WO2007125644A1

WO2007125644A1 - 脂質吸収阻害剤

Info

Publication number: WO2007125644A1
Application number: PCT/JP2007/000378
Authority: WO
Inventors: Ayumu Nozawa; Makoto Kobayashi; Tomonori Unno
Original assignee: Ito En, Ltd.
Priority date: 2006-04-26
Filing date: 2007-04-09
Publication date: 2007-11-08
Also published as: EP2020231A1; AU2007245223B2; EP2020231A4; JPWO2007125644A1; US20090156662A1; JP4705983B2; AU2007245223A1; AU2007245223C1; CA2650403A1

Abstract

天然物由来で安全性の高く、継続摂取可能な脂質吸収阻害組成物及び飲食物を提供する。以下の各成分（Ａ）テアフラビンモノガレート、（Ｂ）テアフラビン、（Ｃ）テアフラビンジガレート及び（Ｄ）ポリフェノールを含有することを特徴とする脂質吸収阻害組成物であって、これらの成分が以下の条件を満たす脂質吸収阻害組成物や飲食物を提供する。（１）含有重量比率［（Ａ）／（Ｂ）］＝０．４～１００％（２）（Ａ）の重量＞（Ｃ）の重量（３）含有重量比［（Ａ）／（Ｄ）］＝０．０１～１．０かかる脂質吸収阻害組成物や飲食物は、動脈硬化や虚血性心疾患（狭心症、心筋梗塞など）等の各種疾病の予防や治療に用いることができる。

Description

明細書

脂質吸収阻害剤

技術分野

[0001 ] 本発明は、亍アフラビン類を有効成分とする脂質吸収阻害組成物、具体的には亍アフラビン類を有効成分とするミセル形成阻害組成物、さらに具体的にはミセル中での脂質不溶化組成物や、ミセルへの溶解■取り込み阻害組成物や、ミセルからの脂質脱離促進組成物や、ミセル膜破壊組成物や、脂質沈澱形成促進組成物に関する。

背景技術

[0002] 脂質は、細胞膜ゃステロイドホルモン等の材料として用いられ、また血管保護の役割を果たすことから体内で重要な働きをしており、生体の構成に欠くことができない。し力、し、現代日本の飽食化により脂質を過剰摂取する機会が増加しており、これに伴い脂質過剰摂取による各種疾病によるリスクに関心が集まっている。脂質過剰摂取や脂質代謝障害等が生じると、動脈硬化や虚血性心疾患（狭心症、心筋梗塞など）等の各種疾病を引き起こす可能性が高くなる。また、脂質過剰摂取により医療費が増大することから大きな社会問題でもある。

[0003] 脂質過剰摂取や脂質代謝障害の予防には、摂取脂質量の制限や適度な運動等が有効であるとされている。しかし、多忙な現代社会においては時間確保が難しく、また食事制限や運動には苦痛を伴うこともあり、脂質の摂取を簡便にコントロールする手段が望まれている。より具体的には、脂質が体内に摂取されたものの体内に吸収されずに排出される作用を有する、安全でかつ簡便に摂取できる脂質吸収阻害組成物が切望されている。

[0004] 中性脂肪は、そのままでは腸上皮細胞に吸収され、腸管内で塍リパーゼにより脂肪酸と 2 _モノグリセリドとに分解され、さらにミセル（m i ce l l e) 形成してからはじめて腸上皮細胞に吸収される。吸収された脂肪酸と 2 _モノグリセリドは、腸上皮細胞中でエステル化により再度結合して、カイロミク口ンに取り込まれリンパ管を経て血中に放出される。

[0005] ミセル（micel le) とは、水に脂肪を分散すると親油性部分を内部として親水性部分を水との界面とすることにより複数の脂肪が集まって形成された球状構造をいう。脂肪は、親水性部分と親油性部分との両方を有することからミセルを形成する性質を有している。生体内では、胆汁酸と脂質とが接触することにより胆汁酸ミセルが形成される。形成されたミセルに脂質が溶解することで、脂質がミセル内に溶解し、かかる脂質を包含したミセルが腸上皮細胞から体内に吸収される。

[0006] これまで中性脂肪吸収抑制剤として、様々な由来の塍リパーゼ活性阻害剤が開発されており、例えばケール由来のリパーゼ阻害剤（特許 368909 9) や、ローズマリー由来のリパーゼ阻害剤（特許 3549997) や、柿果実酵母発酵物を有効成分とするリパーゼ阻害剤（特許 3404235) や、ガロカテキンガレート（GCG) や力テキンガレート（CG)を有効成分とするリパーゼ阻害剤（特開 2005— 247747) が知られている。しかし、これらは一旦ミセル形成したものについては効果は望めなく、また、長鎖脂肪酸分解阻害剤としてのミセル形成阻害組成物についてはほとんど報告がなかった。さらに天然由来で安全なミセル形成阻害組成物、特に紅茶抽出成分であるテアフラビン類を有効成分とする脂質吸収阻害組成物、殊にミセル形成を阻害することによる脂質吸収阻害組成物についてはこれまで知られていなかった。

[0007] また、テアフラビン類と脂質との関連については、例えばテアフラビンの胆汁酸生成促進作用により血中コレステロール濃度を制御することや（特開 2001 -302529) 、亍アフラビン類を含有するコレステロール値を低下させる組成物や（特開 2004_ 1 55784) 、亍アフラビン類が血中の総コレステロール（TC) 値や低比重リポタンパク一コレステロール（ LD L-C) 値ゃトリグリセリド（TG) 値を低下させる効果を有すること (特表 2005— 523242) がすでに知られている。さらに、茶由来のフラバン一 3—オールの 2量体を含むリパーゼ阻害剤を含むリパーゼ阻害剤 (WO 2006/0041 1 4) がすでに知られている。しカヽし、特定割合に規定したテアフラビン類を含有する組成物や飲食品が優れたミセルへの脂質溶解阻害作用を有することや、かかるミセル形成阻害組成物や飲食品が腸上皮細胞に吸収されずに排出促進することはこれまで知られていなかった。特に、テアフラビン類の中でもテアフラビンモノガレートが脂質吸収阻害剤作用に優れており、テアフラビンモノガレートを総ポリフエノール量に対して特定量に規定すると、緑茶抽出物と比較して極めて優れた効果を示すこともこれまで知られていなかった。

[0008] 特許文献 1 ：：特許 3689099

特許文献 2：：特許 3549997

特許文献 3：：特許 3404235

特許文献 4：：特開 2005— 247 7 47

特許文献 5：：特開 2001—302 5 29

特許文献 6：：特開 2004 _ 1 55 7 84

特許文献 7：：特表 2005— 523 2 42

特許文献 8：： WO 2006/004 1 1 4

発明が解決しょうとする課題

[0009] 本発明の課題は、紅茶由来で安全であるテアフラビン類を有効成分とする脂質吸収阻害組成物や、ミセル形成阻害組成物や、該組成物の効果を有する飲食品を提供することにある。

課題を解決するための手段

[0010] 本発明者らは、脂質吸収阻害組成物を有する各種天然由来成分について銳意研究したところ、紅茶成分であるテアフラビン類が優れたミセル形成阻害作用を有することを見出した。また、（1 ) 亍アフラビン類総量に対する亍アフラビンモノガレートとの割合（亍アフラビンモノガレート亍アフラビン）と、（2) 亍アフラビンモノガレートと亍アフラビンジガレートとの割合（亍アフラビンモノガレート>亍アフラビンジガレート）と、（3) ポリフエノール総量に対するテアフラビンモノガレー卜との割合（テアフラビンモノガレートポリフエノール）とを規定することにより優れた脂質吸収阻害組成物や飲食物が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、

1. 以下の各成分

(A) 亍アフラビンモノガレート、

(B) 亍アフラビン、

(C) 亍アフラビンジガレート及び

(D) ポリフヱノール

を含有することを特徴とする脂質吸収阻害組成物であって、これらの成分が以下の条件を満たす脂質吸収阻害組成物

( 1 ) 含有重量比率 [ (A) / (B) ] =0. 4〜 1 00%

(2) (A) の重量 > (C) の重量

(3) 含有重量比 [ (A) / (D) ] =0. 01 -1. 0

2. ェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレー卜のいずれか又はこれらの組合せをさらに含有する上記 1記載の脂質吸収阻害組成物、

3. ミセル形成阻害することを特徴とする上記 1又は 2に記載の脂質溶解阻害組成物、

4. 以下の各成分

(A) テアフラビンモノガレート、

(B) テアフラビン、

(C) 亍アフラビンジガレート及び

(D) ポリフヱノール

を含有することを特徴とする飲食品であって、これらの成分が以下の条件を満たす飲食 pm、

( 1 ) 含有重量比率 [ (A) / (B) ] =0. 4〜 1 00%

(2) (A) の重量 > (C) の重量

(3) 含有重量比 [ (A) / (D) ] =0. 01〜1. 0 5. ェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレー卜のいずれか又はこれらの組合せをさらに含有する上記 4記載の飲食品、

6. ミセル形成阻害することを特徴とする上記 3又は 4に記載の飲食品に関する。

図面の簡単な説明

[図 1]亍アフラビン類によるミセル内コレステロール濃度低下作用を調べた結果を示す図である。

[図 2]ジガレート型テアフラビンによるミセル内コレステロール濃度低下作用を調べた結果を示す図である。

[図 3]テアフラビン類、緑茶抽出物（テアフラン 90S、伊藤園社製）及びェピガロカテキンガレー卜のミセル内コレステロール濃度低下作用を調べた結果を示す図である。

[図 4]テアフラビン類、緑茶抽出物（テアフラン 90S、伊藤園社製）、ェピガロカテキンガレート及び熱異性化カテキンの胆汁酸濃度に対する影響を調ベた結果を示す図である。

[図 5]ジガレート型亍アフラビン及びカ亍キン類（EGEG, ECG, EGC G + ECG) によるミセル内コレステロール濃度低下作用を調べた結果を示す図である。

[図 6]各種紅茶抽出物サンプルのミセル形成阻害効果及びその成分比率を調べた結果を示す図である。

[図 7]実施例 6において使用した緑茶抽出物及び紅茶抽出物の亍アフラビン類の組成を示す図である。

[図 8]実施例 6において使用した緑茶抽出物及び紅茶抽出物の遊離型カ亍キン類とガレート型カ亍キン類の組成を示す図である。

[図 9]紅茶抽出物又は緑茶抽出物の添加量とミセル内のコレステロール脱離能との関係を示す図である。

[図 10]総ポリフエノール量に対するテアフラビンモノガレートの含有比率（M G/Tota I polyphenol) とミセル内残存コレステロールの相関を示す図である発明を実施するための最良の形態

[0013] 本発明の脂質吸収阻害組成物は、以下の各成分

(A) 亍アフラビンモノガレート、

(B) 亍アフラビン、

(C) 亍アフラビンジガレート及び

(D) ポリフヱノール

( 1 ) 含有重量比率 [ (A) / (B) ] =0. 4-1 00%

(2) (A) の重量 > (C) の重量

(3) 含有重量比 [ (A) / (D) ] =0. 01 -1. 0

の要件を全て満たすものをいう。ェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレートもミセル形成阻害効果を有することから、前記脂質吸収阻害組成物にェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレー卜のいずれか又は両方を適宜添加すると、より効果的な脂質吸収阻害効果が得られる。また上記 (1 ) 〜（3) の要件を全て満たす飲食物を単独で使用してもよいが、ェピガロカ亍キンガレート及びェピカ亍キンガレー卜のいずれか又は両方を適宜添加してもよい。本発明の脂質吸収阻害組成物の形態は特に制限されず、例えば、粉末状、顆粒状、液状、錠剤状、液状、乳液状、ペースト状等いずれの形態であってもよい。製剤には、公知材料を適宜配合して公知方法で調製することができる。

[0014] 本発明の脂質吸収阻害組成物は、上記（1 ) 〜（3) の要件を満たすものであって、かつミセル形成阻害効果を有する点で特徴がある。ここでミセル形成阻害効果とは、脂質のミセル中への不溶化作用や、脂質のミセルへの溶解■取込阻害作用や、脂質のミセルからの脱離促進作用や、ミセル膜破壊作用や、脂質の沈殿形成促進作用を有する組成物などを意味する。上記作用は、単独作用でも複数の作用を組合せて効果を示すものであってもよい。 [0015] 本発明の脂質吸収阻害組成物は、ポリフエノールの含有重量比が 0 . 8 ~ 1 . 0、好ましくは 0 . 8 5 ~ 1 . 0、さらに好ましくは 0 . 9 ~ 1 . 0であることより効果がより期待できる。また、本発明における効果を示さない遊離型カ亍キン（ェピガロカ亍キン、ガロカ亍キン、ェピカ亍キン及び（+ ) カ亍キン）の含有重量比が 0〜0 . 1 2、好ましくは 0〜0 . 0 5、さらに好ましくは 0〜0 . 0 1であると、本発明品の効果がより期待できる。

[0016] 本発明の脂質吸収阻害組成物及び飲食品は、（A ) 亍アフラビンに 1個のガレート体が結合した亍アフラビンモノガレー卜と、（B ) 亍アフラビンにガレート体が結合していない亍アフラビンと、（C ) 亍アフラビンに 2つのガレート体が結合した亍アフラビンジガレートとを含有する。上記亍アフラビン類の由来は特に限定されず、天然由来でも化学合成や生合成されたものでもよい。安全性や入手の容易性などから考えると、天然由来、特に半発酵茶や発酵茶、とりわけウーロン茶や紅茶を由来とするものであることが好ましい。半発酵茶や発酵茶を由来とする場合、その茶種はいかなるものであつてもよいが、例えば紅茶であれば、ダージリン、アツサム、二ルギ、シツキ厶、ゥバ、ヌワラエリア、ディンブラ、ウダプセラヮ、キャンディ、ルフナ、キーモン、ラプサンスーチョン、雲南種、ケニア種、ジャワ種、スマトラ種、ネパール種、トルコ種、バングラデイシュ種などを用いることができる。また、天然由来、化学合成又は生合成の方法は特に限定されるものでなく、公知の方法を用いることができる。

[001 7] 本発明の脂質吸収阻害組成物及び飲食品は、さらにポリフエノールを含有する。本発明においてポリフエノールとは、カ亍キン類、アントシァニン、フラボン、イソフラボン、フラバン、フラバノン等のフラボノイド類や、クロロゲン酸等のフエノール類や、エラグ酸や、リグナンや、クルクミンや、クマリン等の通常ポリフエノールに分類されるものであれば特に限定されないが、亍アフラビン類が紅茶由来であることからフラボノィド類が好ましく、カ亍キン類が特に好ましい。後述のように、ェピガロカテキンガレート（E G C G )及びェピカテキンガレート（ E C G )が亍アフラビン類とは別に脂質吸収阻害作用を示すことや、ガロカテキンガレート（G C G )ゃカテキンガレート（C G )がリパーゼ阻害剤を示すことが知られていることから、カテキン類の中でもこれらの 1種又は 2種以上を適宜添加したものであることが最も好ましい。

[0018] 本発明の脂質吸収阻害組成物には、上記亍アフラビン類以外に他の成分を任意に添加してもよい。添加することができる成分としては、上記亍アフラビン類のミセル形成阻害作用の妨げにならなければ単独又は複数添加することができる。具体的には、ミネラル、植物性素材、動物性素材、機能性素材、ビタミン類、甘味料等が挙げられる。本発明において、ェピガロカ亍キンガレート及びェピカテキンガレートも限定的ではあるがミセル形成阻害作用を有することが明らかになったことから、ェピガロカテキンガレート（E G C G )やェピカテキンガレート（E C G )を添加するとさらに効果的なミセル形成阻害効果を得ることができる。

[0019] 本発明の脂質吸収阻害組成物は公知の各種リパーゼ阻害剤と併用することができることから、公知のリノーゼ阻害剤と比べてより優れた脂質吸収阻害効果を得ることができる。併用できるリパーゼ阻害剤は、上記テアフラビン類のミセル形成阻害作用の妨げにならないものであれば限定されないが、例えばガロカテキンガレート（G C G )や力テキンガレート（C G )を有効成分とするリパーゼ阻害剤が挙げられる。

[0020] 本発明の脂質吸収阻害組成物は、食品や飲料などの飲食品に添加■配合してもよい。テアフラビン類が紅茶などに含まれており、安全性に優れた物質であることを考慮すると、飲食品に添加■配合すれば本発明の脂質吸収阻害組成物の継続的摂取が容易となり好ましい。また本発明の投与対象は、本発明が脂質吸収阻害組成物効果を有するものであればよく、例えばヒトや、ゥシ，ブタ，ゥマ，ニヮトリ等の家畜や、ネコ，ィヌ，小トリ等の愛玩動物であってよい。さらに本発明の投与方法も特に限定されないが、投与が容易であることから経口投与が好ましい。

[0021 ] 本発明において、飲食品とは特に限定されるものではなく、例えば無果汁飲料、果汁入り飲料、野菜飲料、豆乳飲料、乳飲料、乳酸菌飲料、茶系飲料、炭酸飲料、コーヒー飲料、アルコール飲料、ミネラル含有飲料、ビタミン含有飲料、機能性食品素材の含有飲料等の飲料類、プリン、ヨーグルト、ァイスクリーム、ゼリー等のデザート食品類、チョコレート、キャラメル、キヤンディ等の菓子類、パン類、つゆ、たれ、ドレッシング等の調味料、スナック食品、レトルト食品及びその他のインスタント食品などを挙げることができるが、吸収性や簡便性の観点から飲料に添加することが好ましい。

[0022] また、前記飲食物には、動物に投与する飲食物も含まれる。動物に投与される飲食物は特に限定されないが、例えばぺットフードゃぺット用各種飲料などに本発明品を添加してもよい。

[0023] 本発明の脂質吸収阻害組成物を飲料に配合する場合、酸化防止剤、香料、各種エステル類、有機酸類、有機酸塩類、無機酸類、無機酸塩類、無機塩類、色素類、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、苦味調整剤、酸味料、 p H調整剤、品質安定剤等の添加剤を単独で又は併用して配合しても良い。本発明の脂質吸収阻害剤を配合した飲料を、缶、 P E T容器、紙パック、瓶などの各種容器に充填して容器詰飲料として提供してもよい。

[0024] 本発明においてテアフラビン類の添加量は特に限定されるものではなく、使用形態等により変動するが、例えばテアフラビン類を液体に溶解して使用する場合、好ましくは"！〜 200 OmgZL、より好ましくは 1 0~1 50 OmgZL、さらに好ましくは 1 0~1 00 OmgZLであることが好ましい。

実施例

[0025] 以下に本発明を実施例によってさらに具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。

[0026] 実施例 1 ：テアフラビン類のミセル内コレステロール脱離能

テアフラビン類は、ガレート体の有無及びガレート体の位置によりテアフラビン（ガレート体なし）（參）、テアフラビン一 3_モノガレート（國）、テアフラビン一3' —モノガレート（口）、テアフラビン _3， 3' —ジガレート（〇）の 4種類に分類されている。これら 4種類のテアフラビン類について、ミセル内コレステロール脱離能を調べた。

[0027] 0. 5mMのコレステロールと、 6. 6 mMのタウロコール酸ナトリウムと、 0. 6mMの卵黄由来のホスファチジル■ コリンと、 1 32mMの塩化ナトリウム (N a C I ) と、 1 5 mMのリン酸ナトリウム（N a H 2 P04 ■ 2 H 20) とからなるミセルを作成した。該ミセルを安定させるために 3 7 °Cで 24時間インキュベーションした。このミセル 3 m Iに亍アフラビン (ナガラサイエンス社製）の溶液 0. 1 m I を、ミセル 1 m Iに対してそれぞれ 0， 200〃 g， 800〃 gとなるように添加し、 37¾で1時間ィンキュベーシヨンした。その後、 220 nmのフィルター（Whatman社製）で濾過し、清澄なミセル溶液を得た。得られたミセル溶液よりコレステロールを抽出し、ガスクロマトグラフ（島津製作所社製）を用い、 5 一コレスタンを内部標準としてミセル内に残存するコレステロールの濃度を調べた。結果を図 1に示す。

[0028] この結果では、ガレートのないテアフラビンとテアフラビン _3， 3' - ジガレート（DG) は、添加量を 0. 5mMまで上げてもミセル中のコレステロール濃度に変化は見られなかった。一方、テアフラビン一 3 _モノガレート（3G) 及びテアフラビン一3' —モノガレート（3' G) では、添加量依存的にミセル内コレステロール濃度が低下し、添加量が 0. 5mMの時点ではテアフラビンゃテアフラビンジガレー卜の約 2倍もミセル内コレステロール濃度が低下した。テアフラビン類の中でもモノガレート型テアフラビンが優れたミセル形成阻害効果を有することが明らかになった。

[0029] 実施例 2 ：ジガレート型亍アフラビンのミセル内コレステロール脱離能

亍アフラビン _3， 3' —ジガレート（像）のミセル内コレステロール脱離能を調べた。亍アフラビン _3， 3' —ジガレートのミセル内コレステロ一ル脱離能は実施例 1では見られなかったので、 0〜2mmo I ZLに添加量を増やして調べた。それ以外は、実施例 1記載の方法に準じて実験した。結果を図 2に示す。 [0030] この結果では、テアフラビン一 3， 3' —ジガレートの添加量が 1 mmo I ZLまででは比較的緩やかなコレステロール低下効果を示した。さらにテアフラビン一 3， 3' —ジガレートの添加量を 2mmo I ZLまで増加させると優れたミセル形成阻害効果を示した。

[0031] 実施例 3 ：亍アフラビン類とカ亍キン類との比較

亍アフラビン類とカ亍キン類とのミセル内コレステロール阻害能を調べた。亍アフラビン類（像）には、組成が亍アフラビン 9. 1、亍アフラビンモノガレート 26. 7 (亍アフラビン一 3_モノガレート（3G) 1 2. 3及び亍アフラビン一3' —モノガレート 1 4. 4) 、亍アフラビンジガレート 1 0. 0である亍アフラビン類（フナコシ社製）を作製して使用した（表 1 ) 。純度は 89%であった。

[0032] [表 1]

(方法）

0. 5mMのコレステロール（シグマ社製）と、 6. 6mMのタウロコール酸ナトリウム（ナカライテスク社製）と、 0. 6mMの卵黄由来のホスファチジル■ コリン（シグマ社製）と、 1 32mMの塩化ナトリウム（N a C I ) (ナカライテスク社製）と、 1 5mMのリン酸ナトリウム（N a H 2 PO 4 ■ 2 H 20) (ナカライテスク社製）とからなるミセルを作成した。該ミセルを安定させるために 37 °Cで 24時間インキュベーションした。このミセル 3 m Iに亍アフラビン類（フナコシ社製）の溶液 0. 1 m I を、ミセル 1 m Iに対してそれぞれ 0， 200〃 g， 800〃 gとなるように添加し、 37 °Cで 1時間インキュベーションした（n = 3) 。その後、 220 nmのフィルター（Whatman社製）で濾過し、清澄なミセル溶液を得た。得られたミセル溶液よりコレステロールを抽出し、ガスクロマトグラフ（島津製作所社製）を用い、 5ひ一コレスタンを内部標準としてミセル内に残存するコレステロールの濃度を調べた。

[0034] また、テアフラビン類にかえてカテキン含有緑茶抽出物（テアフラン 90 S、株式会社伊藤園製）（國）ゃェピガロカテキンガレート（EGCG) ( 和光純薬工業社製）（▲) を使用して上記方法と同様の実験を行った。その結果、亍アフラビン類、緑茶抽出物、ェピガロカテキンガレートのいずれを使用した場合でも、ミセル中のコレステロール濃度が低下したが、ミセル 1 m Iに対して亍アフラビン類を 500〃 g以上添加すると、特に優れたミセル形成阻害効果を示すことがわかった。結果を図 3に示す。

[0035] また、 Eatonらの方法（Eaton, D. L. et aに， Proc Soc Exp Biol Med. 19 76 Jan;

151 (1) :198-202. ) に従い、酵素法により胆汁酸濃度を測定した。テアフラビン類、緑茶抽出物、ェピガロカテキンガレートのいずれも胆汁酸濃度に対し何ら影響を示さなかった。結果を図 4に示す。

[0036] 実施例 4 ：ジガレート型テアフラビンとカテキン類との比較

ジガレート型テアフラビンとカテキン類（EGCG, ECG, EGCG + E CG) とのミセル内コレステロール阻害能を調べた。ジガレート型テアフラビン（ナガラサイエンス社製）とカテキン類（EGCG (和光純薬工業社製）， ECG (和光純薬工業社製）， EGCG + ECG (和光純薬工業社製 ) ) とを使用する以外は、実施例 1記載の方法で実験を行った。図 5に結果を示す。

[0037] ェピガロカテキンガレート（像）と、ェピガロカテキンガレートとェピカテキンガレートとの混合物（國）はミセル内コレステロールを低減したが、ジガレート型亍アフラビン（口）とェピカテキンガレート（〇）とがミセル内コレステロール形成に殆ど影響しなかった。

[0038] 実施例 3及び実施例 4の結果を合わせて考慮すると、実施例 3で亍アフラビン類が示したミセル中コレステロールの大幅な低下作用は、ジガレート型亍アフラビンによるものでないことがわかる。実施例 1の結果をさらに考慮すると、実施例 3におけるコレステロールの大幅な低下作用は、モノガレート型テアフラビンによると思われる。

[0039] 実施例 5 ：

各紅茶抽出物の胆汁酸ミセルからのコレステロール脱離能について調べた。結果を図 6に示す。亍アフラビン、亍アフラビンモノガレート、亍アフラビンジガレート及びポリフエノールとの比率を調べ、胆汁酸ミセルからのコレステロール脱離能に特に優れた効果のある数値範囲を調べた。この結果から、（1 ) 亍アフラビン類（T F)における亍アフラビンモノガレー卜の割合 (MGZT F) が 0. 4〜 1 00%の範囲であり、（2) 亍アフラビンモノガレートと亍アフラビンジガレー卜の量を比較すると亍アフラビンモノガレート量が亍アフラビンジガレート量を上回る場合であり、（3) ポリフエノール中の亍アフラビンモノガレート量（MGZP P) が 0. 01〜1. 0の範囲である場合が最も好ましいミセル形成阻害効果を示すことがわかつた。

[0040] 実施例 6 ：

紅茶抽出物中における総ポリフエノールに対するテアフラビンモノガレー卜の割合の変化が、紅茶抽出物のミセル内コレステロール脱離能に与える影響を調べた。

[0041] 3 Om Iの 60%エタノールに紅茶葉 1 0 gを浸漬抽出することにより試験用の紅茶抽出物を調製した。浸漬抽出は、室温で 30分間の抽出過程を 2度繰り返すことにより行った。かかる工程を 4種類の紅茶葉に対して行い、 4 種類の試験用紅茶抽出物（サンプル A~D) を得た。得られた抽出物をそれぞれ吸引ろ過により濾過（No.2、 90國、 ADVANTEC社製）し、その後、吸着分配クロマトグラフィー（HW- 40EC、東ソ一社製）により 60%エタノールで 3 〜5ベット目の分画を回収し、該分画を濃縮後に冷凍乾燥した。得られた紅茶抽出物 A〜Dと緑茶抽出物（テアフラン 9 OS (伊藤園社製） ) の組成を第 7図及び第 8図に示す。第 7図において、「free」は遊離型亍アフラビンを、「3G」は亍アフラビン一 3—モノガレートを、「3' G」は亍アフラビン -3' —モノガレートを、「DG」は亍アフラビン _3， 3' —ジガレートを、「polyphenol」は総ポリフヱノールを、「MG/Total

po I ypheno I (%)」は総ポリフエノール量に対するテアフラビンモノガレー卜の含有比率を示す。なお、テアフラビンモノガレー卜とは、テアフラビンの基本構造にガレート基が 1個だけ付いているものをいい、具体的にはテアフラビン _ 3 _モノガレート（3G) ゃ亍アフラビン一3' —モノガレート（3' G) が包含される。第 8図において、遊離型カ亍キンとはェピガロカ亍キン、ガロカ亍キン、ェピカ亍キン及び (+)カ亍キンの総量を、ガレート型カ亍キンとはェピガロカテキンガレート、ガロカテキンガレート、ェピカ亍キンガレート及びカ亍キンガレー卜の総量をそれぞれ示す。

[0042] 次に、 0. 5 mMのコレステロール、 6. 6 mMのタウロコール酸ナトリゥム（Sodium taurocho late) 、 0. 6 mMの卵黄ホスファチジル■ コリン（ Egg York Phosphatidyl

Choline) 、 1 32 mMの塩化ナトリウム（NaCI) 、リン酸ナトリウム（Sodi urn Phosphate, NaH₂P0₄ - 2H₂0) の組成で試験用のミセルを作製し（p H 6. 8 ) 、該ミセルを安定化させるため 37 °Cで 24時間インキュベートした。

[0043] 得られたミセル 3 m Iに、 0. 1 m lの紅茶抽出物サンプル（サンプル A ~D) 又は緑茶抽出物（テアフラン 9 OS (伊藤園社製）の溶液）を、ミセルに対して 50 gZm I、 1 00 gZm l、 200 g I となるように添加し、その後 37 °Cで 1時間インキュベートした。インキュベーション後、フィルター（220 nm) で濾過し、脂質抽出、ケン化、へキサン三回抽出後、 T MS化を行い（BST FA + TMCS, supelco) 、 GCにより 5 一コレスタン（5 - cholestane) を内部標準としてミセル内の残存コレステロール量を調べた。この結果を第 9図に示す。

[0044] 第 9図は、紅茶抽出物又は緑茶抽出物の添加量が増加するにつれて、ミセル内のコレステロール脱離能が大きくなることを示している。このことから、紅茶抽出物や緑茶抽出物がミセル形成阻害することにより、脂質吸収阻害作用を有することがわかる。また第 9図は、総ポリフエノール量に対する亍アフラビンモノガレー卜の含有比率（MG/Total polyphenol) が大きくなるにつれて、ミセル内のコレステロール脱離能が大きくなることも示している。

[0045] さらに、第 9図は、テアフラビンが必然的に優れたコレステロール脱離能を向上させるのでなく、特定量以上を添加して初めて優れて優れたコレステロ一ル脱離能を示すようになることも示している。

[0046] 具体的には、サンプル A (MG/Total polyphenol (%)= 2.45) のコレステロ一ル脱離能は、緑茶抽出物（MG/Total

polyphenol (%)= 0) のコレステロール脱離能と比較して極めて弱かった。しかし、サンプル B (MG/Total polyphenol (%)= 5.88) 、サンプル C (MG/Tota polyphenol (%)= 12.2) 及びサンプル D (MG/Total polyphenol (%)= 17.0) のコレステロール脱離能は、緑茶抽出物（MG/Total

polyphenol (%)= 0) のコレステロール脱離能と比較して極めて強かった。また、テアフラビンのコレステロール脱離能は、総ポリフエノール量に対するテアフラビンモノガレー卜の含有比率（MG/Total

polyphenol) に依存して強くなつた。

[0047] なお、 1 00 gZm l m i c e l l e添加時にミセル内残存コレステロール濃度が緑茶抽出物のものと同じ濃度となる、総ポリフエノール量に対するテアフラビンモノガレー卜の含有比率（MG/Total polyphenol) を算出したところ、 MG/Total polyphenolが約 4以上となると緑茶抽出物よりも優れた効果を発揮することが確かめられた。また総ポリフエノール量に対するテアフラビンモノガレー卜の含有比率（MG/Total

polyphenol) が 1 0〜 20%の範囲では、緑茶抽出物の場合と比較して 2倍以上の極めて優れたコレステロール脱離能を示すことも確かめられた。この結果を第 1 0図に示す。

産業上の利用可能性

[0048] 本発明により、天然由来で安全な脂質吸収阻害組成物や飲食品を提供することができる。かかる脂質吸収阻害組成物や飲食品は、動脈硬化や虚血性心疾患（狭心症、心筋梗塞など）等の各種疾病の予防や治療に有用である。さらに本発明品は、各種リパーゼ阻害剤と併用することができるため、従来のリパーゼ阻害剤単独で使用する場合と比較して、より効果的な前記疾病の予防や治療が期待できる。

Claims

請求の範囲 [1] 以下の各成分 (A) 亍アフラビンモノガレート、 (B) 亍アフラビン、 (C) 亍アフラビンジガレート及び (D) ポリフヱノールを含有することを特徴とする脂質吸収阻害組成物であって、これらの成分が以下の条件を満たす脂質吸収阻害組成物。

( 1 ) 含有重量比率 [ (A) / (B) ] =0. 4-1 00%

(2) (A) の重量 > (C) の重量

(3) 含有重量比 [ (A) / (D) ] =0. 01 -1. 0

[2] ェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレー卜のいずれか又はこれらの組合せをさらに含有する請求項 1記載の脂質吸収阻害組成物。

[3] ミセル形成阻害することを特徴とする請求項 1又は 2に記載の脂質溶解阻害組成物。

[4] 以下の各成分

(A) 亍アフラビンモノガレート、

(B) 亍アフラビン、

(C) 亍アフラビンジガレート及び

(D) ポリフヱノール

を含有することを特徴とする飲食品であって、これらの成分が以下の条件を満たす飲食

( 1 ) 含有重量比率 [ (A) / (Β) ] =0. 4〜 1 00%

(2) (Α) の重量 > (C) の重量

(3) 含有重量比 [ (A) / (D) ] =0. 01 -1. 0

[5] ェピガロカテキンガレート及びェピカテキンガレー卜のいずれか又はこれらの組合せをさらに含有する請求項 4記載の飲食品。

[6] ミセル形成阻害することを特徴とする請求項 3又は 4に記載の飲食品。