WO2012167656A1

WO2012167656A1 - 抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘及其应用

Info

Publication number: WO2012167656A1
Application number: PCT/CN2012/073504
Authority: WO
Inventors: 赵波
Original assignee: 深圳市兆博有机生物碘盐技术开发中心
Priority date: 2011-06-08
Filing date: 2012-04-05
Publication date: 2012-12-13
Also published as: CN102319255A; CN102319255B; HK1163522A1

Abstract

本发明提供一种螺旋藻多糖有机生物碘及其应用。以新鲜活体藻泥为载体，加入螺旋藻多糖和有机生物碘，在光照和温控下发生光学自养生物反应而得到螺旋藻多糖有机生物碘，可用于制备抗电离及核微量辐射或核能辐射、提高人体免疫力、抗癌或抗病毒的药品或保健食品。

Description

说明书抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘及其应用

技术领域

本发明涉及到一种抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘及其应用。背景技术英国科学家贝弗里曾预言 "威胁人类两大隐形杀手是辐射及疲劳过度"，人类处在手机、冰箱、电视、电脑、日光灯、微波炉、电磁波、空调、吸尘器等通讯家电不同程度电磁辐射范围中，加上大自然中产生的辐射，时间长久后，造成大脑伤害，引起疲劳、耳鸣、眼疾、头痛脑胀等症状。

《世卫组织称长期用手机可能致癌建议青少年慎用》

来源：中国新闻网 2011年 06月 01 日 15:25

中新网 6月 1 日电世界卫生组织下属的国际癌症研究中心联合发表报告称，一些癌症 (特别是神经胶质瘤)与手机可能有联系，而神经胶质瘤是脑癌的一种。

奥巴马总统国家癌症顾问委员会成员萨米特（ Jonathan Samet)在声明中说： "可能有风险，我们需要对手机和癌症的联系进行进一步的观察。 "

在使用手机时，辐射出的电磁波会加热人体组织，并造成伤害。

世界卫生组织和多国政府都特别强调的是，青少年应该慎用手机。青少年的耳朵和颅骨比成年人更小、更薄，他们在使用手机时，脑部吸收的辐射比成年人要高出 50%。

86年 4月 26日，前苏联切尔诺贝利核电站爆炸。 1979年，美国三哩岛核电站事故。 2011年 3月 11 日大地震引发日本福岛核电站爆炸，波及全球。核爆将放射性物质释放到大气中，形成放射性羽流，随着气流漂移；放射性物质冷却用水被排到海洋中，附近国家蔬菜及自来水已检测出有微量放射物质，微量核辐射 100微西弗对人体健康影响到目前为止很难给出定论。核辐射专家邓普言"发病率与辐射量呈线性关系，一直延伸到低剂量范围。" 2008年德国核电站在《欧洲癌症学报》披露，生活在核电厂周围 5000米范围内， 5岁以下儿童患癌病率上升 47%。新华社电讯报道，专家认为 30 年后，福岛放射物将扩散至整个太平洋。另一个核能专家布伦纳认为 "辐射破坏 DNA, 而那怕是一个受损细胞，都可能成为癌症种子，癌症的发展可以历时数十年。" 微量核辐射对人类健康是缓慢 10年乃至 20年致癌，未爆发出来前是一个长期潜伏不可疏忽的隐形杀手。

核爆放射物 131-碘被媒体报道后，不少人误以为用无机碘可对抗核爆，在国内引发抢购碘盐风潮（实际上 5公斤碘盐总碘含量一次性服用才能对抗核爆 131-碘），人类对核能爆炸产生恐惧。 "潘多拉魔盒"现象发生了，核能发电造福人类同时，又给人类带来灾难。

《螺旋藻抗辐射抗癌功效及原理（一）》

摘自螺旋藻抗辐射抗癌功效及原理（一）百度文库

螺旋藻的抗辐射、抗诱变、防癌、抗癌作用也已为人们发现，本文对螺旋藻研究作一简要综合。

研究资料表明螺旋藻具有很强的抗辐射和抗诱变性，用不同弧度的辐射线照射螺旋藻，在照射强度达 lOOGy(lOOk rad)时，都未观察到对螺旋藻生长的抑制作用，说明螺旋藻具有很强的辐射抗性。

螺旋藻属蓝藻类的微藻，很早前就有人发现蓝藻中巨大鞘丝藻的提取物具有抗白血病活性，从而激起了人们对蓝藻的研究兴趣。

刘力生等（1991 ) 作了用螺旋藻多糖对移植性癌细胞抑制作用的研究，螺旋藻多糖在 200mg/kg剂最时可以显著抑制小鼠体内骨肉瘤细胞的增豉，抑制腹水型肝癌细胞 DNA和蛋白质的合成。抑制作用在 3-24小时内随时间的延长而提高，通过对不同的癌细胞株的半抑制量计算分析，说明不同的双细胞对螺旋藻多糖的敏感性不一样。将药物从培养基中撤除以后，癌细胞 DNA合成的速度迅速恢复。说明螺旋藻多糖对癌细胞增殖的抑制是通过抑制 DNA合成所完成，而且这种抑制是属于代谢抑制。

《螺旋藻抗辐射作用研究》崔文明，张馨，刘泽钦，李宁，韩驰（中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所，北京 100050)

本实验以血白细胞计数、 30d小鼠存活率、小鼠骨髓细胞微核率和小鼠生殖细胞染色体畸变率为观察指标，对螺旋藻的抗辐射保健作用进行了研究。

螺旋藻人体推荐用量为 4.8g 60kg ¹ d 昆明种小鼠（二级）和常备伺料由北京医科大学实验动物科学部提供。动物合格号医动字 01-3049。

射线辐照 1次，辐照条件剂量率为 3.21 Gy/miti，辐射时间为 2min 53s，照射剂量为 9Gy。

结果表明螺旋藻对多次辐照所引起的小鼠染色体损伤有保护作用，并呈较好的剂量 -反应关系。

结果表明螺旋藻对亚慢性辐照所引起的生殖细胞染色体损伤有保护作用。

《螺旋藻抗辐射作用》（齐国力北京大学生物医学研究所教授、北京医科大学附属医院内科主任、美国医学会会员，发表于 2003年 3月 21 日《解放日报》）

螺旋藻抗辐射机理

螺旋藻中含有 5倍于胡萝卜的 β -胡萝卜素、藻蓝蛋白与多糖类物质。人体自由基增多而损伤细胞导致癌症， β -胡萝卜素是最有效抑制自由基活性物质之一。藻类蛋白、藻类多糖已为国内外医学界公认有提高免疫功能，抑制或杀伤肿瘤细胞有着肯定的疗效。同时对减轻肿瘤在化疗、放疗后的副作用升高白细胞均有确切效果。抵抗射线对人体骨髓细胞的损害，具有较强的抗辐射作用。而含有的 Υ -亚麻酸、维生素 Ε 和过氧化物歧化酶（SOD ) 能增强细胞活力。而在自然界中， Y -亚麻酸仅在螺旋藻和母乳中才含有。

阮继红的研究显示，螺旋藻多糖和多糖蛋白，能显著减轻和改善辐射引起的蚕豆根尖细胞核的畸变率和染色体畸变类型。能明显减少辐射后小鼠骨髓中嗜多染性红细胞的微核率，维持骨髓细胞 PEC/ NCE的比率，并对辐射引起的白细胞减少有明显的改善作用。因而认为，螺旋藻多糖及多糖蛋白，是一种有效天然辐射防护剂。

碘元素与螺旋藻多糖是两种不同学科的技术领域，单靠螺旋藻多糖不能对抗核辐射，世卫组织原子能机构认定，有效碘才能抗核辐射（螺旋藻多糖没有被认定抗核辐射）。 98年 5月 2 日深星时报报道赵波富碘多糖超人螺旋藻粉通过深圳市政府鉴定 (见附件）。人民日报 98年 6月 29 日科技天地栏目第十五版报道了深圳市政府及科技局鉴定结论：超人螺旋藻富碘多糖耐高温、无藻腥，引起国内外科技界的巨大反响。有机碘与螺旋藻多糖有机结合添加到食品中是一项创新，填补了国内外空白。螺旋藻多糖是从螺旋藻中提取的一种生物大分子，具有抗辐射、抗突变的功能，可抑制细胞增殖，并具有与膳食纤维极为相似的膨胀作用、凝胶作用、持水能力、低热值等性质，这为其在功能性保健品中的应用展示了广阔的前景。

螺旋藻多糖（PSP) 是一种现有的常规生物提取技术，可获得的抗癌抗肿瘤的生物活性物质，以改良的三氯乙酸法进行提取，所得产品多糖质量含量达 92%以上，优于传统的 SEVDG法。螺旋藻多糖具有很好的医用药用价值。第一抗辐射抗衰老作用， PSP能显著增强辐射引起 DNA损伤复活和程序外 DNA合成，而且能延缓以上两个重要修复反应的饱和及遭受辐射后动物骨髓细胞再生能力，促进造血系统受辐射损伤的恢复，具有一定抗辐射和抗化学物质作用，具有对癌细胞的杀伤抑制作用；第二提高人体免疫功能；第三抗病毒作用。因螺旋藻多糖价格昂贵，我国医学界主要仅限用于抗癌抗肿瘤上。现有产品，深圳市某企业将藻种通过宇宙飞船送到外太空，育种出 "太空螺旋藻片"， "航天育种"方法提高螺旋藻多糖含量，对抗弱电磁辐射及化疗具有一定功效，但不能有效对抗核辐射"碘 -131 "，且成本昂贵。目前现有技术有种抗核辐射的安全碘 "碘化钾片" 限止在特定条件下发生核能危机时使用。

世界卫生组织国际原子能机构提出了《核能应急情况下稳定碘预防策略》，其稳定碘实为无机碘片（碘化钾片及碘酸钾片），并公布不是 "辐射解毒剂" 也不是所有人都能服用，只有在公共卫生机构明确指导下才需要才能够服用。

美国 FPA把碘化钾及碘酸钾定为 GRS级，属低毒物质，添加食盐已上百年，成为当今世界 "补碘"专营的全球必食之碘盐。

世卫组织公布目前全球有 6.5亿人口甲状腺肿，治疗不当，患乳头状甲状腺癌呈上升趋势，已在中非、东南亚、中亚、中欧、东欧等地区泛滥。

江南都市报 2010年 4月 23 日《我们的盐吃得太多了》浙江医院一年收 205名甲状腺癌病人，比 10年前增长了 10倍。均由于无机碘盐所造成。

国内外军方防化部队在对抗生化武器及细菌战时都备有高浓縮的有效碘片（碘酸钾片及碘化钾片）。

鉴于无机碘属低毒物质，它具有双重性，它能对抗核爆，但又对人体会造成不同程度的伤害。如何用有机碘替代无机碘对抗核爆就成了我们这一代科技工作者急需解决的难题。

赵波先生在十几年前就将富含有机碘多糖的螺旋藻粉通过生物技术制成了藻兰多糖提取液，添加到酱油、味精等食品中，并将藻兰多糖提取液添加到青岛啤酒和茅台酒中，引起食品界轰动。

世界卫生组织的 "安全碘" （碘化钾片及碘酸钾片）抗辐射原理是 "以小毒攻大毒"方法，服用超过量碘的碘化钾片及碘酸钾片后，使甲状腺充满，可抵制放射碘（131 碘）侵入人体，防止甲状腺癌发生。其不利因素和弊端，顾此失彼，防不胜防。采用此举，相对可减少 "甲状腺癌"发病率，但不能减少今后引发甲状腺肿大中毒及癌变化风险。中国公共卫生 2006年 4月第 22卷第 4期《碘过量对机体危害及有机碘的开发利用》已有报道，另有研究发现，无机碘摄入超过 40μ_§/(1， 180d后小鼠甲状腺明显肿大，而海带有机碘摄入量即使超过 200μ_§/(1，小鼠甲状腺也未见明显肿大，同时还发现海带有机碘可防治高碘甲肿。

中国公共卫生 2007年 4月第 23卷第 4期《碘对人甲状腺细胞增殖影响》报道，我国甲状腺疾病的发病率呈现上升期不同浓度有趋势，过多的无机碘能够抑制甲状腺细胞的增殖，损害甲状腺细胞，而有机碘对甲状腺细胞增殖情况的影响报道较少。本文利用体外碘刺激试验测定不同浓度的有机碘和无机碘对甲状腺细胞增殖情况的影响，探讨有机碘对人甲状腺细胞的影响，为其作为一种安全的补碘制剂提供依据。

赵波先生用自己人体做试验，连续服用 5年高剂量的有机碘，体内积存量达到数百万微克，其尿碘已达 7950微克，正常人的尿碘是 200微克，创世界纪录。（详见江西省卫生防疫站 98年尿碘化验单）若是无机化学碘，必死无疑，反证了有机碘对人体的安全。用螺旋藻多糖及有机生物碘按国家卫生部规定标准，可配制成新一代抗核辐射有机碘片，取代抗核辐射的无机碘片提供技术支撑。（详见实施例五）

《重庆医学》 2003年 03期登载《钝顶螺旋藻多糖对辐射所致小鼠造血功能抑制的对抗影响》临床试验，由西藏军区总医院皮肤科、第三军医大学预防医学系防原医学教研室及大坪医院血液内科、南京大学生物系联合共同试验结果证明：螺旋藻多糖可对抗核辐射。本实验运用造血细胞培养技术，选用钝顶藻多糖（SPP ), 较系统地观察了 SPP 对正常小鼠和 ^6QCO Y射线 5Gy 照射小鼠外周备细胞，骨髓造血干细胞 ( CFU-S ) 和造血祖细胞（CFU-GM、 CFU-E、 BFU-E ) 增殖分化的影响及其作用特点，拟在研究螺旋藻多糖对机体造血功能的调控作用。

健康昆明种小鼠，雌雄各半，鼠龄 8-10周，体重 22-24g，由第三军医大学实验动物中心提供。照射条件 60Co Y 8Cy致死量照射，吸收剂率率 46.75cGy/min，用于造血干细胞集落测定， 5G主亚致死量照射用于检测外周血各类细胞及粒 -单系造血祖细胞、红系造血祖细胞和骨髓有核细胞总数的实验。

结果：钝顶螺旋藻多糖对外周血细胞及骨骼有核细胞数的影响伤后小鼠外周血 WBC、 PLT及 BMC均较正常对照组明显降低（P<0.01 )，辐射用药组小鼠 WBC、 BMC 又明显高于辐射对照组，而 Hb、 PLT数帽无明显改变（P>0.05 )。表 1显示正常用药组小鼠 BMC明显高于正常对照组（P<0.01 )，而其它指标与正常对照组相比，均无显著性差异 ( P>0.05 )。

详见附件：表 1 钝顶螺旋藻多糖对小鼠外周血细胞及骨髓有核细胞数的影响（X ± s)，表 2 钝顶螺旋藻多糖对小鼠造血祖细胞及造血干细胞数的影响（x ± s)。

SPP能促进造血细胞的增殖与分化，参与造血祖细胞和造血干细胞的直接或间接的调控活动，并对造血和免疫组织有重要影响。这种影响又可能是 SPP具有抗辐射作用和抑制细胞增殖的主要原因。前苏联切尔诺贝利核电站爆炸，日本救灾物资中最多的就是含多糖的螺旋藻胶囊丸及片剂。

江西疾病预防控制中心对 "盐用富碘螺旋藻"（即含纯有机生物碘）总碘在 84700 微克，老鼠毒理实验报告（2009年 12月 1 日完检）连服 30天后的结论，其三致试验均属阴性，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验，小鼠精子畸形试验， AMES试验。主要脏器解剖无病理变化，属实际无毒。（经检索查新，国内外无此案例）而无机碘（碘酸钾、碘化钾）在 10000微克 -10140微克时，老鼠食后即亡。充分证明有机生物碘安全性远远优于碘化钾、碘酸钾。

有机生物碘又叫酪氨酸碘，其中 1-碘酪氨酸含量 96%、 2-碘酪氨酸含量 2%、海藻酸钠 2 %。其中 1-碘酪氨酸化学结构式为：

CH C¾ '··'、;>—— OH

C顯 I 、有机生物碘及其优点在《有机生物碘及其应用》（专利号： ZL200310111222.2 , 专利权人：赵波）中已作阐述。发明内容

本发明的目的就是提供一种抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘，在未发生核能危机之时或已发生核能事故后的周边地区所产生的微量核辐射的防范和预防。使用本发明配制的产品对微量核辐射有防范和预防作用外，可有效对抗防治各类手机、电脑及家电产品及化疗后造成对人体的辐射，达到抗疲劳，抗病毒，抗癌变，提高人体免疫功能，有效补碘，无任何毒副作用，提高人类健康素质；本发明在即将发生核能事故和已发生核能事故之时为人类有效对抗核辐射及各类不同辐射，提供了优于现有技术 "稳定碘"（即碘化钾片和碘酸钾片）的防治效果，其抗辐射原理是 "以无毒攻大毒"，具有新颖性、创造性。造福于人类健康。

本发明是这样来实现的：

提供一种螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于以新鲜活体藻泥为载体，加入螺旋藻多糖和有机生物碘，在光照和温控下发生光学自养生物反应而得到螺旋藻多糖有机生物碘。

其中，上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，按重量配比，优选为藻泥占 50-96%，螺旋藻多糖占 3-50%，有机生物碘占 0.0001-10%。

上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的新鲜活体藻泥选自钝顶螺旋藻、巨大螺旋藻或小球藻。

上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的有机生物碘由 96 %的 1- 碘酪氨酸、 2 %的 2-碘酪氨酸和 2 %的海藻酸钠组成。

上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的光照为日光或人造光源，其光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米。

上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的温控是温度在 30°C -4(TC 之间。

上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于以藻泥的干粉计算，每 100g藻泥干粉，加入螺旋藻多糖 3-50克，有机生物碘以碘计算 100-10，000，000微克。

本发明还提供上述所述的螺旋藻多糖有机生物碘在制备用于抗辐射、提高人体免疫力、抗癌或抗病毒的药品或保健食品中的应用。

其中，上述所述的应用，所述的辐射为电离辐射及核微量辐射或核能辐射。

具体而言，从钝顶螺旋藻、巨大螺旋藻或小球藻养殖池中→捞取新鲜藻泥→过塞 →放入容器中（或另一藻池中） →配料：以藻泥为载体，藻泥要求 10-15公斤通过干燥可还原成 1公斤藻粉的技术标准，按比例添加提纯后的螺旋藻多糖和纯有机生物碘粉（发明专利号： ZL2003 1 0111222.2 ) →搅拌均匀同时→在日光或人造光源，光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米，温控 30°C -40°C之间发生光学自养生物反应过程→检测有机碘总碘含量（以每克干粉含量从 5微克 -10万微克计算有效）及螺旋藻多糖含量（以每 100克干粉含 3-50克多糖为有效标准）达标后，喷雾干燥或冷冻干燥→成品包装→入库 15 °C -20°C恒温贮存。

本发明所述的螺旋藻多糖可以通过现有技术已知的螺旋藻多糖制取技术制备得到。例如：

A、粗提提取螺旋藻多糖 (polysaccharide οΐ Spirulina. PS)时先将螺旋藻干粉进行破壁处理，用低极性溶剂去亲脂性成分，经热水抽提或碱液冷抽提 (可采用微波辅助提取），取上清液浓縮，乙醇醇析后离心、干燥得螺旋藻粗多糖。螺旋藻中蛋白质约占细胞干重的 60〜70 % ，因此提取螺旋藻多糖关键是有效地去除蛋白质。

目前，去蛋白的方法主要有以下几种： Sevag 法、泡沫分离技术、三氯乙酸 (TCA) 法、加热浓縮法、酶法。 Sevag 法是去蛋白质的经典方法，通常只适用于除少量蛋白，而且必须重复多次。 TCA 法去蛋白能縮短流程，多糖损失率降低，有利于后继纯化。用酶法降解蛋白质能提高多糖粗产品的得率，但所得成分中仍有 30 %以上的蛋白质。采用双酶法 (胰蛋白酶、木瓜蛋白酶）进行多糖提取工艺，测得残留的蛋白质含量为 3 %。

B、纯化

通过水提液抽提所得到的粗多糖可能含有多个混合糖组分及小分子杂质，须进一步分级纯化才能得到螺旋藻多糖单一纯品。一般以层析后观察到单一狭窄的峰作为纯度鉴定的标准。常用的纯化方法有：

(1) 离子交换纤维素层析:离子交换和纤维素层析结合起来制成一系列离子交换纤维素层析是基于树脂对不同离子的亲和力不同，溶出各种多糖，用于分离糖类。分离过程中常采用 NaCl 溶液或磷酸缓冲溶液梯度洗脱，可以得到不同级分的单一组分。常见的有 DEAE 纤维素、以及 DEAE-Sepharose 。

(2) 凝胶过滤法:多糖制品经 DEAE 纤维素分离后，需进一步用凝胶过滤法纯化才能得到均一多糖纯品。凝胶过滤法是一种用具有一定孔径大小的凝胶颗粒为支持物的层析方法，可分离大小和形状不同的分子，用于分离不同聚合度的糖类特别有效。葡聚糖凝胶 (Sephadex G)，琼脂糖凝胶 (Sepharase)，聚丙烯酰胺凝胶 (Bio-gel P) 均为亲水性凝胶，都广泛应用于多糖的纯化。螺旋藻多糖的纯化过程中一般采用 Sephadex G100 或 Sephadex G200、 Sepharyl S 100。但 Sephadex G本身是糖类，难免在洗脱液中沾上自凝胶上洗脱下来的糖分，可能会造成精制多糖的不纯。纯化后多糖含量的测定用硫酸蒽酮法根踪检测。

本发明还提供一种更高效的螺旋藻多糖提取新工艺。即采用双酶法 (胰蛋白酶、木瓜蛋白酶）进行多糖提取工艺，脱蛋白效果接近 100 %，粗多糖采用离子交换层析及凝胶层析进一步纯化，并通过纸层析测其组成。通过 DEAE— Sep harose 和 Sep hadex -G50 纯化粗多糖，得到 2 个多糖组分。经测定组分 1的单糖组成为 D _葡葡糖、 D― 木糖、 D—半乳糖、葡萄糖醛酸；组分 2 的单糖组成为： D—葡萄糖、 D—甘露糖、 L一鼠李糖、 D—半乳糖、葡萄糖醛酸。

螺旋藻粉→配成 12%的藻粉溶液→胰蛋白酶水解→木瓜蛋白酶水解→真空浓縮→ 酒精沉淀→丙酮洗涤→冷冻干燥→多糖粗制品多糖粗制品→离子交换层析→透析→凝胶层析→冷冻干燥真空浓縮:在 70〜80 °C真空浓縮至含固形物 20 %。酒精沉淀分离:在浓縮液中加入 5 倍体积的 95 %乙醇，使螺旋藻多糖呈絮状沉淀析出，大部分蛋白质和其它成分保留在溶液中， 4000r/min 离心 15min得沉淀。

蛋白质测定凯式定氮法。

胰蛋白酶最适作用温度的确定，胰蛋白酶的最适作用温度为 55 V, 此时酶解脱蛋白效果最好。

胰蛋白酶最适作用 pH 值的确定，胰蛋白酶在 6.2〜7.2 的范围内具有较高的酶活力。

胰蛋白酶酶解时间的确定，胰蛋白酶作用 2.5h后多糖粗产品中蛋白质含量不再有明显下降，因此蛋白酶作用 2.5h后可中止反应。

胰蛋白酶最适作用量的确定，酶用量达到 3.0%以后脱蛋白效果不再明显增加，所以酶用量确定为 3.0%。

利用木瓜蛋白酶进行二次水解

加酶量 3% ，在 pH6.5 的缓冲液中， 40 °C，保温 20h ，经常振摇。

酶解液经真空浓縮、酒精沉淀后，测得残留蛋白质含量为 3%。

离子交换层析分离多糖

采用 DEAE— Sepharose 柱 (20 X lcm) 进行多糖分离：用 0.01mol/L 、 p H8.0 的吡啶一盐酸缓冲液平衡离子交换柱，粗多糖的上样量为 8mL，流速为 25mL/h，用 O.Olmol /L 、 pH8.0 的吡啶一盐酸缓冲液及 0〜2mol/L 的 NaCl 进行梯度洗脱，得图 1 所示曲线。将该曲线的两个峰分别收集，冷冻干燥得粗组分 1 和粗组分 2。

凝胶层析分离多糖

采用 Sephadex-G50 凝胶柱 (90 X2cm) 进行多糖粗组分 1 和多糖粗组分 2 的分离，洗脱液为蒸馏水，流速 25mL/h ，得图 2、图 3 所示曲线。分别收集单一溶液，冷冻干燥后得多糖纯组分 1 和纯组分 2。

多糖样品经酸解、纸层析得单糖组成为：组分 1 为 D—葡萄糖、 D—木糖、 D—半乳糖、葡萄糖醛酸；组分 2 为 D—葡萄糖、 D—甘露糖、 L—鼠李糖、 D—半乳糖、葡萄糖醛酸。本发明的螺旋藻多糖有机生物碘可作为食用和医用，可生产出抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘片、胶囊、颗粒丸、散冲剂、口服液、滴定液等系列产品。

本发明的抗核辐射的产品中的有机碘含量按照我国卫生部最新指定标准添加制成，其中 3岁以下儿童 25毫克（即 25000微克），成人 100毫克（即 100000微克），孕产妇和 3-12岁儿童 50毫克（即 50000微克）；成人一次摄食量 100毫克相当于五公斤碘盐总碘量。

在制备上述抗核辐射产品中，可采用现有的药品微囊生产技术及现有的碘化油丸生产技术。其中，将原碘化油丸中的核桃油及豆油删除，改为使用橄榄油（其不饱和脂肪酸质优含量高），有益于心脏和血管呵护，可达到人体缓慢吸收有效碘的目的，以求更有效安全对抗辐射碘。对于核能即将发生前 24-48小时之内，可将上述一次性食用量配制成 2-3次服用量，取代缓释剂效果。

抗核微量辐射、抗电离辐射及化疗产品含天然螺旋藻多糖在 3-12g，其有机碘含量通用性产品按每克含 5微克配制，适合任何人群。为增加抗癌抗肿瘤效果，螺旋藻多糖含量在 12-50g。

核辐射除碘 131外，还有铯 -137、氮 -16、氚，放射性物质也会对人体造成伤害，有机生物碘与螺旋藻多糖的联合对抗可减少其对人体伤害程度。有机生物碘及螺旋藻多糖在过量状态下，不仅充盈甲状腺中，还布满在人体全身脂肪酸内及血液中，起到适量保护皮肤、骨骼、血液、五脏之功效。对防治白血病等有一定效果。添加螺旋藻藻兰素及叶绿素后，具有排毒排重金属及放射性体内积存物功效。

本发明所述的螺旋藻多糖有机生物碘可作食疗保健食品，用于抗核微量辐射、抗电离辐射及化疗使用及提高人体免疫力及抗癌抗病毒功能。

本发明所述的螺旋藻多糖有机生物碘可作药品使用，用于对抗核能辐射预防及治疗，抢救灾民，减少癌变发病率，提高人体免疫力，优于现有技术 "稳定碘" （即碘化钾和碘酸钾片）的防治效果，造福于人类健康。

本发明的螺旋藻多糖有机生物碘，根据小鼠急性毒性试验检测 "超人螺旋藻粉" (富碘多糖型）（98 )粤卫防食毒检字第 A022号报告，属无毒级物质及山东省青岛市疾病控制中心 2003CT00019 "食用高碘螺旋藻初步稳定性试验" 报告，经国家科学技术委员会轻科鉴字 [199]第 014号科学技术成果鉴定证书，成果鉴定为将其加入食盐和其他食品中制成补碘食品，在国内外未发现同类产品，是一项创新，是一种安全的补碘食品。有机碘盐已售市 11年，无一例毒副作用，深受用户好评。附图说明

图 1 : DEAE— Sepharose 柱洗脱曲线；

图 2: 多糖组分 1 的 Sephadex - G50 柱洗脱曲线；

图 3 : 多糖组分 2 的 Sephadex - G50 柱洗脱曲线。

图 4: SPP对 PBMC和 K₅₆₂细胞细胞毒作用

图 5 : SPP孵育时间与 ΝΚ活性关系具体实施方式

实施例一：抗核微量辐射、抗家电、通讯、化疗电离辐射，螺旋藻多糖有机生物碘配制方法：

从小球藻养殖池中捞取新鲜活体藻泥→过塞→放入容器中（或另一藻池中）以藻泥为载体，配料配方换算比例：其藻泥每 10-15公斤经喷雾干燥或冷冻干燥后可成 1 公斤藻干粉，同时按每 10-15公斤藻泥添加 30-500克螺旋藻多糖，同时添加纯有机生物碘粉 lg含 1-5微克后→搅拌均匀同时→在日光或人造光源（光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米）温控 30°C-40°C之间→发生光学自养生物反应→喷雾干燥或冷冻干燥成螺旋藻干粉后，测出有机碘总碘每 100克含量 100-500微克，干藻粉螺旋藻多糖每 100克含量 3-50克，即为合格产品→成品包装→入库 15 °C -20°C恒温贮存。

上述产品为抗核微量辐射、抗手机、电脑、家电、化疗后辐射（该产品适合任何人群服用，不受年龄性别限制）。

实施例二：抗核微量辐射、抗家电、通讯、化疗电离辐射，螺旋藻多糖有机生物碘配制方法（补碘型，不同年龄段食用量见说明书）：

从小球藻养殖池中捞取新鲜活体藻泥→过塞→放入容器中（或另一藻池中）以藻泥为载体，配料配方换算比例：其藻泥每 10-15公斤经喷雾干燥或冷冻干燥后可成 1 公斤藻干粉，同时按每 10-15公斤藻泥添加 30-500克螺旋藻多糖，同时添加纯有机生物碘粉 lg含 20-50微克后→搅拌均匀同时→在日光或人造光源（光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米）温控 30°C -40°C之间→发生光学自养生物反应→喷雾干燥或冷冻干燥成螺旋藻干粉后，测出有机碘总碘每 100克含量 2000-5000微克，干藻粉螺旋藻多糖每 100克含量 3-50克，即为合格产品→成品包装→入库 15 °C -20°C恒温贮存。实施例三：抗核辐射螺旋藻多糖有机生物碘配制方法：

从钝顶螺旋藻养殖池中捞取新鲜活体藻泥→过塞→放入容器中（或另一藻池中）以藻泥为载体，配料配方比例：其比例每 10-15公斤经冷冻干燥后可成 1公斤螺旋藻干粉，同时按每 10-15公斤藻泥添加纯有机生物碘粉，使终端产品可达到成年人（每克干藻粉含 10万微克有机碘）或孕产妇和 3-12岁儿童（每克干藻粉含 5万微克有机碘），或 3岁以下儿童（每克干藻粉含 2.5万微克有机碘），同时按每 10-15公斤藻泥添加 300-500克螺旋藻多糖后→搅拌均匀同时，在日光或人造光源（光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米）温控 30°C -40°C之间→发生光学自养生物反应→喷雾干燥成螺旋藻干粉后→测出有机碘总碘总量，达到标准（成人、孕产妇、儿童，世界卫生组织要求含量规定）即为合格→成品包装→入库 15 °C -20°C恒温贮存。若配料时，添加藻蓝素及叶绿素，即具有排毒排体内辐射沉积物功能。

实施例四：抗核辐射螺旋藻多糖有机生物碘配制方法：

从巨大螺旋藻养殖池中捞取新鲜活体藻泥→过塞→放入容器中（或另一藻池中）以藻泥为载体，配料配方比例：其比例每 10-15公斤经冷冻干燥后可成 1公斤螺旋藻干粉，同时按每 10-15公斤藻泥添加纯有机生物碘粉，使终端产品可达到成年人（每干藻粉含 10万微克有机碘）或孕产妇和 3-12岁儿童（每克干藻粉含 5万微克有机碘）， 3岁以下儿童（每克干藻粉含 2.5万微克有机碘），同时按每 10-15公斤藻泥添加 300-500 克螺旋藻多糖后→搅拌均匀同时，在日光或人造光源（光照强度 5-10万勒克司，波长

400-700毫微米）温控 30°C -40°C之间→发生光学自养生物反应→喷雾干燥成螺旋藻干粉后→测出有机碘总碘总量，达到标准（成人、孕产妇、儿童，世界卫生组织要求含量规定）即为合格→成品包装→入库 15 °C -20°C恒温贮存。若配料时，添加一定比例的藻蓝素及叶绿素，使其具有排毒排体内积存辐射积存物，从大小便中排出。

实施例五：抗辐射螺旋藻多糖有机生物碘效果试验：

超过常人 40倍

赵波食用过量有机生物碘临床报告

一、目的：

用自己身体，作人体吸收实验，证明有机生物碘能被人体吸收；作人体过量服用有机生物碘实验，证明对人体无害。为抗核辐射制成有机碘片达到卫生部规定标准量提供依据。

二、试验难度：

本试验国内外为 "首创"，任何检测或卫生部门没有做过此同类试验，谁也不能 "以身试验"，承担由此引起的人身安全和事故责任。

三、指导思想：经 5年来食用高剂量有机碘没有发现危害，通过试验获得卫生部的添加量，为配制成抗核爆有机碘提供依据。

赵波服用超过常人 40倍碘含量验单分析报告（仅供参考）

四、超过常人 40倍碘含量试前准备:

六、超过常人 40倍碘含量服后反应观察:

观察内脉搏心跳呼饮食睡眼甲状腺小便大便

容次 1 次 /分吸眠睛

服用时分钟钟

间

( 98年) 8日早晨 76 76 正正常正正正常正常正常

9点服用常常常

9日早晨 76 76 正正常正干喉结正尿长时间长，有点便结

9点服用常稍渴常涩常无异带黄

反应

10 日早 75 75 正正常正巨同上同上便结，成算盘状晨常多饮常转

9点服用水赤

11 日早 76 76 正正常失巨同上同上大便困难，时间加长，晨常多饮眠赤涂肥皂抹肛门，用手

9点服用水干扣出

燥

12 日早 78 78 正正常正巨同上同上大便困难，时间加长，晨常多饮常赤涂肥皂抹肛门，用手

9点服用水泛扣出落便池肛铛啷有红声

干

燥

13 日早 77 77 正正常正同同上同上解完大汗淋淋有痛感晨常多饮常上

9点服用水

14 日停 75 75 正正常正巨同上同上靠指扣出，有痛感服常多饮常赤

水干

燥

15 日停 74 74 正正常正巨同上同上大便时间减少，仍便服常多饮常赤结

水好

转

干

涩

16 日停 74 74 正正常正巨同上同上大便渐渐恢复正常服常常赤

减

少

17 日停 74 74 正正常正正正常正常正常

服常常常六、目赤与便结产生原因分析及应变措施：

高浓度碘化物进入人体及血液中，通过血液循环引起眼睛视网膜充血，吸收周边水份，产生充血与干燥感：高浓度碘化物进入肠道系统，因碘化物具有极大吸附性，将肠壁与水分吸附干净引起便秘所致。

其应变措施，我吞饮大量水及雪糕、蜂蜜及香蕉，在试验做完以后，为缓解便结，在 9月 15日以后几天服用少许 "牛黄解毒丸"、广州五羊牌 "湿热清"及 "夏桑菊" 冲剂，即恢复正常。

七、检验报告书结果分析

八、上述试验解读

8.1 由前四年的连续服用，体内已产生上百万的碘离子，后六连续服用每天 8000 微克碘离子，因此产生了副作用，停服后副作用消失。

8.2 连续服用六天的实验总量为 54000微克，符合卫生部孕产妇和 3-12岁儿童 (每克干藻粉含 5万微克有机碘）， 3岁以下儿童（每克干藻粉含 2.5万微克有机碘）标准，此案例起到了替代缓释剂的效果。

8.3 由于服用过量碘化物，其尿碘检测结果为 7954微克。（附 98年 10月 15 日检验报告书）

实施例六：盐用富碘螺旋藻粉（高剂量组）抗辐射有机碘解读：

本检测报告单由江西省疾病预防控制中心出具，样品编号：食 20091351，食检验依据： GB15193-2003 《食品安全性毒理学评程序和方法》

毒理学检验结论：

1、急性经口毒性试验：盐用富碘螺旋藻粉对雌雄性小鼠急性经口毒性 MTD均大于

10g/kgBW，属实际无毒。

2、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性。

3、小鼠精子畸形试验：小鼠精子畸形试验结果为阴性。

4、 Ames试验： Ames试验结果为阴性。

5、大鼠 30天喂养试验:各剂量组动物体重、食物利用率、主要脏体比与对照组比较差异无显著性（P〉0.05)。对照组和各剂量组的白细胞计数及其分类、红细胞计数、血红蛋白及各项生化指标（谷丙转氨酸、谷草转氨酸、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、血糖、总蛋白、白蛋白）均在本实验室正常参考值范围内。各组动物大体解剖与主要脏器病理组织检查均未见有意义的病理变化。

每只老鼠每天食用量： 84700微克，连续服用 30天，共 2541000微克。各组动物大体解剖与主要脏器病理组织检查均未见有意义的病理变化。没有发生中毒，没有发生病变。由此可推断，成人每次服用 100000微克是安全的。用此剂量可达到卫生部成人、孕产妇、儿童服用抗核爆标准用量。

实施例七：钝顶螺旋藻多糖抗辐射效果试验数据

钝顶螺旋藻多糖对小鼠外周血细胞及骨髓有核细胞数的影响（X士 s) 指标伤后时间正常对照组正常用药组辐射对照组辐射损伤用

(d) 药组

Hb 5 142.82 + 144.93 + 86.33 + 88.52 +

(g/L) 10 10.63 13.82 15.21^ΔΔ 16.13 n=18~21 15 139.12士 141.15士 96.45 + 105.91 +

WBC 5 15.46 10.03 12.38^ΔΔ 13.42

(IXIOVL) 10 148.22 + 145.29士 145.16士 143.67士 n=18~21 15 11.24 12.19 15.94 15.66

PLT 5 8·42±2·34 8·71±2·23 3·57±0· 94^Δ 3·86±1·43

(IXIOVL) 10 8·25±2·71 8·39±2·16 7.68 ±2· 55" n=18~21 15 8·32±2·65 8·29±2·81 5·72±2· 81^Δ 8.41 ±2.48

BMC 5 261.23士 248.6士 25.63士

(1X107根） 10 46.38 44.65 8·35±2·37 11.74 n=10~18 15 255.34士 257 ±47.25 26.83 + 95.78士

51.27 253 + 46.62 14.85^ΔΔ 29.61

258.37士 13·55±3· 78 98.65士 245.44 +

48.26 31.17^ΔΔ 47.22

10·16±4·81 13·35±1· 19 243.64士 6.18 ±2· 39"

10·51±1·69 51.68 9.34 ±4.34"

10·46±4·11 13·37±3· 55 3·26±1· 72^Δ 10.32±4.08

7·12±3· 85^Δ

10·47±4·62

注：与正常对照组比较， ^Δρ<0.05, ^ΔΔρ<0.01_; 与辐射损伤对照组比较〈0.05 ρ〈0.01 表 2 钝顶螺旋藻多糖对小鼠造血组细胞及造血干细胞数的响（X士 s)

n=10~13 15 18.21 11.26^Δ 12.73 8.65*

CFU-S 66·51±6·25 88·62±5·18 12·32±7· 63 42.12士

(1X10¾MC) 62·25±7·23 10.68" n=8 65·53±7·15 85.81 + 7.21 23·92±8· 65 66.38士

12.85±5.61 11.82

13·11±6·82 85·49±7·82 64.25 ±8.94 9·54±5· 28*

13·15±4·77 6·18±4· 25^Δ 12.74士

15.78±5.27 5.84"

9.04±5.27^Δ 13·35±5· 71

15.93 + 4.04

13·13±4·69

15·52±5· 15 注：与正常对照组比较， ^Δρ<0.05, ^ΔΔρ<0.01_; 与辐射损伤对照组比较〈0.05 ρ〈0.01 实施例八：螺旋藻抗辐射效果试验数据

表 1 螺旋藻对 ^6QCo-r辐照小鼠骨髓红细胞

微核率的影响（X±s

与对照组比较， a: 7<0.01,b: 与高剂量组比较， 7<0.005<

表 2 螺旋藻对 ^6QCo-r辐照小鼠睾丸精母

细胞染色体畸变的影响

染色体畸变数

剂量 (g/kg) 畸变细胞率（％)

(包括断片及易位)

低剂量组 0.4 75 7.5 中剂量组 1.2 50 5.0^b 高剂量组 2.4 36 3.6^ac 辐照对照 0.0 80 8.0^d 空白对照 0.0 3 0.30 与辐射对照组比较， a: 7<0.01，b: p<0.005; 与低剂量组比较，

c: 7<0.001;与空白对照组比较， d: 7<0.01. 实施例九：钝顶螺旋藻多糖抗辐射对急性白血病病人 NK细胞的作用

图 4 SPP对 PBMC和 K₅₆₂细胞细胞毒作用；

2.2.2 SPP作用时间与 ΝΚ细胞活性关系

10mg ·Ι SPP加入 NK效应细胞孵育不同时间对 NK细胞活性影响见图 5，说明效应细胞加 SPP作用 12h以上始有效果，24h达较高水平，故本实验选孵育时间为 24h。

附表 SPP对白血病病人 NK细胞活性

注： <0.01， *>>0.05 正常人

SPP孵育时间（h)

图 5 SPP孵育时间与 NK活性关系

2.2.3 SPP对正常人 NK细胞活性影响

正常人外周血单个核细胞加入 SPPlOmg · L- ¹后 NK细胞活性为 46.70±10.56% 与正常人 NK细胞活性相比较差异无显著性（ρ〉0.05) ，说明该浓度 SPP对正常人 ΝΚ 细胞活性无明显影响。

2.3 SPP对白血病病人 ΝΚ细胞活性作用

SPP使 31例白血病病人外周血 ΝΚ细胞活性从 26.41 ±10.17%提高到 38.33 + 9.45% (ρ<0Μ), 但仍低于正常人 NK细胞活性（ρ<0.01)，不同病期急性白血病病人外周血单个核细胞加入 SPP后 ΝΚ细胞活性均有明显提高（ρ<0.01)。初发、复发期病人 ΝΚ细胞活性加 SPP后虽有提高但仍低于正常人（ρ<0.01 )，而缓解期病人 ΝΚ 细胞活性加 SPP后与正常人相比较则差异无显著性（ρ〉0.05)，见附表。

实施例十：螺旋藻多糖对抗紫外线辐射

3 结果

3.1给药组的最佳浓度：在 96空板中加入药物，对细胞进行培养，与对照组相比，各药物浓度组细胞生长不一，其中 1600、 800 g ' L-¹剂量组细胞于接种后第 2天即出现细胞圆縮难以粘壁，第 3天见培养液内细胞残渣，各药物剂量组于接种后第 4天进行细胞计数，结果见表 1，从而确定 PSP的给药剂量为 100、 50、 25 g · L- 表 1 不同 PSP浓度对细胞生长的影响（Xis) ―

PSP浓度（ g · L— n 细胞密度（1 10⁶个/1^)

0 8 1.8±0· 075

25 8 3.2±0· 142

50 8 3.0±0· 102

100 8 3.0±0· 149

200 8 1.4±0· 127

400 8 0.8±0.093 3-2 DNA损伤实验

在确定好药物浓度后，取细胞以 l X 10⁶/cm²的密度接种于 25mL的培养瓶中，仍用含 10%的胎牛血清， 0.3%的 L-谷氨酰胺， 100U · ΜΓ¹的青霉素和 lOOmg · L ¹的链霉素培养，并分别设对照组和加入 100,50,25 mg - L"¹的 PSP给药组进行培养，细胞在培养 4d后，于 UV下照射 30min，进行铺片，变性，解旋，电泳，中和，染色，观察及拍片，并在每张载玻片上随机选择 10个细胞进行测量，对照组和各给药组的 DNA 迁移距离（MLD ) 如表 2，各给药组的 MLD与对照组相比， MLD明显减少，且在统计学有明显差异

PSP对紫外线照射 30min后细胞的 MLD的影响 (X士 s) ―

3-3 DNA基础水平损伤及损伤后修复

在基础水平损伤后再给予 PSP进行培养，损伤后 30，60，90min各时间进行 SCGE, 各组细胞及各时间的 MLD如表 3，图 4。

表 3 UV诱发的 DNA基础损伤时的 MLD及之后给予 PSP各时间的 MLD^m ( X士 s) ―

*p<0.05,**p<0.01 vt 对照组

Claims

权利要求书

1、一种螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于以新鲜活体藻泥为载体，加入螺旋藻多糖和有机生物碘，在光照和温控下发生光学自养生物反应而得到螺旋藻多糖有机生物碘。

2、根据权利要求 1 所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的螺旋藻多糖有机生物碘的配比为：藻泥占 50-96%，螺旋藻多糖占 3-50%，有机生物碘占 0.0001 -10%

3、根据权利要求 1 所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的藻泥选自钝顶螺旋藻、巨大螺旋藻或小球藻。

4、根据权利要求 1 所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的有机生物碘由 96 %的 1-碘酪氨酸、 2 %的 2-碘酪氨酸和 2 %的海藻酸钠组成。

5、根据权利要求 1所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的螺旋藻多糖是由螺旋藻粉经酶水解、醇沉和柱层析纯化步骤制得的，其中所述的酶为胰蛋白酶和木瓜蛋白酶。

6、根据权利要求 1所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的光照为日光或人造光源，其光照强度 5-10万勒克司，波长 400-700毫微米。

7、根据权利要求 1 所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于所述的温控是温度在 30°C -40°C之间。

8、根据权利要求 1-7任一项所述的螺旋藻多糖有机生物碘，其特征在于以藻泥的干粉计算，每 100g 藻泥干粉，加入螺旋藻多糖 3-50 克，有机生物碘以碘计算 100-10，000，000微克。

9、根据权利要求 1一 8任一项所述的螺旋藻多糖有机生物碘在制备用于抗辐射、提高人体免疫力、抗癌或抗病毒的药品或保健食品中的应用。

10、根据权利要求 9所述的应用，其中所述的辐射为电离辐射及核微量辐射或核能辐射。