３１００およびＧＲＯβを投与せず抗ＣＤ１０６抗体を投与した群（ＣＤ１０６群）、ＡＭＤ３１００、ＧＲＯβおよび抗ＣＤ１０６抗体のいずれも投与しなかった群（非処置群）についても試験した。毎日血糖値と体重を測定し（図１５）、治療開始２０日経過後にマウスの灌流固定を実施した。

　固定２４時間後に固定したマウスを１５％スクロース、０．１Ｍ　ＰＢ液へ移し替え、その後、マウスから膵臓を採取し、膵臓の凍結ブロック作製後、８μｍの凍結切片をクリオスタットにて作製した。

　その後、作製した凍結切片に対して以下の手順を行って免疫染色した（図１６）。
・３回ＰＢＳ（－）で１０分間洗浄する。
・０．３％Ｈ_２０_２のＰＢＳ（－）液に室温で３０分間浸し、内因性ペルオキシダーゼを不活化する。
・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・遮断バッファー（ＰＢＳ中５％正常ヤギ血清＋０．３％トリトン－Ｘ１００）とともに室温で１時間インキュベートする。
・一次抗体（抗インスリン抗体：ＣＳＴ社）を添加し、４℃で一晩インキュベートする。・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・ＩｍｍＰＲＥＳＳ　Ｒｅａｇｅｎｔ（抗ウサギ:VECTOR　Laboratories）を添加し、室温で３０分間インキュベートする。
・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・ＩｍｍＰＡＣＴ　ＤＡＢ基質（VECTOR　Laboratories）を添加し、室温で３０秒間反応させる。
・ｄＨ_２０を添加し、ＤＡＢ反応を停止させる。
・３０秒間ヘマトキシリンで対比染色する。
・水道水で洗浄する。
・脱水し、浸透させる。

　作製した切片試料を顕微鏡下で観察し、膵島をランダムに８～１０個程度選び、膵島の大きさに対するインスリン陽性の割合をＩｍａｇｅ　Ｊソフトウェアで算出した（図１７）。

　結果
　幹細胞を遊走させ、抗ＣＤ１０６抗体で治療した群では、血糖値の減少を認め（図１５）、免疫染色では、非治療群と比較して、インスリン陽性エリアが増加していた（図１７）。

　幹細胞遊走後、異常幹細胞抑制処置を実施することによって、ＳＴＺ投与により１割程度しか残っていなかった膵臓の膵島のインスリン陽性エリアが、３～４割程度まで回復した。このことは、幹細胞遊走剤の投与により骨髄のニッチから末梢に放出された異常幹細胞が抗ＣＤ１０６抗体によって傷害され、他方、正常に機能する幹細胞が膵島を再生する可能性を示す。

（実施例９：ＮＯＤマウスにおける幹細胞の抑制剤および遊走剤の組み合わせ処置）
　自然発症１型糖尿病モデルマウス（ＮＯＤマウス）において、異常幹細胞の抑制剤と遊走剤とを組み合わせることのよる治療効果を試験した。

　方法
　自然発症１型糖尿病モデルであるＮＯＤマウスを日本クレア（大阪府）から購入し、２週間毎に血糖値と体重を測定した。血糖値の上昇が認められた動物に対して、ＡＭＤ３１００（５ｍｇ／ｋｇ：abcam）＋ＧＲＯβ（０．１ｍｇ／ｋｇ:Peprotech)を生理食塩水で調製したのち皮下注射し、１５分経過後、抗ＣＤ１０６抗体（２５０μｇ／マウス）を尾静脈経由で投与（投与間隔は１週間ごと）した。治療開始後、毎日血糖値および体重を測定した（図１８）。

　また、治療開始前に、ＩＣＲマウスと、ＮＯＤであるが糖尿病未発症のマウスと、糖尿病が発症したＮＯＤマウス（いずれのマウスも同一週齢を用いた）との膵島の状態を確認するため、灌流固定を実施し、下記の要領で免疫染色を実施した（図１９）。
・３回ＰＢＳ（－）で１０分間洗浄する。
・０．３％Ｈ_２０_２のＰＢＳ（－）液に室温で３０分間浸し、内因性ペルオキシダーゼを不活化する。
・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・遮断バッファー（ＰＢＳ中５％正常ヤギ血清＋０．３％トリトン－Ｘ１００）とともに室温で１時間インキュベートする。
・一次抗体（抗インスリン抗体：ＣＳＴ社）を添加し、４℃で一晩インキュベートする。・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・ＩｍｍＰＲＥＳＳ　Ｒｅａｇｅｎｔ（抗ウサギ:VECTOR　Laboratories）を添加し、室温で３０分間インキュベートする。
・３回ＰＢＳ（－）で５分間洗浄する。
・ＩｍｍＰＡＣＴ　ＤＡＢ基質（VECTOR　Laboratories）を添加し、室温で３０秒間反応させる。
・ｄＨ_２０を添加し、ＤＡＢ反応を停止させる。
・３０秒間ヘマトキシリンで対比染色する。
・水道水で洗浄する。
・脱水し、浸透させる。
作製した各スライドから画像を取得した。

　結果
　ＮＯＤマウスにおいて、膵島の炎症反応は糖尿病発症前から非常に強く、インスリンの染色が非常に低度であった（図１９）。また、上記処置による糖尿病マウスの血糖値の低下が確認された（図１８）。
　遊走剤と抗体との併用療法は、明らかな血糖低下作用を示した。この効果は抗体による膵島機能の回復による効果と考えられる。
　１型糖尿病においても、異常な造血幹細胞の除去が有用な治療法であると示唆された。

（実施例１０：ヒト糖尿病患者骨髄における異常細胞）
　ヒト糖尿病患者においても骨髄に異常細胞が存在することを確認した。

　滋賀医科大学に入院した２型糖尿病（ＤＭ）患者において、２０００年１月１日～２０１０年１２月３１日の間に病理解剖した例について、骨髄におけるプロインスリン陽性細胞の出現の有無を検討した。組織は、滋賀医科大学解剖学センターでパラフィンに包埋した。パラフィン包埋試料の５μｍ厚の切片をアビジン－ビオチンペルオキシダーゼ複合体（ＡＢＣ）法およびジアミノベンジジン（ＤＡＢ）－ニッケル反応を用いて免疫組織化学のために処理した。キシレンおよびアルコール中で脱パラフィン化した後、切片をマイクロ波（１０ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸緩衝液中、ｐＨ６．０、０．５ｋＷで１０分間）で処理した後、プロインスリンに対する抗体（マウスモノクローナル、Ａｂｃａｍ、ＵＫ）を０．３％Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００（ＰＢＳＴ）を含む０．１％ＰＢＳ中で１：１，０００希釈したもので一晩インキュベートした後、４℃で免疫組織化学のための処理を行った。ＤＡＢ－ニッケル反応後、切片を核ファストレッド溶液でカウンター染色した。

　結果を図２０に示す。ＤＭなしの患者由来の骨髄細胞ではプロインスリン発現は観察されなかったが、ＤＭありの患者由来の骨髄細胞ではプロインスリン発現が観察された。マウスにおいて観察された異常幹細胞の知見はヒトにおいても適用可能だと考えられる。

（実施例１１：ヒトへの適用）
　ヒト糖尿病患者において骨髄由来異常造血幹細胞を同定し、それを標的として糖尿病を治療する。

　研究計画１．糖尿病患者における骨髄由来異常造血幹細胞の同定
（対象）
　非糖尿病群については、滋賀医科大学および附属病院職員において、耐糖能障害の既往がなく、現在も糖尿病治療を受けていないボランティアを募り、随時血糖値およびＨｂＡ１ｃを測定し、随時血糖値＜１４０ｍｇ／ｄｌかつＨｂＡ１ｃ＜６．０％を満たした者を非糖尿病と定義し、コントロール群として２０名登録する。糖尿病群については、ＨｂＡ１ｃが６．５％以上もしくは糖尿病治療中と定義し、滋賀医科大学附属病院糖尿病内分泌内科外来通院患者の中から電子カルテより非糖尿病群と性・年齢をマッチさせたリストを作成し、無作為に８０名（１型糖尿病４０名、２型糖尿病４０名）を登録する。

　（研究方法）
　被験者の問診を行い、身長、体重を測定し、血液検査、尿検査を行い、糖尿病の有無を判定する。採取した血液から単核細胞を抽出し、ＣＤ３４標識骨髄前駆細胞を採取して固定し、免疫染色により形態や発現タンパク質を同定する。また、ｍＲＮＡを抽出した後、ｃＤＮＡを調製し、定量的ＰＣＲによりｍＲＮＡの発現量を定量する。具体的には、末梢血中のＣＤ３４陽性かつＣＤ１０６陽性（ＣＤ３４／ＣＤ１０６）骨髄前駆細胞において、ＴＮＦ－α　ｍＲＮＡおよびインスリンｍＲＮＡの発現量などを測定する。これらの細胞におけるタンパク質の発現の有無も測定する。また、糖尿病患者における糖尿病合併症の有無と血糖コントロールとの関連性を分析する。代表的な合併症である糖尿病性神経障害、網膜症、腎症、脂肪肝、脂質異常症の有無ならびに大血管障害を知るために、神経伝導速度検査、心電図Ｒ－Ｒ間隔検査、眼底網膜検査、尿中アルブミン排出率、腹部ＣＴを用いた腹腔内脂肪量の定量、血液脂質検査、心電図、頸動脈エコー検査、下肢動脈エコー検査を行う。

　（結果の予測）
（１）非糖尿病群ならびに２型糖尿病群では末梢血中のＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞において、ＴＮＦ－α　ｍＲＮＡおよびインスリンｍＲＮＡの発現が見られるが、２型糖尿病群での発現量が増加する。一方、１型糖尿病群ではＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞において、ＴＮＦ－α　ｍＲＮＡの発現は非糖尿病に比較して増加するが、インスリンｍＲＮＡは全く発現しない。
（２）非糖尿病群では末梢血中のＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞において、ＴＮＦ－αおよびプロインスリンのタンパク質を発現している細胞はほとんどない。これに比し、２型糖尿病ではどちらも発現している細胞が増加する。一方、１型糖尿病ではＴＮＦ－αタンパク質を発現する細胞は増加するが、プロインスリンを発現している細胞は皆無である。
（３）１型糖尿病患者において、代表的な合併症である糖尿病性神経障害、網膜症、腎症、脂肪肝、脂質異常症の発症は末梢血中のＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞におけるＴＮＦ－αタンパク質陽性細胞の増加に関連する。一方、２型糖尿病患者においては糖尿病性神経障害、網膜症、腎症、脂肪肝、脂質異常症の発症は末梢血中のＣＤ３／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞におけるＴＮＦ－αタンパク質陽性細胞の増加ならびにプロインスリン陽性細胞の増加に関連する。

　（考察と結論の予想）
１）非糖尿病ではわずかではあるが血中にインスリンｍＲＮＡおよびＴＮＦ－α　ｍＲＮＡを発現するＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞が存在する。この細胞は膵島にホーミングした際に自己抗原を提示する内皮細胞として機能しているのではないかと想定される。
２）２型糖尿病では高血糖によりこの細胞（インスリンｍＲＮＡおよびＴＮＦ－αｍＲＮＡを発現するＣＤ３４／ＣＤ１０６骨髄前駆細胞）が骨髄内および血中にいる状態で、すでにプロインスリンならびにＴＮＦ－αタンパク質を発現すると同時に、異常な機能を持った血管内皮として分化したり、異常な細胞融合能を持つことによりインスリン抵抗性や様々な合併症の原因となるのではないかと想定される。

　研究計画２．骨髄由来異常造血幹細胞を標的とした糖尿病の治療
（対象）
　研究計画１に従い、滋賀医科大学ならびに共同研究施設において、糖尿病患者２８０名（１型糖尿病１４０名、２型糖尿病１４０名）を登録する。１型、２型いずれにおいても糖尿病は一旦発症すると治癒することはないとされている。しかし、１型糖尿病においてはインスリンを使用した厳重な血糖管理により一時的な寛解を示すハネムーン期が出現することが知られている。その期間は報告により様々ではあるが、一般的には１ヶ月から１３年（Wallensteen　M,　Dahlquist　G,　Persson　B,　Landin-OlssonM,　Lernmark　A,　Sundkvist　G,　Thalme　B　(1988)　Factors　influencing　the　magnitude,　duration,　and　rate　off　all　of　β-cell　function　in　type　1　(insulin-dependent)　diabetic　children　followed　for　two　years　from　their　clinical　diagnosis.　Diabetologia　31:　664-669）との報告がある。従って、本治療計画を施行したことで、ハネムーン期が発来したのか、疾患自体が治癒したのかの区別が困難となることが考えられる。また、２型糖尿病においても、厳格なコントロールによってインスリン抵抗性は軽度になることが報告されているH.E.　Lebovitz　(2001)　Insulin　resistance:　definition　and　consequences.　Clin　Endocrinol　Diabetes　109　Suppl　2:　S135-S148)。これにより、インスリンや経口剤などの治療薬量、ならびに内因性のインスリン分泌能の改善が見られる可能性がある。従って、１型および２型のどちらにおいても、今回の治療研究では、インスリン単独により治療する群と新規治療法をする群を作製し、比較検討する必要がある。

　（研究方法）
　被験者の問診を行い、身長、体重を測定し、血液検査、尿検査を行い、糖尿病の有無を判定する。採取した血液から単核細胞を抽出し、ＣＤ３４標識骨髄前駆細胞を採取して固定し、免疫染色により形態や発現タンパク質を同定する。また、ｍＲＮＡを抽出した後、ｃＤＮＡを調製し、定量的ＰＣＲによりｍＲＮＡの発現量を定量する。具体的には、末梢血中のＣＤ３４陽性かつＣＤ１０６陽性骨髄前駆細胞において、ＴＮＦ－α　ｍＲＮＡおよびインスリンｍＲＮＡの発現量などを測定する。これらの細胞におけるタンパク質の発現の有無も測定する。また、糖尿病患者における糖尿病合併症の有無と血糖コントロールとの関連性を分析する。代表的な合併症である糖尿病性神経障害、網膜症、腎症、脂肪肝、脂質異常症の有無ならびに大血管障害を知るために、神経伝導速度検査、心電図Ｒ－Ｒ間隔検査、眼底網膜検査、尿中アルブミン排出率、腹部ＣＴを用いた腹腔内脂肪量の定量、血液脂質検査、頸動脈エコー検査、下肢動脈エコー検査を行う。

　１型例を無作為に２０例ずつの７群、２型例を２０例ずつの７群に、それぞれ分類する。１型および２型において、それぞれ２０例はインスリン治療のみで３ヶ月間コントロールし（コントール群）、残りの１２０例のうち６０例はインスリン治療を開始すると同時に以下の３種類の治療をそれぞれ２０例について開始する（遊走剤なしの治療群）。１）抗ＴＮＦ－α抗体（アダリムマブ４０ｍｇあるいはインフリキシマブ３ｍｇ／ｋｇ）、２）抗ＣＤ１０６抗体（０．８ｍｇ／ｋｇ）、３）トリコスタチン（０．５ｍｇ／ｋｇ）を、１週間に１回静脈内投与し、これらを１２週間継続する。残りの６０例はインスリン治療を開始すると同時に以下の３種類の治療をそれぞれ２０例について開始する（遊走剤ありの治療群）。細胞遊走剤であるＧｒｏβ（１００μｇ／ｋｇ）＋プレリキサフォル（０．２４ｍｇ／ｋｇ）とともに、１）抗ＴＮＦ－α抗体（アダリムマブ４０ｍｇあるいはインフリキシマブ３ｍｇ／ｋｇ）、２）抗ＣＤ１０６抗体（０．８ｍｇ／ｋｇ）、３）トリコスタチン（０．５ｍｇ／ｋｇ）を、１週間に１回静脈内投与し、これらを１２週間継続する。

　（治療効果の判定方法）
　患者は１日６回の自己血糖測定を行う。血糖コントロールの目標はインスリン治療により食前血糖値１４０ｍｇ／ｄｌ以下、食後２時間血糖値２００ｍｇ／ｄｌ以下とする。コントロール基準を満たすように積極的にインスリン量の増減を図り、最終的に１２週目における血糖コントロールのためのインスリン必要量をもって、治療研究期間を終了する。
治療効果の判定は、治療前、治療終了時、治療終了後３、６、９、１２ヶ月目において、下記の判定項目を治療効果として追跡判定する。

　（判定項目）
（Ａ）異常造血幹細胞を消失させる効果
　末梢血液中にあるＣＤ３４／ＣＤ１０骨髄前駆細胞中における発現タンパク質（ＣＤ３４、プロインスリン、ＴＮＦ－α、ＣＤ１０６等）および発現遺伝子（ＣＤ３４　ｍＲＮＡ、インスリンｍＲＮＡ、ＴＮＦ－α　ｍＲＮＡ、ＣＤ１０６　ｍＲＮＡ等）を定量する。
（Ｂ）糖尿病を治癒させる効果
　血糖値、ＨｂＡ１ｃ、尿中ＣＰＲ、脂質、グルカゴン負荷試験を用いたインスリン分泌能を治療前後で行う。膵島関連抗体の測定ならびにその消失の有無を明らかにする。
（Ｃ）合併症に対する治療効果
　代表的な合併症として糖尿病性神経障害、網膜症、腎症、脂肪肝、脂質異常症、大血管障害の有無ならびに変化を治療前後で比較検討する。

　（結果の予測）
　１）インスリン単独での治療により以下のことが明らかとなる。
（Ａ）１型糖尿病、２型糖尿病ともに、異常造血幹細胞は消失しない。
（Ｂ）糖尿病を治癒させる効果は見られない。
（Ｃ）合併症に対する治療効果は多少見られるが、治癒することはない。

　２）細胞遊走剤の有無にかかわらず新規治療により以下のことが明らかとなる。
（Ａ）１型糖尿病、２型糖尿病ともに異常造血幹細胞が消失する。
（Ｂ）１型糖尿病、２型糖尿病ともに一旦治癒する。
（Ｃ）１型糖尿病、２型糖尿病ともに合併症の進行が停止し、明らかな治療効果が見られる。

　３）細胞遊走剤を加えた新規治療により以下のことが明らかとなる。
（Ａ）遊走剤なしに比較して遊走剤を加えた新規治療により、１型糖尿病、２型糖尿病ともに異常造血幹細胞がより早期に消失する。
（Ｂ）遊走剤なしに比較して遊走剤を加えた新規治療により、１型糖尿病、２型糖尿病ともに治癒率の向上が見られる。
（Ｃ）遊走剤なしに比較して遊走剤を加えた新規治療により、１型糖尿病、２型糖尿病ともに合併症の治癒率の向上が見られる。

　（考察と結論の予想）
１）１型ではインスリン単独治療であっても、血糖コントロール効果によりハネムーン期が発来する可能性がある。しかし、この場合、いずれは再度寛解が終了し、インスリン分泌能は再度欠乏してくる。
２）２型糖尿病ではインスリン単独治療により、血糖コントロールがよくなり、インスリン治療が必要なくなる可能性があるが、異常造血幹細胞が消失することはないので、糖尿病が治癒することはない。
３）細胞遊走剤を加えた新規治療により、１型糖尿病が治癒しても、自己抗体を産生する原因となった自己免疫が再燃すると、可能性は残っている。しかし、再度細胞遊走剤を加えた新規治療を行えばよい。
４）２型糖尿病で細胞遊走剤を加えた新規治療により完全に治癒しても、エネルギーの過剰摂取や運動不足により再び高血糖が起こってくると異常造血幹細胞が出現してくる可能性がある。この場合も細胞遊走剤を加えた新規治療を再度行えば治療可能である。

　（注記）
　以上のように、本開示の好ましい実施形態を用いて本開示を例示してきたが、本開示は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願及び他の文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。

　本出願は、２０１９年１０月１８日に日本国特許庁に出願された特願２０１９－１９１３６９号に対する優先権の利益を主張し、その内容全体が本明細書に援用される。

　本開示は、幹細胞を標的とする糖尿病治療の改善を提供し、この知見に基づき、糖尿病および/または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療や予防、ならびに糖尿病および/または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状、あるいはそのリスクの診断を行うための新たな手法が提供される。

Claims

異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該抑制剤は、幹細胞遊走剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
前記異常ＨＣＳは、ＣＤ１０６、およびその機能的等価物からなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないかおよび／または機能していないものである、請求項１に記載の組成物。
前記通常のレベルではない発現は過剰発現である、請求項２に記載の組成物。
前記抑制剤は、抗ＣＤ１０６抗体またはその機能的改変体からなる群より選択される少なくとも１つを含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
前記異常ＨＣＳは、さらに、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）およびプロインスリンからなる群より選択される遺伝子またはタンパク質が通常のレベルで発現していないものである、請求項２～４のいずれか一項に記載の組成物。
前記抑制剤は、抗ＴＮＦ－α抗体またはその機能的改変体およびＨＤＡＣ阻害剤からなる群より選択される少なくとも１つを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
前記疾患、障害および／もしくは症状は、糖尿病合併症を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
前記疾患、障害および／もしくは症状は、神経障害、腎症、肝障害、網膜症、脂肪肝、胃腸障害、骨折治癒遅延、摂食障害、および皮膚障害からなる群より選択される、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
前記幹細胞遊走剤は、前記異常ＨＳＣをニッチから遊走させる能力を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。
前記幹細胞遊走剤は、ＣＸＣＲ４拮抗剤、ＣＸＣＲ２刺激剤、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）剤、からなる群より選択される少なくとも１つの薬剤を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。
前記幹細胞遊走剤は、プレリキシサフォル、ＧＲＯβ２（ＭＩＰ２）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ、フィルグラスチム、ナルトグラスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、からなる群より選択される少なくとも１つを含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組成物。
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と、幹細胞遊走剤との組み合わせを含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための医薬。
幹細胞遊走剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防するための組成物であって、該幹細胞遊走剤は、異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の抑制剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、組成物。
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する薬剤を含む糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の選択のための組成物。
前記遊走および／または残留が、骨髄のニッチからの遊走および／または骨髄のニッチにおける残留である、請求項１４に記載の組成物。
前記遊走検出剤は、ＣＤ１０６または機能的等価物の検出剤を含む、請求項１４または１５に記載の組成物。
被験体において糖尿病または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状を治療および／または予防する方法であって、該被験体に対して異常造血幹細胞（ＨＳＣ）を低減または消失させる薬剤および幹細胞遊走剤を有効量投与する工程を含む、方法。
異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を、被験体において糖尿病または糖尿病ならびに／または糖尿病に関連する疾患、障害および／もしくは症状の治療および／または予防のための処置の指標とする方法であって、該被験体における異常造血幹細胞（ＨＳＣ）の遊走および／または残留を検出する工程を含む、方法。