TWI659044B - 環胜肽、包含其之組成物及其製備方法 - Google Patents
環胜肽、包含其之組成物及其製備方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI659044B TWI659044B TW107107206A TW107107206A TWI659044B TW I659044 B TWI659044 B TW I659044B TW 107107206 A TW107107206 A TW 107107206A TW 107107206 A TW107107206 A TW 107107206A TW I659044 B TWI659044 B TW I659044B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- alkyl
- item
- group
- scope
- patent application
- Prior art date
Links
- 0 *C(N(CC1)CCC1(C(N[C@@](CCCNC(N)=N)C(NCC(N[C@](C1)([C@]1C(O)=O)C(N[C@@]1Cc2ccccc2)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=O Chemical compound *C(N(CC1)CCC1(C(N[C@@](CCCNC(N)=N)C(NCC(N[C@](C1)([C@]1C(O)=O)C(N[C@@]1Cc2ccccc2)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=O 0.000 description 5
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N C1OCCOC1 Chemical compound C1OCCOC1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYGOMGCGJMKBPI-PAMZHZACSA-N NC(NCCC[C@@H](C(NCC(NC(CC(O)=O)C(N[C@H](Cc1ccccc1)C(NC12CCNCC1)=O)=O)=O)=O)NC2=O)=N Chemical compound NC(NCCC[C@@H](C(NCC(NC(CC(O)=O)C(N[C@H](Cc1ccccc1)C(NC12CCNCC1)=O)=O)=O)=O)NC2=O)=N XYGOMGCGJMKBPI-PAMZHZACSA-N 0.000 description 1
- WWDIDIAXIHQMHV-OTWHNJEPSA-N NC(NCCC[C@@H](C(NCC(N[C@@H](CC(O)=O)C(N[C@H](Cc1ccccc1)C(NC12CCOCC1)=O)=O)=O)=O)NC2=O)=N Chemical compound NC(NCCC[C@@H](C(NCC(N[C@@H](CC(O)=O)C(N[C@H](Cc1ccccc1)C(NC12CCOCC1)=O)=O)=O)=O)NC2=O)=N WWDIDIAXIHQMHV-OTWHNJEPSA-N 0.000 description 1
- OPXWDWQEPDGWMG-OTWHNJEPSA-N NC(NCCC[C@@H](C(NCCNCCC(N[C@H](Cc1ccccc1)C(N[C@@H](CC(O)=O)C(NC1)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=N Chemical compound NC(NCCC[C@@H](C(NCCNCCC(N[C@H](Cc1ccccc1)C(N[C@@H](CC(O)=O)C(NC1)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=N OPXWDWQEPDGWMG-OTWHNJEPSA-N 0.000 description 1
- JHKFREYAMLHVON-PEXHNNQPSA-N NC(NCCC[C@@H](C(NCCOCCC(N[C@H](Cc1ccccc1)C(N[C@](C1)(C1C(O)=O)C(NC1)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=N Chemical compound NC(NCCC[C@@H](C(NCCOCCC(N[C@H](Cc1ccccc1)C(N[C@](C1)(C1C(O)=O)C(NC1)=O)=O)=O)=O)NC1=O)=N JHKFREYAMLHVON-PEXHNNQPSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/12—Cyclic peptides with only normal peptide bonds in the ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
本發明揭露一種下列式(I)或(I’)所表示之環胜肽:
其中,R1如說明書之定義。此外,也揭露包含其之醫藥或化妝品組合物及其製備方法。
Description
本發明關於一環胜肽、包含其之醫藥或化妝品組合物及其製備方法。更具體地,本發明關於局部或化妝品皮膚護理之環胜肽、包含其之醫藥或化妝品組成物及其製備方法。
胜肽已被廣泛應用於各種領域,例如局部或化妝品皮膚護理。在已知的胜肽中,發現具有精胺酸(R)-甘胺酸(G)-天門冬胺酸(D)構型(arginine (R)-glycine(G)-aspartate(D)motif)的胜肽作為細胞辨識中常見的單元。
已知包含RGD構型(motif)的胜肽可以結合於整合素(intergrin)RGD結合位,且可通過模擬體內條件而塗佈於組織工程中的合成支架以來增強細胞的附著。
在製備含有RGD構型之胜肽的常規方法中,必須使用耦合劑來催化胜肽的均相或固相合成。然而,耦合劑的使用量並不少,且耦合劑本身的成本很高,因此,胜肽的生產成本不低,且所獲得的胜肽並非全部可用。
因此,希望提供一種包含RGD構型的新胜肽,以及製備該胜肽的新方法;因此,所獲得的胜肽可廣泛應用於各種領域。
本發明之目的在於提供一種新的環胜肽及包含其之醫藥或化妝品組成物。
本發明的RGD-和GRD-環胜肽分別由下列式(I)和(I’)所表示:
其中,
R1為;R2和R3各自獨立為H或C1-6烷基;X為O、S、CH2、或N-R4,其中,R4為H、C1-6烷基、(CH2CH2O)nH、-C(=O)-C1-10烷基、或C(=O)(C2H4)2C(=O)O(C2H4O)nH,其中n=1-3。
優選地,在本發明之環胜肽中,當X為CH2時R3為C1-6烷基。
本發明之醫藥或化妝品組成物包含:一賦形劑、銅(II)離子、或氧釩(II)離子;以及上述本發明之環胜肽。
在本發明之環胜肽及醫藥或化妝品組成物中,X優選為O、S、CH2、或N-R4,其中,R4為H、C1-6烷基、-C(=O)-C4-10烷基、(CH2CH2O)nH、或C(=O)(C2H4)2C(=O)O(C2H4O)nH,其中n=1-3。
在本發明之環胜肽及醫藥或化妝品組成中,R1優選為、、或,其中,R2為H或C1-6烷基,R3為C1-6烷基;以及R4為H、-C(=O)-C4-10烷基、或(CH2CH2O)nH。更優選地,當R1為時,R2為異丙基,R3為甲基;或當R1為時,R4為H、或-C(=O)-庚基。
在本發明之一優選態樣中,本發明之環胜肽由下列式(I-1)至(I-5)和(I’-1)至(I’-5)任一者所表示:
其中,R為C1-10烷基。
本發明之環胜肽包含精胺酸(R)-甘胺酸(G)-天門冬胺酸(D)之胺基酸,其可以結合於整合素(intergrin)RGD結合位。當本發明之環胜肽結合於皮膚的整合素RGD結合位時,可以恢復真皮層和表皮層之間的傳遞過程,且可以刺激基底膜(basement membrane)重要蛋白質的產生。因此,可以達到改善疤痕、傷口、發炎過程、老化、以及/或皺紋形成的目的。因此,本發明之環胜肽和醫藥或化妝品組成物可以應用於局部或化妝品皮膚護理組成物。
優選地,在本發明之環胜肽中,本發明之環胜肽可為式(I-1)至(I-5)和(I’-1)至(I’-5)任一化合物所表示。式(I’-5)之化合物代謝後的產物為ACHA(胺基環己烷羧酸)衍生物,其為非天然胺基酸。然而,例如式(I’-3)之化合物的產物為薄荷酮(menthone),其為天然分子。因此,相較於式(I'-5)的化合物,優選為式(I’-1)至(I’-4)的化合物。
在本發明之醫藥或化妝品組成物中,用於本發明之適合的賦形劑可以是任何用於本領域之賦形劑,例如黏合劑、防沾黏劑(anti-adhesive agent)、分散劑、潤滑劑。
除了本發明之上述環胜肽和醫藥或化妝品組成物外,本發明之另一目的為提供一種用於製備本發明之環胜肽之新的生物相容性催化方法。
本發明之方法包含下列步驟(A)至(D)。
在步驟(A)中,由商業來源或藉由我們的催化方法製備,提供下列式(II-1)或(II’-1)和(II-2)所表示之化合物。
Rc-NH-R1-COOH (II-2)
在此,Ra和Rb各自獨立為烷基、環烷基、芳基、或雜芳基;Rc和Rd各自獨立為保護基;以及 R1為,其中R2和R3各自獨立為H或C1-6烷基;X為O、S、CH2、或N-R4,其中,R4為H、C1-6烷基、(CH2CH2O)nH、-C(=O)-C1-10烷基、或C(=O)(C2H4)2C(=O)O(C2H4O)nH,其中n=1-3。
在步驟(B)中,進行式(II-1)或(II’-1)與(II-2)之化合物之間的反應,以分別獲得由下列式(II-3)和(II’-3)所表示之化合物,
在步驟(C)中,分別進行式(II-3)或(II’-3)之化合物與由下列式(II-4)或(II’-4)所表示之化合物之間的反應,以分別獲得由下列式(II-5)和(II’-5)所表示之化合物。
其中,Rd和Re各自獨立為保護基。
在步驟(D)中,將式(II-5)或(II’-5)之化合物與式(III)之催化劑進行環化反應,以分別獲得式(I)或(I’)所表示之化合物。
M(O)mL1 yL2 z (III)
其中,M一為金屬,選自由IVB、VB、VIB、和錒系(actinide)族所組成之群組;L1和L2分別為配位基;m和y為大於或等於1的整數;z為大於或等於0的整數
在本發明的方法中,Rc和Rd可以為茀基甲氧基羰基(Fluorenylmethyloxycarbonyl,Fmoc);以及Re可以為MTr(4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺醯基)(4-methoxy-2,3,6-trimethylbenzenesulphonyl)。然而,本發明並不局限於此。
在本發明的方法中,式(II-1)或(II'-1)與(II-2)之化合物的反應間,或式(II-3)與(II-4)或(II’-3)與(II’-4)之化合物的反應間,可以用式(III)之催化劑或耦合劑進行。
在本發明的方法中,當以式(III)之催化劑進行步驟(B)至(D)之反應時,步驟(B)至(D)中使用的催化劑可以相同或不相同。
在式(III)之催化劑中,L1為一配位基,其優選為選自Cl、OTf、OTs、NTf2、鹵素、RC(O)CHC(O)R、OAc、OC(O)CF3、OEt、O-iPr、和丁基所組成之群組,其中,R為烷基(優選地為C1-6烷基;更優選地為C1-3烷基)。此外,L2也為一配位基,其優選為選自Cl、H2O、CH3OH、EtOH、THF、CH3CN、和所組成之群組。
再者,在式(III)之催化劑中,M可以為一金屬,選自由IVB、VB、VIB、和錒系族所組成之群組。在一態樣中,M為IVB族之過渡元素,m為1且y為2;其中M可以是Ti、Zr、或Hf。在另一態樣中,M為VB族之過渡元素,m為1且y為2或3;其中M可以是V或Nb。在另一態樣中,M為VIB族之過渡元素,m為1且y為4,其中M可以是Mo、W、或Cr。在另一態樣中M為VIB族之過渡元素,m為2且y為2;其中M為Mo、W、或Cr。在更另一態樣中,M為選自錒系族,m為2且y為2;其中M為U。式(III)之催化劑的具體例子為MoO2Cl2、V(O)OCl2、V(O)(OAc)2、V(O)(O2CCF3)2、Ti(O)(acac)2、Zr(O)Cl2、Hf(O)Cl2、Nb(O)Cl2、MoO2(acac)2、V(O)(OTs)2、V(O)(NTf2)2、或VO(OTf)2,但本發明並不局限於此。
另外,在式(III)之催化劑中,z可以是大於或等於0的整數;且優選地z為0。
用來製備環胜肽之常規方法中,使用3-5當量的耦合劑,例如羥基苯並三唑(hydroxybenzotriazole,HOBt)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(1-hydroxy-7-azabenzotriazole,HOAt)、2-(1H-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽(2-(1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate,HBTU)、和苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷六氟磷酸鹽(benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate,PyBOP)。因為這些耦合劑很貴,所獲得的環胜肽不容易商業化並應用於各種領域。
在本發明用於製備該環胜肽的方法中,式(III)之催化劑為水溶性的且用於促進反應進行。因此,本發明之方法不需使用昂貴的耦合劑,因此,可以以更便宜的方式生產環胜肽,且所獲得的環胜肽可以應用於各種領域。
在本發明中,除非另有說明,化合物中存在的烷基、環烷基、芳基、和雜芳基都包含取代和未取代基團。烷基、環烷基、芳基、和雜芳基上可能的取代基包含但不限於烷基、烯基、鹵素、烷氧基、酮、醇、硫醚、胺甲酸酯(carbamate)、胺基、雜環基、或芳基;但烷基不能被烷基取代。
在本發明中,術語「鹵素」包含F、Cl、Br、和I,且優選為Cl或I。術語「烷基」是指直鏈或支鏈之烷基;優選為包含直鏈和支鏈C1-20烷基;更優選為包含直鏈和支鏈C1-12烷基;最優選為包含直鏈和支鏈C1-6烷基。烷基的具體例子包含但不侷限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、叔丁基、戊基、新戊基、或己基。術語「烷氧基」是指本發明中定義的烷基與氧原子耦合的基團;優選為包含直鏈和支鏈C1-20烷氧基;更優選為包含直鏈和支鏈C1-12烷氧基;最優選為包含直鏈和支鏈C1-6烷氧基。烷氧基的具體例子包含但不侷限於甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、新戊氧基、或己氧基。術語「烯基」是指包含至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的碳氫基團;優選為包含含有至少一個雙鍵的直鏈和支鏈的碳氫C2-20基團;更優選為包含含有至少一個雙鍵的直鏈和支鏈的碳氫C2-12基團;最優選為包含含有至少一個雙鍵的直鏈和支鏈的碳氫C2-6基團。烯基的具體例子包含但不限於乙烯基、丙烯基、烯丙基、或1,4-丁二烯。術語「芳基」是指單價6-碳單環、10-碳雙環、或14-碳三環之芳香環系統。芳基的具體例子包含但不侷限於苯基、萘基、芘基(pyrenyl)、蒽基(anthracenyl)、或菲基(phenanthryl);且該芳基優選為苯基。術語「雜環基」是指具有至少一雜原子之5-8員單環、8-12員雙環、或11-14員三環之雜芳基或雜環烷基,其中該雜原子選自由O、S、和N所組成之群組。雜環基的具體例子包含但不侷限於吡啶基 (pyridyl)、嘧啶基(pyrimidinyl)、呋喃基(furyl)、噻唑基(thiazolyl)、咪唑基(imidazolyl)、或噻吩基(thienyl)。
從以下結合附圖的詳細描述中,本發明之其他目的、優點、和新穎特徵將變得更明顯。
本發明已經以例示性方式描述,且應當理解,所使用的術語是在描述性質而不是限制性質。鑒於上述教導,本發明的許多修飾和變化是可能的。因此,應當理解在所附的權利範圍內,本發明可以以不同於具體描述的方式實施。
本發明之一優選實施例的環胜肽可以由以下方法製備。
在流程I’和II’中,也可以使用耦合劑,例如羥基苯並三唑(HOBt)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(HOAt)、2-(1H-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸鹽(HBTU)、和苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷六氟磷酸鹽(PyBOP)。
在下文中,本發明提供用於製備本發明之環胜肽的實施例,但本發明並不局限於此。
1-胺基-順式-4-甲基環己烷羧酸
取4-甲基環己酮(45g,0.4mole)、氰化鉀(30g,0.4mole)、和氯化銨(22.0g,0.4mole)溶於水(300mL)和乙醇(250mL),並保持在室溫下6天,將深色溶液以水(300mL)稀釋並以氯化氫飽和,再經過2天後,1-胺基-順式-4-甲基環己腈鹽酸鹽(62.2g,88%)會結晶析出,將該鹽酸鹽(60g)與20%鹽酸迴流12小時,將溶液蒸發至乾,並將殘餘物用乙醇-乙醚(9:1)萃取(索氏(Soxhelt)萃取器)8小時,移除溶劑後,將殘餘物以氨水鹼化,得到1-胺基-順式-4-甲基環己烷羧酸(45.5g),針狀物[用乙酸-水(1:1)再結晶],m.p.356-360°(昇華),R f 0.69(元素分析:C8H15NO2實際值:C,61.6;H,9.7;N,8.4%;理論值:C,61.1;H,9.6;N,8.9%)。
反式-2-異丙基-5-甲基環己烷-1-螺-5’-乙內醯脲(trans-2-Isopropyl-5-methylcyclohexane-1-spiro-5'-hydantoin)
由天然的(-)-薄荷酮製備,產率37%,這種螺旋(spiran)形成的針狀物(用乙醇再結晶),m.p.228-231.5°(元素分析:實際值:C,63.0%;H,8.8%;N,11.6%.)
1-胺基-反式-異丙基-5-甲基環己烷羧酸
將先前的乙內醯脲以60%硫酸水解成胺基酸,針狀物[用水-乙酸(1:1)再結晶],m.p.330℃(元素分析:C11H21NO2實際值:C,66.0;H,10.5;N,6.8;理論值C,66.3;H,10.6;N,7.0%)。
二胜肽Fmoc-Asp(OtBu)-D-Phe-OH之合成:
在N2氣下於室溫取Fmoc-Asp(O t Bu)-OH(2.06g,5mmol,1.0當量)於1,2-二氯乙烷(DCE,10mL),加入苯甲酸酐(1.14g,5.05mmol,1.01當量)和MoO2Cl2(100mg,0.5mmol,10mol%),並藉由TLC分析監測反應,反應在室溫下攪拌2小時,直到起始胺基酸完全消耗並冷卻至0℃。在0℃下藉由注射器(syringe)將溶於DCE(5mL)的D-苯丙胺酸苯甲基酯(D-phenylalanine benzyl ester,1.275g,5.0mmol,1.0當量)加入上述溶液中,接著加入胺鹼(5.0mmol,1.0當量),將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘後,蒸發溶劑並將殘餘物以乙酸乙酯(100mL)溶解,以飽和水溶液NaHCO3(30mL)、水(30mL)、食鹽水(30mL)洗,並以Na2SO4乾燥,待溶劑蒸發後,殘餘物以矽膠快速層析法純化,得到白色固體的Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-OBn(2.68g,產率81%)。TLC R f =0.5(乙酸乙酯/己烷=1/5);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.77(d,J=7.6,2H),7.57(q,J=3.6,2H),7.41(t,J=7.6,2H),7.35-7.32(m,4H),7.30-7.27(m,4H),7.17(t,J=6.0,3H),7.02(t,J=6.4,3H),5.83(br,1H),5.13(q,J=12.0,2H),4.87(q,J=7.2,1H),4.58-4.49(m,1H),4.36(d,J=7.2,2H),4.20(t,J=7.2,1H),3.10(dd,J=16.4,5.6,2H),1.43(s,9H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 170.8,170.0,156.0,143.8,143.6,141.3,135.5,135.0,129.2,128.6,128.5,127.7,127.1,125.1,120.0,81.9,67.3,67.2,53.4,51.1,47.0,37.8,37.3,28.0;HRMS(ESI),C40H42N2NaO7理論值([M+Na]+):685.2889;實際值:685.2887。
在室溫下取Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-OBn(2.0g,3.0mmol,1當量)溶於乙酸乙酯/甲醇(v/v=1/1,150mL),加入10%Pd/C(383mg,10mol%),反應在氫氣(氣球)下攪拌1.5小時,接著以矽藻土過濾,以甲醇(30mL)、乙酸乙酯(30mL)多次清洗矽藻土,並合併濾液以真空濃縮,得到白色固體的二胜肽Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-OH(1.699g,99%)。TLC R f =0.23(乙酸乙酯/己烷=2/1)。
1H NMR(300MHz,CDCl3):δ 7.75(d,J=7.5,2H),7.54(d,J=7.2,2H),7.39(t,J=7.5,2H),7.29(d,J=7.2,2H),7.23-7.16(m,5H),7.06(d,J=7.5,1H),6.12(d,J=8.7,1H),3.21(dd,J=9.6,6.3,1H),3.06(dd,J=9.6,6.6,1H),2.72(dd,J=16.8,6.3,1H),2.57(dd,J=16.2,5.7,1H),1.43(s,9H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 171.4,170.8,170.0,156.0,143.7,143.6,141.2,135.7,129.2,128.5,127.7,127.1,125.1,120.0,81.9,67.3,53.4,52.3,51.0,47.0,37.9,37.4,29.7,28.0;HRMS(ESI),C33H36N2NaO7理論值([M+Na]+):595.2420;實際值:595.2423。
二胜肽Fmoc-Arg(Mtr)-Gly-OCH3之合成(藉由EDC-HOBt耦合)
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.72(d,J=7.6,2H),7.63-7.54(m,3H),7.25(t,J=7.6,2H),7.24-7.22(m,1H),6.49(br,1H),6.40(br,1H),6.07(d,J=8.01H),4.32(q,J=6.8,3H),4.14(t,J=7.2,1H),4.02(dd,J=17.6,5.2,1H),3.89(dd,J=17.6,5.2,1H),3.78(s,3H),3.66(s,3H),3.34-3.23(m,2H),2.66(s,3H),2.60(s,3H),2.16(s,3H),2.05(s,3H),1.93(t,J=6.0,1H),1.72-1.60(m,3H),1.27(t,J=6.8,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3)172.8,170.6,158.6,156.5,143.8,143.7,141.2,138.5,136.6,134.7,134.1,133.0,129.1,127.7,125.1,124.9,124.3,120.3,120.0,111.7,67.1,60.4, 55.4,52.3,47.0,41.0,40.2,31.9,30.0,29.7,25.1,24.0,21.0,18.3;HRMS(ESI),C34H41N5NaO8S理論值([M+Na]+):702.2573;實際值:702.2575。
實施例1
在室溫下取Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-OH(1.6g,2.8mmol,1.0當量)溶於1,2-二氯乙烷(DCE,5mL),加入2,6-二硝基苯甲酸酐(2,6-dinitrobenzoic anhydride,974mg,2.82mmol,1.01當量)和MoO2Cl2(56mg,0.28mmol,10mol%),並在N2氣下逐漸加熱至40℃,並以TLC分析監測反應。將反應於40℃下攪拌2小時,直到起始胺基酸完全消耗並冷卻至0℃。在0℃下藉由注射器將溶於DCE(3mL)的1-胺基環己烷羧酸 苯甲基酯(653mg,2.8mmol)加入上述溶液中,接著加入胺(2.8mmol,1.0當量),反應混合物在室溫下攪拌12小時後,蒸發溶劑並將殘餘物以乙酸乙酯溶解,以飽和水溶液NaHCO3(1mL)、水(1mL)、食鹽水(1mL)洗,並以Na2SO4乾燥,待溶劑蒸發後,殘餘物以矽膠快速層析法純化,得到白色固體的Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-ACHA-OBn(1.69g,產率77%)。TLC R f =0.26(乙酸乙酯/己烷=1/5);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.77(d,J=7.6,2H),7.57(d,J=7.2,2H),7.41(t,J=7.6,2H),7.35-7.27(m,7H),7.24-7.16(m,5H),6.95-7.89(br,1H),6.21(br,1H),5.72(br,1H),5.11(q,J=8.0,2H),4.63(q,J=7.6,1H),4.43-4.21(m,3H),4.23(t,J=7.2,1H),3.07(dd,J=16.4,6.4,1H),2.98-2.92(m,1H),2.81(dd,J=16.2,4.8,1H),2.64-2.53(m,1H),1.85-1.79(m,4H),1.64-1.49(m,3H),1.47(s,9H), 1.26-1.20(m,4H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 173.5,170.8,170.5,169.6,143.6,141.3,136.0,129.4,128.7,128.5,128.2,127.8,127.1,127.0,125.0,120.0,82.0,67.3,66.8,59.0,54.1,51.4,47.1,37.3,32.3,32.1,28.0,24.9,21.2,18.3;HRMS(ESI),C46H51N3NaO8理論值([M+Na]+):796.3574;實際值:796.3580。
在室溫下取Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-ACHA-OBn(1.5g,1.9mmol,1當量)溶於乙酸乙酯/甲醇(v/v=1/1,100mL),加入10%Pd/C(242mg,10mol%),反應在氫氣氣氛(氣球)下攪拌2小時,接著以矽藻土過濾,以甲醇(20mL)、乙酸乙酯(20mL)多次清洗矽藻土,並合併濾液以真空濃縮,得到白色固體的二胜肽Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-ACHA-OH(3-5-Fmoc)(1.31g,98%)。TLC R f =0.24(EtOAc/Hex=2/1);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.75(d,J=7.2,2H),7.73-7.72(m,6H),7.40-7.32(m,5H),7.31-7.21(m,6H),6.83(d,J=16.0,1H),6.46(d,J=5.4,1H),6.03(br,1H),4.73(q,J=7.6,1H),4.48-4.42(m,1H),4.41-4.12(m,4H),3.19-3.02(m,2H),2.84-2.68(m,2H),2.18-1.65(m,4H),1.49(s,9H),1.63-1.24(m,6H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 176.6,171.6,171.3,171.1,170.7,156.2,143.7,141.2,136.6,136.5,129.3,128.6,127.7,127.1,126.9,125.1,120.0,81.7,67.5,59.4,54.7,52.1,51.6,47.0,38.0,37.3,36.9,36.7,32.9,31.0,29.7,28.0,25.0,21.3,21.1;HRMS(ESI),C39H45N3NaO8理論值([M+Na]+):706.3104;實際值:706.3108。
步驟-A:取H-D-Phe-Asp(OtBu)-OMe.HCl(1-HCl)(48.7mg,0.126mmol,1.01當量)溶於甲醇(1mL)並冷卻至0℃,在室溫下加入NaHCO3(1.5當量)並攪拌0.5小時,蒸發甲醇後將殘餘物以四氫呋喃(2mL)溶解,以Na2SO4乾燥並過濾,將移除溶劑並真空乾燥,獲得D-Phe-Asp(OtBu)-OMe(1)。
在乾燥的50mL雙頸圓底瓶中加入溶於無水二氯甲烷(1.0mL)的MoO2Cl2(5.0mg,0.025mmol,20mol%),在環境溫度下將Fmoc-1-胺基環己烷-1-羧酸(2-5-Fmoc)(48.3mg,0.125mmol)加入上述溶液中,接著加入苯甲酸酐(29mg,0.127mmol),並加熱至40℃反應6小時後冷卻至0℃。
在0℃下,將溶於DCM(0.5mL)的D-Phe-Asp(OtBu)-OMe(48.3mg,0.125mmol)加入上述溶液中,並緩慢回到室溫,在室溫下攪拌2小時,之後加入2,6-二甲吡啶(14μL),在室溫下繼續攪拌4小時,以水(2mL)終止反應並分離有機層,水層以二氯甲烷(10mLx2)萃取,合併有機層以無水Na2SO4乾燥並濃縮,粗產物以矽膠管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=2/3),得到Fmoc-保護的三胜肽(3’-5-Fmoc)(58mg,67%)。
製備三胜肽(3’)的方法並不局限於上述步驟,例如可藉由以下流程I’-3’-5-Fmoc-B來製備Fmoc-保護的三胜肽(3’-5-Fmoc)。
步驟-B:在乾燥的25mL雙頸圓底瓶中加入溶於DCM(1mL/mmol)的耦合劑(1當量),在0℃下以DIEA(3當量)攪拌處理5分鐘,在0℃下加入Fmoc-1-胺基環己烷-1-羧酸(2-5-Fmoc)(182.7mg,0.5mmol)反應10分鐘,並與H-D-Phe-Asp(OtBu)-OMe鹽酸鹽(1)(192.7mg,0.55mmol)混合,10分鐘後移除冰浴,繼續在室溫下攪拌96小時。將混合物倒入乙酸乙酯(50 x DCM之體積),並根據通常的處理方法處理該溶液,粗產物以矽膠管柱層析法純化,得到Fmoc-保護的三胜肽(3’-5-Fmoc),產率:68%。管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=3:7,R f =0.2)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.74(d,J=7.2Hz,2H),7.57(d,J=7.2Hz,2H),7.40-7.27(m,4H),7.19-7.07(m,5H),6.63(d,J=8.0Hz,1H),5.11(s,1H),4.84(d,J=6.6Hz,1H),4.74(d,J=5.4Hz,1H),4.41-4.32(m,2H),4.15(t,J=6.4Hz,1H),3.59(s,3H),3.23(dd,J=14.0,6.9Hz,1H),3.04(dd,J=14.0,8.2Hz,1H),2.76-2.63(m,2H),1.92-1.77(m,2H),1.60-1.47(m,5H),1.38(s,9H),1.27-1.18(m,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 173.8,171.2,170.6,169.2,155.3,143.6,143.5,141.1,136.6,128.9,128.3,127.6,126.9,126.9,124.8,124.8,119.8,119.8,81.3,66.7,59.3,53.5,52.1,48.7,47.0,37.2,37.0,32.4,30.9,27.7,24.8,21.1,21.0;HRMS(ESI)C40H47N3O8理論值(M+Na+):720.3255;實際值:720.3253。
在室溫下,取Fmoc-保護的三胜肽(3’-5-Fmoc)(200mg,0.28mmol)溶液,以溶於DCM(1mL)的20%哌啶處理1小時,藉由與甲醇共蒸發後移除哌啶,粗產物以真空乾燥並以矽膠管柱層析法純化,得到三胜肽(3’-5)。產率:106.8/136.2=78%管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=9:1,R f =0.2)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.21(d,J=8.2Hz,1H,NH),7.21(t,J=6.8Hz,2H),7.16-7.14(m,3H),7.05(d,J=8.4Hz,1H),4.76-4.72(m,1H),4.63-4.58(m,1H),3.66(s,3H,OCH3),3.15(dd,J=14.0,6.2Hz,1H),3.00(dd,J=14.0,8.0Hz,1H),2.81(dd,J=16.0,4.0Hz,1H),2.51(dd,J=16.0,4.0Hz,1H),1.97-1.72(m,2H),1.58-1.51(m,4H),1.35(s,9H,C(CH3)3),1.36-1.28(m,2H),1.24-1.09(m,2H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 178.3,170.9,170.8,169.9,136.8,129.1,128.3,126.6,81.7,57.1,53.8,52.4,48.2,37.5,37.1,34.4,34.1,27.0,25.0,21.0;HRMS(ESI)C25H37N3O6理論值(M+H+):476.2761;實際值:476.2753。
實施例2
管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=3:1,R f =0.32);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.74(d,J=7.4,2H),7.75-7.70(m,4H),7.38-7.30(m,2H),7.31-7.21 7.19-7.14(m,5H),6.85(d,J=16.0,1H,NH),6.48(d,J=5.4,1H,NH),6.35(br,1H,NH),4.75(q, J=7.4,1H),4.52-4.45(m,1H),4.42-4.13(m,3H),3.78-3.73(m,2H),3.37-3.33(m,2H),3.22-3.06(m,2H),2.85-2.67(m,2H),2.38-2.23(m,2H),2.05-1.83(m,2H),1.49(s,9H),1.42(s,9H);HRMS(ESI),Calcd.for C43H52N4NaO10([M+Na]+):807.3581,found:807.3577.
在乾燥的25mL雙頸圓底瓶中加入溶於DCM(1mL/mmol)的耦合劑(1當量),在0℃下以DIEA(3當量)攪拌處理5分鐘,在0℃下加入1-Boc-哌啶-4-Fmoc-胺基-1-羧酸(2-1-Fmoc)(233.27mg,0.5mmol)反應10分鐘,並與H-D-Phe-Asp(OtBu)-OMe鹽酸鹽(1)(202.91mg,0.525mmol)混合,10分鐘後移除冰浴,繼續在室溫下攪拌96小時。將混合物倒入乙酸乙酯(50 x DCM之體積),並根據通常的處理方法處理該溶液,粗產物以矽膠管柱層析法純化,得到Fmoc-保護的三胜肽(3’-1-Fmoc)。產率:259/399.17=65%管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=3:7,R f =0.2)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.75(d,J=7.6Hz,2H),7.56(t,J=5.2Hz,2H),7.39(dt,J=6.4,2.4Hz,2H),7.32-7.27(m,2H),7.19(t,J=7.6Hz,2H),7.12(t,J=6.2Hz,3H),6.68(d,J=7.6Hz,1H),4.79(s,1H),4.44(d,J=6.0Hz,1H),4.15(t,J=6.2Hz,1H),3.74-3.67(m,1H),3.63(s,3H),3.56(d,J=14.0Hz,1H),3.19(br,1H),2.99(dd,J=14.0,8.2Hz,1H),2.89(br,1H),2.76(dd,J=16.0,6.0Hz,1H),2.60(d,J=12.8Hz,1H),2.05-1.96(m,1H),1.77-1.53 (m,6H),1.42(s,9H),1.38(s,9H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 172.7,171.2,170.5,169.3,155.3,154.3,143.5,143.4,141.1,136.5,128.9,128.3,127.6,126.9,126.9,126.7,124.8,124.7,119.8,81.4,79.6,66.7,57.6,53.6,52.3,48.7,46.9,37.1,28.2,27.8.
在室溫下,取Fmoc-保護的三胜肽(3’-1-Fmoc)(219mg,1.27mmol)溶液,以溶於DCM(1mL)的20%哌啶處理3小時,藉由與甲醇共蒸發後移除哌啶,粗產物以真空乾燥並以矽膠管柱層析法純化,得到三胜肽(3’-1)。產率:113/155.6=72%管柱層析法純化(乙酸乙酯/己烷=9:1,R f =0.2)1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.05(d,J=8.2Hz,1H,NH),7.26-7.14(m,5H),7.05(d,J=8.4Hz,1H),4.76-4.72(m,1H),4.66-4.60(m,1H),3.88-3.76(m,2H,NH2),3.67(s,3H,OCH3),3.16(dd,J=14.0,6.2Hz,1H),3.02-2.92(m,3H),2.82(dd,J=17.0,4.4Hz,1H),2.52(dd,J=17.0,4.6Hz,1H),2.07-2.00(m,1H),1.91-1.84(m,1H),1.58-1.38(m,1H),1.40(s,9H,C(CH3)3),1.36(s,9H,C(CH3)3),1.32-1.20(m,2H),1.11-1.06(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 176.7,170.9,170.6,169.9,154.4,136.6,129.1,128.4,126.7,81.7,79.4,55.3,53.7,52.4,48.2,37.5,37.0,34.2,28.2,27.8;HRMS(ESI)C29H45N4O8理論值(M++1):577.3232;實際值:577.3248。
實施例3
在室溫下取Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-ACHA-OH(3-5-Fmoc)(698g,1mmol,1.0當量)溶於1,2-二氯乙烷(DCE,5mL),加入2,6-二硝基苯甲酸酐(348mg,1.01mmol,1.01當量)和VO(OTf)2(55mg,0.15mmol,15mol%),在N2氣下逐漸加熱至40℃,並藉由TLC分析監測反應。反應在40℃下攪拌4小時,直到起始胺基酸完全消耗後冷卻至0℃,在0℃下藉由注射器將溶於DCE(3mL)的NH2-Arg(Mtr)-Gly-OCH3(4)(457mg,1mmol)溶液加入上述溶液中,接著加入鹼(1.0mmol,1.0當量),將反應混合物在室溫下攪拌12小時,蒸發溶劑並將殘餘物以乙酸乙酯(100mL)溶解,以飽和水溶液NaHCO3(20mL)、水(20mL)、食鹽水(20mL)洗,並以Na2SO4乾燥,待溶劑蒸發後,殘餘物以矽膠快速層析法純化,得到白色固體的Fmoc-Asp(O t Bu)-D-Phe-ACHA-Arg(Mtr)-Gly-OCH3(5-5-Fmoc)(612mg,產率68%)。TLC R f =0.50(EtOAc/Hexane=3/1);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.75(d,2 H,J=7.20Hz),7.57(m,2 H),7.39(t,2 H,J=7.6Hz),7.30-7.18(m,8H),6.60(br,1 H),6.55(br,1 H),4.67(br,1 H),4.52-4.42(m,1H),4.37(q,1 H,J=6.40Hz),4.35-4.23(m,2H),4.19(t,1 H,J=7.2Hz),4.14-4.04(m,1H),3.81(s,3H,OCH3),3.69-3.61(m,1H),3.58(s,3H,CO2CH3),3.46-3.42(m,1H),3.21-3.09(m,2H), 3.03-2.92(m,1H),2.68(s,3H),2.59(s,3H),2.25-2.11(m,2H),2.10(s,3H),2.04-1.83(m,4H),1.79-1.58(m,3H),1.59-1.41(m,4H),1.39(s,9H,C(CH3)3),1.35-1.05(m,4H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ175.4,172.9,172.6,172.0,171.2,170.5,156.7,143.6,141.2,136.3,129.2,129.0,128.7,127.8,127.1,127.0,125.0,120.0,112.3,81.7,77.3,67.2,60.4,55.5,53.0.52.3,51.2,47.0,41.2,37.0,36.7,34.1,30.0,29.0,28.0,24.9,24.3,21.3,20.9,18.3,12.0;HRMS(ESI),C58H74N8NaO13S理論值([M+Na]+):1145.4994;實際值:1145.4981。
在乾燥的25mL雙頸圓底瓶中加入溶於DCM(1mL/mmol)的耦合劑(1.5當量),在0℃下以DIEA(4.0當量)攪拌處理5分鐘,在0℃下加入Fmoc-Gly-Arg(Mtr)-OH(4)(149.6mg,0.22mmol)反應20分鐘,並與三胜肽(3’-5)(106.8mg,0.22mmol)混合,20分鐘後移除冰浴,繼續在室溫下攪拌10天。將粗產物真空乾燥並以矽膠管柱層析法純化,得到Fmoc-保護的胜肽(5’-5-Fmoc)。產率:30%(PyBOP);65%(藉由MoO2Cl2/4-硝基苯甲酸酐)。管柱層析法純化(乙酸乙酯/甲醇=99.5:0.5,R f =0.6);1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.76(d,J=8.0,1H,NH),7.70(d,J=8.2,2H),7.56(d,J=6.4,1H,NH),7.51(d,J=7.2,2H),7.42(bd,1H,NH),7.38(d,J=8.0,2H),7.36-7.16(m,2H),7.11-7.06(m,5H),6.86(d,J=7.6Hz,1H,NH),6.50(s,1H),6.38(bs,2H),4.84(dd,J=14.0,6.6 Hz,1H),4.67(dd,J=13.8,8.0Hz,1H),4.45-4.27(m,2H),4.20-4.11(m,1H),3.90-3.89(m,1H),3.79(s,3H,OCH3),3.73-3.71(m,1H),3.65(s,3H,CO2CH3),3.54-3.46(m,1H),3.43-3.36(m,2H),3.20-3.16(m,1H),3.05(dd,J=14.0,9.3Hz,1H),2.71(t,J=8.0Hz,1H),2.71(m,1H),2.67(s,3H,CH3),2.61(s,3H,CH3),2.10(s,3H,CH3),2.01-1.79(m,3H),1.76-1.51(m,2H),1.50-1.41(m,2H),1.39(s,9H,C(CH3)3),1.32-1.02(m,6H),0.94-0.82(m,2H);HRMS(ESI)C58H74N8O13S理論值(M+H+):1122.5098;實際值:1122.5096。
實施例4
類似於[流程II-5-5-Fmoc]的步驟,得到產物的產率65%。管柱層析法純化(乙酸乙酯/甲醇=9.5:0.5,R f =0.40);1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.76(d,2 H,J=7.4Hz),7.59-7.56(m,2 H),7.38(t,2 H,J=7.6Hz),7.28-7.15(m,8 H),6.64(br,1 H),6.58(br,1 H),4.69(br,1 H),4.55-4.45(m,1H),4.40(dd,1 H,J=7.2,6.4Hz),4.38-4.24(m,2H),4.20(t,1 H,J=7.2Hz),4.16-4.08(m,2H),3.82(s,3H,OCH3),3.76-3.71(m,2H),3.66-3.62(m,1H),3.56(s,3H,CO2CH3),3.44-3.40(m,1H),3.34-3.30(m,2H),3.18-3.12(m,2H),3.01-2.93(m,1H),2.66(s,3H),2.57(s,3H),2.27-2.15(m,2H),2.09(s,3H),2.25-2.04(m,4H),1.78-1.60(m,2H),1.56-1.52(m, 2H),1.40(s,9H,C(CH3)3),1.36(s,9H,C(CH3)3);HRMS(ESI),calculated for C62H82N9O15S([M+H]+):1224.5651,found:1224.5654.
類似於[流程II’-5’-5-Fmoc]的步驟,得到產物的產率72%。管柱層析法純化(乙酸乙酯/甲醇=9.5:0.5,R f =0.4);1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.62(d,J=8.2,1H,NH),7.60(d,J=8.0,2H),7.53(d,J=6.4,1H),7.45(d,J=7.2,2H),7.30(bd,1H,NH),7.36(d,J=8.0,2H),7.34-7.18(m,6H),7.18-7.10(m,5H),6.74(d,J=7.6Hz,1H,NH),6.40(s,1H),6.25(bs,2H),4.81(dd,J=13.8,6.8Hz,1H),4.70(dd,J=13.8,8.0Hz,1H),4.52-4.31(m,3H),4.18-4.08(m,1H),3.95-3.86(m,2H),3.77(s,3H,OCH3),3.73-3.71(m,1H),3.62(s,3H,OCH3),3.68-3.60(m,2H),3.57-3.46(m,1H),3.48-3.36(m,2H),3.18-3.12(m,1H),3.08(t,J=8.0Hz,1H),2.71(dd,J=14.0,9.3Hz,1H),2.73-2.67(m,1H),2.63(s,3H,CH3),2.55(s,3H,CH3),2.11(s,3H,CH3),2.11-1.83(m,6H),1.76-1.61(m,8H),1.55-1.45(m,6H),1.36(s,9H,C(CH3)3),1.36-1.06(m,8H),0.92-0.84(m,2H);HRMS(ESI)C62H82N9O15S理論值(M++H):1224.5651;實際值:1224.5662。
實施例5
[流程III-6-5]
在Fmoc去保護和環化後
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.00(s,1H,C=NH),7.88(bs,1H,NH),7.75(bs,1H,NH),7.64(bs,1H,NH),7.42-7.13(m,6H),7.01(br,1H,NH),6.52(br,1H,MTR-H),6.27(br,2H,NH),4.79-4.71(m,1H),4.62-4.51(m,1H),4.31-4.22(m,1H),4.09-4.02(m,2H),3.81(s,3H,OCH3),3.61-3.56(m,1H),3.54-3.25(m,2H,CH2-quanidine),3.21-3.09(m,1H),3.03-2.87(m,2H),2.69(s,3H,CH3),2.59(s,3H,CH3),2.59-2.47(m,1H),2.11(s,3H,CH3),2.01-1.68(m,5H),1.59-1.52(m,4H),1.52-1.38(m,4H),1.52(s,9H,C(CH3)3),0.86(quin,2H,J=7.8Hz);HRMS(ESI),calculated for C42H61N8O10S([M+H]+):869.4231,found:869.4201;TLC:R f 0.42(EtOAc/MeOH,3/1).
在同時MTR和t-Boc去保護後。
化合物6-5的數據:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.02(bs,2H,G-NH2 +),8.25(bs,1H,G-NH),7.83(bd,J=8.2,1H,amide NH),7.75(d,J=8.0,1H,amide NH),7.71(d,J=8.4,1H,amide NH),7.62(t,J=8.0,1H,amide NH),7.36(d,J=8.2,1H,amide NH),7.22-7.11(m,5H,Ph),4.72(dd,J=15.8,7.8,1H),4.55(bt,1H),4.36(bs,2H),4.20(dd,J=16.0,7.2,1H),3.36(t,J=14.8Hz,2H),3.25-3.12(m,4H),2.64(dd,J=7.6,16.0Hz,1H),2.57(dd,J=16.0,10.4,1H),1.84-1.72(m,4H),1.58-1.50(m,4H),1.48-1.38(m,4H);HRMS(ESI)C28H41N8O7理論值(M++H):601.3093;實際值:601.3094;HPLC分析:(C18,250×4.6mm,0.5(mL/min),λ=254nm).a:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(95:5),30分鐘;b:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(5:95),31-60分鐘;t R:36.71、46.17分鐘。
在室溫下取Fmoc-保護的胜肽(5’-5-Fmoc)(40.5mg,0.036mmol)溶液,以溶於DCM(1mL)的20%哌啶處理1小時,藉由與甲醇共蒸發移除哌啶後,將粗產物真空乾燥並以矽膠管柱層析法純化,產生的產物以在迴流甲苯中的VOOCl2、V(O)(acac)2、或Ti(O)(acac)2(10mol%)處理18小時,形成分子內的醯胺鍵。將產生的粗混合物冷卻至環境溫度並濃縮,粗殘餘物以三氟乙酸(5mL)和水(1mL)溶解,接著以硫代苯甲醚(thioanisole,1mL)處理,混合物以二異丙基醚(5mL)誘導沉澱後,將固體以二異丙基醚清洗並真空乾燥,以獲得環胜肽(6’-5)。環五胜肽(cyclic pentapeptide)進一步以逆相C-18管柱之HPLC純化(梯度:95/5至80/20,水/乙腈),得到純化合物6’-5(18mg,產率69%)。
在Fmoc去保護和環化後:
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.68and7.28(m,2H,imine and amide),7.22-7.12(m,5H,Ph group),6.50(s,1H,amide),6.33(br,2H,amide),4.80(dd,J=6.0,6.9Hz,1H),4.59-4.55(m,1H),4.45-4.36(m,1H),3.80(s,3H,OCH3-Ph),3.33-3.15(m,3H),2.79(t,J=8.4Hz,1H),2.65(s,3H,CH3-Ph),2.59(s,3H,CH3-Ph),2.31(t,J=10.4Hz,1H),2.08(s,3H,CH3-Ph),2.03-1.95(m,4H),1.64-1.41(m,5H),1.36(s,9H,tBu),1.30-1.27(m,2H),1.25-1.22(m,4H);R f 0.5(EtOAc/MeOH,9/1);HRMS(ESI)C42H61N8O10S理論值(M++H):869.4231;實際值:869.4233。
在同時MTr和tert-Boc去保護後:
化合物6’-5的數據:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.12(bs,2H,G-NH2 +),8.22(bs,1H,G-NH),7.79(bd,J=8.4,1H,amide NH),7.72(d,J=8.2,1H,amide NH),7.68(d,J=8.2,1H,amide NH),7.58(t,J=8.0,1H,amide NH),7.41(d,J=8.2,1H,amide NH),7.24-7.13(m,5H,Ph),4.68(dd,J=13.2,6.8,1H),4.45(bt,1H),4.30(bs,2H),4.22(dd,J=16.0,7.2,1H),3.30(t,J=14.0Hz,2H),3.18-3.00(m,4H),2.68(dd,J=7.6,16.0Hz,1H),2.55(dd,J=16.0,10.4,1H),1.78-1.01(m,10H);HRMS(ESI)C28H41N8O7理論值(M++H):601.3098;實際值:601.3090;HPLC分析:(C18,250×4.6mm,0.5(mL/min),λ=254nm).a:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(90:10),30分鐘;b:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(10:90),31-60分鐘;t R:34.6、42.6分鐘。
[流程III-6-1]
在Fmoc去保護和環化後:
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ 7.98(s,1H,C=NH),7.86(bs,1H,NH),7.62(bs,1H,NH),7.38-7.11(m,6H),7.00(br,1H),6.58(br,1H,NH),6.30(br,1H,NH),4.80-4.74(m,1H),4.65-4.57(m,1H),4.34-4.26(m,1H),4.10-4.07(m,2H),3.71-3.67(m,2H),3.60-3.54(m,4H),3.52-3.31(m,2H,CH2-quanidine),3.48(s,3H,OCH3),3.18-3.09(m,1H),3.05-2.91(m,2H),2.69(s,3H,CH3),2.59(s,3H,CH3),2.11(s,3H,CH3),2.21-1.78(m,5H),1.63-1.57(m,2H),1.55(s,9H,C(CH3)3),1.53-1.43(m,2H),1.50(s,9H,C(CH3)3);HRMS(ESI),calculated for C46H68N9O12S([M+H]+):970.4708,found:970.4715;TLC:R f 0.33(EtOAc/MeOH,3/1).
在同時MTr和tert-Boc去保護後:
化合物6-1的數據:1H NMR(400MHz,CDCl3):9.40(bs,2H,G-NH2 +),8.55(bs,1H,G-NH),7.63(bd,J=8.2,1H,amide NH),7.69(d,J=8.0,1H,amide NH),7.63(d,J=8.4,1H,amide NH),7.55(t,J=8.0,1H,amide NH),7.38(d,J=82,1H,amide NH),7.24-7.14(m,5H,Ph),6.81(bs,2H,G-NH2),4.82(dd,J=15.8,7.8,1H),4.70(bt,1H),4.40(bs,2H),4.15(dd,J=16.0,7.2,1H),3.40(t,J=14.8Hz,2H),3.22-3.12(m,4H),2.97-2.88(m,2H),2.81-2.72(dd,J=76,16.0Hz,1H),2.68-2.62(m,2H),2.60(dd,J=16.0,10.4,1H),2.24-2.06(m,3H),184-1.77(m,4H),1.54-1.48(m,2H);HRMS(ESI)calcd for C27H40N9O7(M++H):602.3045;found:602.3041;HPLC analysis:(C18,250×4.6mm,0.5(mL/min),λ=254nm).a.1%TFA in H2O/ACN(90:10)30min;b.1%TFA in H2O/ACN(5:95)31-60min;t R 42.5,51.2min.
在Fmoc、MTR、和t-Boc去保護後:
化合物6’-1的數據:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 9.68(bs,2H,G-NH2 +),8.09(bs,1H,G-NH),7.68(bd,J=84,1H,amide NH),7.64(d,J=8.2,1H,amide NH),7.60(d,J=8.2,1H,amide NH),7.50(t,J=8.0,1H,amide NH),7.45(d,J=8.2,1H,amide NH),7.27-7.16(m,5H,Ph),4.65(dd,J=15.8,7.6,1H),4.72(bt,1H),4.27(bs,2H),4.15(dd,J=15.8,7.4,1H),3.32(t,J=15.2Hz,2H),3.24-3.15(m,4H),2.80-2.65(m,4H),2.64(dd,J=7.6,16.0Hz,1H),2.58(dd,J=16.0,10.4,1H),2.14-2.06(m,2H),2.05(bs,1H,NH),1.89-1.82(m,2H),1.78-1.72(m,4H),1.67-1.48(m,2H);HRMS(ESI)C27H40N9O7理論值(M++H):602.3045;實際值:602.3049;HPLC分析:(C18,250×4.6mm,0.5(mL/min),λ=254nm).a:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(90:10),30分鐘;b:1%三氟乙酸溶於水/乙腈(5:95),31-60分鐘;t R:41.8、50.4分鐘。
雖然已經以優選實施例說明了本發明,但應當理解的是,可以在不脫離如下文所要求保護之本發明之精神及範圍下,進行其他可能的修飾或改變。
Claims (20)
- 如申請專利範圍第1項所述之環胜肽,其中,X為O、CH2、S或N-R4,其中R4為H、C1-6烷基、-C(=O)-C4-10烷基、(CH2CH2O)nH、或C(=O)(C2H4)2C(=O)O(C2H4O)nH,其中,n=1-3。
- 如申請專利範圍第3項所述之環胜肽,其中,R2為H。
- 如申請專利範圍第3項所述之環胜肽,其中,R4為H、或-C(=O)-庚基。
- 一種環胜肽之製備方法,包含下列步驟:(A)提供由下列式(II-1)或(II’-1)與(II-2)所表示的化合物:Rc-NH-R1-COOH (II-2)其中,Ra和Rb各自獨立為烷基、環烷基、芳基、或雜芳基;Rc和Rd各自獨立為保護基;以及R1為,其中,R2和R3各自獨立為H或C1-6烷基;X為O、S、CH2、或N-R4,其中,R4為H、C1-6烷基、(CH2CH2O)nH、-C(=O)-C1-10烷基、或C(=O)(C2H4)2C(=O)O(C2H4O)nH,其中n=1-3;(B)進行式(II-1)或(II’-1)與(II-2)之化合物之間的反應,分別獲得由下列式(II-3)和(II’-3)所表示之化合物:(C)分別進行式(II-3)或(II'-3)之化合物與由下列式(II-4)或(II’-4)所表示之化合物之間的反應,以分別獲得下列式(II-5)和(II’-5)所表示之化合物:Rd和Re各自獨立為保護基;以及(D)將式(II-5)或(II’-5)之化合物與式(III)之催化劑進行環化反應,以分別獲得一由下列式(I)或(I’)所表示之化合物:M(O)mL1 yL2 z (III)其中,M為一金屬,選自由IVB、VB、VIB、和錒系族所組成之群組;L1和L2分別為一配位基;m和y為大於或等於1的整數;以及z為大於或等於0的整數。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中L1為選自Cl、OTf、OTs、NTf2、鹵素、RC(O)CHC(O)R、OAc、OC(O)CF3、OEt、O-iPr、和丁基所組成之群組,其中,R為烷基。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,Rc和Rd為茀基甲氧基羰基,且Re為2,3,6,-三甲基-4-甲氧基苯磺醯基。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,以該式(III)之催化劑進行式(II-1)或(II’-1)與(II-2)化合物之間的反應,或以式(III)之該催化劑進行式(II-3)與(II-4)或式(II’-3)與(II’-4)化合物之間的反應。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,M為IVB族過渡元素,m為1且y為2。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,M為VB族過渡元素,m為1且y為2或3。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,M為VIB族過渡元素,m為1且y為4。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,M為VIB族過渡元素,m為2且y為2。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,M為選自錒系族,m為2且y為2。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,該式(III)之催化劑為MoO2Cl2、V(O)OCl2、V(O)(OAc)2、V(O)(O2CCF3)2、Ti(O)(acac)2、Zr(O)Cl2、Hf(O)Cl2、Nb(O)Cl2、MoO2(acac)2、V(O)(OTs)2、VO(OTf)2、或V(O)(NTf2)2。
- 如申請專利範圍第8項所述之方法,其中,z為0。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP18020140.2A EP3392262B1 (en) | 2017-04-17 | 2018-04-11 | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same |
EP19207106.6A EP3628677B1 (en) | 2017-04-17 | 2018-04-11 | Method for preparing a cyclopeptide |
ES18020140T ES2898056T3 (es) | 2017-04-17 | 2018-04-11 | Ciclopéptido, composición farmacéutica o cosmética que lo comprende y método para prepararlo |
ES19207106T ES2904658T3 (es) | 2017-04-17 | 2018-04-11 | Método para preparar un ciclopéptido |
JP2018077715A JP6638016B2 (ja) | 2017-04-17 | 2018-04-13 | シクロペプチド、それを含む医薬または化粧用組成物、及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US15/488,550 | 2017-04-17 | ||
US15/488,550 US10745444B2 (en) | 2017-04-17 | 2017-04-17 | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW201839008A TW201839008A (zh) | 2018-11-01 |
TWI659044B true TWI659044B (zh) | 2019-05-11 |
Family
ID=63791552
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW107107206A TWI659044B (zh) | 2017-04-17 | 2018-03-05 | 環胜肽、包含其之組成物及其製備方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10745444B2 (zh) |
CN (1) | CN108727468B (zh) |
TW (1) | TWI659044B (zh) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10745444B2 (en) * | 2017-04-17 | 2020-08-18 | National Tsing Hua University | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same |
TWI747138B (zh) * | 2020-01-16 | 2021-11-21 | 國立清華大學 | 環胜肽及其製備方法 |
CN113121647A (zh) * | 2020-01-16 | 2021-07-16 | 陈建添 | 环肽及其制备方法 |
CN112341353B (zh) * | 2020-11-05 | 2022-11-25 | 广州市荔盛化学品有限公司 | 一种丙基甜菜碱及其制备方法 |
CN114634554B (zh) * | 2022-04-09 | 2022-12-06 | 浙江湃肽生物股份有限公司 | 一种抗皱环六肽化合物及其制备方法 |
CN117462440A (zh) * | 2023-12-26 | 2024-01-30 | 杭州湃肽生化科技有限公司 | 功能性环肽及其制备方法及应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1218478A (zh) * | 1996-04-06 | 1999-06-02 | 默克专利股份有限公司 | 环状粘着抑制剂 |
CN1451017A (zh) * | 2000-08-30 | 2003-10-22 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 选择性环肽 |
WO2008102233A1 (en) * | 2007-02-21 | 2008-08-28 | Universita' Degli Studi Di Milano | Integrin targeted cyclopeptide ligands, their preparation and use |
WO2009124754A1 (en) * | 2008-04-08 | 2009-10-15 | Merck Patent Gmbh | Compositions containing cyclic peptides and methods of use |
CN101573371A (zh) * | 2006-12-29 | 2009-11-04 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 环肽类化合物的合成方法 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2769983A1 (en) * | 2013-02-22 | 2014-08-27 | Karlsruher Institut für Technologie | Peptidomimetics possessing photo-controlled biological activity |
US10745444B2 (en) * | 2017-04-17 | 2020-08-18 | National Tsing Hua University | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same |
US10494403B2 (en) * | 2018-03-06 | 2019-12-03 | Ciphore Biomed Technology Limited Company | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same |
-
2017
- 2017-04-17 US US15/488,550 patent/US10745444B2/en active Active
-
2018
- 2018-03-05 CN CN201810178722.4A patent/CN108727468B/zh active Active
- 2018-03-05 TW TW107107206A patent/TWI659044B/zh active
-
2020
- 2020-07-10 US US16/925,472 patent/US10851134B2/en active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1218478A (zh) * | 1996-04-06 | 1999-06-02 | 默克专利股份有限公司 | 环状粘着抑制剂 |
CN1451017A (zh) * | 2000-08-30 | 2003-10-22 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 选择性环肽 |
CN101573371A (zh) * | 2006-12-29 | 2009-11-04 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 环肽类化合物的合成方法 |
WO2008102233A1 (en) * | 2007-02-21 | 2008-08-28 | Universita' Degli Studi Di Milano | Integrin targeted cyclopeptide ligands, their preparation and use |
WO2009124754A1 (en) * | 2008-04-08 | 2009-10-15 | Merck Patent Gmbh | Compositions containing cyclic peptides and methods of use |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
Ruediger Graf et al., "In vivo anti-aging efficacy of a cyclic peptide composition" , IFSCC Magazine, 20120331 , 15(1), pp. 23-27 * |
Ruediger Graf et al., "In vivo anti-aging efficacy of a cyclic peptide composition" , IFSCC Magazine, 20120331 , 15(1), pp. 23-27。 |
Sally J. DeNardo et al., " Neovascular targeting with cyclic RGD peptide (cRGDf-ACHA) to enhance delivery of radioimmunotherapy" , Cancer Biotherapy & Radiopharmaceuticals, 20000229, 15(1), pp. 71-79 * |
Sally J. DeNardo et al., " Neovascular targeting with cyclic RGD peptide (cRGDf-ACHA) to enhance delivery of radioimmunotherapy" , Cancer Biotherapy & Radiopharmaceuticals, 20000229, 15(1), pp. 71-79。 |
孟伟 河北科技大學碩士論文,"含RGD序列环五肽的合成及其对整合素受体α_vβ_3的活性研究(二)", 2011年 * |
孟伟 河北科技大學碩士論文,"含RGD序列环五肽的合成及其对整合素受体α_vβ_3的活性研究(二)", 2011年。 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TW201839008A (zh) | 2018-11-01 |
US20200339632A1 (en) | 2020-10-29 |
US10745444B2 (en) | 2020-08-18 |
US10851134B2 (en) | 2020-12-01 |
CN108727468B (zh) | 2021-12-03 |
CN108727468A (zh) | 2018-11-02 |
US20180298060A1 (en) | 2018-10-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
TWI659044B (zh) | 環胜肽、包含其之組成物及其製備方法 | |
Webb et al. | Conformationally restricted arginine analogs | |
CA2175218A1 (en) | Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone | |
KR20120052354A (ko) | Apaf-1 억제제 화합물 | |
TWI716733B (zh) | 環胜肽、包含其之醫藥或化妝品組成物及其製備方法 | |
Ghandi et al. | Unique substituted 3-oxo-1, 2, 3, 4-tetrahydropyrazino [1, 2-a] benzimidazole-1-carboxamides generated by Ugi 3CC using bifunctional starting material | |
JP4012145B2 (ja) | ピロール−イミダゾールポリアミドの固相合成法 | |
EA015886B1 (ru) | Ингибиторы каспазы на основе пиридазинонового каркаса | |
EP3392262B1 (en) | Cyclopeptide, pharmaceutical or cosmetic composition comprising the same and method for preparing the same | |
Halpern et al. | Dimedone (5, 5-dimethylcyclohexane-1, 3-dione) as a protecting agent for amino groups in peptide synthesis | |
Luthman et al. | Synthesis and use of pseudopeptides derived from 1, 2, 4-oxadiazole-, 1, 3, 4-oxadiazole-, and 1, 2, 4-triazole-based dipeptidomimetics | |
JP2002502378A (ja) | グアニジル化試薬 | |
JPH07500817A (ja) | 有機ニトラート、その製造方法及びこれを心臓血管疾患の治療に使用する方法 | |
JP7278775B2 (ja) | 長鎖化合物の製造方法 | |
EP1020465B1 (en) | Stereoisomeric indole compounds, process for the preparation of the same, and use thereof | |
JP2002532466A (ja) | α−ヒドロキシ−β−アミノ酸およびアミド誘導体の合成のための方法 | |
Gros et al. | Stereochemical control in the preparation of α-amino N-methylthiazolidine masked aldehydes used for peptide aldehydes synthesis | |
JP2009528282A (ja) | 修飾アミノ酸 | |
US20220315623A1 (en) | Cyclic Peptide Compound Simulating Natural Product Structure, And Method For Preparation Thereof | |
Dubowchik et al. | An efficient sequence for the preparation of small secondary amine hydrochloride salts for focused library generation without need for distillation or chromatographic purification | |
TWI747138B (zh) | 環胜肽及其製備方法 | |
CN113121647A (zh) | 环肽及其制备方法 | |
JP4173335B2 (ja) | 光学活性2,3−エポキシプロパン誘導体の製造法 | |
CN116547295A (zh) | 氨基酸向固相合成用树脂的担载方法 | |
JPS6233151A (ja) | ペプチド様化合物 |