WO2006087935A1 - フェノキサジニウム化合物を活性成分として含有する医薬組成物 - Google Patents

フェノキサジニウム化合物を活性成分として含有する医薬組成物 Download PDF

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ring
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malaria
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Masataka Ihara
Kiyosei Takasu
Masayuki Kawakami
Hiroshi Kitaguchi
Kouzou Satou
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Japan Science And Technology Agency
Tohoku University
Fujifilm Corporation
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    • C07D265/34—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines condensed with carbocyclic rings
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    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • composition containing a phenoxadinium compound as an active ingredient
  • Non-Patent Document 1 In Non-Patent Document 1 described above, inhibition of growth of Plasmodium fal ciparum W2 in vitro by phenoxazine represented by the structural formula (3) and the following various compound groups similar thereto is provided. It is shown. Table 1 shows EC values of samples against Plasmodium falciparum for these compounds shown in the literature.
  • mice treated with malaria were treated for 4 consecutive days with an intraperitoneal administration program of 5mgZkgZday.
  • the cure rate compared to untreated mice (suppression: (Decrease ratio of malaria-infected erythrocytes).
  • Complete cure means that suppression is 100%.
  • Non-Patent Document 1 the compounds disclosed in Non-Patent Document 1 were tested in vivo. In the test system, no high malaria growth inhibitory effect was observed, indicating that no actual therapeutic effect can be expected. In addition, the treated model animals only survived for about 1-2 days compared to the untreated animals, and because of their high acute toxicity, they are not suitable for large-scale administration, and thus achieve a high curative effect. It was difficult.
  • Patent Document 1 PCTZUS00Z01968
  • Non-Patent Document 1 Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1995, 39 ⁇ 2671-2677
  • the object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition, particularly a therapeutic and Z or prophylactic agent that has a high therapeutic effect and selective toxicity against parasitic protozoal infections and also exhibits a life-prolonging effect. It is in providing the pharmaceutical composition of.
  • the present invention relates to the following aspects.
  • a pharmaceutical composition comprising a compound represented by the following general formula (1) as an active ingredient:
  • R1 and R2 each independently represents an alkyl group, an aryl group or a heterocyclic group
  • R1 and R2 may be the same or different, and may be optionally substituted with a hydroxyl group, alkoxy group, halogen, amino group, cyano group, sulfonic acid group, carboxyl group, ester group, amide group, or -tro group.
  • R1 and R2 may be condensed to form a ring;
  • R3 and R4 each independently represents an alkyl group, an aryl group or a heterocyclic group, which may be the same or different, and optionally a hydroxyl group, an alkoxy group, a halogen, an amino group, a cyan group, a sulfonic acid group, May be substituted with a carboxyl group, an ester group, an amide group, or a -tro group, or R3 and R4 may be condensed to form a ring;
  • R5 and R6 are each independently halogen, alkyl group, aryl group, heterocyclic group, hydroxyl group, alkoxy group, acyloxy group, amino group, cyano group, sulfonic acid group, carboxyl group, ester group, or R5 and R6 may form an alicyclic ring, an aromatic ring, a heteroalicyclic ring, or a heteroaromatic ring.
  • n are each independently an integer from 0 to 3;
  • Q represents a physiologically acceptable ion
  • composition according to claim 4 wherein the ring is a piperazine ring or a morpholine ring.
  • the compound represented by the above general formula (1) is contained in lmg to: LO, OOOmg, for treating and / or preventing protozoan parasitic infection according to any one of 1 to 10 above Pharmaceutical composition.
  • composition comprising the compound according to the above 1
  • a protozoan parasitic infection according to any one of the above 1 to 11, characterized by being in the form of a liquid, a tablet or a colloid and Z Or a pharmaceutical composition for prevention.
  • the compound contained as an active ingredient in the pharmaceutical composition of the present invention exhibits a growth inhibitory effect even when administered at a low dose against parasitic protozoal infectious diseases, and is higher than the dose showing protozoa growth inhibition. Dose administration does not damage mammalian cells (high selectivity factor). In vivo studies also show that when this compound is administered to a living body rather than at the cellular level, it does not show side effects such as acute toxicity and suppresses the growth of protozoa and exhibits a therapeutic effect and a significant life-prolonging effect. confirmed. Furthermore, since the compound of the present invention contains harmful atoms such as antimony or arsenic, there is no fear of side effects caused by them.
  • alkyl group represented by R1 to R4 in the general formula (1) those having 1 to 12 carbon atoms are preferred, and those having 1 to 6 carbon atoms are more preferred. Or it may be annular.
  • Specific alkyl groups include methyl, ethyl, and butyl groups. Examples of preferred substituents that may be substituted for these alkyl groups are those listed below as substituents Is preferred.
  • aryl group represented by R1 to R4 in the general formula (1) those having 6 to 10 carbon atoms, preferably those having 5 to 15 carbon atoms, are more preferable.
  • the heterocyclic group represented by R1 to R4 in the general formula (1) is preferably a 5- to 8-membered ring, more preferably a 5- or 6-membered ring.
  • the hetero atom include a nitrogen atom, an oxygen atom, a sulfur atom, a selenium atom, a tellurium atom, and a phosphorus atom, and a nitrogen atom, an oxygen atom, a sulfur atom, and a selenium atom are preferable.
  • heterocyclic group examples include a pyrrole ring, a furan ring, a piperidine ring, a monorephorin ring, a piperazine ring, a pyridine ring, and a pyrrolidine ring.
  • the forceful heterocyclic group may be substituted.
  • R1 and R2, or R3 and R4 may be condensed with each other to form a 3- to 12-membered, preferably 5- to 7-membered saturated or unsaturated ring.
  • saturated or unsaturated rings include hetero rings such as piperidine ring, piperazine ring, morpholine ring, azepine ring, pyrrole ring and tetrahydropyridine ring.
  • Examples of the alicyclic ring, aromatic ring, heteroalicyclic ring, or heteroaromatic ring formed by bonding R5 and R6 to each other include, for example, cyclohexene ring, cyclopentene ring, benzene ring, naphthalene ring, dihydropyrrole ring. Examples thereof include a single ring, a tetrahydropyridine ring, a pyrrole ring, a furan ring, a pyridine ring, and an indole ring.
  • the various ring compounds thus formed may be substituted with any substituent.
  • substituents include alkyl substituents such as methyl, ethyl, propyl, and isopropyl groups, aromatic groups such as phenol and naphthyl groups, amino groups, dialkylamino groups, and hydroxy groups.
  • physiologically acceptable ion for Q is the ion that is non-toxic and dissolves the above compound in an aqueous system when the compound is administered to a recipient.
  • physiologically acceptable ions represented by Q include halogen ions such as chloride, bromide and iodide; for example, methanesulfonate, trifluoromethane and sulphonate.
  • ⁇ ⁇ —tonoleens norephonic acid, naphthalene norephonic acid
  • Sulfonate ions such as aliphatic and aromatic sulfonate ions such as droxyethane sulfonate ion; Sulfate ions such as cyclohexane sulfamate ion; Sulfate ions such as methyl sulfate ion and ethyl sulfate ion; Hydrogen sulfate ion Borate ions; alkyl and dialkyl phosphate ions such as jetyl phosphate and methyl hydrogen phosphate ions; pyrophosphate ions such as trimethyl pyrophosphate ion; carboxylate ions (carboxyl ions substituted with carboxyl groups and hydroxyl groups are convenient.
  • physiologically acceptable ion Q are chloride ion, acetate ion, propionate ion, valerate ion, citrate ion, maleate ion, fumarate ion, lactate ion, succinate ion, Examples include tartrate ions, benzoate ions, perchlorate ions, and hydroxide ions.
  • Typical examples of the compound of the general formula (1) that can be used in the present invention include the following compound groups. However, the present invention should not be construed as limited to these compounds. Of these, the compounds represented by A-8, A-9 and A-11 are novel compounds, and therefore the present invention also relates to these compounds themselves.
  • the phenoxadi-um compound which is a compound of the general formula (l) of the present invention, is a conventional technique known to those skilled in the art, for example, Non-Patent Document 1 described in ML Crossley et al., Journal of American Chemical Society, 1952, 74 ⁇ , 578-584, and patent literature published by K. Andreas et al., European Journal of Organic Chemistry, 1999, 4 ⁇ , 923-930. It can be easily synthesized from known starting materials by referring to the above methods. It should be noted that the disclosed contents in these documents are included in the present specification as a part of the contents.
  • the pharmaceutical composition of the present invention containing the compound of the above general formula (1) has malaria disease, afflicting force ⁇ trypanosomiasis (also known as African sleeping sickness), America ⁇ trypanosomiasis (also known as: Chagas disease), leishmaniasis, Babesia, lymphophilia, toxoplasmosis (opportunistic infections such as AIDS), cryptosporidiosis (tropical diarrhea), and other parasitic protozoa It can be used effectively for the treatment and prevention of various types of diseases.
  • trypanosomiasis also known as African sleeping sickness
  • America ⁇ trypanosomiasis also known as: Chagas disease
  • leishmaniasis Babesia
  • lymphophilia lymphophilia
  • toxoplasmosis opportunistic infections such as AIDS
  • cryptosporidiosis tropical diarrhea
  • other parasitic protozoa It can be used effectively for the treatment and prevention of various types of diseases.
  • one or two or more kinds of compounds may be contained as the above-mentioned general formula (1) contained as an active ingredient. May also be used in combination with any other therapeutic agent known to those skilled in the art, including anti-protozoal infection agents.
  • ⁇ antiprotozoal infection agents include black mouth quince, mefloquine, artemisinin, atovacon, and pyrimesamine (above, treatment for malaria); suramin, pentamidine, meralsoprolol, , A therapeutic agent for African sleeping sickness), benz nidazole (hereinafter, a therapeutic agent for Chagas disease), pentostam, amphotericin B, miltefosine and fluconazole (a therapeutic agent for leishmaniasis).
  • Preferable examples of the pharmaceutical carrier or diluent that can be used in the pharmaceutical composition of the present invention in combination with the compound of the general formula (1) include: sodium chloride; salt; magnesium; salt; Lead, glucose; sucrose; lactose; ethyl alcohol; glycerine; mannitol; sorbitol; pentaerythritol; diethylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol, polyethylene glycol 400, other polyethylene glycols; glyceryl trilaurate, and distearic acid Mono-, di- and triglycerides of fatty acids such as glyceryl; pectin; starch; arginic acid; xylos; talc; stone matsuko; olive oil, pine nut oil, castor oil, corn oil, safflower oil, wheat germ oil, sesame oil , Nut oil, castor oil and cod liver oil Oil and grease; gelatin; lecithin; si
  • cyclodextrins for example, a-cyclodextrin, 13-cyclodextrin, ⁇ -cyclodextrin, hydroxyethyl-1 13-cyclodextrin, hydroxypropyl-1- ⁇ -cyclodextrin, Dihydroxypropyl 13-cyclodextrin, carboxymethylethyl 13-cyclodextrin, cycloazodrine, and dimethyl- ⁇ -cyclodextrin, etc .; a milky additive (eg, 2-22 carbon atoms, especially 10-18 carbons) Saturated and unsaturated fatty acids having atoms and monovalent aliphatic or polyhydric alcohols having 1 to 20 carbon atoms such as glycol, glycerin, diethylene glycol, pentaerythritol, ethyl alcohol, butyl alcohol, octadecyl alcohol of And silicones such as dimethyl
  • the pharmaceutically effective amount and administration method or means of administration of the compound of the present invention include the type of parasitic protozoa causing infection, the parasitic site of the protozoa, the severity of the disease state, the treatment policy, the age of the patient, A person skilled in the art can select as appropriate according to weight, sex, general health condition, and (genetic) racial background of the patient.
  • the dosage of the compounds of the present invention is 1 to 10, 0 OOmgZ day Z body weight 70 kg, more typically 50 to 2000 mg Z day Z body weight 70 kg.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can have any shape known to those skilled in the art depending on the administration method and the administration route. They can be administered by any suitable method. For example, when the liquid is in the form of a liquid, tablet, or colloid, it is in the form of a solution dissolved in a 5% aqueous solution of dalcose or with the above carrier or diluent. Intra- and subcutaneous injection methods are mentioned. In the case of tablets, oral administration can be mentioned, and in the case of colloids, it can be applied to the skin.
  • the compound represented by the general formula (1) can be contained in an appropriate amount depending on the purpose, object, shape, etc. of the pharmaceutical composition of the present invention. , OOOmg, preferably about 10mg to 3, 0OOmg.
  • a compound of the general formula (1) of the present invention and a pharmaceutical composition containing the compound as an active ingredient are given to further illustrate the present invention.
  • the present invention is not limited to these examples.
  • the compound represented by A-1 (60% purity) was purchased as a reagent from MP Biomedical Product and used as it was without purification.
  • Other compounds guaranteed a purity of 95% or higher by 1H-NMR and elemental analysis.
  • the compound of the present invention used in the test or the positive target drug was dissolved in DMSO to prepare a test solution having a predetermined concentration.
  • Cultured plasmodium-infected erythrocytes were collected by centrifugation and diluted with non-infected erythrocytes to give an initial infection rate of 0.15%.
  • the hematocrit value at this time was 2.5%.
  • test solution containing a predetermined concentration of the drug or drug-free DMS 0 was adjusted.
  • the test solution was duplicate.
  • Rat-derived L6 cells (rat skeletal myoblast cells) were used.
  • the medium was RPMI 1640 medium supplemented with 1% L-glutamine (200 mM) and 10% fetal calf serum, and cultured at 37 ° C. with 5% CO 2 concentration.
  • the compound of the present invention or the target drug used in the test was dissolved in DMSO to prepare a test solution having a predetermined concentration. Pre-culture and remove the medium containing the cells that have entered the logarithmic growth phase. Next, the test solution containing a predetermined concentration of drug or DMS 0 containing no drug was added to the well. The test solution was duplicated.
  • the growth inhibitory activity was assayed.
  • the test was performed as follows. To each well, 10 ⁇ L of Alamar Blue aqueous solution was added and further cultured for 2 hours. Next, the culture plate is mounted on a fluorescence microplate reader (Spectramax Gemeni XS; manufactured by Molecular Devices Inc., USA), irradiated with an excitation wavelength of 536 nm, and measured for fluorescence intensity at 588 nm. The residual ratio of L6 cells in the liquid addition group and the control was calculated.
  • the chemotherapeutic coefficient used as an index of selective toxicity to black mouth quinine-resistant Plasmodium was calculated according to the following formula to determine the efficacy.
  • Chemotherapy coefficient (EC value of sample for rat L6 cells)
  • Table 3 shows the EC values and selective toxicity coefficients of the samples for the present compound and the positive target drug, respectively, for Kuroguchikin-sensitive P. falciparum and rat L5 cells.
  • the compound of the present invention showed a markedly excellent growth inhibitory effect against chloroquinone-resistant P. falciparum and high selective toxicity.
  • This experiment is for a general 4 day suppressive test for in vivo activity testing of antimalarial compounds.
  • Infected blood is ICR male male 5-week-old (SPF) that has been passed through intraperitoneal infection.
  • the infection rate was obtained for the blood collected by intravenous injection of malaria-infected mice, and after confirming that the infection rate (10-20% infection) had risen moderately, the mouse's heart force malaria-infected blood was collected.
  • ⁇ Infected erythrocytes diluted with PBS buffer to become 4 protozoa, uninfected mice (ICR male, 5 weeks old) ) By tail vein injection.
  • the compound of the present invention used for the test was dissolved in physiological saline (manufactured by Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.) to give a test solution having a predetermined concentration. If the compound is insoluble in saline, use DMSO or Tween 20. It melt
  • mice were 5 mice per group, and the drug was administered by intraperitoneal administration at a predetermined concentration, and treatment (drug administration) was performed every 24 hours for 4 consecutive days from 2 hours after malaria infection. Twenty-four hours after the last treatment, blood was collected from the tail of the mouse to prepare a thin smear, and the number of malaria parasite infections in the test solution addition group and the control was counted under a microscope. The inhibition rate showing the highest and lowest values of 5 mice per group was removed, and the average of 3 mice was taken to calculate the malaria parasite infection rate (Parasitemia).
  • mice Further, the changes in the body weight of the mice and the appearance of the mice such as hair growth were observed, and side effects such as acute toxicity due to drug administration were evaluated. Malaria infected mice therapy (5MgZkgZda y, 4 days treatment, intraperitoneal administration) of the invention compound cure rate after the (%) shown in Table 4.
  • Example 5 after treatment of malaria-infected mice (25-lOOmgZkgZday, oral administration) with Compound A-1 (60% purity) of the present invention, 5 days after infection
  • Table 6 shows the cure rate (%). From 2 hours after malaria infection, the drug was administered 4 times every 24 hours, 12 times every 8 hours, or a single dose.
  • Table 7 shows the cure rate (%) on the 5th day after infection after the compound A-1 (100 mgZkgZ day, oral administration) was administered four times or once every 24 hours.
  • mice [0065] In all the administration programs, weight loss and changes in the state of the mice, which were thought to be caused by side effects, were not observed. In all treatments, a significant survival benefit was observed in mice. In particular, in a program in which lOOmgZkg was administered four times every 24 hours, 3 out of 4 animals per group survived even after 30 days (1 died on day 21). Three surviving animals were blood-collected 36 days later and confirmed the presence or absence of malaria parasites in red blood cells. Malaria parasites did not exist at all.
  • mice [0067] In all administration programs, weight loss and changes in the state of mice, which were thought to be caused by side effects, were not observed. In all treatments, a significant survival benefit was observed in mice.
  • trypanosoma brucei rhodensiense (STIB900 strain) protozoan blood-breathing tripomastigote body was used.
  • the medium used for the experiment was sterilized by filtration in MEM medium, 25 mM N-2-hydroxyethylpiperazine 2 ethanethrophonic acid (HEP ES), lgZL glucose, 1% MEM non-essential amino acids, 0.2 mM 2- Mercaptoethanol, 2 mM sodium pyruvate, 0. ImM hypoxanthine and 15% heat-treated horse serum were used.
  • Protozoan culture is performed in air with a CO concentration of 5%.
  • the temperature was 37 degrees.
  • the compound of the present invention used for the test or the positive target drug was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO, hereinafter the same) to prepare a test solution having a predetermined concentration.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • the growth inhibitory activity was assayed.
  • the test was performed as follows. To each well, 10 ⁇ L of Alamar Blue aqueous solution was added and further cultured for 2 hours. Next, the culture plate is mounted on a fluorescence microplate reader (Spectramax Gemeni XS; manufactured by Molecular Devices Inc., USA), irradiated with an excitation wavelength of 536 nm, and measured for fluorescence intensity at 588 nm. Liquid addition group and control The rate of infection with trypanosomes was calculated. The protozoal infection rate determined above The growth inhibition rate was calculated by the following formula, and the 50% growth inhibitory concentration (EC) was obtained.
  • EC 50% growth inhibitory concentration
  • the selective toxicity coefficient used as an index of selective toxicity to African 'trypanosoma protozoa was calculated using the following formula, and the efficacy was evaluated.
  • Table 8 shows the EC values of the samples against African 'trypanosomes protozoa and rat L6 cells, and selective toxicity coefficients for the compounds of the present invention and the positive target drugs.
  • the compound of the present invention is less toxic to rat L6 cells compared to meralsoprole, which is known as a therapeutic agent for African 'trypanosomatids.
  • amastigotes and tripomastigotes infected with protozoan rat L6 cells of Trypanosoma cruzi (Tulahuen C2C4 strain) were used.
  • the medium used for the experiment was added to RPMI1640 medium containing L6 cells so that L-glutamine (200 mM) was 1% and fetal calf serum was 10%, and cultured at 37 ° C with a CO concentration of 5%.
  • the compound of the present invention used for the test or a positive target drug (benznidazole) was dissolved in DMSO to obtain a test solution having a predetermined concentration.
  • a 96-well culture plate was precultured for 48 hours with a medium containing 3 5 ⁇ 03 protozoa. After changing the culture medium, do not contain the test solution or drug containing the drug at the prescribed concentration.
  • V ⁇ DMS 0 V ⁇ DMS 0 was added. The test solution was duplicated.
  • the growth inhibitory activity was assayed.
  • the test was performed as follows. 50 L of CPRG / Nonidet was added to each well and left for another 2-6 hours. Next, the culture plate was mounted on an absorption microplate reader, the absorbance at 540 nm was measured, and the trypanosomes infection rate of the test solution addition group and the control port was calculated.
  • the protozoan infection rate determined above was calculated as the growth inhibition rate according to the following formula, and the 50% growth inhibition concentration (EC) was obtained.
  • the selective toxicity coefficient used as an indicator of selective toxicity to the American 'trypanosoma protozoa was calculated using the following formula, and the efficacy was evaluated.
  • the compound of the present invention has a markedly superior growth inhibitory effect and a high selective toxicity as compared with benznidazole, which is known as a therapeutic agent for the protozoan parasite.
  • Leishmania donovani (MHOMZETZ67ZL82 strain) was used.
  • the protozoa were subcultured with a Syrian Golden nomsta, from which an amastigote was obtained.
  • SM medium containing 10% heat-treated rabbit embryo serum was adjusted to pH 5.4 and cultured at 37 ° C in air with a CO concentration of 5%.
  • the compound of the present invention used for the test or a positive target drug (miltefosine) was dissolved in DMSO to obtain a test solution having a predetermined concentration.
  • the concentration of amastigote is measured using the CAS Y-cell analysis system (manufactured by Scharfe Germany). Measured. Thereafter, the test solution containing a predetermined concentration of drug or DMS O containing no drug was collected. The test solution was duplicated.
  • the growth inhibitory activity was assayed.
  • the test was performed as follows. To each well, 10 ⁇ L of Alamar Blue aqueous solution was added and further cultured for 2 hours. Next, the culture plate is mounted on a fluorescence microplate reader (Spectramax Gemeni XS; manufactured by Molecular Devices Inc., USA), irradiated with an excitation wavelength of 536 nm, and measured for fluorescence intensity at 588 nm. The leishmania protozoa infection rate was calculated for the liquid addition group and control
  • the protozoan infection rate determined above was calculated as the growth inhibition rate according to the following formula, and the 50% growth inhibition concentration (EC) was obtained.
  • the selective toxicity coefficient used as an indicator of selective toxicity to Leishmania parasites was calculated using the following formula to determine the efficacy.
  • Table 10 shows the EC values and selective toxicity coefficients of the samples of the compounds of the present invention and positive target drugs for L. protozoa and rat L6 cells.
  • the compound of the present invention is

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Abstract

本発明の目的は、医薬組成物、特に、寄生性の原虫感染症に対して高い治療効果及び選択毒性を有し、又、延命効果等を示す治療用及び／又は予防用の医薬組成物を提供するである。 本発明は、一般式（１）で表される化合物を含有する医薬組成物、特に、原虫感染症の治療剤及び／又は予防剤、並びに、それに有効成分として含まれる新規化合物に関する。 【化１】

Description

明 細 書
フエノキサジニゥム化合物を活性成分として含有する医薬組成物 技術分野
[0001] 本発明は医薬組成物及びその有効成分である新規ィ匕合物に関する。本発明の化 合物は、特に、例えば、薬剤耐性マラリアを含むマラリア症、リーシュマニア症、ァフリ 力睡眠病ゃシヤーガス病を含むトリパノソ マ症、トキソプラズマ症、及びクリプトスポ リジゥム症のような寄生虫感染に関連する疾患の治療及び/又は予防に有用である。 背景技術
[0002] 寄生性の原虫感染症は、現在でも特に熱帯や亜熱帯地域を中心に多く知られて おり、例えばマラリア症、リ—シュマニア症、アフリカ 'トリパノソ—マ症（アフリカ睡眠病 )、アメリカ 'トリパノソ一マ症（シャ一ガス病）、リンパフィラリア症、バべシァ症、トキソプ ラズマ症、クリプトスポリジゥム症などが挙げられる。これらには、ヒトのみに感染するも の及び、家畜や小動物にも感染する人畜共通感染症であるものに分類される力 ど ちらにおいても重大な経済的かつ社会的損害をもたらす。例えば、これらの疾病の 中には、一般的な社会生活を送ることが不可能になるほどの重篤な症状を示すもの 、さらには介護必要な寝たきり状態を余儀なくさせるもの、致死性の症状に発展させ るものがある。しかし、これらの疾病に有効性を示すワクチンは現在のところ臨床薬と しては存在せず、今後も開発が困難とされている。
[0003] これらの疾病の中には十分な効果を示す治療薬がな 、もの、治療薬に対する耐性 原虫の出現及び拡散、治療薬の重篤な副作用などが問題となっているものもある。 例えば、現在、リーシュマニア治療剤であるペントスタムは分子内にアンチモン原子 を有することから、治療の副作用としてアンチモン中毒が避けられない。又、アフリカ' トリパノソ—マ (アフリカ睡眠病）の初期治療に使用されるメラルソプロ—ルは分子内 にヒ素原子が含まれており、ヒ素中毒が副作用として起こるという問題点がある。その ような背景のもと、内服や注射、もしくはそれに準じる投与形態で服用できる有効な 治療薬または予防薬の早急な開発が切望されて 、る。
[0004] これまでに、以下の構造式 (2)で表される、酸ィ匕段階が低いフエノキサジン化合物 はトキソプラズマ症の原因となる Toxoplasma gondii由来のデヒドロ葉酸還元酵素 の阻害活性を有することが酵素レベルで知られており（特許文献 1)、寄生虫感染症 に有効であることが示唆されている。しかしながら、この化合物が実際にトキソプラズ マ以外の寄生虫、実際に生きた寄生虫、又は宿主に寄生した状態、即ち細胞レベル や個体レベルで治療効果を示す力否かについて不明である。また、この化合物が原 虫感染症に効果を示す力否かの因果関係は全く不明であり、予想できるものではな かった。
[0005] [化 1]
Figure imgf000003_0001
[0006] 又、以下の構造式（3)で表される Brilliant Cresyl Blueはマラリア症の原因とな る Plasmodium falciparum原虫を用いる in vitro (細胞）評価系で増殖阻害する ことが知られている（非特許文献 1)。し力しながら、生体動物を用いる in vivo 試験系では高いマラリア治療効果を示さず、従って、該文献の記載からは、一般式（ 1)で示される 2つの二置換アミノ基を有するフエノキサジンィ匕合物がマラリア症に効 果を示す力否かについては予想できるものではない。更に、非特許文献 1には、当 該化合物がマラリア以外の寄生虫感染症に治療効果を示すか否かいついても全く 記載されていない。又、この化合物が原虫感染症に効果を示すか否かの因果関係 は全く不明であり、予想できるものではな力つた。
[0007] [化 2]
Figure imgf000003_0002
[0008] 上述の非特許文献 1には、構造式（3)で表されるフエノキサジン及びそれに類似す る以下の各種化合物群の in vitroにおける熱帯熱マラリア原虫（Plasmodium fal ciparum W2)の増殖阻害が示されている。該文献に示されたこれら化合物につい ての熱帯熱マラリア原虫に対するサンプルの EC 値を表 1に示す。
50
[0009] [化 3]
Gallocyanine
Figure imgf000004_0001
Pyrom ne Y
Figure imgf000004_0002
Figure imgf000004_0003
[0010] [表 1] E C 5 o (nM)
化合物
{Plasmodium falciparum W2)
Br i l l i ant C r e s 1 B l e 5. 52±3. 06
Ga l l ocyanine 674± 159
P y r o n i n Y 449 ± 20 1 '
Saf ranine 0 34. 8± 17. 2
Azure B 12. 7±7. 36
Methyl ene B lue 3. 99±2. 3 1
[0011] 更に表 2に上記各化合物について、マラリアに感染したマウスに 5mgZkgZdayの 腹腔投与プログラムで連続 4日間治療を行った結果、無処置のマウスと比較したとき の治癒率（suppression:血液中のマラリア感染赤血球の減少比）を示す。尚、完治 とは suppressionが 100%であることを指す。
[0012] [表 2]
Figure imgf000005_0001
[0013] これらの結果から、上記非特許文献 1に開示される化合物については、 in vivo試 験系では高いマラリア増殖阻害効果が認められず、実際の治療効果は全く期待でき ないことが判る。また、治療に供したモデル動物は治療をしない動物に比べ、約 1〜 2日間だけ延命したにすぎず、急性毒性も高いので、大量の投与には適していない 為、高い治癒効果を実現することは困難であった。
特許文献 1 : PCTZUS00Z01968号公報
非特許文献 1 : Antimicrobial Agents and Chemotherapy誌、 1995年、 39卷 ゝ 2671〜2677頁
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0014] したがって、本発明の目的は、医薬組成物、特に、寄生性の原虫感染症に対して 高い治療効果及び選択毒性を有し、又、延命効果等を示す治療用及び Z又は予防 用の医薬組成物を提供することにある。
課題を解決するための手段
[0015] 本発明らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、上記一般式（1)で表さ れる化合物を含有する医薬組成物において、原虫寄生感染症に対し in vivo試験 系でも高い増殖阻害効果が認められる事を見出した。本発明はこれらの知見に基づ いて完成したものである。
[0016] 即ち、本発明は、以下の各態様に係るものである。
1. 下記一般式（1)で表される化合物を有効成分として含有する医薬組成物：
[0017] [化 4]
Figure imgf000006_0001
[0018] (式中、 R1及び R2はそれぞれ独立にアルキル基、ァリール基又はへテロ環基を表し 、同一でも異なっていてもよぐ任意にヒドロキシル基、アルコキシ基、ハロゲン、ァミノ 基、シァノ基、スルホン酸基、カルボキシル基、エステル基、アミド基、若しくは-トロ 基で置換されていてもよぐ又、 R1と R2が縮合して環を形成していてもよく；
R3及び R4はそれぞれ独立にアルキル基、ァリール基又はへテロ環基を表し、同一 でも異なっていてもよぐ任意にヒドロキシル基、アルコキシ基、ハロゲン、アミノ基、シ ァノ基、スルホン酸基、カルボキシル基、エステル基、アミド基、若しくは-トロ基で置 換されていてもよぐ又、 R3と R4が縮合して環を形成していてもよく；
R5及び R6は、それぞれ独立して、ハロゲン、アルキル基、ァリール基、ヘテロ環基、 ヒドロキシル基、アルコキシ基、ァシルォキシ基、アミノ基、シァノ基、スルホン酸基、 カルボキシル基、エステル基、又は-トロ基を表し、同一でも異なっていてもよぐ R5 及び R6が互いに脂環、芳香環、ヘテロ脂環、又はへテロ芳香環を形成していてもよ
<；
m及び nは、それぞれ独立して、 0〜3の整数であり；及び
Qは生理学的に許容しうるァ-オンを表す)。
2. Rl、 R2、 R3及び R4がそれぞれ独立に炭素数 1〜6のアルキル基であることを 特徴とする、上記 1記載の医薬組成物。
3. Qがハロゲンイオン又は過塩素酸イオンであることを特徴とする、上記 1又は 2記 載の医薬組成物。
4. R1と R2、又は、 R3と R4が縮合して環を形成していることを特徴とする、上記 1
〜3のいずれか一項に記載の医薬組成物。
5. 環がピぺラジン環又はモルホリン環である、請求項 4記載の医薬組成物。
6. 下記構造式で表される化合物の少なくとも一つを有効成分として含有する医薬 組成物：
[化 5]
Figure imgf000008_0001
7.原虫寄生感染症の治療用及び Z又は予防用である、上記 1から 6のいずれかに 記載の医薬組成物。
8. 上記原虫寄生感染症がマラリア症、リーシュマニア症、アフリカ睡眠病、シヤーガ ス病、トキソプラズマ症、リンパフィラリア症、バべシァ症、又はコクシジゥム症であるこ とを特徴とする上記 7記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z又は予防用医薬組成 物。
9. 上記原虫寄生感染症がマラリア症、リーシュマニア症、アフリカ睡眠病、又はシ ヤーガス病であることを特徴とする上記 8に記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z 又は予防用医薬組成物。
10. 上記原虫寄生感染症がマラリア症であることを特徴とする上記 9に記載の原虫 寄生感染症の治療用及び Z又は予防用医薬組成物。
11. 上記一般式（1)で示される化合物が lmg〜： LO, OOOmg含有されていることを 特徴とする上記 1から 10のいずれかに記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z又は 予防用医薬組成物。
12. 上記 1に記載の化合物を含む組成物の形状力 液体状、錠剤状、又はコロイド 状であることを特徴とする上記 1から 11のいずれかに記載の原虫寄生感染症の治療 用及び Z又は予防用医薬組成物。
13.下記のいずれかの構造式で表される化合物：
[化 6]
Figure imgf000009_0001
Figure imgf000010_0001
発明の効果
[0022] 本発明の医薬組成物に有効成分として含まれる化合物は、特に、寄生性の原虫感 染症に対して低用量の投与によっても増殖阻害効果を示し、原虫増殖阻害を示す 用量より高い用量の投与によっても哺乳類細胞を傷つけない (選択毒性係数が高い )。また、細胞レベルではなく生体に本ィ匕合物を投与した場合も、急性毒性などの副 作用を示さず原虫の増殖を抑制し、治療効果及び有意な延命効果を示すことがイン ビボ試験で確認された。更に、本発明化合物には、アンチモン又はヒ素などの有害な 原子が含まれて ヽな 、ために、それらに起因する副作用の恐れがな 、。
発明を実施するための最良の形態
[0023] 以下、本発明による医薬組成物について具体的に説明する。
多種多様な化合物について疾病原因となる原虫の増殖効果を検定し、さらに副作用 の指標となる哺乳類細胞に対しての細胞毒性を評価した。さらに、宿主モデルとして マラリア感染マウスを用いて、多種多様な化合物を任意の量もしくは形態で投与しマ ラリアの治療効果を評価した。後者の評価系で 5〜： LOmgZkgの投与量にて薬剤非 投与のものと比較して、 50%以上のマラリア原虫増殖抑制効果を示すィ匕合物を探索 した。
[0024] その結果、上記効果を示す一般式（1)で表される化合物として、一般式（1)で表され る化合物を見出した。該化合物について更に詳細に説明する。
[0025] 一般式（1)の R1〜R4で表されるアルキル基としては、炭素数 1〜12のものが好ま しぐ炭素数 1〜6のものがより好ましぐ直鎖状でも分岐状でも環状でもよい。具体的 なアルキル基としては、メチル、ェチル、及びブチル基が挙げられる。かかるアルキル 基は置換されてもよぐ好ましい置換基の例としては下記の置換基として挙げたもの が好ましい。一般式（1)の R1〜R4で表されるァリール基としては、炭素数 5〜15の ものが好ましぐ炭素数 6〜10のものがより好ましい。
[0026] 一般式（1)の R1〜R4で表されるヘテロ環基としては、好ましくは 5〜8員環、より好 ましくは 5又は 6員環である。ヘテロ原子としては、窒素原子、酸素原子、硫黄原子、 セレン原子、テルル原子及びリン原子が挙げられ、窒素原子、酸素原子、硫黄原子 及びセレン原子が好ましい。ヘテロ環基の具体例としては、例えば、ピロール環、フラ ン環、ピぺリジン環、モノレホリン環、ピぺラジン環、ピリジン環、ピロリジン環等が挙げ られる。力かるへテロ環基は置換されてもよい。
[0027] また、 R1と R2、又は R3と R4は互いに縮合して 3〜12員、好ましくは 5〜7員環の 飽和又は不飽和環を形成して!/、てもよ!/、。このような飽和又は不飽和環の例として、 例えば、ピぺリジン環、ピぺラジン環、モルホリン環、ァゼピン環、ピロール環、及びテ トラヒドロピリジン環等へテロ環を挙げることが出来る。又、 R5及び R6が互いに結合し て形成される脂環、芳香環、ヘテロ脂環、又はへテロ芳香環の例としては、例えば、 シクロへキセン環、シクロペンテン環、ベンゼン環、ナフタレン環、ジヒドロピロ一ノレ環 、テトラヒドロピリジン環、ピロール環、フラン環、ピリジン環、及びインドール環等を挙 げることができる。
[0028] 上記の形成された各種環化合物は任意の置換基で置換されていてもよい。このよう な置換基の好適例としては、メチル基、ェチル基、プロピル基、イソプロピル基などの アルキル置換基、フエ-ル基、ナフチル基などの芳香族基、アミノ基、ジアルキルアミ ノ基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、ァシルォキシ基、カルボキシル基、アルコキシカル ボ-ル基、ァミノカルボ-ル基、二トリル基、スルホン酸基、ニトロ基、クロ口基、フルォ 口基、及びブロモ基等を挙げることができる。
[0029] 上記の化合物において Qは電荷平衡に必要である。 Qについての「生理学的に許 容しうるァ-オン」 t 、う用語は、 Qが該化合物を受容者に投与した場合に無毒でか つ上記の化合物を水性系に溶解させるイオンであること意味する。 Qによって表され る生理学的に許容しうるァ-オンの好適な例としては、塩素イオン、臭素イオン及びョ ゥ素イオンの如きハロゲンイオン；例えば、メタンスルホン酸イオン、トリフルォロメタン スノレホン酸ィ才ン、 ρ—トノレエンスノレホン酸ィ才ン、ナフタレンスノレホン酸ィ才ン、 2—ヒ ドロキシエタンスルホン酸イオン等の脂肪族及び芳香族スルホン酸イオンの如きスル ホン酸イオン；シクロへキサンスルファミン酸イオンの如きスルファミン酸イオン；メチル 硫酸イオン及びェチル硫酸イオンの如き硫酸イオン；硫酸水素イオン；ホウ酸イオン； ジェチルリン酸イオン及びメチル水素リン酸イオンの如きアルキル及びジアルキルリ ン酸イオン；トリメチルピロリン酸イオンの如きピロリン酸イオン；カルボン酸イオン（カル ボキシ基及び水酸基が置換したカルボン酸イオンが都合よく用いられる）；炭酸ィォ ン；炭酸水素イオン；過塩素酸イオン及び水酸ィヒ物イオンが挙げられる。生理学的に 許容しうるァ-オン Qの特に好ましい例としては塩素イオン、酢酸イオン、プロピオン 酸イオン、吉草酸イオン、クェン酸イオン、マレイン酸イオン、フマル酸イオン、乳酸ィ オン、コハク酸イオン、酒石酸イオン、安息香酸イオン、過塩素酸イオン及び水酸ィ匕 物イオンが挙げられる。
[0030] 本発明で用い得る一般式（1)の化合物の典型的な例としては、以下の化合物群が 挙げられる。しカゝしながら、本発明はこれらの化合物に限定されるものと解釈されるべ きではない。尚、このうち、 A— 8、 A— 9及び A— 11で示される化合物は新規ィ匕合物 であり、従って、本発明はこれら化合物自体にも係るものである。
[0031] [化 9]
Figure imgf000013_0001
本発明の一般式（l)化合物であるフエノキサジ -ゥム化合物は、当業者に公知の 従来技術、例えば、 M. L. Crossleyらにより記述された非特許文献 1、 Journal of American Chemical Society誌、 1952年、 74卷、 578〜584頁、及び、 K. A ndreasらにより d された 特許文献 European Journal of Organic Chemis try誌、 1999年、 4卷、 923— 930頁に記載された方法を参考に公知の出発原料か ら容易に合成することができる。尚、これらの文献における開示内容は本明細書中に その内容の一部として参照されて含まれるものである。
[0033] 上記の一般式（1)の化合物を含有する本発明の医薬組成物は、マラリア症、ァフリ 力 ·トリパノソ―マ症 (別名；アフリカ睡眠病）、アメリカ ·トリパノソ―マ症 (別名：シャ― ガス病）、リーシュマニア症、バべシァ症、リンパフィラリア症、トキソプラズマ症（エイズ などの日和見感染症）、クリプトスポリジゥム症 (熱帯性下痢）、その他寄生性の原虫 による感染が原因となる多様なタイプの疾病の治療及び予防に有効に使用できる。
[0034] 本発明の医薬組成物において、有効成分として含有される上記一般式（1)として 1 又は 2種類以上の化合物を含有してもよぐ更に、必要に応じて、従来から用いられ ている抗原虫感染症剤を含む当業者に公知の任意の他の治療薬と組合せて使用し ても良い。力かる抗原虫感染症剤の好適な例としては、クロ口キン、メフロキン、アル テミシニン、アトバコン、及びピリメサミン（以上、マラリア症の治療薬）；スラミン、ペンタ ミジン、メラルソプロール、及びァスコフラノン (以上、アフリカ睡眠病の治療薬)ベンズ ニダゾ―ル (以上、シャ—ガス病の治療薬）、ペントスタム、アンフォテリシン B、ミルテ フォシン及びフルコナゾール（以上、リーシュマニア症の治療薬)等が挙げられる。
[0035] 一般式（1)の化合物と組合せて、本発明の医薬組成物に用いることのできる医薬 キャリアー又は希釈剤の好適な例としては塩ィ匕ナトリウム;塩ィ匕マグネシウム;塩ィ匕亜 鉛、グルコース；サッカロース；ラクト—ス；エチルアルコール；グリセリン；マン-トール； ソルビトール；ペンタエリスリトール；ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプ ロピレングリコール、ポリエチレングリコール 400、他のポリエチレングリコール；トリラウ リン酸グリセリル、及びジステアリン酸グリセリルの如き脂肪酸のモノ、ジ及びトリグリセ リド；ぺクチン；でんぷん；アルギニン酸；キシロ ス；タルク；石松子；オリ ブ油、ピ ナツ油、ヒマシ油、コーン油、紅花油、小麦麦芽油、ゴマ油、棉実油、ヒマヮリ油及び タラ肝油の如きオイル及び油脂；ゼラチン；レシチン；シリカ；セル口ース；メチルヒドロ キシプロピノレセノレロース、メチノレセノレロース、ヒドロキシェチノレセノレロースの如きセノレ ロース誘導体;ステアリン酸カルシウム、ラウリン酸カルシウム、ォレイン酸マグレシゥ ム、パルミチン酸カルシウム、ベヘン酸カルシウム及びステアリン酸マグネシウム等の
12〜22の炭素原子を有する脂肪酸の塩;シクロデキストリン類 (例えば、 a—シクロ デキストリン、 13—シクロデキストリン、 γ—シクロデキストリン、ヒドロキシェチル一 13 —シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル一 β—シクロデキストリン、ジヒドロキシプロピ ルー 13ーシクロデキストリン、カルボキシメチルェチルー 13ーシクロデキストリン、シク ロアヮォドリン、及びジメチル— β—シクロデキストリン等）；乳ィ匕剤（例えば、 2〜22の 炭素原子，特に 10〜18の炭素原子を有する飽和及び不飽和の脂肪酸とグリコール 、グリセリン、ジエチレングリコール、ペンタエリスリトール、エチルアルコール、ブチル アルコール、ォクタデシルアルコールの如き 1〜20の炭素原子を有する一価の脂肪 族アルコール又は多価アルコールとのエステル；及びジメチルポリシロキサンの如き シリコ—ン等が挙げられる。更に、医薬組成物に従来力も用いられてきた当業者に公 知の任意の追加のキャリア—も本発明の医薬組成物に使用することが出来る。
[0036] 本発明の化合物の薬学的な有効量及び投与方法又は投与手段は、感染症の原 因となる寄生原虫の種類、原虫の寄生部位、病状の重さ、治療方針、患者の年齢、 体重、性別、全般的な健康状態、及び患者の (遺伝的)人種的背景に応じて、当業 者が適宜選択することができる。一般的には、本発明の化合物の投与量は 1〜10, 0 OOmgZ日 Z体重 70kg、より一般的には 50〜2000mgZ日 Z体重 70kgである。
[0037] 本発明医薬組成物は投与方法'投与経路等に応じて当業者に公知の任意の形状 とすることが出来る。それらは適当な方法で投与することが出来る。例えば、形状が、 液体状、錠剤状、コロイド状のものを、液状の場合、 5%ダルコ—ス水溶液に溶力した 形で或いは上記のキャリアー又は希釈剤を伴った形で、静脈内、腹腔内、皮下に注 射する方法が挙げられる。錠剤状の場合では経口から服用が挙げられ、コロイド状の 場合は皮膚に塗布する等の方法が挙げられる。尚、上記一般式（1)で示される化合 物は、本発明の医薬組成物の使用目的、対象、及び形状等に応じて、適当な量で 含有されることが出来る力 通常、 lmg〜10, OOOmg程度、好ましくは、 10mg〜3, 0 OOmg程度含有されている。
[0038] 本発明の一般式（1)の化合物及びそれを有効成分として含有する医薬組成物の 有効性を明らかにするために、以下に実施例を示し、本発明を更に詳細に説明する 力 本発明はこれらに限定されるものではない。尚、以下の実施例中の各表におい て A— 1 (60%純度）で示される化合物は、 MP Biomedical Product社から試薬 として購入したものを精製することなくそのまま用いた。その他の化合物は 95%以上 の純度を 1H—NMR及び元素分析力 保証した。
実施例 1
[0039] 3 ジブチルアミノー 7 ジェチルアミノフエノキサジ -ゥム パークロレイト（化合物 A
8)の合成
室温下、 3 ジブチルァミノフエノール（1. OmL, 4. 43mmol)と N, N ジェチル 4 -トロソァ-リン（790mg, 4. 43mmol)の混合物をエタノール（55mL)に懸 濁し、 60%過塩素酸水溶液 (0. 5mL)を滴下しながらカ卩えた。その混合物を 3時間 加熱還流後、室温に冷却した。溶媒量が約半分になるまで減圧下で濃縮し、溶液を 0°Cに冷却した。沈殿物を濾過により除去し、濾液を濃縮した。濃縮した粗物質をシリ 力ゲルクロマトグラフィ—（溶出液:クロ口ホルム:酢酸ェチル = 9 : 1)で精製し、粗生 成物を得た。この粗生成物をメタノ―ルに溶解し、 0°Cに冷却後ジェチルェ—テルを 若干量滴下することにより、結晶化操作を行った。濃青色の結晶を濾過したところ、 3 ジブチルアミノー 7—ジェチルアミノフエノキサジ -ゥム パークロレイトが 33. 3mg 得られた (単離収率 2%)。
[0040] 1H—NMR (400MHz, CD30 D) δ : 7. 77 (d, 2H, J = 9. 8Hz) , 7. 38 (dd, 1 H, J = 9. 8, 2. 6Hz) , 7. 35 (dd, 1H, J = 9. 8, 2. 6Hz) , 3. 77 (q, 4H, J = 7. 1 Hz) , 3. 70 (q, 4H, J = 7. 8Hz) , 1. 74 (m, 4H) , 1. 46 (m, 4H) , 1. 35 (t, 6H , J = 7. 1Hz) , 1. 02 (t, 6H, J = 7. 5Hz) . FAB - MS 380.
実施例 2
[0041] 3 ェチルメチルアミノー 7 ジメチルアミノフエノキサジ -ゥム パークロレイト（化合 物 A— 9)の合成
室温下、 3—メチルェチルァミノフエノール（300mg, 1. 98mmol)と N, N ジメチ ルー 4 -トロソァ-リン（298mg, 1. 98mmol)の混合物をエタノール（15mL)に 懸濁し、 70%過塩素酸水溶液 (0. 5mL)を滴下しながら加えた。その混合物を 6時 間加熱還流後、室温に冷却し、減圧下溶媒を留去した。その粗物質をシリカゲルクロ マトグラフィ—（溶出液:クロ口ホルム：酢酸ェチル =9:1)で精製し、 216mgの粗生 成物を得た (粗収量 27%)。この粗生成物をメタノ―ルに溶解し 0°Cに冷却し、結晶 化操作を行った。濃青色の結晶を濾過したところ、 3—ェチルメチルアミノー 7—ジメ チルアミノフエノキサジ -ゥム パークロレイトが 13. 3mg得られた（単離収率 2%)。
[0042] 1H-NMR (400MHz, CDC13) δ :7. 80 (s, 1H), 7. 78 (s, 1H), 7.41 (dd, 1H, J = 6. 8, 2. 8Hz), 7. 39 (dd, 1H, J = 6. 8, 2. 8Hz), 6. 96 (d, 1H, J = 2. 8Hz), 6. 94 (d, 1H, J = 2. 8Hz), 3. 81 (q, 4H, J = 7. 2Hz), 3.41 (s, 6H), 3. 38 (s, 3H), 1. 34 (t, 3H, J = 7. 2Hz) . FAB -MS 282.
実施例 3
[0043] 3 ジメチルアミノー 7— (1—ピペラジノ）フエノキサジ -ゥム クロリド 1塩酸塩 (化合 物 A— 11)の合成
室温下、 3— (1—ピペラジノ）フエノール（165mg, 0. 92mmol)と N, N ジメチル 4 -トロソァ-リン（139mg, 0. 92mmol)の混合物をエタノール（50mL)に懸 濁し、 70%過塩素酸水溶液 (0. 5mL)を滴下しながら加えた。その混合物を 6時間 加熱還流後、室温に冷却し、減圧下溶媒を留去した。その粗物質をシリカゲルクロマ トグラフィ—（溶出液:クロ口ホルム：酢酸ェチル =9:1)で精製し、 65mgの粗生成物 を得た。この粗生成物をメタノ―ルに溶解したものをイオン交換榭脂 Amberlyte IR A— 400 (C1)に混和し室温で 2時間放置した。これを濾過し、更に榭脂をメタノール で洗浄した。集めたろ液を減圧下濃縮し、結晶化操作を行った。濃青色の結晶を濾 過したところ、 3 ジメチルァミノ一 7— (1—ピペラジノ)フエノキサジ -ゥム クロリド 1 塩酸塩が 49. 2mg得られた（単離収率 14%)。
[0044] 1H—NMR (400MHz, CD30D) δ :7. 91 (d, 1H, J = 9. 3Hz), 7. 84 (d, 1 H, J = 9. 6Hz), 7. 59 (dd, 1H, J = 9. 6, 2. 7Hz), 7. 49 (dd, 1H, J = 9. 3, 2. 7Hz), 7. 22 (d, 1H, J = 2. 7Hz), 7. 07 (d, 1H, J = 2. 7Hz), 4. 04 (t, 4H, J =5. 3Hz), 3. 52(s, 6H), 3.46 (t, 4H, J = 5. 3Hz) . FAB -MS 309.
[0045] 尚、上記 A— 1〜A— 20で示された中の他の化合物も同様な方法で合成した。
実施例 4 [0046] [クロ口キン耐性熱帯熱マラリア原虫増殖阻害スクリーニング試験 (in vitro) ] 本実施例では、クロ口キン耐性熱帯熱マラリア原虫である、 Plasmodium Falcipa rum K1株の原虫を用いた。実験に用いた培地は、ろ過滅菌した RPMI— 1640培 地で、ヒト血清を 5%となるように添加した。マラリア原虫の培養は O濃度 3%、 CO
2 2 濃度 4%、 N濃度 93%、温度は 37°Cで行った。
2
[0047] 試験に用いる本発明化合物、または陽性対象薬 (クロ口キン）は DMSOに溶解し、 所定濃度の試験液とした。培養したマラリア原虫感染赤血球を遠心分離で集め、非 感染赤血球で希釈し、初期感染率 0. 15%とした。このときのへマトクリット値は 2. 5 %とした。
96穴培養プレ—トのゥエルに、 200 Lのマラリア感染培養液を加え、所定濃度の 薬剤を含む試験液又は薬剤を含まな!/ヽ DMS 0をカ卩ぇ調整した。試験液は duplicat eにとつた。
37°Cで 48時間培養した後、 0. 5 Ciの放射性のトリチウム ( )標識されたヒポキ サンチンを各ゥヱルに加えた。さらに 24時間同条件で培養した後、グラスファイバー フィルタ 上に採取し蒸留水で洗浄した。ベ タプレ ト液体シンチレ シヨンカウン タ—（Wallac社製)で放射線強度を計測し、試験液添加群及びコント口—ルのマラリ ァ原虫感染率を算出した。上記で求めたマラリア原虫感染率力 次式によって増殖 阻害率を算出し、 50%増殖阻害濃度 (EC )を求める。
50
[0048] 増殖阻害率 (％) = { 1—（b— a) Z (c— a) } X 100
a :初期感染率
b :試験液添加時の感染率
c :コントローノレの感染率
[0049] [ラット L6細胞増殖阻害試験 (in vitro) ]
ラット由来 L6細胞（rat skeletal myoblast cell)を用いた。培地は RPMI 1640 培地に、 L グルタミン（200mM)が 1%、胎児牛血清が 10%となるように添カ卩し、 C O濃度 5%、 37°Cで培養した。
2
試験に用いる本発明化合物または対象薬を DMSOに溶解し、所定濃度の試験液 とした。前培養を行い、対数増殖期に入った細胞を含む培地を 96穴培養プレートの ゥエルにとり、次に所定濃度の薬剤を含む試験液又は薬剤を含まな ヽ DMS 0をカロ えた。試験液は duplicateにとつた。
培養プレ—トをインキュべ—タ—中で 72時間培養した後、増殖阻害活性を検定し た。検定は以下のように行った。それぞれのゥエルに 10 μ Lの Alamar Blue水溶液 を加え、さらに 2時間培養した。次に、培養プレ—トを蛍光マイクロプレ—トリ—ダ—（ Spectramax Gemeni XS ;米国モレキユラ—'デバイス社製）に装着し、 536nm の励起波長で照射し、 588nmの蛍光強度を測定し、試験液添加群及びコントロール の L6細胞の残存率を算出した
上記で求めた細胞残存率力 次式によって L6細胞に対する増殖阻害率を算出し 、 50%増殖阻害濃度 (EC )を求めた。
50
[0050] 増殖阻害率（％) = { (C— A)Z(B— A) } X 100
A：初期細胞数
B： 3日後のコントロールの細胞数
C：サンプル添カ卩した 3日後の細胞数
[0051] [クロ口キン耐性マラリアに対する薬効判定]
クロ口キン耐性熱帯熱マラリア原虫とラット L6細胞に対するサンプルの EC 値から
50 サンプルの抗マラリア作用を評価する。クロ口キン耐性マラリア原虫に対する選択毒 性の指標として用いられる化学療法係数を下記式により算出し、薬効判定を行った。
[0052] 化学療法係数 = (ラット L6細胞に対するサンプルの EC 値）
50
÷ (クロ口キン耐性熱帯熱マラリア原虫に対するサンプルの EC 値）
50
[0053] 本発明化合物及び陽性対象薬につ!、てのクロ口キン感受性熱帯熱マラリア原虫と ラット L5細胞に対するサンプルの各 EC 値、並びに選択毒性係数を表 3に示す。
50
これらの結果から、本発明化合物はクロロキノン耐性熱帯熱マラリア原虫に対して 顕著に優れた増殖抑制効果を示し、選択毒性も高 ヽことが示された。
[0054] [表 3] 5 0 %増殖阻害濃度 （n M)
化合物 —— 一 選択毒性
P. falciparum K 1 cytotoxicity L6
A - :1 ( 6 0 %純度） 4 . 6 3 9 5 0 8 6 0
' A I (> 9 5 %純度） 2 . 1 2 0 5 0 0 9 (\ 0 0
A -3 1 5 . 6 8 8 7 0 5 7 0
Α -Λ 2 . 1 4 β 9 0 】 2 0 0
A ； 2 . 4 8 3 3 5 0
A -7 1 , 5 4 0 9 2 7 0
A—l 1 2 7 , 5 6 8 8 0 0 2 0 0 0
A - 1 1 9 (； 8 6 4 0 0 4 0
A 】 5 1 1 7 4 6 0 0 3 9 0 クロ口キン 1 5 0 一 ―
実施例 5
[マラリア感染マウスの腹腔投与での治療試験 (in vivo) ]
本実験は抗マラリア化合物の in vivo活性試験に一般的な 4 day suppressive test 用 、 7こ。
本実験ではローデントマラリア原虫（Plasmodium berghei NK65株）を用いた。 感染血液は、 ICR系雄性マウス 5週齢 (SPF)に腹腔内投与で感染させ継代したもの を使用している。マラリア感染マウスの尾静注で採血したものについて感染率を求め 適度に感染率（10〜20%感染）が上昇していることを確認後、マウスの心臓力 マラ リア感染血液を採血した。赤血球感染率および赤血球数 (cellsZmL)を求め、投与 量 0. 2mL当たり 1. ΟχΙΟ—4原虫になるように PBS緩衝液で希釈した感染赤血球を、 未感染のマウス (ICR系雄性、 5週齢）に尾静注により感染させた。
試験に用いる本発明化合物を生理食塩水 (大塚製薬製）に溶解し、所定濃度の試 験液とした。生理食塩水に化合物が不溶の場合は、 DMSOもしくは Tween 20に 溶解し、試験液とした。コント口—ル群 (薬剤非投与群）には生理食塩水 (大塚製薬製
)のみを用いた。各マウスの体重を求めた後に、体重 lkgあたり薬剤が 5. Omgとなる ように量を算出して、薬剤の投与量を決定した。
マウスは 1群 5匹とし、所定の濃度を腹腔投与で薬剤投与を行い、マラリア感染の 2 時間後から連続 4日間 24時間おきに治療 (薬剤投与)を行った。最後の治療を行つ た 24時間後にマウスの尾より血液を採取し薄層塗抹標本を作成して、顕微鏡下で試 験液添加群及びコントロールのマラリア原虫感染数を計数した。 1群 5匹のマウスのう ち最高と最低の値を示す阻害率を除去し 3匹のマウスで平均をとり、マラリア原虫感 染率（Parasitemia)を算出した
上記で求めたマラリア原虫感染率力も次式によって、 5. OmgZkgZday投与時の 治癒率（suppression)を算出した。
[0056] 治療率： suppression (%) = (b -a) /b X 100
a：試験液添加時の原虫感染率
b：コントロールの原虫感染率
[0057] また、マウスの体重変化と毛づやなどのマウスの様子を観察し、薬剤投与による急 性毒性などの副作用を評価した。本発明化合物についてのマラリア感染マウスを治 療 (5mgZkgZday、 4日治療、腹腔投与)した後の治癒率 (％)を表 4に示す。
[0058] [表 4]
治療薬剤 治癒率 （％)
A-l (60%純度） 46. 3
A -1 (>95%純度） 79. 2
A -2 45. 9
A -3 1 7. 1
A-4 85. 3
A-5 77. 0
Λ-6 83. 1
A -7 90. 3
A-¾ 7 1. 7
A―】 1 54. H
A -1 4 1 7. 4
Λ 1 7 38. 6
A 1 9 2 1. 未処置 0
[0059] 試験した全ての化合物について、腹腔 5mg/kg投与では副作用に由来すると思 われる体重の減少やマウスの状態変化は観察されな力つた。また、薬剤未処置群と 比較して、全ての発明化合物に有意な延命効果が認められた。また、非特許文献 1 に記載された公知の化合物と比較して、顕著に高 L、治癒率を示した。
[0060] 更に、化合物 A— 1 (60%純度）、 A— 4及び A— 11につ 、て、種々の投与量 (腹 腔投与）における治癒率を評価した。実験には前述の 4— day suppressive test を用いて評価した。また、マウスの体重変化と毛づやなどのマウスの様子を観察し、 薬剤投与による急性毒性などの副作用を評価した。本発明化合物 A— 1 (60%純度 ；)、 A— 4及び A— 11についてのマラリア感染マウスを治療（2. 5- 20mg/kg/day 又は 5. 0— 30mgZkgZday、 4日治療、腹腔投与)した後の治癒率（％)を表 5に示 す。
[0061] [表 5]
Figure imgf000023_0001
[0062] 化合物 A—1の 20mgZkg投与及び Α— 11の 30mgZkg投与を除く全ての投与 量において副作用に由来すると思われる体重の減少やマウスの状態変化は観察さ れな力つた。また、化合物 A— 1の 20mgZkg投与及び A— 11の 30mgZkg投与に おいても薬剤投与終了後は、体重増加が認められた。またすベての治療において、 マウスの有意な延命効果が観察された。
実施例 6 [0063] [マラリア感染マウスの経口投与での治療試験 (in vivo) ]
実施例 5に記載の方法に準じて、本発明化合物 A—1 (60%純度）を用いてマラリ ァ感染マウスを治療（25— lOOmgZkgZday、経口投与）した後の、感染後 5日目 での治癒率（％)を表 6に示す。マラリア感染の 2時間後から、薬剤を 24時間おきに 4 回、 8時間おきに 12回、又は単回投与した。又、本発明化合物 A— l (100mgZkgZ day、経口投与）を 24時間おきに 4回又は単回投与した後の、感染後 5日目での治癒 率（％)を表 7に示す。
[0064] [表 6]
Figure imgf000024_0001
* 薬剤投与時に、 経口投与の技術的失敗により 1群 5匹のうち 1匹のマウスが死亡した。
[0065] 全ての投与プログラムにおいて副作用に由来すると思われる体重の減少やマウス の状態変化は観察されな力つた。また全ての治療において、マウスの有意な延命効 果が観察された。特に lOOmgZkgを 24時間ごとに 4回投与するプログラムでは、 1群 4匹中 3匹は 30日後においても生存していた（1匹は 21日目に死亡）。生存した 3匹に ついて 36日後に採血を行い、赤血球中のマラリア原虫の有無を確認した力 マラリア 原虫は全く存在しな力つた。
[0066] [表 7] 投': -/プログラム f 治 Φく ( %
24時間ごと 4冋投与 1 0 0 ni k g ,回 > 9 9 . 9 9
回投 ¾ 1 0 0 ni g /' k g / |n| 7 8 ^ 3 , .
[0067] 全ての投与プログラムにおいて副作用に由来すると思われる体重の減少やマウス の状態変化は観察されな力つた。また全ての治療において、マウスの有意な延命効 果が観察された。
実施例 7
[0068] [アフリカ 'トリパノソ 原虫の培養]
本実験では、 Trypanosoma brucei rhodensiense (STIB900株）の原虫の血 流棲息型トリポマスチゴート体を用いた。実験に用いた培地は、ろ過滅菌した MEM 培地に、 25mMの N - 2-ヒドロキシェチルピペラジン 2 エタンスロホン酸（HEP ES)、 lgZLのグルコース、 1%の MEM非必須アミノ酸、 0. 2mMの 2—メルカプト ェタノ—ル、 2mMのピルビン酸ナトリウム塩、 0. ImMのヒポキサンチン及び 15%熱 処理ゥマ血清を加えたものを用いた。原虫の培養は CO濃度を 5%とした空気中で、
2
温度は 37度で行った。
[0069] [アフリカ 'トリパノソ 原虫増殖阻害スクリ—ユング試験 (in vitro) ]
試験に用いる本発明化合物、または陽性対象薬 (メラルソプロール）はジメチルスル ホキシド (DMSO、以下同じ）に溶解し、所定濃度の試験液とした。
96穴培養プレ—トのゥエルに、原虫の個数が 8xl03個を含む培地と、所定濃度の 薬剤を含む試験液又は薬剤を含まない DMS Oをカ卩え、それぞれ 100 Lになるよう 培地を加え調整した。試験液は duplicateにとつた。
培養プレ—トをインキュべ—タ—中で 72時間培養した後、増殖阻害活性を検定し た。検定は以下のように行った。それぞれのゥエルに 10 μ Lの Alamar Blue水溶液 を加え、さらに 2時間培養した。次に、培養プレ—トを蛍光マイクロプレ—トリ—ダ—（ Spectramax Gemeni XS ;米国モレキユラ—'デバイス社製）に装着し、 536nm の励起波長で照射し、 588nmの蛍光強度を測定し、試験液添加群及びコントロール のトリパノソ マ原虫感染率を算出した。上記で求めた原虫感染率力 次式によって 増殖阻害率を算出し、 50%増殖阻害濃度 (EC )を求めた。
50
[0070] 増殖阻害率 (％) = { 1—（b— a) Z (c— a) } X 100
a :初期感染率
b :試験液添加時の感染率
c :コントローノレの感染率
[0071] [アフリカ ·トリパノソ—マ (アフリカ睡眠病）の薬効判定]
アフリカ 'トリパノソ—マ原虫に対する選択毒性の指標として用いられる選択毒性係数 を下記式により算出し、薬効判定を行った。
[0072]
選択毒性係数 = (ラット L6細胞に対するサンプルの EC 値）
50
÷ (アフリカ ·トリパノソ一マ原虫に対するサンプルの EC 値）
50
[0073] 本発明化合物及び陽性対象薬についてのアフリカ 'トリパノソ—マ原虫とラット L6細 胞に対するサンプルの各 EC 値、並びに選択毒性係数を表 8に示す。これらの結果
50
から、本発明化合物はアフリカ 'トリパノソ—マ原虫に対する治療薬として知られてい るメラルソプロールと比較してラット L6細胞に対する毒性が低いことが示された。
[0074] [表 8]
5 0 %増殖阻害濃度 （n M)
化合物 選択毒性
Trypanosoma brucei rhod. cytotoxicity L6
A - - 1 ( 6 0 %純度） 1 8 1 3 9 5 0 2 2
A -3 5 6 5 8 8 7 0 1 6
A→l 4 9 7 4 6 9 0 9 , 4
A -6 6 7 . 2 8 3 9 ] 2
A -- 7 1 1 3 4 0 9 3 . ( >
·' メラルソプロール 6 7 8 0 0 1 3 0 0 実施例 8 [0075] [アメリカ 'トリパノソ一マ原虫の培養]
本実験では、 Trypanosoma cruzi (Tulahuen C2C4株）の原虫のラット L6細 胞に感染したアマスチゴ—ト体及びトリポマスチゴ—ト体を用いた。実験に用いた培 地は、 L6細胞を含む RPMI1640培地に、 L グルタミン（200mM)が 1%、胎児牛 血清が 10%となるように添加し、 CO濃度 5%、 37°Cで培養した。
2
[0076] [アメリカ 'トリパノソ一マ原虫増殖阻害スクリ一ユング試験 (in vitro) ]
試験に用いる本発明化合物、または陽性対象薬 (ベンズニダゾール）は DMSOに 溶解し、所定濃度の試験液とした。
96穴培養プレートのゥエルに、原虫の個数が 5xl03個を含む培地をカ卩ぇ 48時間 前培養を行った。培地を交換後、所定濃度の薬剤を含む試験液又は薬剤を含まな
Vヽ DMS 0を加えた。試験液は duplicateにとつた。
培養プレートをインキュベータ一中で 96時間培養した後、増殖阻害活性を検定し た。検定は以下のように行った。それぞれのゥエルに 50 Lの CPRG/Nonidetを 加え、さらに 2〜6時間放置した。次に、培養プレ—トを吸光マイクロプレ—トリ—ダ— に装着し、 540nmの吸光度を測定し、試験液添加群及びコント口—ルのトリパノソ— マ原虫感染率を算出した
上記で求めた原虫感染率力 次式によって増殖阻害率を算出し、 50%増殖阻害濃 度 (EC )を求めた。
50
[0077] 増殖阻害率 (％) = { 1—（b— a) Z (c— a) } X 100
a :初期感染率
b :試験液添加時の感染率
c :コントローノレの感染率
[0078] [アメリカ ·トリパノソ マ (シヤーガス病）の薬効判定]
アメリカ 'トリパノソ マ原虫に対する選択毒性の指標として用いられる選択毒性係 数を下記式により算出し、薬効判定を行った。
[0079] 選択毒性係数 = (ラット L6細胞に対するサンプルの EC 値）
50
÷ (アメリカ 'トリパノソ—マ原虫に対するサンプルの EC 値）
50
[0080] 本発明化合物及び陽性対象薬についてのアメリカ 'トリパノソ—マ原虫とラット L6細 胞に対するサンプルの各 EC 値、並びに選択毒性係数を表 9に示す。これらの結果
50
から、本発明化合物はアメリカ ·トリバノソーマ原虫に対する治療薬として知られてい るべンズニダゾールと比較して顕著に優れた増殖抑制効果を示し、選択毒性も高 ヽ ことが示され >た。
[0081] [表 9]
5 0 %増殖阻害濃度 ( n M)
化合物 選択毒性
Trypanosoma cruzi c ytotoxicity L6
A -1 ( 6 0 %純度） 1 4 9 3 9 5 0 2 7
A— 1 (> 9 5 %純度） J 5 2 0 5 0 0 1 4 0 (■)
A -3 4 5 7 8 8 7 0 1
A 4 2 1 .1 4 6 9 0 2, 2
2 4 8 3 9 ：■)
A 7 2 2 4 0 9 1 9 ベンズニダゾール 8 7 0 ― 一
実施例 9
[0082] [リーシュマニア原虫の培養]
本実験では、 Leishmania donovani (MHOMZETZ67ZL82株）を用いた 。原虫は Syrian Goldenノヽムスタ—で継代し、そこからアマスチゴ—ト体を得た。実 験には 10%の加熱処理したゥシ胎児血清をカ卩えた SM培地を用い、 pH5. 4に調整 し CO濃度 5%の空気下、 37°Cで培養した。
2
[0083] [リーシュマニア原虫増殖阻害スクリーニング試験 (in vitro) ]
試験に用いる本発明化合物、または陽性対象薬 (ミルテフォシン）は DMSOに溶解 し、所定濃度の試験液とした。
96穴培養プレートのゥエルに所定の個数の原虫を含む培地を力卩ぇ前処理をほどこ した後、 CAS Yセル分析システム（ドイツ · Scharf e社製)でアマスチゴ―トの濃度を 計測した。その後、所定濃度の薬剤を含む試験液又は薬剤を含まない DMS Oをカロ えた。試験液は duplicateにとつた。
培養プレ—トをインキュべ—タ—中で 72時間培養した後、増殖阻害活性を検定し た。検定は以下のように行った。それぞれのゥエルに 10 μ Lの Alamar Blue水溶液 を加え、さらに 2時間培養した。次に、培養プレ—トを蛍光マイクロプレ—トリ—ダ—（ Spectramax Gemeni XS ;米国モレキユラ—'デバイス社製）に装着し、 536nm の励起波長で照射し、 588nmの蛍光強度を測定し、試験液添加群及びコントロール のリーシュマニア原虫感染率を算出した
上記で求めた原虫感染率力 次式によって増殖阻害率を算出し、 50%増殖阻害 濃度 (EC )を求めた。
50
[0084] 増殖阻害率 (％) = { 1—（b— a) Z (c— a) } X 100
a :初期感染率
b :試験液添加時の感染率
c :コントローノレの感染率
[0085] [リ シュマニアの薬効判定]
リーシュマニア原虫に対する選択毒性の指標として用いられる選択毒性係数を下 記式により算出し、薬効判定を行った。
[0086] 選択毒性係数 = (ラット L6細胞に対するサンプルの EC 値）
50
÷ (リーシュマニア原虫に対するサンプルの EC 値）
50
[0087] 本発明化合物及び陽性対象薬についてのリ―シユマ-ァ原虫とラット L6細胞に対 するサンプルの各 EC 値、並びに選択毒性係数を表 10に示す。本発明化合物はリ
50
—シュマニア原虫に対する治療薬として知られているミルテフォシンに匹敵するか、 又はそれ以上の優れた増殖抑制効果を示し、選択毒性も高 、ことが示された。
[0088] [表 10] 50 %増殖阻害濃度 （/iM)
化合物 選択毒性
Leishmania donovam cytotoxicity L6
A -1 ( 60 %純度） 2 8 1 0 3 9 5 0 1 .
A -3 8 8 7 8 8 7 0 I 0
A -6 2 3 8 3 9 3 (I
A 7 6. 0 4 0 9 () 8 ミルテフオシン 2 8 0 一 ― 産業上の利用可能性
本発明の化合物を活性成分として含有させることにより、優れた原虫感染症の治療 剤及び Ζ又は予防剤を提供することが出来る。

Claims

請求の範囲
[1] 下記一般式 (1)で表される化合物を有効成分として含有する、医薬組成物:
[化 1]
Figure imgf000031_0001
(式中、 R1及び R2はそれぞれ独立にアルキル基、ァリール基又はへテロ環基を表し 、同一でも異なっていてもよぐ任意にヒドロキシル基、アルコキシ基、ハロゲン、ァミノ 基、シァノ基、スルホン酸基、カルボキシル基、エステル基、アミド基、若しくは-トロ 基で置換されていてもよぐ又、 R1と R2が縮合して環を形成していてもよく； R3及び R4はそれぞれ独立にアルキル基、ァリール基又はへテロ環基を表し、同一 でも異なっていてもよぐ任意にヒドロキシル基、アルコキシ基、ハロゲン、アミノ基、シ ァノ基、スルホン酸基、カルボキシル基、エステル基、アミド基、若しくは-トロ基で置 換されていてもよぐ又、 R3と R4が縮合して環を形成していてもよく；
R5及び R6は、それぞれ独立して、ハロゲン、アルキル基、ァリール基、ヘテロ環基、 ヒドロキシル基、アルコキシ基、ァシルォキシ基、アミノ基、シァノ基、スルホン酸基、 カルボキシル基、エステル基、又は-トロ基を表し、同一でも異なっていてもよぐ R5 及び R6が互いに脂環、芳香環、ヘテロ脂環、又はへテロ芳香環を形成していてもよ <；
m及び nは、それぞれ独立して、 0〜3の整数であり；及び
Qは生理学的に許容しうるァ-オンを表す)。
[2] Rl、 R2、 R3及び R4がそれぞれ独立に炭素数 1〜6のアルキル基であることを特徴 とする、請求項 1記載の医薬組成物。
[3] Qがハロゲンイオン又は過塩素酸イオンであることを特徴とする、請求項 1又は 2記載 の医薬組成物。
[4] R1と R2、又は、 R3と R4が縮合して環を形成していることを特徴とする、請求項 1〜3 の!、ずれか一項に記載の医薬組成物。
[5] 環がピぺラジン環又はモルホリン環である、請求項 4記載の医薬組成物。
[6] 下記構造式で表される化合物の少なくとも一つを有効成分として含有する医薬組成 物：
[化 5]
Figure imgf000033_0001
原虫寄生感染症の治療用及び Z又は予防用である、請求項 1から 6のいずれかに記 載の医薬組成物。 [8] 上記原虫寄生感染症がマラリア症、リ―シユマ-ァ症、アフリカ睡眠病、シャ—ガス病 、トキソプラズマ症、リンパフィラリア症、バべシァ症、又はコクシジゥム症であることを 特徴とする請求項 7記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z又は予防用医薬組成 物。
[9] 上記原虫寄生感染症がマラリア症、リーシュマニア症、アフリカ睡眠病、又はシャ— ガス病であることを特徴とする請求項 8に記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z又 は予防用医薬組成物。
[10] 上記原虫寄生感染症がマラリア症であることを特徴とする請求項 9に記載の原虫寄 生感染症の治療用及び Z又は予防用医薬組成物。
[11] 上記一般式（1)で示される化合物が lmg〜 10, OOOmg含有されていることを特徴と する請求項 1から 10のいずれかに記載の原虫寄生感染症の治療用及び Z又は予 防用医薬組成物。
[12] 請求項 1に記載の化合物を含む組成物の形状が、液体状、錠剤状、又はコロイド状 であることを特徴とする請求項 1から 11のいずれかに記載の原虫寄生感染症の治療 用及び Z又は予防用医薬組成物。
[13] 下記のいずれかの構造式で表される化合物：
[化 2]
Figure imgf000034_0001
[化 3]
Figure imgf000034_0002
[化 4]
-V (） "OH
Figure imgf000035_0001
Ll0Z0£/900ZdT/13d
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