KR101529227B1

KR101529227B1 - 연우주안방과 연방을 함유하는 미백 개선용 화장품 조성물 및 이를 포함한 한방화장품

Info

Publication number: KR101529227B1
Application number: KR1020120085869A
Authority: KR
Inventors: 조정희; 정수영; 조현우; 정원석; 정호경; 김기영
Original assignee: 대한민국(보건복지부장관)
Priority date: 2012-08-06
Filing date: 2012-08-06
Publication date: 2015-06-26
Also published as: KR20140019585A

Abstract

본 발명은 연우주안방 및 연방의 추출물을 함유하는 미백 개선용 화장품 조성물, 및 이를 이용하여 제조되는 미백 개선용 화장품으로서, 연화, 연근 및 연자로 구성된 연우주안방과 연방의 물 또는 에탄올 추출물은, 연우주안방과 연방을 건조한 다음, 건조 중량의 10배의 정제수를 포함한 물로 80 내지 100℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 열수 추출, 또는 에탄올 용매로 60 내지 80℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 환류냉각 추출하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 최종 추출물을 수득하는 것을 특징으로 한다. 본 발명에 따른 미백 개선용 화장품은 피부흑화를 개선하고 피부탄력손실 및 피부노화를 방지하는 효과가 있다.

Description

연우주안방과 연방을 함유하는 미백 개선용 화장품 조성물 및 이를 포함한 한방화장품{Cosmetic composition comprising YeonWooJuanbang and Yeonbang for skin whitening}

본 발명은 미백 및 노화방지 개선용 화장품 조성물에 관한 것으로서, 상세하게는 멜라노사이트의 성장을 억제하거나 티로시나제의 활성을 억제하여 멜라닌의 합성을 억제할 수 있는 연화, 연근 및 연자로 구성된 연우주안방, 및 연방이 함유된 연우주안방 가감방을 이용하여 제조된 미백 및 노화방지 개선용 화장품 조성물 및 이를 포함한 한방 화장품에 관한 것이다.

최근에 웰빙의 개념보다 더 포괄적이고 광범위한 로하스(LOHAS, Lifestyles of Health and Sustainablity)에 대한 관심이 높아지면서 건강한 아름다움을 추구하고자 하는 욕구는 사회전반에 걸쳐 매우 팽대되고 있고, 이러한 사회적 여건 조성은 미용에서도 아름다운 피부를 관리할 수 있는 화장품 산업의 발전과 시장성이 급속하게 확대되고 있다.

이와 더불어 한방소재의 바디케어 미용제품은 자신의 피부에 신비스러운 힘을 부여할 것으로 기대되고 있고, 또한 피부안정성에 대한 욕구로 인하여 천연재료에 대한 관심이 더욱 증폭되고 있다. 천연재료의 장점은 항균활성, 항산화 및 부작용이 경미하다는 것을 들 수 있고, 사용후에는 환경친화적인 부산물을 만든다는 점이다.

이와 같은 수요의 흐름에 따라, 현재 한의학계, 의학계 및 화장품업계에서는 안전성을 고려하여 천연물로부터 피부 미백제에 개발을 위하여 많은 연구가 이루어지고 있으며, 그 중 일부는 제품으로 상용화되어 있다. 미백제는 멜라노사이트 (melanocyte)의 성장을 억제하거나 티로시나제 (tyrosinase)의 활성을 억제하여 멜라닌의 합성을 억제하는 효과를 갖는다.

멜라닌은 피부의 색조를 결정하는 주요인자로서 검은색소와 단백질의 복합체로서 주로 인체의 피부에 존재하며 자외선에 대응하여 피부를 보호하고 아민, 유리기, 금속이온 등과 같은 세포독성물질을 제거하는 역할을 수행하고 있다. 멜라닌은 일반적으로 알카리에 난용성인 흑색 멜라닌과 가용성 적색 및 황색 멜라닌으로 구분된다.

이와 같은 멜라닌 세포가 인체에 미치는 유익한 효과에도 불구하고, 자외선, 특히 자외선의 95%에 해당하는 UV-A에 의해 생성되는 멜라닌 세포는 피부에 색소침착과 피부노화를 일으켜 주름, 탄력 상실, 피부흑화 등의 피부 증상이 나타난다. 이를 방지하기 위해 멜라노사이트 (melanocyte)의 성장을 억제하거나 티로시나제 (tyrosinase)의 활성을 억제하여 멜라닌의 합성을 억제함으로써, 인체의 피부에 나타나는 흑화현상 및 노화를 방지할 수 있게 된다.

본 발명에서는 이와 같은 효과를 가져오는 화장품 조성물로 연의 성분중에서도 연우주안방과 연방을 포함하는 연우주안방 가감방을 활용하였다.

연 (蓮, Nelumbo nucifera Gaertner)은 수련과의 여러해살이 수생 식물로서 연의 잎을 연잎(또는 하엽), 연의 꽃 봉우리를 연화, 연꽃의 과실 및 종자를 연자(또는 연밥), 연꽃의 열매인 연밥이 박혀 있는 송이를 연방(또는 연봉), 연의 수술을 연수, 연의 뿌리를 연근이라고 한다. 연잎의 화학성분은 로에메린 (roemerine), 누시페린 (nuciferine), 노르누시페린 (nornuciferine), 아르메파빈 (armepavine), 프로누시페린 (pronuciferine), N-노루시페린 (N-nornuciferine), 루테올린(luteolin), 아노나인 (anonaine), 아시미로빈 (asimilobine), N-메틸아시미로빈 (N-methylasimilobine), N-노라르메파빈 (N-norarmepavine), 리리니딘 (lirinidine), 쿼세틴 (quercetin), 이소쿼세틴 (isoquercitrin), 류코시아니딘 (leucocyanidin), 류코델피니딘 (leucodelphinidin), 글루코니카시드 (gluconicacid), 10-노나코사놀 (10-nonacosanol), β-시토스테롤 (β-sitosterol), 디하이드로로에메린 (dehydroroemerine), 디하이드로누시페린 (dehydronuciferine), 캠프페롤 (kaempferol), 캠프페롤-3-갈락토글루코시드 (kaempferol-3-galactoglucoside), 캠프페롤-3-디클루코시드 (kaempferol-3-diglucoside), 디하이드로아노나인(dehydroanonaine), N-메틸이소코클라우린 (N-methylisococlaurine), N-메틸코클라우린 (N-methylcoclaurine)등이 알려져 있다.

또한, 본 발명에서는 연우주안방(연화, 연근, 연자)과 연방의 미백 및 노화방지 효과를 확인하기 위하여 티로시나제 활성 억제효과, 멜라닌 생합성 저해효과, 항산화(DPPH) 라디컬 소거효과, 도파(DOPA) 산화 저해활성효과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위한 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 멜라노사이트의 성장을 억제하거나 티로시나제의 활성을 억제하여 멜라닌의 합성을 억제함으로써, 인체의 피부에 나타나는 흑화현상 및/또는 노화를 방지할 수 있는 천연재료인 연우주안방과 연방을 함유한 한방 미백 및/또는 노화방지 개선용 화장품 조성물, 및 이를 구성성분으로하여 제조된 한방 화장품을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명에 따른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 미백 및 노화방지 개선효과를 갖는 연화, 연근 및 연자로 구성된 연우주안방, 및 연방의 물 또는 에탄올 추출물을 유효성분으로 하는 한방 미백 개선용 화장품 조성물을 제공하는 것이 특징이다.

또한, 본 발명에 따른 미백 개선용 화장품 조성물에서,

상기 연우주안방 및 연방의 혼합 중량비는 연우주안방:연방=24:12이고, 상기 연우주안방의 각 성분의 혼합 중량비는 연화:연근:연자=7:8:9인 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명에 따른 한방 미백 개선용 화장품 조성물에서,

상기 연우주안방과 연방의 물 또는 에탄올 추출물은,

상기 연우주안방과 연방을 건조한 다음, 건조 중량의 10배의 정제수를 포함한 물로 80 내지 100℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 열수 추출, 또는 에탄올 용매로 60 내지 80℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 환류냉각 추출하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 최종 추출물을 수득하는 방법으로 제조되는 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명에 따른 미백 개선용 화장품 조성물을 이용하여 미백 개선용 한방 화장품이 제조되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 연우주안방과 연방 추출물을 함유하는 조성물은 멜라노사이트의 성장을 억제하거나 티로시나제의 활성을 억제하여 멜라닌 합성을 억제하고, 항산화효과를 나타내는바, 미백 개선용 및 노화방지 효능이 있는 화장품 조성물로 사용될 수 있다.

도 1은 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 물 추출물의 티로시나제 저해 활성을 나타낸 비교도면,
도 2는 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 에탄올 추출물의 티로시나제 저해 활성을 나타낸 비교도면,
도 3은 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 배합별 멜라닌 세포생존율을 나타낸 도면,
도 4는 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 멜라닌 생합성 저해효과를 나타낸 도면,
도 5는 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 물 추출물의 DPPH 라디컬 소거효과를 나타낸 도면,
도 6은 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 에탄올 추출물의 DPPH 라디컬 소거효과를 나타낸 도면,
도 7은 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 물 추출물의 DOPA 산화 저해활성을 나타낸 도면,
도 8은 연우주안방 및 연우주안방 가감방의 에탄올 추출물의 DOPA 산화 저해활성을 나타낸 도면.

이하, 본 발명의 추출물을 수득하는 방법을 상세하게 설명한다.
본 발명에서 사용되는 용어 연우주안방은, 한자로 蓮藕駐顔方로 표기되며, 연의 성분중에서 연화, 연근 및 연자 3개의 구성성분으로 된 것을 말한다.

본 발명은 연의 성분중에서 연화, 연근 및 연자로 구성된 연우주안방과 연방을 활용하여 제조하는 것으로, 본 발명의 추출물은 연우주안방과 연방을 건조하여 그 중량의 약 10배의 정제수를 포함한 물로 80 내지 100℃, 바람직하게는 95℃의 추출 온도에서 약 3시간 동안 3회 반복하여 열수 추출, 또는 에탄올 용매로 60 내지 80℃, 바람직하게는 70℃의 추출 온도에서 약 3시간 동안 3회 반복하여 환류냉각 추출하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 본 발명의 연우주안방과 연방 추출물을 수득한다.

상기 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 1 내지 10 중량%, 바람직하게는 1 내지 5 중량%, 더욱 바람직하게는 3~4 중량%로 함유하는 것을 특징으로 한다.

상기 추출물은 멜라닌 생성 억제효과, 티로시나제 활성 억제효과, 멜라닌 합성억제효과, 항산화 효과를 확인한 결과 뛰어난 효과를 나타내었으며, 또한 피부에 적용시 안전성에도 문제가 없음을 확인할 수 있었다.

본 발명은 상기의 제조방법으로 수득한 연우주안방 가감방[연우주안방(연화, 연근, 연자)과 연방 추출물]을 유효성분으로 함유하는 미백 개선용 피부외용 약학조성물을 제공한다.

본 발명의 미백 개선용 피부외용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 1 내지 3 중량%로 포함한다.

본 발명의 추출물을 포함하는 피부외용 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학 조성물을 제공한다. 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 연우주안방 및 연방 추출물을 함유하는 미백 개선용 화장품 조성물은 피부에 적용할 수 있는 피부 외용제 제형으로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 형태의 약학조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세하게 설명한다. 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것이 아님은 물론이다.

실시예1 . 연우주안방 추출물의 제조

1-1. 연우주안방 물 추출물 제조

연우주안방인 연화, 연근, 연자를 중량비 7:8:9의 비율로 혼합한 100g을 정칭하여 그 10배의 정제수인 1,000ml를 가한 다음 냉각기를 부착하여 95℃ 온도에서 3시간 동안 가열하고 3회 반복하여 추출한 후, 여과지로 감압여과한 여과액을 회전식 감압농축기로 감압농축하여 동결건조기를 이용 건조하여 농축량 14.21g ( 수율 14.2)를 얻었다.

1-2. 연우주안방 에탄올 추출물 제조

연우주안방인 연화, 연근, 연자를 중량비 7:8:9의 비율로 혼합한 100g을 정칭하여 그 10배의 에탄올 1,000ml를 가한 다음 냉각기를 부착하여 70℃ 온도에서 3시간 동안 가열하고 3회 반복하여 추출한 후, 여과지로 감압여과한 여과액을 회전식 감압농축기로 감압농축하여 동결건조기를 이용 건조하여 각각 농축량 10.08g (수율 10.1)을 얻었다.

실시예2 . 연방 추출물의 제조

1-1. 연방 물 추출물 제조

연방 100g을 정칭하여 그 10배의 정제수인 1,000ml를 가한 다음 냉각기를 부착하여 95℃ 온도에서 3시간 동안 가열하고 3회 반복하여 추출한 후, 여과지로 감압여과한 여과액을 회전식 감압농축기로 감압농축하여 동결건조기를 이용 건조하여 농축량 5.4g ( 수율 5.4)을 얻었다.

1-2. 연방 에탄올 추출물 제조

연방 100g을 정칭하여 그 10배의 에탄올 1,000ml를 가한 다음 냉각기를 부착하여 70℃ 온도에서 3시간 동안 가열하고 3회 반복하여 추출한 후, 여과지로 감압여과한 여과액을 회전식 감압농축기로 감압농축하여 동결건조기를 이용 건조하여 농축량 5.01g ( 수율 5.01)을 얻었다.

실시예3 . 연우주안방 가감방의 제조

상기에서 제조된 연우주안방 추출물과 연방의 추출물을 중량비 24:12의 비율로 혼합하여 연우주안방 가감방 물 추출물 및 연우주안방 가감방 에탄올 추출물을 제조한다.

물론, 연화, 연근, 연자, 연방을 중량비 7:8:9:12의 비율로 혼합한 후 상술한 물 추출물 제조 또는 에탄올 추출물 제조방법에 의해 추출물을 제조해도 무방하다.

실험예1 . 티로시나제 활성억제효과 측정

티로시나제 활성억제효과를 측정하기 위하여, 각각 추출물 3~4 mg에 0.1 M 인산염완충액(pH 6.8) 1.5~2 ml 넣고 완전 용해시킨 후 각각의 농도별(100, 250, 500, 1000, 2000 μg/ml) 시료로 준비하였다. 그리고, 기질로서 엘-티로신(L-tyrosin,100 unit, Sigma, U.S.A) 0.3 mg/ml 농도로 인산염완충액(pH 6.8)을 완전히 녹이고, 티로시나제(tyrosinase)는 125 unit/ml 농도로 준비하였다.

96 웰 플레이트(well plate)에 0.1 M 인산염완충액(pH 6.8) 220 μl와 시료액 20 μl 그리고 티로시나제(tyrosinase, 150 unit/ml ~ 200 unit/ml)액 20 μl를 순서대로 넣은 다음, 이 용액에 1.5 mM 티로신(tyrosin) 액 40 μl를 넣고 37℃에서 10~15분 동안 반응시킨 후 이것을 마이크로플레이트 리더(microplate reader)를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.

공시료액으로는 시료액 대신 0.1 M 인산염완충액(pH 6.8)을 넣었으며, 양성대조군은 티로시나아제 반응 억제제인 코직산(kojic acid)을 사용하였다. 또한, 비교군으로 연우주안방 추출물, 마이크로플루다이저 처리한 연우주안방 추출물도 사용하였다. 실험군은 연우주안방 가감방이다.

실험결과, 도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이 대조군으로 사용된 코직산의 물 추출물 및 에탄올추출물은 농도가 증가함에 따라 티로시나제 활성을 유의하게 억제하였다. 코직산의 농도는 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 급격하게 억제되었음을 알 수 있다.

도면에서, 연우M/F는 마이크로플루다이저(M/F) 처리한 연우주안방 추출물을 나타내며, 연우가감방은 연우주안방 가감방 추출물을 나타내는 용어이다.

비교군1인 연우주안방 물 추출물은 도 1에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 100%에서 대략 92%로 감소된 바 활성 억제비율이 낮다는 것을 알 수 있다.

비교군1인 연우주안방 에탄올 추출물은 도 2에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 107%에서 대략 90%로 감소된 바 마찬가지로 활성 억제비율이 낮다는 것을 알 수 있다.

비교군2인 마이크로플루다이저(M/F) 처리한 연우주안방 물 추출물은 도 1에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 110%에서 대략 93%로 감소된 바 활성 억제비율이 낮다는 것을 알 수 있다.

비교군2인 마이크로플루다이저 처리한 연우주안방 에탄올 추출물은 도 2에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 110%에서 대략 94%로 감소된 바 마찬가지로 활성 억제비율이 낮다는 것을 알 수 있다.

실험군인 연우주안방 가감방 물 추출물은 도 1에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 105%에서 대략 92%로 감소된 바 활성 억제비율이 낮다는 것을 알 수 있다.

실험군인 연우주안방 가감방 에탄올 추출물은 도 2에 도시된 바와 같이, 농도가 100μg/ml, 250μg/ml, 500μg/ml, 1000μg/ml, 2000μg/ml로 증가함에 따라 티로시나제 활성이 93%에서 대략 52% 까지 감소된 바 활성이 유의하게 억제되었음을 알 수 있다.

따라서, 연화, 연근, 연자, 연방이 7:8:9:12로 혼합된 연우주안방 가감방의 에탄올 추출물이 티로시나제 활성저해효과가 가장 우수하였다.

실험예2 . 멜라닌 생합성 저해 효과 측정

2-1. 세포 배양

실험에 사용된 세포주는 뮤린 멜라노마(murine melanoma, B-16 F1) 또는 이와 유사한 세포를 적량의 FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6-웰 플레이트(well plate)에 웰(well)당 1×10⁵ 개로 접종한 후 5% CO₂ _,37℃하에서 세포가 웰 바닥에 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다.

2-2. 멜라닌 생성 저해 실험 및 세포생존율 측정

배양 후 배지를 제거하고 시료가 적당 농도로 희석된 배지로 교체한 후 5% CO_2,37℃하에서 일정시간 배양하였으며, 시료의 농도범위는 크리스탈 바이올렛 어세이(crystal violet assay)를 이용한 독성실험을 통하여 결정하였다.

배지를 제거한 세포를 PBS(phosphated buffer saline)로 세척하고, 이것을 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였으며, 회수된 세포는 헤마토사이토미터(hematocytometer)를 이용하여 세포수를 측정한 후 5,000~10,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상등액을 제거하여 펠릿(pellet)을 얻었다.

이 세포 펠릿은 60℃에서 건조한 후 10 % DMSO가 함유된 1 M 수산화나트륨액 100 μl 또는 적량의 세포분쇄버퍼(cell lysis buffer)를 넣어 60℃ 항온조에서 세포내 멜라닌을 얻었다.

이 액을 가지고 마이크로플레이트 리더(microplate reader)로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 일정수 당 멜라닌양을 구하였다.

실험결과, 도 3에 도시된 바와 같이, 0.1mg/ml 농도 이하에서는 비교군1,2 및 실험군에서 세포생존율에 대한 유의성이 없었으며, 실험군인 연우주안방 가감방 에탄올 추출물은 농도 1mg/ml에서 세포생존율이 대략 55%로 낮아졌다는 것을 알 수 있다.

또한, 도 4에 도시된 바와 같이 연우주안방 가감방의 농도가 높을수록 멜라닌 생합성 저해효과가 높았다. 이는 연방 및 연우주안방 추출물에 대략 0.4% 함유되어 있는 쿼세틴 갈락토파이라노제(quercetin-3-O-β-D-galactopyranose)의 TRP-1,2 유전자발현 억제활성으로 인한 것이다.

도 4에 사용된 용어인 'con'은 대조군을 나타내는 용어이고, '가감'은 연우주안방 가감방을 나타내는 용어이다.

실험예3 . 항산화( DPPH ) 라디칼 소거 효과 측정

대조군(control)에는 추출물의 용매를 실험군에는 실험재료를 농도별(10, 25, 50, 100, 250 μg/ml)로 100 μl씩 넣은 후 대조군(control)과 실험군에 각각 60 μM DPPH를 첨가하고, 블랭크(blank)에는 60 μM DPPH대신 에탄올을 넣고 약 3초 정도 흔들어 섞은 후, 실온에서 30분간 방치하고 540 nm에서 마이크로플레이트 리더(microplate reader)로 흡광도를 측정하였다.

대조군으로 비타민C 추출물, 비교군으로 연우주안방 추출물, 마이크로플루다이저 처리한 연우주안방 추출물을 사용하였다.

실험결과, 도 5 및 도 6에 도시된 바와 같이 모든 시료가 농도가 높아질 수록 항산화 라디컬 소거효과가 높아졌다.

실험예4 . 도파 ( DOPA ) 산화 저해활성 효과 측정

타이로신(Tyrosine)이 타이로시나제(Tyrosinase)에 의해 만들어진 DOPA가 도파퀴논(DOPA quinone), 도파크롬(DOPA chrome)으로 산화되는 과정을 억제하는 효과를 측정하였다.

실험결과, 도 7 및 도 8에 도시된 바와 같이 연우주안방 가감방의 에탄올 추출물의 저해활성효과가 농도가 높아짐에 따라 높아졌다.

본 발명의 연우주안방 빛 연방 추출물을 포함하는 조성물은 피부의 미백 및/또는 노화방지 효과를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨, 에센스 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

아래 표1~5에서, 표의 A,B,C,D는 순차적으로 대조군, 미백크림(알부틴 함유), 연우주안방 가감방 1% 함유, 연우주안방 가감방 3% 함유된 제품을 나타내는 것이다.

연우주안방 가감방은 연화, 연근, 연자, 연방이 7:8:9:12 중량비로 복합처분된 추출물이다.

<스킨제조>

스킨제조는 아래 [표l]에서와 같이, 보존제 및 보습제를 수상 용해부에 넣고 45~50℃ 온도로 가열 용해하여 미리 용해시켜둔 후 가용화상을 수상 용해부에 투입하여 에지믹서(Agi Mixer)를 이용하여 천천히 가용화 한 후 나머지 첨가물을 넣고 혼합교반하여 냉각한다.

INCI 명	용도	함량
INCI 명	용도	A	B	C	D
Water	Solvent	To 100	To 100	To 100	To 100
Disodium EDTA	Chelating Agent	0.02	0.02	0.02	0.02
Allantoin	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Methylparaben	Preservative	0.10	0.10	0.10	0.15
Butylene Glycol	Humectant	1.00	1.00	1.00	1.00
Sodium Hyaluronate	Humectant	1.00	1.00	1.00	1.00
Panthenol	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
Alcohol Denat.	Solvent	1.00	1.00	1.00	1.00
Portulaca Oleracea Extract	Skin-Conditioning Agent	0.30	0.30	0.30	0.30
Phyllostachis Bambusoides Juice	Skin-Conditioning Agent	0.20	0.20	0.20	0.20
Betula Platyphylla Japonica Juice	Skin-Conditioning Agent	0.30	0.30	0.30	0.30
Chamaecyparis Obtusa Water	Skin-Conditioning Agent	0.20	0.20	0.20	0.20
Trehalose	Humectant	0.50	0.50	0.50	0.50
Skin Whitening Agent
PEG-60 Hydrogenated Castor Oil	Surfactant	0.20	0.20	0.20	0.20

<로션제조>

로션제조는 아래 [표2]에서와 같이, 유화제, 오일, 항산화제, 보존제를 유상 용해부에서 80~82℃로 가열 용해하여, 일부 첨가물과 용제를 78~80℃로 가열 용해되어진 제조부에 투입하여 호모믹서(HOMO MIXER)를 이용하여 유화 후 40℃까지 냉각, 나머지 첨가제를 넣고 혼합 교반, 냉각한다.

INCI명	용도	함량
INCI명	용도	A	B	C	D
Disodium EDTA	Chelating Agent	0.02	0.02	0.02	0.02
Allantoin	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Methylparaben	Preservative	0.20	0.20	0.20	0.20
Butylene Glycol	Humectant	5.00	5.00	5.00	5.00
Water & Butylene Glycol & Beta-Glucan	Skin-Conditioning Agent	2.00	2.00	2.00	2.00
Polyglyceryl-10 Stearate	Surfactant	0.50	0.50	0.50	0.50
Glycerine	Humectant	5.00	5.00	5.00	5.00
Xanthan Gum	Viscosity Increasing Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Polyacrylate-13 & Polyisobutene & Polysorbate-20	Viscosity Increasing Agent	0.30	0.30	0.30	0.30
Sodium Polyacrylate	Viscosity Increasing Agent	0.20	0.20	0.20	0.20
Cetearyl Alcohol	Emulsion Stabilizer	1.20	1.20	1.20	1.20
Glyceryl Stearate & PEG-100 Stearate	Surfactant	0.20	0.20	0.20	0.20
Stearic Acid	Emulsion Stabilizer	0.70	0.70	0.70	0.70
Caprylic/Capric Triglyceride	Skin-Conditioning Agent	8.00	8.00	8.00	8.00
Camellia Japonica Seed Oil	Skin-Conditioning Agent	1.00	1.00	1.00	1.00
Dimethicone	Skin-Conditioning Agent	0.30	0.30	0.30	0.30
Tocopheryl Acetate	Antioxidant	0.10	0.10	0.10	0.10
Propylparaben	Preservative	0.10	0.10	0.10	0.10
Butyrospermum Parkii	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
Phenoxyethanol	Preservative	0.50	0.50	0.50	0.50
Butylene Glycol & Water & Camellia Japonica Flower Extract	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
	Skin Whitening Agent
Polyquaternium-51	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
Superoxide Dismutase	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Water & Butylene Glycol & Taraxacum Officinale (Dandelion) Extract & Perilla Ocymoides Leaf Extract	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
Water & Butylene Glycol & Dextran & Palmitoyl Tripeptide 8	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
WATER	Solvent	To 100	To 100	To 100	To 100

<크림제조>

크림제조는 아래 [표3]에서와 같이, 유화제, 오일, 항산화제, 보존제를 유상 용해부에서 80~82℃로 가열 용해하여, 일부 첨가물과 용제를 78~80℃로 가열 용해되어진 제조부에 투입하여 호모믹서(HOMO MIXER)를 이용하여 유화 후 40℃까지 냉각, 나머지 첨가제를 넣고 혼합 교반, 냉각한다.

INCI 명	용도	함량
INCI 명	용도	A	B	C	D
Water	Solvent	To 100	To 100	To 100	To 100
Hydrogenated Polydecene	Skin-Conditioning Agent	7.00	7.00	7.00	7.00
Glycerin	Humectant	7.00	7.00	7.00	7.00
Sodium Hyaluronate	Skin-Conditioning Agent	5.00	5.00	5.00	5.00
Cetearyl Alcohol	Emulsion Stabilizer	4.00	4.00	4.00	4.00
Propanediol	Solvent	4.00	4.00	4.00	4.00
Glyceryl Stearate	Surfactant	3.00	3.00	3.00	3.00
Hydrogenated Vegetable Oil	Skin-Conditioning Agent	3.00	3.00	3.00	3.00
Limnanthes Alba (Meadowfoam) Seed Oil	Skin-Conditioning Agent	3.00	3.00	3.00	3.00
Cetyl Ethylhexanoate	Skin-Conditioning Agent	2.50	2.50	2.50	2.50
Cyclopentasiloxane	Skin-Conditioning Agent	2.00	2.00	2.00	2.00
Butyrospermum Parkii (Shea Butter)	Skin-Conditioning Agent	2.00	2.00	2.00	2.00
Glycol Stearate SE	Surfactant	1.50	1.50	1.50	1.50
Beeswax	Emulsion Stabilizer	1.00	1.00	1.00	1.00
Macadamia Ternifolia Seed Oil	Skin-Conditioning Agent	1.00	1.00	1.00	1.00
Dimethicone	Skin-Conditioning Agent	1.00	1.00	1.00	1.00
Cyclohexasiloxane	Skin-Conditioning Agent	1.00	1.00	1.00	1.00
Stearic Acid	Surfactant	0.30	0.30	0.30	0.30
PEG-100 Stearate	Surfactant	0.60	0.60	0.60	0.60
Hydrogenated Lecithin	Skin-Conditioning Agent	0.50	0.50	0.50	0.50
Oil Soluble Licorice(Glycyrrhiza) Extract	Skin-Conditioning Agent	-	0.05	-	-
Skin Whitening Agent
Dimethicone/Vinyl Dimethicone Crosspolymer	Viscosity Increasing Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Polyacrylate-13	Film Former	0.30	0.30	0.30	0.30
Tocopheryl Acetate	Antioxidant	0.20	0.20	0.20	0.20
Methylparaben	Preservative	0.20	0.20	0.20	0.20
Titanium Dioxide	Colorant	0.20	0.20	0.20	0.20
Propylparaben	Preservative	0.15	0.15	0.15	0.15
Chlorphenesin	Preservative	0.15	0.15	0.15	0.15
Polyisobutene	Film Former	0.12	0.12	0.12	0.12
Butylene Glycol	Humectant	0.15	0.15	0.15	0.15
Polysorbate20	Surfactant	0.01	0.01	0.01	0.01
Disodium EDTA	Chelating Agent	0.03	0.03	0.03	0.03
Ascorbyl Tetraisopalmitate	Skin-Conditioning Agent	0.01	0.01	0.01	0.01
Glyceryl Acrylate/Acrylic Acid Copolymer	Skin-Conditioning Agent	0.01	0.01	0.01	0.01
Propylene Glycol	Humectant	0.01	0.01	0.01	0.01
PVM/MACopolymer	Binder	0.01	0.01	0.01	0.01
Pueraria Lobata Root Extract/Morus Alba Fruit Extract/Diospyros Kaki Leaf Extract/Cinnamomum Cassia Bark Extract/Artemisia Princeps Leaf Extract/ChrysanthellumIndicum Extract/Camellia Sinensis Leaf Extrac	Skin-Conditioning Agent	0.1	0.1	0.1	0.1
Niacinamide	Skin-Conditioning Agent	0.1	0.1	0.1	0.1

<에센스제조>

에센스제조는 아래 [표4]에서와 같이, 유화제, 오일, 항산화제, 보존제를 유상 용해부에서 80~82℃로 가열 용해하여, 일부 첨가물과 용제를 78~80℃로 가열 용해되어진 제조부에 투입하여 호모믹서(HOMO MIXER)를 이용하여 유화 후 40℃까지 냉각, 나머지 첨가제를 넣고 혼합 교반, 냉각한다.

INCI 명	용도	함량
INCI 명	용도	A	B	C	D
Water	Solvent	To 100	To 100	To 100	To 100
Glycerin	Skin-Conditioning Agent	9.00	9.00	9.00	9.00
Butylene Glycol	Humectant	9.00	9.00	9.00	9.00
Cyclopentasiloxane	Skin-conditioning agent	8.00	8.00	8.00	8.00
Glycereth-26	Emulsion Stabilizer	7.00	7.00	7.00	7.00
Dimethicone/Vinyl Dimethicone Crosspolymer	Solvent	6.00	6.00	6.00	6.00
Dimethicone	Surfactant	4.00	4.00	4.00	4.00
Cetyl Ethylhexanoate	Skin-Conditioning Agent	3.00	3.00	3.00	3.00
Polyglutamic Acid	Skin-Conditioning Agent	3.00	3.00	3.00	3.00
Cyclohexasiloxane	Skin-Conditioning Agent	2.00	2.00	2.00	2.00
Sodium Hyaluronate	Skin-Conditioning Agent	2.00	2.00	2.00	2.00
PEG-240/HDICopolymer Bis-Decyltetradeceth-20Ether	Surfactant	1.00	1.00	1.00	1.00
Propylparaben	Emulsion Stabilizer	0.15	0.15	0.15	0.15
Methylparaben	Skin-Conditioning Agent	0.15	0.15	0.15	0.15
Chlorphenesin	Skin-Conditioning Agent	0.15	0.15	0.15	0.15
Bisabolol	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Ascorbyl Tetraisopalmitate	Surfactant	0.01	0.01	0.01	0.01
SodiumAcrylate/ SodiumAcryloyldimethylTaurateCopolymer	Surfactant	0.30	0.30	0.30	0.30
Isohexadecane	Skin-Conditioning Agent	0.20	0.20	0.20	0.20
Polysorbate 80	Skin-Conditioning Agent	0.10	0.10	0.10	0.10
Skin Whitening Agent
Pueraria Lobata Root Extract/Morus Alba Fruit Extract/Diospyros Kaki Leaf Extract/Cinnamomum Cassia Bark Extract/Artemisia Princeps Leaf Extract/ChrysanthellumIndicum Extract/Camellia Sinensis Leaf Extract	Skin-Conditioning Agent	0.1	0.1	0.1	0.1

비록 본 발명이 상기에서 언급한 바람직한 실시예와 관련하여 설명되었지만, 본 발명의 요지와 범위로부터 벗어남이 없이 다른 다양한 수정이나 변형이 가능할 것이다. 따라서, 첨부된 청구범위는 본 발명의 진정한 범위 내에 속하는 그러한 수정 및 변형을 포함함은 물론이다.

Claims

연화, 연근 및 연자로 구성된 연우주안방, 및 연방의 물 또는 에탄올 추출물을 유효성분으로 하는 미백 개선용 화장품 조성물.
제 1 항에 있어서,
상기 연우주안방 및 연방의 혼합 중량비는 연우주안방:연방=24:12이고, 상기 연우주안방의 각 성분의 혼합 중량비는 연화:연근:연자=7:8:9인 것을 특징으로 하는 미백 개선용 화장품 조성물.
제 1 항에 있어서,
상기 연우주안방과 연방의 물 또는 에탄올 추출물은,
상기 연우주안방과 연방을 건조한 다음, 건조 중량의 10배의 정제수를 포함한 물로 80 내지 100℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 열수 추출, 또는 에탄올 용매로 60 내지 80℃의 추출 온도에서 3시간 동안 3회 반복하여 환류냉각 추출하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 최종 추출물을 수득하는 방법으로 제조되는 것을 특징으로 하는 미백 개선용 화장품 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 미백 개선용 화장품 조성물을 이용하여 제조되는 미백 개선용 한방 화장품.