TWI787473B - 安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質的溶液 - Google Patents

安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質的溶液 Download PDF

Info

Publication number
TWI787473B
TWI787473B TW108107034A TW108107034A TWI787473B TW I787473 B TWI787473 B TW I787473B TW 108107034 A TW108107034 A TW 108107034A TW 108107034 A TW108107034 A TW 108107034A TW I787473 B TWI787473 B TW I787473B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
sample
aforementioned
living body
heme
solution
Prior art date
Application number
TW108107034A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201939037A (zh
Inventor
酒巻望
田口秀典
牧之段満
山田未佑
Original Assignee
日商榮研化學股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 日商榮研化學股份有限公司 filed Critical 日商榮研化學股份有限公司
Publication of TW201939037A publication Critical patent/TW201939037A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI787473B publication Critical patent/TWI787473B/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/5306—Improving reaction conditions, e.g. reduction of non-specific binding, promotion of specific binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/531—Production of immunochemical test materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721—Haemoglobin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
    • C07K14/805—Haemoglobins; Myoglobins

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本發明係提供一種方法，其係安定化蛋白質的方法，包含使源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸共存的步驟，其中源自活體的檢體中所含蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。若依據本發明，可安定源自活體的檢體中所含的血液蛋白質等之蛋白質。本發明又提供用以使源自活體的檢體中所含蛋白質安定化的安定化溶液、以及用以檢測源自活體的檢體中所含蛋白質的方法及套組。

Description

安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質 的溶液
本發明係關於安定源自活體的檢體中所含蛋白質的方法、用以使源自活體的檢體中所含蛋白質安定化的安定化溶液、以及用以檢測源自活體的檢體中所含蛋白質的方法及套組。
糞便、尿、唾液等之檢體中所含蛋白質的檢測係有用於許多疾病的診斷。例如，藉由檢測糞便檢體中之血液的糞便潛血檢查，可獲得以大腸癌為主的消化器官疾病的診斷的重要資訊。就檢測糞便等之檢體中所含的血紅素(hemoglobin)、血紅素結合素(haptoglobin)、血紅素-血紅素結合素複合體等之血液蛋白質等的方法而言，已知使用抗此等蛋白質的抗體來檢測的免疫學的測定方法。
通常，潛血檢查所使用的檢體係由被驗者自己採取至已置入保存溶液的保存容器中，而輸送至醫院等之檢查機關。於許多情形，於含有檢體的保存溶液(試料)的輸送上要花數日，而輸送中的溫度管理一般而言為困難，因此大多處於保存上不好的溫度條件。檢體中所含的血液蛋白質等之蛋白質會因輸送時之溫度條件等而變性，藉由檢體中之細菌或酵素而被分解或修飾，抗原決定位(epitope)或其附近結構變化時，抗體變的無法辨識此等糞便中所含的蛋白質，而變的無法利用免疫學的測定法的正確測定。尤其血紅素於溶液中為不安定的，於高溫條件下特別容易變性或分解。
就安定化保存溶液中之血紅素的技術而言，已提議例如，添加乙汞硫柳酸鈉(thimerosal)、洛赫西定(chlorhexidine)等之抗菌劑的方法(例如，專利文獻1)、添加蛋白酶抑制物質的方法(例如，專利文獻2)、添加醣苷酶(glycosidase)型溶菌酵素的方法(例如，專利文獻3)、添加血紅素之酵素分解產物的方法(例如，專利文獻4)、添加蘋果酸等之有機酸的方法(例如，專利文獻5)、添加亞胺羧酸(iminocarboxylic acid)的方法(例如，專利文獻6)、添加鹵代鏈烷磺酸(haloalkanesulfonic acid)的方法(例如，專利文獻7)等之各式各樣的方法。
再者，亦已知為了安定血紅素，而添加血紅素結合素的方法(例如，專利文獻8)。已知血紅素結合素存在於廣泛的動物之血液中，可與血紅素快速結合，並形成安定的血紅素-血紅素結合素複合體(Hb-Hp複合體)。藉由事先於保存糞便等之檢體的保存溶液等中添加血紅素結合素，於添加糞便等檢體之際，可將源自活體的檢體所含的血紅素作成安定的血紅素-血紅素結合素複合體。
然而，由於血紅素非常不安定，即使此等之血紅素之安定方法，亦未達到充分防止其變性或分解。因此，作為檢測糞便潛血的方法，雖亦已知檢測較血紅素於安定性更優異的運鐵蛋白(transferrin)的方法(例如，專利文獻9)，但血液中之運鐵蛋白因僅存在血紅素的1/60左右，而有所謂敏感度低的問題。
[先前技術文獻] [專利文獻]
[專利文獻1]特開昭63-271160號公報
[專利文獻2]特開平3-279859號公報
[專利文獻3]特開昭63-246667號公報
[專利文獻4]特開平11-218533號公報
[專利文獻5]特開2003-14768號公報
[專利文獻6]特開2009-097956號公報
[專利文獻7]特開2016-191580號公報
[專利文獻8]特開平10-132824號公報
[專利文獻9]特開昭63-246668號公報
[發明之概要]
糞便、尿、唾液等之源自活體的檢體，特別是糞便中，因大多存有引起血紅素等之蛋白質之分解或修飾的細菌或酵素，即使為如血紅素-血紅素結合素複合體的安定性比較高的蛋白質，亦有被分解或修飾的情形。
因此，本發明的目的是提供一種即使在容易發生分解或變性的不利溫度條件下，也能提高來自生物體的樣品中所含蛋白質的穩定性的方法。
〔1〕一種方法，其係安定源自活體的檢體中所含蛋白質的方法，包含使前述源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸(arylboronic acid)共存的步驟，其中前述源自活體的檢體中所含蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
〔2〕如〔1〕記載之方法，其中芳基硼酸係選自由苯基硼酸及其衍生物所組成的群組之至少一種。
〔3〕如〔1〕或〔2〕記載之方法，其中芳基硼酸係選自由苯基硼酸、羥基苯基硼酸、羧基苯基硼酸、胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種。
〔4〕如〔1〕~〔3〕記載之方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質分散於前述包含芳基硼酸的溶液中的步驟，前述芳基硼酸之前述溶液中之濃度為0.1mmol/L以上。
〔5〕如〔1〕~〔4〕記載之方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質與前述芳基硼酸及糖共存的步驟。
〔6〕如〔5〕記載之方法，其中前述糖係糖醇、單糖及雙糖所組成的群組之至少一種。
〔7〕如〔5〕或〔6〕記載之方法，其中前述糖係選自由山梨糖醇(sorbitol)、葡萄糖(glucose)、甘露糖醇(mannitol)、果糖(fructose)、木糖醇(xylitol)、赤藻糖醇(erythritol)、蔗糖(sucrose)、海藻糖(trehalose)、乳糖(lactose)、及麥芽糖(maltose)所組成的群組之至少一種。
〔8〕如〔5〕~〔7〕記載之方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質分散於包含前述芳基硼酸及前述糖的溶液中的步驟，前述糖之前述溶液中的濃度為5mmol/L以上。
〔9〕如〔1〕~〔8〕記載之方法，其中前述源自活體的檢體係至少含有血紅素，前述方法係包含使該血紅素與血紅素結合素接觸，並使形成血紅素與血紅素結合素之複合體的步驟。
〔10〕如〔1〕~〔9〕記載之方法，其中前述源自活體的檢體為糞便、唾液、或尿。
〔11〕一種安定化溶液，其係用於使源自活體的檢體所含的蛋白質安定化的溶液，其包含芳基硼酸，其中前述源自活體的檢體所含的蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
〔12〕如〔11〕記載之安定化溶液，其中前述芳基硼酸係選自由苯基硼酸及其衍生物所組成的群組之至少一種。
〔13〕如〔11〕或〔12〕記載之安定化溶液，其中前述芳基硼酸係選自由苯基硼酸、羥基苯基硼酸、羧基苯基硼酸、胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種。
〔14〕如〔11〕~〔13〕記載之安定化溶液，其包含糖。
〔15〕如〔14〕記載之安定化溶液，其中糖係選自由山梨糖醇、葡萄糖、甘露糖醇、果糖、木糖醇、赤藻糖醇、蔗糖、海藻糖、乳糖、及麥芽糖所組成的群組之至少一種。
〔16〕如〔11〕~〔15〕記載之安定化溶液，其包含血紅素結合素。
〔17〕如〔11〕~〔16〕記載之安定化溶液，其中前述檢體為糞便、唾液、或尿。
〔18〕如〔11〕~〔17〕記載之安定化溶液，其係用於保存前述源自活體的檢體的溶液。
〔19〕一種方法，其係檢測源自活體的檢體中之蛋白質的方法，其具備：於如〔11〕~〔18〕記載之安定化溶液中，添加前述源自活體的檢體而獲得含有該檢體的試料的步驟；及利用免疫學的測定方法檢測試料中之前述蛋白質的步驟，其中前述源自活體的檢體中之蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
〔20〕如〔19〕記載之方法，其中前述源自活體的檢體係至少包含血紅素，前述試料中之前述血紅素係與血紅素結合素形成複合體。
〔21〕如〔20〕記載之方法，其中前述安定化溶液係如〔16〕記載之安定化溶液。
〔22〕一種套組，其係用於檢測源自活體的檢體中所含蛋白質之套組，包含：如〔11〕~〔18〕記載之安定化溶液、及包含辨識前述蛋白質的抗體的試藥，其中前述蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
若依據本發明，可將源自活體的檢體中所含的血液蛋白質等之蛋白質加以安定化。換言之，若依據本發明，可防止源自活體的檢體中所含的血液蛋白質等之蛋白質變性、分解、修飾。因此，若依據本發明，利用免疫學的測定方法而正確地測定源自活體的檢體中所含蛋白質成為可能。
[用以實施發明之形態]
以下，針對本發明之較佳實施形態加以說明。
〔安定源自活體的檢體中所含蛋白質之方法，蛋白質之安定化溶液〕
與本發明之一實施形態有關的安定源自活體的檢體中所含蛋白質之方法係包含：使源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸共存的步驟。於本實施形態，源自活體的檢體中所含蛋白質可為選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
藉由使源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸共存，可提高源自活體的檢體中所含蛋白質之安定性。包含蛋白質的源自活體的檢體可為糞便、唾液、或尿，亦可為糞便。
使源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸共存的方法並未特別限定，但可列舉於包含芳基硼酸的溶液中，使源自活體的檢體中所含蛋白質分散的方法。其中，「分散」包含溶解及懸浮。
就包含芳基硼酸的溶液而言，可列舉用以保存源自活體的檢體的保存溶液、用於將檢體分散於保存溶液的試料進一步稀釋的稀釋溶液、用以檢測檢體中之蛋白質的套組等中的反應溶液等。尤其，若依據本實施形態，因可使源自活體的檢體中所含蛋白質之安定性顯著提升，可適當使用檢體之保存溶液。
芳基硼酸可適當選自習知者。芳基硼酸可為選自由苯基硼酸及其衍生物所組成的群組之至少一種，亦可為選自由苯基硼酸、羥基苯基硼酸、羧基苯基硼酸、胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種，可為選自由苯基硼酸、3-羥基苯基硼酸、2-羧基苯基硼酸、3-羧基苯基硼酸、4-羧基苯基硼酸、3-胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種，尤其，可為選自 由苯基硼酸、3-羥基苯基硼酸、3-羧基苯基硼酸、3-胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種。
上述溶液中之芳基硼酸之濃度係下限值為0.1mmol/L以上、0.2mmol/L以上、或0.5mmol/L以上者較佳。芳基硼酸之濃度為上述下限值以上時，安定源自活體的檢體中所含蛋白質之效果成為更優異。
又，上述溶液中之芳基硼酸之濃度係上限值為100mmol/L以下、50mmol/L以下、或30mmol/L以下者較佳。一旦芳基硼酸之濃度變得過高，以免疫學的測定法測定源自活體的檢體中所含蛋白質時，有時表觀回收率(apparent recovery rate)會降低。此係認為並非由於安定源自活體的檢體中所含蛋白質的效果降低，而是高濃度之芳基硼酸對免疫學的測定有不良影響。然而，一旦芳基硼酸之濃度為上述上限值以下，對免疫學的測定法的不良影響被抑制，可更正確地測定。
惟，即使溶液中含高濃度之芳基硼酸的情形，於與後述的高濃度之糖共存的情形，藉由芳基硼酸與糖形成複合體，由於高濃度之芳基硼酸對免疫學的測定方法的不良影響被抑制。因此，於與高濃度之糖共存的情形，即使芳基硼酸之濃度為50mmol/L左右，進一步為100mmol/L左右，亦可確保利用免疫學的測定法的正確測定。
作為本實施形態之更具體的一態樣，芳基硼酸係可含於用於使源自活體的檢體中所含蛋白質安定化的溶液(安定化溶液)。例如，安定化溶液為不含有後述的血紅素結合素的情形，芳基硼酸之安定化溶液中之濃度係下限值可為0.1mmol/L以上、0.2mmol/L以上、或0.5mmol/L以上。又，芳基硼酸之安 定化溶液中之濃度係上限值可為20mmol/L以下、10mmol/L以下、或5mmol/L以下。
上述步驟係可作成使源自活體的檢體中所含蛋白質，與上述芳基硼酸一起，進一步與糖共存的步驟。除了芳基硼酸之外，藉由進一步與糖共存，可進一步提高源自活體的檢體中所含蛋白質之安定性。使源自活體的檢體中所含蛋白質與糖共存的方法，可列舉例如，於上述含有芳基硼酸的溶液中，進一步使含有糖的方法。
糖係可適當選自習知者，可列舉例如，山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藻糖醇等之糖醇；葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖等之單糖；蔗糖、海藻糖、乳糖、麥芽糖等之雙糖；寡糖等。
糖可為選自由糖醇、單糖及雙糖所組成的群組之至少一種，可為選自由山梨糖醇、葡萄糖、甘露糖醇、果糖、木糖醇、赤藻糖醇、蔗糖、海藻糖、乳糖、及麥芽糖所組成的群組之至少一種，亦可為選自由山梨糖醇、甘露糖醇、果糖、及蔗糖所組成的群組之至少一種。
然而，葡萄糖、果糖等之於溶液中形成醛基或酮基的糖(還原糖)，會與源自活體的檢體中所含蛋白質或作為此等蛋白質之安定劑而被添加於溶液的白蛋白(albumin)等反應(梅納反應(Maillard reaction))而修飾蛋白質，生成褐色物質(梅納汀(melanoidin))，因而與蛋白質不反應的糖為較佳。源自活體的檢體中所含蛋白質之抗原決定位或其附近經由還原糖被修飾的結構變化時，依據抗體而定，有無法辨識此等源自活體的檢體中所含蛋白質，而無法利用免疫學的測定法正確測定的情形。因此，就本實施形態之更具體的一態樣而言，更佳為使用與蛋白質不反應的非還原糖。非還原糖可為選自由山梨糖醇、甘露糖 醇、木糖醇、赤藻糖醇、海藻糖、蔗糖、及乳糖所組成的群組之至少一種，亦可為選自由山梨糖醇、甘露糖醇及蔗糖所組成的群組之至少一種。
糖之濃度係下限值為5mmol/L以上、10mmol/L以上、或25mmol/L以上為較佳。糖之濃度為上述下限值以上時，與芳基硼酸相乘地作用，成為安定源自活體的檢體中所含蛋白質之效果更進一步優異者。
糖之濃度之上限值，於糖醇及單糖，可為1000mmol/L以下、500mmol/L以下、或100mmol/L以下，於雙糖，可為500mmol/L以下、250mmol/L以下、或100mmol/L以下。糖之濃度為上述上限值以下時，因安定化溶液之黏度不會變的過高，而於測定難以發生妨礙。
用以保存源自活體的檢體中所含蛋白質的安定化溶液，只要將pH保持於5~10，較佳為保持於6~8的緩衝液即可，可為2-嗎啉基乙烷磺酸(MES)、羥基乙基哌
Figure 108107034-A0305-02-0011-24
-2-乙烷磺酸(HEPES)、哌
Figure 108107034-A0305-02-0011-25
-雙(2-乙烷磺酸)(PIPES)等之包含古德緩衝液(Good's buffer)的緩衝液，亦可為磷酸緩衝液、Tris緩衝液或甘胺酸緩衝液。
安定化溶液可進一步含有抗菌劑、pH調整劑、用以調節離子強度的鹽類、界面活性劑、凝集促進劑、蛋白質之保存時所使用的習知安定劑等之添加劑。抗菌劑係包含疊氮化鈉、抗生素、溶菌酵素。就添加劑而言，包含組胺酸、離胺酸等之胺基酸、白蛋白、蛋白酶抑制劑、乙二胺四乙酸(EDTA)等之螯合劑等之具有安定蛋白質的作用者的已知的習知物質。
若依據上述之安定化方法或安定化溶液，藉由芳基硼酸之作用、或藉由芳基硼酸與糖之相乘作用，可提高源自活體的檢體中所含蛋白質之安定性。換言之，若依據上述之安定化方法或安定化溶液，可防止源自活體的 檢體中所含蛋白質的變性、分解或修飾，且可維持源自活體的檢體中所含蛋白質之抗原決定位及其周邊部位的結構。因此，利用免疫學的測定方法檢測源自活體的檢體中所含蛋白質的情形，可期待檢測之正確性的提升。
本實施形態之更具體的一態樣係可包含藉由使至少含有血紅素的源自活體的檢體，與血紅素結合素接觸，而形成血紅素-血紅素結合素複合體的步驟。於此情形，包含血紅素的源自活體的檢體可為糞便、唾液、或尿，亦可為糞便。於糞便中，因存有特別多的引起血紅素之分解或修飾的細菌或酵素，故本實施形態之方法係特別有用的。
雖含有血紅素的源自活體的檢體與血紅素結合素可以任何方式接觸，但較佳為於含有血紅素結合素的前述保存溶液中添加含有血紅素的源自活體的檢體。源自活體的檢體中所含的血紅素係與保存溶液中之血紅素結合素快速地反應，而形成血紅素-血紅素結合素複合體。而且，藉由直接保存添加源自活體的檢體的保存溶液，可安定地保存血紅素-血紅素結合素複合體。又，於血紅素與血紅素結合素之複合體形成，血紅素雖自由二個α鏈與二個β鏈連結的四聚體(α2β2)分出二個二聚體(αβ)，但此現象並未該當本說明書中的「分解」或「變性」。
用於使與本實施形態有關的含有血紅素之源自活體的檢體中所含蛋白質安定化的安定化溶液，係較佳為於含有芳基硼酸、或芳基硼酸及糖的上述之安定化溶液中，進一步添加血紅素結合素者。安定化溶液中之血紅素結合素之濃度係取決於源自活體的檢體的量，例如，0.05單位/L~50單位/L、0.1單位/L~10單位/L、或0.2單位/L~2單位/L。其中，1單位係表示與1mg之血紅素結 合的血紅素結合素之量。上述範圍的血紅素結合素濃度係足以將源自活體的檢體中全部的血紅素作成血紅素-血紅素結合素複合體的濃度。
其中，安定化溶液包含後述的血紅素結合素的情形，上述芳基硼酸之安定化溶液中之濃度係可作成下限值為0.1mmol/L以上、0.2mmol/L以上、0.5mmol/L以上、1mmol/L以上、或5mmol/L以上。芳基硼酸之濃度為上述下限值以上時，源自活體的檢體中所含的血紅素之芳基硼酸所致的安定化效果係與血紅素結合素所致的安定化效果相輔相乘，而成為更顯著。
又，芳基硼酸之安定化溶液中之濃度係可作成上限值為100mmol/L以下、50mmol/L以下、或30mmol/L以下。芳基硼酸之濃度為上述上限值以下時，抑制對免疫學的測定法的不良影響，且更正確的測定成為可能。
若依據與上述之一態樣有關的安定化方法或安定化溶液，可以血紅素-血紅素結合素複合體的形態，安定地保存源自活體的檢體中所含的血紅素。換句話說，若依據上述之安定化方法或安定化溶液，可防止源自活體的檢體中所含的血紅素之變性、分解或修飾，可防止血紅素之抗原決定位及其周邊部位的結構。據此，利用免疫學的測定方法測定源自活體的檢體中所含的血紅素的情形，可期待檢測之正確性的提升。
〔源自活體的檢體中所含蛋白質之檢測方法、檢測套組〕
由本發明之一實施形態所提供的檢測源自活體的檢體中所含蛋白質的方法係具備：於用以使該蛋白質安定化的上述安定化溶液中添加源自活體的檢體，獲得包含源自活體的檢體的試料的步驟；及利用免疫學的測定方法檢測試料中之蛋白質的步驟。
又，由本發明之其他之一實施形態所提供之用以檢測源自活體的檢體中所含蛋白質的套組係包含上述之安定化溶液、及包含辨識源自活體的檢體中所含蛋白質的抗體的試藥。
於上述檢測方法或檢測套組，源自活體的檢體中所含蛋白質可為選自血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體的至少一種。
就於本實施形態所使用的安定化溶液而言，可列舉用以保存源自活體的檢體的保存溶液、用以將使檢體分散於保存溶液的試料進一步稀釋的稀釋溶液、用以檢測檢體中之蛋白質的套組等中的反應溶液等。就套組等中的反應溶液而言，除了後述的免疫學的測定方法中的含有抗體的溶液之外，包含用以與試料混合並調整測定環境的溶液等。
免疫學的測定方法係利用抗體抗源自活體的檢體中所含蛋白質的方法，可使用習知之免疫學的測定手法。免疫學的測定方法，可為例如，乳膠凝集法、金膠體凝集法等之免疫凝集法、免疫層析(immunochromatography)法、或ELISA法。
抗源自活體的檢體中所含蛋白質的抗體並未限制，可為多株抗體，亦可為單株抗體，亦可為可辨識源自活體的檢體中所含蛋白質之抗源自活體的檢體中所含蛋白質的抗體的片段。
抗源自活體的檢體中所含蛋白質的抗體係只要辨識成為測定對象的蛋白質即可，亦可為抗血紅素抗體、抗血紅素結合素抗體、抗血紅素-血紅素結合素複合體抗體。此等之抗體係可利用通常方法來製造。
源自活體的檢體中所含蛋白質之檢測，例如血紅素之檢測，作為一例，可以如下方式進行。首先，添加檢體於置入保存溶液的容器中，作為 試料。可於容器內於任意時間保存檢體，又亦可過濾含有檢體的保存溶液而作為試料。其次，利用免疫學的測定方法檢測試料中之血紅素，例如利用乳膠凝集法檢測。更具體而言，將含有於表面負載抗血紅素抗體的乳膠粒子的試藥，添加於試料。於添加含有乳膠粒子的試藥之前，可利用稀釋液將試料稀釋，又可添加反應溶液。於本態樣，包含芳基硼酸的上述安定化溶液係可為保存溶液、稀釋液、反應溶液之任一者。保存溶液為上述的安定化溶液時，特佳地，於此情形，稀釋液及/或反應溶液可含有亦可不含有芳基硼酸。
於源自活體的檢體中，血紅素可與檢體中之血紅素結合素形成複合體，亦可呈游離的血紅素而存在。因此，用於血紅素之檢測的抗血紅素抗體係較佳可辨識游離的血紅素之抗原決定位，同時亦可能辨識血紅素-血紅素結合素複合體中的血紅素之抗原決定位，且不引起與血紅素結合素的交叉反應。
試料中有血紅素存在的情形，抗血紅素抗體會辨識血紅素，負載抗體的乳膠粒子會凝集。測定由於凝集所致的濁度變化，藉由使用含有已知濃度的血紅素的校準物而作成的校正曲線，求得試料中之血紅素濃度。又，藉由基於校準物之血紅素之濃度而作成的校正曲線，亦可求得試料中之血紅素之濃度。
於上述安定化溶液含有血紅素結合素的情形，血紅素之檢測係可例如以下列方式進行。首先，於置入保存溶液的容器中添加檢體，而作為試料。可於容器內將檢體保存任意時間，又，亦可將含有檢體的保存溶液過濾而作為試料。其次，免利用疫學的測定方法，例如乳膠凝集法，來檢測試料中之血紅素。更具體而言，將含有使抗血紅素抗體負載於表面的乳膠粒子的試藥，添加於試料中。添加含有乳膠粒子的試藥之前，可利用稀釋液將試料稀釋，又亦可添加反應溶液。
於本態樣，包含芳基硼酸及血紅素結合素的安定化溶液可為保存溶液、稀釋液、反應溶液之任一者。
保存溶液為含有芳基硼酸及血紅素結合素的安定化溶液時，特佳為於此情形，稀釋液及/或反應溶液可含有血紅素結合素，亦可不含有，再者，可含有芳基硼酸，亦可不含有。
於本態樣，檢體中有血紅素存在的情形，血紅素係與安定化溶液中所含有的血紅素結合素反應，而形成血紅素-血紅素結合素複合體。無須檢體中之全部的血紅素皆形成複合體，於含有檢體的安定化溶液(試料)，雖可為與血紅素結合素不形成複合體的血紅素存在，但較佳為檢體中之全部之血紅素與血紅素結合素形成複合體。
抗血紅素抗體係可辨識血紅素-血紅素結合素複合體中的血紅素之抗原決定位，且較佳不引起與血紅素結合素的交叉反應。
試料中有血紅素存在的情形，抗血紅素抗體辨識血紅素(包含與血紅素結合素形成複合體的血紅素)，負載抗體的乳膠粒子會凝集。測定由於凝集所致的濁度變化，利用使用包含已知血紅素濃度的血紅素-血紅素結合素複合體的校準物而作成的校正曲線，求得試料中之血紅素濃度。又，利用基於校準物之血紅素-血紅素結合素複合體之濃度而作成的校正曲線，亦可求得試料中之血紅素-血紅素結合素複合體之濃度。
以上說明的實施形態係被記載用以容易理解本發明，並未記載用以限定本發明。因此，上述實施形態所揭示的各要素係亦包含屬於本發明之技術範圍的全部之設計變更或均等物的意旨。
[實施例]
實施例1
調製添加40mmol/L之HEPES(pH6.8)、0.1%之BSA、0.1%之NaN3、1單位/L之血紅素結合素、及0~100mmol/L之苯基硼酸的保存溶液。將添加血紅素的糞便檢體添加於保存溶液而使糞便濃度成為0.5%的試料，於37℃，保存0、7、14及21日。又，糞便檢體係使試料中之血紅素濃度成為約300μg/L的量的方式添加血紅素。替代添加血紅素的糞便檢體，將血紅素添加於保存溶液，同樣地保存使試料中之血紅素濃度成為300μg/L之不含糞便檢體的試料。利用乳膠凝集法測定保存的試料中之血紅素(Hb)濃度(μg/L)。
血紅素之濃度係使用作為測定試藥之「OC-Hemodia(註冊商標)Auto III‘榮研’」(榮研化學股份有限公司製)、作為測定裝置之「OC-Sensor DIANA」(榮研化學股份有限公司製)而測定。上述測定試藥係包含負載抗人類血紅素兔多株抗體的乳膠粒子。
自測定的血紅素之濃度，算出相對於保存溶液添加糞便檢體後立即之血紅素濃度(即，添加糞便檢體後0日後之濃度)的回收率(%)。將結果示於表1。由表1清楚得知，於糞便1、糞便2及糞便3之任一者的試料，藉由以0.5mmol/L以上之濃度添加苯基硼酸，試料中之血紅素之回收率提升。血紅素之回收率係依存於苯基硼酸濃度而提升，於苯基硼酸濃度15mmol/L成為最大，於50mmol/L以上之添加，表觀回收率降低。於不含糞便檢體的試料，未見由於苯基硼酸的添加所致的回收率的提升。此等之結果顯示苯基硼酸會安定含有糞便的試料中之血紅素。又，試料中之血紅素係呈與保存溶液中所含的血紅素結合素結合的血紅素-血紅素結合素複合體而存在，因而上述結果意味著苯基硼酸會安定血紅素-血紅素結合素複合體。
Figure 108107034-A0305-02-0018-1
實施例2
替代實施例1之保存溶液之苯基硼酸，調製各自添加15mmol/L之2-羧基苯基硼酸(2-CPBA)、3-羧基苯基硼酸(3-CPBA)、4-羧基苯基硼酸(4-CPBA)、3-羥基苯基硼酸(3-HPBA)及3-胺基苯基硼酸(3-APBA)的保存溶液，與實施例1同樣地試驗。作為比較例，調製未添加芳基硼酸的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表2。由表2清楚可知，即使為使用其他之芳基硼酸的情形，與未添加芳基 硼酸的比較例相比，糞便1、糞便2及糞便3之任一者之糞便檢體，試料中之血紅素之回收率皆提升。
Figure 108107034-A0305-02-0019-2
實施例3
調製實施例1之保存溶液之苯基硼酸的濃度固定為15mmol/L，進一步添加50mmol/L或100mmol/L之糖(山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、果糖、或甘露糖醇)的保存溶液、或未添加糖的保存溶液，與實施例1同樣地試驗。作為比較例，調製未添加苯基硼酸及糖的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表3。由表3清楚可知，於苯基硼酸，進一步添加山梨糖醇、甘露糖醇、蔗糖、或果糖 的情形，於糞便1、糞便2及糞便3之任一者之糞便檢體，試料中之血紅素之回收率進一步提升，特別是於山梨糖醇及甘露糖醇，回收率顯著地提升。然而，於海藻糖、或葡萄糖，亦觀察到未見回收率提升的糞便檢體(糞便3)。此等之結果顯示，藉由於苯基硼酸中進一步添加糖，可進一步提升包含糞便的試料中之血紅素之安定性，但取決於添加的糖的種類，效果上有差異。於山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、果糖、或甘露糖醇之中，山梨糖醇及甘露糖醇的效果為顯著，尤其山梨糖醇，於糞便檢體(糞便1)，完全未見到回收率的降低。
Figure 108107034-A0305-02-0020-3
Figure 108107034-A0305-02-0021-4
實施例4
調製於不含苯基硼酸的實施例1之保存溶液中，添加100mmol/L之、山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、果糖、或甘露糖醇的保存溶液，與實施例1同樣地試驗。為了比較，藉由不添加此等糖而同樣地試驗。將結果示於表4。由表4清楚可知，於不含苯基硼酸的保存溶液中，即使添加山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖或果糖，包含糞便檢體的試料中之血紅素的回收率未提升。此結果，於單獨山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、或果糖等之糖，顯示未安定包含糞便的試料中之血紅素，顯示苯基硼酸與糖同時存在係有必要的。
Figure 108107034-A0305-02-0021-5
Figure 108107034-A0305-02-0022-6
實施例5
將實施例1之保存溶液之苯基硼酸固定為15mmol/L，調製添加10~500mmol/L之山梨糖醇、或10~250mmol/L之蔗糖的保存溶液、或未添加糖的保存溶液，與實施例1同樣地試驗。作為比較例，調製未添加苯基硼酸及糖的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表5。由表5清楚可知，於糞便1、糞便2及糞便3之任一者之試料，皆依存於山梨糖醇、或蔗糖之添加濃度，含有糞便的試料中之血紅素之回收率提升，藉由25mmol/L以上之添加而固定化。
Figure 108107034-A0305-02-0022-7
Figure 108107034-A0305-02-0023-8
實施例6
替代實施例1之保存溶液之苯基硼酸，調製將3-羧基苯基硼酸(3-CPBA)、3-羥基苯基硼酸(3-HPBA)及3-胺基苯基硼酸(3-APBA)各自添加15mmol/L，並添加100mmol/L之山梨糖醇、蔗糖、或甘露糖醇的保存溶液，與實施例1同樣地試 驗。作為比較例，調製未添加芳基硼酸的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表6。由表6清楚可知，即使使用其他之芳基硼酸，進一步添加山梨糖醇、蔗糖、或甘露糖醇的情形，於糞便1、糞便2及糞便3之任一者之糞便檢體，亦進一步提升試料中之血紅素之回收率，認為可相乘地提高含有糞便的試料中之血紅素的安定性。
Figure 108107034-A0305-02-0024-9
Figure 108107034-A0305-02-0025-10
實施例7
調製將實施例1之保存溶液之苯基硼酸作成0~50mmol/L，並添加100mmol/L之山梨糖醇、或甘露糖醇的保存溶液，與實施例1同樣地試驗。將結果示於表7。由表7清楚可知，於添加糖的保存溶液，即使添加50mmol/L之苯基硼酸，亦未見表觀回收率的降低。一般認為此理由係因芳基硼酸雖(於高濃度)具有抑制免疫凝集反應的性質，但有高濃度的芳基硼酸存在時，對免疫學的測定方法有不良影響並降低表觀回收率，另一方面，進一步有高濃度的糖共存的情形，藉由芳基硼酸與糖形成複合體，由於高濃度的芳基硼酸對免疫學的測定方法的不良影響受到抑制。
Figure 108107034-A0305-02-0025-12
Figure 108107034-A0305-02-0026-13
實施例8
調製添加40mmol/L之HEPES(pH6.8)、0.1%之BSA、0.1%之NaN3、及0~2.5mmol/L之苯基硼酸的保存溶液。又，替代苯基硼酸，將各自添加0.5mmol/L之3-羧基苯基硼酸(3-CPBA)、3-羥基苯基硼酸(3-HPBA)及3-胺基苯基硼酸(3-APBA)的保存溶液合併而調製。將添加血紅素的糞便檢體加至保存溶液使糞便濃度成為0.5%的試料，於37℃保存0、16、38及62小時。又，於糞便檢體，添加試料中之血紅素濃度成為約300μg/L的量的血紅素。替代添加血紅素的糞便檢體，將血紅素添加至保存溶液使添加試料中之血紅素濃度成為300μg/L的不含糞便檢體的試料，同樣地保存。將保存的試料中之血紅素(Hb)濃度(μg/L)，使用與實施例1相同的測定試藥及測定裝置，利用乳膠凝集法而測定。
於本實施例，因於保存溶液中不含血紅素結合素，與實施例1~7相比時，血紅素更快分解，但芳基硼酸所致的血紅素之安定化效果，於本實施例亦被觀察到。即，由表8清楚可知，糞便1、糞便2及糞便3之任一者之試料，藉由以0.25mmol/L以上之濃度添加芳基硼酸，試料中之血紅素之回收率皆提升。又，與實施例1~7不同，因保存溶液中不含血紅素結合素，觀察到試料中之血紅素大半不與血紅素結合素形成複合體地存在。因此，上述結果係意味芳基硼酸對於未與血紅素結合素形成複合體的血紅素亦加以安定化。
Figure 108107034-A0305-02-0027-14
實施例9
將實施例8之保存溶液之苯基硼酸濃度固定於0.5mmol/L，調製進一步添加10~250mmol/L之山梨糖醇或蔗糖、或50~100mmol/L之海藻糖、葡萄糖、果糖或甘露糖醇的保存溶液，與實施例8同樣地試驗。又，添加苯基硼酸且未添加 糖的保存溶液，進一步作為比較例，調製未添加苯基硼酸及糖的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表9A及9B。由表9A及9B清楚可知，於未含血紅素結合素的保存溶液，於苯基硼酸未進一步添加山梨糖醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、果糖或甘露糖醇的情形，糞便1、糞便2及糞便3之任一糞便檢體，試料中之血紅素之回收率皆進一步提升。又，即使於不含苯基硼酸的保存溶液中添加糖，含有糞便檢體的試料中之血紅素之回收率亦未提升。此等之結果顯示，即使不含血紅素結合素的保存溶液，與實施例2~7同樣地獲得苯基硼酸與各種糖的相乘效果。
Figure 108107034-A0305-02-0028-15
Figure 108107034-A0305-02-0029-16
Figure 108107034-A0305-02-0029-17
Figure 108107034-A0305-02-0030-18
將實施例8之保存溶液之苯基硼酸的濃度固定於0.5mmol/L，又替代苯基硼酸，調製各自添加3-羧基苯基硼酸(3-CPBA)、3-羥基苯基硼酸(3-HPBA)及3-胺基苯基硼酸(3-APBA)0.5mmol/L，並添加100mmol/L之山梨糖醇或蔗糖的保存溶液，與實施例8同樣地試驗。作為比較例，調製未添加芳基硼酸的保存溶液，同樣地試驗。將結果示於表10。由表10清楚可知，於不含血紅素結合素的保存溶液，藉由各種之芳基硼酸與糖之併用，試料中之血紅素之回收率進一步提升，觀察到可相乘地提高含有糞便的試料中之血紅素之安定性。
Figure 108107034-A0305-02-0030-23
Figure 108107034-A0305-02-0031-20
Figure 108107034-A0305-02-0032-21

Claims (22)

  1. 一種安定方法，其係安定源自活體的檢體中所含蛋白質的方法，包含使前述源自活體的檢體中所含蛋白質與芳基硼酸(arylboronic acid)共存的步驟，其中前述源自活體的檢體中所含蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
  2. 如請求項1所述之安定方法，其中芳基硼酸係選自由苯基硼酸及其衍生物所組成的群組之至少一種。
  3. 如請求項1所述之安定方法，其中芳基硼酸係選自由苯基硼酸、羥基苯基硼酸、羧基苯基硼酸、胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種。
  4. 如請求項1所述之安定方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質分散於包含前述芳基硼酸的溶液中的步驟，前述芳基硼酸之前述溶液中之濃度為0.1mmol/L以上。
  5. 如請求項1所述之安定方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質與前述芳基硼酸及糖共存的步驟。
  6. 如請求項5所述之安定方法，其中前述糖係糖醇、單糖及雙糖所組成的群組之至少一種。
  7. 如請求項5所述之安定方法，其中前述糖係選自由山梨糖醇(sorbitol)、葡萄糖(glucose)、甘露糖醇(mannitol)、果糖(fructose)、 木糖醇(xylitol)、赤藻糖醇(erythritol)、蔗糖(sucrose)、海藻糖(trehalose)、乳糖(lactose)、及麥芽糖(maltose)所組成的群組之至少一種。
  8. 如請求項5所述之安定方法，其中前述步驟係使前述源自活體的檢體中所含蛋白質分散於包含前述芳基硼酸及前述糖的溶液中的步驟，前述糖之前述溶液中之濃度為5mmol/L以上。
  9. 如請求項1所述之安定方法，其中前述源自活體的檢體係至少含有血紅素，前述方法係包含使該血紅素與血紅素結合素接觸，並使形成血紅素與血紅素結合素之複合體的步驟。
  10. 如請求項1所述之安定方法，其中前述源自活體的檢體為糞便、唾液、或尿。
  11. 一種安定化溶液，其係用於使源自活體的檢體所含的蛋白質安定化的溶液，其包含芳基硼酸，其中前述源自活體的檢體所含的蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
  12. 如請求項11之安定化溶液，其中前述芳基硼酸係選自由苯基硼酸及其衍生物所組成的群組之至少一種。
  13. 如請求項11所述之安定化溶液，其中前述芳基硼酸係選自由苯基硼酸、羥基苯基硼酸、羧基苯基硼酸、胺基苯基硼酸及此等之鹽所組成的群組之至少一種。
  14. 如請求項11所述之安定化溶液，其包含糖。
  15. 如請求項11所述之安定化溶液，其中糖係選自由山梨糖醇、葡萄糖、甘露糖醇、果糖、木糖醇、赤藻糖醇、蔗糖、海藻糖、乳糖、及麥芽糖所組成的群組之至少一種。
  16. 如請求項11所述之安定化溶液，其包含血紅素結合素。
  17. 如請求項11所述之安定化溶液，其中前述檢體為糞便、唾液、或尿。
  18. 如請求項11所述之安定化溶液，其係用以保存前述源自活體的檢體的溶液。
  19. 一種檢測方法，其係檢測源自活體的檢體中之蛋白質的方法，其具備：於如請求項11至18中任一項所述之安定化溶液中，添加前述源自活體的檢體而獲得含有該檢體的試料的步驟，及利用免疫學的測定方法檢測試料中之前述蛋白質的步驟，其中前述源自活體的檢體中之蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
  20. 如請求項19所述之檢測方法，其中前述源自活體的檢體係至少包含血紅素， 前述試料中之前述血紅素係與血紅素結合素形成複合體。
  21. 如請求項20所述之檢測方法，其中前述安定化溶液係如請求項16所述之安定化溶液。
  22. 一種套組，其係用於檢測源自活體的檢體中所含蛋白質之套組，包含：如請求項11至18中任一項所述之安定化溶液、及包含辨識前述蛋白質的抗體的試藥，其中前述蛋白質係選自由血紅素、血紅素結合素、及血紅素-血紅素結合素複合體所組成的群組之至少一種。
TW108107034A 2018-03-02 2019-03-04 安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質的溶液 TWI787473B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2018037227 2018-03-02
JP2018-037227 2018-03-02

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201939037A TW201939037A (zh) 2019-10-01
TWI787473B true TWI787473B (zh) 2022-12-21

Family

ID=67805478

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW108107034A TWI787473B (zh) 2018-03-02 2019-03-04 安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質的溶液

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20200407425A1 (zh)
EP (1) EP3761030A4 (zh)
JP (1) JP7237924B2 (zh)
CN (1) CN111788484A (zh)
AU (1) AU2019227781A1 (zh)
SG (1) SG11202008338PA (zh)
TW (1) TWI787473B (zh)
WO (1) WO2019168109A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2024504059A (ja) * 2021-01-21 2024-01-30 ジェイピー ラボラトリーズ インコーポレイテッド 食物の貯蔵寿命を延長するための材料および方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0997527A1 (en) * 1998-09-22 2000-05-03 Ortho-Clinical Diagnostics Stabilisation of peroxidases

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0281251A3 (en) 1987-02-04 1988-09-28 International Immunoassay Laboratories, Inc. A method for preparing a fecal sample composition for immunoassay testing
JPS63246668A (ja) 1987-03-31 1988-10-13 Kyoto Ikagaku Kenkyusho:Kk 糞便中の潜血検出方法
JPS63246667A (ja) 1987-03-31 1988-10-13 Kyoto Ikagaku Kenkyusho:Kk 糞便中のヘモグロビンの検出方法
JPS63243756A (ja) * 1987-03-31 1988-10-11 Wakamoto Pharmaceut Co Ltd 潜血を検査するための糞便試料の保存方法
CA1312825C (en) * 1988-01-27 1993-01-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Prevention or interruption of panic states with an imidazobenzodiazepine
JPH03279859A (ja) 1990-03-28 1991-12-11 Nitto Denko Corp ヒトヘモグロビンの検出方法
JPH08262020A (ja) * 1995-03-17 1996-10-11 Wako Pure Chem Ind Ltd ヒトヘモグロビンの安定化方法
JPH09224942A (ja) * 1996-02-28 1997-09-02 Nippon Shoji Kk ヒトヘモグロビンの安定化方法
JPH10132824A (ja) * 1996-10-28 1998-05-22 Eiken Chem Co Ltd ヘモグロビンの安定化方法
JP4039590B2 (ja) 1998-01-30 2008-01-30 栄研化学株式会社 ヘモグロビン試料の安定化
GB2353797A (en) * 1999-09-01 2001-03-07 Ortho Clinical Diagnostics Stabilisation of peroxidases
JP2000206117A (ja) * 1999-01-14 2000-07-28 Wakamoto Pharmaceut Co Ltd ヒトヘモグロビンの安定化方法
JP4261665B2 (ja) * 1999-03-05 2009-04-30 アルフレッサファーマ株式会社 溶液中のヒトヘモグロビンの安定化方法および安定化溶液
JP4502352B2 (ja) 2001-06-29 2010-07-14 栄研化学株式会社 ヘムタンパク質の安定化方法および保存溶液
JP5422108B2 (ja) * 2007-10-16 2014-02-19 栄研化学株式会社 ヘムタンパク質の安定化方法及び保存溶液
JPWO2011058958A1 (ja) * 2009-11-10 2013-04-04 富士レビオ株式会社 ヘムタンパク質の安定化用組成物及びそれを用いたヘムタンパク質の安定化方法
JP5551092B2 (ja) * 2010-01-19 2014-07-16 アークレイ株式会社 電気泳動を用いた試料の分析方法及びその利用
JP6434843B2 (ja) * 2015-03-31 2018-12-05 栄研化学株式会社 ヘムタンパク質の保存液及びヘムタンパク質の安定化方法
SG10201913188UA (en) * 2016-02-22 2020-02-27 Agency Science Tech & Res Method for detecting an analyte using surface enhanced raman spectroscopy

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0997527A1 (en) * 1998-09-22 2000-05-03 Ortho-Clinical Diagnostics Stabilisation of peroxidases

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
期刊 Frantzen et al., "Protein-boronic acid conjugates and their binding to low-molecular-mass cis-diols and glycated hemoglobin", Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, 670(1), 1995, pp 37-45. *

Also Published As

Publication number Publication date
KR20200128122A (ko) 2020-11-11
CN111788484A (zh) 2020-10-16
JP7237924B2 (ja) 2023-03-13
EP3761030A1 (en) 2021-01-06
EP3761030A4 (en) 2022-03-02
AU2019227781A1 (en) 2020-09-17
TW201939037A (zh) 2019-10-01
SG11202008338PA (en) 2020-09-29
JPWO2019168109A1 (ja) 2021-02-25
WO2019168109A1 (ja) 2019-09-06
US20200407425A1 (en) 2020-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5422108B2 (ja) ヘムタンパク質の安定化方法及び保存溶液
JP5364310B2 (ja) 反応性物質が結合した微小粒子の安定化方法および該微小粒子含有試薬
TWI787473B (zh) 安定檢體中所含蛋白質的方法、安定檢體中所含蛋白質的溶液
JP6434843B2 (ja) ヘムタンパク質の保存液及びヘムタンパク質の安定化方法
JP7005785B2 (ja) ヘモグロビンの測定試薬、測定キット及び測定方法
JP4261665B2 (ja) 溶液中のヒトヘモグロビンの安定化方法および安定化溶液
JP7348780B2 (ja) 擬似便、およびこれを用いた便潜血検査の精度管理方法
KR102678099B1 (ko) 검체 중에 포함된 단백질을 안정화시키는 방법, 검체 중에 포함된 단백질을 안정화시키기 위한 용액
TWI841542B (zh) 將血紅素與血紅素結合球蛋白之複合體安定化之方法、及用以保存含有血紅素之檢體之保存溶液
WO2019107414A1 (ja) ヘモグロビンとハプトグロビンとの複合体を安定化する方法、及びヘモグロビンを含む検体を保存するための保存溶液
JPH11166932A (ja) ヒトヘモグロビンの安定化方法
CN113125759A (zh) 糖化血红蛋白检测试剂盒
JP6818675B2 (ja) ヘムタンパク質の保存液及びヘムタンパク質の安定化方法
JP7508494B2 (ja) ヘモグロビンの測定試薬、測定キット及び測定方法
JPH09224942A (ja) ヒトヘモグロビンの安定化方法
KR102181485B1 (ko) 면역학적 측정 방법 및 측정 시약