TWI802077B - 減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途 - Google Patents

Abstract

本發明有關於一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途。此複合益生菌組成物包含短乳桿菌菌株GKJOY、發酵乳桿菌菌株GKF3、植物乳桿菌菌株GKK1以及乳酸片球菌菌株GKA4，經投予受試者連續一段期間，可有效減緩排尿頻率、降低膀胱壓力及增加膀胱容量，進而做為有效成分並用於製備各種組成物。

Description

減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途

本發明係有關一種益生菌組成物及其用途，特別是有關於一種減緩排尿頻率、降低膀胱壓力與增加膀胱容量等膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途。

膀胱過動症(overactive bladder syndrome，OAB)係指膀胱儲尿過程中，突然發生不自主的收縮而導致急迫性需立即排尿的需求，且患者通常無法在到達廁所前發生漏尿的現象。其常見明顯症狀包含：急尿、排尿頻率增加(亦稱為頻尿)、夜尿、以及急尿性尿失禁等。國際尿失禁協會(International Continence Society，ICS)指出，頻尿是指每天排尿次數超過八次，夜尿排尿超過一次；夜尿為半夜因尿急感而中斷睡眠起床解尿；急尿為突發性的強烈尿意；尿失禁則是一種不自主性的漏尿現象，即來不及上廁所而漏尿。

膀胱過動症可嚴重影響生活品質，包括減少性交、旅行、運動、無法工作、有罪惡感或自卑等，亦對身心靈具負面影響。一般隨著年齡的增加，過動性膀胱的罹患率會越高，和老化引起的膀胱彈性下降(逼尿肌鬆弛)、膀胱容量減少、雌激素流失所致的骨盆底肌肉衰弱、前列腺肥大所致的排尿阻力、神經病變等有關。根據台灣統計數據20歲以上成人人口約有18%的有這些問題，然而考量到華人社會下老年人對於泌尿道相關疾病的就醫行為較為保守，實際有膀胱過動症患者的比例應該更高。

膀胱過動症的治療方式可概分為行為治療與藥物治療。行為治療包含改善身體健康(改善其他併發症)、飲食習慣、控管水分攝取、定時小便、膀胱訓練、骨盆底運動、減重、禁菸等，避免誘發膀胱過動症的整合式原因。對於非輕度患者則採用藥物方法進行治療，常見藥物有毒蕈鹼阻斷劑(muscarinic antagonist)、抗乙醯膽鹼素(anticholinergics)、鈣離子拮抗劑(calcium antagonists)或肌肉鬆弛劑(muscle relaxant)等；大多透過阻斷部分神經系統的傳遞，以達到調控的效果。然而這些治療藥物難免會產生一些副作用，例如口乾舌燥、便祕、暈眩、視力模糊、認知功能受損等，難以長期使用，也不適合所有族群。

益生菌的許多功能逐漸被發現並報導，且不同菌株具有不同的功效及特性。有研究發現植物乳桿菌( Lactobacillus plantarum)在肥胖老鼠的模式中，有助於降低老鼠體重與血脂等代謝指標(Hus et al., 2019)，以及在氣喘性動物疾病模式中，具改善過敏、提升免疫的效果(Shih et al., 2019)。亦有研究發現植物乳桿菌( L. plantarum)在肌少症的老鼠模式下，有減緩肌肉流失的功能（Li et al., 2020）。還有研究發現副乾酪乳桿菌( Lactobacillus paracasei)可以減緩老化鼠老化的指標，具抗老化效果（Lin et al., 2021）。近年，許多學者更是連結腦-腸軸線來說明益生菌對於神經調控的機制；像是研究指出餵食短乳桿菌( Lactobacillus brevis)或發酵乳桿菌( Lactobacillus fermentum)具有改善因禁錮引起的類憂鬱症老鼠的不正常行為（Chen et al., 2021；Lin et al., 2021）。

然而，益生菌對於膀胱過動症的研究較少，亟需開發一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途。

因此，本發明之一態樣是提供一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其包含短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY、發酵乳桿菌( L. fermentum)菌株GKF3、植物乳桿菌( L. plantarum)菌株GKK1以及乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株GKA4。

其次，本發明之另一態樣是提供一種複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，包含以含有有效劑量之複合益生菌之口服組成物投予受試者連續一段期間，且此複合益生菌包含上述菌株。

根據本發明之上述態樣，提出一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物。在一實施例中，此減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物包含短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY、發酵乳桿菌( L. fermentum)菌株GKF3、植物乳桿菌( L. plantarum)菌株GKK1以及乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株GKA4，短乳桿菌菌株GKJOY是於2019年7月18日寄存於財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC，台灣新竹食品路331號)、寄存編號為BCRC 910920，發酵乳桿菌菌株GKF3是於2018年2月12日寄存於BCRC、寄存編號為 BCRC 910824，植物乳桿菌菌株GKK1是於2019年7月18日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910919，且乳酸片球菌菌株GKA4是於2019年3月6日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910876。

在上述實施例中，前述該複合益生菌組成物可例如為口服組成物，例如醫藥組成物或食品組成物。在上述例示中，前述複合益生菌組成物更包含醫藥及食品上可接受之載劑、賦形劑及/或添加劑。

在上述實施例中，前述複合益生菌組成物之劑型可包括例如粉劑、錠劑、粒劑、栓劑、微膠囊、安瓶、液體噴劑或塞劑。

在上述實施例中，前述膀胱過動症相關症狀包括排尿頻率增加、膀胱壓力增加及/或膀胱容量減少。

根據本發明之另一態樣，提出一種複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，包括以含有一有效劑量之複合益生菌之口服組成物投予受試者連續至少30天，且此複合益生菌包含短乳桿菌菌株GKJOY(BCRC 910920)、發酵乳桿菌菌株GKF3(BCRC 910824)、植物乳桿菌菌株GKK1(BCRC 910919)以及乳酸片球菌菌株GKA4(BCRC 910876)。

在上述實施例中，前述受試者可例如為成人，且前述複合益生菌對此受試者之有效劑量可例如為150 mg/60 kg體重/天至600 mg/60 kg體重/天。

在上述實施例中，前述受試者可例如為大鼠，且前述複合益生菌對此受試者之有效劑量可例如為5 mg/kg體重/天至20 mg/kg體重/天。

應用本發明上述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途，其包含短乳桿菌菌株GKJOY、發酵乳桿菌菌株GKF3、植物乳桿菌菌株GKK1以及乳酸片球菌菌株GKA4，經投予一受試者連續一段期間，可有效減緩排尿頻率、降低膀胱壓力及增加膀胱容量，進而做為有效成分並用於製備各種組成物。

可以理解的是，前述的概括說明及下述的詳細說明僅為例示，旨在對要求保護的發明提供進一步的解釋。

倘若引用文獻對一術語的定義或用法，與此處對該術語的定義不一致或相反，則適用此處對該術語的定義，而不適用該引用文獻對該術語的定義。其次，除非上下文另有定義，單數術語可包括複數，而複數術語亦可包括單數。

如前所述，本發明是提供一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，經投予受試者連續一段期間，可有效減緩排尿頻率、降低膀胱壓力及增加膀胱容量。

在一實施例中，此處所稱之「複合益生菌」可指包含不同種或不同屬的益生菌，例如其包含短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY、發酵乳桿菌( L. fermentum)菌株GKF3、植物乳桿菌( L. plantarum)菌株GKK1以及乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株GKA4。短乳桿菌菌株GKJOY是於2019年7月18日寄存於財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC，台灣新竹食品路331號)、寄存編號為BCRC 910920，並於2019年7月26日確認該菌株存活；短乳桿菌菌株GKJOY另寄存於日本獨立行政法人製品評價技術基盤機構(National Institute of Technology and Evaluation，NITE)特許微生物寄託中心(National Patent Microorganisms Depositary，地址：292-0818日本千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8 122號室)，寄存日期為2020年11月6日，且寄存編號為NITE BP-03316，並於2020年11月11日確認該菌株存活。發酵乳桿菌菌株GKF3是於2018年2月12日寄存於BCRC、寄存編號為 BCRC 910824，並於2018年3月1日確認該菌株存活；發酵乳桿菌GKF3另寄存於中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國普通微生物菌種保藏管理中心，寄存日期為2018年1月12日，寄存編號為CGMCC 15203。植物乳桿菌菌株GKK1是於2019年7月18日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910919，並於2019年7月26日確認該菌株存活。乳酸片球菌菌株GKA4是於2019年3月6日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910876，並於2019年3月13日確認該菌株存活。補充說明的是，本發明需選用特定菌株的複合益生菌，所得之複合益生菌組成物才能發揮減緩膀胱過動症相關症狀等功效。倘若複合益生菌並非選自上述特定菌株、或增減菌株抑或一部或全部替換成同種的其他菌株，則無法預期可獲得減緩膀胱過動症相關症狀的效果。

此處所稱之「膀胱過動症相關症狀」係指膀胱過動症的主症狀及其引起的相關症狀。主症狀可例如尿液急迫感，相關症狀可包括但不限於排尿頻率增加、膀胱壓力增加及/或膀胱容量減少。

在一實施例中，上述複合益生菌各菌株的含量並無特別限制。在一例子中，短乳桿菌菌株GKJOY(BCRC 910920)、發酵乳桿菌菌株GKF3(BCRC 910824)、植物乳桿菌菌株GKK1(BCRC 910919)以及乳酸片球菌菌株GKA4(BCRC 910876)之重量(mg)比或菌數(CFU)比可例如1：1：1：1，然而在其他例子中，上述四種菌株可使用1：1：1：1以外的比例。

在應用時，複合益生菌組成物可例如為口服組成物，例如醫藥組成物或食品組成物。前述複合益生菌的使用態樣可包括但不限於發酵全液、菌泥、上清液及凍乾粉。在上述實施例中，前述發酵全液係指包括菌體與培養液的產物。前述菌泥係指發酵全液去除上清液後的產物。前述上清液係指發酵全液去除菌泥後的產物。前述凍乾粉係指由發酵全液、菌泥及/或上清液所製得的凍乾粉。

前述適用於醫藥組成物的例子可包括但不限於藥品。複合益生菌應用於食品組成物的例子可包括但不限於一般食品、保健食品、飲料、營養補充品、乳製品或飼料等。在前述口服組成物之例子中，複合益生菌組成物更可選擇性包含醫藥及食品上可接受之載劑、賦形劑及/或添加劑。在其他例子中，複合益生菌組成物之劑型可包括但不限於粉劑、錠劑、粒劑、栓劑、微膠囊、安瓶、液體噴劑或塞劑。

當上述複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途時，可將含有一有效劑量之複合益生菌之口服組成物投予受試者連續一段期間。前述有效劑量端視受試者而定，並無特別限制。舉例而言，當受試者為成人時，複合益生菌對成人之有效劑量可例如為150 mg/60 kg體重/天至600 mg/60 kg體重/天，然以225 mg/60 kg體重/天至450 mg/60 kg體重/天為較佳，又以約300 mg/60 kg體重/天為更佳。在另一例子中，當受試者為大鼠時，複合益生菌對此受試者之有效劑量可例如為5 mg/kg體重/天至20 mg/kg體重/天，然以7.5 mg/kg體重/天至15 mg/kg體重/天為較佳，又以約10 mg/kg體重/天為更佳。在其他例子中，前述投予期間可例如連續至少30天。

可以理解的是，下述特定的菌株、特定的配方、特定的使用劑量、特定的檢測方式、觀點、例示及實施例僅供舉例說明，並非做為本發明的限制條件。在不脫離本發明之精神和範圍內，本發明的主要特徵可用於各種實施例。因此本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可輕易確定本案的必要技術特徵，對本發明作各種更動及潤飾，以適用不同的用途及條件。 實施例 1 1.1菌種來源

此實施例所使用的菌種包含特定組合的益生菌，內含乳酸桿菌屬( Lactobacillusspp.)的短乳桿菌（ Lactobacillus brevis）菌株 GKJOY、發酵乳桿菌( Lactobacillus fermentum)菌株 GKF3、植物乳桿菌( Lactobacillus plantarum)菌株 GKK1、以及片球菌屬( Pediococcusspp.)的乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株 GKA4。短乳桿菌菌株GKJOY是於2019年7月18日寄存於財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC，台灣新竹食品路331號)、寄存編號為BCRC 910920，並於2019年7月26日確認該菌株存活；短乳桿菌菌株GKJOY另寄存於日本獨立行政法人製品評價技術基盤機構(National Institute of Technology and Evaluation，NITE)特許微生物寄託中心(National Patent Microorganisms Depositary，地址：292-0818日本千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8 122號室)，寄存日期為2020年11月6日，且寄存編號為NITE BP-03316，並於2020年11月11日確認該菌株存活。發酵乳桿菌菌株GKF3是於2018年2月12日寄存於BCRC、寄存編號為 BCRC 910824，並於2018年3月1日確認該菌株存活；發酵乳桿菌GKF3另寄存於中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國普通微生物菌種保藏管理中心，寄存日期為2018年1月12日，寄存編號為CGMCC 15203。植物乳桿菌菌株GKK1是於2019年7月18日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910919，並於2019年7月26日確認該菌株存活。乳酸片球菌菌株GKA4是於2019年3月6日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910876，並於2019年3月13日確認該菌株存活。

上述菌種皆來自不同地區的醃製品。舉例而言，菌株GKJOY係分離自桃園地區的酸泡菜。菌株GKF3是分離自新竹地區的台式泡菜。菌株GKK1及菌株GKA4則是分離自花蓮地區的酸辣椒。

在一些例子中，上述菌株GKF可採集自台灣新竹北埔小販所販售的傳統醃製發酵泡菜。從天然發酵醃製30天以上的各種蔬果的泡菜產品中取樣，蒐集裝袋後標示，以冷藏箱低溫保存並於當天將檢體袋運送至實驗室進行菌株分離。然後，以無菌操作方式抽取檢體袋內的濾液或蔬果葉片，再以檢體的十倍體積的無菌水進行均質處理。抽取1 mL稀釋液放入含有0.1% 溴甲酚綠(bromocresol green)的MRS培養基中進行37°C、16小時的增菌培養，以增加檢體中內含的乳酸桿菌數量，強化篩選樣品中數量較少的乳酸菌菌株被分離的機率。接著，取增菌培養後的樣品，進行序列稀釋操作。稀釋至十萬倍及一百萬倍的序列稀釋操作後，分別取出0.1 mL放到無菌培養皿中，在培養皿中分別放入Rogosa 培養基瓊脂、BIM-25 瓊脂、馬鈴薯澱粉+酵母萃取瓊脂、溴甲酚綠MRS 瓊脂及溴甲酚紫瓊脂。經過37°C、40 小時厭氧培養後，每種培養基各挑選單一菌落15至20個菌株。將分離後的單一菌株培養於MRS培養液中以特定溫度培養16小時後添加50 %菌種冷凍保存液(甘油)。

上述乳酸桿菌或片球菌分別接種於固態培養基上活化菌種。在一較佳的實施態樣中，該固態培養基為MRS 瓊脂。待生成菌落(colony)後，挑起單一菌落(single colony)接入液態培養基進行液態培養。在一較佳的實施態樣中，菌株培養溫度25°C至40°C下，以例如通氣量0至1 vvm氮氣或二氧化碳、震盪速率250 rpm至1000 rpm的條件下進行液態培養16至24小時、然以18小時為較佳，使活菌數達到最高點。液態培養基為MRS (deMan, Rogosa, and Sharpe)液態培養基。在液態培養完成後，進行發酵培養，其中發酵培養基的配方如表1所示。

表1

成分	比例(重量百分比)
糖類	1~10%
酵母萃出物	0.1~5%
蛋白腖	0.1~5%
微量元素	0.01~2%
半胱胺酸	0.01~0.1%
Tween-80	0.05~1%

1.2製備凍乾粉

上述乳酸桿菌或片球菌分別經發酵培養而完成生長後，收集包含菌體與培養液的發酵全液，以速率1000 rpm至15000 rpm進行離心，以獲得菌體沉澱物(cell pellet)。所得的菌體沉澱物與保護劑(即，6重量%至50重量%脫脂奶粉)混合後冷凍乾燥。前述冷凍乾燥以梯度設定模式進行預凍，依序於20°C至 0°C儲放1至4小時，接著於0°C至-20°C儲放4至8小時，之後於-196°C至-30°C儲放超過8小時。在一較佳實施態樣中，冷凍乾燥的溫度與時間為於-40 °C儲放2小時，接著於-20°C儲放2小時，再於0°C儲放2小時，最後20 °C約10小時以上。之後，將上述所得的凍乾粉置於低溫保存。在另一較佳的實施態樣中，低溫保存的溫度為-30°C至4°C。保存的凍乾粉作為以下動物實驗中所要投予試驗動物的複合益生菌組成物的原料。 1.3試驗動物

以下實施例選用0週齡之Wistar公鼠，每隻重量約300公克，購自BioLASCO(樂斯科生物科技公司)。大鼠飼養在開放式籠架中，每籠2至3隻，鼠房平均溫度約22±2 °C，平均濕度35±5%，定時12小時光照與黑暗，並充分供應飲水及標準飼料。所有動物實驗程序皆由財團法人農業科技研究院實驗動物照護及使用委員會(IACUC)審查同意，並取得核准編號實動字第109099號。試驗動物適應環境1週後，隨機分為對照組與實驗組，每組7隻。 1.4試驗設計

試驗動物以徒手保定後，以口服方式每日投予0.9%生理食鹽水(對照組)或複合益生菌組成物(實驗組)連續30天。實驗組的試驗動物投予劑量10 mg/kg體重(B.W.)之複合益生菌組成物，相當於體重60公斤成人一天口服300 mg。經一個月的連續投予後，試驗動物以3~4%之異氟醚(isoflurane)麻醉。於試驗動物之下腹部開一個小缺口，露出膀胱並以眼科剪在膀胱上端剪出一小開口。將PE50導管(BB31695-PE / 3)插入膀胱上方開口，以手術用綁線(SW SERALON)將其開口與PE導管綁住，待MP150監測系統(MP150 Systems , Biopac)壓力值穩定後，利用注射幫浦(Syringe Pump, KD Scientific® Syringe Pump, KDS230)以0.04 ml/min的速度沿著PE50導管注射生理食鹽水進入膀胱內，並檢測膀胱壓力(bladder pressure)、膀胱容量(bladder capacity)、排尿頻率(urination frequency)、以及排尿延遲指數(urination delay index)。 1.5 數據統計

本文所述的數值係以平均值±標準偏差值(mean ±SD)表示，利用單因子變異數分析(One-way ANOVA)及市售軟體進行分析，以p＜0.05判斷具有統計顯著差異。 實施例2 2.1膀胱壓力檢測

此實施例係以MP150檢測系統，檢測試驗動物之膀胱容積壓力(cystomertrogram)，包括膀胱尚未注射生理食鹽水的壓力值、膀胱注射生理食鹽水後之壓力值、以及膀胱注射生理食鹽水後且經穩定時間後之壓力值。膀胱壓力係以毫米汞柱(mmHg)表示。前述的穩定時間係指膀胱壓力趨於穩定的時間，其中對照組試驗動物的穩定時間為3分鐘，而實驗組試驗動物的穩定時間則為1分鐘。

請參閱圖1A 及圖1B，其係分別繪示根據本發明一實施例之給予生理食鹽水前後之對照組(圖1A)及實驗組(圖1B)的動物膀胱壓力曲線圖，其中圖號▲代表注射生理食鹽水之時間點。

由圖1A的結果可知，對照組試驗動物尚未給予生理食鹽水之前，其膀胱壓力值相對較低(＜ 5 mmHg)，給予生理食鹽水後，其壓力值會瞬間飆高，且壓力值紊亂持續約3分鐘，最高檢測到之膀胱壓力值超過20 mmHg，約3分鐘後才趨於穩定，膀胱壓力值降低於10 mmHg以下。

由圖1B的結果可知，實驗組試驗動物在給予生理食鹽水前，其膀胱壓力值(7.5 mmHg)雖高於對照組，但還在標準範圍內。給予生理食鹽水後，其壓力值逐漸上升至最高17 mmHg，明顯低於對照組，且於1分鐘內趨於穩定(約 8 mmHg)。

請參閱圖2A及圖2B，其係分別繪示根據本發明另一實施例之給予生理食鹽水後且經穩定時間後之對照組(圖2A)及實驗組(圖2B)的動物膀胱壓力曲線圖，其中圖號▲代表注射生理食鹽水之時間點。

由圖2A的結果可知，對照組試驗動物在持續給予生理食鹽水後，其膀胱壓力值為約9 mmHg，雖然壓力尚屬穩定，但其壓力曲線的波段較為紊亂。

由圖2B的結果可知，實驗組試驗動物在持續給予生理食鹽水後，其膀胱壓力值亦為約9 mmHg，但其壓力曲線的波段較為平穩且規律。

上述結果說明試驗動物在投予複合益生菌組成物連續一段期間後，再給予生理食鹽水，其膀胱壓力值較不易受影響，可減緩膀胱壓力值導致排尿的行為。 2.2膀胱容量檢測

此實施例紀錄每隻試驗動物第一次排尿時間，並以0.04 mL/分鐘之流速計算後，得知其膀胱容量。膀胱容量以毫升(mL)表示，其結果如圖3所示。

請參閱圖3，其係繪示根據本發明一實施例之對照組及實驗組的動物膀胱容量之長條圖。由圖3的結果可知，雖然實驗組與對照組在膀胱容量上，並未達到統計上的顯著差異性，但投予含複合益生菌組成物的實驗組試驗動物，其膀胱容量相較於對照組較大，有增加膀胱容量的趨勢。 2.3排尿頻率檢測

此實施例紀錄每隻試驗動物之排尿時間跟次數，並以以每分鐘排尿次數(times/min；次/分鐘)進行統計分析。動物排尿之觀察以尿道口有連續排出定義為排尿之動作，若僅有尿道口濕潤並無連續排出之情形，則不算排尿，其結果如圖4所示。

請參閱圖4，其係繪示根據本發明一實施例之對照組及實驗組的動物排尿頻率的長條圖。由圖4的結果可知，雖然實驗組與對照組在排尿頻率上，並未達到統計上的顯著差異性，但投予含複合益生菌組成物的實驗組試驗動物，其排尿頻率相較於對照組較少，有減緩排尿頻率的趨勢。 2.4排尿延遲指數檢測

此實施例係比較實驗組與對照組之試驗動物的膀胱容量，以獲得排尿延遲指數，並以倍數(fold)表示。由排尿延遲指數結果顯示，投予含複合益生菌組成物的實驗組試驗動物，其膀胱容量為對照組的約1.2倍，有增加排尿延遲(即減緩排尿頻率)的趨勢。

綜言之，本發明以特定的菌株、特定的配方、特定的使用劑量、特定的檢測方式、或特定的評估方法僅用於例示說明減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途。然而，本發明所屬技術領域中具有通常知識者應可理解，在不脫離本發明的精神及範圍內，其他的菌株、其他的配方、其他的使用劑量、其他的檢測方式、或其他的評估方法亦可用於減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物及其用途，並不限於上述。舉例而言，複合益生菌組成物可例如為醫藥組成物或食品組成物，可選擇性包含醫藥及食品上可接受之載劑、賦形劑及/或添加劑，並可製成粉劑、錠劑、粒劑、栓劑、微膠囊、安瓶、液體噴劑或塞劑等劑型。

根據上述實施例，本發明的減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其優點在於此複合益生菌組成物包含短乳桿菌菌株GKJOY、發酵乳桿菌菌株GKF3、植物乳桿菌菌株GKK1以及乳酸片球菌菌株GKA4，經投予一受試者連續一段期間，可有效減緩排尿頻率、降低膀胱壓力及增加膀胱容量，未來可做為有效成分並用於製備各種組成物。

雖然本發明已以數個特定實施例揭露如上，但其他實施例亦有可能。因此，本發明後附請求項之精神及範圍不應限於這裡包含的實施例所述。

無

為讓本發明之上述和其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之詳細說明如下： [圖1A]及[圖1B]係分別繪示根據本發明一實施例之給予生理食鹽水前後之對照組(圖1A)及實驗組(圖1B)的動物膀胱壓力曲線圖，其中圖號▲代表給予生理食鹽水之時間點。 [圖2A]及[圖2B]係分別繪示根據本發明另一實施例之給予生理食鹽水後且經穩定時間後之對照組(圖2A)及實驗組(圖2B)的動物膀胱壓力曲線圖，其中圖號▲代表給予生理食鹽水之時間點。 [圖3]係繪示根據本發明一實施例之對照組及實驗組的動物膀胱容量之長條圖。 [圖4]係繪示根據本發明一實施例之對照組及實驗組的動物排尿頻率的長條圖。

國內寄存資訊(請依寄存機構、日期、號碼順序註記) 短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY是寄存於台灣新竹食品路331號中華民國財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存日期為2019年7月18日，寄存編號為BCRC 910920，並於2019年7月26日確認該菌株存活。 發酵乳桿菌( L. fermentum)菌株GKF3是寄存於台灣新竹食品路331號中華民國財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存日期為2018年2月12日，寄存編號為 BCRC 910824，並於2018年3月1日確認該菌株存活。 植物乳桿菌( L. plantarum)菌株GKK1是寄存於台灣新竹食品路331號中華民國財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存日期為2019年7月18日，寄存編號為BCRC 910919，並於2019年7月26日確認該菌株存活。 乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株GKA4是寄存於台灣新竹食品路331號中華民國財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心，寄存日期為2019年3月6日，寄存編號為BCRC 910876，並於2019年3月13日確認該菌株存活。 國外寄存資訊(請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記) 短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY是寄存於日本獨立行政法人製品評價技術基盤機構(National Institute of Technology and Evaluation，NITE)特許微生物寄託中心(National Patent Microorganisms Depositary，地址：292-0818日本千葉縣木更津市上總鐮足2-5-8 122號室)，寄存日期為2020年11月6日，且寄存編號為NITE BP-03316，並於2020年11月11日確認該菌株存活。 發酵乳桿菌GKF3是寄存於中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國普通微生物菌種保藏管理中心，寄存日期為2018年1月12日，寄存編號為CGMCC 15203。

Claims (10)

1. 一種減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，包含短乳桿菌( Lactobacillus brevis)菌株GKJOY、發酵乳桿菌( L. fermentum)菌株GKF3、植物乳桿菌( L. plantarum)菌株GKK1以及乳酸片球菌( Pediococcus acidilactici)菌株GKA4，該短乳桿菌菌株GKJOY是於2019年7月18日寄存於財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC，台灣新竹食品路331號)、寄存編號為BCRC 910920，該發酵乳桿菌菌株GKF3是於2018年2月12日寄存於BCRC、寄存編號為 BCRC 910824，該植物乳桿菌菌株GKK1是於2019年7月18日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910919，且該乳酸片球菌菌株GKA4是於2019年3月6日寄存於BCRC、寄存編號為BCRC 910876。
2. 如請求項1所述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其中該複合益生菌組成物為一口服組成物。
3. 如請求項2所述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其中該複合益生菌組成物為一醫藥組成物或一食品組成物。
4. 如請求項2所述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，更包含一醫藥及食品上可接受之載劑、賦形劑及/或添加劑。
5. 如請求項1所述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其中該複合益生菌組成物之一劑型包括粉劑、錠劑、粒劑、栓劑、微膠囊、安瓶、液體噴劑或塞劑。
6. 如請求項1所述之減緩膀胱過動症相關症狀之複合益生菌組成物，其中該膀胱過動症相關症狀包括排尿頻率增加、膀胱壓力增加及/或膀胱容量減少。
7. 一種複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，包括以含有一有效劑量之該複合益生菌之一口服組成物投予一受試者連續至少30天，且該複合益生菌包含短乳桿菌菌株GKJOY(BCRC 910920)、發酵乳桿菌菌株GKF3(BCRC 910824)、植物乳桿菌菌株GKK1(BCRC 910919)以及乳酸片球菌菌株GKA4(BCRC 910876)。
8. 如請求項7所述之複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，其中該膀胱過動症相關症狀包括排尿頻率增加、膀胱壓力增加及/或膀胱容量減少。
9. 如請求項7所述之複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，其中該受試者為一成人，且該複合益生菌對該受試者之該有效劑量為150 mg/60 kg體重/天至600 mg/60 kg體重/天。
10. 如請求項7所述之複合益生菌做為減緩膀胱過動症相關症狀之用途，其中該受試者為一大鼠，且該複合益生菌對該受試者之該有效劑量為5 mg/kg體重/天至20 mg/kg體重/天。

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