WO2014025019A1 - 飼料および産業動物のストレス緩和剤 - Google Patents
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Definitions
- the present invention relates to a feed for improving the breeding performance of industrial animals such as mammals, birds, fish, and crustaceans, a stress relieving agent for industrial animals, and a method for relieving the stress of industrial animals.
- a characteristic problem in breeding industrial animals such as livestock and fish is that growth and feed efficiency are reduced in a stress environment.
- pigs are bred with breast milk immediately after birth, but after the weaning period, they are bred with solid feed for the fattening period. At that time, it is known that the amount of feed intake is reduced due to the influence of stress that the feed is switched from breast milk to solid feed. In addition to this, it is known that various stresses such as diarrhea, various infectious diseases, vaccination, and poultry breeding cause a decrease in livestock feed intake and cause growth to be delayed.
- livestock feed efficiency and feed efficiency can be improved by administering to livestock such as pigs an additive for livestock feed containing an additive consisting of glutamine and glutamic acid or an additive consisting of nucleic acid and glutamine (Patent Document 1)
- Patent Document 2 it is known to improve livestock gain efficiency and feed demand rate by administering livestock feed additives containing L-glutamic acid and L-tryptophan to livestock.
- L-valine is a branched chain amino acid and is also a kind of essential amino acid. L-valine plays an important role in synthesizing proteins in the body and as an energy source during exercise.
- Non-patent Document 1 it is known that administration of L-valine to 5-fluorouracil-induced enterocolitis rats can provide an effect of treating intestinal disorders of the small intestine.
- Non-patent Document 2 It is also known that the amount of amino acids required in livestock changes under a stress environment.
- Patent 470883 WO2010 / 143697
- An object of the present invention is to provide a feed for improving the breeding performance of industrial animals, a stress relieving agent for industrial animals, and a method for relieving stress of industrial animals.
- the present inventors have found that the breeding performance of an industrial animal can be improved by administering to the industrial animal a feed in which the mass ratio of L-valine to L-lysine is higher than the nutritionally optimal ratio. .
- the present invention includes the following aspects.
- It contains L-valine and L-lysine, and the mass ratio of L-valine to L-lysine (Val / Lys ratio) is 1.0 to 3.0 in terms of digestible amino acid amount.
- To feed [2] The feed, wherein the Val / Lys ratio is 1.3 to 2.0 in terms of digestible amino acid amount.
- the feed described above which is used for industrial animals.
- the feed wherein the industrial animal is livestock or farmed fish.
- the feed is characterized in that the livestock is chicken or pig.
- the said feed used in order to relieve
- Object to which the feed of the present invention is administered The feed of the present invention is administered to industrial animals.
- industrial animal refers to livestock and / or farmed fish.
- livestock includes, for example, animals for milk, meat, eggs, hair, leather, or labor, and pets (companion animals) such as dogs and cats.
- livestock include cattle, pigs, chickens, horses, turkeys, sheep, goats, dogs, and cats. Of these, pigs and chickens are preferred.
- chicken meat chickens and egg-collecting chickens are preferable, and broilers are more preferable.
- “cultured fish” includes fish and crustaceans.
- ⁇ fish '' specifically, for example, tuna, skipjack, yellowtail, amberjack, flatfish, Thailand, salmon, cod, trout, rainbow trout, flounder, trough puffer, riverfish, horse mackerel, grouper, eel, carp, catfish, tilapia
- Examples include grass carp, hakuren and funa.
- crustaceans include prawns, black tiger, vaname prawns and crabs.
- valine and lysine are both in the L form unless otherwise specified.
- Both L-valine and L-lysine may be a free form or a salt thereof, or a mixture thereof.
- the salt is not particularly limited as long as it can be taken orally by industrial animals.
- L-lysine hydrochloride includes L-lysine hydrochloride, L-lysine carbonate, and L-lysine sulfate.
- the salt one type of salt may be used, or two or more types of salts may be used in combination.
- L-valine L-valine base (free L-valine) is preferably used.
- L-valine and L-lysine may be free L-valine or L-lysine (that is, monomeric L-valine or L-lysine), and L-valine constituting the protein. It may be valine or L-lysine, or a mixture thereof. That is, instead of or in addition to free L-valine or L-lysine, a protein containing L-valine or L-lysine as a constituent element may be used.
- the term “protein” here includes an embodiment called a peptide, an oligopeptide, or a polypeptide.
- Both L-valine and L-lysine may be purified products or raw materials containing L-valine or L-lysine. Further, both L-valine and L-lysine may be in any shape as long as they can be used by industrial animals. Both L-valine and L-lysine may be, for example, granulated while containing a solution, suspension, powder, crystal, or microorganism.
- L-valine and L-lysine commercially available products may be used, and those obtained by appropriately producing them may be used.
- L-valine and L-lysine can be produced by, for example, a synthesis method, an extraction method, or a fermentation method.
- the origin of L-valine and L-lysine is not particularly limited.
- L-lysine can be produced, for example, by the method described in US Pat. No. 6,040,160, US Pat. No. 5,827,698, European Patent 1182261, or US Pat. No. 7,790,422.
- L-valine can be produced, for example, by the method described in European Patent No. 0872547, European Patent No. 1942183, or European Patent Application Publication No. 2218729.
- the feed of the present invention is a feed containing L-valine and L-lysine in a specific ratio.
- Specific ratio refers to a ratio such that the mass ratio of L-valine to L-lysine is higher than the nutritionally optimal ratio. That is, the feed of the present invention contains L-valine and L-lysine such that the mass ratio of L-valine to L-lysine is higher than the nutritionally optimal ratio. In the present invention, the mass ratio of L-valine to L-lysine is also referred to as “Val / Lys ratio”.
- the amount of L-lysine and the amount of L-valine used when calculating the Val / Lys ratio are the total amount of lysine and the amount of total valine, respectively.
- Total lysine amount refers to the total amount of free L-lysine and L-lysine constituting the protein.
- Total valine amount refers to the total amount of free L-valine and L-valine constituting the protein.
- the total amount of lysine and the total amount of valine in the feed are, for example, the respective amino acid concentrations (L-lysine concentration and L-valine concentration) in the hydrolyzed solution using the ninhydrin reaction after acid hydrolysis of the feed protein. Can be calculated based on the measured value.
- an amino acid analyzer can be used for measurement of the amino acid concentration.
- the amino acid concentration can be measured by the standard analysis mode of the fully automatic amino acid analyzer JLC-500 / V (JEOL Ltd.) (reference: Japanese food standard composition table compliant, amino acid composition table 2010) Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology, Science and Technology / Academic Council, Resource Survey Subcommittee Report
- the total amount of lysine and the total amount of valine in various feed materials can be calculated in the same manner.
- the total lysine amount and total valine amount values described in documents such as the Japanese standard feed composition table can also be used.
- the feed of the present invention is converted so that the Val / Lys ratio becomes a predetermined value as described above in terms of the digestible amino acid amount. It preferably contains -valine and L-lysine.
- the Val / Lys ratio calculated in terms of digestible amino acids is also referred to as “digestible Val / Lys ratio”.
- the “digestible amino acid amount” is the amount of amino acid actually used in the industrial animal to be administered.
- the amino acid digestibility of each amino acid varies depending on the type of feed raw material and the type of industrial animal. For example, literature values (Japanese standard feed composition table, Nutrient Requirements of Poultry Ninth revised edition 1994, etc.) can be used.
- the amino acid digestibility is 85% or more when the feed is corn, 80% or more when barley is used, 83% or more when soybean meal is used, and 75% or more when fish meal is used.
- the amino acid digestibility is 80% or more when the feed is corn, 75% or more when barley is used, 70% or more when soybean meal is used, and 70% or more when fish meal is used.
- the digestible total lysine amount and digestible total valine amount in a certain feed material can be calculated by multiplying the total lysine amount and total valine amount of the feed material by the corresponding amino acid digestibility, respectively.
- the total digestible lysine amount and total digestible valine amount in the feed are the total digestible lysine amount and total digestible valine amount in the feed ingredient, respectively. It can be calculated by summing according to the ratio. Depending on the type of feed material and the type of industrial animal, the amino acid digestibility of each amino acid in the feed material is not always clear, and the total digestible lysine content and total digestible valine content in the feed may not be calculated. obtain. In such a case, the Val / Lys ratio calculated from the total lysine amount and the total valine amount may be used as the digestible Val / Lys ratio.
- L-lysine is an essential amino acid
- L-lysine is supplied from feed and the like and is contained in general feed materials.
- L-lysine is likely to be an amino acid (first restricted amino acid) that limits the utilization rate of other essential amino acids in practical feeds. Therefore, the essential amino acids required by industrial animals may be shown as an ideal pattern based on L-lysine, which is the first restriction amino acid. Therefore, various literatures also describe the recommended amount of L-valine based on L-lysine.
- Val / Lys ratio in feed is about 0.68 for piglets and fattening pigs in terms of digestible amino acid amount (Japanese feed standard pig, 1998 version), About 0.77 to 0.81 for chickens for eggs and meat during the breeding season (Britich Poutly Science Vol 40 issue2, p257-265, 1999; Poultry Science September 1994 vol 73 no.9 1441-1447; Poultry Science April 2008 vol.87 no.4 744-758), estimated to be about 0.50 to 0.74 (no literature) for cultured fish and crustaceans.
- Val / Lys ratio is higher than nutritionally optimal ratio means that the Val / Lys ratio of the feed of the present invention is as described above, depending on the type of industrial animal. It is higher than the ideal Val / Lys ratio.
- the Val / Lys ratio is higher than the nutritionally optimal ratio means that the Val / Lys ratio of the feed of the present invention is, for example, greater than 0.75, preferably 0.85. It may be greater than, more preferably greater than 0.95, even more preferably greater than 1.2, particularly preferably greater than 1.3.
- Val / Lys ratio of the feed of the present invention is not particularly limited as long as it is higher than the nutritionally optimum ratio.
- the feed of the present invention may consist only of L-valine and L-lysine, or may contain other components.
- ingredients are not particularly limited as long as they can be taken orally by industrial animals.
- those used in feeds and pharmaceuticals can be used.
- feed raw materials can be blended with the feed of the present invention as long as the effects of the present invention are not impaired.
- feed ingredients include bran, rice bran, wheat bran, and bran braids; Cereals such as corn, rice, wheat, barley and buckwheat; oil meals such as soybean meal, rapeseed meal, cottonseed meal, sweet potato meal, sesame meal, sunflower meal; fish meal, casein, skim milk powder, dried whey, meat Animal feed such as bone meal, meat meal, feather meal, blood meal, and leaf meal such as alfalfa meal.
- the feed of the present invention may be blended with one or more components selected from excipients, extenders, nutritional supplements, feed additives, etc., as long as the effects of the present invention are not impaired. it can.
- excipient include cellulose derivatives such as carboxymethylcellulose.
- bulking agent include dextrin and starch.
- nutritional supplement include vitamins and minerals.
- feed additives include enzyme agents and viable bacteria agents.
- L-valine, L-lysine, and if necessary, other components may be mixed with each other and contained in the feed of the present invention, either separately or in any combination. Separately, it may be contained in the feed of the present invention.
- the feed of the present invention may separately contain one or more feed ingredients containing L-valine and L-lysine and L-valine for additional addition.
- the feed of the present invention can be produced by combining necessary components so that the Val / Lys ratio becomes a predetermined value as described above.
- the feed of the present invention uses the same feed raw material as that for normal industrial animal feed except that the Val / Lys ratio is adjusted to the predetermined value as described above. It can be manufactured by a method. Adjustment of the Val / Lys ratio to a predetermined value can be achieved, for example, by adding L-valine and / or L-lysine to the feed material. The amount of L-valine and / or L-lysine added can be set according to various conditions such as the Val / Lys ratio of the feed material to be used, the desired Val / Lys ratio, the desired L-valine and L-lysine concentrations, etc. .
- a deficient amount of L-valine and / or L-lysine can be added to the feed material depending on the Val / Lys ratio of the feed material used.
- the addition of L-valine and / or L-lysine may be performed at any stage of the feed production process. That is, L-valine and / or L-lysine may be added to the feed raw material, may be added to the feed during production, or may be added to the produced feed.
- the concentration of L-valine and L-lysine in the feed of the present invention is not particularly limited as long as the Val / Lys ratio is a predetermined value as described above.
- the concentrations of L-valine and L-lysine in the feed of the present invention can be appropriately set according to various conditions such as the type of industrial animal and the mode of administration of the feed of the present invention.
- the total L-lysine concentration in the feed of the present invention is preferably such that, for example, when the feed of the present invention is administered to an industrial animal, the required amount of L-lysine in the industrial animal can be satisfied.
- the total L-valine concentration in the feed of the present invention can be set according to the total L-lysine concentration and the Val / Lys ratio.
- the total L-valine concentration in the feed of the present invention may be, for example, 0.5% by mass or more, 1% by mass or more, or 2% by mass or more in terms of digestible amino acid amount.
- the total L-valine concentration in the feed of the present invention may be, for example, 50% by mass or less, 10% by mass or less, or 5% by mass or less in terms of digestible amino acid amount.
- the form of the feed of the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention are not impaired.
- the feed of the present invention may be in any form such as powder, granule, liquid, paste, cube and the like.
- the type of feed of the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention are not impaired.
- the feed of the present invention may be any kind of feed such as breast milk, milk substitute, pre-initial feed (prestarter feed), initial feed (starter feed), fattening feed, and the like.
- ⁇ 4> Use of feed of the present invention
- the breeding performance of industrial animals can be improved by administering the feed of the present invention and breeding industrial animals.
- Examples of “improving rearing performance” include a decrease in feed demand rate, an increase in body weight (growth), an increase in feed intake, and combinations thereof.
- feed requirement rate means the weight of feed necessary for the increase (growth) of unit weight.
- feed efficiency means the weight gain of a unit weight of ingested feed, and is synonymous with “weight gain efficiency”. That is, the “feed requirement rate” is represented by the reciprocal of “feed efficiency (gain efficiency)”. Therefore, the “decrease in feed request rate” is, in other words, an increase in feed efficiency (weight gain efficiency).
- the feed of the present invention it is considered that the breeding performance is improved by relaxing the stress. Therefore, you may use the feed of this invention in order to relieve
- the relaxation of stress is expected to be effective in preventing and / or treating symptoms induced by stress, such as intestinal injury. Therefore, you may use the feed of this invention for the prevention and / or treatment of the intestinal tract injury of an industrial animal, for example.
- the present invention provides a method for relieving stress in industrial animals, including the step of administering the feed of the present invention to industrial animals.
- the present invention also provides a method for preventing and / or treating intestinal injury of an industrial animal, comprising the step of administering the feed of the present invention to the industrial animal.
- the feed of the present invention by administering the feed of the present invention to an industrial animal, for example, the L-lysine requirement of the industrial animal is satisfied and the protein is efficiently synthesized, and the action of L-valine.
- an industrial animal for example, the L-lysine requirement of the industrial animal is satisfied and the protein is efficiently synthesized, and the action of L-valine.
- stress conditions are alleviated and feeding is enhanced.
- the feed of the present invention may be administered alone to industrial animals, or may be administered to industrial animals in combination with other feeds.
- the feed of the present invention may be administered simultaneously with other feeds or may be administered separately.
- the feed of the present invention may be mixed with other feeds and administered.
- the feed of the present invention and other feeds may be administered so that the Val / Lys ratio becomes a predetermined value as described above.
- the Val / Lys ratio of the feed of the present invention and other feeds administered within a predetermined period is the predetermined value as described above. What is necessary is just to administer.
- the predetermined period may be appropriately set according to various conditions such as the aspect of the feed of the present invention, the type of industrial animal, the administration time, etc. For example, 6 hours, 12 hours, 24 hours, 3 days, or 7 days It may be.
- the feed of the present invention contains each component (that is, L-valine, L-lysine, and other components as necessary) separately or in any combination, May be administered simultaneously, and may be administered separately or separately in any combination.
- the feed of the present invention contains one or more feed raw materials containing L-valine and L-lysine and L-valine for additional addition separately, the feed raw material and for additional addition Of L-valine may be administered separately.
- administration may be performed so that the Val / Lys ratio becomes a predetermined value as described above at each administration or within a predetermined period.
- the dose of the feed of the present invention is not particularly limited.
- the dose is preferably such that the necessary amount of L-lysine in the industrial animal can be satisfied.
- the feed of the present invention is administered alone to an industrial animal, it is preferable that the required amount of L-lysine in the industrial animal is satisfied with L-lysine contained in the feed of the present invention.
- L-lysine contained in the feeds of the present invention and L-lysine contained in other feeds cause L- It is preferable to satisfy the required amount of lysine.
- the feed of the present invention may be administered once a day or divided into a plurality of times. Moreover, the feed of this invention may be administered once every several days.
- the dose at each administration may or may not be constant in terms of the total digestible valine amount.
- the dose at each administration may or may not be constant in terms of the digestible total lysine amount.
- the Val / Lys ratio of the feed of the present invention at each administration may or may not be constant.
- the timing for administering the feed of the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention are not impaired.
- the feed of the present invention may be administered continuously immediately after birth of an industrial animal, or may be administered only during a partial period.
- the feed of the present invention may be repeatedly continued and interrupted for an arbitrary period.
- the feed of the present invention may be used as any feed selected from, for example, breast milk, milk substitute, pre-initial feed (prestarter feed), initial feed (starter feed), and fattening feed.
- the feed of the present invention may be used in combination with any feed selected from, for example, breast milk, milk substitute, pre-initial feed (prestarter feed), initial feed (starter feed), and fattening feed.
- the feed of the present invention is preferably administered at a time when the industrial animal is in a stress environment.
- the feed of the present invention may be administered during the entire period when the industrial animal is in a stress environment, or may be administered during a part of the period when the industrial animal is in a stress environment.
- “A part of the period when the industrial animal is in the stress environment” means, for example, a period of 1/10 or more of the period when the industrial animal is in the stress environment, and a period of 1/5 or more. Or a period of one-half or more.
- “industrial animals are in a stress environment” means that the industrial animals are in an environment where anti-pathogenicity and productivity are different from the conventional environment. Examples of such an environment include a change in the breeding environment, a change that affects the digestive tract such as the intestinal tract, and a change in the food environment.
- one aspect of the feed of the present invention is an industrial animal stress relieving agent. That is, the feed of the present invention has an effect of relieving stress when the industrial animal is placed in a stress environment.
- Changes in breeding environment include, for example, changes in hygiene conditions, temperature changes, changes in breeding density, social stress, movement of livestock, shipping, and artificial handling.
- changes affecting the digestive tract include pathogen infection, indigestion (diarrhea and / or vomiting) due to changes in the food environment, changes in hygiene, temperature changes, and vaccination.
- Changes in the food environment include, for example, changes in feed during childbirth or lactation, changes in feed due to growth such as weaning of livestock and shifting from the larval stage to the fry stage.
- the feed of the present invention has an effect of recovering the intestinal tract when the intestinal tract is damaged. That is, one aspect of the feed of the present invention is an industrial animal intestinal recovery agent (intestinal injury treatment agent).
- the feed of the present invention is preferably administered before the intestinal tract is damaged under a stress environment.
- the feed of the present invention has an effect of preventing the intestinal tract from being damaged. That is, one aspect of the feed of the present invention is an industrial animal intestinal injury preventive agent.
- intestinal damage examples include early weaning, feed changes, temperature changes, sanitary conditions, diarrhea due to pathogen infection, and intestinal damage due to vaccine administration.
- the feed of the present invention is particularly preferably administered to broiler chicks and layer (chicken) chicks.
- the feed of the present invention is preferably administered at the age of 0 to 7 days of broiler or layer.
- Various vaccines are usually administered to broiler chicks and layer chicks. Examples of such vaccines include Newcastle disease vaccine, infectious bronchitis vaccine, infectious pharyngeal bronchitis vaccine, fowlpox vaccine, Marek's disease vaccine, and coccidium infection vaccine.
- administration of the feed of the present invention at the time of administration of these vaccines prevents and / or improves (treats) intestinal injury due to vaccine administration, and increases feed efficiency.
- Example 1 Effect of Val Administration in Mice
- LPS lipopolysaccharide
- mice Male 5-week-old ICR mice were used, and each group was divided into 4 groups. Mice were bred for 1 week on a basic diet (AIN-93G). “AIN-93G” is a standard diet for mouse and rat nutritional research published in 1993 by the American Institute of Nutrition. Next, as shown in Table 1, physiological saline or LPS (manufactured by Sigma) whose concentration was examined in advance was dissolved in physiological saline and administered into the abdominal cavity of the mouse. Val suspended in a% methylcellulose solution was orally administered so that the dosage shown in Table 1 was obtained.
- AIN-93G is a standard diet for mouse and rat nutritional research published in 1993 by the American Institute of Nutrition.
- mice were dissected 24 hours after administration of physiological saline or LPS dissolved in physiological saline, and a Ki67-stained specimen of the duodenum was prepared for observation and image analysis using an optical microscope. Since Ki67 staining stains cells other than resting phase (positive), Ki67 staining is used as an indicator of cell proliferation. Moreover, hematoxylin staining was performed as a counterstaining. In the image analysis of the Ki67-stained specimen, the ratio of the area that became positive by Ki67 staining to the area of the whole tissue stained with hematoxylin was calculated, and each test section was compared.
- [result] 1 to 4 show Ki67 stained images with an optical microscope, and Table 2 and FIG. 5 show the results of image analysis. As a result of observation with an optical microscope, it was shown that Ki67 staining intensity was lower in test group 2 (LPS single administration group) than in test group 1 (control group), and cell growth was suppressed by LPS administration. (FIGS. 1 and 2). In test groups 3 and 4 (LPS + Val administration group), the intensity of Ki67 staining was stronger than that in test group 2 (LPS alone administration group) (FIGS. 2, 3, and 4).
- Val administration activates intestinal cell proliferation suppressed by LPS administration.
- Example 2 Effect of Val administration in broiler
- the effect of Val administration under conditions in which stress and intestinal injury were generated by administering a coccidium vaccine in a broiler was examined.
- each test group was divided into 4 test groups with 144 birds, and all groups were bred for one week. Then, it switched to the test feed as Table 3.
- the composition of each feed is shown in Table 4.
- the Val / Lys ratio of the basic feed is 0.77 in terms of digestible amino acids.
- the Val / Lys ratio calculated in terms of digestible amino acids is also referred to as “digestible Val / Lys ratio”.
- the digestible Val / Lys ratio of the feed for Test Zone 7 was adjusted to 1.52 by adding 1.0% Val to the basic feed.
- the digestible Val / Lys ratio of the test group 8 feed was adjusted to 1.90 by adding 1.5% of Val to the basic feed.
- a live coccidial attenuated vaccine (coccivac-B, InterVet) was administered to broilers. Thereafter, the animals were reared until 21 days of age.
- the digestible Val / Lys ratio shown in Table 3 was calculated by the method described below. Hydrolyzed Lys and Val contents of corn and soybean meal were measured by hydrolyzing a sample of the same lot as the raw material actually used for the test, and the result was used for the calculation. Moreover, the amino acid digestibility of each raw material used the value published in True Digestibility of Essential Amino Acids For Poultry, Revision 7, Ajinomoto Heartland Inc. The amino acid digestibility of the crystalline amino acid was regarded as 100%. The values shown in Table 4 were used for the mixing ratio% of each raw material in the feed.
- digestible Lys content in feed% [(analysis value of Lys content of corn 0.28% ⁇ Lys digestibility of corn 81.7% ⁇ mixing rate of corn in feed) + (of soybean meal) Analysis value of hydrolysis Lys content 2.84% ⁇ Lys digestibility of soybean meal 90.6% ⁇ Mixing ratio of soybean meal in feed) + (Lysine guaranteed value of L-lysine hydrochloride for feed 78% ⁇ L-lysine digestibility) 100% ⁇ L-lysine hydrochloride content rate in feed%)] ⁇ 10000.
- digestible Val content% in feed [Analysis value of corn hydrolysis Val content 0.40% ⁇ Val digestibility of corn 87.8% ⁇ Mixing percentage of corn in feed) + (Soybean meal hydrolysis Val Content analysis value 2.15% ⁇ Valence digestibility of soybean meal 90.9% ⁇ Mixing percentage of soybean meal in feed) + (Guarine guaranteed value 96.5% in feed L-valine ⁇ L-valine digestibility 100% ⁇ L -Valin content in feed%)] ⁇ 10000.
- the digestible Val / Lys ratio can be calculated by dividing the digestible Val content by the digestible Lys content obtained by the above calculation. By changing the ratios of corn, soybean meal, L-lysine hydrochloride, and L-valine to be mixed in the feed, a feed having the desired digestible Val / Lys ratio was prepared.
- the weight gain, feed intake, survival rate, and feed requirement ratio (Feed Conversion Ratio; FCR) between 7 and 21 days of age were calculated. Also, the duodenum was dissected at 21 days of age and hematoxylin and eosin stained (HE stained) specimens were prepared. The HE-stained specimen was observed with an optical microscope, and the intestinal villi height, crypt thickness, and V (intestinal villi height) / C (crypt thickness) ratio were calculated.
- the weight gain from 7 to 21 days of age was significantly higher than test groups 5 and 6 (basic feed group) (Table 5, FIG. 7).
- 7 days of age to 21 days compared to Test Zones 5 and 6 basic feed zone
- the feed demand rate at age was significantly lower, i.e. significantly improved (Table 5, Figure 9).
- Example 3 the effect of administering Val at different concentrations and duration to broilers (models of stress and intestinal injury) that caused stress and intestinal injury by administering the coccidium vaccine was examined.
- the digestible Val / Lys ratio shown in Table 9 was calculated in the same manner as in Example 2. That is, the hydrolysis Lys and Val contents of corn and soybean meal were measured by hydrolyzing a sample of the same lot as the raw material actually used in the test, and the result was used for the calculation. Moreover, the amino acid digestibility of each raw material used the value published in True Digestibility of Essential Amino Acids For Poultry, Revision 7, Ajinomoto Heartland Inc. The amino acid digestibility of the crystalline amino acid was regarded as 100%. The values shown in Table 10 were used as the mixing ratio% of each raw material in the feed.
- digestible Lys content in feed% [(Analyzed value of corn hydrolysis Lys 0.24% ⁇ Lys digestibility of corn 81.7% ⁇ Mixing ratio of corn in feed) + (Soybean meal Analysis value of hydrolysis Lys content 2.84% ⁇ Lys digestibility of soybean meal 90.6% ⁇ Mixing ratio of soybean meal in feed) + (Lysine guaranteed value of L-lysine hydrochloride for feed 78% ⁇ L-lysine digestibility) 100% ⁇ L-lysine hydrochloride content rate in feed%)] ⁇ 10000.
- digestible Val content% in feed [Analysis value of corn hydrolysis Val content 0.37% x Val digestion rate of corn 87.8% x Mixing percentage of corn in feed) + (Soybean meal hydrolysis Val Content analysis value 2.21% ⁇ Val digestibility of soybean meal 90.9% ⁇ Mixing ratio of soybean meal in feed) + (Guarine guaranteed value in feed L-valine 96.5% ⁇ L-valine digestibility 100% ⁇ L -Valin content in feed%)] ⁇ 10000.
- the digestible Val / Lys ratio can be calculated by dividing the digestible Val content by the digestible Lys content obtained by the above calculation. By changing the ratios of corn, soybean meal, L-lysine hydrochloride, and L-valine to be mixed in the feed, a feed having the desired digestible Val / Lys ratio was prepared.
- the vaccine was administered as shown in Table 9 at 3 days of age.
- the weight gain, feed intake, survival rate, and feed requirement ratio (Feed Conversion Ratio; FCR) between 0 and 35 days of age were calculated.
- the duodenum was dissected at 21 days of age and hematoxylin and eosin stained (HE stained) specimens were prepared. The HE-stained specimen was observed with an optical microscope, and the V (intestinal villi height) / C (crypt thickness) ratio was calculated.
- the vaccine was administered with the digestible Val / Lys ratio adjusted to 1.52, but Val was added only in Stage I (0-7 days of age) in Test Zone 15 and Test Zone 16 where the administration period of the Val-added feed was different. Only in the test group 15 to which the feed was administered, an increase in body weight over the test group 9 to which no vaccine was administered was observed.
- the V / C ratio was improved as compared with the test group 10, but the extent of the improvement was It was smaller than the test area 15. Therefore, when using the feed of the present invention, it may be preferable to limit the administration period.
- Example 4 Effect of Val administration in broiler (condition without coccidium vaccine)
- the effect of Val in broiler chicks under the condition where no vaccine was administered was examined.
- test feed was fed to each test area as shown in Table 12 and reared.
- Test Zone 1 is a basic feed to which no Val was added, and was prepared using raw materials such as soybean meal and corn so that the digestible Val / Lys ratio of the feed was 0.80.
- the test group 2 feed was prepared such that 0.935% of Val was added and the digestible Val / Lys ratio was 1.52.
- the feed of test group 3 was prepared such that Val was added at 1.425% and the digestible Val / Lys ratio was 1.90.
- test areas 1, 2, and 3 were raised at 3 days of age and autopsy was performed. The remaining individuals were kept up to 7 days of age and were subjected to necropsy after measuring or calculating weight gain, body weight, feed intake, survival rate, and feed requirement ratio (Feed Conversion Ratio; FCR).
- FCR Fee Conversion Ratio
- Plasma was separated from blood and free amino acids in the plasma were measured. From the meat, according to the method of Okutsu et al. Free amino acids were extracted using perchloric acid, and the amount of free amino acids per 100 g of muscle was calculated. Hematoxylin and eosin stained (HE stained) specimens were prepared from the duodenal tissue. The HE-stained specimen was observed with an optical microscope, and the intestinal villi height, crypt thickness, and V (intestinal villi height) / C (crypt thickness) ratio were calculated.
- FIGS. 12 and 14 show the average weight of the fillet collected at 3 days and 7 days of age.
- FIGS. 13 and 15 show the average weight gain during the period of 0 to 3 days and 0 to 7 days.
- FIG. 16 shows FCR for a period of 0-7 days.
- the average weight of the fillet meat and the average weight gain at the age of 3 days and 7 days were significantly higher than those of the test group 1, or It was shown that there is a tendency.
- the FCR significantly decreased or had a tendency as compared with the test group 1.
- FIGS. 17 to 20 show the concentrations of free Val and free 3-methylhistidine (3MeHis) in plasma and fillet collected at 3 days of age.
- the Val concentration was significantly increased in the test groups 2 and 3 depending on the dietary Val concentration in both plasma and fillet.
- the 3-methylhistidine concentration generally used as an indicator of protein catabolism significantly decreases in the test groups 2 and 3 in both plasma and breast meat.
- the digestible Val / Lys ratio in the feed was set high at 1.52-1.90 in young broilers 0-7 days after hatching even under conditions that did not give obvious stress due to coccidium vaccine, etc. It was shown that when the feed was fed, the intestinal tissue was improved in soundness and growth was promoted. That is, it was suggested that the feed of the present invention is not limited to the improvement (treatment) of intestinal tract injury that has already occurred, but is also effective for preventing the occurrence of intestinal tract injury. Although 0-day-old broilers were used in this study, broilers during this period are usually exposed to many stresses such as hatchery selection, vaccine administration, and transportation to the farm.
- the breeding performance of industrial animals can be improved by administering the feed of the present invention and breeding industrial animals.
Abstract
産業動物の飼育成績を改善する手段を提供する。Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して１．０～３．０であることを特徴とする飼料を、産業動物に投与して産業動物を飼育する。
Description
本発明は、哺乳動物、鳥類、魚類、または甲殻類等の産業動物の飼育成績を改善するための飼料、産業動物のストレス緩和剤、および産業動物のストレスを緩和する方法に関する。
家畜や魚等の産業動物の飼育における特徴的な問題として、ストレス環境下で生育や飼料効率が低下することが挙げられる。
例えば、豚は、出生直後は母乳で飼育されるが、その後離乳期を経て、肥育期用の固形飼料により飼育されるようになる。その際、飼料が母乳から固形飼料に切り替わるストレスの影響で、飼料摂取量が低下することが知られている。このほかにも、下痢、種々の感染症、ワクチン接種、および密飼い飼育などの様々なストレスが、家畜の飼料摂取量の低下を引き起こし、生育を遅延させる要因となることが知られている。
この生育の遅延は産業上大きな問題になるため、その対策として、さまざまな試みがなされている。
例えば、グルタミンとグルタミン酸からなる添加物または核酸とグルタミンからなる添加物を含有する家畜飼料用添加物を豚等の家畜に投与することにより、家畜の増体効率および飼料効率を改善することが可能になることが知られている（特許文献１）
また、Ｌ－グルタミン酸とＬ－トリプトファンを含む家畜飼料添加剤を家畜に投与することにより、家畜の増体効率および飼料要求率を改善することが知られている（特許文献２）。
Ｌ－バリンは、分岐鎖アミノ酸であり、必須アミノ酸の１種でもある。Ｌ－バリンは、生体のタンパク質を合成する働きや運動時のエネルギー源として重要な役割を果たす。
また、５－フルオロウラシル誘発腸炎ラットに対して、Ｌ－バリンを投与することにより、小腸の腸管障害を治療する効果が得られることが知られている（非特許文献１）。
また、ストレス環境下で家畜のアミノ酸の要求量が変化することも知られている（非特許文献２）。
しかしながら、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比を栄養学的に最適とされる比率より高めた飼料を産業動物に投与することによる効果については知られていない。
外科と代謝・栄養 ３８巻 ２号 ２００４年
Journal or animal science 2009 87 1686-1694
本発明は、産業動物の飼育成績を改善するための飼料、産業動物のストレス緩和剤、ならびに産業動物のストレスを緩和する方法を提供することを課題とする。
本発明者らは、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比を栄養学的に最適とされる比率より高めた飼料を産業動物に投与することにより、産業動物の飼育成績を改善できることを見出した。
すなわち本発明は以下の態様を含む。
[１]
Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、飼料。
[２]
前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して１．３～２．０であることを特徴とする、前記飼料。
[３]
産業動物に用いられることを特徴とする、前記飼料。
[４]
前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、前記飼料。
[５]
前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、前記飼料。
[６]
産業動物のストレスを緩和するために用いられる、前記飼料。
[７]
産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、前記飼料。
[８]
Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、産業動物のストレス緩和剤。
[９]
前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して、１．３～２．０であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１０]
前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１１]
前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１２]
産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、前記ストレス緩和剤。
[１３]
前記飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物のストレス緩和方法。
[１４]
前記飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物の腸管傷害を予防および／または治療する方法。
[１]
Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、飼料。
[２]
前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して１．３～２．０であることを特徴とする、前記飼料。
[３]
産業動物に用いられることを特徴とする、前記飼料。
[４]
前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、前記飼料。
[５]
前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、前記飼料。
[６]
産業動物のストレスを緩和するために用いられる、前記飼料。
[７]
産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、前記飼料。
[８]
Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、産業動物のストレス緩和剤。
[９]
前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して、１．３～２．０であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１０]
前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１１]
前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、前記ストレス緩和剤。
[１２]
産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、前記ストレス緩和剤。
[１３]
前記飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物のストレス緩和方法。
[１４]
前記飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物の腸管傷害を予防および／または治療する方法。
以下、本発明を詳細に説明する。
＜１＞本発明の飼料が投与される対象
本発明の飼料は、産業動物に投与される。本発明において、「産業動物」とは、家畜および／または養殖魚をいう。
本発明の飼料は、産業動物に投与される。本発明において、「産業動物」とは、家畜および／または養殖魚をいう。
本発明において、「家畜」には、例えば、乳用、肉用、卵用、毛用、皮革用、または労働力用の動物や、イヌ、ネコ等のペット（愛玩動物）が含まれる。「家畜」として、具体的には、例えば、牛、豚、鶏、馬、七面鳥、羊、山羊、イヌ、ネコが挙げられる。なかでも、豚や鶏が好ましい。鶏としては、肉用鶏や採卵鶏が好ましく、ブロイラーがより好ましい。
本発明において、「養殖魚」には、魚類、甲殻類が含まれる。「魚類」として、具体的には、例えば、マグロ、カツオ、ブリ、カンパチ、ヒラマサ、タイ、サケ、タラ、マス、ニジマス、ヒラメ、トラフグ、カワハギ、アジ、ハタ、ウナギ、コイ、ナマズ、ティラピア、ソウギョ、ハクレン、フナが挙げられる。「甲殻類」として、具体的には、例えば、クルマエビ、ブラックタイガー、バナメイエビ、カニが挙げられる。
＜２＞本発明において用いられるＬ－アミノ酸
本発明において、バリンおよびリジンは、特記しない限り、いずれもＬ体である。
本発明において、バリンおよびリジンは、特記しない限り、いずれもＬ体である。
Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、いずれも、フリー体もしくはその塩、またはそれらの混合物であってよい。塩は、産業動物が経口摂取可能なものであれば特に制限されない。例えば、Ｌ－リジンの塩としては、Ｌ－リジン塩酸塩、Ｌ－リジン炭酸塩、Ｌ－リジン硫酸塩が挙げられる。塩としては、１種の塩を用いてもよく、２種またはそれ以上の塩を組み合わせて用いてもよい。Ｌ－バリンとしては、Ｌ－バリンベース（フリー体のＬ－バリン）を用いるのが好ましい。
また、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、いずれも、遊離のＬ－バリンまたはＬ－リジン（すなわち、単量体のＬ－バリンまたはＬ－リジン）であってもよく、タンパク質を構成するＬ－バリンまたはＬ－リジンであってもよく、それらの混合物であってもよい。すなわち、遊離のＬ－バリンまたはＬ－リジンに替えて、あるいは加えて、Ｌ－バリンまたはＬ－リジンを構成要素として含むタンパク質を用いてもよい。なお、ここでいう「タンパク質」には、ペプチド、オリゴペプチド、またはポリペプチドと呼ばれる態様も含まれるものとする。
Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、いずれも、精製品であってもよく、Ｌ－バリンまたはＬ－リジンを含有する原料であってもよい。また、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、いずれも、産業動物が利用可能な態様であればどのような形状であってもよい。Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、いずれも、例えば、溶液、懸濁液、粉末、結晶、または微生物を含有したまま造粒されたものであってよい。
Ｌ－バリンおよびＬ－リジンとしては、市販品を用いてもよく、適宜製造して取得したものを用いてもよい。Ｌ－バリンおよびＬ－リジンは、例えば、合成法、抽出法、又は発酵法で製造することができる。Ｌ－バリンおよびＬ－リジンの由来は特に制限されない。Ｌ－リジンは、例えば、米国特許6,040,160号、米国特許5,827,698号、欧州特許1182261号、または米国特許7,790,422号に記載の方法で製造することができる。Ｌ－バリンは、例えば、欧州特許0872547号、欧州特許1942183号、または欧州特許出願公開2218729号に記載の方法で製造することができる。
＜３＞本発明の飼料
本発明の飼料は、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを特定の比率で含む飼料である。
本発明の飼料は、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを特定の比率で含む飼料である。
「特定の比率」とは、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比が、栄養学的に最適とされる比率より高くなるような比率をいう。すなわち、本発明の飼料は、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比が、栄養学的に最適とされる比率より高くなるように含む。本発明において、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比を「Ｖａｌ／Ｌｙｓ比」ともいう。
本発明において、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比を算出する際に用いられるＬ－リジン量およびＬ－バリン量は、それぞれ、総リジン量および総バリン量である。「総リジン量」とは、遊離のＬ－リジンとタンパク質を構成するＬ－リジンの総量をいう。「総バリン量」とは、遊離のＬ－バリンとタンパク質を構成するＬ－バリンの総量をいう。なお、Ｌ－バリンおよび／またはＬ－リジンが塩として存在する場合、塩の質量を等モルのフリー体の質量に換算してからＶａｌ／Ｌｙｓ比を算出する。
飼料中の総リジン量および総バリン量は、それぞれ、例えば、飼料のタンパク質の酸加水分解後、ニンヒドリン反応を利用して加水分解液中の各アミノ酸濃度（Ｌ－リジン濃度およびＬ－バリン濃度）を測定し、それをもとに算出することができる。アミノ酸濃度の測定には、例えば、アミノ酸分析計を用いることができる。具体的には、例えば、全自動アミノ酸分析機JLC-500/V（日本電子株式会社）の標準分析モードによりアミノ酸濃度を測定することができる（参考文献：日本食品標準成分表準拠 アミノ酸成分表2010 文部科学省 科学技術・学術審議会 資源調査分科会報告）。各種飼料原料中の総リジン量および総バリン量も同様に算出することができる。なお、飼料原料の種類によっては、日本標準飼料成分表等の文献に記載された総リジン量および総バリン量の値を利用することもできる。
また、飼料中のアミノ酸の全てが利用されるとは限らないため、本発明の飼料は、可消化アミノ酸量に換算してＶａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値となるように、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを含むのが好ましい。可消化アミノ酸に換算して算出したＶａｌ／Ｌｙｓ比を、「可消化Ｖａｌ／Ｌｙｓ比」ともいう。「可消化アミノ酸量」とは、投与対象の産業動物において実際に利用されるアミノ酸の量である。各アミノ酸のアミノ酸消化率は、飼料原料の種類や産業動物の種類によって異なるが、例えば、文献値（日本標準飼料成分表、Nutrient Requirements of Poultry Ninth revised edition 1994、等）を利用する事ができる。例えば、豚の場合、アミノ酸消化率は、飼料がトウモロコシの場合は85％以上、大麦の場合は80％以上、大豆粕の場合は83％以上、魚粉の場合は75％以上である。また、例えば、鶏の場合、アミノ酸消化率は、飼料がトウモロコシの場合は80％以上、大麦の場合は75％以上、大豆粕の場合は70％以上、魚粉の場合は70％以上である。このようにアミノ酸消化率は諸条件によって異なるが、一般的には、概ね50％～100％である。ある飼料原料中の可消化総リジン量および可消化総バリン量は、それぞれ、当該飼料原料の総リジン量および総バリン量に、対応するアミノ酸消化率を掛ける事によって算出できる。飼料が複数の飼料原料からなる場合、当該飼料中の可消化総リジン量および可消化総バリン量は、それぞれ、飼料原料中の可消化総リジン量および可消化総バリン量を各飼料原料の配合比率に応じて合計する事によって算出できる。なお、飼料原料の種類や産業動物の種類によっては、飼料原料中の各アミノ酸のアミノ酸消化率は必ずしも明らかでなく、飼料中の可消化総リジン量および可消化総バリン量を算出できない場合もあり得る。そのような場合、総リジン量および総バリン量から算出されたＶａｌ／Ｌｙｓ比を、可消化Ｖａｌ／Ｌｙｓ比として用いてもよい。
なお、Ｌ－リジンは、必須アミノ酸であるため、飼料等から供給されるものであり、一般的な飼料原料中に含まれている。Ｌ－リジンは実用飼料では他の必須アミノ酸の利用率を制限するアミノ酸（第一制限アミノ酸）となりやすい。そのため、産業動物が必要とする必須アミノ酸は、第一制限アミノ酸であるＬ－リジンを基準とした理想パターンとして示されることがある。よって、Ｌ－リジンを基準としたＬ－バリンの推奨量についても種々の文献に記載がある。具体的には、例えば、飼料中の理想的なＶａｌ／Ｌｙｓ比は、可消化アミノ酸量に換算して、子豚および肥育期の豚で０．６８程度（日本飼料標準 豚 １９９８年度版）、育成期の卵用鶏および肉用鶏で０．７７～０．８１程度（Britich Poutly Science Vol 40 issue2, p257-265, 1999； Poultry Science September 1994 vol 73 no.9 1441-1447； Poultry Science April 2008 vol 87 no.4 744-758）、養殖魚および甲殻類で０．５０～０．７４程度（文献なし）であると推定されている。
本発明において、「Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が栄養学的に最適とされる比率より高い」とは、本発明の飼料のＶａｌ／Ｌｙｓ比が、上記のような、産業動物の種類に応じた、飼料中の理想的なＶａｌ／Ｌｙｓ比よりも高いことをいう。本発明において、「Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が栄養学的に最適とされる比率より高い」とは、本発明の飼料のＶａｌ／Ｌｙｓ比が、例えば、０．７５より大きいこと、好ましくは０．８５より大きいこと、より好ましくは０．９５より大きいこと、さらに好ましくは１．２より大きいこと、特に好ましくは１．３より大きいことであってよい。
本発明の飼料のＶａｌ／Ｌｙｓ比は、栄養学的に最適とされる比率より高い限り特に制限されないが、例えば、１．０～３．０、好ましくは１．３～２．０、より好ましくは１．５２～１．９０であってよい。
本発明の飼料は、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンのみからなるものであってもよく、その他の成分を含むものであってもよい。
「その他の成分」としては、産業動物が経口摂取可能なものであれば特に制限されず、例えば、飼料や医薬品に配合して利用されるものを利用できる。
例えば、本発明の飼料には、本発明の効果を損なわない限り、１またはそれ以上の飼料原料を配合することができる。飼料原料としては、例えば、ふすま，米ぬか，麦ふすま，あわぬかなどのぬか類；とうふ粕，でんぷん粕，コプラミール，酒粕，しょうゆ粕，ビール粕，焼酎粕，果実や野菜のジュース粕などの製造粕類；トウモロコシ，イネ，小麦，大麦，燕麦などの穀類；大豆粕，ナタネ粕，綿実粕，あまに粕，ゴマ粕，ヒマワリ粕などの油粕類；魚粉，カゼイン，脱脂粉乳，乾燥ホエー，ミートボーンミール，ミートミール，フェザーミール，血粉などの動物質飼料；アルファルファミールなどのリーフミール類が挙げられる。
また、例えば、本発明の飼料には、本発明の効果を損なわない限り、賦形剤、増量剤、栄養補強剤、飼料添加物等から選択される１またはそれ以上の成分を配合することもできる。賦形剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース等のセルロース誘導体が挙げられる。増量剤としては、例えば、デキストリンやデンプンが挙げられる。栄養補強剤としては、例えば、ビタミン類やミネラル類が挙げられる。飼料添加物としては、例えば、酵素剤や生菌剤が挙げられる。
本発明の飼料において、Ｌ－バリン、Ｌ－リジン、および必要に応じてその他の成分は、互いに混合されて本発明の飼料に含まれていてもよく、それぞれ別個に、あるいは、任意の組み合わせで別個に、本発明の飼料に含まれていてもよい。例えば、本発明の飼料は、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを含有する１またはそれ以上の飼料原料と、追加添加用のＬ－バリンとを、それぞれ別個に含むものであってもよい。
本発明の飼料は、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値となるように、必要な成分を組み合わせることにより製造できる。
例えば、本発明の一態様において、本発明の飼料は、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比を上述したような所定の値に調整する以外は、通常の産業動物用の飼料と同様の飼料原料を用い、同様の方法によって製造することができる。Ｖａｌ／Ｌｙｓ比を所定の値に調整することは、例えば、飼料原料にＬ－バリンおよび／またはＬ－リジンを添加することにより達成できる。Ｌ－バリンおよび／またはＬ－リジンの添加量は、用いる飼料原料のＶａｌ／Ｌｙｓ比、所望のＶａｌ／Ｌｙｓ比、所望のＬ－バリンおよびＬ－リジンの濃度等の諸条件に応じて設定できる。具体的には、例えば、用いる飼料原料のＶａｌ／Ｌｙｓ比等に応じて、不足分のＬ－バリンおよび／またはＬ－リジンを飼料原料に添加することができる。Ｌ－バリンおよび／またはＬ－リジンの添加は、飼料の製造工程のいずれの段階で行われてもよい。すなわち、Ｌ－バリンおよび／またはＬ－リジンは、飼料原料に添加されてもよく、製造途中の飼料に添加されてもよく、製造された飼料に添加されてもよい。
本発明の飼料におけるＬ－バリンおよびＬ－リジンの濃度は、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値である限り特に制限されない。本発明の飼料におけるＬ－バリンおよびＬ－リジンの濃度は、産業動物の種類や本発明の飼料の投与態様等の諸条件に応じて、適宜設定できる。本発明の飼料における総Ｌ－リジン濃度は、例えば、本発明の飼料を産業動物に投与した際に、当該産業動物におけるＬ－リジンの必要量を充足できるような濃度であるのが好ましい。本発明の飼料における総Ｌ－バリン濃度は、総Ｌ－リジン濃度とＶａｌ／Ｌｙｓ比に応じて設定できる。本発明の飼料における総Ｌ－バリン濃度は、例えば、可消化アミノ酸量に換算して、０．５質量％以上、１質量％以上、または２質量％以上であってよい。また、本発明の飼料における総Ｌ－バリン濃度は、例えば、可消化アミノ酸量に換算して、５０質量％以下、１０質量％以下、または５質量％以下であってよい。
本発明の飼料の形態は、本発明の効果を損なわない限り特に制限されない。本発明の飼料は、例えば、粉末状、顆粒状、液状、ペースト状、キューブ状等のいかなる形態であってもよい。
本発明の飼料の種類は、本発明の効果を損なわない限り特に制限されない。本発明の飼料は、例えば、母乳、代用乳、前初期飼料（プレスターター飼料）、初期飼料（スターター飼料）、肥育期飼料等のいかなる種類の飼料であってもよい。
＜４＞本発明の飼料の使用
本発明の飼料を投与して産業動物を飼育することにより、産業動物の飼育成績を改善することができる。「飼育成績の改善」としては、例えば、飼料要求率の低下、増体（生育）の増大、飼料摂取量の増大、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
本発明の飼料を投与して産業動物を飼育することにより、産業動物の飼育成績を改善することができる。「飼育成績の改善」としては、例えば、飼料要求率の低下、増体（生育）の増大、飼料摂取量の増大、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
なお、「飼料要求率」とは、単位重量の増体（生育）のために必要な飼料の重量を意味する。「飼料効率」とは、単位重量の摂取飼料による増体重量を意味し、「増体効率」と同義である。すなわち、「飼料要求率」は、「飼料効率（増体効率）」の逆数で表される。よって、「飼料要求率の低下」とは、言い換えれば、飼料効率（増体効率）の増大である。
本発明の飼料によれば、ストレスの緩和により、飼育成績の改善がなされるものと考えられる。よって、本発明の飼料は、産業動物のストレスを緩和するために用いてもよい。すなわち、本発明の飼料の一態様は、産業動物のストレス緩和剤である。また、ストレスの緩和により、ストレスにより誘発される症状、例えば、腸管傷害の予防および／または治療効果が期待される。よって、本発明の飼料は、例えば、産業動物の腸管傷害の予防および／または治療のために用いてもよい。
よって、本発明は、本発明の飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物のストレス緩和方法を提供する。また、本発明は、本発明の飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物の腸管傷害を予防および／または治療する方法を提供する。
本発明の一態様においては、本発明の飼料を産業動物に投与することにより、例えば、産業動物のＬ－リジン要求量が満たされて効率的にタンパク質が合成されるとともに、Ｌ－バリンの作用によりストレス条件が緩和されて摂食が亢進することとなり、結果として産業動物の飼育成績を改善することができると考えられる。
本発明の飼料は、単独で産業動物に投与してもよく、他の飼料と併用して産業動物に投与してもよい。本発明の飼料を他の飼料と併用する場合、本発明の飼料は、他の飼料と同時に投与されてもよく、別個に投与されてもよい。本発明の飼料を他の飼料と同時に投与する場合、例えば、本発明の飼料は、他の飼料と混合して投与すればよい。本発明の飼料を他の飼料と同時に投与する場合、本発明の飼料および他の飼料の全体で、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値となるように投与すればよい。また、本発明の飼料を他の飼料と別個に投与する場合、所定の期間内に投与される本発明の飼料および他の飼料の全体で、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値となるように投与すればよい。所定の期間は、本発明の飼料の態様、産業動物の種類、投与時期等の諸条件に応じて適宜設定すればよいが、例えば、６時間、１２時間、２４時間、３日間、または７日間であってよい。
また、本発明の飼料が、各成分（すなわち、Ｌ－バリン、Ｌ－リジン、および必要に応じてその他の成分）を、それぞれ別個に、あるいは、任意の組み合わせで別個に含む場合、各成分は、同時に投与されてもよく、それぞれ別個に、あるいは、任意の組み合わせで別個に投与されてもよい。例えば、本発明の飼料が、Ｌ－バリンおよびＬ－リジンを含有する１またはそれ以上の飼料原料と、追加添加用のＬ－バリンとを、それぞれ別個に含む場合、当該飼料原料と追加添加用のＬ－バリンとを、別個に投与してもよい。いずれの投与態様においても、各投与時に、あるいは所定の期間内で、Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が上述したような所定の値となるように投与すればよい。
本発明の飼料の投与量は特に制限されないが、例えば、本発明の飼料を産業動物に投与した際に、当該産業動物におけるＬ－リジンの必要量を充足できるような投与量であるのが好ましい。例えば、本発明の飼料が単独で産業動物に投与される場合は、本発明の飼料に含まれるＬ－リジンにより当該産業動物におけるＬ－リジンの必要量を充足するのが好ましい。また、本発明の飼料が他の飼料と併用されて産業動物に投与される場合は、本発明の飼料に含まれるＬ－リジンおよび他の飼料に含まれるＬ－リジンにより当該産業動物におけるＬ－リジンの必要量を充足するのが好ましい。
本発明の飼料は、１日１回または複数回に分けて投与されてよい。また、本発明の飼料は、数日に１回投与されてもよい。各投与時の投与量は、可消化総バリン量に換算して、一定であってもよく、そうでなくてもよい。各投与時の投与量は、可消化総リジン量に換算して、一定であってもよく、そうでなくてもよい。各投与時の本発明の飼料のＶａｌ／Ｌｙｓ比は、一定であってもよく、そうでなくてもよい。
本発明の飼料を投与する時期は、本発明の効果を損なわない限り特に制限されない。本発明の飼料は、産業動物の出生直後から継続して投与されてもよく、一部の期間にのみ投与されてもよい。また、本発明の飼料は、任意の期間で投与の継続と中断を繰り返してもよい。
例えば、豚の飼育においては、出生直後は母乳のみが投与されるが、１～２週間後からは母乳に加え前初期飼料（プレスターター飼料）が投与される。離乳とともに飼料が初期飼料（スターター飼料）に切り替えられ、その後肥育期飼料を用いて肥育される。すなわち、本発明の飼料は、例えば、母乳、代用乳、前初期飼料（プレスターター飼料）、初期飼料（スターター飼料）、肥育期飼料から選択されるいずれの飼料として用いてもよい。また、本発明の飼料は、例えば、母乳、代用乳、前初期飼料（プレスターター飼料）、初期飼料（スターター飼料）、肥育期飼料から選択されるいずれの飼料と併用して用いてもよい。
本発明の飼料は、産業動物がストレス環境におかれている時期に投与されるのが好ましい。本発明の飼料は、産業動物がストレス環境におかれている時期の全期間において投与されてもよく、産業動物がストレス環境におかれている時期の一部の期間において投与されてもよい。「産業動物がストレス環境におかれている時期の一部の期間」とは、例えば、産業動物がストレス環境におかれている時期の１０分の１以上の期間、５分の１以上の期間、または２分の１以上の期間であってよい。
本発明において、「産業動物がストレス環境におかれている」とは、産業動物が、従来の環境と異なる、抗病原性や生産性が低下するような環境にあることをいう。そのような環境としては、例えば、飼育環境の変化、腸管等の消化管に影響を与える変化、食環境の変化が挙げられる。上述の通り、本発明の飼料の一態様は、産業動物のストレス緩和剤である。すなわち、本発明の飼料は、その一態様において、産業動物がストレス環境におかれているときに、ストレスを緩和する効果を有する。
飼育環境の変化としては、例えば、衛生状況の変化、温度変化、飼育密度の変化、社会的ストレス、畜舎の移動、出荷、人為的なハンドリングが挙げられる。
消化管に影響を与える変化としては、例えば、病原体の感染、食環境の変化による消化不良（下痢および／または嘔吐）、衛生状況の変化、温度変化、ワクチン接種が挙げられる。
食環境の変化としては、例えば、出産または授乳中の飼料の変更、家畜の離乳や仔魚期から稚魚期への移行等の生育による飼料の変更が挙げられる。
本発明の飼料は、特に、ストレス環境下で腸管が傷害を受けることにより、飼料効率が低下している際に投与するのが好ましい。腸管が傷害を受けているかどうかは、例えば、十二指腸のKi67染色標本を作製し、光学顕微鏡による観察および画像解析に供することによって確認できる。Ki67染色では休止期以外の細胞が染まる（陽性）ため、Ki67染色は細胞増殖の指標として利用される。本発明の飼料は、その一態様において、腸管が傷害を受けている際に、腸管を回復する効果を有する。すなわち、本発明の飼料の一態様は、産業動物の腸管回復剤（腸管傷害治療剤）である。
また、本発明の飼料は、ストレス環境下で腸管が傷害を受ける前に投与するのも好ましい。本発明の飼料は、その一態様において、腸管が傷害を受けるのを予防する効果を有する。すなわち、本発明の飼料の一態様は、産業動物の腸管傷害予防剤である。
腸管の傷害としては、早期離乳や飼料変化、温度変化、衛生状況悪化、病原体の感染等による下痢の発生、ワクチン投与による腸管傷害が挙げられる。
本発明の飼料は、特に、ブロイラーのヒナやレイヤー（採卵鶏）のヒナに投与するのが好ましい。具体的には、例えば、本発明の飼料は、ブロイラーやレイヤーの０～７日齢時に投与するのが好ましい。ブロイラーのヒナやレイヤーのヒナには、通常、種々のワクチンが投与される。そのようなワクチンとしては、例えば、ニューカッスル病ワクチン、伝染性気管支炎ワクチン、伝染性咽頭気管支炎ワクチン、鶏痘ワクチン、マレック病ワクチン、コクシジウム感染症ワクチンが挙げられる。本発明の一態様においては、これらのワクチン投与時に本発明の飼料を投与することにより、ワクチン投与による腸管傷害が予防および／または改善（治療）され、飼料効率が高まる。
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、これらの実施例はいかなる意味でも本発明を限定するものと解してはならない。
実施例１：マウスにおけるＶａｌ投与の効果
本実施例では、マウスにおいて、リポ多糖（LPS）投与により腸管の細胞増殖が抑制された条件におけるVal投与効果を検討した。
本実施例では、マウスにおいて、リポ多糖（LPS）投与により腸管の細胞増殖が抑制された条件におけるVal投与効果を検討した。
[実験手順]
オスの５週齢ICR系マウスを用い、各群６匹として４群に分けた。マウスを基礎飼料（AIN-93G）で１週間飼育した。「AIN-93G」は、米国国立栄養研究所（American Institute of Nutrition）から１９９３年に発表された、マウスおよびラットの栄養研究のための標準組成飼料である。次に、表１に示す通り生理食塩水または予備的に濃度を検討したLPS（シグマ社製）を生理食塩水に溶解したものをマウスの腹腔内に投与し、直後に続けて、０．５％メチルセルロース溶液に懸濁したValを表１に記載の投与量となるよう経口投与した。生理食塩水またはLPSを生理食塩水に溶解したものを投与してから２４時間後にマウスを解剖し、十二指腸のKi67染色標本を作製し、光学顕微鏡による観察および画像解析に供した。Ki67染色では休止期以外の細胞が染まる（陽性）ため、Ki67染色は細胞増殖の指標として利用される。また、対比染色として、ヘマトキシリン染色を行った。Ki67染色標本の画像解析では、ヘマトキシリンで染められた組織全体の面積に対するKi67染色で陽性となった面積の比率を算出し、各試験区の比較を行った。
オスの５週齢ICR系マウスを用い、各群６匹として４群に分けた。マウスを基礎飼料（AIN-93G）で１週間飼育した。「AIN-93G」は、米国国立栄養研究所（American Institute of Nutrition）から１９９３年に発表された、マウスおよびラットの栄養研究のための標準組成飼料である。次に、表１に示す通り生理食塩水または予備的に濃度を検討したLPS（シグマ社製）を生理食塩水に溶解したものをマウスの腹腔内に投与し、直後に続けて、０．５％メチルセルロース溶液に懸濁したValを表１に記載の投与量となるよう経口投与した。生理食塩水またはLPSを生理食塩水に溶解したものを投与してから２４時間後にマウスを解剖し、十二指腸のKi67染色標本を作製し、光学顕微鏡による観察および画像解析に供した。Ki67染色では休止期以外の細胞が染まる（陽性）ため、Ki67染色は細胞増殖の指標として利用される。また、対比染色として、ヘマトキシリン染色を行った。Ki67染色標本の画像解析では、ヘマトキシリンで染められた組織全体の面積に対するKi67染色で陽性となった面積の比率を算出し、各試験区の比較を行った。
[結果]
光学顕微鏡でのKi67染色像を図１～４に、画像解析結果を表２および図５に示す。光学顕微鏡での観察の結果、試験区２（LPS単独投与区）では、試験区１（対照区）と比較してKi67染色強度が低く、LPS投与により細胞増殖が抑制されている事が示された（図１、２）。試験区３、４（LPS+Val投与区）では、試験区２（LPS単独投与区）と比較してKi67染色の強度が強かった（図２、３、４）。また、画像解析結果でも、試験区３、４（LPS+Val投与区）では、試験区２（LPS単独投与区）と比較して、Ki67染色で陽性となった面積の比率の上昇傾向が観察された（表２、図５）。
光学顕微鏡でのKi67染色像を図１～４に、画像解析結果を表２および図５に示す。光学顕微鏡での観察の結果、試験区２（LPS単独投与区）では、試験区１（対照区）と比較してKi67染色強度が低く、LPS投与により細胞増殖が抑制されている事が示された（図１、２）。試験区３、４（LPS+Val投与区）では、試験区２（LPS単独投与区）と比較してKi67染色の強度が強かった（図２、３、４）。また、画像解析結果でも、試験区３、４（LPS+Val投与区）では、試験区２（LPS単独投与区）と比較して、Ki67染色で陽性となった面積の比率の上昇傾向が観察された（表２、図５）。
[考察結論]
以上の結果から、Val投与は、LPS投与によって抑制された腸管の細胞増殖を活性化することが示された。
以上の結果から、Val投与は、LPS投与によって抑制された腸管の細胞増殖を活性化することが示された。
実施例２：ブロイラーにおけるＶａｌ投与の効果
本実施例では、ブロイラーにおいて、コクシジウムワクチンを投与する事によりストレスおよび腸管傷害を発生させた条件におけるVal投与効果を検討した。
本実施例では、ブロイラーにおいて、コクシジウムワクチンを投与する事によりストレスおよび腸管傷害を発生させた条件におけるVal投与効果を検討した。
０日齢のオスArbor Acres Plusブロイラーのヒナを用い、１試験区144羽として４試験区に分け、全ての区を１週間馴致飼育した。その後、表３の通り試験飼料に切り替えた。各飼料の組成は表４に示した。基礎飼料のVal/Lys比は、可消化アミノ酸に換算して、0.77である。可消化アミノ酸に換算して算出したVal/Lys比を、「可消化Val/Lys比」ともいう。試験区７用飼料の可消化Val/Lys比は、基礎飼料にValを1.0%添加する事によって1.52に調整した。試験区８用飼料の可消化Val/Lys比は、基礎飼料にValを1.5%添加する事によって1.90に調整した。１０日齢で、表３に示した通りコクシジウム弱毒生ワクチン（coccivac-B, InterVet）をブロイラーに投与した。その後２１日齢まで飼育を行った。
表３に示した可消化Val/Lys比は、以下に述べる方法で算出した。トウモロコシ、大豆粕の加水分解Lys、Val含量は、実際に試験に用いた原料と同じロットのサンプルを加水分解して測定し、その結果を計算に用いた。また、各原料のアミノ酸消化率は、True Digestibility of Essential Amino Acids For Poultry, Revision 7, Ajinomoto Heartland Inc.に掲載されている値を用いた。なお、結晶アミノ酸のアミノ酸消化率は100%とみなした。飼料中の各原料の配合率%は表４に示した値を用いた。
本実施例では、飼料中の可消化Lys含量％ ＝ [(トウモロコシの加水分解Lys含量分析値0.28%×トウモロコシのLys消化率81.7%×トウモロコシの飼料中への配合率%)＋(大豆粕の加水分解Lys含量分析値2.84%×大豆粕のLys消化率90.6%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-リジン塩酸塩のリジン保証値78%×L-リジン消化率100%×L-リジン塩酸塩の飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
同様に、飼料中の可消化Val含量％ ＝ [トウモロコシの加水分解Val含量分析値0.40%×トウモロコシのVal消化率87.8%×トウモロコシの飼料中への配合率%）＋(大豆粕の加水分解Val含量分析値2.15%×大豆粕のVal消化率90.9%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-バリン中のバリン保証値96.5%×L-バリン消化率100%×L-バリンの飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
以上の計算によって求められた可消化Lys含量で可消化Val含量を除することによって、可消化Val/Lys比を計算することができる。飼料へ配合するトウモロコシ、大豆粕、L-リジン塩酸塩、L-バリンの比率を変えることによって目的の可消化Val/Lys比の飼料を調製した。
本実施例では、飼料中の可消化Lys含量％ ＝ [(トウモロコシの加水分解Lys含量分析値0.28%×トウモロコシのLys消化率81.7%×トウモロコシの飼料中への配合率%)＋(大豆粕の加水分解Lys含量分析値2.84%×大豆粕のLys消化率90.6%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-リジン塩酸塩のリジン保証値78%×L-リジン消化率100%×L-リジン塩酸塩の飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
同様に、飼料中の可消化Val含量％ ＝ [トウモロコシの加水分解Val含量分析値0.40%×トウモロコシのVal消化率87.8%×トウモロコシの飼料中への配合率%）＋(大豆粕の加水分解Val含量分析値2.15%×大豆粕のVal消化率90.9%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-バリン中のバリン保証値96.5%×L-バリン消化率100%×L-バリンの飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
以上の計算によって求められた可消化Lys含量で可消化Val含量を除することによって、可消化Val/Lys比を計算することができる。飼料へ配合するトウモロコシ、大豆粕、L-リジン塩酸塩、L-バリンの比率を変えることによって目的の可消化Val/Lys比の飼料を調製した。
７日齢～２１日齢間の増体重量、飼料摂取量、生存率、飼料要求率（Feed Conversion Ratio；ＦＣＲ）を算出した。また、２１日齢で解剖して十二指腸を採取し、ヘマトキシリン・エオジン染色（HE染色）標本を作製した。HE染色標本は光学顕微鏡で観察を行い、腸絨毛高、陰窩厚、V(腸絨毛高)/C(陰窩厚)比を算出した。
[結果]
結果を表５～８、および図６～９に示す。表５および図６～９において、ａ、ｂ、ｃは、異なる文字間で有意差があることを示す。
結果を表５～８、および図６～９に示す。表５および図６～９において、ａ、ｂ、ｃは、異なる文字間で有意差があることを示す。
試験区８（可消化Val/Lys比＝1.90）では、試験区５、６（基礎飼料区）に対し、７日齢～２１日齢時での増体重量が有意に高かった（表５、図７）。また、試験区７（可消化Val/Lys比＝1.52）および試験区８（可消化Val/Lys比＝1.90）では、試験区５、６（基礎飼料区）に対し、７日齢～２１日齢での飼料要求率が有意に低かった、すなわち有意に改善された（表５、図９）。
また、十二指腸HE染色標本の観察結果、試験区６（基礎飼料区；ワクチン投与）では、試験区５（基礎飼料区；ワクチン非投与）と比較して、V/C比が有意に低く、ワクチン投与により腸管傷害が誘導されていることが示された（表８）。また、試験区７（可消化Val/Lys比＝1.52）および試験区８（可消化Val/Lys比＝1.90）では、試験区６（基礎飼料区）と比較して腸絨毛高が高くなり、陰窩厚が薄くなる傾向が見られ、V/C比は有意に高くなり、腸管組織状態の改善が認められた（表６～８）。
[考察結論]
以上の結果から、コクシジウムワクチンを投与してストレスおよび腸管傷害を発生させたブロイラーに、可消化Val/Lys比を1.52～1.90に調整した飼料またはValを1.0%～1.5%添加した飼料を投与することにより、腸管組織の状態を改善し、飼育成績を改善できる事が示された。
以上の結果から、コクシジウムワクチンを投与してストレスおよび腸管傷害を発生させたブロイラーに、可消化Val/Lys比を1.52～1.90に調整した飼料またはValを1.0%～1.5%添加した飼料を投与することにより、腸管組織の状態を改善し、飼育成績を改善できる事が示された。
実施例３
本実施例では、コクシジウムワクチンを投与する事によりストレスおよび腸管傷害を発生させたブロイラー（ストレスおよび腸管傷害のモデル）に、異なる濃度および期間でValを投与した場合の効果について検討を行った。
本実施例では、コクシジウムワクチンを投与する事によりストレスおよび腸管傷害を発生させたブロイラー（ストレスおよび腸管傷害のモデル）に、異なる濃度および期間でValを投与した場合の効果について検討を行った。
０日齢のオスArbor Acres Plusブロイラーのヒナを用い、８試験区（各試験区144羽）に分けて飼育した。0-7日齢までをＩ期、8-21日齢までをＩＩ期、22-35日齢までをＩＩＩ期とし、それぞれの区に対して表９で示したような可消化Val/Lys比の飼料を与えた。なお、Valを添加していないベースの飼料の可消化Val/Lys比は0.80であり、各飼料におけるValの添加量を表１０に示した。
表９に示した可消化Val/Lys比は、実施例２と同様の方法で算出した。すなわち、トウモロコシ、大豆粕の加水分解Lys、Val含量は、実際に試験に用いた原料と同じロットのサンプルを加水分解して測定し、その結果を計算に用いた。また、各原料のアミノ酸消化率は、True Digestibility of Essential Amino Acids For Poultry, Revision 7, Ajinomoto Heartland Inc.に掲載されている値を用いた。なお、結晶アミノ酸のアミノ酸消化率は100%とみなした。飼料中の各原料の配合率%は表１０に示した値を用いた。
本実施例では、飼料中の可消化Lys含量％ ＝ [(トウモロコシの加水分解Lys含量分析値0.24%×トウモロコシのLys消化率81.7%×トウモロコシの飼料中への配合率%)＋(大豆粕の加水分解Lys含量分析値2.84%×大豆粕のLys消化率90.6%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-リジン塩酸塩のリジン保証値78%×L-リジン消化率100%×L-リジン塩酸塩の飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
同様に、飼料中の可消化Val含量％ ＝ [トウモロコシの加水分解Val含量分析値0.37%×トウモロコシのVal消化率87.8%×トウモロコシの飼料中への配合率%）＋(大豆粕の加水分解Val含量分析値2.21%×大豆粕のVal消化率90.9%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-バリン中のバリン保証値96.5%×L-バリン消化率100%×L-バリンの飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
以上の計算によって求められた可消化Lys含量で可消化Val含量を除することによって、可消化Val/Lys比を計算することができる。飼料へ配合するトウモロコシ、大豆粕、L-リジン塩酸塩、L-バリンの比率を変えることによって目的の可消化Val/Lys比の飼料を調製した。
本実施例では、飼料中の可消化Lys含量％ ＝ [(トウモロコシの加水分解Lys含量分析値0.24%×トウモロコシのLys消化率81.7%×トウモロコシの飼料中への配合率%)＋(大豆粕の加水分解Lys含量分析値2.84%×大豆粕のLys消化率90.6%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-リジン塩酸塩のリジン保証値78%×L-リジン消化率100%×L-リジン塩酸塩の飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
同様に、飼料中の可消化Val含量％ ＝ [トウモロコシの加水分解Val含量分析値0.37%×トウモロコシのVal消化率87.8%×トウモロコシの飼料中への配合率%）＋(大豆粕の加水分解Val含量分析値2.21%×大豆粕のVal消化率90.9%×大豆粕の飼料中への配合率%)＋(飼料用L-バリン中のバリン保証値96.5%×L-バリン消化率100%×L-バリンの飼料中への配合率%)]÷10000、とした。
以上の計算によって求められた可消化Lys含量で可消化Val含量を除することによって、可消化Val/Lys比を計算することができる。飼料へ配合するトウモロコシ、大豆粕、L-リジン塩酸塩、L-バリンの比率を変えることによって目的の可消化Val/Lys比の飼料を調製した。
また、３日齢、で表９の通りにワクチンの投与を行った。０日齢～３５日齢間の増体重量、飼料摂取量、生存率、飼料要求率（Feed Conversion Ratio；ＦＣＲ）を算出した。また、２１日齢で解剖して十二指腸を採取し、ヘマトキシリン・エオジン染色（HE染色）標本を作製した。HE染色標本は光学顕微鏡で観察を行い、V(腸絨毛高)/C(陰窩厚)比を算出した。
[結果]
結果を表１１、図１０に示す。ワクチンを投与された試験区１０では、ワクチンを投与されていない試験区９と比較して３５日齢の体重が低く、ワクチンの副作用によって成長が悪化した事が示された。０日齢～３５日齢での増体重量についても同様である。また、可消化Val/Lys比を1.00または1.25に調整し、ワクチンを投与した試験区１１～試験区１４では、可消化Val/Lys比が0.80でワクチンを投与した試験区１０と比較して、Val含有量が増加しているにもかかわらず飼育成績の改善はほとんど見られなかった。また、可消化Val/Lys比を1.52に調整しワクチンを投与しているが、Val添加飼料の投与期間が異なる試験区１５と試験区１６では、Ｉ期（０－７日齢）だけVal添加飼料を投与した試験区１５においてのみ、ワクチン無投与の試験区９を超える体重の伸びが観察された。
結果を表１１、図１０に示す。ワクチンを投与された試験区１０では、ワクチンを投与されていない試験区９と比較して３５日齢の体重が低く、ワクチンの副作用によって成長が悪化した事が示された。０日齢～３５日齢での増体重量についても同様である。また、可消化Val/Lys比を1.00または1.25に調整し、ワクチンを投与した試験区１１～試験区１４では、可消化Val/Lys比が0.80でワクチンを投与した試験区１０と比較して、Val含有量が増加しているにもかかわらず飼育成績の改善はほとんど見られなかった。また、可消化Val/Lys比を1.52に調整しワクチンを投与しているが、Val添加飼料の投与期間が異なる試験区１５と試験区１６では、Ｉ期（０－７日齢）だけVal添加飼料を投与した試験区１５においてのみ、ワクチン無投与の試験区９を超える体重の伸びが観察された。
また、十二指腸のHE染色標本観察結果を図１１に示す。可消化Val/Lys比を1.00または1.25に調整してワクチン投与した試験区１１～試験区１４では、可消化Val/Lys比が0.80でワクチンを投与した試験区１０と比較して、ほぼ同程度のV/C比であり、可消化Val/Lys比の増大による明確な効果は認められなかった。一方、可消化Val/Lys比を1.52に調整した飼料を0-7日齢の期間与えた試験区１５では、試験区１０と比較して、V/C比が改善した。同じく可消化Val/Lys比を1.52に調整した飼料を0-21日齢の期間与えた試験区１６では、試験区１０と比較して、V/C比が改善したが、その改善の程度は試験区１５よりも小さかった。よって、本発明の飼料を利用する際には、投与期間を制限するのが好ましい場合があり得る。
実施例４：ブロイラーにおけるVal投与の効果（コクシジウムワクチンなし条件）
本実施例ではワクチンを投与しない条件でのブロイラーヒナにおけるValの効果を検討した。
本実施例ではワクチンを投与しない条件でのブロイラーヒナにおけるValの効果を検討した。
０日齢のオスArbor Acres Plusブロイラーのヒナを用い、表１２の通り各試験区に試験飼料を給与して飼育した。
試験区１の飼料はValを添加しない基礎飼料であり、大豆粕、トウモロコシ等の原料を用いて、飼料の可消化Val/Lys比が0.80となるように調製した。試験区２の飼料はValを0.935%添加し、可消化Val/Lys比が1.52となるように調製した。試験区３の飼料はValを1.425%添加し、可消化Val/Lys比が1.90となるよう調製した。
試験区１、２、３のうち一部の個体は３日齢で飼育終了し、剖検を行った。残りの個体は７日齢まで飼育を継続し、増体重、体重、飼料摂取量、生存率、飼料要求率（Feed Conversion Ratio；FCR）を測定あるいは算出後、剖検を行った。
３日齢と７日齢の剖検では、採血、ムネ肉の採取、十二指腸の採取を実施した。血液からは血漿を分離し、血漿中の遊離アミノ酸を測定した。ムネ肉からは、奥津らの方法（水産技術、3(1), 37-41, 2010, 「閉鎖循環式養殖システムで飼養したバナメイエビと他のエビ類における筋肉中遊離アミノ酸含量の比較」）に従い過塩素酸を用いて遊離アミノ酸の抽出を行い、筋肉100gあたりの遊離アミノ酸量を算出した。十二指腸組織からはヘマトキシリン・エオジン染色（HE染色）標本を作製した。HE染色標本は光学顕微鏡で観察を行い、腸絨毛高、陰窩厚、V(腸絨毛高)/C(陰窩厚)比を算出した。
[結果]
結果を表１３～１５および図１２～２０に示す。表１５および図１２～２０において、ａ、ｂ、ｃは、異なる文字間で有意差があることを示す。
結果を表１３～１５および図１２～２０に示す。表１５および図１２～２０において、ａ、ｂ、ｃは、異なる文字間で有意差があることを示す。
表１３～１５に示した７日齢での十二指腸組織の観察では、Valを添加していない飼料を与えられた試験区１と比較して、可消化Val/Lys比1.90の飼料を与えられた試験区３で腸陰窩厚が薄くなり、かつ腸絨毛高が高くなる傾向が見られた。V/C比でも試験区３で腸管の組織状態の改善傾向が見られた。すなわち、コクシジウムワクチン等によって直接的に腸管に障害を起こさない場合でも、Valの投与によって腸管の組織状態が改善される事が示された。
図１２、１４には、３日齢、７日齢で採取したムネ肉の平均重量を示す。また図１３、１５には、０～３日齢、０～７日齢の期間の平均増体重量を示す。図１６には、０～７日齢の期間のFCRを示す。可消化Val/Lys比を高く設定した試験区２、３では、試験区１と比較して、３日齢、７日齢のムネ肉平均重量、平均増体重量が有意に高くなること、またはその傾向があることが示された。また、可消化Val/Lys比を高く設定した試験区２、３では、試験区１と比較して、FCRが有意に低下すること、またはその傾向があることが示された。
図１７～２０には、３日齢で採取した血漿、ムネ肉中の遊離Val濃度および遊離３－メチルヒスチジン(3MeHis)濃度を示す。Val濃度は、血漿、ムネ肉中ともに、試験区２、３で飼料中Val濃度に依存して有意に上昇していた。一方、一般的にタンパク異化の指標として利用される３メチルヒスチジン濃度は、血漿、ムネ肉中ともに、試験区２、３で有意に下がる事が示された。
[結論考察]
以上の結果から、コクシジウムワクチン等によって明らかなストレスを与えない条件においても、孵化後０～７日齢の若齢のブロイラーにおいて、飼料中の可消化Val/Lys比を1.52～1.90に高く設定した飼料を給与すると、腸管組織の健全性の向上や成長促進が見られる事が示された。すなわち、本発明の飼料は、既に生じた腸管傷害の改善（治療）に限られず、腸管傷害の発生を予防するためにも有効であると示唆された。本試験では０日齢のブロイラーを用いたが、この時期のブロイラーは通常、孵化場での選別やワクチン投与、農場への輸送など多くのストレスにさらされる。そのため、意図的にストレスを与えない場合においても、飼料へのVal添加によって可消化Val/Lys比を1.52～1.90程度と通常より高く調整する事は有効である。さらに体重だけでなく、将来可食部となるムネ肉重量の増加も認められた。血漿、ムネ肉中の遊離アミノ酸濃度の測定結果から、可消化Val/Lys比の高い飼料で飼育すると血漿、ムネ肉中のVal濃度が高くなる一方、３－メチルヒスチジン濃度は低くなる事が示された。３－メチルヒスチジンはタンパク異化の指標として用いられており、３－メチルヒスチジン濃度の低下は筋タンパク質の分解の抑制と関連すると推測される。よって、Valの飼料添加によって筋肉の分解が抑制された結果、ムネ肉重量の増加や成長の促進が起きた可能性がある。
以上の結果から、コクシジウムワクチン等によって明らかなストレスを与えない条件においても、孵化後０～７日齢の若齢のブロイラーにおいて、飼料中の可消化Val/Lys比を1.52～1.90に高く設定した飼料を給与すると、腸管組織の健全性の向上や成長促進が見られる事が示された。すなわち、本発明の飼料は、既に生じた腸管傷害の改善（治療）に限られず、腸管傷害の発生を予防するためにも有効であると示唆された。本試験では０日齢のブロイラーを用いたが、この時期のブロイラーは通常、孵化場での選別やワクチン投与、農場への輸送など多くのストレスにさらされる。そのため、意図的にストレスを与えない場合においても、飼料へのVal添加によって可消化Val/Lys比を1.52～1.90程度と通常より高く調整する事は有効である。さらに体重だけでなく、将来可食部となるムネ肉重量の増加も認められた。血漿、ムネ肉中の遊離アミノ酸濃度の測定結果から、可消化Val/Lys比の高い飼料で飼育すると血漿、ムネ肉中のVal濃度が高くなる一方、３－メチルヒスチジン濃度は低くなる事が示された。３－メチルヒスチジンはタンパク異化の指標として用いられており、３－メチルヒスチジン濃度の低下は筋タンパク質の分解の抑制と関連すると推測される。よって、Valの飼料添加によって筋肉の分解が抑制された結果、ムネ肉重量の増加や成長の促進が起きた可能性がある。
本発明の飼料を投与して産業動物を飼育することにより、産業動物の飼育成績を改善することができる。
Claims (14)
- Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、飼料。
- 前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して１．３～２．０であることを特徴とする、請求項１に記載の飼料。
- 産業動物に用いられることを特徴とする、請求項１または２に記載の飼料。
- 前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、請求項３に記載の飼料。
- 前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、請求項４に記載の飼料。
- 産業動物のストレスを緩和するために用いられる、請求項１～５のいずれか１項に記載の飼料。
- 産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、請求項６に記載の飼料。
- Ｌ－バリンとＬ－リジンを含み、Ｌ－リジンに対するＬ－バリンの質量比（Ｖａｌ／Ｌｙｓ比）が、可消化アミノ酸量に換算して、１．０～３．０であることを特徴とする、産業動物のストレス緩和剤。
- 前記Ｖａｌ／Ｌｙｓ比が、可消化アミノ酸量に換算して、１．３～２．０であることを特徴とする、請求項８に記載のストレス緩和剤。
- 前記産業動物が、家畜または養殖魚であることを特徴とする、請求項８または９に記載のストレス緩和剤。
- 前記家畜が、鶏または豚であることを特徴とする、請求項１０に記載のストレス緩和剤。
- 産業動物の腸管傷害を予防および／または治療するために用いられる、請求項８～１１のいずれか１項に記載のストレス緩和剤。
- 請求項１～７のいずれか１項に記載の飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物のストレス緩和方法。
- 請求項１～７のいずれか１項に記載の飼料を産業動物に投与する工程を含む、産業動物の腸管傷害を予防および／または治療する方法。
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