WO1999011780A2 - Conductinprotein und verwandtes mittel zur diagnose und zur therapie von tumorerkrankungen - Google Patents

Conductinprotein und verwandtes mittel zur diagnose und zur therapie von tumorerkrankungen Download PDF

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Jürgen BEHRENS
Walter Birchmeier
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Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin
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Definitions

  • the invention relates to new ways of combating tumor diseases by utilizing molecular biological relationships in the development of tumors. It relates specifically to a means of diagnosing tumor diseases and, based on this, to a means of therapy. It also relates to the new protein conductin, its mutants and variants as well as parts thereof, the cDNA sequences analogous to this and their use in gene therapy and pharmacological processes. Areas of application of the invention are medicine and the pharmaceutical industry.
  • Cadherins and catenins form cell adhesion complexes that are responsible for the attachment of cells to one another in numerous tissues.
  • the cadherins are transmembrane proteins and establish direct contact between neighboring cells.
  • - ⁇ , ß- and ⁇ -catenin are cytoplasmic components that connect the cadherins with the actin cytoskeleton.
  • catenins also play a crucial role in signal transduction processes.
  • b-Catenin in vertebrates and the homologous segment polarity gene product Armadillo in Drosphila are stabilized by the Wnt / Wingless signaling pathway (N sse, R., Cell 89, 321-323, 1997).
  • This pathway also plays a role in tumor development.
  • the cytoplasmic pool of ß- Catenin is strictly regulated by the tumor suppressor gene product APC (Adenomatosis Polyposis Coli). Mutations in APC, such as occur in approximately 80% of all colon carcinomas, lead to shortened forms of the APC protein which are no longer able to destabilize ß-catenin. As a result, permanent complexes of ⁇ -catenin with the HMG transcription factor TCF-4 are found in these tumors, which are made responsible for the transformation of the cells. This theory is supported by the recent finding that ß-catenin mutations occur in tumors in which APC is not changed. These also lead to the cytoplasmic stabilization of ß-catenin and to association with LEF-1 / TCF factors (Morin, PJ et. Al., Science 275, 1787-1790).
  • the aim of the invention is to find a new way of preventing tumor formation.
  • the invention has for its object to develop a method for controlling the regulation of ⁇ -catenin in body cells.
  • the invention relates to a new protein which binds to ⁇ -catenin and leads to its cytoplasmic breakdown.
  • This protein has the amino acid sequence shown in Fig. 1 and was called CONDUCTIN.
  • the invention is now based on our own knowledge that conductin via a ⁇ -catenin binding domain to ⁇ -catenin, via a GSK 3ß binding domain to GSK 3ß and via a so-called RGS domain (regulator of G-protein signaling) to APC- Binds fragments.
  • This leads to the cytoplasmic breakdown of ß-catenin and in vertebrates to blockage of the Wnt / wingless signaling pathway. It is therefore clear that Conductin is an important regulator of the ß-catenin function and, in combination with APC, contributes to tumor suppression.
  • the invention relates to an agent for the diagnosis of tumor diseases, which is characterized in that the presence and the amount of Conductin, its mutants and variants or its parts are detected in body cells becomes.
  • This detection can be carried out at the protein level with specific antibodies, especially with monoclonal antibodies.
  • tumor diseases can also be diagnosed at the gene level.
  • selected primers and cDNA probes which are derived from the gene sequence of the conductin,
  • the agent according to the invention for the therapy of tumor diseases contains substances which activate / reactivate the effect of the conductin in the body.
  • these are agents which activate the gene promoter of the conductin or agents which increase the stability of the m-RNA sequences derived from the conductin genes.
  • the main goal of all these agents is to increase the activity of the conductin in the body cells.
  • small molecular substances into consideration, which, for. B. can be found by high-througput number screening.
  • the invention also encompasses gene therapy agents containing genes which code for Conductin, its mutants and variants or parts thereof, or mRNA sequences which are read from these genes.
  • the new protein conductin according to Fig. 1 - SEQ ID No. is also placed under protection. 1, its mutants and variants and parts thereof.
  • Particularly preferred partial sequences are amino acids 78-200 (RGS) - SEQ ID No. 2, 343-396 (GSK 3 ⁇ binding domain) - SEQ ID. No. 3, 397-465 ( ⁇ -catenin binding domain) - SEQ ID No. 4 and 783-833 (Disheveled Homology Region) - SEQ ID No. 5.
  • the scope of protection also includes partial sequences of the Adenomatosis Poliposis Coli (APC), characterized by the amino acid sequences 1464-1604, 1516-1595, 1690-1778 and 1995-2083 as RGS domain interaction sites.
  • APC Adenomatosis Poliposis Coli
  • the analog cDNA sequences in particular the full cDNA sequence of the conductin (base pairs 1-2825) according to FIG. 2 - SEQ ID No. 6 and the partial sequences of the conductin of the nucleotide sequence 446-814 (RGS gene segment) - SEQ ID No. 7, the nucleotide sequence 1241-1402 (gene segment of the GSK 3 ⁇ binding domain) - SEQ ID No. 8, 1403-1609 (gene section of the ⁇ -catenin binding domain) - SEQ ID No. 9 and the nucleotide sequence 2561-2713 (gene segment of the disheveled homology region) - SEQ ID No. 10th
  • Conductin was identified as a ß-catenin interaction partner by a yeast 2-hybrid screen. The complete cDNA sequence was then isolated and sequenced. The deduced amino acid sequence from Conduction is shown in Fig. 1, the nucleotide sequence in Fig. 2 and the comparison of amino acid and nucleotide sequence in Fig. 3. Conductin consists of 840 amino acids and has a molecular weight of 92.8 kDa. Sequence comparisons identified an RGS domain (amino acids 78-200) and a domain related to the protein disheveled (amino acids 783-833, disheveled homology region) in the conductin (Fig. 1-3).
  • the GSK 3ß and ß-catenin binding domains were discovered by interaction studies in the 2-hybrid system (Fig. 4). It was shown that these domains are sufficient and necessary for binding to GSK 3ß or ß-catenin (Fig. 4), whereas the RGS and disheveled homology region are not involved.
  • the interaction of Conductin with GSK 3ß or ß-Catenin has also been demonstrated biochemically in co-immunoprecipitation experiments.
  • Conductin was also found to interact directly with APC.
  • APC fragments of amino acids 1464-1604, 1516-1595, 1690-1778 and 1995-2083 have been identified as interaction sites for Conductin.
  • binding to APC takes place via the RGS domain; this area is sufficient and necessary for the interaction.
  • the other domains in Conductin are not involved (Fig. 4).
  • the Conductin cDNA encodes a protein of 840 amino acids with a calculated molecular weight of 92.8 kDa.
  • the RGS domain double underlined
  • the ⁇ -catenin binding domain single underlined
  • the disheveled homology region are highlighted in bold.
  • sequence areas are marked as in Fig. 1.
  • the Conductin Protein and derived sections are shown schematically.
  • the RGS domain (RGS), the GSK 3 ⁇ binding domain (GSK BD) and the ß-catenin binding site (ß-BD) are highlighted.
  • the interaction with ß-catenin with the APC fragments of amino acids 1464-1604 (APCfr.l) and 1516-1595 (APCfr. 2) and GSK 3ß was investigated in the yeast 2-hybrid assay and quantified as ß-galactosidase units. It can be seen that the binding to ⁇ -catenin is restricted to the ⁇ -catenin binding site, the other parts of the protein do not contribute to this.
  • the analysis also shows the exclusive interaction of APC with the RGS domain of Conductin.

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Abstract

Die Erfindung betrifft neue Wege zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen durch Ausnutzung molekularbiologischer Zusammenhänge bei der Tumorentstehung. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Kontrolle der Regulation von β-Catenin in Körperzellen zu entwickeln. Gegenstand der Erfindung ist ein neues Protein, welches an β-Catenin bindet und zu dessem zytoplasmatischen Abbau führt. Dieses Protein hat die Aminosäuresequenz gemäß Abb. 1 und wurde als CONDUCTIN bezeichnet. Vom Vorkommen und der Wirkung des Conductins in Körperzellen abgeleitet werden Mittel zur Diagnose und zur Therapie von Tumorerkrankungen entwickelt.

Description

CONDUCΗNPROTEIN UND VERWANDTES MITTEL ZUR DIAGNOSE UND ZUR THERAPIE VON TUMORERKRANKUNGEN
Beschreibung
Die Erfindung betrifft neue Wege zur Bekämpfung von Tumorerkrankungen durch Ausnutzung molekularbiologischer Zusammenhänge bei der Tumorentstehung. Sie betrifft im einzelnen ein Mittel zur Diagnose von Tumorerkrankungen, und darauf aufbauend ein Mittel zur Therapie. Sie betrifft ferner das neue Protein Conductin, seine Mutanten und Varianten sowie Teile davon, die dazu analogen cDNA-Sequenzen und deren Verwendung in gentherapeutischen und pharmakologischen Verfahren. Anwendungsgebiete der Erfindung sind die Medizin und die pharmazeutische Industrie.
Cadherine und Catenine bilden Zelladhäsionskomplexe, die in zahlreichen Geweben für die Anheftung der Zellen aneinander verantwortlich sind. Die Cadherine sind Transmembranproteine und stellen den direkten Kontakt zwischen benachbarten Zellen her. - α, ß- und γ-Catenin sind zytoplasmatische Komponenten, die die Cadherine mit dem Aktin-Zytoskelett verbinden. Neben der Funktion bei der Zelladhäsion haben Catenine auch eine entscheidende Rolle bei Signaltransduktionsprozessen. b-Catenin in Vertebraten und das homologe Segmentpolaritäts-Genprodukt Armadillo in Drosphila werden durch den Wnt/Wingless-Signalweg stabilisiert (N sse, R. , Cell 89, 321-323, 1997). Dies führt zu einer Erhöhung der zytoplasmatischen, nicht an Cadherin gebundenen Fraktion dieser Proteine, die daraufhin mit HMG- Transkriptionsfaktoren der LEF-1/TCF-Familie wechselwirken können. Als Resultat wird ß-Catenin/Armadillo in den Zellkern transportiert, wo es zusammen mit den LEF/TCF-Proteinen an DNA bindet und bestimmte Gene aktiviert (Behrens , J. et. al . , Nature 382, 638-642, 1996).
Dieser Signalweg spielt auch eine Rolle bei der Tumorentstehung. In Kolonepithelzellen wird der zytoplasmatische Pool von ß- Catenin durch das Tumorsuppressor-Genprodukt APC (Adenomatosis Polyposis Coli) streng reguliert. Mutationen von APC, wie sie in etwa 80% aller Kolonkarzinome auftreten, führen zu verkürzten Formen des APC Proteins, die nicht mehr in der Lage sind ß- Catenin zu destabilisieren. Dadurch findet man in diesen Tumoren permanente Komplexe von ß-Catenin mit dem HMG-Transkriptions- faktor TCF-4, welche für die Transformation der Zellen verantwortlich gemacht werden. Diese Theorie wird gestützt durch den kürzlichen Befund, daß in Tumoren, in denen APC nicht verändert ist, Mutationen von ß-Catenin auftreten. Diese führen ebenfalls zur zytoplasmatischen Stabilisierung von ß-Catenin und zur Assoziation mit LEF-1/TCF-Faktoren (Morin, P.J. et. al., Science 275, 1787-1790).
Die Erfindung hat das Ziel, einen neuen Weg zur Verhinderung der Tumorentstehung zu finden. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Kontrolle der Regulation von ß- Catenin in Körperzellen zu entwickeln.
Gegenstand der Erfindung ist ein neues Protein, welches an ß- Catenin bindet und zu dessem zytoplasmatischen Abbau führt. Dieses Protein hat die Aminosäuresequenz gemäß Abb. 1 und wurde als CONDUCTIN bezeichnet.
Das Erfindung beruht nun auf der eigenen Erkenntnis, daß Conductin über eine ß-Catenin-Bindungsdomäne an ß-Catenin, über eine GSK 3ß-Bindungsdomäne an GSK 3ß und über eine sogenannte RGS-Domäne (Regulator of G-Protein Signalling) an APC-Fragmente bindet. Dadurch kommt es zum zytoplasmatischen Abbau von ß- Catenin und in Vertebraten zur Blockade des Wnt/Wingless- Signalwegs. Damit ist klar, daß Conductin ein wichtiger Regulator der ß-Catenin-Funktion ist und im Zusammenspiel mit APC zur Tumorsuppression beiträgt.
Davon abgeleitet betrifft die Erfindung ein Mittel zur Diagnose von Tumorerkrankungen, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß das Vorhandensein und die Menge von Conductin, seiner Mutanten und Varianten oder seiner Teile in Körperzellen nachgewiesen wird. Dieser Nachweis kann auf der Proteinebene mit spezifischen Antikörpern durchgeführt werden, speziell mit monoklonalen Antikörpern.
Die Diagnose von Tumorerkrankungen kann gemäß der Erfindung auch auf der Genebene erfolgen. Dazu werden mit ausgewählten Primern und cDNA-Sonden, die aus der Gensequenz des Conductins abgeleitet sind,
- das Gen, das für Conductin, seine Mutanten und Varianten oder Teile davon kodiert, bzw.
- mRNA-Sequenzen, die von diesen Genen abgelesen werden, nachgewiesen.
Das erfindungsgemäße Mittel zur Therapie von Tumorerkrankungen enthält Substanzen, die die Wirkung des Conductins im Körper aktivieren/reaktivieren. Das sind vor allem Mittel, die den Genpromoter des Conductins aktivieren bzw. Mittel, die die Stabilität der von den Conductin-Genen abgeleiteten m-RNA- Sequenzen erhöht. Das Hauptziel aller dieser Mittel besteht erfindungsgemäß darin, die Aktivität des Conductins in den Körperzellen zu erhöhen. Dazu kommen u. a. kleinmolekulare Substanzen in Betracht, die z. B. durch High-Througput-Number- Screening gefunden werden.
Die Erfindung umfaßt auch gentherapeutische Mittel, enthaltend Gene, die für Conductin, seine Mutanten und Varianten oder Teile davon kodieren, bzw. mRNA-Sequenzen, die von diesen Genen abgelesen werden.
Unter Schutz gestellt wird ferner das neue Protein Conductin gemäß Abb. 1 - SEQ ID No. 1, seine Mutanten und Varianten sowie Teile davon. Besonders bevorzugte Teilsequenzen sind die Aminosäuren 78-200 (RGS) - SEQ ID No. 2, 343-396 (GSK 3ß- Bindungsdomäne) - SEQ ID. No. 3, 397-465 (ß-Catenin- Bindungsdomäne) - SEQ ID No. 4 und 783-833 (Dishevelled Homologie-Region) - SEQ ID No. 5. Zum Schutzumfang gehören auch Teilsequenzen des Adenomatosis Poliposis Coli (APC) , gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenzen 1464-1604, 1516- 1595, 1690-1778 und 1995-2083 als RGS-Domänen-Interaktionsorte .
Gleichermaßen beansprucht werden die analogen cDNA-Sequenzen, insbesondere die volle cDNA-Sequenz des Conductins (Basenpaare 1-2825) gemäß Abb. 2 - SEQ ID No. 6 sowie die Teilsequenzen des Conductins der Nukleotidfolge 446-814 (RGS-Genabschnitt) - SEQ ID No. 7, der Nukleotidfolge 1241-1402 (Genabschnitt der GSK 3ß- Bindungsdomäne) - SEQ ID No. 8, 1403-1609 (Genabschnitt der ß- Catenin-Bindungsdomäne) - SEQ ID No. 9 und der Nukleotidfolge 2561-2713 (Genabschnitt der Dishevelled Homologie-Region) - SEQ ID No. 10.
Die Erfindung wird durch die folgenden Ausführungsbeispiele näher erläutert.
Conductin wurde durch einen Hefe 2-Hybrid Screen als ß-Catenin- Interaktionspartner identifiziert. Die vollständige cDNA-Sequenz wurde daraufhin isoliert und sequenziert. Die abgeleitete Aminosäuresequenz von Conduction ist in Abb. 1 gezeigt, die Nukleotidsequenz in Abb. 2 und die Gegenüberstellung von Aminosäure- und Nukleotidsequenz in Abb. 3. Conductin besteht aus 840 Aminosäuren und hat ein Molekulargewicht von 92,8 kDa. Durch Sequenzvergleiche wurde im Conductin eine RGS-Domäne (Aminosäuren 78-200) und eine zu dem Protein Dishevelled verwandte Domäne (Aminosäuren 783-833, Dishevelled Homologie- Region) identifiziert (Abb. 1-3). Die GSK 3ß- und ß-Catenin- Bindungsdomänen (Aminosäuren 343-396 bzw. 397-465) wurden durch Interaktionsstudien im 2-Hybrid-System entdeckt (Abb. 4). Es zeigte sich, daß diese Domänen ausreichend und notwendig für die Bindung an GSK 3ß bzw. ß-Catenin sind (Abb. 4), wohingegen die RGS- und Dishevelled Homologie-Region nicht beteiligt sind. Die Wechselwirkung von Conductin mit GSK 3ß bzw. ß-Catenin wurde auch in Co-Immunpräzipitationsexperimenten biochemisch bewiesen.
Die Wirkung von Conductin auf ß-Catenin wurde in SW480 Zellen untersucht. In diesen Zellen ist das Tumor-Suppressor-Genprodukt APC mutiert, wodurch es zu einem Anstieg des cytoplasmatischen und vor allem nuklearen Gehalts von ß-Catenin kommt. Die Einbringung von Conductin in diese Zellen führt zu einem drastischen Abbau von ß-Catenin, wodurch die Zelle von cytoplasmatischem und im Zellkern befindlichen ß-Catenin depletiert wird (Abb. 4). Diese Wirkung auf den Gehalt von ß- Catenin ist gleich stark wie die von nichtmutiertem APC, woraus geschlossen werden kann, daß Conductin ebenfalls als Tumorsuppressor durch Regulation von ß-Catenin wirkt. Es wurde außerdem gezeigt, daß Conductin den Wnt/Wingless-Signalweg auch in Xenopus-Embryonen durch seine Wirkung auf ß-Catenin hemmt.
Es wurde außerdem festgestellt, daß Conductin mit APC direkt interagiert. APC-Fragmente von Aminosäure 1464-1604, 1516-1595, 1690-1778 und 1995-2083 wurden als Interaktionsstellen für Conductin identifiziert. In Conductin erfolgt die Bindung an APC über die RGS-Domäne; dieser Bereich ist ausreichend und notwendig für die Interaktion. Die anderen Domänen in Conductin sind nicht beteiligt (Abb. 4).
Legende zu den Abbildungen:
Abb. 1
Aminosäuresequenz von Conductin
Die Conductin cDNA kodiert ein Protein von 840 Aminosäuren mit einem berechneten Molekulargewicht von 92,8 kDa. Die RGS-Domäne (doppelt unterstrichen), die ß-Catenin-Bindungsdomäne (einfach unterstrichen) und die Dishevelled Homologie-Region sind durch Fettdruck hervorgehoben.
Abb. 2
Nukleotidsequenz von Conductin von Position 1-2825
Die Sequenzbereiche sind analog zu Abb.l markiert.
Abb. 3
Gegenüberstellung von Aminosäure- und Nukleotidsequenz von
Conductin
Abb.
Analyse der Interaktion von Conductin und seinen Teilen mit ß- Catenin, APC und GSK 3ß
Das Conductin Protein und abgeleitete Teilstücke sind schematisch dargestellt. Hervorgehoben sind die RGS-Domäne (RGS), die GSK 3ß-Bindungsdomäne (GSK BD) und die ß-Catenin- Bindungsstelle (ß-BD). Die Interaktion mit ß-Catenin mit den APC Fragmenten von Aminosäure 1464-1604 (APCfr.l) und 1516-1595 (APCfr. 2) und GSK 3ß wurde im Hefe 2-Hybrid Assay untersucht und als ß-Galaktosidase Einheiten quantifiziert. Man erkennt, daß die Bindung an ß-Catenin auf die ß-Catenin-Bindungsstelle beschränkt ist, die anderen Teile des Proteins tragen dazu nicht bei. Die Analyse zeigt außerdem die ausschließliche Interaktion von APC mit der RGS-Domäne von Conductin. Vergleichbare Ergebnisse für die Bindung an die RGS-Domäne wurden mit APC Fragmenten von Aminosäure 1690-1778 und 1995-2083 erhalten. Der Abbau von ß-Catenin in SW480 Zellen durch Conductin wurde nach transienter Expression der angegebenen Proteine und Immunfluoreszenz-Färbung von ß-Catenin analysiert. Nur Teilstücke von Conductin, die an ß-Catenin binden, führen zu dessen Abbau. Die Analyse zeigt schließlich die Bindung von GSK 3ß an die GSK 3ß-Bindungsdomäne von Conductin.

Claims

Patentansprüche
1. Mittel zur Diagnose von Tumoren, enthaltend eine Substanz, mit der
- Conductin, seine Mutanten und Varianten oder Teile davon bzw.
- Gene, die für Conductin, seine Mutanten und Varianten oder Teile davon kodieren, bzw.
- m-RNA-Sequenzen, die von diesen Genen abgelesen werden, nachgewiesen werden.
2. Mittel zur Diagnose von Tumoren nach Anspruch 1, enthaltend spezifische Antikörper gegen Conductin, seine Varianten oder Mutanten oder Teile davon.
3. Mittel zur Diagnose von Tumoren nach Anspruch 1 und 2 , dadurch gekennzeichnet, daß die spezifischen Antikörper monoklonale Antikörper sind.
4. Mittel zur Diagnose von Tumoren nach Anspruch 1, enthaltend korrespondierende Oligonukleotid-Primer bzw. DNA-Sonden zum Nachweis der Gene und deren Mutationen.
5. Mittel zur Diagnose von Tumoren nach Anspruch 1, enthaltend korrespondierende Oligonukleotid-Primer bzw. DNA-Sonden zum Nachweis der RNA-Sequenzen.
6. Mittel zur Therapie von Tumoren, enthaltend eine Substanz, die die Wirkung des Conductins im Körper aktiviert/reaktiviert.
7. Mittel nach Anspruch 6, enthaltend eine Substanz, die den Genpromoter des Conductins aktiviert.
8. Mittel nach Anspruch 6, enthaltend eine Substanz, die die Stabilität der mRNA-Sequenzen erhöht.
9. Mittel nach Anspruch 6, enthaltend eine Substanz, die die Aktivität des Conductins erhöht.
10. Conductin, seine Varianten und Mutanten sowie Teile davon.
11. Conductin nach Anspruch 10, gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenz 1-840 gemäß Abb. 1 (SEQ ID No. 1), wobei Abb. 1 Bestandteil dieses Anspruchs ist.
12. Teilsequenz des Conductins nach Anspruch 10, gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenz 78-200 (RGS-Domäne) der Abb. 1 (SEQ ID No. 2) .
13. Teilsequenz des Conductins nach Anspruch 10, gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenz 343-396 (GSK 3ß) der Abb. 1 (SEQ ID No. 3 ) .
14. Teilsequenz des Conductins nach Anspruch 10, gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenz 397-465 (ß-Catenin-Bindungsdomäne) der Abb. 1 (SEQ ID No. 4).
15. Teilsequenz des Conductins nach Anspruch 10, gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenz 783-833 (Dishevelled Homologie- Region) der Abb. 1 (SEQ ID No 5).
16. Teilsequenzen des Adenomatosis Poliposis Coli (APC), gekennzeichnet durch die Aminosäuresequenzen 1464-1604, 1516- 1595, 1690-1778 und 1995-2083 als RGS-Domänen-Interaktionsorte.
17. cDNA-Sequenz von Conductin, seiner Varianten oder Mutanten oder Teilen davon.
18. cDNA-Sequenz des Conductins der Nukleotidfolge 1-2825 der Abb. 2 (SEQ ID No. 6), wobei Abb. 2 Bestandteil dieses Anspruchs ist.
19. cDNA-Teilsequenz des Conductins der Nukleotidfolge 446-814 (RGS-Genabschnitt) der Abb. 2 (SEQ ID No. 7).
20. cDNA-Teilsequenz des Conductins der Nukleotidfolge 1241-1402 (Genabschnitt der GSK 3ß-Bindungsdomäne) der Abb. 2 (SEQ ID No. 8).
21. cDNA-Teilsequenz des Conductins der Nukleotidfolge 1403-1609 (Genabschnitt der ß-Catenin-Bindungsdomäne) der Abb. 2 (SEQ ID No. 9) .
22. cDNA-Teilsequenz des Conductins der Nukleotidfolge 2561-2713 (Genabschnitt der Dishevelled Homologie-Region) der Abb. 2 (SEQ ID No. 10) .
23. Verwendung des Conductin-Gens für die Gentherapie von Tumorerkrankungen, dadurch gekennzeichnet, daß ein Vektor mit dem Conductin-Gen konstruiert wird, anschließend ein Gentransfer in den menschlichen Körper erfolgt und damit die Aktivität des Conductins in Körperzellen wiederhergestellt wird.
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