WO1997022628A1 - Inhibiteur d'epaississement de la membrane intravasculaire - Google Patents

Description

血管内膜肥厚抑制剤 技 術 分 ¾

本発明は、 新規な血管内膜肥厚抑制剤に関する。

背 景 _

経皮的冠動脈形成術 ( Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty, 以下 「 P T C A」 と い う ） は、 冠動脈疾患の非外科的治療のため、 近年開発さ れた治療 方法であ り、 具体的には冠動脈の狭窄部をバルー ンに よ り 機械的に拡張さ せる も のであ る。 し力、 しなが ら、 P T C Aは冠動脈疾患の根本的治療法ではな く、 冠動脈の狭 窄部を拡張 して も該部の再狭窄が術後数力 月 以降に 4 0

%前後の頻度で生 じる こ と が知 られてい る。 こ の再狭窄 は血管の中膜平滑筋細胞が、 P T C Aによ る 損傷部位で の血小板凝集や血液凝固の結果生ずる 種々 の因子 （血小 板由来成長因子、 ト ロ ン ビ ン等） に よ り 刺激を う け、 内 膜に遊走 し、 内膜での増殖に よ っ て生 じ る 細胞線維性内 膜肥厚が、 その大き な原因であ る と さ れてい る （プ リ テ イ ツ シ ュ ハー ト ジ ャ ー ナノレ （ Br. Heart J. ) , 5 8 , 6 3 5 — 6 4 3 ( 1 9 8 7 ) 、 ヒ ュ ーマ ン パ ソ ロ ジ 一 ( Human Pathol. ) ， 2 0, 4 7 7 - 4 8 5 ( 1 9 8 9 ) ) こ の再狭窄を抑制する ため、 へパ リ ン等の抗血液凝固 剤、 ア ス ピ リ ン、 ジ ピ リ ダモー ル、 チ ク ロ ビ ジ ン、 プ 口 ス タ サイ ク リ ン及びその誘導体等の血小板凝集抑制剤、 ケ タ セ リ ン等の細胞増殖抑制剤、 エイ コ サペ ン タ エ ン酸、 口バス 夕 チ ン等の脂質低下剤等が前臨床及び臨床で試み られて き たが、 いずれ も臨床上充分な効果を有する薬剤 ではな か っ た （ ア メ リ カ ン ハ ー ト ジ ャ ー ナノレ （ Am, H eart J. ) ， 1 1 7, 7 7 7 - 7 8 2 ( 1 9 8 9 ) 、 同， 1 1 9, 2 3 2 ( 1 9 9 0 ) 、 同， 1 2 2 , 1 7 1 - 1 8 7 ( 1 9 9 1 ) 、 サ一 キ ユ レ イ シ ヨ ン （ Circulation) ， 8 1 , 1 7 5 3 - 1 7 6 1 ( 1 9 9 0 ) 、 ラ ンセ ッ ト ( Lancet) , 1 7 7 - 1 8 1 ( 1 9 8 9 ) 等） 。

特に、 へパ リ ン は、 冠動脈形成術後の長期間投与 （ 1 0 , 0 0 0単位 Z 日、 s . c. ) に よ り、 冠動脈の再狭窄 力 8 2 %の患者に起 こ り、 コ ン ト 口 一ノレ （再狭窄値 ： 3 3 % ) に比べ極めて高い数値を示す と共に、 患者の 4 1 %が異常な 出血を引 き起 こ した との報告 も あ る （ ジ ャ ー ナノレ ォブ ア メ リ カ ン カ レ ッ ジ ォブ カノレ ジオ 口 ジ ー （ J. Am. Col. Cardio. ) , 1 7 ( 2 ) , 1 8 1 Α， ( 1 9 9 1 ) ) 。 へパ リ ンの副作用の一つ と して、 こ 出血助長作用が挙げ られ、 こ れは投与部位での出血のみ な らず、 消化管内 出血や極めて悪質な場合は脳内 出血を 引 き起 こ す こ と も あ り、 最悪の場合出血多量で死亡する こ と も あ る。

ま た、 へパ リ ン又はへノ、。ラ ン硫酸由来の 2 〜 8 個の糖 単位であ る へパ リ ン フ ラ グメ ン ト を有する硫酸化多糖が 平滑筋細胞の増殖を阻害する 作用を有 して い る こ と も 知 られてい る （特表平 4 — 5 0 3 9 5 0 号、 特表平 6 — 5 0 6 9 7 3 号） 。 こ れ ら へパ リ ン フ ラ グメ ン ト を有する 化合物は、 へパ リ ンが有 していたア ンチ ト ロ ン ビ ン mを 介する 抗 ト 口 ン ビ ン作用を消失 させた も のであ る ため

(ブラ ッ ド （ Blood) ， 7 9 , 1 一 1 7 ( 1 9 9 2 ) ) 、 へパ リ ンの有する抗 ト ロ ン ビ ン作用 に基づ く 出血助長作 用 は軽減する と期待さ れる。 しか し、 へパ リ ン の有する in vivoでの平滑筋異常増殖の抑制は、 メ 力 二ズムの一つ と し て こ の ア ン チ ト ロ ン ビ ン ΙΠを介する抗 ト ロ ン ビ ン作 用が考え られてお り、 その作用を消失させたため平滑筋 増殖抑制効果 も ま た低下する。

かかる現状か ら P T C A後の冠動脈の再狭窄、 ひいて は動脈硬化の治療法と して血管の内膜肥厚に対 して抑制 効果を有 し、 臨床で有用性の高い医薬品の開発が待ち望 ま れてい る。

発 明 の 開 示

上述の と お り、 こ れま での と こ ろ、 有効な血管内膜肥 厚抑制剤、 特に P T C A後の冠動脈の再狭窄を抑制する 薬剤は未だ見出 さ れていないのが現状であ り、 本発明 の 主な 目 的は優れた血管内膜肥厚抑制剤を提供する こ と に の ¹

本発明者は、 鋭意検討 した結果、 ナマ コ 由来の硫酸化 多糖が血管内膜肥厚抑制作用を有 し、 特に P T C A後の 冠動脈の再狭窄の抑制に対 して有効であ る こ と を見出 し た。 本発明は、 かかる 知見に基づき、 完成さ れた も ので め る。

本発明は、 ナマ コ 由来の硫酸化多糖の有効量 と薬学的 に許容 さ れる担体 とを含有する血管内膜肥厚抑制剤を提 供する も のであ る。

ま た、 本発明は、 ナマ コ 由来の硫酸化多糖を含有する 血管内膜肥厚抑制剤を製造する ためのナマ コ 由来の硫酸 化多糖の使用を提供する ものであ る。

更に、 本発明は、 ナマ コ 由来の硫酸化多糖の有効量を 患者に投与する こ と を特徴とする血管内膜肥厚の抑制方 法を提供する も のであ る。

本発明の血管内膜肥厚抑制剤は、 ナマ コ 由来の硫酸化 多糖を有効成分とする 医薬製剤組成物であ る。 こ のナマ コ 由来の硫酸化多糖は、 特開昭 6 3 - 1 0 6 0 1 号公報. 特開昭 6 3 - 1 2 8 0 0 1 号公報、 国際公開番号 W 0 9 0 / 0 8 7 8 4 号公報、 国際公開番号 W O 9 0 Z 0 9 1 8 1 号等に記載の公知化合物であ り、 播種性血管内凝固 症候群治療剤、 抗 H I V剤、 血栓症治療剤 と して知 られ てい る が、 血管内膜肥厚抑制剤 と して有用であ る こ と は 全 く 知 られていない。

ま た、 本願で用い られる ナマ コ 由来の硫酸化多糖は、 P T C A後の平滑筋異常増殖を抑制する 力 その メ カ二 ズムは、 へパ リ ンの場合のメ カ ニズム と類似する が出血 の リ ス ク が少ない点で異な る、 へパ リ ン コ フ ァ ク タ ー Π を介する抗 ト ロ ン ビ ン作用であ る と考え られ、 従 っ て出 血助長作用がへパ リ ン類に比 して極めて弱い と い う 大き な特徴を有 してい る。

本発明における ナマ コ 由来の硫酸化多糖 と しては、 含 有 している硫酸基及びカルボキ シル基が遊離の状態の も ので も、 薬学的に許容さ れる塩の状態の も のであ っ て も 良 く、 いずれ も本願血管内膜肥厚抑制剤の有効成分 と し て使用する こ とができ る。 ま た、 ナマ コ 由来の硫酸化多 糖は、 特に、 フ コ ー スを高含量有する 点において、 その 他の公知硫酸化多糖 と明確に区別 さ れ、 特徴づけ られ る。

かか る硫酸化多糖と しては、 無脊椎動物ナマ コ （ Holo thurian) の体壁か ら抽出 さ れた硫酸化多糖 （以下、 「 F G A G」 と称する ） 及びそれに解重合反応を施 した硫酸 化多糖 （以下、 「 D H G」 と称す る ） 等が挙げ られる。 F G A Gは コ ン ド ロ イ チ ン硫酸の一種であ り、 下記物 理化学的特性を有する。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 約 1 5 , 0 0 0 〜 8 0 ， 0 0 0 (高速 G P C法又はポ リ ア ク リ ルア ミ ド電気泳動法） 。

( 3 ) 組成分析 ： 重量組成は次の通 り。

ガラ ク 卜 サ ミ ン 1 3 2 0 重量％

グルク ロ ン酸 1 1 1 9 重量％ フ コ ー ス 1 0 2 8 重量％ 硫 酸 基 2 7 3 8. 5 重量％, モ ノレ比は次の通 り。

ガラ ク ト サ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸基二 1 : 1 ± 0. 2 : 1. 3 5 ± 0. 3 5 : 3. 6 ± 0. 6。

こ こ で、 本明細書において、 硫酸化多糖の重量組成は、 原則 と して、 塩を形成 しない形態、 すなわ ち遊離形態で の数値を示 してい る。

ま た、 ガラ ク ト サ ミ ン、 グルク ロ ン酸、 フ コ ー ス及び 硫酸基の分析は、 下記方法を採用 して行 っ た。

( i )ガラ ク ト サ ミ ン

ホ ワ イ ト （ White) 法 [ カルボハイ ド レー ト リ サーチ ( Carbohydrate Research) 1 1 4 : 2 0 1 , 1 9 8 3 ] ₀ ( i i )ダルク 口 ン酸 ビ ッ タ ー . ミ ュ ア 一 （ Bitter'Muir) 法 [ ア ナ リ テ ィ カ ル バイ オケ ミ ス ト リ — （ Anal. Biochem. ) 4 : 3 3 0,

1 9 6 2 ] ₀

(iii )フ コ ー ス

デ ィ ッ シ ュ （ D i sche )法 [ ジ ャ ー ナノレ ォ ブ バイ オ 口 ジ カ ル ケ ミ ス ト リ ー （ J. Biol. Chem. ) 1 7 5 : 5 9

5 , 1 9 4 8 ] ο

( iv)硫酸基

ド ッ ジ ソ ン & プラ イ ス（Dodgson & Price)法 [バイ オケ ミ カノレ ジ ャ ー ナル （ Biochem. J. ) 8 4 : 1 0 6, 1 9

6 2 ] o

F G A Gは公知物質であ り、 例えば葯学学報 （ Yao Hs ueh Hsueh Pao) , 1 5 ( 5 ) , 2 6 3 - 2 7 0 ， 1 9 8 0. 中葯通報 ( Zhongyao Tongbao) , 7_ ( 4 ) , 2 7 - 2 9 , 1 9 8 2、 葯学学報 （ Yaoxue Xuebao) ， i_8 ( 3 ) ， 2 0 3 - 2 0 8 , 1 9 8 3、 特開昭 6 3 - 1 0 6 0 1 号公報 及び特開昭 6 3 - 1 2 8 0 0 1 号公報にそれぞれ記載さ れてお り、 こ れ ら に記載さ れた方法によ り 容易 に製造で き る。

具体的には、 無脊椎動物ナマ コ （ Holothurian) の体壁 をアルカ リ 分解 し、 更にパ ン ク レアチ ン等の酵素に よ り 分解抽出 し、 そ の抽出物か ら分離精製する こ と に よ り 製 造さ れ る。 製造の際使用 さ れる ナマ コ と して は、 一般的 に は、 例えば、

マナマ コ [Stichopus japonicus Selenka ]_N

シ カ ク ナマ コ [Stichopus chloronoyus Brandt]、

St ichopus variegatus Semper、

ト ラ フ ナマ コ [Holothuria pervicax Selenka

ク ロ ナマ コ [Holothuria atra

ジ ャ ノ メ ナマ コ [ Holothuria argus ]

ァ カ ミ シキ り [Holothuria edulis]、

ハネ ジナマ コ [Holothuria scabra]、

ォキナマ コ [ Parast ichopus nigripunctatusL

ノ、'ィ 力 ナマコ [ The 1 enota ananas]、

フ ジナマ コ [Holothuria monacar ia Lesson]、

二セク ロ ナマ コ [Holothuria leucospi lota Brandt：」、 ィ シ コ [ Cucuinar ia chronhjelmi]ヽ

ヮ ^ [し ucumaria echinata

キ ン コ [Cucumaria f rondosa Japonica!k

コ"カ ク キ ン コ [Pentacta australis]^

シ ロ ナマ コ [Paracaudina chi lensi s ransonneti.j、 シ リ ブ 卜 ィ モナマ コ [Molpadia musculus]、

ホ ソ ィ 力 リ ナマ コ [Leptosynapta i nhaerens ]_N

ム ラ サキク ノレマナマ コ [Polycheira rufescens]^ ォオイ 力 リ ナマ コ [Synapta inaculata

Halodeima c inerascens Brand t )、

Act i nopyga lacanoraCJaeger)^

Act inopyga e ch i n i t es ( J aeger )

Microthele nob i 1 i s ( Se 1 enka )等が使用 さ れる。 原料と な る ナマ コ と しては生ナマ コ或は乾燥 したナマ コであ っ て も良い。 上記ナマ コ の 中ではマナマ コが原料と して最も 好ま しい。

F G A Gに解重合反応を施 した硫酸化多糖と しては、 F G A Gを解重合 した物質 D H Gが特に好ま しい。

D H Gは国際公開番号 W 0 9 0 / 0 8 7 8 4 号公報又 は国際公開番号 W O 9 0 / 0 9 1 8 1 号公報等に記載さ れた方法によ り 容易に製造でき る。 即ち、 F G A G又は その塩を水に溶解 し、 解重合反応に付する こ と によ り 製 造さ れる。 解重合反応は、 へパ リ ン等の高分子硫酸化多 糖を低分子硫酸化多糖に変換する反応であ り、 通常解重 合剤を使用する こ と に よ り な さ れる。 解重合剤 と しては、 過酸化水素、 次亜塩素酸、 次亜臭素酸、 次亜塩素酸ナ ト リ ゥ ム等の次亜ハ ロ ゲ ノ 酸及びその塩類、 過 ヨ ウ素酸、 過 ヨ ウ素酸ナ ト リ ウ ム等の過 ヨ ウ素酸類及びその塩類等 が使用でき、 更に反応促進剤 と してァ ス コ ル ビン酸、 第 一鉄イ オ ン等が使用でき る。 又、 解重合剤を使用せず超 0 音波、 紫外線、 γ 線等の放射線等を単独で用い る力、、 又 は前記解重合剤 と併用する こ と に よ つ て も、 解重合反応 に導 く こ とができ る。 最も好ま しい解重合方法と しては. 過酸化水素を解重合剤 と して使用する も のであ る。 過酸 化水素の反応量は過酸化水素濃度 と して 1 〜 3 1 重量％, 好ま し く は 1 〜 1 6 重量％であ る。 反応時間は通常 1 〜 6 0 時間、 好ま し く は 3 ~ 4 0 時間であ り、 反応温度は 室温〜 8 0 ° (：、 好ま し く は Α Ο ^ δ Ο ^前後であ る。 過 酸化水素を反応さ せる 際の ρ Η は 1 〜 8、 好ま し く は 3 〜 7 の酸性及び中性領域であ る。 ρ Ηを一定に保つ 目 的 で、 酢酸緩衝液、 リ ン酸緩衝液、 ト リ ス緩衝液等の緩衝 液中で反応させて も よ い し、 又反応の際希水酸化ナ ト リ ゥ ム等を使用 した ρ Η コ ン ト ロ ー ラ ーを用 いて も よい。 反応終了後、 ρ Ηを中性に戻 し分離精製を行な う。 分離 精製法と して は、 エタ ノ ール、 アセ ト ン等の有機溶媒に よ る 分別沈殿、 酢酸カ リ ウ ム、 酢酸バ リ ウ ム、 酢酸カ ル シ ゥ 厶、 酢酸ア ンモニ ゥ ム等の酢酸塩に よ る分別沈殿、 セチル ト リ メ チルア ンモニゥ 厶塩等の 4 級ア ンモニゥ ム 塩を用 いる分別沈殿、 D E A Ε — セルロ ー ス （ シ グマ社 製） 、 D E A E — ト ヨパール （東 ソ 一社製） 、 D E A E — セル 口 フ ァ イ ン （チ ッ ツ社製） 、 D o w e x — 1 (ダ ゥ ケ ミ カルズ社製） 等の樹脂に よ る イ オ ン交換 ク ロ マ ト グラ フ ィ ー， S e p h a d e x G — 5 0 ( フ ァ ソレ マ ン ァ — L K B社製 ) 、 S e h a d e x G - 2 0 0 ( フ ァ ノレ マ シ ア 一 ； L K B社製） 等の樹脂によ る ゲル濾過 ク 口 マ ト グラ フ ィ ー、 スぺク ト ラ Zボア （スペ ク ト ラ ム メ デ ィ 力 ノレ イ ンダス ト リ ーズ社製） 等を用 いた透析、 更 には限外濾過等を単独或いは適宜組み合わせて用い る方 法が例示でき る

か く して製造さ れた D H Gは、 下記物理化学的特性を 有する。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 3 , 0 0 0 〜 4 2， 0 0 0。

D H Gの分子量は、 4, 0 0 0 〜 1 5， 0 0 0 程度 (高速 G P C法 ) であ る のが好ま しい。

( 3 ) 組成分析 ： D H Gは 、 ガラ ク ト サ ミ ン、 グルク ロ ン酸及びフ コ ースを構成糖と し、 硫酸基を有 してお り、 その組成は、 次の通 り であ る。

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 8 〜 2 4 重量％、 グノレク 口 ン酸 1 4 〜 2 1 重量％、 フ コ ー ス 1 3 〜 2 0 重量％、 硫 酸 基 3 1 〜 4 4 重量％。

モル比が、 ガラ ク ト サ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸基 - 1 : 0. 8 0 ± 0. 2 0 : 0. 8 5 ± 0. 1 5 : 3. 4 ± 0. 9 0。

( 4 ) 比旋光度 ： [ ひ ] ^{2 D} _D = — 5 5 〜 一 7 3 ° ( C = l % ) 。

ま た、 その他の D H Gの物理化学的性質は、 次の通 り であ る。

( 5 ) 溶解性 ： 水に可溶、 エタ ノ ール、 アセ ト ン等の有 機溶媒に不溶。

( 6 ) 呈色反応 ： 次の通 り。

エ ノレ ソ ン ー モ メレカ" ン （ El son - Morgan ) 反応 十、 力 ノレパ、ゾ一ル硫酸反応 十、 シ スティ ン硫酸反応 +、 オ ル シ ノ ー ル塩酸反応 +、 ァ ズ レ A メ タ ク 口 マ ジ ア

、 Azure A metachromas ia ) 反 fc、 十。

F G A G及び D H Gは上記分析結果の通 り 硫酸基及び カ ソレボキ シル基を分子中に有 してお り、 該基は種々 の塩 基と反応 し塩を形成する。 こ れ らの硫酸化多糖は塩にな つ た状態が安定であ り、 通常ナ ト リ ウ ム及び Z又 はカ リ ゥ 厶等の塩の形態で単離さ れる。 こ れ ら の硫酸化多糖の 塩はダウエ ッ ク ス 5 0 W等の陽イ オ ン交換樹脂等で処理 する こ と に よ り 遊離の硫酸化多糖に導 く こ と も可能であ る。 又、 こ れ らは、 更に必要に応 じ公知慣用の塩交換を 行い、 所望の種々 の塩に変換する こ とができ る。 硫酸化 多糖の塩と しては、 薬学的に許容さ れる塩が用い られ、 . 例えばカ リ ウ ム、 ナ ト リ ウ ム等のアルカ リ 金属、 カルシ ゥ厶、 マグネ シ ウ ム、 ノ< リ ウ 厶等のアルカ リ 土類金属、 ピ リ ジニゥ ム等の有機塩基等が挙げ られる。

本発明に用い られ る有効成分の う ち、 好ま しい もの と し ては、 フ コ ー スを高含量有する硫酸化多糖であ り、 そ の フ コ ース含量は 1 0 〜 2 8 重量％が良い。 ま た、 その 他の構成成分 と してはガラ ク 卜 サ ミ ン、 グルク ロ ン酸及 び硫酸基を有 し、 分子量が約 3 , 0 0 0 - 1 0 0 , 0 0 0 (高速 G P C法又はポ リ ア ク リ ルア ミ ド電気泳動法） で あ る 硫酸化多糖がよ い。

本発明で用い る 好ま しい硫酸化多糖と しては、 下記物 理化学的特性を有する ものが挙げ られる。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 約 3 , 0 0 0 〜 8 0 , 0 0 0 (高速 G P C 法又はポ リ ア ク リ ルァ ミ ド電気泳動法） 。

( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 3 〜 2 4 重量％、 - 1

5 14 グノレク 口 ン酸 1 1 〜 2 1 重量％ フ コ ース 1 0 〜 2 8 重量％ 硫 酸 基 2 7 〜 4 4 重量％, モル比が、

ガラ ク トサ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸基： 1 : 0. 8 0 ± 0. 4 0 : 1. 2 0 ± 0. 5 0 : 3. 4 0 ± 0. 9 0。

更に好ま し く は解重合反応を施 して得 られた硫酸化多 糖であ り、 下記物理化学的特性を有する も のがよい。

10 ( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 約 3 , 0 0 0 〜 4 2 , 0 0 0 (高速 G P C 法） 。 特に好ま しい分子量は 4, 0 0 0 〜 1 5, 0 0 0 であ る。

( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 8 〜 2 4 重量％、 グルク ロ ン酸 1 4 〜 2 1 重量％、 フ コ ー ス 1 3 〜 2 0 重量％、 硫 酸 基 3 〜 4 4 重量％

20 モル比が、

ガラ ク ト サ ミ ン グル ク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸基 - 1 : 0. 8 0 ± 0 2 0 : 0. 8 5 ± 0. 1 5 : 3. 4 0 ± 0. 9 0。

( 4 ) 比旋光度 ： [ α ] ²。。= — 5 5 〜 一 7 3 ° ( C = l °/o ) 。

尚、 こ れ らの硫酸化多糖は、 遊離の形態で も薬学的に 許容さ れ る塩の形態でも 良い こ と は、 前記の通 り であ る。

本発明血管内膜肥厚抑制剤は、 ナマ コ 由来の硫酸化多 糖の有効量と薬学的に許容さ れ る担体 とを用いて、 通常 の方法に従い、 医薬製剤組成物 と して調製される。 こ こ で用い られる担体 と しては、 通常の薬剤に汎用 さ れる各 種の もの、 例えば賦形剤、 結合剤、 崩壊剤、 滑沢剤、 着 色剤、 矯味剤、 矯臭剤、 界面活性剤等を例示でき る。

本発明の血管内膜肥厚抑制、 特に P T C A後の冠動脈 の再狭窄抑制を 目 的 と し た治療剤及び予防剤 と して使用 する 際の投与単位形態 と しては特に限定さ れず、 治療及 び予防の 目 的に応 じて適宜選択でき、 具体的には錠剤、 被覆錠剤、 丸剤、 カ プセル剤、 散剤、 顆拉剤、 細粒剤、 液剤、 乳剤、 懸濁剤等の経口剤、 注射剤、 坐剤、 軟膏剤、 硬膏剤、 貼付剤等の非経口剤を例示でき る。 こ れ ら投与 剤は、 こ の分野で通常知 られた慣用的な製剤方法に よ り 製剤化 さ れる。

錠剤の形態に成形す る に際 しては、 担体 と して例えば 乳糖、 白糖、 塩化ナ ト リ ウ ム、 ブ ドウ糖、 尿素、 デ ンプ ン、 炭酸カノレ シ ゥ ム、 カオ リ ン、 結晶セル ロ ース、 ゲイ 酸等の賦形剤、 水、 エタ ノ ール、 プロパノ ール、 単 シ ロ ッ プ、 ブ ドウ糖液、 デ ンプ ン液、 ゼラ チ ン溶液、 カ ルボ キ シ メ チノレセノレロ ース、 セラ ッ ク、 メ チノレセノレロ ー ス、 リ ン酸カ リ ウ ム、 ポ リ ビニルピ ロ リ ド ン等の結合剤、 乾 燥デ ンプン、 アルギ ン酸ナ ト リ ウ ム、 カ ンテ ン末、 ラ ミ ナラ ン末、 炭酸水素ナ ト リ ウ ム、 炭酸カル シ ウ ム、 ポ リ ォキシエチ レ ン ソ ノ 1 ビタ ン脂肪酸エステル類、 ラ ウ リ ル 硫酸ナ ト リ ウ ム、 ステア リ ン酸モ ノ グ リ セ リ ド、 デ ン プ ン、 乳糖等の崩壊剤、 白糖、 ステア リ ン酸、 カ カオバタ 一、 水素添加油等の崩壊抑制剤、 第 4 級ア ンモニゥ ム塩 基、 ラ ウ リ ル硫酸ナ ト リ ウ ム等の吸収促進剤、 グ リ セ リ ン、 デ ンプン等の保湿剤、 デ ン プン、 乳糖、 カオ リ ン、 ベ ン ト ナイ ト、 コ ロ イ ド状ゲイ 酸等の吸着剤、 精製タ ル ク、 ス テア リ ン酸塩、 ホ ウ酸末、 ポ リ エチ レ ン グ リ コ 一 ル等の滑沢剤等を使用でき る。 更に錠剤は必要に応 じ通 常の剤皮を施 した錠剤、 例えば糖衣錠、 ゼラ チ ン被包錠 腸溶被錠、 フ ィ ルム コ ーテ ィ ン グ錠、 二重錠、 多層錠等 とす る こ とができ る。

丸剤の形態に成形す る に際 しては、 担体 と して例えば ブ ドウ 糖、 乳糖、 デ ンプン、 カ カ オ脂、 硬化植物油、 力 ォ リ ン、 タ ルク 等の賦形剤、 ァ ラ ビァ ゴム末、 ト ラ ガ ン ト 末、 ゼラ チ ン、 エタ ノ ール等の結合剤、 ラ ミ ナラ ン、 力 ンテ ン等の崩壊剤等を使用でき る。

カ プセル剤は常法に従い通常本願の有効成分を上記で 例示 した各種の担体 と混合 して硬質ゼラ チ ンカ プセル、 軟質カ プセル等に充填 して調製さ れる。

坐剤の形態に成形す る に際 しては、 担体 と して例えば ポ リ エチ レ ン グ リ コ ール、 カ カ オ脂、 高級アルコ 一ル、 高級アルコ ールのエステル類、 ゼラ チ ン、 半合成グ リ セ ラ イ ド等を使用でき る。

注射剤 と して調製さ れる場合、 液剤、 乳剤及び懸濁剤 は殺菌され、 且つ血液 と等張であ るのが好ま し く、 こ れ らの形態に調製する に際 しては、 希釈剤 と して例えば水. 乳酸水溶液、 エチルアルコ ール、 マ ク ロ ゴール、 プロ ピ レ ン グ リ コ ール、 ェ ト キシ化イ ソ ステア リ ノレアノレ コ 一ル. ポ リ オキ シィヒイ ソ ステア リ ルアルコ ール、 ポ リ オキシェ チ レ ン ソル ビタ ン脂肪酸エステル類等を使用でき る。 尚. こ の場合等張性の溶液を調製する に十分な量の食塩、 ブ ドウ糖或いはグ リ セ リ ンを医薬製剤中に含有せ しめて も よ く、 ま た通常の溶解補助剤、 緩衝剤、 無痛化剤等を添 加 して も よ い。

軟膏剤、 例えばペー ス ト、 ク リ ーム及びゲルの形態に 調製する際には、 本化合物に通常使用 さ れる基剤、 安定 剤、 湿潤剤、 保存剤等が必要に応 じて配合 さ れ、 常法に よ り 混合、 製剤化 さ れる。 基剤 と しては流動パ ラ フ ィ ン. 白色ワ セ リ ン、 サラ シ ミ ツ ロ ウ、 パ ラ フ ィ ン等が挙げ ら れる。 保存剤 と してはパラォキ シ安息香酸メ チル、 パラ ォキ シ安息香酸ェチル、 パラ ォキ シ安息香酸プロ ピル等 が挙げ られる。

貼付剤を製造す る場合には、 通常の支持体に前記軟膏. ペース ト、 ク リ ー ム、 ゲル等を常法に よ り 塗布すればよ い。 支持体 と しては綿、 ス フ、 化学繊維か らな る織布、 不織布や軟質塩化 ビニル、 ポ リ エチ レ ン、 ポ リ ウ レ タ ン 等の フ ィ ル厶あ る いは発泡体シ 一 ト が適当であ る。

更に上記各製剤には、 必要に応 じて着色剤、 保存剤、 香料、 風味剤、 甘味剤等や他の医薬品を医薬製剤中に含 有せ しめて も よい。

本発明の医薬製剤中に含有さ れるべき有効成分の量と しては、 特に限定されず広範囲に適宜選択 さ れる が、 通 常医薬製剤中 1 〜 7 0 重量％程度とする のがよい _D

上記医薬製剤の投与方法は特に限定さ れず、 各種製剤 形態、 患者の年齢、 性別その他の条件、 患者の症状の程 度等に応 じて適宜決定される。 例えば錠剤、 丸剤、 散剤. 液剤、 懸濁剤、 乳剤、 顆粒剤及びカ プセル剤は経口投与 さ れ る。 坐剤は直腸内投与さ れる。 注射剤は単独で又は ブ ドウ糖、 ア ミ ノ 酸等の通常の補液と混合 して静脈内投 与 さ れ、 更に必要に応 じて単独で動脈内、 筋肉内、 皮内、 皮下又は腹腔内投与さ れる。 軟膏剤は、 皮膚、 口腔内粘 膜等に塗布される。

上記の各投与単位形態中に配合さ れる べき有効成分の 量は、 これを適用すべき患者の症状によ り 或いはその剤 形等に よ り 一定でないが、 一般に投与単位形態当た り 経 口剤では約 1 〜 1， 0 0 0 m g、 注射剤では約 0 · 1 〜 5 0 0 m g、 坐剤では約 5 〜 ： L , O O O m g とする の力 望ま しい。 ま た、 上記投与形態を有する薬剤の 1 日 当 た り の投与量は、 患者の症状、 体重、 年齢、 性別その他の 条件等によ っ て異な り 一概に決定でき ない力 通常成人 1 日 当た り 約 0. 1 〜 5, O O O m g、 好ま し く は 1 〜 1 , O O O m g とすればよ く、 こ れを 1 日 に 1 回又は 2 〜 4 回程度に分けて投与するのが好ま しい。

発明を実施する ための最良の形態

本発明を更に具体的に説明す る ために以下に製造例及 び実施例を示すが、 本発明は以下の も のに限定され る も のではない。 各例中の％は、 原則 と して重量基準であ る。 製造例 1 マナマ コ 由来の硫酸化多糖の製造

乾燥 したマナマ コ (Stichopus j aponicus ) 1 k g を 1 0 Lの温水につけてー晚膨潤させた後、 筋肉組織を除去 し、 ホモ ジナイ ズ した。 1. 0 規定 とな る よ う に水酸化力 リ ゥ ムを加え、 6 0 °Cの温度で 1 0 0 分間処理 し た後、 6 N塩酸で p Hを 8. 5 に調整 し、 パ ン ク レ アチ ン 5 0 g を加え、 5 0 °Cで 3 時間撹拌 した。

遠心分離 して不純物を除去 した後に、 4 . 3 Lのェタ ノ ールを加え、 4 てで放置 し、 生 じた沈殿物を集めた。 8 0 %エタ ノ ール、 無水エタ ノ ール、 アセ ト ンで順に洗浄、 減圧乾燥 して、 粗生成物 5 0 g を得た。 こ の粗生成物 5 0 gを水 3. 5 L に溶解 し、 遠心分離 し、 不溶性物質を 除去 した。 こ の上澄液に 5 %塩化ナ ト リ ウ ム、 4 0 %ェ タ ノ 一ル沈殿処理を行い、 生 じた沈殿物を遠心分離によ り 収集 した。 こ の沈澱物を 2. 5 L の水に溶解 し、 p H を 1 0. 5 に調整 した後、 3 0 %の過酸化水素水を滴下 し、 5 0 °Cの水浴中で加温 （約 3 時間） して脱色 した。 冷却後、 遠心分離によ り 不溶性物質を除去 し、 上澄液に、 酢酸力 リ ゥ ム約 4 9 0 g を加えて 4 °Cで冷蔵 して一晩放 置 した。 翌 日、 生 じた沈澱物を 2 Lの水に溶解 し、 0 て： に冷却 し、 p Hを 2. 8 に調整 し、 冷却遠心分雜によ り、 不溶性物質を除去 した。 上澄液を中和後、 1 9 6 gの酢 酸カ リ ウ ムを加えて 4 °Cで放置後、 生 じた沈澱物を遠心 分離に よ り 収集 した。 沈澱物を再び水に溶解し、 酢酸力 リ ウ ム濃度を 0. 5 Mと し、 4 °Cで 1 夜放置 した。 遠心 分離に よ り、 沈澱物を収集 し、 4 0 %メ タ ノ ールで洗浄 後、 水 1 L に溶解 し、 5 %塩化ナ ト リ ウ ム、 4 0 %エタ ノ ール沈殿を行い、 生 じた沈殿物を遠心分離によ り 収集 した。 沈殿物を 8 0 % メ タ ノ ール、 無水エタ ノ ール、 ァ セ ト ン で順次洗浄 し、 減圧乾燥を行い、 F G A Gナ ト リ ゥ ム · カ リ ウ ム塩を 1 7 g得た。 その物理化学的恒数は- 次の通 り であ っ た。

分子量 ： 5 5， 0 0 0 (高速 G P C 法） 。

組成分析 ： 塩の形態での重量組成は次の通 り。

ガラ ク ト サ ミ ン ： 2 0. 0 %、

グルク ロ ン酸 ： 1 8. 6 %、

フ コ ー ス ： 1 7. 2 %、

硫酸基 : 3 6. 6 %、

ナ ト リ ウ ム ： 6. 2 %、

カ リ ウ ム ： 7. 4 %。

こ の F G A Gナ ト リ ウ ム · カ リ ウ ム塩 2. O g を水 1 4. 7 m l に溶解 し、 3 0 %過酸化水素水 5. 3 m l を 加え、 4 5 °Cでそれぞれ 1 4 時間処理 した。 冷却後、 p Hを 7 付近に戻 し、 2 %塩化ナ ト リ ウ ム、 4 0 %ェタ ノ ール沈殿処理を行い、 凍結乾燥、 減圧乾燥 して D H Gナ ト リ ウ ム ' カ リ ウ ム塩を 1. 6 4 g得た。 その物理化学 的恒数は、 次の通 り であ っ た。 分子量 ： 1 0, 8 0 0 (高速 G P C法） 。

組成分析 ： 塩の形態での重量組成は次の通 り

ガラ ク ト サ ミ ン ： 1 8. 1 %、

グルク ロ ン酸 ： 1 6. 7 %、

フ コ ー ス : 1 4. 8 %

硫酸基 : 3 7. 1 %

ナ ト リ ウ ム ： 5. 0 %、

カ リ ウ ム 6. 5 %。

モ ノレ比 ： 次の通 り。

ガラ ク ト サ ミ ン グルク 口 ン酸 フ コ ー ス ： 硫酸 基 = 1 ： 0. 8 5 0. 8 9 : 3. 8 0₀

比旋光度 ： [ α ] D一 7 2 2 ° ( C = 1 % ) 。 実施例 1 注射剤

製造例 1 で得た D H Gナ ト リ ウ ム ' カ リ ウ ム塩を、 注 射用蒸留水に溶解 し 5 %水溶液 と した。 こ の溶液を凍結 乾燥用バイ アル瓶 1 バイ アル中 にナマ コ 由来硫酸化多糖 と して 6 0 m g充填 し、 凍結乾燥を行な っ た。 別に溶解 液 と して生理食塩水 1 0 m 1 を添付 した。

実施例 2 注射剤

下記処方に従い注射剤を調製 した。 製造例 1 で得た D H Gナトリウム カリウム塩 4 0 m g 生理食一塩水 適量 ―

1 ア ンプル当 り 1 0 m 実施例 3 錠剤

下記処方に従い錠剤を調製 した

製造例 1 で得た D H Gナトリウム，カリウム塩 1 0 m g コ ー ン ス タ ー チ 6 5 m g カ ノレボキ シ メ チソレセノレロ ー ス 2 0 m g ポ リ ビニノレ ピ 口 リ ド ン 3 m g ス テア リ _ン酸マ グネ シ ゥ ム 2 m g

1 錠当 り 1 0 0 m g 実施例 4 坐剤

下記処方に従い坐剤を調製 した。

製造例 1 で得た D H Gナトリウム ·カリウム塩 5 0 m g ウ イ テ ツ ブゾール W— 3 5

(ダイ ナマイ ト ノ ーベル社製） 9 5 0 m g

1 個当 り 1 0 0 0 m g。 薬理試験例 1 血管平滑筋肥厚に対する抑制作用

ラ ッ ト 大動脈に対 して、 パ'ル― ンに よ り 血管内皮を剥 離 し、 その後に生ずる 内膜の肥厚に及ぼす硫酸化多糖の 効果を検討 した。 被験化合物 と しては製造例 1 で得た D H G ナ ト リ ウ ム ， カ リ ウ ム塩 （以下、 D H G - 1 と称す る ） を用いた。 麻酔下でラ ッ 卜腹部正中部を切開 し、 露 出 した右腸骨動脈よ り 3 Fバルー ンカ テーテルを胸部大 動脈部分に挿入 し、 バルー ンを拡張 して血管内皮の剥離 を行っ た （ Lab. Invest. 5 3 , 5 2 3, 1 9 8 5 ) 。 こ の操作の 3 日前よ り D H G - 1 ( 1 0 m g / k g ) の皮 下投与を始め、 操作後 1 4 日 間 1 日 1 回連続皮下投与 し た。 1 4 日 目 に胸部大動脈を摘出 し、 ホルマ リ ン固定、 H. E. (へマ ト キ ン リ ン ア ン ド ェォ ジ ン、 Hemato xylin and Eosin) 染色 した。 内膜の肥厚度は、 中膜平滑 部分の厚みに対する最大に肥厚 した内膜の厚みの比率で 表 した。 比較薬と してへパ リ ン （力価 1 8 5. 6 U / m g のナ ト リ ウ ム塩） の 3 m g Z k g を用いた。 結果を第 1 表に示す。 なお、 へパ リ ンを D H G — 1 と同様に 1 0 m gノ k g 投与 した場合、 皮下投与部位において極めて重篤な出血 (副作用） が見 られたため、 へパ リ ンの単回皮下投与に おいて出血時間を延長 しない最大用量であ る 3 m g Z k g と した。 第 1 表

！被 験 薬 例 数 肥厚度（％ ) 抑制率（ ¾i ) 無 し（コント π ル） 6 7 2 0

D H G - 1 5 3 3 5 4

へノ、⁰ リ ン 5 4 7 3 5 D H G - 1 は出血症状 もな く、 強い肥厚抑制効果を示 したが、 へパ リ ンでは D H G — 1 よ り 低用量で も皮下投 与部位に出血に基づ く 中等度の炎症を認め、 効果 も投与 でき る 最大用量を投与 したに もかかわ らず、 D H G — 1· よ り 弱い も のであ っ た。 こ れに よ り、 D H G — 1 は出血 等の副作用の心配 も な く 投与でき、 しか も効果 も満足の い く も のであ る こ とが判 つ た。

P T C A後の冠動脈の再狭窄は中膜平滑筋細胞の内膜 側への遊走と増殖の結果 と して生ずる 内膜肥厚に よ る も のであ る。 従っ て、 本モデルでの D H Gの効果は、 D H Gの P T C A後の再狭窄抑制作用がへパ リ ン と は異な り 出血の恐れ も な く 示 さ れる こ と を裏付け る ものであ る。 薬理試験例 2 平滑筋細胞の増殖抑制作用

ラ ッ ト 胸部大動脈か ら 中膜平滑筋層を取 り 出 し、 expl ant法で培養 した （ J. Cell. Physiol. , 1 4 2, 3 4 2,

1 9 9 0 ) 。 こ の培養平滑筋細胞を 2 x 1 0 ³個 / " 2 0 0 1 培養液 と な る よ う に調製 し、 翌 日 小量の培養液に溶 解 させた D H G — 1 を最終濃度 と して 0 〜 ： L . 0 g Z m 1 と な る よ う に添加 して 5 日 間培養 し、 M T T法 （ J. Immunol. Method, 6 5, 5 5， 1 9 8 3 ) で生存細胞数 を測定 し、 抑制率 （ ％ ) を算出 した。 結果を第 2 表に示 す。 ； D H G - - 1 (ig/ml ) 抑制率（％ )

0 0

0. 1 6 4

1. 0 5 9

D H G - 1 は 0. l g / m l 以上の濃度で血管平滑 筋細胞の増殖を著明に抑制 した。

薬理試験例 3 平滑筋細胞の遊走抑制作用

上記薬理試験例 2 と 同様に ラ ッ ト 平滑筋細胞を 1 X 1 0 ⁵個 Z m l 培養液とな る よ う 調製 し、 D H G — 1 を最終 濃度力 0 〜 1 0 ^u g Z m l と な る よ う に添加 し、 二層力、 らな る 培養プ レー ト の上室に 2 5 0 1 を入れた。 下室 には 1 n g / m 1 の化学走化性を示す血小板由来成長因 子 （ P D G F ) と D H G — 1 (最終濃度は 0 〜 1 0 g ノ m 1 ) 6 0 0 】 を入れた。 上室 と下室の間は、 細胞 がす り 抜ける こ とができ る多 く の小孔を有する フ ィ ルタ 一 よ り な っ てお り、 6 時間細胞を上室か ら下室へ遊走 さ せた後、 下室のみ 2 4 時間培養後、 デ ィ フ ク イ ッ ク （ D I F F — Q U I K、 国際試薬社製） で固定 · 染色の後、 細胞数を測定 し、 抑制率 （ ％ ) を算出 した。 結果を第 3 表に示す。 第 3 表

D H G - - 1

抑制率 )

0 0

0. 1 1

1. 0 2 0

1 0. 0 6 0

D H G - 1 は 1. 0 ^ g Z ni 】 以上の濃度で、 濃度に 依存 して血管平滑筋細胞の遊走抑制作用を示 した。

薬理試験例 2 と 3 の結果よ り ナマ コ 由来の硫酸化多糖 の P T C A後の再狭窄抑制作用 は、 中膜平滑筋細胞の遊 走あ る いは増殖を抑制する こ と によ り 発揮される こ とが 示さ れた。

産業上の利用可能性

本発明血管内膜肥厚抑制剤の有効成分であ る ナマ コ 由 来の硫酸化多糖は、 血管平滑筋細胞の遊走又は増殖を抑 制 し、 血管平滑筋肥厚に対 して強い抑制作用を示す。 ま た、 へパ リ ン と異な り、 出血症状を起 こ さ ず、 特に P T C A後の冠動脈の再狭窄抑制剤 と して有用 であ る。

Claims

請 求 の 範 囲

1. ナマ コ 由来の硫酸化多糖の有効量 と薬学的に許容さ れる担体 とを含有す る血管内膜肥厚抑制剤

2. 該硫酸化多糖が、 フ コ ー スを 1 0 〜 2 8 重量％含有 する こ とを特徴とする 請求項 1 記載の血管内膜肥厚抑制 剤。

3. 該硫酸化多糖が、 フ コ ー スを 0 〜 2 8 重量％及び 硫酸基を 2 7 - 4 4 重量％含有する こ とを特徴とする 請 求項 1 記載の血管内膜肥厚抑制剤。

4. 該硫酸化多糖が、 下記物理化学的特性を有する も の であ る 請求項 1 記載の血管内膜肥厚抑制剤

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 3 , 0 0 0 〜 8 0 , 0 0 0 (高速 G P C 法 又はポ リ ア ク リ ルア ミ ド電気泳動法） 。

( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 3 ~ 2 4 重量％、 グノレク 口 ン酸 1 1 〜 2 1 重量％、 フ コ ー ス 1 0 〜 2 8 重量％、 硫酸基 2 7 - 4 4 重量％ モル比が、

ガラ ク ト サ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸 基 = 1 ： 0. 8 0 ± 0. 4 0 : 1. 2 0 ± 0. 5 0 : 3. 4 0 ± 0. 9 0。

5. 該硫酸化多糖が、 ナマ コの体壁か ら抽 出 さ れた硫酸 化多糖を解重合 して得 られる も のであ る 請求項 1 記載の 血管内膜肥厚抑制剤。

6. 該硫酸化多糖が、 下記物理化学的特性を有する も の であ る請求項 5 記載の血管内膜肥厚抑制剤。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 3， 0 0 0 〜 4 2 , 0 0 0 (高速 G P C法） ( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 8 〜 2 4 重量％、 グノレク 口 ン酸 1 4 〜 2 1 重量％、 フ コ ー ス 1 3 〜 2 0 重量％、 硫酸基 3 1 〜 4 4 重量％、 モル比が、

ガラ ク ト サ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸 基 = 1 ： 0. 8 0 ± 0. 2 0 : 0. 8 5 ± 0. 1 5 :

3. 4 0 ± 0. 9 0。

( 4 ) 比旋光度 ： [ ひ ] ² ° _D = — 5 5 〜― 7 3 ° ( C = l % ) 。

7. 該硫酸化多糖力 ^ 分子量 ： 4 , 0 0 0 〜 1 5 , 0 0 0 (高速 G P C法） の も のであ る 請求項 6 記載の血管内膜 肥厚抑制剤。

8. ナマ コ 由来の硫酸化多糖を含有する血管内膜肥厚抑 制剤を製造する ためのナマ コ 由来の硫酸化多糖の使用。

9. 該硫酸化多糖が、 フ コ ー ス を 1 0 〜 2 8 重量％含有 する こ とを特徴 とする 請求項 8 記載の使用。

1 0. 該硫酸化多糖が、 フ コ ー スを 1 0 〜 2 8 重量％及 び硫酸基を 2 7 〜 4 4 重量％含有する こ と を特徴とする 請求項 8 記載の使用。

1 1. 該硫酸化多糖が、 下記物理化学的特性を有する も のであ る請求項 8 記載の使用。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末

( 2 ) 分子量 ： 3， 0 0 0 ~ 8 0 , 0 0 0 (高速 G P C法 又はポ リ ア ク リ ルア ミ ド電気泳動法）

( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 3 2 4 重量％ グノレ ク ロ ン酸 1 1 2 1 重量％ フ コ ー ス 1 0 2 8 重量！％ 硫酸 2 7 - 4 4 ¾ ¾ % ル比が、

ガラ ク ト サ ミ ン ： グルク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸 基 = 1 : 0. 8 0 ± 0. 4 0 : 1. 2 0 ± 0. 5 0 : 3. 4 0 ± 0. 9 0。

1 2. 該硫酸化多糖が、 ナマ コ の体壁か ら抽出 さ れた硫 酸化多糖を解重合 して得 られ る ものであ る 請求項 8 記載 の使用。

1 3. 該硫酸化多糖が、 下記物理化学的特性を有する も の であ る請求項 1 2 記載の使用。

( 1 ) 性状 ： 白色不定形強吸湿性粉末。

( 2 ) 分子量 ： 3 , 0 0 0 〜 4 2， 0 0 0 (高速 G P C法） ， ( 3 ) 組成分析 ：

重量組成が、

ガラ ク ト サ ミ ン 1 8 〜 2 4 重量％、 グノレ ク 口 ン酸 1 4 〜 2 1 重量％、 フ コ ー ス 1 3 〜 2 0 重量％、 硫酸基 3 1 ~ 4 4 重量％、 モル比が、

ガラ ク ト サ ミ ン ： グル ク ロ ン酸 ： フ コ ー ス ： 硫酸 基 = 1 : 0. 8 0 ± 0. 2 0 : 0. 8 5 ± 0. 1 5 :

3. 4 0 ± 0. 9 0。

( 4 ) 比旋光度 ： [ α ] ² = — 5 5 〜 7 3 ° ( C = 1 % ) 。

1 4. 該硫酸化多糖が、 分子量 ： 4 , 0 0 0 〜 1 5 , 0 0 0 (高速 G P C法） の ものであ る請求項 1 3 記載の使用。

1 5. ナマ コ由来の硫酸化多糖の有効量を患者に投与す る こ とを特徴とする血管内膜肥厚の抑制方法。