WO2016125863A1 - 細胞培養装置 - Google Patents

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WO2016125863A1
WO2016125863A1 PCT/JP2016/053381 JP2016053381W WO2016125863A1 WO 2016125863 A1 WO2016125863 A1 WO 2016125863A1 JP 2016053381 W JP2016053381 W JP 2016053381W WO 2016125863 A1 WO2016125863 A1 WO 2016125863A1
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WO
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culture
incubator
gas
unit
culture unit
Prior art date
Application number
PCT/JP2016/053381
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English (en)
French (fr)
Inventor
木村 博之
達哉 南
真柄 泰典
Original Assignee
オリンパス株式会社
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Publication date
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Priority to JP2016573419A priority patent/JPWO2016125863A1/ja
Priority to CN201680008433.9A priority patent/CN107208017A/zh
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Priority to US15/666,551 priority patent/US20170327782A1/en

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    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M37/00Means for sterilizing, maintaining sterile conditions or avoiding chemical or biological contamination
    • C12M37/04Seals
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/14Incubators; Climatic chambers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/34Internal compartments or partitions
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/52Mobile; Means for transporting the apparatus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation

Definitions

  • the present invention relates to a cell culture apparatus for culturing cells in a cell culture container.
  • the cells are usually cultured in an incubator that can maintain an environment suitable for growth.
  • a sample such as a cell from the incubator (see, for example, Patent Document 1).
  • the environment temperature, humidity, CO 2 concentration, etc.
  • stressing a sample such as a cell inside.
  • a sample taken out of one of the incubators is also exposed to the external environment, so that the steady state is disturbed during work, and stress is applied.
  • the present invention has been made in view of the above-described circumstances, and provides a cell culture device that simplifies the work when a sample such as a cell is taken in and out of the incubator and can reduce changes in the internal environment of the incubator.
  • the purpose is that. It is another object of the present invention to provide a cell culture apparatus that can maintain a sample taken out of the incubator in an environment similar to the environment in the incubator.
  • One aspect of the present invention includes a culture unit on which a culture vessel is mounted, and an incubator in which a plurality of the culture units are arranged inside and can be maintained in an environment suitable for cell culture.
  • the incubator includes the plurality of culture units.
  • An opening that is provided for each of the culture units and that can be taken in and out for each of the culture units, and that is provided in the opening and shields the internal environment of the incubator from the outside when the culture unit is removed from the incubator. It is a cell culture apparatus provided with the shielding means to do.
  • the operator can take out only a desired sample from the incubator or store it in the incubator, and can reduce environmental changes in the incubator when the sample is taken in and out.
  • the driving means may be means for moving the incubator in a direction in which the culture unit is arranged inside the incubator.
  • the culture unit may include a caster.
  • the operator can easily move the culture unit in and out of the incubator and can easily move it outside the incubator.
  • the culture unit may include a solution supply unit that supplies a solution such as a medium to the culture vessel, and a solution discharge unit that discharges the waste liquid from the culture vessel. This makes it possible to easily replenish a solution such as a culture medium and discard waste liquid.
  • a plurality of the culture units may be arranged in the horizontal direction inside, a plurality of the culture units may be arranged in the vertical direction inside, and the plurality of culture units are arranged in the horizontal and vertical directions inside. You may arrange in a direction.
  • a culture unit including a culture vessel, an incubator in which the culture unit is disposed inside and maintained in an environment suitable for cell culture, and the culture unit taken out from the incubator are disposed.
  • a cell culture device comprising gas flow means.
  • the operator can take out only a desired sample from the incubator or store it in the incubator, and can maintain the gas environment of the removed sample constant, so that the environment changes from within the incubator.
  • the stress applied to the sample can be reduced.
  • the incubator may function as the gas adjusting means.
  • the gas adjusting means it is not necessary to separately install the gas adjusting means, so that the apparatus is compact and the cost is superior.
  • the culture unit forms an open space in the culture unit when arranged in the incubator, and closes in the culture unit when arranged in the work space. It may form a space.
  • the internal environment of the culture unit can be maintained in the same environment as the internal environment of the incubator both inside and outside the incubator, and stress applied to the sample due to environmental changes can be reduced.
  • the gas flow means may circulate gas between the culture unit disposed in the work space and the gas adjustment means.
  • the adjusted gas can be used efficiently, and the cost for adjusting the gas can be reduced.
  • the present invention since an operator can easily put in and out only a desired sample with respect to the incubator, environmental changes in the incubator can be minimized, and the influence on the sample can be reduced. it can. Further, when working in a closed system environment using, for example, an isolator, the work efficiency of the worker is improved because the work of putting in and out of the sample is simple.
  • FIG. 17A It is explanatory drawing which shows schematic structure of the modification of the cell culture apparatus which concerns on 4th Embodiment of this invention. It is a side view of the cell culture apparatus of FIG. 17A. It is a side view of the other example of the cell culture apparatus of FIG. 17A. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the modification of the cell culture apparatus which concerns on 4th Embodiment from 1st Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the other modification of the cell culture apparatus which concerns on 4th Embodiment from 1st Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention.
  • FIG. 17A It is explanatory drawing which shows schematic structure of the modification of the cell culture apparatus which concerns on 4th Embodiment of this invention.
  • FIG. 19B is a side view of the cell culture device of FIG. 19A. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the example of the shielding means of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the other example of the shielding means of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the example of the shielding means of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the other example of the shielding means of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention.
  • FIG. 24A It is a side view of the cell culture apparatus of FIG. 24A. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the modification of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the other modification of the cell culture apparatus which concerns on 5th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the example of the outer door of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the cell culture apparatus which concerns on 6th Embodiment of this invention. It is explanatory drawing which shows schematic structure of the culture unit of the cell culture apparatus which concerns on 6th Embodiment of this invention.
  • a cell culture device according to a first embodiment of the present invention will be described below with reference to the drawings.
  • a cell culture apparatus 100 according to the present embodiment is an apparatus having the configuration shown in FIGS. 1A and 1B, and can accommodate a culture unit 1 that accommodates a culture container 3 (cell culture container) and a plurality of culture units 1. And an incubator 2.
  • the culture unit 1 has a housing structure with a plurality of shelves 4 arranged at intervals in the vertical direction. More specifically, the culture unit 1 has a box-shaped housing having a bottom surface and a top surface that are arranged substantially parallel to each other at intervals, and a side surface that connects the bottom surface and the top surface. Installed so that the bottom is horizontal. Therefore, in this specification, the direction parallel to the bottom surface is the “horizontal direction”, and the direction orthogonal to the bottom surface is the “vertical direction”.
  • the internal space of the enclosure is an open space, and is the same environment as the culture environment (temperature, humidity, CO 2 concentration, etc.) outside the enclosure.
  • the culture vessel 3 can be mounted on the shelf 4 inside the housing.
  • the incubator 2 can maintain the inside in an environment suitable for cell culture, and can accommodate a plurality of culture units 1 arranged in the horizontal direction.
  • the cells in the culture container 3 can be cultured by mounting the culture container 3 containing the cells and the medium on the shelf 4 of the culture unit 1 and storing the culture unit 1 in the incubator 2.
  • Each culture unit 1 can be taken in and out of the incubator 2 independently.
  • the incubator 2 is provided with an opening 5 that can be taken in and out of each culture unit 1 on the side, and each opening 5 is provided with a shielding means.
  • the shielding means has a structure that closes the opening 5 in a state where the culture unit 1 is taken out of the incubator 2. 2A to 3B show examples of shielding means.
  • FIG. 2A shows an example in which the slider 21 is installed as a shielding means so as to be movable in the vertical direction (vertical direction).
  • the opening 5 can be opened by lifting the slider 21 upward, and the culture unit 1 can be pulled out from the inside of the incubator 2 through the opening 5.
  • the opening 5 can be blocked by lowering the slider 21 downward, and the space in the incubator 2 can be closed.
  • FIG. 2B is an example in which a plate-like member 22 that rotates toward the outside of the incubator 2 with one side of the opening 5 as the rotation shaft 23 is installed as a shielding means.
  • the opening 5 can be opened by pulling the plate-shaped member 22 toward the outside of the incubator 2, and the culture unit 1 can be pulled out from the inside of the incubator 2 through the opening 5.
  • the opening 5 can be blocked by returning the plate-like member 22 to the original position, and the space in the incubator 2 can be closed.
  • FIG. 3A is an example in which a plate-like member 31 that enters the incubator 2 by oscillating inside the incubator 2 about one side of the opening as a rotation shaft 32 is installed as a shielding means.
  • a front view of the incubator 2 viewed from the opening 5 side is shown in the upper stage, and a plan view of the incubator 2 viewed from the upper surface side is shown in the lower stage.
  • the plate-like member 31 is arranged at a position where the opening 5 is closed when no external force is applied. Therefore, in the state where the culture unit 1 is pulled out from the inside of the incubator 2, the opening 5 can be blocked by the plate-like member 31 to close the space in the incubator 2.
  • the plate-like member 31 receives a force in the direction of the incubator 2 by the culture unit 1, swings around the rotation shaft 32, and enters the incubator 2.
  • the culture unit 1 is provided with a blocking member 33.
  • the sealing member 33 blocks the opening 5 and the space in the incubator 2 can be closed.
  • FIG. 3A shows an example in which the opening 5 is closed by a single plate-like member 31.
  • the blocking member 33 has another side with the rotation shaft 34 as the other side of the opening 5.
  • the opening 5 may be closed together with the plate member 35.
  • the above is an example of the shielding means as long as the opening 5 is closed in a state where the culture unit 1 is out of the incubator 2 and the internal environment of the incubator 2 can be maintained.
  • the incubator 2 may include a rail member 41 extending in the insertion direction of the culture unit 1 in order to position the culture unit 1.
  • the culture unit 1 may include a locking member 42 for restricting movement other than the direction along the rail member 41 of the culture unit 1.
  • the locking member 42 interacts with the rail member 41 such as being fitted in a groove formed by the rail member 41, and restricts movement other than the direction along the rail member 41 of the culture unit 1.
  • the culture unit 1 can enter the incubator 2 along the rail member 41.
  • the incubator 2 may be provided with smooth means for smooth movement of the culture unit 1 on the bottom surface in contact with the culture unit 1 inside.
  • the smoothing means include a means in which a plurality of cylindrical members 43 as shown in FIG. 4B are arranged in parallel to the moving direction of the culture unit 1 (lateral direction in FIG. 4B).
  • the upper stage shows a view of the cylindrical member 43 on the bottom surface of the incubator 2 as viewed from above
  • the lower stage shows a view of the cylindrical member 43 seen in the horizontal direction.
  • a spherical member may be adopted instead of the cylindrical member 43.
  • the cell culture system 200 according to the present embodiment is a system having the configuration shown in FIGS. 5A and 5B, and includes a unit moving mechanism for facilitating movement of the culture unit 1 outside the incubator 2. This is different from the first embodiment. The rest is the same as in the first embodiment.
  • caster means 52 that facilitates movement when the culture unit 1 is moved in the horizontal direction can be exemplified.
  • the desired number (three or more) of caster means 52 capable of supporting the culture unit 1 is installed on the bottom surface of the culture unit 1.
  • the caster means 52 includes a wheel-like member so that the culture unit 1 can be freely moved in any direction in the horizontal direction, and is fixed to the bottom surface of the culture unit 1 via a support member.
  • the wheel-shaped member may be a ball-shaped member, and may be any shape that can move the culture unit 1 in any direction in the horizontal direction. By doing so, the culture unit 1 can be easily taken in and out of the incubator 2 and the culture unit 1 can be freely moved outside the incubator 2.
  • the unit moving mechanism of this aspect includes a caster unit 53 that facilitates movement when the culture unit 1 is moved in the horizontal direction, and a storage 54 for storing the caster unit 53.
  • the caster means 53 is released from the storage 54 and fixed when the culture unit 1 is pulled out of the incubator 2.
  • the fixation is released and the caster means 53 is stored in the storage 54.
  • FIG. 7A shows an example of the caster means 53.
  • the caster means 53 includes a wheel-like member 55, a support member 56, and a stopper 57.
  • the support member 56 is coupled to the storage 54 at a fulcrum 58, and the caster means 53 can be taken in and out of the storage 54 by rotating substantially around the fulcrum 58 (the fulcrum 58 does not rotate).
  • the end of the support member 56 opposite to the fulcrum 58 is coupled to the wheel-like member 55.
  • the stopper 57 is a member that is installed on the support member 56 and fixes the rotation of the caster means 53 around the fulcrum 58.
  • the wheel-like member 55 may be a ball-like member, and may be any shape that can move the culture unit 1 in any horizontal direction.
  • the rotatable range of the caster means 53 around the fulcrum 58 may be limited.
  • the movable range may be limited to an angle of approximately 90 degrees.
  • the caster means 53 rotates from the hangar 54 so as to draw an arc around the fulcrum 58 by gravity applied to the caster means 53 itself. Released.
  • the caster means 53 rotates about the fulcrum 58 to a predetermined position (fixed position) where the wheel-like member 55 reaches the floor surface.
  • the fulcrum 58 is designed so that the caster means 53 cannot rotate beyond the fixed position.
  • the stopper 57 prevents the caster means 53 from returning in the rotational direction around the fulcrum 58 and is fixed.
  • FIG. 9A to FIG. 9C A configuration as shown in FIG.
  • the stopper 57 includes a movable portion 57a and a fixed portion 57b.
  • the movable portion 57a is attached to the support member 56 via an elastic member (not shown), and is urged toward the fulcrum 58 by the elastic member.
  • the movable portion 57a can move in a direction d connecting the fulcrum 58 and the wheel-like member 55 against the elastic force of the elastic member.
  • the fixing portion 57 b is fixed to the fulcrum 58.
  • the movable part 57a and the fixed part 57b can be in a state in which they are fixed to each other according to their positional relationship.
  • a mode in which the movable portion 57a is provided with a concave portion and both of the fixed portion 57b are fixed in the concave portion is fixed.
  • a part of the fixed portion 57b is fitted in the concave portion of the movable portion 57a, and the movable portion 57a and the fixed portion 57b are fixed to each other. Positioning has been performed.
  • the movable portion 57a is positioned as follows on the support member 56 via an elastic member.
  • an external force in the direction opposite to the fulcrum 58 is applied to the movable portion 57a, the movable portion 57a moves on the support member 56 in a direction away from the fulcrum 58 against the elastic force of the elastic member (FIG. 9C).
  • the fixation of both is released.
  • the movable portion 57a moves on the support member 56 in a direction approaching the fulcrum 58 by the elastic force of the elastic member (the state shown in FIG. 9A or FIG.
  • the state in FIG. 9A is a state in which a part of the fixed part 57b is fixed in the concave part of the movable part 57a, and both are fixed.
  • the fixed part 57b is movable by a part of the movable part 57a. It is in a state where access to the concave portion of the portion 57a is inhibited.
  • the caster means 53 When the culture unit 1 is pulled out from the incubator 2, the caster means 53 is rotated so as to draw an arc around the fulcrum 58 by gravity applied to itself, and is released from the storage 54.
  • the caster means 53 substantially rotates around the fulcrum 58 to a predetermined position (fixed position) where the wheel-like member 55 reaches the floor surface, and the fixed portion 57b of the stopper 57 installed at the fulcrum 58 collides with the movable portion 57a.
  • the movable portion 57a receives a force from the fixed portion 57b and moves on the support member 56 in a direction away from the fulcrum 58 against the elastic force of the elastic member, so that the fixed portion 57b fits into the concave portion of the movable portion 57a.
  • the means 53 is fixed at a fixed position.
  • the concave portion of the movable portion 57a receives a force in a direction returning to the original position by the elastic force of the elastic member.
  • any method may be used as long as the fixing releasing means installed in the incubator comes into contact with the stopper and the fixing by the stopper is released.
  • FIG. A configuration as shown in FIG. 10B may be used.
  • the incubator 2 includes a fixing release means 59 at a position where the culture unit 1 is brought into contact with the movable portion 57a of the stopper 57.
  • the movable portion 57a receives a force from the fixing release means 59 and moves on the support member 56 in a direction away from the fulcrum 58 against the elastic force of the elastic member.
  • the recessed portion and the fixing portion 57b are separated from each other and the caster means 53 is released from being fixed.
  • the culture unit 1 is pushed into the incubator 2 in this state, the caster means 53 comes into contact with the incubator 2 and receives a force in the horizontal direction, and is pushed up while rotating substantially around the fulcrum 58 and stored in the storage 54.
  • the example in which the movable part of the stopper is attached to the support member of the caster means and the fixed part of the stopper is attached to the fulcrum with the storage is shown, but the movable part of the stopper is attached to the fulcrum with the storage and the stopper is fixed.
  • the part may be attached to the support member of the caster means.
  • the stopper is composed of a movable part and a fixed part, and either the movable part or the fixed part is attached to the fulcrum of the hangar and the other is attached to the support member of the caster means.
  • the fixing can be released.
  • the wheel-like member of the caster means is fixed at a predetermined position reaching the floor surface.
  • a cell culture system 300 according to this embodiment is a system having the configuration shown in FIGS. 11A and 11B, and is different from the above embodiments in that the culture unit 1 includes a solution supply unit 61 and a solution discharge unit 62. ing. Other than that, it is the same as the above embodiments.
  • the solution supply means 61 is means for supplying the culture medium 3 after holding the culture medium at a temperature suitable for cell culture (for example, 37 ° C.). From the solution holding container 63 for holding the culture medium, the solution holding container A tubular member 64 that forms a medium flow path toward the culture container 3 and a supply speed control means 65 that controls the flow rate of the medium supplied to the culture container 3 are provided.
  • the solution holding container 63 is provided with a discharge port 63a for discharging the culture medium, and the discharge port 63a is connected to the culture container 3 through a tubular member 64. As shown in FIG. 11A, the solution holding container 63 may include a supply port 63b for replenishing the medium from the outside. By storing the culture unit 1 in the incubator 2, the temperature of the held medium can be maintained at the same temperature as in the incubator 2.
  • the tubular member 64 may be a material having flexibility so that the direction of the flow path can be changed, or may be a material that does not have flexibility and the flow path shape is fixed. A combination of a flexible material and a non-flexible material may be used. One end of the tubular member 64 is connected to the discharge port 63a of the solution holding vessel 63, and the other end is connected to the opening (supply port 3a) of the culture vessel 3.
  • the supply speed control means 65 may be any means as long as the supply speed of the medium supplied to the culture vessel 3 can be controlled.
  • the supply speed control means 65 may be a liquid feed pump installed on the tubular member 64, or a means for adjusting the flow path diameter in the tubular member 64 to control the flow rate.
  • adjusting the flow path diameter in the tubular member 64 to control the flow rate for example, an aspect in which the solution holding container 63 is disposed above the culture container 3 in the direction of gravity and the culture medium is caused to flow to the tubular member 64 by gravity, What is necessary is just to employ
  • the solution discharge means 62 is a means for discharging the culture medium from the culture container 3 as waste liquid, and is a tubular form that forms a waste liquid holding container 66 for holding the waste liquid and a flow path connecting the waste liquid holding container 66 and the culture container 3.
  • a member 67 and a discharge speed control means 68 for controlling the flow rate of the waste liquid flowing through the tubular member 67 are provided.
  • the waste liquid holding container 66 includes a supply port 66a that is connected to the tubular member 67 and through which waste liquid is supplied. As shown in FIG. 11B, the waste liquid holding container 66 may include a discharge port 66b for discharging the waste liquid to the outside.
  • the tubular member 67 may be a material having flexibility so that the direction of the flow path can be changed, or may be a material that does not have flexibility and the flow path shape is fixed. A combination of a flexible material and a non-flexible material may be used. One end of the tubular member 67 is connected to the supply port 66a of the waste liquid holding container 66, and the other end is connected to the opening (discharge port 3b) of the culture vessel 3.
  • the discharge speed control means 68 may be any means as long as it can control the discharge speed of the waste liquid discharged from the culture vessel 3 through the tubular member 67.
  • the discharge speed control means 68 may be a liquid feed pump installed in the tubular member 67, or a means for controlling the discharge speed by applying a negative pressure to the waste liquid holding container 66 and controlling the negative pressure. good.
  • the solution supply means 61, the solution discharge means 62, and the culture vessel 3 are integrally provided in the culture unit 1, and the culture unit 1 is taken in and out of the incubator 2 so that they are integrated. Can be put in and out. Thus, when operations such as medium replenishment and waste liquid disposal are performed outside the incubator 2, the operation can be efficiently performed by removing the culture unit 1.
  • the mode in which the culture unit 1 is taken in and out from the side surface of the incubator 2 has been shown.
  • the mode in which the culture unit 1 is taken in and out from the bottom surface of the incubator 2, and 2 may be taken in and out from the upper surface.
  • a driving means 6 for moving the incubator 2 in the horizontal direction h may be provided.
  • the driving means 6 can move the incubator 2 in a direction (horizontal direction h) in which the plurality of culture units 1 are arranged in the incubator 2.
  • the operator moves the incubator 2 with respect to the work table 7 by the driving means 6, so that the opening 5 for the desired culture unit 1 can be easily operated.
  • the culture unit 1 can be taken in and out by arranging.
  • FIG. 13B is an example in which an operator manually operates, and is an aspect in which the operator moves the incubator 2 in conjunction with the rotation of the rotating unit 8 of the driving unit 6.
  • FIG. 13C shows an example in which the incubator 2 is moved in conjunction with the operator stepping on the pedal 9 of the driving means 6.
  • FIGS. 13A to 13C show a mode in which the culture unit 1 is taken in and out from the side surface of the incubator 2.
  • FIG. 14A as shown in FIG.
  • An embodiment in which the incubator 2 is taken in and out from the bottom may be employed.
  • the work table 7 may be provided with a rail (not shown) for guiding the drawn culture unit 1.
  • the culture unit 1 may be provided with casters on the bottom surface so that the culture unit 1 can be freely moved in any direction in the horizontal direction.
  • the arrangement of the driving means 6 shown in FIGS. 13A to 14B is an example, and the arrangement can be appropriately set as long as the incubator 2 can be moved in the horizontal direction.
  • the cell culture system 400 according to the present embodiment is a system having the configuration shown in FIGS. 15A and 15B, and the incubator 72 accommodates a plurality of culture units 71 arranged not only in the horizontal direction but also in the vertical direction. This is different from the first embodiment. The rest is the same as in the first embodiment.
  • Each culture unit 71 can be taken in and out of the incubator 72 independently.
  • the incubator 72 includes an opening 73 that can be taken in and out of each culture unit 71, and each opening 73 includes a shielding means.
  • the shielding means is configured to close the opening 73 in a state where the culture unit 71 is out of the incubator 72.
  • the upper part shows a perspective view of the cell culture system 400
  • the lower part shows a front view of the cell culture system 400 with the blocking means omitted.
  • FIG. 15B is an example in which a plate-like member 75 that rotates toward the outside of the incubator 72 with one side of the opening 73 as a rotation shaft 74 is installed as a shielding means.
  • the opening 73 can be opened by pulling the plate member 75 toward the outside of the incubator 72, and the culture unit 71 can be pulled out from the inside of the incubator 72 through the opening 73.
  • the opening 73 can be blocked by returning the plate-like member 75 to the original position, and the space in the incubator 72 can be closed.
  • 16A and 16B are examples in which a plate-like member 77 that swings inside the incubator 72 with the one side of the opening as the rotation shaft 76 and enters the inside of the incubator 72 is installed as a shielding means.
  • the plate-like member 77 is arranged at a position where the opening 73 is closed when no external force is applied. In the state where the culture unit 71 is pulled out from the inside of the incubator 72, the opening 73 is blocked by the plate-like member 77, and the space in the incubator 72 can be closed. When the culture unit 71 is stored in the incubator 72, the plate-like member 77 receives a force in the direction of the incubator 72 by the culture unit 71, swings around the rotation shaft 76, and enters the incubator 72.
  • the culture unit 71 is provided with a sealing member 78.
  • the sealing member 78 blocks the opening 73 and the space in the incubator 72 can be closed.
  • 16A and 16B show an example in which the opening 73 is closed by a single plate-like member 77. However, the plate-like member 77 is used together with other plate-like members having the other side of the opening 73 as a rotation axis. The opening 73 may be closed.
  • the above is an example of the shielding means, as long as the opening 73 is closed while the culture unit 71 is out of the incubator 72 and the internal environment of the incubator 72 can be maintained.
  • drive means 10 for moving the incubator 72 in the vertical direction p and the horizontal direction h may be provided.
  • the driving means 10 can move the incubator 72 in the direction in which the plurality of culture units 71 are arranged in the incubator 72 (horizontal direction h and vertical direction p).
  • the operator moves the incubator 72 with respect to the work table 11 by the driving means 10, so that the opening 73 for the desired culture unit 71 can be easily operated.
  • the culture unit 71 can be taken in and out by arranging.
  • FIG. 17B is an example in which an operator manually operates, and is an aspect in which the operator moves the incubator 72 in conjunction with the rotation of the rotating unit 12 of the driving unit 10.
  • FIG. 17C is an example in which the operation is carried out electrically, and is a mode in which the incubator 72 is moved in conjunction with the operator stepping on the pedal 13 of the driving means 10.
  • the rotating part and the pedal may be provided for horizontal movement and for vertical movement, respectively.
  • the work table 11 may be provided with a rail for guiding the drawn culture unit 71.
  • the culture unit 71 may include a caster on the bottom surface so that the culture unit 71 can be freely moved in any direction in the horizontal direction. Note that the arrangement of the driving means 10 shown in FIGS. 17A to 17C is an example, and the arrangement can be appropriately set as long as the incubator 72 can be moved in the horizontal direction h and the vertical direction p.
  • the incubator 2 may have a structure in which only a plurality of culture units 1 are housed as shown in FIG. 18A, or does not have a unit structure together with the culture unit 1 as shown in FIG. 18B.
  • a normal culture space 81 may be provided.
  • a cell culture apparatus 500 is an apparatus having the configuration shown in FIGS. 19A and 19B, and includes a culture unit 91 that accommodates the culture vessel 3, an incubator 92 that can accommodate a plurality of culture units 91, and an incubator.
  • a driving means 93 for moving the 92 in the vertical direction and a work table 94 are provided.
  • the culture unit 91 has a housing structure that can accommodate the culture vessel 3 therein.
  • the internal space of the enclosure is an open space, and is the same environment as the culture environment (temperature, humidity, CO 2 concentration, etc.) outside the enclosure.
  • the incubator 92 can maintain the inside in an environment suitable for cell culture, and can accommodate a plurality of culture units 91 arranged in the vertical direction. By mounting the culture container 3 containing the cells and the medium in the culture unit 91 and housing the culture unit 91 in the incubator 92, the cells in the culture container 3 can be cultured.
  • Each culture unit 91 can be taken into and out of the incubator 92 independently.
  • the incubator 92 includes an opening 95 that can be inserted into and removed from each culture unit 91, and each opening 95 includes a shielding means.
  • the shielding means is configured to close the opening 95 in a state where the culture unit 91 is out of the incubator 92.
  • 20A to 21B show examples of shielding means.
  • FIG. 20A is an example in which a slider 96 is installed as a shielding means so as to be movable in the left-right direction (horizontal direction).
  • the slider 96 can be moved in the horizontal direction to open the opening 95, and the culture unit 91 can be pulled out from the inside of the incubator 92 through the opening 95.
  • the slider 96 can be moved in the horizontal direction to block the opening 95, and the space in the incubator 92 can be closed.
  • FIG. 20B is an example in which a plate-like member 97 that rotates toward the outside of the incubator 92 with one side (arbitrary side) of the opening 95 as the rotation shaft 107 is installed as a shielding means.
  • the opening 95 can be opened by pulling the plate member 97 toward the outside of the incubator 92, and the culture unit 91 can be pulled out from the inside of the incubator 92 through the opening 95.
  • the plate-like member 97 is returned to the original position, whereby the opening 95 is blocked and the space in the incubator 92 can be closed.
  • the upper part shows a front view of the incubator 92
  • the lower part shows a side view of the incubator 92.
  • FIG. 21A shows an example in which a plate-like member 98a that swings inward of the incubator 92 with the one side (arbitrary side) of the opening 95 as the rotation shaft 108 and enters the inside of the incubator 92 is installed as a shielding means.
  • the plate-like member 98a is arranged at a position where the opening 95 is closed when no external force is applied, and the opening 95 is blocked by the plate-like member 98a when the culture unit 91 is pulled out from the inside of the incubator 92.
  • the space in the incubator 92 can be closed.
  • the plate member 98a receives a force in the direction of the inside of the incubator 92 by the culture unit 91, swings around the rotation shaft 108, and enters the inside of the incubator.
  • the sealing member 99 is provided. When the culture unit 91 is pushed into the incubator 92 to the end, the sealing member 99 blocks the opening 95 and the space in the incubator 92 can be closed.
  • FIG. 21A shows an example in which the opening 95 is closed by one plate-like member 98a.
  • the plate-like member 98a has other sides of the opening 95 as the rotation shaft 109.
  • the opening 95 may be closed together with the plate-like member 98b.
  • the upper part shows a front view of the incubator 92
  • the lower part shows a side view of the incubator 92.
  • the above is an example of the shielding means, as long as the opening unit 95 is closed in a state where the culture unit 91 is out of the incubator 92 and the internal environment of the incubator 92 can be maintained.
  • the drive means 93 is a means for moving the incubator 92 in the vertical direction p, and is a means for moving each opening 95 corresponding to each culture unit 91 to the work table 94 to a height.
  • the operator may manually operate the driving unit 93, or the operator may operate the driving unit 93 electrically by turning on / off a switch or the like.
  • FIG. 22A is an example in which an operator manually operates, and is an aspect in which the incubator 92 is moved up and down in conjunction with the rotation of the rotating unit 101 by the operator.
  • FIG. 22B is an example in which the operation is carried out electrically, and is a mode in which the incubator 92 is moved up and down in conjunction with the operator stepping on the pedal 102.
  • each opening 95 of the incubator 92 reaches the height of the work table 94 is provided.
  • the operator manually operates for example, each opening 95 becomes a height of the work table 94, and even if the operator's hand operating the driving unit 93 is resisted, Good (feels like a click)
  • the nearest opening 95 is positioned at the height of the work table 94 and stops, and when the switch is turned on again, the next opening 95 becomes the work table. It may be configured such that the opening 95 is positioned at the height of the work table 94 in turn each time the operator turns on the switch.
  • a plurality of switches corresponding to each opening 95 may be provided, and the corresponding opening 95 may be positioned at the height of the work table 94 when the switch corresponding to the desired opening 95 is turned on.
  • the work table 94 may be provided with a rail 103 for guiding the culture unit 91.
  • the culture unit 91 may include a caster 104 on the bottom surface so that the culture unit 91 can be freely moved in any direction in the horizontal direction.
  • the incubator 92 may include a shelf 105 for mounting the culture unit 91, or a rail 106 for mounting the culture unit 91 as shown in FIG. 25B.
  • smooth means for smoothly moving the culture unit 91 may be provided on the surface of the shelf 105 or the rail 106 that contacts the culture unit 91.
  • the smoothing means include a means in which a plurality of cylindrical members and spherical members are arranged in parallel to the moving direction of the culture unit 91. Accordingly, the columnar member or the spherical member rotates with the movement of the culture unit 91, and the culture unit 91 can be moved smoothly.
  • the driving means has been shown to move the incubator in the vertical direction with respect to the work table.
  • the incubator and the work table may be moved relatively, and the driving means moves the work table in the vertical direction.
  • the driving means may move both the incubator and the work table.
  • the incubator includes an outer door 82 that can cover the entire opening of each culture unit outside the shielding means that opens and closes the opening for inserting and removing each culture unit. May be.
  • the operation of putting in and out the culture unit with respect to the incubator may be performed manually by an operator or electrically by a driving means (not shown).
  • a cell culture apparatus 600 is an apparatus having the configuration shown in FIG. 27, a culture unit 201 that accommodates a culture container (cell culture container) 203, and a gas adjusting unit that adjusts the gas composition, temperature, and the like. 206, a gas flow means 205 for flowing gas between the gas adjusting means 206 and the culture unit 201, an incubator 202 capable of storing the culture unit 201, and a work space 204.
  • the culture unit 201 has a housing structure that can accommodate the culture vessel 203 therein.
  • the culture unit 201 includes an opening 201c through which the culture vessel 203 can be taken in and out, and a shutter 201d for opening and closing the opening 201c.
  • the culture unit 201 includes a supply port 201a for supplying gas to the inside and a discharge port 201b for discharging gas to the outside.
  • the left view, the middle view, and the right view of FIG. 28 are a rear view, a side view, and a front view of the culture unit 201, respectively.
  • the inside of the culture unit 201 is made the same environment as the inside of the incubator 202 by opening the inside of the culture unit 201 with the opening 201c open. Can do.
  • the inside of the culture unit 201 is maintained in the same environment as the inside of the incubator 202 by closing the opening 201c with the shutter 201d and making the inside of the culture unit 201 a closed space. be able to.
  • the culture unit 201 taken out from the incubator 202 is placed in the work space 204, and various operations are performed by the worker.
  • Examples of the work space 204 include an isolator and a clean bench.
  • the gas flow means 205 includes a main body 205a, a gas supply pipe 205b, and a gas recovery pipe 205c.
  • the gas supply pipe 205b is configured to be connected to the supply port 201a of the culture unit 201, and can supply the gas adjusted by the gas adjusting means 206 to the culture unit 201 via the main body 205a.
  • the gas recovery pipe 205c is configured to be connectable to the outlet 201b of the culture unit 201, and the gas in the culture unit 201 can be sent to the gas adjusting means 206 via the main body 205a.
  • the main body 205a is a means for generating a gas flow so that the gas flows between the culture unit 201 and the gas adjusting means 206.
  • the main body 205a may include, for example, a gas discharge unit that discharges gas to the gas supply pipe 205b, or a gas suction unit that sucks gas from the gas recovery pipe 205c, and includes both the gas discharge unit and the gas suction unit. May be.
  • the gas adjusting unit 206 is a unit that adjusts the gas composition, temperature, and the like, and includes a gas mixing unit 206a and a temperature control unit 206b as shown in FIG.
  • the gas mixing unit 206a is connected to the CO 2 cylinder 205f, the O 2 cylinder 205d, and the N 2 cylinder 205e through a tubular member, and mixes an appropriate amount of gas from each cylinder to obtain a desired composition (for example, 5% CO 2). 2 ) means for adjusting the gas.
  • the temperature control means 206b can adjust the gas mixed by the gas mixing means 206a to a desired temperature (for example, 37 ° C.).
  • the gas thus adjusted is supplied into the culture unit 201 by the gas flow means 205 via the gas supply pipe 205b.
  • gas can be circulated between the culture unit 201 and the gas adjusting means 206, and the gas environment in the culture unit 201 can be kept constant.
  • the temperature control means 206b of the gas adjustment means 206 includes a temperature sensor, a heater, and a control means, and the control means may control the heater while detecting the temperature with the temperature sensor. Furthermore, the temperature control means 206b may be provided with a cooler, and the control means controls the heater and the cooler, so that it can be controlled to a desired temperature more quickly.
  • the temperature control method may be PID control.
  • the gas mixing means 206a of the gas adjusting means 206 includes a gas flow meter and a control means, and the control means may control the gas mixing ratio while detecting the flow rate of each gas with the gas flow meter.
  • the gas mixing means 206a may be controlled by a control means using a gas cylinder.
  • the gas composition control method may be PID control.
  • the gas adjustment unit 206 may further include a unit (humidity control unit) for adjusting the humidity of the gas.
  • the humidity control means includes a humidity sensor, a humidifier, and a control means, and the control means may control the humidifier while detecting the humidity with the humidity sensor.
  • the operator closes the opening 201c of the culture unit 201 installed in the incubator 202 with the shutter 201d, and then removes the culture unit 201 into the work space 204.
  • the worker connects the supply port 201a and the discharge port 201b of the culture unit 201 to the gas supply pipe 205b and the gas recovery pipe 205c, respectively, in the work space 204.
  • the supply port 201a and the discharge port 201b are closed when not connected to the gas supply pipe 205b and the gas recovery pipe 205c, but preferably have a structure that opens when connected.
  • gas is circulated between the culture unit 201 and the gas adjusting means 206, and the environment in the culture unit 201 can be maintained in a desired state. In this state, the operator performs work by taking the desired culture vessel 203 into and out of the culture unit 201 at a desired timing.
  • the gas supply pipe 205b and the gas recovery pipe 205c are removed from the supply port 201a and the discharge port 201b of the culture unit 201, respectively.
  • the culture unit 201 is accommodated in the incubator 202, and the shutter 201d is retracted from the opening 201c of the culture unit 201 to make the culture unit 201 an open space.
  • the installation positions of the supply port 201a and the discharge port 201b in the culture unit 201 are arbitrary, if they are installed at a distance from each other, gas exchange efficiency is improved.
  • the gas adjustment unit 206 may include only the CO 2 cylinder 205f and may not adjust the O 2 concentration and the N 2 concentration. Further, the gas adjusting unit 206 may be configured to adjust only the gas temperature without adjusting the gas composition.
  • the gas adjustment unit 206 adjusts the internal environment of the culture unit 201 to the same gas environment as the environment in the incubator 202 (for example, temperature 37 ° C., CO 2 concentration 5%, humidity 95%)
  • the incubator 202 may be omitted.
  • the supply port 201a and the discharge port 201b of the culture unit 201 may be continuously connected to the gas supply pipe 205b and the gas recovery pipe 205c, respectively.
  • each culture unit forms a closed space having a supply port for supplying gas to the inside and a discharge port for discharging gas to the outside, and the inside is made an open space or a closed space by a shutter.
  • the supply port and the discharge port are in a closed state when not connected to the gas supply pipe and the gas recovery pipe, but preferably have a structure that opens when connected.
  • the gas flow means 205 is used to circulate the gas between the culture unit 201 and the gas adjustment means 206.
  • the gas flow means 205 does not include the gas recovery pipe 205c, and the gas adjustment means 206 is provided. It is also possible to simply supply the gas adjusted to the culture unit 201. In this case, the excess gas in the culture unit 201 may be discharged from the discharge port 201b of the culture unit 201, for example.
  • a cell culture system according to a seventh embodiment of the present invention will be described below with reference to the drawings.
  • a cell culture apparatus 700 according to the present embodiment is an apparatus having the configuration shown in FIG. 30, and a cell culture apparatus provided with a gas flow means 207 instead of the gas adjustment means 206 and the gas flow means 205 of the sixth embodiment. It is. Other configurations are the same as those of the sixth embodiment.
  • the gas flow means 207 communicates with the space in the incubator 202 and is a means for causing the gas in the incubator 202 to flow between the culture unit 201.
  • the gas flow means 207 includes a main body 207a, a gas supply pipe 207b, and a gas recovery pipe 207c.
  • the gas supply pipe 207b is configured to be connectable to the supply port 201a of the culture unit 201, and can supply the gas in the incubator 202 to the culture unit 201 via the main body 207a.
  • the gas recovery pipe 207c is configured to be connectable to the discharge port 201b of the culture unit 201, and can send the gas in the culture unit 201 to the incubator 202 through the main body 207a.
  • the main body 207a is a means for generating a gas flow so that the gas flows between the culture unit 201 and the incubator 202.
  • the main body 207a may include, for example, a gas discharge unit that discharges gas to the gas supply pipe 207b, or a gas suction unit that sucks gas from the gas recovery pipe 207c, and includes both the gas discharge unit and the gas suction unit. May be.
  • the procedure for culturing cells using the cell culture device 700 according to this embodiment is the same as that of the sixth embodiment.
  • each culture unit forms a closed space having a supply port for supplying gas to the inside and a discharge port for discharging gas to the outside, and the inside is made an open space or a closed space by a shutter.
  • the supply port and the discharge port are in a closed state when not connected to the gas supply pipe and the gas recovery pipe, but preferably have a structure that opens when connected.
  • the gas flow means 207 is used to circulate the gas between the culture unit 201 and the incubator 202.
  • the gas flow means 207 does not include the gas recovery pipe 207c, and the gas in the incubator 202 is removed. It may be simply supplied to the culture unit 201. In this case, the excess gas in the culture unit 201 may be discharged from the discharge port 201b of the culture unit 201, for example.
  • a personal computer can be exemplified as the control means in the present invention.
  • the PC may have a CPU and a memory, and the function as the control means may be realized by the CPU executing a control program stored in the memory.

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Abstract

細胞培養装置(100)は、培養容器(3)を搭載する培養ユニット(1)と、複数の培養ユニット(1)を内部に配置し、内部を細胞培養に適した環境に維持できるインキュベータ(2)とを備え、インキュベータ(2)は、複数の培養ユニット(1)の各々に対して設けられ、培養ユニット(1)毎に出し入れ可能な開口部(5)と、該開口部(5)に設けられ、培養ユニット(1)がインキュベータ(2)から取り出されたときにインキュベータ(2)の内部環境を外部から遮蔽する遮蔽手段とを備える。

Description

細胞培養装置
 本発明は、細胞培養容器内の細胞を培養する細胞培養装置に関するものである。
 近年、再生医療やバイオ医薬等の研究の進展に伴い、細胞を大量に調製することが要求されるようになってきた。細胞は通常、生育に適した環境を維持できるインキュベータ(保温槽)内で培養される。定期的に細胞の状態を観察したり、培地を交換したりするために、細胞等のサンプルをインキュベータ外に取り出して作業をする必要がある(例えば、特許文献1参照。)。細胞等のサンプルをインキュベータに対して出し入れする際、インキュベータ内の環境(温度、湿度、CO濃度など)は、外部環境にさらされることにより一時的に定常状態を乱されることになり、インキュベータ内にある細胞等のサンプルにストレスを与える可能性がある。
 一方のインキュベータ外に取り出されたサンプルも、外部環境にさらされることにより、作業中定常状態を乱されることになりストレスが与えられることになる。
特開2010-273603号公報
 したがって、細胞等のサンプルをインキュベータに対して出し入れする作業は可能な限り短時間に行う必要がある。しかし、大量のサンプルを扱う作業者にとっては、インキュベータ内の環境を乱さぬようにサンプルを出し入れすることは非常に困難なことである。さらに、例えば臨床用途の細胞の調製には、アイソレータなどを使って閉鎖系での作業が必要となるため、作業者の可動空間が限られており、作業者にかかる負担がさらに増大することになる。
 また、インキュベータ外に出されたサンプルは、できるだけ早くインキュベータに戻すことが好ましいが、大量のサンプルを扱う作業者にとっては困難なことである。
 本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞等のサンプルをインキュベータに対して出し入れする際の作業を簡易にし、インキュベータの内部環境の変化を低減できる細胞培養装置を提供することを目的としている。
 また、インキュベータ外に出されたサンプルをインキュベータ内の環境と同様な環境に維持できる細胞培養装置を提供することを目的としている。
 上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
 本発明の一態様は、培養容器を搭載する培養ユニットと、複数の前記培養ユニットを内部に配置し、内部を細胞培養に適した環境に維持できるインキュベータとを備え、該インキュベータは、前記複数の培養ユニットの各々に対して設けられ、前記培養ユニット毎に出し入れ可能な開口部と、該開口部に設けられ、前記培養ユニットが前記インキュベータから取り出されたときに前記インキュベータの内部環境を外部から遮蔽する遮蔽手段とを備える細胞培養装置である。
 本態様によって、作業者は、所望のサンプルだけをインキュベータから取り出したり、インキュベータに収容したりすることができ、サンプルを出し入れする際のインキュベータ内の環境変化を低減することができる。
 上記態様においては、前記インキュベータを移動させる駆動手段をさらに備えていても良い。
 また、前記駆動手段は、前記インキュベータ内部で前記培養ユニットが配置されている方向に、前記インキュベータを移動させる手段であっても良い。
 このことにより、作業者は所望のサンプルをより扱いやすい位置でインキュベータに対して出し入れすることができる。
 上記態様においては、前記培養ユニットはキャスタを備えていても良い。
 このことにより、作業者は、培養ユニットをインキュベータに対して出し入れし易くなるとともに、インキュベータ外で簡単に移動させることができる。
 上記態様においては、前記培養ユニットは、前記培養容器に培地等の溶液を供給する溶液供給手段と、前記培養容器から廃液を排出させる溶液排出手段とを備えていても良い。このことにより、培地等の溶液の補給や廃液の廃棄を簡単に行うことができる。
 前記インキュベータは、複数の前記培養ユニットを内部に水平方向に配列しても良く、複数の前記培養ユニットを内部に垂直方向に配列しても良く、複数の前記培養ユニットを内部に水平方向および垂直方向に配列しても良い。
 本発明の他の態様は、培養容器を搭載する培養ユニットと、該培養ユニットを内部に配置し、内部を細胞培養に適した環境に維持できるインキュベータと、前記インキュベータから取り出した前記培養ユニットを配置する作業空間と、ガス組成、ガス温度、ガス湿度のうちの少なくとも1つを調整するガス調整手段と、前記作業空間に配置された前記培養ユニットと、前記ガス調整手段との間でガスを流動させるガス流動手段とを備える細胞培養装置である。
 本態様によって、作業者は、所望のサンプルだけをインキュベータから取り出したり、インキュベータに収容したりすることができ、取り出したサンプルのガス環境を一定に維持することができるので、インキュベータ内からの環境変化を低減することができ、サンプルに与えるストレスを軽減することができる。
 上記態様においては、前記インキュベータが前記ガス調整手段として機能しても良い。このことにより、ガス調整手段を別に設置しなくて良いので装置がコンパクトになるとともに、コストの面でも優位となる。
 上記態様においては、前記培養ユニットは、前記インキュベータの内部に配置されている時は前記培養ユニット内に開放空間を形成し、前記作業空間の内部に配置されている時は前記培養ユニット内に閉鎖空間を形成するものであっても良い。このことにより、インキュベータの内でも外でも培養ユニットの内部環境をインキュベータの内部環境と同じ環境に保つことができ、環境変化がサンプルに与えるストレスを軽減することができる。
 上記態様においては、前記ガス流動手段が、前記作業空間に配置された前記培養ユニットと前記ガス調整手段との間でガスを循環させても良い。このことにより、調整したガスを効率よく使うことができ、ガスの調整にかかるコストを削減することができる。
 本発明によれば、作業者が所望のサンプルのみをインキュベータに対して簡単に出し入れすることができるので、インキュベータ内の環境変化を必要最小限に抑えることができ、サンプルに対する影響を軽減することができる。また、例えばアイソレータ等を用いて閉鎖系環境で作業する場合、サンプルの出し入れの作業が簡易なので、作業者の作業効率が向上する。
本発明の第1実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 図1Aの細胞培養装置の正面図である。 本発明の遮蔽手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の遮蔽手段の他の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の遮蔽手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の遮蔽手段の他の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のレール部材の概略構成を示す説明図である。 本発明の円滑手段の概略構成を示す説明図である。 本発明の第2実施形態に係る細胞培養システムの概略構成を示す説明図である。 図5Aの細胞培養システムの正面図である。 本発明の第2実施形態に係る細胞培養システムの概略構成を示す説明図である。 本発明の第2実施形態に係る細胞培養システムの概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 図7Aのキャスタ手段の動作を説明する図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明のキャスタ手段の例の概略構成を示す説明図である。 図10Aのキャスタ手段の動作を説明する図である。 本発明の第3実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 図11Aの細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第1実施形態から第3実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第1実施形態から第3実施形態に係る細胞培養装置の他の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第1実施形態から第3実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 図13Aの細胞培養装置の側面図である。 図13Aの細胞培養装置の他の例の側面図である。 本発明の第1実施形態から第3実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第1実施形態から第3実施形態に係る細胞培養装置の他の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第4実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 図15Aの細胞培養装置における遮蔽部材の動作を説明する図である。 本発明の第4実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 図16Aの細胞培養装置の正面図である。 本発明の第4実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 図17Aの細胞培養装置の側面図である。 図17Aの細胞培養装置の他の例の側面図である。 本発明の第1実施形態から第4実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第1実施形態から第4実施形態に係る細胞培養装置の他の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 図19Aの細胞培養装置の側面図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の遮蔽手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の遮蔽手段の他の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の遮蔽手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の遮蔽手段の他の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の駆動手段の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の駆動手段の他の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図(平面図)である。 図23Aの細胞培養装置の正面図である。 図23Aの細胞培養装置の側面図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図(平面図)である。 図24Aの細胞培養装置の正面図である。 図24Aの細胞培養装置の側面図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第5実施形態に係る細胞培養装置の他の変形例の概略構成を示す説明図である。 本発明の外扉の例の概略構成を示す説明図である。 本発明の第6実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。 本発明の第6実施形態に係る細胞培養装置の培養ユニットの概略構成を示す説明図である。 本発明の第6実施形態に係る細胞培養装置のガス調整手段、ガス循環手段の概略構成を示す説明図である。 本発明の第7実施形態に係る細胞培養装置の概略構成を示す説明図である。
(第1実施形態)
 本発明の第1実施形態に係る細胞培養装置について図面を参照して以下に説明する。
 本実施形態に係る細胞培養装置100は、図1Aおよび図1Bに示される構成の装置であり、培養容器3(細胞培養容器)を収容する培養ユニット1と、複数の培養ユニット1を収納可能なインキュベータ2とを備えている。
 培養ユニット1は、垂直方向に間隔を空けて配列する複数の棚部4を内部に備えた筺体構造をしている。より具体的には、培養ユニット1は、間隔を空けて互いに略平行に配置された底面および上面と、底面と上面とを接続する側面とを有する箱型の筐体を有し、筐体の底面が水平となるように設置される。したがって、本明細書において、底面に平行な方向は「水平方向」であり、底面に直交する方向は「垂直方向」である。筺体の内部空間は開放系空間であり、筺体外部の培養環境(温度、湿度、CO濃度、等)と同じ環境になるようなっている。筺体内部の棚部4に培養容器3を搭載することができる。
 インキュベータ2は、内部を細胞培養に適した環境に維持することができ、複数の培養ユニット1を水平方向に並べて収容することができる。
 培養ユニット1の棚部4に細胞及び培地が入った培養容器3を搭載し、当該培養ユニット1をインキュベータ2内に収納することで、培養容器3内の細胞を培養することができる。
 各培養ユニット1はそれぞれ独立してインキュベータ2に対して出し入れ可能である。インキュベータ2は各培養ユニット1それぞれに対して出し入れ可能な開口部5を側面に備え、それぞれの開口部5は遮蔽手段を備えている。
 遮蔽手段は、培養ユニット1がインキュベータ2外に出された状態で開口部5を閉じる構造をしている。図2Aから図3Bに遮蔽手段の例を示す。
 図2Aは、遮蔽手段として、スライダ21が上下方向(垂直方向)に移動可能に設置されている例である。培養ユニット1を取り出す際はスライダ21を上方向に持ち上げることで開口部5を開くことができ、インキュベータ2内部から開口部5を通して培養ユニット1を引き出すことができる。培養ユニット1を引き出した後、スライダ21を下方向に下ろすことで開口部5を遮断し、インキュベータ2内の空間を閉鎖することができる。
 図2Bは、遮蔽手段として、開口部5の一辺を回転軸23としてインキュベータ2外部に向かって回転する板状部材22が設置されている例である。培養ユニット1を取り出す際は板状部材22をインキュベータ2外側に向け引くことで開口部5を開くことができ、インキュベータ2内部から開口部5を通して培養ユニット1を引き出すことができる。培養ユニット1を引き出した後、板状部材22をもとの位置に戻すことで開口部5を遮断し、インキュベータ2内の空間を閉鎖することができる。
 図3Aは、遮蔽手段として、開口部の一辺を回転軸32としてインキュベータ2の内側に揺動することによってインキュベータ2内部に入り込む板状部材31が設置されている例である。図3Aにおいて、上段にはインキュベータ2を開口部5側から見た正面図が示され、下段にはインキュベータ2を上面側から見た平面図が示されている。板状部材31は、外力が加わっていない状態では開口部5を閉鎖する位置に配置されるようになっている。したがって、インキュベータ2内部から培養ユニット1を引き出した状態では、開口部5は板状部材31によって遮断されてインキュベータ2内の空間を閉鎖することができる。
 培養ユニット1をインキュベータ2内に収納する際、板状部材31は、培養ユニット1によりインキュベータ2内部の方向に力を受け、回転軸32回りに揺動してインキュベータ2内部に入り込む。培養ユニット1には封鎖部材33が備えらている。培養ユニット1をインキュベータ2内部に最後まで押し込むと封鎖部材33が開口部5を封鎖し、インキュベータ2内の空間を閉鎖することができる。図3Aでは1枚の板状部材31により開口部5を閉鎖する例を示したが、図3Bに示すように、封鎖部材33が、開口部5の他の辺を回転軸34とする他の板状部材35とともに開口部5を閉鎖しても良い。
 上記は遮蔽手段の一例であり、培養ユニット1がインキュベータ2外に出された状態で開口部5を閉鎖し、インキュベータ2の内部環境を維持することができる構成であれば良い。
 図4Aに示すように、インキュベータ2は、培養ユニット1の位置決めをするために、培養ユニット1の挿入方向に延びたレール部材41を備えていても良い。このとき培養ユニット1は、培養ユニット1のレール部材41に沿った方向以外の動きを制限するための係止部材42を備えていても良い。係止部材42は、例えば図4Aのように、レール部材41が形成する溝部にはまるなどレール部材41と相互に作用して培養ユニット1のレール部材41に沿った方向以外の動きを制限する。
 このことにより、培養ユニット1はレール部材41に沿ってインキュベータ2内部に進入することができる。
 インキュベータ2は、内部の培養ユニット1と接する底面に、培養ユニット1の移動を円滑にする円滑手段を備えていても良い。円滑手段としては、図4Bに示すような、複数の円柱部材43を培養ユニット1の移動方向(図4Bにおいて横方向)に平行に並べた手段を挙げることができる。図4Aにおいて、上段は、インキュベータ2の底面上の円柱部材43を上側から見た図を示し、下段は、円柱部材43を水平方向に見た図を示している。このことにより、培養ユニット1の移動にともない円柱部材43が回転するので、培養ユニット1を円滑に移動させることができる。
 なお、円柱部材43にかえて球状部材を採用しても良い。
(第2実施形態)
 本発明の第2実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。
 本実施形態に係る細胞培養システム200は、図5Aおよび図5Bに示される構成のシステムであり、培養ユニット1のインキュベータ2外部での移動を容易にするためにユニット移動機構を備えている点で第1実施形態と異なっている。それ以外は、第1実施形態と同様である。
 ユニット移動機構としては、図5Aおよび図5Bに示すように、培養ユニット1を水平方向に移動させる際に移動を容易にするキャスタ手段52を例示することができる。キャスタ手段52は、培養ユニット1の底面に培養ユニット1を支持できる所望の数(3個以上)設置されている。キャスタ手段52は、培養ユニット1を水平方向のいずれの方向にも自由に移動できるように車輪状部材を備えており、支持部材を介して培養ユニット1の底面に固定されている。ここで、車輪状部材はボール状の部材であっても良く、培養ユニット1を水平方向のいずれの方向にも移動できるような形状であれば良い。
 こうすることで、培養ユニット1のインキュベータ2に対する出し入れが容易になるとともに、インキュベータ2の外部で培養ユニット1を自由に移動可能となる。
 次に、図6Aおよび図6Bを使ってユニット移動機構51の別の態様を説明する。本態様のユニット移動機構は、培養ユニット1を水平方向に移動させる際に移動を容易にするキャスタ手段53と、キャスタ手段53を格納するための格納庫54から構成されている。キャスタ手段53は、培養ユニット1をインキュベータ2の外部に引き出した時に格納庫54から放出され固定される。培養ユニット1をインキュベータ2の内部に収納する時は、固定が解除されてキャスタ手段53が格納庫54に収納される。
 図7Aに、キャスタ手段53の一例を示す。
 キャスタ手段53は、車輪状部材55と支持部材56とストッパ57とを備えている。支持部材56は、支点58において格納庫54と結合しており、当該支点58を中心に略回転することでキャスタ手段53を格納庫54に出し入れできるようになっている(支点58は回転しない)。支持部材56の支点58と反対側の端は車輪状部材55と結合している。ストッパ57は支持部材56に設置され、支点58を中心としたキャスタ手段53の回転を固定する部材である。
 ここで、車輪状部材55はボール状の部材であっても良く、培養ユニット1を水平方向のいずれの方向にも移動できるような形状であれば良い。
 また、支点58を中心としたキャスタ手段53の回転可能な範囲は制限されていても良い。例えば、図7Bに示すように、可動範囲が略90度の角度に制限されていても良い。
 図8Aおよび図8Bに示すように、培養ユニット1をインキュベータ2から引き出すと、キャスタ手段53は、該キャスタ手段53自体にかかる重力により支点58を中心に円弧を描くように回転して格納庫54から放出される。キャスタ手段53は、支点58を中心に、車輪状部材55が床面に達する所定位置(固定位置)まで略回転する。支点58は、キャスタ手段53が当該固定位置を越えて回転できないように設計されている。キャスタ手段53が固定位置に達した時、ストッパ57によりキャスタ手段53が支点58を中心とした回転方向に戻ることができなくなり固定される。
 図8Cおよび図8Dに示すように、培養ユニット1をインキュベータ2に収納する場合は、インキュベータ2に設置された固定解除手段59がストッパ57に接触することでストッパ57による固定が解除され、キャスタ手段53が支点58を中心として回転可能となる。この状態で培養ユニット1をインキュベータ2に押し込むと、キャスタ手段53はインキュベータ2と接触して水平方向に力を受け、支点58を中心に略回転しながら押し上げられて、格納庫54に収納される。
 ストッパによるキャスタ手段の固定方法については、キャスタ手段が固定位置に達した時、キャスタ手段が支点を中心として回転できなくなるように固定されればどのような方法でも良いが、例えば図9Aから図9Cに示すような構成であっても良い。
 ストッパ57は、可動部57aと固定部57bとを備えている。可動部57aは、図示しない弾性部材を介して支持部材56に取り付けられており、弾性部材によって支点58に向かって付勢されている。可動部57aは、外力が加わると弾性部材の弾性力に反して支点58と車輪状部材55を結ぶ方向dに移動可能となっている。一方、固定部57bは支点58に固定されている。
 可動部57aと固定部57bは、互いの位置関係により互いを固定する状態となることができる。例えば図9Aから図9Cに示すように、可動部57aが凹部を備え、当該凹部に固定部57bの一部がはまることで両者が固定化される態様を挙げることができる。この場合、車輪状部材55が床面に達する所定位置(固定位置)において、可動部57aの凹部に固定部57bの一部がはまり、互いに固定化されるように可動部57aと固定部57bの位置決めがされている。
 また、可動部57aは、支持部材56上で弾性部材を介して次のような位置決めをされている。支点58とは反対側へ向かう方向の外力が可動部57aに加わっている場合、可動部57aは弾性部材の弾性力に反して、支持部材56上を支点58から離れる方向に移動する(図9Cの状態)。この状態においては、可動部57aと固定部57bが互いに離れるので、両者の固定化が解除される。可動部57aに外力が加わっていない場合、可動部57aは、弾性部材の弾性力により、支持部材56上を支点58に近づく方向に移動する(図9Aまたは図9Bの状態)。図9Aの状態は、可動部57aの凹部に固定部57bの一部がはまることで両者が固定化される状態であり、図9Bの状態は、可動部57aの一部により固定部57bが可動部57aの凹部に接近することが阻害されている状態である。
 培養ユニット1をインキュベータ2から引き出すと、キャスタ手段53はそれ自体にかかる重力により支点58を中心に円弧を描くように回転して格納庫54から放出される。キャスタ手段53は支点58を中心に車輪状部材55が床面に達する所定位置(固定位置)まで略回転し、支点58に設置されたストッパ57の固定部57bが可動部57aと衝突する。この時、可動部57aは固定部57bから力を受け、弾性部材の弾性力に反して支持部材56上を支点58から離れる方向に移動し、固定部57bが可動部57aの凹部にはまり、キャスタ手段53が固定位置に固定される。この時、可動部57aの凹部は弾性部材の弾性力により元の位置に戻る方向に力を受けている。
 固定解除手段59によるキャスタ手段の固定の解除方法については、インキュベータに設置された固定解除手段がストッパに接触することでストッパによる固定が解除されればどのような方法でも良いが、例えば図10Aおよび図10Bに示すような構成であっても良い。
 インキュベータ2は、培養ユニット1を収納する際にストッパ57の可動部57aと接触する位置に固定解除手段59を備えている。培養ユニット1をインキュベータ2内に押し込むと、可動部57aは固定解除手段59から力を受け、弾性部材の弾性力に反して支持部材56上を支点58から離れる方向に移動し、可動部57aの凹部と固定部57bが離れ、キャスタ手段53の固定化が解除された状態となる。この状態で培養ユニット1をインキュベータ2に押し込むと、キャスタ手段53はインキュベータ2と接触して水平方向に力を受け、支点58を中心に略回転しながら押し上げられて、格納庫54に収納される。
 本実施形態では、ストッパの可動部をキャスタ手段の支持部材に取り付け、ストッパの固定部を格納庫との支点に取り付ける例を示したが、ストッパの可動部を格納庫との支点に取り付け、ストッパの固定部をキャスタ手段の支持部材に取り付けても良い。
 つまり、ストッパは可動部と固定部から構成され、可動部と固定部のどちらか一方が格納庫との支点に取り付けられ、他方がキャスタ手段の支持部材に取り付けられており、互いの相対位置により互いを固定化することができる形状を有し、固定化する相対位置以外の相対位置では固定化を解除することができる形状をしている。ここで、可動部と固定部が互いを固定化する相対位置に配置されるとき、キャスタ手段の車輪状部材は床面に達する所定位置で固定される。
(第3実施形態)
 本発明の第3実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る細胞培養システム300は、図11Aおよび図11Bに示される構成のシステムであり、培養ユニット1が溶液供給手段61及び溶液排出手段62を備えている点で上記各実施形態と異なっている。それ以外は、上記各実施形態と同様である。
 溶液供給手段61は、培地を細胞培養に適した温度(例えば37℃)で保持した後に培養容器3に供給する手段であり、培地を保持するための溶液保持容器63と、当該溶液保持容器から培養容器3へ向かう培地の流路を形成する管状部材64と、培養容器3に供給される培地の流速を制御する供給速度制御手段65とを備えている。
 溶液保持容器63は培地を排出する排出口63aを備え、当該排出口63aは管状部材64を介して培養容器3に接続されている。図11Aに示すように、溶液保持容器63は、外部から培地を補給するための供給口63bを備えていても良い。培養ユニット1をインキュベータ2内に収納することで、保持している培地の温度をインキュベータ2内と同じ温度で保持することができる。
 管状部材64は、流路の方向を変更することができるように柔軟性を有した素材であっても良いし、柔軟性を有さず流路形が固定される素材であっても良いし、柔軟性を有する素材と柔軟性を有しない素材との組み合わせでも良い。管状部材64の一端は溶液保持容器63の排出口63aに接続し、他端は培養容器3の開口部(供給口3a)に接続している。
 供給速度制御手段65は、培養容器3に供給される培地の供給速度を制御できればどのような手段でも良い。例えば、供給速度制御手段65は、管状部材64に設置した送液ポンプでも良いし、管状部材64内の流路径を調整して流速を制御する手段であっても良い。管状部材64内の流路径を調整して流速を制御する場合は、例えば、溶液保持容器63を培養容器3より重力方向で上方に配置し、重力によって培地を管状部材64に流す態様や、溶液保持容器63内の溶液に圧力を負荷することによって培地を管状部材64に流す態様などを採用すれば良い。
 溶液排出手段62は、培養容器3から培地を廃液として排出する手段であり、廃液を保持するための廃液保持容器66と、当該廃液保持容器66と培養容器3とを結ぶ流路を形成する管状部材67と、当該管状部材67を流れる廃液の流速を制御する排出速度制御手段68とを備えている。
 廃液保持容器66は、管状部材67に接続し廃液が供給される供給口66aを備えている。図11Bに示すように、廃液保持容器66は、外部へ廃液を排出するための排出口66bを備えていても良い。
 管状部材67は、流路の方向を変更することができるように柔軟性を有した素材であっても良いし、柔軟性を有さず流路形が固定される素材であっても良いし、柔軟性を有する素材と柔軟性を有しない素材との組み合わせでも良い。管状部材67の一端は廃液保持容器66の供給口66aに接続し、他端は培養容器3の開口部(排出口3b)に接続している。
 排出速度制御手段68は、管状部材67を介して培養容器3から排出される廃液の排出速度を制御できればどのような手段でも良い。例えば、排出速度制御手段68は、管状部材67に設置した送液ポンプでも良いし、廃液保持容器66に陰圧を負荷し、陰圧を制御することで排出速度を制御する手段であっても良い。
 本実施形態においては、溶液供給手段61、溶液排出手段62、培養容器3が培養ユニット1内に一体として備えられており、培養ユニット1をインキュベータ2に対して出し入れすることで、それらを一体として出し入れすることができる。このことにより、培地の補給、廃液の廃棄などの作業をインキュベータ2の外で行うとき、培養ユニット1を取り出すことで効率的に作業を行うことができる。
 上記各実施形態において、培養ユニット1をインキュベータ2の側面から出し入れする態様を示したが、例えば、図12Aに示すように、インキュベータ2の底面から出し入れする態様や、図12Bに示すように、インキュベータ2の上面から出し入れする態様であっても良い。
 上記各実施形態において、図13Aおよび図13Cに示すように、インキュベータ2を水平方向hに移動する駆動手段6を備えていても良い。当該駆動手段6は、複数の培養ユニット1がインキュベータ2内で配列されている方向(水平方向h)にインキュベータ2を移動することができる。このことにより、作業者はインキュベータ2に対し培養ユニット1を出し入れする際、駆動手段6によりインキュベータ2を作業台7に対して移動させ、所望の培養ユニット1に対する開口部5を作業しやすい位置に配置して培養ユニット1を出し入れすることができる。
 作業者が駆動手段6を手動で操作しても良く、作業者がスイッチ等をON/OFFして電動で駆動手段6を操作しても良い。図13Bは作業者が手動で操作する例であり、作業者が駆動手段6の回転部8を回転させることに連動してインキュベータ2を移動させる態様である。図13Cは電動で操作する例であり、作業者が駆動手段6のペダル9を踏むことに連動してインキュベータ2を移動させる態様である。
 図13Aから図13Cは、培養ユニット1をインキュベータ2の側面から出し入れする態様を示したが、例えば、図14Aに示すように、インキュベータ2の上面から出し入れする態様や、図14Bに示すように、インキュベータ2の底面から出し入れする態様であっても良い。
 作業台7には、引き出した培養ユニット1を誘導する図示しないレールが設置されていても良い。また、培養ユニット1は底面に培養ユニット1を水平方向のいずれの方向にも自由に移動できるようにキャスタを備えていても良い。
 なお、図13Aから図14Bに示した駆動手段6の配置は一例であって、インキュベータ2を水平方向に移動できれば配置は適宜設定できる。
(第4実施形態)
 本発明の第4実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。 本実施形態に係る細胞培養システム400は、図15Aおよび図15Bに示される構成のシステムであり、インキュベータ72が、複数の培養ユニット71を水平方向のみでなく垂直方向にも配列して収容する点で第1実施形態と異なっている。それ以外は、第1実施形態と同様である。
 各培養ユニット71は、独立してインキュベータ72に対して出し入れ可能である。インキュベータ72は、各培養ユニット71に対して出し入れ可能な開口部73備え、それぞれの開口部73は遮蔽手段を備えている。
 遮蔽手段は、培養ユニット71がインキュベータ72外に出された状態で開口部73を閉じる構成をしている。
 図15Aにおいて、上段は、細胞培養システム400の斜視図を示し、下段は、遮断手段を省略した細胞培養システム400の正面図を示している。
 図15Bは、遮蔽手段として、開口部73の一辺を回転軸74としてインキュベータ72外部に向かって回転する板状部材75が設置されている例である。培養ユニット71を取り出す際は板状部材75をインキュベータ72外側に向け引くことで開口部73を開くことができ、インキュベータ72内部から開口部73を通して培養ユニット71を引き出すことができる。培養ユニット71を引き出した後、板状部材75をもとの位置に戻すことで開口部73を遮断し、インキュベータ72内の空間を閉鎖することができる。
 図16Aおよび図16Bは、遮蔽手段として、開口部の一辺を回転軸76としてインキュベータ72の内側に揺動してインキュベータ72内部に入り込む板状部材77が設置されている例である。
 板状部材77は、外力が加わっていない状態では開口部73を閉鎖する位置に配置するようになっている。インキュベータ72内部から培養ユニット71を引き出した状態では、開口部73は板状部材77によって遮断され、インキュベータ72内の空間を閉鎖することができる。培養ユニット71をインキュベータ72内に収納する際、板状部材77は培養ユニット71によりインキュベータ72内部の方向に力を受け、回転軸76回りに揺動してインキュベータ72内部に入り込む。
 培養ユニット71には封鎖部材78が備えらている。培養ユニット71をインキュベータ72内部に最後まで押し込むと封鎖部材78が開口部73を封鎖し、インキュベータ72内の空間を閉鎖することができる。
 図16Aおよび図16Bでは1枚の板状部材77により開口部73を閉鎖する例を示したが、板状部材77が、開口部73の他の辺を回転軸とする他の板状部材とともに開口部73を閉鎖しても良い。
 上記は遮蔽手段の一例であり、培養ユニット71がインキュベータ72外に出された状態で開口部73を閉鎖し、インキュベータ72の内部環境を維持することができる構成であれば良い。
 本実施形態において、図17Aから図17Cに示すように、インキュベータ72を垂直方向pおよび水平方向hに移動する駆動手段10を備えていても良い。当該駆動手段10は、複数の培養ユニット71がインキュベータ72内で並べられている方向(水平方向h、および、垂直方向p)にインキュベータ72を移動することができる。このことにより、作業者はインキュベータ72に対し培養ユニット71を出し入れする際、駆動手段10によりインキュベータ72を作業台11に対して移動させ、所望の培養ユニット71に対する開口部73を作業しやすい位置に配置して培養ユニット71を出し入れすることができる。
 作業者が駆動手段10を手動で操作しても良く、作業者がスイッチ等をON/OFFして電動で駆動手段10を操作しても良い。図17Bは、作業者が手動で操作する例であり、作業者が駆動手段10の回転部12を回転させることに連動してインキュベータ72を移動させる態様である。図17Cは、電動で操作する例であり、作業者が駆動手段10のペダル13を踏むことに連動してインキュベータ72を移動させる態様である。回転部およびペダルは、図示したように水平移動用と垂直移動用がそれぞれ設置されていても良い。
 作業台11には、引き出した培養ユニット71を誘導するレールが設置されていても良い。また、培養ユニット71は、底面に、培養ユニット71を水平方向のいずれの方向にも自由に移動できるようにキャスタを備えていても良い。
 なお、図17Aから図17Cに示した駆動手段10の配置は一例であって、インキュベータ72を水平方向hおよび垂直方向pに移動できれば配置は適宜設定できる。
 上記各実施形態において、インキュベータ2は、図18Aに示すように内部に培養ユニット1だけを複数収納する構造になっていても良いし、図18Bに示すように培養ユニット1と共にユニット構造を有しない通常の培養空間81を備えていても良い。
(第5実施形態)
 本発明の第5実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。
 本実施形態に係る細胞培養装置500は、図19Aおよび図19Bに示される構成の装置であり、培養容器3を収容する培養ユニット91と、複数の培養ユニット91を収納可能なインキュベータ92と、インキュベータ92を垂直方向に移動する駆動手段93と、作業台94とを備えている。
 培養ユニット91は、内部に培養容器3を収容可能な筺体構造をしている。筺体の内部空間は開放系空間であり、筺体外部の培養環境(温度、湿度、CO濃度、等)と同じ環境になるようなっている。
 インキュベータ92は、内部を細胞培養に適した環境に維持することができ、複数の培養ユニット91を垂直方向に並べて収容することができる。
 培養ユニット91に細胞及び培地が入った培養容器3を搭載し、当該培養ユニット91をインキュベータ92内に収納することで、培養容器3内の細胞を培養することができる。
 各培養ユニット91はそれぞれ独立してインキュベータ92に対して出し入れ可能である。インキュベータ92は各培養ユニット91それぞれに対して出し入れ可能な開口部95備え、それぞれの開口部95は遮蔽手段を備えている。
 遮蔽手段は、培養ユニット91がインキュベータ92外に出された状態で開口部95を閉じる構成をしている。図20Aから図21Bに遮蔽手段の例を示す。
 図20Aは、遮蔽手段として、スライダ96が左右方向(水平方向)に移動可能に設置されている例である。培養ユニット91を取り出す際はスライダ96を水平方向に移動させ開口部95を開くことができ、インキュベータ92内部から開口部95を通して培養ユニット91を引き出すことができる。培養ユニット91を引き出した後、スライダ96を水平方向に移動させ開口部95を遮断し、インキュベータ92内の空間を閉鎖することができる。
 図20Bは、遮蔽手段として、開口部95の一辺(任意の一辺)を回転軸107としてインキュベータ92外部に向かって回転する板状部材97が設置されている例である。培養ユニット91を取り出す際は板状部材97をインキュベータ92外側に向け引くことで開口部95を開くことができ、インキュベータ92内部から開口部95を通して培養ユニット91を引き出すことができる。培養ユニット91を引き出した後、板状部材97をもとの位置に戻すことで開口部95を遮断し、インキュベータ92内の空間を閉鎖することができる。図20Bにおいて、上段は、インキュベータ92の正面図を示し、下段は、インキュベータ92の側面図を示している。
 図21Aは、遮蔽手段として、開口部95の一辺(任意の一辺)を回転軸108としてインキュベータ92の内側へ揺動してインキュベータ92内部に入り込む板状部材98aが設置されている例である。板状部材98aは外力が加わっていない状態では開口部95を閉鎖する位置に配置するようになっており、インキュベータ92内部から培養ユニット91を引き出した状態では開口部95は板状部材98aによって遮断され、インキュベータ92内の空間を閉鎖することができる。
 培養ユニット91をインキュベータ92内に収納する際、板状部材98aは培養ユニット91によりインキュベータ92内部の方向に力を受け、回転軸108回りに揺動してインキュベータ内部に入り込む、培養ユニット91には封鎖部材99が備えらており、培養ユニット91をインキュベータ92内部に最後まで押し込むと封鎖部材99が開口部95を封鎖し、インキュベータ92内の空間を閉鎖することができる。
 図21Aでは1枚の板状部材98aにより開口部95を閉鎖する例を示したが、図21Bに示すように、板状部材98aが、開口部95の他の辺を回転軸109とする他の板状部材98bとともに開口部95を閉鎖しても良い。図21Aおよび図21Bにおいて、上段は、インキュベータ92の正面図を示し、下段は、インキュベータ92の側面図を示している。
 上記は遮蔽手段の一例であり、培養ユニット91がインキュベータ92外に出された状態で開口部95を閉鎖し、インキュベータ92の内部環境を維持することができる構成であれば良い。
 駆動手段93は、インキュベータ92を垂直方向pに移動するための手段であり、各培養ユニット91に対応した各開口部95を作業台94に高さに移動させるための手段である。作業者が手動で駆動手段93を操作しても良く、作業者がスイッチ等をON/OFFして電動で駆動手段93を操作しても良い。図22Aは、作業者が手動で操作する例であり、作業者が回転部101を回転させることに連動してインキュベータ92を上下させる態様である。図22Bは、電動で操作する例であり、作業者がペダル102を踏むことに連動してインキュベータ92を上下させる態様である。
 インキュベータ92の各開口部95が作業台94の高さに達したときに、インキュベータ92を位置決めすることができる機構が設けられていることが好ましい。
 作業者が手動で操作する場合は、例えば、各開口部95が作業台94の高さになる度に、駆動手段93を操作している作業者の手に抵抗がかかる構成となっていても良い(クリックの感覚が手に伝わる等)。
 電動で操作する場合は、例えば、作業者がスイッチをONにすると最も近い開口部95が作業台94の高さに位置決めされて停止し、再度スイッチをONにすると次の開口部95が作業台94の高さに位置決めされ、作業者がスイッチをONにする毎に開口部95が順番に作業台94の高さに位置決めされる構成となっていても良い。各開口部95に対応する複数のスイッチが設けられ、所望の開口部95に対応するスイッチをONにすると対応する開口部95が作業台94の高さに位置決めされる構成でも良い。
 図23Aから図23Cに示すように、作業台94には、培養ユニット91を誘導するレール103が設置されていても良い。
 または、図24Aから図24Cに示すように、培養ユニット91は、底面に、培養ユニット91を水平方向のいずれの方向にも自由に移動できるようにキャスタ104を備えていても良い。
 図25Aに示すように、インキュベータ92は、培養ユニット91を搭載するための棚105を備えていても良いし、図25Bに示すように、培養ユニット91を搭載するためのレール106を備えていても良い
 この場合、棚105またはレール106の培養ユニット91と接する面に、培養ユニット91の移動を円滑にする円滑手段を備えていても良い。円滑手段としては、複数の円柱部材や球状部材を培養ユニット91の移動方向に平行に並べた手段を挙げることができる。このことにより、培養ユニット91の移動にともない円柱部材や球状部材が回転して、培養ユニット91を円滑に移動させることができる。
 本実施形態においては、駆動手段によりインキュベータを作業台に対して垂直方向に移動させる態様を示したが、インキュベータと作業台が相対的に移動すれば良く、駆動手段が作業台を垂直方向に移動させても良いし、駆動手段がインキュベータと作業台を共に移動させても良い。
 上記各実施形態において、インキュベータは、図26に示すように、各培養ユニットを出し入れする開口部を開閉する遮蔽手段の外側に、各培養ユニットの開口部全体を覆うことができる外扉82を備えていても良い。
 上記各実施形態において、インキュベータに対する培養ユニットの出し入れ操作は、作業者が手動でおこなっても良いし、図示しない駆動手段により電動で行っても良い。
(第6実施形態)
 本発明の第6実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。
 本実施形態に係る細胞培養装置600は、図27に示される構成の装置であり、培養容器(細胞培養容器)203を収容する培養ユニット201と、ガスの組成や温度などを調整するガス調整手段206と、ガス調整手段206と培養ユニット201との間でガスを流動させるガス流動手段205と、培養ユニット201を収納可能なインキュベータ202と、作業空間204とを備えている。
 培養ユニット201は、図28に示すように、内部に培養容器203を収納可能な筺体構造をしている。培養ユニット201は、培養容器203を出し入れすることができる開口部201cと、該開口部201cを開閉するためのシャッタ201dとを備えている。また、培養ユニット201は、内部へガスを供給するための供給口201aおよび外部へガスを排出するための排出口201bを備えている。図28の左図、中図および右図はそれぞれ、培養ユニット201の背面図、側面図および正面図である。
 培養ユニット201をインキュベータ202内に設置しているときは、開口部201cが開いた状態にして培養ユニット201内部を開放空間にすることで、培養ユニット201内部をインキュベータ202内と同じ環境にすることができる。
 培養ユニット201をインキュベータ202外に取り出すときは、シャッタ201dにより開口部201cを閉じた状態にして培養ユニット201内部を閉鎖空間にすることで、培養ユニット201内部をインキュベータ202内と同じ環境を維持することができる。
 インキュベータ202から取り出された培養ユニット201は、作業空間204内に配置され、作業者により各種作業が行われる。作業空間204としては、アイソレータ、クリーンベンチ等を例示することができる。
 ガス流動手段205は、本体205aと、ガス供給管205bと、ガス回収管205cとを備えている。
 ガス供給管205bは、培養ユニット201の供給口201aに接続可能な構成をしており、ガス調整手段206によって調整したガスを本体205aを介して培養ユニット201に供給することができる。
 ガス回収管205cは、培養ユニット201の排出口201bに接続可能な構成をしており、培養ユニット201内のガスを本体205aを介してガス調整手段206に送ることができる。
 本体205aは、培養ユニット201とガス調整手段206との間でガスが流動するようにガスの流れを生じさせる手段である。本体205aは、例えば、ガス供給管205bにガスを排出するガス排出手段、または、ガス回収管205cからガスを吸引するガス吸引手段を備えていても良く、ガス排出手段およびガス吸引手段を両方備えていても良い。
 ガス調整手段206は、ガスの組成や温度などを調整する手段であり、図29に示すように、ガス混合手段206aと、温度制御手段206bとを備えている。
 ガス混合手段206aは、管状部材を介してCOボンベ205f、Oボンベ205d、Nボンベ205eと接続しており、各ボンベからのガスを適量混合することで所望の組成(例えば5%CO)のガスを調整する手段である。
 温度制御手段206bは、ガス混合手段206aが混合したガスを所望の温度(例えば37℃)に調整することができる。
 このようにして調整されたガスは、ガス流動手段205によりガス供給管205bを介して培養ユニット201内に供給される。
 この工程を繰り返すことにより培養ユニット201とガス調整手段206との間でガスを循環させ、培養ユニット201内のガス環境を一定に保つことができる。
 ここで、ガス調整手段206の温度制御手段206bは、温度センサと、加熱器と、制御手段とを備え、温度センサで温度を検知しながら、制御手段が加熱器をコントロールしても良い。さらに温度制御手段206bは冷却器を備えていても良く、制御手段が加熱器と冷却器をコントロールすることで、より迅速に所望の温度に制御することが可能となる。温度の制御方法はPID制御でも良い。
 ガス調整手段206のガス混合手段206aは、ガス流量計と、制御手段とを備え、ガス流量計で各ガスの流量を検知しながら、制御手段がガスの混合比をコントロールしても良い。または、ガス混合手段206aは、ガスシリンダを用いて制御手段がガスの混合比をコントロールしても良い。ガス組成の制御方法はPID制御でも良い。
 ガス調整手段206は、ガスの湿度を調整する手段(湿度制御手段)をさらに備えていても良い。湿度制御手段は、湿度センサと、加湿器と、制御手段とを備え、湿度センサで湿度を検知しながら、制御手段が加湿器をコントロールしても良い。
 次に、本実施形態に係る細胞培養装置600を用いて細胞を培養する手順について一例を説明する。
 作業者は、インキュベータ202内に設置された培養ユニット201の開口部201cをシャッタ201dにより閉じた状態にした後、培養ユニット201を作業空間204に取り出す。
 次に、作業者は、作業空間204で、培養ユニット201の供給口201aおよび排出口201bをそれぞれ、ガス供給管205bおよびガス回収管205cに接続する。ここで、供給口201aおよび排出口201bは、ガス供給管205bおよびガス回収管205cに接続していない状態では閉じた状態であるが、接続すると開口する構造となっていることが好ましい。このことにより、培養ユニット201とガス調整手段206との間でガスが循環され、培養ユニット201内の環境を所望の状態に保つことが可能となる。
 この状態で作業者は、所望の培養容器203を所望のタイミングで培養ユニット201に対して出し入れして作業を行う。
 作業終了後、培養ユニット201の供給口201aおよび排出口201bからそれぞれ、ガス供給管205bおよびガス回収管205cを取り外す。培養ユニット201をインキュベータ202内に収納し、培養ユニット201の開口部201cからシャッタ201dを退避させて培養ユニット201を開放空間とする。
 培養ユニット201における供給口201aおよび排出口201bの設置位置は任意であるが、互いに距離を隔てて設置すればガスの交換効率が良くなる。
 ガス調整手段206は、COボンベ205fのみを備え、O濃度およびN濃度は調整しない態様でも良い。
 また、ガス調整手段206は、ガス組成の調整を行わず、ガスの温度のみを調整する態様でも良い。
 本実施形態において、ガス調整手段206が、インキュベータ202内の環境と同じガス環境(例えば、温度37℃、CO濃度5%、湿度95%)に培養ユニット201の内部環境を調整する場合、インキュベータ202がなくても良い。この場合、培養ユニット201の供給口201aおよび排出口201bをそれぞれ、ガス供給管205bおよびガス回収管205cに接続し続けておけば良い。
 本実施形態の培養ユニット201として、第1実施形態から第5実施形態の培養ユニットを適用することができる。この際、各培養ユニットは、内部へガスを供給するための供給口および外部へガスを排出するための排出口を備えた閉鎖空間を形成し、シャッタにより内部を開放空間または閉鎖空間にすることができる構成であれば良い。
 ここで、供給口および排出口は、ガス供給管およびガス回収管に接続していない状態では閉じた状態であるが、接続すると開口する構造となっていることが好ましい。
 本実施形態においては、ガス流動手段205により培養ユニット201とガス調整手段206との間でガスを循環させる態様を示したが、ガス流動手段205がガス回収管205cを備えず、ガス調整手段206が調整したガスを培養ユニット201に供給するだけでも良い。この場合、培養ユニット201内の余分なガスは、例えば、培養ユニット201の排出口201bから排出されれば良い。
(第7実施形態)
 本発明の第7実施形態に係る細胞培養システムについて図面を参照して以下に説明する。
 本実施形態に係る細胞培養装置700は、図30に示される構成の装置であり、第6実施形態のガス調整手段206およびガス流動手段205に代え、ガス流動手段207を備えている細胞培養装置である。その他の構成は、第6実施形態と同様である。
 ガス流動手段207は、インキュベータ202内の空間と連通しており、インキュベータ202内のガスを培養ユニット201との間で流動させる手段である。ガス流動手段207は、本体207aと、ガス供給管207bと、ガス回収管207cとを備えている。
 ガス供給管207bは、培養ユニット201の供給口201aに接続可能な構成をしており、インキュベータ202内のガスを本体207aを介して培養ユニット201に供給することができる。
 ガス回収管207cは、培養ユニット201の排出口201bに接続可能な構成をしており、培養ユニット201内のガスを本体207aを介してインキュベータ202に送ることができる。
 本体207aは、培養ユニット201とインキュベータ202との間でガスが流動するようにガスの流れを生じさせる手段である。本体207aは、例えば、ガス供給管207bにガスを排出するガス排出手段、または、ガス回収管207cからガスを吸引するガス吸引手段を備えていても良く、ガス排出手段およびガス吸引手段を両方備えていても良い。
 本実施形態に係る細胞培養装置700を用いて細胞を培養する手順については、第6実施形態と同様である。
 本実施形態の培養ユニット201として、第1実施形態から第5実施形態の培養ユニットを適用することができる。この際、各培養ユニットは、内部へガスを供給するための供給口および外部へガスを排出するための排出口を備えた閉鎖空間を形成し、シャッタにより内部を開放空間または閉鎖空間にすることができる構成であれば良い。
 ここで、供給口および排出口は、ガス供給管およびガス回収管に接続していない状態では閉じた状態であるが、接続すると開口する構造となっていることが好ましい。
 本実施形態においては、ガス流動手段207により培養ユニット201とインキュベータ202との間でガスを循環させる態様を示したが、ガス流動手段207がガス回収管207cを備えず、インキュベータ202内のガスを培養ユニット201に供給するだけでも良い。この場合、培養ユニット201内の余分なガスは、例えば、培養ユニット201の排出口201bから排出されれば良い。
 本発明における制御手段としては、パーソナルコンピュータ(PC)を例示することができる。例えば、PCが、CPUとメモリとを有し、メモリに記憶された制御プログラムをCPUが実行することで制御手段としての機能を実現しても良い。
1、71、91、201 培養ユニット
2、72、92、202 インキュベータ
3、203 培養容器(細胞培養容器)
4 棚部
5、73、95 開口部
6、10、93 駆動手段
7、11、94 作業台
8、12、101回転部
9、13、102 ペダル
21、96 スライダ
22、31、35、75、77、98a、98b 板状部材
33、78、99 封鎖部材
41 レール部材
42 係止部材
43 円柱部材
52、53 キャスタ手段
54 格納庫
55 車輪状部材
56 支持部材
57 ストッパ
58 支点
59 固定解除手段
61 溶液供給手段
62 溶液排出手段
63 溶液保持容器
64、67 管状部材
65 供給速度制御手段
66 廃液保持容器
68 排出速度制御手段
82 外扉
103 レール
104 キャスタ
105 棚
106 レール
204 作業空間
205、207 ガス流動手段
205a、207a 本体
205b、207b ガス供給管
205c、207c ガス回収管
206a ガス混合手段
206b 温度制御手段

Claims (12)

  1.  培養容器を搭載する培養ユニットと、
     複数の前記培養ユニットを内部に配置し、内部を細胞培養に適した環境に維持できるインキュベータとを備え、
     該インキュベータは、
     前記複数の培養ユニットの各々に対して設けられ、前記培養ユニット毎に出し入れ可能な開口部と、
     該開口部に設けられ、前記培養ユニットが前記インキュベータから取り出されたときに前記インキュベータの内部環境を外部から遮蔽する遮蔽手段とを備える細胞培養装置。
  2.  前記インキュベータを移動させる駆動手段をさらに備える請求項1に記載の細胞培養装置。
  3.  前記駆動手段は、前記インキュベータ内部で前記複数の培養ユニットが配列されている方向に、前記インキュベータを移動させることができる請求項2に記載の細胞培養装置。
  4.  前記培養ユニットは、キャスタを備える請求項1から3のいずれかに記載の細胞培養装置。
  5.  前記培養ユニットは、前記培養容器に培地等の溶液を供給する溶液供給手段と、前記培養容器から廃液を排出させる溶液排出手段とを備える請求項1から4いずれかに記載の細胞培養装置。
  6.  前記インキュベータは、前記複数の培養ユニットを水平方向に内部に配列する請求項1から4のいずれかに記載の細胞培養装置。
  7.  前記インキュベータは、前記複数の培養ユニットを垂直方向に内部に配列する請求項1から4のいずれかに記載の細胞培養装置。
  8.  前記インキュベータは、前記複数の培養ユニットを水平方向および垂直方向に内部に配列する請求項1から4のいずれかに記載の細胞培養装置。
  9.  培養容器を搭載する培養ユニットと、
     該培養ユニットを内部に配置し、内部を細胞培養に適した環境に維持できるインキュベータと、
     前記インキュベータから取り出した前記培養ユニットを配置する作業空間と、
     ガス組成、ガス温度、ガス湿度のうちの少なくとも1つを調整するガス調整手段と、
     前記作業空間に配置された前記培養ユニットと前記ガス調整手段との間でガスを流動させるガス流動手段とを備える細胞培養装置。
  10.  前記インキュベータが、前記ガス調整手段として機能する請求項9に記載の細胞培養装置。
  11.  前記培養ユニットは、前記インキュベータの内部に配置されているときは前記培養ユニット内に開放空間を形成し、前記作業空間の内部に配置されているときは前記培養ユニット内に閉鎖空間を形成する請求項9または10に記載の細胞培養装置。
  12.  前記ガス流動手段が、前記作業空間に配置された前記培養ユニットと前記ガス調整手段との間でガスを循環させる請求項9から11のいずれかに記載の細胞培養装置。
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