WO2014094379A1

WO2014094379A1 - 一种具有祛皱功效的蜂毒组合物

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Publication number: WO2014094379A1
Application number: PCT/CN2013/070958
Authority: WO
Inventors: 陈华; 孙恢礼; 张偲; 潘剑宇; 蔡冰娜; 孙小钰
Original assignee: 中国科学院南海海洋研究所
Priority date: 2012-12-20
Filing date: 2013-01-25
Publication date: 2014-06-26
Also published as: CN102973483B; CN102973483A

Abstract

一种具有祛皱功效的蜂毒组合物，它包括祛皱化妆品基质成分，还含有蜂毒。

Description

一种具有祛皱功效的蜂毒组合物

技术领域：

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种具有祛皱功效的蜂毒组合物。背景技术：

衰老是生命不可抗拒的自然过程，受遗传、环境、社会心理等多种因素的影响，皱纹则是机体衰老在皮肤上的外在表现，与皮肤松弛、紫外线照射、重力、面部表情肌反复收縮及肌肉本身张力等因素有关。一般而言，从 25岁起前额和下睑出现最初的皱纹， 30岁从眼外眦向外出现鱼尾状细皱纹， 35岁耳前出现纵向皱纹， 40岁耳前皱纹增多，颈前自颌向下出现纵皱纹。 45岁下睑皱纹更明显，唇红开始变薄。 50 岁面部皱纹加深，手背皱纹增多，鼻梁、耳前、颌部也出现皱纹，颈前明显纵皱褶，如鸡颈状。 55岁开始出现老年斑， 60岁后口周见放射状皱纹， 75岁唇红变得非常薄，手背皮肤如薄皱纹纸样。因此，从 25岁起，皱纹几乎与人形影不离。

皱纹不仅昭示着难以磨灭的岁月痕迹，而且严重影响皮肤美观甚至人的社交和心理，容易引起焦虑、抑郁、自卑和恐慌等负面情绪，从而影响生活质量，是爱美人士的大敌。为减少肌龄、祛除皱纹、永葆青春，使用具有显著祛皱功效的化妆品必不可少。然而，目前市面上祛皱化妆品琳琅满目，广告也十分诱人，效果却差强人意。而一些祛皱效果非常显著的化妆品，多含重金属、激素等违禁成分，存在一定安全隐患。而相对较为安全的产品也只能作用于皮肤表层，并不能深入真皮层甚至肌肉组织发挥作用，祛皱效果并不明显。这就好比修路，仅让路面平整，路基却并未加固。因此，如能开发出同时作用于表皮、真皮和肌肉组织深层祛皱化妆品，必将能给爱美人士带来福音。发明内容：

本发明的目的在于针对现有祛皱化妆品存在潜在安全隐患、仅能作用于皮肤表层，不能深入真皮层甚至肌肉组织发挥作用、祛皱功效不显著等问题，提供一种更安全、能同时作用于表皮、真皮和肌肉组织的深层祛皱，祛皱效果显著的具有祛皱功效的蜂毒组合物。本发明的具有祛皱功效的蜂毒组合物，包括祛皱化妆品基质成份，其特征在于，还含有蜂毒。

优选，所述的蜂毒是通过以下方法制备的，取粗蜂毒用水溶解，然后再通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

该蜂毒纯化方法在简化了蜂毒纯化工艺，节省了成本同时，还可以对具有显著祛皱作用的蜂毒肽、蜂毒明肽等活性物质有效富集和浓縮，去除了透明质酸酶、磷脂酶 A₂等易引起皮肤过敏反应、发炎及疼痛的物质，在保证安全性、无皮肤刺激和过敏的同时，使祛皱功效显著增强。该纯化方法解决了现有技术中蜂毒中具有祛皱功效的活性物质尚未有效富集等问题，填补了蜂毒在祛皱化妆品中应用的空白，并充分发挥其祛皱功效。

优选，所述的蜂毒，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.00001%〜2%。

所述的蜂毒是优选是通过以下方法制备的：取粗蜂毒加 10-30倍体积水充分溶解， 5000-lOOOOg离心 10-30min，上清液通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

为增强保湿、增加皮肤弹性、深层祛皱等功效，本发明的具有祛皱功效的蜂毒组合物优选还含有透明质酸，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.01%-2%。进一步优选还含有海洋动物胶原蛋白肽，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.01%-5%。

所述的海洋动物胶原蛋白肽是指鳕鱼皮胶原蛋白肽、鲨鱼皮胶原蛋白肽、海参胶原蛋白肽、鱿鱼皮胶原蛋白肽中的一种或几种的组合。其可市购，也可根据现有方法制备。

本发明所述的透明质酸为市售。

所述的粗蜂毒可以为胡蜂粗蜂毒和 /或蜜蜂粗蜂毒，可以自己用蜂毒采集器采集，也可以从市购。

本发明的具有祛皱功效的蜂毒组合物是通过以下方法制备的，将蜂毒以粉末状形式或预先配制成质量分数为 10%-50%水溶液，与其它成分均质或混合而成，可以根据所配制的蜂毒组合物种类按照常规的工艺配制，可制成膏霜、乳液、水剂、凝胶、啫喱、气雾剂或面膜等祛皱化妆品。

本发明的具有祛皱功效的蜂毒组合物稳定性好、涂布均匀、铺展性良好。本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物可作为普通化妆品或具有祛皱作用的功能化妆品。如果用于祛除皮肤皱纹，则可祛除脸部、眼周、颈脖、躯干和四肢的皱纹。

通过分析皮肤生理结构及皱纹形成原因，本发明人发现皮肤中基质形成水合网架结构决定着皮肤的结构形态和物理性质，即皮肤紧致度、弹性、水润度等视觉容貌。如果基质组成和结构处于健康状态，则皮肤表现为充盈、紧致、水润，富有弹性。因此，抗皱紧致皮肤的主要途径就是维持和保护皮肤基质组成和结构以及皮下肌肉组织。

本发明的解决方案正是基于发明人对皱纹的各种影响因素和形成机理，以及对各功能活性物质美容护肤功效的了解，结合现代化妆品和药理学的研究成就，从众多活性物质中优选出具有显著祛除皱纹功效的蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽，并进行科学组方和协同复配，优选出具有显著祛皱功效的化妆品组合物的配方以及工艺。

本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物中的蜂毒，其含有丰富的蜂毒肽、蜂毒明肽、儿茶酚胺、游离氨基酸和甘油等活性成分。其分子量小，免疫原性低，不易产生过敏反应。

蜂毒肽是向神经性的，能选择性地与周围运动神经末梢突触前膜发生作用，抑制突触前膜对神经递质乙酰胆碱的释放，使神经突触内兴奋传导阻滞，从而引起所支配肌肉松弛性麻痹，并抑制周围神经冲动传导。鱼尾纹、额纹、眉间纹等多因面部表情肌长期收縮牵拉皮肤而成，蜂毒肽与支配面部表情肌的面神经发生作用后，面部表情肌松弛性麻痹、肌张力减弱，皱纹明显淡化或消失。蜂毒肽还具有明显的抗氧化、防紫外辐射等作用，能消除皮肤炎症、抑制肿胀，延缓肌肤衰老。

蜂毒明肽能增加毛细血管通透性，改善微循环，促进表皮细胞新陈代谢，加速新老皮肤细胞更替，使皮肤饱满，富有弹性。它还能营养修复肌营养不良细胞，使皮肤细胞重新恢复活力。儿茶酚胺对因光照、粉刺 /痤疮等引起的受损皮肤具有消炎作用，以利于伤口愈合，减小疤痕。

游离氨基酸中的丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸和丙氨酸是角质层中天然的保湿因子，蛋氨酸和半胱氨酸是角蛋白重要组成成分，甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸是胶原蛋白重要组成成分。精氨酸能舒张血管，促进皮肤血液流动和新陈代谢。谷氨酸能促进细胞增殖和分化，促进胶原蛋白生成和伤口愈合。鸟氨酸能改善血液流动，促进细胞增殖和皮肤再生。蛋氨酸和组氨酸有抗氧化活性，谷氨酸和半胱氨酸不仅有抗氧化活性，还有抑制酪氨酸酶活性，能保护皮肤免受紫外线损伤，并抑制黑色素生成。甘油能吸收空气中的水分，防止皮肤水分蒸发，从而达到保湿效果，辅助延缓皮肤衰老。

本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物中的透明质酸又称玻璃酸，化妆品市场上俗称玻尿酸，是人表皮及真皮的主要基质成分之一。它是自然界中目前发现的保湿性最好的物质，被称为最理想的天然保湿因子，可改善因干燥而生成的皱纹。外源性添加透明质酸可对皮肤内源性透明质酸进行补充，小分子量透明质酸能渗透到皮肤真皮层，维持皮肤水分，促进表皮细胞增殖、分化和伤口愈合。它还能在皮肤表面形成一层薄膜，使皮肤柔嫩、光滑，增加弹性、延缓衰老。透明质酸对皮肤角质层具有高浸润性和保湿性，还能促进蜂毒、海洋动物胶原蛋白肽等活性成分更易被皮肤吸收，从而增强祛皱功效。

本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物中的海洋动物胶原蛋白肽与皮肤角质层结构相似，因此它与皮肤具有良好的相容性、亲和力和渗透性。它能渗入皮肤表皮层，发挥天然保湿因子的作用，还能填充在皮肤基质之间，在皮肤表面形成一层极薄的膜层，以增加皮肤张力，舒展细小皱纹。由于含有丰富的羟基、氨基等亲水基团，海洋动物胶原蛋白肽还具有良好的保湿性，能促进皮肤成纤维细胞胶原和透明质酸的生成，促进新陈代谢、修复皮肤组织，从而有效预防并减少皮肤皱纹或松弛，使皮肤柔润光滑，恢复弹性。

本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物祛除皱纹效果卓著，其中蜂毒与透明质酸、海洋动物胶原蛋白肽具有良好的协同增效作用，可使保湿、改善皮肤干燥和松弛、增加皮肤弹性，深层祛皱等效果显著增强。本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物功效成分明确，质量稳定，品种多样，可满足不同性别、年龄、肤质人群的需求。

一般而言，本发明中只含有蜂毒的具有祛皱功效的蜂毒组合物对祛除因面部表情肌收縮引起的皱纹尤为有效，如抬头纹、鼻梁纹、眉间川字纹、鱼尾纹、颊部皱纹等；本发明含有蜂毒和透明质酸的具有祛皱功效的蜂毒组合物对祛除因缺水或习惯性表情引起的皱纹尤为有效，如干纹、细纹、眼袋纹等；本发明含有蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽的具有祛皱功效的蜂毒组合物对因日晒、缺水、习惯性表情、经常化妆甚至是过度减肥导致的皮下脂肪减少而引起的皱纹尤为有效。

需要说明的是，由于皱纹是最难对付的皮肤问题之一，具有祛皱功效的蜂毒组合物同样也可作为普通化妆品使用，以延缓皱纹生成，并祛除已有干纹、细纹。也就是说，本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物既可用作普通化妆品，又可用作具有祛皱作用的功能化妆品。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

( 1 ) 针对皮肤特殊的生理学构造及其对化妆品所用成分的敏感性，本发明中的具有祛皱功效的蜂毒组合物优选了纯天然的蜂毒为主要原料。虽然目前添加蜂毒的化妆品非常罕见，但蜂毒早已被收录于《国际化妆品原料标准中文名称目录（2010版）》中，这说明将蜂毒应用于化妆品是安全的、可行的。此外，在本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物中，所使用的蜂毒是经过纯化处理的，将粗蜂毒中易引起皮肤过敏、发炎以及疼痛的物质有效去除，而将蜂毒肽、蜂毒明肽等成分高度富集，从而发挥出更显著的祛皱功效。同时，本发明中的蜂毒能迅速被皮肤吸收，不引起皮肤过敏，也不会给皮肤带来任何负担。

(2) 本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物从补水保湿、促进微循环、保护皮肤免受紫外线损伤、清除自由基、促进胶原蛋白和弹性纤维合成、消除炎症等多方面发挥作用，还能与支配面部表情肌的面神经发生作用，使面部表情肌松弛性麻痹、肌张力减弱，从而祛皱皱纹。本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物能同时作用于表皮、真皮和肌肉组织，重织肌肤弹力结构，减轻或消除已形成的皱纹或褶印，对动力性和混合性皱纹起到跟拉皮手术相当的祛皱效果，而且效果持久。

(3 ) 本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物，其品种多样，适用于不同性别、年龄和肤质的人群，尤其适用于长期因日晒、肌肤缺水、习惯性表情、经常化妆甚至是过度减肥导致的皮下脂肪减少而备受皱纹困扰的爱美人士。本发明具有祛皱功效的蜂毒组合物可用作祛除面部和颈部皱纹的普通化妆品或功能化妆品，还可用作祛除其它身体部位皱纹的普通化妆品或功能化妆品。

(4) 本发明利用了蜂毒与透明质酸、海洋动物胶原蛋白肽之间的稳定化协同增效作用，使其祛除皮肤皱纹的效果显著增强。具体实施方式

以下对本发明作进一步说明，但本发明的实施方式不局限于以下的实施例介绍，凡依照本发明的方法所作的等同的变化或变通都应视为本发明保护的范畴。

以下所用原料，除特殊指明外，均为市售。

实施例 1

采用蜂毒采集器采集胡蜂粗蜂毒，加 25体积水充分溶解， 8000g离心 15min，上清液通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜超滤，滤液冷冻干燥制得蜂毒。

本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物，按总质量百分数 100%计，由以下组份组成：

A相：卡波姆 0.2%、甘油 4%、丙二醇 3%、去离子水余量。

B相：鲸蜡硬脂醇醚 -2 1.5%、鲸蜡硬脂醇醚 -21 2%、霍霍巴油 3%、鲸蜡硬脂醇 2%、单硬脂酸甘油酯 1%、辛酸 /癸酸甘油三酸酯 4%、棕榈酸乙基己酯 3%、聚二甲基硅氧烷 2%、十四酸异丙酯 3%、羟苯乙酯 0.1%。

C相：蜂毒 0.1% (以去离子水预先配制成质量分数 50%蜂毒溶液的形式添加）。

D相：氮酮/ PEG-40氢化蓖麻油 1%、三乙醇胺 0.2%、苯氧乙醇 /羟苯甲酯 / 羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%。

工艺过程：分别加热 A相和 B相到 80°C，搅拌下将 B相加入到 A相中。搅拌冷却至 45 °C，将 C相加入到 A、 B相的混合物中，搅拌混合 lOmin后，加入 D相，混合均质制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱膏霜。

本实施方式配制的膏霜有光泽、质地细腻、分布均匀、油水相不分离。涂在脸上，易吸收，持续使用一个月后，抬头纹、鼻梁纹和颊部皱纹大部分消失或变浅。实施例 2

采用蜂毒采集器采集蜜蜂粗蜂毒，加 10 倍体积水充分溶解， 5000g 离心 30min, 上清液通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物，按总质量百分数 100%计，由以下组份组成：

A相：卡波姆 0.1%、甘油 5%、丙二醇 3%、去离子水余量。

B相：鲸蜡硬脂醇醚 -2 1.2%、鲸蜡硬脂醇醚 -21 1.5%、氢化聚异丁烯 3%、辛酸 /癸酸甘油三酸酯 3%、棕榈酸乙基己酯 3%、聚二甲基硅氧烷 2%、羟苯乙酯 0.1%。

C相：蜂毒 2% (以粉末的形式添加）。

D相：氮酮/ PEG-40氢化蓖麻油 1%、三乙醇胺 0.1%、苯氧乙醇 /羟苯甲酯 / 羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%。

工艺过程：分别加热 A相和 B相到 80°C，搅拌下缓慢将 B相加入到 A相中。搅拌冷却至 55 °C，将 C相加入到 A、 B相的混合物中，搅拌混合 lOmin后，加入 D相，混合均质制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱乳液。

本实施方式配制的乳液手感细腻、涂布均匀、油水不分离、易吸收。涂在颈脖处，持续使用一个月后，颈部皱纹明显变浅。实施例 3

从武汉益民蜂产品有限公司购买胡蜂粗蜂毒，加 30 倍体积水充分溶解， lOOOOg离心 10min，上清液通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

A 相：汉生胶 0.4%、丙烯酸酯 /C_1Q__3Q烷基丙烯酸酯交联聚合物 0.6%、 EDTA-2Na0.1% 甘油 5%、丙二醇 5%、丁二醇 5%、去离子水余量。

B相：蜂毒 0.00001% (以蒸馏水预先配制成质量分数 10%蜂毒溶液的形式添加）、去离子水 20%。

C相： PEG-40氢化蓖麻油酯 1%、三乙醇胺 0.2%、香精 0.1%、苯氧乙醇 / 羟苯甲酯 /羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%。

工艺过程：混合 A相组分并加热到 80°C搅拌均匀，冷却至 40°C时加入预先混合均匀的 B相，搅拌 lOmin至透明，加入 C相搅拌混匀后制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱凝胶。

本实施方式配制的凝胶透明、组织细腻、无结块，在 -10°C和 40°C条件下，无膏体分离。涂在眼周皮肤上，极易吸收，持续使用一个月，细纹消失，鱼尾纹明显变浅。实施例 4

从福建省神峰科技开发有限公司购买的蜜蜂粗蜂毒，加 15倍体积水充分溶解， 6000g离心 20min，上清液通过截留分子量 lOOOODa的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

A相：汉生胶 0.2%、丙烯酸酯 /C_1Q__3Q烷基丙烯酸酯交联聚合物 0.6%、甘油 5%、丙二醇 3%、去离子水余量。

B相：蜂毒 0.01% (以去离子水预先配制成质量分数 50%蜂毒溶液的形式添加）、从柳州市柳化集团大力透明质酸有限公司购买的透明质酸 2%、去离子水 30%。

C相：氮酮/ PEG-40氢化蓖麻油 1%、三乙醇胺 0.3%、苯氧乙醇 /羟苯甲酯 / 羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%。

工艺过程：混合 A相组分并加热到 80°C搅拌均匀，冷却至 45 °C时加入预先混合均匀的 B相，搅拌均质 3min，室温下按顺序加入 C相各组分，搅拌均匀制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱啫喱。

本实施方式中配制的啫喱，质地轻盈，感觉凉爽。涂在眼周和耳前皮肤上，迅速吸收，持续使用一个月，眼周和耳前皮肤处的干纹和小细纹消失，眼袋纹明显变浅。实施例 5

按照实施例 1和 2制备蜂毒的方法分别制得胡蜂蜂毒和蜜蜂蜂毒。

A相：甘油 5%、丙二醇 3%、丁二醇 2%、去离子水余量。

B相：胡蜂蜂毒 1%、蜜蜂蜂毒 1% (蜂毒均以粉末的形式添加）、从江苏海华生物科技有限公司购买的透明质酸 0.5%、去离子水 38%。

C相：氮酮/ PEG-40氢化蓖麻油 1%、三乙醇胺 0.2%、苯氧乙醇 /羟苯甲酯 / 羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%。

工艺过程： 35 °C，先混合 A相，再将预先混匀的 B组加入 A相中，搅拌混合均匀后加入 C相组分，混匀制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱水剂。

本实施方式配制的水剂无沉淀、透明度高、易吸收、无刺激。涂抹在脸部、嘴唇或颈脖，持续使用一个月，嘴唇和颈脖处皮肤纹理变浅，脸部干纹消失，表

实施例 6

按照实施例 2制备蜂毒的方法，制得蜜蜂蜂毒。

蜂毒 0.00001% (以粉末的形式添加）、透明质酸 0.01%、浓度为 75%的乙醇 9%、香水 1%、防腐剂 0.1%、去离子水余量。 30°C，搅拌均匀，制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱气雾剂。

本实施方式配制的气雾剂稳定性好、无沉淀、形成喷雾的水珠细腻。喷于躯干和四肢，持续使用一个月，皮肤变得水润，干纹和细纹消失。实施例 7

按照实施例 3制备蜂毒的方法，制得胡蜂蜂毒。

A相：卡波姆 0.1%、甘油 5%、丙二醇 3%、去离子水余量。

C相：胡蜂蜂毒 0.2%、透明质酸 1%、从青岛奥海通微生态科技有限公司购买的鳕鱼皮胶原蛋白肽 0.5%。

工艺过程：分别加热 A相和 B相到 80°C，搅拌下缓慢将 B相加入到 A相中。搅拌冷却至 45 °C，将 C相加入到 A、 B相的混合物中，搅拌混合 lOmin后，加入 D相，混合均质制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱乳液。

本实施方式配制的乳液手感细腻、涂布均匀、油水不分离。涂在手背处，极易吸收，持续使用一个月后，手背皮肤变得光滑、有弹性，皱纹明显变浅。实施例 8

B相：胡蜂蜂毒 1%、蜜蜂蜂毒 1%、透明质酸 0.01%、从青岛未来生物科技有限公司购买的鲨鱼皮胶原蛋白肽 0.01%、去离子水 26%。

工艺过程：混合 A相组分并加热到 80°C搅拌均匀，冷却至 45 °C时加入预先混合均匀的 B相，搅拌 lOmin至透明，加入 C相搅拌混匀后制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱凝胶。

本实施方式配制的凝胶透明、组织细腻、无结块，在 -10°C和 40°C条件下，无膏体分离。涂在眼周和颈脖处，极易吸收，持续使用一个月，眼袋纹消失，鱼尾纹和颈部皱纹明显变浅。实施例 9

按照实施例 4制备蜂毒的方法，制得蜜蜂蜂毒。

A相：汉生胶 0.2%、丙烯酸酯 /C_1Q__3Q烷基丙烯酸酯交联聚合物 0.6%、甘油

5%、丙二醇 3%、去离子水余量。

B相：蜜蜂蜂毒 0.00001%、透明质酸 2%、鱿鱼皮胶原蛋白肽 1.5%、海参胶原蛋白肽 1.5%、去离子水 34.8%。

工艺过程：混合 A相组分并加热到 80°C搅拌均匀，冷却至 45°C时加入预先混合均匀的 B相，搅拌均质 3min，室温下按顺序加入 C相各组分，搅拌均匀制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱啫喱。

本实施方式中配制的啫喱，质地轻盈，感觉凉爽。涂在腹部，能迅速吸收，持续使用一个月，因过度减肥或抽脂引起的腹部皱裳明显变浅，皮肤变得紧致有弹性。实施例 10

按照实施例 1制备蜂毒的方法，制得胡蜂蜂毒。

蜂毒 1%、透明质酸 2%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 5%、纳米珍珠粉 10%、杏仁粉 11%、蜂蜜 5%、防腐剂 1%、去离子水余量。常温下搅拌均匀，制得本实施例的具有祛皱功效的蜂毒组合物一含有蜂毒的祛皱面膜。

本实施方式配制的面膜可直接食用、口感佳，也可直接敷于面部，给皮肤补充养分和水分。持续使用一个月，皮肤变得光滑、柔润、有弹性，干纹、细纹和表情纹消失，深度皱纹明显变浅。对下列各种样品进行皮肤过敏、刺激性测试，并对清除自由基能力以及改善皮肤皱纹效果（连续使用 8周后）进行评价：质量分数 0.5%胡蜂粗蜂毒溶液、质量分数 0.5%蜜蜂粗蜂毒溶液、质量分数 0.5%胡蜂蜂毒溶液（按照实施例 1制备蜂毒的方法，制得胡蜂蜂毒）、质量分数 0.5%蜜蜂蜂毒溶液（按照实施例 2制备蜂毒的方法，制得蜜蜂蜂毒），溶剂均为去离子水。

皮肤过敏、刺激性测试以及改善皮肤皱纹效果评价实验对象：健康志愿者 20 名，男、女各 10名，年龄 38-41岁，无严重系统疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病、无活动性过敏性疾病，对护肤类化妆品无严重过敏史、近 1个月内未曾使用激素类药物或免疫抑制剂、未参加其他临床试验，未涂抹任何化妆品等外用制剂。随机分为 4组，每组 5人。

使用皮肤皱纹测试仪 SV600进行祛皱功效评价，先用硅模复制所测定部位的皮肤皱纹模型，计算机根据皮肤皱纹深度进行等级分类与统计处理。计算样品使用前、使用后的皮肤平均粗糙度 R3 ( BP: 对 5个相同长度、不同节段所测得的 R1值取算数平均数，其中 R1表示在一定长度内峰值与最低值之间的距离， μηι) ο 结果用 AR3 (即：使用样品前与使用样品后的皮肤平均粗糙度的差值）表示，数值越高，代表皱纹改善效果越好。

表 1 各实验样品皮肤过敏性测试及抗氧化、祛皱功效评价

对羟自由对 DPPH自皮肤平均粗糙样品过敏反应刺激性基清除率由基清除率度变化（AR3，

( % ) ( %) μιη) 轻微红肿，伴

0.5%胡

有轻微瘙痒，有刺痛，皮损处有热

蜂粗蜂 59.3±12.4 28.3±7.4 28.6±5.5 严重的会脱辣感

毒溶液

皮

0.5%胡无明显刺激，有 1人

无红肿和瘙

蜂蜂毒皮损处有极轻微感 86.6±8.9 45.6±11.6 44.3±7.8 痒

溶液觉

0.5%蜜轻微瘙痒，严

皮损处有刺痛和轻

蜂粗蜂重的皮肤发 56.6±11.5 20.1±6.5 26.4±6.7 微热辣感

毒溶液红

0.5%蜜

无红肿和瘙

蜂蜂毒无明显刺激 83.0±5.2 42.5±7.9 41.0±7.6 痒

溶液由于粗蜂毒溶液（即 0.5%胡蜂粗蜂毒溶液、 0.5%蜜蜂粗蜂毒溶液）中透明质酸酶、磷脂酶 A₂等易引起皮肤过敏、发炎或刺痛感的物质并未有效脱除，所以粗蜂毒溶液对皮肤有较明显刺激，易引发红肿、瘙痒等过敏症状。而纯化后的蜂毒，由于过敏原和引起皮肤炎症和疼痛的物质被有效祛除，所以纯化后的蜂毒溶液（即 0.5%胡蜂蜂毒溶液、 0.5%蜜蜂蜂毒溶液）对皮肤刺激性极小，也不引起皮肤过敏，可放心使用。

同时，由于蜂毒肽、蜂毒明肽等祛皱成分得到了有效浓縮和富集，经过纯化的蜂毒溶液（即 0.5%胡蜂蜂毒溶液、 0.5%蜜蜂蜂毒溶液）清除羟自由基和 DPPH 自由基能力，以及改善皮肤皱纹的能力，均显著优于粗蜂毒溶液（即 0.5%胡蜂粗蜂毒溶液、 0.5%蜜蜂粗蜂毒溶液）。

此外，与来源于蜜蜂的蜂毒溶液（即 0.5%蜜蜂粗蜂毒、 0.5%蜜蜂蜂毒溶液）相比，来源于胡蜂的蜂毒溶液（即 0.5%胡蜂粗蜂毒溶液、 0.5%胡蜂蜂毒溶液）抗氧化和祛除皱纹的能力更显著。因此，胡蜂蜂毒祛皱功效要略优于蜜蜂蜂毒。实施例 12

对下列各种样品改善皮肤皱纹等功效进行评价（连续使用 8周）。

本实施例的百分数指的是质量百分数。

本实施例的胡蜂蜂毒按照实施例 1制备蜂毒的方法制得，蜜蜂蜂毒按照实施例 2制备蜂毒的方法制得。

化妆品基质：汉生胶 0.2%、丙烯酸酯 /C_1Q__3Q烷基丙烯酸酯交联聚合物 0.6%、甘油 5%、丙二醇 3%、氮酮 /PEG-40氢化蓖麻油 1%、三乙醇胺 0.3%、苯氧乙醇 /羟苯甲酯 /羟苯丁酯 /羟苯乙酯 /羟苯丙酯 /羟苯异丁酯 0.1%、去离子水余量。

含粗蜂毒化妆品组合物（即样品 A，粗蜂毒含量为质量分数 2%):

A1 : 胡蜂粗蜂毒 2%、化妆品基质 98%;

A2: 蜜蜂粗蜂毒 2%、化妆品基质 98%;

A3：胡蜂粗蜂毒 0.5%、蜜蜂粗蜂毒 1.5%、化妆品基质 98%。

含蜂毒化妆品组合物（即样品 B，蜂毒含量为质量分数 2%):

B1 : 胡蜂蜂毒 2%、化妆品基质 98%;

B2: 蜜蜂蜂毒 2%、化妆品基质 98%;

B3 : 胡蜂蜂毒 0.5%、蜜蜂蜂毒 1.5%、化妆品基质 98%。含透明质酸化妆品组合物（即样品 C): 透明质酸 2%、化妆品基质 98%。含蜂毒和透明质酸化妆品组合物（即样品 D，蜂毒、透明质酸的总含量为质量分数 2%， D1-D4的区别在于蜂毒种类以及蜂毒与透明质酸含量的比例不同）：

D1 : 胡蜂蜂毒 0.00001%、透明质酸 1.99999%、化妆品基质 98%;

D2: 蜜蜂蜂毒 0.1%、透明质酸 1.9%、化妆品基质 98%;

D3 : 胡蜂蜂毒 0.5%、透明质酸 1.5%、化妆品基质 98%;

D4: 胡蜂蜂毒 0.99%、蜜蜂蜂毒 1%、透明质酸 0.01%、化妆品基质 98%。含透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物（即样品 E，透明质酸与海洋动物胶原蛋白肽的总含量为质量分数 2%， E1-E4的区别在于海洋动物胶原蛋白肽的种类以及海洋动物胶原蛋白肽与透明质酸含量的比例不同）：

E1 : 透明质酸 0.01%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 1.99%、化妆品基质 98%;

E2: 透明质酸 0.5%、鲨鱼皮胶原蛋白肽 1%、海参胶原蛋白肽 0.5%、化妆品基质 98%;

E3 : 透明质酸 1%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 0.5%、鲨鱼皮胶原蛋白肽 0.5%、化妆品基质 98%;

E4: 透明质酸 1.99%、鱿鱼皮胶原蛋白肽 0.01%、化妆品基质 98%;

含蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物（即样品 F，蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽的总含量为质量分数 2%):

F1 : 胡蜂蜂毒 0.00001%、透明质酸 0.99999%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 1%、化妆品基质 98%;

F2: 蜜蜂蜂毒 0.1%、透明质酸 1.4%、鲨鱼皮胶原蛋白肽 0.5%、化妆品基质 98%；

F3 : 胡蜂蜂毒 0.4%、蜜蜂蜂毒 0.4%、透明质酸 0.01%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 1.19%、化妆品基质 98%;

F4: 胡蜂蜂毒 1%、透明质酸 0.99%、鱿鱼皮胶原蛋白肽 0.01%、化妆品基质 98%;

F5 : 蜜蜂蜂毒 0.5%、透明质酸 0.5%、鳕鱼皮胶原蛋白肽 0.5%、海参胶原蛋白肽 0.5%、化妆品基质 98%;

F6:胡蜂蜂毒 0.5%、蜜蜂蜂毒 1%、透明质酸 0.2%、鲨鱼皮胶原蛋白肽 0.3%、化妆品基质 98%。

选取有干纹、细纹、鱼尾纹、表情纹、颈部纹等皱纹困扰的健康志愿者 66 名，其中男性 24名，女性 42名，年龄 38-43岁，平均 40.7岁，无严重系统疾病、免疫缺陷或自身免疫性疾病，对化妆品无过敏、面部无急性炎症、未使用激素类药物或免疫抑制剂、未参加其他临床试验，未涂抹外用制剂。随机分为 22组，即化妆品基质组、含粗蜂毒化妆品组合物组（样品 Al-A3 )、含蜂毒化妆品组合物组（样品 Bl-B3 )、含透明质酸化妆品组合物组（样品 C)、含蜂毒和透明质酸化妆品组合物组（样品 Dl-D4)、含透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物组（样品 El-E4)、含蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物组 (样品 F1-F6), 每组 3名。

各组志愿者用温水清洁皮肤后，在面部、眼周、颈部、手背（同一位置）均匀涂抹相应的化妆品，每天早晚各 1次，连续使用 8周后，使用皮肤水分测量仪 Corneometer CM825 测量手背皮肤角质层中的含水量（％)，使用表皮水分散失测定仪 TM300测量手背皮肤水分散失量 [TEML， g/(h-m²)] o 使用皮肤皱纹测试仪 SV600测试眼周皮肤皱纹（先用硅模复制所测定部位的皮肤皱纹模型，计算机根据皮肤皱纹深度进行等级分类与统计处理），计算样品使用前、使用后的皮肤平均粗糙度 R3 ( BP :对 5个相同长度、不同节段所测得的 R1值取算数平均数，其中 R1表示在一定长度内峰值与最低值之间的距离， μηι)。结果用 AR3 (即：使用样品前与使用样品后的皮肤平均粗糙度的差值）表示，数值越高，代表皱纹改善效果越好。使用皮肤弹性测试仪 ΜΡΑ580测试面部皮肤弹性（测试过程中负压恒定为 450mpa)，结果用回弹量 Ur (即取消负压 0.1秒后皮肤的恢复值）与皮肤的最大拉伸量 Uf的比值表示，数值越接近 1，说明皮肤弹性越好。

测定结果见表 2，其中样品 A (即含粗蜂毒化妆品组合物）为样品 A1-A3组的平均值，样品 B (即含蜂毒化妆品组合物）为样品 B1-B3组的平均值，样品 D (即含蜂毒和透明质酸化妆品组合物）为样品 D1-D4组的平均值，样品 E (即含透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物）为样品 E1-E4组的平均值，样品 F (即含蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物）为样品 F1-F6 组的平均值。

与 "化妆品基质"组相比，在连续使用其它化妆品组合物 8周后，皮肤水合度都有明显的增加，表皮水分散失量显著减少，弹性和皱纹改善程度明显。与"含粗蜂毒化妆品组合物一 A"相比，在连续使用"含蜂毒化妆品组合物一 B"8周后，皮肤皱纹改善效果更明显。与"含透明质酸化妆品组合物一 C"和"含蜂毒化妆品组合物一 B"相比，在连续使用"含蜂毒和透明质酸化妆品组合物一 D"8 周后，皮肤水合度和皱纹改善效果更为明显。与"含透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物一 E"和"含蜂毒化妆品组合物一 B"相比，在连续使用"含蜂毒、透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽化妆品组合物一 F" 8周后，皮肤角质层含水量、弹性和皱纹改善效果更为明显，鱼尾纹和表情纹变浅甚至消失，皮肤变得更光润而有弹性。

表 2 各化妆品样品改善皮肤功效评价

皮肤含水量水分散失量弹性参数皮肤平均粗糙度实验样品

( %) [TEML, g/(h-m²)] (即 Ur/Uf) 变化（AR3 , μιη) 化妆品基质 27.1士2.3 12.8士0.4 0.64士 0.04 6.31士 0.13 样品 A (即含粗蜂

31.1士1.3 10.3士0.7 0.72士 0.06 24.3±0.15 毒化妆品组合物）

样品 B (即含蜂毒

34.5士1.9 9.4士 0.9 0.80士 0.04 42.2±0.17 化妆品组合物）

样品 C (即含透明

质酸化妆品组合 30.8士 1.5 9.6士 0.6 0.67士 0.05 9.45士0.19 物）

样品 D (即含蜂毒

和透明质酸化妆品 40.1士 1.7 8.4士0.8 0.86士 0.06 47.4士 0.21 组合物）

样品 E (即含透明

质酸和海洋动物胶

31.8士1.4 9.5士0.5 0.71士0.05 12.3士 0.31 原蛋白肽化妆品组

合物）

样品 F (即含蜂毒、

透明质酸和海洋动

43.3士2.1 7.8士0.9 0.89士 0.04 49.3士0.25 物胶原蛋白肽化妆

品组合物）由此可见，本发明中的蜂毒改善皮肤水合度、减少水分散失量、改善皮肤弹性和皱纹等效果显著优于粗蜂毒。此外，本发明中的蜂毒与透明质酸，以及蜂毒与透明质酸、海洋动物胶原蛋白肽具有显著的协同增效作用，可使皮肤水合度、弹性及皱纹等改善效果大为提高。

综上所述，本发明中的具有祛皱功效的蜂毒组合物祛除皱纹效果卓著，而且蜂毒与透明质酸和海洋动物胶原蛋白肽具有良好的协同复配作用，可使改善皮肤干燥、松弛、皱纹等效果显著增强。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应视为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围。

Claims

权利要求书

1、一种具有祛皱功效的蜂毒组合物，包括祛皱化妆品基质成份，其特征在于，还含有蜂毒。

2、根据权利要求 1所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的蜂毒是通过以下方法制备的，取粗蜂毒用水溶解，然后再通过截留分子量 lOOOODa 的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

3、根据权利要求 2所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的蜂毒是通过以下方法制备的：取粗蜂毒加 10-30倍体积水充分溶解， 5000-10000g离心 10-30min，上清液通过截留分子量 lOOOODa 的超滤膜进行超滤后，将滤液冷冻干燥制得蜂毒。

4、根据权利要求 1或 2或 3所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的蜂毒，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.00001%~2%。

5、根据权利要求 4所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的具有祛皱功效的蜂毒组合物还含有透明质酸，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.01%-2%。

6、根据权利要求 5所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的具有祛皱功效的蜂毒组合物还含有海洋动物胶原蛋白肽，其含量占蜂毒组合物总质量的 0.01%-5%。

7、根据权利要求 6所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的海洋动物胶原蛋白肽为鳕鱼皮胶原蛋白肽、鲨鱼皮胶原蛋白肽、海参胶原蛋白肽、鱿鱼皮胶原蛋白肽中的一种或几种的组合。

8、根据权利要求 2或 3所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的粗蜂毒为胡蜂粗蜂毒和 /或蜜蜂粗蜂毒。

9、根据权利要求 1所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的蜂毒组合物是指膏霜、乳液、水剂、凝胶、啫喱、气雾剂或面膜。

10、根据权利要求 1所述的蜂毒组合物，其特征在于，所述的蜂毒组合物能用作普通化妆品或具有祛皱功效的功能化妆品，所述祛皱的皮肤部位是指脸部、眼周、颈脖、躯干或四肢。