WO2011018885A1 - 皮膚外用剤、美白剤、抗酸化剤および抗老化剤 - Google Patents

皮膚外用剤、美白剤、抗酸化剤および抗老化剤 Download PDF

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鈴木理香子
長谷川聖高
佐藤潔
草苅健
横井時也
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株式会社資生堂
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Definitions

  • the present invention relates to a whitening agent, an antioxidant and an anti-aging agent containing a plant extract as an active ingredient, and further to a skin external preparation containing the same.
  • melanin pigments are formed due to hormonal abnormalities or stimulation of ultraviolet rays from sunlight, which abnormally deposits in the skin. It is considered a thing.
  • This melanin pigment which causes skin coloring, is produced in melanin granules (melanosomes) in melanocytes (melanocytes) located between the epidermis and dermis, and the generated melanin is delivered to keratinocytes and is intradermally To accumulate.
  • the biochemical reaction in this melanocyte is estimated as follows. That is, tyrosine, an essential amino acid, is converted from dopa to dopaquinone by the action of the enzyme tyrosinase, and the process of this change to black melanin by enzymatic or non-enzymatic oxidation is the melanin pigment formation process.
  • tyrosine an essential amino acid
  • tyrosinase the process of this change to black melanin by enzymatic or non-enzymatic oxidation is the melanin pigment formation process.
  • various plant-derived extracts have been conventionally developed in view of their safety and mild irritation to the skin (for example, Patent Documents 1 to 5). reference).
  • active oxygen is generated by ultraviolet rays.
  • free radicals react with an oxidizable substrate such as lipid to induce a chain oxidation reaction. Accordingly, active oxygen that becomes free radicals amplifies damage to body tissues such as skin.
  • the skin Since the skin is constantly exposed to oxygen and ultraviolet rays, it is the tissue that is most damaged by free radicals due to oxidative stress. In recent years, various active oxygens generated by ultraviolet rays cause sebum and lipid peroxidation, protein denaturation, enzyme inhibition, etc., which in the short term induce skin inflammation and the like. In the long term, it is thought to cause aging and cancer.
  • active oxygen and lipid peroxide are considered to be involved in skin diseases such as atopic dermatitis, contact dermatitis, and psoriasis.
  • active oxygen free radical
  • skin diseases such as atopic dermatitis, contact dermatitis, and psoriasis.
  • active oxygen free radical
  • a substance having the ability to trap free radicals can suppress or stop the radical chain reaction, and for example, what is called an antioxidant is equivalent. Therefore, an external preparation for skin containing an antioxidant can be expected to have a preventive / improving effect on skin aging (for example, spots, wrinkles, sagging) due to photooxidative stress. In addition, prevention and improvement effects can be expected as a skin external preparation for various skin diseases related to free radicals.
  • Vitamin E and vitamin C which are known as antioxidants, are free radical scavenging antioxidants in vivo.
  • synthetic antioxidants such as BHT and BHA are also known.
  • extracts of shiitake mushroom, enokitake mushroom, shimeji mushroom, kawatake mushroom, matsutake mushroom, garlic mushroom, spinach mushroom, nameko and other basidiomycetes have been reported (Patent Documents 6 to 8).
  • an antioxidant composed of an extract of the genus Pleurotus genus (Patent Document 9) and an antioxidant composed of an extract of the genus Periwinkle plant (Patent Document 10) have been reported.
  • JP-A-8-3109939 JP-A-7-89843 Japanese Patent Laid-Open No. 9-30954 Japanese Patent Laid-Open No. 2003-73224 JP-A-9-263534 Japanese Patent Laid-Open No. 5-317016 JP-A-6-65575 JP 59-124984 A JP-A-11-171723 JP-A-11-171720
  • the present invention is a skin external preparation characterized by containing an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the present invention is a whitening agent comprising an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the present invention is a cosmetic for whitening characterized by containing an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the present invention is an antioxidant comprising an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the present invention is an anti-aging agent characterized by containing an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the present invention is an anti-aging cosmetic characterized in that it comprises an extract of a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the external preparation for skin of the present invention has excellent whitening action, anti-aging action and antioxidant action, lightening pigmentation / stain / freckle / liver spots, etc. It has the effect of preventing / suppressing skin aging and skin diseases caused by free radicals).
  • the whitening agent of the present invention has an excellent whitening action, and has excellent effects on lightening and whitening of pigmentation, stains, freckles, liver spots and the like.
  • the whitening cosmetic composition of the present invention exerts an excellent whitening effect when applied to the skin, has lightening of pigmentation, stains, freckles, liver spots, etc. after sunburn, has an excellent effect on whitening, and is safe It is also highly probable.
  • the anti-aging agent and antioxidant of the present invention have excellent free radical scavenging ability to prevent / suppress skin aging and skin diseases caused by active oxygen (free radicals).
  • the anti-aging cosmetic of the present invention exhibits excellent free radical scavenging ability when applied to the skin, and can prevent / suppress skin aging and skin diseases caused by active oxygen (free radicals), and also has safety. It is expensive.
  • the plant used in the present invention is a Polythia mast tree (Polyalthia longifolia).
  • the Polythia mast tree (Polythia longifolia) is an evergreen tree that reaches 15 to 20 meters in height in the tropics.
  • the plant extract used in the present invention can be obtained by appropriately drying or pulverizing the leaves, branches, flowers, bark, seeds or fruits, and roots of the above plant, and then extracting with a solvent.
  • the extraction may be performed at room temperature, but the extraction can be promoted by heating, stirring and heating under reflux as necessary.
  • the obtained extract can be used as it is or after being appropriately subjected to treatment such as filtration, concentration, and decolorization. It is also possible to remove the solvent once and redissolve it in a solvent different from the solvent used for extraction.
  • the obtained extract can be further purified by activated carbon, column matography or the like.
  • the site to be used is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not hindered, but extracts from leaves and branches are preferable.
  • the extraction solvent used in the present invention may be any solvent that is usually used for extraction, and in particular, alcohols such as methanol, ethanol, 1,3-butanediol, propylene glycol, dipropylene glycol, hydrous alcohols, acetone, Although organic solvents such as ethyl acetate and chloroform can be used alone or in combination, methanol, ethanol, 1,3-butanediol, acetone and the like are preferable, and methanol, ethanol and 1,3-butanediol are particularly preferable. These extracts may be used after being purified by solvent fractionation, activated carbon treatment, column chromatography, or the like.
  • alcohols such as methanol, ethanol, 1,3-butanediol, propylene glycol, dipropylene glycol, hydrous alcohols, acetone
  • organic solvents such as ethyl acetate and chloroform
  • the whitening agent, antioxidant, and anti-aging agent of the present invention are characterized by containing a polythiaia mast tree (Polyalthia longifolia), but various other types within a range not impairing the effects of the present invention.
  • the component of this can be contained.
  • the whitening agent, antioxidant, and anti-aging agent of the present invention can be blended into a skin external base to obtain a skin whitening external preparation or an anti-aging skin external preparation based on an antioxidant action.
  • These external preparations for skin can be suitably used particularly in the fields of cosmetics, pharmaceuticals, quasi drugs and the like.
  • the blending amount of the plant extract in the external preparation for skin of the present invention is usually 0.00001% by mass or more, preferably 0.0001% by mass or more (hereinafter, blended as a dry product from which the solvent is removed unless otherwise specified). Amount). If the blending amount is extremely small, the effect is not sufficiently exhibited.
  • the upper limit is not particularly limited as long as the effect of the present invention is not impaired. However, even if it is excessively mixed, a remarkable effect commensurate with the increase in amount cannot be obtained, and there are cases where adverse effects are exerted on the formulation design and usability. Therefore, it is usually 10% by mass or less, more preferably 5% by mass or less.
  • the skin external preparation of the present invention is produced by blending the whitening agent, antioxidant and anti-aging agent according to the present invention into the base of the skin external preparation.
  • the external preparation for skin of the present invention is a component that is usually used for external skin preparations such as cosmetics and pharmaceuticals within the range that does not impair the effects of the present invention, such as humectants, antioxidants, oily agents.
  • Components, ultraviolet absorbers, surfactants, thickeners, alcohols, powder components, colorants, aqueous components, water, plant extracts, various skin nutrients, and the like can be appropriately blended as necessary.
  • the dosage form of the external preparation for skin of the present invention may be any form as long as it is conventionally used for external preparations for skin, such as ointments, creams, emulsions, lotions, packs, bath preparations, etc.
  • the dosage form is not particularly limited.
  • the present invention will be described in more detail with reference to the following examples, but the present invention is not limited thereto. Unless otherwise specified, the amount is shown in mass%. Initially, the preparation method of the plant extract used in the present Example, the test method regarding the melanin production inhibitory effect and the results thereof, the test method regarding the antioxidant effect and the results thereof will be described.
  • the aqueous phase was similarly extracted twice more with ethyl acetate.
  • the obtained ethyl acetate layer was mixed, and then the ethyl acetate was removed under reduced pressure to obtain about 0.31 g of an ethyl acetate fraction.
  • test substance Mouse B16 melanoma cells were seeded in a 6-well plate at 100,000 cells / well. On the next day, a test substance solution (solvent: DMSO) was added.
  • Table 3 shows the results of the melanin amount ratio (%) and the cell number ratio (%) using the masttree 1,3-butanediol extract as follows. 1,3-butanediol extract was added to a final concentration of 0.4% (v / v) with respect to the medium. As a control, 0.4% of only the solvent (1,3 butanediol) contained in the extract was added. None of them were cytotoxic.
  • the mast tree of the present invention has an excellent melanin-inhibiting action in any of the methanol extract, the ethanol extract, the ethyl acetate fraction of the methanol extract, and the 1, ⁇ 3-butanediol extract. It can be seen that it is useful as a whitening agent.
  • Antioxidant effect evaluation method (DPPH radial quenching assay) A test substance dissolved in dimethylsulfoxide was injected into a 96-well plate at 10 ⁇ l / well, and 1 mmol / l 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl solution was added at 90 ⁇ l / well. After standing at room temperature for 10 minutes, the absorbance at 517 nm was measured, and the extinction ratio (%) relative to the control of the amount of radicals was determined from the absorbance data.
  • the mast tree extract content in each formulation was expressed as the amount of dry residue after the extraction solvent was removed.
  • Formulation Example 8 Cream Mass% Masttree 90% 1,3-butanediol extract 0.05 Potassium 4-methoxysalicylate 3.0 Propylene glycol 5.0 Glycerin 8.0 Stearic acid 2.0 Stearyl alcohol 7.0 Hydrogenated Lanolin 2.0 Squalane 5.0 2-Octyldodecyl alcohol 6.0 Polyoxyethylene cetyl alcohol ether 3.0 Glycerin monostearate ester 2.0 Potassium hydroxide appropriate amount ethyl paraben appropriate amount perfume appropriate amount ion-exchanged water remainder

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Abstract

【課題】優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有する美白剤、および活性酸素（フリーラジカル）による皮膚老化や皮膚疾患を防止・抑制する優れたフリーラジカル捕捉能を有する抗酸化剤、抗老化剤を提供する。 【解決手段】バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むものとする。

Description

皮膚外用剤、美白剤、抗酸化剤および抗老化剤
　本発明は植物抽出物を有効成分とする美白剤、抗酸化剤および抗老化剤に関し、さらにこれを含む皮膚外用剤に関するものである。
　皮膚のしみなどの発生機序については一部不明な点もあるが、一般には、ホルモンの異常や日光からの紫外線の刺激が原因となってメラニン色素が形成され、これが皮膚内に異常沈着するものと考えられている。皮膚の着色の原因となるこのメラニン色素は、表皮と真皮との間にあるメラニン細胞（メラノサイト）内のメラニン生成顆粒（メラノソーム）において生産され、生成したメラニンは、ケラチノサイトに受け渡されて表皮内に蓄積する。
　このメラノサイト内における生化学反応は、次のようなものと推定されている。すなわち、必須アミノ酸であるチロシンが酵素チロシナーゼの作用によりドーパからドーパキノンとなり、これが酵素的または非酵素的酸化作用により黒色のメラニンへ変化する過程がメラニン色素の生成過程である。
　上記のメラニン色素の生成を抑制する美白剤については、従来より植物由来の抽出物が、その安全性や皮膚への刺激の穏やかさを期待して種々開発されている（例えば特許文献１～５参照）。
　一方、紫外線により活性酸素が発生することは周知である。活性酸素のうち、フリーラジカル型のものは脂質などの酸化性基質と反応すると、連鎖的な酸化反応を誘発する。したがって、フリーラジカルとなる活性酸素は、皮膚等の身体組織に対するダメージを増幅する。
　皮膚は、常時、酸素や紫外線にさらされるため、フリーラジカルによる酸化ストレスのダメージが最も大きな組織である。近年では、紫外線により発生した種々の活性酸素が、皮脂や脂質の過酸化、蛋白変性、酵素阻害等を引き起こし、それが、短期的には皮膚の炎症などを誘発する。また、長期的には、老化やガンなどの原因となると考えられている。
　また、活性酸素や過酸化脂質は、アトピー性皮膚炎や接触皮膚炎、乾癬などの皮膚疾患にも関与すると考えられている。このように、皮膚老化や皮膚疾患には、活性酸素（フリーラジカル）が深く関与している。
　フリーラジカルを捕捉する能力を備える物質は、ラジカル連鎖反応を抑制したり、停止させたりすることができ、例えば抗酸化剤と呼ばれているものが相当する。
　したがって、抗酸化剤を配合した皮膚外用剤は、光酸化ストレスによる皮膚老化（例えば、シミ、しわ、たるみなど）に予防・改善効果が期待できる。また、フリーラジカルが関連する各種皮膚疾患用皮膚外用剤としても、予防・改善効果が期待できる。
　酸化防止剤として知られているビタミンＥやビタミンＣは、生体内におけるフリーラジカル捕捉型抗酸化物質である。また、ＢＨＴやＢＨＡの合成抗酸化物質も知られている。また、植物由来の酸化防止剤としては、シイタケ、エノキタケ、シメジ、カワラタケ、マツタケ、マンネンタケ、ホウウロクタケ、ナメコ、その他の担子菌類の抽出物が報告されている（特許文献６～８）。さらに、ゴマノハグサ科モウズイカ属植物の抽出物からなる抗酸化剤や（特許文献９）、ムラサキ科カキバチシャノキ属植物の抽出物からなる抗酸化剤（特許文献１０）が報告されている。
特開平８－３１０９３９号公報 特開平７－８９８４３号公報 特開平９－３０９５４号公報 特開２００３－７３２２４号公報 特開平９－２６３５３４号公報 特開平５－３１７０１６号公報 特開平６－６５５７５号公報 特開昭５９－１２４９８４号公報 特開平１１－１７１７２３号公報 特開平１１－１７１７２０号公報
　このように、植物由来の美白剤、抗酸化剤、抗老化剤については、新しい植物で新たな美白効果を奏する植物を見出すことが求められている。そこで本発明者らはこのような従来の事情に対処して、新しい植物由来の美白剤、抗酸化剤、抗老化剤およびそれを配合した皮膚外用剤を提供することを目的とする。
　本発明者等は、このような現状に鑑み、鋭意研究を重ねた結果、特定の植物抽出物に優れた美白作用、抗酸化作用、抗老化作用があることを見出し、本発明を完成するに至った。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする皮膚外用剤である。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする美白剤である。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする美白用化粧料である。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗酸化剤である。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗老化剤である。
　本発明は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗老化用化粧料である。
　本発明の皮膚外用剤は、優れた美白作用、抗老化作用および抗酸化作用を有し、色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有すると共に、活性酸素（フリーラジカル）による皮膚老化や皮膚疾患を防止・抑制する効果を有するものである。
　本発明の美白剤は、優れた美白作用を有しており、色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有するものである。
　本発明の美白用化粧料は、肌に塗布することで優れた美白効果を発揮し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有し、安全性も高いものである。
　本発明の抗老化剤および抗酸化剤は、活性酸素（フリーラジカル）による皮膚老化や皮膚疾患を防止・抑制する優れたフリーラジカル捕捉能を有するものである。
　本発明の抗老化用化粧料は、肌に塗布することで優れたフリーラジカル捕捉能を発揮し、活性酸素（フリーラジカル）による皮膚老化や皮膚疾患を防止・抑制することができ、安全性も高いものである。
マストツリーのエタノール抽出物によるラジカル消去作用の結果を示す図である。 マストツリーの１，３－ブタンジオール抽出物によるラジカル消去作用の結果を示す図である。
　以下、本発明について詳述する。本発明に用いる植物は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）である。このバンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）は、熱帯では街路樹や緑陰樹としても植栽される、高さ１５～２０メートルに達する常緑高木である。
　本発明の植物およびその抽出物に関しては、美白作用、抗酸化作用、抗老化作用共にこれまで知られておらず、本発明者らによって初めて見出されたものである。
　また本発明に用いられる植物は、外用で用いた報告もないものである。
　本発明に用いられる植物抽出物は、上記植物の葉、枝、花、樹皮、種子または果実、根を適宜、乾燥あるいは粉砕した後、溶媒にて抽出することにより得られる。抽出は室温静置で行っても良いが、必要に応じて加温、攪拌、加熱還流により抽出を促進することが可能である。得られた抽出液は、そのまま、あるいは適宜濾過・濃縮・脱色などの処理を施して用いることが出来る。また、一旦溶媒を除去した後に、抽出に用いた溶媒とは異なる溶媒に再溶解して用いることも可能である。得られた抽出物を活性炭やカラムマトグラフィーなどによりさらに精製して用いることも可能である。
　用いる部位は本発明の効果を妨げない限り特に限定されないが、葉・枝からの抽出物が好ましい。
　本発明に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール、１，３－ブタンジオール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール等のアルコール類、含水アルコール類、アセトン、酢酸エチルエステル、クロロフォルム等の有機溶媒を単独あるいは組み合わせて用いることができるが、メタノール、エタノール、１，３－ブタンジオール、アセトン等が好ましく、メタノール、エタノール、１，３－ブタンジオールが特に好ましい。また、これらの抽出物を溶媒分画や活性炭処理やカラムクロマトグラフィーなどにより精製して用いても良い。
　本発明の美白剤、抗酸化剤、抗老化剤は、バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）を含むことを特徴とするが、本発明の効果を損なわない範囲において他の種々の成分を含有することが出来る。
　本発明の美白剤、抗酸化剤、抗老化剤は、皮膚外用基剤に配合して、美白用皮膚外用剤、あるいは抗酸化作用に基づく抗老化用皮膚外用剤とすることができる。これらの皮膚外用剤は、特に化粧料、医薬品、医薬部外品等の分野において好適に用いることができる。
　本発明の皮膚外用剤における植物抽出物の配合量は、通常０．００００１質量％以上、好ましくは０．０００１質量％以上である（以下、特に指定しない場合は溶媒を除去した乾燥物としての配合量を示す）。配合量が極端に少ないと効果が十分に発揮されない。上限は本発明の効果を損なわない範囲において特に限定されないが、過剰に配合しても増量に見合った顕著な効果が得られないこと、また、製剤設計や使用性などにおいて悪影響を及ぼすこともあることなどから、通常１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
　本発明の皮膚外用剤は、本発明による美白剤、抗酸化剤、抗老化剤を皮膚外用剤の基剤に配合して製造される。本発明の皮膚外用剤には、上記必須成分以外に、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、保湿剤、酸化防止剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、植物エキス類、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
　その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸、アルコキシサリチル酸および／またはその塩類等の他の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合することができる。
　本発明の皮膚外用剤の剤型は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来皮膚外用剤に用いるものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
　本発明について以下に実施例を挙げてさらに詳述するが、本発明はこれによりなんら限定されるものではない。配合量は特記しない限り質量％で示す。
　最初に、本実施例で用いた植物抽出物の調製方法、メラニン生成抑制効果に関する試験方法とその結果、抗酸化効果に関する試験方法とその結果について説明する。
１．試料の調製
　本実施例は、いずれも沖縄産の植物を用いたが、これに限定されるものではない。
(１) Polyalthia longifoliaの葉・枝　８．２１ｇにメタノール８３ｍＬを加え、室温で７日間浸漬後、ろ過した。ろ液中のメタノールを留去した後、減圧にて乾燥させることによりメタノール抽出物１．３８５ｇを得た。
(２) Polyalthia longifoliaの葉・枝　１．０１ｇにエタノール１０ｍｌを加え、室温で７日間浸漬後、ろ過した。ろ液中のエタノールを留去した後、減圧にて乾燥させることによりエタノール抽出物０．０７４ｇを得た。
(３) Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａの葉・枝　１．００ｇに１，３－ブタンジオール１０ｍLを加え、室温で７日間浸漬後、ろ過することにより１，３－ブタンジオール抽出液７．０５ｇを得た。抽出液中の乾燥残分量は１０５℃、真空下で５時間乾燥させた後、重量を測定することにより算出した（２．５ｍｇ／ｇ）。
(４) (１)で得られたメタノール抽出物０．６ｇを水３０ｍｌに分散・溶解した後、３０ｍｌの酢酸エチルエステルを加えて分液ロート中で激しく数分間混合し、抽出した。数分間静置後、酢酸エチル相を回収した。水相は同様に酢酸エチルエステルでさらに２回抽出した。得られた酢酸エチル層を混合した後、減圧により酢酸エチルエステルを除去することにより、酢酸エチルエステル画分約０．３１ｇを得た。
２．メラニン生成抑制効果試験方法およびその結果
　前述の各種の抽出方法により得られたマストツリー抽出物を試験試料として次の方法でメラニン生成抑制効果を測定・評価した。
（１）細胞播種・試験物質の添加
　マウスＢ１６メラノーマ細胞を６ウェルプレートに１００，０００細胞／ウェルで播種した。翌日、試験物質溶液（溶媒：ＤＭＳＯ）を添加した。
（２）細胞増殖測定
　細胞数は呼吸活性にて測定した。試験物質溶液添加から３日後に培地を吸引除去した後、アラマーブルー試薬（アラマー社製）を用いて、反応時間３０分、３７℃の条件下で呼吸活性を測定した。溶媒のみ添加したコントロール群に対する試験物質添加群の細胞数比率（％）を算出した。細胞数比率が高いほど細胞毒性が低いことを意味する。
（３）メラニン量の測定とその結果
　培地を吸引除去し、バッファー（リン酸緩衝液５０ｍＭ、ｐＨ６．８）を用いて３回洗浄した後、１Ｍ　ＮａＯＨを添加して細胞を溶解し、４７５ｎｍの吸光度を測定した。この吸光度とメラニン量は比例することがわかっているので、測定値をメラニン量の相対値として扱い、コントロール群（溶媒のみ添加）に対する試験物質添加群のメラニン量比率（％）を算出した。メラニン量比率が低いほどメラニン生成抑制効果が高いことを意味する。
　マストツリーのメタノール抽出物およびエタノール抽出物を用いたメラニン量比率（％）および細胞数比率（％）の結果を表１に、マストツリーメタノール抽出物の酢酸エチル分画を用いたメラニン量比率（％）および細胞数比率（％）の結果を表２にそれぞれ示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　表３は、マストツリーの１, ３－ブタンジオール抽出液を次のようにして用いたメラニン量比率（％）および細胞数比率（％）の結果を示したものである。
　１, ３－ブタンジオール抽出液を培地に対して最終濃度０．４％（v／ｖ）となるように添加した。コントロールは抽出液に含まれる溶媒（１, ３ブタンジオール）のみを０．４％添加した。いずれも細胞毒性は認められなかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　表１～３より、本発明のマストツリーは、メタノール抽出物、エタノール抽出物、メタノール抽出物の酢酸エチル分画物、１, ３－ブタンジオール抽出液のいずれも優れたメラニン抑制作用を有し、美白剤として有用であることが分かる。
３．抗酸化効果の試験方法およびその結果
　本発明で用いられる植物抽出物は上記美白作用のみならず、優れた抗酸化効果も有する。以下に抗酸化効果の試験方法とその結果について述べる。
（１）抗酸化効果の評価法（ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ａｓｓａｙ）
　Ｄｉｍｅｔｈｙｌ　Ｓｕｌｆｏｘｉｄｅで溶解した被験物質を９６ｗｅｌｌプレートに１０μｌ／ｗｅｌｌずつ注入した後、１ｍｍｏｌ／ｌの１，１－Ｄｉｐｈｅｎｙｌ－２－ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ溶液を９０μｌ／ｗｅｌｌ添加した。室温にて１０分間放置した後、５１７ｎｍにおける吸光度を測定し、吸光度のデータより、ラジカル量のコントロールに対する消去率（％）を求めた。
（２）抗酸化効果の評価結果
　被験物質として１００％エタノール抽出物を用いた時の評価結果を図１に示す。マストツリーから調製したエタノール抽出物には低濃度から濃度依存的にＤＰＰＨラジカル消去作用が認められ、高い抗酸化効果を有することが分かった。
　また被験物質として化粧品に汎用される保湿剤（ポリオール類）である、１，３－ブタンジオールにて抽出したエキスにも図２に示すように高い抗酸化効果が認められた。
　以上の結果から、マストツリーの抽出物は優れた抗酸化効果を示し、肌の老化を防ぎ、若々しく健康な肌の状態を維持する抗老化剤として用いることができる。
　以下に、種々の剤型の本発明による皮膚外用剤の配合例を実施例として説明する。各処方中のマストツリー抽出物含量は抽出溶媒を除去した後の乾燥残分量として表した。
配合処方例１　化粧水　　　　　　　　質量％
トリメチルグリシン　　　　　　　　　１．０
マストツリーエタノール抽出液　　　　０．００００１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　１．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
アルギン酸ナトリウム　　　　　　　　０．１
エチルアルコール　　　　　　　　　　５．０
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル　０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　適量
クエン酸　　　　　　　　　　　　　　適量
クエン酸ナトリウム　　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例２　化粧水　　　　　　　　質量％
マストツリーアセトン抽出物１，３－ブタンジオール転溶液　０．５
グリセリン　　　　　　　　　　　　　２．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　４．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド　１．０
ＰＥＧ／ＰＰＧ－１４／７ジメチルエーテル　３．０
エリスリトール　　　　　　　　　　　１．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油　　　０．５
ジイソステアリン酸ポリグリセリル　　０．３
トリエチルヘキサノイン　　　　　　　０．３
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　適量
クエン酸　　　　　　　　　　　　　　適量
クエン酸ナトリウム　　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例３　化粧水　　　　　　　　質量％
トラネキサム酸　　　　　　　　　　　１．０
４－メトキシサリチル酸カリウム　　　１．０
リポ酸　　　　　　　　　　　　　　　０．１
ハマメリス葉エキス　　　　　　　　　０．１
ヒポタウリン　　　　　　　　　　　　０．１
クララエキス　　　　　　　　　　　　０．１
トウニンエキス　　　　　　　　　　　０．１
ブナの芽エキス　　　　　　　　　　　０．１
マストツリー１，３-ブタンジオール抽出液　０．０００１
アスコルビン酸リン酸マグネシウム　　０．１
チオタウリン　　　　　　　　　　　　０．１
緑茶エキス　　　　　　　　　　　　　０．１
西洋ハッカエキス　　　　　　　　　　０．１
イリス根エキス　　　　　　　　　　　１．０
トリメチルグリシン　　　　　　　　　１．０
グリセリン　　　　　　　　　　　　　１．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
ヒドロキシエチルセルロース　　　　　０．０５
エチルアルコール　　　　　　　　　　５．０
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル　０．２
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　適量
クエン酸　　　　　　　　　　　　　　適量
クエン酸ナトリウム　　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例４　乳液　　　　　　　　　質量％
グリチルリチン酸ジカリウム　　　　　０．０５
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　０．５
マストツリージプロピレングリコール抽出液　０．００１
Ｌ－グルタミン酸ナトリウム　　　　　０．０５
ウイキョウエキス　　　　　　　　　　０．１
酵母エキス　　　　　　　　　　　　　０．１
ジオウエキス　　　　　　　　　　　　０．１
ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン　０．１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　６．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
ポリオキシエチレンメチルグルコシド　３．０
ヒマワリ油　　　　　　　　　　　　　１．０
スクワラン　　　　　　　　　　　　　２．０
イソドデカン　　　　　　　　　　　　４．０
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　３．０
キサンタンガム　　　　　　　　　　　０．１
カルボキシビニルポリマー　　　　　　０．１
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体　０．１
エチルアルコール　　　　　　　　　　５．０
水酸化カリウム　　　　　　　　　　　適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　適量
ベンガラ　　　　　　　　　　　　　　適量
黄酸化鉄　　　　　　　　　　　　　　適量
エチルパラベン　　　　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例５　日中用乳液　　　　　　質量％
グリチルリチン酸ジカリウム　　　　　０．１
マストツリーアセトン抽出物エタノール転溶液　０．００００３
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　０．１
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
スクワラン　　　　　　　　　　　　　０．５
イソドデカン　　　　　　　　　　　１０．０
イソヘキサデカン　　　　　　　　　２５．０
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　２．０
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体　１．５
トリメチルシロキシケイ酸　　　　　　１．０
４－ｔ－ブチル－４’－メトキシジベンゾイルメタン　１．０
パラメトキシ桂皮酸２－エチルヘキシル　　５．０
ジパラメトキシ桂皮酸モノ－２－エチルヘキサン酸グリセリル　１．０
シリコーン被覆微粒子酸化チタン　　　４．０
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト　　０．５
球状ポリエチレン末　　　　　　　　　３．０
タルク　　　　　　　　　　　　　　　５．０
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例６　乳液　　　　　　　　　質量％
Ｌ－アルギニン　　　　　　　　　　　０．１
ローヤルゼリーエキス　　　　　　　　０．１
酵母エキス　　　　　　　　　　　　　０．１
マストツリー９０％エタノール抽出液　１．０
グリチルレチン酸ステアリル　　　　　０．０５
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム　　０．１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　５．０
ジプロピレングリコール　　　　　　　７．０
ポリエチレングリコール１５００　　　２．０
流動パラフィン　　　　　　　　　　　７．０
ワセリン　　　　　　　　　　　　　　３．０
ベヘニルアルコール　　　　　　　　　１．０
バチルアルコール　　　　　　　　　　２．０
ホホバ油　　　　　　　　　　　　　　１．０
ステアリン酸　　　　　　　　　　　　０．５
イソステアリン酸　　　　　　　　　　０．５
ベヘニン酸　　　　　　　　　　　　　０．５
テトラ２－エチルヘキサン酸ペンタエリスリット　３．０
２－エチルヘキサン酸セチル　　　　　３．０
モノステアリン酸グリセリン　　　　　１．０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン　１．０
カルボキシビニルポリマー　　　　　　０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　適量
水酸化カリウム　　　　　　　　　　　適量
メチルパラベン　　　　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例７　乳液　　　　　　　　　質量％
アスコルビン酸グルコシド　　　　　　１．５
トラネキサム酸　　　　　　　　　　　１．０
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　０．１
ヒアルロン酸ナトリウム　　　　　　　０．０５
マストツリー１，３-ブタンジオール抽出液　０．０００３
パントテニルエチルエーテル　　　　　０．１
グリチルレチン酸ステアリル　　　　　０．１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　７．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
ポリエチレングリコール２００００　　０．５
ワセリン　　　　　　　　　　　　　　２．０
ホホバ油　　　　　　　　　　　　　　３．０
スクワラン　　　　　　　　　　　　　２．０
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル　０．５
ベヘニルアルコール　　　　　　　　　０．５
バチルアルコール　　　　　　　　　　０．２
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　２．０
テトラ２－エチルヘキサン酸ペンタエリスリット　０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油　　　１．０
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル　３．０
４－ｔ－ブチル－４’－メトキシジベンゾイルメタン　０．１
ジパラメトキシ桂皮酸モノ－２－エチルヘキサン酸グリセリル　０．１
キサンタンガム　　　　　　　　　　　０．１
カルボキシビニルポリマー　　　　　　０．２
エタノール　　　　　　　　　　　　　５．０
水酸化カリウム　　　　　　　　　　　適量
ピロ亜硫酸ナトリウム　　　　　　　　適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　適量
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　適量
黄酸化鉄　　　　　　　　　　　　　　適量
パラオキシ安息香酸エステル　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例８　クリーム　　　　　　　質量％
マストツリー９０％１，３－ブタンジオール抽出液　０．０５
４－メトキシサリチル酸カリウム　　　３．０
プロピレングリコール　　　　　　　　５．０
グリセリン　　　　　　　　　　　　　８．０
ステアリン酸　　　　　　　　　　　　２．０
ステアリルアルコール　　　　　　　　７．０
水添ラノリン　　　　　　　　　　　　２．０
スクワラン　　　　　　　　　　　　　５．０
２－オクチルドデシルアルコール　　　６．０
ポリオキシエチレンセチルアルコールエーテル　３．０
グリセリンモノステアリン酸エステル　２．０
水酸化カリウム　　　　　　　　　　　適量
エチルパラベン　　　　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　適量
イオン交換水　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例９　クリーム　　　　　　　質量％
４－メトキシサリチル酸カリウム　　　１．０
３－Ｏ－エチルアスコルビン酸　　　　１．０
マストツリー５０％エタノール抽出液　０．３
コエンザイムＱ１０　　　　　　　　　０．０３
トラネキサム酸　　　　　　　　　　　２．０
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　０．１
ヒアルロン酸ナトリウム　　　　　　　０．０５
パントテニルエチルエーテル　　　　　０．１
グリチルレチン酸ステアリル　　　　　０．１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　７．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　５．０
ポリエチレングリコール２００００　　０．５
ワセリン　　　　　　　　　　　　　　２．０
ベヘニルアルコール　　　　　　　　　０．５
バチルアルコール　　　　　　　　　　０．２
スクワラン　　　　　　　　　　　　　２．０
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル　０．５
ホホバ油　　　　　　　　　　　　　　３．０
テトラ２－エチルヘキサン酸ペンタエリスリット　１．０
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　２．０
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル　１．５
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油　　　１．０
カルボキシビニルポリマー　　　　　　０．２
キサンタンガム　　　　　　　　　　　０．１
エタノール　　　　　　　　　　　　　５．０
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　適量
黄酸化鉄　　　　　　　　　　　　　　適量
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　適量
水酸化カリウム　　　　　　　　　　　適量
パラオキシ安息香酸エステル　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例１０　二層タイプ日中用乳液　質量％
トラネキサム酸　　　　　　　　　　　　２．０
４－メトキシサリチル酸カリウム　　　　１．０
マストツリー５０％１，３－ブタンジオール抽出液　０．３
グリチルリチン酸ジカリウム　　　　　　０．０２
グルタチオン　　　　　　　　　　　　　１．０
チオタウリン　　　　　　　　　　　　　０．０５
クララエキス　　　　　　　　　　　　　１．０
ジプロピレングリコール　　　　　　　　５．０
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　　５．０
イソヘキサデカン　　　　　　　　　　２５．０
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体　２．０
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト　０．５
ブチルエチルプロパンジオール　　　　　０．５
パラメトキシ桂皮酸２－エチルヘキシル　７．５
トリメチルシロキシケイ酸　　　　　　　５．０
球状ポリアクリル酸アルキル粉末　　　　５．０
パルミチン酸デキストリン被覆微粒子酸化亜鉛　１５．０
ＥＤＴＡ３ナトリウム　　　　　　　　　適量
メチルパラベン　　　　　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　残余
配合処方例１１　ジェル　　　　　　　　質量％
４－メトキシサリチル酸カリウム　　　　０．１
オドリコソウエキス　　　　　　　　　　０．１
マストツリー酢酸エチル画分　　　　　　０．００００１
グリチルリチン酸ジカリウム　　　　　　０．１
アスコルビン酸グルコシド　　　　　　　２．０
酢酸トコフェロール　　　　　　　　　　０．１
オウゴンエキス　　　　　　　　　　　　０．１
ユキノシタエキス　　　　　　　　　　　０．１
グリセリン　　　　　　　　　　　　　　２．０
１，３－ブタンジオール　　　　　　　　５．０
ポリエチレングリコール１５００　　　　３．０
ポリエチレングリコール２００００　　　３．０
寒天末　　　　　　　　　　　　　　　　１．５
キサンタンガム　　　　　　　　　　　　０．３
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体　０．０５
オクタン酸セチル　　　　　　　　　　　３．０
ジメチルポリシロキサン　　　　　　　　５．０
ヘキサメタリン酸ナトリウム　　　　　　適量
ジブチルヒドロキシトルエン　　　　　　適量
黄酸化鉄　　　　　　　　　　　　　　　適量
クエン酸　　　　　　　　　　　　　　　適量
クエン酸ナトリウム　　　　　　　　　　適量
水酸化ナトリウム　　　　　　　　　　　適量
フェノキシエタノール　　　　　　　　　適量
香料　　　　　　　　　　　　　　　　　適量
精製水　　　　　　　　　　　　　　　　残余

Claims (6)

  1. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする皮膚外用剤。
  2. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする美白剤。
  3. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする美白用化粧料。
  4. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗酸化剤。
  5. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗老化剤。
  6. 　バンレイシ科ポリアルティア属（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ）マストツリー（Ｐｏｌｙａｌｔｈｉａ ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）の抽出物を含むことを特徴とする抗老化用化粧料。
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