WO1983004180A1 - Immobilized pepsin for removing blood immune complex and method for removing blood immune complex using immobilized pepsin - Google Patents

Description

明 21 ffi -

発 明 の名称 血 中免疫複合体除去用 固定化ペ プシ ンお よび固定 化 ぺ プ シ ン を用 い た 血中免疫複合体除去方法 技術分野

本発明 は 、 血 中免疫複 合钵除去用 固定 化 ペ プシ ン お よ び固定化ペ プシ ン を 用 い た 血中免疫複合体除去方法 に 関 する 。 背景技術

慢性関 節 リ ウ マ チ、 全身紅斑性狼瘡 （ S L E ) 、 ルー

ブス 腎炎 に 代表さ れる自 己免疫疾患あ る い は免疫複合体 病 （ イ ミ ユ ー ン コ ンプ レ ッ ク ス デ ィ ズ イ ーズ、 immu ne compl ex d i sease) はそ の名 の通 り 、 種々 の抗原 と抗 体 と の複合体 、 す なわ ち 、 免疫複合体に よ り 惹き起 こ さ れる疾患で あ る 。 免疫複合体病の発症機序 は複雑であ り 不明な点も 多 い が 、 お お よ そ 次の よ う な経過を た どる ち の と。考え ら れて い る 。 すなわ ち 、 翊菌ゃ ウ ィ ルス 感染 な ど に よ っ て組織 に 障害が起 こ る と 、 斩た に 出現 し た 自 己 抗原や ウ ィ ルス感染細胞な ど に 対す る 抗体が産生 さ れ 、 こ れ ら の抗体 は対応す る抗原 と 反応 し て 免疫複合 体を 形 成す る 。 免疫複合体 は 補体系 、 血 小板な ど を活性化 し 、

ヒ ス タ ミ ン 、 セ ロ 卜 ニ ン な ど の 血 管作働物質を遊離 す る た め 血管透過性が亢進 す る 。 次いで 、 流血中 の免疫複 合 体が透過 性 の亢進 し た血管壁 に 入 り 込 み 、 基底膜 に 沿 つ

υκど

ΟΜΡΙ て沈着す る 。 沈着 し た免疫複合体 に捕体が作用 し て生成 さ れる 白血球遊走因子 に よ っ て 免疫複合体の沈着部位 に 多核 白血球が集簇する 。 多核 白 血球 は免疫禝合体 と 反応 する と 、 種々 の钽織障害物質 、 例 え ばカ テブシ ン D、 E コ ラゲナ ― ゼ 、 エラ ス タ ーゼ 、 血管透過性因 子 （ パ ー ミ ア ビ リ テ ィ ー フ ァ ク タ ー 、 p e r ea b M i t y f a c t o r ) な どを成出 し 、 こ れ ら の物質 に よ っ て組緩障害が惹き起 こ さ れる 。 S L E な ど の免疫複合体病患者の血中補体価は 一般に低 く 、 病状の悪化 と 補体価の 低下 は密接 に 梠 関 し こ の補体価の低下 は抗原一抗体反応部位、 例 え ば腎、 血 管な どで多量の補体が消費さ れる た めで ある と さ れて い る ₀ ま た 、 免疫複合体は血液凝固系 と ち 関連 し 、 障害耝 織への フ ィ プ リ ノ イ ド沈着を促進する な ど 、 そ の多様な 障害機構に よ つ て 重篤な病変へ と進展させる も の と 考え ら れて い る 。

現在 、 こ れ ら 免疫複合体病の治療 に は 、 ス テ ロ イ ド剤 免疫抑制剤 、 抗炎症剤等に よ る薬物療法の ほ か 、 理学療 法 、 血漿交換療法などが利用 さ れて い る 。 特 に 血槳交換 療法は病因で あ る免疫複合休を除去 す る 最も確実な治療 法の一つ で あ る が 、 交換す るた め の血槳の確保が 困難で あ る た め 、 充分 に その利点を活用 し 切 れて い ない の が現 状であ る 。

発明 の 開示

本発明者 ら は血漿交換療法 と同 等の効果をも ち 、 旦っ 交換血漿を必要 と し ない 治療法を開発 すべ く 、 鋭意研究

0ΜΡΙ を重ね た 結果 、 す で に ペプシ ン及 び白 血球 中 に 含 ま れる ペプ シ ン様酵素が 中性領域下 に お い て は 正常の 血漿蛋 白 に は影響を与え る こ と な し に 免疫複合俅 を特異的 に分解

す る こ と を見 出 し 、 該酵素を有効成分 と する免疫複合体

病治療剤 を発明 した （ 特願 昭 5 6— 1 8 4 2 9 、 P C

T/ J P 8 2 X 0 0 0 3 7 ) 。 本発明 は先の発明 を更に

改良 し た ち の で あ っ て 、 免疫複合体病患者血橥 を 固定化

ペプシ ンで処理 す る こ と に よ り 血漿蛋 白 の本来の 機能を

損な う こ と な く 免疫複合体を除去 す る 方法 お よ びそれ に

用 い る 固定化ペプシ ン を提供する も ので あ る 。

血漿交換療法の主 目 的 は患者血槳中 の非透析性 の病因

物質、 と り わ け免疫複合体を 除去する こ と に あ る こ と か

ら 該固定化 ぺ ブシ ンを用 い て 患者血槳 を処理 す る こ と に

よ り 交換血漿の必要な し に 血漿交換 と周等の効果を上げ

る こ と が可能で あ る 。 例 え ぱ 、 免疫複合体病患者の血漿

を該固定化ペ プ シ ン を充塡 し た カ ラ ム 内 を 通 し て 体外循

環さ せる こ と に よ り 、 他 の血漿蛋 白 に影響 を お よ ぽす こ

と な く 免疫複合休 の みを 除去 する こ と が 出来 る 。 し か も .

当 該方法を用 い れば代用 血槳ゃ他人の血漿 を用 い る 必要

が な い た め 、 血 清肝炎の発症、 .血 液不適合 に よ る 障害な

ど の 副作用 の 発現も考慮 し な く て も よ い 。

本発 明 に 用 い る ペプシ ン は公知 の 酵素 [ ジ ャ ー ナル

ォプ ク リ ニ カ ル イ ン べ ス テ ィ ゲー シ ヨ ン （ J . C I i n . I nvest . ) 2 7巻 8 1 8頁 1 9 4 8年 ] で あ

り 、 各種動 物 の 胃 、 血 液 、 尿 中 な ど に 含 ま れて い る ぺ プ

OMPI

W1PO シ ノ ー ゲ ン を適当 な方法 に よ り 精製 し た の ち 、 適当 な S

体に結合さ せ、 し かる の ち ¾処理に て 活性化 す る こ と に

よ り 本発明 の 固定化 ぺプシ ンを得 る こ と がで き る 。 本発

明 の 固定化ペ プシ ン 製造 に 用 い る ぺ プ シ ン と し て は人 由

来の ペプシ ンが最も 安全且つ 効果的で あ り 、 好 ま し いが

人以外の動物 由 来のぺプシ ン を用いる こ と ち可 εで あ る

固定化 に 用 い る担体 と し て は セ フ ァ ロ ー ス 、 ァガ ロ ー ス

ガ ラ ス ビ ー ズな どの蛋白 吸着能の低い担体が好 ま し い 。

ま た 、 人 工透析器 の濾過膜の 内面 に ペプシ ンを 固定化 し

て用 い る か 、 あ る い はナ イ ロ ン チュ ー プな ど の よ う に 直

接ペプシ ンを結合さ せ得る チ ュ ― ァを担 体 と し て 用 い る

こ と はさ ら に 好 ま し く 、 固定化の方法 は公知 の技術を利

用 する こ と が可能で の る ₀ ま た 、 哺乳類の 白 血球をホ モ

ジネ — 卜 し た上清液を 、 0 . ^ M 酸緩衝液 （ Ρ Η 5 .

3 ) にて 平衡化 し た D E A E — セル ロ ー ス カ ラ ム を通過

さ せる こ と に よ り 、 ぺ プシ ン様酵素を吸着さ せ た の ち 0

5 M塩化ナ 卜 リ ウ ム を含む同 緩衝液 に て 溶出 し、 いで

0 . 9 %生理食塩水 に 膨潤せ し め た セ フ ア デ ッ ク ス G—

0 0に よ るゲルク ロ マ 卜 グラ フ ィ 一 に よ り 精製 し たぺ

プ シ ン様酵素を適当 な担体に 結合さ せた 固定化酵 を用

い る こ と ちで ぎる 。

例 えば 、 ヒ 卜 尿を セ ィ フ ァ ー ら （ S eijffers) の方法

[ アメ リ カ ン ジ ャ ー ナル 才プ フ ィ ジ オ ロ ジ ー （ A

mer . J . P hysiol . 〉 2 0 6巻 Ί Ί 0 6頁 1 9 6

4年 ] に 準 じ 、 0 . 1 M酢酸緩衝液 （ P H 5 . 3 ) に て

ヒ^

ΟΜΡΙ 平衡化 し た D E A E — セ ル ロ ー ス カ ラ ム を 通過 さ せ る こ と に よ り 、 ぺ プシ ノ ー ゲ ン を吸着 さ せ た の ち 、 0 . M の塩 化ナ ト リ ウ ム を含む周緩衝液 に て 溶出 す る 。 溶出 液 を濃縮後、 0 . 9 % の生理食塩水 に 膨潤 せ し め た セ フ ァ デ ッ ク ス G— Ί 0 0 に よ る ゲル ク ロ マ ト グラ フ ィ ー に よ り さ ら に 精製 し た の ち 、 臭化 シ ア ン を用 い て セ フ ァ ロ ー ス に カ ッ プ リ ン グさせ固定 化べプシ ノ ー ゲ ン を得 、 つ い で 酸性条件下に て 活性化 す る こ と に よ り 達せ ら れる 。

本発明 の方法を実施す るに 際 し て は免疫複合体病患者

か ら 血液を体外回路 に 導き全血 をそ の ま ま 当 該固定化べ

プシ ンで処理す る か 、 血漿分離器で分離 し た血隳の みを

当 該固定化ペ プ シ ン で処理 し た の ち 、 血球成分 と 合 し 、

再び体内 に 還流 す る 、 いわ ゆ る 体外循環法 を利用 す る の

が便利 で あ る 。 固定化ペ プ シ ン に よ る処理 は セ フ ァ ロ ー

ス な ど に 結合さ せた ペプ シ ン をカ ラ ム に 充填 し 、 こ の 力

ラ ム 内 を ώ漿分離器で分離 し た血漿 を 灌流 さ せ る かあ る

い は中空 の チ ュ ー ブの 内 面 に ペプ シ ンを 固定 化 し 、 こ の

チ ュ ー ブ内 に 血 液 ま た は血漿を 灌 流 さ せ る こ と に よ っ て

行な う の が好 ま し いが 、 こ れの み に 限定 さ れる も の で は

な い 。 ま た ώ液を体外循環さ せ る に は 、 血 液を送出 す る

た め の ポ ンプ 、 血球 と 血漿を 分離 す る た め の血漿分離器

お よ びこ れ ら の機械を制御 す る た め の HI御装置 と か ら な

る装置を使用 す る の が便利で あ る 。 こ の よ う な装置 と し

て は 例 え ば分離血漿灌流型人工肝補助 装置 （ 幷上 昇 治

療学 5 巻 4 7 7 頁 1 9 8 0 年 ） が利 用 で き る 。 本

OMPI 方法で は通常血液 1 0 0 mlIにっ き固定化ペプシン 1 — 1

0 0 mg好 ま し く は 5 — 5 0 m gを用 いる のが適当であるが 免疫複合体の含量に応じ て適宜増減する こ と も可能であ る。 以下、 実施例にて さ ら に詳細に本発明を説明する 。

発明を実施するための最良の形態 実施例一 1

セフ ァ ロ ー ス 4 B 1 5 0 mlに蒸溜水を加えて 3 0 0 ml と し 、 6 N水酸化ナ 卜 リ ウ 厶準溶液を甩い て P H 1 1 . 0

次いで、 2 . 5 %臭化シア ン 3 0 0 m Iを加え 、 液温を 1 6 °Cに保持 しなが ら 3 0分間 P Hを 1 1 . 0 - 1 . 5 に維持 した。 その後 、 予め 5で に冷 31しておい た蒸溜水お よび 0 . Ί M重炭酸ナ 卜 リ ゥム溶液でセ フ ァ ロ ー スを洗浄 し て臭化シァンを除去 し、 jiJ溶液 3 0 0 m I

ら

に懸濁 し 濁液 3 0 0 m Iに ヒ 卜 尿ぺプシノ ーゲン F 1

0 0 mg加えて 、 5 1 6時間静かに境拌 し なが ら反応 s

させ、 固定化ぺプシ ノ ーゲンを調製 し た 。 次いで、 こ の 固定化ぺプシノ 一ゲンを P H 2 . 0で 1 0分間活性化 し

て固定化ぺプシ ン と し 、 その固定化べプシ ン ( ペプシ ン

1 mgZ m ί 脂 ） 1 0 0 mlをガラス カ ラム （ 4 X 8 cm ) に 充填 し た

血中 に 免疫複合体の存在が証明さ れた慢性闋節 リ ゥマ

チ、 全身紅斑性狼瘡の患者のへパ リ ン加血漿 1 0 0 m Iを 、

3 7で に保温 した固定化ぺプシ ンカ ラム 内を Ί 時間あた

り 3 0 m Iの速度で通過さ せた 。 処理前後の血槳中免疫複

合体量を凝集 ヒ 卜 I g Gを

OMPI

、 wiPo ： t et al ) の方法 [ ァ ー テ ロ ス ク レ ロ ー シ ス （ A tlieros c I erosi s ) 2 9 1 8 1 頁 Ί 9 7 8 年 ] に 従 い 、 モ ルモ ッ ト 補体を用 い て 羊赤 血球溶血 反応 に よ り 、 ま た血 漿中 の アルブ ミ ン お よ び ァ — グ ロ ブ リ ン量を セル ロ ー ス ア セ テ ー ト 胰 を用 い た 電気 泳動法 （ 医化学実験講座 5 巻 2 0 1 頁 1 9 7 3年 ） に よ り 測定 し た 。 結果をそ れぞれ第 1 表 、 第 2表 に 示 し た 。

固定化 ペ プ シ ン カ ラ ム 内 を通過 さ せ る こ と に よ り 、 血 漿中免疫複合体濃度 は いず れも低下 し た が正 常血漿蛋 白 に は 変化 が な か っ た 。 第 1 表

疾患名 血漿番号 免疫複合体濃度 （ g Zffli )

処理前 処理後 ―

慢性 関節 1 1 8 4 6 3

リ ウマチ 2 1 2 5 5 0以下

3 3 4 5—0以下

全身紅斑性 1 4 0 3 1 2 3

狼瘡 2 2 5 3 7 1

3 9 6 5 0以下

Λ-ΡΙ WTPO 第 2 表

疾患名 血 5 番号 アルブ ミ ン r 一 グ ロ ブ リ ン

( g Zdl ) ( g Z d I ) 処理前 処理 後 処理前 処理後 慢性関節 Ί 4 . 3 4 . 3 0 . 8 0 . 8 リ ウマチ 2 4 . 9 4 . 9 1 . 0 1 . 0

3 5 . 0 5 . 0 1 . 2 1 . 2 全身紅斑性 1 " 4 . 8 4 . 8 1 . 3 1 . 3 狼瘡 2 5 . 0 5 . 0 1 . 3 1 . 3

3 5 . 1 5 . 1 1 . 2 1 . 2 実施例 一 2

ァ ミ ノ プ ロ ピル化ガラス ビ — ズ 5 0 0 を 1 0 m Iの水 に懸濁 し 、 5 N水酸化ナ 卜 リ ゥ ム水溶液で P H 0 に 謂 製 し た 。 こ の懸濁液に 、 1 . 5 9 の臭化シ ア ンを含むテ 卜 ラ t ド ロ フ ラ ン溶液 1 5 mlを加え た の ち 、 1 0分圜 5 N水酸化ナ ト リ ウ ム水溶液を適時添-加 し て P H 1 0 に 保 つ た 後、 ガ ラ ス ビ ー ズを瀘取 し 〇 . M重炭酸ナ 卜 リ ウ ム溶液で洗浄 し た 。 こ の様 に処理 し た ガ ラ ス ビー ズを 、 3 M 1 1 — ア ミ ノ ウ ンデカ ン 酸メ チルエ ス テル塩酸塩 を 含む 0 . 1 M重炭漦ナ 卜 リ ウ ム水溶液 2 5 mlと メ タ ノ 一 ル 2 5 m Iの混 合溶媒 に 懸濁 し、 Hを 9 に 保ち 、 4 Vで —夜反応 し た 。 ガ ラ ス ビ ー ズを瀘取 、 水 お よ びメ タ ノ 一 ルで洗淨後、 2 0 m Iの無水メ タ ノ 一 ル に麖濁 し 、 こ れ に 1 miの抱水 ヒ ドラ ジ ンを加 え、 3 時間攬拌 し た 。 ガラ ス ビ ー ズを メ タ ノ ー ル 、 0 . 1 Ν塩 酸 、 水 に て顒次洗淨 後 塩 酸 2 0 mlに 懸濁 し 、 こ れ に 亜硝 酸 ナ ト リ ウ ム 2 8 〇 mgを加 え 、 0で で 2 0分間攛拌反応 し た 。 反応終了後 ガ ラ ス ビ ー ズを少屋の水で 洗净 し 、 0 . 重炭 酸 ナ 卜 リ ウ 厶 （ P H 8 ) 水溶液 2 0 mlに 懸濁 さ せ た 。 こ の 懸濁 液 に 、 ブ タ ぺプ シ ノ ー ゲ ン 5 O mgを添加 、 溶解 し 、 4

で一夜攛拌反応さ せた 。 こ の よ う に し て 得 ら れた 固定化 ぺ ブシ ノ — ゲンを P H 2 で Ί 0分藺加溫 し て 活性化 し 、 固定化ペプシ ン と し た の ち 0 . 1 5 M生 理食塩水 1 0 πΜ に 懸濁 し 、 ガ ラ ス カ ラ ム （ 1 X 8 cm) に 充塡 し た 。 免疫 複合体を含むへパ リ ン加血槳 1 O ralを 1 時藺 に 3 mlの速 度で上記 カ ラ ム 内 を通過 さ せ 、 前後の免疫複合体濃度お よび血漿蛋 白 の性状を実施例 — " 1 と 周様 に 検討 し た 。 結 果をそれぞれ第 3 表お よ び第 4表 に示 し た 。

固定 化ペプシ ン カ ラ ム 内 を通過 さ せる こ と に よ り 血漿 中免疫複合体濃度 は いずれも低下 し た が 、 正常血漿蛋 白 に は変化 が なか っ た 。

0. PI

W\PQ 第 3表 疾患名 血漿番号 免疫複合体濃度 処理前 — 処理後 慢性関節 1 1 9 3 5 8

リ ウ マチ 2 6 7 6 5

3 1 43 5 0以下 全身紅斑性 1 3 5 3 1 3 4

狼瘡 2 2 9 6 8 8

3 1 9 9 5 0以下

第 4表 疾患名 血漿番号 アルブ ミ ン ₇ — グ ロ プ リ ン

( g zd+) ( 9 /d! ) o 処理前 処理後 一 処理前—処理後 慢性関節 1 4. 8 4. 8 0 9

全身紅斑性 1 4. 8 4. 8 1 - 2 1 . 2 狼瘡 2 5 . 1 5 . 1 1 . 2 1 . 2

3 5 . 0 5 . 0 1 . 2 . 2

実施例一 3

長さ 1 5 cmの ナイ ロ ン チ ュ ー ァ （ 内径 3 mm) を 3 5 °C の恒温槽 に 浸漬 し 、 4 . 5 N塩酸で 内腔を 篛た し 1 5分 間反応さ せた 。 内腔を蒸溜水 お よ び 0. 2 M重炭铰 ナ 卜 リ ウ ム溶液 （ P H 9 . 4 ) で 洗 浄 の の ち 、 周 § ¾ に 溶解

し た 5 % グル タ ル アルデハ イ ド溶液を 満 た し 2 0分間反

応さ せた 。 次いで 、 0. 0 5 M リ ン酸緩 衝液 （ P H 8 .

0 ) で充分 に 内腔表面を洗浄 し た の ち 、 周溶液 に 溶解 し た ラ ッ 卜 尿ぺプシ ノ ー ゲ ン 5 mgを ◦ . 2 ml 分 の速度で

2時間 に わ た り 循環 し 反応 さ せ 、 チ ュ ー ブ内腔に ぺブ シ

ノ — ゲンを 固定化 し た 。 さ ら に 、 こ の チ ュ ー ブ内腔を P

H 2の塩酸溶液で 1 0分 圊処理 し て活性化 し 、 固定化べ

プシ ン と し た 。

鈴木 ら の方法 （ 日 本薬理学維誌 6 8巻 5 7 2頁

1 9 7 2年 ） に 準 じ 、 抗 ラ ッ 卜 腎家兎血清を "！ 群 6匹の

ウ イ ス タ — 系雄性 ラ ッ 卜 に 5 ml/ kg静注 し 、 腎炎を惹起

させ た 。 腎炎惹起 2 1 日 後の ラ ッ 卜 の頸静脈に へゾ、 ' リ ン

処理 し た 注射針を 2本揮入 し て 固定 し 、 注射針間 を上述

のチ ュ ー ブで連結 し体外循環回路を作成 し 、 毎時 2 mlの

速度で 4 時間 循環 し た 。 な お対照 に は ペプシ ン を 固定 し

て いな い チ ュ ー ブを周様 に 用 い た 。 体外循環後の 血中免

疫複合体濃度を実施例 一 1 と 周様 の方法 に よ り 測定 し 、

結果を第 5表 に 示 し た 。

内腔表面 に ペプシ ン を 固定 し たチ ュ ー ブ内 を 循環さ せ

る こ と に よ り 血 中免疫複合体濃度は 著 し く 低下 し た 。

O PI 第 5表

免疫複合体 ¾度 （ ^ g ノ ml ) 対 照 群 2 8 3 ± 2 9

固定化ペプシ ン群 1 9 5 ± 1 1

P < 0 . 0 5 実施例一 4

ペ ン 卜 バル ビ タ ー ル麻酔 し た 5頭の成犬 （ 体重 1 0— 1 5 kg) の肘静脈に セル 口 ー ス ♦ ァ セ テ ー 卜 中空杀を用 い た 瀘過型の血隳分離器 を装着 し 、 へパ リ ン処理 し た血 漿灌流回路に実施例一 1 で 調製 し た 固定化ぺプシ ン カ ラ ム を接統 し 、 定速流量ボ ンプ （ ぺ リ ス タ ポ ンプ ァ 卜 — ） を用い て毎時 3 O mlの速度で流れる よ ラ に 篛節 し た 。 ま た 、 固定化ペプシ ン カ ラ ム を通遏 し た ώ槳お よぴ分離 し た血球成分 は併せて他側の肘静脈 に 灌流する体外循環回 路を作成 し た 。 一方、 股静脈か ら 可 溶性免疫複合体 （ ヒ 卜 I g G : 抗 ヒ 卜 I g G家鬼抗体を 4 ： 1 の比で 調製 し た ） 4 0 mg/ kgを 3 時間 に わ た り 持統注入器 （ ッルー ス

A— ！ [ 型 ） を用 い て 静注 し た 。 な お対照に はペプシ ン を固定 し て い な い セ フ ァ ロ ー ス カ ラ ム を周様に 用 い た 。 体外循環開始 3 時間後の血漿中免疫複 口 ！ ¾ を実施例 一 1 と周様の方法で測定 し 6表 に示 し た 。

固定化ペプシ ン カ ラ ムを通過さ せる こ と によ り 血漿中 免疫複合体濃度 は著明 に低下 し た 。 第 6 表

'免疫複合体濃度 ( U g / ml ) 対 照 群 3 4 3 士 2 7

1 **

固定化ペ プシ ン群 .1 ◦ 5 土 1

** P < 0 0

実施例一 5

実施例 一 1 に準 じ て 中空鎳維型の人 工透析器 （ D ο '—

4 C ordis ) の 瀘過 内 表面に 臭化シ ア ン を用 い て ヒ 卜 胃 べプシ ノ — ゲン 1 0 0 mgを結合さ せ た の ち 、 p H 2

0の塩酸で 1 0分 間活性化 し て 固定化ペプ シ ン と し た 。 こ の人工透折器 に 免疫複合体を含むへパ リ ン加血液 2 0

0 ml ( 5例 ） を毎分 1 O mlの速度で循環 さ せ た 。 な お 、 対照 に は ペプシ ン を 固定 化 し て い な い人 工透析器を同様 に し て用 い た 。 循環 2 時間後、 血漿を分離 し そ の免疫複 合体濃度を実施例 一 Ί と 同 様 の方法 に よ り 測定 し 、 結果 を第 7表 に示 し た 。 固定化 ペプシ ン内 を循環さ せ る こ と に よ り 血 中免疫複 合体濃度 は著 し く 低下 し た 。

第 7表 免疫複合体濃度 ( g , /-ml ) 対 照 群 2 0 3 土 1 9

固定化ペ プシ ン群 1 2 8 ± 1 7 *

* P < 0 . 0 5 W1PO 以上実施例で述ベた よ う に 、 本発明 に おけ る固定化ぺ プシ ン は血中免疫複合体を明 ら かに低下させ、 しかち正 常血槳蛋白 に は全く 影響を与えない こ と か ら 、 免疫複合 休病患者血液ま た は血漿を当該固定化ぺプシンで処理 し たのち再び体内 に灌流する こ と に よ り 血液の生理的機能 を失う こ と な く 免疫複合体を除去する こ とが可能である この こ と は当該固定化ぺプシ ンお よび免疫複合体除去方 法を利用 する こ と に よ り 、 交換血漿の必要な し に 、 血漿 交換療法 と周等の効果を挙げ得る こ と を意味するあので あ り 、 その意義は極めて大ぎい。

O PI WIPO

Claims

請 求 の 範 囲 ペプシ ン を担体 に 結合 さ せ た 血中免疫複合体除去用 固定化 ベアシ ン

ペプシ ン が ヒ 卜 尿 由 来で あ る請求の 範囲 第 1 項記載 の 固定化ペプシ ン

免疫複合体含有血液 ま た は血槳を固定化'ペ プシ ン と 接触さ せる こ と か ら な る免疫複合体除去方法

ペプシ ンが ヒ 卜 尿 由 来で あ る 請求の範囲第 3 項記載 の免疫複合体除去方法

固定 化ペプシ ン を カ ラ ム に 充填 し て 使用 す る 請求の

範囲第 3 項記載の免疫複合体除去方法

ペプシ ン をチ ュ ー ブに 固定 し て 使用 す る 請求 の 範囲

第 3 項記載の 免疫複合体除去方法

ペ プシ ンを人 工透析瀘過膜 に 固定 し て 使用 す る 請求

の 範囲第 3 項記載の免疫複合体除去方法

OMPl