TWI804469B - 用於重量管理之以植物為基礎的組成物及使用方法 - Google Patents

Abstract

用於預防或治療肥胖的組成物和方法被描述。組成物包括一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制固醇調節元件結合蛋白1c (SREBP1c)啟動子的活性，以及其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的核因子活化B細胞κ輕鏈增強子(NF-κB)活性。

Description

用於重量管理之以植物為基礎的組成物及使用方法

相關申請案 本件專利案依據35 U.S.C. § 119(e)主張於2016年7月1日所提申的美國臨時專利申請案序號62/357,586的申請日的利益，它藉此被併入本案以做為參考資料。

本發明係有關用於重量管理之以植物為基礎的組成物及使用方法。

發明背景 鑑於全球的人類肥胖或不需要的增重的增加盛行率，對於預防肥胖和/或在早期階段對它作用和/或治療它的有效藥理學方式有一迫切的需要。在肥胖中，破壞性併發症是第2型糖尿病的增加發生率，其中60%可被直接地歸因於體脂肪增加。

現今十年來，肥胖被認為是一特徵在於一慢性低度發炎狀態的發炎性疾病。肥胖與發炎性細胞介素和急性期蛋白質的增加循環濃度有關。在編碼發炎因子的基因的局部向上調節已被描述，與巨噬細胞在脂肪組織的一顯著累積有關。此外，呈肥胖狀態的內臟脂肪組織的特徵在於前-發炎介質的較高表現和巨噬細胞的增加累積。由於內臟脂肪經由門靜脈直接地排出至肝臟，內臟脂肪組織的發炎可在葡萄糖和脂質肝代謝上具有不利的影響，亦即，增加的肝醣和脂質儲存以及增加的葡萄糖輸出。

在人體內的能量平衡藉由令碳(碳水化合物和脂質)穿梭朝向儲存或利用途徑而被調節。碳在碳水化合物與脂質之間的分佈被高度地整合和轉錄地控制。

預防肥胖和/或在早期階段對它作用的新穎和有效的藥理學方式被需要。

發明概要 某些具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬(Gynostemma )的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制固醇調節元件結合蛋白1c (Sterol Regulatory Element Binding Protein 1c, SREBP1c)啟動子的活性，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的核因子活化B細胞κ輕鏈增強子(Nuclear Factor Kappa-Light-Chain-enhancer of activated B cells, NF-κB)活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些其他具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些進一步的具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

在該等被描述的組成物中，該等萃取物的總量可在約0.005重量百分比與約50重量百分比之間；或在約0.0033重量百分比與約33.3重量百分比之間。該組成物可呈一適合用於口服攝取的形式，諸如一丸劑、一錠劑、一膠囊、一膠囊型錠劑(caplet)、一糖衣錠、一粉末、一液體、一凝膠、一糖漿、一漿體、一懸浮液、一補充劑(亦即，營養補充劑)。該組成物可以是一藥學的藥物或補充劑、一非處方藥物或補充劑或一食品產品或補充劑。該組成物可用於治療或預防肥胖。該組成物可包括一藥學上或保健營養學上(nutraceutically)可接受的載體、佐劑或賦形劑的至少一者。

某些進一步的具體例有關於一種用於在一個體中治療或預防肥胖的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一種含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度，以及其中該組成物降低該個體的重量達至少5%。該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性。該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性。

某些進一步的具體例有關於一種用於在一個體中抑制SREBP1c啟動子的活性的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一種含有一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，以及其中該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的濃度。

又某些進一步的具體例有關於一種用於在一個體中抑制經IL-1β刺激的NF-κB的活性的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一種含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的濃度。

在該等被描述的方法中，該投予被完成以治療或預防糖成癮、不需要的體重增加、肥胖或代謝症候群的至少一者。該個體是肥胖的或有肥胖的風險。該被投予的組成物可呈一適合用於口服攝取的形式，諸如一丸劑、一錠劑、一膠囊、一膠囊型錠劑、一糖衣錠、一粉末、一液體、一凝膠、一糖漿、一漿體、一懸浮液、一補充劑。該被投予的組成物可以是一藥學的藥物。該被投予的組成物可以是一非處方藥物。該被投予的組成物可在一食品產品中。

本發明的這些以及其他特徵和優點在考量本較佳實施例的下列詳細說明、觀看連同隨文檢附的圖式後將變得顯而易見的。

較佳實施例之詳細說明 要被瞭解的是：被描述的組成物和方法不限於在此所描述的特定組成物、方法學或規程。進一步，除非另有定義，所有在此所使用的技術和科學術語具有與一熟習本發明所屬技藝者慣常瞭解的相同意義。亦被瞭解的是：在此所使用的術語是僅用於描述特定具體例的目的，並且不被意欲限制本發明的範疇，它將僅由申請專利範圍所限制。 在某些具體例中，一固醇調節元件結合蛋白1c (SREBP1c)啟動子抑制劑可被投予至一個體以在身體內抑制 SREBP1c啟動子活性。SREBP1c是一被發現以控制重新脂質生成途徑(denovo lipogeneic pathways)(亦即，自碳水化合物來源的脂質形成)的轉錄因子。SREBP1c是特別地重要的在過量碳水化合物攝取(這是一導致過重和肥胖的常見情節)的期間轉錄地調節碳水化合物朝向脂肪酸和三酸甘油酯合成的通量。令人驚訝地，如這裡所顯示的，綠茶和絞股藍屬的植物成分或植物萃取物的一摻合物提供一SREBP1c啟動子抑制劑活性的一協同抑制。沒有受一理論的約束，在SREBP1c啟動子活性上的效用不是起因於單獨的綠茶或絞股藍屬萃取物，而是僅當這兩者被組合成一組成物時。因此，被相信的是：在這兩個萃取物中“所有”植物性化合物的組合有助於一SREBP1c啟動子抑制劑活性的協同抑制。SREBP1c啟動子活性的此抑制可有效地預防和/或降低在身體內來自碳水化合物來源的脂質形成。存在於身體內的碳水化合物可衍生自糖類，諸如含果糖的糖(例如，果糖、蔗糖或高果糖玉米糖漿)、可在身體內被轉化成果糖的糖(例如，山梨糖醇)、葡萄糖、碳水化合物(例如，澱粉)或任何其他來源。在過量碳水化合物攝取的期間碳水化合物朝向脂肪酸和三酸甘油酯合成的增強通量和SREBP1c啟動子活性可促成各種不同的病況(例如，肥胖、代謝症候群、腎疾病、前期糖尿病、糖尿病、三磷酸腺苷(ATP)消耗、單核球趨化蛋白-1 (monocyte chemotactic protein-1, MCP‑1)產生、胰島素抗性或腎內尿酸生產)。SREBP1c啟動子活性的抑制可以是有益的用於支持重量管理(例如，在過量碳水化合物攝取和相關的熱量攝取的期間藉由轉錄地調節碳水化合物朝向脂肪酸和三酸甘油酯合成的通量)並且提供一預防肥胖和/或在早期階段作用對它作用和/或治療它的有效藥理學方式。

SREBP1c啟動子活性的抑制可有效地降低來自碳水化合物來源的脂質形成(它可有助於過重、肥胖、代謝症候群或其他病況)。降低來自碳水化合物來源的脂質形成可以是有益的用於支持重量管理(例如，藉由轉錄地調節碳水化合物朝向脂肪酸和三酸甘油酯合成的通量)。

在某些其他具體例，一核因子活化B細胞κ輕鏈增強子(NF-κB)抑制劑可被投予至一個體以在身體內抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性。NF-κB是已被發現在肥胖中升高的前-發炎基因的一轉錄調節子。令人驚訝地，綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的植物成分或植物萃取物的一摻合物提供經IL-1β刺激的NF-κB活性的一抑制。經IL-1β刺激的NF-κB 活性的此抑制可有效地預防和或降低前-發炎細胞介素(它又被知曉有助於各種不同的病況，諸如被認為特徵在於身體內的前-發炎細胞介素的增加表現的慢性低度發炎病況的過重和肥胖)的表現。在身體內經IL-1β刺激的NF-κB活性的抑制可是有利的用於支持重量管理(例如，藉由降低前-發炎 細胞介素的表現)和提供一種預防肥胖和/或在早期階段對它作用和/或治療它的有效藥理學方式。

在此可被交換地使用的術語“個體”和“病患”意指一哺乳動物，特別地一先前已被診斷的人類。在一特別的具體例中，該個體是一有肥胖風險的個體或是一肥胖個體。

術語“肥胖”意指一特徵在於一過量的體脂肪的病況。肥胖的操作定義是根據身體質量指數(Body Mass Index, BMI)，它被計算為每高度(呈公尺)平方的體重(kg/m² )。肥胖意指一種藉此一其他方面健康的個體具有一BMI大於或相等於30 kg/m² 的病況，或一種藉此一有至少一合併症的個體具有一BMI大於或相等於27 kg/m² 的病況。

一“肥胖個體”是一具有一BMI大於或相等於30 kg/m² 的其他方面健康的個體或一具有一BMI大於或相等於27 kg/m² 的有至少一合併症的個體。一“有肥胖風險的個體”是一具有一為25 kg/m² 至小於30 kg/m² 的BMI的其他方面健康的個體或一具有一為25 kg/m² 至小於27 kg/m² 的BMI的有至少一合併症的個體。在亞裔人口中，與肥胖有關的增加風險可發生在一較低的BMI。在亞洲和亞太國家(包括日本)中，“肥胖”意指一種藉此一具有至少一需要減重或藉由減重而被改善的肥胖-誘發的或肥胖-相關的合併症的個體具有一BMI大於或相等於25 kg/m² 的病況。在這些國家的一“肥胖個體”意指一具有至少一需要減重或藉由減重而被改善的肥胖-誘發的或肥胖-相關的合併症的個體具有一BMI大於或相等於25 kg/m² 。在這些國家中，一“有肥胖風險的個體”是一具有一大於23 kg/m² 至小於25 kg/m² 的BMI的人。

如在此所使用的術語“固醇調節元件結合蛋白1c”或“SREBP1c”在本技藝具有它的一般意義。SREBP1c是一控制重新脂質生成途徑(亦即，來自碳水化合物來源的脂質形成)的轉錄因子。SREBP1c是特別重要的在過量碳水化合物攝取(它是一導致過重和肥胖的常見情節)的期間轉錄地調節碳水化合物朝向脂肪酸和三酸甘油酯合成的通量。

如在此所使用的“核因子活化B細胞κ輕鏈增強子”或“NF-κB”在本技藝具有它的一般意義。NF-κB是在肥胖中升高的前-發炎基因的一轉錄調節子。

術語“SREBP1c活性的抑制劑”、“SREBP1c活性抑制劑”或“SREBP1c啟動子活性的抑制劑”意指一具有一生物效用以抑制或顯著地降低SREBP1c啟動子的活性的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物(botanical extract)、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。

術語“經IL-1β刺激的NF-κB抑制劑”或“經IL-1β刺激的NF-κB活性抑制劑”或“經IL-1β刺激的NF-κB活性的抑制劑”意指一具有一生物效用以抑制或顯著地降低經IL-1β刺激的NF-κB的活性的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。

術語“組成物”意指一種治療、改善、促進、增加、管理、控制、維持、最佳化、修飾、降低、抑制或預防一與一自然狀態、生物過程或疾病或病症有關的特定病況之產品。例如，該被描述的組成物在一肥胖個體或一有肥胖風險的個體中調節或降低肥胖和類似之物。術語組成物包括，但不限於，包括一有效量的一萃取物(們)、它們的至少一組分或它們的一混合物或萃取物的一混合物的藥學的(亦即，藥物)、非處方(OTC)、化妝品、食品、食品成分或膳食補充組成物。

如此處所用的，術語“萃取物”、“植物萃取物(plant extract)”或“植物性萃取物(botanical extract)”意指一種包括呈一濃縮形式的植物(諸如綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果)的一物質的一活性成分(們)的呈一固體、黏質或液體物質或製劑的一形式的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。術語“萃取物”被意欲包括不僅一種藉由使用一選自於在水、1至4個碳原子的低級醇(諸如甲醇、乙醇、丁醇等等)、乙烯、丙酮、己烷、醚、氯仿、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、N,N-二甲基甲醯胺(N,N-dimethylformamide, DMF)、二甲基亞碸(dimethylsulfoxide, DMSO)、1,3-丁二醇、丙二醇和它們的一組合之中的溶劑而自綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果所產生的粗萃取物，而且在此一溶劑中的該粗萃取物的一分離部分。任何萃取方法可被採用(一些示範性方法被提供在下面)，只要它確保該活性成分(們)的萃取和保存。植物性萃取物的實例包括來自綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物。該等綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物亦可被商業地獲得自各種不同的來源。

術語“藥學上可接受的”意指那些適合供使用與人類和低等動物的組織接觸而沒有過度毒性、不相容性、不安定性、刺激性和類似性質，與一合理的利益/風險比相稱的藥、藥物、萃取物或惰性成分。

術語“投予(administer)”、“投予(administered)”、“投予(administers)”和“投予(administering)”被定義為導入或提供一組成物給一個體以執行它的所欲功能。投予可藉由任何適合的途徑而被進行，諸如口服地、鼻內地、非經腸道地(靜脈內地、肌肉內地、腹膜內地或皮下地)、直腸地或局部地。

如此處所用的，術語“有效量”或“治療有效量”意指一在劑量有效的並且歷時足以達到一所欲結果的時間的期間的量。例如，該“有效量”或“治療有效量”意指當投予一個體(例如，哺乳動物(諸如一人類))時是足以達到治療(諸如在一個體中降低重量或降低肥胖和類似之物)的一純組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合的量。構成一“有效量”或“治療有效處理”的這個揭示的一組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分的量將變化，視該活性劑或該化合物、要被治療的病況和它的嚴重性、投予的方式、治療的持續時間或要被治療的個體的年齡而定，但是可藉由一熟習此技藝者考量他自己的知識和這個揭示而被例行地決定。

術語“降低(reduce)”、“降低(reducing)”、“抑制(inhibit)”或“抑制(inhibiting)”意指在綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的一植物成分或植物萃取物或者這些植物萃取物的一組合的存在下，一在基因或蛋白質活性和/或表現和/或它的下游作用的減少或降低。該抑制可以是協同的或加成的或預測的。術語“協同的”意指當被組合時產生一要比個別萃取物的總和(亦即，被預測的反應)、貢獻等等更大的總效用的萃取物的交互作用；協同作用。

術語“降低肥胖”指明在投予該等被描述的組成物的期間或之後，一在個體的體重中可測量的降低。例如，一個體的重量可被降低達自約5%至約60%或更多。一個體的重量可被降低達至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%或更多。要被瞭解的是：在上面所例示的示範性百分比之間的百分比亦被包括。

如此處所用的，術語“載體”意指一種有助於維持一或多個植物萃取物在一可溶和均質狀態的呈一適合用於投予的形式的組成物，它是無毒的並且不以一有害方式與其它組分交互作用。

除非另有指示，遍及這個揭示的所有被引述的比例和百分比是按照重量。

在一實例中，一種用於抑制SREBP1c啟動子的活性的組成物可包括一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物的一摻合物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物 協同地抑制SREBP1c啟動子的活性；該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

在另一個實例中，一種用於抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性的組成物包括一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

該等綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物可使用任何適合的萃取技術而被獲得。一般而言，一植物的任何部分可被使用以產生該植物萃取物包括，但不限於，根、莖、葉、花、果實以及果莢。該植物的一或多個部分可被萃取以產生該植物萃取物。在這個方面，該植物的一或更多部分可被收集和研磨。之後，該被研磨的材料可以一適合的溶劑而被萃取。溶劑可在一濃縮步驟被移除。例如，該被萃取的材料可被篩選或過濾以產生一上澄液和一濾餅。該濾餅可被擠壓以移除該液體的一實質部分，它可被添加至該上澄液。該濾餅接著可被脫水和被使用作為一纖維來源。該上澄液可被蒸餾以移除該溶劑或它的一部分以形成一植物萃取物液體濃縮物。該被移除的溶劑可被再循環。該濃縮物可被乾燥(例如，藉由噴霧乾燥)以提供一乾燥的植物萃取物。該乾燥的植物萃取物可如在此所描述的而被分析和/或標準化。

該溶劑可包括醇、水或它們的一組合。示範性醇溶劑可包括，但不限於，C1-C7醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇和丁醇)、水-醇(hydro-alcohols)，或醇和水的混合物(例如，含水乙醇(hydroethanol))、多元醇(例如，丙二醇和丁二醇)以及脂肪醇。這些醇溶劑的任一者可呈一混合物的形式而被使用。在一實例中，該植物萃取物使用乙醇、水或它們的一組合(例如，一約95%乙醇和約5%水的混合物)而被萃取。

在一實例中，該綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物可使用一有機溶劑萃取技術而被獲得。在另一個實例中，溶劑連續分餾可被使用以獲得該萃取物(們)。全水-乙醇萃取技術亦可被使用以獲得該萃取物(們)。一般而言，這個被意指為一種一次性萃取(lump-sum extraction)。在過程所產生的植物萃取物可包括一廣泛的各種不同的存在於該被萃取的材料中的植物性化合物。該等植物性化合物可以是脂溶性或水溶性。在收集該萃取溶液之後，該溶劑可被蒸發，導致該萃取物。

總乙醇萃取亦可被使用以獲得該等萃取物。這個技術使用乙醇做為溶劑。這個萃取技術可產生一種包括除了水溶性化合物外還有脂溶性和/或親脂性化合物的植物萃取物。

一可被使用以獲得該等綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物的萃取技術的另一個實例是超臨界流體二氧化碳萃取(SFE)。在這個萃取操作程序中，要被萃取的材料可不被不暴露至任何有機溶劑。相反的，在超臨界條件(＞31.3℃和＞ 73.8巴)下，二氧化碳可被使用作為該萃取溶劑(有或沒有一修飾劑)。那些熟習此技藝者將瞭解：溫度和壓力條件可被改變以獲得萃取物的最佳產率。這個技術可產生一脂溶性和/或親脂性化合物的萃取物，相似於一全己烷和乙酸乙酯萃取技術。

該植物萃取物可被標準化至一規定量的一特定化合物。例如，該植物萃取物可被標準化至一規定量的一活性成分或植物性化合物。例如，該綠茶的植物萃取物可被標準化至約40%的表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)、≥ 70%兒茶素(catechins)和6%-13%咖啡因。

存在於該等被描述的SREBP1c啟動子活性-抑制和或在該經IL-1β刺激的NF-κB活性-抑制組成物中的植物萃取物的量可視數種因素而定，包括抑制的所欲位準、一特定植物萃取物或它的組分的抑制位準以及其他因素。較佳地，若該等2種萃取物存在，各個植物萃取物可存在在一以該總組成物的重量計自約0.005重量百分比至約50重量百分比的量，若3種萃取物存在，各個植物萃取物可存在在一以該總組成物的重量計自約0.0033重量百分比至約33.3重量百分比的量。

綠茶

綠茶是由茶樹(Camellia sinensis )葉子製成。數種品種的綠茶存在，它可由於生長條件、園藝、生產加工和收穫的時間而實質地不同。兩個主要品種被種植：關於中國茶的中國小葉種(Camellia sinensis var.sinensis )和關於印度阿薩姆茶的阿薩姆種(Camellia sinensis var.assamica )。術語“綠茶的萃取物”意指一種呈一固體、黏質或液體物質或製劑的一形式的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。該物質或製劑可包括呈一濃縮形式的綠茶的任何知曉的品種的一物質的一活性成分(們)。

葉子是4–15 cm (1.6–5.9 in)長和2–5 cm (0.79–1.97 in)寬。新鮮葉子含有約4%咖啡因，以及相關化合物(包括可可鹼)。幼齡的淺綠色葉子較佳地被收穫用於茶生產；它們具有短的白色毛在底面。較老的葉子是深綠色。不同的葉子年齡產生不同的茶品質，因為它們的化學組成物是不同的。通常，頂端(芽)和最前面的二至三片葉子被收穫用於加工。這個手採摘每一至二星期被重複。

綠茶萃取物可含有一廣泛範圍的抗-發炎、抗氧化和抗致癌物特徵。綠茶可能是有幫助的在治療慢性發炎狀態。在綠茶萃取物中的主要抗氧化成分是綠茶兒茶素(green tea catechins, GTC)，其包含有四種主要的表兒茶素衍生物(epicatechin derivatives)，那就是，表兒茶素(epicatechin, EC)、表沒食子兒茶素(epigallocatechin, EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)以及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG)，其中，EGCG佔超過40%的總含量。其他組分包括三種類的類黃酮(flavonoids)，被知曉為堪非黃酮醇(kaempferol)、槲皮素(quercetin)和楊梅黃酮(myricetin)。一要比在許多其他植物明顯地更高含量的楊梅黃酮被偵測在茶和它的萃取物，並且這個高濃度的楊梅黃酮可能與茶和它的萃取物的生物活性有一些關聯。被相信的是：綠茶的所有成分組合以絞股藍屬有助於一SREBP1c啟動子抑制劑活性的協同抑制和/或組合以絞股藍屬和未成熟的蘋果有助於經IL-1β刺激的NF-κB活性的抑制。

絞股藍屬

絞股藍屬是在瓜科(cucumber)、葫蘆科(gourd)和甜瓜科(melon family)的多年生攀緣藤本植物的一屬，包含有至少19個物種，全部原產於東方或遠東。絞股藍屬的選擇物種包括聚果絞股藍(G. aggregatum)、緬甸絞股藍(G. burmanicum)、心籽絞股藍(G. cardiospermum)、翅莖絞股藍(G. caulopterum)、扁果絞股藍(G. compressum)、廣西絞股藍(G. guangxiense)、G. intermedium、疏花絞股藍(G. laxiflorum)、光葉絞股藍(G. laxum)、長梗絞股藍(G. longipes)、小籽絞股藍(G. microspermum)、白脉絞股藍(G. pallidinerve)、G. papuanum、五柱絞股藍(G. pentagynum)、毛果絞股藍(G. pentaphyllum)、毛絞股藍(G. pubescens)、單葉絞股藍(G. simplicifolium)、喙果絞股藍(G. yixingense)以及小果絞股藍(G. zhejiangense)。絞股藍屬萃取物可以是絞股藍屬的物種的任一者的一萃取物。術語“絞股藍屬的萃取物”意指一呈一固體、黏質或液體物質或製劑的形式的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。該物質或製劑可包括呈一濃縮形式的絞股藍屬的任何所知曉的品種的一物質的一活性成分(們)。

被相信的是：絞股藍屬的所有成分組合以綠茶萃取物有助於一SREBP1c啟動子抑制劑活性的協同抑制和/或組合以綠茶和未成熟的蘋果有助於經IL-1β刺激的NF-κB活性的抑制。

未成熟的蘋果

蘋果和蘋果產品被廣泛地認為是人類飲食的重要部分，因為它們含有數種營養和健康-有益的組成(包括有機酸、膳食纖維、維生素和多酚)(Schieber et al., 2001)。這些組成的有益效用已被歸因於多酚和它的抗氧化能力。在蘋果中多酚的主要種類是黃烷-3-醇(flavan-3-ols)(兒茶素、表兒茶素和原花青素(proanthocyanidin))、羥基肉桂酸(hydroxycinnamic acids)(漂木酸(chlorogenic acid)和p-香豆醯奎尼酸(p-coumaroylquinic acid))、二氫查耳酮(dihydrochalcones)(根皮苷(phloridzin)和根皮素葡萄糖苷(phloretin glucoside))和黃酮醇(flavonols)(槲皮素和芸香苷(rutin))(Schieber et al., 2001；Alonso-Salces et al., 2005)。有趣地，這些多酚的含量強烈地視它們的品種和成熟度而定(Akiyama et al., 2005；Wu et al., 2007)。特別地。總酚含量(TPC)(Park et al., 2004；Renard et al., 2007)、原花青素(Akiyama et al., 2005)和類黃酮(Awad et al., 2001)被包含在未成熟的蘋果要比在成熟的高出10倍。

如上面所注意到的，未成熟的蘋果含有相當高位準的多酚(Adil et al., 2007；Sudha et al., 2007)，它已被報導具有各種不同的生理功能，包括抗-過敏活性(Kojima et al., 2000；Akiyama et al., 2005)、抗-癌活性(Yanagida et al., 2000)以及抗-動脈硬化活性(D’Angelo et al., 2007)。為了改善植物多酚萃取效率，碳水化合物-水解酵素(諸如果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶和聚葡萄糖酶)的使用現今已被導入以釋放細胞壁複合多酚(Meyer et al., 1998；Landbo and Meyer, 2001；Sørensen et al., 2005)，以及萃取技術(諸如超音波-輔助萃取)(Liyana-Pathirana and Shahidi, 2005；Wang et al., 2008)。這些酵素可在崩解植物細胞壁基質和促進多酚萃取扮演一角色(Renard et al., 2001；Pinelo et al., 2006；Stalikas, 2007；Le B ourvellec et al., 2009)。許多加工變數(諸如酵素、基質、溶劑、溫度等等)可影響在植物的多酚萃取效率(Meyer et al., 1998)。利用果膠酶用於增強蘋果渣多酚的萃取效率的方法已被描述(Zheng et al., 2008)。

術語“未成熟的蘋果”意指一沒有被充分製備、發育和成熟的蘋果；不容易消耗的蘋果。未成熟的蘋果可來自任何品種的蘋果樹，以及特別地來自在蘋果屬(genusMalus. )(例如，蘋果(Malus domestica ))的最廣泛地種植的物種的蘋果。術語“未成熟的蘋果的萃取物”意指一種呈一固體、黏質或液體物質或製劑的一形式的純化合物、組成物、萃取物、植物性萃取物、萃取物混合物、植物性萃取物混合物、該萃取物的組分和/或活性劑或成分或者它們的一組合。該物質或製劑可包括呈一濃縮形式的未成熟的蘋果的任何知曉的品種的一物質的一活性成分(們)。

被相信的是：所有未成熟的蘋果的成分組合以綠茶和絞股藍屬有助於經IL-1β刺激的NF-κB活性的抑制。

組成物

某些具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物之組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些其他具體例有關於一種由一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些進一步的具體例有關於一種實質上由一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些其他具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物的組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些其他具體例有關於一種由一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些其他具體例有關於一種實質上由一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些進一步的具體例有關於一種包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些進一步的具體例有關於一種由一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

某些進一步的具體例有關於一種實質上由一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和未成熟的蘋果的萃取物所構成的組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。

該等被描述的組成物可適合用於投予一個體以支持重量管理，預防、治療或降低不需要的增重、肥胖、糖尿病、胰島素抗性或代謝症候群。該個體可以是，例如，一肥胖個體或一有肥胖風險的個體。

該等組成物可以是包括有效量的萃取物、它們的至少一組分或它們的一混合物之藥學(亦即，藥物)組成物、非處方(OTC)組成物、化妝品組成物、食品組成物、食品成分或膳食補充劑組成物。特別地，該等組成物可以是包括各個呈一有效量的綠茶和絞股藍屬和選擇性地未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物之藥學(亦即，藥物)組成物、非處方(OTC)組成物、化妝品組成物、食品組成物、食品成分或膳食補充劑組成物。

在該等經描述之用於口服的、舌下的、皮下的、肌肉內的、靜脈內的、穿皮的、局部的或直腸投予之藥學組成物中，活性萃取物的摻合物可呈一單位投予形式(作為一具有慣常的藥學載體的混合物)而被投予至動物和人類。適合的單位投予形式包含有口服-途徑形式(諸如錠劑、凝膠膠囊、粉末、顆粒和口服懸浮液或溶液)、舌下的和頰的投予形式、氣溶膠、植入物、皮下的、穿皮的、局部的、腹膜內的、肌肉內、靜脈內、表皮下的、穿皮的、椎管內和鼻內的投予形式以及直腸的投予形式。

在一實例中，該等被描述的組成物可個別地呈一固體劑量形式(例如，錠劑或膠囊型錠劑)被提供，包括，例如，自約50 mg至約2 g的各個植物萃取物；在所提供的劑量範圍內的任何劑量範圍和劑量是適合的，例如，該等被描述的組成物可個別地呈一固體劑量形式(例如，錠劑或膠囊型錠劑)被提供，包括約50 mg、約10 mg、約150 mg、約200 mg、約300 mg、約400 mg、約450 mg、約500 mg、約550 mg、約600 mg、約650 mg、約700 mg、約750 mg、約800 mg、約850 mg、約900 mg、約950 mg、約1 g，以及約2 g。在上面直接地提到的示範性範圍和劑量之間的其他劑量範圍亦被預期。該組成物可被投予以使各個植物萃取物的劑量是自每天約150 mg至每天約2 g。在某些具體例中，該組成物可被投予以使各個植物萃取物的一劑量是每天約50 mg、每天約10 mg、每天約150 mg、每天約200 mg、每天約300 mg、每天約400 mg、每天約450 mg、每天約500 mg、每天約550 mg、每天約600 mg、每天約650 mg、每天約700 mg、每天約750 mg、每天約800 mg、每天約850 mg、每天約900 mg、每天約950 mg、每天約1 g，以及每天約2 g。該組成物可有如一單一劑量或呈多劑量而被投予。在一實例中，該組成物可被投予每天上達三劑量。例如，該組成物可在飯前被投予。

該劑量可以呈一可對一些個體有效的單一單位而被選擇以提供一抑制效用的位準，同時亦容許相對簡單的劑量增加以提供可對其他個體有效的抑制效用的其它位準。在一實例中，該等被描述的組成物可呈一適合用於口服攝取的形式。該形式可被配置有如一被意欲提供一特定劑量的各個植物萃取物的單一劑量形式。例如，該單一劑量形式可以是一丸劑、一錠劑、一膠囊或一飲料(drink shot)。如上面所注意到的，該單一劑量形式可包括自約50 mg至約2 g的各個植物萃取物在該被投予的組成物。

在一實例中，該載劑可包括鹽水、緩衝鹽水、右旋糖或水。該載劑可包括適合的賦形劑或助劑以促進加工該等活性化合物成為適合用於投予一個體的製劑。該組成物可藉由任何適合的途徑而被投予，包括口服的、靜脈內的、肌肉內的、動脈內的、脊髓內的、椎管內的、腦室內的、穿皮的、皮下的、腹膜內的、鼻內的、非經腸道的、局部的、舌下的或直腸的方式。口服劑量形式可包括錠劑、丸劑、糖衣錠、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿體、懸浮液以及類似之物。

在某些具體例中，該等組成物含有藥學上可接受的用於一能夠被注射的配方的載劑。這些可特別是等張的、無菌的鹽水溶液(磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣或氯化鎂和類似之物或此等鹽的混合物)，或者乾燥的，特別地冷凍乾燥的組成物(其在視情況而定添加無菌水或生理鹽水之後允許可注射的溶液的組成)。

適合用於可注射的用途的藥學形式包括無菌水性溶液或分散液；包括芝麻油、花生油或水性丙二醇的配方；以及用於無菌可注射的溶液或分散液的即時製劑的無菌粉末。在所有例子中，該形式必須是無菌的並且必須是流體至容易的可注射性存在的程度。它在製造和儲存的條件下必須是安定的，並且必須被保存對抗微生物(諸如細菌和真菌)的污染作用。

包含有綠茶、絞股藍屬和選擇性地未成熟的蘋果的萃取物作為自由鹼和藥學上可接受的鹽類的溶液可被製備在適合被混合以一表面活性劑(諸如羥丙織維素)的水中。分散液亦可被製備在甘油、液體聚乙二醇和它們的混合物以及在油中。在儲存和使用的正常條件下，這些製劑含有一防腐劑以防止微生物的生長。

SREBP1c啟動子活性或表現和經IL-1β刺激的NF-κB活性或表現的抑制劑可被配方成一種呈一中性或鹽形式的組成物。藥學上可接受的鹽類包括酸加成鹽(與蛋白質的自由胺基基團而被形成)，並且其以無機酸(諸如，例如，鹽酸或磷酸)或此等有機酸(如乙酸、草酸、酒石酸、苦杏仁酸和類似之物)而被形成。與自由羧基基團所形成的鹽亦可衍生自無機鹼(諸如，例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵)以及此等有機鹼(如異丙胺、三甲胺、組胺酸、普魯卡因和類似之物)。該載體亦可以是一溶劑或含有例如水、乙醇、聚醇(例如，甘油、丙二醇和液體聚乙二醇和類似之物)、它們的適合混合物和蔬菜油的分散介質。適合的流動性可被維持，例如，藉由一包衣(諸如卵磷脂)的使用、藉由在分散的情況下維持所需的粒徑，以及藉由表面活性劑的使用。微生物的作用的預防可藉由各種不同的抗細菌和抗真菌劑(例如對羥苯甲酸酯(parabens)、氯丁醇、酚、山梨酸(sorbic acid)、乙汞硫柳酸鈉(thimerosal)和類似之物)而被引起。在許多例子中，較佳的是包括等張劑(例如，糖或氯化鈉)。該等可注射的組成物的延長吸收可藉由在該等組成物中使用延遲吸收的試劑(例如單硬脂酸鋁和明膠)而被引起。

無菌可注射的溶液藉由併入該等呈所需量的抑制劑與各種不同的上面所列舉的其他成分(如被要求)在適當的溶劑中，繼而過濾殺菌而被製備。一般而言，分散液藉由併入各種不同的殺菌活性成分至一含有鹼性分散介質和來自上面所列舉的那些的所需其它成分的無菌載劑內而被製備。在用於製備無菌可注射的溶液的無菌粉末的例子中，製備的較佳方法是真空-乾燥和冷凍-乾燥技術，它自一先前-無菌過濾的溶液產生一具有該活性成分加上任何額外的所欲成分的粉末。

在配方後，溶液可以一與劑量配方相容的方式和以此量是治療有效的而被投予。該等配方呈各種不同的劑量形式而被容易地投予，諸如上面所描述的可注射的溶液的類型，但是藥物釋放膠囊和類似之物亦可被採用。

關於配於一水性溶液的非經腸道的投予，例如，若需要的話該溶液應該被適當地緩衝，並且該液體稀釋劑首先以足夠的鹽水或葡萄糖而使等張。這些特定水性溶液特別適合用於靜脈內的、肌肉內的、皮下的和腹膜內的投予。鑒於本發明，可被採用的無菌水性介質將是那些熟習此技藝者所知曉。例如，一劑量可被溶解在1 ml的等張NaCl 溶液並且被添加至1000 ml的皮下灌注液(hypodermoclysis fluid)或者在注入的建議位址而被注射。在劑量的一些變化將必然地發生，視要被治療的個體的病況而定。在任何情況下，負責投予的人將決定用於個別個體的適當劑量。SREBP1c啟動子活性或表現和經IL-1β刺激的NF-κB活性或表現的抑制劑可被配方在一治療混合物內以含有自約50 mg至約2 g的各個植物萃取物或組分。多劑量亦可被投予。

除了該等被配方用於非經腸道的投予(諸如靜脈內的或肌肉內的注射)的所述萃取物以外，其他藥學上可接受的形式包括，例如錠劑或其他固體用於口服投予；脂質體配方；定時釋放膠囊；以及現今被使用的任何其他形式。

在某些具體例中，該等被描述的組成物將展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度。另擇地，該等被描述的組成物將展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一小於約50 μg/mL的各個萃取物的濃度。另擇地，該等被描述的組成物將展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一小於約40 μg/mL、小於約30 μg/mL、小於約20 μg/mL、小於約10 μg/mL、小於約5 μg/mL或小於約2 μg/mL的各個萃取物的濃度。

在某些具體例中，相對於缺乏該等萃取物，該包括綠茶和絞股藍屬的萃取物的一摻合物之組成物可抑制SREBP1c啟動子活性達至少約10%，另擇地，至少約50%，另擇地，至少約75%，另擇地，至少約90%，或至少約100%。該抑制是協同的。令人驚訝地，被證明的是：如相較於該等個別的萃取物和一預測的效用，百分比抑制是顯著地更高和協同的對於綠茶和絞股藍屬的一摻合物(在10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL和60 μg/mL的各個萃取物的試驗濃度)。參見圖 1A-D 。

在某些具體例中，相對於缺乏該等萃取物，該包括綠茶、絞股藍屬和未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物之組成物可抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性達至少約10%，另擇地，至少約50%，另擇地，至少約75%，另擇地，至少約90%，或至少約100%。令人驚訝地，被證明的是：如相較於被使用作為一正對照的純化合物Bay 11-7085，未成熟的蘋果、綠茶和絞股藍屬萃取物的一摻合物劑量依賴地抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性(在100 pg/ml的各個萃取物的試驗濃度)。參見圖 3 。

下列示範性組成物(具有一量的各個活性成分在所指示的範圍)將提供可被使用以在一個體中治療或預防肥胖或類似之物的數種組成物的一者：

方法

該組成物可適合用於投予至一個體以支持重量管理。在一實例中，該組成物可被投予至一個體以治療或預防肥胖。因此，某些具體例有關於一種用於在一個體中治療或預防肥胖的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和選擇性地一未成熟的蘋果的萃取物的一摻合物之組成物，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的各個萃取物的濃度，以及其中該組成物降低該個體的重量達至少5%。該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制固醇調節元件結合蛋白1c (SREBP1c)啟動子的活性。該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性。

某些進一步的具體例有關於一種用於在一個體中抑制固醇調節元件結合蛋白1c (SREBP1c)啟動子的活性的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一包含有一綠茶的萃取物和一絞股藍屬的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制SREBP1c啟動子的活性，以及其中該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的濃度。

又某些進一步的具體例有關於一種用於在一個體中抑制經IL-1β刺激的NF-κB的活性的方法，其包含有投予該個體一足夠量的一包含有一綠茶的萃取物、一絞股藍屬的萃取物和一未成熟的蘋果的萃取物之組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約0.1 μg/mL至約1000 μg/mL的濃度。

在該等被描述的方法中，該投予被完成以治療或預防糖成癮、不需要的體重增加、肥胖或代謝症候群的至少一者。該個體是肥胖的或可能有肥胖的風險。該被投予的組成物可呈一適合用於口服攝取的形式，諸如一丸劑、一錠劑、一膠囊、一膠囊型錠劑、一糖衣錠、一粉末、一液體、一凝膠、一糖漿、一漿體、一懸浮液、一補充劑。該被投予的組成物可以是一藥學的藥物。該被投予的組成物可以是一非處方藥物。該被投予的組成物可在一食品產品中。實施例

實施例1：各種不同劑量的綠茶和絞股藍屬以及綠茶和絞股藍屬的摻合物在SREBP1c活性上的效用

這個研究的目的是要測定綠茶和絞股藍屬的萃取物或該等萃取物的一組合在SREBP1c活性上的效用(亦即，百分比抑制)。該等萃取物在10 μg/mL (圖1A )、20 μg/mL (圖1B )、40 μg/mL (圖1C )和60 μg/mL (圖1D )的各個萃取物的濃度被使用。

該SREBP1c啟動子活性研究被進行如下。

HEPG2細胞株在全長人類SREBP1c啟動子的控制下使用Fugene 6轉染試劑(Roche, Indianapolis, IN)被安定地轉染以一螢光素酶報導載體(pGL4.27)。安定的細胞在一96井盤、在25mM葡萄糖DMEM培養基中生長和被處理以萃取物歷時18hr以最大地刺激SREBP1c啟動子活性。在18hr的培育之後，該培養基自該細胞被移除並且該等細胞以200ul的磷酸鹽緩衝液(PBS)清洗一次。接著25µl的被動溶解緩衝液(Biotium, Hayward, CA)被加入每個井並且在室溫被培育歷時10 min以溶解該等細胞。在這個之後，100µl的螢光素(Biotium, Hayward, CA)被添加並且發光在一讀盤機中被讀取。數據被表示為相對於未被處理的細胞(被設定至0%)的百分比抑制。

令人驚訝地，被證明的是：如相較於該等個別的萃取物和一預測的效用，該百分比抑制是顯著地更高和協同的對於綠茶和絞股藍屬的一摻合物(在10 μg/mL (圖1A )、20 μg/mL (圖1B )、40 μg/mL (圖1C )和60 μg/mL (圖1D )的各個萃取物的試驗濃度)。參見圖 1A-D 。

實施例2：以綠茶和絞股藍屬萃取物在SREBP1c啟動子活性上的協同的數學計算

圖2顯示藉由使用Loewe相加模型所產生的數據的等效圖，其中協同＜1；加成= 1；拮抗＞ 1 (參見下列方程式)。組合指數 =Ca,r +Cb,r Icx,a Icx,b Ca,r = 在協同實驗中綠茶萃取物的濃度 ICx,a = 相等於協同效用的綠茶萃取物的濃度 Cb,r = 在協同實驗中絞股藍屬萃取物的濃度 ICx,b = 相等於協同效用的絞股藍屬萃取物的濃度

所有被試驗的摻合物劑量被計算為高度協同，那是一CI ＜1。

實施例3：未成熟的蘋果、綠茶和絞股藍屬萃取物的摻合物在經IL-1β刺激的NF-κB活性上的效用

研究被進行如下。

人類A549細胞使用Fugene 6轉染試劑(Roche, Indianapolis, IN)被安定地轉染以一pNFκB-Luc質體(Clontech, Mounta在View, CA)。為了評估樣品的抗-發炎活性，該等細胞以5 X 104/井被接種在白色、96井、透明底部的微量滴定盤中，並且在OptiPro無血清培養基中被培育過夜。隔天，該等細胞被暴露至未成熟的蘋果、綠茶和絞股藍屬萃取物的一摻合物和IL-1β (100 pg/ml)。在添加IL-1β之後6小時，該等細胞被溶解，以及螢光素酶的相對量使用來自Biotium (Hayward, CA)的螢光素試劑而被評估。純化合物Bay 11-7085被使用作為一正對照。數據被表示為百分比對照，其中由僅被暴露至IL-1β的對照細胞所引起的相對發光單位被設定在100%。

被證明的是：未成熟的蘋果、綠茶和絞股藍屬萃取物的一摻合物劑量依賴地抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性。參見圖 3 。

雖然本發明已參考特定的示範性具體例而被描述，明顯的是：各種不同的修改和變化可針對這些具體例被做出，而沒有背離本發明的精神和範疇。下面的申請專利範圍(包括所有等效物)被意欲定義本發明的精神和範疇。

圖1A描繪一顯示綠茶(10 µg/mL)和絞股藍屬(10 µg/mL)在SREBP1c啟動子活性上的效用的長條圖；

圖1B描繪一顯示綠茶(20 µg/mL)和絞股藍屬(20 µg/mL)在SREBP1c啟動子活性上的效用的長條圖；

圖1C描繪一顯示綠茶(40 µg/mL)和絞股藍屬(40 µg/mL)在SREBP1c啟動子活性上的效用的長條圖；

圖1D描繪一顯示綠茶(60 µg/mL)和絞股藍屬(60 µg/mL)在SREBP1c啟動子活性上的效用的長條圖；

圖2描繪使用Loewe相加模型所產生的數據的一等效圖；以及

圖3描繪一顯示未成熟的蘋果、綠茶和絞股藍屬萃取物的一摻合物在經IL-1β刺激的NF-κB活性上的效用的圖。

(無)

Claims (22)

1. 一種組成物，其包含有：一綠茶的萃取物，其被標準化至約40%的表沒食子兒茶素沒食子酸酯並且包含至少約70%兒茶素和約6%-13%咖啡因；一絞股藍屬(Gynostemma)的萃取物；以及一未成熟的蘋果的萃取物，其包含至少約60%多酚，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制固醇調節元件結合蛋白1c(SREBP1c)啟動子的活性；其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的核因子活化B細胞κ輕鏈增強子(NF-κB)活性；該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約10μg/mL至約60μg/mL的綠茶的萃取物之濃度及一自約10μg/mL至約60μg/mL的絞股藍屬的萃取物之濃度；及其中該組成物中各活性成分的量為：600-800mg的該綠茶的萃取物、400-500mg的該絞股藍屬的萃取物和500-700mg的該未成熟的蘋果的萃取物。
2. 如請求項1的組成物，其中在該組成物中該等萃取物的總量在0.005重量百分比與50重量百分比之間。
3. 如請求項1至2中任一項的組成物，其中該組成物是呈一適合用於口服攝取的形式。
4. 如請求項3的組成物，其中該形式是選自於由下列所構成的群組：一丸劑、一錠劑、一膠囊、一膠囊型錠劑(caplet)、一糖衣錠、一粉末、一液體、一凝膠、一糖漿、一漿體、一懸浮液、一補充劑。
5. 如請求項1至2中任一項的組成物，其中該組成物是一藥學的藥物。
6. 如請求項1至2中任一項的組成物，其中該組成物是一非處方藥物。
7. 如請求項1至2中任一項的組成物，其中該組成物是在一食品產品中。
8. 如請求項1至2中任一項的組成物，其進一步包含有一藥學上或保健營養學上(nutraceutically)可接受的載體、佐劑或賦形劑的至少一者。
9. 如請求項1至2中任一項的組成物，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物是藉由下列萃取方法中之至少一者予以製備：使用一溶劑萃取，該溶劑是選自於醇、水或其等之組合；一總乙醇萃取方法；一超臨界流體二氧化碳萃取(SFE)方法；一溶劑連續分餾方法；或一全水-乙醇萃取技術。
10. 如請求項1至2中任一項的組成物，該組成物進一步包含一載體或載劑。
11. 如請求項10的組成物，其中該載體是 選自於由鹽水、緩衝鹽水、右旋糖及水所構成的群組。
12. 如請求項11的組成物，其中該載劑對於能夠注射的製劑而言是藥學上可接受的，其選自於由等張的、無菌的鹽水溶液所構成的群組。
13. 一種如請求項1至12中任一項的組成物在製備一醫藥品之用途，其中該一醫藥品用於治療或預防肥胖。
14. 如請求項13的用途，其中該醫藥品降低一肥胖個體的重量達至少5%。
15. 一種組成物在製備一產品的用途，該產品係用於在一個體中治療或預防肥胖，其中該組成物含有：一綠茶的萃取物，其被標準化至約40%的表沒食子兒茶素沒食子酸酯並且包含至少約70%兒茶素和約6%-13%咖啡因；一絞股藍屬的萃取物；和一未成熟的蘋果的萃取物，其包含至少約60%多酚，該組成物展現至少IC50，其中至少50%抑制發生在一自約10μg/mL至約60μg/mL的綠茶的萃取物之濃度及一自約10μg/mL至約60μg/mL的絞股藍屬的萃取物之濃度；以及其中該組成物降低該個體的重量達至少10%，及其中該組成物中各活性成分的量為：600-800mg的該綠茶的萃取物、400-500mg的該絞股藍屬的萃取物和 500-700mg的該未成熟的蘋果的萃取物。
16. 如請求項15的用途，其中該綠茶的萃取物和該絞股藍屬的萃取物協同地抑制固醇調節元件結合蛋白1c(SREBP1c)啟動子的活性。
17. 如請求項15的用途，其中該綠茶的萃取物、該絞股藍屬的萃取物和該未成熟的蘋果的萃取物抑制經IL-1β刺激的NF-κB活性。
18. 如請求項15至17中任一項的用途，其中該組成物係擬投予至該個體以治療或預防糖成癮、不需要的體重增加、肥胖或代謝症候群的至少一者。
19. 如請求項15至17中任一項的用途，其中該個體是肥胖的。
20. 如請求項15至17中任一項的用途，其中該個體有肥胖的風險。
21. 如請求項15至17中任一項的用途，其中該組成物是呈一適合用於口服攝取的形式。
22. 如請求項21的用途，其中該形式是選自於由下列所構成的群組：一丸劑、一錠劑、一膠囊、一膠囊型錠劑、一糖衣錠、一粉末、一液體、一凝膠、一糖漿、一漿體、一懸浮液、一補充劑。

Images