WO2004110438A1 - Agent de diagnostic et de therapie photodynamiques de maladies oncologiques - Google Patents

Agent de diagnostic et de therapie photodynamiques de maladies oncologiques Download PDF

Info

Publication number
WO2004110438A1
WO2004110438A1 PCT/BY2004/000005 BY2004000005W WO2004110438A1 WO 2004110438 A1 WO2004110438 A1 WO 2004110438A1 BY 2004000005 W BY2004000005 W BY 2004000005W WO 2004110438 A1 WO2004110438 A1 WO 2004110438A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
chlorin
polyvinylpyrrolidone
hours
tumor
therapy
Prior art date
Application number
PCT/BY2004/000005
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Peter Timofeevich Petrov
Henadz Aleksandrovich Isakau
Tatsiana Victorovna Trukhacheva
Mikhail Vladimirovich Haurylau
Mikhail Aleksandrovich Kaplan
Original Assignee
Peter Timofeevich Petrov
Henadz Aleksandrovich Isakau
Trukhacheva Tatsiana Victorovn
Mikhail Vladimirovich Haurylau
Mikhail Aleksandrovich Kaplan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Peter Timofeevich Petrov, Henadz Aleksandrovich Isakau, Trukhacheva Tatsiana Victorovn, Mikhail Vladimirovich Haurylau, Mikhail Aleksandrovich Kaplan filed Critical Peter Timofeevich Petrov
Publication of WO2004110438A1 publication Critical patent/WO2004110438A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/409—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having four such rings, e.g. porphine derivatives, bilirubin, biliverdine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the invention relates to the pharmaceutical industry and is intended for use in medicine in the diagnosis and treatment of malignant neoplasms of the skin, mucous membranes and hollow organs.
  • a photosensitizer For photodynamic therapy, a photosensitizer is required, which, after its introduction into the body, is able to selectively accumulate in the tumor tissue and, under the influence of radiation of a certain wavelength, produce particles that are toxic to these tissues, leading to their destruction.
  • the photodynamic effect has also been successfully used to diagnose neoplasms. This application is based on the fact that fluorescence induced by irradiation of a photosensitizer (PS) is many times higher than the fluorescence background of normal tissue and is recorded by a special system, accurately indicating the location of the malignant tumor.
  • Photodynamic therapy makes it possible to precisely control the selectivity of the therapeutic effect on tissues that have undergone pathological changes. Such selectivity is difficult to obtain by other methods, for example, chemotherapy or radiotherapy.
  • the most well-known agent used in the photodynamic therapy of cancerous tumors is currently a drug with the commercial name Photofrin II, which is a complex mixture containing hematoporphyrin elements connected by simple and complex ether bonds (polyhematoporphyrin ethers / esters) [1].
  • Photofrin II is a complex mixture containing hematoporphyrin elements connected by simple and complex ether bonds (polyhematoporphyrin ethers / esters) [1].
  • the sensitizer has an intense absorption band in the long wavelength region (more than bOOnm).
  • the extinction coefficient is relatively low ( ⁇ -ZOO ⁇ cm ⁇ M '1 ), as a result of which Photofrin has a small penetration depth of radiation into the tissues and treatment of tumors with a deeper localization is difficult.
  • this drug is characterized by a high level of accumulation in the skin and slow excretion from the body. Because of this, it has high phototoxicity, which can persist up to 12 weeks after treatment.
  • Photosensitizers based on chlorophyll derivatives are known, for example, chlorin e 6 and its derivatives [2]. Photosensitizers of this group have several advantages:
  • the prototype of the invention is a pharmaceutical composition (FC) based on chlorin e 6 and polyvinylpyrrolidone, in the following ratio of components (mass%): derivatives of chlorin ev - 40 ⁇ 90,
  • the aim of the invention is to obtain a means for photodynamic diagnosis and therapy, with a higher selectivity of accumulation in tumors, an increased therapeutic effect (increased degree of tumor necrosis) due to the strengthening
  • 25 photosensitizers are used on the basis of chlorophyll a derivatives, for example, chlorin e 6 and / or their derivatives, in combination with polyvinylpyrrolidone (PVP) in the following ratio of components by weight: chlorin e b - 1 part, polyvinylpyrrolidone - from 1.51 to 200 pieces.
  • the tool is prepared as follows: Example 1. A portion of 1 g of chlorin e 6 is dissolved with stirring in aqueous solution of sodium hydroxide with a volume of 0.3 l, dissolve 1.51 g of polyvinylpyrrolidone in water for injection with a volume of 0.7 l and the resulting solutions are mixed. Adjust the pH of the resulting solution with hydrochloric acid to 8.3 - 8.4, sterilize the filtration, and freeze-dry. FC is ready for use.
  • FIG. 1 Absorption spectrum of FC according to example 1 (1: 1.51) in phosphate buffer solution (pH 8.5)
  • Example 2 A portion of chlorin & in Ir is dissolved with stirring in a solution of sodium hydroxide with a volume of 0.3 l, then 10 g of polyvinylpyrrolidone is dissolved in water for injection with a volume of 0.7 l and the solutions are mixed. Adjust the pH of the resulting solution with acid hydrochloric to 8.3 - 8.4, sterilizing filtration is carried out and freeze-dried. FC is ready for use.
  • FIG. 2 The absorption spectrum of the FC according to example 2 (1: 10) in phosphate buffer solution (pH 8.5)
  • Example 3 A portion of chlorin e 6 Ir is dissolved with stirring in an aqueous solution of sodium hydroxide with a volume of 0.3 l, then 200 g of polyvinylpyrrolidone is dissolved in water for injection with a volume of 0.7 l and mixed
  • FIG. 3 The absorption spectrum of FC according to example 3 (1: 200) in phosphate 5 buffer solution (pH 8.5)
  • FC its content in Plissa lymphosarcoma is 2.0-3.1 times higher than the content in healthy tissue.
  • the ratio “textile / healthy tissue” is 2.0: 1; 2.2: 1; 3.1: 1; 2.4: 1; 2.2: 1 (Fig. 4), i.e. maximum accumulation contrast (k) is 3.1.
  • FC a complex of chlorin e 6 with polyvinylpyrrolidone 1:10)
  • its content in Pliss lymphosarcoma is 3.6-7.7 times higher than the content of the photosensitizer in healthy tissue.
  • the ratio “textile / healthy tissue” is 3.6: 1; 5.2: 1 and 7.2: 1; 7.7: 1; 5.6: 1 (Fig. 4), i.e. maximum accumulation contrast is 7.7.
  • FIG. 4 The accumulation of the claimed FC and FC prototype in lymphosarcoma
  • Plisa (FS accumulation level in normal tissue is taken as 1)
  • the claimed FC is characterized by a higher selectivity of accumulation in tumor tissues.
  • High contrast accumulation can improve the reliability of diagnosis of neoplasms.
  • This property of PS is especially important for the detection of small size 5 tumors, where only a significant excess of the fluorescence intensity of pathological zones in relation to healthy tissue can be distinguished with high reliability from their own fluorescent tissue background.
  • the use of the claimed FC allows to achieve a higher high efficiency of PDT by increasing the area of tumor necrosis and subsequent inhibition of tumor growth. This is confirmed by experimental data on the study of the area of tumor necrosis after PDT using FC based on the complex chlorin e 6 : polyvinylpyrrolidone in a mass ratio of 1: 10.
  • FIG. 5 Inhibition of tumor growth after PDT with the claimed FC and FC prototype.
  • Figure 6 shows the absorption spectra of the complex of chlorin e 6 with polyvinylpyrrolidone in phosphate buffered saline (0.05M, pH 8.5) at a weight ratio of chlorin e 6 : polyvinylpyrrolidone 1: 1, 1: 10 and 1: 200.
  • Spectral changes associated with the bathochromic shift of the long-wavelength absorption band of the sensitizer and the simultaneous increase in the absorption intensity indicate the interaction of chlorin e 6 molecules and polyvinylpyrrolidone in solution and the formation of a molecular complex.
  • FIG. 6 Absorption spectra of the complex of chlorin e 6 with polyvinylpyrrolidone in phosphate buffer solution (0.05M, pH 8.5) according to the prototype (1), and with a mass ratio of chlorin e b : polyvinylpyrrolidone 1:10 (2), 1: 200 (3).
  • the concentration of chlorin e 6 is the same for the three samples.
  • Derivatives exhibit similar properties to chlorin e 6 .
  • a number of its derivatives for example, chlorin r b ,
  • FIG. 7 Dependence of the absorption solution growth (in%) multicomponent PS comprising chlorin e 6 and purpurin 5 monoethyl ether of chlorin e 6 concentrations of polyvinylpyrrolidone
  • FC consisting of chlorin e b and polyvinylpyrrolidone in a weight ratio of 1: 1.51, 1: 10, 1: 200 relative to the prototype has shown that the claimed FC possess a

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

СРЕДСТВО ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ И ТЕРАПИИ
ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и предназначено для использования в медицине при диагностике и лечении злокачественных новообразований кожи, слизистых оболочек и полых органов.
Для фотодинамической терапии необходимо наличие фотосенсибилизатора, который после его введения в организм способен селективно накапливаться в опухолевой ткани и под воздействием излучения определенной длины волны продуцировать частицы, токсичные для этих тканей, приводя к их разрушению. Фотодинамический эффект также успешно используется для диагностики новообразований. Это применение основано на том, что флуоресценция, индуцированная облучением фотосенсибилизатора (ФС), многократно превышает флуоресцентный фон нормальной ткани и регистрируется специальной системой, точно указывая локализацию злокачественной опухоли. Фотодинамическая терапия дает возможность точного контроля избирательности терапевтического воздействия на ткани, претерпевшие патологические изменения. Такую избирательность трудно получить другими методами, например, химиотерапией или радиотерапией.
Наиболее известным средством, используемым в фотодинамической терапии раковых опухолей, в настоящее время является препарат с коммерческим названием Фотофрин II, представляющий собой сложную смесь, содержащую гематопорфириновые элементы, соединенные простыми и сложными эфирными связями (полигематопорфириновые простые/сложные эфиры) [1]. Для эффективного проведения процесса фотодинамической терапии важно наличие у сенсибилизатора интенсивной полосы поглощения в длинноволновой области (более бООнм). Для Фотофрина в наиболее длинноволновой полосе поглощения (630 ± Юнм) 5 коэффициент экстинкции относительно невысок (ε-ЗОООсм^М'1), в результате чего для Фотофрина характерна малая глубина проникновения излучения в ткани и затруднено лечение опухолей более глубокой локализации. Кроме того, данный препарат характеризуется высоким уровнем накопления в коже и медленным выведением из организма. Из-за ю этого он обладает высокой фототоксичностью, которая может сохраняться до 12 недель после проведения лечения.
К недостаткам фотосенсибилизаторов на основе полигематопорфиринов следует также отнести неопределенность химического состава вследствие нестандартности основного сырья,
15 склонность к агрегации в водных растворах и недостаточно высокую избирательность накопления в опухоли.
Известны фотосенсибилизаторы на основе производных хлорофилла, например хлорин e6 и его производные [2]. Фотосенсибилизаторы данной группы имеют ряд преимуществ:
20 - большую глубину проникновения возбуждающего излучения в ткани, поскольку максимум поглощения хлоринов лежит вблизи окна прозрачности биологической ткани (650-680 нм);
- более высокий уровень накопления фотосенсибилизатора в опухолевых тканях;
25 - более оптимальные фармакокинетические характеристики препарата в организме - хлорин e6 быстро накапливается в опухоли и практически полностью выводится из организма в течение нескольких дней, т.е. фототоксичность проявляется в значительно меньшей степени, чем для гематопорфиринов; зо - препараты на основе хлоринов обладают выраженной фотодинамической активностью.
Прототипом изобретения является фармацевтическая композиция (ФК) на основе хлорина e6 и поливинилпирролидона, при следующем соотношении компонентов (масс %): производные хлорин ев - 40 ÷ 90,
5 поливинилпирролидон - 10 ÷ 60, что эквивалентно соотношению в массовых частях - хлорин e6: поливинилпирролидон = 1 : (0,1 - 1.5) [3]. Такая композиция позволяет сохранить стабильность основных физико-химических характеристик препарата в процессе хранения. Кроме того, использование лиофилизированной лекарственной формы в виде комплекса хлорина e6 с ю поливинилпирролидоном предотвращает процессы агрегации хлоринов, улучшает их растворимость. Снижение агрегации позволяет сохранить более высокий квантовый выход синглетного кислорода и, следовательно, обеспечивает более высокий цитотоксический эффект. Однако, коэффициент избирательности фотосенсибилизатора, заявленного в прототипе, не
15 превышает 4.
Целью изобретения является получение средства для фотодинамической диагностики и терапии, обладающего более высокой избирательностью накопления в опухолях, повышенным терапевтическим эффектом (увеличение степени некроза опухолей) за счет усиления
20 генерации цитотоксических частиц.
Повышение коэффициента избирательности накопления позволяет значительно повысить достоверность и эффективность диагностики злокачественных новообразований с помощью предлагаемой ФК.
Поставленная цель достигается тем, что в качестве
25 фотосенсибилизатора используются ФК на основе производных хлорофилла «a», например хлорина e6 и/или их производных, в комплексе с поливинилпирролидоном (ПВП) при следующем соотношении компонентов по массе: хлорин еб - 1 часть, поливинилпирролидон - от 1,51 до 200 частей. Средство получают следующим образом: зо Пример 1. Навеску 1 г хлорина e6 растворяют при перемешивании в водном растворе гидроокиси натрия объемом 0.3л, растворяют 1,51 г поливинилпирролидона в воде для инъекций объемом 0.7л и полученные растворы смешивают. Юстируют рН полученного раствора кислотой хлористоводородной до 8.3 - 8.4, проводят стерилизующую фильтрацию и высушивают лиофильно. ФК готова к применению.
Спектр поглощения продукта по примеру 1 в фосфатном буферном растворе (рН 8.5) представлен на фиг. 1 (λmax: 504, 535, 602, 655.5).
Figure imgf000005_0001
45 П. 475. 500. 525. 550. 575. 600. 6?,5. 650. 675. 700. 725.
HM ю Фиг. 1 Спектр поглощения ФК по примеру 1 (1 :1.51) в фосфатном буферном растворе (рН 8.5)
Изучение динамики накопления ФК по примеру 1 в опухолевой и здоровой тканях показывает, что его содержание в лимфосаркоме Плисса в
15 2.8 - 4.5 раза превышает содержание в здоровой ткани. В сроки 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов отношение «oпyxoль/здopoвaя ткaнь» составляет 2.8:1, 3.2:1, 4.5:1, 4.1:1, 3.4:1.
Изучение площади некроза опухоли лимфосаркома Плисса после ФДТ с ФК по примеру 1 показало, что она составляет 45,3%.
20 Пример 2. Навеску хлорина &в Ir растворяют при перемешивании в растворе гидроокиси натрия объемом 0.3л, затем растворяют 10 г поливинилпирролидона в воде для инъекций объемом 0.7л и смешивают растворы. Юстируют рН полученного раствора кислотой хлористоводородной до 8.3 - 8.4, проводят стерилизующую фильтрацию и высушивают лиофильно. ФК готова к применению.
Спектр поглощения продукта полученный по примеру 2 в фосфатном буферном растворе (рН 8.5) представлен на фиг. 2 (λmax: 504.5, 536.0, 604.5, 658.5).
Figure imgf000006_0001
450.0 475.0 500.0 525.0 550.0 575.0 600.0 625.0 650.0 675.0 700.0 725.0нм
Фиг. 2 Спектр поглощения ФК по примеру 2 (1 :10) в фосфатном буферном растворе (рН 8.5)
ю Изучение динамики накопления ФК по примеру 2 в опухолевой и здоровой тканях показывает, что его содержание в лимфосаркоме Плисса в 3,6-7,7 раза превышает содержание в здоровой ткани. В сроки 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов отношение «oпyxoль/здopoвaя ткaнь» составляет 3.6:1, 5.2:1, 7.2:1, 7.7:1, 5.6:1.
15 Изучение площади некроза опухоли лимфосаркома Плисса после ФДТ с ФК по примеру 2 показало, что она составляет 63,8%.
Пример 3. Навеску хлорина e6 Ir растворяют при перемешивании в водном растворе гидроокиси натрия объемом 0.3л, затем растворяют 200 г поливинилпирролидона в воде для инъекций объемом 0.7л и смешивают
20 растворы. Юстируют рН полученного раствора кислотой хлористоводородной до 8.3 - 8.4, проводят стерилизующую фильтрацию и высушивают лиофильно. ФК готова к применению. Спектр поглощения продукта по примеру 3 в фосфатном буферном растворе (рН 8.5)пpeдcтaвлeн на фиг. 3 (λmax: 505.5, 536, 607.5, 662.5).
Figure imgf000007_0001
450.0 475.0 500.0 525.0 550.0 575.0 600.0 625.0 650.0 675.0 700.0 725.0 HM
Фиг. 3 Спектр поглощения ФК по примеру 3 (1 :200) в фосфатном 5 буферном растворе (рН 8.5)
Изучение динамики накопления ФК по примеру 3 в опухолевой и здоровой тканях показывает, что его содержание в лимфосаркоме Плисса в
7,5-16,2 раза превышает содержание в здоровой ткани. В сроки 1 час, 2 часа, ιо 4 часа, 6 часов, 8 часов отношение «oпyxoль/здopoвaя ткaнь» составляет
7.5:1, 9.8:1, 16.2:1, 13.2:1, 10.9:1.
Изучение площади некроза опухоли лимфосаркома Плисса после ФДТ с ФК по примеру 3 показало, что она составляет 81,1%.
Увеличение содержания поливинилпирролидона по сравнению с 15 прототипом приводит к получению ряда новых положительных свойств ФС.
Во-первых, значительно повышается избирательность накопления препарата в опухолевой ткани. Оценка этого эффекта проведена путем сопоставления данных накопления ФК на основе комплекса хлорина еб с поливинилпирролидоном (1:10) в опухолевой и здоровой тканях. В качестве
20 препарата сравнения взята ФК по прототипу.
Исследования накопления фотосенсибилизаторов в тканях выполнены на белых рандомбредных лабораторных крысах обоего пола массой 150-180 г. Измерения осуществляли, когда перевитые опухоли достигли размеров 0,5- 1 см3. Число животных в группе: по 3 крысы на каждую точку фармакокинетической кривой. Раствор ФК вводили однократно внутривенно в дозе 5,0 мг/кг, наблюдения проводили в течение 48 часов после инъекции. В качестве растворителя ФК использовали раствор натрия хлорида 0,9% для инъекций.
При введении ФК по прототипу его содержание в лимфосаркоме Плисса в 2.0-3.1 раза превышает содержание в здоровой ткани. В сроки 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов отношение «oпyxoль/здopoвaя ткaнь» составляет 2.0:1; 2.2:1; 3.1:1; 2.4:1; 2.2:1 (фиг. 4), т.е. максимальная контрастность накопления (k) составляет 3,1.
При введении ФК по предлагаемому изобретению (комплекс хлорина e6 с поливинилпирролидоном 1:10) его содержание в лимфосаркоме Плисса в 3,6-7,7 раза превышает содержание фотосенсибилизатора в здоровой ткани. В сроки 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов отношение «oпyxoль/здopoвaя ткaнь» составляет 3,6:1; 5,2:1 и 7,2:1; 7,7:1; 5,6:1 (фиг. 4), т.е. максимальная контрастность накопления составляет 7,7.
Figure imgf000008_0001
Время после введения пепарата, часы
Фиг. 4 Накопление заявляемой ФК и ФК по прототипу в лимфосаркоме
Плиса (уровень накопления ФС в нормальной ткани взят за 1) Таким образом, заявляемая ФК характеризуется более высокой избирательностью накопления в опухолевых тканях. Высокая контрастность накопления позволяет повысить надежность диагностики новообразований. Это свойство ФС особенно важно для детектирования опухолей небольшого 5 размера, где только значительное превышение интенсивности флуоресценции патологических зон по отношению к здоровой ткани позволяет с высокой достоверностью отличить от их собственного флуоресцентного фона тканей.
Во-вторых, применение заявляемой ФК позволяет достичь более ю высокой эффективности ФДТ за счет увеличения площади некроза опухоли и последующего торможения роста опухолей. Это подтверждено экспериментальными данными по исследованию площади некроза опухолей после ФДТ при использовании ФК на основе комплекса хлорин e6 : поливинилпирролидон в массовом соотношении 1 :10. В качестве препарата
15 сравнения взята ФК по прототипу.
Исследования выполняли на белых беспородных лабораторных крысах с перевитой подкожно саркомой. Площадь некрозов оценивалась по функциональному состоянию сосудистой системы опухолей после фотооблучения лимфосарком Плисса в дозе 100 Дж/см2 спустя 3 часа от 20 момента внутривенного введения фотосенсибилизаторов в дозе 2.5 мг/кг. С этой целью через 24 часа после воздействия внутривенно вводили животным 0.6% раствор синьки Эванса в физиологическом растворе в дозе 1.0 мл/ЮОг веса.
Проведенные эксперименты показали, что площадь некроза для ФК по 25 прототипу и заявляемой ФК (1:10) равны соответственно 41.3 и 62.8%.
Таким образом, показано, что заявляемая ФК позволяет достичь более полного повреждения опухолевой ткани.
В-третьих, применение заявляемой ФК позволяет достичь более высокой степени торможения роста опухоли. Для оценки торможения роста зо опухоли саркомы M-I проводили эксперимент аналогичный предыдущему с дозой облучения 300 Дж/см2. В качестве растворителя использовали раствор натрия хлорида 0,9% для инъекций. Раствор фотосенсибилизатора вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 5,0 мг/кг и проводили облучение опухоли через 3 часа. Наблюдение продолжалось в течение 21 суток после проведения ФДТ. Динамика коэффициента абсолютного прироста опухолей после ФДТ при использовании ФК на основе комплекса xлopинe6:пoливинилпиppoлидoн в массовом соотношении 1 :10 и ФК по прототипу показана на фиг. 5.
Figure imgf000010_0001
(10:1)
Фиг. 5 Торможение роста опухолей после ФДТ с заявляемой ФК и ФК по прототипу.
Как следует из экспериментальных данных при использовании заявляемой ФК рост опухоли в течение 21 дня после проведения ФДТ не наблюдается. В случае использования ФК по прототипу на десятые сутки наблюдения фиксируется повторный рост опухоли. Таким образом, показано, что заявляемая ФК обладает преимуществом по сравнению с представленной в прототипе, так как способна разрушить все раковые клетки.
Достигнутые положительные фармакологические свойства объясняются физико-химическими характеристиками заявляемой ФК. На фиг 6 показаны спектры поглощения комплекса хлорина e6 с поливинилпирролидоном в фосфатном буферном растворе (0.05M, рН 8.5) при массовом соотношении хлорин e6 : поливинилпирролидон 1 :1, 1 :10 и 1:200. Спектральные изменения, связанные с батохромным смещением длинноволновой полосы поглощения сенсибилизатора и одновременным увеличением интенсивности поглощения свидетельствуют о взаимодействии молекул хлорина e6 и поливинилпирролидона в растворе и образовании молекулярного комплекса.
Figure imgf000011_0001
560.0 580.0 600.0 620.0 640.0 660.0 680.0 700.0
Фиг. 6 Спектры поглощения комплекса хлорина e6 с поливинилпирролидоном в фосфатном буферном растворе (0.05M, рН 8.5) по прототипу (1), и при массовом соотношении хлорин еб : поливинилпирролидон 1:10 (2), 1 :200 (3). Концентрация хлорина e6 одинакова для трех образцов.
Аналогичные хлорину e6 свойства проявляют и его производные. При взаимодействии в водном растворе молекул ПВП и многокомпонентного ФС, содержащего кроме хлорина еб ряд его производных (например хлорин рб,
ю моноэтиловый эфир хлорина e6, пурпурин 5) также наблюдается батохромный сдвиг вместе с увеличением интенсивности поглощения в длинноволновой полосе фотосенсибилизатора. Доказательством этому служит зависимость прироста поглощения раствора (в %) многокомпонентного ФС, включающего хлорин Q6, пурпурин 5 и моноэтиловый эфир хлорина e6 от концентрации поливинилпирролидона (фиг. 7). Форма приведенной кривой и абсолютные значения интенсивности поглощения (при одинаковой суммарной концентрации фотосенсибилизатора) практически не зависят от соотношения производных хлорина.
Figure imgf000012_0001
Соотношение ФC:ПBП (m:m)
Фиг. 7 Зависимость прироста поглощения раствора (в %) многокомпонентного ФС, включающего хлорин e6, пурпурин 5 и моноэтиловый эфир хлорина e6 от концентрации поливинилпирролидона
Это можно объяснить тем, что гидрофобный остов тетрапиррольной молекулы хлорина, который присутствует во всех производных хлорина еg, является определяющим для степени взаимодействия
(комплексообразования) с молекулами ПВП. Поэтому комплексообразование и поливинилпирролидона с производными хлорина e6 также приводит к изменению ряда физико-химических характеристик раствора ФС и получению положительных фармакологических свойств препарата в фотодинамической терапии и диагностике.
5 Экспериментальные исследования изменения интенсивности поглощения раствора хлорина e6 и/или его производных в зависимости от содержания поливинилпирролидона (фосфатный буферный раствор 0.05M, рН 8.5) позволяют обосновать нижний и верхний пределы соотношения хлорин &в '. поливинилпирролидон 1 : (1.51-200) в заявляемой ФК. Результаты ю этих исследований показаны на фиг. 7.
Как видно из приведенной зависимости, при содержании ПВП выше верхнего предела (1 : 200) практически не происходит дальнейшего возрастания интенсивности поглощения красной полосы раствора ФК. Кроме того, при более высоком содержании ПВП раствор препарата имеет высокую
15 вязкость. Это создает проблемы при его введении и может вызывать отрицательную реакцию организма.
Таким образом, сравнительное изучение ФК, состоящих из хлорина еб и поливинилпирролидона в соотношении по массе 1 :1.51, 1 :10, 1 :200 по отношению к прототипу, показало, что заявляемые ФК обладают более
20 высокой избирательностью накопления в опухоли и, следовательно, более высокой диагностической способностью. При увеличении доли поливинилпирролидона происходит увеличение коэффициента экстинкции фотосенсибилизатора и смещение максимума поглощения в красную область. Такие изменения способствуют усилению цитотоксического
25 эффекта и увеличению глубины проникновения излучения в ткани, приводя к повышению специфической активности и диагностической эффективности этих ФК, что показано в примерах выше.
Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет добиться существенных качественных отличий заявляемого средства по сравнению с зо прототипом. Литература
1. Byrne CJ, Маrshаllsау LV, Wаrd AD, J. Рhоtосhеm. Рhоtоbiоl: В., 6 (1- 2), 1990.
5 2. Патент РФ N 2054476 "Способ получения 18-кaρбoкcи-20-
(кapбoкcимeтил)-8-этeнил-13-этил-2,3-дигидpo-3,7Д2Д7-тeтpaмeтил- 2Ш,23H-пopфин-2-пpoпиoнoвoй кислоты или ее солей".
3. Решение о выдаче патента по заявке N°19990767 от 16.05.03, «Cpeдcтвo для фотодинамической терапии злокачественных ю новообразований - фoтoлoн», П.Т. Петров и др.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний на основе порфиринов с использованием в качестве сенсибилизатора хлорина e6 и/или его производных и поливилпирролидона, отличающееся тем, что содержит указанные компоненты в следующем соотношении (по массе): хлорин e6 - 1 часть, поливинилпирролидон от 1.51 до 200 частей.
PCT/BY2004/000005 2003-06-17 2004-02-10 Agent de diagnostic et de therapie photodynamiques de maladies oncologiques WO2004110438A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BY20030608 2003-06-17
BYA20030608 2003-06-17

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2004110438A1 true WO2004110438A1 (fr) 2004-12-23

Family

ID=33546107

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/BY2004/000005 WO2004110438A1 (fr) 2003-06-17 2004-02-10 Agent de diagnostic et de therapie photodynamiques de maladies oncologiques

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2004110438A1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006106383A1 (en) * 2005-04-07 2006-10-12 Photo Diagnostic Devices (Pdd) Ltd Photosensitizers and mri enhancers
RU2568597C1 (ru) * 2014-11-27 2015-11-20 Общество с ограниченной ответственностью "РЕВИКСАН" (ООО "РЕВИКСАН") Фотосенсибилизатор и способ его получения

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4977177A (en) * 1985-04-30 1990-12-11 Nippon Petrochemicals Company, Ltd. Tetrapyrrole polyaminomonocarboxylic acid therapeutic agents
RU2152790C1 (ru) * 1999-05-12 2000-07-20 Мещерякова Аделия Леонидовна Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
RU2183956C1 (ru) * 2001-03-30 2002-06-27 Общество с ограниченной ответственностью "РАДА-ФАРМА" Фотосенсибилизатор и способ его получения

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4977177A (en) * 1985-04-30 1990-12-11 Nippon Petrochemicals Company, Ltd. Tetrapyrrole polyaminomonocarboxylic acid therapeutic agents
RU2152790C1 (ru) * 1999-05-12 2000-07-20 Мещерякова Аделия Леонидовна Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
RU2183956C1 (ru) * 2001-03-30 2002-06-27 Общество с ограниченной ответственностью "РАДА-ФАРМА" Фотосенсибилизатор и способ его получения

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006106383A1 (en) * 2005-04-07 2006-10-12 Photo Diagnostic Devices (Pdd) Ltd Photosensitizers and mri enhancers
RU2568597C1 (ru) * 2014-11-27 2015-11-20 Общество с ограниченной ответственностью "РЕВИКСАН" (ООО "РЕВИКСАН") Фотосенсибилизатор и способ его получения

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5972171B2 (ja) 光力学的療法のためのヒト血清アルブミンをベースにしたナノ粒子キャリアシステム
CN1980661B (zh) 阳离子细菌叶绿素衍生物及其用途
KR101419124B1 (ko) 폴리에틸렌옥사이드-폴리프로필렌옥사이드 블록공중합체와 광감작제가 공유 결합된 광역학 치료용 복합체
JPH0794392B2 (ja) 新規なテトラピロ−ルポリアミノモノカルボン酸医薬用組成物
JPH0688902B2 (ja) 新規なテトラピロ−ル医薬用組成物
AU2013357030B2 (en) Chlorin derivative useful in photodynamic therapy and diagnosis
JPH08501301A (ja) 血液における感光剤の皮膚を通しての生体内活性化
CN110448699B (zh) 包含功能性多肽修饰七甲川花菁素类染料的肿瘤细胞核靶向载药纳米粒子及制备方法
CN111072679B (zh) 一种非周边季铵基修饰锌酞菁及其制备方法和应用
CA1291710C (en) Tetrapyrrole therapeutic agents
RU2367434C1 (ru) Фотосенсибилизатор и способ его получения
US9999760B2 (en) DVDMS sensitizer for cancer sonodynamic therapy
RU2152790C1 (ru) Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
CN106924732A (zh) 一种超声治疗用肿瘤靶向型血卟啉注射剂及其制备方法
CN113616809B (zh) 超分子有机框架材料在清除光动力治疗残留药物中的应用
AU2005330277A1 (en) Photosensitizers and MRI enhancers
WO2004110438A1 (fr) Agent de diagnostic et de therapie photodynamiques de maladies oncologiques
Istomin et al. Uptake and phototoxicity of tricarbocyanine indolenine dye covalently bound with glucose (TICS) under acidification of tumor cells environment
KR20150011521A (ko) 광역학 치료를 위한 덴드리머 형태의 폴리아미노산 기반 수용성 광응답제 및 이의 제조방법
CN111393465A (zh) 一种轴向半乳糖/乳糖修饰的硅酞菁及其制备方法和应用
RU2549953C2 (ru) Фотосенсибилизатор для фотодинамической терапии
KR101459226B1 (ko) 광역학 치료를 위한 폴리아미노산 기반의 수용성 광응답제 및 이의 제조방법
CN113717183B (zh) 周环不对称精氨酸修饰酞菁及其制备和在制药领域的应用
CN100439372C (zh) 卟啉衍生物
RU2663900C1 (ru) Водорастворимая лекарственная форма мезо-тетра(3-пиридил)бактериохлорина для фотодинамической терапии

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
122 Ep: pct application non-entry in european phase