TWI728409B - Hgf冷凍乾燥製劑 - Google Patents
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Abstract
本發明目標在於提供一冷凍乾燥製劑,該冷凍乾燥製劑相較于傳統冷凍乾燥製劑具有改進的肝細胞增生因子儲根據以下公式(A)計算肝細胞增生因子的濃度存穩定性。本發明提供一冷凍乾燥製劑,該冷凍乾燥製劑包括(1)一肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽。
Description
本發明涉及一包含肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑。
肝細胞增生因子(HGF)係一生物活性肽,具有肝實質細胞增殖活性並且已經在多種動物物種中發現。在人類中,已經在來自患有暴發性肝炎患者的血漿中發現人肝細胞增生因子(hHGF)(專利文獻1),並且近年來,重組人肝細胞增生因子(rhHGF)已經可以藉由生物技術大規模生產(非專利文獻1)。預期該等肝細胞增生因子可以用作藉由增加正常肝實質細胞而針對肝炎和肝硬化有效的治療和預防劑,並且由於其多種生物活性,可以用作腎衰竭及胃、十二指腸、皮膚等由抗癌劑的副作用引起的病損之治療劑。
包含肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑已經揭露於專利文獻2中,該專利公開包括一肝細胞增生因子以及一穩定劑例如甘胺酸、丙胺酸、山梨醇、甘露醇或葡聚糖硫酸鹽。
專利文獻3揭露了一冷凍乾燥製劑,包括濃度低至小於5 mg/mL的、適合於藥物的肝細胞增生因子,該配製物包括穩定劑例如精胺酸、離胺酸、組胺酸、穀胺酸或天冬胺酸。
專利文獻4揭露了一冷凍乾燥製劑,包括一肝細胞增生因子以及一穩定劑例如純蔗糖。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
[專利文獻1]日本專利特開昭63-22526號公報
[專利文獻2]日本專利特開平9-25241號公報
[專利文獻3]國際公開第2000/072873號
[專利文獻4]國際公開第2008/102849號
[非專利文獻]
[非專利文獻1] 《自然》(Nature),342卷,440-443頁,1989
[發明所欲解決之問題]
然而,目的在於增加肝細胞增生因子穩定性的、包括揭露於專利文獻2~4中的肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑仍未提供足夠的儲存穩定性。
此外,尚未知如何抑制與肝細胞增生因子關聯的雜質之生成或如何保持包含肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中的儲存前同功型比率。
因此本發明目標在於提供一冷凍乾燥製劑,該冷凍乾燥製劑相較于傳統冷凍乾燥製劑具有改進的肝細胞增生因子儲存穩定性。
[解決問題之技術手段]
本發明之諸位發明人已經進行了大量的研究以實現上述目標並且結果發現可能使用一冷凍乾燥製劑實現該目標,該冷凍乾燥製劑包括(1)一肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽。由此諸位發明人完成了本發明。
本發明提供了以下內容:
[1]一種冷凍乾燥製劑,該冷凍乾燥製劑包括(1)一肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽;
[2]一種用於生產冷凍乾燥製劑之方法,該方法包括以下步驟:
(I)在添加(1)一肝細胞增生因子之前,調節一水性溶液之pH為pH 4.5至6.5,該水性溶液至少包括(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽;並且製備一水性溶液,該水性溶液包括(1)該肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽;並且
(II)將步驟(I)中獲得的、包含肝細胞增生因子之水性溶液冷凍乾燥;
[3]一種方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子;
[4]一種方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以抑制肝細胞增生因子聚集體之生成、抑制與肝細胞增生因子關聯的雜質的生成和/或保持儲存前同功型比率;
[5]一種方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以抑制肝細胞增生因子聚集體之生成;
[6]一種方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以抑制與肝細胞增生因子關聯的雜質之生成;
[7]一種方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以保持肝細胞增生因子的儲存前同功型比率;以及
[8]如以上描述的項目[1]至[7],其中該肝細胞增生因子具有由SEQ ID NO: 1表示之胺基酸序列。
[發明之效果]
本發明可以提供一冷凍乾燥製劑,該冷凍乾燥製劑相較于傳統冷凍乾燥製劑具有改進的肝細胞增生因子儲存穩定性。
在下文中詳細描述了本發明之實施方式。本發明不限於下文描述的實施方式並且在發明範圍內可以進行不同修改。
本發明之冷凍乾燥製劑包括(1)一肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自下組的化合物(下文也稱作“化合物(3)”),該組由以下各項組成:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽。
用於在本發明中使用的肝細胞增生因子係一具有促進肝實質細胞生長的活性的蛋白質,並且不具體受限,只要其被純化一定程度可以用作一藥物。例如,可以參見專利公開JP-A-H11-56382。
該肝細胞增生因子可以是組織器官(例如哺乳動物的肝臟、脾臟、和腎臟)或流體組織(例如血漿和血清)中天然存在的那些中的任一種,或是被改性為具有變體胺基酸序列和/或變體碳水化合物鏈的那些中的任一種。哺乳動物之實施例包括人、大鼠、兔、乳牛、馬、綿羊等,其中人係較佳的。人肝細胞增生因子的胺基酸序列之實施例包括SEQ ID NO: 1。
該肝細胞增生因子可以提取並純化自組織器官(例如哺乳動物的肝臟、脾臟、和腎臟)以及流體組織(例如血漿和血清),或分離自產該肝細胞增生因子的細胞。
該肝細胞增生因子可以藉由向一適當的宿主細胞引入一適當載體(其中已經藉由遺傳工程技術整合了編碼該肝細胞增生因子之多核苷酸)來獲得。該載體不具體受限,只要其允許表達編碼肝細胞增生因子的多核苷酸。該載體的實施例包括具有選擇標記(係針對抗生素例如新黴素具有抗性的基因)的載體、具有編碼二氫葉酸還原酶(DHFR)或穀胺醯胺合成酶(GS)的基因的載體等,其可以在動物細胞中擴增,其中較佳的是pCI載體(可獲得自普洛麥格公司(Promega))以及pcDNA載體(可獲得自英傑公司(Invitrogen))。該宿主細胞不具體受限,只要其允許使用載體進行轉化並且允許重組肝細胞增生因子進行表達。宿主細胞的實施例包括大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌、絲狀真菌、植物細胞、昆蟲細胞、動物細胞等,其中較佳的是動物細胞並且特別佳的是中國倉鼠卵巢(CHO)細胞。
藉由遺傳工程技術獲得的肝細胞增生因子可以是,例如,無具體限制的重組肝細胞增生因子。例如,可以參見專利公開JP-A-H3-285693。所用的肝細胞增生因子可以是,例如,獲得自為CHO細胞的宿主細胞的重組人肝細胞增生因子(rhHGF)。
肝細胞增生因子可以是,在改性的胺基酸序列保留該肝細胞增生因子的活性的範圍內,藉由天然存在的肝細胞增生因子的胺基酸序列中的一個或多個,較佳的是1個至10個胺基酸殘基的取代、缺失、添加或插入或其組合改性的改性肝細胞增生因子。改性的肝細胞增生因子可以是與天然存在的肝細胞增生因子之胺基酸序列具有,例如,80%,較佳的是85%,更佳的是90%並且仍更佳的是95%同源性的肝細胞增生因子。例如,可以參見WO 90/010651、專利公開JP-A-H4-030000以及專利公開JP-A-H5-111383。
凍乾之前肝細胞增生因子的濃度不具體受限並且可以是例如,5 mg/mL或更低,較佳的是3 mg/mL或更低並且更佳的是1 mg/mL或更低。
向患者胃腸外給予本發明之冷凍乾燥製劑。
當冷凍乾燥製劑用於肺部給予時,本發明之冷凍乾燥製劑在使用之前進行溶解並且藉由噴霧器向患者進行給予。
當冷凍乾燥製劑用於注射時,本發明之冷凍乾燥製劑在使用之前進行溶解並且向患者靜脈內、皮下、或肌內給予。
藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的水性溶液中肝細胞增生因子的濃素不具體受限並且可以是例如,5 mg/mL或更低。用於溶解本發明之冷凍乾燥製劑的水不具體受限,只要它係醫療實踐中使用的水即可,並且其實施例包括注射用水、已滅菌的純化水、鹽水等。
用於在本發明中使用的海藻糖不具體受限,只要它被純化為藥學上可接受之程度並且其實施例包括海藻糖酐、海藻糖水合物等。海藻糖水合物的實施例包括但不具體受限於列於《日本藥典》(Japanese Pharmacopoeia)第16版等中的海藻糖水合物(海藻糖二水合物)。
添加至該冷凍乾燥製劑中的海藻糖之量係這樣的以使得肝細胞增生因子與海藻糖(在該段落的下文中,表述為相當於海藻糖酐的量)之間的質量比係,例如,1 : 4至1 : 460,較佳的是1 : 4至1 : 370並且更佳的是1 : 8至1 : 280。可替代地,基於就固體物質而言該冷凍乾燥製劑之總質量係按質量計100.0份,海藻糖係,例如,按質量計20.0至95.0份並且較佳的是按質量計30.0至94.0份。此外,在藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的、包含1.0 mg/mL的肝細胞增生因子的水性溶液中,海藻糖濃度係,例如,4.0 mg/mL至460.0 mg/mL並且較佳的是8.0 mg/mL至280.0 mg/mL。
用於在本發明中使用的化合物(3)選自由以下各項組成之群組:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽。
該化合物(3)不具體受限,只要它被純化為藥學上可接受之程度。可以使用一種或兩種或更多種化合物(3)。
鑒於聚集體或雜質生成的抑制,化合物(3)較佳的是一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽。
化合物(3)包括作為一鹼性物質的精胺酸、組胺酸、離胺酸和葡甲胺並且較佳的是一種或多種選自精胺酸、組胺酸和離胺酸的化合物。添加至冷凍乾燥製劑中的化合物(3)之量可以在如下濃度範圍內,該範圍允許肝細胞增生因子在用於生產該冷凍乾燥製劑的、包含肝細胞增生因子的水性溶液中、或在藉由溶解該冷凍乾燥製劑獲得的、包含肝細胞增生因子的水性溶液中溶解而不聚集。
添加至冷凍乾燥製劑中的化合物(3)之量係這樣的以使得肝細胞增生因子與化合物(3)(在該段落的下文中,表述為相當於游離態的量)之間的質量比係,例如,1 : 1至1 : 50,較佳的是1 : 1至1 : 40並且更佳的是1 : 2至1 : 35。可替代地,基於就固體物質而言該冷凍乾燥製劑的總質量係按質量計100.0份,化合物(3)之量係,例如,按質量計1.5至60.0份並且較佳的是按質量計3.0至59.0份。此外,在藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的、包含1.0 mg/mL的肝細胞增生因子的水性溶液中,化合物(3)的量係,例如,1.0 mg/mL至50.0 mg/mL,較佳的是1.0 mg/mL至40.0 mg/mL並且更佳的是2.0 mg/mL至35.0 mg/mL。
在本發明中化合物(3)可以是其藥學上容許之鹽。藥學上容許之鹽之實施例包括鹽酸鹽、乙酸鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽等。
在本發明中,在一包括(1)肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑中,藉由進一步包括(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽,可以相較于傳統冷凍乾燥製劑改進肝細胞增生因子之儲存穩定性。如在此使用的,儲存穩定性係指抑制肝細胞增生因子聚集體之生成、抑制與肝細胞增生因子關聯的雜質之生成和/或保持儲存前同功型比率。
本發明提供了一方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子。
即本發明提供了一方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以抑制肝細胞增生因子聚集體之生成。
本發明還提供了一方法,該方法藉由包含(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽來穩定肝細胞增生因子,以抑制含有(1)肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑中與肝細胞增生因子關聯的雜質的生成。
本發明進一步提供了一方法,該方法藉由將(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽包含於含有(1)肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑中來穩定肝細胞增生因子,以保持肝細胞增生因子之儲存前同功型比率。
如在此使用的,術語“聚集體”係指肝細胞增生因子之聚集體並且其實施例包括可溶性聚集體(例如二聚體和三聚體)以及藉由相互作用生成之不可溶性聚集體。
在本發明中,聚集體的量可以藉由,例如,經尺寸排阻層析法測量可溶性聚集體之量來評估。
在本發明中,可溶性聚集體之量,例如,當針對儲存在60℃ 1個月後的冷凍乾燥製劑經由尺寸排阻層析法評估聚集體之量時,是例如,小於1.4%並且較佳的是1.0%或更低。可替代地,針對儲存在60℃ 1個月後的冷凍乾燥製劑經由尺寸排阻層析法測量的聚集體之量係儲存之前聚集體之量的例如,4.6倍或更低,較佳的是4倍或更低,更佳的是3.5倍或更低並且仍更佳的是3倍或更低。
不可溶性聚集體之量可以藉由以下方法進行評估,針對相對較大(具有1 µm或更大尺寸)的不可溶性聚集體,藉由《日本藥典》第16版中描述的在不可溶性顆粒物質測試中的不透光度法或微流成像法,並且針對具有小於1µm或更低尺寸的不可溶性聚集體,藉由光散射法或超速離心法。
如在此使用的,術語“雜質”(“impurity”或“impurities”)係指對應於反相層析法中觀察到的除肝細胞增生因子峰之外的一個或多個峰的一種或多種物質。
藉由反相層析法評估雜質之量。例如,針對在本說明書實施例中使用的冷凍乾燥製劑,如圖1中所示的,觀察到了在保留時間為10分鐘左右的兩個峰(下文分別稱為“ImpA”和“ImpB”)以及除ImpA和ImpB之外的、在保留時間為6至7分鐘左右的其他雜質的峰(下文成為“其他imp”)。
在本發明中,其他雜質之量,例如,當針對儲存在60℃ 1個月後的冷凍乾燥製劑經由反相層析法評估雜質的量時,是例如,1.7%或更低,較佳的是1.5%或更低,更佳的是1.3%或更低並且仍更佳的是1.0%或更低。可替代地,針對儲存在60℃ 1個月後的冷凍乾燥製劑經由反相層析法測量的雜質的量係儲存之前雜質之量的例如,小於9倍,更佳的是7倍或更低,更佳的是5倍或更低並且仍更佳的是3倍或更低。
如在此使用的,術語“同功型”係指肝細胞增生因子的電荷變體(charge variant)並且是指具有不同電荷狀態的多種蛋白質。
同功型比率可以,例如,藉由離子交換層析法進行評估。例如,針對在本說明書實施例中使用的冷凍乾燥製劑,如圖2中所示的,觀察到了在保留時間為35至45分鐘處的兩個峰(下文分別稱為“峰A”和“峰B”)。如在此使用的,術語“同功型比率”係指每種同功型相對於同功型總量的比例。
本發明中肝細胞增生因子的生物活性可以根據在轉化生長因子β-1(TGFβ-1)存在下評估貂肺上皮細胞(Mv.1.Lu細胞)或4BMr5細胞的增殖的、基於細胞的測定進行評估(參見《免疫方法雜誌》(Journal of Immnological Methods),258卷,1-11頁,2001等)並且可以被表示為50%有效濃度(EC50)。儲存期間冷凍乾燥製劑之生物活性變化可以表示為藉由用儲存之後的EC50除以儲存之前的EC50獲得的相對滴度(%)。
為了保持用於生產冷凍乾燥製劑的、包含肝細胞增生因子的水性溶液或藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的、包含肝細胞增生因子的水性溶液之恒定pH,該冷凍乾燥製劑可包含一緩衝劑。
在本發明中使用的緩衝劑不具體受限,只要它係藥學上可接受的,並且其實施例包括磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鈉一水合物、檸檬酸水合物、檸檬酸鈉水合物、檸檬酸二鈉、乙酸、冰乙酸、乙酸鈉水合物、碳酸鈉水合物、碳酸氫鈉、甘胺酸、甘胺醯甘胺酸等。
緩衝劑通常以緩衝溶液形式使用,常用的緩衝溶液係例如磷酸鹽緩衝溶液、檸檬酸緩衝溶液以及乙酸緩衝溶液。
依據凍乾前包含肝細胞增生因子的水性溶液的濃度,冷凍乾燥製劑中的緩衝劑的量係例如1至100 mM。藉由調節濃度至這個範圍,可以實現藉由溶解該冷凍乾燥製劑獲得的、包含肝細胞增生因子的水性溶液之恒定pH。
取決於pH,肝細胞增生因子具有變化的溶解度,其中最低限度之溶解度在等電點左右。因此當考慮到等電點時,可以選擇pH,以使得肝細胞增生因子可以在用於生產該冷凍乾燥製劑的、包含肝細胞增生因子的水性溶液中、或在藉由溶解該冷凍乾燥製劑獲得的、包含肝細胞增生因子的水性溶液中溶解而不聚集。
在本發明中,在本說明書中的實施例中使用的肝細胞增生因子例如,在做為等電點的中性pH左右具有0.1至0.2 mg/mL的最低溶解度並且在pH 5左右具有1.6 mg/mL或更高的溶解度。因此,凍乾前的水性溶液以及藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的水性溶液具有的pH係例如,4.5至6.5並且較佳的是5.0至6.0。
在本發明之用於生產肝細胞增生因子的冷凍乾燥製劑之方法中,除緩衝劑之外可以使用一pH調節劑以調節凍乾前的水性溶液之pH。
在本發明中使用的pH調節劑不具體受限,只要它係藥學上可接受的,並且其實施例包括鹽酸、無水檸檬酸、檸檬酸水合物、檸檬酸鈉水合物、甘胺酸、丁二酸、乙酸、冰乙酸、乙酸鈉水合物、酒石酸、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鈉水合物、乾碳酸鈉、單乙醇胺、三乙醇胺、乳酸、乳酸鈉、磷酸、磷酸氫鈉水合物、無水磷酸一氫鈉、磷酸二氫鈉、無水磷酸二氫鈉、磷酸二氫鈉晶體、磷酸三鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀等。
為了防止待給予的藥物溶液中肝細胞增生因子含量之下降(歸因於冷凍乾燥製劑重構後肝細胞增生因子吸附於組成容器之玻璃或樹脂上),冷凍乾燥製劑可以包含一表面活性劑。
在本發明中使用的表面活性劑不具體受限,只要它係藥學上可接受的,並且其實施例包括非離子型表面活性劑,具體包括聚山梨酯80、聚山梨酯20、泊洛沙姆、聚乙二醇、HCO-40、HCO-60等。
在藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的、包含1.0 mg/mL的肝細胞增生因子的水性溶液中,表面活性劑在冷凍乾燥製劑中之量係,例如,0.020至1.0 mg/mL,較佳的是0.050至1.0 mg/mL,更佳的是0.075至0.5 mg/mL並且仍更佳的是0.075至0.2 mg/mL。
基於就固體物質而言冷凍乾燥製劑之總質量係按質量計100.0份,本發明之冷凍乾燥製劑包括按質量計0.1至4.5份的肝細胞增生因子,按質量計20.0至95.0份的海藻糖(在該段落的下文中,表述為相當於海藻糖酐之量)以及按質量計1.5至60.0份的化合物(3)(在該段落的下文中,表述為相當於游離態的量)。在一個實施方式中,基於就固體物質而言冷凍乾燥製劑之總質量係按質量計100.0份,肝細胞增生因子按質量計占0.3至4.4份,海藻糖按質量計占30.0至94.0份並且化合物(3)按質量計占3.0至59.0份。在另一個實施方式中,肝細胞增生因子按質量計占0.3至4.4份,海藻糖按質量計占30.0至94.0份,化合物(3)按質量計占3.0至59.0份並且聚山梨酯80按質量計占0.026至0.7份。
在本發明中,如果需要的話,冷凍乾燥製劑可以進一步包括一添加劑,例如運載體、張度劑以及抗氧化劑。
一用於生產本發明之冷凍乾燥製劑之方法,該方法包括以下步驟:
(I)在添加(1)一肝細胞增生因子之前,調節一水性溶液的pH為pH 4.5至6.5,該水性溶液至少包括(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽;並且製備一水性溶液,該水性溶液包括(1)該肝細胞增生因子,(2)海藻糖以及(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽;並且
(II)將步驟(I)中獲得的、該包含肝細胞增生因子之水性溶液凍乾。
本發明之冷凍乾燥製劑可以藉由該生產方法生產。
在步驟(I)中,將包括至少(3)一種或多種選自由以下各項組成的群組之化合物:精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及其藥學上容許之鹽的水性溶液之pH調節至pH 4.5至6.5並且較佳的是調節至pH 5.0至6.0。
在調節pH之前,該水性溶液可以包含(2)海藻糖但不包含(1)肝細胞增生因子。即,在將包括至少化合物(3)的水性溶液之pH調節至pH 4.5至6.5之後,向其中添加(1)肝細胞增生因子或向其中同時或順序地添加(1)肝細胞增生因子以及(2)海藻糖。
為了調節pH,可以使用緩衝劑和/或pH調節劑。在pH調節過程中,反應溫度不具體受限。
可以藉由溶解化合物(3)於一溶劑中來製備包括至少化合物(3)之水性溶液。
用於製備包括至少化合物(3)的水性溶液之溶劑不具體受限,只要其係例如,藥學上可接受的水。其實施例包括注射用水、已滅菌的純化水等。
(1)肝細胞增生因子和(2)海藻糖能以原樣或以水性溶液形式添加。用於製備水性溶液的溶劑可以與用於製備包括至少化合物(3)的水性溶液的溶劑相同或不同。在(1)肝細胞增生因子和(2)海藻糖的添加過程中,溫度不具體受限。
在步驟(I)中,如果需要的話,可以添加表面活性劑、其他添加劑(運載體、張度劑、抗氧化劑等)等。
在步驟(II)中,將步驟(I)中獲得的、包含肝細胞增生因子之水性溶液冷凍乾燥。
在將包含肝細胞增生因子的水性溶液傾倒入小瓶或安瓿中之後,該包含肝細胞增生因子的水性溶液可以根據常用方法冷凍乾燥。
較佳的是包含肝細胞增生因子之水性溶液藉由經由過濾器等的過濾進行滅菌並冷凍乾燥。
冷凍乾燥方法之實施例包括包含如下三單元操作的一方法:一冰凍步驟,用於在常壓下冷卻並冷凍;一初級乾燥步驟,用於在減壓下昇華並乾燥未與溶質結合的自由水;以及一次級乾燥步驟,用於去除溶質中固有的吸附水和結晶水(可以提及《日本藥學技術》(Pharm. Tech. Japan),8卷,1期,75-87頁,1992等以供參考)。
冷凍步驟過程中之溫度係,例如,-40℃或更低。初級乾燥步驟過程中的溫度係,例如,-20℃至10℃。次級乾燥步驟過程中的溫度係,例如,20℃至30℃。減壓係例如,10 Pa或更低。
如在此使用的,術語“塊狀物(cake)”係指冷凍乾燥製劑中的多孔固體物質。可以藉由多孔結構或塊狀物的顏色或冷凍乾燥製劑在水中的溶解度之目視觀察或由此獲得的水性溶液的目視觀察來評估該冷凍乾燥製劑之特徵。
本發明之冷凍乾燥製劑總體上是可接受的白色塊狀物並且在水中快速溶解以給出一澄澈且無色的水性溶液。
另一方面,潛在地歸因於可能衍生自肝細胞增生因子等的不可溶性聚集體之生成,藉由溶解傳統冷凍乾燥製劑獲得的水性溶液可能是渾濁的。由此藉由溶解冷凍乾燥製劑獲得的水性溶液之特徵可以指示不可溶性聚集體之生成。冷凍乾燥製劑儲存後水性溶液澄澈之事實意味著不可溶性聚集體之生成受到抑制。
實施例
藉由不限制本發明之實施例,在下文中更加詳細地描述本發明。
基於專利公開JP-A-H11-056382中揭露的胺基酸序列資訊,藉由完全合成一基因、將該基因併入到一載體中、在CHO細胞中表達蛋白質並且分離和純化該蛋白質來製備在本發明實施例中使用的肝細胞增生因子。
(實施例1至25和比較例1至7)
藉由下文描述之方法製備實施例和比較例中的冷凍乾燥製劑。表1至4指出包含肝細胞增生因子的每mL各水性溶液中多種組分之量(mg)。表中的值四捨五入至小數點後一位。以範圍從100 mL至250 mL的體積製備包含肝細胞增生因子之水性溶液。
[表1]
[表2]
[表3]
[表4]
<混合緩衝液之製備>
根據包含肝細胞增生因子的每種水性溶液之體積以及表1至4中指出的濃度,混合除肝細胞增生因子或聚山梨酯80之外的組分並用適當量之注射用水(包含肝細胞增生因子的水性溶液體積的約80%)攪拌。目視確認溶解之後,用鹽酸和/或氫氧化鈉將pH調節至5.5並且用注射用水調節體積以給出一混合緩衝液。
<包含肝細胞增生因子的水性溶液之製備>
藉由以下程序製備包含肝細胞增生因子之水性溶液。
(a)藉由使用上述混合緩衝液超濾,調節包含肝細胞增生因子的水性溶液以獲得如表1中指出的肝細胞增生因子之濃度。在紫外-可見光分光光度計(使用具有1 cm的光程的池)上測量在280 nm處的吸光度之後,根據以下公式(A)計算肝細胞增生因子的濃度:
蛋白質濃度(mg/mL)=(A280/1.73)×D (A)
其中:
A280:在280 nm處之吸光度;
1.73:0.1%濃度的樣品溶液在1 cm的光程以及在280 nm處的理論吸光度;並且
D:測量時的稀釋因數。
(b)其後添加聚山梨酯80從而獲得表1中指出的所希望濃度,隨後藉由經由無菌過濾器進行過濾(產品名稱:MILLEX GV 0.22µm過濾器,可獲得自密理博公司(Millipore))以給出包含肝細胞增生因子的水性溶液。
<冷凍乾燥步驟>
將該包含肝細胞增生因子之水性溶液以1 mL分到5-mL玻璃小瓶中,然後將該等玻璃小瓶用橡皮帽部分閉合。根據表5中指出的程序冷凍乾燥之後,將每個小瓶用橡皮帽完全閉合。然後將鋁帽附接至該玻璃小瓶以給出冷凍乾燥製劑。
比較例5係根據WO 2000/072873中揭露的配方生產的冷凍乾燥製劑。比較例6係根據WO 2008/102849中揭露的配方生產的冷凍乾燥製劑。
[表5]
(測試實施例1)
根據以下程序,針對冷凍乾燥製劑之特徵、冷凍乾燥製劑在注射用水中的溶解度以及溶解後獲得的水性溶液之特徵檢查實施例1至11和比較例1至6的所獲得的冷凍乾燥製劑。
<方法>
在1000至3000勒克斯的環境中,在白色和黑色背景下目視觀察每種獲得的冷凍乾燥製劑(塊狀物之形成以及色調)。然後向每種冷凍乾燥製劑中添加注射用水(1 mL),接著將其靜置,之後目視觀察冷凍乾燥製劑的溶解度和所獲得溶液的顏色。
表6中指出的術語“即溶”係指配製物在1分鐘之內完全溶解並且術語“微溶”係指配製物在甚至1分鐘之後未完全溶解。
<結果>
實施例1至4和比較例1至6的樣品的結果示於表6中。實施例1至4形成白色塊狀物並且顯示更好的溶解度。包含木糖醇的比較例1以及包含山梨醇的比較例3不形成塊狀物並且是白色或無色的熔融固體。不包含糖類的比較例5係白色固體,無針對冷凍乾燥製劑通常觀察到的塊狀物形成。實施例5至11也形成了類似於實施例1至4的白色塊狀物並且顯示更好的溶解度。
[表6]
將所獲得的冷凍乾燥製劑在25℃、40℃或60℃下儲存在恒溫室中持續2週或1個月,隨後進行以下測試。
(測試實施例2)
如下評估實施例1至25和比較例1至7中可溶性聚集體之量。
<方法>
在冰冷卻下向實施例和比較例的每種冷凍乾燥製劑中添加注射用水(1 mL)以用於溶解。將該溶液適度震盪以獲得勻質溶液,隨後靜置5分鐘。將所獲得的溶液分散到250-µL小瓶插入物,將該等插入物放置於HPLC小瓶以獲得樣品。
在以下分析條件下針對儲存之前以及之後可溶性聚集體的量藉由尺寸排阻層析法對每種樣品進行測量並且藉由面積百分比法計算可溶性聚集體之量。
檢測器:UV 280 nm;
管柱:保護柱(商標名:TSKgel G3000SWXL,可獲得自東曹公司(Tosoh Corporation));
管柱溫度:30℃;
流動相:藉由溶解39 g的磷酸二氫鈉、87.5 g的氯化鈉以及5.0 g的月桂基硫酸鈉於5000 mL的水中並用2 mol/L氫氧化鈉溶液調節該溶液的pH至7.5 獲得;
進樣50 µL;並且
流速:1 mL/min。
<結果>
初始(儲存之前)以及在25℃、40℃或60℃下儲存2週或1個月之後的樣品中可溶性聚集體的量之測量結果示於表7至9中。初始以及在60℃下儲存1個月之後的、實施例1至4和比較例1至6的樣品中可溶性聚集體的量之測量結果示於圖3中。此外,冷凍乾燥製劑中海藻糖含量與可溶性聚集體的量之間的相關性示於表10中。
根據表7,比較例1至6的可溶性聚集體之量隨著儲存期和儲存溫度之增加而增加。在60℃下儲存1個月之後,可溶性聚集體之量顯著增加。
同時根據表7和8,如在比較例中的、可溶性聚集體的量的這樣一種顯著變化在所測試的儲存條件下針對實施例1至11未觀察到。由此可溶性聚集體的生成在實施例1至11中受到抑制,甚至是在60℃的儲存條件下。
根據表9和10,在不包含海藻糖的比較例7中,可溶性聚集體之量顯著增加。
而針對包含不同量的肝細胞增生因子的實施例12至15以及包含不同量的精胺酸之實施例23至25,未觀察到可溶性聚集體之量的顯著變化。
[表7]
[表8]
[表9]
[表10]
(測試實施例3)
如下評估實施例1至25和比較例1至7中雜質之量。
<方法>
使用的樣品係在HPLC小瓶中的、製備以用於可溶性聚集體的量之評估的那些。
在以下分析條件下針對儲存之前以及之後雜質的量藉由反相層析法對每種樣品進行測量並且藉由面積百分比法計算雜質之量。
檢測器:UV 215 nm;
管柱:反相柱(商標名:Inertsil WP300-C8,可獲得自GL科學公司(GL Sciences Inc.)),附接有GL Cart保護柱;
管柱溫度:40℃;
流動相A:水/三氟乙酸(1000 : 1);
流動相B:乙腈/三氟乙酸(1000 : 0.85);
進樣:25 µL;
流速:1 mL/min;並且
梯度:流動相B相對於流動相A和流動相B的總量之體積比:15%(初始)-70%(27.5 min)-70%(30 min)-15%(30.01 min)-15%(35 min)。
<結果>
初始(儲存之前)以及在25℃、40℃或60℃下儲存2週或1個月之後的實施例1至11和比較例1至6的樣品中雜質的量之測量結果示於表11和12中。初始以及在60℃下儲存1個月之後的、實施例1至4和比較例1至6的樣品中雜質的總量之測量結果示於圖4中。
根據表11,在25℃和40℃的儲存條件下實施例1至4中雜質的總量未顯著變化。根據表11和12,甚至是在60℃的儲存條件下,實施例1至11中雜質之總量相對于初始值增加至多兩倍,而所有比較例的配製物中量的增加都是幾乎10倍或更高。在60℃儲存條件下,發現所有比較例配製物中ImpA、ImpB以及其他imp中任一者都增加。由此雜質的生成在實施例1至11中受到抑制,甚至是在60℃的儲存條件下。
在實施例12至25中,在任何儲存條件下都未觀察到雜質總量之顯著變化。
[表11]
[表12]
(測試實施例4)
如下評估實施例1至25和比較例1至7中的同功型比率。
<方法>
使用的樣品係在HPLC小瓶中的、製備以用於聚集體的量的評估的那些。
在以下分析條件下針對儲存之前以及之後的同功型之量藉由離子交換層析法對每種樣品進行測量並且藉由面積百分比法計算同功型比率。
檢測器:UV 215 nm;
管柱:商標名:Agilent Bio SCX NP5 PK,可獲得自安捷倫科技公司(Agilent Technologies);
管柱溫度:30℃;
流動相A:50 mmol/L Tris-HCl緩衝液(pH 9.0);
流動相B:50 mmol/L Tris-HCl緩衝液(pH 9.0),1 mol/L NaCl;
進樣:50 µL;
流速:0.5 mL/min;並且
梯度:相對於流動相A和流動相B的總量的流動相B之體積比:20%(初始)-60%(50 min)-80%(51 min)-80%(60 min)-20%(60.01 min)-20%(80 min)。
<結果>
同功型的量的變化之測量結果表示為相對於初始(儲存之前)以及在25℃、40℃或60℃下儲存2週或1個月之後的樣品中峰A和峰B的總和而言的峰B之比率,示於表13至15中。同功型比率的變化的測量結果表示為初始以及在60℃下儲存1個月之後的、實施例1至4和比較例1至6的樣品中峰B之比率,示於圖5中。此外,冷凍乾燥製劑中海藻糖含量與峰B的比率之間的相關性示於圖6中並且精胺酸含量與峰B的比率之間的相關性示於圖7中。
根據表13和14,在所測試儲存條件下,在實施例1至11和比較例5中幾乎未觀察到峰B的同功型比率之變化,而在60℃的儲存條件下,在其他比較例中峰B的同功型比率顯著變化。由此同功型比率變化在實施例1至11中受到抑制,甚至是在60℃的儲存條件下。在比較例1中,儲存後觀察到顯著變化,即,峰A的同功型被消除,使得所檢測的同功型僅是峰B並且觀察到不是同功型的一峰。
根據圖6,發現峰B的同功型比率隨著配製物中海藻糖含量之增加而下降。類似地,針對不包含海藻糖的比較例7之配製物,也觀察到了峰B的同功型比率之下降。
根據圖7,發現在60℃的儲存條件下持續1個月後峰B的同功型比率隨著配製物中精胺酸含量之下降而下降。
同時根據配製物中肝細胞增生因子之含量變化,未觀察到同功型比率變化。
[表13]
[表14]
[表15]
(測試實施例5)
如下評估實施例1至25和比較例1至7中不可溶性聚集體之量。
<方法>
向每種冷凍乾燥製劑中添加注射用水(1 mL),將該冷凍乾燥製劑靜置並且然後稀釋於注射用水或每種安慰劑水性溶液中以給出樣品。在流動顆粒成像分析儀上針對儲存前和儲存後不可溶性微粒之數量對每種樣品進行測量,並且根據以下公式計算不可溶性微粒之數量:
微粒數量(數量/小瓶)= P × 1000 × V/(n × v)
其中:
P:檢測的顆粒之數量;
V:樣品溶液之體積(mL);
n:測量數;並且
v:每一測量的樣品之體積。
<結果>
初始(儲存之前)以及在60℃下儲存2週或1個月之後的實施例1至11和比較例1至6的樣品中不可溶性聚集體的量之測量結果示於表16和17中。
根據表16,在60℃下儲存1個月之後,在比較例1至6中的不可溶性聚集體之量增加。同時根據表16和17,如在比較例中的、不可溶性聚集體量的這樣一種顯著變化針對實施例1至11未觀察到。由此不可溶性聚集體之生成在實施例1至11中受到抑制,甚至是在60℃的儲存條件下持續1個月。針對實施例12至25未觀察到不可溶性聚集體的量之顯著變化。
[表16]
[表17]
(測試實施例6)
如下評估實施例1、比較例5和比較例6之生物活性。
<方法>
培養貂肺上皮細胞(Mv.1.Lu細胞),確認細胞活力,並且然後以1 × 105
個/Ml製備細胞溶液。向96-孔測定板的每個孔中添加轉化生長因子β-1(TGFβ-1)之溶液並且向每個孔中添加肝細胞增生因子濃度為0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64或128 ng/mL之樣品溶液。然後添加1 × 105
個/mL的細胞溶液並且將該板在5%二氧化碳培養箱中在37℃下培養69小時。向該板添加可獲得自東仁分子技術公司(Dojindo Molecular Technologies, Inc.)之細胞計數套組(Cell Counting Kit)(10 µL),然後將該板培養3小時並且針對在450 nm處的吸光度進行測量。
相對於樣品中的HGF濃度(橫軸),將所獲得的吸光度繪製在縱軸上,並且使用分析軟體(SoftMax Pro,可獲得自分子設備公司(Molecular Devices))、採用平行線分析以及4參數回歸分析計算該等樣品之EC50。藉由用儲存之後的EC50除以儲存之前的EC50計算相對滴度(%)。
<結果>
在60℃下儲存1個月之後的、實施例1和比較例5和6的樣品中EC50之相對滴度示於表18中。
根據表18,在60℃下儲存1個月之後,針對比較例5和6觀察到相對滴度之下降。
同時針對實施例1未觀察到相對滴度之下降,表明甚至是在60℃儲存條件下持續1個月之後仍保持生物活性。
[表18]
[產業上之可利用性]
本發明之冷凍乾燥製劑之所以具有產業利用性係因為它可以提供具有高品質之醫療實用肝細胞增生因子配製物。
序列表自由文本
SEQ ID NO: 1表示人肝細胞增生因子之胺基酸序列。
圖1係與肝細胞增生因子關聯的雜質之代表性層析圖;
圖2係肝細胞增生因子同功型之代表性層析圖;
圖3顯示在測試實施例2中初始以及在60℃儲存1個月後測試的冷凍乾燥製劑中可溶性聚集體之量;
圖4顯示在測試實施例3中初始以及在60℃儲存1個月後測試的冷凍乾燥製劑中雜質之總量;
圖5顯示相對於在測試實施例4中初始以及在60℃儲存1個月後測試的冷凍乾燥製劑中的同功型,峰B之比率;
圖6顯示相對於在測試實施例4中測試的冷凍乾燥製劑中的同功型,海藻糖含量與峰B的比率之間之相關性;並且
圖7顯示相對於在測試實施例4中測試的冷凍乾燥製劑中的同功型,精胺酸含量與峰B的比率之間之相關性。
Claims (15)
- 一種冷凍乾燥製劑,其包含:(1)肝細胞增生因子;(2)海藻糖;以及(3)選自由精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及該等之藥學上容許之鹽所組成之群中之1種以上化合物;冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:460,肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:50。
- 如請求項1之冷凍乾燥製劑,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:370。
- 如請求項1之冷凍乾燥製劑,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:8至1:280。
- 如請求項1至3中任一項之冷凍乾燥製劑,其中肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:40。
- 如請求項1至3中任一項之冷凍乾燥製劑,其中肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:2至1:35。
- 一種冷凍乾燥製劑之製造方法,其包括如下步驟:(I)於混合(1)肝細胞增生因子之前,將至少含有(3)選自由精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及該等之藥學上容許之鹽所組成之群中之1種以上化合物的水溶液調整為pH值4.5~6.5,並製備含有(1)肝細胞增生因子、(2)海藻糖、以及(3)選自由精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及該等之藥學上容許之鹽所組成之群中之1種以上化合物的水溶液;及(II)將上述(I)中所獲得之含有肝細胞增生因子之水溶液進行冷凍乾燥;冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:460,肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:50。
- 如請求項6之冷凍乾燥製劑之製造方法,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:370。
- 如請求項6之冷凍乾燥製劑之製造方法,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:8至1:280。
- 如請求項6至8中任一項之冷凍乾燥製劑之製造方法,其中肝 細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:40。
- 如請求項6至8中任一項之冷凍乾燥製劑之製造方法,其中肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:2至1:35。
- 一種肝細胞增生因子之穩定化方法,其係藉由使含有(1)肝細胞增生因子之冷凍乾燥製劑中含有(2)海藻糖、以及(3)選自由精胺酸、組胺酸、離胺酸、葡甲胺、穀胺酸、天冬胺酸、脯胺酸、肌酸、肌酸酐、三羥甲基胺基甲烷、及該等之藥學上容許之鹽所組成之群中之1種以上化合物而進行;冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:460,肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:50。
- 如請求項11之肝細胞增生因子之穩定化方法,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:4至1:370。
- 如請求項11之肝細胞增生因子之穩定化方法,其中冷凍乾燥製劑中之肝細胞增生因子與海藻糖之質量比為1:8至1:280。
- 如請求項11至13中任一項之肝細胞增生因子之穩定化方法,其中肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:1至1:40。
- 如請求項11至13中任一項之肝細胞增生因子之穩定化方法,其中肝細胞增生因子與(3)1種以上化合物之質量比為1:2至1:35。
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Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11548926B2 (en) | 2016-03-17 | 2023-01-10 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Method for producing an active hepatocyte growth factor (HGF) |
TW202310868A (zh) * | 2021-05-14 | 2023-03-16 | 美商克拉里斯生物醫療股份有限公司 | 用於治療眼睛疾病的生長因子組合物 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1367703A (zh) * | 1999-05-31 | 2002-09-04 | 三菱化学株式会社 | Hgf冻干制剂 |
TW201141507A (en) * | 2010-02-18 | 2011-12-01 | Transtech Pharma Inc | RAGE fusion protein compositions and methods of use |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2564486B2 (ja) | 1986-07-14 | 1996-12-18 | 修治 橋本 | 肝細胞増殖因子 |
NZ232813A (en) | 1989-03-10 | 1992-08-26 | Snow Brand Milk Products Co Ltd | Human fibroblast glycoprotein, cell differentiation, blood vessel endothelial cell growth factor, cellular immunology inforcing factor of 78 or 74 thousand daltons plus or minus two thousand daltons |
JP2706704B2 (ja) | 1989-06-05 | 1998-01-28 | 敏一 中村 | 組換ヒト肝実質細胞増殖因子 |
JP3036782B2 (ja) | 1990-04-03 | 2000-04-24 | 三菱化学株式会社 | ヒト肝実質細胞増殖因子の生産方法および該因子を産生する形質転換体 |
JP2577091B2 (ja) | 1989-08-11 | 1997-01-29 | 三菱化学株式会社 | 肝実質細胞増殖因子及びそれをコードする遺伝子 |
JP2777678B2 (ja) | 1990-06-11 | 1998-07-23 | 敏一 中村 | 組換ヒト肝実質細胞増殖因子及びその製造方法 |
JP3072628B2 (ja) | 1990-11-19 | 2000-07-31 | 敏一 中村 | ヒト肝実質細胞増殖因子をコードする染色体dna |
JP3213985B2 (ja) | 1991-10-18 | 2001-10-02 | 三菱化学株式会社 | 新規なタンパク質 |
CA2102463A1 (en) | 1992-11-05 | 1994-05-06 | Mitsubishi Chemical Corporation | Protein and gene encoding said protein |
JP3232714B2 (ja) | 1992-11-20 | 2001-11-26 | 三菱化学株式会社 | 新規なタンパク質およびそれをコードする遺伝子 |
NZ262634A (en) * | 1993-02-23 | 1997-02-24 | Genentech Inc | Stabilizing polypeptides against degradation by organic solvents by admixing the peptide with trehalose or mannitol |
JP2747979B2 (ja) | 1994-08-19 | 1998-05-06 | 雪印乳業株式会社 | ヒト由来の糖蛋白質からなる生理活性因子を有効成分とする医薬 |
JP3927248B2 (ja) | 1995-07-11 | 2007-06-06 | 第一製薬株式会社 | Hgf凍結乾燥製剤 |
JP2859577B2 (ja) | 1996-03-27 | 1999-02-17 | 三菱化学株式会社 | 肝実質細胞増殖因子 |
JP4463885B2 (ja) | 1996-12-05 | 2010-05-19 | 敏一 中村 | 劇症肝炎疾患治療剤 |
JP2980888B2 (ja) | 1998-07-09 | 1999-11-22 | 三菱化学株式会社 | 肝実質細胞増殖因子をコードする遺伝子 |
JP4090236B2 (ja) | 2000-12-05 | 2008-05-28 | 三菱化学株式会社 | 活性型肝細胞増殖因子アクティベーターに対する特異的抗体とその使用法 |
DE10204792A1 (de) | 2002-02-06 | 2003-08-14 | Merck Patent Gmbh | Lyophilisierte Zubereitung enthaltend Immuncytokine |
US7432044B2 (en) | 2004-07-26 | 2008-10-07 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for modulating hepatocyte growth factor activation |
WO2006063300A2 (en) | 2004-12-10 | 2006-06-15 | Genentech, Inc. | Crystal structure of hepatocyte growth factor activator complexed with kunitz domain inhibitor |
EP2014676B1 (en) | 2006-04-20 | 2012-03-07 | Kringle Pharma Inc. | Hgf precursor protein mutant and activated form thereof |
CA2673260A1 (en) * | 2006-12-20 | 2008-07-03 | Bayer Healthcare Llc | Factor vii and viia compositions |
WO2008102452A1 (ja) * | 2007-02-22 | 2008-08-28 | Kringle Pharma Inc. | Hgf製剤 |
US9393304B2 (en) * | 2008-10-29 | 2016-07-19 | Ablynx N.V. | Formulations of single domain antigen binding molecules |
AR078667A1 (es) | 2009-10-19 | 2011-11-23 | Genentech Inc | Moduladores de activador del factor de crecimiento de hepatocitos (hgfa) |
JP2012051822A (ja) | 2010-08-31 | 2012-03-15 | Institute Of Physical & Chemical Research | 肺癌診断用ポリペプチド、肺癌の検出方法、および治療効果の評価方法 |
WO2012144535A1 (ja) | 2011-04-18 | 2012-10-26 | 国立大学法人京都大学 | 急性肝不全抑制剤及びその薬効評価法 |
WO2013018851A1 (ja) | 2011-08-02 | 2013-02-07 | 独立行政法人国立がん研究センター | 誘導肝幹細胞から肝分化誘導する方法及び誘導肝前駆細胞 |
WO2014063128A1 (en) | 2012-10-20 | 2014-04-24 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Cancer cell trap |
RU2506946C1 (ru) * | 2012-11-28 | 2014-02-20 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Технология лиофилизации обогащенной тромбоцитами плазмы с сохранением жизнеспособности факторов tgf pdgf vegf |
WO2017159771A1 (ja) | 2016-03-18 | 2017-09-21 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | 肝細胞増殖因子(hgf)のpdマーカー |
CN106175986B (zh) | 2016-07-26 | 2017-12-01 | 复旦大学附属中山医院 | 一种瓣膜夹合器 |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1367703A (zh) * | 1999-05-31 | 2002-09-04 | 三菱化学株式会社 | Hgf冻干制剂 |
TW201141507A (en) * | 2010-02-18 | 2011-12-01 | Transtech Pharma Inc | RAGE fusion protein compositions and methods of use |
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