KR100825929B1 - 미백효과를 갖는 한방 약재추출물, 그 추출물의 제조방법및 이를 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 백지, 백출, 백복령, 백급 및 세신을 혼합 추출한 한방약재추출물을 포함하는 미백 화장료 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 상기 화장료 조성물은 상기한 바의 약재들을 파쇄시킨 후, 적정량의 비율로 혼합하고, 이에 용매를 가하여 추출한 한방약재 추출물을 0.0001 내지 50중량%, 바람직하게는 0.01 내지 5중량%의 양으로 통상의 화장료 베이스에 첨가하였을 경우, 멜라닌 생성 억제 등의 미백효과를 나타낸다.
한방약재 추출물, 미백효과, 화장료

Description

미백효과를 갖는 한방 약재추출물, 그 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물{Oriental medicine plant extract having whitening effect, manufacturing method thereof and cosmetics comprising the oriental medicine plant extract}
도1은 본 발명에 따른 한방약재추출물의 미백효과의 실험결과로서 멜라닌 합성의 저해율을 나타낸 그래프이다.
본 발명은 미백효과를 갖는 한방약재 추출물과 그 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 산화로 인하여 발생하는 유해라디칼 및 기타 산화물질로부터의 피부 내 세포보호 및 피부 미백 기능이 뛰어난 약재 추출물과 그 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기한 약재 추출물은 우수한 항산화 및 세포보호효과를 나타내며, 멜라닌 합성에 중요한 역할을 담당하는 티로시나제(Tyrosinase)를 효과적으로 저해하고, 마우스 유래 비16에프10(B16F10) 멜라노마(melanoma) 세포 내 멜라닌 생합성을 억제하는 등의 미백활성물질을 효율적으로 추출, 분리하여 이를 화장료 조성물에 함유시켜 그 효과를 나타낸 화장료 조성물에 관한 것이다.
자외선에 의해 일어나는 피부 손상은 직접적인 화상 등의 피부손상 이외에도 피부에 침투된 자외선으로 인해 생성되는 산화물질, 즉 활성산소에 의한 발생하는 2차적인 현상들이 더 큰 문제를 발생시킬 수 있다. 피부 내 형성된 이러한 유해산소물질은 세포의 DNA 자체를 손상시키는가 하면 DNA 복제과정에 영향을 주어 유전자 정보에 돌연변이를 일으킬 수 있는 위험을 초래하며, 이로 인한 각종 피부 질환 및 피부암의 원인이 되고 있다. 따라서 체내에서는 자연적인 방어기작으로 자외선에 의해 발생된 유해산소에 의한 비정상적인 염증 물질이 케라티노사이트(Keratinocyte)에서 발현되며, 발현된 염증유발 물질은 멜라닌 생성세포인 멜라노사이트(Melanocyte)를 자극하여 지속적으로 멜라노좀(Melanosome) 내 멜라닌의 합성을 촉진시킨다. 그러나 이 때 발생하는 멜라닌 색소는 추후에도 소멸되지 않고, 피부 세포에 남아 색소 침착을 일으키는 원인이 되며, 이러한 현상이 심화될 경우, 여성의 경우 대인기피 등의 사회적인 문제를 야기할 수 있다. 따라서 효과적이며 안전한 미백 물질을 찾기 위한 노력들이 많이 이루어지고 있지만, 현재까지 통용되고 있는 미백 물질인 알부틴, 하이드로퀴논, 코직산 등의 경우, 그 사용에 있어 효능 및 안전성에 문제를 나타내거나, 제품 내에서의 그 효능의 유지가 어려운 실정이다. 또한 아스코르빈산의 경우, 제품 적용 시 제품 안정성에 큰 영향을 주기 때문에 그 사용에 있어 제한적인 것이 현실이다. 따라서 피부 미백에 있어 근본적인 원인인 유해산소를 제거하면서 미백효과를 나타내는 안전한 신규 원료 및 이를 이용한 제품 개발이 필요한 실정이다. 또한, 천연물은 안전성이 우수하며, 다양한 활성성분을 가지는 여러 가지 성분들을 함유하고 있어 종래에 사용되었던 원료가 갖는 문제점을 해결하기에 적합하기에 이들로부터 유효한 성분을 추출하여 이를 적용하는 연구가 진행되어 왔다.
이에 본 발명자들은 피부 미백에 효능을 가지는 천연유래물질을 찾고자 다양한 동, 식물추출물들을 연구한 결과, 백지, 백출, 백복령, 백급 및 세신을 배합한 한방약재 혼합물로부터 미백효과를 내는 안전한 추출물을 얻고, 이를 제형화 함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은, 피부 내 유해산소를 제거하여 피부세포를 보호하며, 보다 우수한 미백작용을 나타내는 한방약재 추출물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 피부 내 유해산소를 제거하여 피부세포를 보호하며 우수한 미백작용을 나타내는 한방약재 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 피부 내 유해산소를 제거하여 피부세포를 보호하며 우수한 미백작용을 나타내는 한방약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 본 발명의 목적은 유효성분을 포함하는 천연물질로서 백지, 백출, 백강잠, 백급 및 세신을 포함하는 한방약재 혼합물의 추출물을 포함하여 이루어지는 화장료 조성물에 의해 달성된다.
본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물은 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 한방약재 혼합물을 용매로 추출하여 수득될 수 있다.
상기 한방약재 혼합물을 추출하는 용매로는 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드(CH2Cl2), 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 것이 될 수 있다.
상기 한방약재 추출물은 상기 혼합물을 상기 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것에 의하여 수득될 수 있다.
상기 한방약재 추출물은 상기 혼합물을 상기 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것에 의하여 수득될 수 있다.
본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물의 제조방법은, (1) 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 혼합하여 한방약재 혼합물을 준비하는 혼합단계; 및 (2) 상기 혼합물을 용매를 사용하여 추출하여 한방약재 추출물을 수득하는 추출단계;들을 포함하여 이루어진다.
상기 (2)의 추출단계 이후에 상기 추출단계에서 수득되는 추출물을 감압농축한 후, 동결건조시키는 동결건조단계가 더 수행될 수 있다.
상기 추출단계는 상기 약재 혼합물을 상기 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것으로 이루어질 수 있다.
상기 추출단계는 상기 약재 혼합물을 상기 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것으로 이루어질 수 있다.
또한 상기 추출단계 이후에 추출단계에서 수득되는 한방약재 추출물을 유기용매를 사용하여 분획시키는 분획단계가 더 포함될 수 있다.
또한 본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물은, 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 한방약재 혼합물을 용매로 추출하여 수득되는 추출물을 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 30중량% 및 잔량으로서 화장료 베이스를 포함하여 이루어짐을 특징으로 한다.
상기 화장료 조성물을 구성하는 화장료 베이스는 유연화장수(스킨로션), 영양화장수(영양로션), 에센스, 크림, 바디크림 또는 팩을 조성하는 화장료 베이스가 될 수 있다.
이하 본 발명의 구체적인 실시예를 첨부한 도면을 참조하여 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물은 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 혼합물을 용매로 추출하여 수득되는 것임을 특징으로 한다.
상기 백지는 구리때(Angelica dahurica Bent. et Hooker)의 뿌리로, 가을에 꽃대가 나오지 않은 어린 식물의 뿌리를 캐어, 겉껍질을 벗기고, 햇볕에 말린다. 뿌리에는 22종 이상의 쿠마린이 총 0.3 내지 0.9% 함유되어 있으며, 정유는 0.2% 이상 있다(문관심, 약초의 성분과 이용, p513-515, 1984).
상기 백출(Atractylodes japonica)은 삽주라 불리우는 높이 약 80㎝되는 여러해살이풀의 뿌리 중 굵고 덩어리 진 것을 골라 겉껍질을 벗긴 것이다. 뿌리줄기에는 약 1.5%의 정유와 카로틴, 이눌린 고무질, 알칼로이드 반응이 있다. 정유의 주성분은 세스쿠이테르펜인 아트락틸론이며 이외 푸르푸랄, 에우데스몰, 히네솔이 있다(문관심, 약초의 성분과 이용, p719, 1984).
상기 백복령(Poria cocos)은 솔뿌리혹 또는 솔풍령이라고 하며, 벌목한 지 3 내지 4년 지난 소나무뿌리에 기생하여 혹처럼 크게 자란 균핵이다. 흔히 땅 속 20 내지 50㎝ 깊이에 있다. 흰 것을 흰솔뿌리혹(백복령), 분홍색인 것을 붉은솔뿌리혹(적복령), 소나무뿌리가 가운데 있는 것을 복신이라고 한다. 다당류인 파키만이 약 94% 있다(문관심, 약초의 성분과 이용, p100, 1984).
상기 백급(Bletilla striata Reichb.fil)은 자란, 대왐풀이라고도 하며, 덩이뿌리를 증기에 쪄서 말린 것을 백급이라고 한다. 아열대지방에서 자라는 여러해살이 풀이며, 잎은 뿌리에서 4 내지 5개가 자라는데, 넓은 버들잎 모양이고, 세로줄이 많이 갔다. 뿌리는 둥글고 희다(문관심, 약초의 성분과 이용, p835, 1984).
상기 세신(Asarum sieboldii)은 족두리풀이라고 불리우는 여러해살이풀로 우리나라 전국 각지, 특히 중부와 북부의 해발 100 내지 1,700m되는 산골짜기 넓은잎나무 밑의 비옥하고 습한 그늘에서 자란다. 이른 여름에 뿌리를 캐어 말린 것을 세신이라고 하며, 아사리닌과 세사민이 각기 2 내지 3% 함유된 정유성분을 함유하며, 이 밖에 카쿠올, 리그닌 화합물, 플로보노이드, 쿠마린, 미량의 사포닌과 알카로이드를 함유하고 있다(문관심, 약초의 성분과 이용, p835, 1984).
상기 백지, 백출은 상기 한방약재 혼합물 중에 10 내지 30중량부의 양으로 포함될 수 있다. 상기 백지, 백출의 양이 10중량부 미만으로 포함되는 경우, 유효한 성분을 얻기 힘든 문제점이 있을 수 있고, 반대로 30중량부를 초과하는 경우, 추출물의 성상에서 본연의 향과 색으로 화장료 조성물에 적용하기 힘든 문제점이 있을 수 있다. 상기 백복령, 백급, 세신은 상기 혼합물 중에 2 내지 10중량부의 양으로 포함될 수 있다. 상기 백복령, 백급, 세신의 경우, 각각의 양이 2중량부 미만일 경우, 역시 유효한 성분을 얻기 힘든 문제점이 있을 수 있으며, 반대로 10중량부를 초과하는 경우 그 약효가 강하여 피부 자극 등의 부작용을 나타내는 문제점이 있을 수 있다.
상기 한방약재 혼합물을 추출하는 용매로는 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드(CH2Cl2), 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 것이 될 수 있다.
상기 한방약재 추출물은 상기 약재 혼합물을 상기 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것에 의하여 수득될 수 있다. 상기 가열에 의한 추출에서 가열온도가 50℃ 미만이거나 추출시간이 1시간 미만인 경우, 추출이 충분 히 이루어지지 않아 추출율이 낮아지는 문제점이 있을 수 있고, 반대로 100℃를 초과하거나 20시간을 초과하는 것은 생산성의 저하 및 에너지의 불필요한 낭비 등의 문제점이 있을 수 있다.
달리, 상기 한방약재 추출물은 상기 약재 혼합물을 상기 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것에 의하여 수득될 수 있다. 상기 침지에 의한 추출에서 온도가 5℃ 미만이거나 추출시간이 1일 미만인 경우, 추출이 충분히 이루어지지 않아 추출율이 낮아지는 문제점이 있을 수 있고, 반대로 40℃를 초과하거나 15일을 초과하는 것은 생산성의 저하 및 에너지의 불필요한 낭비 등의 문제점이 있을 수 있다.
본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물의 제조방법은, (1) 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 혼합하여 약재혼합물을 준비하는 혼합단계; 및 (2) 상기 혼합물을 용매를 사용하여 추출하여 한방약재 추출물을 수득하는 추출단계;들을 포함하여 이루어진다.
상기 (2)의 추출단계 이후에 상기 추출단계에서 수득되는 추출물을 감압농축한 후, 동결건조시키는 동결건조단계가 더 수행될 수 있다.
상기 추출단계는 순환냉각장치가 있는 추출기에서 상압하에서, 상기 한방약재 혼합물을 상기 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것으로 이루어질 수 있다.
또한, 상기 추출단계는 상기 약재혼합물을 상기 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것으로 이루어질 수 있다.
또한 상기 추출단계 이후에 추출단계에서 수득되는 한방약재 추출물을 유기용매를 사용하여 분획시키는 분획단계가 더 포함될 수 있다.
또한 수득된 추출물은 동결건조법 또는 분무건조법을 이용하여 건조분말 추출물을 획득할 수 있으며, 또한, 저급알코올(메탄올, 에탄올), 부탄올, 에틸아세테이트, 벤젠, 메틸렌클로라이드와 같은 유기용매의 경우, 이를 감압 농축하여 증류수를 가한 후, 이를 증류수를 이용한 추출과 같은 방법으로 처리하여 추출물을 획득할 수 있다.
상기와 같은 방법에 의해 얻은 한방약재 추출물은 높은 활성성분을 함유하고 있어 활성산소를 제거하고, 세포 내 멜라닌 색소의 생성을 억제하며, 티로시나제(Tyrosinase)의 활성을 낮추는 효과를 갖는다.
또한 본 발명에 따른 미백효과를 갖는 한방약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물은, 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 약재 혼합물을 용매로 추출하여 수득되는 추출물을 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 30중량% 및 잔량으로서 화장료 베이스를 포함하여 이루어짐을 특징으로 한다.
상기 화장료 조성물을 구성하는 화장료 베이스는 유연화장수(스킨로션), 영양화장수(영양로션), 에센스, 크림, 바디크림 또는 팩을 조성하는 화장료 베이스가 될 수 있다.
이 때, 상기 화장료에의 건조분말 형태의 추출물의 함량은 0.0001 내지 5중 량%, 액상의 1.3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린과 그 혼합액의 경우 0.001% 내지 50중량%, 각기 바람직하게는 전자의 경우 0.01 내지 1중량%, 그리고 후자의 경우 0.1 내지 10중량%의 양으로 화장료에 첨가할 수 있다. 또한, 상기 화장료 조성물은 상기 한방약재 추출물을 화장료, 다시 말하면 유연화장수(스킨), 영양화장수(로션), 에센스, 영양크림, 팩, 바디로션, 바디오일 등에 첨가하는 것을 말한다.
따라서 본 발명은 활성산소를 제거하며 그에 따른 멜라닌 생성을 억제하는 백지, 백출, 백복령, 백급 및 세신으로부터 얻은 한방약재 추출물을 함유한 미백 화장료 조성물을 제공한다.
그러나 상기 추출법은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니며, 이하 실시 예에 의하여 본 발병을 상세히 설명한다. 또한 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 수용성 추출물의 제조
건조된 백지 15g, 백출 15g, 백복령 5g, 백급 5g, 세신 5g의 5가지 약재들을 혼합한 혼합물 45g에 증류수 900g를 넣고, 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 5시간 끓여서 추출한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 상온으로 냉각한 후, 0.1㎛ 중공사 여과장치로 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 24g(건조중량)을 수득하였다.
실시예 2-1. 에탄올 추출물의 제조(가열추출)
건조된 백지 30g, 백출 30g, 백복령 10g, 백급 10g, 세신 10g의 5가지 약재들을 혼합한 혼합물 90g에 70% 에탄올 1,800g을 넣고, 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 5시간 끓여서 추출한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 상온으로 냉각한 후, 와트만(Whatman) No.2 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 19g(건조중량)을 수득하였다.
실시예 2-2. 에탄올 추출물의 제조( 침지추출 )
상기 실시예 2-1의 약재 혼합물 90g에 95% 에탄올 1800g을 넣고, 상온에서 7일간 침지시켜 추출한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 와트만(Whatman) No.2 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 1.2g(건조중량)을 수득하였다.
실시예 2-3. 메탄올 추출물의 제조( 침지추출 )
에탄올 대신 80% 메탄올을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 2-2와 동일하게 수행하였으며, 본 발명에 따른 추출물 16.5g(건조중량)을 수득하였다.
실시예 3-1. 에탄올 추출물의 제조(추출 후 분획)
건조된 백지 300g, 백출 300g, 백복령 100g, 백급 100g, 세신 100g의 5가지 약재들을 혼합한 약재혼합물 900g에 70% 에탄올 2,700㎖을 넣고, 상온에서 3일간 침지시켜 추출한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 다시 70% 에탄올 3,150㎖을 넣고, 동일하게 2차 추출을 하였다. 이와 같은 공정을 3차 추출까지 진행한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 와트만(Whatman) No.2 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축한 뒤, 농축액 105.88g을 동결 건조시켜 본 발명에 따른 2가지 형태의 추출물을 각각 15.61g(점성물질), 7.75g(분말)씩 수득하였다.
실시예 3-2. n- 헥산 분획추출물의 제조
상기 실시예 3-1에서 감압 농축된 추출물 농축액 500g에 n-헥산을 1:1로 첨가하여 분획 추출하였다. 이 과정을 3회 반복하여 추출한 후, 이를 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 포화 염화나트륨 용액과 무수 황산나트륨을 이용하여 순차대로 물층을 제거하고, 와트만(Whatman) No. 2 여과지로 여과하였다. 이를 다시 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 4.58g의 액상 추출물을 수득하였다.
실시예 3-3. 에틸아세테이트 분획추출물의 제조
상기 실시예 3-2에서 분획추출 후, 남은 추출물 농축액 450g에 에틸아세테이 트를 1:1로 첨가하여 분획 추출하였다. 이 과정을 3회 반복하여 추출한 후, 이를 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 포화 염화나트륨 용액과 무수 황산나트륨을 이용하여 순차대로 물층을 제거하고, 와트만(Whatman) No. 2 여과지로 여과하였다. 이를 다시 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 2가지 형태의 분말상의 0.58g(연갈색), 점토상의 2.2g(진한 갈색)을 각각 수득하였다.
실시예 3-4. 부탄올 분획추출물의 제조
상기 실시예 3-3에서 분획추출 후 남은 추출물 농축액 420g에 부탄올을 1:1로 첨가하여 분획 추출하였다. 이 과정을 3회 반복하여 추출한 후, 이를 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 포화 염화나트륨 용액과 무수 황산나트륨을 이용하여 순차대로 물층을 제거하고, 와트만(Whatman) No. 2 여과지로 여과하였다. 이를 다시 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 1.99g(건조중량)을 수득하였다.
실시예 3-5. 분획추출물(잔류물)의 제조
상기 실시예 3-4에서 분획추출 후 남은 추출물 농축액 310g을 냉각 콘덴서가 달린 감압증류장치에서 40℃로 감압 농축하고, 동결 건조시켜 본 발명에 따른 추출물 25.92g(건조중량)을 얻었다.
실시예 4-1. 부틸렌글리콜 가용 추출물의 제조
건조된 백지 30g, 백출 30g, 백복령 10g, 백급 10g, 세신 10g의 5가지 약재들을 혼합한 혼합물 90g에 50% 1,3-부틸렌글리콜 900g을 넣고, 상온에서 5일간 침지시켜 추출한 후, 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 와트만(Whatman) No.2 여과지로 여과하여 본 발명에 따른 액상의 추출물 826g을 수득하였다.
실시예 4-2. 프로필렌글리콜 가용 추출물의 제조
50% 1,3-부틸렌글리콜 대신 50% 프로필렌글리콜 900g을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 4-1과 동일하게 수행하여 본 발명에 따른 액상의 추출물 872g을 수득하였다.
실시예 4-3. 디프로필렌글리콜 가용 추출물의 제조
50% 1,3-부틸렌글리콜 대신 50% 디프로필렌글리콜 900g을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 4-1과 동일하게 수행하여 본 발명에 따른 액상의 추출물 812g을 수득하였다.
실시예 4-4. 글리세린 가용 추출물의 제조
50% 1,3-부틸렌글리콜 대신 50% 글리세린 900g을 사용하는 것을 제외하고는 상기 실시예 4-1과 동일하게 수행하여 본 발명에 따른 액상의 추출물 796g을 수득하였다.
실험예 1
상기 각 실시예들에서 얻어진 각각의 시료들을 이용하여 추출용매 및 조건에 따른 세포 독성의 변화를 측정하였다. 또한 실시예 3-1과 3-3의 경우, 분말상의 시료를 사용하였다.
1-1. 실험 방법
CCD-986sk 인간피부 섬유아세포(Human dermal skin fibroblast)에 대한 세포독성 측정은 소량의 세포의 생세포수를 측정하기 위한 방법으로 잘 알려진 염색법의 일종인 중성적색분석법(neutral red assay)을 실시하였다. 즉, CCD-986sk를 10% FBS(fetal bovine serum)-DMEM(Dulbecco's modified essential medium)에 배양한 후, 이를 취하여 세포농도를 2.5× 104cell/㎖로 조정한 세포액을 조제한 후, 이를 96-웰플레이트(96-well plate)에 200㎕씩 분주하고, 이를 37℃, 5% 이산화탄소(CO2) 인큐베이터에서 24시간 배양시켰다. 24시간 배양 후, 배지를 제거한 후, 10% FBS-DMEM로 조제한 농도별 추출물 100㎕과 10% FBS-DMEM 100㎕를 다시 첨가하여 동일 조건에서 7일간 배양시켰다. 이 때, 10% FBS-DMEM만를 사용한 실험구를 대조구로 사용하였다. 7일간 배양한 후, 배지 및 용액을 제거하고, 50㎍/㎖ 중성적색소(neutral red)(in 10% FBS-DMEM)를 200㎕씩 넣은 후, 37℃ 인큐베이터에서 2시간 반응시켰다. 중성적색소 용액을 제거한 후, 1% 염화칼슘(CaCl2), 1% 포름알데 히드(Formaldehyde)(in D.W(탈이온수)) 용액을 100㎕씩 넣고, 1분간 교반시킨 후, 용액을 제거하고, 이에 1% 아세트산, 50% 에탄올(in D.W)을 다시 100㎕씩 넣고, 15분간 교반시킨 후, 마이크로플레이트 계수기(microplate reader)를 이용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다.
1-2. 실험 결과
결과는 하기 표 1에 기재하였다.
시료 1%(100%) 0.5%(50%) 0.25%(25%) 0.125%(12.5%)
실시예 1 70.58% 81.69% 100.12% 100.14%
실시예 2-1 35.48% 41.64% 60.58% 64.95%
실시예 2-2 30.15% 40.88% 43.78% 57.98%
실시예 2-3 50.66% 61.87% 90.16% 95.57%
실시예 3-1 58.62% 57.86% 93.46% 98.78%
실시예 3-2 120.38% 118.02% 116.65% 111.46%
실시예 3-3 66.25% 76.32% 82.50% 78.79%
실시예 3-4 33.81% 49.33% 55.34% 90.37%
실시예 3-5 111.68% 106.48% 107.11% 105.85%
실시예 4-1 30.15% 37.00% 40.02% 21.03%
실시예 4-2 16.28% 20.87% 49.31% 90.87%
실시예 4-3 60.84% 79.88% 91.87% 99.58%
실시예 4-4 90.50% 102.58% 99.61% 98.37%
시료 0.0625% (6.25%) 0.03125% (3.125%) 0.015625% (1.5625%) 0.0078125% (0.78125%)
실시예 1 99.48% 102.68% 103.91% 100.78%
실시예 2-1 70.78% 100.26% 100.97% 99.87%
실시예 2-2 90.85% 94.71% 98.76% 103.46%
실시예 2-3 100.59% 104.65% 102.46% 102.87%
실시예 3-1 98.44% 99.00% 103.20% 101.25%
실시예 3-2 109.52% 104.30% 105.22% 99.67%
실시예 3-3 83.61% 84.03% 84.26% 101.90%
실시예 3-4 95.67% 100.60% 106.44% 105.16%
실시예 3-5 105.06% 103.82% 100.17% 105.41%
실시예 4-1 23.14% 24.82% 101.36% 102.95%
실시예 4-2 102.59% 100.48% 100.07 100.85%
실시예 4-3 98.67% 102.56% 100.49% 102.62%
실시예 4-4 100.63% 101.58% 100.91% 99.91%
실시예 4의 경우, ()의 농도로 진행하였음
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1, 2(2-1 내지 2-3), 3(3-1 내지 3-5)의 경우, 전체적으로 1% 농도에서 독성을 나타내었으나, 일부는 세포독성을 나타내지 않은 시료들도 나타났으며, 이 실험 결과를 토대로 세포독성을 나타내지 않은 농도 내에서 추후 실험을 진행하였다.
실험예 2
상기 실시예 1, 2, 3 및 4(4-1 내지 4-4)에 대한 항산화효과를 측정하였다.
2-1. 프리라디칼 소거능 측정
2-1-1. 실험방법
시료에 대한 전자공여능 측정은 다음과 같이 실시하였다. 각 추출물의 용액 100㎕에 5×10-4M의 DPPH(1-1-디페닐-2-피크릴-히드라질(1-1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)) 100㎕를 넣고, 1분간 교반한 후, 25℃ 인큐베이터에서 30분간 반응시킨 후, 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였다. 실험 대조구로는 동일농도의 엘-아스코르빈산(L-Ascorbic acid)를 사용하였으며, 전자공여능은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
2-1-2. 실험 결과
결과는 하기 표 2에 기재하였다.
시료 (100ppm) 프리라디칼 소거능
아스코르빈산 85.91%
실시예 1 30.54%
실시예 2-1 50.18%
실시예 2-2 61.38%
실시예 2-3 49.57%
실시예 3-1 10.32%
실시예 3-2 0.44%%
실시예 3-3 9.97%
실시예 3-4 79.84%
실시예 3-5 27.77%
실시예 4-1 18.97%
실시예 4-2 36.53%
실시예 4-3 39.28%
실시예 4-4 41.19%
상기 표 2 에 나타난 바와 같이, 실시예 3-4의 경우, 대조구인 아스코르빈산과 유사한 프리라디칼 소거능을 나타내었으며, 나머지의 경우, 그 효과가 대조구에 비하여는 약한 것을 확인할 수 있었다.
2-2. 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD ; Superoxide dismutase) 유사활성 측정
2-2-1. 실험 방법
SOD 유사활성은 다음과 같이 실시하였다. 각 추출물 당 100ppm의 농도별 시료용액 20㎕에 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 분석 키트(SOD assay kit-WST) 내 더블류에스티 작업용액(WST working solution) 200㎕을 넣어 교반한 후, 다시 효소작업용액(Enzyme working solution) 20㎕를 넣어 혼합한 후, 37℃ 인큐베이터에서 20분간 반응시키고, 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 450nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험 대조구로는 동일 농도의 엘-아스코르빈산을 사용하였으며, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.
2-2-2. 실험 결과
결과는 하기 표 3에 기재하였다.
시료(100ppm) 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성(%)
아스코르빈산 1.29%
실시예 1 9.22%
실시예 2-1 10.28%
실시예 2-2 7.44%
실시예 2-3 0.34%
실시예 3-1 10.74%
실시예 3-2 6.77%
실시예 3-3 1.42%
실시예 3-4 61.24%
실시예 3-5 0.76%
실시예 4-1 3.24%
실시예 4-2 1.57%
실시예 4-3 10.50%
실시예 4-4 0.38%
상기 표 3에 나타난 바와 같이, 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성의 경우에도 실험예 2-1과 같은 경향을 나타내며 실시예 3-4의 경우, 대조구인 아스코르빈산에 비하여 높은 활성을 보였다.
이와 같은 결과는 자유라디칼 소거능에서 다소 대조구인 아스코르빈산보다 다소 낮은 결과를 나타냈었던 것에 비하여 본 한방약재 혼합추출물이 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 유사활성 측의 메카니즘에서 강한 항산화 효과를 나타낸다는 것을 알 수 있다.
실험예 3
상기 실시예 1, 2, 3 및 4에 대한 세포 보호 효과를 측정하였다.
3-1. 실험 방법
과산화물에 의한 CCD-986sk(Human skin dermal fibroblast)의 손상을 억제하는 효과를 측정하기 위해 다음과 같이 실시하였다. 즉, CCD-986sk(Human dermal skin fibroblast)를 10% FBS-MEME에 배양한 후, 이를 취하여 세포농도를 2.0× 105cell/㎖로 조정한 세포액을 조제한 후, 이를 96-웰플레이트에 200㎕씩 분주하고, 이를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양시켰다.
24시간 배양 후, 배지를 제거한 후, 얼용액(Earle' solution(0.12M 염화나트륨(NaCl), 5mM 염화칼륨(KCl), 0.83mM 황산마그네슘(MgSO4ㆍ7H2O), 5.5mM 글루코스(glucose), 1.8mM 염화칼슘(CaCl2), 1mM 인산나트륨(NaH2PO4ㆍ2H2O), 26.2mM 탄산수소나트륨(NaHCO3) in 탈이온수(D.W)) 내의 1.5mM 과산화수소수(H2O2) 용액으로 조제한 추출물 200㎕을 다시 첨가하여 동일 조건에서 90분간 반응시켰다. 이 때 얼용액 만을 사용하여 제조한 실험구를 대조구로 사용하였다.
90분간 반응시킨 후, 배지 및 용액을 제거하고, 50㎍/㎖ 중성적색소(in 10% FBS-MEME)를 200㎕씩 넣은 후, 37℃ 인큐베이터에서 2시간 반응시켰다. 중성적색소 용액을 제거한 후, 1% CaCl2, 1% 포름알데히드(in D.W) 용액을 100㎕씩 넣고, 1분간 교반시킨 후, 용액을 제거하고, 이에 1% 아세트산, 50% 에탄올(in D.W)을 다시 100㎕씩 넣고, 15분간 교반시킨 후, 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 570㎚에서 흡광도를 측정하였다.
3-2. 실험 결과
결과는 하기 표 4에 기재하였다.
시료(100ppm) 세포생존율(%)
대조구 100.00%
실시예 1 111.68%
실시예 2-1 121.38%
실시예 2-2 109.21%
실시예 2-3 101.43%
실시예 3-1 122.82%
실시예 3-2 194.98%
실시예 3-3 99.93%
실시예 3-4 219.78%
실시예 3-5 131.08%
실시예 4-1 100.18%
실시예 4-2 106.87%
실시예 4-3 100.68%
실시예 4-4 104.16%
상기 표 4에 나타난 바와 같이, 대부분 과산화물에 의한 세포 손상을 억제하는 효과를 나타내었으며 특히, 실시예 3-2, 3-4의 경우, 높은 세포 보호 효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
실험예 4
상기 실시예 1, 2, 3 및 4에 대한 미백효과를 측정하였다.
4-1. 티로시나제 효소 저해 활성 효과 측정
4-1-1. 실험 방법
티로시나제(Tyrosinase) 저해활성 측정은 티로시나제의 작용 결과 생성되는 도파크롬(DOPA chrome)을 비색법에 의해 측정하는 야기(Yagi) 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉, 반응구는 96-웰플레이트 내 0.1M 인산완충액(phosphate buffer(pH6.5)) 110㎕에 1.5mM 엘-티로신(L-Tyrosine) 용액(in 0.1M 인산완충액(pH 6.5) 40㎕ 및 시료용액 10㎕을 넣은 후, 머쉬룸 티로시나제(mushroom tyrosinase)(2000unit/㎖) 10㎕을 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 도파크롬을 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 490㎚에서 측정하였다.
또한 시험결과의 비교를 위해 양성대조구로 동일 농도의 알부틴(Arbutin)을 사용하였다.
4-1-2. 실험 결과
결과는 하기 표 5에 기재하였다.
시료(100ppm) 티로시나제 활성 억제율(%)
알부틴 83.50%
실시예 1 20.71%
실시예 2-1 19.65%
실시예 2-2 20.71%
실시예 2-3 14.29%
실시예 3-1 9.83%
실시예 3-2 7.77%
실시예 3-3 26.59%
실시예 3-4 37.44%
실시예 3-5 20.23%
실시예 4-1 6.90%
실시예 4-2 8.38%
실시예 4-3 5.24%
실시예 4-4 9.38%
상기 표 5에 나타난 바와 같이, 실시예 3-4에서 티로시나제 활성 억제 효과를 보였으며, 그 외는 낮은 활성 억제능을 나타냄을 확인할 수 있었다.
4-2. B16F10 멜라노마 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과 측정
4-2-1. 실험 방법
마우스 유래 B16F10 멜라노마(melanoma) 내 멜라민(melanin) 생합성을 억제하는 효과를 측정하기 위하여 다음과 같이 실험을 진행하였다. 즉, B16F10(melanoma)을 10% FBS-MEME에 배양한 후, 이를 취하여 세포농도를 5.0× 104cell/㎖로 조정한 세포액을 조제한 후, 이를 지름 60㎜의 플레이트에 5㎖씩 분주하고, 이를 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24시간 배양시켰다. 24시간 배양 후, 배지를 제거한 후, 10% FBS-MEME로 조제한 500ppm 농도의 시료 1㎖과 5% 테오필라인(Theophylline)(0.05M)(in 10% FBS-MEME) 4㎖를 다시 첨가하여 동일 조건에서 72시간 배양시켰다. 이 때 10% FBS-MEME 만을 사용한 실험구를 대조구로 사용하였으며, 양성대조구는 동일 농도의 알부틴을 사용하였다. 72시간 배양한 후, 각 플레이트 내의 용액 내 멜라닌 생성량을 측정하기 위하여 용액을 1㎖씩 마이크로튜브(microtube)에 옮기고, 이를 200㎕씩 취하여 96-well plate에 분주한 후, 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 405㎚에서 흡광도를 측정하였다. 또한 세포 내 멜라닌 생성량을 측정하기 위하여 우선 플레이트 내 나머지 배지를 제거하고, 1× PBS(-)로 1회 세척하였다. 다시 0.85N 수산화칼륨 용액을 0.5㎖씩 넣은 후, 30분 내지 1시간 가량 반응시켜 세포 내 멜라닌을 취하여 마이크로튜브에 옮기고, 다시 1× PBS(-) 0.5㎖를 넣고 잔량의 멜라닌을 취하여 혼합한 뒤, 역시 이로부터 200㎕씩 취하여 96-웰 플레이트(well plate)에 옮겨 마이크로플레이트 계수기를 이용하여 405㎚에서 흡광도를 측정하였다.
4-2-2. 실험 결과
결과는 하기 표 6에 기재하고, 도 1에 그래프로 도시하였다.
시료(100ppm) 멜라닌 생성 억제율(%)
알부틴 34.79%
실시예 1 3.91%
실시예 2-1 40.16%
실시예 2-2 19.82%
실시예 2-3 30.25%
실시예 3-1 56.51%
실시예 3-2 35.33%
실시예 3-3 24.91%
실시예 3-4 54.52%
실시예 3-5 30.97%
실시예 4-1 19.61%
실시예 4-2 30.13%
실시예 4-3 10.07%
실시예 4-4 15.89%
상기 표 6 및 도 1에 나타난 바와 같이, 실시예 2와 3에서 멜라닌 생성을 억제하는 높은 활성을 나타내냄을 확인할 수 있었다.
이하는 각 화장품 제형에 있어서 본 한방약재 추출물을 함유하여 피부 내 활성 산소를 제거하며, 피부를 보호하고, 피부 미백에 효과를 나타내는 제형으로서의 화장물 조성료의 예를 보여주며 처방예는 다음과 같다.
여기에 사용된 추출물은 실시예 3-4의 추출물이다.
처방예 1
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.01
폴리옥시에칠렌경화피마자유 0.5
글리신 3.0
디포타슘글리시리제이트 0.1
1,3-부틸렌 글리콜 3.0
소듐히아루로네이트 0.1
에탄올 5.0
항산화제 0.1
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
처방예 2
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.01
글리세린 7.0
소르비탄스테아레이트 슈크로오즈코코에이트 2.0
미네랄 오일 4.0
트리옥타노인 1.0
스테아릭에씨드 1.0
글리세릴 스테아레이트 0.5
소르비탄모노스테아레이트 1.0
디메치콘 0.5
항산화제 0.3
트리에탄올아민 0.1
카보머 0.2
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
처방예 3
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 항산화 및 미백 에센스의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.05
글리세린 5.0
1,3-부틸렌 글리콜 2.0
폴리에칠렌 글리콜 2.0
카보머 1.0
소듐히아루로네이트 0.1
글리신 3.0
폴리아크릴아마이드 2.0
히드록시에칠셀룰로이즈 0.2
에탄올 3.0
폴리옥시에칠렌경화피마자유 1.0
항산화제 0.3
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
처방예 4
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 항산화 및 미백크림의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.1
1,3-부틸렌글리콜 3.0
글리세린 3.0
하이드로제네이티드 레시친 1.0
옥틸도데카놀 3.0
트리옥타노인 2.0
스테아릭에씨드 1.5
세토스테아릴알콜 2.0
폴리솔베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 2.0
디메치콘 3.0
항산화제 0.3
산탄검 0.2
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
처방예 5
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 바디크림의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.01
1,3-부틸렌글리콜 6.0
글리세린 4.0
소듐세틸설페이트 0.1
판테놀 1.0
산탄검 1.0
카보머 0.1
비스왁스 0.3
세탄올 2.5
글리세릴스테아레이트 2.5
소르비탄 스테아레이트 1.5
미네랄오일 5.0
스쿠알렌 2.0
항산화제 0.3
디메치콘 1.0
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
처방예 6
본 발명에 따른 한방약재 추출물(실시예 3-4)을 함유한 화장료 중 팩의 처방예는 다음과 같다.
성분 함량(중량%)
한방약재 추출물 0.01
글리세린 7.0
1,3-부틸렌 글리콜 3.0
스쿠알렌 3.0
디메치콘 3.0
소듐히아루로네이트 0.1
글리신 2.0
폴리아크릴아마이드 5.0
항산화제 0.3
트리에탄올아민 0.1
EDTA 0.1
방부제 적량
정제수 잔량
상기 실시예들 및 실험예들에서 확인된 바와 같이, 본 발명에 따른 한방약재 추출물은 우수한 유해산소 제거능력과 세포보호효과 및 멜라닌 생성을 억제하는 뛰어난 작용을 지니고 있으며, 본 발명의 추출물을 첨가하여 제조한 화장료 역시 항산화 및 피부 미백효과가 우수하였다.
따라서 본 발명에 의하면 산화를 억제하여 피부 세포의 손상 및 노화를 예방하고 피부 미백 기능이 뛰어난 한방약재 추출물과, 이러한 추출물의 제조방법 및 이를 포함하는 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

Claims (11)

  1. 삭제
  2. 삭제
  3. 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 한방약재 혼합물을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것에 의하여 수득되는 것임을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물.
  4. 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 포함하는 한방약재 혼합물을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것에 의하여 수득되는 것임을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물.
  5. 삭제
  6. 삭제
  7. (1) 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 혼합하여 한방약재 혼합물을 준비하는 혼합단계; 및
    (2) 상기 한방약재 혼합물을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 용매와 함께 50 내지 100℃에서 1 내지 20시간 가열시키는 것으로 이루어짐을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물의 제조방법.
  8. (1) 백지 10 내지 30중량부, 백출 10 내지 30중량부, 백복령 2 내지 10중량부, 백급 2 내지 10중량부 및 세신 2 내지 10중량부를 혼합하여 한방약재 혼합물을 준비하는 혼합단계; 및
    (2) 상기 한방약재 혼합물을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 헥산, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린 또는 이들의 혼합물로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 용매에 5 내지 40℃에서 1 내지 15일간 침지시키는 것으로 이루어짐을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물의 제조방법.
  9. 제7항 또는 제8항에 있어서,
    상기 추출단계 이후에 추출단계에서 수득되는 한방약재 추출물을 에탄올, n-헥산, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어지는 군에서 선택된 유기용매를 사용하여 분획시키는 분획단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물의 제조방법.
  10. 제 3항 또는 제4항 기재의 한방약재 추출물을 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 30중량% 및 잔량으로서 화장료 베이스를 포함하여 이루어짐을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 화장료 조성물을 구성하는 화장료 베이스가 유연화장수(스킨로션), 영양화장수(영양로션), 에센스, 크림, 바디크림 또는 팩을 조성하는 화장료 베이스임을 특징으로 하는 미백효과를 갖는 한방약재 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
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