UA126654C2 - Сполуки для лікування або профілактики вірусних інфекцій грипу - Google Patents

Сполуки для лікування або профілактики вірусних інфекцій грипу Download PDF

Info

Publication number
UA126654C2
UA126654C2 UAA201806293A UAA201806293A UA126654C2 UA 126654 C2 UA126654 C2 UA 126654C2 UA A201806293 A UAA201806293 A UA A201806293A UA A201806293 A UAA201806293 A UA A201806293A UA 126654 C2 UA126654 C2 UA 126654C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
compound
virus
compounds
group
influenza
Prior art date
Application number
UAA201806293A
Other languages
English (en)
Inventor
Бетті Джін
Бетти Джин
Ее-Лін Ше
Ее-Лин Ше
Пол Артур Джоунз
Пітер Джеймз Дженкінз
Питер Джеймз Дженкинз
Генрі Кеннет Віндл
Генри Кеннет Виндл
Вень Ян У
Original Assignee
Остраліен Байомедікал Ко. Пті Лтд
Остралиен Байомедикал Ко. Пти Лтд
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from AU2015904895A external-priority patent/AU2015904895A0/en
Application filed by Остраліен Байомедікал Ко. Пті Лтд, Остралиен Байомедикал Ко. Пти Лтд filed Critical Остраліен Байомедікал Ко. Пті Лтд
Publication of UA126654C2 publication Critical patent/UA126654C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/645—Polycationic or polyanionic oligopeptides, polypeptides or polyamino acids, e.g. polylysine, polyarginine, polyglutamic acid or peptide TAT
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6839—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting material from viruses
    • A61K47/6841—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting material from viruses the antibody targeting a RNA virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1021—Tetrapeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Представлений винахід передбачає сполуки для застосування в лікуванні та/або попередженні грипу. Сполука містить перший та другий домени, причому перший домен містить щонайменше одну анкерну групу, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу, та другий домен містить щонайменше одну аніонну групу. Перший та другий домени є ковалентно зв'язаними. Крім того, передбаченими є фармацевтично прийнятні солі, сольвати, проліки або стереоізомер сполук.

Description

(57) Реферат:
Представлений винахід передбачає сполуки для застосування в лікуванні та/або попередженні грипу. Сполука містить перший та другий домени, причому перший домен містить щонайменше одну анкерну групу, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу, та другий домен містить щонайменше одну аніонну групу. Перший та другий домени є ковалентно зв'язаними. Крім того, передбаченими є фармацевтично прийнятні солі, сольвати, проліки або стереоізомер сполук.
ДАТА ПОДАННЯ
ПІ Дана заявка є пов'язаною з пріоритетом та заявляє пріоритет за австралійською заявкою на патент Мо 2015904895, поданою 20 листопада 2015 року, весь зміст якої є включений в даний документ у вигляді посилання.
ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ
(2) Дана заявка стосується сполук для медичного застосування, зокрема для лікування або профілактики вірусних інфекцій. Дана заявка також стосується способів отримання сполук.
ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ
ІЗЇ Грип представляє собою респіраторну інфекцію, яка щорічно вражає від 5 95 до 25 95 населення США, з них приблизно 200 000 госпіталізують, та 25 000 вмирає. Інфекція грипу продовжує залишатися постійною загрозою для здоров'я людей та тягарем для системи охорони здоров'я. Зовсім недавно виникнення високо патогенних вірусів Н5М! та вірусів Н7МОУ з джерел птахів, та їх можливість для отримання здатності передачі людині підвищує ризик, пов'язаний з інфікуванням грипу. Незважаючи на те, що вакцини залишаються наріжним каменем профілактики, необхідним є значний час для розробки ефективної вакцини проти частих мутацій будь-якого нового вірусного штаму. Лікарські засоби проти грипу, такі як інгібітори вірусних нейраминідаз (інгібітори НА), включаючи занамівір (КеІепга) та оселтамивір (Татійнй) та блокатори іонних каналів М2, отримані з адамантанів, включаючи амантидин та римантидин, є доступними та продаються протягом більше 20 років, але їх ефективність є обмеженою механізмом дії. Їх ефективність може бути додатково знижена за рахунок вірусної мутації та розвитку резистентності до наступного лікарського засобу.
ЇЇ Наприклад, блокатори іонних каналів М2 в даний час не рекомендуються для застосування, тому що майже весь циркулюючий сезон вірус А (включаючи НІМірсітоО9) несе точку мутації 531 в гені М2, яка надає стійкість до амантадину та римантадіну. Це в результаті спричинило важку залежність від альтернативних інгібіторів МА, таких як занамівір, оселтамивір та перамивір.
ІБЇ Інгібітори МА впливають на збір та зародження вірусів грипу А у вірусному життєвому циклі. Для нащадкових віріонів, які вивільняються з клітини, нейрамінідаза (МА) повинна відщепити групу сіалової кислоти від глікопротеїнів-господарів, що є важливим для поширення
Зо вірусу та повторного інфікування. Таким чином, блокування функції нейрамінідази специфічними інгібіторами (інгібіторами МА) є способом лікування грипу. Проте, оскільки таке інгібування відбувається на більш пізній стадії вірусного життєвого циклу (тобто після введення вірусу, реплікації, збирання та зародження на поверхні клітини), велика частина пошкоджень вже була зроблена клітині. Крім того, це впливає тільки на віруси, які породжуються на поверхні клітини. Непригнічене вірусний потомство може інфікувати нові клітини. Це призводить до прогресування тяжкості захворювання. З метою зменшення тяжкості захворювання, оптимальне терапевтичне вікно для лікування лікарськими засобами інгібіторами МА є раннім в стадії прогресування захворювання. Проте, оскільки терапевтична ефективність даного активного агента загалом визначається механізмом дії, лікарські засоби на основі інгібітора МА вважаються відносно м'якими та мають обмежену клінічну перевагу.
І6Ї Існує потреба в нових підходах до лікування грипу.
І/ Життєвий цикл грипу А включає декілька стадій: (а) Грип Вірус має ліпідну бішарову оболонку, в межах якої знаходиться вісім геномних сегментів РНК, кожен з яких асоціюється з тримерною вірусною РНК-полімеразою (РВІ, РВ2,
РА) та покритий множинними нуклеопротеїнами (МР) для утворення мЕМР. Зовнішній шар ліпідної оболонки має шип з декількома копіями НА, МА та невеликою кількістю М2, тоді як молекули МІ підтримують мЕМР, прикріплені до внутрішнього шару. (Б) Глікопротеїн НА вірусної поверхні зв'язується з рецепторами сіалової кислоти на поверхні клітини-господаря та вірус транспортується в клітину в ендоцитарну везикулу. Низький рівень рН в ендосомах викликає конформаційну зміну в протеїні НА, що призводить до злиття вірусних та ендосомальних мембран. Низький рівень рН також викликає потік протонів у вірус через іонний канал М2, тим самим дисоціюючи мЕМР з протеїнів матриксу М1. Коли молекули
МІ дисоціюються, мЕМР, які вивільняються в цитоплазму, переносяться в ядро шляхом розпізнавання послідовностей ядерної локалізації (МІ 5) на нуклеопротеїнах. (с) В ядрі, вірусна полімераза, яка ініціювала синтез вірусної мРНК з 5'-блокованими фрагментами РНК, відщеплюється від господаря пре-мРНК. Субодиниця РВ2 зв'язує 5'-кеп господаря пре-мРНК, та домен ендонуклеази в субодиниці РА розщеплює пре-мРНК від 10 до 13 нуклеотида в 5" - 3" напрямку від кепа. Транскрипція вірусної мРНК, внаслідок цього, ініціюється з розщепленого З'-кінця кепованого сегмента РНК. Дане "зривання кепа" бо відбувається на виникаючих пре-мРНК.
(4) Вірусні мРНК транспортуються до цитоплазми для трансляції в вірусні протеїни.
Поверхневі протеїни НА, М2 та МА обробляються в ендоплазматичному ретикулумі (ЕК), глікозилюються в апараті Гольджі та транспортуються в клітинну мембрану. (є) Протеїн М51 вірусу грипу А відіграє вирішальну роль в пригніченні продукування мРНК господаря шляхом інгібування процесінгу З3'-кінця господарів пре-мРНК, в наслідок чого блокуючи продукування господарів пре-мРНК, включаючи мРНК інтерферону-В. На відміну від господарів пре-мРНК, вірусні мРНК не вимагають процесінгу З3'-кінця за рахунок механізму клітини господаря. Тому, вірусні мРНК транспортуються до цитоплазми, тоді як синтез МРНК господаря переважно блокується. () Вірусна полімераза несе відповідальність не тільки за кепований РНК-примірований синтез МРНК, але також за неприміровану реплікацію вРНК як зазначено далі: (У вРНК--(к) кРНК--(-) вР НК.
Молекули нуклеопротеїну є необхідними для цих двох стадій реплікації та депонуються на
КРНК та вРНК під час синтезу РНК. Отримані в результаті МКМР згодом транспортуються в цитоплазму, опосередкований комплексом М1-М52, який є зв'язаним з МКМР; М52 взаємодіє з людським протеїном СКМ, який експортує мАМР з ядра. (4) мМАеМР досягають клітинної мембрани, щоб бути включеними в нові віруси, які виділяються. Протеїни НА та МА в нових вірусах містять термінальні сіалові кислоти, які можуть викликати скопичення вірусів та прикріплення до клітинної поверхні. МА новостворених вірусів розщеплює ці залишки сіалової кислоти, тим самим вивільняючи вірус з клітини-господаря.
ІЗ Під час стадій (а) та (Б) життєвого циклу вірусу грипу, вірусний поверхневий глікопротеїновий гемаглютинін (НА) зв'язується з рецепторами сіалової кислоти на клітині- господарі, з наступним опосередкованим рецептором ендоцитозом вірусу в клітку. Низький рівень рН в ендосомах викликає конформаційну зміну в протеїні НА, що призводить до злиття вірусної та ендосорної мембрани. Тим часом низький рівень рН також викликає потік протонів у вірус через іонний канал М2, тим самим вивільняючи вірусний генетичний матеріал в ядро для того, щоб розпочати процес вірусної інфекції в клітці.
ІЗ) Визнано, що дія низького рівня рН на вірус у позаклітинному середовищі інактивує вірус.
Показано, що низький рН інтраназальних гелевих спреїв пригнічує віруси грипу іп міго та
Зо захищає від інфікування грипом. Проте, в таких дослідженнях ефективна концентрація кислот становить приблизно 0,15 М (приблизно рН 3,5). Крім того, для контакту з вірусом необхідно мати вірацидний ефект. Крім того, спреї продемонстрували ефективність тільки на ранніх стадіях вірусної інфекції. Незважаючи на те, що величина рН, наближена до 3,5, може бути досягнута шляхом введення буферного назального спрею з рН 3,5, існує обмеження назальної доставки, що забезпечує порівняно короткий час утримування продукту в носі через мукоциліарний кліренс. Час звичайного знаходження назально введеного розчину в людині становить приблизно від 12 до 15 хвилин.
МОЇ Крім того, у випадку лікування вірусної інфекції, кислотний буфер повинен бути доставлений глибоко в дихальні шляхи. Цілком імовірно, що кислотний характер такого буфера викликатиме подразнення та непереносимість у людей. Тому кислотні інтраназальні спреї не є прийнятними як терапевтичні агенти для лікування інфекції грипу, оскільки вони є суттєво обмеженими та неспецифічними.
М1Ї Поліаніонні сполуки пропонують привабливі функції, як анти-ВІЛ-агенти. Спектр противірусної активності поліаніонів поширюється на різні оболонкові віруси, включаючи орто- та пара-міксо віруси (вірус грипу). Такі поліаніони, як показано, інгібують вірусну реплікацію в клітинних культурах в концентрації від 0,1 до 1 мкг/мл. Переважно такі сполуки не є цитотоксичними навіть в концентраціях до в 10 000 разів вищих. Проте дані речовини страждають низкою фармакокінетичних та токсикологічних недоліків, які, як здається, погіршують їх клінічну застосовність, наприклад, в току крові вони можуть утримуватися різними протеїнами плазми, перш ніж вони потраплять до місця дії. Крім того, деякі сульфатовані полісахариди є відомими через небажану антикоагулянтну активність. 121 Існує потреба в нових противірусних агентах, які є ефективними проти грипу. Зокрема, існує потреба в нових антивірусних агентах, які демонструють один або декілька з наступних чинників: ї) висока специфічна активність проти грипу, ії) швидка дія щодо контролю інфекції, іїї) антивірусна активність широкого спектру (включаючи грип А, В, пташиний грип), ім) ефективність проти штамів, резистентних до лікарських засобів, м) низька тенденція щодо резистентності до лікарських засобів, мі) подовжена тривалість дії, мії) висока селективність, мії) покращене терапевтичне вікно; іх) низька токсичність, х) менша кількість побічних ефектів та/або хі) є прийнятним для терапевтичного та профілактичного застосування. 60 СУТЬ ВИНАХОДУ
13) Представлений винахід передбачає сполуки та способи лікування та/або попередження інфекції грипу.
І14| Сполуки за представленим винаходом, які також називаються як "сполуки поверхневої інженерії"? як вважається, змінюють поверхню вірусу, перетворюючи поверхню в мікро кислотне/аніонне середовище для того, щоб селективно втручатися в вірусний життєвий цикл, включаючи наведені вище стадії (а) та (Б). 15)! Це, як вважають, досягається шляхом застосування сполук за представленим винаходом, які поєднують групу, яка зв'язується з вірусом грипу, та кислотну(ї) або аніонну(ї) групу(и), які діють для перешкоджання зв'язуванню гемаглютиніну з клітиною. Це надає перевагу, оскільки сполуки за винаходом діють для запобігання інфікуванню клітини, та здійснюють свій вплив позаклітинно. Це попереджає необхідність молекули захоплювати клітину, що повинно призвести до зниження токсичності та/"або меншої кількості побічних ефектів. 16) В одному аспекті, представлений винахід передбачає сполуку, яка містить перший та другий домен, перший домен, який містить щонайменше одну анкерну групу, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу; та другий домен, який містить щонайменше одну аніонну групу; або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват, проліки або стереоізомер, причому перший та другий домени є ковалентно зв'язаними.
І17| В іншому аспекті, передбаченими є сполуки, причому перший та другий домени є ковалентно зв'язаними через щонайменше один дивалентний лінкер. (18) В ще інших аспектах, сполуки за винаходом можуть додатково містити багатовалентну скелетну групу. 19) В іншому аспекті, передбаченими є сполуки формули (1): к-лі-в-ра--о п р
Формула (І) або їх фармацевтично прийнятна сіль, сольват, проліки або стереоізомер, де:
А в кожному випадку представляє собою анкерну групу;
Зо В представляє собою багатовалентну скелетну групу;
С в кожному випадку представляє собою аніонну групу;
Ї/ та І? в кожному випадку представляють собою дивалентні лінкери; п представляє собою ціле число від 1 до 4; та р представляє собою ціле число від 1 до 3. (29) В інших аспектах, передбаченими є фармацевтичні композиції, які містять сполуку за винаходом або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват, проліки або стереоізомер. В наступних аспектах, передбаченим є застосування сполуки за винаходом або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату, проліків або стереоізомеру у виробництві лікарського засобу для лікування або попередження вірусної інфекції грипу. (21| В інших аспектах, передбаченими є способи лікування або попередження вірусної інфекції грипу, які включають введення суб'єкту, що цього потребує, терапевтично ефективної кількості сполуки за винаходом або її фармацевтично прийнятної солі, сольвату, проліків або стереоізомеру. (22)| В деяких аспектах, вірусною інфекцією грипу є грип А, грип В, пташиний грип або резистентний до лікарських засобів штам грипу. (23) Якщо не зазначено інше, всі технічні та наукові терміни, які використовуються в даному документі, мають такі самі значення, які звичайно розуміють фахівці в галузі, до якої належить даний винахід. (24)| Посилання на будь-який рівень техніки в даному описі не сприймається, та не повинен сприйматися як, визнання або будь-яка форма підтвердження, що такі форми рівня техніки є частиною звичайних, загальних знань. (25) Всі документи, цитовані в даному документі, кожен є включеним у вигляді посилання в повному обсязі.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
(26) Фіг. 1: Узагальнення різних умов для попереднього лікування вірусу (А/Зудпеу/250/99 або/Зуапеу/5/97) з використанням досліджуваних сполук перед інфікуванням МОСК клітин.
І27| Фіг. 2: Попереднє лікування вірусу (А/Зуйпеу/250/99) з використанням досліджуваних сполук перед інфікуванням МОСК клітин, А) МО348, В) МОЗ345 та С) занамівіру (контроль).
І28| Фіг. 3: Попереднє лікування вірусу (А/Зудпеу/5/97) з використанням досліджуваних сполук перед інфікуванням МОСК клітин, А) МО348, В) МОЗ345 та С) занамівіру (контроль).
І29| Фіг. 4: Попереднє лікування вірусу (А/Зуйпеу/250/99) з використанням МО345 (досліджувана сполука) та занамівіру (контроль) протягом різних періодів часу та умов перед інфікуванням МОСК клітин.
ІЗОЇ Фіг. 5: Порівняння противовірусної активності МО314-1 та МО021-7 проти А/Зудпеу/5/97 (НЗМ).
ІЇЗ1!Ї Фіг. 6: Порівняння противовірусної активності МО314-14 та МО0021-7 проти
А/Мів55і55іррі/03/01 (НІМІ) немутантного типу.
ЇЗ2| Фіг. 7: Порівняння противовірусної активності МО021-7 та МО0О051-3 проти
А/Мів55і55іррі/03/01 (НІМІ) немутантного типу.
ІЗЗ|Ї Фіг. 8: Порівняння противовірусної активності МО021-7 та МО0О051-3 проти
А/Мів5і55іррі/03/01 (НІТМ1) Н274У (резистентного до оселтамивіру).
ЇЗ4| Фіг. 9: Порівняння противовірусної активності МОЗ314-14 та МО0021-7 проти
А/Мів5іззіррі/03/01 (НІМІ) Н274У (резистентного до оселтамивіру).
ЇЗ5Ї Фіг. 10: Узагальнення часу обробок, інфекції та збору органів для оцінки показників вірусного кліренсу в легенях та носових проходах у мишей.
ІЗ6Ї Фіг. 11: Порівняльні легеневі вірусні титри у мишей для оцінки показників вірусного кліренсу з використанням МОО21, занамівіру та РВ5.
ІЇЗ7| Фіг. 12: Порівняльні легеневі вірусні титри у мишей для оцінки показників вірусного кліренсу з використанням МОО21, занамівіру та РВЗ5 в дні 1, 3, 5 та 7 після інфікування.
ІЗ8І Фіг. 13: Порівняльний вірусний титр, виражений як відсоток значення контрольної групи з РВ5.
ІЗ9Ї Фіг. 14: Порівняльні втрати маси у мишей для оцінки показників вірусного кліренсу при використанні МО021, занамівіру та РВ5.
І4ОЇ| Фіг. 15: Нейтралізація А/Саїїогпіа/7/09 (пан-НІТ МІ) іп міїго.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС
Ї41| Як обговорювалося вище сполуки за представленим винаходом, як вважається, змінюють поверхню вірусу, перетворюючи поверхню в мікро кислотне/аніонне середовище для того, щоб селективно втручатися в стадії вірусного життєвого циклу.
І42| Вважається, що кислотні/аніонні групи сполук за представленим винаходом перетворюють поверхню вірусу в мікро кислотне/аніонне середовище, яке знижує або інактевує вірусну активність. Крім того, вважається, що дані сполуки діють позаклітинно та, тому, можуть бути пов'язані зі зменшенням частоти випадків побічних ефектів, зниженою токсичністю та/або зменшення тенденції щодо резистентності. Більш конкретно, вважається, що сполуки за представленим винаходом діють позаклітинно в точках групової мішені вірусного життєвого циклу, включаючи, але не обмежуючись цим: - Кислотні/аніонні групи генерують низький рН на поверхні вірусу, який викликає передчасно дозріваючу конформаційну зміну в гемаглютиніновому (НА) протеїні, який може потім зменшити або затримати злиття вірусу та клітини. Це є специфічним для стадії (Б) вірусного життєвого циклу, про яку йде мова. - Крім того, вважається, що створення середовища з низьким рН на поверхні вірусу викликає потік протонів у вірус через іонний канал М2, що може спричинити вивільнення генетичного матеріалу поза клітинами. Це є специфічним для стадії (б) вірусного життєвого циклу, про яку йде мова. - Вважається, що анкерні групи сполук за винаходом можуть перехресно зшивати МА/НА та агрегувати частинки вірусу, щоб зменшити рухливість та інфекційність вірусів. Це є специфічним для стадій (а) ти (Б) вірусного життєвого циклу, про які йде мова. - Вважається, що анкерні групи інгібують функцію нейрамінідази (МА), зменшуючи або попереджаючи вивільнення нових вірусів з клітинної мембрани. Це є специфічним для стадії (9) вірусного життєвого циклу, про яку йде мова.
І43)Ї Вважається, що порушення стадій (а) та (Б) вірусного життєвого циклу може зменшити потенційну тяжкість інфекції за рахунок зниження вірусної інфекційності, включаючи вірусну інвазію в клітини, вірусне порушення нормальних функцій клітинного ядра та/або вірусної реплікації. Відповідно, вважається, що введення сполук за представленим винаходом може забезпечити більш ефективне лікування вірусної інфекції та/або більш швидке одужання для пацієнтів, ніж на даний час доступні лікарські засоби інгібітори МА. Крім того, вважається, що сполуки за представленим винаходом можуть застосовуватися профілактично для попередження інфікування грипом.
І44)| Відповідно, в одному аспекті, представлений винахід передбачає сполуку, яка містить перший та другий домен, де перший домен, містить щонайменше одну анкерну групу, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу; та другий домен, який містить щонайменше одну аніонну групу; або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват, проліки або стереоізомер, причому перший та другий домени є ковалентно зв'язаними.
І45) В деяких аспектах, перший та другий домени можуть бути ковалентно зв'язаними через щонайменше один дивалентний лінкер. В інших аспектах, сполуки за винаходом можуть додатково містити багатовалентну скелетну групу.
І46) В іншому аспекті, представлений винахід передбачає сполуки формули (1):
А-О в-На-о п р
Формула (І) або їх фармацевтично прийнятну сіль, сольват, проліки, естер або стереоізомер, причому:
А в кожному випадку представляє собою анкерну групу;
В представляє собою багатовалентну скелетну групу;
С в кожному випадку представляє собою аніонну групу;
Ї/ та І? в кожному випадку представляють собою дивалентні лінкери; п представляє собою ціле число від 1 до 4; та р представляє собою ціле число від 1 до 4.
І47| Як використовується в даному документі, "сполука за винаходом" або "сполука формули ()" означає сполуку або її фармацевтично прийнятну сіль, сольват, проліки, естер або стереоізомер, або фізіологічно функціональну її похідну.
І48)| Термін "анкерну групу", як використовується в даному документі, стосується будь-якої прийнятної групи, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу. В деяких варіантах здійснення, анкерна група представляє собою групу, яка зв'язується з нейрамінідазою, таку як інгібітор нейрамінідази або його похідну. Приклади прийнятних груп включають, але не обмежуються цим, сіалову кислоту або її похідні, включаючи М- або О-заміщені похідні нейрамінової кислоти, такі як занамівір або ланінамівір, оселтамивір, перамівір, 2,3-дифлуорсіалову кислоту (ОЕ5А) та її похідні. В інших варіантах здійснення, анкерна група містить домен зв'язування антитіла, який специфічно зв'язує нейрамінідазу. Приклади прийнятної анкерної групи, яка містить домен зв'язування антитіла, який специфічно зв'язує нейрамінідазу, включають антитіло (АБ) або антиген зв'язуючий фрагмент антитіла, одноланцюговий фрагмент антитіла (5СЕМ) або однодоменне антитіло (аАБ).
І49| Термін "скелетна група", як використовується в даному документі, стосується будь-якої прийнятної багатовалентної групи, до якої приєднується одна або декілька анкерних груп та одна або декілька кислотних або аніонних груп. В деяких аспектах, скелетна група може представляти собою тривалентну групу. В інших аспектах, скелетна група може представляти собою чотиривалентну групу. Приклади прийнятних скелетних груп включають, але не обмежуються цим, необов'язково заміщений пропан-1,2,3-трикарбоксилат, необов'язково заміщений циклогексан-1,3,5-трикарбоксилат, та необов'язково заміщені бензол-1,2,4,5- тетракарбоксилат.
І5ОЇ Терміни "кислотна або аніонна група" та "кислотна/аніонна група" стосується будь-якої прийнятної функціональної групи, яка має кислотні та/або аніонні властивості, яка діє, щоб перешкодити зв'язуванню гемаглютиніна з клітиною. Специфічно, термін "аніонний" описує чистий негативний заряд функціональної групи або матеріалу. Буде зрозумілим, що даний негативно заряджений матеріал може мати один або декілька позитивно заряджені протиїони асоційовані з ним, або навпаки. В розчині, негативно заряджений матеріал може дисоціювати на один або декілька позитивно заряджених проти іонів, з якими він є асоційованим. Як використовується в даному документі, термін "аніонний" використовується, щоб описати властивість такого матеріалу або функціональної групи, а не всього комплексу з одним або декількома протиіонами, які будуть, як правило, робити комплекс нейтральним. Слід розуміти, що певні функціональні групи є негативно зарядженими, нейтральними або позитивно зарядженими при різних значеннях рн. Чи є матеріал аніонним буде визначатися на основі суми даних зарядів. Наприклад, в межах обсягу винаходу кислотна або аніонна група може включати одну або декілька наступних функціональних груп карбонової, сульфонової, фосфорної та фосфонової кислот та їх ізостери або біоізостери. Приклади прийнятних кислотних або аніонних груп включають, карбонові кислоти, амінокислоти, дипептиди, трипептиди або поліпептиди або їх похідні, які мають кислотні та/або аніонні властивості, такі як аспарагінову кислоту, цистеїнову кислоту, глутамінову кислоту або пептиди, отримані з аспарагінової кислоти, цистеїнової кислоти та/або глутамінової кислоти.
ІЗ1|Ї Термін "сіалова кислота" є добре відомим в даній галузі та стосується 9-карбон моносахариду, зокрема того, який отримують з нейрамінової кислоти. Приклади прийнятних груп включають, але не обмежуються цим, необов'язково заміщені моносахариди, отримані шляхом М- та/або О-заміщень М-ацетилнейрамінової кислоти (Меиб5Ас) та М- гліколілнейрамінової кислоти (Меи5с(с).
І52І Термін "інгібітор нейрамінідази" є добре відомим в даній галузі та стосується класу сполук, які блокують фермент нейрамінідази. В деяких варіантах здійснення, анкерна група може представляти собою інгібітор нейрамінідази або її похідну. Приклади прийнятних інгібіторів нейрамінідази включають, але не обмежуються цим, сіалову кислоту або похідну сіалової кислоти, таку як 2,3-дифлуорсіалова кислота. Інші прийнятні інгібітори нейрамінідази включають:
Яке г 2 чі ве ще дені дет вия ви щу шк й їх 5 й пе ЗЕ
Занаіно Сита не Во в виб ни туя щ ач а У я ВЕ че, шо ще ще о
Півні вх Перо» та їх похідні.
ІЗ) Терміни "специфічне зв'язування" або "специфічно зв'язуючи", як використовується в даному документі, по відношенню до взаємодії антитіла з другим хімічним видом, означає, що взаємодія є залежною від присутності конкретної структури (наприклад, антигенної детермінанти або епітопа) в хімічному виді; наприклад, антитіло розпізнає та зв'язується з конкретною протеїновою структурою, а не з протеїнами взагалі.
І54) Термін "антитіло", як використовується в даному документі, широко стосується будь-якої молекули імуноглобуліну (Ід), яка складається з чотирьох поліпептидних ланцюгів, двох важких (Н) ланцюгів та двох легких (І) ланцюгів, або будь-якого функціонального фрагмента, мутанта, варіанта, або його похідної, який зберігає основні ознаки зв'язування епітопу молекули Ід. Такі мутантні, варіантні або похідні формати антитіл є відомими в даній галузі техніки. Необмежуючі варіанти здійснення яких розглядаються нижче.
І55) В повнодовжинному антитілі, кожен важкий ланцюг складається з варіабельної ділянки
Зо важкого ланцюга (скорочено в даному документі як НСМЕ або МН) та константної ділянки важкого ланцюга. Константна ділянка важкого ланцюга складається з трьох доменів, СНІ, СН2 та СНЗ. Кожен легкий ланцюг складається з варіабельної ділянки легкого ланцюга (скорочено в даному документі як СУК або МІ) та константної ділянки легкого ланцюга. Константна ділянка легкого ланцюга складається з одного домена, СІ. МН та Мі. ділянки можуть бути додатково підрозділені на ділянки гіперваріабельності, які називаються ділянками визначення комплементарності (СОК), які перемежовуються з ділянками, які є більш консервативними, які називаються каркасними ділянками (ЕК). Кожна МН та Мі. складається з трьох СОК та чотирьох
ЕК, вирівняних від аміно-кінця до карбокси-кінця в наступному порядку: ЕКІ, СОКІ, ЕК2, СОК2,
ЕКЗ, СОКЗ, ЕК4. Молекули імуноглобуліну можуть бути будь-якого типу (наприклад, Ідс, ІДЕ,
І9М, дО, ІдА та Ід), класу (наприклад, Ідс1, Ідс2, до 3, Ід, ІДАЇ та ІдАг) або підкласу.
І56Ї Термін "антиген-зв'язуючий домен" або "антиген-зв'язуючий фрагмент" антитіла, як використовується в даному документі, стосується одного або декількох фрагментів антитіла або протеїна, які зберігають здатність специфічно зв'язуватися з антигеном (наприклад, ІІ-12).
Показано, що антиген-зв'язуюча функція антитіла може виконуватися фрагментами повнодовжинного антитіла. Такі варіанти здійснення антитіл також можуть бути біспецифічними, подвійно специфічними або мультиспецифічними форматами; специфічно зв'язуючись з двома або більше різними антигенами. Приклади зв'язуючих фрагментів, які охоплюються терміном
"антиген-зв'язуюча частина" антитіла включають (ї) баб фрагмент, одновалентний Фрагмент, який складається з МІ, МН, Сі. та СНІ доменів; (ії) Е(ар)2 фрагмент, двовалентний фрагмент, який містить два аб фрагменти, зв'язані дисульфідним містком в шарнірній ділянка; (ії) га фрагмент, який складається з МН та СНІ доменів; (ім) Ем фрагмент, який складається з Мі. та УН доменів одноплечових антитіл, (м) ЧАБ фрагмент (Умага еї а. 1989 Маїиге 341 544-6, М/іпіег еї аї., публікація РСТ МО 90/05144 ДАІ, включена в даний документ у вигляді), який містить одноваріабельний домен; та (мії) виділену ділянку визначення комплементарності (СОМ). Крім того, хоча два домени фрагмента Ем, МІ. та МН, кодуються окремими генами, вони можуть бути з'єднаними, використовуючи рекомбінантні способи, застосовуючи синтетичний лінкер, що забезпечує можливість їх отримувати як єдиний протеїновий ланцюг, в якому пара Мі та УН ділянок утворюють одновалентні молекули (відомі, як один ланцюг Ем (5сЕм); (дивіться, наприклад, Віга еї аЇ. 1988 Зсіепсе 242 423-6; Нивіоп єї аІ. 1988 Ргос Маї! Асай 5сі ОО 5 А 85 5879-83). Такі одноланцюгові антитіла також є призначеними, щоб бути охопленими терміном "антиген-зв'язуюча частина" антитіла. Крім того, охопленими є інші форми одноланцюгових антитіл, такі як діатіла. Діатіла представляють собою двовалентні, біспецифічні антитіла, в яких
МН та МІ домени експресуються на одному поліпептидному ланцюгу, але використовуючи лінкер, який є занадто коротким, щоб дозволити спарювання між двома доменами на одному й тому самому ланцюгу, тим самим змушуючи домени до спарювання з комплементарними доменами іншого ланцюга та створення двох антиген-зв'язуючих сайтів (дивіться, наприклад,
Ноїїїдет", Р., еї а!., 1993, Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 90:6444-6448; Роак, В. У., єї аї., 1994, Бігистште 2:1121-1123). Такі частини зв'язування антитіла є відомими в даній галузі (Копіегтапп апа Юибреї едв., Апіїбоду Епдіпеегіпуд 2001 Зргіпдег/-Мепад. Мем/ Моїк. 790 рр., ІЗВМ 3-540-41354-5).
І57| В одному варіанті здійснення, анкерна група в кожному випадку представляє собою будь-яку прийнятну анкерну групу, яка зв'язується з поверхнею вірусів грипу. В деяких варіантах здійснення, анкерна група в кожному випадку представляє собою групу, яка зв'язується з нейрамінідазою, включаючи інгібітор нейрамінідази або його похідну. В певних варіантах здійснення, анкерна група представляє собою інгібітор нейрамінідази або його похідну, вибрану з сіалової кислоти, такої як занамівір або ланінамівір, 2,3-дифлуорсіалової кислоти, оселтамивіру, перамівіру, та їх похідних. В інших варіантах здійснення, анкерна група в кожному
Зо випадку містить домен зв'язування антитіла, який специфічно зв'язує нейрамінідазу. В певних варіантах здійснення, коли анкерна група представляє собою домен зв'язування антитіла, який специфічно зв'язує нейрамінідазу, анкерну групу вибирають з групи, яка складається з антитіла (АБ), антиген-зв'язуючого фрагмента антитіла, одноланцюгового фрагмента антитіла (5СЕМ) та однодоменного антитіла (дАБ). Сполуки за винаходом можуть містити всього від 1 до 6 анкерних груп, переважно від 2 до 4 анкерних груп, більш переважно 2 анкерні групи.
І58| В іншому варіанті здійснення, анкерна група представляє собою одновалентний радикал, отриманий з групи формули ЇЇ їв м нм Е і Ж поту би
ОЗ, .
Ото КЕ групи формули ЇЇ м - Су дя КЕ чт я Я уча групи формули ІМ я ОВУ і
ОН ен ЗО та групи формули М сх ї Б не ї ще ження готових я де Еї вибирають з групи, яка складається з -СООН, СООНР в, -«50зН, -РОзН»,-РО(ОН в)»
Си вибирають з -МН»е, -«СНеаМН», -(СНег)2МН»,
Н МН
МН МН р МН М МН» Х - ХУ
М МН ж ет ва їх хан, ви За чн,
МН Мне Мне СН н
Ті вибирають з групи, яка складається з необов'язково заміщеного Сі-Свє алкілу, необов'язково заміщені С2-Свє алкенілу, або необов'язково заміщені Сг-Св алкінілу;
М: вибирають з групи, яка складається з -СНеВ?7, -(СНг)2В7, -«СНЄСНА;СН»В;;
В? вибирають з групи, яка складається з Н, -ОН, -ОСН»з, -ОАс, -МН», або -5Н;
Вв та Ке кожен незалежно вибирають з групи, яка складається з гідрогену, -Мз, -СМ, -
СНоМН», гуанідіно або -МА:оВіч;
В» вибирають з гідрогену, необов'язково заміщеного С:і-Свє алкілу, необов'язково заміщеного
С2-Св алкенілу або необов'язково заміщеного С2-Св алкінілу;
Віто та Кії кожен незалежно вибирають з групи, яка складається з гідрогену, необов'язково заміщеного С:і-Свє алкілу групу, необов'язково заміщеного Сі-Сє ацилу, -С(МН)ІМН», -СНгСООН,
СНе.СНгОН або -СНгСН(В:г) (В з),
Ви» та Кіз кожен незалежно вибирають з О та КМ, та
В:« вибирають з групи, яка складається з гідрогену, -ОН, -ОСН», -МН», та -М(СНв)»,
Ві та К:і5 кожен незалежно вибирають з гідрогену та СО2В'в,
Вів представляє собой Н або необов'язково заміщені С1-Св алкілу;
Ві? вибирають з МН» та -МНС(-МН)МН»;
СНз нк-й о « о
Сег представляє собой СН(СНоСН»)» ;
Вів вибирають з групи, яка складається з гідрогену, необов'язково заміщеного С1-Свє алкілу, необов'язково заміщеного С2г-Св алкенілу та необов'язково заміщеного Сг2-Св алкінілу.
І59)| В ще інших варіантах здійснення, анкерна група в кожному випадку вибирають з групи, яка складається з групи формули МІ та групи формули МІ:
шу ще шк СВ жо
ГЕО КНЕЕ М,
СН ши и па й ! Я реа чо як ям - то ще прорив ХЕ де В"! вибирають з групи, яка складається з -МЕ», гуанідіно, -ОМН», де Е представляє собой
Н або необов'язково заміщений С.-Св алкіл,
В? вибирають з групи, яка складається з Н, необов'язково заміщеного С.1-Свє алкілу, та необов'язково заміщеного арилу, та
ВЗ вибирають з групи, яка складається з Н, необов'язково заміщеного С:1-Сє алкілу, необов'язково заміщеного арилу, та необов'язково заміщеного С1-Свє ацилу.
ІБО)| В іншому варіанті здійснення, анкерна група представляє собою групу формули (Міа): зу
Кк Кі З 5 но я ям
ОВК МВ, 10 . " п
ІЄ1| В наступному варіанті здійснення, анкерна група представляє собою групу формули (МПа):
М
Ма т я
Ух й З ках УК
Кк З ! ХУ
НН Ше
І62| В варіанті здійснення, лінкер (такий як 1 та/або 12 формули І) в кожному випадку представляє собою будь-який прийнятний дивалентний лінкер. В одному варіанті здійснення, лінксер в кожному випадку незалежно вибирають зі зв'язку, необов'язково заміщеного С1-С12 алкілену, -2(0)-МВ-, -0-С(0)0-МВ-, -С-М-0-, -Б-М-МВ-, -502-МВ-, дисульфіду, -С(0)-МАВ-(СНг)х-
МА-, -«(СНг)-МА-, -««СНа)-(О-(СНг)у-)2-, необов'язково заміщеного -С-М-О-, необов'язково заміщеного -С-М-МА-алкілену, необов'язково заміщеного алкіленсульфонамід, необов'язково заміщеного алкілендисульфіду, де К незалежно представляє собою Н або С.1-Св алкіл, таде х, у та 7 кожен представляють собою цілі числа, незалежно вибрані з 0, 1, 2, З та 4.
ІБ3) В одному варіанті здійснення, в якому анкерна група представляє собою групу формули (МІ) або формули (Міа), лінкер 1 формули (І) вибирають з -С(0)-МА-(СНг)-МВ-, -«СНг)-МН- та - (Снах-(О-(СнНа»)у)», де х, у та 7 кожен представляють собою цілі числа, незалежно вибрані з 0, 1,
2, 3 та 4. В іншому варіанті здійснення в якому анкерна група представляє собою групу формули (МІЇ) або формули (МіІа), лінкер 1 формули (І) представляє собою -(СНг)-МН-, де х представляє собою ціле число, вибране з 0, 1, 2, З та 4.
ІБ4) В одному варіанті здійснення, лінкер 2 формули (І) представляє собою зв'язок.
І65| В варіанті здійснення, скелетна група представляє собою будь-яку прийнятну багатовалентну групу. В одному варіанті здійснення, скелетна група представляє собою тривалентну скелетну групу. В іншому варіанті здійснення, скелетна група представляє собою чотиривалентну скелетну групу. В одному варіанті здійснення, скелетну групу вибирають з необов'язково заміщеної трикарбоксилатної групи, необов'язково заміщеної тетракарбоксилатної групи або багатовалентного пептиду. В інших варіантах здійснення, скелетну групу вибирають з необов'язково заміщеного пропан-1,2,3-трикарбоксилату, необов'язково заміщеного / проп-1-ен-1,2,3-трикарбоксилату, необов'язково заміщеного циклопропан-1,2,3-трикарбоксилату, необов'язково заміщеного циклогексан-1,3,5- трикарбоксилату, необов'язково заміщеного бензол-1,3,5-трикарбоксилату, необов'язково заміщеного метантетракарбоксилату, необов'язково заміщеного 1,2,3,4- бутантетракарбоксилату, необов'язково заміщеного етилен-1,1,2,2-тетракарбоксилату, такого як етилендіамінтетраоцтова кислота (ЕДТО), необов'язково заміщеного циклогексан-1,2,4,5- тетракарбоксилату, та необов'язково заміщеного бензол-1,2,4,5-тетракарбоксилату. В ще інших варіантах здійснення, скелетну групу вибирають з необов'язково заміщеного пропан-1,2,3- трикарбоксилату, необов'язково заміщеного циклогексан-1,3,5-трикарбоксилату, необов'язково заміщеного бензол-1,2,4,5-тетракарбоксилату, необов'язково заміщеної піромелітової кислоти та необов'язково заміщеної дипіромелітової кислота, утвореної за рахунок -2(0)-МН-МН-С(О)- зв'язку (5,5'-(гідразин-1,2-дикарбоніл)біс(бензол-1,2,4-карбонової кислоти). В ще інших варіантах здійснення, скелетна група представляє собою багатовалентний пептид.
Іб6|Ї В варіанті здійснення, кислотна або аніонна група представляє собою будь-яку прийнятну функціональну групу, яка має кислотні та/або аніонні властивості, які діють так, щоб перешкоджати зв'язуванню гемаглютиніну з клітиною. В деяких варіантах здійснення, кислотна або аніонна група представляє собою будь-яку прийнятну групу, яка містить одна або декілька функціональних груп, вибраних з карбонових кислот, сульфонових кислот, фосфорних кислот та
Зо фосфонових кислот та їх ізостерів або біоізостерів. В деяких варіантах здійснення, кислотна або аніонна група представляє собою будь-яку прийнятну амінокислоту, дипептид, трипептид, поліпептид або їх похідні, які містять одну або декілька кислотних функціональних груп. В одному варіанті здійснення, кислотна або аніонна група представляє собою аспарагінову кислоту, цистеїнову кислоту, глутамінову кислоту або пептиди, отримані з аспарагінової кислоти, цистеїнової кислоти та/або глутамінової кислоти.
ІЄ7| В варіанті здійснення, сполуки за винаходом містять всього від 2 до 26 кислотних/аніонних залишків, переважно від 4 до 10 кислотних/аніонних залишків. Наприклад, коли кислотна або аніонна група містить дикарбонову кислоту, оцінюється, що такий фрагмент містить два різних кислотних/"аніонних залишків. Як приклад з посиланням на відповідні приклади сполук за винаходом, зазначається, що МОЗ349 містить всього дев'ять кислотних або аніонних залишків (п'ять залишків карбонової кислоти та чотири залишки сульфонової кислоти),
МО348 містить всього сім кислотних або аніонних залишків (чотири залишки карбонової кислоти та три залишки сульфонової кислоти), МО345 містить всього вісім кислотних або аніонних залишків (один залишок карбонової кислоти та сім залишків сульфонової кислоти), МО352 містить всього дев'ять кислотних або аніонних залишків (два залишки карбонової кислоти та сім залишків сульфонової кислоти), МОЗ356 містить всього шість кислотних або аніонних залишків (два залишки карбонової кислоти та чотири залишки сульфонової кислоти), МО357 містить всього шість кислотних або аніонних залишків (два залишки карбонової кислоти та чотири залишки сульфонової кислоти), МОЗ358 містить всього вісім кислотних або аніонних залишків (вісім залишків карбонової кислоти), МО359 містить всього вісім кислотних або аніонних залишків (два залишки карбонової кислоти та шість залишків сульфонової кислоти), МО37З3 містить всього вісім кислотних або аніонних залишків (вісім залишків карбонової кислоти), та
МО376 містить всього десять кислотних або аніонних залишків (десять залишків карбонової кислоти).
І68) В іншому варіанті здійснення, кислотна або аніонна група представляє собою групу формули МІ:
ен Мн Ма
Ше но, В дм юю мн хх скроні У прорюкаа НИ в якій
АВ" в кожному випадку незалежно вибирають з групи, яка складається з -СООН, -5О3Н, -
МНОСН»БОзЗН, -СОМН-Суа, -СОМН-Азр, /-СОМН-Азр(і-МНСН»бЗОзН)м, та /-СОМН-Аврі(-
МНОНегРОзН)», де м представляє собою ціле число 1 або 2;
В? вибирають з групи, яка складається з -ОН та -МНСНоБОЗзН и представляє собою ціле число від 0 до 3;
Ї представляє собою ціле число від 0 до 3; г представляє собою ціле число від 0 до 6; м представляє собою ціле число від 1 до 12.
ІБ9| В варіанті здійснення, п представляє собою ціле число від 1 до 4. В іншому варіанті здійснення, п представляє собою ціле число від 1ї7 до 3. В певних варіантах здійснення, п представляє собою 1. В інших варіантах здійснення, п представляє собою 2. В ще інших варіантах здійснення, п представляє собою 3. В наступних варіантах здійснення, п представляє собою 4.
ІЇ70) В варіанті здійснення, р представляє собою ціле число від 1 до 4. В іншому варіанті здійснення, р представляє собою ціле число від 1 до 2. В певних варіантах здійснення, р представляє собою 1. В інших варіантах здійснення, р представляє собою 2. В ще інших варіантах здійснення, р представляє собою 3. В наступних варіантах здійснення, р представляє собою 4.
Г/11| Додатково, альтернативно, в деяких варіантах здійснення сполуки формули (І) можуть бути модифікованими, або до, під час, або після зборки, щоб підвищити або модифікувати біологічну активність та/або афінність зв'язування для поверхні вірусу грипу. В варіанті здійснення, коли кислотні або аніонні групи містять одну або карбонові кислоти, включаючи амінокислоти, карбонова кислота може бути модифікованою за рахунок сульфатування, фосфорилювання, взаємного перетворення функціональних груп та/або приєднання побічних ланцюгів. Наприклад, коли кислотні або аніонні групи містять карбонову кислоту, карбонова кислота може бути модифікованою до аміду або сульфатованого аміду, включаючи -
С(-О)МН(СНег)5ОзН. Альтернативно, або додатково, коли кислотні або аніонні групи містять
Зо амінокислоту або пептид, С-кінець може бути модифікованим, щоб включати альтернативні функціональні групи, такі як перетворення терміної кислоти до аміду або сульфатованого аміду, включаючи -С(-О)МН(СНг)5ОзН.
Ї72)| Стосовно формули (І) розглядаються наступні комбінації сполуки, розкритої в даному документі, будь-якої або декількох (Її) - (мії): () А представляє собою формулу (Іа); ог
А представляє собою формулу (Ша); (ї) В представляє собою пропан-1 ,2,3-трикарбонову кислоту; або
В представляє собою циклогексан-1,3,5-трикарбоксилат, ог
В представляє собою бензол-1,2,4,5-тетракарбоксилат; (її) Г" представляє собою -С(0)-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)2-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)з-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)4-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)5-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)в-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг);-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)в-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)е-МН-; або
І" представляє собою -С(0)-(СНг):о-МН-; або
Ї" представляє собою -С(0)-(СНг)12-МН-; або |" представляє собою -(СНг)6-МН-; або
Ї" представляє собою -(СНг)в-МН-; або
Ї" представляє собою -(СНг)о-МН-; або
Ї" представляє собою -(СНг):о-МН-; або
Ї" представляє собою -(СНг)12-МН-; (ім) І? представляє собою зв'язок; (м) С представляє собою І -аспарагінову кислоту; або
С представляє собою ЮО-аспарагінову кислоту; або
С представляє собою І -цистеїнову кислоту; або
С представляє собою Ю-цистеїнову кислоту; або
С представляє собою -(І -А5р)2-ОН; або
С представляє собою -(О-Авр)2-ОН; або
С представляє собою -(І-Суа)»-ОН; або
С представляє собою -(О-Суа)»-ОН; або
С представляє собою -(І -Азр)3-ОН; або
С представляє собою -(0-Авр)з-ОН; або
С представляє собою -(І -Суа)з-ОН; або
С представляє собою -(О0-Суа)з-ОН; або
С представляє собою -(І-Суа);- ОН; або
С представляє собою -(О-Суа);-ОН; або
С представляє собою -(І -Авр-І -Суа)-ОН; або
С представляє собою -(І -Авр-І -Суа)-ОН; або
С представляє собою -|І -Азр(І -Суа)|-ОН; або
С представляє собою -І0-Азр(О-Суа)|-ОН; або
С представляє собою -(І -Азр(І -Суа)-ОН; або
С представляє собою -|(І -Авр)-(І-Суа)з|-ОН; або
С представляє собою -|((0-Авр)4-(0-Суа)з|-ОН; або
С представляє собою -|І -Азр(І -Суа)|-ОН; або
С представляє собою -І0-Азр(О-Суа)|-ОН; або
С представляє собою -(І -Азр(І -Суа)-ОН; або
С представляє собою -(І0-Азр(О-Суа)Да-ОН; або
С представляє собою І -Азр(МНОНебБОзН)»г; або
С представляє собою О-Азр(МНОНегБОзН)»г; або
С представляє собою -|І -Азр(ІМНОНг5Оз)|І--МНОН»БОзН; або
С представляє собою -І0-Азр(МНОНг50Оз)|-МНОН»гБО: Н; (м) п представляє собою 2; або п представляє собою З (мії) р представляє собою 1; або р представляє собою 2.
Ї/3| Для простоти посилання, ілюстративні приклади сполук за винаходом можуть бути скороченими. Наприклад, в контексті ілюстративних прикладів, для простоти посилання, анкерна група (включаючи А формули (І)) та лінкер (включаючи 1 формули (І)), в кожному випадку, можуть бути представленими як одна група, називається як 2х або Бу. Особливо, коли сполуки за винаходом містять групу формули 2, такі групи є похідними сіалової кислоти, в яких функціональна група (аміно або гуанідино) заміщують гідроксильну групу в 4-ому положенні кільця сіалової кислоти. Така модифікація дозволяє групам формули 72х взаємодіяти з вірусними нейраминідазами грипу, але не з нейраминідазами ссавців. Це передбачає аспект безпеки, коли сполуки за винаходом вводяться ссавцям, включаючи людей. Групи формули Зу є зв'язаними через 2-гідрокси групу сіалової кислоти. Зокрема, тіо-глікозидна лінкерна група використовується в поєднанні з анкерною групою в формулі бу, такій як 2-5-(СНг)"МНЕ, яка протидіє ферментному гідролізу при порівнянні з еквівалентними етерними лінкерами, такими як 2-0-(СНег)п"МНЕ. Для простоти посилання, структури 2х або Зу є наведеними нижче:
чем ОМ вик КМ в ї СМС ик Ф нет я дню ОН н - 4 я и
ММ. еВ
Ех чне
МОМЕНТ сх
Структура 2х Скорочення
Х представляє собою 0
Х представляє собою 2
Х представляє собою З
Х представляє собою 4
Х представляє собою 5
Х представляє собою 6
Х представляє собою 7
Х представляє собою 8
Х представляє собою 9
Х представляє собою 10
Х представляє собою 12 г дуття ди вою шк) | овечку. не й т вен у озерна З,
Структура 5у Скорочення
У представляє собою 6
У представляє собою 8
У представляє собою 9
У представляє собою 10
У представляє собою 12
І74Ї Для простоти посилання, в контексті ілюстративних прикладів, сполуки, з яких може бути отримана скелетна група В формули (І), є скороченими наступним чином
Скорочення Структура Назва сооК цис-1,3,5-
СНТСА циклогексантрикарбонова кислота ноос СООн сан
ТСА 7 Трикарбонова кислота нос спон
Структура
НООС, А СООН
РУВ С Піромелітова кислота
Кн У с нос З соов ноос сон . . . о Ди-піромелітова кислота зі
Н зв'язком С(О0)-МН-МН-С(О)
РУВ-МН-МН-РУВ | МООС 7 соон о 5.5'-(гідразин-1,2-
Н дикарбоніл)біс(бензол- о 1,2,4-карбонова кислота) нос соон
І75| Для простоти посилання, в контексті ілюстративних прикладів, анкерна група А, лінкер
Ї1 та скелетна група В формули (І), можуть бути скороченими наступним чином:
Структура Структура г оон
РК2 ТСА(2х5)2 РКІ ТСА(7х5)2 ноос СОУ, ос со
Ос ОБ ий : Со
РКІ РУВ(7х)2 | РКО РУВ(25)2 0 хОос с соон ноост Зот чооюн сОоОон СсОоОН
СНТСА(7х)» сх СНТСА(5у» Фі
Кос соду вус сову сову оон
РК2 ТСА(5у» -к РКІ ТСА(5у» ноос сову зуб сову но е те пе
ПООО у СОУ ЗУ дити СО,
РКІ РУВ(5У» : і РК2 РУВ(5У» . я 5 Е 4, вус и сООМ ноос и ООН соон со5,
СНТСА(28У г СНТСА(7х)(5У) г вУшзе СсОох
У Оях 7,0С СО7,
Структура Структура 7 ОС оди СОЮ ЗУ сютт СОН
РКІ РУВ(2х)г(5У) о | РК2 РУВ(2х):(5У) ХК ! вуст оо, гос сов, а о ; ! нодендни Я то МнСснвО,В
РК2РУН(АОг(МНОНгЗОзН) 2 хо й і Ж о
І7/6Ї Для простоти посилання, в контексті ілюстративних прикладів, сполуки з яких можуть бути отримані кислотні або аніонні групи формули (І), є скороченими наступним чином:
Структура
МН
Суа ! Зо3н .
Суа-80зН ва Цистеїнова кислота он
С
ІЇ-Суа м кормі Ї-Цистеїнова
І-Суа-5ОЗзН у кислота оп чно
О-Суа о : раки р-Цистеїнова р-Суа-5ОЗН им кислота сон
МН. о о. Аспарагінова
Щі ку, кислота он
І ч я | -Аспарагінова
І-А5р | тов кислота
ОН
Шо о : Ї . м А р-Аспарагінова 0-Азр и - СН кислота
ОН
Структура мно о шва чн (І-А5р)забо о
І -Авр-Ї -Авр-Ї -Азр он и ї он сн
МН о ша
Мн о (0О-А5р)з або о. : р-Азр-О-Азр-О-Авр :
Мо ву
Он он мне ово мн (І-Суа)з або зозн
ІЇ-Суа-І-Суа-І-Суа н вер он ще
Е 8 ваша сн
МН
(О-Суа)з або " зон 0-Суа-О-Суа-О-Суа ун ви он
МН соя
МН
З М тен
Я ву
МН
(І-Суа))-ОН або зон (І-Суа);
Мн
МН ок у
МН дсьн
Он чн, щи ї
Кі 5 н зр с о т (0О-Суа);-ОН Е ен (0-Суа); аа з
Мн вит оз цН дя би і он
МН» о нти
МН--
ОН
Мн ї
І -Аврі( -Суа)-І -АзрцІ -
Суа)-І-Азр(І -Суа)-ОН 5ОЗН або МН-- ц
І -Азрі(І -Суа)|з МН о У шк ки он т я
МА;
Е що
МН ет
ОМ ї У р-Азр(О-Суа)-О- :
Аер(О-Суа)-О-Авр(О- А ЗОН
Суа)-ОН МН або ш К (О-Азр(О-Суа) |з МН ; Щи " Мч ан
ОН ї
Ммнь о ори оннонвоу
А з
АБР(МНСНеВОзН)- и ннонвоу
АР(МНОН»ВОзН)- вн
Авр(МНнОНгБО зн)» о о. омнснвоя
Мн сн,
І зон т» о
СІ
І-(А5рВ і (АвріВ | ОН зол
ІЇ-(Азр) Ї о
ОН о і Х
ОН чна о мив о
О-(Азр)(В)-О-(А5рі(В)- | он о АЖ
О-(Авр) т мно оно р
У он он
Мн 2 0
І 1 о
М о
ЦІ :
І-(Азр(В)-О-(А5ру(В)- он З кН
ІЇ-(Азр) Ї о он о АЖ ке он он
МН о о Е у
ММ У
: о он
О-АзріІ -Азр)-О-АзріІ - 0 А
Авр)-0-А5рі -Азр) МН
МН У
0 он о х аа
ОН у
ОН
І/7| Ілюстративні приклади сполук за винаходом є представленими нижче.
Структура
Н о М
ТІ соон
МОог21
Мол. |СНТСА(7)»-І-Авр сон маса 1243 7 7 о о о
М 5ОоЗНн - З о
МО154 о
Мол СНТСА(7о0)2-І - МН НМ
З ТА5рР(МНОНоВОЗН) ХХ маса 5ОЗН 14857 2 2 о о о
Н
М. ЗОН о
Ж
Мои |СнНтТоА(о)ео- о мн
З ТА5рР(МНОНоВОЗН) у маса ЗОоЗНн 14857 23 2 о о он о соон но З у (СНозвМН о
МОро12 не з
Мол. /|СНТСА(7)5(5в6) у маса с Е 1534 он 7 7 о о
Структура х сон
Н і) М
Мою! |РК2 Тоді. 0 о ол. Азр-їЇ -А5рі маса о ноос 1318 М
Н їз ноос
ЗОН оо о Зозн ща о о У
Н Н
Н Н
М хх м
М М г А й о З
ЗОН о А Мо зоЗн че Гн
Мн нм
МО185 | РК2РУВ(7и)2(О- о о
Мол. А5р)МНОоН»г5Оз)2 о- -ок маса Іг о о с 1852 ся он н он но о (є нос Х "'ПІМНАс АснНнМ / Ссоон
МН НК не -
Мне НОМ о о га 29 5озН о Мн о
МО314 | СНТСА(20)-І - о он
Мол. АзрііІ -Суа)-І - М маса /|Авр-(І-Суа)-І- Н возн 1982 АзріІ -Суа) МН о о о он
М
Н воЗН
МН о о ку Хо
М
Н он о
Структура ; в)
АЖ Р Х. о /(сновмн НІЦНоС)в., є но о о сон ноос он
МО317 но я
М РК2 ТСА(2)2-(О- о ПІМНАс ол. | дер-О-Аер) АСНМ маса р Е о «МН 1318 НМ іме МН
МН Нм т НМ сон о
НьМ 5 МН» 5-4. осн сооНн оо 2о го о
МН ут
МН ут
МН ут
МОЗ42 |рКо тод(70)2-(О-
Мол. |дер-р-Суар-ОН хН маса ж
МН ут нм ут
МН ут
МН ут он
Структура о о 2о 20 о
Мн
МО343 ІрКо тТсд(70)2-(О- о. А вон
Мол. Суар-ОН маса 1597 МН ит
МН ут он о о о о о ХХ. А Сно)вмн Нас ХХ.
Н Н Е о Соон ноос. о х но он о Се»
АСНМ х Мн И/ЧНАс
Ше й и
Мне Мн БОознН МН. ут
МОЗ45 Ей
Мол РК2ТСА(70)-(О- о А вон маса | Суа(8ОзНДнОН вав 2201 МН ут
Мн ут ни ву
МН ут он
Структура о он о о
Х сей ши о м-7Снгдмн нн о
Н мМ МНАс но о сон ноос- но | МН мозав | СНТСА(2о0)2-(О- АсНМ т оно возн -
М А5р(О-Суа)-О- Е Е нм
Ол. НМ МН Е МН» маса дер(В'суано ва сш КК он - - М 1982 зр(О-Суа)) нм Н овозн
Мо о о х Я м
Н возн
МН оо о зр» С м
Н он о о о д 2 возн о мно
СНТСА(70)(О- о Х м он
МО349 |Авр(О-Суа)-0- Н вон
Мол. А5р(О-Суа)-О- НМ о о маса /|Авр(О-Суа)-О- : 2248 |Авр(О-Суац-ОН о м он
Н воз мно о о х ж он
М ку С
МНоо о вух Го
МУ
Н он о
Структура о о 2 ра но МН о о Е у
Мн ит
МН о : 8ОзЗН
Мо? |рРК2 РУВ(2)4- з маса СуарСсоОон МН 1994 Е
Мн
НМ ут
МН у он
Структура он вич, ня вич,
Е о о
Мов РК РУВ(2ідеЧО- це ; ол. |Суа-р-Суар " маса У 1940 г Мн о о Е ву
МН ву он о о 2 2
Нм Мн
МО357 рКко РУД(7)-О- :
Мол. Суа-О-Суа|» Е маса ноз о ОО Е 1854 з о р
НМ Мн пов : зозн соон ноос7
Структура он ее» нм вер»
НМ ноос о о о
МОЗ358 | РКІ РУВ(7 п)2(І--
Мол. Азр-ї -Авр-ї - НМ г маса Азріг 1940 2 МН о Бе
МН кут
МН вул он
Структура он вия
НА ово
НК ща
Е о о
МОЗ РК РУВ(ЛТЦО- : ол. | суві ОНР НМ Та маса уа)з 2158 2 МН о у
Мн у
МН ут он он юю
НМ зов что
Е о о
Мо |РКІ РУВ(атдеЧО- : ол. |двр-О-Аврр нм 2 маса р р 1710 га МН о вул
МН ут он
Структура он юю что нм юю что
НМ зо чо
Е О о
МОЗ373 |РКІ РУВ(2п)2-(О- :
Мол. Авр-О-А5р-0О- НМ й маса Азріг 1940 за МН ? у
МН ут
МН ут он
Структура он юю что ни дос чо
НМ юс чо
НМ юю чо
Б о о
МО376 | РК! РУВ(2 п)2-І(О- І
Мол. Авр-О-Авр-О- НМ 2 маса Авр-О-Авріг 2170 2 МН о ву
МН ут
МН зр
МН ут он
І/81 Термін "алкіл" як використовується самостійно або в комбінації в даному документі стосується насиченої вуглеводневої групи з лінійним або розгалуженим ланцюгом. Термін "С1-12 алкіл" стосується такої групи, яка містить від одного до дванадцяти атомів карбону та "нижчий алкіл" стосується Сі-вє алкільних груп, які містять від одного до шість атомів карбону, таких як метил ("Ме"), етил (ЕС), н-пропіл, ізопропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил, трет-бутил та подібні.
І79| Термін "циклоалкіл" стосується неароматичних, насичених неароматичних карбоциклів.
Термін "Со циклоалкіл", наприклад, стосується такої групу, яка має від 4 до 9 атомів карбону.
Приклади включають циклобутил, циклопентил та циклогексил.
ІВОЇ Термін "алкеніл" стосується лінійного або розгалуженого вуглеводню, який містить один або декілька подвійних зв'язків, переважно один або два подвійних зв'язків. Термін "С2-12 алкеніл", наприклад, стосується такої групи, яка містить від двох до дванадцяти атомів карбону.
Приклади алкенілу включають аліл, 1-метилвініл, бутеніл, ізо-бутеніл, 1,3-бутадієніл, З-метил-2- бутеніл, 1,3-бутадієніл, 1,4-пентадієніл, 1-пентеніл, 1-гексеніл, З-гексеніл, 1,3-гексадієніл, 1,4- гексадієніл та 1,3,5-гексатриєніл.
ІВ1| Термін "алкініл" стосується лінійного або розгалуженого вуглеводню, який містить один або декілька потрійних зв'язків, переважно один або два потрійних зв'язків. Термін "С2-12 алкініл", наприклад, стосується такої групи, яка містить від двох до дванадцяти атомів карбону.
Приклади включають 2-пропініл та 2- або З-бутиніл.
І82| Термін "алкокси", як використовується самостійно або в комбінації, стосується алкільної групи з лінійним або розгалуженим ланцюгом ковалентно з'єднаної через оксигеновий зв'язок (-
О-), та терміни "С:-є алкокси" та "нижчий алкокси" стосуються таких груп, які містять від одного до шести атомів карбону, такі як метокси, етокси, пропокси, ізопропокси, бутокси, трет-бутокси та подібні.
ІЗЗ3Ї Термін "циклоалкеніл" стосується циклічних алкенільних груп, які мають одне циклічне кільце або декілька конденсованих кілець, та щонайменше одну точку внутрішньої ненасиченості, який переважно включає від 4 до 11 атомів карбону. Приклади прийнятних циклоалкенільних груп включають, наприклад, циклобут-2-еніл, циклопент-3-еніл, циклогекс-4- еніл, циклоокт-3-еніл, інденіл та подібні.
ЇВ4| Термін "ацил" стосується груп Н-С(0)-, алкіл-С(0)-, циклоалкіл-С(0)-, арил-С(0О)-, гетероарилу-С(О)- та гетероцикліл-С(О)-, де алкіл, циклоалкіл, арил, гетероарил та гетероцикліл є описаними в даному документі.
ІВ5Ї Термін "арил" стосується карбоциклічних (негетероциклічних) ароматичних кілець або кільцевих систем. Ароматичні кільця можуть представляти собою моно- або біциклічні кільцеві системи. Ароматичні кільця або кільцеві системи, як правило, містять від 5 до 10 атомів карбону. Приклади прийнятних арильних груп включають, але не обмежуються цим, феніл, біфеніл, нафтил, тетрагідронафтил, та подібні.
ІЗ) Термін "алкілен" стосується насиченого вуглеводневого радикалу з розгалуженим або лінійним ланцюгом або циклічного вуглеводневого радикалу, який має два одновалентних радикальних центри, отриманих шляхом видалення двох атомів гідрогену з одного й того ж або двох різних атомів карбону вихідного алкану. Наприклад, алкіленова група може мати від 1 до 20 атомів карбону, від 1 до 10 атомів карбону, або від 1 до 6 атомів карбону. Типові алкіленові радикали включають, але не обмежуються цим, метилен (-СНе-), 1,1-етил (-СН(СНЗ)-), 1,2-етил (-СНеСНег-), 1,1-пропіл (-СН(СНоСНЗ)-), 1,2-пропіл (-СНаСН(СНЗ)-), 1,3-пропіл (-СНСНоСН»-), 1,4- бутил (-СНЕСНаСНСН»-), та подібні.
ІЗ7|Ї Термін "алкенілен" стосується ненасиченого, вуглеводневого радикалу з розгалуженим або лінійним ланцюгом або циклічного вуглеводневого радикалу, який має два одновалентних радикальних центри, отриманих шляхом видалення двох атомів гідрогену з одного й того ж або двох різних атомів карбону вихідного алкену. Наприклад, та алкеніленова група може мати від 1 до 20 атомів карбону, від ї до 10 атомів карбону, або від 1 до б атомів карбону. Типові алкеніленові радикали включають, але не обмежуються цим, 1,2-етилен (-СН(СН-).
ІЗ8Ї Термін "алкінілен" стосується ненасиченого, вуглеводневого радикалу з розгалуженим або лінійним ланцюгом або циклічного вуглеводневого радикалу, який має два одновалентних радикальних центри, отриманих шляхом видалення двох атомів гідрогену з одного й того ж або двох різних атомів карбону вихідного алкіну. Наприклад, алкініленова група може мати від 1 до 20 атомів карбону, від 1 до 10 атомів карбону, або від 1 до 6 атомів карбону. Типові алкініленові радикали включають, але не обмежуються цим, ацетилен (-С(С-), пропаргіл (-СНе2С(С-), та 4- пентиніл (-СНЕСНа.СНеС(СН-).
ІЗУОЇ Термін "арилен" стосується арильного радикалу, який має два одновалентних радикальних центрів, отриманих шляхом видалення двох атомів гідрогену з одного й того ж або двох різних атомів карбону або гетероатомів вихідної арильної групи.
ІЗОЇ Терміни "атом галогену" та "галоген" стосується атомів флуору, хлору, брому та йоду.
І91| Термін "галогеналкільна" група, в якій один або декілька атомів гідрогену алкільної групи є заміщеними на галоген.
І92| Термін "гетероарил" стосується одновалентної ароматичної карбоциклічної групи, яка переважно містить від 2 до 10 атомів карбону та від 1 до 4 гетероатомів, вибраних з оксигену, нітрогену та сульфуру в кільці. Переважно гетероатомом є нітроген. Такі гетероарильні групи можуть мати одне кільце (наприклад, піридил, піроліл або фурил) або декілька конденсованих кілець (наприклад, індолізиніл, бензотієніл, або бензофураніл).
І93Ї Термін "гетероцикліл" стосується одновалентної насиченої або ненасиченої групи, яка має одне кільце або декілька конденсованих кілець, переважно від 1 до 8 атомів карбону та від 1 до 4 гетероатомів, вибраних з нітрогену, сульфуру, оксигену, селену або фосфору в кільці.
І94| Термін "необов'язково заміщений" означає, що група може включати один або декілька замісників. Один або декілька атомів гідрогену в групі може бути заміщеним замісниковими групами, незалежно вибраними з галогенів (наприклад, галогеналкіл, такий як -СЕз або -СЕ2Н),
Сівалкілу, Сгвалкенілу, Сг-валкінілу, -(СНг)мСз-7циклоалкілу, -(СНео)мС47циклоалкенілу, - 60 (СНг)марилу, -(СНег)мгетероциклілу, -"СНг)мгетероарилу, -С6На(О)дсСі-валкілу, -С(РН)з, -СМ, -ОВ,
-0-(СНгег)1--8, -О-(СН2г)1-6-ОВ, -ОС(О)В, -С(О)В, -Ф(О)ОВ, -ОС(О)МА В", -МА'В", -МО», -МАС(О)В", -МАС(ОМА'Я", 0 -МАС(БІМАВ" 0 -МАБ(О)»В, -МАСО)ОВ, 0 -С(МА)МАВ" 0/-С(-МОВА, -С(-МОН)МА'В", -С(О)МА'В", -С(-МСМ)-МА'В", -С(-МА)МА'В", -С(-МАЗЗА", -МА'Є(-МОМ)5А", -
СОоМАБОо»Н, -С(5)МА'В", -(О)аВ, -502МА' В", -502МАС(О)В", -05(0)28, -РО(ОВ)» та -МО»; дем є 0-6, д є 0-2 та кожен К, К' та КЕ" незалежно вибирають з Н, С.-валкілу, Севалкенілу, Сг-валкінілу,
Сз-7циклоалкілу, С.7циклоалкенілу, арилу, гетероциклілу, гетероарилу, Сі-валкіларилу, Сі- валкілгетероарилу, та Сі-валкілгетероциклілу, де алкіл, алкеніл, алкініл, циклоалкіл, циклоалкеніл, арил, гетероцикліл, гетероарил, Сі-валкіларил, Сі-валкілгетероарил, або С. валкілгетероцикліл, можуть бути необов'язково заміщеними від однієї до шести однаковими або різними групами, вибраними з галогену, гідрокси, нижчого алкілу, нижчого алкокси, -СО2Н, СЕз,
СМ, фенілу, МН»е та -МО»; або коли ЕЕ" та КЕ" є приєднаними до одного й того ж атому нітрогену, вони можуть, разом з атомом, до якого вони є приєднаними, утворюють 5-7 членне нітроген- вмісне гетероциклічне кільце.
І95) В переліках можливих функціональних груп, визначених в даному документі, де дана група містить дві або більше підгрупи, наприклад, підгрупи тау можуть бути перераховані у форматі (підгрупа АГ(Іпідгрупа В) як в алкіларилі, або (підгрупа АІ(Іпідгрупа ВіІ(підгрупа СІ) як в арилоксіалкілі, порядок підгруп, як вони перераховані вище, не є призначеним для того, щоб бути обмеженими порядком, в якому вони представлені. Таким чином, група з двох підгруп, визначених як підгрупа АЇ (підгрупа ВІ, таких як алкіларил, також є призначеними для того, щоб бути посиланням на групу з двох підгруп, визначених як підгрупа ВІ (підгрупа АЇ, таких як арилалкіл.
ІО6Ї Термін "хіральний" стосується молекул, які мають властивість неспівпадіння при накладанні партнера дзеркального відображення, тоді як термін "нехіральний" стосується молекул, які є співпадаючими при накладанні їх партнера дзеркального відображення.
І97| Термін "стереоізомери" стосується сполуки, які мають ідентичну хімічну будову, але відрізняються щодо розташування атомів або груп у просторі.
І8| Термін "діастереомер" стосується стереоїзомера з двома або більше центрами хіральності, та чиї молекули не є дзеркальними зображеннями один одного. Діастереомери мають різні фізичні властивості, наприклад, температури плавлення, температури кипіння,
Зо спектральні властивості та реакційноздатності. Суміші діастереомерів можуть розділятися з використанням аналітичних процедур високої роздільної здатності, таких як електрофорез та хроматографія.
І99| Термін "енантіомери" стосується двох стереоізомерів сполук, які є не співпадаючими при накладанні дзеркальних відображень один на одне.
М100| Стереохімічні визначення та умовні позначення, які використовуються в даному документі, як правило, слідують 5. Р. Рагкег, Ед., Мсатгам-Нії! Оіспопагу ої Снпетіса! Тептз (1984)
Меатгам-Нії ВоокК Сотрапу, Мем/ МоїК; апа Еїїеї, Е. апа У/Пеп, 5., Зіегеоспетівігу ої Огдапіс
Сотроипаз (1994) УЧопйп УМіеу 5 5оп5, Іпс., Мем/ МоїК. Багато органічних сполук існують в оптично активних формах, тобто вони мають здатність обертати площину поляризованого світла. При описуванні оптично активної сполуки префікси О та І або К та 5 використовуються для позначення абсолютної конфігурації молекули щодо його хірального(их) центру(ів).
Префікси а та І або (ж) та (-у використовуються для позначення знака обертання площини поляризованого світла сполукою, з (-) або 1, що означає, що сполука є обертаючою вліво.
Сполука, яка має префіксування (х) або й є обертаючою вправо. Для наданої хімічної структури дані стереоізомери є ідентичними, за винятком того, що вони є дзеркальними відображеннями один одного. Специфічний стереоізомер також може називатись як енантіомер, та суміш таких ізомерів часто називають енантіомерною сумішшю. Суміш енантіомерів 50:50 називають рацемічною сумішшю або рацематом, який може виникати, коли не існує стереоселективності або стереоспецифічності в хімічній реакції або процесі. Терміни "рацемічна суміш" та "рацемат" стосуються еквімолярної суміші з двох енантіомерних видів, позбавленої оптичної активності. 01) Як використовується в даному документі, амінокислоти та їх похідні можуть бути скорочені до їх відповідних трьох-літерних або одно-літерних кодів за необхідності. Наприклад, цистеїнову кислоту може бути названа в даному документі як Суа, Субі або Сузі-5ОЗзН, аспарагінова кислота може бути названа як Азр.
МО2| Солі сполук за винаходом є переважно фармацевтично прийнятними, однак буде зрозуміло, що також не фармацевтично прийнятні солі також попадають в межі обсягу представленого винаходу, оскільки вони є використовуваними як проміжні сполуки в отриманні фармацевтично прийнятних солей. 103) Буде зрозуміло, що сполуки за винаходом, та їх солі можуть бути представлені у формі бо фармацевтично прийнятних похідних. Термін "фармацевтично прийнятна похідна" включає фармацевтично прийнятні естери, проліки, сольвати та гідрати сполук формули (І), або їх солі.
Фармацевтично прийнятні похідні можуть включати будь-який фармацевтично прийнятний гідрат або будь-яку іншу сполуку або проліки, які, після введення суб'єкту, є здатними забезпечувати (безпосередньо або опосередковано) сполуку за винаходом, або її активний метаболіт або залишок.
І104| Фармацевтично прийнятні солі включають кислотні адитивні солі, основні адитивні солі, та солі четвертинних амінів та піридинію. Кислотні адитивні солі утворюються зі сполуки за винаходом та фармацевтично прийнятної неорганічної або органічної кислоти, включаючи, але не обмежуючись цим, гідрохлоридну, гідробромідну, сульфатну, фосфорну, метансульфонову, толуолсульфонову, бензолсульфонову, оцтову, пропіонову, аскорбінову, лимонну, малонову, фумарову, малеїнову, молочну, саліцилову, сульфамову, винну або аміно- кислоти. Протиїони четвертинних амінів та піридинію включають хлорид, бромід, йодид, сульфат, фосфат, метансульфонат, цитрат, ацетат, малонат, фумарат, сульфамат та тартрат. Основні адитивні солі включають, але не обмежуються цим, солі, такі як натрію, калію, кальцію, літію, магнію, амонію та алкіламонію. Крім того, основні нітроген-вмісні групи можуть бути кватернізованими такими агентами, як нижчий алкіл-галогеніди, такі як метил, етил, пропіл, та бутил хлориди, броміди та йодиди; діалкілсульфати, такі як диметил та діетилсульфат; та інші. Солі можуть бути отримані за відомим способом, наприклад, шляхом обробки сполуки з відповідною кислотою або основою в присутності прийнятного розчинника. 1051 Сполуки за винаходом можуть знаходитись в кристалічній формі та/або як сольвати (наприклад, гідрати) та мається на увазі, що обидві форми знаходяться в межах обсягу представленого винаходу. Термін "сольват" представляє собою комплекс варіабельної стехіометрії, утвореної розчиненою речовиною (в даному винаході, сполукою за винаходом) та розчинником. Такі розчинники не повинні перешкоджати біологічній активності розчиненої речовини. Розчинники можуть представляти собою, як приклад, воду, етанол або оцтову кислоту. Способи сольватації, як правило, є відомими в даній галузі. 1106) Термін "проліки" використовується в його найширшому сенсі та охоплює ті похідні, які іп мімо перетворюються в сполуки за винаходом. Такі похідні будуть легко представленими кваліфікованими фахівцями в даній галузі, та включають, наприклад, сполуки, в яких вільна
Зо гідрокси група перетворюється в естерну похідну або кільцевий атом нітрогену перетворюється в М-оксиди. Приклади естерних похідних включають алкілові естери, фосфатні естери та які утворені з амінокислот, переважно валіну. Будь-яка сполука, яка представляє собою проліки сполуки за винаходом, знаходиться в межах обсягу та задуму винаходу. 107 Термін "фармацевтично прийнятний естер" включає біологічно прийнятні естери сполуки за винаходом, такі як похідні сульфонової, фосфонової та карбонової кислот.
МО8| Таким чином, в іншому аспекті винаходу, передбаченими є опроліки або фармацевтично прийнятні естерні сполуки за винаходом або їх солі. 109) Буде зрозуміло, що сполуки за винаходом мають щонайменше один асиметричний центр, та тому є здатними існувати в більш ніж одній стереоізомерній формі. Винахід поширюється на кожну з цих форм окремо та їх суміші, включаючи рацемати.
Загальноприйнято, ізомери можуть бути розділені, застосовуючи хроматографічні способи або застосовуючи розділяючий агент. Альтернативно, індивідуальні ізомери можуть бути отримані шляхом асиметричного синтезу з використанням хіральних проміжних сполук. Там, де сполука має щонайменше один карбон-карбон подвійний зв'язок, вона може відбуватися в 2- та Е- формах з усіма ізомерними формами сполук, включеними в представлений винахід.
П101| Винахід також включає, де це можливо, сіль або фармацевтично прийнятну похідну, таку як фармацевтично прийнятний естер, сольват та/або проліки зазначених вище варіантів здійснення винаходу. 111) В іншому аспекті винаходу, передбаченою є фармацевтична композиція, яка містить терапевтично ефективну кількість однієї або декількох зазначених вище сполук або їх фармацевтично прийнятних солей, включаючи їх фармацевтично прийнятні похідні, та необов'язково фармацевтично прийнятний носій або розріджувач. 112) В іншому аспекті, представлений винахід передбачає фармацевтичні композиції для застосування в лікуванні або попередженні вірусної інфекції грипу, причому композиція містить ефективну кількість сполуки за винаходом, або її фармацевтично прийнятної солі, включаючи її фармацевтично прийнятну похідну, та необов'язково фармацевтично прийнятний носій або розріджувач. 113) Термін "композиція" є призначеним включати композицію активного інгредієнта з інкапсулюючим матеріалом як носієм, одержуючи капсулу, в якій активний інгредієнт (з або без бо іншого носія) є оточеним носіями.
І114| Фармацевтичні композиції або препарати включають ті, які є прийнятними для перорального, ректального, назального, місцевого (включаючи букальне та сублінгвальне), вагінального або парентерального (включаючи ввнутрішньом'язове, підшкірне та внутрішньовенне) введення або в формі прийнятній для введення шляхом інгаляції або інсуффляції. В одному варіанті здійснення, сполуки за винаходом є сформульованими для інгаляції, перорального введення, інтраназального введення, внутрішньочеревного введення, внутрішньовенного введення або внутрішньом'язового введення. 115) Загальні чинники, які слід приймати до уваги при формуляції та/або виробництві агентів фармацевтичних композицій можуть бути знайдені, наприклад, в Кетіпдіоп'5
Ріпаптасецшііса! бсіепсе5, бБіхіеепій Едйоп, Е. МУ. Мапіп (Маск Рибіївпіпа Со., Еазюп, Ра., 1980), та Кетіпдіоп: Те Зсіепсе апа Ргасіїсе ої Рпагтасу, 2151 Едйоп (Гірріпсой УМіШіатве 8 УМІКіпв, 2005). 116) В одному варіанті здійснення, композиції та препарати відповідно до винаходу можуть вводити суб'єкту, що цього потребує, шляхом будь-якого прийнятного способу доставки - інгаляційного, інсуффляційного або інтраназального. Прийнятні способи для інгаляційного, інсуффляційного або інтраназального введення є добре відомими кваліфікованому фахівцю в даній галузі. 117) В одному варіанті здійснення, композиції або препарати сполук за винаходом можуть бути в формі прийнятній для введення шляхом інгаляції або інсуффляції. Наприклад, композиції або препарати сполук за винаходом можуть бути отримані у вигляді сухого порошку, розчину, суспензії або аерозолю для інгаляції або інсуффляції через рот або ніс. Препарати прийнятні для введення у вигляді аерозолю або сухого порошку можуть бути отримані відповідно до загальноприйнятих способів та можуть бути доставлені з іншими терапевтичними агентами, такими як сполуки, які до теперішнього часу використовувалися в лікуванні або профілактиці інфекцій, як описано в даному документі. 118) В одному варіанті здійснення, композиції або препарати сполук за винаходом можуть вводитись за допомогою інгалятора сухого порошку. Використовуваними можуть бути інгалятори сухого порошку типів, явно розкритих в даній галузі, а також мікронізовані стружки ізостатично спресованих таблеток або дисків лікарського засобу з використовуваними інертними зв'язуючими речовинами, такими як лактоза, або без них. Даний спосіб введення передбачає особливо швидку доставку в легені. Коли сполука за винаходом забезпечується у формі сухого порошку, вона може бути представлена самостійно або в суміші з відповідним фармацевтично прийнятним розріджувач, таким як крохмаль, похідні крохмалю, такі як гідроксипропілметилцелюлоза або полівінілпіролідин (РМР), похідні цукру, такі як маніт або лактоза. Порошкова композиція може бути представлена в одиничній дозованій формі, наприклад, в капсулах або картриджах, наприклад, желатинових або сформованих пластикових або блістерних пакетах, з яких порошок може вводитися за допомогою інгаляційного пристрою, або в багатодозовій формі з, наприклад, порошкового резервуара. 119) Для інгаляції крапель, туману та аерозолів є легко доступні різні пристрої, такі як небулайзери або аерозольні генератори під тиском. Крім того, такими пристроями можуть відмірюватися дози для забезпечення однорідності дозування. 1201) Всі інгалятори можуть бути спроектовані та модифіковані для доставки рідких або твердих частинок до слизової оболонки носа, а також верхніх та/або нижніх дихальних шляхів. 121) В іншому варіанті здійснення, композиції або препарати сполук за винаходом можуть вводитись шляхом інгаляції або інсуфляції за допомогою вологого аерозольного інгалятора.
Наприклад, композиції або препарати сполук за винаходом можуть бути отримані для введення шляхом вологої аерозольної інгаляції в попередньо відміряному інгаляторі. 122) В наступному варіанті здійснення, композиції або препарати сполук за винаходом знаходяться в формі прийнятній для введення інтраназально. Інтраназальні композиції, розкриті в даному документі, можуть вводитись у вигляді спрею або краплі. Відповідно, прийнятної комерційні пакети, які містять інтраназальний препарат, можуть бути в будь-якому контейнері для розпилення, відомому в даній галузі В одному або декількох варіантах здійснення, препарати відповідно до винаходу можуть вводитись за допомогою розпилювального пристрою або контейнера. Розпилювальні пристрої відповідно до винаходу можуть бути одиночними одноразовими дозованими системами або багаторазовими дозованими системами, наприклад, які включають ємність, насос та/або механізм керування клапанами. Такі розпилювальні пристрої є доступними комерційно. Прийнятні комерційні розпилювальні пристрої включають ті, що доступні від Метега, Аріаг, Везрак та Весіоп-біскіпзоп. Інші прийнятні засоби для введення композицій або препаратів інтраназально відповідно до винаходу включають капельницю,
шприц, флакон пульверизатор та будь-який інший засіб, відомий в даній галузі для нанесення рідин на слизову оболонку точним та повторюваним чином.
123) Сполуки за представленим винаходом можуть також вводитись у широкому діапазоні пероральних та парентеральних дозованих форм.
Фахівцям в даній галузі буде очевидним, що наступні дозовані форми можуть містити, як активний компонент, або сполуку за винаходом, або фармацевтично прийнятну сіль сполуки за винаходом.
1124) Композиції або препарати сполук за винаходом можуть бути у формі стерильного ін'єкційного препарату, такого як стерильна ін'єкційна водна або олійна суспензія.
Дана суспензія може бути сформульована відповідно до відомого рівня техніки з використанням тих прийнятної диспергуючих або зволожуючих агентів та суспендуючих агентів, які були зазначені в даному документі.
Стерильний ін'єкційний препарат може також представляти собою стерильний ін'єкційний розчин або суспензію в нетоксичному парентерально прийнятному розріджувачі або розчиннику, такому як розчин в 1,3-бутандіолі, або отримані у вигляді ліофілізованого порошку.
Серед прийнятних носіїв та розчинників, які можуть бути використані,
є вода, розчин Рінгера та ізотонічний розчин натрію хлориду.
Крім того, стерильні фіксовані олії можуть традиційно використовуватися як розчинник або суспендуюче середовище.
З цією метою може використовуватися будь-яка легка фіксована олія, включаючи синтетичні моно- або дигліцериди.
Крім того, жирні кислоти, такі як олеїнова кислота, також можуть бути використані для приготування ін'єкційних препаратів.
Крім того, препарати, прийнятні для парентерального введення, включають водні та неводні стерильні ін'єкційні розчини, які можуть містити антиоксиданти, буфери, бактеріостати та розчинники, які роблять препарат ізотонічним з кров'ю призначеного реципієнта; та водні та неводні стерильні суспензії, які можуть включати суспендуючі агенти та загущуючі агенти.
125) Композиції або препарати сполук за винаходом можуть також вводитись перорально,
наприклад, можуть бути отримані як таблетки, троше, пастилки, водні або олійні суспензії, здатні до диспергування порошки або гранули, емульсії, тверді або м'які капсули, сиропи або еліксири.
Композиції, призначені для перорального застосування, можуть бути отримані відповідно до будь-якого способу, відомого в даній галузі з рівня техніки для виробництва фармацевтичних композицій та такі композиції можуть містити один або декілька агентів,
включаючи підсолоджуючі агенти, ароматизуючі агенти, барвники та консервуючі агенти, для того, щоб забезпечити прийнятний препарат.
126Ї Сполуки за винаходом, разом із загальноприйнятим ад'ювантом, носієм або розріджувачем, можуть бути випущені на ринок у формі фармацевтичних композицій та їх одиничних дозувань, та в такій формі можуть використовуватися як тверді форми, такі як таблетки або заповнені капсули, або рідкі форми, такі як розчини, суспензії, емульсії, еліксири або капсули, наповнені таким самим, всі для перорального застосування, у вигляді супозиторіїв для ректального введення; або у вигляді стерильних ін'єкційних розчинів для парентерального (включаючи підшкірне) застосування.
127) Такі фармацевтичні композиції та їх одиничні дозовані форми можуть містити традиційні інгредієнти у звичайних пропорціях, з додатковими активними сполуками або основами або без них, та такі одиничні дозовані форми можуть містити будь-яку прийнятну ефективну кількість активного інгредієнта, що відповідає призначеному добовому діапазону доз, який застосовується.
Препарати, які містять десять (10) міліграмів активного інгредієнта або, більш широко, від 0,1 до ста (100) міліграмів, на таблетку, є відповідно прийнятними ілюстративними одиничними дозованими формами.
128) Для одержання фармацевтичних композицій із сполук за представленим винаходом, фармацевтично прийнятні носії можуть бути або твердими, або рідкими.
Тверді форми препаратів включають порошки, таблетки, драже, капсули, саше, супозиторії, та здатні до диспергування гранули.
Твердим носієм може бути одна або декілька речовин, які також можуть діяти як розріджувачі, ароматичні агенти, солюбілізатори, змащуючі агенти, суспендуючі агенти, зв'язуючі речовини, консерванти, розпушуючі агенти для таблеток, або інкапсулюючий матеріал.
129| В порошках, носій представляє собою дрібнодисперсну тверду речовину, яка знаходиться в суміші з дрібнодисперсним активним компонентом.
130 В таблетках активний компонент змішується з носієм, який має необхідну зв'язуючу здатність в прийнятних пропорціях, та пресується в бажаній формі та розмірі.
(131) Порошки та таблетки переважно містять від п'яти або десяти до приблизно сімдесяти відсотків активної сполуки.
Прийнятні носії представляють собою карбонат магнію, стеарат магнію, тальк, цукор, лактозу, пектин, декстрин, крохмаль, желатин, трагакант, метилцелюлозу,
бо натрію карбоксиметилцелюлозу, низькоплавкий віск, какао-масло, тощо.
Термін "препарат" є призначеним включати препарат активної сполуки з інкапсулюючим матеріалом як носієм, що забезпечує капсулу, в якій активний компонент, з або без носіїв, є оточеним носієм, який, таким чином, є поєднаним з ним. Подібним чином, включеними є саше та пастилки. Таблетки, порошки, капсули, драже, саше та пастилки можуть використовуватися як тверді форми, прийнятні для перорального введення. (1321) Для отримання супозиторіїв спочатку розплавляють низькоплавкий віск, такий як суміш гліцеридів жирних кислот або какао-масло, та активний компонент іх гомогенно диспергують в ньому, як при перемішуванні. Розплавлену гомогенну суміш потім виливають в відповідного розміру форми, дають охолонути, та, таким чином, затвердіти.
І133| Препарати, прийнятні для вагінального введення можуть бути представлені як пессарії, тампони, креми, гелі, пасти, піни або спреї, які містять на додаток до активного інгредієнта такі носії, як ті, що є відомими в даній галузі за таким призначенням. (134) Препарати рідкої форми включають розчини, суспензії та емульсії, наприклад, водні або вода-пропіленгліколеві розчини. Наприклад, рідкі препарати для парентерального введення можуть бути сформульовані як розчини в водно-поліетиленгліколевому розчині. (135) Композиції стерильної рідкої форми включають стерильні розчини, суспензії, емульсії, сиропи та еліксири. Активний інгредієнт може бути розчинений або суспендований в фармацевтично прийнятному носії, такому як стерильна вода, стерильний органічний розчинник або суміш з обох.
І136Ї Сполуки відповідно до представленого винаходу можуть, таким чином, бути сформульованими для парентерального введення (наприклад, шляхом ін'єкції, наприклад, введення болюсу або безперервної інфузії) та можуть бути представлені в одиничній дозованій формі в ампулах, заздалегідь заповнених шприцах, невеликого об'єму інфузії або в багатодозових контейнерах з додаванням консерванта. Композиції можуть приймати такі форми, як суспензії, розчини або емульсії в олійних або водних носіях, та можуть містити набір агентів, таких як суспендуючі, стабілізуючі та/або диспергуючі агенти. Альтернативно, активний інгредієнт можуть бути в порошковій формі, отриманій шляхом аскптичного виділення стерильної твердої речовини або шляхом ліофілізації з розчину, для розбавлення прийнятним носієм, наприклад, стерильною, вільною від пірогенів водою, перед застосуванням.
Зо І137| Водні розчини, прийнятні для перорального застосування можуть бути отримані шляхом розчинення активного компонента у воді та додавання відповідних барвників, ароматизаторів, стабілізуючих та загущувальних речовин, за необхідності. 138) Водні суспензії, прийнятної прийнятні для перорального застосування можуть бути отримані шляхом диспергування дрібнодисперсного активного компонента у воді з в'язким матеріалом, таким як природні або синтетичні смоли, камеді, метилцелюлоза, натрію карбоксиметилцелюлоза, або інші добре відомі суспендуючі агенти.
І1З39| Крім того, включеними є препарати твердої форми, які є призначеними для перетворення, перед застосуванням, в препарати рідкої форми для перорального введення.
Такі рідкі форми включають розчини, суспензії та емульсії. Дані препарати можуть містити, на додаток до активного компонента, барвники, ароматизатори, стабілізатори, буфери, штучні та натуральні підсолоджувачі, диспергатори, загусники, солюбілізуючі агенти, тощо.
І140| Для місцевого введення в епідерміс сполуки відповідно до винаходу можуть бути сформульованими як мазі, креми або лосьйони, або як трансдермальний пластир. Мазі та креми, наприклад, можуть бути сформульованими з водною або олійнійною основою з додаванням прийнятних загущуючих та/або гелеутворюючих агентів. Лосьйони можуть бути сформульованими з водною або олійною основою, та, як правило, також будуть містити один або декілька емульгуючих агентів, стабілізуючих агентів, диспергуючих агентів, суспендуючих агентів, загущуючих агентів або барвників.
І141| Препарати, прийнятні для місцевого введення в ротовій порожнині включають льодяники, які містять активний агент в ароматизованій основі, як правило, сахарозі та гуміарабику або трагаканті; пастилки, які містять активний інгредієнт в інертній основі, такій як желатин та гліцерин або сахароза та гуміарабик; та ополіскувачі для ротової порожнини, які містять активний інгредієнт в прийнятному рідкому носії. 1142) Розчини або суспензії застосовують безпосередньо до порожнини носа за допомогою звичайних засобів, наприклад, використовуючи крапельницю, піпетку або спрей. Препарати можуть бути представлені одній або багатодозовій формі В останньому випадку використовуючи крапельницю або піпетку пацієнтом може бути досягнуто введення відповідного, заздалегідь визначеного об'єму розчину або суспензії. У випадку спрею, це може досягатись, наприклад, за допомогою відмірюючого розпилюючого насосу для впорскування. бо Для покращення назальної доставки та утримання в носф, сполуки відповідно до винаходу можуть бути інкапсульованими циклодекстринами, або сформульованими з іншими агентами, які, як очікується, підвищують доставку та утримання в слизовій оболонці носа. 1143) Введення в дихальні шляхи також може бути досягнуто за допомогою аерозольного препарата, в якому активний інгредієнт забезпечується в герметичній упаковці під тиском з прийнятним пропелентом, таким як гідрофлуороалкан (НЕА) або хлорфлуоркарбон (СЕС), наприклад, дихлордифлуорметан, трихлорфлуорметан, або дихлортетрафлуоретан, діоксид карбону, або інший придатний газ. Аерозоль також може традиційно містити поверхнево- активну речовину, таку як лецитин. Доза лікарського засобу може контролюватись за допомогою вбудованого дозуючого клапана.
І144| Альтернативно активні інгредієнти можуть бути представлені у формі сухого порошку, наприклад, порошкової суміші сполуки в прийнятній порошковій основі, такій як лактоза, крохмаль, похідні крохмалю, такі як гідроксипропілметилцелюлоза та полівінілпіролідон (РМР).
Відповідно порошковий носій буде утворювати гель в порожнині носа. Порошкова композиція може бути представлена в одиничній дозованій формі, наприклад, у вигляді капсул або картриджів, наприклад, желатинових або блістерних пакетів, з яких порошок може вводитись за допомогою інгалятора. 1145) В препаратах, призначених для введення в дихальні шляхи, включаючи інтраназальні препарати, сполука, як правило, буде мати невеликий розмір частинок, наприклад, порядку від 5 до 10 мікрон або менше. Такий розмір частинок може бути отриманий за способами, відомими в даній галузі, наприклад, шляхом мікронізації.
І146|Ї При бажанні, застосованими можуть бути препарати, пристосовані для отримання тривалого вивільнення активного інгредієнта.
І147| Фармацевтичні препарати переважно знаходяться в одиничних дозованих формах. В такій формі, препарат підрозділяється на одиничні дози, які містять відповідні кількості активного компонента. Одинична дозована форма може бути упакованим препаратом, де пакет містить дискоетні кількості препарату, такі як упаковані таблетки, капсули, та порошки у флаконах або ампулах. Крім того, одинична дозована форма може представляти собою саму капсулу, таблетку, саше або пастилку, або може бути відповідне число будь-якого з них в упакованій формі.
І148)| Винахід також включає сполуки за відсутності носія, де сполуки знаходяться в одиничній дозованій формі. 1491) Кількість сполуки за винаходом, яка вводиться, може бути в діапазоні від приблизно 0,01 мг до 2000 мг на день, в залежності від активності сполуки та захворювання, яке лікується. 150) Кількість сполуки, необхідної для застосування в лікуванні, буде варіюватися залежно від способу введення, природи стану, який лікується, та віку та стану тварини (включаючи пацієнтів людей), та в остаточному підсумку буде на розсуд лікуючого ветеринара або лікаря. 151) Наприклад, прийнятна доза буде в діапазоні від приблизно 0,1 мг до 100 мг/кг маси тіла на день, переважно в діапазоні від 0,1 мг до 50 мг/кг/день.
І152| В деяких варіантах здійснення, дозування для перорального введення буде знаходитись в діапазоні від 1 мг/кг/день до 100 мг/кг/день. Доза для ін'єкції буде знаходитись в діапазоні від 1 мг/кг/день до 100 мг/кг/день. Доза для інгаляції буде знаходитись в діапазоні від 0,01 мг/кг/'день до 1 мг/кг/день. В деяких переважних варіантах здійснення, доза буде знаходитись в діапазоні від 5 мг - 50 мг/кг для перорального або ін'єкційного введення від двох до трьох разів на день протягом періоду від 1 до 15 днів, переважно від З до 12 днів, більш переважно від 5 до 10 днів. В інших переважних варіантах здійснення, доза буде знаходитись в діапазоні від 0,1 до 0,5 мг/кг для інгаляції від одного до п'яти разів на день протягом періоду від 1 до 15 днів, переважно від З до 12 днів, більш переважно протягом періоду від 5 до 10 днів.
Альтернативно, в іншому переважному варіанті здійснення, доза буде знаходитись в діапазоні від 0,2 мг/кг до 0,4 мг/кг для інгаляції як одноразове щоденне введення протягом тривалості лікування. Слід розуміти, що бажана доза може вводитись у вигляді однієї дози або у вигляді розділеної дози, введеної з відповідними інтервалами, наприклад, як дві, три, чотири або більше піддоз на день. (153) Сполуки за винаходом відповідно вводяться в одиничній дозованій формі, наприклад, яка містить від 0,1 до 10 мг активного інгредієнта на одиничну дозовану форму.
І154| Незважаючи на те, що для застосування в терапії, сполуки можуть вводитись як неочищені хімічні речовини, переважно представляють активний інгредієнт як фармацевтичний препарат. Таким чином, винахід, крім того, передбачає фармацевтичний препарат, який включає сполуки разом з одним або декількома їх фармацевтично прийнятними носіями та, необов'язково, інші терапевтичні та/або профілактичні інгредієнти. Носій(ї) повинен/повинні бути
"прийнятними!" в сенсі сумісності з іншими інгредієнтами препарата та не є шкідливим для його одержувача.
І155| Фармацевтичні препарати включають ті, які є прийнятними для перорального, ректального, назального, або парентерального (включаючи внутрішньом'язове, інтрадермальне, підшкірне та внутрішньовенне) введення або в формі прийнятної для введення в шлунково-кишковий тракт, або в формі, прийнятної для дихальних шляхів (включаючи носові проходи), наприклад, шляхом інгаляції або інсуффляції, або для інтрадермальної або підшкірної імплантації або для трансдермального пластиря. Препарати, де це доречно, можуть бути відповідно представлені в дискретних одиницях дозування та можуть бути отримані за будь- яким зі способів, добре відомих в даній галузі. Всі способи включають стадію об'єднання активної сполуки з носієм, таким як рідкий носій або дрібнодисперсний твердий носій або їх комбінації, та потім, за необхідності, формування продукту в потрібний препарат.
І156Ї Переважними композиціями є рідини або порошки для інтраназального введення, таблетки або капсули для перорального введення та рідини для внутрішньовенного введення.
І157| Фармацевтичні препарати сполук відповідно до представленого винаходу можуть спільно вводитись з одним або декількома іншими активними агентами в комбінованій терапії.
Наприклад, фармацевтичний препарат активної сполуки може спільно вводитись (наприклад, окремо, одночасно або послідовно), з одним або декількома іншими противірусними агентами, антибіотиками та протизапальними лікарськими засобами. (158) Термін "терапевтично ефективна кількість" стосується такої кількості, яка є достатньою для ефективного лікування, як визначено вище, при введенні суб'єкту, такому як ссавець, включаючи людину, яка потребує такого лікування. Терапевтично ефективна кількість буде варіюватися в залежності від суб'єкта та стану захворювання, яке лікується, тяжкості захворювання та способу введення, та може бути визначена звичайним чином кваліфікованим фахівцем в даній галузі.
І159| Термін "лікування" як використовується в даному документі охоплює будь-яке лікування захворювання або хвороби у тварини, переважно ссавця, більш переважно людини, та включає: (ї) попередження захворювання або стану, який виникає у суб'єкта; (ії) інгібування захворювання або стану, (її) полегшення захворювання або стану, або (ім) полегшення станів/симптомів, викликаних захворюванням.
І160| Терміни "попередження" та "профілактика", як використовується в даному документі, стосуються введення лікарського засобу заздалегідь, щоб попередити або запобігти виникненню одного або декількох симптомів захворювання або розладу. Кваліфікований фахівець в галузі медицини визнає, що термін "запобігати" не є абсолютним терміном. В медичній галузі, як мається на увазі, він стосується профілактичного введення лікарського засобу, щоб суттєво зменшити ймовірність або серйозність стану або симптому стану, та це є сенсом, задуманим в даному розкритті. Як використовується в стандартному тексті в галузі, довіднику лікарських засобів, терміни "попереджувати", "попередження" та "запобігання" стосовно розладу або захворювання, стосуються запобіганню причини, ефектів, симптомів або прогресуванню захворювання або розладу до того, як захворювання або розлад сам повністю проявиться.
І161| Терміни "вводити", "який вводиться" або "введення" по відношенню до сполуки, композиції або препаратаза винаходом означає введення сполуки в систему тварини, яка потребує лікування. Коли сполука за винаходом забезпечується в комбінації з одним або декількома іншими активними агентами, "введення" та його варіанти кожен, як мається на увазі, включає паралельне та/або послідовне введення сполуки та інших активних агентів.
ПРИКЛАДИ
І162| Аспекти, розкриті в даному документі, крім того, є описаними з використанням наступних необмежуючих прикладів.
Загальні способи та примітки 1163) Якщо не зазначено інше, ЯМР спектри реєстрували на ВгиКег Амапсе 300, Хміп-ЯМР версії 3.5 на ОРХ ЗООА.
І164| Якщо не зазначено інше, мас-спектри реєстрували на мас-спектрометрі Умаїег5
Місготав5 2МО, використовуючи ЕСІ (зонд електроспрей іонізації), використовуючи програмне забезпечення Умаїег Маз5 І упх МТ. (165) Якщо не зазначено інше, флеш колоночна хроматографія здійснювалась на силікагелі 6О г245 (Е. МегекК).
І166)| Тонко-шарова хроматографія (ТШХ) здійснювалась на силікагелевих попередньо покритих пластинах (Е. МегсК).
167! Якщо не зазначено інше, високоефективну рідинну хроматографію (ВЕРХ) здійснювали на модулі розділення М/ас(ег5 АПШапсе 2690, використовуючи УФ детектор подвійної довжини хвилі 2487 Умаїег5 та програмне забезпечення Умаїего МіПеппішт 32.
Загальна процедура контролю за лабораторними тваринами 1168) Етичне регулювання відповідних експериментів з використанням лабораторних тварин проводилося відповідно до затвердження Інституційного комітету з догляду та використання тварин відповідних установ / університетів.
Загальна процедура аналіза зменшення числа бляшок 169| МОСК клітини висівали в шестилункові планшети з тканинною культурою та вирощували до злиття за стандартними способами. Віруси грипу розбавляли в мінімальному об'ємі фосфатно-буферного сольового розчину (РВ5), доповненого 0,2 95 ВЗА, щоб отримати оцінюваний титр від 50 до 100 БУО (бляшкоутворюючих одиниць) на лунку. Після поглинання на
МОСК клітинах протягом 1 год. при 37 "С в атмосфері 5 95 СО2, вірусні інокуляти аспірували та замінювали на середовище для вірусного росту (мінімальна середовище Ігла, доповнене В5А, трипсином, та інсулін-трансферрин-селеном), яке містить агар або агарозу в кількості (як правило, від 1 до 2 95) достатній для того, щоб зробити середовище гелеподібним при кімнатній температурі. Планшети інкубували при 37 "С в атмосфері СО2 доки не розвивалися бляшки (як правило, від 2 до 4 днів). Бляшки візуалізували з використанням прийнятної плями (наприклад, 0,495 кристалічного фіолетового в формальному сольовому розчині), перш ніж їх підраховували. Противірусну ефективність (ЕС5О) визначали як концентрацію сполуки в середовищі, яка зменшила кількість бляшок на 50 95 від значення необробленого контролю.
Матеріалух та загальна процедура їог СРЕ аззау
І179| Досліджувані сполуки розчиняли в стерильній воді та зберігали при -20 "С. Сполуки потім розбавляли в середовищі для аналізу (МЕМ -- трипсин) до потрібних концентрацій.
І171| Середовище для аналізу містило Сбібсо 1 МЕМ (500 мл), доповнене 1 мМ МЕМ замінних амінокислот, 50 Од.-пеніциліну 50 мкг/мл стрептоміцину, 1 мМ натрію пірувату.
Трипсин (ТРОК- оброблений) додавали до середовища до кінцевої концентрації 1мкг/мл, перед тим як проводити аналіз.
І172| МОСК клітин (АТСС) вирощували в середовищі для вирощування-сібсо І х МЕМ (500
Зо мл), доповненому 1 мМ МЕМ замінних амінокислот, 50 Од.-пеніциліну -50 мкг/мл стрептоміцин, 1 мМ натрію пірувату, та 10 95 ЕВ5. 173) Вірусний вихідний розчин розбавляли в РВ5. (174) Аналіз проводили, використовуючи СеїІТГйге 96 Адпеои5 Опе 5оїішіоп Сеї! РгоїїГегайоп
Авзау (Рготеда).
І175| Якщо не зазначено інше, наступний загальний спосіб використовували для СРЕ аналізів:
Її МОСК клітин вирощували до злиття в 9б-лунковому планшеті в середовищі для вирощування; і) Середовище видаляли; ії) 46 мкл розбавленого вірусу додавали в лунку, включаючи пробно інфіковані лунки; їм) Планшети інкубували при 37 "С протягом 1,5 год. Протягом даного часу, отримували досліджувані сполуки. м) Через 1,5 год. вірусний інокулят видаляли. мі) Сполуки, які досліджували, були отримані, шляхом виконання 1:3 серійного розбавлення сполук в зазначених вище планшетах: а) 100 мкл середовища для аналізу додавали в рядки 3-11;
Б) 150 мкл сполук додавали в рядок 2; с) титрування 50 мкл з рядків 2-10, потім 50 мкл відкидали з рядка 10. а) Рядок 11 служив як позитивний та негативний контроль. мії) Клітин інкубували при 37 "С протягом 48 год. - 96 год. мії) Через 48 год. - 96 год. після інфікування, середовище видаляли. їх) Середовище замінювали на 100 мкл середовища для аналізу без трипсину. х) Додавали 20 мкл на лунку розчину для детектування. хі) Планшети інкубували при 37 "С протягом додаткової 1 год. хії) Абсорбцію планшетів вимірювали на 490 нм.
Приклад 1: Попередня обробка вірусу з використанням досліджуваних сполук перед інфікуванням МОСК клітин (176) Ілюстративні сполуки формули (І) застосовували для визначення противірусної активності перед інфікуванням МОСК клітин. МО345 (РК2 ТСА(20)2-(Ю-Суа-503Н)7-ОНІ, МО345 60 КРК2 ТСА(20)2-(Суа)7-ОНІ, мОЗ348 (СНТСА(20)2-0-Азр-(0-Суа)-0О-Азр-(0-Суа)-0-Авр-(О-Суа)-
ОНІ та мО348 |(СНТСА(20)2-0-Азр-(0-Суа-503Н)-0-Азр-(О0-Суа-503Н)-0-Авр-(0-Суа-50ОЗН)-
ОНІ досліджували як ілюстративні сполуки формули (І). Досліджували активність проти двох вірусні штамів, А/Зудпеу/250/99 (НІМІ), та А/Зуапеу/5/97 (НЗМ2). Занамівір застосовували як контроль.
І177| Умови детально представлені в таблиці 1 та узагальнений результат представлено на
Фіг. 1.
Таблиця 1:
Узагальнений результат умов для попредньої обробки вірусу перед інфікуванням МОСК клітин
ВО в Й
У 1 год., вірусну суспензію видаляли, потім клітини промивали РВЗ (х 1), мова 1 . . о додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ.
Вірус обробляли РВ5 при к.т. протягом 60 хв., потім попередньо адсорбували на МОСК клітинах при 37 "С протягом 1 год. Вірусну суспензію видаляли.
Умова 2 Клітини промивали РВЗ5 (х 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МІТТ.
Вірус обробляли трипсином (11 мкг/мл) при к.т. протягом 60 хв., потім попередньо адсорбували на МОСК клітинах при 37 "С протягом 1 год., вірусну
Умова 3 суспензію видаляли, потім клітини промивали РВЗ5 (х 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ.
Вірус обробляли трипсином (1 мкг/мл) при к.т. протягом 30 хв., потім змішували зі сполукою при к.т. протягом 30 хв., потім попередньо адсорбували на МОСК
У клітинах при 37 "С протягом 1 год., вірусну суспензію видаляли. Клітини мова 4 : . промивали РВ5 (х, 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ.
Вірус обробляли зі сполукою при к.т. протягом 30 хв., потім змішували з трипсином (1 мкг/мл) при к.т. протягом 30 хв., потім попередньо адсорбували на
У МОСК клітинах при 37 "С протягом 1 год., вірусну суспензію видаляли. Клітини мова 5 . ї промивали РВ5 (х 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ.
Вірус, сполуку та трипсин (1 мкг/мл) змішували при к.т. протягом 1 год., потім попередньо адсорбували на МОСК клітинах при 37 "С протягом 1 год., вірусну
Умова 6 суспензію видаляли. Клітини промивали РВ5 (х 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ.
Вірус змішували зі сполукою при к.т. протягом 1 год., потім попередньо адсорбували на МОСК клітинах при 37 "С протягом 1 год., вірусну суспензію
Умова 7 видаляли. Клітини промивали РВЗ5 (х 1), додавали середовище для аналізу, та інкубували при 37 "С протягом 72 год., досліджували, застосовуючи калориметричну систему аналізу МТТ. (178) Результати для/5уйпеу/250/99 наведені в таблиці 2 та на фігурах 2А, 2В та 26.
Результати для/Зуйпеу/5/97 наведені в таблиці З та на фігурах ЗА, ЗВ та ЗС.
І179| Результати показують, що сполуки формули (І), МО345, та МО348, нейтралізують віруси А/Зудпеу/25/99 (НІМІ) та А/Зуйпеу/5/97 (НЗМ2) позаклітинно. Попередня обробка вірусів
Занамівіром не вплинула на інфекційності вірусів. 180) Порівняння повторного періоду дії МО345-2 та Занамівіру по відношенню до
А/5уапеу/250/99 показує, що МО345-2 нейтралізують обидва віруса через менше, ніж 1 хвилину.
Результати для/Зуйпеу/250/99 наведені в таблиці 2 та на фігурах 2А, 2В та 2С. Результати для/Зуйпеу/5/97 наведені в таблиці 4 та на фігурі 4.
Таблиця 2: Попередня обробка вірусу перед інфікуванням МОСК клітин
Досліджувані сполуки: МО348-2, МОЗ345-2 та Занамівір (контроль)
Титр вірусу: А/Буйпеу/25/99
Таблиця 2: мМО348-2
Умови | 77777777 Ї7771717171717171717171717171171717171717171111111110 | Середнєзначення: 51171171 25ОТ 17712386 11111112 7171776 | 2301 | 226 |р7ео2ггі | -/|ИКВ 2еві мМО348-2
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 61111111
МО345-2
Умови | 77777777 Ї777171717171717171717171717117171717171711111111110 | Середнєзначення.: 77171776. 2305 | 2303 | лоб | 7721
МО345-2
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 6111111111111111111111111лобяв111111111
Занамівір ен | пе як | зв 10 значення 7771117176 | 0446 | 0512 | 0443 | 0467 щЩ 22711111 0663 | 0791. | ..7777777171717171107270
Занамівір
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 61111111
Примітки: Сполуки розчиняли в НгО до 50 мкг/мл. Додаткові розбавлення робили в їхРВ5 дооо 5 мкг/мл. Клітини витримували в середовищі, яке містить 1 мкг/мл трипсину. Аналізували через 72 год. після інфікування. (1000 140711) 0,5х107 вірусу попередньо адсорбували протягом 1 год., вірус видаляли, клітини промивали один раз, та додавали свіже середовище, інкубували протягом 72 год.
Таблиця 3: Попередня обробка вірусу перед інфікуванням МОСК клітин
Досліджувані сполуки: МОЗ348-2, МОЗ345-2 та Занамівір (контроль)
Титр вірусу: А/Зуапеу/5/97
Таблиця 3:
Попередня обробка вірусу перед інфікуванням МОСК клітин
Умови 77777177 |Середнєзначення//: 71117176. 269 | 248 | 2658 | - 2609..Й. КЯ мМО348-2
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 611111111111111111111111111111111111111лоаю1
МО345-2
Умови ЇЇ 77777177 |Середнєзначення/7/: 77117176. 2568 172523 | 2456 | -(К 2516 Г-:/НЖ
МО345-2
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 61111111
Занамівір
Умови 77777171 |Середнєзначення//: 777717171776 | 032 | р 0936 | 0324 | 0327
Занамівір
Фо в порівнянні з контролем (без інфікування) 61111111
Примітки: Сполуки розчиняли в НгО до 50 мкг/мл. Додаткові розбавлення робили в їІхРВ5 до 5 мкг/мл. Клітини витримували в середовищі, яке містить 1 мкг/мл трипсину. Аналізували через 72 год. після інфікування. (2000 271011) 1х107 вірусу попередньо адсорбували протягом 1 год., вірус видаляли, клітини промивали один раз, та додавали свіже середовище, інкубували протягом 72 год.
Таблиця 4: Порівняння періоду дії для попередньої обробки вірусу перед інфікуванням
МОСК клітин
Досліджувані сполуки: МОЗ345-2 та Занамівір (контроль)
Титр вірусу: А/Зудйпеу/250/99
Таблиця 4:
Порівняння періоду дії для попередньої обробки вірусу перед інфікуванням МОСК клітин значення значення 30 0314 |0347| | 0331 | 1,762 | 1756 1,746 | 1,755
Занамівір значення значення (Контроль | (17777777 | 77 11111111 01111111 моз45-277777777177771 71171711 Занамівр7////7/:З
Примітка: Сполуки розчиняли в Н2гО до 50 мкг/мл. Додаткові розбавлення робили в їІхРВ5 до 0,5 мкг/мл. Клітини витримували в середовищі, яке містить 1 мкг/мл трипсину. Аналізували через 72 год. після інфікування. (1000 140711) 1х107 вірусу попередньо адсорбували протягом 1 год., вірус видаляли, клітини промивали один раз, та додавали свіже середовище, інкубували протягом 72 год.
Приклад 2: Порівняння варіабельних кислотних/аніонних груп на противірусну активність досліджуваних сполук 181) Ілюстративні сполуки формули (І) застосовували для того, щоб порівняти вплив кислотних/аніонних груп на противірусну активність. Наступні сполуки досліджували як ілюстративні сполуки формули (1): - МОЗ314-1: (СНТСА(70)2-І -Авр-(І -Суві-5ОзН)-Авр-(І -Суві-5ОзН)-І -Авр-(І -Суві-5ОзН)-ОН, яка містить три сульфонові кислоти та чотири карбонові кислоти; - МОО21-7: СНТОА(2)»-І -Азр, яка містить яка містить 2 карбонові кислоти; та - МОО51-3: РК2 ТСА(2)2-І -Авр-І -Авр, яка містить З карбонові кислоти.
І182| Досліджували активність щодо трьох вірусних штамів, А/Зудпеу/250/99 (НІМІ),
А/Мі5зіззіррі/03/01 (НІМІ) немутантного типу, та А/Міззіззіррі/03/01 (НІМ1) Н274У (резистентний до оселтамивіру). 183) Результати для А/Зуйпеу/5/97 (НЗМ2) наведені в таблиці 5 та на фігурі 5. Результати для А/Мів5із55іррі/03/01 (НІМІ) немутантного типу наведені в таблиці 5 та на фігурах 6 та 7.
Результати для А/Мівззіззіррі/03/01 (НІ1М1) Н274У (резистентного до оселтамивіру) наведені в таблиці 5 та на фігурах 8 та 9.
Таблиця 5:
Порівняння кислотних/аніонних груп на противірусну активність . бли А/Міввіввіррі/03/01 (НІМ1) сполука Немутантного типу ; оселтамивіру 184) Результати показують, що противірусні активності сполук були пропорційними кількості кислотних/аніонних груп.
Приклад 3: Модифікація показників вірусного кліренсу в легені та носових проходах (185) Оцінювали вплив ілюстративних сполук формули (І) на показники вірусного кліренсу в легені та носових проходах мишей. МО021 (СНТСА(2)2-І-Авр) досліджували як ілюстративну сполуку формули (І). Занамівір та РВ5 застосовували як контролі.
Зо І186| 20 мишей на групу обробляли інтраназально під анезстезією 2 мкг МОО21, 2 мкг
Занамівіру або РВ5З в дні -1, -1, -2, 3, 4 та «5 та інфікували сублетальною дозою 50 БУО вірусу грипу РК8 в день 0. Мишей зважували щоденно. П'ять мишей на групу обробки піддавали евтаназії в дні 1, 3, 5 та 7 після інфікування, та їх легені та носові проходи збирали. Легені аналізували щодо вірусного навантаження. Носові проходи зберігали при -80 "С до аналізу. 11871 Всі обробки, інфікування та евтаназія мишей відбувалися протягом двох годинного вікна через 24 години після втручання на наступний день. Миші не отримували лікування в той же день, коли вони були вбиті. Терміни обробки інфекції та збирання органів наведені на Фіг. 10. 188) Результати детально представлені в таблиці б та на фіг. 11-14. В усіх точках часу вірусне навантаження на легені (виражене як Іс910) у мишей, оброблених МОО21, було значно нижчим, ніж для мишей, оброблених РВЗ5. В дні З та 7 після інфікування вірусне навантаження на легені МО021 у мишей, оброблених МОО21, також було значно нижчим, ніж для мишей, оброблених Занамівіром. Результати оцінювали, використовуючи однофакторний дисперсійний аналіз (АМОМА) з ретроспективним аналізом Тьюкі дані в день 1, З та 5 та І-критерій Манна-Уїтні дані в день 7. Поріг аналізу становив 101,07. Негативним зразкам призначили значення 101. Не оброблені миші (контрольна обробка РВ5) не дожили до 7-го дня незважаючи на низьку дозу вірусу.
І189| Втрати маси оцінювали для груп мишей, які не були вбиті до 7-го дня після інфікування. Результати свідчать про мінімальну втрату маси після обробки МОО21, значно меншу, ніж втрата маси, яка спостерігається при введенні Занамівіра в більш пізні точки часу.
Таблиця 6:
Модифікація показників вірусного кліренсу в легені та носових проходах 11111111 індивідуальнітитри./////://////:К/НООЯЇСеС 11111101 мМро2і | Занамівр./// | Р /-З 111112521111717111111111307. | 7777182 1111112ов111111111111112661111 11111131
Гвв111111111111112961111 11111130
Гвв1111111111115711 11111111 3791 1111111112831111111111111114661111 17111711 568 2 а6і11111111111111497. |... 7.5
Гяя1111111114911 17111111 вигсшщС 1111111 263111111111111111134611 17111715 11118и11111111111300 177717171171584 1111111118659111117171111111171497. | ...7рр7589 2 1111111882111111111111111157711 11111111 6б0сС1щ 1111111 480111111711111111156611111117 11111115
День? 7 Ї777777111851111111111111470 вив 5мя Її 1118в21111111118590 Її
Гвив1111111111111464 ою 5ая 11111071 Середнізначеннятитріввгруліі//-/:/ //(// |/ 11111101 мрогі | 0 Занамвір/// | 7 РВЗ З
День? /////////Ї77717171717171279Ї11111111472 1 190) Статистичний аналіз кривих втрати маси, застосовуючи 2-факторний дисперсійний аналіз АМОМА повторних вимірювань, показав значну різницю в кривих лікування (р«е0,0001).
Зверніть увагу на те, що 2-факторний дисперсійний аналіз АМОМА повторних вимірювань був завершений тільки для даних, отриманих до 5-го дня після інфікування, оскільки група РВ5 не мала повних даних про днів б та 7 через передчасну смерть. Пост-критерій Бонферроні показав, що як Занамівір, так і МО021 значно відрізнялися від РВ5 в дні 3, 4 та 5 (р«0,001). Той же аналіз, проведений на кривих повної втрати маси для МОО21 та Занамівіру, лише показав статистично значущу різницю в двох кривих втрати маси в цілому (р-0,0443) з пост-критерій
Бонферроні, що свідчить про значущі відмінності, які існують на 6б-ий день (ре0,01) та 7-ий день (р-е0,001). 191| Результати показують, що багаторазові щоденні обробки 2 мкг сполуки МОО21 дозволяли суттєво зменшити вірусне навантаження легенів в порівнянні з мишами, які отримували подібним чином РВ5 в дні 1, З та 5 після інфікування та також 2 мкг Занамівіру в день З та 7 після інфікування. Значне зниження вірусного навантаження супроводжувалося меншою втратою втрати маси у мишей та, як очікується, дорівнює суттєвому зменшенню тяжкості захворювання. Мінімальна втрата маси з МО0О21 протягом усього курсу захворювання була вражаючою та значно кращою, ніж із Занамівіром у більш пізні точки часу. 192) Незважаючи на те, що миші отримували дозу вірусу РЕК8, яка в звичайних умовах була сублетальною, всі миші, що отримували контрольну терапію РВ5, втрачали вагу та були вбиті до 7-го дня після інфікування. Неочікувані передчасні смерті можуть бути пов'язаними зі шкідливим впливом щоденного анестетика та інтраназального введення 50 мкл рідини. Однак, в групах МОО21 та Занамівіру, лікування перевищувало будь-які шкідливі ефекти.
Приклад 4: Скринінг СРЕ аналізу 193) Скринінги СРЕ аналізу проводили для ілюстративних сполук формули (І) відповідно до загальної процедури для СРЕ аналізу, зазначеного вище. Результати детально представлені в таблицях 7 та 8. Конкретні противірусні скринінги іп міго також проводили для ряду вірусних штамів, включаючи Грип А Н7МОУ А/Аппші/1/2003 (Таблиця 9), Грип А НЬМ1 Нопд Копад/213/2003 (Таблиця 10), Грип А НЗМ2 Регпійп/16/2009 (Таблиця 11), Грип А Н7МО А/Аппці/1/2003 (Таблиця 12), Грип А НІМІ Саїйогпіа 07/2009 (Таблиця 13), Грип А Н5М1 Биск/ммМ/л1525/81 (Таблиця 14),
Грип А Н5М1 Тпайапа/16/2004 (Таблиця 15), Вірус грипу А НІМІ, А/Мів5івзвіррі/3/2001 Н275У, резистентний до оселтамивіру (Таблиця 16), Вірус грипу А НЬМ1 Биск/ММЛ 525/81 (Таблиця 17),
Вірус грипу В, В/Вгізрапе/60/2008 (Таблиця 18), Вірус грипу В, В/Ріогіда/4/2006 (Таблиця 19) та
А/Зудпеу/250/99 (НІМІ) (Таблиця 20). 1194) Дані щодо протигрипозної активності вказують на те, що чим більше кислотних груп в сполуках формули (І), тим вище противірусна активність. (195) Протигрипозна активність ілюстративних сполук формули (І) додатково оцінювали в наступних СРЕ аналізах (Таблиця 38) та при різних вірусних титрах (Таблиця 39).
Приклад 5: Антивірусна активність проти резистентних до оселтамивіру штамів грипу (196) Антивірусна активність проти резистентних до оселтамивіру штамів грипу оцінювали для ілюстративних сполук формули (І). Реєстрували інгібування розміру бляшки та кількості бляшок. Оселтамивір застосовували як контроль. Результати детально представлені в таблиці 21.
Приклад 6: Аналіз зменшення числа вірусних бляшок 197| Ілюстративні сполуки формули (І) оцінювали щодо зниження вірусної бляшки по відношенню до кожного з СА/07/2009 вірусу НІМІ та А/РК/8 вірусу НІМІ. Занамівір застосовували як контроль. Результати детально представлені в таблиці 22 та 23, відповідно.
Приклад 7: Дані щодо ефективності для ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей (198) Ефективність іп мімо ілюстративних сполук формули (І) оцінювали у мишей проти ряду вірусних інфекцій.
Зо І199| Таблиця 24 детально розкриває виживання миші після вірусного інфікування одним з вірусів А/СаїЇПйогпіа/04/2009 (НІМІ) А/МмМісіогіа/3/75 (НЗМ2), А/Міввіввіррі/3/01 / Н2г75У, резистентного до оселтарнівіру (Н1М1), А/ОисКк/ММЛ 525/81 (Н5МІ), або В/5іспиап/379/99 (РіиВ) та одноразового введення сполуки з ілюстративних сполук формули (І) в різних дозуваннях.
І200| Таблиця 25 детально розкриває виживання миші після інтраназального вірусного інфікування А/РК/8 вірусом (500 БУО/миша) та одноразового введення сполуки з ілюстративних сполук формули (І) в різних дозуваннях.
І201| Таблиця 26 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І), при введенні в різних дозуваннях після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/СаЇйотіа/04/2009 (НІМІрат) у мишей. Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
І202| Таблиця 27 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні в різних дозуваннях через 48 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) у мишей. Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
Ї203| Таблиця 28 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні через 48 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) у мишей. Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
І204| Таблиця 29 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні в різних дозуваннях через 48 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РЕ/8 (НІМІ) (500 БУО/миша) у мишей.
Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо. (2О5| Таблиця 30 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні в різних дозуваннях через 60 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІТМ1) (500 БУО/миша) у мишей.
Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
І206Ї Таблиця 31 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні через 60 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) (500 БУО/миша) у мишей. Занамівір використовували як контроль, та сольовий розчин використовували як плацебо.
І207| Таблиця 32 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні через 72 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) (500 БУО/миша) у мишей. (208| Таблиця 33 детально розкриває ефекти одноразового інтраназального лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні через 72 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) (500 БУО/миша) у мишей.
І209| Таблиця 34 детально розкриває ефекти одноразового лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні внутрішньочеревно за 1 год. перед летальним інфікуванням вірусом грипу А/РК/8 (НІ1МІ1) (500 БУО/миша) на мишей. (210) Таблиця 35 детально розкриває ефекти лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні внутрішньочеревно через 4 год. після інфікування (20 мкг/миша/день х 5 днів) на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НТ М1) (500 БУО/миша) у мишей. (2111 Результати, представлені в таблицях 34 та 35 показують, що сполуки формули (1) можуть використовуватися в системному лікуванні інфекції. (212) Таблиця 36 детально розкриває ефекти лікування ілюстративними сполуками формули (ЇЇ при введенні інтраназально через 60 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НТМ1) (500 БУО/миша) у мишей. (213) Таблиця 37 детально розкриває ефекти лікування ілюстративними сполуками формули (ЇЇ при введенні інтраназально через 60 год. після інфікування на виживання від вірусної інфекції грипу А/РК/8 (НТМ1) (500 БУО/миша) у мишей. (214) Таблиця 38 детально розкриває ефекти лікування ілюстративними сполуками формули (І) при введенні внутрішньочеревно за 1 год. перед летальним інфікуванням вірусом грипу
А/РРУ/УВ (Н1ТМ1) (5Х00БУО/миша) на мишей. (215) Результати досліджень іп міго та іп мімо демонструють, що сполуки формули (Ії) є ефективними проти ряду штамів грипу, включаючи грип А, В, пташиний грип та резистентні до лікарських засобів штами. Крім того, результати демонструють, що сполуки формули (І) не проявляють цитотоксичність.
І216Ї Стосовно досліджень на мишах, було виявлено, що інфіковані миші, як правило, втрачають меншу масу тіла та/або відновлюються швидше, коли їх лікують сполуками формули (І) при порівнянні з або сольовим розчином плацебо, та/або контролем (тобто, Занамівіром).
Крім того, було виявлено, що сполуки формули (І) були ефективними після введення в носовий прохід у мишей для періоду або більше, ніж 11 днів. (217| Дані щодо ефективності іп мімо показують, що сполуки формули (І) були, щонайменше, в 75 разів (за масовим дозуванням) або » в 400 разів (за молярним дозуванням) більш активним, ніж контроль Занамівіром. (218) Стосовно даних щодо ефективності іп мімо для мишей, інфікованих вірусом грипу А
РК8 (500 БУО/миша) на основі порівняльного часу інтраназальні введення ілюстративних сполук за винаходом через 48 год., 60 год., або 72 год. після інфікування в результаті призводили до виживання більшості мишей, та максимальної втрати маси тіла « 15 95 (тільки у трьох мишей втрати маси тіла становила 20-25 95).
І219| Стосовно даних щодо ефективності іп мімо для мишей, інфікованих вірусом грипу
А/РК/8 (500 БУО/миша), внутрішньочеревні введення ілюстративних сполук за винаходом в результаті призводили до виживання всіх мишей, та показує, що сполуки за винаходом можуть використовуватись для системного лікування інфекції. (220) Дві ілюстративні сполуки формули (І), МО185 та МО317 досліджували в ПЕКО ІС5О (пПЕВО-СНО, автоматизована фіксація потенціала) аналізі. Обидва результати показали, що дві сполуки були безпечними стосовно кардіо-токсичності. Крім того, МО185 та МО317 досліджували в кінома скануванні, не існувало ніякої значної взаємодії між сполуками та кіназами при 100 нМ.
Таблиця 7:
Скринінг СРЕ аналізу
Сполую | ММ| ЕСю | ЕСю | ЕСю | ЕСю
Ме | 17 САЛО7/2009 | Ойск/ММ/1525/81 | Репп/16/2009 | КНіогіда/4/2006 71111117 нуимл| нм / н/мло| нм о / нумло| нм | ну/мл | нм мрої5 |1166/ 7 | 6 | 04 | 054 | 78 | 67 | 25 | 21 мроїб |л1166 9 | 77 | 06 | 051 33 | 28 | 82 | 7 мот2з3 1974 8 | 82 | 07 | 072 л0000|омкм)| 0,96 | 0,98 мо154 |71485 9 | 606 / «013 | «0087 / «013 | «0,087 | «013 | «0,087 мОо2гі9 |1712) 5 | 292 | 05 | 029 10000|558мкм| 777 | 0,99 мОогі2 |1215) 8 | 658 | 084 | 0,7 | 42 | 346 | 0,71 | 0,58 мо185 |т1852) 6 | 32 | «03 | «0,07 | «013 | «0,07 | «03 | «007 лмо191 Щ|7457) 9 | 61 | «03 | «0089 | «013 | «0089| 032 | 021 "бС5о» 10,000 нг/мл
МОСК клітинна лінія
Таблиця 8:
Протигрипозна вірусна активність, отримана за СРЕ аналізом" (ЕСво НМ) (ММ1852) | (ММ1982) | (ММ2201) | (ММ1982) | (ММ1243) | (ММ332)
А/томпеміе/74/2011. | 074 | 009 | 0041 | 006 | 040 | 5
А/Міввізвіррио3/0ї ут | 089 | 009 | 024 | 027 | 043 | 566
А/Міввіввірр/оЗ/01Нг74у | 089 | 009 | 024 | 027 | 043 | 566
А/Репі/2бі/2009. | 049 | 036 | 032 | 035 | 057 | 66
Таблиця 8:
Протигрипозна вірусна активність, отримана за СРЕ аналізом" (ЕСво НМ)
Вірус грип МО185 МО314 МО345 МОз348 МОО21 | Занамівір рус грипу (ММ1852) | (ММ1982) | (ММ2201) | (ММ1982) | (ММ1243) | (ММ332)
А/Місіогіа/503/06
В/Гомупвеміїе/2/2011 »1789 "ССво» б0Онг/мл МОСК клітинна лінія «х значення представляють собою середні значення з щонайменше трьох визначень
Таблиця 9:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н7МО, А/Аппиші/1/2003)
Назва аналізу лікарського ЕС5БО ЕС9О Со50 « ж
Зменшення врожаю
МО0О51 вірусу/Нейтральний червоний 0,0031 »1,0 » 312 (Токсичність)
Нейтральний червоний
МО0О51 (Цитопатичний «- 0,00032 »1,0 » 3100 ефект/Токсичність)
Зменшення врожаю
МО154 вірусу/Нейтральний червоний 0,01 »1,0 » 100
Токсичність
Нейтральний червоний
МО154 (Цитопатичний «- 0,00032 »1,0 » 3100 ефект/Токсичність)
Зменшення врожаю
МО185 вірусу/Нейтральний червоний 0,00185 »1,0 » 540 (Токсичність)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний «- 0,00032 »1,0 » 3100 ефект/Токсичність)
Зменшення врожаю
Рибавірин вірусу/Нейтральний червоний 8,25 » 1000 » 121 (Токсичність)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 24 » 1000 » 42 ефект/Токсичність) "Біво-ССво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 10:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5МІ1, Нопд Копад/213/2003)
Назва аналізу лікарського ЕС5БО ЕС9О Со50 « ж
Зменшення врожаю
МО0О51 вірусу/Нейтральний червоний -0,00032| 51,0 » 3100 (Токсичність)
Нейтральний червоний
МО0О51 (Цитопатичний « 0,00032 »1,0 |» 3100 ефект/Гоксичність
МО154 (Зменшенняврожаю. | /«000032| хо | - |53100
Таблиця 10:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5МІ1, Нопд Копад/213/2003)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 со50 |, їж оленя. 11
Токсичність)
Нейтральний червоний
МО154 (Цитопатичний « 0,00032 »1,0 153100 ефект/Гоксичність
Зменшення врожаю
МО185 вірусу/Нейтральний червоний -0,00032| 51,0 » 3100 (Токсичність)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний « 0,00032 »1,0 153100 ефект/ТГоксичність)
Зменшення врожаю
Рибавірин вірусу/Нейтральний червоний 14,68 » 1000 » 68 (Токсичність)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 17 » 1000 | 559 ефект/ТГоксичність) "Біво-ССво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 11:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НЗМ2, Репіп/16/2009)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусуІНейтральний 0,00086 20,32 2370 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,0001 20,32 23200 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00173 20,32 5180 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний 0,00032 20,32 51000 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00485 20,32 »66 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,00054 20,32 2590 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00115 20,32 5280 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0006 20,32 2530 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Ммозвг З |орохаювіруунеятальний | 000002 оба || ето
Таблиця 11:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НЗМ2, Репіп/16/2009)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж 11111111 Їчервониїд////////// ЇЇ Ї11111ї1 г
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,00038 20,32 »840 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 4,4 2320 »7З3 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 5 2320 »64 ефект/Токсичність) "Біво-ССво /ЛЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 12:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н7МО, А/Аппиші/1/2003) . . ЕСво ЕСвео ССво « ях
Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,001 52,0 252000 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний 0,015 52,0 5130 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,025 52,0 »80 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0042 52,0 2480 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,00063 52,0 23200 ефект/ТГоксичність) . Візуальний (Зменшення врожаю
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 6,4 2320 250 ефект/ТГоксичність) "Біво-ССво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 13:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НІМІ, СаїІйогпіа/07/2009)
Назва аналізу лікарського ЕСво ЕСвоо ССво « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00026 | 50,32 »1230 червоний
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,00015 20,32 | х2100 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0017 20,32 5190 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний 0,0009 20,32 2360 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0047 20,32 268 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,00077 20,32 2420 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0046 20,32 »70 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0007 20,32 2460 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0041 20,32 »78 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,00025 20,32 | »1300 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 2,3 2320 »140 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 2,5 2320 5130 ефект/Гоксичність «Біво-СОСво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 14:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НЬМ1, биск/ммМ/1525/81)
Назва аналізу лікарського ЕСво ЕСво ССво « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00153 20,32 5210 червоний мот: Ситиюнення зе (зжіню (Цитопатичний
Таблиця 14:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НЬМ1, биск/ммМ/1525/81)
Назва аналізу лікарського ЕСво ЕСво ССво « їж 11111111 Ф(ефект/Локсичніст.їд//://.ОЇ 7 / Ї77777171171Ї11111711111 1
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00096 20,32 2330 червоний
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний 0,00099 20,32 2320 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0065 20,32 549 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,0018 20,32 »180 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,00835 20,32 238 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,00085 20,32 2380 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0077 20,32 »42 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,00094 20,32 2340 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин | врожаю вірусу/Нейтральний 2,3 2320 »140 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин | (Цитопатичний 6,5 2320 549 ефект/ТГоксичність) "Біво-ССво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 15:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5МІ1, Тпайапа/16/2004)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 со50 |, їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,012 52,0 »170 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,0045 22,0 »440 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний 0,010 52,0 5200 червоний) мет Диня ою! ле (Цитопатичний
Таблиця 15:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5МІ1, Тпайапа/16/2004)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 со50 |, їж 11111111 Д|ефеку/токсичністу.д//-:.Х/:.:З ЇЇ /!/ ( / ЇЇ
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,005 52,0 2400 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,0069 52,0 52390 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,010 52,0 5200 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0055 52,0 2360 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,002 52,0 21000 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,0037 52,0 2540 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 2,719 2320 5120 червоний
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 3,7 2320 »86 ефект/Токсичність) "Біво-ССво /ЛЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 16:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НІМІ,
А/Міввіввіррі/3/2001 Н275У, резистентний до оселтамивіру)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,006 52,0 2330 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,0062 52,0 2320 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний -0,002 52,0 51000 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0036 52,0 2560 червоний) мое тн |оюе! о лоівю (Цитопатичний
Таблиця 16:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А НІМІ,
А/Міввіввіррі/3/2001 Н275У, резистентний до оселтамивіру)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж 11111111 ефек/токсичністьуї//:|/ | !/ / Її ЇЇ
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0089 52,0 5220 червоний
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0067 52,0 2300 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,008 52,0 5250 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,0081 52,0 5250 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 10 2320 232 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 9,5 2320 »34 ефект/Токсичність) «Біво-СОСво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 17:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5М1, биск/ММ/1525/81)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний -0,002 52,0 51000 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний -0,002 52,0 51000 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0042 52,0 2480 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,0035 52,0 2570 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний) мене тен ле.) | ілю! (Цитопатичний
Таблиця 17:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу А Н5М1, биск/ММ/1525/81)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж 11111111 ефек/токсичністьуї//:|/ | !/ / Її ЇЇ
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0023 52,0 2870 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,0026 52,0 »7170 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 10 2320 232 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 10 2320 232 ефект/Токсичність) «Біво-СОСво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 18:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу В, В/Вгізрапе/60/2008)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,006 52,0 2330 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,0062 52,0 2320 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний -0,002 52,0 51000 ефект/Токсичність
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0036 52,0 2560 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,0036 52,0 2560 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0089 52,0 5220 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0067 52,0 2300 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,008 52,0 5250 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,0081 52,0 5250 ефект/Токсичність)
Таблиця 18:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу В, В/Вгізрапе/60/2008)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 10 2320 232 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 9,5 2320 »34 ефект/Токсичність) «Біво-СОСво /ЕСво ««Біво-СбСво /ЕСоо
Таблиця 19:
Противірусний скринінг іп міго (Вірус грипу В, В/РіІогіда/4/2006)
Назва аналізу лікарського ЕС5О ЕС9О0 бо50 « їж
Візуальний (Зменшення
МО185 врожаю вірусу/Нейтральний 0,006 52,0 2330 червоний)
Нейтральний червоний
МО185 (Цитопатичний 0,0062 52,0 2320 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МО317 врожаю вірусу/Нейтральний -0,002 52,0 51000 червоний)
Нейтральний червоний
МО317 (Цитопатичний -0,002 52,0 51000 ефект/ТГоксичність)
Візуальний (Зменшення
МО345 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0036 52,0 2560 червоний)
Нейтральний червоний
МО345 (Цитопатичний 0,0036 52,0 2560 ефект/Токсичність
Візуальний (Зменшення
МО349 врожаю вірусу/Нейтральний 0,0089 52,0 5220 червоний)
Нейтральний червоний
МО349 (Цитопатичний 0,0067 52,0 2300 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
МОЗ352 врожаю вірусу/Нейтральний 0,008 52,0 5250 червоний)
Нейтральний червоний
МОЗ352 (Цитопатичний 0,008 52,0 5250 ефект/Токсичність)
Візуальний (Зменшення
Рибавірин врожаю вірусу/Нейтральний 10 2320 232 червоний)
Нейтральний червоний
Рибавірин (Цитопатичний 9,5 2320 »34 ефект/Токсичність
УІзоеС Со /ЕСзо У БІво-ССво /ЕСво
Таблиця 20:
Противірусний скринінг іп міго (А/5удпеу/250/99)
ЕС5О (нг/мл) ЕС5О (НМ)
МороО12
СНТСА(7)2(56) (ММ 1534 ов 0,039
Мро21
Занамівір (ММ 332) 22,228
Інгібування розміру бляшки та кількості бляшок ілюстративними сполуками формули (І)
Таблиця 21:
Противірусна активність проти резистентних до оселтамивіру штамів грипу --- 1 | ож ол реетея нг/мл нг/мл нг/мл нг/мл НМ
Вірус (Підтип |Розмір Кількість Розмір Кількість| Розмір Кількість Розмір Кількість Розмірі Кількість ве 1111919 рота, пло Мото тло побу ов (В/Рейпів (0197 1 | 1-00 |01-ї1,0|Ї 1-06 |ї0-0| 1-0 |0-10| 1-100 | 1000 |»10,000 а Діапазон надається, коли ІСво попадає між двох концентрацій лікарського засобу. ьЬ Діапазон, представлений з повторами, може перекривати більше ніж один одто розбавлення.
Таблиця 22:
Аналіз зменшення числа вірусних бляшок (СА/07/2009 вірус Н1М1) нин ЕСБО пннннІ""'нВШНШИОНИ 011 Сполука | ММ | н/мл | нм бюжЮ
МО185 1852 0,095 0,05140
МО317 1318 0,068 0,05168
МО343 1597 0,012 0,00749
МмО344 2057 0,021 0,01038
МО345 2201 0,017 0,00797 1,969 5,933
Таблиця 23:
Аналіз зменшення числа вірусних бляшок (А/РЕ/8 вірус Н1М1) 11111111 вєсю СС 11111111 бполукаїд////// ЇЇ ММ ЇЇ ямсСсСс2
МО185 1852 4,256
МмО344 2057 1,471
МО342 2208 1,276
МО345 2201 1,719
МО348 1982 1,919
Таблиця 23:
Аналіз зменшення числа вірусних бляшок (А/РЕ/8 вірус Н1М1) 11111111 вєсю СС 11111111 бполукаїд/////// ЇЇ ММ ЇЇ ямсСсСс2
МО0О51 1318 1,744
МОЗ343 1597 1,273
МО317 1318 3,303 10150
Таблиця 24: Дані щодо ефективності іп мімо у миші ілюстративних сполук формули (І)
Виживання/всього мишей після вірусної інфекції та лікування сполукою один раз в різних дозуваннях.
Таблиця 24:
Дані щодо ефективності іп мімо у миші ілюстративних сполук формули (І)
Вірус, яким Мро21 МО154 МО185 Занамівір о . Плацебо інфікували мишей мкг/миша мкг/миша мкг/миша мкг/миша 7111111. |5о|т701|2 1501702 | 50 | то | 2 |т150| 50 позанотівюв?о09 вно | змо |Бло 1010 |толо ато 1010 | вало АМО злої 0/2 пам 1010! ло 6/0 пОДлОм І шо ж вло|зло| о/го 1001 Ттомо АЛЛО |яло|лоло|вло|ЗлЛо|лОо|Ї 10/20
А/Міввіввіррі/3/01
Н2г75У
Резистентний до 1010|10/1017/10|1010|10/10) 9/9 | ТОЛОІТОЛО|9ЛО0 | 810 00/20 оселтарнівіру вірус
НІМІ ям МИ вав тло | вло (гло |томо| вало 6ло|1оло| вло 710 | 710 Що 8/2о пвспоапіз/999 | вло | вло |710 1010 1010|9710| 910 | ло |вмо 910 Що 1/2о
Примітка: Сполуки вводили один раз інтраназально за 24 години до інфікування; мишей інфікували інтраназальногоїу та періода спостереження уаз 21 днів.
Таблиця 25: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Виживання/всього мишей після вірусної інфекції та лікування сполукою один раз в різних дозуваннях та разів. Мишей інфікували інтраназально вірусом А/РК/8 (500 БУО/миша) та лікували інтраназально ілюстративними сполуками формули (1).
Таблиця 25:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей 0 ЇМО185 ЇМОЗ342 |МОЗ343 | МОЗ44 | МОЗ345 | МОЗ348 год. до інфікування до інфікування птшенене | 55 вві до інфікування поет |551 ері, 15 до інфікування до інфікування бо
Таблиця 25:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей 0 ЇМО185 ЇМОЗ342 |МОЗ343 | МОЗ44 | МОЗ345 | МОЗ348 до інфікування
Таблиця 26: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО 185 та Занамівіром при введенні після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/Саїтогпіа/04/2009 (НІ МІрат) у мишей.
Таблиця 26:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей (години)? смерті? -50
МО185 4ло вка
МО185 1.10 7,зкО,Б
МО185 оло 6,3ж0,9 6,750,7
Плацебо.// | (| 77717240 ШЕ 5,6х0,9
МО185 6,521,0
МО185 зло 7итх1,0
МО185 1.10 7,6х0,97 оло 6,60,8 (Плацебо/ | :Г//Ї 7777484 05 6,620,6 а По відношенню до дії вірусу. ьУ мишей, які померли протягом 21-денного періода спостереження. с Початкові розміри груп становили 10 мишей, яким давали лікарський засіб, та 15 мишей, яким давали плацебо. Чотири тварини було виключено, оскільки вони не демонстрували ніяких ознак інфекції (ніякої втрати маси). " Р«е0,05, и" Р«0,01, и рРе0, 001, в порівнянні з плацебо.
Таблиця 27: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МО317, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 48 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу 10. А/РРУ/В (НІМІ) у мишей.
Таблиця 27:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей с Час лікування Виживаності/ | Максимальна втрата маси у мишей полука мкг/миша а Ь години Всього
МО185 « 10 95 4/5; 12 95 1/5
МО317 « 10 95 2/5; 20 95 2/5
Занамівр./// | 40 | 48 | 05
Сольовий плацебо ж 051
МО185 «10 95 4/5; 17 95 1/5
МО317 х 10 95 3/5; 15 95 1/5; 20 95 1/5
Занамівр./ | 700.48 17777705 Її
Сольовий плацебо рон 6051 а По відношенню до дії вірусу. ; б Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 28: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МО345, МО348, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 48 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РЕ/В8 (НІТМ1) у мишей.
Таблиця 28:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Час лікування Виживаності/ Максимальна втрата маси у
Сполука мкг/миша 5 (години)? Всього мишей?
МО185 25 965 1/5; «10 96 1/5; «15 95 3/5
МОЗ45 510 95 4/5; «15 96 1/5
Моз 25 965 1/5; «15 95 3/5; «25 95 1/5
Занамівір. | (40 | (48 | 05 9
Сольовий а плацебо (ошно |О8|ро а По відношенню до дії вірусу; Б Протягом 21-денного періода спостереження; с Усереднений день смерті: 6,9 днів; 4 Усереднений день смерті: 6,6 днів
Таблиця 29: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МО348, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 48 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу
А/РР/В (НІМІ) (500БУО/миша) у мишей.
Таблиця 29:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей (години)а мишей
МО185 10 96 1/5; «15 95 1/5; 15 96 2/5
Моз 10 96 3/5; 15 95 1/5; 25 95 1/5
Занамівір. | (40 2 | 48 | 05 /
Сольовий плацебо (ошно |О8|05 1 а По відношенню до дії вірусу; 5 Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 30: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 60 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) (5Х00БУО/миша) у мишей.
Таблиця 30:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Сполука мкг/миша Час лікування Виживаності/Всього Максимальна втрата маси у (години)а мишей моі85 | (40 | 760 | 77777755 | 610 963/5; 12 965 1/5; 1595 1/5 мої85 | 200... | .ЮюЮюЮЙйв0 | 7.Юю7ь-о 55 (|«10962/5Б;12 96 2/5; 1595 1/5
Занамівр! ////200..ЙЮЙ | .ЮюЮюЮюД607777717171717171717114/56 777717 11096 1/5; 15 96 1/5; 220 96 2/5 (Плацебо |Сольовийрозчин|ї 60 17717105 1111 а По відношенню до дії вірусу; Б Протягом 21-денного періода спостереження; с Усереднений день смерті: 8 днів; 4 Усереднений день смерті: 6,6 днів
Таблиця 31: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МО317, МО345, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 60 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РЕ/В8 (НІ1ТМ1) (500БУО/миша) у мишей.
Таблиця 31:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей . Максимальна .
Час лікування . Усереднений
Сполука мкг/миша Виживаності/Всього|ї втрата маси у : (години)г мишей? день смерті морі85 | 40 | 60 | 25 | 20961/5;24951/5 мо317 | 40 | 60 | щ-(г5 | 20961/5;24951/5 моз45 | 40 1777760 | 777717115/5 18/21 гово | 60 | щ 056. 6ЮЩ | ( | ббднів
Занамівірї | 40 | 60 | 05 5 щ | | 5агднів
Сольовий . плацебо (ом | 60 | 051000 водно а По відношенню до дії вірусу; 5 Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 32: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 72 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РК/в (НІМІ) (Х00БУО/миша) у мишей.
Таблиця 32:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Сполука | мкг/миша Час лікування Виживаності/Всього Максимальна втрата Усереднений (години)а маси у мишей день смерті 5 У 1/5; «15 У61/5; . -10 95 1/5; «15 Фо 2/5; .
Занамівр | 40 | 72 | 05Б | | 58днів
Занамівр | 200... | "(72 | 05Б | | балднів
Сольовий . плацебо |на | 21051111 |ванв а По відношенню до дії вірусу; 5 Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 33: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МО345, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 72 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу
А/РР/В (НІМІ) (500БУО/миша) у мишей.
Таблиця 33:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей
Сполука мкг/миша Час лікування Виживаності/Всього Максимальна втрата Усереднений (години)а маси у мишей день смерті 20 дв 2/10; 15 Фо 1/10; .
МОтв5 бло 1295 2/10: 10/96 1/10| 725 ДНІВ 25 901/10; 18 Фо 1/10; .
Занамівр | 40 | 72 | 05 5 щЩ | | ббднів
Сольовий . планю ее | з |051 | вель а По відношенню до дії вірусу; 5 Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 34: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив внутрішньочеревного лікування одноразово МО185, МО317, Занамівіром або сольовим розчином за 1 год. перед летальним інфікуванням вірусом грипу А/РК/8 (НІ1М1) (5Б00БУО/миша) у мишей.
Таблиця 34:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Сполука мкг/миша Час лікування Виживаності/Всього Максимальна втрата маси у (години)? мишей?
МО185 15 95 3/5; 18 95 1/5; 20 95 1/5
МО317 15 96 3/5; 24 95 1/5
Занамівр.////177720 Її 11111711111б/є 11111111
Сольовий а планю (20010100 а По відношенню до дії вірусу; ?" Протягом 21-денного періода спостереження; - Усереднений день смерті: 7 днів; "У Усереднений день смерті: 7 днів
Таблиця 35: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив внутрішньочеревного лікування 20 мкг/миша/день х 5 днів МО185, МОЗ317,
Занамівіром або сольовим розчином через 4 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РК/8 (НІМІ) (5Х00БУО/миша) у мишей.
Таблиця 35:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Сполука мкг/миша/день х 5 Час лікування Виживаності/Всього Максимальна втрата (години)2 маси у мишей
МО185
Занамівр. | 20х5 | 4 щ | 056 | СС пеню денні. Го 1 а По відношенню до дії вірусу; " Протягом 21-денного періода спостереження; с Усереднений день смерті: 7,5 днів; 7 Усереднений день смерті: 7,5 днів.
Таблиця 36: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МО185, МОЗ317, Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 60 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу
А/РНА/В (НІМІ) (500БУО/миша) у мишей.
Таблиця 36:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей
Сполука мкг/миша Час лікування) Виживаності/ | Максимальна втрата | Усереднений
У (години) Всього маси у мишей? день смерті
МО185 740 1771160 17771155 лова; |2оовлв 11
МО317 740 17711760 17771155 лось; |24овгв111 2000 | 60 | --з5 | т15961/5|24962/5
Занамвір.ї | 40 | 60 | 05 | | | днів
Сольовий . роми МА | 6 |та а По відношенню до дії вірусу, ?е Протягом 21-денного періода спостереження
Таблиця 37: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив інтраназального лікування одноразово МОЗ345, МОЗ356, МОЗ357, МОЗ358, МОЗз359,
Занамівіром або сольовим розчином при введенні через 60 год. після інфікування на виживання при вірусній інфекції грипу А/РА/8 (НІТМ1) (500БУО/миша) у мишей
Таблиця 37:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп ммо у мишей
Час Максимальна втрата |Усереднений
Сполука мкг/миша | лікування І|Виживаності/Всього р» ред : (години)? маси у мишей день смерті моз45 | 40 | 60 | щ-(л5 (59615, | | днів -10 95 -15 95 25 96
Занамівір. | 40 | 60 | (05 | | | | бднів
Сольовий . роми МА | 6 | 0511 вв а По відношенню до дії вірусу" " Протягом 21-денного періода спостереження.
Таблиця 38: Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей
Вплив внутрішньочеревного лікування одноразово МО345, МО373, Занамівіром або сольовим розчином, за 1 год. перед летальним інфікуванням вірусом грипу А/РК/8 (НІМІ)
Таблиця 38:
Дані щодо ефективності ілюстративних сполук формули (І) іп мімо у мишей с Час лікування | Виживаності/ Я - Ь полука Махітит мишей втрати маси (години)а Всього
МОЗ345 10961/5 | 1295 1/5 | 18951/5 | 22 95 2/5
МО372 1095 1/5 | 12951/5 | 20951/5 | 23 95 2/5
Занамвір////| /-1 7770/6611 Ї11111111Ї1111117111
Сольовий 4 д/ва розчин а По відношенню до дії вірусу, ? Протягом 14-денного періода спостереження, г Усереднений день смерті 7 днів, "У Усереднений день смерті 5 днів
Таблиця 39: Протигрипозна вірусна активність в СРЕ аналізі для ілюстративних сполук формули (І) (ЕС50 нг/мл/нм)
Таблиця 39:
Протигрипозна вірусна активність в СРЕ аналізі для ілюстративних сполук формули (І) (ЕС5О нг/мл/нм) мО185 | МмОо356 | мМО357 | мМОЗ358 | мМО359 | мМО371 | мМОрог1 д/Буйпеу/2воюе |в дова Ото о 2т/0и39 омвоюта|та 0027/0217 вола 0,06/0,032 0,03/0,016 |0,04/0,021 |10,09/0,046 оовоогз па 00 |0,06/0,048 лі тожпеміе/ 74201 «0,0в/«00 0.03/0,01610,03/0,016 0.080015 зотоюоя ла 0 |оовююгя у евіввірріЮвіОт 0 ов/0,043 |0,06/0,032 0,06/0,032| ОІВ о ов/0,0350,06/0,048
А/Мів55іввіррі/03/01/ 0,133/0,0810,03/0,01510,06/0,027 |0,02/0,011 д/Репіп/261/2009 /0,09/0,048 повва о оовют Іс» 0,03/0,024
А/місюгіа/170/2012 |10,27/0,14510,27/0,145|1,20/0,647 0,27/0,157 |0,27/0,217
А/Зуйпеу/5/97 0,13/0,07010,06/0,03210,18/0,09710,09/0,04610,16/0,074|Іп/а. 10,27/0,217
В/ГомпвміПе/2/20111| 5,07/2,73 10,28/0,151| 2,5/1,348 | 2,5/1,28 | 2,5/1,158 2,5/2,01
Таблиця 40:
Протигрипозна вірусна активність в СРЕ аналізі для ілюстративних сполук формули (І) при різних вірусних титрах (ЕСво нг/мл/нМ) мМОр185 | мМОЗ356 | МО358 | МО359 |МО371| МО345 Мрог1
Пон 20.08/0,0160,03/0,0160,03/0,01 варот/о ові пля - Ю,08/0,0136 0,03/0,24 . Ніякого лтомозміе/74/2011. ввузБ | 08/0,43 | 48/24,7 | 66/30,5 66/38,6| 158/71,7 | інгібування (5х10-5/мл) при 197
Приклад 8: Токсикологія АОМЕ для ілюстративних сполук формули (І) (2211 Дві сполуки формули (І), МО185 та МО317, досліджували в ПЕКО ІС5О (ПЕКО-СНО, автоматизована фіксація потенціалу) аналізі Значення ІС5О МО 185 не можливо було обчислити. Крива концентрація-відповідь для МОЗ317 показала менше ніж 2595 ефекту в найвищій перевіреній досліджуваній концентрації, тобто ІС50 » 100 нм.
(222) Результати показали, що МО185 та МО317 були безпечними щодо кардіотоксичності.
Приклад 9: Профілювання сканування КІМОМЕ для ілюстративних сполук формули (І) (223) Дві сполуки формули (І), МО185 та МО317, досліджували відповідно до наступного протоколу для аналізів кіназ. (224| Для більшості аналізів, штами кіназа-міченого Т7 фагу вирощували в паралельних в 24-пункових блоках в господарі Е. соїї, отриманому з ВІ 21 штаму. Е. соїї вирощували до Іод- фази та інфікували Т7 фазою із замороженого стокового розчину (змінюваність інфекції - 0,4) та інкубували зі струшуванням при 32 "С до лізису (90-150 хвилин). Лізати центрифугували (6,000 х 9) та фільтрували (0,2 мкМ), щоб видалити клітинний дебріс. Залишкові кінази продукували в
НЕК-293 клітинах та потім мітили ДНК для детектування кількісної ПЛР. Оставлені кінази продукували в клітинах НЕК-293 і згодом позначали ДНК для виявлення кількісної ПЛР. Покриті стрептавідином магнітні кульки обробляли біотинільованими лігандами малої молекули протягом 30 хвилин при кімнатній температурі для одержання афінних смол для аналізів кіназ.
Лігандовані кульки блокували надмірним біотином та промивали блокуючим буфером (ЗеавВіоск (прокол), 1 95 В5А, 0,05 956 Тмееп20, 1 мМ ОТТ), щоб видалити незв'язаний ліганд та зменшити неспецифічне зв'язування фагу. Реакції зв'язування збирали шляхом комбінування кіназ, лігандовані кульки афінності та досліджувані сполуки в 1 х зв'язуючому буфері (20 95 5еавВіоск, 0,17 х РВ5, 0,0595 Тмееп20, 6 мМ ОТТ). Досліджувані сполуки отримували як 40х вихідні розчини в 10095 ДМСО та безпосередньо розбавляли в аналізі. Всі реакції проводили в поліпропіленових 384-лункових планшетах у кінцевому об'ємі 0,04 мл. Планшети для аналізу інкубували при кімнатній температурі зі струшуванням протягом 1 години та кульки афінності промивали буфером (1хРВ5, 0,05 95 Тмееп 20). Кульки потім повторно суспендували в буфері для елюювання (1хРВ5, 0,05 95 Тм'ееп 20, 0,5 мкМ небіотинільованого ліганду афінності) та інкубували при кімнатній температурі зі струшуванням протягом 30 хвилин. Концентрацію кінази в елюатах вимірювали, застосовуючи кількісну ПЛР. (225) Не існувало значної взаємодії між сполуками та кіназами при 100 нМ. Результати наведені в таблиці 41.
Таблиця 41:
Таблиця оцінки селективності азва сполуки . . . селективності | попадань |немутантних кіназ (НМ) селективності мо185 503353. | 0 | 2 ющ 395 2 Щ | 100 | 0 мо185 |5000 -/-/Д(/О | 0 | юки її мої85 |50) (Б ЇЇ 0 | щз95 | 100 | 0 мо317 58355 .| 0 | 2 ющ 395 2 Щ | 100 | 0 мо317 |500 77777770 | ююз952ЮЩ | 100 | 0 " мо317 |50) 77777770 | 395 2 Ю Щ | лоб | 0
Зо Отримання ілюстративних сполук за винаходом (226) Для зручності, багато хімічних фрагментів є представленими, використовуючи добре відомі скорочення, включаючи, але не обмежуючись цим, метил (Ме), етил (ЕЮ, н-пропіл (пРі), ізопропіл (іРг), н-бутил (пВи), трет-бутил (Ви), н-гексил (пНех), циклогексил (сНех), феніл (РІ), метокси (Мед), етокси (БЕ), триметилсиліл (ТМ5), трет-бутилоксикарбоніл (Вос) та ацетил (Ас). (227| Для зручності, багато хімічних сполук є представленими, використовуючи добре відомі скорочення, включаючи, але не обмежуючись цим, метанол (МеОнН), етанол (ЕН), діетиловий етер (ЕФО), етилацетат (ЕЮАс), триетиламін (ТЕА), дихлорметан (метиленхлорид, ДХМ,
СНесСіІг), трифлуороцтова кислота (ТФО), трифлуоретанол (ТЕЕ), диметилформамід (ДМФ), натрію сульфат (Ма2504), тетрагідрофуран (ТГФ), мета-хлорпероксибензойна кислота (пСРВА), гексаметилдисилазанова сіль натрію (мМанмо5), О-(7-азабензотриазол-1-іл)-М,
М,М',М'-тетраметилуронію гексафлуорфосфат (НАТІШ), О-(бензотриазол-1-іл)-М, | М,М'М'- біс(тетраметилен)ууронію гексафлуорфосфат (НВТИ), диметилсульфоксид (ДМСО), магнію сульфат (М9504), натрію гідрокарбонат (МансСоО»з), трет-бутанол (-ВИОН), 1-етил-3-(3- диметиламінопропіл)карбодіїміду гідрохлоридна сіль (ЕОСІ.НСІ), тетра-н-бутиламонію флуорид (ТВАБК), М, М-діізопропілетиламін (ДІПЕА), трет-бутилдиметилсиліл (ТВОМ5), 1- гідроксибензотриазол (НОВІ), транс-дихлорбіс(трифенілфосфін)паладію(!) (РасІг(РРИЗ)2), тетра(трифенілфосфін)паладію(0) (РД(РРАЗ)4), три(дибензиліденацетон) дипаладію(0)
(Раг(авра)З), три-ії-бутилфосфонію тетрафлуорборат (-ВиИЗРН.ВЕ4), 4,5-бісідифенілфосфіно)- 9,9-диметилксантен (Хапірпо5), трифенілфосфін (РРІЗ), діїзопропілазодикарбоксилат (ОІАВ), піридинію хлорхромат (РОСС), борана диметилсульфід (ВМ5), титану ізопропоксид (ТіоїіРга4), натрію триацетоксиборгідрид (Мавн(ОАс)З), натрію ціаноборгідрид (мМавнз(СМ)), натрію боргідрид (Мавна), амонію хлорид (МН4АСІ), хлороформ (СНСЇІЗ), марганцю діоксид (Мпог), калію карбонат (К2СО3), 1,2-дихлоретан (ДХЕ), натрію азид (Мам3), натрію нітрит (МамМмо2г) ди- трет-бутилдикарбонат (Вос20), та 5-ацетамідометил (Асіт). (228) Загальний синтез сполук формули (І) наведено на Схемі 1 нижче:
Схема 1: Загальний синтез сполук формули (І)
ВНЕНЯ УКХ похоомююЙ НЖВ КВ СКУ УЖ ее
МОВ хх Вацеаа БО.
ЗВОНКОВ ДЕУДИМУ пехеееюектютВ о ее нев кевва Хе УНН СЬО. неваееенка ВАСКО ВО ТВ комою ОМ, ВК ВУКЬчОх»
Тк МКУ СВІ СО ЕХ НО звису нОоМ МЕМ ВМО
ВЕЖ СВОИ, ен ен е:
ВНТ еВ УА Ь ОА кова сво
Приклад 10: Отримання М-Вос-1,9-діамінононану (229) 1,9-Діамінононан (1 г, 6,329 ммоль) розчиняли в суміші з 50 мл етанолу та 50 мл води, потім додавали ди-і-бутилдикарбонат (1,38 г, 6,329 ммоль) при к.т. Всю суміш перемішували при к.т. протягом 16 год., отримуючи білу суспензію. Дану суспензію фільтрували. Після висушування на повітрі тверда речовина представляла собою ди-Вос-1,9-діамінононан 488 мг (1,3бммоль, 21,53 95 вихід). Фільтрат екстрагували дихлорметаном (150 мл, 100 мл). Водний шар, який містить непрореагувавший 1,9-діамінононан (289 мг, 1,83 ммоль) може бути повернутий в цикл в наступну партію препарата. Органічні екстракти об'єднували та промивали 50 мл води, потім перемішували з 10 г безводного Ма2504 при к.т. протягом ночі. Органічну суспензію фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи М-Вос-1,9- діамінононан 809 мг (49,5 95вихід) у вигляді безбарвної твердої речовини. МС 295(М'Н1).
Приклад 11: Отримання анкерної сполуки 2п'
І230| Синтез детально представлений на Схемі 2 нижче. Наступні номери посилання на сполуки та посилання на стадію синтезу стосуються Схеми 2.
І231| Стадія А) Сіалову кислоту (1) (5 г, 16,18 ммоль) та смолу Юомжех 50 х 8(Няю) (ІО г) перемішували в безводному метанолі (400 мл) при 60-62"С протягом 48 год. Суміш фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (2) у вигляді білої твердої речовини 4,5 г (13,25 ммоль, 82,5 95 вихід). МС З38(М--1).
Зо (232) Стадія В) Сполука (2) (4 г, 11,87 ммоль) перемішували з оцтовим ангідридом (40 мл, а 1,08, ММ 102,29, 423 ммоль) та сульфатною кислотою (2 мл). Суміш потім перемішували при 32-35 "С протягом 72 год. на олійній бані. Реакційну суміш додавали по краплям до суміші, що перемішується, з Ма2гСОЗ (51 г) у воді (280 мл) та етилацетаті (14 мл) на крижаній бані. Потім, суміш перемішували протягом додаткових 1,5 год. на крижаній бані, потім екстрагували етилацетатом (400 мл, 270 мл). Етилацетатні екстракти об'єднували та промивали 10 95 розчином Мансоз (270 мл х 2), насиченим розчином Масі (270 мл х 2), сушили над безводним
Ма2504 протягом ночі. Фільтрували, фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (3) 4,78 г (11,57 ммоль, 97,5 95 вихід). МС 414(М--1). Олійний залишок перетворювався на майже білу тверду речовину після зберігання в ексикаторі над Р2О5 протягом З днів. (233) Стадія С) Сполуку (3) (3,47 г, 8,4 ммоль) розчиняли в трет-ВиОнН (25 мл). До даного розчину додавали азидотриметилсилан (1,81 мл, 13,63 ммоль). Всю суміш перемішували при 80-82 "С в атмосфері аргону протягом 24 год. Реакційну суміш розбавляли етилацетатом (100 мл), потім перемішували з 0,9 г МаМмо2 в 25 мл води, та регулювали до рН 2 5М НСІ протягом 1 год. при кімнатній температурі. Двофазну суміш розділяли, водний шар екстрагували етилацетатом (50 мл). Органічні екстракти об'єднували та промивали послідовно водою (25 мл х 2), 6 96 розчином Мансоз (25 мл), водою (25 мл х 3), потім сушили над Ма2504. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (4) 3,17 г (6,95 ммоль, 82,7 95 вихід) у вигляді олійної речовини. МС 457 (М--1), 479(М--Ма), 925(2М'-Ма). (234| Стадія 0) Сполуку (4) (3,15 г, 6,91 ммоль) розчиняли в метанолі (100 мл) та толуолі (70 мл). Розчин поміщали в вакуум, щоб видалити повітря (кисень), потім знову заповнювали аргоном. До даної суміші додавали Ра/С (10 95) (616 мг), потім поміщали в вакуум, щоб видалити аргон, який потім замінювали на водень (Н2г). Гідрогенування здійснювали при кімнатній температурі протягом 2 год., та каталізатор потім відфільтровували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (5) 2,82 г (6,55 ммоль, 94,7 9о вихід) у вигляді майже білої твердої речовини. МС 431 (М--1). (2351) Стадія Е) Сполуку (5) (2,80 г, 6,51 ммоль) розчиняли в безводному ацетонітрилі (15 мл). До даного розчину додавали М, М'-Ди-Вос-1Н-піразол-1-карбоксамідин |Біс(Вос)РСНІ (3,03 г, 9,76 ммоль). Всю суміш перемішували в атмосфері аргону при кімнатній температурі протягом 40 год. Реакційну суміш випаровували в вакуумі насухо. Залишок розчиняли в етилацетаті (4 мл), потім розбавляли гексаном (4 мл), застосовували флеш колоночну хроматографію, промивали гексаном (150 мл), потім розчинником (етилацетат:гексан 1:1) (150 мл), на завершення елюювали розчинником (етилацетат:гексан 1:1) Випаровування в вакуумі зібраних фракцій давало продукт - сполуку (6), 3,23 г (4,8 ммоль, 73,7 95 вихід) у вигляді білої твердої речовини. МС 673(М'1). (236) Стадія РЕ) Сполуку (б) (2,8715 г, 4,273 ммоль) розчиняли в безводному метанолі (22 мл). До даного розчину додавали МаОСНЗ (4,9134 мг, 0,2136 ммоль) в атмосфері аргону. Всю суміш перемішували в атмосфері аргону при к.т. протягом 2,5 год., потім регулювали до рн 6,5 смолою Юоуех50 х 8(Н»я), яку потім відфільтровували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполука (7) 2,2024 г (4,0337 ммоль, 94,4 95 вихід) у вигляді білої твердої речовини.
МС 547(М1). (237| Стадія с) Сполуку (7) (2 г, 3,66 ммоль) розчиняли в безводному ацетонітрилі. До даного розчину додавали 1,1"-карбонілдімідазол (714 мг, 4,403 ммоль). Всю суміш перемішували в атмосфері аргону при 20-30 "С протягом 18 год. Отримане випаровували в
Зо вакуумі насухо, потім залишок піддавали флеш колоночній хроматографії, спочатку промивали гексаном (150 мл), потім обробляли розчинником (етилацетат:гексан 2:1). Фракції зі значенням
КІ 0,5 (етилацетат:гексан 2:1) об'єднували та випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (8) 1,35 г (2,36 ммоль, 64,5 95 вихід) у вигляді білої твердої речовини. МС 573(М'-1). (2381 Стадія Н) Сполуку (8) (1,3 г, 2,27 ммоль) розчиняли в безводному піридині (12,5 мл). До даного розчину додавали п-нітрофеніл хлорформіат (503,3 мг, 2,497 ммоль), 4-диметиламіно- піридин (808,5 мг, 6,62 ммоль). Всю суміш перемішували при 30 "С в атмосфері аргону протягом 7 год. До даної реакційної суміші додавали розчин М-Вос-1,9-діамінононану (690 мг, 2,67 ммоль) та 4-диметиламінопіридину (166 мг, 1,36 ммоль) в безводному піридині (4 мл). Реакційну суміш перемішували в атмосфері аргону при 30 "С протягом 16 год., потім випаровували в вакуумі, щоб видалити піридин. Залишок розподіляли між етилацетатом (300 мл) та водою (50 мл), яка містить 2,45 мл 5М НОСІ, промивали послідовно водою (50 мл х 2), 2 96 розчином МаНСОЗ (50 мл х 6), водою (50 мл х 2), сушили над безводним Ма2504, та фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, отримуючи 2,25 г олійної речовини. Отриману речовину піддавали флеш колоночній хроматографії (етилацетат:гексан 1,5:1 як елюєнт). Фракції (зі значенням КІ 0,27
ТШХ, етилацетат:гексан 1,5:1 як проявляючий розчинник) об'єднували та випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (9) 1,057 г (1,234 ммоль, 54,4 95 вихід) у вигляді білої твердої речовини. МС 857(Ма1), 879(Ма-Ма). 1ЛН-ЯМР (ДМСО-аб) б(м.ч.) 11,42 (1Н, с, гуанідин
МНВОс), 8,25 (1Н, д, МН-4), 7,95 (1Н, д, АСМН), 7,16 (1Н, т, ОСОМН), 6,75 (1Н, т, ноніл МНВОс), 5,80 (ІН, с, Н-3), 4,92 (2Н, м, Н-7, Н-8), 4,75 (1Н, м, Н-4), 4,31-4,62 (4Н, м, Н-5, Н-6, Н-9, Н-9), 3,74 (ЗН, с, СООСНУЗ), 2,90 (4Н, м, МНСНІ(СН2г)7СНаМН), 1,86 (ЗН, с, МНСОСНУЗ), 1,49 (9Н, с,
Вос), 1,38 (18Н, с, Вос), 1,2-1,6 (14Н, м, МНСН2(СН2г)7СНнаМнН).
І239| Стадія І) Сполуку (9) (1 г, 1,168 ммоль) розчиняли в суміші з трифлуороцтової кислоти (ТФО) (36 мл) та метилфенілового етеру (анізол) (3,9 мл) в дихлорметані (СН2СІ2) (36 мл). Всю суміш перемішували при 25 "С протягом 2 год. та 40 хв., потім її випаровували в вакуумі при 35"С протягом 2 год. Залишок перемішували в гексані (100 мл) при к.т. протягом ночі, гексан декантували, та додавали свіжий гексан (60 мл), та перемішування продовжували протягом 4 год. при к.т. Гексан потім видаляли. Залишок розчиняли в СН2СІ2 (10 мл) та випаровували насухо при 35-40"С. Залишок розчиняли у воді (25 мл). Водний розчин сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (10) 1,026 г (1,143 ммоль, 97,8 95 вихід) у вигляді білої піни 60 ТФОЗ2п, сіль. МО 557 (Ман1) ММ 2п, - 556, ТФОЗ2п, - 8981.
Схема 2: Отримання анкеруючої сполуки 7п' дантеї, яд, ха ве ні он ше: Ши ч ресор вені ПТ вади пекюсокотоссоєосе ще во її вом дня й снах ак й сн нн а їв яко" пером, не ча Еш ж зав ній мб пеня
ЕОУ зве В сок ве Бай брюрюют ше шк иа: НН М ща
ЗАВ яке пе ша т пеню х. а сети очне ооо, звавь Вч рев ев ще її ж девряннияя НИ У важ зтяку реве на ее од Янв
Приклад 12: Отримання анкерних-скелетних сполук РУК(2 т )2 (240) Синтез детально представлений на Схемі З нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 3.
І2А1| До розчину піромелітового діангідриду (11) (27,25 мг, 0,125 ммоль) в безводному ДМФ (2мл) додавали 2п, (10) (224,5 мг, 0,25ммоль) та діїзопропілетиламін (ДІПЕА) (130,64 мкл, 0,75 ммоль) при кімнатній температурі. Всій реакційній суміші давали перемішуватись в атмосфері аргону при 25 С протягом 36 год., потім обробляли сумішшю етеру: петролейного етеру 1:1 (100 мл). Осад фільтрували, промивали етером, та сушили на повітрі, отримуючи майже білу тверду речовину (197 мг), які потім піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
Аналітична ВЕРХ: рері градієнт (242) Колонка: колонка Сетіпі С18 100А 5 мкм 150 х 3,00 мм. Довжина хвилі: 220/280 нм.
Швидкість потоку: 0,7 мл/хв. Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота. Розчинник В-100 95
Ацетонітрил. Температура: 30 "С. Градієнт: 0-50 908, 15 хвилин. Час утримання: РКІРУК(2п, )2 (12) при 14,35 хвилин, РК2РУК(2П, )2 (13) при 14,53 хвилин.
Препаративна ВЕРХ: (243) Колонка: Умаїег Хіегга С18 преп. М5 колонка 19 х 50 мм, 5 мкм. Довжина хвилі: 220/280 нм. Швидкість потоку; 8 мл/хв. Розчинник А-0,1 95 Трифлуороцтова кислота. Розчинника
В-100 96 Ацетонітрил. Температура: 30 "С. Градієнт: 10-100 908, 80 хвилин. Чисті фракції
РКІРУК(2П, )2 та РКОРУК(АП, )2 (13) збирали та сушили при заморожуванні окремо, отримуючи
РКІРУК(АП, )2 (12) 49 мг, та РКОРУК(2П, )2 (13) 42 мг, відповідно. (244| РКІРУК(Яп, )2 (12) МС показала ЕСІ ме 10М 1331,5 іон. /ІН-ЯМР (0209) б (м.ч.): 8,00 (2Н, с, ароматичний пара Н х 2), 6,00 (2Н, д, Н-3 х 2), 5,20-5,50 (АН, м, Н-7 х 2, Н-8 х 2), 4,35- 4,90 (8Н, м, Н-4 х 2, Н-5 х 2, Н-6 х 2, Н-9 х 2), 4,15 (2Н, дд, Н-9' х 2), 3,80 (6Н, с, СООСНЗ х 2),
3,25-3,45 (АН, м, ОСОМНСНАІ х 2), 2,90-3,20 (4Н, м, МНСНАО х 2), 1,95 (6Н, с, СНЗСО х 2), 1,20- 1,70 (28Н, м, (СН2)7 х 2). (245) РК2РУВ(7п, )2 (13) МС показала ЕСІ яме 10М 1331,5 іон. "ІН-ЯМР (0209) б (м.ч.) 8,35 (ІН, с, ароматичний Н х 1), 7,50 (1Н, с, ароматичний Н х 1), 6,00 (2Н, д, Н-3 х 2), 5,20-5,50 (4Н,
М, Н-7 х 2, Н-8 х 2), 4,35-4,90 (8Н, м, Н-4 х 2, Н-5 х 2, Н-6 х 2, Н-9 х 2), 4,15 (2Н, дд, Н-9' х г), 3,80 (6Н, с, СООСНЗ х 2),3,25-3,45 (АН, м, ОСОМНОСНАІО х 2), 2,90-3,20 (4Н, м, МНСНАІО х 2), 1,95 (6Н, СНЗСО х 2), 1,20-1,70 (28Н, м, (СН2)7 х 2).
Схема 3: Отримання анкерних-скелетних сполук РУК(А т )2
ОСОМН(СН МН, о "А 7
О г
А ( СОС 0 о ї Й | зтФо
З МН У, 0 МН 0 і /- 1) Мне
РУМО), (0) др ? о
НО к | й а гі и | т гі х ОН ючи ОН 09 бо (2) (13) (о РК РУК ап» РКО РУВ(Я пі»
Приклад 13: Отримання кислотної/аніонної групи О-АЗр(МНнОН»ЗОзН)»
І246|Ї Синтез детально представлений на Схемі 4 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 4. (247| Вос-О-Аспарагінову кислоту (14) (233 мг, 1 ммоль) та НВТИ Г(О-(бензотриазол-1-іл)-М,
М,М',М'-біс(тетраметилен)уронію гексафлуорфосфаті| (758 мг, 2 ммоль) розчиняли в ДМФ (10 мл). До даного розчину додавали ДІПЕА (діїзопропілетиламін) (349мкл, 2 ммоль). Розчин перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім об'єднували з розчином натрію амінометансульфонату (332 мг, 2,5 ммоль) в ДМФ (3 мл). Отриманому в результаті розчину давали перемішуватись при кімнатній температурі протягом ночі. Реакційну суміш випаровували в вакуумі, отримуючи світло-оранжеву тверду речовину. Отриману речовину розчиняли у воді (20 мл), промивали етилацетатом (20 мл х 3), водну фазу випаровували в вакуумі, щоб видалити органічний розчинник, потім сушили при заморожуванні, отримуючи сирий продукт (15) 310 мг у вигляді білої твердої речовини, яку піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
Аналітична ВЕРХ: рері градієнт
І248| Колонка: колонка Сетіпі С18 Т00А 5 мкм 150 х 30 хв. Довжина хвилі: 220 нм.
Швидкість потоку: 0,7 мл/хв. Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота. Розчинник В-100 95
Ацетонітрил. Температура: 30 "С. Градієнт: 0-50 908, 15 хвилин. Час утримання: Сполука (15) як вільна кислота на 4,669 хвилині МС ЕСІ -ме 418(М-1), пік розчинника на 1,658 хвилині, амінометансульфонова кислота на 2,722 хвилині, НВТИи речовина на 5,520 хвилині, моно Вос-О-
Авр-МНОН2БОЗН на 5,802 хвилині.
Препаративна ВЕРХ
І249| Колонка: колонка Септіпі АХІА С18, 5 мкм 50х21,2 мм Довжина хвилі: 220 хв.
Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил; Температура: 30 "С. Градієнт: 0-100 998, 100 хвилин.
І250| Фракція, яка містить (15) збирали та об'єднували разом, потім сушили при заморожуванні, отримуючи чистий продукт (15), як вільну кислоту. МС ЕСІ -ме 418(М-1). Сполуку (15), як вільну кислоту (200 мг, 0,477 ммоль) розчиняли в трифлуороцтовій кислоті (10 мл), яка містить анізол (1 мл). Розчин перемішували при кімнатній температурі протягом однієї години, потім випаровували в вакуумі насухо. Залишок розтирали в етері (20 мл х 2) та фільтрували.
Тверду речовину сушили на повітрі, потім знову розчиняли у воді, сушили при заморожуванні отримуючи продукт (16) 106 мг у вигляді білої твердої речовини. МС ЕСІ -ме 318(М-1). Продукт розчиняли у воді (10 мл), потім нейтралізують двома еквівалентами натрію гідроксиду, сушили при заморожуванні, отримуючи динатрієву сіль (16) у вигляді білої твердої речовини.
Схема 4: Отримання кислотної/аніонної групи О-Ахр(ІМНОНегБОзН)»2
ММВоє (З МИВос ОО с ра А німесн,ЗО,Ма Ок под тя - "он панно тяж Її
МН он | їз
Ї" зома (п вома (15)
Мне о
ВИ нн пт й їн
Ї" щі вон (16) р-Авр(МНСНВСЬНІ),
Приклад 14: Отримання сполуки МО185, РК2РУК(2и)2(0О-Азр)(МНОНг5Оз)2|2
І251| Синтез детально представлений на Схемі 5 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 5. (2521) До розчину РКОРУК(2П, )2 (13) (30 мг, 22,56 мкмоль) в сухому ДМФ (5 мл) додавали
НАТО (10-(7-азабензотриазол-1-іл)-М, М,М';М'-біс(тетраметилен)уронію гексафлуорфосфаті (17,14 мг, 45,11 мкмоль) та ДІПЕА (7,9 мкл, 45,31 мкмоль). Отриманий в результаті розчин перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали динатрієву сіль (16) (О-АЗр(МНСН2ЗОЗМа) гі (33 мг, 91,16 мкмоль) в ДМФ (5мл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 18 год., потім піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
Аналітична ВЕРХ: рер 1 градієнт (253) Колонка: колонка Сетіпі С18 100А 5 мкм 150 х 3,00 мм; Довжина хвилі: 220/280 нм;
Швидкість потоку: 0,7 мл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил; Температура: 30 "С; Градієнт: 0-50 958, 15 хвилин; Час утримання: продукт (17) як вільна кислота на 14,270 хвилині. МС ЕСІ нме-3зЗ0М 967,5, МС ЕСІ -ме, -25м 965,4. Інші піки були
Зо наступними: вихідний матеріал РК2РУК(2п, ) (13) на 11,7 хвилині, РК2РУК(2п, )2-0-
Азр(МНнНСН2ЗОоЗН)2 на 13,6 хвилині.
Препаративна ВЕРХ (254) Колонка: Умаїег Хіеїта преп. МС С18 колонка 19 х 50 мм 5 мкм; Довжина хвилі: 220/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,195 Трифлуороцтова кислота; Розчинник
В-100 Фо Ацетонітрил; Температура: 30 "С; Градієнт: 0-100 95 В 100 хвилин.
Продукт елююється в оберненому профілі до аналітичного Сетіпі. Профіль єлюювання 25- 3595 Ацетонітрил. Відбирали проби фракцій, та пробірки з більше, ніж 90 95 чистотою об'єднували, та інший матеріал відокремлювали на колонці сетіпі АХІА.
Продукт (17) сушили при заморожуванні, отримуючи білий пухнастий порошок. МС ЕСІ -ме-
25м 965,4, показала ММ 1932. Сполуку (17) РК2 РУК(А» )2(0-Азр(МНОНгЗОзН)гІ» (8 мг, 4,14 мкмоль) розчиняли в 50 95 метанольному водному розчині (2 мл), потім додавали триетиламін (40мкл, 287,5 мкмоль). Отриманий в результаті розчин перемішували при кімнатній температурі.
Реакцію відслідковували, застосовуючи аналітичну ВЕРХ за піком на 10,848 хвилині. Через 2 год., реакційну суміш підкислювали оцтовою кислотою (60 мкл, 1049 мкмоль) та розбавляли до мл водою. Розчин чистили на колонці Кіпеїех. Чисті фракції об'єднували та сушили при заморожуванні, отримуючи продукт (183 РК2 РМА(2)2І0-Азр(МНОН»БОзН)г|. 6 мг у вигляді білого порошку.
ВЕРХ час утримання 10,695 хв. МС ЕСІ -ме-ЗОМ 925,6. 10 Для того, щоб видалити залишок ТФО в сполуці, чистий матеріал розчиняли в 60 мл 4 мМ
НСІ та сушили при заморожуванні, потім розчиняли в 60 мл 1 мМ НСІ та сушили при заморожуванні, на завершення сушили при заморожуванні з 60 мл води. Вихід 5,6 мг (18)
МО185 ММ1852.
Схема 5: Отримання сполуки МО185, РК2РУН(Я)2(0-Азр)(МНОНг5О)2|» я АЖ ї - Оу ; часно ме т, С ці й Ж 2 Ат д- Ммнсндоума -тр а ї те й а
З т (133 (18) як ди Ма сіль а Ф о ? масувсньнні-Яоо нях ох Ї мн сл сСюнвсу птн месьвононн ОХ 2 мнендоума і у ат
З Ф З о новснан-Я оц й п Ї меня дит мновьвсьн пт новснян- " СУ днонвсн
Оті о а а8) осамн--(сна)вмчна рсочн -(СА2)внн, , 1 » о до ер реоосна у пер просо ще АЕМНЯ ни мн а дн Ме МН чно чна
Приклад 15: Отримання анкерної сполуки о (255) Синтез детально представлений на Схемі 6 нижче. Наступні номера посилання на сполуку та посилання на стадію синтеза стосуються Схеми 6. (256) Відповідно до процедури (Н) та (І), описаної в прикладі 11, взаємодія сполуки (8) з п- нітрофенілхлорформіатом, потім М-Вос-1,8-діамінооктаном, після хроматографії, отримували сполуку (19) у вигляді білої твердої речовини. МС 843 (Ма-1). Сполуку (19) отримували з трифлуороцтовою кислотою (ТФО), після обробки, отримуючи сполука (20) 720, у вигляді білої піни ТФОЗ320О, сіль МС 543 (Ма-1) |ММ ої 20, - 542, ТФОЗ370, - 884).
Схема 6: Отримання анкерної сполуки 7о"
он оСОМН(СНу МН - о о Фе о б сооснь г | соОсн»
Її | й
АеМИ ; сення « Я Ж АСМН т мн НКСН, МВС їн риемвос ут воє
МнВос МН Вос (19) (8)
ОСОМН(СН) МН - о (о вд сООснв пт й ОЇ ЗтФо
АеМН т о
МН
(20) 29
Приклад 16: Отримання анкерних-скелетних сполук РК1 ТСА(2о)2 та РК2 ТСА(7о)2
І257| Синтез детально представлений на Схемі 7 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 7. (2581) До розчину ТСА (21) (3,085 мг, 17,52 мкмоль) в ДМФ (309 мкл) додавали НАТИ (13,32 мг, 35,03 мкмоль) та ДІПЕА (6,5 мкл, 37,32 мкмоль). Всю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали по краплям розчин 7270", (20) (30,97 мг, 35,03 мкмоль) та ДІПЕА (18,44 мкл, 105,9 мкмоль) в ДМФ (600 мкл). Реакційній суміші давали перемішуватись протягом ночі при кімнатній температурі. Отриману в результаті суміш піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
Аналітична ВЕРХ: рері градієнт
І259| Колонка: Рпиєпотепех С18 5 мкл 110А 150 х З мм Довжина хвилі: 220/280 нм;
Швидкість потоку: 0,7мл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил; Температура: 30 С; Градієнт: 100-50958 15 хвилин, Час утримання: РК!1
ТОА(70732 (22) 11,100 хв. та РК2 ТСА(70732 (23) 11,156 хв. (260 РКІ ТСА(7207)2 (22) 1Н-ЯМР (020) б м.ч. при 2,5 м.ч. (АВ симетричний дд, 4Н,
Санг-СЬнНЗ) показав її симетричну структуру. МС 1225,4 (ММ 1224). (261| РК2 ТСА(7207)2 (23) 1ІН-ЯМР (020) б м.ч. при 2,35-2,75 м.ч. (асиметричний, дд, 4Н, (Сан2г 7СрБнНаг) показав її асиметричну структуру. МС 12254 (ММ 1224).
Препаративна ВЕРХ (262) Розчин підкислювали невеликою кількістю 1М оцтової кислоти та розбавляли до 25 мл водою. Отримане фільтрували через 0,45 мкм шприцевий фільтр та прокачували насосом через колонку УМаїег Хіегга преп. МС С18 19 х 50 мм з від 20 95 до 80 95 буфером А. Швидкість потоку 8 мл/хв, градієнт 0-100 9568 100 хвилин, довжина хвилі 210/280 нм. Профіль єлюювання
Порожній ДМФ/ДІПЕА/НАТО (2г63| РК! ТСА(72072 та РК2 ТСА(20")2 додатково чистили та розділяли на колонці
Рпепотепех Сетіпі 5 мкм С18 110А Ахіа 50 х 21,2 мм в 0,1 95 ТФО буфері. (264) Співвідношення РК1/РК2 становить приблизно 1:2, обидва МС ЕСІ «ЗОМ 1225 4.
Схема 7: Отримання анкерних-скелетних сполук РК1І ТСА(270)2 та РК2 ТСА(7о)2 о-с-он осоМмн(сНо мн» ой о ої соосн, -к Ху -3ТФО) я АСМН т
О-с с-о мно
Ін он КТ
МН
(21) (20)
Трикарбаллілова кислота (ТСА) 7
У о-с-ОоН О-с-7о ----ннннннннн з 4 о що о-с с-о 2о то Е. он (223 (23)
РК ТСА(20 РК? ТСА(2оУ
Приклад 17: Отримання'кислотної/аніонної групи (О-Суа-5ОзЗНІ; ОН
І265| Синтез детально представлений на Схемі 8 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 8. (266) Як детально описано на Схемі 8, застосовували твердофазний синтез, щоб отримати
ІО-Суз-5НІ7-ОН (33), з наступним окисненням поліцистеїну (33), отримуючи (О-СуабзОЗНІ7-ОН (34). (267| ЕГтос-О-Сув(Тпи)-ОН (24) (2,93 г, зммоль) розчиняли в сухому дихлорметані (ДХМ) (35 мл) в 50 мл пробірці РаїЇсоп, потім додавали 2-хлортритилхлоридну смолу (25) (5 г), інтенсивно струшували, додавали діїзопропілетиламін (ДІПЕА) (3,5 мл, 20 ммоль). Через 5 хв., додавали іншу частину ДІПЕА (1,3 мл, 7,5ммоль). Всю суміш струшували протягом додаткових 4 год. Для того, щоб дезактивувати будь-який залишковий реакційноздатний 2-хлортритилхлорид, додавали метанол (4 мл). Суміш струшували протягом додаткових 30 хвилин. Смолу промивали послідовно ДМФ (20 мл х 3), ДХМ (20 мл х 3), метанолом (20 мл х 3), потім сушили в вакуумі протягом ночі. Вихід показав навантаження 0,57 мМ/г (26). (268) Для видалення Ріптос-групи зі смолу, смола (26) попередньо набухала в ДХМ (35 мл), потім додавали 50 95 піперидин в ДМФ (30 мл). Всю суміш поміщали на ротатор протягом 30 хв.
Це повторювали зі свіжим розчином 50 95 піперидину в ДМФ (30 мл) протягом 60 хв. Смолу потім промивали послідовно ДМФ (20 мл х 2), ДХМ (20 мл х 2), ДМФ (20 мл х 3). Присутнім був позитивний тест на нінгідрин. Смолу (27) готували для сполучення. (269) До розчину Етос-О-Сувз(Тпи)-ОН (24) (1758 мг, З ммоль) в ДМФ (6 мл) додавали НВТИ
ІО-(бензотриазол-1-іл)-М, М,М'М'-біс(тетраметилен)уронію гексафлуорфосфат| (1140 мг, З ммоль) та ДІПЕА (523 мкл, З ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали смолу (27) (2,5 г, 0,57 мМ/г, 1,5 ммоль). Реакційній суміші давали перемішуватись протягом 24 год. Негативний тест на нінгідрин, смолу промивали ДМФ (20 мл х 3), потім обробляли 5 95 оцтовим ангідридом, 1 96ДІПЕА в ДМФ (20 мл) протягом 30 хвилин.
Смолу (28) потім промивали ДМФ (20 мл х 3), ДХМ (20 мл х 3), метанолом (20 мл х 3). Смолу (28) попередньо набухала в ДХМ, та додавали 30 95 піперидин/М-метилпіролідон в ДМФ (20 мл).
Зо Всю суміш поміщали на ротатор на 30 хвилин, потім свіжий розчин 30 906 піперидину та М- метилпіролідону протягом додаткових 60 хвилин, після промивання ДМФ (20 мл х 2), ДХМ (20 мл х 2), ДМФ (20 мл х 2), отримуючи смолу (29). (279) Смолу (29) додатково сполучали протягом 24 год. (24) (1758 мг, З ммоль) в ДМФ (6 мл), попередньо активовану протягом 10 хвилин НВТИ (1140 мг, З ммоль) та ДІПЕА (52Змкл,
Зммоль), після обробки, отримуючи смолу (30). Половину якої потім піддавали наступним процедурам: зняття захисту, використовуючи піперидин/метилпіролідон, повторно сполучали з (24) попередньо активованим НВТИШ/ДІПЕА, для того, щоб повторити дану процедуру 4 рази, отримуючи смолу (31). (271| Смолу (31) промивали ДХМ (20 мл х 5), потім поміщали в 50 мл пробірку Раїсоп, додавали 4095 оцтову кислоту в ДХМ (35 мл), на ротатор при кімнатній температурі, струшували протягом 6 год. Суспензію смоли фільтрували, фільтрат випаровували в вакуумі до світло-жовтої піни. Залишок промивали водою (100 мл х 3), після висушування отримували білу тверду речовину (32) (О-Суз(Тип))7-ОН. (2721 (32) перемішували в розчині ТФО (20 мл), триізопропілсилану (1 мл) та води (0,5 мл) протягом З год. Отриману в результаті суспензія фільтрували. Фільтрат випаровували до олійної речовини, яку потім розтирали з етером (20 мл х 4), отримували білу тверду речовину.
Перемішували в 50 95 ацетонітрильному водному розчині (100 мл). Матеріал обробляли ультразвуком для утворення білої суспензії, яку сушили при заморожуванні, отримуючи сирий продукт (33) (О-Сувз-5НІ7-ОН (380 мг).
Аналітична ВЕРХ (273| Колонка: Рпиєпотепех Сетіпі 5 мкМ С18 110А 150 х 3,00 мм Розчинник А-0,1 95
Трифлуороцтова кислота, Розчинник В-100 95 Ацетонітрил, Швидкість потоку: 0,7 мл/хв.,
Довжина хвилі: 210/280 нм, Температура: 30 "С, Градієнт: 0-50 95 В 15 хвилин, Час утримання: 9,356 хвилин. (274) МС конус к25М Основний пік 740 конус -25М Основний пік 738 показав ММ (33), який становив 739 (О-Субз-5НІ/7-ОН (275) Сполуку (33) (10 мг, 13,53 мкмоль) додавали до розчину надмурашиної кислоти (І мл), попередньо охолодженого на бані крига-сіль. Всю суміш перемішували на крижаній бані протягом 1 год., потім розбавляли 100 мл холодної води, сушили при заморожуванні, отримуючи світло-жовту піну (34). Даний матеріал чистили на колонці Рпепотепех Кіпеїех 5 мкм ХВ-С18 100А, використовуючи ізократичний 0,1 95 ТФО як елюєнт, отримуючи сполуку (34)
ГІО-Сузі-5БОЗНІ7-ОН ММ 1075, МС конус ї50М 1076 (М'1) у вигляді безбарвного порошку.:
І276Ї Надмурашину кислоту отримували шляхом змішування мурашиної кислоти (8,74 мл), води (0,9бмл) та 30 95 гідрогенпероксиду (1 мл), та дозволяючи суміші постояти при кімнатній
Зо температурі протягом 30 хвилин в закритій колбі. Даний пероксид повинен бути свіже приготовленим перед застосуванням.
Схема 8: Отримання кислотної/аніонної групи (О-Суві-503НІ? ОН їж яка дах
Во ВК сднннен о хання а -- у Же дм зе Ежен а
Зецвкех бах фак коня
Дюна 5 - Ні ще Ще Ум ная ож тв песто ооо г що все камеиех Вер уь ве З
Віче в що б КВ дю тон
Хо ВВЕ 0 сек 0одожу заяв че ее код ш ех т А. нен ї | Біснекеця ца : люеюван я они ВУХ у І ная я конічния
А ї-
І дк ВтИ
Зоря ВХ бр чт їх дере денне нена. 9
Мак ДИ о ми
МК ТК Сх дня муку | Вер кон ОК і їх по покаеОЯ ния
Приклад 18: Отримання сполуки МО345, РК2 ТСА(20)2-ІЮ-Суві-5ОзНІ;-ОН
І277| Синтез детально представлений на Схемі 9 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 9. (278| До розчину ої РК2 ТСА(20732 (23) (4 мг, 3,268 мкмоль) в безводному ДМФ (2 мл) додавали НАТИ (1,242 мг, 3,268 мкмоль) та 2 95 ДІПЕА в ДМФ (30 мкл, 3,44 мкмоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім об'єднували з розчином (34), (О-СувІ-5ОЗНІ7-ОН (7,03 мг, 6,54 мкмоль) та ДІПЕА (9,11 мкл, 52,32 мкмоль), в ДМФ (З мл).
Всю реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Суміш розбавляли до 15 мл водою/метанолом 1/1, потім піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
Препаративна ВЕРХ:
І(279| Колонка: Рпепотепех Кіпеїех 5 мкм ХВ-С18 50 х 21,2 мм; Довжина хвилі: 220/280 нм;
Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота (ТФО); Розчинник
В-100 95 Ацетонітрил; Температура: 30 "С; Градієнт: 0-100 95 В, 80 хвилин. Фракції, які містять (35) вільну кислоту (В-Н) об'єднували та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (35) як вільну кислоту (В-Н) 4 мг у вигляді білого порошку. МС ЕСІ яме конус З5М 11421 2 ж іон. (289) Сполуку (35) як вільну кислоту (В-Н), РК2 ТСА(207)2-(0-Суві-БОЗНІ7-ОН (4 мг, 1,754 мкмоль) розчиняли в 50 96 метанольному водному розчині (800 мкл), який містить триетиламін (ТЕА) (20 мкл, 146 мкмоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі, відслідковували за
ВЕРХ. Обробляли через З год. Розчин чистили на колонці Кіпеїех. Чисті фракції з час утримання 11,254 хв. об'єднували та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (36) 2 мг у вигляді білого порошку. МС ЕСІ «ме конус 40М 1102,2 2 я іон. (281) Для того, щоб видалити залишок ТФО зі сполуки, сполуку (36) розчиняли в 4 мМ НеС1 (ЗОмл) та сушили при заморожуванні. Потім розчиняли в 1 мМ НСІ (30 мл) та сушили при заморожуванні. На завершення сушили при заморожуванні з води (30 мл), отримуючи продукт (36) 1,1 мг, МО345 РК2 ТСА(20)2І1О-Суві-5БОЗНІ7-ОН ММ2201 МС 2202 (М'1)|.
Схема 9: Отримання сполуки МОЗ345, РК2 ТСА(20)2-ІО-Суві-503НІ;-ОН ММ2201 ет с
Го Ше НЕТШЛІЗЕА па-сувьвоськисив їх с Ферет тнинт тв ше ин т- г х. ах (23) Ст тн
С їе -в пог. дин дну вима сему ко є ск «343
Взоснова, ДЕД псих ке г ! себ суе цу оо сис ї у то за ство ск Ше битттнт та т бе п (Й е В свою они шен) Гробу щ т т - т МК ня щ ниж п р д-ви нн ся тери тки дих 1 (За су тд пат ТО стухх «Еаців р и В вк толь ТМ ссМВе ВОАС сс МЕС, жен. з син ск ія дух, ни спон вка -ї т о Стр єОєт ее с Ї ВІ 7 з . на ії НВ
Шірх ЕМ ит Єр кор с тт
Кл бус скечн на мне
Приклад 19: Отримання анкерної сполуки 7" (282) Синтез детально представлений на Схемі 10 нижче. Наступні номера посилання на 5 сполуку та посилання на стадію синтеза стосуються Схеми 10.
І283| Відповідно до процедури (Н) та (І), описаної в прикладі 11, реакція сполуки (8) з п- нітрофенілхлорформіатом, потім М-Вос-1,6-діаміногексаном, після хроматографії давала сполуку (37) у вигляді білої твердої речовини, МС 815 (Ма-1). Сполуку (37) отримували з трифлуороцтовою кислотою (ТФО) та анізолом, після обробки, отримуючи сполуку (38) 2" у вигляді білої форми ТФО солі. МС 515 (Мн). (ММ 2" - 514, ТФОЗ32" - 8561.
Схема 10: Отримання анкерної сполуки 7"
ОН р чсніутви ; 0 о о
Об ; соОсн і СоОсН 0 3 й з ю и деМН я вонн :
Мн НАС) НВО МН се КВОс дееМво / ів
МНВос МНВос (7) (8) оСОМН(СН,) МН () 07 /0 б СООсн " й | зтФо
АСМИ т
З
МН
/к
Мне (38) 2
Приклад 20: Отримання анкерної скелетної сполуки СНТСА(2")2
І284| Синтез детально представлений на Схемі 11 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 11.
І285) До розчину СНТСА(З9) (4,4 мг, 20 мкмоль) в ДМФ (300 мкл) додавали НАТИ (15,2 мг, 40 мкмоль) та ДІПЕА (7,4 мкл, 42,4 мкмоль). Всю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали по краплям розчин 2" (38) (34,24 мг, 40 мкмоль) та ДІПЕА (21,06 мкл, 120,9 мкмоль) в ДМФ (700 мкл). Реакційній суміші давали перемішуватись протягом ночі при кімнатній температурі. Отриману в результаті суміш розбавляли 1М НАс (50 мкл) та водою (25 мл). Отримане фільтрували через 0,45 мкм шприцевий фільтр. Фільтрат піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ.
І286) Колонка: колонка Умаїег Хієта преп. МС С18 19 х 50 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм;
Швидкість потоку: 8мл/хв., Розчинник А-0,195 ТФО Розчинник В-100 95 Ацетонітрил;
Температура: 30 "С; Градієнт: 0-10095 В 100 хвилин; Профіль єлюювання Порожній
ДМФ/ДІПЕА/НАТИ.
І287| Фракції, які містять сполука (40) додатково чистили на колонці Рпиепотепех Септіпі 5
МКМ С18 110А АХІА 50 х 21,2 мм в 0,1 957ФО буфері. Фракцію сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (40) СНТСА(2")2, 15 мг у вигляді білої піни. МС ЕСІ жме, «ЗОм, 1209 показав
ММ 1208.
Схема 11: Отримання анкерної скелетної сполуки СНТСА(2")2
ОСОМНІСН МН л й б СоОст, ля і У
АН,
МН
НООс СООН зе
МН» (35)
Цис-1,3,5- 5 ! (нт циклогексантрикарбонова кислота (38) 7
СОН преп пт лотки жютантктечн Де
З д й а / ї 7 (40)
СНТОА,
Приклад 20: Отримання анкерної сполуки 56
І288)| Синтез детально представлений на Схемі 12 нижче. Наступні номера посилання на сполуку та посилання на стадію синтеза стосуються Схеми 12.
І289| Стадія А) Сполуку (1) перемішували в безводному метанолі (100 мл) при кімнатній температурі протягом 48 год., суміш фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі насухо, щоб отримати сполука (41), 1,25 г (6,037 ммоль, 93 95 Вихід) у вигляді білої твердої речовини. МС 324 (М-Н1). (290) Стадія В) Сполуку (41) (1,95 г, 6,037 ммоль) перемішували в ацетилхлориді (20 мл, 281 ммоль) при кімнатній температурі протягом З днів, потім випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (42) 3,06 г (6,01 ммоль, 99 95 Вихід). МО 510,5 (М.н1). (2911 Стадія С) Залишок (42) (3,06 г, 6,01ммоль) перемішували в дихлорметані (ДХМ) (35 мл), потім додавали К5Ас (3,57 г, 31,26 ммоль). Реакційну суміш перемішували в атмосфері аргону при кімнатній температурі протягом 40 год., розбавляли дихлорметаном (50 мл), потім розподіляли між дихлорметаном та водою (50 мл). Органічний шар промивали 595 Масі розчином (22 мл х 2), та сушили над безводним Ма2504 протягом ночі, фільтрували. Фільтрат випаровували насухо, щоб отримати (43) 2,93 г (5,34 ммоль, 88,8 90Вихід) у вигляді майже білої піни. МС 550 (М.І).
Ї292| Стадія Ю) Сполуку (43) (200 мг, 0,364 ммоль), та Вос-аміногексанбромід (107,4 мг, 0,385 ммоль) перемішували в ДМФ (2 мл), до яких додавали дієтиламін (0,81 мл, 7,83 ммоль).
Всю суміш перемішували в атмосфері аргону при 2570 протягом 2,5 год. Реакційну суміш розподіляли між етилацетатом (ЕА) (80 мл) та насиченим розчином Масі. Органічний шар промивали насиченим розчином Масі (15 мл х 3), водою (10 мл х 3). Органічний шар сушили над Ма2504, фільтрували, фільтрат випаровували в вакуумі насухо. Залишок піддавали хроматографії на силікагелевій колонці (Толуол:Ацетон - 2:1). Фракції, які містять сполуку (44) об'єднували та випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (44) 98 мг (0,139 ммоль, 38 95Вихід) у вигляді білої піни. МС 706 (М.--1). (293) Стадія Е) Сполуку (44) (95 мг, 0,135 ммоль) розчиняли в безводному метанолі (1 мл).
Зо До даного розчину додавали натрію метоксид (0,16 мг, 6,94 мкмоль) в атмосфері аргону, реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 2,5 год., потім смолою бОомжех5оО х 8(Ня) рН регулювали до 6,0-6,5, фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуум насухо, отримуючи сполуку (45) 71 мг (0,132 ммоль, 97,9 96Вихід) у вигляді білої піни. МС 5З8(М-1). (294) Стадія Е) Сполуку (45) (60 мг, 0,109 ммоль) перемішували в атмосфері аргону в 0,2М
Маон (2 мл, 0,4 ммоль) при кімнатній температурі протягом 2,5 год. рН розчину регулювали до 3-4 смолою Юомех5о х 8(Н) та фільтрували. Фільтрат сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (46) 56 мг (0,107 ммоль, 98 95Вихід) у вигляді білої піни. МС 524(М-1). 2951) Стадія С) Сполуку (46) (50 мг, 0,0956 ммоль) розчиняли в суміші трифлуороцтової кислоти (ТФО) (2 мл, 25,96 ммоль) та метилфенілетеру (анізолу) (0,2 мл, 1,84 ммоль) в дихлорметані (2 мл). Всю суміш перемішували при 25 "С протягом 2,5 год., потім випаровували в вакуумі при 35 "С протягом 2 год. Залишок промивали в гексані (10 мл х 2) при кімнатній температурі протягом ночі, гексан декантували. Залишок перемішували в етері (10 мл х 2) при кімнатній температурі, потім етер видаляли. Залишок розчиняли у воді (1 мл), та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (47), у вигляді білої піни 56-ТФО сіль, 51 мг (0,0949 ммоль, 99 95 Вихід). МС 424(М-) (ММ 56-423, 56-1ФО сіль - 537).
Схема 12: Отримання анкерної сполуки в он ан п ; ту 0 персо Фо ДТ Лесосон (в)
Асмн - Аечи х зн он
ІК 18) ре Кк г о соосн. 7 Ав -7 ломи - ами ту де сас ї43) (хг)
Ас он
Ав ! о соосна їв) н ? о спосна Ф
АесМн у Асщн -
Оде Он (443 - 45) тА он г соон п) песртуе но ее вс но веснаемн, дон щі, доми у 7 Фо он ом їаві а Бе Фо
Приклад 21: Отримання сполуки МОО12, СНТСА(2)5(5в)
І296| Синтез детально представлений на Схемі 13 нижче. Наступні номера посилання на сполуку та посилання на стадію синтеза стосуються Схеми 13.
І297| До розчину СНТСА(2")2 (40) (4 мг, 3,3 мкмоль) в ДМФ (100 мкл) додавали НАТИ (1,254 мг, 3,3 мкмоль) та ДІПЕА (0,бмкл, 3,44 мкмоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали розчин солі 56-Т1ФО (47) (1,8 мг, 3,35 мкмоль) та ДІПЕА
(1,20 мкл, 6,89 мкмоль) в ДМФ (100 мкл). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Отриману в результаті суміш розбавляли 1М НАс (5 мкл) та водою (2 мл), потім фільтрували через 0,45 мкм шприцевий фільтр. Фільтрат піддавали розділенню та очистці за допомогою ВЕРХ. (298| Колонка: Рпепотепех Сетіпі АХІА 5 мкМ, С18 110А 50 х 21,2 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота у воді МіїЇїд;
Розчинник В-100 95 Ацетонітрил; Градієнт: 0-100 925 В, 100 хвилин, лінійний; Температура: 30 70. (2991 Фракції, які містять сполуку (48) збирали та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (48) СНТСА(2")2(56) 2,4 мг, у вигляді білої піни. МС ЕСІ «ЗОм 1615 показав ММ 1614.
ЇЗООЇ Сполуку (48) (2,4 мг, 1,486 мкмоль) перемішували в 50 906 метанольному водному розчині (9Омкл), який містить триетиламін (6,6 мкл) при кімнатній температурі протягом 5 год., потім випаровували в вакуумі насухо. Залишок знову розчиняли у воді (100мкл), сушили при заморожуванні, отримуючи продукт (493 СНТСА(2)2(56), 2 мг (1,303 ммоль 87,7 95 Вихід) у вигляді білої піни. МС ЕСІ «ЗОм 1535,7, показав ММ 1534,7.
Схема 13: Отримання сполуки МОО12, СНТСА(2)2(5в) в Мел а ве адже ж ї с ей 7 Ото ЧО ую
КЗЗ І ї (азу сет А ДЖ та: у Був шити ким дв ши. чи г гий о ЗО доркотчния 8) ва
ЕНТОМІМВ сколяковкдя то ре но ЕФ нирки з щу ре жо пз Ко дк зу ре де
Як вк
Приклад 22: Отримання анкерної скелетної сполуки СНТСА(7 о)»
ІЗО1| Синтез детально представлений на Схемі 14 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 14.
ІЗО2)Ї Отримання анкерної сполуки (20) 20'детально представлене в прикладі 15. Анкерну скелетну сполуку (50) СНТСА(20")2 отримували відповідно до процедури, детально описаної в прикладі 20. Анкерну скелетну сполуку (50) СНТСА(20")2 отримували у вигляді білої твердої речовини. МС ЕСІ яме, «ЗОм 1265 показав ММ 1264
Схема 14: Отримання анкерної скелетної сполуки СНТСА(7о)2
ОСОМН(СН.) МН, г дру т доМНЯ у
МН ноос соОН зн
МН» (39)
Цис-1,3,5-циклогексантрикарбонова кислота (20)2;у (СНТСА)
Сон птнениннтти тт нсннкснттяснюсноЗдю 0 сх о й» Є / ЗЕ ге (50)
СНТСА(2 у);
Приклад 23: Отримання кислотної/аніонної групи О-Азр(О-Суа)-0-Азр(О-Суа)-0-Азр(О-Суа)- он
ІЗОЗ|Ї Синтез детально представлений на Схемі 15 нижче. Наступні номера посилання на сполуку (А) - (І) та посилання на стадію синтеза стосуються Схеми 15.
ЇЗ04| Вос-О-Цистеїн(Аст)метиловий естер, |Вос-О-Суз(Аст)-ОМе| (1,532 г, 5 ммоль) розчиняли в трифлуороцтовій кислоті (ТФО) (10 мл), яка містить анізол (1 мл), та перемішували при кімнатній температурі протягом 30 хвилин. Реакційну суміш потім випаровували в вакуумі, щоб видалити ТФО, отримуючи олійну речовину, яку розтирали в етері (100 мл х 2), потім зновурозчиняли в 2095 ацетонітрильному водному розчині (100 мл), та сушили при заморожуванні протягом 72 год., отримуючи сполуку ТФОО-Сув(Аст)-ОМе, 1,60 г. ВЕРХ/МС показала ММ 206,35 (у вигляді вільної основи).
ЇЗО5| Етос-О-Аспарагінова-а-кислота-В-О-і-бутиловий естер, (Етос-О-Авр-ОБиїй), (1,646 г, 4 ммоль) активували НВТИО (ММ 379,25) (1,517 г, 4 ммоль) та ДІПЕА (ММ 129,25) (0,517 г, 4 ммоль) в ДМФ (20 мл) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім об'єднували з розчином ТФО-О-Сув(Аст)-ОМе (1,47 г, 4,2 ммоль) та ДІПЕА (0,542 г, 4,2 ммоль) в ДМФ (10 мл).
Всій реакційній суміші давали перемішуватись протягом 16 год. при кімнатній температурі.
Реакцію відслідковували, застосовуючи ВЕРХ. Суміш випаровували в вакуумі, щоб видалити
ДМФ. Потім до залишку додавали воду (5 х 70 мл), щоб вимити з нього залишковий ДМФ та отримати О-Суз(Аст)ОМе як майже білу тверду речовину, яку потім сушили в вакуумі, отримуючи сполуку (А), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-О-Виї у вигляді білої твердої речовини.
ВЕРХ/МС показала ММ 599,7.
ІЗО6Ї Сполуку (А) (1,2 г, 2 ммоль) отримували з 20 95 піперидину в ацетонітрилі (20 мл) протягом 30 хвилин при кімнатній температурі, потім фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі, отримуючи сполуку (В), О-Азр(О-Сув(Аст)-ОМе1|-ОВиї. ВЕРХ/МС показала ММ 377,4.
ІЗО7| Сполуку (А) (599,7 мг, 1 ммоль) отримували з ТФО (6 мл) протягом 1 год. при кімнатній температурі. Потім випаровували в вакуумі насухо. Залишок розтирали в етері (50 мл х 3), потім розчиняли в 30 95 ацетонітрильному водному розчині (100 мл), та сушили при заморожуванні,
Зо отримуючи сполуку (С), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-ОН у вигляді білої твердої речовини.
ВЕРХ/МС показала ММ 542,7.
ІЗО8Ї Сполуку (С), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-ОН (434 мг, 0,8 ммоль) активували НВТО (303,4 мг, 0,8 ммоль) та ДІПЕА (103,4 мг, 0,8 ммоль) в ДМФ (8 мл) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали сполуку (В), О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-ОВиї (9332 мг, 0,688 ммоль). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год. ДМФ випаровували в вакуумі та залишковий ДМФ видаляли обережним промиванням водою білої твердої речовини. Потім білу тверду речовину сушили в вакуумі протягом 24 год., отримуючи сполуку (0), Етос-О-А5зрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0О-Азр(О-Сув(Аст)-ОМе!|-ОВиї, у вигляді білої твердої речовини. ВЕРХ/МС показала ММ 902,19. Сполуку (0) отримували з ТФО (16 мл) при кімнатній температурі протягом 1 год., щоб видалити трет-бутиловий естер. ТФО випаровували в вакуумі насухо. Залишок промивали водою, щоб видалити залишкову ТФО, та тверду речовину сушили в вакуумі протягом 72 год., щоб отримати Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе!|-О-АзрІО-Сув(Аст)-
ОМе|-ОН. ВЕРХ/МС показав ММ 846.
ЇЗО9| / Етос-О-Азр(О-Сув(Аст)-ОМе|-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе| ОН (423 мг, 0,бттої) активували НВТИ (189,5 мг, 0,5 ммоль) та ДІПЕА (64,63 мг, 0,5 ммоль) в ДМФ (5 мл) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім додавали сполуку (В), О-Азр(ІО-Суз(Аст)-ОМе|-
ОВиї (317 мг, 0,84 ммоль). Всю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год.
Завершення реакції відслідковували за ВЕРХ, та ДМФ видаляли в вакуумі. Отриману білу тверду речовину обережно промивали холодною водою, потім сушили в вакуумі протягом 48 год., отримуючи сполуку (Е), Етос-0-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0-Азр(О-
Сув(Аст)-ОМе|-ОВиї, ММ 1206, яку додатково чистили, застосовуючи ВЕРХ.
ІЗ10| Аналітична ВЕРХ даного матеріалу показала чистоту 70 95. Матеріал розчиняли в 50 95 метанол/вода та фільтрували через 0,2 мкм фільтр для препаративної ВЕРХ.
Препаративна ВЕРХ
ІЗ11| Колонка: колонка У/аїег5 Хієїта С18 5 мкм 19 х 50 мм в серіях по 40 мг; Довжина хвилі: 220/280 нм; Швидкість потоку: вмл/хв; Розчинник А-0,1 96 Трифлуороцтова кислота; Розчинник
В-100 95 Ацетонітрил; Градієнт: 10-100 958, 100 хвилин; Температура: 30 "б.
ІЗ12| Сполуку (ЕЕ), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0-АзрІО-Сув(Асту)-
ОМе|)|ОВиї потім обробляли ТФО (10 мл) протягом 1 год. при кімнатній температурі та випаровували в вакуумі насухо. Залишок розчиняли в 40 95 ацетонітрильному водному розчині (100 мл), та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (Е), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|- р-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0О-АзрІО-Сувз(Аст)-ОМе| ОН, у вигляді білої твердої речовини.
Зо ВЕРХ/МС показала ММ 1150,27.
ІЗ13| Сполуку (Є), Етос-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе1|-0-АзрІО-Сув(Аст)-ОМе|-0-АзрІО-Сув(Аст)-
ОМе!|-ОН (200 мг, 0,1738 ммоль) отримували з 20 95 піперидину в ацетонітрилі (10 мл) протягом хвилин з перемішуванням при кімнатній температурі та потім фільтрували. Фільтрат випаровували в вакуумі. Залишок перемішували в 50 95 суміші вода/метанол (20 мл), яка містить триетиламін (500 мкл) при кімнатній температурі протягом 6 год., завершення реакції, щоб зазначити, відслідковували за ВЕРХ. Дану суміш випаровували в вакуумі насухо, отримуючи сполуку (С), О-АзрІО-Сув(Аст)-ОНІ-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОНІ-О-АзрІО-Сув(Аст)-ОНІ-
ОН. ВЕРХ/МС показала ММ 885,9.
ІЗ14| Аналітична ВЕРХ показала 50 95 чистоту.
ІЗ15) Сполуку (С) додатково чистили, застосовуючи препаративну ВЕРХ.
ІЗ16) Колонка: колонка Рпепотепех Септіпі Ахіа 110А 5 мкм 50 х 21,2 мм С18 ВЕРХ Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,195 ТФО; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил; Градієнт: 0-100 958, 100 хвилин; Температура: 307
ЇЗ17| Зразок (100 мг) розчиняли в 1095 метанольному водному розчині, обробляли ультразвуком, та фільтрували через 0,2 мкм фільтр. 20 мг/серіх прокачували насосом в колонку з градієнтним перебігом. Фракції відслідковували, застосовуючи аналітичну ОФ-ВЕРХ, використовуючи колонку Рпепотепех Сетіпі С18 5 мкМ. Швидкість потоку 0,7 мл/хв; Довжина хвилі 210/280 нм; Градієнт 0-50 95 В 15 хвилин; Розчинник А-0,1 967ФО; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил.
ЇЗ18| Фракції з корректним МС більше, ніж 90 95 чистотою об'єднували та сушили при заморожуванні, отримуючи чисту сполуку (0).
ЇЗ19| Сполуку (с), О-Азр ІО-Сув(Аст)-ОНІ-О-Азр-(О-Сув(Аст)-ОНІ-О-АзрІр-Сув(Аст)-ОНІ-
ОН, (21,8 мг, 0,0246 ммоль) розчиняли в ТФО (10 мл), яка містить анізол (200 мкл), потім додавали трифлуорметансульфонат срібла (504 мг, 1,96 ммоль). Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1 год. потім випаровували в вакуумі насухо.
Залишок розтирали в етері (40 мл х2), етер промивання декантували. Залишок перемішували в 1М оцтовій кислоті (20 мл), яка містить дитіотреїтол (403 мг, 2,62 ммоль) при 25 "С протягом З год. Суспензію центрифугували в 50 мл пробірках Таісоп протягом 10 хвилин при 4000 об./хв.
Супернатант обережно збирали, потім чистили, застосовуючи ВЕРХ, та сушили при заморожуванні отримуючи сполуку (Н), О-Азр(О-Суз-ЗН, -ОН)-0-Азр(О-Суз-ЗН, -ОН)-0-Авр(О-
Сув-5Н, -ОН)-ОН, ВЕРХ/МС показала ММ 672,3.
ІЗ20Ї Суміш 95 95 мурашиної кислоти (7,36 мл), 30 956 Н2О2 (0,8 мл) та Н2гО (0,368 мл) залишали при кімнатній температурі протягом 30 хвилин, потім перемішували при -57С на крижаній бані, до якої додавали сполуку (Н) (8 мг, 0,0119 ммоль) та перемішували протягом 1 год., потім в вакуумі протягом 10 хвилин. Залишковий розчин потім розбавляли водою до 200 мл та сушили при заморожуванні, отримуючи сполуку (І) 9,5 мг, 0-АзрІО-Суа-5ОЗН, -ОНІ-О-
А5рІО-Суа-5ОЗН, -ОНІ-0-АзрІО-Суа-5ОЗН, -ОНІ|-ОН у вигляді білої твердої речовини, ВЕРХ/МС показала ММ 816,78.
ІЗ21| Дану сполуку чистили шляхом обессолювання в наступних умовах.
ЇЗ22| Колонка: колонка ВЕРХ Рпєпотепех Сетіпі Ахіа 110А 5 мкм 50 х 21,2 мм С18;
Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1 95 ТФО; Розчинник
В-100 95 аценітрил; Градієнт: 0-100 958, 100 хвилин, Температура: 30 "б. Сполука (І) елююється близько до вакуума.
ІЗ23| Даний матеріал потім сушили при заморожуванні, отримуючи білий порошок як чисту сполуку (І). Сполуку (І) нейтралізували триетиламіном (ТЕА) з утворенням ТЕА солі (51) наступним чином:
В зжуумюю жо сессюхюх В сесооюс дерен В жххккхюю во «уххуюхмх 5
Вк, тки ях ДИ « НВТИШ: О-1Н-Бензотриазол-1-іл)-М, М,М'/М'-тетраметилуронію гексафлуорфосфату ММ 379,24
ТФО: Трифлуороцтова кислота ММ 114,02
ДІПЕА: Діізопропілетиламін ММ 129,25
ТЕА; Триетиламін ММ 101,19
Аст: 5-ацетамідометил як тіо-захисна група
ОВиї: трет-бутиловий естер
Схема 15: Отримання кислотної/аніонної групи О-А5р(О-Субз)-О-Азр(О0-Сувз)-О-Азр(О-Сувзі)- он
Зо
Рене ВОТНОНИВКой с ще
Ї х - ! зва ї 1 се
Оси
І Оу В ей йо ч ав Кав-їавнон
Ко нс рег дж ще : І
Деттот К АКу нннсі І в : і ВипЕвИех ї Е ї водо вірне секр ВВЕ
Тк ДНА х. і
З : СЕ і ф зве
ВЕЖІ І ЖК ЖК КА ВАЖКА ВККС : Е фено Веде бечаа Кеди ВХ
Гсувноні ДМК. КНСУВІЖенЇ
З- во ве вна І:
Вовк пень еонВа пен не Ву «ее
ТОН Пнликйоні Бесунконі В са ке ме «Ео піоереденоя й пдв ня дсдядеевня дво се КІ горі ПАНІ Твен щ щи Ви до (Хан потен золи ще ща
Щооойвюя безйщівея ба тео КВ
БАЯН бує М віру яМ ї. 007 3
З о щи іесоонех . кн
СеЗВКО перу Осн ванмон вну є Оуен ж оо В ОННВе:
КО са
Бе - СЬКУ Не , дети ВВ
Приклад 24: Отримання сполуки МО348, СНТСА(209)2-І0-Азр(О-Суз)-0О-Азр(О-Суві)-0-Авр(О-
Сугу|-Он
ІЗ24| Синтез детально представлений на Схемі 16 нижче. Наступні номера посилання на сполуку стосуються Схеми 16.
ІЗ25| Сполуку (50), СНТСА(20")2 з прикладу 22 (10,744 мг, 8,5 мкмоль) перемішували з
НАТИ (3,23 мг, 8,5 мкмоль) та ДІПЕА (1,496 мкл, 8,56 мкмоль) в ДМФ (5 мл) при кімнатній температурі протягом 10 хвилин, потім об'єднували зі сполукою (51), О-Азр(О-Суа-5038, -ОВ)- 0-Авр-(0-Суа-5038, -08)-0-Азр(О-Суа-5038, -ОВ)-ОВ, з прикладу 23 (13,2 мг, 8,67мкмоль) в
ДМФ (5мл). Всю суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 16 год. Отриману в результаті суміш відслідковували, застосовуючи аналітичну ВЕРХ/МС пік 1 з часом утримання, 12,903 хв. 44 95 МС ЕСІ кме, ї20м 1032,3 2-іон, ЕСІ -ме, -40м 1030,7 2-іон, показала ММ 2062 як сполука (52) без основи, яка є, . СНТСА(20)2І0-Азр(О-Суа-5ОЗН, -ОН)-0-Азр(О-Суа-5ОЗН, -
ОН)-0-Азр-(0-СувІі-5ОЗН, -ОНХ-ОН.
Аналітична ВЕРХ:
ІЗ26)Ї Колонка: Рпепотепех Кіпеїех ЕМО 5 мкм С18 100А 150 х 4,6 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 0,7 мл/хв; Розчинник А-0,195 ТФО; Розчинник В-100 95
Ацетонітрил; Градієнт: 0-50 908, 15 хвилин, лінійний; Температура: 30 "С.
ІЗ27| Отриману в результаті суміш підкислювали лимонною кислотою, розбавляли до 20 мл водою, та фільтрували через 0,2 мкм фільтр, потім піддавали препаративній ВЕРХ для розділення та очистки.
Препаративна ВЕРХ
ІЗ28| Колонка: Рпепотепех Сетіпі АХІА 5 мкм С18 110А 50 х 21,2 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1ТФО; Розчинник В-100 95 Ацетонітрил;
Градієнт: 0-100 958, 100 хвилин, лінійний; Температура: 30 "с.
ЇЗ29| Основний пік з часом утримання 31,087 хв. представляв собою продукт (52). Фракції, які містять продукт збирали та знову чистили, застосовуючи додаткову ВЕРХ наступним чином.
ІЗЗОЇ Колонка: Рпепотепех Кіпеїех х В 5 мкм С18 100А 50 х 21,2 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм; Швидкість потоку: 8 мл/хв; Розчинник А-0,1 ТФО; Розчинник В-100 95 Ацетонітрилі;
Градієнт: 5 956-100 958, 80 хв., лінійний; Температура 30 "С.
ЇЗ31Ї Очищену сполуку (52) з часом утримання 19,597 хв. повністю відокремлювали від вихідного матеріалу з часом утримання 21,714 хв.
ІЗ32| Сполуку (52) (3,5 мг, 1,697 мкмоль) розчиняли в 50 95 суміші метанол/вода (5мл), яка містить триетиламін (ТЕА) (18 мкл, 129 мкмоль). Перемішували при кімнатній температурі протягом З год. ВЕРХ показала не повне завершення реакції, тому, додавали додаткові 11 мкл
ТЕА. Суміш перемішували протягом додаткових 60 хвилин, після цього ВЕРХ показала завершення реакції. Реакційний розчин потім нейтралізували до рН 6 1М оцтовою кислотою.
Розчин потім розбавляли до 20 мл водою. Суміш піддавали ВЕРХ.
Аналітична ВЕРХ
ІЗ33Ї Колонка: Рпепотепех Кіпеїех Емо 5 мкм С18 100А 150 х З мм; Довжина хвилі: 210/280 нм Швидкість потоку: 0,7 мл/хв; Розчинник А-20 мМ МанНрРОЯ4 рн 7,0 буфером; Розчинник В-10 мМ МанНРО4 рн 7,0 буфером ж 50 95 Ацетонітрил; Градієнт: 0-100 958, 30 хвилин, лінійний;
Температура: 30 "С
Препаративна ВЕРХ
ІЇЗ34)| Колонка: Рнепотепех Кіпеїєх ХВ 5 мкм С18 100А 50 х 21,2 мм; Довжина хвилі: 210/280 нм Швидкість потоку: мл/хв; Розчинник А-0,195 ТФО Розчинник В-100 95 Ацетонітрилі
Градієнт: 0-100 958, 8Охв., лінійний; Температура: 30 "0.
ЇЗЗ5Ї Продукт (53) елюювали з часом утримання 16,431 хв.
ЇЗЗ36Ї Чисті фракції об'єднували та сушили при заморожуванні, потім використовуючи НСІ обмін для того, щоб видалити залишкову ТФО. Висушування при заморожуванні давало продукт (53) СНТСА(20)2І0-Азр(О-Суа)-0-Азр(О-Суа)-О-Азр(О-Суа|-ОН з чистотою » 99 95 у вигляді білої твердої речовини. МС ЕСІ конус -20м, 990,5 2-іон показала ММ 1982.
Схема 16: Отримання сполуки МОЗ348, СНТСА(20)2-І0-Азр(О-Суві)-О-Азр(О-Суві)-0-Авр(О-
Сузуц-Оон соон - НВТШ)ДІПЕА о. тн бе на 02-Авріб Сук ЗОВ, ОВБІ р я г ж -0-АзріО-Суві- О.В, ОВІ - р-Азр(р-Суві-БОдВ, ОВІ-ОВ (БО) (533
СНТСА(),
ВАТЕА а
З 2 | Її хи ; ие О-й о п-о 7
Мн їн о Е
А с зозв вер дннн вовни з МА ні р н нн Я ЕЕ 9 кр 5ОзВ рн пози но н мно я ооо
Е я. зозн вер ння 4 Оз ут ння ц овос ФО вн Я (53) (52) мМоз48 СсНтТсА(Х,У О-Авр(Д-Суві)- 0П-Авр(Й-Сув)-0-Азр(р-СувіЦ- ОН
МУХ 1982
ПОСИЛАННЯ
ВЕРЕВЕМСЕ5 1) МНО: іпнепга (5еазопаї). 2009, ассеззей аг пЕрулимли мо. піітеаіасепігеЛасізпевів/5211/еп. 2) МеїегзКу МІ, Мазхіеноп Ва, І оде Н, Ріїє ТМ г, Вабіпснак Т: Ерідетіоіоду, тісгобіоіоду, апа ї'єаїтепі сопзідегайоп5 ог Басієїа! рпеитопіа сотріїсайпу іпПшепга. Іпі У іптесі Оів., 2012 16:е 321-331.
З) Наїє ВС, Аїргесні ВА, Сагсіа-Завіге А: Іппайе іттипе емавіоп 5ігаїедієв ої іпїшеплга мігив5ев.
Ешшге Містобвіо!. 2010, 5:23-41. 4) Раіезе Р, Зпам/ МІ: оппотухомігідає: Ше мігизев5 апа ІНеїг геріїсайоп, Іп Рівїд5 Мігоіоду, 5 еайіоп. Еапеа Бу: Кпіре ОМ, Номієу РМ, РНйаде!рніа, РА:Гірріпсоїї УМШат»5ь 2007:1647- "689. 5) Заіотоп В. єї аі|.: Тне іпїмепла мігив5 епідта. Сеї). 136 (3), 402-410 (2009). б) Сао В. вї а: Нитап іп'есійоп м/йй а помеї! аміап-огідіп іпїнепга А (Н7МО) мігив. М. Епаї. «у.
Меа. 368 (20): 1888-1897 (2013). 7) Іта! М. сеї аІ. Ехрегітепіа! адаріайоп ої ап іпПйшепла НЬ НА сопієї5 гезрігаюгу агорієї
ТМапетіввіоп Юю геаззопапі Н5 НА/НІТ МІ мігиз іп Теітеїв. Маїшиге, 486 (7403): 420-428 (2012). 8) Нетізі 5. евї а)ї.: Аігрогпе іІгапотіввіоп ої іпїнепла А/Н5МІ міги5 реуееп Геїгтеїв. бсіепсе, 336 (6088):1534-1541 (2012). 9) Виззеї! С А, єї а).: Тне роїепійа! ог гезрігаїюгу агорієї-тапотіввіріє А/Н5МІ іпішепла мігив Ю емоїме іп а таттаїап Нові. б5сіепсе, 336 (6088): 1541-1547 (2012). 10) Ни У, еї аї.: А5зосіайоп реїмееп адмегзе сіїпіса! ошісоте іп питап аізєазе5 сайзей Бу помеї! іпїшепга А Н7МОЗ мігив апа 5иЇ5іаїпеай міга! зпедаїпд апа етегдепсез ої апіїміга! гезівїапсе.
І апсеї, 381 (9885): 2273-2279 (2013). 11) Ва; М, вега).: Етегдепсе ої ОзепНаїпіміг-гевівїапі рапдетіс НІМІ мігив дигіпуд ргорнуїахів. М.
Епо)!. У Меа., 361 (23): 2296-2297 (2009). 12) Наудеп Е, : ОемеІоріпд пем/ апіїміга! адепів ог іпїшсепга Меаїтепі: мпаї дое5 Ше їшиге поа? Сіїпіса! Іптесіїсив5 Оізеазез, 48:53-13 (2009). 13) Оавз К, еї аї.: Зіпгисігев ої іпїмеплга А ргоївїіп5 апа іпвіднів іпіо апіїміга! агид їагдеїв5. Майте зЗігисіига! 5 Моїесшаг Віоіоду, Мої.17, Мо.5, 530-538 (2010). 14) Наудеп Р.: Меуег іпїнепла апіїмігаІ5, Біоїпегареціїсв апа сотрбіпаїййоп5. Іпїшепга апа Оїнег
Везрігаюгу Мігизез 7 (Биррі. 1), 63-75 (2012). 15) МашШеп М МУ, еї аї.: Апіїмігаїє іп 5єазопаі апа рапаєтіс іпПшепга-їшиге регзресіїмев5.
Іпїлепга апа Оїйег Незрігайюгу Мігив, 7 (Зиррі. 1), 76-80 (2012). 16) Момеї апіїміга! Іегарієв5 їог іпїшепга апа оїпег гезрігаїогу мігизев5: Вепсі о Веавзіде. Пе АТ
ІЗІВУ-АМа Сопіегепсе, 2-4 дипе 2015, Опімегейу ої Техаз аї А!йвіїп ОБА. 17) Спеп, МУ. еї аї. А помеї! іпПшмепга А мігив тПйоспопангіа! ргоївіп їпаї іпдисез сеї! деа. Маї.
Меа. 7, 1306-1912 (2001). 18) Вебеї, 9.9. в ММіІєу, О.С. Весеріог Біпаіпд апа тетбгапе Тивіоп іп міги5 епігу; Пе іпїшепга
Ппетаддішіпіп. Аппи. Нем. Віоспет. 69, 531-569 (2000). 19) Ми. ММ. в Рапів, М. Тне аігесійопаїйу ої їТПе писієаг їШапгропі ої Ше іпїшепга А депоте ів димеп Бу 5еїесіїме ехрозиге ої писієаг ІосаіІІ2айоп зедоепсе5 оп писіеоргоївїп. Мігої. У., 6, 68 (2009). 20) ОІтапеп І., Вгопі, В.А. 4; Ктша, А.М. ТНе гоїє ої їмо ої пе іпПшепла міги5 соге Р ргоївіпв іп гесодпігіпу сар 1 вігисійге5 (т7СрррМт) оп АМАз апа іп іпійацйіпд міга! ВМА ігапзстгірійоп. Ргос.
Маї!. Асад. осі. О5А, 78, 7355-7359 (1981). 21) Ріоїсн, 5.)., Вошіоу. М., Онгапеп, І. а Китша, В.М. А ипідие сар(т7 арррХт)-дерепаєпі іпнепга мійоп епдописієазе сієахе5 сарред АМА5 0 депегаїе Ше ргітег5 Ійаї іпійаїе мікаї
АМА ігапзстірійоп. Сеїї, 23, 847-858 (1981). 22) Надеп, М., Спипо, Т.0.У., Вшїснег, А. є Кгузіа!ї, М. Весотрбіпапі іпПшепга міги5 роїтутегазе: гедшцігетепі ої Боїй 5' апа 3З' міка! епа5 Тог епдописієазе асіїмну. у). Міго!., 68, 1509-1515 (1994). 23) Зпіті?и, К., Ідиспі, А., Согпуои, В. б Опо, У. Іпїпеплга мігив іппірії5 сівєамаде ої Ше НЗР7О рге-тАМАз аї Ше роіІуадепуїайоп 5йе. Мітоіоду, 254, 213-219 (1999). 24) Метегоїй, М.Е., Вагабіпо, 5.М., Ії, М., КеПег, МУ. 5 Кгиа, В.М. Іпйнепла міги5 МО ргоївїп іпієгасів м/йй Ше сейшШаг 30 КОа 5ибипії ої СРБЕ апа іпріріїє З'єпа Топтаїйоп ої сеїїшаг ргетАМА»в. Мої. Сеї! 1, 991-1000 (1998). 25) Мемусотр, Г.І... єї а)ї. Іпіегасіоп ої Те іпПшепга а міги5 писівосарзій ргоївїп мїй їШйе міка!
АМА роїутегазе роїепііагез ипріітеа міка! АМА геріїсайоп. У. Міко!., 83, 29-36 (2009). 26) Мештапп, с., Нидпез, М.Т. 4. КажаокКа, У. ІпЯШепла А мігив М52 ргоївіп тедіаїез хВМР 60 писіваг ехроїй Шгоцди МЕ5-іпаерепаєпі іпіегасіоп мйй САМІ. ЕМВО 3., 19, 6751-6758
27) Мауак, О.Р., Ниї, Е.К. Ваптап, 5. Аззетбіу апа ридаїпа ої іпїшеплга мігив. Міги5 Нез, 106, 147-165 (2004). 28) Неппіє Р., Вомуеї! Р. еї аї.: Гом/ рН іпігтапазаї! 5ргауз іпасіїмайе іпПшепла мігизев іп міго апа ргоїесі Теїтеїв5 адаіпві іпПшеплга іпіесіоп. Незрігаюгу Незеагси, 8, 37 (2007). 29) Апдегзоп І, Ргосіог ОР: Меазигтетенпі ої паза! тисосіїагу сІівєагапсе. Єиг. У. Небзріг. Оів., 64, 37-40 (1983). 30) ІГапде Е.А. еї ас: А сотрагайме війцду ої Ше епйесі ої Сіміс асій, Сарзаїсіп апа,
Везіпітегаюхіп оп їШйе соцдп спаІепде іп Сиіпеа-рід апа тап. Риїтопагу Рпаптасоіоду, 6, 171- 175 (1993).
З1) ТапаКка, М. еї а): МесНнапібзтве ої Сарзаїісіп-апа Сійпіс-асід-іпдисед соцди гтеПехевз іп
Сиціпеарід. у. Рнаптасої. зсі., 99, 77-82 (2005). 32) Ек ЮОе СіегсЯд, Тома ітргомед апіі-НІМ спетоїНегару, ІШегарешіс вігаіедіеб5 ог іптегмепійоп м/йп НІМ іп'есіоп5. Мей. Спет... мої. 38, Мо.14, Р.2491 (1995). 33) Арей У еї а: Сепегайоп ап СпНагасіегігайоп ої гтесотбріпапі іпїсеплга А (НІМІ) міги5
Натоїгіпду атапіадіпе гезібіїіапсе тиїайоп. Апіїтістор. Адепі5 СпетоїНег. 49: 556-559 (2005). 34) ВіІїдні В. евї а): Адатапіапе гезібїапсе агошпа іпїшепга А міги5ез ізоїаївд єапу дигіпд те 2005-2006 іпїнепла зеазоп іп Ше Опівєд сіаїез. АМА, 8: 891-894 (2006). 35) Віїдні В. еї аї.: Іпсідепсе ої адтапіїпе ге5ібтапсе атопод іпїшепга А (НЗМ2) міги5ез ізоїаїєй мжопаміде їгтот 1994 о 2005: а сайве їог сопсепт. І апсеї, 9492: 1175-1181 (2005). 36) Меїзоп М. еї а!.: ТНе огідіп апа діора! етегдепсе ої адатапіпе гевівіапі А (НЗМ2) іпїепга мігив. Мітоїоду, 388: 270-278 (2009). 37) Моп Цевівїп єї а!.: Вайопа! Оевзідп ої Роїепі 5біаійдавзе-разей Іппіріюг5 ої ІпПшепла Міги5
Веріїсайоп. Маїшцге, 363, 418-423 (1993). 38) Кіптрр, К.: Несепі Адмапсе5 іп Ше Оізсомегу апа ОемеІортепі ої Апії-іпПшепга Огидв5.
Ехреп Оріп. Тнег. Раї., 14, 1153-1168 (2004). 39) Мапд, Сс.: Несепі Адмапсев іп Ше Оібсомегу апа Оемеіортепі ої Апії-іпїшепга Огид5.
Ехреп Оріп. Тнег. Раї., 12, 845-861 (2002). 40) Аравє!-Мавдіа, А. Е. єї а!.: Зупіпевзів ої ІпЯшепла Мецгатіпідазе Іппібйогв. Сит. Оріп. ЮОгид
Зо рівсив5. ЮОеєм., 4, 776-791 (2001). 41) Мапа, Са. Т. еї а): Оезідп, Зупіпевзів, апа бБігисіцге Апаїузів ої Іпїшепга Мешгатіпідазе
Іппіріог5 Сопіаїпіпд Руттоїїдіпе Согев. у). Мед. Спет., 44, 1192-1201 (2001) 42) Вари, У.5. єї аї.: Оізсомегу ої а Момеї, Ніднпіу Роїепі, Огаїу Асіїме, апа Зеїесіїме Іп'їшепга
Мешцгатіпідазе Іппібйог ІШтоцоай Бігисіште-разей Огпа Оезідп. У. Мед. Снет., 43, 3482-3486 (2000). 43) Спапа, Р. єї а: Зупіпезе5 апа Мешгатіпідабзе Іпрірйогу Асіїмйу ої Мийівирвійшей
Сусіорепіапе Атіде Оегімаїїмев5. у). Мед. Спет., 47, 1919-1929 (2004). 44) Нопаа, Т. єї а!.: Зупіпезіз апа Апіїі-іпШепла ЕмаїЇшйайоп ої Роїумаїепі біаійдаве Іппіріог5 реагіпд 4-Сцапаіпо-Мец5Асгеп адетгімаїїмев. Віоогуд. Мед. Спет. І ей. 12, 1929-1932 (2002). 45) Нопаа, Т. еї а): Зупіпевзів апа Апії-іпїШепга Мігиб5 Асіїмйу ої 7-О-АїЇКуїаїєд аегімаїїмев5
Веїагед (о 7апатіміг. Віоогуд. Мед. Спет. І ей. 12, 1925-1928 (2002). 46) Ос! Маг С. еї аї|.: Мешгатіпідавзе іппіріюг5 ог іпїсепга сотріїсайопв5. Іапсеї 384, 1260 (2014). 47) УеНегтзоп Т. еї а): Меигатіпідазе іппірпог5 ог ргемепіїпу апа ігеаїйпа іпїшепга іп пеайну адийв апа спідгеп. Соснгапе Оаїаразе 5узі. Нем., 4:00008965 (2014). 48) Мдпуєп-Мап-Тат .) 5. єї аї.: АпіїмігаІ5 Тог іпПшепла м/плеге пом ог сіїпіса! ргасіїсе апа рапаєтіс ргерагедпев57? І апсеї, 384: 386-387 (2014). 49) Неесе, Р.А. евї аі.: РСТ Іпі Аррі. М/098/21243 (1998). САТ1998, 12928172. 50) Маївоп, К.С. єї аі: Ніаніу роїепі апа Іопд-асіїпу іітегіс апа іеігатегіс іппіріюг5 ої іпнеплга міги5 пешгатіпідазе. Віоогд. Мед. Спет... Г ей., 14, 1589 (2004). 51) Оетаїпе, О.А. єї аї.: ОЮОітегіс сотрошйипа5 апа Пеїг ибзе аз апії-міга! адепіб. М/003/040138.
Спет. АбБзіг., 138:354175 (2003). 52) Масдопаїд, 5.).Р. еї а: Роїепі апа Іопод-асіїпуд аітегіс іпрірйог5 ої іпйцепга міги5 пешатіпідазе аге еМПесіїме аї а опе-меекКіу дозіпд гедітеп. Апіїтістор. Адепів апа Спетоїй., 48, 4542 (2004). 53) Масаопаїйа, 5.9.Р.; еї аі.: Оітег 2апатіміг сопійдате5 м/йй магпоивз ІпКіпдуд дгоимр аге роїепі,
Іопа-Іазіїпд іппіріюгз5 ої іпїшепла пешгатіпідазе іпсішаіпуд НОМ Аміап іпПшеплга. у. Мед. Спет., 48, 2964 (2005). 54) Ргазег В.Н. єї аї!.: Зупіпевів ої 1,4-Шіагоїе ПпКей гапатіміг дітегв аз підпіу роїепі іпрірйогв 60 ої іпЯмепга А апа В. Мед. Спет. Соттип., 4, 383 (2013).
55) Маїапабе МУ. єї аї. 9. ої Мігоіодіса! Метод, 48, 257 (1994).

Claims (17)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Сполука формули (І) ково п р формула (І) або її фармацевтично прийнятні сіль або алкіловий естер, в якій: А в кожному випадку вибирають з групи, що складається зі занамівіру, ланінамівіру, озелтамівіру та перамівіру; В являє собою багатовалентну скелетну групу, вибрану з групи, що складається з пропан-1,2,3- трикарбоксилату, циклогексан-1,3,5-трикарбоксилату, бензол-1,3,5-трикарбоксилату, циклогексан-1,2,4,5-тетракарбоксилату та бензол-1,2,4,5-тетракарбоксилату; С в кожному випадку являє собою аніонну групу формули (МІП): д- о МН о в" І г М в" » формула (МІ) в якій В" в кожному випадку незалежно вибирають з групи, яка складається з -СООН, -5ОЗН, - МНенНоЗОзН, -«СОМН-Суа, -«СОМН-Авр, -«СОМН-Азр(-МНОНоЗОзН)» та -«СОМН-Азр(І-МНОНгРОзН)м, де м являє собою ціле число 1 або 2; В? вибирають з групи, яка складається з -ОН та -МНОНоБОзН; и являє собою ціле число від 0 до 3; Ї являє собою ціле число від 0 до 3; г являє собою ціле число від 0 до 6; м являє собою ціле число від 1 до 12; Ї" в кожному випадку являє собою -С(0)-(СНг)-МН-; Ї2 в кожному випадку являє собою зв'язок; х являє собою 12 або ціле число від 0 до 10; п являє собою ціле число 2 або 3; та Зо р являє собою ціле число 1 або 2.
2. Сполука за п. 1, яка вибрана з групи, що складається з: Н о М ТІ ооо соон 2 2 о о о
Н
М. Вон о ох мно ОН 2о 2о о о о
Н
М. Вон о ох - мно ОН 2о 2о о о 7 соон Н о М о о о ноос М Н 7 ноос зоно о вон я о о Є М Кк М с. ща вон о М Мо он (Но С)» (СНе дв М о МН нм о- -о о он но о ноос-- пе МНАс АСНМ уру-теоон Н НМ н- -я МН, нм о о 24 у вон о МН о о он М МН о вон о о Хо М Н МН о зоно о он М Н он о оо 7 2 о МН нути МН зу Мн нути он о о оо о сн о м- г) МН НМ (НеО)в м 7 Н - но Н о о он но / СсоОН ноос он АснМ о М І МНАС Ї о МН НМ що МН ат НМ НМ, соон Нм т МН,
5-0. оон сооНн оо 2 2 о Мн вул Мн зу Мн зуль Мн зу Мн зу Нім зу Мн зу Мн зу он оо 2 2 о Мн нуля Мн вул Мн вул Мн ут Мн нути Нім нути Мн нути он о оо о р чо) МН НМ (Нову Ж о М М о н Н Е о сооН ноос о ; но | о | он он он АСНМ : МН "МНАс и ва нм ит МН, щА ОН Мн, ва МН нути МН у МН виття Нм нути МН ва он о он о о о у-», АХ (СНО)в МН Нм (Нос)5- МН ОН о М о НІ сло» МНАс о соон ноос но Х он | он МН АСНМ ; о МН о : І НМ НМ МН о м он Мн, т Я воко МН о ЗОН Мн, І " о х , он м" Мн о воно о : сх он М Н он о о о 2о 2 вон о МН о : он о : - м Н о НМ о ОН о : | он м" МН о зоно о : и он х о МН о ОН о : м он М Н он о о о 2 г но МН о о: и МН и Зо Мн о вия Мн и зон Мн о щи вон Нм ва Мн о щи вон он он ючи МН вчить о го о щі 7. г МН о о: и Мн о вия он о о г г нм МН о Е ех о вия нм Мн нож. АХ, Я вон соотщоос7 797 он перо НМ перо НМ ноос о о о НМ 2 2 МН о о о соон МН зе МН зе он он ючи НМ ви НМ що се о нм га г МН о о: МН зу МН нути он он ов тоо НМ ювт чо го о Нм 2, га МН о о: ит МН заитя он он ють о НМ ють о НМ ря о г о о НМ 2 2 МН о о: о и МН о зу МН о зу он в якій 7о являє собою осомн(сндмНАЯ- о соон но : он АснМ : НМ и Мн, 7 являє собою осомн(сНаМН-З- о соон но : он АснМ - нм и" МН 2 та 7ап являє собою осомн(сНімН-З- о соон но ; он АснМ : НМ и МН, або її фармацевтично прийнятні сіль або алкіловий естер.
3. Сполука за п. 1, в якій А являє собою занамівір.
4. Сполука за п. 1, в якій В являє собою бензол-1,2,4,5-тетракарбоксилат.
5. Сполука за п. 1, в якій КЕ" в кожному випадку незалежно являє собою -СООН та ЕЕ? являє собою -ОН.
6. Сполука за п. 1, в якій (А-І"| в кожному випадку незалежно представлений групою формули 2х, що має структуру: осомн(снаучНн-Я- о соон Но но АснМ : Ах
МН. в якій х являє собою 12 або ціле число від 0 до 10.
7. Сполука за п. 6, в якій 7х являє собою формулу 2п осомн(сНімН-З- о соон но : он АснМ : Ах
МН.
8. Сполука за п. 1 формули:
он юс» о НМ юс» о НМ юю» о о о НМ 7 г МН о о: АТ МН о зу МН вул он в якій 7и являє собою осомн(сНімН-З- о соон но т он АснмМ - Ах
МН. або її фармацевтично прийнятні сіль або алкіловий естер.
9. Фармацевтична композиція, яка містить сполуку за будь-яким з пп. 1-8.
10. Фармацевтична композиція за п. 9, де сполука являє собою сполуку за п. 5 або її фармацевтично прийнятні сіль або естер.
11. Фармацевтична композиція за п. 9, яка призначена для інгаляції, перорального введення, інтраназального, внутрішньоочеревинного введення, внутрішньовенного або внутрішньом'язового введення.
12. Фармацевтична композиція за п. 9, яка додатково містить додатковий активний агент.
13. Застосування сполуки за будь-яким одним з пп. 1-8 або її фармацевтично прийнятних солі або алкілового естеру у виробництві лікарського засобу для лікування або попередження вірусної інфекції грипу.
14. Застосування за п. 13, де вірусна інфекція грипу являє собою грип А, грип В, пташиний грип або резистентний до лікарських засобів штам грипу.
15. Застосування за п. 13 або 14, де інфекція являє собою інфекцію дихальних шляхів або системну інфекцію.
16. Застосування за п. 13, де лікарський засіб розроблено для інгаляції, перорального введення, інтраназального введення, внутрішньоочеревинного введення, внутрішньовенного або внутрішньом'язового введення.
17. Застосування за п. 13, де сполука вибрана з он юс То НМ юс о НМ юю чо го о НМ 7 га МН о о: ит МН зу МН зу он з в якій 7и являє собою осомн(сндчН-Я- о соон но ; он АсСНМ ; Ах МН, або її фармацевтично прийнятні сіль або алкіловий естер.
УМ й Н я їх Бо 4 з З а Я 5 і ВЕ і : і ! : : : З : ї ; : ї З ; х Ж і і ї я т : ї ї ї ї : ї 1 ї : дія до ї ї і З ! КИ Я ким Ж З їх ї що уже: х жк. і з Ж ТЕКИ У х Ж х " шо пак, і та ЕКО . до ї СБК Ме ЕЕ де ХМ я ї кни дих : : реа су. і ЕМЕЖЕ ІЩУК : і СК КЕ п к туууочї нзесдк ух ї МІ Ж 5 х УРИВКИ ТК т ярих У и ь і я : утрені ОЗ і ОКУК. ЗІАКИ :; :; ї т Є дру Е ї ї З : ії їчаКі : ! : Я і кт " ї : : ї : : ї ї ї : ї : : і : . : : ї ї х їх ї ї ї і : Ї ї і І : ах «Перанеекннв ака де клони, НОВУ вання ЗІ М под;
с с. н. їз уч «Маданання уки, ВЕОЧиВиних З БЕХ «Модавяння сиром нще дим мату, Ммеусунання М У Так г. Я
Фе ит нин ВУЖ КВ БОБ внниниснинння МОЖЕ ОБ МИХ д з ї МВ БО МОЖЕ Ка ї. ІК, птн КВК Ки ВК з Же 0 ВЩУХ, дуети пл ОБО КОЯ М ї ЖИМ. 0 КК сн - мої пикеиктититиииюти ки се и Киююн в Мккккн них ВОМУ, сконеиєєю сесииииенитимиия ЖИ ТК МОЖЕ СМ КОТ Ж МИ ЩЕ ЩЕ ЕЕ і МОХ ЖЖ 000 у сек Її плити тити Ин КИ. «КИМ КК Ж ММ солити - ТИ КЗ ВИК. ЖЕ дк ОТ МОТЕ МЕ МЕ МО Уооошщої ши син Ко ШКО ЯК т ях МО Ма БА БЕЗ -- ї Му ЖЕ МИЩЕ МИ М шиї регент КК Дня ни КО В ЩО БК бою мислити пместтюи тин МК МК КТ ТКООЯ ОТ ШОВ. МЕ ЖК. МВ х З МИ КК ЖК дя ї седмкО ї пали полити ТИ КИ КК ЖОМУ сдеоннляятитя тили - ПК КИХ МОЗ ш Тл ШТ ЖИ МИХ МЕ ше ї ФОП, дХ. КИ. ЗИ Ж шому З п о КК У МО их МО В КЕ ку 1 ІПТ о ПИИТ МИ. У І Ж ЛУ ХК нин їй сту 1 бика ти ЕК ЕК КИ Кия т ШАМУМ смоли ит й МИЛА ЕХ. ЖЕ ШИК що - хе Ме М МА дих Ж : Б БК ше БА МК КК, М пташие У МК и КЕ нн МК В М МКК ТАКЖЕ КЕ МКК МЕ МБ КВ ОМ ЕОК ШЕ КИ ДЕ ЕХ З О СК ан пункт Мен в а п т « х Я ш щ х 3 й ї ну шо х Кут укоси імп не хх М ЗУ МІХ ЕХ Ма ж и КО у МИХ ПП МЕ. ІЕ : МЕ Ж, МПК ит с КЕ, муеитиєсииииииии тити М ОА МІВ Ж 8 ух КО, МТУ ЖОВ М МЕ З В : МЕЖ ОВД фронту сю плине нн ЗДА ОЕМ» МОБ мя ща Е : ж ЖИ. ний кон ХХ Ол мн МКУ В МЕ Тл їх аа МИША МП СУК ЖІЛОХ ї ЩЕ г ТЕ ШИ хх пах. З паж КИМ и ВУ ж ЖЕКу сфони тику Кия ВЕК ШЕ МТ її я ХК СЕ ЖИ ВЕ ШТЕ МЕ х : МЕ КК ДИ ни КО, ЄооошУЯ ек, пнтятникюкх жен Джин Мини рн й ФО00ОЖЩД свити МЕ ЕК Ми КОС МЕ 00 М МЕ З ї ЩЕ ДИТ. ЖК со Ж шо пожити пото ВВЕ ЩОКУ миє си МЕ МО Мо МИТ хх ї МЕ ЖАХ ЖІ МИ їх кл ї. пшижно ин ВХ Ж Диня ДК КВ го т ся и у Кит ІТ же п х : МОЖ Б Ба я нимжи Її ЄМ КИ В У Я ОД «декани, ВШ ЖЕ ЖИ ПІВ гу МЕЖ З М ЖЕ МОХ ЩА шо ІБ Фо де ОБЖ ОБОХ М КІВ - ОХ ОЖЖХ ЖК. ЕХ они КК Пи ЗШ и сен п тя - Мих ОООЖШЕ В ИЮООООЖИ по ПА БО ВО БК ОА, тиша «ЖК пе КК сти МКК ою Ми Ки Ми, ПЕ АК одної т
І . в з х Кк хх «Е х. п с ї З ш ех 5 З я Ущови ЯНЕКУ доня ї хх УК ХХ ї ОО, ппеггеєииюн чо М ня р ї Я зе й кАдАННИ юю ху МЕЖТУ; срениииниикииииитии ок гу га МКУ смеининтуя ї ї УУКУМ, ХО Ву денетететниятететяня ще т -к Ше М М ДК суку Я пет т оре КВ т нд ЕК ООМКК у дення Зо ох МК МОУ ї ех ххх Ж МИ ШЕ ЖЕ й Ух ж М МЕ МК ЗЕ ЖИ Ж же 1 Я КОД ни ВК В КЕ МООТЕ ре Ж ООКЕЖ БК ОКХ М б МИХ ЖЕ сах ВИ ЖЕ ЖИТ ОБ БО МУ М. МКК ун ПЕК, І КК у я КК юку КК ори я х МО т 7 Я сх : у Кя ї Ж д Ї ех. УВО иа
ХЕЖМУВ. т. и и ШЕ ШКТ Я й : М МА Ко У о сво ше. ДЕ МК. Ж хо ЛАМКМ лу шию ШЕ Б Ж Ж В жЖщо МА 0ОВКА ШИ» - - ЕЕ ОВО МЕ М я ї ЖЕ Ж БИ ща р пуд Її ЕК ЩО 0 ДИ 0 А ЛЕМ : ЖАШЕ ЖЖ Ж СВ -- ї ЩЕ МЕ Р ї МУ ЖЕ ЖЕ г тд 0 ЩЕЖМ Сх МК ДЖЕК ДИ. ВЕК» Ох МОЖЕ ЖЕ ОБОВ ща : ІТ. Ж ЖЕО 00ОЖВ Зо сук пр МЖК КИ ОКИС щООСАЖМОї З МОЖЕ Ме оз Ше ШЛЕ ШК ХЕ МА З ше ЖЕ. МК. ОБЖ КВ МОМ Х я МЕ ЖИЕЕ ЗХ МИТА х : Х ЖК ОБЖ ВЕ хожащм КІ ШИЖ Ши ее я 0ОПВКО От МЕ ОООСЖЕ ЩЕ ВЕ ОО М ЖЕО БК ОЖщА сх ї МІХ Ж МЕ ПИ Е : МОЖ МЖЖ ЖОВ їй сті ХЕ . 00 ЖИЛИМ .О0СЩИМЖ.. СХИЛЮ РИЮОО и ОЯЖЕ, МИЛИХ У ЖЕ ХМ ХУ М МЕ М Сх ї МЕ МУ ЖЕ ЖЕ З с Її дов сх МОЖЕ ЖЖ. ВКА зі жи ЖОВ св, МО СВО ВЖК ВИЩЕ Х ЗУ ВЖИ АЛЕ СКЗ. МАОСВОХ МЕ ОБИЕ ОМ Ж КВ Мао ЖХ М МЕ ОМ ЖЖ М 0ОЖВ МИХ ЩЕ ти ОВК МЕ НВ. ЗХ М МИХ КЗ як ЗА ки км ик МК у ЖК у ЖК ї їх х ї ш ш т зов щ нови щі ТЕМУ шин й шили 1 ШИ Ж ШИЯ ШОЕ ди ДЛ МИТА ШІ І ХИДУКОТ ; дО ОМ МИНЕ ГО Ж : ДА МА В Е пк шипи ДИ. ЖК ВО Мт де. ОпЕЖУТШООї - ПИТИ М УА Іл МТМ М МІД ШЛЕ мот ЗЕ ї ДЛ ША МИ ІОТА Жодної ЖЕ МА МЕ ІА Ж оженх МЕ М МЕ їла ОП с : ЖЕ МЕ МІЙ пила ІЗ ЖЕ МТА Мих пла ЯК оди Її ЖЕ МИПЕ ВЛИТИ ШОВ Є ШК пронии ХЕ ЛЕ ШИ Хо ж и ЩИТ ШЕ ЩЕ ШИтЕ р шик ВЕ ШЕ ШЕ ШЕ Ж ООН МЕ ЖЖ си ЩЕ ХИЖІ ОЕ МЕ ПИЛ Ж - : ЖЕ КЕ Вл ї2Й Ж теки 1 ШИХ ШИХ ЖИМ ШІ МО смиУ ШИХ ШТ ЖЕ ПЕ а Пи яе х ре дІтУ М ДЕ ж : МЕ їх ХІІ ШИ Х стуки й ВЖЕ тий ЩА ШК Ос -- Ма Я БИ хх их ШІ М МІХ ДИ с : Ж. Ма ЖІ Ж Ж осі шк БОБ оз ПІ - шк ШТ» ЗИ МИТО. СЕ «Мк МУ Ма МОУ МА К ї ШИХ ВШ ША ШИТИ щ ї ШИЕ МИ Ж ших Х ФМ 07, КУ, дл сехих. МИОКЕ МЕ ДИ ХА МЕЖ о ШЕ ОО КШЖе се Ще МОВ ДИ ЖОВ ни М ЖИ МА ХХ ШЕ ШИ ІОВ Мао 0 ЖЕД МВ ХЕ ЖОХЕ КИТИ шик ОЖІЩХ Ма и М ЖИТ ЖК ЖИЛЕ ТК пе ух ММ ММК они МТК о АК ик нон я, ї сх пе ї т ш по ї -Е ш т Ц с : хи УМОВ ЕХ г рт. Б ху і сммжн ї . і Ж : Ж ІЖУМ Я дже линии пики птн зи ха ї Ж ХК У ї че ки 3 ХА еетитютю жест т тт ма ссхжххх о МУК й зл пигин пиття. зооитиня. ШО ЖК ду сни сяяти нн оон Ех Й : Ж оддиї як і оди Ще плин ХО ЗАТ х ї дин її диижж ЇХ. ХХХ, Ух ших ХУ кеВ В КУ я ДМ ей ки :ОЖА ЖЕ ВХ ЗХ ША МНЕ ЖОТЕ : Ж МЕ ЖЕ МИХ МЕ МО М зим ЗОН ЖЕ МЕ ВИНЕН Ж ЖЕ МЕ МЕ «2 КУМ син МК куки кн КК де ин ВИК - Бо дл ну. її п. т ї Ж ве хх М п ї дж К У кокНЯ Фіг З у с Ж дм. їхУ ї ї Мої з ї жо БВ ве г. поллкк пін - І х : У ха до : ХЕ ї Ж дао | ї : ш ЖЕК 1 синя ри и и Ж я шин о і поко п шия Ж : НУ Е І ЮА УВК З : ХЕ 1 с Ах : ї Її ЕК ча Я ї З ки ук Шо: І ЕК Умова: ДЕ тт Кк Е : ІЗ Люта оких мим МОЇ Я її щ З ІКОНИ МО Ж 1 з їх Етно х Х мої з з ІІ сном хе х : ЩЕ щк З : Бо ї Я ХУ : Ж вен ен о о ек Ж те Ті Ох ТІ ї ТІ ВІ ОХ ПН КК Ж ї ПК ПІ ПО Х ОХ ПІ Ж щ ІЗ ПК Х я З ЩО І КС м ТК Ж: ЗЕ т КО Я ЩО В Ж Я ЖК Ме щпше 11 КО ПК ПУ ЗЕ ІК Же х ТКУ ня БУХ М ще МУК ХУ Хе МК с МВ Ж : ї 5 «Їх Ж се Ух з х й М ТЕ Же КЕ І Зх: Що : - зх М с кс е умі гне че еку о км во Куй ееиния вірує вно нука їни питне лет ятати няття Кт или потен І Ж їй ВУ КА Я КУВ : ж діву ІНОЗ : З Щі Ії . ї ОК : їй, ВИК ут ую у Ко еф тА Н е її дну, ле ДИТИ Хна, Мч Як І щ МКС т не им і хр ня . а - п РО МАЛМОСЯ х ше с ІІ ТОЖ ї х. р її ОО ще шити лину ий х. в . її І 1 у х її ЕК же 4 . моляии пет неттняити рве Вт тт . й ще 5 ах и р оди ХУ к : ї НК : х х В 1 : СЯ У 1: І ХУ. з х. 5 1. о-ж'/Г щу сх я шій южін жк кни ик ки хі: ше Ії І І ХЖехенкі Му 1: : х МОЯ оте ню залу зт стен ототтнннно ЕДМю ї я ЖМИю ОСТ її: ух ї її ОМ : 1: : - ог г. -. скл па м хОш па Зк Боях жк С МОЖ ть тож пої : хщш со ЖЕ ТЕ Ж Б М Пол МУ СА : : хх мкцхи : ОО МИНЕ дики КК : : УК І ЖК АВ : : ТК екЖ ДВІМКИ ЖИ НК ВА не ! 5 8. хх 8. ХСН Бі кис Ух СЯ ККУ : іх АдйіехізвіовиВІі Немутантнего тиву НІ : ЕВ : Ї 5 пк : ТЕ КО кож Ії Іо дж о Кк Ії Ж РО КУТКУ КИТ кю ях зних Ії ї 5 ї х х т: їх пис х - ще ІОЖ ї ще не Н х х І: БО х х НЕ Жду у і М І І Ух ; її
Ж. зво сли У лин В ле й Жде ко Не Жов дк Не у Бу УМЖУ т плини пииии ж пити пии питати г топтати КК ДК ик и тк як :ї Ж ї : жі У ї т З ї тож «с -хк че сг ївсУт гу Ух сс кі жі Іру: Її в ЗЕ ще як ща В? МЖК За ї їх : оку Не ї : іо моме І : кока г, : Воді в В керу тах ня МЯ ВЯ : : АНВазіе они МНемутантного типу (НЯ ! їх З : ж ї ок : ОО ВК : її Ж ода орех її В : ве по Мох Ух м Ж о и Й по М 1: ЕОЖ шою ве Ії гОоЖ ом. К її : як ї х х тІ : меш х І: В ї ке 1: ще «ки Ко з: тоЄ ї и її ж Трах : п : ї ЖЕ, пре тянни ммтлйни нти орви пореют кати датованих плати тити плттют ку ХККАхк І її Її Х. ККУ : пики З пиття пжжжжя т кюжюя, - : ї їж 1 1 ВЕ ЖЕ Ж 5 За ЖІ З п Б ЗЕВКОЇ ЕХ ник ЕКО ВЕК ВК : : ок ВК В ВК :
Я. У се АНДевіаневвОЗКи мата (КМ, / іх Я і : : Ж : сх : ТЕ І БИКА КВ 7 М Ж Ві нн п . . П Ж вв Я НЕ : Її ШК ле й ннннннннннняня дн З т нотні нні ши Ж шкі У ; БА У п Ж ї х НИ : ря га яке штикіав ти аиии ни ит тлиииоинииутинития подання пеннвнання псиптттиииии, . НЕ ї ї Б ІЇ Ж ащі зх и : М з ! 2. п о пен нини ники ин «Жено Вк ння и КЕ Не Ії НЕ ; : Е ЖЕ та а за лу ї ца вах ВЕ: Бі мя ПБС ФВ а КАНД ви НОВА МО ТНК Е Є : : їЕ ЗК ПДК ї ОМ ї х 5 : ГОМ ї КУ 5 : в ЖЕ ХА ЖЖ пл т НОВ ОВ МАО: Ж з ї : ши КК ВК ЕК ЕМ : ! жене Я В дея 1 0 3 3 3 8 5 6 72 7177 Яке ие нн о Вони ок кн нн х х а хх я х х х їх їх ХЕ х аа ж з х І Й - безе Кк Кі х ; роки ! ак зх ак КЗ х ї З . ї ї 5 : Н ї хх х. х У х х х. З х У х їх до, яки дощ. скажакву еаяк, ди ї вовастио, мирлегеня та насавВих Ехо дДІВ. х сою які вон вк кх Ти рема фа юх Кк «І т ї пока анна о део вруєсного навантаження ї х мишен ЛЕ я ож нохц. я Жук Ж кім. М ЗЕ х - МЕМ: ІН з ЗНМ М до Деу Її х Ж -х т Есе 7 «Кук я х н "х лилия Е аа хх Б 3 ї ї х х 1: ї " У й хх Х ре кої ї У 5 М ї ЖЕ: те о М ї х . ї з : ОСІ ж 1 Хкфеех ї ее Х Ж Ж 1 шк що З і Ва: Ж я їх уд їх ї х же Мох : ї ї : ї - що з |і ав їх з м їх Ж жаї Ж ї х х п х ОО ово Яожо же ЕН ця ї що З х ї ї В Бу . ж її 5. Її ї ГоУ Ко или Ж ї : їх її х Б ІД : НЕ: жк ї ї Ек фо жив ОМА У Її ж х ш ЕТ : хх і. 7 х : ї й Х Дек фне о орд о ооо сою юю ою ооо дню ооо рою как ва дО УК БА тк аж ВХ ТЕ: ех АК МЕМ Ж Мща5 БМ С БЕ БІ ЇВ ББ БОБ АК ях. Я з ї До ї 3 ох АВК ї й ро Я ще Кн : - 2 - З ее З Ко евро вва щ 3 - ї ї -- Ж ї у ї сх ВЕ ХЕ є 5 я т родні омннкоі ВО КУ ХО ї що х Мих їх х МОЖ 3 Ся дн 3 ї Х Ж я хх Ж Ж 3 ик. в ВК КУ ще ї 5 Я ке ШИ м хе ї ОЗ С М ке ум ї ї шо М. Зо : деко ї ххх, З х ол Може ї Ж я хо їх ї Мох М Ей и озок ххх ї ше ОХ ще ко З х
МО. ї У КЕ 5. х о ХУ ж 3 5 Ж я Я ж : Ух : ш ! ее Кк Ж , Ж че ! х с су ХЕ х В ї х ї ї х ї -ї ї ДЕ е о ДК ЕК ккд кк Кк хх КК Кук юк хх Гама З Кт Жігмду У Крим я дань І» З МН День денетсне вебікування іх сх щ в т п у ж х 8 Х З ку Хо з Т г д х ння 3. о тд те З прнх, В З ТН Певе З ХО МАН Ук ВОНО 5 ме ЕН - я ї з шо ОВ Кое; ще Боже ОО М Її МК М ОВ ї КИ ще І: 0 ї т ОО КОХ З І ї о ОВ в: ї М ще і шо ; МЖК п о. : МОЄ Ящьх Ме о М Х : щКОО0ОМЕ Ме: ОО Е Же ок і і кох йо Х Ж :: 5 ще се з х зер (Е
5. КМУ Ж ї 5 їх СЕ й им МК ї ї ОХ с Ж ОО о. х ї ХЕ сх хх й ж су. хх т. КЗ «ще ОХ: ї х ЗХ ї п х те - М ї хе ВХ х З ВІ ноз ди Ж ХХ зо Х нка ХХ КК жх Зй М ж х СЯ З КЗ х х х Х У Но
Ж. я ж жу «М ях «й 2 а як а НЯ ШНМ Ко «У З ЕН об У су ЕХ Я в: ще й ка 5 ЖИ " х яв.
UAA201806293A 2015-11-20 2016-11-16 Сполуки для лікування або профілактики вірусних інфекцій грипу UA126654C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU2015904895A AU2015904895A0 (en) 2015-11-20 Compounds for medicinal applications
PCT/AU2016/051100 WO2017083914A1 (en) 2015-11-20 2016-11-16 Compounds for medicinal applications

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA126654C2 true UA126654C2 (uk) 2023-01-11

Family

ID=58717109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201806293A UA126654C2 (uk) 2015-11-20 2016-11-16 Сполуки для лікування або профілактики вірусних інфекцій грипу

Country Status (19)

Country Link
US (1) US11007274B2 (uk)
EP (1) EP3377487B1 (uk)
JP (1) JP7034913B2 (uk)
KR (1) KR20180083402A (uk)
CN (1) CN108473483B (uk)
AU (1) AU2016356726C1 (uk)
BR (1) BR112018010027A2 (uk)
CA (1) CA3005774C (uk)
EA (1) EA033921B9 (uk)
ES (1) ES2911027T3 (uk)
IL (1) IL259425B (uk)
MX (1) MX2018005999A (uk)
MY (1) MY195168A (uk)
PH (1) PH12018501076A1 (uk)
SG (1) SG11201803962WA (uk)
TW (1) TWI742015B (uk)
UA (1) UA126654C2 (uk)
WO (1) WO2017083914A1 (uk)
ZA (1) ZA201803214B (uk)

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2919890B2 (ja) 1988-11-11 1999-07-19 メディカル リサーチ カウンスル 単一ドメインリガンド、そのリガンドからなる受容体、その製造方法、ならびにそのリガンドおよび受容体の使用
JP3691075B2 (ja) 1996-11-14 2005-08-31 バイオタ、サイアンティフィック、マネージメント、プロプライエタリ、リミテッド 新規化合物およびその使用方法
AUPP913999A0 (en) 1999-03-12 1999-04-01 Biota Scientific Management Pty Ltd Novel chemical compounds and their use
AUPR001000A0 (en) 2000-09-08 2000-10-05 Biota Scientific Management Pty Ltd Novel chemical compounds and their use
AUPR879501A0 (en) * 2001-11-09 2001-12-06 Biota Scientific Management Pty Ltd Novel chemical compounds and their use
DE102004002132A1 (de) 2004-01-15 2005-08-11 Man Roland Druckmaschinen Ag Einrichtung zur Erzeugung einer Beschichtung von Druckprodukten einer Druckmaschine
JP5950390B2 (ja) 2012-03-26 2016-07-13 国立大学法人 琉球大学 新規ミモシン誘導体
US10130714B2 (en) * 2012-04-14 2018-11-20 Academia Sinica Enhanced anti-influenza agents conjugated with anti-inflammatory activity
GB201313201D0 (en) * 2013-07-24 2013-09-04 Univ East Anglia Virus Detection
CN105085455A (zh) * 2014-05-13 2015-11-25 中国科学院广州生物医药与健康研究院 唾液酸类似物或其药学上可接受的盐及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP7034913B2 (ja) 2022-03-14
IL259425A (en) 2018-07-31
PH12018501076A1 (en) 2019-01-28
MX2018005999A (es) 2018-11-22
EA033921B1 (ru) 2019-12-10
EA201891072A1 (ru) 2018-11-30
CA3005774A1 (en) 2017-05-26
KR20180083402A (ko) 2018-07-20
NZ742593A (en) 2023-08-25
JP2019502662A (ja) 2019-01-31
AU2016356726A1 (en) 2018-06-07
TWI742015B (zh) 2021-10-11
US11007274B2 (en) 2021-05-18
EA033921B9 (ru) 2020-01-22
US20180264128A1 (en) 2018-09-20
MY195168A (en) 2023-01-11
AU2016356726B2 (en) 2021-02-25
WO2017083914A1 (en) 2017-05-26
CN108473483B (zh) 2022-08-30
CA3005774C (en) 2024-01-09
EP3377487B1 (en) 2022-01-12
ZA201803214B (en) 2019-07-31
CN108473483A (zh) 2018-08-31
TW201726641A (zh) 2017-08-01
SG11201803962WA (en) 2018-06-28
BR112018010027A2 (pt) 2018-11-21
EP3377487A4 (en) 2019-07-17
IL259425B (en) 2021-10-31
ES2911027T3 (es) 2022-05-17
AU2016356726C1 (en) 2021-12-09
EP3377487A1 (en) 2018-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA3154618A1 (en) Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
CN104530415B (zh) 一种异官能化y型聚乙二醇衍生物、制备方法及其生物相关物质
CN108440564A (zh) 被取代的多环氨基甲酰基吡啶酮衍生物及其前药
TW201132365A (en) Lipids, lipid compositions, and methods of using them
IL122315A (en) Cyclic peptides and antifungal pharmaceutical compositions containing them
TW201021853A (en) Releasable cationic lipids for nucleic acids delivery systems
US20130171127A1 (en) Composition for regenerating normal tissue from fibrotic tissue
EP4361129A1 (en) Cationic lipid compounds used for nucleic acid delivery, composition and use
CA3220689A1 (en) Lipid nanoparticles and methods of use thereof
CA3214481A1 (en) Branched tail lipid compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
CN110312522A (zh) 赖氨酸特异性组蛋白脱甲基化酶-1抑制剂及其用途
JPH11505846A (ja) 環状ペプチド抗真菌薬
UA126654C2 (uk) Сполуки для лікування або профілактики вірусних інфекцій грипу
JP2018502851A (ja) アムホテリシンｂの尿素誘導体の簡便な合成法
US20170042923A1 (en) Reduced toxicity molecular conjugates of anti-fungal agents
US20150004695A1 (en) Lipid particle, nucleic acid transfer carrier, compound for manufacturing nucleic acid transfer carrier, method for manufacturing lipid particle, and gene transfer method
CN102727505A (zh) 红景天苷在防治肌萎缩疾病中的应用
US20130210887A1 (en) Dendrimers as non-viral vehicles for gene therapy
CN110290792A (zh) 吗啡喃衍生物和其用于治疗自体免疫、发炎或感染相关的障碍的组合物
US20230132763A1 (en) Fucosyltransferase specific inhibition using fucose mimetics
JPWO2016190310A1 (ja) タイトジャンクションの緩和剤、該緩和剤を含む薬剤吸収補助剤、及び該緩和剤を含む医薬組成物
US20240180954A1 (en) Cationic lipid
WO2024124148A1 (en) Lipid compounds and methods of making and use thereof
WO2015143535A1 (en) Small molecule inhibitors of gp120-mediated hiv infection and methods of use
NZ742593B2 (en) Compounds for medicinal applications