WO2012134005A1 - 유황을 섭취한 파리 유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

유황을 섭취한 파리 유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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WO2012134005A1
WO2012134005A1 PCT/KR2011/007226 KR2011007226W WO2012134005A1 WO 2012134005 A1 WO2012134005 A1 WO 2012134005A1 KR 2011007226 W KR2011007226 W KR 2011007226W WO 2012134005 A1 WO2012134005 A1 WO 2012134005A1
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extract
composition
sulfur
metabolic diseases
fly
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PCT/KR2011/007226
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박병성
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셀비타(주)
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63—Arthropods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism

Definitions

  • the present invention relates to a novel use of fly larvae ( Musca domestica L. ), specifically the present invention is a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases containing sulfur ingested fly larvae extract as an active ingredient, a method for preparing the same and It relates to a health functional food using the same.
  • LDL-C Low fat diets, along with obesity due to body fat accumulation, increase the LDL-C content, known as triglycerides and harmful cholesterol in the blood, and lower the HDL-C content, a beneficial cholesterol. Increased blood LDL-C has been shown to be a major cause of cardiovascular disease and can lead to high mortality (SM Grundy, Cholesterol and coronary heart disease, JAMA, 256, 2849-2858 (1986)).
  • the liver is an important organ in vivo that performs important functions such as nutrient metabolism and detoxification, and it has been reported that its function is impaired by harmful chemicals and alcohol (EH Maynard, S. Brittern, and RG James).
  • EH Maynard, S. Brittern, and RG James Effect of 3-methylchloanthrene induction on the CCL4-induced changes in rat hepatic microsomal enzyme system, Biochem.Pharmacol , 21, 745-747 (1972), Y. Ha, YS Kim, CR Ahn, JM Kweon, CW Park, YK Ha, and JO Kim
  • Mycelial culture of lentinus edodes alleviates rat liver toxicity induced by carbon tetrachloride and ethanol, J.
  • Chronic alcohol administration and the supply of carbon tetracycline (CCL 4 ) can dramatically increase free radicals caused by lipid peroxidation in liver tissues, resulting in cytotoxicity due to liver damage (T. Noll, and H. Groot, The critical steady-state hypoxic conditions in carbon tetrachloride-induced lipid peroxidation in rat liver microsome, Biochem.Biophys.Acta , 795, 356-362 (1984)), which results in the destruction of liver tissue cell membranes and protein synthesis.
  • GAM-GTP gamma-glutamyl transpeptidase
  • gamma-GTP gamma-glutamyl transpeptidase Influx and increase
  • the present inventors are studying a new therapeutic agent that can effectively prevent and treat metabolic diseases
  • the ethanol extract obtained from fly larvae is administered to obese rats fed with high-fat diet, thereby reducing blood lipid, CCL 4
  • alcohol was administered to rats intraperitoneally injected, it was found that the ethanol extract obtained from fly larvae can effectively prevent and treat metabolic diseases, and the sulfur-fed larvae extract was administered.
  • This invention was completed by confirming that the effect of treating and preventing this metabolic disease is remarkable.
  • an object of the present invention is to provide a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases containing fly larvae extract as an active ingredient.
  • Another object of the present invention to provide a health functional food for the prevention or improvement of metabolic diseases containing fly larvae extract as an active ingredient.
  • Another object of the present invention to provide a method for preparing a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases, including the fly larvae extract.
  • Another object of the present invention to provide a method for preventing or treating metabolic diseases using fly larvae extract.
  • the present invention provides a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases containing a fly larva (Musca domestica L.) extract as an active ingredient.
  • the fly larva may be bred for 2 to 7 days with a feed containing sulfur of 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the feed.
  • the extract may be an ethanol extract.
  • the extract may lower blood lipid content or inhibit liver damage.
  • the metabolic disease may be selected from the group consisting of obesity, diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, arteriosclerosis and fatty liver.
  • the present invention provides a health functional food for the prevention or improvement of metabolic diseases containing fly larvae (Musca domestica L.) extract as an active ingredient.
  • the metabolic disease may be selected from the group consisting of obesity, diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, arteriosclerosis and fatty liver.
  • the fly larva may be bred for 2 to 7 days with a feed containing sulfur of 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the feed.
  • the present invention provides a method for preparing a composition for preventing or treating metabolic diseases, comprising extracting an extract of sulfur-fed fly larvae (Musca domestica L.).
  • breeding fly larvae for 2 to 7 days in a feed containing 0.1 to 20% by weight of sulfur relative to 100% by weight of the feed High temperature, high pressure treatment and squeezing the fly larvae to obtain fly larvae residues; Mixing pure ethanol to the fly larva residue; Cooling the mixture to obtain a sample of ethanol extract; And depressurizing and extracting the extract.
  • the manufacturing method the fly larva sample at a high temperature of 150 °C, 1,000 PSI and compressed to obtain a fly larva residue; Mixing pure ethanol in a ratio of 1:10 to the fly larva residue; Extracting the mixture three times at 60 ° C. three times using a reflux condenser to obtain an ethanol extract sample; And concentrating the extract under reduced pressure using a rotary vacuum concentrator on a 40 ° C. water bath.
  • the fly larvae extract according to the present invention is an extract obtained from sulfur ingested fly larvae and has an effect of reducing blood lipid when administered to an animal model inducing obesity, and protects liver damage when administered to an animal model injected with alcohol. Since it has been confirmed, the composition of the present invention comprising the fly larva extract can prevent, treat or improve metabolic diseases such as obesity, diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, arteriosclerosis and fatty liver that can occur due to abnormal lipid metabolism There is an effect that can be used as a pharmaceutical composition and a functional food composition.
  • T1 control
  • T2 CCL 4 intraperitoneal injection group
  • T3 CL 4 intraperitoneal injection group after oral administration of fly larvae extract
  • T4 combined oral administration of fly larvae extract and alcohol
  • T5 fly oral administration of alcohol after oral administration
  • T1 shows a control group not treated with anything
  • T2 is oral administration of a fly larva extract (5mg) not ingested sulfur
  • T3 are graphs showing the degree of reduction of plasma LDL-C components in the group of 5 mg, 7.5 mg, and 10 mg of sulfur-fed fly larvae extracts, respectively.
  • the present invention is characterized by providing a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases containing the fly larvae ( Musca domestica L. ) extract as an active ingredient.
  • the fly larvae extract according to the present invention is a sulfur ingested fly larvae extract obtained by breeding fly larvae with feed containing sulfur, when the sulfur ingested fly larvae extract is administered to obese rats ingesting a high fat diet It has been found that blood lipid content is reduced, and when administered to rats whose liver is damaged due to intraperitoneal injection of carbon tetrachloride (CCL 4 ) or alcohol administration, it can protect liver function and ultimately prevent or treat metabolic diseases. It was.
  • CCL 4 carbon tetrachloride
  • three rats (SDS strain) males using three treatment groups that is, a general diet group not administered the larva extract, HO (obesity induced by high fat diet) Group), and HOE (peripheral rats, sulfur ingestion fly larva extract 5.0mg orally administered group), and completely randomly placed, and in Example 4, the rats (SDS strain) using 45 male rats were completely placed in five treatment groups
  • the five treatment groups were T1 (control), T2 (CCL 4 intraperitoneal injection group), T3 (CCL 4 intraperitoneal injection group after oral administration of sulfur ingested fly larvae extract), T4 (combined oral administration of sulfur ingested fly larvae extract and alcohol).
  • T5 oral sulfur ingestion fly larvae extract oral group after alcohol oral administration
  • 9.94% weight reduction in HOE compared with HO Table 1
  • blood LDL-cholesterol and arteriosclerosis index was 44.66% , 51.50%
  • the HDL-cholesterol content was significantly increased (p ⁇ 0.05) (Table 3).
  • blood AST, ALT, -GTP, and bilirubin concentrations were highest in T2 and T3, in the order of T4 or T5, and T1 was the lowest except that bilirubin was the same as T1. ⁇ 0.05) (Table 4).
  • LDL-C a lipid component present in plasma
  • LDL-C content was decreased in the group administered with the larval extract which did not consume sulfur compared to the control group which had not treated anything.
  • the reduction of LDL-C was significantly reduced compared to the group administered the fly larvae extract ingested sulfur.
  • the present inventors were able to find out that the fly larvae extract can be used as a new biomedical material for the prevention of diseases of humans in the prevention and treatment of obesity, lipid metabolism and alcoholic liver disease.
  • the larvae ingested sulfur it was found that a significantly elevated effect could be obtained.
  • the present invention can provide a composition for the prevention or treatment of metabolic disease containing the fly larvae extract as an active ingredient, preferably the composition for the prevention or treatment of metabolic disease containing the fly larvae extract ingested sulfur as an active ingredient Can be provided.
  • composition of the present invention can be used as a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of metabolic diseases.
  • the metabolic disease refers to a disease caused by abnormality of energy metabolic processes in the body, and refers to a disease caused by abnormal control of adipocyte differentiation and lipid metabolism and may be caused by obesity. .
  • the metabolic disease may include, but is not limited to, obesity, type 2 diabetes, hyperlipidemia, hypercholesterolemia, arteriosclerosis, and fatty liver.
  • diabetes is caused by a variety of causes, such as increased animal food and fat intake, decreased physical activity, and largely insulin-dependent (Insulin-Dependent Diabetes Mellitus type 1 diabetes) and insulin-independent (Non-Insulin) Dependent Diabetes Mellitus (Type 2 Diabetes), which is caused by a deficiency of insulin, a glucose-regulating hormone in the blood. And account for most of the diabetic patients in Korea.
  • type 2 diabetes is also called adult type diabetes and has been found to be caused by excessive body fat accumulated in the body.
  • insulin secretion disorder and defects in insulin action (insulin resistance) in target cells are observed.
  • the composition for preventing or treating metabolic diseases according to the present invention may include 'pharmaceutically effective amount' of fly larvae extract alone or may include one or more pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents.
  • the term 'pharmaceutically effective amount' refers to an amount sufficient to prevent, ameliorate, and treat a metabolic disease.
  • the pharmaceutically effective amount of the fly larvae extract according to the present invention may be 0.5 ⁇ 100 mg / day / kg body weight, preferably 0.5 ⁇ 5 mg / day / weight kg.
  • the pharmaceutically effective amount may be appropriately changed according to the degree of symptoms of metabolic disease, the age, weight, health condition, sex, route of administration, and duration of treatment of the patient.
  • compositions according to the present invention may further comprise a “pharmaceutically acceptable” carrier.
  • pharmaceutically acceptable refers to a composition that is physiologically acceptable and that, when administered to a human, typically does not cause allergic or similar reactions, such as gastrointestinal disorders, dizziness, and the like.
  • Pharmaceutically acceptable carriers include, for example, carriers for oral administration such as lactose, starch, cellulose derivatives, magnesium stearate, stearic acid, and the like for parenteral administration such as water, suitable oils, saline, aqueous glucose and glycols, and the like. And the like may further comprise stabilizers and preservatives.
  • Suitable stabilizers include antioxidants such as sodium hydrogen sulfite, sodium sulfite or ascorbic acid.
  • Suitable preservatives include benzalkonium chloride, methyl- or propyl-parabens and chlorobutanol.
  • Other pharmaceutically acceptable carriers may be referred to those described in the following documents (Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated in a suitable form according to methods known in the art together with the pharmaceutically acceptable carrier as described above. That is, the pharmaceutical composition of the present invention may be prepared in various parenteral or oral administration forms according to known methods, and isotonic aqueous solution or suspension is preferable as an injectable formulation as a typical formulation for parenteral administration. Injectable formulations may be prepared according to techniques known in the art using suitable dispersing or wetting agents and suspending agents. For example, each component may be formulated for injection by dissolving in saline or buffer.
  • oral dosage forms include, but are not limited to, powders, granules, tablets, pills and capsules.
  • compositions formulated in such a manner can be administered in a effective amount via several routes including oral, transdermal, subcutaneous, intravenous or intramuscular.
  • the term 'effective amount' refers to an amount exhibiting a prophylactic or therapeutic effect when administered to a patient.
  • the dosage of the pharmaceutical composition according to the present invention may be appropriately selected depending on the route of administration, subject to administration, age, gender weight, individual difference and disease state.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may vary the content of the active ingredient according to the degree of disease, preferably 1-10000mg / kg body weight / day, more preferably 10 ⁇ 1000mg / kg body weight / day It may be administered several times a day at an effective dose of.
  • the composition for preventing or treating metabolic diseases of the present invention may be administered in parallel with known compounds having the effect of preventing, improving or treating metabolic diseases.
  • the present invention can provide a medicament for the prevention and treatment of metabolic diseases, including the composition containing the fly larvae extract as an active ingredient, and the present invention is administered to a subject in need thereof a therapeutically effective amount. It can provide a method for preventing or treating metabolic diseases comprising the step of.
  • fly larvae extract by the administration of the fly larvae extract in the individual to which the extract is administered, the weight reduction effect of the body adipose tissue, the effect of improving insulin resistance and glucose tolerance disorders, the production and secretion of inflammatory cytokines It is because it can induce an inhibitory effect, the effect of promoting the production and secretion of anti-inflammatory cytokines, or the expansion and activity of immune cells.
  • composition for the prevention or treatment of metabolic diseases of the present invention can be added to food for the purpose of preventing and improving the symptoms of metabolic diseases, the composition can be used as a composition for food for the prevention and improvement of metabolic diseases.
  • composition for food for the prevention and improvement of metabolic diseases of the present invention can be easily utilized as a food, for example, the main raw material, secondary ingredients, food additives, functional foods or beverages that are effective in preventing or improving metabolic diseases.
  • the term 'food' refers to a natural product or processed product containing one or more nutrients, and preferably means a state in which it can be directly eaten through some processing process, It includes all foods, food additives, functional foods and drinks.
  • Foods to which the composition for preventing and improving metabolic diseases according to the present invention can be added include, for example, various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, functional foods, and the like.
  • food includes special nutritional products (e.g., prepared oils, infants, infant foods, etc.), processed meat products, fish products, tofu, jelly, noodles (e.g. ramen, noodles, etc.), breads, health supplements, seasonings.
  • Foods e.g. soy sauce, miso, red pepper paste, mixed soy sauce
  • sauces confectionery (e.g. snacks), candy, chocolates, gums, ice creams, dairy products (e.g.
  • fermented milk, cheese, etc. other processed foods
  • kimchi, Pickled foods various kimchi, pickles, etc.
  • beverages e.g., fruit drinks, vegetable drinks, soy milk, fermented beverages, etc.
  • natural seasonings e.g., ramen soup, etc.
  • the food, beverage or food additives may be prepared by a conventional manufacturing method.
  • the 'functional food' refers to the control of biological defense rhythms and disease prevention of food groups or food compositions that have added value to the food by using physical, biochemical, and biotechnological techniques to act and express the function of the food for a specific purpose. It means a food that is designed and processed to fully express the body's regulatory function regarding recovery and the like, and specifically, it may be a health functional food.
  • the functional food may include food acceptable food additives, and may further include appropriate carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of functional foods.
  • the 'beverage' refers to a generic term for drinking to quench thirst or to enjoy a taste and includes a functional drink.
  • the beverage contains, as essential ingredients, a composition for the prevention and amelioration of the metabolic disease as an essential ingredient, and there are no special limitations to the other ingredients, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks. Can be.
  • foods containing the composition for the prevention and improvement of metabolic diseases in addition to those described above may be flavored with various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants and fillers (cheese). , Chocolate and the like), pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like.
  • the components can be used independently or in combination.
  • the amount of the composition according to the present invention may comprise from 0.001% to 90% by weight of the total food weight, preferably 0.1% by weight To 40% by weight, and in the case of a beverage, it may be included in a ratio of 0.001g to 2g, preferably 0.01g to 0.1g based on 100ml, for health and hygiene purposes or for health control purposes.
  • 0.001g to 2g preferably 0.01g to 0.1g based on 100ml
  • the present invention is characterized by providing a method for producing a composition for the prevention or treatment of metabolic diseases, characterized in that it comprises the step of extracting the extract of sulfur ingested fly larvae (Musca domestica L.).
  • the fly larva extract is an extract obtained from the larvae of the fly ingested sulfur, obtained from fly larvae bred for 2 to 7 days in a feed containing 0.1 to 20% by weight of sulfur relative to 100% by weight of the feed Can be, the fly larvae reared in the above process to obtain a fly larva residue by high temperature, high pressure treatment and then compressed; Mixing pure ethanol to the fly larva residue; Cooling the mixture to obtain a sample of ethanol extract; And through the step of concentrating the extract under reduced pressure, the fly larva extract according to the present invention can be obtained.
  • fly larvae ingested by ingesting sulfur are treated with high temperature at 150 ° C. and 1,000 PSI and compressed to obtain fly larva residues; Mixing pure ethanol in a ratio of 1:10 to the fly larva residue; Extracting the mixture three times at 60 ° C. three times using a reflux condenser to obtain an ethanol extract sample; And the larvae extract of the present invention through the step of decompression, concentration using a rotary vacuum concentrator on a 40 °C water bath can be prepared.
  • sulfur is an oxygen group element (element symbol: S, atomic number: 16, atomic weight: 32.06, melting point: 112.8 ° C. (a sulfur), boiling point: 444.7 ° C., specific gravity: 2.07 (a sulfur)) belonging to group 6B of the periodic table. It is the fourth most abundant mineral in the human body after calcium, phosphorus, and potassium. It is found in all cells of the body and is a component of the important amino acids, cystine, cysteine, and methionine. It is essential for the body, and is also a component of the vitamins thiamin and biotin, which are also present in saliva, bile and hormone insulin. It accounts for 0.15% of body weight, and sulfur accounts for 10% of the body's mineral content. As such, sulfur is one of the most important substances in metabolic activities such as breathing and assimilation of living things.
  • sulfur is known as a medicine of the world, which is the most essential action for human life activity. Legislated sulfur is the best remedy to combat yang lack, and has been used as a medicine for gynecological pediatric diseases, including various ulcers, inflammations and colds. However, sulfur itself has a problem that it is not easy to use because it is very toxic.
  • fly larvae emit secretions from their bodies as a means to extinguish in vitro for food, and these secretions contain a lot of digestive enzymes, especially when they come into contact with sulfur. Has the property to be removed.
  • the sulfur that can be used in the present invention is toxic sulfur or legally removed sulfur sulfur All of them can be used, preferably sulfur can be used to remove the toxicity. In one embodiment of the present invention used commercially available sulfur from which the toxicity is removed.
  • the amount of sulfur to be added in the feed should be added in an appropriate range in consideration of this point, sulfur can be added in an amount of 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the feed, preferably 0.1 to 5.0% by weight It is preferable to add.
  • fly larvae may be added in an amount of 0.1 to 20% by weight relative to the total weight of the feed to maximize the therapeutic effect of metabolic diseases while inducing more stable and normal growth.
  • fly larvae artificially raised and produced in the standard environment of flies were provided by Golden Bioking Co., Ltd.
  • the inventors of the present invention have added sulfur to feed the fly to improve the physiological activity of the extract of fly larvae.
  • Larvae were raised. More specifically, fly fly larvae hatched from fly eggs 2 days by adding 2% by weight of Indian natural sulfur (detoxified sulfur) to 100% by weight of general breeding medium containing 70% water content. Intake for days.
  • the fly larvae thus grown were compressed after treatment for 30 minutes at 1,000 PSI at a high temperature of 150 °C to obtain a fly larva residue.
  • the larva residue and pure ethanol were mixed at a ratio of 1:10, and then extracted three times at 60 ° C.
  • the inventors of the present invention in order to determine whether the extract obtained from the sulfur-flying flies larvae obtained in Example 1 has an effect of protecting the lipid reduction and liver damage in the body, the mice and the ingestion of the extract obtained The following experiments were performed on control mice that were not treated, and the intake content of the extract was determined by BS Park (A study on the bioactive effect of ethanol extracts from fly larvae, J. Environ. Agri. Res, 9, 9-22, 2007).
  • anesthetized and dissected animals were discontinued for 12 hours before the end of the experiment and only water was supplied.
  • blood was injected into the heparinized vacuum tube (Becton Dickinson Vacutainer System, Franklin lakes, NJ 07417, USA) using a heparinized syringe from the abdominal aorta to prevent blood clotting. It was.
  • Plasma was separated by centrifuging the blood for 20 minutes at 3,000 rpm. The separated plasma was frozen in liquid nitrogen gas (-196 ° C) and then frozen and stored at -20 ° C until biochemical analysis. Liver, kidney, heart, spleen, thymus and abdominal fat were removed immediately after collection, washed with physiological saline, and then adsorbed on whatman filter paper (No. 2) to remove moisture and weighed organs.
  • the triglyceride, total cholesterol, and HDL-C content in blood lipid fractions were quantified by commercially prepared enzyme kit (Asan Pharmaceutical, South Korea), and the LDL-C content was calculated by Friedwald's formula (1972) (GR Warnick, RH). Knopp, V. Fitzpatrick, and L. Branson, Estimating low-density lipoprotein cholesterol by the Friedewald equation is adequate for classifying patients on the basis of nationally recommended cutpoints, Clin. Chem, 36, 15-19, (1990)), cardiovascular
  • the atherosclerotic index (AI) used to determine the risk of relational disease was calculated by (total cholesterol)-(HDL-C) / HDL-C (T.
  • liver mesenchyme Animals were sacrificed to assess the extent of histologic hepatocellular damage and tissues were taken from the liver mesenchyme immediately after opening and fixed in 4% paraformaldehyde solution. After the dehydration process, a paraffin was used to make 4-5 ⁇ m tissue sections, and then hematoxylin-eosin stain (H-E stain) was performed. The stained tissues were photographed at 200-fold using an optical microscope (Olympus AX70, Japan), and liver damage patterns were compared and analyzed according to the administration of fly larva ethanol extract.
  • Nutr, 107, 1340-1348 (1977)) was formulated and pelletized after preparation.
  • the composition of the general diet is 20.0% casein, corn starch 15.0%, sugar 50.0%, a-cellulose 5.0%, corn oil 5.0%, mineral mixture 3.5%, vitamin mixture 1.0%, choline bitrate 0.2%, DL-methionine 0.3% And the energy and protein content in the general diet were equally adjusted.
  • the composition of the high-fat diet was reduced by 20% of sugar and replaced by 20% of pork oil. Adjusted.
  • the average daily dietary intake was lower in the obese rat group and the extract-administered group compared to the control group, and compared with the obese rat group, the dietary intake was significantly increased and improved.
  • the average daily weight gain was significantly increased in the obese rat group and the extract group compared with the control group, and compared with the obese rat group, the weight was significantly reduced by 9.94%, resulting in an obese body weight control effect.
  • the dietary efficiency was higher in the obese rat and extract group than in the control group, and statistical significance was found. Especially, the obese rat group showed the lowest dietary requirement for unit weight gain. Despite the low dietary intake in the obese rat group, the weight gain was higher and the dietary efficiency was higher in accordance with the report of Park et al.
  • liver, kidney, heart, spleen and adipose tissue when orally administered fly larva ethanol extract obtained from the larvae of sulfur-fed flies according to the present invention in rats fed high fat diet As you see.
  • the liver weight was significantly increased in the obese rat group compared with the control group, but there was no significant difference between the control group and the extract.
  • Adipose tissue weight was significantly higher in the obese rat group and extract group compared with the control group, and compared with the obese rat group, the extract group was significantly decreased, and the effect of extract on body fat accumulation in obese rats was recognized.
  • the results showed a similar tendency to that reported by Park et al. (2008), in which liver and adipose tissue weights were increased in obese rats fed a high-fat diet compared to rats fed a normal diet (CH Park, DI).
  • Triglyceride content was significantly increased in the obese rat group compared with the control group, but there was no significant difference between the control group and the extract.
  • Total cholesterol, LDL-C content, and arteriosclerosis index were significantly higher in the obese rat group and the extract group than the control group.
  • LDL-C and arteriosclerosis index were significantly decreased by 44.66% and 51.50%, respectively, compared to the obese rat group, and the effect of extract on blood LDL-C and arteriosclerosis index was observed in obese rats.
  • the HDL-C content was the highest in the control group, and was lower in the order of the extract-treated group and the obese rat group. An important finding of this study was that oral administration of fly larva ethanol extract could lower blood lipid levels in obese rats fed high fat diet.
  • LDL is the most important lipid carrier for the accumulation of cholesterol in the arteries.
  • HDL is a lipoprotein that carries cholesterol from the arteries to the liver. Increasing C eventually increases the ability to transport cholesterol from the blood and tissues to the liver, ie, removes blood cholesterol by reverse transport of cholesterol. Therefore, LDL-C in the blood is called bad cholesterol because HDL-C is harmful to health, and HDL-C is called good cholesterol (SM Grundy, Cholesterol and coronary heart disease, JAMA, 256, 2849-2858 (1986). )).
  • Atherosclerosis index indicates the triglyceride content of HDL-C in the body, and if the value is 3.0 or more in the clinic, it is considered as the risk level of atherosclerosis (L. Rosenfeld, Lipoprotein analysis, Arch. Pathol. Lab. Med, 113, 1101-1110 (1989)).
  • the new finding was that such reductions in blood lipids were observed in the fly larvae ethanol extract group and had a bioactive effect of improving lipid metabolism in humans.
  • SDS Forty-five male rats
  • T1 control
  • T2 0.5 injection of CCL 4 per 100 g body weight at the start of the experiment
  • T3 for 19 days
  • the amount of alcohol supplied to the rats is the amount of 70kg adult male ingesting one bottle of soju every day.
  • one bottle of soju is 360 mL of 20% alcohol
  • one bottle of soju is equivalent to 360 mL per 70,000 g of adult 70kg body weight.
  • the experimental animal breeding room temperature was maintained at 20 ⁇ 2 °C, relative humidity 60 ⁇ 5% and the illumination was adjusted in a 12 hour cycle. Unlimited diet and water were supplied, and the average daily weight gain, dietary intake and dietary efficiency were examined during the experiment.
  • Gamma-GTP showed the highest T2 intraperitoneally injected with CCL 4 compared to the control group T1, followed by T3, T5, and T4, and statistically significant differences between treatments were observed.
  • AST increased in order of T2, T3, T4, and T5 compared to T1, and ALT was highest in order of T2, T3, T5, and T1, T4 was the lowest, and statistically significant difference was observed between treatments.
  • Bilirubin was higher in order of T2, T3, T5, and T4 compared to T1, and statistically significant difference was observed between treatment groups.
  • AST and ALT are amino acid synthase that is present in liver and various organs to examine the degree of destruction of hepatocytes, and gamma-GTP and bilirubin test for hepatocellular dysfunction and bile flow.
  • the liver weight was increased by T2, T3 and T5 significantly compared to the control group T1, but there was no significant difference between T1 and T4.
  • the weights of the spleen and thymus were significantly lower in T2, T3, and T5 compared to T1, but no statistically significant difference was found between T1 and T4.
  • Abdominal fat did not show any significant difference between T1 and T4, which was injected orally with 5.0 mg of fly larvae extract per 100g body weight for 20 days, and 0.514 mL of 20% alcohol on days 6, 12, and 18, respectively.
  • T5 showed the highest accumulation rate, T2 followed by T3, and statistically significant difference between these treatments was recognized.
  • the liver weight was significantly increased in CCL 4 or intraperitoneally injected T2, T3, T5 compared to T1, which is a control group, and T4, which was a combination of alcohol and extract, due to metabolic disorders of nutrients and other substances due to liver damage. This may be due to the excessive accumulation of these substances in liver tissue. Excessive alcohol consumption due to excessive drinking can lead to hypertrophy of the liver due to fibrosis of fatty liver and liver tissue cells (MA Leo, M. Sato, and CS Lieber, Effect of hepatic vitamin A depletion on the liver in human and rats, Gastroenterology , 84, 562-572 (1983). In this experiment, we found that the administration of the extract prevents the enlargement of alcoholic liver tissue cells, and can reduce abdominal fat and activate immune organ cells.
  • liver tissue cells The classical lobules of liver tissue cells (T1) of normal rats were arranged in parallel with radial hepatic cords and oriental blood vessels from the central vein.
  • T2 administered with CCL 4 hepatic tissue cells were observed to be damaged by endothelial cells, and a portion of the hepatocytes swelled around the central vein of the unique hepatic lobule. It can be seen that the normal hepatocellular arrangement was severely disturbed.
  • liver tissue cells (T4) in combination with the extract and alcohol appeared slightly damaged form compared to normal liver tissue cells (T1), but was observed to be less damaged than T3.
  • T5 which had been administered with extracts, almost lost the central hepatic vein as well as the radial arrangement.
  • T2 Morphological features (T2) of hepatic tissue cells examined when CCL 4 was administered in this experiment were observed in the rats when CCL 4 was administered. It was similar to the results of Kim et al. (2009) that hepatocyte damage could be observed (DH Kim, YK Deung, YM Lee, YS Yoon, and KJ Lee, The effect of saengshik on the hepatotoxicity of mouse induced by carbon tetrachloride, Korean J Electron Microscopy, 37, 11-21 (2007)).
  • the present inventors performed the following experiment to prove that the lipid metabolism improving effect of the sulfur ingested fly larvae extract according to the present invention can obtain a more improved effect due to sulfur ingestion.
  • the content of the harmful lipid component LDL-C in the body compared to the control group (T1) that did not receive anything, compared to the control group (T1) did not receive the sulfur larvae mice fed a larvae extract was reduced by 2.56%
  • the LDL-C content was decreased by 10.59%, 16.78% and 19.98%, respectively, in proportion to the dose.
  • the present inventors have found that the extract of sulfur-flyed fly larvae has a remarkably superior lipid-improving effect compared to the extracts of fly larvae not ingested sulfur.

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Abstract

본 발명은 파리유충(Musca domestica L.)의 신규한 용도에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명은 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물, 이의 제조방법 및 이를 이용한 건강기능식품에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유황을 섭취한 파리유충 추출물은 비만이 유도된 동물모델에 투여하였을 경우 혈액지질 감소 효과가 있으며, 알코올을 주입한 동물모델에 투여하였을 경우 간 손상 보호 효과가 확인되었으므로, 본 발명에 따른 파리유충 추출물을 포함하는 조성물은 지질대사의 이상으로 발생할 수 있는 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간과 같은 대사성 질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 약학적 조성물 및 기능성 식품 조성물로 사용할 수 있는 효과가 있다.

Description

유황을 섭취한 파리 유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물
본 발명은 파리유충(Musca domestica L.)의 신규한 용도에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명은 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 이의 제조방법 및 이를 이용한 건강기능식품에 관한 것이다.
최근 보도에 따르면 뇌 및 심장 혈관계 질환이 암 다음으로 사망률이 높은 한국인의 사망원인으로 알려져 있다. 또한 세계적으로 급속한 인구의 고령화, 육식 위주의 식생활 습관 및 지나친 음주 등으로 고지혈증, 비만, 당뇨병 및 알코올성 지방간 등에 의한 질병부담이 증가하고 있다(L. B. Seeff, K. L. Lindsay, B. R. Bacon, T. F. Kresina, J. H. Hoofnagle, Complementary and alternative medicine in chronic liver disease. Hepatology, 34, 595-603 (2001)). 이와 같은 대사증후군의 위험성을 예방하기 위해 생체 활성을 지닌 새로운 천연물 소재에 대한 연구가 진행되고 있다(R. H. Eckel, S. M. Grundy, and P. Z. Zimmer, The metabolic syndrome, Lancet, 365, 1415-1428 (2005)).
고지방 식이 섭취는 체지방 축적에 의한 비만과 함께 혈액 내 중성지방과 유해 콜레스테롤로 알려진 LDL-C 함량을 증가시키고, 유익한 콜레스테롤인 HDL-C 함량을 낮춘다. 혈액 LDL-C의 증가는 심장혈관계질환을 일으킬 수 있는 주원인으로 밝혀졌으며 높은 사망률을 초래할 수 있다(S. M. Grundy, Cholesterol and coronary heart disease, JAMA, 256, 2849-2858 (1986)).
한편, 간은 영양소대사 및 해독작용과 같은 중요한 기능을 수행하는 생체 내 중요기관으로서, 유해화학물질과 알코올 등에 의한 손상으로 그 기능이 저하된다고 보고되어 있다(E. H. Maynard, S. Brittern, and R. G. James, Effect of 3-methylchloanthrene induction on the CCL4-induced changes in rat hepatic microsomal enzyme system, Biochem. Pharmacol, 21, 745-747 (1972), Y. Ha, Y. S. Kim, C. R. Ahn, J. M. Kweon, C. W. Park, Y. K. Ha, and J. O. Kim, Mycelial culture of lentinus edodes alleviates rat liver toxicity induced by carbon tetrachloride and ethanol, J. Life Sci, 20, 133-141 (2010)). 지나친 음주는 알코올의 대사 산물인 알데히드를 과잉으로 생성시켜 각종 대사성 질환 및 간염, 간경화증, 간암과 같은 알코올성 간질환을 유발할 수 있다(I. R. Wiilner, and A. Reuben, Alcohol and the liver, Curr. Opin. Gastroenterol, 21, 323-330 (2005)., C. S. Lieber, Ethanol metabolism, cirrhosis and alcohol, Clin. Chem, ACTA, 257, 59-84 (1997)., C. S. Lieber, Alcohol and liver, Gasroeenterol, 106, 1085-1090 (1994)). 만성적인 알코올의 투여와 사염화탄소(CCL4, carbon tetracycline)의 공급은 간 조직에서 지질과산화에 의한 자유라디칼(free radical)을 급격히 증가시켜 간 손상에 의한 세포독성을 초래할 수 있는데(T. Noll, and H. Groot, The critical steady-state hypoxic conditions in carbon tetrachloride-induced lipid peroxidation in rat liver microsome, Biochem. Biophys. Acta, 795, 356-362 (1984)), 이로 인해 간 조직의 세포막은 파괴되고 단백질 합성이 억제되어 혈액 속으로 감마-GTP (gamma-glutamyl transpeptidase), ALT (alanine aminotransferase=GPT, glutamic pyruvic transaminase), AST (aspartate aminotransferase=GOT, glutamic oxaloacetic transaminase), 감마-GTP (gamma-glutamyl transpeptidase)가 유입되어 증가한다(B. Chance, H. Sies, and A. Broveries, Hydroperoxide metabolism in mammalian organs, Physiol. Rev, 59, 527-605 (1979)., M. Dakeishi, T. Iwate, N. Ishil, and K. Murata, Effect of alcohol consumption on hepatocellular injury in Japanese man, Tohoku. J. Exp. Med, 202, 31-39 (2004)).
한편, 파리유충(Musca domestica L.)을 이용한 생체치료는 20세기 초에 고질적인 연조직의 골수염과 화농성 감염의 치료를 위해 이용되었으나 항생제 내성균의 출현으로 재도입되었으며(R. A. Sherman, M. J. R. Hall, and S. Thomas, Medicinal maggots: an ancient remedy for some contemporary afflictions, Annu. Rev. Entomol, 45, 55?81 (2000)), 특히 살아있는 유충보다는 오히려 분비물과 추출물을 이용하는 것이 많은 이점을 나타낼 수 있는 것으로 평가되고 있다(D. Jaklic, A. Lapanje, K. Zupani1, D. Smrke, and N. Gunde-Cimerman, Selective antimicrobial activity of maggots against pathogenic bacteria, J. Med. Microbiol, 57, 617-625 (2008)). 선행연구를 통해 본 발명자들은 파리유충으로부터 얻어진 수용성단백질효소 분해물에서 MRSA 억제력을 갖는 5 kDa 이하의 펩타이드가 존재함을 보고하였으며(A. Jang, C. R. Cho, B. S. Park, and K. J. Yoon, Seperation of antibaterial low molecular peptides from Musca domesica maggot against methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA) and vancomycin resistant enterococcus (VRE), 2007 International Symposium and Annual Meeting, Kor. Soc. Food Sci. Nutr, October 17-19, p 275 (2007)), 에탄올 추출물에서 MRSA, VRE 균주에 대한 강력한 항균효과가 있음을 보고한 바 있다(A. Jang, S. O. Park, J. H. Shin, W. K. Choi, and B. S. Park, Antibacterial activity of ethanol extracts from house fly-maggot against various strains of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus and Vancomycin-resistant enterococci strain, Annals of Animal Resources Sciences, 20, 6-15 (2009)).
그러나 이 외에 파리 유충 추출물의 인체 유익한 다른 생리활성에 대해서는 알려져 있지 않은 바, 파리 유충 추출물의 새로운 용도에 대한 개발이 필요하다.
이에 본 발명자들은 대사성 질환을 효과적으로 예방하고 치료할 수 있는 새로운 치료제를 연구하던 중, 파리유충으로부터 얻어진 에탄올추출물을 고지방식이를 급여해서 유도한 비만 쥐에 투여할 경우 혈액지질 감소 효과가 있으며, CCL4 및 알코올을 복강주사 한 흰쥐에 투여할 경우 간 손상 보호효과가 있다는 결과를 통해 파리유충으로부터 얻어진 에탄올추출물을 투여시 대사성 질환을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있음을 확인하였고, 나아가 유황을 섭취한 파리유충 추출물이 대사성 질환을 치료 및 예방하는 효과가 현저하다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 파리유충 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 파리유충 추출물을 이용한 대사성 질환의 예방 또는 치료방법을 제공하는 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 파리유충(Musca domestica L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 파리유충은 사료 총 중량에 대해 0.1~20중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 사육한 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 에탄올 추출물일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 혈액지질 함량을 낮추거나 간 손상을 억제할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군 중에서 선택되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 파리유충(Musca domestica L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 파리유충은 사료 총 중량에 대해 0.1~20중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 사육한 것일 수 있다.
나아가 본 발명은 유황을 섭취한 파리유충(Musca domestica L.)의 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 사료 총 100중량%에 대해 0.1~20중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 파리유충을 사육하는 단계; 파리유충을 고온, 고압처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계; 상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 혼합하는 단계; 상기 혼합물을 냉각시키고 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및 상기 추출물을 감압, 농축하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 제조방법은, 파리유충 시료를 150℃의 고온, 1,000 PSI로 처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계; 상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 1:10의 비율로 혼합하는 단계; 상기 혼합물을 환류 냉각장치를 이용해서 60℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하여 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및 상기 추출물을 40℃ 수욕 상에서 회전식 진공농축기를 사용하여 감압, 농축하는 단계를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 파리유충 추출물은 유황을 섭취한 파리 유충으로부터 수득한 추출물로서 비만이 유도된 동물모델에 투여하였을 경우 혈액지질 감소 효과가 있으며, 알코올을 주입한 동물모델에 투여하였을 경우 간 손상 보호 효과가 확인되었으므로, 상기 파리유충 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물은 지질대사의 이상으로 발생할 수 있는 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간과 같은 대사성 질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있는 약학적 조성물 및 기능성 식품 조성물로 사용할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 정상식이를 섭취한 흰쥐에게 CCL4와 성인 남자가 섭취하는 소주 1병에 해당하는 알코올을 각각 복강주사 하였을 때 간 조직세포의 형태학적 변화를 관찰한 광학현미경 사진이다(H&E, x200). T1 (대조군), T2 (CCL4 복강주사군), T3 (파리유충 추출물 경구투여 후 CCL4 복강주사군), T4 (파리유충 추출물과 알코올의 병합 경구투여군), T5 (알코올 경구투여 후 파리유충 추출물 경구투여군).
도 2는 본 발명에 따른 유황 섭취 파리유충 추출물의 지질대사 개선 효과를 나타낸 결과로서, T1은 아무것도 처리하지 않은 대조군을 나타낸 것이고, T2는 유황을 섭취하지 않은 파리유충 추출물(5mg)을 경구 투여한 군을 나타낸 것이고, T3, T4 및 T5는 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 마우스에 각각 5mg, 7.5mg 및 10mg씩 투여한 군에서 혈장 내 LDL-C 성분의 감소 정도를 그래프로 나타낸 것이다.
본 발명은 파리유충(Musca domestica L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.
특히, 본 발명에 따른 상기 파리유충 추출물은 파리의 유충을 유황을 함유한 사료로 사육시켜 수득한 유황섭취 파리유충 추출물로서, 이러한 유황 섭취 파리유충 추출물을 고지방 식이를 섭취한 비만 흰쥐에게 투여하였을 경우 혈액지질 함량이 감소되고, 사염화탄소 (CCL4)의 복강주사 또는 알코올 투여로 인해 간이 손상된 쥐에 투여하였을 경우 간 기능을 보호할 수 있는 효과가 있어 궁극적으로 대사성 질환을 예방 또는 치료할 수 있다는 사실을 발견하였다.
보다 구체적으로, 본 발명의 일실시예에 따르면 흰쥐 (SDS strain) 수컷 27마리를 이용하여 3개의 처리구, 즉, 파리유충 추출물을 투여하지 않은 일반식이군, HO (고지방식이에 의해 유도한 비만 군), HOE (비만 쥐에게 체중 100g 당 유황섭취 파리유충 추출물 5.0mg 경구투여군)로 구분하여 완전임의배치하고, 실시예 4에서는 흰쥐 (SDS strain) 수컷 45마리를 이용해서 5처리구로 완전임의 배치하였으며, 5개의 처리구는 T1 (대조군), T2 (CCL4 복강주사군), T3 (유황섭취 파리유충 추출물 경구투여 후 CCL4 복강주사군), T4 (유황섭취 파리유충 추출물과 알코올의 병합 경구투여군), T5 (알코올 경구투여 후 유황섭취 파리유충 추출물 경구투여군)로 구분하여 실험한 결과, HO와 비교할 때 HOE에서 체중 9.94% 감소(표 1) 및 혈액의 LDL-콜레스테롤과 동맥경화지수는 44.66%, 51.50% 유의하게 낮아졌으나, HDL-콜레스테롤 함량은 유의하게 증가하였다(p<0.05)(표 3). 또한, 혈액 AST, ALT, -GTP 및 빌리루빈의 농도는 T2 및 T3에서 가장 높았고 T4 또는 T5 순서로 높았으며 빌리루빈이 T1과 동일하였음을 제외하면 T1이 가장 낮게 나타나서 처리구간 통계적인 유의차가 있었다(p<0.05)(표 4). 한편, 간 조직세포의 형태학적인 관찰결과, CCL4에 의해 야기된 간 조직세포의 손상으로부터 회복이 추출물을 투여한 T3에서 관찰되었으며, 알코올을 경구 투여한 경우 T5에 비하여 T4에서 높게 나타났다(p<0.05)(도 1).
뿐만 아니라 본 발명의 다른 일실시예에 따르면, 유황에 의한 지질개선 효과를 보다 확실히 입증하기 위해 유황을 섭취하지 않은 파리유충 추출물과 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 대상으로 상기 추출물들을 마우스에 경구투여한 후, 혈장 내 존재하는 지질성분인 LDL-C의 함량을 측정한 결과, 아무것도 처리하지 않은 대조군에 비해 유황을 섭취하지 않은 파리유충 추출물을 투여한 군의 경우 LDL-C의 함량이 감소한 것으로 나타났으나, 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 섭취한 군의 경우 LDL-C의 감소 정도는 유황을 섭취하지 않은 파리유충 추출물을 투여한 군에 비해 월등하게 감소되는 것을 알 수 있었다.
따라서 본 발명자들은 상기 결과들을 통해 사람의 질병예방을 위한 의생명 신소재로서 파리유충 추출물을 비만방지, 지질대사 및 알코올성 간질환의 예방 및 치료용도로 사용할 수 있다는 사실을 알 수 있었으며, 이러한 효과는 파리유충에게 유황을 섭취시킬 경우, 현저하게 상승된 효과를 얻을 수 있다는 사실을 알 수 있었다.
그러므로 본 발명은 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 조성물을 제공할 수 있으며, 바람직하게는 유황을 섭취한 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 대사성 질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물로 사용될 수 있다.
본 명세서에서 상기 대사성 질환(또는 대사증후군)은 체내의 에너지 대사 과정의 이상으로 야기되는 질환을 일컫는 용어로서, 지방세포의 분화 및 지질대사의 조절이상으로 야기되는 질환을 말하며 비만으로 야기될 수 있다.
상기 대사성 질환으로는 이에 제한되지는 않으나, 비만, 제2형 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간 등이 포함될 수 있다.
일반적으로 당뇨병은 비만과 마찬가지로 동물성 식품과 지방질 섭취의 증가, 신체 활동량의 감소 등 다양한 원인으로 발병되고 있으며, 크게 인슐린 의존형(Insulin-Dependent Diabetes Mellitus; 제1형 당뇨) 및 인슐린비의존형(Non-Insulin-Dependent Diabetes Mellitus; 제 2형 당뇨)의 2 가지로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 혈액 내의 글루코스 조절 호르몬인 인슐린(insulin)의 분비 결핍으로 야기되며, 제2형 당뇨병은 주로 40대 이후에 발병되며, 우리나라 당뇨병 환자의 대부분을 차지한다. 제2형 당뇨병은 제1형과는 달리 성인형 당뇨병이라고도 불리며, 몸 안에서 과도하게 축적된 체지방에 의해 발병되는 것으로 밝혀진 바 있다. 특히 제2형 당뇨병 환자의 경우, 인슐린의 분비 장애 및 표적세포에서 인슐린 작용의 결함(인슐린 저항성)이 모두 관찰된다.
본 발명에 따른 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 '약학적으로 유효한 양'의 파리유충 추출물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 유효한 양'이란 대사성 질환을 예방, 개선 및 치료하기에 충분한 양을 말한다. 본 발명에 따른 파리유충 추출물의 약학적으로 유효한 양은 0.5 ~ 100 mg/day/체중kg, 바람직하게는 0.5 ~ 5 mg/day/체중kg일 수 있다. 그러나 상기 약학적으로 유효한 양은 대사성 질환의 증상 정도, 환자의 연령, 체중, 건강상태, 성별, 투여 경로 및 치료기간 등에 따라 적절히 변화될 수 있다.
상기 본 발명에 따른 약학적 조성물은 "약학적으로 허용되는" 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기에서 "약학적으로 허용되는"이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증 등과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 약학적으로 허용되는 담체로는 예를 들면, 락토스, 전분, 셀룰로스 유도체, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 등과 같은 경구 투여용 담체 및 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코스 및 글리콜 등과 같은 비경구 투여용 담체 등이 있으며 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르 브산과 같은 항산화제가있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다. 그 밖의 약학적으로 허용되는 담체로는 다음의 문헌에 기재되어 있는 것을 참고로 할 수 있다(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1995).
본 발명에 따른 약학적 조성물은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 적합한 형태로 제형화 될 수 있다. 즉, 본 발명의 약학적 조성물은 공지의 방법에 따라 다양한 비경구 또는 경구 투여용 형태로 제조될 수 있으며, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것으로는 주사용 제형으로 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하다. 주사용 제형은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제조할 수 있다. 예를 들면, 각 성분을 식염수 또는 완충액에 용해시켜 주사용으로 제형화 될 수 있다. 또한, 경구투여용 제형으로는, 이에 한정되지는 않으나, 분말, 과립, 정제, 환약 및 캡슐 등이 있다.
상기와 같은 방법으로 제형화된 약학적 조성물은 유효량으로 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다. 상기에서 '유효량' 이란 환자에게 투여하였을 때, 예방 또는 치료 효과를 나타내는 양을 말한다. 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여량은 투여 경로, 투여 대상, 연령, 성별 체중, 개인차 및 질병 상태에 따라 적절히 선택할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 약학적 조성물은 질환의 정도에 따라 유효성분의 함량을 달리할 수 있으나, 바람직하게는 1~10000mg/체중kg/day, 더욱 바람직하게는 10~1000mg/체중kg/day의 유효용량으로 하루에 수회 반복 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 대사성 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 효과를 가지는 공지의 화합물과 병행하여 투여할 수도 있다.
따라서 본 발명은 파리유충 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물을 포함하는 대사성 질환의 예방 및 치료용 약제를 제공할 수 있으며, 또한 본 발명은 파리유충 추출물을 이를 필요로 하는 개체에게 치료상 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료방법을 제공할 수 있다.
이는 본 발명에 따른 파리유충 추출물의 경우, 상기 추출물이 투여된 개체 내에서 파리유충 추출물의 투여에 의해 체내 지방조직의 중량 감소 효과, 인슐린 저항성 및 내당증 장애 개선 효과, 염증성 사이토카인의 생성 및 분비 억제 효과, 항염증성 사이토카인의 생성 및 분비 촉진 효과, 또는 면역세포의 확장 및 활성 효과를 유도할 수 있기 때문이다.
나아가 본 발명의 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 대사성 질환 증상의 예방 및 개선을 목적으로 하는 식품에 첨가할 수 있으므로, 상기 조성물을 대사성 질환의 예방 및 개선을 위한 식품용 조성물로 사용할 수 있다.
그러므로 본 발명의 대사성 질환의 예방 및 개선을 위한 식품용 조성물은 대사성 질환의 예방 또는 개선에 효과가 있는 식품, 예컨대, 식품의 주원료, 부원료, 식품 첨가제, 기능성 식품 또는 음료로 용이하게 활용할 수 있다.
본원에서 상기 '식품'이란, 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 식품, 식품 첨가제, 기능성 식품 및 음료를 모두 포함하는 것을 말한다.
본원발명에 따른 대사성 질환의 예방 및 개선용 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본원발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제 유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 빵류, 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 캔디류, 쵸코렛류, 껌류, 아이스크림류, 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실 음료, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등)를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 식품, 음료 또는 식품첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
또한, 상기 '기능성 식품'이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
또한, 본원발명에서 상기 '음료'란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며 기능성 음료를 포함한다. 상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 대사성 질환의 예방 및 개선용 조성물을 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
나아가 상기 기술한 것 이외에 본 발명의 대사성 질환의 예방 및 개선용 조성물을 함유하는 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있으며, 상기 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 대사성 질환의 예방 및 개선용 조성물을 함유하는 식품에 있어서, 상기 본 발명에 따른 조성물의 양은 전체 식품 중량의 0.001중량% 내지 90중량%로 포함할 수 있으며, 바람직하게는 0.1중량% 내지 40중량%로 포함할 수 있고, 음료의 경우, 100ml를 기준으로 0.001g 내지 2g, 바람직하게는 0.01g 내지 0.1g의 비율로 포함할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 건강 조절을 목적으로 하는 장기간 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있으므로 상기 범위에 한정되는 것은 아니다.
뿐만 아니라 본 발명은 유황을 섭취한 파리유충(Musca domestica L.)의 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공할 수 있는 특징이 있다.
본 발명에서 상기 파리유충 추출물은 유황을 섭취한 파리의 유충으로부터 수득한 추출물로서, 사료 총 100중량%에 대해 0.1~20중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 사육한 파리유충으로부터 수득할 수 있으며, 상기 과정으로 사육한 파리유충은 이후 고온, 고압처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계; 상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 혼합하는 단계; 상기 혼합물을 냉각시키고 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및 상기 추출물을 감압, 농축하는 단계를 통해 본 발명에 따른 파리유충 추출물을 수득할 수 있다.
보다 구체적으로 상기 유황을 섭취하여 사육한 파리유충은 150℃의 고온, 1,000 PSI로 처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계; 상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 1:10의 비율로 혼합하는 단계; 상기 혼합물을 환류 냉각장치를 이용해서 60℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하여 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및 상기 추출물을 40℃ 수욕 상에서 회전식 진공농축기를 사용하여 감압, 농축하는 단계를 통해 본 발명의 파리유충 추출물을 제조할 수 있다.
한편, 유황은 주기율표 제6B족에 속하는 산소족 원소(원소기호: S, 원자번호: 16, 원자량: 32.06, 녹는점: 112.8℃(a황), 끓는점: 444.7℃, 비중: 2.07(a황))로서 칼슘, 인, 칼륨 다음으로 인체에 4 번째로 많은 미네랄로, 체내의 모든 세포에서 발견되며 중요 아미노산인 시스틴(Cystine), 시스테인(Cysteine), 메티오닌(Methionine)의 구성성분으로서 세포 자신의 생명을 위해 필수적이며, 또한 비타민인 티아민과 비오틴의 구성성분이며, 타액과 담즙 그리고 호르몬인 인슐린 속에서도 존재한다. 체중의 0.15%를 차지하며, 체내의 광물질 함량의 10%를 황이 차지한다. 이렇듯 유황은 생물의 호흡, 동화 작용 등 신진대사 활동에 없어서는 안될 가장 중요한 물질 중 하나이다.
또한, 예부터 한방에서 유황은 인간의 생명활동에 가장 원초적인 작용인 보양(補陽), 보기(補氣)해 주는 천하의 명약으로 알려져 있다. 법제된 유황은 최고의 보양제로 양기 부족을 다스리고, 각종 궤양과 염증 및 냉증을 비롯해 부인병 소아병에 약으로 쓰여 왔다. 그러나 유황은 그 자체가 맹독성을 지니고 있어 용이하게 사용하지 못하는 문제점이 있었다.
한편 파리유충은 먹이를 섭취하기 위해 체외소화를 하기 위한 수단으로 자신의 몸에서 분비물을 내보내는데 이러한 분비물에는 각종 소화효소 성분이 많이 포함되어 있으며, 특히 이 분비물이 유황과 접촉할 경우 유황의 독성이 제거되는 특성을 가지고 있다.
따라서 파리유충을 사육하기 위해 본 발명에서는 독성이 있는 유황을 사용해도 파리유충 사육에 큰 지장을 초래하지 않는 특징이 있으며, 본 발명에서 사용할 수 있는 유황은 독성이 있는 유황 또는 독성이 제거된 법제 유황을 모두 사용할 수 있고, 바람직하게는 독성을 제거한 유황을 사용할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 독성이 제거된 시중에서 판매하고 있는 유황을 사용하였다.
그러나 사료 중에 유황을 많이 첨가할 경우, 사료내 무기질 과다 함량으로 영양분이 부족할 수 있으며, 또한 유황은 효소의 음식물 분해를 방해하므로 파리유충의 분비물 작용에 역행한다. 이것은 유충의 에너지 고갈과 음식물의 비분해로 영양 섭취의 부족으로 이어져 정상적인 성장이 어려울 수 있는 문제점이 있다. 따라서 사료내 첨가하는 유황의 양은 이러한 점을 고려하여 적정 범위로 첨가하여야 하는데, 유황을 사료 총 중량에 대해 0.1~20중량%의 양으로 첨가할 수 있으며, 바람직하게는 0.1~5.0중량%의 양으로 첨가하는 것이 바람직하다.
상기 유황을 사료 총 중량에 대해 0.1중량% 미만으로 첨가할 경우에는 유황으로 인한 본 발명의 목적 효과를 얻기가 미비한 문제점이 있으며, 반면 유황의 함량이 사료 총 중량에 대해 20중량%를 초과할 경우에는 앞서 기재한 바와 같이 파리유충의 성장에 문제점이 있을 수 있다.
그러므로 본 발명에서는 파리유충이 더욱 안정되고 정상적인 성장을 유도하면서도 대사성 질환의 치료효과를 극대화하기 위해 사료 총 중량에 대해 0.1~20중량%의 양으로 첨가할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
유황섭취 파리유충 추출물의 제조
파리의 표준환경에서 인공적으로 사육 생산한 파리유충 시료를 골든바이오킹(주)으로부터 제공받았는데, 파리의 사육과정에서 본 발명자들은 파리유충의 추출물의 생리활성을 향상시키기 위해 유황을 첨가한 사료로 파리유충을 사육하였다. 보다 상세하게, 파리 알에서 부화된 지 2일째 되는 파리유충을 수분함량이 70%로 함유된 일반사육배지 100중량%에 대해 인도산 천연유황(독성이 제거된 유황)을 2중량%로 첨가하여 5일 동안 섭취시켰다. 이렇게 사육된 파리유충은 150℃의 고온에서 1,000 PSI로 30분간 처리 후 압착해서 파리유충 잔사를 얻었다. 파리유충 잔사와 순수한 에탄올을 1:10의 비율로 혼합한 후 환류 냉각장치를 이용해서 60℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하여 에탄올 추출물 시료를 얻었다. 추출물은 40℃ 수욕 상에서 회전식 진공농축기 (Eyela N-1000, Tokyo Rikakikai Co., Japan)를 사용하여 감압, 농축하였으며 냉장보관하면서 시료로 사용하였다.
<실시예 2>
실험방법
동물실험은 유럽실험동물 취급면허 기준(Scot PIL training manual, Glasgow Univ. UK. (1994))에서 제시된 윤리적이고 과학적인 절차에 따라서 수행하였으며 강원대학교 동물실험윤리위원회 (IACUC)의 승인을 얻었다.
<2-1> 혈액채취 및 생화학적 분석
본 발명자들은 상기 실시예 1에서 수득한 유황을 섭취한 파리유충으로부터 수득한 추출물이 체내에서 지질감소 효과 및 간 손상을 보호하는 효과가 있는지를 확인하기 위해, 상기 수득한 추출물을 섭취시킨 마우스 및 섭취시키지 않은 대조군 마우스를 대상으로 다음과 같은 실험을 수행하였으며, 이때 추출물의 섭취함량은 B. S. Park에 의해 공개된 방법(A study on the bioactive effect of ethanol extracts from fly larvae, J. Environ. Agri. Res, 9, 9-22, 2007 참조)에 따라 수행하였다.
실험동물의 희생은 마취와 해부의 편리를 위하여 실험종료 12시간 전부터 식이공급을 중단하고 물만 공급하였다. 흰쥐를 에틸에테르(ethyl ether)로 가볍게 마취시킨 후 복대동맥으로부터 헤파린 처리된 주사기를 이용해서 heparinized vacuum tube (Becton Dickinson Vacutainer System, Franklin lakes, NJ 07417, USA) 속으로 혈액을 주입하여 혈액응고를 방지하였다. 혈액을 3,000 rpm에서 20분간 원심분리 하여 혈장을 분리하였으며 분리된 혈장은 액체 질소가스(-196℃)에서 급속 냉동한 다음 생화학적 분석 시까지 -20℃에서 냉동, 보관하였다. 간, 신장, 심장, 비장, 흉선 및 복부 지방을 채혈 후 즉시 떼어서 생리식염수로 혈액을 씻은 다음 whatman filter paper (No. 2)에 흡착시켜서 수분을 제거하고 기관의 무게를 측정하였다.
혈액의 지질분획 중 중성지방, 총콜레스테롤, HDL-C 함량은 상업용으로 조제된 효소키트(아산제약, 대한민국)로 정량하였고, LDL-C 함량은 Friedwald 공식(1972)으로 계산하였으며(G. R. Warnick, R. H. Knopp, V. Fitzpatrick, and L. Branson, Estimating low-density lipoprotein cholesterol by the Friedewald equation is adequate for classifying patients on the basis of nationally recommended cutpoints, Clin. Chem, 36, 15-19, (1990)), 심혈관계질환의 위험도판정에 이용되는 동맥경화지수(AI, atherogenic index)는 (총콜레스테롤)-(HDL-C)/HDL-C에 의하여 계산하였다(T. Yuji, Serum lipid levels and factors affecting atherogenic index in Japanese children, J. Physiol. Anthropol. Appl. Human Sci, 24, 511-515, (2005)). 혈액의 Bilirubin, 감마-GTP는 Orlowski 법, AST, ALT 함량은 Karmen 법을 응용한 주식회사 영동제약의 키트를 이용해서 측정하였다.
<2-2> 간 조직세포 관찰
조직학적 간세포 손상 정도를 평가하기 위해 동물을 희생시킨 후 개복 즉시 간 중엽에서 조직을 채취하여 4% 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 용액에 고정하였다. 탈수과정을 거친 후 파라핀(paraffin)을 이용하여 4~5 ㎛의 조직절편을 만든 후 헤마톡실린-에오신 염색(hematoxylin-eosin stain, H-E stain)을 시행하였다. 염색한 조직을 광학현미경(Olympus AX70, Japan)을 이용하여 200배로 촬영하였으며 파리유충 에탄올추출물의 투여에 따른 간 손상형태를 비교 및 해석하였다.
<2-3> 통계분석
분석된 자료의 통계처리는 SAS program을 이용하였으며 각 처리구의 평균과 표준오차를 구하고 분산분석을 실시한 다음 Duncan's multiple range test에 의하여 95%수준에서 유의성(P<0.05)을 검정하였다(SAS, SAS/STAT User's Guide, Statistics, SAS Inst. Inc., Cary, NC, (2004)).
<실시예 3>
본 발명에 따른 파리유충 추출물의 혈액지질 감소 효과
<3-1> 실험설계 및 사양관리
흰쥐 (SDS) 수컷 27마리 (평균체중 200 g)를 (주)대한바이오링크에서 구입하여 사용하였으며 일주일 동안 사육환경에 적응시킨 후 4주간 실험처리를 하였다. 즉, 3 처리구 3반복 (반복당 3마리)으로 완전임의배치 하였으며 각 처리구는 NC (추출물을 투여하지 않은 일반식이군), HO (고지방식이 유도 비만 쥐, high-fat diet induced obese rats), HOE (고지방식이 유도 비만 쥐에게 체중 100g 당 본 발명의 추출물 5.0mg 경구투여군)로 구분하였다. 동물에게 경구 투여된 추출물의 공급량은 상술한 바와 같이 Park (2007)의 실험결과에 기초하여 혈액지질 감소효과의 안정점(Plateau)으로 선정하였다. 실험식이는 AIN-76(American Institute of Nutrition, Report of the American Institute of Nutrition ad hoc committee on standards for nutritional studies, J. Nutr, 107, 1340-1348 (1977))에 기초한 정제식이를 조제 후 펠렛 처리하였다. 일반식이의 조성은 카제인 20.0%, 옥수수전분 15.0%, 설탕 50.0%, a-셀룰로스 5.0%, 옥수수기름 5.0%, 미네랄 혼합제 3.5%, 비타민 혼합제 1.0%, choline bitrate 0.2%, DL-methionine 0.3%로써 배합하였고 일반식이 내 에너지와 단백질 함량을 동일하게 조절하였다. 고지방식이의 조성은 일반식이 조성 가운데서 설탕의 량을 20% 줄이고 돼지기름을 20%로 대치하여 배합하였으며 따라서 고지방식이의 지방함량은 옥수수기름 5%와 돼지기름 20%가 첨가되어 25%로 조절하였다.
<3-2> 사양성적
고지방식이를 섭취한 비만 쥐에게 유황을 섭취한 파리유충의 에탄올추출물을 경구투여 하였을 때 조사한 식이섭취량, 체중 증가량 및 식이효율은 표 1에서 보는 바와 같다.
<표 1>
[규칙 제91조에 의한 정정 29.11.2011]　
Figure WO-DOC-TABLE-91
일일 평균 식이섭취량은 정상군인 대조군과 비교하였을 때 비만 쥐 군과 추출물 투여군에서 낮아졌으며, 비만 쥐 군과 비교할 때 추출물 투여에 의해 식이섭취량이 유의하게 증가되어 개선되는 경향을 나타냈다. 일일 평균 체중 증가량은 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군과 추출물 투여군이 유의하게 증가하였으며, 비만 쥐 군과 비교할 때 추출물 투여에 의해 체중이 9.94% 유의하게 감소하여 비만체중 조절효과가 있었다. 식이효율은 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군과 추출물 투여군이 높았으며 통계적 유의성이 인정되었고 특히 비만 쥐 군은 단위 체중증가에 필요한 식이요구량이 가장 낮은 것으로 나타났다. 비만 쥐 군에서 식이섭취량이 낮았음에도 불구하고 체중 증가량이 높았고 식이효율이 높게 나타났던 점은 Park 등(2008)의 보고와 일치하며(C. H. Park, D. I. Kim, H. K. Jung, G. D. Lee, K. S. Kim, and J. H. Hong, Effect of Bulnesia sarmienti single and complex extracts on serum lipid and body fat in rats fed high-fat diet, Korean J. Food Sci. Technol, 40, 449-454 (2008)), 그 이유는 흰쥐가 실험기간 중 섭취한 고지방식에 기인한 에너지 섭취량이 높았기 때문에 상대적으로 식이섭취량이 낮았으며 체중이 증가한 점은 근육 양의 증가보다는 간의 비대와 함께 축적된 체지방 증가(표 2)에 기인하였을 것으로 볼 수 있다. 동물의 식이섭취는 에너지 요구량에 의해 결정되기 때문에 저에너지 식이섭취와 비교할 때 고에너지 식이를 섭취하는 경우 식이섭취량은 낮아지는 것으로 알려져 있다(L. F. M. van Zutphen, V. Baumans, and A. C. Beynen, Principles of laboratory animal science, Elsevier, Netherlands, 109-113 (1993)).
<3-3> 장기 무게변화
고지방식이를 섭취한 쥐를 대상으로 본 발명에 따른 유황을 섭취한 파리의 유충으로부터 수득한 파리유충 에탄올추출물을 경구투여 하였을 때 간, 신장, 심장, 비장 및 지방조직의 무게변화는 표 2에서 보는 바와 같다.
<표 2>
[규칙 제91조에 의한 정정 29.11.2011]　
Figure WO-DOC-TABLE-98
간 무게는 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군이 유의하게 증가하였으나 대조군과 추출물 사이의 유의차는 나타나지 않았다. 지방조직 무게는 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군과 추출물 투여군이 유의하게 높게 나타났으며, 비만 쥐 군과 비교할 때 추출물 투여군은 유의하게 감소하여 비만 쥐에서 추출물이 체지방 축적을 낮추는 효과가 인정되었다. 본 실험결과는 정상식이를 섭취한 흰쥐 그룹과 비교할 때 고지방식이를 섭취한 비만 쥐 그룹에서 간 및 지방조직 무게가 증가하였다는 Park 등(2008)의 보고와 비슷한 경향을 보였다(C. H. Park, D. I. Kim, H. K. Jung, G. D. Lee, K. S. Kim, and J. H. Hong, Effect of Bulnesia sarmienti single and complex extracts on serum lipid and body fat in rats fed high-fat diet, Korean J. Food Sci. Technol, 40, 449-454 (2008)). 일반적으로 고지방식이를 섭취하게 되면 간에서 지질대사 이상이 초래되어 간 조직 내 지질의 축적이 일어나므로 간 무게가 정상식이를 섭취하였을 때보다 증가하는 것으로 알려졌다(M. A. Leo, M. Sato, and C. S. Lieber, Effect of hepatic vitamin A depletion on the liver in human and rats, Gastroenterology, 84, 562-572 (1983)).
<3-4> 혈액 지질변화
고지방식이를 섭취한 비만 쥐에게 유황을 섭취한 파리유충 에탄올추출물을 경구투여 하였을 때 조사한 혈액 지질변화는 표 3에서 보는 바와 같다.
<표 3>
[규칙 제91조에 의한 정정 29.11.2011]　
Figure WO-DOC-TABLE-104
중성지방 함량은 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군이 유의하게 증가하였으나 대조군과 추출물 사이의 유의차는 나타나지 않았다. 총 콜레스테롤, LDL-C 함량 및 동맥경화지수는 대조군과 비교할 때 비만 쥐 군과 추출물 투여군이 유의하게 높게 나타났다. LDL-C 과 동맥경화지수는 비만 쥐 군과 비교할 때 추출물 투여군은 각각 44.66%, 51.50% 유의하게 감소하여 비만 쥐에서 추출물이 혈액 LDL-C 와 동맥경화지수를 낮추는 효과가 인정되었다. HDL-C 함량은 대조군이 가장 높았으며 추출물 투여군, 비만 쥐 군 순으로 낮아졌고 각 처리구 간 통계적인 유의차가 인정되었다. 본 실험 결과에서 발견한 중요한 사실은 고지방식이를 섭취한 비만 쥐에서 파리유충 에탄올 추출물의 경구투여가 혈액 지질수준을 낮출 수 있다는 점이었다. 본 실험결과는 정상식이를 섭취한 흰쥐 그룹과 비교할 때 고지방식이를 섭취한 흰쥐 그룹에서 혈액 지질 함량이 유의하게 증가하였다는 Park 등(2008)의 보고와 비슷한 경향을 보였다(C. H. Park, D. I. Kim, H. K. Jung, G. D. Lee, K. S. Kim, and J. H. Hong, Effect of Bulnesia sarmienti single and complex extracts on serum lipid and body fat in rats fed high-fat diet, Korean J. Food Sci. Technol, 40, 449-454 (2008)). 한편, 파리유충 에탄올추출물이 혈액 지질수준을 유의하게 낮출 수 있었다는 Park(2007)의 결과는 본 실험 결과를 지지해준다(B. S. Park, A study on the bioactive effect of ethanol extracts from fly larvae, J. Environ. Agri. Res, 9, 9-22 (2007)). 혈액 중성지방과 LDL-C의 높은 수준은 심근경색, 동맥경화증과 같은 심장혈관계 질환으로 인한 사망률을 높이고, HDL-C의 수준 증가는 이를 예방하는 데 큰 도움이 되는 것으로 널리 알려져 있다(J. Jensen., B. Anette., D. Steen., H. Kjeld, and H. Gunhild, The effect of palm oil, lard and puff-pastry margarine on postprandial lipid and hormone responses in normal-weight and obese young women, Brit. J. Nutr, 82, 469-479 (1999)). LDL은 동맥 내 콜레스테롤 축적에 가장 중요한 지질 운반체로써 콜레스테롤 에스터를 간에서 혈액 및 신체 내 여러 부위의 말초조직 세포 속으로 수송해주며, HDL은 동맥으로부터 콜레스테롤을 간으로 운반해 주는 지질단백질로써 혈액 HDL-C의 증가는 결국 혈액 및 조직으로부터 간에 이르는 콜레스테롤 운반능력을 높여줌으로써 즉 콜레스테롤의 역수송(reverse transport)에 의하여 혈액 콜레스테롤을 제거하는 기능을 갖는다. 따라서 혈액 내 LDL-C가 많으면 건강에 해롭기 때문에 LDL-C를 나쁜 콜레스테롤이라고 부르며, HDL-C는 좋은 콜레스테롤이라고 부르고 있다(S. M. Grundy, Cholesterol and coronary heart disease, JAMA, 256, 2849-2858 (1986)). 동맥경화지수는 체내 HDL-C에 대한 중성지방의 함량을 나타내며 그 값이 임상에서 3.0 이상이면 동맥경화의 위험수준으로 판단된다(L. Rosenfeld, Lipoprotein analysis, Arch. Pathol. Lab. Med, 113, 1101-1110 (1989)). 여기서 발견한 새로운 사실은 파리유충 에탄올추출물의 투여군에서 이와 같은 혈액지질의 감소가 관찰된 점으로 볼 때 사람에 대한 지질대사 개선의 생체활성효과를 갖는다는 점이었다.
<실시예 4>
본 발명에 따른 파리유충 추출물의 간 기능 보호 효과
<4-1> 실험설계 및 사양관리
평균체중 200g의 흰쥐 (SDS) 수컷 45마리를 (주)대한바이오링크에서 구입하여 사용하였으며 일주일 동안 사육환경에 적응시킨 후 20일 동안 실험처리를 하였다. 5처리구 3반복 (반복당 3마리)으로 완전임의배치 하였으며 각 처리구는 T1 (대조구), T2 (실험개시 일에 체중 100 g 당 CCL4 0.5 mL를 1회 복강주사군), T3 (19일 동안 체중 100g 당 본 발명의 유황을 섭취한 파리유충 추출물 5.0 mg을 매일 경구투여 후 20일째에 CCL4 0.5 mL를 복강주사군), T4 (20일 동안 체중 100g 당 파리유충 추출물 5.0 mg을 매일 경구투여하면서 6, 12, 18일째 날짜에 각각 20% 알콜 0.514 mL를 각각 복강주사군), T5 (19일 동안 체중 100g 당 20% 알콜 0.514 mL를 매일 복강주사 후 20일째에 파리유충 추출물 5.0 mg을 경구투여군)로 구분하였다. 여기서 흰쥐에게 공급한 알콜의 양은 체중 70kg 성인남자가 매일 소주 1병을 섭취하는 량이다. 즉 소주 1병은 20% 알콜 360 mL이고 체중 70kg 성인남자의 소주 1병 섭취량은 70,000 g 당 360 mL에 해당되므로 계산하면 성인남자는 체중 g당 소주 0.00514 mL를 섭취하는 것이 된다. 따라서 체중 100 g당 20% 알콜 (=소주의 알콜 농도) 0.514 mL 섭취가 계산되며 흰쥐에게 소주 1병 투여량은 흰쥐 체중 100 g당 20% 알콜을 0.514 mL 복강 주사해주는 량과 동일하게 된다. 실험동물 사육실 온도는 20±2℃, 상대습도 60±5%로 유지하였고 조명은 12시간 주기로 조절하였다. 실험식이와 물은 무제한 공급하였고 실험기간 중 일일 평균 체중 증가량, 식이섭취량 및 식이효율을 조사하였다.
<4-2> 간 기능효소
정상식이를 섭취한 흰쥐에게 CCL4와 성인 남자가 섭취하는 소주 1병에 해당하는 알코올을 각각 복강주사 하였을 때 간 기능 관련한 효소의 혈액 수준에 관한 파리유충 에탄올추출물의 투여효과를 조사한 결과는 표 4에서 보는 바와 같다.
<표 4>
[규칙 제91조에 의한 정정 29.11.2011]　
Figure WO-DOC-TABLE-117
감마-GTP는 대조군인 T1과 비교할 때 CCL4를 복강주사 한 T2가 가장 높았으며 T3, T5, T4 순으로 높은 경향을 보였고 각 처리구 간 통계적인 유의차가 인정되었다. AST는 T1과 비교할 때 T2, T3, T4, T5 순으로 증가하였으며 ALT는 T2, T3, T5, T1 순으로 높았고 T4가 가장 낮게 나타났으며 각 처리구 간 통계적인 유의차가 인정되었다. 빌리루빈은 T1과 비교할 때 T2, T3, T5, T4 순서로 높았으며 처리구 간 통계적인 유의차가 인정되었다. 이와 같은 결과는 파리유충 추출물의 투여군에서 장기무게의 안정적인 수준을 유지하고(표 5), 간 세포손상(도 1)을 예방하는데 큰 영향을 끼쳤으며, 파리유충 에탄올추출물에 함유된 생리활성 펩타이드의 기능일 것으로 사료된다(A. Jang, C. R. Cho, B. S. Park, and K. J. Yoon, Seperation of antibaterial low molecular peptides from Musca domesica maggot against methicillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA) and vancomycin resistant enterococcus (VRE), 2007 International Symposium and Annual Meeting, Kor. Soc. Food Sci. Nutr, October 17-19, p 275 (2007)). AST와 ALT는 간과 각종 장기에 존재하는 아미노산 합성효소로서 간세포의 파괴정도를 검사하며, 감마-GTP와 빌리루빈은 간세포의 장애와 담즙의 흐름 상태를 검사하고 상기 효소의 수치가 증가하면 간염, 지방간, 알코올성 간 장애, 간 경변 및 담도폐색을 의심할 수 있는 지표로서 널리 알려져 있다. 알코올을 장기적으로 섭취한 T5에 비해 알코올과 추출물을 병합 투여한 T4에서 이러한 효소 수치가 유의하게 낮아졌으며, 특히 ALT의 경우 T4가 대조구인 T1보다 낮아졌음은 괄목할 만한 부분이다. 본 실험결과 나타난 새로운 점은 파리유충 에탄올추출물의 투여가 간 손상으로 증가하는 상기의 효소 수치를 낮출 있다는 사실이었다.
<4-3> 장기 무게변화
정상식이를 섭취한 흰쥐에게 CCL4와 성인 남자가 섭취하는 소주 1병에 해당하는 알코올을 각각 복강주사 하였을 때 장기 무게변화에 관한 파리유충 에탄올추출물의 투여효과를 조사한 결과는 표 5에서 보는 바와 같다.
<표 5>
[규칙 제91조에 의한 정정 29.11.2011]　
Figure WO-DOC-TABLE-124
간의 무게는 대조군인 T1과 비교할 때 T2, T3, T5가 유의하게 증가되어 비대하였음을 나타냈으나 T1과 T4 사이의 유의차는 없었다. 비장과 흉선의 무게는 T1과 비교할 때 T2, T3, T5가 유의하게 낮아졌으나 T1과 T4 간 통계적인 유의차는 인정되지 않았다. 복강지방은 T1과 20일 동안 체중 100g 당 파리유충 추출물 5.0 mg을 매일 경구투여하면서 6, 12, 18일째 날짜에 20% 알콜 0.514 mL를 각각 복강주사 했던 T4 간 유의차는 나타나지 않았으나, T1과 비교할 때 T5가 가장 높은 축적률을 보였고 T2, T3 순서로 높게 나타났으며 이들 처리구 간 통계적인 유의차가 인정되었다. 간 무게가 대조군인 T1 및 알코올과 추출물을 병합 투여한 T4에 비해 CCL4 또는 알코올을 복강주사 한 T2, T3, T5에서 유의하게 비대하였던 점은 간 손상에 기인한 영양소 및 기타 물질의 대사 장애로 간 조직 내 이러한 물질이 과잉으로 축적되었기 때문일 것으로 사료된다. 지나친 음주로 인한 알코올의 과량 섭취는 지방간 및 간 조직세포의 섬유화로 간이 비대해 질 수 있다(M. A. Leo, M. Sato, and C. S. Lieber, Effect of hepatic vitamin A depletion on the liver in human and rats, Gastroenterology, 84, 562-572 (1983)). 본 실험 결과에서 추출물의 투여로 알코올성 간 조직세포가 비대해지는 것을 예방할 수 있으며 복부지방 감소 및 면역기관 세포를 활성화할 수 있다는 새로운 사실을 관찰하였다.
<4-4> 간 조직세포의 형태학적 변화
정상식이를 섭취한 흰쥐에게 CCL4와 성인 남자가 섭취하는 소주 1병에 해당하는 알코올을 각각 복강주사 하였을 때 간 조직세포의 형태학적 변화를 관찰한 파리유충 에탄올추출물의 투여효과를 조사한 결과는 도 1에서 보는 바와 같다. 정상적인 흰쥐의 간 조직세포(T1)의 고유 간 소엽(classic lobule)은 중심정맥으로부터 방사형의 간세포 삭(hepatic cell cords)과 동양혈관이 나란히 배열되어 있었다. CCL4를 투여한 T2의 경우 간 조직세포는 내피세포(endothelial cells)의 손상이 관찰되었으며, 고유한 간 소엽의 중심정맥 주변으로 간세포의 일부가 팽윤됨으로써 간 소엽의 가장 자리를 향하여 방사형 배열을 보여야 하는 정상적인 간세포 배열이 심하게 흐트러졌음을 볼 수 있었다. 그러나 이러한 간세포의 손상 정도는 추출물을 투여한 이후에 CCL4를 투여하였던 T3의 경우 간 조직의 손상 정도가 덜 하는 것으로 관찰되었다. 한편, 추출물과 알코올을 병합 투여한 간 조직세포(T4)의 경우 정상적인 간 조직세포(T1)와 비교할 할 때 약간 손상된 형태로 나타났으나 T3보다는 덜 손상된 것으로 관찰되었다. 장기적으로 알코올을 투여한 이후 추출물을 투여한 T5의 경우 간 중심정맥은 물론 방사형 배열도 거의 망가졌으며 모든 처리구 가운데서 현저하게 나빠진 것으로 나타났다. 이러한 간 세포손상으로 인하여 혈액으로 이동된 각종 효소의 수준이 증가되었음을 알 수 있었다(표 4). 본 실험결과 나타난 새로운 발견은 파리유충 에탄올추출물이 간 조직의 산화적 손상 및 알코올에 의한 손상을 예방하는데 크게 도움이 될 수 있다는 사실이었다. 본 실험에서 CCL4를 투여하였을 때 조사된 간 조직세포의 형태학적인 모습(T2)은 흰쥐에게 CCL4를 투여하였을 때 중심정맥 주위로 심한 조직괴사가 관찰되었고 괴사된 조직 주위로 지방산 변화를 동반한 간세포의 손상을 볼 수 있었다는 Kim 등(2009)의 결과와 비슷하였다(D. H. Kim, Y. K. Deung, Y. M. Lee, Y. S. Yoon, and K. J. Lee, The effect of saengshik on the hepatotoxicity of mouse induced by carbon tetrachloride, Korean J. Electron Microscopy, 37, 11-21 (2007)).
<실시예 5>
본 발명에 따른 유황섭취 파리유충 추출물의 지질대사 개선 효과
나아가 본 발명자들은 본 발명에 따른 유황섭취 파리유충 추출물의 지질대사 개선효과가 유황섭취로 인해 보다 개선된 효과를 얻을 수 있음을 입증하기 위해 다음과 같은 실험을 수행하였다.
먼저 (주)대한바이오링크로부터 평균 체중 200g의 흰쥐 수컷 15마리를 대상으로 각 군당 3마리씩 총 5개의 군으로 나눈 뒤, 각 군당 하기 표에 기재된 바와 같이 체중 100g 당 파리유충 추출물을 경구 투여하고, 4주 동안 사육한 후 혈장의 지질 함량을 각각 조사하였다. 지질 함량 조사는 상기 실시예 3에 기재된 방법과 동일한 방법으로 수행하였다. 또한, 이때 유황으로 인한 지질대사 개선효과를 확인하기 위해 T2 실험군은 유황이 함유되지 않은 사료만으로 사육한 파리유충 추출물을 흰쥐에 경구투여 후 실험을 수행하였으며 그 결과는 도 2에 나타내었다.
표 6 처리 조건
실험군 처리조건 (체중 100g 당 경구투여량)
T1 대조군으로서 파리유충의 추출물을 투여하지 않은 군
T2 유황이 함유되지 않은 사료를 섭취한 파리유충의 추출물을 5mg 투여한 군
T3 2% 유황이 함유된 사료를 섭취한 파리유충 추출물을 5mg 투여한 군
T4 2% 유황이 함유된 사료를 섭취한 파리유충 추출물을 7.5mg 투여한 군
T5 2% 유황이 함유된 사료를 섭취한 파리유충 추출물을 10mg 투여한 군
분석 결과, 도 7에 나타낸 바와 같이, 체내 유해한 지질성분인 LDL-C의 함량은 아무것도 처리하지 않은 대조군(T1)에 비해 유황을 섭취시키지 않은 파리 유충 추출물을 투여한 마우스 군의 경우 2.56% 감소한 것으로 나타났으며, 유황을 섭취시킨 파리유충 추출물을 투여한 마우스 군의 경우, 투여량에 비례하여 LDL-C의 함량이 각각 10.59%, 16.78% 및 19.98% 감소하는 것으로 나타났다.
이러한 결과를 통해 본 발명자들은 유황을 섭취한 파리유충의 추출물이 유황을 섭취하지 않은 파리유충 추출물에 비해 지질개선 효과가 현저하게 우수하다는 사실을 알 수 있었다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (11)

  1. 파리유충(Musca domestica L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 파리유충은 사료 총 중량에 대해 0.1~20.0중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 사육한 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 에탄올 추출물인 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 혈액지질 함량을 낮추거나 간 손상을 억제함으로써 대사성 질환을 예방 또는 치료하는 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  6. 파리유충(Musca domestica L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 대사성 질환은 비만, 당뇨병, 고지혈증, 고콜레스테롤증, 동맥경화증 및 지방간으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 질환인 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  8. 제6항에 있어서,
    상기 파리유충은 사료 총 중량에 대해 0.1~20.0중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 사육한 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  9. 유황을 섭취한 파리유충(Musca domestica L.)의 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.
  10. 제9항에 있어서,
    사료 총 100중량%에 대해 0.1~20.0중량%의 유황을 함유한 사료로 2~7일간 파리유충을 사육하는 단계;
    파리유충을 고온, 고압처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계;
    상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 혼합하는 단계;
    상기 혼합물을 냉각시키고 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및
    상기 추출물을 감압, 농축하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 제조방법은
    파리유충 시료를 150℃의 고온, 1,000 PSI로 처리하고 압착하여 파리유충 잔사를 얻는 단계;
    상기 파리유충 잔사에 순수한 에탄올을 1:10의 비율로 혼합하는 단계;
    상기 혼합물을 환류 냉각장치를 이용해서 60℃에서 3시간씩 3회 반복 추출하여 에탄올 추출물 시료를 얻는 단계; 및
    상기 추출물을 40℃ 수욕 상에서 회전식 진공농축기를 사용하여 감압, 농축하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2629606C1 (ru) * 2016-08-01 2017-08-30 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва" Применение соединения магния, обладающего гепатопротекторной активностью, для лечения алкогольного и лекарственного гепатита
WO2021007933A1 (zh) * 2019-07-16 2021-01-21 华祥荣 五谷虫在用于治疗糖尿病中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008103006A1 (en) * 2007-02-23 2008-08-28 Sang Kyoo Lee Processing method of sulfur using maggots
WO2008102988A1 (en) * 2007-02-23 2008-08-28 Sang Kyoo Lee Breeding method of sulfur maggots

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100828114B1 (ko) 2007-01-26 2008-05-08 주식회사 메디라바텍 집파리 유충의 에탄올 추출물을 유효성분으로 하는 항미생물용 사료 첨가제 및 그 제조방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008103006A1 (en) * 2007-02-23 2008-08-28 Sang Kyoo Lee Processing method of sulfur using maggots
WO2008102988A1 (en) * 2007-02-23 2008-08-28 Sang Kyoo Lee Breeding method of sulfur maggots

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BYUNG SUNG PARK.: "Effects of Ethanol Extracts from Fly Larvae on the Plasma Lipid Level in Rats", STUDY ON ANIMAL RESOURCES, vol. 19, 2008, pages 51 - 57 *
BYUNG SUNG PARK.: "Effects of Fly Maggot Extracts on the Liver and Plasma Lipid in Rat Fed High-Fat Diets", JOURNAL OF KOCSA, vol. 27, no. 3, 2010, pages 290 - 299 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2629606C1 (ru) * 2016-08-01 2017-08-30 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва" Применение соединения магния, обладающего гепатопротекторной активностью, для лечения алкогольного и лекарственного гепатита
WO2021007933A1 (zh) * 2019-07-16 2021-01-21 华祥荣 五谷虫在用于治疗糖尿病中的应用
US11096970B2 (en) 2019-07-16 2021-08-24 Xiangrong Hua Preparation and application of grain worm for treating diabetes
US12059440B2 (en) 2019-07-16 2024-08-13 Xiangrong Hua Preparation and application of grain worm for treating diabetes

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