WO2014073919A1 - 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물 - Google Patents

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WO2014073919A1
WO2014073919A1 PCT/KR2013/010168 KR2013010168W WO2014073919A1 WO 2014073919 A1 WO2014073919 A1 WO 2014073919A1 KR 2013010168 W KR2013010168 W KR 2013010168W WO 2014073919 A1 WO2014073919 A1 WO 2014073919A1
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WO
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alopecia
hair
amino acid
acid sequence
seq
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PCT/KR2013/010168
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Inventor
최강열
김현이
이성훈
한균희
민도식
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연세대학교 산학협력단
주식회사 한독
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Publication date
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    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth

Definitions

  • the present invention relates to a composition for preventing, treating or improving alopecia.
  • the human hair is about 100,000 to 150,000 pieces, and each hair has a different cycle and repeats the anagen, the catagen, and the telogen.
  • the hair grows to produce keratin
  • the degeneration phase grows slowly as the metabolic process slows down while maintaining the shape of the hair.
  • keratin is not produced and cell division of hair follicles stops and is rapidly contracted.
  • the hair follicles cease to be fully active and ready for hair loss, which is pushed out by the newly growing hair at the base of the resting hair and falls out on its own and repeats the cycles of physical action such as combing or washing the hair. This cycle is repeated over three to six years, resulting in the normal loss of 100 hairs per day.
  • the cause of hair loss is a genetic cause largely, and not only men's problems but also women's hair loss is increasing as a serious problem recently.
  • hormone imbalance mental stress in social life, exposure to air pollution, processed foods, severe illness due to high fever, nutritional imbalance, intake of anticancer and antithyroid drugs, administration of oral contraceptives, shampoo, strong ultraviolet rays
  • various habits and circumstances such as sweating during exercise, eating habits, and psychological pressure are known as the main culprit.
  • Minoxidil and finasteride are representative drugs used to promote hair growth. Minoxidil from the US Upzone may cause side effects such as swelling, arrhythmia and unwanted hair on long term application. The effect of minoxidil is most effective between 6 months and 1 year from use and then gradually It is known that the effect is reduced.
  • Finasteride developed by Merck, is known to inhibit the activity of 5-a-reductase, an enzyme that acts on male hormone testosterone metabolism in hair follicles. An increase in suicidal thoughts has been reported. In addition, it is not applicable to women of childbearing age or pregnant women because it increases the probability of birth of birth defects. Moreover, it is known that hair loss progresses again if both drugs are discontinued.
  • Valproic acid but taking it during pregnancy is known to greatly reduce the child's cognitive development ability.
  • various types of conventional hair regrowth have been attempted to help hair growth for the purpose of promoting blood circulation of the scalp and nourishing hair roots.
  • the current toxic and side effects are severe and their effects are also insufficient. .
  • the present inventors have made efforts to develop a material capable of preventing hair loss and promoting hair growth without side effects.
  • peptides composed of some amino acid sequences of proteins CXXC4 and CXXC5 present in the body have an effect of promoting hair growth. It confirmed and completed this invention.
  • the association between hair loss and polypeptides consisting of some amino acid sequences of CXXC4 and CXXC5 is not known.
  • Non-Patent Document 1 Matsushita and Matsui, (2005), Protein transduction technology. J Mol Med 83, 324-328
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating alopecia containing a polypeptide having a amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 to 13 to 55 amino acids.
  • the polypeptide may be an amino acid sequence encoding a protein transduction domain (PTD) is further inserted into the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • PTD protein transduction domain
  • the PTD may be Poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp or Transportan.
  • the polypeptide may be a linker further inserted between the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence encoding PTD.
  • the alopecia is alopecia areata, hereditary androgen alopecia, resting alopecia, traumatic alopecia, hair growth wall, pressure alopecia, growth alopecia, nasal alopecia, syphilis alopecia, seborrheic alopecia, symptomatic alopecia It may be selected from the group consisting of scar alopecia and congenital alopecia.
  • the pharmaceutical composition may have a formulation of a cream, lotion, shampoo, gel, or pack.
  • the present invention also provides a cosmetic composition for improving alopecia comprising a polypeptide having a amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 to 13 to 55 amino acids.
  • the polypeptide may be a cosmetic composition for improving alopecia in which an amino acid sequence encoding PTD (protein transduction domain) is additionally inserted into the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the PTD may be Poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp or Transportan.
  • the polypeptide may be a linker is further inserted between the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence encoding the PTD.
  • the alopecia is alopecia areata, hereditary androgen alopecia, resting alopecia, traumatic alopecia, hair growth wall, pressure alopecia, growth alopecia, nasal alopecia, syphilis alopecia, seborrheic alopecia, symptomatic alopecia, May be selected from the group consisting of scarring alopecia, or congenital alopecia.
  • the cosmetic composition is an external preparation for skin, hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair rinse, hair conditioner, hair spray, hair aerosol, pomade, powder gel, hair pack, hair treatment Formulations, eyelash regrowth, eyelash regrowth, eyelash nutritional agent.
  • composition comprising the polypeptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 according to the present invention, as well as pharmaceutically available as a hair loss prevention and hair growth promoting composition, can also be usefully used as a cosmetic composition.
  • FIG. 2 is a tissue staining result showing that the hair of the growth phase was increased in the experimental group treated with PolyR8-HFAP while most of the control hair was resting.
  • Figure 3 is an analysis result showing that the number of hair follicles in the growth phase increased significantly in the experimental group treated with PolyR8-HFAP.
  • the present invention relates to a composition for preventing, treating or ameliorating alopecia containing a polypeptide having 13 to 100 amino acid sequences comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the present invention also relates to a composition for preventing, treating or improving alopecia containing a polypeptide having 13 to 75 amino acid sequences including the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the present invention also relates to a composition for preventing, treating or improving alopecia containing a polypeptide having 13 to 55 amino acid sequences comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the present invention also provides a composition for preventing, treating or improving alopecia containing a polypeptide having a 13 to 30 amino acid sequence comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 corresponds to some amino acid sequences of proteins CXXC4 and CXXC5 present in the body.
  • a polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 of the present invention can be used to prevent, treat or ameliorate alopecia, and thus the present invention provides a composition comprising a polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 It provides a use for the prevention, treatment or amelioration of alopecia of. Also provided is a method for preventing, treating or ameliorating alopecia using a composition containing a polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the polypeptide is characterized in that the amino acid sequence encoding the protein transduction domain (PTD) is further inserted into the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • PTD mainly consists of basic amino acids, such as arginine and lysine, and it can induce penetration into a cell by adding PTD to N-terminal or C-terminal of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Specific examples of PTD are known in the art, and the type of PTD introduced into the amino acid of SEQ ID NO: 1 is not particularly limited.
  • PTD can be poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp or Transportan, for example poly R8 is the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2, HIV-Tat is the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, HSV VP22 is of SEQ ID NO: 4
  • the amino acid sequence, Antp may be an amino acid sequence of SEQ ID NO: 5 or a transportan may have an amino acid sequence of SEQ ID NO: 6.
  • the polypeptide may be a linker is further inserted between the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence encoding the PTD.
  • linkers are known in the art, and the type of linker inserted between the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and the amino acid sequence encoding the PTD is not particularly limited.
  • the linker may consist of 4 to 12 amino acid sequences, such as 4 to 8 glycine, for example, a polypeptide with an additional linker inserted may have an amino acid sequence of SEQ ID NO: 7.
  • the composition according to the present invention is a composition for preventing, treating or improving alopecia, wherein the alopecia is alopecia alopecia, hereditary androgen alopecia, telogen effluvium, traumatic alopecia, hair growth wall (Trichotillomania ), Pressure alopecia, growth alopecia, alopecia areata, alopecia syphlltiac, alopecia seborrhecia, symptomatic alopecia, scarring alopecia and congenital alopecia. .
  • composition for preventing, treating or ameliorating alopecia may be administered by a method such as applying or spreading directly on the skin such as hair or scalp, such as creams, lotions, ointments, aerosols, It may have a formulation of a shampoo, gel, or pack.
  • Methods for the formulation or formulation suitable for each formulation are well known in the art. Those skilled in the art can appropriately select and use various combinations of ingredients used to prepare conventional external preparations in preparing these formulations.
  • Such ingredients include, in the case of ointments, creams, gels, lotions, white petrolatum, yellow petrolatum, lanolin, bleached beeswax, cetanol, stearyl alcohol, stearic acid, hardened oils, gelled hydrocarbons, polyethylene glycols, liquid paraffin,
  • bases such as squalane, oleic acid, isopropyl myristate, glycerin triisooctanoate, crotamiton, diethyl sebacate, adipic acid diisopropyl, hexyl laurate, fatty acids, fatty acid esters, aliphatic alcohols, vegetable oils, and the like.
  • Solvents and dissolution aids such as tocopherol derivatives, L-ascorbic acid, dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole; and preservatives such as parahydroxybenzoic acid esters; glycerin, propylene glycol, Moisturizers such as sodium hyaluronate, polyoxyethylene derivatives, glycerin fatty acid esters, sucrose fatty acids Surfactants such as esters, sorbitan fatty acid esters, propylene glycol fatty acid esters and lecithin, and thickeners such as carboxyvinyl polymer, xanthan gum, carboxymethyl cellulose, carboxymethyl cellulose sodium salts, hydroxypropyl cellulose and hydroxypropyl methyl cellulose. Etc.
  • a stabilizer, a preservative, an absorption promoter, a pH adjuster, and other suitable additives can be mix
  • any one or more of a synthetic surfactant, a preservative, a thickening agent, a viscosity adjusting agent, a pH adjusting agent, a perfume, a dye, a hair conditioner, and water, which are cleaning components, may be contained.
  • synthetic anionic surfactants are alkyl and alkyl ether sulfates, and representative examples thereof include sodium lauryl sulfate, lauryl ammonium sulfate, lauryl sulfate triethanolamine, polyoxyethylene lauryl sulfate, polyoxyethylene lauryl ammonium sulfate, and the like. have.
  • synthetic amphoteric surfactants are alkyl betamin and alkyl amidopropyl betaine, and representative examples thereof are cocodimethyl carboxymethyl betaine, lauryldimethyl carboxymethyl betaine, lauryl dimethyl alpha-carboxyethyl betaine. , Cetyl dimethyl carboxymethyl betaine, cocamidopropyl betaine and the like.
  • the nonionic surfactants include alkanol amides and amine oxides, such as lauryl diethyl amine oxide, palm oil alkyldimethyl amine oxide, lauric acid diethanolamide, palm oil fatty acid diethanolamide, palm oil fatty acid monoethanolamide, and the like.
  • optional ingredients used in the present invention are well known to those skilled in the art as conventional optional ingredients for maintaining basic physical properties and quality as shampoos.
  • Such optional ingredients include pearlescent aids, preservatives, thickeners and viscosity adjusting agents, pH adjusting agents, perfumes, dyes, hair conditioning agents.
  • ethylene glycol monostearate pearlescent aids such as ethylene glycol distearate, methyl paraoxane benzoate, preservatives such as mixtures of methylchloroisothiazolinone and methyl isothiazolinone, sodium chloride, ammonium chloride, propylene glycol and Thickening and viscosity modifiers, pH adjusting agents such as citric acid, phosphoric acid, sodium hydroxide, potassium hydroxide, hair conditioning agents such as polyquaternium-10, polyquaternium-7, methylpolysiloxane, dimethiconecopolyol, hydrolyzed animal protein Dyes such as water-soluble tars can be used, and fragrances can also be used.
  • Hair to which the composition according to the present invention is applied includes hair follicles and hair follicles of the head, hair and eyelashes, and eyelashes, beards, armpits, pubic hair, and all parts of the hair follicles and hair follicles throughout the body.
  • composition according to the present invention may be a pharmaceutical composition, a quasi-drug composition, a cosmetic composition.
  • composition of the present invention is a pharmaceutical composition
  • it may be applied by topical application by parenteral administration or application.
  • Suitable dosages of the pharmaceutical compositions according to the present invention may vary with the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration and may be appropriately selected by those skilled in the art.
  • composition according to the invention when the composition according to the invention is a cosmetic composition, it contains auxiliaries commonly used such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, fragrances, fillers, blocking agents, pigments, odorants and dyes. can do.
  • auxiliaries commonly used such as hydrophilic or lipophilic gelling agents, hydrophilic or lipophilic active agents, preservatives, antioxidants, solvents, fragrances, fillers, blocking agents, pigments, odorants and dyes. can do.
  • the cosmetic composition is a skin external preparation formulation of hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair rinse, hair conditioner, hair spray, hair aerosol, pomade, powder gel, hair pack, hair treatment, eyebrow regrowth, eyelash regrowth, eyelash It may be a formulation of a nutrient.
  • composition for preventing hair loss according to the present invention can be used for pets with different formulations.
  • it can be prepared in various forms such as solution, sol-gel, emulsion, oil, wax, aerosol, etc. such as pet shampoo and pet rinse. It can be prepared by addition.
  • polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1
  • poly R8 RRRRRRRR
  • polyglycine linker GGGG
  • FITC fluorescent dye at the carboxyl terminus
  • PolyR8-HFAP Air follicle activating peptide
  • the skin tissue of the mouse experimented in FIG. 1 was immersed in 4% paraformaldehyde and fixed, embedded in paraffin, and sliced into 4 ⁇ m thick.
  • the delaminated tissues were deparaffinized and rehydrated and stained with hematoxylin (purple) and eosin (pink) to observe histological structures.
  • hematoxylin purple
  • eosin pink
  • the skin tissue flakes used in FIG. 2 were deparaffinized and rehydrated, and then heated in 121 mM sodium citrate buffer for 15 minutes to regenerate antigenicity.
  • Antibodies were treated to induce antigen-antibody responses. Again, the antibody was recognized as an antigen, and the secondary antibody bound to the fluorescent material was treated on the flake to induce an antigen-antibody reaction, and the result was observed through a fluorescence microscope. As a result, it was confirmed that the expression of these epidermal differentiation markers was significantly increased in the skin tissue treated with the peptide (FIG. 4).
  • composition for preventing, treating or improving alopecia is a composition comprising a polypeptide having an amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and is not only pharmaceutically usable as a composition for preventing and promoting hair loss, but also as a cosmetic composition. It can be usefully used.

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Abstract

본 발명은 체내에 존재하는 단백질 CXXC4 및 CXXC5의 일부 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다. 상기 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드는 탈모의 진행을 완화하고, 모발의 양모/육모, 성장을 촉진할 수 있어, 탈모증의 예방, 치료 또는 개선에 효과적이다.

Description

탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물
본 발명은 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
인체의 모발은 약 10 만 내지 15 만개 정도이며, 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기(anagen), 퇴행기(catagen) 및 휴지기(telogen)를 반복한다. 성장기는 모발이 성장하여 케라틴이 만들어지고, 퇴행기는 성장기가 끝나고 모발의 형태를 유지하면서 대사과정이 느려지는 시기로써 천천히 성장한다. 퇴행기에는 케라틴은 만들어지지 않고 모낭의 세포 분열이 정지되어 급격히 위축되는 시기이다. 다음의 휴지기 시기가 되면 모낭은 활동을 완전히 멈추고 탈모를 준비하게 되어 휴지기 모발의 기저부에서 새롭게 자라는 성장기 모발에 의해 밀려나 저절로 빠지며, 빗질이나 머리를 감는 등의 물리적 작용에 의해 빠지는 주기를 반복한다. 이러한 주기는 3~6년에 걸쳐 반복되는데 그 결과 일일 평균 100개 전후의 모발이 정상적으로 탈락하게 된다.
상기와 같이 사람의 모발은 모주기를 가지고 있기 때문에 털갈이 없이 항상 일정한 모발의 수를 유지하게 된다. 그러나 대머리가 진행되면 모근에 존재하는 유두가 작아지고, 모유두가 작아지면 머리털의 굵기도 가늘어지고 동시에 모주기도 짧아지며, 새로 자라나온 털은 더욱 가늘어지게 된다. 따라서 대머리가 진행되면 머리털은 솜털로 변하며 모주기는 더욱 짧아져 조금 자란 후 빠지게 된다.
대머리가 진행되면 두피에 기름이 많아져서 지루성 피부염이 잘 생기고, 모근에 부착되어 있는 피지선은 점차로 커지면서 피지를 많이 만들어 내는데, 이는 대머리의 원인이 아니고 대머리의 이차적인 현상이나 이러한 현상이 다시 탈모를 촉진하는 원인이 된다.
탈모의 원인은 유전적인 원인이 크게 자리하고 있으며, 비단 남성들만의 문제가 아니라 여성들의 탈모현상도 늘어나고 있는 상황으로 최근 심각한 문제로 대두되고 있다. 유전적 요인 외에 호르몬의 불균형적인 분비, 사회생활의 정신적 스트레스, 대기오염 노출, 가공 식품의 섭취, 고열로 인한 중병, 영양의 불균형, 항암제 및 항갑상선제의 복용, 경구 피임약의 투여, 샴푸, 강한 자외선이나 운동 중 흘리는 땀, 식습관, 심리적 압박감등의 다양한 습관과 환경이 주범으로 알려져 있다.
미녹시딜과 피나스테라이드는 모발성장촉진을 위해 쓰이고 있는 대표적인 약물들이다. 미국 업존사의 미녹시딜(minoxidil)은 장기 적용시 부종, 부정맥과 원하지 않는 부위에 털이 나는 등의 부작용을 초래할 수 있으며, 미녹시딜의 효과는 사용으로부터 6 개월에서 1 년 사이에 가장 큰 효과를 보이고 이후에는 서서히 그 효과가 줄어드는 것으로 알려져 있다.
또한 머크사에서 개발한 피나스테라이드(finasteride)는 모낭에서 남성호르몬 테스토스테론 대사에 작용하는 효소인 5-a-리덕테이즈(5-a-reductase)의 활성을 억제하는 물질로 알려져 있으나 성기능 장애와 우울증 및 자살충동의 증가가 보고된 바 있다. 또한 기형아 출산의 가능성을 높이기 때문에 가임기의 여성이나 임신 중의 여성에게는 적용이 불가능하다. 게다가, 두 약물 모두 적용을 중단할 경우 다시 탈모가 진행되는 것으로 알려져 있다.
이 외에도 발프로산이 있지만, 임신 중 복용할 경우 아이의 인지발달 능력이 크게 떨어진다고 알려져 있다. 이처럼 종래의 여러 종류의 발모제는 일반적으로 두피의 혈행 촉진과 모근의 영양공급을 목적으로 하여 모발의 성장에 도움을 주도록하는 방법이 시도되었으나 이 역시 독성과 부작용이 심하고 그 효과 또한 미흡한 것이 현재 실정이다.
이에 본 발명자들은, 부작용없이 탈모를 방지하고 발모를 촉진할 수 있는 물질을 개발하고자 예의 노력한 결과, 체내에 존재하는 단백질 CXXC4 및 CXXC5의 일부 아미노산 서열로 구성된 펩타이드가 모발성장을 촉진하는 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다. CXXC4 및 CXXC5의 일부 아미노산 서열로 구성된 폴리펩타이드와 탈모와의 관련성은 아직까지 알려진 바 없다.
[선행기술문헌]
[비특허문헌]
비특허문헌 1: Matsushita and Matsui, (2005), Protein transduction technology. J Mol Med 83, 324-328
본 발명의 목적은 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13 개 내지 55 개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열에 PTD(protein transduction domain)를 코딩하는 아미노산 서열이 추가로 삽입되어 있는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 PTD는 Poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp 또는 Transportan일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 링커가 추가로 삽입되어 있는 것 일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 탈모증은 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 약학적 조성물은 크림, 로션, 샴푸, 젤, 또는 팩의 제형을 갖는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13개 내지 55개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열에 PTD(protein transduction domain)를 코딩하는 아미노산 서열이 추가로 삽입되어 있는 것인 탈모증 개선용 화장료 조성물일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 PTD는 Poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp 또는 Transportan일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 링커가 추가로 삽입되어 있는 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 탈모증은 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 반흔성 탈모증, 또는 선천성 탈모증으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것일 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 화장료 조성물은 피부 외용제 제형으로서 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말 젤, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 눈썹발모제, 속눈썹 발모제, 속눈썹 영양제의 제형일 수 있다.
본 발명에 따른 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 포함하는 조성물은, 탈모방지 및 발모촉진용 조성물로서 약학적으로 이용가능 할 뿐만 아니라, 화장료 조성물로서도 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 PolyR8-HFAP를 처리한 마우스의 피부에서 모발의 성장이 촉진되었음을 보여주는 결과이다.
도 2는 대조군이 휴지기의 모발이 대부분인 반면 PolyR8-HFAP를 처리한 실험군에서 성장기의 모발이 많아졌음을 보여주는 조직염색 결과이다.
도 3은 PolyR8-HFAP를 처리한 실험군에서 성장기에 있는 모낭의 수가 크게증가하였음을 보여주는 분석 결과이다.
도 4는 PolyR8-HFAP를 처리한 실험군에서 모발이 성장기에 있음을 보여주는 표피 분화 마커인 로리크린, 필라그린, 케라틴 14이 크게 증가하였음을 보여주는 조직형광염색 결과이다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명한다.
본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13 개 내지 100 개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
또한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13 개 내지 75 개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
또한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13 개 내지 55 개의아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 것이다.
또한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13 개 내지 30 개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다.
[서열번호 1] RKTGHQICKFRKC
서열번호 1의 아미노산 서열은 체내에 존재하는 단백질 CXXC4 및 CXXC5의 일부 아미노산 서열에 해당한다.
후술하는 실시예 및 하기 도면에 나타난 바와 같이, 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드의 아미노 말단 쪽에 8 개의 아르기닌을 부착하여 마우스의 피부에 도포한 결과 모발 성장과 관련된 표피 분화 마커들이 증가하고 성장기에 있는 모발들이 증가하였음을 확인할 수 있다.
따라서, 본 발명의 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드는 탈모증을 예방 또는 치료하거나 개선하기 위해 사용될 수 있고, 이에 따라 본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드를 함유하는 조성물의 탈모증의 예방, 치료 또는 개선하기 위한 용도를 제공한다. 또한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드를 함유하는 조성물을 이용한 탈모증의 예방, 치료 또는 개선 방법을 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열에 PTD(protein transduction domain)를 코딩하는 아미노산 서열이 추가로 삽입되어 있는 것을 특징으로 한다.
PTD는 주로 아르기닌이나 라이신 등의 염기성 아미노산으로 구성되어 있으며, PTD를 서열번호 1의 아미노산 서열의 N-terminal 혹은 C-terminal에 추가함으로써 세포 내로의 침투를 유도할 수 있다. PTD의 구체적인 예는 업계에 공지되어 있으며, 서열번호 1의 아미노산에 도입되는 PTD의 종류는 특별히 제한되지 않는다.
PTD는 poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp 또는 Transportan일 수 있으며, 예를 들어 poly R8은 서열번호 2의 아미노산 서열, HIV-Tat은 서열번호 3의 아미노산 서열, HSV VP22는 서열번호 4의 아미노산 서열, Antp 는 서열번호 5의 아미노산 서열 또는 Transportan는 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 것일 수 있다.
[서열번호 2] RRRRRRRR
[서열번호 3] YGRKKRRQRRR
[서열번호 4] DAATATRGRSAASRPTERPRAPARSASRPRRPVE
[서열번호 5] RQIKIWFQNRRMKWKK
[서열번호 6] AGYLLGKINLKALAALAKKIL
본 발명의 일 구현예에 의하면, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 링커가 추가로 삽입되어 있는 것일 수 있다. 링커의 구체적인 예는 당업계에 공지되어 있으며 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 삽입되는 링커의 종류는 특별히 제한되지 않는다.
링커는 4 개 내지 12 개의 아미노산 서열로 이루어질 수 있으며, 예컨대 4 개 내지 8 개의 글라이신일 수 있으며, 예를 들어 링커가 추가로 삽입된 폴리펩타이드는 서열번호 7의 아미노산 서열을 가질 수 있다.
[서열번호 7] RRRRRRRRGGGGRKTGHQICKFRKC
본 발명에 따른 조성물은 탈모증의 예방, 치료, 또는 개선용 조성물로서, 상기 탈모증은 원형 탈모증(Alopecia Areata), 유전성 안드로겐 탈모증(Androgenetic Alopecia), 휴지기 탈모증(Telogen Effluvium), 외상성 탈모증, 발모벽(Trichotillomania), 압박성 탈모증(Pressure Alopecia), 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증(Alopecia syphlltiac), 지루 탈모증(Alopecia seborrhecia), 증후성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증으로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 탈모증의 예방, 치료, 또는 개선용 조성물은 피부, 예컨대 모발 또는 두피에 직접 도포 또는 산포하는 등의 방법에 의해 투여할 수 있는 제형, 예를 들어, 크림, 로션, 연고, 에어로졸, 샴푸, 겔, 또는 팩의 제형을 갖는 것일 수 있다. 각각의 제형에 적합한 배합성분이나 제제를 위한 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 당업자들은 이들 제제를 제조할 때, 통상의 외용제를 제조하는 데에 사용되는 각종 배합 성분을 적절히 선택하여 사용할 수 있다.
그러한 성분으로는 연고제, 크림제, 겔제, 로션제의 경우에 있어서는, 백색 바셀린, 황색 바셀린, 라놀린, 표백밀랍, 세탄올, 스테아릴알코올, 스테아르산, 경화유, 겔화 탄화수소, 폴리에틸렌글리콜, 유동 파라핀, 스쿠알란 등의 기제가 있고, 올레산, 미리스트산이소프로필, 트리이소옥탄산글리세린, 크로타미톤, 세바크산디에틸, 아디프산디이소프로필, 라우르산헥실, 지방산, 지방산 에스테르, 지방족 알코올, 식물유 등의 용제 및 용해 보조제가 있으며, 토코페롤 유도체, L-아스코르브산, 디부틸하이드록시톨루엔, 부틸하이드록시아니솔 등의 산화 방지제가 있고, 파라하이드록시벤조산에스테르 등의 방부제가 있으며, 글리세린, 프로필렌글리콜, 히알루론산나트륨 등의 보습제가 있고, 폴리옥시에틸렌유도체, 글리세린 지방산 에스테르, 자당 지방산 에스테르, 소르비탄 지방산 에스테르, 프로필렌글리콜 지방산 에스테르, 레시틴 등의 계면 활성제가 있으며, 카르복시비닐 폴리머, 잔탄검, 카르복시메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스나트륨염류, 하이드록시프로필셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 증점제 등이 있다.
에어로졸제의 경우에 있어서는, 연고제, 크림제, 겔제, 현탁제, 유제, 액제 및 로션제 등의 조제에 사용되는 백색 바셀린, 황색 바셀린, 라놀린, 표백 밀랍, 세탄올, 스테아릴알코올, 스테아르산, 경화유, 겔화 탄화수소, 폴리에틸렌글리콜, 유동 파라핀, 스쿠알란 등의 기제, 올레산, 미리스트산이소프로필, 아디프산디이소프로필, 세바크산이소프로필, 트리이소옥탄산글리세린, 크로타미톤, 세바크산디에틸, 라우르산헥실, 지방산, 지방산 에스테르, 지방족 알코올, 식물유 등의 용제 및 용해 보조제, 토코페롤 유도체, L-아스코르브산, 디부틸하이드록시톨루엔, 부틸하이드록시아니솔 등의 산화 방지제, 파라하이드록시벤조산에스테르 등의 방부제, 글리세린, 프로필렌글리콜, 히알루론산나트륨 등의 보습제, 폴리옥시에틸렌 유도체, 글리세린 지방산 에스테르, 자당 지방산 에스테르, 소르비탄 지방산 에스테르, 프로필렌글리콜 지방산 에스테르, 레시틴 등의 계면 활성제, 카르복시비닐 폴리머, 잔탄검, 카르복시메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스 나트륨염류, 하이드록시프로필셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 증점제 등이 있으며, 추가로 각종 안정제, 완충제, 교미제, 현탁화제, 유화제, 방향제, 보존제, 용해 보조제, 그 밖의 적당한 첨가제를 배합할 수 있다.
또한, 필요에 따라 안정제, 보존제, 흡수 촉진제, pH 조정제, 그 밖의 적당한 첨가제를 배합할 수 있다.
샴푸의 경우에 있어서는, 세정 성분인 합성 계면활성제와 방부제, 점증제, 점도 조절제, pH 조절제, 향료, 염료, 모발 컨디셔닝제 및 물 중 어느 하나 이상을 함유할 수 있다. 상기 합성 계면활성제 중 합성 음이온 계면활성제는 알킬 및 알킬 에테르 설페이트로서, 대표적인 예로 라우릴 황산나트륨, 라우릴 황산암모늄, 라우릴 황산 트리에탄올아민, 폴리옥시에틸렌 라우릴 황산나트륨, 폴리옥시에틸렌 라우릴 황산암모늄 등이 있다. 또한 상기 합성 계면활성제 중 합성 양쪽성 계면활성제는 알킬 베타민 및 알킬 아미도프로필 베타인으로서, 대표적인 예로는 코코디메틸 카복시메틸 베타인, 라우릴디메틸 카복시메틸 베타인, 라우릴 디메틸 알파-카복시에틸 베타인, 세틸 디메틸 카복시메틸 베타인, 코카미도 프로필 베타인 등이 있다.
상기 비이온 계면활성제는 알카놀 아미드 및 아민 옥사이드로서, 라우릴 디에틸 아민옥사이드, 야자유 알킬디메틸 아민옥사이드, 라우린산 디에탄올아미드, 야자유 지방산 디 에탄올아미드, 야자유 지방산 모노에탄올아미드 등이 있다.
본 발명에서 사용되는 임의 성분으로서는 샴푸로서의 기본적 물성 및 품질을 유지하기 위한 통상적인 임의 성분으로서, 당해 분야의 전문가에게 널리 공지되어 있다. 이러한 임의 성분에는 진주박 보조제, 방부제, 점중제 및 점도 조절제, pH 조절제, 향료, 염료, 모발 컨디셔닝제가 포함된다. 예를 들면 에틸렌글리콜 모노스테아레이트, 에틸렌글리콜 디스테아레이트와 같은 진주박 보조제, 파라 옥시안식향산메틸, 메틸클로로 이소치아졸리논과 메틸 이소치아졸 리논의 혼합물과 같은 방부제, 염화나트륨, 염화암모늄, 프로필렌 글리콜과 같은 점증제 및 점도 조절제, 구연산, 인산, 수산화나트륨, 수산화칼륨과 같은 pH 조절제, 폴리쿼터늄-10, 폴리쿼터늄-7, 메틸폴리실록산, 디메티콘코폴리올, 가수분해 동물 단백질과 같은 모발 컨디셔닝제, 수용성 타르와 같은 염료가 사용되며, 또한 향료가 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물이 적용되는 모발이란, 머리의 모근 및 모낭, 머리카락 및 속눈썹과 겉눈썹, 수염, 겨드랑이, 음모, 신체 전반에 모근 및 모낭이 있는 모든 부위를 포함한다.
본 발명에 따른 조성물은 약학적 조성물, 의약외품 조성물, 화장료 조성물일 수 있다.
본 발명의 조성물이 약학적 조성물인 경우 비경구 투여, 도포에 의한 국부 투여(topical application) 방식으로 적용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다를 수 있고, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물이 화장료 조성물인 경우 통상적으로 이용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료를 함유할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 피부 외용제 제형으로서 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말 젤, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 눈썹발모제, 속눈썹 발모제, 속눈썹 영양제의 제형일 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 탈모 방지용 조성물은 그 제형을 달리하여 애완동물용으로도 사용할 수 있다. 예를 들어, 애완동물용 샴푸 및 애완동물용 린스 등과 같이 용액, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스, 에어졸 등 다양한 형태로 제조될 수 있고, 애완동물의 피부에 자극이 적고 보습력이 탁월한 중성의 세제를 첨가하여 제조할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 본 발명의 구체적인 실시 형태를 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드의 효능을 확인하기 위해 서열번호 1의 아미노산 말단에 poly R8 (RRRRRRRR)과 폴리 글라이신 링커(GGGG) 및 카르복실 말단에 라이신과 형광 염색물질인 FITC(fluorescein isothiocyanate)를 덧붙인 PolyR8-HFAP(Hair follicle activating peptide) 펩타이드를 합성하였다.
PolyR8-HFAP: RRRRRRRRGGGGRKTGHQICKFRKCK-(FITC)
실험예 1
실시예 1에서 합성된 펩타이드의 모발성장촉진 효과를 확인하기 위해 휴지기에 들어간 7주령 된 C3H 마우스의 등 부위의 모발을 제거하고 모발이 제거된 부위에 대조군에는 vehicle(50% 에탄올, 20% 프로필렌글라이콜, 30% 물)을, 처리군에는 vehicle에 각각 40 mM, 500 mM 농도로 녹인 펩타이드와 VPA를 50 ㎕씩 25일간 매일 1회 도포하였다. 결과 대조군에 비해 VPA와 펩타이드가 처리된 군에서 모발의 성장이 촉진되었음을 알 수 있었으며, 특히 펩타이드가 처리된 군에서 모발 성장이 크게 증가한 것을 확인할 수 있었다(도 1).
실험예 2
도 1에서 실험한 마우스의 피부조직을 4% 파라포름알데하이드에 담가 고정한 후 파라핀에 포매하고 4 ㎛ 두께로 박편하였다. 박편된 조직을 탈파라핀화 및 재수화한 후 조직학적 구조를 관찰하기 위해 헤마톡실린(보라색)과 에오신(분홍색)을 이용하여 염색하였다. 이를 현미경으로 관찰한 결과 대조군에 비해 펩타이드와 VPA가 처리된 군에서 성장기에 있는 모낭이 많이 발견됨을 확인할 수 있었다(도 2).
실험예 3
도 2에서 얻은 조직염색결과로부터 마우스 한 마리 당 50개 이상의 모낭들을관찰하여 전체 모낭 중 성장기에 있는 모낭의 비율을 계산해 본 결과 펩타이드 혹은 VPA를 처리한 군에서 그 비율이 상당히 증가한 것을 확인할 수 있었으며, 펩타이드의 경우 VPA에 비교할 때도 성장기 모낭의 비율이 3배가량 증가한 것을 확인하였다(도 3).
실험예 4
도 2에서 사용한 피부조직 박편을 탈파라핀화 및 재수화한 후 항원성을 재생하기 위해 10 mM 소디움 사이트레이트 버퍼에 넣어 121 ℃에서 15분간 가열하였다. 비특이적인 항원-항체반응을 막기 위해 알부민을 이용하여 박편을 블로킹(blocking)한 후 성장하는 모발에서 증가하는 것으로 알려진 표피 분화 마커들인 로리크린(loricrin), 필라그린(filaggrin), 케라틴 14(keratin 14) 항체를 처리하여 항원-항체 반응을 유도하였다. 다시 상기 항체들을 항원으로 인식할 수 있는, 형광물질과 결합된 이차 항체를 박편에 처리하여 항원-항체 반응을 유도한 후 그 결과를 형광 현미경을 통해 관찰하였다. 결과 펩타이드가 처리된 피부조직에서 이들 표피 분화 마커들의 발현이 크게 증가한 것을 확인할 수 있었다(도 4).
본 발명에 따른 탈모증의 예방, 치료 또는 개선용 조성물은 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 포함하는 조성물로서, 탈모방지 및 발모촉진용 조성물로서 약학적으로 이용가능 할 뿐만 아니라, 화장료 조성물로서도 유용하게 이용될 수 있다.

Claims (12)

  1. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13개 내지 55개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열에 PTD(protein transduction domain)를 코딩하는 아미노산 서열이 추가로 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 PTD(protein transduction domain)는 poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp 또는 Transportan인 것을 특징으로 하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 링커가 추가로 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 탈모증은 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것인 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 약학적 조성물은 크림, 로션, 에어로졸, 샴푸, 젤, 또는 팩의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 탈모증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  7. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 13개 내지 55개의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 함유하는 탈모증 개선용 화장료 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열에 PTD(protein transduction domain)를 코딩하는 아미노산 서열이 추가로 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모증 개선용 화장료 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 PTD(protein transduction domain)는 poly R8, HIV-Tat, HSV VP22, Antp 또는 Transportan인 것을 특징으로 하는 탈모증 개선용 화장료 조성물.
  10. 제8항에 있어서,
    상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 PTD를 코딩하는 아미노산 서열 사이에 링커가 추가로 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모증 개선용 화장료 조성물.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 탈모증은 원형 탈모증, 유전성 안드로겐 탈모증, 휴지기 탈모증, 외상성 탈모증, 발모벽, 압박성 탈모증, 생장기 탈모증, 비강성 탈모증, 매독성 탈모증, 지루 탈모증, 증후성 탈모증, 반흔성 탈모증 및 선천성 탈모증으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상인 탈모증 개선용 화장료 조성물.
  12. 제7항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 외용제 제형으로서 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말 젤, 헤어팩, 헤어트리트먼트, 눈썹발모제, 속눈썹 발모제 또는 속눈썹 영양제의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 탈모증 개선용 화장료 조성물.
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