WO2005007194A1

WO2005007194A1 - Formulaciones mucoadhesivas semisólidas

Info

Publication number: WO2005007194A1
Application number: PCT/ES2004/000336
Authority: WO
Inventors: Álvaro ACEBRÓN FERNÁNDEZ; Ana Campuzano García; Rosa Maria HERNÁNDEZ MARTÍN; Manuela Igartua Olaechea; José Luis Pedraz Muñoz; Alicia Rodríguez Gascón
Original assignee: Italfarmaco, S.A.
Priority date: 2003-07-16
Filing date: 2004-07-16
Publication date: 2005-01-27
Also published as: EP1652535A1; DE602004029369D1; EP1652535B1; US20060240111A1; HRP20100635T1; ES2353694T3; CY1110954T1; JP4891765B2; EP2100612A2; SI1652535T1; ATE482723T1; ES2237298A1; ES2237298B1; PL1652535T3; DK1652535T3; JP2007528864A; PT1652535E; US8663688B2; EP2100612A3

Abstract

Formulaciones mucoadhesivas semisólidas de aplicación vaginal, con características técnicas y organolépticas mejoradas, que contienen al menos dos polímeros bioadhesivos gelificantes y un ingrediente activo, útiles en prevención y/o tratamiento de diversas patologías y trastornos del ser humano o animal.

Description

FORMULACIONES MUCOADHESIVAS SEMISÓLIDAS

DESCRIPCIÓN Esta invención se refiere a formulaciones mucoadhesivas semisólidas de aplicación vaginal, que comprenden al menos dos polímeros bioadhesivos gelificantes y un ingrediente activo. También hace referencia a procedimientos para prepararlas y a sus usos en prevención o tratamiento de diversas patologías y trastornos del ser humano o animal.

ESTADO DE LA TÉCNICA El término bioadhesión se utiliza para definir la habilidad de un material natural o sintético de pegarse a membranas biológicas, resultando en un intimo contacto del material con el tejido por un periodo más o menos prolongado de tiempo. La mucoadhesión se refiere a un caso especial de bioadhesión en el que el tejido es una mucosa. Estos conceptos han recibido un grado significativo de atención debido a su potencial aplicación en la administración de fármacos. Aunque existe debate acerca del mecanismo de bioadhesión, la mayoría de los investigadores concuerdan en que este fenómeno es de interés porque incrementa el tiempo de residencia de una forma farmacéutica en el sitio de absorción, y esto puede resultar en un aumento de la biodisponibilidad del fármaco . Una formulación bioadhesiva de liberación controlada puede mejorar la eficacia y/o la seguridad de un tratamiento ayudando a mantener las concentraciones de fármaco entre los niveles efectivo y tóxico, localizándolo en un tejido especifico, aumentando la intimidad y duración de contacto entre el complejo fármaco- polimero y la superficie tisular. Por otra parte, una composición bioadhesiva cuando es administrada por via tópica (por ejemplo vaginal) no experimenta metabolismo de primer paso por el higado. Los productos farmacéuticos bioadhesivos se pueden presentar en distintas formas (partículas, suspensiones, comprimidos, supositorios, geles, etc.) y ser administrados por diferentes vias (ocular, nasal, vaginal, gastrointestinal, rectal, dérmica, etc.). La administración de fármacos por via vaginal puede ser una alternativa preferida en ciertos casos aunque, para que la terapia sea exitosa, se deben superar algunas dificultades. Las formulaciones a utilizar por esta via deben ser cuidadosamente diseñadas para no producir efectos indeseados en la paciente que conduzcan al incumplimiento del tratamiento. Se ha visto que comprimidos y supositorios pueden causar molestias (irritación), óvulos y cremas pueden producir flujo vaginal excesivo . Además, es preferible que las composiciones posean buenas propiedades bioadhesivas pues, debido a las características anatómicas y fisiológicas de la vagina, es muy difícil lograr que permanezcan adheridas a sus paredes y puedan liberar el fármaco en esta área durante un periodo de tiempo prolongado. Los documentos EP 0431719, EP 0500807, EP 0719146, WO 96/10989, WO 99/13862 y WO 01/24788 describen formulaciones bioadhesivas con un polímero de ácido carboxilico entrecruzado (Polycarbophil) y un polímero gelificante (preferiblemente Carbopol 934P) que pueden contener diferentes principios activos. Los documentos FR 2609391 y GB 2199495 describen supositorios bioadhesivos de aplicación vaginal formados por, al menos, un polímero hidrofilico (NaCMC, HPMC o Carbopol) y un medicamento (antifúngicos del tipo nistatina o imidazólicos) . El documento WO 85/02092 describe composiciones bioadhesivas para aplicación en piel o mucosas que incluyen un polímero entrecruzado carboxi-funcional (Polycarbophil) y un agente terapéutico. El documento US 5942243 describe una composición mucoadhesiva en forma de hidrogel que comprende uno o más fármacos (clotrimazol, nonoxynol-9, progesterona, etc.) y un copolimero termoplástico . El documento EP 0818194 describe composiciones hidratantes adhesivas a biomembranas que comprenden preferiblemente un polímero entrecruzado con grupos carboxilo (Stablese, Carbopol 934P) , un polímero soluble en agua (Gantrez, NaCMC) y un compuesto polihidroxilado (glicerina, propilenglicol) . Opcionalmente pueden contener medicamentos (antifúngicos, antibacterianos, antivirales, espermicidas, etc.) El documento WO 97/15314 describe una composición farmacéutica vaginal en forma de gel que contiene una fuente de peróxido (peróxido de hidrógeno) , un sistema tampón (ácido cítrico / citrato) , un polímero bioadhesivo acuosoluble (Carbopol 974P) y, opcionalmente, un agente terapéutico adicional (nonoxynol-9, etc. ) . El documento WO 98/20872 describe formulaciones tópicas que comprenden un lipido microbicida (monocarpin) en un agente formador de hidrogel (Carbopol, povidona, NaCMC, etc.). El documento WO 98/05303 describe complejos mucoadhesivos de Polycarbophil y antifúngico o antiprotozoario (de tipo imidazol o triazol) útiles en el tratamiento tópico de afecciones de mucosa, y formulaciones en gel que los contienen. El documento WO 00/47144 describe una composición bioadhesiva vaginal basada en formulación sinérgica de carragenina, agarosa, polímeros de ácido acrilico (Pemulen) o Polycarbophil y agente terapéutico. El documento WO 00/50078 describe microesferas para aplicación en mucosas que comprenden al menos un antigeno y un bioadhesivo (HPMC, Carbopol, Polycarbophil) . En suma, muchas formulaciones farmacéuticas bioadhesivas han sido estudiadas en los últimos años, no siempre con éxito. Existe, por tanto, la necesidad de disponer de nuevas composiciones con propiedades bioadhesivas y organolépticas optimizadas, en particular para aplicación vaginal. La vagina es un tubo fibromuscular hueco formado por tres capas tisulares: mucosa, muscular y adventicia. La mucosa vaginal está constituida por epitelio escamoso estratificado no queratinizado, carente de glándulas. El epitelio vaginal es sensible a hormonas y manifiesta cambios cíclicos y dependientes de la edad, tanto morfológicos como funcionales. Hasta la pubertad ocurre una atrofia fisiológica. Durante la pubertad, por acción de las hormonas ováricas, el epitelio incrementa su grosor y resistencia para comenzar a ser más o menos atrófico una vez instaurada la menopausia . La mucosa vaginal se continúa hacia el exterior, a nivel de los genitales externos, formando la mucosa vulvar, constituida por un epitelio similar al vaginal. La vagina está colonizada por flora bacteriana mixta en la que predominan los lactobacilos . Hasta la menopausia el pH normal está entre 3,5 y 4,5. En las mujeres postmenopáusicas el pH vaginal pasa a ser relativamente alto y pierde las colonias de lactobacilos. La funcionalidad fisiológica de la zona vulvovaginal puede facilitar, en ciertas circunstancias, el establecimiento de patologías de base inflamatoria o infecciosa. Las condiciones inflamatorias que afectan la mucosa vaginal y pueden afectar también a la vulva son denominadas vulvovaginitis . Pueden ser secundarias a múltiples causas incluyendo infecciones, irritación, alergia o enfermedades sistémicas. Para el alivio sintomático del prurito vaginal extremo, especialmente en las vulvovaginitis pediátricas, se suele recurrir a la administración de derivados de adrenocorticoides por via tópica (en piel o membranas mucosas externas) . Las infecciones vulvovaginales requieren del tratamiento con distintos fármacos por via oral o intravaginal, por ejemplo antisépticos, antibióticos, antimicóticos o antivirales, dependiendo de su etiología. Las vulvovaginitis atróficas se suelen tratar con geles hidratantes tópicos (vaginales), sin principio activo o con estrógenos, dependiendo de su causa. Existen además otras indicaciones para el tratamiento por via vaginal, tanto para el abordaje de problemas locales como de trastornos sistémicos. La dificultad o imposibilidad de concebir o mantener el embarazo puede requerir de estimulación/apoyo de la fase lútea en mujeres en edad fértil. Asimismo, en los abortos de repetición o amenazas de aborto se recurre a la administración empírica de progesterona natural por via vaginal. En los programas de reproducción asistida (por diferentes técnicas) se suele recurrir a la administración de hormonas, preferentemente progesterona natural, tanto por via oral como vaginal. En algunos de estos programas se administra también estriol por via vaginal. En inducción del parto o finalización de la gestación, se contempla administrar prostaglandinas o sus análogos, con vistas a la maduración y dilatación del cérvix uterino y la estimulación uterina . En patologías cicatriciales, por ejemplo después de episiotomia postparto o tras conización cervical, se suelen administrar por via tópica fármacos que favorecen la cicatrización. Por otra parte, ante la necesidad de métodos anticonceptivos se ha propuesto la administración de gestágenos y estrógenos por via vaginal .

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Existe, por tanto, la necesidad de contar con composiciones farmacéuticas mucoadhesivas vaginales de fácil aplicación, elevada capacidad de bioadhesión, no irritantes ni incómodas para la paciente y que permitan la liberación de principios activos de acuerdo a los objetivos preventivos y/o terapéuticos deseados. Los inventores de la presente invención han encontrado que la combinación de al menos un primer polímero gelificante bioadhesivo del tipo ácido poliacrilico entrecruzado con divinilglicol y al menos un segundo polímero gelificante bioadhesivo derivado del ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol permite obtener formulaciones semisólidas que tienen muy buena capacidad bioadhesiva. Es decir, hacen posible un contacto directo y prolongado de un agente farmacológicamente activo con biomembranas, asegurando asi una acción óptima sobre éstas sin producir mayores molestias al paciente. Asimismo, esta combinación de polímeros hace que las formulaciones resultantes sean hidratantes y posean agradables propiedades organolépticas las que, sumadas a su elevada bioadhesión, contribuyen a mejorar el cumplimiento en tratamientos preventivos o terapéuticos. En consecuencia, un primer aspecto de la presente invención se refiere a formulaciones mucoadhesivas semisólidas que comprenden al menos: - un primer polímero gelificante bioadhesivo del tipo ácido poliacrilico entrecruzado con divinilglicol en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - un segundo polímero gelificante bioadhesivo derivado del ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol, en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - un agente hidratante / humectante en una cantidad entre 0% y 20% en peso de la formulación, - un componente graso / lipófilo, en una cantidad entre 0% y 50% en peso de la formulación, - un agente solubilizante / emulsionante en una cantidad entre 0% y 70% en peso de la formulación, - agente neutralizante en cantidad suficiente para situar el pH de la formulación entre 2 y 6, - un agente farmacológicamente activo, - agua, en cantidad suficiente para completar la formulación. Por otra parte, la combinación de polímeros de la presente invención hace que los geles mucoadhesivos resultantes muestren una gran versatilidad. Es asi que permiten incorporar cantidades muy dispares de fármaco (desde centésimas a decenas de gramos de principio activo/100 gramos de formulación) manteniendo excelente bioadhesión y logrando eficacia profiláctica o terapéutica. Asimismo, la selección cuali y cuantitativa de los componentes de las formulaciones mucoadhesivas de la presente invención, permite ajusfar el perfil de cesión del fármaco al objetivo profiláctico y/o terapéutico buscado en cada caso, haciendo posible espaciar las aplicaciones (hasta una aplicación diaria o incluso más) y/o obtener un producto seguro. En suma, las formulaciones de la presente invención se pueden aplicar fácilmente por via vaginal, poseen muy buena capacidad bioadhesiva, no causan irritación ni molestias a la paciente, tienen propiedades hidratantes y permiten la liberación controlada del agente farmacológicamente activo de acuerdo al perfil deseado para cada condición clínica. Otro aspecto de la presente invención se refiere a procedimientos para la preparación de las formulaciones mucoadhesivas de la presente invención. Otro aspecto de la presente invención se refiere al uso de los geles mucoadhesivos de la presente invención en la preparación de medicamentos para la prevención o el tratamiento de diversas patologías y trastornos a nivel vaginal.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Fig.l - gráfico que ilustra la bioadhesión "in vitro" (indicada en términos de área) de cinco formulaciones (A, B, C, D y E) de acuerdo con la presente invención. Fig.2 - gráfico que ilustra la bioadhesión "in vitro" comparada de dos formulaciones de acuerdo con la presente invención (G y H) con una disponible comercialmente (F) . Fig. 3 - gráfico que ilustra la bioadhesión "in vivo" de una formulación de estriol 0,005 % a la mucosa vaginal de ratas ovariectomizadas . Fig. 4 - gráfico que ilustra la bioadhesión "in vivo" de una formulación de estriol 0,005 % a la mucosa vaginal de ratas sin ovariectomizar . Fig.5 - gráfico que ilustra los perfiles de cesión "in vitro" de cuatro formulaciones (K, L, Q, R) de acuerdo con la presente invención. Fig.6 - gráfico que ilustra los perfiles de cesión "in vitro" de seis formulaciones de estriol 0,05% con distintos excipientes (J, K, M, N, O, P) .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Una clase preferida de polímeros gelificantes bioadhesivos a utilizar en esta invención es la constituida por polímeros de ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o aliléteres de pentaeritritol, disponibles comercialmente bajo la denominación Carbopol® (Carbomer) por B.F. Goodrich Chemical Co . Carbopol® 934P se suele considerar el candidato ideal para administración vaginal. Durante el desarrollo de las formulaciones de la presente invención, sorprendentemente se ha encontrado que otros polímeros, por ejemplo Carbopol® 971P, pueden ser empleados con muy buenos resultados. Otra clase preferida de polímero gelificante bioadhesivo a emplear en la presente invención es la constituida por polímeros de ácido acrilico entrecruzado con divinilglicol, disponible comercialmente bajo la marca Noveon® AA-1 Polycarbophil USP

(Policarbofil AAl) . En particular, la combinación de Carbopol® 971P NF y Policarbofil AAl confiere excelentes propiedades bioadhesivas a las formulaciones presentes. Una realización de la presente invención se refiere a formulaciones mucoadhesivas semisólidas que comprenden al menos: - un primer polímero gelificante bioadhesivo del tipo del ácido poliacrilico entrecruzado con divinilglicol, en particular Policarbofil AAl, en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - un segundo polímero gelificante bioadhesivo derivado del ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol, en particular Carbopol 971P, en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - un agente hidratante / humectante seleccionado del grupo formado por glicerina, propilenglicol, dipropilenglicol, polietilenglicoles (por ejemplo PEG-4, PEG-6, PEG-8), poligliceroles (como diglicerol o triglicerol) , sorbitol, pentaeritriol, derivados de metiléter de glucosa, en una cantidad entre 0% y 20% en peso de la formulación, - un componente graso / lipófilo, seleccionado del grupo formado por parafina, vaselina, aceite mineral, aceites vegetales (por ejemplo de palma, maiz, cacahuete) , aceites vegetales hidrogenados, en una cantidad entre 0% y 50% en peso de la formulación, - un agente solubilizante / emulsionante seleccionado del grupo formado por esteres de ácidos grasos de polietilenglicol (como Labrafil M 1944) , derivados polioxietilenados de aceite de ricino (como Cremophor EL) , fosfolipidos y sus mezclas (como lecitina de huevo, de soja, etc.), esteres de ácidos grasos de polioxietilensorbitan (por ejemplo Polisorbatos 60 y 80) , alquilsulfatos de sodio (como laurilsulfato de sodio) , esteres de sorbitan, monoestearato de glicerilo, alquiléteres de polioxietileno, estearatos de polioxietileno, en una cantidad entre 0% y 70% en peso de la formulación, - un agente neutralizante, seleccionado del grupo formado por soluciones acuosas de NaOH, KOH y trietanolamina, en cantidad suficiente para situar el pH de la formulación entre 2 y 6, - un agente farmacológicamente activo, - agua, en cantidad suficiente para completar la formulación. En una realización más preferida Policarbofil AAl es utilizado en una cantidad entre 0,5% y 2,5%, y más preferiblemente entre 0,75% y 1,5%, mientras que Carbopol 971P es empleado en una cantidad entre 0,1% y 1%, y más preferiblemente entre 0,25% y 0,5% en peso de la formulación. Cuando las formulaciones de la presente invención contengan un agente hidratante, éste va a estar preferiblemente en una cantidad entre 5% y 15% en peso de la formulación. Cuando incluyan un componte graso y/o solubilizante, éste va a estar preferiblemente en una cantidad entre 5% y 50%, y más preferiblemente entre 10% y 40% en peso de la formulación. Si es necesario incluir, además, un agente emulsionante éste va a estar preferiblemente en una cantidad entre 0,1% y 15% en peso de la formulación. Además de los componentes antes mencionados, las formulaciones de la presente invención pueden incluir otros aditivos farmacéuticamente aceptables. Aditivos usuales incluyen agentes conservantes seleccionados entre parabenos y sus sales (por ejemplo metilparabeno, propilparabeno) , ácido sórbico y sus sales, ácido benzoico y sus sales, etc., en una cantidad entre 0,02% y 1% en peso de la formulación . Otros aditivos que pueden ser utilizados son ajustadores de pH, aromatizantes, colorantes e incrementadores de la penetración. Entre los ajustadores de pH se incluyen agentes acidificantes seleccionados entre soluciones acuosas de HC1, ácido láctico y ácido acético. Los agentes farmacológicamente activos que pueden ser administrados empleando las formulaciones de la presente invención, pero sin limitarse exclusivamente a ellos, incluyen: hormonas, antibacterianos, antifúngicos, antivirales, agentes activos contra enfermedades de trasmisión sexual (anti-STD) , espermicidas, anestésicos locales, antiinflamatorios, relajantes del músculo liso (antiespasmódicos) , inductores del parto (prostaglandinas) , etc. A modo de ejemplos no limitativos cabe citar los siguientes: Estrógenos: estriol, 17-β-estradiol . Progestágenos : progesterona, medrogestona, medroxi- progesterona. Antiprotozoarios : metronidazol Antibacterianos: clindamicina, trimetoprim, sulfametoxazol, penicilinas (ampicilina, meticilina) , cefalosporinas, tetraciclinas (doxiciclina) , bacitracina, lincomicina, colistina, polimixina B, vancomicina, gentamicina, kanamicina, neomicina, estreptomicina, eritro icina, amikacina, tobramicina. Antifúngicos: clotrimazol, ketoconazol, miconazol, fenticonazol, tioconazol, sertaconazol, oxiconazol, itraconazol, butaconazol, terconazol, saperconazol, troconazol, fluconazol, econazol, nistatina, amfotericina B. Antivirales (anti-HIV, anti-Herpes) con propiedades espermicidas: nonoxinol-9, octoxinol-9, menfegol. Anestésicos locales: tetracaina, mepivacaina, lidocaina, benzocaina, procaina. Corticoesteroides antiinflamatorios (glucocorticoides) : beta- metasona, hidrocortisona, triamcinolona, mometasona. Antimflamatorios no esteroideos: diclofenac, etodolac, íbuprofeno, mdometacina, meloxicam, piroxicam. Relajantes del músculo liso (agonistas β-adrenergicos) : terbutalma, ritodrma, ísoxsuprma, fenoterol, salambutol, hexoprenalma, metaproterenol, bitolterol y pirbuterol. Inductores del parto (Prostaglandmas y análogos) : PGE2 (dinoprostona) , PGF2α (dmoprost) , carboprost, sulprostona, misoprostol, gemeprost. Una realización especialmente preferida de la presente invención se refiere a formulaciones bioadhesivas que comprenden progesterona natural micronizada entre 10 y 50 % en peso de la formulación. Estas composiciones son útiles en tratamientos de deficiencias de la fase lútea, en particular en procedimientos de fertilización "m vitro" (FIV) . Otra realización especialmente preferida se refiere a formulaciones mucoadhesivas que contienen estriol en una cantidad entre 0,001 y 1 % en peso de la formulación. Estas composiciones son útiles en el tratamiento o la prevención de atrofia urogenital por déficit estrogenico. Otra realización especialmente preferida se refiere a formulaciones bioadhesivas que comprenden clotrimazol entre 1 y 50 % en peso de la formulación. Estas composiciones son útiles en el tratamiento o la prevención de candidiasis vaginal. Otra realización especialmente preferida se refiere a formulaciones mucoadhesivas que contienen clindamicma entre 1 y 30 % en peso de la formulación. Estas composiciones son útiles en el tratamiento o la prevención de vagmosis por agentes infecciosos . Las composiciones mucoadhesivas de la invención pueden ser aplicadas en una cantidad suficiente para formar una capa sobre toda la superficie vaginal, usualmente entre 1 a 5 gramos, que permite obtener un régimen posológico eficaz y seguro. Los dispositivos que se pueden utilizar con este fin son cualquiera de aquellos conocidos en el estado de la técnica, por ejemplo un aplicador con émbolo. Uno de los procedimientos que pueden ser utilizados para preparar las formulaciones mucoadhesivas de la presente invención comprende los pasos de: 1- disolver los conservantes en agua destilada, añadiendo si es necesario un agente acidificante hasta obtener un pH adecuado para la no gelificación de los polímeros en la etapa siguiente (aproximadamente entre 2,5 y 3,5), 2- añadir los polímeros gelificantes a la solución de la etapa anterior, agitando enérgicamente hasta conseguir una perfecta dispersión, 3- adicionar a la mezcla de la etapa anterior el agente neutralizante, agitando hasta lograr el pH adecuado para la gelificación de los polímeros y para la aplicación vaginal (aproximadamente entre 4 y 5) , 4- incorporar el resto de los componentes de la formulación al gel resultante de la etapa anterior. De forma alternativa, y en particular en el caso de los agentes activos hidrosolubles, el resto de los componentes pueden ser incorporados antes de formar el gel. Por otra parte, los ingredientes activos liposolubles pueden ser disueltos o dispersos en el agente hidratante / humectante antes de ser incorporados al gel. Otro método que puede ser empleado para obtener las formulaciones mucoadhesivas de la presente invención comprende las etapas de: 1'- disolver los conservantes en agua destilada, añadiendo un agente acidificante hasta obtener un pH adecuado para que los polímeros no gelifiquen en la etapa siguiente, 2'- añadir los polímeros gelificantes a la solución de la etapa anterior, agitando enérgicamente hasta lograr una perfecta dispersión, 3'- incorporar el agente activo a la mezcla constituida por el componente graso / lipófilo y el agente solubilizante / emulsionante, 4'- añadir la mezcla de la etapa 2' a la dispersión de la etapa 1' , 5'- añadir el agente neutralizante hasta lograr el pH adecuado para la gelificación de los polímeros y para la aplicación vaginal. Sin perjuicio de lo anteriormente mencionado, cualquier otro método de los conocidos por un experto en la materia, se puede utilizar para preparar las formulaciones de la presente invención.

ENSAYOS Las propiedades de las formulaciones de la presente invención se manifiestan a través los siguientes ensayos "in-vitro" e "in- vivo" no limitativos:

1- Ensayos de bioadhesión "in vitro" El aparato utilizado para medir esta propiedad es un analizador de textura, tal como el texturómetro TA-XT 21 de Stable Micro Systems, U.K., y el método es el descrito por Peh, K. et al. en J. Pharm. Sci. 2, 1999 con ciertas modificaciones descritas a continuación. Una membrana de cuero curtido, ligeramente humedecida con agua destilada, se coloca en el soporte superior móvil del equipo. La cantidad necesaria de gel para formar un disco de alrededor de 4 cm de diámetro, se deposita en la plataforma inferior del texturómetro. Se desplaza la membrana en forma descendente hasta que hace contacto con el gel y se aplica una fuerza predeterminada (0,1 kg durante 30 seg) . A continuación se inicia la separación desplazando la membrana en sentido ascendente a una velocidad predeterminada (1 mm/s) . Para evaluar la mucoadhesión de las diferentes formulaciones se determinan la fuerza de adhesión y el trabajo de adhesión. La medida correspondiente a la fuerza de adhesión se obtiene cuando el gel se separa completamente de la membrana. El trabajo de adhesión se calcula a partir del área de la curva obtenida al representar la fuerza que opone el gel a la separación frente al tiempo. Cada gel fue analizado por quintuplicado. Empleando el método antes mencionado (a una temperatura de 25

°C) se determinó la bioadhesión de las formulaciones A a H definidas a continuación. Formulación A: Clotrimazol 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA- -1 1,5 % Glicerina 10 % NaOH csp pH 4, 5 Agua csp 100 % Formulación B: Progesterona 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA- -1 1,5 % Propilenglicol 10 % Cremophor 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 % Formulación C: Progesterona 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA- -1 1,5 % Propilenglicol 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 % Formulación D: Estriol 0,05 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA- ^•1 1,5 % Glicerina 10 % Cremophor 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 % Formulación E: Estriol 0,05 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA- ^•1 1,5 % Glicerina 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 Formulación F: Disponible comercialmente (Crinone®) Progesterona 8 % Formulación G: Progesterona 8 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,5 % Propilenglicol 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 % Formulación H: Progesterona 8 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,5 % Propilenglicol 10 % Cremophor 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 % Los resultados obtenidos se muestran en la tabla I y en las figuras 1 y 2. Tabla I

El análisis de estos resultados permite concluir que los geles de la presente invención tienen excelente capacidad bioadhesiva, superando los valores obtenidos con la formulación comercialmente disponible (Formulación F) . Esta característica se mantiene aún a altas cargas de principio activo (Formulaciones A, B y C) , lo que las hace útiles en aquellas situaciones en las que se busca una aplicación diaria o una única aplicación de la formulación, como es el caso de los tratamientos FIV con progesterona y la terapia antifúngica con clotrimazol, respectivamente.

2- Ensayos de bioadhesión "in vivo" En el presente estudio se utilizaron un total de 40 ratas

Wistar hembras, 20 ovariectomizadas y 20 sin ovariectomizar . Las 20 ratas operadas se distribuyeron aleatoriamente en 4 grupos con

5 animales cada uno (grupos 1A a 4A) . Las 20 ratas sin operar se distribuyeron del mismo modo (grupos IB a 4B) . La formulación del Ejemplo 5 se administró tópicamente, mediante una cánula por via vaginal, en un volumen de 150 μL a las 40 ratas de los 8 grupos. Los animales se pueden mantener durante un tiempo suspendidos ligeramente de la cola para impedir la salida del gel al exterior. Habiendo transcurrido 1 hora desde la administración, se realizó un frotis vaginal a cada rata de los grupos 1A y IB. Lo mismo se hizo a las 2 horas para cada rata de los grupos 2A y 2B, a las 4 horas para las ratas de los grupos 3A y 3B, y a las 6 horas para los animales de los grupos 4A y 4B. Se permitió la eliminación natural de los restos de gel remanente en la mucosa vaginal de las 40 ratas y una semana después nuevamente se administró a todas ellas un volumen de 150 μL de la formulación en estudio. Habiendo transcurrido 8 horas desde la administración se realizó un frotis vaginal a cada rata de los grupos 1A y IB. A las

10 horas desde la administración el frotis se hizo para cada rata de los grupos 2A y 2B, a las 11 horas para las ratas de los grupos

3A y 3B, y a las 12 horas para los animales de los grupos 4A y 4B. Nuevamente se permitió la eliminación natural del gel remanente en la mucosa vaginal de todas las ratas y se repitió el procedimiento del párrafo anterior, realizando en este caso los frotis a las 15, 18, 21 y 24 horas para los grupos 1, 2, 3 y 4, respectivamente. Resultó entonces el siguiente esquema de trabajo: Grupo 1A: ratas ovariectomizadas, frotis realizado a 1, 8 y 15 horas, Grupo 2A: ratas ovariectomizadas, frotis realizado a 2, 10 y 18 horas, Grupo 3A: ratas ovariectomizadas, frotis realizado a 4, 11 y 21 horas, Grupo 4A: ratas ovariectomizadas, frotis realizado a 6, 12 y 24 horas, Grupo IB: ratas sin ovariectomizar, frotis realizado a 1, 8 y 15 horas, Grupo 2B: ratas sin ovariectomizar, frotis realizado a 2, 10 y 18 horas, Grupo 3B: ratas sin ovariectomizar, frotis realizado a 4, 11 y 21 horas, Grupo 4B: ratas sin ovariectomizar, frotis realizado a 6, 12 y 24 horas. Los frotis se tiñeron con Alcian Blue y se evaluó la muco adhesión según el método propuesto por Kockisch et . al en Journal of Controlled Reléase 77, 1-6 (2001) . Los resultados se muestran en las figuras 3 y 4. El análisis de los resultados permite concluir que la elevada capacidad bioadhesiva mostrada en los ensayos in vitro se manifiesta también in vivo, quedando aún gel adherido a mucosas a las 24 horas de su administración en las ratas ovariectomizadas y a las 12 horas en las ratas sin operar.

3- Ensayos de cesión "in vitro" de formulaciones de estriol El aparato utilizado para determinar los perfiles de cesión es un microdializador, tal como el Quix Sep® de Membrane Filtration Products, Inc. USA, y el método similar al descrito por

Senel, S. et al. en Proceed. Int. Sy p. Control. Reí. Bioact. Mater., 1998 o Chang, J.Y. et al. en Int . J. Pharm. , 2002 con ciertas modificaciones descritas a continuación. Se deposita alrededor de 1 g de gel en el dispositivo microdializador y se cubre con una membrana Cellu Sep® T2 de 6.000-8.000 Da de tamaño de corte molecular. Se introduce el sistema en un vaso con 25-50 mi de solución tampón y se mantiene en agitación magnética media. A los tiempos preestablecidos se toma 1 mi del medio de disolución y se reemplaza con solución fresca. Las muestras obtenidas se cuantifican por espectrofluorimetria (χ_eXcιtacιón = 280 nm , χ_emιsιón = 312 nm) . Se elabora una recta de calibrado con valores de fluorescencia para disoluciones estándar (0,05-10 μg/ml) y se utiliza para obtener la concentración de estriol de las diferentes muestras. Empleando el método antes mencionado se determinaron los perfiles de cesión de las formulaciones J a R definidas a continuación. Formulación J: Estriol 0,05 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,0 % Propilenglicol 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 Formulación K: Estriol 0,05 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,5 % Glicerina 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 Formulación L: Igual a Form.K pero además contiene 10 % Cremophor. Formulación M: Igual a Form. K pero además contiene 5 % Parafina. Formulación N: Igual a Form. K pero con 10% Propilenglicol en lugar de 10% Glicerina Formulación O: Igual a Form. K pero además contiene 5 % Labrafil. Formulación P: Igual a Form. K pero además contiene 5 % Vaselina. Formulación Q: Estriol 0,005 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,0 % Glicerina 10 % NaOH csp pH 4,5 Agua csp 100 Formulación R: Igual a Form. Q pero además contiene 10% Cremophor. Los resultados obtenidos se muestran en las figuras 5 y 6. El análisis de los mismos permite concluir que la selección cuali y cuantitativa de los polímeros y demás excipientes permite obtener diferentes perfiles de cesión del principio activo, acordes a los objetivos buscados en cada caso. Esta característica es particularmente importante en aquellos geles que contienen fármacos de efectos indeseables dependientes de la dosis, como es el caso de los estrógenos.

4- Ensayos de cesión y eficacia "in vivo" de formulaciones de estriol En el presente estudio se utilizaron un total de 32 ratas Wistar Han hembras ovariectomizadas que se distribuyeron aleatoriamente en 4 grupos con 8 animales cada uno (2 animales/jaula) : Grupo 1 tratado con Formulación T (0,125 mg estriol) Grupo 2 tratado con Formulación E (0,125 mg estriol) Grupo 3 tratado con Formulación Q (0,0125 mg estriol) Grupo 4 tratado con Formulación S (0,005 mg estriol) Formulación E: detallada anteriormente. Formulación Q: detallada anteriormente. Formulación S: igual a Formulaciones E y Q pero conteniendo 0,002 % de estriol en lugar de 0,05 % y 0,005 % de estriol, respectivamente . Formulación T: disponible comercialmente (Ovestinon®) conteniendo 0,1% de estriol. Las formulaciones farmacéuticas se administraron tópicamente, mediante una cánula por via vaginal, en un volumen de 125 μL la primera formulación y 250 μL las tres restantes. Tras haber transcurrido 15 dias desde la ovariectomia, se realizó un frotis vaginal diario a cada rata hasta comprobar el estado menopáusico en todas las ratas, determinando la ausencia de células cornificadas . El mismo dia que no se detectaron células cornificadas, se extrajo de cada rata una muestra de 0,1 mL de sangre para la determinación de los niveles básales de estriol mediante inmunoensayo enzimático (EIA) (Kit Comercial Oxford Biomedical) . Al dia siguiente se administraron las 4 formulaciones a los 4 grupos experimentales y se tomaron muestras de 0,25 mL de sangre a los 30 minutos y a las 1, 2, 4, 6, 8, 24 y 48 horas. Coincidiendo con el último muestreo (48 h) se realizó el primer frotis vaginal. Se siguieron realizando frotis vaginales diarios hasta la aparición de células cornificadas y entonces se dejaron de hacer.

Determinación de niveles plasmáticos de estriol Las muestras de sangre se centrifugaron a 12000 rpm durante 2 minutos, para la obtención de plasma que se congeló a -20°C. Una vez hecha la extracción de la última muestra de sangre (48 h) se procedió a la extracción de estriol de las muestras de plasma y a su inmediata determinación mediante EIA. Los resultados obtenidos se muestran en la tabla II. Tabla I I

Determinación de actividad estrogénica. Se introdujo, a través de la vulva, 1 mL de solución salina estéril en la vagina de las ratas y cuidadosamente se realizó la extracción de exudado. A continuación se procedió a la extensión del frotis. Por cada rata se realizaron dos frotis, que fueron fijados y teñidos, uno con el método de Diff-Quick y otro con el de Papanicolau. El efecto del tratamiento con cada una de las formulaciones se observó en función de la aparición de epitelio vaginal cornificado, según el test de Allen-Doisy. Éste es un test de actividad estrogénica. La desaparición de leucocitos y la aparición de células cornificadas en el frotis vaginal constituye un resultado positivo. Los resultados obtenidos se muestran en la tabla III. Tabla III

El análisis de los resultados obtenidos permite concluir que las formulaciones de la presente invención (E, Q, S) , a pesar de tener concentraciones entre 2 y 50 veces menores, muestran una eficacia terapéutica similar a la de la formulación comercialmente disponible (Formulación T) .

EJEMPLOS La invención se ilustra con los siguientes ejemplos no limitativos : 1- Procedimiento de preparación de geles de estriol 0,002% En un depósito de capacidad adecuada, se incorporan 2 kg de glicerina y 0,4 g de estriol. Se agita a 300 r.p.m. hasta completa disolución (aproximadamente 12 h) . En otro deposito de capacidad adecuada, provisto de sistema de agitación tipo turbo, se cargan 17,2 kg de agua desmineralizada y se adicionan lentamente, bajo agitación continua a 900 r.p.m., 36,63 g de metilparaben sódico (equivalentes a 32 g de metilparaben) y 4,49 g de propilparaben sódico (equivalentes a 4 g de propilparaben). Posteriormente se acidula con HC1 37% (c.s.p. pH=3,0-3,5) . Se agita a 500 r.p.m. durante 5 minutos. Se adiciona lentamente y bajo agitación continua 300 g de Policarbofil y 100 g de Carbopol 971P. Finalizada la incorporación, se mantiene la agitación a 900 r.p.m. durante 30 minutos, hasta lograr una perfecta mezcla. Se tapa el depósito y se deja en reposo la fase anterior durante 2 horas para conseguir una perfecta humectación de los agentes gelificantes. Se agrega la disolución de estriol en glicerina sobre la dispersión obtenida con los agentes gelificantes, con el turboagitador conectado. Se agita durante 20 minutos. Se adiciona una solución de hidróxido sódico al 10 %, lentamente y bajo agitación continua sobre la dispersión obtenida en la etapa anterior. Se mantiene la agitación durante 15 minutos. Si es necesario se ajusta el pH del gel resultante con NaOH al 10 % o HC1 al 10% para obtener un valor de pH final entre 4,5 y 5,5. Se ajusta el peso con agua desmineralizada y se mezcla bien. Se desairea el gel a vacio (0,8 bar) durante 2 horas.

2- Formulación de progesterona Progesterona 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Propilenglicol 10 % Cremophor 10 % Metilparabeno 0,15 % Propilparabeno 0,05 % HC1 37% csp pH 2,5 - 3,5 KOH 10% csp pH 4,5 Agua csp 100 %

3- Formulación de progesterona Progesterona 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Lecitina de soja 0,4 % Labrafil 37,5 % Metilparabeno 0,16 % Propilparabeno 0,02 % HC1 37% csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10% csp pH 4,5 Agua csp 100 % 4- Formulación de progesterona Progesterona 12,5 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Lecitina de soja 0,4 % Labrafil 25 % Metilparabeno 0,16 % Propilparabeno 0,02 % HC1 37 % csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10 % csp pH 4 , 5 Agua csp 100 % 5- Formulación de progesterona Progesterona 15 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Polisorbato 60 8 % Labrafil 45 % Metilparabeno 0,16 % Propilparabeno 0,02 % HC1 37 % csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10 % csp pH 4 , 5 Agua csp 100 %- Formulación de progesterona Progesterona 20 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Polisorbato 80 10 % Aceite de cacahuete 50 % Metilparabeno 0,16 % Propilparabeno 0,02 % HC1 37 % csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10 % csp pH 4 , 5 Agua csp 100 %- Formulación de estriol Estriol 0,05 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,5 % Glicerina 10 % Metilparabeno 0,15 % Propilparabeno 0,05 % HC1 37% csp pH 2,5 - 3,5 KOH 10% csp pH 4,5 Agua csp 100 %- Formulación de estriol Estriol 0,005 % (p/p) Carbopol 971P 0,5 % Policarbofil AA-1 1,5 % Glicerina 10 % Metilparabeno 0,16 % Propilparabeno 0,02 % HC1 37 % csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10% csp pH 4 , 5 Agua csp 100 %- Formulación de clotrimazol Clotrimazol 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Glicerina 10 % Cremophor 10 % Metilparabeno 0,16% Propilparabeno 0,02% HC1 37% csp pH 2,5 - 3,5 KOH 10% csp pH 4,5 Agua csp 100 %0- Formulación de clotrimazol Clotrimazol 25 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Lecitina de soja 0,4 % Labrafil 37,5 % Metilparabeno 0,16% Propilparabeno 0,02% HC1 37% csp pH 2, 5 - 3,5 NaOH 10% csp pH 4 , 5 Agua csp 100 %1- Formulación de clindamicina Clindamicina 10 % (p/p) Carbopol 971P 0,25 % Policarbofil AA-1 0,75 % Propilenglicol 10 % Metilparabeno 0,16% Propilparabeno 0,05% HC1 37% csp pH 2,5 - 3,5 NaOH 10% csp pH 4, 5 Agua csp 100 %

Claims

REIVINDICACIONES

1. Formulación mucoadhesiva semisólida caracterizada porque comprende : - al menos un primer polímero gelificante bioadhesivo del tipo ácido poliacrilico entrecruzado con divinilglicol en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - al menos un segundo polímero gelificante bioadhesivo derivado del ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol, en una cantidad entre 0,1% y 5% en peso de la formulación, - al menos un agente hidratante / humectante en una cantidad entre 0% y 20% en peso de la formulación, - al menos un componente graso / lipófilo, en una cantidad entre 0% y 50% en peso de la formulación, - al menos un agente solubilizante / emulsionante en una cantidad entre 0% y 70% en peso de la formulación, - al menos agente neutralizante, en cantidad suficiente para situar el pH de la formulación entre 2 y 6, - al menos un agente farmacológicamente activo, - agua, en cantidad suficiente para completar la formulación.

2. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero de ácido acrilico entrecruzado con divinilglicol es Policarbofil AAl.

3. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero de ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol es seleccionado del grupo formado por Carbopol 971P, Carbopol 940, Carbopol 941, Carbopol 980 y Carbopol 981.

4. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 3, caracterizada porque el polímero de ácido acrilico entrecruzado con alilsacarosa o alilpentaeritritol es Carbopol 971P.

5. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el agente hidratante / humectante es seleccionado del grupo formado por glicerina, propilenglicol, dipropilenglicol, polietilen-glicoles, poligliceroles, sorbitol, pentaeritriol y derivados de metiléter de glucosa.

6. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el componente graso / lipófilo es seleccionado del grupo formado por parafina, vaselina, aceite mineral, aceites vegetales y aceites vegetales hidrogenados.

7. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el solubilizante / emulsionante es seleccionado del grupo formado por esteres de ácidos grasos de polietilenglicol, derivados polioxietilenados de aceite de ricino, fosfolipidos y sus mezclas, ácidos grasos de polioxietilensorbitan, alquilsulfatos de sodio, esteres de sorbitan, monoestearato de glicerilo, alquiléteres de polioxietileno y estearatos de polioxietileno.

8. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, en la que el agente neutralizante es seleccionado del grupo formado por soluciones acuosas de NaOH, KOH y trietanolamina .

9. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el ingrediente farmacológicamente activo es seleccionado del grupo formado por hormonas, antibacterianos, antimicóticos, anti-protozoarios, agentes anti-STD, espermicidas, anestésicos locales, antiinflamatorios, inductores del parto y relajantes del músculo liso.

10. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque además comprende un agente conservante seleccionado entre parabenos y sus sales, ácido benzoico y sus sales y ácido sórbico y sus sales, en una cantidad entre 0,02% y 1% en peso de la formulación.

11. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el ingrediente activo es la hormona progesterona en cantidad farmacológicamente eficaz y no tóxica, y porque es administrada de modo de obtener niveles séricos de progesterona de 7 a 20 ng/ml.

12. Formulación de acuerdo con la reivindicación 11, en la que la progesterona es progesterona natural micronizada.

13. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 10 caracterizada, porque el ingrediente activo es la hormona estriol en una cantidad farmacéuticamente eficaz y no tóxica.

14. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 10, caracterizada porque el ingrediente activo es el antimicótico clotrimazol en una cantidad terapéuticamente eficaz y no tóxica.

15. Formulación de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 10, caracterizada porque el ingrediente activo es el antibacteriano clindamicina en una cantidad terapéuticamente eficaz y no tóxica.

16. Procedimiento para la preparación de las formulaciones de acuerdo con las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque comprende las etapas de: 1- disolver los conservantes en agua destilada, añadiendo un agente acidificante hasta obtener un pH adecuado para la no gelificación de los polímeros en la etapa siguiente (entre 2,5 y 3,5) 2- añadir los polímeros gelificantes a la solución de la etapa anterior, agitando enérgicamente hasta conseguir una perfecta dispersión, 3- adicionar a la mezcla de la etapa anterior el agente neutralizante, agitando hasta lograr el pH adecuado para la gelificación de los polímeros (entre 4 y 5) , 4- incorporar el resto de los componentes de la formulación al gel resultante de la etapa anterior.

17. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 16, caracterizado porque además comprende disolver o dispersar el agente farmacológicamente activo en el agente hidratante / humectante antes de incorporarlo en el gel.

18. Procedimiento para la preparación de las formulaciones de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 15 caracterizado porque comprende las etapas de: 1'- disolver los conservantes en agua destilada, añadiendo un agente acidificante hasta obtener un pH adecuado para la no gelificación de los polímeros en la etapa siguiente, 2'- añadir los polímeros gelificantes a la solución de la etapa anterior, agitando enérgicamente hasta lograr una perfecta dispersión, 3'- incorporar el agente activo a la mezcla constituida por el componente graso y el agente solubilizante / emulsionante, 4'- añadir la mezcla de la etapa 2' a la dispersión de la etapa 1' , 5'- añadir el agente neutralizante hasta lograr el pH adecuado para la gelificación de los polímeros.

19. Uso de las formulaciones de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 15 en la preparación de un medicamento de aplicación en mucosas.

20. Uso de la formulación de acuerdo con la reivindicación 11 ó 12 en la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de deficiencias de la fase lútea.

21. Uso de la formulación de acuerdo con la reivindicación 13 en la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de atrofia urogenital por déficit estrogénico.

22. Uso de la formulación de acuerdo con la reivindicación 14 en la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de candidiasis vaginal.

23. Uso de la formulación de acuerdo con la reivindicación 15 en la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de vaginosis por agentes infecciosos.